KR20210010435A - 콜로니 자극 인자의 표적화에 의한 녹내장 및 시신경병증 치료법 - Google Patents

Abstract

본 발명은 시신경병성 장애를 치료하기 위한 조성물 및 방법을 제공한다.

Description

콜로니 자극 인자의 표적화에 의한 녹내장 및 시신경병증 치료법

관련 출원들에 대한 상호 참고문헌

본 출원은, 전체 내용이 본원에 그 전체로서 참조로 첨부되어 있는 미국 가명세서 출원 제62/638,884호(2018년 3월 5일 출원)의 이익을 주장한다.

연방 지원 연구에 대한 진술

본 발명은 국립 안 연구소(National Eye Institute)가 부여한 R01 EY025259하에 정부의 지원으로 진행되었다. 정부는 본 발명에 대하여 임의의 권리들을 가진다.

본 발명의 분야

본 발명은 안 장애(ocular disorder)에 관한 것이다.

녹내장은 안압(IOP) 상승 및 망막신경절세포(RGC)의 사멸, 그리고 시신경변성과 연관된 안 장애의 한 군이다. 녹내장은 전 세계에 있어 불가역적 실명의 주요 원인이다. 치료 선택권은 단지 안압(IOP)을 낮추는데 제한되어 왔으나, 이는 질환의 진행을 늦출 뿐 질환을 멈추지는 못한다.

본 발명은 (높은 IOP와는 독립적이거나 또는 이와 연관된) 실명이 발생함에 있어 근본적 기저 결함을 해결하는 조성물 및 방법을 제공한다.

따라서 대상체에서 시신경병성 장애를 치료하기 위한 방법은 콜로니자극인자 1(CSF1) 또는 이의 수용체의 억제제를 눈에 국소 투여함으로써 수행된다. 예를 들어 억제제는 항체이다. 대안적으로 본 방법은 콜로니자극인자 2(CSF2) 단백질 또는 폴리펩티드를 눈에 국소 투여함으로써 수행된다.

대상체는 녹내장으로 진단되거나 녹내장으로 진행될 소인이 있거나 위험이 있는 것으로 확인되는 대상체로서, 예를 들어 대상체는 아직 안압(IOP) 상승을 보이지 않는 대상체이다. 그러므로 본 조성물 및 방법은 이 장애의 조기 치료에 특히 유용하다.

임의의 구현예에서, 대상체에서 시신경병성 장애를 치료하기 위한 방법은 콜로니자극인자 1(CSF1) 또는 이의 수용체의 억제제를 눈에 국소 투여하거나, 또는 콜로니자극인자 2(CSF2) 단백질 또는 폴리펩티드를 눈에 국소 투여하는 단계를 포함한다. 임의의 구현예에서, 대상체는 녹내장으로 진단된 대상체이다. 임의의 구현예에서, 억제제 또는 폴리펩티드는 유리체내 투여된다. 임의의 구현예에서, 억제제는 CSF1 또는 CSF1 수용체와 특이적으로 결합하는 항체를 포함한다.

임의의 구현예에서, 대상체에서 시신경병성 장애를 예방 또는 치료하는 방법은, 콜로니자극인자 1(CSF1) 또는 이의 수용체의 억제제와, 콜로니자극인자 2(CSF2) 폴리펩티드 치료적 유효량만큼을 포함하는 약학 조성물을 눈에 국소 투여함으로써, 시신경병성 장애를 예방 또는 치료하는 단계를 포함한다. 임의의 구현예에서, CSF1 또는 이의 수용체의 억제제와, CSF2 단백질 또는 폴리펩티드 재조합 단백질은 미세교세포 활성화를 억제한다. 임의의 구현예에서, CSF1 또는 이의 수용체의 억제제와, CSF2 단백질 또는 폴리펩티드 재조합 단백질은 망막신경절세포(RGC) 및 시각 기능의 상실을 막아준다. 임의의 구현예에서, CSF1 또는 이의 수용체의 억제제와, CSF2 단백질 또는 폴리펩티드 재조합 단백질은 미세교세포 활성화를 억제하고, 망막신경절세포(RGC) 및 시각 기능의 상실을 막아준다. 임의의 구현예에서, CSF1 또는 이의 수용체의 억제제는 항체, 항체 단편, 앱타머, 소분자, 안티센스 올리고뉴클레오티드, siRNA 시약, Fab, Fab', F(ab')₂ 단편들, Fv 단편, 단일 사슬 항체, 항체의 모의체, 펩토이드, 사이토카인, 세포성 인자, 효소 또는 이것들의 조합을 포함한다. 임의의 구현예에서, 본 약학 조성물은 항 CSF1 항체 및 CSF2 재조합 펩티드를 포함한다. 임의의 구현예에서, 본 약학 조성물은 항 CSF1 수용체의 항체와 CSF2 재조합 펩티드를 포함한다. 임의의 구현예에서, 본 약학 조성물은 항 CSF1 항체와 항 CSF1 수용체의 항체를 포함한다. 임의의 구현예에서, 본 약학 조성물은 항 CSF1 항체, 항 CSF1 수용체의 항체 및 CSF2 폴리펩티드를 포함한다. 임의의 구현예에서, 본 약학 조성물은 CSF1 항체의 억제제 및/또는 CSF1 수용체의 억제제 및/또는 CSF2 폴리펩티드를 포함한다.

임의의 구현예에서, 약학 조성물은 콜로니자극인자 1(CSF1) 또는 이의 수용체의 억제제와, 콜로니자극인자 2(CSF2) 단백질 또는 폴리펩티드 치료적 유효량만큼을 포함한다. 임의의 구현예에서, CSF1 또는 이의 수용체의 억제제는 항체, 항체 단편, 앱타머, 소분자, 안티센스 올리고뉴클레오티드, siRNA 시약, Fab, Fab', F(ab')₂ 단편들, Fv 단편, 단일 사슬 항체, 항체의 모의체, 펩토이드, 사이토카인, 사이토카인 효현제, 사이토카인 길항제, 세포성 인자, 효소 또는 이것들의 조합을 포함한다.

임의의 구현예에서, 대상체에서 미세교세포 활성화를 억제하는 방법은 대상체에 콜로니자극인자 1(CSF1) 또는 이의 수용체의 억제제를 투여하는 단계, 또는 콜로니자극인자 2(CSF2) 단백질 또는 폴리펩티드를 눈에 국소 투여하는 단계를 포함한다. 임의의 구현예에서, 대상체는 녹내장으로 진단된 대상체이다. 임의의 구현예에서, CSF1의 억제제, CSF1 수용체의 억제제 또는 CSF2 폴리펩티드는 유리체내 투여된다. 임의의 구현예에서, CSF1 또는 이의 수용체의 억제제는 항체, 항체 단편, 앱타머, 소분자, 안티센스 올리고뉴클레오티드, siRNA 시약, Fab, Fab', F(ab')₂ 단편들, Fv 단편, 단일 사슬 항체, 항체의 모의체, 펩토이드, 사이토카인, 사이토카인 효현제, 사이토카인 길항제, 세포성 인자, 효소 또는 이것들의 조합을 포함한다.

임의의 구현예에서, CSF1 또는 CSF1 수용체의 억제제는 안구내 투여용으로 제형된다. 임의의 구현예에서, CSF1의 억제제는 안구내 투여용으로 제형된다. 임의의 구현예에서, CSF2 폴리펩티드 또는 단백질은 안구내 투여용으로 제형된다.

몇몇 예에서, 억제제 또는 폴리펩티드는 유리체내 투여된다. CSF1 또는 CSF 수용체의 예시적 억제제로서는 CSF1 또는 CSF1 수용체에 특이적인 항체를 포함한다. 예를 들어 CSF1의 억제제는 안구내 투여용으로 제형된다.

본 치료법은 대안적으로, 또는 CSF1 처리와 연계되어 안구내 투여용으로 제형된 CSF2 폴리펩티드 또는 단백질을 포함한다.

본원에 개시된 각각의 구현예는 기타 개시된 구현예 각각에도 적용가능한 것으로 고려된다. 그러므로 본원에 기술된 다양한 요소들의 모든 조합은 본 발명의 범위내에 있다.

본 발명의 기타 특징들과 이점들은 이하 본 발명의 바람직한 구현예들에 관한 서술 및 특허청구의 범위로부터 분명해질 것이다. 달리 정의되지 않는 한, 본원에 사용된 모든 기술 용어 및 과학 용어는 본 발명이 속하는 분야의 숙련자에 의해 보통 이해되는 의미와 동일한 의미를 가진다. 비록 본원에 기술된 방법 및 재료와 유사하거나 동일한 방법 및 재료가 본 발명을 실시 또는 시험하는데 사용될 수 있지만, 적합한 방법과 재료가 이하에 기술되어 있다. 본원에 인용된 공개 외국 특허 및 특허 출원 모두는 참조로서 본원에 첨부되어 있다. 본원에 인용된 승인 번호로 표시되는 Genbank 및 NCBI 제출물은 본원에 참조로 첨부되어 있다. 본원에 인용된 기타 공개 참고문헌, 서류, 원고 및 과학 문헌 모두는 참조로 첨부되어 있다. 분쟁이 있는 경우, 정의를 포함하고 있는 본 명세서가 이를 조정할 것이다. 뿐 아니라, 재료, 방법 및 실시예는 단지 예시적인 것일뿐, 제한하고자 하는 것은 아니다.

도 1a ~ 도 1c는 정상 마우스(도 1a: Ctr), 마이크로비드 주사후 3일차 마우스(3D MB)(도 1b) 및 7일차 마우스(7D MB)(도 1c)의 망막 영역에서의 CSF1 발현에 관한 영상이다. 도 1d는 정상 망막(Ctr)과, 마이크로비드 주사후 3일차 마우스(3) 및 7일차 마우스(7)로부터 수집한 망막에서 검출되는 CSF1 mRNA 수준의 상대적 배수 변화를 보여주는 막대 그래프이다. 축약어: ONL(외핵층); OPL(외망상층); INL(내핵층); IPL(내망상층); GCL(신경절세포층). **는 P값이 0.001 미만임을 나타낸다. 본 도면 "도 1a ~ 도 1d"는 정상 망막과 녹내장 망막에서의 CSF1 발현을 보여주는 것이다.
도 2a는 마이크로비드 주사후 7일차 녹내장 마우스(MB 7D) 및 14일차 녹내장 마우스(MB 14D)와 정상 마우스(Ctr)의 망막 영역에 관한 일련의 각 영상들이다. 도 2b는 대조군 및 녹내장 망막에서 RT-PCR에 의해 확정된 CSF2 mRNA 수준의 정량 결과를 보여주는 막대 그래프이다. 도 2c는, 대조군 및 녹내장 망막에서 로딩 대조군(loading control)인 β-액틴과, CSF2의 단백질 수준을 보여주는 대표적 웨스턴 블럿 결과에 관한 사진이다. 도 2d는, 마이크로비드 주사후 7일차 및 14일차인 녹내장 망막 및 정상 망막에서 CSF2 단백질 수준의 정량 결과로서, 정상 망막의 경우에 대해 정규화된 정량 결과를 보여주는 막대 그래프이다. * 및 ***는 P값이 0.05 미만 및 0.001 미만임을 나타낸다. GCL = 신경절세포층; IPL = 내망상층; INL = 내핵층; OPL = 외망상층, 및 ONL = 외핵층. 본 도면 "도 2a ~ 도 2d"는 정상 및 녹내장 망막에서의 CSF2 발현을 보여준다.
도 3a는, D3 및 D7에 CSF1R Ab, CSF2, CSF1R Ab + CSF2, 또는 대조군 비이클이 유리체내 주사된 마우스에 MB를 주사한 후 당일에서 42일차/6주차에 이르기까지의 안압(IOP) 수준을 보여주는 선 그래프이다. 도 3b는, 녹내장 눈에서 양의 암순응임계반응(positive Scotopic Threshold Response; pSTR) 대 대측성 정상 눈에서 양의 암순응임계반응(pSTR)의 비를 보여주는 막대 그래프이다. 도 3c는 OMR의 대비 민감도(contrast sensitivity; CS)를 보여주는 막대 그래프이다. 도 3d는 대조군(Ctr)의 망막신경절세포(RGC) 밀도와, 비이클(Veh), CSF1R Ab, CSF2, 그리고 CSF2+CSF1 Ab 처리군의 망막신경절세포(RGC) 밀도를 보여주는 막대 그래프이다. Ctr군은 미주사 눈임에 주목한다. 도 3e ~ 도 3g는 마이크로비드 주사후 6주차일 때 Brn3a+ RGC(빨강색)의 현미경 사진이다. 이 도면 "도 3a ~ 도 3g"에서, '#' 및 '*'는 대조군과 비이클 군 각각에 대해 비교하는 통계 분석을 나타낸다. *, ** 및 ***는 P값이 각각 0.05 미만, 0.01 미만 및 0.001 미만임을 나타낸다. #, ## 및 ###는 P값이 0.05 미만, 0.01 미만 및 0.001 미만임을 나타낸다. 이 도면 "도 3a ~ 도 3g"는, 선행 기술에서 인지되었던 인간 녹내장에 관한 마우스 모델(마이크로비드 유도성 모델)에서 CSF 조정은 망막 기능, 시각 성능(visual performance)을 보호하고 신경세포 상실(neuronal loss)을 막아줌을 입증한다.
도 4a 및 도 4b는 녹내장 SPF 마우스 및 무균 마우스에서 사이토카인 프로필을 보여주는 그래프이다. 안압(IOP) 상승후 1주차, 2주차 및 8주차일 때 무 특이 병원체(SPF) 마우스 및 무균(GF) 마우스의 망막에 있어 콜로니자극인자 1(CSF1)의 혈청중 수준(도 4a) 및 CSF2의 혈청중 수준(도 4b)의 Luminex 검정에 의한 정량 결과. 녹내장 GF 마우스에서의 CSF1의 하향조절과 CSF2의 상향조절은 SPF 마우스에서에 비하여 일관됨에 주목한다.
도 5a 및 도 5b는 마이크로비드(MB) 주사 마우스에서 상향조절된 CSF1/CSF1R 발현을 보여주는 그래프이다. qPCR 정량 결과는, 마이크로비드 유도성 안압 상승후 마우스 망막에서 CSF1 발현이 상향조절되고(도 5a) CSF1R 발현도 상향조절됨(도 5b)을 입증해준다.
도 6a, 도 6b 및 도 6c는 MB 주사 마우스에서 CSF2 발현이 하향조절됨을 입증해주는 일련의 그래프 및 웨스턴 블럿 결과이다. qPCR 결과(도 6a) 및 웨스턴 블럿 정량 결과(도 6b 및 도 6c)는, MB 유도성 안압 상승후 마우스 망막에서 CSF2 및 CSF2R 발현이 하향조절됨을 보여준다.
도 7은 실험 디자인을 보여주는 개략도이다. 이는, CSF1R 항체(CSF1R Ab)를 투여하여 CSF1을 억제하는 것 및/또는 CSF2 신호전달을 촉진하는 것은 녹내장 손상으로부터 RGC를 보호한다는 가설에 바탕을 둔 것이다. 4개의 실험군이 제안되었는데, 즉 높은 IOP를 유도하기 위해 MB를 주사한 후 비이클(PBS), CSF1R Ab, CSF2, 또는 CSF1R+CSF2 처리가 수행된 마우스 군이 연구되었다.
도 8은 마우스군 모두에서의 안압(IOP) 수준을 보여주는 그래프이다. IOP 수준은 전체 기간 동안 모니터링되었다. 모든 실험군에서의 IOP 수준은 MB 주사후 기준치 10 mmHg로부터 16 mmHg보다 높게 상승하여 유지되었다.
도 9는 MB 주사후 CSF1RAb 및/또는 CSF2 처리에 의해 RGC 상실이 감소하였음을 보여주는 그래프이다. RGC는 대조군(Ctr) 마우스와, 비이클, CSF1RAb, CSF2, 그리고 CSF1RAb+CSF2 처리된 녹내장(MB 주사) 마우스로부터 계수되었다.
도 10은 MB 주사후 CSF1RAb/CSF2 처리에 의해 pSTR이 증가하였음을 보여주는 그래프이다. pSTR 주파수는, MB 주사전(Ctr), MB 주사후 4주차(G4w) 및 6주차(G6w)일 때 비이클, CSF1RAb, CSF2 또는 CSF1RAb+CSF2 처리된 MB 유도성 녹내장 마우스에서 평가되었다.
도 11a 및 도 11b는 MB 주사후 CSF1RAb/CSF2 처리에 의해 시각 기능이 증가하였음을 입증해주는 그래프이다. MB 주사전(Ctr), MB 주사후 4주차(G4w) 및 6주차(G6w)일 때 비이클, CSF1RAb, CSF2 또는 CSF1RAb+CSF2 처리된 MB 유도성 녹내장 마우스에서 시각 대비 민감도 및 시력 평가.
도 12는 높은 IOP가 lba-1 발현을 유도하였음을 보여주는 그래프이다. MB 주사 당일, MB 주사후 3일차, 7일차 및 14일차일 때의 마우스 망막내 lba-1 수준의 qPCR 정량 결과.
도 13은 높은 IOP가 뮬러 아교세포(Muller glia)를 활성화함을 입증하는 웨스턴 블럿 결과 및 그래프이다. MB 주사 당일, MB 주사후 3일차, 7일차 및 14일차일 때 마우스 망막에 있어 활성화된 뮬러 아교세포 마커, GFPA의 발현에 관한 웨스턴 블럿 정량 결과.

미세교세포의 활성화는 녹내장의 신경변성 진행에 중요한 역할을 담당한다. 콜로니자극인자 1(CSF1) 및 콜로니자극인자 2(CSF2)는 미세교세포 기능을 조절함으로써 녹내장 신경세포 상실에 연루되어 있다. 녹내장 발병 마우스는 CSF1 수준의 상향조절과 CSF2의 하향조절을 보였다. 더욱이 녹내장 마우스 모델에서 CSF2 재조합 단백질의 첨가, 또는 CSF1 수용체에 대한 항 CSF1 또는 항체의 유리체내 주사에 의한 CSF1의 중화는 녹내장 마우스 모델에서 미세교세포 활성화를 유의미하게 억제하였고, 망막신경절세포(RGC) 및 시각 기능의 상실을 막아주었다. 데이터는, CSF 경로 조정은 녹내장 및/또는 시신경병증 발병 대상체에 임상 이익을 부여하는데 유용함을 보여준다.

콜로니자극인자

CSF-1은 순환(circulation) 중에 대개 프로테오글리칸의 형태로 대략 10 ng/mL의 생물 활성 농도만큼 존재한다. 이는, 간엽 및 상피 기원의 다양한 세포에 의해 구성적으로 생성된다. 병인과는 무관하게 감염, 암 및 만성염증성질환을 비롯하여 다수의 상이한 병상에 있어 순환 중 수준은 증가한다. CSF1은 단핵식세포의 생존, 증식 및 분화를 제어하고, 여성의 생식기 세포를 조절한다. CSF1은 또한 난소암, 자궁내막암, 유방암, 그리고 골수양 조직과 림프양 조직의 암에서 자가분비 및/또는 측분비 역할을 담당할 수도 있다. CSF1의 순환 중 수준은 또한 임신 기간 동안 상승하여, 태반형성에 기여하기도 한다. 마우스와 인간 둘 다에서는 출산 전후에 조직 및 순환성 CSF1이 출현한다. 염증의 경우, CSF1은 또한 재보충된 대식세포 자체에 의해 생성될 수도 있지만, 마우스에서는 적어도 대부분의 대식세포는 CSF1을 생성하지 않으며, 이 단백질이 존재하지 않을 때에는 세포 사멸이 진행된다. 보통의 정상상태 조건하에서 CSF1의 생성은, CSF1 수용체(CSF1R)에 의한 수용체 매개 내포작용 후 세포내 파괴를 통하여 조직 대식세포에 의해 진행되는 CSF1 소모에 의해 균형이 맞추어진다.

GM-CSF 및 CSF2라고도 공지된 과립구-대식세포 콜로니자극인자는 대식세포, T 세포, 비만세포, 자연살해세포, 내피세포 및 섬유아세포에 의해 분비되는 단량체 당단백질로서, 사이토카인으로서 작용한다. CSF2는 과립구 및 대식세포의 생성, 분화 및 기능을 제어한다. 자연 발생 CSF2의 약학적 유사체는 살그라모스팀(sargramostim) 또는 몰그라모스팀(molgramostim)이라 지칭된다. CSF2는 화학요법 후 백혈구 생성을 자극하는 의약으로서 사용될 수 있다. 이는 또한 HIV 감염 환자에서 백신 보조제로서 사용될 수도 있다.

콜로니자극인자 3(CSF3)은 골수를 자극하여 과립구 및 줄기세포가 생산되도록 하고, 이것들을 혈류에 방출되도록 만드는 당단백질이다. 이는 가능상 사이토카인이자 호르몬, 즉 일종의 콜로니 자극 인자로서, 다수의 상이한 조직에 의해 생성된다. 자연 발생 CSF3의 약학적 유사체는 필그라스팀(filgrastim) 및 레노그라스팀(lenograstim)이라 지칭된다. CSF3는 또한 호중구 전구체 및 성숙한 호중구의 생존, 증식, 분화 및 기능을 자극한다.

CSF1 및 CSF2는 단핵구/대식세포의 작용을 매개함에 있어 주된 역할을 담당하는 한편, CSF2 및 CSF3는 과립구(호중구)를 조절한다. 대식세포는 활성화된 후 하위유형 M1 및 M2로 분극(polarization)된다. CSF2는 전염증성 사이토카인, 예컨대 TNF-α 및 IL-12를 분비하고, 면역반응을 자극함으로써 세균이나 종양에 대한 방어작용을 향상시키는 M1 표현형을 촉진한다. 이와는 대조적으로 CSF1은 소염 사이토카인을 분비하고, 조직 수선 및 혈관생성을 촉진하는 M2 표현형을 자극한다.

CSF2 및 CSF2의 수용체는 티로신 키나아제 과에 속하며, PI-3/AKT, MAPK, STAT 경로의 하류 경로를 활성화함으로써 세포 생존/증식, 분화 및 활성화에 신호를 전달한다.

본 발명이 등장하기 이전에 녹내장 또는 망막 신경퇴행성 질환에서의 CSF1 및/또는 CSF2의 역할은 확인된 바 없었다.

데이터(도 1a ~ 도 1d, 도 2a ~ 도 2d, 도 3a ~ 도 3f, 도 5a, 도 5b, 도 9, 도 10, 도 11a, 도 11b)는, 인간 녹내장 마우스 모델에서 CSF1 또는 CSF1 수용체 봉쇄뿐 아니라, CSF2 단백질 투여/증량이 망막신경절세포 변성을 막아주었고, 시각 성능을 보호하여 주었음을 보여주었다. 이들 데이터는, 녹내장 신경 손상의 발병기전에 대해 새로운 통찰을 열어주었고, CSF1/CSF1 수용체 활성의 차단, 및/또는 CSF2 재조합 단백질의 녹내장 환자 유리체내 주사를 통한 투여에 관한 치료적 잠재성을 입증하였다. 이러한 제제의 유리체로의 다수 회 주사는 안과에서 환자에게 일반적으로 행하여지는 위험성이 낮은 조치이다. 녹내장은 시신경병증의 가장 흔한 형태이다. 본 조성물과 방법은 또한 시신경병증의 다른 형태 또는 뇌 및 척추의 유사한 신경변성 병태를 치료하는데 적용될 수 있다.

CSF에 의한 미세교세포 활성화 조절은 녹내장에서 신경변성을 유도한다

본원에 기술된 연구는, 미생물총 부재하에 생육된 마우스(무균 마우스)에서 안압(IOP) 상승 후 망막신경절세포(RGC) 손상이 일어나지 않음을 보여준다. 더욱이 데이터는 무균 마우스에서 콜로니자극인자 1(CSF1)의 발현은 하향조절되었던 반면에, CSF2는 상향조절되었음을 보여주었다. 이후에는 CSF1 및 CSF2가 녹내장에서 RGC 상실을 매개함에 있어 반대되는 역할을 담당하였는지를 확정하기 위한 연구들이 수행되었다. 본원에는 표준 녹내장 마우스 모델에서 CSF1 및 CSF2의 발현 및 연루가 보고되어 있다.

마이크로비드(MB)는 높은 IOP를 유도하기 위해 성체 B6 마우스의 전안방에 주사되었다. CSF1/2 및 이의 수용체 발현은 MB 주사 후 상이한 시점에서 면역염색 및 정량적 중합효소연쇄반응(qPCR)에 의해 관찰되었다. CSF2 및/또는 CSF1의 중화 항체는 IOP가 높은 마우스에 유리체내 투여되었다. 온 조직표본고정 망막(whole mount retina) 중 RGC를 표지화하기 위해 항 brn3a 염색이 사용되었다.

MB 주사 후 2주차일 때 망막에서 CSF1의 발현은 상향조절되는 것으로 확인되었던 반면에, CSF2는 하향조절되었다. 데이터는 또한, CSF2 또는 CSF1에 특이적인 항체, 예컨대 중화 항체 중 어느 하나의 투여는 녹내장 RGC 상실을 염수 처리 대조군 마우스에서에 비하여 감소시켰거나 완화시켰음을 보여주었다. CSF1 수용체는 미세교세포 및 RGC와 연관된 것으로 확인되었던 반면에, CSF2 수용체는 뮬러 세포 및 RGC에 의해 발현되었다.

이들 데이터는, 녹내장성 RGC 변성을 유도하는 높은 IOP하에 CSF1 및 CSF2가 미세교세포 및 뮬러 세포 활성화에 대해 반대의 약할을 담당한다는 것을 보여준다. 이러한 발견들은, CSF 신호전달의 억제 및/또는 CSF 신호전달의 증폭이 녹내장과 같은 시신경병성 장애가 발병한 대상체에서 RGC 상실 및 시야 상실(vision loss)을 감소시키거나 막는데 유효함을 보여준다.

CSF1 , CSF2

UniProtKB - P09603(CSF1_HUMAN)이 이하에 제공된다(서열 번호 1):

인간 콜로니자극인자 1 수용체(CSF1-R)의 아미노산 서열 AAH47521.1이 이하에 제공된다(서열 번호 2):

서열 번호 2(GenBank 승인번호 AAH47521.1)은 본원에 참조로 첨부되어 있다.

CSF1-R의 예시적 랜드마크 잔기, 도메인 및 단편은 28번 ~ 85번 잔기(면역글로불린 유사 도메인), 207번 ~ 293번 잔기(면역글로불린 유사 도메인), 209번 ~ 290번 잔기(면역글로불린 유사 도메인), 299번 ~ 400번 잔기(줄기세포인자수용체(SCFR)의 제4 면역글로불린(Ig) 유사 도메인), 401번 ~ 495번 잔기(면역글로불린 유사 도메인), 542번 ~ 914번 잔기(단백질 키나아제, 촉매 도메인) 또는 588번 ~ 591번 잔기, 594번, 596번, 614번, 616번, 647번, 663번 ~ 666번, 778번, 782번 ~ 783번, 785번, 795번 및 796번 잔기(ATP 결합 부위)를 포함하나, 이에 한정되는 것은 아니다. CSF1-R 단백질의 단편은 그 길이가 전장 단백질의 길이보다 짧은데, 예컨대 상기 CSF1-R의 경우 이의 단편은 그 길이가 적어도 3개, 4개, 5개, 6개, 7개, 8개, 9개, 10개, 20개, 30개, 40개, 50개, 100개, 200개 또는 이 이상의 잔기이되, 예컨대 972개 잔기보다는 짧다.

인간 CSF1-R 핵산 서열 BC047521.1(개시 코돈과 종결 코돈에 밑줄침)(서열 번호 3):

CSF2(GM-CSF라고도 공지됨)의 서열은 NP_000749.2(과립구-대식세포 콜로니자극인자 전구체)에 기술되어 있으며; 이는 본원에 전체로서 참조로 첨부되어 있다(서열 번호 4):

CSF1 및 CSF1R의 항체 및 억제제

사이토카인 콜로니자극인자 1(CSF1; CSF-1; 대식세포 콜로니자극인자; M-CSF)에 대해 유도된 인간화 면역글로불린(Ig) G2 모노클로날 항체(mAb)로서, 잠재적 면역조정 활성 및 항신생물형성 활성을 가지는 항체, 즉 항 CSF1 모노클로날 항체 PD-0360324는 CSF1을 표적화하고, 이에 결합하여 중화한다. 이는 CSF1이, 단핵구 및 대식세포와 같이 다양한 면역 세포상에 발현되는 자체의 수용체, 즉 CSF1R(CD115; M-CSFR)과 결합하는 것을 막아준다. 이는 이와 같은 세포내에서 CSF1R 활성화 및 CSF1R 매개 신호전달을 막아서, 결과적으로는 단핵구 분화 억제, 대식세포 활성 차단, 그리고 염증 조정인자 생성의 감소를 초래하여, 염증을 감소시킨다. PD-0360324는 종양 미세환경에서 CSF1R 의존적 종양 연관 대식세포(TAM)를 차단함으로써 TAM 매개 면역 억제를 줄여주고, 조절 T 세포(Treg)를 감소시키며, 면역계를 재활성화하고, 세포독성 T 세포의 침윤 증가에 의해 매개되는 항종양 세포 반응을 개선한다. TAM은 면역 억제, 종양 세포 증식 및 생존에서 핵심적인 역할을 담당한다. CSF-1은 단핵구 및 대식세포의 증식, 분화 및 생존을 조절함에 있어 핵심적인 역할을 담당한다.

예시적 항체로서는 R&D systems(Minneapolis, MN)로부터 입수 가능한 것들, 예컨대 중화된 마우스 M-CSF 항체(Cat #: MAB416-SP, 또는 eBioscience(ThermoFischer)); CD115(c-fms) 모노클로날 항체(Cat #: AFS9 또는 Peprotech(Rocky Hill, NJ 08553, United States); 재조합 마우스 GM-CSF(Cat #: 315-03)를 포함한다.

콜로니자극인자 1 수용체(CSF-1R; CSF1R)의 생체내이용가능한 경구투여 억제제로서, 잠재적 항신생물형성 활성을 가지는 억제제, 즉 CSF1R의 억제제 BLZ945(4-[2((1R,2R)-2-하이드록시사이클로헥실아미노)-벤조티아졸-6-일옥실]-피리딘-2-카복실산 메틸아미드)는, 종양 연관 대식세포(TAM)상에 발현된 CSF1R과 선택적으로 결합하여, CSF1R의 활성을 차단하고, CSF1R 매개 신호전달경로를 억제한다. 이는, TAM의 활성과 증식을 억제하고, 기존 TAM의 면역억제성을 다시 계획한다. 종합하면, 이는 종양 미세환경에서 TAM 매개 면역억제를 줄여주고, 면역계를 재활성화하며, T 세포에 의해 매개되는 항종양세포 반응을 개선한다. 대식세포 콜로니자극인자 수용체(M-CSFR) 및 CD115(분화 클러스터 115)라고도 공지된 CSF1R은 이 자체의 리간드, 즉 콜로니자극인자 1(CSF1)에 대한 세포 표면 수용체인데; 이 수용체는 종양 미세환경에서 TAM에 의해 과발현되고, 면역 억제 및 종양 세포 증식 유도 둘 다에서 주된 역할을 담당한다.

티로신 키나아제 수용체인 콜로니자극인자 1 수용체(CSF1R; CSF-1R; C-FMS; CD115; M-CSFR)의 또 다른 억제제로서, 잠재적 항신생물형성, 대식세포 관문-억제 및 면역조정 활성을 가지는 억제제, 즉 DCC-3014는 단핵구, 대식세포 및 파골세포 상에 발현되는 CSF1R을 표적화하여 이에 결합하고, CSF1R 리간드, 즉 콜로니자극인자 1(CSF1) 및 인터루킨 34(IL34)와 CSF1R의 결합을 억제한다. 이는 이들 세포에서 CSF1R 활성화 및 CSF1R 매개 신호전달을 막아준다. 이는 대식세포 및 단핵구에 의한 염증 매개체의 생성을 차단하고, 이로써 염증을 줄여준다. DCC-3014는, 종양 미세환경에의 재보충과 CSF1R 의존적 종양 연관 대식세포(TAM)의 활성을 차단함으로써, 대식세포에 의한 면역조정 활성을 억제하고, T 세포 침윤 및 항종양 T 세포 면역반응을 향상시켜, 종양 세포의 증식을 억제한다. TAM은 종양 미세환경에서 핵심적인 역할을 담당하고, 면역 억제를 가능하게 하는데; TAM은 염증, 종양 세포 증식, 혈관생성, 침습 및 생존을 촉진한다.

암 환자를 대상으로 임상 시험 단계에 있는 CSF1 수용체의 기타 억제제의 예로서는 펙시다티닙(PLX3397, PLX108-01), PLX7486, ARRY-382, JNJ-40346527, BLZ945, 에막투주맙(RG7155), AMG820, IMC-CS4(LY3022855), MCS110, GW-2580, 글리벡(이마티닙 메실산염)을 포함한다(Cannarile, Michael A et al. "Colony-stimulating factor 1 receptor (CSF1R) inhibitors in cancer therapy"　Journal for immunotherapy of cancer　vol. 5,1 53. 18 Jul. 2017, doi:10.1186/s40425-017-0257-y).

CSF1R의 소분자 억제제인 PLX73086(AC708)은 CSF1R 활성화 감소를 초래하고, 종양 연관 대식세포 감소를 통해 혈관생성에 대한 내성을 회복시킬 수 있다(Lyons, Y.A. et al., Oncotarget. 2017 Aug 24;8(57):96496-96505. doi: 10.18632/oncotarget.20410. eCollection 2017 Nov 14). 키아우라닙(CS2164)은 AURKB, CSF-1R, VEGFR, KIT 및 PDGFRA를 억제하여, 종양 성장 및 혈관생성의 감소를 유도하는 다중 키나아제 억제제이다(Zhou, Y. et al., Cancer Sci . 2017 Mar;108(3):469-477. doi: 10.1111/cas.13141. Epub 2017 Mar 7). 스프라이셀(다사티닙)은 ABL, BCR-ABL 및 단백질 키나아제의 SRC 과의 억제제로서, KIT, DDR1/2, PDGFRA/B 및 EPHA2를 비롯한 기타 키나아제에 대해 세포 성장을 막는 추가 활성을 가진다(Kothiwale S. et al., Drug Discov Today. 2015 Feb;20(2):255-61. doi: 10.1016/j.drudis.2014.09.025. Epub 2014 Oct 7). DCC-3014는 CSF1R을 억제하고, 잠재적으로는 다른 제제와 조합하여 항 종양 면역 반응 증가를 달성한다(Cancer Res 2016;76(14 Suppl): Abstract nr 4889). 데비오 0617B는 SRC, JAK 및 ABL, III군 키나아제, CSF1R, FLT3, KIT, PDGFR, V군 키나아제, VEGFR 1/2/3의 다중 키나아제 억제제로서, Stat3 및 Stat5 신호전달의 억제를 초래할 수 있고, 그 결과 종양 세포 성장 및 전이의 억제가 달성된다(Murone, M. et al., Mol Cancer Ther. 2016 Oct;15(10):2334-2343. Epub 2016 Jul 20). 도비티닙(TKI258)은 Flt3, c-Kit, CSF1R, FGFR 1-4, VEGFR 1-3, 그리고 PDGFR 알파 및 베타를 비롯하여 다수의 수용체 티로신 키나아제를 표적화하고, 그 결과 잠재적으로 종양 성장의 감소를 달성한다(Lesca E., et al., J Mol Biol. 2014 Nov 11;426(22):3744-3756. doi: 10.1016/j.jmb.2014.09.004. Epub 2014 Sep 16; Andre F. et al., Clin Cancer Res. 2013 Jul 1;19(13):3693-702. doi: 10.1158/1078-0432.CCR-13-0190. Epub 2013 May 8). 에막투주맙(RG7155)은 CSF1R의 이량체화를 억제하여, 리간드 의존적 신호전달 및 리간드 독립적 신호전달의 감소를 달성하는 모노클로날 항체이다(Ries C. H. et al., Cancer Cell. 2014 Jun 16;25(6):846-59. doi: 10.1016/j.ccr.2014.05.016. Epub 2014 Jun 2). FF-10101은, 내부 탠덤 중복(FLT3-ITD) 및 공지의 내성 돌연변이(D835Y, Y842C, Y842H 또는 F691L)를 포함하는 Flt3의 제2 세대 불가역적 억제제로서, Kit 및 Csf1r(Fms)을 또한 억제하기도 한다(Yamaura T. et al., Blood. 2018 Jan 25;131(4):426-438. doi: 10.1182/blood-2017-05-786657. Epub 2017 Nov 29). GW2580은 CSF-1R의 ATP 경쟁 선택적 억제제로서, 종양 세포 성장의 감소를 유도할 수 있다(Ryder M. et al., PLoS One. 2013;8(1):e54302. doi: 10.1371/journal.pone.0054302. Epub 2013 Jan 23). JNJ-40346527은 CSF1R의 소분자 억제제이다(von Tresckow B. et al., Clin Cancer Res. 2015 Apr 15;21(8):1843-50. doi: 10.1158/1078-0432.CCR-14-1845. Epub 2015 Jan 27). Ki20227은 CSF1R을 억제하여, CSF 의존적 세포 성장의 감소를 초래할 수 있다(Ohno H. et al., Mol Cancer Ther. 2006 Nov;5(11):2634-43). 레스타우르티닙(CEP-701) (Hexner E. O. et al., Blood. 2008 Jun 15;111(12):5663-71. Epub 2007 Nov 5). 리니파닙(ABT-869)은 FLT1(VEGFR1), CSF-1R, KDR(VEGFR2), FLT3 및 KIT에 대한 특이성을 가지는 관계로, 세포 증식 및 종양 성장의 억제와, 종양 퇴행을 달성할 수 있는 수용체 티로신 키나아제 억제제이다(Albert D. H. et al., Mol Cancer Ther. 2006 Apr;5(4):995-1006). 라이답트(미도스타우린)는 다중 키나아제 억제제이다(Ashman L.K. et al., Expert Opin Investig Drugs. 2013 Jan;22(1):103-15. doi: 10.1517/13543784.2013.740010. Epub 2012 Nov 6). 타시그나(닐로티닙)는 BCR-ABL, PDGFR, KIT, DDR 및 CSF-1R을 비롯한 몇몇 티로신 키나아제를 억제한다(Blay J.Y. et al., Semin Oncol. 2011 Apr;38 Suppl 1:S3-9. doi: 10.1053/j.seminoncol.2011.01.016). 펙시다티닙(PLX3397)은 KIT, CSF1R, FLT3 및 FLT3/ITD를 비롯하여 다수 개의 수용체 티로신 키나아제를 억제한다(Smith C. C. et al., Cancer Discov. 2015 Jun;5(6):668-79. doi: 10.1158/2159-8290.CD-15-0060. Epub 2015 Apr 6). PLX7486은 CSF1R, TRKA, TRKB 및 TRKC와 결합하여 이를 억제한다. 넥사바(소라페닙)는 RAF 키나아제, VEGFR2, VEGFR3, PDGFR-베타, KIT, FLT3, RET 및 CSF1R을 비롯하여 몇몇 키나아제에 대한 활성을 가지는 다중 키나아제 억제제이다(Ullrich K. et al., Br J Haematol. 2011 Nov;155(3):398-402. doi: 10.1111/j.1365-2141.2011.08685.x. Epub 2011 Apr 22). 수텐트(수니티닙)는 KDR(VEGFR2), PDGFR, c-KIT, FLT3, RET 및 CSF1R을 억제한다(Subbiah V. et al., J Hematol Oncol. 2014 Aug 1;7:52. doi: 10.1186/s13045-014-0052-x).

임의의 구현예에서, CSF1R의 억제제는 PLX3397(Tahmasebi F. et al., J Cell Biochem. 2019 Jan 10. doi: 10.1002/jcb.28344), GW-2580(Gerber Y. N. et al., Front Cell Neurosci . 2018; 12: 368.), BLZ-945(Pyonteck S. M. et al., Nat Med. 2013 Oct;19(10):1264-72. doi: 10.1038/nm.3337) 또는 이것들의 조합을 포함한다. 임의의 구현예에서, CSF1R 중화 항체는 RG-7155, FPA-008, M279(예컨대 AMGEN으로부터 입수 가능한 제품) 또는 이것들의 조합을 포함한다.

CSF1 또는 이의 수용체와 특이적으로 결합하는 항체는 CSF1 분자의 기능 또는 활성을 억제한다. 서열 번호 1 또는 2에 대해 유도된 항체는 당 분야에 공지된 임의의 방법에 의해 생산될 수 있다. 임의의 구현예에서, 항체 또는 이의 단편은 서열 번호 1 또는 2 각각에 대해 적어도 50%의 서열 동일성을 가지는 CSF1 펩티드 또는 CSF1R과 특이적으로 결합한다. 임의의 구현예에서, 본 항체 또는 이의 단편은 서열 번호 1 또는 2 각각에 대해 적어도 75%의 서열 동일성을 가지는 CSF1 펩티드 또는 CSF1R과 특이적으로 결합한다. 임의의 구현예에서, 본 항체 또는 이의 단편은 서열 번호 1 또는 2 각각에 대해 적어도 95%의 서열 동일성을 가지는 CSF1 펩티드 또는 CSF1R과 특이적으로 결합한다. 임의의 구현예에서, 본 항체 또는 이의 단편은 서열 번호 1 또는 2 중 에피토프와 특이적으로 결합한다.

임의의 구현예에서, CSF1 및 이의 수용체의 억제제(들)는, CSF2보다는 CDF1 및 이의 수용체를 우선적으로 억제한다. 임의의 구현예에서, CSF1의 억제제 또는 CSF1R의 억제제는 CSF2의 활성이나 기능에 비해 CSF1의 발현 및/또는 활성 및/또는 기능을 약 1배까지 억제한다. 임의의 구현예에서, CSF1의 억제제 또는 CSF1R의 억제제는 CSF2의 활성이나 기능에 비해 CSF1의 발현 및/또는 활성 및/또는 기능을 약 2배, 약 3배, 약 5배, 약 10배, 약 20배, 약 50배 또는 이 이상까지 억제한다. 임의의 구현예에서, CSF1의 억제제 또는 CSF1R의 억제제는 CSF2의 활성이나 기능에 비해 CSF1의 발현 및/또는 활성 및/또는 기능을 적어도 5%까지 억제한다. 임의의 구현예에서, CSF1의 억제제 또는 CSF1R의 억제제는 CSF2의 활성이나 기능에 비해 CSF1의 발현 및/또는 활성 및/또는 기능을 적어도 10%, 적어도 15%, 적어도 20%, 적어도 30%, 적어도 40%, 적어도 50%, 적어도 60%, 적어도 70%, 적어도 80%, 적어도 85%, 적어도 86%, 적어도 87%, 적어도 88%, 적어도 89%, 적어도 90%, 적어도 91%, 적어도 92%, 적어도 93%, 적어도 94%, 적어도 95%, 적어도 96%, 적어도 97%, 적어도 98%, 적어도 99% 또는 이 이상까지 억제한다.

CSF1 및 CSF2의 활성은 당 분야에 공지되어 있고 본원에도 또한 상세히 기술된 임의의 가짓 수의 검정법에 의해 확정될 수 있다. 예를 들어 mRNA 발현, 단백질 발현(도 1a ~ 도 1c, 도 2a ~ 도 2d, 도 5a 및 도 5b, 도 6a ~ 도 6c), 안압(도 3a ~ 도 3g, 도 8, 도 12), 사이토카인 프로필(도 5a 및 도 5b), RGC 상실(도 9), 양의 암순응임계반응(pSTR)(도 10), 시각 기능(도 11a 및 도 11b), lba-1 발현(도 12), 뮬러 아교세포 활성화(도 13). 억제제가 CSF2보다는 CSF1 또는 이의 수용체를 특이적으로 억제하는지는 유사한 검정법에 의해 확정될 수 있다. 예를 들어 CSF1, CSF1R의 발현 대 CSF2의 발현. 이러한 검정법은 통상적으로 행하여지는 임상 관찰과 병행될 수 있다.

망막신경절세포(RGC)의 기능은 녹내장 실험 모델 및 유전자 모델에서 내망막신경세포의 활성에 중점을 두는 ERG 기법의 변법을 통하여 비 침습적으로 평가될 수 있다. 가장 잘 이해되는 기법은 대비 반전 격자 또는 체커보드에 반응하고, 기능성 RGC의 존재에 선택적으로 의존하는 패턴 망막전위도(Pattern Electroretinogram; PERG)이다. 녹내장 모델에서, PERG는 RGC의 조직학적 상실이 일어나기 전에 변경될 수 있는데; PERG 변경은 중간 정도의 IOP 저하로 반전될 수 있거나, 중간 정도의 IOP 상승으로 심화될 수 있다. 특정의 휘도 자극 조건(luminance-stimulus condition)에서 플래시-ERG는 근위 망막에서 기원하는 전기적 활동도를 반영할 수 있으며, 몇몇 녹내장 실험 모델(양의 암순응임계반응, pSTR; 음의 암순응임계반응, nSTR; 음의 명순응반응(Photopic Negative Response; PhNR); 진동 전위(Oscillatory Potential; OP); 다초점 ERG(mfERG))에서 변경될 수 있는 성분을 보인다(Vittorio Porciatti, Exp Eye Res. 2015 Dec; 141: 164-170).

몇몇 구현예에서, 항원 결합 도메인은 이의 단편의 인간화 항체이다. "인간화" 항체는, 상보성결정영역(CDR) 아미노산 잔기 모두 또는 실질적으로 모두는 비 인간 CDR로부터 유래하고, 틀 영역(FR) 아미노산 잔기 모두 또는 실질적으로 모두는 인간 FR로부터 유래하는 항체이다. 인간화 항체는, 인간 항체로부터 유래하는 항체 불변 영역 적어도 일부를 선택적으로 포함할 수 있다. 비 인간 항체의 "인간화 형태"란, 통상 인간에 대한 면역원성을 줄이고자 인간화를 거쳤음과 아울러, 비 인간 모 항체의 특이성 및 친화성을 보유하는 비 인간 항체의 변이체를 지칭한다. 몇몇 구현예에서, 인간화 항체 내 몇몇 FR 잔기는, 예컨대 항체의 특이성 또는 친화성이 회복 또는 개선되도록 비 인간 항체(예컨대 CDR 잔기가 유래하는 항체)의 대응 잔기로 치환된다.

몇몇 구현예에서, 항체의 중쇄 및 경쇄는 전장일 수 있거나, 또는 항원 결합부(Fab, F(ab')2, Fv 또는 단일 사슬 Fv 단편(scFv))일 수 있다. 다른 구현예에서, 항체 중쇄 불변 영역은, 예컨대 IgG1, IgG2, IgG3, IgG4, IgM, IgAl, IgA2, IgD 및 IgE로부터 선택되고, 구체적으로, 예컨대 IgG1, IgG2, IgG3 및 IgG4로부터 선택되며, 더욱 구체적으로 IgG1(예컨대 인간 IgG1)이다. 다른 구현예에서, 항체 경쇄 불변 영역은, 예컨대 카파 또는 람다로부터 선택되고, 구체적으로는 카파이다.

제공된 항체들 가운데 항체는 항체 단편이다. "항체 단편"이란, 비변형(intact) 항체 이외의 분자로서, 비변형 항체가 결합하는 항원과 결합하는, 이 비변형 항체의 일부를 포함하는 분자를 지칭한다. 항체 단편의 예로서는 Fv, Fab, Fab', Fab'-SH, F(ab')₂; 다이아바디; 선형 항체; 가변 중쇄(V_H) 영역, 단일 사슬 항체 분자, 예컨대 scFv 및 단일 도메인 V_H 단일 항체; 그리고 항체 단편들로 형성된 다중 특이적 항체를 포함하나, 이에 한정되는 것은 아니다. 특정 구현예에서, 항체는 가변 중쇄 영역 및/또는 가변 경쇄 영역을 포함하는 단일 사슬 항체 단편, 예컨대 scFv이다.

임의의 구현예에서, 항체는 단일 도메인 항체이다. 단일 도메인 항체는 항체의 중쇄 가변 도메인 전부 또는 일부, 또는 항체의 경쇄 가변 도메인 전부 또는 일부를 포함하는 항체 단편이다. 임의의 구현예에서, 단일 도메인 항체는 인간 단일 도메인 항체이다.

항체 단편은 다양한 기법, 예컨대 비변형 항체의 단백분해절단뿐 아니라 재조합 숙주 세포에 의한 생성(이에 한정되는 것은 아님)으로 제조될 수 있다. 몇몇 구현예에서, 항체는 재조합 생산되는 단편, 예컨대 자연 발생되지 않고/않거나, 자연 발생 비변형 항체의 효소절단에 의해 생산될 수 없는 배열들을 포함하는 단편, 예컨대 합성 링커, 예컨대 펩티드 링커에 의해 연결된 2개 이상의 항체 영역 또는 사슬을 가지는 단편이다. 몇몇 양태에서, 항체 단편은 scFv이다.

임의의 구현예에서, 항체 또는 항체 단편은 CSF1 또는 CSF1 수용체에 대해 큰 결합 친화성을 가진다. 구현예들에서, 증가한 결합 친화성은 기준 항원과의 결합 친화성보다 더 크다.

임의의 구현예에서, CSF1의 억제제는 CSF1의 발현 또는 활성을 억제하는 자체의 능력을 기반으로 선택된다. 임의의 구현예에서, CSF1의 억제제는 CSF1 수용체의 발현 또는 기능을 억제하거나, CSF1이 CSF1 수용체와 결합하는 것을 억제하는 자체의 능력을 기반으로 선택된다. 임의의 구현예에서, 이러한 잠재적 치료제로서, 스크리닝 검정을 기반으로 동정된 치료제는 자체의 치료 활성을 시험하기 위해 선택된다. 임의의 구현예에서, 치료 활성은 미세교세포 활성화를 억제하는 것, 망막신경절세포(RGC) 및 시각 기능의 상실을 막는 것이다.

후보/시험 제제: 자연에 존재하거나 인공적으로 생산된 임의의 제제를 비롯하여 다양한 후보 제제, 예컨대 CSF1 및 이의 수용체의 억제제가 본 발명의 스크리닝 방법에 사용될 수 있다. 후보 제제는 임의의 화학군에 속하는 것, 예컨대 항체, 소분자, 단백질, 펩티드, 소형 유기 화합물, 당류, 지방산, 스테로이드, 퓨린, 피리미딘, 핵산과, 이것들의 다양한 구조적 유사체 또는 조합일 수 있다. 몇몇 구현예에서, 스크리닝 방법은 후보 제제들의 조합 라이브러리를 이용한다. 조합 라이브러리는 단계별 방식으로 합성될 수 있는 다수의 유형의 화합물에 대해 제조될 수 있다. 이러한 화합물로서는 폴리펩티드, 베터-턴(beta-turn) 모의체, 핵산, 다당류, 인지질, 호르몬, 프로스타글란딘, 스테로이드, 방향족 화합물, 헤테로사이클릭 화합물, 벤조디아제핀, 올리고머 N-치환 글리신 및 올리고카밤산염을 포함한다. 화합물의 대형 조합 라이브러리는 문헌[Affymax, WO 95/12608, Affymax, WO 93/06121, Columbia University, WO 94/08051, Pharmacopeia, WO 95/35503 및 Scripps, WO 95/30642(이 문헌들 각각은 모든 목적을 위해 본원에 참조로 첨부됨]에 기술된, 암호화 합성 라이브러리(ESL)법에 의해 구성될 수 있다. 펩티드 라이브러리는 또한 파지 전시법에 의해 제조될 수 있다. 예컨대 문헌(Devlin, W0 91/18980)을 참조한다.

후보 제제는 다수의 화학군을 포함하나, 통상적으로는 유기 화합물로서, 예를 들어 소형 유기 화합물, 핵산, 예컨대 올리고뉴클레오티드, 펩티드 또는 항체이다. 적합하게 소형 유기 화합물은, 예컨대 분자량이 약 40 또는 약 50을 초과하되, 약 2,500 미만인 것일 수 있다. 후보 제제는 단백질 및/또는 DNA와 상호작용하는 기능성 화학기를 포함할 수 있다.

후보 제제는 다양한 공급원, 예컨대 합성 또는 천연 화합물 라이브러리로부터 수득될 수 있다. 예를 들어 다양한 유기 화합물 및 생체분자의 무작위 합성 및 유도 합성을 위해, 무작위화 올리고뉴클레오티드 발현을 비롯한 다수의 방법이 이용될 수 있다. 대안적으로, 예컨대 세균, 진균 및 동물의 추출물 형태를 가지는 천연 화합물 라이브러리가 이용될 수 있거나 용이하게 제조된다.

화학적 라이브러리: 조합 화학에 있어서의 발전은 변별적 화합물 수 백개 ~ 수 천개의 신속하고 경제적인 합성을 가능하게 하였다. 이 화합물은, 통상적으로 중간 정도의 크기를 가지는 것으로서, 효율적 스크리닝을 위해 디자인된 소 분자 라이브러리 내에 배치된다. 조합법은 신규 화합물을 동정하는데 적합한 비편향 라이브러리를 제조하는데 사용될 수 있다. 뿐 아니라, 크기가 더 작고, 다양성이 떨어지는 것으로서, 이미 확정된 생물 활성을 가지면서 단일 모 화합물로부터 유래하는 라이브러리가 제조될 수 있다.

조합 화학 라이브러리는 화학 합성법 또는 생물 합성법 중 어느 하나에 의해 다수의 화학적 "빌딩 블록(building block)"들, 예컨대 시약들을 합함으로써 제조된 다양한 화학적 화합물의 집합체이다. 예를 들어 선형 조합 화학 라이브러리, 예컨대 폴리펩티드 라이브러리는 화학적 빌딩 블록(아미노산) 세트를 다수의 조합을 이루며, 그리고 잠재적으로는 가능한 한 모든 방법을 동원하여 소정의 화합물 길이(즉 폴리펩티드 화합물내 아미노산의 수)로 합함으로써 제조된다. 이와 같은 화학적 빌딩 블록들의 조합적 혼합을 통하여 수 백만개의 화학적 화합물이 합성될 수 있다.

"라이브러리"는 2개 내지 50,000,000개의 다양한(diverse) 구성원 화합물을 포함할 수 있다. 바람직하게 라이브러리는 적어도 48개의 다양한 화합물, 바람직하게는 96개 이상의 다양한 화합물, 더욱 바람직하게는 384개 이상의 다양한 화합물, 더욱 바람직하게는 10,000개 이상의 다양한 화합물, 바람직하게는 100,000개를 초과하는 다양한 구성원, 가장 바람직하게는 1,000,000개를 초과하는 다양한 구성원 화합물을 포함한다. "다양한"이란, 라이브러리 내 화합물 50% 이상이 라이브러리의 또 다른 임의의 구성원의 화학 구조와 동일하지 않은 화학 구조를 가짐을 의미한다. 바람직하게 라이브러리 내 화합물의 75% 이상, 더욱 바람직하게는 90% 이상, 가장 바람직하게는 약 99% 이상은 집합체의 또 다른 임의의 구성원의 화학 구조와 동일하지 않은 화학 구조를 가진다.

조합 화학 라이브러리의 제조는 당 분야의 숙련자들에게 널리 공지되어 있다. 이의 검토를 위해서는, 문헌[Thompson et al., Synthesis and application of small molecule libraries, Chem Rev 96:555-600, 1996; Kenan et al., Exploring molecular diversity with combinatorial shape libraries, Trends Biochem Sci 19:57-64, 1994; Janda, Tagged versus untagged libraries: methods for the generation and screening of combinatorial chemical libraries, Proc Natl Acad Sci USA. 91:10779-85, 1994; Lebl et al., One-bead-one-structure combinatorial libraries, Biopolymers 37:177-98, 1995; Eichler et al., Peptide, peptidomimetic, and organic synthetic combinatorial libraries, Med Res Rev. 15:481-96, 1995; Chabala, Solid-phase combinatorial chemistry and novel tagging methods for identifying leads, Curr Opin Biotechnol. 6:632-9, 1995; Dolle, Discovery of enzyme inhibitors through combinatorial chemistry, Mol. Divers. 2:223-36, 1997; Fauchere et al., Peptide and nonpeptide lead discovery using robotically synthesized soluble libraries, Can J. Physiol Pharmacol. 75:683-9, 1997; Eichler et al., Generation and utilization of synthetic combinatorial libraries, Mol Med Today 1: 174-80, 1995; and Kay et al., Identification of enzyme inhibitors from phage-displayed combinatorial peptide libraries, Comb Chem High Throughput Screen 4:535-43, 2001]을 참조한다.

화학물질 다양성 라이브러리를 제조하기 위해 또 다른 화학물질도 사용될 수 있다. 이러한 화학물질로서는 펩토이드(PCT 공개공보 WO 91/19735); 암호화된 펩티드(PCT 공개공보 WO 93/20242); 무작위 바이오-올리고머(PCT 공개공보 WO 92/00091); 벤조디아제핀(미국 특허 제5,288,514호); 다이버소머(diversomer), 예컨대 히단토인, 벤조디아제핀 및 디펩티드(Hobbs, et al., Proc. Nat. Acad. Sci. USA, 90:6909-6913 (1993)); 비닐위치 폴리펩티드(Hagihara, et al., J. Amer. Chem. Soc. 114:6568 (1992)); β-D-글루코스 스캐폴드 보유 비 펩티드성 펩티도모의체(Hirschmann, et al., J. Amer. Chem. Soc., 114:9217-9218 (1992)); 소형 화합물 라이브러리의 유사 유기 합성(Chen, et al., J. Amer. Chem. Soc., 116:2661 (1994)); 올리고카밤산염(Cho, et al., Science, 261:1303 (1993)); 및/또는 펩티딜 포스폰산염(Campbell, et al., J. Org. Chem. 59:658 (1994)); 핵산 라이브러리((Ausubel, Berger and Sambrook, 상동) 참조); 펩티드 핵산 라이브러리(예컨대 미국 특허 제5,539,083호 참조); 항체 라이브러리(예컨대 Vaughn, et al., Nature Biotechnology, 14(3):309-314 (1996) 및 PCT/US96/10287 참조); 탄수화물 라이브러리(예컨대 Liang, et al., Science, 274:1520-1522 (1996) 및 미국 특허 제5,593,853호 참조); 소형 유기 분자 라이브러리(예컨대 Benzodiazepines, Baum C&E News, January 18, page 33 (1993) 참조); 이소프레노이드(미국 특허 제5,569,588호); 티아졸리디논 및 메타티아자논(미국 특허 제5,549,974호); 피롤리딘(미국 특허 제5,525,735호 및 동 제5,519,134호); 모폴리노 화합물(미국 특허 제5,506,337호); 벤조디아제핀(미국 특허 제5,288,514호) 등을 포함하나, 이에 한정되는 것은 아니다.

조합 라이브러리를 제조하기 위한 디바이스는 시판중에 있다[예컨대 357 MPS, 390 MPS, Advanced Chem. Tech, Louisville Ky., Symphony, Rainin, Woburn, Mass., 433A Applied Biosystems, Foster City, Calif., 9050 Plus, Millipore, Bedford, Mass.]. 또한, 다수의 조합 라이브러리가 시판되고 있다[예를 들어 ComGenex, Princeton, N.J., Asinex, Moscow, Ru, Tripos, Inc., St. Louis, Mo., ChemStar, Ltd., Moscow, RU, 3D Pharmaceuticals, Exton, Pa., Martek Bio sciences, Columbia, Md. 등].

본 발명의 스크리닝 검정법은, 적합하게 동물 모델, 세포 기반 시스템 및 비 세포 기반 시스템을 포함하며, 이를 구현한다. 예컨대 다양한 약물 스크리닝 기법 또는 분석 기법 중 임의의 것에 의하여 화합물 라이브러리를 스크리닝하거나, 또는 관심 화합물을 동정함으로써 치료 이익을 가지는 제제를 동정하기 위해 동정된 유전자, 이의 변이체, 단편 또는 올리고펩티드가 사용된다. 이러한 스크리닝에 사용되는 유전자, 이의 대립형질, 단편 또는 올리고펩티드는 용액 중에 자유로울 수 있거나, 고체 지지체에 고정될 수 있거나, 세포 표면이 보유할 수 있거나, 세포내에 위치할 수 있다. 측정은 이하 실시예 섹션에 상세히 기술된 바와 같이 수행될 것이다.

몇몇 구현예에서, 후보 치료제를 동정하는 방법은 특이적 표적 분자를 함유하는 시료를 고처리량 스크리닝 검정에서 스크리닝하는 단계를 포함한다.

다른 구현예에서, 치료제를 동정하는 방법은, (i) 표적 분자와 후보 치료제를 접촉시키는 단계; (i) 이 제제가 펩티드의 기능 또는 펩티드와 파트너 분자의 상호작용을 조정하는지, 또는 (ii) 이 제제가 표적의 핵산 서열 발현 및/또는 기능을 조정하는지 확인하는 단계를 포함한다.

다른 구현예에서, 질환을 치료하기 위한 후보 치료제를 동정하는 방법은, 표적 분자를 발현하는 것으로서, 단리된 세포를 배양하는 단계; 이 배양된 세포에 후보 치료제를 투여하는 단계; 후보 치료제의 존재 또는 부재 하에서의 표적 분자 발현, 활성 및/또는 기능을 대조군 세포에서와 비교하여 상관시키는 단계[단 약물은 원하는 치료 결과를 바탕으로 동정됨]를 포함한다. 예를 들어 약물은 표적 분자의 수준을 조정하는데, 이로써 이 수준은 질환의 상태에 대한 지표가 되거나, 또는 표적 분자는 어떤 경로의 상류이건 또는 하류이건 간에 거기에서 다른 분자의 양 또는 활성을 조정하게 된다. 다른 예에서, 본 검정법은 키나아제 활성을 측정한다. 다른 예에서, 본 검정법은 결합 파트너를 측정한다. 다른 예에서, 본 검정법은 원하는 치료 결과를 제공하는 후보 치료제의 양을 측정한다.

진단 및 후보 약물 발견을 위한 것으로서 적합한 또 다른 방법은, 표적 분자를 발현하는 세포를 시험 시료와 접촉시키는 단계와, 표적 분자, 이의 대립형질 또는 단편, 또는 표적 분자, 이의 대립형질 또는 단편의 발현 생성물과 시험 제제의 상호작용을 확인하는 단계를 포함한다.

다른 구현예에서, 예컨대 환자의 세포 또는 환자로부터 얻은 유체와 같은 시료는 단리된 다음, 후보 치료 분자와 접촉된다. 유전자 또는 이의 발현 생성물은, 어느 유전자 또는 발현 생성물이 약물에 의해 조절되는지 동정하기 위해 모니터링된다.

약학 조성물

전술된 바와 같이, 본 발명의 조성물은 당 분야의 숙련자에게 공지된 다양한 방법으로 제조될 수 있다. 본 발명의 조성물은, 조성물 자체의 원천 공급원 또는 이 자체가 수득된 방법에 상관없이, 그 용도에 따라서 제형될 수 있다. 예를 들어 전술된 핵산 및 벡터는 조직 배양액 중 세포에 적용하기 위하거나, 또는 환자나 대상체에 투여하기 위한 조성물 중에 제형될 수 있다. 본 발명의 약학 조성물 중 임의의 것은 의약 제조에 사용하기 위해 제형될 수 있으며, 구체적인 용도는 이하 치료에 관한 내용에 명시되어 있다. 이러한 조성물은 약학 분야에 널리 공지된 방식으로 제조될 수 있으며, 국소 치료가 바람직한지 또는 전신 치료가 바람직한지와, 치료될 부위에 따라서 다양한 경로를 통해 투여될 수 있다. 투여는 국소 투여(예컨대 안과 투여 및 점막, 예컨대 비내, 질내 및 직장 전달), 폐내 투여(예컨대 분무기에 의한 분말이나 에어로졸의 흡입 또는 취입; 기관내, 비내, 상피 및 경피), 안구, 경구 또는 비경구 투여일 수 있다. 안구 전달을 위한 방법은 국소 투여(점안액), 수술에 의해 결막낭에 삽입된 안과 삽입물 또는 풍선 카테터에 의한 결막하, 안구주위 또는 유리체내 주사 또는 도입을 포함할 수 있다. 비경구 투여는 정맥내, 동맥내, 피하, 복막내 또는 근육내 주사 또는 주입; 또는 두개내, 예컨대 지주막하 또는 뇌실내 투여를 포함한다. 비경구 투여는 단일 볼루스 투여의 형태일 수 있거나, 예를 들어 연속 주입 펌프에 의하여 이루어질 수 있다. 국소 투여를 위한 약학 조성물 및 약학 제형은 경피 패치, 연고, 로션, 크림, 겔, 점적, 좌제, 스프레이, 액체 및 분말 등을 포함할 수 있다. 종래의 약학 담체, 수성 분말 또는 유질 베이스 및 증점제 등이 필요할 수 있거나 요망될 수 있다.

본 발명은 또한 활성 성분으로서 본원에 기술된 폴리펩티드, 핵산 및 벡터를, 약학적으로 허용 가능한 담체 하나 이상과 함께 함유하는 약학 조성물을 포함한다. "약학적으로 허용 가능한 담체"란 용어는, 약학적으로 허용 가능한 성분에 대해 매질로서 사용될 수 있는 용매, 분산 매질, 코팅, 항균제, 등장제 및 흡수지연제, 완충제, 부형제, 결합제, 윤활제, 겔 및 계면활성제 등 임의의 것 그리고 모두를 포함한다. 본 발명의 조성물을 제조함에 있어 활성 성분은, 통상 부형제와 혼합되거나, 부형제에 의해 희석되거나, 또는 이러한 담체 내에, 예컨대 캡슐, 정제, 사세트, 페이퍼 또는 기타 용기의 형태로 봉입된다. 부형제가 희석제로서 사용될 때, 이는 활성 성분에 대해 비이클, 담체 또는 매질의 역할을 하는 고체, 반고체 또는 액체인 물질(예컨대 생리 식염수)일 수 있다. 그러므로 본 조성물은 정제, 알약, 분말, 로진즈, 사세트, 교갑, 엘릭시르, 현탁액, 에멀전, 용액, 시럽, (고체로서, 또는 액체 매질 중) 에어로졸, 로션, 크림, 연고, 겔, 연질 및 경질 젤라틴 캡슐, 좌제, 멸균 주사용액 및 멸균 포장 분말의 형태를 가질 수 있다. 당 분야에 공지된 바와 같이, 희석제의 유형은 의도로 하는 투여 경로에 따라서 달라질 수 있다. 얻어진 조성물은 추가의 제제, 예컨대 보존제를 포함할 수 있다. 몇몇 구현예에서, 담체는 액체 기반 또는 중합체 기반 콜로이드일 수 있거나 이를 포함할 수 있다. 몇몇 구현예에서, 담체 물질은 리포좀, 하이드로겔, 미립자, 나노입자 또는 블록 공중합체 미셀로서 제형된 콜로이드일 수 있다. 명시된 바와 같이, 담체 물질은 캡슐을 생성할 수 있고, 이 물질은 중합체 기반 콜로이드일 수 있다.

몇몇 경우에 있어, 국소 안구용 제형은 용액, 현탁액, 크림, 연고, 겔, 겔 형성 액체, 리포좀 또는 미셀을 함유하는 현탁액, 스프레이 제형 또는 에멀전이다. 몇몇 경우에 있어, 국소 안구용 제형은 또한 안정화제, 계면활성제, 중합체 기반 담체, 겔화제, 유기 보조용매, pH 활성 성분, 삼투압 활성 성분으로부터 선택되는, 약학적으로 허용 가능한 부형제 하나 이상을, 보존제와 함께 또는 보존제를 제외하고 포함한다. 몇몇 경우에 있어, 지연 방출 반고체 제형, 지연 방출 고체 제형 또는 안구용 임플란트가 발병된 눈에 주입된다. 몇몇 구현예에서, 지연 방출 반고체 제형, 지연 방출 고체 제형 또는 안구용 임플란트는 약학적으로 허용 가능한 부형제를 추가로 포함한다. 몇몇 경우에서, 지연 방출 반고체 제형, 지연 방출 고체 제형 또는 안구용 임플란트는 CSF1 또는 이의 수용체의 억제제, CSF2 폴리펩티드, 또는 이것들의 조합; 그리고 폴리젖산(PLA), 폴리글리콜산(PLGA), 그리고 폴리젖산과 폴리글리콜산의 공중합체로부터 선택되는 생분해성 중합체를 포함한다.

안과용 제형은 안과에서 허용 가능한 부형제, 예컨대 점활제(demulcent), 긴장성 조정제, 보존제, 완충제, pH 조정제, 가용화제, 계면활성제, 킬레이트화제, 경피흡수촉진제, 유화제, 현탁제, 안정화제, 항산화제, 담체, 가소제, 방출 개질 또는 제어 부형제, 이온교환수지 등(이에 한정되는 것은 아님) 적어도 하나를 추가로 포함한다. 적합한 점활제로서는 글리세린, 폴리비닐피롤리돈, 폴리에틸렌 산화물, 폴리에틸렌글리콜(PEG), 예컨대 PEG 400 및 PEG 300 등(이에 한정되는 것은 아님), 또는 이것들의 조합; 프로필렌글리콜, 솔비톨 및 폴리아크릴산 등, 또는 이것들의 조합을 포함하나, 이에 한정되는 것은 아니다. 본 발명의 조성물에 유용한 긴장성 조정제로서는 염, 예컨대 염화나트륨, 염화칼륨 및 염화칼슘(이에 한정되는 것은 아님)을 포함할 수 있으나, 이에 한정되는 것은 아니고, 비 이온성 긴장성 제제로서는 프로필렌글리콜, 글리세롤, 만니톨 및 덱스트란 등, 또는 이것들의 조합을 포함할 수 있으나, 이에 한정되는 것은 아니다.

적합한 킬레이트화제로서는 EDTA 및 이의 염을 포함할 수 있으나, 이에 한정되는 것은 아니다. 사용될 수 있는 가용화제로서는 CREMOPHOR EL®, 트윈 80 및 사이클로덱스트린 등, 또는 이것들의 조합을 포함하나, 이에 한정되는 것은 아니다. 적합한 사이클로덱스트린, 예컨대 α-사이클로덱스트린, β-사이클로덱스트린, γ-사이클로덱스트린, 하이드록시프로필-β-사이클로덱스트린, 하이드록시프로필-γ-사이클로덱스트린, 디메틸-β-사이클로덱스트린 및 디메틸-γ-사이클로덱스트린 등, 또는 이것들의 조합(이에 한정되는 것은 아님)이 사용될 수 있다. pH 조정제로서는 수산화나트륨, 염화수소산, 붕산, 트리스, 트리에탄올아민 및 수산화나트륨을 포함할 수 있다. 적합한 완충제로서는 인산염 및 아세트산염 등, 그리고 아미노 알코올, 예컨대 2-아미노-2-메틸-1-프로판올(AMP), 아스코르브산염, 붕산염, 탄산수소/탄산수소들, 시트르산염, 글루콘산염, 젖산염, 프로피온산염 및 트리스(트로메타민) 완충제 등, 또는 이것들의 조합을 포함하나, 이에 한정되는 것은 아니다. 적합한 보존제로서는 염화벤잘코늄, 폴리쿼테뮴-1, p-하이드록시벤조산 에스테르, 과붕산나트륨, 아염소산나트륨, 알코올, 예컨대 클로로부탄올, 벤질알코올 또는 페닐에탄올, 구아니딘 유도체, 예컨대 폴리헥사메틸렌 비구아니드, 과붕산나트륨 및 소르빈산 등, 또는 이것들의 조합을 포함하나, 이에 한정되는 것은 아니다. 선택적으로 사용될 수 있는 것으로서 적합한 경피흡수촉진제로서는 폴리옥시에틸렌글리콜라우릴에테르, 폴리옥시에틸렌글리콜스테아릴에테르, 폴리옥시에틸렌글리콜올레일에테르, 타우로콜산나트륨, 사포닌 및 CREMOPHOR EL 등, 또는 이것들의 조합을 포함하나, 이에 한정되는 것은 아니다.

사용될 수 있는 것으로서 적합한 계면활성제로서는 이온성 및 비이온성 계면활성제 등, 또는 이것들의 조합을 포함하나, 이에 한정되는 것은 아니다. 적합한 비이온성 계면활성제로서는 폴록사머, 틸록사폴, 폴리소르빈산염, 폴리옥시에틸렌, 피마자 오일 유도체, 소르비탄 에스테르, 폴리옥실 스테아르산염, 및 이것들 중 2개 이상의 혼합물을 포함하나, 이에 한정되는 것은 아니다. 적합한 약학 담체로서는 멸균수; 전해질, 예컨대 염화나트륨; 덱스트로스; 수중 또는 식염수중 덱스트로스; 저급 알칸올, 연고 베이스, 예컨대 천연 왁스, 예컨대 백밀랍, 카나우바 왁스, 울 왁스(울 지방), 정제 라놀린, 무수 라놀린; 석유 왁스, 예컨대 고체 파라핀, 미세결정질 왁스; 탄화수소, 예컨대 액체 파라핀, 백색 바셀린(예컨대 백색 PROTOPET®) 및 황색 바셀린 등, 또는 이것들의 조합(이에 한정되는 것은 아님)을 포함한다. 적합한 유화제, 예컨대 지방산의 모노글리세라이드 또는 디글리세라이드, 포스파티드, 예컨대 레시틴, 폴리소르빈산염, 마크로골, 폴록사머, 틸록사폴, 폴리에틸렌글리콜 유도체, 폴리비닐알코올 등과, 이것들의 혼합물(이에 한정되는 것은 아님)이 포함될 수 있다. 적합한 안정화제, 예컨대 폴리에틸렌글리콜 하이드록시스테아르산염, 티오우레아, 티오솔비톨, 디옥틸설포숙신산나트륨, 모노글리세롤 등, 또는 이것들의 조합(이에 한정되는 것은 아님)이 사용될 수 있다. 항산화제, 예컨대 아스코르브산, 아세틸시스테인, 시스테인, 아황산수소나트륨, 부틸화 하이드록시아니솔, 부틸화 하이드록시톨루엔 또는 알파-토코페롤 아세트산염 (이에 한정되는 것은 아님)이 사용될 수 있다. 가소제, 예컨대 글리세롤 등(이에 한정되는 것은 아님)이 사용될 수 있다.

방출 개질 또는 제어 부형제, 예컨대 중합체성 방출 개질 또는 제어 부형제, 비 중합체성 방출 개질 또는 제어 부형제, 또는 이것들의 조합(이에 한정되는 것은 아님)이 본 발명의 조성물 중에 포함될 수 있다. 예시적 방출 개질 또는 제어 부형제로서는 베헨산글리세릴, 키토산, 캐러기난, 셀룰로스 유도체, 예컨대 에틸셀룰로스, 아크릴산 및 메타크릴산 중합체 또는 공중합체 등, 또는 이것들의 유도체나 조합을 포함한다. 본 발명의 안과용 제형은 추가의 점도 향상제, 예컨대 셀룰로스 및 셀룰로스 유도체, 예컨대 메틸셀룰로스, 하이드록시프로필셀룰로스, 하이드록시에틸셀룰로스, 에틸하이드록시에틸셀룰로스, 하이드록시프로필메틸셀룰로스, 나트륨 카복시메틸셀룰로스, 아세토프탈산셀룰로스 등, 또는 이것들의 조합(이에 한정되는 것은 아님); 알긴산, 알긴산나트륨, 알긴산프로필렌글리콜, 폴리비닐피롤리돈, 카복시비닐 중합체 또는 카보머(CARBOPOL®), 폴리비닐알코올, 글리세린, 폴리에틸렌글리콜, 폴리옥시프로필렌 및 폴리옥시에틸렌의 3블록 공중합체, 폴리에톡시화 솔비탄, 폴리솔베이트 80, 황산콘드로이친, 디메티콘, 퍼플루오로노닐디메티콘, 사이클로메티콘, 덱스트란, 프로테오글리칸, 천연 다당류, 예컨대 히알루론산 및 이의 염, 구아 검, 카라야, 자일로글루칸 검, 키토산, 젤란 검, 펙틴, 콜라겐 및 변형 콜라겐 등, 또는 이것들의 조합(이에 한정되는 것은 아님)을 선택적으로 포함할 수 있으나, 이에 한정되는 것은 아니다.

본 발명의 안과용 제형은 추가의 겔화제, 예컨대 다당류 검, 예컨대 젤란 검, 타마린드 검, 트래거칸트, 메뚜기콩 검, 아가로스, 캐러기난, 구아 검, 하이드록시프로필 구아 검, 히알루론산, 키토산, 콘작, 아카시아, 펙틴, 아라비아, 커드란, 글루칸 검, 스클레로글루칸 및 황산화 글루칸 황산염 등, 또는 이것들의 조합(이에 한정되는 것은 아님); 셀룰로스 및 이의 유도체, 예컨대 메틸셀룰로스, 카복시메틸셀룰로스, 메틸셀룰로스; 하이드록시프로필셀룰로스, 메틸하이드록시프로필셀룰로스, 하이드록시프로필메틸셀룰로스, 셀룰로스 아세트산염, 에틸셀룰로스, 메틸하이드록시에틸셀룰로스, 하이드록시에틸셀룰로스 및 셀룰로스 검 등, 또는 이것들의 조합(이에 한정되는 것은 아님); 가교 아크릴 중합체 또는 카보머(CARBOPOL™), 알로에베라 겔, 폴리비닐 알코올, 폴리아크릴아미드, 폴록사머, 폴리메틸비닐에테르-말레산 무수물, 팽창성 수불용 중합체, 예컨대 하이드로겔 등, 또는 이것들의 조합(이에 한정되는 것은 아님)을 선택적으로 포함할 수 있으나, 이에 한정되는 것은 아니다. 이온 교환 수지, 예컨대 무기 제올라이트 또는 합성에 의해 제조된 유기 수지(이에 한정되는 것은 아님)가 본 발명의 조성물에 사용될 수 있다. 본 발명의 안과용 제형은, 선택적으로 추가의 점막접착제, 예컨대 폴리아크릴산, 히알루로난, 키토산, 풀루란, 셀룰로스 유도체, 예컨대 메틸셀룰로스, 하이드록시프로필 메틸셀룰로스, 나트륨 카복시메틸셀룰로스(이에 한정되는 것은 아님), 폴리갈락투론산, 알긴산나트륨, 펙틴, 자일로글루칸, 잔탄 검, 카보머(CARBOPOL™), 폴리비닐 알코올, 폴리비닐피롤리돈, 폴리에틸렌글리콜 및 폴록사머 등, 또는 이것들의 조합을 포함하나, 이에 한정되는 것은 아니다.

상기 예들에 관한 목록은 예시를 위한 목적으로 주어진 것이지, 철저함을 도모하기 위한 것은 아니다. 상기 목적에 유용한 것으로서 또 다른 제제의 예는 안과용 제형에 널리 공지되어 있으며, 본 발명에 의해 고려되고 있다. 본 발명의 제형 중 부형제의 농도는 다양할 수 있음도 고려된다. 본 발명의 안과용 제형은 점안액, 안 로션(eye lotion), 현탁액, 분산액, 겔, 연고, 에멀전, 콜로이드성 용액, 안구 삽입물, 안구용 하이드로겔, 필름, 미니 정제, 나노에멀전 및 미립자 시스템, 예컨대 리포좀, 극미립자, 나노입자 등(이에 한정되는 것은 아님)의 형태를 가질 수 있다. 일 구현예에서, 본 발명의 안과용 제형은 현장 겔화 시스템(in-situ gelling system)의 형태를 가진다. 다른 구현예에서, 본 발명의 현장형 겔화 조성물은 하나 이상의 가교제, 예컨대 붕산염 등(이에 한정되는 것은 아님)을 포함할 수 있다. 다른 구현예에서, 본 발명의 현장형 겔화 조성물은 하나 이상의 가교제를 포함하지 않는다.

추가의 구현예에서, 안구 삽입물의 형태를 가지는 본 발명의 안과용 제형은 생분해성 안구 삽입물이다. 다른 구현예에서, 안구 삽입물의 형태를 가지는 본 발명의 안과용 제형은 비 생분해성 안구 삽입물이다.

본 발명의 안과용 제형은 액체, 고체 또는 반고체 투여형의 형태를 가질 수 있다. 또한 일 구현예에서, 본 발명의 안과용 제형은 눈과 양립 가능한 삼투압 및 pH를 가지도록 제형된다. 본 발명의 안과용 제형은 최종 투여형에 따라서 안과에서 허용 가능한 것으로서 적합한 부형제를 포함할 수 있다. 일 구현예에서, 본 안과용 제형은 생리적으로 관용될 수 있는 pH 범위가 유지되도록 제형된다. 일 구현예에서, 본 안과용 제형의 pH 범위는 5 내지 9의 범위이다. 다른 구현예에서, 본 안과용 제형의 pH 범위는 6 내지 8의 범위이다.

추가의 구현예에서, 본 발명의 안과용 제형은 눈에의 국소 투여를 위한 것이다. 다른 구현예에서, 본 발명의 안과용 제형은 안구내 또는 안구주위 투여를 위한 것이다. 추가의 구현예에서, 본 발명의 안과용 제형은 활성 제제의 안구 강(ocular cavity)으로의 급속 방출용이다.

다른 구현예에서, 본 발명의 안과용 제형은 안구 강에서의 지연 방출 또는 제어 방출을 위한 것이다. 추가의 구현예에서, 본 발명의 안과용 제형은, 1일 1회 투여를 위한 것이다. 일 구현예에서, 본 안과용 제형으로부터 활성 제제의 지연 또는 제어 방출 전달은 약 24시간의 지연기간 동안의 진행을 위한 것이다. 다른 구현예에서, 활성 제제의 본 안과용 제형으로부터의 활성 제제의 지연 또는 제어 방출 전달은 약 12시간의 지연기간 동안의 진행을 위한 것이다. 추가의 구현예에서, 본 안과용 제형으로부터 활성 제제의 지연 또는 제어 방출 전달은 약 10시간의 지연기간 동안의 진행을 위한 것이다. 또 다른 구현예에서, 본 안과용 제형으로부터 활성 제제의 지연 또는 제어 방출 전달은 약 8시간의 지연기간 동안의 진행을 위한 것이다. 일 구현예에서, 본 안과용 제형으로부터 활성 제제의 지연 또는 제어 방출 전달은 약 6시간의 지연기간 동안의 진행을 위한 것이다. 추가의 구현예에서, 본 안과용 제형으로부터 활성 제제의 지연 또는 제어 방출 전달은 약 4시간 내지 약 24시간의 지연기간 동안의 진행을 위한 것이다.

본 발명의 안과용 제형의 투여형에 따라서 적당한 제조 방법이 사용된다. 당 분야에 공지된 안과용 제형의 다양한 제조 방법이 사용될 수 있다. 또한, 본 안과용 제형 또는 이에 사용된 부형제 및/또는 활성 제제는 투여형에 따라서 당 분야의 숙련자에게 공지된 방법 한 가지 이상에 의해 적합하게 멸균된다. 일 구현예에서, 안구 삽입물의 형태를 가지는 본 발명의 안과용 제형은 당 분야에 널리 공지된 성형 또는 압출 방법에 의해 제조된다. 다른 구현예에서, 안과용 용액의 형태를 가지는 본 발명의 안과용 제형은 규정된 양만큼의 약물을 안과에서 허용 가능한 부형제와 함께 규정된 부피만큼의 담체 용매에 용해 또는 현탁함으로써 제조된다. 본 발명의 안과용 제형으로서 임의의 것의 입도는 당 분야의 숙련자에게 공지된, 안과에서 허용 가능한 한계치들 이내에 있다.

본 발명의 조성물은 인간이나 동물의 치료에 유용하다.

조성물 또는 제형의 투여는, 1일에 1회, 1일에 2회, 1일에 3회, 1일에 4회 또는 이보다 더 자주 이루어질 수 있다. 횟수는 어떤 치료법의 치료 유지기(treatment maintenance phase) 동안 감소될 수 있다[예컨대 매일 또는 1일에 2회 대신, 2일 또는 3일에 1회]. 투여량과 투여 횟수는, 예를 들어 본 발명의 방법으로 치료되는 병태 질환의 임상 징후, 병리학적 징후, 그리고 임상 및 준임상 증상뿐 아니라, 환자의 병력을 고려하여, 치료 담당의의 판단을 기반으로 조정될 수 있다.

본원에 개시된 제제가 치료에 사용될 때 필요한 양은, 투여 경로, 치료가 필요한 병태의 성질, 환자의 연령, 체중 및 상태에 따라 달라질 것임과, 궁극적으로는 참여 담당의의 변별력에 따를 것임이 이해될 것이다. 조성물은, 통상 CSF1 또는 이의 수용체의 억제제, CSF2 폴리펩티드, 또는 이것들의 조합 유효량만큼을 함유할 것이다. 예비 용량은 동물 시험에 따라서 결정될 수 있으며, 인간에의 투여를 위한 투여량의 양 조정은 당 분야에서 받아들여지는 실무에 따라 수행될 수 있다.

치료 지속기간, 즉 수행일 수는 대상체를 치료하는 담당의에 의해 용이하게 결정될 것이나; 치료 수행일 수는 약 1일 내지 약 365일의 범위일 수 있다. 본 방법에 의해 제공되는 바와 같이, 치료 효능은 해당 치료가 성공적인지, 또는 추가 (또는 개선된) 치료가 필요한지를 결정하기 위해 치료 과정 내내 모니터링될 수 있다.

본 치료 화합물의 투여량, 독성 및 치료 효능은, 예컨대 LD50(모집단의 50%에 치사적인 용량) 및 ED50(모집단의 50%에서 치료적으로 유효한 용량)을 결정하기 위한 방법으로서, 세포 배양액 또는 실험 동물에서의 표준 약학 방법에 의해 확정될 수 있다. CSF1 및 CSF1R의 억제제와, CSF2의 투여형은 통상의 숙련자에 의해 용이하게 결정될 수 있으며, 예컨대 당 분야에 공지된 표준 방법에 따라서 투여량, 안전성 및 효능을 확정하기 위한 것으로서, 문헌에 보고된 임상 연구 및 동물 모델을 통해 수득될 수 있다. 정확한 제형, 투여 경로 및 투여량은 환자 상태를 고려하여 개별 담당의에 의해 선택될 수 있다.

임의의 구현예에서, 본 약학 조성물은 항 CSF1 항체 및 CSF2 재조합 펩티드를 포함한다. 임의의 구현예에서, 본 약학 조성물은 항 CSF1 수용체의 항체 및 CSF2 재조합 펩티드를 포함한다. 임의의 구현예에서, 본 약학 조성물은 항 CSF1 항체 및 항 CSF1 수용체의 항체를 포함한다. 임의의 구현예에서, 본 약학 조성물은 항 CSF1 항체 및 항 CSF1 수용체의 항체와, CSF2 폴리펩티드를 포함한다. 임의의 구현예에서, 본 약학 조성물은 CSF1 항체의 억제제 및/또는 CSF1 수용체의 억제제 및/또는 CSF2 폴리펩티드를 포함한다.

임의의 구현예에서, 약학 조성물은 콜로니자극인자 1(CSF1) 또는 이의 수용체의 억제제와, 콜로니자극인자 2(CSF2) 단백질 또는 폴리펩티드 치료적 유효량만큼을 포함한다. 임의의 구현예에서, CSF1 또는 이의 수용체의 억제제는 항체, 항체 단편, 앱타머, 소분자, 안티센스 올리고뉴클레오티드, siRNA 시약, Fab, Fab', F(ab')2 단편들, Fv 단편, 단일 사슬 항체, 항체의 모의체, 펩토이드, 사이토카인, 사이토카인 효현제, 사이토카인 길항제, 세포성 인자, 효소 또는 이것들의 조합을 포함한다.

임의의 구현예에서, 본원에 구현된 약학 조성물은 사이토카인, 사이토카인 효현제, 사이토카인 길항제 또는 이것들의 조합을 포함한다. 예를 들어 약학 조성물은 콜로니자극인자 1(CSF1) 또는 이의 수용체의 억제제 및/또는 콜로니자극인자 2(CSF2) 단백질 또는 폴리펩티드 및/또는 사이토카인(들), 사이토카인 효현제, 사이토카인 길항제 또는 이것들의 조합 치료적 유효량만큼을 포함한다.

임의의 구현예에서, CSF1 또는 CSF1 수용체의 억제제는 안구 투여용으로 제형된다. 임의의 구현예에서, CSF1의 억제제는 안구 투여용으로 제형된다. 임의의 구현예에서, CSF2 폴리펩티드 또는 단백질은 안구 투여용으로 제형된다.

몇몇 예들에서, 억제제 또는 폴리펩티드는 유리체내에 투여된다. CSF1 또는 CSF 수용체의 예시적 억제제로서는 CSF1 또는 CSF1 수용체에 특이적인 항체를 포함한다. 예를 들어 CSF1의 억제제는 안구 투여용으로 제형된다.

대안적으로, 또는 CSF1 치료와 아울러, 본 치료법은 안구 투여용으로 제형된 CSF2 폴리펩티드 또는 단백질을 포함한다.

본 발명은 점도가 물의 점도와 유사한 용액으로 제형된 CSF1 및 CSF1R의 억제제, CSF2 폴리펩티드, 또는 이것들의 조합의 제형을 제공한다. 본 용액은 약학적으로 허용 가능한 제제/부형제, 예컨대 사이클로덱스트린(이에 한정되는 것은 아님)을 포함한다. 이처럼 제형된 용액은 눈으로의 국소 투여에 적합한 것으로서, 투명하고 무색인 용액이다.

본 발명의 용액은 활성 제제의 전안부 노출을 줄여줌으로써, 용액중 활성 제제의 농도 증가와 전달 횟수 증가를 허용하므로, 눈의 후안부 내 활성 제제의 농도가 높게 유지되는 것이 촉진된다.

본 발명의 용액은 활성 제제, 즉 CSF1의 억제제, CSF1R의 억제제, CSF2 폴리펩티드, 또는 이것들의 조합, 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염을 약 0.005% w/v 내지 약 95% w/v만큼 포함한다. 몇몇 구현예에서, CSF1의 억제제, CSF1R의 억제제, CSF2 폴리펩티드, 또는 이것들의 조합의 용액 중 농도는 국소 투여용인 경우 약 0.005% w/v ~ 약 0.01% w/v, 약 0.01% w/v ~ 약 0.05% w/v, 약 0.05% w/v ~ 약 0.1% w/v, 약 0.1% w/v ~ 약 0.2% w/v, 약 0.2% w/v ~ 약 0.3% w/v, 약 0.3% w/v ~ 약 0.4% w/v, 약 0.4% w/v ~ 약 0.5% w/v, 약 0.5% w/v ~ 약 0.6% w/v, 약 0.6% w/v ~ 약 0.7% w/v, 약 0.7% w/v ~ 약 0.8% w/v, 약 0.8% w/v ~ 약 0.9% w/v, 약 0.9% w/v ~ 약 1.0% w/v, 약 1.0% w/v ~ 약 2.0% w/v, 약 2.0% w/v ~ 약 3.0% w/v, 약 3.0% w/v ~ 약 4.0% w/v, 약 4.0% w/v ~ 약 5.0% w/v, 0.005% w/v ~ 약 20% w/v, 약 0.005% w/v ~ 약 25% w/v, 약 0.005% w/v ~ 약 30% w/v, 약 0.005% w/v ~ 약 40% w/v, 약 0.005% w/v ~ 약 50% w/v 또는 이 이상이다. 몇몇 구현예에서, 용액은 CSF1의 억제제, CSF1R의 억제제, CSF2 폴리펩티드, 또는 이의 조합을 약 0.005% w/v, 약 0.05% w/v, 약 0.1% w/v, 약 0.2% w/v, 약 0.3% w/v, 약 0.4% w/v, 약 0.5% w/v, 약 0.6% w/v, 약 0.7% w/v, 약 0.8% w/v, 약 0.9% w/v, 약 1.0% w/v, 약 2.0% w/v, 약 3.0% w/v, 약 4.0% w/v, 약 5.0% w/v, 약 10% w/v, 약 15% w/v, 약 20% w/v, 약 25% w/v, 약 30% w/v, 약 40% w/v, 약 50% w/v 또는 이 이상만큼 포함한다.

몇몇 구현예에서, 본 제형은 억제제들 중 임의의 것의 용해도를 개선하기 위해 사이클로덱스트린을 포함한다. 화합물 I. 사이클로덱스트린, 즉 6개 내지 8개의 덱스트로스 단위가 1개 또는 4개의 결합을 통해 연결되어 이루어진 올리고당류는, 물이나 수용액(예컨대 PBS 완충제) 중 용해도가 떨어지거나 낮은 활성 제제의 용해도를 증가시킨다. 사이클로덱스트린은 소수성 활성 제제와 친수성 복합체를 형성한다.

사용될 수 있는 하나 이상의 사이클로덱스트린은 본 발명의 용액 중에 사용된다. 본 발명의 제형에 사용하기 위한 사이클로덱스트린의 비제한적 예로서는, 예컨대 2-하이드록시프로필-β-사이클로덱스트린, 메틸-β-사이클로덱스트린, 무작위 메틸화 β-사이클로덱스트린, 에틸화 베타-사이클로덱스트린, 트리아세틸-β-사이클로덱스트린, 과아세틸화 β-사이클로덱스트린, 카복시메틸-β-사이클로덱스트린, 하이드록시에틸-β-사이클로덱스트린, 2-하이드록시-3-(트리메틸암모니오)프로필-베타-사이클로덱스트린, 글루코실-β-사이클로덱스트린, 말토실-β-사이클로덱스트린, 설포부틸에테르-베타-사이클로덱스트린, 분지형 β-사이클로덱스트린, 하이드록시프로필-γ-사이클로덱스트린, 무작위 메틸화 γ-사이클로덱스트린, 트리메틸-γ-사이클로덱스트린, 또는 이것들의 조합이 있다.

정의

구체적으로 달리 정의되지 않는 한, 본원에 사용된 모든 기술 용어 및 과학 용어는 당 분야(예컨대 세포 배양, 분자 유전학 및 생화학 분야)의 숙련자에 의해 일반적으로 이해되는 의미와 동일한 의미를 가지는 것으로 간주되어야 할 것이다.

본원에 사용된 바와 같은 단수 형태를 나타내는 "하나의(a)", "한(an)" 및 "본(the)"은 명백히 달리 지시되지 않는 한 복수의 것을 가리키는 대상을 포함한다. 그러므로 예컨대 "하나의 질환", "하나의 질환 상태" 또는 "하나의 핵산"이 가리키는 대상은 이러한 구현예 하나 이상을 가리티는 대상이며, 당 분야의 숙련자들에게 공지된 이것들의 균등물 등을 포함한다.

본원에 사용된 바와 같이 수치 값이나 범위와 관련된 내용에 있어 "약"이란 용어는, 내용이 더욱 한정된 범위를 필요로 하지 않는 한, 나열 또는 청구된 수치 값 또는 범위의 ±10%인 경우를 의미한다.

본원에 사용된 바와 같은 "제제"란 용어는, 어떤 질환 또는 기타 의학적 병태를 예방, 완화 또는 치료할 수 있는 임의의 분자, 화학적 실체, 조성물, 약물, 치료제, 화학요법제 또는 생물 제제를 포함하는 의미이다. 이 용어는, 소분자 화합물, 안티센스 올리고뉴클레오티드, siRNA 시약, 항체, 에피토프 인지 부위를 보유하는 항체 단편, 예컨대 Fab, Fab', F(ab')₂ 단편들, Fv 단편, 단일 사슬 항체, 항체의 모의체(예컨대 DARPin, 아피바디 분자, 아필린, 아피틴, 안티칼린, 아비머, 파이노머, Kunitz 도메인 펩티드 및 모노바디), 펩토이드, 앱타머, 효소, 펩티드, 유기 또는 무기 분자, 그리고 천연 또는 합성 화합물 등을 포함한다. 제제는 임상 시험 중, 전임상 시험 테스트 단계 중 임의의 단계 또는 FDA 승인 후 본 발명의 방법에 따라서 검정될 수 있다.

본원의 "항체"란 용어는 최광의로 사용되고 있으며, 이로서는 폴리클로날 및 모노클로날 항체, 예컨대 비변형 항체 및 기능성(항원 결합) 항체 단편, 예컨대 단편 항원 결합(Fab) 단편, F(ab')₂ 단편, Fab' 단편, Fv 단편, 재조합 IgG(rlgG) 단편, 항원과 특이적으로 결합할 수 있는 가변 중쇄(V_H) 영역, 단일 사슬 항체 단편, 예컨대 단일 사슬 가변 단편(scFv), 그리고 단일 도메인 항체(예컨대 sdAb, sdFv, 나노바디) 단편을 포함한다. 이 용어는, 면역글로불린의 유전적으로 조작되고/조작되거나 아니면 변형된 형태, 예컨대 인트라바디, 펩티바디, 키메라 항체, 전인간 항체, 인간화 항체 및 이종접합 항체, 다중 특이적(예컨대 2중 특이적) 항체, 다이아바디, 트리아바디 및 테트라바디, 탠덤(tandem) 디-scFv, 탠덤 트리-scFv를 포함한다. 달리 진술되지 않는 한, "항체"란 용어는 항체의 기능성 항체 단편을 포함하는 것으로 이해되어야 할 것이다. 이 용어는 또한 비변형 또는 전장 항체, 예컨대 임의의 군 또는 하위 군 항체, 예컨대 IgG와, 항체의 하위 군들, 즉 IgM, IgE, IgA 및 IgD를 포함한다. "항체"란 용어는 모든 종의 것, 예컨대 인간 항체 및 인간화 항체를 포함하는 것이고, 항원 표적은 임의의 종으로부터 유래한 것일 수 있다. 그러므로, 예컨대 항원 "X"와 결합하는 항체는 마우스 항 인간 X, 인간 항 인간 X; 인간화 항 인간 X, 염소 항 인간 X; 염소 항 마우스 X; 래트 항 인간 X; 마우스 항 래트 X 등일 수 있다. 임의의 종에서 생성된 항체로서, 다른 종으로부터 유래하거나, 몇몇 경우에는 동일한 종으로부터 유래한(예컨대 자가면역 반응 또는 염증 반응에서 생성된) 항원 표적, 예컨대 "X"에 대해 생성된 항체의 조합은 제한이 없으며, 본 발명에서는 모든 종의 것이 구현된다.

"앱타머"는 다른 분자와 결합하는 DNA 또는 RNA 분자 자체의 능력을 바탕으로 하여 무작위 풀(random pool)로부터 선택된 DNA 또는 RNA 분자이다. 앱타머는 표적 분자와 특이적으로 결합하는데, 단 이때의 핵산 분자는 이 핵산 분자 자체가 원래 있던 환경에서 표적 분자에 의해 인지되는 서열을 포함하는 서열을 가진다. 대안적으로 앱타머는 표적 분자, 즉 자연에서 핵산 분자와 결합하지 않는 표적 분자와 결합하는 핵산 분자일 수 있다. 표적 분자는 임의의 관심 분자일 수 있다. 예를 들어 앱타머는 단백질의 리간드 결합 도메인에 결합하여, 단백질과 자연 발생 리간드의 상호작용을 막는데 사용될 수 있다. 이는 비제한적 예로서, 당업자들은 당 분야에 일반적으로 공지된 기법이 사용됨으로써 다른 구현예가 용이하게 제조될 수 있음을 인지할 것이다[예를 들어 문헌(Gold et al., Annu . Rev. Biochem . 64:763, 1995; Brody and Gold, J. Biotechnol . 74:5, 2000; Sun, Curr . Opin . Mol. Ther . 2:100, 2000; Kusser, J. Biotechnol . 74:27, 2000; Hermann and Patel, Science 287:820, 2000; 및 Jayasena, Clinical Chem . 45:1628, 1999)을 참조한다].

상기 서술 및 특허청구의 범위에서, "~중 적어도 하나" 또는 "~중 하나 이상"과 같은 어구는 요소들이나 특징들과 연결되는 목록이 선행될 수 있다. "및/또는"이란 용어는 또한 2개 이상의 요소들이나 특징들의 목록에서 등장할 수 있다. 이 용어가 사용되는 내용과 함축적으로나 명료하게 모순되지 않는 한, 이러한 어구는 개별적으로 나열된 요소들이나 특징들 중 임의의 것, 또는 나열된 요소들이나 특징들 중 임의의 것과 나열된 또 다른 요소들이나 특징들 중 임의의 것의 조합을 의미하도록 의도된다. 예를 들어 "A 및 B 중 적어도 하나"; "A 및 B 중 하나 이상"; 그리고 "A 및/또는 B"와 같은 어구들은 각각 "A 단독, B 단독, 또는 A와 B 둘 다"를 의미하도록 의도된다. 3개 이상의 항목을 포함하는 목록에 대해서도 또한 유사한 해석이 이루어져야 한다. 예를 들어 "A, B 및 C 중 적어도 하나"; "A, B 및 C 중 하나 이상"; 그리고 "A, B 및/또는 C"라는 어구들은 각각 "A 단독, B 단독, C 단독, A 및 B 둘 다, A 및 C 둘 다, B 및 C 둘 다, 또는 A 및 B 및 C 모두"를 의미하도록 의도된다. 또한, 상기 및 특허청구의 범위에서 "~를 기반으로 하는"이란 용어의 사용은 "적어도 부분적으로 ~를 기반으로 하는"을 의미하여, 나열되지 않은 특징 또는 요소도 또한 허용될 수 있음을 의미하도록 의도된다.

어떤 매개변수가 제공되는 경우, 해당 범위 내의 모든 정수와, 이의 소수 첫째 자리도 또한 본 발명에 의해 제공됨이 이해된다. 예를 들어 "0.2 mg ~ 5 mg"은 0.2 mg, 0.3 mg, 0.4 mg, 0.5 mg, 0.6 mg 등으로부터 5.0 mg을 포함하여 이에 이르기까지에 대한 개시이다.

"비교 윈도우(comparison window)"란, 2개의 서열이 최적으로 정렬된 후 한 서열이 이의 인접 위치들의 갯수와 동일한 갯수의 인접 위치들을 가지는 기준 서열과 비교될 수 있는 분절로서, 인접 위치들의 갯수 중 임의의 한 가지 경우(예컨대 적어도 약 10개 ~ 약 100개, 약 20개 ~ 약 75개, 약 30개 ~ 약 50개, 약 100개 ~ 약 500개, 약 100개 ~ 약 200개, 약 150개 ~ 약 200개, 약 175개 ~ 약 200개, 약 175개 ~ 약 225개, 약 175개 ~ 약 250개, 약 200개 ~ 약 225개, 약 200개 ~ 약 250개)를 보이는 분절을 지칭한다. 다양한 구현예에서, 비교 윈도우는 정렬된 2개의 서열 중 어느 하나 또는 둘 다의 전체 길이이다. 몇몇 구현예에서, 비교되는 2개의 서열은 상이한 길이를 포함하고, 비교 윈도우의 전체 길이는 2개의 서열보다 더 길거나 더 짧다. 비교를 위하여 서열들을 정렬하는 방법은 당 분야에 널리 공지되어 있다. 예를 들어 Smith & Waterman의 국소 상동성 알고리즘(Adv. Appl. Math. 2:482 (1981)), Needleman & Wunsch의 상동성 정렬 알고리즘(J. Mol. Biol. 48:443 (1970)), Pearson & Lipman의 유사성 검색법(Proc. Nat'l. Acad. Sci. USA 85:2444 (1988)), 이들 알고리즘의 전산화 실행(GAP, BESTFIT, FASTA 및 TFASTA; Wisconsin Genetics Software Package, Genetics Computer Group, 575 Science Dr., Madison, Wis.), 또는 수동식 정렬 및 육안 관찰(예컨대 문헌(Current Protocols in Molecular Biology(Ausubel et al., eds. 1995 증보판) 참조)에 의해 비교를 위한 서열들의 최적 정렬이 수행될 수 있다.

다양한 구현예에서, 서열 동일성% 및 서열 유사성%를 확정하는데 적합한 알고리즘은, 문헌(Altschul et al., Nuc. Acids Res. 25:3389-3402 (1977) 및 Altschul et al., J. Mol. Biol. 215:403-410 (1990))에 각각 기술된 BLAST 및 BLAST 2.0 알고리즘이다. BLAST 및 BLAST 2.0은 핵산 및 단백질에 대한 서열 동일성%를 확정하기 위해 본원에 기술된 매개변수와 함께 사용될 수 있다. BLAST 분석을 수행하기 위한 소프트웨어는, 당 분야에 공지된 바와 같이 국립생명공학정보센터(National Center for Biotechnology Information)를 통해 공중이 사용 가능하다. 이 알고리즘은, 우선 조회 서열(query sequence) 내 (데이터베이스 서열 중 동일 길이를 가지는 어떤 워드와 정렬될 때 양의 값인 몇몇 역치 스코어 T와 매칭되거나 이를 만족하는) 짧은 워드들(길이: W)을 동정함으로써 고 점수매김 서열쌍(high scoring sequence pair; HSP)을 동정하는 단계를 포함한다. T는 이웃 워드 스코어 역치(neighborhood word score threshold)로서 지칭된다(Altschul et al., 상동). 이러한 초기의 이웃 워드 히트는 이를 함유하는 더 긴 HSP를 찾기 위한 검색을 개시함에 있어 시드(seed)로서의 역할을 한다. 워드 히트는, 누적 정렬 스코어(cumulative alignment score)가 증가할 수 있는 한, 각각의 서열을 따라서 양 방향으로 연장된다. 누적 스코어는, 뉴클레오티드 서열의 경우에는 매개변수 M(매칭 잔기 쌍에 대한 리워드 스코어(reward score); 항상 0 초과) 및 매개변수 N(미스매칭 잔기에 대한 페널티 스코어(penalty score); 항상 0 미만)이 사용되어 산정된다. 아미노산 서열의 경우, 점수매김 매트릭스는 누적 스코어를 산정하는데 사용된다. 워드 히트의 각 방향으로의 연장은, 누적 정렬 스코어가 자체의 최대 달성 값으로부터 양 X만큼 감소하거나; "-"의 점수가 매겨진 잔기 정렬 하나 이상의 누적으로 말미암아 누적 스코어가 0 이하가 될 때; 또는 어느 한 서열의 말단에 도달할 때 중단된다. BLAST 알고리즘 매개변수 W, T 및 X는 정렬의 감도와 속도를 결정한다. (뉴클레오티드 서열용인) BLASTN 프로그램은 디폴트로서 워드길이(W) 11, 기대치(E) 10, M = 5, N = -4, 그리고 두 가닥 비교를 이용한다. 아미노산 서열용인 BLASTP 프로그램은 디폴트로서 워드길이 3, 기대치(E) 10, 그리고 BLOSUM62 점수매김 매트릭스(문헌(Henikoff & Henikoff, Proc. Natl. Acad. Sci. USA 89:10915 (1989)) 참조), 정렬치(B) 50, 기대치(E) 10, M = 5, N = -4, 그리고 두 가닥 비교를 이용한다.

전이부를 나타내는 용어인 "~를 포함하는(comprising)"은, "~를 포함하는(including)", "~를 함유하는(containing)" 또는 "~에 의해 특징지어지는(characterized by)"과 유사어로서, 포괄적이거나 비제한적이며, 추가의 나열되지 않은 요소들이나 방법의 단계들을 배제하지 않는다. 이와는 대조적으로, 전이부를 나타내는 어구인 "~으로 이루어진(consisting of)"은 청구항에 명시되지 않은 임의의 요소, 단계 또는 성분을 배제한다. 전이부를 나타내는 어구인 "본질적으로 ~으로 이루어진(consisting essentially of)"은 특허청구의 범위를, 여기에 명시된 재료나 단계, 그리고 청구된 발명의 기본적이고 신규의 특징(들)에 실질적으로 영향을 미치지 않는 재료나 단계에 한정한다.

본원에 사용된 바와 같은 "사이토카인"이란 용어는, 하나의 세포 모집단에 의해 방출된 단백질로서, 다른 세포에 대해 세포내 매개체로서의 역할을 하거나, 또는 단백질을 생산하는 세포에 대해 자가분비 효과를 보이게 하는 단백질을 총괄하여 지칭한다. 이러한 사이토카인의 예들로서는 림포카인, 모노카인; 인터루킨("IL"), 예컨대 IL-1, IL-1α, IL-2, IL-3, IL-4, IL-5, IL-6, IL-7, IL-8, IL-9, IL-10, IL-11, IL-12, IL-13, IL-15, IL-17A-F, IL-18 ~ IL-29(예컨대 IL-23), IL-31, 예컨대 PROLEUKINTM rIL-2; 종양 괴사 인자, 예컨대 TNF-α 또는 TNF-β, TGF-β 1 ~ 3; 그리고 기타 폴리펩티드 인자, 예컨대 백혈병억제인자("LIF"), 섬모향신경성인자("CNTF"), CNTF 유사 사이토카인("CLC"), 카디오트로핀("CT") 및 키트 리간드(Kit Ligand ; "KL")를 포함한다.

치료 화합물의 양을 지칭할 때 본원에 사용되는 바와 같은 "유효"란, 해당 화합물이 본 발명의 방식으로 사용될 때 이 화합물의 양이 과도한 부작용(예컨대 독성, 자극성 또는 알레르기 반응)을 보이지 않고 합리적인 이익/위험 비에 상응하여 원하는 치료 반응을 나타내기에 충분함을 지칭한다.

"부형제"는, 치료적으로나 생물학적으로 활성인 화합물이 아닌 것으로서, CSF2 폴리펩티드 또는 개시된 억제제 중 하나 이상에 함유될 수 있거나 합하여질 수 있는 임의의 기타 화합물을 포함하는 것으로 본원에서 사용된다. 보통 말하는 부형제는 약학적으로나 생물학적으로 허용 가능하거나 유관하여야 한다(예를 들어 부형제는, 일반적으로 대상체에 무독성이어야 한다). "부형제"는 이러한 화합물 하나를 포함하고, 또한 부형제 다수 개를 포함하도록 의도되기도 한다. 본 출원을 위하여, "부형제" 및 "담체"란 용어는 본 출원의 발명의 설명 전반에서 호환되어 사용되고 있으며, 상기 용어들은 본원에서 "안전하고 유효한 약학 조성물의 제형을 실행하는데 사용된 성분"이라 정의된다.

항체에 있어서 "고 친화성"이란 용어는, 항체의 표적 항원에 대한 K_D가 1 x 10^-7 M 이하, 더욱 바람직하게 5 x 10^-8 M 이하, 더욱더 바람직하게 1 x 10^-8 M 이하, 더욱더 바람직하게 5 x 10^-9 M 이하 그리고 더욱더 바람직하게 1 x 10^-9 M 이하인 경우를 지칭한다. 그러나, "고 친화성" 결합은 다른 항체 이소타입에 대해서는 달라질 수 있다. 예를 들어 IgM 이소타입에 대한 "고 친화성" 결합이란, 항체의 K_D가 10^-6 M 이하, 10^-7 M 이하, 10^-8 M 이하인 경우를 지칭한다.

2개 이상의 핵산 또는 폴리펩티드 서열에 관한 내용 중 "동일한" 또는 "동일성"%란 용어는, 2개 이상의 서열 또는 종속 서열이, 서열 비교 알고리즘이 사용되거나 수동식 정렬 및 육안 관찰에 의해 측정됨에 따라 비교 윈도우 또는 지정된 영역에 걸쳐 최대 대응도로 정렬되거나 비교될 때, 동일하거나, 또는 동일한 아미노산 잔기 또는 뉴클레오티드를 특정 퍼센트만큼 가지는(예컨대 전체 폴리펩티드 서열의 특정 영역 또는 이의 개별 영역에 대해서, 예컨대 50%, 55%, 60%, 65%, 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99% 또는 이 이상의 동일성을 보이는) 경우를 지칭한다. 이처럼 적어도 약 80% 동일한 서열은 "실질적으로 동일한" 것이라 칭하여진다. 몇몇 구현예에서, 2개의 서열은 100% 동일하다. 임의의 구현예에서, 2개의 서열은 서열 중 어느 하나(예컨대 서열들의 길이가 상이할 경우에는 이 2개의 서열 중 더 짧은 서열)의 전체 길이에 걸쳐 100% 동일하다. 다양한 구현예에서, 동일성은 시험 서열의 상보성을 지칭할 수 있다. 몇몇 구현예에서, 동일성은 그 길이가 적어도 약 10개 내지 약 100개, 약 20개 내지 약 75개, 약 30개 내지 약 50개 아미노산 또는 뉴클레오티드인 영역에 걸쳐 존재한다. 임의의 구현예에서, 동일성은 그 길이가 적어도 약 50개 아미노산인 영역, 또는 더욱 바람직하게 그 길이가 100개 내지 500개 아미노산, 100개 내지 200개 아미노산, 150개 내지 200개 아미노산, 175개 내지 200개 아미노산, 175개 내지 225개 아미노산, 175개 내지 250개 아미노산, 200개 내지 225개 아미노산, 200개 내지 250개 아미노산 또는 이 이상의 아미노산인 영역에 걸쳐 존재한다.

본원에 사용된 바와 같은 "단리된" 또는 "정제된" 핵산 분자, 폴리뉴클레오티드, 폴리펩티드 또는 단백질은 기타 세포성 물질로부터, 또는 재조합 기법에 의해 생산될 때에는 배양 배지로부터, 또는 화학 합성될 때에는 화학적 전구체 또는 기타 화학물질로부터 실질적으로 분리되어 있다. 정제된 화합물은 적어도 60 중량%(건조 중량)만큼의 관심 화합물이다. 바람직하게 제제 중 관심 화합물은 적어도 75 중량%, 더욱 바람직하게는 적어도 90 중량%, 가장 바람직하게는 적어도 90 중량%만큼 존재한다. 예를 들어 정제된 화합물은 원하는 화합물이 적어도 90 중량%(w/w), 91 중량%(w/w), 92 중량%(w/w), 93 중량%(w/w), 94 중량%(w/w), 95 중량%(w/w), 98 중량%(w/w), 99 중량%(w/w) 또는 100 중량%(w/w) 존재하는 것이다. 순도는 임의의 적당한 표준 방법, 예컨대 컬럼 크로마토그래피, 박층 크로마토그래피 또는 고성능 액체 크로마토그래피(HPLC) 분석에 의해 측정된다. 정제 또는 단리된 폴리뉴클레오티드(리보핵산(RNA) 또는 데옥시리보핵산(DNA))는 자연 발생 상태일 때 이 자체에 측접하는 유전자 또는 서열이 존재하지 않는 것이다. 정제 또는 단리된 단백질 또는 펩티드는 자연 발생 상태일 때 이 자체에 측접하는 아미노산 또는 아미노산 서열이 존재하지 않는 것이다. 정제되었다 함은 또한 인간 대상체에 투여하여도 안전한(예컨대 감염성 제제 또는 독성 제제가 존재하지 않는) 무균성의 정도를 정의한다. 이와 유사하게 "실질적으로 순수한"이란, 뉴클레오티드 또는 폴리펩티드가 자연상 이와 공존하는 성분들로부터 분리되었음을 의미한다. 통상적으로 뉴클레오티드 및 폴리펩티드는, 자연상 이것과 결합되어 있는 자연 발생 유기 분자 및 단백질로부터 적어도 60 중량%, 적어도 70 중량%, 적어도 80 중량%, 적어도 90 중량%, 적어도 95 중량%, 또는 심지어 적어도 99 중량%만큼이 분리되어 있을 때, 실질적으로 순수한 것이다.

본 발명의 명세서와 이에 첨부된 특허청구의 범위에서 사용되는 바와 같이, "또는"이란 용어는 내용 중 달리 명확히 명시되어 있지 않는 한, 일반적으로 "및/또는"을 포함하는 의미로 사용된다.

"서열 동일성 퍼센트"는, 비교 윈도우에 대해 최적으로 정렬된 서열 2개를 비교함으로써 확정되는데, 단 여기서 비교 윈도우 중 폴리뉴클레오티드 또는 폴리펩티드 서열의 일부는 2개의 서열의 최적 정렬을 위한 기준 서열(부가 또는 결실을 포함하지 않는 서열)에 비하여 부가 또는 결실(즉 갭(gap))을 포함할 수 있다. 퍼센트는, 동일한 핵산 염기 또는 아미노산 잔기가 양 서열에 발생한 위치의 갯수를 확정하여, 매칭된 위치의 갯수를 구하고, 이 매칭된 위치의 갯수를 비교 윈도우 내 위치의 총 갯수로 나눈 다음, 그 결과에 100을 곱하여 서열 동일성 퍼센트를 구함으로써 산정된다. 하나의 서열은 통상 서열 비교를 위해 기준 서열, 즉 시험 서열의 비교 대상인 서열로서의 역할을 한다. 다양한 구현예에서, 서열 비교 알고리즘이 사용될 때, 시험 서열과 기준 서열은 컴퓨터에 입력되고, 필요하다면 종속 서열 좌표가 지정되며, 서열 알고리즘 프로그램 매개변수가 지정된다. 바람직하게 디폴트 프로그램 매개변수가 사용될 수 있거나, 또는 대안적인 매개변수가 지정될 수 있다. 이후 서열 비교 알고리즘은, 기준 서열을 기준으로 하여 프로그램 매개변수를 바탕으로 시험 서열에 대한 서열 동일성%를 산정한다.

본원에 사용된 바와 같은 "약학적으로 허용 가능한" 담체 또는 부형제란, 과도한 부작용(예컨대 독성, 자극성 및 알레르기 반응)을 나타내지 않고 합리적인 이익/위험 비에 상응하여 인간 및/또는 동물에 사용하기 적합한 담체 또는 부형제를 지칭한다. 이는, 예컨대 본 발명의 화합물을 대상체에 전달하기 위한 것으로서, 약학적으로 허용 가능한 용매, 현탁제 또는 비이클일 수 있다.

"기준"이란, 표준 조건 또는 대조 조건을 의미한다.

"소분자"는 질량이 2000 달톤 미만인 화합물이다. 소분자의 분자 질량은, 바람직하게 1000 달톤 미만, 더욱 바람직하게 600 달톤 미만인데, 예를 들어 화합물은 500 달톤 미만, 400 달톤 미만, 300 달톤 미만, 200 달톤 미만 또는 100 달톤 미만이다.

본원에 사용된 바와 같이, 표적과 "특이적으로 결합하는" 항체는, 표적과 1 x 10^-7 M 이하, 더욱 바람직하게 5 x 10^-8 M 이하, 더욱 바람직하게 3 x 10^-8 M 이하, 더욱 바람직하게 1 x 10^-8 M 이하, 더욱더 바람직하게 5 x 10^-9 M 이하의 K_D로 결합하는 표적화 리간드, 예컨대 항체를 지칭하도록 의도된다.

본원에 사용된 바와 같은 "대상체", "환자", "개체" 등의 용어는 제한적이도록 의도되지 않고, 일반적으로 호환될 수 있다. 즉 "환자"라 기술된 개체는 반드시 소정의 질환이 발병했어야 하는 것은 아니지만, 단지 의료 디바이스를 필요로 할 수는 있다. 본원에 사용된 바와 같은 "대상체"란 용어는, 시신경병증으로 진단된 대상체를 포함한다. 예를 들어 대상체는 IOP가 상승한 것으로 진단된 대상체이다. 대안적으로 대상체는 IOP가 상승하지 않고 시신경병증을 포함하는 경우로 특징지어진 대상체이다. 몇몇 경우, 초기 녹내장은 IOP가 상승하지 않고 CSF1 및/또는 CSF2 수준이 비정상적인 것에 의해 특징지어진다. 이러한 환자는 본원에 기술된 조성물과 방법을 사용한 초기 치료로부터 이익을 얻는다.

본원에 사용된 바와 같이 어떤 장애와 연관된 "증상"으로는 해당 장애와 연관된 임의의 임상 발현 또는 실험실 발현을 포함하고, 대상체가 느낄 수 있는 바 또는 관찰할 수 있는 바에 한정되지 않는다.

본원에 사용된 바와 같은 "치료하는 것"이란, 예컨대 어떤 장애의 진행을 억제, 퇴행 또는 정체시키는 것을 포함한다. "치료하는 것"은 또한 어떤 장애의 임의의 증상 또는 증상들을 예방 또는 완화하는 것도 포함한다. 본원에 사용된 바와 같이, 대상체에서 질환의 진행 또는 질환의 합병증을 "억제하는 것"은, 대상체에서 해당 질환의 진행 및/또는 해당 질환의 합병증을 예방 또는 감소시키는 것을 의미한다.

"가변 영역" 또는 "가변 도메인"이란 용어가 항체, 예컨대 항체 단편에 대하여 사용될 때, 이 용어는 항체와 항원의 결합에 연루된 항체의 중쇄 또는 경쇄의 도메인을 지칭한다. 원산 항체의 중쇄 및 경쇄의 가변 도메인(각각 V_H 및 V_L)은, 각각의 도메인이 4개의 보존적 틀 영역(FR)과 3개의 CDR을 포함하는 것과 같이 일반적으로 그 구조가 유사하다(예를 들어 문헌(Kindt et al. Kuby Immunology, 6th ed., W.H. Freeman and Co., page 91 (2007)) 참조). 단일 V_H 또는 V_L 도메인은 항원 결합 특이성을 부여하는데 충분할 수 있다. 더욱이 특정 항원과 결합하는 항체는 상보성 V_H 또는 V_L 도메인의 라이브러리를 각각 스크리닝하기 위해, 항원과 결합하는 항체로부터 유래하는 V_H 또는 V_L 도메인을 사용하여 단리될 수 있다. 예를 들어 문헌(Portolano et al., J. Immunol. 150:880-887 (1993); Clarkson et al., Nature 352:624-628 (1991))을 참조한다.

본원에 개시된 모든 유전자, 유전자의 명칭, 그리고 유전자 생성물은, 본원에 개시된 조성물 및 방법이 적용될 수 있는 임의의 종으로부터 유래하는 상동체(homolog)에 대응하도록 의도된다. 따라서 이 용어들은 인간과 마우스로부터 유래하는 유전자 및 유전자 생성물을 포함하나, 이에 한정되는 것은 아니다. 특정 종으로부터 유래하는 유전자 또는 유전자 생성물이 개시될 때, 이러한 개시내용은 그것이 등장한 내용이 명료하게 명시하지 않는 한, 단지 예시적인 것일 뿐, 제한적인 것으로 해석되지 않음이 이해된다. 그러므로 예를 들어 본원에 개시된 유전자 또는 유전자 생성물(몇몇 구현예에서는 포유류 핵산 및 아미노산 서열에 관함)은, 다른 동물, 예컨대 기타 포유류, 어류, 양서류, 파충류 및 조류(birds)(이에 한정되는 것은 아님)로부터 유래하는 이종 상동성 및/또는 상동성 유전자 및 유전자 생성물을 포함하는 것으로 의도된다. 바람직한 구현예에서, 유전자, 핵산 서열, 아미노산 서열, 펩티드, 폴리펩티드 및 단백질은 인간의 것이다.

본원에 인용된 승인 번호에 의해 명시된 Genbank 및 NCBI 제출물은 본원에 참조로서 첨부되어 있다. 본원에 인용된 기타 공개 참고문헌, 서류, 원고 및 과학 문헌 모두는 본원에 참조로 인용되어 있다. 상충되는 경우, 정의를 포함하는 본 발명의 설명이 이를 제어할 것이다. 또한, 재료, 방법 및 실시예는 단지 예시적인 것일 뿐, 제한적인 것으로 의도되지 않는다.

기타 구현예

본 발명이 자체의 상세한 설명과 연계되어 기술되었을 때, 상기 서술은 첨부된 특허청구의 범위에 의해 한정되는 본 발명의 범위를 예시하도록 의도된 것이지, 이를 한정하고지 하는 것은 아니다. 기타 양태, 이점 및 변형예는 하기 특허청구의 범위 안에 속한다.

본원에 언급된 특허 문헌과 과학 문헌은, 당 분야의 숙련된 기술을 가진 자들이 이용 가능한 지식을 정립해준다. 본원에 인용된 미국 특허 및 공개 또는 미공개 미국 특허출원은 참조로서 첨부되어 있는 것이다. 본원에 언급된 외국 특허 및 특허출원 모두는 본원에 참조로 첨부되어 있다. 본원에 인용된 승인 번호로 명시된 Genbank 및 NCBI 제출물은 본원에 참조로 첨부되어 있다. 본원에 인용된 기타 공개 참고문헌, 서류, 원고 및 과학 문헌은 본원에 참조로 첨부되어 있다.

본 발명은 자체의 바람직한 구현예를 참고로 하여 구체적으로 보이고 기술되었던 한편, 다양한 형태 및 세부 사항에 가하여지는 변화는 첨부된 특허청구의 범위로부터 벗어나지 않고 그 안에서 이루어질 수 있음은 당 분야의 숙련자들에 의해 이해될 것이다.

SEQUENCE LISTING <110> THE SCHEPENS EYE RESEARCH INSTITUTE, INC. <120> A THERAPY FOR GLAUCOMA AND OPTIC NEUROPATHY BY TARGETING COLONY STIMULATING FACTORS <130> 036770-575001WO <150> US 62/638,884 <151> 2018-03-05 <160> 4 <170> PatentIn version 3.5 <210> 1 <211> 554 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 1 Met Thr Ala Pro Gly Ala Ala Gly Arg Cys Pro Pro Thr Thr Trp Leu 1 5 10 15 Gly Ser Leu Leu Leu Leu Val Cys Leu Leu Ala Ser Arg Ser Ile Thr 20 25 30 Glu Glu Val Ser Glu Tyr Cys Ser His Met Ile Gly Ser Gly His Leu 35 40 45 Gln Ser Leu Gln Arg Leu Ile Asp Ser Gln Met Glu Thr Ser Cys Gln 50 55 60 Ile Thr Phe Glu Phe Val Asp Gln Glu Gln Leu Lys Asp Pro Val Cys 65 70 75 80 Tyr Leu Lys Lys Ala Phe Leu Leu Val Gln Asp Ile Met Glu Asp Thr 85 90 95 Met Arg Phe Arg Asp Asn Thr Pro Asn Ala Ile Ala Ile Val Gln Leu 100 105 110 Gln Glu Leu Ser Leu Arg Leu Lys Ser Cys Phe Thr Lys Asp Tyr Glu 115 120 125 Glu His Asp Lys Ala Cys Val Arg Thr Phe Tyr Glu Thr Pro Leu Gln 130 135 140 Leu Leu Glu Lys Val Lys Asn Val Phe Asn Glu Thr Lys Asn Leu Leu 145 150 155 160 Asp Lys Asp Trp Asn Ile Phe Ser Lys Asn Cys Asn Asn Ser Phe Ala 165 170 175 Glu Cys Ser Ser Gln Asp Val Val Thr Lys Pro Asp Cys Asn Cys Leu 180 185 190 Tyr Pro Lys Ala Ile Pro Ser Ser Asp Pro Ala Ser Val Ser Pro His 195 200 205 Gln Pro Leu Ala Pro Ser Met Ala Pro Val Ala Gly Leu Thr Trp Glu 210 215 220 Asp Ser Glu Gly Thr Glu Gly Ser Ser Leu Leu Pro Gly Glu Gln Pro 225 230 235 240 Leu His Thr Val Asp Pro Gly Ser Ala Lys Gln Arg Pro Pro Arg Ser 245 250 255 Thr Cys Gln Ser Phe Glu Pro Pro Glu Thr Pro Val Val Lys Asp Ser 260 265 270 Thr Ile Gly Gly Ser Pro Gln Pro Arg Pro Ser Val Gly Ala Phe Asn 275 280 285 Pro Gly Met Glu Asp Ile Leu Asp Ser Ala Met Gly Thr Asn Trp Val 290 295 300 Pro Glu Glu Ala Ser Gly Glu Ala Ser Glu Ile Pro Val Pro Gln Gly 305 310 315 320 Thr Glu Leu Ser Pro Ser Arg Pro Gly Gly Gly Ser Met Gln Thr Glu 325 330 335 Pro Ala Arg Pro Ser Asn Phe Leu Ser Ala Ser Ser Pro Leu Pro Ala 340 345 350 Ser Ala Lys Gly Gln Gln Pro Ala Asp Val Thr Gly Thr Ala Leu Pro 355 360 365 Arg Val Gly Pro Val Arg Pro Thr Gly Gln Asp Trp Asn His Thr Pro 370 375 380 Gln Lys Thr Asp His Pro Ser Ala Leu Leu Arg Asp Pro Pro Glu Pro 385 390 395 400 Gly Ser Pro Arg Ile Ser Ser Leu Arg Pro Gln Gly Leu Ser Asn Pro 405 410 415 Ser Thr Leu Ser Ala Gln Pro Gln Leu Ser Arg Ser His Ser Ser Gly 420 425 430 Ser Val Leu Pro Leu Gly Glu Leu Glu Gly Arg Arg Ser Thr Arg Asp 435 440 445 Arg Arg Ser Pro Ala Glu Pro Glu Gly Gly Pro Ala Ser Glu Gly Ala 450 455 460 Ala Arg Pro Leu Pro Arg Phe Asn Ser Val Pro Leu Thr Asp Thr Gly 465 470 475 480 His Glu Arg Gln Ser Glu Gly Ser Phe Ser Pro Gln Leu Gln Glu Ser 485 490 495 Val Phe His Leu Leu Val Pro Ser Val Ile Leu Val Leu Leu Ala Val 500 505 510 Gly Gly Leu Leu Phe Tyr Arg Trp Arg Arg Arg Ser His Gln Glu Pro 515 520 525 Gln Arg Ala Asp Ser Pro Leu Glu Gln Pro Glu Gly Ser Pro Leu Thr 530 535 540 Gln Asp Asp Arg Gln Val Glu Leu Pro Val 545 550 <210> 2 <211> 972 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 2 Met Gly Pro Gly Val Leu Leu Leu Leu Leu Val Ala Thr Ala Trp His 1 5 10 15 Gly Gln Gly Ile Pro Val Ile Glu Pro Ser Val Pro Glu Leu Val Val 20 25 30 Lys Pro Gly Ala Thr Val Thr Leu Arg Cys Val Gly Asn Gly Ser Val 35 40 45 Glu Trp Asp Gly Pro Pro Ser Pro His Trp Thr Leu Tyr Ser Asp Gly 50 55 60 Ser Ser Ser Ile Leu Ser Thr Asn Asn Ala Thr Phe Gln Asn Thr Gly 65 70 75 80 Thr Tyr Arg Cys Thr Glu Pro Gly Asp Pro Leu Gly Gly Ser Ala Ala 85 90 95 Ile His Leu Tyr Val Lys Asp Pro Ala Arg Pro Trp Asn Val Leu Ala 100 105 110 Gln Glu Val Val Val Phe Glu Asp Gln Asp Ala Leu Leu Pro Cys Leu 115 120 125 Leu Thr Asp Pro Val Leu Glu Ala Gly Val Ser Leu Val Arg Val Arg 130 135 140 Gly Arg Pro Leu Met Arg His Thr Asn Tyr Ser Phe Ser Pro Trp His 145 150 155 160 Gly Phe Thr Ile His Arg Ala Lys Phe Ile Gln Ser Gln Asp Tyr Gln 165 170 175 Cys Ser Ala Leu Met Gly Gly Arg Lys Val Met Ser Ile Ser Ile Arg 180 185 190 Leu Lys Val Gln Lys Val Ile Pro Gly Pro Pro Ala Leu Thr Leu Val 195 200 205 Pro Ala Glu Leu Val Arg Ile Arg Gly Glu Ala Ala Gln Ile Val Cys 210 215 220 Ser Ala Ser Ser Val Asp Val Asn Phe Asp Val Phe Leu Gln His Asn 225 230 235 240 Asn Thr Lys Leu Ala Ile His Gln Gln Ser Asp Phe His Asn Asn Arg 245 250 255 Tyr Gln Lys Val Leu Thr Leu Asn Leu Asp Gln Val Asp Phe Gln His 260 265 270 Ala Gly Asn Tyr Ser Cys Val Ala Ser Asn Val Gln Gly Lys His Ser 275 280 285 Thr Ser Met Phe Phe Arg Val Val Glu Ser Ala Tyr Leu Asn Leu Ser 290 295 300 Ser Glu Gln Asn Leu Ile Gln Glu Val Thr Val Gly Glu Gly Leu Asn 305 310 315 320 Leu Lys Val Met Val Glu Ala Tyr Pro Gly Leu Gln Gly Phe Asn Trp 325 330 335 Thr Tyr Leu Gly Pro Phe Ser Asp His Gln Pro Glu Pro Lys Leu Ala 340 345 350 Asn Val Thr Thr Lys Asp Thr Tyr Arg His Thr Phe Thr Leu Ser Leu 355 360 365 Pro Arg Leu Lys Pro Ser Glu Ala Gly Arg Tyr Ser Phe Leu Ala Arg 370 375 380 Asn Pro Gly Gly Trp Arg Ala Leu Thr Phe Glu Leu Thr Leu Arg Tyr 385 390 395 400 Pro Pro Glu Val Ser Val Ile Trp Thr Phe Ile Asn Gly Ser Gly Thr 405 410 415 Leu Leu Cys Ala Ala Ser Gly Tyr Pro Gln Pro Asn Val Thr Trp Leu 420 425 430 Gln Cys Ser Gly His Thr Asp Arg Cys Asp Glu Ala Gln Val Leu Gln 435 440 445 Val Trp Asp Asp Pro Tyr Pro Glu Val Leu Ser Gln Glu Pro Phe His 450 455 460 Lys Val Thr Val Gln Ser Leu Leu Thr Val Glu Thr Leu Glu His Asn 465 470 475 480 Gln Thr Tyr Glu Cys Arg Ala His Asn Ser Val Gly Ser Gly Ser Trp 485 490 495 Ala Phe Ile Pro Ile Ser Ala Gly Ala His Thr His Pro Pro Asp Glu 500 505 510 Phe Leu Phe Thr Pro Val Val Val Ala Cys Met Ser Ile Met Ala Leu 515 520 525 Leu Leu Leu Leu Leu Leu Leu Leu Leu Tyr Lys Tyr Lys Gln Lys Pro 530 535 540 Lys Tyr Gln Val Arg Trp Lys Ile Ile Glu Ser Tyr Glu Gly Asn Ser 545 550 555 560 Tyr Thr Phe Ile Asp Pro Thr Gln Leu Pro Tyr Asn Glu Lys Trp Glu 565 570 575 Phe Pro Arg Asn Asn Leu Gln Phe Gly Lys Thr Leu Gly Ala Gly Ala 580 585 590 Phe Gly Lys Val Val Glu Ala Thr Ala Phe Gly Leu Gly Lys Glu Asp 595 600 605 Ala Val Leu Lys Val Ala Val Lys Met Leu Lys Ser Thr Ala His Ala 610 615 620 Asp Glu Lys Glu Ser Leu Met Ser Glu Leu Lys Ile Met Ser His Leu 625 630 635 640 Gly Gln His Glu Asn Ile Val Asn Leu Leu Gly Ala Cys Thr His Gly 645 650 655 Gly Pro Val Leu Val Ile Thr Glu Tyr Cys Cys Tyr Gly Asp Leu Leu 660 665 670 Asn Phe Leu Arg Arg Lys Ala Glu Ala Met Leu Gly Pro Ser Leu Ser 675 680 685 Pro Gly Gln Asp Pro Glu Gly Gly Val Asp Tyr Lys Asn Ile His Leu 690 695 700 Glu Lys Lys Tyr Val Arg Arg Asp Ser Gly Phe Ser Ser Gln Gly Val 705 710 715 720 Asp Thr Tyr Val Glu Met Arg Pro Val Ser Thr Ser Ser Asn Asp Ser 725 730 735 Phe Ser Glu Gln Asp Leu Asp Lys Glu Asp Gly Arg Pro Leu Glu Leu 740 745 750 Arg Asp Leu Leu His Phe Ser Ser Gln Val Ala Gln Gly Met Ala Phe 755 760 765 Leu Ala Ser Lys Asn Cys Ile His Arg Asp Val Ala Ala Arg Asn Val 770 775 780 Leu Leu Thr Asn Gly His Val Ala Lys Ile Gly Asp Phe Gly Leu Ala 785 790 795 800 Arg Asp Ile Met Asn Asp Ser Asn Tyr Ile Val Lys Gly Asn Ala Arg 805 810 815 Leu Pro Val Lys Trp Met Ala Pro Glu Ser Ile Phe Asp Cys Val Tyr 820 825 830 Thr Val Gln Ser Asp Val Trp Ser Tyr Gly Ile Leu Leu Trp Glu Ile 835 840 845 Phe Ser Leu Gly Leu Asn Pro Tyr Pro Gly Ile Leu Val Asn Ser Lys 850 855 860 Phe Tyr Lys Leu Val Lys Asp Gly Tyr Gln Met Ala Gln Pro Ala Phe 865 870 875 880 Ala Pro Lys Asn Ile Tyr Ser Ile Met Gln Ala Cys Trp Ala Leu Glu 885 890 895 Pro Thr His Arg Pro Thr Phe Gln Gln Ile Cys Ser Phe Leu Gln Glu 900 905 910 Gln Ala Gln Glu Asp Arg Arg Glu Arg Asp Tyr Thr Asn Leu Pro Ser 915 920 925 Ser Ser Arg Ser Gly Gly Ser Gly Ser Ser Ser Ser Glu Leu Glu Glu 930 935 940 Glu Ser Ser Ser Glu His Leu Thr Cys Cys Glu Gln Gly Asp Ile Ala 945 950 955 960 Gln Pro Leu Leu Gln Pro Asn Asn Tyr Gln Phe Cys 965 970 <210> 3 <211> 3904 <212> DNA <213> Homo sapiens <400> 3 ggtggccttg cctagctaaa aggggaagaa gaggatcagc ccaaggagga ggaagaggaa 60 aacaagacaa acagccagtg cagaggagag gaacgtgtgt ccagtgtccc gatccctgcg 120 gagctagtag ctgagagctc tgtgccctgg gcaccttgca gccctgcacc tgcctgccac 180 ttccccaccg aggccatggg cccaggagtt ctgctgctcc tgctggtggc cacagcttgg 240 catggtcagg gaatcccagt gatagagccc agtgtccccg agctggtcgt gaagccagga 300 gcaacggtga ccttgcgatg tgtgggcaat ggcagcgtgg aatgggatgg ccccccatca 360 cctcactgga ccctgtactc tgatggctcc agcagcatcc tcagcaccaa caacgctacc 420 ttccaaaaca cggggaccta tcgctgcact gagcctggag accccctggg aggcagcgcc 480 gccatccacc tctatgtcaa agaccctgcc cggccctgga acgtgctagc acaggaggtg 540 gtcgtgttcg aggaccagga cgcactactg ccctgtctgc tcacagaccc ggtgctggaa 600 gcaggcgtct cgctggtgcg tgtgcgtggc cggcccctca tgcgccacac caactactcc 660 ttctcgccct ggcatggctt caccatccac agggccaagt tcattcagag ccaggactat 720 caatgcagtg ccctgatggg tggcaggaag gtgatgtcca tcagcatccg gctgaaagtg 780 cagaaagtca tcccagggcc cccagccttg acactggtgc ctgcagagct ggtgcggatt 840 cgaggggagg ctgcccagat cgtgtgctca gccagcagcg ttgatgttaa ctttgatgtc 900 ttcctccaac acaacaacac caagctcgca atccatcaac aatctgactt tcataataac 960 cgttaccaaa aagtcctgac cctcaacctc gatcaagtag atttccaaca tgccggcaac 1020 tactcctgcg tggccagcaa cgtgcagggc aagcactcca cctccatgtt cttccgggtg 1080 gtagagagtg cctacttgaa cttgagctct gagcagaacc tcatccagga ggtgaccgtg 1140 ggggaggggc tcaacctcaa agtcatggtg gaggcctacc caggcctgca aggttttaac 1200 tggacctacc tgggaccctt ttctgaccac cagcctgagc ccaagcttgc taatgttacc 1260 accaaggaca catacaggca caccttcacc ctctctctgc cccgcctgaa gccctctgag 1320 gctggccgct actccttcct ggccagaaac ccaggaggct ggagagctct gacgtttgag 1380 ctcacccttc gatacccccc agaggtaagc gtcatatgga cattcatcaa cggctctggc 1440 acccttttgt gtgctgcctc tgggtacccc cagcccaacg tgacatggct gcagtgcagt 1500 ggccacactg ataggtgtga tgaggcccaa gtgctgcagg tctgggatga cccataccct 1560 gaggtcctga gccaggagcc cttccacaag gtgacggtgc agagcctgct gactgttgag 1620 accttagagc acaaccaaac ctacgagtgc agggcccaca acagcgtggg gagtggctcc 1680 tgggccttca tacccatctc tgcaggagcc cacacgcatc ccccggatga gttcctcttc 1740 acaccagtgg tggtcgcctg catgtccatc atggccttgc tgctgctgct gctcctgctg 1800 ctattgtaca agtataagca gaagcccaag taccaggtcc gctggaagat catcgagagc 1860 tatgagggca acagttatac tttcatcgac cccacgcagc tgccttacaa cgagaagtgg 1920 gagttccccc ggaacaacct gcagtttggt aagaccctcg gagctggagc ctttgggaag 1980 gtggtggagg ccacggcctt tggtctgggc aaggaggatg ctgtcctgaa ggtggctgtg 2040 aagatgctga agtccacggc ccatgctgat gagaaggagt ccctcatgtc cgagctgaag 2100 atcatgagcc acctgggcca gcacgagaac atcgtcaacc ttctgggagc ctgtacccat 2160 ggaggccctg tactggtcat cacggagtac tgttgctatg gcgacctgct caactttctg 2220 cgaaggaagg ctgaggccat gctgggaccc agcctgagcc ccggccagga ccccgaggga 2280 ggcgtcgact ataagaacat ccacctcgag aagaaatatg tccgcaggga cagtggcttc 2340 tccagccagg gtgtggacac ctatgtggag atgaggcctg tctccacttc ttcaaatgac 2400 tccttctctg agcaagacct ggacaaggag gatggacggc ccctggagct ccgggacctg 2460 cttcacttct ccagccaagt agcccagggc atggccttcc tcgcttccaa gaattgcatc 2520 caccgggacg tggcagcgcg taacgtgctg ttgaccaatg gtcatgtggc caagattggg 2580 gacttcgggc tggctaggga catcatgaat gactccaact acattgtcaa gggcaatgcc 2640 cgcctgcctg tgaagtggat ggccccagag agcatctttg actgtgtcta cacggttcag 2700 agcgacgtct ggtcctatgg catcctcctc tgggagatct tctcacttgg gctgaatccc 2760 taccctggca tcctggtgaa cagcaagttc tataaactgg tgaaggatgg ataccaaatg 2820 gcccagcctg catttgcccc aaagaatata tacagcatca tgcaggcctg ctgggccttg 2880 gagcccaccc acagacccac cttccagcag atctgctcct tccttcagga gcaggcccaa 2940 gaggacagga gagagcggga ctataccaat ctgccgagca gcagcagaag cggtggcagc 3000 ggcagcagca gcagtgagct ggaggaggag agctctagtg agcacctgac ctgctgcgag 3060 caaggggata tcgcccagcc cttgctgcag cccaacaact atcagttctg ctgaggagtt 3120 gacgacaggg agtaccactc tcccctcctc caaacttcaa ctcctccatg gatggggcga 3180 cacggggaga acatacaaac tctgccttcg gtcatttcac tcaacagctc ggcccagctc 3240 tgaaacttgg gaaggtgagg gattcagggg aggtcagagg atcccacttc ctgagcatgg 3300 gccatcactg ccagtcaggg gctgggggct gagccctcac cccccgcctc ccctactgtt 3360 ctcatggtgt tggcctcgtg tttgctatgc caactagtag aaccttcttt cctaatcccc 3420 ttatcttcat ggaaatggac tgactttatg cctatgaagt ccccaggagc tacactgata 3480 ctgagaaaac caggctcttt ggggctagac agactggcag agagtgagat ctccctctct 3540 gagaggagca gcagatgctc acagaccaca ctcagctcag gccccttgga gcaggatggc 3600 tcctctaaga atctcacagg acctcttagt ctctgcccta tacgccgcct tcactccaca 3660 gcctcacccc tcccaccccc atactggtac tgctgtaatg agccaagtgg cagctaaaag 3720 ttgggggtgt tctgcccagt cccgtcattc tgggctagaa ggcaggggac cttggcatgt 3780 ggctggccac accaagcagg aagcacaaac tcccccaagc tgactcatcc taactaacag 3840 tcacgccgtg ggatgtctct gtccacatta aactaacagc attaatacaa aaaaaaaaaa 3900 aaaa 3904 <210> 4 <211> 144 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 4 Met Trp Leu Gln Ser Leu Leu Leu Leu Gly Thr Val Ala Cys Ser Ile 1 5 10 15 Ser Ala Pro Ala Arg Ser Pro Ser Pro Ser Thr Gln Pro Trp Glu His 20 25 30 Val Asn Ala Ile Gln Glu Ala Arg Arg Leu Leu Asn Leu Ser Arg Asp 35 40 45 Thr Ala Ala Glu Met Asn Glu Thr Val Glu Val Ile Ser Glu Met Phe 50 55 60 Asp Leu Gln Glu Pro Thr Cys Leu Gln Thr Arg Leu Glu Leu Tyr Lys 65 70 75 80 Gln Gly Leu Arg Gly Ser Leu Thr Lys Leu Lys Gly Pro Leu Thr Met 85 90 95 Met Ala Ser His Tyr Lys Gln His Cys Pro Pro Thr Pro Glu Thr Ser 100 105 110 Cys Ala Thr Gln Ile Ile Thr Phe Glu Ser Phe Lys Glu Asn Leu Lys 115 120 125 Asp Phe Leu Leu Val Ile Pro Phe Asp Cys Trp Glu Pro Val Gln Glu 130 135 140

Claims (27)

1. 콜로니자극인자 1(CSF1) 또는 이의 수용체의 억제제를 눈에 국소 투여하거나, 또는 콜로니자극인자 2(CSF2) 단백질 또는 폴리펩티드를 눈에 국소 투여하는 단계를 포함하는, 대상체에서 시신경병성 장애를 치료하기 위한 방법.
2. 제1항에 있어서, 상기 대상체는 녹내장으로 진단된 대상체인 방법.
3. 제1항에 있어서, 상기 억제제 또는 CSF2 폴리펩티드는 유리체내 투여되는 방법.
4. 제1항에 있어서, 상기 억제제는 CSF1 또는 CSF1 수용체(CSF1R)에 특이적인 항체를 포함하는 방법.
5. 제1항 내지 제4항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 CSF1R의 억제제는 PLX3397, GW-2580, BLZ-945, RG-7155, FPA-008, M279 또는 이것들의 조합을 포함하는 방법.
6. 제1항에 있어서, 상기 억제제는 소분자인 방법.
7. 콜로니자극인자 1(CSF1) 또는 이의 수용체의 억제제와, 콜로니자극인자 2(CSF2) 폴리펩티드 치료적 유효량만큼을 포함하는 약학 조성물을 눈에 국소 투여하여, 시신경병성 장애를 예방 또는 치료하는 단계를 포함하는, 대상체에서 시신경병성 장애를 예방 또는 치료하는 방법.
8. 제6항에 있어서, 상기 CSF1 또는 이의 수용체의 억제제와, CSF2 단백질 또는 폴리펩티드 재조합 단백질은 미세교세포 활성화를 억제하는 방법.
9. 제6항에 있어서, 상기 CSF1 또는 이의 수용체의 억제제와, CSF2 단백질 또는 폴리펩티드 재조합 단백질은 망막신경절 세포(RGC) 및 시각 기능의 상실을 막는 방법.
10. 제6항에 있어서, 상기 CSF1 또는 이의 수용체의 억제제는 항체, 항체 단편, 앱타머, 소분자, 안티센스 올리고뉴클레오티드, siRNA 시약, Fab, Fab', F(ab')₂ 단편들, Fv 단편, 단일 사슬 항체, 항체의 모의체, 펩토이드, 사이토카인, 세포성 인자, 효소 또는 이것들의 조합을 포함하는 방법.
11. 제6항에 있어서, 상기 약학 조성물은 항 CSF1 항체 및/또는 CSF1 수용체(CSF1R) 억제제 및 CSF2 재조합 펩티드를 포함하는 방법.
12. 제6항 내지 제11항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 CSF1R의 억제제는 PLX3397, GW-2580, BLZ-945, RG-7155, FPA-008, M279 또는 이것들의 조합을 포함하는 방법.
13. 콜로니자극인자 1(CSF1) 또는 이의 수용체의 억제제와, 콜로니자극인자 2(CSF2) 단백질 또는 폴리펩티드 치료적 유효량만큼을 포함하는 약학 조성물.
14. 제13항에 있어서, 상기 CSF1 또는 이의 수용체의 억제제와, CSF2 단백질 또는 폴리펩티드 재조합 단백질은 미세교세포 활성화를 억제하는 약학 조성물.
15. 제13항 또는 제14항에 있어서, 상기 CSF1 또는 이의 수용체의 억제제와, CSF2 단백질 또는 폴리펩티드 재조합 단백질은 망막신경절 세포(RGC) 및 시각 기능의 상실을 막는 약학 조성물.
16. 제10항에 있어서, 상기 CSF1 또는 이의 수용체의 억제제는 항체, 항체 단편, 앱타머, 소분자, 안티센스 올리고뉴클레오티드, siRNA 시약, Fab, Fab', F(ab')₂ 단편들, Fv 단편, 단일 사슬 항체, 항체의 모의체, 펩토이드, 사이토카인, 세포성 인자, 효소 또는 이것들의 조합을 포함하는 약학 조성물.
17. 제13항 내지 제16항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 CSF1R의 억제제는 PLX3397, GW-2580, BLZ-945, RG-7155, FPA-008, M279 또는 이것들의 조합을 포함하는 약학 조성물.
18. 콜로니자극인자 1(CSF1) 또는 이의 수용체의 억제제를 대상체에 투여하거나, 또는 콜로니자극인자 2(CSF2) 단백질 또는 폴리펩티드를 눈에 국소 투여하는 단계를 포함하는, 대상체에서 미세교세포 활성화를 억제하는 방법.
19. 제18항에 있어서, 상기 대상체는 녹내장으로 진단된 대상체인 방법.
20. 제18항에 있어서, 상기 CSF1의 억제제 및/또는 CSF1 수용체의 억제제, 또는 CSF2 폴리펩티드는 유리체내 투여되는 방법.
21. 제18항 내지 제20항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 CSF1 또는 이의 수용체의 억제제는 항체, 항체 단편, 앱타머, 소분자, 안티센스 올리고뉴클레오티드, siRNA 시약, Fab, Fab', F(ab')₂ 단편들, Fv 단편, 단일 사슬 항체, 항체의 모의체, 펩토이드, 사이토카인, 세포성 인자, 효소 또는 이것들의 조합을 포함하는 방법.
22. 제18항 내지 제22항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 CSF1R의 억제제는 PLX3397, GW-2580, BLZ-945, RG-7155, FPA-008, M279 또는 이것들의 조합을 포함하는 방법.
23. 안구 투여용으로 제형되는 콜로니자극인자 1(CSF1)의 억제제.
24. 안구 투여용으로 제형되는 콜로니자극인자 1 수용체(CSF1R)의 억제제.
25. 안구 투여용으로 제형되는 콜로니자극인자 2(CSF2) 폴리펩티드 또는 단백질.
26. 콜로니자극인자 1(CSF1)의 억제제, 콜로니자극인자 1 수용체(CSF1R)의 억제제, 콜로니자극인자 2(CSF2) 폴리펩티드 또는 단백질, 또는 이것들의 조합을 포함하는 안구용 제형.
27. 제26항에 있어서, 상기 제형은 용액, 현탁액, 겔, 메쉬(mesh), 임플란트 또는 에멀전을 포함하는 안구용 제형.

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