KR20200110561A - 글루타티온 물질을 유효성분으로 하는 항산화 및 면역강화 조성물 - Google Patents

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Abstract

본원의 글루타티온 조성물은 글루탐산, 글리신, 시스테인의 3개의 아미노산으로 구성되는 트리펩타이드이며, 효모나 동물의 간장, 근육 등의 조직 중에 널리 분포한다. 글루타티온은 환원형(reduced form)으로 미생물과 동식물의 세포 내에 존재하면서 산화적 스트레스(oxidative damage)에 대한 항산화 작용을 하는 것으로 알려졌으며, 간질환 개선, 당뇨병 치료, 항암 활성 등 다양한 약리 효과를 가진다고 알려졌다. 또한, 글루타티온이 식품 조성물에 포함되는 경우 정미 성분으로 작용하여 맛의 지속성을 유지시켜 줄 수있다.
본원은 글루타티온 조성물은 주원료인 글루타티온 조성물 전체중량 100중량 %에 대하여 글루타티온 조성물의 총 중량을 기준으로 1ppm(w/w) 이상이 투입되고 여기에 부원료인 비타민(Vitamin), 병안류(柄眼類, Stalemate). 올리고당(oligonucleotide), 칼슘(calcium), 마그네슘(as Magnesium Oxide),카복실산(Carboxylic acid), 징크옥사이드(Zinc Oxide), 구리(Cupric Oxide), 망간(Manganese Sulfate),몰리브덴(Sodium Molybdate) ,클로라이드(Potassium Chloride), 포타슘(Potasssium Chloride) 아미노에테인술폰산(aminoethanesulfonic acid), 콜라겐(collagen), 키토산(Chinos), 요오드(Iodine), 펜토테닉산(Antithetic Acid) ,비오틴(Biotin), 카테킨(Catching), 폴리페놀(polythene), 밀크티슬(Milk Thistle), 버섯류(fungi), 동충하초(cordyceps)정제 수, 감미료, 알코올, 물질중 선택된 어느 하나 이상의 물질이 상기 글루타티온은 조성물의 총 중량을 기준으로 1ppm(w/w) 이상이 투입되되;
상기 글루타티온 조성물에 투입된 부원료는 엑소펩티다아제(exopeptidase)와 엔도 펩티다아제(endopeptidase)를 포함한 프로테아제(protease), 리파아제(lipase), 라티움(raktium)을 포함한 단당류(單糖類, monosaccharide) 또는 다당류(多糖類, polysaccharide)를 더 포함하는 것을 특징으로 한다.
본 발명의 글루타티온은 섭취나 주사시 과잉 발생한 활성 산소로부터 몸을 보호하고 질병과 노화를 예방할 수 있으며 피부 도포시에는 글루타티온이 멜라닌 합성을 억제하고 피부를 하얗게 만들며, 피부 노화 방지 및 피부에 탄력을 줄뿐 아니라 윤기가 흐르도록 도와주어 자연스럽게 피부 미백효과를 나타내도록 하는 좋은 기능이 있다.

Description

글루타티온 물질을 유효성분으로 하는 항산화 및 면역강화 조성물{Antioxidant and immunity enhancing composition comprising glutathione enzyme as an active ingredient}
본 발명은 글루타티온(Glutathione)효소를 유효성분으로 함유하는 항산화(anti oxidation) 조성물에 관한 것으로 이러한 글루타티온은 항산화기능과 활성산소 제거와 면역기능을 강화하는 물질로 널리알려져있다.
특히 간 기능 보호와 피부개선기능이 있어 피부 미백과 노화 피부의 상태를 예방 및 치료하며 주름 및 잔주름의 출현, 피부의 건조함, 칙칙함 또는 과다한 주름살 및 주름의 출현, 처짐, 변색, 또는 피부 발작, 여드름 및 반점, 폐경 후 피부 상태를 예방하거나 치료하기 위한 글루타티온을 주재료로 하고 부재료인 비타민, 단백질과, 아미노산 등을 약용성분으로 하여 섭취하거나 피부에 도포할 수 있는 글루타티온 제조 기술을 제시하고자 한다.
근래에 와서 주목받는 글루타티온(GSH)은 시트르산(citric acid), 글리신(lysine), 글루코오스(glucose)글루탐산 모노 나트륨(monosodium glutamate),글루코아밀라아제(glucoamylase),글루타메이트(glutamate) 등의 아미노산으로 구성된 트리펩타이드(tripeptide)로서, 간 및 전신의 항산화제(antioxidant), 항독소제(antitoxin), 항암제(anti-carcinogen), 항돌연변이제(anti-mutagen),항노화(anti-aging), 항염(anti-inflammatory) 및 면역 증강 기능을 가진 생체 영양소로 잘 알려졌다.
글루타티온 효소(Glutathione enzyme)는 활성산소로부터 간, 폐, 심장과 혈액 등의 손상을 막아주며, 또한 DNA의 복구, 림프구의 활성, 기타 각종 항암활성을 지니고 있으며, 주로 간에서 70%가 만들어지고 폐에서 15%, 신장에서 15%가량이 만들어지나 나이와 함께 또는 질병 정도에 따라 그 수치가 줄어들기 때문에 글루타티온의 결핍은 노화를 촉진하고, 세포 내 낮은 글루타티온 농도는 세포사멸을 유발하므로 암환자나 에이즈 환자의 경우글루타티온 섭취가 필수적이라 할 수도 있다.
생체 내 글루타티온 농도가 낮아지게 되면 심장 질환, 당뇨, 고혈압, 관절염 등이 자주 생기는 것으로 알려졌다. 또한, 독성물질이나 알코올 대사가 일어나는 간의 원활한 해독작용을 위해서는 글루타티온의 섭취가 유용하다.
그러나 글루타티온은 섭취를 하더라도 위장관의 낮은 pH 및 소화효소의 작용에 의해 쉽게 분해되므로 흡수율 및 생체이용률이 매우 낮은 편이며, 효소적 또는 비효소적으로 쉽게 산화되어 이 황화결합을 형성하면서 두 분자가 결합하게 되면 산화형태의 글루타티온(GSSG)이 되는데, 이러한 산화형태는 항산화 기능성이 결여된다. 따라서 글루타티온의 경구 섭취를 위한 종래의 기술은 글루타티온 자체를 섭취한다기보다는 글루타티온을 구성하는 각각의 아미노산을 섭취하여 체내 합성을 유도하거나, 전구물질인 N-아세틸시스테인(NAC)이나 리포익 에시드(lipoic acid)를 섭취하기도 하였다.
한편, 미국 특허 제6,011,067호에서는 마른버짐과 같이 피부가 벗겨지는 (desquamating) 염증성 장애의 국소 치료를 위한 보조 약으로서 수개의 상승작용성 항산화제를 포함하는 조성물로서, L-글루타티온 및 셀레늄 화합물을 활성성분으로 포함하는 조성물을 개시하며 Hersh의 개시는 청구된 조성물의 항건선 효과에 대한 두 성분의 존재의중요성을 강조하였다. 또 다른 선행기술로는 미국 특허 제3,948,569호 (Kalopissis)는 다양한 두피 및 모발 적용 및 과다 피지 분비를 치료 (combat)하기 위한, 글루타티온의 S-치환된 직쇄형 및 분지형 알킬 및 알케닐 유도체의 용도를 개시하고 있다. 또 다른 미국 특허 제5,516,507호 (N 'Guyen)는 피부 노화의 국소 치료를 위한 글루타티온 모노-알킬 에스테르를 개시한다. 이 글루타티온 모노-알킬 에스테르는 글리신 잔기에서 치환되고 단지 1 내지 10개의 탄소를 갖는 알킬 사슬을 이용하였다. 아울러 미국특허출원 2004/0147452 (Yu)는 광범위한 상태에 대해 국소적용을 위한 비-양쪽성 (non-amphoteric) N-아실 글루타티온 유도체의 용도를 제시한다. 또한, 상기 글루타티온은 효모추출물에 포함되어 있는 것임을 특징으로 할 수도 있고 또 다른 등록특허 10-13168064 또한 상기 실리마린은 엉겅퀴 추출물에 포함되어 있는 것임을 특징으로 한다. 아울러 US 4,582,801에서는 탄소, 질소 및 무기염의 동화할 수 있는 공급원을 포함하는 배양 배지에서, 글루타티온을 생산하는 능력 및 1,2,4-트리아졸 또는 아지드화 나트륨에 대해 내성을 갖는 사카로마이시스(Saccharin)속에 속하는 균주를 배양하여, 미생물 세포 내에 글루타티온을 축적시켜서, 세포를 수거하고, 이로부터 글루타티온을 회수함을 포함하여, 높은 수율(건조 세포 기준으로 약 3-4% 및 약 0.7 -0.9% g/l)로 글루타티온를 생산하는 방법이 여러 특허에서 나타나고 있다.
기타 논문 등에서 글루타티온은 수송 및 세포 방어에서뿐만 아니라 다양한 대사 과정에서 결정적인 역할을 한다. 그것은 단백질과 다른 분자들과의 이황화물 결합의 환원, DNA의 데옥시리보뉴클레오타이드 전구물질의 합성, 대사작용의 다양한 단계에서 형성되는 많은 활성 산소 매개체 (예를 들면, 과산화물) 및 자유 라디칼(free radical)의 해로운 효과로부터 세포 보호를 수행한다. 글루타티온 대사작용에서의 효소 작용 및 수송 작용은 다음에서 다루어진다 : [참조문헌: Meister 'Selective Modification Of Glutathione Metabolism', Science, volume 220, No.4596,472-477 (1983)]한편, 유데 K, O 및 아크레모이츠는 문헌[참조: 'High-gltathione containing yeast Saccharomyces cerevisiae: optimization of production', Acta Microbiologica Polonica, 1997, vol.46, No.1, 105-114] 에서 글루타티온을 고 함량으로 함유하는 효모 에스. 세레비지애 S-8H를 사용하여, 1.6 g/l의 글루타티온 평균 수율 및 건조 바이오 매스 17㎎/g의 글루타티온함량을 수득하는 글루타티온 수율을 극대화하는 방법에 대해서 논의하고 있다. 더불어 치-지엔 리오 등은 문헌[참조: 'Medium optimization for glutathione production by Saccharomyces cerevisiae ',Process Biology, vol.34, 1999, 17-23] 에서 효모 균주에서 글루코오스, 펩톤 및 황산 마그네슘이 세포 성장과 글루타티온생산에 적합하고, 글루타티온생산은 평균 26-28㎎/l까지, 최고치는 124.93㎎/l에 이른다고 보고하고 있다. 더불어 알파파라 씨. 등은 문헌[참조: 'Cysteine addition strategy for maximum glutathione production in fed-batch culture of Saccharomyces cerevisiae ', Appl. Microbiol. Biotechnol., 1992, 37, 141-146]에서 발효 기간동안, 약 0 .8g/l에 이르는 총 글루타티온 생산을 극대화하기 위해서 반응기에서 일정한 시스테인 농도를 유지시켜야 한다고 교시한다. 한편, 균주 컬렉션에서 글루타티온은 GN/2222로 동정 되고, '내셔널 컬렉션 오브 이스트 컬쳐스'(NCYC)에서 2000년 10월 24일자로 기탁된, 수탁번호 NCYC 2983인 캔디다 보이디니( Candida boidinii )이다. 한편, Neuroscience 138:1161-1170 (2006) (Perlugig et al.)은 알츠하이머 질환을 치료하기 위해 신경 세포에서 글루타티온 수준의 향상을 달성하기 위한 트리시클로데칸-9-일-크산토게네이트의 용도를 개시한다. WO 2009/047728 (Liguri)은글루타티온의 친유성 유도체가 알츠하이머 질환 및 헌팅턴 무도증을 치료하는데 유용하다는 것을 개시한바있다.
인체에서 간은 가장 큰 글루타티온 저장소이며 나이가 들어감에 따라서 글루타티온 수치가 급격하게 떨어지게 된다.
세포는 P450 CYP1B1 이라는 접합 및 많은 기타 대사적 요구를 위한 글루타티온을 합성하고, 그 후 글루타티온을 SH/환원력의 전신 공급원 (systemic source)으로서 방출하며 글루타티온은 쓸개즙을 통해 장내강구획 (intestinal luminal compartment)으로 운반된다. 세뇨관, 장의 내벽, 및 폐의 상피조직은 상당한 P450 활성 및 글루타티온을 방출하는 보통의 능력을 갖는다.
글루타티온 등가물 (glutathione equivalent)은 대부분 시스테인의 산화되고 더욱 안정한 형태인 시스틴으로서 혈액 내에서 순환한다.
세포는 혈액으로부터 아미노산인 시스틴(cystine)을 들여오고, 시스틴을 시스테인(Cysteine)으로 재전환시키며 그로부터 글루타티온을 합성한다.
역으로, 세포 내에서 글루타티온은 아스코르베이트 결합(ascorbate-loaded) 및 비타민은 DL-과 같은 산화 형태의 다른 항산화제를 재환원시키는 데 도움을 준다.
본원의 조성물인 글루타티온은 L-글루타민, L-시스테인, 및 글리신의 선형 트리 펩티드의 기술적 구조를 갖는다.
N-L-감마-글루타밀-시스테이닐 글리신 또는 L-글루타티온인 상기 분자는 그의 강한 전자-공여 특성을 설명하는, 시스테이닐 부위 상에술피드릴 (SH) 기를 갖는다. 전자를 잃으면, 상기 분자는 산화되고, 두 개의 산화된 글루타티온 분자는 이황화- 3 -결합 (disulfide bridge)에 의해 결합 (이량화)되어 글루타티온 디술피드 또는 산화형 글루타티온 (GSSG)을 형성한다.
이 결합은 재환원에 대해 가역적이다. 글루타티온은 세포 내적으로 및 세포 외적으로 모두 엄격한 항상성 조절 (homeostatic control) 하에 있다. 글루타티온 합성, GSSG/산화형 글루타티온으로부터 그의 재생, 및 그의 이용 간에 동적인 균형이 유지된다.
항상성 글루타티온 산화환원 회로 (homeostaticglutathione redox cycle)는 소비되는 만큼 글루타티온 수준을 유지하고자 한다. 식품으로부터 이용 가능한 양은 극히 제한적이고 (150mg/day 미만), 산화적 고갈이 합성을 앞지를 수 있는 문제점이 있었다.
상기한바 대로 글루타티온은 매우 중요한 세포 보호제 (protectant)이다. 글루타티온은 반응성 히드록실 자유 라디칼, 기타 산소-중심 (oxygen-centered)의 자유 라디칼, 및 DNA 및 기타 생체분자 상의 라디칼 중심을 직접 퀀칭(quench)시킨다.
글루타티온은 또 다른 특성은 방사선 손상으로부터 피부, 수정체, 각막, 및 망막을 보호하고 간, 신장, 폐, 장 점막 및 기타 기관에서 P450 해독의 생화학적 기초를 보호한다.
글루타티온은 티올-환원 당량을 요구하는 많은 효소를 위한 필수적인 보조 인자이고, 효소 상의 산화환원-민감성(redox-sensitive) 활성 부위를 필요한 환원 상태로 유지하는데 도움을 준다. 고차 티올 세포계 (higher-order
thiol cell system) - 메탈로티오네인, 티오레독신, 및 기타 산화환원 조절자 단백질은 궁극적으로 글루타티온 수준 및 글루타티온/GSSG 산화환원 비율에 의해 조절된다.
글루타티온 및 그의 대사 산물은 여러 주요한 대사 경로를 통해 에너지 (energetic) 및 신경전달물질 합성(syntheses)에 또한, 관련 (interface)된다. 글루타티온 가용성은 류코트리엔 및 기타 아이코사노이드의 염증 촉진 능력 (pro-inflammatory potential)을 하향 조절한다.
사람 조직에서 글루타티온의 수준은 일반적으로 0.1 내지 10밀리 몰 (mm)의 범위이고, 간 내에 (10mm 이하) 및 비장, 신장, 수정체, 적혈구, 및 백혈구 내에 가장 농축되어 있다. 혈장 농도는 마이크로 몰 범위 (약 4.5 μ M)에 있다. 글루타티온을 고갈시킬 수 있는 산화 스트레스 인자는 자외선 및 기타 방사선; 바이러스 감염; 환경적 독소; 생활 화학물질 (household chemical) 및 중금속; 수술, 염증, 화상, 패혈성 쇼크; 및 글루타티온 전구체 및 효소 결핍을 포함한다.
본원의 글루타티온 효소 조성물은 조성물 100 중량%에 대하여 효모추출물 10~60 중량%와 부재료인 비타민, 단백질, 아미노산 등을 30~95중량 %를 혼합하여 조성하는 것을 특징으로 할 수 있으며 상기 조성물은 식품 조성물 또는 약학 및 미용 조성물인 것을 특징으로 한다.
글루타치온(GSH)의 중요성을 강조한 대표적인 학자는 몬트리올 McGill대학 교수인 Gimmy gutman이다. 그는 많은 사람의 건강과 질병이 글루타치온과 관련 되었다고 보고했다.
글루타치온(L-r-glutamyl-L-cysteinglycin)은 Glutathone sulfhydryl의 일반적인 명칭이며 약자로 흔히 GSH로 쓴다. GSH는 글리신(glycine), 글루타민(glutamine), 시스테인(cystein) 세가지 아미노산이 결합되어 만든 형태의 트리펩타이드 (Tripeptide)로 체내에서 자연적으로 생산된다. 글루타치온은 온몸의 세포에서 생성되지만 주로 간에서 생산된다.
현재 일반인들에게 글루타치온의 중요성에 대해 잘 알려져 있지 않다. 그러나 앞으로는 비타민처럼 인체의 건강을 유지하기 위해 중요한 물질로 인식될 것으로 예상된다.
인체내에서 GSH농도가 낮으면 곧 질병과 죽음을 의미할 정도로 GSH의 기능은 매우 중요하다. 글루타치온은 체내에서 해독기능, 면역기능, 항산화 기능 등 핵심적인 역활을 한다. 만약 결핍된다면 이 같은 기능을 수행하지 못해 인체는 치명적적인 손상을 입게 된다.
글루타치온은 인체내에서 매우 중요한 해독제다. 우리는 매일 약품, 오염물질, 발암물질, 방사선 등과 같은 수많은 독성물질을 접하게 되지만 별문제가 없이 건강하게 지낸다. 그것은 독성물질이 글루타치온의 효소시스템에 의해 제거되기 때문이다. 만약 글루타치온이 체내에서 감소한다면, 간 기능이 저하되고 결국 독성물질의 과다 축적으로 인해 죽게 될 것이다.
우리의 몸은 매일 많은 병원균에 공격 받으며 암세포나 돌연변이 세포가 탄생하게 되지만 면역 시스템에 의해 차단된다. 인체의 면역 시스템은 끊임없이 세포손상과 질병을 유발시키는 병원균과 암세포를 찾아 내 공격하여 보호하기 때문이다. 그러나 글루타치온이 부족하게 되면 우리 몸의 면역시스템이 기능하지 못해 질병이나 암이 발생하게 된다.
또한 인체는 활성산소에 의해 끊임없이 산화된다. 활성산소는 세포벽에 손상을 입히거나 파괴시키고 지질을 과산화시켜 많은 질병을 유발하지만 우리 몸의 항산화제 시스템에 의해 보호된다. 글루타치온은 가장 강력한 항산화제이며 체내에서 자연스럽게 생성된다.
글루타치온은 이처럼 해독제, 면역시스템 증진제, 항산화제로써 우리들의 삶을 유지하고 건강과 장수를 가능하게 하는 중요한 물질이다
본원의 글루타티온은 아미노산 시스틴의 아민 기와 glutamate의 측쇄인 carboxyl기가 연결된 3개의 아미노산 잔기로 구성된 펩티드이다. GSH(γ-glu-cys-gly) 분자는 살아있는 세포에서 고농도로 존재하여 비 글루타티온 효소 환원 황의 저장고 역할을 한다. 그 독특한 산화환원 및 친핵성(nucleophilic) 특성 때문에 글루타티온은 생물학적 환원반응에서 활성산소 제거, 생체 이물질 및 중금속 배출에 대해 중요한 방어기능을 한다. 상기 글루타티온의 항산화기능은 이 물질이-340 Mv의 산화환원
잠재력이 있어서 세포를 환원시키거나 단백질들의 이황화 결합을 환원시킬 수 있기 때문이다. 일부 콩과 식물은 유사한 트리 펩티드(Glu-Cys-Ala)인 homo GSH(hGSH)을 함유하기도 한다.
이와 같이 본원의 글루타티온은 항산화제여서 자유라디칼(free radical)이나 과산화물 같은 활성산소에 의하여 야기된 세포구성 요소의 손상을 방지한다. 본 발명의 글루타티온은 섭취나 주사시 과잉 발생한 활성 산소로부터 몸을 보호하고 질병과 노화를 예방할 수 있으며 피부 도포시에는 글루타티온이 멜라닌 합성을 억제하고 피부를 하얗게 만들며, 피부 노화 방지 및 피부에 탄력을 줄뿐 아니라 윤기가 흐르도록 도와주어 자연스럽게 피부 미백효과를 나타내도록 한다.
더불어 면역 기능강화 항산화 및 간 보호 효능에서 현저한 상승효과를 나타내었고 작용 수행에 필요한 글루타티온은 간 기능을 높이는 효과와 유해 물질의 해독작용을 한다.
아울러 글루타티온은 수정체와 각막에 많이 존재하고 있으며, 백내장이나 각막 질환 등의 안과 질환에 대해 예방 효과가 있으며 글루타티온을 보충해서 백내장의 발병과 진행을 예방하는 것 외에 각막 장애를 경감시키는 것으로 밝혀지고 있다.
도 1은 본 발명의 글루타티온 물질을 유효성분으로 하는 항산화 및 면역강화 조성물의 일 실시 예에 의한 글루타티온의 사슬 구조 도를 나타낸 그림이다.
도 2는 본 발명의 글루타티온 물질을 유효성분으로 하는 항산화 및 면역강화 조성물의 일 실시 예에 의한 글루타티온의 화학식을 나타낸 그림이다.
도 3은 본 발명의 글루타티온 물질을 유효성분으로 하는 항산화 및 면역강화 조성물의 일 실시 예에 의한 글루타티온의 사이클을 나타낸 그림이다.
도 4는 본 발명의 글루타티온 물질을 유효성분으로 하는 항산화 및 면역강화 조성물의 일 실시 예에 의한 글루타티온 효소의 활성산소 제거과정을 나타낸 그림이다.
도 5는 본 발명의 글루타티온 물질을 유효성분으로 하는 항산화 및 면역강화 조성물의 일 실시 예에 의한 글루타티온의 기능을 나타낸 그림이다.
도 6은 본 발명의 글루타티온 물질을 유효성분으로 하는 항산화 및 면역강화 조성물의 일 실시 예에 의한 글루타티온의 환원 효소를 나타낸 그림이다.
도 7은 본 발명의 글루타티온 물질을 유효성분으로 하는 항산화 및 면역강화 조성물의 일 실시 예에 의한 글루타티온의 황산화 과정을 나타낸 그림이다.
도 8은 본 발명의 글루타티온 물질을 유효성분으로 하는 항산화 및 면역강화 조성물의 일 실시 예에 의한 글루타티온 투여후 24시간의 변화를그림으로 나타낸 것이다.
도 9는 본 발명의 글루타티온 물질을 유효성분으로 하는 항산화 및 면역강화 조성물의 일 실시 예에 의한 글루타티온이 포함된 뇌의 해부학적 영역을 나타낸 그림이다.
도 10은 본 발명의 글루타티온 물질을 유효성분으로 하는 항산화 및 면역강화 조성물의 일 실시 예에 의한 글루타티온의 마이크로 플레이트 리더를 이용한 형광 측정 글루타티온 측정 키트를 나타낸 그림이다.
도 11은 본 발명의 글루타티온 물질을 유효성분으로 하는 항산화 및 면역강화 조성물의 일 실시 예에 의한 글루타티온의 섭취후 반응을 나타낸 그림이다.
도 12는 본 발명의 글루타티온 물질을 유효성분으로 하는 항산화 및 면역강화 조성물의 일 실시 예에 의한 글루타티온의 글루타티온 투입 전 투입 후 반응을 나타낸 그림이다.
도 13은 본 발명의 글루타티온 물질을 유효성분으로 하는 항산화 및 면역강화 조성물의 일 실시 예에 의한 글루타티온의 할성산소에 의한 여드름 발생과 깨끗한 피부를 나타낸 그림이다.
도 14은 본 발명의 글루타티온 물질을 유효성분으로 하는 항산화 및 면역강화 조성물의 일 실시 예에 의한 글루타티온의 황산화 수치에 의한 여드름 발생과 깨끗한 피부를 나타낸 그림이다.
도 15는 본 발명의 글루타티온 물질을 유효성분으로 하는 항산화 및 면역강화 조성물의 일 실시 예에 의한 글루타티온의 투입과 여드름의 상관관계를 나타낸 그림이다.
도 16은 본 발명의 글루타티온 물질을 유효성분으로 하는 항산화 및 면역강화 조성물의 일 실시 예에 의한 글루타티온의 염증성 여드름의 특정수준을 나타낸 그림이다.
도 17은 본 발명의 글루타티온 물질을 유효성분으로 하는 항산화 및 면역강화 조성물의 일 실시 예에 의한 글루타티온의 세포내 글루타티온의 합성과 분해과정을 나타낸 그림이다.
이하 본 발명의 실시 예들을 상세히 설명하며 본 발명을 설명함에서, 관련된 공지 기능 또는 구성에 대한구체적인 설명이 본 발명의 요지를 불필요하게 흐릴 수도 있다고 판단되는 경우에는 그 상세한 설명을 생략할 것이다.
더불어 본 명세서에서 사용되는 용어들은 본 발명의 바람직한 실시 예를 적절히 표현하기 위해 사용된 용어들로서, 이는 당업자의 의도 또는 본 발명이 속하는 분야의 관례 등에 따라 달라질 수있다.
따라서, 본 용어들에 대한 정의는 본 명세서 전반에 걸친 내용을 토대로 내려져야 할 것이다. 명세서 전체에서, 어떤 부분이 어떤 구성요소를 "포함"한다고 할 때, 이는 특별히 반대되는 기재가 없는 한 다른 구성요소를 제외하는 것이 아니라 다른 구성요소를 더 포함할 수 있는 것을 의미한다.
본원의 글루타티온은 전술한바 대로 인체의 항상성(homeostasis)을 유지시켜주는 중요한 역할을 한다고 알려졌으며, 세포의 활성화는 물론 노화된 세포를 교체해 주고 또한, 세포 내에 축적되어 있는 노폐물이나 독소를 제거하는 기능이 탁월하며 특히, 이상적으로 분열하는 세포를 억제함으로써 항암 효능도 탁월하다고 보고되어 있다.
이러한 글루타티온(Glutathione)은 아미노산의 하나로서 맨 끝에 있는 아민기(-NH2)를 히드록시기(OH-)로 치환하면 글루탐산(Glutamic acid)이 되며 아민기(-NH2)를 2개 가지고 있으나 염기성을 띠지 않으며 사탕무에서 발견되었다.
이물질은 세포 내 항산화 물질로 독성 금속을 포함해 우리가 일상생활에서 노출되는 모든 위험한 물질을 제거하거나 무력화시키는 일을 하며 독소, 오염물질 노출, 질병, 스트레스, 영양부족, 피로 등으로 글루타티온이 결핍될 수 있으며 심하면 체내 독소가 배출되지 않고 쌓이게 되고 활성산소 배출 저하와 면역기능 장애가 나타난다. 글루타티온은 카테킨(Catechin)이나 폴리페놀(polyphenol)보다도 몇 배나 강한 항산화 작용을 하는 것으로 알려졌으며 본래 인체의 간에 포함돼 있으나 체내 노화나 인공식품 첨가물 섭취, 자외선 등으로 점차 감소하기도 한다.
본 발명의 글루타티온이나 효소의 제조방법이나 취득방법은 전 세계적으로 매우 다양하게 구현할 수 있으며 글루타티온을 정제하는 다양한 방법이 알려져있다.
예컨대 본원에서 사용할 수 있는 글루타티온의 제조방법으로는 카드뮴, 바나듐, 구리, 철, 납, 알루미늄, 코발트, 크롬, 망간, 니켈, 몰리브데늄 및 수은 중에서 선택된 금속 화합물을 이용하는 방법과;
바람직하게는 과산화물 (예를 들면, 과산화수소, t-부틸-퍼옥사이드)과 알데히드 (메틸글리옥살, 포름알데히드, 아세트알데, 하이드로퍼옥사이드( t-부틸-HOOH) 등을 이용할수도 있고 에멀션을 위한 제제·효모(yeast)는 낭자균 혹은 구형 또는 난형의 단세포 미생물로서 건조 사용할수있는 제조 방법등이 있다.
이러한 효모에는 단백질, 식이섬유, 비타민, 무기질, 핵산, 글루타티온, 에르고스테롤(ergosterol) 등이 함유되어 있으므로 양질의 단백질 공급과 비타민 B군의 공급에 유용하며, 흡수성이 뛰어난 미네랄의 공급과 장내 이용도가 높은 식이섬유의 함량이 높으며 효모 추출물에는 다량의 글루타티온이 함유되어 있다는 것이다..
한편, 본원에서 선택적으로 사용할 수 있는 미생물로부터 제조된 글루타티온 효소는 예를 들어 이온 교환 크로마토그래피(ion exchange chromatography), 히드록시 아파타이트 크로마토그래피(hydroxyapatite chromatography), 인회석 크로마토그래피(fluoroapatite chromatography), 변위 크로마토그래피(displacement chromatography), 갤 전기영동법(gel electrophoresis )이있는데 이는 갤 메트릭스에 전류를 흘려보내 DNA, RNA, 단백질 등을 분리하는 방법이며 투석 또는 친 화성 크로마토그래피(ultrafiltration or affinity chromatography)를 사용하여 정제토록 하는 방법이다.
더불어 에탄올 침전(ethanol precipitation), 역상 HPLC(Reverse Phase HPLC), 실리카(silica) 상의 크로마토그래피, 헤파린(heparin) 상의 크로마토그래피, 크로마토 포커싱(chromatofocusing), SDS-PAGE 및 황산 암모늄 침전(sulfate precipitation)과 같은 글루타티온 효소 정제를 위한 다른 기술 또한 회수되는 단백질에 따라 가능하다.
이러한 정제 기술은 당 업계에 잘 알려졌고, 예를 들어 Scopes( Protein purification: principles and practice, 3판, Springer Verlag, 1994) 에 기술되어 있으며 생성된 글루타티온 효소는 이러한 친화 정제(affinity purification)와 같은 당 업계에 공지된 방법을 사용하여 정제토록한다.
예를 들어, 헥사-히스 태그를 포함하는 단백질은 니켈-니트릴로 크리 아세트산(Ni-NTA)을 포함하는 샘플과 접촉하여 헥사-히스 태그가 고체 또는 반고체 지지체에 고정되어 특별히 결합하는 단계, 결합하지 않은 단백질을 세척하는 단계 및 결합한 단백질을 순차로 분리하는 단계를 거쳐 정제할 수도 있다.
본원의 추출 및/또는 정제된 글루타티온 효소는 조성물로 제제화될 수 있으며
예를 들어, 조성물은 예방, 치료 또는 의용 화장품 용도로 비 경구적 투여, 국소 투여(topical administration),경구 투여, 근육 내 투여,안구내 투여(intraocular administration),피하 투여,국소 투여(local administration),에어로졸 투여,피내 투여 또는 경피 투여(transdermal administration)용으로 널리 사용할 수 있다.
전형적인 일일 투여량은 2 μ g/kg 내지 200㎎/㎏ 이상의 범위가 바람직하고
환자에게 투여되는 예시적인 글루타티온 효소 투여량은 환자 몸무게의 0.2 내지 20mg/kg의 범위가 바람직하다.
투여를 위한 조성물은 약학 적으로 허용 가능한 운반체(carrier) 바람직하게는 수성 운반체(aqueous carrier)중에 용해된 글루타티온 효소의 용액을 일반적으로 포함할 것이다. 수성 운반체의 종류는, 예를 들면, 완충 식염수 등을 사용할 수 있다. 다른 예시적인 운반체로는 물, 식염수, 링거액, 덱스트로스 용액, 및 5% 정도의 혈청 알부민을 포함토록한다.
바람직하게는 리포솜(liposome) 또한, 운반체로써 이용될 수 있고 운반체는 등장성 및 화학적 안정성을 향상시키는, 예를 들면, 완충액 및 보존제를 첨가제를 소량 포함할 수 있다.
상기 조성물은 생리학적 조건의 근접이 요구되는 것처럼 pH 조정 및 완충재, 독성 조절제 등과 같은, 예를 들면, 아세트산나트륨, 염화나트륨, 염화칼륨, 염화칼슘, 젖산 나트륨 등의 약학 적으로 허용 가능한 보조 물질을 포함할 수 도있다.
약학적 조성물을 제조하기 위한 기술은 Remington ’Pharmaceutical Sciences(16th Ed. Mack Publishing Company, 1980) 에 예시된 바와 같이, 당해 분야에 일반적으로 알려져 있다.
본 명세서에 기술된 추출, 분리 또는 생산된 글루타티온 효소는 고체 지지체 또는 반고체 지지체에 부착될 수 있으며 예시적인 반 고체 지지체는 일반적으로 효소 또는 산 염기 가수 분해 또는 용해에 의해 분해되는 중합체(polymer)를 재료로 만들어진 매트릭스(matrices)이다.
한편 미생물(微生物)의 영양(營養) 원(源)으로서 유기화합물(有機化合物)로 된 탄소원은 덱스트로즈, 덱스트린, 녹말, 글루코오스, 프룩토스, 삭카로즈, 만니톨, 만노즈 같은 당류 ; 유기산 ; 알코올 ; 알데하이드 ; 글리세롤 ; 전분 ; 지방 ; 오일; 탄화수소 및 유청 및 그 밖의 유사한 것 중의 하나를 포함할 수 있다.
특히, 본 발명에 따르면 글루타티온의 생산은 사탕무, 당밀 같은 보편적인 탄소원을 사용하여 유리한 조건에서 수행될 수도 있고 맥아추출물, 옥수수침출액, 카제인의 효소 가수분 해물, 대두분, 건조 효모, 펩톤, 콩 펩톤, 육즙, 질산염, 아미노산, 카제인, 암모늄염과 그 밖의 유사한 것 중의 하나 이상의 물질을 포함할 수 있으며 바람직하게는 질산암모늄, 황산 암모늄과 같은 암모늄염을 사용하여 획득할 수도 있다.
바람직하게는 본 발명에서는 칸디다 유틸리스 SY8-M2-1(Candida utilis SY8-M2-1, 기탁번호: KFCC11487P)를 사용할수있다.
상기 칸디다 유틸리스 SY8-M2-1은 칸디다 속(Candida sp) 효모 변이주로서, 고농도의 글루타티온을 포함하며 항산화 효과, 우수한 정미성을 가진다.
본 발명의 일측면에서, 상기 칸디다 유틸리스 SY8-M2-1(Candida utilis SY8-M2-1, 기탁번호: KFCC11487P)은 칸디다 유틸리스(Candida utilis)(기탁기관: 한국미생물보존센터, 기탁번호: KCCM50342)을 출발 물질로 할 수 있다.
이러한 칸디다 유틸리스(Candid utilize)는 문헌상으로 글루타티온 효소 생산 효율이 매우 높은 효모 균주이며 상기 칸디다 유틸리스 SY8-M2-1은 100 내지 200 μ g-글루타티온/mL을 포함할 수 있고 상기 칸디다 유틸리스 SY8-M2-1은 110 내지 170 μ g-글루타티온/mL을 포함할 수 있으며 상기 칸디다 유틸리스 SY8-M2-1은 건조 균체 중량당 50 내지 100㎎-글루타티온/g을 포함할 수 있다.
예컨대 상기 칸디다 유틸리스 SY8-M2-1은 건조 균체 중량당 60 내지 90㎎-글루타티온/g을 포함할 수 있고 상기 포함된 글루타티온 값은 기존의 야생 균주와 비교하여 2~3배 증가한 수치일 수 있다.
본 명세서에서 효모가 "글루타티온을 포함하거나 글루타티온을 생산한다."라는 것은 글루타티온을 균체 내에 누적한다는 것을 의미할 수도 있다.
본 발명의 상기 칸디다 유틸리스 SY8-M2-1은 우수한 항산화 효과를 가지며 이는 상기 칸디다 유틸리스 SY8-M2-1의 뛰어난 DPPH 라디칼(radical) 소거 등으로 표현될 수 있으며 상기 칸디다 유틸리스 SY8-M2-1은 30-90%의 DPPH 라디칼 소거능을 가질 수 있는데 프리 라디칼 소거능이란 프리 라디칼의 공격으로부터 인체 세포를 보호하는 생화학 반응을 말한다.
예컨대 상기 칸디다 유틸리스 SY8-M2-1은 36-81%의 DPPH 라디칼 소거능을 가질 수 있다. 본 발명의 또 다른 일측면에서, 상기 칸디다 유틸리스 SY8-M2-1은 80% 이상의 DPPH 라디칼 소거능을 가질 수 있으며 상기 칸디다 유틸리스 SY8-M2-1의 DPPH 라디칼 50%를 소거함에 필요한 농도인 IC50 (inhibitory conc)값은 야생 균주의 그것에 비해 3배 이상 작을 수 있다.
아울러 상기 칸디다 유틸리스 (Candida utilis SY8-M2-1) 는 뛰어난 정미성을 가지며 신맛, 단맛, 짠맛, 쓴맛, 감칠맛 등을 가진다는 것을 의미할 수 있으며 칸디다 유틸리스 SY8-M2-1, 그 배양액 또는 그 추출물을 식품 조성물 분야에 다양하게 활용하여, 정미성이 뛰어난 식품 조성물을 제조할 수있다.
더불어 상기 칸디다 유틸리스 SY8-M2-1의 추출물, 배양액 또는 엑기스를 제공한다.
상기 칸디다 유틸리스 SY8-M2-1(Candida utilis SY8-M2-1) 은 2010년 3월 31일 한국 미생물보존센터(Korean Culture Center of Microorganisms)에 미생물 기탁번호 KFCC11487P로 기탁되었다.
더욱 바람직하게는 글루타티온 효모 제조 방법은 칸디다 속(Candida) 효모에 변이 유도원을 처리하는 단계를 포함하며 상기 글루타티온 효모 제조 방법은 상기 단계 이후, 변이 유도원을 처리한 칸디다 속 효모 균체 중 배지(culture medium, 培地)에서 생장 가능한 균체를 선별하는 단계를 더 포함할 수있다.
또한, 본 발명은 글루타티온 효모 추출물의 제조 방법을 제공한다. 본 발명의 일측면에서, 상기 글루타티온 효모 추출물의 제조 방법은 칸디다 속 효모에 변이 유도원을 처리하는 단계;
상기 단계에서 변이 유도원(physical mutagen)을 처리한 효모 균체 중 배지에서 생장 가능한 균체를 선별하는 단계; 및 상기 단계에서 선별한 효모 균체에 세포벽 분해 효소, 핵산 분해 효소, AMP(acide adenosine-monophosphate 아데노신 일인산) 전환 효소 및 글루타티온 효소 분해 효소 중 하나 이상을 처리하여 효소 분해하는 단계를 포함할 수도 있다.
예컨대 상기 칸디다 속 효모는 칸디다 속에 속하는 것으로, 당업자가 용이하게 본원을 실행하기 위해서는 입수 가능한 모든 효모를 포함할 수 있고 상기 칸디다 속(Candida sp) 효모는 칸디다 유틸리스(Candid utilize)(기탁기관: 한국미생물보존센터, 기탁번호: KCCM50342)을 포함한다.
본 발명의 일측면에서, 상기 변이 유도원은 일반적으로 균주에 변이를 유도할 수 있는 모든 수단을 포함하고 변이 유도원은 화학 물질, 방사선 또는 UV를 포함할 수 있다. 상기 UV는 5-10분 동안 2회 이상 칸디다 속 효모에 처리될 수 있으며 효모에 5-10분 동안 2회 내지 5회 이상도 처리될 수있다.
상기한 일 실시 예인 상기 제조 방법에 의해 제조된 글루타티온 효모는 칸디다 유틸리스 SY8-M2-1(Candida utilis SY8-M2-1) (기탁기관: 한국미생물보존센터, 기탁번호: KFCC11487P) 또는 그의 추출물을 포함토록 하며 칸디다 속 효모에 변이 유도원을 처리하는 단계 이후, 상기 효모를 배지에서 배양하는 단계를 더 포함할 수 있으며 효모 균체 중 배지에서 생장 가능한 균체를 선별하는 단계에서, 상기 배지는 효모 배양용 배지로 사용될 수 있는 모든 배지, 예를 들어 YM 배지인 효모 (yeast), 곰팡이 (mold) 그리고 산성에서 견디는 미생물들을 배양할 때 사용하는 YM 배지를 포함한다.
한편, 상기 배지는 이스트 추출물(yeast extract), 글루코오스(glucose), NH4 H2 PO4 및 L-시스테인(cystein)을 포함하는 배지를 포함할 수 있고 상기 배지는 총 배지 부피당 3.0-5.0%(v/v)의 이스트 추출물, 1.0-3.0%(v/v)의 글루코오스, 0.01-0.1%(v/v)의 NH4 H2 PO4 및 0.01-0.1%(v/v)의 L-시스테인을 포함할 수 있다. 바람직하게는 상기 배지는 글루코오스(glucose), 펩톤(peptone), 이스트 추출물(yeast extract) 및 말토스 추출물(maltose extract)을 포함하며 상기 배지는 총 배지 부피당 1.0%(v/v) 글루코오스, 0.5%(v/v) 펩톤, 0.3%(v/v) 이스트 추출물 및 0.3%(v/v) 말토스(maltose)추출물을 더 포함할 수있다.
한편, 상기 효모 균체 중 배지에서 생장 가능한 균체를 선별하는 단계는 상기 배지에서 생장 가능한 균체를 분리하여 글루타티온 함량이 높은 균체를 선별하는 과정을 포함할 수 있고 상기 배지는 이스트 추출물, 글루코오스, 인산암모늄(NH4H2PO4) 및 L-시스테인을 포함하는 배지일 수있다.
또한, 상기 효모 균체를 배양하여 선별하는 단계 이후, 상기 효모 균체를 원심 분리하는 단계를 더 포함할 수 있으며 상기 원심 분리는 관형 원심분리기, 연속식 원심분리기, 연속식 고액 분리, 농축 장비 등을 이용하여 시행할 수 있으나, 본원에서는 분리단계나 방법을 한정이나 제한하지 않는다.
상기 효소를 분해하는 단계는 세포벽 분해 효소, 핵산 분해 효소, AMP 전환 효소 및 글루타티온 효소 분해 효소 중 하나 이상을 처리하는 과정을 포함하며 상기 세포벽 분해 효소의 예로는 글루카나제(glutamate)를 들 수 있고, 핵산 분해 효소의 예로는 포스포디에스트라제(phosphodiestrase)를 들 수 있으며, AMP 전환 효소의 예로는 디아미나제(delaminate)를 들 수 있고, 글루타티온 효소 분해 효소의 예로는 알칼리제(alcalase), 플레보자임(flavorsome)을 적용할 수도 있으며 pH 5~9, 온도 대략 30~80℃에서 1~3일간 동안 진행될 수 있고 상기 조건 및 시간은, 분해 효소에 의한 분해 효율을 고려한 것이다.
상기 글루타티온 효모 추출물의 제조 방법은, 효소 분해하는 단계 이후, 반응 생성물을 원심 분리 및 활성탄 처리를 통해 탈색 및 탈취한 후 여과하여 농축하는 단계를 더 포함한다. 이러한 후 처리 단계를 통해, 특유의 효모 체취를 제거하여 제조된 효모 추출물의 상품 가치를 높이고, 활용 범위를 넓히는 효과가 있다.
한편 상기 글루타티온 효모는 100 내지 200 μ g-글루타티온/mL을 포함할 수 있으며 상기 글루타티온 효모는 110 내지 170 μ g-글루타티온/mL을 포함할 수 도있다.
상기 글루타티온 효모는 일례로 건조 균체 중량당 50 내지 100㎎-글루타티온/g을 포함할 수 있으며 건조 균체 중량당 60 내지 90㎎-글루타티온/g을 포함할 수 있고 상기 글루타티온 효모는 1-10 mg/ml 농도 범위에서 30-90%의 DPPH 라디칼 소거능을 가질 수 있다 상기 글루타티온 효모의 DPPH 라디칼 50%를 소거함에 필요한 농도인 IC50 값은 야생 균주 또는 그의 추출물에 비해 3배 이상 작게 할 수도 있다.
초기 pH가 4인 경우 40mg/L 정도의 높은 글루타티온이 생산되었으며 배양온도에 따른 글루타티온의 생산은 30℃에서 가장 높게 나타났다. 그리고 최소 배지에 첨가한 시스테인은 배양 12 시간이 지나자 글루타티온의 생산성이 높게 나타났다.
또한, 생물 반응기를 이용한 회분식 배양에서 기질 농도에 따른 세레비세에 (S=Saccharomyces) 효모의 성장 특성 및 글루타티온 생산은 글루코오스 농도 30g/L에서 글루타티온 생산량이 70 mg/L로 가장 높았다.
최소 배양액에 배양 초기에 0.5% (v/v) 글라이신과 글루탐산을 각각 첨가하고 배양 11시간에 시스테인을 0.5% (v/v) 추가로 첨가한 경우에 글루타티온의 생산량이 많았다. 회분식 배양 후 기질을 첨가하는 유가식 발효 공정에서는 반응기 내 글루코오스 농도가 0.5 g/L 이하로 유지되도록 글루코오스를 계단식으로 공급하였을 때 글루타티온은 약 102 mg/L로 높은 생산량이 발생 하였다.
한편, 2차원 형광 센서를 이용하여 글루타티온 생산 공정의 모니터링은 배양액의 배지 조성이나 성장 특성 등 배양기 내의 환경 변화에 따라 형광 영역 및 세기가 다르게 나타났으며 형광 데이터는 기질 및 생산물 그리고 균체 성장 등의 각종 공정 변수와 좋은 상관성을 보였다.
일 실시 예에 의한 발효조건으로 30℃, pH 6.0, 교반속도 300 rpm, 통기량 3.0 vvm에서 72시간 만에 255.8mg/L을 생산하는 것을 개시하고 글루타티온 생산성 효모 균주 S. cerevisiae FF-8 (KACC 93023)을 글루코오스 3%(w/v), 효모추출물 3%, KH2 PO4 0.06%, L-cysteine 0.06%의 배양용 배지를 첨가한 발효조에서 배양온도 30℃, 초기 pH 6.0, 교반속도 200 rpm, 공기공급속도 3.0 vvm, 내부압력 0.8 kgf/㎠ 조건에서 본원의 글루타티온을 생산하게 됨이 더욱 바람직하다.
한편, 상기 추출에 있어서,추출 조건에는 특별한 제한은 없으며 일반적인 중탕법을 사용할 수 있다. 물을 용매로 사용하여 추출할 때 물의 양에는 특별히 제한이 없으나, 추출 온도 및 시간을 고려할 때 추출체의 총중량에 대하여 10배 내지 100배를 사용할 수 있고, 추출 조건은 30° C 내지 100° C이며 1일~3일 동안 추출할 수 있다.
본 발명의 통기방식이나 발효조는 공기 또는 산소 및/또는 이들의 혼합물 중의 하나를 통기 시켜 수행될 수 있으며 글루타티온을 획득하기 위해서 유리하게 통기 되는 발효조에서 수행된다. 바람직한 발효조는 통기 진탕형 또는 에어-리프트(air-lift) 발효조가 바람직하고 플라스크 및 상이한 발효조에서도 수행될 수도 있다.
상기 조성물은, 본 발명이 목적으로 하는 주 효과를 손상시켜지 않는 범위 내에서 주 효과에 상승효과를 줄 수 있는 다른 성분 등을 함유할 수 있다. 예를 들어, 물성 개선을 위하여 향료, 색소, 살균제, 산화 방지제, 방부제, 보습제, 점증제, 무기염류, 유화제 및 합성 고분자 물질 등의 첨가제를 더 포함할 수도 있다.
그 외에도, 수용성 비타민, 유용성 비타민, 고분자 펩티드, 고분자 다당 및 해초 엑기스 등의 보조 성분을 더 포함할 수도 있으며 상기 성분들은 제형 또는 사용 목적에 따라서 당업자가 어려움 없이 예의 선정하여 배합할 수 있으며, 그 첨가량은 본 발명의 목적 및 효과를 손상시키지 않는 범위 내에서 선택될 수있다.
더욱 바람직하게는 상기 조성물은 본 발명이 목적으로 하는 주 효과를 손상시키지 않는 범위 내에서 향료,색소,살균제,산화방지제, 방부제,보습제,점증제,무기염류,유화제,부형제,합성 고분자 물질 등의 첨가제를 더 포함할 수 있을 그뿐만 아니라,비타민,고분자 펩티드, 고분자 다당 및 해초 액기스 등의 보조 성분 및 기타 용매를 더 포함 시킬수도 있다.
상기 첨가제, 보조성분 및 기타 용매의 구체적인 예가 크게 한정되는 것은 아니
며 그 첨가량 또한 본 발명의 목적 및 효과를 손상시키지 않는 범위 내에서 크게 한정되지 않는다.
또한, 상기 글루타티온 조성물의 제형의 예가 크게 한정되는 것은 아니며,
예를 들어,용액,유화물,점성 혼합물, 타블렛,환, 캡슐, 팩, 분말 등의 다양한 형태일 수 있으며,단순 음용,주사 투여, 스프레이 방식 등의 다양한 방법으로 적용될 수있다.
또한, 글루타티온 조성물은 상기 균주에 의한 발효 단계 이후에,알코올을 포함한 용매를 이용하여 추출하는 단계; 및 상기 추출물을 농축하는 단계를 포함하는 조성물의 추출물의 농축액이나 건조 분말을 포함한다.
한편, 생산에 사용되는 광물질 염은 배양용 배지에 따라 다양하며 나트륨, 칼륨, 마그네슘, 황산염, 염산염, 질산염 이온을 제공하는 가용성 무기염이 사용될 수 있다. 이런 염은, 예를 들면, 일가 염기의 인산 칼륨, 황산 마그네슘, 일가 염기의
황산칼륨, 질산나트륨이 될 수 있으며 탄산칼슘의 첨가도 가능하다.
다음으로 일실시예에의한 본원 도면에 대하여 상세히 설명하면 다음과 같다.
도 1은 본 발명의 글루타티온 물질을 유효성분으로 하는 항산화 및 면역강화 조성물의 일 실시 예에 의한 글루타티온의 사슬 구조 도를 나타낸 그림으로 글루타티온은 기본적인 기능은 세포막, DNA의 유지를 도와주며 인지질의 불포화지방산 과산화 방지와 활성산소를 방어한다.
또한 미토콘드리아에서 TCA 회로같은 ATP 생산과정이나 시토크롬 P-450과 같은 산화효소 체계를 통해 유해한 중간산물인 활성산소(자유라디칼)가 생성되는데 글루타티온은 생체 내에서 이를 방어하는 복합적인 방어체계의 한 부분으로 작용하며 효소도 또다른 방어체계를 구성하는데 이 효소의 활성화를 위해서 다른 미량 무기질도 필요하며 글루타티온은 이런 무기질들과의 상호작용이 중요한 것이다.
도 2는 본 발명의 글루타티온 물질을 유효성분으로 하는 항산화 및 면역강화 조성물의 일 실시 예에 의한 글루타티온의 화학식을 나타낸 그림으로 본원 글루타티온의 화학식: C10H17N3O6S,몰 질량: 307.32g/mol,녹는점: 195 °C이다.
도 3은 본 발명의 글루타티온 물질을 유효성분으로 하는 항산화 및 면역강화 조성물의 일 실시 예에 의한 글루타티온의 사이클을 나타낸 그림으로 글루타티온 - 아스 코르 베이트 순환은 신진 대사 과정에서 발생하는 활성 산소 종인 과산화수소 (H2O2)를 해독하는 대사 경로를 갖는다. 주기에는 항산화 물질 인 아스 코르 베이트, 글루타티온 및 NADPH와 이들 대사 산물을 연결하는 효소가 포함된다.
이 경로의 첫 번째 단계에서 H2O2는 ascorbate peroxidase (페록시다아제 아스코르브산염)(APX)에 의해 전자 공여체로 아스코르브산염를 사용하여 물로 환원되며 산화 된 모노데하이드로아스코르빈산염 환원효소(monodehydroascorbate reductase)에 의해 재생되며 아스코르브산염으로 감소되어 산화 된 글루타티온 (GSSG)를 생성하게된다.
도 4는 본 발명의 글루타티온 물질을 유효성분으로 하는 항산화 및 면역강화 조성물의 일 실시 예에 의한 글루타티온 효소의 활성산소 제거과정을 나타낸 그림으로
활성산소는 유리기, 자유기, Free radical 등으로 불리우는 물질로서, 우리 몸속에 들어온 산소가 혈관을 따라 필요 조직으로 운반되는 과정, 또는 에너지로 사용되는 대사과정에서 강한 산화력을 가지게 된 물질을 말하며 사람은 1분에 약 20회 정도의 호흡을 하고, 1회 호흡시 약 500cc 정도의 공기를 들이마시며 즉, 1분동안에는 약 10,000cc 정도의 공기를 마시는데, 이중에서 2,000cc 정도가 산소에 해당하고, 산소의 2% 정도인 40cc가 활성산소가 된다.그래서 사람의 몸 속에서는 하루에 57,600cc의 활성산소가 만들어지게 되며 이러한 활성산소는 우리 몸의 어느곳에서나 생성이 가능하고, 우리 몸을 구성하고 있는 정상 세포를 산화시키며, 세포벽을 붕괴시키게 되며 세포가 산화되는 과정에서 과산화지질이라는 물질이 만들어지는데, 이 물질은 맹독성을 가지고 있으며, 혈관의 탄력성을 떨어뜨려서 동맥경화증을 유발하는 원인이 되고, 동맥경화는 뇌졸중이나 심근경색증 등을 유발하게 된다.
도 5는 본 발명의 글루타티온 물질을 유효성분으로 하는 항산화 및 면역강화 조성물의 일 실시 예에 의한 글루타티온의 기능을 나타낸 그림이고 도 6은 본 발명의 글루타티온 물질을 유효성분으로 하는 항산화 및 면역강화 조성물의 일 실시 예에 의한 글루타티온의 환원 효소를 나타낸 그림으로 글루타티온은 강력한 항산화제로서 다른 항산화제와 같이 작용을 하며 조절자(Regulator) 역할을 한다. 비타민 C나 E는 활성산소를 만나게 되면 글루타티온에 넘겨주고 원래 상태로 돌아가게 된다. 글루타티온분자는 하이드록시 라디칼을 만나 전자를 주어 유해성이 없는 물 분자로 만들고 자신은 다른 자유 라디칼을 가진 글루타티온 분자와 짝을 맺음으로써 독성이 없는 짝지은 글루타티온 분자가 된다.
도 7은 본 발명의 글루타티온 물질을 유효성분으로 하는 항산화 및 면역강화 조성물의 일 실시 예에 의한 글루타티온의 황산화 과정을 나타낸 그림으로우리 몸에는 활성산소를 깨끗한 물로 정화시키는 물질을 가지고 있는데 이것이 바로 항산화 효소인 것으로 항산화 효소는 우리 몸에서 만들어지는 물질로 유리기(활성산소)라는 매연을 물로 정화시키는 일차적인 임무를 맡고 있다.
항산화제가 불안정한 유리기에 전자를 제공하여 유리기를 안정한 상태로 중화시키는 작용을 하는 반면, 항산화 효소는 인체에서 발생되는 유리기(활성산소)를 분해하는 작용을 한다. 항산화 효소인 글루타티온은 노화의 정도나 수명을 평가하는 방법으로 항산화 효소인 글루타티온을 측정하는데, 혈액속에 글루타티온의 농도가 높은 사람은 질병이 적고 혈압이 낮으며, 체지방이 적은 경향이 있다.
특히 에이즈, 암 그리고 자가 면역질환을 가진 사람들의 혈액 속에는 글루타티온의 수치가 떨어져있으며 이와 같이 글루타티온은 인체에서 가장 많이 생성되는 항산화 효소로 세포나 혈액속의 콜레스테롤의 산화를 방지하는 강력한 항산화 효소인 것이다.
도 8은 본 발명의 글루타티온 물질을 유효성분으로 하는 항산화 및 면역강화 조성물의 일 실시 예에 의한 글루타티온 투여후 24시간의 변화를 그림으로 염증성 피부에 글루타티온의 레벨이 높아질수록 호전되는 변화를 가져온것을 알수있었다.
도 9는 본 발명의 글루타티온 물질을 유효성분으로 하는 항산화 및 면역강화 조성물의 일 실시 예에 의한 글루타티온이 포함된 뇌의 해부학적 영역을 나타낸 그림으로 평균 글루타티온 농도를 (inmm)단위로 나타낸 것이다.
도 10은 본 발명의 글루타티온 물질을 유효성분으로 하는 항산화 및 면역강화 조성물의 일 실시 예에 의한 글루타티온의 마이크로 플레이트 리더를 이용한 형광 측정 글루타티온 측정 키트를 나타낸 그림으로 글루타티온 용량 반응은 흑색 고체 96- 웰 플레이트에서 증폭된 마이크로 플레이트 리더를 이용하여 형광 측정 글루타티온을 측정하였다.
도 11은 본 발명의 글루타티온 물질을 유효성분으로 하는 항산화 및 면역강화 조성물의 일 실시 예에 의한 글루타티온의 섭취후 반응을 나타낸 그림으로 글루타티온 5mg과 10mg을 투입한 반응을 나타낸것이다.
도 12는 본 발명의 글루타티온 물질을 유효성분으로 하는 항산화 및 면역강화 조성물의 일 실시 예에 의한 글루타티온의 글루타티온 투입 전 투입 후 반응을 나타낸 그림으로 글루타티온이 함유된 조성물의 영향을 받는 피부 부위에 적용하여 마른버짐 및 기타 염증성 피부 질환을 국소적으로 치료하였고 알파 리포산은 조성물 중 보조 성분으로서 포함될 수 있다.
도 13은 본 발명의 글루타티온 물질을 유효성분으로 하는 항산화 및 면역강화 조성물의 일 실시 예에 의한 글루타티온의 할성산소에 의한 여드름 발생과 깨끗한 피부를 나타낸 그림으로 arbonyl content (protein oxidation) 카르보닐 함량 (단백질 산화)와 malondialdehyde (lipid peroxidation) 말론디 알데히드 (지질 과산화)
글루타티온 분자인 C10H17N3O6S의 볼 스틱 모델. WB Wright (1958 년 9월)의 X- 선 결정 학적 자료. "글루타티온의 결정 구조".글루타티온 분자의 볼 스틱 모델 을 나타낸 것이다.
Figure pat00001
도 14은 본 발명의 글루타티온 물질을 유효성분으로 하는 항산화 및 면역강화 조성물의 일 실시 예에 의한 글루타티온의 황산화 수치에 의한 여드름 발생과 깨끗한 피부를 나타낸 그림이고 도 15는 본 발명의 글루타티온 물질을 유효성분으로 하는 항산화 및 면역강화 조성물의 일 실시 예에 의한 글루타티온의 투입과 여드름의 상관관계를 나타낸 그림이고 도 16은 본 발명의 글루타티온 물질을 유효성분으로 하는 항산화 및 면역강화 조성물의 일 실시 예에 의한 글루타티온의 염증성 여드름의 특정수준을 나타낸 그림으로 인체내에 글루타티온 수치가 높아질수록 염증성 피부가 완화되는 것을 알수가 있었다.
도 17은 본 발명의 글루타티온 물질을 유효성분으로 하는 항산화 및 면역강화 조성물의 일 실시 예에 의한 글루타티온의 세포내 글루타티온의 합성과 분해과정을 나타낸 그림으로 GSH의 분해는 감마-글루타밀 전이효소(glutamyl transpeptidase)에 의하여 촉매되며 글루타메이트(glutamate)와 씨스테인사이의 결합이 끊어지며 일어난다. 이때 글루타메이트 잔기가 수용체 아미노산으로 이동된다.
이어서 아미노산 2개가 붙어있는 형태인 Cys-Gly 다이펩타이드는 효소 디펩티다아제 (dipeptidase)에 의하여 분해되고 Glu-aa는 효소에 의하여 아래의 순서로 분해된다.
Glu-Cys-Gly + aa → Glu-aa + Cys-Gly
Cys-Gly → Cys + Gly
Glu-aa → 5-oxoproline + aa
이외에도 GSH-특이 효소인 카르복시펩티다아제(carboxypeptidase)와
글루타밀 옥소프롤린라제 (glutamyl-cyclotransferase)가 관여하는 GSH 분해경로와는 다른 대체 분해경로를 가지고 있을 수도 있다.
그리고 Glu-Cys-Gly → Glu-Cys + Gly Glu-Cys → 5-oxoproline + Cys 분해 경로의 마지막 단계에서는 효소 5 옥소프롤린라제에 의해서 5 옥소프롤린(5-oxoproline) 이 글루타메이트로 전환된다
한편, 본원에서 제조된 글루타티온 효소 조성물 전체중량 100중량 %에 대하여 글루타티온 5~70중량 %가 투입되고 여기에 부원료들인 비타민(Vitamin), 병안류(柄眼類, Stalemate). 올리고당(oligonucleotide), 칼슘(calcium), 마그네슘(as Magnesium Oxide), 카복실산(Carboxylic acid), 징크옥사이드(Zinc Oxide), 구리(Cupric Oxide), 망간(Manganese Sulfate), 몰리브덴(Sodium Molybdenum) ,클로라이드(Potassium Chloride), 포타슘(Potasssium Chloride) 아미노에테인술폰산(aminoethanesulfonic acid), 콜라겐(collagen), 키토산(Chinos), 요오드(Iodine), 펜토테닉산(Antithetic Acid) ,비오틴(Biotin), 카테킨(Catching), 폴리페놀(polythene), 밀크티슬(Milk Thistle), 버섯류(fungi), 동충하초(cordyceps)정제 수, 감미료, 알코올 중 선택된 어느 하나 이상의 물질이 상기 글루타티온 조성물에 30~95중량 %가 투입되되; 약제학적으로 허용 가능한 통상의 부형제나 운반체 또는 보조제를 더 포함하여 혼합이나 희석 등의 방법으로 제품을 완성한다.
바람직하게는 상기 글루타티온 조성물은 시트르산(citric acid), 글리신(lysine), 글루코오스(glucose),글루탐산 모노 나트륨(monosodium glutamate), 글루코아밀라아제(glaucoma), 글루타메이트(glutamate), 규산염 광물(硅酸鹽鑛物, silicate minerals)의 층 내에 삽입되어 있는 글루타티온-몬모릴로나이트(Montmorillonite)혼성체를 더포함하여 글루타티온 조성물로 제조될수있다.
더욱 바람직하게는 글루타티온 조성물 전체중량 100중량 %에 대하여 주원료인 글루타티온 5~70중량 %가 투입되고 여기에 부원료인 비타민(Vitamin), 병안류(柄眼類, Stalemate). 올리고당(oligonucleotide), 칼슘(calcium), 마그네슘(as Magnesium Oxide), 카복실산(Carboxylic acid), 징크옥사이드(Zinc Oxide), 구리(Cupric Oxide), 망간(Manganese Sulfate), 몰리브덴(Sodium Molybdenum) ,클로라이드(Potassium Chloride), 포타슘(Potasssium Chloride) 아미노에테인술폰산(aminoethanesulfonic acid), 콜라겐(collagen), 키토산(Chinos), 요오드(Iodine), 펜토테닉산(Antithetic Acid) ,비오틴(Biotin), 카테킨(Catching), 폴리페놀(polythene), 밀크티슬(Milk Thistle), 버섯류(fungi), 동충하초(cordyceps)정제 수, 감미료, 알코올, 물질중 선택된 어느 하나 이상의 물질이 상기 글루타티온 조성물에 30~95중량%가 투입되되;
상기 글루타티온 조성물에 투입된 부원료는 엑소펩티다아제(exopeptidase)와 엔도 펩티다아제(endopeptidase)를 포함한 프로테아제(protease), 리파아제(lipase), 라티움(raktium)을 포함한 단당류(單糖類, monosaccharide) 또는 다당류(多糖類, polysaccharide)를 더 포함할수도 잇다.
더욱 바람직하게는 상기 글루타티온의 성분의 취득은 식물성 또는 동물성, 광물질 중, 화학물질 중 선택된 적어도 어느 하나 이상으로 한다.
더불어 상기 글루타티온의 성분은 유기성 또는 무기성인 것을 특징으로 하는 글루타티온 효소를 유효성분으로 하는 상기 글루타티온 조성물은 갈락토미세스 나이아신(galactomycetanise),나이신아미드(niacin amide),카로티노이드(carotene), 베타카로틴(β-carotene), 레티놀(retinal), 레티노이드(retina), 프로바이오닉스(Robotics), 브로멜라인(Bromeliad), 덱스트린(dextrin),콜린(choline),레시틴(Lecithin)이노시톨(inositol),엘-오르니틴(L-Corinthian), 엘-아스파르트산(L-aspartame), 엘셀레늄(L-Selenomethionine),엘라이신(L-Lysine), 엘트레오닌(L-threonine) , 엘메티오닌(L-methionine), 엘아르기닌(L-arginine), 엘글리신(L-glycine),엘시스틴(L-cystine), 엘엘트레오닌( L-threonine) 엘이소류신(L-Isoleucine),엘 페닐알라닌(L- Phenylalanine), 엘트립토판(L-Tryptophan), 엘카르니틴틴(L- carnitine), 엘 세린(L-Seine), 엘티로신(L-Tyrosine) 엘타우린(L-Taurine )엘프롤린(L-Proline) 중 택일된 어느 하나 이상이 투입될 수도 있다.
상기 글루타티온 조성물은 아미노산(amino acid) 및 단백질을 포함하며 상기 글루타티온 조성물은 식물의 잎, 줄기, 꽃, 뿌리 씨,열매로 이루어진 군에서
선택된 어느 하나의 재료의 조성물이며 바람직한 동식물 추출물로서는 허브나 야채, 채소, 버섯 등에서 선택되어 사용되며 예컨대 차 추출물, 장미 추출물, 황금초 추출물, 삼백초 추출물, 황백초 추출물, 메릴로트 추출물, 광대수염 추출물, 감초 추출물, 작약 추출물, 비누 패랭이꽃 추출물, 수세미 추출물, 키나 추출물, 범의귀 추출물, 클라라 추출물, 연 추출물, 회향 추출물, 벚꽃 추출물, 장미 추출물, 지황 추출물, 레몬 추출물, 자근 추출물, 알로에 추출물, 창포 뿌리 추출물, 유카리 추출물, 쇠뜨기 추출물, 선사 추출물, 타임 추출물, 해초 추출물, 오이 추출물, 정향풀 추출물, 나무딸기 추출물, 멜리사 추출물, 당근 추출물, 마로니에 추출물, 복숭아 추출물, 복숭아잎 추출물, 뽕나무 추출물, 수레국화 추출물, 하마멜리스 추출물, 감초 추출물, 은행나무 추출물, 노루발 풀 추출물 등의 식물 추출물이나 태반 추출물, 콜라겐 등의 동물 추출물 등을 들 수있다.
더불어 상기 글루타티온 조성물은 상기 글루타티온 조성물은 산제, 용액,점성혼합물,타블렛,환,주사제,과립제, 정제, 캡슐제, 현탁액, 마스크 팩, 에멀션, 시럽, 갤, 에어로졸, 연고, 크림, 드링크제로 구성된 군으로부터 선택된 적어도 하나 이상의 제형인 것을 특징으로 하며 더욱 바람직하게는 상기 글루타티온 조성물은 주원료인 글루타티온 조성물 전체중량 100중량 %에 대하여 글루타티온 조성물의 총 중량을 기준으로 1ppm(w/w) 이상이 투입되고 여기에 부원료인 비타민(Vitamin), 병안류(柄眼類, Stalemate). 올리고당(oligonucleotide), 칼슘(calcium), 마그네슘(as Magnesium Oxide),카복실산(Carboxylic acid), 징크옥사이드(Zinc Oxide), 구리(Cupric Oxide), 망간(Manganese Sulfate),몰리브덴(Sodium Molybdate) ,클로라이드(Potassium Chloride), 포타슘(Potasssium Chloride) 아미노에테인술폰산(aminoethanesulfonic acid), 콜라겐(collagen), 키토산(Chinos), 요오드(Iodine), 펜토테닉산(Antithetic Acid) ,비오틴(Biotin) ,카테킨(Catechin),폴리페놀(polythene), 밀크티슬(Milk Thistle), 버섯류(fungi), 동충하초(cordyceps)정제 수, 감미료, 알코올, 물질중 선택된 어느 하나 이상의 물질이 상기 글루타티온은 조성물의 총 중량을 기준으로 1ppm(w/w) 이상이 투입될 수도 있게된다.
더더욱 바람직하게는 조성물의 총 중량%를 기준으로 글루타티원 원재료와 부재료의 농도를 각각 0.1ppm(w/w) 내지 5,000ppm(w/w)의 농도로 제조할 수도 있으며 농도는 제한하지는 않는다.
아울러 상기 글루타티온 조성물에 투입된 부원료는 엑소펩티다아제(exopeptidase)와 엔도 펩티다아제(endopeptidase)를 포함한 프로테아제(protease), 리파아제(lipase), 라티움(raktium)을 포함한 단당류(單糖類, monosaccharide) 또는 다당류(多糖類, polysaccharide)를 더포함하여 제조할수있다.
본 발명의 바람직한 구체 예에서, 글루타티온은 5-50 중량 %, 더욱 바람직하게는 5-70 중량 %의 매우 높은 농도 수준으로 운반체 중에 제공되며 글루타티온 함유량의 증가 및 상기 바이오메스로부터의 글루타티온의 빠르고 효과적인 분리를 개선해 줄 수 있는, 글루타티온 생산에 대한 효율적인 방법을 제공한다.
상기의 비타민 및 미네랄 혼합물의 조성비는 비교적 건강기능식품에 적합한 성분을 바람직한 실시 예로 혼합 조성하였지만, 사용용도와 그 배합비를 임의로 변형 실시하여도 무방하다.
이상 설명한 본원은 본 발명이 속한 기술분야에서 통상의 지식을 가진 자에 의하여 다양한 변형이나 응용이 가능하며, 본 발명에 따른 기술적 사상의 범위는 아래의 특허청구범위에 의하여 정해져야 할 것이다.
글루타티온은 그의 환원 형태에서, 훌륭한 항산화제 및 그러므로 고등 유기체에 대한 자유라디칼에 의해 야기된 손상에 대해 방어를 구성하는 화합물이다. S-아세틸-글루타티온은 산화로부터 글루타티온을 보호하고, 동시에 가수분해에 의해 그를 쉽게 해리하는 그의 합성 유도체이다.
본 발명의 바람직한 구체 예에서, 글루타티온은 5-50 중량 %, 더욱 바람직하게는 5-70 중량 %의 매우 높은 농도 수준으로 담체 중에 제공되며 글루타티온 함유량의 증가 및 상기 바이오메스로부터의 글루타티온의 빠르고 효과적인 분리를 개선해 줄 수 있는, 글루타티온 생산에 대한 경제적인 방법을 제공한다.
상기의 비타민 및 미네랄 혼합물의 조성비는 비교적 건강기능식품에 적합한 성분을 바람직한 실시 예로 혼합 조성하였지만, 그 배합비를 임의로 변형 실시하여도 무방하며 식품,의료,화장품,로션,선크림,보습제등에 널리 사용할수가 있다.

Claims (8)

  1. 글루타티온 조성물 전체중량 100중량 %에 대하여 주원료인 글루타티온 물질 5~70중량 %가 투입되고 여기에 부원료로는 동식물 추출물,허브,야채,채소,버섯,
    비타민(Vitamin), 병안류(柄眼類, Stalemate). 올리고당(oligonucleotide), 칼슘(calcium), 마그네슘(as Magnesium Oxide),카복실산(Carboxylic acid), 징크옥사이드(Zinc Oxide), 구리(Cupric Oxide), 망간(Manganese Sulfate), 몰리브덴(Sodium Molybdenum) ,클로라이드(Potassium Chloride), 포타슘(Potasssium Chloride) 아미노에테인술폰산(aminoethanesulfonic acid), 콜라겐(collagen), 키토산(Chinos), 요오드(Iodine), 펜토테닉산(Antithetic Acid) ,비오틴(Biotin), 카테킨(Catching), 폴리페놀(polythene), 밀크티슬(Milk Thistle), 동충하초(cordyceps)정제 수, 감미료, 알코올 중 선택된 어느 하나 이상의 물질이 상기 글루타티온 조성물에 30~95중량 %가 투입되며 여기에 부형제, 운반체 또는 보조제를 더 포함하여 상기 조성물에 투입된 것을 특징으로 하는 글루타티온 물질을 유효성분으로 하는 항산화 및 면역강화 조성물.
  2. 청구항 제1항에 있어서,
    상기 글루타티온 조성물은 시트르산(citric acid), 글리신(lysine), 글루코오스(glucose)글루탐산 모노 나트륨(monosodium glutamate), 글루코아밀라아제(glaucoma), 글루타메이트(glutamate), 규산염 광물(硅酸鹽鑛物, silicate minerals)의 층 내에 삽입되어 있는 글루타티온-몬모릴로나이트(Monitorial)성체중 적어도 하나 이상을 더 포함하는 것을 특징으로 하는 글루타티온 물질을 유효성분으로 하는 항산화 및 면역강화 조성물.
  3. 글루타티온 조성물 전체중량 100중량 %에 대하여 주원료인 글루타티온 물질 5~70중량 %가 투입되고 여기에 부원료로는 동식물,추출물,허브,야채,채소,버섯,
    비타민(Vitamin), 병안류(柄眼類, Stalemate). 올리고당(oligonucleotide), 칼슘(calcium), 마그네슘(as Magnesium Oxide),카복실산(Carboxylic acid), 징크옥사이드(Zinc Oxide), 구리(Cupric Oxide), 망간(Manganese Sulfate), 몰리브덴(Sodium Molybdenum) ,클로라이드(Potassium Chloride), 포타슘(Potasssium Chloride) 아미노에테인술폰산(aminoethanesulfonic acid), 콜라겐(collagen), 키토산(Chinos), 요오드(Iodine), 펜토테닉산(Antithetic Acid) ,비오틴(Biotin), 카테킨(Catching), 폴리페놀(polythene), 밀크티슬(Milk Thistle), 동충하초(cordyceps)정제 수, 감미료, 알코올, 물질중 선택된 어느 하나 이상의 물질이 상기 글루타티온 조성물 100중량 %에 대하여 30~95중량 %가 투입되되; 상기 글루타티온 조성물에 투입된 상기 부원료는 엑소펩티다아제(exopeptidase)와 엔도 펩티다아제(endopeptidase)를 포함한 프로테아제(protease), 리파아제(lipase), 라티움(raktium)을 포함한 단당류(單糖類, monosaccharide) 또는 다당류(多糖類, polysaccharide)를 택일된 어느 하나를 더 포함하는 것을 특징으로 하는 글루타티온 물질을 유효성분으로 하는 항산화 및 면역강화 조성물.
  4. 청구항 제1항 또는 3항 중 어느 한 항에 있어서,
    상기 글루타티온의 취득은 식물성, 동물성, 광물질, 화학물질, 유기성 또는 무기성 물질에서 선택된 적어도 어느 하나 또는 하나 이상의 물질에서 취득하여 사용하는 것을 특징으로 하는 글루타티온 물질을 유효성분으로 하는 항산화 및 면역강화 조성물.
  5. 청구항 제1항 또는 3항 중 어느 한 항에 있어서,
    상기 글루타티온 조성물은 갈락토미세스 나이아신(galactomycetanise),니아신아미드(niacin amide), 카로티노이드(carotene), 베타카로틴(β-carotene), 레티놀(retinal), 레티노이드(retina), 프로바이오닉스(Robotics), 로멜라인(Bromeliad), 덱스트린(dextrin),콜린(choline),레시틴(Lecithin)이노시톨(inositol),엘오르니틴(L-Corinthian), 엘아스파르트산(L-aspartame), 엘 셀레늄(L-Selenite), 엘라이신(L-Lysine), 엘트레오닌(L-threadiness), 엘메티오닌(L-methionine), 엘아르기닌(L-arginine), 엘글리신(L-glycine), 엘시스틴(L-cystine), 엘엘트레오닌( L-threonine) 엘이소류신(L-Isoleucine),엘 페닐알라닌(L- Phenylalanine), 엘트립토판(L-Tryptophan), 엘카르니틴틴(L- carnitine), 엘 세린(L-Seine), 엘티로신(L-Tyrosine) 엘타우린(L-Taurine )엘프롤린(L-Proline) 중 선택된 어느 하나 이상이 투입된 것을 특징으로 하는 글루타티온 물질을 유효성분으로 하는 항산화 및 면역강화 조성물.
  6. 청구항 제5항에 있어서,
    상기 글루타티온 조성물은 아미노산(amino acid) 및 단백질이 포함되며;
    상기 글루타티온 조성물은 식물의 잎, 줄기, 꽃, 뿌리 씨, 열매로 이루어진 군에서
    선택된 적어도 어느 하나 또는 하나 이상의 조성물이며 상기 글루타티온 조성물은 글루타티온 효모 추출물을 더 포함하는 것을 특징으로 하는 글루타티온 물질을 유효성분으로 하는 항산화 및 면역강화 조성물.
  7. 청구항 제6항에 있어서,
    상기 글루타티온 조성물은 산제, 용액, 점성혼합물, 타블렛, 환, 주사제, 정제, 캡슐제, 현탁액, 마스크 팩, 에멀션, 시럽, 갤, 에어로졸, 연고, 크림, 드링크제로 구성된 군으로부터 선택된 어느 하나인 것을 특징으로 하는 글루타티온 물질을 유효성분으로 하는 항산화 및 면역강화 조성물.
  8. 글루타티온 조성물 전체중량 100중량 %에 대하여 글루타티온 1ppm(w/w) 이상이 투입되고 여기에 부원료인 비타민(Vitamin), 병안류(柄眼類, Stalemate). 올리고당(oligonucleotide), 칼슘(calcium), 마그네슘(as Magnesium Oxide),카복실산(Carboxylic acid),징크옥사이드(Zinc Oxide), 구리(Cupric Oxide), 망간(Manganese Sulfate),몰리브덴(Sodium Molybdate) ,클로라이드(Potassium Chloride),포타슘(Potasssium Chloride) 아미노에테인술폰산(aminoethanesulfonic acid), 콜라겐(collagen), 키토산(Chinos), 요오드(Iodine), 펜토테닉산(Antithetic Acid) ,비오틴(Biotin) ,카테킨(Catechin),폴리페놀(polythene), 밀크티슬(Milk Thistle), 버섯류(fungi), 동충하초(cordyceps)정제 수, 감미료, 알코올, 물질중 선택된 어느 하나 이상의 물질이 상기 글루타티온은 조성물의 총 중량을 기준으로 1ppm(w/w) 이상이 투입되되;
    상기 글루타티온 조성물에 투입된 부원료는 엑소펩티다아제(exopeptidase)와 엔도 펩티다아제(endopeptidase)를 포함한 프로테아제(protease), 리파아제(lipase), 라티움(raktium)을 포함한 단당류(單糖類, monosaccharide) 또는 다당류(多糖類, polysaccharide), 아미노산(amino acid) 및 단백질 중 적어도 어느 하나 또는 하나 이상을 더 포함하는 것을 특징으로 하는 글루타티온 물질을 유효성분으로 하는 항산화 및 면역강화 조성물.
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.8g/l에 이르는 총 글루타티온 생산을 극대화하기 위해서 반응기에서 일정한 시스테인 농도를 유지시켜야 한다고 교시한다.
글루타티온 대사작용에서의 효소 작용 및 수송 작용은 다음에서 다루어진다 : [참조문헌: Meister 'Selective Modification Of Glutathione Metabolism', Science, volume 220, No.4596,472-477 (1983)]한편, 유데 K, O 및 아크레모이츠는 문헌[참조: 'High-gltathione containing yeast Saccharomyces cerevisiae: optimization of production', Acta Microbiologica Polonica, 1997, vol.46, No.1, 105-114] 에서 글루타티온을 고 함량으로 함유하는 효모 에스. 세레비지애 S-8H를 사용하여, 1.6 g/l의 글루타티온 평균 수율 및 건조 바이오 매스 17㎎/g의 글루타티온함량을 수득하는 글루타티온 수율을 극대화하는 방법에 대해서 논의하고 있다.
기타 논문 등에서 글루타티온은 수송 및 세포 방어에서뿐만 아니라 다양한 대사 과정에서 결정적인 역할을 한다. 그것은 단백질과 다른 분자들과의 이황화물 결합의 환원, DNA의 데옥시리보뉴클레오타이드 전구물질의 합성, 대사작용의 다양한 단계에서 형성되는 많은 활성 산소 매개체 (예를 들면, 과산화물) 및 자유 라디칼(free radical)의 해로운 효과로부터 세포 보호를 수행한다.
더불어 알파파라 씨. 등은 문헌[참조: 'Cysteine addition strategy for maximum glutathione production in fed-batch culture of Saccharomyces cerevisiae ', Appl. Microbiol. Biotechnol., 1992, 37, 141-146]에서 발효 기간동안, 약 0
더불어 치-지엔 리오 등은 문헌[참조: 'Medium optimization for glutathione production by Saccharomyces cerevisiae ',Process Biology, vol.34, 1999, 17-23] 에서 효모 균주에서 글루코오스, 펩톤 및 황산 마그네슘이 세포 성장과 글루타티온생산에 적합하고, 글루타티온생산은 평균 26-28㎎/l까지, 최고치는 124.93㎎/l에 이른다고 보고하고 있다.
또 다른 선행기술로는 미국 특허 제3,948,569호 (Kalopissis)는 다양한 두피 및 모발 적용 및 과다 피지 분비를 치료 (combat)하기 위한, 글루타티온의 S-치환된 직쇄형 및 분지형 알킬 및 알케닐 유도체의 용도를 개시하고 있다.
아울러 US 4,582,801에서는 탄소, 질소 및 무기염의 동화할 수 있는 공급원을 포함하는 배양 배지에서, 글루타티온을 생산하는 능력 및 1,2,4-트리아졸 또는 아지드화 나트륨에 대해 내성을 갖는 사카로마이시스(Saccharin)속에 속하는 균주를 배양하여, 미생물 세포 내에 글루타티온을 축적시켜서, 세포를 수거하고, 이로부터 글루타티온을 회수함을 포함하여, 높은 수율(건조 세포 기준으로 약 3-4% 및 약 0.7 -0.9% g/l)로 글루타티온를 생산하는 방법이 여러 특허에서 나타나고 있다.
아울러 미국특허출원 2004/0147452 (Yu)는 광범위한 상태에 대해 국소적용을 위한 비-양쪽성 (non-amphoteric) N-아실 글루타티온 유도체의 용도를 제시한다.
한편, Neuroscience 138:1161-1170 (2006) (Perlugig et al.)은 알츠하이머 질환을 치료하기 위해 신경 세포에서 글루타티온 수준의 향상을 달성하기 위한 트리시클로데칸-9-일-크산토게네이트의 용도를 개시한다. WO 2009/047728 (Liguri)은글루타티온의 친유성 유도체가 알츠하이머 질환 및 헌팅턴 무도증을 치료하는데 유용하다는 것을 개시한바있다.
한편, 균주 컬렉션에서 글루타티온은 GN/2222로 동정 되고, '내셔널 컬렉션 오브 이스트 컬쳐스'(NCYC)에서 2000년 10월 24일자로 기탁된, 수탁번호 NCYC 2983인 캔디다 보이디니( Candida boidinii )이다.
한편, 미국 특허 제6,011,067호에서는 마른버짐과 같이 피부가 벗겨지는 (desquamating) 염증성 장애의 국소 치료를 위한 보조 약으로서 수개의 상승작용성 항산화제를 포함하는 조성물로서, L-글루타티온 및 셀레늄 화합물을 활성성분으로 포함하는 조성물을 개시하며 Hersh의 개시는 청구된 조성물의 항건선 효과에 대한 두 성분의 존재의중요성을 강조하였다.

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