KR20200108451A

KR20200108451A - 화합물 및 이의 제조방법과 용도

Info

Publication number: KR20200108451A
Application number: KR1020207023106A
Authority: KR
Inventors: 하이펑 자오
Original assignee: 메드스프링 인터내셔널 리미티드
Priority date: 2018-01-12
Filing date: 2019-01-11
Publication date: 2020-09-18
Also published as: EP3738962A1; CN110028501A; JP7318956B2; CA3088303A1; CN110028501B; AU2019207140A1; EP3738962A4; EP3738962B1; US20210078985A1; JP2021510383A; WO2019137463A1

Abstract

본 발명은 식I로 표시되는 화합물 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염, 용매화물 또는 프로드러그에 관한 것으로, 여기서, M은 일가 알칼리 금속이다. 또한, 본 발명은 상기 화합물 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염, 용매화물 또는 프로드러그의 제조방법, 이를 함유하는 약학 조성물 및 약물 제조에 있어서의 이의 용도, 상기 약물의 CCR4-매개 질환의 치료에 관한 것이다.

Description

화합물 및 이의 제조방법과 용도

본 출원은 2018년 1월 12일자로 출원된 중국 발명특허출원 제201810032410.2호, 발명의 명칭 "화합물 및 이의 제조 방법과 용도"에 기초한 우선권을 주장하며, 그 모든 내용은 참고문헌으로 본 특허 출원에 병합된다.

본 발명은 신규 화합물, 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염, 용매화물 또는 프로드러그에 관한 것이다. 또한, 본 발명은 상기 화합물 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염, 용매화물 또는 프로드러그의 제조방법, 이를 함유하는 약물 조성물 및 약물 제조에 있어서의 이의 용도, 상기 약물의 CCR4-매개 질환의 치료에 관한 것이다.

CCR4(Chemokine Receptor 4)는 1995년에 Christine A.Power 등이 처음으로 발견(Christine AP 등 J. Biol. Chem. 1995, 270(8): 19495-19500)하였으며, 케모카인 수용체(CCR)패밀리에 속하며, 7회 막횡단 G-단백질 결합 수용체이다. CCR4는 MDC(Macrophage-derive chemokine) 및 TARC(thymus andactivation regulated chemokine) (Sadatoshi Maeda 등 VeterinaryImmunology and Immunopathology 2002(90): 145-154)과 같은 2개의 자연적으로 존재하는 특정 리간드가 있다. 최근 새로 발견된 CKLF1(Chemokine-like factor 1)도 이의 리간드 중의 하나이다(Han WL 등 Biochem J, 2001, 357(Pt1): 127-135).

CCR4은 말초혈 백혈구, 흉선세포, 호염기성 백혈구, 단핵세포, 대식세포, 혈소판, IL-활성화된 NK세포, 비장 및 뇌에서 발현될 수 있으며, 다양한 질환에서 중요한 작용을 한다. 인간 알레르기피부염(AD)이 발병하였을 경우, CD4+T세포에서 발현하는 CCR4는 말초혈의 단핵세포(PBMCs)에서 발현이 증가되며, 혈청중의 TARC 수준도 상응하게 증가된다. 이는 세포에서 CCR4의 발현의 화학주성은 TARC로 부터 유도되며, 또한 인간 알레르기피부염의 발병시 Th2 세포를 선택적으로 손상된 피부로 전이하게 하는 것을 표명한다. 알레르기피부염 치료용 약물은 주요하게 항히스타민제의 약물, 기관지 확장증제로써, 이들은 증상만 개선할 수 있을 뿐, 질병의 발전에는 작용을 일으키지 못한다. 또한, 코르티코스테로이드류 화합물도 알레르기피부염에 일정한 작용이 있지만, 안전상의 리스크가 존재한다. 연구에 따르면, MDC 또는 TARC의 길항 작용은 염증부위의 T세포의 응집을 감소시킬 수 있어, CCR4 길항제는 알레르기성 염증의 치료에 아주 효과적일 수 있다. 상기 알레르기성 염증은 알레르기성비염, 알레르기피부염을 포함할 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다.

CCR4은 만성폐쇄성폐렴, 만성기관지염 및 천식과 같은 폐 질환과도 관련이 있는 것으로 밝혀졌다. CCR4는 천식 반응에 관여하는 세포에서 제한적으로 발현할 수 있어, 천식 치료의 좋은 타겟으로 간주된다. 따라서, CCR4 길항제의 개발은 우수한 응용 전망이 있다.

CN101370793A에서는 CCR4-매개 질환에 사용되는 것을 포함하는， 하기 식으로 표시되는 화합물 및 CCR4 길항제로써의 이의 용도를 개시하였다.

,

여기서 각 치환기는 해당 출원에서 정의하여 개시한 바와 같다.

CN102388039A에서는 CCR4 길항제와 관련된 치료에서의 응용을 포함하는 인다졸화합물 및 CCR4길항제로써의 이의 용도를 개시하였다.

,

본 분야에서는 여전히 더 우수한 CCR4 억제 활성을 구비하거나, 또는 물 또는 기타 용매에서의 용해도가 더 높거나, 또는 생체이용율이 더 높은 등과 같이 더 우수한 CCR4 억제제가 필요하다.

본 발명은 식I로 표시되는 화합물, 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염, 용매화물 또는 프로드러그를 제공하며:

여기서, M은 일가 알칼리 금속이다. 예로 M은 Li, Na, K, Rb 또는 Cs이다. M은 바람직하게는 Na 또는 K이다.

본 발명의 일 측면에 따르면, 상기 식I로 표시되는 화합물은 하기와 같다.

본 발명의 식I로 표시되는 화합물의 적합한 약학적으로 허용가능한 염은 예로, 식I로 표시되는 화합물의 산 부가염이며, 예로, 무기산 또는 유기산(예로 염산, 브롬화수소산, 황산, 트리플루오로아세트산, 시트르산 또는 말레산)과 형성된 산 부가염; 또는 암모늄염, 또는 유기염기(예로 메틸아민, 디메틸아민, 트리메틸아민, 피폐리딘, 모르폴린 또는 트리-(2-하이드록시에틸)아민)와 형성된 염이다.

본 발명의 식I로 표시되는 화합물의 적합한 약학적으로 허용가능한 용매화물은 예로 수화물이며, 예로 반수화물, 일수화물, 이수화물, 삼수화물 또는 이들의 선택 가능한 조합이다.

본 발명의 화합물은 프로드러그 형태로 투여될 수 있으며, 상기 프로드러그는 인체 또는 동물체내에서 분해되여 본 발명의 화합물을 방출하는 화합물이다. 프로드러그의 실예는 체내(in vivo) 분해 가능한 에스테르 유도체와 체내 분해 가능한 아미드 유도체를 포함하며, 상기 에스테르 유도체는 식I로 표시되는 화합물의 카르복실기 또는 히드록실기에 형성될 수 있고, 상기 아미드 유도체는 식I로 표시되는 화합물의 카르복실기 또는 아미노기에 형성될 수 있다.

식I로 표시되는 화합물의 약학적으로 허용가능한 프로드러그는, 예로 체내에서 분해 가능한 에스테르 또는 에테르 일 수 있다. 하이드록시기를 함유하는 식I로 표시되는 화합물의 체내 분해 가능한 에스테르 또는 에테르는, 예로, 인체 또는 동물체내에서 분해되어 모체 하이드록시기 화합물의 약학적으로 허용가능한 에스테르 또는 에테르를 생성한다. 하이드록시기에 대하여, 적합한 약학적으로 허용가능한 에스테르 형성 그룹은 무기에스테르, 예로 인산에스테르(아미노포스포사이클릭에스테르를 포함)를 포함한다. 하이드록시기에 대하여, 적합한 약학적으로 허용가능한 에스테르 형성 그룹은 (1-10C)알카노일기(예로, 아세틸기, 벤조일기, 페닐아세틸기, 치환된 벤조일기 및 치환된 페닐아세틸기), (1-10C)알콕시 카르보닐기(예로, 에톡시 카르보닐기, N,N-[디-(1-4C)알킬]카르바모일기, 2-디알킬아미노아세틸기 및 2-카르복시아세틸기)를 더 포함한다. 페닐아세틸기 및 벤조일기 치환기의 실예는 아미노메틸기, N-알킬아미노메틸기, N,N-디알킬아미노메틸기, 모르폴리노메틸, 피페라진-1-일메틸기 및 4-(1-4C)알킬피페라진-1-일메틸기를 포함한다. 하이드록시기에 대하여, 적합한 약학적으로 허용가능한 에테르 형성 그룹은 a-아실옥시알킬기를 포함하며, 예로, 아세톡시메틸기 및 피발로옥시메틸기이다.

본 발명의 식I로 표시되는 화합물 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염, 용매화물 또는 프로드러그는 CCR4 억제제 활성을 갖는다. 이로부터, 본 발명의 식I로 표시되는 화합물 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염, 용매화물 또는 프로드러그는 CCR4-매개 질환의 치료에 사용될 수 있고, 또는 CCR4-매개 질환 치료용 약물의 제조에 사용될 수 있다. 구체적으로, 본 발명의 식I로 표시되는 화합물 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염, 용매화물 또는 프로드러그는 CCR4의 조절(예로 CCR4의 활성 억제)이 환자에게 유리한 질환의 치료에 사용될 수 있다.

본 발명의 일 측면에서는, 상기에서 한정한 식I로 표시되는 화합물 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염, 용매화물 또는 프로드러그, 및 이와 혼합된 약학적으로 허용가능한 부형제를 포함하는 약물 조성물을 제공한다. 여기서 부형제는 예로 희석제 또는 담체이다. 상기 약물 조성물은 CCR4-매개 질환 치료용이다.

본 발명의 약물 조성물은 당업계의 공지된 통상적인 약용 부형제를 사용할 수 있으며, 통상적인 방법을 통하여 얻을 수 있다. 예로, 경구 투여용 조성물로 제조할 경우, 착색제, 감미제, 향미료 및/또는 보존제 등의 부형제를 1종 또는 그 이상으로 포함할 수 있다.

본 발명의 약물 조성물은 경구 투여에 적합한 형태(예로, 정제, 파스필레스, 경질 캡슐 또는 연질 캡슐, 물 또는 오일의 현탁액, 유제, 분산성 분말 또는 과립, 시럽 또는 엘릭시르), 국소 투여에 적합한 형태(예로, 크림, 연고, 젤 또는 물 또는 유성 용액 또는 현탁액), 흡입 투여에 적합한 형태(예로, 미세하게 분산된 분말제 또는 액체 에어로졸), 스프레이 투여에 적합한 형태(예로, 미세하게 분산된 분말제) 또는 비경구 투여에 적합한 형태(예로, 정맥내, 피하, 복막내 또는 근육내 투여용 멸균수 또는 유성 용액, 또는 직장 투여용 좌제)로 사용될 수 있다.

1종 또는 그 이상의 부형제와 조합하여 형성하는 단일 제형의 활성 성분의 양은 치료 대상 및 구체적인 투여 경로 따라, 필요에 따라 변경할 수 있다. 예로, 사람에게 경구 투여할 경우, 제제는 통상적으로 적절하고 편리한 양의 부형제와 혼합된 활성성분 0.1mg~1g(더 적합하게는 1~250mg, 예로, 1~100mg)을 포함하며, 상기 부형제는 전체 조성물 중량의 약 5~98% 범위를 차지한다.

치료용 또는 예방용을 목적으로 하는 식I로 표시되는 화합물 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염, 용매화물 또는 프로드러그의 투여량은 일반적으로 질환의 성질 및 중증도, 동물 또는 환자의 연령과 성별 및 투여 경로에 따라 공지된 의학원리에 근거하여 변경할 수 있다.

본 발명의 일 측면에서는,상기에서 한정한 식I로 표시되는 화합물 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염, 용매화물 또는 프로드러그의 CCR4-매개 질환의 치료(또는 예방)를 제공한다.

본 발명의 다른 일 측면에 따르면, CCR4-매개 질환 치료용(또는 예방용) 약물의 제조에 있어서, 상기에서 한정한 식I로 표시되는 화합물 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염, 용매화물 또는 프로드러그의 용도를 제공한다.

CCR4-매개 질환은 염증 또는 감염과 관련된 질환 및 질병일 수 있다. CCR4-매개 질환은:

(1) 천식을 포함하는 기도폐쇄성 질환, 여기서 천식은 기관지천식, 알레르기천식, 내인성천식, 외신성천식, 운동유발성 천식, 약물유발성(아스피린과 NSAID 유발 천식 포함)천식 및 분진유발성 천식, 간헐적 천식 및 지속적 천식을 포함하며; 만성 폐쇄성 폐질환(COPD); 전염성기관지염 및 호산구성 기관지염을 포함하는, 기관지염; 폐기종; 기관지 확장증; 낭포성섬유증; 과민성폐렴; 잠재 섬유성 폐포염, 특발성 간질성 폐렴, 항종양 치료와 만성 감염 합병증으로 인한 섬유화를 포함하는, 폐섬유증; 폐혈관의 혈관염과 혈전 형성 질환 및 폐동맥고압; 비염: 약물성 비염 및 혈관 운동성 비염을 포함하는 급성비염 및 만성비염; 신경성 비염을 포함하는 다년성 알레르기 비염 및 계절성 알레르기성 비염; 감기 및 호흡기세포융합바이러스, 인플루엔자, 코로나바이러스 및 아데노바이러스로 인한 감기를 포함하는, 급성 바이러스 감염;과 같은 호흡기 질환;

(2) 뼈 및 관절의 관절염; 경추염과 요추염 및 요통과 경부통; 골다공증; 류마티스관절염; 요산염 침착증, 피로인산칼슘 침착증과 칼슘 인회석 관련 건염, 활액낭염 및 활액염을 포함하는, 급성 활막염 및 만성 활막염; 피부근염 및 다발성근염을 포함하는 염증성근병증; 류마티스성 다발근통; 임의의 관절에 분포된 특발성 염증성 관절염 및 관련 중후군과 류마티스염 및 이의 전신 합병증을 포함하는, 연소성 관절염; 약물유발성 관절통, 건염 및 근육병;과 같은 뼈 및 관절의 염증;

(3) 피부염, 습진, 아토피 피부염, 알레르기 접촉피부염, 풍진 및 가려움증, 등과 같은 건선 및 염증성 피부병;

(4) 다년성 알레르기 결막염 또는 봄 알레르기 결막염을 포함하는 결막염; 홍채염; 전포도막염 및 뒤포도막염; 맥락막염; 자가면역; 망막에 영향을 미치는 퇴행성 또는 염증성 질환; 교감안염; 사르코이드증; 바이러스, 진균 및 박테리아에 감염된 안염;을 포함하는 안검염 및 안염;

(5) 위장염증, 비뇨 생식기 염증 및 면역체계 염증 등과 같은 CCR4와 관련된 기타 질환; 등을 포함한다.

본 발명의 또 다른 일 측면에서는, 식I로 표시되는 화합물을 제조하는 방법을 제공하며,

여기서, M은 Li, Na, K, Rb 또는 Cs와 같은 일가 알칼리 금속이며, 바람직하게는 Na 또는 K이다. 상기 방법은 하기 식의 화합물6과

일가 알칼리 금속M의 강알칼리를 유기용매에서 교반하여 반응시킨 후, 여과 건조하는 단계를 포함한다. 상기 화합물6과 상기 일가 알칼리 금속M의 강알칼리의 몰비는 바람직하게는 1:0.5~2이다. 상기 화합물6과 상기 일가 알칼리 금속M의 강알칼리의 몰비는 더 바람직하게는 약 1:1이다.

상기 반응은 적합한 유기용매중에서 진행될 수 있다. 예로, 상기 유기용매는 에스테르계, 방향족 탄화수소계, 에테르계, 알코올계 또는 기타 수용성 극성용매일 수 있으며; 상기 에스테르계 용매는 메틸 아세테이트, 에틸 아세테이트, 프로필 아세테이트 또는 부틸 아세테이트이며; 상기 방향족 탄화수소계 용매는 벤젠, 톨루엔, 에틸벤젠, 이소프로필벤젠 또는 자일렌이며; 상기 에테르계 용매는 에테르, 이소프로필에테르, 메틸 t-부틸에테르, 테트라하이드로퓨란, 1,4-디옥산, 에틸렌글리콜디메틸에테르 또는 디에틸렌글리콜디메틸에테르이며; 상기 알코올계 용매는 메탄올, 에탄올, 프로판올, n-부탄올 또는 에틸렌글리콜이며; 상기 기타 수용성 극성용매는 아세톤, 부탄온, N,N-디메틸포름아미드, N,N-디메틸아세트아미드 또는 디메틸술폭시드이다. 상기 일가 알칼리 금속M의 강알칼리는 M의 수산화물일 수 있으며, 예로 NaH 또는 KH이다. 상기 일가 알칼리 금속M의 강알칼리는 M의 알콕시드일 수도 있으며, 예로, 소듐 t-부톡사이드 또는 포타슘 t-부톡사이드이다. 상기 강알칼리는 알칼리 금속 M의 산화물, 수산화물 또는 중탄산염 등을 더 포함한다. 본 발명의 또 다른 일 측면에서, 상기 방법은 상기 화합물6을 유기용매에 용해시킨 후, MH 또는 M의 알콕시드를 첨가하여, 교반하여 반응시킨(예로, 15℃~35℃ 온도하에서 1~3.5시간동안 교반하여 반응시킨)후 여과 건조하는 단계를 더 포함한다. 상기 화합물6과 상기 MH 또는 M의 알콕시드의 몰비는 바람직하게는 1:0.5~2이고, 상기 화합물6과 상기 MH 또는 M의 알콕시드의 몰비는 더 바람직하게는 약 1:1이다.

본 발명의 일 측면에서는, 하기 식Ⅱ로 표시되는 화합물의 제조방법을 제공한다.

여기서, 상기 화합물6을 유기용매에 용해시킨 후, NaH를 첨가하고, 교반하여 반응시킨(예로, 15℃~35℃ 온도하에서 1~3.5 시간동안 교반하여 반응시킨) 후, 여과 건조시킨다. 화합물6과 NaH의 몰비는 바람직하게는 1:0.5~2이고, 더 바람직하게는 약 1:1이다.

본 발명의 일 측면에 따르면, 하기 식Ⅲ로 표시되는 화합물의 제조방법을 제공한다.

여기서, 상기 화합물6을 유기용매에 용해시킨 후, KH를 첨가하고, 교반하여 반응시킨(예로, 15℃~35℃ 온도하에서 1~3.5시간동안 교반하여 반응시킨) 후, 여과 건조시킨다. 화합물6과 KH의 몰비는 바람직하게는 1:0.5~2이고, 더 바람직하게는 약 1:1이다.

여기서, 상기 화합물6을 유기용매에 용해시킨 후, 포타슘 t-부톡사이드를 첨가하고, 교반하여 반응시킨(예로, 15℃~35℃ 온도하에서 1~3.5 시간동안 교반하여 반응시킨) 후, 여과 건조시킨다. 화합물6과 포타슘 t-부톡사이드의 몰비는 바람직하게는 1:0.5~2이고, 더 바람직하게는 약 1:1이다.

이미 알려진 바와 같이, 종래기술의 CCR4 억제제는 용해도가 낮아, 약물 제제의 난이도를 증가시키며, 약물 활성성분의 방출에 영향주며, 생체이용율이 낮아 최대 안전 투여량하에서 체내에서 목적하는 혈중약물 농도에 도달할 수 없는 문제점이 존재하여, 약물의 치료효과에 영향을 준다. 본 발명에서 제공하는 식I로 표시되는 화합물, 특히 식Ⅱ로 표시되는 화합물과 식Ⅲ로 표시되는 화합물은 더 우수한 CCR4 억제제로서, 종래기술 대비 현저한 장점이 있는 바, 그 장점은 하기와 같다.

1. 현저하게 증가된 용해도. 식Ⅱ로 표시되는 화합물과 식Ⅲ로 표시되는 화합물은 화합물6과 비교할 경우, 동일한 조건하에서 현저하게 증가된 용해도를 구비한다. 예로, 실온의 수용액중에서 식Ⅱ로 표시되는 화합물과 식Ⅲ로 표시되는 화합물의 용해도는 500 또는 40mg/ml이고, 동일한 조건하에서의 화합물6의 용해도는 0.02mg/ml인 바, 용해도를 비교할 경우 2000~25000배 향상되었다.

2. 더 우수한 생체이용율. 표준 CaCO-2 체외(in vitro) 막투과 평가결과에 근거하면, 화합물6의 Papp(apparent permeability coefficient)는 0.13Х10^-6으로서, 흡수되기 어려운 화합물에 속하는 반면, 동일한 실험조건하에서, 식Ⅱ로 표시되는 화합물과 식Ⅲ로 표시되는 화합물의 Papp는 68.82~101.33Х10^-6으로써, 막투과성이 530~780배 향상되었으며, 흡수되기 쉬운 화합물에 속한다.

3. 더 우수한 체내 및 체외 활성. 방사 표지화 실험에서 본 발명의 식Ⅱ로 표시되는 화합물과 식Ⅲ로 표시되는 화합물의 IC50은 2.26*10^-9mol/L~7.47*10^-10mol/L이며, 동일한 실험 조건하에서의 화합물6의 활성보다 6 및 210배 향상되었음을 증명하였다.

이하, 실시예를 결합하여, 본 발명의 실질적인 내용과 유익한 효과에 대해 추가로 설명한다. 실시예는 본 발명을 설명하기 위한 것으로서, 본 발명을 한정하기 위한 것은 아니다.

실시예1 N-[(3-{[3-{[(5-클로로-2-티에닐)술포닐]아미노}-4-(메톡시)-1H-인다졸-1-일]메틸}페닐)메틸]-2-하이드록시-2-메틸프로피온아미드의 제조

하기 식으로 표시되는 화합물6인 N-[(3-{[3-{[(5-클로로-2-티에닐)술포닐]아미노}-4-(메톡시)-1H-인다졸-1-일]메틸}페닐)메틸]-2-하이드록시-2-메틸프로피온아미드의 제조

단계1 중간체 화합물1인 4-(메톡시)-1H-인다졸-3-아민의 제조

6-플루오로-2메톡시벤조니트릴(50g, 0.33mol)과 히드라진 수화물(50g, 0.99mol)을 n-부탄올 400ml에 용해시키고, N₂의 보호하에서 20h동안 환류 반응 시켰다. 용액이 냉각된 후, 물 400ml를 첨가하여 균일하게 교반하고, 유기층을 분리하고, 수상에 석출된 고체를 수집하였다. 유기층 용매를 감압 증류하여, 잔류물과 수상 및 수상에서 석출된 고체와 혼합하고, 에틸아세테이트(3Х400ml)로 추출하였다. 물(2Х400ml)로 유기층을 세척하고, 무수 황산마그네슘으로 건조시켰다. 감압 증류하여 용매를 제거하고, 진공 건조하여 회백색의 고체(46.32g, 수율 85.8%)를 얻었다. MS ESI+ 164(M+H)⁺.

단계2 중간체 화합물2인 3-{[3-아미노-4-(메톡시)-1H-인다졸-1-일]메틸}벤조니트릴의 제조

수산화칼륨(9g, 160.7mmol)과 DMSO(200ml)을 혼합하고, 균일하게 교반하였다. 4-(메톡시)-1H-인다졸-3-아민(10.48g, 64.3mmol)을 첨가하였고, 용액은 짙은 자색으로 변했다. 실온에서 10min 동안 교반한 후, 3-(클로로메틸)벤조니트릴(11.8g, 64.3mmol)을 첨가하고, 계속하여 2h 동안 교반하였다. 반응액에 물 500ml를 첨가하였고, 반응액은 에멀젼으로 변했다. 디클로로메탄(3Х400ml)으로 추출하고, 물(2Х400ml)로 세척하고, 무수 황산마그네슘으로 건조시켰다. 칼럼크로마토그래피(디클로로메탄/에틸아세테이트=5/1) 후, 감압 증류하여 용매를 제거하고, 진공 건조하여 옅은 황색의 고체(13.22g, 수율 73.9%)를 얻었다. MS ESI+279(M+H)⁺.

단계3 중간체 화합물3인 5-클로로-N-{1-[(3-시아노페닐)메틸]-4-(메톡시)-1H-인다졸-3-일}-2-티오펜술폰아미드의 제조

실온 및 질소 보호 분위기에서, 5-클로로-2-티오펜설포닐클로라이드(7.96g, 36.7mmol)의 피리딘(12ml)용액을 3-{[3-아미노-4-(메톡시)-1H-인다졸-1-일]메틸}벤조니트릴(10.2g, 36.7mmol)이 담겨진 2구 플라스크에 적가하였다. 반응액은 짙은 적색으로 변했다. 1h 후, 반응액을 염산(2mol/L) 500ml에 첨가하고, 디클로로메탄(4Х500ml)으로 추출하고, 물(3Х500ml)로 세척하고, 무수 황산마그네슘으로 건조시켰다. 칼럼크로마토그래피(디클로로메탄/에틸아세테이트=100/1) 후, 감압 증류하여 용매를 제거하고, 진공 건조하여 백색 고체(13.43g, 수율 79.9%)를 얻었다. MS ESI+ 459(M+H)⁺.

단계4 중간체 화합물4인 N-[1-{[3-(아미노메틸)페닐]메틸}-4-(메톡시)-1H-인다졸-3-일]-5-클로로-2-피오펜술폰아미드하이드로글로라이드의 제조

5-클로로-N-{1-[(3-시아노페닐)메틸]-4-(메톡시)-1H-인다졸-3-일}-2-티오펜술폰아미드(15.75g, 34.4mmol)를 테트라하이드로퓨란 200ml에 용해시키고, 0℃의 조건하에서 방치하였다. 질소 보호하에서, 반응 시스템에 THF중 1.0M 수소화알루미늄리튬(86ml, 86mmol)용액을 한방울씩 적가하였고, 적가 과정 중 시스템의 온도는 10℃ 이하로 유지하였다. 적가 완료 후, 시스템을 실온의 조건으로 옮겨 계속하여 2h 동안 교반하였다. 물 10ml, 2mol/L 수산화나트륨 수용액 60ml을 첨가하여 ??칭 반응(??칭과정에서 대량의 열을 방출하기에, 얼음물욕에서 진행)을 시켰다. 30min 동안 교반 후, 고체를 여과하고, THF로 고체를 세척하고, 세척액과 여과액을 합친다. 여과액은 실리카겔 컬럼으로 처리하고, 여과하고 메탄올로 세척한 후, 2.5L에서 10% 2N 염산으로 세척하였다. 합친 후 농축하여 다량의 고체를 얻었으며, 여과하여 물로 세척하고, 진공 건조하여 백색 고체(12.6g, 수율 73.6%)를 얻었다. MS ESI+ 463(M+H)⁺.

단계5 중간체 화합물5인 2-{[(3-{[3-{[(5-클로로-2-티에닐)술포닐]아미노}-4-(메톡시)-1H-인다졸-1-일]메틸}페닐)메틸]아미노}-1,1-디메틸-2-옥소에틸아세테이트의 제조

얼음물욕 조건하에서, N-[1-{[3-(아미노메틸)페닐]메틸}-4-(메톡시)-1H-인다졸-3-일]-5-클로로-2-티오펜술폰아미드하이드로콜로라이드(15.6g, 31.3mmol), 트리메틸아민(9.6g, 95mmol), 디클로로메탄 400ml를 혼합하고, 균일하게 교반하였다. 다음 2-클로로-1,1-디메틸-2-옥소에틸아세테이트(5.2g, 31.3mmol)를 한방울씩 적가하였다. 적가 완료 후, 실온 및 질소 보호 조건하에서 계속하여 2h 동안 교반하였다. 2mol/L 염산(150ml), 포화 탄산수소나트륨 용액(150ml), 포화 식염수(150ml)를 각각 사용하여 세척하였다. 무수 황산마그네슘으로 건조시켰다. 칼럼크로마토그래피(석유에테르/에틸아세테이트=1/1) 후, 감압 증류하여 용매를 제거하고, 진공 건조하여 백색의 폼 형태의 고체(14.1g, 수율 76.3%)를 얻었다. MS ESI+ 591(M+H)⁺.

단계6 화합물6인 N-[(3-{[3-{[(5-클로로-2-티에닐)술포닐]아미노}-4-(메톡시)-1H-인다졸-1-일]메틸}페닐)메틸]-2-하이드록시-2-메틸프로피온아미드의 제조

2-{[(3-{[3-{[(5-클로로-2-티에닐)술포닐]아미노}-4-(메톡시)-1H-인다졸-1-일]메틸}페닐)메틸]아미노}-1,1-디메틸-2-옥소에틸아세테이트(6.55g, 11.1mmol)가 용해된 메탄올(350ml)용액에 탄산칼륨(4.6g, 33.3mmol)을 첨가하였다. 실온에서 4h 동안 교반하고, 시스템내에는 다량의 고체가 석출되었다. 감압 증류하여 용매를 제거하고, 증발 건조시킨 후, 물 100ml를 첨가하고, 2mol/L의 염산으로 PH를 산성으로 조절하였다. 에틸아세테이트(200mlХ2)로 추출하고, 추출액은 물층이 중성으로 될때까지 물(200mlХ2)로 세척하였다. 유기층을 무수 황산마그네슘으로 건조시켰다. 칼럼크로마토그래피(석유에테르/에틸아세테이트=1/1.5) 후, 감압 증류하여 용매를 제거하고, 진공 건조하여 백색의 고체(5.08g, 수율 83.5%)를 얻었다. MS ESI+ 549(M+H)⁺ ; 1H-NMR(400 MHz, DMSO-d6) : 10.40(s, 1H ), 8.13 (t, 1H), 7.33 (d, 1H ), 7.24-7.08 (m, 6H ), 6.93(d, 1H) , 6.46 (d, 1H), 5.45 (s, 2H ), 5.33 (s, 1H ), 4.17(d, 2H) , 3.72 (s, 3H), 1.20 (s, 6H ).

실시예2 식Ⅱ로 표시되는 화합물

N-[(3-{[3-{[(5-클로로-2-티에닐)술포닐]아미노}-4-(메톡시)-1H-인다졸-1-일]메틸}페닐)메틸]-2-하이드록시-2-메틸프로피온아미드나트륨염의 제조

식6으로 표시되는 화합물 N-[(3-{[3-{[(5-클로로-2-티에닐)술포닐]아미노}-4-(메톡시)-1H-인다졸-1-일]메틸}페닐)메틸]-2-하이드록시-2-메틸프로피온아미드(2.5g, 4.56mmol)를 무수 테트라하이드로퓨란 30ml에 용해시키고, 용액이 맑아질 때까지 균일하게 교반하였다. 시스템내에 NaH(60%)(182mg, 4.56mmol)를 첨가하고, 35

에서 1.0h 동안 교반하였다. 시스템내에 다량의 백색의 고체가 생성되었으며, 여과하여 백색 고체를 얻었고, 테트라하이드로퓨란으로 세척하고, 진공 건조 오븐으로 이동하여 건조시켜 백색의 고체(2.09g, 수율 80.4%)를 얻었다. 1H-NMR(400 MHz, DMSO-d6) : 8.08 (t, 1H), 7.20 (d, 1H ), 7.14-6.78 (m, 7H ), 6.20 (d, 1H), 5.33 (s, 1H ), 5.19 (s, 2H ), 4.16(d, 2H) , 3.74 (s, 3H), 1.21 (s, 6H ).

실시예3 식Ⅲ로 표시되는 화합물

N-[(3-{[3-{[(5-클로로-2-티에닐)술포닐]아미노}-4-(메톡시)-1H-인다졸-1-일]메틸}페닐)메틸]-2-하이드록시-2-메틸프로피온아미드칼륨염의 제조

방법1: 식6으로 표시되는 화합물인N-[(3-{[3-{[(5-클로로-2-티에닐)술포닐]아미노}-4-(메톡시)-1H-인다졸-1-일]메틸}페닐)메틸]-2-하이드록시-2-메틸프로피온아미드(2.5g, 4.56mmol)를 무수 테트라하이드로퓨란 30ml에 용해시키고, 용액이 맑아질 때까지 균일하게 교반하였다. 시스템내에 KH(30%)(600mg, 4.56mmol)를 첨가하고, 15℃하에서 3.5h 동안 교반하였다. 시스템에 다량의 백색의 고체가 생성되었으며, 여과하여 백색의 고체를 얻었으며, 테트라하이드로퓨란으로 세척하고, 진공 건조 오븐으로 이동하여 건조시켜 백색의 고체(2.21g, 수율 83.1%)를 얻었다. 1H-NMR(400 MHz, DMSO-d6) : 8.10 (t, 1H), 7.22 (d, 1H ), 7.17-6.79 (m, 7H ), 6.21 (d, 1H), 5.35 (s, 1H ), 5.19 (s, 2H ), 4.18(d, 2H), 3.75 (s, 3H), 1.22 (s, 6H ).

방법2: 식6으로 표시되는 화합물인 N-[(3-{[3-{[(5-클로로-2-티에닐)술포닐]아미노}-4-(메톡시)-1H-인다졸-1-일]메틸}페닐)메틸]-2-하이드록시-2-메틸프로피온아미드(1.37g, 2.5mmol)을 무수 테트라하이드로퓨란 15ml에 용해시키고, 용액이 맑아질 때까지 균일하게 교반하였다. 시스템내에 포타슘 t-부톡사이드(280mg, 2.5mmol)를 첨가하고, 실온에서 10min 동안 교반하였다. 시스템에 다량의 백색의 고체가 생성되었으며, 여과하여 백색의 고체를 얻었으며, 테트라하이드로퓨란으로 세척하고, 진공 건조 오븐으로 이동하여 건조시켜 백색의 고체(1.35g, 수율 92.1%)를 얻었다. 1H-NMR(400 MHz, DMSO-d6): 8.09 (t, 1H), 7.20 (d, 1H ), 7.13-6.78 (m, 7H ), 6.20 (d, 1H), 5.34 (s, 1H ), 5.18 (s, 2H ), 4.16(d, 2H), 3.74 (s, 3H), 1.21 (s, 6H ).

실시예4 용해도 테스트

화합물의 용해도는 2010판 약전 제2부 범례중에서 제정한 방법에 따라 측정하였다. 실시예1에서 제조하여 얻은 화합물6인 N-[(3-{[3-{[(5-클로로-2-티에닐)술포닐]아미노}-4-(메톡시)-1H-인다졸-1-일]메틸}페닐)메틸]-2-하이드록시-2-메틸프로피온아미드를 각각 10mg, 100mg, 1000mg으로 정밀하게 평량하여, 25℃±2℃의 조건하에서 500ml의 플라스크에 넣고, 눈금까지 물을 첨가하여 희석하였으며, 5분 마다 30초 동안 진탕하였으며, 30분내의 용해 정도를 관찰하였으며, 10mg의 샘플만 가시적 용질이 없으며, 이의 물에서의 용해도가 0.02mg/ml임을 얻었다.

실시예2에서 제조하여 얻은 식Ⅱ로 표시되는 화합물 N-[(3-{[3-{[(5-클로로-2-티에닐)술포닐]아미노}-4-(메톡시)-1H-인다졸-1-일]메틸}페닐)메틸]-2-하이드록시-2-메틸프로피온아미드나트륨염을 각각 10mg, 100mg, 1000mg, 2000mg으로 정밀하게 평량하여, 25℃±2℃의 조건하에서 2ml의 플라스크에 넣고, 눈금까지 물을 첨가하여 희석하였으며, 5분 마다 30초 동안 진탕하였으며, 30분내의 용해 정도를 관찰하였으며, 2000mg 샘플을 제외한 기타 샘플은 모두 가시적 용질이 없으며, 이의 물에서의 용해도가 500mg/ml임을 얻었다.

실시예3에서 제조하여 얻은 식Ⅲ로 표시되는 화합물 N-[(3-{[3-{[(5-클로로-2-티에닐)술포닐]아미노}-4-(메톡시)-1H-인다졸-1-일]메틸}페닐)메틸]-2-하이드록시-2-메틸프로피온아미드칼륨염을 각각 8mg, 80mg, 800mg, 1600mg으로 정밀하게 평량하여, 25℃±2℃의 조건하에서 2ml의 플라스크에 넣고, 눈금까지 물을 첨가하여 희석하였으며, 5분 마다 30초 동안 진탕하였으며, 30분내의 용해 정도를 관찰하였으며, 800mg, 1600mg 샘플을 제외한 기타 샘플은 모두 가시적 용질이 없으며, 이의 물에서의 용해도가 40mg/ml임을 얻었다.

결과는 하기 표1에서 나타낸 바와 같다.

식Ⅱ로 표시되는 화합물 및 식Ⅲ로 표시되는 화합물은 화합물6인 N-[(3-{[3-{[(5-클로로-2-티에닐)술포닐]아미노}-4-(메톡시)-1H-인다졸-1-일]메틸}페닐)메틸]-2-하이드록시-2-메틸프로피온아미드와 비교할 경우, 동일한 조건하에서 현저하게 증가된 용해도를 구비한다. 실온의 수용액에서 식Ⅱ로 표시되는 화합물 및 식Ⅲ로 표시되는 화합물의 용해도는 500mg/ml 및 40mg/ml이고, 동일한 조건하에서 N-[(3-{[3-{[(5-클로로-2-티에닐)술포닐]아미노}-4-(메톡시)-1H-인다졸-1-일]메틸}페닐)메틸]-2-하이드록시-2-메틸프로피온아미드의 용해도는 0.02mg/ml인 바, 용해도를 비교할 경우 2000~25000배 향상되었다.

실시예5 체외 CCR4 길항 활성 테스트

방사성 리간드 [35S]-GTPγS 경쟁 시험을 통하여 길항제의 효능을 측정하였다. 간단하게 말하면, CCR4을 발현하는 CHO막을 23G 바늘을 통하여 균질화 시켰다. 다음, 측정 완충용액(20mM HEPES, 10mM MgCl₂, 100mM NaCl, 0.05％ BSA, 40ug/ml 사포닌, 5M KOH를 사용하여 pH를 7.4로 조절)에서 이들 막을 WGA-코팅된 Leadseeker SPA 비드에 부착시켜, 3μg/웰의 최종 측정 농도(FAC)의 막 및 250μg/웰의 FAC 비드 용액을 생성하였다. 얼음에서 60분 동안의 프리커플링 후, GDP를 첨가하여 4.4uM FAC를 얻었다. 다음, 측정 완충용액에서 제조한 [35S]-GTPγS 를 비드/막 용액중에 첨가하여, 0.33nM FAC를 얻었다. 인간 MDC를 비드/막/[35S]-GTPγS 현탁액 중에 첨가하여, 최대 작용제 반응을 나타내는 80％ (EC80)의 FAC를 얻었다. 비드/막/[35S]-GTPγS/작용제 현탁액을 백색의 Greiner 폴리프로필렌 384-웰 플레이트(45μl/웰)중에 분배하며, 이중에는 화합물 0.5μl가 함유되어 있다. 다음 최종 측정 용액(45.5μl)을 밀봉시키고, 원심분리기로 원심분리 한 다음, 실온에서 3~6시간동안 배양하였다. 다음 Viewlux기를 사용하여 플레이트를 읽었으며, 루미네선스를 IC₁₀₀에 대한 표준 길항제의 최대 억제 반응의 백분율로 하여 플로팅하였다. 평가 결과는 표2에서 나타낸 바와 같다.

실시예6 체외 막투과 테스트

Caco-2세포 모델은 인간 결장 선암종 세포로써, 구조와 기능은 분화된 장상피세포와 유사한 바, 미세융모 등 구조를 구비하며, 소장의 솔가장자리 상피와 관련된 효소계를 구비한다. 체외 장 수송을 시뮬레이션하는 실험에 사용될 수 있으며, 이미 인간 소장에서의 약물의 흡수를 예측하고, 및 약물 수송 메커니즘의 연구에서 표준 체외 스크리닝 도구로 사용되고 있다. 약물 흡수 능력 판단 방법: Papp(apparent permeability coefficient), Papp>2Х10^-6 흡수가 좋은 약물에 속한다.

1. 실험재료 및 기기

Caco-2 세포(School of Pharmacy, Zhejiang University에서 증정), DMEM 배지(GIBCO-BRL, USA), 표준 소태아혈청(FBS, Hyclone, USA), 비필수 아미노산(Nonessential amino acids, NEAA, Hyclone, USA), 페니실린(Huabei Pharmaceutical Co., Ltd.), 스트렙토마이신(Huabei Pharmaceutical Co., Ltd.), HEPES(Amresco, USA), EDTA-Na(Beijing Chemical Plant), 트립신(Trypsin, 1: 250, Amresco, USA), 글루타민은 Sigma사(USA)에서 구매, G418(Merck, USA), MilliPore 초순수.

Millicell 삽입형 배양접시(폴리카보네이트 막, 0.4μm, 직경 12mm, MilliPore, USA), 세포 배양 플레이트(COSTAR, USA), 세포 저항기(Millicell-ERS, Millipore, USA), 울트라 클린 벤치(SW-CJ-IFD, Suzhou Antai Air Technology Co., Ltd.), 이산화탄소 인큐베이터(Sanyo, Japan), 도립현미경(CK, Olympus, Tokyo), 배양접시(Corning, USA). 초순수기(Simplicity, MilliPore, USA), 형광분광광도계(F-4500, HITACHI, Japan), 1/10000 전자 저울(BS 110S, Beijing Saiduolis Balance Co., Ltd.), LC-MS(Agilent 1100 LC-MSD_VL, DE, USA).

2. 실험방법

2.1 용액의 조제

배양액의 조제: DMEM을 사용시, 10% FBS, 1 % 글루타민, 100 U·mL^-1페니실린 및 스트렙토마이신의 이중 항생제 용액, 1% 비필수 아미노산, G418 1.2mg·L^-1를 첨가하였다.

소화액의 조제: 트립신 1g, EDTA 80mg을 평량하고, 인산염 완충용액 400mL를 첨가하고, 0.22μm 여과막으로 여과하여 제균하였으며, 사용할 때까지 -20℃에서 냉동 보관하였다.

글루타민 저장 용액의 조제: 글루타민 2.92g에 PBS 완충용액 100mL를 첨가하고, 0.22μm 여과막으로 여과하여 제균하였으며, 1mL씩 분리하여, 사용할 때까지 -20℃에서 냉동 보관하였다.

페니실린 저장 용액의 조제: 페니실린 80만 U에 생리식염수 20mL를 첨가하고, 스트렙토마이신 100만 U에 생리식염수 25mL를 첨가한다. 양자를 1:1로 균일하게 혼합하고, 0.22μm 여과막으로 여과하여 제균하였으며, 1mL씩 분리하여, 사용할 때까지 -20℃에서 냉동 보관하였다.

HBSS액의 조제: NaCl 8.0g, KCl 0.4g, Na₂HPO₄·H₂O 0.0475g, KH₂PO₄ 0.06g, Hapes 6g를 초순수중에 첨가하여 용해시키고, pH 값을 7.2~7.4로 조절하고, 1L까지 물을 첨가하고, 0.22μm 여과막으로 여과하여 제균하였으며, 사용할 때까지 -20℃에서 보관하였다.

2.2 세포의 배양

냉동 보관된 Caco-2 세포를 꺼내여, 37℃ 수욕에서 신속하게 해동하였다. 소생 후의 세포는 10 % FBS를 함유하는 DMEM 배지에 넣고, 37℃, 5% CO₂, 90%의 상대습도의 인큐베이터에서 배양시키며, 배지는 격일로 교체하였다. 1~2일 성장한 세포를 융합 후, 0.25 % 트립신-EDTA(0.2%) 혼합 소화액을 사용하여, 37℃의 조건하에서 소화시켰으며, 일정한 비율로 계대배양하였으며, 실험용 세포는 40~60계대였다.

세포가 80% 융합에 도달하면, 소화시킨 후, 완전배지를 이용하여 세포를 현탁시키고, 1Х10⁶개·mL^-1씩 Millicell 플레이트에 접종하였다. 배양액은 2일 1회 교체하고, 일주일후 부터는 1일 1회 교체하였다. 5일간 배양 후, 저항값이 정점(＞200Ω·cm²)에 도달하면, 막투과 실험에 사용될 수 있다.

2.3 Caco-2 단층 세포의 품질 제어:

2.3.1 막 횡단 상피세포 전기저항(TEER)의 측정

막 횡단 전기저항을 측정시, 먼저 전극을 DMEM 배양액 중에 침지시켜 24h 동안 평형시키고, 꺼내여 70% 알코올에 침지시켜 15min 동안 소독한 후, 실온에서 방치하여 전극을 자연 건조 시키며, 다시 무균 DMEM 배양액에 넣고 15min 동안 평형시킨다. 실험시 전극의 양단을 24웰 Millicell 배양 플레이트의 각 홀의 상하 풀(pool)에 삽입하여 저항값을 검출하였으며, 매개 홀은 임의의 포인트에서 3번 측정하여 저항값을 기록하였으며, 이와 동시에, 블랭크 홀의 저항값도 측정하였으며, 하기 공식에 따라 막 횡단 저항값(TEER)을 계산하였다.

TEER=(R_t-R₀)ХS

여기서, R_t는 실측 저항값이고; R₀은 블랭크 홀의 저항값이며; S는 유효 막의 면적이다.

2.3.2 양성 화합물의 품질 제어:

Rho-123를 양성 품질 제어 화합물로 하며, 해당 화합물은 HBSS로 5μmol·L^-1까지 희석하였다. 실험전에 먼저 각 웰중의 배지를 흡입하여 버리고, 37℃의 HBSS액으로 2회 세척한 다음 37℃의 인큐베이터에서 배양하였으며, 상층 풀(upper pool)에는 Rho-123을 첨가하고, 하층 풀(lower pool)에는 HBSS액을 첨가하였으며, 항온 진탕기에서 배양하였으며, 0min, 30min, 90min, 120min의 각 시점에서 하층 풀의 용액을 수집하여 사용할 때까지 -20℃에서 저장하였다. 형광분광광도계로 하층 풀 중의 Rho-123 투과량을 측정하였다. 여기서 방출파장은 430nm로 설정하고, 여기파장은 530nm로 설정하였다. 본 실험에서 Rho-123의 P_app값은 문헌에서 보고된 값과 일치하였다.

2.4 약물의 막투과 실험

실험전에 37℃의 HBSS액으로 세포가 접종된 Millicel을 적절한 시간동안 담그고, Millicell을 살살 세척하여, 세포 표면의 부착물을 제거하였다. 캐비티 표면에서 기저 표면의 투과성: 상측(AP)에는 약물 함유 HBSS액 0.35mL를 첨가하고, 하측(BL)에는 블랭크 HBSS액 1.2mL를 첨가하였다. 37℃에서, 50r·min^-1로 진탕하였으며, 0min, 30min, 90min, 120min의 각 시점에서 하측에서 50 μL씩 샘플링하고, 동일 체적의 블랭크 HBSS액을 보충하였다. 매개 농도는 3개 홀씩 반복하였으며, 꺼낸 용액은 정밀하게 내부 표준용액 50μL, 에틸아세테이트 350μL에 넣고, 진탕하여 균일하게 혼합하였으며, 12000rmp으로 5min 동안 원심분리하여, 상층액 300μL을 취하여, 증발 건조시켰으며, 아세토니트릴 50μL로 재용해시키고, 10μL를 취하여 주입하여 테스트하였다. 기저 표면에서 캐비티 표면의 투과성은 하측(BL)에 약물을 첨가하고, 상측(AP)에 블랭크 HBSS액을 첨가하며, 이 후의 단계는 캐비티 표면에서 기저 표면의 투과성 실험의 방법과 동일하다.

약물의 P_app(apparent permeability coefficient)의 크기는 약물이 단일층 세포를 투과하는 능력 및 약물의 흡수 속도 및 정도를 나타낸다. 이는 하기 식으로 계산할 수 있다:

여기서, DQ는 약물이 Dt시간대 내에 투과한 양이고, A는 세포의 표면적이며, 본 모델에서는 막을 지지하는 멱적(0.6 cm²)이며, C₀는 초기 농도이다. P_app의 단위는 통상적으로 cm/h(cm·h^-1) 또는 cm/s(cm·s^-1)로 표시된다.

2.5 샘플 테스트

LC/MS를 사용하여 테스트 하였다. 매개 샘플의 농도는 이의 표준곡선(50nM-10000nM)으로 정량하였다.

3． 실험 결과

본 출원의 발명인은 CCR4 억제제로써 식I로 표시되는 화합물을 발견 및 제공하였으며, 이는 종래기술 대비 현저하게 증가된 용해도를 구비하고, 더 우수한 생체이용율 및 더 우수한 체내 및 체외 CCR4의 억제 활성을 구비하며, 종래 기술의 CCR4 억제제에 존재하는 용해도가 낮고, 약물 활성성분의 방출에 영향주며, 생체이용율이 너무 낮아 최대 안전 투여량하에서 체내에서 목적하는 혈중약물 농도에 도달할 수 없는 문제점을 해결하였다.

상기 내용은 본 발명에 대한 설명이며, 본 발명을 한정하는 것으로 간주하여서는 아니된다. 달리 설명되지 않는 한, 본 발명의 실시는 유기화학, 폴리머 화학, 생물 기술 등의 통상적인 기술을 사용하며, 상술한 설명 및 실시예에서 특별히 기재한 내용 외, 기타 방식으로 본 발명을 실현할 수 있음은 명백한 것이다. 본 발명의 범위내의 방면 및 개선은 당업자에게 있어서 자명한 것이다. 본 발명의 교시에 따라, 다양한 변경 및 변형이 가능하기에, 이는 본 발명의 범위내에 포함된다.

특별한 설명이 없는 한, 본 발명에서 온도의 단위 "도"는 섭씨 온도, 즉 ℃를 나타낸다.

이하 문헌은 전문을 인입하는 방식으로 본 출원에서 공개된다.

Claims

하기 식I로 표시되는 화합물 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염, 용매화물 또는 프로드러그:

여기서, M은 일가 알칼리 금속이다.
제1항에 있어서,
M은 Li, Na, K, b 또는 Cs인, 화합물 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염, 용매화물 또는 프로드러그.
제2항에 있어서,
M은 Na 또는 K인, 화합물 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염, 용매화물 또는 프로드러그.
제1항 내지 제3항 중 어느 한 항의 식I로 표시되는 화합물 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염, 용매화물 또는 프로드러그, 및 이에 혼합된 약학적으로 허용가능한 부형제를 포함하는, 약학 조성물.
제1항 내지 제3항 중 어느 한 항의 식I로 표시되는 화합물 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염, 이의 용매화물 또는 프로드러그를 치료가 필요한 환자에게 투여하는 단계를 포함하는, CCR4-매개 질환의 치료방법.
CCR4-매개 질환 치료용 약물의 제조에 있어서, 제1항 내지 제3항 중 어느 한 항의 식I로 표시되는 화합물 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염, 용매화물 또는 프로드러그의 용도.
제6항에 있어서,
상기 CCR4-매개 질환은:
(1) 천식을 포함하는 기도폐쇄성 질환, 여기서 천식은 기관지천식, 알레르기천식, 내인성천식, 외신성천식, 운동유발성 천식, 약물유발성(아스피린과 NSAID 유발 천식 포함)천식 및 분진유발성 천식, 간헐적 천식 및 지속적 천식을 포함하며; 만성 폐쇄성 폐질환(COPD); 전염성기관지염 및 호산구성 기관지염을 포함하는, 기관지염; 폐기종; 기관지 확장증; 낭포성섬유증; 과민성폐렴; 잠재 섬유성 폐포염, 특발성 간질성 폐렴, 항종양 치료와 만성 감염 합병증으로 인한 섬유화를 포함하는, 폐섬유증; 폐혈관의 혈관염과 혈전 형성 질환 및 폐동맥고압; 비염: 약물성 비염 및 혈관 운동성 비염을 포함하는 급성비염 및 만성비염; 신경성 비염을 포함하는 다년성 알레르기 비염 및 계절성 알레르기성 비염; 감기 및 호흡기세포융합바이러스, 인플루엔자, 코로나바이러스 및 아데노바이러스로 인한 감기를 포함하는, 급성 바이러스 감염;과 같은 호흡기 질환;
(2) 뼈 및 관절의 염증; 경추염과 요추염 및 요통과 경부통; 골다공증; 류마티스관절염; 요산염 침착증, 피로인산칼슘 침착증과 칼슘 인회석 관련 건염, 활액낭염 및 활액염을 포함하는, 급성 활막염 및 만성 활막염; 피부근염 및 다발성근염을 포함하는 염증성근병증; 류마티스성 다발근통; 임의의 관절에 분포된 특발성 염증성 관절염 및 관련 중후군과 류마티스염 및 이의 전신 합병증을 포함하는, 연소성 관절염; 약물유발성 관절통, 건염 및 근육병;과 같은 골관절염;
(3) 피부염, 습진, 아토피 피부염, 알레르기 접촉피부염, 풍진 및 가려움증, 등과 같은 건선 및 염증성 피부병;
(4) 다년성 알레르기 결막염 또는 봄 알레르기 결막염을 포함하는 결막염; 홍채염; 전포도막염 및 뒤포도막염; 맥락막염; 자가면역; 망막에 영향을 미치는 퇴행성 또는 염증성 질환; 교감안염; 사르코이드증; 바이러스, 진균 및 박테리아에 감염된 안염;을 포함하는 안검염 및 안염;
(5) 위장염증, 비뇨 생식기 염증 및 면역체계 염증 등과 같은 CCR4와 관련된 기타 질환; 등을 포함한다.
제7항에 있어서,
상기 CCR4-매개 질환은 천식을 포함하는 기도폐쇄성 질환, 여기서 천식은 기관지천식, 알레르기천식, 내인성천식, 외신성천식, 운동유발성 천식, 약물유발성(아스피린과 NSAID 유발 천식 포함)천식 및 분진유발성 천식, 간헐적 천식 및 지속적 천식을 포함하며; 만성 폐쇄성 폐질환(COPD); 전염성기관지염 및 호산구성 기관지염을 포함하는, 기관지염; 폐기종; 기관지 확장증; 낭포성섬유증; 과민성폐렴; 잠재 섬유성 폐포염, 특발성 간질성 폐렴, 항종양 치료와 만성 감염 합병증으로 인한 섬유화를 포함하는, 폐섬유증; 폐혈관의 혈관염과 혈전 형성 질환 및 폐동맥고압; 비염: 약물성 비염 및 혈관 운동성 비염을 포함하는 급성비염 및 만성비염; 신경성 비염을 포함하는 다년성 알레르기 비염 및 계절성 알레르기성 비염; 감기 및 호흡기세포융합바이러스, 인플루엔자, 코로나바이러스 및 아데노바이러스로 인한 감기를 포함하는, 급성 바이러스 감염;과 같은 호흡기 질환이며,
여기서, 상기 CCR4-매개 질환은 바람직하게는 천식, COPD 및 비염인 것을 특징으로 하는 용도.
하기 식I로 표시되는 화합물의 제조방법으로서,
여기서, M은 Li, Na, K, Rb 또는 Cs와 같은 일가 알칼리 금속이며, 바람직하게는 Na 또는 K이며,

상기 방법은 하기 식의 화합물6과 상기 알칼리 금속 M의 강알칼리를 유기용매에서 교반하여 반응시킨 후, 여과 건조하는 단계를 포함하며,

여기서, 화합물6과 상기 알칼리 금속 M의 강알칼리의 몰비는 바람직하게는 1:0.5~2이고, 더 바람직하게는 약 1:1이다.
제9항에 있어서,
상기 M의 강알칼리는 M의 수산화물 또는 M의 알콕시드이며, 상기 방법은 화합물6을 유기용매에 용해시킨 후, MH 또는 M의 알콕시드를 첨가하여, 교반하여 반응시킨 후, 여과 건조하는 단계를 포함하는 방법.