KR20210050807A - 마리안 플럼 추출물을 포함하는 근 기능 개선, 운동수행능력 증강 또는 항-피로용 조성물 - Google Patents
마리안 플럼 추출물을 포함하는 근 기능 개선, 운동수행능력 증강 또는 항-피로용 조성물 Download PDFInfo
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Abstract
본 발명에 따른 마리안 플럼 추출물은 근육의 기능, 근육량 증대 또는 근육세포의 분화에 관여하는 유전자의 mRNA 또는 단백질 발현을 촉진시키는 효과를 통해서, 근육량의 증대, 근 기능 또는 운동수해능력의 증강 또는 빠른 피로 회복이 가능하게 하고, 각종 질병에 의하여 유발되는 운동수행능력 저하, 근육의 기능 저하, 근육의 손실 또는 근육의 피로 등을 예방 또는 개선할 수 있으며, 천연물질로서 체내 부작용이 없어 기능성 식품 또는 의약품 등에 효과적으로 사용될 수 있다.
Description
본 발명은 마리안 플럼(marian plum) 추출물을 유효성분으로 함유하는 근 기능 개선, 운동수행능력 증강 또는 항-피로용 조성물에 관한 것이다.
지난 50∼100년간, 인간 신체활동의 감소현상은 제 2형 당뇨, 비만, 심혈관 질환 등과 같은 대사성 질환의 발병률 증가와 연관되어 있음이 알려졌다. 신체활동 부족은 세계보건기구에서 발표한 사망원인 중 4위를 차지한다. 이러한 현상들로 인해 세계보건기구, 미국심장협회, 영국심장재단 등의 단체에서는 일주일에 5일 이상, 최소 30분의 유산소운동을 권장하고 있다. 실제로 운동에 의해 당뇨, 비만, 유방암과 대장암의 발병률을 줄이고, 우울증에도 좋은 치료효과가 있음이 확인 되었다(British Journal of Pharmacology, 170: 1153-1166, 2013; American Journal of Cardiology, 110: 58B??68B, 2012).
에너지 소비를 촉진하여 항피로 및 운동수행능력 향상을 위한 대표적인 방법 중의 하나로는 미토콘드리아에 의한 지방산 산화(fatty acid oxidation)를 증가시켜 adenosine triphosphate (ATP)를 생성시키는 방법이 있다. 이를 관장하는 미토콘드리아의 수와 능력은 peroxisome proliferator-activated receptor-gamma coactivator 1 alpha (PGC-1α) 보조활성자에 의해 조절되고, PGC-1α활성은 sirtuin (SIRT1)에 의해 조절되는 것으로 밝혀졌다(EMBO Journal, 26: 1913-1923, 2007; Cell Metabolism, 1: 361-370, 2005; Cell, 127(6); 1109-1122, 2006).
Scarpulla와 그의 공동연구자들은 nuclear respiratory factor (NRF)라는 단백질을 동정하였다(Journal of Cellular Biochemistry, 97: 673-683, 2006). NRF 군의 단백질들은 핵에서 미토콘드리아의 다양한 유전자들의 프로모터에 결합을 하여 미토콘드리아의 복제와 전사를 활성화시켜 미토콘드리아의 생성을 유도하는 것으로 밝혀졌다. NRF 군의 단백질들은 PGC-1α 보조활성 인자와 물리적으로 상호작용하여 발현이 증진되는 것으로 밝혀졌다(Cell, 98: 115-24, 1999).
그 외에, adenosine monophosphate activated protein kinase (AMPK), peroxisome proliferator-activated receptor delta (PPARδ), estrogen-related receptor alpha (ERRα) 및 transcription factor A, mitochondrial (Tfam)등이 항피로 및 운동수행능력 향상과 관련이 있는 인자로 알려져 있다.
한편, 근위축(muscle atrophy)이란 근육량의 점진적 감소에 의하여 발생하는 것으로, 근육의 약화 및 퇴행을 일컫는다(Cell, 119: 907-910, 2004). 근 위축은 비활동, 산화적 스트레스, 만성 염증에 의해 촉진되며 근육 기능과 운동 능력을 약화시킨다(Clinical Nutrition, 26: 524-534, 2007). 근육기능을 결정짓는 가장 중요한 요소는 근육량이며, 이는 단백질 합성과 분해의 균형에 의해 유지된다. 근 위축증은 단백질 분해가 합성보다 더 일어날 때 발생한다(International Journal of Biochemistry and Cell Biology. 37: 1985-1996, 2005).
근육 크기는 근육 내에서 일어나는 동화작용(anabolism)이나 이화작용(catabolism)을 유도하는 세포 내 신호전달 과정(signalling pathways)에 의해 조절되며 근육 단백질의 분해보다 합성을 유도하는 신호전달 반응이 많이 일어날 경우 근육 단백질 합성이 증가 되는데, 이는 근육 단백질 증가에 따른 근육 크기 증가(hypertrophy)나 근섬유 수 증가(hyperplasia)로 나타난다(The Korea Journal of Sports Science, 30: 1551-1561, 2011).
근 비대 유도 인자들은 근 세포 내에서 phosphatidylinositol-3 kinase (PI3K)/Akt pathway의 자극을 기점으로 다운스트림 단백질(downstream proteins)을 인산화 시킴으로써 단백질 합성을 유도한다. 이 중 PI3K/Akt 신호전달에 의한 mammalian target of rapamycin (mTOR)의 활성은 세포 내에서 다양한 성장 신호를 통합하는 중심 성장 신호전달 기전으로 인정되고 있다. mTOR의 활성화는 두 개의 다운스트림 타겟(downstream targets)인 4E binding protein 1 (4EBP1)과 70-kDa ribosomal S6 kinase (p70S6K)를 활성화시킴으로써 근 단백질 합성을 유도하여 근육량 증가에 기여한다(The Korea Journal of Sports Science, 30: 1551-1561, 2011; Journal of Biological Chemistry, 278: 40717-40722, 2003).
근육세포의 분화와 근육 형성은 다양한 근육 조절 인자(muscle regulatory factors)에 의해 조절된다(Cellular and Molecular Life Science, 70: 4117-4130, 2013). 그 중, myoD는 근육 분화에 특이적인 유전자의 발현을 개시하게 하고 중간엽줄기세포(mesenchymal stem cell)가 근원세포로 분화하는 것을 유도한다. MyoD에 의해 조절되는 myogenin은 근원세포의 결합(fusion)에 가장 중요한 요소로, 근관세포(myotube)의 형성에 관여한다. 이 같은 과정을 통해 형성된 근섬유는 다발을 이루어 최종적으로 근육을 형성하게 된다(Cellular and Molecular Life Science, 70: 4117-4130, 2013; Cold Spring Harbor Perspectives in Biology, 4(2): a0008342).
학명이 보우에아 마크로필라(Bouea macrophylla)와 보우에아 오포시티포리아(Bouea oppositifolia)을 포함하는 열대식물 마리안 플럼은 태국에서는 마프랑(maprang), 인도네시아에서는 간다리아(gandaria), 말레이시아에서는 군당(kundang)으로 알려져 있다. 마리안 플럼의 과육은 피클, 주스, 잼, 시럽, 스튜 등에 사용되며, 어린잎은 샐러드나 페이스트(paste)의 원료로 이용된다(Edible Medicinal and Non-Medicinal Plants, 1: 69-74, 2012). 마리안 플럼은 항산화효과(Jurnal Ilmiah Farmasi, 2(2): 1-7, 2013), 항암효과(Srinagarind Medical Journal, 28(1): 100-109, 2013), 구충효과(Journal of Ethnopharmacology, 123: 475-482, 2009)를 갖는 것으로 보고되어 있다.
그러나, 본 발명의 이전에는 마리안 플럼의 근 기능 개선, 항피로 및 운동수행능력 증강 효과에 관해서는 알려진 바 없다.
Edible Medicinal and Non-Medicinal Plants, 1: 69-74, 2012
Jurnal Ilmiah Farmasi, 2(2): 1-7, 2013
Srinagarind Medical Journal, 28(1): 100-109, 2013
Journal of Ethnopharmacology, 123: 475-482, 2009
이에 본 발명자들은 운동수행능력 증강, 근 기능 개선 또는 항-피로 활성을 갖는 천연물질을 탐색 하던 중, 마리안 플럼 추출물이 근육세포의 분화 및 미토콘드리아의 합성을 촉진하는 효과를 가짐을 확인하여 본 발명을 완성하였다.
따라서, 본 발명은 마리안 플럼 추출물을 유효성분으로 포함하는 운동수행능력 증강, 근 기능 개선 또는 항-피로용 조성물을 제공하는 것을 목적으로 한다.
상기 과제를 해결하기 위한 수단으로서, 본 발명은 마리안 플럼 추출물을 유효성분으로 포함하는 조성물을 제공한다.
구체적으로, 본 발명은 마리안 플럼 추출물을 유효성분으로 포함하는 운동수행능력 저하 예방 또는 치료용 약학 조성물을 제공한다.
또한, 본 발명은 마리안 플럼 추출물을 유효성분으로 포함하는 운동수행능력 증가용 식품 조성물을 제공한다.
또한, 본 발명은 마리안 플럼 추출물을 유효성분으로 포함하는 근 기능 또는 근육의 손상 또는 저하 질환 예방 또는 치료용 약학 조성물을 제공한다.
또한, 본 발명은 마리안 플럼 추출물을 유효성분으로 포함하는 근 기능 개선용 식품 조성물을 제공한다.
또한, 본 발명은 마리안 플럼 추출물을 유효성분으로 포함하는 항-피로용 약학 조성물을 제공한다.
또한, 본 발명은 마리안 플럼 추출물을 유효성분으로 포함하는 항-피로용 식품 조성물을 제공한다.
본 발명에 따른 마리안 플럼 추출물은 근육의 기능, 근육량 증대 또는 근육세포의 분화에 관여하는 유전자의 mRNA 또는 단백질 발현을 촉진시키는 효과를 통해서, 근육량의 증대, 근 기능 또는 운동수해능력의 증강 또는 빠른 피로 회복이 가능하게 하고, 각종 질병에 의하여 유발되는 운동수행능력 저하, 근육의 기능 저하, 근육의 손실 또는 근육의 피로 등을 예방 또는 개선할 수 있으며, 천연물질로서 체내 부작용이 없어 기능성 식품 또는 의약품 등에 효과적으로 사용될 수 있다.
도 1은 L6 근육세포에서, 보우에아 마크로필라 과육 에탄올 추출물의 처리에 따른 p-mTOR의 단백질 발현을 측정한 결과를 보여준다.
도 2는 L6 근육세포에서, 보우에아 마크로필라 과육 에탄올 추출물의 처리에 따른 p-4EBP1과 p-P70S6K의 단백질 발현을 측정한 결과를 보여준다.
도 3은 L6 근육세포에서 보우에아 마크로필라 과육 에탄올 추출물의 처리에 따른 근육 분화 조절 유전자 MyoD와 myogenin의 mRNA 발현량을 측정한 결과를 보여준다.
도 4는 보우에아 마크로필라 과육 에탄올 추출물의 처리에 따른 PGC-1α의 활성을 측정한 결과를 보여준다.
도 5는 L6 근육세포에서 보우에아 마크로필라 과육 에탄올 추출물의 처리에 따른 운동능력향상과 관련된 유전자 PGC-1α, SIRT1, p-AMPK, PPARδ의 단백질 발현을 측정한 결과를 보여준다.
도 6은 L6 근육세포에서 보우에아 마크로필라 과육 에탄올 추출물의 처리에 따른 미토콘드리아 생합성과 관련된 유전자 PGC-1α, ERRα, Tfam, NRF-1의 mRNA발현을 측정한 결과를 보여준다.
도 2는 L6 근육세포에서, 보우에아 마크로필라 과육 에탄올 추출물의 처리에 따른 p-4EBP1과 p-P70S6K의 단백질 발현을 측정한 결과를 보여준다.
도 3은 L6 근육세포에서 보우에아 마크로필라 과육 에탄올 추출물의 처리에 따른 근육 분화 조절 유전자 MyoD와 myogenin의 mRNA 발현량을 측정한 결과를 보여준다.
도 4는 보우에아 마크로필라 과육 에탄올 추출물의 처리에 따른 PGC-1α의 활성을 측정한 결과를 보여준다.
도 5는 L6 근육세포에서 보우에아 마크로필라 과육 에탄올 추출물의 처리에 따른 운동능력향상과 관련된 유전자 PGC-1α, SIRT1, p-AMPK, PPARδ의 단백질 발현을 측정한 결과를 보여준다.
도 6은 L6 근육세포에서 보우에아 마크로필라 과육 에탄올 추출물의 처리에 따른 미토콘드리아 생합성과 관련된 유전자 PGC-1α, ERRα, Tfam, NRF-1의 mRNA발현을 측정한 결과를 보여준다.
이하, 본 발명의 구성을 구체적으로 설명한다.
본 발명은 마리안 플럼 추출물을 유효성분으로 포함하는 조성물에 관한 것이다. 상기 조성물은 마리안 플럼 추출물을 유효성분으로 포함하는 증상의 예방, 개선 또는 치료용 조성물 일 수 있다.
본 발명에서 마리안 플럼(marian plum) 이란 옻나무과(Anacardiaceae) 보우에아속 식물인 보우에아 마크로필라(Bouea macrophylla) 또는 보우에아 오포시티포리아(Bouea oppositifolia) 식물을 의미하는 것으로, 상기 식물의 과육, 잎, 또는 씨앗을 비론한 식물 전체를 포함하는 의미하고, 건조 또는 가공 된 형태를 모두 포함한다.
따라서, 본 발명의 마리안 플럼 추출물은 보우에아 마크로필라 및 보우에아 오포시티포리아로 이루어진 군에서 선택된 하나 이상의 식물의 추출물일 수 있다.
본 발명의 추출물의 제조는 상기 마리안 플럼의 모든 부위를 사용할 수 있고, 추출 부위의 제한을 받는 것은 아니다. 추출물을 제조하기 위해서는 상기 식물체 형태에 의하여 제한되지 않고, 상기 식물체는 세척, 건조 등의 전처리 또는 가공 과정을 거친 것을 모두 포함하는 의미이다. 상기 식물체의 전처리 또는 가공은 추출방식에 따라서 통상적인 방법에 따라 수행될 수 있다.
상기 추출물은 통상의 식물 추출물의 제조방법에 따라 제조된 것일 수 있다.
보다 구체적으로, 상기 추출물은 마리안 플럼 식물체로부터 액즙을 분리하는 방식으로 추출된 착즙(juice extraction) 일 수 있다. 상기 착즙은 마리안 플럼을 파쇄, 압축하는 단계를 포함하는 통상의 착즙 방법에 따라서 제조될 수 있고, 피스톤 프레스식, 스크루 프레스식, 팽창식 프레스, 터블러식 또는 원심 착즙기를 포함한 통상의 착즙기를 이용하여 수행될 수 있다.
또한, 상기 추출물은 마리안 플럼 식물체 또는 그 추출물을 압착 및/또는 증류(distillation)하여 얻어진 정유(essential oil) 일 수 있다.
또한, 상기 추출물은 불순물을 제거한 상기 마리안 플럼에 추출용매를 가하여 추출과정을 수행하거나, 추출용매로 추출하여 제조한 추출물에 분획용매를 가하여 분획하여 제조할 수 있다. 상기 추출과정은 냉침추출법, 온침추출법, 가압추출법, 초고압 추출 또는 초음파 분쇄 추출법일 수 있다.
상기 추출용매는 물, 아임계 유체, 초임계 유체 및 유기용매로 이루어진 군에서 선택된 1종 이상 일 수 있다. 상기 유기용매는 탄소수 1 내지 6의 유기용매 일 수 있고, 구체적으로 알코올(alcohol), 아세톤(acetone), 에테르(ether), 벤젠(benzene), 클로로포름(chloroform), 에틸아세테이트(ethyl acetate), 메틸렌 클로라이드(methylene chloride), 헥산(hexane), 시클로헥산(cyclohexane) 및 석유 에테르(petroleum ether)로 이루어진 군에서 선택된 하나 이상 일 수 있다.
상기 초고압 추출에 의한 초고압 추출물은 100 MPa 이상의 초고압 조건 하에서 추출, 정제된 추출물 일 수 있다.
상기 분획물은 상기 추출법으로 제조한 추출물, 구체적으로 조추출액에 분획용매를 이용하여 분획과정을 더욱 실시한 추출물 일 수 있다. 상기 분획용매는 물, 부탄올, 에틸아세테이트, 에테르, 클로로포름, 벤젠, 헥산, 메틸렌클로라이드 또는 이들의 혼합용매로부터 선택된 것 일 수 있다. 상기 분획과정은 구체적으로 상기 조추출액에 분획용매를 순서대로 가한 후에, 층 분리한 분획물들을 순차적으로 수득하는 방법으로 수행할 수 있다. 상기 분획 과정은 조추출액으로부터 분획된 분획물에 다시 분획용매를 가하는 단계를 1 회 이상 포함할 수 있다. 이러한 측면에서, 본 발명의 추출물은 마리안 플럼 추출물과 마리안 플럼 추출물의 분획물을 모두 포함하는 의미하다.
상기 추출물은 추출 또는 분획과정을 수행한 이후, 감압 여과 과정을 수행하거나 추가로 농축 및/또는 동결건조를 수행하여 용매를 제거하거나 농축 할 수 있다. 상기 수득한 추출물은 사용시까지 급속 냉동 냉장고(deep freezer)에 보관할 수 있다.
또한, 상기 마리안 플럼 추출물은 시판되고 있는 추출물을 이용할 수 있다.
본 명세서에서 '예방'이란 어떤 증상, 질병 또는 병증의 발병을 억제하거나 지연시키는 모든 행위를 의미한다. 일 예로 근육의 감소 또는 손실, 근 기능의 저하 또는 운동수행능력의 저하, 육체적 피로 회복 능력의 저하 등을 억제하거나 지연시키는 것을 의미한다.
본 명세서에서 '개선'은 어떤 증상, 질병 또는 병증 상태를 호전 또는 이롭게 변경하는 모든 행위를 의미하는 것으로, 일 예로 근육의 감소 또는 손실, 근 기능의 저하 또는 운동수행능력의 저하, 육체적 피로 회복 능력의 저하 등의 증상을 호전시키는 것을 의미한다.
본 명세서에서 '치료'는 질병 또는 병증의 진행을 지연, 중단 또는 역전시키는 모든 행위를 의미하는 것으로, 일 예로 질병 등에 의한 근육의 감소 또는 손실, 근 기능의 저하 또는 운동능력의 저하, 육체적 피로 회복 능력의 저하 등을 중단, 경감, 완화 또는 없애거나, 역전시키는 것을 의미한다.
본 발명의 조성물은 마리안 플럼 추출물 외에, 추가로 동일 또는 유사한 기능을 나타내거나, 마리안 플럼 추출물의 효과에 영향을 주지 않으면서 그 효과를 상승시킬 수 있는 성분을 1종 이상 포함할 수 있다.
본 발명의 마리안 플럼 조성물은 운동수행능력 증강용 조성물 일 수 있다.
본 명세서에서 '운동수행능력' 이란 '운동능력' 이라고도 하며, 일상생활이나 스포츠에서 볼 수 있는 신체동작으로 외형적으로 달리기, 뛰기, 던지기, 헤엄치기 등으로 구분할 때, 상기 동작을 수행하는 능력을 의미한다. 상기 용어 '운동수행능력 증강'은 운동수행능력의 개선 또는 향상을 의미하며, 구체적으로 상기 동작을 빠르게, 강하게, 정확하게, 오랫동안 할 수 있도록 개선 또는 향상 되거나, 상기 운동능력의 저하시 본래의 운동 능력 또는 본래보다 우수한 정도로 회복 되는 것을 의미한다. 상기 운동수행능력은 근력, 민첩성 및 지구력 등의 인자로 규정될 수 있다.
이러한 측면에서, 본 발명의 '운동수행능력 증강용' 조성물이란 운동수행능력 증강 효과가 있는 물질을 유효성분으로 포함하는 조성물로, 운동수행능력의 저하를 예방하거나, 저하된 운동수행능력을 다시 증강시켜 치료 할 수 있다는 측면에서 '운동수행능력 저하 예방 또는 치료용' 조성물 일 수 있다. 상기 조성물은 약학 조성물, 식품 조성물 및 의약외품 조성물을 포함한다.
상기 운동수행능력 증강용 약학 조성물 이란 바람직하게는 운동수행능력 저하를 예방하는 저하 예방 또는 치료용 약학 조성물 일 수 있다. 보다 구체적으로, 대사성 질환, 퇴행성 질환, 미토콘드리아 이상 질환, 노화, 지구력 저하증, 순발력 저하증, 무기력증, 근육 폐기 및 우울증으로 이루어진 군에서 선택된 어느 하나의 질병에 의해 나타나는 운동수행능력 저하의 예방 또는 치료용 조성물 일 수 있다.
본 발명의 마리안 플럼 조성물은 근기능 개선 또는 근육 증가 촉진용 조성물 일 수 있다.
본 명세서에서, '근'은 근육과 같은 의미로, 힘줄과 살을 포괄적으로 지칭하는 것으로, '근 기능'은 근육의 수축에 의해 힘을 발휘하는 능력을 의미하며, 근육이 저항을 이겨내기 위하여 최대한으로 수축력을 발휘할 수 있는 능력인 근력, 근육이 주어진 중량에 얼마나 오랫동안 또는 얼마나 여러 번 수축과 이완을 반복할 수 있는지를 나타내는 능력인 근지구력, 단시간 내에 강한 힘을 발휘하는 능력인 순발력을 포함한다. 이러한 근 기능은 간이 주관하며, 근육량에 비례한다. 또한, 용어 '근 기능 개선'은 근 기능을 더 좋게 향상시키는 것을 말한다.
본 명세서에서 '근육 증가'란 체내 근육의 중량 또는 체내 근육이 차지하는 함량이 증가되는 것을 의미하며, '근육 증가 촉진'이란 근육의 증가와 관련된 생리활성 기작등이 활발해지는 작용을 통하여 상기 근육량의 증가를 더욱 빠르고 활발하게 하는 효과를 의미한다.
이러한 측면에서 본 명세서에서 '근 기능 개선용 조성물' 또는 '근육 증가 촉진용 조성물' 이란 근 기능 개선 또는 근육 증가 촉진 효과가 있는 물질을 유효성분으로 포함하는 조성물로, 약학 조성물, 식품 조성물 및 의약외품 조성물을 포함한다.
상기 약학 조성물은 마리안 플럼 추출물을 유효성분으로 포함하는 근 기능 또는 근육의 감소, 소모 또는 퇴화 질환 예방 또는 치료용 약학 조성물 일 수 있다.
상기 근육 감소, 소모 또는 퇴화는 유전적 요인, 후천적 요인 또는 노화 등을 원인하여 발생하며, 상기 근육 감소 또는 근육 소모는 근육량의 점진적 손실, 근육 특히 골격근 또는 수의근 및 심장근육의 약화 및 퇴행 증상을 나타낸다.
상기 근 기능 손상, 근육의 감소, 소모 또는 퇴화 질환과 관련된 질환으로 근위축증(muscular atrophy), 근이영양증(muscular dystrophy), 근육 퇴화, 근무력증, 악액질(Cachexia) 및 근육감소증(Sacopenia) 을 포함하며, 이에 제한되는 것은 아니다.
일 실험예에서, 본 발명의 마리안 플럼 추출물을 처리한 경우 mTOR의 활성을 촉진하여 단백질 합성을 유도하는 신호전달 반응을 활성화 함으로써 근 단백질의 합성을 유도하여 근육량을 증가시킬 수 있음을 실험적으로 확인 하였다. 또한, 근육세포의 분화와 관련된 MyoD와 myogenin의 활성을 촉진하여 근관세포로의 분화를 증가시켜 근육 형성을 촉진하는 효과가 있음을 실험적으로 확인하였다.
본 발명의 마리안 플럼 조성물은 항 피로용 조성물 일 수 있다.
본 명세서에서 '피로' 운동 수행 후 근육에 누적되는 육체적 피로를 의미하는 것으로, 이는 근육 내 리코겐 농도, 젖산 디하이드로게나제 활성 및 구연산 합성효소 활성에 의해 유발되는 것 일 수 있다.
일 실험예에서, 마리안 플럼 추출물을 처리한 경우 제1형 골격근섬유의 전사를 촉진하는 PPARδ 발현을 증가시켜 근육 내 항피로 효과가 있음을 확인 하였다.
본 발명에 있어서, 상기 조성물은 식품 조성물 일 수 있다.
따라서, 본 발명의 조성물은 식품 제형 제조를 위해 사용될 수 있다.
상기 식품 조성물은 바람직하게는 바람직하게는 마리안 플럼 추출물을 유효성분으로 포함하는 운동수행능력 증강용, 근 기능 개선 또는 근육 증가 촉진용 또는 항피로용 식품 조성물 일 수 있다. 또는, 마리안 플럼 추출물을 유효성분으로 포함하는 운동수행능력 저하 예방 또는 개선용; 근 기능 또는 근육 감소, 손실 또는 퇴화 예방 또는 개선용; 또는 피로 회복 능력 저하의 예방 또는 개선용 식품 조성물일 수 있다.
본 발명의 식품 조성물은 기능성 식품(functional food), 영양 보조제(nutritional supplement), 건강식품(health food), 식품 첨가제(food additives), 의료식품(medical food) 및 사료 등의 모든 형태를 포함하며, 인간 또는 가축을 모두 포함하는 동물을 취식대상으로 한다.
상기 의료식품은 환자용식품이라고도하고, 특수영양식품이라고도 하고, 정상적으로 섭취, 소화, 흡수 또는 대사할 수 있는 능력이 제한되거나 손상된 환자 또는 질병이나 임상적 상태로 인하여 일반인과 생리적으로 특별히 다른 영양요구량을 가진 사람의 식사의 일부 또는 전부를 대신할 목적으로 이들에게 경구 또는 경관급식을 통하여 공급할 수 있도록 제조ㆍ가공된 형태의 환자용 식품, 영ㆍ유아용 특수조제식품을 의미한다.
상기 식품 조성물은 당업계에 공지된 통상적인 방법에 따라 다양한 형태로 제조할 수 있다. 일반 식품으로는 이에 한정되지 않지만 음료(알콜성 음료 포함), 과실 및 그의 가공식품(예: 과일통조림, 병조림, 잼, 마아말레이드 등), 어류, 육류 및 그 가공식품(예: 햄, 소시지 콘비이프 등), 빵류 및 면류(예: 우동, 메밀국수, 라면, 스파게이트, 마카로니 등), 과즙, 각종 드링크, 쿠키, 엿, 유제품(예: 버터, 치이즈 등), 식용식물 유지, 마아가린, 식물성 단백질, 레토르트 식품, 냉동식품, 각종 조미료(예: 된장, 간장, 소스 등) 등에 상기 마리안 플럼 추출물을 첨가하여 제조할 수 있다.
또한, 영양보조제로는 이에 한정되지 않지만 캡슐, 타블렛, 환 등에 상기 마리안 플럼 추출물을 첨가하여 제조할 수 있다.
또한, 건강기능식품으로는 이에 한정되지 않지만 예를 들면, 상기 마리안 플럼 추출물 자체를 차, 쥬스 및 드링크의 형태로 제조하여 음용(건강음료)할 수 있도록 액상화, 과립화, 캡슐화 및 분말화하여 섭취할 수 있다. 또한, 상기 마리안 플럼 추출물을 식품 첨가제의 형태로 사용하기 위해서는 분말 또는 농축액 형태로 제조하여 사용할 수 있다. 또한, 상기 마리안 플럼 추출물과 근 기능 개선, 근육 증강, 운동수행능력 증강 또는 항피로 효과가 있다고 알려진 공지의 활성 성분과 함께 혼합하여 조성물의 형태로 제조할 수 있다.
본 발명의 식품 조성물이 건강음료 조성물로 이용되는 경우, 상기 건강음료 조성물은 통상의 음료와 같이 여러 가지 향미제 또는 천연 탄수화물 등을 추가 성분으로 함유할 수 있다. 상술한 천연 탄수화물은 포도당, 과당과 같은 모노사카라이드; 말토스, 수크로스와 같은 디사카라이드; 덱스트린, 사이클로덱스트린과 같은 폴리사카라이드; 자일리톨, 소르비톨, 에리트리톨 등의 당알콜일 수 있다. 감미제는 타우마틴, 스테비아 추출물과 같은 천연 감미제; 사카린, 아스파르탐과 같은 합성 감미제 등을 사용할 수 있다. 상기 천연 탄수화물의 비율은 본 발명의 조성물 100 mL 당 일반적으로 약 0.01 ∼ 0.04 g, 바람직하게는 약 0.02 ∼ 0.03 g 이다.
마리안 플럼 추출물은 전체 식품 조성물 총 중량에 대하여 0.01 내지 100 중량%로 포함될 수 있다. 또한, 본 발명의 식품 조성물은 마리안 플럼 추출물과 함께 근 기능 개선, 근육 증강, 운동수행능력 증강 또는 항피로 효과가 있는 것으로 알려진 다른 활성 성분과 함께 혼합하여 제조될 수 있다.
상기 외에 본 발명의 건강식품은 여러 가지 영양제, 비타민, 전해질, 풍미제, 착색제, 펙트산, 펙트산의 염, 알긴산, 알긴산의 염, 유기산, 보호성 콜로이드 증점제, pH 조절제, 안정화제, 방부제, 글리세린, 알코올 또는 탄산화제 등을 함유할 수 있다. 그 밖에 본 발명의 건강식품은 천연 과일주스, 과일주스 음료, 또는 야채 음료의 제조를 위한 과육을 함유할 수 있다. 이러한 성분은 독립적으로 또는 혼합하여 사용할 수 있다. 이러한 첨가제의 비율은 크게 중요하진 않지만 본 발명의 조성물 100 중량부당 0.01 ~ 0.1 중량부의 범위에서 선택되는 것이 일반적이다.
본 발명에 있어서, 상기 조성물은 약학 조성물 일 수 있다. 바람직하게는 질병의 예방 또는 치료용 약학조성물 일 수 있다.
상기 약학 조성물은 의약 제형 제조를 위해 사용할 수 있다.
상기 약학 조성물은 추가로 동일 또는 유사한 기능을 나타내는 유효성분을 1종 이상 함유할 수 있다. 예컨대, 근육의 감소 또는 손실, 근 기능의 저하 또는 운동수행능력의 저하, 피로 회복 능력의 저하를 예방 또는 치료 할 수 있는 성분을 포함할 수 있을 것이다. 추가적인 예방 또는 치료 성분을 포함하게 되면 본 발명의 조성물의 효과는 더욱 증진될 수 있다. 상기 성분 추가 시에는 복합 사용에 따른 안전성, 제형화의 용이성, 유효성분들의 안정성이 고려될 수 있다. 추가의 성분은 전체 조성물 중량에 대하여 0.0001 중량% 내지 10 중량%로 포함될 수 있다. 예를 들어, 0.0001 중량% 내지 1 중량%, 0.0001 중량% 내지 0.1 중량%, 0.0001 중량% 내지 0.01 중량%, 0.0001 중량% 내지 0.001 중량%, 0.001 중량% 내지 10 중량%, 0.001 중량% 내지 1 중량%, 0.001 중량% 내지 0.1 중량%, 0.001 중량% 내지 0.01 중량%, 0.01 중량% 내지 10 중량%, 0.01 중량% 내지 1 중량%, 0.01 중량% 내지 0.1 중량%, 0.1 중량% 내지 10 중량%, 0.1 중량% 내지 1 중량%일 수 있다. 상기 함량 범위는 안전성, 상기 마리안 플럼 추출물의 제형화 시의 용이성 등의 요건에 따라 조절될 수 있다.
본 발명의 조성물은 약학적으로 허용 가능한 담체를 더 포함할 수 있다. 상기 약학적으로 허용 가능한 담체는 완충액, 주사용 멸균수, 일반 식염수 또는 인산염 완충 식염수, 슈크로스, 히스티딘, 염 및 폴리솔베이트 등과 같은 여러 성분을 함유할 수 있고, 이에 제한되는 것은 아니다.
본 발명의 조성물은 경구 또는 비경구로 투여할 수 있으며, 일반 약학 제제의 형태, 예를 들어, 임상 투여 시 경구 및 비경구의 여러 가지 제형으로 투여될 수 있는데, 제제화할 경우에는 보통 사용하는 충진제, 증량제, 결합제, 습윤제, 붕해제, 계면활성제 등의 희석제 또는 부형제를 사용하여 조제될 수 있다.
상기 경구 투여를 위한 고형제제에는 정제, 환제, 산제, 과립제, 캡슐제 등이 포함되며, 이러한 고형제제는 본 발명의 의약 조성물에 적어도 하나 이상의 부형제 예를 들면, 전분, 칼슘 카보네이트(Calcium carbonate), 수크로스(Sucrose) 또는 락토오스(Lactose), 젤라틴 등을 섞어 조제될 수 있다.
상기 단순한 부형제 이외에 마그네슘 스티레이트 탈크 같은 윤활제들도 사용될 수 있다. 경구를 위한 액상 제제로는 현탁제, 내용액제, 유제, 시럽제 등이 해당되는데 흔히 사용되는 단순희석제인 물, 리퀴드 파라핀 이외에 여러가지 부형제, 예를 들면 습윤제, 감미제, 방향제, 보존제 등이 포함될 수 있다.
비경구 투여를 위한 제제에는 멸균된 수용액, 비수성용제, 현탁제, 유제, 동결건조제제, 좌제가 포함된다. 비수성용제, 현탁용제로는 프로필렌 글리콜(Propylene glycol), 폴리에틸렌 글리콜, 올리브 오일과 같은 식물성 기름, 에틸올레이트와 같은 주사 가능한 에스테르 등이 사용될 수 있다. 좌제의 기제로는 위텝솔(witepsol), 마크로골, 트윈(tween) 61, 카카오지, 라우린지, 글리세로제라틴 등이 사용될 수 있다.
본 발명의 약학 조성물은 마리안 추출물을 유효량으로 포함할 때 예방 또는 치료 효과를 제공할 수 있다. 본 발명에 있어서, '유효량'이라 함은 근육 감소 또는 퇴화, 운동수행능력 저하, 피로회복 능력 감소 등을 예방, 치료, 개선 하거나, 근육량 증가 촉진, 운동수행능력 증강 또는 항피로 활성을 증진시킬 수 있는 추출물의 양을 의미한다. 본 발명의 조성물이 유효량의 상기 마리안 플럼 추출물을 포함할 때 바람직한 질환의 예방 또는 치료 효과를 제공할 수 있다. 본 발명의 조성물에 포함되는 상기 마리안 플럼 추출물의 유효량은 조성물이 제품화되는 형태, 상기 화합물이 생체 내에 적용되는 방법 및 생체 내에 머무르는 시간 등에 따라 달라질 것이다. 따라서, 일일 투여량은 상기 마리안 플럼 추출물의 양을 기준으로 0.1 내지 100 ㎎/㎏이고, 바람직하게는 30 내지 80 ㎎/㎏이고, 더욱 바람직하게는 50 내지 60 mg/kg이며, 하루 1 ∼ 6 회 투여될 수 있다.
본 발명의 조성물은 단독으로, 또는 수술, 방사선 치료, 호르몬 치료, 화학 치료 및 생물학적 반응조절제를 사용하는 방법들과 병용하여 사용할 수 있다.
본 발명의 조성물은 외용제 제형 제조를 위해 사용할 수 있다.
상기 외용제는 피부에 직접 도포할 수 있는 것일 수 있다. 본 발명의 조성물을 외용제로 사용하는 경우, 추가로 지방 물질, 유기 용매, 용해제, 농축제 및 겔화제, 연화제, 항산화제, 현탁화제, 안정화제, 발포제(foaming agent), 방향제, 계면활성제, 물, 이온형 유화제, 비이온형 유화제, 충전제, 금속이온봉쇄제, 킬레이트화제, 보존제, 비타민, 차단제, 습윤화제, 필수 오일, 염료, 안료, 친수성 활성제, 친유성 활성제 또는 지질 소낭 등 피부 외용제에 통상적으로 사용되는 임의의 다른 성분과 같은 피부 과학 분야에서 통상적으로 사용되는 보조제를 함유할 수 있다. 또한 상기 성분들은 피부 과학 분야에서 일반적으로 사용되는 양으로 도입될 수 있다.
본 발명의 조성물이 외용제로 제공될 경우, 이에 제한되는 것은 아니나, 연고, 패취, 겔, 크림 또는 분무제 등의 제형일 수 있다. 본 발명의 일 구현예에 따르면, 마리안 플럼 추출물은 연고제, 마스크, 습포제, 첩부제 또는 경피흡수제 등에 사용 될 수 있다.
본 발명에 있어서, 상기 조성물은 의약외품 조성물 일 수 있다.
상기 의약외품 조성물은 바람직하게는 마리안 플럼 추출물을 유효성분으로 포함하는 운동수행능력 증강용, 근 기능 개선 또는 근육 증가 촉진용 또는 항피로용 의약외품 조성물 일 수 있다.
본 발명의 조성물을 의약외품 조성물로 사용하는 경우, 마리안 플럼 추출물을 그대로 첨가하거나 다른 의약외품 성분과 함께 통상적인 방법에 따라 적절하게 사용될 수 있다. 유효성분의 혼합양은 사용 목적(예방, 건강 또는 치료적 처치)에 따라 적합하게 결정될 수 있다.
상기 의약외품 조성물에 대하여 식품 조성물 약학 조성물에 대한 내용이 준용될 수 있다.
이하, 본 출원을 실시예 및 실험예를 통해 상세히 설명한다. 하기 실시예 및 실험예는 본 출원을 예시하는 것일 뿐 본 출원의 범위가 하기 실시예 및 실험예에 한정되는 것은 아니다.
[실시예 1] 보우에아 마크로필라 과육 추출물 제조
1) 보우에아 마크로필라 과육 에탄올 추출물 제조
건조된 보우에아 마크로필라 과육을 믹서로 분쇄한 다음, 분쇄한 보우에아 마크로필라 과육 100 g을 100% 에탄올 1 L에 넣고 50℃에서 3시간 동안 추출하였다. 추출된 시료는 와트만(Whatman) 2번 여과지로 감압여과하고, 여과된 추출액을 진공 회전 농축기로 농축하여 용매성분을 제거한 후 보우에아 마크로필라 과육 에탄올 추출물을 얻었다.
2) 보우에아 마크로필라 과육 50% 에탄올 추출물 제조
상기 실시예 1-1과 동일한 방법으로 실시하되, 상기 100% 에탄올 대신 70%(w/w)의 에탄올 수용액을 이용하여 보우에아 마크로필라 과육 50% 에탄올 추출물을 얻었다.
3) 보우에아 마크로필라 과육 열수 추출물 제조
상기 실시예 1-1과 동일한 방법으로 실시하되, 상기 100% 에탄올 대신 물을 이용하고, 50℃ 대신 80℃의 온도에서 추출함으로써 보우에아 마크로필라 과육 열수 추출물을 얻었다.
4) 보우에아 마크로필라 과육 에틸아세테이트 추출물 제조
상기 실시예 1-1과 동일한 방법으로 실시하되, 상기 100% 에탄올 대신 100% 에틸아세테이트를 이용하여 보우에아 마크로필라 과육 에틸아세테이트 추출물을 얻었다.
5) 보우에아 마크로필라 과육 초고압 추출물 제조
건조시킨 보우에아 마크로필라 과육을 믹서로 분쇄한 다음, 분쇄한 보우에아 마크로필라 과육 시료 1 g과 18% 에탄올 76 mL을 폴리에틸렌(polyethylene) 팩에 넣고 밀봉한 후 초고압 추출장치(Frescal MFP-7000; Mitsubishi Heavy Industries, Tokyo, Japan)를 이용하여 추출하였다. 초고압 추출조건은 추출 압력이 320 MPa, 추출 시간은 5 분이었다. 추출된 시료는 와트만 2번 여과지로 여과하고, 여과된 추출액을 진공 회전 농축기로 농축하여 용매성분을 제거함으로써 보우에아 마크로필라 과육 초고압 추출물을 얻었다.
6) 보우에아 마크로필라 과육 초임계 추출물 제조
건조시킨 보우에아 마크로필라 과육을 믹서로 분쇄한 다음, 분쇄한 보우에아 마크로필라 과육 1 g을 시료 카트리지에 충전하고, 초임계 장치(SFX 3560, Isco Inc., Lincoln, NE, USA)를 이용하여 추출하였다. 이때, 초임계 유체 추출 조건은 추출 압력이 40 MPa, 추출 온도는 50, 초임계 이산화탄소의 유속은 60 mL/min, 추출 시간은 60 min이었다. 초임계 추출이 완료된 후, 추출 장치의 압력을 낮춰 초임계 유체 상태를 해제함으로써 보우에아 마크로필라 과육 초임계 추출물을 얻었다.
7) 보우에아 마크로필라 과육 아임계 추출물 제조
분쇄한 보우에아 마크로필라 과육 50 g을 1 L 물과 함께 아임계 추출장치(Biovan, Gyeonggi, Korea)의 아임계수 반응기에 넣고 밀폐하였다. 밀폐 후, 반응기의 온도를 200℃, 압력은 20 MPa로 상승시켰으며, 반응기의 온도가 200℃에 도달하면 상기 온도를 20분간 유지하여 추출을 하였다. 20분 후 추출물의 냉각수가 공급되는 저장탱크로 이송하여 30℃까지 급속 냉각시킨 후, 부유 잔사를 분리하기 위해 3,600 rpm으로 30분 동안 원심분리하여 상등액만 취하였다. 이후, 동결건조기(ilShin Lab Co. Ltd., Seoul, Korea)를 이용하여 물을 전부 제거함으로써 보우에아 마크로필라 과육 아임계 추출물을 제조하였다.
[실시예 2] 보우에아 마크로필라 씨앗 추출물 제조
1) 보우에아 마크로필라 씨앗 에탄올 추출물 제조
보우에아 마크로필라 씨앗을 사용한 것을 제외하고는 실시예 1-1의 제조방법과 동일한 방법으로 보우에아 마크로필라 씨앗 에탄올 추출물을 제조하였다.
2) 보우에아 마크로필라 씨앗 50% 에탄올 추출물 제조
보우에아 마크로필라 씨앗을 사용한 것을 제외하고는 실시예 1-2의 제조방법과 동일한 방법으로 보우에아 마크로필라 씨앗 50% 에탄올 추출물을 제조하였다.
3) 보우에아 마크로필라 씨앗 열수 추출물 제조
보우에아 마크로필라 씨앗을 사용한 것을 제외하고는 실시예 1-3의 제조방법과 동일한 방법으로 보우에아 마크로필라 씨앗 열수 추출물을 제조하였다.
4) 보우에아 마크로필라 씨앗 헥산 추출물 제조
보우에아 마크로필라 씨앗과 헥산을 사용한 것을 제외하고는 실시예 1-4의 제조방법과 동일한 방법으로 보우에아 마크로필라 씨앗 헥산 추출물을 제조하였다.
5) 보우에아 마크로필라 씨앗 초고압 추출물 제조
보우에아 마크로필라 씨앗을 사용한 것을 제외하고는 실시예 1-5의 제조방법과 동일한 방법으로 보우에아 마크로필라 씨앗 초고압 추출물을 제조하였다.
6) 보우에아 마크로필라 씨앗 초임계 추출물 제조
보우에아 마크로필라 씨앗을 사용한 것을 제외하고는 실시예 1-6의 제조방법과 동일한 방법으로 보우에아 마크로필라 씨앗 초임계 추출물을 제조하였다.
7) 보우에아 마크로필라 씨앗 아임계 추출물 제조
보우에아 마크로필라 씨앗을 사용한 것을 제외하고는 실시예 1-7의 제조방법과 동일한 방법으로 보우에아 마크로필라 씨앗 아임계 추출물을 제조하였다.
[실시예 3] 보우에아 마크로필라 잎 추출물 제조
1) 보우에아 마크로필라 잎 에탄올 추출물 제조
보우에아 마크로필라 잎을 사용한 것을 제외하고는 실시예 1-1의 제조방법과 동일한 방법으로 보우에아 마크로필라 잎 에탄올 추출물을 제조하였다.
2) 보우에아 마크로필라 잎 50% 에탄올 추출물 제조
보우에아 마크로필라 잎을 사용한 것을 제외하고는 실시예 1-2의 제조방법과 동일한 방법으로 보우에아 마크로필라 잎 50% 에탄올 추출물을 제조하였다.
3) 보우에아 마크로필라 잎 열수 추출물 제조
보우에아 마크로필라 잎을 사용한 것을 제외하고는 실시예 1-3의 제조방법과 동일한 방법으로 보우에아 마크로필라 잎 열수 추출물을 제조하였다.
4) 보우에아 마크로필라 잎 에틸아세테이트 추출물의 제조
보우에아 마크로필라 잎을 사용한 것을 제외하고는 실시예 1-4의 제조방법과 동일한 방법으로 보우에아 마크로필라 잎 에틸아세테이트 추출물을 제조하였다.
5) 보우에아 마크로필라 잎 초고압 추출물 제조
보우에아 마크로필라 잎을 사용한 것을 제외하고는 실시예 1-5의 제조방법과 동일한 방법으로 보우에아 마크로필라 잎 초고압 추출물을 제조하였다.
6) 보우에아 마크로필라 잎 초임계 추출물 제조
보우에아 마크로필라 잎을 사용한 것을 제외하고는 실시예 1-6의 제조방법과 동일한 방법으로 보우에아 마크로필라 잎 초임계 추출물을 제조하였다.
7) 보우에아 마크로필라 잎 아임계 추출물 제조
보우에아 마크로필라 잎을 사용한 것을 제외하고는 실시예 1-7의 제조방법과 동일한 방법으로 보우에아 마크로필라 잎 아임계 추출물을 제조하였다.
[실시예 4] 보우에아 오포시티폴리아 과육 추출물 제조
1) 보우에아 오포시티폴리아 과육 에탄올 추출물 제조
보우에아 오포시티폴리아 과육을 사용한 것을 제외하고는 실시예 1-1의 제조방법과 동일한 방법으로 보우에아 오포시티폴리아 과육 에탄올 추출물을 제조하였다.
2) 보우에아 오포시티폴리아 과육 50% 에탄올 추출물 제조
보우에아 오포시티폴리아 과육을 사용한 것을 제외하고는 실시예 1-2의 제조방법과 동일한 방법으로 보우에아 오포시티폴리아 과육 50% 에탄올 추출물을 제조하였다.
3) 보우에아 오포시티폴리아 과육 열수 추출물 제조
보우에아 오포시티폴리아 과육을 사용한 것을 제외하고는 실시예 1-3의 제조방법과 동일한 방법으로 보우에아 오포시티폴리아 과육 열수 추출물을 제조하였다.
4) 보우에아 오포시티폴리아 과육 에틸아세테이트 추출물의 제조
보우에아 오포시티폴리아 과육을 사용한 것을 제외하고는 실시예 1-4의 제조방법과 동일한 방법으로 보우에아 오포시티폴리아 과육 에틸아세테이트 추출물을 제조하였다.
5) 보우에아 오포시티폴리아 과육 초고압 추출물 제조
보우에아 오포시티폴리아 과육을 사용한 것을 제외하고는 실시예 1-5의 제조방법과 동일한 방법으로 보우에아 오포시티폴리아 과육 초고압 추출물을 제조하였다.
6) 보우에아 오포시티폴리아 과육 초임계 추출물 제조
보우에아 오포시티폴리아 과육을 사용한 것을 제외하고는 실시예 1-6의 제조방법과 동일한 방법으로 보우에아 오포시티폴리아 과육 초임계 추출물을 제조하였다.
7) 보우에아 오포시티폴리아 과육 아임계 추출물 제조
보우에아 오포시티폴리아 과육을 사용한 것을 제외하고는 실시예 1-7의 제조방법과 동일한 방법으로 보우에아 오포시티폴리아 과육 아임계 추출물을 제조하였다.
[실시예 5] 보우에아 오포시티폴리아 씨앗 추출물 제조
1) 보우에아 오포시티폴리아 씨앗 에탄올 추출물 제조
보우에아 오포시티폴리아 씨앗을 사용한 것을 제외하고는 실시예 1-1의 제조방법과 동일한 방법으로 보우에아 오포시티폴리아 씨앗 에탄올 추출물을 제조하였다.
2) 보우에아 오포시티폴리아 씨앗 50% 에탄올 추출물 제조
보우에아 오포시티폴리아 씨앗을 사용한 것을 제외하고는 실시예 1-2의 제조방법과 동일한 방법으로 보우에아 오포시티폴리아 씨앗 50% 에탄올 추출물을 제조하였다.
3) 보우에아 오포시티폴리아 씨앗 열수 추출물 제조
보우에아 오포시티폴리아 씨앗을 사용한 것을 제외하고는 실시예 1-3의 제조방법과 동일한 방법으로 보우에아 오포시티폴리아 씨앗 열수 추출물을 제조하였다.
4) 보우에아 오포시티폴리아 씨앗 헥산 추출물 제조
보우에아 오포시티폴리아 씨앗과 헥산을 사용한 것을 제외하고는 실시예 1-4의 제조방법과 동일한 방법으로 보우에아 오포시티폴리아 씨앗 헥산 추출물을 제조하였다.
5) 보우에아 오포시티폴리아 씨앗 초고압 추출물 제조
보우에아 오포시티폴리아 씨앗을 사용한 것을 제외하고는 실시예 1-5의 제조방법과 동일한 방법으로 보우에아 오포시티폴리아 씨앗 초고압 추출물을 제조하였다.
6) 보우에아 오포시티폴리아 씨앗 초임계 추출물 제조
보우에아 오포시티폴리아 씨앗을 사용한 것을 제외하고는 실시예 1-6의 제조방법과 동일한 방법으로 보우에아 오포시티폴리아 씨앗 초임계 추출물을 제조하였다.
7) 보우에아 오포시티폴리아 씨앗 아임계 추출물 제조
보우에아 오포시티폴리아 씨앗을 사용한 것을 제외하고는 실시예 1-7의 제조방법과 동일한 방법으로 보우에아 오포시티폴리아 씨앗 아임계 추출물을 제조하였다.
[실시예 6] 보우에아 오포시티폴리아 잎 추출물 제조
1) 보우에아 오포시티폴리아 잎 에탄올 추출물 제조
보우에아 오포시티폴리아 잎을 사용한 것을 제외하고는 실시예 1-1의 제조방법과 동일한 방법으로 보우에아 오포시티폴리아 잎 에탄올 추출물을 제조하였다.
2) 보우에아 오포시티폴리아 잎 50% 에탄올 추출물 제조
보우에아 오포시티폴리아 잎을 사용한 것을 제외하고는 실시예 1-2의 제조방법과 동일한 방법으로 보우에아 오포시티폴리아 잎 50% 에탄올 추출물을 제조하였다.
3) 보우에아 오포시티폴리아 잎 열수 추출물 제조
보우에아 오포시티폴리아 잎을 사용한 것을 제외하고는 실시예 1-3의 제조방법과 동일한 방법으로 보우에아 오포시티폴리아 잎 열수 추출물을 제조하였다.
4) 보우에아 오포시티폴리아 잎 에틸아세테이트 추출물의 제조
보우에아 오포시티폴리아 잎을 사용한 것을 제외하고는 실시예 1-4의 제조방법과 동일한 방법으로 보우에아 오포시티폴리아 잎 에틸아세테이트 추출물을 제조하였다.
5) 보우에아 오포시티폴리아 잎 초고압 추출물 제조
보우에아 오포시티폴리아 잎을 사용한 것을 제외하고는 실시예 1-5의 제조방법과 동일한 방법으로 보우에아 오포시티폴리아 잎 초고압 추출물을 제조하였다.
6) 보우에아 오포시티폴리아 잎 초임계 추출물 제조
보우에아 오포시티폴리아 잎을 사용한 것을 제외하고는 실시예 1-6의 제조방법과 동일한 방법으로 보우에아 오포시티폴리아 잎 초임계 추출물을 제조하였다.
7) 보우에아 오포시티폴리아 잎 아임계 추출물 제조
보우에아 오포시티폴리아 잎을 사용한 것을 제외하고는 실시예 1-7의 제조방법과 동일한 방법으로 보우에아 오포시티폴리아 잎 아임계 추출물을 제조하였다.
[실험예 1] 보우에아 마크로필라 추출물 처리에 따른 근 기능에 관여하는 주요 유전자의 단백질 발현 증가효과 확인
L6 근육모세포(L6 myoblast, ATCC, Manassas, VA, USA)를 10% FBS(fetal bovine serum; Hyclone, Logan, UT, USA)를 포함하는 DMEM(Dulbecco's modified Eagle's media; Hyclone)이 담긴 6-웰 플레이트에 1ㅧ 105 세포/웰(cells/well)이 되도록 넣었다.
세포밀도가 약 80~85%가 되었을 때, 웰에 있는 배지를 제거하고 2% HS (Horse serum; Hyclone)가 함유된 DMEM (Hyclone)에 상기 실시예 1-1에서 제조한 보우에아 마크로필라 과육 에탄올 추출물 10, 40 μg/mL를 각각 녹인 후, 세포에 처리하여 근관세포(myotube) 분화를 유도하였다. 이 때, 추출물 대신 0.01% DMSO를 처리한 군을 대조군으로 하였다. 이 과정을 2일 1번씩 총 3번 배지를 교환하여 6일 동안 분화시킨 후, 단백질 가수분해효소 억제제 칵테일(proteinase inhibitor cocktail, Sigma, St. Louis, MO, USA)이 포함된 NP-40 완충용액(ELPIS-Biotech, Daejeon, Korea)으로 용해시켰다. 완충용액에 용해된 세포를 1.5 mL 튜브(tube)로 옮겨 13,000rpm으로 10 분간 원심분리한 후 상등액만을 취하였다. 상기에서 얻은 상등액을 브래드포드(Bradford, Bio-Rad Laboratories Inc., Hercules, CA, USA)법을 이용하여 정량 하였다. 정량된 단백질을 5분간 끓인 후 10% SDS-PAGE로 전기영동하여 분리하였으며, 분리된 단백질들을 니트로셀룰로스 막으로 전달하였다. p-mTOR 1차 항체를 2.5% BSA(bovine serum albumin; bioWORLD, Dublin, OH, USA)에 1:1000의 비율로 희석하여 니트로셀룰로스 막에 전달된 단백질과 20시간 동안 상온에서 반응시켰다. 1차 항체를 반응시킨 다음 TBST(Tris-buffer Saline Tween20)를 이용하여 니트로셀룰로스 막을 10 분간 3회 세척하였다. 세척 후, 1차 항체를 인지하는 2차 항체(anti-goat horseradish)를 2.5% BSA에 1:5000이 되도록 희석하여 니트로셀룰로스 막과 2 시간 동안 상온에서 반응시켰으며, TBST를 이용하여 10 분씩 3회에 걸쳐 세척하였다. 단백질 밴드(Protein band)는 ECL 웨스턴블롯 검출시약(ECL western blotting detection reagents, Amersham, Tokyo, Japan)을 이용하여 발색하였으며, G;BOX EF 이미징 시스템(G;BOX EF imaging system, Syngene, Cambridge, UK)을 이용하여 발색된 단백질 밴드(Protein band)를 확인하였다. 그 결과를 도 1에 나타내었다.
도 1에 나타낸 바와 같이 보우에아 마크로필라 과육 에탄올 추출물의 처리에 의해 L6 근육모세포에서 근 기능 개선에 관여하는 주요 유전자 p-mTOR의 발현량이 증가한 것을 확인할 수 있었다. 이는 본 발명의 보우에아 마크로필라 과육 에탄올 추출물이 근육세포 내에서 p-mTOR의 단백질 발현량을 증가시킴으로써 근육 생성을 증가시키는 능력이 있음을 의미한다.
[실험예 2] 보우에아 마크로필라 추출물 처리에 따른 근육 생성에 관여 주요 유전자의 단백질 발현 증가효과 확인
L6 근육모세포(L6 myoblast, ATCC)를 10% FBS (Hyclone)가 함유된 DMEM (Hyclone)와 함께 6-웰 플레이트에 1 ㅧ 105 세포/웰이 되도록 넣었다. 세포밀도가 약 80 내지 85%가 되었을 때, 웰에 있는 배지를 제거하고 2% HS (Hyclone)가 함유된 DMEM에 상기 실시예 1-1에서 제조한 보우에아 마크로필라 과육 에탄올 추출물 10, 40 μg/mL를 각각 녹인 후, 세포에 처리하여 근관세포(myotube) 분화를 유도하였다. 이 때, 추출물 대신 0.01% DMSO를 처리한 군을 대조군으로 하였다. 이 과정을 2일 1번씩 총 3번 배지를 교환하여 6일 동안 분화시킨 후, 단백질 가수분해효소 저해제 칵테일(proteinase inhibitor cocktail, Sigma)이 포함된 NP-40 완충용액(ELPIS-Biotech)으로 용해시켰다. 완충용액에 용해된 세포를 1.5 mL 튜브(tube)로 옮겨 13,000rpm으로 10분간 원심분리하여 상등액만을 취하였다. 상등액을 브래드포드(Bradford)법을 이용하여 정량하였다. 정량된 단백질을 5분간 끓인 후 10% SDS-PAGE로 전기영동하여 분리하였으며, 분리된 단백질들을 니트로셀룰로스 막으로 전달하였다. p-4EBP1과 p-P70S6K 1차 항체를 2.5% BSA(bioWORLD)에 1:1000의 비율로 희석하여 니트로셀룰로스 막에 전달된 단백질과 20시간 동안 상온에서 반응시켰다. 1차 항체를 반응시킨 다음 TBST 완충액을 이용하여 니트로셀룰로스 막을 10분간 3회 세척하였다. 세척 후, 1차 항체를 인지하는 2차 항체(anti-goat horseradish)를 2.5% BSA에 1:5000이 되도록 희석하여 니트로셀룰로스 막과 2시간 동안 상온에서 반응시켰으며, TBST 완충액을 이용하여 10분씩 3회에 걸쳐 세척하였다. 단백질 밴드(Protein band)는 ECL 웨스턴 블롯 검출 시약(western blotting detection reagent, Amersham)를 사용하여 발색하였으며, G;BOX EF 이미징 시스템(G;BOX EF imaging system, Syngene)을 이용하여 발색된 단백질 밴드(Protein band)를 확인하였다. 그 결과를 도 2에 나타내었다.
도 2에 나타낸 바와 같이 보우에아 마크로필라 과육 에탄올 추출물의 처리에 의해 L6 근육모세포에서 근육 생성에 관여하는 주요 유전자인 p-4EBP1과 p-P70S6K의 발현량이 증가된 것을 확인할 수 있었다. 이는 본 발명의 보우에아 마크로필라 과육 에탄올 추출물이 근육세포 내에서 p-4EBP1과 p-P70S6K의 단백질 발현량을 증가시킴으로써 근육 생성을 증가시키는 효과를 가짐을 의미한다.
[실험예 3] 보우에아 마크로필라 추출물 처리에 따른 근육세포의 분화활성에 관여하는 주요 유전자의 발현증가 확인
L6 근육모세포(L6 myoblast, ATCC)를 10% FBS (Hyclone)가 함유된 DMEM (Hyclone)과 함께 6-웰 플레이트에 1 ㅧ 105 세포/웰이 되도록 넣었다. 세포밀도가 약 80 내지 85%가 되었을 때, 웰에 있는 배지를 제거하고 2% HS (Hyclone)가 함유된 DMEM (Hyclone)에 상기 실시예 1-1에서 제조한 보우에아 마크로필라 과육 에탄올 추출물 10, 40 μg/mL 농도로 각각 녹여 세포에 처리하여 근관세포(myotube) 분화를 유도하였다. 이 때, 시료 대신 0.01% DMSO를 처리한 군을 대조군으로 하였다. TRIzol시약(Invitrogen, Carlsbad, CA, USA)을 사용하여 분화된 세포로부터 총 RNA를 분리하였다. 분리한 총 RNA는 나노드랍(NanoDrop 1000; Thermo Fisher Scientific Inc., MA, USA)을 이용하여 정량하였다. 정량된 16 μL의 RNA를 역전사 효소 프리믹스(Reverse Transcriptase Premix, ELPIS-Biotech, korea)와 PCR 기계(Gene Amp PCR System 2700, Applied Biosystems, MA, USA)를 이용하여 42℃ 55 분, 70℃ 15 분의 조건에서 cDNA로 합성하였다. 16 μL의 생성된 cDNA 중 4 μL의 cDNA와 하기의 특정 프라이머(Bioneer, Daejeon, Korea) 그리고 PCR premix(ELPIS-Biotech)로 95℃에서 30 초, 60℃에서 1 분, 72℃에서 1 분을 30번 반복하여 PCR을 수행하였다.
MyoD
Forward primer: 5'-TTTCGACTCACCAGACCTGC-3'(서열번호 1)
Reverse primer: 5'-CAGAGCCTGCAGACCTTCAA-3'(서열번호 2)
Myogenin
Forward primer: 5'-TTTCGCACCTGATGGACCTG-3'(서열번호 3)
Reverse primer: 5'-CTTTCTTGAGCCTGCGCTTC-3'(서열번호 4)
β-Actin:
Forward primer: 5'-AGCCATGTACGTAGCCATCC-3'(서열번호 5)
Reverse primer: 5'-CTCTCAGCTGTGGTGCTGAA-3'(서열번호 6)
PCR 결과 증폭된 cDNA를 1.5% 아가로스 겔(agarose gel)에서 전기영동하여 분리하였으며, G;BOX EF 이미징 시스템(G;BOX EF imaging system, Syngene)을 이용하여 cDNA 밴드(cDNA band)를 확인하였다. 그 결과를 도 3에 나타내었다.
도 3에 나타낸 바와 같이, 보우에아 마크로필라 과육 에탄올 추출물을 처리한 경우 근육세포의 분화 활성에서 주요 유전자인 MyoD와 myogenin의 mRNA 발현이 증가함을 확인 알 수 있다. 이는 본 발명의 보우에아 마크로필라 과육 에탄올 추출물이 근육세포 내에서 근육 분화를 촉진하는 효과를 가짐을 의미한다.
[실험예 4] 보우에아 마크로필라 추출물 처리에 따른 항피로 및 운동수행능력에 관여하는 유전자의 활성증가 확인
COS-7 원숭이 신장세포(ATCC)를 pGL3-PGC-1α-luc (Addgene, Cambridge, MA, USA)로 형질감염 시킨 후, 실시예 1-1에서 제조한 보우에아 마크로필라 과육 에탄올 추출물을 형질감염된 세포에 24시간 처리하여, PGC-1α의 활성화를 측정하였다. 구체적으로, 본 발명의 실시예 1-1에서 제조한 마리안 플럼 과육 에탄올 추출물을 10 및 20 μg/mL의 농도로 각각 처리한 실험군과 0.01% DMSO를 처리한 대조군을 비교하였다. 그 결과를 도 4에 나타내었다.
도 4에 나타난 바와 같이, 보우에아 마크로필라 과육 에탄올 추출물은 PGC-1α의 활성을 농도 의존적으로 증가시켰고, 10 또는 20 μg/mL 처리군 모두 대조군과 비교 했을 때 유의적인 증가(**, p < 0.01)를 보였다. 이는 본 발명의 보우에아 마크로필라 과육 에탄올 추출물이 PGC-1α를 활성화를 통해 항피로 및 운동능력을 향상시키는 효과를 가짐을 의미한다.
[실험예 5] 보우에아 마크로필라 추출물에 따른 운동능력향상 관련 유전자의 발현 증가 확인
p-AMPK, SIRT1 및 PGC-1α는 운동능력의 향상에 관여하는 유전자로, 본 발명의 보우에아 마크로필라 과육 에탄올 추출물을 처리한 경우 이러한 운동능력 관련 유전자의 발현에 영향을 주는 것이지 확인하기 위하여, 상기 유전자의 단백질 활성 변화를 측정하였다.
L6 근육모세포(L6 myoblast, ATCC)를 10% FBS (Hyclone)를 포함하는 DMEM (Hyclone)이 담긴 6-웰 플레이트에 1 ㅧ 105 세포/웰이 되도록 넣었다. 세포밀도가 약 80 내지 85%가 되었을 때, 웰에 있는 배지를 제거하고 2% HS (Hyclone)가 함유된 DMEM에 상기 실시예 1-1에서 제조한 보우에아 마크로필라 과육 에탄올 추출물 10 μg/mL와 40 μg/mL를 각각 녹인 후, 세포에 처리하여 근관세포(myotube) 분화를 유도하였다. 이 때, 추출물 대신 0.01% DMSO를 처리한 군을 대조군으로 하였다. 이 과정을 2일 1번씩 총 3번 배지를 교환하여 6일 동안 분화시킨 후, 단백질 가수분해효소 저해제 칵테일(proteinase inhibitor cocktail, Sigma)이 포함된 NP-40 완충용액(ELPIS-Biotech)으로 용해시켰다. 완충용액에 용해된 세포를 1.5 mL 튜브(tube)로 옮겨 13,000rpm으로 10분간 원심분리하여 상등액만을 취하였다. 상등액을 브래드포드(Bradford)법을 이용하여 정량하였다. 정량된 단백질을 5분간 끓인 후 10% SDS-PAGE로 전기영동하여 분리하였으며, 분리된 단백질들을 니트로셀룰로스 막으로 전달하였다. SIRT1, PGC-1α, SIRT1, p-AMPK, PPARδ의 1차 항체를 2.5% BSA(bioWORLD)에 1:1000의 비율로 희석하여 니트로셀룰로스 막에 전달된 단백질과 20시간 동안 상온에서 반응시켰다. 1차 항체를 반응시킨 다음 TBST를 이용하여 니트로셀룰로스 막을 10분간 3회 세척하였다. 세척 후, 1차 항체를 인지하는 2차 항체(anti-goat horseradish)를 2.5% BSA에 1:5000이 되도록 희석하여 니트로셀룰로스 막과 2시간 동안 상온에서 반응시켰으며, TBST를 이용하여 10분씩 3회에 걸쳐 세척하였다. Protein band는 ECL western blotting detection reagents(Amersham)를 사용하여 발색하였으며, G;BOX EF 이미징 시스템(G;BOX EF imaging system, Syngene)을 이용하여 발색된 Protein band를 확인하였다. 그 결과를 도 5에 나타내었다.
도 5에 나타낸 바와 같이, 보우에아 마크로필라 과육 에탄올 추출물 처리에 의해 운동능력향상과 관련된 단백질 p-AMPK, SIRT1, PGC-1α의 발현량이 증가한 것을 확인할 수 있었다. 이는 본 발명의 보우에아 마크로필라 과육 에탄올 추출물이 운동능력향상 관련 유전자의 발현을 증가시키는 효과를 가짐을 의미한다.
[실험예 6] 보우에아 마크로필라 추출물의 미토콘드리아 생합성 관련 유전자의 mRNA 발현 증가 확인
PGC-1α, ERRα, Tfam 및 NRF-1는 미토콘드리아의 생합성과 관련된 유전자로, 마리안 플럼 추출물이 상기 유전자의 발현에 영향을 주는지 확인하기 위하여, 각 유전자의 mRNA 발현량 변화를 측정하였다.
L6 근육모세포(L6 myoblast, ATCC)를 10% FBS (Hyclone)를 포함하는 DMEM (Hyclone)이 단긴 6-웰 플레이트에 1 ㅧ 105 세포/웰이 되도록 넣었다. 세포밀도가 약 80 내지 85%가 되었을 때, 웰에 있는 배지를 제거하고 2% HS (Hyclone)가 함유된 DMEM (Hyclone)에 상기 실시예 1-1에서 제조한 보우에아 마크로필라 과육 에탄올 추출물 10 μg/mL와 40 μg/mL 농도로 각각 녹여 세포에 처리하여 근관세포(myotube) 분화를 유도하였다. 이 때, 추출물 대신 0.01% DMSO를 처리한 군을 대조군으로 하였다. TRIzol시약(Invitrogen)을 사용하여 분화된 세포로부터 총 RNA를 분리하였다. 분리된 총 RNA는 나노드랍(NanoDrop 1000; Thermo Fisher Scientific Inc.)을 이용하여 정량하였다. 정량된 16 μL의 RNA를 역전사 효소 프리믹스(Reverse Transcriptase Premix, ELPIS-Biotech)와 PCR 기계(Gene Amp PCR System 2700; Applied Biosystems)를 이용하여 42℃ 55 분, 70℃ 15 분의 조건에서 cDNA를 합성하였다. 16 μL의 생성된 cDNA 중 4 μL의 cDNA 와 하기의 특정 프라이머(Bioneer) 그리고 PCR premix (ELPIS-Biotech)로 95℃에서 30 초, 60℃에서 1분, 72℃에서 1 분을 30번 반복하여 PCR을 수행하였다.
PGC-1α:
Forward primer: 5'-ATGTGTCGCCTTCTTGCTCT-3'(서열번호 7)
Reverse primer: 5'-ATCTACTGCCTGGGGACCTT-3'(서열번호 8)
ERRα:
Forward primer: 5'-GCTGGTGGTTGAACCTGAGA-3'(서열번호 9)
Reverse primer: 5'-GGGCTAACACCCTATGCCAG-3'(서열번호 10)
Tfam:
Forward primer: 5'-GCTTCCAGGAGGCTAAGGAT-3'(서열번호 11)
Reverse primer: 5'-CCCAATCCCAATGACAACTC-3'(서열번호 12)
NRF-1:
Forward primer: 5'-TGGACCCAAGCATTACGGAC-3'(서열번호 13)
Reverse primer: 5'-GGTCATTTCACCGCCCTCTA-3'(서열번호 14)
β-Actin:
Forward primer: 5'-AGCCATGTACGTAGCCATCC-3'(서열번호 15)
Reverse primer: 5'-CTCTCAGCTGTGGTGGTGAA-3'(서열번호 16)
PCR 결과 증폭된 cDNA를 1.5% 아가로스 겔(agarose gel)에서 전기영동하여 분리하였으며, G;BOX EF 이미징 시스템(G;BOX EF imaging system, Syngene)을 이용하여 cDNA 밴드(cDNA band)를 확인하였다. 그 결과를 도 6에 나타내었다.
도 6에 나타낸 바와 같이, 보우에아 마크로필라 과육 에탄올 추출물을 처리함에 따라 미토콘드리아 생합성 관련 유전자인 PGC-1α, ERRα, NRF-1 및 Tfam의 mRNA 발현이 모두 증가한 것을 확인할 수 있었다. 이는 본 발명의 보우에아 마크로필라 과육 에탄올 추출물이 미토콘드리아 생합성 관련 유전자 발현 증가시켜, 미토콘드리아의 합성을 촉진할 수 있음을 의미한다.
이하, 본 발명에 따른 마리안 플럼 추출물을 함유하는 의약품 또는 식품의 제조예를 설명한다, 이는, 본 발명은 이를 한정하고자 함이 아닌 단지 구체적으로 설명하고자 함이다. 하기와 같은 조성성분 및 조성비로 본 발명의 마리안 플럼 추출물을 가지고 하기와 같은 조성성분 및 조성비에 따라 제조예 1 내지 2의 의약품 또는 식품 조성물을 통상적인 방법에 따라서 제조하였다.
[제조예 1] 의약품
1) 산제
상기 실시예 1 내지 6의 마리안 플럼 추출물 50 mg, 결정셀룰로오즈 2 g을 혼합한 후 통상의 산제 제조방법에 따라서 기밀포에 충진하여 산제를 제조하였다.
2) 정제
상기 실시예 1 내지 6의 마리안 플럼 추출물 50 mg, 결정셀룰로오즈 400 mg, 스테아린산 마그네슘 5 mg을 혼합한 후 통상의 정제 제조방법에 따라서 타정하여 정제를 제조하였다.
3) 캡슐제
상기 실시예 1 내지 6의 마리안 플럼 추출물 30 mg, 유청단백질 100 mg, 결정셀룰로오즈 400 mg, 스테아린산 마그네슘 6 mg을 혼합한 후 통상의 캡슐제 제조방법에 따라서 젤라틴 캡슐에 충전하여 캡슐제를 제조하였다.
[제조예 2] 식품
건강식품의 제조
상기 실시예 1 내지 6의 마리안 플럼 추출물 1000 mg, 비타민 A 아세테이트 70 ug, 비타민 E 1.0 mg, 비타민 B1 0.13 mg, 비타민 B2 0.15 mg, 비타민 B6 0.5 mg, 비타민 B12 0.2 ug, 비타민 C 10 mg, 비오틴 10 ug, 니코틴산아미드 1.7 mg, 엽산 50 ug, 판토텐산 칼슘 0.5 mg, 황산제1철 1.75 mg, 산화아연 0.82 mg, 탄산마그네슘 25.3 mg, 제1인산칼륨 15 mg, 제2인산칼슘 55 mg, 구연산칼륨 90 mg, 탄산칼슘 100 mg, 염화마그네슘 24.8 mg를 혼합하여 제조할 수 있으며, 그 배합비를 임의로 변형 실시하여도 무방하며, 통상의 건강식품 제조방법에 따라 상기의 성분을 혼합한 다음, 과립을 제조하고, 통상의 방법에 따라 건강식품 조성물 제조에 사용할 수 있다.
2) 건강음료의 제조
상기 실시예 1 내지 6의 마리안 플럼 추출물 1000 mg, 구연산 1000 mg, 올리고당 100 g, 매실농축액 2 g, 타우린 1 g에 정제수를 가하여 전체 900 ml 통상의 건강음료 제조방법에 따라 상기의 성분을 혼합한 다음, 약 1시간동안 85에서 교반 가열한 후, 만들어진 용액을 여과하여 멸균된 2 L용기에 취득하여 밀봉 멸균한 뒤 냉장 보관한 다음 건강음료 조성물 제조에 사용할 수 있다.
3) 츄잉껌
껌 베이스 20 중량%, 설탕 76.9 중량%, 향료 1 중량% 및 물 2 중량% 와 상기 실시예 1 내지 6의 마리안 플럼 추출물 0.1 중량%를 배합하여 통상의 방법으로 츄잉껌을 제조하였다.
4) 캔디
설탕 60 중량%, 물엿 39.8 중량% 및 향료 0.1 중량%와 상기 실시예 1 내지 6의 마리안 플럼 추출물 0.1 중량%를 배합하여 통상의 방법으로 캔디를 제조하였다.
5) 비스켓
박력 1급 25.59 중량%, 중력 1급 22.22 중량%, 정백당 4.80 중량%, 식염 0.73 중량%, 포도당 0.78 중량%, 팜쇼트닝 11.78 중량%, 암모늄 1.54 중량%, 중조 0.17 중량%, 중아황산나트륨 0.16 중량%, 쌀가루 1.45 중량%, 비타민 B 0.0001 중량%, 밀크향 0.04 중량%, 물 20.6998 중량%, 전지분유 1.16 중량%, 대용분유 0.29 중량%, 제1인산칼슘 0.03 중량%, 살포염 0.29 중량% 및 분무유 7.27 중량%와 상기 실시예 1 내지 6의 마리안 플럼 추출물 중량%를 배합하여 통상의 방법으로 비스켓을 제조하였다.
Claims (11)
- 마리안 플럼 추출물을 유효성분으로 포함하는 운동수행능력 저하 예방 또는 치료용 약학조성물.
- 제1항에 있어서, 마리안 플럼은 보우에아 마크로필라(Bouea macrophylla) 및 보우에아 오포시티폴리아(Bouea oppositifolia)로 이루어진 군에서 선택되는 하나 이상인 것을 특징으로 하는 약학조성물.
- 제1항에 있어서, 마리안 플럼 추출물은 물, 탄소수 1 내지 6의 유기용매, 아임계 유체 및 초임계 유체로 이루어진 군에서 선택되는 하나 이상인 것을 특징으로 하는 약학조성물.
- 제3항에 있어서, 탄소수 1 내지 6의 유기용매는 알코올(alcohol), 아세톤(acetone), 에테르(ether), 벤젠(benzene), 클로로포름(chloroform), 에틸아세테이트(ethyl acetate), 메틸렌 클로라이드(methylene chloride), 헥산(hexane), 시클로헥산(cyclohexane) 및 석유 에테르(petroleum ether)로 이루어진 군에서 선택된 하나 이상인 것을 특징으로 하는 약학조성물
- 제1항에 있어서, 퇴행성 질환, 미토콘드리아 이상 질환, 노화, 지구력 저하증, 순발력 저하증, 무기력증, 근육 폐기 및 우울증으로 이루어진 군에서 선택된 하나 이상인 것을 특징으로 하는 약학조성물
- 마리안 플럼 추출물을 유효성분으로 포함하는 운동수행능력 개선용 식품조성물.
- 마리안 플럼 추출물을 유효성분으로 포함하는 근 기능 또는 근육의 감소, 소모 또는 퇴화 질환 예방 또는 치료용 약학 조성물.
- 제7항에 있어서, 상기 질환은 근위축증(muscular atrophy), 근이영양증(muscular dystrophy), 근육 퇴화, 근무력증, 악액질(Cachexia) 및 근육감소증(Sacopenia)으로 이루어진 군에서 선택된 하나 이상인 것을 특징으로 하는 약학조성물.
- 마리안 플럼 추출물을 유효성분으로 포함하는 근 기능 개선 또는 근육 증가 촉진용 식품조성물.
- 마리안 플럼 추출물을 유효성분으로 포함하는 항-피로용 약학 조성물.
- 마리안 플럼 추출물을 유효성분으로 포함하는 항-피로용 식품 조성물.
Priority Applications (1)
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KR1020190135289A KR20210050807A (ko) | 2019-10-29 | 2019-10-29 | 마리안 플럼 추출물을 포함하는 근 기능 개선, 운동수행능력 증강 또는 항-피로용 조성물 |
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KR1020190135289A KR20210050807A (ko) | 2019-10-29 | 2019-10-29 | 마리안 플럼 추출물을 포함하는 근 기능 개선, 운동수행능력 증강 또는 항-피로용 조성물 |
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Edible Medicinal and Non-Medicinal Plants, 1: 69-74, 2012 |
Journal of Ethnopharmacology, 123: 475-482, 2009 |
Jurnal Ilmiah Farmasi, 2(2): 1-7, 2013 |
Srinagarind Medical Journal, 28(1): 100-109, 2013 |
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