KR20210003950A - 살포자성 방법 및 조성물 - Google Patents

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Abstract

퍼카르복실산-기반 조성물로 기질의 내생포자 오염을 감소시키기 위한 방법 및 조성물이 본원에 제공된다. 이 방법은 퍼카르복실산-기재 조성물의 산화-환원 전위를 지속적으로 모니터링하는 단계를 포함할 수 있다.

Description

살포자성 방법 및 조성물
관련 출원에 대한 상호 참조
본 출원은 35 U.S.C. §119(e)(1) 에 의거해 2018 년 5 월 31 일자로 출원된 미국 가출원 일련번호 제 62/678,562 호를 우선권 주장하고, 이의 내용은 본원에 참조로서 인용된다.
기술 분야
본 발명은 내생포자 오염을 감소시키기 위한 퍼카르복실산-기반 조성물에 관한 것이다.
특정 종의 박테리아는 가혹한 조건이나 영양 부족에 반응하여 내생포자를 형성할 수 있다. 내생포자는 고도로 압축된 미생물 DNA 를 함유하는 휴면상태의, 다중층 비-생식 구조이다. 내생포자는 예를 들어, 일반적으로 박테리아를 죽이는 고온, UV 조사, 건조, 화학적 및 효소 노출과 같은 환경적 공격에 저항성이다. 결과적으로 내생포자는 표준 항균 처리로 쉽게 죽지 않는다. 열 및 영양 배지와 같은 적절한 조건에 노출되면 내생포자가 발아하여 생존가능한 박테리아를 생성할 수 있다. 내생포자는 장기간 휴면상태를 유지할 수 있다. 인간 병원체, 예컨대 바실리스 안트라시스 (Bacillis anthracis) 및 클로스트리듐 보툴리눔 (Clostridium botulinum) 은 포자-형성 박테리아이다. 내생포자 오염, 예를 들어, 의료 장비, 의약품 제조 및 식품 포장에 사용되는 장비 및 식품 자체의 오염은 인간 건강에 심각한 위험을 초래할 수 있다. 내생포자 및 내생포자 형성 미생물에 의한 오염을 안전하고 효과적으로 제거하는 방법에 대한 지속적인 요구가 있다.
발명의 요약
본원에는 내생포자 또는 포자형성 미생물에 의한 기질의 오염을 감소시키는 방법이 제공되며, 이 방법은 오염을 줄이기에 충분한 시간 동안, 과산화물 분해 효소의 부재 하에 약 1.2 내지 30.0 의 중량% 비율로 퍼카르복실산 및 과산화수소를 포함하는 조성물과 기질을 접촉시키는 단계를 포함한다. 내생포자는 파에니바실러스 치벤시스 (Paenibacillus chibensis), 파에니바실러스 파비스포러스 (Paenibacillus favisporus), 바실러스 세레우스 (Bacillus cereus), 바실러스 아트로파에우스 (Bacillus atrophaeus), 바실러스 서브틸리스 (Bacillus subtilis) 및 제오바실러스 스테아로테르모필루스 (Geobacillus stearothermophilus) 또는 이들의 조합으로 이루어진 군으로부터 선택된 미생물에 의해 생성될 수 있다. 퍼카르복실산은 C1-C10 퍼카르복실산, 예를 들어, 퍼아세트산을 포함할 수 있다. 퍼카르복실산 대 과산화수소의 중량% 비율은 약 1.2, 1.6, 1.8, 2.0, 2.2, 2.4, 2.5, 2.6, 2.8, 3.0, 3.2, 3.4, 3.6, 3.8, 4.0, 4.2, 4.4, 4.6, 4.8, 5.0, 5.2, 5.4, 5.6, 5.8, 또는 6.0 일 수 있다. 또한 본원에는 내생포자 또는 포자형성 미생물에 의한 기질의 오염을 감소시키는 방법이 제공되며, 이 방법은 오염을 줄이기에 충분한 시간 동안, 과산화물 분해 효소의 부재 하에 약 500 mV 초과의 산화-환원 전위 (ORP) 를 갖는 퍼카르복실산 및 과산화수소를 포함하는 조성물과 기질을 접촉시키는 단계를 포함한다. 또한 내생포자 오염으로 오염된 또는 그러한 위험에 처한 기질을 처리하는 방법이 제공되며, 이 방법은 퍼카르복실산 및 과산화수소를 포함하는 용액을 제조하는 단계; 500 mV 초과의 산화-환원 전위 (ORP) 를 제공하도록 퍼카르복실산 및 과산화수소의 농도를 조정하는 단계; 및 내생포자 오염을 감소시키기에 충분한 시간 동안 과산화물 분해 효소의 부재 하에 조절된 용액과 기질을 접촉시키는 단계를 포함하며, 여기서 ORP 는 접촉 단계 동안 연속적으로 모니터링된다.
본 발명의 이들 및 다른 특징 및 이점은 본 발명의 바람직한 구현예의 다음의 상세한 설명에서 보다 완전하게 개시되거나 이에 의해 명백해질 것이며, 이는 유사한 번호가 유사한 부분을 지칭하고 추가로 하기와 같은 첨부 도면과 함께 고려될 것이다.
도 1 은 55℃ 에서 2900 ppm 의 PAA 에서 P. 치벤시스 (P. chibensis) BAA-725 에 대한 PAA/H2O2 비율의 함수로서 D-값을 보여주는 그래프이다.
도 2 는 55℃ 에서 2900 ppm 의 PAA 에서 P. 파비스포러스 (P. favisporus) 에 대한 PAA/H2O2 비율의 함수로서 D-값을 보여주는 그래프이다.
도 3 은 65℃ 에서 6000 ppm 의 PAA 에서 P. 파비스포러스에 대한 PAA/H2O2 비율의 함수로서 D-값을 보여주는 그래프이다.
도 4 는 다양한 PAA 제형의 PAA 농도의 함수로서 산화-환원 전위 (ORP) 를 보여주는 그래프이다.
도 5 는 H2SO4 아쥬반트의 존재 하에 PAA 농도의 함수로서 산화-환원 전위 (ORP) 를 보여주는 그래프이다.
도 6 은 처리 시스템의 한 구현예를 설명하는 도식이다.
바람직한 구현예의 상세한 설명
바람직한 구현예에 대한 이러한 설명은 본 발명의 전체 서면 설명의 일부로 간주되는 첨부 도면과 관련하여 판독되도록 의도된다. 도면은 반드시 크기가 조정될 필요는 없으며, 본 발명의 특정 특징은 명확성과 간결함을 위해 크기조정 또는 다소 개략적인 형태로 과장되어 표시될 수 있다. 설명에서, 상대적 용어, 예컨대 "수평", "수직", "위", "아래", "상부" 및 "하부" 뿐 아니라 이의 파생어 (예, "수평으로", "아래로", "위로" 등) 은 당시 설명된 방향 또는 논의 중인 도면 그림에 제시된 방향을 나타내는 것으로 해석되어야 한다. 이러한 상대적 용어는 설명의 편의를 위한 것이며 일반적으로 특정 방향을 요구하는 것으로 의도되지 않는다. "안쪽으로" 대 "바깥으로", "세로" 대 "측면" 등을 포함하는 용어는 적절하게 서로에 대해 또는 연신 축에 대해, 또는 회전 축 또는 중심에 대해 상대적으로 해석되어야 한다. 부착, 커플링 등과 관련된 용어, 예컨대 "연결된" 및 "상호연결된" 은, 별도로 명시하지 않는 한, 구조가 개재 구조를 통해 직접적으로 또는 간접적으로 서로 고정되거나 부착되는 관계뿐만 아니라, 이동가능한 또는 단단한 부착물 또는 관계를 의미한다. 용어 "작동가능하게 연결된" 은 관련 구조가 그 관계로 인해 의도한 대로 작동할 수 있도록 하는 부착, 커플링 또는 연결이다. 단일 머신 만이 도시되어 있는 경우, "머신" 이라는 용어는 본원에서 논의된 하나 이상의 방법론을 수행하기 위해 명령 세트 (또는 복수 세트) 를 개별적으로 또는 공동으로 실행하는 임의의 머신 컬렉션을 포함하는 것으로 간주된다. 청구범위에서, 수단-플러스-기능 조항은, 사용되는 경우, 구조적 등가물 뿐만 아니라 등가 구조를 포함하여 인용된 기능을 수행하기 위해 기재된 설명 또는 도면에 의해 설명, 제안 또는 명백하게 표현된 구조를 포괄하도록 의도된다.
본 발명은 기질의 내생포자 오염을 감소시키기 위한 방법 및 조성물에 관한 것이다. 본 발명자들은 과산화물 분해 효소의 부재 하에 약 1.2 내지 6.0 의 중량% 비율로 퍼카르복실산과 과산화수소를 포함하는 조성물이 내생포자 오염을 효과적으로 감소시키는 것을 발견했다. 더욱 구체적으로, 과산화물 분해 효소의 부재 하에 약 1.2 내지 6.0 의 중량% 비율은 약 1.2 미만의 중량% 비율로 수득된 것보다 더 짧은 접촉 시간에 내생포자 형성 미생물의 수준을 실질적으로 감소시켰다. 조성물은 일반적으로 표준 항균 처리에 저항하는 미생물에 대한 살포자성 활성을 나타냈다.
본 발명자들은 또한 PAA 농도가 증가함에 따라 퍼아세트산/과산화수소 (PAA/H2O2) 용액의 산화 환원 전위 (ORP) 가 증가했다는 것을 발견하였다. 예기치않게, PAA/H2O2 비율이 증가함에 따라, 심지어 PAA 농도가 일정하게 유지된 경우에도, 용액의 ORP, 및 따라서 산화력이 증가하였다. 반대로, 비록 H2O2 가 일반적으로 강한 산화제로 간주될지라도, PAA 농도를 일정하게 유지하는 경우 H2O2 의 양의 증가는 용액의 ORP, 및 따라서 산화력을 감소시켰다. 이에 따라, ORP 의 지속적인 모니터링을 기반으로 한 살포자성 치료 시스템이 제공된다.
특정 이론에 제한되지 않고, ORP 및 PAA/H2O2 비율 사이의 관련성은 H2O2 가 산화제 또는 환원제로서 담당할 수 있는 과산-기반 제형 중의 H2O2 에 의해 수행되는 이중 역할과 관련이 있다는 것으로 보인다.
조성물
본원에 개시된 조성물은 퍼카르복실산을 포함한다. 퍼카르복실산은 2 개 또는 3 개의 탄소 원자를 갖는 유기 지방족 과산, 예를 들어 퍼아세트산 및 퍼옥시프로판산을 포함할 수 있다. 퍼카르복실산은 C1-C10 카르복실 과산을 포함할 수 있다. 다른 퍼카르복실산은 C2-C5 디카르복실 과산 또는 C6-C12 모노카르복실 과산을 포함할 수 있다. 추가 과산은 2 내지 5 개의 탄소 원자를 갖는 저급 유기 지방족 모노카르복실산, 예컨대 아세트산 (에탄산), 프로피온산 (프로판산), 부티르산 (부탄산), 이소-부티르산 (2-메틸-프로판산), 발레르산 (펜탄산), 2-메틸-부탄산, 이소-발레르산 (3-메틸-부탄산) 및 2,2-디메틸-프로판산이다.
본원에 개시된 방법에 유용한 과산은 퍼아세트산 (퍼옥시아세트산 또는 PAA) 또는 퍼포름산 또는 이들의 조합이다. 퍼카르복실산 용액, 예를 들어, 퍼아세트산 용액은 전형적으로 퍼아세트산, 물, 과산화수소, 아세트산 및 물의 동적 평형 혼합물이다. 이들 화합물의 중량비는 가변적일 수 있다. 퍼아세트산/과산화수소 (PAA/H2O2) 의 유용한 중량비는 약 1.2 내지 약 30.0 의 범위일 수 있다. 따라서, PAA/H2O2 의 중량비는 약 1.2, 약 1.6, 약 1.8, 약 2.0, 약 2.2, 약 2.4, 약 2.5, 약 2.6, 약 2.8, 약 3.0, 약 3.2, 약 3.4, 3.6, 3.8, 약 4.0, 약 4.2, 약 4.4, 약 4.6, 약 4.8, 약 5.0, 약 5.2, 약 5.4, 약 5.6, 약 5.8, 약 6.0, 약 6.5, 약 7.0, 약 7.5, 약 8.0, 약 8.5, 약 9.0, 약 9.5, 약 10.0, 약 12.0, 약 14.0, 약 16.0, 약 18.0, 약 20.0, 약 22.0, 약 24.0, 약 26.0, 약 28.0, 또는 약 30.0 일 수 있다. 일부 구현예에서, PAA/H2O2 의 중량비는 약 1.5, 약 2.2, 약 5.0 또는 약 5.5 일 수 있다.
퍼아세트산 용액은 퍼아세트산과 과산화수소의 농도로 확인할 수 있다. 상업적으로 이용가능한 퍼아세트산 용액은 2-35% 퍼아세트산과 5-30% 과산화수소를 함유하며, 나머지는 아세트산과 물인, 전형적인 제형을 가지고 있다. 예시적인 퍼아세트산 용액은 15% 퍼아세트산과 10% 과산화수소; 22% 퍼아세트산과 10% 과산화수소; 35% 퍼아세트산과 7% 과산화수소; 15% 퍼아세트산과 3% 과산화수소; 22% 퍼아세트산과 4% 과산화수소를 포함할 수 있다. 예시적인 PAA 용액은 15:10:36; 15:10:35; 35:10:15; 20-23:5-10:30-45 및 35:10:15 의 PAA : 과산화수소 : 아세트산의 중량비를 갖는 것들이다.
조성물에서 퍼아세트산의 농도는 약 1 ppm 내지 약 10,000 ppm 의 범위일 수 있다. 따라서 퍼아세트산의 농도는 약 1 ppm, 약 2 ppm, 약 3 ppm, 약 4 ppm, 약 5 ppm, 약 6 ppm, 약 7 ppm, 약 8 ppm, 약 9 ppm, 약 10 ppm, 약 12 ppm, 약 15 ppm, 약 18 ppm, 약 20 ppm, 약 25 ppm, 약 30 ppm, 약 35 ppm, 약 40 ppm, 약 45 ppm, 약 50 ppm, 약 60 ppm, 약 75 ppm, 약 100 ppm, 약 125 ppm, 약 150 ppm, 약 200 ppm, 약 250 ppm, 약 300 ppm, 약 350 ppm, 약 400 ppm, 약 450 ppm, 약 500 ppm, 약 1000 ppm, 약 1500 ppm, 약 2000 ppm, 약 2200 ppm, 약 2500 ppm, 약 2900 ppm, 약 3000 ppm, 약 3500 ppm, 약 4000 ppm, 약 4500 ppm, 약 5000 ppm, 약 6000 ppm, 약 7500 ppm, 또는 약 10,000 ppm 일 수 있다.
과산화물은 수성 저장 용액으로서 수득되고 사용을 위해 희석될 수 있다. 수성 과산화수소 저장 용액은 적어도 약 8 wt% H2O2, 적어도 약 15 wt% H2O2, 적어도 약 20 wt% H2O2, 적어도 약 27% H2O2, 적어도 약 35 wt% H2O2 를 함유할 수 있다. 본 발명에 사용하기에 적합한 이들 농도의 수성 과산화수소 저장 용액은 안정화된 H2O2 용액으로서 상업적 공급 업체로부터 쉽게 입수가능하다. 고농축 수성 과산화수소 저장 용액 (상당히 50 wt% H2O2 초과) 도 또한 사용될 수 있다. 약 50 wt% H2O2 초과의 수성 H2O2 저장 용액은 일반적으로 엄격한 취급 및 안전 조치가 필요하다. 따라서, 수성 과산화수소 저장 용액은 약 8 wt% H2O2 내지 약 70 wt% H2O2, 약 15 wt% H2O2 내지 약 50 wt% H2O2, 약 25 wt% H2O2 내지 약 40 wt% H2O2 의 범위의 농도를 가질 수 있다. 유용한 저장 용액은 약 30 wt% H2O2 내지 약 40 wt% H2O2 의 범위의 농도를 가질 수 있다.
본원에 개시된 조성물은 과산화물 분해 효소, 예를 들어 카탈라제를 배제한다. 이러한 효소는 과산화물을 물과 산소로 분해하는 것을 촉매한다. 본 발명자들은 효능을 향상시키기 위해 PAA/H2O2 조성물에서 과산화물의 수준을 감소시키기 위해 카탈라제 처리에 의존한 이전의 교시와는 반대로, 약 1.2 내지 6.0 의 중량 % 비율에서 PAA/H2O2 조성물이 카탈라제의 부재 하에 효과적인 살포자성 활성을 제공한다는 것을 발견했다. 따라서, 카탈라제의 생략은 잔류 효소를 제거하기 위해 샘플을 추가로 처리할 필요 없이 비용 없이 효과적인 살포자성 활성을 제공한다.
본원에 개시된 조성물은 과산화물 격리제, 즉 과산화물의 활성이 제거되도록 과산화물과 복합체를 형성할 수 있는 작용제를 배제한다. 과산화물 격리제는 예를 들어, 티타늄 (IV) 의 염, 예컨대 티타늄 아세테이트일 수 있다.
조성물은 아쥬반트를 포함하거나 배제할 수 있다. 아쥬반트는 안정화제, 습윤제 또는 조성물의 살생물 활성을 향상시키는 시약일 수 있다. 일부 구현예에서, 아쥬반트는 산, 예를 들어 황산 (H2SO4) 일 수 있다. 일부 구현예에서, 아쥬반트는 히드록시산, 예컨대 시트르산, 이소시트르산, 락트산, 글루콘산 및 말산일 수 있다. 일부 구현예에서, 아쥬반트는 금속 킬레이터, 예를 들어 에틸렌디아민테트라아세트산 (EDTA) 이다. 일부 구현예에서, 아쥬반트는 안정화제, 예를 들어 포스폰산 또는 포스포네이트, 예를 들어 DeQuest 2010 일 수 있다. 일부 구현예에서, 아쥬반트는 격리제, 예를 들어 디피콜린산일 수 있다. 일부 구현예에서, 아쥬반트는 계면활성제, 예를 들어 음이온성 라우릴레이트, 소르비탄 및 그 각각의 에스테르, 즉 폴리에틸렌 소르비탄 모노라우릴레이트; 및 단쇄 지방 에스테르 (C6-C12) 일 수 있다.
본원에 개시된 조성물은 포자형성 미생물로 오염되었거나 오염 위험이 있거나 포자형성 미생물로 오염된 것으로 의심되는 기질의 처리에 일반적이고 다양하게 유용하다. 조성물은 다양한 방식으로 제형화될 수 있다. 한 구현예에서, 퍼카르복실산 및 과산화수소는 농축된 수용액을 형성하기 위해 사용 전에 조합될 수 있다. 농축된 수용액은 적절한 농도로 사용하기 직전에 희석될 수 있다. 용액의 산화력은 산화-환원 전위를 평가하여 지속적으로 모니터링될 수 있다. 산화 환원 전위는 하나 이상의 ORP 프로브를 사용하여 모니터링될 수 있다. 일반적으로, 유용한 ORP 값은 약 450 mV, 약 480 mV, 약 500 mV, 약 520 mV, 약 540 mV, 약 560 mV, 약 580 mV, 약 600 mV, 약 620 mV, 약 640 mV, 약 660 mV, 약 680 mV, 약 700 mV, 약 720 mV, 약 740 mV, 약 760 mV, 약 780 mV, 약 800 mV, 약 820 mV, 약 840 mV, 약 860 mV, 약 880 mV, 약 900 mV, 약 920 mV, 약 940 mV, 약 960 mV, 약 980 mV 또는 약 1000 mV 일 것이다.
희석된 수용액은 액체 또는 얼음, 미스트, 안개, 증기 또는 초임계 유체로서 기질에 적용될 수 있다. 기질은 예를 들어 담금, 침수, 침지 또는 미스트 또는 안개로서의 분무를 포함하는 다양한 방식으로 조성물에 의해 접촉될 수 있다. 대안적으로, 조성물은 기체 증기로 증발되고 증기로서 적용될 수 있다. 일부 구현예에서, 농축된 수용액은 항미생물 처리에 적합한 최종 농도에 도달하기 위해 탱크 내 물에 첨가될 수 있다.
조성물과 기질 사이의 접촉 시간은 온도, 기질의 특성, 적용 방법 및 표적화되는 특정 미생물에 따라 달라질 수 있다. 조성물과 기질 사이의 접촉 시간은 몇 초에서 1 시간 이상 범위일 수 있다. 예시적인 접촉 시간은 약 1 초, 약 2 초, 약 3 초, 약 4 초, 약 5 초, 약 6 초, 약 7 초, 약 8 초, 약 9 초, 약 10 초, 약 15 초, 약 20 초, 약 25 초, 약 30 초, 약 40 초, 약 45 초, 약 50 초, 약 60 초, 약 90 초, 약 120 초, 약 3 분, 약 5 분, 약 8 분, 약 10 분, 약 15 분, 약 30 분, 약 45 분 또는 약 60 분을 포함한다.
일반적으로, 미생물 오염의 감소는 처리된 기질에서 생존가능한 미생물의 수준을 결정하여 분석할 수 있다. 일부 구현예에서, 미생물 오염의 감소는 미처리된 대조군 기질과 비교하여 처리된 식품의 오염의 약 50%, 약 80%, 약 90%, 약 95%, 약 99% 또는 약 99.9% 의 감소일 수 있다. 대안으로 또는 추가로, 감소를 Log10 감소로서 명시할 수 있다. 따라서 일부 구현예에서, 미생물 오염의 감소는 미처리된 대조군 기질에 비해 1, 2, 3, 4, 5, 6 또는 7 Log 감소일 수 있다. 미생물 오염의 수준은 예를 들어, 미생물 성장, 핵산 증폭 기술, 예컨대 중합효소 연쇄 반응 및 면역분석을 포함하는 표준 배양 방법에 의해 결정될 수 있다.
일부 구현예에서, 치료 효능은 "D-값" 으로서 표현될 수 있다. D-값은 주어진 온도 및 PAA 농도에서 표적 유기체의 1 Log10 (또는 90%) 감소를 달성하는데 필요한 시간 (예, 초) 이다. 따라서, D-값이 작을수록, 항미생물 효능이 높아진다.
본원에 개시된 방법 및 조성물은 혐기성 및 호기성 포자 형성 유기체 둘 다를 포함하는 포자 형성 박테리아에 의한 오염을 감소시키는데 유용하다. 예시적인 혐기성 유기체는 클로스트리듐 spp., 예를 들어, 클로스트리듐 보툴리눔 및 클로스트리듐 퍼프린겐스 (Clostridium perfringens) 를 포함한다. 예시적인 호기성 유기체는 파에니바실러스 spp. (Paenibacillus spp.), 예를 들어, 파에니바실러스 치벤시스 (Paenibacillus chibensis) 및 파에니바실러스 파비스포러스 (Paenibacillus favisporus); 제오바실러스 spp. (Geobacillus spp.), 예를 들어, 제오바실러스 스테아로테르모필러스 (Geobacillus stearothermophilus); 바실러스 spp., 예를 들어, 바실러스 세레우스 (Bacillus cereus), 바실러스 아트로파에우스 (Bacillus atrophaeus), 바실러스 서브틸리스; 브레비바실러스 spp., 예를 들어, 브레비바실러스 아그리 (Brevibacillus agri) 및 브레비바실러스 보르스텔렌시스 (Brevibacillus borstelensis); 스포로사르시나 spp., 예를 들어, 스포로사르시나 우레아에 (Sporosarcina ureae); 및 파에니스포로사르시나 (Paenisporosarcina) 를 포함한다.
조성물은 의료용, 플라스틱, 세라믹 유리, 목재, 고무 복합재 또는 이들의 조합을 포함하는 다양한 재료를 포함하는 다양한 기질에 적용될 수 있다. 기질은 포자 형성 미생물로 오염된 기질 또는 포자 형성 미생물에 의한 오염에 취약하거나 오염 위험이 있는 기질일 수 있다. 예를 들어, 조성물은 의료 장치, 식품 또는 음료 제조 장비, 약학 제조 장비 또는 식품을 포함하는 기질에 적용될 수 있다. 예시적인 기질은 식품 준비 및 가공에 사용되는 장비 및 포장, 예를 들어 음료 용기, 무균 충전 기계, 유제품 장비; 약학 준비 및 포장에 사용되는 장비 및 용기, 의료 장비 및 장치, 예컨대 수술 기구 또는 진단에 사용되는 기타 기구, 예를 들어, 내시경 치과 도구 및 기타 장비, 및 수의학 장비를 포함한다.
조성물은 건물과 그 내용물을 포함하여 다양한 물체에 적용될 수 있다. 따라서, 조성물은 상기 설명된 임의의 시설에서 바닥, 벽, 문, 문 손잡이 및 고정물에 적용될 수 있다. 조성물은 또한 그러한 시설에서 발견되는 물체에 적용될 수 있다. 조성물은 의료 기기 및 장비, 예를 들어 수술실 내 수술대 및 기타 고정물, 병원 침대, 트레이 테이블, 거니, 휠체어, 보행기, 재사용 가능한 의료 기기 및 액세서리, 예를 들어, 기구 트레이, 가위, 청진기, 카테터, 수술용 메스, 랜싯, 청진기, 심박조율기, 심박조율기 케이블, 기관절개 튜브, 온도계, 봉합사 또는 외과용 클램프를 포함하나 이에 제한되지 않는 헬스 케어 시설에서 발견되는 물체에 특히 유용하다. 다른 예시적인 물체는 욕실 물체 및 표면 (예, 바닥, 욕조, 샤워실, 거울, 화장실, 비데, 욕실 고정물), 주방 표면 (예, 조리대, 스토브, 오븐, 레인지, 싱크대, 냉장고, 냉동고, 전자레인지, 가전제품, 테이블, 의자, 캐비닛, 서랍 및 바닥) 을 포함하나 이에 제한되지 않는다.
본원에 제공된 조성물 및 방법은 세라믹, 비닐, 왁스가 없는 비닐, 리놀륨, 멜라민, 유리, 에나멜, 플라스틱, 가소화 목재, 금속 (예, 스테인리스 스틸 또는 크롬처리된 표면) 페인트칠된 또는 니스칠된 또는 밀봉된 표면, 직물 또는 고무를 포함하나 이에 제한되지 않는 다양한 범위 또는 재료에 적용가능하다.
조성물은 또한 음식과 접촉하는 물체의 표면에도 적용될 수 있다. 이들 물체는 식품 준비 및 가공 장비, 예를 들어, 식기, 수저, 혼합 장치, 분쇄기, 예를 들어 고기 분쇄기, 텀블러, 블렌더, 액화기, 발효 탱크, 저장 탱크 또는 냉장 장비를 포함할 수 있다. 조성물은 또한 조리대, 도마, 싱크대 및 기타 작업 표면을 포함하여 음식 준비에 사용되는 표면에도 적용될 수 있다.
본원에 기재된 조성물 및 방법은 또한 식품, 예를 들어 식물 및 식물 부분 (예, 씨앗, 채소 및 과일) 의 표면 처리를 위해 사용될 수 있다. 적합한 식물 및 식물 부분은 원료 농업 상품 (, 비-가공 제품) 및 가공 제품 뿐 아니라 예를 들어, 육류, 생선 또는 조개 등의 동물성 단백질을 함유하는 식품을 포함한다.
또한 과산-기반 시스템의 항균 효능이 ORP 에 의해 표시되는 산화력의 함수라는 출원인의 발견에 기초한 물질의 내생포자 오염을 감소시키는 시스템이 제공된다. 청구항의 방법을 수행하기 위한 예시적인 시스템이 도 6 에 도시되어 있다. ORP 를 모니터링함으로써, PAA 농도 및 최적 PAA/H2O2 비율을 유지할 수 있다.
시스템은 PAA 주입구 (8) 을 통해 PAA 저장소 (6) 으로부터 공급되며, 물 주입구 (7) 로부터 물이 제공되는, 농축된 PAA 를 희석하기 위한 하나 이상의 메이크업 탱크 (1), 메이크업 탱크 (1) 의 배출량을 모니터링하기 위한 PAA 프로브 (2) 및 ORP 프로브 (3), 및 희석된 PAA 가 공급되는 살포자성 처리 탱크 (4) 를 제공한다. 시스템은 처리 후 PAA 의 사용을 허용하기 위한 선택적 재활용 라인 (5) 를 포함할 수 있다. PAA 의 H2O2 로의 분해로 인해 H2O2 농도는 저장 용액보다 재활용된 용액에서 더 높을 것으로 예상된다. 최적의 PAA/H2O2 비율을 유지하기 위해, ORP 프로브는 공급물 용액의 ORP 를 지속적으로 모니터링한다. 퍼지 (9) 가 그에 따라 조정할 수 있다. PAA 프로브는 PAA 농축액과 물의 주입을 목표 수준의 PAA 로 모니터링하고 제어하는데 사용된다. 대안적으로는, H2O2 프로브는 PAA/H2O2 비율을 모니터링하기 위해 ORP 프로브 대신 또는 추가로 사용될 수 있다.
실시예
실시예 1
미생물. 모든 미생물은 인증된 제조업체에서 포자 형태로 구입하였다.  유기체와 제조업체는 하기에 나열된다.
파에니바실러스 치벤시스 - American Type Culture Collection (ATCC);
파에니바실러스 파비스포러스 - DSMZ;
바실러스 세레우스 14579 - Presque Isle Cultures;
바실러스 아트로파에우스 9372 - Mesa Labs;
바실러스 서브틸리스 6633 -  Presque Isle Cultures;
바실러스 서브틸리스 19659 - Presque Isle Cultures;.
수령 시, 포자 배양물의 역가는 Butterfield 완충액에서 연속 희석한 후 3M AC Petrifilm™ 에 플레이팅하여 분석하였다.  그다음 Petrifilm™ 을 35℃ 에서 약 48 시간 동안 인큐베이션하고 늘어놓았다.  배양물을 전용 냉장고에 보관하였다. 매번 사용하기 전에, 포자 배양물의 역가를 재분석하여 배양물이 생존가능하고 오염되지 않은 상태로 남아 있는지 확인하였다.
실시예 2
파에니바실러스 치벤시스 BAA-725 는 표 1 에 제시된 바와 같은 PAA/H2O2 의 비율을 갖는 PAA 제형으로 처리되었다.
표 1: PAA/H 2 O 2 제형
Figure pct00001
PAA 제형은 사용 전에 탈이온수에서 약 2900 ppm 으로 희석되었다. 제형의 온도를 55℃ 로 상승시키고 실제 PAA 및 H2O2 농도를 사용 직전에 자동적정기에서 측정하였다.
P. 치벤시스 BAA-725 는 스테인리스 스틸 스트립에 접종되었다. P. 치벤시스 BAA-725 는 스트립을 PAA 제형에 10, 20 또는 30 초 동안 침지함으로써 접촉시켰다. 임의의 생존 유기체를 회수하고, 인큐베이션하고 계수하였다. 0.5% 소듐 티오설페이트를 함유하는 Letheen 브로쓰에 배양물을 현탁하고, 5 분 동안 초음파처리하고, 30 초 동안 볼텍싱하여 미생물을 회수하였다. 그다음 샘플을 Butterfield 완충액에 연속 희석하고, 3M AC Petrifilm™ 에 플레이팅하고, 35℃ 에서 약 48 시간 동안 인큐베이션하였다. 인큐베이션 후, Petrifilm 상의 생존 미생물을 계수하였다.
포자 사멸의 효능은 D-값으로 표현되었다. D-값은 주어진 온도 및 PAA 농도에서 표적 유기체의 1 Log10 (또는 90%) 감소를 달성하는데 필요한 시간 (예, 초) 이다. 따라서, D-값이 작을수록, 포자 사멸 효능이 높아진다.
도 1 에서 볼 수 있듯이, D-값은 PAA/H2O2 비율이 0.2 에서 1.2 로 증가함에 따라 약 16-18 초에서 약 4 초로 감소하였다. D-값은 약 1.8 내지 약 5.0 의 PAA/H2O2 비율에서 비교적 일정하게 유지되었다. 이들 데이터는 P. 치벤시스 BAA-725 포자를 사멸시키는데 유용한 PAA/H2O2 비율이 약 1.2 초과라는 것을 제시하였다.
실시예 3
파에니바실러스 치벤시스 BAA-725 를, H2O2 를 가수분해하는 효소인 카탈라제의 존재 및 부재 하에 PAA 제형으로 처리하였다.
35 중량% PAA 및 7 중량% H2O2 를 갖는 평형 PAA/H2O2 용액을, 약 2900 ppm 의 PAA 농도로 탈이온수 (DI) 로 희석하였다. 카탈라제 처리를 위해, 1 마이크로리터의 카탈라제 (Sigma-Aldrich, 아스페길루스 (Aspergillus) 의 카탈라제, ≥ 4000 유닛/mg 단백질, 약 14.4 mg/ml 단백질) 를 200 ml 용액에 첨가하고 온도에서 45 분 동안 인큐베이션하였다. 그다음 용액을 수조에서 55℃ 로 가온시켰다. 가온 단계는 약 38 분 걸렸다. 목표 온도에 도달하면, 실제 PAA 및 H2O2 농도를 자동적정기로 측정하였다.
P. 치벤시스 BAA-725 를 실시예 1 에 기술된 방법에 따라 스테인레스 스틸 스트립에 접종하고 카탈라제 분해된 PAA 용액 및 카탈라제 분해되지 않은 대조군 PAA 용액과 접촉시켰다. 샘플은 10, 20 및 30 초 동안 PAA 용액으로 처리되었다.
D-값은 전술한 바와 같이 계산되었다. 이 분석 결과가 표 2 에 제시된다.
표 2. 카탈라제 효소의 유무에 따른 PAA 용액의 D-값 비교
Figure pct00002
표 2 에서 볼 수 있듯이, 4.7 의 PAA/H2O2 비율에의 PAA 용액으로 수득된 D-값은 H2O2 함량을 100 ppm 미만으로 감소시키기 위해 카탈라제로 처리된 동일한 PAA 용액으로 수득된 것과 매우 유사하였다. 이들 데이터는 4.7 의 PAA/H2O2 비율에의 PAA 용액은 좀더 시간-소모적 효소 처리를 거친 PAA 샘플로서 P. 치벤시스 BAA-725 를 사멸시키는데 적어도 효과적이라는 것을 제시하였다. 이들 데이터는 효과적인 포자 사멸을 위해 그러한 효소 처리가 필요하지 않다는 것을 추가로 제시하였다.
실시예 4
파에니바실러스 파비스포러스는 표 3 에 제시된 바와 같은 PAA/H2O2 의 비율을 갖는 PAA 제형으로 처리되었다.
표 2 PAA/H 2 O 2 제형
Figure pct00003
PAA 제형은 사용 전에 탈이온수에서 약 2900 ppm 으로 희석되었다. 제형의 온도를 55℃ 로 상승시키고 실제 PAA 및 H2O2 농도를 사용 직전에 자동적정기에서 측정하였다.
P. 파비스포러스는 스테인리스 스틸 스트립에 접종되었다. P. 파비스포러스 샘플은 스트립을 PAA 제형에 10, 20 또는 30 초 동안 침지함으로써 접촉시켰다. 임의의 생존 유기체를 회수하고, 인큐베이션하고 계수하였다. 포자 사멸의 효능은 D-값으로 표현되었다.
도 2 에서 볼 수 있듯이, D-값은 PAA/H2O2 비율이 0.2 에서 약 3.5 로 증가함에 따라 약 120 초에서 약 20 초로 감소하였다. D-값은 약 3.5 내지 약 4.5 의 PAA/H2O2 비율에서 비교적 일정하게 유지되었다. 이들 데이터는 P. 파비스포러스의 사멸에 유용한 비율이 약 3.5 였다는 것을 제안하였다. 이들 데이터는 또한 P. 파비스포러스를 사멸시키는 것이 P. 치벤시스 BAA-725 보다 좀더 어려웠다는 것을 나타내었다.
실시예 5
P. 파비스포러스 포자에 대항하는 PAA/H2O2 의 효능에 대한 PAA 농도 및 인큐베이션 온도의 영향을 평가하였다.
35 중량% PAA 및 7 중량% H2O2 를 갖는 평형 PAA/H2O2 용액의 분취액을, 약 2900 ppm, 4500 ppm, 또는 6000 ppm 의 PAA 농도로 탈이온수 (DI) 로 희석하였다. 제형의 온도를 55℃ 또는 65℃ 로 상승시키고 실제 PAA 및 H2O2 농도를 사용 직전에 자동적정기에서 측정하였다.
P. 파비스포러스는 스테인리스 스틸 스트립에 접종되었다. P. 파비스포러스는 스트립을 PAA 제형에 10, 20 또는 30 초 동안 침지함으로써 접촉시켰다. 임의의 생존 유기체를 회수하고, 인큐베이션하고 계수하였다. 포자 사멸의 효능은 D-값으로 표현되었다. 이 실험 결과가 표 3 에 제시된다.
표 3: P. 파비스포러스 의 경우 PAA 농도 및 온도가 D-값에 미치는 영향
Figure pct00004
표 3 에서 볼 수 있듯이, 55℃ 의 온도에서 약 4.7 내지 약 4.6 의 PAA/H2O2 비율에서 PAA 농도가 2900 ppm 에서 6000 ppm 으로 증가함에 따라 D-값은 약 38 초에서 약 14 초로 감소하였다. 온도를 65℃ 로 올렸을 때, 약 4.6 의 비율에서 6000 ppm PAA 에서 D-값이 6 으로 감소하였다.
실시예 6
P. 파비스포러스를, H2O2 를 가수분해하는 효소인 카탈라제의 존재 및 부재 하에 PAA 제형으로 처리하였다. 제형은 표 4 에 제시된다.
표 4: PAA/H 2 O 2 제형
Figure pct00005
PAA 용액을 약 6000 ppm 의 PAA 농도로 탈이온수 (DI) 로 희석하였다. 카탈라제 처리를 위해, 1 내지 15 마이크로리터의 카탈라제 (Sigma-Aldrich, 아스페길루스 (Aspergillus) 유래의 카탈라제, ≥ 4000 유닛/mg 단백질) 를 200 ml PAA 용액에 첨가하고 실온에서 45 분 동안 인큐베이션하였다. 그다음 용액을 목표 온도에 도달하도록 65℃ 수조에서 약 40 내지 약 70 분 동안 인큐베이션하였다.
목표 온도에 도달하면, 실제 PAA 및 H2O2 농도를 자동적정기로 측정하였다.
P. 파비스포러스를 실시예 1 에 기재된 방법에 따라 스테인레스 스틸 스트립에 접종하고 카탈라제 분해된 PAA 용액 및 카탈라제 분해되지 않은 PAA 용액과 접촉시켰다. P. 파비스포러스 샘플은 스트립을 PAA 제형에 10, 20 또는 30 초 동안 침지함으로써 PAA 와 접촉시켰다. 임의의 생존 유기체를 회수하고, 인큐베이션하고 계수하였다. 포자 사멸의 효능은 D-값으로 표현되었다. 이 분석 결과가 도 3 에 제시된다.
도 3 에서 볼 수 있듯이, 65℃ 에서 6000 ppm 의 PAA 에서의 PAA 용액에 대한 D-값은 PAA/H2O2 비율이 0.2 에서 약 5.0 로 증가함에 따라 약 40 초에서 약 5 초로 감소하였다. 카탈라제 처리된 동일한 용액에 대한 D-값은 명목상 PAA/H2O2 비율이 0.2 에서 약 5.0 으로 증가함에 따라 40 초 이상에서 약 6 초로 감소하는, 유사한 경향을 보였다. 이들 데이터는 카탈라제 치료가 PAA 살포자성 활성의 효능을 증가시키지 않았음을 시사하였다.
실시예 7
바실러스 세레우스 14579, 바실러스 아트로파에우스 9372, 바실러스 서브틸리스 6633, 및 바실러스 서브틸리스 19659 포자에 대한 PAA/H2O2 제형의 효과를 평가하였다. 제형은 표 5 에 제시된다.
표 5: PAA/H 2 O 2 제형
Figure pct00006
PAA 제형은 사용 전에 탈이온수에서 약 1500 ppm 으로 희석되었다. 제형의 온도를 50℃ 로 상승시키고 실제 PAA 및 H2O2 농도를 사용 직전에 자동적정기에서 측정하였다.
바실러스 세레우스 14579, 바실러스 아트로파에우스 9372, 바실러스 서브틸리스 6633, 및 바실러스 서브틸리스 19659 포자는 스테인리스 스틸 스트립에 접종되었다. P. 파비스포러스 샘플은 스트립을 PAA 제형에 10, 20 또는 30 초 동안 침지함으로써 접촉시켰다. 임의의 생존 유기체를 회수하고, 인큐베이션하고 계수하였다. 포자 사멸의 효능은 D-값으로 표현되었다. 이 분석 결과가 표 6 에 제시된다.
표 6: 바실러스 종의 경우 D-값에 대한 PAA 농도의 영향
Figure pct00007
표 6 에 나타난 바와 같이, 두 제형 모두 시험된 모든 바실러스 종에 대해 50℃ 에서 1500 ppm PAA 에서 살포자성 활성을 나타냈다.
실시예 8
PAA 수용액의 산화-환원 전위 (ORP) 를 분석하였다. 용액은 표 7 에 제시된다.
표 7: PAA/H 2 O 2 제형
Figure pct00008
분석을 위해, PAA 제형을 DI 물에서 최대 약 6000 ppm 까지 연속 희석하였다. ORP 는 Pt 팁과 Accument Ag/AgCl 기준 전극이 있는 Accumet ORP 프로브로 측정되었다. 실제 PAA 및 H2O2 농도를 자동적정기로 측정하였다. 모든 용액은 실온에 있었다.
PAA 제형에 대한 ORP 와 PAA 농도 간의 관련성은 도 4 에 제시된다. 도 4 에서 볼 수 있듯이, ORP 는 각 제형에 대한 PAA 농도가 증가함에 따라 증가하였다. 놀랍게도, PAA/H2O2 비율이 증가함에 따라, 심지어 PAA 농도가 일정하게 유지된 경우에도, ORP 가 증가하였다. 예를 들어, 약 90 ppm 의 PAA 에서, ORP 는 0.2 의 PAA/H2O2 비율에 대해 약 420 mV 였다 (표 7 의 제형 4). ORP 는 0.6 의 PAA/H2O2 비율에 대해 약 480 mV 로 증가하였다 (표 7 의 제형 3). ORP 는 1.5 의 PAA/H2O2 비율에 대해 약 520 mV 로 증가하였다 (표 7 의 제형 2). 마지막으로, ORP 는 2.5 의 PAA/H2O2 비율에 대해 약 540 mV 로 증가하였다 (표 7 의 제형 1). 이 관련성은 심지어 분석된 최고 PAA 농도 (500 ppm) 에서도 유지되었다. 500 ppm 의 PAA 에서, ORP 는 각각 0.2, 0.6, 1.5 및 2.5 의 PAA/H2O2 비율에서 440 mV, 500 mV, 540 mV 및 580 mV 였다. 이들 데이터는 PAA 용액 중의 H2O2 농도의 증가가 ORP 및 따라서 용액의 산화력에 악영향을 미칠 것임을 시사하였다. 이들 데이터는 더 높은 PAA/H2O2 비율을 갖는 PAA 제형이 더 낮은 PAA/H2O2 비율을 갖는 PAA 제형보다 양호한 살포자성 효율을 갖는다는 이전 예의 데이터와 일치한다.
특정 이론에 제한되지 않고, ORP 및 PAA/H2O2 비율 사이의 관련성은 제형 중의 H2O2 에 의해 수행되는 이중 역할과 관련이 있는 것으로 보인다.
실시예 9
PAA 수용액의 ORP 에 대한 아쥬반트의 효과를 평가하였다. 용액은 표 8 에 제시된다.
표 8 PAA/H 2 O 2 아쥬반트 제형
Figure pct00009
분석을 위해, PAA 제형을 DI 물에서 최대 약 1000 ppm 까지 연속 희석하였다. ORP 는 Pt 팁과 Accument Ag/AgCl 기준 전극이 있는 Accumet ORP 프로브로 측정되었다. 실제 PAA 및 H2O2 농도를 자동적정기로 측정하였다. 모든 용액은 실온에 있었다.
PAA 제형에 대한 ORP 와 PAA 농도 간의 관련성은 도 5 에 제시된다. 도 5 에서 볼 수 있듯이, ORP 는 각 제형에 대한 PAA 농도가 증가함에 따라 증가하였다. ORP 는 또한 H2SO4 아쥬반트의 존재 하에서도 증가하였다.
실시예 10
비-포자 형성 박테리아인 E. 콜라이 살모넬라에 대한 항균 효능에 대한 PAA/H2O2 비율의 효과를 분석하였다.
에스케리챠 콜라이 8739 및 살모넬라 엔테리카 14028 이 실험에 사용되었다. 10 μL 의 접종된 현탁액을 피펫을 사용하여 멸균 스테인리스 스틸 호일 스트립에 놓고 완전히 건조되도록 하였다. 과산 시험 용액을 특정 농도로 희석하였다. 50 mL 의 PAA 용액을 각각의 멸균 원심 분리 튜브에 각각 첨가하였다. 건조된 스트립을 상기 설명한 대로 과산 용액에 담갔다. 살모넬라를 22℃ 에서 처리하였다.
그다음 스트립을 10 mL Letheen 브로스와 0.5% 소듐 티오설페이트에서 중화시켰다. 원심분리 튜브의 뚜껑을 닫고 교반하였다. 중화된 튜브를 5 분 동안 초음파 처리한 다음, 30 초 동안 볼텍싱하였다. 샘플을 Butterfield 완충액에 연속 희석하고, Petrifilm APC 에 플레이팅하고, 35℃ 에서 48 시간 동안 인큐베이션하였다.
표 9 에서 볼 수 있듯이, PAA/H2O2 의 비율이 더 높으면 효능이 양호하여 E. 콜라이 살모넬라 모두에 대해 D-값의 감소를 가져왔다.
표 9: E. 콜라이 살모넬라 종의 경우 D-값에 대한 PAA/H 2 O 2 비율의 효과
Figure pct00010
실시예 11
PAA 사용에 대한 PAA/H2O2 비율의 효과를 평가하였다. 바실러스 아트로파에우스 9372 는 상기 기술된 바와 같이 PAA 제형으로 처리되었다.
표 8 에 나타난 바와 같이, 1000 ppm PAA 및 55℃ 에서 22/10 PAA 제형은, 60℃, 1500 ppm 에서 5/15 PAA 제형의 D-값 (1.4 초) 에 근접한 D-값 (1.9 초) 을 가졌다. 반대로, 1500 ppm 및 50℃ 에서 5/15 PAA 제형에 대한 D 값은 4.6 초였다. 따라서, 사용되는 PAA 의 양은, 낮은 PAA/H2O2 비율에서 5/15 PAA 제형을 높은 PAA/H2O2 비율에서 22/10 PAA 제형으로 대체함으로써, 항균 효능을 유지하면서 1/3 까지 줄일 수 있을 것이다.
표 10: PAA 사용에 대한 PAA/H 2 O 2 비율의 효과
Figure pct00011
전술한 바로 부터, 당업자에게는 특정 실시예들이 예시의 목적으로 본 명세서에서 설명되었지만, 다양한 변형들이 본 발명의 사상 및 범위로부터 일탈함없이 행해질 수 있음이 이해될 것이다. 따라서, 전술한 상세한 설명은 제한적이라기보다는 예시적인 것으로 간주되며, 하기 청구 범위는 청구된 주제를 특히 지적하고 명확하게 주장하도록 의도된 것은 모든 등가물을 포함하는 것임을 이해해야 한다.

Claims (30)

  1. 내생포자 또는 포자형성 미생물에 의한 기질의 오염을 감소시키는 방법으로서, 오염을 줄이기에 충분한 시간 동안, 과산화물 분해 효소의 부재 하에 약 1.2 내지 30.0 의 중량% 비율로 퍼카르복실산 및 과산화수소를 포함하는 조성물과 기질을 접촉시키는 단계를 포함하는 내생포자 또는 포자형성 미생물에 의한 기질의 오염을 감소시키는 방법.
  2. 제 1 항에 있어서, 내생포자가 파에니바실러스 치벤시스 (Paenibacillus chibensis), 파에니바실러스 파비스포러스 (Paenibacillus favisporus), 바실러스 세레우스 (Bacillus cereus), 바실러스 아트로파에우스 (Bacillus atrophaeus), 바실러스 서브틸리스 (Bacillus subtilis)제오바실러스 스테아로테르모필루스 (Geobacillus stearothermophilus) 또는 이들의 조합으로 이루어진 군으로부터 선택된 미생물에 의해 생성되는 내생포자 또는 포자형성 미생물에 의한 기질의 오염을 감소시키는 방법.
  3. 제 1 항에 있어서, 포자형성 미생물이 파에니바실러스 치벤시스 (Paenibacillus chibensis), 파에니바실러스 파비스포러스 (Paenibacillus favisporus), 바실러스 세레우스 (Bacillus cereus), 바실러스 아트로파에우스 (Bacillus atrophaeus), 바실러스 서브틸리스 (Bacillus subtilis)제오바실러스 스테아로테르모필루스 (Geobacillus stearothermophilus) 또는 이들의 조합으로 이루어진 군으로부터 선택되는 내생포자 또는 포자형성 미생물에 의한 기질의 오염을 감소시키는 방법.
  4. 제 1 항에 있어서, 기질이 금속, 플라스틱, 세라믹, 유리, 목재, 고무, 복합재 또는 이들의 조합으로 이루어진 군으로부터 선택되는 재료를 포함하는 내생포자 또는 포자형성 미생물에 의한 기질의 오염을 감소시키는 방법.
  5. 제 4 항에 있어서, 기질이 의료 장치, 식품 또는 음료 제조 장비, 약학 제조 장비 또는 식료품을 포함하는 내생포자 또는 포자형성 미생물에 의한 기질의 오염을 감소시키는 방법.
  6. 제 1 항에 있어서, 퍼카르복실산이 C1-C10 퍼카르복실산인 내생포자 또는 포자형성 미생물에 의한 기질의 오염을 감소시키는 방법.
  7. 제 1 항에 있어서, 퍼카르복실산이 퍼아세트산인 내생포자 또는 포자형성 미생물에 의한 기질의 오염을 감소시키는 방법.
  8. 제 1 항에 있어서, 퍼카르복실산 대 과산화수소의 중량% 비율이 약 1.2, 1.6, 1.8, 2.0, 2.2, 2.4, 2.5, 2.6, 2.8, 3.0, 3.2, 3.4, 3.6, 3.8, 4.0, 4.2, 4.4, 4.6, 4.8, 5.0, 5.2, 5.4, 5.6, 5.8, 또는 6.0 인 내생포자 또는 포자형성 미생물에 의한 기질의 오염을 감소시키는 방법.
  9. 제 1 항에 있어서, 퍼카르복실산 대 과산화수소의 중량% 비율이 약 1.2, 1.8, 2.4, 3.0, 3.4, 4.0, 4.6, 4.8 또는 5.0 인 내생포자 또는 포자형성 미생물에 의한 기질의 오염을 감소시키는 방법.
  10. 제 1 항에 있어서, 과산화물 분해 효소가 카탈라제인 내생포자 또는 포자형성 미생물에 의한 기질의 오염을 감소시키는 방법.
  11. 제 1 항에 있어서, 접촉 단계가 담금, 분무, 침지 또는 적심을 포함하는 내생포자 또는 포자형성 미생물에 의한 기질의 오염을 감소시키는 방법.
  12. 제 1 항에 있어서, 조성물의 산화-환원 전위 (ORP) 가 약 500 mV 내지 약 1000 mV 인 내생포자 또는 포자형성 미생물에 의한 기질의 오염을 감소시키는 방법.
  13. 제 1 항에 있어서, 접촉 단계가 약 3 초 내지 약 60 초 동안인 내생포자 또는 포자형성 미생물에 의한 기질의 오염을 감소시키는 방법.
  14. 제 1 항에 있어서, 내생포자 오염이 약 1 Log10 감소되는 내생포자 또는 포자형성 미생물에 의한 기질의 오염을 감소시키는 방법.
  15. 제 1 항에 있어서, 내생포자 오염이 약 90% 감소되는 내생포자 또는 포자형성 미생물에 의한 기질의 오염을 감소시키는 방법.
  16. 내생포자 또는 포자형성 미생물에 의한 기질의 오염을 감소시키는 방법으로서, 오염을 줄이기에 충분한 시간 동안, 과산화물 분해 효소의 부재 하에 약 500 mV 초과의 산화-환원 전위 (ORP) 를 갖는 퍼카르복실산 및 과산화수소를 포함하는 조성물과 기질을 접촉시키는 단계를 포함하는 내생포자 또는 포자형성 미생물에 의한 기질의 오염을 감소시키는 방법.
  17. 내생포자 오염으로 오염되었거나 위험이 있는 기질을 처리하는 방법으로서:
    a) 과카르복실산 및 과산화수소를 포함하는 용액을 제조하는 단계;
    b) 500 mV 초과의 산화-환원 전위 (ORP) 를 제공하기 위해 퍼카르복실산 및 과산화수소의 농도를 조정하는 단계; 및
    c) 내생포자 오염을 감소시키기에 충분한 시간 동안 과산화물 분해 효소의 부재 하에 단계 b 의 용액과 기질을 접촉시키고, 여기서 ORP 는 접촉 단계 동안 연속적으로 모니터링되는 단계
    를 포함하는 내생포자 오염으로 오염되었거나 위험이 있는 기질을 처리하는 방법.
  18. 제 17 항에 있어서, 내생포자가 파에니바실러스 치벤시스 (Paenibacillus chibensis), 파에니바실러스 파비스포러스 (Paenibacillus favisporus), 바실러스 세레우스 (Bacillus cereus), 바실러스 아트로파에우스 (Bacillus atrophaeus), 바실러스 서브틸리스 (Bacillus subtilis)제오바실러스 스테아로테르모필루스 (Geobacillus stearothermophilus) 또는 이들의 조합으로 이루어진 군으로부터 선택된 미생물에 의해 생성되는 내생포자 오염으로 오염되었거나 위험이 있는 기질을 처리하는 방법.
  19. 제 17 항에 있어서, 기질이 금속, 플라스틱, 세라믹, 유리, 목재, 고무, 복합재 또는 이들의 조합으로 이루어진 군으로부터 선택되는 재료를 포함하는 내생포자 오염으로 오염되었거나 위험이 있는 기질을 처리하는 방법.
  20. 제 19 항에 있어서, 기질이 의료 장치, 식품 또는 음료 제조 장비, 약학 제조 장비 또는 식료품을 포함하는 내생포자 오염으로 오염되었거나 위험이 있는 기질을 처리하는 방법.
  21. 제 17 항에 있어서, 퍼카르복실산이 C1-C10 퍼카르복실산인 내생포자 오염으로 오염되었거나 위험이 있는 기질을 처리하는 방법.
  22. 제 17 항에 있어서, 퍼카르복실산이 퍼아세트산인 내생포자 오염으로 오염되었거나 위험이 있는 기질을 처리하는 방법.
  23. 제 17 항에 있어서, 퍼카르복실산 대 과산화수소의 중량% 비율이 약 1.2, 1.6, 1.8, 2.0, 2.2, 2.4, 2.5, 2.6, 2.8, 3.0, 3.2, 3.4, 3.6, 3.8, 4.0, 4.2, 4.4, 4.6, 4.8, 5.0, 5.2, 5.4, 5.6, 5.8, 또는 6.0 인 내생포자 오염으로 오염되었거나 위험이 있는 기질을 처리하는 방법.
  24. 제 17 항에 있어서, 퍼카르복실산 대 과산화수소의 중량% 비율이 약 1.2, 1.8, 2.4, 3.0, 3.4, 4.0, 4.6, 4.8 또는 5.0 인 내생포자 오염으로 오염되었거나 위험이 있는 기질을 처리하는 방법.
  25. 제 17 항에 있어서, 과산화물 분해 효소가 카탈라제인 내생포자 오염으로 오염되었거나 위험이 있는 기질을 처리하는 방법.
  26. 제 17 항에 있어서, 접촉 단계가 담금, 분무, 침지 또는 적심을 포함하는 내생포자 오염으로 오염되었거나 위험이 있는 기질을 처리하는 방법.
  27. 제 17 항에 있어서, 조성물의 산화-환원 전위 (ORP) 가 약 500 mV 내지 약 1000 mV 인 내생포자 오염으로 오염되었거나 위험이 있는 기질을 처리하는 방법.
  28. 제 17 항에 있어서, 접촉 단계가 약 3 초 내지 약 60 초 동안인 내생포자 오염으로 오염되었거나 위험이 있는 기질을 처리하는 방법.
  29. 제 17 항에 있어서, 내생포자 오염이 약 1 Log10 감소되는 내생포자 오염으로 오염되었거나 위험이 있는 기질을 처리하는 방법.
  30. 제 17 항에 있어서, 내생포자 오염이 약 90% 감소되는 내생포자 오염으로 오염되었거나 위험이 있는 기질을 처리하는 방법.
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