KR20200137294A

KR20200137294A - 플로로탄닌을 포함하는 방사선에 의한 피부질환 예방, 개선 또는 치료용 조성물

Info

Publication number: KR20200137294A
Application number: KR1020190063401A
Authority: KR
Inventors: 박희철; 최창훈; 안원균; 김신영; 박지혜
Original assignee: 사회복지법인 삼성생명공익재단
Priority date: 2019-05-29
Filing date: 2019-05-29
Publication date: 2020-12-09

Abstract

본 발명은 플로로탄닌 (phlorotannin)을 포함하는 조성물에 관한 것으로서, 보다 구체적으로는 플로로탄닌 (phlorotannin)을 유효성분으로 포함하는, 피부 손상, 방사선 피부염 또는 건선 예방, 개선 또는 치료용 조성물에 관한 것이다.
본 발명에 따른 조성물은 플로로탄닌 (phlorotannin)을 유효성분으로 포함하며, 상기 조성물은 방사선 조사에 의해 발생한 피부질환의 진행을 억제할 수 있는바, 상기 피부질환 예방, 개선 또는 치료용 조성물의 유효성분으로 유용하게 사용될 수 있을 것으로 기대된다.

Description

플로로탄닌을 포함하는 방사선에 의한 피부질환 예방, 개선 또는 치료용 조성물{Composition comprising phlorotannin for preventing, improving or treating skin diseases by radiation}

본 발명은 플로로탄닌 (phlorotannin)을 포함하는 조성물에 관한 것으로서, 보다 구체적으로는 플로로탄닌 (phlorotannin)을 유효성분으로 포함하는, 피부 손상, 방사선 피부염 또는 건선 예방, 개선 또는 치료용 조성물에 관한 것이다.

해조류도 일반적인 식물들과 마찬가지로 휘발성의 테르펜류, 방향 물질, 아세토게닌류 (acetogenins),　아미노산 유도 물질 및 폴리페놀 화합물 등을 만들어내는 것으로 알려져 있고, 해조류 중　갈조류는 플로로글루시놀 (phloroglucinol) 유도 물질인 플로로탄닌이라 불리는 폴리페놀성 물질을 생성한다고 보고되며, 최근 연구는 갈조류의 감태, 대황, 모자반, 패 등에서 많은 플로로탄닌 성분을 함유하고 있다고 보고한다.

또한, 플로로탄닌 (phlorotannin)은 다시마목 다시마과에 속하는 갈조류인 감태 (Ecklonia cava)에서 특히 다량 발견되는 주요 성분으로, 대표적인 플로로탄닌으로는 에콜 (eckol), 디에콜 (dieckol), 트리플로레톨 (triphlorethol) A 등이 있으며, 이 성분들은 항산화 효과, 항염 효과,　UV　보호 효과, 미백 효과, 항고혈압 효과, 항당뇨 효과 등 우수한 효과가 있다고 알려져 있다.

한편, 의학기술의 발달로 평균 수명이 증가하고 고령화 인구가 점차 증가하고 있고, 이에 고령화 질환 중 하나인 암 환자 수도 지속적으로 증가하는 추세이며, 최근에는 이러한 암 환자를 치료하기 위하여 방사선 치료 기기를 활용한 치료 기술이 발전하고 점차 정교해져 연평균 6.2 %씩 방사선 항암 치료를 받는 환자 수가 증가하고 있다.

이에 따라, 정상 조직의 손상을 최소화하고 종양 세포에 대해서만 선택적으로 방사선 치료의 효과를 높이고 방사선 치료의 부작용을 낮추기 위한 기술이 지속적으로 개발되고 있으나, 방사선 치료 기술의 발달에도 불구하고 방사선 치료 시 정상 세포 손상에 의한 부작용 발생이 여전히 문제되고 있다. 그 중 방사선 치료 시 부작용으로 나타나는 피부 손상은 가시적인 형태학적 변화가 뚜렷하여 과거부터 알려져 있었으며, 조사된 선량에 따라 다양한 반응이 나타나는데, 예를 들면, 건선, 탈모, 홍반, 수포 궤양 등의 급성 또는 만성적 증상이 있다. 특히, 방사선 피부염의 경우 유방암, 폐암, 간암, 두경부암 환자에게서 많이 발생하는데 저분할 고선량 치료 등을 처치함에 따라 피부에 손상을 가져오고 심한 경우 심한 통증이나 심리적인 고통을 유발하여 환자의 삶의 질을 저하시킨다. 상기의 피부 손상을 예방하기 위해 스테로이드 또는 표피성장인자를 주성분으로 하거나 세라마이드를 이용한 피부 보습을 통해 피부 재생을 촉진시키기 위한 크림 등이 개발되어 있으나, 많은 부작용 또는 고비용이 문제되었다.

이에, 방사선으로 유도된 피부염에 적용 가능한 치료제에 관한 연구가 진행 중이나 (한국등록특허공보 제10-0772494호), 아직 미흡한 실정이다.

본 발명은 상기와 같은 문제점을 해결하기 위해 안출된 것으로서, 본 발명자들은 방사선 조사로 인해 발생한 피부질환의 예방, 개선 또는 치료에 효과적인 소재를 발굴하기 위해 연구 노력한 결과, 갈조류인 감태 (Ecklonia cava)의 주요 성분인 플로로탄닌 (phlorotannin)을 포함하는 조성물이 상기 피부질환 개선 또는 치료에 효과적임을 확인하고, 이에 기초하여 본 발명을 완성하게 되었다.

이에, 본 발명은 플로로탄닌 (phlorotannin)을 유효성분으로 포함하는, 방사선 조사에 의한 피부질환 예방 또는 치료용 약학적 조성물을 제공하는 것을 목적으로 한다.

또한, 본 발명은 플로로탄닌 (phlorotannin)을 유효성분으로 포함하는, 방사선 조사에 의한 피부질환 예방 또는 치료용 피부외용제 조성물을 제공하는 것을 목적으로 한다.

또한, 본 발명은 플로로탄닌 (phlorotannin)을 유효성분으로 포함하는, 방사선 조사에 의한 피부질환 개선용 화장료 조성물을 제공하는 것을 목적으로 한다.

그러나 본 발명이 이루고자 하는 기술적 과제는 이상에서 언급한 과제에 제한되지 않으며, 언급되지 않은 또 다른 과제들은 아래의 기재로부터 당업자에게 명확하게 이해될 수 있을 것이다.

상기와 같은 본 발명의 목적을 달성하기 위하여, 본 발명은,

플로로탄닌 (phlorotannin)을 유효성분으로 포함하는, 방사선 조사에 의한 피부질환 예방 또는 치료용 약학적 조성물을 제공한다.

또한, 본 발명은 플로로탄닌 (phlorotannin)을 유효성분으로 포함하는, 방사선 조사에 의한 피부질환 예방 또는 치료용 피부외용제 조성물을 제공한다.

또한, 본 발명은 플로로탄닌 (phlorotannin)을 유효성분으로 포함하는, 방사선 조사에 의한 피부질환 개선용 화장료 조성물을 제공한다.

본 발명의 일구현예로, 상기 피부질환은 피부 손상, 방사선 피부염 및 건선으로 이루어진 군에서 선택된 어느 하나 이상일 수 있다.

본 발명의 다른 구현예로, 상기 피부 손상은 홍반, 피부 궤양, 괴사 및 섬유화로 이루어진 군에서 선택된 어느 하나 이상일 수 있다.

또한, 본 발명은 상기 약학적 조성물을 개체에 투여하는 단계를 포함하는, 방사선 조사에 의한 피부질환 예방 또는 치료 방법을 제공한다.

또한, 본 발명은 상기 약학적 조성물의, 방사선 조사에 의한 피부질환 예방 또는 치료 용도를 제공한다.

본 발명에 따른 조성물은 플로로탄닌 (phlorotannin)을 유효성분으로 포함하며, 상기 조성물은 방사선 조사에 의해 발생한 피부질환의 진행을 억제할 수 있는바, 상기 피부질환 예방, 개선 또는 치료용 조성물의 유효성분으로 유용하게 사용될 수 있을 것으로 기대된다.

도 1은 방사선 조사 및 플로로탄닌 (phlorotannin) 처리에 따른 피부의 병리학적 변화를 관찰한 결과를 나타낸 것이다.
도 2는 방사선 조사 및 플로로탄닌 (phlorotannin) 처리에 따른 피부 조직의 병리학적 변화를 H&E 염색을 통해 확인한 결과를 나타낸 것이다.
도 3은 방사선 조사 및 플로로탄닌 (phlorotannin) 처리에 따른 외피의 두께 변화를 처리한 플로로탄닌의 농도 별로 분석한 결과를 나타낸 것이다.
도 4는 방사선 조사 및 플로로탄닌 (phlorotannin) 처리에 따른 진피의 두께 변화를 처리한 플로로탄닌의 농도 별로 분석한 결과를 나타낸 것이다.

본 발명은 상기와 같은 문제점을 해결하기 위해 안출된 것으로서, 본 발명자들은 방사선 조사로 인해 발생한 피부질환의 예방, 개선 또는 치료에 효과적인 소재를 발굴하기 위해 연구 노력한 결과, 갈조류인 감태 (Ecklonia cava)의 주요 성분인 플로로탄닌 (phlorotannin)을 포함하는 조성물이 상기 피부질환 치료에 효과적임을 확인함으로써 본 발명을 완성하였다.

이에, 본 발명은 플로로탄닌 (phlorotannin)을 유효성분으로 포함하는, 방사선 조사에 의한 피부질환 예방 또는 치료용 약학적 조성물을 제공한다.

본 발명에서 예방 또는 치료 대상으로 하는 질환인 "방사선 조사에 의한 피부질환"은 방사선 조사가 직·간접의 원인이 되어 발생한 피부질환을 의미하고, 그 종류로는 피부 손상, 방사선 피부염 또는 건선이 있으나, 이것으로 제한되는 것은 아니다.

또한, 방사선으로 인한 피부 손상으로는 홍반, 피부 궤양, 괴사 또는 섬유화 등이 있으나, 이것으로 제한되는 것은 아니다.

본 발명에서 사용되는 용어, "방사선 피부염 (radiodermatitis)"은 방사선 조사에 의한 피부염으로 X선이나 라듐 동위원소에서 나오는 β선 등을 쬐어 일어나는 피부 장애로 엑스선 피부염이라고도 한다. 급성과 만성으로 구분되며, 증세는　방사선이 가진　에너지에 따라 달라지나, X선에 의한 급성인 경우 그 표재치료 (30∼80kV)에서, 제1도는 2 내지 3주의　잠복기　후에 탈모, 가벼운 홍반 (erythema), 낙설 (desquamation),　색소침착 등을 일으키는 것으로 400r 정도의 방사선 조사로 나타난다. 제2도는 1 내지 2주의 잠복기를 거쳐 심한 홍반, 부종, 열감, 낙설 또는 색소침착을 일으키는 것으로 600r 정도의 방사선 조사로 나타난다. 제3도는 1주일 경과 후 수포 또는 미란을 형성하며 동통이 있고,　모세혈관　확장, 위축 또는 탈모를 일으킨다. 제4도는 2,000r 정도의 방사선 조사 후 2 내지 3일 안에 심한　염증을 일으켜　진피심층까지 괴사와 궤양을 일으키고 주위에 혈관확장, 색소침착 또는 탈실을 일으키는 것으로 동통이 현저하며 궤양은 고치기 어렵다. 이 경우 치유되더라도 반흔을 볼 수 있고 후에　암으로 진행될 가능성이 매우 높다.

또한, 만성인 경우는 소량의 X선을 장기간　반복　조사받은 부위에 나타난다. 증상으로 홍반 또는 수포 등의 급성 증세는 나타나지 않으나, 장기간을 거친 다음 혈관의 변화, 모세혈관 확장, 결합직변성, 색소이상, 각질증식 또는 위축 등의 변화를 일으킨다.

한편, 급성장애의 치료로는 연고요법을 주로 사용하며, 만성의 경우에는 외용요법으로　항생물질 연고를 사용한다. 상태가 심할 경우에는 피부이식수술로 치료한다.

본 발명에서 사용되는 용어, "건선 (psoriasis)"은 명확하지는 않으나, 면역체계의 이상으로 발병하는 질환으로, 스트레스, 피부외상 또는 상기도 감염 같은 환경적 인자를 만날 경우 면역 시스템의 이상이 일어나 건선이 발병한다고 보고되고 있다. 건선의 증상으로는 피부가 붉어지는 증상인 홍반과 하얀 각질이 일어나는 증상인 인설을 주 증상으로 두꺼워진 피부에 홍반과 인설이 같이 발생하는 것이 일반적이다. 주로 팔꿈치, 무릎, 엉덩이, 두피 등 자극을 많이 받는 부위에 발생한다. 다른 피부질환과 달리 병변이 발생한 피부와 정상피부와의 경계가 뚜렷한 특징이 있으며, 물방울, 판상, 농포성, 박탈성 건선 또는 건선 관절염 등 다양한 임상 양상을 보인다. 건선이 심한 정도는 얼마나 넓은 부위의 피부를 침범했느냐에 따라 주로 판단하며, 10 % 이상의 피부가 건선으로 덮일 경우 중등증 이상으로 분류하고 고강도의 치료를 하게 된다.

본 발명의 일실시예에서는, 방사선을 조사한 지 21일째 되는 마우스의 피부 조직을 병리한 후 H&E 염색을 수행하여 외피 (epidermis) 및 진피 (dermis)의 두께를 확인한 결과, 외피와 진피가 모두 두꺼워진 것을 확인하였는데, 이는 방사선 조사로 인해 피부의 손상이 증가한 것을 의미하는 것이다 (실시예 2-2 참조).

본 발명의 다른 실시예에서는, 방사선 조사와 함께 플로로탄닌 (phlorotannin)을 처리한 시료 병행 처리군 (IR + 플로로탄닌 0.05 %, 0.5 %, 5 %)의 경우 방사선 조사 대조군 (IR)에 비해 외피와 진피의 두께가 모두 유의적으로 감소한 것을 확인하였다 (실시예 2-2 및 2-3 참조).

상기 실시예 결과를 통해 방사선 조사로 유도된 피부 손상에서 플로로탄닌을 유효성분으로 포함하는 약학적 조성물을 처리하는 경우 상기 피부 손상이 감소될 수 있으며, 상기 조성물이 방사선에 의해 유도된 피부 손상의 유망한 치료제가 될 수 있다는 것을 알 수 있었다.

본 발명에 따른 상기 약학적 조성물은 플로로탄닌 (phlorotannin)을 유효성분으로 포함하며, 유효성분 이외에 약제학적으로 허용되는 담체를 포함할 수 있다. 상기 약학적으로 허용 가능한 담체는 제제시에 통상적으로 이용되는 것으로서, 식염수, 멸균수, 링거액, 완충 식염수, 사이클로덱스트린, 덱스트로즈 용액, 말토덱스트린 용액, 글리세롤, 에탄올, 리포좀 등을 포함하지만 이에 한정되지 않으며, 필요에 따라 항산화제, 완충액 등 다른 통상의 첨가제를 더 포함할 수 있다. 또한 희석제, 분산제, 계면활성제, 결합제, 윤활제 등을 부가적으로 첨가하여 수용액, 현탁액, 유탁액 등과 같은 주사용 제형, 환약, 캡슐, 과립 또는 정제로 제제화할 수 있다. 적합한 약학적으로 허용되는 담체 및 제제화에 관해서는 레밍턴의 문헌에 개시되어 있는 방법을 이용하여 각 성분에 따라 바람직하게 제제화할 수 있다. 본 발명의 약학적 조성물은 제형에 특별한 제한은 없으나 주사제, 흡입제, 피부 외용제 등으로 제제화할 수 있다.

본 발명의 약학적 조성물은 목적하는 방법에 따라 경구 투여하거나 비경구투여 (예를 들어, 정맥 내, 피하, 복강 내 또는 국소에 적용)할 수 있으며, 투여량은 환자의 상태 및 체중, 질병의 정도, 약물형태, 투여경로 및 시간에 따라 다르지만, 당업자에 의해 적절하게 선택될 수 있다.

본 발명의 약학적 조성물은 약학적으로 유효한 양으로 투여한다. 본 발명에 있어서 "약학적으로 유효한 양"은 의학적 치료 또는 진단에 적용 가능한 합리적인 수혜/위험 비율로 질환을 치료 또는 진단하기에 충분한 양을 의미하며, 유효용량 수준은 환자의 질환 종류, 중증도, 약물의 활성, 약물에 대한 민감도, 투여 시간, 투여 경로 및 배출비율, 치료기간, 동시 사용되는 약물을 포함한 요소 및 기타 의학 분야에 잘 알려진 요소에 따라 결정될 수 있다. 본 발명에 다른 약학적 조성물은 개별 치료제로 투여하거나 다른 치료제와 병용하여 투여될 수 있고 종래의 치료제와는 순차적 또는 동시에 투여될 수 있으며, 단일 또는 다중 투여될 수 있다. 상기한 요소들을 모두 고려하여 부작용 없이 최소한의 양으로 최대 효과를 얻을 수 있는 양을 투여하는 것이 중요하며, 이는 당업자에 의해 용이하게 결정될 수 있다.

구체적으로 본 발명의 약학적 조성물의 유효량은 환자의 연령, 성별, 상태, 체중, 체내에 활성 성분의 흡수도, 불활성률 및 배설속도, 질병종류, 병용되는 약물에 따라 달라질 수 있으며, 일반적으로는 체중 1 ㎏ 당 0.001 내지 150 ㎎, 바람직하게는 0.01 내지 100 ㎎을 매일 또는 격일 투여하거나, 1일 1 내지 3회로 나누어 투여할 수 있다. 그러나 투여 경로, 비만의 중증도, 성별, 체중, 연령 등에 따라서 증감 될 수 있으므로 상기 투여량이 어떠한 방법으로도 본 발명의 범위를 한정하는 것은 아니다.

또한, 본 발명은 플로로탄닌 (phlorotannin)을 유효성분으로 포함하는 피부 외용제 조성물 또는 화장료 조성물을 제공할 수 있는 것으로, 피부 외용제로 제공되는 경우 이에 한정되는 것은 아니나, 연고, 패취, 겔, 크림 또는 분무제와 같은 제형을 가질 수 있으며, 화장료 조성물로 제공되는 경우 유연화장수, 수렴화장수, 영양화장수, 영양크림, 마사지크림, 에센스, 아이크림, 아이에센스, 클렌징크림, 클렌징폼, 클렌징 워터, 팩, 파우더, 바디로션, 바디크림, 바디오일, 바디에센스, 메이크업 베이스, 파운데이션, 염모제, 샴푸, 린스 또는 바디 세정제 등으로 제형화 될 수 있으나, 이에 한정되는 것은 아니다.

피부 외용제 조성물 또는 화장료 조성물로 사용 시, 피부 외용제 또는 화장료의 제형에 맞게 물질을 더 첨가할 수 있다. 예를 들어, 이에 한정되는 것은 아니나 제형이 페이스트, 크림 또는 겔인 경우에는 담체 성분으로서 동물성유, 식물성유, 왁스, 파라핀, 전분, 트라칸트, 셀룰로오스 유도체, 폴리에틸렌 글리콜, 실리콘, 벤토나이 트, 실리카, 탈크 또는 산화아연 등이 이용될 수 있고, 제형이 파우더 또는 스프레이인 경우에는 담체 성분으로 서 락토스, 탈크, 실리카, 알루미늄 히드록시드, 칼슘 실리케이트 또는 폴리아미드 파우더가 이용될 수 있으며, 특히, 스프레이인 경우에는 추가적으로 클로로플루오로히드로카본, 프로판/부탄 또는 디메틸 에테르와 같은 추 진체를 포함할 수 있다. 또한 제형이 용액 또는 유탁액인 경우에는 담체 성분으로서 용매, 용해화제 또는 유탁 화제가 이용되는데, 바람직하게는 물, 에탄올, 이소프로판올, 에틸 카보네이트, 에틸 아세테이트, 벤질 알코올, 벤질 벤조에이트, 프로필렌글리콜, 1,3-부틸글리콜 오일, 글리세롤 지방족 에스테르, 폴리에틸렌 글리콜 또는 소르비탄의 지방산 에스테르일 수 있으나 이에 한정되는 것은 아니다. 제형이 현탁액인 경우에는 담체 성분으로 서 물, 에탄올 또는 프로필렌 글리콜과 같은 액상의 희석제, 에톡실화 이소스테아릴 알코올, 폴리옥시에틸렌 소르비톨 에스테르 및 폴리옥시에틸렌 소르비탄 에스테르와 같은 현탁제, 미소 결정성 셀룰로오스, 알루미늄 메타 히드록시드, 벤토나이트, 아가 또는 트라칸트 등이 이용될 수 있으며, 제형이 계면-활성제 함유 클렌징인 경우 에는 담체 성분으로서 지방족 알코올 설페이트, 지방족 알코올 에테르 설페이트, 설포숙신산 모노에스테르, 이 세티오네이트, 이미다졸리늄 유도체, 메틸타우레이트, 사르코시네이트, 지방산 아미드 에테르 설페이트, 알킬아 미도베타인, 지방족 알코올, 지방산 글리세리드, 지방산 디에탄올아미드, 식물성유, 라놀린 유도체 또는 에톡실화 글리세롤 지방산 에스테르 등이 이용될 수 있으나 이에 한정되는 것은 아니다.

본 발명의 다른 양태로서, 본 발명은 플로로탄닌 (phlorotannin)을 유효성분으로 포함하는 약학적 조성물을 개체에 투여하는 단계를 포함하는 피부질환의 예방 또는 치료 방법을 제공한다.

본 발명에서 "개체"란 질병의 치료를 필요로 하는 대상을 의미하고, 보다 구체적으로는 인간 또는 비-인간인 영장류, 생쥐 (mouse), 쥐 (rat), 개, 고양이, 말 및 소 등의 포유류를 의미한다.

이하, 본 발명의 이해를 돕기 위하여 바람직한 실시예를 제시한다. 그러나 하기의 실시예는 본 발명을 보다 쉽게 이해하기 위하여 제공되는 것일 뿐, 하기 실시예에 의해 본 발명의 내용이 한정되는 것은 아니다.

[실시예]

실시예 1. 실험 재료 및 실험 방법

1-1. 시료

본 실험에 사용된 플로로탄닌은 부경대학교 해양 의생명과학 연구실로부터 분양받아 사용하였다.

1-2. 실험동물

실험동물은 5 ~ 6주령 BALB/c 마우스 (OrientBio 사, South Korea)를 사용하였다. 실험동물은 표준 사육조건 온도 23 ℃, 습도 50 %로 유지되는 환경에서 사료와 음수는 자유롭게 섭취하도록 하였다. 실험군은 정상 대조군 (Non IR), 방사선 조사 대조군 (IR, vehicle), 시료 병행 처리군 (IR + 플로로탄닌 0.05 %, 0.5 %, 5 %)으로 나누어 실험하였다.

본 발명에 따른 실험을 위해, 본 발명자들은 삼성서울병원 실험동물 윤리위원회에 실험동물계획서를 제출하여 승인 받았으며 (동물실험 승인번호, 2018047001), 동물실험 및 관리는 삼성서울병원 실험동물윤리위원회의 윤리적 기준에 의거하여 시행하였다.

1-3. 방사선 조사

다리 부위 털을 제모한 마우스에 대한 방사선 조사는 일반적인 방사선 조사기 (삼성서울병원)를 이용하여 2 cm의 조직 동등물 (bolus)을 덮은 후 100 cm의 거리에서 12 Gy/1회/일의 용량으로 3일간 실시하였다.

1-4. 시료의 처리

본 발명에 따른 플로로탄닌을 포함하는 시료를 참깨 오일 (sesame oil)에 0.05 %, 0.5 %, 5 % 농도로 녹인 후, 방사선을 조사한 부위에 50 ul로 1회 도포하였다.

또한, 최초 방사선 조사일로부터 3주간 2 내지 3일 간격으로 주 3회 상기 시료를 도포하였다.

1-5. H&E 염색

최초 방사선 조사일로부터 21일째 방사선 조사 부위의 부검을 실시하여 다리 부위의 피부를 채취한 후 10 % 중성 포르말린에 고정하고, 통상적인 방법에 따라 파라핀 블록을 제작하였다. 그 다음으로, 조직 절편 (4 mm)을 만들어 슬라이드에 고정 후 autostainer XL (Leica 사)를 이용하여 통상적인 프로토콜에 따라 histoclear, 100 % alcohol, 95 % alcohol, water 순으로 탈 파라핀 단계를 거쳤다.

그 다음으로, 핵 염색을 위하여 hematoxylin, water 1 % acid alcohol, water 순서로 염색 단계를 거치고, 세포질과 조직결합 염색을 위하여 eosin, water 처리 단계를 거친 후 95 % alcohol, 100 % alcohol, histoclear의 순서로 탈수 및 투명화 단계를 진행하였다. 마지막으로, scanscope AT 장비를 이용하여 400배의 배율에서 관찰하였고, 분석 프로그램 (Aperio 사, USA)을 이용하여 방사선 조사 및 시료 처리 부위의 외피 (epidermis) 및 진피 (dermis)의 두께를 분석하였다.

1-6. 통계처리

각각의 실험 결과는 평균의 표준오차 (SEM)로 나타내었으며, Prism 프로그램을 이용하여 ANOVA test를 실시하였다 (p < 0.05, p <0.01, p < 0.005의 수준에서 유의성 검정 실시).

실시예 2. 플로로탄닌 도포에 따른 피부 변화 양상의 확인

2-1. 플로로탄닌 도포에 따른 방사선 조사로 인한 피부 병리 증상 완화의 확인

방사선을 조사한 마우스에서 발생하는 피부 병리 현상 (피부질환)에 대하여 플로로탄닌이 미치는 영향을 확인하기 위해 피부 외부의 상태를 카메라 (cannon 사)를 이용하여 촬영하였다.

그 결과, 도 1에서 나타낸 바와 같이, 방사선 조사 후 참깨 오일 (sesame oil)만 처리한 방사선 조사 대조군 (IR)에서 방사선 조사 후 7일째부터 피부 발적, 건조, 궤양 등의 피부 손상, 피부염 또는 건선의 외적 증상이 나타나는 것을 확인하였다.

또한, 시료 병행 처리군 (IR + 플로로탄닌 0.05 %, 0.5 %, 5 %)에서 상기 증상이 완화되는 것을 육안으로 확인하였다.

상기의 결과로부터 플로로탄닌이 방사선 조사로 인해 발생하는 피부 손상, 피부염 또는 건선의 외적 증상을 완화시키는 효과를 갖는다는 것을 확인할 수 있었다.

2-2. 플로로탄닌 도포에 따른 외피 (epidermis)의 두께 변화 확인

방사선을 조사한 마우스에서 나타나는 피부 손상에 대하여 플로로탄닌이 미치는 영향을 확인하기 위해 H&E 염색을 수행하였다. 보다 구체적으로, 방사선을 조사한 지 21일째 되는 마우스의 피부 조직을 병리한 후 H&E 염색을 수행하여 외피 (epidermis)의 두께를 확인하였다.

그 결과, 도 2에서 나타낸 바와 같이, 방사선 조사 대조군 (IR, vehicle)의 경우 외피의 두께가 101.6 ± 6.629 μm로 측정되어 정상 대조군 (Non IR) (10.96 ± 1.129 μm)에 비해 외피의 두께가 827 % 증가한 것을 확인하였다 (여기서, 외피의 두께가 두꺼울수록 피부 손상은 큰 것을 나타내고, 외피는 진한 보라색으로 염색됨).

또한, 도 3에서 나타낸 바와 같이, 시료 병행 처리군 (IR + 플로로탄닌 0.05 %, 0.5 %, 5 %) 중 시료 병행 처리군 (IR + 플로로탄닌 0.05 %)의 경우 외피의 두께가 42.9 ± 7.969 μm로 측정되었고, 시료 병행 처리군 (IR + 플로로탄닌 0.5 %)의 경우 외피의 두께가 41.3 ± 7.387 μm로 측정되었으며, 시료 병행 처리군 (IR + 플로로탄닌 5 %)의 경우 외피의 두께가 61.67 ± 5.879 μm로 측정되어 각각 방사선 조사 대조군 (IR, vehicle)에 비해 외피의 두께가 유의하게 감소함을 확인하였다. 보다 구체적으로, 각각 방사선 조사 대조군 (IR, vehicle)에 비해 외피 (epidermis) 두께가 58 %, 59 %, 39 %씩 감소함을 확인하였다.

상기 결과로부터 플로로탄닌이 방사선 조사로 인해 유도된 외부 피부 손상을 억제하는 효과를 갖는다는 것을 확인할 수 있었다.

2-3. 플로로탄닌 도포에 따른 진피 (epidermis)의 두께 변화 확인

방사선을 조사한 마우스에서 나타나는 중증 피부 손상 정도에 대하여 플로로탄닌이 미치는 영향을 확인하기 위해 H&E 염색을 수행하였다. 보다 구체적으로, 방사선을 조사한 지 21일째 되는 마우스의 피부 조직을 병리한 후 H&E 염색을 수행하여 진피 (dermis)의 두께를 확인하였다.

그 결과, 도 2에서 나타낸 바와 같이, 방사선 조사 대조군 (IR, vehicle)의 경우 진피의 두께가 242.1 ± 10.78 μm로 측정되어 정상 대조군 (Non IR) (104.9 ± 4.891μm)에 비해 내피의 두께가 130 % 증가한 것을 확인하였다 (여기서, 진피의 두께가 두꺼울수록 피부 손상은 큰 것을 나타내고, 진피는 옅은 보라색으로 염색됨).

또한, 도 4에서 나타낸 바와 같이, 시료 병행 처리군 (IR + 플로로탄닌 0.05 %, 0.5 %, 5 %) 중 시료 병행 처리군 (IR + 플로로탄닌 0.05 %)의 경우 진피의 두께가 226.3 ± 11.49 μm로 측정되었고, 시료 병행 처리군 (IR + 플로로탄닌 0.5 %)의 경우 진피의 두께가 223.7 ± 9.231 μm로 측정되었으며, 시료 병행 처리군 (IR + 플로로탄닌 5 %)의 경우 진피의 두께가 189 ± 7.963 μm로 측정되어 방사선 조사 대조군 (IR, vehicle)에 비해 유의하게 진피의 두께가 감소함을 확인하였다. 보다 구체적으로, 방사선 조사 대조군 (IR, vehicle)에 비해 20 % 감소함을 확인하였다.

상기 결과로부터 플로로탄닌이 방사선 조사로 인한 피부의 외부 손상뿐만 아니라 방사선으로 인해 피부 내부의 세포 손상까지도 억제하는 효과를 갖는다는 것을 확인할 수 있었다.

상기 진술한 본 발명의 설명은 예시를 위한 것이며, 본 발명이 속하는 기술분야의 통상의 지식을 가진 자는 본 발명의 기술적 사상이나 필수적인 특징을 변경하지 않고서 다른 구체적인 형태로 쉽게 변형이 가능하다는 것을 이해할 수 있을 것이다. 그러므로 이상에서 기술한 실시예들은 모든 면에서 예시적인 것이며 한정적이 아닌 것으로 이해해야만 한다.

Claims

플로로탄닌 (phlorotannin)을 유효성분으로 포함하는, 방사선 조사에 의한 피부질환 예방 또는 치료용 약학적 조성물.
제1항에 있어서,
상기 피부질환은 피부 손상, 방사선 피부염 및 건선으로 이루어진 군에서 선택된 어느 하나 이상인 것을 특징으로 하는, 피부질환 예방 또는 치료용 약학적 조성물.
제2항에 있어서,
상기 피부 손상은 홍반, 피부 궤양, 괴사 및 섬유화로 이루어진 군에서 선택된 어느 하나 이상인 것을 특징으로 하는, 피부질환 예방 또는 치료용 약학적 조성물.
플로로탄닌 (phlorotannin)을 유효성분으로 포함하는, 방사선 조사에 의한 피부질환 예방 또는 치료용 피부외용제 조성물.
제4항에 있어서,
상기 피부질환은 피부 손상, 방사선 피부염 및 건선으로 이루어진 군에서 선택된 어느 하나 이상인 것을 특징으로 하는, 피부질환 예방 또는 치료용 피부외용제 조성물.
제5항에 있어서,
상기 피부 손상은 홍반, 피부 궤양, 괴사 및 섬유화로 이루어진 군에서 선택된 어느 하나 이상인 것을 특징으로 하는, 피부 질환 예방 또는 치료용 피부외용제 조성물.
플로로탄닌 (phlorotannin)을 유효성분으로 포함하는, 방사선 조사에 의한 피부질환 개선용 화장료 조성물.
제7항에 있어서,
상기 피부질환은 피부 손상, 방사선 피부염 및 건선으로 이루어진 군에서 선택된 어느 하나 이상인 것을 특징으로 하는, 피부질환 개선용 화장료 조성물.
제8항에 있어서,
상기 피부 손상은 홍반, 피부 궤양, 괴사 및 섬유화로 이루어진 군에서 선택된 어느 하나 이상인 것을 특징으로 하는, 피부질환 개선용 화장료 조성물.