KR20200141463A

KR20200141463A - 상피의 처치를 위한 펩타이드의 용도

Info

Publication number: KR20200141463A
Application number: KR1020207031166A
Authority: KR
Inventors: 삘립쁘 몽동; 까롤린느 링겐바흐; 올가 그라시오쏘
Original assignee: 쎄데르마
Priority date: 2018-04-05
Filing date: 2019-04-04
Publication date: 2020-12-18
Also published as: CN111918638A; US20210093537A1; JP2021520371A; FR3079749B1; US11523980B2; EP3773460B1; BR112020018265A2; EP3773460A1; FR3079749A1; JP2023161014A; WO2019193113A1

Abstract

펩타이드는 화학식 X-(Xaa)_nK^*TFK^*-(Xaa)_m-Z를 갖는다. 이는 표피의 상태를 보존하거나 개선시키는 것을 돕는다. 화학식에서, K^*는 라이신 K, 오르니틴, 디아미노부티르산 또는 디아미노프로피온산, 또는 하이드록실 유도체로부터 선택되고; (Xaa)_n 및 (Xaa)_m은 서로 독립적으로 Gly, Ala, Pro, Val, Leu, Ile 및 Phe 중에서 선택된 n 또는 m개의 아미노산 Xaa의 서열에 상응하고, n 및 m 정수는 0 내지 5에서 동일하거나 상이할 수 있으며; N-말단에서 X는 H, -CO-R¹, -SO₂-R¹ 또는 바이오티닐 그룹으로부터 선택되고; C-말단에서 Z는 OH, OR¹, NH₂, NHR¹ 또는 NR¹R²로부터 선택되고; R¹ 및 R²는, 서로 독립적으로, 알킬, 아릴, 아르알킬, 알킬아릴, 알콕시, 사카라이드 및 아릴옥시 그룹으로부터 선택되며, 이는 직쇄, 측쇄, 사이클릭, 폴리사이클릭, 불포화, 하이드록실화, 카보닐화, 인산화 및/또는 황화될 수 있고, 상기 그룹은 1 내지 24개의 탄소 원자를 가지며 이의 골격 내에 O, S 및/또는 N 헤테로원자를 지닐 수 있다. 바람직한 펩타이드는 Pal-KTFK이다.

Description

상피의 처치를 위한 펩타이드의 용도

본 발명은 화장(cosmetic) 또는 피부과학적(dermatological) 펩타이드 기반한 처치(treatment), 이러한 펩타이드를 기반으로 한 신규의 화장 또는 피부과학적 성분 및 이를 포함하는 조성물에 관한 것이다. 본 발명은 보다 특히 사람 또는 동물 포유동물의 피부 및 이의 부속기관(appendage)의 처치(treatment)를 위한 펩타이드에 관한 것이다.

본 발명은 특히 화장품, 피부과학 제품 및 위생 및 개인 생활용품 산업에 관한 것이다.

펩타이드는 중요한 신호 기능(signal function)을 가지고 있으며 많은 생화학적 공정을 조정한다. 그 결과, 이러한 펩타이드는 특히 화장 산업에서 오랫동안 필수적이고 촉망받는 활성 성분이 되어 왔으며, 여기서 피부 및 부속기관을 아름답게 할 수 있고, 다시 말해서, 이들의 일반적인 상태를 개선시키기 위한 신규 화합물이 지속적으로 연구 중에 있다.

현재 제안되고 있는 펩타이드의 대부분은 세포외 매트릭스 구성성분, 주로, 콜라겐과 엘라스틴의 자극을 통해 피부 상에 작용하는 펩타이드이다. 다수의 펩타이드가, 특히 본 출원인에 의해 이러한 측면에서 제안되고 있는데, 예를 들면, MATRIXYL® 상표명 하의 Pal-KTTKS(서열 번호: 1), MATRIXYL® 3000 상표명 하에 시판되는 Pal-GHK 및 Pal-GQPR(서열 번호: 2)을 포함하는 혼합물, MATRIXYL®synthe'6® 상표명 하에 시판되는 Pal-KMO2K(MO2는 디옥시겐화된 메티오닌에 상응한다) 또는 보다 최근에는 MATRIXYL®Morphomics® 상표명 하에 시판되는 Pal-K(P)HG(라이신 상에 그래프트된 프롤린을 가짐), Dermaxyl^TM 또는 Biopeptide EL^TM 상표명 하에 시판되는 Pal-VGVAPG(서열 번호: 3) 또는 Idealift^TM 또는 Calmosensine^TM 상표명 하에 시판되는 N-아세틸-Tyr-Arg-O-헥사데실이 있다.

피부의 미(beauty) 및 양호한 건강은 특히 각질세포의 최적의 분화 및 이의 최외곽 층인, 각질층(stratum corneum)을 형성하는 표피의 능력을 통해서, 및 박리에 의해 상기 최외각 막의 정기적인 재생을 통해서, 표피의 질 및 두께에 매우 크게 의존한다. 실제로, 표피 및 특히 각질층은 외부 환경의 분자 및 공격(광 복사, 오염 물질 등)으로부터 우리자신을 보호하는데 필수적인 실제 피부 장벽을 형성한다. 예를 들면, 이러한 피부 장벽의 양호한 보호는 피부의 조기 노화(premature aging)를 유발할 수 있는 표피의 미세염증 위험, 민감성 피부에 대해 필수적인 상기 모두의 보호 위험을 유리하게 제한할 것이다. 이는 또한 표피의 양호한 보습을 유지하는 것을 돕는 수분 손실 위험을 제한한다.

발명의 요약

본 발명은 표피, 특히 각질층의 특성에 있어서 활성을 갖는 펩타이드, 다시 말해서 피부 표면 위의 제1 층에서 작용할 수 있는 펩타이드를 제공하는 것을 목표로 한다.

이러한 목적을 위해, 제1 양태에 따라서, 본 발명은 표피의 상태를 보존하거나 개선시키기 위한 비-치료학적 화장 처치를 위한, 다음의 화학식 1을 갖는 펩타이드의 용도를 제공한다:

[화학식 1]

X-(Xaa)_nK^*TFK^*-(Xaa)_m-Z

상기 화학식 1에서:

· K^*는 라이신, 오르니틴, 디아미노부티르산 또는 디아미노프로피온산, 또는 이의 하이드록실화된 유도체를 포함하는 그룹 중에서 선택되고, 2개의 K^*는 동일하거나 상이하며;

· (Xaa)_n 및 (Xaa)_m은 각각 서로 독립적으로 Gly, Ala, Pro, Val, Leu, Ile 및 Phe로부터 서로 독립적으로 선택된 n 또는 m개의 아미노산 Xaa의 서열에 상응하고, n 및 m은 0 내지 5 사이에서 동일하거나 상이할 수 있는 정수이고;

· N-말단 끝에서 X는 H, -CO-R¹, -SO₂-R¹ 또는 바이오티노일 그룹이고;

· C-말단 끝에서 Z는 OH, OR¹, NH₂, NHR¹ 또는 NR¹R²로부터 선택되고;

· 여기서 R¹ 및 R²는 서로 독립적으로, 알킬, 아릴, 아르알킬, 알킬아릴, 알콕시, 사카라이드 및 아릴옥시로부터 선택되며, 이는 직쇄, 측쇄, 사이클릭, 폴리사이클릭, 불포화, 하이드록실화, 카보닐화, 인산화, 및/또는 황화될 수 있고, 상기 그룹은 1 내지 24개의 탄소 원자를 가지며 이의 골격 내에 하나 이상의 O, S 및/또는 N 헤테로원자를 가질 수 있다.

따라서, 본 발명에 따라 사용된 펩타이드는 이것이 표피 상에서 생물학적으로 활성인 아미노산 서열 K^*TFK^*를 적어도 함유함을 특징으로 한다. Gly, Ala, Pro, Val, Leu, Ile 및 Phe로부터 선택된 1 내지 5개의 비-극성 아미노산의 서열은 바람직하게는 Gly, Ala, Pro, Val, 바람직하게는 Gly 및 Ala로부터 선택된 활성 서열 K^*TFK^*의 한쪽 측면에 첨가될 수 있다.

바람직하게는, 본 발명에 따라서, K^*는 라이신 또는 오르니틴, 보다 바람직하게는 라이신이다. 바람직한 하이드록실화된 유도체는 하이드록시라이신이다.

보다 바람직하게는 본 발명에 따라서 n 및 m은 0 내지 2이고, 바람직하게는 0과 동일하며, 펩타이드는 화학식 2를 갖는다:

[화학식 2]

X-K^*TFK^*-Z (서열 번호: 4).

바람직하게는, 펩타이드는 화학식 3을 갖는다:

[화학식 3]

X-KTFK-Z

여기서,

K는 라이신(Lys), T는 트레오닌(Thr), F는 페닐알라닌(Phe)이고, X 및 Z는 상기 정의한 바와 같다.

시험관내(in vitro) 시험 결과(각질세포 배양물, 피부 외식편(skin explant) 또는 재구성된 피부에서)가 본 발명에 따른 펩타이드 덕분에, 특히 피부 장벽 기능을 보강하고 표피의 천연 성숙 공정을 조화시킴으로써, 표피의 상태의 보존/보호 및 개선을 나타내는, 상세한 설명 란에서 하기 제공된다.

이러한 시험은 몇가지 수준에서 본 발명에 따른 펩타이드의 표적화된 작용을 입증하였으며, 특히:

- 펩타이드는 피부 장벽을 구성하거나 장벽의 기원에서 각질세포의 분화에 긍정적으로 개입하는(intervening) 수개의 분자의 생산을 자극하고;

- 펩타이드는 표피의 상부 부분의 보습을 개선시키고;

- 펩타이드는 표피탈락(desquamation)에 의한 각질층의 재생을 개선시키고;

- 펩타이드는 α-크리스탈린(crystallin)의 생산을 자극하고;

- 펩타이드는 다수의 작은 매일의 공격(광 방사선, 오염물 등)에 의해 유발된 피부 미세염증에 관련된 다수의 분자의 수준을 저하시킨다.

상세한 설명에서 하기 제공된 생체내(in vivo) 시험 결과는 이후 본 발명에 따른 펩타이드와 관련된 실제 화장 이점: 피부의 매끄러움(smoothing), 보다 우수한 보습(따라서 보다 투명하고, 탄력있고(supple) 보들보들한(soft) 피부) 및 개선된 광채 및 안색의 균질화(homogenization of the complexion))를 나타낸다.

본 발명 덕분에, 피부 결함이 회피되거나 감소된다.

바람직하게는, 본 발명에 따른 펩타이드는 N-말단 위치 또는 C-말단 위치에서 변형되며, X가 H이고 Z가 OH인 경우는 배제된다.

본 발명의 다른 바람직한 특징에 따라서:

- R¹ 및/또는 R²는 탄소수 1 내지 24의 알킬 쇄, 바람직하게는 탄소수 3 내지 24의 친지성 알킬 쇄이고/이거나;

- X는 바람직하게는 옥타노일(C₈), 데카노일(C₁₀), 라우로일(C₁₂), 미리스토일(C₁₄), 팔미토일(C₁₆), 스테아로일(C₁₈), 바이오티노일, 엘라이도일, 올레오일 및 리포일로부터 선택되고; 보다 바람직하게는 라우로일(C₁₂), 미리스토일(C₁₄) 및 팔미토일(C₁₆)로부터 선택된 아실 그룹 CO-R¹이고/이거나,

- Z는 OH, OMe, OEt 및 NH₂, 바람직하게는 OH로부터 선택되고/되거나;

- X는 팔미토일(C₁₆), 미리스토일(C₁₄) 및 라우로일(C₁₂); 보다 바람직하게는 팔미토일(C₁₆)로부터 선택되고 Z는 OH이다.

N-말단 또는 C-말단 위치에서 특수한 산 유도체를 포함하는 펩타이드, 예를 들면, 아스코르브산, 레티노산, 신남산, 올레아놀산, 하이알루론산, 니코틴산, 리포산(lipoic acid), 갈릭산 또는 판토텐산의 펩타이드가 또한 본 발명에 포함된다.

본 발명에 따른 바람직한 펩타이드는 N-말단 끝에 팔미토일 쇄 치환(X는 Pal이다)을 지니고 C-말단 끝에 치환을 지니지 않은(Z는 OH이다) 것에 상응하는 화학식 4의 Pal-KTFK-OH(또한 Pal-KTFK로 지칭됨, 서열 번호: 5)이다:

[화학식 4]

본 발명에 따른 펩타이드는 광학적으로 순수할 수 있거나 L 또는 D 이성체 또는 이의 혼합물로 이루어질 수 있다. 천연적으로 존재하는 L-이성체가 바람직할 수 있다. 펩타이드는 경우에 따라 염 형태, 특히 하이드로클로라이드 또는 아세테이트일 수 있다.

본 발명은 또한 펩타이드(화학적 작용의 변형 및/또는 첨가를 지니지만 탄소 골격 내에 변화는 없다) 및 유사체(화학적 작용의 변형 및/또는 첨가를 지니지만 또한 탄소 골격 내에 변화를 지닌다), 다른 종(species), 예를 들면, 금속 이온(예컨대, 구리, 아연, 망간, 마그네슘, 및 다른 것)과 같은 다른 종과의 복합체(complex)를 포함한다.

본 발명에 따른 이의 용도를 위하여, 펩타이드는 예상된 생약 형태(galenic form)에 따라, 적절하게는 가용화제와 함께, 생리학적으로 허용되는 친지성 또는 소수성 매트릭스 속에 가용화될 수 있다.

"생리학적으로 허용되는 매질"은 본 발명에 따라서, 제한없이, 수성 또는 하이드로알코올성 용액(hydroalcoholic solution), 유중수 에멀젼(water-in-oil emulsion), 수중유 에멀젼(oil-in-water emulsion), 미세에멀젼(microemulsion), 수성 겔, 무수 겔, 혈청, 소낭의 분산액, 분말을 의미한다.

"생리학적으로 허용되는"은 본 발명의 펩타이드를 포함하는 성분 및, 독성, 비혼화성(incompatibility), 불안정성, 알레르기 반응, 및 기타의 위험없이, 소화되거나 피부 내로 주사될 수 있는 조성물이 포유동물 점막, 손발톱(nail), 두피, 모발, 체모 및 피부 및 보다 특히 사람과 접촉된 국소 또는 경피용으로 적합함을 의미한다. 이러한 "생리학적으로 허용되는 매질"은 조성물의 부형제로 통상적으로 지칭하는 것을 형성한다.

본 발명에 따른 펩타이드는 또한 결합되어, 벡터화된 형태(vectorized form)로 사용될 수 있거나, 마크로(macro)-, 마이크로(micro)- 또는 나노(nano)-입자, 예를 들면, 캡슐, 구체, 리포좀, 올레오좀, 킬로마이크론(chylomicron), 스폰지 상으로/내로 혼입 및/또는 흡착될 수 있거나, 예를 들면, 유기 분말 중합체, 활석, 벤토나이트, 포자 또는 외막(exin) 및 다른 무기 또는 유기 지지체 상에 흡착될 수 있다.

바람직하게는, 본 발명에 따른 펩타이드는 오일-왁스 계면활성제와 물의 미세에멀젼 속에 "포획된(captured)" 특수한 형태로 사용됨으로써 이의 침투를 지연시키고 이를 표피의 수준에서, 피부의 표면 상에서 보다 생이용가능하도록 한다.

이러한 특수한 형태로 인하여, 펩타이드는 실질적으로 진피로 도입되는 것이 실질적으로 방지되며 각질층으로부터 및 이후 표피의 모든 수준 내에서 이의 생물학적 작용을 서서히 및 균일하게 발달시킬 수 있다.

본 발명의 제2 양태에 따라서, 화학식 1의 펩타이드 및, 표피 상에 작용하기 위해 피부 내로 상기 펩타이드의 침투를 지연시킬 수 있는 생리학적으로 허용되는 비히클를 포함하는 화장 또는 피부과학적 성분이 존재한다:

[화학식 1]

X-(Xaa)_nK^*TFK^*-(Xaa)_mZ

상기 화학식 1에서:

· K^*는 라이신, 오르니틴, 디아미노부티르산 또는 디아미노프로피온산, 또는 이의 하이드록실화된 유도체로부터 선택되고, 2개의 K^*는 동일하거나 상이하며;

· (Xaa)_n 및 (Xaa)_m는 서로 독립적으로 Gly, Ala, Pro, Val, Leu, Ile 및 Phe로부터 독립적으로 선택된 n 또는 m개의 아미노산 Xaa의 서열에 대해 서로 독립적으로 상응하며, n 및 m 정수는 0 내지 5의 범위에서 동일하거나 상이할 수 있고;

· N-말단 끝에서 X는 H, -CO-R¹, -SO₂-R¹ 또는 바이오티노일 그룹으로부터 선택되고;

· R¹ 및 R²는, 서로 독립적으로, 알킬, 아릴, 아르알킬, 알킬아릴, 알콕시, 사카라이드 및 아릴옥시 그룹으로부터 선택되고, 이는 직쇄, 측쇄, 사이클릭, 폴리사이클릭, 불포화, 하이드록실화, 카보닐화, 인산화, 및/또는 황화될 수 있으며, 상기 그룹은 1 내지 24개의 탄소 원자를 가지고 이의 골격 내에 하나 이상의 O, S 및/또는 N 헤테로원자를 가질 수 있다.

펩타이드는 본 발명의 제1 양태에 따라서 상기 정의된 바와 같이 보다 정밀하다.

바람직하게는, 비히클 또는 벡터는 오일-왁스 계면활성제와 물의 미세에멀젼이고 여기서 펩타이드는 용매화되고, 보다 바람직하게는 레시틴을 함유하는 왁스성 상을 포함한다.

형성된 미세에멀젼에서, 펩타이드는 펩타이드와 왁스 입자 사이에 이온성, 수소 및 반데르 바알스(Van der Vals)의 약한 결합의 확립을 통한 및 계면활성제를 통한 용매화(solvation)에 의해 자체적으로 "트랩핑"됨이 밝혀졌다.

이후 국소 적용 동안 유도된 힘 및 에너지는 이러한 약한 결합을 파괴시켜 느리고 점진적인 펩타이드 탈용매화에 의해 각질층 속에 펩타이드의 방출을 허용한다.

본 발명의 제3 양태에 따라서, 본 발명의 제2 양태에 따른 성분을 포함하는 화장 또는 피부과학적 조성물이 제공된다.

본 발명에 따른, 특히 본 발명의 제3 양태에 따른 펩타이드를 포함하는 조성물은 사용자에 의해 궁극적으로 적용될 것이다.

조성물은 임의의 생약 형태(예는 상세한 설명에서 하기 제공되어 있다)로 제공될 수 있으며 또한 천연 또는 합성 섬유, 울(wool), 또는 피부와 접촉되도록 조정되거나, 의복, 예를 들면, 주간 또는 야간 속옷, 손수건, 또는 휴지에 사용될 수 있는 된 임의의 물질을 통해 전달되어 이러한 피부/직물 접촉을 통해 이의 화장 또는 피부과학적 효과를 발휘하고 연속적인 국소 전달되도록 한다.

특수한 및 유리한 방식으로, 본 발명에 따라서, 펩타이드는 활성의 보강으로서 작용하고/하거나 하나 이상의 다른 활성에서 상보성 방식으로 작용하도록 조정된 적어도 하나의 추가의 활성제와 함께 회합될 수 있다.

이러한 목적을 위한 다양한 추가의 활성 물질이 상세한 설명에서 하기 언급된다.

제4 양태에 따라서, 본 발명은 피부에 유효량의 상술한 본 발명의 제3 양태에 따른 화장 또는 피부과학적 조성물을 국소 적용함을 포함하는 피부의 심미적 외형을 개선시키는 방법을 제공한다.

제5 양태에 따라서, 본 발명은 별도의 구획(compartment) 속에 다음을 포함하는 자가-탠닝 화장 처치(self-tanning cosmetic treatment)를 생산하기 위한 키트(kit)를 제공한다:

a) 상기 정의한 바와 같은 본 발명에 따른 조성물 또는 생리학적으로 허용되는 매질 속에 제1 양태에 따라 상기 정의된 바와 같은 본 발명에 따른 펩타이드를 포함하는 조성물;

b) 생리학적으로 허용되는 매질 속에 자가-탠닝 활성제를 포함하는 조성물.

특히 및 유리하게는, 본 발명에 따른 펩타이드는 자가-탠닝 활성제의 적용 전에 천연의 보들보들한 매끄러움을 달성하는데 사용될 수 있으며, 이러한 펩타이드는 특히 자가-탠닝 활성제의 적용 전, 적어도 3일, 바람직하게는 6일, 보다 바람직하게는 8일 동안 적용된다.

본 발명에 따라서, "국소 처치" 또는 "국소 사용"은 이것이 적용되는 부위: 피부, 점막, 부속기관에서 작용하도록 의도된 적용을 의미한다.

본 발명에 따른 펩타이드 또는 이를 함유하는 조성물은 표적화된 구역에 국소 적용될 수 있다.

"유효"량은 다양한 인자, 예를 들면, 환자의 연령, 상태, 장애 또는 병리(pathology)의 중증도, 및 투여 방식에 의존한다. 유효량은 목적한 효과를 달성하기에 충분한 무-독성 양을 의미한다.

본 발명에 따른 화장 조성물에서, 유효량으로 존재할 펩타이드는 일반적으로 조성물의 용도(destination) 및 보다 또는 거의 알려지지 않은 목적한 효과에 따라, 조성물의 총 중량에 대해 0.000001% 내지 5%, 바람직하게는 0.00001% 내지 0.1%, 보다 바람직하게는 약 0.0005 내지 0.005%의 비이다.

이러한 적용에 사용된 모든 퍼센트 및 비는 총 조성물의 중량 기준이며 모든 측정은 달리 명시하지 않는 한, 25℃에서 이루어진다.

예를 들면, 얼굴 화장 처치를 위해, 유럽 화장품 지침(European Cosmetics Directive)은 크림의 경우 2.72 mg/cm²/일/개인 및 바디 로션의 경우 0.5 mg/cm²/일/개인의 표준 적용 양을 설정하여 왔다.

다른 특징에 따라서, 본 발명에 따른 화장 처치 방법은 피부에서 목표로 하는 하나 이상의 다른 처치 방법, 예를 들면, 광 치료요법, 열, 진동, 전기천공 처치, 미세침 패치(micor-needle patch), 또는 방향요법(aromatherapy)과 연합될 수 있다.

본 발명에 따라서, 상술한 방법의 실행을 위해 의도된 수개의 구획 또는 키트를 지닌 장치가 제안될 수 있으며, 이는 예로써, 및 제한없이, 제1 구획 속에 본 발명에 따른 활성 성분을 포함하는 조성물 및 제2 구획 속에 추가의 부형제 및/또는 활성제를 포함할 수 있으며, 상기 제1 및 제2 구획 속에 함유된 상기 조성물은 본원에서 특히 상기 정의한 처치 중 하나에서 사용 시간에 걸쳐 동시에, 별도로 또는 확산을 위한 조합 조성물로서 고려된다.

본 발명에 따른 조성물은 치료학적 처치, 특히 피부, 특히 질환이 있는 표피를 가진 피부의 치료에 적합하다.

제6의 양태에 따라서, 본 발명에 따른 화장 용도, 방법, 조성물 및 키트를 위한 펩타이드가 제공되며, 이러한 펩타이드는 화학식 1을 갖고, 펩타이드 Pal-KTFK-OH 및 Ela-KTFK-OH는 배제된다:

[화학식 1]

X-(Xaa)_nK^*TFK^*-(Xaa)_m-Z

상기 화학식 1에서:

· K^*는 라이신(K), 오르니틴, 디아미노부티르산 또는 디아미노프로피온산, 또는 이의 하이드록실화된 유도체를 포함하는 그룹에서 선택되고, 2개의 K^*는 동일하거나 상이하며;

· (Xaa)_n 및 (Xaa)_m은 각각 서로 독립적으로 Gly, Ala, Pro, Val, Leu, Ile 및 Phe로부터 서로 독립적으로 선택된 n 또는 m개 아미노산 Xaa의 서열에 상응하고, n 및 m은 0 내지 5 사이에서 동일하거나 상이할 수 있는 정수이며;

· C-말단 끝에서 Z는 OH, OR¹, NH₂, NHR¹ 또는 NR¹R²로부터 선택되며;

· 여기서 R¹ 및 R²는, 서로 독립적으로 알킬, 아릴, 아르알킬, 알킬아릴, 알콕시, 사카라이드 및 아릴옥시 그룹으로부터 선택되고, 이는 직쇄, 측쇄, 사이클릭, 폴리사이클릭, 불포화, 하이드록실화, 카보닐화, 인산화, 및/또는 황일 수 있으며, 상기 그룹은 1 내지 24개의 탄소 원자를 가지고 이의 골격 내에 하나 이상의 O, S 및/또는 N 헤테로원자를 가질 수 있다.

펩타이드의 바람직한 특징에 따라서:

- K^*는 라이신 K 또는 오르니틴이고/이거나;

- n 및 m은 서로 독립적으로 0 또는 1 또는 2이고/이거나;

- 펩타이드는 N-말단 위치에서 또는 C-말단 위치에서 변형되고, X가 H이고 Z가 OH인 경우는 배제되고/되거나;

- R¹ 및/또는 R²는 탄소수 1 내지 24의 알킬 쇄이고/이거나;

- X는 아실 그룹 CO-R¹이고 Z는 OH, OMe, OEt 및 NH₂로부터 선택되고/되거나;

- 펩타이드는 바람직하게는 펩타이드가 용매화된, 보다 바람직하게는 레시틴을 함유하는 왁스 상(waxy phase)을 포함하는 오일-왁스 계면활성제와 물의 미세에멀젼인 비히클 또는 벡터 내에서 용매화된다.

상세한 설명

본 발명은 다음의 구현예의 설명 및 시험관내 및 생체내 시험의 측면에서 보다 잘 이해될 것이다.

A) 본 발명에 따른 Pal-KTFK 펩타이드(서열 번호: 5)의 제조 실시예

Pal-KTFK 펩타이드를 펩타이드 합성에 의해 제조한다. 라이신을 이의 말단 산 작용(커플링제, 예를 들면 DCC(디사이클로헥실카보디이미드) 또는 HBTU(2- (1H-벤조트리아졸-1-일)-1,3,3-테트라메틸우로늄 헥사플루오로포스페이트)/HOBT(1-하이드록시-벤조트리아졸)을 지님)을 통해 수지와 커플링된다. 이렇게 보호된 라이신은 커플링제의 존재하에서 트레오닌 유도체와 반응 한 후, 동일한 작동을 수행하여 페닐알라닌을 첨가하고, 유사하게 제2의 라이신을 첨가한다. 후자는 이후 이의 아민 작용에서 염기의 존재하에 활성화된 팔미트산 유도체(예를 들면, 팔미토일 클로라이드)로 아실화된다. 펩타이드 쇄는 산 매질 속에서 수지로부터 절단되며 침전, 세척 및 건조 후, 팔미토일-라이실-트레오닐-페닐알라닐-라이신 생성물이 고체형으로 수득된다.

B) Pal-KTFK(서열 번호: 5)를 포함하는 본 발명에 따른 화장 활성 성분의 제조 실시예

Pal-KTFK 펩타이드는 양쪽성(amphiphilic)이고, Pal 쇄는 소수성이며 페닐알라닐 부분은 친수성이다. 펩타이드는 적합한 계면활성제가 들어있는 물/글리콜 매트릭스 속에서 가용화된다.

C) 벡터화된 펩타이드를 사용한 본 발명에 따른 화장 활성 성분의 제조 실시예

프로토콜:

단계 1: ≪ 부형제 ≫ 상의 제조:

수성 상: 물 + 계면활성제

+ 왁스 상: 왁스 + 레시틴계 계면활성제

+ 오일 상: 오일 + 계면활성제

강하게 교반하여 수중유 에멀젼을 형성시킨다. 이러한 단계는 액체 부분 및 왁스 입자를 포함하는 고체 부분을 포함하는 이종 상을 생성한다.

단계 2: 본 발명에 따른 활성 펩타이드를 포함하는 상의 제조:

수성 상: 물 + Pal-KTFK 펩타이드(200 ppm)

단계 3: 중간 교반 하에 ≪ 부형제 ≫ 상 속에 ≪ 활성 ≫ 상을 가한다.

단계 4: 최종 에멀젼 속에 보존제를 포함하는 하나 이상의 상을 임의로 첨가한다.

단계 5: 최종 에멀젼 속에 pH 조절인자(대략 4.5의 목적한 pH)를 임의로 가한다.

왁스는 다수의 왁스, 뿐만 아니라 오일로 구성될 수 있다.

수득된 제품:

형성된 에멀젼 속에서, 펩타이드는 펩타이드와 왁스 입자 사이의 약한 이온, 수소 및 반 데르 바알스 결합의 확립으로 인하여 미리 형성된 수중유 에멀젼 속에 용매화에 의해 자체적으로 "트랩핑(trapping)"됨이 발견되어 있다.

Pal-KTFK 펩타이드는 양쪽성이므로 이것이 확산되고 탈-용매화 후 균일하게 작용할 각질세포간 접합(cement)을 위한 고 친화성을 갖는다.

D) 시험관내 효능 시험

이들을 이의 용매화되지 않은 형태의, 본 발명에 따른 바람직한 펩타이드, Pal-KTFK에서 수행하였다.

다음의 시험관내 시험은 상피 세포: 정상의 사람 각질형성세포(keratinocytes)(NHK) 또는 피부 외식편 또는 재구성된 피부 상에서 수행하였다. 본 발명에 따른 펩타이드는 피부 상에서 추천된 사용 농도에서, 불활성 용매(에탄올) 중 용액으로 시험하였다.

1/ 상피 장벽의 개선 및 상피 성숙의 조화(harmonisation)

조각질층(horny layer) 또는 각질층은 한편으로는, 서로 강력하게 결합된 평평하고, 비-핵화된 세포 및, 다른 한편으로는, 이의 조성 및 조립이 환경의 물리적, 화학적 및 생물학적 공격에 대해 크게 내성인 이러한 구조의 유일한 특성을 보증하는 지질 및 단백질과 회합하는 매우 복잡한 조립체(assembly)이다.

다음의 시험은 3개의 상이한 생물학적 시스템(사람 각질형성세포의 박층 배양물 또는 사람 피부 외식편 또는 재구성된 피부의 배양물)에서, 상피 분화 및 장벽 형성에 관련된 다양한 마커의 검정 덕분에, 본 발명의 펩타이드가 상피 항상성 및 피부 장벽의 보강을 유도함을 나타낸다.

각질형성세포는 칼슘 민감성 효소인, 트랜스글루타미나제의 개입을 통해 상호연결된, 인볼루크린 및 로리크린으로 불리는 단백질로 형성된 강력한 외부 쉘(outer shell)과 함께 서서히 성숙한다. 각질층의 성숙 및 항상성에서 다른 단백질, SPRR(작은 프롤린이 풍부한 영역 단백질)은 단백질 사이에 유연하지만 강력한 교차-연결을 생성함으로써, 또한 트랜스글루타미나제의 활성을 통해 이러한 단백질 쉘을 강화시키기 위해 제공된다. NICE-1은 이의 유전자가 많은 계층 단백질(stratum protein)의 것과 동일한 위치에 위치하는 단백질이다. 이의 조성은 이것이 트랜스글루타미나제에 대해 이상적인 기질이 되도록 하며 로리크린의 것과 유사하다. LEC(말기 각질화된 엔벨로프 단백질(Late Cornified Envelope Protein))은 또한 마지막 구성성분 중에서 성숙 상 동안 브릿지된다. 또한, 케라틴 10 및 1, 뿐만 아니라, 세라믹은 각질층 및 이의 단백지질 매트릭스의 형성 및 품질에 있어서 매우 중요하므로, 이의 합성을 자극하는 중요한 화장 활성성분이다.

양호한 장벽 기능은 또한 각질형성세포에 의해 생산된 필라그린(filaggrin) 및 필라그린-2에 매우 의존적이며 여기서 이들은 유의적인 물질대사를 겪는다. 이들은 케라틴에 결합함으로써 각질세포(corneocyte)를 안정화시킬 시간을 제공하며 이후 각질층에서 발견된 천연 보습 인자(NMF)의 필수 구성성분을 생산하는 아미노산으로 분해되게 된다. 물은 또한 각질형성세포를 둘러싸고 있는 하이알루론산에 의해 표피 내에 보유되어 실질적인 스폰지로서 작용함으로써 물 속에서 이의 중량을 1000배까지 끌어들이고 보유한다.

최종적으로, α-크리스탈린은 HSP 계열과 관련된 작은 단백질(또는 열 쇼크 단백질)이다. 이는 표피 내에 존재하며 여기서 이는 상피 세포를 보호하고, 이의 미토콘드리아 기능을 회복하며 산화 스트레스에 대한 이의 내성을 증가시킨다. 이러한 단백질은 세포 내에서 및 이의 목전(immediate vicinity)에서 발견되는 특성을 지닌다. 이의 존재로 피부는 UV, 염증 및 보다 일반적으로 산화형 공격으로부터 보호된다.

1.1/DNA-배열

원리:

본 발명에 따른 펩타이드를 6 또는 24시간 동안 합치성(confluent) KHN(n=3)으로 접촉시킨다. 이후에, KHN 매트(mat)를 세정하고 세포를 파쇄하여 이의 mRNA를 추출하였다. 이러한 mRNA를 이후 DNA 칩(chip) 위에 침착 및 qRT-PCR(실시간 정량적 역 전사 폴리머라제 연쇄 반응)과 유사한 방법에 의한 증폭 후 분석되는 작은 DNA 서열로 전환시킨다. 펩타이드로 인한 mRNA 변이는 대조군 경우(펩타이드 용매)와 비교한다.

결과:

[표 1]

상피 분화 단백질을 암호화하는 유전자의 발현의 제어와 관련된 변이. 4ppm의 본 발명에 따른 펩타이드의 효과.

독성 효과는 나타나지 않았다. * = 6시간 접촉; ** = 24시간 접촉

이러한 시험은 몇가지 생물학적 표적이 본 발명에 따른 펩타이드와 접촉시 NHK에서 조기(6 내지 24시간)에 유도되었음을 나타낸다. 로리크린, 필라그린 및 필라그린 2의 유전자, 각질 세포의 구축 또는 각질층의 보습에 관련된 3개의 단백질은 용매 대조군에서보다 통계적으로 더 우수하게 발현되었다(p<0.01). 또한 필라그린 유전자의 발현에 대한 qRT-PCR 분석을 수행하였으며, 등가의 4 내지 6 ppm의 본 발명의 펩타이드가 이러한 발현을 2.87까지 증가시켰고 대조군과 비교하여 각각 3.66배 증가시켰음이 관찰되었다(p<0.01).

1.2/LC-MS/MS에 의한 연구(질량 분광법과 커플링된 액체 크로마토그래피)

원리:

DNA-배열(상기 1.1/)과 동일한 그러나 보다 긴 배양시간(7일)을 사용한 배양 프로토콜을 사용하였으며, 이러한 LC-MS/MS 방법을 사용한 단백질 생산은 보다 더 오래 걸림이 관찰되었다. NHK 배양 배지(n=3)를 3일마다 교환하였다. 이러한 접촉 말기에, 세포를 분해하여 단백질을 추출하고 이들을 파쇄된 물질 상에서 프로테아제의 작용을 회합시키는 방법에 의한 파쇄된 물질, 질량 분광분석법에 대한 커플링된 액체 크로마토그래피에 의한 단편의 분리, 이어서 천연에 따른 기존의 단백질의 확인 및 농축 및 수득된 단편의 양의 형태(LC-MS/MS)로 이를 분석하였다. 등가의 양의 단백질에서 LC-MS/MS 분석을 수행하기 위하여, 단백질 농도를 파쇄된 물질에서 측정하였다.

변화 연구 및 스튜던츠-t 시험(Student's t test)을 수행하여 결과의 유의성을 판단하였다.

결과:

[표 2]

표피의 항상성 성숙과 관련된 단백질의 제어에 관한 변화. 4 ppm의 본 발명에 따른 펩타이드의 효과.

독성 효과는 나타나지 않았다.

이러한 결과는, 본 발명에 따른 펩타이드가 분화와 관련된 단백질: 필라그린, NICE-1 및 SPRR1A의 생산을 긍정적으로 유도함을 입증하며, 3개 모두 증가하였다. 병행하여, 상피 분화 현상 동안 생산되는 것으로 또한 알려진, 케라틴-10에서의 증가가 있다. 케라틴은 표피의 항상성에 우호적으로 기여하는, 데스모솜(desmosome)(세포간 연결)을 통해 표피를 강화시키는데 사용된다.

흥미롭게도 및 예측하지 못하게, α-크리스탈린 단백질의 발현은 대조군의 경우에서보다 더 중요한 것으로 여겨졌으며, 상호보완적인 탐구를 이끌었다.

1.3/재구성된 피부에서 α-크리스탈린

원리:

정상의 사람 섬유아세포를 매트릭스에 씨딩(seeding)하였다. 수일 후 각질형성세포가 이러한 등가의 표피 상에 침착되어 세포의 균일한 층을 형성하였다. 이러한 단계에서 전체를 공기-액체 계면(에멀젼)에 통과시켜 다계층화된 표피(pluristratified epidermis)를 형성시켰다. 21일(대략) 후, 등가의 성숙한 피부가 수득되었다(각질층을 포함하는 표피와 함께).

발현 상(emergence phase) 전날에, 이러한 피부의 합치성 사람 각질형성세포의 층에 본 발명에 따른 펩타이드를 24시간 동안 및 이어서 이후 18일 동안(표피의 형성 기간) 제공하였다. 동결-단면(Cryo-section)(7 μm)을 제조하고 α-크리스탈린을 형광성 항체(면역조직화학)로 표지하였다. 형광성을 사진으로 분석하고, 등가의 표면을 모든 사진에 대해 분석하였다(n = 51 내지 59). 스튜던츠 t 시험을 수행하였다.

결과:

[표 3]

재구성된 피부 표피 내에서 α-크리스탈린 단백질의 발현. 4 및 6 ppm의 본 발명에 따른 펩타이드의 효과.

독성 효과는 나타나지 않았다.

이러한 결과는 α-크리스탈린이 본 발명에 따른 펩타이드 덕분에 피부에서 매우 명확하게 자극됨을 나타낸다(대조군에 대하여 +61 및 +164%, p<0.01). 이러한 단백질은 표피 내에 존재하는 각질형성세포, 이의 단백질 및 이의 미토콘드리아의 보호 효과를 발휘하는 것으로 기술된다.

1.4/표피의 분화 및 보습 성분의 조절

원리:

합치성 NHK(n=3)를 본 발명에 따른 펩타이드의 존재 또는 부재(대조군) 하에 7일 동안 앞서와 같이 배양한 다음, 면역조직화학 마킹(marking)을 표피의 성숙의 특징적인 단백질: 인볼루크린, 로리크린 및 필라그린, 또는 보습의 특징적인 단백질: 필라그린 뿐만 아니라 세라미드(각질층의 구성 성분)에 대해 지시된 항체를 사용하여 수행하였다.

보습 양태는 ELISA 방법에 의해 각질형성세포에 의해 생산된 하이알루론산의 검정으로 평가하였다.

최종적으로, 트랜스글루타미나제의 활성 및 트랜스글루타미나제-5 유전자의 발현에 대한 본 발명에 따른 펩타이드의 영향을 평가하였다.

이를 위해, 합치성 NHK를 본 발명에 따른 펩타이드와 21일까지 접촉시켰다. 트랜스글루타미나제 활성을 이러한 효소에 의해 각질층 단백질에 결합된 형광성 단실카다베린을 사용한 프로토콜을 사용하여 평가하였다. 형광성의 분석을 수행하고, 결과를 용매 대조군과 비교하였다.

트랜스글루타미나제-5와 관련하여, qRT-PCR을 KHN과 본 발명에 따른 펩타이드 사이의 72시간 접촉 후 수행하였다.

세포의 수의 정량화는 당해 부분에 기술된 4개의 시험에 대해 병행하여 수행함으로써, 세포의 수에 대한 결과를 감소시켰다.

결과:

[표 4]

NHK(면역형광성)에서 인볼루크린, 로리크린, 필라그린 및 세라미드의 유도. 2 ppm의 본 발명에 따른 펩타이드의 효과.

독성 효과는 나타나지 않았다.

이러한 결과는 본 발명에 따른 펩타이드가 NHK의 성숙을 효과적으로 촉진시킴을 나타낸다. 효과는 2 ppm에서 명확하다.

[표 5]

NHK에서 하이알루론산 분비의 유도. 4 및 6 ppm의 본 발명에 따른 펩타이드의 효과.

독성 효과는 나타나지 않았다.

이러한 결과는 본 발명에 따른 펩타이드가 표피의 보습에 관여함을 나타낸다.

[표 6]

KHN에서 트랜스글루타미나제 활성 및 트랜스글루타미나제-5 유전자 발현에 있어서의 변화. 4 및 6 ppm의 본 발명에 따른 펩타이드의 효과.

이러한 결과는 특히 로리크린 단백질, 인볼루크린에 결합하는 것으로 알려진, 트랜스글루타미나제-5 유전자의 발현에 대한 본 발명에 따른 펩타이드의 효과를 나타내며, 따라서 각질층의 형성에 기여한다. 동시에, 각질형성세포 내에서 트랜스글루타미나제 단백질의 활성에 있어서의 증가가 또한 존재한다.

보충적 방법에 의해 수득된 모든 이러한 결과는 NHK와 본 발명에 따르는 펩타이드의 접촉이 가능한 환경적 및 환경적 공격과 관련하여 피하 장벽의 보강을 생성하고 표피의 표면 층의 보습을 촉진시키는 주요 세포 구성성분의 합성의 자극을 유도함을 나타낸다.

1.5/ 성숙의 자극 메카니즘: TRPC6

TRPC6 수용체(일시적인 수용체 잠재성 표준(Transient Receptor Potential Canonical) 6)를 칼슘-유도된 각질형성세포 분화에 포함시킨다. 이의 단순한 자극은 표피의 분화 및 이어서 각질층의 형성에 필수적인 구조를 구성하는데 충분하다. TRPC6은 기저 층의 각질형성세포가 부재한다. 이는 표피의 성숙한 부분에 대해 특이적이다.

DNA-배열(상기 1.1 참고)은 각질층의 형성을 암호화하는 유전자의 자극 외에도, 세포내 칼슘 플럭스(calcium flux)를 제공하는 단백질인, TRPC6을 암호화하는 mRNA의 생산에 있어서의 증가를 나타내었다. 본 발명에 따른 펩타이드(4 ppm)와 관련된 이러한 매우 유의적인 증가는 6시간 째에 용매 대조군과 비교하여 x 6.05이었다.

원리:

합치성 각질형성세포를 특이적인 칼슘 프로브(probe)로 로딩(loading)하였다. 이러한 분자는 세포내 유리 칼슘의 존재하에서 매우 형광성으로 된다. 현미경 하에서 형광성의 출현을 모니터링하였다. 세포는 일단 로딩되면, 세정한 다음 6 또는 15 ppm에서 본 발명에 따른 펩타이드 또는 양성 대조군(브래디키닌)을 제공하였다.

변화의 연구 및 스튜던츠 t 시험을 수행하여 결과의 유의성을 판단하였다(각각의 조건에 대해 n=3).

결과:

가시적인 결과는 본 발명에 따른 펩타이드가 실제로 합치성 각질형성 세포내에서 세포내 칼슘 이동을 유도함을 나타낸다(세포와 펩타이드 사이에 약 30분 접촉 후 형광 현미경 하에 가시성임). 이러한 칼슘 방출 메카니즘은 각질층의 성분의 배위된 형성을 허용함으로써 각질형성세포의 분화를 촉진하는 것으로 잘 알려져 있다.

1.6/ 성숙의 후생적 조절: ANCR

ANCR(항-분화 비암호화 RNA)은 855개 염기로 구성된 Lnc-RNA(긴 비-암호화 RNA)이다. 이는 표피의 항상성에 필수적이다. 이는 이의 기저 부분에서 과발현되며, 대조적으로, 분화되어 성숙한 부분에서는 크게 감소한다. ANCR은 표피의 재생 및 상피 장벽의 형성에 관여하는 메카니즘의 복잡한 네트워크의 부분이다. 각질형성세포 내에서 이의 실험적 고갈은 상피 성숙의 조기 및 최종 마커: 필라그린, 로리크린, 인볼루크린의 발현과 함께 후자의 분화를 개시한다. 이는 피하 장벽의 형성에 적용시키는 후생적 조절의 예이다.

원리:

본 시험에서 합치성 각질형성세포를 본 발명에 따른 펩타이드와 24시간 동안 접촉시킨 다음, 세포를 세정하고, 분쇄하며 이의 RNA를 추출하여, DNA로 전환한 다음 qRT-PCR로 분석하였다.

변화 연구 및 스튜던츠 t-시험을 수행하여 결과의 유의성을 판단하였다(각각의 조건에 대해 n=4).

결과:

[표 7]

24시간째에 Lnc-RNA ANCR 발현의 변화; 본 발명에 따른 펩타이드의 효과(대조군에 대한 비율에 있어서의 결과)

이러한 결과는 본 발명에 따른 펩타이드가 상피 분화의 후생적 조절인자인, 이러한 Lnc-RNA의 중간의, 그러나 용량-의존적이고 유의적인 감소를 허용함을 나타낸다.

1.7/ 데스모솜

데스모솜은 서로에 대해 각질형성세포를 연결시키는 플라크(plaque)를 형성한다. 이러한 플레이트는 매우 내성이다. 이들은 특히 데스모글레인으로 형성된다. 이들은 케라틴-10 필라멘트의 세포내 앵커링(anchoring)을 허용하며 표피의 세포성 결합(cellular cohesion)에 관여한다.

원리:

데스모글레인은 6 ppm의 본 발명에 따른 펩타이드를 함유하는 크림 또는 위약 크림을 제공받은 복부 피부(여성, 백인, 54세)의 단면에서 조사하였다. 6일 후(크림을 매일 적용함), 피부를 동결시키고 단면화하여 이러한 단백질에 대한 항체를 사용하여 데스모글레인을 조사하였다(형광성 면역조직화학). 사진을 형광 현미경으로 찍고 영상을 적합한 소프트웨어를 사용하여 분석하였다. 결과를 위약 크림의 것과 비교하였다.

결과:

[표 8]

복부 피부 외식편 모델에서 6일째에 데스모글레인 생산의 변화; 본 발명에 따른 펩타이드의 효과(대조군에 대한 비율에 있어서의 결과)

이러한 결과는 데스모솜의 필수 구성성분인, 데스모솜 단백질의 발현이 유의적으로 증가하였으므로, 데스모솜의 형성이 본 발명에 따른 펩타이드로 인하여 양호해짐을 나타낸다.

1.8/표피탈락에 대한 효과

KLK5(칼리크레인 5)는 천연의 표피탈락을 허용함으로써, 보들보들한 천연 폴리싱 효과(natural polishing effect)("소프트-폴리시(soft-polish)")를 보증하는 각질층의 재생에 관여하는 효소이다.

원리:

데스모글레인에 대해 사용된 것과 동일한 단락 뿐만 아니라 동일한 방법(형광성 면역조직화학)을 사용하여 이러한 표피탈락 마커에 대한 본 발명에 따른 펩타이드의 효과를 분석하고 정량화하였다.

결과:

[표 9]

복부 피부 외식편 모델에서 6일째에 KLK5 생산에 있어서의 변화; 본 발명에 따른 펩타이드의 효과(대조군에 대한 비율에 있어서의 결과).

피부의 항상성은 효과적인 피부 장벽의 형성 외에도, 표피탈락에 의한 각질세포의 재생을 보증할 가능성을 필요로 한다. KLK5에 있어서의 유의적인 증가가 본 발명에 따른 펩타이드를 사용하여 관찰되며, 이는 보들보들한 천연의 매끄러운 현상을 보증하는 것으로 알려져 있다.

2/염증 마커의 생산의 조절

피부를 일정한 스트레스(UV, 흡연, 오염물질 등에 대한 노출)에 적용시키는데, 이들 중 일부는 직접적이거나 간접적인 염증 반응을 유발한다. 낮은 강도이지만, 조절되지 않거나 일정한 염증 반응은 IL-1α, IL-1β, IL-6, TNFα와 같은 사이토킨, 및 PGE2와 같은 지질의 생산을 유도하여 다른 세포를 끌어들이거나 자극함으로써 캐스캐이드(cascade)에 있어서의 반응을 유발한다. 이렇게 형성된 전-염증성 미세환경은 피부의 항상성을 변형시키고 세포 및 조직의 생물분자를 점차적으로 변형시키거나 심지어 파괴한다. 피부 장벽 통합성(integrity)의 파괴가 또한 유도된다. 따라서, 염증, IL-6 및 PGE-2의 매개인자는 미세-염증을 통해 조기 노화 현상을 가져오는 것으로 알려져 있다. 또한, 민감성 및 자극된 피부는 사이토킨, 전-염증성 펩타이드(예를 들면, IL-1, IL-6) 및 전-염증성 지질(예를 들면, PGE-2)의 비정상적으로 높은 분비를 특징으로 한다.

활성을 시험하기 위하여, 각질형성세포를 온화한 스트레스 조건(UVB 방사선의 적용) 하에서 배양함으로써 피부의 실험적 미세-염증을 모사(mimic)하였다. 이러한 상황에서, 염증 매개인자의 이의 분비에 있어서의 유의적인 감소는 피부의 회복 및 보호 작용의 의미로 해석될 것이다.

원리:

배양물 속에서 및 합치에서 NHK를 본 발명에 따른 펩타이드(또는 이의 용매)와 24시간 동안 이의 생존을 허용하는 배지 속에서 접촉시킨 다음, 매트(mat)를 생리학적 완충액 속에서 UVB로 조사하고 다시 시험할 생성물과 24시간 동안 접촉시킨다. 이러한 항온처리 말기에, 배양 배지를 ELISA로 검정하여 조사(irradiation)에 대한 반응시 이러한 세포에 의해 생산된 전-염증성 매개인자의 양을 파악하였다. 결과를 용매 대조군 +/- 조사와 비교하였다. 세포 호흡 시험을 수행하여 세포의 수를 평가하고 결과를 표준화하였다.

변화의 연구 및 스튜던츠 t 시험을 수행하여 결과의 유의성을 판단하였다.

결과:

[표 10]

UBV에 노출된 NHK에 의한 전-염증성 매개인자의 분비의 변화, 본 발명에 따른 펩타이드의 효과.

이러한 결과는 UBV 조사에 노출된 NHK에 의한 전-염증성 매개인자의 분비를 조절하는 본 발명에 따른 펩타이드의 매우 흥미로운 효과를 나타낸다. 이러한 효과는 특히 민감성 및 자극된 피부에 대해 피하 장벽을 강화시키며 미세염증을 유발하는 조사 및 다양한 오영물질에 대한 노출에 의해 유도된 피하 노화를 지연시킨다.

E) 생약/본 발명에 따른 조성물의 제조

본 발명에 따른 펩타이드는 성분 형태로, 또는 소비자에 대한 최종 화장 조성물을 생산하는 시기에, 임의로 활성을 뒷받침하고/하거나 보충하는, 추가의 화장 활성 성분과 함께 제형화될 수 있다. 이러한 조성물은 얼굴, 신체, 목, 두피, 모발, 속눈썹, 체모에, 임의의 형태로 또는 당해 분야의 기술자에게 공지된 비히클로, 특히, 용액, 분산액, 에멀젼, 페이스트 또는 분말의 형대로, 개별적으로 또는 예비혼합되어 제공되거나 개별적으로 또는 예비-혼합물로서 운반된다.

화장품에서, 특히 얼굴, 신체, 모발 및 체모 및 메이크업-보호 범위의 피부보호 범위에서 적용이 제안될 수 있다.

이러한 성분은 이의 기능(들), 적용 부위(신체, 얼굴, 목, 가슴, 손, 모발, 속눈썹, 눈썹, 체모 등), 목적한 최종 효과 및 표적화된 소비자에 따라 임의의 범주, 예를 들면, 안색(complextion)의 광채(radiance)에 작용하는, 항산화제, 텐서(tensor), 보습제, 자양제(nourishing), 보호제, 스무딩제(smoothing), 리모델링제(remodeling), 볼륨제(volumizing)(지방충전제(lipofiling)), 눈두덩(undereye bags) 및 다크서클(dark circles)에 대해, 항노화제, 주름방지제, 슬리밍제(slimming), 스무딩제(soothing), 근-완화제(myo-relaxing), 홍반 방지제(anti-redness), 튼살방지제(anti-stretch marks), 선스크린(sunscreen) 등의 것일 수 있다.

워싱톤 디씨에 소재하는 "The Cosmetic, Toiletry, and Fragrance Association, Inc."에 의해 발표된, CTFA("International Cosmetic Ingredient Dictionary & Handbook" (18th Edition, 2018)은 제한없이, 피부 보호 및 각질 보호 산업에서 일반적으로 사용된 광범위한 화장 성분을 기술하고 있으며, 이는 본 발명의 조성물에서 추가의 성분으로서 사용하기에 적합하다.

비타민 B3 화합물로부터 선택된 화합물, 니아신아미드 또는 토코페롤과 같은 화합물, 레티놀, 헥사미딘, α-리포산, 레스베라트롤 또는 DHEA와 같은 레티노이드 화합물, 하이알루론산, 펩타이드, 특히 N-아세틸-Tyr-Arg-O-헥사데실, Pal-VGVAPG(서열 번호: 3), Pal-KTTKS(서열 번호: 1), Pal-GHK, Pal-KMO2K, Pal-GQPR(서열 번호: 2) 및 Pal-K(P)HG이 언급될 수 있으며, 이는 화장 또는 피부과학적 조성물에서 광범위하게 사용된 활성 성분이다.

특히 유용한 다른 추가의 피부 보호 활성제는 Sederma의 시판 문헌 및 www.sederma.com or www.crodarom.fr.에서 찾을 수 있다.

표피 및/또는 각질층의 특성에 있어서의 활성을 보강하는데 있어서, 추가의 활성제를 다음을 포함하는 그룹으로부터 선택할 수 있다: 인지질, 다양한 세라미드, 스핑고신, 파이토스핑고신, 파이토스핑고리피드, 콜레스테롤 및 이의 유도체, 스테롤(특히, 카놀라 및 대두의 것), 지방산(특히 리놀레산, 팔미트산, 리포산, 티옥트산), 스쿠알렌(특히, 올리브의 것), 트리글리세라이드(특히 코코넛 오일), 라놀린, 라놀린 알코올, 라노스테롤, 비타민 D3, 토코페릴 니코티네이트, 다양한 오일(특히, 아르간, 장미, 바오밥(baobab)), 아스코르브산, N-아세틸 시스테인 및 N-아세틸-L-세린, 비타민 B3 화합물(예를 들면, 니아신아미드 및 니코틴산), 판테놀, 슈도필라그린, 아르기닌, 세린, PCA 염(피롤리돈 카복실산), 센텔라 아시아티카(Centella asiatica) 잎의 추출물(마데카소시드 및 아시아티코시드 속에서 적정됨), 특정의 식물 추출물(참마(wild yam)의 뿌리, 체스트넛(chestnut), 세다르 버드(cedar bud), 솔라나세아에(Solanaceae)), 플랑크톤 및 효모. Sederma에 의해 시판된 다음의 활성 성분이 또한 언급될 수 있다: Venuceane™(써무스 써모필루스(Thermus thermophilus)의 발효 배지의 추출물), Moist 24™(임페라타 실린드리카(Imperata cylindrica) 뿌리의 글리콜산 추출물), Dermaxyl™(세라미드 2와 Pal-VGVAPG 펩타이드의 배합물), Senestem™(플란타고 란세올라타(Plantago lanceolata)의 시험관내 식물 세포 배양 추출물), Ceramide 2™(세라미드), Ceramide HO3™(하이드록시세라미드), Optim Hyal™(보다 더 또는 덜 아세틸화된 글루쿠론산 올리고사카라이드), Meiritage™(부플레우룸 팔카툼(Bupleurum falcatum), 아스트라갈루스 멤브라나세우스(Astragalus membranaceus), 아트락틸로데스 마크로세팔라(Atractylodes macrocephala) 뿌리 추출물의 조합물), Revidrat™(미리스틸 포스포말레이트), Pacifeel™(미라빌리스 잘라파(Mirabilis jalapa)의 추출물, Hydronesis™(살리노코쿠스 히스파니쿠스(Salinococcus hispanicus)의 발효로부터), 비누화될 수 없는 shea butter™ 및 Citystem™(마루비움 불가레(Marrubium vulgare)의 시험관내 식물 세포 배양 추출물).

보다 일반적으로, 다음의 시판되는 활성제가 또한 예로서 언급될 수 있다: 베타인, 글리세롤, Actimoist Bio 2™(Active organics), AquaCacteen™(Mibelle AG Cosmetics), Aquaphyline™(Silab), AquaregulK™(Solabia), Carciline™(Greentech), Codiavelane™(Biotech Marine), Dermaflux™(Arch Chemicals, Inc), Hydra'Flow™(Sochibo), Hydromoist L™(Symrise), RenovHyal™(Soliance), Seamoss™(Biotech Marine), Argireline™(Lipotec로부터의 시판되지 않는 아세틸 헥사펩타이드-3), 스필란톨 또는 상표명 Gatuline Expression™ 하에 알려진 악멜라 올레라세아(Acmella oleracea)의 추출물, 명칭 Boswellin™ 하에 공지된 하에 시판된 보스웰리아 세라타(Boswellia serrata)의 추출물, Deepaline PVB™ (Seppic), Syn-AKE™(Pentapharm), Ameliox™, Bioxilift™(Silab), PhytoCellTec^TM Argan(Mibelle), Papilactyl D™(Silab), Preventhelia™(Lipotec), 또는 Sederma에 의해 시판된 다음의 활성 성분: Subliskin™, Venuceane™, Moist 24™, Vegesome Moist 24™, Essenskin™, Juvinity™, Revidrat™, Resistem™, Chronodyn™, Kombuchka™, Chromocare™, Calmosensine™, Glycokin factor S™, Biobustyl™, Idealift™, Ceramide 2™, Ceramide A2™, Ceramide HO3™, Legance™, Intenslim™, Prodizia™, Beautifeye™, PacifeelTM, Zingerslim™, Meiritage™, Senestem™, Sebuless™, Majestem™, Apiscalp™, Rubistem™, Citystem^TM, Neonyca^TM, NG Insaponifiables de Beurre de Karite^TM, Majestem^TM, Hydronesis^TM 및 Poretect^TM, 또는 이의 혼합물.

본 발명의 펩타이드와 조합될 수 있는 식물 추출물(통상의 추출물의 형태 또는 시험관내 방법에 의해 제조됨) 중에서, 아이비(Ivy), 특히 영국 아이비(English Ivy)(헤데라 헬릭스(Hedera helix)), 부플레우룸 키넨시스(Bupleurum chinensis), 부플레룸 팔카툼(Bupleurum falcatum), 아르니카(arnica)(아르니타 몬타나 엘(Arnica montana L)), 로즈마리(로즈마리누스 오피시날리스 엔(Rosmarinus officinalis N)), 매리골드(marigold)(칼렌둘라 오피시날리스(Calendula officinalis)), 세이지(sage)(살비아 오피시날리스 엘(Salvia officinalis L)), 인삼(파낙스 진셍(Panax ginseng)), 징코 빌로바(ginko biloba), 세인트-존스-워트(St.-John's-Wort)(하이퍼리쿰 페르포라툼(Hyperycum perforatum)), 부쳐스-브룸(butcher's-broom)(루스쿠스 아쿨레아투스 엘(Ruscus aculeatus L)), 유럽 메도스위트(European meadowsweet)(필리펜둘라 울마리아 엘(Filipendula ulmaria L)), 큰-꽃의 자바 테아(big- flowered Jarva tea)(오르토시폰 스타민쿠스 벤쓰(Orthosiphon stamincus benth)), 아티초크(artichoke)(사이나라 스콜리무스(Cynara scolymus)), 조류(푸쿠스 베시쿨로수스(Fucus vesiculosus)), 자작나무(베툴라 알바(Betula alba)), 녹차, 콜라 너트(cola nuts)(콜라 니피다(Cola nipida)), 홀스-체스트넛(horse-chestnut), 대나무, 센텔라 아시아티카(Centella asiatica), 헤더(heather), 푸쿠스(fucus), 버드나무, 마우스-이어(mouse-ear), 에스신(escine), 캉주(cangzhu), 크리산텔룸 인디쿰(chrysanthellum indicum), 아르메니아세아 속(Armeniacea genus)의 식물, 아트락틸로디스 플라티코돈(Atractylodis platicodon), 신노메눔(Sinnomenum), 파르비티디스(Pharbitidis), 플레밍기아(Flemingia), 콜레우스(Coleus), 예를 들면, 씨, 포르스코흘리이(C. Forskohlii), 씨, 블루메이(C. blumei), 씨, 에스퀴롤리이(C. esquirolii), 씨. 스쿠텔라로이데스(C. scutellaroides), 씨. 크산탄투스(C. xanthantus) 및 씨. 바르바투스(C. Barbatus)의 추출물, 예를 들면, 콜레우스 바라바투스(Coleus barbatus)의 뿌리의 추출물, 발로테(Ballote), 구이오아(Guioa), 다발리아(Davallia), 테르미날리아(Terminalia), 바링토니아(Barringtonia), 트레마(Trema), 안티로비아(antirobia), 세크로피아(cecropia), 아르가니아(argania), 디오스코레아에(dioscoreae), 예를 들면, 디오스코레아 오포시타(Dioscorea opposita) 또는 멕시칸(Mexican)의 추출물, 암미 비스나가(Ammi visnaga), 시에게스벡키아(Siegesbeckia), 특히 시에게스벡키아 오리엔탈리스(Siegesbeckia orientalis)의 추출물, 에리카세아에(Ericaceae) 과의 식물성 추출물, 특히 빌베리(bilberry) 추출물(빅시니움 안구스티폴리움(Vaccinium angustifollium)) 또는 아륵토스타필로스 우바 우르시(Arctostaphylos uva ursi), 알로에 베라(aloe vera), 스테롤(예컨대, 파이토스테롤)을 함유하는 식물, 만지스타(Manjistha)(루비아(Rubia) 속, 특히 루비아 코르디폴리아(Rubia cordifolia)로부터 추출됨), 및 구갈(Guggal)(콤미포라(Commiphora) 속, 특히 콤미포라 물쿨(Commiphora mukul)의 식물로부터 추출됨), 콜라(kola) 추출물, 카모마일, 적 클로버 추출물, 피퍼 메티스티쿰(Piper methysticum) 추출물(Sederma로부터의 Kava Kava™), 바코파 모니에리(Bacopa monieri) 추출물(Sederma로부터의 Bacocalmine™) 및 채찍 산호(sea whip) 추출물, 글리시리자 글라브라(Glycyrrhiza glabra), 멀베리(mulberry), 멜라레우카(melaleuca)(차 나무), 라레아 디바리카타(Larrea divaricata), 라브도시아 루베스켄스(Rabdosia rubescens), 유글레나 그라실리스(Euglena gracilis), 피브라우레아 레키사 히루디네아(Fibraurea recisa Hirudinea), 차파랄 소르굼(Chaparral Sorghum)의 추출물, 해바라기꽃 추출물, 에난티아 클로란타(Enantia chlorantha), 스페르마코세아(Spermacocea) 속의 미트라카르페(Mitracarpe), 부추 바로스마(Buchu barosma), 라우소니아 이네르미스 엘.(Lawsonia inermis L.), 아디안티움 카필루스-베네리스 엘.(Adiantium capillus-veneris L.), 첼리도늄 마주스(Chelidonium majus), 루파 실린드리카(Luffa cylindrica), 재패니즈 만다린(Japanese Mandarin)(시트러스 레티쿨라타 블란토 바르. 운시우(Citrus reticulata Blanco var. unshiu)), 카멜리아 시넨시스(Camelia sinensis), 임페라타 실린드리카(Imperata cylindrica), 글라우시움 플라붐(Glaucium Flavum), 쿠프레쑤스 셈페르비렌스(Cupressus sempervirens), 폴리고나툼 멀티플로룸(Polygonatum multiflorum), 로베일리 헴슬레야(loveyly hemsleya), 삼부쿠스 니그라(Sambucus nigra), 파세올루스 루나투스(Phaseolus lunatus), 센타우리움(Centaurium), 마크로시스티스 피리페라(Macrocystis pyrifera), 투르네라 디푸사(Turnera diffusa), 아네마레나 아스포델로이데스(Anemarrhena asphodeloides), 포르툴라카 필로사(Portulaca pilosa), 헤물루스 루풀루스(Humulus lupulus), 코페아 아라비카(Coffea arabica), 일렉스 파라구아리엔시스(Ilex paraguariensis) 또는 글로부랄리아 코르디폴리아(Globularia cordifolia), 알비찌아 줄리브리씬(Albizzia julibrissin), 옥시덴드론 아르보레툼(Oxydendron arboretum), 징김베르 제룸베트 스미쓰(Zingimber zerumbet smith), 아스트라갈루스 멤브라나세우스(Astragalus membranaceus), 아트락틸로데스 마크로세팔라에(Atractylodes macrocephalae), 플란타고 란세올라타(Plantago lanceolata), 레온토로듐 알피늄(Leontopodium alpinum), 미라빌리스 잘라파(Mirabilis jalapa), 마루비움 불가레(Marrubium vulgare), 아피움 그라베올렌스(Apium graveolens) 또는 난과식물(orchids)의 추출물.

본 발명의 조성물은 하나 이상의 추가의 펩타이드, 예를 들면, 이에 제한없이, 디-, 트리-, 테트라-, 펜타- 및 헥사펩타이드 및 이의 유도체를 포함할 수 있다. 특수한 구현예에 따라서, 조성물 속의 추가의 펩타이드의 농도는 1x10^-7 중량% 내지 20 중량%, 바람직하게는 1x10^-6 중량% 내지 10 중량%, 바람직하게는 1x10^-5 중량% 내지 5 중량%의 범위이다. 용어 "펩타이드"는 본원에서 10개의 이하의 아미노산을 함유하는 펩타이드, 이의 유도체, 이성체 및 다른 종, 예를 들면, 금속 이온(예컨대, 구리, 아연, 망간, 마그네슘, 및 기타)와의 복합체를 지칭한다. 용어 "펩타이드"는 천연 펩타이드 및 합성 펩타이드 둘 다를 지칭한다. 이는 또한 펩타이드를 함유하고, 천연에서 발견되고/되거나 상업적으로 이용가능한 조성물을 지칭한다.

본원에 사용하기에 적합한 디펩타이드는 카르노신(βAH), YR, VW, NF, DF, KT, KC, CK, KP, KK, TT, PA, PM 또는 PP를 포함하나, 이에 한정되지 않는다.

본원에 사용하기에 적합한 트리펩타이드는 RKR, HGG, GKH, GHK, GGH, GHG, KFK, KAvaK, KβAK, KAbuK, KAcaK, KPK, KMOK, KMO₂K(MO₂는 디-산소화된 설폭사이드 메티오닌이다), KVK, PPL, PPR, SPR, QPA, LPA 또는 SPA를 포함하나, 이에 한정되지 않는다.

본원의 추가의 펩타이드로서 사용하기에 적합한 테트라펩타이드는 RSRK(서열 번호: 6), GQPR(서열 번호: 7), KTAK(서열 번호: 8), KAYK(서열 번호: 9) 또는 KFYK(서열 번호: 10)을 포함하나, 이에 한정되지 않는다.

적합한 펜타펩타이드는 KTTKS(서열 번호: 11)를 포함하나, 이에 한정되지 않는다.

적합한 헥사펩타이드는 GKTTKS(서열 번호: 12) 및 VGVAPG(서열 번호: 13)를 포함하나, 이에 한정되지 않는다.

본 발명에 따라 사용하기 위한 다른 적합한 펩타이드를 선택할 수 있으며, 이러한 목록은 제한없이 다음으로부터 선택될 수 있다: 펩타이드의 친지성 유도체, 바람직하게는 팔미토일(Pal) 유도체 또는 미리스토일(Myr), 및 전술한 바와 같은 금속 복합체(예컨대, 트리펩타이드 HGG의 구리 복합체). 바람직한 디펩타이드는 예를 들면 N-팔미토일-β-Ala-His, N-아세틸-Tyr-Arg-헥사데실에스테르(Sederma로부터의 Calmosensine™, Idealift™), Pal-RT 또는 Pal-KT(Sederma)를 포함한다. 바람직한 트리펩타이드 유도체는 예를 들면, Pal-GKH 및 Pal-GHK(Sederma로부터), HGG의 구리 유도체(Sigma로부터의 Lamin™), 리포스폰딘(N-엘라이도일-KFK) 및 보존적 치환의 이의 유사체, N-아세틸-RKR-NH₂(펩타이드 CK⁺), N-Biot-GHK(Sederma로부터), Pal-KAvaK, Pal-KβAlaK, Pal-KAbuK, Pal-KAcaK, 또는 Pal-KMO₂K(Sederma로부터의 Matrixyl®synthe' 6®), Pal-KVK(DSM의 Syn-Coll^TM), 및 이의 유도체를 포함한다.

제WO2015181688호 출원에 기술된 화학식 X-Pro*-Pro*-Xaa-Y의 항노화 트리펩타이드, 예를 들면, Myr-PPL-OH and Myr-PPR-OH가 또한 본원에서 언급될 수 있으며 여기서 Xaa는 N-말단에서 Leu, Arg, Lys, Ala, Ser, 및 Asp로부터 선택되고, X는 C-말단에서 H, -CO-R¹ 및 -SO₂-R¹으로부터 선택되며, Y는 OH, OR¹, NH₂, NHR¹ 또는 NR¹R²로부터 선택되고, R¹ 및 R²는 서로 독립적으로, 알킬, 아릴, 아르알킬, 알킬아릴, 알콕시 및 아릴옥시 그룹으로부터 선택되며, 이는 직쇄, 측쇄, 사이클릭, 폴리사이클릭, 불포화, 하이드록실화, 카보닐화, 인산화 및/또는 황화될 수 있고, 상기 그룹은 가능하게는 이의 골격에 헤테로원자, 특히 O, S 및/또는 N을 지니며, Pro*는 프롤린, 이의 유사체 또는 유도체에 상응한다.

본원에서 또한 제WO2014/080376호에 개시된 화학식 X-(Xaa₁)n-Pro*-Xaa₂-Y의 전색소화(propigmenting) 및/또는 프로-멕(pro-mec) 디펩타이드, 예를 들면, 다음의 펩타이드 Pal-SPR-OH, Pal-PPR-OH, Pal-QPA-OH, Pal-LPAOH, Myr-SPA-OH, Pal-PM-OH, Pal-PA-OH 및 Pal-PP-OH가 인용될 수 있으며, 여기서 n은 0, 1 또는 2이고, Xaa₁은 Ala, Val, Met, Leu, Iso, Phe, Pro로부터 선택된 소수성 아미노산, 및 이의 유사체 및 유도체; 또는 Ser, Thr, Tyr, Asp, Glu로부터 선택된 극성 아미노산 및 이의 유사체 및 유도체이고; n이 2인 경우 2개의 아미노산 Xaa₁은 동일하거나 상이할 수 있고; Xaa₂는 Ala, Val, Met, Leu, Iso, Phe로부터 선택된 소수성 아미노산, 및 이의 유사체 및 유도체, 또는 Arg, Lys, His로부터 선택된 염기성 아미노산, 및 이의 유사체 및 유도체이고; N 말단 끝에서 X는 H, -CO-R₁ 및 -SO₂-R₁으로부터 선택되고; C 말단 끝에서 Y는 OH, OR₁, NH₂, NHR₁ 또는 NR₁R₂로부터 선택되고; R₁ 및 R₂는 서로 독립적으로 알킬, 아릴, 아르알킬, 알킬아릴, 알콕시 및 아릴옥시 그룹으로부터 선택될 수 있으며, 이들은 직쇄, 측쇄, 사이클릭, 폴리사이클릭, 포화, 불포화, 하이드록실화, 카보닐화, 인산화 및/또는 황화될 수 있고, 상기 그룹은 이의 골격 내에 O, S 및/또는 N 헤테로원자를 가지거나 가지지 않을 수 있고 Pro*는 프롤린, 이의 유사체 또는 유도체에 상응한다.

본 발명에 따른 추가의 펩타이드로서 사용하기에 적합한 테트라펩타이드 유도체는 Pal-GQPR(서열 번호: 2)(Sederma로부터), Ela-KTAK(서열 번호: 14), Ela-KAYK(서열 번호: 15) 또는 Ela-KFYK(서열 번호: 16)를 포함하나, 이에 한정되지 않는다. 본원에서 추가의 펩타이드로서 사용하기에 적합한 펜타펩타이드 유도체는 Pal-KTTKS(서열 번호: 1)(Sederma로부터 Matrixyl®로서 이용가능함), Pal-YGGFXaa(서열 번호: 17)(여기서 Xaa는 Leu 또는 Pro이다), 또는 이의 혼합물을 포함하나, 이에 한정되지 않는다.

본원에서 사용하기에 적합한 헥사펩타이드 유도체는 Pal-VGVAPG(서열 번호: 3), Pal-GKTTKS(서열 번호: 18), Pal-HLDIIXaa(여기서 Xaa는 Trp, Phe, Tyr, Tic, 7-하이드록시-Tic ou Tpi(서열 번호: 19) 및 이의 유도체이다)를 포함하나, 이에 한정되지 않는다. Pal-GHK 및 Pal-GQPR(서열 번호: 2)의 혼합물(Matrixyl® 3000, Sederma) 또한 언급될 수 있다.

트리펩타이드 또는 유도체를 함유하는 상업적으로 이용가능한 바람직한 조성물은 Sederma의 Biopeptide-CL™, Maxilip™, Biobustyl™, Procapil™ 및 Matrixyl®synthe' 6®를 포함한다. 테트라펩타이드의 상업적으로 이용가능한 바람직한 공급원으로부터의 조성물은 Sederma에 의해 제안된, 50 내지 500 ppm의 Pal-GQPR(서열 번호: 2) 및 부형제를 함유하는 Rigin™, Eyeliss™, Matrixyl® Reloaded 및 Matrixyl 3000®을 포함한다.

다음의 시판 펩타이드 뿐만 아니라 추가의 활성 성분이 언급될 수 있다:

- Pentapharm에 의해 시판된 Vialox™(INCI 명칭 = 펜타펩타이드-3(알라닌, 아르기닌, 이소루이신, 글리신 및 프롤린을 포함하는 합성 펩타이드)), Syn-ake™(β-Ala-Pro-Dab-NH-Bzl) 또는 Syn-Coll™ (Pal-Lys-Val-Lys-OH);

- Lipotec에 의해 시판된 Argireline™(Ac-Glu-Glu-Met-Gln-Arg-Arg-NH₂(INCI 명칭 = 아세틸 헥사펩타이드-3)(서열 번호: 20), Leuphasyl™(Tyr-D-Ala-Gly-Phe-Leu)(서열 번호: 21), Aldenine™(Gly-His-Lys), Trylagen^TM(INCI 명칭 = 슈도알테로모나스 페르멘트(Pseudoalteromonas Ferment) 추출물, 가수분해된 밀 단백질, 가수분해된 대두 단백질, 트리펩타이드-10 시트룰린(시트룰린과 프리펩타이드-10의 반응 생성물(아스파르트산, 이소루이신 및 라이신으로 구성된 합성 펩타이드)), 트리펩타이드-1), Eyeseryl™(Ac-β-Ala-His-Ser-His)(서열 번호: 22), Serilesine™(Ser-Ile-Lys-Val-Ala-Val)(서열 번호: 23) 또는 Decorinyl™(INCI 명칭: 트리펩타이드-10 시트룰린 = 시트룰린과 트리펩타이드-10의 반응 생성물(아스파르트산, 이소루이신 및 라이신으로 구성된 합성 펩타이드);

- Vincience에 의해 시판된 Collaxyl™(Gly-Pro-Gln-Gly-Pro-Gln(서열 번호: 24)) 또는 Quintescine™(Cys-Gly);

Les Laboratoires Serobiologiques/Cognis에 의해 시판된 Cytokinol™LS(카제인 가수분해물);

- l’lnstitut Europeen de Biologie Cellulaire로부터 시판된 Kollaren™(Gly-His-Lys), IP2000™(Pal-Val-Tyr-Val) 또는 Meliprene™(INCI 명칭 = 모노플루오로헵타펩타이드-1: 아세트산과 아르기닌, 글리신, 글루탐산, 히스티딘, 노르루이신, p-플루오로페닐알라닌 및 트립토판을 포함하는 합성 펩타이드의 반응 생성물);

- Innovations에 의해 시판된 Neutrazen™(Pal-His-D-Phe-Arg-NH₂); 또는

- lnfinitec Activos에 의해 시판된 BONT-L-펩타이드™(INCI 명칭 = 팔미토일 헥사펩타이드-19: 팔미트산과 헥사펩타이드-19(아스파라긴, 아스파르트산, 라이신 및 메티오닌으로 구성된 합성 펩타이드)의 반응 생성물), Timp-펩타이드™(INCI 명칭 = 아세틸 헥사펩타이드-20: 헥사펩타이드-20(알라닌, 글리신, 라이신, 발린 및 프롤린으로 구성된 합성 펩타이드)의 반응 생성물) 또는 ECM Moduline™(INCI 명칭 = 팔미토일 트리펩타이드-28: 팔미트산과 트리펩타이드-28(아르기닌, 라이신 및 페닐알라닌으로 구성된 합성 펩타이드)의 반응 생성물.

본 발명에 따른 상이한 조성물/제형은 추가의 활성 성분의 예와 함께 하기 기술되어 있다.

본 발명에 따른 활성 성분은 다시 말해 벡터화된 펩타이드를 포함하는, C/ 지점에 기술된 바와 같다.

활성 성분은 일반적으로 1 내지 5%, 바람직하게는 3%의 범위로 제형화된다.

1) 크림형, 예를 들면, 얼굴용 항노화 데이 크림(day cream)

추가의 활성 성분(들)의 예(들):

1. 다음과 같은 보습/스무딩(moisturizing/smoothing) 성분

하이알루론산 단편과 유사한 구조를 갖는 아세틸화된 글루쿠론산 올리고사카라이드를 함유하는, Sederma에서 시판된 OPTIM HYAL ^TM .

2. 다음과 같은 유지(sebo)-조절인자 성분:

안색을 정화하고, 매트화(mattifying)하고 리프레쉬(refreshing)하며, 결점을 가리는, 시험관내 세포 배양물에 의해 수득된 시링가 불가리스(Syringa vulgaris)의 추출물을 포함하는, Sederma에 의해 시판된 SEBULESS ^TM .

피부에 견고성, 색조 및 밀도를 제공함으로써 노화로 붕괴되는 모공-유지 구조를 강화시키는, 실롤리노펩타이드 및 센키우놀리드 속에서 연마된 아마씨(flaxseed) 및 셀러리(celeri) 추출물의 조합물을 포함하는 Sederma에 의해 시판된 PORETECT ^TM .

3. 다음과 같은 피부/피부 장벽의 탄성 특성에 작용하는 성분:

특히 엘라스틴 자극을 통해, 얼굴의 처짐을 방지하고 중력에 대한 내성을 개선시키는, N-아세틸-타이로실-아르기닐-O-헥사데실 에스테르 리포디펩타이드를 포함하는, Sederma에 의해 시판된 IDEALIFT ^TM .

4. 세라미드 2, 각질층의 세멘트(cement), 및 주름을 펴고 피하 장벽을 회복시키는, 팔미토일화된 매트리킨인, Pal-Val-Gly-Val-Ala-Pro-Gly를 배합시킨, Sederma에 의해 시판된 DERMAXYL ^TM .

1) 온화한 수성 세럼형(serum form)

추가의 활성 성분(들)의 예(들)

1. 다음과 같은 항노화 성분:

특히 피부의 점탄성 특성을 개선시키고 색소반(pigment pot)의 노쇠를 약화시키는, 플란타고 란세올라타(Plantago lanceolata)의 시험관내 세포 배양물에 의해 수득된 식물 세포를 포함하는, Sederma에 의해 시판된 SENESTEM ^TM ^.

2. 다음과 같은 항산화제 성분:

레온토포드산 속에서 적정된 시험관내 세포 배양물에 의해 수득된 레온토포디움 알피눔(leontopodium alpinum)의 식물 세포를 기반으로하고, 산화 스트레스(오염물질, UV 방사선)를 중화시키고 피부 긴장을 회복시키는, Sederma에 의해 시판된 MAJESTEM ^TM .

2) 겔 형

추가의 활성 성분(들)의 예(들):

다음과 같은 오염방지 성분:

1. 고 포르시토사이드 B 농도로 시험관내에서 마루비움 불가레(Marrubium vulgare)로부터 수득된 식물 세포를 기반으로 하고; 오염물질 공격에 대항하여 사용되며: 피부를 보들보들하고 매끄럽게 만들고, 피부 질감(texture)을 개량하고, 블랙헤드(blackhead)의 가시성을 감소시키고, 피부가 윤기가 나도록(radiant) 하고 정화시키는, Sederma에 의해 시판된 CITYSTEM™.

2. 민감성 피부용 스무딩 성분(smoothing ingredient):

미라빌리스 잘라파(Mirabilis Jalapa)의 추출물을 포함하는, Sederma에 의해 시판된 PACIFEEL ^TM .

3. 다음과 같은 보습 성분:

호마린 및 에리트리톨로 구성된 삼투보호성 보습 활성 성분인, Sederma에 의해 시판된 AQUALANCE ^TM .

3) 스프레이 마스크 제조용 겔 형

추가의 활성 성분(들)의 예(들):

1. 다음과 같은 안색 광채(complexion radiance)에 작용하는 성분:

프로토베르베린(protoberberine) 및 올레아놀산이 풍부한 에난티아 클로란타(Enantia chlorantha) 추출물을 포함하고; 모공 크기 및 밝기를 감소시키고; 여드름이 생기기 쉬운 피부의 알갱이(grain)를 개량하는, Sederma에 의해 시판된 EVERMAT ^TM .

2. 다음과 같은 재활성화 특성을 갖는 성분:

Crodarom에 의해 시판된 Fruitliquid ^TM Kumquat ^TM .

4) 메이크 업 베이스용의 크림 형

추가의 활성 성분(들)의 예(들)

1. 다음과 같은 눈/눈 가장자리 아래의 다크 서클에 작용하는 성분:

2개의 마트리킨, Pal-GHK 및 Pal-GQPR와, N-하이드록시석신이미드 및 플라보노이드, 크리신의 배합물인, Sederma에 의해 시판된 HALOXYL ^TM .

3개의 성분: 헤스페리딘 메틸 찰콘, 발릴-트립토판(VW) 디펩타이드 및 Pal-GQPR 리포펩타이드를 배합시킨, Sederma에 의해 시판된 EYELISS ^TM .

당화에 의해 유발된 손상으로부터 피부를 회복시키고 보호함으로써, 피로한 기색: 다크 서클, 눈두덩(undereye bags), 칙칙한 안색(dull complexion) 및 그려진 특징(drawn feature)의 가시적 감소를 촉진하는 알비지아 줄리브리씬(Albizia julibrissin)의 추출물을 포함하는, Sederma에 의해 시판된 PRODIZIA™.

2. Sederma에 의해 시판된 펩타이드(들): 예를 들면, MATRIXYL®, MATRIXYL 3000 ^TM , MATRIXYL synthe'6 ^TM 및/또는 MATRIXYL Morphomics ^TM 을 기반으로 하는 주름반지제/노화방지제 성분.

F) 생체내 효능 시험

시험한 제품: 상기 생약 부분의 E) 지점의 크림 1).

원리:

본 발명에 따른 펩타이드의 효능 평가를 다음의 3개의 상보성 연구 동안 특정 수의 자원자에서 수행하였다:

1. 결점이 있는(imperfect) 피부의 개선을 측정하고 상이한 매개변수를 연구하기 위해 수개의 보완 기술을 사용하는 첫번째 위약-조절된 연구:

· 표준화된 사진에서 수행된 결점의 평가;

· Epsilon^TM 장치로 수행된 보습의 영상 평가;

· 색상 카메라로 수행된 피부 매끄러움의 평가; 및

· "스트리핑(stripping)"(접착성 지지체 상의 세포 층의 박리)에서 영상 분석에 의한 각질세포 크기(각질층의 상태)의 평가.

2. CLCT 임상 평가 방법(색상, 광도, 선명도, 투명도)에 의한 안색에 대한 인지된 효과를 정량화하기 위한 얼굴 전체의 두번째 연구.

3. 적용의 균질성 및 자가-탠닝 제품(self-tanning product)을 분석함으로써 펩타이드의 부드러운 "광택(polish)" 효과를 입증하는 것을 목표로 하는 세번째 위약-조절된 연구.

1/제1 연구

프로토콜

구체적인 포함 기준

본 연구는 눈에 대해 결점이 있는 피부, 다시 말해서, 칙칙하고/피곤하며/지저분한 안색 및/또는 불규칙한 피부 질감, 거친 피부를 지닌, 41세의 중년(30 내지 50세)의 29명의 여성 패널에서 수행하였다. 다른 한편, 주사비(rosacea), 여드름(pimple) 또는 발적과 같은 결점은 제외시켰다.

자원자들은 단일 보습제(moisturizer)를 사용한 1개월의 세척 기간을 관찰하여야 했으며 문지르기(scrub) 또는 마스크 유형의 어떠한 화장 행위 뿐만 아니라 어떠한 유의적인 햇빛도 배제하여야 했다.

연구 유형, 기간, 적용

본 연구는 얼굴 및 팔뚝에 단일 블라인드(single blind)로서 수행하였다. 6주 동안, 자원자는 본 발명에 따른 크림 및 대측에는 위약 크림을 아침과 저녁에 적용하였다.

연구의 개요는 다음에 따라 요약된다.

통계

통계적 연구는 스튜던츠 t-시험 또는, 필요한 경우, 비-매개변수 윌콕슨 시험(non-parametric Wilcoxon test)을 사용하여 수행하였다. 양측 시험(bilateral test)을 일치된 시리즈에서 수행하였다. 전문가 평가를 위해, Khi² 시험을 사용하였다.

방법 및 결과

결점 평가

표준화된 사진을 고 화질 디지탈 카메라, 특수 조명 및 자원자에 대한 구속 시스템을 사용하는 사진 벤치(photographic bench)를 사용하여 T0 및 T6 주째에 촬영하였다. 얼굴의 위치, 사진 및 조명 설정을 표준화하고 시간이 경과하면서 재생되도록 제어하였다.

수득한 사진은 5명의 전문가 심사에 의해 평가되었다. 각각의 자원자에 대해, 전문가는 처치 전 및 후에 사진을 시각화하고 다음의 기술로 이들의 의견을 제공하였다: "안색이 개선됨", 즉 안색이 보다 균질하고, 피부가 결함이 거의 없이 보다 더 부드럽다.

결과는 하기 나타낸다.

^** p<0.01로 불리한 의견에 비해 유의적인 변화/

$ p<0.05로 위약으로부터 유의적인 변화.

본 발명에 따른 크림의 적용은 3%의 불리한 의견에 대해 54%의 양호한 의견으로 안색의 가시적이고 유의적인 개선을 가져온다. 대조적으로, 단지 36%의 긍정 및 8%의 부정으로, 위약 사용은 명확하게 및 유의적으로 상이하였다(p <0.05).

보습 평가

Epsilon^TM E100 장치(Biox로부터)를 사용하였다. 이는 수천개의 지점에 걸쳐, 단일 값 뿐만 아니라 평균 값, 및 보습 영상("커패시던스 영상(capacitance imaging)")을 제공한다는 특색을 갖는다. 공간 해상도가 50 μm인 이의 정전용량형 센서 덕분에, 영상 영역은 12.8 x 15mm이며, 이는 76800 픽셀(pixel)에 상응한다. 각각의 픽셀은 벤치마크 : 공기 = 1 및 물 = 80로서 0과 85 사이의 피부 유전 유전율(dielectric permittivity)의 ε 값을 제공한다. 도해상 관심 외에도, 이러한 2D 측정은 또한 피부의 지형(topography of the skin), 및 보습이 이러한 매개변수를 개선시킴이 알려져 있으므로, 확대하면 이의 균질성, 또는 심지어 잠재적으로는 이의 유연성에 대한 정보를 갖도록 한다.

[표 11]

팔뚝에서 보습의 변화(n=3회 측정, 25명의 자원자)

^* 위약에 대해: 비-매개변수 시험, 한쪽(unilateral); p<0.1 양쪽(bilaterally). Nsd: 유의적인 차이 없음

본 발명에 따른 크림의 6주 적용 후, 보습 값은 +25.8%까지 증가한다. 동시에, 위약의 적용은 +11.3%의 더 작은 증가를 야기하였다(팔은 일반적으로 크림이 없으므로, 위약이 효과를 갖는 것은 일반적이다).

Epsilon^TM을 사용하여 수득된 영상을 또한 5명의 전문가 심사에 의해 평가받았다.

각각의 자원자에 대해, 전문가는 본 발명에 따른 크림 또는 위약 크림을 사용한 처치 후 사진을 시각화하고 가장 큰 균질성을 갖는 영상을 선택하였다.

[표 12]

피부 균질성에 관해 호의적이거나 호의적이지 않은 의견의 %(n = 25명의 자원자, 5명의 심사)

** p<0.01로 "위약 카테고리를 사용하여 보다 균질한 피부"와 관련한 유의적인 변화.

영상에서, 각각의 검은 부위는 정보를 제공하지 않으나 각각의 픽셀은 정보를 제공한다. 보습의 분포는 2개의 영상 사이에서 변한다: 본 발명에 따른 크림을 제공받은 부위에 상응하는 영상은 위약을 제공받은 부위에 상응하는 영상보다 픽셀에 있어 ≪보다 조밀≫하다. 이는 피부가 보다 더 촉촉하게(hydrated)되어 있는 것 외에도, 더 부드러워지고 잠재적으로 보다 더 탄력(suppler)있어졌음을 나타낸다.

매끄러움 평가(Smoothing evaluation)

색상 카메라를 당해 평가에 사용하였다. 이는 어떠한 빛남(shine)도 피하기 위해 편광이 있는 확산되고 일정한 LED 조명을 사용한 카메라이다. 이는 영상 보정 알고리즘을 가지고 있으며, 이는 즉각적인 색상 보정 및 영상 균질성(가장자리에서 음영 제거)을 허용한다. 이의 측정 필드(measurement field)는 16 x 12 mm이고 해상도는 1천만 픽셀이다. 이는 20μm 보다 더 작은 구조물을 볼 수 있도록 하는 x50 줌(zoom)을 가지고 있다. 또한, 입체광도계 기술을 기반으로 한 시스템 덕분에, 카메라는 상이한 조명 조건 하에서 수개의 영상을 기록하며, 이는 영상을 3D로 재구축하여 피부의 지형을 분석할 수 있도록 한다.

이러한 마지막 기능을 본 발명에 따른 크림의 연구에 사용하여 지형의 2개의 매개변수를 평가하였다: 미세지형(microrelief)의 복잡성 및 깊이.

[표 13]

팔뚝에서 미세지형의 지형의 변화(매끄러움 효과)(평균 2개의 부위, 28명의 자원자)

^* 위약에 대해: 매개변수 한쪽 시험(Parametric unilateral test); p<0.08 및 양쪽 시험 p<0.05

먼저, 위약의 매끄러움 효과(각각의 매개변수에 대해 -8.5% 및 -14.3%)가 있으며, 이는 앞서와 같이 당해 부위에서 크림의 비정상적인 흡수에 의해 설명될 수 있다.

그러나, 본 발명에 따른 크림의 효과는 미세지형의 깊이(위약에 대해 -12.8%, p<0.04) 또는 이의 복잡성(위약에 대해 -20.9%, p<0.05)에 상관없이 광범위하고 유의적으로 더 높다.

각질세포 크기의 평가

몇가지 연구는 각질세포의 크기가 미세-스트레스 조건 하에서 감소됨을 나타내며, 이는 각질세포의 일부 미성숙을 유발하는 표피의 비율에 있어서의 증가와 관련되어 있음을 나타낸다.

T0 및 T6 주째에, 각질 세포를 자원자 피부로부터 표준화된 방식으로 접착제를 사용하여 수거한 다음 형광성 시약으로 표지함으로써 가시화하고 현미경 하에 이의 표면을 정량화하였다. 자원자 및 사례별로 약 300개의 각질 세포를 정량화하였다.

[표 14]

얼굴에서 각질세포의 크기의 변화(n = 300개에 걸친 평균 각질세포, 29명의 자원자)

이러한 결과는 각질세포의 크기가 본 발명에 따른 크림으로 처리한 면에서 T0 내지 T6 주 사이에 유의적으로 변하지 않았음을 나타낸다. 이러한 크기의 감소는 위약 처리한 면에서 관찰되었다(-2.4%, p<0.01).

시험은 기후 및 온도의 변화가 많은 계절인, 가을에 수행하였다. 자원자 피부는 이러한 변화를 스트레스로 "기록"함으로서 각질세포 크기에 있어서 약간의 감소를 초래할 가능성이 있다. 본 발명에 따른 크림의 사용은 표피 위 부분의 항상성을 유지하도록 하며 따라서 특히 전-염증 매개인자를 감소시키고 피부 장벽을 강화시키는 이의 특성 덕분에, 이를 진정시켰다.

2/제2 연구

프로토콜

구체적인 포함 기준

본 연구는 칙칙한 안색(Spincontrol Laboratory CLCT 척도(색상, 광도, 선명도, 투명도) 및 피부의 광유형 I 내지 III을 사용하여 36세의 중간 연령(22 내지 44세)의 26명의 여성의 패널에서 수행하였다.

연구 유형, 기간, 적용

본 연구는 얼굴에서 수행하였다. 6주 동안 자원자는 본 발명에 따른 크림을 아침과 저녁에 적용하였다.

통계

CLCT 지수의 경우, 이론적 평균에 대해 한쪽 스튜던츠 t 시험을 사용하였다. 자원자에 의한 자가-평가의 경우, Khi² 시험을 사용하였다.

방법 및 결과

1/CLCT에 의한 안색의 평가

안색을 평가하기 위해, CLCT 방법은 안색의 특징적인 7개의 설명자의 훈련된 심사에 의한 가시적인 분석을 기반으로 한다.

- 피부 색은 백인 피부를 특징으로 하는 4개 색조로 정의된다: 핑크-레드, 올리브, 베이지, 연 핑크;

- 광도는 얼굴의 두드러진 부위 상의 "광점(light spot)"의 강도로 정의한다.

- 선명도는 피부 색 균일성 및 질감 규칙성(균질성)의 합성이고;

- 투명도는 피부를 통해 볼 수 있고 이의 섬세함을 반영하는 능력에 의해 특징화된다.

평가할 대상체는 2개의 "주광색" 램프 사이에 앉아서 어떠한 외부 영향도 피하기 위해 망토와 검정색 샬롯(charlotte)을 착용하였다. 심사자는 색상 차트로부터 4개의 색상을 평가하는 반면, 다른 3명의 서술자는 0 내지 100 범위의 아날로그 척도를 사용하여 등급화한다.

7명의 서술자로부터 "i" 지수를 계산한 다음, 델타 i (T6) - i (T0)를 만들어서 "I" CLCT 지수를 계산한다. 이러한 지수가 5를 초과하는 경우, 유의적인 가능성으로, 생성물이 안색의 윤기에 효과적인 것으로 일컬어질 수 있다.

[표 15]

얼굴에서 안색 개념의 변화(n = 3회의 심사, 26명의 자원자)

6주 동안 본 발명에 따른 크림의 적용은 CLCT 지수를 +8.4 단위(+33.5%, T0에 대해 p<0.01)로 변화시켰으며, 이는 크림이 안색의 윤기를 위한 효과적인 제품이 되도록 한다. 가장 유의적으로 개선된 서술자는 올리브(25%까지 감소), 베이지(4%까지 감소) 및 연 핑크(16%까지 개선, T0에 대해 모두 p<0.01)이었다.

자가-평가에 의한 안색의 평가

본 발명에 따른 크림의 6주의 적용 말기에, 자원자는 몇가지 사항에 대한 자신의 의견을 제공하였다.

결과는 제품의 매우 양호한 개념을 나타내며, 이는 자원자가 즐거움(68%), 빠른 흡수(71%) 및 메이크업 망치지 않음(84%)을 발견하는 것이다. 얼굴에서의 효과는 피부가 촉촉하고 거침이 거의 없음(68% 및 69%)에 관심이 있으나 특히 덜 칙칙한 피부의 안색(59%)이 더 흥미가 있다. 이들 모두는 보다 아름다운 피부(66%) 및 보다 우수한 외모(62%)를 갖도록 하는데 기여한다.

3/제3의 연구

프로토콜

구체적인 포함 기준

본 연구는 표현형 I 내지 III 피부를 지닌 37세(20 내지 49세)의 20명의 여성의 패널에서 수행하였다.

연구 유형, 기간, 적용

본 연구는 팔에서 단일 블라인드로 수행하였다. 6주 동안, 자원자는 본 발명에 따른 크림 및 대측의 위약 크림(contra-lateral placebo cream)을 아침 및 저녁에 적용하였다.

통계

통계 연구는 Khi² 시험을 사용하여 수행하였다.

방법 및 결과

DHA 염색(도코사헥사에노산)을 모니터링함에 의한 "부드러운 광택(soft polish)"의 효과의 평가

본 연구는 자가-탠너 적용(self-tanner application) 전에, 피부를 보다 매끄럽게 함으로써 피부 자가-탠너의 보다 균일하고 오래 지속되는 적용을 보증하기 위하여 피부를 매우 부드럽게 광택을 내거나 박리하는 것을 수행함이 필수적이라는 사실을 기반으로 한다.

본 발명에 따른 크림의 "자가 광택" 효과를 입증하기 위하여, 크림을 6주 동안 적용한 다음, 구역(zone)에 DHA(통상의 자가-탠너)를 제공하고 착색한 다음 페이딩(fading)에 이어 C-Cube^TM 카메라를 사용하여 획득하였다.

T2 일과 T7 일 사이에 페이딩(fading)의 강도 및 균질성에 있어서의 효과를 평가하기 위하여, C-Cube^TM 카메라에 의한 획득으로부터 생성되는 영상을 전문가 패널이 평가하였다. 각각의 자원자의 경우, 전문가는 어느 영상 쌍(본 발명에 따른 크림 또는 위약 크림)이 페이딩(변색이 거의 없음) 및/또는 균질성(작은 갈색 패치가 거의 없음)의 측면에서 가장 허용되는 발전을 나타내었는지를 확립하여야 했다.

결과는 위약을 선호하는 투표자(vote) 중 25%와 비교하여 투표자 중 63%로 본 발명에 따른 크림을 제공받은 부위에 대해 매우 명확한 선호도를 나타낸다. 이러한 결과는 p<0.01로 통계적으로 유의적이다. 따라서, 본 발명에 따른 크림을 사용한 피부의 제조는 물리적 박리와 비교가능한 각질층의 부드럽고 자연스러운 매끄러움을 생성하였다.

SEQUENCE LISTING <110> SEDERMA <120> USE OF A PEPTIDE FOR THE TREATMENT OF EPIDERM <130> IP20203877FR <150> FR1852950 <151> 2018-04-05 <160> 24 <170> KopatentIn 2.0 <210> 1 <211> 5 <212> PRT <213> artificial sequence <220> <223> synthetic peptide <220> <221> MOD_RES <222> (1)..(1) <223> amidation by a Palmitoyl chain on the N terminal end <400> 1 Lys Thr Thr Lys Ser 1 5 <210> 2 <211> 4 <212> PRT <213> artificial sequence <220> <223> synthetic peptide <220> <221> MOD_RES <222> (1)..(1) <223> amidation by a Palmitoyl chain on the N terminal end <400> 2 Gly Gln Pro Arg 1 <210> 3 <211> 6 <212> PRT <213> artificial sequence <220> <223> synthetic peptide <220> <221> MOD_RES <222> (1)..(1) <223> amidation by a Palmitoyl chain on the N terminal end <400> 3 Val Gly Val Ala Pro Gly 1 5 <210> 4 <211> 4 <212> PRT <213> artificial sequence <220> <223> synthetic peptide <220> <221> MISC_FEATURE <222> (1)..(1) <223> Xaa being a lysine, ornithine, diaminobutyric acid, diaminopropionic acid or an hydroxylated derivative thereof <220> <221> MOD_RES <222> (1)..(1) <223> X = -CO-R1 or -SO2-R1 or biot group, R1 = C1-C24 group <220> <221> MOD_RES <222> (4)..(4) <223> Z = -OR1, -NH2, -NHR1 ou -NR1R2 ; R1, R2 = C1-C24 group <220> <221> MISC_FEATURE <222> (4)..(4) <223> Xaa being a lysine, ornithine, diaminobutyric acid, diaminopropionic acid or an hydroxylated derivative thereof <400> 4 Xaa Thr Phe Xaa 1 <210> 5 <211> 4 <212> PRT <213> Artificial sequence <220> <223> Synthetic peptide <220> <221> MOD_RES <222> (1)..(1) <223> amidation by a Palmitoyl chain on the N terminal end <400> 5 Lys Thr Phe Lys 1 <210> 6 <211> 4 <212> PRT <213> artificial sequence <220> <223> synthetic peptide <400> 6 Arg Ser Arg Lys 1 <210> 7 <211> 4 <212> PRT <213> artificial sequence <220> <223> synthetic peptide <400> 7 Gly Gln Pro Arg 1 <210> 8 <211> 4 <212> PRT <213> Artificial sequence <220> <223> Synthetic peptide <400> 8 Lys Thr Ala Lys 1 <210> 9 <211> 4 <212> PRT <213> Artificial sequence <220> <223> Synthetic peptide <400> 9 Lys Ala Tyr Lys 1 <210> 10 <211> 4 <212> PRT <213> Artificial sequence <220> <223> Synthetic peptide <400> 10 Lys Phe Tyr Lys 1 <210> 11 <211> 5 <212> PRT <213> artificial sequence <220> <223> synthetic peptide <400> 11 Lys Thr Thr Lys Ser 1 5 <210> 12 <211> 6 <212> PRT <213> artificial sequence <220> <223> Synthetic peptide <400> 12 Gly Lys Thr Thr Lys Ser 1 5 <210> 13 <211> 6 <212> PRT <213> artificial sequence <220> <223> synthetic peptide <400> 13 Val Gly Val Ala Pro Gly 1 5 <210> 14 <211> 4 <212> PRT <213> Artificial sequence <220> <223> Synthetic peptide <220> <221> MOD_RES <222> (1)..(1) <223> amidation by a Elaidoyl chain on the N terminal end <400> 14 Lys Thr Ala Lys 1 <210> 15 <211> 4 <212> PRT <213> Artificial sequence <220> <223> Synthetic peptide <220> <221> MOD_RES <222> (1)..(1) <223> amidation by a Elaidoyl chain on the N terminal end <400> 15 Lys Ala Tyr Lys 1 <210> 16 <211> 4 <212> PRT <213> Artificial sequence <220> <223> Synthetic peptide <220> <221> MOD_RES <222> (1)..(1) <223> amidation by a Elaidoyl chain on the N terminal end <400> 16 Lys Phe Tyr Lys 1 <210> 17 <211> 5 <212> PRT <213> artificial sequence <220> <223> synthetic peptide <220> <221> MOD_RES <222> (1)..(1) <223> amidation by a Palmitoyl chain on the N terminal end <220> <221> MISC_FEATURE <222> (5)..(5) <223> Xaa being either a Proline P or a Leucine L. <400> 17 Tyr Gly Gly Phe Xaa 1 5 <210> 18 <211> 6 <212> PRT <213> artificial sequence <220> <223> synthetic peptide <220> <221> MOD_RES <222> (1)..(1) <223> amidation by a Palmitoyl chain on the N terminal end <400> 18 Gly Lys Thr Thr Lys Ser 1 5 <210> 19 <211> 6 <212> PRT <213> Artificial sequence <220> <223> Synthetic peptide <220> <221> MOD_RES <222> (1)..(1) <223> amidation by a Palmitoyl chain on the N terminal end <220> <221> MISC_FEATURE <222> (6)..(6) <223> Xaa being Trp, Phe, Tyr, Tic, 7-hydroxy-Tic or Tpi <400> 19 His Leu Asp Ile Ile Xaa 1 5 <210> 20 <211> 6 <212> PRT <213> artificial sequence <220> <223> synthetic peptide <220> <221> MOD_RES <222> (1)..(1) <223> Acetylation on the N-terminal end <400> 20 Glu Glu Met Gln Arg Arg 1 5 <210> 21 <211> 5 <212> PRT <213> artificial sequence <220> <223> synthetic peptide <400> 21 Tyr Ala Gly Phe Leu 1 5 <210> 22 <211> 4 <212> PRT <213> artificial sequence <220> <223> synthetic peptide <400> 22 Ala His Ser His 1 <210> 23 <211> 6 <212> PRT <213> artificial sequence <220> <223> synthetic peptide <400> 23 Ser Ile Lys Val Ala Val 1 5 <210> 24 <211> 6 <212> PRT <213> artificial sequence <220> <223> synthetic peptide <400> 24 Gly Pro Gln Gly Pro Gln 1 5

Claims

표피의 상태를 보존하거나 개선시키기 위한 비-치료학적 화장 처치(cosmetic treatment)를 위한, 다음 화학식 1을 갖는 펩타이드의 용도:
[화학식 1]
X-(Xaa)_nK^*TFK^*-(Xaa)_m-Z
상기 화학식 1에서:
· K^*는 라이신 K, 오르니틴, 디아미노부티르산 또는 디아미노프로피온산, 또는 이의 하이드록실화된 유도체를 포함하는 그룹 중에서 선택되고, 2개의 K^*는 동일하거나 상이하며;
· (Xaa)_n 및 (Xaa)_m은 각각 서로 독립적으로 Gly, Ala, Pro, Val, Leu, Ile 및 Phe 중에서 서로 독립적으로 선택된 n 또는 m개의 아미노산 Xaa의 서열에 상응하고, n 및 m은 0 내지 5 사이에서 동일하거나 상이할 수 있는 정수이고;
· N-말단 끝에서 X는 H, -CO-R¹, -SO₂-R¹ 또는 바이오티노일 그룹으로부터 선택되고;
· C-말단 끝에서 Z는 OH, OR¹, NH₂, NHR¹ 또는 NR¹R²로부터 선택되고;
· 여기서 R¹ 및 R²는 서로 독립적으로, 알킬, 아릴, 아르알킬, 알킬아릴, 알콕시, 사카라이드 및 아릴옥시 그룹으로부터 선택되며, 이는 직쇄, 측쇄, 사이클릭, 폴리사이클릭, 불포화, 하이드록실화, 카보닐화, 인산화, 및/또는 황화될 수 있고, 상기 그룹은 1 내지 24개의 탄소 원자를 가지며, 이의 골격 내에 하나 이상의 O, S 및/또는 N 헤테로원자를 가질 수 있음.
제1항에 있어서, 처치가 피부를 매끄럽게 하고/하거나 이의 보습을 개선시키고/시키거나 안색의 광채 및 균질화를 개선시키기 위해 의도됨을 특징으로 하는 용도.
제1항 또는 제2항에 있어서, 처치(treatment)가 상피 장벽(epidermal barrier)을 개선시키고/시키거나 강화시킴을 특징으로 하는 용도.
제1항 내지 제3항 중 어느 한 항에 있어서, 펩타이드가 외부 환경의 분자 및 공격(광 조사, 오염물질 등)으로부터 피부, 특히 민감성 피부를 보호할 수 있음을 특징으로 하는 용도.
제1항 내지 제4항 중 어느 한 항에 있어서, 펩타이드가 각질 층의 표피 탈락(desquamation) 및 피부의 천연 박리(natural peel)를 촉진함을 특징으로 하는 용도.
제1항 내지 제5항 중 어느 한 항에 있어서, 펩타이드가 α-크리스탈린의 생산을 자극하여 피부를 UV, 염증성 및 산화 유형의 공격으로부터 보호할 수 있음을 특징으로 하는 용도.
제1항 내지 제6항 중 어느 한 항에 있어서, 펩타이드가 오일-왁스-계면활성제 미세에멀젼 및 물 속에 용매화됨으로써 이의 침투를 지연시키고 이것이 표피 수준에서 피부의 표면에서 보다 더 생이용가능하도록 함을 특징으로 하는 용도.
제1항 내지 제7항 중 어느 한 항에 있어서, 자가-탠닝 활성제(self-tanning active)의 적용 전에 천연의 부드러운 매끄러움(soft smoothing)을 달성하기 위한 용도.
제8항에 있어서, 펩타이드가 자가-탠닝 활성제의 적용 전에, 적어도 3일의 기간 동안 적용되는 용도.
화학식 1의 펩타이드 및, 피부 내로 상기 펩타이드의 침투를 지연시켜 표피에 작용하도록 할 수 있는 생리학적으로 허용되는 비히클(vehicle)을 포함하는 화장(cosmetic) 또는 피부과학적(dermatological) 성분(ingredient):
[화학식 1]
X-(Xaa)_nK^*TFK^*-(Xaa)_m-Z
상기 화학식 1에서:
· K^*는 라이신 K, 오르니틴, 디아미노부티르산 또는 디아미노프로피온산, 또는 이의 하이드록실화된 유도체를 포함하는 그룹 중에서 선택되고, 2개의 K^*는 동일하거나 상이하며;
· (Xaa)_n 및 (Xaa)_m은 각각 서로 독립적으로 Gly, Ala, Pro, Val, Leu, Ile 및 Phe 중에서 서로 독립적으로 선택된 n 또는 m개의 아미노산 Xaa의 서열에 상응하고, n 및 m은 0 내지 5 사이에서 동일하거나 상이할 수 있는 정수이고;
· N-말단 끝에서 X는 H, -CO-R¹, -SO₂-R¹ 또는 바이오티노일 그룹으로부터 선택되고;
· C-말단 끝에서 Z는 OH, OR¹, NH₂, NHR¹ 또는 NR¹R²로부터 선택되고;
· R¹ 및 R²는 서로 독립적으로, 알킬, 아릴, 아르알킬, 알킬아릴, 알콕시, 사카라이드 및 아릴옥시 그룹으로부터 선택되며, 이는 직쇄, 측쇄, 사이클릭, 폴리사이클릭, 불포화, 하이드록실화, 카보닐화, 인산화, 및/또는 황화될 수 있고, 상기 그룹은 1 내지 24개의 탄소 원자를 가지며 이의 골격 내에 하나 이상의 O, S 및/또는 N 헤테로원자를 가질 수 있음.
제10항에 있어서, 상기 비히클이 펩타이드가 용매화된 오일-왁스-계면활성제 미세에멀젼 및 물임을 특징으로 하는, 화장 또는 피부과학적 성분.
제10항 또는 제11항에 따른 활성 성분을 포함함을 특징으로 하는 화장 또는 피부과학적 조성물.
별도의 구획(compartiment) 속에
a) 제12항에 따른 조성물 또는, 생리학적으로 허용되는 매질 속에 다음의 화학식 1의 펩타이드를 포함하는 조성물, 및
b) 생리학적으로 허용되는 매질 속에, 자가-탠닝 활성제를 포함하는 조성물,을 포함하는, 자가-탠닝 화장 처치를 수행하기 위한 키트(kit):
[화학식 1]
X-(Xaa)_nK^*TFK^*-(Xaa)_m-Z
상기 화학식 1에서:
· K^*는 라이신 K, 오르니틴, 디아미노부티르산 또는 디아미노프로피온산, 또는 이의 하이드록실화된 유도체를 포함하는 그룹 중에서 선택되고, 2개의 K^*는 동일하거나 상이하며;
· (Xaa)_n 및 (Xaa)_m은 각각 서로 독립적으로 Gly, Ala, Pro, Val, Leu, Ile 및 Phe 중에서 서로 독립적으로 선택된 n 또는 m개의 아미노산 Xaa의 서열에 상응하고, n 및 m은 0 내지 5 사이에서 동일하거나 상이할 수 있는 정수이고;
· N-말단 끝에서 X는 H, -CO-R¹, -SO₂-R¹ 또는 바이오티노일 그룹으로부터 선택되고;
· C-말단 끝에서 Z는 OH, OR¹, NH₂, NHR¹ 또는 NR¹R²로부터 선택되고;
· 여기서 R¹ 및 R²는 서로 독립적으로 알킬, 아릴, 아르알킬, 알킬아릴, 알콕시, 사카라이드 및 아릴옥시로부터 선택되며, 이는 직쇄, 측쇄, 사이클릭, 폴리사이클릭, 불포화, 하이드록실화, 카보닐화, 인산화, 및/또는 황화될 수 있고, 상기 그룹은 1 내지 24개의 탄소 원자를 가지며 이의 골격 내에 하나 이상의 O, S 및/또는 N 헤테로원자를 가질 수 있음.
K^*가 라이신 K 또는 오르니틴임을 특징으로 하는, 제1항 내지 제9항 중 어느 한 항에 따른 용도, 또는 제10항 또는 제11항에 따른 성분, 또는 제13항에 따른 키트.
n 및 m이 서로 독립적으로 0 또는 1 또는 2임을 특징으로 하는, 제1항 내지 제9항 또는 제14항 중 어느 한 항에 따른 용도, 또는 제10항 또는 제11항 또는 제14항 중 어느 한 항에 따른 성분, 또는 제13항 또는 제14항에 따른 키트.
펩타이드가 N-말단 위치 또는 C-말단 위치에서 변형(modified)되고, X가 H이고 Z가 OH인 경우는 배제됨을 특징으로 하는, 제1항 내지 제9항 중 어느 한 항에 따른 용도, 또는 제10항 또는 제11항에 따른 성분, 또는 제13항에 따른 키트.
제16항에 있어서, R¹ 및/또는 R²가 탄소수 1 내지 24의 알킬 쇄임을 특징으로 하는, 용도 또는 성분 또는 키트.
제16항 또는 제17항에 있어서, X가 아실 그룹 CO-R¹이고 Z가 OH, OMe, OEt 및 NH₂로부터 선택됨을 특징으로 하는, 용도 또는 성분 또는 키트.
펩타이드가 Pal-KTFK(서열 번호: 5)임을 특징으로 하는, 제1항 내지 제9항 또는 제14항 내지 제18항 중 어느 한 항에 따른 용도, 또는 제10항 또는 제11항, 또는 제14항 내지 제18항 중 어느 한 항에 따른 성분, 또는 제13항 내지 제18항 중 어느 한 항에 따른 키트.
다음 화학식 1의 펩타이드로서, 펩타이드 Pal-KTFK-OH 및 Ela-KTFK-OH는 배제되는 펩타이드:
[화학식 1]
X-(Xaa)_nK^*TFK^*-(Xaa)_m-Z
상기 화학식 1에서:
· K^*는 라이신 K, 오르니틴, 디아미노부티르산 또는 디아미노프로피온산, 또는 이의 하이드록실화된 유도체를 포함하는 그룹 중에서 선택되고, 2개의 K^*는 동일하거나 상이하며;
· (Xaa)_n 및 (Xaa)_m은 각각 서로 독립적으로 Gly, Ala, Pro, Val, Leu, Ile 및 Phe 중에서 서로 독립적으로 선택된 n 또는 m개의 아미노산 Xaa의 서열에 상응하고, n 및 m은 0 내지 5 사이에서 동일하거나 상이할 수 있는 정수이고;
· N-말단 끝에서 X는 H, -CO-R¹, -SO₂-R¹ 또는 바이오티노일 그룹으로부터 선택되고;
· C-말단 끝에서 Z는 OH, OR¹, NH₂, NHR¹ 또는 NR¹R²로부터 선택되고;
· 여기서 R¹ 및 R²는 서로 독립적으로, 알킬, 아릴, 아르알킬, 알킬아릴, 알콕시, 사카라이드 및 아릴옥시 그룹으로부터 선택되며, 이는 직쇄, 측쇄, 사이클릭, 폴리사이클릭, 불포화, 하이드록실화, 카보닐화, 인산화, 및/또는 황화될 수 있고, 상기 그룹은 1 내지 24개의 탄소 원자를 가지며, 이의 골격 내에 하나 이상의 O, S 및/또는 N 헤테로원자를 가질 수 있음.
제20항에 있어서, K^*가 라이신 K 또는 오르니틴인 펩타이드.
제20항 또는 제21항에 있어서, n 및 m이 서로 독립적으로 0 또는 1 또는 2인 펩타이드.
제20항 내지 제22항 중 어느 한 항에 있어서, n 및 m이 서로 독립적으로 0 또는 1 또는 2인 펩타이드.
제20항 내지 제23항 중 어느 한 항에 있어서, 펩타이드가 N-말단 위치 또는 C-말단 위치에서 변형되고, X가 H이고 Z가 OH인 경우는 제외되는 펩타이드.
제20항 내지 제24항 중 어느 한 항에 있어서, R¹ 및/또는 R²가 탄소수 1 내지 24의 알킬 쇄인 펩타이드.
제20항 내지 제25항 중 어느 한 항에 있어서, X가 아실 그룹 CO-R¹이고 Z가 OH, OMe, OEt 및 NH₂로부터 선택되는 펩타이드.