KR20200006292A

KR20200006292A - 초피나무 추출물 또는 그 분획물을 유효성분으로 함유하는 항염, 주름개선, 미백용 화장료 조성물 및 그 제조방법

Info

Publication number: KR20200006292A
Application number: KR1020180079854A
Authority: KR
Inventors: 장문식; 김성천; 문미연; 임준환; 이하연; 김정하
Original assignee: 주식회사 더가든오브내추럴솔루션
Priority date: 2018-07-10
Filing date: 2018-07-10
Publication date: 2020-01-20

Abstract

본 출원은 초피나무 추출물 또는 그 분획물 및 그 제조방법 그리고 이를 함유하는 항염, 주름개선 및 미백 기능성 화장료 조성물에 관한 것이다.

Description

초피나무 추출물 또는 그 분획물을 유효성분으로 함유하는 항염, 주름개선, 미백용 화장료 조성물 및 그 제조방법 {Anti-inflammatory, anti-wrinkle, whitening cosmetic composition comprising the extract or fraction of Zanthoxylum piperitum DC. as an active ingredient and preparation method of the same}

본 출원은 초피나무 추출물 또는 그 분획물을 유효성분으로 함유하는 기능성 화장료 조성물 및 이들의 제조방법에 관한 것이다.

염증반응은 생체나 조직에 물리적 작용이나 화학적 물질, 세균 감염 등의 어떠한 기질적 변화를 가져오는 침습이 가해질 때 그 손상부위를 수복 재생하려는 기전이지만 지속적인 염증반응은 도리어 점막 손상을 촉진하고, 그 결과 일부에서는 암 발생 등의 질환을 이끈다. 염증반응에 대하여 대식세포는 선천 면역 뿐만 아니라 획득 면역 등 다양한 숙주반응에 관여하는 항상성 유지에 관여하는 것으로 알려져 있으며, 염증반응 시 nitric oxide(NO)와 cytokine을 생산하여 감염 초기에 생체방어에 중요한 역할을 한다. 이 중 NO는 체내 방어기능, 신호전달기능, 신경독성, 혈관확장 등의 다양한 생리 기능을 가지며 일반적인 NO의 형성은 박테리아를 죽이거나 종양을 제거시키는 중요한 역할을 하지만, 염증상태에서 iNOS에 의해 과잉 생성된 NO는 혈관 투과성, 부종 등의 염증반응을 촉진시킬 뿐만 아니라 염증매개체의 생합성을 촉진하여 오히려 염증을 심화시키는 것으로 알려져 있어 (Yoon et al., Korean J. Food Sci. Technol. Vol 39, No.4, 464-469, 2007) NO 생성 억제는 염증 억제를 측정하는 지표로써 활용되고 있다.

멜라닌(Melanin)은 신체의 눈동자, 머리카락 또는 피부색 등을 결정짓는 색소로서 자외선과 같은 외부로부터의 자극으로부터 세포를 보호하는 과정에서 합성된다. 자외선에 의해 피부가 자극을 받으면 표피의 melanocyte에 존재하는 melanocortin 1 receptor (MC1R)와 뇌하수체에서 분비되는 α-melanocyte stimulating hormone (α-MSH)이 결합하여 cyclic adenosine monophosphate (cAMP)/protein kinase A (PKA) 경로에 의해 microphthalmia-associated transcription factor (MITF)의 발현이 증가된다. 그로 인해 melanin 합성에 중요한 역할을 하는 tyrosinase, tyrosinase related protein-1, -2 (TRP-1, -2) 활성이 증가되고 melanin 합성이 유발된다. 이러한 작용으로 우리 피부는 자외선으로부터 발생할 수 있는 피부암 등 각종 피부 질환으로부터 보호된다. 하지만 이러한 작용이 과도할 경우 색소 침착 등으로 인한 기미, 주근깨를 유발하는 등 부작용을 야기되기도 한다(Kwon et al.,Journal of Life Science, Vol 24, No 9, 946-951, 2014).

사람의 피부는 노화가 진행됨에 따라 신진대사를 조절하는 각종 호르몬의 분비가 감소하고, 면역세포 및 피부 세포의 기능과 활성이 저하되어 생체에 필요한 면역 단백질 및 생체 구성 단백질 생합성이 감소되어 생기는 내인성 노화와, 각종 오염물질과 자외선에 의한 광노화에 의한 주름 증가, 탄력감소, 피부 건조 증가로 인한 기미, 주근깨 및 검버섯 등이 생성되는 외적 노화가 알려져 있다. 피부세포의 주요 구성성분인 콜라겐은 진피 건조 중량의 약 70-80%를 차지하며, 이 중 type Ⅰ콜라겐이 총 콜라겐의 80%를, type Ⅲ콜라겐이 15%를 차지한다. 일반적으로 피부에서 type Ⅰ 콜라겐의 합성과 그 분해효소인 MMP-1의 활성은 적절한 균형을 유지하며 피부의 탄력을 유지하는데, 내인성 노화 및 외인적 노화 요인에 의해 이 균형이 깨어질 경우 피부 주름생성의 원인이 된다(Youn et al., Korean J. Food Preserv 19(3), 393-399, 2012).

초피나무(Zanthoxylum piperitum DC.)는 우리나라를 비롯하여 중국, 일본 등 동북 아시아에 널리 자생하는 운향과(Rutaceae)의 산초나무(Zanthoxylum)에 속하는 낙엽관엽으로 이들 수종에는 각종 매운맛, 정유성분 및 유지가 함유되어 있어 예부터 동북아시아에서 가장 오래된 전통적인 향신료, 약용, 제유용으로 널리 사용되어 왔다 (Kim et al., 2000). 초피는 신미 성분과 특유의 citrus 같은 향기를 포함하는 정유성분을 가지고 있어 옛부터 중국에서는 chinese pepper라고 하여 오향(초피, 계피, 회향, 진피, 정향 등) 중 초피를 최고의 향신료로 사용해 왔다. 일본에서는 japanese pepper로 불리면서 일본요리에 특유한 향미를 주는 향신료 또는 약용으로 널리 이용되어 왔다. 우리나라에서는 열매를 갈아서 추어탕이나 매운탕, 보신탕 등에 넣어 냄새를 잡아주는 향신료로 사용되고 있으며 옛 문헌에서는 고추가 김치에 사용되기 전 김치의 향신료 역할로 초피를 대신 사용하였다고 하였다 (Na et al., Changwon National University, 2004). 초피나무의 주요 성분으로는 잎의 quercetin, afzelin, quercitrin, hyperoside, hesperidin 등이 알려져 있으며(Hur et al.,Natural Product Sciences, 7(1), 23-26, 2001), 열매에서는 ZP-amide(Hatano et al., Phytochemistry, 65(18), 2599-2604, 2005), hydroxy-sanshool, bugeanol 등이 알려져 있다(Matthias et al., J. Agic. Food. Chem, 62, 2479-2488, 2014).

대한민국 등록특허 제10-1303950호는 초피나무 추출물을 유효성분으로 함유하는 골 질환 예방 및 치료용 조성물에 관하여 개시하고 있고, 대한민국 등록특허 제10-0480972호는 초피나무 추출물을 유효성분으로 하는 다이옥신 유사물질에 대한 길항성 조성물에 관하여 개시하고 있다. 한편, 대한민국 공개특허 제10-20160036198호는 초피나무 추출물을 유효성분으로 함유하는 자외선 차단용 화장료 조성물을 개시하고 있으나, 초피나무 추출물 또는 그 분획물을 유효성분으로 함유하는 항염, 미백, 주름 개선 기능을 동시에 갖는 기능성 화장료 조성물에 대한 연구는 전무하다. 이러한 배경 하에, 본 발명자들은 초피나무 추출물 또는 그 분획물을 유효성분으로 함유하는 항염, 주름개선 또는 미백 기능성 화장료를 개발하기 위하여 예의 연구 노력함으로써 본 출원을 완성하였다.

본 출원의 목적은 초피나무 추출물의 제조방법을 제공하는 것이다.

본 출원의 다른 목적은 초피나무 분획물의 제조방법을 제공하는 것이다.

본 출원의 다른 목적은 초피나무 추출물 및 초피나무 분획물을 제공하는 것이다.

본 출원의 다른 목적은 초피나무 추출물과 초피나무 분획물로 이루어진 군에서 선택되는 어느 하나 이상의 물질을 유효성분으로 함유하는 항염, 주름 개선 또는 미백 기능성 화장료 조성물을 제공하는 것이다.

본 출원의 다른 목적 및 이점은 첨부한 청구범위 및 도면과 함께 하기의 상세한 설명에 의해 보다 명확해질 것이다. 본 명세서에 기재되지 않은 내용은 본 출원의 기술 분야 또는 유사 분야에서 숙련된 자이면 충분히 인식하고 유추할 수 있는 것이므로 그 설명을 생략한다.

이하, 본 출원 내용에 대하여 구체적으로 설명하면 다음과 같다. 한편, 본 출원에서 개시한 일 실시 양태의 설명 및 실시 형태는 공통된 사항에 대하여 다른 양태의 설명 및 실시 형태에도 적용될 수 있다. 또한, 본 출원에서 개시된 다양한 요소들의 모든 조합이 본 출원의 범주에 속한다. 더불어, 하기 기술된 구체적인 서술에 의하여 본 출원의 범주가 제한된다고 볼 수 없다.

본 출원의 목적을 달성하기 위하여 본 출원은 일 양태로써 초피나무 추출물의 제조방법을 제공한다. 초피나무는 건조된 형태로 사용될 수 있으며 에탄올,벤젠, 아세톤을 포함하는 유기용매로 추출하여 감압흡입여과기와 같은 장치를 이용하여 농축되는 방식으로 추출물을 수득할 수 있다. 본 발명에 있어서, "추출물"은 초피나무를 분말화하거나, 열수추출법, 에탄올 추출법 등에 의해 수득한 추출물을 의미한다. 초피나무 부위는 잎, 가지, 열매 등 식물의 다양한 부위를 포함할 수 있으며 이에 제한되지 않는다. 초피나무 잎은 100 내지 200g의 무게를 사용할 수 있으며, 바람직하게는 130 내지 180g, 가장 바람직하게는 150g이 사용된다. 초피나무 가지와 열매는 200 내지 700g의 무게를 사용할 수 있으며 바람직하게는 300 내지 600g, 더욱 바람직하게는 400g의 무게가 사용된다. 초피나무의 잎, 가지, 열매 등 초피나무 추출물을 수득하기 위하여 사용될 수 있는 에탄올의 농도는 30 내지 70%(V/V), 더 바람직하게는 40 내지 60%(V/V)가 사용될 수 있고, 가장 바람직하게는 50%(V/V)가 사용된다.

본 출원은 또 다른 양태로써, 상기 초피나무 추출물에 추가적으로 분획 용매를 더 사용하여 초피나무 분획물의 제조방법을 제공한다. 상기 분획 용매는 hexane, chloroform, ethyl acetate, butanol, distilled water를 이용할 수 있고 이에 제한되지 않는다. 분획층은 크로마토그래피와 같은 혼합물을 분리하는 실험기법을 사용하여 유기화합물을 수득할 수 있다. 크로마토그래피는 normal silica gel 로 충진된 컬럼 크로마토그래피, sephadex LH-20이 충진된 컬럼 크로마토그래피를 목표하는 분획물에 따라 선택적으로 혹은 순차적으로 사용할 수 있다.

본 출원의 한 양태에 따르면, 본 출원은 상기 제조방법으로 제조된 세포독성이 없는 초피나무 추출물, 분획물 및 이를 유효성분으로 함유하는 항염, 주름개선 및 미백 기능성 화장료 조성물을 제공한다. 세포독성은 MTT(Thiazolyl Blue Tetrazolium Bromide)와 같은 시약을 첨가하여 마이크로플레이트 계수기를 이용하여 측정하는 방법, leakage assay, Neutral red assay를 이용하여 수행할 수 있다.

본 출원에 있어서, 화장료 조성물에 함유되는 초피나무 추출물 또는 그 분획물의 함량은 화장료 조성물 총 중량 대비 0.01 내지 30.0 중량%가 사용될 수 있다. 바람직하게는 5 내지 20 중량%가 사용될 수 있고 가장 바람직하게는 10 중량%가 사용된다. 상기 중량% 범위보다 더 적은 비율을 함유하는 경우에는 항염, 주름개선, 미백 효과를 실질적으로 발휘하기 어렵고, 상기보다 더 많은 비율을 함유하는 경우에는 경제적이지 않다.

본 출원에 있어서, 초피나무 추출물 또는 그의 분획물을 유효성분으로 함유하는 기능성 화장료 조성물은 화장수, 스킨로션, 스킨 소프너, 스킨토너, 아스트린젠트, 로션, 밀크로션, 모이스처 로션, 영양로션, 맛사지크림, 영양크림, 모이스처 크림, 핸드크림, 에센스, 영양에센스, 팩, 비누, 샴푸, 클렌징폼, 클렌징로션, 클렌징크림, 바디로션, 바디클렌저, 유액으로 구성된 군에서 선택된 어느 하나의 제형인 것을 특징으로 한다.

본 출원에서 용어, "항염증"의 용어는 염증을 주병변으로 하는 질병을 총칭하는 의미로서, 이에 제한되지는 않으나 바람직하게는 아토피성 피부염, 건선, 알러지성 피부염, 접촉성 피부염 및 습진이 포함된다.

본 출원은 초피나무 추출물 또는 그 분획물과 이들의 제조방법 및 이를 함유하는 항염, 주름 개선 및 미백 기능성 화장료 조성물을 제공하는 뛰어난 효과가 있다.

도 1은 본 발명 초피나무 잎 추출물 및 유기화합물의 제조과정을 나타내는 모식도이다.
도 2는 본 발명 초피나무 가지 추출물 및 유기화합물의 제조과정을 나타내는 모식도이다.
도 3은 본 발명 초피나무 열매 추출물 및 유기화합물의 제조과정을 나타내는 모식도이다.
도 4는 본 발명 초피나무 잎 추출물의 농도별 항염 활성 실험결과를 나타내는 그래프이다.
도 5는 본 발명 초피나무 가지 추출물의 농도별 항염 활성 실험결과를 나타내는 그래프이다.
도 6은 본 발명 초피나무 열매 추출물의 농도별 항염 활성 실험결과를 나타내는 그래프이다.
도 7은 본 발명 초피나무 가지 추출물의 항주름 활성 실험결과를 나타내는 그래프이다.
도 8은 본 발명 초피나무 열매 추출물의 항주름 활성 실험결과를 나타내는 그래프이다.
도 9는 본 발명 초피나무 잎 추출물의 미백 활성 실험결과를 나타내는 그래프이다.
도 10은 본 발명 초피나무 가지 추출물의 미백 활성 실험결과를 나타내는 그래프이다.
도 11은 본 발명 초피나무 열매 추출물의 미백 활성 실험결과를 나타내는 래프이다.
도 12는 본 발명 초피나무 잎, 열매로부터 분리된 유기화합물 3의 항염 활성 실험결과를 나타내는 그래프이다.
도 13은 본 발명 초피나무 잎, 열매로부터 분리된 유기화합물 3의 미백 활성 실험결과를 나타내는 그래프이다.
도 14는 본 발명 초피나무 가지로부터 분리된 유기화합물 4의 항염 활성 실험결과를 나타내는 그래프이다.

이하, 본 출원에 따른 실시예를 통하여 본 발명을 보다 상세히 설명하고자 한다. 다만 본 출원의 하기 실시예는 본 출원의 일 예시에 불과하다. 이들 실시예는 본 발명을 보다 구체적으로 설명하기 위한 것으로서, 첨부된 청구항에 제시된 본 발명의 범위가 이들 실시예에 의해 제한되지 않는다는 것은 본 발명이 속하는 기술분야에서 통상의 지식을 가진 자에게 있어 명백할 것이다.

[실시예 1] 본 발명 초피나무 잎 추출물 및 유기화합물 1,2,3의 수득

건조 상태의 초피나무 잎 150g을 50% 에탄올(V/V)을 이용하여 추출하였다. 상기 추출액은 감압 흡입 여과기를 이용하여 여액만 농축하여 초피나무 잎 추출물을 수득하였다.

상기 초피나무 잎 추출물(21g)은 100% 증류수에 현탁하고 hexane, chloroform(190mg), ethyl acetate(1.5g), butanol, distilled water 순으로 분획을 진행하여 분획물을 수득하였다. 그 중 ethyl acetate 분획층을 normal silica gel로 충진된 컬럼 크로마토그래피를 실시하여 유기화합물 1(358mg, 화학식 1)을 얻었으며, 유기화합물 1의 1H & 13C-NMR data의 결과는 표 1과 같다. 다음 sephadex LH-20이 충진된 컬럼 크로마토그래피를 실시하여 유기화합물 2(16mg, 화학식 2)를 얻었으며, 유기화합물 2의 1H & 13C-NMR data의 결과는 표 2와 같다. Chloroform 분획층은 normal silica gel 로 충진 된 컬럼 크로마토그래피를 실시하여 유기화합물 3(9.7mg, 화학식 3)을 얻었으며, 유기화합물 3의 1H 13C-NMR data의 결과는 표 3과 같다 (도 1).

[실시예 2] 본 발명 초피나무 가지 추출물 및 유기화합물 4의 제조

건조 상태의 초피나무 가지 400g을 50% 에탄올(V/V)을 이용하여 추출하였다. 상기 추출액은 감압 흡입 여과기를 이용하여 여액만 농축하여 초피나무 가지 추출물을 수득하였다.

상기 초피나무 가지 추출물(12g)을 100% 증류수에 현탁하고 hexane, chloroform, ethyl acetate, butanol 순으로 분획을 진행하여 분획물을 수득하였다. 그 중 hexane 분획층을 normal silica gel과 sephadex LH-20으로 충진 된 컬럼 크로마토그래피를 순차적으로 실시하여 유기화합물 4(1.0mg, 화학식 4)을 얻었으며, 유기화합물 4의 1H & 13C-NMR data의 결과는 표 4와 같다(도 2).

[실시예 3] 본 발명 초피나무 열매 추출물 및 유기화합물 1,3,5의 제조

건조 상태의 초피나무 열매 400g을 50% 에탄올(V/V)을 이용하여 추출하였다. 상기 추출액은 감압 흡입 여과기를 이용하여 여액만 농축하여 초피나무 열매 추출물을 수득하였다.

상기 초피나무 열매 추출물(28g)을 100% 증류수에 현탁하고 hexane, chloroform, ethyl acetate, butanol, distilled water 순으로 분획을 진행하여 분획물을 수득하였다. 그 중 hexane 분획층을 normal silica gel 이 충진 된 컬럼 크로마토그래피를 실시하여 유기화합물 3(158.8 mg, 화학식 3)을 얻었다. Ethyl acetate 분획층은 침전 실험으로 유기화합물 5(85.1mg, 화학식 5)를 얻었으며, 유기화합물 5의 1H & 13C-NMR data 의 결과는 표 5와 같다. 또한, Ethyl acetate 분획층은 normal silica gel과 sephadex LH-20 으로 충진된 컬럼 크로마토그래피를 순차적으로 실시하여 유기화합물 1(49.5mg, 화학식 1)을 얻었다(도 3).

[실험예 1] 초피나무 추출물 및 유기화합물 3, 4의 항염 활성

상기 실시예 1,2,3에서 수득한 초피나무 잎, 가지 및 열매 추출물과, 유기화합물 3,4의 항염 활성을 측정하기 위하여 RAW 264.7 cell에 염증 유발 물질인 LPS를 인위적으로 처리한 후 상기 추출물과 유기화합물을 처리하여 염증 억제효과가 있는지를 평가하였다. 즉, 96-well plate에 well 당 2 x 10⁵cell을 분주한 다음 24시간 동안 37℃, 5% CO₂ incubator에서 세포들을 배양하였다. 상기 세포들을 overnight 배양한 다음 새로운 배지로 교환해주고 LPS(1㎍/mL)와 각 초피나무 추출물은 0.5, 1,2 %(W/V)의 농도로, 유기화합물 3은 10, 50, 100㎍/mL의 농도로, 유기화합물 4는 5, 10, 50㎍/mL의 농도로 처리하여 24시간 동안 배양하였다. 배양 후, 배지 상층액을 취해 13,000 rpm에서 3분 동안 원심 분리하여 상등액만 모은 후, Griess 시약과 1:1로 반응시키고 570 nm에서 흡광도를 측정하였다.

40% 부틸렌글라이콜(BG) 추출 후 NO 생성 억제 효과를 측정한 결과, 각 추출물의 2% 농도(W/V)에서 초피나무 잎, 가지, 열매 추출물은 각 약 43%(도 4), 50%(도 5) 66%(도 6), 유기화합물 3(도 12)은 100㎍/mL의 농도에서 약 92%, 유기화합물 4는 50㎍/mL의 농도에서 약 96%(도 14)의 높은 NO 생성 억제 효능을 보였다.

[실험예 2] 초피나무 추출물의 항주름 활성

상기 실시예 1,3에서 수득한 초피나무 잎과 열매 추출물의 항주름 활성을 측정하기 위하여 섬유아세포에서의 type I procollagen 생합성량 측정하였다. 이를 위해 섬유아세포를 5x10⁴cell/mL의 농도로 48 well plate에 접종 후 세포를 증식시켰다. 배지는 혈청 10%를 함유한 DMEM 배지를 사용하였으며, 접종 후 24시간 후 시험 시료를 배지에 10, 50 및 100㎍/mL로 첨가하고 1일 동안 37℃, 5% CO₂ 배양기에서 배양하였다. 배지를 튜브로 옮기고 15,000rpm에서 30초 동안 원심분리하여 얻은 상층액을 시험 시료로 하여 procollagen type I C-peptide를 측정하였다.

실험결과, 50% 에탄올(EtOH) 추출 후 100㎍/mL의 농도에서 초피나무 가지 추출물은 약 280%(도 7), 초피나무 열매 추출물은 약 82%(도 8)의 증대된 콜라겐합성 효능을 확인하였다.

[실험예 3] 초피나무 추출물 및 유기화합물 3의 미백 활성

상기 실시예 1,2,3에서 수득한 초피나무 잎, 가지 및 열매 추출물 그리고 유기화합물 3의 미백 활성을 측정하기 위하여 멜라닌 형성 억제 실험을 수행하였다. 이를 위하여 murine melanoma(B-16 F1) 세포를 적량의 FBS(fetal bovine serum)가 함유된 DMEM 배지로 6-well plate에 well당 1×10⁵개로 접종한 후 5% CO₂, 37℃ 하에서 세포가 well 바닥에 약 80% 이상 부착될 때까지 배양하였다. 배양 후 배지를 제거하고 시료가 적당 농도로 희석된 배지로 교체한 후 5% CO₂, 37℃ 하에서 일정시간 배양하였다. 배지를 제거한 세포를 PBS(phosphated buffer saline)로 세척하고 트립신으로 처리하여 세포를 회수하였다. 회수한 세포를 hematocytometer를 이용하여 세포 수를 측정한 후 5,000∼10,000rpm으로 10분간 원심분리 한 다음 상등액을 제거하여 pellet을 얻었다. 상기 세포 pellet은 60℃에서 건조한 후 10% DMSO가 함유된 1M 수산화나트륨액 100㎕ 또는 적량의 cell lysis buffer를 넣어 60℃ 항온조에서 세포 내 멜라닌을 얻었다. 상기 액을 가지고 마이크로플레이트 측정기로 405nm에서 흡광도를 측정하여 세포 일정 수당 멜라닌 양 또는 일정 단백질 당 멜라닌 양을 구하였다.

실험결과, 50% 에탄올(EtOH)로 추출 후 100㎍/mL의 농도에서 초피나무 잎 추출물은 약 27%(도 9), 초피나무 가지 추출물은 약 18%(도 10), 초피나무 열매 추출물은 약 25%(도 11)의 멜라닌 생성을 억제하는 효능을 보였다. 또한, 유기화합물 3은 100㎍/mL의 농도에서 약 20%(도 13)의 멜라닌 생성을 억제하는 효과를 확인하였다.

[실험예 4] 초피나무 추출물, 유기화합물의 세포 독성 조사

초피나무 추출물 또는 유기화합물의 세포독성을 알아보기 위하여, 해당 세포(실험예 2 내지 4에서 사용된 각 세포)를 5x10⁴cells/mL 농도로 하여 96-well plate 각 well에 200㎕씩 분주하여 37℃, CO₂ 인큐베이터에서 1일 동안 배양하였다. 이때 배지는 FBS 10%와 항생제 1%가 포함된 DMEM 배지를 이용하였다. 배양 후, 상기 추출물을 농도별로 첨가한 후, 같은 배양조건에서 24시간 배양하였다. 배양이 끝난 후 5㎎/mL MTT(Thiazolyl Blue Tetrazolium Bromide) 시약을 첨가하여 동일 조건에서 3시간 배양하였다. 그 후 배양액을 제거하고 DMSO(Dimetyl sulfoxide)을 100㎕씩 첨가한 후 10분 동안 교반하고, 마이크로플레이트 계수기(Micro plate reader)를 이용하여 570nm 에서 결과값을 측정하였으며, 대조군값을 기준으로 생존율을 계산하였다.

도 4 내지 도 14의 꺾은선 그래프에 나타나는 결과에 따르면 실험에 사용한 모든 추출물 농도에서 독성이 없음을 확인하였다.

이하, 본 발명을 사용하기에 바람직하고 다양한 화장품 제형을 개시하지만 본 발명의 권리범위는 개시된 제형에 제한되지 않음은 물론이다.

[제조예 1] 화장수

상기 실시예1 내지 3에서 수득한 본 발명 초피나무 추출물이 함유된 화장수를 하기 표 6과 같이 제조하였다.

원료	원 료	함량(중량%)
1	본 발명 초피나무 추출물	10.0
2	글리세린	3.0
3	부틸렌 글리콜	2.0
4	프로필렌 글리콜	2.0
5	폴리옥시에칠렌 경화피마자유	1.0
6	에탄올	10.0
7	트리에탄올아민	0.1
8	방부제	미량
9	색소	미량
10	향료	미량
11	정제수	잔량

[제조예 2] 로션

본 발명 상기 실시예1 내지 3에서 수득한 본 발명 초피나무 추출물이 함유된 로션을 하기 표 7와 같이 제조하였다.

원료	원 료	함량(중량%)
1	본 발명 초피나무 추출물	10.0
2	밀납	1.0
3	폴리솔베이트 60	1.5
4	솔비단 세스퀴올레이트	0.5
5	유동 파라핀	10.0
6	소르비단 스테아레이트	1.0
7	친유형 모노스테아린신 글리세린	0.5
8	스테아린산	1.5
9	글리세릴스테아레이트/피이지-400 스테아레이트	1.0
10	프로필렌글리콜	3.0
11	카르복시폴리머	0.1
12	트리에탄올아민	0.2
13	방부제	미량
14	색소	미량
15	향료	미량
16	정제수	잔량

[제조예 3] 크림

본 발명 상기 실시예1 내지 3에서 수득한 본 발명 초피나무 추출물이 함유된 크림을 하기 표 8와 같이 제조하였다.

함량	원 료	함량(중량%)
1	본 발명 초피나무 추출물	10.0
2	스테아린산	2.0
3	세틸알콜	2.0
4	글리세릴모노스테아레이트	2.0
5	폴리옥시에틸렌소르비단모소스테아레이트	0.5
6	솔비단세스퀴올레이트	0.5
7	글리세릴모노스테아레이트/글리세릴스테아레이트/폴리옥시에틸렌스테아레이트	1.0
8	왁스	1.0
9	유동파라핀스	4.0
10	스쿠알란	4.0
11	카프릴릭/카프릭트리글리세라이드	4.0
12	카르복시비닐폴리머	0.3
13	부틸렌글리콜	5.0
14	글리세린	3.0
15	트리에탄올아민	0.5
16	정제수	잔량

[제조예 4] 에센스 제조

본 발명 상기 실시예1 내지 3에서 수득한 본 발명 초피나무 추출물이 함유된 에센스를 하기 표 9와 같이 제조하였다.

함량	원 료	함량(중량%)
1	본 발명 초피나무 추출물	10.0
2	시토 스테롤	1.7
3	폴리글리세릴 2-올레이트	1.5
4	세라마이드	0.7
5	스테아레스-4	1.2
6	콜레스테롤	1.5
7	디세틸포스페이트	0.4
8	농글리세린	5.0
9	마카다미아 오일	15.0
10	카르복시비닐폴리머	0.2
11	산탄검	0.2
12	방부제	미량
13	향료	미량
14	정제수	잔량

이상의 설명으로부터, 본 출원이 속하는 기술분야의 당업자는 본 출원이 그 기술적 사상이나 필수적 특징을 변경하지 않고서 다른 구체적인 형태로 실시될 수 있다는 것을 이해할 수 있을 것이다. 이와 관련하여, 이상에서 기술한 실시예들은 모든 면에서 예시적인 것이며 한정적인 것이 아닌 것으로 이해해야만 한다. 본 출원의 범위는 상기 상세한 설명보다는 후술하는 특허 청구범위의 의미 및 범위 그리고 그 등가 개념으로부터 도출되는 모든 변경 또는 변형된 형태가 본 출원의 범위에 포함되는 것으로 해석되어야 한다.

본 출원은 초피나무 추출물 또는 그 분획물을 유효성분으로 함유하는 피부 항염, 주름 개선 및 미백 기능성 화장료 조성물을 제공하는 효과가 있어 천연 화장품 산업상 매우 유용한 발명인 것이다.

Claims

초피나무 잎, 가지 및 열매 중 어느 하나의 부위의 초피나무 용매 추출물.
제1항에 있어서, 상기 용매가 에탄올인 초피나무 용매 추출물.
제2항에 있어서, 상기 에탄올의 농도는 30 내지 70%(v/v)인 것이 특징인 추출물.
초피나무 잎, 가지 및 열매 중 어느 하나의 부위의 초피나무 용매 추출물에 분획 용매를 추가로 더 사용하여 분획한 초피나무 추출 분획물.
제4항에 있어서, 상기 분획 용매는 Hexane, Chloroform, Ethyl Acetate, Butanol, Distilled water 로 이루어진 군에서 선택되는 어느 하나 이상의 용매인 초피나무 추출 분획물.
하기 화학식 1 내지 화학식 5의 유기화합물 중 어느 하나 이상이 함유된 화장료 조성물.
초피나무 용매 추출물 또는 그의 분획물이 함유된 화장료 조성물.
제7항에 있어서, 상기 초피나무 용매 추출물 또는 그의 분획물의 함량은 화장료 조성물 총 중량 대비 0.01 내지 30.0 중량% 함유된 화장료 조성물.
초피나무 용매 추출물 또는 그의 분획물을 유효성분으로 함유하는 항염증 기능성 화장료 조성물.
초피나무 용매 추출물 또는 그 분획물을 유효성분으로 함유하는 주름 개선 기능성 화장료 조성물.
초피나무 용매 추출물 또는 그 분획물을 유효성분으로 함유하는 미백 개선 기능성 화장료 조성물.
제9항 내지 제11항 중 어느 한 항의 화장료 조성물이 화장수, 로션, 크림 및 에센스 중에서 선택되는 어느 하나의 제형인 것이 특징인 화장료 조성물
초피나무 잎, 가지 및 열매 중 어느 하나의 부위를 유기 용매로 추출하여 감압 흡입 여과기를 이용하여 농축하는 것이 특징인 초피나무 추출물의 제조방법.
제13항에 있어서, 상기 유기 용매는 에탄올인 것이 특징인 방법.
제13항에 있어서, 상기 초피나무 추출물에 분획 용매를 추가로 선택적 또는 순차적으로 더 사용하여 분획하는 것이 특징인 방법.