KR20190112801A - Wnt 억제제 및 항-pd-1 항체 분자의 조합 투여 일정 - Google Patents

Wnt 억제제 및 항-pd-1 항체 분자의 조합 투여 일정 Download PDF

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Abstract

본 발명은 약학 분야, 특히 암 치료에 사용하기 위한 Wnt 억제제 및 PD-1 억제제에 관한 것이다. 구체적으로, 본 발명은 암 치료에 사용하기 위한 Wnt 억제제, 또는 이의 약제학적으로 허용가능한 염, 및 PD-1 억제제, 또는 이의 약제학적으로 허용가능한 염을 포함하는 약제학적 조합물, 상기 조합물을 투여하는 단계를 포함하는 암 치료 방법, 및 암 치료용 약제의 제조를 위한 조합물의 용도에 관한 것이다.

Description

WNT 억제제 및 항-PD-1 항체 분자의 조합 투여 일정
본 발명은 약학 분야, 특히 암 치료에 사용하기 위한 Wnt 억제제 및 항-PD-1 항체 분자에 관한 것이다. 구체적으로, 본 발명은 암 치료에 사용하기 위한 Wnt 억제제, 또는 이의 약제학적으로 허용가능한 염, 및 항-PD-1 항체 분자, 또는 이의 약제학적으로 허용가능한 염을 포함하는 약제학적 조합물; 상기 조합물을 투여하는 단계를 포함하는 암 치료 방법; 및 암 치료용 약제의 제조를 위한 상기 조합물의 용도에 관한 것이다.
Wnt (Wingless) 계열은 배아발생 과정에서 세포간 상호작용을 조절하고 발암, 노화 및 섬유증과 관련이 있는 고도로 보존된 분비 단백질 군이다. Wnt 유전자는 30년 전에 쥐 유방 종양에서 종양유전자로 확인되었으며, 많은 연구에서 핵심 종양발생 경로로 확인되었다. Wnt 유전자 계열은 Int1/Wnt1 원종양유전자 및 초파리 wingless("Wg"), 초파리 Wnt1 상동체와 관련된 대량의 분비 단백질을 코딩한다(Cadigan 등 Genes & Development 1997, 11, 3286).
예정사 1(PD-1) 단백질은 T-세포 조절인자의 확대된 CD28/CTLA4 계열의 억제성 구성원이다(Okazaki 등 Curr. Opin. Immunol. 2002, 14, 391779; Bennett 등 J. Immunol . 2003, 170, 711). CD28 수용체의 리간드는 "B7 슈퍼패밀리"로도 공지되어 있는, 관련 B7 분자의 그룹을 포함한다(Coyle 등 Nature Immunol. 2001, 2(3), 203; Sharpe 등 Nature Rev. Immunol. 2002, 2, 116; Collins 등 Genome Biol. 2005, 6, 223.1; Korman 등 Adv. Immunol. 2007, 90, 297). B7.1(CD80), B7.2(CD86), 유도성 공동자극성 리간드(ICOS-L), 예정사-1 리간드(PD-L1; B7-H1), 예정사-2 리간드(PD-L2; B7-DC), B7-H3, B7-H4 및 B7-H6을 포함하는, B7 슈퍼패밀리의 여러 구성원들이 공지되어 있다(Collins 등 Genome Biol. 2005, 6, 223.1). CD28 패밀리의 다른 구성원은 CD28, CTLA-4, ICOS 및 BTLA를 포함한다. PD-1은 단량체로서 존재하는 것으로 제시되어 있는데, 다른 CD28 패밀리 구성원들에 특징적인 쌍을 이루지 않은 시스테인 잔기가 결여되어 있다. PD-1은 활성화된 B 세포, T 세포, 및 단핵구 상에서 발현된다.
PD-L1은 다양한 인간 암에 풍부하다(Dong 등 Nat. Med. 2002, 8, 787). PD-1은 TCR 신호를 음성적으로 조절하는 면역-억제 단백질로 알려져 있다(Ishida, 등 EMBO J. 1992, 11, 3887; Blank 등 Immunol. Immunother. 2006, 56(5), 739). PD-1과 PD-L1 사이의 상호작용은 예를 들어 종양 침윤 림프구의 감소, T-세포 수용체 매개된 증식의 감소 및/또는 암세포에 의한 면역 회피로 이어질 수 있는 면역 체크포인트로서 작용할 수 있다(Dong 등 J. Mol. Med. 2003, 81, 281; Blank 등 Cancer Immunol. Immunother. 2005, 54, 307; Konishi 등 Clin. Cancer Res. 2004, 10, 5094). 면역 억제는 PD-1과 PD-L1 또는 PD-L2의 국소 상호작용을 억제함으로써 역전될 수 있으며; 이 효과는 PD-1과 PD-L2의 상호작용이 또한 차단될 때 부가적이다(Iwai 등 Proc. Nat. Acad. Sci. USA 2002, 99:12293-7; Brown 등 2003, 170, 1257).
몇 가지 증거들은 Wnt 경로 신호전달이 다양한 암에서 중요할 수 있음을 시사한다. 표준 Wnt 경로 구성요소, 예컨대 APC 및 β-카테닌의 돌연변이는 일부 악성종양의 발병에 중요한 역할을 할 수 있다. 인간 전이성 흑색종 샘플의 최근 분자 분석은 WNT/b-카테닌 신호전달 경로의 활성화와 T-세포 유전자 발현 시그니처의 부재 사이의 상관관계를 보여주었다(Spranger 등 Nature 2015, 523, 231).
암 치료에서 면역 반응을 조절하는데 있어서 면역 체크포인트 경로의 중요성을 감안할 때 면역계를 활성화하거나 면역요법에 대한 내성을 극복하는 새로운 조합 요법을 개발할 필요가 있다.
본 발명은 본원에서 정의된 바와 같은 약제학적 조합물을 제공함으로써 이러한 요구를 해결한다.
본 발명의 제1 양태는 암 치료에 사용하기 위한, 화학식 I의 Wnt 억제제, 2-(2',3-디메틸-[2,4'-비피리딘]-5-일)-N-(5-(피라진-2-일)피리딘-2-일)아세트아미드 [화학식 I의 화합물], 또는 이의 약제학적으로 허용가능한 염,
[화학식 I]
Figure pct00001
및 (ii) 항-PD-1 항체 분자 또는 이의 약제학적으로 허용가능한 염을 포함하는 약제학적 조합물이며, (i)은 최대 4주기동안 각 주기의 1일 내지 15일에 매일 투여되며, (ii)는 주기당 적어도 1회 투여된다.
본 발명의 또 다른 양태는 암 치료를 위한 약제를 제조하기 위해, 화학식 I의 wnt 억제제, 2-(2',3-디메틸-[2,4'-비피리딘]-5-일)-N-(5-(피라진-2-일)피리딘-2-일)아세트아미드, 또는 이의 약제학적으로 허용가능한 염을 항-PD-1 항체 분자 (ii), 또는 약제학적으로 허용가능한 염과 조합하여 사용하는 것을 제공하며, (i) 및 (ii)는 본 명세서에 정의된 바와 같이 투여되며, 바람직하게는, (i)은 최대 4주기동안 각 주기의 1일 내지 15일에 매일 투여되며, (ii)는 주기당 적어도 1회 투여된다.
본 발명의 또 다른 양태는 암을 치료하기 위한 방법을 제공하며, 상기 방법은 유효량의 (i) 및 (ii)를 이를 필요로 하는 환자에게 투여하는 단계를 포함하며, (i)은 최대 4주기동안 각 주기의 1일 내지 15일에 매일 투여되며, (ii)는 주기당 적어도 1회 투여된다.
도 1은 15일 노출 후 종양 생검에서 분리된 RNA 샘플의 NanoString 측정된 유전자 발현을 나타낸다.
도 2는 이 분석에서 9쌍의 대상체에 대한 선별 검사 및 요약 방문에서의 CD3 발현을 나타낸다.
도 3은 연구를 위해 선택된 T-세포 시그니처 중 하나를 보여준다.
도 4는 치료 후 Wnt 경로의 변조를 보여준다.
도 5는 CD103+ 수지상 세포의 포집과 관련된 케모카인 시그니처를 보여준다.
도 6은 CD8+ T-세포의 포집과 관련된 케모카인 시그니처를 보여준다.
도 7a 및 7b: 다양한 유형의 암 세포에 대한 암 게놈지도(TCGA)에서의 T-세포 및 Wnt 시그니처 간의 상관관계를 보여준다.
도 8: 임상 연구 설계를 도시한다.
최근에는, 분비된 당 단백질인 R-스폰딘 1-4 (RSPO1-4)은 표준 Wnt 신호전달의 중요한 활성제로서 등장했다. RSPO는 류신-풍부한 반복체-함유 G-단백질-결합된 수용체(LGR4-6) 및 막관통 E3 유비퀴틴 리가아제 RING 핑거 43/아연 및 RING 핑거 3(RNF43/ZNRF3)과 결합하여, 삼원 복합체를 형성한다(Chen 등 Genes Dev; 2013, 27, 1345). RNF43/ZNRF3은 Fz 및 LRP6의 전환을 촉진하여 Wnt 신호전달을 길항시킨다(Hao 등 Nature 2012, 485 (7397), 195-200; Koo 등 Nature, 2012, 488 (7413), 665). RSPO의 결합은 RNF43/ZNRF3의 엔도사이토시스를 유도하여, 막-결합된 Fz 및 LRP6의 수준을 증가시키고 Wnt 리간드-매개된 신호전달을 향상시킨다. 표적 세포 내에서 신호전달을 활성화하기 위해서는 Wnt 단백질이 적절히 분비되고 세포외 공간을 통해 수송되어야 한다. 호저(porcupine)는 Wnt 단백질에 팔미토일 기를 추가하는 막-결합된-O-아실트랜스퍼라제(MBOAT)이다(Takada 등 Dev. Cell 2006, 11, 791). 표준 Wnt 경로 구성요소, 예컨대 APC 및 β-카테닌의 돌연변이는 일부 악성종양의 발병에 중요한 역할을 하며, 그 유전병변은 상류 Wnt 경로 조절에 영향을 미친다. Wnt 경로 신호전달의 억제는 최근 부작용 및 용량 제한 독성과 같은 몇 가지 단점과 관련이 있었다. 이러한 단점은 Wnt 억제제의 항-종양 효능을 제한했다. 이와 별도로, Wnt 경로의 활성화는 면역요법에 대한 내성과 관련이 있으며, 종양이 면역 검출을 회피하고 체크-포인트 억제제에 대한 임상적 이점을 감소시킬 수 있게하는 메커니즘을 제공한다(Spranger 등 Nature 2015, 523, 231). 예를 들어, 본 발명의 Wnt 억제제, 즉 2-(2',3-디메틸-[2,4'-비피리딘]-5-일)-N-(5-(피라진-2-일)피리딘-2-일)아세트아미드가 시험되고, 피부 및 종양의 생검에서 pLRP6 및 AXIN2qPCR의 수준이 분석되었다. pLRP6 및 AXIN2의 수준은 2-(2',3-디메틸-[2,4'-비피리딘]-5-일)-N-(5-(피라진-2-일)피리딘-2-일)아세트아미드, 또는 이의 약제학적으로 허용가능한 염에 의한 치료후 피부 샘플 생검에서 억제되었으며, 이는 Wnt 경로의 억제를 나타낸다. 불행하게도 다른 연구에서 2-(2',3-디메틸-[2,4'-비피리딘]-5-일)-N-(5-(피라진-2-일)피리딘-2-일)아세트아미드, 또는 이의 약제학적으로 허용가능한 염은 단일 약제로서 단독으로, 증가된 세포독성 유전자 시그니처 및 종양 효능의 결여를 나타냈다. 또한, 동물 실험에서 랫트 연구에서 비주 감소; 랫트 및 개 모델에서 위장(GI)관, 뼈 및 치아에서의 독성; 및 랫트의 골수 및 개의 신장에 영향을 미치는 이차 효과를 보여주었다.
Wnt 억제제 (i)를 단독 투여한 환자의 치료는 종양의 면역 시그니처의 변화를 가져왔으며, 단일 약제 Wnt 억제제 (i)로 8~15일간 치료하면 이러한 변화를 초래하기에 충분하다는 사실이 밝혀졌다. 이러한 발견은 항-PD-1 항체 분자 (ii), 또는 이의 약제학적으로 허용가능한 염과 함께 Wnt 억제제 (i)를 간헐적으로 투여하는 것이 수지상 세포 및 T-세포를 민감하게 할 수 있고, 따라서 특히 뼈에 대한 만성 Wnt 투여의 독성들 중 일부를 완화시키면서 PD-1 억제의 효과를 증강시키기에 충분하다는 결론을 도출했다.
Wnt 신호전달 경로는 (뼈 형성에 관여하는) 골아 세포의 발생 및 생존에 필수적이며, (뼈 흡수에 관여하는) 파골 세포를 음성적으로 조절한다. 이와 관련하여, Wnt 억제제는 뼈 흡수와 뼈의 얇아짐을 유발하는 것으로 밝혀졌다. Wnt 억제제에 대한 임상 연구에서 일부 환자는 골절을 경험했으며, 이는 골아 세포 및 파골 세포에 Wnt 경로 억제가 미치는 영향과 관련이 있을 수 있다. 따라서, Wnt 억제제 (i), 예를 들어 2-(2',3-디메틸-[2,4'-비피리딘]-5-일)-N-(5-(피라진-2-일)피리딘-2-일)아세트아미드, 또는 이의 약제학적으로 허용가능한 염을 최대 4회의 치료주기 중 1 내지 15일에만 매일과 같이 더 짧은 기간동안 투여하면, Wnt 억제제가 뼈에 임상적으로 관련된 변화를 일으키는 위험을 줄일 수 있다. 또한, Wnt 억제제의 짧은 간헐적 투여는 활성화된 수지상 세포 시그니처의 상향조절을 초래하기에 충분했다. 이는 수지상 세포의 이 아형이 항-종양 반응을 위해 T 세포를 포집하고 활성화하는데 중요하기 때문에 관련이 있다. 암 치료에서 Wnt 신호전달의 억제는 수지상 세포 및 T-세포 활성화의 억제의 방출을 통해 PD-1 억제에 대한 반응 속도를 개선시킨다. 전반적으로, Wnt 억제제 (i)와 항-PD-1 항체 분자의 조합은 Wnt 억제제가 예를 들어, 8 또는 15일 동안 치료 주기의 초기에만 투여되며, 두 화합물의 상호 조정된 효과를 나타낼 수 있고, 예를 들어 Wnt 억제제 (i) 단독 사용에 비해 더 나은 효능 및 훨씬 감소된 안전성 프로파일을 제공할 수 있다.
본 발명에 따르면, Wnt 억제제는 세포에서 Wnt 신호전달의 활성을 표적화하거나, 감소시키거나, 억제하는 화합물이다. 예를 들어, Wnt 억제제는 호저 억제제일 수도 있다. Wnt 억제제 (i)는 WO2010/101849에 개시된 화합물이다. 항-PD-1 항체 분자, 또는 이의 약제학적 염과 조합된 Wnt 억제제는 화학식 I의 2-(2',3-디메틸-2,4'-비피리딘-5-일)-N-(5-(피라진-2-일)피리딘-2-일)아세트아미드, 또는 이의 약제학적으로 허용가능한 염이며,
[화학식 I]
Figure pct00002
,
WO2010/101849에 개시되어 있다(화합물 86, 실시예 10).
따라서, 본 발명은 암 치료에 사용하기 위한, (i) 2-(2',3-디메틸-[2,4'-비피리딘]-5-일)-N-(5-(피라진-2-일)피리딘-2-일)아세트아미드, 또는 이의 약제학적으로 허용가능한 염, 및 (ii) 항-PD-1 항체 분자 또는 이의 약제학적으로 허용가능한 염을 포함하는 약제학적 조합물을 제공하며, 상기 화학식 I의 화합물, 즉 2-(2',3-디메틸-[2,4'-비피리딘]-5-일)-N-(5-(피라진-2-일)피리딘-2-일)아세트아미드, 또는 이의 약제학적으로 허용가능한 염은 최대 4주기 동안 각 주기 중 1일 내지 15일에 매일 투여되며, 본 명세서에 기재된 항-PD-1 항체 분자 (ii)는 주기 당 적어도 1회 투여된다. Wnt 억제제는 4주기 동안 투여될 수 있다.
본 명세서에서, 용어 "약제학적 조합물"은 비-고정된 조합물을 지칭한다. 용어 "비-고정된 조합물"은 활성 성분, 예를 들어 화학식 I의 화합물, 즉 2-(2',3-디메틸-[2,4'-비피리딘]-5-일)-N-(5-(피라진-2-일)피리딘-2-일)아세트아미드, 또는 이의 약제학적으로 허용가능한 염 및 항-PD-1 항체 분자, 또는 약제학적으로 허용가능한 염 형태가 개별적인 실체로서 특정한 시간 제한 없이 동시에 또는 순차적으로 환자에게 투여되는 것을 의미하며, 이러한 투여로 인해 환자의 신체에서 두 화합물의 치료적으로 효과적인 수준을 제공한다.
용어 "조합물" 또는 "와 조합하여"는 요법 또는 치료제가 동시에 투여되고/되거나 함께 전달되기 위하여 제형화되어야 함을 암시하고자 하는 것은 아니지만, 이들 전달 방법은 본 명세서에 기재된 범주 이내에 있다. 조합물 형태의 치료제들은 하나 이상의 다른 추가의 요법 또는 치료제와 동시에, 그 전에, 또는 그에 후속하여 투여될 수 있다. 치료제 또는 치료 프로토콜은 임의의 순서대로 투여될 수 있다. 일반적으로, 각각의 작용제는 그러한 작용제에 대해 결정된 용량으로 및/또는 시간 일정에 투여될 것이다. 이 조합물에 이용되는 추가의 치료제는 함께 투여되거나 상이한 조성물로 개별적으로 투여될 수 있음이 또한 이해될 것이다. 일반적으로, 조합하여 이용되는 추가의 치료제는 이들이 개별적으로 이용될 때의 수준을 초과하지 않는 수준으로 이용될 것으로 예측된다. 일부 실시형태에서, 조합하여 이용되는 수준은 개별적으로 이용되는 수준보다 더 낮을 것이다.
본 발명의 Wnt 억제제와 조합하여 사용될 수 있는, 항-PD-1 항체 분자, 또는 이의 약제학적으로 허용가능한 염은 본 명세서에 개시된 임의의 항-PD-1 항체이다. 예를 들어, 항-PD-1 항체 분자는 본 명세서에 기재된 항체, 예를 들어 BAP049-클론-B 또는 BAP049-클론-E 중 어느 하나로부터 선택되거나; 또는 표 1에 기재된, 또는 표 1의 뉴클레오타이드 서열; 또는 전술한 서열 중 임의의 서열과 실질적으로 동일한 (예를 들어, 적어도 80%, 85%, 90%, 92%, 95%, 97%, 98%, 99% 또는 그 이상 동일한) 서열에 의해 코딩된 항체로부터의 적어도 하나의 항원-결합 영역, 예를 들어 가변 영역 또는 이의 항원-결합 단편을 포함할 수 있다. 항-PD1 항체 분자는 바람직하게는 니볼루맙(Opdivo), 펨브롤리주맙(Keytruda), 피딜리주맙, PDR-001, 또는 이의 약제학적 염으로부터 선택된다. 가장 바람직하게는, 항-PD-1 항체 분자는 PDR-001, 또는 이의 약제학적 염이다. PDR-001로도 지칭된 항-PD-1 항체 분자는 PCT/CN2016/099494에 기재되어 있다. 특히, PDR-001 억제제, 또는 이의 약제학적으로 허용가능한 염은 표 1에 기재된 바와 같은, BAP049-클론-E의 HCDR1, HCDR2 및 HCDR3 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 영역(VH) 및 BAP049-클론-E의 LCDR1, LCDR2 및 LCDR3 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 영역(VL)을 포함한다.
본 발명의 항-PD-1 항체 분자, 또는 이의 약제학적으로 허용가능한 염은 예를 들어, 본 명세서에 기재된 항체, 예를 들어 BAP049-클론-B 또는 BAP049-클론-E 중 어느 하나로부터 선택되거나; 표 1에 기재된, 또는 표 1의 뉴클레오타이드 서열; 또는 전술한 서열 중 임의의 서열과 실질적으로 동일한 (예를 들어, 적어도 80%, 85%, 90%, 92%, 95%, 97%, 98%, 99% 또는 그 이상 동일한) 서열에 의해 코딩된 항체로부터의 적어도 1개, 2개, 3개 또는 4개의 가변 영역을 포함한다.
본 발명의 항-PD-1 항체 분자, 또는 이의 약제학적으로 허용가능한 염은 예를 들어, 본 명세서에 기재된 항체, 예를 들어 BAP049-클론-B 또는 BAP049-클론-E 중 어느 하나로부터 선택되거나; 표 1에 기재된, 또는 표 1의 뉴클레오타이드 서열; 또는 전술한 서열 중 임의의 서열과 실질적으로 동일한 (예를 들어, 적어도 80%, 85%, 90%, 92%, 95%, 97%, 98%, 99% 또는 그 이상 동일한) 서열에 의해 코딩된 항체로부터의 적어도 1개 또는 2개의 중쇄 가변 영역을 포함한다.
본 발명의 항-PD-1 항체 분자, 또는 이의 약제학적으로 허용가능한 염은 예를 들어, 본 명세서에 기재된 항체, 예를 들어 BAP049-클론-B 또는 BAP049-클론-E 중 어느 하나로부터 선택되거나; 표 1에 기재된, 또는 표 1의 뉴클레오타이드 서열; 또는 전술한 서열 중 임의의 서열과 실질적으로 동일한 (예를 들어, 적어도 80%, 85%, 90%, 92%, 95%, 97%, 98%, 99% 또는 그 이상 동일한) 서열에 의해 코딩된 항체로부터의 적어도 1개 또는 2개의 경쇄 가변 영역을 포함한다.
본 발명의 항-PD-1 항체 분자, 또는 이의 약제학적으로 허용가능한 염은, 예를 들어, IgG4, 예를 들어, 인간 IgG4에 대한 중쇄 불변 영역을 포함한다. 인간 IgG4는 EU 넘버링에 따른 위치 228에 치환(예를 들어 Ser에서 Pro으로의 치환)을 포함한다. 항-PD-1 항체 분자는 IgG1, 예를 들어 인간 IgG1에 대한 중쇄 불변 영역을 포함한다. 인간 IgG1은 EU 넘버링에 따른 위치 297에 치환(예를 들어 Asn에서 Ala으로의 치환)을 포함한다. 인간 IgG1은 또한 EU 넘버링에 따른 위치 265에 치환, EU 넘버링에 따른 위치 329에 치환, 또는 둘 모두(예를 들어 위치 265에 Asp에서 Ala으로의 치환 및/또는 위치 329에 Pro에서 Ala으로의 치환)를 포함할 수 있다. 인간 IgG1은 EU 넘버링에 따른 위치 234에 치환, EU 넘버링에 따른 위치 235에 치환, 또는 둘 모두(예를 들어 위치 234에 Leu에서 Ala으로의 치환 및/또는 위치 235에 Leu에서 Ala으로의 치환)를 포함한다. 중쇄 불변 영역은 표 3에 기재된 아미노 서열, 또는 이와 실질적으로 동일한(예를 들어 적어도 80%, 85%, 90%, 92%, 95%, 97%, 98%, 99% 이상 동일한) 서열을 포함한다.
본 발명에 따른 항-PD-1 항체 분자, 또는 이의 약제학적으로 허용가능한 염은 예를 들어, 카파 경쇄 불변 영역, 예를 들어, 인간 카파 경쇄 불변 영역을 포함한다. 경쇄 불변 영역은 표 3에 기재된 아미노산 서열, 또는 이와 실질적으로 동일한(예를 들어 적어도 80%, 85%, 90%, 92%, 95%, 97%, 98%, 99% 이상 동일한) 서열을 포함한다.
본 발명에 따른 항-PD-1 항체 분자, 또는 이의 약제학적으로 허용가능한 염은 예를 들어, IgG4, 예를 들어 인간 IgG4에 대한 중쇄 불변 영역 및 카파 경쇄 불변 영역, 예를 들어 인간 카파 경쇄 불변 영역, 예를 들어 표 3에 기재된 아미노 서열 또는 이와 실질적으로 동일한(예를 들어 적어도 80%, 85%, 90%, 92%, 95%, 97%, 98%, 99% 이상 동일한) 서열을 포함하는 중쇄 및 경쇄 불변 영역을 포함한다. 인간 IgG4는 EU 넘버링에 따른 위치 228에 치환(예를 들어 Ser에서 Pro으로의 치환)을 포함한다. 항-PD-1 항체 분자는 IgG1, 예를 들어 인간 IgG1에 대한 중쇄 불변 영역, 및 카파 경쇄 불변 영역, 예를 들어 인간 카파 경쇄 불변 영역, 예를 들어 표 3에 기재된 아미노 서열 또는 이와 실질적으로 동일한(예를 들어 적어도 80%, 85%, 90%, 92%, 95%, 97%, 98%, 99% 이상 동일한) 서열을 포함하는 중쇄 및 경쇄 불변 영역을 포함한다. 인간 IgG1은 또한 EU 넘버링에 따른 위치 297에 치환(예를 들어 Asn에서 Ala으로의 치환)을 포함할 수 있다. 인간 IgG1은 EU 넘버링에 따른 위치 265에 치환, EU 넘버링에 따른 위치 329에 치환, 또는 둘 모두(예를 들어 위치 265에 Asp에서 Ala으로의 치환 및/또는 위치 329에 Pro에서 Ala으로의 치환)를 포함한다. 인간 IgG1은 EU 넘버링에 따른 위치 234에 치환, EU 넘버링에 따른 위치 235에 치환, 또는 둘 모두(예를 들어 위치 234에 Leu에서 Ala으로의 치환 및/또는 위치 235에 Leu에서 Ala으로의 치환)를 포함한다.
본 발명의 항-PD-1 항체 분자, 또는 이의 약제학적으로 허용가능한 염은 또한 예를 들어 BAP049-클론-B 또는 BAP049-클론-E의 아미노산 서열; 또는, 표 1에 기재된, 또는 표 1의 뉴클레오타이드 서열에 의해 코딩된 아미노산 서열; 또는 상기 서열 중 임의의 것과 실질적으로 동일한(예를 들어 적어도 80%, 85%, 90%, 92%, 95%, 97%, 98%, 99% 이상 동일한) 서열을 포함하는 중쇄 가변 도메인 및 불변 영역, 경쇄 가변 도메인 및 불변 영역, 또는 둘 모두를 포함한다. 항-PD-1 항체 분자는 선택적으로, 표 4에 나타낸 바와 같은 중쇄, 경쇄 또는 둘 모두로부터의 리더 서열; 또는 이와 실질적으로 동일한 서열을 포함한다.
본 발명에 따른 항-PD-1 항체 분자, 또는 이의 약제학적으로 허용가능한 염은 본 명세서에 기재된 항체, 예를 들어 BAP049-클론-B 또는 BAP049-클론-E 중 어느 하나로부터 선택된 항체; 또는, 표 1에 기재된 바와 같은, 또는 표 1의 뉴클레오타이드 서열; 또는 전술한 서열 중 임의의 서열과 실질적으로 동일한 (예를 들어, 적어도 80%, 85%, 90%, 92%, 95%, 97%, 98%, 99% 또는 그 이상 동일한) 서열에 의해 코딩된 항체의 중쇄 가변 영역으로부터의 적어도 1, 2 또는 3개의 상보성 결정 영역(CDR)을 포함한다.
본 발명에 따른 항-PD-1 항체 분자, 또는 이의 약제학적으로 허용가능한 염은, 예를 들어 표 1에 개시된, 또는 표 1에 나타낸 뉴클레오타이드 서열에 의해 코딩된 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 영역으로부터의 적어도 1, 2 또는 3개의 CDR(또는 총괄적으로 모든 CDR)을 포함한다. CDR 중 하나 이상(또는 총괄적으로 모든 CDR)은 표 1에 나타내거나, 표 1에 나타낸 뉴클레오타이드 서열에 의해 코딩된 아미노산 서열에 비하여, 1, 2, 3, 4, 5, 6개 이상의 변경, 예를 들어 아미노산 치환 또는 결실을 갖는다.
본 발명에 따른 항-PD-1 항체 분자, 또는 이의 약제학적으로 허용가능한 염은 예를 들어, 본 명세서에 기재된 항체, 예를 들어 BAP049-클론-B 또는 BAP049-클론-E 중 어느 하나로부터 선택된 항체; 또는 표 1에 기재된, 또는 표 1의 뉴클레오타이드 서열; 또는 전술한 서열 중 임의의 서열과 실질적으로 동일한 (예를 들어, 적어도 80%, 85%, 90%, 92%, 95%, 97%, 98%, 99% 또는 그 이상 동일한) 서열에 의해 코딩된 항체의 경쇄 가변 영역으로부터의 적어도 1, 2 또는 3개의 CDR을 포함한다.
항-PD-1 항체 분자, 또는 이의 약제학적으로 허용가능한 염은, 예를 들어 표 1에 개시된, 또는 표 1에 나타낸 뉴클레오타이드 서열에 의해 코딩된 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 영역으로부터의 적어도 1, 2 또는 3개의 CDR(또는 총괄적으로 모든 CDR)을 포함한다. CDR 중 하나 이상(또는 총괄적으로 모든 CDR)은 표 1에 나타내거나, 표 1에 나타낸 뉴클레오타이드 서열에 의해 코딩된 아미노산 서열에 비하여, 1, 2, 3, 4, 5, 6개 이상의 변경, 예를 들어 아미노산 치환 또는 결실을 갖는다.
항-PD-1 항체 분자, 또는 이의 약제학적으로 허용가능한 염은 예를 들어, 본 명세서에 기재된 항체, 예를 들어 BAP049-클론-B 또는 BAP049-클론-E 중 어느 하나로부터 선택된 항체; 또는 표 1에 기재된, 또는 표 1의 뉴클레오타이드 서열; 또는 전술한 서열 중 임의의 서열과 실질적으로 동일한 (예를 들어, 적어도 80%, 85%, 90%, 92%, 95%, 97%, 98%, 99% 또는 그 이상 동일한) 서열에 의해 코딩된 항체의 경쇄 가변 영역으로부터의 적어도 1, 2 또는 3개의 CDR을 포함한다.
항-PD-1 항체 분자, 또는 이의 약제학적으로 허용가능한 염은, 예를 들어 표 1에 개시된, 또는 표 1에 나타낸 뉴클레오타이드 서열에 의해 코딩된 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 영역으로부터의 적어도 1, 2 또는 3개의 CDR(또는 총괄적으로 모든 CDR)을 포함한다. CDR 중 하나 이상(또는 총괄적으로 모든 CDR)은 표 1에 개시된, 표 1에 나타낸 뉴클레오타이드 서열에 의해 코딩된 아미노산 서열에 비하여, 1, 2, 3, 4, 5, 6개 이상의 변경, 예를 들어 아미노산 치환 또는 결실을 갖는다. 특정 실시형태에서, 항-PD-1 항체 분자, 또는 이의 약제학적으로 허용가능한 염은 경쇄 CDR 내에 치환, 예를 들어 경쇄의 CDR1, CDR2 및/또는 CDR3 내에 하나 이상의 치환을 포함한다. 항-PD-1 항체 분자, 또는 이의 약제학적으로 허용가능한 염은, 경쇄 가변 영역의 위치 102에서 경쇄 CDR3 내의 치환, 예를 들어, 표 1에 따른 경쇄 가변 영역(예를 들어, 변형된 서열에 대한 SEQ ID NO: 54 또는 70)의 위치 102에서 시스테인의 티로신으로의 치환, 또는 시스테인의 세린 잔기로의 치환을 포함한다.
본 발명에 따른 항-PD-1 항체 분자, 또는 이의 약제학적으로 허용가능한 염은, 예를 들어 표 1에 개시된, 또는 표 1에 나타낸 뉴클레오타이드 서열에 의해 코딩된 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 및 경쇄 가변 영역으로부터의 적어도 1, 2, 3, 4, 5 또는 6개의 CDR(또는 총괄적으로 모든 CDR)을 포함한다. 일 실시형태에서, CDR 중 하나 이상(또는 총괄적으로 모든 CDR)은 표 1에 개시된, 또는 표 1에 나타낸 뉴클레오타이드 서열에 의해 코딩된 아미노산 서열에 비하여, 1, 2, 3, 4, 5, 6개 이상의 변경, 예를 들어 아미노산 치환 또는 결실을 갖는다.
본 발명의 항-PD-1 항체 분자, 또는 이의 약제학적으로 허용가능한 염은, 예를 들어, 본 명세서에 기재된 항체, 예를 들어, BAP049-클론-B 또는 BAP049-클론-E 중 어느 하나로부터 선택된 항체; 또는 표 1에 기재된, 또는 표 1의 뉴클레오타이드 서열에 의해 코딩된 항체로부터의 6개의 CDR 모두, 또는 밀접하게 관련된 CDR, 예를 들어, 동일하거나 적어도 하나의 아미노산 변경, 그러나 2, 3 또는 4개 이하의 변경(예를 들어, 치환, 결실, 또는 삽입, 예를 들어, 보존적 치환)을 갖는 CDR을 포함한다. 항-PD-1 항체 분자, 또는 이의 약제학적으로 허용가능한 염은 또한, 본 명세서에 기재된 임의의 CDR을 포함할 수 있다. 항-PD-1 항체 분자, 또는 이의 약제학적으로 허용가능한 염은 경쇄 CDR 내에 치환, 예를 들어 경쇄의 CDR1, CDR2 및/또는 CDR3 내에 하나 이상의 치환을 포함한다. 본 발명에 따른 항-PD-1 항체 분자, 또는 이의 약제학적으로 허용가능한 염은, 경쇄 가변 영역의 위치 102에 경쇄 CDR3 내의 치환, 예를 들어, 표 1에 따른 경쇄 가변 영역의 위치 102에 시스테인의 티로신으로의 치환, 또는 시스테인의 세린 잔기로의 치환을 포함한다.
본 발명의 항-PD-1 항체 분자 또는 이의 약제학적으로 허용가능한 염은 본 명세서에 기재된 항체, 예를 들어 BAP049-클론-B 또는 BAP049-클론-E로 중 어느 하나로부터 선택된 항체; 또는 표 1에 기재된, 또는 표 1의 뉴클레오타이드 서열; 또는 전술한 서열 중 임의의 서열과 실질적으로 동일한 (예를 들어, 적어도 80%, 85%, 90%, 92%, 95%, 97%, 98%, 99% 또는 그 이상 동일한) 서열; 또는 표 1에 제시된 Kabat 등에 따른 1, 2 또는 3개의 CDR에 대한 적어도 하나의 아미노산 변경, 그러나 2, 3 또는 4개 이하의 변경(예를 들어, 치환, 결실 또는 삽입, 예를 들어, 보존적 치환)을 갖는 서열에 의해 코딩된 항체의 중쇄 가변 영역으로부터의 Kabat 등에 따른 적어도 1, 2 또는 3개의 CDR(예를 들어, 표 1에 제시된 Kabat 정의에 따른 적어도 1, 2 또는 3개의 CDR)을 포함한다.
본 발명의 항-PD-1 항체 분자 또는 이의 약제학적으로 허용가능한 염은 예를 들어, 본 명세서에 기재된 항체, 예를 들어 BAP049-클론-B 또는 BAP049-클론-E로 중 어느 하나로부터 선택된 항체; 표 1에 기재된, 또는 표 1의 뉴클레오타이드 서열; 또는 전술한 서열 중 임의의 서열과 실질적으로 동일한 (예를 들어, 적어도 80%, 85%, 90%, 92%, 95%, 97%, 98%, 99% 또는 그 이상 동일한) 서열; 또는 표 1에 제시된 Kabat 등에 따른 1, 2 또는 3개의 CDR에 대한 적어도 하나의 아미노산 변경, 그러나 2, 3 또는 4개 이하의 변경(예를 들어, 치환, 결실 또는 삽입, 예를 들어, 보존적 치환)을 갖는 서열에 의해 코딩된 항체의 경쇄 가변 영역으로부터의 Kabat 등에 따른 적어도 1, 2 또는 3개의 CDR(예를 들어, 표 1에 제시된 Kabat 정의에 따른 적어도 1, 2 또는 3개의 CDR)을 포함한다.
본 발명에 따른 항-PD-1 항체 분자 또는 이의 약제학적으로 허용가능한 염은 예를 들어, 본 명세서에 기재된 항체, 예를 들어 BAP049-클론-B 또는 BAP049-클론-E로 중 어느 하나로부터 선택된 항체; 또는 표 1에 기재된, 또는 표 1의 뉴클레오타이드 서열; 또는 전술한 서열 중 임의의 서열과 실질적으로 동일한 (예를 들어, 적어도 80%, 85%, 90%, 92%, 95%, 97%, 98%, 99% 또는 그 이상 동일한) 서열; 또는 표 1에 제시된 Kabat 등에 따른 1, 2, 3, 4, 5 또는 6개의 CDR에 대한 적어도 하나의 아미노산 변경, 그러나 2, 3 또는 4개 이하의 변경(예를 들어, 치환, 결실 또는 삽입, 예를 들어, 보존적 치환)을 갖는 서열에 의해 코딩된 항체의 중쇄 및 경쇄 가변 영역으로부터의 Kabat 등에 따른 적어도 1, 2, 3, 4, 5 또는 6개의 CDR(예를 들어, 표 1에 제시된 Kabat 정의에 따른 적어도 1, 2, 3, 4, 5 또는 6개의 CDR)을 포함한다.
본 발명의 항-PD-1 항체 분자 또는 이의 약제학적으로 허용가능한 염은 본 명세서에 기재된 항체, 예를 들어 BAP049-클론-B 또는 BAP049-클론-E로 중 어느 하나로부터 선택된 항체; 또는 표 1에 기재된, 또는 표 1의 뉴클레오타이드 서열; 또는 전술한 서열 중 임의의 서열과 실질적으로 동일한 (예를 들어, 적어도 80%, 85%, 90%, 92%, 95%, 97%, 98%, 99% 또는 그 이상 동일한) 서열; 또는 표 1에 제시된 Kabat 등에 따른 6개의 CDR 모두에 대한 적어도 하나의 아미노산 변경, 그러나 2, 3 또는 4개 이하의 변경(예를 들어, 치환, 결실 또는 삽입, 예를 들어, 보존적 치환)을 갖는 서열에 의해 코딩된 항체의 중쇄 및 경쇄 가변 영역으로부터의 Kabat 등에 따른 6개의 CDR 모두(예를 들어, 표 1에 제시된 Kabat 정의에 따른 6개의 CDR 모두)를 포함한다. 본 발명에 따른 항-PD-1 항체 분자, 또는 이의 약제학적으로 허용가능한 염은 본 명세서에 기재된 임의의 CDR을 포함할 수 있다.
본 발명에 따른 항-PD-1 항체 분자, 또는 이의 약제학적으로 허용가능한 염은 예를 들어, 본 명세서에 기재된 항체, 예를 들어 BAP049-클론-B 또는 BAP049-클론-E 중 어느 하나로부터 선택된 항체; 또는 표 1에 기재된, 또는 표 1의 뉴클레오타이드 서열; 또는 적어도 PD-1과 접촉하는 초가변 루프로부터의 아미노산; 또는 표 1에 제시된 Chothia 등에 따른 1, 2 또는 3개의 초가변 루프에 대한 적어도 하나의 아미노산 변경, 그러나 2, 3 또는 4개 이하의 변경(예를 들어, 치환, 결실 또는 삽입, 예를 들어, 보존적 치환)을 갖는 서열에 의해 코딩된 항체의 중쇄 가변 영역으로부터의 적어도 1, 2 또는 3개의 Chothia 초가변 루프(예를 들어, 표 1에 제시된 Chothia 정의에 따른 적어도 1, 2 또는 3개의 초가변 루프)를 포함한다.
본 발명에 따른 항-PD-1 항체 분자, 또는 이의 약제학적으로 허용가능한 염은 예를 들어, 본 명세서에 기재된 항체, 예를 들어 BAP049-클론-B 또는 BAP049-클론-E 중 어느 하나로부터 선택된 항체; 또는 표 1에 기재된, 또는 표 1의 뉴클레오타이드 서열; 또는 적어도 PD-1과 접촉하는 초가변 루프로부터의 아미노산; 또는 표 1에 제시된 Chothia 등에 따른 1, 2 또는 3개의 초가변 루프에 대한 적어도 하나의 아미노산 변경, 그러나 2, 3 또는 4개 이하의 변경(예를 들어, 치환, 결실 또는 삽입, 예를 들어, 보존적 치환)을 갖는 서열에 의해 코딩된 항체의 경쇄 가변 영역의 적어도 1, 2 또는 3개의 Chothia 초가변 루프(예를 들어, 표 1에 제시된 Chothia 정의에 따른 적어도 1, 2 또는 3개의 초가변 루프)를 포함한다.
본 발명에 따른 항-PD-1 항체 분자, 또는 이의 약제학적으로 허용가능한 염은 예를 들어, 본 명세서에 기재된 항체, 예를 들어 BAP049-클론-B 또는 BAP049-클론-E 중 어느 하나로부터 선택된 항체; 또는 표 1에 기재된, 또는 표 1의 뉴클레오타이드 서열; 또는 적어도 PD-1과 접촉하는 초가변 루프로부터의 아미노산; 또는 표 1에 제시된 Chothia 등에 따른 1, 2, 3, 4, 5 또는 6개의 초가변 루프에 대한 적어도 하나의 아미노산 변경, 그러나 2, 3 또는 4개 이하의 변경(예를 들어, 치환, 결실 또는 삽입, 예를 들어, 보존적 치환)을 갖는 서열에 의해 코딩된 항체의 중쇄 및 경쇄 가변 영역으로부터의 적어도 1, 2, 3, 4, 5 또는 6개의 초가변 루프(예를 들어, 표 1에 제시된 Chothia 정의에 따른 적어도 1, 2, 3, 4, 5 또는 6개의 초가변 루프)를 포함한다.
본 발명에 따른 항-PD-1 항체 분자, 또는 이의 약제학적으로 허용가능한 염은 예를 들어, 본 명세서에 기재된 항체, 예를 들어 BAP049-클론-B 또는 BAP049-클론-E 중 어느 하나로부터 선택된 항체의 6개의 초가변 루프 모두(예를 들어, 표 1에 제시된 Chothia 정의에 따른 6개의 초가변 루프 모두), 또는 밀접하게 관련된 초가변 루프, 예를 들어 표 1에 제시된 Chothia 등에 따른 6개의 초가변 루프 모두에 대한 동일한 또는 적어도 1개의 아미노산 변경, 그러나 2, 3 또는 4개 이하의 변경(예를 들어, 치환, 결실 또는 삽입, 예를 들어, 보존적 치환)을 갖거나; 또는 적어도 1개의 아미노산 변경, 그러나 2, 3 또는 4개 이하의 변경(예를 들어, 치환, 결실 또는 삽입, 예를 들어, 보존적 치환)을 갖는 초가변 루프를 포함한다. 본 발명에 따른 항-PD-1 항체 분자, 또는 이의 약제학적으로 허용가능한 염은 본 명세서에 기재된 임의의 초가변 루프를 포함할 수 있다.
본 발명에 따른 항-PD-1 항체 분자, 또는 이의 약제학적으로 허용가능한 염은 예를 들어, 본 명세서에 기재된 항체, 예를 들어, BAP049-클론-B 또는 BAP049-클론-E 중 어느 하나로부터 선택된 항체의 상응하는 초가변 루프와 동일한 정준 구조, 예를 들어, 본 명세서에 기재된 항체의 중쇄 및/또는 경쇄 가변 도메인의 적어도 루프 1 및/또는 루프 2와 동일한 정준 구조를 갖는 적어도 1, 2 또는 3개의 초가변 루프를 포함한다. (초가변 루프 정준 구조의 설명에 대해서는, 예를 들어, Chothia 등 J. Mol. Biol. 1992, 227, 799; Tomlinson 등 J. Mol. Biol. 1992, 227:776-798을 참조한다). 이들 구조는 이들 참고문헌에 기재된 표의 검토에 의해 결정될 수 있다.
본 발명에 따른 항-PD-1 항체 분자, 또는 이의 약제학적으로 허용가능한 염은 또한 표 1에 기재된 바와 같이, 예를 들어 Kabat 등 및 Chothia 등에 따라 정의된 초가변 루프 또는 CDR의 조합을 포함할 수 있다.
본 발명에 따른 항-PD-1 항체 분자, 또는 이의 약제학적으로 허용가능한 염은 예를 들어, Kabat 및 Chothia 정의에 따른, 본 명세서에 기재된 항체, 예를 들어, BAP049-클론-B 또는 BAP049-클론-E 중 어느 하나로부터 선택된 항체; 또는 표 1의 뉴클레오타이드 서열; 또는 전술한 서열 중 임의의 서열과 실질적으로 동일한(예를 들어, 적어도 80%, 85%, 90%, 92%, 95%, 97%, 98%, 99% 또는 그 이상 동일한) 서열; 또는 표 1에 개시된 Kabat 및/또는 Chothia에 따른 1, 2 또는 3개의 CDR 또는 초가변 루프에 대한 적어도 하나의 아미노산 변경, 그러나 2, 3, 또는 4개 이하의 변경(예를 들어, 치환, 결실, 또는 삽입, 예를 들어, 보존적 치환)을 갖는 서열에 의해 코딩된 항체의 중쇄 가변 영역으로부터의 적어도 1, 2 또는 3개의 CDR 또는 초가변 루프(예를 들어, 표 1에 제시된 Kabat 및 Chothia 정의에 따른 적어도 1, 2 또는 3개의 CDR 또는 초가변 루프)를 포함한다.
예를 들어, 본 발명에 따른 항-PD-1 항체 분자, 또는 이의 약제학적으로 허용가능한 염은 예를 들어 표 1에 제시된 바와 같이, Kabat 등에 따른 VH CDR1 또는 Chothia 등에 따른 VH 초가변 루프 1, 또는 이들의 조합물을 포함할 수 있다. VH CDR1의 Kabat 및 Chothia CDR의 조합물은 아미노산 서열 GYTFTTYWMH(SEQ ID NO: 224) 또는 이와 실질적으로 동일한(예를 들어 적어도 하나의 아미노산 변경을 갖지만, 2, 3 또는 4개 이하의 변경(예를 들어 치환, 결실 또는 삽입, 예를 들어 보존적 치환)을 갖는) 아미노산 서열을 포함한다. 항-PD-1 항체 분자는 예를 들어 표 1에 나타낸 바와 같은, 예를 들어 Kabat 등에 따른 VH CDR 2~3 및 Kabat 등에 따른 VL CDR 1~3를 추가로 포함할 수 있다. 따라서, 프레임워크 영역(FW)은 Kabat 등에 따라 정의되는 CDR 및 Chothia 등에 따라 정의되는 초가변 루프의 조합물에 기초하여 정의된다. 예를 들어, 항-PD-1 항체 분자는 예를 들어 표 1에 제시된 바와 같이, Chothia 등에 따른 VH 초가변 루프 1에 기초하여 정의된 VH FW1 및 Kabat 등에 따른 VH CDR 1~2에 기초하여 정의된 VH FW2를 포함할 수 있다. 항-PD-1 항체 분자는 예를 들어 Kabat 등에 따른 VH CDR 2~3에 기초하여 정의되는 VH FW 3~4 및 Kabat 등에 따른 VL CDR 1~3에 기초하여 정의되는 VL FW 1~4를 추가로 포함할 수 있다.
본 발명에 따른 항-PD-1 항체 분자, 또는 이의 약제학적으로 허용가능한 염은 Kabat 및 Chothia 정의에 따라, 본 명세서에 기재된 항체, 예를 들어, BAP049-클론-B 또는 BAP049-클론-E 중 어느 하나로부터 선택된 항체의 경쇄 가변 영역으로부터의 적어도 1, 2 또는 3개의 CDR(예를 들어, 표 1에 제시된 Kabat 및 Chothia 정의에 따른 적어도 1, 2 또는 3개의 CDR)을 포함한다.
본 발명에 따른 항-PD-1 항체 분자, 또는 이의 약제학적으로 허용가능한 염은 하기를 포함한다:
(a) SEQ ID NO: 4의 VHCDR1 아미노산 서열, SEQ ID NO: 5의 VHCDR2 아미노산 서열, 및 SEQ ID NO: 3의 VHCDR3 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 영역(VH); 및 SEQ ID NO: 13의 VLCDR1 아미노산 서열, SEQ ID NO: 14의 VLCDR2 아미노산 서열, 및 SEQ ID NO: 33의 VLCDR3 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 영역(VL);
(b) SEQ ID NO: 1로부터 선택되는 VHCDR1 아미노산 서열; SEQ ID NO: 2의 VHCDR2 아미노산 서열; 및 SEQ ID NO: 3의 VHCDR3 아미노산 서열을 포함하는 VH; 및 SEQ ID NO: 10의 VLCDR1 아미노산 서열, SEQ ID NO: 11의 VLCDR2 아미노산 서열 및 SEQ ID NO: 32의 VLCDR3 아미노산 서열을 포함하는 VL;
(c) SEQ ID NO: 224의 VHCDR1 아미노산 서열, SEQ ID NO: 5의 VHCDR2 아미노산 서열, 및 SEQ ID NO: 3의 VHCDR3 아미노산 서열을 포함하는 VH; 및 SEQ ID NO: 13의 VLCDR1 아미노산 서열, SEQ ID NO: 14의 VLCDR2 아미노산 서열 및 SEQ ID NO: 33의 VLCDR3 아미노산 서열을 포함하는 VL; 또는
(d) SEQ ID NO: 224의 VHCDR1 아미노산 서열; SEQ ID NO: 2의 VHCDR2 아미노산 서열; 및 SEQ ID NO: 3의 VHCDR3 아미노산 서열을 포함하는 VH; 및 SEQ ID NO: 10의 VLCDR1 아미노산 서열, SEQ ID NO: 11의 VLCDR2 아미노산 서열 및 SEQ ID NO: 32의 VLCDR3 아미노산 서열을 포함하는 VL.
본 발명에 따른 항-PD-1 항체 분자, 또는 이의 약제학적으로 허용가능한 염은 SEQ ID NO: 1, SEQ ID NO: 4 또는 SEQ ID NO: 224로부터 선택된 VHCDR1 아미노산 서열; SEQ ID NO: 2 또는 SEQ ID NO: 5의 VHCDR2 아미노산 서열; 및 SEQ ID NO: 3의 VHCDR3 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 영역(VH); 및 SEQ ID NO: 10 또는 SEQ ID NO: 13의 VLCDR1 아미노산 서열, SEQ ID NO: 11 또는 SEQ ID NO: 14의 VLCDR2 아미노산 서열, 및 SEQ ID NO: 32 또는 SEQ ID NO: 33의 VLCDR3 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 영역(VL)을 포함한다.
본 발명에 따른 항-PD-1 항체 분자, 또는 이의 약제학적으로 허용가능한 염은 예를 들어, SEQ ID NO: 38의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 도메인 및 SEQ ID NO: 70의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 도메인을 포함할 수 있다.
본 발명에 따른 항-PD-1 항체 분자, 또는 이의 약제학적으로 허용가능한 염은 예를 들어, SEQ ID NO: 91의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 및 SEQ ID NO: 72의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄를 포함할 수 있다.
본 발명에 따른 항-PD-1 항체 분자, 또는 이의 약제학적으로 허용가능한 염은 표 1에 기재된 바와 같은 BAP049-클론-B 또는 BAP049-클론-E의 HCDR1, HCDR2 및 HCDR3 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 영역(VH) 및 표 1에 기재된 바와 같은 BAP049-클론-B 또는 BAP049-클론-E의 LCDR1, LCDR2 및 LCDR3 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 영역(VL)을 포함한다.
본 발명에 따른 항-PD-1 항체 분자, 또는 이의 약제학적으로 허용가능한 염은 표 1에 기재된 바와 같은 BAP049-클론-E의 HCDR1, HCDR2 및 HCDR3 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 영역(VH) 및 표 1에 기재된 바와 같은 BAP049-클론-E의 LCDR1, LCDR2 및 LCDR3 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 영역(VL)을 포함한다.
본 발명의 항-PD-1 항체 분자, 또는 항-PD-1 항체 분자는 그의 기능에 실질적인 영향을 미치지 않는 추가의 보존적 또는 비-필수적 아미노산 치환을 가질 수 있는 것으로 이해된다.
용어 "항체 분자"는 적어도 하나의 면역글로불린 가변 도메인 서열을 포함하는 단백질, 예를 들어 면역글로불린 사슬 또는 이의 단편을 지칭한다. 용어 "항체 분자"는, 예를 들어 단일클론 항체(면역글로불린 Fc 영역을 갖는 전장 항체를 포함함)를 포함한다. 항체 분자는 전장 항체, 또는 전장 면역글로불린 사슬, 또는 전장 항체, 또는 전장 면역글로불린 사슬의 항원 결합 또는 기능성 단편을 포함한다. 항체 분자는 또한 다중특이적 항체 분자일 수 있고, 예를 들어 이는 복수개의 면역글로불린 가변 도메인 서열을 포함하며, 여기서 복수개 중 제1 면역글로불린 가변 도메인 서열은 제1 에피토프에 대해 결합 특이성을 갖고, 복수개 중 제2 면역글로불린 가변 도메인 서열은 제2 에피토프에 대해 결합 특이성을 갖는다.
용어 "약제학적으로 허용가능한 염"은 예를 들어, 바람직하게 유기 또는 무기 산과 함께 산 부가염으로서 형성될 수 있다. 적합한 무기 산으로는 예를 들어 할로겐산, 예컨대 염산이 있다. 적합한 유기 산으로는 예를 들어, 카르복실산 또는 술폰산, 예컨대 푸마르산 또는 메탄술폰산이 있다. 단리 또는 정제 목적을 위해, 약제학적으로 허용되지 않는 염, 예를 들어 피크레이트 또는 과염소산 염을 사용할 수도 있다. 치료용으로, 약제학적으로 허용가능한 염 또는 유리 화합물 만이 사용되며(따라서, 약제학적 제제의 형태로 적용가능하며), 따라서 이들은 바람직하다. 본 명세서에서 유리 화합물의 어떠한 언급도, 적절하고 편리한 경우 상응하는 염을 또한 지칭하는 것으로 이해된다. 본 명세서에 기재된, 억제제의 염은 바람직하게 약제학적으로 허용가능한 염이며; 약제학적으로 허용가능한 염을 형성하는 적합한 카운터-이온은 당 분야에 공지되어 있다.
용어 "약제학적으로 허용가능한"은 합리적인 이익/위험 비율에 비례하는, 과도한 독성, 자극, 알레르기 반응, 또는 다른 문제 또는 합병증없이 인간 및 동물의 조직과 접촉하여 사용하기에 적합한 화합물, 물질, 조성물 및/또는 투여 형태를 지칭한다.
용어 "억제" 또는 "억제제"는 주어진 분자, 예를 들어 면역 체크포인트 억제제, 예컨대 항-PD-1 항체 분자의 특정 파라미터, 예를 들어 활성의 감소를 포함한다. 예를 들어, 적어도 5%, 10%, 20%, 30%, 40% 이상의 활성, 예를 들어 PD-1 또는 PD-L1 활성의 억제가 이 용어에 의해 포함된다. 따라서, 억제는 100%일 필요가 없다.
용어 "암"은 비정상 세포 증식의 급속하고 제어되지 않은 성장을 특징으로 하는 질병을 지칭한다. 암 세포는 국부로 또는 혈류 및 림프계를 통해 신체의 다른 부분으로 확산될 수 있다. 다양한 암의 예로는 백혈병, 전립선암, 신장암, 간암, 뇌암, 림프종, 난소암, 폐암, 자궁경부암, 피부암, 유방암, 두경부 편평세포암종(HNSCC), 췌장암, 위장암, 결장직장암, 삼중-음성 유방암(TNBC), 폐의 편평세포암, 식도의 편평세포암, 자궁경부의 편평세포암 또는 흑색종이 있지만, 이에 한정되는 것은 아니다. 본 발명에 따르면, 상기 조합물로 특히 잘 치료될 수 있는 질환 상태는 삼중-음성 유방암(TNBC), 췌장암, 폐의 편평세포암, 식도의 편평세포암, 자궁경부의 편평세포암, 또는 흑색종이다.
용어 "종양" 및 "암"은 본원에서 상호호환가능하게 사용되며, 예를 들어 두 용어는 모두 고형 및 액상, 예를 들어 미만성 또는 순환성 종양을 포괄한다. 일 실시형태에서, 용어 "암" 또는 "종양"은 악성 암 및 종양, 뿐만 아니라 진행성 암 및 종양을 포함한다.
용어 "치료"는, 예를 들어, 질병을 치유하거나 질병 회귀 또는 질병의 진행 지연에 영향을 줄 목적으로 그러한 치료가 필요한 온혈 동물, 특히 인간에게 본 명세서에 기재된 바와 같은 Wnt 억제제, 또는 이의 약제학적으로 허용가능한 염, 및 항-PD-1 항체 분자, 또는 이의 약제학적으로 허용가능한 염의 조합물을 치료적 투여하는 것을 포함한다. 임의의 질병 또는 장애와 관련하여 "치료하다", "치료하는" 또는 "치료"라는 용어는 질병 또는 장애를 개선하는(예를 들어, 질병 또는 이의 임상 증상들 중 적어도 하나의 발생을 감속 또는 정지 또는 감소시키는) 것, 질병 또는 장애의 발병 또는 진전 또는 진행을 예방 또는 지연시키는 것을 지칭한다.
Wnt 억제제, (i) 2-(2',3-디메틸-[2,4'-비피리딘]-5-일)-N-(5-(피라진-2-일)피리딘-2-일)아세트아미드, 또는 이의 약제학적으로 허용가능한 염은 각 주기의 1 내지 15일 또는 각 주기의 1 내지 8일에 매일 투여될 수 있다. Wnt 억제제, (i) 2-(2',3-디메틸-[2,4'-비피리딘]-5-일)-N-(5-(피라진-2-일)피리딘-2-일)아세트아미드는 최대 4주기 투여될 수 있다. Wnt 억제제 (i)는 4주기 동안 투여될 수 있다. 첫 1주기에만 투여될 수도 있다. 바람직하게는, Wnt 억제제 (i)는 최대 4주기 동안 각 주기의 1 내지 15일동안 투여된다. 가장 바람직하게는, Wnt 억제제 (i)는 최대 4주기 동안 각 주기의 1 내지 8일에 매일 투여된다. 본 발명은 또한, (i) 2-(2',3-디메틸-[2,4'-비피리딘]-5-일)-N-(5-(피라진-2-일)피리딘-2-일)아세트아미드, 또는 이의 약제학적으로 허용가능한 염이 첫 1주기 동안에만 투여되도록 한다. 본 발명은 또한, (i) 2-(2',3-디메틸-[2,4'-비피리딘]-5-일)-N-(5-(피라진-2-일)피리딘-2-일)아세트아미드, 또는 이의 약제학적으로 허용가능한 염이 4주기 동안에만 투여되도록 한다. 본 명세서에 개시된 바와 같은 Wnt 억제제는 2회 연속 투여사이에 12시간 간격으로 1일 1회 또는 1일 2회 투여될 수 있다. 조합 파트너 (ii) 항-PD-1 항체 분자는 임상적으로 의미가 있는 한, 더 많은 주기 동안 계속 투여될 수 있다. 일 실시형태에서, (ii) 항-PD-1 항체 분자는 최대 4주기 동안 또는 4주기 동안 투여된다.
본 명세서에 개시된 바와 같은 조합 파트너는 주기 중 동일한 날 또는 상이한 날에 투여된다. 용어 "주기"는 정기적인 일정에 따라 반복되는, 일 또는 개월로 표시된 특정 기간을 지칭한다. 본 명세서에 개시된 주기는 보다 바람직하게는, 일 단위로 표시된다. 예를 들어, 주기는 28일, 30일, 60일, 90일일 수 있지만, 이에 한정되지는 않는다. 가장 바람직하게는, 본 명세서에 지칭된 바와 같은 "주기"는 28일 길이이다. 상기 주기는 여러 번(예를 들어 2회, 3회, 4회, 5회 등...) 반복될 수 있으며, 각 주기의 길이는 동일하며, 임상적으로 의미가 있는 한, 즉 종양 성장이 적어도 감소되거나, 통제되거나, 또는 종양이 수축하거나, 부작용이 용인될 수 있는 한, 반복될 수 있다. 조합 파트너 중 하나, 예를 들어 Wnt 억제제가 최대 4주기 동안 투여되는 반면, 다른 조합 파트너는 더 많은 주기 동안 계속 투여될 수 있다. 본 발명의 (i)를 투여하는 것에 의한 치료는 가장 바람직하게는 최대 4주기 동안, 특히 4주기 동안 반복된다. Wnt 억제제가 최대 4주기 동안 투여될 수 있다고 하더라도, 일정 시간 후, 예를 들어, 화합물이 신체에서 완전히 제거된 경우 및 최대 4주기 동안 투여된 Wnt 억제제가 단독으로 또는 항-PD-1 항체 분자에 의해 야기되는 효과의 향상을 통해 어떠한 긍정적인 효과를 가져오지 못하게 될 때, Wnt 억제제는 다시 최대 4주기의 또 다른 행에 대해 투여될 수 있다. (단지 1주기 또는 단지 4주기를 포함하는) 최대 4주기의 첫 번째 행과 최대 4주기의 제2 또는 그 이후 행 사이의 기간은 Wnt 경로의 억제에 의해 야기된 효과, 예컨대 뼈 밀도의 감소가 누적되는 것을 방지하기에 충분히 길어야 한다.
Wnt 억제제 (i) 2-(2',3-디메틸-[2,4'-비피리딘]-5-일)-N-(5-(피라진-2-일)피리딘-2-일)아세트아미드, 또는 이의 약제학적으로 허용가능한 염은 2.5 mg/일, 5 mg/일, 7.5 mg/일, 10 mg/일, 20 mg/일, 40 mg/일, 80 mg/일, 120 mg/일, 또는 180 mg/일의 1일 투여용량으로 경구로 또는 정맥내로, 가장 바람직하게는 경구로 투여될 수 있다. 바람직하게는, 1일 투여용량은 2.5 mg/일, 5 mg/일, 또는 10 mg/일이다. 가장 바람직하게는, 1일 투여용량은 10 mg/일이다.
본 발명에 따르면, (i) 2-(2',3-디메틸-[2,4'-비피리딘]-5-일)-N-(5-(피라진-2-일)피리딘-2-일)아세트아미드, 또는 이의 약제학적으로 허용가능한 염은, 경구로, 예를 들어, 불활성 희석제 또는 담체와 함께 약제학적 조성물로 투여될 수 있다.
본 발명에 따르면, 니볼루맙(Opdivo), 펨브롤리주맙(Keytruda), 피딜리주맙, PDR-001, 또는 이의 약제학적 염으로부터 선택되는 항-PD-1 항체 분자 (ii), 또는 이의 약제학적으로 허용가능한 염은 암 치료에 사용될 수 있으며, 주기로 2주마다 또는 4주마다 투여된다. 가장 바람직하게는, 항-PD-1 항체 분자 PDR-001 (ii), 또는 이의 약제학적으로 허용가능한 염은 본 명세서에 기재된 바와 같이, 암 치료에 사용된다. 가장 바람직하게는 PDR-001 (ii)는 4주마다 투여된다. PDR-001은 300~400 mg/일의 투여용량으로 주사에 의해 (예를 들어, 피하로 또는 정맥내로) 투여된다. 바람직하게는, 항-PD-1 항체 분자 PDR-001, 또는 이의 약제학적으로 허용가능한 염은 300 내지 400 mg/일의 단일 투여용량으로 정맥내로 투여된다. 가장 바람직하게는, 항-PD-1 항체 분자 PDR-001 (ii), 또는 이의 약제학적으로 허용가능한 염은 400 mg/일의 단일 투여용량으로 투여된다. 가장 바람직하게는, 항-PD-1 항체 분자 PDR-001, 또는 이의 약제학적으로 허용가능한 염은 4주마다 400 mg/일의 투여용량으로 투여된다. 투여용량은 단일 볼러스로 또는 여러 개의 분할 투여용량으로 투여될 수 있다.
구체적으로, 투여 일정은 (첫 1주기 단독 또는 4주기 단독, 또는 최대 4주기 동안 매 주기의 1~15일 또는 1~8일에) 화학식 I의 Wnt 억제제 2-(2',3-디메틸-[2,4'-비피리딘]-5-일)-N-(5-(피라진-2-일)피리딘-2-일)아세트아미드, 또는 이의 약제학적으로 허용가능한 염의 2.5 mg/일, 5 mg/일 또는 10 mg/일로부터, 및 2주 또는 4주마다 항-PD-1 항체 분자 (ii), 또는 이의 약제학적으로 허용가능한 염의 300 mg/일부터 400 mg/일까지, 다양할 수 있다. 예를 들어, 본 발명에 따라, (i) 2-(2',3-디메틸-[2,4'-비피리딘]-5-일)-N-(5-(피라진-2-일)피리딘-2-일)아세트아미드, 또는 이의 약제학적으로 허용가능한 염의 2.5 mg/일이 1~8일에 또는 1~15일에 투여되며, 항-PD-1 항체 분자 (ii), 또는 이의 약제학적으로 허용가능한 염은 4주기 동안 또는 최대 4주기 동안 4주마다 1회 400 mg/일의 투여용량으로 투여된다. 본 발명에 따른 또 다른 예는, (i) 2-(2',3-디메틸-[2,4'-비피리딘]-5-일)-N-(5-(피라진-2-일)피리딘-2-일)아세트아미드, 또는 이의 약제학적으로 허용가능한 염의 5 mg/일을 1~8일에 또는 1~15일에 투여하는 것, 및 항-PD-1 항체 분자 (ii), 또는 이의 약제학적으로 허용가능한 염을 4주기 동안 또는 최대 4주기 동안 4주마다 1회 400 mg/일의 투여용량으로 투여하는 것으로 구성된다. 본 발명에 따른 또 다른 예에서는, (i) 2-(2',3-디메틸-[2,4'-비피리딘]-5-일)-N-(5-(피라진-2-일)피리딘-2-일)아세트아미드, 또는 이의 약제학적으로 허용가능한 염의 10 mg/일을 1~8일에 또는 1~15일에 투여하며, 항-PD-1 항체 분자 (ii), 또는 이의 약제학적으로 허용가능한 염이 4주기 동안 또는 최대 4주기 동안 4주마다 1회 400 mg/일의 투여용량으로 투여된다.
본 발명에 따른 또 다른 예에서는, (i) 2-(2',3-디메틸-[2,4'-비피리딘]-5-일)-N-(5-(피라진-2-일)피리딘-2-일)아세트아미드, 또는 이의 약제학적으로 허용가능한 염의 2.5 mg/일을 주기 1 동안에만 투여하고, 항-PD-1 항체 분자 (ii), 또는 이의 약제학적으로 허용가능한 염을 4주마다 400 mg/일의 투여용량으로 투여한다. 본 발명에 따른 또 다른 예에서는, (i) 2-(2',3-디메틸-[2,4'-비피리딘]-5-일)-N-(5-(피라진-2-일)피리딘-2-일)아세트아미드, 또는 이의 약제학적으로 허용가능한 염의 5 mg/일을 주기 1 동안에만 투여하고, 항-PD-1 항체 분자 (ii), 또는 이의 약제학적으로 허용가능한 염을 4주마다 400 mg/일의 투여용량으로 투여한다. 본 발명에 따른 또 다른 예에서는, (i) 2-(2',3-디메틸-[2,4'-비피리딘]-5-일)-N-(5-(피라진-2-일)피리딘-2-일)아세트아미드, 또는 이의 약제학적으로 허용가능한 염의 10 mg/일을 주기 1 동안에만 투여하고, 항-PD-1 항체 분자 (ii), 또는 이의 약제학적으로 허용가능한 염을 4주마다 400 mg/일의 투여용량으로 투여한다.
항체 분자는 많은 치료적 응용에 있어서, 바람직한 투여 경로/방식이 정맥내 주사 또는 주입일 수 있지만, 해당 분야에 알려져 있는 다양한 방법에 의해 투여될 수 있다. 예를 들어, 항체 분자는 20 mg/분 초과, 예를 들어, 20~40 mg/분, 및 통상적으로 40 mg/분 이상의 속도로 정맥내 주입에 의해 투여되어, 약 300 내지 400 mg/일의 투여용량에 도달할 수 있다. 정맥내 주사 또는 주입을 위해, 치료적 조성물은 통상적으로 제조 및 저장의 조건 하에서 무균 상태이고 안정해야 한다. 본 조성물은 용액, 마이크로에멀젼, 분산액, 리포좀, 또는 높은 항체 농도에 적합한 다른 질서있는 구조로서 제형화될 수 있다. 필요한 양의 활성 화합물(즉, 항체 또는 항체의 일부분)을, 필요에 따라 성분들 중 하나 또는 이들의 조합물과 함께, 적절한 용매 중에 혼입한 후, 여과 멸균함으로써 멸균 주사용 용액이 제조될 수 있다. 일반적으로, 분산액은 기본 분산 매질 및 필요한 다른 성분들을 함유하는 멸균 비히클 내로 활성 화합물을 혼입시킴으로써 제조된다. 멸균 주사용 용액의 제조를 위한 멸균 분말의 경우에, 바람직한 제조 방법은 미리 멸균-여과된 용액으로부터 활성 성분에 더하여 임의의 추가의 원하는 성분의 분말을 산출하는 진공 건조 및 냉동-건조이다. 예를 들어, 코팅, 예컨대 레시틴의 사용에 의해, 분산액의 경우에는 필요한 입자 크기의 유지에 의해, 그리고 계면활성제의 사용에 의해 용액의 적절한 유동성이 유지될 수 있다. 흡수를 지연시키는 작용제, 예를 들어 모노스테아르산염 및 젤라틴을 주사용 조성물 중에 포함시킴으로써, 주사용 조성물의 연장된 흡수를 야기할 수 있다.
투여 경로 및/또는 방식이 원하는 결과에 따라 달라질 것이라고 이해될 것이다. 예를 들어, 활성 화합물은 화합물을 급속 방출로부터 보호할 담체를 사용하여, 예컨대 이식물, 경피 패치 및 마이크로캡슐화 전달 시스템을 포함한 제어 방출 제형으로 제조될 수 있다. 생분해성, 생체적합성 중합체, 예컨대 에틸렌 비닐 아세테이트, 폴리무수물, 폴리글리콜산, 콜라겐, 폴리오르토에스테르, 및 폴리락트산이 사용될 수 있다. 상기 제형의 제조를 위한 많은 방법은 특허를 받거나 당업자에게 일반적으로 공지되어 있다(예를 들어, Sustained and Controlled Release Drug Delivery Systems, J. R. Robinson, ed., Marcel Dekker, Inc., New York, 1978).
마찬가지로, (i) 2-(2',3-디메틸-[2,4'-비피리딘]-5-일)-N-(5-(피라진-2-일)피리딘-2-일)아세트아미드, 또는 이의 약제학적으로 허용가능한 염은 항-PD-1 항체 분자 (ii), 또는 약제학적으로 허용가능한 염과 조합하여, 암 치료를 위한 약제의 제조를 위해 사용될 수 있다.
같은 이유로, 본 발명은 또한, 유효량의 조합 파트너(예를 들어 (i) 2-(2',3-디메틸-[2,4'-비피리딘]-5-일)-N-(5-(피라진-2-일)피리딘-2-일)아세트아미드, 또는 이의 약제학적으로 허용가능한 염 및 항-PD-1 항체 분자 (ii), 또는 이의 약제학적으로 허용가능한 염)를 이를 필요로 하는 환자에게 투여하는 단계를 포함하는, 암 치료 방법을 제공한다.
용어 "환자" 또는 "대상체"는 온혈 동물을 지칭한다. 가장 바람직한 실시형태에서, 대상체 또는 환자는 인간이다. 이는 본 명세서에 개시된 바와 같이, 진단되어, 질병 또는 장애 치료를 필요로 하는 인간일 수 있다.
암 치료를 위한 약제의 제조 또는 이를 필요로 하는 환자의 암을 치료하는 방법에 사용되는 경우, (i) 및 (ii)는 상기 설명한 바와 같은 투여용량 및 투여 일정으로 사용될 수 있다.
가장 바람직하게는 상기 조합물은 Wnt 억제제 (i) 2-(2',3-디메틸-[2,4'-비피리딘]-5-일)-N-(5-(피라진-2-일)피리딘-2-일)아세트아미드, 또는 이의 약제학적으로 허용가능한 염, 및 항-PD-1 항체 분자 PDR-001(ii), 또는 이의 약제학적으로 허용가능한 염을 포함한다. 두 조합물 파트너 (i) 및 (ii)는 본 명세서에 기재된 바와 같은 투여 일정에 따라 투여될 수 있다. 예를 들어 (i) 2-(2',3-디메틸-[2,4'-비피리딘]-5-일)-N-(5-(피라진-2-일)피리딘-2-일)아세트아미드, 또는 이의 약제학적으로 허용가능한 염은 최대 4주기 동안, 예를 들어 4주기 동안 또는 첫 1주기 동안에만 각 주기의 1 내지 15일 또는 1 내지 8일에 매일 투여될 수 있다. PDR-001 (ii), 또는 이의 약제학적으로 허용가능한 염은 주기당 적어도 1회 투여된다. 예를 들어, (i) 2-(2',3-디메틸-[2,4'-비피리딘]-5-일)-N-(5-(피라진-2-일)피리딘-2-일)아세트아미드, 또는 이의 약제학적으로 허용가능한 염은 2.5 mg/일, 5 mg/일, 7.5 mg/일, 10 mg/일, 20 mg/일, 40 mg/일, 80 mg/일, 120 mg/일, 180 mg/일의 투여용량으로 상기 특정 조합으로 투여된다. 바람직하게는, 상기 투여용량은 2.5 mg/일, 5 mg/일, 또는 10 mg/일이다. 가장 바람직하게는, 상기 투여용량은 10 mg/일이다. PDR-001 억제제 (ii), 또는 이의 약제학적으로 허용가능한 염은 300~400 mg/일의 단일 투여용량, 가장 바람직하게는 400 mg/일의 투여용량으로 투여된다.
같은 이유로, 본 발명은 또한, 유효량의 조합 파트너(예를 들어 (i) 2-(2',3-디메틸-[2,4'-비피리딘]-5-일)-N-(5-(피라진-2-일)피리딘-2-일)아세트아미드, 또는 이의 약제학적으로 허용가능한 염 및 항-PD-1 항체 분자 (ii), 또는 이의 약제학적으로 허용가능한 염)를 이를 필요로 하는 환자에게 투여하는 단계를 포함하는, 암 치료 방법을 제공한다.
본 명세서에 기재된 바와 같이, 조합 파트너 (i) 및 (ii)는 감소된 뼈 밀도와 같은 Wnt 신호전달 경로 억제에 의해 야기되는 부작용을 감소시키면서, 상승작용적으로 활성일 수 있다.
본 발명의 조합 파트너의 "유효량" 또는 "치료적 유효량"이란 용어는 원하는 치료 결과를 달성하기 위해 필요한 투여용량 및 기간 동안 효과적인 양을 지칭한다. 조합 파트너의 치료적 유효량은 개체의 질환 상태, 연령, 성별, 및 체중과 같은 인자에 따라 달라질 수 있다. 또한, 치료적 유효량은 본 명세서에 기재된 바와 같은 조합물의 임의의 독성 효과 또는 유해 효과보다 치료적으로 유익한 효과가 더 큰 것이다. "치료적으로 유효한 투여용량"은 바람직하게는 측정가능한 파라미터, 예를 들어 종양 성장 속도를 치료받지 않은 대상체와 대비하여 적어도 약 20%만큼, 더 바람직하게는 적어도 약 40%만큼, 더욱 더 바람직하게는 적어도 약 60%만큼, 휠씬 더 바람직하게는 적어도 약 80%만큼 억제한다.
실시예
실시예 1:
NanoString은 최대 약 1000개의 유전자의 선택된 패널에 대한 유전자 발현을 측정한다. 이것은 타겟 RNA(리보핵산)에 직접 하이브리드화하는 고유 바코드화 프로브를 사용하여 실행된다. 그리고나서, RNA-프로브 하이브리드는 겔 상에서 소진되어 바코드를 선형화한다. 이 바코드는 내부적으로 개발된 파이프라인을 사용하여 카운팅되고 정규화된다.
화학식 I의 Wnt 억제제 2-(2',3-디메틸-[2,4'-비피리딘]-5-일)-N-(5-(피라진-2-일)피리딘-2-일)아세트아미드에 의한 치료 시에, 8일 내지 28일 사이에 스크리닝시에 종양 생검을 수행하였다. 종양을 포르말린에 고정시키고, 파라핀(FFPE)에 포매하거나 이후에 RNA에 직접 넣었다. 이 샘플을 Genoptix로 옮겼으며, 약력학(PD) 마커 AXIN2의 실시간 qPCR 분석을 위해 RNA를 단리하였다. Remnant RNA를 분석 연구실(ARL)로 옮겼으며, 여기서 면역-관련 유전자의 맞춤 설계 패널뿐만 아니라 (2016) NanoString pan-cancer 면역 프로파일링 패널을 사용하여 유전자 발현을 프로파일링하였다. 샘플을 특정 징후 내에서 표준화한 것을 제외하고, NanoString에 의해 권장된 방법을 사용하여 유전자 발현을 표준화하였으며(예를 들어, 흑색종 또는 췌장암 샘플을 별도로 표준화함), geNorm 안정성 메트릭[PMID: 12184808]을 사용하여 하우스키핑 유전자를 선택하였다. 두 패널 사이에 특정 유전자가 중첩되어 있으며, 이를 사용하여 가변성 및 기타 품질 관리 파라미터를 평가하였다. NanoString 표준화 절차와 인접한 핵심 생검에서 염색된 헤마톡실린과 에오신(H&E)의 수동 검토로 QC 메트릭을 부과하여, 코호트를 11쌍 샘플로 좁혔다. 분석 코호트에 대해 9쌍의 샘플을 남긴 원칙적 구성요소 분석에서 특이치가 되는 것으로 밝혀졌으므로 추가로 2개의 샘플을 제거하였다. 본 명세서에 기재된 카운트 데이터는 한 가지를 제외하고 NanoString에 의해 권장되는 방법에 따라 표준화되었다. 즉, 본 명세서에 기재된 바와 같이 특정 징후 내에서 샘플이 표준화되었고, 약 40개의 하우스키핑 유전자(NanoString 웹사이트에서 상업적으로 이용가능한 암 면역 패널로 정의됨, 2016)를 샘플을 통한 생물학적 표준화에 사용하였다.
종양-면역 미세환경에 있어서 표현형 변화에 대한 데이터를 조사하기 전에 유전자 시그니처를 사용했다. 이전에는, 활성화된 WNT 신호전달을 갖는 유전자 조작 마우스에서 종양 미세환경의 수지상 세포 및 T-세포가 억제되었다고 밝혀졌지만; 그러나 이 효과가 가역적이라는 것은 밝혀지지 않았다. 따라서, 본 발명자들의 목적은 Wnt 억제제로 치료받은 환자의 샘플에서 유전자 발현 분석을 사용하여, WNT 경로의 약리학적 억제에 의해 근위 면역 세포상의 종양내 WNT 신호전달의 억제 효과가 역전될 수 있는 정도를 결정하는 것이었다.
화학식 I의 화합물이 종양 면역 미세환경에 영향을 미치는지를 이해하기 위해, 면역 유전자 발현과 PD 마커 AXIN2 사이의 관계를 조사하였다. 이 마커를 사용하여 특정 종양에서 WNT 경로가 억제된 정도를 이해할 수 있다. 개별 유전자에 초점을 맞추는 대신, 특정 경로 또는 세포 기능을 설명하는 일련의 유전자(유전자 시그니처)의 기하 평균 발현을 사용했다. 하나의 유전자 시그니처는 CD8+ T-세포의 포집과 관련된 케모카인 시그니처[PMID: 19293190]이며, 다른 시그니처는 활성화된 CD103+ 수지상 세포[PMID: 25970248]과 관련되어 있다. AXIN2 발현에서 관찰된 배수-변화(fold-changes)에 의해 입증된 바와 같이 모든 대상체가 WNT 경로의 강력한 억제를 나타내지는 않았다. 흥미롭게도, 케모카인 시그니처 및 수지상 세포 시그니처의 증가된 발현과 AXIN2 억제 사이에는 상당히 선형적인 관계가 있는 것으로 보인다(아래 참조). 본 발명자들은 WNT 경로의 약리학적 억제가 주위 수지상 세포 집단의 수반되는 자극을 초래한다는 것을 관찰했다. 상기 수지상 세포는 자극을 받으면 T-세포를 종양으로 포집하는 기능을 한다. 중요하게는, 이러한 관찰은 Wnt 억제제에 15일 노출된 후에 행해졌는데, 이는 화학식 I의 화합물의 간헐적 투여가 체크포인트 억제제와 조합되어 이전에는 면역 침윤이 없었던 종양의 상황에서 항-종양 면역 반응을 자극할 수 있음을 나타낸다.
유전자 시그니처를 통해 작은 샘플 크기에서도 생물학적 연관성뿐만 아니라 주어진 적응증에서 많은 샘플간에 강한 상관 관계를 관찰할 수 있었다. Wnt 억제제 치료받은 환자의 샘플은 발현된 T-세포 시그니처를 가졌으며, 이는 환자 및 다른 용량 수준과 같은 치료 조건에서 나타난다(도 2). 도 2는 이 분석에서 9쌍의 대상체에 대한 요약 방문에 존재하는 T-세포 수준과 선별시의 CD3 발현간에 강한 상관관계를 보여준다.
본 연구에서 사용된 유전자 시그니처 중 하나는 도 3에 도시된 T-세포 시그니처이다.
화학식 I의 Wnt 억제제에 의한 Wnt 경로 상의 조절은 상기 Wnt 억제제, 즉 (i) 2-(2',3-디메틸-[2,4'-비피리딘]-5-일)-N-(5-(피라진-2-일)피리딘-2-일)아세트아미드가 종양-면역 미세환경에 영향을 미치는 방법과 함께 고려되었다(도 4). 동일한 정확한 RNA 샘플을 사용하여 측정된, AXIN2 발현 변화는 Wnt 억제제 (i) 2-(2',3-디메틸-[2,4'-비피리딘]-5-일)-N-(5-(피라진-2-일)피리딘-2-일)아세트아미드가 WNT 경로에 영향을 미치는 방법의 척도로 사용되었다. AXIN2 발현의 변화는 선형 모델에 의해 면역 시그니처 변화에 맞추어졌다.
도 4의 각 그래프는, 하기와 같이 도시된다: Y-축은 Wnt 억제제 (i) 2-(2',3-디메틸-[2,4'-비피리딘]-5-일)-N-(5-(피라진-2-일)피리딘-2-일)아세트아미드에 대한 노출후, 주어진 면역 시그니처 변화를 도시하며, X-축은 AXIN2 변화를 제공한다. 둘 다 log2 스케일이다. 양수 값은 주어진 시그니처 또는 AXIN2에서 유전자의 평균 발현이 증가했음을 나타낸다. 첫째, 타입 I 인터페론 시그니처와 AXIN2 억제 사이의 약한 관계가 관찰되었다. 둘째, 인터페론 감마(또는 타입 II 인터페론)와 AXIN2 억제 사이의 관계가 관찰되었다. 인터페론 감마는 전형적으로 CD8+ T-세포에 의해 발현된다. 마지막으로, AXIN2 억제와 비만 세포 및 T-조절(T-reg) 시그니처 사이의 보통의 반비례 관계가 관찰되었다. 이 두 세포 유형 모두 종양-면역 미세환경에서 면역-억제가 되는 것으로 관찰되었다. 흥미롭게도, 케모카인 시그니처(도 6) 및 수지상 세포 시그니처(도 5)의 증가된 발현과 AXIN2 억제 사이에는 상당히 선형적인 관계가 있는 것으로 보인다. 이는 WNT 경로의 약리학적 억제가 주위 수지상 세포 집단의 수반되는 자극을 초래한다는 것을 처음으로 관찰한 것이다.
증가된 WNT 신호전달에 대한 반응으로 CD103+ 수지상 세포에서 조절되는 것으로 확인된 특정 유전자들(Spranger 등 Nature 2015, 523, 231) 중 일부가 사용되어, AXIN2 억제에 대한 일련의 특정 시그니처를 생성하고, 모델링하였다(도 5). 도 5에서, 각 점은 한 환자의 샘플 쌍을 나타낸다. X-축에는 스크리닝부터 치료까지의 종양에 있어서 AXIN2 발현의 log2 배수-변화를 나타내었다. Y-축에는 스크리닝부터 치료까지의 종양에 있어서 수지상 세포 시그니처 발현의 log2 배수-변화를 나타내었다. 수지상 시그니처에 포함된 유전자는 BATF3, ITGAE, IRF8, CCR5, CCL3, CCL4, CXCL1이다. 추세선은 견고한 선형 모델을 사용하여 데이터 포인트를 회귀하여 이루어진 선형 추정치이다. 각 점 옆의 숫자는 치료 시작부터 치료 생검까지의 일수를 나타낸다. Spranger 등(Nature 2015, 523, 231)에 따르면, Wnt-반응성 유전자는 BATF3, ITGAE, IRF8, CCR5, CCL3, CCL4, CXCL1이다. 여기에서, 다른 시그니처들 중 일부와 유사하게, CD103+ 수지상 세포의 활성화와 연관된 유전자의 증가된 발현과 AXIN2 억제 사이의 양의 관계가 관찰되었다. 이는 수지상 세포의 이 아형이 항-종양 반응을 위해 T 세포를 라이센싱하고 활성화하는데 중요하기 때문에 관련이 있다.
이러한 데이터는 Wnt 억제제 (i) 2-(2',3-디메틸-[2,4'-비피리딘]-5-일)-N-(5-(피라진-2-일)피리딘-2-일)아세트아미드, 또는 이의 약제학적으로 허용가능한 염이, 면역 세포 침윤을 증가시키고 CD103+ 수지상 세포의 억제를 경감시킴으로써 종양-면역 미세환경에 영향을 미치고 있음을 시사한다. 이 세포들은 항-종양 면역반응을 유도하는 세포독성 T 세포의 활성화 및 동원에 중요하다. 이것은 T 세포의 억제를 경감시키는 항 PD-1 항체 분자(PD-1 억제제라고도 함)를 첨가하여 수지상 세포에 대한 Wnt 억제제의 효과와 상승작용을 하도록 지원한다.
종양으로의 CD8+ T 세포의 동원과 밀접한 상관 관계가 있는 것으로 밝혀진 또 다른 유전자 시그니처도 또한 조사하였다. 상기 유전자 시그니처는 주로 케모카인으로 구성되며, 상기 언급된 Spranger 등(Nature 2015, 523, 231) 수지상 세포 시그니처와 일부 중복된다. 상기 케모카인들은 용량-의존적인 방식으로 CD8+ T 세포를 동원하는 것으로 나타났다. CD8+ T-세포 동원과 관련있는 케모카인은 CCL2, CCL3, CCL4, CCL 5, CXCL9 및 CXCL10이다. 본 발명자들이 환자 샘플에서 이 케모카인 시그니처내 유전자의 평균 발현을 측정하고 이를 AXIN2 억제와 비교했을 때, 다시, WNT 경로가 억제되는 정도와 이 유전자 시그니처의 발현 사이의 선형 관계를 관찰하였다(도 6). 도 6에서, 각 점은 한 환자의 샘플 쌍을 나타낸다. X-축에는 스크리닝부터 치료까지의 종양에 있어서 AXIN2 발현의 log2 배수-변화를 나타내었다. Y-축에는 스크리닝부터 치료까지의 종양에 있어서 케모카인 시그니처 발현의 log2 배수-변화를 나타내었다. 케모카인 시그니처에 포함된 유전자는: CCL2, CCL3, CCL4, CCL5, CXCL9, 및 CXCL10이다. 추세선은 견고한 선형 모델을 사용하여 데이터 포인트를 회귀하여 이루어진 선형 추정치이다. 각 점 옆의 숫자는 치료 시작부터 치료 생검까지의 일수를 나타낸다. 도 6에 도시된 바와 같이, 수지상 세포는 자극을 받으면 T-세포를 종양으로 동원하는 기능을 한다. 중요하게는, 이 관찰은 WNT 억제제 (i) 2-(2',3-디메틸-[2,4'-비피리딘]-5-일)-N-(5-(피라진-2-일)피리딘-2-일)아세트아미드, 또는 이의 약제학적으로 허용가능한 염에 대한 약 15일 노출 후 이루어졌으며, 이는 WNT 억제제 (i)의 간헐적인 투여가 체크포인트 억제제와 조합되어 이전에는 면역 침윤이 없었던 종양의 상황에서 항-종양 면역 반응을 자극할 수 있음을 시사한다.
암세포의 기원 조직과 상관없이, 암 게놈 아틀라스(the Cancer Genome Atlas, TCGA)의 T-세포와 Wnt/CTNNB1 시그니처 사이의 반비례 상관관계가 편평 세포 암에서 일관되게 나타남을 발견했다(Sanger 등, 2015). 반비례 상관관계는 또한 TNBC와 가장 밀접하게 연관된 유전자-발현 기반 아형인 기저부 유방암에서도 강했다(Bertucci 등, 2008). 도 7은 암 세포의 여러가지 상이한 유형의 상관관계를 나타낸다. Wnt1 시그니처는 6개의 CTNNB1 타겟들: EFNB3, APC2, HNF1A, TCF12, 및 VEGFA로 구성된다.
[표 1]
Figure pct00003
Figure pct00004
Figure pct00005
Figure pct00006
Figure pct00007
Figure pct00008
Figure pct00009
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[표 2]
Figure pct00011
Figure pct00012
Figure pct00013
Figure pct00014
[표 3]
Figure pct00015
Figure pct00016
[표 4]
Figure pct00017
실시예 2: 임상 연구 요약
하기 임상 연구는 실시예 1의 근거, 결과 및 결론을 확인하는데 사용될 것이다. 실시예 1에서 기대되는 안전성 및 효능이 또한 평가될 것이다.
Figure pct00018
Figure pct00019
Figure pct00020
Figure pct00021
Figure pct00022
임상 시험 설계가 도 8에 도시되어 있다.
실시예 3: 췌장 성장의 단독 억제 및 면역요법과의 조합 억제
하기 실험 연구는 실시예 1의 근거, 결과 및 결론을 확인하는데 사용될 것이다. 또한 실시예 1에서 기대되는 효능이 추가로 평가될 것이다.
이 연구는 PDX-CRE KRASG12D P53R172H/+ 마우스에서 췌장 종양 세포의 성장을 억제하기 위해 단독으로 또는 항-PD1 분자와 조합하여, 화학식 I의 화합물의 능력을 조사할 것이다.
처리군:
A) 비히클
B) 화학식 I의 화합물, 5mg/kg BID, PO
C) 화학식 I의 화합물, 5mg/kg BID, PO 및 항-PD1(주 2회 복강내)
D) 화학식 I의 화합물, 5mg/kg BID, PO 및 아이소타입 대조군(주 2회 복강내)
약 10~15마리의 마우스가 각 처리군에 들어갈 것이다
처리 기간: 마우스가 만져지는 종양 부담을 가질 때 치료를 시작할 것이다. 마우스는 췌장암의 증상을 나타낼 때 채취될 것이다(중간 120일). 치료군 및 대조군 동물의 코호트는 종양 면역 및 염증 침윤의 분석을 위한 단기 처리(7일 미만) 후 샘플링될 것이다.
종양 성장은 초음파를 통해 모니터링될 것이다. 췌장암의 증상 및 전이가 전파되는 시간도 모니터링될 것이다. 분화, 세포사멸, 증식 및 노화의 마커에 대한 HC도 또한 모니터링될 것이다.
판독결과: 핵 β-카테닌, BrdU 통합, CD4+, CD8+, CD3+(T-림프구), F4/8-(대식세포) 및 NIMP(호중구)에 대한 IHC. 코호트 동물에 대한 분리된 RNA 형태의 물질 및 dta 및 단기 개입에 따른 면역 및 염증성 시그니처에 대한 GSEA와 함께 RNASeq에 의한 전체 전사체 분석이 결정될 것이다.
실시예 4: 흑색종 성장의 단독 억제 및 면역요법과의 조합 억제
하기 실험 연구는 실시예 1의 근거, 결과 및 결론을 확인하는데 사용될 것이다. 실시예 1에서 기대되는 효능이 또한 추가로 평가될 것이다.
이 연구는 TyrCreER BRafV600E/+ Ptenfl/+ 및 TyrCreER BRafV600E/+ Ptenfl/+ Catnblox(ex3)/+ 마우스에서 흑색종 종양 세포의 성장을 억제하기 위해 단독으로 또는 항-PD1 분자와 조합하여, 화학식 I의 화합물의 능력을 조사할 것이다.
처리군:
A) 비히클
B) 화학식 I의 화합물, 5mg/kg BID, PO
C) 화학식 I의 화합물, 5mg/kg BID, PO 및 항-PD1(주 2회 복강내)
D) 화학식 I의 화합물, 5mg/kg BID, PO 및 아이소타입 대조군(주 2회 복강내)
약 10~15마리의 마우스가 각 처리군에 들어갈 것이다.
처리 기간: 흑색종(5 mm 직경)의 형성시 처리를 시작할 것이며, 종양이 종점(직경 15 mm)에 도달할 때까지 계속될 것이다. 종양 성장은 캘리퍼 측정에 의해 모니터링될 것이다.
판독결과: 캘리퍼 측정에 의한 종양 성장, 병리학적 검사에 의한 종양 세포질, β-카테닌에 대한 IHC 및, IHC에 의한 Wnt 표적 유전자, 간질 세포/침윤 면역 세포 마커에 대한 qPCR.
실시예 5: 흑색종 성장의 단독 억제 및 면역요법과의 조합 억제
하기 실험 연구는 실시예 1의 근거, 결과 및 결론을 확인하는데 사용될 것이다. 실시예 1에서 기대되는 효능이 또한 추가로 평가될 것이다.
이 연구는 마우스 유래 흑색종이 이식된 CD-1 누드 또는 C57BL/^ 마우스(TyrCreER BRafV600E/+ Ptenfl/+ 및 TyrCreER BRafV600E/+ Ptenfl/+ Catnblox(ex3)/+ 마우스)에서 흑색종 종양 세포의 성장을 억제하기 위해 단독으로 또는 항-PD1 분자와 조합하여, 화학식 I의 화합물의 능력을 조사할 것이다.
처리군:
A) 비히클
B) 화학식 I의 화합물, 5mg/kg BID, PO
C) 화학식 I의 화합물, 5mg/kg BID, PO 및 항-PD1(주 2회 복강내)
D) 화학식 I의 화합물, 5mg/kg BID, PO 및 아이소타입 대조군(주 2회 복강내)
약 10~15마리의 마우스가 각 처리군에 들어갈 것이다.
처리 기간: 흑색종(5 mm 직경)의 형성시 처리를 시작할 것이며, 종양이 종점(직경 15 mm)에 도달할 때까지 계속될 것이다. 종양 성장은 캘리퍼 측정에 의해 모니터링될 것이다.
판독결과: 캘리퍼 측정에 의한 종양 성장, 병리학적 검사에 의한 종양 세포질, β-카테닌에 대한 IHC 및, IHC에 의한 Wnt 표적 유전자, 간질 세포/침윤 면역 세포 마커에 대한 qPCR.
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Sequence: Synthetic oligonucleotide" <400> 140 cagaacgact atagctaccc ctacacc 27 <210> 141 <211> 39 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <221> source <223> /note="Description of Artificial Sequence: Synthetic oligonucleotide" <400> 141 agtcagtcac tgctggatag cggtaatcag aagaacttc 39 <210> 142 <211> 9 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <221> source <223> /note="Description of Artificial Sequence: Synthetic oligonucleotide" <400> 142 tgggcctct 9 <210> 143 <211> 18 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <221> source <223> /note="Description of Artificial Sequence: Synthetic oligonucleotide" <400> 143 gactatagct acccctac 18 <210> 144 <400> 144 000 <210> 145 <400> 145 000 <210> 146 <400> 146 000 <210> 147 <211> 25 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <221> source <223> /note="Description of Artificial Sequence: Synthetic peptide" <400> 147 Glu Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Glu 1 5 10 15 Ser Leu Arg Ile Ser Cys Lys Gly Ser 20 25 <210> 148 <211> 75 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Sequence: Synthetic oligonucleotide" <400> 156 tgggtccgcc aggctaccgg tcaaggcctc gagtggatgg gt 42 <210> 157 <211> 14 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <221> source <223> /note="Description of Artificial Sequence: Synthetic peptide" <400> 157 Trp Ile Arg Gln Ser Pro Ser Arg Gly Leu Glu Trp Leu Gly 1 5 10 <210> 158 <211> 42 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <221> source <223> /note="Description of Artificial Sequence: Synthetic oligonucleotide" <400> 158 tggatcaggc agtccccatc gagaggcctt gagtggctgg gt 42 <210> 159 <211> 42 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <221> source <223> /note="Description of Artificial Sequence: Synthetic oligonucleotide" <400> 159 tggatccggc agtccccctc taggggcctg gaatggctgg gc 42 <210> 160 <211> 14 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <221> source <223> /note="Description of Artificial Sequence: Synthetic peptide" <400> 160 Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Met Gly 1 5 10 <210> 161 <211> 42 <212> DNA <213> Artificial 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Sequence: Synthetic peptide" <400> 177 Glu Ile Val Leu Thr Gln Ser Pro Ala Thr Leu Ser Leu Ser Pro Gly 1 5 10 15 Glu Arg Ala Thr Leu Ser Cys 20 <210> 178 <211> 69 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <221> source <223> /note="Description of Artificial Sequence: Synthetic oligonucleotide" <400> 178 gaaattgtgt tgacacagtc tccagccacc ctgtctttgt ctccagggga aagagccacc 60 ctctcctgc 69 <210> 179 <211> 69 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <221> source <223> /note="Description of Artificial Sequence: Synthetic oligonucleotide" <400> 179 gagatcgtgc tgacccagtc ccctgccacc ctgtcactgt ctccaggcga gagagctacc 60 ctgtcctgc 69 <210> 180 <211> 69 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <221> source <223> /note="Description of Artificial Sequence: Synthetic oligonucleotide" <400> 180 gagatcgtcc tgactcagtc acccgctacc ctgagcctga gccctggcga gcgggctaca 60 ctgagctgt 69 <210> 181 <211> 23 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <221> source <223> /note="Description of Artificial Sequence: Synthetic peptide" <400> 181 Asp Ile Val Met Thr Gln Thr Pro Leu Ser Leu Pro Val Thr Pro Gly 1 5 10 15 Glu Pro Ala Ser Ile Ser Cys 20 <210> 182 <211> 69 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <221> source <223> /note="Description of Artificial Sequence: Synthetic oligonucleotide" <400> 182 gatattgtga tgacccagac tccactctcc ctgcccgtca cccctggaga gccggcctcc 60 atctcctgc 69 <210> 183 <211> 23 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <221> source <223> /note="Description of Artificial Sequence: Synthetic peptide" <400> 183 Asp Val Val Met Thr Gln Ser Pro Leu Ser Leu Pro Val Thr Leu Gly 1 5 10 15 Gln Pro Ala Ser Ile Ser Cys 20 <210> 184 <211> 69 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <221> source <223> /note="Description of Artificial Sequence: Synthetic oligonucleotide" <400> 184 gatgttgtga tgactcagtc tccactctcc ctgcccgtca cccttggaca gccggcctcc 60 atctcctgc 69 <210> 185 <211> 23 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <221> source <223> /note="Description of Artificial Sequence: Synthetic peptide" <400> 185 Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly 1 5 10 15 Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys 20 <210> 186 <211> 69 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <221> source <223> /note="Description of Artificial Sequence: Synthetic oligonucleotide" <400> 186 gacatccaga tgacccagtc tccatcctcc ctgtctgcat ctgtaggaga cagagtcacc 60 atcacttgc 69 <210> 187 <211> 15 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <221> source <223> /note="Description of Artificial Sequence: Synthetic peptide" <400> 187 Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ala Pro Arg Leu Leu Ile Tyr 1 5 10 15 <210> 188 <211> 45 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <221> source <223> /note="Description of Artificial Sequence: Synthetic oligonucleotide" <400> 188 tggtaccagc agaaacctgg ccaggctccc aggctcctca tctat 45 <210> 189 <211> 45 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <221> source <223> /note="Description of Artificial Sequence: Synthetic oligonucleotide" <400> 189 tggtatcagc agaagcccgg 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Artificial Sequence: Synthetic peptide" <400> 194 Trp Tyr Leu Gln Lys Pro Gly Gln Ser Pro Gln Leu Leu Ile Tyr 1 5 10 15 <210> 195 <211> 45 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <221> source <223> /note="Description of Artificial Sequence: Synthetic oligonucleotide" <400> 195 tggtacctgc agaagccagg gcagtctcca cagctcctga tctat 45 <210> 196 <211> 32 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <221> source <223> /note="Description of Artificial Sequence: Synthetic polypeptide" <400> 196 Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr 1 5 10 15 Phe Thr Ile Ser Ser Leu Glu Ala Glu Asp Ala Ala Thr Tyr Tyr Cys 20 25 30 <210> 197 <211> 96 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <221> source <223> /note="Description of Artificial Sequence: Synthetic oligonucleotide" <400> 197 ggggtcccct cgaggttcag tggcagtgga tctgggacag atttcacctt taccatcagt 60 agcctggaag ctgaagatgc tgcaacatat tactgt 96 <210> 198 <211> 96 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <221> source <223> 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Artificial Sequence: Synthetic polypeptide" <400> 205 Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr 1 5 10 15 Phe Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro Glu Asp Ile Ala Thr Tyr Tyr Cys 20 25 30 <210> 206 <211> 96 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <221> source <223> /note="Description of Artificial Sequence: Synthetic oligonucleotide" <400> 206 ggggtcccat caaggttcag tggaagtgga tctgggacag attttacttt caccatcagc 60 agcctgcagc ctgaagatat tgcaacatat tactgt 96 <210> 207 <211> 96 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <221> source <223> /note="Description of Artificial Sequence: Synthetic oligonucleotide" <400> 207 ggcgtgccct ctaggtttag cggtagcggt agtggcaccg acttcacctt cactatctct 60 agcctgcagc ccgaggatat cgctacctac tactgt 96 <210> 208 <211> 10 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <221> source <223> /note="Description of Artificial Sequence: Synthetic peptide" <400> 208 Phe Gly Gln Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys 1 5 10 <210> 209 <211> 30 <212> DNA <213> Artificial Sequence 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Claims (41)

  1. 암 치료에 사용하기 위한, (i) 2-(2',3-디메틸-[2,4'-비피리딘]-5-일)-N-(5-(피라진-2-일)피리딘-2-일)아세트아미드, 또는 이의 약제학적으로 허용가능한 염, 및 (ii) 항-PD-1 항체 분자 또는 이의 약제학적으로 허용가능한 염을 포함하는 약제학적 조합물로서, (i)은 최대 4주기 동안 각 주기의 1일 내지 15일에 매일 투여되며, (ii)는 주기당 적어도 1회 투여되는, 약제학적 조합물.
  2. 제1항에 있어서,
    (i)은 최대 4주기 동안 각 주기의 1일 내지 8일에 투여되는, 약제학적 조합물.
  3. 제1항 또는 제2항에 있어서,
    (i)은 첫 1주기 동안에만 투여되는, 약제학적 조합물.
  4. 제1항 또는 제2항에 있어서,
    (i)은 4주기 동안에만 투여되는, 약제학적 조합물.
  5. 제1항 내지 제4항 중 어느 한 항에 있어서,
    각 주기는 28일인, 약제학적 조합물.
  6. 제1항 내지 제5항 중 어느 한 항에 있어서,
    (i)은 1일 2회 투여되는, 약제학적 조합물.
  7. 제6항에 있어서,
    (i)은 12-시간 간격으로 투여되는, 약제학적 조합물.
  8. 제1항 내지 제7항 중 어느 한 항에 있어서,
    (i)의 1일 투여용량은 2.5 mg/일, 5 mg/일, 7.5 mg/일, 10 mg/일, 20 mg/일, 40 mg/일, 80 mg/일, 120 mg/일, 또는 180 mg/일인, 약제학적 조합물.
  9. 제8항에 있어서,
    (i)의 1일 투여용량은 2.5 mg/일, 5 mg/일, 또는 10 mg/일인, 약제학적 조합물.
  10. 제8항 또는 제9항에 있어서,
    (i)의 1일 투여용량은 10 mg/일인, 약제학적 조합물.
  11. 제1항 내지 제10항 중 어느 한 항에 있어서,
    (ii)는 주기로 2주마다 또는 4주마다 투여되는, 약제학적 조합물.
  12. 제11항에 있어서,
    (ii)는 4주마다 투여되는, 약제학적 조합물.
  13. 제11항 또는 제12항에 있어서,
    (ii)는 니볼루맙, 펨브롤리주맙, 피딜리주맙, PDR-001, 또는 이의 약제학적 염으로부터 선택되는, 약제학적 조합물.
  14. 제13항에 있어서,
    (ii)는 PDR-001, 또는 이의 약제학적 염인, 약제학적 조합물.
  15. 제13항에 있어서, (ii)는 300 내지 400 mg/일의 단일 투여용량으로 정맥내 투여되는, 약제학적 조합물.
  16. 제15항에 있어서,
    상기 단일 투여용량은 400 mg/일인, 약제학적 조합물.
  17. 제1항, 제2항, 제5항 내지 제9항 또는 제11항 내지 제16항 중 어느 한 항에 있어서, (i)의 2.5 mg/일이 1~8일에 투여되고, (ii)의 400 mg/일이 최대 4주기 동안 4주마다 1회 투여되는, 약제학적 조합물.
  18. 제1항, 제5항 내지 제9항 또는 제11항 내지 제16항 중 어느 한 항에 있어서,
    (i)의 2.5 mg/일이 1~15일에 투여되고, (ii)의 400 mg/일이 최대 4주기 동안 4주마다 1회 투여되는, 약제학적 조합물.
  19. 제3항 내지 제9항 또는 제11항 내지 제18항 중 어느 한 항에 있어서,
    (i)의 2.5 mg/일이 1주기에만 투여되고, (ii)의 400 mg/일이 4주마다 투여되는, 약제학적 조합물.
  20. 제1항, 제2항, 제5항 내지 제9항 또는 제11항 내지 제16항 중 어느 한 항에 있어서,
    (i)의 5 mg/일이 1~8일에 투여되고, (ii)의 400 mg/일이 최대 4주기 동안 4주마다 1회 투여되는, 약제학적 조합물.
  21. 제1항, 제5항 내지 제9항 또는 제11항 내지 제16항 중 어느 한 항에 있어서,
    (i)의 5 mg/일이 1~15일에 투여되고, (ii)의 400 mg/일이 최대 4주기 동안 4주마다 1회 투여되는, 약제학적 조합물.
  22. 제3항 내지 제9항, 제11항 내지 제16항, 제20항 또는 제21항 중 어느 한 항에 있어서,
    (i)의 5 mg/일이 1주기에만 투여되고, (ii)의 400 mg/일이 4주마다 투여되는, 약제학적 조합물.
  23. 제1항, 제2항, 제5항 내지 제16항 중 어느 한 항에 있어서,
    (i)의 10 mg/일이 1~8일에 매일 투여되고, (ii)의 400 mg/일이 최대 4주기 동안 4주마다 투여되는, 약제학적 조합물.
  24. 제1항 또는 제5항 내지 제16항 중 어느 한 항에 있어서,
    (i)의 10 mg/일이 1~15일에 투여되고, (ii)의 400 mg/일이 최대 4주기 동안 4주마다 투여되는, 약제학적 조합물.
  25. 제1항, 제3항 내지 제16항, 제23항 또는 제24항 중 어느 한 항에 있어서,
    (i)의 10 mg/일이 1주기에만 투여되고, (ii)의 400 mg/일이 4주마다 투여되는, 약제학적 조합물.
  26. 제1항 내지 제25항 중 어느 한 항에 있어서,
    (ii)는 4주마다 연속 투여되는, 약제학적 조합물.
  27. 암 치료를 위한 약제를 제조하기 위해, 항-PD-1 항체 분자, 또는 약제학적으로 허용가능한 염과 조합한, (i) 2-(2',3-디메틸-[2,4'-비피리딘]-5-일)-N-(5-(피라진-2-일)피리딘-2-일)아세트아미드, 또는 이의 약제학적으로 허용가능한 염의 용도로서, (i) 및 (ii)는 제1항 내지 제26항 중 어느 한 항에 정의된 바와 같이 투여되며, 바람직하게는, (i)은 최대 4주기 동안 각 주기의 1일 내지 16일에 매일 투여되며, (ii)는 주기당 적어도 1회 투여되는, 용도.
  28. 제27항에 있어서,
    (i)은 최대 4주기 동안 또는 첫 1주기 동안에만 각 주기의 1일 내지 16일에, 각 주기의 1일 내지 8일에 투여되는, 용도.
  29. 제27항 또는 제28항에 있어서,
    (i)의 1일 투여용량이 2.5 mg/일, 5 mg/일, 7.5 mg/일, 10 mg/일, 20 mg/일, 40 mg/일, 80 mg/일, 120 mg/일, 또는 180 mg/일인, 용도.
  30. 제27항 내지 제29항 중 어느 한 항에 있어서,
    (i)의 1일 투여용량이 10 mg/일인, 용도.
  31. 제27항 내지 제30항 중 어느 한 항에 있어서,
    (ii)가 300~400 mg/일의 단일 투여용량으로 투여되는, 용도.
  32. 제27항 내지 제30항 중 어느 한 항에 있어서,
    (ii)가 400 mg/일의 단일 투여용량으로 투여되는, 용도.
  33. 제27항에 있어서,
    (i) 및 (ii)가 제17항 내지 제25항 중 어느 한 항에 정의된대로 투여되는, 용도.
  34. 암을 치료하기 위한 방법으로서, 상기 방법은 유효량의 (i) 및 (ii)를 이를 필요로 하는 환자에게 투여하는 단계를 포함하며, (i)은 최대 4주기 동안 각 주기의 1일 내지 15일에 매일 투여되며, (ii)는 주기당 적어도 1회 투여되는, 방법.
  35. 제34항에 있어서,
    상기 방법은 제1항 내지 제26항 중 어느 한 항에 정의된대로 유효량의 (i) 및 (ii)를 투여하는 단계를 포함하는, 방법.
  36. 제1항 내지 제26항 중 어느 한 항에 따른 암 치료에 사용하기 위한 약제학적 조합물, 제27항 내지 제33항 중 어느 한 항에 따른 (ii) 항-PD-1 항체 분자, 또는 이의 약제학적으로 허용가능한 염과 조합한, (i) 2-(2',3-디메틸-[2,4'-비피리딘]-5-일)-N-(5-(피라진-2-일)피리딘-2-일)아세트아미드, 또는 이의 약제학적으로 허용가능한 염의 용도, 또는 제34항 내지 제36항 중 어느 한 항에 따른 암 치료를 위한 방법으로서, 상기 암은 삼중-음성 유방암(TNBC), 두경부 편평세포암종, 췌장암, 위장암, 결장직장암, 폐의 편평세포암, 식도의 편평세포암, 자궁경부의 편평세포암 또는 흑색종인, 약제학적 조합물, 용도, 또는 방법.
  37. 제1항 내지 제36항 중 어느 한 항에 있어서,
    상기 암은 삼중-음성 유방암(TNBC), 췌장암, 또는 흑색종인, 약제학적 조합물, 용도, 또는 방법.
  38. 제1항 내지 제37항 중 어느 한 항에 있어서,
    (i) 및 (ii)는 뼈 흡수를 감소시키는데 있어서 상승작용적으로 활성인, 약제학적 조합물, 용도, 또는 방법.
  39. 제1항 내지 제38항 중 어느 한 항에 있어서,
    (i) 2-(2',3-디메틸-[2,4'-비피리딘]-5-일)-N-(5-(피라진-2-일)피리딘-2-일)아세트아미드, 또는 이의 약제학적으로 허용가능한 염은 경구로 또는 정맥내로, 가장 바람직하게는 경구로 투여되는, 약제학적 조합물, 용도, 또는 방법.
  40. 제1항 내지 제39항 중 어느 한 항에 있어서,
    상기 항-PD-1 항체 분자 (ii)는 니볼루맙, 펨브롤리주맙, 피딜리주맙, PDR-001, 또는 이의 약제학적 염으로부터 선택되는, 약제학적 조합물, 용도, 또는 방법.
  41. 제1항 내지 제40항 중 어느 한 항에 있어서,
    상기 항-PD-1 항체 분자 (ii)는 PDR-001, 또는 이의 약제학적 염인, 약제학적 조합물, 용도, 또는 방법.
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