KR20210120054A - Akt 억제제 - Google Patents

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KR20210120054A
KR20210120054A KR1020217027161A KR20217027161A KR20210120054A KR 20210120054 A KR20210120054 A KR 20210120054A KR 1020217027161 A KR1020217027161 A KR 1020217027161A KR 20217027161 A KR20217027161 A KR 20217027161A KR 20210120054 A KR20210120054 A KR 20210120054A
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허 티안
지에 안
지안리앙 자오
동휘 천
지안 우
단 수
춘시아 주
조우샨 티안
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난징 치아 타이 티안큉 파마슈티컬 컴파니 리미티드
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Abstract

본 발명은 AKT 억제제를 개시하며, 구체적으로 화학식 I로 표시되는 화합물 또는 그의 약학적으로 허용가능한 염에 관한 것이다. 본 발명은 또한 그의 제조 방법, 및 AKT 단백질 키나제에 의해 매개되는 질환의 예방 및/또는 치료에서의 그의 용도를 제공한다.
Figure pct00287

Description

AKT 억제제
본 출원은 2019년 1월 29일에 중국 국가지식재산관리국에 출원된 출원 번호 201910084801.3의 중국 특허 출원의 우선권을 주장하며, 그 전체 내용은 참조로 본 출원에 통합된다.
본 발명은 의약화학 분야에 속하며, 구체적으로 AKT 억제제, 및 이의 제조방법 및 의학적 용도에 관한 것이다.
PI3K/AKT/mTOR 경로는 포스파티딜이노시톨 3-키나제(PI3K) 및 그 하류 단백질 AKT(단백질 키나제 B, PKB로도 알려짐)와 라파마이신의 포유류 표적(mTOR)으로 구성되며, 세포에서 매우 중요한 신호 전달 경로로서, 세포 성장, 생존, 증식, 세포자멸사, 혈관신생 및 자가포식 과정에서 매우 중요한 생물학적 기능을 수행한다. 이 경로의 비정상적 활성화는 암, 신경병증, 자가면역 질환, 혈액 및 림프계 질환을 비롯한 일련의 질병을 유발할 수 있다.
세린/트레오닌 키나제의 일종인 AKT는 수많은 다운스트림 이펙터를 통해 세포 생존, 성장, 대사, 증식, 이동 및 분화에 영향을 미친다. 인간 종양의 50% 이상이 AKT의 과활성화, 특히 전립선암, 췌장암, 방광암, 난소암 및 유방암이 있다. AKT의 과활성화는 종양 형성, 종양 전이 및 약물 내성 발달로 이어질 수 있다.
AKT 에는 AKT1, AKT2 및 AKT3의 세 가지 하위 유형이 있다. 대표적인 단백질 키나제로서 각 하위유형은 아미노-말단 PH 도메인(Pleckstrin 상동성 도메인), 중간에 ATP와 결합하는 키나제 도메인, 및 카복시-말단-조절 도메인으로 구성된다. 세가지 하위유형의 아미노산 서열의 약 80%는 상동성이며, PH 도메인과 키나제 도메인의 접합 영역에서만 큰 변화를 가진다.
현재 PI3K/AKT/mTOR 신호 경로에 대한 표적 약물은 주로 PI3K 억제제와 mTOR 억제제이며, AKT는 신호 전달 경로의 핵심이다. AKT 활성의 억제는 업스트림 PI3K 억제로 인한 심각한 부작용을 피할 수 있을 뿐만 아니라, 약물의 효능에 영향을 미치는, 다운스트림 mTOR 억제로 인한 부정적인 피드백 메커니즘을 피할 수 있다. 따라서, 효과적이고 선택적인 AKT 억제제를 찾는 것은 현재 종양-표적 약물 연구 및 개발의 중요한 방향이다. CN101631778A는 시클로펜타[D]피리미딘 유도체의 클래스를 개시하고, CN101578273A는 히드록실화 및 메톡시화 시클로펜타[D]피리미딘 유도체의 클래스를 개시하고, CN101511842A는 디히드록푸로 피리미딘 유도체의 클래스를 개시하고, CN101970415A는 5H-시클로펜타[d]피리미딘 유도체의 클래스를 개시한다. 이들 화합물은 이 10μM 미만의 AKT1을 억제하는 IC50 을 가진다.
한 측면에서, 본 발명은 하기 화학식 I로 표시되는 화합물 또는 그의 약학적으로 허용가능한 염을 제공하고,
Figure pct00001
식중
R1 는 H, OH, 할로겐, CN, NH2, NO2, 또는 할로겐 또는 OH로 선택적으로 치환된 C1-C6 알킬로 구성되는 군으로부터 선택되고;
R2 및 R3 는 H, C1-C6 알킬, C3-C6 시클로알킬, (C3-C6 시클로알킬)-(CH2)-, (C3-C6 시클로알킬)-(CH2CH2)-, 벤질, 페네틸, 피롤리디닐, 테트라하이드로푸라닐 및 테트라하이드로피라닐로 구성되는 군으로부터 각각 독립적으로 선택되고, 여기서 상기 C1-C6 알킬, C3-C6 시클로알킬, (C3-C6 시클로알킬)-(CH2)- 또는 (C3-C6 시클로알킬)-(CH2CH2)- 는 할로겐, OH, CN, NH2 또는 C1-C3 알콕시로 선택적으로 치환되고, 상기 벤질 또는 페네틸은 할로겐, OH, CN, NO2, NH2, C1-C3 알콕시, 할로겐화 C1-C3 알콕시, C1-C3 알킬 또는 할로겐화 C1-C3 알킬로 선택적으로 치환되고, 상기 피롤리디닐, 테트라하이드로푸라닐 또는 테트라하이드로피라닐은 할로겐, OH, C1-C3 알킬, 시클로프로필메틸 또는 C1-C4 알카노일로 선택적으로 치환되며; 또는
R1 및 R2 은, R1 및 R2 가 부착된 원자와 함께, 4-7 원 질소-함유 헤테로시클릭 고리를 형성하고;
m 및 n 은 각각 독립적으로 0, 1, 2 또는 3 이고;
R4 및 R5 둘다 수소이거나 또는 R4 및 R5 는 함께 =O를 형성하고;
Figure pct00002
는 하기로 구성되는 군으로부터 선택되며
Figure pct00003
R6, R7, R8, 및 R9 는 H, CN, C1-C6 알킬 및 C1-C6 알콕시로 구성되는 군으로부터 각각 독립적으로 선택되고, 여기서 상기 C1-C6 알킬 또는 C1-C6 알콕시는 할로겐, OH, CN 또는 C1-C3 알콕시로 선택적으로 치환되며;
R10 은 H 또는 C1-C6 알킬이고, 여기서 상기 C1-C6 알킬은 할로겐, OH, CN 또는 C1-C3 알콕시로 선택적으로 치환되며;
L 은 선택적으로 치환된 1-2 질소 원자를 함유하는 5-12원 포화 헤테로시클릭 고리이며;
G 는 6-10원 아릴 또는 1-5 R11로 선택적으로 치환된 5-10 원 헤테로아릴이고;
R11 는 할로겐, OH, CN, NH2, NO2, 벤질옥시, -NH(C1-C6 알킬), -N(C1-C6 알킬)2, -C(=O)NH2, -C(=O)NH(C1-C6 알킬), -C(=O)N(C1-C6 알킬)2, -SO2(C1-C6 알킬), C1-C6 알킬 및 C1-C6 알콕시로 구성되는 군으로부터 독립적으로 선택되고, 여기서 상기 C1-C6 알킬 또는 C1-C6 알콕시는 할로겐으로 선택적으로 치환되며;
단, R1 및 R2 모두가 H가 아니면, R1 및 R2는 R1 및 R2가 부착되는 원자와 함께, 4-7원 질소 함유 헤테로시클릭 고리를 형성한다.
일부 실시양태에서, R1 은 H, OH, 및 할로겐 또는 OH로 선택적으로 치환된 C1-C6 알킬로 구성되는 군으로부터 선택되고; 일부 바람직한 실시양태에서, R1 은 H, OH, Me, CF3 및 CH2OH 로 구성되는 군으로부터 선택되며; 일부 더욱 바람직한 실시양태에서, R1 은 H 또는 OH 이고; 일부 가장 바람직한 실시양태에서, R1 은 H 이다.
일부 실시양태에서, R2 및 R3 은 H, C1-C6 알킬, C3-C6 시클로알킬, (C3-C6 시클로알킬)-(CH2)-, (C3-C6 시클로알킬)-(CH2CH2)-, 벤질, 페네틸, 피롤리디닐 및 테트라하이드로피라닐로 구성되는 군으로부터 각각 독립적으로 선택되며, 여기서 상기 C1-C6 알킬, C3-C6 시클로알킬, (C3-C6 시클로알킬)-(CH2)- 또는 (C3-C6 시클로알킬)-(CH2CH2)- 은 F, Cl, Br, I, OH, CN, NH2 또는 C1-C3 알콕시로 선택적으로 치환되며, 상기 벤질 또는 페네틸은 F, Cl, Br, I, OH, OMe, CF3 또는 Me로 선택적으로 치환되며, 그리고 상기 피롤리디닐 또는 테트라하이드로피라닐은 F, Cl, Br, I, OH, C1-C3 알킬, 시클로프로필메칠 또는 C1-C4 알카노일로 선택적으로 치환된다.
일부 실시양태에서, R2 및 R3 는 H, 메틸, 에틸, 이소프로필, 이소부틸, 터트-부틸, 3-펜틸, CH2OH, CH2CH2OH, CH2CH2OMe, CF3, CH2CF3, CH2CHF2, CH2CH2F, 시클로프로필, 시클로펜틸, 시클로헥실, 시클로프로필-(CH2)-, 시클로펜틸-(CH2)-, 시클로헥실-(CH2)-, 시클로프로필-(CH2CH2)-, 시클로펜틸-(CH2CH2)-, 벤질, 4-플루오로벤질, 4-클로로벤질, 4-플루오로페네틸, 4-클로로페네틸 및 테트라하이드로피란-4-일로 구성되는 군으로부터 각각 독립적으로 선택된다.
일부 바람직한 실시양태에서, R2 및 R3 는 H, 메틸, 에틸, 이소프로필, 시클로프로필, 시클로헥실, 시클로프로필-(CH2)-, 시클로헥실-(CH2)- 및 테트라하이드로피란-4-일로 구성되는 군으로부터 각각 독립적으로 선택된다.
일부 더욱 바람직한 실시양태에서, R2 및 R3 는 H, 이소프로필 및 시클로프로필로 구성되는 군으로부터 각각 독립적으로 선택된다.
일부 실시양태에서, R2 는 H 이다.
일부 실시양태에서, R3 는 이소프로필 또는 시클로프로필이다.
일부 실시양태에서, R2 는 H 및 R5 는 이소프로필 또는 시클로프로필이다.
일부 실시양태에서, R1 및 R2 은 R1 및 R2 가 부착한 원소들과 함께, 다음을 형성하며,
Figure pct00004
여기서, R3 의 정의는 상기와 같다.
일부 더욱 바람직한 실시양태에서, R1 및 R2, 은 R1 및 R2 가 부착된 원자들과 함께 다음을 형성하며,
Figure pct00005
여기서, R3 의 정의는 상기와 같다.
일부 실시양태에서, m 은 0, 1, 또는 2; 일부 바람직한 실시양태에서, m 은 0 또는 1; 일부 더욱 바람직한 실시양태에서, m 은 1이다.
일부 실시양태에서, n 은 0, 1, 또는 2; 일부 바람직한 실시양태에서, n 은 0 또는 1; 일부 더욱 바람직한 실시양태에서, n 은 0 이다.
일부 실시양태에서, R4 및 R5 은 둘다 H 이다.
일부 실시양태에서, R4 및 R5 은 함께 =O 를 형성한다.
일부 실시양태에서,
Figure pct00006
은 다음으로 구성되는 군으로부터 선택된다.
Figure pct00007
일부 실시양태에서,
Figure pct00008
은 다음으로 구성되는 군으로부터 선택된다.
Figure pct00009
일부 실시양태에서,
Figure pct00010
은 다음으로 구성되는 군으로부터 선택된다.
Figure pct00011
일부 실시양태에서,
Figure pct00012
는
Figure pct00013
이며, R4 및 R5는 함께 =O 를 형성한다.
일부 실시양태에서,
Figure pct00014
는
Figure pct00015
이며, R4 및 R5는 함께 =O 를 형성한다.
일부 실시양태에서,
Figure pct00016
는
Figure pct00017
이며, R4 및 R5 은 함께 =O 을 형성한다.
일부 실시양태에서,
Figure pct00018
는
Figure pct00019
이며, R4 및 R5 은 함께 =O 을 형성한다.
일부 실시양태에서,
Figure pct00020
는
Figure pct00021
이며, R4 및 R5 은 둘다 H이다.
일부 실시양태에서,
Figure pct00022
는
Figure pct00023
이며, R4 및 R5 은 함께 =O 을 형성한다.
일부 실시양태에서, R6, R7, R8, 및 R9 는 H, CN, C1-C6 알킬 및 C1-C6 알콕시로 구성되는 군으로부터 각각 독립적으로 선택되며, 여기서 상기 C1-C6 알킬 또는 C1-C6 알콕시는 F, Cl, Br, I, OH, CN 또는 OMe 로 선택적으로 치환된다.
일부 실시양태에서, R6, R7, R8, 및 R9 는 H, CN, C1-C6 알킬 및 C1-C6 알콕시로 구성되는 군으로부터 각각 독립적으로 선택되며, 여기서 상기 C1-C6 알킬 또는 C1-C6 알콕시는 F, CN 또는 OH로 선택적으로 치환된다.
일부 실시양태에서, R6, R7, R8, 및 R9 는 H, CN, 메틸, 에틸, 프로필, 이소프로필, CF3, CH2CF3, CH2CHF2, CH2CH2F, CH2CN, CH2CH2CN, CH2OH, CH2CH2OH, OMe, OEt, OCH2CH2CH3 및 이소프로폭시로 구성되는 군으로부터 각각 독립적으로 선택된다.
일부 실시양태에서, R6 는 H, CN, 메틸, 에틸, 프로필, 이소프로필, CF3, CH2CF3, CH2CHF2, CH2CH2F, CH2CN, CH2CH2CN, CH2OH, CH2CH2OH, OMe, OEt, OCH2CH2CH3 및 이소프로폭시로 구성되는 군으로부터 각각 독립적으로 선택되고; 일부 바람직한 실시양태에서, R6 은 H, CN, 메틸, 에틸, 이소프로필, CF3, CH2CH2OH, OMe 및 OEt 로 구성되는 군으로부터 선택되고; 일부 더욱 바람직한 실시양태에서, R6 는 H, CN, 메틸, CF3 및 OMe 로 구성되는 군으로부터 선택되고; 일부 더욱 바람직한 실시양태에서, R6 는 CN, 메틸, CF3 및 OMe로 구성되는 군으로부터 선택되고; 일부 더욱 바람직한 실시양태에서, R6 는 H, CN 및 메틸로 구성되는 군으로부터 선택되고; 일부 더욱 바람직한 실시양태에서, R6 는 H, CF3 및 메틸로 구성되는 군으로부터 선택되고; 일부 더욱 바람직한 실시양태에서, R6 는 메틸 또는 CF3이다.
일부 실시양태에서, R7 는 H 이다.
일부 실시양태에서, R8 는 H, CN, 메틸, 에틸, 프로필, 이소프로필, CF3, CH2CF3, CH2CHF2, CH2CH2F, CH2CN, CH2CH2CN, CH2OH, CH2CH2OH, OMe, OEt, OCH2CH2CH3 및 이소프로폭시로 구성되는 군으로부터 선택되고; 일부 바람직한 실시양태에서, R8 는 H, CN, 메틸, 에틸, 이소프로필, CF3, CH2CH2OH, OMe 및 OEt로 구성되는 군으로부터 선택되고; 일부 더욱 바람직한 실시양태에서, R8 는 H, CN 및 메틸로 구성되는 군으로부터 선택되고; 일부 더욱 바람직한 실시양태에서, R8 는 H 또는 CN 이고; 일부 더욱 바람직한 실시양태에서, R8 는 H 또는 메틸이고; 일부 더욱 바람직한 실시양태에서, R8 는 H 이다.
일부 실시양태에서, R9 는 H 이다.
일부 실시양태에서, R10 는 H 또는 C1-C6 알킬이고, 여기서 상기 C1-C6 알킬 은 할로겐, OH 또는 CN로 선택적으로 치환되고; 일부 실시양태에서, R10 는 H, 메틸, 에틸, 프로필, 이소프로필, CF3, CH2CF3, CH2CHF2, CH2CH2F, CH2CN, CH2CH2CN, CH2OH 및 CH2CH2OH 로 구성되는 군으로부터 선택되고; 일부 바람직한 실시양태에서 R10 는 메틸, 에틸, 이소프로필, CH2CF3, CH2CHF2, CH2CN 및 CH2CH2OH 로 구성되는 군으로부터 선택되고; 일부 더욱 바람직한 실시양태에서, R10 은 메틸, 에틸, CH2CN 및 CH2CH2OH 로 구성되는 군으로부터 선택되고; 일부 더욱 바람직한 실시양태에서, R10 는 메틸이다.
일부 실시양태에서, L은 하나 이상의 R12 로 선택적으로 치환된 다음의 군으로 구성되는 군으로부터 선택되고;
Figure pct00024
식중
단일 물결선은 L이 카보닐에 연결된 위치이고, 이중 물결선은 L이 피리미딘에 연결된 위치이며;
R12 은 할로겐, OH, CN, 비닐, C1-C6 알킬 및 C1-C6 알콕시로 구성되는 군으로부터 선택되고, 여기서 상기 C1-C6 알킬 또는 C1-C6 알콕시는 할로겐 또는 OH 로 선택적으로 치환되고;
h 는 0, 1, 2, 3 또는 4;
j 는 0, 1, 2, 또는 3;
k 는 1, 2, 3, 또는 4;
q, s, v, 및 t 는 각각 독립적으로 0, 1, 또는 2 이고, q, s, v, 및 t 는 동시에 0 이 아니고;
p 는 0, 1, 2, 또는 3;
e 는 0, 1, 또는 2;
u 는 1, 2, 또는 3;
W 및 Z 는 각각 독립적으로 N 또는 C 이고, W 및 Z 의 적어도 하나는 N 이다.
일부 실시양태에서, R12 은 F, Cl, Br, I, OH, CN, 비닐, 메틸, 에틸, 프로필, 이소프로필, CF3, CH2CF3, CH2CHF2, CH2CH2F, OMe, OEt, CH2OH, CH2CH2OH, OCH2OH 및 OCH2CH2OH 로 구성되는 군으로부터 선택되고; 일부 바람직한 실시양태에서 R12 은 메틸, 에틸, 이소프로필, CF3, CH2CF3, OMe, OEt, CH2OH 및 OCH2OH 로 구성되는 군으로부터 선택되고; 일부 바람직한 실시양태에서, R12 는 메틸, 에틸 및 CF3 로 구성되는 군으로부터 선택되고; 일부 더욱 바람직한 실시양태에서, R12 는 메틸이다.
일부 실시양태에서, h 는 0, 1, 2 또는 3 그리고 j 는 0, 1, 또는 2; 일부 바람직한 실시양태에서 h 는 0, 1 또는 2 그리고 j 는 0 또는 1; 일부 더욱 바람직한 실시양태에서, h 는 0 또는 1 그리고 j 는 0; 일부 더욱 바람직한 실시양태에서, h 는 1이고 j는 0 이다.
일부 실시양태에서, k 는 1, 2, 또는 3; 일부 바람직한 실시양태에서 k 는 1 또는 3; 일부 더욱 바람직한 실시양태에서, k 는 1 이다.
일부 실시양태에서, q, s, v, 및 t 는 각각 독립적으로 0 또는 1, 그리고 q, s, v, 및 t 는 동시에 0 이 아니고; 일부 바람직한 실시양태에서 q, s, v, 및 t 는 모두 1이고; 일부 더욱 바람직한 실시양태에서, q 및 s 는 둘다 0 이고, v 및 t 는 둘다 1이고; 일부 더욱 바람직한 실시양태에서, q 및 s 는 둘다 1이고, v 및 t 는 둘다 0 이고; 일부 더욱 바람직한 실시양태에서, s 및 v 는 둘다 0이고, q 및 t는 둘다 1이다.
일부 실시양태에서, p 는 0, 1, 또는 2; 일부 바람직한 실시양태에서 p 는 0 또는 2; 일부 더욱 바람직한 실시양태에서, p 는 2 이다.
일부 실시양태에서, e 는 0 또는 1, 그리고 u 는 1 또는 2; 일부 바람직한 실시양태에서 e 는 0 또는 1이고, u 는 1이며; 일부 더욱 바람직한 실시양태에서, e 는 0 이고, u 는 1 이다.
일부 실시양태에서, W 는 C이고, Z는 N이고; 일부 바람직한 실시양태에서 W 는 N 이고 Z 는 C이고; 일부 더욱 바람직한 실시양태에서, W 및 Z 는 둘다 N 이다.
일부 더욱 바람직한 실시양태에서, L 는 하나 이상의 R12 로 선택적으로 치환된 다음의 기로 구성되는 군으로부터 선택되며:
Figure pct00025
여기서, R12 의 정의는 위에서와 같다.
일부 더욱 바람직한 실시양태에서, L 은 하나 이상의 R12 로 선택적으로 치환된 다음의 기로 구성되는 군으로부터 선택되며:
Figure pct00026
여기서, R12 의 정의는 상기와 같다.
일부 더욱 바람직한 실시양태에서, L은 다음으로 이루어진 군으로부터 선택된다.
Figure pct00027
일부 더욱 바람직한 실시양태에서, L은 다음으로 이루어진 군으로부터 선택된다.
Figure pct00028
일부 더욱 바람직한 실시양태에서, L은 다음으로 이루어진 군으로부터 선택된다.
Figure pct00029
일부 실시양태에서, G 는 1-5 R11 로 선택적으로 치환된 페닐이고, 또는 하나 이상의 R11 로 선택적으로 치환된 티에닐 또는 피리딜이다.
일부 실시양태에서, R11 는 F, Cl, Br, I, OH, CN, NH2, NO2, 벤질옥시, 메틸, 에틸, 이소프로필, CH2CF3, CF3, SMe, OMe, OCF3, OEt 및 이소프로폭시로 구성되는 군으로부터 독립적으로 선택되고; 일부 바람직한 실시양태에서 R11 는 F, Cl, Br, CN, 벤질옥시, 메틸, 에틸, 이소프로필, CF3, OMe, SMe 및 OCF3 로 구성되는 군으로부터 독립적으로 선택되고; 일부 더욱 바람직한 실시양태에서, R11 는 F, Cl 및 CF3 로 구성되는 군으로부터 독립적으로 선택되고; 일부 더욱 바람직한 실시양태에서, R11 는 Cl이다.
일부 실시양태에서, G는 페닐, 2-클로로페닐, 3-클로로페닐, 4-클로로페닐, 4-플루오로페닐, 4-브로모페닐, 4-메틸페닐, 4-에틸페닐, 4-이소프로필페닐, 4-트리플루오로메틸페닐, 4-시아노페닐, 4-메톡시페닐, 4-메틸티오페닐, 4-트리플루오로메톡시페닐, 4-클로로-3-플루오로페닐, 3,4-디플루오로페닐, 2,4-디클로로페닐 및 4-벤질옥시페닐로 구성되는 군으로부터 선택되고; 일부 바람직한 실시양태에서 G 는 4-클로로페닐, 4-클로로-3-플루오로페닐, 4-트리플루오로메틸페닐 및 3,4-디플루오로페닐로 구성되는 군으로부터 선택되고; 일부 더욱 바람직한 실시양태에서, G 는 4-클로로페닐이다.
일부 실시양태에서, G는 하나 이상의 할로겐들로 선택적으로 치환된 티에닐 또는 피리딜이고; 일부 더욱 바람직한 실시양태에서, G 는 하나 이상의 F, Cl, Br 또는 I로 선택적으로 치환된 티에닐 또는 피리딜이고; 일부 더욱 바람직한 실시양태에서, G 는 다음으로 구성되는 군으로부터 선택된다.
Figure pct00030
또다른 측면에서, 본 발명은 화학식 II로 표현되는 화합물 또는 그의 약학적으로 허용가능한 염을 제공하며,
Figure pct00031
식중, R1, R2, R4, R5, G, L, m 및
Figure pct00032
는 화학식 I로 표현되는 화합물에서와 동일한 정의를 가진다.
또다른 측면에서, 본 발명은 화학식 III 로 표현되는 화합물 또는 그의 약학적으로 허용가능한 염을 제공하며,
Figure pct00033
식중, R2, R4, R5, G, L, 및
Figure pct00034
는 화학식 I로 표현되는 화합물에서와 동일한 정의를 갖는다.
또다른 측면에서, 본 발명은 화학식 IV로 표현되는 화합물 또는 그의 약학적으로 허용가능한 염을 제공하며,
Figure pct00035
식중, R2, G, L, 및
Figure pct00036
는 화학식 I로 표현되는 화합물에서와 동일한 정의를 갖는다.
또다른 측면에서, 본 발명은 화학식 V로 표현되는 화합물 또는 그의 약학적으로 허용가능한 염을 제공하며,
Figure pct00037
식중, R2, R6, R8, G, 및 L 는 화학식 I로 표현되는 화합물에서와 동일한 정의를 갖는다.
또다른 측면에서, 본 발명은 화학식 VI로 표현되는 화합물 또는 그의 약학적으로 허용가능한 염을 제공하고,
Figure pct00038
식중, R2, R6, R8, R11 및 L은 화학식 I로 표현되는 화합물에서와 동일한 정의를 갖는다, 그리고 d 는 0, 1, 2, 3, 4 또는 5이다.
일부 실시양태에서, d 는 0, 1, 2 또는 5; 일부 바람직한 실시양태에서 d 는 0, 1 또는 2; 일부 더욱 바람직한 실시양태에서, d 는 1 또는 2; 일부 더욱 바람직한 실시양태에서, d는 1 이다.
또다른 측면에서, 본 발명은 화학식 VII로 표현되는 화합물 또는 그의 약학적으로 허용가능한 염을 제공하고,
Figure pct00039
식중, R2, R6, R8, R11 및 L는 화학식 I로 표현되는 화합물에서와 동일한 정의를 갖는다, 그리고 d 는 화학식 VI로 표현되는 화합물에서와 동일한 정의를 갖는다.
또다른 측면에서, 본 발명은 화학식 VIII로 표현되는 화합물 또는 그의 약학적으로 허용가능한 염을 제공하며,
Figure pct00040
식중, R2, R8, R10, G, 및 L 은 화학식 I로 표현되는 화합물에서와 동일한 정의를 갖는다.
또다른 측면에서, 본 발명은 화학식 IX 로 표현되는 화합물 또는 그의 약학적으로 허용가능한 염을 제공하며,
Figure pct00041
식중, R2, R8, R10, R11 및 L은 화학식 I로 표현되는 화합물에서와 동일한 정의를 가지며, d는 화학식 VI로 표현되는 화합물에서와 동일한 정의를 갖는다.
또다른 측면에서, 본 발명은 또한 화학식 X로 표현되는 화합물 또는 그의 약학적으로 허용가능한 염을 제공하며,
Figure pct00042
식중, R1, R2, R3, G, L, m, n 및
Figure pct00043
는 화학식 I로 표현되는 화합물에서와 동일한 정의를 갖는다..
또다른 측면에서, 본 발명은 또한 화학식 XI 로 표현되는 화합물 또는 그의 약학적으로 허용가능한 염을 제공하며,
Figure pct00044
식중, R2, R6, G, 및 L 은 화학식 I로 표현되는 화합물에서와 동일한 정의를 갖는다.
또다른 측면에서, 본 발명은 또한 화학식 XII 로 표현되는 화합물 또는 그의 약학적으로 허용가능한 염을 제공하며,
Figure pct00045
식중, R2, R6, R11 및 L 은 화학식 I로 표현되는 화합물에서와 동일한 정의를 가지며, d는 화학식 VI로 표현되는 화합물에서와 동일한 정의를 가진다.
또다른 측면에서, 본 발명은 다음의 화합물들 또는 그의 약학적으로 허용가능한 염을 제공한다:
Figure pct00046
Figure pct00047
Figure pct00048
Figure pct00049
Figure pct00050
Figure pct00051
Figure pct00052
Figure pct00053
Figure pct00054
Figure pct00055
Figure pct00056
Figure pct00057
Figure pct00058
Figure pct00059
Figure pct00060
시스-(5R)-4-(5-((S)-2-(4-클로로페닐)-3-(이소프로필아미노)프로피오닐)헥사하이드로피롤[3,4-c]피롤-2(1H)-일)-5-메틸-5,8-디하이드로피리도[2,3-d]피리미딘-7(6H)-온, 또는
트랜스-(5R)-4-(5-((S)-2-(4-클로로페닐)-3-(이소프로필아미노)프로피오닐)헥사하이드로피롤[3,4-c]피롤-2(1H)-일)-5-메틸-5,8-디하이드로피리도[2,3-d]피리미딘-7(6H)-온.
또다른 측면에서, 본 발명은 다음의 화합물들을 제공한다:
Figure pct00061
또 다른 측면에서, 본 발명은 또한 치료적으로 유효량의 화학식 I, II, III, IV, V, VI, VII, VIII, IX, X, XI 또는 XII의 화합물 또는 그의 약학적으로 허용가능한 염을 포함하는 약학 조성물을 제공한다.
일부 실시양태에서, 본 발명은 또한 치료 유효량의 화학식 I, II, III, IV, V, VI, VII, VIII, IX, X, XI 또는 XII의 화합물 또는 그의 약학적으로 허용가능한 염, 및 하나 이상의 약학적으로 허용가능한 담체를 포함하는 약학 조성물을 제공한다.
본 발명의 약학 조성물은 임의의 적합한 경로 또는 방법, 예를 들어 경구 또는 비경구(예를 들어, 정맥내) 투여에 의해 투여될 수 있다. 화학식 I, II, III, IV, V, VI, VII, VIII, IX, X, XI 또는 XII의 화합물의 치료적으로 유효량은 약 0.001 내지 20mg/kg 체중/일, 바람직하게는 0.01 내지 10 mg/Kg 체중/일 이다.
경구 투여의 경우, 본 발명의 약학 조성물은 일반적으로 정제, 캡슐 또는 용액의 형태로 제공된다. 정제는 본 발명의 화합물 또는 그의 약학적으로 허용가능한 염 및 약학적으로 허용가능한 담체를 함유할 수 있다. 담체는 희석제, 붕해제, 결합제, 윤활제, 착색제 또는 보존제를 포함하지만 이에 제한되지는 않는다. 상기 캡슐은 경질 캡슐과 연질 캡슐을 포함한다.
비경구 투여의 경우, 본 발명의 약학 조성물은 정맥 주사, 근육 주사 또는 피하 주사에 의해 투여될 수 있다. 일반적으로 멸균 수용액 또는 현탁액 또는 동결 건조 분말로 제공되며 적절한 pH 및 등장도로 조정된다.
또 다른 측면에서, 본 발명은 또한 화학식 I, II, III, IV, V, VI, VII, VIII, IX, X, XI 또는 XII의 화합물의 AKT 단백질 키나제에 의해 매개되는 질병 또는 상태를 예방 및/또는 치 료하기 위한 의약의 제조에 있어서의 용도를 제공한다.
또 다른 측면에서, 본 발명은 또한 본 발명의 화학식 I, II, III, IV, V, VI, VII, VIII, IX, X, XI 또는 XII의 화합물 또는 본 발명의 약학 조성물을 필요로 하는 대상에게 투여하는 것을 포함하는, AKT 단백질 키나제에 의해 매개되는 질환 또는 상태를 예방 및/또는 치료하는 방법을 제공한다.
또 다른 측면에서, 본 발명은 또한 AKT 단백질 키나제에 의해 매개되는 질병 또는 상태의 예방 및/또는 치료에 사용하기 위한 본 발명의 화학식 I, II, III, IV, V, VI, VII, VIII, IX, X, XI 또는 XII의 화합물 또는 본 발명의 약학 조성물을 제공한다
AKT 단백질 키나제에 의해 매개되는 질환 또는 상태의 예는 유방암, 전립선암, 또는 난소암을 포함하나 이에 제한되지는 않는다.
본 발명의 화합물은 AKT1, AKT2 및 AKT3에 대한 억제 효과가 있으며, 특히 AKT3에 대해 현저한 억제 효과가 있고, 암세포에 대한 현저한 증식 억제 효과가 있으며, 약동학적 흡수가 양호하고, 경구 흡수 효과가 현저히 우수하다.
또 다른 측면에서, 본 발명은 화학식 V의 화합물의 제조 방법을 제공하며, 하기 합성 반응식을 포함하나 이에 제한되지 않는다:
합성 반응식 1:
Figure pct00062
식중, R2, R6, R8, G, h, 및 j는 위에서 정의된 바와 같고, P1 은 H 또는 아미도 보호기이며, P2 는 아미도 보호기이다.
염기(예: 나트륨 메톡사이드) 및 용매(예: 메탄올)의 존재 하에, 화학식 1-2의 화합물은 화학식 1-1의 화합물로부터 제조되고; 염기(예: 나트륨 메톡사이드) 및 용매(예: 메탄올)의 존재 하에, 화학식 1-2의 화합물을 포름아미딘 아세테이트와 반응시켜 화학식 1-3의 화합물을 제조하고; 염기(예: 디이소프로필에틸아민) 및 용매(예: 아세토니트릴)의 존재 하에, 화학식 1-4의 화합물은 화학식 1-3의 화합물로부터 제조되고; 화학식 1-4의 화합물을 추가로 반응시켜 화학식 1-5의 화합물을 생성하고; 화학식 1-5의 화합물을 화학식 1-6의 화합물과 반응시켜 화학식 1-7의 화합물을 제조하며; 화학식 1-7의 화합물의 보호기를 제거하여 화학식 1-8의 화합물을 제조하며; 화학식 1-8의 화합물을 화학식 1-9의 화합물과 반응시켜 화학식 1-10의 화합물을 제조한다. P1이 아미노 보호기인 경우, 합성 반응식 1은 아미노 보호기를 제거하는 단계를 추가로 포함한다.
합성 반응식 2:
Figure pct00063
식중, R2, R6, R8, G, q, v, s, t, 및 p 는 위에서 정의된 바와 같고, P1 는 H 또는 아미도 보호기이며, P2 는 아미도 보호기이다.
화학식 1-5의 화합물은 합성 반응식 1에 따라 제조되며; 화학식 1-5의 화합물을 화학식 2-6의 화합물과 반응시켜 화학식 2-7의 화합물을 제조하며; 화학식 2-7의 화합물의 보호기를 제거하여 화학식 2-8의 화합물을 제조하며; 화학식 2-8의 화합물을 화학식 1-9의 화합물과 반응시켜 화학식 2-10의 화합물을 제조한다. P1이 아미도 보호기인 경우, 합성 반응식 2는 아미도 보호기를 제거하는 단계를 추가로 포함한다.
합성 반응식 3:
Figure pct00064
식중, R2, R6, R8, G, h, j, 및 k 는 위에서 정의된 바와 같고, P1 은 H 또는 아미도 보호기이고, P2 는 아미도 보호기이다.
화학식 1-5의 화합물은 합성 반응식 1에 따라 제조되며; 화학식 1-5의 화합물을 화학식 3-6의 화합물과 반응시켜 화학식 3-7의 화합물을 제조하며; 화학식 3-7의 화합물의 보호기를 제거하여 화학식 3-8의 화합물을 제조하며; 화학식 3-8의 화합물을 화학식 1-9의 화합물과 반응시켜 화학식 3-10의 화합물을 제조한다. P1 아미도 보호기인 경우, 합성 반응식 3은 아미도 보호기를 제거하는 단계를 추가로 포함한다.
합성 반응식 4:
Figure pct00065
식중, R2, R6, R8, e, 및 u 는 위에서 정의된 바와 같고, P1 는 H 또는 아미도 보호기이며, P2 는 아미도 보호기이다.
화학식 1-5의 화합물은 합성 반응식 1에 따라 제조되며; 화학식 1-5의 화합물을 화학식 4-6의 화합물과 반응시켜 화학식 4-7의 화합물을 제조하며; 화학식 4-7의 화합물의 보호기를 제거하여 화학식 4-8의 화합물을 제조하며; 화학식 4-8의 화합물을 화학식 1-9의 화합물과 반응시켜 화학식 4-10의 화합물을 제조한다. P1이 아미도 보호기인 경우, 합성 반응식 4는 아미도 보호기를 제거하는 단계를 추가로 포함한다.
또다른 측면에서, 본 발명은 화학식 VIII의 화합물을 제조하는 방법을 제공하며, 다음의 합성 반응식들을 포함하나 이에 제한되지는 않는다:
합성 반응식 5:
Figure pct00066
식중, R2, R10, R8, G, h, 및 j 는 위에서 정의된 바와 같고, P1 는 H 또는 아미도 보호기이고, P2 는 아미도 보호기이다.
염기(예:수소화나트륨) 및 용매(예: 테트라하이드로푸란)의 존재 하에, 화학식 5-2의 화합물은 화학식 5-1의 화합물로부터 제조되고; 염기(예: 트리에틸아민) 및 용매(예: 이소프로판올)의 존재 하에, 화학식 5-2의 화합물을 NH2P2와 반응시켜 화학식 5-3의 화합물을 제조하고; 염기(예: 수소화나트륨) 및 용매(예: DMF)의 존재 하에, 화학식 5-4의 화합물은 화학식 5-3의 화합물로부터 제조되고; 화학식 5-4의 화합물의 보호기를 제거하여 화학식 5-5의 화합물을 제조하며; 화학식 5-5의 화합물을 화학식 1-6의 화합물과 반응시켜 화학식 5-7의 화합물을 제조하며; 화학식 5-7의 화합물의 보호기를 제거하여 화학식 5-8의 화합물을 제조하며; 화학식 5-8의 화합물을 화학식 1-9의 화합물과 반응시켜 화학식 5-10의 화합물을 제조한다. P1이 아미도 보호기인 경우, 합성 반응식 5는 보호기를 제거하는 단계를 추가로 포함한다.
합성 반응식 6:
Figure pct00067
식중, R2, R10, R8, G, q, s, v, t, 및 p 는 위에서 정의된 바와 같고, P1 는 H 또는 아미도 보호기이며, P2 는 아미도 보호기이다.
화학식 5-5의 화합물은 합성 반응식 5에 따라 제조되고; 화학식 5-5의 화합물을 화학식 2-6의 화합물과 반응시켜 화학식 6-7의 화합물을 제조하며; 화학식 6-7의 화합물의 보호기를 제거하여 화학식 6-8의 화합물을 제조하며; 화학식 6-8의 화합물을 화학식 1-9의 화합물과 반응시켜 화학식 6-10의 화합물을 제조한다. P1 이 아미도 보호기인 경우, 합성 반응식 6은 보호기를 제거하는 단계를 추가로 포함한다.
합성 반응식 7:
Figure pct00068
식중, R2, R10, R8, G, h, j, 및 k 는 위에서 정의된 바와 같고, P1 은 H 또는 아미도 보호기이며, P2 는 아미도 보호기이다.
화학식 5-5의 화합물은 합성 반응식 5에 따라 제조되고; 화학식 5-5의 화합물을 화학식 3-6의 화합물과 반응시켜 화학식 7-7의 화합물을 제조하며; 화학식 7-7의 화합물의 보호기를 제거하여 화학식 7-8의 화합물을 제조하며; 화학식 7-8의 화합물을 화학식 1-9의 화합물과 반응시켜 화학식 7-10의 화합물을 제조한다. P1이 아미도 보호기인 경우, 합성 반응식 7은 보호기를 제거하는 단계를 추가로 포함한다.
합성 반응식 8:
Figure pct00069
식중, R2, R10, R8, G, e, 및 u 는 위에서 정의된 바와 같고, P1 는 H 또는 아미도 보호기이며, P2 는 아미도 보호기이다.
화학식 5-5의 화합물은 합성 반응식 5에 따라 제조된다; 화학식 5-5의 화합물을 화학식 4-6의 화합물과 반응시켜 화학식 8-7의 화합물을 제조하며; 화학식 8-7의 화합물의 보호기를 제거하여 화학식 8-8의 화합물을 제조하며; 화학식 8-8의 화합물을 화학식 1-9의 화합물과 반응시켜 화학식 8-10의 화합물을 제조한다. P1 이 아미도 보호기인 경우, 합성 반응식 8은 보호기를 제거하는 단계를 추가로 포함한다.
합성 반응식 9:
Figure pct00070
식중, X 는 할로겐이고, R6, h, j, 및 G 는 위에서 정의된 바와 같고, P1 은 H 또는 아미도 보호기이며, P2 는 아미도 보호기이다.
화학식 9-2의 화합물은 화학식 9-1의 화합물로부터 제조되며; 화학식 9-2의 화합물을 화학식 1-6의 화합물과 반응시켜 화학식 9-3의 화합물을 제조하며; 화학식 9-3의 화합물이 환원되어 화학식 9-4의 화합물이 생성되고; 화학식 9-4의 화합물은 고리 형성 반응을 거쳐 화학식 9-5의 화합물을 제조하고; 화학식 9-5의 화합물의 보호기를 제거하여 화학식 9-6의 화합물 또는 그의 염을 제조하고, 이를 화학식 1-9의 화합물과 추가로 반응시켜 화학식 9-7의 화합물을 제조한다. P1이 아미도 보호기인 경우, 합성 반응식 9는 보호기를 제거하는 단계를 추가로 포함한다.
합성 반응식 10:
Figure pct00071
식중, X 는 할로겐, R6, q, v, s, t, p 및 G 는 위에서 정의된 바와 같고, P1 은 H 또는 아미도 보호기이며, P2 는 아미도 보호기이다.
화학식 9-2의 화합물은 화학식 9-1의 화합물로부터 제조되며; 화학식 9-2의 화합물을 화학식 2-6의 화합물과 반응시켜 화학식 10-3의 화합물을 제조하며; 화학식 10-3의 화합물이 환원되어 화학식 10-4의 화합물이 생성되고; 화학식 10-4의 화합물은 고리 형성 반응을 거쳐 화학식 10-5의 화합물을 제조하고; 화학식 10-5의 화합물의 보호기를 제거하여 화학식 10-6의 화합물 또는 그의 염을 제조하고, 이를 화학식 1-9의 화합물과 추가로 반응시켜 화학식 10-7의 화합물을 제조한다. P1이 아미도 보호기인 경우, 합성 반응식 10은 보호기를 제거하는 단계를 추가로 포함한다.
합성 반응식 11:
Figure pct00072
식중, X는 할로겐, R6, h, k, j, 및 G 는 위에서 정의된 바와 같고, P1 는 H 또는 아미도 보호기이며, P2 는 아미도 보호기이다.
화학식 9-2의 화합물은 화학식 9-1의 화합물로부터 제조되고; 화학식 9-2의 화합물을 화학식 11-1의 화합물과 반응시켜 화학식 11-2의 화합물을 제조하고; 화학식 11-2의 화합물이 환원되어 화학식 11-3의 화합물이 생성되고; 화학식 11-3의 화합물은 고리 형성 반응을 거쳐 화학식 11-4의 화합물을 제조하고; 화학식 11-4의 화합물의 보호기를 제거하여 화학식 11-5의 화합물 또는 그의 염을 제조하고, 이를 화학식 1-9의 화합물과 추가로 반응시켜 화학식 11-6의 화합물을 제조한다. P1이 아미도 보호기인 경우, 합성 반응식 11은 보호기를 제거하는 단계를 추가로 포함한다.
합성 반응식 12:
Figure pct00073
식중, R6, R8, h, k, j, 및 G 는 위에서 정의된 바와 같고, P1 은 H 또는 아미도 보호기이고, and P2 는 아미도 보호기이다.
화학식 12-1 의 화합물은 화학식 1-5의 화합물과 화학식 11-1의 화합물을 반응시킴으로써 제조되고; 화학식 12-1의 화합물의 보호기는 화학식 12-2의 화합물을 제조하기 위해 제거되고; 화학식 12-2의 화합물은 화학식 1-9 의 화합물과 반응하여 화학식 12-3의 화합물을 제조한다. P1 이 아미도 보호기인 경우, 합성 반응식 12는 상기 보호기를 제거하는 단계를 추가로 포함한다.
당업자들은 L이 R12 로 치환된 경우, 본 발명의 화합물은 위에서 언급한 합성 방식을 참조하여 제조할 수 있다는 것을 이해할 것이다.
도 1은 실시예 15의 이성질체 2의 단일 분자의 개략도이다.
도 2는 실시예 15의 이성질체 2의 단결정의 비대칭 구조 단위의 개략도이다.
도 3은 실시예 34의 이성질체 1의 단일 분자의 개략도이다.
도 4는 실시예 34의 이성체 1의 단결정의 비대칭 구조 단위의 개략도이다.
도 5는 실시예 34의 이성질체 3의 단일 분자의 개략도이다.
도 6은 실시예 34의 이성질체 3의 단결정의 비대칭 구조 단위의 개략도이다.
정의
달리 명시되지 않는 한 명세서 및 청구범위에서 사용되는 다음 용어는 다음의 의미를 갖는다:
본원에 사용된 용어 "화합물"은 그의 모든 입체이성질체 및 호변이성질체를 포함한다.
본 발명의 화합물은 비대칭일 수 있고, 예를 들어, 하나 이상의 입체이성질체를 가질 수 있다. 달리 명시되지 않는 한, 모든 입체 이성질체는 예를 들어 거울상 이성질체 및 부분입체 이성질체를 포함한다. 발명의 비대칭 탄소 원자를 함유하는 화합물은 광학적으로 활성인 순수한 형태 또는 라세미 형태로 분리될 수 있다. 광학적으로 활성의 순수한 형태의 화합물은 이들의 라세미 혼합물로부터 분리되거나 키랄 원료 물질 또는 키랄 시약을 사용하여 합성될 수 있다. 라세미체, 부분입체 이성질체 및 거울상 이성질체는 모두 본 발명의 범위에 포함된다.
본 발명의 화합물은 또한 그의 호변이성질체를 포함한다. 호변 이성질체는 단일 결합과 인접한 이중 결합의 교환에서 파생되며, 이는 하나의 양성자를 함께 전달하는 것을 동반한다.
"선택적" 또는 "선택적으로"라는 용어는 후술하는 사건 또는 상황이 발생할 수도 있고 일어나지 않을 수도 있음을 의미하며, 설명에는 사건 또는 상황의 발생 및 발생하지 않음이 포함된다.
본 명세서에서 사용된 수치 범위는 주어진 범위의 각 정수를 의미한다. 예를 들어, "C1-C6"은 기가 1개의 탄소 원자, 2개의 탄소 원자, 3개의 탄소 원자, 4개의 탄소 원자, 5개의 탄소 원자 또는 6개의 탄소 원자를 가질 수 있음을 의미하고; "C3-C6"은 기가 3개의 탄소 원자, 4개의 탄소 원자, 5개의 탄소 원자, 또는 6개의 탄소 원자를 가질 수 있음을 의미한다.
"치환된"이라는 용어는 특정 원자 또는 기의 원자가가 정상이고 치환된 화합물이 안정한 한, 특정 원자 또는 기의 임의의 하나 이상의 수소 원자가 치환기로 대체됨을 의미한다. 치환기가 케토기(즉, =O)인 경우, 두 개의 수소 원자가 대체됨을 의미한다. 달리 명시되지 않는 한, 치환기의 유형 및 수는 그들이 화학적으로 실현 가능한 한 임의적일 수 있다.
임의의 변수(예: R)가 화합물의 구성 또는 구조에서 한번 이상 발생하는 경우, 각 경우의 그 정의는 각 경우에서 독립적이다. 따라서, 예를 들어, 기가 1-5 R로 치환된 경우, 상기 기는 임의로 최대 5 R로 치환될 수 있고 R 은 각각의 경우에 독립적인 옵션이 있다.
또한, 그들의 치환체 및/또는 변이체의 조합은 그러한 조합으로 안정한 화합물이 형성되는 경우에만 허용된다.
용어 "알킬"은 표시된 수의 탄소 원자를 갖는 선형 또는 분지형 포화 탄화수소 기를 포함하는 포화 지방족 탄화수소 기를 지칭한다. 예를 들어, 용어 "C1-C6 알킬"은 C1 알킬, C2 알킬, C3 알킬, C4 알킬, C5 알킬 및 C6 알킬을 포함하고, 그의 예로는 메틸, 에틸, n-프로필, 이소프로필, n-부틸, 이소부틸, 터트-부틸, n-펜틸, 2-펜틸, 3-펜틸, n-헥실, 2-헥실, 3-헥실 등을 포함한다. 이는 메틸렌 및 에틸렌과 같은 2가 기일 수 있다.
용어 "알콕시"는 알킬-O- 구조를 갖는 기를 지칭하며, 여기서 알킬은 선형 또는 분지형 포화 1가 탄화수소 기를 포함한다. 예를 들어, "C1-C3 알콕시"는 메톡시, 에톡시, n-프로폭시 및 이소프로폭시를 포함한다.
용어 "알카노일"은 RC(=O)- 구조를 갖는 기를 지칭하며, 여기서 R은 H 또는 선형 또는 분지형 포화 1가 탄화수소 기를 포함하는 포화 지방족 탄화수소 기이다. 예를 들어, "C1-C4 알카노일"은 C1 알카노일, C2 알카노일, C3 알카노일 및 C4 알카노일을 포함한다. 적합한 알카노일은 포르밀, 아세틸, n-프로피오닐, 이소프로피오닐, n-부티릴, 이소부티릴 및 터트-부티릴을 포함한다.
용어 "할로겐화"는 하나 이상의 할로겐 원자로 치환된 것을 의미하며, 할로겐 원자의 예는 불소 원자, 염소 원자, 브롬 원자 및 요오드 원자를 포함한다. 예를 들어, 용어 "할로겐화 C1-C3 알콕시"는 하나 이상의 할로겐 원자에 의해 치환된 C1-C3 알콕시를 말하며, 그의 예로는 OCF3, OCHF2, OCH2F, OCH2CF3, OCH2CHF2, 또는 OCF2CF3가 포함되나 이에 제한되지 않는다. 예를 들어, 용어 "할로겐화 C1-C3 알킬"은 하나 이상의 할로겐 원자에 의해 치환된 C1-C3 알킬을 말하며, 그의 예로는 CF3, CHF2, CH2F, CH2CF3, CH2CHF2, 또는 CF2CF3가 포함되지만 이에 제한되지는 않는다.
용어 "시클로알킬"은 헤테로원자 또는 이중 결합이 없는 모노시클릭 포화 탄화수소 시스템을 의미한다. 용어 "C3-C6 시클로알킬"의 예는 시클로프로필, 시클로부틸, 시클로펜틸 및 시클로헥실을 포함하지만 이에 제한되지는 않는다.
용어 "아릴"은 공액 π-전자 시스템을 갖는 전체 탄소 모노시클릭 또는 융합된 폴리시클릭 방향족 고리 그룹을 나타내며, 이는 모 방향족 고리 시스템의 단일 탄소 원자에서 하나의 수소 원자를 제거하여 얻어진다. 예를 들어, 아릴은 6-20개의 탄소 원자, 6-14개의 탄소 원자, 또는 6-10개의 탄소 원자를 가질 수 있다. 포화, 부분 불포화 고리, 또는 방향족 카복실릭 고리와 융합된 방향족 고리를 포함하는 바이시클릭 기도 또한 포함된다. 예에는 페닐, 나프틸, 안트릴, 인덴, 인단, 1,2-디히드로나프탈렌, 1,2,3,4-테트라히드로나프탈렌이 포함되나 이에 제한되지는 않는다.
용어 "헤테로아릴"은 질소, 산소 및 황으로 이루어진 군으로부터 독립적으로 선택된 헤테로원자를 갖는 적어도 하나의 5-, 6- 및 7-원 고리를 함유하는 1가 아릴을 말하며, 5-10개의 원자(고리 중 적어도 하나는 방향족임)를 가지는 융합된 고리 시스템을 포함한다. 헤테로아릴의 예는 피리딜, 티에닐, 이미다졸릴, 피리미디닐, 피리딜, 푸릴, 피라지닐, 티아졸릴, 퀴놀리닐, 이소퀴놀리닐, 인돌릴, 벤즈이미다졸릴, 이미다조피리딜, 벤조푸라닐, 피리다지닐, 이소인돌릴을 포함하며, 이에 한정되지는 않는다.
"원(membered)"이라는 용어는 고리를 구성하는 백본 원자의 수를 나타낸다. 예를 들어, "5-10 원"은 고리를 구성하는 백본 원자의 수가 5, 6, 7, 8, 9 또는 10임을 의미한다. 따라서 예를 들어, 피리딘, 피페리딘, 피페라진 및 벤젠은 6원 고리이며, 티오펜 및 피롤은 5원 고리이다.
용어 "헤테로사이클릭 고리"는 고리 탄소 원자 및 1 내지 2개의 고리 헤테로원자를 갖는 5 내지 12원 포화 비-방향족 시스템을 말하며, 여기서 헤테로원자는 질소, 황 및 산소 원자로 이루어진 군으로부터 독립적으로 선택된다. 하나 이상의 질소 원자를 함유하는 헤테로사이클릭 기에서, 원자가가 허용되는 한 접합점은 탄소 또는 질소 원자일 수 있다. 헤테로사이클릭 고리는 모노사이클릭 또는 2개 이상의 고리가 융합 고리, 가교 고리 또는 스피로 고리의 형태로 존재하고, 적어도 하나의 고리가 하나 이상의 헤테로원자를 포함하는 바이사이클릭 고리와 같은 폴리사이클릭 고리 시스템일 수 있다
치환기 R12는 원자가가 허용되는 하나의 고리의 모든 원자에 결합할 수 있다. 치환체 및/또는 이의 변이체의 조합은 이러한 조합으로 안정한 화합물이 형성되는 경우에만 허용된다. 당업자는 하나 이상의 R12 치환기를 함유하는 임의의 기에 대해, 공간에 존재하는 것이 불가능하고/또는 합성될 수 없는 임의의 치환 또는 치환 패턴이 도입되지 않을 것임을 이해할 수 있다.
단일 물결선
Figure pct00074
및 이중 물결선
Figure pct00075
은 모두 화학 결합이 연결된 위치를 나타내며 둘다 동일한 화학적 의미를 갖는다. 달리 명시되지 않는 한,
Figure pct00076
와
Figure pct00077
"의 차이는 연결 위치 또는 순서일 뿐이다.
용어 "아미도 보호기"는 아미도의 질소 위치에서 부반응을 방지하기에 적합한 보호기를 의미한다. 아미도 보호기의 예는 Boc, DMB, 벤질옥시카보닐, 9-플루오레닐메틸옥시카보닐, 벤질, 포르밀 및 아세틸을 포함하지만 이에 제한되지는 않는다.
"약학적으로 허용가능한 염"이라는 용어는 생물학적 부작용 없이 특정 화합물의 유리산 및 염기의 생물학적 효능을 유지하는 염을 말하며, 예를 들어 산(유기산 및 무기산 포함) 부가염 또는 염기(유기 염기 및 무기 염기 포함) 부가염이다.
본 발명의 약학적으로 허용가능한 염은 산 또는 염기성 기를 함유하는 모 화합물로부터 통상적인 화학적 방법에 의해 합성될 수 있다. 일반적으로, 이러한 염은 유리 산 또는 염기 형태의 이러한 화합물을 물 또는 유기 용매 또는 이들의 혼합물 중 화학양론적으로 적절한 양의 염기 또는 산과 반응시켜 제조된다.
"유효량" 또는 "치료 유효량"이라는 용어는 무독성이지만 원하는 효과를 달성할 수 있는 충분한 양의 약물 또는 의약을 지칭한다.
"약학적으로 허용되는 담체"라는 용어는 신체에 명백한 자극 효과가 없고 활성 화합물의 생물학적 활성 및 성능을 손상시키지 않는 담체를 의미하며, 여기에는 인간이나 동물에 사용할 수 있는 주 식품의약국(State Food and Drug Administration)에서 승인된 모든 희석제, 붕해제, 접착제, 활택제 및 습윤제를 포함하지만 이에 한정되지는 않는다.
특허청구범위 및 명세서에 사용된 약어와 그 의미는 다음과 같다:
M: mol/L
mM: mmol/L
nM: nmol/L
Boc: 터트-부톡시카보닐
DMB: 2,4-디메톡시벤질
NMP: N-메틸피롤리돈
DMAP: p-디메틸아미노피리딘
DMF: N, N-디메틸포름아미드
DEA: 디에틸아민
PE: 페트롤륨 에테르
EA: 에틸 아세테이트
HATU: (2-(7-아자벤조트리아졸)-N,N,N',N'-테트라메틸우레아 헥사플루오로포스페이트)
RT: 머무름 시간
SFC: 초임계 유체 크로마토그래피
h: 시간
min: 분
TK: 티로신 키나제
SEB: 형광 신호 인핸서
HTRF: 균질한 시간-분해 형광
DTT: 디티오트레이톨
NR: 계산되지 않음
제조 방법:
이하, 본 발명의 화합물의 제조방법을 보다 구체적으로 설명하나, 본 발명의 범위가 이들 특정의 제조방법에 의해 제한되는 것은 아니다. 또한, 반응물, 용매, 염기, 사용된 화합물의 량, 반응 온도, 반응 시간, 등의 반응 조건은 하기 실시예에 한정되는 것은 아니다.
본 발명의 화합물은 또한 본 명세서에 기재되거나 당업계에 공지된 다양한 합성 방법을 조합하여 편리하게 제조할 수 있으며, 이러한 조합은 당업자에 의해 용이하게 수행될 수 있다.
공정 A:
Figure pct00078
반응 조건: a) 에틸 크로토네이트, 나트륨 메톡사이드(30 중량%)의 메탄올 용액, 메탄올; b) 포름아미딘 아세테이트, 나트륨 메톡사이드의 메탄올 용액(30 중량%); c) 옥시염화인, 디이소프로필에틸아민, 아세토니트릴; d) 암모니아(25-28 중량%); e) 터트-부틸피페라진-1-카복실레이트; f) 트리플루오로아세트산, 디클로로메탄; g) (S)-2-(4-클로로페닐)-3-(이소프로필아미노)프로피온산, 2-(7-벤조트리아졸 옥사이드)-N,N,N',N'-테트라메틸우레아 헥사플루오로포스페이트, 디이소프로필에틸아민, 디클로로메탄.
실시예 1
4-(4-((S)-2-(4-클로로페닐)-3-(이소프로필아미노)프로피오닐)피페라진-1-일)-5-메틸-5,8-디히드로피리도[2,3-d]피리미딘-7(6H)-온
Figure pct00079
a) 트리메틸 2-메틸프로판-1,1,3-트리카복실레이트
질소 보호하에, 나트륨 메톡사이드(30 wt%)의 메탄올 용액(8.16 g)을 20℃에서 메탄올(400 mL)에 첨가하였다. 이어서, 생성된 용액을 70℃로 가열하고, 디메틸 말로네이트(24.64g) 및 에틸 크로토네이트(21.08g)를 균일하게 혼합하였고, 나트륨 메톡사이드의 메탄올 용액에 적가하고, 70℃에서 3시간 동안 반응시켰다. 반응 종료 후, 용매를 감압하에 증발시키고, 에틸아세테이트(100mL)를 가하고 4M 염산으로 pH를 7로 조정한 후 물 100mL를 가하였다. 유기 상을 분리하고 농축하여 황색 액체 45.48g을 얻었고, 이를 정제 없이 다음 단계에 직접 사용하였다.
Figure pct00080
b) 메틸 3-(4,6-디히드록시피리미딘-5-일)부티레이트
질소 보호 하에, 나트륨 메톡사이드(30 중량%)의 메탄올 용액(97.55 g)을 20℃에서 메탄올(400 mL)에 첨가하였다. 이어서, 생성된 용액을 -15℃로 냉각시키고, 포름아미딘 아세테이트(22.98g)를 첨가하였다. 생성된 반응 시스템을 30분 동안 반응시켰다.
이어서, 트리메틸 2-메틸프로판-1,1,3-트리카복실레이트(45.72g)를 적가하고, 천천히 온도를 20℃까지 올려 12시간 동안 반응을 계속하였다. 반응 종료 후, 반응 용액을 0℃로 냉각하고 4M 염산을 첨가하여 pH=2로 조정하였다. 고체 침전물을 얻기 위해 용매를 감압하에 증발시킨 후, 0℃에서 물 100mL를 첨가하였다. 고체를 흡입 여과에 의해 수집하였다. 필터 케이크를 물(50mL)로 세척하고 진공에서 건조하여 29.60g의 황색 고체를 얻었고, 이를 정제 없이 다음 단계에서 직접 사용하였다.
Figure pct00081
c) 메틸 3-(4,6-디클로로피리미딘-5-일)부티레이트
질소 보호 하에, 메틸 3-(4,6-디히드록시피리미딘-5-일)부티레이트(9.1g)를 22℃에서 아세토니트릴(100mL)에 분산시키고, 옥시염화인(16.03g) 및 디이소프로필에틸아민(7.79g)을 차례로 적가하여 분산시켰다. 반응계는 분명히 발열성이었고, 고체가 서서히 용해 및 맑아진 다음, 온도를 60℃로 상승시키고 반응 용액을 18시간 동안 반응시켰다. 반응이 완료된 후, 반응 용액을 0℃로 냉각시키고, 200mL 얼음물에 붓고, 포화 중탄산나트륨 용액으로 pH = 7-8로 조정하고, 에틸 아세테이트로(50mL x 3)로 추출하였다. 유기 상을 혼합하고, 감압하에 용매를 증발시키고, 잔류물을 실리카겔 컬럼크로마토그래피(페트롤륨 에테르:에틸 아세테이트=4:1, 부피비)로 분리하여 갈색 액체 8.36g을 얻었다.
d) 4-클로로-5-메틸-5,8-디히드로피리도[2,3-d]피리미딘-7(6H)-온
메틸 3-(4,6-디클로로피리미딘-5-일)부티레이트(4.12g) 및 암모니아(25-28wt%, 25mL)를 20℃에서 100mL 오토클레이브에 첨가하고, 반응 시스템을 60℃로 가열하고 18시간 동안 반응시켰다. 반응 종료 후, 반응 용액을 0℃로 냉각하고, 흡인 여과하고, 필터 케이크를 30mL(석유 에테르:에틸 아세테이트 = 10:1, 부피비)로 펄프화하여 담색 고체 1.51g을 얻었다. 1H NMR(300MHz, DMSO-d6)δ(ppm)1.09-1.12(d, J=7.2Hz, 3H), 2.36-2.49(m, 1H), 2.92-3.00(m, 1H), 3.27-3.36(m, 1H), 8.54(s, 1H).
e) 터트-부틸 4-(5-메틸-7-옥소-5,6,7,8-테트라히드로피리도[2,3-d]피리미딘-4-일)피페라진-1-카복실레이트
질소 보호 하에, 4-클로로-5-메틸-5,8-디히드로피리도[2,3-d]피리미딘-7(6H)-온(0.42g) 및 터트-부틸피페라진-1-카복실레이트(10.76g)을 140℃로 직접 가열하고 6시간 동안 교반하였다. 반응 종료 후, 반응 용액을 0℃로 냉각하고, 얼음물 30mL에 붓고, 4M 염산으로 pH=7로 조정하고, 디클로로메탄(20mL×2)으로 추출하였다. 상기 용매를 감압하에 증발하고, 잔여물을 실리카겔 컬럼크로마토그래피(디클로로메탄:메탄올=30:1, 부피비)로 분리하여 담황색 고체 0.67g을 얻었다. LC-MS(ESI) m/z: 348, (M+H).
Figure pct00082
f) 5-메틸-4-(피페라진-1-일)-5,8-디히드로피리도[2,3-d]피리미딘-7(6H)-온
터트-부틸
4-(5-메틸-7-옥소-5,6,7,8-테트라히드로피리도[2,3-d]피리미딘-4-일)피페라진-1-카복실레이트(0.67g)를 25℃에서 디클로로메탄(10mL)에 용해시키고, 트리플루오로아세트산(1.31g)을 첨가하고, 상기 반응계를 16시간 동안 반응시켰다. 반응 종료 후, 용매를 감압하에 증발시키고, 잔여물을 0℃로 냉각하고, 20% 수산화나트륨 용액으로 pH=12로 조정하고, 디클로로메탄(20 mL x 6)으로 추출하였다. 유기층을 혼합하여 감압하에 증발하여 용매를 제거하고, 잔여물을 실리카겔 컬럼크로마토그래피(디클로로메탄:메탄올=20:1, 부피비)로 분리하여 황색 고체 0.39g을 얻었고 다음 단계에서 이를 그대로 사용하였다.
g) 4-(4-((S)-2-(4-클로로페닐)-3-(이소프로필아미노)프로피오닐)피페라진-1-일)-5-메틸-5,8-디히드로피리도[2,3-d]피리미딘- 7(6H)-온
질소 보호 하에, 5-메틸-4-(피페라진-1-일)-5,8-디히드로피리도[2,3-d]피리미딘-7(6H)-온(0.10 g) 및 (S)-2-(4-클로로페닐)-3-(이소프로필아미노)프로피온산(0.107g)을 20℃에서 디클로로메탄(5mL)에 용해시킨 다음, 2-(7-벤조트리아졸 옥사이드)-N,N,N',N'-테트라메틸우레아 헥사플루오로포스페이트(0.184g) 및 디이소프로필에틸아민(0.078g)을 별도로 첨가하고, 반응계를 25℃에서 16시간 동안 반응시켰다. 반응이 완료된 후, 반응 용액에 물 10mL를 첨가하였다. 유기 상을 분리하고 포화 염화나트륨 용액(2 mL)으로 세척하였다. 감압하에서 용매를 증발시킨 후 잔여물을 컬럼크로마토그래피(디클로로메탄:메탄올=25:1, 부피비)로 분리하여 백색 고체 0.12g을 얻었다. LC-MS(ESI) m/z: 471(M+H).
Figure pct00083
실시예 2:
(S)-4-(4-((S)-2-(4-클로로페닐)-3-(이소프로필아미노)프로피오닐)피페라진-1-일)-5-메틸-5,8-디히드로피리도[2,3-d]피리미딘-7(6H)-온 및 (R)-4-(4-((S)-2-(4-클로로페닐)-3-(이소프로필아미노)프로피오닐)피페라진-1-일)-5-메틸-5,8-디히드로피리도[2,3-d]피리미딘-7(6H)-온.
Figure pct00084
질소 보호 하에, 5-메틸-4-(피페라진-1-일)-5,8-디히드로피리도[2,3-d]피리미딘-7(6H)-온(0.49g) 및 (S)-2-(4-클로로페닐)-3-(이소프로필아미노)프로피온산(0.53g)을 20℃에서 N,N-디메틸포름아미드(20mL)에 용해시킨 다음, 2-(7-벤조트리아졸 옥사이드)-N,N,N',N'-테트라메틸우레아 헥사플루오로포스페이트(1.50g) 및 디이소프로필에틸아민(0.51g)을 별도로 첨가하고, 반응계를 25℃에서 4시간 동안 반응시켰다. 반응이 완료된 후, 반응 용액에 물 100mL를 첨가하였다. 유기 상을 분리하고 포화 염화나트륨 용액(40mL)으로 세척하였다. 감압 하에서 용매를 증발시킨 후, 잔여물을 실리카겔 컬럼 크로마토그래피(디클로로메탄:메탄올=25:1, 부피비)로 분리하여 백색 고체 0.59g을 얻었다. 키랄 분해 후, (S) 구성 생성물 0.21g(de% = 100%) 및 (R) 구성 생성물 0.19g(de% = 99%)을 얻었다.
분해능 기기: waters SFC200; 칼럼: Daicel Chiralcel OD, 250×30 mm ID, 5μm; 이동 상 A: CO2, 이동 상 B: 이소프로판올(0.1% NH3 ·H2O 함유), A:B = 70:30(부피비).
Figure pct00085
공정 B:
Figure pct00086
반응 조건: a) 메틸 아크릴레이트, 나트륨 메톡사이드(30 중량%)의 메탄올 용액, 메탄올; b) 포름아미딘 아세테이트, 나트륨 메톡사이드, 메탄올; c) 옥시염화인, 디이소프로필에틸아민, 아세토니트릴; d) 암모니아(25-28 중량%); e) 터트-부틸피페라진-1-카복실레이트; f) 트리플루오로아세트산, 디클로로메탄; g) (S)-2-(4-클로로페닐)-3-(이소프로필아미노)프로피온산, 2-(7-벤조트리아졸 옥사이드)-N,N,N',N'-테트라메틸우레아 헥사플루오로포스페이트, 디이소프로필에틸아민, 디클로로메탄.
실시예 3
(S)-4-(4-(2-(4-클로로페닐)-3-(이소프로필아미노)프로피오닐)피페라진-1-일)-5,8-디히드로피리도[2,3-d]피리미딘-7(6H)-온
Figure pct00087
제조는 에틸 크로토네이트 대신 메틸 아크릴레이트를 사용하는 실시예 1에 기재된 방법에 따라 수행하였다.
Figure pct00088
실시예 4
4-((R)-4-((S)-2-(4-클로로페닐)-3-(이소프로필아미노)프로피오닐)-2-메틸피페라진-1-일)-5,8-디히드로피리도[2,3-d]피리미딘-7(6H)-온
Figure pct00089
터트-부틸피페라진-1-카복실레이트 대신에 터트-부틸 (R)-3-메틸피페라진-1-카복실레이트를 사용하는 실시예 3에 기재된 방법에 따라 제조하였다.
Figure pct00090
실시예 5
4-((S)-4-((S)-2-(4-클로로페닐)-3-(이소프로필아미노)프로피오닐)-2-메틸피페라진-1-일)-5,8-디히드로피리도[2,3-d]피리미딘-7(6H)-온
Figure pct00091
터트-부틸피페라진-1-카복실레이트 대신에 터트-부틸 (S)-3-메틸피페라진-1-카복실레이트를 사용하는 실시예 3에 기재된 방법에 따라 제조하였다.
Figure pct00092
공정 C:
Figure pct00093
반응 조건: a) 에틸 크로토네이트, 나트륨 메톡사이드(30 중량%)의 메탄올 용액, 메탄올; b) 인산수소이나트륨, 탈이온수, 염산, 리파제(Candida rugosa), 수산화나트륨; c) 포름아미딘 아세테이트, 나트륨 메톡사이드, 메탄올; d) 옥시염화인, 디이소프로필에틸아민, 아세토니트릴; e) 암모니아(25-28 중량%).
중간체
(R)-4-클로로-5-메틸-5,8-디히드로피리도[2,3-d]피리미딘-7(6H)-온
Figure pct00094
a) 트리메틸 2-메틸프로판-1,1,3-트리카복실레이트
질소의 보호 하에, 나트륨 메톡사이드(30 wt%, 50.32 g)의 메탄올 용액을 20℃에서 메탄올(900 mL)에 첨가하였다. 이어서, 생성된 용액을 70℃로 가열하였다. 디메틸 말로네이트(461.12g) 및 에틸 크로토네이트(349.46g)를 균일하게 혼합한 후, 나트륨 메톡사이드의 메탄올 용액에 적가하고, 70℃에서 3시간 동안 반응시켰다. 반응 종료 후 용매를 감압하에 증발하고, 에틸 아세테이트(1L)를 가하고 4M 염산으로 pH를 7~8로 조정한 후 물 500mL를 가하였다. 유기 상을 분리하고 농축하여 황색 액체 777.68g을 얻었다.
Figure pct00095
b) 트리메틸 (R)-2-메틸프로판-1,1,3-트리카복실레이트
인산수소이나트륨(4.5g)을 25℃에서 1.5L의 탈이온수에 용해시키고, 2N 염산으로 pH를 7.05로 조정하였다. 트리메틸 2-메틸프로판-1,1,3-트리카복실레이트(150.46g) 및 리파제(Candida rugosa, 40g, 6일 첨가)를 첨가하고, pH를 2N 수산화나트륨 용액으로 7.0-7.6으로 조정하였다. 반응은 35℃에서 6일 동안 수행하였다. 키랄 테스트 결과는 ee% > 98% 이다(키랄 테스트 조건: Chiralpak IC, 4.6 x 250 mm, 5 μm, n-헥산:에탄올=9:1, 부피비). 반응 용액을 10℃로 냉각하고, 3M 염산으로 pH=3-4로 조정한 후, 에틸 아세테이트 500mL를 첨가하였다. 흡인 여과한 후, 얻어진 필터 케이크를 에틸 아세테이트(600mL)로 세척하고, 분리하고, 포화 중탄산나트륨 수용액(100mL)으로 세척하였다. 이어서, 유기 상을 분리하고 농축하여 담황색 액체 26.89g을 얻었다.
Figure pct00096
c) 메틸 (R)-3-(4,6-디히드록시피리미딘-5-일)부티레이트
질소 보호하에 포름아미딘 아세테이트(11.33g)를 20℃에서 메탄올(200mL)에 녹인 후 0℃로 냉각한 후 나트륨 메톡사이드(30%, 55.62g)의 메탄올 용액을 적가하고 0℃ 에서 60분 동안 반응시켰다. 트리메틸(R)-2-메틸프로판-1,1,3-트리카복실레이트(24.07g)의 메탄올(60mL) 용액을 적가하였다. 온도를 자연적으로 20℃로 올려 반응액을 10시간 동안 반응시켰다. 반응 종료 후, 반응 용액을 0℃로 냉각하고, 3N 염산을 첨가하여 pH를 5~6으로 조정하였다. 감압하에서 용매를 증발시킨 후, 잔여물을 0℃로 냉각시키고, 3N 염산을 첨가하여 pH=3으로 조정하여 고체 침전물을 얻었다. 고체를 흡입 여과에 의해 수집하였다. 필터 케이크를 얼음물(100mL)로 세척하고 진공에서 건조하여 18.79g의 백색 고체를 얻었고, 이를 다음 단계에 직접 사용하였다.
d) 메틸 (R)-3-(4,6-디클로로피리미딘-5-일)부티레이트
질소 보호 하에, 메틸 (R)-3-(4,6-디히드록시피리미딘-5-일)부티레이트(14.63g)를 22℃에서 아세토니트릴(70mL)에 분산시키고, 옥시염화인(26.42g) 및 디이소프로필에틸아민(12.51g)을 연속적으로 적가하였다. 반응 시스템은 분명히 발열성이었고, 그 다음 온도를 60°C로 올렸다. 고체를 서서히 용해하여 맑게 하고, 반응 용액을 18시간 동안 계속하였다. 반응 종료 후, 반응 용액을 0℃로 냉각하고, 에틸 아세테이트 100mL를 첨가하였다. 포화 탄산수소나트륨 용액으로 pH를 7~8로 조정하고, 반응 용액을 에틸 아세테이트(50mL×3)로 추출하고, 감압하에 증발하여 유기 상을 제거하여 황색 고체 13.89g을 얻었고, 이는 다음 단계에서 직접 사용되었다.
e) (R)-4-클로로-5-메틸-5,8-디히드로피리도[2,3-d]피리미딘-7(6H)-온
메틸 (R)-3-(4,6-디클로로피리미딘-5-일)부티레이트(13.89g) 및 암모니아(25-28wt%, 70mL)를 20℃에서 100mL 오토클레이브에 첨가하고, 반응 시스템을 50℃로 가열하고 18시간 동안 반응시켰다. 반응 종료 후, 반응 용액을 0℃로 냉각하고, 흡인여과하고, 필터 케이크를 30mL(페트롤륨 에테르:에틸 아세테이트 = 10:1, 부피비)로 펄프화하여 담색 고체 7.32g을 얻었다.
Figure pct00097
공정 D:
Figure pct00098
반응 조건: a) 터트-부틸 2,5-디아자비시클로[2.2.1]헵탄-2-카복실레이트, 4-디메틸아미노피리딘, N-메틸피롤리돈; b) 염화수소/1,4-디옥산(4.0M), 디옥산; c) (S)-2-(4-클로로페닐)-3-(이소프로필아미노)프로피온산, 2-(7-벤조트리아졸 옥사이드)-N,N,N',N'-테트라메틸우레아 헥사플루오로포스페이트, 디이소프로필에틸아민, N,N-디메틸포름아미드.
실시예 6
(5R)-4-(5-((S)-2-(4-클로로페닐)-3-(이소프로필아미노)프로피오닐)-2,5-디아자비시클로[2.2.1]헵탄-2-일)-5-메틸-5,8-디히드로피리도[2,3-d]피리미딘-7(6H)-온
Figure pct00099
a) 터트-부틸 4-(5-메틸-7-옥소-5,6,7,8-테트라히드로피리도[2,3-d]피리미딘-4-일)피페라진-1-카복실레이트
질소 보호 하에, (R)-4-클로로-5-메틸-5,8-디히드로피리도[2,3-d]피리미딘-7(6H)-온(0.30g), 터트-부틸 2,5-디아자비시클로[2.2.1]헵탄-2-카복실레이트(1.21g) 및 4-디메틸아미노피리딘(0.58g)을 22℃에서 N-메틸피롤리돈에 용해시키고, 140℃로 가열하여 6시간 동안 반응시켰다. 반응 종료 후, 반응 용액을 0℃로 냉각하고, 얼음물 30mL에 붓고, 4M 염산으로 pH=4-5로 조정하고, 에틸 아세테이트(20mL x 2)로 추출하였다. 유기 상을 포화 염화나트륨 용액(10 mL x 3)으로 세척하고 감압하에 증발한 후 잔여물을 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피(페트롤륨 에테르:에틸 아세테이트=1:1, 부피비)로 분리하여 옅은 노란색 고체 0.33g을 얻었다. LC-MS(ESI) m/z: 360(M+H).
b)(5R)-4-(2,5-디아자비시클로[2.2.1]헵탄-2-일)-5-메틸-5,8-디히드로피리도[2,3 -d]피리미딘-7(6H)-온
터트-부틸 4-(5-메틸-7-옥소-5,6,7,8-테트라히드로피리도[2,3-d]피리미딘-4-일)피페라진-1-카복실레이트(0.28g)를 25℃에서 다이옥산(3 mL)에 용해시키고, 염화수소/1,4-디옥산(4.0 M, 1.91 g)을 첨가하여 16시간 동안 반응시켰다. 반응 종료 후, 반응 용액을 농축하여 용매를 제거하고, 0℃로 냉각하고, 20% 수산화나트륨 용액으로 pH = 12로 조정하고, 디클로로메탄(20 mL x 8)으로 추출하였다. 유기 상을 감압하에 증발시켜 갈색 고체 0.15g을 얻었고, 이것을 다음 단계에 직접 사용하였다.
c) (5R)-4-(5-((S)-2-(4-클로로페닐)-3-(이소프로필아미노)프로피오닐)-2,5-디아자비시클로[2.2.1]헵탄-2-일)-5-메틸-5,8-디히드로피리도[2,3-d]피리미딘-7(6H)-온
질소 보호 하에, 터트-부틸 4-(5-메틸-7-옥소-5,6,7,8-테트라히드로피리도[2,3-d]피리미딘-4-일)피페라진-1-카복실레이트 (0.15 g) 및 (S)-2-(4-클로로페닐)-3-(이소프로필아미노)프로피온산(0.157g)을 20℃에서 N,N-디메틸포름아미드(5mL)에 용해시킨 다음, 2-(7-벤조트리아졸) 옥사이드)-N,N,N',N'-테트라메틸우레아 헥사플루오로포스페이트(0.26g) 및 디이소프로필에틸아민(0.29g)을 별도로 첨가하였다. 반응계를 25℃에서 16시간 동안 반응시켰다. 반응이 완료된 후, 반응 용액에 물 10mL를 첨가하였다. 유기 상을 분리하고 포화 염화나트륨 용액(2 mL)으로 세척하였다. 상기 유기 상을 감압하에 증발시킨 후 잔여물을 실리카겔 컬럼 크로마토그래피(디클로로메탄:메탄올=20:1, 부피비)로 분리하여 밀색 고체 0.037g을 얻었다.
Figure pct00100
실시예 7
(R)-4-((R)-4-((S)-2-(4-클로로페닐)-3-(이소프로필아미노)프로피오닐)-2-메틸피페라진-1-일)-5-메틸-5,8-디히드로피리도[2,3-d]피리미딘-7(6H)-온
Figure pct00101
터트-부틸 2,5-디아자비시클로[2.2.1]헵탄-2-카복실레이트 대신 (R)-4-Boc-2-메틸피페라진을 사용한 실시예 6에 기재된 방법에 따라 제조하였다.
Figure pct00102
실시예 8
(R)-4-((R)-4-((S)-2-(4-클로로페닐)-3-(이소프로필아미노)프로피오닐)-3-메틸피페라진-1-일)-5-메틸-5,8 -디히드로피리도[2,3-d]피리미딘-7(6H)-온
Figure pct00103
터트-부틸 2,5-디아자비시클로[2.2.1]헵탄-2-카복실레이트 대신 (R)-1-N-Boc-2-메틸피페라진을 사용하는 실시예 6에 기재된 방법에 따라 제조하였다.
Figure pct00104
실시예 9
(R)-4-((S)-4-((R)-2-(4-클로로페닐)-3-(이소프로필아미노)프로피오닐)-3-메틸피페라진-1-일)-5-메틸-5,8-디히드로피리도[2,3-d]피리미딘-7(6H)-온
Figure pct00105
터트-부틸 2,5-디아자비시클로[2.2.1]헵탄-2-카복실레이트 대신 (S)-1-N-Boc-2-메틸피페라진을 사용하는 실시예 6에 기재된 방법에 따라 제조하였다.
Figure pct00106
실시예 10
(R)-4-(8-((S)-2-(4-클로로페닐)-3-(이소프로필아미노)프로피오닐)-3,8-디아자비시클로[3.2.1]옥탄-3-일)-5-메틸-5,8-디히드로피리도[2,3-d]피리미딘-7(6H)-온
Figure pct00107
터트-부틸 2,5-디아자비시클로[2.2.1]헵탄-2-카복실레이트 대신에 터트-부틸 3,8-디아자비시클로[3.2.1]옥탄-8-포르메이트를 사용한 실시예 6에 기재된 방법에 따라 제조하였다..
Figure pct00108
실시예 11
(R)-4-(3-((S)-2-(4-클로로페닐)-3-(이소프로필아미노)프로피오닐)-3,8-디아자비시클로[3.2.1]옥탄-8-일)-5-메틸-5,8-디히드로피리도[2,3-d]피리미딘-7(6H)-온
Figure pct00109
터트-부틸 2,5-디아자비시클로[2.2.1]헵탄-2-카르복실레이트 대신에 터트-부틸 3,8-디아자비시클로[3.2.1]옥탄-3-포르메이트를 사용한 실시예 6에 기재된 방법에 따라 제조하였다.
Figure pct00110
실시예 12
(R)-4-(4-((S)-2-(4-클로로페닐)-3-(이소프로필아미노)프로피오닐)-4,7-디아자스피로[2.5]옥탄-7-일)-5-메틸-5,8-디히드로피리도[2,3-d]피리미딘-7(6H)-온
Figure pct00111
터트-부틸 2,5-디아자비시클로[2.2.1]헵탄-2-카복실레이트 대신에 터트-부틸 4,7-디아자스피로[2.5]옥탄-4-포르메이트를 사용한 실시예 6에 기재된 방법에 따라 제조하였다.
Figure pct00112
실시예 13
(5R)-4-(5-((S)-2-(4-클로로페닐)-3-(이소프로필아미노)프로피오닐)헥사히드로피롤로[3,4-c]피롤-2(1H)-일)-5-메틸-5,8-디히드로피리도[2,3-d]피리미딘-7(6H)-온
Figure pct00113
터트-부틸 2,5-디아자비시클로[2.2.1]헵탄-2-카복실레이트 대신에 터트-부틸 헥사히드로피롤로[3,4-c]피롤-2(1H)-포르메이트를 사용한 실시예 6에 기재된 방법에 따라 제조하였다. 최종 생성물을 제조하고 분해하여 시스-이성질체 및 트랜스-이성질체를 얻었다. 키랄 분해능 조건: 분해능 기기: waters SFC200; 컬럼: Daicel Chiralcel AD, 250×30 mm ID, 5μm; 이동 상 A: CO2, 이동 상 B: 에탄올(0.1% 암모니아 함유), A:B = 65:35(부피비). 머무름 시간이 8-10분인 생성물을 시스-이성질체로 수집하고, 머무름 시간이 11-13분인 생성물을 트랜스 이성질체로 수집하였다.
Figure pct00114
Figure pct00115
실시예 14
(R)-4-(6-((S)-2-(4-클로로페닐)-3-(이소프로필아미노)프로피오닐)-2,6-디아자스피로[3.3]헵탄-2-일)-5-메틸-5 ,8-디히드로피리도[2,3-d]피리미딘-7(6H)-온
Figure pct00116
터트-부틸 2,5-디아자비시클로[2.2.1]헵탄-2-카복실레이트 대신에 터트-부틸 2,6-디아자스피로[3.3]헵타-2-포메이트를 사용한 실시예 6에 기재된 방법에 따라 제조하였다.
Figure pct00117
공정 E:
Figure pct00118
반응 조건: a) 터트-부틸 2,5-디아자비시클로[4.1.0]헵탄-2-카르복실레이트, N-메틸피롤리돈, 4-디메틸아미노피리딘; b) 염화수소/1,4-디옥산(4.0M), 디클로로메탄; c) (S)-3-((터트-부톡시카보닐)(이소프로필)아미노)-2-(4-클로로페닐)-프로피온산, 2-(7-벤조트리아졸 옥사이드)-N,N,N',N'-테트라메틸우레아 헥사플루오로포스페이트, 4-디메틸아미노피리딘, N,N-디메틸포름아미드; d) 트리플루오로아세트산, 디클로로메탄.
실시예 15
(R)-4-((1S,6R)-5-((S)-2-(4-클로로페닐)-3-(이소프로필아미노)프로피오닐)-2,5-디아자비시클로[4.1.0]헵탄-2-일)-5-메틸-5,8-디히드로피리도[2,3-d]피리미딘-7(6H)-온 또는 (R)-4-((1R,6S)-5-((S)-2-(4-클로로페닐)-3-(이소프로필아미노)프로피오닐)-2,5-디아자비시클로[4.1.0]헵탄-2-일)-5-메틸-5,8-디히드로피리도[2,3-d]피리미딘-7(6H)-온
Figure pct00119
이성질체 1 이성질체 2
a) 터트-부틸 5-((R)-5-메틸-7-옥소-5,6,7,8-테트라히드로피리도[2,3-d]피리미딘-4-일)-2,5-디아자비시클로[4.1.0]헵탄-2-카복실레이트
질소 보호 하에, (R)-4-클로로-5-메틸-5,8-디하이드로피리도[2,3-d]피리미딘-7(6H)-온(0.21g), 터트-부틸 2,5-디아자비시클로[4.1.0]헵탄-2-카복실레이트(0.31g) 및 4-디메틸아미노피리딘(0.39g)을 22℃에서 N-메틸피롤리돈(5mL)에 용해시키고, 140℃로 가열하고, 3시간 동안 반응시켰다. 반응 종료 후, 반응 용액을 20℃로 냉각하고, 20mL의 얼음물에 붓고, 에틸 아세테이트(20mL×2)로 추출하고, 포화 염화나트륨 용액(10mL×3)으로 세척하였다. 용매를 감압하에 증발시키고 잔여물을 실리카겔 컬럼 크로마토그래피(페트롤륨 에테르:에틸 아세테이트=3:1-1:1, 부피비)로 분리하여 담황색 액체 0.28g을 얻었다. LC-MS(ESI) m/z: 360(M+H).
b)(5R)-4-(2,5-디아자비시클로[4.1.0]헵탄-2-일)-5-메틸-5,8-디히드로피리도[2,3-d]피리미딘-7(6H)-온 히드로클로라이드
터트-부틸 5-((R)-5-메틸-7-옥소-5,6,7,8-테트라히드로피리도[2,3-d]피리미딘-4-일)-2,5-디아자비시클로[4.1.0]헵탄-2-카복실레이트(0.28g)를 20℃에서 디클로로메탄(5mL)에 녹인 후, 염화수소/1,4-디옥산(4.0mL)을 가하여 1시간 동안 반응시켰다. 반응 종료 후, 반응액을 증발시켜 감압하에서 용매를 제거하여 황색 고체 0.23g을 얻었고, 이를 다음 단계에 그대로 사용하였다.
c) 터트-부틸 (2S)-2-(4-클로로페닐)-3-(5-((R)-5-메틸-7-옥소-5,6,7,8-테트라히드로피리도[2,3-d]피리미딘-4-일)-2,5-디아자비시클로[4.1.0]헵탄-2-일)-3-옥소프로필)(이소프로필)카바메이트
질소 보호 하에, (5R)-4-(2,5-디아자비시클로[4.1.0]헵탄-2-일)-5-메틸-5,8-디히드로피리도[2,3-d]피리미딘-7(6H)-온 히드로클로라이드(0.20g) 및 (S)-3-((터트-부톡시카보닐)(이소프로필)아미노)-2-(4-클로로페닐)-프로피온산(0.22g)을 20 ℃에서 N,N-디메틸포름아미드(5mL)에 용해시키고 나서, 2-(7-벤조트리아졸 옥사이드)-N,N,N',N'-테트라메틸우레아 헥사플루오로포스페이트(0.59g)와 4-디메틸아미노피리딘(0.48g)을 각각 첨가하여 25℃에서 4시간 동안 반응시켰다. 반응 종료 후, 반응 용액에 물 20ml를 가하고, 상기 반응 용액을 에틸 아세테이트(10mL×3)로 추출하였다. 유기 상을 포화 염화나트륨 용액(10mL×2)으로 세척하고 감압 하에 증발시켰다. 컬럼 크로마토그래피(디클로로메탄:메탄올=50:1)로 분리하여 황색 고체 0.18g을 얻었다. LC-MS(ESI) m/z: 583(M+H).
d) (R)-4-((1S,6R)-5-((S)-2-(4-클로로페닐)-3-(이소프로필아미노)프로피오닐)-2,5-디아자비시클로[4.1.0]헵탄-2-일)-5-메틸-5,8-디히드로피리도[2,3-d]피리미딘-7(6H)-온 또는 (R)-4-((1R,6S)-5-((S)-2-(4-클로로페닐)-3-(이소프로필아미노)프로피오닐)-2,5-디아자비시클로[4.1.0]헵탄-2-일)-5-메틸-5,8-디히드로피리도[2,3-d]피리미딘-7(6H)-온
터트-부틸 (2S)-2-(4-클로로페닐)-3-(5-((R)-5-메틸-7-옥소-5,6,7,8-테트라히드로피리도[2,3-d]피리미딘-4-일)-2,5-디아자비시클로[4.1.0]헵탄-2-일)-3-옥소프로필)(이소프로필)카르바메이트(0.18g)를 20℃에서 디클로로메탄(2mL)에 용해시키고, 트리플루오로아세트산(0.86mL)을 가하여 3시간 동안 반응시켰다. 반응 종료 후 반응 용액에 디클로로메탄(10mL)을 가하고 0℃에서 2M 수산화나트륨 용액을 적가하여 pH=12로 조정하였다. 분리 후, 유기층을 포화 염화나트륨 용액(5 mL)으로 세척하였고, 무수 황산나트륨으로 건조시켰다. 유기 상을 감압하에 증발시켜 황색 고체 0.10g을 얻었다. 고성능 분취 액체 크로마토그래피 분리 후, 이성질체 1(3 mg) 및 이성질체 2(12 mg)를 얻었다.
HPLC 조건: 컬럼: Aglient 5 μm prep-C18 50 x 21.2 mm, 이동 상 A: 물(0.1% 암모니아 함유); 이동 상 B: 메탄올. 구배: 시간 0-10분, 상 B: 60-70%(부피비).
Figure pct00120
Figure pct00121
Figure pct00122
단결정 회절에 의한 구성 측정:
단결정 제조: 30.0 mg의 이성질체 2의 화합물 및 2.0 mL의 이소프로판올을 5 mL 스크류-탑 유리병에 첨가하고 5분 동안 교반하였다. 고체를 용해시키고 정화시켰으며, 옥살산 이수화물 3.9 mg을 칭량하여 상기 유리병에 첨가하였다. 유리병에서 백색 고체가 점차적으로 침전되었다. 실온에서 3시간 동안 교반한 후, 유리병에 다량의 백색 고체가 침전되었고, 유리병에 메탄올 1.0mL를 가하면 용액이 맑아지는 동안 흰색 고체가 서서히 사라졌다. 교반을 1시간 동안 계속하였다. 용액을 0.22μm 미세다공성 막을 통해 3mL 스크류-탑(screw-top) 유리병에 여과하고, 유리병 입구를 플라스틱 랩으로 덮었다. 플라스틱 랩을 병 입구에 바늘로 뚫어 8개의 작은 구멍을 만들고, 혼합물을 실온에서 7일 동안 방치하여 이성질체 2의 화합물의 옥살레이트 단결정을 얻었다.
단결정 회절 실험:
단결정 X선 회절계: BRUKER D8 VENTURE PHOTON II
파장: Ga K α(λ=1.34139
Figure pct00123
)
시험 온도: 190K
구조 분석을 위한 컴퓨터 프로그램:SHELXL-2018
단결정 데이터: 분자식: C55H72Cl2N12O9; 분자량: 1116.14; 결정 시스템: 육각형 결정 시스템; 공간 그룹: P 61; 단위 셀 매개변수: a=25.8406(15)
Figure pct00124
, b=25.8406(15)
Figure pct00125
, c=45.916(3)
Figure pct00126
, α=90°, β=90°, γ=120°; 단위 셀 부피: V=26552(4)
Figure pct00127
3; 단위 셀에 포함된 분자식의 수: Z=12; 계산된 밀도: Dcalc= 0.838g/cm3; R(Fo): 0.0730; RW(Fo2): 0.2069; 적합도(S): 1.034; 플랙 매개변수: 0.066(9).
구조 설명: 단결정 X선 회절 및 구조 분석은 상기 얻어진 단결정이 이성질체 2의 옥살레이트 이소프로판올 복합체임을 보여준다. 결정의 비대칭 구조 단위는 4개의 이성질체 2 분자, 2개의 옥살산 분자 및 2개의 이소프로판올 분자를 포함하며, 여기서 이성질체 2와 옥살산은 옥살산염을 형성한다. 이성질체 2의 화합물의 단일 분자 개략도는 도 1에 표시되고 옥살레이트 단결정의 비대칭 구조 단위는 도 2에 표시된다. 구조식은 다음과 같다:
Figure pct00128
공정 F:
Figure pct00129
반응 조건: a) 메틸 4,4,4-트리플루오로-2-크로토네이트, 나트륨 메톡사이드의 메탄올 용액(30중량%); b) 포름아미딘 아세테이트, 나트륨 메톡사이드의 메탄올 용액(30 중량%); c) 옥시염화인, 디이소프로필에틸아민, 아세토니트릴; d) 암모니아(25-28 중량%); e) 터트-부틸피페라진-1-카복실레이트; f) 트리플루오로아세트산, 디클로로메탄; g) (S)-2-(4-클로로페닐)-3-(이소프로필아미노)프로피온산, 2-(7-벤조트리아졸 옥사이드)-N,N,N',N'-테트라메틸우레아 헥사플루오로포스페이트, 디이소프로필에틸아민, 디클로로메탄.
실시예 16
4-(4-((S)-2-(4-클로로페닐)-3-(이소프로필아미노)프로피오닐)피페라진-1-일)-5-(트리플루오로메틸)-5,8-디히드로피리도[2,3-d] 피리미딘-7(6H)-온
Figure pct00130
공정 F 에 따라, 실시예 1에 기재된 방법에 따라 제조하였다. LC-MS(ESI) m/z: 525(M+H).
이성질체 분리: 초임계 유체 크로마토그래피에 의해 상기 언급된 제목의 화합물의 키랄 분리를 수행하여 이성질체 1 및 이성질체 2를 얻었다. 분리 장치 및 조건: waters SFC200; 칼럼: Daicel Chiralcel AS, 250×30 mm ID, 5 μm; 이동 상: A는 CO2, B는 에탄올(0.1% NH3H2O): A: B = 85:15(체적비) ; 유속: 60mL/분, 컬럼 온도: 38℃.
이성질체 1:
Figure pct00131
Figure pct00132
이성질체 2:
Figure pct00133
Figure pct00134
공정 G:
Figure pct00135
반응 조건: a) 터트-부틸 4-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-디옥사보롤란-2-일)-3,6-디히드로피리딘-1(2H)-카복실레이트, 디옥산, 세슘 탄산염, 물, 테트라키스(트리페닐포스핀)팔라듐; b) 메탄올, 포름산, 탄소상 팔라듐(5%), 수소; c) 디클로로메탄, 염화수소/1,4-디옥산 용액(4.0M); d) (S)-3-((터트-부톡시카보닐)(이소프로필)아미노)-2-(4-클로로페닐)프로피온산, N,N-디메틸포름아미드, 2-(7-벤조트리아졸 옥사이드)-N,N,N',N'-테트라메틸우레아 헥사플루오로포스페이트, 디이소프로필에틸아민; e) 디클로로메탄, 염화수소/1,4-디옥산 용액(4.0 M).
실시예 17
Figure pct00136
a) 터트-부틸 (R)-4-(5-메틸-7-옥소-5,6,7,8-테트라히드로피리도[2,3-d]피리미딘-4-일)-3,6-디히드로피리딘-1(2H ))-포메이트
질소 보호 하에, (R)-4-클로로-5-메틸-5,8-디히드로피리도[2,3-d]피리미딘-7(6H)-온(0.60g) 및 터트-부틸 4-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-디옥사보롤란-2-일)-3,6-디히드로피리딘-1(2H)-카복실레이트(1.03g)를 22℃에서 디옥산(20mL)에 용해시켰으며, 탄산세슘과 물(5mL)을 가하고, 마지막으로 테트라키스(트리페닐포스핀)팔라듐(0.35g)을 가하고 100℃에서 7시간 동안 반응시켰다.
반응 종료 후, 반응 용액을 20℃로 냉각하고, 20mL의 얼음물에 붓고, 에틸 아세테이트(20mL)로 추출하였다. 유기 상을 감압하에 증발시키고, 잔여물을 실리카겔 컬럼 크로마토그래피(페트롤륨 에테르:에틸 아세테이트=4:1, 부피비)로 분리하여 담황색 고체 0.81g을 얻었다. MS(ESI) m/z: 345(M+H).
b) 터트-부틸 (R)-4-(5-메틸-7-옥소-5,6,7,8-테트라히드로피리도[2,3-d]피리미딘-4-일)피페리딘-1-카복실레이트
터트-부틸 (R)-4-(5-메틸-7-옥소-5,6,7,8-테트라히드로피리도[2,3-d]피리미딘-4-일)-3,6-디히드로피리딘-1(2H))-포메이트(0.75g)를 20℃에서 메탄올(50mL)에 용해시키고, 포름산(0.11g) 및 0.30g의 탄소상 팔라듐(5%)을 첨가하였다. 반응 시스템을 질소로 3회 교체하고 수소를 채우고, 60℃에서 16시간 동안 반응시켰다. 반응 종료 후, 반응 용액을 10℃로 냉각하고, 팔라듐-카본을 흡인여과하고, 여과액을 감압하에 증류하여 용매를 제거하여 무색 오일리 생성물 0.66g을 얻었다. MS(ESI) m/z: 347(M+H).
c)(R)-5-메틸-4-(피페리딘-4-일)-5,8-디히드로피리도[2,3-d]피리미딘-7(6H)-온
터트-부틸 (R)-4-(5-메틸-7-옥소-5,6,7,8-테트라히드로피리도[2,3-d]피리미딘-4-일)피페리딘-1-카르복실레이트 (0.63 g)는 25℃에서 디클로로메탄(10mL)에 녹이고 염화수소/1,4-디옥산 용액(4.0M)(10mL)을 가하여 2시간 동안 반응시켰다. 반응 종료 후, 반응 용액을 농축하여 용매를 제거하고, 0℃로 냉각하고, 20% 수산화나트륨 용액을 첨가하여 pH = 12로 조정하고, 에틸 아세테이트(10 mL x 3)로 추출하였다. 유기 상을 포화 염화나트륨 용액으로 세척하고 감압하에 증발하여 황색 고체 0.346g을 얻었고 이를 다음 단계에 그대로 사용하였다.
d) 터트-부틸(S)-2-(4-클로로페닐)-3-(4-((R)-5-메틸-7-옥소-5,6,7,8-테트라히드로피리도[2,3-d]피리미딘-4-일)피페리딘-1-일)-3-옥소프로필)(이소프로필)카바메이트
질소의 보호 하에, (R)-5-메틸-4-(피페리딘-4-일)-5,8-디히드로피리도[2,3-d]피리미딘-7(6H)-온 (0.302g) 및 (S)-3-((터트-부톡시카보닐)(이소프로필)아미노)-2-(4-클로로페닐)프로피온산(0.308g)을 20℃에서 N,N-디메틸포름아미드(5mL)에 용해시킨 다음, 2-(7-벤조트리아졸 옥사이드)-N,N,N',N'-테트라메틸우레아 헥사플루오로포스페이트(0.86g) 및 디이소프로필에틸아민(0.76g)을 별도로 첨가하고, 20℃에서 3시간 동안 반응시켰다. 반응이 완료된 후, 반응 용액에 물 30mL를 첨가하였다. 에틸 아세테이트(50mL)를 추출을 위해 첨가하였다. 분리 후 유기 상을 포화 염화나트륨 수용액(10 mL x 2)으로 세척하고 감압하에 증발 후 잔류물을 실리카겔 컬럼크로마토그래피(디클로로메탄:메탄올 = 25:1, 부피비)로 분리하여 흰색 고체 0.339를 얻었고, 이는 다음 단계에 직접 사용되다.
e) (R)-4-(1-((S)-2-(4-클로로페닐)-3-(이소프로필아미노)프로피오닐)피페리딘-4-일)-5-메틸-5,8-디히드로피리도[2,3- d]피리미딘-7(6H)-온
터트-부틸 (S)-2-(4-클로로페닐)-3-(4-((R)-5-메틸-7-옥소-5,6,7,8-테트라히드로피리도[2,3-d]피리미딘-4-일)피페리딘-1-일)-3-옥소프로필)(이소프로필)카바메이트(0.320g)를 25℃에서 디클로로메탄(3mL)에 용해시키고 염화수소/1,4-디옥산 용액(4.0M) )(2.9 mL)를 첨가하여 2시간 동안 반응시켰다. 반응 종료 후, 반응 용액을 감압하에 증발하여 용매를 제거하고, 0℃로 냉각하고, 20% 수산화나트륨을 첨가하여 pH = 12로 조절하고, 에틸 아세테이트(10mL×3)로 추출하였다. 결과를 포화 염화나트륨 용액(15 mL)으로 세척하였다. 유기 상을 감압하에 증발시켜 백색 고체 0.176g을 얻었다.
Figure pct00137
공정 H:
Figure pct00138
반응 조건: a) 터트-부틸피페라진-1-카복실레이트, N-메틸피롤리돈, 4-디메틸아미노피리딘; b) 디클로로메탄, 염화수소/1,4-디옥산 용액(4.0M); c) 디이소프로필에틸아민, N,N-디메틸포름아미드, 2-(7-벤조트리아졸 옥사이드)-N,N,N',N'-테트라메틸우레아 헥사플루오로포스페이트, 1-(터트-부톡시카보닐)-4-(4-클로로페닐)피페리딘-4 -카복실산; d) 디클로로메탄, 염화수소/1,4-디옥산 용액(4.0 M).
실시예 18
(R)-4-(4-(4-(4-클로로페닐)피페리딘-4-카보닐)피페라진-1-일)-5-메틸-5,6-디히드로피리도[2,3-d]피리미딘-7(8H)-온 포메이트
Figure pct00139
a) 터트-부틸 (R)-4-(5-메틸-7-옥소-5,6,7,8-테트라히드로피리도[2,3-d]피리미딘-4-일)피페라진-1-카복실레이트
(R)-4-클로로-5-메틸-5,6-디히드로피리도[2,3-d]피리미딘-7(8H)-온(400 mg), 터트-부틸피페라진-1-카복실레이트 (1.8 g) 및 4-디메틸아미노피리딘(494 mg)을 20℃에서 N-메틸피롤리돈(10 mL)에 용해시켰다. 반응 용액을 질소로 3회 교체하고, 질소 보호 하에 150℃로 가열하고 4시간 동안 반응시켰다. 반응이 완료된 후, 반응 용액을 에틸 아세테이트 20mL에 붓고, 물(2mL x 2)로 세척한 다음, 0.5M 묽은 염산으로 pH = 5-6이 되도록 세척하였다. 분리 후, 유기 상을 무수 황산나트륨으로 건조하고 농축하여 조 생성물(crude product)을 얻었다. 조 생성물을 분리하고 플래쉬 컬럼 크로마토그래피(용리액: 석유 에테르/에틸 아세테이트 = 2:1, 부피비)로 정제하여 백색 고체 0.6g을 얻었다. LC-MS(ESI) m/z: 348(M+H).
b)(R)-5-메틸-4-(피페라진-1-일)-5,6-디히드로피리도[2,3-d]피리미딘-7(8H)-온
(R)-4-(5-메틸-7-옥소-5,6,7,8-테트라하이드로피리도[2,3-d]피리미딘-4-일)터트-부틸피페라진-1-카복실레이트(0.6g)를 용해시켰으며, 18℃에서 디클로로메탄(2mL)에 넣고 염화수소/1,4-디옥산 용액(4.0M, 5mL)을 적가하고 18℃에서 2시간 동안 반응시켰다. 반응 종료 후, 반응 용액을 감압하에 용매를 증발시켜 유상의 표적 생성물을 얻었다. 생성물을 디클로로메탄에 용해시키고 수산화나트륨 고체를 첨가하였다. 혼합물을 오일성 물질이 용해될 때까지 교반하였다. 고체를 여과에 의해 제거하였다. 잔여물을 농축하여 백색 고체(0.3g)를 얻었고, 이를 다음 단계에 직접 사용하였다.
c) 터트-부틸 (R)-4-(4-클로로페닐)-4-(4-(5-메틸-7-옥소-5,6,7,8-테트라히드로피리도[2,3-d]피리미딘-4-일))피페라진-1-카보닐)피페리딘-1-카복실레이트(R)-5-메틸-4-(피페라진-1-일)-5,6-디히드로피리도[2,3-d]피리미딘-7(8H)-온(150mg),(1-터트-부톡시카보닐)-4-(4-클로로페닐)피페리딘-4-카복실산(247 mg), 디이소프로필에틸아민(235 mg) 및 2-(7-벤조트리아졸 옥사이드))-N, N,N',N'-테트라메틸우레아 헥사플루오로포스페이트(346mL)를 18℃에서 N,N-디메틸포름아미드(3mL)에 용해시키고, 18℃에서 12시간 동안 반응시켰다. 반응이 완료된 후, 반응 용액을 에틸 아세테이트(20mL)에 붓고 물(5mL x 3)로 세척하였다. 유기 상을 감압하에 증발시켜 조 생성물을 얻었다. 조 생성물을 실리카겔 컬럼(용리액: 석유 에테르/에틸 아세테이트 = 1:2, 부피비)으로 분리하고 정제하여 무색 오일상의 목적 생성물 280 mg을 얻었고, 이를 다음 단계에 바로 사용하였다.
d)(R)-4-(4-(4-(4-클로로페닐)피페리딘-4-카보닐)피페라진-1-일)-5-메틸-5,8-디히드로피리도[2,3-d]피리미딘- 7(6H)-온 포메이트
터트-부틸 (R)-4-(4-클로로페닐)-4-(4-(5-메틸-7-옥소-5,6,7,8-테트라히드로피리도[2,3-d]피리미딘-4-일))피페라진-1-카보닐)피페리딘-1-카복실레이트(280mg)를 15℃에서 디클로로메탄(5mL)에 용해시키고, 염화수소/1,4-디옥산 용액(4.0M, 5mL)을 15°C에서 1.5시간 동안 반응시킨다. 반응 종료 후, 반응 용액을 농축하여 백색의 조 생성물을 얻었다.
상기 조 생성물을 고성능 액체 크로마토그래피로 분리하여 60 mg의 목적 생성물을 얻었다. HPLC 조건: 컬럼: Kromasil 10 μm C18 50 x 250 mm, 이동 상 A: 물(0.1% 포름산 함유), 이동 상 B: 메탄올. 구배: 시간 0-10분, 상 B 20%; 10-30분, 상 B 20-50%; 30-40분, 상 B 50%(부피비), RT=31.4분.
Figure pct00140
공정 I:
Figure pct00141
반응 조건: a) 메틸 메타크릴레이트, 나트륨 메톡사이드, 메탄올; b) 포름아미딘 아세테이트, 나트륨 메톡사이드, 메탄올; c) 옥시염화인, 디이소프로필에틸아민, 아세토니트릴; d) 암모니아(25-28 중량%); e) 터트-부틸피페라진-1-카복실레이트, N,N-루티딘-4-아민, N-메틸피롤리돈; f) 염화수소/1,4-디옥산 용액(4.0M); g) (S)-3-((터트-부톡시카보닐)(이소프로필)아미노)-2-(4-클로로페닐)프로피온산, 디이소프로필에틸아민, 2-(7-벤조트리아졸 옥사이드)-N,N,N',N'-테트라메틸우레아 헥사플루오로포스페이트, N,N-디메틸포름아미드; h) 염화수소/1,4-디옥산 용액(4.0M).
실시예 19
4-(4-((S)-2-(4-클로로페닐)-3-(이소프로필아미노)프로필)피페라진-1-일)-6-메틸-5,8-디히드로피리도[2,3-d]피리미딘- 7(6H)-온 염산염
Figure pct00142
a) 1,1,3-트리메틸부탄 트리카복실산
질소 보호하에 나트륨 메톡사이드(2.45g)를 20℃에서 메탄올(50mL)에 분산시키고, 디메틸 말로네이트(5g) 및 메틸 메타크릴레이트(3.75g)를 첨가하여, 온도를 60℃로 상승시키고, 16시간 동안 반응을 수행하였다. 반응 종료 후, 반응 용액을 감압하에 증발시켜 용매를 제거하여 황색 액체 5g을 얻었고, 이를 다음 단계에 그대로 사용하였다.
b) 메틸 3-(4,6-디히드록시피리미딘-5-일)-2-메틸프로피오네이트
질소 보호 하에, 나트륨 메톡사이드(11.67g)를 20℃에서 메탄올(30mL)에 용해시키고, 이를 0℃로 냉각시켰다. 교반하면서 포름아미딘 아세테이트(2.44g)를 가하여 30분간 반응시킨 후 1,1,3-트리메틸부탄 트리카르복실산(5g)을 적가하고, 20℃에서 16시간 동안 반응시켰다. 반응 종료 후, 반응 용액에 염산 이소프로판올(4.0M)을 첨가하여 pH=5로 조정하였다. 감압하에 용매를 증발시키고, 잔여물을 0℃로 냉각하였다. 고체를 침전시키고 흡입 여과하였다. 필터 케이크를 물(50mL)로 세척하고, 필터 케이크를 건조하여 3.7g의 담황색 고체를 얻었고, 이는 다음 단계에서 직접 사용되었다.
c) 메틸 3-(4,6-디클로로피리미딘-5-일)-2-메틸프로피오네이트
질소 보호 하에, 메틸 3-(4,6-디히드록시피리미딘-5-일)-2-메틸프로피오네이트(3g)를 22℃에서 아세토니트릴(60mL)에 분산시키고, 옥시염화인(2.91mL) 및 디이소프로필에틸아민 (1.18 mL)를 연속적으로 적가하였다. 반응 시스템은 분명히 발열성이었고, 고체가 점차 용해 및 맑아진 다음, 온도를 90℃로 상승시키고 16시간 동안 반응을 수행하였다. 반응 종료 후, 반응액을 물(100mL)에 붓고, 에틸아세테이트(100mL)를 가하여 추출하였다. 유기 상을 포화 염화나트륨 용액(100mL x 3)으로 세척하고, 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 회전 건조시켰다. 생성물을 실리카겔 컬럼 크로마토그래피(페트롤륨 에테르:에틸 아세테이트 = 10:1, 부피비)로 정제하여 백색 고체 1.50g을 얻었고, 이를 다음 단계에 바로 사용하였다.
d) 4-클로로-6-메틸-5,8-디히드로피리도[2,3-d]피리미딘-7(6H)-온
20℃에서 암모니아(3mL)에 메틸 3-(4,6-디클로로피리미딘-5-일)-2-메틸프로피오네이트(1.5g)를 첨가하고 20℃에서 16시간 동안 반응시켰다. 반응 종료 후, 반응 용액을 물(100mL)에 붓고, 에틸아세테이트(100mL)를 가하여 추출하였다. 유기 상을 포화 염화나트륨 용액(100mL x 3)으로 세척하고, 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 회전 건조시켰다. 생성물을 실리카겔 칼럼 크로마토그래피(페프롤륨 에테르:에틸 아세테이트 = 4:1, 부피비)로 정제하여 백색 고체 0.30g을 얻었다. LC-MS(ESI) m/z: 199(M+H).
e) 터트-부틸 4-(6-메틸-7-옥소-5,6,7,8-테트라히드로피리도[2,3-d]피리미딘-4-일)피페라진-1-카복실레이트
터트-부틸피페라진-1-카복실레이트(0.28g) 및 N,N-루티딘-4-아민(0.31g)을 N-메틸피롤리돈(3 mL) 중 4-클로로-6-메틸-5,8-디하이드로피리도[2,3-d]피리미딘-7(6H)-온(0.1g) 용액에 20℃에서 첨가하고, 그리고나서 반응 혼합물을 150℃에서 3시간 동안 교반하였다. 반응 종료 후, 반응용액을 물(100mL)에 붓고, 에틸아세테이트(100mL)를 가하여 추출하였다. 유기상을 포화 염화나트륨 용액(100mL x 3)으로 세척하고, 무수 황산나트륨으로 건조시켰다. 용매를 감압하에 증발시켰다. 생성물을 실리카겔 플레이트 크로마토그래피(페트롤륨 에테르:에틸 아세테이트 = 1:1, 부피비)로 정제하여 백색 고체 0.31g을 얻었다. LC-MS(ESI) m/z: 348.2(M+H).
f) 6-메틸-4-(피페라진-1-일)-5,8-디히드로피리도[2,3-d]피리미딘-7(6H)-온
염화수소/1,4-디옥산 용액(4.0M, 10mL)을 터트-부틸 4-(6-메틸-7-옥소-5,6,7,8-테트라히드로피리도[2,3-d]피리미딘)-4-일)피페라진-1-카복실레이트(0.1g)에 20℃에서 첨가하였고, 반응 혼합물을 20℃에서 3시간 동안 교반하였다. 반응 종료 후 용매를 감압하에 증발시켜 백색에 가까운 고체(0.1g)를 얻었다. LC-MS(ESI) m/z: 248.2(M+H).
g) 터트-부틸 (2S)-2-(4-클로로페닐)-3-(4-(6-메틸-7-옥소-5,6,7,8-테트라히드로피리딘[2,3-d]피리미딘-4)-일)피페라진-1-일)-3-옥소프로필(이소프로필)카바메이트
(S)-3-((터트-부톡시카보닐)(이소프로필)아미노)-2-(4-클로로페닐)프로피온산(0.17g) 및 디이소프로필에틸아민(0.16g)을 N,N-디메틸포름아미드 (10 mL) 중 6-메틸-4-(피페라진-1-일)-5,8-디하이드로피리도[2,3-d]피리미딘-7(6H)-온(0.1g) 용액에 20℃에서 첨가하였다. 반응 혼합물을 2분 동안 교반하였다. 2-(7-벤조트리아졸 옥사이드)-N,N,N',N'-테트라메틸우레아 헥사플루오로포스페이트(0.23g)를 20℃에서 첨가하고, 반응 혼합물을 20℃에서 1시간 동안 교반하였다. 반응 종료 후, 반응액을 물(100mL)에 붓고, 에틸아세테이트(100mL)를 가하여 추출하였다. 유기 상을 포화 염화나트륨 용액(100mL x 3)으로 세척하고, 무수 황산나트륨으로 건조시켰다. 용매를 감압 하에 증발시켰다. 생성물을 실리카겔 플레이트 크로마토그래피(페트롤륨 에테르:에틸 아세테이트 = 1:2, 부피비)로 정제하여 백색 고체 0.08g을 얻었고, 이를 다음 단계에 바로 사용하였다.
h) 4-(4-((S)-2-(4-클로로페닐)-3-(이소프로필아미노)프로피오닐)피페라진-1-일)-6-메틸-5,8-디히드로피리도[2,3-d]피리미딘-7(6H)-온 염산염
20℃에서, 염화수소/1,4-디옥산 용액(4.0 M, 3 mL)을 터트-부틸 (2R)-2-(4-클로로페닐)-3-(4-(6-메틸-7-옥소-5,6,7,8-테트라히드로피리도[2,3-d]피리미딘-4-일)피페라진-1-일)-3-옥소프로필(이소프로필)카바메이트(0.2g)에 첨가하였다. 반응 혼합물을 20℃에서 3시간 동안 교반하였다. 반응 종료 후, 반응 용액을 감압하에 증발하여 용매를 제거하고 결과물을 HPLC로 분리하여 백색에 가까운 고체 0.06g을 얻었다.
Figure pct00143
이성질체 분리:
초임계 유체 크로마토그래피로 상기 제목 화합물을 키랄 분해하였다. 분해 장치 및 조건: Waters SFC200; 칼럼: Daicel Chiralcel AS, 250×30mm ID, 5μm; 이동 상: A는 CO2, B는 메탄올(0.1% NH3H2O), A:B = 90:10(부피비) ; 유속 60mL/분, 컬럼 온도 38 ℃.
이성질체 1:
Figure pct00144
Figure pct00145
이성질체 2:
Figure pct00146
Figure pct00147
공정 J:
Figure pct00148
반응 조건: a) 에틸 브로모아세테이트, 수소화나트륨, 요오드화 테트라부틸암모늄, 테트라히드로푸란; b) 2,4 디메톡시벤질아민, 트리에틸아민, 이소프로판올; c) 요오드화 메틸, 수소화나트륨, N,N-디메틸포름아미드; d) 트리플루오로아세트산; e) 터트-부틸피페라진-1-카복실레이트, 4-디메틸아미노피리딘, N-메틸피롤리돈; f) 염화수소/1,4-디옥산 용액(4.0M); g) (S)-3-((터트-부톡시카보닐)(이소프로필)아미노)-2-(4-클로로페닐)프로피온산, 디이소프로필에틸아민, 2-(7-벤조트리아졸 옥사이드)-N,N,N',N'-테트라메틸우레아 헥사플루오로포스페이트, N,N-디메틸포름아미드; h) 염화수소/1,4-디옥산 용액(4.0M).
실시예 20
(S)-4-(4-(2-(4-클로로페닐)-3-(이소프로필아미노)프로피오닐)피페라진-1-일)-5-메틸-5,8-디히드로프테리딘-7(6H)-온 히드로클로라이드
Figure pct00149
a) 에틸 2-((4,6-디클로로피리미딘-5-일)아미노)아세테이트
수소화나트륨(2.93g)을 0℃에서 테트라히드로푸란(100mL) 중 4,6-디클로로-5-아미노피리미딘(10.0g)의 용액에 첨가하였다. 반응 혼합물을 2분 동안 교반하였다. 온도를 20℃로 올리고 에틸 브로모아세테이트(12.22g)를 첨가한 다음, 요오드화 테트라부틸암모늄(27.03g)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 20℃에서 16시간 동안 교반하였다. 반응 종료 후 반응액을 물(100mL)에 붓고 30분간 교반한 후 에틸아세테이트(100mL)를 가하여 추출하였다. 유기 상을 포화 염화나트륨 용액(100mL x 3)으로 세척하고, 무수 황산나트륨으로 건조시켰다. 용매를 감압하에 증발시켰다. 생성물을 실리카겔 칼럼 크로마토그래피(페프롤륨 에테르:에틸 아세테이트 = 20:1, 부피비)로 정제하여 무색 유성상 생성물 6.5g을 얻었고, 이를 다음 단계에 바로 사용하였다.
b) 4-클로로-8-(2,4-디메톡시벤질)-5,8-디히드로프테리딘-7(6H)-온
20℃에서, 2,4-디메톡시벤질아민(3.67g)을 이소프로판올(150mL) 중 에틸 2-((4,6-디클로로피리미딘-5-일)아미노)아세테이트(5g)의 용액에 첨가하고, 이어서, 트리에틸아민(4.45g)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 80℃에서 18시간 동안 교반하였다. 반응 종료 후, 반응액을 여과하고, 필터 케이크를 에탄올로 세척하고, 감압하에 건조하여 백색에 가까운 고체 5.0g을 얻었고, 이를 다음 단계에 그대로 사용하였다.
c) 4-클로로-8-(2,4-디메톡시벤질)-5-메틸-5,8-디히드로프테리딘-7(6H)-온
0℃에서, 요오드화 메틸(1.68g)를 N,N-디메틸포름아미드 (30 mL)중의 4-클로로-8-(2,4-디메톡시벤질)-5,6-디하이드로프테리딘-7(8H)-온(3.3g)의 용액에 첨가하고, 반응 혼합물을 20분 동안 교반하였다. 온도를 0℃로 유지하고 수소화나트륨(0.47g)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 0℃에서 3시간 동안 교반하였다. 반응 종료 후, 반응 용액을 물(100mL)에 붓고, 에틸 아세테이트(100mL)를 가하여 추출하였다. 유기 상을 포화 염화나트륨 용액(100mL x 3)으로 세척하고, 무수 황산나트륨으로 건조시켰다. 용매를 감압하에 증발시켰다. 생성물을 실리카겔 칼럼 크로마토그래피(페프롤륨 에테르:에틸 아세테이트 = 5:1, 부피비)로 정제하여 백색 고체 1.5g을 얻었고, 이를 다음 단계에 바로 사용하였다.
d) 4-클로로-5-메틸-5,8-디히드로프테리딘-7(6H)-온
20℃에서, 트리플루오로아세트산(20mL)을 4-클로로-8-(2,4-디메톡시벤질)-5-메틸-5,6-디히드로프테리딘-7(8H)-온(5g)에 첨가하였다. 반응 혼합물을 60℃에서 16시간 동안 교반하였다. 반응 종료 후, 감압하에서 용매를 증발시켜 보라색에 가까운 고체(1.0g)를 얻었다. LC-MS(ESI) m/z: 199.1(M+H). 1H NMR(300MHz, DMSO-d6) δ(ppm) 11.60(s, 1H), 8.35(s, 1H), 3.77(s, 2H), 2.85(s, 3H).
e) 터트-부틸 4-(5-메틸-7-옥소-5,6,7,8-테트라히드로프테리딘-4-일)피페라진-1-카복실레이트
터트-부틸피페라진-1-카복실레이트(0.85g) 및 4-디메틸아미노피리딘(0.93g)을 N-메틸피롤리돈(5mL) 중 4-클로로-5-메틸-5,8-디하이드로프테리딘-7(6H)-온(0.3g)의 용액에 20 ℃에서 첨가하였다. 반응 혼합물을 150℃에서 3시간 동안 교반하였다. 반응 종료 후, 반응 용액을 물(100mL)에 붓고, 에틸 아세테이트(100mL)를 가하여 추출하였다. 유기상을 포화 염화나트륨 용액(100mL x 3)으로 세척하고, 무수 황산나트륨으로 건조시켰다. 용매를 감압하에 증발시켰다. 생성물을 실리카겔 플레이트 크로마토그래피(페프롤륨 에테르:에틸 아세테이트 = 1:1, 부피비)로 정제하여 백색 고체 0.27g을 얻었고, 이를 다음 단계에 바로 사용하였다.
f) 5-메틸-4-(피페라진-1-일)-5,8-디히드로프테리딘-7(6H)-온
염화수소/1,4-디옥산 용액(4.0M, 3mL)을 터트-부틸 4-(5-메틸-7-옥소-5,6,7,8-테트라히드로프테리딘-4-일)피페라진-1-카복실레이트(0.1g)에 20℃에서 첨가하였고, 반응 혼합물을 20℃에서 3시간 동안 교반하였다. 반응 종료 후, 용매를 감압하에 증발하여 백색에 가까운 고체(0.1g)를 얻었다.
g) 터트-부틸 (S)-2-(4-클로로페닐)-3-(4-(5-메틸-7-옥소-5,6,7,8-테트라히드로프테리딘-4-일)피페라진-1-일)-3-옥소프로필(이소프로필)카바메이트
20℃에서, (S)-3-((터트-부톡시카보닐)(이소프로필)아미노)-2-(4-클로로페닐)프로피온산(0.17g) 및 디이소프로필에틸아민(0.16g)을 N,N-디메틸포름아미드(10mL) 중 5-메틸-4-(피페라진-1-일)-5,6-디히드로프테리딘-7(8H)-온(0.1g) 용액에 첨가하였다. 반응 혼합물을 2분 동안 교반하였다. 그리고나서, 2-(7-벤조트리아졸 옥사이드)-N,N,N',N'-테트라메틸우레아 헥사플루오로포스페이트(0.23g)를 20℃에서 첨가하고, 반응 혼합물을 20℃에서 1시간 동안 교반하였다.
반응 종료 후, 반응액을 물(100mL)에 붓고, 에틸 아세테이트(100mL)를 가하여 추출하였다. 유기 상을 포화 염화나트륨 용액(100 mL×3)으로 세척하고 무수 황산나트륨으로 건조시켰다. 용매를 감압하에 증발시켰다. 생성물을 실리카겔 플레이트 크로마토그래피(페트롤륨 에테르:에틸 아세테이트 = 1:1.5, 부피비)로 정제하여 백색 고체 0.08g을 얻었다. LC-MS(ESI) m/z: 572(M+H).
h)(S)-4-(4-(2-(4-클로로페닐)-3-(이소프로필아미노)프로피오닐)피페라진-1-일)-5-메틸-5,8-디히드로프테리딘-7(6H)-온 염산염
20℃에서, 염화수소/1,4-디옥산 용액(4.0 M, 3 mL)을 터트-부틸 (S)-(2-(4-클로로페닐)-3-(4-(5-메틸-7-옥소-5,6,7,8-테트라히드로프테리딘-4-일)피페라진-1-일)-3-옥소프로필(이소프로필)카르바메이트 (0.08 g)에 첨가하였다. 반응 혼합물을 20℃에서 3시간 동안 교반하였다. 반응 종료 후 감압하에 증발하여 용매를 제거하고 결과물을 HPLC로 분리하여 백색에 가까운 고체 0.02g을 얻었다.
Figure pct00150
실시예 21
4-(8-((S)-2-(4-클로로페닐)-3-(이소프로필아미노)프로피오닐)-3,8-디아자비시클로[3.2.1]옥탄-3-일)-5-메틸-5,8-디히드로프테리딘-7(6H)-온 포메이트
Figure pct00151
터트-부틸피페라진-1-카복실레이트 대신에 터트-부틸 3,8-디아자비시클로[3.2.1]옥탄-8-카복실레이트를 사용한 실시예 20에 기재된 방법에 따라 제조하였다. 목적 생성물에 대한 HPLC 조건: 컬럼: Aglient 5 μm prep-C18 50 x 21.2 mm, 이동 상 A: 물(0.1% 포름산 함유); 이동 상 B: 아세토니트릴. 구배: 시간 0-10분, 상 B 5-75%(부피비), RT=3.4분.
Figure pct00152
실시예 22
4-((S)-4-((S)-2-(4-클로로페닐)-3-(이소프로필아미노)프로피오닐)-3-메틸피페라진-1-일)-5-메틸-5,8-디히드로프테리딘-7 (6H)-온
Figure pct00153
터트-부틸피페라진-1-카복실레이트 대신에 (S)-1-N-Boc-2-메틸피페라진을 사용하는 실시예 20에 기재된 방법에 따라 제조하였다. 0℃에서 10% 수산화나트륨 용액을 첨가하여 최종 생성물을 pH = 9로 조정하고, 디클로로메탄(10 mL x 3)으로 추출하였다. 유기 상을 포화 염화나트륨 용액(15 mL)으로 세척하고, 무수 황산나트륨으로 건조하고, 감압하에 증발시켜 백색 고체 70 mg을 얻었다.
Figure pct00154
공정 K:
Figure pct00155
시약: a) 암모니아(25-28 중량%), 테트라히드로푸란; b) 아세토니트릴, 터트-부틸피페라진-1-카복실레이트, N,N-디이소프로필에틸아민; c) 수소화붕소나트륨, 메탄올, 포화 염화암모늄 수용액; d) 트리클로로메틸 카보네이트, N,N-디이소프로필에틸아민, 테트라히드로푸란; e) 디클로로메탄, 염화수소/1,4-디옥산 용액(4.0M); f) (S)-3-((터트-부톡시카르보닐)(이소프로필)아미노)-2-(4-클로로페닐)프로피온산, N,N-디이소프로필에틸아민, N,N-디메틸포름아미드, 2-(7-아조벤조트리아졸)- N,N,N',N'-테트라메틸우레아 헥사플루오로포스페이트; g) 디클로로메탄, 염화수소/1,4-디옥산 용액(4.0M).
실시예 23
5-(4-((S)-2-(4-클로로페닐)-3-(이소프로필아미노)프로피오닐)피페라진-1-일)-4-메틸-1,4-디히드로-2H-피리미도[4,5- d][1,3]옥사진-2-온 포메이트
Figure pct00156
a) 1-(4-아미노-6-클로로피리미딘-5-일)에타논
20℃에서, 1-(4,6-디클로로피리미딘-5-일)에타논(2.5g)을 테트라히드로푸란(15mL)에 용해시키고, 암모니아(9g)를 첨가하였다. 반응 용액을 20℃에서 5시간 동안 교반한 후 농축하여 소량의 물로 희석하고, 흡인 여과하여 백색 고체를 얻은 후 진공건조하여 백색고체 2g을 얻었고, 이를 다음 단계에서 직접 사용하였다.
b) 터트-부틸 4-(5-아세틸-6-아미노피리미딘-4-일)피페라진-1-카복실레이트
1-(4-아미노-6-클로로피리미딘-5-일)에타논(2g) 및 N,N-디이소프로필에틸아민(3g)을 20℃에서 아세토니트릴(20mL)에 용해시켰다. 이어서, 1-(4-아미노-6-클로로피리미딘-5-일)에타논을 첨가하고, 반응 용액을 40℃에서 5시간 동안 교반하였다. 반응 종료 후, 용매를 감압 증발시켜 조 생성물을 얻었다. 조 생성물을 실리카겔 컬럼 크로마토그래피(에틸 아세테이트:페트롤륨 에테르 = 1:1, 부피비)로 분리 정제하여 담황색 고체 3.2g을 얻었고, 이를 다음 단계에 직접 사용하였다.
c) 터트-부틸 4-(6-아미노-5-(1-히드록시에틸)피리미딘-4-일)피페라진-1-카복실레이트
터트-부틸 4-(5-아세틸-6-아미노피리미딘-4-일)피페라진-1-카복실레이트(1.5g)를 20℃에서 메탄올(15mL)에 용해시키고 -10℃로 냉각시켰다. 그 다음, 수소화붕소나트륨(1g)을 배치로 첨가하였다. 첨가가 완료된 후, 반응 용액을 천천히 20℃로 가온하고 추가로 3시간 동안 교반하였다. 반응이 완료된 후, 반응 용액을 염화암모늄 포화 수용액으로 급랭시켰다. 반응 용액을 농축하고 에틸 아세테이트(20mL x 2)로 펄프화하였다. 모액을 농축하여 유상의 조 생성물을 얻는다. 조 생성물을 분리하고 실리카겔 컬럼 크로마토그래피(디클로로메탄:메탄올=1:30, 부피비)로 정제하여 백색 유상의 생성물 400mg을 얻었다. LC-MS(ESI): m/z=324 [M+H].
d) 터트-부틸 4-(4-메틸-2-옥소-1,4-디히드로-2H-피리미도[4,5-d][1,3]옥사진-5-일)피페라진-1-카르복실레이트
20℃에서, 터트-부틸 4-(6-아미노-5-(1-히드록시에틸)피리미딘-4-일)피페라진-1-카복실레이트(300 mg) 및 N,N-디이소프로필에틸아민(282 mg)을 테트라히드로푸란(3mL)에 용해시켰다. 이후 온도를 -5℃로 낮추고 트리클로로메틸 카보네이트를 천천히 첨가하고, -5℃에서 0.5시간 동안 교반하였다. 그런 다음 온도를 천천히 18℃로 올리고 반응 용액을 1.5시간 동안 교반하였다. 반응이 완료된 후, 반응을 중탄산나트륨 수용액으로 켄칭하고 에틸 아세테이트(10 mL x 3)로 추출하였다. 유기 상을 조합하고 무수 황산나트륨으로 건조하고, 여과하고, 농축하여 오일성 조 물질(crude)를 얻었다. 조 물질을 분리하고 실리카겔 컬럼 크로마토그래피(페트롤륨 에테르:에틸 아세테이트 = 1:1, 부피비)로 정제하여 백색 고체 108mg을 얻었다. LC-MS(ESI) m/z=350[M+H].
e) 4-메틸-5-(피페라진-1-일)-1,4-디히드로-2H-피리미도[4,5-d][1,3]옥사진-2-온 히드로클로라이드
20℃에서, 터트-부틸 4-(4-메틸-2-옥소-1,4-디히드로-2H-피리미도[4,5-d][1,3]옥사진-5-일)피페라진-1-카복실레이트(100 mg)를 디클로로메탄(3mL)에 용해시키고 교반 하에 염화수소/1,4-디옥산 용액(4.0 M, 3mL)을 첨가하였다. 반응 용액을 20℃에서 1시간 동안 교반한 결과, 백색 고체가 침전되었다. 반응 용액을 감압 증발시켜 용매를 제거하여 백색 고체 목적 생성물 80mg을 얻었고, 이를 다음 단계에 바로 사용하였다.
f) 터트-부틸 (2S)-2-(4-클로로페닐)-3-(4-(4-메틸-2-옥소-1,4-디히드로-2H-피리미도[4,5-d][1,3]옥사진-5-일)피페라진-1-일)-3-옥소프로필)(이소프로필)카바메이트
20℃에서, 4-메틸-5-(피페라진-1-일)-1H-피리미도[4,5-d][1,3]옥사진-2(4H)-온(80 mg), (S)-3-((터트-부톡시카보닐)(이소프로필)아미노)-2-(4-클로로페닐)프로피온산(100mg), N,N-디이소프로필에틸아민(113mg) 및 2-(7-아조벤조트리아졸)-N,N,N',N'-테트라메틸우레아 헥사플루오로포스페이트(167 mg)를 무수 N,N-디메틸포름아미드(2.5mL)에 용해시켰다. 반응 용액을 20℃에서 12시간 동안 교반하였다. 반응 종료 후, 반응 용액을 에틸 아세테이트(20 mL)에 붓고 물로 2회, 염화나트륨 수용액으로 1회 세척하였다. 유기 상을 농축하여 조 생성물을 얻었다. 미정제 생성물을 실리카겔 컬럼 크로마토그래피(석유 에테르:에틸 아세테이트 = 1:1, 부피비)로 분리 정제하여 백색 고체 130mg을 얻었다. LC-MS(ESI) m/z=573[M+H].
g) 5-(4-((S)-2-(4-클로로페닐)-3-(이소프로필아미노)프로피오닐)피페라진-1-일)-4-메틸-1,4-디히드로-2H-피리미도[4,5-d][1,3]옥사진-2-온 포메이트
터트-부틸 (2S)-2-(4-클로로페닐)-3-(4-(4-메틸-2-옥소-1,4-디히드로-1H-피리미도[4,5-d][1,3])옥사진-5-일)피페라진-1-일)-3-옥소프로필)(이소프로필)카바메이트(130mg)를 20℃에서 디클로로메탄(2mL)에 용해시켰다. 교반 하에 염화수소/1,4-디옥산 용액(4.0M, 2mL)을 첨가하고, 반응 용액을 20℃에서 2시간 동안 교반하였다. 반응 종료 후, 반응액을 0℃로 냉각하고, 10% 수산화나트륨 용액을 첨가하여 pH = 9로 조절하고, 디클로로메탄(10 mL x 3)을 첨가하여 추출하였다. 유기상을 포화 염화나트륨 용액(15 mL)으로 세척하고, 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 감압하에 증발시켰다. 잔여물을 분리하고 고성능 분취 액체 크로마토그래피로 정제하여 32 mg의 백색 고체를 얻었다. HPLC 조건: 컬럼: Aglient 5 μm prep-C18 50 x 21.2 mm, 이동 상 A: 물(0.1% 포름산 함유); 이동 상 B: 아세토니트릴, 구배: 시간 0-10분, 상 B 5-45%(부피비), RT=3.7분.
Figure pct00157
이성질체 분리:
초임계 유체 크로마토그래피로 상기 제목의 화합물을 키랄 분해하였다. 분해 장치 및 조건: Waters SFC200; 칼럼: Daicel Chiralcel AD, 250×30 mm ID, 5 μm; 이동 상: A는 CO2, B는 메탄올(0.1% NH3H2O), A:B = 65:35(부피 비율); 유속 60mL/분, 컬럼 온도 38°C.
이성질체 1:
Figure pct00158
Figure pct00159
이성질체 2:
Figure pct00160
Figure pct00161
실시예 24
Figure pct00162
이성질체 1 이성질체 2
터트-부틸피페라진-1-카복실레이트 대신에 터트-부틸 3,8-디아자비시클로[3.2.1]옥탄-8-포메이트를 사용하는 공정 F 에 기재된 방법에 따라 제조하였다. 최종 생성물을 초임계 유체 크로마토그래피로 분해하여 이성질체 1 및 이성질체 2를 얻었다. 분리 장치 및 조건: waters SFC200; 칼럼: Daicel Chiralcel OD, 250×30mm ID, 5μm; 이동상: A는 CO2, B는 에탄올(0.1% NH3H2O)이고 A: B=70:30(체적비); 유속 60mL/분, 컬럼 온도 38℃.
Figure pct00163
실시예 25
Figure pct00164
이성질체 1 이성질체 2
터트-부틸피페라진-1-카복실레이트 대신에 터트-부틸 3,8-디아자비시클로[3.2.1]옥탄-3-포메이트를 사용하는 공정 F에 기재된 방법에 따라 제조하였다. 최종 생성물을 초임계 유체 크로마토그래피로 분리하여 이성질체 1 및 이성질체 2를 얻었다. 분리 장치 및 조건: waters SFC200; 칼럼: Daicel Chiralcel OZ, 250×30 mm ID, 5μm; 이동상: A는 CO2, B는 에탄올(0.1% NH3H2O)이다. A: B=60:40(체적비); 유속 60mL/분, 컬럼 온도 38℃.
Figure pct00165
실시예 26
Figure pct00166
터트-부틸피페라진-1-카복실레이트 대신에 터트-부틸 3,8-디아자비시클로[3.2.1]옥탄-3-포메이트를 사용하는, 공정 J에 기재된 방법에 따라 제조하였다.
Figure pct00167
실시예 27
Figure pct00168
터트-부틸피페라진-1-카복실레이트 대신에 터트-부틸 2,5-디아자비시클로[4.1.0]헵탄-2-카복실레이트를 사용하는 반응식 J에 기재된 방법에 따라 제조하였다. 최종 생성물을 초임계 유체 크로마토그래피로 분리하여 이성질체 1 및 이성질체 2를 얻었다. 분리 장치 및 조건: Waters SFC200; 칼럼: Daicel Chiralcel OZ, 250×30 mm ID, 5μm; 이동상: A는 CO2, B는 에탄올(0.1% NH3H2O)이다. A: B=60:40(체적비); 유속 60mL/분, 컬럼 온도 38℃.
초고성능 컨버전스 크로마토그래피 크로마토그래피 조건: 컬럼: Daicel Chiralcel AD, 2.1×150mm ID, 3 μm, 이동 상 A: CO2, 이동 상 B: 에탄올(0.1% DEA), 구배: 시간 0-8분, 상 B 5-40 %(부피비); 유속: 1mL/분; 컬럼 온도 40℃ 이성질체 1: RT=4.0분; 이성질체 2: RT=4.8분.
Figure pct00169
실시예 28
Figure pct00170
제조는 요오드화 메틸 대신 요오드화 에틸을 사용하고, 터트-부틸피페라진-1-카복실레이트 대신 터트-부틸 3,8-디아자비시클로[3.2.1]옥탄-8-카복실레이트를 사용하는 공정 J에 기재된 방법에 따라 수행되었다.
Figure pct00171
실시예 29
Figure pct00172
제조는 요오드화 메틸 대신에 브로모아세토니트릴을 사용하는 공정 J에 기재된 방법에 따라 수행하였다.
Figure pct00173
실시예 30
Figure pct00174
제조는 요오드화 메틸 대신 1-플루오로-2-아이오도에탄을 사용하는 공정 J에 기재된 방법에 따라 수행하였다.
Figure pct00175
공정 J-1:
Figure pct00176
반응 조건: a) 디메틸 터트-부틸(2-아이오도에톡시) 실란, 수소화나트륨, N,N-디메틸포름아미드; b) 터트-부틸 3,8-디아자비시클로[3.2.1]옥탄-8-포르메이트, 4-디메틸아미노피리딘, N-메틸피롤리돈; c) 염화수소/디옥산 용액; d) (S)-3-((터트-부톡시카르보닐)(이소프로필)아미노)-2-(4-클로로페닐)프로피온산, 디이소프로필에틸아민, 2-(7-벤조트리아졸 옥사이드)-N,N,N',N'-테트라메틸우레아 헥사플루오로포스페이트, N,N-디메틸포름아미드; e) 트리플루오로아세트산, 디클로로메탄.
실시예 31
Figure pct00177
a) 5-(2-((터트-부틸디메틸실릴)옥시에틸)-4-클로로-8-(2,4-디메톡시벤질)-5,8-디히드로프테리딘-7(6H)-온
0℃에서, 수소화나트륨(0.53g)을 N,N-디메틸포름아미드(30mL) 중의 4-클로로-8-(2,4-디메톡시벤질)-5,8-디하이드로프테리딘-7(6H)-온(2.2g)의 용액에 첨가하였다. 반응 혼합물을 20분 동안 교반하였다. 디메틸 터트-부틸(2-아이오도에톡시)실란(2.82g)을 0℃에서 첨가하였다. 반응 혼합물을 0℃에서 3시간 동안 교반하였다. 반응 용액을 물(100mL)에 붓고, 에틸 아세테이트(100mL)를 첨가하여 추출하였다. 유기상을 포화 염화나트륨 용액(100mL x 3)으로 세척하고, 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 회전 건조시켰다. 생성물을 실리카겔 컬럼 크로마토그래피(페트롤륨 에테르:에틸 아세테이트 = 5:1)로 정제하여 백색 고체 생성물 0.8g을 얻었다.
b) 5-(2-((터트-부틸디메틸실릴)옥시에틸)-4-(8-터트-부틸옥시카보닐-3,8-디아자비시클로[3,2,1]옥탄-3-일)-8-(2,4-디메톡시벤질)-5,8-디히드로프테리딘-7(6H)-온
터트-부틸 3,8-디아자비시클로[3.2.1]옥탄-8-포메이트(0.85g) 및 4-디메틸아미노피리딘(0.17g)을 N-메틸피롤리돈 중 단계 a)의 생성물(0.2g)의 용액에 20℃에서 첨가하였다. 반응 혼합물을 150℃에서 3시간 동안 교반하였다. 반응 용액을 물(100mL)에 붓고, 에틸 아세테이트(100mL)를 첨가하여 추출하였다. 유기 상을 포화 염화나트륨 용액(100mL x 3)으로 세척하고, 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 회전 건조시켰다. 생성물을 실리카겔 플레이트 크로마토그래피(페트롤륨 에테르:에틸 아세테이트 = 1:1)로 정제하여 백색 고체 생성물 0.08g을 얻었다.
c)4-(3,8-디아자비시클로[3.2.1]옥탄-3-일)-8-(2,4-디메톡시벤질)-5-(2-히드록시에틸)-5,8-디히드로프테리딘-7(6H)-온
염화수소/디옥산 용액(3mL)을 20℃에서 단계 b)의 생성물(0.08g)에 첨가하였다. 반응 혼합물을 20℃에서 3시간 동안 교반하였다. 반응 용액을 스핀 건조하여 백색에 가까운 고체(0.06g)를 얻었다.
d) 터트-부틸 ((S)-2-(4-클로로페닐)-3-3-(8-(2,4-디메톡시벤질)-5-(2-히드록시에틸)-7-옥소-5,6,7,8-테트라히드로프테리딘-4-일)-3,8-디아자비시클로[3.2.1]옥탄-8-카바메이트)-3-옥소프로필(이소프로필)에스테르
(S)-3-((터트-부톡시카보닐)(이소프로필)아미노)-2-(4-클로로페닐)프로피온산(0.04g) 및 디이소프로필에틸아민(0.03g)을 N,N-디메틸포름아미드(10mL) 중단계 c)의 생성물(0.06g) 용액에 20℃에서 첨가하였다. 반응 혼합물을 2분 동안 교반하였다. 2-(7-벤조트리아졸 옥사이드)-N,N,N',N'-테트라메틸우레아 헥사플루오로포스페이트(0.04g)를 20℃에서 첨가하고, 반응 혼합물을 20℃에서 1시간 동안 교반하였다. 반응 용액을 물(100mL)에 붓고, 에틸 아세테이트(100mL)를 첨가하여 추출하였다. 유기 상을 포화 염화나트륨 용액(100mL x 3)으로 세척하고, 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 회전 건조시켰다. 생성물을 실리카겔 플레이트 크로마토그래피(페트롤륨 에테르:에틸 아세테이트 = 1:2)로 정제하여 백색 고체 생성물 0.04g을 얻었다.
e) 4-8-((S)-2-(4-클로로페닐)-3-(이소프로필아미노)프로피오닐)-3,8-디아자비시클로[3.2.1]옥탄-3-일)-5-(2-히드록시에틸)-5,6-디히드로프테리딘-7(8H)-온
트리플루오로아세트산(3mL)을 20℃에서 단계 d)의 생성물(40mg)에 첨가하였다. 반응 혼합물을 60℃에서 3시간 동안 교반하였다. 반응 용액을 회전 건조하고, NaHCO3 를 가하고 20분간 교반하여 여과하여, 백색에 가까운 고체 생성물(10 mg)을 얻었다.
Figure pct00178
실시예 32
Figure pct00179
터트-부틸피페라진-1-카르복실레이트 대신에 터트-부틸 3,8-디아자비시클로[3.2.1]옥탄-8-포메이트를 사용하는 공정 K에 기재된 방법에 따라 제조하였다. 최종 생성물을 초임계 유체 크로마토그래피로 분리하여 이성질체 1 및 이성질체 2를 얻었다. 분리 장치 및 조건: waters SFC200; 칼럼: Daicel Chiralcel OZ, 250×30 mm ID, 5 μm; 이동상: A는 CO2, B는 이소프로판올(0.1% NH3H2O)이다. A: B=60:40(체적비) ; 유속 60mL/분, 컬럼 온도 38℃
초고성능 컨버전스 크로마토그래피 조건: 컬럼: Daicel Chiralcel AD, 2.1×150 mm ID, 3 μm, 이동상 A: CO2, 이동상 B: 이소프로판올(0.1% DEA), 구배: 시간 0-8분, 상 B 5-40 %(부피비); 유속: 1mL/분; 컬럼 온도 40℃. 이성질체 1: RT=4.3분; 이성질체 2: RT=4.5분.
이성질체 1:
Figure pct00180
이성질체 2:
Figure pct00181
실시예 33
Figure pct00182
터트-부틸피페라진-1-카복실레이트 대신에 터트-부틸 3,8-디아자비시클로[3.2.1]옥탄-3-포메이트를 사용하는 공정 K에 기재된 방법에 따라 제조하였다. 최종 생성물을 초임계 유체 크로마토그래피로 분리하여 이성질체 1 및 이성질체 2를 얻었다. 분리 장치 및 조건: waters SFC200; 칼럼: Daicel Chiralcel OZ, 250×30 mm ID, 5 μm; 이동상: A는 CO2, B는 에탄올(0.1% NH3H2O)이다. A: B=60:40(체적비) ; 유속 60mL/분, 컬럼 온도 38℃.
초고성능 컨버전스 크로마토그래피 조건: 컬럼: Daicel Chiralcel AD, 2.1×150 mm ID, 3 μm, 이동 상 A: CO2, 이동 상 B: 에탄올(0.1% DEA), 구배: 시간 0-8분, 상 B 5-40 %(부피비); 유속: 1mL/분; 컬럼 온도 40℃. 이성질체 1: RT=4.6분; 이성질체 2: RT=5.0분.
이성질체 1:
Figure pct00183
이성질체 2:
Figure pct00184
실시예 34
Figure pct00185
Figure pct00186
a) 1-(4-아미노-6-클로로피리미딘-5-일)에타논(화합물 34-1)
20℃에서, 1-(4,6-디클로로피리미딘-5-일)에타논(2.5g)을 테트라히드로푸란(15mL)에 용해시키고, 암모니아(9g)를 첨가하였다. 반응 용액을 20℃에서 5시간 동안 교반한 후, 농축하여 소량의 물로 희석하고, 흡인 여과하여 백색 고체를 얻은 후 진공건조하여 백색 고체 2g을 얻었고, 이는 다음 단계에서 직접 사용되었다.
b) 1-(4-아미노-6-클로로피리미딘-5-일)에탄-1-올(화합물 34-2)
1-(4-아미노-6-클로로피리미딘-5-일)에타논(1.5g)을 20℃에서 메탄올(15mL)에 용해시키고 -10℃로 냉각시켰다. 그 다음, 수소화붕소나트륨(1g)을 배치로 첨가하였다. 첨가가 완료된 후, 반응 용액을 천천히 20℃로 가온하고 추가로 3시간 동안 교반하였다. 반응이 완료된 후, 반응 용액을 염화암모늄 포화 수용액으로 급랭시켰다. 반응 용액을 농축하고 에틸 아세테이트(20mL x 2)로 펄프화하였다. 모액을 농축하여 유성의 조 생성물을 얻는다. 조 생성물을 크로마토그래피 컬럼으로 분리하여 400 mg의 백색 유성의 생성물을 얻었다. LC-MS(ESI) m/z: 174(M+H).
c) 5-클로로-4-메틸-1,4-디히드로-2H-피리미딘[4,5-d][1,3]옥사진-2-온(화합물 34-3)
20℃에서, 1-(4-아미노-6-클로로피리미딘-5-일)에탄-1-올(300 mg) 및 N,N-디이소프로필에틸아민(282 mg)을 테트라히드로푸란(3 mL)에 용해시켰다. 이후 온도를 -5℃로 낮추고 비스(트리클로로메틸)카보네이트(300mg)를 천천히 첨가하고, -5℃에서 0.5시간 동안 교반하였다. 그런 다음 온도를 천천히 18℃로 올리고 반응 용액을 1.5시간 동안 교반하였다. 반응이 완료된 후, 반응을 중탄산나트륨 수용액으로 켄칭하고 에틸 아세테이트(10 mL x 3)로 추출하였다. 유기 상을 합하고 무수 황산나트륨으로 건조하고, 여과하고 농축하여 오일성 조 생성물을 얻었다. 조 생성물을 분리하고 컬럼 크로마토그래피로 정제하여 108 mg의 백색 고체를 얻었다. LC/MS(ESI) m/z: 200(M+H).
d) (S)-5-클로로-4-메틸-1,4-디히드로-2H-피리미딘[4,5-d][1,3]옥사진-2-온(화합물 34-4a) 및 (R)-5-클로로-4-메틸-1,4-디히드로-2H-피리미딘[4,5-d][1,3]옥사진-2-온(화합물 34-4b)
화합물 34-3을 SFC 키랄 컬럼으로 분리하여 목적 생성물인 화합물 34-4a 및 화합물 34-4b를 얻었다.
SFC 키랄 분해능 조건은 다음과 같다. 기기: waters SFC200; 분리 컬럼: Daicel Chiralcel AD, 250×50 mm ID, 10 μm; 이동 상: A: CO2, B: 메탄올(0.1% NH3H2OO), A: B=65:35(부피비); 유속: 150mL/분; 압력: 100바; 컬럼 온도: 38℃; 검출 파장: 220nm; 사이클 시간: 14분; 샘플 전처리: 300ml MeOH에 용해된 10g; 주입 부피: 16 ml.
후처리: 시료를 40℃에서 농축하고 동결건조하여 각각 제목의 화합물 34-4a 및 화합물 34-4b를 얻었다.
경로 1: 이성질체 1 및 이성질체 4의 제조
e) 터트-부틸 5-((S)-4-메틸-2-옥소-1,4-디히드로-2H-피리미딘[4,5-d][1,3]옥사진-5-일)-2,5- 디아자비시클로[4.1.0]헵탄-2-카복실레이트(화합물 34-5a)
화합물 34-4a(2g) 및 터트-부틸 2,5-디아자비시클로[4.1.0]헵탄-2-카복실레이트(3.58g)를 무수 MeCN(20mL)에 용해시키고, DIEA(3.89g)를 첨가하고, 반응 용액을 질소로 퍼징하고, 튜브를 밀봉하고 95℃에서 6시간 동안 교반하였다. 반응 종료 후, 반응 용액을 농축하여 목적물의 조 생성물을 얻었다. 조생성물을 DCM에 녹이고 물로 세척하고 농축하여 조 생성물을 얻은 후 컬럼 크로마토그래피(EA:PE=1:1)로 분리 및 정제하여 담갈색 고체 3.2g을 얻었다.
f) (4S)-5-(2,5-디아자비시클로[4.1.0]헵탄-2-일)-4-메틸-1,4-디히드로-2H-피리미도[4,5-d][1,3]옥사진-2-온 염산염(화합물 34-6a)
단계 e)의 생성물(3.2g)을 HCl/i-PrOH(10mL)에 용해시키고, 실온에서 2시간 동안 교반하였다. 반응 종료 후, 반응 용액을 농축하여 조 생성물을 얻었고, 이를 정제 없이 다음 단계에 바로 사용하였다.
g) 화합물 34-7a
단계 f)의 생성물(3.3g), (S)-3-((터트-부톡시카보닐)(이소프로필)아미노)-2-(4-클로로페닐)프로피온산(4.9g), HATU(6.32g) 및 DIPEA (4.3g)을 무수 DMF(50mL)에 용해시켰다. 반응 용액을 실온에서 12시간 동안 교반하였다. 반응이 완료된 후, 반응 용액을 에틸 아세테이트 100mL에 붓고 물(20mL x 3) 및 포화 염화나트륨 용액 10mL로 세척하였다. 유기 상을 건조하고 농축하여 조 생성물을 얻었다. 조 생성물을 분리하고 컬럼 크로마토그래피(PE:EA=1:1)로 정제하여 갈색 고체 7.2g을 얻었다. MS(ESI) m/z: 585(M+H).
h) 화합물 34-8a
단계 g)의 생성물(7.2g)을 MeOH(25mL)에 녹인 후, HCl/디옥산(70mL)을 첨가하고, 반응 용액을 실온에서 2시간 동안 교반한 후, 농축하여 적색 오일상의 조 생성물을 얻었다. 조 생성물을 MeOH(20 mL)에 용해시키고 Na2CO3로 제거하고 농축하여 조 생성물 6 g을 얻었다.
i) 이성질체 1 및 이성질체 4
화합물 34-8a를 SFC 키랄 컬럼으로 분리하여 이성질체 1 및 이성질체 4를 얻었다.
SFC 키랄 분해능 조건: 기기: waters SFC200; 분리 컬럼: Daicel Chiralcel AD, 250×50 mm ID, 10 μm; 이동상: A: CO2, B: MeOH(0.1% NH3H2O), A:B=75:25; 유속: 70mL/분; 압력: 100바; 컬럼 온도: 38℃; 검출 파장: 254nm; 사이클 시간: 5분; 샘플 전처리: 200ml MeOH에 용해된 10g; 주입 부피: 16 ml.
후처리: 샘플을 40℃에서 농축하고 동결건조하여 목적 화합물 이성질체 1 및 이성질체 4를 각각 얻었다.
경로 2: 이성질체 2 및 이성질체 3의 제조
화합물 34-4b를 원료 물질로 사용하여 경로 1에 기재된 방법에 따라 이성질체 2 및 이성질체 3을 각각 제조하였다.
Figure pct00187
단결정 회절에 의한 구성 측정:
(1) 이성질체 1의 구성 측정
단결정 제조: 이성질체 1의 화합물(50.0 mg) 및 3.0 ml 이소프로판올을 5 ml 스크류-탑 유리병에 칭량하고 5분 동안 교반하였다. 고체를 용해시키고 정화시켰다. 옥살산 이수화물 13.0mg을 칭량하여 상기 유리병에 첨가하였다. 유리병에서 백색 고체가 점차적으로 침전되었다. 실온에서 3시간 동안 교반한 후, 유리병에 다량의 백색 고체가 침전되었다. 유리병에 메탄올 1.5mL와 정제수 0.2mL를 가하고 용액이 맑아지는 동안 흰색 고체가 서서히 사라졌다. 교반을 1시간 동안 계속하였다. 용액을 0.22μm 미세다공성 막을 통해 20ml 스크류 탑 유리병에 여과하고, 유리병 입구를 플라스틱 랩으로 덮었다. 플라스틱 랩을 병 입구에 바늘로 뚫어 8개의 작은 구멍을 만들고, 혼합물을 실온에서 10일 동안 방치하여 이성질체 1의 화합물의 옥살레이트 단결정을 얻었다.
단결정 회절 실험:
단결정 X선 회절계: BRUKER KAPPA APEX-II CCD
파장: Cu Kα(λ=1.54178
Figure pct00188
)
시험 온도: 296K
구조해석용 컴퓨터 프로그램: SHELXL-2018
단결정 데이터: 분자식: C50H60Cl2N12O10; 분자량: 1060.00; 결정계: 사방정계 결정계; 공간 그룹: C 2 2 2; 단위 셀 매개변수: a=15.719(2)
Figure pct00189
, b=17.411(2)
Figure pct00190
, c=48.335(6)
Figure pct00191
, α=90°, β=90°, γ=90°; 단위 셀 부피: V=13228(3)
Figure pct00192
3; 단위 셀에 포함된 분자식의 수: Z=8; 계산된 밀도 : Dcalc= 1.064 g/ cm3; R(Fo): 0.0612; RW(Fo 2): 0.1856; 적합도 (S): 1.023; 플랙 매개변수(Flack parameter): 0.040(11).
구조 설명: 단결정 X-선 회절 및 구조 분석은 얻어진 단결정이 이성질체 1의 옥살레이트 임을 보여준다. 결정의 비대칭 구조 단위는 2개의 이성질체 분자와 1개의 옥살산 분자를 포함한다. 화합물 이성질체 1의 단일 분자 개략도는 도 3에, 옥살레이트 단결정은 도 4에 보여진다. 구조식은 다음과 같다:
Figure pct00193
(2) 이성질체 3의 구성 측정
단결정 제조: 상기 이성질체 1의 단결정 제조에 기재된 방법에 따라 이성질체 3의 옥살산염 단결정을 제조하였다.
단결정 회절 실험:
단결정 X-선 회절계: BRUKER D8 VENTURE PHOTON II
파장: Ga K α (γ = 1.34139
Figure pct00194
)
실험 온도: 173K
구조 분석을 위한 컴퓨터 프로그램: SHELXL-2018
단결정 데이터: 분자식: C52H64Cl2N12O15; 분자량: 1168.05; 결정계: 단사정계; 공간 그룹: P 21/c; 단위 셀 매개변수: a=20.1588(13)
Figure pct00195
, b=21.4744(14)
Figure pct00196
, c=14.4055(9)
Figure pct00197
, α=90°,β=98.259(3)°,γ=90°; 단위 셀 부피: V=6171.4(7)
Figure pct00198
3; 단위 셀에 포함된 분자식의 수: Z=4; 계산된 밀도: Dcalc= 1.257 g/cm3; R(Fo): 0.0634; RW(Fo 2): 0.2016; 적합도 (S): 1.053.
구조 설명: 단결정 X-선 회절 및 구조 분석은 얻어진 단결정이 이성질체 3의 옥살산염 수화물(oxalate hydrate)임을 보여준다. 결정의 비대칭 구조 단위는 3개의 이성질체 3 분자, 2개의 옥살산 분자 및 1개의 물 분자를 포함하며, 여기서 이성질체 3과 옥살산은 옥살산염을 형성한다. 이성질체 3의 화합물의 단분자 개략도는 도 5에, 옥살산 단결정의 비대칭 구조 단위는 도 6에 나타내었다. 구조식은 다음과 같다.
Figure pct00199
공정 L:
Figure pct00200
반응 조건: a) (2,4-디메톡시페닐)메틸아민, 트리에틸아민, 테트라히드로푸란; b) 4,6-디클로로피리미딘-5-아민, 트리에틸아민, 이소프로판올; c) 요어드화 메틸, 수소화나트륨, N,N-디메틸포름아미드; d) 터트-부틸피페라진-1-카복실레이트, 4-디메틸아미노피리딘, N-메틸피롤리돈; e) 염화수소/디옥산 용액; f) (S)-3-((터트-부톡시카보닐)(이소프로필)아미노)-2-(4-클로로페닐)프로피온산, 디이소프로필에틸아민, 2-(7-벤조트리아졸 옥사이드)-N,N,N',N'-테트라메틸우레아 헥사플루오로포스페이트, N,N-디메틸포름아미드; g) 트리플루오로아세트산.
실시예 35
Figure pct00201
a) 에틸 2-(2,4-디메톡시벤질)아미노아세테이트
트리에틸아민(0.6g) 및 (2,4-디메톡시페닐)메틸아민(1.0g)을 0℃에서 THF(10mL) 중 에틸 브로모아세테이트(1.0g)의 용액에 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 3시간 동안 교반하였다. 반응 용액을 물(100mL)에 붓고, 에틸 아세테이트(100mL)를 첨가하여 추출하였다. 유기 상을 포화 염화나트륨 용액(100mL x 3)으로 세척하고, 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 회전 건조시켰다. 생성물을 실리카겔 컬럼 크로마토그래피(페트롤륨 에테르:에틸 아세테이트 = 3:1)로 정제하여 백색 고체 생성물 1.3g을 얻었다.
b) 4-클로로-8-(2,4-디메톡시벤질)-7,8-디히드로프테리딘-6(5H)-온
트리에틸아민(1.56g) 및 4,6-디클로로피리미딘-5-아민(0.84g)을 0℃에서 이소프로판올(10mL) 중 에틸 2-(2,4-디메톡시벤질)아미노아세테이트(1.3g)의 용액에 첨가하였다. 반응 혼합물을 90℃에서 3시간 동안 교반하였다. 반응 용액을 여과하여 백색 고체 생성물 0.7g을 얻었다.
c) 4-클로로-8-(2,4-디메톡시벤질)-5-메틸-7,8-디히드로프테리딘-6(5H)-온
0℃에서, 수소화나트륨(76.7 mg)을 N-디메틸포름아미드(5mL)중 4-클로로-8-(2,4-디메톡시벤질)-7,8-디히드로프테리딘-6(5H)-온(0.5g)의 용액에 첨가하였다. 반응 혼합물을 20분 동안 교반하였다. 메틸 요오다이드(255 mg)를 0℃에서 첨가하였다. 반응 혼합물을 0℃에서 3시간 동안 교반하였다. 반응 용액을 물(100mL)에 붓고, 에틸 아세테이트(100mL)를 첨가하여 추출하였다. 유기 상을 포화 염화나트륨 용액(100mL x 3)으로 세척하고, 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 회전 건조시켰다. 생성물을 실리카겔 컬럼 크로마토그래피(페트롤륨 에테르:에틸 아세테이트 = 5:1)로 정제하여 백색 고체 생성물 0.5g을 얻었다.
d)4-(8-(2,4-디메톡시벤질)-5-메틸-6-옥소-5,6,7,8-테트라히드로프테리딘-4-일)피페라진-1-카복실레이트
터트-부틸피페라진-1-카복실레이트(0.53g) 및 4-디메틸아미노피리딘(0.52g)을 N-메틸피롤리돈(10mL) 중 4-클로로-8-(2,4-디메톡시벤질)-5-메틸-7,8-디히드로프테리딘-6(5H)-온(0.5g)의 용액에 20℃에서 첨가하였다. 반응 혼합물을 150℃에서 3시간 동안 교반하였다. 반응 용액을 물(100mL)에 붓고, 에틸 아세테이트(100mL)를 첨가하여 추출하였다. 유기 상을 포화 염화나트륨 용액(100mL x 3)으로 세척하고, 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 회전 건조시켰다. 생성물을 실리카겔 플레이트 크로마토그래피(페프롤륨 에테르:에틸 아세테이트 = 1:1)로 정제하여 백색 고체 생성물 0.5g을 얻었다.
e) 8-(2,4-디메톡시벤질)-5-메틸-4-(피페라진-1-일)-7,8-디히드로프테리딘-6(5H)-온
염화수소/디옥산 용액(5mL)을 4-(8-(2,4-디메톡시벤질)-5-메틸-6-옥소-5,6,7,8-테트라히드로프테리딘-4-일)피페라진-1카복실레이트(0.1g)에 20℃에서 첨가하였다. 반응 혼합물을 20℃에서 3시간 동안 교반하였다. 반응 용액을 회전 건조하여 백색에 가까운 고체(0.1g)를 얻었다.
f) (S)-터트-부틸(2-(4-클로로페닐)-3-(4-(8-(2,4-디메톡시벤질)-5-메틸-6-옥소-5,6,7,8-테트라히드로프테리딘-4-일)피페라진-1-일)-3-옥소프로필)(이소프로필)카바메이트
(S)-3-((터트-부톡시카르보닐)(이소프로필)아미노)-2-(4-클로로페닐)프로피온산(0.12g) 및 디이소프로필에틸아민(0.10g)을 N,N-디메틸포름아미드(10mL) 중 8-(2,4-디메톡시벤질)-5-메틸-4-(피페라진-1-일)-7,8-디히드로프테리딘-6(5H)-온(0.1g) 용액에 20℃에서 첨가하였다. 반응 혼합물을 2분 동안 교반하였다. 2-(7-벤조트리아졸 옥사이드)-N,N,N',N'-테트라메틸우레아 헥사플루오로포스페이트(0.12g)를 20℃에서 첨가하고, 반응 혼합물을 20℃에서 1시간 동안 교반하였다. 반응 용액을 물(100mL)에 붓고, 에틸 아세테이트(100mL)를 첨가하여 추출하였다. 유기 상을 포화 염화나트륨 용액(100mL x 3)으로 세척하고, 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 회전 건조시켰다. 생성물을 실리카겔 플레이트 크로마토그래피(페트롤륨 에테르:에틸 아세테이트 = 1:2)로 정제하여 백색 고체 생성물 0.1g을 얻었다.
g)(S)-4-(4-(2-(4-클로로페닐)-3-(이소프로필아미노)프로피오닐)피페라진-1-일)-5-메틸-7,8-디히드로프테리딘-6(5H)-온
트리플루오로아세트산(5mL)을 (S)-터트-부틸(2-(4-클로로페닐)-3-(4-(8-(2,4-디메톡시벤질)-5-메틸-6-옥소-5,6,7,8-테트라히드로프테리딘-4-일)피페라진-1-일)-3-옥소프로필)(이소프로필)카바메이트 (100 mg))에 20℃에서 첨가하였다. 반응 혼합물을 60℃에서 3시간 동안 교반하였다. 반응 용액을 회전 건조하여 백색에 가까운 고체(20 mg)를 얻었다.
Figure pct00202
공정 M:
Figure pct00203
반응 조건: a) 2,4-디메톡시벤질아민, N,N-디이소프로필에틸아민, 아세토니트릴; b) 테트라히드로푸란, 탄산칼륨, 메틸 2-클로로-2-옥소아세테이트; c) N,N-디이소프로필에틸아민, 에탄올; d) 터트-부틸 3,8-디아자비시클로[3.2.1]옥탄-8-카복실레이트, N,N-디이소프로필에틸아민, 아세토니트릴; e) N,N-디메틸포름아미드, 탄산칼륨, 요오드화메틸; f) 트리플루오로아세트산; g) (S)-3-((터트-부톡시카보닐)(이소프로필)아미노)-2-(4-클로로페닐)프로피온산, N,N-디이소프로필에틸아민, N,N-디메틸포름아미드, HATU; h) 디클로로메탄, 염화수소/이소프로판올 용액.
실시예 36:
Figure pct00204
a) 6-클로로-N-(2,4-디메톡시벤질)피리미딘-4,5-디아민
4,6-디클로로피리미딘-5-아민(2g), N,N-디이소프로필에틸아민(4.7g) 및 2,4-디메톡시벤질아민(2.45g)을 아세토니트릴(20mL)에 용해시켰다. 반응 용액을 90℃에서 5시간 동안 교반한 후 농축하여 조 생성물을 얻은 다음 디클로로메탄에 녹이고 소량의 물로 세척하였다. 유기 상을 회전 증발로 건조시켜 조 생성물을 얻었다. 조 생성물을 컬럼크로마토그래피(PE:EA=1:1)로 분리 정제하고 농축하여 담황색 고체 목적 생성물(3.5g)을 얻었다.
b) 메틸 2-((4-클로로-6-(((2,4-디메톡시벤질)아미노)피리미딘-5-일)아미노)-2-옥소아세테이트
6-클로로-N-(2,4-디메톡시벤질)피리미딘-4,5-디아민(1.5g), 탄산칼륨(1.1g) 및 메틸 2-클로로-2-옥소아세테이트(623mg)를 무수 에탄올( 20mL)에 용해시켰다. 반응 용액을 20℃에서 3시간 동안 교반하였다. 반응 용액을 30 mL 에틸 아세테이트에 붓고 물(10 mL x 2)로 세척하였다. 유기 상을 일정한 중량으로 농축하여 조 생성물을 얻었다. 조 생성물을 정제하고 (PE:EA=3:1) 펄프화하여 백색 고체 생성물(1.6g)을 얻었다.
c) 4-클로로-8-(2,4-디메톡시벤질)-5,8-디히드로프테리딘-6,7-디온
메틸 2-((4-클로로-6-(((2,4-디메톡시벤질)아미노)피리미딘-5-일)아미노)-2-옥소아세테이트(1g)를 무수 에탄올(10mL)에 용해시키고, N,N-디이소프로필에틸아민(1.02g)을 첨가하였다. 질소 보호하에서 반응 용액을 90℃ ~ 110℃에서 2시간 동안 교반한 후 반응 용액을 농축하여 조 생성물을 얻었다. 디클로로메탄에 넣고 묽은 염산으로 약산성을 조정하고 물로 세척하여 염을 제거하였다. 유기 상을 농축하여 조 생성물을 얻었다. 그리고나서 조 생성물을 정제하고 (PE:EA=3:1)로 펄프화하여 백색 유성의 생성물(800mg)을 얻었다.
Figure pct00205
d) 터트-부틸-3-(8-(2,4-디메톡시벤질)-6,7-디옥소-5,6,7,8-테트라히드로프테리딘-4-일)-3,8-디아자비시클로[3.2.1] 옥탄-8-카르복실레이트
4-클로로-8-(2,4-디메톡시벤질)-5,8-디히드로프테리딘-6,7-디온(250mg), 터트-부틸(1R,5S)-3,8-디아자비시클로[3.2.1]옥탄-8-카복실레이트(456 mg) 및 N,N-디이소프로필에틸아민(278 mg)을 무수 아세토니트릴(5 mL)에 용해시켰다. 질소 보호하에 반응 용액을 밀봉하고 90℃에서 3시간 동안 교반하였다. 그 후, 반응 용액을 농축하여 유상의 조 물질을 얻었다. 유성 조 물질을 에틸 아세테이트(30mL)에 용해시키고, 묽은 염산으로 pH = 3-4로 조정하고, 물로 pH = 5-6으로 세척하고, 농축하여 조 생성물을 얻었다. 조 생성물을 분리하고 컬럼 크로마토그래피(PE:EA=1:1)로 정제하여 200 mg의 백색 고체를 얻었다, m/z=525(M+H).
e) 터트-부틸-3-(8-(2,4-디메톡시벤질)-5-메틸-6,7-디옥소-5,6,7,8-테트라히드로프테리딘-4-일)-3,8-디아자비시클로[ 3.2.1]옥탄-8-카복실레이트
터트-부틸-3-(8-(2,4-디메톡시벤질)-6,7-디옥소-5,6,7,8-테트라히드로프테리딘-4-일)-3,8-디아자비시클로[3.2.1]옥탄-8-카복실레이트(180mg), 요오드화 메틸 (146mg) 및 탄산칼륨(142mg)을 무수 DMF(3mL)에 용해시켰다. 반응 용액을 20℃에서 1시간 동안 교반한 다음, 30mL EA에 붓고 물(10mL x 2) 및 포화 염화나트륨 용액(10mL)으로 세척하고, 유기 상을 농축하여 조 생성물을 얻었다. 조 생성물을 분리하고 컬럼 크로마토그래피(PE:EA=3:1)로 정제하여 담황색 고체 180 mg을 얻었다.
f) 4-((1R,5S)-3,8-디아자비시클로[3.2.1]옥탄-3-일)-5-메틸-5,8-디히드로프테리딘-6,7-디온
터트-부틸-3-(8-(2,4-디메톡시벤질)-5-메틸-6,7-디옥소-5,6,7,8-테트라히드로피리딘-4-일)-3,8-디아자비시클로[3.2.1]옥탄-8-카복실레이트(120mg)를 무수 DCM(1 mL)에 용해시키고, TFA(2 mL)를 적가하고 반응 용액을 실온에서 3시간 동안 교반하였다. 반응 용액은 적색이었다. 반응액을 직접 농축하여 조 생성물을 얻었고, 이를 탄산수소나트륨 용액으로 pH = 8-9로 조절한 후 농축하여, THF에 녹인 후 여과하여 염을 제거하고 잔여물을 컬럼크로마토그래피(DCM: MeOH=10:1)로 분리하여 60 mg의 유성의 생성물을 얻었다.
g) 터트-부틸 ((S)-2-(4-클로로페닐)-3-3-(5-메틸-6,7-디옥소-5,6,7,8-테트라히드로프테리딘-4-일)-3,8-디아자비시클로[3.2.1]옥탄-8-일)-3-옥소프로필 카바메이트(이소프로필)
화합물 4-(3,8-디아자비시클로[3.2.1]옥탄-3-일)-5-메틸-5,8-디히드로프테리딘-6,7-디온(60 mg), (S)-3-((터트)-부톡시카보닐)(이소프로필)아미노)-2-(4-클로로페닐)프로피온산(90mg), (2-(7-아조벤조트리아졸)-N,N,N',N'-테트라메틸우레아 헥사플루오로포스페이트(130mg), 및 N,N-디이소프로필에틸아민(102mg)을 무수 DMF(2 mL)에 녹이고, 반응액을 상온에서 3시간 동안 교반한 후, 에틸 아세테이트 20 mL에 붓고 물(50 mL x 2)로 세척하였다. 유기 상을 무수황산나트륨으로 건조하고 농축하여 조생성물을 얻었다. 조 생성물을 실리카겔 컬럼 크로마토 그래피(DCM:MeOH=10:1)로 분리 정제하여 유상 생성물 120mg을 얻었다.
h) 4-(8-((S)-2-(4-클로로페닐)-3-(이소프로필아미노)프로피오닐)-3,8-디아자비시클로[3.2.1]옥탄-3-일)-5-메틸-5,8-디히드로프테리딘-6,7-디온
터트-부틸 ((S)-2-(4-클로로페닐)-3-3-(5-메틸-6,7-디옥소-5,6,7,8-테트라히드로프테리딘-4-일)-3,8-디아자비시클로[3.2.1]옥탄-8-일)-3-옥소프로필 카바메이트(이소프로필)를 DCM(2mL)에 용해시키고, HCl/i-PrOH(2mL)를 적가하였다. 반응 용액을 상온에서 3시간 동안 교반한 후 농축하여 조 생성물을 얻었다. 조 생성물을 HPLC로 분리하고 동결건조하여 14 mg의 백색 고체를 얻었다. m/z: 499(M+H).
Figure pct00206
실시예 37
공정 N:
Figure pct00207
반응 조건: a) 트리에틸아민, 디-터트-부틸 디카보네이트, 디클로로메탄; b) 나트륨 비스(트리메틸실릴)아미드(테트라히드로푸란 중 2.0 mol/L), 브로모메틸 메틸 에테르, 2-메틸테트라히드로푸란; c) (R)-4-벤질옥사졸리딘-2-온, 디이소프로필에틸아민, 트리메틸아세틸 클로라이드, 톨루엔; d) 사염화티타늄(톨루엔 중 1mol/L), 디이소프로필에틸아민, 디클로로메탄; e) 과산화수소 용액(30%), 수산화리튬 일수화물, 테트라히드로푸란, 물; f) 터트-부틸 2,5-디아자비시클로[4.1.0]헵탄-2-카복실레이트, 4-디메틸아미노피리딘, N-메틸피롤리돈; g) 염화수소/디옥산 용액(4.0M); h) 2-(7-벤조트리아졸 옥사이드)-N,N,N',N'-테트라메틸우레아 헥사플루오로포스페이트, 디이소프로필에틸아민, N,N-디메틸포름아미드; i) 염화수소/디옥산 용액(4.0M).
a) 터트-부틸 시클로프로필 카바메이트
질소 보호하에, 시클로프로필아민(9.3g) 및 트리에틸아민(19.7g)을 20℃에서 디클로로메탄(100mL)에 용해시키고, 0℃에서 디-터트-부틸 디카보네이트(35.48g)를 적가하였다. 반응은 20℃에서 16시간 동안 수행하였다. 반응 종료 후 용매를 제거하여 무색 액체 24.3g을 얻었다. 1H NMR(400MHz, CDCl3) δ(ppm) 0.47-0.50(m, 2H), 0.66-0.72(m, 2H), 1.44(s, 9H), 2.53(m, 1H), 4.79(s, 1H) .
b) 터트-부틸 시클로프로필(메톡시메틸)카바메이트
질소 보호하에, 터트-부틸 시클로프로필 카바메이트(24.3g)를 2-메틸테트라히드로푸란(100mL)에 용해시키고, 나트륨 비스(트리메틸실릴)아미드(120mL)를 0℃에서 적가하였다. 반응 용액을 0℃에서 1시간 동안 교반하고, 브로모메틸 메틸 에테르(35.7g)를 0℃에서 적가하였다. 반응 용액을 0℃에서 6시간 동안 교반한 후 얼음물 50g에 붓고, 분리하고, 에틸 아세테이트(100mL x 2)로 추출하였다. 반응액을 직접 농축하여 무색의 액상 생성물 29.1g을 얻었고, 이를 정제하지 않고 다음 단계에 바로 사용하였다.
c) (R)-4-벤질-3-(2-(4-(클로로페닐)아세틸)옥사졸리딘-2-온
질소 보호 하에 2-(4-클로로페닐)아세트산(50g), (R)-4-벤질옥사졸리딘-2-온(45.5g) 및 디이소프로필에틸아민(127.3g)을 톨루엔(600mL)에 용해하여 15℃에서 ℃에 이어 트리메틸아세틸 클로라이드(38.4g)를 적가하였다. 반응 용액을 16시간 동안 환류 교반한 후, 물 200mL에 붓고, 분리하고, 포화 염화나트륨 용액 120mL로 세척하였다. 유기 상을 건조하고 농축하여 조 생성물을 얻었다. 조 생성물을 컬럼 크로마토그래피(PE:EA=5:1)로 분리 및 정제하여 백색 고체 32g을 얻었다. 1H NMR(400MHz, DMSO-d6) δ(ppm)2.88-3.02(m, 2H), 4.12-4.37(m, 4H), 4.64-4.70(m, 1H), 7.13-7.16(m.23), 7 -7.32(m, 5H), 7.39-7.42(m, 2H).
d) 터트-부틸 ((S)-3-((R)-4-벤질-2-옥사졸리딘-3-일)-2-(4-클로로페닐)-3-옥소프로필)(시클로프로필)카바메이트
질소 보호 하에, (R)-4-벤질-3-(2-(4-(클로로페닐)아세틸)옥사졸리딘-2-온(3.48g)을 디클로로메탄(60mL)에 용해시키고, 사염화티타늄 톨루엔 용액(13 mL)를 0℃에서 적가하였다, 반응 용액을 0℃에서 2시간 동안 교반하였다. DIPEA(1.49g)를 적가하고, 반응 용액을 0℃에서 1.5시간 동안 교반하고, 터트-부틸사이클로프로필(메톡시메틸)카바메이트(2.77g)를 적가하였다. 반응 용액을 0℃에서 6시간 동안 교반한 후 반응을 종료하였다. 그리고나서 반응 용액을 포화 염화암모늄 용액 30mL에 붓고 분리하고, 120 mL의 포화 염화나트륨 용액으로 세척하였다. 유기 상을 건조 및 농축하여 조 생성물을 얻었다. 조 생성물을 실리카겔 컬럼 크로마토그래피(PE:EA=10:1)로 분리 및 정제하여 2.50 g의 무색 유성 생성물을 얻었다.
e) (S)-3-((터트-부톡시카르보닐)(시클로프로필)아미노)-2-(4-클로로페닐)프로피온산
수산화리튬일수화물(0.63g)을 물(18mL)에 용해하고, 테트라히드로푸란(20mL)을 첨가하고, 0℃에서 과산화수소(1.6mL)를 적가하였다. 터트-부틸 ((S)-3-((R)-4-벤질-2-옥사졸리딘-3-일)-2-(4-클로로페닐)-3-옥소프로필)(사이클로프로필)카바메이트(2.50g)를 0℃ 에서 첨가하였다. 반응 용액을 0℃에서 3시간 동안 교반하고, 반응 용액에 아황산나트륨 포화 용액(15mL)을 첨가하고, 1.5시간 동안 반응시키고 중황산칼륨 포화 용액으로 pH = 3-4로 조정하여, 에틸 아세테이트(30mL x 2)로 추출하고 분리하였다.
유기상을 건조하고 농축하여 조 생성물을 얻었다. 조 생성물을 분리하고 컬럼 크로마토그래피(PE:EA=1:1)로 정제하여 1.26g의 무색 고체를 얻었다. 1H NMR(400MHz, DMSO-d6) δ(ppm):0.45-0.48(m,2H), 0.60-0.64(m,2H), 1.30(s,9H),2.19(s,1H), 3.61(d, J=7.6Hz, 1H), 3.95(t, J=8.0Hz, 1H), 7.37(dd, J=26.8, 8.8Hz, 4H), 12.7(s, 1H).
f) 5-((R)-5-메틸-7-옥소-5,6,7,8-테트라히드로피리도[2,3-d]피리미딘-4-일)-2,5-디아자비시클로[4.1.0] 헵탄-2-카르복실레이트
질소 보호 하에, (R)-4-클로로-5-메틸-5,8-디하이드로피리도[2,3-d]피리미딘-7(6H)-온(300mg), 터트-부틸 2,5-디아자비시클로[4.1.0]헵탄-2-카복실레이트(455 mg) 및 4-디메틸아미노피리딘(600 mg)을 N-메틸피롤리돈(5 mL)에 용해시켰다. 반응 용액을 120℃에서 12시간 동안 교반한 후, 물 50mL에 붓고, 에틸 아세테이트(20mL x 2)로 추출하고, 포화 염화나트륨 용액 15mL로 세척하였다. 유기 상을 건조하고 용매를 제거하여 조 생성물을 얻었다. 조 생성물을 분리하고 실리카겔 컬럼 크로마토그래피(PE:EA=1:1-1:2)로 정제하여 황색 고체 400mg을 얻었다.
g) (5R)-4-(2,5-디아자비시클로[4.1.0]헵탄-2-일)-5-메틸-5,8-디히드로피리도[2,3-d]피리미딘-7(6H)-온
5-((R)-5-메틸-7-옥소-5,6,7,8-테트라히드로피리도[2,3-d]피리미딘-4-일)-2,5-디아자비시클로[4.1.0]헵탄-2-카복실레이트(400mg)를 디옥산(5mL)에 용해시키고, 염화수소/디옥산 용액(5 mL)을 적가하였다. 반응 용액을 25℃에서 2시간 동안 교반하였다. 반응 종료 후, 반응 용액을 직접 농축하여 조 황색 고체를 얻었고, 이를 다음 단계에 바로 사용하였다.
h) 터트-부틸 ((S)-2-(4-클로로페닐)-3-((1R,6S)-5-((R)-5-메틸-7-옥소-5,6,7,8-테트라히드로피리도[2,3-d]피리미딘-4-일)-2,5-디아자비시클로[4.1.0]헵탄-2-일)-3-옥소프로필)(시클로프로필)카바메이트
질소 보호 하에, (5R)-4-(2,5-디아자비시클로[4.1.0]헵탄-2-일)-5-메틸-5,8-디히드로피리도[2,3-d]피리미딘-7( 6H)-온(270 mg), 화합물 5(389 mg), 2-(7-벤조트리아졸 옥사이드)-N,N,N',N'-테트라메틸우레아 헥사플루오로포스페이트(474 mg) 및 디이소프로필에틸아민(671 mg)을 N,N-디메틸포름아미드(10mL)에 용해하였다. 반응이 완료될 때까지 반응 용액을 25℃에서 3시간 동안 교반하였다. 반응 용액을 물 50mL에 붓고 에틸 아세테이트(20mL x 2)로 추출하고 포화 염화나트륨 용액(10mL x 3)으로 세척하고 유기 상을 건조 및 농축하여 조 생성물을 얻었다. 조 생성물을 분리하고 컬럼 크로마토그래피(PE:EA=1:2)로 정제하여 320 mg의 황색 고체를 얻었다.
i) (R)-4-((1R,6S)-5-((S)-2-(4-클로로페닐)-3-(시클로프로필아미노)프로피오닐)-2,5-디아자비시클로[4.1.0]헵탄-2-일)-5-메틸-5,8-디히드로피리도[2,3-d]피리미딘-7(6H)-온 및 (R)-4-((1S,6R)-5-((S)-2-(4-클로로페닐)-3-(시클로프로필아미노)프로피오닐)-2,5-디아자비시클로[4.1.0]헵탄-2-일)-5-메틸-5,8-디히드로피리도[2,3-d]피리미딘-7(6H)-온
터트-부틸((S)-2-(4-클로로페닐)-3-((1R,6S)-5-((R)-5-메틸-7-옥소-5,6,7,8-테트라하이드로피리도[2,3-d]피리미딘-4-일)-2,5-디아자비시클로[4.1.0]헵탄-2-일)-3-옥소프로필)(시클로프로필)카바메이트(320 mg)를 디옥산(2.5 mL)에 용해시키고, 염화수소/디옥산 용액(2.7mL)을 적가하였다. 반응 용액을 25℃에서 14시간 동안 교반하여 반응을 완료하였다. 그 후, 반응 용액을 농축하여 조 생성물을 얻고, 포화 탄산칼륨 용액으로 pH=13-14로 조정하고, DCM(10mL x 2)으로 추출하고, 물(10mL)로 세척하고, 탈용매화하였다. 생성물을 초임계 유체 크로마토그래피로 분리하여 이성질체 1(61.2 mg) 및 이성질체 2(31.2 mg)를 얻었다.
분해 장치 및 조건: waters SFC200; 칼럼: Daicel Chiralcel AS, 250×30 mm ID, 5 μm; 이동상: A는 CO2, B는 이소프로판올(0.1% NH3H2O)이고. A:B=70:30(체적비); 유속 60mL/분, 컬럼 온도 38℃.
초고성능 컨버전스 크로마토그래피 조건: 컬럼: Daicel Chiralcel AD, 2.1×150 mm ID, 3 μm, 이동상 A: CO2, 이동 상 B: 이소프로판올(0.1% DEA), 구배: 시간 0-8분, 상 B 5-40 %(부피비); 유속: 1mL/분; 컬럼 온도 40℃. 이성질체 1: RT=3.7분; 이성질체 2: RT=4.6분.
Figure pct00208
실시예 38
Figure pct00209
터트-부틸 2,5-디아자비시클로[4.1.0]헵탄-2-카복실레이트 대신에 터트-부틸 3,8-디아자비시클로[3.2.1]옥탄-8-카복실레이트를 사용하는 공정 N에 기재된 방법에 따라 목적 화합물을 제조하였다.
Figure pct00210
실시예 39
공정 P:
Figure pct00211
반응 조건: a) 터트-부틸아민, N,N-디메틸포름아미드; b) 에틸 2-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-디옥사보란-2-일)시클로프로판 카복실레이트, 팔라듐 아세테이트, 트리시클로헥실포스핀, 탄산칼륨, 톨루엔, 물; c) 황산, 디클로로메탄; d) 트리에틸아민, 에탄올; e) 터트-부틸 3,8-디아자비시클로[3.2.1]옥탄-8-카복실레이트, N,N-디이소프로필에틸아민, N,N-디메틸포름아미드; f) 염화수소/디옥산 용액; g) (S)-3-((터트-부톡시카보닐)(이소프로필)아미노)-2-(4-클로로페닐)프로피온산, 디이소프로필에틸아민, 2-(7-벤조트리아졸 옥사이드)-N,N,N',N'-테트라메틸우레아 헥사플루오로포스페이트, N,N-디메틸포름아미드; h) SFC; i) 염화수소/디옥산 용액.
a) N-(터트-부틸)-6-클로로-5-요오도피리미딘-4-아민
4,6-디클로로-5-아이오도피리미딘(4.00g)을 교반 하에 N,N-디메틸포름아미드(60ml)와 혼합하고, 질소 보호 하에 실온에서 터트-부틸아민(5.32g)을 첨가하였다. 혼합물을 실온에서 밤새 교반하였다. 이어서, 혼합물을 물(300 mL)에 붓고 에틸 아세테이트(2 x 50 mL)로 추출하였다. 유기 상을 합하고 무수 황산나트륨으로 건조시켰다. 여과 후, 여액을 감압하에 농축하여 담황색 고체(4.1g)를 얻었다.
b) 에틸 2-(4-(터트-부틸)-6-클로로피리미딘-5-일)시클로프로필 카복실레이트
질소 보호 하에, N-터트-부틸-6-클로로-5-요오도피리미딘-4-아민(4.10g) 및 2-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-디옥사보로-2-일)시클로프로판-1-카복실레이트(6.32g)를 톨루엔(64.00mL) 및 물(16.00mL)에 용해시켰다. 트리시클로헥실포스핀(1.475g), 팔라듐 아세테이트(1.475g) 및 탄산칼륨(0.59g)을 각각 첨가하고, 혼합물을 90℃에서 밤새 교반하였다. 이어서, 혼합물을 실온으로 냉각시키고, 물(100mL)로 희석하고, 에틸 아세테이트(2 x 100mL)로 추출하였다. 유기상을 합하고 무수 황산나트륨으로 건조시켰다. 여과 후 여과액을 감압하에 농축하고, 상기 생성물을 실리카겔 플레이트 크로마토그래피(페트롤륨 에테르:에틸 아세테이트 = 10:1)로 정제하여 암황색 고체 2.50g을 얻었다.
c) 에틸 2-(4-아미노-6-클로로피리미딘-5-일)시클로프로필 카복실레이트
에틸 2-(4-(터트-부틸)-6-클로로피리미딘-5-일)시클로프로필 카르복실레이트(2.50g)를 디클로로메탄(40.00mL)에 첨가하였다. 0-5℃에서 질소의 보호 하에, 황산(4.94g)을 적가하였다. 반응 용액을 실온에서 1시간 동안 교반한 다음, 0℃로 냉각시키고, 혼합물을 포화 중탄산나트륨 용액으로 pH =8로 중화시켰다. 반응 용액을 디클로로메탄(2 x 50 ml)으로 추출하였다. 유기상을 합하고 무수 황산마그네슘으로 건조시켰다. 여과 후, 여과액을 감압하에 농축하여 황색 액체 2.4g을 얻었다.
d) 1-클로로-7,7a-디히드로-5H-시클로프로판[4,5]피리도[2,3-d]피리미딘-6(6aH)-온
실온에서 질소 보호 하에, 에틸 2-(4-아미노-6-클로로피리미딘-5-일)시클로프로필 카복실레이트(2.40g) 및 트리에틸아민(6.03g)을 200.00mL의 에탄올 용액에 첨가하였다. 반응 혼합물을 80℃에서 밤새 교반하였다. 이어서, 혼합물을 실온으로 냉각시키고 진공에서 농축시켰다. 생성물을 실리카겔 플레이트 크로마토그래피(페트롤륨 에테르:에틸 아세테이트 = 1:1)로 정제하여 담황색 고체 1.05g을 얻었다.
e) 터트-부틸 3-(6-옥소-6,6a,7,7a-테트라히드로-5H-시클로프로판피리도[4,5]피리미딘-1-일)-3,8-디아자비시클로[3.2.1]옥탄-8 -카복실레이트
터트-부틸 3,8-디아자비시클로[3.2.1]옥탄-8-카복실레이트(0.43g) 및 N,N-디이소프로필에틸아민(0.39g)을 N,N-디메틸포름아미드(5mL) 중 1-클로로-7,7a-디히드로-5H-시클로프로판[4,5]피리도[2,3-d]피리미딘-6(6aH)-온(0.20g)의 용액에 20℃에서 첨가하였다. 반응 혼합물을 110℃에서 24시간 동안 교반하였다. 반응 용액을 물(100mL)에 붓고, 에틸 아세테이트(100mL)를 첨가하여 추출하였다. 유기상을 포화 염화나트륨 용액(100mL x 3)으로 세척하고, 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 회전 건조시켰다. 생성물을 실리카겔 크로마토그래피(페트롤륨 에테르:에틸 아세테이트 = 1:1)로 정제하여 백색 고체 0.30g을 얻었다.
f) 1-3,8-디아자비시클로[3.2.1]옥탄-3-일)-7,7-디히드로-5H-시클로프로판[4,5]피리도[2,3-d]피리미딘-6(6aH)-온
4M 염화수소/디옥산 용액(2mL)을 터트-부틸3-(6-옥소-6,6a,7,7a-테트라히드로-5H-시클로프로판피리딘[4,5]피리미딘-1-일)-3,8-디아자비시클로[3.2.1]옥탄-8-카르복실레이트(0.15g)에 20℃에서 첨가하였다. 반응 혼합물을 20℃에서 3시간 동안 교반하였다. 반응 용액을 스핀 건조하여 백색에 가까운 고체(0.12g)를 얻었다.
g) 터트-부틸 ((2R)-2-(4-클로로페닐)-3-옥소-3-3-(6-옥소-6,6a,7,7a-테트라히드로-5H-시클로프로필-4,5]피리도[2,3-d]피리미딘-1-일)-3,8-디아자비시클로[3.2.1]옥탄-8-일)프로필 카바메이트(이소프로필)에스테르
(S)-3-((터트-부톡시카보닐)(이소프로필)아미노)-2-(4-클로로페닐)프로피온산(0.18g) 및 디이소프로필에틸아민(0.17g)을 N,N -디메틸포름아미드(5mL) 중 1-3,8-디아자비시클로의[3.2.1]옥탄-3-일)-7,7-디히드로-5H-시클로프로판[4,5]피리도[2,3-d]피리미딘-6(6aH)-온(0.12 g) 용액에 20℃에서 첨가하였다. 반응 혼합물을 2분 동안 교반하였다. 2-(7-벤조트리아졸 옥사이드)-N,N,N',N'-테트라메틸우레아 헥사플루오로포스페이트(0.20g)를 20℃에서 첨가하고, 반응 혼합물을 20℃에서 1시간 동안 교반하였다. 반응 용액을 물(100mL)에 붓고, 에틸 아세테이트(100mL)를 첨가하여 추출하였다.
유기상을 포화 염화나트륨 용액(100mL x 3)으로 세척하고, 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 회전 건조시켰다. 생성물을 실리카겔 플레이트 크로마토그래피(페트롤륨 에테르:에틸 아세테이트 = 1:1.5)로 정제하여 백색 고체 0.20g을 얻었다.
h) 키랄 분해능
분해 장치 및 조건: Waters SFC200; 칼럼: Daicel Chiralcel AS, 250×50 mm ID, 10 μm; 이동 상: A는 CO2, B는 메탄올(0.1% NH3H2O), A:B = 60:40(부피비); 유속 60mL/분, 컬럼 온도 38℃.
i) 이성질체 1 및 이성질체 2의 제조
4M 염화수소/디옥산 용액(1 mL)을 20℃에서 이성질체 1a(20 mg)에 첨가하였다. 반응 혼합물을 20℃에서 3시간 동안 교반하였다. 반응 용액을 회전 건조하고 결과물은 HPLC로 분리되어 백색에 가까운 고체(10 mg)를 얻었다.
동일한 방식으로, 이성질체 2a로부터 이성질체 2를 제조하였다.
Figure pct00212
실시예 40
Figure pct00213
터트-부틸 3,8-디아자비시클로[3.2.1]옥탄-8-카르복실레이트 대신에 터트-부틸피페라진-1-카르복실레이트를 사용한 실시예 39의 공정 P에 기재된 방법에 따라 제조하였다. 초임계 유체 크로마토그래피로 분리한 후, Boc 보호기를 제거하여 각각 이성질체 1 및 이성질체 2를 얻었다. 분해 장치 및 조건: Waters SFC200; 칼럼: Daicel Chiralcel AS, 250×50 mm ID, 10 μm; 이동상: A는 CO2, B는 이소프로판올(0.1% NH3H2O), A:B = 60:40(부피비) ; 유속 60mL/분, 컬럼 온도 38℃.
Figure pct00214
실험예 1: 시험관내 효소 활성 실험
1. 재료 및 시약
엔비젼 리더(분자 장치)
화이트 384-웰 플레이트 (Art. No. #264706, Thermo)
HTRF kinEASE TK 키트에 포함된 주요 시약 (Art. No.#62TKOPEC, Cisbio)
TK-비오틴 기질
스트렙타비딘-XL665
유로퓸-표지된 티로신 키나제 기질 항체
5 x 효소 반응 버퍼
SEB
HTRF 감지 버퍼
AKT1 (Art. No. # 01-101, 카르나)
AKT2 (Art. No. # 01-102, 카르나)
AKT3 (Art. No. #PV3185, 인비트로겐)
ATP 10mM (Art. No. #PV3227, 인비트로겐)
DTT 1M (Art. No. #D5545, 시그마)
MgCl2 1M (Art. No. #M8266, 시그마)
본 발명의 화합물
양성 대조군: GDC-0068
2. 실험 절차
2.1 시약의 준비
[표 1] 키나제 반응 시스템의 성분 및 농도
Figure pct00215
1 x 키나제 반응 버퍼
키나제 AKT1, AKT2 및 AKT3의 1mL 1x 키나제 반응 버퍼에는 200μL 5x 키나제 반응 버퍼, 5μL 1M MgCl2, 1μL 1M DTT 및 794μL 초순수가 포함되어 있다.
5 x TK-비오틴 기질 및 ATP 작업 용액
TK-비오틴 기질 및 ATP의 특정 농도는 표 1에 나와 있다.
기질 및 ATP를 1 x 키나제 반응 버퍼로 반응 농도의 5배로 희석하였다.
5 x 키나제 작업 용액
효소 스크리닝에 사용된 농도는 표 1에 나와 있다. 1 x 키나제 반응 버퍼를 사용하여 5 x 효소 작업 용액을 제조하였다.
4 x 스트렙타비딘-XL665 작업 용액
반응에서 스트렙타비딘-XL665의 농도는 표 1에 나와 있다. 검출 버퍼는 4 x 스트렙타비딘-XL665 작업 용액을 준비하는 데 사용되었다.
4 x 유로퓸E-표지된 티로신 키나제 기질 항체 작업 용액
유로퓸-표지된 티로신 키나제 기질 항체를 검출 반응 버퍼를 작업 용액으로 하여 100배 희석하였다.
2.2 실험 공정
모든 시약은 위의 방법에 따라 준비되었다. 이들 시약은 효소를 제외하고, 실온으로 평형화한 후 샘플 로딩이 뒤따랐다.
a) 먼저, 화합물 스톡 용액(10mM DMSO 용액)을 DMSO로 100μM 화합물 용액으로 희석한 다음, 1 x 키나제 반응 버퍼로 2.5μM 화합물 작업 용액(2.5% DMSO 포함)으로 희석하였다. 1 x 키나제 반응 버퍼를 사용하여 2.5% DMSO 용액을 제조한 다음, 2.5% DMSO 용액을 사용하여 2.5μM 화합물 작업 용액을 희석하고, 이를 4배 비율로 7배 희석하여 8 농도의 화합물 작업 용액을 얻었다.(2500nM, 625nM, 156nM, 39nM, 9.8nM, 2.4nM, 0.6nM 및 0.15nM). 대조군 웰에 추가하여, 희석된 화합물 작업 용액 4 μL를 모든 반응 웰에 첨가하였다. 4 μL의 미리 준비된 2.5% DMSO/키나제 버퍼를 대조군 웰에 첨가하였다.
b) 이전에 준비한 TK-비오틴 기질 용액 2μL를 모든 반응 웰에 첨가하였다. 효소 스크리닝에 사용된 기질의 농도는 표 1에 나와 있다.
c) 이전에 준비한 효소 용액 2 μL를 음성 웰을 제외한 모든 반응 웰에 첨가하였다. 효소의 농도는 표 1에 나와 있다. 음성 웰의 부피는 1 x 키나제 반응 버퍼에 해당하는 2 μL의 효소로 채워졌다. 플레이트를 밀봉 필름으로 밀봉하였다. 혼합 후, 플레이트를 실온에서 10분 동안 인큐베이션하여 화합물과 효소가 완전히 결합되도록 하였다.
d) 2μL의 ATP 용액을 모든 반응 웰에 첨가하여 키나제 반응을 시작하였다. 효소 스크리닝 중 ATP 농도 및 반응 시간은 표 1에 나와 있다.
e) 시험용액은 키나제 반응이 끝나기 5분 전에 준비하였다. 키트의 검출 버퍼를 사용하여 스트렙타비딘-XL665 및 유로퓸-표지된 티로신 키나제 기질 항체(1:100) 검출 용액을 준비하였다. 효소 스크리닝 동안 검출 시약의 농도는 표 1에 나와 있다.
f) 키나제 반응이 완료된 후, 희석된 스트렙타비딘-XL665 5 μL를 모든 반응 웰에 첨가하고, 혼합 후 희석된 유로퓸-표지된 티로신 키나제 기질 항체 검출 용액을 즉시 첨가하였다.
g) 플레이트를 밀봉하고 잘 혼합하였다. 실온에서 1시간 동안 반응시킨 후, ENVISION(Perkinelmer) 기기를 사용하여 형광 신호(320 nm 여기, 665 nm, 615 nm 방출)를 검출하였다. 각 웰의 억제율은 완전 활성 웰과 배경 신호 웰을 통해 계산하였으며, 다중 웰의 경우 평균값을 취하였다. 한편, 각 시험 화합물의 절반의 최대 억제 농도(IC50)를 맞추기 위해 전문 도면분석 소프트웨어인 PRISM 6.0을 사용하였다.
[표 2] 실험의 샘플 로딩 과정 표
Figure pct00216
2.3 데이터 분석
ER = 665 nm 형광 값/ 615 nm 형광 값
억제율 = (ER양성 대조군 - ER샘플)/ (ER양성 대조군 - ER음성 대조군) * 100%
3. 실험 결과
실험 결과는 표 3에 나와 있다.
[표 3] AKT 억제 활성
Figure pct00217
Figure pct00218
Figure pct00219
Figure pct00220
Figure pct00221
Figure pct00222
Figure pct00223
Figure pct00224
Figure pct00225
Figure pct00226
Figure pct00227
실험예 2 약동학적 평가
실시예 10, 실시예 21, GDC-0068 및 실시예 34의 화합물 이성질체 4의 제형:
혼합 멘스트룸(menstruum): Tween 80: PEG400: 물 = 1:9:90(v/v/v)
화합물을 DMSO와 함께 10 mg/mL 스톡 용액으로 제형화하였다.
10 mg/mL 농도의 원액 400 μl를 유리병에 정확하게 피펫팅하고 혼합 멘스트룸 3.6 mL를 추가하였다. 최종 제형에서 멘스트룸의 비율은 DMSO 이고: 혼합 멘스트룸(v/v) = 10:90 이다. 볼텍싱(또는 초음파 처리)하고 균일하게 분배한 후, 각 화합물에 대해 1 mg mL-1 농도의 투여 용액 4 mL를 얻었다.
실시예 15의 화합물의 이성질체 2의 제형:
멘스트룸: DMSO: PEG400: 초순수 = 5:20:75(v/v/v)
실시예 15의 화합물의 시험 샘플 이성질체 2 5.37 mg을 유리병에 칭량하고; 0.269 mL의 DMSO를 첨가하고, 볼텍싱하여 고체 물질을 완전히 용해시키고; 1.074 mL의 PEG400을 첨가하고, 볼텍싱하고, 혼합하였고: 초순수 4.028 mL를 가하고, 볼텍싱하고 혼합하여 농도 1mg·mL-1의 무색 용액을 얻었다.
실험 동물: 마우스, ICR 계통, 출처: Weitong Lihua Laboratory Animal Technology Co., Ltd., 연령: 6-10주, 수컷.
실험 계획
[표 4] 동물 실험 계획의 표
Figure pct00228
실험 동물은 Suzhou Shengsu New Pharmaceutical Development Co., Ltd.의 동물실에서 먹였다. 동물실은 환기가 잘되고 에어컨이 완비되어 있다. 온도는 20~25℃, 습도는 40~70%로 유지했다. 각각 12시간씩 밝고 어두운 조명을 놓았고 실험동물들은 자유롭게 먹고 마셨다. 적어도 5일 동안 정상적인 먹이를 준 후, 수의학적 검사 후 신체 징후가 좋은 마우스를 이 실험에 선택되었다. 각 마우스는 꼬리에 태그가 표시되어 있다. 동물 실험 계획은 표 4에 나와 있다.
체중을 측정한 후 각 마우스의 이론적 투여량은 다음 공식에 따라 계산된다.
Figure pct00229
실험 전날, 마우스를 밤새 금식하고 자유롭게 마시게 하였고, 투여 4시간 후에 먹였다.
실험 당일, 그룹 A 내지 E의 마우스에 실시예 10, 실시예 21, GDC-0068, 실시예 15의 이성질체 2, 및 실시예 34의 이성질체 4의 투여액 10 mgkg-1을 위내 투여하였다. 투여 후 각 시점에서 마우스의 오르빗(orbit)에서 약 100μL의 혈액을 채취하여 EDTA-K2 항응고관에 넣었다. 전체 혈액 샘플을 5500 rpm에서 10분간 원심분리하고, 분리된 혈장은 생물학적 샘플 분석을 위해 -40 ~ -20 ℃의 냉장고에 보관하였다. 마우스 혈장 내 화합물의 농도를 결정하기 위한 LC-MS/MS 분석 방법이 확립되어 이 실험에서 얻은 생물학적 샘플 내 화합물 농도를 결정하는 데 사용되었다. Pharsight Phoenix 7.0의 비구획 모델을 사용하여 약동학적 매개변수를 계산하였다.
실험 결과: 실험 결과를 표 5에 나타내었다.
[표 5] 본 발명의 화합물의 약동학적 매개변수
Figure pct00230

Claims (16)

  1. 하기 화학식 I로 표시되는 화합물 또는 그의 약학적으로 허용가능한 염:
    Figure pct00231

    식중,
    R1 는 H, OH, 할로겐, CN, NH2, NO2, 또는 할로겐 또는 OH로 선택적으로 치환된 C1-C6 알킬로 구성되는 군으로부터 선택되고;
    R2 및 R3 는 H, C1-C6 알킬, C3-C6 시클로알킬, (C3-C6 시클로알킬)-(CH2)-, (C3-C6 시클로알킬)-(CH2CH2)-, 벤질, 페네틸, 피롤리디닐, 테트라하이드로푸라닐 및 테트라하이드로피라닐로 구성되는 군으로부터 각각 독립적으로 선택되고, 여기서 상기 C1-C6 알킬, C3-C6 시클로알킬, (C3-C6 시클로알킬)-(CH2)- 또는 (C3-C6 시클로알킬)-(CH2CH2)- 는 할로겐, OH, CN, NH2 또는 C1-C3 알콕시로 선택적으로 치환되고, 상기 벤질 또는 페네틸은 할로겐, OH, CN, NO2, NH2, C1-C3 알콕시, 할로겐화 C1-C3 알콕시, C1-C3 알킬 또는 할로겐화 C1-C3 알킬로 선택적으로 치환되고, 상기 피롤리디닐, 테트라하이드로푸라닐 또는 테트라하이드로피라닐은 할로겐, OH, C1-C3 알킬, 시클로프로필메틸 또는 C1-C4 알카노일로 선택적으로 치환되며; 또는
    R1 및 R2 은, R1 및 R2 가 부착된 원자와 함께, 4-7 원 질소-함유 헤테로시클릭 고리를 형성하고;
    m 및 n 은 각각 독립적으로 0, 1, 2 또는 3 이고; 바람직하게는 m 은 0, 1, 또는 2; 더욱 바람직하게는, m 은 0 또는 1; 더욱 바람직하게는, m 은 1이며; 바람직하게는 n 은 0, 1, 또는 2; 더욱 바람직하게는, n 은 0 또는 1; 더욱 바람직하게는, n 은 0 이며;
    R4 및 R5 둘다 수소이거나 또는 R4 및 R5 는 함께 =O를 형성하고; 바람직하게는 R4 및 R5 는 함께 =O를 형성하며;
    Figure pct00232
    는 하기로 구성되는 군으로부터 선택되며
    Figure pct00233

    R6, R7, R8, 및 R9 는 H, CN, C1-C6 알킬 및 C1-C6 알콕시로 구성되는 군으로부터 각각 독립적으로 선택되고, 여기서 상기 C1-C6 알킬 또는 C1-C6 알콕시는 할로겐, OH, CN 또는 C1-C3 알콕시로 선택적으로 치환되며;
    R10 은 H 또는 C1-C6 알킬이고, 여기서 상기 C1-C6 알킬은 할로겐, OH, CN 또는 C1-C3 알콕시로 선택적으로 치환되며;
    L 은 선택적으로 치환된 1-2 질소 원자를 함유하는 5-12원 포화 헤테로시클릭 고리이며;
    G 는 6-10원 아릴 또는 1-5 R11로 선택적으로 치환된 5-10 원 헤테로아릴이고;
    R11 는 할로겐, OH, CN, NH2, NO2, 벤질옥시, -NH(C1-C6 알킬), -N(C1-C6 알킬)2, -C(=O)NH2, -C(=O)NH(C1-C6 알킬), -C(=O)N(C1-C6 알킬)2, -SO2(C1-C6 알킬), C1-C6 알킬 및 C1-C6 알콕시로 구성되는 군으로부터 독립적으로 선택되고, 여기서 상기 C1-C6 알킬 또는 C1-C6 알콕시는 할로겐으로 선택적으로 치환되며;
    단, R1 및 R2 모두가 H가 아니면, R1 및 R2는 R1 및 R2가 부착되는 원자와 함께, 4-7원 질소 함유 헤테로시클릭 고리를 형성하며;
    바람직하게는, 상기 화합물은 화학식 II로 표현되는 구조를 가지며:
    Figure pct00234

    바람직하게는, 상기 화합물은 화학식 III로 표현되는 구조를 가지며:
    Figure pct00235

    더욱 바람직하게는, 상기 화합물은 화학식 Ⅳ로 표현되는 구조를 가지며:
    Figure pct00236

    더욱 바람직하게는, 상기 화합물은 화학식 Ⅴ로 표현되는 구조를 가지며:
    Figure pct00237

    더욱 바람직하게는, 상기 화합물은 화학식 VI로 표현되는 구조를 가지며:
    Figure pct00238

    식중, d 는 0, 1, 2 또는 5; 바람직하게는 d 는 0, 1 또는 2; 더욱 바람직하게는, d 는 1 또는 2; 더욱 바람직하게는, d는 1 이며;
    더욱 바람직하게는, 상기 화합물은 화학식 VII로 표현되는 구조를 가지며:
    Figure pct00239

    식중, d 는 0, 1, 2 또는 5; 바람직하게는 d 는 0, 1 또는 2; 더욱 바람직하게는, d 는 1 또는 2; 더욱 바람직하게는, d는 1 이다;
    더욱 바람직하게는, 상기 화합물은 화학식 VIII로 표현되는 구조를 가지며:
    Figure pct00240

    더욱 바람직하게는, 상기 화합물은 화학식 IX 로 표현되는 구조를 가지며:
    Figure pct00241

    식중, d 는 0, 1, 2 또는 5; 바람직하게는 d 는 0, 1 또는 2; 더욱 바람직하게는, d 는 1 또는 2; 더욱 바람직하게는, d는 1 이며;
    바람직하게는, 상기 화합물은 화학식 XI로 표현되는 구조를 가지며:
    Figure pct00242

    더욱 바람직하게는, 상기 화합물은 화학식 XII 로 표현되는 구조를 가지며:
    Figure pct00243

    식중, d 는 0, 1, 2 또는 5; 바람직하게는 d 는 0, 1 또는 2; 더욱 바람직하게는, d 는 1 또는 2; 더욱 바람직하게는, d는 1 임.
  2. 제1항에 있어서,
    식중 R1 이 H, OH, 및 할로겐 또는 OH로 선택적으로 치환된 C1-C6 알킬로 이루어진 군으로부터 선택되고; 바람직하게는, R1은 H, OH, Me, CF3 및 CH2OH로 이루어진 군으로부터 선택되고; 보다 바람직하게는, R1은 H 또는 OH이고; 가장 바람직하게는, R1은 H인 화합물 또는 그의 약학적으로 허용가능한 염.
  3. 제1항에 있어서,
    식중 R2 및 R3 은 H, C1-C6 알킬, C3-C6 시클로알킬, (C3-C6 시클로알킬)-(CH2)-, (C3-C6 시클로알킬)-(CH2CH2)-, 벤질, 페네틸, 피롤리디닐 및 테트라히드로피라닐로 구성되는 군으로부터 각각 독립적으로 선택되며, 여기서 상기 C1-C6 알킬, C3-C6 시클로알킬, (C3-C6 시클로알킬)-(CH2)- 또는 (C3-C6 시클로알킬)-(CH2CH2)- 은 F, Cl, Br, I, OH, CN, NH2 또는 C1-C3 알콕시로 선택적으로 치환되며, 상기 벤질 또는 페네틸은 F, Cl, Br, I, OH, OMe, CF3 또는 Me로 선택적으로 치환되며, 상기 피롤리디닐 또는 테트라드히드로피라닐은 F, Cl, Br, I, OH, C1-C3 알킬, 시클로프로필메틸 또는 C1-C4 알카노일로 선택적으로 치환되며;
    바람직하게는 R2 및 R3 는 H, 메틸, 에틸, 이소프로필, 이소부틸, 터트-부틸, 3-펜틸, CH2OH, CH2CH2OH, CH2CH2OMe, CF3, CH2CF3, CH2CHF2, CH2CH2F, 시클로프로필, 시클로펜틸, 시클로헥실, 시클로프로필-(CH2)-, 시클로펜틸-(CH2)-, 시클로헥실-(CH2)-, 시클로프로필-(CH2CH2)-, 시클로펜틸-(CH2CH2)-, 벤질, 4-플루오로벤질, 4-클로로벤질, 4-플루오로페네틸, 4-클로로페네틸 및 테트라히드로피란-4-일로 구성되는 군으로부터 각각 독립적으로 선택되며;
    더욱 바람직하게는, R2 및 R3 는 H, 메틸, 에틸, 이소프로필, 시클로프로필, 시클로헥실, 시클로프로필-(CH2)-, 시클로헥실-(CH2)- 및 테트라히드로피란-4-일로 구성되는 군으로부터 각각 독립적으로 선택되며;
    더욱 바람직하게는, R2 및 R3 는 H, 이소프로필 및 시클로프로필로 구성되는 군으로부터 각각 독립적으로 선택되며;
    더욱 바람직하게는, R2 는 H이고;
    더욱 바람직하게는, R3 는 이소프로필 또는 시클로프로필이고;
    가장 바람직하게는, R2 는 H 이고, R3 는 이소프로필 또는 시클로프로필인 화합물 또는 그의 약학적으로 허용가능한 염.
  4. 제1항에 있어서,
    식중 R1 및 R2 은 R1 및 R2 가 부착된 원소들과 함께 다음을 형성하며,
    Figure pct00244

    바람직하게는, R1 및 R2은 R1 및 R2 가 부착된 원자들과 함께
    Figure pct00245
    을 형성하는 화합물 또는 그의 약학적으로 허용가능한 염.
  5. 제1항에 있어서,
    Figure pct00246
    은 다음으로 구성되는 군으로부터 선택되는 화합물 또는 그의 약학적으로 허용가능한 염.
    Figure pct00247

    Figure pct00248
    바람직하게는
    Figure pct00249

    더욱 바람직하게는
    Figure pct00250

    바람직하게는,
    Figure pct00251
    는
    Figure pct00252
    이며, R4 및 R5는 함께 =O 를 형성하며;
    바람직하게는,
    Figure pct00253
    는
    Figure pct00254
    이며, R4 및 R5는 함께 =O 를 형성하며;
    바람직하게는,
    Figure pct00255
    는
    Figure pct00256
    이며, R4 및 R5 은 함께 =O 를 형성하며;
    바람직하게는,
    Figure pct00257
    는
    Figure pct00258
    이며, R4 및 R5 은 함께 =O 를하며;
    바람직하게는,
    Figure pct00259
    는
    Figure pct00260
    이며, R4 및 R5 은 둘다 H이며;
    바람직하게는,
    Figure pct00261
    는
    Figure pct00262
    이며, R4 및 R5 은 함께 =O 를 형성함.
  6. 제1항에 있어서,
    식중 R6, R7, R8, 및 R9 는 H, CN, C1-C6 알킬 및 C1-C6 알콕시로 구성되는 군으로부터 각각 독립적으로 선택되며, 여기서 상기 C1-C6 알킬 또는 C1-C6 알콕시는 F, Cl, Br, I, OH, CN 또는 OMe 로 선택적으로 치환되며;
    바람직하게는, R6, R7, R8, 및 R9 는 H, CN, C1-C6 알킬 및 C1-C6 알콕시로 구성되는 군으로부터 각각 독립적으로 선택되며, 여기서 상기 C1-C6 알킬 또는 C1-C6 알콕시는 F, CN 또는 OH로 선택적으로 치환되며;
    바람직하게는, R6, R7, R8, 및 R9 는 H, CN, 메틸, 에틸, 프로필, 이소프로필, CF3, CH2CF3, CH2CHF2, CH2CH2F, CH2CN, CH2CH2CN, CH2OH, CH2CH2OH, OMe, OEt, OCH2CH2CH3 및 이소프로폭시로 구성되는 군으로부터 각각 독립적으로 선택되며;
    R6 는 H, CN, 메틸, 에틸, 프로필, 이소프로필, CF3, CH2CF3, CH2CHF2, CH2CH2F, CH2CN, CH2CH2CN, CH2OH, CH2CH2OH, OMe, OEt, OCH2CH2CH3 및 이소프로폭시로 구성되는 군으로부터 각각 독립적으로 선택되고; 보다 바람직하게는, R6 은 H, CN, 메틸, 에틸, 이소프로필, CF3, CH2CH2OH, OMe 및 OEt 로 구성되는 군으로부터 선택되고; 보다 바람직하게는, R6 는 H, CN, 메틸, CF3 및 OMe 로 구성되는 군으로부터 선택되고; 보다 바람직하게는, R6 는 CN, 메틸, CF3 및 OMe로 구성되는 군으로부터 선택되고; 보다 바람직하게는, R6 는 H, CN 및 메틸로 구성되는 군으로부터 선택되고; 가장 바람직하게는, R6 는 메틸 또는 CF3 이고;
    보다 바람직하게는 R7 는 H 이고;
    보다 바람직하게는, R8 는 H, CN, 메틸, 에틸, 프로필, 이소프로필, CF3, CH2CF3, CH2CHF2, CH2CH2F, CH2CN, CH2CH2CN, CH2OH, CH2CH2OH, OMe, OEt, OCH2CH2CH3 및 이소프로폭시로 구성되는 군으로부터 선택되고; 보다 바람직하게는, R8 는 H, CN, 메틸, 에틸, 이소프로필, CF3, CH2CH2OH, OMe 및 OEt로 구성되는 군으로부터 선택되고; 보다 바람직하게는, R8 는 H, CN 및 메틸로 구성되는 군으로부터 선택되고; 보다 바람직하게는, R8 는 H 또는 CN 이고; 보다 바람직하게는, R8 는 H 또는 메틸이고; 가장 바람직하게는, R8 는 H 이고; 보다 바람직하게는, R9 는 H 인 화합물 또는 그의 약학적으로 허용가능한 염.
  7. 제1항에 있어서,
    식중, R10 는 H 또는 C1-C6 알킬이고, 여기서 상기 C1-C6 알킬은 할로겐, OH 또는 CN로 선택적으로 치환되고; 바람직하게는, R10 는 H, 메틸, 에틸, 프로필, 이소프로필, CF3, CH2CF3, CH2CHF2, CH2CH2F, CH2CN, CH2CH2CN, CH2OH 및 CH2CH2OH 로 구성되는 군으로부터 선택되고; 보다 바람직하게는, R10 는 메틸, 에틸, 이소프로필, CH2CF3, CH2CHF2, CH2CN 및 CH2CH2OH 로 구성되는 군으로부터 선택되고; 보다 바람직하게는, R10 은 메틸, 에틸, CH2CN 및 CH2CH2OH 로 구성되는 군으로부터 선택되고; 보다 바람직하게는, R10 는 메틸인 화합물 또는 그의 약학적으로 허용가능한 염.
  8. 제1항에 있어서,
    L은 하나 이상의 R12 로 선택적으로 치환된 다음의 기들로 구성되는 군으로부터 선택되고;
    Figure pct00263
    및
    Figure pct00264

    식중,
    단일 물결선은 L이 카보닐에 연결된 위치이고, 이중 물결선은 L이 피리미딘에 연결된 위치이며;
    R12 은 할로겐, OH, CN, 비닐, C1-C6 알킬 및 C1-C6 알콕시로 구성되는 군으로부터 선택되고, 여기서 상기 C1-C6 알킬 또는 C1-C6 알콕시는 할로겐 또는 OH 로 선택적으로 치환되고;
    h 는 0, 1, 2, 3 또는 4;
    j 는 0, 1, 2, 또는 3;
    k 는 1, 2, 3, 또는 4;
    q, s, v, 및 t 는 각각 독립적으로 0, 1, 또는 2 이고, q, s, v, 및 t 는 동시에 0 이 아니고;
    p 는 0, 1, 2, 또는 3;
    e 는 0, 1, 또는 2;
    u 는 1, 2, 또는 3;
    W 및 Z는 각각 독립적으로 N 또는 C 이고, W 및 Z 의 적어도 하나는 N 이며;
    바람직하게는 R12 은 F, Cl, Br, I, OH, CN, 비닐, 메틸, 에틸, 프로필, 이소프로필, CF3, CH2CF3, CH2CHF2, CH2CH2F, OMe, OEt, CH2OH, CH2CH2OH, OCH2OH 및 OCH2CH2OH 로 구성되는 군으로부터 선택되고; 보다 바람직하게는 R12 은 메틸, 에틸, 이소프로필, CF3, CH2CF3, OMe, OEt, CH2OH 및 OCH2OH 로 구성되는 군으로부터 선택되고; 보다 바람직하게는, R12 는 메틸, 에틸 및 CF3 로 구성되는 군으로부터 선택되고; 가장 바람직하게는, R12 는 메틸이며;
    바람직하게는, h 는 0, 1, 2 또는 3 그리고 j 는 0, 1, 또는 2; 보다 바람직하게는 h 는 0, 1 또는 2 그리고 j 는 0 또는 1; 보다 바람직하게는, h 는 0 또는 1 그리고 j 는 0; 가장 바람직하게는, h 는 1이고 j는 0 이며;
    바람직하게는, k 는 1, 2, 또는 3; 보다 바람직하게는 k 는 1 또는 3; 보다 바람직하게는, k 는 1 이며;
    바람직하게는, q, s, v, 및 t 는 각각 독립적으로 0 또는 1이고, q, s, v, 및 t 는 동시에 0 이 아니고; 보다 바람직하게는, q, s, v, 및 t 는 모두 1이고; 보다 바람직하게는, q 및 s 는 둘다 0 이고, 그리고 v 및 t 는 둘다 1이고; 보다 바람직하게는, q 및 s 는 둘다 1이고, v 및 t 는 둘다 0 이고; 가장 바람직하게는, s 및 v 는 둘다 0 이고, q 및 t는 둘다 1이며;
    바람직하게는, p 는 0, 1, 또는 2; 보다 바람직하게는, p 는 0 또는 2; 보다 바람직하게는, p 는 2이며;
    바람직하게는, e 는 0 또는 1, 그리고 u 는 1 또는 2; 보다 바람직하게는, e 는 0 또는 1, 그리고 u 는 1; 보다 바람직하게는, e 는 0, 그리고 u 는 1 이며;
    바람직하게는, W 는 C 이고, Z는 N이고; 바람직하게는, W 는 N이고 Z 는 C이고; 보다 바람직하게는, W 및 Z 는 둘다 N 인 화합물 또는 그의 약학적으로 허용가능한 염.
  9. 제8항에 있어서,
    L은 하나 이상의 R12 로 선택적으로 치환된 다음의 기들로 구성되는 군으로부터 선택되는 것을 특징으로 하는 화합물 또는 그의 약학적으로 허용가능한 염:
    Figure pct00265

    바람직하게는, L 은 하나 이상의 R12 로 선택적으로 치환된 다음의 기들로 구성되는 군으로부터 선택되며:
    Figure pct00266

    더욱 바람직하게는, L은 다음으로 구성되는 군으로부터 선택되며;
    Figure pct00267

    더욱 바람직하게는, L은 다음으로 이루어진 군으로부터 선택되며;
    Figure pct00268

    더욱 바람직하게는, L은 다음으로 이루어진 군으로부터 선택됨.
    Figure pct00269
  10. 제1항에 있어서,
    식중, G 는 1-5 R11 로 선택적으로 치환된 페닐이고, 또는 하나 이상의 R11 로 선택적으로 치환된 티에닐 또는 피리딜이며;
    바람직하게는, R11 는 F, Cl, Br, I, OH, CN, NH2, NO2, 벤질옥시, 메틸, 에틸, 이소프로필, CH2CF3, CF3, SMe, OMe, OCF3, OEt 및 이소프로폭시로 구성되는 군으로부터 독립적으로 선택되고; 보다 바람직하게는, R11 는 F, Cl, Br, CN, 벤질옥시, 메틸, 에틸, 이소프로필, CF3, OMe, SMe 및 OCF3 로 구성되는 군으로부터 독립적으로 선택되고; 보다 바람직하게는, R11 는 F, Cl 및 CF3 로 구성되는 군으로부터 독립적으로 선택되고; 가장 바람직하게는, R11 는 Cl이며;
    바람직하게는 G 는 페닐, 2-클로로페닐, 3-클로로페닐, 4-클로로페닐, 4-플루오로페닐, 4-브로모페닐, 4-메틸페닐, 4-에틸페닐, 4-이소프로필페닐, 4-트리플루오로메틸페닐, 4-시아노페닐, 4-메톡시페닐, 4-메틸티오페닐, 4-트리플루오로메톡시페닐, 4-클로로-3-플루오로페닐, 3,4-디플루오로페닐, 2,4-디클로로페닐 및 4-벤질옥시페닐로 구성되는 군으로부터 선택되고; 보다 바람직하게는, G 는 4-클로로페닐, 4-클로로-3-플루오로페닐, 4-트리플루오로메틸페닐 및 3,4-디플루오로페닐로 구성되는 군으로부터 선택되고; 보다 바람직하게는, G 는 4-클로로페닐이며;
    바람직하게는, G는 하나 이상의 할로겐들로 선택적으로 치환된 티에닐 또는 피리딜이고; 바람직하게는, G 는 하나 이상의 F, Cl, Br 또는 I로 선택적으로 치환된 티에닐 또는 피리딜이고; 보다 바람직하게는, G 는 다음으로 구성되는 군으로부터 선택되는 화합물 또는 그의 약학적으로 허용가능한 염.
    Figure pct00270
  11. 다음으로 구성되는 군으로부터 선택되는 화합물 또는 그의 약학적으로 허용가능한 염:
    Figure pct00271

    Figure pct00272

    Figure pct00273

    Figure pct00274

    Figure pct00275

    Figure pct00276

    Figure pct00277

    Figure pct00278

    Figure pct00279

    Figure pct00280

    Figure pct00281

    Figure pct00282

    Figure pct00283

    Figure pct00284

    Figure pct00285

    시스-(5R)-4-(5-((S)-2-(4-클로로페닐)-3-(이소프로필아미노)프로피오닐)헥사하이드로피롤[3,4-c]피롤-2(1H)-일)-5-메틸-5,8-디하이드로피리도[2,3-d]피리미딘-7(6H)-온, 및
    트랜스-(5R)-4-(5-((S)-2-(4-클로로페닐)-3-(이소프로필아미노)프로피오닐)헥사하이드로피롤[3,4-c]피롤-2(1H)-일)-5-메틸-5,8-디하이드로피리도[2,3-d]피리미딘-7(6H)-온.
  12. 다음으로 구성되는 군으로부터 선택되는 화합물:
    Figure pct00286
  13. 제1항 내지 제12항 중 어느 한 항의 화합물 또는 그의 약학적으로 허용가능한 염을 포함하는 약학 조성물로서;
    바람직하게는, 제1항 내지 제12항 중 어느 한 항의 화합물 또는 그의 약학적으로 허용가능한 염 및 하나 이상의 약학적으로 혀용가능한 담체를 포함하는 약학조성물.
  14. 제1항 내지 제12항 중 어느 한 항의 화합물 또는 그의 약학적으로 허용가능한 염 또는 제13항의 약학 조성물의, AKT 단백질 키나제에 의해 매개되는 질환 또는 상태를 예방 및/또는 치료를 위한 의약의 제조에 있어서의 용도로서; 바람직하게는, 상기 질환 또는 상태는 암이며; 보다 바람직하게는, 상기 질환 또는 상태는 유방암, 전립선암 또는 난소암인 것을 특징으로 하는 용도.
  15. 제1항 내지 제12항 중 어느 한 항의 화합물 또는 그의 약학적으로 허용가능한 염 또는 제13항의 약학 조성물을 필요로 하는 대상에게 투여하는 것을 포함하는 AKT 단백질 키나제에 의해 매개되는 질환 또는 상태를 예방 및/또는 치료 방법으로서; 바람직하게는, 상기 질환 또는 상태는 암이며; 보다 바람직하게는, 상기 질환 또는 상태는 유방암, 전립선암 또는 난소암인 것을 특징으로 하는 방법.
  16. AKT 단백질 키나제에 의해 매개되는 질병 또는 상태의 예방 및/또는 치료에 사용하기 위한, 바람직하게는, 상기 질환 또는 상태는 암이며; 보다 바람직하게는, 상기 질환 또는 상태는 유방암, 전립선암 또는 난소암인, 제1항 내지 제12항 중 어느 한 항의 화합물 또는 그의 약학적으로 허용가능한 염 또는 제13항의 약학 조성물.
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