KR20180121933A

KR20180121933A - 마루비움 불가레로부터 기원한 성분의 미용 용도

Info

Publication number: KR20180121933A
Application number: KR1020187027815A
Authority: KR
Inventors: 까롤린 린게바흐; 엠마누엘 도리도; 삘립쁘 몽동
Original assignee: 쎄데르마
Priority date: 2016-03-23
Filing date: 2017-03-21
Publication date: 2018-11-09
Also published as: EP3432991B1; US10722452B2; WO2017163174A1; US20190099362A1; CN108778242A; KR102284752B1; EP3432991A1; CN108778242B; FR3049194B1; FR3049194A1; HK1258152A1

Abstract

본 발명은 활성 분자로서 포르시토사이드 B의 유효량을 포함하는, 피부 모공을 팽팽하게 하기 위한 비-치료학적 미용 치료를 위한 마루비움 불가레로부터 기원한 식물 물질의 용도를 제안한다. 상기 식물 물질은 바람직하게는 세포 부스러기가 없는 탈분화된 식물 세포의 세포 추출물로 바람직하게 구성된다. 당해 치료는 특히 피부 거죽 면을 정련하고/하거나 지성 경향이 있는 피부를 치료하기 위해 의도된다.

Description

마루비움 불가레로부터 기원한 성분의 미용 용도

기술 분야

본 발명은 피부 또는 두피의 외관 및 일반적인 상태를 개선시키기 위해 의도된 미용 치료(cosmetic treatment)용 식물로부터 기원한 식물 물질의 용도에 관한 것이다. 본 발명은 예를 들면, 특히 식물로부터 기원한 새로운 활성 성분에 대한 증가하는 요구에 있어서, 신제품이 항상 요구되고 있는 미용 및 위생 및 개인 관리 산업에 적용될 수 있다. 이러한 활성 성분을 사용하여 효능, 제한된 자극 및 알레르기 위험, 감소된 부작용, 생분해성의 지속적인 개발 및/또는 공정 무역의 타당성으로 표지(labeling)/증명 및 적절도의 가능성과 조합하는 것이 가능하다.

배경 기술

본 발명의 목적은 보다 구체적으로 피부의 모공(pore)을 치료함으로써 피부를 아름답게 하는데 효과적인 식물로부터 기원한 식물 물질을 제안하기 위한 것이다.

피부는 표면에 많은 모공이 있으며 이의 기능은 과도한 피지 및 죽은 세포 및 땀과 같은 피부로부터의 불순물을 제거하는 것이다. 피부가 너무 지성이거나 각질세포 증식 속도가 너무 크면, 모공이 막힐 수 있으며 이후 이는 확대되거나 확장될 수 있다. 이후에, 모공은 보다 가시적으로 되며 피부의 거죽 면을 불규칙적이고 보기 흉하도록 한다.

순수한 미용 치료의 일부로서, 마지막 단계가 심지어 보다 보기 흉하게 되는 것을 방지하기 위하여 상위(upstream)로 작용할 수 있는 것이 또한 중요하며, 여기서 모공 속에 형성된 면포(comedon)는 여드름 뾰루지로 변형되며, 이후 의학적 치료가 요구될 수 있다.

흰꽃 광대식물(White Horehound) 또는 마루비오(Marrubio)로서 또한 공지된 마루비움 불가레(Marrubium vulgare)는 유럽, 아메리카 및 아시아의 온대 지역에서 자발적으로 성장하는 라미아세아에 계열(Lamiaceae family)의 식용가능한 약초 식물이다. 흰꽃 광대식물의 의약적 특성은 로마 및 아랍에 알려졌으며, 당해 식물은 호흡 및 소화 장애에 대한 치료약으로서 인기있는 의약으로 자주 사용되어 왔다. 게다가, 국소 적용시, 상기 식물은 소염 특성을 지니는 것으로 알려져 있다.

시험관내(in vitro) 배양에 의해 수득되고 글리세린 및 크산탄 검 속에 현탁된 마루비움 불가레를 포함하는 미용 성분은 유리 라디칼에 대한 특성 및 피부의 자기-방어의 자극 덕분에 항-오염/해독 활성제로서 이미 제안되어 왔다. 식물 세포를 시험관내 제조하기 위한 기술은 유리하게는 포르시토사이드 B(또한 특허원 제EP2319914호에 기술됨)와 같은 페닐프로파노이드, 및 식물 스테롤(phystosterol), 아미노산 및 다당류에 풍부한 재생가능한 조성물을 수득하는 것을 가능하도록 한다.

발명의 요약

본 발명은 피부 모공을 팽팽하게 하기 위한 비-치료학적 미용 치료용의 마루비움 불가레로부터 기원한 식물 물질을 포함하는 미용 성분의 용도를 제공한다. 당해 치료 덕분에, 피부는 가시적으로 보다 더 아름답게 된다. 이의 거죽 면은 미세-기복(micro-relief)의 매끄러운 효과 덕분에 보다 균일하게 정련된다. 모공 속에 존재하는 피지로 인하여, 지성/번들거리는 외관은 감소된다.

이러한 효과를 입증하는 생체내(in vivo) 시험의 결과는 이후에 명세서에서 보다 상세히 제공된다.

본 발명에 따라서, 마루비움 불가레로부터 기원한 식물 물질은 전체 식물 또는 이의 부분들로부터 직접 전통적인 추출법에 의해, 또는 식물의 상이한 기관으로부터 기원한 세포 또는 조직 세포주로부터 세포 배양 또는 조직 배양에 의한 시험관내 배양 방법에 의해 수득될 수 있다.

본 발명에 따라서, 식물 물질은 바람직하게는 시험관내 식물 배양에 의해 수득된다. 실제로, 시험관내 배양에 의해 수득하는 것은 농공 경로(농작물 재배 및 공장에서 후속적인 추출)보다도 많은 장점을 갖는다. 작물 상태의 완전한 조절로 인하여, 시험관내 배양으로 수득된 물질은 독성 물질(제초제, 살충제, 비료, 중금속 및 식물 해충으로부터 기원할 수 있는 것들과 같은 기타 오염물질)이 없다. 더욱이, 시험관내 배양 조건의 엄격한 제어는 계통(strain)의 자발적인 변화 위험성을 감소시키고 기후, 기상학적 및 지리학적 조건 및 이들의 위험요소와 연결된, 가변성의 문제를 유발하는 농작물과는 대조적으로, 요구되는 목적한 분자에 상응하는 제2 대사산물의 재생성 프로파일을 보증한다. 더욱이, 이러한 시험관내 기술은 식물의 천연의 생명 주기 및 제2 대사산물의 계절적 생산과 같은 장애로부터 자유로워서, 보다 우수한 안전 및 신속한 공급이 가능하도록 한다. 여전히 또한, 이는 실질적으로 물 소비를 제한하고, 경작지(arable land)의 소비를 피하며 토양 오염을 방지하므로, 환경적 충격을 최소화시킨다. 또한, 식물 또는 심지어 종자도 새로운 시험관내 배양을 개시하기에 충분하기 때문에 생물다양성이 보존된다. 마지막으로, 당해 기술은 목적한 분자의 생산을 향한 세포 물질대사(특히 배양물의 유발에 의해)를 지시하고 조절하며 비교적 신속한 프로토콜을 수행함으로써 특정 분자, 특히 식물에서 소량으로 생산된 것들의 수율을 증가시킬 가능성을 제공한다.

식물의 시험관내 배양의 영역에서 기존의 기술은 특히:

- 분화되지 않거나(undifferentiated) 탈분화된(dedifferentiated) 세포의 배양(이후에는, 식물 세포 배양으로서 언급됨): 이러한 유형의 방법은 우선 한천(agar) 배지 속에서, 분화되지 않은 세포 또는 탈분화된 세포인 분열 조직 세포로부터 고도로 증식하는 세포주의 생성(캘루스(callus)의 형태로 성장시킨 후, 식물 단편, 잎, 줄기, 뿌리 또는 기타의 제거)을 우선적으로 포함한다. 이후에, 이들 계통을 액체 배지 속에서 배양함으로써 생물량을 실질적으로 증가시킨다. 성장 주기 말기에 및 정의되고 최적화될 배지 조건(예를 들면, 우수한 유발 배지의 조사) 하에서, 세포 생물량은 목적한 분자를 합성할 것이다. 이후에, 배양을 중지하고 예를 들면, 최적의 순간에 추출함으로써, 최대 량의 목적한 분자를 수득한다. 이미 상업적으로 이용가능한 기존의 세포주를 또한 사용할 수 있다; 및

- 조직 또는 기관의 배양: 이러한 유형의 배양은 뿌리 부분("뿌리 배양"), "지상부("줄기 배양") 또는 체세포 배아에 관한 것일 수 있다. 이러한 유형의 방법 중에서, 배양은 아그로박테리움 리조겐스(Agrobacterium rhizogens)(뿌리) 또는 아그로박테리움 투메파스키엔스(Agrobacterium tumefasciens)(줄기) 세균에 의한 게놈 형질전환을 겪을 수 있다. 이러한 방식으로 형질전환된 뿌리 또는 지상부는 고 성장 속도를 가지며 유전적으로 매우 안정하다. 이들은 유발 매개변수의 최적화 후 목적한 분자를 합성하는데 사용된다. 이들 배양물을 이후에 통상의 수단으로 "추출"하여 활성 식물 물질을 회수한다.

여전히 추가의 바람직한 특징에 따라서, 본 발명에 따른 식물 물질은 시험관내 세포 배양으로부터 기원하며, 이는 상술한 바와 같이, 유리하게는 페닐프로파노이드, 특히 포르시토사이드(Forsythoside) B가 풍부한 재생가능한 조성물을 수득하는 것을 가능하도록 한다.

보다 구체적으로, 식물세포 배양의 시험관내 방법은 개략적으로:

- 필요할 경우, 초기에 식물 부분(잎, 뿌리, 줄기, 싹, ...)의 절단부에서 수득된 캘루스(분화되지 않거나 탈분화된 세포 집단)로부터 세포주를 확립하고;

- 예정된 기준(일정한 표현형 및 선택된 대사물질의 최적 및 고정된 생산, 증식능)에 따라 세포의 생물량을 대규모로 생산할 수 있는 세포주의 선택;

- 이후에, 당해 선택된 균주로부터, 가능하게는 유발 단계를 사용하여, 바람직하게는 증식 상 말기에 상기 세포 생물량의 생성; 및

- 세번째로, 전체 세포를 회수하기 위하여 수득된 세포 생물량을 처리하는데 있어서, 임의로 고압하의 균질화에 의한 세포 응집물의 파괴 또는 이들 세포의 용해, 또는, 경우에 따라, 상기 세포의 성분의 추출, 즉, 세포 부스러기가 없는 세포 추출물의 회수.

본 발명의 여전히 추가의 바람직한 특징에 따라서, 마루비움 불가레로부터 기원한 식물 물질은 시험관내 세포 배양법에 의해 수득된 분화되지 않거나 탈분화된 전체 및/또는 용해된 식물 세포 및/또는 세포 부스러기로부터 제거된 상기 세포의 세포 추출물(이후에는, 세포 추출물로 지칭됨)을 포함한다.

또한, 다른 바람직한 특성에 따라서, 본 발명에 따른 식물 물질은 활성 분자로서 유효량의 포르시토사이드 B를 포함한다. 단백질, 아미노산, 식물스테롤, 지질 및 다당류 또한 본 발명에 따른 식물 세포에서 화합물 범주로 확인되었다.

본 발명에 따라서, 마루비움 불가레의 분화되지 않거나 탈분화된 세포는 바람직하게는 분무-건조되거나 동결건조된 형태로 사용될 수 있다. 이는 이들의 장기간 저장을 허용하며 이들의 생물학적 활성을 보존하지만, 본 발명에 따라 우선적으로, 세포 부스러기가 없는 마루비움 불가레의 분화되지 않거나 탈분화된 세포의 세포 추출물이 사용되며, 이는 겔 유형의 제형을 보다 용이하게 제조할 가능성과 같은, 유리하게는 생약학 품질을 지닌 투명한 식물 물질을 수득하는 것을 가능하게 한다. 세포 성분은 어떠한 생리학적으로 허용되는 용매, 또는 이들 용매의 어떠한 혼합물에 의해서도 "회수"될 수 있고/있거나 추출될 수 있다. 추출은 조합될 수 있는 다양한 공지된 공정에 따라 수행될 수 있다: 고온의, 해리법(maceration), 달임, 주입(infusion), 가압, 침출, 초음파, 초단파에 의해서 또는 어떠한 화학적 또는 물리적 공정에 의한 세포의 용해에 의해서 수행됨. 세포 부스러기를 제거하기 위한 상들의 분리는 여과 또는 원심분리에 의해 수행할 수 있다. 대안적으로, 초임계 또는 아임계 유체를 사용하여 생물량을 추출하는 것이 또한 가능하다.

본 발명에 따라서, 포르시토사이드 B와 같은 목적한 분자를 농축시키기 위하여, 산업적으로 이용가능한 모든 방법에 의해 액체-액체 분배 또는 크로마토그래피에 의해, 특히 흡착성 수지를 사용하여 세포 추출물의 완전한 정제를 예상하는 것이 또한 선택적으로 가능하다.

바람직하게는, 본 발명에 따라서, 생리학적으로 허용되는 매질은 친수성 매트릭스이다.

바람직하게는 또한, 본 발명에 따른 미용 치료는 국소적(topical)이다.

본 발명에 따라 사용될 수 있는 탈분화되거나 분화되지 않은 세포를 수득하기 위하여, 다음의 바람직한 방법이 사용될 수 있다:

1) 마루비움 불가레의 선택된 균주로부터, 연속적인 예비-배양 및 크기 증가에 의한 중요한 예비-생물량의 수득;

2) 상기 예비-생물량 및 적합한 배양 배지로부터 생물반응기 속에서 상기 탈분화되거나 분화되지 않은 세포의 생물량 생산; 및

3) 상기 배양 배지로부터 포르시토사이드 B가 농축된 상기 생물량의 분리 및 이에 의한 상기 탈분화되거나 분화되지 않은 세포의 회수.

상기 설명한 기술들 중 하나에 따라, 생리학적으로 허용되는 배지 속에서 부스러기가 없는 상기 세포의 세포 성분을 회수하기 위한 추가의 단계를 가하는 것이 가능하다.

본 발명에 따른 다른 임의의 특징에 따라서:

4) 생물반응기 생산 단계는 유발 단계를 포함할 수 있으며, 이는 유리하게는 포르시토사이드 B의 수준을 증가시키는 단계 및/또는;

5) 유리하게는 생존능이 큰 최대 양의 생물량을 생산하기 위해, 반응기로부터 생물량을 7 내지 21일; 바람직하게는 10 내지 14일의 배양 기간 후 여과에 의해 수집하는 단계; 및/또는

6) 생물량을 고압 하에서 균질화 단계에 적용시켜 세포 응집물을 파괴할 수 있는 단계; 및/또는

7) 세포 생물량을 건조하는 추가의 단계를 추가하여 이를 장기간 보존할 수 있는 단계; 및/또는

일반적으로, 목적한 화합물의 유발은 배양물에 미생물 분획(특히 사카로마이세스 효모)을 첨가하여: 예를 들면, 키토산, 메틸자스모네이트, 자스몬산, 살리실산과 같은 생물학적 기원의 분자의 배양 외에도; 예를 들면, 파클로부트라졸과 같은 비-생물학적 기원의 분자의 배양 외에; 온도, pH 또는 예를 들면, 만니톨과 같은 비-대사가능한 당에 의해 유도된 삼투압 스트레스에 있어서의 변화의 배양물에 대한 적용; 거대요소 및 당에 있어서 환경의 심지어 보다 급격한 궁핍의 사용; 배양물에 목적한 화합물의 생산을 유발하는 것 외에, 이들을 트랩(trap)할 수 있는 흡착성 수지의 첨가에 의해 수행할 수 있다.

바람직하게는, 본 발명에 따라서, 유발은 배양 배지, 특히 영양물 수준을 개질시켜 수행한다.

본 발명을 실행하기 위한 조성물의 제조

본 발명에 따른, 특히 국소용의 미용 조성물은, 생리학적으로 허용되는 매질 속에, 마루비움 불가레로부터 기원한 식물 물질, 바람직하게는, 전체 또는 용해된, 시험관내 세포 배양 공정에 의해 수득된 식물 세포, 또는 세포 부스러기가 없는 이들의 세포 추출물을 포함한다. 부형제 및 식물 물질의 투여량에 따라서, 당해 조성물은 최종 사용자용으로 의도된 농축된 활성 성분 또는 거의 농축되지 않은 최종 조성물을 구성할 것이다.

"생리학적으로 허용되는 매질"은 본 발명에 따라서 특히 수성 또는 하이드로-알코올성 용액, 유중수 유액(water-in-oil emulsion), 수중 유 유액(oil-in-water emulsion), 마이크로-유액(micro-emulsion), 수성 겔, 무수 겔, 세럼(serum), 소낭(vesicle)의 분산액, 또는 분말을 의미한다.

"생리학적으로 허용되는"은 조성물이 국소 또는 경피용으로 적합하며, 포유동물, 특히 사람의 점막, 부속기관(손톱, 모발 및 모발들), 두피 및 피부와 접촉시, 독성, 부적합성, 불안정성, 알레르기 반응, 및 기타의 위험없이 피부내로 소화되거나 주입될 수 있는 조성물을 의미한다.

당해 "생리학적으로 허용되는 매질"은 조성물의 부형제로 일반적으로 불리는 것을 형성한다.

본 발명의 식물 물질은 유효한 상승 또는 보강 농도에서 다른 활성 성분과 합해져서 다음과 같은, 본 발명에 기술된 바람직한 효과를 달성할 수 있다: 방사선 여과제, 특히 UVA 및/또는 UVB, 보습, 습윤, 진정, 근이완(myorelaxing), 슬리밍(slimming), 재구성, 탄력(firming), 펌핑(plumping), 긴장(tensor), 매끄러움(smoothing), 미세순환시 작용하는 제제, 염증에서, 유리 라디칼에서의 작용, 주름 방지(anti-wrinkle), 미백(lightening), 안색의 광채에서의 작용, 항-당화, 프로-착색(pro-pigmenting), 스트라툼 코르네움(stratum corneum)에서, 진피-표피 접합에서, HSP 단백질의 생산시, 견고성, 탄성, 피부 탄력성, 모발 재성장, 펩타이드, 비타민 등에서의 작용.

본 발명에 따라서, 식물 물질은 당해 분야의 숙련가에게 공지된 어떠한 적절한 형태로도, 특히, 용액, 분산액, 유액, 페이스트, 또는 분말의 형태로, 개별적으로 또는 예비혼합물로서 또는 개별적으로 비히클(vehicle) 속에서 또는 마크로(macro)-, 마이크로(micro)-, 또는 나노(nano)-캡슐, 마크로-, 마이크로- 또는 나노-구형, 리포좀, 올레오좀(oleosome) 또는 칠로마이크론(chylomicron), 마크로-, 마이크로- 또는 나노입자, 또는 마크로-, 마이크로- 또는 나노-스폰지, 마이크로- 또는 나노-유액의 형태로, 또는 유기 중합체 분말, 활석, 벤토나이트, 포자 또는 외피, 및 다른 무기 또는 유기 지지체와 같은 벡터 속의 예비 혼합물로서 흡착된 형태로 얼굴, 신체 및/또는 두피에 적용될 수 있다.

미용 분야에서, 특히, 얼굴, 신체 및/또는 두피의 피부 보호 범위, 및 메이크업-보호 범위에서 적용이 제안될 수 있다.

보다 일반적으로, 본 발명에 따른 식물 물질은 어떠한 모든 형태, 마크로-, 마이크로-, 및 나노-입자, 또는 마크로-, 마이크로-, 및 나노-캡슐에 결합되거나, 이 속에 혼입되거나 이 속에 흡수되거나 이 위에 흡착된 형태로, 피부와 접촉하도록 의도된 주간 또는 야간용 직물, 천연 또는 합성 섬유, 울(wool), 및 의복 또는 속옷에 사용될 수 있는 어떠한 물질의 처리에 사용되어 이러한 피부/직물 접촉을 통해 이들의 미용 효과를 발휘하고 연속적인 국소 전달을 허용할 수 있다.

CTFA(워싱톤 디.씨 소재의, 이전에는- ≪ the Cosmetic, Toiletry, and Fragrance Association, Inc. ≫였던, ≪ 개인용품 자문 위원회(the Personal Care Products council) ≫에 의해 발표된 ≪International Cosmetic Ingredient Dictionary & Handbook ≫ (16th Ed. 2016))는 피부 보호 산업에서 일반적으로 사용된 제한되지 않은 광범위한 미용 및 약제학적 성분을 기술하고 있으며, 이들은 본 발명에 따른 조성물 속의 추가 성분으로서 사용하기에 적합하다.

또한 특히 유용한 추가의 피부 보호 활성성분은 Sederma의 상업 문헌 및 웹사이트 www.sederma.com.에서 찾을 수 있다.

다음의 상업적인 활성 성분이 또한 예로서 언급될 수 있다: 베타인, 글리세롤, Actimoist Bio 2^TM(활성 유기물), AquaCacteen^TM(Mibelle AG Cosmetics), Aquaphyline^TM(Silab), AquaregulK^TM(Solabia), Carciline^TM(Greentech), Codiavelane^TM(Biotech Marine), Dermaflux^TM(Arch Chemicals, Inc), Hydra'Flow^TM(Sochibo), Hydromoist L^TM(Symrise), RenovHyal^TM(Soliance), Seamoss^TM(Biotech Marine), Argireline^TM(리포테크(Lipotec)의 아세틸 헥사펩타이드-3의 시판명), 시판명 Gatuline Expression^TM 하에 알려진 악멜라 올레라세아(Acmella oleracea)의 스필라톨(spilanthol) 또는 추출물, 시판명 Boswellin^TM 하에 알려진 보스웰리아 세라타(Boswellia serrata)의 추출물, Deepaline PVB^TM(Seppic), Syn-AKE^TM(Pentapharm), Ameliox^TM, Bioxilift^TM(Silab), PhytoCellTec^TMArgan(Mibelle), Papilactyl D^TM(Silab), Preventhelia^TM(Lipotec), 또는 Sederma에 의해 제안된 다음의 활성 성분: Subliskin^TM, Venuceane^TM, Moist 24^TM, Vegesome Moist 24^TM, Essenskin^TM, Juvinity^TM, Revidrat^TM, Resistem^TM, Chronodyn^TM, Kombuchka^TM, Chromocare^TM, Calmosensine^TM, Glycokin factor S^TM, Biobustyl^TM, Idealift^TM, Ceramide 2^TM, Ceramide A2^TM, Ceramide HO3^TM, Legance^TM, Intenslim^TM, Prodizia^TM, Beautifeye^TM, 비누화되지 않은 NG-시어 버터(shea butter)(천연 등급), Zingerslim^TM, Meiritage^TM, Senestem^TM, Sebuless^TM, Majestem^TM, Apiscalp^TM, Rubistem^TM 또는 이의 혼합물.

본 발명이 마루비움 불가레로부터의 식물 물질과 함께 조합될 수 있는 식물 추출물(전통적인 추출물의 형태 또는 시험관내에서 제조된 형태) 중에서, 담쟁이 덩굴, 특히, 서양 담쟁이 덩굴(English Ivy)(헤데라 헬릭스(Hedera Helix)), 부플레우룸 치넨시스(Bupleurum chinensis), 부플레우룸 팔카툼(Bupleurum falcatum), 아르니카(arnica)(아르니카 몬타나 엘(Arnica montana L)), 로즈마리(로즈마리누스 오피시날리스 엔(Rosmarinus officinalis N)), 천수국(marigold)(칼렌둘라 오피시날리스(Calendula officinalis)), 세이지(sage)(살비아 오피시날리스 엘(Salvia officinalis L)), 인삼(파낙스 진셍(Panax ginseng)), 긴코 빌로바(ginko biloba), 망종화(St.-John's-Wort)(하이퍼리쿰 페르포라툼(Hyperycum perforatum)), 부쳐스-브룸(butcher's-broom)(루스쿠스 아쿨레아투스 엘(Ruscus aculeatus L)), 유럽 조팝나무(European meadowsweet)(필리펜둘라 울마리아 엘(Filipendula ulmaria L)), 빅-플라워드 자바 티(big-flowered Jarva tea)(오르토시폰 스타민쿠스 젠쓰(Orthosiphon stamincus benth)), 아티쵸크(artichoke)(시나라 스콜리무스(Cynara scolymus)), 조류(푼쿠스 베시쿨로수스(Fucus vesiculosus)), 자작나무(베툴라 알바(Betula alba)), 녹차, 콜라나무 열매(cola nut)(콜라 니피다(Cola nipida)), 마로니에(horse-chestnut), 대나무, 센텔라 아시아티카(Centella asiatica), 헤더(heather), 푸쿠스(fucus), 버드나무, 점나도 나물(mouse-ear), 에스킨(escine), 캉츄(cangzhu), 크리산텔륨 인디쿰(chrysanthellum indicum), 아르메니아케아 속(Armeniacea genus) 식물, 아트락틸로디스 플라티코돈(Atractylodis platicodon), 신노메눔(Sinnomenum), 파르비티디스(Pharbitidis), 플레밍기아(Flemingia), 시. 포르스코흘리이(C. forskohlii), 씨. 블루메이(C. blumei), 씨, 에스퀴롤리이(C. esquirolii), 씨. 스쿠텔라로이데스(C. scutellaroides), 씨. 크산탄투스(C. xanthantus) 및 씨. 바르바투스(C. barbatus)와 같은 콜레우스(Coleus), 예를 들면, 콜레우스 바르바투스(Coleus barbatus)의 뿌리 추출물, 발로테(Ballote), 구이오아(Guioa), 다발리아(Davallia), 테르미날리아(Terminalia,), 바링토니아(Barringtonia), 트레마(Trema), 안티로비아(Antirobia), 세크로피아(Cecropia), 아르가니아(Argania), 디오스코레아에 옵포시타(Dioscorea opposita)와 같은 디오스코레아에(Dioscoreae) 또는 멕시칸의 추출물, 암미 비스나가(Ammi visnaga), 시에게스벡키아(Siegesbeckia), 특히 시에게스벡키아 오리엔탈리스(Siegesbeckia orientalis)의 추출물, 에리카케아에(Ericaceae) 계열의 식물성 추출물, 특히 월귤나무 추출물(박시니움 안구스티폴리움(Vaccinium angustifollium)) 또는 아륵토스타필로스 우바 우르시(Arctostaphylos uva ursi), 알로에 베라(aloe vera), 스테롤을 함유하는 식물(예컨대, 식물스테롤), 만지스타(Manjistha)(루비아 속(genus Rubia), 특히 루비아 코르디폴리아(Rubia cordifolia)의 식물로부터 추출됨), 및 구갈(Guggal)(콤미포라(Commiphora), 특히 콤미포라 무쿨(Commiphora mukul)의 식물로부터 추출됨), 콜라(kola) 추출물, 캄모밀레, 붉은 토끼풀(red clover) 추출물, 피퍼 메티스티쿰(Piper methysticum) 추출물(Sederma로부터의 Kava Kava^TM), 바코파 모니에리(Bacopa monieri) 추출물(Sederma로부터의 BacocalmineTM) 및 채찍산호(sea whip) 추출물, 글리키리자 글라브라(Glycyrrhiza glabra), 뽕나무, 멜라레우카(Melaleuca)(차 나무), 라레아 디바리카타(Larrea divaricata), 라브도시아 루베스켄스(Rabdosia rubescens), 유글레나 그라실리스(Euglena gracilis), 피브라우레아 레키사 히루디네아(Fibraurea recisa hirudinea), 차파랄 소르굼(Chaparral sorghum), 해바라기 꽃 추출물, 에난티아 콜로란타(Enantia chlorantha), 스페르마코케아 속(Spermacocea genus)의 미트라카르페(Mitracarpe), 부추 바로스마(Buchu barosma), 라우소니아 디네르미스 엘.(Lawsonia inermis L.), 아디안티움 카필루스-베네리스 엘.(Adiantium capillus-veneris L.), 첼리도니움 마주스(Chelidonium majus), 루파 실린드리카(Luffa cylindrica), 일본 만다린(Japanese Mandarin)(시트루스 레티쿨라타 블란크 변종. 운쉬우(Citrus reticulata blanco var. unshiu)), 카멜리아 시넨시스(Camelia sinensis), 임페라타 실린드리카(Imperata cylindrica), 글라우시움 플라붐(Glaucium Flavum), 쿠프레쑤스 셈페르비렌스(Cupressus Sempervirens), 폴리고나툼 물티플로룸(Polygonatum multiflorum), 로베일리 헴슬레야(loveyly hemsleya), 삼부쿠스 니그라(Sambucus nigra), 파세올루스 루나투스(Phaseolus lunatus), 센타우리움(Centaurium), 마크로키스티스 피리페라(Macrocystis pyrifera), 투르네라 디퓨사(Turnera diffusa), 아네마레나 아스포델로이데스(Anemarrhena asphodeloides), 포르툴라카 필로사(Portulaca pilosa), 후물루스 루풀루스(Humulus lupulus), 코페아 아라비카(Coffea Arabica), 일렉스 파라구아리엔시스(Ilex paraguariensis) 또는 글로불라리아 코르디폴리아(Globularia cordifolia), 알비찌아 줄리브리씬(Albizzia julibrissin), 옥시덴드론 아르보레툼(Oxydendron arboretum), 진김버 제룸벳 스미쓰(Zingimber Zerumbet Smith), 아스트라갈루스 멤브라나케우스(Astragalus membranaceus), 아트락틸로데스 마크로세팔라에(Atractylodes macrocephalae), 플란타고 란케올라타(Plantago lanceolata), 레온토포디움 알피움(Leontopodium alpinum), 미라빌리스 잘라파(Mirabilis jalapa) 또는 아피움 그라베올렌스(Apium graveolens) 또는 오르치드스(orchids)의 추출물이 보다 특히 언급될 수 있다.

본 발명의 조성물은 디-, 트리-, 테트라-, 펜타- 및 헥사-펩타이드를 포함하나, 이에 한정되지 않는 하나 이상의 펩타이드 및 이들의 유도체를 포함할 수 있다. 특수한 구현예에 따라서, 조성물 속의 추가의 펩타이드의 농도는 1x10^-7 중량% 내지 20 중량%, 바람직하게는 1x10^-6 중량% 내지 10 중량%, 바람직하게는 1x10^-5 중량% 내지 5 중량%의 범위이다.

본 발명에 따라서, 용어 "펩타이드"는 10개 이하의 아미노산을 함유하는 펩타이드, 이들의 유도체, 이성체 및 금속 이온(예컨대, 구리, 아연, 망간, 마그네슘, 및 기타)와 같은 다른 종과의 복합체를 지칭한다. 용어 "펩타이드"는 천연 펩타이드 및 합성 펩타이드 둘 다를 지칭한다. 이는 또한 펩타이드를 함유하고 천연에서 발견되고/되거나 시판되는 조성물을 지칭한다.

본원에 사용하기에 적합한 디펩타이드는 카르노신(베타-AH), YR, VW, NF, DF, KT, KC, CK, KP, KK, TT, PA, PM 또는 PP를 포함하나 이에 한정되지 않는다.

본원에 사용하기에 적합한 트리펩타이드는 RKR, HGG, GHK, GGH, GHG, KFK, KAvaK, KβAK, KAbuK, KAcaK, KPK, KMOK, KMO2K, PPL, PPR, SPR, QPA, LPA 또는 SPA를 포함하나, 이에 한정되지 않는다.

본원에 사용하기에 적합한 테트라펩타이드는 RSRK(서열 번호: 1), GQPR (서열 번호: 2) 또는 KTFK (서열 번호: 3), KTAK (서열 번호: 4), KAYK (서열 번호: 5) 또는 KFYK (서열 번호: 6)를 포함하나, 이에 한정되지 않는다.

적합한 펜타펩타이드는 KTTKS (서열 번호: 7)를 포함하나 이에 한정되지 않는다. 적합한 헥사펩타이드는 GKTTKS (서열 번호: 8) 및 VGVAPG (서열 번호: 9)를 포함하나 이에 한정되지 않는다.

본원에 사용하기 위한 다른 적합한 펩타이드는 펩타이드의 친지성 유도체, 바람직하게는 팔미토일 유도체, 및 전술한 바와 같은 금속 복합체(예컨대, 트리펩타이드 HGG의 구리 복합체)를 포함하나 이에 한정되지 않는다. 바람직한 디펩타이드는 예를 들면, N-팔미토일-베타-Ala-His, N-아세틸-Tyr-Arg-헥사데실에스테르(Sederma로부터의 Calmosensine^TM, Idealift^TM)를 포함한다. 바람직한 트리펩타이드 유도체는 예를 들면, N-팔미토일-Gly-Lys-His 및 Pal-Gly-His-Lys (Sederma로부터의 Pal-GKH 및 Pal-GHK), HGG의 구리 유도체 (Sigma로부터의 Lamin^TM), 리포스폰딘(N-엘라이도일-KFK) 및 보존적 치환의 이의 유사체, N-아세틸-RKR-NH₂(펩타이드 CK+), N-Biot-GHK (Sederma 로부터), Pal-KAvaK, Pal-KβAlaK, Pal-KAbuK, Pal-KAcaK, Pal-KMO₂K (Sederma로부터의 Matrixyl Synthe'6^TM) 및 이의 유도체를 포함한다.

특허원 제WO2015181688호에 기술된 화학식 X-Pro*-Pro*-Xaa-Y(여기서 Xaa는N-말단에서 Leu, Arg, Lys, Ala, Ser, 및 Asp로부터 선택되고, X는 H, -CO-R₁ 및 -SO₂-R₁으로부터 선택되며 C-말단에서 Y는 OH, OR₁, NH₂, NH_R1 또는 NR₁R₂로부터 선택되고, R₁ 및 R₂는 서로 독립적으로 직쇄, 측쇄, 사이클릭, 폴리사이클릭, 불포화, 하이드록실화, 카보닐화, 포스포릴화 및/또는 황화될 수 있는 아릴, 아릴, 아르알킬, 알킬아릴, 알콕시 및 아릴옥시 그룹을 포함하는 그룹에서 선택되고, 상기 그룹은 이의 골격내에 헤테로 원자, 특히 O, S 및/또는 N, 및 프롤린에 상응하는 Pro*, 예를 들면, Myr-PPL-OH 및 Myr-PPR-OH를 포함하는 이의 유사체 또는 유도체를 포함한다.

또한, 특허원 제WO 2014/080376호에 기술된 화학식 X-(Xaa1)n-Pro*-Xaa2-Y(여기서 n은 0, 1 또는 2이고, Xaa1은 Ala, Val, Met, Leu, Iso, Phe, Pro, 및 이의 유사체 또는 유도체로부터 선택된 소수성 아미노산이거나; Ser, Thr, Tyr, Asp, Glu 및 이의 유도체 및 유사체로부터 선택된 극성 아미노산이고; n이 2인 경우, 2개의 아미노산 Xaa1은 동일하거나 상이할 수 있으며; Xaa2는 Ala, Val, Met, Leu, Iso, Phe, 및 이의 유사체 또는 유도체로부터 선택된 소수성 아미노산; Arg, Lys, His, 및 이의 유도체 및 유사체로부터 선택된 염기성 아미노산이고; 펩타이드의 N-말단에서, X는 H, -CO-R₁ 및 -SO₂-R₁로부터 선택되고; 펩타이드의 C-말단에서 Y는 OH, OR₁, NH₂, NHR₁ 또는 NR₁R₂로부터 선택되며, R₁ 및 R₂는 서로 독립적으로 직쇄, 측쇄, 사이클릭, 폴리사이클릭, 불포화, 하이드록실화, 카보닐화, 포스포릴화 및/또는 황화될 수 있는 알킬, 아릴, 아르알킬, 알킬아릴, 알콕시 및 아릴옥시 그룹으로부터 선택되고, 상기 그룹은 이의 골격내에 헤테로원자, 특히 O, S 및 또는 N을 지니고; Pro*는 프롤린, 이의 유사체 또는 유도체에 상응하며; 이는 예를 들면, 펩타이드 Pal-SPR-OH, Pal-PA-OH, Pal-PA-OH, Pal-QPA-OH, Pal-LPA-OH, Myr-SPA-OH 및 Pal-PP-OH를 포함한다)의 프로-착색 및/또는 pro-mec 디펩타이드 및 트리펩타이드가 또한 본원에 적합하다.

본 발명에 따라 사용하기에 적합한 테트라펩타이드 유도체는 N-Pal-GQPR (서열 번호: 10) (Sederma로부터), Pal-KTFK (서열 번호: 11) 또는 Ela KTFK (서열 번호: 12), Ela-KTAK (서열 번호: 13), Ela-KAYK (서열 번호: 14) 또는 Ela-KFYK (서열 번호: 15)를 포함하나, 이에 한정되지 않는다. 본원에 사용하기 위한 적합한 펜타펩타이드 유도체는 Pal-KTTKS (서열 번호: 16) (Sederma로부터 Matrixyl^TM로 이용가능), N-Pal-Tyr-Gly-Gly-Phe-X(여기서 X는 Leu 또는 Pro이다)(서열 번호: 17), N-Pal-His-Leu-Asp-Ile-Ile-X(여기서 X는 Trp, Phe, Tyr, Tic, 7-하이드록시-Tic 또는 Tpi이다)(서열 번호: 18), 또는 이의 혼합물이다. 헥사펩타이드 유도체는 N-Pal-VGVAPG (서열 번호: 19), Pal-GKTTKS (서열 번호: 20) 및 이의 유도체를 포함한다. Pal-GHK 및 Pal-GQPR (서열 번호: 10) (MatrixylTM 3000, Sederma)의 혼합물이 또한 언급될 수 있다.

트리펩타이드 또는 이의 유도체를 함유하는 상업적으로 이용가능한 바람직한 조성물은 Sederma의 Biopeptide-CL^TM, Maxilip^TM, Biobustyl^TM, Procapil^TM 및 MatrixylTMsynthe'6^TM을 포함한다. 테트라펩타이드의 상업적으로 이용가능한 바람직한 공급원의 조성물은 Sederma에 의해 제안된, 50 내지 500 ppm의 Pal-GQPR (서열 번호: 10) 및 부형제를 포함하는 Rigin^TM, Eyeliss^TM, 재로딩된 Matrixyl^TM 및 Matrixyl 3000^TM을 포함한다.

다음에 시판된 펩타이드 및 추가의 활성 성분이 언급될 수 있다:

- Pentapharm에서 시판하는 Vialox^TM(INCI 명칭 = 펜타펩타이드-3(알라닌, 아르기닌, 이소루이신, 글리신 및 프롤린을 포함하는 합성 펩타이드)), Syn-ake^TM(β-Ala-Pro-Dab-NH-Bzl) 또는 Syn-CollTM (Pal-Lys-Val-Lys-OH);

- Lipotec에서 시판하는 Argireline^TM (Ac-Glu-Glu-Met-Gln-Arg-Arg-NH₂ (INCI 명칭 = 아세틸헥사펩타이드-3)(서열 번호: 21), Leuphasyl^TM (Tyr-D-Ala-Gly-Phe-Leu) (서열 번호: 22), Aldenine^TM (Gly-His-Lys), Trylagen^TM (INCI 명칭 = 슈도알테로모나스 발효 추출물(Pseudoalteromonas Ferment Extract), 가수분해된 밀 단백질, 가수분해된 대두 단백질, 트리펩타이드-10 시트룰린(시트룰린 및 트리펩타이드-10의 반응 생성물(아스파르트산, 이소루이신 및 라이신으로 구성된 합성 펩타이드)), 트리펩타이드-1), Eyeseryl^TM(Ac-β-Ala-His-Ser-His)(서열 번호: 23), Serilesine^TM (Ser-Ile-Lys-Val-Ala-Val) (서열 번호: 24) 또는 Decorinyl^TM (INCI 명칭: 트리펩타이드-10 시트룰린 = 시트룰린 및 트리펩타이드-10의 반응 생성물(아스파르트산, 이소루이신 및 라이신으로 구성된 합성 펩타이드);

- Vincience에서 시판하는 Collaxyl^TM (Gly-Pro-Gln-Gly-Pro-Gln (서열 번호: 25)) 또는 Quintescine^TM (Cys-Gly);

- Les Laboratoires Serobiologiques/Cognis에서 시판하는 Cytokinol^TMLS(카제인 가수분해물);

- l'lnstitut Europ

en de Biologie Cellulaire에서 시판하는 Kollaren^TM (Gly-His-Lys), IP2000TM (Pal-Val-Tyr-Val) 또는 Meliprene^TM (INCI 명칭 = 모노플루오로헵타펩타이드-1: 아세트산과 아르기닌, 글리신, 글루탐산, 히스티딘, 노르루이신, p-플루오로페닐알라닌 및 트립토판을 포함하는 합성 펩타이드의 반응 생성물);

- Innovations에서 시판하는 Neutrazen^TM (Pal-His-D-Phe-Arg-NH₂); 또는

- lnfinitec Activos에서 시판하는 BONT-L-Peptide^TM(INCI 명칭 = 팔미토일 헥사펩타이드-19: 팔미트산과 헥사펩타이드-19 (아스파라긴, 아스파르트산, 라이신 및 메티오닌으로 구성된 합성 펩타이드)의 반응 생성물), Timp-Peptide^TM (INCI 명칭 = 아세틸 헥사펩타이드-20: 헥사펩타이드-20(알라닌, 글리신, 라이신, 발린 및 프롤린으로 구성된 합성 펩타이드)의 아세틸화에 의해 수득된 반응 생성물) 또는 ECM Moduline^TM (INCI 명칭 = 팔미토일 트리펩타이드-28: 팔미트산과 트리펩타이드-28(아르기닌, 라이신 및 페닐알라닌으로 구성된 합성 펩타이드)의 반응 생성물.

보다 구체적으로는, 본 발명에 따라서, 마루비움 불가레로부터 기원한 식물 물질은 국소 미용 또는 피부-약제학적 조성물 속의 통상적인 활성 성분인, 비타민 B3, 니아신아미드 또는 토코페롤과 같은 화합물, 레티놀, 헥사미딘, α-리포산, 레스베라트롤 또는 DHEA와 같은 레티노이드 화합물, 하이알루론산, 펩타이드, 특히 N-아세틸-Tyr-Arg-O-헥사데실, Pal-VGVAPG (서열 번호: 19), Pal-KTTKS (서열 번호: 16), Pal-GHK, Pal-KMO2K 및 Pal-GQPR (서열 번호: 10)의 화합물로부터 선택된 적어도 하나의 화합물과 조합될 수 있다.

본 발명은 또한 피부 및 이의 부속기관의 외관 및 일반적인 상태를 개선시키기 위한, 특히 이를 필요로 하는 대상체의 피부에 마루비움 불가레로부터 기원한 식물 물질 또는 이를 생리학적으로 허용되는 부형제 속에 포함하는 조성물을 유효량으로 국소 적용함을 포함하여, 모공을 팽팽하게 하기 위한 미용 또는 피부학적 국소 치료 방법을 제공한다. 본 발명에 따른 치료는 결함이 있는 피부, 특히 확장된 모공의 존재로 인하여 균일하지 않은 피부 거죽 면, 및 지성 경향이 있는 피부(두피 포함)를 치료할 수 있도록 한다.

"국소 치료" 또는 "국소 사용"은 본 발명에 따라 이것이 적용된 위치: 피부, 점막, 부속기관에서 작용하도록 의도된 적용을 의미한다.

본 발명에 따른 마루비움 불가레로부터 기원한 식물 물질을 포함하는 조성물은 표적화된 구역에 국소 적용될 수 있다.

본 발명에 따른 사용을 위해, 조성물 속의 활성 성분의 유효량, 다시 말해서 이의 투여량은 환자의 연령, 피부의 상태 등과 같은 다양한 인자에 의존한다. 유효량은 목적한 효과를 달성하기에 충분한 비-독성 양을 의미한다.

본 발명에 따른 치료용 및 사용자용으로 의도된 미용 조성물/제형에서 포르시토사이드 B의 유효 수준은 일반적으로 총 조성물의 중량에 대하여 1 ppm 내지 50 ppm, 바람직하게는 3 ppm 내지 25 ppm, 보다 바람직하게는 5 내지 10 ppm이다.

본원에 사용된 모든 퍼센트 및 비는 총 조성물의 중량 기준이며 모든 측정은 달리 명시하지 않는 한 25℃에서 이루어진다.

예를 들면, 얼굴 미용 치료를 위해서, 유럽 화장품 지침(European Cosmetics Directive)은 1.54mg/일/개인의 크림 적용을 위한 표준량을 설정하였으며, 이는 얼굴의 모공의 본 발명에 따른 미용 치료를 위한 1일 및 개인당 투여량의 표준 지표를 제공한다.

다른 구체적인 특징에 따라서, 본 발명에 따른 미용 치료 방법은 조명-치료요법(lumino-therapy), 열 또는 방향요법 치료와 같이 피부를 표적화하는 하나 이상의 다른 치료 방법과 조합될 수 있다.

본 발명에 따라서, 수개의 구획 또는 키트(kit)를 지닌 장치가 예를 들면 및 비-제한적으로 본 발명의 식물 물질을 포함하는 조성물을 함유하는 제1 구획, 및 다른 활성 성분 및/또는 부형제를 함유하는 조성물을 제2 구획 속에 포함할 수 있으며, 당해 경우에 상기 제1 및 제2 구획 속에 함유된 조성물은 시간내에 동시, 별도로 또는 단계별 사용을 위한 조합 조성물인 것으로 고려된다.

본 발명에 따른 치료 방법은 피부의 모공을 팽팽하게 하고, 거죽 면, 즉, 미세 기복을 개선시키며, 피부의 지성 및 광택나는 외관을 개선시키기 위해 미용 치료로 보다 특별히 조정된다. 따라서, 본 발명에 따른 치료는 지성 경향을 지닌 피부에 대해 보다 특별하게 조정되어, 유리하게는 이들에게 매팅 효과(matting effedct)를 제공한다. 본 발명에 따른 치료는 또한 두피의 모공을 치료하는데 효과적이다.

첨부되는 도 1 내지 도 4는 다양한 시험을 설명한다.
도 1은 영상 가공 소프트웨어의 도움으로, 코의 날개의 면포(comedon)를 정량화하는 것이 가능하도록 하는 상이한 단계를 설명하기 위한 일련의 3개의 연속된 영상을 제공한다.
도 2는 제공된 구역에서 포르피린에 의해 점유된 모공을 분석하는데 사용된 UV 광 하의 일련의 2개의 사진을 나타낸다.
도 3은 VISIA^TM 장치를 사용하여 수행된 피부결(texture)의 분석을 설명하는 일련의 2장의 사진을 나타낸다.
도 4는 주변 투영 기술의 수단으로 수득된 완화 프로파일의 묘사를 나타낸다.

상세한 설명

본 발명은 시험관내에서 수득한 본 발명에 따른 바람직한 식물 물질의 제조의 예 및 당해 식물 물질을 사용하여 수득한 생체 내 시험의 결과를 수반하는 상세한 설명에 비추어 볼 때 보다 잘 이해되고 다른 장점들이 명백해질 것이다.

A) 식물 세포 추출물의 시험관내 제조의 예

세포주의 생성

마루비움 불가레 속의 잎들의 선택된 조각을 수집하여, 세척하고 수 mm의 작은 조각으로 절단함으로써, 200 내지 1500개의 식물로부터 생산하였다. 일련의 탈오염 및 멸균 처리 후, 상기 조각을 식물 성장 호르몬을 함유하는 영양 배지의 존재하에서 한천 배양 배지 속에 두어 캘로게네시스(callogenesis)(캘루스의 형성)을 유도한다.

적합한 기간 후, 탈분화된 세포 또는 캘루스의 집단이 형성되며,이를 보다 큰 표면 위에 및 신선한 배양 배지 내로 이전시켜 증식시킨다. 다수의 아배양(subculture; 새로운 배양 배지로 이전)을 수행하여 세포주를 안정화시키는데, 즉 높고 일정한 속도의 증식, 표현형 보존까지, 목적한 생물활성 화합물(1차 및 2차 대사산물)의 일정한 함량을 수득한다.

이후에 세포주를 세포를 적절한 기간 동안 배양하고, 형성된 세포의 응집물을 취하여 이를 세포 응집물의 증식을 수득할 수 있도록 하는 기간 동안 액체 배양 배지 속에 접종하는 것으로 이루어진 선택 단계에 적용시킨다. 최고의 세포주는 선택된 대사산물의 최적 함량, 가장 우수한 생물학적 활성 및 균질한 표현형을 지닌 큰 생물량을 가능한 한 신속하게 및 재생적으로 제공하는 것일 것이다.

당해 세포주는 또한 HPLC에 의해 측정된 세포의 무수 중량을 기준으로 하여 약 350 중량 ppm의 최소량으로 포르시토사이드 B를 생산하는 이의 능력에 대해 선택되었다.

마루비움 불가레의 분화되지 않거나 탈분화된 세포의 생물량(biomass)을 수득하기 위한 산업적 공정 및 당해 생물량의 처리

세포주로부터 출발하여 위에서 기술한 바와 같이 제조된 또는 기존의 계통으로부터 제조하였다.

마루비움 불가레 계통을 초기에 증식시켜 충분한 양의 탈분화된 세포 생물량을 수득함으로써 대규모 생산 단계를 수행한다.

다음 단계를 시행한다:

a) 액체 배지 속에서 선택된 계통의 접종 및 충분한 시간 동안의 배양으로 적어도 300%의 생물량 증가를 수득하는 단계;

b) 임의로 단계 a)에서 수득한 현탁액을 신선한 액체 배지 내로 이전하고 충분한 시간 동안 재-배양하여 적어도 300%의 생물량 증가를 수득하는 단계;

c) 임의로, 단계 b)를 반복하는 단계;

d) 단계 a) 내지 c)에서 수득된 세포 현탁액을 신선한 액체 배지가 들어있는 생물반응기내로 이전시키고, 이러한 조건 하에 및 충분한 시간 동안 배양하여 목적한 대사산물, 즉 포르시토사이드 B를 충분한 양으로 포함하는 페닐프로파노이드 글리코사이드를 함유하는 세포 생물량을 수득하는 단계, 생물반응기 속에서의 당해 생산 단계는 배양 배지의 영양물 수준을 개질시킴으로써 수행된 유발 단계를 포함한다.

생물반응기:

용적: 접종으로 사용된 생물량의 용적보다 5 내지 50배 더 큰 용적; 생물반응기의 내부 표면은 매끈하고 균일하다(세포 벽을 파괴할 수 있는 가장자리 또는 각이 없음).

배양 조건:

배양 배지: 무기물 염(거대-요소 및 미세-요소의 용액), 비타민, 식물 호르몬 및 슈크로즈를 포함하는 배지. 식물성 한천을 고체 배지에 가한다.

온도: 15℃ 내지 35℃, 바람직하게는 20℃ 내지 30℃ 및 심지어 보다 바람직하게는 25℃.

기간: 7 내지 21일, 바람직하게는 10 내지 14일.

생물량 진탕: 생물량을 최적으로 통기시키고, 동시에 내부 수단 또는 외부 수단으로 진탕을 유지시키는 것이 중요하다. 생물량이 다량인 경우, 비록 약하지만, 진탕이 특히 최종 단계에서 효과적임이 필수적이다. 본 발명의 목적을 위해, 적합한 내부 교반 수단은 20 내지 120 rpm, 바람직하게는 60 rpm으로 회전하는 프로펠러, 또는 외부적으로 바람직하게는 40 내지 200 rpm 및 바람직하게는 약 120 rpm에서 외부적으로, 바람직하게는 회전하는 궤도적 교반 수단이다.

산소화: 일반적으로 10리터의 생물량에 대해 분당 0.5 내지 4 리터, 바람직하게는 분당 2 내지 2.5 리터의 유속(flow rate)에서 멸균 공기를 사용하여 수행한다. 대안적으로 10% 내지 100% v/v의 산소를 함유하는 가스 혼합물을 사용할 수 있다. 공기 또는 산소를 유속이 10 ml/min 내지 600 ml/min 및 바람직하게는 50 ml/min 내지 350 ml/min인 노즐을 사용하여 확산시키기 위한 수단을 사용하는 것이 바람직하다.

수득된 생물량의 처리:

- 배양 배지를 제거하고 세포 생물량을 회수하기 위한 여과. 당해 생물량은 이의 동일한 함량의 동결건조된 세포를 특징으로 할 수 있다.

- 단백질 성분, 포르시토사이드 B를 포함하는 페닐프로파노이드 글리코사이드를 포함하는 배양물에 의해 생산된 1차 및 2차 대사산물의 분석적 측정에 의한 세포 속에 함유된 활성 화합물의 특성화.

- 이의 세포 부스러기가 없는 세포 추출물을 수득하기 위한, 세포의 분쇄, 용해 또는 파괴에 의한 세포 성분의 추출 및 액체 및 고체 상의 분리(원심분리 또는 여과 또는 등가의 방법에 의함).

임의로, 세포 추출물을 수지 위에서 정제하여 포르시토사이드 B 함량을 증가시킨다.

B) 본 발명에 따라 사용하기 위한 활성 성분의 제조

식물 물질을 부형제를 형성하는 생리학적으로 허용되는 매질과 혼합한다.

바람직한 예로서, 단락 A)에서 상술한 바와 같은 시험관내 세포 배양에 의해 수득된 식물 물질의 경우, 이러한 생리학적으로 허용되는 배지는 본 발명에 따라, 식물 세포가 현탁되어 있거나 상기 세포의 세포 성분을 포함하는 친수성 매트릭스이다. 미용 조성물의 경우에, 친수성 매트릭스는 예를 들면, 글리세롤 및/또는 부틸렌 글리콜로 구성된다.

따라서 예를 들면, 글리세롤(약 80%)로 이루어진 생리학적으로 허용되는 부형제 혼합물 속에 전체 탈분화된 세포(무수 세포의 대략 1 내지 2%에 상응함)의 신선한 생물량의 세포 추출물의 20 중량%를 포함하는, 미용 용도를 위한 활성 성분이 본 발명을 시행하기 위해 형성될 수 있으며, 상기 성분은 약 0.035%의 포르시토사이드 B의 최종의 최소 수준을 갖는다. 이후에, 이러한 성분은 상기 제형의 0.3 내지 15 중량%, 바람직하게는 1 내지 5 중량%, 보다 바람직하게는 2 내지 3 중량% 및 일반적으로 2 중량%를 나타내는 생약학 F)에서 하기 개재한 바와 같이 미용 제형을 제조하는데 사용될 수 있다.

명백하게는 본 발명에 따라서, 상이한 수준의 포르시토사이드 B, 특히 보다 더 높은 수준을 포함하거나, 시험관내 방법에 의해(예를 들면, 속도를 증가시킬 수 있는 적절한 유발 수단에 의해) 직접 수득되거나, 수득된 세포의 정제/농축 상에 의해(예를 들면, 세포 성분의 추출 후 농축 단계에 의해) 수득한 식물 물질을 사용하는 것이 가능하다.

예를 들면, 높은 수준의 포르시토사이드 B, 예를 들면, 무수 물질에 대해 10% 더 많은 수준을 포함하는 정제된 세포 추출물의 형태인 식물 세포를 제작하는 것이 가능하며, 상기 세포 자체는 상기 설명한 바와 같이 활성 성분을 제조하는데 사용된다.

C) 생약학 ( Galenic )

다양한 미용 제형은 시험관내에서 수득된 마루비움 불가레의 세포 추출물로 이루어진 본 발명에 따른 식물 물질을 사용하여 하기 기술되어 있다. 임의로 본 발명에 따른 활성 성분의 활성을 보조하고/하거나 이에 더하여, 추가의 활성 성분을 이들의 소수성 또는 친수성 특성에 따라 적절한 상에 가할 수 있다. 이들 성분은 이들의 작용(들), 적용 부위(신체, 얼굴, 목, 흉상, 손 등), 고려된 최종 효과 및 표적화된 소비자에 따라 어떠한 범주, 특히 주름 방지, 보습제, 다크 서클(dark circle) 치료용, 탄력(firming), 항-당화, 볼륨화(volumizing), 진정, 근-이완, 홍반 방지, 해독 등에 따른 어떠한 범주일 수 있다.

하기 제공된 생약 제형에 사용된 본 발명에 따른 활성 성분: 상기 B)에서 기술된 성분.

1) 크림형 (특히 하기 D 단락에 나타낸 생체내 시험에 사용됨)

프로토콜: A 부분을 30분 동안 교반하지 않고 와동시킨 후 수 욕(water bath)을 사용하여 75℃에서 가열한다. B 부분을 75℃에서 수욕을 사용하여 가열한다. C 부분을 45℃에서 용융시킨다. D 부분을 미리 냉각시킨 C 부분과 혼합한다. C+D 부분을 교반하에 A 부분에 붓는다. 앞서의 상에서 B 부분을 신속한 교반 하에 가한다. E 부분을 교반 하에 앞서의 상에서 즉시 가한다. 연속적으로 균질화한 후 F, G 및 H 부분을 가한다.

당해 제형에 첨가될 수 있는 Sederma에의해 시판된 성분의 예:

·REVIDRATE ^TM: 특히 표피의 결합(cohesion) 및 이의 수화를 개선시키는 활성 물질.

·MATRIXYL synthe'6 ^TM: 노화에 의해 유발된 피부 손상의 복구를 돕는 팔미토일 트리펩타이드-38을 포함하는 주름방지제 성분.

·MAJESTEM ^TM: 레온토포드산 속에 적정된 시험관내 세포 배양에 의해 수득된 식물 세포를 기반으로 한 활성제; 처진 목 피부를 팽팽하게 하고, 빰을 들어올리고 눈 주변의 주름, 특히 눈가의 잔주름을 매끈하게 함.

·PRODIZIA ^TM: 당화 및 글리콕시드화의 손상에 의해 유발된 것으로부터 피부를 복구하고 보호함으로써 피부 피로 신호: 다크 서클, 눈 밑 살(under eye bag), 윤기없는 안색 및 핼쓱한 이목구비에 대항하는 알비지아 줄리브리씬(Albizia julibrissin)의 추출물을 포함하는 활성 성분.

·CALMOSENSINE ^TM : Tyr-Arg 리포-디펩타이드를 포함하는 민감성 피부에 활성인 진정제. 이는 불편한 느낌을 감소시킨다.

·SUBLISKIN ^TM : 외부 공격성에 대해 내성이 되도록 하면서 피부를 보습하고 매끈하게 하는 활성 성분.

2) 세럼 형

프로토콜: A 부분을 B 부분에 교반하에 가하고 75℃에서 수욕을 사용하여 가열한다. C 부분을 75℃에서 수욕을 사용하여 가열한다. C 부분을 A+B 부분에 교반 하에 가한다. pH를 D 부분을 사용하여 5.50 +/- 10으로 조절한다. E 부분을 45℃ 이하에서 가한다. F 부분을 35℃ 이하에서 가한다.

당해 제형에 첨가될 수 있는 Sederma에 의해 시판된 성분의 예:

· EVERMAT ^TM: 모공 크기를 감소시키고 피부 거죽 면을 개량하는, 프로토베르베린 및 올레아놀산이 풍부한 에난티아 클로란타(Enantia chlorantha)의 추출물과 관련된 활성 물질.

· RESISTEM ^TM: 글로불라리아 코르디폴리아(Globularia cordifolia) 식물의 세포 배양에 의해 수득된 추출물을 기반으로, 피부가 이의 자체의 항-노화 방어계를 생성하는 것을 돕는 항-노화 활성 물질.

· HALOXYL ^TM: 다크 서클을 다시 흡수하는 눈 윤곽 치료용 활성 성분.

3) 조직 마스크용 생약 형(맑고 투명한 액체)

프로토콜: A 및 B 부분을 제조한다. B 부분을 A 부분에 교반하에 가한다. C 부분을 제조한다. C 부분을 가한다. 이후에 D 부분을 균질화한다. 잘 균질화한다. 조직 마스크를 생성물에 가한다. 사용전 2분간 둔다.

본 제형에 첨가될 수 있는 Sederma에 의해 사판된 성분의 예:

· EYELISS ^TM: 눈 밑 살의 외관을 방지하는데 도움을 주는 활성 성분. 이는 3개 성분을 조합한다: 모세관 투과성을 감소시키는 헤스페리딘 메틸 챨콘, 림프 순환을 촉진하는 발릴-트립토판(VW) 디펩타이드 및 견고성, 탄성을 개선시키고 염증을 감소시키는 Pal-GQPR 리포펩타이드.

· MATRIXYL 3000 ^TM : 노화에 의해 유발된 피부 손상을 복구하는데 상승적으로 도움을 주는 2개의 마트리킨 Pal-GHK 및 Pal-GQPR을 포함하는 펩타이드-계 주름 방지 성분.

· WONDERLIGHT ^TM: 노화 및 스트레스에 의해 두드러진 과색소침착: 흑자(lentigines), 작란반(ephelides), 염증후 점 및 기미를 감소시키는데 도움을 주는, 지용성 성분 중 후물루스 루풀루스(Humulus lupulus)(Hops) 솔방울의 분말을 포함하는 활성 물질.

4) 클린싱 로션 형

프로토콜: A 및 B 부분을 제조한다. B 부분을 A 부분에 교반 하에 붓는다. C 부분을 제조하고 이를 가한다. 완전히 균질화한다. 잘 균질화하면서 D, E, F, G 및 H 부분을 연속적으로 가한다.

· OPTIM HYAL ^TM : Glycokines^TM, 하이알루론산 단편과 유사한 구조를 갖는 아세틸화된 글루쿠론산의 올리고뉴클레오타이드; 주름을 펴고, 표면을 재수화시키고 깊숙하게 하며; 피부의 굴곡성 및 내성을 향상시킨다.

· SEBULESS ^TM: 보송하게 하고 안색을 생기를 되찾게 하며, 염증성 흠을 희미하게 하는 시린가 불가리스(Syringa vulgaris) 추출물을 포함하는 수지-조절인자(sebe-regulator) 성분을 정화함.

5) 분무기 형(Atomizer form)

프로토콜: A 부분 및 B 부분을 제조한다. B 부분을 A 부분에 교반 하에 붓는다. C 부분을 제조하고 이를 가한다. 완전히 균질화한다. D 부분을 가한다. 잘 혼합한다.

· AQUALANCE ^TM: 호마린 및 에리트리톨을 포함하는 삼투압 보호제 보습 활성 성분.

· PACIFEEL ^TM: 피하 불편함을 완화시키고 민감성 및 반응성 피부의 발적을 희미하게 하며 표피을 강화하고 수화시키는, 분꽃으로 또한 알려진 미라빌리스 잘라파(Mirabilis jalapa) 식물의 천연 추출물을 포함하는 활성 성분.

D) 생체내 연구

원리

본 발명에 따른 성분의 효능의 평가를 2개의 별도의 연구에서 65명의 자원자에서 수행하였다.

· 표준화된 사진의 상이한 유형에 대한 영상 분석에 의해 모공 및 면포의 분석에 구체적으로 촛점을 맞춘 연구.

· VISIA ^TM 영상 분석 및 주변 투영에 의한, 피부의 미코-완화(mico-relief)(MDN: "마이크로디프레셔너리 네트워크(Microdepressionary network)")의 연구

1) 모공 및 면포의 분석

얼굴의 모공은 후자가 착색을 나타내는 경우 또한 "블랙헤드(blackhead)"로 불리는, 면포에 상응하는 원통형 플러그로서 또는 깔대기 유형의 빈 구조물로서 보이는, 피지샘 주머니의 확장된(넓어진) 개구부로 정의된다. 시험은 얼굴에 직접 또는 패치(patch)의 도움으로 추출 후 이들 플러그를 촬영하여 정량화한 이들 플러그에서 수행하였다.

프로토콜

구체적인 포함 기준

연구는 코의 날개에 가시적인 블랙헤드/면포를 지닌, 평균 연령 44세(21 내지 67세)의 남성 또는 여성 자원자 40명에서 수행하였다.

이들에게 첫번째 지정 1개월 전 및 연구 전체에서 심미적 보호(피부 클린징, 패치, 박리, 마스크 등의 사용)를 수행하지 말도록 요청하였다. 또한, 일광 또는 UV에 대한 노출, 및 시험한 부위에 다른 화장품의 적용을 금지하였다.

연구 유형, 기간 및 적용

본 연구는 얼굴에서 수행하였다. 상기 생약 부분 C)에서 본 발명에 따른 성분 2%를 함유하는 크림(제형 1)을 4주 동안 사용 조건 하에서 아침 및 저녁에 적용하였다.

연구 개요는 다음과 같이 요약될 수 있다:

통계적 연구를 스튜던츠 t-시험(Student's t-test), 또는 경우에 따라, 비-모수 윌콕슨 시험(non-parametric Wilcoxon test)을 사용하여 수행하였다. 테일드 시험(tailed test)을 쌍을 이룬 데이타(paired data)에서 수행하였다.

결과

a. 코 날개의 사진 및 면포( comedones )의 분석

HeadScan^TM 광 벤치(photo bench)(Orion concept 공급원)을 사용하여 코 날개 를 획득하였다. 당해 벤치는 Nikon^TM D7000 디지탈 카메라, 경합 방식(contention system) 및 섬광 시스템으로 이루어진다. 당해 시스템을 사용하여 재생 방식으로 얼굴의 사진을 수득할 수 있다.

영상 분석은 영상 분석 소프트웨어를 사용하여 수행하였다. 상이한 단계(이들의 크기/환상(size/circularity)에 따른 대상의 여과, 2원화(binarization), 분절화 및 분류)는 원래의 영상을 분절화하여 면포를 정량화하였다. 도 1은 이들의 크기 및 이들의 환상에 따른 정량화가능한 대상을 추출하는 것을 가능하게 하는 이들 단계를 나타낸다.

표 1: 본 발명에 따른 2%의 성분을 함유하는 크림의 적용 후 면포의 변화(n = 40명의 자원자)

본 발명에 따른 크림의 적용 4주 후, 면포의 수에 있어서 -8.8% (p<0.05)의 유의적인 감소가 있었다. 동시에, 이들 면포에 의해 점유된 면적은 또한 8.8% (p<0.01)까지 유의적으로 감소하였다. 이러한 결과로부터, 피부에서 모공 및/또는 면포의 보다 낮은 가시성 및 상응하게 가시적으로 개선된 피부 결/거죽 면이 추론된다.

b. 면포의 추출 및 표준화된 사진 및 이들의 특성 분석:

코 날개 면포를 벗겨내는 패치(exfoliating patch)(Nivea^TM)를 사용하여 표준화된 방식으로 추출하였다. 이후에, 당해 패치를 이동가능한 Nomadcam^TM 사진 벤치(Newtone Technologies 공급원)을 사용하여 촬영하였다. 이는 Nikon^TM D90 디지탈 카메라, 교차 편광 및 이중 비색계가 장착된 섬광 조명 시스템으로 이루어진다. 당해 시스템은 위치 선정 및 표준화된 색상을 보증한다.

최종적으로, 면포의 추출 및 정량화는 영상 분석으로 수행한다.

표 2: 본 발명에 따른 2%의 성분을 함유하는 크림의 적용 후 면포의 변화(n = 40명의 자원자)

당해 결과 분석은 블랙헤드에 있어서 다수의 수준에서의 효과를 나타낸다. 한편, 이들의 수는 -45% (p<0.01)까지 강력하게 감소하였으며, 이는 앞서의 결과를 입증한다. 다른 한편, 이들의 길이는 15% (p<0.01)까지 감소하였으므로, 이는 모공 크기에서의 감소를 나타낸다. 최종적으로, 매개변수 b^*가 -9.5% (p<0.01)까지 감소하므로 보다 낮은 착색이 또한 관찰되는데, 이는 플러그의 산화 현상에 있어서 본 발명에 따른 활성 성분의 작용을 나타낸다. 이들 모두는 얼굴의 면포 및 따라서 모공의 보다 낮은 가시성을 유발하는데 기여한다.

c. 포르피린 분석을 위한 면포의 추출 및 표준화된 UV 사진:

포르피린은 일반적으로 지성 또는 종창 경향이 있는 피부와 관련된 모공 속에 위치한 세균 배출물이다. 포르피린의 감소는 부분적으로 모공 크기에 있어서의 감소에 기인할 수 있다. 블랙헤드/면포는 앞서의 단락에서와 동일한 방식으로 추출된다. 이후에, 이들은 표준화된 방식으로 VISIA^TM 사진 벤치(Canfield Company)에 의해 촬영하였다. 다른 것들 중에서, VISIA^TM을 사용하여 UV 광 하에 사진을 수득하는 것이 가능하다(첨부된 도 2에 나타낸 바와 같음). 이후에, VISIA^TM에 통합된 소프트웨어는 포르피린에 의해 점유된 모공의 수 및 포르피린에 의해 점유된 면적의 퍼센트를 고려한 지수 및 이들의 강도를 시험자가 측정한 구역에서 추출할 수 있다.

표 3: 본 발명에 따른 2%의 성분을 함유하는 크림의 적용 후 포르피린의 변화(n = 40명의 자원자)

상기 결과는 포르피린의 양 및 이들이 코에서 점유하는 부위에 있어서의 감소를 나타낸다(T0에 대해 -24.1% 및 -26.8%, 둘 다에 대해 p<0.01). 따라서 이는 모공 크기에 있어서의 감소를 나타낸다.

피부의 균일성 및 매끈함의 분석

상이한 시도를 피부에서 모공에 의해 유발된 미세-기복을 고려한 당해 연구 동안 수행하였다. 원리는 모공에 있어서의 감소가 이들의 완화에 있어서의 감소와 직접 관련된다는 것이다. 이를 위해, 이중 획득을 VISIA ^TM 및 주변 투영을 사용한 영상 분석에 의해 이루었다.

프로토콜

구체적인 포함 기준

본 연구는 얼굴에 일부 미세한 라인이 있는 평균 연령 45세(36 내지 50세)의 30명의 여성 자원자의 패널에서 수행하였다. 이들에게 1차 지정 1개월 전에, 및 연구 전체에서 심미적 보호(피부 클린징, 패취, 박리, 마스크 등의 사용)를 수행하지 말도록 요청하였다. 또한, 일광 또는 UV에 대한 노출, 및 시험한 부위에 다른 화장품의 적용을 금지하였다.

연구 유형, 기간 및 적용

본 연구는 얼굴에서 이중-블라인드 방식(double-blind manner)으로 수행하였다(본 발명에 따른 활성 성분이 포함되거나 포함되지 않은 본 발명에 따른 성분의 2% 크림 및 대측으로 적용된 위약 크림, 생약 C) 부분에서 제형 1) 참고). 2개의 크림을 4주 동안 2일마다 마사지로 적용하였다.

연구 개요는 다음과 같이 요약될 수 있다:

결과

a. VISIA ^TM 을 사용한 피부결 분석

VISIA^TM (Canfield)을 사용하였다. 당해 장치는 상이한 조명(백색 광, UV, 편광됨) 하에서 표준화된 사진을 수득하도록 하며 통합된 소프트웨어는 상이한 매개변수를 제공할 수 있다. 2개 부위 사이의 색상 이질성의 실제적인 척도인 피부 결을 연구하였다(또한 결함으로 불림). 따라서, 이는 피부의 융기 및 중공(hollow)을 검출한다(첨부된 도 3에 나타냄). 피부결은 얼굴의 당해 부위에서, 모공과 연결된 거?과 동질화될 수 있다.

표 4: 본 발명에 따른 2%의 성분을 함유하는 크림의 적용 후 피부결 매개변수의 변화(n = 30명의 자원자)

^* nds : 유의적인 차이 없음.

상기 결과는 위약 적용 4주 후 피부의 악화를 나타낸다. 결함의 수는 +6% (p<0.05)까지 증가하였다. 동시에, 본 발명에 따른 크림의 적용은 결함의 수에 있어서 심지어 1.3%의 작은 감소와 함께 피부결에 있어서 당해 악화를 제어할 수 있도록 함을 알 수 있다. 이러한 유의적인 차이는 -7.3% (p<0.05)이다.

b. 프린트 및 주변 투영에 의한 매끈함의 분석

실리콘 중합체(Silflo®)를 사용한 얼굴 피부의 완화의 부정적인 각인은 제품의 적용 전 및 후에 빰에서 수행하였다. 이후에, 미세-기복의 연구를 18x13mm의 장(field)을 지닌 PRIMOS^TM 장치(GFM)를 사용한 주변 투영 기술을 사용하여 수행하였다. 미세-기복에 특이적인 이러한 장은 빰의 완화에 대해 특히 조정된, 탁월한 측면 분해능을 갖는다.

도 4는 당해 장치로 수득된 완화 프로파일을 나타낸다.

연구된 매개변수는 다음과 같았다:

Ra: 평균 거?

Rz 및 Rt: 평균 및 최대 진폭

이들의 감소는 매끄러움 효과를 특징화한다.

표 5: 본 발명에 따른 2%의 성분을 함유하는 크림의 적용 후 미세-기복(microrelief)의 변화 (n = 30명의 자원자)

본 발명에 따른 크림의 적용은 T0와 관련하여 -9.0%의 감소로 빰의 매끈함을 생성한다. 동시에, 위약의 적용은 효과를 생산하지 않는다. 본 발명에 따른 크림의 효과는 위약의 것보다 우수하다(-9.1%의 차이, p<0.05). 평균 및 최대 깊이 매개변수의 경우, 유사한 감소가 관찰되었다(-6.3 및 -6.3%, 둘 다 T0에 대해 p<0.05). 피부의 이러한 매끈함은 모공을 매끈하게 한다.

SEQUENCE LISTING <110> SEDERMA <120> COSMETIC USE OF AN INGREDIENT DERIVED FROM MARRUBIUM VULGARE <130> IP20183483FR <150> FR1670126 <151> 2016-03-23 <160> 25 <170> KopatentIn 2.0 <210> 1 <211> 4 <212> PRT <213> artificial sequence <220> <223> synthetic peptide <400> 1 Arg Ser Arg Lys 1 <210> 2 <211> 4 <212> PRT <213> artificial sequence <220> <223> synthetic peptide <400> 2 Gly Gln Pro Arg 1 <210> 3 <211> 4 <212> PRT <213> artificial sequence <220> <223> synthetic peptide <400> 3 Lys Thr Phe Lys 1 <210> 4 <211> 4 <212> PRT <213> Artificial sequence <220> <223> Synthetic peptide <400> 4 Lys Thr Ala Lys 1 <210> 5 <211> 4 <212> PRT <213> Artificial sequence <220> <223> Synthetic peptide <400> 5 Lys Ala Tyr Lys 1 <210> 6 <211> 4 <212> PRT <213> Artificial sequence <220> <223> Synthetic peptide <400> 6 Lys Phe Tyr Lys 1 <210> 7 <211> 5 <212> PRT <213> artificial sequence <220> <223> synthetic peptide <400> 7 Lys Thr Thr Lys Ser 1 5 <210> 8 <211> 6 <212> PRT <213> artificial sequence <220> <223> Synthetic peptide <400> 8 Gly Lys Thr Thr Lys Ser 1 5 <210> 9 <211> 6 <212> PRT <213> artificial sequence <220> <223> synthetic peptide <400> 9 Val Gly Val Ala Pro Gly 1 5 <210> 10 <211> 4 <212> PRT <213> artificial sequence <220> <223> synthetic peptide <220> <221> MOD_RES <222> (1)..(1) <223> amidation by a Palmitoyl chain on the N terminal end <400> 10 Gly Gln Pro Arg 1 <210> 11 <211> 4 <212> PRT <213> Artificial sequence <220> <223> synthetic peptide <220> <221> MOD_RES <222> (1)..(1) <223> amidation by a Palmitoyl chain on the N terminal end <400> 11 Lys Thr Phe Lys 1 <210> 12 <211> 4 <212> PRT <213> artificial sequence <220> <223> synthetic peptide <220> <221> MOD_RES <222> (1)..(1) <223> amidation by a Elaidoyl chain on the N terminal end <400> 12 Lys Thr Phe Lys 1 <210> 13 <211> 4 <212> PRT <213> Artificial sequence <220> <223> Synthetic peptide <220> <221> MOD_RES <222> (1)..(1) <223> amidation by a Elaidoyl chain on the N terminal end <400> 13 Lys Thr Ala Lys 1 <210> 14 <211> 4 <212> PRT <213> Artificial sequence <220> <223> Synthetic peptide <220> <221> MOD_RES <222> (1)..(1) <223> amidation by a Elaidoyl chain on the N terminal end <400> 14 Lys Ala Tyr Lys 1 <210> 15 <211> 4 <212> PRT <213> Artificial sequence <220> <223> Synthetic peptide <220> <221> MOD_RES <222> (1)..(1) <223> amidation by a Elaidoyl chain on the N terminal end <400> 15 Lys Phe Tyr Lys 1 <210> 16 <211> 5 <212> PRT <213> artificial sequence <220> <223> synthetic peptide <220> <221> MOD_RES <222> (1)..(1) <223> amidation by a Palmitoyl chain on the N terminal end <400> 16 Lys Thr Thr Lys Ser 1 5 <210> 17 <211> 5 <212> PRT <213> artificial sequence <220> <223> synthetic peptide <220> <221> MOD_RES <222> (1)..(1) <223> amidation by a Palmitoyl chain on the N terminal end <220> <221> MISC_FEATURE <222> (5)..(5) <223> Xaa being either a Proline P or a Leucine L. <400> 17 Tyr Gly Gly Phe Xaa 1 5 <210> 18 <211> 6 <212> PRT <213> Artificial sequence <220> <223> Synthetic peptide <220> <221> MOD_RES <222> (1)..(1) <223> amidation by a Palmitoyl chain on the N terminal end <220> <221> MISC_FEATURE <222> (6)..(6) <223> Xaa being Trp, Phe, Tyr, Tic, 7-hydroxy-Tic or Tpi <400> 18 His Leu Asp Ile Ile Xaa 1 5 <210> 19 <211> 6 <212> PRT <213> artificial sequence <220> <223> synthetic peptide <220> <221> MOD_RES <222> (1)..(1) <223> amidation by a Palmitoyl chain on the N terminal end <400> 19 Val Gly Val Ala Pro Gly 1 5 <210> 20 <211> 6 <212> PRT <213> artificial sequence <220> <223> synthetic peptide <220> <221> MOD_RES <222> (1)..(1) <223> amidation by a Palmitoyl chain on the N terminal end <400> 20 Gly Lys Thr Thr Lys Ser 1 5 <210> 21 <211> 6 <212> PRT <213> artificial sequence <220> <223> synthetic peptide <220> <221> MOD_RES <222> (1)..(1) <223> Acetylation on the N-terminal end <400> 21 Glu Glu Met Gln Arg Arg 1 5 <210> 22 <211> 5 <212> PRT <213> artificial sequence <220> <223> synthetic peptide <400> 22 Tyr Ala Gly Phe Leu 1 5 <210> 23 <211> 4 <212> PRT <213> artificial sequence <220> <223> synthetic peptide <400> 23 Ala His Ser His 1 <210> 24 <211> 6 <212> PRT <213> artificial sequence <220> <223> synthetic peptide <400> 24 Ser Ile Lys Val Ala Val 1 5 <210> 25 <211> 6 <212> PRT <213> artificial sequence <220> <223> synthetic peptide <400> 25 Gly Pro Gln Gly Pro Gln 1 5

Claims

피부 모공을 팽팽하게 하기 위한 미용의 비-치료학적 치료(non-therapeutical treatment)를 위한, 마루비움 불가레(Marrubium vulgare)로부터의 식물 물질(plant material)을 포함하는 미용 성분의 용도.
청구항 1에 있어서,
상기 식물 물질이 활성 분자로서 유효량의 포르시토사이드 B(Forsythoside B)를 포함하는 용도.
청구항 2에 있어서,
상기 식물 물질이 시험관내(in vitro) 식물 배양(plant culture)에 의해 수득되는 용도.
청구항 3에 있어서,
상기 식물 물질이 시험관내 세포 배양 공정에 의해 수득된, 전체(whole) 및/또는 분해된(lysed), 분화되지 않거나 탈분화된 식물 세포, 및/또는 세포 부스러기가 없는 상기 세포의 세포 추출물을 포함하는 용도.
청구항 4에 있어서,
생리학적으로 허용되는 매질 속에 현탁된 식물 세포의 용도.
청구항 4에 있어서,
친수성 매트릭스로 구성된 생리학적으로 허용되는 매질 속의 세포 추출물의 용도.
청구항 1 내지 청구항 6 중 어느 한 항에 있어서,
상기 치료가 국소인 용도.
청구항 1 내지 청구항 7 중 어느 한 항에 있어서,
피부 거죽 면(skin grain)을 개선시키기 위한 용도.
청구항 1 내지 청구항 8 중 어느 한 항에 있어서,
지성 경향을 갖는 피부 및 두피 치료용 용도.
청구항 1 내지 청구항 9 중 어느 한 항에 있어서,
피부를 매끈하게 하기 위한 용도.
피부의 모공을 팽팽하게 하기 위한 비-치료학적 미용 활성 성분 또는 비-치료학적 미용 조성물을 제조하기 위한, 시험관내 세포 배양 방법에 의해 수득된 마루비움 불가레의 분화되지 않거나 탈분화된 전체 및/또는 용해된 식물 세포, 및/또는 세포 부스러기를 포함하지 않는 상기 세포의 세포 추출물의 용도.
청구항 11에 있어서,
상기 식물 세포 또는 상기 추출물이 포르시토사이드 B를 활성 분자로서 포함하는 용도.
시험관내 세포 배양 방법에 의해 수득된 마루비움 불가레의, 전체 및/또는 용해된, 분화되지 않거나 탈분화된 식물 세포, 및/또는 세포 부스러기를 포함하지 않는 상기 세포의 세포 추출물, 및 생리학적으로 허용되는 부형제를 포함하는, 특히 청구항 1 내지 청구항 10 중 어느 한 항에 따른 용도를 위한 조성물로서, 상기 조성물이 상기 세포 또는 세포 추출물로부터 대략 1 내지 50 ppm의 포르시토사이드 B를 포함하는 조성물.
청구항 13에 있어서,
비타민 B3 화합물, 니아신아미드, 토코페롤, 레티노이드 화합물, 헥사미딘, α-리포산, 레스베라트롤, DHEA, 하이알루론산, 및 N-아세틸-Tyr-Arg-O-헥사데실 에스테르, Pal-VGVAPG, Pal-KTTKS, Pal-GHK, Pal-KMO2K 및 Pal-GQPR 펩타이드로부터 선택된 하나 이상의 다른 추가의 활성 성분을 포함하는 조성물.