KR20190133846A - 에르고스테롤 퍼옥사이드를 포함하는 항염증용 조성물 - Google Patents
에르고스테롤 퍼옥사이드를 포함하는 항염증용 조성물 Download PDFInfo
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Abstract
본 발명은 항염증용 조성물에 관한 것으로서, 더욱 상세하게는 에르고스테롤 퍼옥사이드를 포함하는 염증성 질환의 예방 또는 치료용 약학적 조성물과, 항염증용 식품 및 항염증용 화장료 조성물에 관한 것이다. 본 발명에 따른 에르고스테롤 퍼옥사이드는 염증 유발 마우스에서 사이토카인 IL-4 및 IL-17을 억제하는 효과를 가지고 있는바, 염증성 질환 예방, 개선 및 치료 분야에서 다양하게 활용될 수 있다.
Description
본 발명은 항염증용 조성물에 관한 것으로서, 더욱 상세하게는 에르고스테롤 퍼옥사이드를 포함하는 염증성 질환의 예방 또는 치료용 약학적 조성물과, 항염증용 식품 및 항염증용 화장료 조성물에 관한 것이다.
염증 반응은 생체나 조직에 물리적 작용이나 화학적 물질, 세균 감염 등의 어떠한 기질적 변화를 가져오는 침습이 가해질 때 그 손상부위를 수복 재생하려는 기전으로, 일단 자극이 가해지면 국소적으로 히스타민, 세로토닌, 브라디키닌, 프로스타글란딘, HETE(hydroxyeicosatetraenoic acid), 류코트리엔과 같은 혈관 활성 물질이 유리되어 혈관 투과성이 증대되면서 염증을 유발한다.
대식세포는 일산화질소(NO), 프로스타글란딘 E2(PGE2) 및 전염증성 사이토카인 등을 분비함으로써 염증에 반응하고, 염증 및 면역반응 모두에서 중요한 조절세포로 작용하는데, 이렇게 작용하기 위해서는 반드시 활성화 과정을 거쳐야 한다. 그람 음성균의 세포벽 구성성분 중의 하나이며 내독소로 잘 알려진 LPS(lipopolysaccharide)는 대식세포의 활성화에 관여하는 가장 잘 알려진 외부인자로서, 특히 RAW 264.7 세포와 같은 대식세포나 단핵세포에서 TNF-α(tumor necrosis factor-alpha), IL-6(interleukin-6), IL-1β(interleukin-1 beta)와 같은 전염증성 사이토카인(pro-inflammatory cytokine)을 분비하여 염증부위에서 증가되는 것으로 알려져 있다. LPS가 대식세포를 자극하게 되면 iNOS(inducible nitric oxide synthase)라는 효소에 의해 L-알기닌이 L-시트룰린으로 변하는 과정에서 일산화질소(NO)가 생성됨으로써 대식세포로부터 NO가 생성된다. 포유동물에서 NO는 세 가지 종류의 NO 합성효소(NOS, nitric oxide synthase), 즉 nNOS(neuronal NOS), eNOS(endothelial NOS) 및 iNOS(inducible NOS)에 의해 합성된다. 이 중에서 nNOS와 eNOS에 의해 생성되는 NO는 정상적인 생체기능을 위해 생성되며, 조직 내에서의 농도는 일정수준으로 낮게 유지된다. 그러나 iNOS에 의해 생성된 NO는 과도하게 생성되어 병리적인 혈관확장, 세포독성, 조직 손상 등과 같은 생체에 유해한 작용을 나타낸다.
최근, 염증의 생성을 줄일 수 있는 방법에 관한 연구가 활발히 진행되고 있으며, 지금까지의 연구 결과로는 자극에 의해 조직이나 혈장에서 활성화되는 브라디키닌과 같은 키닌(kinins), 다양한 사이토카인, 프로스타글란딘 E2 등이 부종 형성과 혈관 확장에 관여하여 염증의 원인이 된다는 것이 알려져 있다. 따라서 항염증제로서 비스테로이드성 항염증제(nonsteroidal anti-inflammatory drugs, NSAIDs)가 많이 사용되어 왔다. 그러나 비스테로이드성 항염증제를 장기간 복용하게 되면 위장관계의 소화성 궤양출혈로 인한 이차적 빈혈 초래, 혈소판 기능 억제, 분만 유도 억제, 신장에 대한 부작용, 간장 손상, 과민 반응 등의 심각한 부작용을 초래한다. 따라서 종래 약물의 부작용을 극복하기 위하여 인체에 부작용이 적고 항염증 효과가 우수한 치료제의 개발에 대한 필요성이 절실히 요구되고 있다.
이에 본 발명자들은 인체에 부작용이 적고 항염증 효과가 우수한 치료제를 개발하기 위하여 예의 연구 노력한 결과, 에르고스테롤 퍼옥사이드의 항염증 효과를 확인함으로써 본 발명을 완성하게 되었다.
따라서 본 발명의 목적은, 에르고스테롤 퍼옥사이드(Ergosterol peroxide)를 포함하는, 염증성 질환의 예방 또는 치료용 약학적 조성물을 제공하는 것이다.
본 발명의 다른 목적은, 에르고스테롤 퍼옥사이드를 포함하는, 항염증용 식품 조성물을 제공하는 것이다.
본 발명의 또 다른 목적은, 에르고스테롤 퍼옥사이드를 포함하는, 항염증용 화장료 조성물을 제공하는 것이다.
상기 목적을 달성하기 위하여, 본 발명은 에르고스테롤 퍼옥사이드를 포함하는, 염증성 질환의 예방 또는 치료용 약학적 조성물을 제공한다.
또한 본 발명은 에르고스테롤 퍼옥사이드를 포함하는, 항염증용 식품 조성물을 제공한다.
또한 본 발명은 에르고스테롤 퍼옥사이드를 포함하는, 항염증용 화장료 조성물을 제공한다.
본 발명에 따른 에르고스테롤 퍼옥사이드는 염증 유발 마우스에서 사이토카인 IL-4 및 IL-17을 억제하는 효과를 가지고 있는바, 염증성 질환 예방, 개선 및 치료 분야에서 다양하게 활용될 수 있다.
도 1은 본 발명에 따른 에르고스테롤 퍼옥사이드의 구조식을 나타낸 도이다.
도 2는 염증 유발 마우스에서 본 발명의 에르고스테롤 퍼옥사이드의 처리에 따른 사이토카인의 농도를 측정한 결과를 나타낸 도이다.
도 3은 염증 유발 마우스의 비장 세포에서 본 발명의 에르고스테롤 퍼옥사이드의 처리에 따른 사이토카인의 농도를 측정한 결과를 나타낸 도이다.
도 4는 염증 유발 마우스의 림프 세포에서 본 발명의 에르고스테롤 퍼옥사이드의 처리에 따른 사이토카인의 농도를 측정한 결과를 나타낸 도이다.
도 2는 염증 유발 마우스에서 본 발명의 에르고스테롤 퍼옥사이드의 처리에 따른 사이토카인의 농도를 측정한 결과를 나타낸 도이다.
도 3은 염증 유발 마우스의 비장 세포에서 본 발명의 에르고스테롤 퍼옥사이드의 처리에 따른 사이토카인의 농도를 측정한 결과를 나타낸 도이다.
도 4는 염증 유발 마우스의 림프 세포에서 본 발명의 에르고스테롤 퍼옥사이드의 처리에 따른 사이토카인의 농도를 측정한 결과를 나타낸 도이다.
이하, 본 발명을 상세히 설명한다.
본 발명의 양태에 따르면, 본 발명은 본 발명은 에르고스테롤 퍼옥사이드를 포함하는, 염증성 질환의 예방 또는 치료용 약학적 조성물을 제공한다.
본 발명의 다른 양태에 따르면, 본 발명은 에르고스테롤 퍼옥사이드를 포함하는, 항염증용 식품 조성물을 제공한다.
본 발명의 또 다른 양태에 따르면, 본 발명은 에르고스테롤 퍼옥사이드를 포함하는, 항염증용 화장료 조성물을 제공한다.
이하, 실시예를 통하여 본 발명을 더욱 상세히 설명하고자 한다. 이들 실시예는 오로지 본 발명을 예시하기 위한 것으로서, 본 발명의 범위가 이들 실시예에 의해 제한되는 것으로 해석되지는 않는 것은 당업계에서 통상의 지식을 가진 자에게 있어서 자명할 것이다.
실시예
1. 에르고스테롤
퍼옥사이드의
항염증 효과 확인
1-1. 염증 유발 마우스 제작 및 샘플 획득
에르고스테롤 퍼옥사이드의 항염증 효과를 확인하기 위하여, 염증이 유발된 마우스에 도 1의 구조식으로 표시되는 에르고스테롤 퍼옥사이드를 농도별로 처리하였다.
구체적으로, 4주령의 Balb/c 마우스에 알부민(ovalbumin, OVA), OVA/Poly(I:C) 및 OVA/LPS로 각각 감작하여 염증을 유도하였다. 염증이 유발된 마우스(0. 7 및 14 일)에 각각 25μg의 알부민(Ovalbumin; OVA; Sigma-aldrich, USA) 및 1mg의 백반(Alum; Thermo, Rockford, IL, USA)을 혼합하여 복강에 주사하여, 알레르기 항원을 염증이 유발된 마우스에 감작시켰다. 상기 마우스에 염증 유도로부터 21 내지 28일까지의 기간 동안 5μg의 OVA를 비강에 점적하여 항원 공격(antigen challenge)을 시행하여 염증 유발 마우스를 제작하였다.
제작된 염증 유발 마우스에 도 1의 구조식으로 표시되는 에르고스테롤 퍼옥사이드를 각각 1, 2.6, 6, 10 및 20μg/ml의 농도로 처리하였다. 음성대조군은 4주령의 Balb/c 마우스에 인산완충식염수(phosphate buffered saline; PBS)를 주사하였으며, OVA 대신 PBS를 비강 점적하였으며, 에르고스테롤 퍼옥사이드를 처리하지 않았다.
염증을 유도한지 29일 째에 상기 비강 점적한 마우스를 희생시켜 비장 및 코점막 조직 샘플을 채취하였다. 메쉬(mesh)를 이용하여 채취된 비장 샘플로부터 단일 세포를 분리하였다. 또한 코점막 조직 샘플에 RBC 용해 버퍼(Sigma-aldrich, USA)를 처리하여 적혈구를 제거하여 림프 세포(호중구)를 얻었다. 분리된 비장 세포 및 림프세포를 각각 24-웰 배양 플레이트에 3×106cells/ml의 농도로 분주하였다. 분주된 비장 세포 및 림프세포를 37℃ CO2 배양기에서 3 내지 4일간 배양한 뒤, 세포 배양액을 수집하였다.
1-2. 에르고스테롤
퍼옥사이드의
농도에 따른 사이토카인 농도 측정
효소면역분석을 통해 실시예 1-1의 염증 유발 마우스에서 사이토카인 IL-4 및 IL-17의 농도를 측정하였다. 상기 효소면역분석은 효소면역분석 키트(Enzyme linked immunosorbent assay, ELISA, DuoSet, R&D Systems, MN, USA)를 사용하였으며, 제조사의 매뉴얼에 따라 실험을 수행하였다. 효소면역분석 수행한 후 IL-4 및 IL-17 농도 측정은 마이크로플레이트 리더(TECAN, Mannedorf, Switzerland)를 이용하여 450 및 540nm의 파장에서 OD 값을 측정하였으며, 이를 표준곡선(standard curve)으로 나타내었다. 실험 결과는 3회 반복하였고 ‘평균값± SEM‘으로 나타내었다. OD 값 측정 시 음성대조군은 에르고스테롤 퍼옥사이드를 용해한 0.1 % 디메틸설폭사이드(Dimethyl sulfoxide, DMSO)가 함유된 배양배지를 사용하였다. 염증 유발 마우스의 사이토카인 농도 측정 결과는 도 2에 나타내었다.
도 2에 나타낸 바와 같이, 에르고스테롤 퍼옥사이드가 염증 유발 마우스에서 IL-4 및 IL-17 농도를 감소시키는 효과가 있음을 확인하였다.
1-3. 비장 세포 배양액의 사이토카인 농도 측정
효소면역분석을 통해 실시예 1-1에서 수득한 비장 세포 배양액의 사이토카인 IL-4 및 IL-17의 농도를 측정하였다. 상기 효소면역분석은 실시예 1-2의 방법과 동일하게 수행하였다. 림프 세포 배양액의 사이토카인 농도 측정 결과는 도 3에 나타내었다.
도 3에 나타낸 바와 같이, 에르고스테롤 퍼옥사이드는 비장 세포의 IL-4 및 IL-17을 농도 의존적으로 억제하는 것을 알 수 있다.
1-3. 림프 세포 배양액의 사이토카인 농도 측정
효소면역분석을 통해 실시예 1-1에서 수득한 림프 세포 배양액의 사이토카인 IL-4 및 IL-17의 농도를 측정하였다. 상기 효소면역분석은 실시예 1-2의 방법과 동일하게 수행하였다. 림프 세포 배양액의 사이토카인 농도 측정 결과는 도 4에 나타내었다.
도 4에 나타낸 바와 같이, 에르고스테롤 퍼옥사이드는 림프 세포의 IL-4 및 IL-17을 농도 의존적으로 억제하는 것을 알 수 있다.
종합적으로 본 발명자들은 에스고스테롤 퍼옥사이드가 염증 유발 마우스에서 사이토카인 IL-4 및 IL-17을 억제하는 것을 확인하였다. 이는 에르고스테롤이 항염증 효과가 있음을 의미하는 바, 본 발명의 에르고스테롤 퍼옥사이드는 염증성 질환 예방, 개선 및 치료 분야에서 다양하게 활용될 수 있다.
이하, 제제예를 통하여 본 발명을 더욱 상세히 설명하고자 한다. 제제예는 오로지 본 발명을 예시하기 위한 것으로서, 본 발명의 범위가 제제예에 의해 제한되는 것으로 해석되지 않는다.
제제예
1. 항균용 약학적 조성물의 제조
1-1.
산제의
제조
에르고스테롤 퍼옥사이드 20 mg
유당 100 mg
탈크 10 mg
상기의 성분들을 혼합하고 기밀포에 충진하여 산제를 제조한다.
1-2. 정제의 제조
에르고스테롤 퍼옥사이드 10 mg
옥수수전분 100 mg
유당 100 mg
스테아린산 마그네슘 2 mg
상기의 성분들을 혼합한 후 통상의 정제의 제조방법에 따라서 타정하여 정제를 제조한다.
1-3. 캡슐제의 제조
에르고스테롤 퍼옥사이드 10 mg
결정성 셀룰로오스 3 mg
락토오스 14.8 mg
마그네슘 스테아레이트 0.2 mg
통상의 캡슐제 제조방법에 따라 상기의 성분을 혼합하고 젤라틴 캡슐에 충전하여 캡슐제를 제조한다.
1-4. 주사제의 제조
에르고스테롤 퍼옥사이드 10 mg
만니톨 180 mg
주사용 멸균 증류수 2974 mg
Na2HPO42H2O 26 mg
통상의 주사제의 제조방법에 따라 1 앰플당 (2 ml) 상기의 성분 함량으로 제조한다.
1-5.
액제의
제조
에르고스테롤 퍼옥사이드 20 mg
이성화당 10 g
만니톨 5 g
정제수 적량
통상의 액제의 제조방법에 따라 정제수에 각각의 성분을 가하여 용해시키고 레몬향을 적량 가한 다음 상기의 성분을 혼합한 다음 정제수를 가하여 전체를 정제수를 가하여 전체 100ml로 조절한 후 갈색병에 충진하여 멸균시켜 액제를 제조한다.
제제예
2 항염증용 식품 제제의 제조
2-1. 건강식품의 제조
에르고스테롤 퍼옥사이드 100 mg
비타민 혼합물 적량
비타민 A 아세테이트 70 g
비타민 E 1.0 mg
비타민 B1 0.13 mg
비타민 B2 0.15 mg
비타민 B6 0.5 mg
비타민 B12 0.2 g
비타민 C 10 mg
비오틴 10 g
니코틴산아미드 1.7 mg
엽산 50 g
판토텐산 칼슘 0.5 mg
무기질 혼합물 적량
황산제1철 1.75 mg
산화아연 0.82 mg
탄산마그네슘 25.3 mg
제1인산칼륨 15 mg
제2인산칼슘 55 mg
구연산칼륨 90 mg
탄산칼슘 100 mg
염화마그네슘 24.8 mg
상기의 비타민 및 미네랄 혼합물의 조성비는 비교적 건강식품에 적합한 성분을 바람직한 실시예로 혼합 조성하였지만, 그 배합비를 임의로 변형 실시하여도 무방하며, 통상의 건강식품 제조방법에 따라 상기의 성분을 혼합한 다음, 과립을 제조하고, 통상의 방법에 따라 건강식품 조성물 제조에 사용할 수 있다.
2-2. 건강음료의 제조
에르고스테롤 퍼옥사이드 100 mg
비타민 C 15 g
비타민 E(분말) 100 g
젖산철 19.75 g
산화아연 3.5 g
니코틴산아미드 3.5 g
비타민 A 0.2 g
비타민 B1 0.25 g
비타민 B2 0.3 g
물 정량
통상의 건강음료 제조방법에 따라 상기의 성분을 혼합한 다음, 약 1 시간 동안 85 에서 교반 가열한 후, 만들어진 용액을 여과하여 멸균된 2 L 용기에 취득하여 밀봉 멸균한 뒤 냉장 보관한 다음 본 발명의 건강음료 조성물 제조에 사용한다.
상기 조성비는 비교적 기호음료에 적합한 성분을 바람직한 실시예로 혼합 조성하였지만 수요계층이나, 수요국가, 사용용도 등 지역적, 민족적 기호도에 따라서 그 배합비를 임의로 변형 실시하여도 무방하다.
제제예
3. 항염증용 화장품 첨가제의 제조
3-1. 유연화장수(스킨로션)의 제조
에르고스테롤 퍼옥사이드 0.5%
베타-1,3-글루칸 1.0%
부틸렌글리콜 2.0%
프로필렌글리콜 2.0%
카르복시비닐폴리머 0.1%
피이지-12 노닐페닐에테르 0.2%
폴리솔베이트 80 0.4%
에탄올 10.0%
트리에탄올아민 0.1%
방부제, 색소, 향료 적량
정제수 to 100%
3-2. 영양화장수(
밀크로션
)의 제조
에르고스테롤 퍼옥사이드 0.5 %
베타-1,3-글루칸 1.0 %
밀납 4.0 %
폴리솔베이트 60 1.5 %
솔비탄세스퀴올레이트 1.5 %
유동파라핀 0.5 %
카프릴릭/카프릭트리글리세라이드 5.0 %
글리세린 3.0 %
부틸렌글리콜 3.0 %
프로필렌글리콜 3.0 %
카르복시비닐 폴리머 0.1 %
트리에탄올아민 0.2 %
방부제, 색소, 향료 적량
정제수 to 100 %
3-3. 영양크림의 제조
에르고스테롤 퍼옥사이드 1.0 %
베타-1,3-글루칸 5.0 %
밀날 10.0 %
폴리솔베이트 60 1.5 %
피이지 60 경화피마자유 2.0 %
솔비탄세스퀴올레이트 0.5 %
유동파라핀 10.0 %
스쿠알란 5.0 %
카프릴릭/카프릭트리글리세라이드 5.0 %
글리세린 5.0 %
부틸렌글리콜 3.0 %
프로필렌글리콜 3.0 %
트리에탄올아민 0.2 %
방부제, 색소, 향료 적량
정제수 to 100%
이상, 본 발명내용의 특정한 부분을 상세히 기술하였는바, 당업계의 통상의 지식을 가진 자에게 있어서, 이러한 구체적인 기술은 단지 바람직한 실시양태일 뿐이며, 이에 의해 본 발명의 범위가 제한되는 것이 아닌 점은 명백할 것이다. 따라서 본 발명의 실질적인 범위는 첨부된 청구항들과 그것들의 등가물에 의해 정의된다고 할 것이다.
Claims (5)
- 에르고스테롤 퍼옥사이드(Ergosterol peroxide)를 포함하는, 염증성 질환의 예방 또는 치료용 약학적 조성물.
- 제1항에 있어서,
상기 조성물은 에르고스테롤 퍼옥사이드를 1 내지 20μg/ml의 농도로 포함하는, 염증성 질환의 예방 또는 치료용 약학적 조성물.
- 제1항에 있어서,
상기 염증성 질환은 IL-4 또는 IL-17의 발현 증가로 인한 염증성 질환인, 염증성 질환의 예방 또는 치료용 약학적 조성물.
- 에르고스테롤 퍼옥사이드를 포함하는, 항염증용 식품 조성물.
- 에르고스테롤 퍼옥사이드를 포함하는, 항염증용 화장료 조성물.
Priority Applications (1)
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|---|---|---|---|
| KR1020180058737A KR20190133846A (ko) | 2018-05-24 | 2018-05-24 | 에르고스테롤 퍼옥사이드를 포함하는 항염증용 조성물 |
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|---|---|---|---|
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| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
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| KR1020180058737A KR20190133846A (ko) | 2018-05-24 | 2018-05-24 | 에르고스테롤 퍼옥사이드를 포함하는 항염증용 조성물 |
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-
2018
- 2018-05-24 KR KR1020180058737A patent/KR20190133846A/ko unknown
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