KR20200014796A

KR20200014796A - Gpr6의 테트라하이드로피리도피라진 조절제

Info

Publication number: KR20200014796A
Application number: KR1020197037207A
Authority: KR
Inventors: 제이슨 더블유. 브라운; 스티븐 히치콕; 마리아 홉킨스; 쇼타 키쿠치; 홀저 모넨샤인; 홀리 레이차드; 크리스틴 슐라이허; 후이카이 쑨; 토드 맥클린
Original assignee: 다케다 파머수티컬 컴패니 리미티드
Priority date: 2017-06-15
Filing date: 2018-06-15
Publication date: 2020-02-11
Also published as: US20180360831A1; IL271332B2; CO2019015086A2; WO2018232202A1; CN110730781B; EP3638673A4; PH12019502792A1; CN110730781A; EP3638673A1; IL271332A; TWI775874B; AU2018285677B2; JP2022188199A; BR112019026430A2; JP7460369B2; RU2019144408A3; IL271332B; MX2019014940A; JP2020523287A; US10406157B2

Abstract

본 명세서에 기재된 바와 같은 화학식 1의 화합물 및 이의 약제학적으로 허용 가능한 염이 개시되어 있다. 본 개시내용은 또한 화학식 1의 화합물을 제조하기 위한 재료 및 방법, 이를 함유하는 약제학적 조성물, 및 GPR6과 연관된 질환, 장애 및 병태를 치료하기 위한 이의 용도에 관한 것이다.

Description

GPR6의 테트라하이드로피리도피라진 조절제

관련 출원에 대한 상호참조

본 출원은 미국 가출원 제62/520,430호(출원일: 2017년 6월 15일); 미국 가출원 제62/591,247(출원일: 2017년 11월 28일); 미국 가출원 제62/649,856호(출원일: 2018년 3월 29일); 및 미국 가출원 제62/672,261호(출원일: 2018년 5월 16일)의 유익을 주장하며; 이들 각각은 이들의 전문이 참고로 본 명세서에 원용된다.

발명의 분야

본 발명은 G 단백질-결합된 수용체 6(G protein-coupled receptor 6: GPR6)의 조절제인 테트라하이드로피리도피라진 유도체, 이를 함유하는 약제학적 조성물, 및 GPR6과 연관된 질환, 장애 및 병태를 치료하기 위한 이들의 용도에 관한 것이다.

GPR6은 막관통 수용체의 G 단백질-결합된 수용체(GPCR) 패밀리의 구성원이다. GPR6은 G 단백질(Gs) 경로를 통해서 신호를 전달한다. 이것은 중추신경계(CNS)에서, 특히 선조체의 중간 돌기 신경(medium spiny neuron: MSN)에서 고도로 발현되고, 말초 조직에서 최소 발현을 나타낸다. 도파민작용성 신경분포의 주된 선조체 표적은 담창구(간접적) 및 선조체흑질(직접적) 출력 경로의 MSN에 존재한다. 직접적 출력 경로의 MSN은 D1 도파민 수용체를 발현하는 한편 간접적 경로에서의 것은 D2 수용체를 발현한다. GPR6은 선조체의 D2 수용체-발현 MSN에서 풍부한데, 여기서 GPR6 활성도는 세포내 제2 메신저 cAMP의 수준을 증가시키며, 이는 D2 수용체 신호전달에 기능적으로 반대되는 것이다. Gs-결합된 GPR6의 길항작용 또는 역작용은 MSN에서 cAMP를 감소시키고, 따라서 D2 수용체의 도파민-매개 활성화에 대한 기능적 대안을 제공한다.

공개된 국제 특허 출원 제WO 2015/095728A1호(이의 전문이 참고로 본 명세서에 편입됨)는, GPR6의 조절제인 많은 테트라하이드로피리도피라진 유도체를 기재한다. 이들 화합물은 (S)-1-(2-(4-(2,4-다이플루오로페녹시)피페리딘-1-일)-3-((테트라하이드로퓨란-3-일)아미노)-7,8-다이하이드로피리도[3,4-b]피라진-6(5H)-일)에탄-1-온("화합물 A")을 포함한다. 화합물 A는 GPR6의 잠재적으로 효율적인 조절제이지만, 이는 hERG(human ether-a-go-go-related gene) 활성도의 저해에 관한 차선의 안전 마진을 가졌다. 예컨대, 문헌[X. Yao et al., British Journal of Pharmacology (2008) 154:1446-56] 참조. hERG의 저해는 잠재적인 QT 간격 연장 및 심부정맥과 연관된 하나의 인자이다.

본 발명은 테트라하이드로피리도피라진 유도체 및 이를 함유하는 약제학적 조성물을 제공한다. 테트라하이드로피리도피라진 유도체는 GPR6의 조절제이고, 파킨슨병과 같은 신경 장애를 포함하는, GPR6과 연관된 질환, 장애 및 병태를 치료하는데 사용될 수 있다.

본 발명의 일 양상은 하기 화학식 1의 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용 가능한 염을 제공한다:

화학식 1은 화합물(R)-1-(2-(4-(2,4-다이플루오로페녹시)피페리딘-1-일)-3-((테트라하이드로퓨란-3-일)아미노)-7,8-다이하이드로피리도[3,4-b]피라진-6(5H)-일)에탄-1-온을 묘사한다.

소정의 실시형태에 있어서, 화학식 1의 화합물 또는 약제학적으로 허용 가능한 염은 20% 이상, 40% ee, 60% ee, 80% ee, 90% ee, 98% ee, 99% ee 또는 100% ee의 거울상이성질체 과잉량(ee)을 갖는 거울상이성질체 순도를 가진다. 소정의 실시형태에 있어서, 화합물은 유리 형태(free form)로서 존재한다.

본 발명의 추가의 양상은 본 명세서에 기재된 바와 같은 화학식 1의 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용 가능한 염; 및 약제학적으로 허용 가능한 부형제를 포함하는 약제학적 조성물을 제공한다.

본 발명의 추가의 양상은 의약(medicament)으로서 사용하기 위한, 본 명세서에 기재된 바와 같은 화학식 1의 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용 가능한 염을 포함하는 약제학적 조성물을 제공한다. 소정의 실시형태에 있어서, 약제학적 조성물은 파킨슨병, 레보도파-유도 운동이상증(evodopa-induced dyskinesia), 헌팅턴병, 약물 중독, 섭식장애, 인지장애, 조현병, 양극성 장애, 뇌전증, 알츠하이머병, 불안증 및 우울증의 치료에 사용하기 위한 것이다. 소정의 실시형태에 있어서, 약제학적 조성물은 아만타딘을 더 포함한다. 본 발명의 다른 양상은 GPR6과 연관된 질환, 장애 또는 병태의 치료로서 사용하기 위한 약제학적 조성물을 제공한다.

본 명세서에 기재된 본 발명의 각종 실시형태는 본 명세서에 기재된 바와 같은 화학식 1의 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용 가능한 염, 및 약제학적으로 허용 가능한 부형제를 포함하는 약제학적 조성물을 제공한다. 소정의 실시형태에 있어서, 약제학적 조성물은 의약으로서 사용하기 위한 것이다. 소정의 실시형태에 있어서, 약제학적 조성물의 사용은 파킨슨병, 레보도파-유도 운동이상증, 헌팅턴병, 약물 중독, 섭식장애, 인지장애, 조현병, 양극성 장애, 뇌전증, 알츠하이머병, 불안증 및 우울증으로 이루어진 군으로부터 선택되는 질환, 장애 또는 병태의 치료이다.

본 발명의 추가의 양상은 GPR6과 연관된 질환, 장애 또는 병태의 치료를 위한 의약의 제조를 위한 화학식 1의 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용 가능한 염의 용도를 제공한다. 소정의 실시형태에 있어서, 질환, 장애 또는 병태는 파킨슨병, 레보도파-유도 운동이상증, 헌팅턴병, 약물 중독, 섭식장애, 인지장애, 조현병, 양극성 장애, 뇌전증, 알츠하이머병, 불안증 및 우울증으로 이루어진 군으로부터 선택된다.

본 발명의 추가의 양상은 GPR6과 연관된 질환, 장애 또는 병태를 치료하는 방법을 제공하되, 해당 방법은 유효량의 본 명세서에 기재된 바와 같은 화학식 1의 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용 가능한 염을 투여하는 단계를 포함한다. 소정의 실시형태에 있어서, 화학식 1의 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용 가능한 염은 경구 투여된다.

본 발명의 또 다른 양상은 대상체에서 질환, 장애 또는 병태를 치료하는 방법을 제공하되, 해당 방법은 대상체에게 유효량의 화학식 1의 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용 가능한 염을 투여하는 단계를 포함하되, 질환, 장애 또는 병태는 파킨슨병, 레보도파-유도 운동이상증, 헌팅턴병, 약물 중독, 섭식장애, 인지장애, 조현병, 양극성 장애, 뇌전증, 알츠하이머병, 불안증 및 우울증으로부터 선택된다.

소정의 실시형태에 있어서, 본 명세서에 기재된 방법에서 투여된 화학식 1의 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용 가능한 염은 약 0.1 ㎎/㎏ 내지 약 1.0 ㎎/㎏ 또는 약 0.5 ㎎/㎏ 내지 약 5.0 ㎎/㎏의 범위로부터 선택된 용량으로 투여된다. 소정의 실시형태에 있어서, 화합물 또는 약제학적으로 허용 가능한 염은 약 40 ㎎/㎏ 내지 약 60 ㎎/㎏의 범위 내의 용량으로 투여된다. 소정의 실시형태에 있어서, 본 명세서에 기재된 방법에서 투여된 화학식 1의 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용 가능한 염은 약 5 ㎎/㎏ 내지 약 15 ㎎/㎏, 약 10 ㎎/㎏ 내지 약 20 ㎎/㎏, 약 15 ㎎/㎏ 내지 약 25 ㎎/㎏, 약 20 내지 약 30 ㎎/㎏, 약 25 ㎎/㎏ 내지 약 35 ㎎/㎏, 약 30 ㎎/㎏ 내지 약 40 ㎎/㎏, 약 35 ㎎/㎏ 내지 약 45 ㎎/㎏, 및 약 45 ㎎/㎏ 내지 약 55 ㎎/㎏로 이루어진 군의 범위로부터 선택된 용량으로 투여된다. 소정의 실시형태에 있어서, 용량은 약 30 ㎎/㎏ 내지 약 40 ㎎/㎏, 약 35 ㎎/㎏ 내지 약 45 ㎎/㎏, 약 40 ㎎/㎏ 내지 약 50 ㎎/㎏, 약 45 ㎎/㎏ 내지 약 55 ㎎/㎏, 약 50 ㎎/㎏ 내지 약 60 ㎎/㎏, 약 55 ㎎/㎏ 내지 약 65 ㎎/㎏, 및 약 60 ㎎/㎏ 내지 약 70 ㎎/㎏으로 이루어진 군으로부터 선택된 범위이다. 소정의 실시형태에 있어서, 용량은 약 50 ㎎/㎏일 수 있다. 소정의 실시형태에 있어서, 용량은 약 1 ㎎/㎏ 초과이다. 소정의 실시형태에 있어서, 용량은 약 1 ㎎/㎏이다. 소정의 실시형태에 있어서, 용량은 약 50 ㎎/㎏ 내지 약 100 ㎎/㎏, 약 100 ㎎/㎏ 내지 약 150 ㎎/㎏, 약 150 ㎎/㎏ 내지 약 200 ㎎/㎏, 약 200 ㎎/㎏ 내지 약 250 ㎎/㎏, 약 250 ㎎/㎏ 내지 약 350 ㎎/㎏, 약 300 ㎎/㎏ 내지 약 350 ㎎/㎏, 약 350 ㎎/㎏ 내지 약 400 ㎎/㎏, 약 400 ㎎/㎏ 내지 약 450 ㎎/㎏, 약 450 ㎎/㎏ 내지 약 500 ㎎/㎏으로 이루어진 군으로부터 선택된 범위 내이다. 소정의 실시형태에 있어서, 용량은 약 500 ㎎/㎏이다. 대안적으로, 용량은 500 ㎎/㎏ 미만이다.

소정의 실시형태에 있어서, 용량은 35 ㎎/㎏이다. 소정의 실시형태에 있어서, 용량은 36 ㎎/㎏이다. 소정의 실시형태에 있어서, 용량은 37 ㎎/㎏이다. 소정의 실시형태에 있어서, 용량은 38 ㎎/㎏이다. 소정의 실시형태에 있어서, 용량은 39 ㎎/㎏이다. 소정의 실시형태에 있어서, 용량은 40 ㎎/㎏이다. 소정의 실시형태에 있어서, 용량은 41 ㎎/㎏이다. 소정의 실시형태에 있어서, 용량은 42 ㎎/㎏이다. 소정의 실시형태에 있어서, 용량은 43 ㎎/㎏이다. 소정의 실시형태에 있어서, 용량은 44 ㎎/㎏이다. 소정의 실시형태에 있어서, 용량은 45 ㎎/㎏이다. 소정의 실시형태에 있어서, 용량은 46 ㎎/㎏이다. 소정의 실시형태에 있어서, 용량은 47 ㎎/㎏이다. 소정의 실시형태에 있어서, 용량은 48 ㎎/㎏이다. 소정의 실시형태에 있어서, 용량은 49 ㎎/㎏이다. 소정의 실시형태에 있어서, 용량은 50 ㎎/㎏이다. 소정의 실시형태에 있어서, 용량은 51 ㎎/㎏이다. 소정의 실시형태에 있어서, 용량은 52 ㎎/㎏이다. 소정의 실시형태에 있어서, 용량은 53 ㎎/㎏이다. 소정의 실시형태에 있어서, 용량은 54 ㎎/㎏이다. 소정의 실시형태에 있어서, 용량은 55 ㎎/㎏이다. 소정의 실시형태에 있어서, 용량은 56 ㎎/㎏이다. 소정의 실시형태에 있어서, 용량은 57 ㎎/㎏이다. 소정의 실시형태에 있어서, 용량은 58 ㎎/㎏이다. 소정의 실시형태에 있어서, 용량은 59 ㎎/㎏이다. 소정의 실시형태에 있어서, 용량은 60 ㎎/㎏이다. 소정의 실시형태에 있어서, 용량은 61 ㎎/㎏이다. 소정의 실시형태에 있어서, 용량은 62 ㎎/㎏이다. 소정의 실시형태에 있어서, 용량은 63 ㎎/㎏이다. 소정의 실시형태에 있어서, 용량은 64 ㎎/㎏이다. 소정의 실시형태에 있어서, 용량은 65 ㎎/㎏이다. 소정의 실시형태에 있어서, 투여하는 단계는 경구적으로 일어난다.

본 발명의 추가의 양상은 유효량의 약제학적 조성물; 및 적어도 1종의 추가의 약리학적 활성제를 포함하는 병용 요법(combination therapy)을 제공한다. 소정의 실시형태에 있어서, 추가의 약리학적 활성제는 레보도파, DOPA 데카복실라제 저해제, 도파민 작용제, 항콜린제, B-선택적 모노아민 산화효소 저해제, 및 카테콜 O-메틸 전이효소 저해제로 이루어진 군으로부터 선택된다. 다른 실시형태에 있어서, 추가의 약리학적 활성제는 DOPA 데카복실라제 저해제와 병용되는 레보도파이다. 소정의 실시형태에 있어서, 추가의 약리학적 활성제는 카비도파; 벤세라지드; 메틸도파; α-다이플루오로메틸-DOPA; 3',4',5,7-테트라하이드록시-8-메톡시아이소플라본; 아포몰핀 염산염; 브로모크립틴; 로티고틴; 프라미펙솔; 로피니롤; 트라이헥실페니딜; 벤즈트로핀 메실레이트; 사피나마이드; 셀레길린; 라사길린; 엔타카폰; 및 톨카폰으로 이루어진 군으로부터 선택된다. 소정의 실시형태에 있어서, 추가의 약리학적 활성제는 베타-세크레타제 저해제, 감마-세크레타제 저해제, HMG-CoA 환원효소 저해제, 비스테로이드성 항염증 약물(NSAID)로 이루어진 군으로부터 선택된다. 소정의 실시형태에 있어서, 추가의 약리학적 활성제는 아파존, 아스피린, 셀레콕십, 다이클로페낙(미소프로스톨과 함께 그리고 미소프로스톨 없이), 디플루니살, 에토돌락, 페노프로펜, 플루르바이프로펜, 이부프로펜, 인도메타신, 케토프로펜, 메클로페나메이트 나트륨, 메페남산, 멜록시캄, 나부메톤, 나프록센, 옥사프로진, 페닐부타존, 피록시캄, 콜린 및 마그네슘 살리실레이트, 살살레이트, 및 설린닥으로 이루어진 군으로부터 선택된다. 소정의 실시형태에 있어서, 추가의 약리학적 활성제는 도네페질, 리바스티그민, 메만틴 및 갈란타민으로 이루어진 군으로부터 선택된다. 소정의 실시형태에 있어서, 추가의 약리학적 활성제는 진정제, 최면제, 항불안제, 항정신병약 및 신경안정제로 이루어진 군으로부터 선택된다. 소정의 실시형태에 있어서, 추가의 약리학적 활성제는 아미트립틸린, 아목사핀, 아리피프라졸, 아세나핀, 부프로피온, 클로르다이아제폭사이드, 시탈로프람, 클로르프로마진, 클로자핀, 데시프라민, 데스벤라팍신, 독세핀, 둘록세틴, 에스시탈로프람, 플루옥세틴, 플루옥세틴, 플루페나진, 할로페리돌, 일로페리돈, 이미프라민, 아이소카복사지드, 라모트리진, 레보밀나시프란, 루라시돈, 미르타자핀, 네파조돈, 노르트립틸린, 올란자핀, 팔리페리돈, 파록세틴, 퍼페나진, 페넬진, 프로트립틸린, 쿠에티아핀, 리스페리돈, 사피나마이드, 셀레길린, 세르트랄린, 트라닐시프로민, 트라조돈, 트라이미프라민, 벤라팍신, 빌라조돈, 보르티옥세틴, 및 지프라시돈으로 이루어진 군으로부터 선택된다. 소정의 실시형태에 있어서, 추가의 약리학적 활성제는 알프라졸람, 클로르다이아제폭사이드, 클로바제팜, 클로나제팜, 클로라제페이트, 다이아제팜, 에스타졸람, 플루라제팜, 로라제팜, 미다졸람, 옥사제팜, 프라제팜, 쿠아제팜, 테마제팜, 및 트라이아졸람, 하이드록시진, 에스조피클론, 잘레플론, 졸피뎀, 및 조피클론, 및 부스피론으로 이루어진 군으로부터 선택된다. 소정의 실시형태에 있어서, 추가의 약리학적 활성제는 아세타졸아마이드, 카바마제핀, 클로바잠, 클로나제팜, 에슬리카바제핀 아세테이트, 에토석시마이드, 가바펜틴, 라코사마이드, 라모트리진, 레베티라세탐, 나이트라제팜, 옥스카바제핀, 페람파넬, 피라세탐, 페노바비탈, 페니토인, 프레가발린, 프리미돈, 레티가빈, 루피나마이드, 나트륨 발프로에이트, 스티리펜톨, 티아가빈, 토피라메이트, 비가바트린 및 조니사마이드로 이루어진 군으로부터 선택된다.

본 명세서에서의 본 발명의 각종 실시형태는, 본 명세서에서 정의된 바와 같은 약제학적 조성물을 대상체에게 투여하는 단계를 포함하는, 대상체에서 파킨슨병을 치료하는 방법을 제공한다. 몇몇 실시형태에 있어서, 약제학적 조성물의 투여는 대상체의 운동근육 증상을 개선시킨다. 소정의 실시형태에 있어서, 투여하는 단계는 경구적으로 수행된다.

본 명세서에서의 본 발명의 각종 실시형태는 약 0.1 ㎎/㎏ 내지 약 1.0 ㎎/㎏ 또는 약 0.5 ㎎/㎏ 내지 약 5.0 ㎎/㎏의 범위로 이루어진 군으로부터 선택된 용량으로 화합물 또는 약제학적으로 허용 가능한 염의 경구 투여를 위하여 적응된 화학식 1의 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용 가능한 염의 투약 형태(dosage form)를 제공한다. 소정의 실시형태에 있어서, 화합물 또는 약제학적으로 허용 가능한 염은 약 40 ㎎/㎏ 내지 약 60 ㎎/㎏의 범위 내의 용량으로 투여된다. 소정의 실시형태에 있어서, 화학식 1의 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용 가능한 염은 약 5 ㎎/㎏ 내지 약 15 ㎎/㎏, 약 10 ㎎/㎏ 내지 약 20 ㎎/㎏, 약 15 ㎎/㎏ 내지 약 25 ㎎/㎏, 약 20 내지 약 30 ㎎/㎏, 약 25 ㎎/㎏ 내지 약 35 ㎎/㎏, 약 30 ㎎/㎏ 내지 약 40 ㎎/㎏, 약 35 ㎎/㎏ 내지 약 45 ㎎/㎏, 및 약 45 ㎎/㎏ 내지 약 55 ㎎/㎏으로 이루어진 군으로부터 선택된 용량이다. 소정의 실시형태에 있어서, 용량은 약 30 ㎎/㎏ 내지 약 40 ㎎/㎏, 약 35 ㎎/㎏ 내지 약 45 ㎎/㎏, 약 40 ㎎/㎏ 내지 약 50 ㎎/㎏, 약 45 ㎎/㎏ 내지 약 55 ㎎/㎏, 약 50 ㎎/㎏ 내지 약 60 ㎎/㎏, 약 55 ㎎/㎏ 내지 약 65 ㎎/㎏, 및 약 60 ㎎/㎏ 내지 약 70 ㎎/㎏으로 이루어진 군으로부터 선택된 범위이다. 소정의 실시형태에 있어서, 용량은 약 50 ㎎/㎏일 수 있다. 소정의 실시형태에 있어서, 용량은 약 1 ㎎/㎏ 초과이다. 소정의 실시형태에 있어서, 용량은 약 1 ㎎/㎏이다. 소정의 실시형태에 있어서, 용량은 약 50 ㎎/㎏ 내지 약 100 ㎎/㎏, 약 100 ㎎/㎏ 내지 약 150 ㎎/㎏, 약 150 ㎎/㎏ 내지 약 200 ㎎/㎏, 약 200 ㎎/㎏ 내지 약 250 ㎎/㎏, 약 250 ㎎/㎏ 내지 약 350 ㎎/㎏, 약 300 ㎎/㎏ 내지 약 350 ㎎/㎏, 약 350 ㎎/㎏ 내지 약 400 ㎎/㎏, 약 400 ㎎/㎏ 내지 약 450 ㎎/㎏, 약 450 ㎎/㎏ 내지 약 500 ㎎/㎏으로 이루어진 군으로부터 선택된 범위 내이다. 소정의 실시형태에 있어서, 용량은 약 500 ㎎/㎏이다. 대안적으로, 용량은 500 ㎎/㎏ 미만이다.

소정의 실시형태에 있어서, 용량은 35 ㎎/㎏이다. 소정의 실시형태에 있어서, 용량은 36 ㎎/㎏이다. 소정의 실시형태에 있어서, 용량은 37 ㎎/㎏이다. 소정의 실시형태에 있어서, 용량은 38 ㎎/㎏이다. 소정의 실시형태에 있어서, 용량은 39 ㎎/㎏이다. 소정의 실시형태에 있어서, 용량은 40 ㎎/㎏이다. 소정의 실시형태에 있어서, 용량은 41 ㎎/㎏이다. 소정의 실시형태에 있어서, 용량은 42 ㎎/㎏이다. 소정의 실시형태에 있어서, 용량은 43 ㎎/㎏이다. 소정의 실시형태에 있어서, 용량은 44 ㎎/㎏이다. 소정의 실시형태에 있어서, 용량은 45 ㎎/㎏이다. 소정의 실시형태에 있어서, 용량은 46 ㎎/㎏이다. 소정의 실시형태에 있어서, 용량은 47 ㎎/㎏이다. 소정의 실시형태에 있어서, 용량은 48 ㎎/㎏이다. 소정의 실시형태에 있어서, 용량은 49 ㎎/㎏이다. 소정의 실시형태에 있어서, 용량은 50 ㎎/㎏이다. 소정의 실시형태에 있어서, 용량은 51 ㎎/㎏이다. 소정의 실시형태에 있어서, 용량은 52 ㎎/㎏이다. 소정의 실시형태에 있어서, 용량은 53 ㎎/㎏이다. 소정의 실시형태에 있어서, 용량은 54 ㎎/㎏이다. 소정의 실시형태에 있어서, 용량은 55 ㎎/㎏이다. 소정의 실시형태에 있어서, 용량은 56 ㎎/㎏이다. 소정의 실시형태에 있어서, 용량은 57 ㎎/㎏이다. 소정의 실시형태에 있어서, 용량은 58 ㎎/㎏이다. 소정의 실시형태에 있어서, 용량은 59 ㎎/㎏이다. 소정의 실시형태에 있어서, 용량은 60 ㎎/㎏이다. 소정의 실시형태에 있어서, 용량은 61 ㎎/㎏이다. 소정의 실시형태에 있어서, 용량은 62 ㎎/㎏이다. 소정의 실시형태에 있어서, 용량은 63 ㎎/㎏이다. 소정의 실시형태에 있어서, 용량은 64 ㎎/㎏이다. 소정의 실시형태에 있어서, 용량은 65 ㎎/㎏이다.

상기 및 기타 목적, 특징 및 이점은, 첨부 도면에 예시된 바와 같이, 본 발명의 특징 실시형태의 이하의 설명으로부터 명백해질 것이다. 도면은 반드시 일정 척도로 그려진 것은 아니고, 대신에 본 발명의 각종 실시형태의 원리를 예시할 때 강조되어 있다.
도 1은 파킨슨병의 6-하이드록시도파민(6-OHDA) 모델에 대한 치료 효과를 도시한 그래프이다.

본 출원은 WO 2015/095728에 관련된 것이며, 이는 이의 전문이 참고로 본 명세서에 편입된다.

I. 정의

달리 표시되지 않는 한, 본 개시내용은 이하에 제공된 정의를 사용한다.

"약" 또는 "대략"은, 측정 가능한 수치 변수와 관련하여 사용될 경우, 변수의 표시된 값 및 그 표시된 값의 실험 오차 이내 또는 그 표시된 값의 ±10 퍼센트 이내인(어느 것이다 더 큰) 변수의 모든 값을 지칭한다.

"거울상이성질체 과잉량" 또는 "ee"는, 전체의 퍼센트로서 표현된, 다른 것에 비해서 하나의 거울상이성질체의 과잉량을 지칭하며, 거울상이성질체를 함유하는 샘플의 거울상이성질체(카이럴) 순도의 척도이다. 예를 들어, 샘플이 과잉의 R-거울상이성질체를 함유할 경우, ee는 하기 식으로부터 결정될 수 있다:

식 중, A _R 및 A _S 는 샘플 내 R- 및 S- 거울상이성질체의 양이다.

"병용 요법"은 하나 초과의 치료 방식을 포함하는 질환, 장애 또는 병태의 치료를 위한 접근법을 지칭한다. 예를 들어, 치료 방식은 하나 초과의 약제학적 조성물 또는 약제학적 활성제 또는 이의 조합물일 수 있다. 치료 방식들은 동시에, 순차로 또는 임의의 순서로 투여될 수 있다. 이들은, 상이한 용량으로, 상이한 투약 주기로, 또는 상이한 경로를 통해서 (어느 것이든 적합한 것으로) 투여될 수 있다. 치료 방식의 몰비는 특별히 제한되지 않는다.

"운동근육 증상"은, GPR6과 연관된 질환, 장애 및 병태, 예컨대, 파킨슨병을 가진 대상체에서 일어나는 활성도의 감소를 지칭한다.

"실질적으로 순수한 거울상이성질체" 및 이의 변형어는 90% ee 이상으로 샘플에 존재하는 거울상이성질체를 지칭한다.

"순수한 거울상이성질체" 및 이의 변형어는 98% ee 이상으로 샘플에 존재하는 거울상이성질체를 지칭한다.

"대상체"는 인간을 포함하는 포유동물을 지칭한다.

"약제학적으로 허용 가능한" 물질은 대상체에게 투여하기에 적합한 물질을 지칭한다.

"치료하는"은 이러한 용어가 적용되는 질환, 장애 또는 병태의 진행을 역전, 완화, 저해하거나, 또는 이를 예방하는 것을 지칭하거나, 또는 이러한 질환, 장애 또는 병태의 하나 이상의 증상의 진행을 역전, 완화, 저해하거나, 또는 예방하는 것이다.

"치료"는 바로 위에서 정의된 바와 같은 "치료하는"의 행위를 지칭한다.

"약물", "약물 물질", "활성 약제학적 성분" 등은, 치료를 필요로 하는 대상체를 치료하기 위하여 사용될 수 있는 화합물(예컨대, 화학식 1의 화합물)을 지칭한다.

"유효량"의 약물, "치료적 유효량"의 약물 등은 대상체를 치료하는데 사용될 수 있는 약물의 양을 지칭하며, 특히, 대상체의 중량 및 연령 및 투여 경로에 따라 좌우될 수 있다.

"부형제"는 약물에 대한 임의의 희석제 또는 비히클을 지칭한다.

"약제학적 조성물"은 1종 이상의 약물 물질과 1종 이상의 부형제의 조합물을 지칭한다.

"약물 제품", "약제학적 투약 형태", "투약 형태", "최종 투약 형태" 등은, 치료를 필요로 하는 대상체를 치료하는데 적합한 약제학적 조성물을 지칭하고, 일반적으로 정제, 캡슐, 분말 또는 과립을 함유하는 사쉐, 액체 용액 또는 현탁액, 패치, 필름 등의 투약 형태일 수 있다.

"GPR6와 연관된 병태" 및 유사한 어구는, GPR6의 길항작용 또는 역작용을 포함하는, 대상체에서 GPR6을 조절하는 질환, 장애 또는 병태에 관한 것이고, 치료적 또는 예방적 유익을 제공할 수 있다.

이하의 약어가 본 명세서에서 사용될 수 있다: Ac(아세틸); ACN(아세토나이트릴); AIBN(아조-비스-아이소부티로나이트릴); API(활성 약제학적 성분); aq(수성); BINAP(2,2'-비스(다이페닐포스피노)-1,1'-바이나프틸); Boc(tert-부톡시카보닐); Cbz(카보벤질옥시); dba(다이벤질리덴아세톤); DCC(1,3-다이사이클로헥실카보다이아마이드); DCE(1,1-다이클로로에탄); DCM(다이클로로메탄); DIPEA(N,N-다이아이소프로필에틸-아민, 후니그 염기); DMA(N,N-다이메틸아세트아마이드); DMAP(4-다이메틸아미노피리딘); DME(1,2-다이메톡시에탄); DMF(N,N-다이메틸폼아마이드); DMSO(다이메틸설폭사이드); dppf(1,1'-비스(다이페닐포스피노)페로센); DTT(다이티오트레이톨); EC₅₀(절반 최대 반응에서의 유효 농도); EDA(에톡실화 도데실 알코올, BRIJ® 35); EDC(N-(3-다이메틸아미노프로필)-N'-에틸카보다이아마이드); EDTA(에틸렌다이아민테트라아세트산); ee(거울상이성질체 과잉량); eq(당량); Et(에틸); Et₃N(트라이에틸-아민); EtOAc(에틸 아세테이트); EtOH(에탄올); HATU(2-(3H-[1,2,3]트라이졸로[4,5-b]피리딘-3-일)-1,1,3,3-테트라메틸우로늄 헥사플루오로포스페이트(V)); HEPES(4-(2-하이드록시에틸)피페라진-1-에탄설폰산); HOAc(아세트산); HOBt(1H-벤조[d][1,2,3]트라이아졸-1-올); IC₅₀(50% 저해에서의 농도); IPA(아이소프로판올); iPrOAc(아이소프로필 아세테이트); IPE(아이소프로필에터); Ki(저해 상수; 리간드가 존재하지 않을 경우 수용체의 50%를 점유하게 될 경쟁 검정에서의 경쟁 리간드의 농도); LDA(리튬 다이아이소프로필아마이드); LiHMDS(리튬 비스(트라이메틸실릴)아마이드); mCPBA(m-클로로퍼옥시벤조산); Me(메틸); MeOH(메탄올); MTBE(메틸 tert-부틸 에터); mp(융점); NaOt-Bu(나트륨 tert-부톡사이드); NMM(N-메틸몰폴린); NMP(N-메틸-피롤리돈); OTf(트라이플레이트); PE(석유 에터); Ph(페닐); pEC₅₀(-log₁₀(EC₅₀)(여기서 EC₅₀은 몰(M) 단위로 부여됨); pIC₅₀(-log₁₀(IC₅₀)(여기서 IC₅₀은 몰(M) 단위로 부여됨); Pr(프로필); c-Pr(사이클로프로필), i-Pr(아이소프로필); PTFE(폴리테트라플루오로에틸렌); RT(실온, 대략 20℃ 내지 25℃); T3P(2,4,6-트라이프로필-1,3,5,2,4,6-트라이옥사트라이포스피난 2,4,6-트라이옥사이드); TCEP(트리스(2-카복시에틸)포스핀); TFA(트라이플루오로아세트산); TFAA(2,2,2-트라이플루오로아세트산 무수물); THF(테트라하이드로퓨란); TMEDA (N ¹,N ¹,N ²,N ²-테트라메틸에탄-1,2-다이아민); TMS(트라이메틸실릴); 및 Tris 완충액(2-아미노-2-하이드록시메틸-프로판-1,3-다이올 완충액).

II. 본 발명의 조성물

이하에 나타낸 바와 같이, 본 개시내용은 화학식 1의 화합물 및 이의 약제학적으로 허용 가능한 염에 관한 것이다. 본 개시내용은 또한 화학식 1의 화합물을 제조하는 재료 및 방법, 이 화합물을 함유하는 약제학적 조성물, 및 파킨슨병을 포함하는 CNS의 질환, 장애 또는 병태, 및 GPR6과 연관된 기타 질환, 장애 또는 병태를 치료하기 위한 화학식 1의 화합물 및 이의 약제학적으로 허용 가능한 염(선택적으로 기타 약리학적 활성제와 병용)의 용도에 관한 것이다.

화학식 1의 화합물은 염, 복합체, 용매화물, 수화물 및 액정으로서 존재할 수 있다. 마찬가지로, 화학식 1의 화합물의 염은 복합체, 용매화물, 수화물 및 액정으로서 존재할 수 있다.

화학식 1의 화합물은 약제학적으로 허용 가능한 염을 형성할 수 있다. 이들 염은 산 부가염(이산(di-acid)을 포함) 및 염기염을 포함한다. 약제학적으로 허용 가능한 산 부가염은 염산, 질산, 인산, 황산, 브로민화수소산, 요오드화수소산, 플루오르화수소산 및 인산과 같은 무기산으로부터 유래된 염뿐만 아니라, 지방 모노- 및 다이카복실산, 페닐-치환 알칸산, 하이드록시 알칸산, 알켄이산, 방향족 산, 지방족 산 및 방향족 설폰산 등과 같은 유기 산으로부터 유래된 비독성 산을 포함할 수 있다. 이러한 염은 아세테이트, 아디페이트, 아스파테이트, 벤조에이트, 베실레이트, 바이카보네이트, 카보네이트, 바이설페이트, 설페이트, 보레이트, 캄실레이트, 시트레이트, 사이클라메이트, 에디실레이트, 에실레이트, 폼에이트, 푸마레이트, 글루셉테이트, 글루코네이트, 글루쿠로네이트, 헥사플루오로포스페이트, 하이벤제이트, 하이드로클로라이드/클로라이드, 하이드로브로마이드/브로마이드, 하이드로아이오다이드/아이오다이드, 이세티오네이트, 락테이트, 말레이트, 말레에이트, 말로네이트, 메실레이트, 메실설페이트, 나프틸레이트, 2-납시레이트, 니코티네이트, 나이트레이트, 오로테이트, 옥살레이트, 팔미테이트, 파모에이트, 포스페이트, 하이드로겐 포스페이트, 다이하이드로겐 포스페이트, 파이로글루타메이트, 사카레이트, 스테아레이트, 석시네이트, 탄네이트, 타르타레이트, 토실레이트, 트라이플루오로아세테이트 및 지노포에이트 염을 포함할 수 있다.

약제학적으로 허용 가능한 염기염은 아민뿐만 아니라 알칼리 또는 알칼리 토금속 양이온과 같은 금속 양이온을 비롯한, 염기로부터 유래된 염을 포함할 수 있다. 적합한 금속 양이온의 예는 나트륨, 칼륨, 마그네슘, 칼슘, 아연 및 알루미늄을 포함할 수 있다. 적합한 아민의 예는 아르기닌, N,N'-다이벤질에틸렌다이아민, 클로로프로카인, 콜린, 다이에틸아민, 다이에탄올아민, 다이사이클로헥실아민, 에틸렌다이아민, 글리신, 라이신, N-메틸글루타민, 올라민, 2-아미노-2-하이드록시메틸-프로판-1,3-다이올 및 프로카인을 포함할 수 있다. 유용한 산 부가염 및 염기염의 논의에 대해서, 문헌[S. M. Berge et al., J. Pharm . Sci . (1977) 66:1-19]을 참조하고; 또한 문헌[Stahl and Wermuth, Handbook of Pharmaceutical Salts: Properties, Selection, and Use (2002)](이들 문헌은 이들의 전문이 참고로 본 명세서에 편입됨)을 참조한다.

약제학적으로 허용 가능한 염은 각종 방법을 이용해서 제조될 수 있다. 예를 들어, 화학식 1의 화합물은 목적하는 염을 제공하기 위하여 적절한 산 또는 염기와 반응할 수 있다. 대안적으로, 화학식 1의 화합물의 전구체는 산- 또는 염기-불안정한 보호기를 제거하거나 또는 전구체의 락톤 또는 락탐기를 개방하기 위하여 산 또는 염기와 반응할 수 있다. 또한, 화학식 1의 화합물의 염은 적절한 산 또는 염기에 의한 치료를 통해서 또는 이온교환수지와의 접촉을 통해서 다른 염(또는 유리 형태)으로 전환될 수 있다. 반응 후에, 염은 용액으로부터 석출된다면 여과에 의해, 또는 염을 회수하기 위하여 증발에 의해 단리될 수 있다. 염의 이온화도는 완전히 이온화된 것으로부터 거의 비이온화된 것까지 다양할 수 있다.

화학식 1의 화합물은 완전히 비정질로부터 완전히 결정질까지의 범위의 고체 상태의 연속체로 존재할 수 있다. 용어 "비정질"은, 재료가 분자 수준에서 긴 범위 순서를 결여하는 상태를 지칭하고, 온도에 따라서, 고체 또는 액체의 물리적 특성을 나타낼 수 있다. 전형적으로, 이러한 재료는 독특한 X-선 회절 패턴을 부여하지 않으며, 고체의 특성을 나타내는 동안, 더욱 형식적으로 액체로서 기재된다. 가열 시, 고체 특성으로부터 액체 특성으로의 변화가 일어나며, 이는 상태 변화, 전형적으로 제2 순서("유리 전이")를 특징으로 한다. 용어 "결정질"은, 재료가 분자 수준에서 규칙적으로 정렬된 내부 구조를 갖고 정의된 피크를 가진 독특한 X-선 회절 패턴을 제공하는 고체 상태를 지칭한다. 이러한 재료는, 충분히 가열된 경우, 또한 액체의 특성을 나타낼 것이지만, 고체로부터 액체로의 변화는 상 변화, 전형적으로 제1 순서("융점")를 특징으로 한다.

화학식 1의 화합물은 또한 비용매화된 형태 및 용매화된 형태로 존재할 수 있다. 용어 "용매화물"은 화합물 및 하나 이상의 약제학적으로 허용 가능한 용매 분자(예컨대, 에탄올)를 포함하는 분자 복합체를 기재한다. 용어 "수화물"은 용매가 물인 용매화물이다. 약제학적으로 허용 가능한 용매화물은 용매가 동위원소 치환될 수 있는 것들(예컨대, D₂O, 아세톤-d ₆, DMSO-d ₆)을 포함한다.

유기 화합물의 용매화물 및 수화물에 대한 현재 허용된 분류 시스템은 단리된 부위, 채널 및 금속-이온 배좌 용매화물 및 수화물 간을 구별하는 것이다. 예컨대, 문헌[K. R. Morris (H. G. Brittain ed.) Polymorphism in Pharmaceutical Solids (1995)](이의 전문이 참고로 본 명세서에 편입됨) 참조. 단리된 부위 용매화물 및 수화물은 용매(예컨대, 물) 분자가 유기 화합물의 분자를 개입시킴으로써 서로 직접 접촉으로부터 단리되는 것들이다. 채널 용매화물에서, 용매 분자들은 격자 채널들에 있으며, 여기서 이들은 다른 용매 분자 바로 옆에 있다. 금속-이온 배좌 용매화물에서, 용매 분자는 금속 이온에 결합된다.

용매 또는 물이 타이트하게 결합된 경우, 복합체는 수분과는 독립적인 잘-정의된 화학량론을 가질 것이다. 그러나, 용매 또는 물이 약하게 결합된 경우, 채널 용매화물에서 그리고 흡습성 화합물에서, 물 또는 용매 함량은 습도 및 건조 상태에 따라 좌우될 것이다. 이러한 경우에, 비-화학량론이 전형적으로 관찰될 것이다.

화학식 1의 화합물은 또한 화합물(약물) 및 적어도 하나의 다른 성분이 화학량론적 또는 비-화학량론적 양으로 존재하는 다성분 복합체(염 및 용매화물 이외)로서 존재할 수 있다. 이 유형의 복합체는 포접화합물(약물-숙주 내포 복합체) 및 공결정을 포함한다. 후자는 전형적으로 비-공유결합 상호작용을 통해 함께 결합되지만 또한 염과의 중성 분자의 복합체일 수도 있는 중성 분자 성분의 결정질 복합체로서 정의된다. 공결정은 용융 결정화에 의해, 용매로부터의 재결정에 의해, 또는 성분들을 함께 물리적으로 분쇄시킴으로써 제조될 수 있다. 예컨대, 문헌[O. Almarsson and M. J. Zaworotko, Chem . Commun . (2004) 17:1889-1896](전문이 참고로 본 명세서에 편입됨) 참조. 다성분 복합체의 일반적인 검토에 대해서는, 문헌[J. K. Haleblian, J. Pharm . Sci . (1975) 64(8):1269-88](이의 전문이 참고로 본 명세서에 편입됨)을 참조한다.

적합한 조건이 적용되는 경우, 화학식 1의 화합물은 중간 상태(중간상 또는 액정)로 존재할 수 있다. 중간 상태는 진짜의 결정질 상태와 진짜의 액체 상태(용융 또는 용액) 사이에 놓인다. 온도 변화의 결과로서 생기는 메조몰피즘(mesomorphism)은 "열향성(thermotropic)"으로서 기재되며, 물 또는 다른 용매와 같은 제2 성분의 첨가에 기인하는 메조몰피즘은 "친액성"(lyotropic)으로서 기재된다. 친액성 중간상을 형성하는 잠재성을 가진 화합물은 "양친매성"으로서 기재되고, 극성 이온 모이어티(예컨대, -COO^-Na⁺, -COO^-K⁺, -SO₃ ^-Na⁺) 또는 극성 비-이온성 모이어티(예컨대, -N^-N⁺(CH₃)₃)를 갖는 분자를 포함한다. 예컨대, 문헌[N. H. Hartshorne and A. Stuart, Crystals and the Polarizing Microscope (4th ed, 1970)](이의 전문이 참고로 본 명세서에 편입됨) 참조.

화학식 1의 화합물은 다형체로서 존재할 수 있거나, 동위원소로-표지될 수 있거나, 전구약물의 투여에 기인할 수 있거나, 또는 투여 후에 대사산물을 형성할 수 있다.

"전구약물"은, 생체내에서 대사되는 경우, 목적하는 생리학적 활성도를 갖는 화합물로 전환될 수 있는, 생리학적 활성도를 거의 또는 전혀 갖지 않는 화합물을 지칭한다. 전구약물은, 예를 들어, 문헌[H.　Bundgaar, Design of Prodrugs (1985)](이의 전문이 참고로 본 명세서에 편입됨)에 기재된 바와 같이, 생리학적 활성 화합물에 존재하는 적절한 작용기를 "프로-모이어티"로 대체함으로써 제조될 수 있다. 전구약물의 예는 각각 카복실산, 하이드록시 또는 아미노 작용기를 화학식 1의 화합물의 에스터, 에터 또는 아마이드 유도체를 포함한다. 전구약물의 추가의 논의에 대해서는, 예컨대, 문헌[T. Higuchi and V. Stella "Pro-drugs as Novel Delivery Systems," ACS Symposium Series 14 (1975) 및 E. B. Roche ed., Bioreversible Carriers in Drug Design (1987)](이들의 각각은 이들의 전문이 참고로 본 명세서에 편입됨)을 참조한다.

"대사산물"은 생리학적 활성 화합물의 투여 시 생체내에서 형성되는 화합물을 지칭한다. 그 예는, 각각 메틸, 알콕시, 3차 아미노, 2차 아미노, 페닐 및 아마이드기를 갖는 화학식 1의 화합물의 하이드록시메틸, 하이드록시, 2차 아미노, 1차 아미노, 페놀 및 카복실산 유도체를 포함한다.

화학식 1의 화합물은, 적어도 하나의 원소가 동일한 원자번호를 갖지만 자연에서 통상 발견되는 원자질량과는 상이한 원자질량을 갖는 원자로 대체되는 동위원소 변이체를 보유할 수 있다. 화학식 1의 화합물에 내포를 위하여 적합한 동위원소는, 예를 들어, 수소의 동위원소, 예컨대, ²H 및 ³H; 탄소의 동위원소, 예컨대, ¹¹C, ¹³C and ¹⁴C; 질소의 동위원소, 예컨대, ¹³N 및 ¹⁵N; 산소의 동위원소, 예컨대, ¹⁵O, ¹⁷O 및 ¹⁸O; 및 플루오린의 동위원소, 예컨대, ¹⁸F를 포함한다. 동위원소 변이체(예컨대, 중수소, ²H)의 사용은 더 큰 대사 안정성, 예를 들어, 생체내 반감기의 증가 또는 용량 요건의 감소에 기인하는 소정의 치료적 이점을 제공할 수 있다. 또한, 개시된 화합물의 소정의 동위원소 변이체는 방사성 동위원소(예컨대, 삼중수소, ³H, 또는 ¹⁴C)를 혼입할 수 있는데, 이는 약물 및/또는 기질 조직 분포 연구에서 유용할 수 있다. 양전자 방출 동위원소, 예컨대, ¹¹C, ¹⁸F,¹⁵O 및 ¹³N로의 치환은, 기질 수용체 점유도를 조사하는 양전자 방출 단층촬영술(PET) 연구에서 유용할 수 있다. 동위원소-표지된 화합물은 비표지된 시약 대신에 적절한 동위원소-표지된 시약을 이용해서 본 개시내용에서 어디에선가 기재된 것과 유사한 공정에 의해 제조될 수 있다.

III. 본 발명의 조성물을 제조하는 방법

화학식 1의 화합물은 이하에 기재된 수법을 이용해서 제조될 수 있다. 반응식 및 실시예의 일부는, 유기 화학의 분야에서의 통상의 기술을 가진 자에게 알려진, 산화, 환원 등을 포함하는 통상의 반응, 분리 수법(추출, 증발, 석출, 크로마토그래피, 여과, 혼화(trituration), 결정화 등) 및 분석 절차의 상세를 생략할 수 있다. 이러한 반응 및 수법의 상세는 문헌[Richard Larock, Comprehensive Organic Transformations (1999)] 및 Michael B. Smith 등에 의해 편집된 다수-용적 시리즈(문헌[Compendium of Organic Synthetic Methods (1974 et seq.)](이들의 각각은 이들의 전문이 참고로 본 명세서에 편입됨)을 비롯한 많은 처리에서 발견될 수 있다. 출발 재료 및 시약은 상업적 공급처로부터 얻어질 수 있거나 또는 문헌의 방법을 이용해서 제조될 수 있다. 반응식의 몇몇은 화학적 변형(예컨대, 에스터의 가수분해로부터의 알코올, 이산의 탈카복실화로부터의 CO₂ 등)에 기인하는 부수적인 생성물을 생략할 수 있다. 또한, 몇몇 경우에, 반응 중간체는 단리 또는 정제 없이(즉, 인시추) 후속의 단계에서 사용될 수 있다.

이하의 반응식 및 실시예의 몇몇에서, 소정의 화합물은 보호기를 사용해서 제조될 수 있고, 다른 반응 부위에서 원치 않는 화학 반응을 방지한다. 보호기는 또한 용해도를 증대시키거나 또는 다르게는 화합물의 물성을 변경시키는데 사용될 수 있다. 보호기 전략의 논의를 위하여, 보호기를 고정 및 제거하기 위한 재료 및 방법의 설명, 및 아민, 카복실산, 알코올, 케톤, 알데하이드 등을 포함하는 통상의 작용기에 대한 유용한 보호기의 편집은, 문헌[T. W. Greene and P. G. Wuts; Protective Groups in Organic Chemistry; 3^rd edition; John Wiley & Sons, Inc.; New York (1999) 및 P. Kocienski, Protective Groups, Georg Thieme, Stuttgart (2000)](이들의 각각은 이들의 전문이 참고로 본 명세서에 편입됨)을 참조한다.

일반적으로, 실질적으로 화학량론적 양의 반응물을 이용해서 수행될 수 있지만, 소정의 반응은 과잉의 하나 이상의 반응물을 이용해서 유익할 수 있다. 또한, 명세서를 통해서 개시된 반응의 다수는 실온(RT) 및 분위기 압력에서 수행될 수 있지만, 반응 속도, 수율 등에 따라서, 몇몇 반응은 상승된 압력에서 운용될 수 있거나 또는 더 높은 온도(예컨대, 환류 조건) 또는 더 낮은 온도(예컨대, -78℃ 내지 0℃)를 이용할 수 있다. 화학량론적 범위, 온도 범위, pH 범위 등에 대한 개시내용 및 청구범위에서의 임의의 참조 대상은, 또한, 명확하게 용어 "범위"를 이용하든지의 여부에 관계없이, 표시된 종점을 포함한다.

많은 화학적 변형이 또한 하나 이상의 융화성 용매를 이용할 수 있고, 이는 반응 속도 및 수율에 영향을 미칠 수 있다. 반응물의 속성에 따라서, 하나 이상의 용매는 극성 양성자성 용매(물 포함), 극성 비양성자성 용매 또는 일부 조합일 수 있다. 대표적인 용매는 포화 지방족 탄화수소(예컨대, n-펜탄, n-헥산, n-헵탄, n-옥탄, 사이클로헥산, 메틸사이클로헥산); 방향족 탄화수소(예컨대, 벤젠, 톨루엔, 자일렌); 할로겐화 탄화수소(예컨대, 염화메틸렌, 클로로폼, 사염화탄소); 지방족 알코올(예컨대, 메탄올, 에탄올, 프로판-1-올, 프로판-2-올, 부탄-1-올, 2-메틸-프로판-1-올, 부탄-2-올, 2-메틸-프로판-2-올, 펜탄-1-올, 3-메틸-부탄-1-올, 헥산-1-올, 2-메톡시-에탄올, 2-에톡시-에탄올, 2-부톡시-에탄올, 2-(2-메톡시-에톡시)-에탄올, 2-(2-에톡시-에톡시)-에탄올, 2-(2-부톡시-에톡시)-에탄올); 에터(예컨대, 다이에틸 에터, 다이-아이소프로필 에터, 다이부틸 에터, 1,2-다이메톡시-에탄, 1,2-다이에톡시-에탄, 1-메톡시-2-(2-메톡시-에톡시)-에탄, 1-에톡시-2-(2-에톡시-에톡시)-에탄, 테트라하이드로퓨란, 1,4-다이옥산); 케톤(예컨대, 아세톤, 메틸 에틸 케톤); 에스터(메틸 아세테이트, 에틸 아세테이트); 질소-함유 용매(예컨대, 폼아마이드, N,N-다이메틸폼아마이드, 아세토나이트릴, N-메틸-피롤리돈, 피리딘, 퀴놀린, 나이트로벤젠); 황-함유 용매(예컨대, 이황화탄소, 다이메틸 설폭사이드, 테트라하이드로-티오펜-1,1-다이옥사이드); 및 인-함유 용매(예컨대, 헥사메틸포스포릭 트라이아마이드)를 포함한다.

IV. 제형 및 투여

화학식 1의 화합물(이의 약제학적으로 허용 가능한 복합체, 염, 용매화물 및 수화물 포함)은, 적절한 투약 형태 및 투여 경로를 선택하기 위하여, 용해도 및 pH에 대한 용액 안정성, 투수성 등과 같은 생물약제학적 특성에 대해 평가되어야 한다. 약제학적 용도를 위하여 의도된 화합물은 결정질 또는 비정질 생성물로서 투여될 수 있고, 예를 들어, 석출, 결정화, 냉동 건조, 분무 건조, 증발 건조, 마이크로파 건조 또는 무선 주파수 건조와 같은 방법에 의해 고체 플러그, 분말 또는 필름으로서 얻어질 수 있다.

화학식 1의 화합물은 단독으로 또는 1종 이상의 생리학적 활성 화합물과 조합하여 투여될 수 있다. 일반적으로, 1종 이상의 이들 화합물은 1종 이상의 약제학적으로 허용 가능한 부형제와 회합하여 약제학적 조성물(제형)로서 투여된다. 부형제의 선택은, 특히, 특정 투여 모드, 용해도 및 안정성에 대한 부형제의 효과, 및 투약 형태의 속성에 따라 좌우된다. 이들의 제조를 위한 유용한 약제학적 조성물 및 방법은, 예를 들어, 문헌[A. R. Gennaro (ed.), Remington : The Science and Practice of Pharmacy (20th ed., 2000)]에서 찾을 수 있다.

화학식 1의 화합물은 경구적으로 투여될 수 있다. 경구 투여는 연하를 포함할 수 있는데, 이 경우에 화합물은 위장관을 통해서 혈류에 유입된다. 대안적으로 또는 부가적으로, 경구 투여는 화합물이 경구 점막을 통해 혈류에 유입되도록 하는 점막 투여(예컨대, 협측, 설하, 설상(supralingual) 투여)를 포함할 수 있다.

경구 투여에 적합한 제형은 정제 등과 같은 고체, 반고체 및 액체 시스템; 멀티- 또는 나노-입상체, 액체 또는 분말을 함유하는 연질 또는 경질 캡슐; 액체-충전될 수 있는 로렌지; 츄(chew); 겔; 신속 분산 투약 형태; 필름; 질좌약(ovule); 스프레이; 및 협측 및 점막접착 패치를 포함한다. 액체 제형은 현탁액, 용액, 시럽 및 엘릭시르를 포함한다. 이러한 제형은 연질 또는 경질 캡슐(예컨대, 젤라틴 또는 하이드록시프로필메틸셀룰로스)에 충전제로서 사용될 수 있고, 전형적으로 담체(예컨대, 물, 에탄올, 폴리에틸렌 글리콜, 프로필렌 글리콜, 메틸셀룰로스, 또는 적합한 오일) 및 1종 이상의 유화제, 현탁제 및 둘 다를 포함한다. 액체 제형은 또한 (예컨대, 사쉐로부터) 고체의 재구성에 의해 제조될 수 있다.

화학식 1의 화합물은 또한 문헌[Liang and Chen, Expert Opinion in Therapeutic Patents (2001) 11(6):981-986](이의 전문이 참고로 본 명세서에 편입됨)에 기재된 것들과 같은 신속 용해, 신속 붕해 투약 형태로 사용될 수 있다.

정제 투약 형태를 위하여, 용량에 따라서, 활성 약제학적 성분(API)은 약 1 중량% 내지 약 80 중량%의 투약 형태 또는 더욱 전형적으로 투약 형태의 약 5 중량% 내지 약 60 중량%를 차지할 수 있다. API 이외에, 정제는 1종 이상의 붕해제, 결합제, 희석제, 계면활성제, 활택제, 윤활제, 항산화제, 착색제, 착향제, 보존제 및 맛 가리움제를 포함할 수 있다. 붕해제의 예는 나트륨 전분 글리콜레이트, 나트륨 카복시메틸 셀룰로스, 칼슘 카복시메틸 셀룰로스, 크로스카멜로스 나트륨, 크로스포비돈, 폴리비닐피롤리돈, 메틸 셀룰로스, 미세결정질 셀룰로스, C_1-6 알킬-치환된 하이드록시프로필셀룰로스, 전분, 전호화 전분 및 알긴산나트륨을 포함한다. 일반적으로, 붕해제는 투약 형태의 약 1 중량% 내지 약 25 중량% 또는 약 5 중량% 내지 약 20 중량%를 차지할 것이다.

결합제는 일반적으로 정제 제형에 화합 특성을 부여하는데 사용된다. 적합한 결합제는 미세결정질 셀룰로스, 젤라틴, 당, 폴리에틸렌 글리콜, 천연 및 합성 검, 폴리비닐피롤리돈, 전호화 전분, 하이드록시프로필셀룰로스 및 하이드록시프로필메틸셀룰로스를 포함한다. 정제는 또한 희석제, 예컨대, 락토스(일수화물, 분무-건조된 일수화물, 무수), 만니톨, 자일리톨, 덱스트로스, 수크로스, 솔비톨, 미세결정질 셀룰로스, 전분 및 이염기성 인산칼슘 이수화물을 함유할 수 있다.

정제는 또한 표면 활성제, 예컨대, 라우릴황산나트륨 및 폴리솔베이트 80, 및 활택제, 예컨대, 이산화규소 및 탤크를 포함할 수 있다. 존재할 경우, 표면 활성제는 정제의 약 0.2 중량% 내지 약 5 중량%를 차지할 수 있고, 활택제는 정제의 약 0.2 중량% 내지 약 1 중량%를 포함할 수 있다.

정제는 또한 윤활제, 예컨대, 스테아르산마그네슘, 스테아르산칼슘, 스테아르산아연, 나트륨 스테아릴 푸마레이트, 및 스테아르산마그네슘과 라우릴황산나트륨의 혼합물을 함유할 수 있다. 윤활제는 정제의 약 0.25 중량% 내지 약 10 중량% 또는 약 0.5 중량% 내지 약 3 중량%를 차지할 수 있다.

정제 배합물은 정제를 형성하기 위하여 직접 또는 롤러 압착에 의해 압착될 수 있다. 정제 배합물 또는 배합물의 부분은 대안적으로 타정 전에 습식-, 건식- 또는 용융-과립화, 용융 응결 또는 압출될 수 있다. 필요에 따라서, 배합하기 전에, 1종 이상의 성분은 선별(screening) 또는 분쇄 또는 둘 다에 의해 크기 조절될 수 있다. 최종 투약 형태는 하나 이상의 층을 포함할 수 있고, 코팅, 비코팅 또는 캡슐화될 수 있다. 예시적인 정제는 최대 약 80 중량%의 API, 약 10 중량% 내지 약 90 중량%의 결합제, 약 0 중량% 내지 약 85 중량%의 희석제, 약 2 중량% 내지 약 10 중량%의 붕해제, 및 약 0.25 중량% 내지 약 10 중량%의 윤활제를 함유할 수 있다. 배합, 과립화, 분쇄, 선별, 타정, 코팅의 논의뿐만 아니라, 약물 제품을 제조하기 위한 대안적인 수법의 설명에 대해서는, 문헌[A. R. Gennaro (ed.), Remington: The Science and Practice of Pharmacy (20th ed., 2000); H. A. Lieberman et al. (ed.), Pharmaceutical Dosage Forms: Tablets, Vol. 1-3 (2d ed., 1990); 및 D.　K.　Parikh & C.　K.　Parikh, Handbook of Pharmaceutical Granulation Technology, Vol. 81 (1997)](이들의 각각은 이들의 전문이 참고로 본 명세서에 편입됨)을 참조한다.

인간 또는 수의과 용도를 위한 소모성 경구 필름은 신속하게 용해되거나 점막접착될 수 있는 유연한 수-가용성 또는 수-팽윤성 박막 투약 형태이다. API 이외에, 전형적인 필름은 1종 이상의 필름-형성 중합체, 결합제, 용매, 습윤제, 가소제, 안정제 또는 유화제, 점도 조절제 및 용매를 포함한다. 기타 필름 성분은 항산화제, 착색제, 착향료 및 화학 조미료, 보존제, 타액 자극제, 냉각제, 공-용매(오일 포함), 진정제, 증량제, 소포제, 계면활성제, 및 맛가리움제를 포함할 수 있다. 제형의 몇몇 성분은 하나 초과의 기능을 수행할 수 있다.

투약 요건 이외에, 필름 내 API의 양은 이의 용해도에 따라 좌우될 수 있다. 물이 가용성인 경우, API는 전형적으로 필름 내 약 1 중량% 내지 약 80 중량%의 비-용매 성분(용질) 또는 필름 내 약 20 중량% 내지 약 50 중량%의 용질을 포함할 것이다. 덜 가용성인 API는 조성물 중 더 큰 비율, 전형적으로 필름 내 최대 약 88 중량%의 비-용매 성분을 포함할 수 있다.

필름-형성 중합체는 천연 다당류, 단백질, 또는 합성 하이드로콜로이드로부터 선택될 수 있고, 전형적으로 약 0.01 중량% 내지 약 99 중량% 또는 약 30 중량% 내지 약 80 중량%의 필름을 차지한다.

필름 투약 형태는 전형적으로 박리성 백킹 지지체 또는 종이 상에 코팅된 수성 박막의 증발 건조에 의해 제조되며, 이는 건조 오븐 또는 터널에서(예컨대, 조합된 코팅-건조 장치에서), 동결건조 장비에서, 또는 진공 오븐에서 수행될 수 있다.

경구 투여를 위한 유용한 고형 제형은 즉시 방출 제형 및 조절 방출 제형을 포함할 수 있다. 조절 방출 제형은 지연-, 지속-, 펄스-, 제어-, 표적- 및 프로그래밍된-방출을 포함한다. 적합한 조절 방출 제형의 일반적인 설명을 위하여, 미국 특허 제6,106,864호(이의 전문이 참고로 본 명세서에 편입됨)를 참조한다. 높은 에너지 분산 및 삼투 및 코팅 입자와 같은 기타 유용한 방출 수법의 상세에 대해서, 문헌[Verma et al, Pharmaceutical Technology On-line (2001) 25(2):1-14](이의 전문이 참고로 본 명세서에 편입됨)을 참조한다.

화학식 1의 화합물은 또한 대상체의 혈류, 근육 또는 내장에 직접 투여될 수 있다. 비경구 투여를 위한 적합한 수법은 정맥내, 동맥내, 복강내, 척추강내, 심실내, 요도내, 흉골내, 두개내, 근육내, 활막내 및 피하 투여를 포함한다. 비경구 투여를 위한 적합한 디바이스는 마이크로니들 주사기를 포함하는 니들 주사기, 니들-없는 주사기 및 주입 디바이스를 포함한다.

비경구 제형은 전형적으로 부형제, 예컨대, 염, 탄수화물 및 완충제(예컨대, 약 3 내지 약 9의 pH)를 함유할 수 있는 수성 용액이다. 그러나, 몇몇 용도를 위하여, 화학식 1의 화합물은 멸균, 발열원-무함유수와 같은 적합한 비히클과 함께 사용되도록 건조된 형태로서 또는 멸균 비수성 용액으로서 더욱 적합하게 제형화될 수 있다. 멸균 조건 하에 (예컨대, 동결건조에 의해) 비경구 제형의 제조는 표준 약제학적 수법을 이용해서 용이하게 달성될 수 있다.

비경구 용액의 제조에서 사용되는 화합물의 용해도는, 예컨대, 용해도-증강제의 혼입과 같이 적절한 제형 수법을 통해서 증가될 수 있다. 비경구 투여용 제형은 즉시 또는 조절 방출되도록 제형화될 수 있다. 조절 방출 제형은 지연, 지속, 펄스형, 제어, 표적 및 프로그래밍된 방출을 포함한다. 따라서, 화학식 1의 화합물은 활성 화합물의 조절 방출을 제공하는 이식된 데포로서 투여를 위한 현탁액, 고체, 반고체 또는 틱소트로픽 액체로서 제형화될 수 있다. 이러한 제형의 예는 약물-코팅된 스텐트 및 약물-부하된 폴리(DL-락틱-코글리콜)산(PGLA) 미소구체를 포함하는 반고체 및 현탁액을 포함한다.

화학식 1의 화합물은 또한 피부 또는 점막에 국소적으로, 피부내로 또는 경피적으로 투여될 수 있다. 이 목적을 위한 전형적인 제형은 겔, 하이드로겔, 로션, 용액, 크림, 연고, 살포제, 드레싱, 발포물, 필름, 피부 패치, 웨이퍼, 이식물, 스펀지, 섬유, 붕대 및 마이크로에멀션을 포함한다. 리포솜이 또한 사용될 수 있다. 전형적인 담체는 알코올, 물, 광유, 액체 석유, 백색 석유, 글리세린, 폴리에틸렌 글리콜 및 프로필렌 글리콜을 포함할 수 있다. 국소 제형은 또한 침투 증강제를 포함할 수 있다. 예컨대, 문헌[Finnin and Morgan, J. Pharm . Sci . 88(10):955-958 (1999)](이의 전문이 참고로 본 명세서에 편입됨) 참조.

다른 국소 투여 수단은 전기천공, 이온영동, 음파영동, 초음파영동 및 마이크로니들 또는 니들 없는(예컨대 POWDERJECT^TM 및 BIOJECT^TM) 주사에 의한 전달을 포함한다. 국소 투여용의 제형은 위에서 기재된 바와 같이 즉석 또는 조절 방출되도록 제형화될 수 있다.

화학식 1의 화합물은 또한 비강내로 또는 흡입에 의해, 전형적으로 건조 분말, 에어로졸 분무 또는 비강 점적의 형태로 투여될 수 있다. 흡입기는 건조 분말을 투여하는데 사용될 수 있고, API 단독, API와 희석제, 예컨대, 락토스의 분말 배합물, 또는 API와 인지질, 예컨대, 포스파티딜콜린을 포함하는 혼합 성분 입자를 포함한다. 비강내 사용을 위하여, 분말은 생체접착제, 예컨대, 키토산 또는 사이클로덱스트린을 포함할 수 있다. 가압된 용기, 펌프, 스프레이어, 애토마이저(atomizer), 또는 네불라이저가 API, API의 방출을 분산, 용해 또는 연장시키기 위한 1종 이상의 제제(예컨대, 물과 함께 또는 물 없이 EtOH), 추진제로서 역할하는 1종 이상의 용매(예컨대, 1,1,1,2-테트라플루오로에탄 또는 1,1,1,2,3,3,3-헵타플루오로프로판), 및 선택적 계면활성제, 예컨대, 솔비탄 트라이올레에이트, 올레산, 또는 올리고락트산을 포함하는 용액 또는 현탁액으로부터 에어로졸 분무를 발생시키기 위하여 사용될 수 있다. 전기유체역학을 이용하는 애토마이저는 미세 미스트를 생성하는데 사용될 수 있다.

건조 분말 또는 현탁액 제형에서 사용하기 전에, 약물 생성물은 통상 흡입에 의한 전달에 적합한 입자 크기로 분쇄된다(전형적으로 5미크론 미만의 최대 치수를 갖는, 용적을 기준으로, 입자의 90%). 이것은 임의의 적절한 크기 감소 방법, 예컨대, 나선형 젯 밀링, 유동상 젯 밀링, 초임계 유체 처리, 고압 균질화 또는 분무 건조에 의해 달성될 수 있다.

흡입기 또는 취입기에 사용하기 위한 캡슐, 블리스터 및 카트리지(예를 들어, 젤라틴 또는 하이드록시프로필메틸 셀룰로스로 제조됨)는 활성 화합물, 적합한 분말 기제, 예컨대, 락토스 또는 전분, 및 성능 조절제, 예컨대, L-류신, 만니톨, 또는 스테아르산마그네슘의 분말 혼합물을 함유하도록 조제될 수 있다. 락토스는 무수 또는 일수화물일 수 있다. 기타 적합한 부형제는 덱스트란, 글루코스, 말토스, 솔비톨, 자일리톨, 프럭토스, 수크로스 및 트레할로스를 포함한다.

미세 미스트를 생성하기 위하여 전기유체역학을 이용하는 애토마이저에서 사용하기 위한 적합한 용액 제형은 1회 작동당 약 1㎍ 내지 약 20㎎의 API를 함유할 수 있고, 작동 용적은 약 1㎕ 내지 약 100㎕로 달라질 수 있다. 전형적인 제형은 화학식 1의 화합물, 프로필렌 글리콜, 멸균수, EtOH 및 NaCl을 포함할 수 있다. 프로필렌 글리콜 대신에 사용될 수 있는 대안적인 용매는, 글리세롤 및 폴리에틸렌 글리콜을 포함한다.

흡입 투여, 비강내 투여 또는 둘 다를 위한 제형은, 예를 들어, PGLA를 이용해서 직접 또는 조절 방출되도록 제형화될 수 있다. 적합한 착향료, 예를 들어, 멘톨 및 레보멘톨 또는 감미제, 예컨대, 사카린 또는 나트륨 사카린이 흡입/비강내 투여를 위하여 의도된 제형에 첨가될 수 있다.

건조 분말 흡입기 및 에어로졸의 경우에, 투약 단위는 계량된 양을 전달하는 밸브에 의해서 결정된다. 단위는 전형적으로 약 10㎍ 내지 약 1000㎍의 API를 함유하는 계량된 용량 또는 "퍼프"(puff)를 투여하도록 배열된다. 전체적인 일일 용량은 약 1 ㎎/㎏ 내지 약 500 ㎎/㎏의 범위일 것이며, 이는 단일 용량으로, 또는 더욱 통상적으로 하루를 통해서 분할된 용량으로서 투여될 수 있다.

활성 화합물은, 예컨대, 좌제, 페서리 또는 관장제의 형태로 직장으로 또는 질내로 투여될 수 있다. 코코아 버터는 전통적인 좌제 기제이지만, 각종 대안품이 적절한 바와 같이 사용될 수 있다. 직장 또는 질 투여를 위한 제형은 위에서 기재된 바와 같이 직접 또는 조절 방출되도록 제형화될 수 있다.

화학식 1의 화합물은 또한 전형적으로 등장성, pH-조절된 멸균 식염수 중에 미분화된 현탁액 또는 용액의 점적의 형태로 눈 또는 귀에 직접 투여될 수 있다. 안구 및 귀 투여에 적합한 다른 제형은 연고, 겔, 생분해성 이식물(예컨대, 흡수성 겔 스펀지, 콜라겐), 비생분해성 이식물(예컨대, 규소), 웨이퍼, 렌즈 및 입상체 또는 소포 시스템, 예컨대, 니오좀(niosome) 또는 리포솜을 포함한다. 제형은 1종 이상의 중합체 및 보존제, 예컨대, 염화벤즈알코늄을 포함할 수 있다. 전형적인 중합체는 가교결합된 폴리아크릴산, 폴리비닐알코올, 하이알루론산, 셀룰로스 중합체(예컨대, 하이드록시프로필메틸셀룰로스, 하이드록시에틸셀룰로스, 메틸 셀룰로스), 및 헤테로폴리사카라이드 중합체(예컨대, 젤란검)를 포함한다. 이러한 제형은 또한 이온영동에 의해 전달될 수 있다. 안구 또는 귀 투여를 위한 제형은 위에서 기재된 바와 같이 직접 또는 조절 방출되도록 제형화될 수 있다.

용해도, 분해속도, 맛-가리움, 생물학적 이용성 또는 안정성을 개선시키기 위하여, 화학식 1의 화합물은 사이클로덱스트린 및 이의 유도체 및 폴리에틸렌 글리콜-함유 중합체를 포함하는 가용성 거대분자 실체물과 조합될 수 있다. 예를 들어, API-사이클로덱스트린 복합체는 일반적으로 가장 투약 형태 및 투여 경로에 유용하다. 봉입 복합체 및 비봉입 복합체 둘 다가 사용될 수 있다. API와의 직접 복합체화에 대한 대안으로서, 사이클로덱스트린은 보조 첨가제로서, 즉, 캐리어, 희석제 또는 가용화제로서 사용될 수 있다. 알파-, 베타- 및 감마-사이클로덱스트린은 이들 목적을 위하여 통상 사용된다. 예컨대, WO 91/11172, WO 94/02518, 및 WO 98/55148(이들의 각각은 이들의 전문이 참고로 본 명세서에 편입됨) 참조.

위에서 주지된 바와 같이, 화학식 1의 화합물(이의 약제학적으로 허용 가능한 복합체, 염, 용매화물 및 수화물 포함)은 각종 질환, 장애 및 병태를 치료하기 위하여 1종 이상의 다른 활성 약제학적 활성 화합물과 조합될 수 있다. 이러한 경우에, 활성 화합물은 위에서 기재된 바와 같은 단일 투약 형태로 조합될 수 있거나 또는 조성물의 공동 투여에 적합한 키트의 형태로 제공될 수 있다. 키트는 (1) 2종 이상의 상이한 약제학적 조성물(이중 적어도 1종은 화학식 1의 화합물을 함유함); 및 (2) 분할된 병 또는 분할된 포일 포켓과 같은 2종의 약제학적 조성물을 개별적으로 보유하는 디바이스를 포함한다. 이러한 키트의 예는 정제 또는 캡슐의 패키지에 사용되는 친숙한 블리스터 팩이다. 키트는 상이한 유형의 투약 형태(예컨대, 경구 및 비경구)를 위하여 또는 상이한 약제학적 조성물을 별도의 투약 간격으로 투여하기 위하여, 또는 서로에 대해서 상이한 약제학적 조성물을 적정하기 위하여 적합하다. 환자 순응성을 원조하기 위하여, 키트는 전형적으로 투여를 위한 지시를 포함하고 메모리 원조로 제공될 수 있다.

인간 환자에게 투여하기 위하여, 청구된 화합물의 총 일일 용량은 전형적으로 약 0.1 ㎎/㎏ 내지 약 1.0 ㎎/㎏ 또는 약 0.5 ㎎/㎏ 내지 약 5.0 ㎎/㎏의 범위이다. 소정의 실시형태에 있어서, 화합물 또는 약제학적으로 허용 가능한 염은 약 40 ㎎/㎏ 내지 약 60 ㎎/㎏의 범위 내의 용량으로 투여된다. 소정의 실시형태에 있어서, 본 명세서에 기재된 방법으로 투여된 화학식 1의 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용 가능한 염은 약 5 ㎎/㎏ 내지 약 15 ㎎/㎏, 약 10 ㎎/㎏ 내지 약 20 ㎎/㎏, 약 15 ㎎/㎏ 내지 약 25 ㎎/㎏, 약 20 내지 약 30 ㎎/㎏, 약 25 ㎎/㎏ 내지 약 35 ㎎/㎏, 약 30 ㎎/㎏ 내지 약 40 ㎎/㎏, 약 35 ㎎/㎏ 내지 약 45 ㎎/㎏, 및 약 45 ㎎/㎏ 내지 약 55 ㎎/㎏으로 이루어진 군으로부터 선택된 용량으로 투여된다. 소정의 실시형태에 있어서, 용량은 약 30 ㎎/㎏ 내지 약 40 ㎎/㎏, 약 35 ㎎/㎏ 내지 약 45 ㎎/㎏, 약 40 ㎎/㎏ 내지 약 50 ㎎/㎏, 약 45 ㎎/㎏ 내지 약 55 ㎎/㎏, 약 50 ㎎/㎏ 내지 약 60 ㎎/㎏, 약 55 ㎎/㎏ 내지 약 65 ㎎/㎏, 및 약 60 ㎎/㎏ 내지 약 70 ㎎/㎏으로 이루어진 군으로부터 선택된 범위이다. 소정의 실시형태에 있어서, 용량은 약 50 ㎎/㎏일 수 있다. 소정의 실시형태에 있어서, 용량은 약 1 ㎎/㎏ 초과이다. 소정의 실시형태에 있어서, 용량은 약 1 ㎎/㎏이다. 소정의 실시형태에 있어서, 용량은 약 50 ㎎/㎏ 내지 약 100 ㎎/㎏, 약 100 ㎎/㎏ 내지 약 150 ㎎/㎏, 약 150 ㎎/㎏ 내지 약 200 ㎎/㎏, 약 200 ㎎/㎏ 내지 약 250 ㎎/㎏, 약 250 ㎎/㎏ 내지 약 350 ㎎/㎏, 약 300 ㎎/㎏ 내지 약 350 ㎎/㎏, 약 350 ㎎/㎏ 내지 약 400 ㎎/㎏, 약 400 ㎎/㎏ 내지 약 450 ㎎/㎏, 약 450 ㎎/㎏ 내지 약 500 ㎎/㎏으로 이루어진 군으로부터 선택된 범위 내이다. 소정의 실시형태에 있어서, 용량은 약 500 ㎎/㎏이다. 대안적으로, 용량은 500 ㎎/㎏ 미만이다.

소정의 실시형태에 있어서, 용량은 35 ㎎/㎏이다. 소정의 실시형태에 있어서, 용량은 36 ㎎/㎏이다. 소정의 실시형태에 있어서, 용량은 37 ㎎/㎏이다. 소정의 실시형태에 있어서, 용량은 38 ㎎/㎏이다. 소정의 실시형태에 있어서, 용량은 39 ㎎/㎏이다. 소정의 실시형태에 있어서, 용량은 40 ㎎/㎏이다. 소정의 실시형태에 있어서, 용량은 41 ㎎/㎏이다. 소정의 실시형태에 있어서, 용량은 42 ㎎/㎏이다. 소정의 실시형태에 있어서, 용량은 43 ㎎/㎏이다. 소정의 실시형태에 있어서, 용량은 44 ㎎/㎏이다. 소정의 실시형태에 있어서, 용량은 45 ㎎/㎏이다. 소정의 실시형태에 있어서, 용량은 46 ㎎/㎏이다. 소정의 실시형태에 있어서, 용량은 47 ㎎/㎏이다. 소정의 실시형태에 있어서, 용량은 48 ㎎/㎏이다. 소정의 실시형태에 있어서, 용량은 49 ㎎/㎏이다. 소정의 실시형태에 있어서, 용량은 50 ㎎/㎏이다. 소정의 실시형태에 있어서, 용량은 51 ㎎/㎏이다. 소정의 실시형태에 있어서, 용량은 52 ㎎/㎏이다. 소정의 실시형태에 있어서, 용량은 53 ㎎/㎏이다. 소정의 실시형태에 있어서, 용량은 54 ㎎/㎏이다. 소정의 실시형태에 있어서, 용량은 55 ㎎/㎏이다. 소정의 실시형태에 있어서, 용량은 56 ㎎/㎏이다. 소정의 실시형태에 있어서, 용량은 57 ㎎/㎏이다. 소정의 실시형태에 있어서, 용량은 58 ㎎/㎏이다. 소정의 실시형태에 있어서, 용량은 59 ㎎/㎏이다. 소정의 실시형태에 있어서, 용량은 60 ㎎/㎏이다. 소정의 실시형태에 있어서, 용량은 61 ㎎/㎏이다. 소정의 실시형태에 있어서, 용량은 62 ㎎/㎏이다. 소정의 실시형태에 있어서, 용량은 63 ㎎/㎏이다. 소정의 실시형태에 있어서, 용량은 64 ㎎/㎏이다. 소정의 실시형태에 있어서, 용량은 65 ㎎/㎏이다. 총 일일 용량은 단일 또는 분할된 용량으로 투여될 수 있고, 의사의 재량으로, 위에서 주어진 전형적인 범위 밖으로 들어갈 수 있다. 이들 용량은 약 60㎏ 내지 약 70㎏의 질량을 갖는 평균 인간 대상체에 기초하더라도, 의사는 이 질량이 이 질량 범위 밖에 들어가는 환자(예컨대, 소아과 환자)에 대해서 적절한 용량을 결정하는 것이 가능할 것이다.

화학식 1의 화합물은 GPR6의 조절이 나타내는 질환, 장애 및 병태를 치료하는데 사용될 수 있다. 위에서 언급된 바와 같이, Gs-결합된 GPR6의 길항작용 또는 역작용은 D2 수용체의 도파민-매개 활성화에 대한 기능적 대안을 제공한다. 그와 같이, GPR6의 활성도를 조절하는 화합물은, 약물 중독, 섭식장애, 인지장애, 조현병, 양극성 장애, 뇌전증 및 우울증뿐만 아니라, 파킨슨병, 레보도파-유도 운동이상증, 및 헌팅턴병과 같은 운동 장애와 같은 운동 장애를 비롯한, 각종 신경 및 정신 장애를 치료하는데 유용할 수 있다. 소정의 실시형태에 있어서, 화학식 1의 화합물은 파킨슨병을 치료하기 위하여 대상체의 운동근육 증상을 개선시킨다. 소정의 실시형태에 있어서, 화학식 1의 화합물은 이들 장애의 치료를 위하여 아만타딘과의 병용 요법에 포함된다.

파킨슨병의 병리적 홀마크는 흑질 내의 신경 세포 소실이다. 흑질선조체 경로의 변성은 도파민의 선조체 농도의 감소를 유발하고, 이는 운동 및 비운동 임상 소견을 초래한다. 많은 파킨슨병 환자는 도파민에 대한 전구약물인 레보도파로 치료된다. 레보도파는 유도된 운동이상(induced dyskinesia: LID), 충동적 제어 장애(ICD), 정신병적 증상 및 수면장애를 비롯한 통상의 심각한 부작용을 갖는다. LID는 진행성 질환이고, 파킨슨병 환자의 90%가 10년 이내에 LID를 발병한다. 불가역적 적응은, 직접적인 경로에서 과민증을 초래하는 저감된 탈감작을 포함하는, LID의 설치류 모델에서 MSN에서의 D1 수용체 신호전달을 일으킨다. D2 수용체가 아니라 D1의 유전적 비활성화는 마우스에서 LID를 파기시킨다. 그러나, D1 수용체 신호신호전달의 봉쇄는 레보도파의 항파킨슨병 효능에 영향을 미치지 않는다. 6-OHDA 모델은 도파민 신경전달의 손실 및 운동장애를 포함하는 파킨슨병의 많은 양상을 모방한다.

청구된 화합물은 GPR6과 연관된 하나 이상의 질환, 장애 또는 병태를 치료하기 위하여 하나 이상의 다른 생리학적 활성 화합물 또는 요법과 조합(즉, 병용)될 수 있다. 이러한 조합은 더 적은 부작용, 서비스가 부족한 환자 모집단을 치료하는 개선된 능력 또는 상승작용적 활성도를 포함하는 상당한 치료적 이점을 제공할 수 있다. 예를 들어, 화학식 1의 화합물(이의 약제학적으로 허용 가능한 복합체, 염, 용매화물 및 수화물을 포함)은 파킨슨병을 포함하는 운동 장애를 치료하기 위한 하나 이상의 화합물 또는 요법과 조합하여 동시에, 순차적으로 또는 개별적으로 투여될 수 있다. 이들 화합물은 레보도파; DOPA 데카복실라제 저해제, 예컨대, 카비도파, 벤세라지드, 메틸도파, α-다이플루오로메틸-DOPA 및 3',4',5,7-테트라하이드록시-8-메톡시아이소플라본; 도파민 작용제, 예컨대, 아포몰핀 염산염, 브로모크립틴, 로티고틴, 프라미펙솔, 및 로피니롤; 아만타딘; 항콜린제, 예컨대, 트라이헥실페니딜 및 벤즈트로핀 메실레이트; B-선택적 모노아민 산화효소(MAO-B) 저해제, 예컨대, 사피나마이드, 셀레길린 및 라사길린; 및 카테콜 O-메틸 전이효소(COMT) 저해제, 예컨대, 엔타카폰 및 톨카폰을 포함한다.

운동 장애를 치료하는데 사용되는 약물 이외에, 화학식 1의 화합물은 알츠하이머병 및 인지에 영향을 미치는 기타 질환, 장애 및 병태를 치료하는데 사용된 의약과 조합될 수 있다. 이러한 약물은 베타-세크레타제 저해제, 감마-세크레타제 저해제, HMG-CoA 환원효소 저해제, 비스테로이드성 항염증 약물(NSAID, 예컨대, 아파존, 아스피린, 셀레콕십, 다이클로페낙(미소프로스톨과 함께 그리고 미소프로스톨 없이), 디플루니살, 에토돌락, 페노프로펜, 플루르바이프로펜, 이부프로펜, 인도메타신, 케토프로펜, 메클로페나메이트 나트륨, 메페남산, 멜록시캄, 나부메톤, 나프록센, 옥사프로진, 페닐부타존, 피록시캄, 콜린 및 마그네슘 살리실레이트, 살살레이트, 및 설린닥), 비타민 E, 및 항아밀로이드 항체를 포함한다. 알츠하이머병을 치료하기 위하여 사용되는 화합물의 구체적인 예는 도네페질, 리바스티그민, 메만틴 및 갈란타민을 포함한다.

부가적으로 또는 대안적으로, 화학식 1의 화합물은 진정제, 최면제, 항불안제, 항정신병약, 신경안정제, 및 신경 또는 정신 질환의 치료에 사용되는 기타 약물과 조합될 수 있다. 예를 들어, 화학식 1의 화합물은, 아미트립틸린, 아목사핀, 아리피프라졸, 아세나핀, 부프로피온, 클로르다이아제폭사이드, 시탈로프람, 클로르프로마진, 클로자핀, 데시프라민, 데스벤라팍신, 독세핀, 둘록세틴, 에스시탈로프람, 플루옥세틴, 플루옥세틴, 플루페나진, 할로페리돌, 일로페리돈, 이미프라민, 아이소카복사지드, 라모트리진, 레보밀나시프란, 루라시돈, 미르타자핀, 네파조돈, 노르트립틸린, 올란자핀, 팔리페리돈, 파록세틴, 퍼페나진, 페넬진, 프로트립틸린, 쿠에티아핀, 리스페리돈, 셀레길린, 세르트랄린, 트라닐시프로민, 트라조돈, 트라이미프라민, 벤라팍신, 빌라조돈, 및 보르티옥세틴, 및 지프라시돈을 포함하는, 우울증(항우울제) 및/또는 조현병(비정형적인 또는 전형적인 항정신병약)을 치료하기 위한 1종 이상의 제제(항불안제)와 조합될 수 있다.

마찬가지로, 화학식 1의 화합물은, 벤조다이아제핀(알프라졸람, 클로르다이아제폭사이드, 클로바제팜, 클로나제팜, 클로라제페이트, 다이아제팜, 에스타졸람, 플루라제팜, 로라제팜, 미다졸람, 옥사제팜, 프라제팜, 쿠아제팜, 테마제팜, 및 트라이아졸람), 항히스타민제(하이드록시진), 비-벤조다이아제핀(에스조피클론, 잘레플론, 졸피뎀, 및 조피클론) 및 부스피론을 포함하는, 불안증을 치료하기 위한 1종 이상의 제제(항불안제)와 조합될 수 있다.

화학식 1의 화합물은 또한 아세타졸아마이드, 카바마제핀, 클로바잠, 클로나제팜, 에슬리카바제핀 아세테이트, 에토석시마이드, 가바펜틴, 라코사마이드, 라모트리진, 레베티라세탐, 나이트라제팜, 옥스카바제핀, 페람파넬, 피라세탐, 페노바비탈, 페니토인, 프레가발린, 프리미돈, 레티가빈, 루피나마이드, 나트륨 발프로에이트, 스티리펜톨, 티아가빈, 토피라메이트, 비가바트린 및 조니사마이드를 포함하는, 뇌전증을 치료하기 위한 1종 이상의 제제(항간질제 또는 항경련제)와 조합될 수 있다.

생물학적 활성도

GPR6 조절제로서의 화합물의 활성도는 시험관내 방법 및 생체내 방법을 비롯하여 각종 방법에 의해 결정될 수 있다.

I. cAMP의 시험관내 저해(EC50)

이 세포-기반 검정은 CHO-K1 세포에서 발현된 GPR6 수용체의 구성적 cAMP 활성도를 저해하는 시험 화합물의 능력을 측정한다. CHO 세포는 GPR6 수용체에서 안정적으로 발현되는데, 이의 발현은 테트라사이클린 유도성 소자에 의해 제어된다. 세포를, F12K, 10% FBS, 1% Penn/Strep, 200㎍/㎖ 하이그로마이신을 함유하는 배지에서 배양하였다. GPR6 수용체 발현은 성장 배지에서 2㎍/㎖ 독시사이클린(Sigma D9891)으로 20시간 동안 유도된다. 독시사이클린의 첨가 후에, 세포는 96-웰 하프-용적 흑색 조직 배양 플레이트(Costar)에서 웰당 450 내지 750개 세포의 밀도로 평판배양되고, cAMP 검정 전에 20시간 동안 인큐베이터(37℃, 5% CO₂)에 배치된다.

배양 배지를 세포로부터 제거하고, 이러한 세포를 50㎕/웰의 링거 완충액(MgCl₂ 0.047 ㎎/㎖, NaH₂PO₄ 0.18 ㎎/㎖, Na₂HPO₄ 0.1 ㎎/㎖, KCl 0.34 ㎎/㎖, NaHCO₃ 1.26 ㎎/㎖, D-글루코스 1.8 ㎎/㎖, NaCl 7 ㎎/㎖; pH=7.4)으로 세척한다. 시험 화합물을 DMSO에 현탁시키고, 0.5% 지방산 무함유 BSA + 300μM 3-아이소부틸-1-메틸잔틴(IBMX)을 함유하는 링거 완충액에 희석시키고, 37℃ 및 5% CO₂에서 45분 동안 세포 상에서 인큐베이팅시킨다. 인큐베이팅 후에, 세포를 PerkinElmer LANCE® Ultra cAMP 검정 키트(TRF0263)로부터 Eu-cAMP 트레이서 용액으로 실온에서 10분 동안 조건 조절한다. 이어서, LANCE® 키트로부터의 ULIGHT^TM-항-cAMP 용액을 첨가하고, PerkinElmer EnVision 플레이트 판독기에서 균질시간분해형광(homogeneous time resolved fluorescence: HTRF) 검출 전에 실온에서 1시간 동안 진탕기에서 인큐베이팅시킨다. EC₅₀ 곡선은 GraphPad Prism 5.03을 이용해서 4-파라미터 로지스틱 방정식으로 생성된다.

II. cAMP의 시험관내 저해(IC50)

이 세포-기반 검정은 또한 CHO-K1 세포에서 발현된 GPR6 수용체의 구성적 cAMP 활성도를 저해하는 화합물의 능력을 측정한다. CHO 세포는 GPR6 수용체에서 안정적으로 발현되는데, 이의 발현은 테트라사이클린 유도성 소자에 의해 제어된다. 세포를, F12K, 10% FBS, 1% Penn/Strep, 200㎍/㎖ 하이그로마이신을 함유하는 배지에서 배양하였다. GPR6 수용체 발현은 성장 배지에서 1㎍/㎖ 독시사이클린(Sigma D9891)으로 20시간 동안 유도된다. 독시사이클린의 첨가 후에, 세포는 하프-용적 흑색 투명 하부 플레이트(Costar)에서 웰당 250 내지 500개 세포의 밀도로 평판배양되고, cAMP 검정 전에 20시간 동안 인큐베이터(37℃, 5% CO₂)에 배치된다.

배양 배지를 세포로부터 제거하고, 이러한 세포를 50㎕/웰의 링거 완충액(MgCl₂0.047 ㎎/㎖, NaH₂PO₄ 0.18 ㎎/㎖, Na₂HPO₄ 0.1 ㎎/㎖, KCl 0.34 ㎎/㎖, NaHCO₃ 1.26 ㎎/㎖, D-글루코스 1.8 ㎎/㎖, NaCl 7 ㎎/㎖; pH=7.4)으로 세척한다. 화합물을 DMSO에 현탁시키고, 0.5% 지방산 무함유 BSA를 함유하는 링거 완충액에 희석시키고, 37℃ 및 5% CO₂에서 45분 동안 세포 상에서 인큐베이팅시킨다. 인큐베이팅 후에, 세포를 PerkinElmer LANCE® Ultra cAMP 검정 키트(TRF0264)로부터 Eu-cAMP 트레이서 용액으로 실온에서 10분 동안 인큐베이팅시킨다. 이어서, LANCE® 키트로부터의 ULIGHT™-항-cAMP 용액을 첨가하고, BMG POLARSTAR® Omega 플레이트 판독기에서 HTRF 검출 전에 1시간 동안 실온에서 진탕기 상에서 인큐베이팅시킨다. IC₅₀ 곡선은 GraphPad Prism 5.03을 이용해서 4-파라미터 로지스틱 방정식으로 생성되었다.

III. GPR6에 대한 시험관내 경쟁 결합( Ki )

여과-기반 포맷을 이용하는 경쟁 결합 검정은 GPR6 역 작용제의 결합 특징을 연구하는데 사용된다. 이 방법은 독시사이클린 유도성 프로모터에 의해 구동된 인간 GPR6 cDNA를 발현하는 CHO-K1 세포로부터 제조된 막을 이용한다. 시험 화합물의 연속 희석물(1㎕의 시험 리간드/웰)을 함유하는 검정 레디 96 웰 플레이트(Assay ready 96 well plate)(651201, Greiner, 미국 소재)는 액체 핸들러(5μM, 최종 검정 최상 농도)를 이용해서 DMSO에서 제조된다. 검정 완충액(50mM Tris, pH 7.4, 50mM NaCl, 6mM MgCl₂ _, 지방산 무함유 0.1% BSA, 1:100 프로테이나제 저해제 칵테일, Sigma USA)을 첨가하고(39㎕/웰), 플레이트를 10분 동안 플레이트 진탕기 상에서 혼합한다. GPR6-특이적 ³H 방사성리간드는 검정 완충액 중에 제조하고 각 웰에 첨가한다(40㎕, 2.4nM 최종 검정 농도).

결합 반응을 개시시키기 위하여, 인간 GPR6 수용체를 발현하는 세포로부터 얻어진 40㎕의 전체 막을 첨가한다. 막을 검정 완충액에 제조하고, 웰당 15㎍/웰 최종 검정 농도로 첨가한다. 플레이트를 밀봉하고 300 RPM에서 30초 동안 혼합하고, 실온에서 2시간 동안 인큐베이팅시킨다. 이 반응 혼합물을 이어서 필터메이트(1450-421, filtermate A, PerkinElmer, 미국 소재)를 통해서 여과시키고, Tomtec HARVERSTER96™ 기기를 이용해서 완충액(50mM Tris, pH 7.4, 50mM NaCl, 6mM MgCl₂ _, 지방산 무함유 0.1% BSA)으로 5회 세척한다. 필터를 마이크로파로 건조시킨다. 신틸레이터 시트(Scintillator sheet)(1450-411, PerkinElmer, 미국 소재)를 필터 상에 용융시키고 CPM/웰이 MICROBETA® Trilux 기기(PerkinElmer, 미국 소재)에서 정량화되기 전에 가열-밀봉시킨다. 사용 전에, 필터메이트를 0.5% 폴리에틸렌아민 용액에 완만하게 진탕하면서 3시간 동안 미리 담그고 나서, 하룻밤에 걸쳐서 공기 건조시킨다. IC₅₀ 및 Ki값은 Prism(GraphPad, 미국 소재)에서 비선형 회귀 분석을 이용해서 계산된다. Kd값은 표준 방사성 리간드 포화 실험에서 결정된다.

IV. 생체내 파킨슨병 모델 - 할로페리돌 -유도 카탈렙시

파킨슨병의 운동 증상은 운동불능, 운동완만증, 경직증, 미진 및 자세 이상을 포함하고, 흑질 도파민작용성 세포의 손실 및 선조체 도파민 수준의 감소와 연관된다. 설치류에 대한 할로페리돌의 투여는 파킨슨병의 치료에 대해서 임상적으로 검증된 레보도파 및 기타 약물의 투여에 의해 역전된 전이성 파킨슨-유사 상태를 초래한다. 문헌[Duty, S. & Jenner, P. Br. J. Pharmacol . 164:1357-1391 (2011)](이의 전문이 참고로 본 명세서에 편입됨) 참조. 할로페리돌은 도파민 D2, 더 적은 정도로, 중간 돌기 신경의 D1 수용체(각각 운동 회로의 간접 및 직접 경로를 포함함)를 길항시킨다. 선조체 도파민 전달의 결과적인 블록은 근육 강직증 및 카탈렙시의 증후군으로서 분명한 기저핵 회로 내에서 비정상 하류 개시를 초래한다. 카탈렙시는 파킨슨병의 임상 특징을 반영하도록 상정되었고, 이에 의해서 환자는 운동을 개시시키는 불능성을 경험한다.

25 내지 35g 체중의 수컷 C57Bl6 마우스가 사용된다. 카탈렙시는 수직 그리드 시험 상에서 동물을 시험하기 전에 적어도 30분 도파민 수용체 길항제 할로페리돌(0.45 ㎎/㎏)의 피하(sc) 투여에 의해 유도된다. 이 시험을 위하여, 래트 또는 마우스는 벤치 테이블에서 약 70도의 각도에서 배치된 25㎝×43㎝ 플렉시글라스(plexiglass cage) 케이지의 철망 커버 상에 배치된다. 대상체는 외전되고(abducted) 뻗은 모두 4개의 다리("개구리 자세")를 가진 그리드 상에 배치된다. 이러한 비정상적 자세의 이용은 카탈렙시에 대한 이 시험의 특이성에 있어서 필수이다. 하나의 발의 제1 완전한 제거(하강 잠복)가 될 때까지 발의 배치로부터의 시간 범위는, 래트에 대해서 120초 동안 최대로 측정된다. 마우스에 대해서, 마우스의 앞발은 플렉시글라스(Plexiglas) 플랫폼 위쪽에 2인치 상승된 수평 금속봉 상에 배치되고, 시간은 시험당 최대 30초 동안 기록된다. 시험은 동물의 앞발이 플랫폼으로 되돌아갈 경우 또는 30초 후에 끝난다. 시험은 3회 반복되고, 3회 시험의 평균치가 카탈렙시의 강도 지수로서 기록된다. 동물은 투약이 할로페리돌의 투약 후 60분 또는 90분에 평가된 후 30분에 평가된다.

할로페리돌 유도 카탈렙시를 역전시키는 GPR6 조절제의 효능은 GPR6 조절제 시험 화합물과 함께 0.45 ㎎/㎏ ip(복강내 주사)의 할로페리돌을 대상체에게 투여 후 30분, 60분 및/또는 90분에 측정된다. 화학식 1의 화합물은 할로페리돌과 함께 0.1 내지 100 ㎎/㎏(0.5% 메틸 셀룰로스로 경구/po)의 용량 범위로 투여된다. 아데노신 A2A 길항제 SCH 420814(프레라데난트(preladenant))가 양성 대조군으로서 3 ㎎/㎏ ip로 투약된다.

V. 패치 클램프 수법을 통한 인간 hERG의 저해

자동화 전체 세포 패치-클램프 시스템(QPATCH® 16)은 단일 셀로부터 외향 칼륨 전류를 기록하는데 사용된다. 검정은 인간 hERG cDNA로 안정적으로 형질주입된 CHO-K1(Chinese Hamster Ovary) 세포를 이용한다. 세포를 트립신처리에 의해 수거하고 기록 전에 실온에서 혈청-무함유 배지에서 유지시킨다. 세포는 자동화된 패치-클램프 부위에 적용되기 전에 세포외 용액에서 세척되고 재현탁된다. 시험 용액은 패치-클램프 검정일에 수성 세포외 용액(137mM NaCl, 4mM KCl, 1.8mM CaCl₂, 1mM MgCl₂, 10mM D(+)-글루코스, 10mM HEPES, NaOH로 7.4로 조절된 pH)으로 제조된다. 7가지 농도(0.03, 0.1, 0.3, 1, 3, 10 및 30μM)의 시험 화합물이 IC₅₀을 결정하기 위하여 사용된다. 수성 세포내 용액은 130mM KCl, 10mM NaCl, 1mM MgCl₂, 10mM EGTA, 5mM MgATP 및 10mM HEPES(KOH로 7.2로 조절된 pH)를 함유한다.

전체 세포 구성이 달성된 후에, 세포를 -80㎷에서 유지한다. -40㎷까지 50㎳ 펄스가 누설 전류를 측정하기 위하여 전달되고, 이는 테일 전류 온라인으로부터 차감된다. 이어서 세포를 2초 동안 +20㎷로 탈분극시키고 나서 -40㎷까지 1초 펄스를 적용하여 hERG 테일 전류를 나타낸다. 이 패러다임은 매5초에 한번 전달되어 전류 진폭을 모니터링한다. 검정은 실온에서 수행된다. 세포외 용액(대조군)이 먼저 적용되고 세포는 5분 동안 용액 중에서 안정화된다. 이어서, 시험 화합물을 낮은 농도에서 높은 농도로 순차 동일 세포에 적용한다. 세포를 5분 동안 각 시험 농도에서 인큐베이팅시킨다. 기준 화합물 E-4031(N-(4-(1-(2-(6-메틸피리딘-2-일)에틸)피페리딘-4-카보닐)페닐)메탄설폰아마이드)은 다수의 농도에서 동시에 시험되어 IC₅₀값을 얻는다. hERG 채널의 퍼센트 저해는 화합물의 적용 전 및 후에 테일 전류 진폭을 비교함으로써 계산된다(전류차는 대조군으로 정규화된다).

실시예

이하의 실시예는 예시적인 비제한적이고 본 발명의 구체적인 실시형태를 나타내도록 의도된다.

I. ¹ H 핵자기공명(NMR)

¹H NMR 스펙트럼은 이하의 실시예에서 많은 화합물에 대해서 얻어졌다. 특징적인 화학적 이동(δ)은 s(단일항), d(이중항), t(삼중항), q(사중항), m(다중항), 및 br(브로드)을 포함하는 주된 피크의 지칭을 위한 통상의 약어를 이용해서 테트라메틸실란으로부터 백만부당 부의 다운필드에서 부여된다. 이하의 약어는 통상의 용매: CDCl₃(중수소클로로폼), DMSO-d ₆(중수소다이메틸설폭사이드), CD₃OD(중수소메탄올), CD₃CN(중수소아세토나이트릴) 및 THF-d ₈ (중수소테트라하이드로퓨란)에 대해서 사용된다. 질량 스펙트럼([M+H]⁺에 대해서 m/z)은 전기분무 이온화(ESI-MS) 또는 압력 화학 이온화(APCI-MS) 질량 분광법 중 하나를 이용해서 기록된다.

II. 고성능 액체 크로마토그래피( HPLC )

나타낸 경우, 소정의 제조 및 실시예의 생성물은 질량-촉발된 HPLC(예컨대, 펌프: 물^TM 2525; MS: ZQ^TM; 소프트웨어: MASSLYNX^TM), 플래시 크로마토그래피 또는 분취 박층 크로마토그래피(TLC)에 의해 정제된다. 역상 크로마토그래피는, 전형적으로 각각 0.035% 및 0.05% 트라이플루오로아세트산(TFA)을 함유하는 CH₃CN 및 물 이동상으로 용리되는 산성 조건("산 모드")하에서 또는 둘 다 10mM NH₄HCO₃를 함유하는, 물 및 20/80 (v/v) 물/아세토나이트릴 이동상으로 용리되는 염기성 조건("염기성 모드")하에서 칼럼(예컨대, Phenomenex GEMINI^TM 5μ, C18, 30㎜×150㎜; AXIA^TM, 5μ, 30㎜×75㎜) 상에서 수행된다. 분취 TLC는 전형적으로 실리카겔 60 F₂₅₄ 플레이트 상에서 수행된다. 크로마토그래피에 의해 단리 후에, 용매가 제거되고, 생성물은 원심 증발기(예컨대, GeneVac^TM), 회전 증발기, 진공 플라스크 등에서 건조에 의해 얻어진다. 불활성(예컨대, 질소) 또는 반응성(예컨대, H₂) 분위기에서의 반응은, 전형적으로 약 1 기압의 압력(14.7 psi)에서 수행된다.

III. 합성

제조 1: (R)-2-(4-(2,4-다이플루오로페녹시)피페리딘-1-일)-N-(테트라하이드로퓨란-3-일)피리도[3,4-b]피라진-3-아민

DMSO(50㎖) 중 3-클로로-2-(4-(2,4-다이플루오로페녹시)피페리딘-1-일)피리도[3,4-b]피라진(10g, 26.5 m㏖)의 용액에 (R)-테트라하이드로퓨란-3-아민(ArkPharm, AK-75910, 로트 WZG082316-PB01)(5.32㎖, 61.0 m㏖)을 첨가하였다. 이 용액을 70℃에서 10시간 동안 가열하고, 이어서 물(300㎖)로 희석시키고, iPrOAc(300㎖)로 추출하였다. 수성상을 iPrOAc(100㎖)로 더 추출하였다. 유기상을 합하여, 포화 수성 NH₄Cl(300㎖)로 그리고 염수(200㎖)로 세척하고, MgSO₄ 위에서 건조시키고, 진공중 농축시키고 하우스 진공하에 건조시켜 밝은 황색 고체(11.4g)를 제공하였다. 고체를 교반하에 iPrOAc(55㎖)에 용해시키고, 가열 환류시켰다. 헵탄(33㎖)을 가열하면서 서서히 조금씩 첨가하여 석출을 방지하였다. 이어서 용액을 교반하면서(약 400 rpm) 20℃로 냉각시켰으며, 이 시간 동안 석출물이 형성되었다. 혼합물을 주위 온도로 서서히 냉각시키고, 하룻밤 교반하였다. 고체를 진공 여과에 의해 수집하고, 헵탄 중 빙랭 20% iPrOAc로 헹구고, 적어도 30분 동안 필터 케이크를 통해 진공을 뽑아서 건조시키고, 수집하여 표제의 화합물을 밝은 황색 고체로서 제공하였다(9.771g, 86%). ¹H NMR (500 MHz, DMSO-d ₆) δ ppm 1.84 - 1.96 (m, 2 H), 2.01 - 2.16 (m, 3 H), 2.20 - 2.31 (m, 1 H), 3.22 - 3.31 (m, 2 H), 3.64 - 3.80 (m, 4 H), 3.85 - 3.93 (m, 1 H), 4.00 (dd, J=9.28, 6.35 Hz, 1 H), 4.55 - 4.67 (m, 2 H), 6.94 (d, J=5.86 Hz, 1 H), 6.99 - 7.06 (m, 1 H), 7.25 - 7.37 (m, 2 H), 7.46 (d, J=5.37 Hz, 1 H), 8.31 (d, J=5.37 Hz, 1 H), 8.79 (s, 1 H); ESI-MS m/z [M+H]⁺ 428.

제조 2: (S)-2-(4-(2,4-다이플루오로페녹시)피페리딘-1-일)-N-(테트라하이드로퓨란-3-일)피리도[3,4-b]피라진-3-아민

DMSO(5㎖) 중 3-클로로-2-(4-(2,4-다이플루오로페녹시)피페리딘-1-일)피리도[3,4-b]피라진(1.0g, 2.65 m㏖)의 용액에 (S)-테트라하이드로퓨란-3-아민(AstaTech 카탈로그 #37021)(0.578㎖, 6.64 m㏖)을 첨가하였다. 이 용액을 22시간 동안 밀봉된 마이크로파에서 70℃에서 가열하고, 이때 HPLC-MS는 반응이 완결된 것을 나타내었다. 반응 혼합물(5㎖)을 물(150㎖)로 희석시키고, iPrOAc(150㎖)로 추출하였다. 수성상을 iPrOAc(50㎖)로 더욱 추출하였다. 유기상을 합하여, 포화 수성 NH₄Cl(150㎖)로 그리고 염수(100㎖)로 세척하고, MgSO₄ 위에서 건조시키고, CELITE® 상에서 진공중 농축시켰다. 조질의 생성물을 헵탄 중 0 내지 60% EtOAc의 구배로 용리시키는 칼럼 크로마토그래피(30g NH 실리카겔 칼럼)에 의해 정제시켜 표제의 화합물을 백색 고체로서 제공하였다(1.05g, 93%). ¹H NMR (500 MHz, DMSO-d ₆) δ ppm 1.90 (td, J=8.54, 3.91 Hz, 2 H), 2.01 - 2.16 (m, 3 H), 2.20 - 2.31 (m, 1 H), 3.21 - 3.32 (m, 2 H), 3.63 - 3.80 (m, 4 H), 3.89 (q, J=7.49 Hz, 1 H), 4.00 (dd, J=9.28, 6.35 Hz, 1 H), 4.54 - 4.67 (m, 2 H), 6.96 (d, J=6.35 Hz, 1 H), 7.00 - 7.08 (m, 1 H), 7.26 - 7.39 (m, 2 H), 7.46 (d, J=5.37 Hz, 1 H), 8.31 (d, J=5.37 Hz, 1 H), 8.79 (s, 1 H); ESI-MS m/z [M+H]⁺ 428.

실시예 1: (R)-1-(2-(4-(2,4-다이플루오로페녹시)피페리딘-1-일)-3-((테트라하이드로퓨란-3-일)아미노)-7,8-다이하이드로피리도[3,4-b]피라진-6(5H)-일)에탄-1-온

HOAc(80㎖) 및 THF(80㎖) 중 (R)-2-(4-(2,4-다이플루오로페녹시)피페리딘-1-일)-N-(테트라하이드로퓨란-3-일)피리도[3,4-b]피라진-3-아민(16g, 37.4 m㏖)을 주입한 플라스크에 무수 아세트산(17.66㎖, 187 m㏖)을 질소하에 첨가하였다. 탄소상 팔라듐(10%, Aldrich 205699-10G, 로트 #MKBZ3284V)(3.19g, 2.99 m㏖)을 질소하에 첨가하였다. 플라스크를 수소-충전한 풍선에 연결하고, 하우스 진공으로 배기하고 수소로 8회 재충전하였다. 이 반응 혼합물을 40시간 동안 수소하에 교반하고, 이어서 케이크가 건조되지 않도록 주의하면서 CELITE®의 패드를 통해서 여과시켰다. 플라스크 및 필터 케이크를 EtOAc(48㎖), 메탄올(48㎖) 및 EtOAc(48㎖)로 헹구었다. 여과액을 진공중 농축시켜 THF, EtOAc 및 메탄올(욕 온도 ≤ 40℃)을 제공하였다. 이 용액을 헵탄(480㎖)으로 희석시키고, 진공 중 재농축시켜 HOAc(욕 온도 ≤ 45℃)를 공비혼합 제거하였다. 잔사를 iPrOAc(320㎖)에 장입하고, 10 중량% 수성 K₂CO₃(320㎖, 230 m㏖)(세척 전 pH 13, 세척 후에 pH 10) 및 염수(240㎖, 세척 후에 pH 7)로 세척하고, MgSO₄ 위에서 건조시키고, 진공중 농축시키고 하우스 진공하에 적어도 1시간 동안 건조시켜 밝은 황색 고체를 제공하였다(16.71g). 조질의 생성물을 에탄올(84㎖)에 장입하고, 교반하면서 오일욕에서 가열하였다. 고체가 용해된 후에, 용액을 교반하면서 오일욕에서 서서히 냉각시키고 이 동안 석출이 시작되어 형성되고, 용액은 흐리게 되었다. 혼합물을 오일욕에서 주위 온도로 냉각시키고 하룻밤 교반하였다. 재결정 후에, 백색 고체를 진공 여고에 의해 수집하고, 빙랭 에탄올로 헹구고, 고진공 하에 건조시켜, 표제의 화합물을 백색 고체로서 제공하였다(13.34g, 75%). ¹H NMR (500 MHz, DMSO-d ₆) δ ppm 1.81 - 2.00 (m, 3 H), 2.02 - 2.12 (m, 5 H), 2.14 - 2.24 (m, 1 H), 2.60 (t, J=5.61 Hz, 1 H), 2.72 (t, J=5.86 Hz, 1 H), 2.84 - 2.96 (m, 2 H), 3.26 - 3.32 (m, 2 H), 3.56 (dt, J=8.79, 5.13 Hz, 1 H), 3.65 - 3.78 (m, 3 H), 3.81 - 3.94 (m, 2 H), 4.33 - 4.47 (m, 3 H), 4.52 (tt, J=8.18, 4.03 Hz, 1 H), 5.91 (dd, J=13.42, 6.10 Hz, 1 H), 6.97 - 7.05 (m, 1 H), 7.24 - 7.36 (m, 2 H); ESI-MS m/z [M+H]⁺ 474; mp 150℃(DSC 피크); 카이럴 순도(카이럴 칼럼 크로마토그래피를 통해서) > 98% ee.

화합물 A: (S)-1-(2-(4-(2,4-다이플루오로페녹시)피페리딘-1-일)-3-((테트라하이드로퓨란-3-일)아미노)-7,8-다이하이드로피리도[3,4-b]피라진-6(5H)-일)에탄-1-온

질소하에 HOAc(5㎖) 및 THF(5㎖) 중 (S)-2-(4-(2,4-다이플루오로페녹시)피페리딘-1-일)-N-(테트라하이드로퓨란-3-일)피리도[3,4-b]피라진-3-아민(1.05g, 2.456 m㏖)을 주입한 플라스크에 무수 아세트산(1.159㎖, 12.28 m㏖)을 첨가하였다. 탄소상 팔라듐(10%, Aldrich 205699-10G, 로트 #MKBZ3284V)(0.523g, 0.491 m㏖)을 질소하에 첨가하였다. 플라스크를 수소-충전한 풍선에 연결하고, 하우스 진공으로 배기시키고, 수소로 8회 재충전시켰다. 이 반응 혼합물을 수소하에 18시간 동안 교반하고, 이어서 필터 케이크가 건조되지 않도록 주의해서 셀라이트(Celite)®의 패드를 통해서 여과시켰다. 플라스크 및 필터 케이크를 EtOAc(20㎖), 메탄올(20㎖) 및 EtOAc(20㎖)로 헹구고, 여과액을 셀라이트(CELITE)® 상에서 진공중 농축시켰다. 조질의 생성물을 헵탄 중 0 내지 60% EtOAc의 구배로 용리시키는 칼럼 크로마토그래피(120g NH 실리카겔 칼럼, 크기 200)에 의해 정제시켜, 백색 고체(1.0g)를 제공하였다. 백색 고체를 에탄올(5㎖)에 장입하고, 교반하의 오일욕에서 80℃로 가열하였다. 고체가 용해된 후에, 가열을 중단하고, 용액을 오일욕에서 교반하에 20℃로 서서히 냉각시켰다. 이 혼합물을 실온에서 3일 동안 교반하였다. 고체를 진공 여과에 의해 수집하고, 빙랭 에탄올로 헹구고, 고진공 하에 건조시켜, 표제의 화합물을 백색 고체로서 제공하였다(848㎎, 72.9%). ¹H NMR (500 MHz, DMSO-d ₆) δ ppm 1.82 - 2.00 (m, 3 H), 2.02 - 2.12 (m, 5 H), 2.13 - 2.24 (m, 1 H), 2.60 (t, J=5.86 Hz, 1 H), 2.72 (t, J=5.86 Hz, 1 H), 2.83 - 2.96 (m, 2 H), 3.24 - 3.32 (m, 2 H), 3.56 (dt, J=8.79, 5.25 Hz, 1 H), 3.66 - 3.77 (m, 3 H), 3.81 - 3.94 (m, 2 H), 4.33 - 4.47 (m, 3 H), 4.52 (tt, J=8.08, 3.87 Hz, 1 H), 5.93 (dd, J=13.30, 6.22 Hz, 1 H), 6.98 - 7.06 (m, 1 H), 7.24 - 7.35 (m, 2 H); ESI-MS m/z [M+H]⁺ 474; mp 149℃(DSC 피크); 카이럴 순도 (카이럴 칼럼 크로마토그래피를 통해서) > 98% ee.

IV. cAMP(EC ₅₀ )의 시험관내 저해 검정

표 1은 화학식 1의 화합물(실시예 1) 및 화합물 A에 대한 생물학적 검정 데이터(cAMP의 시험관내 저해)를 열거하며, 이는 CHO-K1 세포에서 표현된 GPR6 수용체의 구성적 cAMP 활성도를 저해하는 시험 화합물의 능력(pEC₅₀으로서 표현됨)을 측정하는 세포-기반 검정에 따라서 시험되었다. 검정은 제목 "cAMP의 시험관내 저해(EC₅₀)"하에 명세서에 기재된다.

추가의 분석은 제목 "cAMP의 시험관내 저해(IC₅₀)"하에 명세서에 기재된 검정을 이용하는 화합물의 IC₅₀을 결정함으로써 수행된다.

V. cAMP의 시험관내 저해(IC ₅₀ )의 검정

표 2는 화학식 1의 화합물(실시예 1)에 대한 그리고 화합물 A에 대해서 GPR6 경쟁 결합 검정으로부터의 저해 상수(Ki) 및 hERG 기능적 검정으로부터 IC₅₀값을 나열한다. 위에서 기재된 바와 같이, 각 화합물에 대한 Ki는 인간 GPR6 cDNA를 발현하는 CHO-K1 세포로부터 제조된 막을 이용하는 여과-기반 포맷을 이용한 경쟁 결합 검정을 이용해서 얻어졌고; 각 화합물에 대한 IC₅₀은 인간 hERG cDNA로 형질주입된 CHO-K1 세포를 이용하는 자동화된 전체 세포 패치-클램프 시스템을 이용한 hERG 기능적 검정을 이용해서 얻어졌다.

표 2에서의 데이터는 화학식 1의 화합물이 화합물 A보다 상당히 적은 강한 hERG의 저해제인 것을 나타낸다. 최대 유리 화합물(약물) 농도에서 GPR6의 50% 점유도를 가정하면, 표 2에 나타낸 비 (hERG IC₅₀)/Ki는 문헌(X. Yao et al., British Journal of Pharmacology (2008) 154:1446-56, 50(이의 전문이 참고로 본 명세서에 편입됨) 참조)에 정의된 바와 같은 유리 약물("SM-무함유")에 대한 안전 마진으로서 보여질 수 있다. 안전 마진을 비교하면, 화학식 1의 화합물은 생체내 연구로의 진행을 위하여 개선된 SM-무함유를 나타낸다. 300 미만의 SM-무함유는 1452페이지("findings suggest that an SM-free of 300 or more may denote a compound devoid of a potential for causing QTc prolongation")에서 Yao 등에 정의된 바와 같이, 생체내 연구로 진행하기에 적절한 것으로 여겨진다.

할로페리돌-유도 카탈렙시를 역전시키는 화학식 1의 화합물(실시예 1) 및 화합물 A의 능력이 또한 분석된다. 화합물은 제목 "생체내 파킨슨병 모델 - 할로페리돌-유도 카탈렙시"하에 본 개시내용에서 기재된 검정에 따라서 시험된다.

VI. 6- 하이드록시도파민 (6- OHDA ) 래트 모델의 치료

운동 활성도를 개선시키는 화합물은 파킨슨병에 대한 잠재적인 요법으로서 유망한 것으로 여겨진다. 파킨슨병의 6-OHDA 모델의 래트는 마취하에 브레그마(Bregma)에 대해서 1±3, -5㎜로 선조체 및 좌표들, 즉, 전방-후방(AP): 내측-외측(ML): 등-복부(DV)에 6-OHDA의 쌍방 주사를 공급받았다. 래트는 적어도 28일 후에 운동 활성도에 대해서 시험되었다. 동물은 화학식 1(실시예 1) 또는 비히클(대조군)로 투여 전에 운동 활성도 박스에 30분 동안 길들였다.

운동 활성도는 적외빔의 어레이로 덮인 개방 시야 안테나에서 측정되었다. 동물에 의한 빔 브레이크는 활성도를 모니터링하기 위하여 AMLOGGER 소프트웨어를 이용해서 진행되었다. 화학식 1(실시예 1)은 도 1에 도시된 바와 같이 50분 후에 비히클(대조군)을 투여한 래트와 비교해서 두 용량(5 ㎎/㎏ 및 10 ㎎/㎏)에 대한 운동 활성도의 용량 의존 개선을 나타내었다. 활성도의 유의한 증가는 10 ㎎/㎏ 용량을 투여한 래트에서 관찰되었다. 이들 데이터는 화학식 1(실시예 1)이 파킨슨병 환자의 증상을 개선시키는데 효과적일 것임을 나타낸다.

VII. 원격측정을 사용한 심혈관계에 대한 화학식 1( 실시예 1)의 효과

최소 8개월령 및 7 내지 15㎏ 체중의 의식 있는 비글개(Marsahall BioResources, 뉴욕주 노스로즈 소재)에서의 화학식 1(실시예 1)의 잠재적인 심혈관 효과. 비글개에게는 적절한 Charles River Laboratories(퀘벡주 몬트리올 소재) 표준 작동 절차(TB 12-04-06)에 따라서 DSI PHYSIOTEL® Digital L21 송신기 임플란트로부터 원격측정 디바이스를 장착시켰다. 생체전위 리드(biopotential lead)를 변형된 리드 II 구성에 배치한다. 실험실 환경에 동물을 순응시키기 위하여 원격측정 디바이스의 외과적 이식의 개시와 동물 도입 사이에 6일의 최소 순응 기간이 허용된다. 수술과 치료의 시작 사이에 4주의 최소 회복 기간이 허용된다. 동물 실내 환경에 대한 표적화된 조건은, 지정된 절차 동안을 제외하고, 12시간 명소 및 12시간 암소를 갖는 30 내지 70% 습도에서 17℃ 내지 23℃이다.

동물은, 동물이 개별적으로 수용되는 투약 및 모니터링 기간을 배제하고, 실험실 동물의 보호 및 이용에 대한 지침(Guide for the Care and Use of Laboratory Animals)(8^th Ed., National Academies Press, 2111)(이의 전문이 참고로 본 명세서에 편입됨)에 기재된 바와 같은 자동 급수 밸브가 장착된 스테인리스강 케이지에 사회적으로 수용될 수 있다.

DSI PHYSIOTEL® Digital L21 송신기의 외과적 이식 후에, 동물에게는, 3일 동안 300g의 PMI NUTRITION® International Certified Canine Chow No. 5007과 혼합된 1캔의 AID 처방식이와, 4일 동안 300g의 PMI NUTRITION® International Certified Canine Chow No. 5007과 혼합된 1캔의 AID 처방식이로 이루어진 식품 보충물이 수술 후 7일 동안 제공된다. 투약일에, 투약 시작 전 적어도 5시간에 사료가 제공되고, 1시간의 표적을 위하여 이용 가능하게 되고, 이어서 투약 전 적어도 4시간에 제거되었다. 사료가 투약 전 4시간 기간 동안 제거된 후에 육류 처치(beefy treat)는 이용 가능하지 않다. 나머지 사료는, 만약 있다면, 그 날의 사망률/빈사상태 점검의 종료 동안 제공되고, 하룻밤 방치한다. 보충 식이는 임상 징후 또는 다른 변화에 의해 보증된 바와 같은 동물에게 공급된다.

역삼투 및 초음파 조사에 의한 처리 후의 도시 수돗물은, 지정된 절차 동안을 제외하고, 자동 급수 시스템을 통해서 각 동물에게 자유로이 이용 가능하다. 필요한 경우, 물그릇이 제공된다. 물의 주기적인 분석이 수행되고, 이들 분석의 결과는 시험 설비에서 파일 처리된다. 연구의 객관성을 간섭할 수도 있는 어떠한 알려진 오염물도 물에 존재하지 않는 것으로 간주된다.

투약 시작 전에, 심혈관 파라미터 및 ECG 신호 품질을 평가하기 위하여 적어도 24시간 동안 Data Sciences International(DSI) PONEMAH™ 시스템을 이용해서 ECG, LVP, 혈압 및 체온이 수집된다. 최소 30초의 지속기간의 ECG가 수집되고, 정량적 검토를 위하여 심장병전문의에게 전송된다. 정상적인 혈액학/임상 화학 파라미터 및 정상의 혈류동태학/ECG 파라미터를 나타내는 동물만이 연구에 등록된다.

동물은 용량 제형 투여의 개시 전에 적어도 3일 동안 경구 영양섭식에 순응된다. 케이지/수돗물은 5 ㎖/㎏의 용량 용적에서 플라스틱 시린지에 부착된 1회용 카테터를 이용하는 경구 영양섭식에 의해 투여된다. 투약 제형은, 용량 투여 전에 그리고 지속적으로 용량 투여 동안 동물 룸에서 적어도 30분 동안 교반한다.

ULTRAPURE™ Water(Charles River Laboratories, 퀘벡주 몬트리올 소재) 중 2% 레시틴 및 0.5% 메틸셀룰로스 또는 30, 100 및 300 ㎎/㎏에서의 시험 화합물을 함유하는 단일 용량의 비히클(대조군)은 경구 위관영양법에 의해 투여된다. 비히클은 각 용량 세션을 위하여 제조되고, 광으로부터 보호된 교반 플레이트 상에서 4℃에서 유지된 냉장고에서 보존되고, 필요에 따라 분배된다. 비히클은 냉장고에서 꺼내고, 투여 전 및 연속해서 투여 동안 실온에서 적어도 30분 동안 교반된다. 투약 제형은 광으로부터 보호된 교반 플레이트 상에서 4℃에서 유지된 냉장고에서 보존되고, 필요에 따라서 분배된다. 투약 제형을 냉장고에서 꺼내어, 투약 전 그리고 계속해서 연속 동안 적어도 30분 동안 실온에서 교반한다.

4마리의 수컷 개의 각각은 각 용량 사이에 7일의 간격을 두고 화학식 1(실시예 1)의 3용량 수준과 비히클 1용량을 공급받는다. 모니터링된 파라미터는 혈압으로부터 유도된 심박수, 좌심실 압력(LVP) 및 심전도 파형; LVP(최대 심장수축 및 확장말기 LVP 및 최대 양/음 dP/dt값); 심전도(Van de Water 방정식 QTcv=QT-87(60/HR-1)을 이용해서 계산된 PR 간격(PR), RR 가변성(RR"), QRS 복합체(QRS), QT 간격 및 QTcv); 및 체온을 포함한다.

ECG 세그먼트의 마킹은 ECG 패턴 인지 소프트웨어를 사용해서 수행된다. 각 동물에 대한 라이브러리는 주야 사이클 둘 다로부터 대표적인 사이클로 구성되고, 적절한 Charles River Laboratories(퀘벡주 몬트리올 소재)에 따라서 정량적 평가를 위하여 적절한 마킹을 확보하도록 모니터링 기회에 대해 적용된다. 이 종에 대한 전기생리학적 규준을 초과하는 임의의 데이터값은 추가의 분석으로부터 배제된다.

투약일에 각 원격측정 모니터링 기회 동안, ECG는 각 용량 전에 (적어도 30분 떨어져서) 그리고 투약 후 대략 1(±5분), 2, 4, 6, 8, 10, 12, 15, 18 및 23(±15분) 시간에 2회 평가된다. 최소 30초가 각 시점에서 평가된다. 모든 파형은 리듬 또는 전도 장애 또는 다른 비정상의 P-QRS-T파를 검출하도록 정량적으로 평가된다. 혈액 샘플은 (임상 화학을 위하여) 하룻밤 식품 결핍 후에 경정맥으로부터 수집된다.

화학식 1(실시예 1)로 투여된 동물에 대해서 동맥 혈압, 수축성 또는 P-R 간격, QRS 복합체, 또는 QT 간격 지속시간에서 비히클로부터의 결과와 비교해서 화학식 1의 화합물(실시예 1)을 투여한 비글개에서 변화가 관찰되지 않는다.

등가물 및 범위

당업자라면 본 명세서에 기재된 발명에 따라서 구체적인 실시형태에 대한 많은 등가물을 단지 루틴한 실험을 이용해서 확인할 수 있거나 인식할 것이다. 본 발명의 범위는 상기 설명으로 제한되지 않아야 하고, 오히려 첨부된 청구범위에 제시된 바와 같다.

청구범위에 있어서, 단수 표현은 문맥으로부터 모순되는 것으로 표시되거나 또는 달리 명백하지 않은 한 하나 또는 그 초과를 의미할 수 있다. 하나의 그룹의 하나 이상의 구성원 사이에 "또는"을 포함하는 청구범위 또는 설명은, 만약 그룹의 구성원 중 하나 또는 전부가 문맥으로부터 모순되는 것으로 표시되거나 또는 달리 명백하지 않은 한 주어진 생성물 또는 공정에 존재하거나, 이에 이용되거나 또는 달리 관련된다면 충족되는 것으로 여겨진다. 본 발명은 명확하게 하나의 그룹의 하나의 구성원이 주어진 생성물 또는 공정에 존재하거나, 이에 이용되거나 또는 달리 관련되는 실시형태를 포함한다. 본 발명은 하나 초과 또는 전체의 그룹의 구성원이 주어진 생성물 또는 공정에 존재하거나, 이에 이용되거나 또는 달리 관련되는 실시형태를 포함한다.

또한, 용어 "포함하는"은 개방되거나 또는 허용되는 것이지만, 추가의 요소 또는 단계의 포함을 필요로 하지 않는 것에 유의해야 한다. 용어 "포함하는"이 본 명세서에서 사용될 경우, 따라서 용어 "로 이루어진"은 또한 포함되거나 개시된다.

범위가 주어진 경우, 종점이 포함된다. 또한, 당업자의 이해 및 문맥으로부터 달리 표시되거나 또는 달리 명백하게 되지 않는 한, 범위로서 표현된 값은, 문맥이 달리 명백하게 기술하지 않는 한, 본 발명의 상이한 실시형태에서 기재된 범위 내의 임의의 특정 값 또는 하위범위를 범위의 하한의 단위의 1/10까지 가정할 수 있다.

또한, 종래 기술 내에 들어가는 본 발명의 임의의 특정 실시형태는 청구범위의 임의의 하나 이상으로부터 명확하게 배제될 수 있음이 이해되어야 한다. 이러한 실시형태들은 당업자에게 공지된 것으로 감안되므로, 이들은 그러한 배제가 본 명세서에서 명확하게 제시되지 않더라도 배제될 수 있다. 본 발명의 조성물의 임의의 특정 실시형태(예컨대, 임의의 항생제, 치료 또는 활성 성분; 임의의 제조 방법; 사용 방법 등)는, 종래 기술의 존재와 관련되든 아니든, 어떤 이유로든, 임의의 하나 이상의 청구범위로부터 배제될 수 있다.

사용된 용어는 제한이라기보다 오히려 설명의 용어이고, 이의 보다 넓은 양상에서 본 발명의 정신과 범위로부터 벗어나는 일 없이 첨부된 청구범위의 이해의 범위 내에서 변화가 이루어질 수 있다는 것이 이해되어야 한다.

본 발명은 수개의 기재된 실시형태에 관하여 몇몇 길이로 그리고 몇몇 특이성으로 기재되었지만, 임의의 이러한 상세 또는 실시형태 또는 임의의 특정 실시형태로 제한되어야 하는 것으로 의도되지 않지만, 종래 기술을 감안하여 이러한 청구범위의 최광의의 가능한 해석을 제공하고, 따라서 본 발명의 의도된 범위를 효율적으로 포함하도록 첨부된 청구범위를 참조하여 해석되어야 한다. 본 발명은 본 명세서에서 비제한적인 예에 의해 더욱 예시된다.

Claims

하기 화학식 1의 화합물, 또는 이의 약제학적으로 허용 가능한 염:

.
제1항에 있어서, 20% 이상의 거울상이성질체 과잉량(ee)의 거울상이성질체 순도를 갖는, 화합물, 또는 이의 약제학적으로 허용 가능한 염.
제1항에 있어서, 40% ee 초과의 거울상이성질체 순도를 갖는, 화합물, 또는 이의 약제학적으로 허용 가능한 염.
제1항에 있어서, 60% ee 초과의 거울상이성질체 순도를 갖는, 화합물, 또는 이의 약제학적으로 허용 가능한 염.
제1항에 있어서, 80% ee 초과의 거울상이성질체 순도를 갖는, 화합물, 또는 이의 약제학적으로 허용 가능한 염.
제1항에 있어서, 90% ee 초과의 거울상이성질체 순도를 갖는, 화합물, 또는 이의 약제학적으로 허용 가능한 염.
제1항에 있어서, 98% ee 초과의 거울상이성질체 순도를 갖는, 화합물, 또는 이의 약제학적으로 허용 가능한 염.
제1항에 있어서, 99% ee 초과의 거울상이성질체 순도를 갖는, 화합물, 또는 이의 약제학적으로 허용 가능한 염.
제1항에 있어서, 100% ee의 거울상이성질체 순도를 갖는, 화합물, 또는 이의 약제학적으로 허용 가능한 염.
제1항 내지 제9항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 화합물은 유리 형태(free form)로 존재하는, 화합물, 또는 이의 약제학적으로 허용 가능한 염.
약제학적 조성물로서,
(a) 제1항 내지 제10항 중 어느 한 항에 정의된 바와 같은 화합물, 또는 이의 약제학적으로 허용 가능한 염; 및
(b) 약제학적으로 허용 가능한 부형제
를 포함하는, 약제학적 조성물.
의약(medicament)으로서 사용하기 위한 제11항에 정의된 바와 같은 약제학적 조성물.
파킨슨병, 레보도파-유도 운동이상증(levodopa-induced dyskinesia), 헌팅턴병, 약물 중독, 섭식장애, 인지장애, 조현병, 양극성 장애, 뇌전증, 알츠하이머병, 불안증 및 우울증으로 이루어진 군으로부터 선택된 질환, 장애 또는 병태의 치료에 사용하기 위한, 제11항에 따른 약제학적 조성물.
대상체에서 질환, 장애 또는 병태를 치료하는 방법으로서,
(a) 제1항 내지 제10항 중 어느 한 항에 정의된 화합물, 또는 이의 약제학적으로 허용 가능한 염을 상기 대상체에게 투여하는 단계를 포함하는, 질환, 장애 또는 병태를 치료하는 방법.
제14항에 있어서, 상기 질환, 장애 또는 병태는 파킨슨병, 레보도파-유도 운동이상증, 헌팅턴병, 약물 중독, 섭식장애, 인지장애, 조현병, 양극성 장애, 뇌전증, 알츠하이머병, 불안증 및 우울증으로 이루어진 군으로부터 선택된 적어도 하나인, 질환, 장애 또는 병태를 치료하는 방법.
제14항 또는 제15항에 있어서, 상기 약제학적 조성물은 약 40 ㎎/㎏ 내지 약 60 ㎎/㎏의 용량으로 투여되는, 질환, 장애 또는 병태를 치료하는 방법.
제14항 또는 제15항에 있어서, 상기 화합물, 또는 이의 약제학적으로 허용 가능한 염은 약 30 ㎎/㎏ 내지 약 40 ㎎/㎏, 약 35 ㎎/㎏ 내지 약 45 ㎎/㎏, 약 40 ㎎/㎏ 내지 약 50 ㎎/㎏, 약 45 ㎎/㎏ 내지 약 55 ㎎/㎏, 약 50 ㎎/㎏ 내지 약 60 ㎎/㎏, 약 55 ㎎/㎏ 내지 약 65 ㎎/㎏, 및 약 60 ㎎/㎏ 내지 약 70 ㎎/㎏으로 이루어진 군으로부터 선택된 범위 내의 용량으로 투여되는, 질환, 장애 또는 병태를 치료하는 방법.
제14항 또는 제15항에 있어서, 상기 화합물, 또는 이의 약제학적으로 허용 가능한 염은 약 50 ㎎/㎏의 용량으로 투여되는, 질환, 장애 또는 병태를 치료하는 방법.
제14항에 있어서, 상기 투여하는 단계는 경구적으로 일어나는, 질환, 장애 또는 병태를 치료하는 방법.
제11항에 정의된 바와 같은 약제학적 조성물 및 적어도 1종의 추가의 약리학적 활성제를 포함하는 병용 요법(combination therapy).
제20항에 있어서, 상기 추가의 약리학적 활성제는 레보도파, DOPA 데카복실라제 저해제, 도파민 작용제, 항콜린제, B-선택적 모노아민 산화효소 저해제 및 카테콜 O-메틸 전이효소 저해제로 이루어진 군으로부터 선택되는, 병용 요법.
제21항에 있어서, 상기 추가의 약리학적 활성제는 아만타딘인, 병용 요법.
제21항에 있어서, 상기 추가의 약리학적 활성제는 DOPA 데카복실라제 저해제와 병용된 레보도파인, 병용 요법.
제21항에 있어서, 상기 추가의 약리학적 활성제는 카비도파; 벤세라지드; 메틸도파; α-다이플루오로메틸-DOPA; 3',4',5,7-테트라하이드록시-8-메톡시아이소플라본; 아포몰핀 염산염; 브로모크립틴; 로티고틴; 프라미펙솔; 로피니롤; 트라이헥실페니딜; 벤즈트로핀 메실레이트; 사피나마이드; 셀레길린; 라사길린; 엔타카폰; 및 톨카폰으로 이루어진 군으로부터 선택되는, 병용 요법.
제21항에 있어서, 상기 추가의 약리학적 활성제는 베타-세크레타제 저해제, 감마-세크레타제 저해제, HMG-CoA 환원효소 저해제, 비스테로이드성 항염증 약물(NSAID)로 이루어진 군으로부터 선택되는, 병용 요법.
제25항에 있어서, 상기 비스테로이드성 항염증 약물(NSAID)은 아파존, 아스피린, 셀레콕십, 다이클로페낙(미소프로스톨과 함께 그리고 미소프로스톨 없이), 디플루니살, 에토돌락, 페노프로펜, 플루르바이프로펜, 이부프로펜, 인도메타신, 케토프로펜, 메클로페나메이트 나트륨, 메페남산, 멜록시캄, 나부메톤, 나프록센, 옥사프로진, 페닐부타존, 피록시캄, 콜린 및 마그네슘 살리실레이트, 살살레이트, 및 설린닥으로 이루어진 군으로부터 선택되는, 병용 요법.
제21항에 있어서, 상기 추가의 약리학적 활성제는 도네페질, 리바스티그민, 메만틴 및 갈란타민으로 이루어진 군으로부터 선택되는, 병용 요법.
제21항에 있어서, 상기 추가의 약리학적 활성제는 진정제, 최면제, 항불안제, 항정신병약 및 신경안정제로 이루어진 군으로부터 선택되는, 병용 요법.
제21항에 있어서, 상기 추가의 약리학적 활성제는 아미트립틸린, 아목사핀, 아리피프라졸, 아세나핀, 부프로피온, 클로르다이아제폭사이드, 시탈로프람, 클로르프로마진, 클로자핀, 데시프라민, 데스벤라팍신, 독세핀, 둘록세틴, 에스시탈로프람, 플루옥세틴, 플루옥세틴, 플루페나진, 할로페리돌, 일로페리돈, 이미프라민, 아이소카복사지드, 라모트리진, 레보밀나시프란, 루라시돈, 미르타자핀, 네파조돈, 노르트립틸린, 올란자핀, 팔리페리돈, 파록세틴, 퍼페나진, 페넬진, 프로트립틸린, 쿠에티아핀, 리스페리돈, 사피나마이드, 셀레길린, 세르트랄린, 트라닐시프로민, 트라조돈, 트라이미프라민, 벤라팍신, 빌라조돈, 보르티옥세틴, 및 지프라시돈으로 이루어진 군으로부터 선택되는, 병용 요법.
제21항에 있어서, 상기 추가의 약리학적 활성제는 알프라졸람, 클로르다이아제폭사이드, 클로바제팜, 클로나제팜, 클로라제페이트, 다이아제팜, 에스타졸람, 플루라제팜, 로라제팜, 미다졸람, 옥사제팜, 프라제팜, 쿠아제팜, 테마제팜, 및 트라이아졸람, 하이드록시진, 에스조피클론, 잘레플론, 졸피뎀, 및 조피클론, 및 부스피론으로 이루어진 군으로부터 선택되는, 병용 요법.
제21항에 있어서, 상기 추가의 약리학적 활성제는 아세타졸아마이드, 카바마제핀, 클로바잠, 클로나제팜, 에슬리카바제핀 아세테이트, 에토석시마이드, 가바펜틴, 라코사마이드, 라모트리진, 레베티라세탐, 나이트라제팜, 옥스카바제핀, 페람파넬, 피라세탐, 페노바비탈, 페니토인, 프레가발린, 프리미돈, 레티가빈, 루피나마이드, 나트륨 발프로에이트, 스티리펜톨, 티아가빈, 토피라메이트, 비가바트린 및 조니사마이드로 이루어진 군으로부터 선택되는, 병용 요법.
대상체에서 파킨슨병을 치료하는 방법으로서,
(a) 제11항에 정의된 바와 같은 약제학적 조성물을 상기 대상체에게 투여하는 단계를 포함하는, 파킨슨병을 치료하는 방법.
제32항에 있어서, 상기 화합물을 투여하는 것은 상기 대상체의 운동근육 증상을 개선시키는, 파킨슨병을 치료하는 방법.
제32항 또는 제33항에 있어서, 상기 투여하는 단계는 경구적으로 일어나는, 파킨슨병을 치료하는 방법.
투약 형태(dosage form)로서, 제1항 내지 제10항 중 어느 한 항에 정의된 바와 같은 화합물, 또는 이의 약제학적으로 허용 가능한 염 및 약제학적으로 허용 가능한 부형제를 포함하되, 상기 투약 형태는 약 30 ㎎/㎏ 내지 약 40 ㎎/㎏, 약 35 ㎎/㎏ 내지 약 45 ㎎/㎏, 약 40 ㎎/㎏ 내지 약 50 ㎎/㎏, 약 45 ㎎/㎏ 내지 약 55 ㎎/㎏, 약 50 ㎎/㎏ 내지 약 60 ㎎/㎏, 약 55 ㎎/㎏ 내지 약 65 ㎎/㎏, 및 약 60 ㎎/㎏ 내지 약 70 ㎎/㎏으로 이루어진 군으로부터 선택된 범위 내의 용량으로 상기 화합물, 또는 이의 약제학적으로 허용 가능한 염의 경구 투여를 위하여 구성되는, 투약 형태.
제35항에 있어서, 상기 용량은 약 40 ㎎/㎏ 내지 약 60 ㎎/㎏의 범위 내인, 투약 형태.
제35항에 있어서, 상기 용량은 50 ㎎/㎏인, 투약 형태.
제35항에 있어서, 상기 용량은 35 ㎎/㎏, 36 ㎎/㎏, 37 ㎎/㎏, 38 ㎎/㎏, 39 ㎎/㎏, 40 ㎎/㎏, 41 ㎎/㎏, 42 ㎎/㎏, 43 ㎎/㎏, 44 ㎎/㎏, 45 ㎎/㎏, 46 ㎎/㎏, 47 ㎎/㎏, 48 ㎎/㎏, 49 ㎎/㎏, 50 ㎎/㎏, 51 ㎎/㎏, 52 ㎎/㎏, 53 ㎎/㎏, 54 ㎎/㎏, 55 ㎎/㎏, 56 ㎎/㎏, 57 ㎎/㎏, 58 ㎎/㎏, 59 ㎎/㎏, 60 ㎎/㎏, 61 ㎎/㎏, 62 ㎎/㎏, 63 ㎎/㎏, 64 ㎎/㎏ 및 65 ㎎/㎏으로 이루어진 군으로부터 선택되는, 투약 형태.
대상체에서 GPR6과 연관된 질환, 장애 또는 병태를 치료하는 방법으로서, 유효량의 제1항 내지 제10항 중 어느 한 항에 정의된 바와 같은 화학식 1의 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용 가능한 염을 상기 대상체에게 투여하는 단계를 포함하는, GPR6과 연관된 질환, 장애 또는 병태를 치료하는 방법.
제39항에 있어서, 상기 화학식 1의 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용 가능한 염은 경구 투여되는, GPR6과 연관된 질환, 장애 또는 병태를 치료하는 방법.
의약으로서 사용하기 위한, 제1항 내지 제10항 중 어느 한 항에 정의된 바와 같은 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용 가능한 염.
GPR6과 연관된 질환, 장애 또는 병태의 치료를 위한 의약의 제조에서 사용하기 위한, 제1항 내지 제10항 중 어느 한 항에 정의된 바와 같은 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용 가능한 염.
제41항 또는 제42항에 있어서, 상기 질환, 장애 또는 병태는 파킨슨병, 레보도파-유도 운동이상증, 헌팅턴병, 약물 중독, 섭식장애, 인지장애, 조현병, 양극성 장애, 뇌전증, 알츠하이머병, 불안증 및 우울증으로 이루어진 군으로부터 선택되는, 화합물, 또는 이의 약제학적으로 허용 가능한 염.