KR20200015523A - 유전자의 노린 유도 발현 및 질환을 치료하기 위한 이의 용도 - Google Patents
유전자의 노린 유도 발현 및 질환을 치료하기 위한 이의 용도 Download PDFInfo
- Publication number
- KR20200015523A KR20200015523A KR1020197035946A KR20197035946A KR20200015523A KR 20200015523 A KR20200015523 A KR 20200015523A KR 1020197035946 A KR1020197035946 A KR 1020197035946A KR 20197035946 A KR20197035946 A KR 20197035946A KR 20200015523 A KR20200015523 A KR 20200015523A
- Authority
- KR
- South Korea
- Prior art keywords
- norin
- expression
- genes
- retinal
- casp3
- Prior art date
Links
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 title claims abstract description 75
- 230000014509 gene expression Effects 0.000 title claims abstract description 49
- 201000010099 disease Diseases 0.000 title description 7
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 title description 7
- 238000000034 method Methods 0.000 claims abstract description 37
- 108090000397 Caspase 3 Proteins 0.000 claims abstract description 17
- 108010018828 cadherin 5 Proteins 0.000 claims abstract description 17
- 102000008790 VE-cadherin Human genes 0.000 claims abstract description 16
- 102000003952 Caspase 3 Human genes 0.000 claims abstract description 15
- -1 CLCL6 Proteins 0.000 claims abstract description 13
- 101000762366 Homo sapiens Bone morphogenetic protein 2 Proteins 0.000 claims abstract description 11
- 102100024506 Bone morphogenetic protein 2 Human genes 0.000 claims abstract description 10
- 102100026966 Thrombomodulin Human genes 0.000 claims abstract description 10
- 102100039339 Atrial natriuretic peptide receptor 1 Human genes 0.000 claims abstract description 8
- 102100035023 Carboxypeptidase B2 Human genes 0.000 claims abstract description 8
- 101000961044 Homo sapiens Atrial natriuretic peptide receptor 1 Proteins 0.000 claims abstract description 8
- 101000946518 Homo sapiens Carboxypeptidase B2 Proteins 0.000 claims abstract description 8
- 101000940068 Homo sapiens Collagen alpha-1(XVIII) chain Proteins 0.000 claims abstract description 7
- 101000595923 Homo sapiens Placenta growth factor Proteins 0.000 claims abstract description 7
- 101000763314 Homo sapiens Thrombomodulin Proteins 0.000 claims abstract description 7
- 102100035194 Placenta growth factor Human genes 0.000 claims abstract description 7
- 102100031162 Collagen alpha-1(XVIII) chain Human genes 0.000 claims abstract description 6
- 102100020997 Fractalkine Human genes 0.000 claims abstract description 6
- 101000854520 Homo sapiens Fractalkine Proteins 0.000 claims abstract description 6
- 101000852992 Homo sapiens Interleukin-12 subunit beta Proteins 0.000 claims abstract description 6
- 101000873418 Homo sapiens P-selectin glycoprotein ligand 1 Proteins 0.000 claims abstract description 6
- 102100036701 Interleukin-12 subunit beta Human genes 0.000 claims abstract description 6
- 102100034925 P-selectin glycoprotein ligand 1 Human genes 0.000 claims abstract description 6
- 108010005939 Ciliary Neurotrophic Factor Proteins 0.000 claims abstract description 4
- 102100031614 Ciliary neurotrophic factor Human genes 0.000 claims abstract description 4
- 102100038446 Claudin-5 Human genes 0.000 claims abstract description 4
- 101000936738 Coturnix japonica Astacin-like metalloendopeptidase Proteins 0.000 claims abstract description 4
- 101000882896 Homo sapiens Claudin-5 Proteins 0.000 claims abstract description 4
- 101000655540 Homo sapiens Protransforming growth factor alpha Proteins 0.000 claims abstract description 4
- 101000794562 Naegleria gruberi Calmodulin, flagellar Proteins 0.000 claims abstract description 4
- 102100040990 Platelet-derived growth factor subunit B Human genes 0.000 claims abstract description 4
- 108010019674 Proto-Oncogene Proteins c-sis Proteins 0.000 claims abstract description 4
- 102100032350 Protransforming growth factor alpha Human genes 0.000 claims abstract description 4
- 102100021866 Hepatocyte growth factor Human genes 0.000 claims abstract 2
- 101000898034 Homo sapiens Hepatocyte growth factor Proteins 0.000 claims abstract 2
- 101001076408 Homo sapiens Interleukin-6 Proteins 0.000 claims abstract 2
- 101000868152 Homo sapiens Son of sevenless homolog 1 Proteins 0.000 claims abstract 2
- 108010073929 Vascular Endothelial Growth Factor A Proteins 0.000 claims description 32
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 claims description 23
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 claims description 23
- 102000004196 processed proteins & peptides Human genes 0.000 claims description 20
- 241000282414 Homo sapiens Species 0.000 claims description 19
- 229920001184 polypeptide Polymers 0.000 claims description 19
- 230000002792 vascular Effects 0.000 claims description 19
- 230000002207 retinal effect Effects 0.000 claims description 17
- 238000002347 injection Methods 0.000 claims description 13
- 239000007924 injection Substances 0.000 claims description 13
- 230000004888 barrier function Effects 0.000 claims description 12
- 102000001003 Frizzled-4 Human genes 0.000 claims description 9
- 108050007986 Frizzled-4 Proteins 0.000 claims description 9
- 206010038934 Retinopathy proliferative Diseases 0.000 claims description 9
- 239000012634 fragment Substances 0.000 claims description 9
- 102000005962 receptors Human genes 0.000 claims description 9
- 108020003175 receptors Proteins 0.000 claims description 9
- 241000283690 Bos taurus Species 0.000 claims description 5
- 102100039037 Vascular endothelial growth factor A Human genes 0.000 claims description 4
- 210000001210 retinal vessel Anatomy 0.000 claims description 4
- FWMNVWWHGCHHJJ-SKKKGAJSSA-N 4-amino-1-[(2r)-6-amino-2-[[(2r)-2-[[(2r)-2-[[(2r)-2-amino-3-phenylpropanoyl]amino]-3-phenylpropanoyl]amino]-4-methylpentanoyl]amino]hexanoyl]piperidine-4-carboxylic acid Chemical compound C([C@H](C(=O)N[C@H](CC(C)C)C(=O)N[C@H](CCCCN)C(=O)N1CCC(N)(CC1)C(O)=O)NC(=O)[C@H](N)CC=1C=CC=CC=1)C1=CC=CC=C1 FWMNVWWHGCHHJJ-SKKKGAJSSA-N 0.000 claims description 3
- COXVTLYNGOIATD-HVMBLDELSA-N CC1=C(C=CC(=C1)C1=CC(C)=C(C=C1)\N=N\C1=C(O)C2=C(N)C(=CC(=C2C=C1)S(O)(=O)=O)S(O)(=O)=O)\N=N\C1=CC=C2C(=CC(=C(N)C2=C1O)S(O)(=O)=O)S(O)(=O)=O Chemical group CC1=C(C=CC(=C1)C1=CC(C)=C(C=C1)\N=N\C1=C(O)C2=C(N)C(=CC(=C2C=C1)S(O)(=O)=O)S(O)(=O)=O)\N=N\C1=CC=C2C(=CC(=C(N)C2=C1O)S(O)(=O)=O)S(O)(=O)=O COXVTLYNGOIATD-HVMBLDELSA-N 0.000 claims description 3
- 241000699666 Mus <mouse, genus> Species 0.000 claims description 3
- 101150108126 PLAU gene Proteins 0.000 claims description 3
- 239000001045 blue dye Substances 0.000 claims description 3
- 239000000975 dye Substances 0.000 claims description 3
- 229960003699 evans blue Drugs 0.000 claims description 3
- 238000001727 in vivo Methods 0.000 claims description 3
- 241000282326 Felis catus Species 0.000 claims description 2
- 241001494479 Pecora Species 0.000 claims description 2
- 206010064930 age-related macular degeneration Diseases 0.000 claims description 2
- GNBHRKFJIUUOQI-UHFFFAOYSA-N fluorescein Chemical compound O1C(=O)C2=CC=CC=C2C21C1=CC=C(O)C=C1OC1=CC(O)=CC=C21 GNBHRKFJIUUOQI-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- 210000005167 vascular cell Anatomy 0.000 claims 2
- 241000283707 Capra Species 0.000 claims 1
- 241000700199 Cavia porcellus Species 0.000 claims 1
- 241000699800 Cricetinae Species 0.000 claims 1
- 241000283073 Equus caballus Species 0.000 claims 1
- 241000287828 Gallus gallus Species 0.000 claims 1
- 241000283973 Oryctolagus cuniculus Species 0.000 claims 1
- 241000009328 Perro Species 0.000 claims 1
- 241000700159 Rattus Species 0.000 claims 1
- 241000282898 Sus scrofa Species 0.000 claims 1
- 238000007910 systemic administration Methods 0.000 claims 1
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 abstract description 53
- 102000005789 Vascular Endothelial Growth Factors Human genes 0.000 abstract description 29
- 108010019530 Vascular Endothelial Growth Factors Proteins 0.000 abstract description 29
- 238000003776 cleavage reaction Methods 0.000 abstract description 8
- 230000007017 scission Effects 0.000 abstract description 8
- 102000011727 Caspases Human genes 0.000 abstract description 6
- 108010076667 Caspases Proteins 0.000 abstract description 6
- 102100031358 Urokinase-type plasminogen activator Human genes 0.000 abstract description 6
- 108090000715 Brain-derived neurotrophic factor Proteins 0.000 abstract description 3
- 102000004219 Brain-derived neurotrophic factor Human genes 0.000 abstract description 3
- 101001001487 Homo sapiens Phosphatidylinositol-glycan biosynthesis class F protein Proteins 0.000 abstract description 3
- 101000638886 Homo sapiens Urokinase-type plasminogen activator Proteins 0.000 abstract description 3
- 239000002243 precursor Substances 0.000 abstract description 3
- 230000003827 upregulation Effects 0.000 abstract description 3
- 208000024827 Alzheimer disease Diseases 0.000 abstract description 2
- 102000013455 Amyloid beta-Peptides Human genes 0.000 abstract description 2
- 108010090849 Amyloid beta-Peptides Proteins 0.000 abstract description 2
- 101001086785 Homo sapiens Occludin Proteins 0.000 abstract description 2
- 102100032604 Occludin Human genes 0.000 abstract description 2
- 208000020339 Spinal injury Diseases 0.000 abstract description 2
- 230000006907 apoptotic process Effects 0.000 abstract description 2
- 230000008030 elimination Effects 0.000 abstract description 2
- 238000003379 elimination reaction Methods 0.000 abstract description 2
- 230000016273 neuron death Effects 0.000 abstract description 2
- 235000018102 proteins Nutrition 0.000 description 46
- 235000001014 amino acid Nutrition 0.000 description 34
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 32
- 229940024606 amino acid Drugs 0.000 description 31
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 description 30
- 238000009472 formulation Methods 0.000 description 26
- 210000001578 tight junction Anatomy 0.000 description 23
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 22
- 210000004204 blood vessel Anatomy 0.000 description 18
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 17
- 210000001525 retina Anatomy 0.000 description 16
- 210000004155 blood-retinal barrier Anatomy 0.000 description 15
- 230000004378 blood-retinal barrier Effects 0.000 description 15
- 238000006467 substitution reaction Methods 0.000 description 15
- 230000003111 delayed effect Effects 0.000 description 14
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 14
- 210000002919 epithelial cell Anatomy 0.000 description 13
- 102000003745 Hepatocyte Growth Factor Human genes 0.000 description 12
- 108090000100 Hepatocyte Growth Factor Proteins 0.000 description 12
- 239000004005 microsphere Substances 0.000 description 12
- 208000017442 Retinal disease Diseases 0.000 description 11
- 206010038923 Retinopathy Diseases 0.000 description 11
- 108010002321 Tight Junction Proteins Proteins 0.000 description 11
- 102000000591 Tight Junction Proteins Human genes 0.000 description 11
- 108090000435 Urokinase-type plasminogen activator Proteins 0.000 description 11
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 11
- 230000001965 increasing effect Effects 0.000 description 11
- 230000037361 pathway Effects 0.000 description 11
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 11
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 10
- 210000002889 endothelial cell Anatomy 0.000 description 10
- 230000035772 mutation Effects 0.000 description 10
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 9
- DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N Glycine Chemical compound NCC(O)=O DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 8
- 102000003990 Urokinase-type plasminogen activator Human genes 0.000 description 8
- 239000000853 adhesive Substances 0.000 description 8
- 230000001070 adhesive effect Effects 0.000 description 8
- 239000000969 carrier Substances 0.000 description 8
- 230000008859 change Effects 0.000 description 8
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 8
- 238000013270 controlled release Methods 0.000 description 8
- 230000006378 damage Effects 0.000 description 8
- 230000001419 dependent effect Effects 0.000 description 8
- 229960005356 urokinase Drugs 0.000 description 8
- 230000033115 angiogenesis Effects 0.000 description 7
- QVGXLLKOCUKJST-UHFFFAOYSA-N atomic oxygen Chemical compound [O] QVGXLLKOCUKJST-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 7
- 239000003937 drug carrier Substances 0.000 description 7
- 239000003446 ligand Substances 0.000 description 7
- 239000000463 material Substances 0.000 description 7
- 239000001301 oxygen Substances 0.000 description 7
- 229910052760 oxygen Inorganic materials 0.000 description 7
- 239000008194 pharmaceutical composition Substances 0.000 description 7
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 7
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 7
- MTCFGRXMJLQNBG-REOHCLBHSA-N (2S)-2-Amino-3-hydroxypropansäure Chemical compound OC[C@H](N)C(O)=O MTCFGRXMJLQNBG-REOHCLBHSA-N 0.000 description 6
- 238000009015 Human TaqMan MicroRNA Assay kit Methods 0.000 description 6
- 102100025036 Norrin Human genes 0.000 description 6
- 206010030113 Oedema Diseases 0.000 description 6
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 6
- 125000003275 alpha amino acid group Chemical group 0.000 description 6
- 238000003491 array Methods 0.000 description 6
- 210000003161 choroid Anatomy 0.000 description 6
- 239000003085 diluting agent Substances 0.000 description 6
- LOKCTEFSRHRXRJ-UHFFFAOYSA-I dipotassium trisodium dihydrogen phosphate hydrogen phosphate dichloride Chemical compound P(=O)(O)(O)[O-].[K+].P(=O)(O)([O-])[O-].[Na+].[Na+].[Cl-].[K+].[Cl-].[Na+] LOKCTEFSRHRXRJ-UHFFFAOYSA-I 0.000 description 6
- 239000007943 implant Substances 0.000 description 6
- 210000004692 intercellular junction Anatomy 0.000 description 6
- 150000002632 lipids Chemical class 0.000 description 6
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 6
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 6
- 239000002953 phosphate buffered saline Substances 0.000 description 6
- 229920000642 polymer Polymers 0.000 description 6
- 230000000699 topical effect Effects 0.000 description 6
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 5
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 5
- 102000013446 GTP Phosphohydrolases Human genes 0.000 description 5
- 108091006109 GTPases Proteins 0.000 description 5
- PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N Glycerine Chemical compound OCC(O)CO PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- DCXYFEDJOCDNAF-REOHCLBHSA-N L-asparagine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC(N)=O DCXYFEDJOCDNAF-REOHCLBHSA-N 0.000 description 5
- ROHFNLRQFUQHCH-YFKPBYRVSA-N L-leucine Chemical compound CC(C)C[C@H](N)C(O)=O ROHFNLRQFUQHCH-YFKPBYRVSA-N 0.000 description 5
- OUYCCCASQSFEME-QMMMGPOBSA-N L-tyrosine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=C(O)C=C1 OUYCCCASQSFEME-QMMMGPOBSA-N 0.000 description 5
- 108010022233 Plasminogen Activator Inhibitor 1 Proteins 0.000 description 5
- 102100039418 Plasminogen activator inhibitor 1 Human genes 0.000 description 5
- 108050003627 Wnt Proteins 0.000 description 5
- 102000013814 Wnt Human genes 0.000 description 5
- 239000004480 active ingredient Substances 0.000 description 5
- 238000012377 drug delivery Methods 0.000 description 5
- 210000001951 dura mater Anatomy 0.000 description 5
- 229940088598 enzyme Drugs 0.000 description 5
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 5
- 230000003834 intracellular effect Effects 0.000 description 5
- 239000012528 membrane Substances 0.000 description 5
- 210000004379 membrane Anatomy 0.000 description 5
- 230000035699 permeability Effects 0.000 description 5
- 239000000546 pharmaceutical excipient Substances 0.000 description 5
- 230000002829 reductive effect Effects 0.000 description 5
- 230000011664 signaling Effects 0.000 description 5
- 230000009885 systemic effect Effects 0.000 description 5
- 102000015735 Beta-catenin Human genes 0.000 description 4
- 108060000903 Beta-catenin Proteins 0.000 description 4
- 108010064064 Junctional Adhesion Molecules Proteins 0.000 description 4
- 102000014748 Junctional Adhesion Molecules Human genes 0.000 description 4
- CKLJMWTZIZZHCS-REOHCLBHSA-N L-aspartic acid Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC(O)=O CKLJMWTZIZZHCS-REOHCLBHSA-N 0.000 description 4
- WHUUTDBJXJRKMK-VKHMYHEASA-N L-glutamic acid Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CCC(O)=O WHUUTDBJXJRKMK-VKHMYHEASA-N 0.000 description 4
- AYFVYJQAPQTCCC-GBXIJSLDSA-N L-threonine Chemical compound C[C@@H](O)[C@H](N)C(O)=O AYFVYJQAPQTCCC-GBXIJSLDSA-N 0.000 description 4
- KDXKERNSBIXSRK-UHFFFAOYSA-N Lysine Natural products NCCCCC(N)C(O)=O KDXKERNSBIXSRK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 101001128134 Mus musculus NACHT, LRR and PYD domains-containing protein 5 Proteins 0.000 description 4
- 241000699670 Mus sp. Species 0.000 description 4
- 101710085992 Norrin Proteins 0.000 description 4
- 201000010183 Papilledema Diseases 0.000 description 4
- 206010038886 Retinal oedema Diseases 0.000 description 4
- KZSNJWFQEVHDMF-UHFFFAOYSA-N Valine Natural products CC(C)C(N)C(O)=O KZSNJWFQEVHDMF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 230000002159 abnormal effect Effects 0.000 description 4
- 239000000654 additive Substances 0.000 description 4
- 229920002988 biodegradable polymer Polymers 0.000 description 4
- 230000001086 cytosolic effect Effects 0.000 description 4
- 206010012601 diabetes mellitus Diseases 0.000 description 4
- 238000010586 diagram Methods 0.000 description 4
- 230000003511 endothelial effect Effects 0.000 description 4
- 102000034356 gene-regulatory proteins Human genes 0.000 description 4
- 108091006104 gene-regulatory proteins Proteins 0.000 description 4
- 230000001939 inductive effect Effects 0.000 description 4
- 238000001990 intravenous administration Methods 0.000 description 4
- 239000002502 liposome Substances 0.000 description 4
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 4
- 230000033001 locomotion Effects 0.000 description 4
- 230000007246 mechanism Effects 0.000 description 4
- 108020004999 messenger RNA Proteins 0.000 description 4
- 239000003094 microcapsule Substances 0.000 description 4
- 230000000144 pharmacologic effect Effects 0.000 description 4
- 230000002062 proliferating effect Effects 0.000 description 4
- 230000017854 proteolysis Effects 0.000 description 4
- 201000011195 retinal edema Diseases 0.000 description 4
- 230000006641 stabilisation Effects 0.000 description 4
- 238000011105 stabilization Methods 0.000 description 4
- WVDDGKGOMKODPV-UHFFFAOYSA-N Benzyl alcohol Chemical compound OCC1=CC=CC=C1 WVDDGKGOMKODPV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 102000004127 Cytokines Human genes 0.000 description 3
- 108090000695 Cytokines Proteins 0.000 description 3
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 208000028506 Familial Exudative Vitreoretinopathies Diseases 0.000 description 3
- 102000005698 Frizzled receptors Human genes 0.000 description 3
- 108010045438 Frizzled receptors Proteins 0.000 description 3
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 description 3
- WHUUTDBJXJRKMK-UHFFFAOYSA-N Glutamic acid Natural products OC(=O)C(N)CCC(O)=O WHUUTDBJXJRKMK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 239000004471 Glycine Substances 0.000 description 3
- QNAYBMKLOCPYGJ-REOHCLBHSA-N L-alanine Chemical compound C[C@H](N)C(O)=O QNAYBMKLOCPYGJ-REOHCLBHSA-N 0.000 description 3
- COLNVLDHVKWLRT-QMMMGPOBSA-N L-phenylalanine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=CC=C1 COLNVLDHVKWLRT-QMMMGPOBSA-N 0.000 description 3
- 108010052285 Membrane Proteins Proteins 0.000 description 3
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 3
- 108091028043 Nucleic acid sequence Proteins 0.000 description 3
- 102000013566 Plasminogen Human genes 0.000 description 3
- 108010051456 Plasminogen Proteins 0.000 description 3
- 229920000954 Polyglycolide Polymers 0.000 description 3
- 229920001710 Polyorthoester Polymers 0.000 description 3
- 239000004372 Polyvinyl alcohol Substances 0.000 description 3
- DNIAPMSPPWPWGF-UHFFFAOYSA-N Propylene glycol Chemical compound CC(O)CO DNIAPMSPPWPWGF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 108090000190 Thrombin Proteins 0.000 description 3
- 108010079274 Thrombomodulin Proteins 0.000 description 3
- 108091008605 VEGF receptors Proteins 0.000 description 3
- 230000009471 action Effects 0.000 description 3
- 230000004913 activation Effects 0.000 description 3
- 235000004279 alanine Nutrition 0.000 description 3
- 238000003556 assay Methods 0.000 description 3
- WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N beta-D-glucose Chemical compound OC[C@H]1O[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N 0.000 description 3
- 230000004071 biological effect Effects 0.000 description 3
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 3
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 3
- 230000017531 blood circulation Effects 0.000 description 3
- 210000004556 brain Anatomy 0.000 description 3
- 239000002775 capsule Substances 0.000 description 3
- 230000017455 cell-cell adhesion Effects 0.000 description 3
- 239000006071 cream Substances 0.000 description 3
- 230000003247 decreasing effect Effects 0.000 description 3
- 239000008121 dextrose Substances 0.000 description 3
- 239000006185 dispersion Substances 0.000 description 3
- 239000002552 dosage form Substances 0.000 description 3
- 230000034964 establishment of cell polarity Effects 0.000 description 3
- 201000006902 exudative vitreoretinopathy Diseases 0.000 description 3
- 230000020764 fibrinolysis Effects 0.000 description 3
- 239000000499 gel Substances 0.000 description 3
- 239000003102 growth factor Substances 0.000 description 3
- 230000000302 ischemic effect Effects 0.000 description 3
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 3
- 230000007935 neutral effect Effects 0.000 description 3
- 210000000056 organ Anatomy 0.000 description 3
- 230000002093 peripheral effect Effects 0.000 description 3
- 230000026731 phosphorylation Effects 0.000 description 3
- 238000006366 phosphorylation reaction Methods 0.000 description 3
- 229920000747 poly(lactic acid) Polymers 0.000 description 3
- 229920002451 polyvinyl alcohol Polymers 0.000 description 3
- 210000003583 retinal pigment epithelium Anatomy 0.000 description 3
- 238000003757 reverse transcription PCR Methods 0.000 description 3
- 210000003786 sclera Anatomy 0.000 description 3
- 230000019491 signal transduction Effects 0.000 description 3
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 3
- 238000010561 standard procedure Methods 0.000 description 3
- 238000007920 subcutaneous administration Methods 0.000 description 3
- 208000024891 symptom Diseases 0.000 description 3
- 230000000946 synaptic effect Effects 0.000 description 3
- 239000003826 tablet Substances 0.000 description 3
- 229940124597 therapeutic agent Drugs 0.000 description 3
- 229960004072 thrombin Drugs 0.000 description 3
- YBJHBAHKTGYVGT-ZKWXMUAHSA-N (+)-Biotin Chemical compound N1C(=O)N[C@@H]2[C@H](CCCCC(=O)O)SC[C@@H]21 YBJHBAHKTGYVGT-ZKWXMUAHSA-N 0.000 description 2
- 102000007469 Actins Human genes 0.000 description 2
- 108010085238 Actins Proteins 0.000 description 2
- 239000004475 Arginine Substances 0.000 description 2
- CIWBSHSKHKDKBQ-JLAZNSOCSA-N Ascorbic acid Chemical compound OC[C@H](O)[C@H]1OC(=O)C(O)=C1O CIWBSHSKHKDKBQ-JLAZNSOCSA-N 0.000 description 2
- DCXYFEDJOCDNAF-UHFFFAOYSA-N Asparagine Natural products OC(=O)C(N)CC(N)=O DCXYFEDJOCDNAF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N Atomic nitrogen Chemical compound N#N IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 108091003079 Bovine Serum Albumin Proteins 0.000 description 2
- 102400000667 Brain natriuretic peptide 32 Human genes 0.000 description 2
- 101800000407 Brain natriuretic peptide 32 Proteins 0.000 description 2
- 101800002247 Brain natriuretic peptide 45 Proteins 0.000 description 2
- 101710179555 Carboxypeptidase 2 Proteins 0.000 description 2
- 108010035532 Collagen Proteins 0.000 description 2
- 102000008186 Collagen Human genes 0.000 description 2
- 108010001463 Collagen Type XVIII Proteins 0.000 description 2
- 102000047200 Collagen Type XVIII Human genes 0.000 description 2
- 241001269524 Dura Species 0.000 description 2
- 108010037362 Extracellular Matrix Proteins Proteins 0.000 description 2
- 102000010834 Extracellular Matrix Proteins Human genes 0.000 description 2
- 108091007911 GSKs Proteins 0.000 description 2
- 102000004103 Glycogen Synthase Kinases Human genes 0.000 description 2
- 241000282412 Homo Species 0.000 description 2
- 101000979761 Homo sapiens Norrin Proteins 0.000 description 2
- 206010061218 Inflammation Diseases 0.000 description 2
- AGPKZVBTJJNPAG-WHFBIAKZSA-N L-isoleucine Chemical compound CC[C@H](C)[C@H](N)C(O)=O AGPKZVBTJJNPAG-WHFBIAKZSA-N 0.000 description 2
- KZSNJWFQEVHDMF-BYPYZUCNSA-N L-valine Chemical compound CC(C)[C@H](N)C(O)=O KZSNJWFQEVHDMF-BYPYZUCNSA-N 0.000 description 2
- ROHFNLRQFUQHCH-UHFFFAOYSA-N Leucine Natural products CC(C)CC(N)C(O)=O ROHFNLRQFUQHCH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000004472 Lysine Substances 0.000 description 2
- 208000001344 Macular Edema Diseases 0.000 description 2
- 206010025415 Macular oedema Diseases 0.000 description 2
- 241000124008 Mammalia Species 0.000 description 2
- 102000002151 Microfilament Proteins Human genes 0.000 description 2
- 101150060710 NPR1 gene Proteins 0.000 description 2
- 206010028980 Neoplasm Diseases 0.000 description 2
- 102000045595 Phosphoprotein Phosphatases Human genes 0.000 description 2
- 108700019535 Phosphoprotein Phosphatases Proteins 0.000 description 2
- 108091000080 Phosphotransferase Proteins 0.000 description 2
- 229920002732 Polyanhydride Polymers 0.000 description 2
- 102000001253 Protein Kinase Human genes 0.000 description 2
- 206010038848 Retinal detachment Diseases 0.000 description 2
- 208000014139 Retinal vascular disease Diseases 0.000 description 2
- 206010038933 Retinopathy of prematurity Diseases 0.000 description 2
- MTCFGRXMJLQNBG-UHFFFAOYSA-N Serine Natural products OCC(N)C(O)=O MTCFGRXMJLQNBG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 108010019965 Spectrin Proteins 0.000 description 2
- 102000005890 Spectrin Human genes 0.000 description 2
- 101710172711 Structural protein Proteins 0.000 description 2
- AYFVYJQAPQTCCC-UHFFFAOYSA-N Threonine Natural products CC(O)C(N)C(O)=O AYFVYJQAPQTCCC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000004473 Threonine Substances 0.000 description 2
- 102000003978 Tissue Plasminogen Activator Human genes 0.000 description 2
- 108090000373 Tissue Plasminogen Activator Proteins 0.000 description 2
- 108091023040 Transcription factor Proteins 0.000 description 2
- 102000040945 Transcription factor Human genes 0.000 description 2
- 102100033177 Vascular endothelial growth factor receptor 2 Human genes 0.000 description 2
- 241000251539 Vertebrata <Metazoa> Species 0.000 description 2
- 230000004156 Wnt signaling pathway Effects 0.000 description 2
- 230000002378 acidificating effect Effects 0.000 description 2
- 125000000539 amino acid group Chemical group 0.000 description 2
- 230000001772 anti-angiogenic effect Effects 0.000 description 2
- 239000003963 antioxidant agent Substances 0.000 description 2
- 235000006708 antioxidants Nutrition 0.000 description 2
- ODKSFYDXXFIFQN-UHFFFAOYSA-N arginine Natural products OC(=O)C(N)CCCNC(N)=N ODKSFYDXXFIFQN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 235000009582 asparagine Nutrition 0.000 description 2
- 229960001230 asparagine Drugs 0.000 description 2
- 239000011324 bead Substances 0.000 description 2
- 239000004621 biodegradable polymer Substances 0.000 description 2
- 230000000740 bleeding effect Effects 0.000 description 2
- 229940098773 bovine serum albumin Drugs 0.000 description 2
- 239000000872 buffer Substances 0.000 description 2
- 230000015556 catabolic process Effects 0.000 description 2
- 230000024245 cell differentiation Effects 0.000 description 2
- 230000004663 cell proliferation Effects 0.000 description 2
- 230000001413 cellular effect Effects 0.000 description 2
- 239000011247 coating layer Substances 0.000 description 2
- 229920001436 collagen Polymers 0.000 description 2
- 238000012790 confirmation Methods 0.000 description 2
- 235000018417 cysteine Nutrition 0.000 description 2
- XUJNEKJLAYXESH-UHFFFAOYSA-N cysteine Natural products SCC(N)C(O)=O XUJNEKJLAYXESH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 210000004292 cytoskeleton Anatomy 0.000 description 2
- 238000012217 deletion Methods 0.000 description 2
- 230000037430 deletion Effects 0.000 description 2
- 238000009792 diffusion process Methods 0.000 description 2
- 230000003828 downregulation Effects 0.000 description 2
- 210000002472 endoplasmic reticulum Anatomy 0.000 description 2
- 238000013265 extended release Methods 0.000 description 2
- 239000000835 fiber Substances 0.000 description 2
- 238000002073 fluorescence micrograph Methods 0.000 description 2
- 239000007850 fluorescent dye Substances 0.000 description 2
- 239000011521 glass Substances 0.000 description 2
- ZDXPYRJPNDTMRX-UHFFFAOYSA-N glutamine Natural products OC(=O)C(N)CCC(N)=O ZDXPYRJPNDTMRX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 235000004554 glutamine Nutrition 0.000 description 2
- 235000011187 glycerol Nutrition 0.000 description 2
- 230000012010 growth Effects 0.000 description 2
- JYGXADMDTFJGBT-VWUMJDOOSA-N hydrocortisone Chemical compound O=C1CC[C@]2(C)[C@H]3[C@@H](O)C[C@](C)([C@@](CC4)(O)C(=O)CO)[C@@H]4[C@@H]3CCC2=C1 JYGXADMDTFJGBT-VWUMJDOOSA-N 0.000 description 2
- 230000002209 hydrophobic effect Effects 0.000 description 2
- 230000001976 improved effect Effects 0.000 description 2
- 230000002757 inflammatory effect Effects 0.000 description 2
- 230000004054 inflammatory process Effects 0.000 description 2
- 238000001802 infusion Methods 0.000 description 2
- 230000005764 inhibitory process Effects 0.000 description 2
- 238000003780 insertion Methods 0.000 description 2
- 230000037431 insertion Effects 0.000 description 2
- 230000003993 interaction Effects 0.000 description 2
- 210000003093 intracellular space Anatomy 0.000 description 2
- 150000002500 ions Chemical class 0.000 description 2
- 229960000310 isoleucine Drugs 0.000 description 2
- AGPKZVBTJJNPAG-UHFFFAOYSA-N isoleucine Natural products CCC(C)C(N)C(O)=O AGPKZVBTJJNPAG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000010410 layer Substances 0.000 description 2
- 201000010230 macular retinal edema Diseases 0.000 description 2
- 235000010270 methyl p-hydroxybenzoate Nutrition 0.000 description 2
- 210000004925 microvascular endothelial cell Anatomy 0.000 description 2
- 230000005012 migration Effects 0.000 description 2
- 238000013508 migration Methods 0.000 description 2
- 210000001616 monocyte Anatomy 0.000 description 2
- HPNRHPKXQZSDFX-OAQDCNSJSA-N nesiritide Chemical compound C([C@H]1C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CCSC)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@H](C(N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CSSC[C@@H](C(=O)N1)NC(=O)CNC(=O)[C@H](CO)NC(=O)CNC(=O)[C@H](CCC(N)=O)NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@H](CCSC)NC(=O)[C@H](CCCCN)NC(=O)[C@H]1N(CCC1)C(=O)[C@@H](N)CO)C(C)C)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CC=1N=CNC=1)C(O)=O)=O)[C@@H](C)CC)C1=CC=CC=C1 HPNRHPKXQZSDFX-OAQDCNSJSA-N 0.000 description 2
- 238000010606 normalization Methods 0.000 description 2
- 210000004940 nucleus Anatomy 0.000 description 2
- 235000018343 nutrient deficiency Nutrition 0.000 description 2
- 239000003921 oil Substances 0.000 description 2
- 239000002674 ointment Substances 0.000 description 2
- 230000001582 osteoblastic effect Effects 0.000 description 2
- 102000006271 p21-Activated Kinases Human genes 0.000 description 2
- 108010058266 p21-Activated Kinases Proteins 0.000 description 2
- 239000002245 particle Substances 0.000 description 2
- COLNVLDHVKWLRT-UHFFFAOYSA-N phenylalanine Natural products OC(=O)C(N)CC1=CC=CC=C1 COLNVLDHVKWLRT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 102000020233 phosphotransferase Human genes 0.000 description 2
- 230000001766 physiological effect Effects 0.000 description 2
- 239000000843 powder Substances 0.000 description 2
- 239000003755 preservative agent Substances 0.000 description 2
- 230000035755 proliferation Effects 0.000 description 2
- 108060006633 protein kinase Proteins 0.000 description 2
- 230000008439 repair process Effects 0.000 description 2
- 210000003660 reticulum Anatomy 0.000 description 2
- 230000004264 retinal detachment Effects 0.000 description 2
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 2
- 239000008223 sterile water Substances 0.000 description 2
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 2
- 239000013589 supplement Substances 0.000 description 2
- 239000000829 suppository Substances 0.000 description 2
- 239000000375 suspending agent Substances 0.000 description 2
- 229960000187 tissue plasminogen activator Drugs 0.000 description 2
- 230000032258 transport Effects 0.000 description 2
- OUYCCCASQSFEME-UHFFFAOYSA-N tyrosine Natural products OC(=O)C(N)CC1=CC=C(O)C=C1 OUYCCCASQSFEME-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000004474 valine Substances 0.000 description 2
- 230000008728 vascular permeability Effects 0.000 description 2
- 239000008215 water for injection Substances 0.000 description 2
- 108091032973 (ribonucleotides)n+m Proteins 0.000 description 1
- 108010088751 Albumins Proteins 0.000 description 1
- 102000009027 Albumins Human genes 0.000 description 1
- 102220495838 Alkaline ceramidase 1_S29A_mutation Human genes 0.000 description 1
- GUBGYTABKSRVRQ-XLOQQCSPSA-N Alpha-Lactose Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1O[C@@H]1[C@@H](CO)O[C@H](O)[C@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-XLOQQCSPSA-N 0.000 description 1
- 206010002091 Anaesthesia Diseases 0.000 description 1
- MLDQJTXFUGDVEO-UHFFFAOYSA-N BAY-43-9006 Chemical compound C1=NC(C(=O)NC)=CC(OC=2C=CC(NC(=O)NC=3C=C(C(Cl)=CC=3)C(F)(F)F)=CC=2)=C1 MLDQJTXFUGDVEO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 101150099550 COL18A1 gene Proteins 0.000 description 1
- OYPRJOBELJOOCE-UHFFFAOYSA-N Calcium Chemical compound [Ca] OYPRJOBELJOOCE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000282472 Canis lupus familiaris Species 0.000 description 1
- 102000005367 Carboxypeptidases Human genes 0.000 description 1
- 108010006303 Carboxypeptidases Proteins 0.000 description 1
- 208000024172 Cardiovascular disease Diseases 0.000 description 1
- 108010001857 Cell Surface Receptors Proteins 0.000 description 1
- 102000000844 Cell Surface Receptors Human genes 0.000 description 1
- 206010053567 Coagulopathies Diseases 0.000 description 1
- 208000011231 Crohn disease Diseases 0.000 description 1
- 102000016736 Cyclin Human genes 0.000 description 1
- 108050006400 Cyclin Proteins 0.000 description 1
- FBPFZTCFMRRESA-KVTDHHQDSA-N D-Mannitol Chemical compound OC[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)CO FBPFZTCFMRRESA-KVTDHHQDSA-N 0.000 description 1
- 229920002307 Dextran Polymers 0.000 description 1
- SHIBSTMRCDJXLN-UHFFFAOYSA-N Digoxigenin Natural products C1CC(C2C(C3(C)CCC(O)CC3CC2)CC2O)(O)C2(C)C1C1=CC(=O)OC1 SHIBSTMRCDJXLN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102000017944 Dishevelled Human genes 0.000 description 1
- 108050007016 Dishevelled Proteins 0.000 description 1
- KCXVZYZYPLLWCC-UHFFFAOYSA-N EDTA Chemical compound OC(=O)CN(CC(O)=O)CCN(CC(O)=O)CC(O)=O KCXVZYZYPLLWCC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000002965 ELISA Methods 0.000 description 1
- 102220542351 Endogenous retrovirus group K member 113 Pro protein_S28A_mutation Human genes 0.000 description 1
- 108010079505 Endostatins Proteins 0.000 description 1
- 102100038591 Endothelial cell-selective adhesion molecule Human genes 0.000 description 1
- 241000283086 Equidae Species 0.000 description 1
- 101710181403 Frizzled Proteins 0.000 description 1
- AEMRFAOFKBGASW-UHFFFAOYSA-N Glycolic acid Polymers OCC(O)=O AEMRFAOFKBGASW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102000016285 Guanine Nucleotide Exchange Factors Human genes 0.000 description 1
- 108010067218 Guanine Nucleotide Exchange Factors Proteins 0.000 description 1
- 101000794587 Homo sapiens Cadherin-5 Proteins 0.000 description 1
- 101000882622 Homo sapiens Endothelial cell-selective adhesion molecule Proteins 0.000 description 1
- 101001043594 Homo sapiens Low-density lipoprotein receptor-related protein 5 Proteins 0.000 description 1
- 206010020772 Hypertension Diseases 0.000 description 1
- DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M Ilexoside XXIX Chemical compound C[C@@H]1CC[C@@]2(CC[C@@]3(C(=CC[C@H]4[C@]3(CC[C@@H]5[C@@]4(CC[C@@H](C5(C)C)OS(=O)(=O)[O-])C)C)[C@@H]2[C@]1(C)O)C)C(=O)O[C@H]6[C@@H]([C@H]([C@@H]([C@H](O6)CO)O)O)O.[Na+] DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M 0.000 description 1
- 208000026350 Inborn Genetic disease Diseases 0.000 description 1
- 208000022559 Inflammatory bowel disease Diseases 0.000 description 1
- 102220465608 Insulin-like growth factor II_R64E_mutation Human genes 0.000 description 1
- ZDXPYRJPNDTMRX-VKHMYHEASA-N L-glutamine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CCC(N)=O ZDXPYRJPNDTMRX-VKHMYHEASA-N 0.000 description 1
- FFEARJCKVFRZRR-BYPYZUCNSA-N L-methionine Chemical compound CSCC[C@H](N)C(O)=O FFEARJCKVFRZRR-BYPYZUCNSA-N 0.000 description 1
- QIVBCDIJIAJPQS-VIFPVBQESA-N L-tryptophane Chemical compound C1=CC=C2C(C[C@H](N)C(O)=O)=CNC2=C1 QIVBCDIJIAJPQS-VIFPVBQESA-N 0.000 description 1
- 239000002147 L01XE04 - Sunitinib Substances 0.000 description 1
- 239000005511 L01XE05 - Sorafenib Substances 0.000 description 1
- 239000002136 L01XE07 - Lapatinib Substances 0.000 description 1
- GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N Lactose Natural products OC[C@H]1O[C@@H](O[C@H]2[C@H](O)[C@@H](O)C(O)O[C@@H]2CO)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N 0.000 description 1
- 102000004895 Lipoproteins Human genes 0.000 description 1
- 108090001030 Lipoproteins Proteins 0.000 description 1
- 229930195725 Mannitol Natural products 0.000 description 1
- 102000018697 Membrane Proteins Human genes 0.000 description 1
- 206010027476 Metastases Diseases 0.000 description 1
- 108010040897 Microfilament Proteins Proteins 0.000 description 1
- 102100038895 Myc proto-oncogene protein Human genes 0.000 description 1
- 101710135898 Myc proto-oncogene protein Proteins 0.000 description 1
- 101150025720 NDP gene Proteins 0.000 description 1
- 206010029113 Neovascularisation Diseases 0.000 description 1
- 102220596838 Non-structural maintenance of chromosomes element 1 homolog_R38A_mutation Human genes 0.000 description 1
- 238000013355 OIR mouse model Methods 0.000 description 1
- 208000012868 Overgrowth Diseases 0.000 description 1
- 101150038998 PLAUR gene Proteins 0.000 description 1
- 229910019142 PO4 Inorganic materials 0.000 description 1
- 102000035195 Peptidases Human genes 0.000 description 1
- 108091005804 Peptidases Proteins 0.000 description 1
- ONIBWKKTOPOVIA-UHFFFAOYSA-N Proline Natural products OC(=O)C1CCCN1 ONIBWKKTOPOVIA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000004365 Protease Substances 0.000 description 1
- 108010076504 Protein Sorting Signals Proteins 0.000 description 1
- 102000004022 Protein-Tyrosine Kinases Human genes 0.000 description 1
- 108090000412 Protein-Tyrosine Kinases Proteins 0.000 description 1
- 206010064714 Radiation retinopathy Diseases 0.000 description 1
- 230000010799 Receptor Interactions Effects 0.000 description 1
- 102220492229 Replication stress response regulator SDE2_R37A_mutation Human genes 0.000 description 1
- 206010057430 Retinal injury Diseases 0.000 description 1
- 206010038926 Retinopathy hypertensive Diseases 0.000 description 1
- 208000032458 Retinopathy solar Diseases 0.000 description 1
- 108010005020 Serine Peptidase Inhibitor Kazal-Type 5 Proteins 0.000 description 1
- 102000012479 Serine Proteases Human genes 0.000 description 1
- 108010022999 Serine Proteases Proteins 0.000 description 1
- 102100025420 Serine protease inhibitor Kazal-type 5 Human genes 0.000 description 1
- 101150035628 Serpine1 gene Proteins 0.000 description 1
- DWAQJAXMDSEUJJ-UHFFFAOYSA-M Sodium bisulfite Chemical compound [Na+].OS([O-])=O DWAQJAXMDSEUJJ-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 229920002472 Starch Polymers 0.000 description 1
- 108010016283 TCF Transcription Factors Proteins 0.000 description 1
- 102000000479 TCF Transcription Factors Human genes 0.000 description 1
- 101150026337 THBD gene Proteins 0.000 description 1
- 101710150448 Transcriptional regulator Myc Proteins 0.000 description 1
- 102000004887 Transforming Growth Factor beta Human genes 0.000 description 1
- 108090001012 Transforming Growth Factor beta Proteins 0.000 description 1
- QIVBCDIJIAJPQS-UHFFFAOYSA-N Tryptophan Natural products C1=CC=C2C(CC(N)C(O)=O)=CNC2=C1 QIVBCDIJIAJPQS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 208000036866 Vitreoretinopathy Diseases 0.000 description 1
- 208000027418 Wounds and injury Diseases 0.000 description 1
- 239000003655 absorption accelerator Substances 0.000 description 1
- 150000001242 acetic acid derivatives Chemical class 0.000 description 1
- 108091000387 actin binding proteins Proteins 0.000 description 1
- 239000012190 activator Substances 0.000 description 1
- 230000000996 additive effect Effects 0.000 description 1
- 230000002411 adverse Effects 0.000 description 1
- 150000001298 alcohols Chemical class 0.000 description 1
- 230000037005 anaesthesia Effects 0.000 description 1
- 239000012491 analyte Substances 0.000 description 1
- 230000002491 angiogenic effect Effects 0.000 description 1
- 239000003242 anti bacterial agent Substances 0.000 description 1
- 229940124599 anti-inflammatory drug Drugs 0.000 description 1
- 239000003146 anticoagulant agent Substances 0.000 description 1
- 229940127219 anticoagulant drug Drugs 0.000 description 1
- 238000013459 approach Methods 0.000 description 1
- 239000012062 aqueous buffer Substances 0.000 description 1
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 description 1
- 239000007900 aqueous suspension Substances 0.000 description 1
- 235000010323 ascorbic acid Nutrition 0.000 description 1
- 229960005070 ascorbic acid Drugs 0.000 description 1
- 239000011668 ascorbic acid Substances 0.000 description 1
- 229940009098 aspartate Drugs 0.000 description 1
- 235000003704 aspartic acid Nutrition 0.000 description 1
- 230000001746 atrial effect Effects 0.000 description 1
- 229960003005 axitinib Drugs 0.000 description 1
- RITAVMQDGBJQJZ-FMIVXFBMSA-N axitinib Chemical compound CNC(=O)C1=CC=CC=C1SC1=CC=C(C(\C=C\C=2N=CC=CC=2)=NN2)C2=C1 RITAVMQDGBJQJZ-FMIVXFBMSA-N 0.000 description 1
- 239000000022 bacteriostatic agent Substances 0.000 description 1
- 230000003385 bacteriostatic effect Effects 0.000 description 1
- 230000008901 benefit Effects 0.000 description 1
- 229960000686 benzalkonium chloride Drugs 0.000 description 1
- 235000019445 benzyl alcohol Nutrition 0.000 description 1
- CADWTSSKOVRVJC-UHFFFAOYSA-N benzyl(dimethyl)azanium;chloride Chemical compound [Cl-].C[NH+](C)CC1=CC=CC=C1 CADWTSSKOVRVJC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- OQFSQFPPLPISGP-UHFFFAOYSA-N beta-carboxyaspartic acid Natural products OC(=O)C(N)C(C(O)=O)C(O)=O OQFSQFPPLPISGP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960000397 bevacizumab Drugs 0.000 description 1
- 239000011230 binding agent Substances 0.000 description 1
- 229920000249 biocompatible polymer Polymers 0.000 description 1
- 229920013641 bioerodible polymer Polymers 0.000 description 1
- 230000033228 biological regulation Effects 0.000 description 1
- 229960002685 biotin Drugs 0.000 description 1
- 235000020958 biotin Nutrition 0.000 description 1
- 239000011616 biotin Substances 0.000 description 1
- 230000023555 blood coagulation Effects 0.000 description 1
- 208000015294 blood coagulation disease Diseases 0.000 description 1
- 239000007975 buffered saline Substances 0.000 description 1
- DQXBYHZEEUGOBF-UHFFFAOYSA-N but-3-enoic acid;ethene Chemical compound C=C.OC(=O)CC=C DQXBYHZEEUGOBF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 210000004900 c-terminal fragment Anatomy 0.000 description 1
- 238000010805 cDNA synthesis kit Methods 0.000 description 1
- 229910052791 calcium Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000011575 calcium Substances 0.000 description 1
- 150000001720 carbohydrates Chemical class 0.000 description 1
- 235000014633 carbohydrates Nutrition 0.000 description 1
- 230000021164 cell adhesion Effects 0.000 description 1
- 210000003855 cell nucleus Anatomy 0.000 description 1
- 102000008373 cell-cell adhesion mediator activity proteins Human genes 0.000 description 1
- 108040002566 cell-cell adhesion mediator activity proteins Proteins 0.000 description 1
- 230000036755 cellular response Effects 0.000 description 1
- 238000005119 centrifugation Methods 0.000 description 1
- 239000002738 chelating agent Substances 0.000 description 1
- 125000003636 chemical group Chemical group 0.000 description 1
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 1
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 1
- 150000001860 citric acid derivatives Chemical class 0.000 description 1
- 239000000701 coagulant Substances 0.000 description 1
- 230000009852 coagulant defect Effects 0.000 description 1
- 230000015271 coagulation Effects 0.000 description 1
- 238000005345 coagulation Methods 0.000 description 1
- 229940110456 cocoa butter Drugs 0.000 description 1
- 235000019868 cocoa butter Nutrition 0.000 description 1
- 239000003086 colorant Substances 0.000 description 1
- 238000004440 column chromatography Methods 0.000 description 1
- 238000002648 combination therapy Methods 0.000 description 1
- 239000002299 complementary DNA Substances 0.000 description 1
- 238000013329 compounding Methods 0.000 description 1
- 238000005094 computer simulation Methods 0.000 description 1
- 238000002247 constant time method Methods 0.000 description 1
- 101150085553 cpb-2 gene Proteins 0.000 description 1
- 125000000151 cysteine group Chemical group N[C@@H](CS)C(=O)* 0.000 description 1
- 230000007423 decrease Effects 0.000 description 1
- 230000006735 deficit Effects 0.000 description 1
- 238000006731 degradation reaction Methods 0.000 description 1
- 238000002716 delivery method Methods 0.000 description 1
- 210000004443 dendritic cell Anatomy 0.000 description 1
- 238000001514 detection method Methods 0.000 description 1
- 238000011161 development Methods 0.000 description 1
- 230000018109 developmental process Effects 0.000 description 1
- QONQRTHLHBTMGP-UHFFFAOYSA-N digitoxigenin Natural products CC12CCC(C3(CCC(O)CC3CC3)C)C3C11OC1CC2C1=CC(=O)OC1 QONQRTHLHBTMGP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- SHIBSTMRCDJXLN-KCZCNTNESA-N digoxigenin Chemical compound C1([C@@H]2[C@@]3([C@@](CC2)(O)[C@H]2[C@@H]([C@@]4(C)CC[C@H](O)C[C@H]4CC2)C[C@H]3O)C)=CC(=O)OC1 SHIBSTMRCDJXLN-KCZCNTNESA-N 0.000 description 1
- 239000004205 dimethyl polysiloxane Substances 0.000 description 1
- 239000007884 disintegrant Substances 0.000 description 1
- 238000004090 dissolution Methods 0.000 description 1
- 239000002934 diuretic Substances 0.000 description 1
- 230000004064 dysfunction Effects 0.000 description 1
- 238000004945 emulsification Methods 0.000 description 1
- 239000000839 emulsion Substances 0.000 description 1
- 238000005538 encapsulation Methods 0.000 description 1
- 230000012202 endocytosis Effects 0.000 description 1
- 230000008497 endothelial barrier function Effects 0.000 description 1
- 210000003038 endothelium Anatomy 0.000 description 1
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 1
- 239000003623 enhancer Substances 0.000 description 1
- 210000000981 epithelium Anatomy 0.000 description 1
- 239000005038 ethylene vinyl acetate Substances 0.000 description 1
- 210000002744 extracellular matrix Anatomy 0.000 description 1
- 210000001723 extracellular space Anatomy 0.000 description 1
- 238000003804 extraction from natural source Methods 0.000 description 1
- 208000030533 eye disease Diseases 0.000 description 1
- 239000003889 eye drop Substances 0.000 description 1
- 229940012356 eye drops Drugs 0.000 description 1
- 239000000796 flavoring agent Substances 0.000 description 1
- 235000019634 flavors Nutrition 0.000 description 1
- 239000012530 fluid Substances 0.000 description 1
- 238000003633 gene expression assay Methods 0.000 description 1
- 238000002695 general anesthesia Methods 0.000 description 1
- 208000016361 genetic disease Diseases 0.000 description 1
- 230000002068 genetic effect Effects 0.000 description 1
- 229930195712 glutamate Natural products 0.000 description 1
- 235000013922 glutamic acid Nutrition 0.000 description 1
- 239000004220 glutamic acid Substances 0.000 description 1
- 150000002334 glycols Chemical class 0.000 description 1
- 230000013595 glycosylation Effects 0.000 description 1
- 238000006206 glycosylation reaction Methods 0.000 description 1
- 239000008187 granular material Substances 0.000 description 1
- 239000003979 granulating agent Substances 0.000 description 1
- 238000004128 high performance liquid chromatography Methods 0.000 description 1
- HNDVDQJCIGZPNO-UHFFFAOYSA-N histidine Natural products OC(=O)C(N)CC1=CN=CN1 HNDVDQJCIGZPNO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960000890 hydrocortisone Drugs 0.000 description 1
- 201000001948 hypertensive retinopathy Diseases 0.000 description 1
- 230000000984 immunochemical effect Effects 0.000 description 1
- 238000012744 immunostaining Methods 0.000 description 1
- 230000001771 impaired effect Effects 0.000 description 1
- 238000002513 implantation Methods 0.000 description 1
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 description 1
- 238000000099 in vitro assay Methods 0.000 description 1
- 238000005462 in vivo assay Methods 0.000 description 1
- 230000002779 inactivation Effects 0.000 description 1
- 238000011534 incubation Methods 0.000 description 1
- 230000006698 induction Effects 0.000 description 1
- 230000004968 inflammatory condition Effects 0.000 description 1
- 208000027866 inflammatory disease Diseases 0.000 description 1
- 239000004615 ingredient Substances 0.000 description 1
- 239000003112 inhibitor Substances 0.000 description 1
- 230000002401 inhibitory effect Effects 0.000 description 1
- 208000014674 injury Diseases 0.000 description 1
- 229910001867 inorganic solvent Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000003049 inorganic solvent Substances 0.000 description 1
- 238000007918 intramuscular administration Methods 0.000 description 1
- 238000007912 intraperitoneal administration Methods 0.000 description 1
- 238000010253 intravenous injection Methods 0.000 description 1
- QRWOVIRDHQJFDB-UHFFFAOYSA-N isobutyl cyanoacrylate Chemical compound CC(C)COC(=O)C(=C)C#N QRWOVIRDHQJFDB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000011813 knockout mouse model Methods 0.000 description 1
- 239000008101 lactose Substances 0.000 description 1
- 229960004891 lapatinib Drugs 0.000 description 1
- BCFGMOOMADDAQU-UHFFFAOYSA-N lapatinib Chemical compound O1C(CNCCS(=O)(=O)C)=CC=C1C1=CC=C(N=CN=C2NC=3C=C(Cl)C(OCC=4C=C(F)C=CC=4)=CC=3)C2=C1 BCFGMOOMADDAQU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000023404 leukocyte cell-cell adhesion Effects 0.000 description 1
- 230000000670 limiting effect Effects 0.000 description 1
- 230000004807 localization Effects 0.000 description 1
- 230000007774 longterm Effects 0.000 description 1
- 239000006210 lotion Substances 0.000 description 1
- 239000000314 lubricant Substances 0.000 description 1
- 210000002751 lymph Anatomy 0.000 description 1
- 210000003563 lymphoid tissue Anatomy 0.000 description 1
- 208000002780 macular degeneration Diseases 0.000 description 1
- VTHJTEIRLNZDEV-UHFFFAOYSA-L magnesium dihydroxide Chemical compound [OH-].[OH-].[Mg+2] VTHJTEIRLNZDEV-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 239000000347 magnesium hydroxide Substances 0.000 description 1
- 229910001862 magnesium hydroxide Inorganic materials 0.000 description 1
- 238000012423 maintenance Methods 0.000 description 1
- 230000007257 malfunction Effects 0.000 description 1
- 239000000594 mannitol Substances 0.000 description 1
- 235000010355 mannitol Nutrition 0.000 description 1
- 230000001404 mediated effect Effects 0.000 description 1
- 210000005033 mesothelial cell Anatomy 0.000 description 1
- 229910052751 metal Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000002184 metal Substances 0.000 description 1
- 230000009401 metastasis Effects 0.000 description 1
- 229930182817 methionine Natural products 0.000 description 1
- 125000002496 methyl group Chemical group [H]C([H])([H])* 0.000 description 1
- 239000004292 methyl p-hydroxybenzoate Substances 0.000 description 1
- 238000001000 micrograph Methods 0.000 description 1
- 230000020474 morphogenesis of a polarized epithelium Effects 0.000 description 1
- 210000002200 mouth mucosa Anatomy 0.000 description 1
- 238000002703 mutagenesis Methods 0.000 description 1
- 231100000350 mutagenesis Toxicity 0.000 description 1
- 239000002105 nanoparticle Substances 0.000 description 1
- 230000001452 natriuretic effect Effects 0.000 description 1
- 229910052757 nitrogen Inorganic materials 0.000 description 1
- 229940021182 non-steroidal anti-inflammatory drug Drugs 0.000 description 1
- 231100000252 nontoxic Toxicity 0.000 description 1
- 230000003000 nontoxic effect Effects 0.000 description 1
- 239000000346 nonvolatile oil Substances 0.000 description 1
- 102000039446 nucleic acids Human genes 0.000 description 1
- 108020004707 nucleic acids Proteins 0.000 description 1
- 150000007523 nucleic acids Chemical class 0.000 description 1
- 239000012053 oil suspension Substances 0.000 description 1
- 239000006186 oral dosage form Substances 0.000 description 1
- 230000002018 overexpression Effects 0.000 description 1
- 239000006201 parenteral dosage form Substances 0.000 description 1
- 239000006072 paste Substances 0.000 description 1
- 230000010412 perfusion Effects 0.000 description 1
- 210000005259 peripheral blood Anatomy 0.000 description 1
- 239000011886 peripheral blood Substances 0.000 description 1
- 235000021317 phosphate Nutrition 0.000 description 1
- 150000003013 phosphoric acid derivatives Chemical class 0.000 description 1
- 230000035790 physiological processes and functions Effects 0.000 description 1
- 239000002504 physiological saline solution Substances 0.000 description 1
- 229940012957 plasmin Drugs 0.000 description 1
- 229920003023 plastic Polymers 0.000 description 1
- 239000004033 plastic Substances 0.000 description 1
- 230000010287 polarization Effects 0.000 description 1
- 229920001983 poloxamer Polymers 0.000 description 1
- 229920000435 poly(dimethylsiloxane) Polymers 0.000 description 1
- 229920001200 poly(ethylene-vinyl acetate) Polymers 0.000 description 1
- 238000002264 polyacrylamide gel electrophoresis Methods 0.000 description 1
- 229920001610 polycaprolactone Polymers 0.000 description 1
- 229920001223 polyethylene glycol Polymers 0.000 description 1
- 108010094020 polyglycine Proteins 0.000 description 1
- 229920000232 polyglycine polymer Polymers 0.000 description 1
- 239000004633 polyglycolic acid Substances 0.000 description 1
- 239000004626 polylactic acid Substances 0.000 description 1
- 230000004481 post-translational protein modification Effects 0.000 description 1
- 230000002028 premature Effects 0.000 description 1
- 230000008569 process Effects 0.000 description 1
- 230000002250 progressing effect Effects 0.000 description 1
- 230000006785 proliferative vitreoretinopathy Effects 0.000 description 1
- 230000001737 promoting effect Effects 0.000 description 1
- 230000000644 propagated effect Effects 0.000 description 1
- 235000010232 propyl p-hydroxybenzoate Nutrition 0.000 description 1
- 239000004405 propyl p-hydroxybenzoate Substances 0.000 description 1
- QELSKZZBTMNZEB-UHFFFAOYSA-N propylparaben Chemical compound CCCOC(=O)C1=CC=C(O)C=C1 QELSKZZBTMNZEB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000004845 protein aggregation Effects 0.000 description 1
- 230000012846 protein folding Effects 0.000 description 1
- 230000005451 protein repair Effects 0.000 description 1
- 238000001243 protein synthesis Methods 0.000 description 1
- 230000004850 protein–protein interaction Effects 0.000 description 1
- 229960003876 ranibizumab Drugs 0.000 description 1
- 238000011084 recovery Methods 0.000 description 1
- 230000009467 reduction Effects 0.000 description 1
- 230000001105 regulatory effect Effects 0.000 description 1
- 230000004263 retinal angiogenesis Effects 0.000 description 1
- 210000001927 retinal artery Anatomy 0.000 description 1
- 230000004254 retinal expression Effects 0.000 description 1
- 210000000844 retinal pigment epithelial cell Anatomy 0.000 description 1
- 102220078934 rs144054843 Human genes 0.000 description 1
- 102220137167 rs756021929 Human genes 0.000 description 1
- 150000003873 salicylate salts Chemical class 0.000 description 1
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 description 1
- 238000007789 sealing Methods 0.000 description 1
- 230000028327 secretion Effects 0.000 description 1
- 238000000926 separation method Methods 0.000 description 1
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 description 1
- 230000035939 shock Effects 0.000 description 1
- 208000007056 sickle cell anemia Diseases 0.000 description 1
- 238000002741 site-directed mutagenesis Methods 0.000 description 1
- 238000004513 sizing Methods 0.000 description 1
- 150000003384 small molecules Chemical class 0.000 description 1
- 239000011734 sodium Substances 0.000 description 1
- 229910052708 sodium Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000010267 sodium hydrogen sulphite Nutrition 0.000 description 1
- 201000000824 solar retinopathy Diseases 0.000 description 1
- 239000007909 solid dosage form Substances 0.000 description 1
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 1
- 229960003787 sorafenib Drugs 0.000 description 1
- 230000002269 spontaneous effect Effects 0.000 description 1
- 238000010186 staining Methods 0.000 description 1
- 235000019698 starch Nutrition 0.000 description 1
- 239000008107 starch Substances 0.000 description 1
- 230000003637 steroidlike Effects 0.000 description 1
- 230000004936 stimulating effect Effects 0.000 description 1
- 238000003756 stirring Methods 0.000 description 1
- 239000000758 substrate Substances 0.000 description 1
- 235000000346 sugar Nutrition 0.000 description 1
- 229960001796 sunitinib Drugs 0.000 description 1
- WINHZLLDWRZWRT-ATVHPVEESA-N sunitinib Chemical compound CCN(CC)CCNC(=O)C1=C(C)NC(\C=C/2C3=CC(F)=CC=C3NC\2=O)=C1C WINHZLLDWRZWRT-ATVHPVEESA-N 0.000 description 1
- 238000001356 surgical procedure Methods 0.000 description 1
- 238000013268 sustained release Methods 0.000 description 1
- 239000012730 sustained-release form Substances 0.000 description 1
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 description 1
- 230000002194 synthesizing effect Effects 0.000 description 1
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 1
- ZRKFYGHZFMAOKI-QMGMOQQFSA-N tgfbeta Chemical compound C([C@H](NC(=O)[C@H](C(C)C)NC(=O)CNC(=O)[C@H](CCC(O)=O)NC(=O)[C@H](CCCNC(N)=N)NC(=O)[C@H](CC(N)=O)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H]([C@@H](C)O)NC(=O)[C@H](CCC(O)=O)NC(=O)[C@H]([C@@H](C)O)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)CNC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@H](CCC(N)=O)NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@@H](N)CCSC)C(C)C)[C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N[C@@H](CC=1C=CC=CC=1)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N1[C@@H](CCC1)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CC=1C=CC=CC=1)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N1[C@@H](CCC1)C(=O)N1[C@@H](CCC1)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(O)=O)C1=CC=C(O)C=C1 ZRKFYGHZFMAOKI-QMGMOQQFSA-N 0.000 description 1
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 description 1
- 230000004797 therapeutic response Effects 0.000 description 1
- 239000002562 thickening agent Substances 0.000 description 1
- 239000010409 thin film Substances 0.000 description 1
- 230000009772 tissue formation Effects 0.000 description 1
- 230000008467 tissue growth Effects 0.000 description 1
- 239000008181 tonicity modifier Substances 0.000 description 1
- 238000011200 topical administration Methods 0.000 description 1
- 239000006208 topical dosage form Substances 0.000 description 1
- 231100000331 toxic Toxicity 0.000 description 1
- 230000002588 toxic effect Effects 0.000 description 1
- 238000012546 transfer Methods 0.000 description 1
- 230000009466 transformation Effects 0.000 description 1
- 230000014616 translation Effects 0.000 description 1
- 230000006453 vascular barrier function Effects 0.000 description 1
- 230000008189 vertebrate development Effects 0.000 description 1
- 210000004127 vitreous body Anatomy 0.000 description 1
- 238000005406 washing Methods 0.000 description 1
- 230000007279 water homeostasis Effects 0.000 description 1
Images
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
- A61K38/16—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- A61K38/17—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
- A61K38/1703—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans from vertebrates
- A61K38/1709—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans from vertebrates from mammals
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K49/00—Preparations for testing in vivo
- A61K49/001—Preparation for luminescence or biological staining
- A61K49/006—Biological staining of tissues in vivo, e.g. methylene blue or toluidine blue O administered in the buccal area to detect epithelial cancer cells, dyes used for delineating tissues during surgery
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
- A61K9/0012—Galenical forms characterised by the site of application
- A61K9/0019—Injectable compositions; Intramuscular, intravenous, arterial, subcutaneous administration; Compositions to be administered through the skin in an invasive manner
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
- A61K9/0012—Galenical forms characterised by the site of application
- A61K9/0048—Eye, e.g. artificial tears
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
- A61P25/28—Drugs for disorders of the nervous system for treating neurodegenerative disorders of the central nervous system, e.g. nootropic agents, cognition enhancers, drugs for treating Alzheimer's disease or other forms of dementia
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P27/00—Drugs for disorders of the senses
- A61P27/02—Ophthalmic agents
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K49/00—Preparations for testing in vivo
- A61K49/001—Preparation for luminescence or biological staining
- A61K49/0013—Luminescence
- A61K49/0017—Fluorescence in vivo
- A61K49/0019—Fluorescence in vivo characterised by the fluorescent group, e.g. oligomeric, polymeric or dendritic molecules
- A61K49/0021—Fluorescence in vivo characterised by the fluorescent group, e.g. oligomeric, polymeric or dendritic molecules the fluorescent group being a small organic molecule
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K49/00—Preparations for testing in vivo
- A61K49/001—Preparation for luminescence or biological staining
- A61K49/0013—Luminescence
- A61K49/0017—Fluorescence in vivo
- A61K49/0019—Fluorescence in vivo characterised by the fluorescent group, e.g. oligomeric, polymeric or dendritic molecules
- A61K49/0021—Fluorescence in vivo characterised by the fluorescent group, e.g. oligomeric, polymeric or dendritic molecules the fluorescent group being a small organic molecule
- A61K49/0041—Xanthene dyes, used in vivo, e.g. administered to a mice, e.g. rhodamines, rose Bengal
- A61K49/0043—Fluorescein, used in vivo
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
- A61K9/0012—Galenical forms characterised by the site of application
- A61K9/0048—Eye, e.g. artificial tears
- A61K9/0051—Ocular inserts, ocular implants
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Public Health (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Ophthalmology & Optometry (AREA)
- Neurology (AREA)
- Neurosurgery (AREA)
- Immunology (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Marine Sciences & Fisheries (AREA)
- Zoology (AREA)
- Gastroenterology & Hepatology (AREA)
- Dermatology (AREA)
- Psychiatry (AREA)
- Hospice & Palliative Care (AREA)
- Cardiology (AREA)
- Heart & Thoracic Surgery (AREA)
- Physics & Mathematics (AREA)
- Biodiversity & Conservation Biology (AREA)
- Oncology (AREA)
- Optics & Photonics (AREA)
- Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
- Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
- Peptides Or Proteins (AREA)
Abstract
유전자 CASP3 및 THBD의 발현을 증가시키고, 유전자 COL18A1, CPB2, NPR1, OCLN, BMP2, CLCL6, IL12B, SELPLG, CX3CL1, CASP3, THBD, COL18A1, CPB2, NPR1, CLDN5, CLD3, PIGF, BDNF, CNTF, VEGF-A, CAM-1, PGF, FOX-01, FOX-04, PDGFB, TGFA, HGF, VE-카데린 또는 PLAU의 발현을 감소시키기 위한 방법이 제공된다. 결과적으로 이러한 유전자의 발현과 연관된 병태들이 치료된다. 카스파아제 3은 CASP3(GenBank 기관 승인번호: GCA_000001405.22)에 의해 암호화되며, 카스파아제 6 및 7을 절단하여 활성화하고; 이 단백질 자체는 카스파아제 8, 9 및 10에 의해 가공 및 활성화된다, 카스파아제 3은, 알츠하이머병 및 척추 손상 후 뉴런 사멸과 연관되어 있는 아밀로이드-베타 4A 전구체 단백질의 절단에 지배적으로 수반되는 카스파아제이다. 카스파아제 3은 세포자살에 연루되므로, CASP3의 상향조절은 기능장애 세포 제거를 유도하는데 이용될 수 있다.
Description
관련 출원
본 출원은 그 내용이 본원에 참조로 인용되어 있는 미국 가 명세서 특허출원 제62/501,940호(2017년 5월 5일 출원)의 우선권 이익을 주장한다.
본 발명의 분야
본 발명은, 일반적으로 조직, 예컨대 망막, 뇌 그리고 말초 혈관에 노린(norrin) 단백질을 적용하여 이러한 조직에서의 유전자 발현을 조절하는 방법; 구체적으로 질환을 치료하는데 유효한 유전자 조절을 달성하는 방법에 관한 것이다.
망막병증은 시야 결손(vision impairment)을 유발할 수 있는, 눈의 망악에 일어나는 임의의 손상이다. 망막병증은 종종 망막혈관질환, 또는 비정상 혈류에 의해 유발되는 망막 손상을 지칭한다. 종종 당뇨병 또는 고혈압에서 보이는 바와 같은 망막병증, 또는 미숙아의 경우에는 미숙아 망막병증(ROP)은 눈이 보이는 전신질환에 대한 징후이기도 하다.
망막병증 또는 망막혈관질환은 넓게는 증식성 유형 및 비 증식성 유형으로 분류될 수 있다. 이러한 망막병증 유형 둘 다는 정상이었던 망막으로의 혈류를 상이한 기작을 통해 변경시킴으로써 질환을 일으킨다. 망막은 망막중심동맥에서 뻗어나오는 작은 분지 혈관들에 의해 공급된다. 증식성 망막병증이란, 비정상적 혈관 성장에 의해 유발되는 손상을 지칭한다. 보통 혈관신생(angiogenesis)은 자연에서 발생하는 조직 성장 및 형성의 한 부분으로서, 이 혈관신생은 기존의 혈관들로부터 새로운 혈관이 형성되는 생리적 과정이다. 혈관신생이 과다하게 진행되거나 그 속도가 비정상적으로 빠르면, 신혈관화(neovascularization)라 칭하여지는 혈관의 과 성장이 일어나게 되는데, 과 성장한 혈관은 종종 망막조직 관류시 무효하고, 약하며, 손상되기 쉽다. 이처럼 약하고 손상되기 쉬운 혈관은 또한 종종 누출을 일으키기도 하여, 유체, 단백질 및 기타 파편들이 유출되어 망막으로 들어가도록 허용할 수 있다. 과 성장한 혈관은 또한 강도가 떨어져서 출혈을 일으키기 쉬운 경향을 보인다. 비 증식성 유형의 경우, 혈관 자체의 직접적인 손상 또는 기능저하로 말미암아 망막으로의 비정상적 혈류가 초래된다. 비 증식성 손상의 공통된 원인 다수로서는 고혈압성 망막병증, 미숙아 망막병증, 방사선 망막병증, 태양광 망막병증, 그리고 겸상적혈구질환과 연관된 망막병증을 포함한다.
다양한 망막병증으로 말미암은 허혈 조직에서의 산소 및 영양소 결핍을 보완하기 위해, 투과성과 관련된 시토카인은 과도하게 상향조절된다.
다양한 염증성 질환은 누출 유도성 부종에 의해 특징지어진다. 이러한 부종은 세포 수준에서 상피 세포와 내피 세포 사이의 연접 기능저하와 연관되어 있다. 이러한 유형의 염증과 관련된 그러한 기작 한 가지는, 투과성과 연관된 시토카인의 과도한 상향조절에 의해 산소와 영양소 결핍을 보완하는 허혈 조직에서의 기작이다. 혈관 내피 성장 인자(VEGF)의 과 발현은 세포 대 세포 접착 분자, 예컨대 VE-카데린(VE-cadherin) 및 클로딘-5(claudin-5) 고갈로 말미암은 혈관 투과성 증가를 초래한다. 크론병(Crohn' s disease)과 염증성 장질환은 밀착 연접 기작의 실패로 말미암아 진행되는 것으로 확인되었다(JD Schulzke et al. Ann N Y Acad Sci. 2009 May; 1165:294-300. doi: 10.1111).
내피 밀착 연접은 다수의 조직, 예컨대 혈관 및 뇌에서 발견되고, 혈관벽의 내피성 내막은 혈관 및 말초혈관 구획들 사이의 계면에 존재하는 제어 투과성 장벽을 형성한다. 비록 내피는 상기 구획 2개를 완벽하게 격리하는 효율적인 장벽으로서의 역할을 하지만, 이는 또한 장벽 내강에서 멀리 떨어져 있는 면과 내강 면 사이에서 용질과 물의 선택적 교환을 허용하는 투과성 필터로서의 역할도 할 수 있다. 밀착 연접 실패로 말미암은 평형 기능의 파괴는, 혈관조직, 림프계 및 뇌의 여러 가지 염증성 병태를 초래한다. 이러한 병태는 보통 스테로이드성 소염제 또는 비스테로이드성 소염제로 치료되지만, 이와 같은 기존의 치료제는 효능과 부작용의 관점에서 한계가 있다.
뿐 아니라 다수의 암은 오로지 혈관 내피 성장 인자(VEGF)에 의해 전파되는 혈관신생을 통해서만 진행된다. 또한, 종양의 전이에서는 이러한 세포들이 순환하며 이동하는 것을 허용하는, 세포들 사이의 연접 이완(junction loosening)이 반드시 일어나야 한다.
상피층과 내피층은 유기체의 순환계와 조직 사이에서의 이온 및 분자의 이동을 위한 교환이 일어나는 부위일 뿐만 아니라, 이러한 이동에 대한 장벽이기도 한 부위이다. 인접 상피 세포와 내피 세포 사이의 복합작용으로서는 밀착 연접 및 접착 연접을 포함한다. 척추동물 상피 세포와 내피 세포는 접착 연접과, 이 접착 연접의 첨단에 존재하는 밀착 연접을 보인다. 밀착 연접은 상피 및 내피 분극시 이를 준비하는 역할을 하며, 세포 내 공간을 통한 용질 확산에 대해 첨단-측면 장벽(apico-lateral barrier)을 확립한다(대문 기능). 밀착 연접은 또한 첨단막 및 기저측막 사이에서의 지질 및 막 단백질의 이동을 제한한다(울타리 기능). 밀착 연접은 막내 원섬유의 망상조직을 포함하는, 질서가 매우 잘 잡힌 막 접착 부위이다. 밀착 연접은 경막 단백질, 예컨대 오클루딘, 클로딘-5 및 연접 접착 분자(Junctional Adhesion Molecules; JAM) 및 다수의 세포질 주변 단백질을 포함한다. 이것들은 종래 기술 도면인 도 1에 도식적으로 보였다. 경막 단백질은 세포-세포 접착을 매개하는 한편, 시토졸 밀착 연접 반(plaque)은 내재하는 세포골격에 밀착 연접 경막 단백질을 연결해주는 다양한 유형의 단백질(예컨대 PDZ 단백질, 예컨대 ZO(Zona Occludens) 과)을 함유한다. 이러한 어댑터는 또한 조절 단백질, 예컨대 단백질 키나아제, 포스파타아제, 소 GTP아제 및 전사 인자를 밀착 연접에 보충해 주기도 한다. 결과적으로 구조 단백질(액틴 및 스펙트린)과 조절 단백질(액틴 결합 단백질, GTP아제 및 키나아제)은 경막 단백질과 병치되어 있다. 이러한 단백질 발판작업(scaffolding)은 질서가 매우 잘 잡힌 구조들, 예컨대 상피 세포 분극, 증식 및 분화를 조절하는 신호전달 패치 또는 연접 복합체의 조립을 촉진한다. 이러한 발판작업은 또한 망막색소상피에서도 유효하다.
눈 혈관조직의 증가한 투과성은 부종을 초래할 수 있다. 부종 원인, 예컨대 당뇨병에 대한 임상적 특징이 연구된 바 있지만, 망막 혈관조직의 약해진 세포간 연접을 다루는 데에는 관심이 거의 기울여지지 않았다. 혈관조직 누출과 연관된 부종은 합병증, 예컨대 황반 부종 및 삼출성 망막 박리를 일으킬 수 있다.
상피, 예컨대 망막 색소 상피는 순환계 혈액을 다른 조직과 격리하는 역할을 한다. 상피는 유기체의 순환계와 조직 사이에서의 이온 및 분자의 이동을 위한 교환이 일어나는 부위일 뿐만 아니라 이러한 이동에 대한 장벽이기도 한 부위이다. 인접 세포들 사이의 복합 작용으로서는 밀착 연접 및 접착 연접을 포함한다. 척추동물 상피 세포는 접착 연접의 첨단에 존재하는 밀착 연접을 보인다. 밀착 연접은 상피 분극시 이를 준비하는 역할을 하며, 세포 내 공간을 통한 용질 확산에 대해 첨단-측면 장벽을 확립한다(대문 기능). 밀착 연접은 또한 첨단막 및 기저측막 사이에서 지질과 막 단백질의 이동을 제한한다(울타리 기능). 밀착 연접은 막내 원섬유의 망상조직을 포함하는, 질서가 매우 잘 잡힌 막 접착 부위이다. 밀착 연접은 경막 단백질, 예컨대 오클루딘, 클로딘-5 및 연접 접착 분자(JAM) 및 다수의 세포질 주변 단백질을 포함한다. 이것들은 종래 기술 도면인 도 1에 도식적으로 보였다. 경막 단백질은 세포-세포 접착을 매개하는 한편, 시토졸 밀착 연접 반은 내재하는 세포골격에 밑착 연접 경막 단백질을 연결해주는 다양한 유형의 단백질(예컨대 PDZ 단백질, 예컨대 ZO(Zona Occludens) 과)을 함유한다. 이러한 어댑터는 또한 조절 단백질, 예컨대 단백질 키나아제, 포스파타아제, 소 GTP아제 및 전사 인자를 밀착 연접에 보충해 주기도 한다. 결과적으로 구조 단백질(액틴 및 스펙트린) 및 조절 단백질(액틴 결합 단백질, GTP아제 및 키나아제)은 경막 단백질과 병치되어 있다. 이러한 단백질 발판작업은 질서가 매우 잘 잡힌 구조들, 예컨대 상피 세포 분극, 증식 및 분화를 조절하는 신호전달 패치 또는 연접 복합체의 조립을 촉진한다. 이러한 발판작업은 또한 망막색소상피에서도 유효하다.
VEGF는 핵심 내피 세포 접착 분자, 즉 VE-카데린의 빠른 내포작용(endocytosis)을 유도함으로써 혈관의 투과성을 유도하고, 이로써 내피의 장벽 기능을 무너뜨린다. 이 과정은 Vav2(구아닌 뉴클레오티드 교환 인자)의 Src-의존적 인산화(보이지 않음)를 통하여 VEGFR에 의해 소 GTP아제, 즉 Rac이 활성화됨으로써 개시된다. 종국에 Rac 활성화는 VE-카데린의 세포 내 미부에 매우 잘 보존된 모티프의 p21-활성화 키나아제(PAK)-매개 인산화를 촉진한다. 이는 세포간 연접의 해체를 초래한다(Gavard et al., Nat Cell Biol. 2006 Nov;8(11): 1223-34. Epub 2006 Oct 22).
비 변형 밀착 연접과 함께 정상적으로 기능을 발휘하는 망막 색소 상피 세포(도 1의 좌측 패널에 보임)에서, VEGF는 자체의 대응 수용체 VEGFR에 결합하지 않고, 클로딘-5는 핵 내에서 이 클로딘-5를 암호화하는 유전자로부터 정상적으로 발현되어, 소포체에 의해 가공된다. 오클루딘, 클로딘-5 및 JAM은 함께 기능성 밀착 연접을 이루고, VE-카데린은 접착 연접을 이루어 이를 체계화한다.
이와는 대조적으로, 도 1의 우측 패널에 보인 바와 같이 VEGF가 VEGFR에 결합하면, Src/Rac/Pak 복합체는 베타-카테닌에 작용하여, 접착 연접을 탈안정화한다. 이와 같이 진행되는 캐스케이드는 클로딘-5 발현과 조립을 방해하여, 밀착 연접 구조의 소실을 초래하는 것으로 생각된다. 도 2는 다양한 유전자와, 각각의 유전자들이 혈액 망막 장벽 일체성(BRB)에 미치는 잠재적 영향력에 관한 종래 기술의 연구를 보여주는 표이다.
노리병(Norrie disease) 단백질 또는 X-연관 삼출성 유리체망막병증 2 단백질(EVR2)이라고도 공지된 노린(norrin)은 인간에서 NDP 유전자에 의해 암호화되는 단백질이다. 노린 단백질은 척추동물 망막 혈관의 발달을 조절하고, 귀의 중요한 혈관을 제어하는 신호를 유도한다. 노린은 프리즐드 4(Frizzled 4)와 큰 친화성으로 결합한다(노린은 프리즐드 수용체 하위유형 4(Fz4)에 대한 리간드임). 노린은 나노몰 단위의 친화성으로 Fz4에 결합하고(Xu, et al, Cell, 2004; 116:883-895; Clevers, Curr Biol, 2004; 14:R436-437; Nichrs, Dev Cell, 2004; 6:453-454)), 프리즐드 4 녹아웃(knockout) 마우스는 망막 혈관의 비정상적인 발달을 보인다.
노린과 Fz4의 상호작용은 세포 표면 수용체 LRP5에 의존적이다(Xu, 2004). 프리즐드 수용체는 β-카테닌 고전적 신호전달 경로에 연계된다. 프리즐드 수용체 결합을 통한 글리코겐 합성효소 키나아제(GSK) 3β 및 액신의 비활성화는 β-카테닌을 안정화하고, 추후 세포 핵 내에 β-카테닌이 축적되게 만들어, Gl-S-기 전이에 중요한 표적 유전자, 예컨대 사이클린 Dl 또는 c-Myc의 변환을 활성화한다(Willert et al., Curr Opin Genet Dev, 1998; 8:95-102). 노린 활성이 억제되면, 안 질환과 연관된 혈관신생이 방지되는 것이 확인되었다(US 2010/0129375).
지적된 바와 같이, 증식성 망막병증의 전형적 특징은 혈관의 투과성을 초래하는 과도한 VEGF 발현이다. VEGF는, 세포 대 세포 연접 단백질을 직접 인산화하고, 연접 단백질을 분해하는 효소의 발현을 증가시키며, 단핵구가 혈관 내막에 부착하는 것을 허용하는, 백혈구 접착을 유도함으로써 혈액 망막 장벽(BRB)을 파괴하기 시작한다. Wnt 신호전달 리간드인 노린을 이용한 실험은, 노린이 혈관을 안정화하여, OIR 마우스 모델 망막에서 BRB를 복구시킬 수 있음을 보였다. 리간드는 생물학적 용도로 사용되는 생물분자와 복합체를 형성하는 물질이다. 단백질-리간드 결합에서, 리간드는 일반적으로 표적 단백질상 어떤 부위에 결합함으로써 신호를 발생시키는 분자이다. 결합은 통상 표적 단백질의 입체구조 변화를 초래한다. Wnt 신호전달 경로는, 신호를 세포 표면 수용체를 통과시켜 세포에 도입하는 단백질들로 구성된 신호전달 경로의 한 군이다. Wnt 신호전달 경로 3가지, 즉 고전적 Wnt 경로, 비고전적 평면 세포 분극 경로, 그리고 비고전적 Wnt/칼슘 경로가 특성규명되었다. 이들 경로 3가지는 모두 Wnt-단백질 리간드가, 디셸브드 단백질(dishevelled protein)에 대한 생물학적 신호를 통과시켜 세포 내부에 도입하는 프리즐드 과 수용체에 결합함으로써 활성화된다.
혈액 망막 장벽(BRB)의 복구에 관한 증거는 망막 내피 세포들을 연결하는 연접 단백질, 예컨대 클로딘 및 VE-카데린을 재정립함으로써 확인되고, 고전적 Wnt 신호전달은 밀착 연접 단백질의 발현을 직접 상향조절할 수 있긴 하지만, 이는 장벽 복구를 완벽하게 해결해주지 못한다. 더욱이, 증식성 망막병증(PR)은 BRB 파괴를 초래하고, 항 VEGF는 증식을 억제한다고 공지되어 있긴 하지만, 망막 장벽에 대한 항 VEGF 효과는 오로지 일시적인 것일 뿐이다. 게다가 노린 단백질은 눈의 누출성 혈관조직과 연관된 부종을 치료함에 있어 연루되지 않지만, 노린과 함께 혈관 안정화에 기여할 수 있는 경로를 확정할 필요는 여전히 있다. 그러나 노린에의 노출로 말미암아 그 발현이 조정되는 기타 유전자는 아직까지 공지되어 있지 않다.
따라서 노린을 투여함으로써 유전자 발현을 조절하는 것과, 어떤 질환과 연관된 해당 질환의 치료를 위한 방법, 예컨대 혈관조직 누출과 연관된 망막 부종을 치료하기 위한 방법은 여전히 필요한 실정이다. 뿐 아니라 증식성 망막병증은 혈액 망막 장벽(BRB) 파괴를 초래하고, 항 VEGF는 증식을 억제하긴 하지만, 이 항 VEGF의 망막 장벽에 대한 효과는 단지 일시적일 뿐이다. 따라서 장기간의 효능이 개선된 치료법이 필요하다.
혈관조직을 노린에 노출시키는 단계와, 노린이 BMP2, CLCL6, IL12B, SELPLG, CX3CL1, CASP3, THBD, COL18A1, CPB2, NPR1, CLDN5, CLD3, PIGF, BDNF, CNTF, VEGF-A, CAM-1, PGF, FOX-01, FOX-04, PDGFB, TGFA, HGF, VE-카데린 또는 PLAU 유전자 적어도 하나의 유전자 발현을 조정하도록 충분한 시간을 허용하는 단계를 포함하는, 혈관조직 장벽을 치료하는 방법이 제공된다.
본 발명의 이와 같은 측면들과 기타 측면들은 첨부된 도면들, 그리고 이하의 발명의 상세한 설명에서 설명될 것이다.
도 1은 강조하여 표시된 세포 내 임의의 경로에서 경로를 변화시키는 VEGF의 기능을 보여주는 도면으로서, 비 변형 세포 연접을 가지는 세포(좌측 패널)와, 약화되었거나 파괴된 세포 연접을 가지는 세포(우측 패널)에 관한 종래 기술의 모식도이고;
도 2는 다양한 유전자와, 각각의 유전자가 혈액 망막 장벽 일체성에 잠재적으로 미치는 영향력에 관한 종래 기술에 따른 연구를 보여주는 표이며;
도 3은 VE-카데린 및 클로딘-5의 세포 내 발현을 유도함에 있어 본 발명의 효능이 발휘될 수 있는 경로에 관한 모식도이고;
도 4는 본 발명의 효능을 평가하기 위한 단계들의 모식도이며;
도 5는 "인간 혈관신생 성장 인자"를 검정하기 위해 구성된 어레이를 도시하고;
도 6은 "인간 내피 세포 생물학"을 검정하기 위해 구성된 어레이를 도시하며;
도 7은 배지만이 존재할 때(좌측 상단 패널), VEGF(배지 1 ml당 100 ng)에 노출되었을 때(우측 상단 패널), 노린(배지 1 ml당 250 ng)에 노출되었을 때(좌측 하단 패널), 그리고 VEGF(배지 1 ml당 100 ng)와 노린(배지 1 ml당 250 ng) 둘 다에 노출되었을 때(우측 하단 패널), 그로부터 24시간 후 VE-카데린에 대해 면역 염색된(세포 주위 경계, 그린색) 인간 망막 미세혈관 내피 세포(HRMEC)의 형광 현미경사진(배율: 20배)을 보여주는 것이고;
도 8은 배지만 존재할 때(좌측 상단 패널), VEGF(배지 1 ml당 100 ng)에 노출되었을 때(우측 상단 패널), 노린(배지 1 ml당 250 ng)에 노출되었을 때(좌측 하단 패널), 그리고 VEGF(배지 1 ml당 100 ng)와 노린(배지 1 ml당 250 ng) 둘 다에 노출되었을 때(우측 하단 패널), 그로부터 24시간 후 클로딘-5에 대해 면역 염색된(세포 주위 경계, 그린색) HRMEC의 형광 현미경사진(배율: 40배)을 보여주는 것이며;
도 9는 첨가물이 없을 때, VEGF가 첨가되었을 때, 노린이 첨가되었을 때, 또는 VEGF 및 노린의 조합이 첨가되었을 때, 그로부터 24시간 후 HRMEC 단일층 내 클로딘-5의 mRNA 발현에 관한 정규화 막대 그래프(노린이 클로딘-5 발현을 복구시키는 것을 보여줌)이고;
도 10은 눈에 주사되지 않은 마우스(좌측 패널)과 눈에 노린이 주사된 마우스(우측 패널)의 산소 유도성 망막병증(OIR) 모델 눈에서의 에반스 블루 누출을 보여주는 망막 현미경사진이며[단, 이 영상들은 노린 주사후 3일 경과시에 촬영한 것으로서, 밝은 부위(백색)는 혈관 누출이 일어났음을 보여주는 것이고, 주사된 눈은 모세혈관 망상조직이 보존되었음을 보여줌];
도 11a 및 도 11b는 상이한 처리 조건하에서 클로딘-5와 VE-카데린 각각의 상대적 발현을 보여주는 막대 그래프이고;
도 12a 및 도 12b는 상이한 처리 조건하에 7시간 및 24시간 경과시 골형성단백질 2(BMP2)의 상대적 발현을 각각 보여주는 막대 그래프이며;
도 13a 및 도 13b는 상이한 처리 조건하에 7시간 및 24시간 경과시 간세포 성장 인자(HGF)의 상대적 발현을 각각 보여주는 막대 그래프이다.
도 1은 강조하여 표시된 세포 내 임의의 경로에서 경로를 변화시키는 VEGF의 기능을 보여주는 도면으로서, 비 변형 세포 연접을 가지는 세포(좌측 패널)와, 약화되었거나 파괴된 세포 연접을 가지는 세포(우측 패널)에 관한 종래 기술의 모식도이고;
도 2는 다양한 유전자와, 각각의 유전자가 혈액 망막 장벽 일체성에 잠재적으로 미치는 영향력에 관한 종래 기술에 따른 연구를 보여주는 표이며;
도 3은 VE-카데린 및 클로딘-5의 세포 내 발현을 유도함에 있어 본 발명의 효능이 발휘될 수 있는 경로에 관한 모식도이고;
도 4는 본 발명의 효능을 평가하기 위한 단계들의 모식도이며;
도 5는 "인간 혈관신생 성장 인자"를 검정하기 위해 구성된 어레이를 도시하고;
도 6은 "인간 내피 세포 생물학"을 검정하기 위해 구성된 어레이를 도시하며;
도 7은 배지만이 존재할 때(좌측 상단 패널), VEGF(배지 1 ml당 100 ng)에 노출되었을 때(우측 상단 패널), 노린(배지 1 ml당 250 ng)에 노출되었을 때(좌측 하단 패널), 그리고 VEGF(배지 1 ml당 100 ng)와 노린(배지 1 ml당 250 ng) 둘 다에 노출되었을 때(우측 하단 패널), 그로부터 24시간 후 VE-카데린에 대해 면역 염색된(세포 주위 경계, 그린색) 인간 망막 미세혈관 내피 세포(HRMEC)의 형광 현미경사진(배율: 20배)을 보여주는 것이고;
도 8은 배지만 존재할 때(좌측 상단 패널), VEGF(배지 1 ml당 100 ng)에 노출되었을 때(우측 상단 패널), 노린(배지 1 ml당 250 ng)에 노출되었을 때(좌측 하단 패널), 그리고 VEGF(배지 1 ml당 100 ng)와 노린(배지 1 ml당 250 ng) 둘 다에 노출되었을 때(우측 하단 패널), 그로부터 24시간 후 클로딘-5에 대해 면역 염색된(세포 주위 경계, 그린색) HRMEC의 형광 현미경사진(배율: 40배)을 보여주는 것이며;
도 9는 첨가물이 없을 때, VEGF가 첨가되었을 때, 노린이 첨가되었을 때, 또는 VEGF 및 노린의 조합이 첨가되었을 때, 그로부터 24시간 후 HRMEC 단일층 내 클로딘-5의 mRNA 발현에 관한 정규화 막대 그래프(노린이 클로딘-5 발현을 복구시키는 것을 보여줌)이고;
도 10은 눈에 주사되지 않은 마우스(좌측 패널)과 눈에 노린이 주사된 마우스(우측 패널)의 산소 유도성 망막병증(OIR) 모델 눈에서의 에반스 블루 누출을 보여주는 망막 현미경사진이며[단, 이 영상들은 노린 주사후 3일 경과시에 촬영한 것으로서, 밝은 부위(백색)는 혈관 누출이 일어났음을 보여주는 것이고, 주사된 눈은 모세혈관 망상조직이 보존되었음을 보여줌];
도 11a 및 도 11b는 상이한 처리 조건하에서 클로딘-5와 VE-카데린 각각의 상대적 발현을 보여주는 막대 그래프이고;
도 12a 및 도 12b는 상이한 처리 조건하에 7시간 및 24시간 경과시 골형성단백질 2(BMP2)의 상대적 발현을 각각 보여주는 막대 그래프이며;
도 13a 및 도 13b는 상이한 처리 조건하에 7시간 및 24시간 경과시 간세포 성장 인자(HGF)의 상대적 발현을 각각 보여주는 막대 그래프이다.
본 발명은 유전자 CASP3 및 THBD의 발현을 증가시키고; 유전자 COL18A1, CPB2, NPR1, OCLN 및 PLAU의 발현은 감소시키는 방법으로서 유용성을 가진다. 결과적으로 이러한 유전자의 발현과 연관된 병태들이 치료된다.
특히 카스파아제 3은 CASP3(GenBank 기관 승인번호: GCA_000001405.22)에 의해 암호화되며, 카스파아제 6 및 7을 절단하여 활성화하고; 이 단백질 자체는 카스파아제 8, 9 및 10에 의해 가공 및 활성화된다, 카스파아제 3은, 알츠하이머병 및 척추 손상 후 뉴런 사멸과 연관되어 있는 아밀로이드-베타 4A 전구체 단백질의 절단에 지배적으로 수반되는 카스파아제이다. 카스파아제 3은 세포자살에 연루되므로, CASP3의 상향조절은 기능장애 세포 제거를 유도하는데 이용될 수 있다.
THBD 유전자는 트롬보모듈린(TM), 즉 내피 세포 표면에 발현되고 트롬빈에 대해 보조인자로서 역할을 하는 내재성 막 단백질을 암호화한다. 이는 트롬빈을 항응고 효소로 전환시켜줌으로써 응혈 촉진성 효소에 의한 혈액 응고를 줄여준다. 트롬보모듈린은 또한, 인간 중피 세포, 단핵구 및 수지상 세포 하위세트에서 발현된다. 이의 발현 증가는, 수술, 유전적 과 응고장애. 당뇨병 또는 심혈관질환과 연관된 응혈 효과를 제한하는데 사용된다.
SERPINE1 유전자는, 내피 플라스미노겐 활성인자 억제인자라고도 공지된 플라스미노겐 활성인자 억제인자-1(PAI-1) 또는 세르핀 E1을 암호화하고, 이 단백질은 조직 플라스미노겐 활성인자(tPA) 및 유로키나아제(uPA), 즉 플라스미노겐의 활성인자의 주요 억제인자로서 작용하므로, 섬유소용해현상을 초래한다. 그러므로 노린 투여와 연관된 이들 유전자의 발현 증가는 섬유소용해를 증가시키는데 임상적으로 유효하다.
COL18A1 유전자는 콜라겐 알파-1(XVIII) 사슬을 암호화한다. 이 콜라겐은 비콜라겐성 도메인이 중간에 끼어있는 다수의 삼중 나선 도메인(콜라겐성 도메인)을 함유하는 세포외 기질 단백질인 멀티플렉신(multiplexin) 중 하나이다. 단백분해로 인해 생성된 XVIII형 콜라겐의 C-말단 단편은 엔도스타틴, 즉 유효한 항혈관신생 단백질인데, 결과적으로 노린 투여를 통한 이의 발현 감소는, 노인성 황반 변성 및 증식성 망막병증에서 관찰되는 바와 같은 혈관신생시의 과도한 혈관 성장을 제한하는데 유효하다.
CPB2 유전자는 카복시펩티다아제-2를 암호화하는데, 이 카복시펩티다아제-2가 Arg92 잔기에서 트롬빈/트롬보모듈린 복합체에 의한 단백분해에 의해 활성화되면, 카복시펩티다아제 활성을 보인다. 활성화된 카복시펩티다아제-2는 섬유소용해를 줄여주므로, CPB2의 발현 감소는 혈관 누출 및 출혈을 감소시키는 것과 연관된다.
NPR1 유전자는 나트륨이뇨성 펩티드 수용체 A/구아닐레이트 사이클라아제 A(아트리오나트륨이뇨성(atrionatriuretic) 펩티드 수용체 A)를 암호화하고, 이 수용체의 수준과 활성은, 펩티드계 호르몬인 심방 나트륨이뇨성 펩티드(ANP)와 뇌 나트륨이뇨성 펩티드(BNP)의 상이한 조직에서의 생물학적 효과가 주로 염과 물의 항상성 유지를 지향하는 쪽으로 발휘되도록 결정짓는다. 결과적으로 이 유전자의 하향조절은 혈관 누출을 감소시키는데 연루되어 있다.
PLAU 유전자는 세포외 기질의 분해에 수반되는 세린 프로테아제(EC 3.4.21.73)를 암호화하고, 플라스미노겐 내 Arg-Val 결합의 특이적 절단에 의해 플라스미노겐을 플라스민으로 전환함에 있어 활성을 보인다. 결과적으로 이 유전자의 하향조절은 내피 세포 누출을 치료하는데 연루되어 있다.
유전자 BMP2, CLCL6, IL12B, SELPLG, CX3CL1, CASP3, THBD, COL18A1, CPB2, NPR1, CLDN5, CLD3, PIGF, BDNF, CNTF, VEGF-A, CAM-1, PGF, FOX-01, FOX-04, PDGFB, TGFA, HGF, VE-카데린은 모두 망막 발현에 공통된 유전자들의 종래 명칭들을 나타낸다.
특정의 작동 이론에 국한되고자 하지 않을 때, 망막 상피 세포의 프리즐드-4 수용체와 노린 단백질의 결합은 베타-카테틴의 분해를 제한하므로, 이후 베타-카테틴은 축적되어 상피 세포 핵에 편재화되고, 그 다음 TCF/LEF(T 세포 인자/림프 증강 인자)와 함께 유전자 변환을 통한 세포 반응을 유도한다. 그 다음, 클로딘-5 및 VE-카데린 유전자는 전사되고, 소포체를 통해 대응 단백질이 생성된다. 이로써 생성된 단백질은 기능 저하 세포 연접을 수복한다. 이는 도 3에 도식적으로 도시되어 있다. 클로딘-5 및 VE-카데린 단백질은 또한 본 발명의 임의의 구현예들에서 실험을 통한 연구에 의해 획득되거나 사용되기도 한다.
하기 정의들은 본 발명의 이해를 도모하기 위해 본원에 사용되고 있다.
"투여"는 본원에서 노린 단백질 또는 노린을 함유하는 조성물을 대상체 망막에 제공하는 수단으로서 정의된다. 이러한 투여는, 예컨대 경구, 경막(예컨대 구강점막), 주사(예컨대 피하, 정맥내, 비경구, 복막내, 안내), 흡입(예컨대 경구 또는 비강), 또는 국소(예컨대 점안액, 크림 등)(이에 한정되는 것은 아님)와 같은 임의의 경로에 의해 이루어질 수 있다. 물론 약학 제제는 각각의 투여 경로에 적합한 형태로 제공된다.
"변경"이란, 당 분야에 공지된 표준적 방법(예컨대 본원에 기술된 방법들)에 의해 검출되는 바와 같은, 유전자 또는 폴리펩티드의 발현 수준 또는 활성의 변화(증가 또는 감소)를 의미한다. 본원에 사용된 바와 같은 "변경"은 적어도 10%의 발현 수준 변화, 바람직하게 25%의 발현 수준 변화, 더욱 바람직하게 40%의 발현 수준 변화, 그리고 가장 바람직하게 50% 이상의 발현 수준 변화를 포함한다.
"유사체"란, 노린 단백질의 기능상 또는 구조상 특징들과 동일하지는 않지만 유사한, 기능상 또는 구조상 특징들을 가지는 분자를 의미한다. 예를 들어 폴리펩티드 유사체는 대응하는 자연발생 노린의 생물 활성을 보유함과 아울러, 자연발생 폴리펩티드의 기능에 비하여 그 기능을 향상시키는 임의의 생화학적 변형을 가진다. 이러한 생화학적 변형은, 예를 들어 리간드 결합을 변경시키지 않고, 유사체의 프로테아제 내성, 가용성, 막 투과성 또는 반감기를 증가시킬 수 있었다. 유사체는 비자연발생 아미노산을 포함할 수 있다.
본 발명에서, "~를 포함하다(comprise)", "~를 포함하는(comprising)", "~를 함유하는(containing)" 및 "~를 가지는(having)" 등은, 미국 특허법이 이 용어들에 부여하는 의미를 가질 수 있고, "~를 포함하다(include)", "~를 포함하는(including)"등을 의미할 수 있으며; "본질적으로 ~으로 이루어진" 또는 "본질적으로 이루어진"도 유사하게 미국 특허법이 이 용어들에 부여하는 의미를 가질 수 있으며, 이 용어에는 제약이 없는 관계로, 언급된 용어의 의미 이상의 의미가 존재함으로 말미암아 언급된 용어가 가지는 기본적이거나 신규한 특징들이 바뀌지 않는 한, 이와 같이 언급된 용어가 가지는 의미 이상의 의미는 허용되나, 선행 기술에 의한 구현예들은 배제한다.
"대조군"이란, 표준 또는 기준인 입장에 있는 것을 의미한다.
"검출하다"란, 검출될 피분석물의 존재, 부재 또는 그 양을 동정하는 것을 지칭한다.
"검출 가능한 표지"란, 관심 분자와 결합할 때, 이 관심 분자를 분광학적, 광화학적, 생화학적, 면역화학적 또는 화학적 수단을 통해 검출 가능하게 만드는 조성물을 의미한다. 예를 들어 유용한 표지로서는 방사성 동위원소, 자성 비드, 금속 비드, 콜로이드성 입자, 형광 염료, 전자 농축 시약, 효소(예컨대 ELISA에서 통상 사용되는 효소), 바이오틴, 디곡시게닌 또는 햅텐을 포함한다.
"단편"이란, 노린의 일부분을 의미한다. 이 일부분은, 바람직하게 인간의 원산 노린 폴리펩티드를 이루는 133개 아미노산 잔기들이 보이는 전체 길이의 적어도 40%, 50%, 60%, 70%, 80% 또는 90%를 함유한다. 단편은 아미노산을 40개, 50개, 60개, 70개, 80개, 90개, 100개, 110개, 120개, 130개 또는 심지어 133개 모두 포함한다.
"절단체(truncate)"는 40개 이상의 아미노산 잔기로 이루어진 노린 단백질의 폴리펩티드 말단이 절단된 노린 단편을 포함할 것이다.
"단리된 폴리펩티드"란, 자연에서 노린과 동반되어 발생하는 성분들로부터 분리된 노린의 폴리펩티드 유사체를 의미한다. 통상적으로 폴리펩티드가 자연에서 그것과 결합되어 존재하는 단백질 및 자연발생 유기 분자로부터 분리되어 적어도 60 중량%로 존재할 때 단리되었다고 한다. 바람직하게 제제에는 본 발명의 폴리펩티드가 적어도 75 중량%, 더욱 바람직하게 적어도 90 중량%, 그리고 가장 바람직하게 적어도 99 중량% 존재한다. 본 발명의 단리된 폴리펩티드는, 예를 들어 자연 공급원으로부터의 추출, 이러한 폴리펩티드를 암호화하는 재조합 핵산의 발현, 또는 단백질의 화학 합성에 의해 수득될 수 있다. 순도는 임의의 적당한 방법, 예컨대 컬럼 크로마토그래피, 폴리아크릴아미드 겔 전기영동 또는 HPLC 분석에 의해 측정될 수 있다.
노린은, 이하에 보인 바와 같은 NCBI 승인 번호 NP_000257.1에 대한 아미노산 동일성이 적어도 약 85%이고, 망막상피세포의 프리즐드-4 수용체와 결합하는 능력을 가지는 폴리펩티드 또는 이의 단편으로서 정의될 것이다.
gil45577891reflNP_000257.11 노린 전구체[호모 사피엔스]
본원에 사용된 바와 같이, "제제를 수득하는 것"에서와 같은 "수득하는 것"은 제제를 합성, 구입, 또는 획득하는 것을 포함한다.
"환자" 또는 "대상체"란 용어는, 치료, 관찰 또는 실험 대상인 동물을 지칭한다. 단지 예를 들자면, 대상체로서는 포유류, 예컨대 인간 또는 비인간 포유류, 예컨대 비인간 영장류, 소, 말, 개, 양 또는 고양이(이에 한정되는 것은 아님)를 포함하나, 이에 한정되는 것은 아니다.
"약학적으로 허용 가능한"이란, 인간을 포함한 동물에서의 사용에 대해 연방 또는 주 정부의 규제기관에 의해 승인을 받았거나 승인받을 수 있는 경우, 또는 미국 약전 또는 기타 일반적으로 인지되는 약전에 나열된 경우를 지칭한다.
"약학적으로 허용 가능한 부형제, 담체 또는 희석제"란, 제제와 함께 대상체에 투여될 수 있고, 제제의 약리 활성을 무효화하지 않으며, 치료적 양만큼의 제제를 전달하는데 충분한 용량으로 투여될 때 무독성인 부형제, 담체 또는 희석제를 지칭한다.
본원에 제공된 범위들은 해당 범위 내에 속하는 값 모두에 대한 간략한 기재형식인 것으로 이해된다. 예를 들어 1 내지 50의 범위는, 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22, 23, 24, 25, 26, 27, 28, 29, 30, 31, 32, 33, 34, 35, 36, 37, 38, 39, 40, 41, 42, 43, 44, 45, 46, 47, 48, 49 또는 50으로 이루어진 군에 속하는 임의의 수, 수들의 조합 또는 종속 범위뿐만 아니라 전술된 정수들 사이에 오는 소수점 값 모두, 예컨대 1.1, 1.2, 1.3, 1.4, 1.5, 1.6, 1.7, 1.8 및 1.9를 포함하는 것으로 이해된다. 종속 범위와 관련하여, 어떤 범위의 끝점 중 어느 하나로부터 확장되어 "내포된 종속 범위"가 특히 고려된다. 예를 들어 예시적 범위 1 내지 50의 내포된 종속 범위는 1 내지 10, 1 내지 20, 1 내지 30, 그리고 1 내지 40과 같은 한 방향으로의 종속 범위, 또는 50 내지 40, 50 내지 30, 50 내지 20, 그리고 50 내지 10과 같은 다른 한 방향으로의 종속 범위를 포함할 수 있다.
"감소시키다"란, 적어도 10%, 25%, 50%, 75% 또는 100%만큼의 음의 방향의 변경을 의미한다.
서열 동일성은 통상적으로 서열 분석 소프트웨어(예를 들어 위스콘신 대학 생물공학 센터(1710 University Avenue, Madison) Genetics Computer Group의 서열 분석 소프트웨어 패키지, Wis. 53705, BLAST, BESTFIT, GAP 또는 PILEUP/PRETTYBOX 프로그램)를 사용하여 측정된다. 이러한 소프트웨어는 다양한 치환, 결실 및/또는 기타 변형에 상동성의 정도를 할당함으로써 동일하거나 유사한 서열을 매칭(matching)한다. 보존적 치환은 통상적으로 다음과 같은 군들, 즉 글리신, 알라닌; 발린, 이소루신, 루신; 아스파르트산, 글루탐산, 아스파라긴, 글루타민; 세린, 트레오닌; 리신, 아르기닌; 그리고 페닐알라닌, 티로신 내에서의 치환을 포함한다. 동일성 정도를 확정하는 것에 대한 예시적 접근법에서, BLAST 프로그램이 사용될 수 있는데, 이 경우 확률 스코어 e3 내지 e100는 서열들이 밀접하게 관련됨을 나타낸다.
본원에 사용되는 바와 같은 "치료하다", "치료된", "치료하는 것" 및 "치료" 등의 용어는 BRB 기능저하와 연관된 질환 및/또는 증상을 감소 또는 경감시키는 것을 지칭한다.
통상적으로 치료적 유효 투여량은 화합물의 혈청 중 농도를 약 0.1 ng/ml로부터 약 50 μg/ml ~ 약 100 μg/ml으로 만들어야 한다.
내용 중 특별히 진술되어 있지 않거나 내용으로부터 명료하지 않은 한, 본원에 사용되는 바와 같은 "또는"이란 용어는 포괄적인 것으로 이해된다. 내용 중 특별히 진술되어 있지 않거나 내용으로부터 명료하지 않은 한, 본원에 사용되는 바와 같은 "한", "하나의" 및 "본"은 단수의 대상 또는 복수의 대상인 것으로 이해된다.
내용 중 특별히 진술되어 있지 않거나 내용으로부터 명료하지 않은 한, 본원에 사용되는 바와 같은 "약"이란 용어는, 당 분야에서 보통 관용되는 범위 이내, 예를 들어 평균의 표준 편차 2 이내로서 이해된다. "약"은 진술된 값의 10%, 9%, 8%, 7%, 6%, 5%, 4%, 3%, 2%, 1%, 0.5%, 0.1%, 0.05% 또는 0.01% 이내로서 이해될 수 있다. 내용 중 특별히 진술되어 있지 않거나 내용으로부터 명료하지 않은 한, 본원에 제공된 모든 수치 값들은 "약"이라는 용어에 의해 수식될 수 있다.
노린은 세포외 공간에 분비되는 길이 133개 아미노산인 단백질이다. 주요 도메인 2개는 일반적인 노린 단백질 구조를 한정하는데: 신호 펩티드는 분자의 편재화를 유도하고; 시스테인-매듭 모티프(cysteine-knot motif)는 프리즐드-4 수용체 결합에 필요한 제3의 확증을 제공한다(Meitinger, T, et al, Nat Genet, 1993; 5:376-380; Berger, W, et al. Hum Mol Genet, 1996; 5:51-59). 프리즐드-4 수용체와의 결합 능력을 보유하는, 노린의 절단체 및 단편이 본원에서 유효하다. 본 발명의 몇몇 구현예들에서, 노린의 절단체 또는 단편은 시스테인-매듭 모티프를 보유한다.
시스테인-매듭 모티프의 중요성은 노린의 구조적 확증을 제공함에 있어 시스테인 잔기들간 이황화 결합에 관한 요건을 입증하는 컴퓨터 모델링에 의해 부각된다. 그러나 시스테인-매듭 모티프 이외의 영역에서의 돌연변이는 불완전한 단백질 폴딩을 초래하고, 결국에는 가족성 삼출 유리체망막병증(FEVR) 및 관련 유리체망막병증을 유발한다.
본 발명의 임의의 구현예들에서, 24개 잔기로 이루어진 노린의 N-말단 절단체는 하기 아미노산 서열을 가진다:
몇몇 단편과 절단체, 예컨대 서열 번호 2는 노린에 비해 가용성이 개선되었음이 발견되었다.
본 발명은 노린과 실질적으로 상동성이며, 프리즐드-4 수용체에 선택적으로 결합하는 능력을 여전히 보유하는 변이체 및 균등물을 추가로 포함한다. 이러한 것들은, 예를 들어 보존적 치환 돌연변이, 즉 하나 이상의 아미노산이 유사한 아미노산으로 치환되는 돌연변이를 함유할 수 있다. 예를 들어 보존적 치환이란, 어떤 아미노산이, 동일한 일반 군에 속하는 다른 아미노산으로 치환되는 것, 예를 들어 하나의 산성 아미노산이 다른 산성 아미노산으로, 하나의 염기성 아미노산이 다른 염기성 아미노산으로, 또는 하나의 중성 아미노산이 다른 중성 아미노산으로 치환되는 것을 지칭한다.
본 발명의 노린은 프리즐드-4 결합 특성을 보유하는 재조합 노린, 자연발생 노린 또는 합성 노린일 수 있다. 본 발명의 아미노산 서열 몇몇은 단백질의 구조나 기능에 유의미한 영향을 미치지 않고 변형될 수 있음은 당 분야에 인지될 것이다. 따라서 본 발명은 상당한 활성을 보이는 노린의 변형을 추가로 포함하는데; 이러한 돌연변이로서는 결실, 삽입, 도치, 반복 및 유형 치환(type substitution)을 포함한다. 본원에서 작동가능한 노린 돌연변이체는, 예시적으로 서열 번호 1에 비하여 아미노산 치환 R64E를 포함한다. 선택적으로 생물 활성인 펩티드는 서열 번호 1에 비한 다중 돌연변이체로서, T27A, S28A, S29A; P36A, R37A, R38A; Y120A, R121A, Y122A; H127A, E129A, E130A; 또는 이것들의 조합이다. 다중 돌연변이로 돌연변이된 임의의 아미노산은 단일 돌연변이로서 작동가능하다. 본원에 유효한 다른 서열 돌연변이는 문헌[Smallwood, P M, et al, J Biol Chem, 2007: 282:4057-4068]의 도 6a 또는 문헌[Ke, J et al. Genes& Dev. 2013: 27: 2305-2319]에 예시되어 있다. 상이한 아미노산 부위에 발생한 다른 돌연변이는 유사하게 작동가능한 것으로 이해되고 있다. 임의의 특정 부위에 보존된 아미노산의 돌연변이는, 바람직하게 글리신이나 알라닌으로 돌연변이됨도 또한 이해되고 있다. 임의의 중성 하전, 하전, 소수성, 친수성, 합성, 비자연발생, 비인간 또는 기타 아미노산으로의 돌연변이는 유사하게 작동가능함도 또한, 이해되고 있다.
본원에 개시된 예시적 폴리펩티드의 특징과 유사한 특징을 가지는 분자를 생성할 수 있거나 생성할 수 없는 변형 및 변화는, 선택적으로 본 발명의 화합물에 포함되는 노린 단백질의 (1차, 2차 또는 3차) 구조에서도 일어날 수 있다. 보존된 아미노산 염기들에서의 변화는 생성되는 단백질의 활성에 영향을 줄 가능성이 가장 큼이 이해되고 있다. 그러나 수용체 상호작용, 단백질 분해에 대한 내성 또는 단백질 분해 촉진, 세포 내 또는 세포외 트래피킹(trafficking), 분비. 단백질-단백질 상호작용, 번역후 변형, 예컨대 당화, 인산화 및 황산화 등에 대해 작동가능한 아미노산 변화는, 생리학적 활성을 변경 또는 유지하는 능력을 약간이나마 보유하면서 본 발명의 화합물의 활성 증가 또는 감소를 초래할 수 있음도 또한 이해되고 있다. 서열 내 다른 아미노산에 대한 임의의 아미노산 치환은 활성을 그다지 주목할만하게 상실하지 않으면서 일어나는 것으로 공지되어 있다.
이러한 변화를 발생시킴에 있어, 아미노산의 소수성 지수(hydropathic index)가 고려된다. 본 발명에 따르면, 임의의 아미노산은 소수성 지수가 유사한 다른 아미노산에 대해 치환될 수 있고, 그로 말미암아 여전히 유사한 생물 활성을 가지는 폴리펩티드가 생성된다. 소수성과 하전 특징들을 기반으로 각각의 아미노산에 소수성 지수가 할당된다. 이러한 지수들은 하기와 같다: 이소루신(+4.5); 발린(+4.2); 루신(+3.8); 페닐알라닌(+2.8); 시스테인/시스테인(+2.5); 메티오닌(+1.9); 알라닌(+1.8); 글리신(-0.4); 트레오닌(-0.7); 세린(-0.8); 트립토판(-0.9); 티로신(-1.3); 프롤린(-1.6); 히스티딘(-3.2); 글루타메이트(-3.5); 글루타민(-3.5); 아스파르테이트(-3.5); 아스파라긴(-3.5); 리신(-3.9); 및 아르기닌(-4.5).
특정의 이론에 국한되고자 하지 않을 때, 아미노산의 상대적 소수성 특징은 생성된 폴리펩티드의 2차 구조를 결정하고, 종국에는 다른 분자와 폴리펩티드의 상호작용을 한정하는 것으로 생각된다. 아미노산은 소수성 지수가 유사한 다른 아미노산에 의해 치환될 수 있고, 그로부터 여전히 기능상 균등한 폴리펩티드가 수득될 수 있음은 당 분야에 공지되어 있다. 이러한 변화에서 소수성 지수가 +/- 2 이내인 아미노산의 치환이 바람직하고, 소수성 지수가 +/- 1 이내인 아미노산의 치환이 특히 바람직하며, 소수성 지수가 +/- 0.5 이내인 아미노산의 치환이 더욱더 특히 바람직하다.
상기에 개략적으로 기술된 바와 같이, 아미노산 치환은 일반적으로 아미노산 측쇄 치환기의 상대적 유사성, 예를 들어 아미노산 측쇄 치환기의 소수성, 친수성, 하전량 및 크기 등을 기반으로 이루어진다. 상기 특징들 다수가 고려된 예시적 치환은 당 업자들에게 널리 공지되어 있으며, 하기의 경우들을 포함한다(원래 잔기: 예시적 치환): (Ala: Gly, Ser), (Arg: Lys), (Asn: Gin, His), (Asp: Glu, Cys, Ser), (Gin: Asn), (Glu: Asp), (Gly: Ala), (His: Asn, Gin), (He: Leu, Val), (Leu: He, Val), (Lys: Arg), (Met: Leu, Tyr), (Ser: Thr), (Thr: Ser), (Tip: Tyr), (Tyr: Trp, Phe), 그리고 (Val: He, Leu).
노린 및 유사체는 보통은 단백질의 일부가 아닌 추가의 화학기를 함유하도록 추가로 변형될 수 있다. 이처럼 유도체화된 기는 단백질의 가용성, 생물학적 반감기, 흡수성 또는 결합 친화성을 개선할 수 있다. 이 기는 또한 단백질의 바람직하지 않은 임의의 부작용 등을 줄이거나 없앨 수 있다. 이들 기에 대한 개관은 문헌[Remington's Pharmaceutical Sciences, 20th ed., Mack Publishing Co., Easton, PA (2000)]에서 찾아볼 수 있다.
본원에 기술된 단리 노린은 당 분야에 공지된 임의의 적합한 방법에 의해 제조될 수 있다. 이러한 방법은 직접 단백질 합성 방법으로부터, 단리된 폴리펩티드 사슬을 암호화하는 DNA 서열을 구성한 후, 이러한 서열을 형질전환된 적합한 숙주 내에서 발현시키는 방법에 이르기까지 다양하다. 몇몇 구현예들에서, DNA 서열은 재조합 기술이 이용되어 관심 야생형 단백질을 암호화하는 DNA 서열을 단리 또는 합성함으로써 구성된다. 선택적으로 서열은 자체의 기능성 유사체를 제공하는 부위 특이적 돌연변이유발법에 의해 돌연변이유발될 수 있다(Zoeller et al., Proc. Nat'l. Acad. Sci. USA 81 :5662-5066 (1984) 및 미국 특허 제4,588,585호).
본 발명에 따르면, 기능저하된 연접을 가지는 망막 상피 세포의 밀착 연접과 접착 연접은 노린, 이의 절단체 또는 단편 투여량만큼에 노출된다. 노린에 노출된 후의 세포는 입증할 수 있을 정도로 더 높은 수준의 세포성 연접 클로딘-5 및 VE-카데린을 가지게 된다. 그러므로 본 발명은 VEGF의 망막 및 맥락막 상피 세포에 대한 효과를 포함하여 시토카인의 망막 및 맥락막 상피 세포에 대한 효과를 역전시킨다. 이로써 기능저하 망막 또는 맥락막 상피 세포 연접과 연관된 망막 부종 및 망막 박리는 감소한다.
서열 번호 2의 노린 절단체는 10 ng/ml ~ 1000 ng/ml의 농도로 클로딘-5 및 VE-카데린의 세포 연접 수준을 증가시키는데 유효한 것으로 관찰된다.
본 발명은 또한 유효량만큼의 노린만을 포함하거나, 유효량만큼의 노린과 약학적으로 허용 가능한 담체, 부형제 또는 첨가제를 함께 포함하는 약학 조성물에 관한 것이기도 하다. 특히 유리한 유도체는 (예컨대 맥락막에 안내 투여된 노린이 혈액에 더욱 용이하게 흡수되도록 허용함으로써) 포유류에 투여된 노린의 생체이용률을 증가시키는 유도체이거나, 또는 원산 단백질에 비하여 노린의 생체내 구획(예컨대 망막)으로의 전달을 향상시키는 유도체이다.
본 발명에 따른 약학 조성물을 제조하기 위해 치료적 유효량만큼의 노린은, 바람직하게 투여형을 제조하기 위한 종래의 제약학적 화합 기술에 따라 약학적으로 허용 가능한 담체와 친밀하게 혼합된다. 담체는, 투여에 요망되는 제제의 형태(예컨대 여타의 것들 중에서도 안내, 경구, 국소 또는 비경구 투여형, 예컨대 겔, 크림, 연고, 로션 및 서방형 이식 제제 등)에 따라서 매우 다양한 형태를 취할 수 있다.
노린은 또한 부가 치료제, 예컨대 항 VEGF 제제와 함께 투여된다. 본원에 유효한 항 VEGF 제제로서는, 예시적으로 베바시주맙, 라니비주맙 소 분자, 즉 VEGF에 의하여 자극되는 티로신 키나아제를 억제하는 분자, 예컨대 라파티닙, 수니티닙, 소라페닙, 악시티닙, 파조파닙 또는 이것들의 조합을 포함한다. 항 VEGF 제제 및 노린을 포함하는 조합 치료제가 제공된다. 놀랍게도, VEGF가 세포에 결합하는 것을 억제함과 동시에 밀착 연접 및 접착 연접 단백질 발현을 자극함으로써 종래의 항 VEGF 제제의 효능이 향상된다는 사실이 발견되었다. 예를 들자면, 항 VEGF 제제는 통상 당뇨병에 대하여 속발성인 황반 부종의 적응증을 보이는 대상체 대략 75%에서 유효하다. 이러한 효능은 노린의 동시 투여로 말미암아 85% 이상까지 증가한다.
안내, 비경구, 피내, 피하 또는 국소 적용에 사용되는 용액이나 현탁액은 하기 성분들, 즉 멸균 희석제, 예컨대 주사용수, 염수 용액, 불휘발성 오일, 폴리에틸렌 글리콜, 글리세린, 프로필렌 글리콜 또는 기타 합성 용매; 항균제, 예컨대 벤질 알코올 또는 메틸 파라벤; 항산화제, 예컨대 아스코르브산 또는 중아황산나트륨; 킬레이트화제, 예컨대 에틸렌디아민테트라아세트산; 완충제, 예컨대 아세트산염, 시트르산염 또는 인산염, 그리고 긴장성 조정제, 예컨대 염화나트륨 또는 덱스트로스를 포함할 수 있다.
액체인 경구용 제제의 형태, 예컨대 현탁액, 엘릭시르 및 용액과 같은 형태로 투여될 때, 담체가 사용되는데, 적합한 담체 및 첨가제, 예컨대 물, 글리콜, 오일, 알코올, 풍미제, 보존제, 착색제 등이 사용될 수 있다. 고체인 경구 투여용 제제는, 예컨대 분말, 정제, 캡슐의 형태로서 제공되고, 고체인 제제, 예컨대 좌제에 적합한 담체 및 첨가제로서는 전분, 당 담체, 예컨대 덱스트로스, 만니톨, 락토스 및 관련 담체, 희석제, 과립화제, 윤활제, 결합제 또는 붕해제를 포함한다. 요망된다면, 정제 또는 캡슐은 표준 기술에 의한 장용외피형 또는 지연 방출형일 수 있다. 노린은 고체 투여형, 즉 동결건조형 또는 펠릿화 용액 액적으로서 제공된다.
일 구현예에서, 활성 화합물은, 이 화합물이 체내에서 급속하게 제거되는 것을 막아줄 담체와 함께, 예컨대 제어 방출형 제제, 예컨대 임플란트 및 마이크로캡슐화 전달계로서 제조된다. 생체분해성이자 생체적합성인 중합체, 예컨대 에틸렌 비닐 아세트산염, 폴리무수물, 폴리글리콜산, 콜라겐, 폴리오르토에스테르 및 폴리젖산이 사용될 수 있다. 이러한 제제를 제조하기 위한 방법은 당 업자들에게 명백할 것이다.
리포좀 현탁액은 또한 약학적으로 허용 가능한 담체일 수 있다. 리포좀 현탁액은 당 업자에게 공지된 방법에 따라서 제조될 수 있다. 예를 들어 리포좀 제제는 적당한 지질(들)을 추후 증발될 무기 용매 중에 용해한 다음, 용기 표면상에 건조 지질로 된 박막을 남김으로써 제조될 수 있다. 그 다음, 활성 화합물 수용액이 이 용기에 도입된다. 이후, 용기는 작업자에 의해 직접 휘저어지고, 그 결과 용기 측벽으로부터 지질인 재료가 분리되면서 지질 응집체가 분산되는데, 이로써 리포좀 현탁액이 형성되는 것이다. 당 업자들에게 널리 공지된 또 다른 제조 방법도 또한 본 발명의 이러한 측면에 사용될 수 있다.
피부로의 국소 투여에 적합한 제제는 약학적으로 허용 가능한 담체 중에 섞여 투여될 성분을 포함하는 연고, 크림, 겔 및 페이스트로서 제공될 수 있다. 바람직한 국소 전달계로서는 투여될 성분을 함유하는 경피 패치가 있다.
직장내 투여용 제제는, 예컨대 코코아 버터 또는 살리실산염을 포함하는 적합한 베이스를 함유하는 좌제로서 제공될 수 있다.
비경구 제제는 유리나 플라스틱으로 제조된 앰플, 1회용 시린지 또는 다수 회 투여용 바이알에 담겨 밀봉될 수 있다. 만일 정맥내 투여가 이루어진다면, 바람직한 담체는, 예를 들어 생리학적 염수 또는 인산염 완충 염수(PBS)를 포함한다.
비경구용 제제의 경우, 담체는 보통 멸균수 또는 염화나트륨 수용액을 포함할 것이지만, 분산을 돕는 성분들을 비롯한 다른 성분들도 포함될 수 있다. 물론 멸균수가 멸균된 상태로 사용되고 유지되는 경우, 노린과 담체도 또한 멸균되어야 한다. 주사용 현탁액도 또한 제조될 수 있는데, 이 경우 적당한 액체 담체 및 현탁제 등이 사용될 수 있다.
비경구 투여 또는 안내 투여에 적합한 제제로서는, 항산화제, 완충제, 정균제 및 (제제를 대상 수용개체의 혈액과 등장성이 되도록 만드는) 용질을 함유할 수 있는 수성 및 비수성 멸균 주사 용액과; 현탁제와 증점제를 포함할 수 있는 수성 및 비수성 멸균 현탁액을 포함한다. 제제는 단위 투여 또는 다수 회 투여용 용기, 예컨대 밀봉된 앰플 및 바이알로서 제공될 수 있으며, 사용 직전에 단지 멸균 액체 담체, 예컨대 주사용수의 첨가를 필요로 하는 동결-건조(동결 건조) 상태로 보관될 수 있다. 즉석 주사 용액 및 현탁액은 앞서 기술된 종류의 멸균 분말, 과립 및 정제로부터 제조될 수 있다.
활성 화합물의 투여는 연속 투여(정맥내 주입)로부터 매일 수 회(예를 들어 Q.I.D.) 행하여지는 경구 투여에 이르기까지 다양할 수 있으며, 그 예로서는 국소, 안내, 비경구, 근육내, 정맥내, 피하, 맥락막내 또는 (경피흡수촉진제를 포함할 수 있는) 경피 투여를 포함할 수 있다.
대상체에 치료제를 적용하는 것은 관심 부위에의 투여를 위해 국소로 이루어질 수 있다. 본 발명의 노린을 관심 부위에 제공하기 위해서는 다양한 기술, 예컨대 주사, 카테터, 트로카, 발사체(projectile), 플루로닉 겔, 스텐트, 약물 지연 방출 중합체, 또는 내부에 대한 접근을 제공하는 기타 디바이스가 사용될 수 있다. 환자로부터 분리된 관계로 장기 또는 조직이 접근가능한 상태인 경우, 이러한 장기나 조직은 본 발명의 노린을 함유하는 매질이 담긴 수조에 담그어질 수 있으며, 본 발명의 노린은 장기에 도포될 수 있거나 또는 편리한 임의의 방식으로 적용될 수 있다.
노린은, 요망되는 생리학적 또는 약리학적 국소 효과 또는 전신 효과를 수득함에 있어 유효한 조성물의 제어 방출 및 지연 방출에 적합한 디바이스를 통해 투여될 수 있다. 본 방법은 지연 방출형 약물 전달계를, 제제의 방출이 요망되는 구역에 배치하는 단계, 이 제제가 디바이스를 통과하여 원하는 치료 구역에 도달하도록 허용하는 단계를 포함한다. 더욱 구체적으로, 노린은 직접 이식에 적합한 안내 디바이스를 통해 눈의 유리체로 투여될 수 있다. 본 발명의 이와 같은 디바이스는 놀랍게도 다양한 노린의 지연 제어 방출을 제공하여, 유해한 국소 및 전신 부작용이 발생할 위험 없이 눈을 치료하는 것으로 확인된다. 본 발명의 안내 전달 방법의 목적은 안내 디바이스에 담긴 약물의 양을 최대로 하되, 디바이스의 크기는 최소로 하여, 임플란트 작용 지속기간을 연장시키는 것이다. 예를 들어 미국 특허 제5,378,475호; 동 제5,773,019호; 동 제6,001,386호; 동 제6,217,895호; 동 제6,375,972호; 및 동 제6,756,058호를 참조한다.
기타 노린 전달 방법으로서는 안내 수정체에 적용되어 염증 또는 후안방 혼탁을 방지할 수 있는 안내 전달계와, 유리체, 망막 아래 또는 공막 위에 직접 삽입될 수 있는 안내 전달계[단 이 경우 삽입은 계, 즉 지연 방출형 약물 전달계를 주입하거나 수술로 이식하여 달성될 수 있음]를 사용하는 방법, 그리고 요망되는 국소 또는 전신 생리학적 또는 약리학적 효과를 수득함에 있어 유효한 제제의 제어 투여 및 지연 투여를 제공하기 위한 방법으로서, 요망되는 위치에 지연 방출 약물 전달계를 수술로 이식하는 단계를 포함하는 방법을 포함한다.
전달계의 예로서는, 노린을 함유하는 내부 저장장치, 제제 통로에 비투과성인 내부 튜브, 제1 말단과 제2 말단을 가지고, 내부 저장장치의 적어도 일부분을 덮는 내부 튜브, 어떤 재료로 사이징(sizing)되거나 그 재료로 제조되어 자체의 무게를 견딜 수 있게 된 내부 튜브, 내부 튜브의 제1 말단에 배치된 비투과성 부재, 제제가 저장장치로부터 빠져나와 내부 튜브의 제1 말단을 관통하여 통과하는 것을 막아주는 비투과성 부재, 그리고 내부 튜브의 제2 말단에 배치된 투과성 부재[단 이 투과성 부재는 제제가 내부 튜브의 제2 말단을 관통하여 저장장치로부터 빠져나와 확산되는 것을 허용함]를 포함하는 지연 방출 약물 전달계를 포함하나, 이에 한정되는 것은 아니다. 노린을 눈의 한 분절에 투여하기 위한 방법은, 지연 방출 디바이스를 이식하여 노린을 눈의 유리체 또는 맥락막에 전달하는 단계, 또는 이식 가능한 지연 방출 디바이스를 이식하여 본 발명의 화합물을 눈의 한 분절 또는 맥락막에 투여하는 단계를 포함하는데; 단 지연 방출 약물 전달 디바이스는 a) 노린을 함유하는 약물 코어부; b) 제제의 통로에 대해 본질적으로 비투과성이고, 약물 코어를 수용하기 위한 내부 구획을 둘러싸서 한정하는 일체형 컵 적어도 1개[단 이 일체형 컵은 개방된 상부 말단을 포함하고, 이 일체형 컵의 개방형 상부 말단부의 적어도 일부 주위에는 오목한 그루브 적어도 1개가 존재함]; c) 노린 통로에 대해 투과성인 투과성 플러그[단 이 투과성 플러그는 일체형 컵의 개방된 상부 말단에 배치되어 있음]를 포함하는데, 여기서 상기 그루브는 이 그루브를 제자리에 지탱시키는 투과성 플러그와 상호작용하여 상기 개방된 상부 말단을 밀폐하고, 상기 투과성 플러그는 제제가 투과성 플러그를 관통하여 약물 코어부로부터 빠져나와 이 일체형 컵의 개방된 상부 말단 밖으로 배출되도록 허용한다. 지연 방출 노린 전달 디바이스는 요망되는 가용성과 중합체 코팅층을 가지는 내부 코어 노린을 포함하고, 이 중합체층은 노린에 대해 투과성이며, 중합체 코팅층은 내부 코어를 완전히 덮는다.
노린은 미소구로서 투여될 수 있다. 예를 들어 노린은 R&D Systems(Minneapolis, Minn.)로부터 구입될 수 있거나, 문헌[Jiang, C, et al, Mol. Vis., 2007; 13:1783-92]에 기술된 바와 실질적으로 동일하게 클로닝, 발현 및 정제된 후, 자발적 유화 기술(Fu, K, et al, J. Pharm. Sci., 2003; 92: 1582-91)을 이용하여 생체분해성 미소구에 담지될 수 있다. 미소구는 부피비 4:1인 트리플루오로에탄올디클로로메탄 5 ml(수산화마그네슘 8 mg 보충) 중에 50:50 폴리(락티드-코-글리콜산)(PLGA) 200 mg을 용해하고 나서, 캡슐화가 진행되는 동안 단백질 응집을 최소화하면서 합성 및 담지된다. 노린 10 μg은 3 ml PBS 중에 용해된 도큐세이트 나트륨(Sigma-Aldrich, St. Louis, Mo.) 100 mg 및 소 혈청 알부민(BSA) 7 mg 용액 300 μl중에 재구성될 수 있다. 이 용액은 와류(vortexing)된 다음, 가만히 저어주면서 1 %(w/v) 폴리비닐 알코올(PVA, 88% 가수분해됨) 200 ml에 부어질 수 있다. 미소구는 3시간 동안 교반되어 경화된 다음, 원심분리에 의해 수집된 후, 3회 세척될 수 있으며, 그 결과 잔류 PVA가 제거된다. 만일 미소구가 즉시 주사되지 않는다면, 이 미소구는 액체 질소에 넣어져 급속 동결된 다음, 72시간 동안 동결건조된 후, 데시케이터(-20℃) 내에 보관된다. 노린 함유 미소구의 평균 직경은 입도에 의해 확정되는 바에 따르면 8 μm이다. 노린은 또한 정맥내 주사에 의해 투여될 수도 있다. 예를 들어 용액 중 노린은 전술된 바와 같이 미소구로 포장될 수 있거나. 또는 세포 내에서 발현될 수 있거나, 또는 정제된 형태로 용액 중에 존재하다가 문헌[Jiang, 2007]에 기술된 바와 실질적으로 동일하게 유리체내 주사로 망막에 노출될 수 있다. 유리체내 주사는 일반적인 마취가 이루어진 후 안과 수술용 현미경(Moller-Wedel GmbH, Wedel, Germany)과 베벨 글라스 미세바늘(외부 직경: 대략 100 μm)이 사용되어 수행될 수 있다. 미소구 현탁액은 PBS 중에 제조될 수 있으며(2 %(w/v) 및 10 %(w/v)), 주사 직전에 간단히 와류됨으로써 균일한 분산상태가 보장된다. 연곽 뒤 1.5 mm에 있는 공막을 뚫는데 30 게이지 피하주사 바늘이 사용될 수 있다. 검정 시료 5 마이크로리터만큼은, 선택적으로 50 μl들이 Hamilton 시린지(Hamilton Co, Reno, Nev.)를 사용함으로써 이와 같은 유리체로의 통로를 경유하여 주사된다. 바늘은, 적당한 전달을 보장하고 쇼크를 예방하기 위해, 주사가 종료된 후 1분 동안 제자리에 꽂힌 상태를 유지하도록 놓아두었다가 이후 서서히 빼 내진다. 이뿐만 아니라 압력을 낮추기 위해 천자가 동시에 수행될 수 있으며, 이로써 역류가 방지된다.
노린은 또한 제어 방출 전달계에 의한 망막으로의 전달에 의해 투여될 수도 있다. 이식가능한 제어 방출 전달계는 미국 특허출원 제2005/0281861호 공보에 기술되어 있고, 제제화된 최종 캡슐당 100 μg과 같이 하여 계로 포장된다. 예를 들어 노린 함유 약물 전달계는 겸자 또는 트로카가 사용되어 공막을 2 mm ~ 3 mm 절개한 후 눈에 배치될 수 있다. 대안적으로 절개가 이루어지지 않을 수도 있는데, 즉 트로카나 기타 전달 디바이스를 눈에 직접 삽입하여 이 계를 눈에 집어넣을 수 있다. 계를 눈에 배치한 후 디바이스가 빼 내지면, 스스로 닫히는 구멍이 생길 수 있다. 임플란트를 눈에 삽입하는데 사용되는 디바이스의 일례는, 본원에 참조로 인용된 미국 특허출원 제2004/0054374호 공보에 개시되어 있다. 계의 위치는 부재를 감싸고 있는 치료제 성분 또는 약물의 농도 구배에 영향을 미칠 수 있으므로, 방출 속도에도 영향을 미칠 수 있다(예를 들어 유리체 주변에 더 가까이에 배치된 부재는 더 느린 방출 속도를 보일 수 있음). 따라서 계는 망막 표면 근처 또는 유리체의 후안방에 배치되는 것이 바람직하다.
바람직한 단위 투여형 제제는 본원에서 상기 언급된 바와 같이 투여되는 성분의 1일 용량 또는 단위, 1일 분할 용량 또는 이의 적당한 분율 만큼을 함유하는 제제이다.
본 발명의 노린 투여 계획은 다양한 요인들, 예컨대 BRB 누출 정도, 투여 경로, 안구용적, 황반 분리 용적, 그리고 사용된 특정의 노린을 기반으로 한다. 따라서 투여 계획은 매우 다양할 수 있으나, 통상 표준 방법이 사용되어 결정될 수 있다.
임의의 구현예들에서, 노린은 1일 1회 투여되고; 다른 구현예들에서, 노린은 1일 2회 투여되며; 또 다른 구현예들에서, 노린은 2일에 1회, 3일에 1회, 4일에 1회, 5일에 1회, 6일에 1회, 7일에 1회, 2주에 1회, 3주에 1회, 4주에 1회, 2개월에 1회, 6개월에 1회, 또는 1년에 1회 투여된다. 투여 간격은 개별 환자의 요구에 따라 조정될 수 있다. 더욱 긴 투여 간격을 위해서는 연장 방출형 또는 데포형 제제가 사용될 수 있다.
약학적으로 허용 가능한 담체, 부형제 또는 희석제는, 예시적으로 염수, 완충 염수, 덱스트로스, 물, 글리세롤, 에탄올, 멸균 등장 수성 완충제 및 이것들의 조합을 포함한다.
제어 방출 비경구 조성물은 수성 현탁액, 미소구, 마이크로캡슐, 자성 미소구, 오일 용액, 오일 현탁액, 에멀전의 형태를 가질 수 있거나, 또는 활성 성분은 생체적합성 담체(들), 리포좀, 나노입자, 임플란트 또는 주입 디바이스에 혼입될 수 있다.
미소구 및/또는 마이크로캡슐의 제조에 사용되기 위한 재료로서는 생체분해성/생체침식성 중합체, 예컨대 PLGA, 폴리글락틴, 폴리-(이소부틸 시아노아크릴산염), 폴리(2-하이드록시에틸-L-글루타민) 및 폴리(젖산)을 포함한다.
제어 방출 비경구 제제를 제제화하는데 사용될 수 있는 생체적합성 담체로서는 탄수화물, 예컨대 덱스트란, 단백질, 예컨대 알부민, 지단백 또는 항체를 포함한다.
임플란트에 사용되기 위한 재료는 비생체분해성 재료, 예를 들어 폴리디메틸실록산, 또는 생체분해성 재료, 예를 들어 폴리(카프로락톤), 폴리(젖산), 폴리(글리콜산) 또는 폴리(오르토 에스테르)일 수 있다.
보존제의 예들로서는 파라벤, 예컨대 메틸 또는 프로필 p-하이드록시벤조산염 및 염화벤잘코늄을 포함하나, 이에 한정되는 것은 아니다.
주사 데포 투여형은, 생체분해성 중합체, 예컨대 폴리락티드-폴리글리콜리드 중 본 발명의 화합물(들)의 마이크로캡슐 기질을 형성함으로써 제조된다. 화합물 대 중합체 비와, 사용된 특정 중합체의 성질에 따라서, 화합물 방출 속도가 제어될 수 있다. 다른 생체분해성 중합체의 예들로서는 폴리(오르토에스테르) 및 폴리(무수물)을 포함한다. 데포 주사 제제는 또한 약물을, 체조직과 양립 가능한 리포좀이나 마이크로캡슐에 포집함으로써 제조될 수도 있다.
전술된 제어 방출, 연장 방출 및 지연 방출 조성물 중 임의의 것은 활성 성분을 약 30분에서 약 1주일, 약 30분에서 약 72시간, 약 30분에서 약 24시간, 약 30분에서 약 12시간, 약 30분에서 약 6시간, 약 30분에서 약 4시간, 그리고 약 3시간에서 약 10시간 이내에 방출하도록 제제화될 수 있다. 구현예들에서, 활성 성분(들)의 유효 농도는 대상체에 약학 조성물이 투여되고 난 후, 대상체 내에서 4시간, 6시간, 8시간, 10시간, 12시간, 16시간, 24시간, 48시간, 72시간, 또는 그 이상 동안 유지된다.
노린이 인간이나 동물에게 약으로서 투여되면, 노린은 그 자체로서, 또는 약학적으로 허용 가능한 담체, 부형제 또는 희석제와 함께 활성 성분을 함유하는 약학 조성물로서 제공될 수 있다.
환자에게 독성을 보이지 않으면서 특정 환자에 요망되는 치료 반응을 달성하는데 유효한 활성 성분의 양, 조성물, 그리고 투여 방식을 달성하기 위한, 본 발명의 약학 조성물 중 활성 성분의 실제 투여량 수준과 투여에 관한 시간경과는 가변적일 수 있다. 일반적으로 노린은 망막 부종 또는 황반 변성 또는 FEVR과 연관된 증상들을 줄이거나 없애기 충분한 양으로 투여된다.
예시적 안내 용량 범위로서는 1일에 0.00001 mg 내지 250 mg, 1일에 0.0001 mg 내지 100 mg, 1일에 1 mg 내지 100 mg, 1일에 10 mg 내지 100 mg, 1일에 1 mg 내지 10 mg, 그리고 1일에 0.01 mg 내지 10 mg을 포함한다. 제제의 바람직한 용량은 환자가 관용할 수 있고, 심각하거나 허용되지 않는 부작용을 발현하지 않는 최대량이다. 본 발명의 임의의 구현예들에서, 치료적 유효 투여량은 노린의 안내 농도를 약 0.1 ng/ml로부터 약 50 μg/ml ~ 100 μg/ml까지로 만든다. 본 발명의 임의의 구현예들에서, 제제 50 nM 내지 1 μM이 대상체의 눈에 투여된다. 관련 구현예들에서, 노린 약 50 nM ~ 약 100 nM, 약 50 nM ~ 약 250 nM, 약 100 nM ~ 약 500 nM, 약 250 nM ~ 약 500 nM, 약 250 nM ~ 약 750 nM, 약 500 nM ~ 약 750 nM, 약 500 nM ~ 약 1 μM, 또는 약 750 nM ~ 약 1 μM이 대상체의 눈에 투여된다.
유효량 확정은 당 업자들의 역량 안에서, 특히 본원에 제공된 상세한 개시내용을 참고로 잘 이루어진다. 일반적으로 노린의 효과적인 양 또는 유효량은, 우선 제제(들) 저용량만큼을 투여한 다음, 처리된 대상체에서 최소한의 유해 부작용 또는 허용 가능한 정도의 유해 부작용만을 보이며 요망되는 효과(예컨대 망막 부종과 연관된 증상의 감소 또는 비발현)가 관찰될 때까지, 투여된 용량 또는 투여량을 점점 늘려가면서 확정된다. 본 발명의 약학 조성물을 투여하는데 적당한 용량과 투여 스케줄을 확정하는데 적용 가능한 방법은, 예를 들어 문헌[Goodman and Oilman's The Pharmacological Basis of Therapeutics, Goodman et al., eds., 11th Edition, McGraw-Hill 2005, and Remington: The Science and Practice of Pharmacy, 20th and 21st Editions, Gennaro and University of the Sciences in Philadelphia, Eds., Lippencott Williams & Wilkins (2003 및 2005)](이들 문헌은 각각 본원에 참조로 인용됨)에 기술되어 있다.
이하에는 노린이 세포 대 세포 접착 분자의 내피 세포 고갈을 어떻게 극복할 수 있으며, 혈관을 다시 안정화할 수 있는지에 관한 시험관 내 및 생체 내 실시예들이 기술되어 있는데, 이 실시예들은 예시를 위한 것이지 본 발명의 범위를 한정하고자 하는 것은 아니다.
시험관내 검정
실시예 1: 발현 어레이를 사용하는, 노린에 의한 혈관 안정화
노린 혈관 안정화 유도를 실현할 수 있는 경로를 탐구하기 위한 실험을 수행한 결과, 노린은 증식성 망막병증(PR)의 산소 유도성 망막병증(OIR) 모델에서 혈액 망막 장벽(BRB)을 복구시키는 것으로 확인되었으므로, 본 발명자들은 노린이 인간 망막 미세혈관 내피 세포(HRMEC)에서의 유전자 발현 변화를 유도하였는지 관찰하였다.
실험에서 HRMEC(P5-P8)를, 세포 부착 인자가 코팅된 평판에 접종하여 합류상태가 될 때까지 생육하였다.
합류상태에 도달하였을 때, 평판 내 배지를 하기의 것으로 교체한 다음, 24시간(또는 7시간) 동안 항온처리하여 mRNA를 단리하였다:
배지: 어레이 및 연접 택맨(Taqman)용 10% FBS/CSC 배지(Cell Systems), 또는 하이드로코르티손 불포함 2.5 % FBS/EndoGro(Millipore).
VEGFA165-b: R&D Systems(100 ng/ml), 그리고 노린: R&D Systems(250 ng/ml 또는 200ng/ml)(BMP2/HGF 택맨 검정용).
Agilent Absolutely RNA RT-PCR 키트를 사용하여 세포로부터 mRNA를 단리한 다음, Qiagen RT2 First Strand 키트(어레이용) 및 Agilent Affinity Script QPCR cDNA 합성 키트(개별 택맨 검정용)를 사용하여 이 mRNA 0.5 ug ~ 1 ug을 cDNA로 전환하였다.
FAM 표지화 택맨 유전자 발현 검정을, 정규화에 사용하였던 Vic 표지화 TBP 택맨 검정과 동시진행하였다.
RT-PCR을 Stratagene MX3000P 시스템상에서 진행하였다.
검정용 어레이를 도 4를 참조하여 다음과 같이 구성하였다: Qiagen RT2 PCR 프로파일러 어레이를 사용하여, 어레이를 "혈관신생 성장 인자" 및 "인간 내피 세포 생물학"용으로 구성하였는데, 이때 어레이 각각은 84개의 유관 경로 유전자에 대한 PCR 어레이를 함유하였다.
노린 처리 및 노린 미처리(배지만으로 처리) HREC에서의 발현을, 두 가지 유형의 어레이를 사용하여 비교하였다. SYBR Green RT-PCR을 이용하여 검출한 다음, 배수 차이(fold difference)를 델타 CT 방법에 의해 산정하였다.
도 5는 "인간의 혈관신생 성장 인자"를 검정하기 위해 구성한 어레이를 도시하는 것이다.
도 6은 "인간 내피 세포 생물학"을 검정하기 위해 구성한 어레이를 도시하는 것이다.
실험의 결과들은, 일반적 패턴 2가지를 규명해냈다:
노린은 염증 매개인자의 발현을 감소시키는 역할을 함.
노린은 유로키나아제 경로 신호전달을 진행시킴.
택맨 검정 결과
실시예 2:
대조 조건하에서 클로딘-5를 도 7의 좌측 상단 패널에 보인 바와 같이 세포들의 세포-세포 경계에 편재화하였다. 여기에 VEGF를 첨가하였더니(도 7의 우측 상단 패널), 세포-세포 접착 분자가 감소하는 것과, 자갈과 같은 형상이 없어지는 것을 확인할 수 있었다. 그러나 VEGF와 노린이 함께 첨가되었을 때(도 7의 우측 하단 패널)에는 연접 단백질과 형상이 복구되었다. 노린 단독 첨가시의 효과를 보였다(도 7의 좌측 하단 패널).
실시예 3: 클로딘-5의 세포 내 면역염색 - VEGF 공격시
항 인간 VE-카데린 대신에 마우스 항 인간 클로딘-5 항체를 사용하여 상기 과정을 반복하였다(4℃, 밤새도록). 세포를 PBS로 세척한 후, 이 세포를 항 인간 클로딘-5 항체에 특이적인 염료 접합 2차 항체와 함께 항온처리한 다음, 이후에는 PBS 중에서 세척하고 나서 형광현미경을 사용하여 영상을 촬영하였다.
대조 조건하에서 클로딘-5를 도 8의 좌측 상단 패널에 보인 바와 같이 세포들의 세포-세포 경계에 편재화하였다. 여기에 VEGF를 첨가하였더니(도 8의 우측 상단 패널), 세포-세포 접착 분자가 감소하는 것과, 자갈과 같은 형상이 없어지는 것을 확인할 수 있었다. 그러나 VEGF와 노린이 함께 첨가되었을 때(도 8의 우측 하단 패널)에는 연접 단백질과 형상이 복구되었다. 노린 단독 첨가시의 효과를 보였다(도 8의 좌측 하단 패널).
실시예 4: 클로딘-5 mRNA의 세포 내 발현 - VEGF 공격시
공격 제제로서 VEGF를 TGF-베타로 대체하여 실시예 3의 과정을 반복하였다. 검출된 클로딘-5 mRNA의 양을, 배지만 존재하는 대조군에 대해 정규화하여 도 9에 보였다. 노린은 클로딘-5 발현 수준을 배지 대조군에서의 발현 수준보다 높게 증가시키는 것으로 관찰되었다.
실시예 4: OIR 마우스에 있어 혈관 누출의 생체내 검정 및 클로딘-5 염색
마우스 산소 유도성 망막병증(OIR) 모델을 사용하여 허혈성 망막을 만들고, 이로써 혈관 형상 및 기능 변화를 평가할 수 있었다. 고산소 환경에서 마우스를 생육하여 무혈관 망막(avascular retina) 구역을 생성하였다. 정상 산소 환경으로 복귀되었을 때, 혈관은 누출을 보이면서 비조절 방식으로 성장하였다. 형광 염료(에반스 블루 또는 플루오레세인)를 전신 주사하여 누출의 양을 시각화한 다음, 현미경으로 망막을 관찰하였다. OIR 마우스에서 에반스 블루 염료는 망막 혈관에 누출이 일어나는 것과, 클로딘-5가 파괴되었음을 보여줄 수 있었다(도 10의 좌측 패널). 그러나 무혈관 망막에서 OIR을 유도한 후 노린을 주사한 OIR 눈에서 에반스 블루 염료는 오로지 혈관만을 염색하였다(도 10의 우측 패널). 오른쪽 눈에 노린을 주사하고 나서 4일 후에 영상을 촬영하였다.
도 11a 및 도 11b는 상이한 처리 조건하에 있은지 24시간 후의 클로딘-5 및 VE-카데린의 상대적 발현 각각을 보여주는 막대 그래프이다. BMP2 택맨 검정 결과는 BMP2 발현 감소라는 어레이상 결과와 부합하지 않았음에 주목한다.
도 12a 및 도 12b는, 상이한 처리 조건하에 있은지 7시간 및 24시간 후의 골형성단백질 2(BMP2)의 상대적 발현을 보여주는 막대 그래프이다. HGF 택맨 검정 결과는 어레이에서 보이는 검정 결과와 유사하였다(노린은 HGF 발현을 감소시킴).
도 13a 및 도 13b는 상이한 처리 조건하에 있은지 7시간 및 24시간 후의 간세포 성장 인자(HGF)의 상대적 발현을 보여주는 막대 그래프이다.
유전자 발현 어레이는, 노린 처리(24시간) HRMEC에서 유전자 몇몇은 달리 발현되었음을 밝혔다. 이들 유전자 몇몇은 염증 매개인자, 즉 BMP2, CLCL6, IL12B, SELPLG & CX3CL1이다.
어레이 및 택맨 검정에서 노린은 유로키나아제 신호전달 경로에 수반되는 기타 유전자 몇몇(SPINK5, PLAU PAI-1)과 HGF를 탈조절(dysregulation)하였다. 유로키나아제 경로는 ECM과 연접 단백질을 분해하는 효소의 활성화를 초래하였다. HGF는 유로키나아제(uPA) 활성을 증가시켰고, 그 결과 EC의 이동에 관한 표현형이 유도되었다(Colombo, E. et al. (2007), Hepatocyte Growth Factor/Scatter Promotes Retinal Angiogenesis through Increased Urokinase Expression. IOVS, 48(4), 1793-1800). 뿐 아니라, 이전의 연구들은, 유로키나아제 수용체(UPAR)의 억제는 클로딘-5 단백질 발현의 VEGF-A 억제를 극복할 수 있었음을 보여주었다(Motta, C. et al (2016). Molecular mechanisms Mediating Antiangiogenic Action of the Urokinase Receptor-Derived Peptide UPARANT in Human Retinal Enodothelial Cells. 57, 5723-5735).
당 업자는 전술된 상세한 설명, 그리고 도면 및 특허청구의범위를 인지할 것이므로, 하기 특허 청구의 범위에 정의된 본 발명의 범위로부터 벗어나지 않고 본 발명의 바람직한 구현예들을 대상으로 변형 및 변화가 이루어질 수 있다.
Claims (13)
- 혈관조직을 노린에 노출시키는 단계; 및
상기 노린이 BMP2, CLCL6, IL12B, SELPLG, CX3CL1, CASP3, THBD, COL18A1, CPB2, NPR1, BMP2, CLCL6, IL12B, SELPLG, CX3CL1, CASP3, THBD, COL18A1, CPB2, NPR1, CLDN5, CLD3, PIGF, BDNF, CNTF, VEGF-A, CAM-1, PGF, FOX-01, FOX-04, PDGFB, TGFA, HGF, VE-카데린 또는 PLAU 유전자 적어도 하나의 유전자 발현을 조정하도록 충분한 시간을 허용하는 단계
를 포함하는, 혈관조직 장벽을 치료하는 방법. - 제1항에 있어서, 상기 유전자 모두는 상기 노린에 의해 조정되는 방법.
- 제1항에 있어서, 상기 혈관조직 장벽은 생체 내, 즉 대상체 망막 혈관인 방법.
- 제3항에 있어서, 상기 대상체는 노인성 황반 변성 또는 증식성 망막병증이 발병한 대상체인 방법.
- 제3항에 있어서, 상기 노출 단계는 안내 주사에 의해 수행되는 방법.
- 제3항에 있어서, 상기 노출 단계는 전신 투여에 의해 수행되는 방법.
- 제3항에 있어서, 상기 대상체는 인간인 방법.
- 제3항에 있어서, 상기 대상체는 소, 말, 양, 돼지, 염소, 닭, 고양이, 개, 마우스, 기니아피그, 햄스터, 토끼, 래트이거나, 또는 이것들 중 하나로부터 유래하는 세포 중 하나인 방법.
- 제1항 내지 제8항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 노린은 서열 번호 2의 폴리펩티드인 방법.
- 제1항 내지 제8항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 노린은 망막 혈관 세포의 프리즐드-4 수용체와 결합하는 서열 번호 1의 단편인 방법.
- 제1항 내지 제8항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 노린은 재조합체인 방법.
- 제1항 내지 제8항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 노린이 유전자 발현을 조정하도록 충분한 시간을 허용한 후 염료를 망막 혈관 세포와 접촉시키는 단계를 추가로 포함하는 방법.
- 제12항에 있어서, 상기 염료는 에반스 블루 염료 또는 플루오레세인인 방법.
Applications Claiming Priority (3)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| US201762501940P | 2017-05-05 | 2017-05-05 | |
| US62/501,940 | 2017-05-05 | ||
| PCT/US2018/031355 WO2018204909A2 (en) | 2017-05-05 | 2018-05-07 | Norrin induced expression of genes and use thereof to treat disease |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| KR20200015523A true KR20200015523A (ko) | 2020-02-12 |
Family
ID=64016798
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| KR1020197035946A KR20200015523A (ko) | 2017-05-05 | 2018-05-07 | 유전자의 노린 유도 발현 및 질환을 치료하기 위한 이의 용도 |
Country Status (6)
| Country | Link |
|---|---|
| US (1) | US20200268838A1 (ko) |
| EP (1) | EP3618851A4 (ko) |
| JP (2) | JP2020518675A (ko) |
| KR (1) | KR20200015523A (ko) |
| CN (1) | CN110891593A (ko) |
| WO (1) | WO2018204909A2 (ko) |
Families Citing this family (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN111926021B (zh) * | 2020-07-29 | 2024-06-21 | 武汉纽福斯生物科技有限公司 | 重组人norrin胱氨酸结生长因子表达载体及其应用 |
Family Cites Families (8)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JP5859307B2 (ja) * | 2008-09-10 | 2016-02-10 | ジェネンテック， インコーポレイテッド | 眼の血管新生を阻害する方法 |
| US9114078B2 (en) * | 2009-03-17 | 2015-08-25 | Retinol Solutions Llc | Methods and compositions for genetic and retinal disease |
| EP2804629A1 (en) * | 2012-01-18 | 2014-11-26 | Genentech, Inc. | Anti-lrp5 antibodies and methods of use |
| CN105431161A (zh) * | 2013-02-21 | 2016-03-23 | 范安德尔研究所 | Norrin突变体多肽、其制造方法和用途 |
| EP2968452A4 (en) * | 2013-03-15 | 2016-10-05 | Michael Thomas Trese | COMPOSITIONS AND METHOD FOR THE TREATMENT OF NETWORK DISEASES |
| US10202429B2 (en) * | 2015-06-08 | 2019-02-12 | Retinal Solutions Llc | Norrin regulation of cellular production of junction proteins and use to treat retinal vasculature edema |
| US10206978B2 (en) * | 2015-06-08 | 2019-02-19 | Retinal Solutions Llc | Norrin regulation of junction proteins and the use thereof to treat epithelial or endothelial membrane leakage induced edema |
| TWI721274B (zh) * | 2018-05-29 | 2021-03-11 | 趙效明 | 組合物用於製備治療發育性視網膜血管疾病的藥物之用途 |
-
2018
- 2018-05-07 EP EP18795043.1A patent/EP3618851A4/en active Pending
- 2018-05-07 WO PCT/US2018/031355 patent/WO2018204909A2/en active Application Filing
- 2018-05-07 US US16/611,063 patent/US20200268838A1/en active Pending
- 2018-05-07 JP JP2020511870A patent/JP2020518675A/ja active Pending
- 2018-05-07 CN CN201880044645.1A patent/CN110891593A/zh active Pending
- 2018-05-07 KR KR1020197035946A patent/KR20200015523A/ko not_active IP Right Cessation
-
2022
- 2022-12-05 JP JP2022194529A patent/JP2023027172A/ja active Pending
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| CN110891593A (zh) | 2020-03-17 |
| EP3618851A2 (en) | 2020-03-11 |
| US20200268838A1 (en) | 2020-08-27 |
| JP2023027172A (ja) | 2023-03-01 |
| JP2020518675A (ja) | 2020-06-25 |
| WO2018204909A3 (en) | 2019-02-21 |
| EP3618851A4 (en) | 2020-04-15 |
| WO2018204909A2 (en) | 2018-11-08 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| US10799557B2 (en) | Norrin regulation of junction proteins and the use thereof to treat epithelial or endothelial membrane leakage induced edema | |
| US10703787B2 (en) | Norrin regulation of cellular production of junction proteins and use to treat retinal vasculature edema | |
| US11198714B2 (en) | Synthetic truncated norrin protein | |
| KR20050044471A (ko) | 종양 및 세포의 제거 또는 파괴를 필요로 하는 다른질환의 치료에 효과적인 펩티드 | |
| CN102026667A (zh) | 紫杉醇、紫杉醇类似物或紫杉醇结合物的药物组合物及相关制备方法和用途 | |
| US20160022769A1 (en) | Compostions and methods for treating retinal disease | |
| Xu et al. | A novel antiangiogenic peptide derived from hepatocyte growth factor inhibits neovascularization in vitro and in vivo | |
| Loo et al. | Discovery of hyperstable noncanonical plant-derived epidermal growth factor receptor agonist and analogs | |
| DK2276501T3 (en) | METHODS AND COMPOSITIONS FOR GENETIC AND RETINAL DISEASE | |
| JP2023027172A (ja) | ノリン誘発性の遺伝子発現および疾患を処置するためのその使用 | |
| Xu et al. | Thermoresponsive gel for sustained release of BMP4 to inhibit corneal neovascularization | |
| US20230126239A1 (en) | Norrin regulation of plasmalemma vesicle-associated protein and use to treat macular degeneration | |
| US20240000890A1 (en) | Neural regeneration with synthetic protein administration | |
| CN113645994A (zh) | 使用色素上皮衍生因子(pedf)治疗疾病的方法 | |
| WO2018183219A2 (en) | Nucleic acid-based compositions and methods for treating small vessel diseases | |
| US20210000911A1 (en) | Compositions and methods for protecting epithelial and barrier integrity | |
| JP2016509590A (ja) | 加齢に伴う障害の治療のための組換え７型コラーゲンの投与 | |
| KR20140046781A (ko) | 보체인자 ｈ를 포함하는 맥락막 신생혈관 생성 예방 또는 치료용 조성물 | |
| WO2017075661A1 (en) | Methods and compositions for treating cns injury |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| A201 | Request for examination | ||
| E902 | Notification of reason for refusal | ||
| AMND | Amendment | ||
| AMND | Amendment | ||
| E601 | Decision to refuse application | ||
| AMND | Amendment | ||
| X601 | Decision of rejection after re-examination |