KR20210116413A - 화장 또는 피부과 조성물 - Google Patents

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KR20210116413A
KR20210116413A KR1020217005295A KR20217005295A KR20210116413A KR 20210116413 A KR20210116413 A KR 20210116413A KR 1020217005295 A KR1020217005295 A KR 1020217005295A KR 20217005295 A KR20217005295 A KR 20217005295A KR 20210116413 A KR20210116413 A KR 20210116413A
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필리프 레브로
쟝 줄리앙 바롱네
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베쎄에르
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Abstract

본 발명은 굴살 (oyster meat)의 알칼리 가수분해물, 및 주름 또는 잡티와 같은 노화 현상 처리 또는 피부 견고성 개성 및 피부 장근 효과 달성을 위한 화장 및 피부과 조성물에 관한 것이다.

Description

화장 또는 피부과 조성물
본 발명은 굴, 상세하게는 굴살 (oyster meat)의 신규 추출물, 이를 함유하는 약학 및 화장조성물, 더욱 상세하게는 국소 도포용 조성물, 이의 제조 공정 및 피부과 (dermatology) 또는 화장 분야에서, 상세하게는 피부 장애 예컨대 피부결, 피부색, 피부 투명감의 변화, 자극 및 주름의 출현에 대한 처치에서의 이의 용도에 관한 것이다.
피부 노화는 내재적 또는 외재적 인자들이 관여되는 두가지의 차별적이고 독립적인 과정의 결과이다. 외재적 노화는 다양하고 가변적인 환경 인자들로 유발되는 노화이고 더욱 상세하게는 태양에 노출되는 광노화 및 오염물, 담배 등에 의한 것이다. 이 결과 예컨대 매우 깊은 주름의 변화, 반점들의 출현 및 “파치먼트 (parchment)” 피부가 형성된다.
내재적 또는 시간생물학적 노화는 연령과 연관된 정상적 또는 생체적 노화이고 상세하게는 상피 세포 재생 지연 및 잔주름 또는 주름의 출현으로 나타난다. 따라서, 나이가 들어감에 따라, 피부는 세포외 기질에서 보유하는 수분 일부를 상실하고, 이어 노화 과정을 거쳐 섬유화 증가 및 섬유 탄력 감소로 이어진다. 노화 과정에서, 피부 구조 및 기능 변화가 관찰된다.
피부 노화에 따른 주요 임상적 증상 (signs)은 잔주름 및 깊은 주름이 나타나는 것이고, 나이에 따라 확실히 많아진다. 깊은 주름 및 잔주름들이 새겨지고; 피부는 점차 꺼지고 견고함을 잃고; 표면에서, 피부는 광택이 없어진다.
상기된 외재적 인자들 가운데, 가변 온도 및 습도에 노출되거나 오염물, UV 선 등에 대한 노출이 언급될 수 있다. 피부 톤 광택에 영향을 주는 내재적 인자들 가운데, 스트레스, 피로, 호르몬 변화, 상피의 탈수화 또는 피부 장벽 기능 변화, 예컨대, 시간생물학적 노화와 연관된 모든 인자들이 언급될 수 있다.
이들 외재적 및 내재적 인자들은 안색을 흐리게 하고, 불균일하고 윤기 없고, 번들거리게 함으로써 피부 결함, 주름, 잔주름, 색소 반점들, 검버섯을 촉진 또는 심지어 악화시킨다. 이러한 안색 변화는, 때로는 원인이 다원적이지만, 미용 관리 센터 또는 피부과 전문의원에서 점차 증가되는 공통의 상담 이유이다.
최근 수년간, 다양한 단백질분해효소를 이용한 식물 및 동물 단백질의 효소적 가수분해에 의해 획득되는 다양한 가수분해물에 대한 생리적 활성들이 연구되었고, 이들은 다양한 가공 식품, 조미료, 샴푸, 화장료, 등에 사용되고 있다
예를들면, KR101841088는 첨가된 단백질분해효소를 통해, 산성 pH에서 굴살에 대한 단백질 가수분해를 통해 획득한 굴 추출물을 기술한다. 외인성 단백질분해효소에 의한 효소적 단백질가수분해에 의해 유래되는 펩티드가 풍부한 상기 추출물은 주름 처리에 사용된다.
출원인은, 놀랍게도, 알칼리 가수분해에 의해 획득한, 따라서 효소적 단백질분해과정이 없고 또는 외인성 단백질분해효소 첨가가 없이 획득한, 굴살의 추출물은 피부 노화 증상 처치 및 피부 세포 성장 자극에 대한 매우 유리한 특성들을 보인다는 것을 알았다.
본 발명에 의한 조성물은 주름을 줄이고, 광유도 또는 비-광유도 피부 노화에 대응하고, 상피 및 진피 세포 활성을 회복시켜, 피부를 견고하게 하고, 탄력을 높이고, 반점들을 예방 또는 처리하고, 또는 상처 치유를 자극하여 노화 증상을 예방 또는 치료 목적으로 피부과 또는 화장 분야에서 외용제로 사용될 수 있다.
따라서, 본 발명은, 실시태양에 따르면, 굴살의 알칼리 가수분해에 의해 획득되는 굴 추출물에 관한 것이다.
본원에서 사용되는 용어 “굴”은, 굴과 (Ostreidae)의 쌍각 조개 연체동물 (bivalve mollusk)을 칭하는 것이다.
더욱 상세하게는, 피노돈타 (Pynodonta), 크라쏘스트레아 (Crassostrea) 또는 오스트레아 (Ostrea) 종들이 언급된다.
피노돈타 속은 심해 굴들의 종을 포함하고, 계속 잠겨있는 곳에서 서식한다 (최대 2000m). 이들은 공포 (vacuoles)로 이루어진 매우 둥근 껍질을 가진다.
크라쏘스트레아는 조간대 (각 조수에서 형성되는 해안 지대)의 굴들이다. 난자 및 정자 간 무작위 만남으로 껍질 외부에서 생식된다.
오스트레아 속은 항상 잠기거나 또는 때로 노출되는 지역에서 서식하고 다른 생식 방식을 가진다: 껍질 내부에서 수정된 후, 유생이 외부로 방출된다.
굴은 육질부 (fleshy part)를 둘러싸는 두 개의 판막 (valves) 또는 껍질을 가진다. 이러한 육질부는 꺼풀 (mantle), 아가미 (gills), 계절에 따라 이리 (milt) 및 폐각근 (adductor muscle)을 포함한다.
본 발명에서, “굴살”의 추출물이 언급되고, 이는 꺼풀 및 아가미, 해당된다면 이리, 및 폐각근 일부 또는 전부를 포함하는 육질부에서 획득되는 추출물이다.
바람직하게는, 사용되는 굴살은 굴의 이리를 포함한다.
본 발명에 의한 추출물은 굴살의 알칼리 가수분해에 의해 획득되는 추출물이다.
굴살은 날 것 (fresh) 또는 냉동된 것, 온전한 것 (whole), 절단된 것 (cut) 또는 분쇄된 것 (ground)일 수 있고 이어 알칼리 가수분해 단계가 수행된다.
본원에서 사용되는 용어 굴살의 “알칼리 가수분해”란, 굴살이 알칼리 화합물로, 8 내지 13의 pH, 특히 9 내지 12에서 배양되는 것을 의미한다. 상세하게는, 이러한 가수분해는 임의의 외래 효소 첨가 없이, 특히 외래 단백질분해 효소 첨가 없이 수행된다.
본 발명에 의한 알칼리 가수분해는, 단백질분해효소가 첨가되지 않고 가수분해가 수행되는 pH를 고려할 때, 효소적 단백질가수분해가 아니다.
알칼리 화합물은 소망 pH가 달성되는 함량 및 농도의 임의의 염기, 상세하게는 강염기, 예컨대 NaOH 또는 KOH, 또는 (Ca(OH)2)또는NH4OH일 수 있다.
바람직한 실시태양에 따르면, 본 발명에 의한 추출물은 이하 기술되는 본 발명에 의한 공정에 의해 획득될 수 있다. 본 발명에 의한 추출물 제조를 위한 공정은 굴살, 상세하게는 이리가 있는 굴살을, pH8 내지 13, 특히 9 내지 12, 더욱 상세하게는 약 11의 알칼리 매질에서 침용 (maceration)하는 단계를 포함한다.
특히, 선택적으로 파편화 및/또는 분쇄된 날 또는 냉동 굴살을, 염기, 바람직하게는 염기, 상세하게는 강염기와 혼합하고 전체를, 바람직하게는 실온에서, 2 내지 12 시간, 상세하게는 3 내지 9 시간, 더욱 상세하게는 약 6 시간 동안 배양한다.
과잉 식물수 (vegetation water), 및/또는 점액을 제거하고, 알칼리 가수분해 매질이 희석되는 것을 방지하기 위하여 먼저 굴살에서 물을 따라낸다. 배수된 굴살이란 80 내지 90중량%의 수분을 가지는 굴살, 예컨대, 천연 상태이지만 식물수 또는 점액이 없는 굴살을 의미한다.
배양 혼합물은 임의의 적합한 수단에 의해, 연속적으로 또는 간헐적으로 교반될 수 있다.
선택되는 염기는 희망 pH를 달성하기에 충분한 함량 및 농도의 NaOH, KOH, (Ca(OH)2) 또는 NH4OH일 수 있다.
전형적으로, 염기, 예컨대 NaOH, NH4OH, (Ca(OH)2) 또는 KOH는, 예를들면, 0.5 내지 2 M, 특히 1 M의 농도를 가질 수 있다.
본 발명의 또 다른 특정 실시태양에 의하면, 알칼리 가수분해는 교반 하에서 또는 정적 상태에서, 2℃ 내지 37℃, 상세하게는 2℃ 내지 25℃, 더욱 상세하게는 2℃ 내지 20℃, 더더욱 상세하게는 2℃ 내지 15℃, 또는 2℃ 내지 10C의 온도에서 수행된다.
가수분해는 초음파 또는 압출에 의해 조력될 수 있다.
가수분해 지속 시간은 1 분 내지 48 시간, 더욱 상세하게는 약 3 내지 10 시간, 및 더더욱 상세하게는 약 6 시간일 수 있다. 압출은 1회, 또는 2 내지 3 회 반복될 수 있다.
염기 부피 대 굴살 중량의 비율은 15:1 내지 2:1, 특히 15:1 내지 5:1, 더욱 상세하게는 10:1일 수 있다.
상기 비율은 염기 농도 및 굴살에 잔존하는 잔류수에 따라 달라질 수 있다. 비율은 자체가 중요한 것이 아니며 배양되는 혼합물의 pH를 8 내지 13, 특히 9 내지 12, 더욱 상세하게는 약 11로 달성하기 위한 이들 파라미터에 따라 달라진다.
따라서 본 발명의 목적은 임의의 외래 효소 주입 없이, 특히 외래 단백질분해 효소 첨가 없이, 8 내지 13, 특히 9 내지 12의 pH에서 굴살에 대한 알칼리 가수분해 에 의해 획득되는 굴 추출물에 관한 것이다.
본 발명에 의한 추출물은 점액 및/또는 식물수가 없는 굴살의 추출물이다.
상기된 바와 같이 알칼리 매질에서의 배양 단계 후, 매질의 pH가 4 내지 7, 특히 4 내지 6, 더욱 상세하게는 4 내지 5가 되도록 산을 첨가하여 혼합물을 중화한다 중성화는 임의의 적합한 산, 예를들면 시트르산, 황산, 아세트산 또는 임의의 기타 적합한 산에서 선택되는 약산 또는 강산에 의해 수행된다.
혼합물이 중화되고 또는 이어 액체/고체 분리 단계가 수행되어 부유 입자들이 없는 투명한 액상을 회수할 수 있다.
파편, 입자 및 세포 잔해 제거를 위한 임의의 적합한 기술 예컨대 여과, 원심분리가 적합하다. 전형적으로, 액체/고체 분리 단계가 수행되어 20μm를 초과하는 입자들이 제거된다.
본 발명의 또 다른 특정 실시태양에 따르면, 이어 고상은 원심분리 또는 여과에 의해 분리되어 입자들이 없는 투명 액상을 얻을 수 있다. 여과는 5 내지 20μm, 특히 10 내지 20μm의 차단 능을 가지는 여과지 또는 여과판으로 수행될 수 있다. 적합한 필터 또는 여과판은 Pall®의 K 시리즈 두꺼운 여과판 범위에서 선택될 수 있다. 이러한 판은 셀룰로스 섬유, 규조토, 및 펄라이트의 균형 잡힌 혼합물로 이루어지고, 균일한 기질을 형성한다. 따라서 K300 내지 K900 타입의 Pall® K-시리즈 판이 선택된다. 건식 추출물이 될 때까지, 액상 추출물은 거의 농축될 수 있다.
얻어진 투명 액상은 본 발명에 의한 추출물을 구성한다.
이렇게 얻어진 본 발명에 의한 추출물의 고형분은 2 내지 15%, 특히 2 내지 12%, 특히 약 10중량%로 포함된다. 추출물의 이러한 고형분은 가수분해된 굴의 유기물질 및 첨가된 화합물들, 가수분해용 염기 및 중화용 산을 포함한다.
본 발명 또 다른 실시태양에서, 농축 단계에서 또한 캐리어가 첨가되어 1 내지 75% 건식 추출물 또는 고형분을 함유하는 추출물을 얻을 수 있다.
캐리어는 말토덱스트린, 락토스, 실리카, 글리세린, 글리콜, 또는 화장료에서 허용되고 추출물을 가용화하는 임의의 기타 캐리어, 바람직하게는 생물계 유래 예컨대, 예를들면, 생물계 글리콜 (1,2-펜탄디올; 1,3-부탄디올; 1,3-프로판디올 등), 및 또한 친수 가용화제 예컨대 알킬 글리코시드 (Sepiclear, Apyclean, APXC4 등)일 수 있다.
본 발명의 특정 실시태양에 의하면, 추출물은 활성 탄소 상에서 탈색될 수 있다.
얻어진 추출물은 자체로 또는 농축하여, 또는 건조 캐리어 존재 또는 부재에서 분말 형태로 건조되어 사용될 수 있다.
추출물은, 캐리어 부재에서, 진공 하에서 고형분 중량비가 5 내지 30%, 바람직하게는 5 내지 20% 및 더욱 상세하게는 5 내지 15%, 또는 더더욱 상세하게는 약 10%로 농축될 수 있다.
농축은 열적으로 수행되어 (바람직하게는 50℃ 미만 및 진공 하에서) 브릭스 정도 (Brix degrees)를 높이고 미생물 오염에 대한 안정성을 높인다.
추출물은 또한 단독으로 또는 캐리어 (예를들면 말토덱스트린, 녹말 또는 락토스) 상에서 건조될 수 있다.
바람직하게는, 농축 추출물은 1 그램의 굴살 당1.5 내지 8 그램의 추출물, 더욱 상세하게는 1 그램의 굴살 당2 내지 6 그램의 추출물, 더욱 상세하게는 1 그램의 굴살 당3 내지 5 그램의 추출물, 더욱 상세하게는 1 그램의 굴살 당 약 4 그램의 추출물에 상응하는 추출물이다. 여기서, 물이 빠진 굴살에 대한 것이다.
추출물 제조 방법은 어떠한 외인성 효소도 혼합물에 첨가되지 않는다는 점에 특징이 있다. 상세하게는, 단백질분해효소는 굴살 및 염기의 혼합물에 첨가되지 않는다.
굴 유기물질의 가수분해는 따라서 알칼리 가수분해로 이루어지고 유기물질은 따라서 실질적으로 가용성인 유기 성분 및 무기 성분으로 분해된다. 이러한 알칼리 가수분해에서, 물 흐름, 온도, 및 알칼리성이 조합되어 조직의 용해 및 분해 과정이 촉진되고, 처리 후 몇 시간 후, 아미노산, 펩티드, 탄수화물, 지방산 비누, 뉴클레오티드, 염 등이 풍부한 유색 액체가 얻어진다
특정 실시태양에 의하면, 본 발명에 의한 굴 추출물은 중량% 단위로, 추출물의 고형분과 관련하여, 1% 내지 10%의 유리 아미노산; 3% 내지 12% 단백질 또는 펩티드, 0.005% 내지 0.05% 총 당 (sugars) 및 0.1% 내지 1% 폴리페놀을 포함한다.
유리 아미노산 함량은, 중량% 단위로, 추출물의 고형분과 관련하여, 1 내지 8% 포함되고; 단백질 또는 펩티드 함량은, 중량% 단위로, 추출물의 고형분과 관련하여, 5 내지 10% 포함되고; 총 당 함량은, 중량% 단위로, 추출물의 고형분과 관련하여, 0.01 내지 0.05% 포함되고 폴리페놀 함량은, 중량% 단위로, 추출물의 고형분과 관련하여, 0.1 내지 0.5% 포함된다. %는 추출물의 고형분과 관련하여 중량 기준으로 나타낸다. 상기된 바와 같이, 추출물은 굴의 유기물질 및 가수분해용으로 첨가된 화합물 (예컨대, 염기) 및 중화용으로 첨가된 화합물 (예컨대, 산)을 포함한다.
본 발명의 또 다른 목적은 피부과 또는 화장조성물을 제공하는 것이며, 이는 본 발명에 의한 굴 추출물 및 피부과 또는 화장용으로 허용 가능한 부형제를 포함한다.
본 발명에 의한 약학조성물 또는 화장조성물은 적어도 하나의 약학적으로 허용되는 또는 화장품에서 허용되는 부형제가 상기된 본 발명에 의한 추출물에 혼합된 것이다. 이는 바람직하게는 피부용, 상세하게는 안면 피부용 및/또는 손 피부용 국소 조성물이다.
본 발명에서, “약학적으로 허용되는 또는 화장품에서 허용되는”이란 약학조성물 또는 화장조성물의 제조에 유용하고, 일반적으로 안정하고, 독성이 없으며 생물학적으로 또는 그렇지 않으면 달리 바람직하지 못한 것이 아니고 약학적 또는 화장적 용도로 허용되고, 상세하게는 피부과 또는 미용적 용도, 상세하게는 국소 도포에 허용되는 것을 의미한다. 본 발명에 의한 조성물은 바람직하게는 국소적으로, 상세하게는 피부에 도포할 의도이다. 바람직하게는, 화장품에서 허용되는 부형제는 국소적 투여에 적합하다. 상세하게는, 허용 가능한 부형제는 양호한 안정성, 호감적인 촉감 및 느낌을 부여하다. 이들은 또한 예를들면 화장품에서 알려지고 통상적으로 사용되는 조제 또는 첨가제일 수 있고: 예컨대 계면활성제, 색소, 보존제, 방향제, 막-형성제, 증점제 등일 수 있다.
따라서 본 발명에 의한 조성물은 국소적 적용을 위하여 통상 알려진 제형, 예컨대, 활성 성분의 특성 및 접근성을 개선하기 위하여 피부 침투에 조력하는 부형제와 함께, 상세하게는 로션, 폼, 젤, 분산형, 유화형, 분사형, 장액, 마스크 또는 크림 형태일 수 있다.
바람직하게는, 크림 형태일 수 있다. 이들 조성물은 일반적으로, 본 발명에 의한 추출물 외에, 일반적으로 물 또는 용제, 예를들면 알코올, 에테르 또는 글리콜 기반의 생리적으로 허용 가능한 매질을 함유한다. 이들은 또한 계면활성제, 착화제, 보존제, 안정제, 유화제, 점증제, 겔화제, 보습제, 연화제, 미량 원소, 정유, 향료, 색소, 무광제, 화학적 또는 무기 필터, 보습제를 함유한다.
실시태양에 따르면, 본 발명에 의한 피부과 조성물 또는 화장 조성물은 본 발명에 의한 굴 추출물의 함량이 조성물 총 중량 기준으로 0.01중량% 내지 10중량%, 더욱 상세하게는 0.05중량% 내지 5중량%인 것을 특징으로 한다. 상기 백분율은 추출물 고형량 및 농도에 따라 달라질 수 있다.
전형적으로, 본 발명에 의한 피부과 조성물 또는 화장 조성물은 경구 또는 국소 제형, 바람직하게는 국소 제형인 것을 특징으로 한다.
본 발명의 목적은 본 발명에 의한 추출물 또는 본 발명에 의한 상기 추출물을 함유하는 피부과 또는 화장 조성물 또는 피부 노화 증상에 대처하는 본 발명에 의한 피부과 또는 화장 조성물의 화장적, 특히 비-치료적, 용도에 관한 것이다.
본 발명에 의한 추출물 또는 본 발명에 의한 화장 또는 피부과 조성물의 화장적 용도는 더욱 상세하게는 피부 상태를 회복시키고, 피부 견고성을 보강하고 가시적으로 새겨진 주름 및 깊은 주름을 줄이기 위하여 의도된다.
또한 본 발명은 피부 노화 증상 대처 방법에 관한 것이고 본 발명에 의한 추출물 또는 본 발명에 의한 화장조성물 또는 피부과 조성물의 유효 함량을 필요한 대상체에 바람직하게는 국소적으로 적용하는 단계를 포함한다.
본 발명의 또 다른 목적은 피부 무결성 및 상태 회복을 위하여 피부 회복 촉진을 의도하는 피부과 조성물에 관한 것이고, 이는 피부과 또는 화장 활성 성분으로서 본 발명에 의한 추출물 및 적어도 하나의 피부과에서 또는 화장품에서 허용되는 부형제를 포함한다.
실시태양에 따르면, 본 발명은 따라서 피부 장애 예방 및/또는 처치를 위한 화장 조성물의 용도에 관한 것이고, 상기 화장 조성물은 활성 성분으로서 본 발명에 의한 굴 추출물을 포함한다.
실시태양에서, 본 발명에 의한 용도에 있어서, 피부 장애는 피부결, 색, 투명감 변화, 자극 및 주름 출현으로 나타난다.
더욱 상세하게는, 피부 장애는 환경 스트레스의 결과이다.
특정 실시태양에 따르면, 환경 스트레스는 햇빛, 담배에 의해 유발된다.
대안에 의하면, 본 발명에 의한 용도와 관련하여, 조성물은 경구형 또는 외용 형태이고, 바람직하게는 외용 형태인 것을 특징으로 한다.
바람직하게는, 외용 형태는 크림, 젤, 연고 및 분사제로 이루어진 군에서 선택된다.
경구 형태로 사용되는 실시태양에서, 이러한 경구 형태는 정제, 캡슐 및 경구 현탁 분말로 이루어진 군에서 선택된다. 본 발명에 의한 조성물은 경구적으로 또는 임의의 기타 약학적 투여 경로로 투여될 수 있다. 본 발명에 의한 조성물은 인간을 포함하는 포유동물에게 투여되도록 제제된다. 이들 조성물은 구강, 설하, 피하, 근육내, 정맥내 또는 경피 투여되도록 제조된다. 이러한 경우, 활성 성분(들)은, 통상의 약학적 담체와 혼합되어, 동물 또는 인간에게, 단위 투약 형태로 투여될 수 있다.
식품 보충제 또는 약물의 경우, 하기 투여 형태가 고려될 수 있다: 캡슐, 경구 정제, 저작성 정제, 발포성 정제, 로젠지, 환제, 분말, 과립, 경구액 또는 현탁액, 및 설하 및 구강 투여 형태. 바람직한 투여 형태는 캡슐이다. 정제 형태의 고형 조성물이 제조될 때, 본 발명에 의한 추출물은 약학 전달체 예컨대 젤라틴, 녹말, 락토스, 스테아르산 마그네슘, 활석, 아라비아 검, 실리카 또는 기타 등과 혼합될 수 있다. 본 발명에 의한 추출물과 희석제를 혼합하고 (임의 단계) 얻어진 혼합물을 연질 또는 경질 캡슐에 투입하여 캡슐이 제제된다. 시럽 또는 엘릭시르 형태의 제제는 본 발명에 의한 추출물 및 감미제, 풍미제 및 적합한 색소가 함유될 수 있다. 수-분산성 분말 또는 과립형은 현탁제와 혼합되는 본 발명에 의한 추출물, 및 맛 조절제 또는 감미제를 함유할 수 있다.
바람직하게는, 본 발명에 의한 조성물은 경구 투여로 의도된다.
본 발명의 또 다른 목적은 의약품 용도로서 본 발명에 의한 조성물을 제공하는 것이다.
본 발명의 또 다른 목적은 세포 성장 자극 및 상처 치료 촉진 용도로서 본 발명에 의한 추출물 또는 조성물에 관한 것이다.
따라서, 본 발명은 또한 상처 및 피부 자극 치료 용도로서 피부과 조성물에 관한 것이고, 이는 본 발명에 의한 굴 추출물 및 피부과에서 허용 가능한 부형제를 포함한다.
실제로, 본 발명에 의한 추출물은 유의미하게 섬유아세포에 의한 프로콜라겐 합성을 촉진하고, 이는 표피 상처 치료 및 상세하게는 표피 손상, 감염 또는 자극에 이은 흉터에 관여하는 결합조직의 주요 부분을 구성하는 섬유 (fibrillar) 단백질들 중 하나이다.
실제로, 섬유아세포의 이동 및 유도, 및 내피 세포의 증식에 따라, 피부 손상, 감염 또는 자극 24 시간 후 피부 회복이 개시된다. 3 내지 5 일 후, 치료를 보이는 특정 육아조직이 나타난다. 이러한 조직 출현은 섬유아세포의 증식 및 새로운 박벽의 미세관으로 특정되고, 때로 염증성 세포, 주로 대식세포와 혼합될 수 있다. 육아조직에서 점차 더 많은 섬유아세포가 쌓이고, 이는 더 많은 콜라겐으로 축적되고, 이 결과 흉터가 형성된다. 흉터는 시간 경과에 따라 재구성된다.
본 발명은 또한 피부 트러블 개선, 예방 또는 취급을 의도로 화장방법, 상세하게는 비-치료적 피부 처치에 관한 것으로 본 발명에 의한 화장 조성물을 피부에 적용하는 단계를 포함한다.
본 발명에 의한 화장 처치 방법은 피부 장애 개선을 위한 것이고, 이는 피부 노화 증상 개선을 포함하고, 상세하게는 주름 개선, 피부 견고성 개선 및 피부 장근 효과 (skin tension effect) 달성에서 선택되는 효과를 포함한다.
본 발명에 의한 피부 처치 미용 방법은 또한 피부 노화와 관련되는 피부 장애 개선을 위한 것이고, 검버섯 및 안면의 미백화 처치를 포함한다.
실시예 1: 굴살 채취
채취 환경: 밀폐실 (closed room).
수거 대상 재료 = “깨끗한” 껍질의 밀키 굴들 (개방 전에 껍질들을 솔질하고 세척한다);
장비 및 보조도구= 냉동 팩 + 굴살 팩을 두기 위한 얼음 트레이.
굴들을 개방하고 살 (꺼풀, 근, 이리)을 수거하여 얼음 위의 팩에 넣는다.
팩을 밀봉하고, 계량하여 최대 30 분까지 얼음 상에 보관한 후 팩을 -18℃ 또는 -20℃ 냉장고에 넣어둔다.
실시예 2: 알칼리 가수분해에 의한 추출물 획득 및 결정
알칼리 가수분해로 얻어진 추출물은 껍질에서 수거된 직후 드라이아이스에 보관된 냉동 “밀키” 굴들에서 유래한 것이다.
선택되는 가수분해 방식은 알칼리 방식이고, 더욱 상세하게는 1 M NaOH 용액에 의한 것이다.
굴살 (배수되어 식물수가 없는 대략 200g)을 200ml의 1 M NaOH 용액과 혼합하여 약 10 내지 11 pH의 용액을 얻는다.
실온 및 어두운 곳에서 6 시간 교반 접촉 후, 시트르산을 이용하여 약 4.7의 pH로 혼합물을 중화한다.
혼합물을 셀룰로스 필터로 여과한 후 진공 하에서 농축하여 신선 굴1g 당 4g의 추출물을 획득하였다. 얻어진 추출물의 고형분 함량은 10%이다.
획득된 추출물은 다음 특징을 가진다:
굴 추출물 함량 (추출물의 고형분 기준 중량%)
단백질 7.8%
총 폴리페놀 0.3%
총 당 0.01%
유리 아미노산 2%
단백질 결정
총 단백질은 로리법으로 시험된다. 이러한 비색분석법에서, 표준 곡선 OD750nm=f(단백질 함량)이 준비된다. 본 실험에서 사용되는 기준 단백질은 소혈청알부민 (BSA)이다. 표준 범위에 대하여 수행된 것과 동일한 프로토콜을 적용하여 각각의 추출물에서 단백질의 총 함량이 결정된다.
폴리페놀 결정
총 폴리페놀은 폴린-시오칼토 시약법으로 평가된다. 이러한 비색분석법에서, 기준 분자 농도를 증가시키면서 표준 곡선 OD720nm=f이 준비된다. 본 실험에서 사용되는 기준 폴리페놀은 갈산이다. 표준 범위에 대하여 수행된 것과 동일한 프로토콜을 적용하여 각각의 추출물에서 폴리페놀의 총 함량이 결정된다.
당 결정
총 당은 황산-안트론 가수분해법으로 평가된다. 이러한 비색분석법에서, 기준 분자 농도를 증가시키면서 표준 곡선 OD578nm=f이 준비된다. 본 실험에서 사용되는 기준 폴리페놀은 글루코스이다. 표준 범위에 대하여 수행된 것과 동일한 프로토콜을 적용하여 각각의 추출물에서 당의 총 함량이 결정된다.
실시예 3: 추출물의 생물학적 특성 연구
실시예 1에 따라 얻어진, 고형분 함량이 10%인 추출물이 사용된다.
초순수로 희석한 후 사용된다. 추출물 농도들은 다음과 같다: 0.5%, 1.5% 및 4.5% w/v (100mL 의 물 당 추출물의 g).
콜라겐 마이크로비드를 이용한 대상 시험 /장근 효과의 측정. 본 모델에서, 냉동-건조된 8-mm-직경의 콜라겐 원반이 사용된다. 상이한 처리에 따른 원반 수축이 영상 분석으로 측정된다. 콜라겐 원반 표면적이 감소할수록, 활성제의 장근 효과는 더 크다.
본 연구에 사용되는 기준 생성물은 100mg/ml의 소혈청알부민이다.
8-mm-직경의 콜라겐 원반을 40μl 초순수 (대조), 기준 생성물 및 농도가 점차 커지는 시험 생성물들에 담지하였다.
결과 장근 효과
1.5%의 추출물에 대하여 / 결과 + 49.4%;
4.5% 추출물에 대하여/ 결과 +56.5%
정상 인간 피부 세포 배양물에 대한 시험 / 멜라닌 억제:
본 연구 모델은 4세 공여자의 포피에서 얻은 정상 인간 멜라닌 세포를 이용한다. 멜라닌 세포를 분리하고 합류까지 단층으로 배양한다. 이후 세포를 72H 동안 기준 생성물 (양성 대조) 또는 농도가 점차 커지는 피험 생성물들 부재 (대조) 또는 존재에서 배양한다.
기준 생성물 (양성 대조군)은 250μM의 코직산이다.
배양 종료 후, 세포 용해물에서 405nm의 분광광도적 측정으로 세포내 멜라닌 함량을 평가한다.
결과 멜라닌 억제 효과:
0.5%의 추출물; 결과: -17.1%.
프로콜라겐 타입 I 생성에 대한 자극 효과
본 연구 모델은 68세 여성 공여자의 정상 인간 섬유아세포를 이용한다. 섬유아세포를 분리하고 합류까지 단층으로 배양한다. 이어 세포를 48H 동안 기준 생성물 (양성 대조) 또는 농도가 점차 커지는 피험 생성물들 부재 (대조) 또는 존재에서 배양한다.
기준 생성물 (양성 대조군)은 1ng/ml 및 10ng/ml의 TGF-Beta이다.
배양 48H 후, 배지에서 생성되는 프로콜라겐 타입 I의 함량은 민감 및 특이 ELISA 키트를 이용하여 평가한다.
결과: 프로콜라겐 타입 I 생성의 자극:
0.015%의 추출물; 결과+18%.
이들 결과는 표피 손상 또는 자극 후 상처 치료에서 본 발명에 의한 추출물의 양성 효과를 보인다.
효소 시험
타입 I 콜라겐분해효소 억제 효과
본 분석 시스템은 클로스트리듐 히스톨리티쿰 (Clostridium histolyticum)에 의해 생성되는 순수화 타입 I 콜라겐분해효소, 및 비색분석법에 의한 특이 검출 기질로 수행된다. 타입 I 콜라겐분해효소에 의한 이러한 기질의 소모 정도는 파장 405nm에서의 분광기로 매 3 분 마다 광학 밀도 (OD) 측정으로 확인된다. 이러한 측정을 위한 배양 시간은 45 분이다.
기준 대조군 (즉 2.5mM의 EDTA)을 이용하여 시험 효소의 조절 능력 및 상세하게는 억제 능력을 확인한다.
타입 I 콜라겐분해효소 억제에 대한 결과
0.15%의 추출물; 결과: - 67.3%.
0.5%의 추출물; 결과 -82.2%.
1.5%의 추출물; 결과 -91.1%.
총 콜라겐분해효소에 대한 억제 효과
본 분석 시스템은 정상 인간 섬유아세포 배양 배지에서 유래되는 반-순수 콜라겐분해효소, 및 비색분석법에 의한 특이 검출 기질로 수행된다. 총 콜라겐분해효소에 의한 기질의 소모 정도는 파장 405nm에서의 분광기로 매 3 분 마다 광학 밀도 (OD) 측정으로 확인된다. 이러한 측정을 위한 배양 시간은 45 분이다.
기준 대조군 (즉 2.5mM의 EDTA)을 이용하여 시험 효소의 조절 능력 및 상세하게는 억제 능력을 확인한다.
총 콜라겐분해효소 억제에 대한 결과
0.5%의 추출물; 결과 -18.7%.
1.5%의 추출물; 결과 -44.7%.
결론:
추출물 (10% 고형분), 및 1% 함량의 추출물은, 피부 표면에서 긴장 효과를 부여하여 주름을 제거할 수 있는 장근 효과를 보인다. 섬유아세포 배양물에서 타입 I 프로콜라겐의 생성 자극 시험은 굴살의 알칼리 가수분해로 유래되는 추출물은 피부 견고성과 연관되는 섬유를 증가시켜 피부 조직의 세포외 기질 함량을 증가시킨다는 것을 보인다. 이러한 능력은 또한 주름 채움으로 이어질 수 있다. 이러한 이론에 따라, 임의의 유인 효과 (콜라겐 섬유 분해는 반응에 의해 콜라겐 생성을 자극하고, 따라서 임의의 콜라겐분해효소 활성 자극은 콜라겐 생성을 간접적으로 자극할 수 있다는 주장)는 배제된다.
이러한 효과는 타입 I 콜라겐분해효소 및 더욱 일반적으로 모든 콜라겐분해효소 억제에 의한 콜라겐 분해를 중지시키는 추출물의 능력에 의해 보강되고, 따라서 임의의 유인 효과는 배제되고, 타입 I 프로콜라겐을 자극하는 추출물의 실질적인 생물학적 능력이 보여진다. 마지막으로, 추출물은 0.5% 함량부터 멜라닌 생성을 제한하고, 이러한 특성은 검버섯 억제, 및 안색 미백화에 조력한다.

Claims (14)

  1. 8 내지 13, 특히 9 내지 12의 pH에서 및 임의의 외래 효소 첨가 없이, 특히 임의의 외래 단백질분해 효소의 첨가 없이 굴살을 알칼리 가수분해하여 획득되는 굴 추출물.
  2. 제1항에 있어서, 중량%로, 추출물의 고형분은, 1% 내지 10%의 유리 아미노산; 3% 내지 12%의 단백질 또는 펩티드, 0.005% 내지 0.05%의 총 당 및 0.1% 내지 1%의 폴리페놀을 포함하는, 굴 추출물.
  3. 피부과 또는 화장 조성물로서, 제1항 또는 제2항의 굴 추출물 및 피부과에서 또는 화장품에서 허용되는 부형제를 포함하는, 조성물.
  4. 제3항에 있어서, 굴 추출물의 함량은 조성물 총 중량 기준으로0.01% 내지 10%인, 조성물.
  5. 제3항 또는 제4항에 있어서, 상기 조성물은 경구 형태 또는 국소 형태, 바람직하게는 국소 형태인, 조성물.
  6. 제3항 내지 제5항 중 어느 하나의 항에 있어서, 피부 장애 예방 및/또는 처지 용도로서, 상기 화장 조성물은, 활성 성분으로서, 제1항 또는 제2항의 굴 추출물 및 화장품에서 허용되는 부형제를 포함하는, 조성물.
  7. 제6항에 있어서, 상기 피부 장애는 피부결, 색, 투명감의 변화, 및 주름 출현으로 나타나는, 조성물.
  8. 제6항 또는 제7항에 있어서, 상기 피부 장애는 환경 스트레스의 결과인, 조성물.
  9. 제8항에 있어서, 상기 환경 스트레스는 태양, 담배로 인한 것인, 조성물.
  10. 제6항 내지 제9항 중 어느 하나의 항에 있어서, 상기 조성물은 경구 형태 또는 국소 형태, 바람직하게는 국소 형태인, 조성물.
  11. 제10항에 있어서, 상기 국소 형태는 크림, 젤, 연고 및 분사제형으로 이루어진 군에서 선택되는, 조성물.
  12. 제10항에 있어서, 상기 경구 형태는 정제, 캡슐 및 경구 현탁 분말로 이루어진 군에서 선택되는, 조성물.
  13. 제3항 내지 제5항 중 어느 하나의 항에 있어서, 피부 노화 관련 현상 개선 용도로서, 상세하게는: 주름 개선, 피부 견고성 개선 및 피부 장근 효과 달성, 검버섯 처치 및 안면 미백화에서 선택되는 개선 용도를 위한, 조성물.
  14. 피부과 조성물로서, 제1항 또는 제2항의 굴 추출물 및 피부과에서 허용되는 부형제를 포함하고, 상처 및 피부 자극 치료 용도의 피부과 조성물.
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