KR20190110578A - Light에 결합하는 항원 결합 분자 - Google Patents

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Abstract

본 발명은 항원 결합 분자, 특히 세포 수용체 헤르페스 바이러스 유입 매개체 (HVEM) 및 림프독소 베타 수용체에 결합하는 LIGHT와 경쟁하는 TNF-관련된 사이토카인 LIGHT (TNFSF14)에 결합하는 항체, 이의 단편 및 변이체, 및 염증성 장애 및 면역 장애의 치료 및/또는 예방에서의 상기 항원 결합 분자의 용도에 관한 것이다.

Description

LIGHT에 결합하는 항원 결합 분자
본 발명은 항원 결합 분자, 특히 세포 수용체 헤르페스 바이러스 유입 매개체 (HVEM) 및 림프독소 베타 수용체에 결합하는 LIGHT와 경쟁하는 TNF-관련된 사이토카인 LIGHT (TNFSF14)에 결합하는 항체, 이의 단편 및 변이체, 및 염증성 장애 및 면역 장애의 치료 및/또는 예방에서의 상기 항원 결합 분자의 용도에 관한 것이다.
TNFSF14 또는 CD258로도 알려져 있는, LIGHT (림프독소-유사로, 유도성 발현을 나타내고 T 림프구에 의해 발현된 수용체인 HVEM에 대해 HSV 당단백질 D와 경쟁한다)는 활성화된 T 세포 상에서 상향조절된다. LIGHT는 천연 T 세포 상에서는 발현되지 않지만 활성화에 의해 상향조절되어, 4시간 이내에 나타나고, 12-24시간까지 피크에 이르고 48시간까지 T 세포 상에서 사라진다("Mechanisms regulating expression of the tumor necrosis factor-related LIGHT gene. Role of calcium-signaling pathway in the transcriptional control", Castellano R 등 J Biol Chem. 2002 Nov 8; 277:42841 -51). LIGHT는 또한 미성숙한 수지상 세포, NK 세포 및 단핵구에 의해 발현된다 ("Lymphotoxin/light, lymphoid microenvironments and autoimmune disease". Gommerman JL 등 Nat Rev Immunol 2003, 3:642-655; "LIGHT, a TNF-like molecule, costimulates T cell proliferation and is required for dendritic cell-mediated allogeneic T cell response". Tamada K 등 J Immunol 2000,164:4105-4110). LIGHT는 3개의 TNFSF 수용체로: T 세포에 의해 주로 발현된 헤르페스바이러스 유입 매개체 (HVEM) ("Reciprocal Expression of the TNF Family Receptor Herpes Virus Entry Mediator and Its Ligand LIGHT on Activated T Cells: LIGHT Down-Regulates Its Own Receptor". Morel Y. 등 J. Immunol. 2001,167:2479-2486); 기질 및 비-림프양 조혈 세포에 의해 발현된 림프독소 β 수용체 (LTBR) ("LIGHT, novel ligand for lymphotoxin beta receptor and TR2/HVEM induces apoptosis and suppresses in vivo tumor formation via gene transfer". Zhai Y 등 J. Clin. Invest. 1998,102:1142-1151); 및 가용성 단백질 유인 수용체 3 (DcR3/ TNFRSF6B)에 대한 리간드이다.
LIGHT는 DC 억제된 동종이계 T 세포반응에 대한 T 세포 증식 및 IFNγ 생산, 그리고 LIGHT의 차단을 증진시키는 것이 나타날 때 HVEM에 대한 공통 자극 역할을 갖는 것으로 1차 확인되었다 ("LIGHT, TNF-like molecule, costimulates T cell proliferation and is required for dendritic cell-mediated allogeneic T cell response" Tamada K. 등 J Immunol 2000,164:4105-4110; "Antibodies to TR2 ("herpesvirus entry mediator), a new member of the TNF receptor superfamily, block T cell proliferation, expression of activation markers, and production of cytokines". Harrop 등 J Immunol 1998,161:1786-1794). LIGHT-HVEM 상호작용은 또한 NK 세포, 중성구 및 단핵구의 활성화 및 효과기 기능을 증진시키는 것으로 밝혀졌다 ("LIGHT enhances the bactericidal activity of human monocytes and neutrophils via HVEM" Heo SK 등 J Leukocyte Biol 2006, 79:330-338; "HVEM signaling in monocytes is mediated by intracellular calcium mobilization" Heo SK 등 J Immunol 2007, 179:6305-6310).
비록 LTβR은 비-조혈 세포 예컨대 기질 세포상에서 주로 발현되지만, LIGHT-LTβR매개된 신호전달은 DC 활성화 및 팽창에 관여되는 것으로 최근에 밝혀졌다 ("Stimulating lymphotoxin beta receptor on the dendritic cells is critical for their homeostasis and expansion". Wang YG 등 J Immunol 2007, 175:6997-7002). LTβR 신호전달은 또한 이차 림프양 구조의 발달 ("Modulating the intestinal immune system: the role of lymphotoxin and GALT organs". Spahn TW 등 Gut 2004, 53:456-465) 및 모든 이차 림프양 구조의 부재가 유도된 마우스에서 LT□ 및 LIGHT 둘 모두의 결실 ("Targeted disruption of LIGHT causes defects in costimulatory T cell activation and reveals cooperation with lymphotoxin beta in mesenteric lymph node genesis". Scheu, S. etal.JExp Med 2002,195:1613-1624)에 결정적이다.
LIGHT는 만성 염증성 자가면역 질환의 진행에 연루되었고 ("LIGHT, new member of the TNF superfamily, and lymphotoxin alpha are ligands for herpesvirus entry mediator", Mauri DN 등 Immunity. 1998 Jan; 8(l):21 -30) 그리고 최근 증거는 LIGHT가 조기 발병 염증성 장 질환에 기여한다는 것을 나타낸다.
염증성 장 질환 (IBD)은 결장 및 소장의 염증성 병태의 군이다. 주요 유형의 IBD는 크론병 (CD) 및 궤양성 대장염 (UC)이다. 훨씬 적은 사례에 대한 설명은 다른 형태의 IBD, 예컨대: 교원성 결장염, 림프구성 결장염, 허혈성 대장염, 전환 결장염, 베체트병, 및 불확정 결장염이다.
CD와 UC 간의 주요 차이는 염증성 변화의 위치 및 특성이다. CD는 입부터 항문까지의 위장관의 임의의 부분에 영향을 줄 수 있지만, 대다수의 사례는 말단 회장에서 개시한다. 그에 반해서, UC는 결장 및 직장에 제한된다. 또한, CD 및 UC는 상이한 비율로 추가의-장내 징후, 예컨대 간 문제, 관절염, 피부 징후, 및 눈 문제를 나타낸다.
비록 매우 상이한 질환이지만, CD 및 UC 둘 모두는 임의의 하기 증상을 나타낼 수 있다: 복통, 구토, 설사, 직장 출혈, 골반의 영역에서 중증 내부 경련/근경직, 체중 감소, 및 다양한 연관된 불편 또는 질환 예컨대 관절염, 괴저성 농피증, 및 원발성 경화 담관염. 진단은 일반적으로 병리적 병변의 생검으로 결장경검사에 의한다. IBD는 통증, 구토, 설사, 및 다른 사회적으로 허용될 수 없는 증상 때문에 사람의 삶의 질을 제한하지만, 이것이 독자적으로 거의 치명적이지는 않다. IBD의 치료는 건강관리 시스템에 상당한 요구를 부과하고 증가된 건강관리 비용과 연관된다. IBD의 최적의 치료는 그것의 형태에 좌우된다. 예를 들어, 메살라진은 CD에서보다 UC에서 더 유용하다. 일반적으로, 중증도의 수준에 따라, IBD는 프레드니손, 아자티오프린 (이뮤란), 메토트렉세이트, 또는 6-머캅토퓨린과 같은 약물로 면역억제를 요한다. 종종, 스테로이드가 질환 발적을 제어하기 위해 사용된다. 최근에, 단백질 기반 치료제 예컨대 TNF를 중화하는 항체 (TNF 억제제)가 사용되었다. 그러나, IBD 환자의 3분의 1만이 TNF 억제제에 잘 반응하고, 3분의 1은 전혀 반응을 나타내지 않았다. IBD의 중증 사례는 수술, 예컨대 창자 절제, 협착 성형술, 또는 일시적 또는 영구적 결장조루술 또는 회장루형성술을 필요로 할 수 있다.
일반적으로 치료는 넓은 항-염증성이 있는 약물, 예컨대 프레드니손을 투여함에 의해 개시된다. 염증이 성공적으로 제어된 경우, 환자는 일반적으로 차도 있는 질환을 유지하기 위해 경량의 약물, 예컨대 아사콜, 메살라진으로 스위칭된다. 성공하지 못한 경우, (또한 항-염증성 효과를 가질 수 있는) 메살라진과 상기 언급된 면역억제 약물의 조합이 환자에 따라 투여될 수 있거나 투여될 수 없다. 치료의 목표는 차도를 달성하는 것이고, 그 후 환자는 일반적으로 잠재적인 부작용이 적은 경량 약물로 스위칭된다. 그러나 가끔씩 최초 증상의 급격한 재발이 나타날 수 있는데; 이는 "플레어업"으로 알려져 있다. 상황에 따라, 이것은 자체적으로 사라질 수 있거나 또는 약물을 필요로 할 수 있다. 플레어업 간의 시간은 수 주에서 수 년이 될 수 있으며, 환자와 요법 간에 광범위하게 변한다.
따라서, IBD를 치료하는데 보다 일관되게 효과적이며, 비-면역원성이고 인간에 사용하기에 안전한 개선된 치료 레지멘에 대한 당 업계에서의 절실한 요구가 있다.
신규한 실험적 접근법이 조사되고 있다. 억제성 LTβR-Fc 융합 단백질로 처리된 마우스는 CD4+ T 세포-매개된 병리학인, 결장염의 CD4+CD45RBhigh T 세포 전이 모델에서 염증성 증상을 감소시켰다 (Gastroenterology. 1998 Dec; 115(6): 1464-75, "Both the lymphotoxin and tumor necrosis factor pathways are involved in experimental murine models of colitis", Mackay F 등). LIGHT의 구성적 형질전환 T 세포 특이적 발현은 또한 인간 IBD를 닮은 자가면역-유사 병리학으로 중증 장내염증으로 이어진다고 밝혀졌다 ("The critical role of LIGHT in promoting intestinal inflammation and Crohn's disease", Wang J 등 J Immunol. 2005 Jun 15; 174:8173-82; "Constitutive expression of LIGHT on T cells leads to lymphocyte activation, inflammation, and tissue destruction", Shaikh RB et al J Immunol. 2001,167:6330-7; "The critical role of LIGHT, a TNF family member, in T cell development", Wang J 등 J Immunol. 2001, 167:5099-105; "Dysregulated LIGHT expression on T cells mediates intestinal inflammation and contributes to IgA nephropathy", Wang J 등 J Clin Invest. 2004,113:826-35). LIGHT-발현 림프구는 LIGHT 형질전환 동물로부터의 장간막림프절세포가 RAG-/- 마우스로 이전될 때 IBD-유사 증상 (예를 들어, 인간 크론병의 사이토카인 프로파일, 틈새 궤양, 회장염, 및 결장 IFN-y 및 TNF에서의 증가)을 유도할 수 있다 ("The critical role of LIGHT in promoting intestinal inflammation and Crohn's disease", Wang J 등 J Immunol. 2005; 174:8173-82). 인간 질환에서, LIGHT 발현의 증가는 활성 크론병 환자에서 관측되었다 (Cohavy et al 2005 supra; Wang et al 2005 supra; Wang et al 2004 supra; "LIGHT expression by mucosal T cells regulate IFN-gamma expression in the intestine", Cohavy O 등 J Immunol. 2004, 173:251 -8). LIGHT는 또한 IBD 환자의 소화관 T 세포에서 상승되는 것으로 실증되었다 (Cohavy et al 2004 supra). 유전적 증거는 또한 IBD에서 LIGHT에 대한 역할을 지지한다 ("Genomic characterization of LIGHT reveals linkage to an immune response locus on chromosome 19pl3.3 and distinct isoforms generated by alternate splicing or proteolysis", Granger SW 등 J Immunol. 2001,167:5122-8). LIGHT의 게놈 특성규명은 또한 교대의 스플라이싱 또는 단백질 분해에 의해 생성된 염색체 19p13.3 상의 면역 반응 유전자좌 및 뚜렷한 동형체에 대한 연결을 밝힌다; ("Genomewide search in Canadian families with inflammatory bowel disease reveals two novel susceptibility loci", Rioux JD 등 Rioux 등 Am J Hum Genet. 2000,66:1863-70; "Inflammatory bowel disease is linked to 19p13 and associated with ICAM-12", Low JH 등 Inflamm Bowel Dis. 2004,10:173-81; "The genetics of inflammatory bowel disease", Bonen DK, Cho JH Gastroenterology 2003,124:521 -36). 또한, DcR3에서 결함있는 변이체는 일부 사례의 IBD의 발병에서 역할을 하고 종양 괴사 인자-패밀리 일원 중 이 그룹을 표적화하는 개입은 IBD 환자에 이점이 있을 수 있다는 것이 제안되었다 ("Targeted resequencing identifies defective variants of decoy receptor 3 in pediatric-onset inflammatory bowel disease", Cardinale CJ 등 Genes Immun. 2013,14:447-52).
인간 LIGHT (LIGHT)는 또한 이식편대숙주 질환 (GvHD)에 연루된다. 예를 들어, LIGHT는 T 세포에 대한 강력한 공동자극 활성을 제공하여, B7-CD28 경로에 독립적인 Th1 사이토카인의 증식 및 생산을 향상시키는 것이 밝혀졌다 (예를 들어, Tamada et al 2000 supra 참고). 항-HVEM 단클론성 항체, 또는 HVEM-lg 중 어느 하나에 의해 LIGHT-HVEM 상호자극의 차단은 동종이계 T 세포 반응을 억제한다 (예를 들어, Tamada et al 2000 supra; Harrop JA 등 1998 supra 참고).
게다가, LTβR-lg 또는 쥣과 항-LIGHT 항체의 생체내 투여는 쥣과 급성GvHD 모델에서 항-숙주 세포독성 T 림프구 (CTL) 반응을 억제한다 ("Modulation of T-cell-mediated immunity in tumor and graft-versus-host disease models through the LIGHT co-stimulatory pathway", Tamada K 등 Nat Med. 2000,6:283-9).
HVEM에 의한 전염증성 및 억제성 신호전달을 지시하는 많은 작용은 세포 표면에서 제어된다. 이들 뚜렷한 신호전달 결과는 3가지 핵심 생체물리학적 파라미터에서 유래한다: 리간드 및 수용체의 특이적 짝짓기, 가용성 또는 막-고정된 위치에서 리간드의 형태, 및 리간드-수용체 참여의 시스 또는 트랜스 문맥. 리간드 및 수용체의 특이성은 염증성 및 억제성 신호전달을 지시하는 일차 기전을 제공한다. HVEM은 BTLA (B 및 T 림프구 감쇠기) 및 LIGHT가 그 자체로 BTLA에 대한 활성화 리간드인, HVEM 상의 뚜렷한 부위를 계합하기 때문에 수용체 및 리간드 둘 모두로서 이중 역할을 한다. HVEM의 도메인외는 TNFR 상과의 서명 모티프인, 시스테인-풍부 도메인의 4 반복을 함유한다 ("The molecular architecture of the TNF superfamily", Bodmer JL 등 Trends Biochem Sci. 2002; 27:19-26). BTLA 결합 부위는 HVEM의 N-말단에서 제1 시스테인-풍부 도메인에 위치하고, 반면에 상동성 모델링은 LIGHT가 HVEM의 반대편 표면 상이지만 제2 및 제3 도메인에 결합한다는 것을 나타낸다 ("Attenuating lymphocyte activity: the crystal structure of the BTLA-HVEM complex", Compaan DM 등 J Biol Chem. 2005; 280:39553-39561). 유형 II 막관통 단백질인, LIGHT는 가용성, 생체활성 형태를 방출하도록 단백질분해 될 수 있다 ("Genomic Characterization of LIGHT Reveals Linkage to an Immune Response Locus on Chromosome 19p13.3 and Distinct Isoforms Generated by Alternate Splicing or Proteolysis", Granger 등 J Immunol. 2001; 167:5122-5128). 가용성 LIGHT는 고친화도로 HVEM에 결합하지만, BTLA와는 경쟁하지 않아, 양 리간드가 동시에 HVEM을 점유하게 할 수 있다. 사실상, 가용성 LIGHT 및 LTα는 HVEM에 대한 BTLA의 결합을 증진하여, 분자 복합체의 형성에 연루된다 ("Evolutionarily divergent herpesviruses modulate T cell activation by targeting the herpesvirus entry mediator cosignaling pathway", Cheung TC 등 Proc Natl AcadSci U S A. 2005; 102:13218-13223). 현저한 대조에서, 막 형태의 LIGHT는, 짐작컨대 막의 근접으로 인한 입체 장애인, 비경쟁적 기전에 의해 HVEM-BTLA 결합을 방해한다.
트랜스 신호전달
몇개의 TNF 리간드-수용체 결정 구조에서 볼 수 있는 보존에 기초하여, 막 LIGHT의 입체 형태는 HVEM에 계합하고 신호전달을 활성화시키기 위해 (인접한 세포막에서) 트랜스로 되어야 한다. BTLA는 유세포측정-기반 FRET 시스템에 의해 드러난 바와 같이 생존가능 세포의 막에서 이량체를 형성한다. BTLA의 이량체성 형태는 클러스터링 HVEM에 대한 기전을 제안하였고 이 기전은 BTLA가 막단백질로서 또는 IgG의 Fc로 가용성 이량체성 융합 단백질로 조작됨으로 HVEM의 활성화를 유도하는 것을 입증하는 실험에서 확인되었다 ("TNF SUPERFAMILY NETWORKS: Bidirectional and Interference Pathways of the Herpesvirus Entry Mediator (TNFSF14)", Ware CF and Sedy J Curr Opin Immunol. 2011,23: 627-631).
HVEM의 반대측 상에 결합 영역의 위치에도 불구하고, LIGHT 및 BTLA 둘 모두는 TRAF2-의존적 기전을 통해 표준적 NFkB RelA 경로를 유도하여, 신호전달 결과는 두 리간드 모두에 대해 정성적으로 동일하다는 것을 나타낸다 ("Unconventional ligand activation of herpesvirus entry mediator signals cell survival", Cheung TC 등 Proc Natl AcadSci U S A. 2009; 106:6244-6249). 이 결과는 두 리간드 모두가 NFkB를 활성화시키는 TRAF2 E3 리가제 경로를 개시하도록 HVEM에 충분한 형태적 재구성을 제공한다는 것을 시사한다. HVEM은 LTβR과 같은 다른 TNFR과 마찬가지로 TRAF3을 그것의 신호전달 복합체 안으로 모집하지 않고, 따라서 HVEM의 신호전달 활성은 활성화 NFkB RelA로 제한된다.
HVEM의 시스 및 트랜스
T 세포에서 HVEM 및 BTLA의 공동발현은 HVEM에 접근하여 활성화시키는 LIGHT 및 다른 리간드의 능력을 방해하는 고유 기전을 형성한다 ("T cell intrinsic heterodimeric complexes between HVEM and BTLA determine receptivity to the surrounding microenvironment", Cheung TC 등 J Immunol. 2009; 183:7286-7296). 이전의 연구는 LIGHT의 가용성 형태의 거동은 그것의 막 결합된 형태가 대표적이었다고 주로 추정했다. 이 가정은 사실상 상피 세포에서 LTβR 또는 HVEM을 활성화시키는 가용성 LIGHT의 능력에서의 경우이다. 그러나, 가용성과 막 LIGHT 간의 구별이, 상피 세포와는 대조적으로 그것의 억제성 수용체 BTLA와 HVEM을 공동발현하는 T 세포의 연구에서 부각되었다. 인간 혈액 및 고유의 마우스 비장으로부터 유래된 T 세포는 HVEM 및 BTLA를 구성적으로 공동발현한다. HVEM 및 BTLA는 어느 하나의 유전자에서 유전자적으로 결핍된 마우스에서 나타낸 바와 같이 서로 독립적으로 발현된다. 이와 함께 HVEM-BTLA 시스 복합체는 안정하고, 신호전달 활성이 HVEM과 연관되지 않더라도 세포 표면에서 발현된다. 시스 복합체의 형성은 단지 HVEM이 BTLA의 도메인외에 결합하되는 것만을 요구하였고, 트랜스로 HVEM에 결합하는 BTLA에 영향을 주는 돌연변이는 또한 시스로의 결합에 영향을 주어, HVEM-BTLA 시스 복합체가 트랜스로서 동일한 결합 부위를 점한다는 것을 나타낸다. 사실상, HVEM 및 BTLA를 공동발현하는 세포는 HVEM 또는 BTLA-Fc에 결합할 수 없어, 이는 시스 복합체에서 분자의 >85%로 1:1의 비로 T 세포의 세포 표면 상의 HVEM 및 BTLA를 정량화하는 방법을 제공했다. 중요하게는, 비록 LIGHT의 결합이 기대된 대로 검출가능하였고, HVEM 단독을 발현하는 세포에서, 이들 리간드가 완전하게 기능적이 없지만, 가용성 LIGHT 또는 LTα의 첨가는 NFkB의 유도에 의해 검출될 때 HVEM을 활성화시기지 못했다. 가용성 또는 막 위치 중 어느 하나에서 BTLA 또는 CD160은 또한 시스 복합체를 발현하는 세포에서 HVEM을 활성화시기지 못했다. 따라서, BTLA는 HVEM과 공발현될 때 억제제로서 기능한다 ("TNF SUPERFAMILY NETWORKS: Bidirectional and Interference Pathways of the Herpesvirus Entry Mediator (TNFSF14)", Ware CF and Sedy J CurrOpinImmunol. 2011, 23:627-631).
막 형태의 LIGHT는 BTLA와 시스 복합체 내에서 HVEM을 활성화시킬 수 있는 유일한 세포 리간드이다. 그러나, 이 활성화는 BTLA의 부재에서 HVEM의 막 LIGHT 활성화에 비교하여 감소된다. 시스-복합체를 파괴하는 BTLA에 대한 항체의 존재는 HVEM을 활성화시키기 위해 LIGHT와 상승작용을 하며, 이는 BTLA로부터 HVEM의 분해가 HVEM을 활성화시키는 막 LIGHT 능력의 핵심 생체물리학적 특성임을 시사한다, 이들 결과는 막 LIGHT가 4가지 뚜렷한 신호전달 기능인: HVEM의 활성화, HVEM-BTLA 시스 복합체의 파괴, LTβR의 활성화, 및, 즉 가용성 LIGHT가 항-염증성인 HVEM-BTLA 착물 형성을 향상시키는 가용성 형태를 가진다는 것을 나타낸다 ("Targeting lymphocyte activation through the lymphotoxin and LIGHT pathways", Ware CF Immunol Rev. 2008; 223:186-201).
본 발명자들는 LIGHT, 특히 막 LIGHT에 특이적으로 결합하는 항원 결합 분자를 확인했다. 본 발명의 항원 결합 분자는 가용성 LIGHT보다 더 높은 친화도로 막 LIGHT에 결합한다. 본 발명의 항원 결합 분자는 또한 1개의 항원 결합 분자 대 1개의 LIGHT 삼량체의 비로 LIGHT의 삼량체에 우선적으로 결합한다.
본 발명의 제1 양태에서, VHCDR3을 포함하는 중쇄 가변 영역 및/또는 VLCDR3을 포함하는 경쇄 가변 영역을 포함하는 항원 결합 분자 또는 이의 단편 또는 변이체가 제공되고, 상기 항원 결합 분자는 LIGHT에 결합한다.
본 발명의 제2 양태에서, 중쇄 가변 영역 및/또는 경쇄 가변 영역을 포함하는 항원 결합 분자 또는 이의 단편 또는 변이체가 제공되고, 상기 영역 각각은 3개의 CDR 영역을 포함하고, 상기 항원 결합 분자는 LIGHT에 결합한다.
본 발명의 제3 양태에서, 항원 결합 분자가 제공되고, 상기 항원 결합 분자는 LIGHT에 특이적으로 결합하고 하기로 구성된 군으로부터 선택되는 항체이다: 2E08, 3A07, 3B04, 3C10, 3D12, 3E09, 2B11, 3B04_var1, 3B04_var2, 3B04_var3, 3B04_var4, 3B04_var5, 3B04_var6, 3B04_var7, 3B04_var8, 3B04_var9, 3B04_var10, 3B04_var11, 3B04_var12, 3B04_var13, 3B04_var14, 3B04_var15, 3B04_var16, 3D12_var1, 3D12_var2, 3D12_var3, 3D12_var4, 3D12_var5, 3D12_var6, 3D12_var7, 3D12_var8, 3D12_var9, 3D12_var10, 3D12_var11, 3D12_var12, 3D12_var13, 3D12_var14, 3D12_var15 및 3D12_var16. 본 발명은 또한, provide 상기 항체로부터 유래된 단편 및 변이체를 제공한다.
본 발명의 제4 양태에서, LIGHT에 결합하고 LIGHT에 결합하기 위해 제1, 제2 또는 제3 양태의 항원 결합 분자와 경쟁하는 항원 결합 분자 또는 이의 단편 또는 변이체가 제공된다.
본 발명의 제5 양태에서, 제1, 제2 또는 제3 양태의 항원 결합 분자 에 의해 결합된 LIGHT의 에피토프에 특이적으로 결합하는 항원 결합 분자가 제공된다.
본 발명의 제6 양태에서, LIGHT의 에피토프에 특이적으로 결합하는 항원 결합 분자가 제공되되, 상기 에피토프는 아미노산 GRATSSSRVW (서열번호: 124)을 포함한다.
본 발명의 제7 양태에서, 1개의 항원 결합 분자 대 1개의 LIGHT 삼량체의 비로 LIGHT 분자의 타이머 에 특이적으로 결합된 항원 결합 분자가 제공된다.
본 발명의 제8 양태에서, LIGHT의 제1, 제2 또는 제3 양태의 항원 결합 분자에의 결합을 억제하는 LIGHT에 특이적으로 결합하되는 항원 결합 분자가 제공된다.
본 발명의 제9 양태에서, 제1, 제2 또는 제3 양태의 항원 결합 분자로부터의 1 내지 10, 1 내지 5 또는 1 내지 2개의 아미노산 치환을 포함하는 항-LIGHT 항원 결합 분자가 제공된다. 본 발명의 추가 양태에서, 항-LIGHT 항원 결합 분자가 제공되되, 상기 항-LIGHT 항원 결합 분자는 본 발명의 항-LIGHT 항원 결합 분자의 인간화된 유도체 이다.
본 발명의 추가 양태에서, 본 발명의 항원 결합 분자 또는 항체의 친화성 성숙된 돌연변이체가 제공된다.
본 발명의 또 추가의 양태에서, 항-LIGHT 항원 결합 분자 또는 이의 친화성 성숙된 돌연변이체가 제공되고, 상기 항원 결합 분자 또는 친화성 성숙된 돌연변이체는 약 1 nM 미만의 막 LIGHT에 대한 KD 값 및 약 1 nM 초과의 가용성 LIGHT에 대한 KD 값을 가지며, 특히 항-LIGHT 항원 결합 분자 또는 이의 친화성 성숙된 돌연변이체는 약 1 nM 미만의 막 LIGHT에 대한 KD 값 및 약 5nM 초과의 가용성 LIGHT에 대한 KD 값을 가지며, 그리고 항-LIGHT 항원 결합 분자 또는 이의 친화성 성숙된 돌연변이체 바람직하게는 약 0.5nM 미만의 막 LIGHT에 대한 KD 값 및 약 10nM 초과의 가용성 LIGHT에 대한 KD 값, 또는 약 0.1 nM 미만의 막 LIGHT에 대한 KD 값 및 약 10nM 초과의 가용성 LIGHT에 대한 KD 값을 갖는다.
본 발명의 또 다른 양태에서, 막 LIGHT의 HVEM 및/또는 LTβR에의 결합 또는 LIGHT 발현 세포의 HVEM 및/또는 LTβR에의 결합 및 선택적으로 막 LIGHT의 유인 수용체 3에의 또는 막 LIGHT 발현 세포의 유인 수용체 3에의 결합을 부분적으로 억제하는 항-LIGHT 항체가 제공된다.
본 발명의 추가 양태에서, 본 발명의 항원 결합 분자, 또는 이의 단편 또는 변이체를 포함하는 약제학적 조성물이 제공된다.
본 발명의 또 추가의 양태에서 의약에서 사용하기 위한, 본 발명의 항원 결합 분자 또는 약제학적 조성물이 제공된다.
또 다른 양태에서, 염증성 장애 또는 질환을 치료 및/또는 예방하는데 사용하기 위한, 본 발명의 항원 결합 분자 또는 약제학적 조성물이 제공된다.
또 다른 양태에서, 염증성 장애 또는 질환의 치료에 사용하기 위한 약제의 제조에서의, 본 발명의 항원 결합 분자 또는 약제학적 조성물의 용도가 제공된다.
추가 양태에서, 필요로 하는 대상체에서 염증성 장애 또는 질환을 치료 또는 예방하는 방법이 제공되고, 상기 방법은 상기 대상체에게 본 발명의 항원 결합 분자 또는 약제학적 조성물의 치료적 유효량을 투여하는 것을 포함한다.
본 발명의 항원 결합 분자를 인코딩하는 핵산, 상기 헥산을 포함하는 벡터, 및 숙주세포, 뿐만 아니라 키트, LIGHT 단백질의 HVEM 및/또는 LTβR에의 결합 또는 LIGHT 발현 세포의 HVEM 및/또는 LTβR에의 결합을 억제하는 방법, 항-LIGHT 항원 결합 분자를 발현시키는 세포를 생산하는 방법으로서, 상기 세포를 본 발명의 플라스미드 또는 벡터로 형질감염시키는 단계를 포함하는 방법, 및 항-LIGHT 항원 결합 분자의 생산 방법으로서, 세포 내양 배지에서 본 발명의 숙주세포를, 상기 세포 내부의 플라스미드 또는 벡터의 인코딩 핵산 서열을 발현시키는 조건 하에서 배양시키는 단계를 포함하는 방법이 또한 제공된다.
도 1A는 안정적으로 형질감염된 LIGHT EL4 세포에 모든 7개 리드 항-막 LIGHT mAb의 결합을 도시한다. 각각의 mAb의 EC50이 묘사되어 있고 2A11은 음성 대조군 항-HEL mAb이다.
도 1B는 HeLa 세포 루시퍼라아제 리포터 세포 검정에서 생리적 및 질환 농도에서 항-막 LIGHT mAbs의 가용성 LIGHT에의 결합의 결핍을 도시한다. 루시퍼라아제 검정에 의해 측정된 가용성 LIGHT-매개된 LTbR-의존적 NF-kB 활성화에 대한 항-막 LIGHT mAbs 3B04 및 3D12의 효과의 결핍.
도 2A 및 2B는 막 LIGHT (HEK293FF 인간-LIGHT 세포)에 대해 결합하는 바이오티닐화된 HVEM-Fc (도 2A) 또는 바이오티닐화된LTβR-Fc (도 2B)에 대한 항-막 LIGHT mAb 3D12, 3B04, 3E09, 2B11, 2E08, 3A07 및 3C10에 대한 경쟁 검정을 도시한다. IRR은 음성 대조군 항-HEL mAb이다.
도 3은 리드 항-막 LIGHT mAb에 의해 안정적으로 형질감염된 EL4-LIGHT 세포에 의해 자극된 HT-29 세포로부터 IL-8 분비의 억제를 도시한다. IRR은 음성 대조군 항-HEL mAb이다.
도 4는 막 LIGHT (EL4-LIGHT) 세포에 대한 결합에 대해 DcR3-Fc에 대한 항-막 LIGHT mAb 3D12, 3B04 및2B11의 경쟁 결합을 도시한다. 비교를 위해 EP2292663으로부터의 mAb F19가 포함된다.
도 5는 자극된 CD8 T 세포 상에서 LIGHT에 대해 결합하는 7개 리드 항-막 LIGHT mAb, 3D12, 3B04, 3E09, 2B11, 2E08, 3A07 및 3C10, (두꺼운 단일 흑색선)의 유세포 측정 플랏을 도시한다. 점선은 이차 항체 단독인 반면 얇은 단일 흑색선은 대조군 항-HEL mAb (02A11)이다.
도 6은 3개 LIGHT 변이체에 대해 7개 리드 항-막 LIGHT mAb (3D12, 3B04, 3E09, 2B11, 2E08, 3A07 및 3C10) 결합의 유세포 측정 플랏을 도시한다. 실험은 각각의 mAb로 3회 반복되었다. 무관한 항-HEL mAb는 음성 대조군으로 사용되었고 상업적 항-LIGHT mAb는 양성 대조군으로 사용되었다.
도 7은 7개 쥣과 단클론성 항-LIGHT 중쇄 가변 영역의 아미노산 서열을 도시한다. 각각의 중쇄 가변 영역의 CDR (CDR1, CDR2 및 CDR3)이 강조되어 있다.
도 8은 7개 쥣과 단클론성 항-LIGHT 경쇄 가변 영역의 아미노산 서열을 도시한다. 각각의 경쇄 가변 영역의 CDR (CDR1, CDR2 및 CDR3)이 강조되어 있다.
도 9는 3B04 모체 항체로부터 유래된 가변 중쇄 및 경쇄 인간화된 및 탈면역화된 사슬의 아미노산 서열을 도시한다. 각각의 중쇄 및 경쇄 가변 영역의 CDR (CDR1, CDR2 및 CDR3)이 강조되어 있다.
도 10은 3D12 모체 항체로부터 유래된 가변 중쇄 및 경쇄 인간화된 및 탈면역화된 사슬의 아미노산 서열을 도시한다. 각각의 중쇄 및 경쇄 가변 영역의 CDR (CDR1, CDR2 및 CDR3)이 강조되어 있다.
도 11은 다른 항-LIGHT (막 및 가용성) mAb에 비교하여 안정적으로 형질감염된 LIGHT EL4 세포에 대한 항-막 LIGHT mAb 3B04 및 3D12의 결합을 도시한다. 비교를 위해 EP2292663으로부터의 mAb F19 및 mAb F23이 포함된다.
도 12는 mAb 3B04, 3D12, 2E08, 3A07, 3C10, 2B11및 3E09의 에피토프위치 (aa 188-197)를 묘사하는 LIGHT의 결정 구조의 3D 시각화를 도시한다.
도 13은 음성 (IgG) 및 양성 (휴미라, 항-TNF) 대조군에 비교된 hu-NOG 마우스에서 DSS-유도된 결장염의 생체내 모델에서 항-막 LIGHT mAb 3B04 (변이체 16)의 효과를 도시한다.
본 명세서에서 사용된 바와 같이, "항원 결합 분자"는 서로에 대해 결합 특이성을 갖는 한쌍의 분자의 구성원이다. 항원 결합쌍의 구성원은 자연적으로 유래될 수 있거나 또는 전체적으로 또는 부분적으로 합성으로 생산될 수 있다. 한쌍의 분자의 일 구성원은 그것의 표면 상에, 돌출부 또는 공동일 수 있고, 한쌍의 분자의 다른 구성원에 특이적으로 결합하고, 따라서 그의 특정 공간적 및 극성 조직에 상보적인 영역을 갖는다. 따라서, 쌍의 구성원들은 구체적으로 서로에 대해서 결합하는 특성을 갖는다. 항원 결합 쌍의 유형 예는 항원-항체, 바이오틴-아비딘, 호르몬-호르몬 수용체, 수용체-리간드 및 효소-기질이다. 본 발명은 일반적으로 항원-항체 유형 상호작용에 관한 것이다. 본 발명에서 사용된 항원 결합 분자는 다른 분자보다 LIGHT, hLIGHT, 막 LIGHT, LIGHT의 에피토프 또는 hLIGHT의 에피토프에 보다 큰 친화성으로 결합하고, 즉 이것은 LIGHT, hLIGHT, 막 LIGHT, LIGHT의 에피토프 또는 hLIGHT의 에피토프에 특이적으로 결합한다. LIGHT, hLIGHT, 막 LIGHT, LIGHT의 에피토프 또는 hLIGHT의 에피토프에 대한 항원 결합 분자의 결합 친화도는 해리 상수 (KD)를 사용하여 측정될 수 있다. LIGHT, hLIGHT, 막 LIGHT, LIGHT의 에피토프 또는 hLIGHT의 에피토프에 대한 항원 결합 분자의 결합 친화도는 또한 결합 상수 (Ka)를 사용하여 측정될 수 있다. 본 명세서에 기재된 hLIGHT의 에피토프에 대한 항원 결합 분자의 KD 값은 대안적인 LIGHT의 에피토프 또는 비-LIGHT 에피토프에 대한 항원 결합 분자의 KD 값보다 낮을 것이다.
LIGHT, hLIGHT 및/또는 막 LIGHT에 결합하는 항원 결합분자는 항-LIGHT 항체를 포함한다. 본 발명에서 사용된 항원 결합 분자는 전형적으로 항체이다.
본 명세서에서 사용된 바와 같은 용어 "항체"는 면역글로불린 분자 및 면역글로불린 분자의 면역학적으로 활성부, 즉, 천연적이든 또는 부분적으로 또는 전체적으로 합성으로 생산되든 간에 항원에 특이적으로 결합하는 항원 결합 부위를 함유하는 분자를 지칭한다. 본 용어는 또한 항체 결합 도메인이거나 또는 이에 상동성인 결합 도메인을 갖는 임의의 폴리펩타이드 또는 단백질을 포괄한다. 항체는 다클론성 또는 단클론성일 수 있다. 이들은 천연 공급원으로부터 유래될 수 있거나, 또는 이들은 부분적으로 또는 전체적으로 합성으로 생산될 수 있다. 항체는 전형적으로 2개의 동일한 중쇄 및, 중쇄보다 더 작은 2개의 동일한 경쇄를 함유하는 폴리펩타이드이다. 포유동물에는, 람다 (λ) 및 카파 (κ)로 불리는 2개의 유형의 경쇄가 있다. 각각의 중쇄 및 각각의 경쇄는 가변 영역 및 불변 영역으로 구성된다. 중쇄 가변 영역은 VH 영역으로 지칭되고 경쇄 가변 영역은 VL 영역으로 지칭된다. 카파 경쇄의 경우, VL 영역은 또한 VK 영역으로 지칭될 수 있다. 중쇄 및 경쇄의 각각의 가변 영역은 3개의 상보성 결정 영역 (CDR)인, CDR1, CDR2 및 CDR3을 포함한다. 이들은 각각 VLCDR1, VLCDR2, VLCDR3, VHCDR1, VHCDR2 및 VHCDR3으로 명명된다. 항체의 예는 면역글로불린 아이소타입 (예를 들어, IgG, IgE, IgM, IgD 및 IgA) 및 그것의 아이소타입 서브클래스; 항원 결합 도메인, 예컨대 Fab, F(ab')2, Fv, scFv, dAb, Fd를 포함하는 단편; 및 디아바디이다.
항체 및 항원 결합 분자의 단편
본 발명의 항원 결합 분자는 항체의 단편, 구체적으로 항체의 항원 결합 단편일 수 있다. 항원 결합 단편은 하나 이상의 항원 결합 영역을 포함한다. 전체의 항체의 단편은 결합 항원의 기능을 수행할 수 있다는 것이 나타났다. 결합 단편의 예는 다음과 같다: (i) VL, VH, CL 및 CH1 도메인으로 구성된 Fab 단편; (ii) VH 및 CH1 도메인으로 구성된 Fd 단편; (iii) 단일 항체의 VL 및 VH 도메인으로 구성된 Fv 단편; (iv) VH 도메인으로 구성되는 dAb 단편 (Ward, E.S. 등, Nature 341:544-546 (1989)); (v) 단리된 CDR 영역; (vi) 2개의 연결된 Fab 단편을 포함하는 2가 단편인, F(ab')2 단편; (vii) VH 도메인 및VL 도메인이 2개의 도메인이 연합하도록 하는 펩타이드 링커에 의해 연결되어 항원 결합 부위를 형성하는, 단일 사슬 Fv 분자 (scFv) (Bird 등, Science 242:423-426 (1988); Huston 등, PNAS USA 85:5879-5883 (1988)); (viii) 이중특이적 단일 사슬 Fv 이량체 (PCT/US92/09965) 및 (ix) 유전자 융합에 의해 구축된 다가 또는 다중특이적 단편인, "디아바디" (WO94/13804; P. Hollinger 등, Proc. Natl. Acad. Sci. USA 90: 6444-6448 (1993)). 전형적으로, 단편은 Fab, F(ab')2 또는 Fv 단편 또는 scFv 분자이다.
디아바디는 폴리펩타이드의 다량체로, 각각의 폴리펩타이드는 면역글로불린 경쇄의 결합 영역을 포함하는 제1 도메인 및 면역글로불린 중쇄의 결합 영역을 포함하는 제2 도메인을 포함하고, 2개의 도메인은 (예를 들어 펩타이드 링커에 의해) 연결되지만 항원 결합 부위를 형성하도록 서로 간에 연관될 수 있고: 항원 결합 부위는 다량체 내의 하나의 폴리펩타이드의 제1 도메인과 다량체 내의 또 다른 폴리펩타이드의 제2 도메인의 회합에 의해 형성된다 (WO94/13804).
이중특이적 항체가 사용되는 경우, 이들은 다양한 방식 (Hollinger & Winter, Current Opinion Biotechnol. 4:446-449 (1993))으로 제조될 수 있고, 예를 들어 화학적으로 또는 하이브리드 하이브리도마로부터 제조될 수 있는 종래의 이중특이적 항체이거나, 또는 하기에 언급된 임의의 이중특이적 항체 단편일 수 있다. 전체의 항체보다는 scFv 이량체 또는 디아바디를 사용하는 것이 바람직할 수 있다. 디아바디 및 scFv는 가변 도메인만을 사용하여 Fc 영역 없이 구축될 수 있어, 잠재적으로 항-개체특이형 반응을 감소시킨다. 이중특이적 항체의 다른 형태는 문헌 [Traunecker 등, EMBO Journal 10:3655-3659 (1991)]에 기재된 단일 사슬 "Janusins"을 포함한다.
이중특이적 전체의 항체와는 대조적으로 이중특이적 디아바디는 또한 이들이 E. 콜리에서 쉽게 구축되고 발현될 수 있기 때문에 유용할 수 있다. 적절한 결합 특이성의 디아바디 (및 많은 다른 폴리펩타이드 예컨대 항체 단편)는 라이브러리로부터 파아지 디스플레이 (WO94/13804)를 사용하여 쉽게 선택될 수 있다. 디아바디의 하나의 아암이, 예를 들어, 항원 X에 대해 지향된 특이성으로 일정하게 유지되는 경우, 다른 아암이 변화되고 적절한 특이성의 항체가 선택되는 라이브러리가 제작될 수 있다.
동일성 및 상동성
당해 분야에서 알려진 바와 같은 "동일성"은 서열을 비교함에 의해 결정된 2개의 또는 그 초과의 폴리펩타이드 서열 또는 2개의 또는 그 초과의 폴리뉴클레오타이드 서열 사이의 관계이다. 당업계에서, 동일성은 또한 이러한 서열의 줄 간의 매치에 의해 결정될 때, 경우에 따라, 폴리펩타이드 또는 폴리뉴클레오타이드 서열 사이의 서열 관련성의 정도를 의미한다. 2개의 폴리펩타이드 또는 2개의 폴리뉴클레오타이드 서열 간의 동일성을 측정하는 수많은 방법이 존재하지만, 동일성을 결정하기 위해 통상적으로 이용되는 방법은 컴퓨터 프로그램에 한정된다. 2개의 서열 간의 동일성을 결정하기 위한 바람직한 컴퓨터프로그램은, 비제한적으로, GCG 프로그램 패키지를 포함한다 (Devereux, 등, Nucleic Acids Research, 12, 387 (1984), BLASTP, BLASTN, and FASTA (Atschul 등, J. Molec. Biol. 215, 403 (1990)).
아미노산 서열을 비교하기 위해 CLUSTAL 프로그램과 같은 프로그램을 사용할 수 있다. 이 프로그램은 아미노산 서열을 비교하고 적절하게 어느 하나의 서열에 공간을 삽입함에 의해 최적의 정렬을 찾는다. 최적의 정렬에 대한 아미노산 동일성 또는 유사성 (아미노산 유형의 동일성 플러스 보존)을 계산하는 것이 가능하다. BLASTx 같은 프로그램은 유사한 서열의 가장 긴 신장을 정렬하고 적합성에 대한 값을 할당한다. 따라서 각각 상이한 점수를 갖는 유사성의 몇개의 영역이 발견되는 비교를 얻는 것이 가능하다. 두 유형의 동일성 분석이 본 발명에서 고려된다.
2개의 아미노산 서열 또는 2개의 핵산 서열의 동일성 퍼센트는 최적의 비교 목적을 위해 서열을 배열하고 (예를 들어, 갭은 서열과 함께 최상의 정렬을 위해 제1 서열에 도입될 수 있음) 그리고 상응하는 위치에서 아미노산 잔기 또는 뉴클레오타이드을 비교함에 의해 결정된다. "최상의 정렬"은 최고 동일성 퍼센트를 초래하는 2개의 서열의 정렬이다. 동일성 퍼센트는 비교되는 서열 내의 동일한 아미노산 잔기 또는 뉴클레오타이드의 수에 의해 결정된다 (즉, % 동일성 = 동일한 위치의 수/위치의 총수 x 100). 일반적으로, 본 명세서에서 % 동일성에 언급은 문맥 상 특정하지 않거나 또는 달리 의미하지 않는 한 분자의 전장에 따른 % 동일성을 지칭한다.
2개의 서열 사이의 동일성 퍼센트의 결정은 당해 분야의 숙련가에게 알려진 수학적 알고리즘을 사용하여 달성될 수있다. 2개의 서열을 비교하기 위한 수학적 알고리즘의 예는 문헌 [Karlin and Altschul (1990) Proc. Natl. Acad. Sci. USA 87:2264-2268]의 알고리즘으로, 문헌 [Karlin and Altschul (1993) Proc. Natl. Acad. Sci. USA 90:5873-5877]에서와 같이 변형된다. 문헌 [Altschul, 등 (1990) J. Mol. Biol. 215:403-410]의 N BLAST 및 XBLAST 프로그램은 그와 같은 알고리즘을 편입했다. 본 발명의 핵산 분자에 대한 뉴클레오타이드 서열 상동성을 얻기 위한 BLAST 뉴클레오타이드 검색은 NBLAST 프로그램으로, 점수 = 100, 단어 길이 = 12로 수행될 수 있다. 본 발명의 단백질 분자에 대한 아미노산 서열 상동성을 얻기 위한 BLAST 단백질 검색은 XBLAST 프로그램으로, 점수 = 50, 단어 길이 = 3으로 수행될 수 있다. 비교하기 위한 갭핑된 정렬을 얻기 위해, 문헌 [Altschul 등 (1997) Nucleic Acids Res. 25:3389-3402]에서 기재된 바와 같은 갭핑된 BLAST가 이용될 수 있다. 대안적으로, PSI-Blast가 사용되어 분자간의 원연관계 (Id.)를 감지하는 반복된 조사를 수행할 수 있다. BLAST, 갭핑된 BLAST, 및 PSI-Blast 프로그램을 이용하는 경우, 각각의 프로그램 (예를 들어, XBLAST 및 NBLAST)의 디폴트 파라미터가 사용될 수 있다. http://www.ncbi.nlm.nih.gov 참고. 서열의 비교를 위해 이용되는 수학적 알고리즘의 또 다른 예는 마이어와 밀러, CABIOS (1989)의 알고리즘이다. CGC 서열 정렬 소프트웨어 패키지의 일부인 ALIGN 프로그램 (버전 2.0)은 그와 같은 알고리즘을 편입했다. 당업계에서 알려진 서열 분석을 위한 다른 알고리즘은 문헌 [Torellis and Robotti (1994) Comput. Appl. Biosci., 10 :3-5]에 기재된 바와 같은 ADVANCE 및 ADAM; 및 문헌 [Pearson and Lipman (1988) Proc. Natl. Acad. Sci. 85:2444-8]에 기재된 FASTA를 포함한다. FASTA 내에서, ktup는 검색의 민감성 및 속도를 설정하는 제어 선택이다.
전형적으로, 본 발명에 제공된 항원 결합 분자의 CDR의 아미노산 서열은 하기에 기재된 CDR의 아미노산 서열에 대해 아미노산 수준에서, 예를 들어, HGMP (인간 게놈 맵핑 프로젝트)에 의해 제공된 BLAST 컴퓨터 프로그램 (Atschul 등, J. Mol. Biol. 215, 403-410 (1990))의 디폴트 파라미터를 사용하여 적어도 70% 동일성을 갖는다. 더욱 전형적으로, CDR 서열은 하기에 나타난 서열에 대해 아미노산 수준에서 적어도 75%, 80%, 85%, 90%, 91 %, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98% 또는 적어도 99% 동일성을 갖는다. 전형적으로 본 발명에서 사용된 항원 결합 분자의 각각의CDR 서열은 아래에 제시된 CDR의 아미노산 서열에 대해 이 수준의 동일성을 갖는다. 대안적으로, 본 발명에서 사용된 항원 결합 분자의 임의의 1, 2, 3, 4 또는 5개의 CDR은 아래에 제시된 CDR의 아미노산 서열에 대해 이 수준의 동일성을 갖는다.
본 발명에서 제공된 항원 결합 분자의 VH 및 VL 영역의 아미노산 서열은 하기에 기재된 VH 및 VL 영역의 아미노산 서열에 대해 아미노산 수준에서, 예를 들어, HGMP (인간 게놈 맵핑 프로젝트)에 의해 제공된 BLAST 컴퓨터 프로그램 (Atschul 등, J. Mol. Biol. 215, 403-410 (1990))의 디폴트 파라미터를 사용하여 적어도 70% 동일성을 갖는다. 더욱 전형적으로, VH 및 VL 영역은 하기에 나타난 서열에 대해 아미노산 수준에서 적어도 75%, 80%, 85%, 90%, 91 %, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98% 또는 적어도 99% 동일성을 갖는다.
전형적으로 본 발명에서 사용된 항원 결합 분자의 각각의VH 및 VL 영역은 아래에 제시된 VH 및 VL 영역의 아미노산 서열에 대해 이 수준의 동일성을 갖는다. 대안적으로, 본 발명에서 사용된 항원 결합 분자의 VH 및 VL 영역 중 단 하나는 아래에 제시된 VH 및 VL 영역의 아미노산 서열에 대해 이 수준의 동일성을 갖는다.
본 명세서에서 사용된 바와 같은 동일성은 "상동성" 및 "유사성"과 교환가능하게 사용된다. 특정 % 동일성에 대한 언급은 % 상동성 및 % 유사성에 동등하게 적용한다. 상동성 및 유사성은 적절한 알고리즘, 예컨대 FASTA, BLAST 및 갭핑된 BLAST를 사용하여 결정될 수 있다. 이들 분석을 수행하기 위한 소프트웨어는 공공연하게 이용가능하다.
변이체
본 발명은 또한 하기에 언급된 펩타이드 서열의 변이체로 확장한다. 본 명세서에서 사용된 바와 같은 용어 "변이체"는 유사한 아미노산 서열을 가지고 및/또는 동일한 기능을 보유하는 단백질에 관한 것이다. 예를 들어, 용어 "변이체"는 하나 이상의 아미노산 첨가, 결실, 치환 등을 포함하는 단백질 또는 폴리펩타이드를 포괄한다. 본 발명의 변이체의 예는 하나 이상의 다른 아미노산으로 하나 이상의 아미노산의 치환과는 별개로 아래에 정의된 바와 같은 펩타이드를 포함하는 단백질이다. 숙련가는 다양한 아미노산이 유사한 특성을 갖는다는 것을 알고 있다. 서브스턴스의 하나 이상의 이러한 아미노산은 그 서브스턴스의 원하는 활성을 제거함이 없이 하나 이상의 다른 이러한 아미노산에 의해 종종 치환될 수 있다.
따라서 아미노산 글리신, 알라닌, 발린, 류신 및 이소류신은 서로 (지방족 측쇄를 갖는 아미노산)에 대해 종종 치환될 수 있다. 이들 가능한 치환 중, 글리신 및 알라닌이 (이들이 상대적으로 짧은 측쇄를 가지기 때문에) 서로에 대해 치환되도록 사용되는 것과 발린, 류신 및 이소류신이 (이들이 소수성인 더 큰 지방족 측쇄를 가지기 때문에) 서로에 대해 치환되도록 사용되는 것 바람직하다. 서로에 대해 종종 치환될 수 있는 다른 아미노산은 하기를 포함한다: 페닐알라닌, 티로신 및 트립토판 (방향족 측쇄를 갖는 아미노산); 라이신, 아르기닌 및 히스티딘 (염기성 측쇄를 갖는 아미노산); 아스파르테이트 및 글루타메이트 (산성 측쇄를 갖는 아미노산); 아스파라긴 및 글루타민 (아미드 측쇄를 갖는 아미노산); 및 시스테인 및 메티오닌 (황함유 측쇄를 갖는 아미노산).
이런 성질의 치환은 종종 "보존적" 또는 "반-보존적" 아미노산 치환으로 지칭된다.
3개의 문자 및 하나의 문자 암호를 사용하여 아미노산은 다음과 같이 지칭될 수 있다: 글리신 (G 또는 Gly), 알라닌 (A 또는 Ala), 발린 (V 또는 Val), 류신 (L 또는 Leu), 이소류신 (I 또는 lie), 프롤린 (P 또는 Pro), 페닐알라닌 (F 또는 Phe), 티로신 (Y 또는 Tyr), 트립토판 (W 또는 Trp), 라이신 (K 또는 Lys), 아르기닌 (R 또는 Arg), 히스티딘 (H 또는 His), 아스파르트산 (D 또는 Asp), 글루탐산 (E 또는 Glu), 아스파라긴 (N 또는 Asn), 글루타민 (Q 또는 Gin), 시스테인 (C 또는 Cys), 메티오닌 (M 또는 Met), 세린 (S 또는 Ser) 및 트레오닌 (T 또는 Thr). 잔기가 아스파르트산 또는 아스파라긴일 수 있는 경우, 기호 Asx 또는 B가 사용될 수 있다. 잔기가 글루탐산 또는 글루타민일 수 있는 경우, 기호 Glx 또는 Z가 사용될 수 있다. 문맥이 달리 특정하지 않는 한, 아스파르트산에 대한 언급은 아스파르테이트를 포함하고, 글루탐산은 글루타메이트를 포함한다.
아미노산 결실 또는 삽입은 또한 아래에 언급된 융합 단백질에 대한 아미노산 서열에 대해 이루어 질 수 있다. 따라서, 예를 들어, 폴리펩타이드의 활성에 대해 실질적인 효과를 가지지 않거나, 또는 적어도 이러한 활성을 제거하지 않는 아미노산은 결실될 수 있다. 그와 같은 결실은 여전히 활성을 유지하면서 폴리펩타이드의 전체적인 길이 및 분자량이 감소될 수 있기 때문에 유리할 수 있다. 이것은 특정 목적을 위해 필요한 폴리펩타이드의 양이 감소되게 할 수 있고 - 예를 들어, 투약량 수준이 감소될 수 있다.
따라서 아미노산 글리신, 알라닌, 발린, 류신 및 이소류신은 서로 (지방족 측쇄를 갖는 아미노산)에 대해 종종 치환될 수 있다. 이들 가능한 치환 중, 글리신 및 알라닌이 (이들이 상대적으로 짧은 측쇄를 가지기 때문에) 서로에 대해 치환되도록 사용되는 것과 발린, 류신 및 이소류신이 (이들이 소수성인 더 큰 지방족 측쇄를 가지기 때문에) 서로에 대해 치환되도록 사용되는 것 바람직하다. 서로에 대해 종종 치환될 수 있는 다른 아미노산은 하기를 포함한다: 페닐알라닌, 티로신 및 트립토판 (방향족 측쇄를 갖는 아미노산); 라이신, 아르기닌 및 히스티딘 (염기성 측쇄를 갖는 아미노산); 아스파르테이트 및 글루타메이트 (산성 측쇄를 갖는 아미노산); 아스파라긴 및 글루타민 (아미드 측쇄를 갖는 아미노산); 및 시스테인 및 메티오닌 (황함유 측쇄를 갖는 아미노산).
일부 구현예에서, 하기 아미노산은 보존적 아미노산 치환을 위해 서로에 대해 교환될 수 있다:
Figure pct00001
하기에 주어진 서열에 대한 아미노산 교환은, 예를 들어, 부위지향적 돌연변이유발 또는 고체상태 합성을 사용함에 의해, 임의의 적합한 기술을 사용하여 이루어 질 수 있다.
본 발명의 범위 이내에서의 아미노산 치환 또는 삽입은 자연 발생 또는 비-자연 발생 아미노산을 사용하여 이루어질 수 있음이 인정되어야 한다. 천연 또는 합성 아미노산이 사용되든 않든 간에, 단지 L- 아미노산이 존재하는 것이 바람직하다.
본 발명의 일 구현예에서, 항체 결합 도메인 또는 항원 결합 도메인에서 1 내지 10, 바람직하게는 1 내지 5개의 아미노산 치환을 포함하는 본 발명의 항원 결합 분자, 또는 이의 항원 결합 단편이 제공된다. 예를 들어, 본 발명의 일 구현예에서, 항-LIGHT 항체 또는 이의 항원 결합 단편이 제공되고, 상기 항-LIGHT 항체 이의 항원 결합 단편은 2E08, 3A07, 3B04, 3C10, 3D12, 3E09, 2B11, 3B04_var1, 3B04_var2, 3B04_var3, 3B04_var4, 3B04_var5, 3B04_var6, 3B04_var7, 3B04_var8, 3B04_var9, 3B04_var10, 3B04_var11, 3B04_var12, 3B04_var13, 3B04_var14, 3B04_var15, 3B04_var16, 3D12_var1, 3D12_var2, 3D12_var3, 3D12_var4, 3D12_var5, 3D12_var6, 3D12_var7, 3D12_var8, 3D12_var9, 3D12_var10, 3D12_var11, 3D12_var12, 3D12_var13, 3D12_var14, 3D12_var15 및 3D12_var16으로 구성된 군으로부터 선택된 항체의 6개의 CDR 영역을 포함하고, 상기 항원 결합 분자는 그것의 CDR 영역 중 모두를 가로지르는 1 내지 10개의 아미노산 치환, 바람직하게는 1 내지 5개의 아미노산 치환을 갖는다. 본 발명의 추가 구현예에서, 항-LIGHT 항원 결합 분자 또는 이의 항원 결합 단편이 제공되되, 상기 항-LIGHT 항체 이의 항원 결합 단편은 2E08, 3A07, 3B04, 3C10, 3D12, 3E09, 2B11, 3B04_var1, 3B04_var2, 3B04_var3, 3B04_var4, 3B04_var5, 3B04_var6, 3B04_var7, 3B04_var8, 3B04_var9, 3B04_var10, 3B04_var11, 3B04_var12, 3B04_var13, 3B04_var14, 3B04_var15, 3B04_var16, 3D12_var1, 3D12_var2, 3D12_var3, 3D12_var4, 3D12_var5, 3D12_var6, 3D12_var7, 3D12_var8, 3D12_var9, 3D12_var10, 3D12_var11, 3D12_var12, 3D12_var13, 3D12_var14, 3D12_var15 및 3D12_var16으로 구성된 군으로부터 선택된 항체의 VH 및 VL 서열을 포함하고, 상기 항원 결합 분자는 그것의 VH 및 VL 서열을 가로지르는 1 내지 10개의 아미노산 치환, 바람직하게는 1 내지 5개의 아미노산 치환을 갖는다. 본 발명의 또 추가의 구현예에서, 항-LIGHT 항체가 제공되되, 상기 항-LIGHT 항체는 2E08, 3A07, 3B04, 3C10, 3D12, 3E09, 2B11, 3B04_var1, 3B04_var2, 3B04_var3, 3B04_var4, 3B04_var5, 3B04_var6, 3B04_var7, 3B04_var8, 3B04_var9, 3B04_var10, 3B04_var11, 3B04_var12, 3B04_var13, 3B04_var14, 3B04_var15, 3B04_var16, 3D12_var1, 3D12_var2, 3D12_var3, 3D12_var4, 3D12_var5, 3D12_var6, 3D12_var7, 3D12_var8, 3D12_var9, 3D12_var10, 3D12_var11, 3D12_var12, 3D12_var13, 3D12_var14, 3D12_var15 및 3D12_var16으로 구성된 군으로부터 선택된 항체이고, 상기 항체는 1 내지 10개의 아미노산 치환, 바람직하게는 1 내지 5개의 아미노산 치환을 갖는다.
일부 구현예에서, 하나 이상의 아미노산 치환은 CDR 영역 또는 영역에 있다. 다른 구현예에서, 하나 이상의 아미노산 치환은 프레임워크 영역에서, 즉 가변성 중쇄 및 경쇄에서이지만, CDR 영역 또는 영역들에서는 아니다. 다른 구현예에서, 하나 이상의 아미노산 치환은 가변 중쇄 및/또는 가변 경쇄 영역에 임의의 위치에 있을 수 있다.
본 발명의 범위 내의 다른 변이체는 LIGHT, 바람직하게는 막 LIGHT에 대한 증가된 친화도를 갖는 변형된 본 발명의 항원 결합 분자를 포함한다. 일 구현예에서, 본 발명의 항원 결합 분자는 친화성- 성숙된 항체이다. 일 구현예에서, 본 발명의 항원 결합 분자는 인간화된 친화성-성숙된 항체이다.
임의의 알려진 방법은 LIGHT, 바람직하게는 막 LIGHT에 대한 증가된 친화도로 친화성- 성숙된 항체 또는 인간화된 친화성-성숙된 항체를 생성하기 위해 본 발명의 항원 결합 분자의 친화도를 증가시키기 위해 사용될 수 있다.
따라서 본 발명의 항원 결합 분자의 친화성 성숙된 돌연변이체 또는 변이체인 항원 결합 분자가 제공된다. 예를 들어, 일 구현예에서, 2E08, 3A07, 3B04, 3C10, 3D12, 3E09, 2B11, 3B04_var1, 3B04_var2, 3B04_var3, 3B04_var4, 3B04_var5, 3B04_var6, 3B04_var7, 3B04_var8, 3B04_var9, 3B04_var10, 3B04_var11, 3B04_var12, 3B04_var13, 3B04_var14, 3B04_var15, 3B04_var16, 3D12_var1, 3D12_var2, 3D12_var3, 3D12_var4, 3D12_var5, 3D12_var6, 3D12_var7, 3D12_var8, 3D12_var9, 3D12_var10, 3D12_var11, 3D12_var12, 3D12_var13, 3D12_var14, 3D12_var15 및 3D12_var16으로 구성된 군으로부터 선택된 항체의 친화성- 성숙된 변이체가 제공된다. 일반적으로, 친화성 성숙된 돌연변이체는 모 항체 (돌연변이체가 유래된 항체)보다 LIGHT (특히 인간 LIGHT)에 대한 더 높은 친화도를 갖는다. 또한 본 발명은 본 발명의 항원 결합 분자 또는 항체의 친화성 성숙에 의해 얻을 수 있거나 수득된 항원 결합 분자 및 항체가 제공된다.
본 발명의 항원 결합 분자는 전형적으로 항체, 더욱 전형적으로 단클론성 항체이다. 바람직한 구현예에서, 본 발명의 단클론성 항체는 인간화된 항체이. 일부 구현예에서, 항체는, 인간 불변 영역이 이용된 완전한-인간 단클론성 항체 이다.
단클론성 항체의 생산 방법은 예를 들어 하기에 기재된 바와 같이 숙련가에게 잘 알려져 있다: Frenzel 등, "Expression of Recombinant Antibodies", Front Immunol, 2013, 4:217 (그 내용은 본 명세서에 참고로 편입됨).
본 발명의 단클론성 항체는 항체의 아미노산 서열을 변형시킴으로써 인강화될 수 있다. 본 발명의 항원 결합 분자의 면역원성을 감소시키는 방법은 적합한 항체 프레임워크 스캐폴드에 대한 CDR 이식 또는, 예를 들어 부위 지향적 돌연변이유발 또는 다른 통상적으로 사용된 분자 생물학적 기술에 의한 가변 표면 잔기 리모델링을 포함한다 (Roguska 등 Protein Eng. 9 895-904 (1996)).
적용가능한 다른 방법은 분자 내의 포텐셜 T-세포 에피토프의 확인, 및 예를 들어 부위 지향적 돌연변이유발 (탈면역화)에 의한 상기 에피토프의 후속적인 제거를 포함할 수 있다. 항원 결합 분자의 인간화는 바람직할 수 있고, 상기 분자는 치료제로서 사용될 수 있다. CDR 영역 또는 주위 프레임워크 서열의 인간화는 원하는 대로 수행될 수 있다.
단클론성 및 다른 항체를 취하고 최초 항체의 특이성을 보유하는 다른 항체 또는 키메라 분자를 생산하기 위해 재조합 DNA 기술을 사용할 수 있다. 그와 같은 기술은 항체의 면역글로불린 가변 영역, 또는 상보적 결정 영역 (CDR)을 인코딩하는 DNA를 상이한 면역글로불린의 불변 영역, 또는 불변 영역 플러스 프레임워크 영역으로 도입하는 것을 수반할 수 있다. 항체를 생산하는 하이브리도마 또는 다른 세포는 유전적 돌연변이 또는 다른 변화를 일으킬 수 있고, 이는 생산된 항체의 결합 특이성을 변경시킬 수 있거나 그렇지 않을 수 있다.
일 구현예에서, 중쇄 가변 영역 및/또는 경쇄 가변 영역은 적어도 85% 인간화된, 적어도 90% 인간화된, 적어도 95% 인간화된, 적어도 96% 인간화된, 적어도 97% 인간화된, 적어도 98% 인간화된 또는 적어도 99% 인간화된다. 일부 구현예에서, 항체는 보존적으로 예를 들어 더 나은 항원 결합을 유지하기 위해 인간화된다. 그와 같은 보존적으로 인간화된 항체에서, 몇 개의 항체 치환은 인간화된 항체와 비교하여 행해질 수 있다.
예를 들어, 일 구현예에서, 경쇄 가변 영역은 인간화될 수 있지만, Arg38, Gln40, Gln45 및 Ser59를 보유할 수 있고 중쇄 가변 영역은 인간화될 수 있지만, Ile48, Asn61, Lys65 및 Ala68를 보유할 수 있다. 또 다른 구현예에서, 경쇄 가변 영역은 인간화될 수 있지만, Arg38 및 Gln40를 보유할 수 있고, 중쇄 가변 영역은 인간화될 수 있지만, Ile48 및 Asn61를 보유할 수 있다.
본 발명의 항원 결합 분자는, 일부 구현예에서, 탈면역화된, 예를 들어 하기에 기재된 방법을 사용하여 탈면역화된다: Jones 등, "Deimmunization of monoclonal antibodies", Methods Mol Biol, 2009, 525:405-23 (이들의 내용은 참고로 편입되어 있음). 탈면역화는 조합된 면역학적 및 분자 생물학 기술을 사용하여 서열로부터 T-세포 에피토프를 제거한다.
일부 본 발명의 구현예들에서, 따라서, 탈면역화된 항-LIGHT 항원 결합 분자 또는 이의 항원 결합 단편이 제공되고, 항-LIGHT 항원 결합 분자 또는 이의 항원 결합 단편은 2E08, 3A07, 3B04, 3C10, 3D12, 3E09, 2B11, 3B04_var1, 3B04_var2, 3B04_var3, 3B04_var4, 3B04_var5, 3B04_var6, 3B04_var7, 3B04_var8, 3B04_var9, 3B04_var10, 3B04_var11, 3B04_var12, 3B04_var13, 3B04_var14, 3B04_var15, 3B04_var16, 3D12_var1, 3D12_var2, 3D12_var3, 3D12_var4, 3D12_var5, 3D12_var6, 3D12_var7, 3D12_var8, 3D12_var9, 3D12_var10, 3D12_var11, 3D12_var12, 3D12_var13, 3D12_var14, 3D12_var15 및 3D12_var16으로 구성된 군으로부터 선택된 항체의 6개의 CDR 영역의 탈면역화된 변이체를 포함한다. 본 발명의 추가 구현예에서, 탈면역화된 항-LIGHT 항원 결합 분자 또는 이의 항원 결합 단편이 제공되되, 상기 항-LIGHT 항원 결합 분자 또는 이의 항원 결합 단편은 2E08, 3A07, 3B04, 3C10, 3D12, 3E09, 2B11, 3B04_var1, 3B04_var2, 3B04_var3, 3B04_var4, 3B04_var5, 3B04_var6, 3B04_var7, 3B04_var8, 3B04_var9, 3B04_var10, 3B04_var11, 3B04_var12, 3B04_var13, 3B04_var14, 3B04_var15, 3B04_var16, 3D12_var1, 3D12_var2, 3D12_var3, 3D12_var4, 3D12_var5, 3D12_var6, 3D12_var7, 3D12_var8, 3D12_var9, 3D12_var10, 3D12_var11, 3D12_var12, 3D12_var13, 3D12_var14, 3D12_var15 및 3D12_var16으로 구성된 군으로부터 선택된 항체의 VH 및/또는 VL 서열의 탈면역화된 변이체를 포함한다. 본 발명의 또 추가의 구현예에서, 탈면역화된 항-LIGHT 항체가 제공되고, 상기 항-LIGHT 항체는 2E08, 3A07, 3B04, 3C10, 3D12, 3E09, 2B11, 3B04_var1, 3B04_var2, 3B04_var3, 3B04_var4, 3B04_var5, 3B04_var6, 3B04_var7, 3B04_var8, 3B04_var9, 3B04_var10, 3B04_var11, 3B04_var12, 3B04_var13, 3B04_var14, 3B04_var15, 3B04_var16, 3D12_var1, 3D12_var2, 3D12_var3, 3D12_var4, 3D12_var5, 3D12_var6, 3D12_var7, 3D12_var8, 3D12_var9, 3D12_var10, 3D12_var11, 3D12_var12, 3D12_var13, 3D12_var14, 3D12 var15 및 3D12 var16으로 구성된 군으로부터 선택된 항체의 탈면역화된 변이체이다.
항원 결합 분자 및 이의 항원 결합 단편은 7개의 친계 항체 3B04, 3D12, 2E08, 3C10, 3A07, 3E09 및 2B11을 기반으로 한다. 친계 항체 외에, 본 발명은 특히, 3B04_var1, 3B04_var2, 3B04_var3, 3B04_var4, 3B04_var5, 3B04_var6, 3B04_var7, 3B04_var8, 3B04_var9, 3B04_var10, 3B04_var11, 3B04_var12, 3B04_var13, 3B04_var14, 3B04_var15, 3B04_var16, 3D12_var1, 3D12_var2, 3D12_var3, 3D12_var4, 3D12_var5, 3D12_var6, 3D12_var7, 3D12_var8, 3D12_var9, 3D12_var10, 3D12_var11, 3D12_var12, 3D12_var13, 3D12_var14, 3D12_var15 및 3D12_var16를 포함하는 친계 항체의 인간화된 및 탈면역화된 유도체와 관련되어 있고, 그러나 나머지 5개의 친계 항체의 인간화된 및 탈면역화된 유도체가 또한 제공된다. 본 발명은 또한 본 발명의 친계 또는 인간화된/탈면역화된 항체로부터 1개 초과의 항원 결합 도메인을 포함하는 항체-단편, 뿐만 아니라 추가 변이체 예컨대 1개 이상의 보존적 아미노산 치환 (예컨대 1 내지 10, 또는 바람직하게는 1 및 5 치환)을 함유하는 항원 결합 도메인 및 본 발명의 항원 결합 분자의 친화성 성숙된 변이체를 기반으로 한다. 본 발명의 모든 항원 결합 분자는 LIGHT에 특이적으로 결합한다.
본 발명의 항원 결합 분자, 특히 항체는 IgA, IgD, IgE, IgG, IgM 및 IgY를 포함하는 임의의 적합한 유형일 수 있지만, IgG가 바람직할 수 있다. lgG4 백본은 가장 바람직할 수 있다. 관련된 구현예에서, 본 발명의 항체의 불변 영역은 유리한 효과르르 위해, 예를 들어 안정성을 증가시키고 Fc 감마 수용체 상호작용을 감소시키기 위해 변형될 수 있다. 그와 같은 변형은 Fc 영역에서 S241 P 및 L248E 치환을 포함한다. 다른 적합한 변형은 숙련가에게 알려져 있다.
본 발명에 의해 제공된 항체의 요약이 아래에 제공된다. 항원 결합 변이체, 유도체 및 이의 단편은 또한 본 발명의 일부로서 제공된다:
표 1. 2개의 친계 항체의 친계 마우스 항체 및 보존적으로 인간화된, 인간화된 및 탈면역화된 버전의 요약
Figure pct00003
Figure pct00004
표 4 - 인간화된/탈면역화된 중쇄 및 경쇄 가변 영역의 조합은 3B04 모체 항체로부터 유래된 16개의 항체를 생산한다
Figure pct00005
표 5 - 인간화된/탈면역화된 중쇄 및 경쇄 가변 영역의 조합은' 3D12 모체 항체로부터 유래된 16개의 항체를 생산한다
Figure pct00006
본 발명의 다양한 구현예들는 이제 더 상세히 논의된다.
VHCDR3 및/또는 VLCDR3 영역을 포함하는 항원 결합 분자
3B04
일 구현예에서, 하기를 포함하는 항원 결합 분자, 예를 들어 항체, 이의 단편 또는 변이체가 제공된다: 아미노산 서열 ETDYFFDY (서열번호: 8)에 대해 적어도 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 91 %, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98% 또는 99% 동일성을 갖는 아미노산을 포함하는 중쇄 가변 영역 및/또는 아미노산 서열 QNVLTTPWT (서열번호: 4)에 대해 적어도 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 91 %, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98% 또는 99% 동일성을 갖는 아미노산을 포함하는 경쇄 가변 영역. 일 구현예에서, 하기를 포함하는 항원 결합 분자, 예를 들어 항체, 이의 단편 또는 변이체가 제공된다: 아미노산 서열 ETDYFFDY (서열번호: 8)에 대해 적어도 90% 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 영역 및/또는 아미노산 서열 QNVLTTPWT (서열번호: 4)에 대해 적어도 90% 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 영역.
일 구현예에서, 하기를 포함하는 항원 결합 분자, 예를 들어 항체, 이의 단편 또는 변이체가 제공된다: 아미노산 서열 ETDYFFDY (서열번호: 8)을 포함하는 중쇄 가변 영역 및/또는 아미노산 서열 QNVLTTPWT (서열번호: 4)을 포함하는 경쇄 가변 영역. 특정 구현예에서, 항원 결합 분자는 항체 또는 이의 단편 또는 변이체이되, 상기 상기 항체 또는 이의 단편 또는 변이체의 VHCDR3 영역은 ETDYFFDY (서열번호: 8)이고/거나 상기 항체 또는 이의 단편 또는 변이체의 VLCDR3 영역은 QNVLTTPWT (서열번호: 4)이다.
3D12
일 구현예에서, 하기를 포함하는 항원 결합 분자, 예를 들어 항체, 이의 단편 또는 변이체가 제공된다: 아미노산 서열 ETDYFFDY (서열번호: 48)에 대해 적어도 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 91 %, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98% 또는 99% 동일성을 갖는 아미노산을 포함하는 중쇄 가변 영역 및/또는 아미노산 서열 QNVLSTPWT (서열번호: 44)에 대해 적어도 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 91 %, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98% 또는 99% 동일성을 갖는 아미노산을 포함하는 경쇄 가변 영역. 일 구현예에서, 하기를 포함하는 항원 결합 분자, 예를 들어 항체, 이의 단편 또는 변이체가 제공된다: 아미노산 서열 ETDYFFDY (서열번호: 48)에 대해 적어도 90% 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 영역 및/또는 아미노산 서열 QNVLSTPWT (서열번호: 44)에 대해 적어도 90% 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 영역.
일 구현예에서, 하기를 포함하는 항원 결합 분자, 예를 들어 항체, 이의 단편 또는 변이체가 제공된다: 아미노산 서열 ETDYFFDY (서열번호: 48)을 포함하는 중쇄 가변 영역 및/또는 아미노산 서열 QNVLSTPWT (서열번호: 44)을 포함하는 경쇄 가변 영역. 특정 구현예에서, 항원 결합 분자는 항체 또는 이의 단편 또는 변이체이되, 상기 상기 항체 또는 이의 단편 또는 변이체의 VHCDR3 영역은 ETDYFFDY (서열번호: 48)이고/거나 상기 항체 또는 이의 단편 또는 변이체의 VLCDR3 영역은 QNVLSTPWT (서열번호: 44)이다.
2E08
일 구현예에서, 하기를 포함하는 항원 결합 분자, 예를 들어 항체, 이의 단편 또는 변이체가 제공된다: 아미노산 서열 SRGEYGNYDAMDY (서열번호: 88)에 대해 적어도 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 91 %, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98% 또는 99% 동일성을 갖는 아미노산을 포함하는 중쇄 가변 영역 및/또는 아미노산 서열 QQSNEDPLT (서열번호: 84)에 대해 적어도 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 91 %, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98% 또는 99% 동일성을 갖는 아미노산을 포함하는 경쇄 가변 영역. 일 구현예에서, 하기를 포함하는 항원 결합 분자, 예를 들어 항체, 이의 단편 또는 변이체가 제공된다: 아미노산 서열 SRGEYGNYDAMDY (서열번호: 88)에 대해 적어도 90% 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 영역 및/또는 아미노산 서열 QQSNEDPLT (서열번호: 15)에 대해 적어도 90% 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 영역.
일 구현예에서, 하기를 포함하는 항원 결합 분자, 예를 들어 항체, 이의 단편 또는 변이체가 제공된다: 아미노산 서열 SRGEYGNYDAMDY (서열번호: 88)을 포함하는 중쇄 가변 영역 및/또는 아미노산 서열 QQSNEDPLT (서열번호: 84)을 포함하는 경쇄 가변 영역. 특정 구현예에서, 항원 결합 분자는 항체 또는 이의 단편 또는 변이체이되, 상기 상기 항체 또는 이의 단편 또는 변이체의 VHCDR3 영역은 SRGEYGNYDAMDY (서열번호: 88)이고/거나 상기 항체 또는 이의 단편 또는 변이체의 VLCDR3 영역은 QQSNEDPLT (서열번호: 84)이다.
3C10
일 구현예에서, 하기를 포함하는 항원 결합 분자, 예를 들어 항체, 이의 단편 또는 변이체가 제공된다: 아미노산 서열 ETDYFFDY (서열번호: 96)에 대해 적어도 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 91 %, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98% 또는 99% 동일성을 갖는 아미노산을 포함하는 중쇄 가변 영역 및/또는 아미노산 서열 QQWSSYPLT (서열번호: 92)에 대해 적어도 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 91 %, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98% 또는 99% 동일성을 갖는 아미노산을 포함하는 경쇄 가변 영역. 일 구현예에서, 하기를 포함하는 항원 결합 분자, 예를 들어 항체, 이의 단편 또는 변이체가 제공된다: 아미노산 서열 ETDYFFDY (서열번호: 96)에 대해 적어도 90% 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 영역 및/또는 아미노산 서열 QQWSSYPLT (서열번호: 92)에 대해 적어도 90% 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 영역.
일 구현예에서, 하기를 포함하는 항원 결합 분자, 예를 들어 항체, 이의 단편 또는 변이체가 제공된다: 아미노산 서열 ETDYFFDY (서열번호: 96)을 포함하는 중쇄 가변 영역 및/또는 아미노산 서열 QQWSSYPLT (서열번호: 92)을 포함하는 경쇄 가변 영역. 특정 구현예에서, 항원 결합 분자는 항체 또는 이의 단편 또는 변이체이되, 상기 상기 항체 또는 이의 단편 또는 변이체의 VHCDR3 영역은 ETDYFFDY (서열번호: 96)이고/거나 상기 항체 또는 이의 단편 또는 변이체의 VLCDR3 영역은 QQWSSYPLT (서열번호: 92)이다.
3A07
일 구현예에서, 하기를 포함하는 항원 결합 분자, 예를 들어 항체, 이의 단편 또는 변이체가 제공된다: 아미노산 서열 ETDYFFDY (서열번호: 104)에 대해 적어도 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 91 %, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98% 또는 99% 동일성을 갖는 아미노산을 포함하는 중쇄 가변 영역 및/또는 아미노산 서열 QQWSSYPLT (서열번호: 100)에 대해 적어도 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 91 %, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98% 또는 99% 동일성을 갖는 아미노산을 포함하는 경쇄 가변 영역. 일 구현예에서, 하기를 포함하는 항원 결합 분자, 예를 들어 항체, 이의 단편 또는 변이체가 제공된다: 아미노산 서열 ETDYFFDY (서열번호: 104)에 대해 적어도 90% 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 영역 및/또는 아미노산 서열 QQWSSYPLT (서열번호: 100)에 대해 적어도 90% 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 영역.
일 구현예에서, 하기를 포함하는 항원 결합 분자, 예를 들어 항체, 이의 단편 또는 변이체가 제공된다: 아미노산 서열 ETDYFFDY (서열번호: 104)을 포함하는 중쇄 가변 영역 및/또는 아미노산 서열 QQWSSYPLT (서열번호: 100)을 포함하는 경쇄 가변 영역. 특정 구현예에서, 항원 결합 분자는 항체 또는 이의 단편 또는 변이체이되, 상기 상기 항체 또는 이의 단편 또는 변이체의 VHCDR3 영역은 ETDYFFDY (서열번호: 104)이고/거나 상기 항체 또는 이의 단편 또는 변이체의 VLCDR3 영역은 QQWSSYPLT (서열번호: 100)이다.
3E09
일 구현예에서, 하기를 포함하는 항원 결합 분자, 예를 들어 항체, 이의 단편 또는 변이체가 제공된다: 아미노산 서열 GTGDGFAY (서열번호: 112)에 대해 적어도 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 91 %, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98% 또는 99% 동일성을 갖는 아미노산을 포함하는 중쇄 가변 영역 및/또는 아미노산 서열 QQNNEDPYT (서열번호: 108)에 대해 적어도 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 91 %, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98% 또는 99% 동일성을 갖는 아미노산을 포함하는 경쇄 가변 영역. 일 구현예에서, 하기를 포함하는 항원 결합 분자, 예를 들어 항체, 이의 단편 또는 변이체가 제공된다: 아미노산 서열 GTGDGFAY (서열번호: 112)에 대해 적어도 90% 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 영역 및/또는 아미노산 서열 QQNNEDPYT (서열번호: 108)에 대해 적어도 90% 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 영역.
일 구현예에서, 하기를 포함하는 항원 결합 분자, 예를 들어 항체, 이의 단편 또는 변이체가 제공된다: 아미노산 서열 GTGDGFAY (서열번호: 112)을 포함하는 중쇄 가변 영역 및/또는 아미노산 서열 QQNNEDPYT (서열번호: 108)을 포함하는 경쇄 가변 영역. 특정 구현예에서, 항원 결합 분자는 항체 또는 이의 단편 또는 변이체이되, 상기 상기 항체 또는 이의 단편 또는 변이체의 VHCDR3 영역은 GTGDGFAY (서열번호: 112)이고/거나, 상기 항체 또는 이의 단편 또는 변이체의 VLCDR3 영역은 QQNNEDPYT (서열번호: 108)이다.
2B11
일 구현예에서, 하기를 포함하는 항원 결합 분자, 예를 들어 항체, 이의 단편 또는 변이체가 제공된다: 아미노산 서열 SRGEYGNYDAMDY 서열 (서열번호: 120)에 대해 적어도 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 91 %, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98% 또는 99% 동일성을 갖는 아미노산을 포함하는 중쇄 가변 영역 및/또는 아미노산 서열 QQSNEDPYT (서열번호: 116)에 대해 적어도 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 91 %, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98% 또는 99% 동일성을 갖는 아미노산을 포함하는 경쇄 가변 영역. 일 구현예에서, 하기를 포함하는 항원 결합 분자, 예를 들어 항체, 이의 단편 또는 변이체가 제공된다: 아미노산 서열 SRGEYGNYDAMDY 서열 (서열번호: 120)에 대해 적어도 90% 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 영역 및/또는 아미노산 서열 QQSNEDPYT (서열번호: 116)에 대해 적어도 90% 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 영역.
일 구현예에서, 하기를 포함하는 항원 결합 분자, 예를 들어 항체, 이의 단편 또는 변이체가 제공된다: 아미노산 서열 SRGEYGNYDAMDY 서열 (서열번호: 120)을 포함하는 중쇄 가변 영역 및/또는 아미노산 서열 QQSNEDPYT (서열번호: 116)을 포함하는 경쇄 가변 영역. 특정 구현예에서, 항원 결합 분자는 항체 또는 이의 단편 또는 변이체이되, 상기 상기 항체 또는 이의 단편 또는 변이체의 VHCDR3 영역은 SRGEYGNYDAMDY 서열 (서열번호: 120)이고/거나, 상기 항체 또는 이의 단편 또는 변이체의 VLCDR3 영역은 QQSNEDPYT (서열번호: 116)이다.
3B04 변이체
일 구현예에서, 하기를 포함하는 항원 결합 분자, 예를 들어 항체, 이의 단편 또는 변이체가 제공된다: 아미노산 서열 ETDYFFDY (서열번호: 16)에 대해 적어도 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 91 %, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98% 또는 99% 동일성을 갖는 아미노산을 포함하는 중쇄 가변 영역 및/또는 아미노산 서열 QNVLTTPWT (서열번호: 12)에 대해 적어도 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 91 %, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98% 또는 99% 동일성을 갖는 아미노산을 포함하는 경쇄 가변 영역. 일 구현예에서, 중쇄 가변 영역은 아미노산 서열 ETDYFFDY (서열번호: 16)에 대해 적어도 90% 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하고/거나 경쇄 가변 영역은 아미노산 서열 QNVLTTPWT (서열번호: 12)에 대해 적어도 90% 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함한다.
일 구현예에서, 아미노산 서열 ETDYFFDY (서열번호: 16)을 포함하는 중쇄 가변 영역 및/또는 아미노산 서열 QNVLTTPWT (서열번호: 12)을 포함하는 경쇄 가변 영역을 포함하는 항체, 단편 또는 그것의 변이체가 제공된다. 특정 구현예에서, 항체, 단편 또는 그것의 변이체가 제공되되, 상기 항체 또는 이의 단편 또는 변이체의 VHCDR3 영역은 ETDYFFDY (서열번호: 16)이고/거나, 상기 항체 또는 이의 단편 또는 변이체의 VLCDR3 영역은 QNVLTTPWT (서열번호: 12)이다.
일 구현예에서, 하기를 포함하는 항원 결합 분자, 예를 들어 항체, 이의 단편 또는 변이체가 제공된다: 아미노산 서열 ETDYFFDY (서열번호: 24)에 대해 적어도 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 91 %, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98% 또는 99% 동일성을 갖는 아미노산을 포함하는 중쇄 가변 영역 및/또는 아미노산 서열 QNVLTTPWT (서열번호: 20)에 대해 적어도 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 91 %, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98% 또는 99% 동일성을 갖는 아미노산을 포함하는 경쇄 가변 영역. 일 구현예에서, 하기를 포함하는 항원 결합 분자, 예를 들어 항체, 이의 단편 또는 변이체가 제공된다: 아미노산 서열 ETDYFFDY (서열번호: 24)에 대해 적어도 90% 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 영역 및/또는 아미노산 서열 QNVLTTPWT (서열번호: 20)에 대해 적어도 90% 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 영역.
일 구현예에서, 아미노산 서열 ETDYFFDY (서열번호: 24)을 포함하는 중쇄 가변 영역 및/또는 아미노산 서열 QNVLTTPWT (서열번호: 20)을 포함하는 경쇄 가변 영역을 포함하는 항체, 단편 또는 그것의 변이체가 제공된다. 특정 구현예에서, 항체, 단편 또는 그것의 변이체가 제공되되, 상기 항체 또는 이의 단편 또는 변이체의 VHCDR3 영역은 ETDYFFDY (서열번호: 24)이고/거나, 상기 항체 또는 이의 단편 또는 변이체의 VLCDR3 영역은 QNVLTTPWT (서열번호: 20)이다.
일 구현예에서, 하기를 포함하는 항원 결합 분자, 예를 들어 항체, 이의 단편 또는 변이체가 제공된다: 아미노산 서열 ETDYFFDY (서열번호: 32)에 대해 적어도 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 91 %, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98% 또는 99% 동일성을 갖는 아미노산을 포함하는 중쇄 가변 영역 및/또는 아미노산 서열 QNVLTTPWT (서열번호: 28)에 대해 적어도 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 91 %, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98% 또는 99% 동일성을 갖는 아미노산을 포함하는 경쇄 가변 영역. 일 구현예에서, 하기를 포함하는 항원 결합 분자, 예를 들어 항체, 이의 단편 또는 변이체가 제공된다: 아미노산 서열 ETDYFFDY (서열번호: 32)에 대해 적어도 90% 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 영역 및/또는 아미노산 서열 QNVLTTPWT (서열번호: 28)에 대해 적어도 90% 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 영역.
일 구현예에서, 아미노산 서열 ETDYFFDY (서열번호: 32)을 포함하는 중쇄 가변 영역 및/또는 아미노산 서열 QNVLTTPWT (서열번호: 28)을 포함하는 경쇄 가변 영역을 포함하는 항체, 단편 또는 그것의 변이체가 제공된다. 특정 구현예에서, 항체, 단편 또는 그것의 변이체가 제공되되, 상기 항체 또는 이의 단편 또는 변이체의 VHCDR3 영역은 ETDYFFDY (서열번호: 32)이고/거나, 상기 항체 또는 이의 단편 또는 변이체의 VLCDR3 영역은 QNVLTTPWT (서열번호: 28)이다.
일 구현예에서, 하기를 포함하는 항원 결합 분자, 예를 들어 항체, 이의 단편 또는 변이체가 제공된다: 아미노산 서열 ETDYFFDY (서열번호: 40)에 대해 적어도 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 91 %, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98% 또는 99% 동일성을 갖는 아미노산을 포함하는 중쇄 가변 영역 및/또는 아미노산 서열 QNVLTTPWT (서열번호: 36)에 대해 적어도 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 91 %, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98% 또는 99% 동일성을 갖는 아미노산을 포함하는 경쇄 가변 영역. 일 구현예에서, 하기를 포함하는 항원 결합 분자, 예를 들어 항체, 이의 단편 또는 변이체가 제공된다: 아미노산 서열 ETDYFFDY (서열번호: 40)에 대해 적어도 90% 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 영역 및/또는 아미노산 서열 QNVLTTPWT (서열번호: 36)에 대해 적어도 90% 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 영역.
일 구현예에서, 아미노산 서열 ETDYFFDY (서열번호: 40)을 포함하는 중쇄 가변 영역 및/또는 아미노산 서열 QNVLTTPWT (서열번호: 36)을 포함하는 경쇄 가변 영역을 포함하는 항체, 단편 또는 그것의 변이체가 제공된다. 특정 구현예에서, 항체, 단편 또는 그것의 변이체가 제공되되, 상기 항체 또는 이의 단편 또는 변이체의 VHCDR3 영역은 ETDYFFDY (서열번호: 40)이고/거나, 상기 항체 또는 이의 단편 또는 변이체의 VLCDR3 영역은 QNVLTTPWT (서열번호: 36)이다.
3D12 변이체
일 구현예에서, 하기를 포함하는 항원 결합 분자, 예를 들어 항체, 이의 단편 또는 변이체가 제공된다: 아미노산 서열 ETDYFFDY (서열번호: 56)에 대해 적어도 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 91 %, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98% 또는 99% 동일성을 갖는 아미노산을 포함하는 중쇄 가변 영역 및/또는 아미노산 서열 QNVLSTPWT (서열번호: 52)에 대해 적어도 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 91 %, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98% 또는 99% 동일성을 갖는 아미노산을 포함하는 경쇄 가변 영역. 일 구현예에서, 하기를 포함하는 항원 결합 분자, 예를 들어 항체, 이의 단편 또는 변이체가 제공된다: 아미노산 서열 ETDYFFDY (서열번호: 56)에 대해 적어도 90% 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 영역 및/또는 아미노산 서열 QNVLSTPWT (서열번호: 52)에 대해 적어도 90% 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 영역.
일 구현예에서,을 포함하는 항체, 단편 또는 그것의 변이체가 제공된다 아미노산 서열 ETDYFFDY (서열번호: 56)을 포함하는 중쇄 가변 영역 및/또는 아미노산 서열 QNVLSTPWT (서열번호: 52)을 포함하는 경쇄 가변 영역. 특정 구현예에서, 항체, 단편 또는 그것의 변이체가 제공되되, 상기 항체 또는 이의 단편 또는 변이체의 VHCDR3 영역은 ETDYFFDY (서열번호: 56)이고/거나, 상기 항체 또는 이의 단편 또는 변이체의 VLCDR3 영역은 QNVLSTPWT (서열번호: 52)이다.
일 구현예에서, 하기를 포함하는 항원 결합 분자, 예를 들어 항체, 이의 단편 또는 변이체가 제공된다: 아미노산 서열 ETDYFFDY (서열번호: 64)에 대해 적어도 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 91 %, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98% 또는 99% 동일성을 갖는 아미노산을 포함하는 중쇄 가변 영역 및/또는 아미노산 서열 QNVLSTPWT (서열번호: 60)에 대해 적어도 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 91 %, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98% 또는 99% 동일성을 갖는 아미노산을 포함하는 경쇄 가변 영역. 일 구현예에서, 하기를 포함하는 항원 결합 분자, 예를 들어 항체, 이의 단편 또는 변이체가 제공된다: 아미노산 서열 ETDYFFDY (서열번호: 64)에 대해 적어도 90% 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 영역 및/또는 아미노산 서열 QNVLSTPWT (서열번호: 60)에 대해 적어도 90% 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 영역.
일 구현예에서, 하기를 포함하는 항체, 단편 또는 그것의 변이체가 제공된다. 아미노산 서열 ETDYFFDY (서열번호: 64)을 포함하는 중쇄 가변 영역 및/또는 아미노산 서열 QNVLSTPWT (서열번호: 60)을 포함하는 경쇄 가변 영역. 특정 구현예에서, 항체, 단편 또는 그것의 변이체가 제공되되, 상기 항체 또는 이의 단편 또는 변이체의 VHCDR3 영역은 ETDYFFDY (서열번호: 64)이고/거나, 상기 항체 또는 이의 단편 또는 변이체의 VLCDR3 영역은 QNVLSTPWT (서열번호: 60)이다.
일 구현예에서, 하기를 포함하는 항원 결합 분자, 예를 들어 항체, 이의 단편 또는 변이체가 제공된다: 아미노산 서열 ETDYFFDY (서열번호: 72)에 대해 적어도 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 91 %, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98% 또는 99% 동일성을 갖는 아미노산을 포함하는 중쇄 가변 영역 및/또는 아미노산 서열 QNVLSTPWT (서열번호: 68)에 대해 적어도 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 91 %, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98% 또는 99% 동일성을 갖는 아미노산을 포함하는 경쇄 가변 영역. 일 구현예에서, 하기를 포함하는 항원 결합 분자, 예를 들어 항체, 이의 단편 또는 변이체가 제공된다: 아미노산 서열 ETDYFFDY (서열번호: 72)에 대해 적어도 90% 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 영역 및/또는 아미노산 서열 QNVLSTPWT (서열번호: 68)에 대해 적어도 90% 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 영역.
일 구현예에서, 아미노산 서열 ETDYFFDY (서열번호: 72)을 포함하는 중쇄 가변 영역 및/또는 아미노산 서열 QNVLSTPWT (서열번호: 68)을 포함하는 경쇄 가변 영역을 포함하는 항체, 단편 또는 그것의 변이체가 제공된다. 특정 구현예에서, 항체, 단편 또는 그것의 변이체가 제공되되, 상기 항체 또는 이의 단편 또는 변이체의 VHCDR3 영역은 ETDYFFDY (서열번호: 72)이고/거나, 상기 항체 또는 이의 단편 또는 변이체의 VLCDR3 영역은 QNVLSTPWT (서열번호: 68)이다.
일 구현예에서, 하기를 포함하는 항원 결합 분자, 예를 들어 항체, 이의 단편 또는 변이체가 제공된다: 아미노산 서열 ETDYFFDY (서열번호: 80)에 대해 적어도 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 91 %, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98% 또는 99% 동일성을 갖는 아미노산을 포함하는 중쇄 가변 영역 및/또는 아미노산 서열 QNVLSTPWT (서열번호: 76)에 대해 적어도 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 91 %, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98% 또는 99% 동일성을 갖는 아미노산을 포함하는 경쇄 가변 영역. 일 구현예에서, 하기를 포함하는 항원 결합 분자, 예를 들어 항체, 이의 단편 또는 변이체가 제공된다: 아미노산 서열 ETDYFFDY (서열번호: 180)에 대해 적어도 90% 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 영역 및/또는 아미노산 서열 QNVLSTPWT (서열번호: 76)에 대해 적어도 90% 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 영역.
일 구현예에서, 아미노산 서열 ETDYFFDY (서열번호: 80)을 포함하는 중쇄 가변 영역 및/또는 아미노산 서열 QNVLSTPWT (서열번호: 76)을 포함하는 경쇄 가변 영역을 포함하는 항체, 단편 또는 그것의 변이체가 제공된다. 특정 구현예에서, 항체, 단편 또는 그것의 변이체가 제공되되, 상기 항체 또는 이의 단편 또는 변이체의 VHCDR3 영역은 ETDYFFDY (서열번호: 80)이고/거나, 상기 항체 또는 이의 단편 또는 변이체의 VLCDR3 영역은 QNVLSTPWT (서열번호: 76)이다.
중쇄 및/또는 경쇄 CDR
3B04
일 구현예에서, 하기를 포함하는 항체, 이의 단편 또는 변이체가 제공된다:
하기를 포함하는 중쇄 가변 영역: 아미노산 서열 DYEMH (서열번호: 6)에 대해 적어도 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 91 %, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98% 또는 99% 동일성을 포함하는 VHCDR1, 아미노산 서열 EIDPETGDTAYSQKFKG (서열번호: 7)에 대해 적어도 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 91 %, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98% 또는 99% 동일성을 포함하는 VHCDR2, 아미노산 서열 ETDYFFDY (서열번호: 8)에 대해 적어도 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 91 %, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98% 또는 99% 동일성을 포함하는 VHCDR3; 및/또는
하기를 포함하는 경쇄 가변 영역:에 대해 적어도 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 91 %, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98% 또는 99% 동일성을 포함하는 VLCDR1 아미노산 서열 GASENIYGALN (서열번호: 2), 아미노산 서열 GATNLAD (서열번호: 3)에 대해 적어도 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 91 %, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98% 또는 99% 동일성을 포함하는 VLCDR2 및 아미노산 서열 QNVLTTPWT (서열번호: 4)에 대해 적어도 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 91 %, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98% 또는 99% 동일성을 포함하는 VLCDR3.
일 구현예에서, 하기를 포함하는 항체, 이의 단편 또는 변이체가 제공된다:
하기를 포함하는 중쇄 가변 영역: 아미노산 서열 DYEMH (서열번호: 6)에 대해 적어도 90% 동일성을 포함하는 VHCDR1, 아미노산 서열 E I D P ETG DTAYSQ KF KG (서열번호: 7)에 대해 적어도 90% 동일성을 포함하는 VHCDR2, 아미노산 서열 ETDYFFDY (서열번호: 8)에 대해 적어도 90% 동일성을 포함하는 VHCDR3; 및/또는
하기를 포함하는 경쇄 가변 영역: 아미노산 서열 GASENIYGALN (서열번호: 2)에 대해 적어도 90% 동일성을 포함하는 VLCDR1, 아미노산 서열 GATNLAD (서열번호: 3)에 대해 적어도 90% 동일성을 포함하는 VLCDR2 및 아미노산 서열 QNVLTTPWT (서열번호: 4)에 대해 적어도 90% 동일성을 포함하는 VLCDR3.
일 구현예에서, 하기를 포함하는 항체, 이의 단편 또는 변이체가 제공된다:
하기를 포함하는 중쇄 가변 영역: 아미노산 서열 DYEMH (서열번호: 6)을 포함하는 VHCDR1, 아미노산 서열 EIDPETGDTAYSQKFKG (서열번호: 7)을 포함하는 VHCDR2, 아미노산 서열 ETDYFFDY (서열번호: 8)을 포함하는 VHCDR3; 및/또는
하기를 포함하는 경쇄 가변 영역: 아미노산 서열 GASENIYGALN (서열번호: 2)을 포함하는 VLCDR1, 아미노산 서열 GATNLAD (서열번호: 3)을 포함하는 VLCDR2 및 아미노산 서열 QNVLTTPWT (서열번호: 4)을 포함하는 VLCDR3.
3D12
일 구현예에서, 하기를 포함하는 항체, 이의 단편 또는 변이체가 제공된다:
하기를 포함하는 중쇄 가변 영역: 아미노산 서열 DSEIH (서열번호: 46)에 대해 적어도 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 91 %, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98% 또는 99% 동일성을 포함하는 VHCDR1, 아미노산 서열 EIDPETGGTAYNQKFKG (서열번호: 47)에 대해 적어도 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 91 %, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98% 또는 99% 동일성을 포함하는 VHCDR2, 아미노산 서열 ETDYFFDY (서열번호: 48)에 대해 적어도 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 91 %, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98% 또는 99% 동일성을 포함하는 VHCDR3; 및/또는
하기를 포함하는 경쇄 가변 영역: 아미노산 서열 GASENIYGALN (서열번호: 42)에 대해 적어도 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 91 %, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98% 또는 99% 동일성을 포함하는 VLCDR1, 아미노산 서열 GATNLAD (서열번호: 43)에 대해 적어도 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 91 %, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98% 또는 99% 동일성을 포함하는 VLCDR2 및 아미노산 서열 QNVLSTPWT (서열번호: 44)에 대해 적어도 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 91 %, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98% 또는 99% 동일성을 포함하는 VLCDR3.
일 구현예에서, 하기를 포함하는 항체, 이의 단편 또는 변이체가 제공된다:
하기를 포함하는 중쇄 가변 영역: 아미노산 서열 DSEIH (서열번호: 46)에 대해 적어도 90% 동일성을 포함하는 VHCDR1, 아미노산 서열 EIDPETGGTAYNQKFKG (서열번호: 47)에 대해 적어도 90% 동일성을 포함하는 VHCDR2, 아미노산 서열 ETDYFFDY (서열번호: 48)에 대해 적어도 90% 동일성을 포함하는 VHCDR3; 및/또는
하기를 포함하는 경쇄 가변 영역: 아미노산 서열 GASENIYGALN (서열번호: 42)에 대해 적어도 90% 동일성을 포함하는 VLCDR1, 아미노산 서열 GATNLAD (서열번호: 43)에 대해 적어도 90% 동일성을 포함하는 VLCDR2 및 아미노산 서열 QNVLSTPWT (서열번호: 44)에 대해 적어도 90% 동일성을 포함하는 VLCDR3.
일 구현예에서, 하기를 포함하는 항체, 이의 단편 또는 변이체가 제공된다:
하기를 포함하는 중쇄 가변 영역: 아미노산 서열 DSEIH (서열번호: 46)을 포함하는 VHCDR1, 아미노산 서열 EIDPETGGTAYNQKFKG (서열번호: 47)을 포함하는 VHCDR2, 아미노산 서열 ETDYFFDY (서열번호: 48)을 포함하는 VHCDR3; 및/또는
하기를 포함하는 경쇄 가변 영역: 아미노산 서열 GASENIYGALN (서열번호: 42)을 포함하는 VLCDR1, 아미노산 서열 GATNLAD (서열번호: 43)을 포함하는 VLCDR2 및 아미노산 서열 QNVLSTPWT (서열번호: 44)을 포함하는 VLCDR3.
2E08
일 구현예에서, 하기를 포함하는 항체, 이의 단편 또는 변이체가 제공된다:
하기를 포함하는 중쇄 가변 영역: 아미노산 서열 DYAIH (서열번호: 86)에 대해 적어도 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 91 %, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98% 또는 99% 동일성을 포함하는 VHCDR1, 아미노산 서열 VISTYYGDASYNQKFKG (서열번호: 87)에 대해 적어도 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 91 %, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98% 또는 99% 동일성을 포함하는 VHCDR2, 아미노산 SRGEYGNYDAMDY 서열 (서열번호: 88)에 대해 적어도 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 91 %, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98% 또는 99% 동일성을 포함하는 VHCDR3 to; 및/또는
하기를 포함하는 경쇄 가변 영역: 아미노산 서열 KASQSVDYDGDSYMN (서열번호: 82)에 대해 적어도 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 91 %, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98% 또는 99% 동일성을 포함하는 VLCDR1, 아미노산 서열 AASNLES (서열번호: 83)에 대해 적어도 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 91 %, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98% 또는 99% 동일성을 포함하는 VLCDR2 및 아미노산 서열 QQSNEDPLT (서열번호: 84)에 대해 적어도 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 91 %, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98% 또는 99% 동일성을 포함하는 VLCDR3.
일 구현예에서, 하기를 포함하는 항체, 이의 단편 또는 변이체가 제공된다:
하기를 포함하는 중쇄 가변 영역: 아미노산 서열 DYAIH (서열번호: 86)에 대해 적어도 90% 동일성을 포함하는 VHCDR1, 아미노산 서열 VISTYYGDASYNQKFKG (서열번호: 87)에 대해 적어도 90% 동일성을 포함하는 VHCDR2, 아미노산 SRGEYGNYDAMDY 서열 (서열번호: 88)에 대해 적어도 90% 동일성을 포함하는 VHCDR3; 및/또는 하기를 포함하는 경쇄 가변 영역: 아미노산 서열 KASQSVDYDGDSYMN (서열번호: 82)에 대해 적어도 90% 동일성을 포함하는 VLCDR1, 아미노산 서열 AASNLES (서열번호: 83)에 대해 적어도 90% 동일성을 포함하는 VLCDR2 및 아미노산 서열 QQSNEDPLT (서열번호: 84)에 대해 적어도 790% 동일성을 포함하는 VLCDR3.
일 구현예에서, 하기를 포함하는 항체, 이의 단편 또는 변이체가 제공된다:
하기를 포함하는 중쇄 가변 영역: 아미노산 서열 DYAIH (서열번호: 86)을 포함하는 VHCDR1, 아미노산 서열 VISTYYGDASYNQKFKG (서열번호: 87)을 포함하는 VHCDR2, 아미노산 SRGEYGNYDAMDY 서열 (서열번호: 88)을 포함하는 VHCDR3을 포함하는 중쇄 가변 영역; 및/또는
하기를 포함하는 경쇄 가변 영역: 아미노산 서열 KASQSVDYDGDSYMN (서열번호: 82)을 포함하는 VLCDR1, 아미노산 서열 AASNLES (서열번호: 83)을 포함하는 VLCDR2 및 아미노산 서열 QQSNEDPLT (서열번호: 84)을 포함하는 VLCDR3.
3C10
일 구현예에서, 하기를 포함하는 항체, 이의 단편 또는 변이체가 제공된다:
하기를 포함하는 중쇄 가변 영역: 아미노산 서열 DSEIH (서열번호: 94)에 대해 적어도 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 91 %, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98% 또는 99% 동일성을 포함하는 VHCDR1, 아미노산 서열 EIDPETGGTAYNQKFKG (서열번호: 95)에 대해 적어도 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 91 %, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98% 또는 99% 동일성을 포함하는 VHCDR2, 아미노산 서열 ETDYFFDY (서열번호: 96)에 대해 적어도 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 91 %, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98% 또는 99% 동일성을 포함하는 VHCDR3; 및/또는
하기를 포함하는 경쇄 가변 영역: 아미노산 서열 SASSSVSYMY (서열번호: 90)에 대해 적어도 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 91 %, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98% 또는 99% 동일성을 포함하는 VLCDR1, 아미노산 서열 DTSNLAS (서열번호: 91)에 대해 적어도 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 91 %, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98% 또는 99% 동일성을 포함하는 VLCDR2 및 아미노산 서열 QQWSSYPLT (서열번호: 92)에 대해 적어도 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 91 %, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98% 또는 99% 동일성을 포함하는 VLCDR3.
일 구현예에서, 하기를 포함하는 항체, 이의 단편 또는 변이체가 제공된다:
하기를 포함하는 중쇄 가변 영역: 아미노산 서열 DSEIH (서열번호: 94)에 대해 적어도 90% 동일성을 포함하는 VHCDR1, 아미노산 서열 EIDPETGGTAYNQKFKG (서열번호: 95)에 대해 적어도 90% 동일성을 포함하는 VHCDR2, 아미노산 서열 ETDYFFDY (서열번호: 96)에 대해 적어도 90% 동일성을 포함하는 VHCDR3; 및/또는
하기를 포함하는 경쇄 가변 영역: 아미노산 서열 SASSSVSYMY (서열번호: 90)에 대해 적어도 90% 동일성을 포함하는 VLCDR1, 아미노산 서열 DTSNLAS (서열번호: 91)에 대해 적어도 90% 동일성을 포함하는 VLCDR2 및 아미노산 서열 QQWSSYPLT (서열번호: 92)에 대해 적어도 90% 동일성을 포함하는 VLCDR3.
일 구현예에서, 하기를 포함하는 항체, 이의 단편 또는 변이체가 제공된다:
하기를 포함하는 중쇄 가변 영역: 아미노산 서열 DSEIH (서열번호: 94)을 포함하는 VHCDR1, 아미노산 서열 EIDPETGGTAYNQKFKG (서열번호: 95)을 포함하는 VHCDR2, 아미노산 서열 ETDYFFDY (서열번호: 96)을 포함하는 VHCDR3; 및/또는
하기를 포함하는 경쇄 가변 영역: 아미노산 서열 SASSSVSYMY (서열번호: 90)을 포함하는 VLCDR1, 아미노산 서열 DTSNLAS (서열번호: 91)을 포함하는 VLCDR2 및 아미노산 서열 QQWSSYPLT (서열번호: 92)을 포함하는 VLCDR3.
3A07
일 구현예에서, 하기를 포함하는 항체, 이의 단편 또는 변이체가 제공된다:
하기를 포함하는 중쇄 가변 영역: 아미노산 서열 DSEIH (서열번호: 102)에 대해 적어도 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 91 %, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98% 또는 99% 동일성을 포함하는 VHCDR1, 아미노산 서열 EIDPETGGTAYNQKFKG (서열번호: 103)에 대해 적어도 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 91 %, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98% 또는 99% 동일성을 포함하는 VHCDR2, 아미노산 서열 ETDYFFDY (서열번호: 104)에 대해 적어도 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 91 %, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98% 또는 99% 동일성을 포함하는 VHCDR3; 및/또는
하기를 포함하는 경쇄 가변 영역: 아미노산 서열 SASSSVSYMY (서열번호: 98)에 대해 적어도 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 91 %, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98% 또는 99% 동일성을 포함하는 VLCDR1, 아미노산 서열 DTSNLAS (서열번호: 99)에 대해 적어도 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 91 %, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98% 또는 99% 동일성을 포함하는 VLCDR2 및 아미노산 서열 QQWSSYPLT (서열번호: 100)에 대해 적어도 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 91 %, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98% 또는 99% 동일성을 포함하는 VLCDR3.
일 구현예에서, 하기를 포함하는 항체, 이의 단편 또는 변이체가 제공된다:
하기를 포함하는 중쇄 가변 영역: 아미노산 서열 DSEIH (서열번호: 102)에 대해 적어도 90% 동일성을 포함하는 VHCDR1, 아미노산 서열 EIDPETGGTAYNQKFKG (서열번호: 103)에 대해 적어도 90% 동일성을 포함하는 VHCDR2, 아미노산 서열 ETDYFFDY (서열번호: 104)에 대해 적어도 90% 동일성을 포함하는 VHCDR3; 및/또는
하기를 포함하는 경쇄 가변 영역: 아미노산 서열 SASSSVSYMY (서열번호: 98)에 대해 적어도 90% 동일성을 포함하는 VLCDR1, 아미노산 서열 DTSNLAS (서열번호: 99)에 대해 적어도 90% 동일성을 포함하는 VLCDR2 및 아미노산 서열 QQWSSYPLT (서열번호: 100)에 대해 적어도 90% 동일성을 포함하는 VLCDR3.
일 구현예에서, 하기를 포함하는 항체, 이의 단편 또는 변이체가 제공된다:
하기를 포함하는 중쇄 가변 영역: 아미노산 서열 DSEIH (서열번호: 102)을 포함하는 VHCDR1, 아미노산 서열 EIDPETGGTAYNQKFKG (서열번호: 103)을 포함하는 VHCDR2, 아미노산 서열 ETDYFFDY (서열번호: 104)을 포함하는 VHCDR3; 및/또는
하기를 포함하는 경쇄 가변 영역: 아미노산 서열 SASSSVSYMY (서열번호: 98)을 포함하는 VLCDR1, 아미노산 서열 DTSNLAS (서열번호: 99)을 포함하는 VLCDR2 및 아미노산 서열 QQWSSYPLT (서열번호: 100)을 포함하는 VLCDR3.
3E09
일 구현예에서, 하기를 포함하는 항체, 이의 단편 또는 변이체가 제공된다:
하기를 포함하는 중쇄 가변 영역: 아미노산 서열 DYYMY (서열번호: 110)에 대해 적어도 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 91 %, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98% 또는 99% 동일성을 포함하는 VHCDR1, 아미노산 서열 AIGDGGIYTYYADTVKG (서열번호: 111)에 대해 적어도 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 91 %, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98% 또는 99% 동일성을 포함하는 VHCDR2, 아미노산 서열 GTGDGFAY (서열번호: 112)에 대해 적어도 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 91 %, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98% 또는 99% 동일성을 포함하는 VHCDR3; 및/또는
하기를 포함하는 경쇄 가변 영역: 아미노산 서열 RASESVDSYGNSFMH (서열번호: 106)에 대해 적어도 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 91 %, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98% 또는 99% 동일성을 포함하는 VLCDR1, 아미노산 서열 LASNLES (서열번호: 107)에 대해 적어도 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 91 %, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98% 또는 99% 동일성을 포함하는 VLCDR2 및 아미노산 서열 QQNNEDPYT (서열번호: 108)에 대해 적어도 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 91 %, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98% 또는 99% 동일성을 포함하는 VLCDR3.
일 구현예에서, 하기를 포함하는 항체, 이의 단편 또는 변이체가 제공된다:
하기를 포함하는 중쇄 가변 영역: 아미노산 서열 DYYMY (서열번호: 110)에 대해 적어도 90% 동일성을 포함하는 VHCDR1, 아미노산 서열 AIGDGGIYTYYADTVKG (서열번호: 111)에 대해 적어도 90% 동일성을 포함하는 VHCDR2, 아미노산 서열 GTGDGFAY (서열번호: 112)에 대해 적어도 90% 동일성을 포함하는 VHCDR3; 및/또는
하기를 포함하는 경쇄 가변 영역: 아미노산 서열 RASESVDSYGNSFMH (서열번호: 106)에 대해 적어도 90% 동일성을 포함하는 VLCDR1, 아미노산 서열 LASNLES (서열번호: 107)에 대해 적어도 90% 동일성을 포함하는 VLCDR2 및 아미노산 서열 QQNNEDPYT (서열번호: 108)에 대해 적어도 90% 동일성을 포함하는 VLCDR3.
일 구현예에서, 하기를 포함하는 항체, 이의 단편 또는 변이체가 제공된다:
하기를 포함하는 중쇄 가변 영역: 아미노산 서열 DYYMY (서열번호: 110)을 포함하는 VHCDR1, 아미노산 서열 AIGDGGIYTYYADTVKG (서열번호: 111)을 포함하는 VHCDR2, 아미노산 서열 GTGDGFAY (서열번호: 112)을 포함하는 VHCDR3을 포함하는 중쇄 가변 영역; 및/또는
하기를 포함하는 경쇄 가변 영역: 아미노산 서열 RASESVDSYGNSFMH (서열번호: 106)을 포함하는 VLCDR1, 아미노산 서열 LASNLES (서열번호: 107)을 포함하는 VLCDR2 및 아미노산 서열 QQNNEDPYT (서열번호: 108)을 포함하는 VLCDR3.
2B11
일 구현예에서, 하기를 포함하는 항체, 이의 단편 또는 변이체가 제공된다:
하기를 포함하는 중쇄 가변 영역: 아미노산 서열 DYAIH (서열번호: 118)에 대해 적어도 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 91 %, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98% 또는 99% 동일성을 포함하는 VHCDR1, 아미노산 서열 VISTYYGDASYNQKFKG (서열번호: 119)에 대해 적어도 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 91 %, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98% 또는 99% 동일성을 포함하는 VHCDR2, 아미노산 서열 SRGEYGNYDAMDY (서열번호: 120)에 대해 적어도 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 91 %, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98% 또는 99% 동일성을 포함하는 VHCDR3; 및/또는
하기를 포함하는 경쇄 가변 영역: 아미노산 서열 RASESVDSYGNSFMH (서열번호: 114)에 대해 적어도 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 91 %, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98% 또는 99% 동일성을 포함하는 VLCDR1, 아미노산 서열 RASNLES (서열번호: 115)에 대해 적어도 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 91 %, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98% 또는 99% 동일성을 포함하는 VLCDR2 및 아미노산 서열 QQSNEDPYT (서열번호: 116)에 대해 적어도 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 91 %, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98% 또는 99% 동일성을 포함하는 VLCDR3.
일 구현예에서, 하기를 포함하는 항체, 이의 단편 또는 변이체가 제공된다:
하기를 포함하는 중쇄 가변 영역: 아미노산 서열 DYAIH (서열번호: 118)에 대해 적어도 90% 동일성을 포함하는 VHCDR1, 아미노산 서열 VISTYYGDASYNQKFKG (서열번호: 119)에 대해 적어도 90% 동일성을 포함하는 VHCDR2, 아미노산 서열 SRGEYGNYDAMDY (서열번호: 120)에 대해 적어도 90% 동일성을 포함하는 VHCDR3 comrise; 및/또는 하기를 포함하는 경쇄 가변 영역: 아미노산 서열 RASESVDSYGNSFMH (서열번호: 114)에 대해 적어도 90% 동일성을 포함하는 VLCDR1, 아미노산 서열 RASNLES (서열번호: 115)에 대해 적어도 90% 동일성을 포함하는 VLCDR2 및 아미노산 서열 QQSNEDPYT (서열번호: 116)에 대해 적어도 90% 동일성을 포함하는 VLCDR3.
일 구현예에서, 하기를 포함하는 항체, 이의 단편 또는 변이체가 제공된다:
하기를 포함하는 중쇄 가변 영역: 아미노산 서열 DYAIH (서열번호: 118)을 포함하는 VHCDR1, 아미노산 서열 VISTYYGDASYNQKFKG (서열번호: 119)을 포함하는 VHCDR2, 아미노산 서열 SRGEYGNYDAMDY (서열번호: 120)을 포함하는 VHCDR3; 및/또는
하기를 포함하는 경쇄 가변 영역: 아미노산 서열 RASESVDSYGNSFMH (서열번호: 114)을 포함하는 VLCDR1, 아미노산 서열 RASNLES (서열번호: 115)을 포함하는 VLCDR2 및 아미노산 서열 QQSNEDPYT (서열번호: 116)을 포함하는 VLCDR3.
3b04_var 1
일 구현예에서, 하기를 포함하는 항체, 이의 단편 또는 변이체가 제공된다:
하기를 포함하는 중쇄 가변 영역: 아미노산 서열 DYEMH (서열번호: 14)에 대해 적어도 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 91 %, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98% 또는 99% 동일성을 포함하는 VHCDR1, 아미노산 서열 EIDPETGDTAYSQKFKG (서열번호: 15)에 대해 적어도 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 91 %, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98% 또는 99% 동일성을 포함하는 VHCDR2 및 아미노산 서열 ETDYFFDY (서열번호: 16)에 대해 적어도 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 91 %, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98% 또는 99% 동일성을 포함하는 VHCDR3; 및/또는
하기를 포함하는 경쇄 가변 영역: 아미노산 서열 GASENIYGALN (서열번호: 10)에 대해 적어도 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 91 %, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98% 또는 99% 동일성을 포함하는 VLCDR1, 아미노산 서열 GATNLAD (서열번호: 11)에 대해 적어도 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 91 %, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98% 또는 99% 동일성을 포함하는 VLCDR2 및 아미노산 서열 QNVLTTPWT (서열번호: 12)에 대해 적어도 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 91 %, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98% 또는 99% 동일성을 포함하는 VLCDR3.
일 구현예에서, 하기를 포함하는 항체, 이의 단편 또는 변이체가 제공된다:
하기를 포함하는 중쇄 가변 영역: 아미노산 서열 DYEMH (서열번호: 14)에 대해 적어도 90% 동일성을 포함하는 VHCDR1, 아미노산 서열 EIDPETGDTAYSQKFKG (서열번호: 15)에 대해 적어도 90% 동일성을 포함하는 VHCDR2 및 아미노산 서열 ETDYFFDY (서열번호: 16)에 대해 적어도 90% 동일성을 포함하는 VHCDR3 comrise; 및/또는
하기를 포함하는 경쇄 가변 영역: 아미노산 서열 GASENIYGALN (서열번호: 10)에 대해 적어도 90% 동일성을 포함하는 VLCDR1, 아미노산 서열 GATNLAD (서열번호: 11)에 대해 적어도 90% 동일성을 포함하는 VLCDR2 및 아미노산 서열 QNVLTTPWT (서열번호: 12)에 대해 적어도 90% 동일성을 포함하는 VLCDR3.
일 구현예에서, 하기를 포함하는 항체, 이의 단편 또는 변이체가 제공된다:
하기를 포함하는 중쇄 가변 영역: 아미노산 서열 DYEMH (서열번호: 14)을 포함하는 VHCDR1, 아미노산 서열 EIDPETGDTAYSQKFKG (서열번호: 15)을 포함하는 VHCDR2 및 아미노산 서열 ETDYFFDY (서열번호: 16)을 포함하는 VHCDR3; 및/또는
하기를 포함하는 경쇄 가변 영역: 아미노산 서열 GASENIYGALN (서열번호: 10)을 포함하는 VLCDR1, 아미노산 서열 GATNLAD (서열번호: 11)을 포함하는 VLCDR2 및 아미노산 서열 QNVLTTPWT (서열번호: 12)을 포함하는 VLCDR3.
3b04_var 2
일 구현예에서, 하기를 포함하는 항체, 이의 단편 또는 변이체가 제공된다:
하기를 포함하는 중쇄 가변 영역: 아미노산 서열 DYEMH (서열번호: 22)에 대해 적어도 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 91 %, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98% 또는 99% 동일성을 포함하는 VHCDR1, 아미노산 서열 EIDPETGDTAYSQKFQG (서열번호: 23)에 대해 적어도 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 91 %, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98% 또는 99% 동일성을 포함하는 VHCDR2 및 아미노산 서열 ETDYFFDY (서열번호: 24)에 대해 적어도 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 91 %, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98% 또는 99% 동일성을 포함하는 VHCDR3; 및/또는
하기를 포함하는 경쇄 가변 영역: 아미노산 서열 GASENIYGALN (서열번호: 10)에 대해 적어도 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 91 %, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98% 또는 99% 동일성을 포함하는 VLCDR1, 아미노산 서열 GATNLAD (서열번호: 11)에 대해 적어도 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 91 %, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98% 또는 99% 동일성을 포함하는 VLCDR2 및 아미노산 서열 QNVLTTPWT (서열번호: 12)에 대해 적어도 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 91 %, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98% 또는 99% 동일성을 포함하는 VLCDR3.
일 구현예에서, 하기를 포함하는 항체, 이의 단편 또는 변이체가 제공된다:
하기를 포함하는 중쇄 가변 영역: 아미노산 서열 DYEMH (서열번호: 22)에 대해 적어도 90% 동일성을 포함하는 VHCDR1, 아미노산 서열 EIDPETGDTAYSQKFQG (서열번호: 23)에 대해 적어도 90% 동일성을 포함하는 VHCDR2 및 아미노산 서열 ETDYFFDY (서열번호: 24)에 대해 적어도 90% 동일성을 포함하는 VHCDR3; 및/또는
하기를 포함하는 경쇄 가변 영역: 아미노산 서열 GASENIYGALN (서열번호: 10)에 대해 적어도 90% 동일성을 포함하는 VLCDR1, 아미노산 서열 GATNLAD (서열번호: 11)에 대해 적어도 90% 동일성을 포함하는 VLCDR2 및 아미노산 서열 QNVLTTPWT (서열번호: 12)에 대해 적어도 90% 동일성을 포함하는 VLCDR3.
일 구현예에서, 하기를 포함하는 항체, 이의 단편 또는 변이체가 제공된다:
하기를 포함하는 중쇄 가변 영역: 아미노산 서열 DYEMH (서열번호: 22)을 포함하는 VHCDR1, 아미노산 서열 EIDPETGDTAYSQKFQG (서열번호: 23)을 포함하는 VHCDR2 및 아미노산 서열 ETDYFFDY (서열번호: 24)을 포함하는 VHCDR3); 및/또는
하기를 포함하는 경쇄 가변 영역: 아미노산 서열 GASENIYGALN (서열번호: 10)을 포함하는 VLCDR1, 아미노산 서열 GATNLAD (서열번호: 11)을 포함하는 VLCDR2 및 아미노산 서열 QNVLTTPWT (서열번호: 12)을 포함하는 VLCDR3.
3b04_var3
일 구현예에서, 하기를 포함하는 항체, 이의 단편 또는 변이체가 제공된다:
하기를 포함하는 중쇄 가변 영역: 아미노산 서열 DYEMH (서열번호: 30)에 대해 적어도 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 91 %, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98% 또는 99% 동일성을 포함하는 VHCDR1, 아미노산 서열 EIDPETGDTAYSQKFQG (서열번호: 31)에 대해 적어도 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 91 %, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98% 또는 99% 동일성을 포함하는 VHCDR2 및 아미노산 서열 ETDYFFDY (서열번호: 32)에 대해 적어도 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 91 %, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98% 또는 99% 동일성을 포함하는 VHCDR3; 및/또는
하기를 포함하는 경쇄 가변 영역: 아미노산 서열 GASENIYGALN (서열번호: 10)에 대해 적어도 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 91 %, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98% 또는 99% 동일성을 포함하는 VLCDR1, 아미노산 서열 GATNLAD (서열번호: 11)에 대해 적어도 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 91 %, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98% 또는 99% 동일성을 포함하는 VLCDR2 및 아미노산 서열 QNVLTTPWT (서열번호: 12)에 대해 적어도 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 91 %, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98% 또는 99% 동일성을 포함하는 VLCDR3.
일 구현예에서, 하기를 포함하는 항체, 이의 단편 또는 변이체가 제공된다:
하기를 포함하는 중쇄 가변 영역: 아미노산 서열 DYEMH (서열번호: 30)에 대해 적어도 90% 동일성을 포함하는 VHCDR1, 아미노산 서열 EIDPETGDTAYSQKFQG (서열번호: 31)에 대해 적어도 90% 동일성을 포함하는 VHCDR2 및 아미노산 서열 ETDYFFDY (서열번호: 32)에 대해 적어도 90% 동일성을 포함하는 VHCDR3; 및/또는
하기를 포함하는 경쇄 가변 영역: 아미노산 서열 GASENIYGALN (서열번호: 10)에 대해 적어도 90% 동일성을 포함하는 VLCDR1, 아미노산 서열 GATNLAD (서열번호: 11)에 대해 적어도 90% 동일성을 포함하는 VLCDR2 및 아미노산 서열 QNVLTTPWT (서열번호: 12)에 대해 적어도 90% 동일성을 포함하는 VLCDR3.
일 구현예에서, 하기를 포함하는 항체, 이의 단편 또는 변이체가 제공된다:
하기를 포함하는 중쇄 가변 영역: 아미노산 서열 DYEMH (서열번호: 30)을 포함하는 VHCDR1, 아미노산 서열 EIDPETGDTAYSQKFQG (서열번호: 31)을 포함하는 VHCDR2 및 아미노산 서열 ETDYFFDY (서열번호: 32)을 포함하는 VHCDR3; 및/또는
하기를 포함하는 경쇄 가변 영역: 아미노산 서열 GASENIYGALN (서열번호: 10)을 포함하는 VLCDR1, 아미노산 서열 GATNLAD (서열번호: 11)을 포함하는 VLCDR2 및 아미노산 서열 QNVLTTPWT (서열번호: 12)을 포함하는 VLCDR3.
3b04_var4
일 구현예에서, 하기를 포함하는 항체, 이의 단편 또는 변이체가 제공된다:
하기를 포함하는 중쇄 가변 영역: 아미노산 서열 DYEMH (서열번호: 38)에 대해 적어도 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 91 %, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98% 또는 99% 동일성을 포함하는 VHCDR1, (서열번호: 39)에 대해 적어도 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 91 %, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98% 또는 99% 동일성을 포함하는 VHCDR2 및 아미노산 서열 ETDYFFDY (서열번호: 40)에 대해 적어도 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 91 %, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98% 또는 99% 동일성을 포함하는 VHCDR3; 및/또는
하기를 포함하는 경쇄 가변 영역: 아미노산 서열 GASENIYGALN (서열번호: 10)에 대해 적어도 70%, 75%, 80%,
85%, 90%, 91 %, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98% 또는 99% 동일성을 포함하는 VLCDR1, 아미노산 서열 GATNLAD (서열번호: 11)에 대해 적어도 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 91 %, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98% 또는 99% 동일성을 포함하는 VLCDR2 및 아미노산 서열 QNVLTTPWT (서열번호: 12)에 대해 적어도 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 91 %, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98% 또는 99% 동일성을 포함하는 VLCDR3.
일 구현예에서, 하기를 포함하는 항체, 이의 단편 또는 변이체가 제공된다:
하기를 포함하는 중쇄 가변 영역: 아미노산 서열 DYEMH (서열번호: 38)에 대해 적어도 90% 동일성을 포함하는 VHCDR1, 아미노산 서열 EIDPETGDTAYSQKFQG (서열번호: 39)에 대해 적어도 90% 동일성을 포함하는 VHCDR2 및 아미노산 서열 ETDYFFDY (서열번호: 40)에 대해 적어도 90% 동일성을 포함하는 VHCDR3; 및/또는
하기를 포함하는 경쇄 가변 영역: 아미노산 서열 GASENIYGALN (서열번호: 10)에 대해 적어도 90% 동일성을 포함하는 VLCDR1, 아미노산 서열 GATNLAD (서열번호: 11)에 대해 적어도 90% 동일성을 포함하는 VLCDR2 및 아미노산 서열 QNVLTTPWT (서열번호: 12)에 대해 적어도 90% 동일성을 포함하는 VLCDR3.
일 구현예에서, 하기를 포함하는 항체, 이의 단편 또는 변이체가 제공된다:
하기를 포함하는 중쇄 가변 영역: 아미노산 서열 DYEMH (서열번호: 38)을 포함하는 VHCDR1, 아미노산 서열 EIDPETGDTAYSQKFQG (서열번호: 39)을 포함하는 VHCDR2 및 아미노산 서열 ETDYFFDY (서열번호: 40)을 포함하는 VHCDR3; 및/또는
하기를 포함하는 경쇄 가변 영역: 아미노산 서열 GASENIYGALN (서열번호: 10)을 포함하는 VLCDR1, 아미노산 서열 GATNLAD (서열번호: 11)을 포함하는 VLCDR2 및 아미노산 서열 QNVLTTPWT (서열번호: 12)을 포함하는 VLCDR3.
3b04_var5
일 구현예에서, 하기를 포함하는 항체, 이의 단편 또는 변이체가 제공된다:
하기를 포함하는 중쇄 가변 영역: 아미노산 서열 DYEMH (서열번호: 14)에 대해 적어도 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 91 %, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98% 또는 99% 동일성을 포함하는 VHCDR1, 아미노산 서열 EIDPETGDTAYSQKFKG (서열번호: 15)에 대해 적어도 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 91 %, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98% 또는 99% 동일성을 포함하는 VHCDR2 및 아미노산 서열 ETDYFFDY (서열번호: 16)에 대해 적어도 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 91 %, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98% 또는 99% 동일성을 포함하는 VHCDR3; 및/또는
하기를 포함하는 경쇄 가변 영역: 아미노산 서열 GASENIYGALN (서열번호: 18)에 대해 적어도 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 91 %, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98% 또는 99% 동일성을 포함하는 VLCDR1, 아미노산 서열 GATNLAD (서열번호: 19)에 대해 적어도 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 91 %, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98% 또는 99% 동일성을 포함하는 VLCDR2 및 아미노산 서열 QNVLTTPWT (서열번호: 20)에 대해 적어도 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 91 %, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98% 또는 99% 동일성을 포함하는 VLCDR3.
일 구현예에서, 하기를 포함하는 항체, 이의 단편 또는 변이체가 제공된다:
하기를 포함하는 중쇄 가변 영역: 아미노산 서열 DYEMH (서열번호: 14)에 대해 적어도 90% 동일성을 포함하는 VHCDR1, 아미노산 서열 EIDPETGDTAYSQKFKG (서열번호: 15)에 대해 적어도 90% 동일성을 포함하는 VHCDR2 및 아미노산 서열 ETDYFFDY (서열번호: 16)에 대해 적어도 90% 동일성을 포함하는 VHCDR3; 및/또는
하기를 포함하는 경쇄 가변 영역: 아미노산 서열 GASENIYGALN (서열번호: 18)에 대해 적어도 90% 동일성을 포함하는 VLCDR1, 아미노산 서열 GATNLAD (서열번호: 19)에 대해 적어도 90% 동일성을 포함하는 VLCDR2 및 아미노산 서열 QNVLTTPWT (서열번호: 20)에 대해 적어도 90% 동일성을 포함하는 VLCDR3.
일 구현예에서, 하기를 포함하는 항체, 이의 단편 또는 변이체가 제공된다:
하기를 포함하는 중쇄 가변 영역: 아미노산 서열 DYEMH (서열번호: 14)을 포함하는 VHCDR1, 아미노산 서열 EIDPETGDTAYSQKFKG (서열번호: 15)을 포함하는 VHCDR2 및 아미노산 서열 ETDYFFDY (서열번호: 16)을 포함하는 VHCDR3; 및/또는
하기를 포함하는 경쇄 가변 영역: 아미노산 서열 GASENIYGALN (서열번호: 18)을 포함하는 VLCDR1, 아미노산 서열 GATNLAD (서열번호: 19)을 포함하는 VLCDR2 및 아미노산 서열 QNVLTTPWT (서열번호: 20)을 포함하는 VLCDR3.
3b04_var6
일 구현예에서, 하기를 포함하는 항체, 이의 단편 또는 변이체가 제공된다:
하기를 포함하는 중쇄 가변 영역: 아미노산 서열 DYEMH (서열번호: 22)에 대해 적어도 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 91 %, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98% 또는 99% 동일성을 포함하는 VHCDR1, 아미노산 서열 EIDPETGDTAYSQKFQG (서열번호: 23)에 대해 적어도 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 91 %, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98% 또는 99% 동일성을 포함하는 VHCDR2 및 아미노산 서열 ETDYFFDY (서열번호: 24)에 대해 적어도 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 91 %, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98% 또는 99% 동일성을 포함하는 VHCDR3; 및/또는
하기를 포함하는 경쇄 가변 영역: 적어도 70%, 75%, 80%,
85%, 90%, 91 %, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98% 또는 99% 동일성을 포함하는 VLCDR1 (아미노산 서열 GASENIYGALN (서열번호: 18)에 대해), 아미노산 서열 GATNLAD (서열번호: 19)에 대해 적어도 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 91 %, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98% 또는 99% 동일성을 포함하는 VLCDR2 및 아미노산 서열 QNVLTTPWT (서열번호: 20)에 대해 적어도 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 91 %, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98% 또는 99% 동일성을 포함하는 VLCDR3.
일 구현예에서, 하기를 포함하는 항체, 이의 단편 또는 변이체가 제공된다:
하기를 포함하는 중쇄 가변 영역: 아미노산 서열 DYEMH (서열번호: 22)에 대해 적어도 90% 동일성을 포함하는 VHCDR1, 아미노산 서열 EIDPETGDTAYSQKFQG (서열번호: 23)에 대해 적어도 90% 동일성을 포함하는 VHCDR2 및 아미노산 서열 ETDYFFDY (서열번호: 24)에 대해 적어도 90% 동일성을 포함하는 VHCDR3; 및/또는
하기를 포함하는 경쇄 가변 영역: 아미노산 서열 GASENIYGALN (서열번호: 18)에 대해 적어도 90% 동일성을 포함하는 VLCDR1, 아미노산 서열 GATNLAD (서열번호: 19)에 대해 적어도 90% 동일성을 포함하는 VLCDR2 및 아미노산 서열 QNVLTTPWT (서열번호: 20)에 대해 적어도 90% 동일성을 포함하는 VLCDR3.
일 구현예에서, 하기를 포함하는 항체, 이의 단편 또는 변이체가 제공된다:
하기를 포함하는 중쇄 가변 영역: 아미노산 서열 DYEMH (서열번호: 22)을 포함하는 VHCDR1, 아미노산 서열 EIDPETGDTAYSQKFQG (서열번호: 23)을 포함하는 VHCDR2 및 아미노산 서열 ETDYFFDY (서열번호: 24)을 포함하는 VHCDR3 및/또는
하기를 포함하는 경쇄 가변 영역: 아미노산 서열 GASENIYGALN (서열번호: 18)을 포함하는 VLCDR1, 아미노산 서열 GATNLAD (서열번호: 19)을 포함하는 VLCDR2 및 아미노산 서열 QNVLTTPWT (서열번호: 20)을 포함하는 VLCDR3.
3b04_var 7
일 구현예에서, 하기를 포함하는 항체, 이의 단편 또는 변이체가 제공된다:
하기를 포함하는 중쇄 가변 영역: 아미노산 서열 DYEMH (서열번호: 30)에 대해 적어도 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 91 %, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98% 또는 99% 동일성을 포함하는 VHCDR1, 아미노산 서열 EIDPETGDTAYSQKFQG (서열번호: 31)에 대해 적어도 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 91 %, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98% 또는 99% 동일성을 포함하는 VHCDR2 및 아미노산 서열 ETDYFFDY (서열번호: 32)에 대해 적어도 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 91 %, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98% 또는 99% 동일성을 포함하는 VHCDR3; 및/또는
하기를 포함하는 경쇄 가변 영역: 아미노산 서열 GASENIYGALN (서열번호: 18)에 대해 적어도 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 91 %, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98% 또는 99% 동일성을 포함하는 VLCDR1, 아미노산 서열 GATNLAD (서열번호: 19)에 대해 적어도 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 91 %, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98% 또는 99% 동일성을 포함하는 VLCDR2 및 아미노산 서열 QNVLTTPWT (서열번호: 20)에 대해 적어도 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 91 %, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98% 또는 99% 동일성을 포함하는 VLCDR3.
일 구현예에서, 하기를 포함하는 항체, 이의 단편 또는 변이체가 제공된다:
하기를 포함하는 중쇄 가변 영역: 아미노산 서열 DYEMH (서열번호: 30)에 대해 적어도 90% 동일성을 포함하는 VHCDR1, 아미노산 서열 EIDPETGDTAYSQKFQG (서열번호: 31)에 대해 적어도 90% 동일성을 포함하는 VHCDR2 및 아미노산 서열 ETDYFFDY (서열번호: 32)에 대해 적어도 90% 동일성을 포함하는 VHCDR3; 및/또는
하기를 포함하는 경쇄 가변 영역: 아미노산 서열 GASENIYGALN (서열번호: 18)에 대해 적어도 90% 동일성을 포함하는 VLCDR1, 아미노산 서열 GATNLAD (서열번호: 19)에 대해 적어도 90% 동일성을 포함하는 VLCDR2 및 아미노산 서열 QNVLTTPWT (서열번호: 20)에 대해 적어도 90% 동일성을 포함하는 VLCDR3.
일 구현예에서, 하기를 포함하는 항체, 이의 단편 또는 변이체가 제공된다:
하기를 포함하는 중쇄 가변 영역: 아미노산 서열 DYEMH (서열번호: 30)을 포함하는 VHCDR1, 아미노산 서열 EIDPETGDTAYSQKFQG (서열번호: 31)을 포함하는 VHCDR2 및 아미노산 서열 ETDYFFDY (서열번호: 32)을 포함하는 VHCDR3; 및/또는
하기를 포함하는 경쇄 가변 영역: 아미노산 서열 GASENIYGALN (서열번호: 18)을 포함하는 VLCDR1, 아미노산 서열 GATNLAD (서열번호: 19)을 포함하는 VLCDR2 및 아미노산 서열 QNVLTTPWT (서열번호: 20)을 포함하는 VLCDR3.
3b04_var 8
일 구현예에서, 하기를 포함하는 항체, 이의 단편 또는 변이체가 제공된다:
하기를 포함하는 중쇄 가변 영역: 아미노산 서열 DYEMH (서열번호: 38)에 대해 적어도 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 91 %, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98% 또는 99% 동일성을 포함하는 VHCDR1, (서열번호: 39)에 대해 적어도 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 91 %, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98% 또는 99% 동일성을 포함하는 VHCDR2 및 아미노산 서열 ETDYFFDY (서열번호: 40)에 대해 적어도 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 91 %, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98% 또는 99% 동일성을 포함하는 VHCDR3; 및/또는
하기를 포함하는 경쇄 가변 영역: 아미노산 서열 GASENIYGALN (서열번호: 18)에 대해 적어도 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 91 %, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98% 또는 99% 동일성을 포함하는 VLCDR1, 아미노산 서열 GATNLAD (서열번호: 19)에 대해 적어도 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 91 %, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98% 또는 99% 동일성을 포함하는 VLCDR2 및 아미노산 서열 QNVLTTPWT (서열번호: 20)에 대해 적어도 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 91 %, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98% 또는 99% 동일성을 포함하는 VLCDR3.
일 구현예에서, 하기를 포함하는 항체, 이의 단편 또는 변이체가 제공된다:
하기를 포함하는 중쇄 가변 영역: 아미노산 서열 DYEMH (서열번호: 38)에 대해 적어도 90% 동일성을 포함하는 VHCDR1, 아미노산 서열 EIDPETGDTAYSQKFQG (서열번호: 39)에 대해 적어도 90% 동일성을 포함하는 VHCDR2 및 아미노산 서열 ETDYFFDY (서열번호: 40)에 대해 적어도 90% 동일성을 포함하는 VHCDR3; 및/또는
하기를 포함하는 경쇄 가변 영역: 아미노산 서열 GASENIYGALN (서열번호: 18)에 대해 적어도 90% 동일성을 포함하는 VLCDR1, 아미노산 서열 GATNLAD (서열번호: 19)에 대해 적어도 90% 동일성을 포함하는 VLCDR2 및 아미노산 서열 QNVLTTPWT (서열번호: 20)에 대해 적어도 90% 동일성을 포함하는 VLCDR3.
일 구현예에서, 하기를 포함하는 항체, 이의 단편 또는 변이체가 제공된다:
하기를 포함하는 중쇄 가변 영역: 아미노산 서열 DYEMH (서열번호: 38)을 포함하는 VHCDR1, 아미노산 서열 EIDPETGDTAYSQKFQG (서열번호: 39)을 포함하는 VHCDR2 및 아미노산 서열 ETDYFFDY (서열번호: 40)을 포함하는 VHCDR3; 및/또는
하기를 포함하는 경쇄 가변 영역: 아미노산 서열 GASENIYGALN (서열번호: 18)을 포함하는 VLCDR1, 아미노산 서열 GATNLAD (서열번호: 19)을 포함하는 VLCDR2 및 아미노산 서열 QNVLTTPWT (서열번호: 20)을 포함하는 VLCDR3.
3b04_var 9
일 구현예에서, 하기를 포함하는 항체, 이의 단편 또는 변이체가 제공된다:
하기를 포함하는 중쇄 가변 영역: 아미노산 서열 DYEMH (서열번호: 14)에 대해 적어도 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 91 %, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98% 또는 99% 동일성을 포함하는 VHCDR1, 아미노산 서열 EIDPETGDTAYSQKFKG (서열번호: 15)에 대해 적어도 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 91 %, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98% 또는 99% 동일성을 포함하는 VHCDR2 및 아미노산 서열 ETDYFFDY (서열번호: 16)에 대해 적어도 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 91 %, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98% 또는 99% 동일성을 포함하는 VHCDR3; 및/또는
하기를 포함하는 경쇄 가변 영역: 아미노산 서열 GASENIYGALN (서열번호: 26)에 대해 적어도 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 91 %, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98% 또는 99% 동일성을 포함하는 VLCDR1, 아미노산 서열 GATNLAD (서열번호: 27)에 대해 적어도 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 91 %, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98% 또는 99% 동일성을 포함하는 VLCDR2 및 아미노산 서열 QNVLTTPWT (서열번호: 28)에 대해 적어도 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 91 %, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98% 또는 99% 동일성을 포함하는 VLCDR3.
일 구현예에서, 하기를 포함하는 항체, 이의 단편 또는 변이체가 제공된다:
하기를 포함하는 중쇄 가변 영역: 아미노산 서열 DYEMH (서열번호: 14)에 대해 적어도 90% 동일성을 포함하는 VHCDR1, 아미노산 서열 EIDPETGDTAYSQKFKG (서열번호: 15)에 대해 적어도 90% 동일성을 포함하는 VHCDR2 및 아미노산 서열 ETDYFFDY (서열번호: 16)에 대해 적어도 90% 동일성을 포함하는 VHCDR3; 및/또는
하기를 포함하는 경쇄 가변 영역: 아미노산 서열 GASENIYGALN (서열번호: 26)에 대해 적어도 90% 동일성을 포함하는 VLCDR1, 아미노산 서열 GATNLAD (서열번호: 27)에 대해 적어도 90%, 98% 또는 99% 동일성을 포함하는 VLCDR2 및 아미노산 서열 QNVLTTPWT (서열번호: 28)에 대해 적어도 90% 동일성을 포함하는 VLCDR3.
일 구현예에서, 하기를 포함하는 항체, 이의 단편 또는 변이체가 제공된다:
하기를 포함하는 중쇄 가변 영역: 아미노산 서열 DYEMH (서열번호: 14)을 포함하는 VHCDR1, 아미노산 서열 EIDPETGDTAYSQKFKG (서열번호: 15)을 포함하는 VHCDR2 및 아미노산 서열 ETDYFFDY (서열번호: 16)을 포함하는 VHCDR3; 및/또는
하기를 포함하는 경쇄 가변 영역: 아미노산 서열 GASENIYGALN (서열번호: 26)을 포함하는 VLCDR1, 아미노산 서열 GATNLAD (서열번호: 27)을 포함하는 VLCDR2 및 아미노산 서열 QNVLTTPWT (서열번호: 28)을 포함하는 VLCDR3.
3b04_var10
일 구현예에서, 하기를 포함하는 항체, 이의 단편 또는 변이체가 제공된다:
하기를 포함하는 중쇄 가변 영역: 아미노산 서열 DYEMH (서열번호: 22)에 대해 적어도 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 91 %, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98% 또는 99% 동일성을 포함하는 VHCDR1, 아미노산 서열 EIDPETGDTAYSQKFQG (서열번호: 23)에 대해 적어도 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 91 %, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98% 또는 99% 동일성을 포함하는 VHCDR2 및 아미노산 서열 ETDYFFDY (서열번호: 24)에 대해 적어도 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 91 %, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98% 또는 99% 동일성을 포함하는 VHCDR3; 및/또는
하기를 포함하는 경쇄 가변 영역: 아미노산 서열 GASENIYGALN (서열번호: 26)에 대해 적어도 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 91 %, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98% 또는 99% 동일성을 포함하는 VLCDR1, 아미노산 서열 GATNLAD (서열번호: 27)에 대해 적어도 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 91 %, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98% 또는 99% 동일성을 포함하는 VLCDR2 및 아미노산 서열 QNVLTTPWT (서열번호: 28)에 대해 적어도 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 91 %, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98% 또는 99% 동일성을 포함하는 VLCDR3.
일 구현예에서, 하기를 포함하는 항체, 이의 단편 또는 변이체가 제공된다:
하기를 포함하는 중쇄 가변 영역: 아미노산 서열 DYEMH (서열번호: 22)에 대해 적어도 90% 동일성을 포함하는 VHCDR1, 아미노산 서열 EIDPETGDTAYSQKFQG (서열번호: 23)에 대해 적어도 90% 동일성을 포함하는 VHCDR2 및 아미노산 서열 ETDYFFDY (서열번호: 24)에 대해 적어도 90% 동일성을 포함하는 VHCDR3; 및/또는
하기를 포함하는 경쇄 가변 영역: 아미노산 서열 GASENIYGALN (서열번호: 26)에 대해 적어도 90% 동일성을 포함하는 VLCDR1, 아미노산 서열 GATNLAD (서열번호: 27)에 대해 적어도 90% 동일성을 포함하는 VLCDR2 및 아미노산 서열 QNVLTTPWT (서열번호: 28)에 대해 적어도 90% 동일성을 포함하는 VLCDR3.
일 구현예에서, 하기를 포함하는 항체, 이의 단편 또는 변이체가 제공된다:
하기를 포함하는 중쇄 가변 영역: 아미노산 서열 DYEMH (서열번호: 22)을 포함하는 VHCDR1, 아미노산 서열 EIDPETGDTAYSQKFQG (서열번호: 23)을 포함하는 VHCDR2 및 아미노산 서열 ETDYFFDY (서열번호: 24)을 포함하는 VHCDR3; 및/또는
하기를 포함하는 경쇄 가변 영역: 아미노산 서열 GASENIYGALN (서열번호: 26)을 포함하는 VLCDR1, 아미노산 서열 GATNLAD (서열번호: 27)을 포함하는 VLCDR2 및 아미노산 서열 QNVLTTPWT (서열번호: 28)을 포함하는 VLCDR3.
3b04_var 11
일 구현예에서, 하기를 포함하는 항체, 이의 단편 또는 변이체가 제공된다:
하기를 포함하는 중쇄 가변 영역: 아미노산 서열 DYEMH (서열번호: 30)에 대해 적어도 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 91 %, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98% 또는 99% 동일성을 포함하는 VHCDR1, 아미노산 서열 EIDPETGDTAYSQKFQG (서열번호: 31)에 대해 적어도 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 91 %, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98% 또는 99% 동일성을 포함하는 VHCDR2 및 아미노산 서열 ETDYFFDY (서열번호: 32)에 대해 적어도 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 91 %, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98% 또는 99% 동일성을 포함하는 VHCDR3 및/또는
하기를 포함하는 경쇄 가변 영역: 아미노산 서열 GASENIYGALN (서열번호: 26)에 대해 적어도 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 91 %, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98% 또는 99% 동일성을 포함하는 VLCDR1, 아미노산 서열 GATNLAD (서열번호: 27)에 대해 적어도 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 91 %, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98% 또는 99% 동일성을 포함하는 VLCDR2 및 아미노산 서열 QNVLTTPWT (서열번호: 28)에 대해 적어도 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 91 %, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98% 또는 99% 동일성을 포함하는 VLCDR3.
일 구현예에서, 하기를 포함하는 항체, 이의 단편 또는 변이체가 제공된다:
하기를 포함하는 중쇄 가변 영역: 아미노산 서열 DYEMH (서열번호: 30)에 대해 적어도 90% 동일성을 포함하는 VHCDR1, 아미노산 서열 EIDPETGDTAYSQKFQG (서열번호: 31)에 대해 적어도 90% 동일성을 포함하는 VHCDR2 및 아미노산 서열 ETDYFFDY (서열번호: 32)에 대해 적어도 90% 동일성을 포함하는 VHCDR3; 및/또는
하기를 포함하는 경쇄 가변 영역: 아미노산 서열 GASENIYGALN (서열번호: 26)에 대해 적어도 90% 동일성을 포함하는 VLCDR1, 아미노산 서열 GATNLAD (서열번호: 27)에 대해 적어도 90% 동일성을 포함하는 VLCDR2 및 아미노산 서열 QNVLTTPWT (서열번호: 28)에 대해 적어도 90% 동일성을 포함하는 VLCDR3.
일 구현예에서, 하기를 포함하는 항체, 이의 단편 또는 변이체가 제공된다:
하기를 포함하는 중쇄 가변 영역: 아미노산 서열 DYEMH (서열번호: 30)을 포함하는 VHCDR1, 아미노산 서열 EIDPETGDTAYSQKFQG (서열번호: 31)을 포함하는 VHCDR2 및 아미노산 서열 ETDYFFDY (서열번호: 32)을 포함하는 VHCDR3; 및/또는
하기를 포함하는 경쇄 가변 영역: 아미노산 서열 GASENIYGALN (서열번호: 26)을 포함하는 VLCDR1, 아미노산 서열 GATNLAD (서열번호: 27)을 포함하는 VLCDR2 및 아미노산 서열 QNVLTTPWT (서열번호: 28)을 포함하는 VLCDR3.
3b04_var 12
일 구현예에서, 하기를 포함하는 항체, 이의 단편 또는 변이체가 제공된다:
하기를 포함하는 중쇄 가변 영역: 아미노산 서열 DYEMH (서열번호: 38)에 대해 적어도 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 91 %, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98% 또는 99% 동일성을 포함하는 VHCDR1, (서열번호: 39)에 대해 적어도 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 91 %, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98% 또는 99% 동일성을 포함하는 VHCDR2 및 아미노산 서열 ETDYFFDY (서열번호: 40)에 대해 적어도 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 91 %, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98% 또는 99% 동일성을 포함하는 VHCDR3 및/또는
하기를 포함하는 경쇄 가변 영역: 아미노산 서열 GASENIYGALN (서열번호: 26)에 대해 적어도 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 91 %, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98% 또는 99% 동일성을 포함하는 VLCDR1, 아미노산 서열 GATNLAD (서열번호: 27)에 대해 적어도 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 91 %, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98% 또는 99% 동일성을 포함하는 VLCDR2 및 아미노산 서열 QNVLTTPWT (서열번호: 28)에 대해 적어도 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 91 %, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98% 또는 99% 동일성을 포함하는 VLCDR3.
일 구현예에서, 하기를 포함하는 항체, 이의 단편 또는 변이체가 제공된다:
하기를 포함하는 중쇄 가변 영역: 아미노산 서열 DYEMH (서열번호: 38)에 대해 적어도 90% 동일성을 포함하는 VHCDR1, 아미노산 서열 EIDPETGDTAYSQKFQG (서열번호: 39)에 대해 적어도 90% 동일성을 포함하는 VHCDR2 및 아미노산 서열 ETDYFFDY (서열번호: 40)에 대해 적어도 90% 동일성을 포함하는 VHCDR3; 및/또는
하기를 포함하는 경쇄 가변 영역: 아미노산 서열 GASENIYGALN (서열번호: 26)에 대해 적어도 90% 동일성을 포함하는 VLCDR1, 아미노산 서열 GATNLAD (서열번호: 27)에 대해 적어도 90% 동일성을 포함하는 VLCDR2 및 아미노산 서열 QNVLTTPWT (서열번호: 28)에 대해 적어도 90% 동일성을 포함하는 VLCDR3.
일 구현예에서, 하기를 포함하는 항체, 이의 단편 또는 변이체가 제공된다: 하기를 포함하는 중쇄 가변 영역: 아미노산 서열 DYEMH (서열번호: 38)을 포함하는 VHCDR1, 아미노산 서열 EIDPETGDTAYSQKFQG (서열번호: 39)을 포함하는 VHCDR2 및 아미노산 서열 ETDYFFDY (서열번호: 40)을 포함하는 VHCDR3; 및/또는
하기를 포함하는 경쇄 가변 영역: 아미노산 서열 GASENIYGALN (서열번호: 26)을 포함하는 VLCDR1, 아미노산 서열 GATNLAD (서열번호: 27)을 포함하는 VLCDR2 및 아미노산 서열 QNVLTTPWT (서열번호: 28)을 포함하는 VLCDR3.
3b04_var 13
일 구현예에서, 하기를 포함하는 항체, 이의 단편 또는 변이체가 제공된다:
하기를 포함하는 중쇄 가변 영역: 아미노산 서열 DYEMH (서열번호: 14)에 대해 적어도 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 91 %, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98% 또는 99% 동일성을 포함하는 VHCDR1, 아미노산 서열 EIDPETGDTAYSQKFKG (서열번호: 15)에 대해 적어도 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 91 %, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98% 또는 99% 동일성을 포함하는 VHCDR2 및 아미노산 서열 ETDYFFDY (서열번호: 16)에 대해 적어도 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 91 %, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98% 또는 99% 동일성을 포함하는 VHCDR3; 및/또는
하기를 포함하는 경쇄 가변 영역: 아미노산 서열 RASENIYGALN (서열번호: 34)에 대해 적어도 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 91 %, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98% 또는 99% 동일성을 포함하는 VLCDR1, 아미노산 서열 GATNLAE (서열번호: 35)에 대해 적어도 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 91 %, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98% 또는 99% 동일성을 포함하는 VLCDR2 및 아미노산 서열 QNVLTTPWT (서열번호: 36)에 대해 적어도 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 91 %, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98% 또는 99% 동일성을 포함하는 VLCDR3.
일 구현예에서, 하기를 포함하는 항체, 이의 단편 또는 변이체가 제공된다:
하기를 포함하는 중쇄 가변 영역: 아미노산 서열 DYEMH (서열번호: 14)에 대해 적어도 90% 동일성을 포함하는 VHCDR1, 아미노산 서열 EIDPETGDTAYSQKFKG (서열번호: 15)에 대해 적어도 90% 동일성을 포함하는 VHCDR2 및 아미노산 서열 ETDYFFDY (서열번호: 16)에 대해 적어도 90% 동일성을 포함하는 VHCDR3; 및/또는
하기를 포함하는 경쇄 가변 영역: 아미노산 서열 RASENIYGALN (서열번호: 34)에 대해 적어도 90% 동일성을 포함하는 VLCDR1, 아미노산 서열 GATNLAE (서열번호: 35)에 대해 적어도 90% 동일성을 포함하는 VLCDR2 및 아미노산 서열 QNVLTTPWT (서열번호: 36)에 대해 적어도 90% 동일성을 포함하는 VLCDR3.
일 구현예에서, 하기를 포함하는 항체, 이의 단편 또는 변이체가 제공된다:
하기를 포함하는 중쇄 가변 영역: 아미노산 서열 DYEMH (서열번호: 14)을 포함하는 VHCDR1, 아미노산 서열 EIDPETGDTAYSQKFKG (서열번호: 15)을 포함하는 VHCDR2 및 아미노산 서열 ETDYFFDY (서열번호: 16)을 포함하는 VHCDR3; 및/또는
하기를 포함하는 경쇄 가변 영역: 아미노산 서열 RASENIYGALN (서열번호: 34)을 포함하는 VLCDR1, 아미노산 서열 GATNLAE (서열번호: 35)을 포함하는 VLCDR2 및 아미노산 서열 QNVLTTPWT (서열번호: 36)을 포함하는 VLCDR3.
3b04_var 14
일 구현예에서, 하기를 포함하는 항체, 이의 단편 또는 변이체가 제공된다:
하기를 포함하는 중쇄 가변 영역: 아미노산 서열 DYEMH (서열번호: 22)에 대해 적어도 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 91 %, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98% 또는 99% 동일성을 포함하는 VHCDR1, 아미노산 서열 EIDPETGDTAYSQKFQG (서열번호: 23)에 대해 적어도 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 91 %, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98% 또는 99% 동일성을 포함하는 VHCDR2 및 아미노산 서열 ETDYFFDY (서열번호: 24)에 대해 적어도 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 91 %, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98% 또는 99% 동일성을 포함하는 VHCDR3; 및/또는
하기를 포함하는 경쇄 가변 영역: 적어도 70%, 75%, 80%,
85%, 90%, 91 %, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98% 또는 99% 동일성을 포함하는 VLCDR1 (아미노산 서열 RASENIYGALN (서열번호: 34)에 대해), 아미노산 서열 GATNLAE (서열번호: 35)에 대해 적어도 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 91 %, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98% 또는 99% 동일성을 포함하는 VLCDR2 및 아미노산 서열 QNVLTTPWT (서열번호: 36)에 대해 적어도 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 91 %, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98% 또는 99% 동일성을 포함하는 VLCDR3.
일 구현예에서, 하기를 포함하는 항체, 이의 단편 또는 변이체가 제공된다:
하기를 포함하는 중쇄 가변 영역: 아미노산 서열 DYEMH (서열번호: 22)에 대해 적어도 90% 동일성을 포함하는 VHCDR1, 아미노산 서열 EIDPETGDTAYSQKFQG (서열번호: 23)에 대해 적어도 90% 동일성을 포함하는 VHCDR2 및 아미노산 서열 ETDYFFDY (서열번호: 24)에 대해 적어도 90% 동일성을 포함하는 VHCDR3; 및/또는
하기를 포함하는 경쇄 가변 영역: 아미노산 서열 RASENIYGALN (서열번호: 34)에 대해 적어도 90% 동일성을 포함하는 VLCDR1, 아미노산 서열 GATNLAE (서열번호: 35)에 대해 적어도 90% 동일성을 포함하는 VLCDR2 및 아미노산 서열 QNVLTTPWT (서열번호: 36)에 대해 적어도 90% 동일성을 포함하는 VLCDR3.
일 구현예에서, 하기를 포함하는 항체, 이의 단편 또는 변이체가 제공된다:
하기를 포함하는 중쇄 가변 영역: 아미노산 서열 DYEMH (서열번호: 22)을 포함하는 VHCDR1, 아미노산 서열 EIDPETGDTAYSQKFQG (서열번호: 23)을 포함하는 VHCDR2 및 아미노산 서열 ETDYFFDY (서열번호: 24)을 포함하는 VHCDR3; 및/또는
하기를 포함하는 경쇄 가변 영역: 아미노산 서열 RASENIYGALN (서열번호: 34)을 포함하는 VLCDR1, 아미노산 서열 GATNLAE (서열번호: 35)을 포함하는 VLCDR2 및 아미노산 서열 QNVLTTPWT (서열번호: 36)을 포함하는 VLCDR3.
3b04_var15
일 구현예에서, 하기를 포함하는 항체, 이의 단편 또는 변이체가 제공된다:
하기를 포함하는 중쇄 가변 영역: 아미노산 서열 DYEMH (서열번호: 30)에 대해 적어도 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 91 %, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98% 또는 99% 동일성을 포함하는 VHCDR1, 아미노산 서열 EIDPETGDTAYSQKFQG (서열번호: 31)에 대해 적어도 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 91 %, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98% 또는 99% 동일성을 포함하는 VHCDR2 및 아미노산 서열 ETDYFFDY (서열번호: 32)에 대해 적어도 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 91 %, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98% 또는 99% 동일성을 포함하는 VHCDR3; 및/또는
하기를 포함하는 경쇄 가변 영역: 아미노산 서열 RASENIYGALN (서열번호: 34)에 대해 적어도 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 91 %, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98% 또는 99% 동일성을 포함하는 VLCDR1, 아미노산 서열 GATNLAE (서열번호: 35)에 대해 적어도 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 91 %, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98% 또는 99% 동일성을 포함하는 VLCDR2 및 아미노산 서열 QNVLTTPWT (서열번호: 36)에 대해 적어도 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 91 %, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98% 또는 99% 동일성을 포함하는 VLCDR3.
일 구현예에서, 하기를 포함하는 항체, 이의 단편 또는 변이체가 제공된다:
하기를 포함하는 중쇄 가변 영역: 아미노산 서열 DYEMH (서열번호: 30)에 대해 적어도 90% 동일성을 포함하는 VHCDR1, 아미노산 서열 EIDPETGDTAYSQKFQG (서열번호: 31)에 대해 적어도 90% 동일성을 포함하는 VHCDR2 및 아미노산 서열 ETDYFFDY (서열번호: 32)에 대해 적어도 90% 동일성을 포함하는 VHCDR3; 및/또는
하기를 포함하는 경쇄 가변 영역: 아미노산 서열 RASENIYGALN (서열번호: 34)에 대해 적어도 90% 동일성을 포함하는 VLCDR1, 아미노산 서열 GATNLAE (서열번호: 35)에 대해 적어도 90% 동일성을 포함하는 VLCDR2 및 아미노산 서열 QNVLTTPWT (서열번호: 36)에 대해 적어도 90% 동일성을 포함하는 VLCDR3.
일 구현예에서, 하기를 포함하는 항체, 이의 단편 또는 변이체가 제공된다:
하기를 포함하는 중쇄 가변 영역: 아미노산 서열 DYEMH (서열번호: 30)을 포함하는 VHCDR1, 아미노산 서열 EIDPETGDTAYSQKFQG (서열번호: 31)을 포함하는 VHCDR2 및 아미노산 서열 ETDYFFDY (서열번호: 32)을 포함하는 VHCDR3; 및/또는
하기를 포함하는 경쇄 가변 영역: 아미노산 서열 RASENIYGALN (서열번호: 34)을 포함하는 VLCDR1, 아미노산 서열 GATNLAE (서열번호: 35)을 포함하는 VLCDR2 및 아미노산 서열 QNVLTTPWT (서열번호: 36)을 포함하는 VLCDR3.
3b04_var 16
일 구현예에서, 하기를 포함하는 항체, 이의 단편 또는 변이체가 제공된다:
하기를 포함하는 중쇄 가변 영역: 아미노산 서열 DYEMH (서열번호: 38)에 대해 적어도 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 91 %, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98% 또는 99% 동일성을 포함하는 VHCDR1, (서열번호: 39)에 대해 적어도 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 91 %, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98% 또는 99% 동일성을 포함하는 VHCDR2 및 아미노산 서열 ETDYFFDY (서열번호: 40)에 대해 적어도 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 91 %, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98% 또는 99% 동일성을 포함하는 VHCDR3; 및/또는
하기를 포함하는 경쇄 가변 영역: 적어도 70%, 75%, 80%,
85%, 90%, 91 %, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98% 또는 99% 동일성을 포함하는 VLCDR1 (아미노산 서열 RASENIYGALN (서열번호: 34)에 대해), 아미노산 서열 GATNLAE (서열번호: 35)에 대해 적어도 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 91 %, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98% 또는 99% 동일성을 포함하는 VLCDR2 및 아미노산 서열 QNVLTTPWT (서열번호: 36)에 대해 적어도 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 91 %, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98% 또는 99% 동일성을 포함하는 VLCDR3.
일 구현예에서, 하기를 포함하는 항체, 이의 단편 또는 변이체가 제공된다:
하기를 포함하는 중쇄 가변 영역:
아미노산 서열 DYEMH (서열번호: 38)에 대해 적어도 90% 동일성을 포함하는 VHCDR1, 아미노산 서열 EIDPETGDTAYSQKFQG (서열번호: 39)에 대해 적어도 90% 동일성을 포함하는 VHCDR2 및 아미노산 서열 ETDYFFDY (서열번호: 40)에 대해 적어도 90% 동일성을 포함하는 VHCDR3; 및/또는
하기를 포함하는 경쇄 가변 영역: 아미노산 서열 RASENIYGALN (서열번호: 34)에 대해 적어도 90% 동일성을 포함하는 VLCDR1, 아미노산 서열 GATNLAE (서열번호: 35)에 대해 적어도 90% 동일성을 포함하는 VLCDR2 및 아미노산 서열 QNVLTTPWT (서열번호: 36)에 대해 적어도 90% 동일성을 포함하는 VLCDR3.
일 구현예에서, 하기를 포함하는 항체, 이의 단편 또는 변이체가 제공된다:
하기를 포함하는 중쇄 가변 영역: 아미노산 서열 DYEMH (서열번호: 38)을 포함하는 VHCDR1, 아미노산 서열 EIDPETGDTAYSQKFQG (서열번호: 39)을 포함하는 VHCDR2 및 아미노산 서열 ETDYFFDY (서열번호: 40)을 포함하는 VHCDR3; 및/또는
하기를 포함하는 경쇄 가변 영역: 아미노산 서열 RASENIYGALN (서열번호: 34)을 포함하는 VLCDR1, 아미노산 서열 GATNLAE (서열번호: 35)을 포함하는 VLCDR2 및 아미노산 서열 QNVLTTPWT (서열번호: 36)을 포함하는 VLCDR3.
3d12_var 1
일 구현예에서, 하기를 포함하는 항체, 단편 또는 그것의 변이체가 제공된다:
하기를 포함하는 중쇄 가변 영역: 아미노산 서열 DSEIH (서열번호: 54)에 대해 적어도 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 91 %, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98% 또는 99% 동일성을 포함하는 VHCDR1, 아미노산 서열 EIDPETGGTAYNQKFKG (서열번호: 55)에 대해 적어도 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 91 %, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98% 또는 99% 동일성을 포함하는 VHCDR2 및 아미노산 서열 ETDYFFDY (서열번호: 56)에 대해 적어도 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 91 %, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98% 또는 99% 동일성을 포함하는 VHCDR3; 및/또는
하기를 포함하는 경쇄 가변 영역: 아미노산 서열 GASENIYGALN (서열번호: 50)에 대해 적어도 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 91 %, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98% 또는 99% 동일성을 포함하는 VLCDR1, 아미노산 서열 GATNLAD (서열번호: 51)에 대해 적어도 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 91 %, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98% 또는 99% 동일성을 포함하는 VLCDR2 및 아미노산 서열 QNVLSTPWT (서열번호: 52)에 대해 적어도 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 91 %, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98% 또는 99% 동일성을 포함하는 VLCDR3.
일 구현예에서, 하기를 포함하는 항체, 단편 또는 그것의 변이체가 제공된다:
하기를 포함하는 중쇄 가변 영역: 아미노산 서열 DSEIH (서열번호: 54)에 대해 적어도 90% 동일성을 포함하는 VHCDR1, 아미노산 서열 EIDPETGGTAYNQKFKG (서열번호: 55)에 대해 적어도 90% 동일성을 포함하는 VHCDR2 및 아미노산 서열 ETDYFFDY (서열번호: 56)에 대해 적어도 90% 동일성을 포함하는 VHCDR3; 및/또는
하기를 포함하는 경쇄 가변 영역: 아미노산 서열 GASENIYGALN (서열번호: 50)에 대해 적어도 90% 동일성을 포함하는 VLCDR1, 아미노산 서열 GATNLAD (서열번호: 51)에 대해 적어도 90% 동일성을 포함하는 VLCDR2 및 아미노산 서열 QNVLSTPWT (서열번호: 52)에 대해 적어도 90% 동일성을 포함하는 VLCDR3.
일 구현예에서, 하기를 포함하는 항체, 단편 또는 그것의 변이체가 제공된다:
하기를 포함하는 중쇄 가변 영역: 아미노산 서열 DSEIH (서열번호: 54)을 포함하는 VHCDR1, 아미노산 서열 EIDPETGGTAYNQKFKG (서열번호: 55)을 포함하는 VHCDR2 및 아미노산 서열 ETDYFFDY (서열번호: 56)을 포함하는 VHCDR3; 및/또는
하기를 포함하는 경쇄 가변 영역: 아미노산 서열 GASENIYGALN (서열번호: 50)을 포함하는 VLCDR1, 아미노산 서열 GATNLAD (서열번호: 51)을 포함하는 VLCDR2 및 아미노산 서열 QNVLSTPWT (서열번호: 52)을 포함하는 VLCDR3.
3d12 무거운 2, 가벼운 1 var 2
일 구현예에서, 하기를 포함하는 항체, 단편 또는 그것의 변이체가 제공된다:
하기를 포함하는 중쇄 가변 영역: 아미노산 서열 DSEIH (서열번호: 62)에 대해 적어도 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 91 %, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98% 또는 99% 동일성을 포함하는 VHCDR1, 아미노산 서열 EIDPETGGTAYNQKFQG (서열번호: 63)에 대해 적어도 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 91 %, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98% 또는 99% 동일성을 포함하는 VHCDR2 및 아미노산 서열 ETDYFFDY (서열번호: 64)에 대해 적어도 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 91 %, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98% 또는 99% 동일성을 포함하는 VHCDR3; 및/또는
하기를 포함하는 경쇄 가변 영역: 아미노산 서열 GASENIYGALN (서열번호: 50)에 대해 적어도 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 91 %, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98% 또는 99% 동일성을 포함하는 VLCDR1, 아미노산 서열 GATNLAD (서열번호: 51)에 대해 적어도 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 91 %, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98% 또는 99% 동일성을 포함하는 VLCDR2 및 아미노산 서열 QNVLSTPWT (서열번호: 52)에 대해 적어도 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 91 %, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98% 또는 99% 동일성을 포함하는 VLCDR3.
일 구현예에서, 하기를 포함하는 항체, 단편 또는 그것의 변이체가 제공된다:
하기를 포함하는 중쇄 가변 영역: 아미노산 서열 DSEIH (서열번호: 62)에 대해 적어도 90% 동일성을 포함하는 VHCDR1, 아미노산 서열 EIDPETGGTAYNQKFQG (서열번호: 63)에 대해 적어도 90% 동일성을 포함하는 VHCDR2 및 아미노산 서열 ETDYFFDY (서열번호: 64)에 대해 적어도 90% 동일성을 포함하는 VHCDR3; 및/또는
하기를 포함하는 경쇄 가변 영역: 아미노산 서열 GASENIYGALN (서열번호: 50)에 대해 적어도 90% 동일성을 포함하는 VLCDR1, 아미노산 서열 GATNLAD (서열번호: 51)에 대해 적어도 90% 동일성을 포함하는 VLCDR2 및 아미노산 서열 QNVLSTPWT (서열번호: 52)에 대해 적어도 90% 동일성을 포함하는 VLCDR3.
일 구현예에서, 하기를 포함하는 항체, 단편 또는 그것의 변이체가 제공된다:
하기를 포함하는 중쇄 가변 영역: 아미노산 서열 DSEIH (서열번호: 62)을 포함하는 VHCDR1, 아미노산 서열 EIDPETGGTAYNQKFQG (서열번호: 63)을 포함하는 VHCDR2 및 아미노산 서열 ETDYFFDY (서열번호: 64)을 포함하는 VHCDR3; 및/또는
하기를 포함하는 경쇄 가변 영역: 아미노산 서열 GASENIYGALN (서열번호: 50)을 포함하는 VLCDR1, 아미노산 서열 GATNLAD (서열번호: 51)을 포함하는 VLCDR2 및 아미노산 서열 QNVLSTPWT (서열번호: 52)을 포함하는 VLCDR3.
3d12 무거운 3, 가벼운 1, var 3
일 구현예에서, 하기를 포함하는 항체, 단편 또는 그것의 변이체가 제공된다:
하기를 포함하는 중쇄 가변 영역: 아미노산 서열 DSEIH (서열번호: 70)에 대해 적어도 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 91 %, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98% 또는 99% 동일성을 포함하는 VHCDR1, 아미노산 서열 EIDPETGGTAYAQKFQG (서열번호: 71)에 대해 적어도 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 91 %, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98% 또는 99% 동일성을 포함하는 VHCDR2 및 아미노산 서열 ETDYFFDY (서열번호: 72)에 대해 적어도 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 91 %, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98% 또는 99% 동일성을 포함하는 VHCDR3; 및/또는
하기를 포함하는 경쇄 가변 영역: 아미노산 서열 GASENIYGALN (서열번호: 50)에 대해 적어도 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 91 %, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98% 또는 99% 동일성을 포함하는 VLCDR1, 아미노산 서열 GATNLAD (서열번호: 51)에 대해 적어도 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 91 %, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98% 또는 99% 동일성을 포함하는 VLCDR2 및 아미노산 서열 QNVLSTPWT (서열번호: 52)에 대해 적어도 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 91 %, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98% 또는 99% 동일성을 포함하는 VLCDR3.
일 구현예에서, 하기를 포함하는 항체, 단편 또는 그것의 변이체가 제공된다:
하기를 포함하는 중쇄 가변 영역: 아미노산 서열 DSEIH (서열번호: 70)에 대해 적어도 90% 동일성을 포함하는 VHCDR1, 아미노산 서열 EIDPETGGTAYAQKFQG (서열번호: 71)에 대해 적어도 90% 동일성을 포함하는 VHCDR2 및 아미노산 서열 ETDYFFDY (서열번호: 72)에 대해 적어도 90% 동일성을 포함하는 VHCDR3; 및/또는
하기를 포함하는 경쇄 가변 영역: 아미노산 서열 GASENIYGALN (서열번호: 50)에 대해 적어도 90% 동일성을 포함하는 VLCDR1, 아미노산 서열 GATNLAD (서열번호: 51)에 대해 적어도 90% 동일성을 포함하는 VLCDR2 및 아미노산 서열 QNVLSTPWT (서열번호: 52)에 대해 적어도 90% 동일성을 포함하는 VLCDR3.
일 구현예에서, 하기를 포함하는 항체, 단편 또는 그것의 변이체가 제공된다:
하기를 포함하는 중쇄 가변 영역: 아미노산 서열 DSEIH (서열번호: 70)을 포함하는 VHCDR1, 아미노산 서열 EIDPETGGTAYAQKFQG (서열번호: 71)을 포함하는 VHCDR2 및 아미노산 서열 ETDYFFDY (서열번호: 72)을 포함하는 VHCDR3; 및/또는
하기를 포함하는 경쇄 가변 영역: 아미노산 서열 GASENIYGALN (서열번호: 50)을 포함하는 VLCDR1, 아미노산 서열 GATNLAD (서열번호: 51)을 포함하는 VLCDR2 및 아미노산 서열 QNVLSTPWT (서열번호: 52)을 포함하는 VLCDR3.
3d12 무거운 4, 가벼운 1, var 4
일 구현예에서, 하기를 포함하는 항체, 단편 또는 그것의 변이체가 제공된다:
하기를 포함하는 중쇄 가변 영역: 아미노산 서열 DSEMH (서열번호: 78)에 대해 적어도 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 91 %, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98% 또는 99% 동일성을 포함하는 VHCDR1, 아미노산 서열 EIDPETGGTAYAQKFQG (서열번호: 79)에 대해 적어도 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 91 %, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98% 또는 99% 동일성을 포함하는 VHCDR2 및 아미노산 서열 ETDYFFDY (서열번호: 80)에 대해 적어도 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 91 %, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98% 또는 99% 동일성을 포함하는 VHCDR3; 및/또는
하기를 포함하는 경쇄 가변 영역: 아미노산 서열 GASENIYGALN (서열번호: 50)에 대해 적어도 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 91 %, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98% 또는 99% 동일성을 포함하는 VLCDR1, 아미노산 서열 GATNLAD (서열번호: 51)에 대해 적어도 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 91 %, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98% 또는 99% 동일성을 포함하는 VLCDR2 및 아미노산 서열 QNVLSTPWT (서열번호: 52)에 대해 적어도 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 91 %, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98% 또는 99% 동일성을 포함하는 VLCDR3.
일 구현예에서, 하기를 포함하는 항체, 단편 또는 그것의 변이체가 제공된다:
하기를 포함하는 중쇄 가변 영역: 아미노산 서열 DSEMH (서열번호: 78)에 대해 적어도 90% 동일성을 포함하는 VHCDR1, 아미노산 서열 EIDPETGGTAYAQKFQG (서열번호: 79)에 대해 적어도 90% 동일성을 포함하는 VHCDR2 및 아미노산 서열 ETDYFFDY (서열번호: 80)에 대해 적어도 90% 동일성을 포함하는 VHCDR3; 및/또는
하기를 포함하는 경쇄 가변 영역: 아미노산 서열 GASENIYGALN (서열번호: 50)에 대해 적어도 90% 동일성을 포함하는 VLCDR1, 아미노산 서열 GATNLAD (서열번호: 51)에 대해 적어도 90% 동일성을 포함하는 VLCDR2 및 아미노산 서열 QNVLSTPWT (서열번호: 52)에 대해 적어도 90% 동일성을 포함하는 VLCDR3.
일 구현예에서, 하기를 포함하는 항체, 단편 또는 그것의 변이체가 제공된다:
하기를 포함하는 중쇄 가변 영역: 아미노산 서열 DSEMH (서열번호: 78)을 포함하는 VHCDR1, 아미노산 서열 EIDPETGGTAYAQKFQG (서열번호: 79)을 포함하는 VHCDR2 및 아미노산 서열 ETDYFFDY (서열번호: 80)을 포함하는 VHCDR3; 및/또는
하기를 포함하는 경쇄 가변 영역: 아미노산 서열 GASENIYGALN (서열번호: 50)을 포함하는 VLCDR1, 아미노산 서열 GATNLAD (서열번호: 51)을 포함하는 VLCDR2 및 아미노산 서열 QNVLSTPWT (서열번호: 52)을 포함하는 VLCDR3.
3d12, 무거운 1, 가벼운 2, var 5
일 구현예에서, 하기를 포함하는 항체, 단편 또는 그것의 변이체가 제공된다:
하기를 포함하는 중쇄 가변 영역: 아미노산 서열 DSEIH (서열번호: 54)에 대해 적어도 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 91 %, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98% 또는 99% 동일성을 포함하는 VHCDR1, 아미노산 서열 EIDPETGGTAYNQKFKG (서열번호: 55)에 대해 적어도 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 91 %, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98% 또는 99% 동일성을 포함하는 VHCDR2 및 아미노산 서열 ETDYFFDY (서열번호: 56)에 대해 적어도 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 91 %, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98% 또는 99% 동일성을 포함하는 VHCDR3; 및/또는
하기를 포함하는 경쇄 가변 영역: 아미노산 서열 GASENIYGALN (서열번호: 58)에 대해 적어도 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 91 %, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98% 또는 99% 동일성을 포함하는 VLCDR1, 아미노산 서열 GATNLAD (서열번호: 59)에 대해 적어도 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 91 %, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98% 또는 99% 동일성을 포함하는 VLCDR2 및 아미노산 서열 QNVLSTPWT (서열번호: 60)에 대해 적어도 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 91 %, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98% 또는 99% 동일성을 포함하는 VLCDR3.
일 구현예에서, 하기를 포함하는 항체, 단편 또는 그것의 변이체가 제공된다:
하기를 포함하는 중쇄 가변 영역: 아미노산 서열 DSEIH (서열번호: 54)에 대해 적어도 90% 동일성을 포함하는 VHCDR1, 아미노산 서열 EIDPETGGTAYNQKFKG (서열번호: 55)에 대해 적어도 90% 동일성을 포함하는 VHCDR2 및 아미노산 서열 ETDYFFDY (서열번호: 56)에 대해 적어도 90% 동일성을 포함하는 VHCDR3; 및/또는
하기를 포함하는 경쇄 가변 영역: 아미노산 서열 GASENIYGALN (서열번호: 58)에 대해 적어도 90% 동일성을 포함하는 VLCDR1, 아미노산 서열 GATNLAD (서열번호: 59)에 대해 적어도 90% 동일성을 포함하는 VLCDR2 및 아미노산 서열 QNVLSTPWT (서열번호: 60)에 대해 적어도 90% 동일성을 포함하는 VLCDR3.
일 구현예에서, 하기를 포함하는 항체, 단편 또는 그것의 변이체가 제공된다:
하기를 포함하는 중쇄 가변 영역: 아미노산 서열 DSEIH (서열번호: 54)을 포함하는 VHCDR1, 아미노산 서열 EIDPETGGTAYNQKFKG (서열번호: 55)을 포함하는 VHCDR2 및 아미노산 서열 ETDYFFDY (서열번호: 56)을 포함하는 VHCDR3; 및/또는
하기를 포함하는 경쇄 가변 영역: 아미노산 서열 GASENIYGALN (서열번호: 58)을 포함하는 VLCDR1, 아미노산 서열 GATNLAD (서열번호: 59)을 포함하는 VLCDR2 및 아미노산 서열 QNVLSTPWT (서열번호: 60)을 포함하는 VLCDR3.
3d12 무거운 2, 가벼운 2, var 6
일 구현예에서, 하기를 포함하는 항체, 단편 또는 그것의 변이체가 제공된다:
하기를 포함하는 중쇄 가변 영역: 아미노산 서열 DSEIH (서열번호: 62)에 대해 적어도 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 91 %, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98% 또는 99% 동일성을 포함하는 VHCDR1, 아미노산 서열 EIDPETGGTAYNQKFQG (서열번호: 63)에 대해 적어도 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 91 %, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98% 또는 99% 동일성을 포함하는 VHCDR2 및 아미노산 서열 ETDYFFDY (서열번호: 64)에 대해 적어도 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 91 %, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98% 또는 99% 동일성을 포함하는 VHCDR3; 및/또는
하기를 포함하는 경쇄 가변 영역: 아미노산 서열 GASENIYGALN (서열번호: 58)에 대해 적어도 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 91 %, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98% 또는 99% 동일성을 포함하는 VLCDR1, 아미노산 서열 GATNLAD (서열번호: 59)에 대해 적어도 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 91 %, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98% 또는 99% 동일성을 포함하는 VLCDR2 및 아미노산 서열 QNVLSTPWT (서열번호: 60)에 대해 적어도 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 91 %, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98% 또는 99% 동일성을 포함하는 VLCDR3.
일 구현예에서, 하기를 포함하는 항체, 단편 또는 그것의 변이체가 제공된다:
하기를 포함하는 중쇄 가변 영역: 아미노산 서열 DSEIH (서열번호: 62)에 대해 적어도 90% 동일성을 포함하는 VHCDR1, 아미노산 서열 EIDPETGGTAYNQKFQG (서열번호: 63)에 대해 적어도 90% 동일성을 포함하는 VHCDR2 및 아미노산 서열 ETDYFFDY (서열번호: 64)에 대해 적어도 90% 동일성을 포함하는 VHCDR3; 및/또는
하기를 포함하는 경쇄 가변 영역: 아미노산 서열 GASENIYGALN (서열번호: 58)에 대해 적어도 90% 동일성을 포함하는 VLCDR1, 아미노산 서열 GATNLAD (서열번호: 59)에 대해 적어도 90% 동일성을 포함하는 VLCDR2 및 아미노산 서열 QNVLSTPWT (서열번호: 60)에 대해 적어도 90% 동일성을 포함하는 VLCDR3.
일 구현예에서, 하기를 포함하는 항체, 단편 또는 그것의 변이체가 제공된다:
하기를 포함하는 중쇄 가변 영역: 아미노산 서열 DSEIH (서열번호: 62)을 포함하는 VHCDR1, 아미노산 서열 EIDPETGGTAYNQKFQG (서열번호: 63)을 포함하는 VHCDR2 및 아미노산 서열 ETDYFFDY (서열번호: 64)을 포함하는 VHCDR3; 및/또는
하기를 포함하는 경쇄 가변 영역: 아미노산 서열 GASENIYGALN (서열번호: 58)을 포함하는 VLCDR1, 아미노산 서열 GATNLAD (서열번호: 59)을 포함하는 VLCDR2 및 아미노산 서열 QNVLSTPWT (서열번호: 60)을 포함하는 VLCDR3.
3d12, 무거운 3, 가벼운 2, var 7
일 구현예에서, 하기를 포함하는 항체, 단편 또는 그것의 변이체가 제공된다:
하기를 포함하는 중쇄 가변 영역: 아미노산 서열 DSEIH (서열번호: 70)에 대해 적어도 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 91 %, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98% 또는 99% 동일성을 포함하는 VHCDR1, 아미노산 서열 EIDPETGGTAYAQKFQG (서열번호: 71)에 대해 적어도 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 91 %, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98% 또는 99% 동일성을 포함하는 VHCDR2 및 아미노산 서열 ETDYFFDY (서열번호: 72)에 대해 적어도 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 91 %, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98% 또는 99% 동일성을 포함하는 VHCDR3; 및/또는
하기를 포함하는 경쇄 가변 영역: 아미노산 서열 GASENIYGALN (서열번호: 58)에 대해 적어도 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 91 %, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98% 또는 99% 동일성을 포함하는 VLCDR1, 아미노산 서열 GATNLAD (서열번호: 59)에 대해 적어도 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 91 %, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98% 또는 99% 동일성을 포함하는 VLCDR2 및 아미노산 서열 QNVLSTPWT (서열번호: 60)에 대해 적어도 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 91 %, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98% 또는 99% 동일성을 포함하는 VLCDR3.
일 구현예에서, 하기를 포함하는 항체, 단편 또는 그것의 변이체가 제공된다:
하기를 포함하는 중쇄 가변 영역: 아미노산 서열 DSEIH (서열번호: 70)에 대해 적어도 90% 동일성을 포함하는 VHCDR1, 아미노산 서열 EIDPETGGTAYAQKFQG (서열번호: 71)에 대해 적어도 90% 동일성을 포함하는 VHCDR2 및 아미노산 서열 ETDYFFDY (서열번호: 72)에 대해 적어도 90% 동일성을 포함하는 VHCDR3; 및/또는
하기를 포함하는 경쇄 가변 영역: 아미노산 서열 GASENIYGALN (서열번호: 58)에 대해 적어도 90% 동일성을 포함하는 VLCDR1, 아미노산 서열 GATNLAD (서열번호: 59)에 대해 적어도 90% 동일성을 포함하는 VLCDR2 및 아미노산 서열 QNVLSTPWT (서열번호: 60)에 대해 적어도 90% 동일성을 포함하는 VLCDR3.
일 구현예에서, 하기를 포함하는 항체, 단편 또는 그것의 변이체가 제공된다:
하기를 포함하는 중쇄 가변 영역: 아미노산 서열 DSEIH (서열번호: 70)을 포함하는 VHCDR1, 아미노산 서열 EIDPETGGTAYAQKFQG (서열번호: 71)을 포함하는 VHCDR2 및 아미노산 서열 ETDYFFDY (서열번호: 72)을 포함하는 VHCDR3; 및/또는
하기를 포함하는 경쇄 가변 영역: 아미노산 서열 GASENIYGALN (서열번호: 58)을 포함하는 VLCDR1, 아미노산 서열 GATNLAD (서열번호: 59)을 포함하는 VLCDR2 및 아미노산 서열 QNVLSTPWT (서열번호: 60)을 포함하는 VLCDR3.
3d12 무거운 4, 가벼운 2, var 8
일 구현예에서, 하기를 포함하는 항체, 단편 또는 그것의 변이체가 제공된다:
하기를 포함하는 중쇄 가변 영역: 아미노산 서열 DSEMH (서열번호: 78)에 대해 적어도 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 91 %, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98% 또는 99% 동일성을 포함하는 VHCDR1, 아미노산 서열 EIDPETGGTAYAQKFQG (서열번호: 79)에 대해 적어도 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 91 %, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98% 또는 99% 동일성을 포함하는 VHCDR2 및 아미노산 서열 ETDYFFDY (서열번호: 80)에 대해 적어도 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 91 %, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98% 또는 99% 동일성을 포함하는 VHCDR3; 및/또는
하기를 포함하는 경쇄 가변 영역: 아미노산 서열 GASENIYGALN (서열번호: 58)에 대해 적어도 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 91 %, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98% 또는 99% 동일성을 포함하는 VLCDR1, 아미노산 서열 GATNLAD (서열번호: 59)에 대해 적어도 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 91 %, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98% 또는 99% 동일성을 포함하는 VLCDR2 및 아미노산 서열 QNVLSTPWT (서열번호: 60)에 대해 적어도 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 91 %, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98% 또는 99% 동일성을 포함하는 VLCDR3.
일 구현예에서, 하기를 포함하는 항체, 단편 또는 그것의 변이체가 제공된다:
하기를 포함하는 중쇄 가변 영역: 아미노산 서열 DSEMH (서열번호: 78)에 대해 적어도 90% 동일성을 포함하는 VHCDR1, 아미노산 서열 EIDPETGGTAYAQKFQG (서열번호: 79)에 대해 적어도 90% 동일성을 포함하는 VHCDR2 및 아미노산 서열 ETDYFFDY (서열번호: 80)에 대해 적어도 90% 동일성을 포함하는 VHCDR3; 및/또는
하기를 포함하는 경쇄 가변 영역: 아미노산 서열 GASENIYGALN (서열번호: 58)에 대해 적어도 90% 동일성을 포함하는 VLCDR1, 아미노산 서열 GATNLAD (서열번호: 59)에 대해 적어도 90% 동일성을 포함하는 VLCDR2 및 아미노산 서열 QNVLSTPWT (서열번호: 60)에 대해 적어도 90% 동일성을 포함하는 VLCDR3.
일 구현예에서, 하기를 포함하는 항체, 단편 또는 그것의 변이체가 제공된다:
하기를 포함하는 중쇄 가변 영역: 아미노산 서열 DSEMH (서열번호: 78)을 포함하는 VHCDR1, 아미노산 서열 EIDPETGGTAYAQKFQG (서열번호: 79)을 포함하는 VHCDR2 및 아미노산 서열 ETDYFFDY (서열번호: 80)을 포함하는 VHCDR3; 및/또는
하기를 포함하는 경쇄 가변 영역: 아미노산 서열 GASENIYGALN (서열번호: 58)을 포함하는 VLCDR1, 아미노산 서열 GATNLAD (서열번호: 59)을 포함하는 VLCDR2 및 아미노산 서열 QNVLSTPWT (서열번호: 60)을 포함하는 VLCDR3.
3d12, 무거운 1, 가벼운 3, var 9
일 구현예에서, 하기를 포함하는 항체, 단편 또는 그것의 변이체가 제공된다:
하기를 포함하는 중쇄 가변 영역: 아미노산 서열 DSEIH (서열번호: 54)에 대해 적어도 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 91 %, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98% 또는 99% 동일성을 포함하는 VHCDR1, 아미노산 서열 EIDPETGGTAYNQKFKG (서열번호: 55)에 대해 적어도 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 91 %, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98% 또는 99% 동일성을 포함하는 VHCDR2 및 아미노산 서열 ETDYFFDY (서열번호: 56)에 대해 적어도 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 91 %, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98% 또는 99% 동일성을 포함하는 VHCDR3; 및/또는
하기를 포함하는 경쇄 가변 영역: 아미노산 서열 GASENIYGALN (서열번호: 66)에 대해 적어도 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 91 %, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98% 또는 99% 동일성을 포함하는 VLCDR1, 아미노산 서열 GATNLAD (서열번호: 67)에 대해 적어도 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 91 %, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98% 또는 99% 동일성을 포함하는 VLCDR2 및 아미노산 서열 QNVLSTPWT (서열번호: 68)에 대해 적어도 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 91 %, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98% 또는 99% 동일성을 포함하는 VLCDR3.
일 구현예에서, 하기를 포함하는 항체, 단편 또는 그것의 변이체가 제공된다:
하기를 포함하는 중쇄 가변 영역: 아미노산 서열 DSEIH (서열번호: 54)에 대해 적어도 90% 동일성을 포함하는 VHCDR1, 아미노산 서열 EIDPETGGTAYNQKFKG (서열번호: 55)에 대해 적어도 90% 동일성을 포함하는 VHCDR2 및 아미노산 서열 ETDYFFDY (서열번호: 56)에 대해 적어도 90% 동일성을 포함하는 VHCDR3; 및/또는
하기를 포함하는 경쇄 가변 영역: 아미노산 서열 GASENIYGALN (서열번호: 66)에 대해 적어도 90% 동일성을 포함하는 VLCDR1, 아미노산 서열 GATNLAD (서열번호: 67)에 대해 적어도 90% 동일성을 포함하는 VLCDR2 및 아미노산 서열 QNVLSTPWT (서열번호: 68)에 대해 적어도 90% 동일성을 포함하는 VLCDR3.
일 구현예에서, 하기를 포함하는 항체, 단편 또는 그것의 변이체가 제공된다:
하기를 포함하는 중쇄 가변 영역: 아미노산 서열 DSEIH (서열번호: 54)을 포함하는 VHCDR1, 아미노산 서열 EIDPETGGTAYNQKFKG (서열번호: 55)을 포함하는 VHCDR2 및 VHCDR3을 포함하는 중쇄 가변 영역; 및/또는
하기를 포함하는 경쇄 가변 영역: 아미노산 서열 GASENIYGALN (서열번호: 66)을 포함하는 VLCDR1, 아미노산 서열 GATNLAD (서열번호: 67)을 포함하는 VLCDR2 및 아미노산 서열 QNVLSTPWT (서열번호: 68)을 포함하는 VLCDR3.
3d12 무거운 2, 가벼운 3 var 10
일 구현예에서, 하기를 포함하는 항체, 단편 또는 그것의 변이체가 제공된다:
하기를 포함하는 중쇄 가변 영역: 아미노산 서열 DSEIH (서열번호: 62)에 대해 적어도 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 91 %, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98% 또는 99% 동일성을 포함하는 VHCDR1, 아미노산 서열 EIDPETGGTAYNQKFQG (서열번호: 63)에 대해 적어도 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 91 %, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98% 또는 99% 동일성을 포함하는 VHCDR2 및 아미노산 서열 ETDYFFDY (서열번호: 64)에 대해 적어도 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 91 %, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98% 또는 99% 동일성을 포함하는 VHCDR3; 및/또는
하기를 포함하는 경쇄 가변 영역: 아미노산 서열 GASENIYGALN (서열번호: 66)에 대해 적어도 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 91 %, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98% 또는 99% 동일성을 포함하는 VLCDR1, 아미노산 서열 GATNLAD (서열번호: 67)에 대해 적어도 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 91 %, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98% 또는 99% 동일성을 포함하는 VLCDR2 및 아미노산 서열 QNVLSTPWT (서열번호: 68)에 대해 적어도 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 91 %, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98% 또는 99% 동일성을 포함하는 VLCDR3.
일 구현예에서, 하기를 포함하는 항체, 단편 또는 그것의 변이체가 제공된다:
하기를 포함하는 중쇄 가변 영역: 아미노산 서열 DSEIH (서열번호: 62)에 대해 적어도 90% 동일성을 포함하는 VHCDR1, 아미노산 서열 EIDPETGGTAYNQKFQG (서열번호: 63)에 대해 적어도 90% 동일성을 포함하는 VHCDR2 및 아미노산 서열 ETDYFFDY (서열번호: 64)에 대해 적어도 90% 동일성을 포함하는 VHCDR3; 및/또는
하기를 포함하는 경쇄 가변 영역: 아미노산 서열 GASENIYGALN (서열번호: 66)에 대해 적어도 90% 동일성을 포함하는 VLCDR1, 아미노산 서열 GATNLAD (서열번호: 67)에 대해 적어도 90% 동일성을 포함하는 VLCDR2 및 아미노산 서열 QNVLSTPWT (서열번호: 68)에 대해 적어도 90% 동일성을 포함하는 VLCDR3.
일 구현예에서, 하기를 포함하는 항체, 단편 또는 그것의 변이체가 제공된다:
하기를 포함하는 중쇄 가변 영역: 아미노산 서열 DSEIH (서열번호: 62)을 포함하는 VHCDR1, 아미노산 서열 EIDPETGGTAYNQKFQG (서열번호: 63)을 포함하는 VHCDR2 및 아미노산 서열 ETDYFFDY (서열번호: 64)을 포함하는 VHCDR3; 및/또는
하기를 포함하는 경쇄 가변 영역: 아미노산 서열 GASENIYGALN (서열번호: 66)을 포함하는 VLCDR1, 아미노산 서열 GATNLAD (서열번호: 67)을 포함하는 VLCDR2 및 아미노산 서열 QNVLSTPWT (서열번호: 68)을 포함하는 VLCDR3.
3d12, 무거운 3, 가벼운 3, var 11
일 구현예에서, 하기를 포함하는 항체, 단편 또는 그것의 변이체가 제공된다:
하기를 포함하는 중쇄 가변 영역: 아미노산 서열 DSEIH (서열번호: 70)에 대해 적어도 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 91 %, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98% 또는 99% 동일성을 포함하는 VHCDR1, 아미노산 서열 EIDPETGGTAYAQKFQG (서열번호: 71)에 대해 적어도 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 91 %, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98% 또는 99% 동일성을 포함하는 VHCDR2 및 아미노산 서열 ETDYFFDY (서열번호: 72)에 대해 적어도 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 91 %, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98% 또는 99% 동일성을 포함하는 VHCDR3; 및/또는
하기를 포함하는 경쇄 가변 영역: 아미노산 서열 GASENIYGALN (서열번호: 66)에 대해 적어도 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 91 %, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98% 또는 99% 동일성을 포함하는 VLCDR1, 아미노산 서열 GATNLAD (서열번호: 67)에 대해 적어도 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 91 %, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98% 또는 99% 동일성을 포함하는 VLCDR2 및 아미노산 서열 QNVLSTPWT (서열번호: 68)에 대해 적어도 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 91 %, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98% 또는 99% 동일성을 포함하는 VLCDR3.
일 구현예에서, 하기를 포함하는 항체, 단편 또는 그것의 변이체가 제공된다:
하기를 포함하는 중쇄 가변 영역: 아미노산 서열 DSEIH (서열번호: 70)에 대해 적어도 90% 동일성을 포함하는 VHCDR1, 아미노산 서열 EIDPETGGTAYAQKFQG (서열번호: 71)에 대해 적어도 90% 동일성을 포함하는 VHCDR2 및 아미노산 서열 ETDYFFDY (서열번호: 72)에 대해 적어도 90% 동일성을 포함하는 VHCDR3 및/또는
하기를 포함하는 경쇄 가변 영역: 아미노산 서열 GASENIYGALN (서열번호: 66)에 대해 적어도 90% 동일성을 포함하는 VLCDR1, 아미노산 서열 GATNLAD (서열번호: 67)에 대해 적어도 90% 동일성을 포함하는 VLCDR2 및 아미노산 서열 QNVLSTPWT (서열번호: 68)에 대해 적어도 90% 동일성을 포함하는 VLCDR3.
일 구현예에서, 하기를 포함하는 항체, 단편 또는 그것의 변이체가 제공된다:
하기를 포함하는 중쇄 가변 영역: 아미노산 서열 DSEIH (서열번호: 70)을 포함하는 VHCDR1, 아미노산 서열 EIDPETGGTAYAQKFQG (서열번호: 71)을 포함하는 VHCDR2 및 아미노산 서열 ETDYFFDY (서열번호: 72)을 포함하는 VHCDR3; 및/또는
하기를 포함하는 경쇄 가변 영역: 아미노산 서열 GASENIYGALN (서열번호: 66)을 포함하는 VLCDR1, 아미노산 서열 GATNLAD (서열번호: 67)을 포함하는 VLCDR2 및 아미노산 서열 QNVLSTPWT (서열번호: 68)을 포함하는 VLCDR3.
3d12 중쇄 4, 경쇄 3, var 12
일 구현예에서, 하기를 포함하는 항체, 단편 또는 그것의 변이체가 제공된다:
하기를 포함하는 중쇄 가변 영역: 아미노산 서열 DSEMH (서열번호: 78)에 대해 적어도 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 91 %, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98% 또는 99% 동일성을 포함하는 VHCDR1, 아미노산 서열 EIDPETGGTAYAQKFQG (서열번호: 79)에 대해 적어도 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 91 %, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98% 또는 99% 동일성을 포함하는 VHCDR2 및 아미노산 서열 ETDYFFDY (서열번호: 80)에 대해 적어도 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 91 %, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98% 또는 99% 동일성을 포함하는 VHCDR3; 및/또는
하기를 포함하는 경쇄 가변 영역: 아미노산 서열 GASENIYGALN (서열번호: 66)에 대해 적어도 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 91 %, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98% 또는 99% 동일성을 포함하는 VLCDR1, 아미노산 서열 GATNLAD (서열번호: 67)에 대해 적어도 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 91 %, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98% 또는 99% 동일성을 포함하는 VLCDR2 및 아미노산 서열 QNVLSTPWT (서열번호: 68)에 대해 적어도 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 91 %, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98% 또는 99% 동일성을 포함하는 VLCDR3.
일 구현예에서, 하기를 포함하는 항체, 단편 또는 그것의 변이체가 제공된다:
하기를 포함하는 중쇄 가변 영역: 아미노산 서열 DSEMH (서열번호: 78)에 대해 적어도 90% 동일성을 포함하는 VHCDR1, 아미노산 서열 EIDPETGGTAYAQKFQG (서열번호: 79)에 대해 적어도 90% 동일성을 포함하는 VHCDR2 및 아미노산 서열 ETDYFFDY (서열번호: 80)에 대해 적어도 90% 동일성을 포함하는 VHCDR3; 및/또는
하기를 포함하는 경쇄 가변 영역: 아미노산 서열 GASENIYGALN (서열번호: 66)에 대해 적어도 90% 동일성을 포함하는 VLCDR1, 아미노산 서열 GATNLAD (서열번호: 67)에 대해 적어도 90% 동일성을 포함하는 VLCDR2 및 아미노산 서열 QNVLSTPWT (서열번호: 68)에 대해 적어도 90% 동일성을 포함하는 VLCDR3.
일 구현예에서, 하기를 포함하는 항체, 단편 또는 그것의 변이체가 제공된다:
하기를 포함하는 중쇄 가변 영역: 아미노산 서열 DSEMH (서열번호: 78)을 포함하는 VHCDR1, 아미노산 서열 EIDPETGGTAYAQKFQG (서열번호: 79)을 포함하는 VHCDR2 및 아미노산 서열 ETDYFFDY (서열번호: 80)을 포함하는 VHCDR3; 및/또는
하기를 포함하는 경쇄 가변 영역: 아미노산 서열 GASENIYGALN (서열번호: 66)을 포함하는 VLCDR1, 아미노산 서열 GATNLAD (서열번호: 67)을 포함하는 VLCDR2 및 아미노산 서열 QNVLSTPWT (서열번호: 68)을 포함하는 VLCDR3.
3d12, 무거운 1, 가벼운 4, var 13
일 구현예에서, 하기를 포함하는 항체, 단편 또는 그것의 변이체가 제공된다:
하기를 포함하는 중쇄 가변 영역: 아미노산 서열 DSEIH (서열번호: 54)에 대해 적어도 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 91 %, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98% 또는 99% 동일성을 포함하는 VHCDR1, 아미노산 서열 EIDPETGGTAYNQKFKG (서열번호: 55)에 대해 적어도 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 91 %, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98% 또는 99% 동일성을 포함하는 VHCDR2 및 아미노산 서열 ETDYFFDY (서열번호: 56)에 대해 적어도 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 91 %, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98% 또는 99% 동일성을 포함하는 VHCDR3; 및/또는
하기를 포함하는 경쇄 가변 영역: 아미노산 서열 RASENIYGALN (서열번호: 74)에 대해 적어도 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 91 %, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98% 또는 99% 동일성을 포함하는 VLCDR1, 아미노산 서열 GATNLAE (서열번호: 75)에 대해 적어도 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 91 %, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98% 또는 99% 동일성을 포함하는 VLCDR2 및 아미노산 서열 QNVLSTPWT (서열번호: 76)에 대해 적어도 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 91 %, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98% 또는 99% 동일성을 포함하는 VLCDR3.
일 구현예에서, 하기를 포함하는 항체, 단편 또는 그것의 변이체가 제공된다:
하기를 포함하는 중쇄 가변 영역: 아미노산 서열 DSEIH (서열번호: 54)에 대해 적어도 90% 동일성을 포함하는 VHCDR1, 아미노산 서열 EIDPETGGTAYNQKFKG (서열번호: 55)에 대해 적어도 90% 동일성을 포함하는 VHCDR2 및 아미노산 서열 ETDYFFDY (서열번호: 56)에 대해 적어도 90% 동일성을 포함하는 VHCDR3; 및/또는
하기를 포함하는 경쇄 가변 영역: 아미노산 서열 RASENIYGALN (서열번호: 74)에 대해 적어도 90% 동일성을 포함하는 VLCDR1, 아미노산 서열 GATNLAE (서열번호: 75)에 대해 적어도 90% 동일성을 포함하는 VLCDR2 및 아미노산 서열 QNVLSTPWT (서열번호: 76)에 대해 적어도 90% 동일성을 포함하는 VLCDR3.
일 구현예에서, 하기를 포함하는 항체, 단편 또는 그것의 변이체가 제공된다:
하기를 포함하는 중쇄 가변 영역: 아미노산 서열 DSEIH (서열번호: 54)을 포함하는 VHCDR1, 아미노산 서열 EIDPETGGTAYNQKFKG (서열번호: 55)을 포함하는 VHCDR2 및 VHCDR3을 포함하는 중쇄 가변 영역; 및/또는
하기를 포함하는 경쇄 가변 영역: 아미노산 서열 RASENIYGALN (서열번호: 74)을 포함하는 VLCDR1, 아미노산 서열 GATNLAE (서열번호: 75)을 포함하는 VLCDR2 및 아미노산 서열 QNVLSTPWT (서열번호: 76)을 포함하는 VLCDR3.
3d12 무거운 2, 가벼운 4, var 14
일 구현예에서, 하기를 포함하는 항체, 단편 또는 그것의 변이체가 제공된다:
하기를 포함하는 중쇄 가변 영역: 아미노산 서열 DSEIH (서열번호: 62)에 대해 적어도 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 91 %, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98% 또는 99% 동일성을 포함하는 VHCDR1, 아미노산 서열 EIDPETGGTAYNQKFQG (서열번호: 63)에 대해 적어도 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 91 %, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98% 또는 99% 동일성을 포함하는 VHCDR2 및 아미노산 서열 ETDYFFDY (서열번호: 64)에 대해 적어도 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 91 %, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98% 또는 99% 동일성을 포함하는 VHCDR3; 및/또는
하기를 포함하는 경쇄 가변 영역: 아미노산 서열 RASENIYGALN (서열번호: 74)에 대해 적어도 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 91 %, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98% 또는 99% 동일성을 포함하는 VLCDR1, 아미노산 서열 GATNLAE (서열번호: 75)에 대해 적어도 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 91 %, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98% 또는 99% 동일성을 포함하는 VLCDR2 및 아미노산 서열 QNVLSTPWT (서열번호: 76)에 대해 적어도 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 91 %, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98% 또는 99% 동일성을 포함하는 VLCDR3.
일 구현예에서, 하기를 포함하는 항체, 단편 또는 그것의 변이체가 제공된다:
하기를 포함하는 중쇄 가변 영역: 아미노산 서열 DSEIH (서열번호: 62)에 대해 적어도 90% 동일성을 포함하는 VHCDR1, 아미노산 서열 EIDPETGGTAYNQKFQG (서열번호: 63)에 대해 적어도 90% 동일성을 포함하는 VHCDR2 및 아미노산 서열 ETDYFFDY (서열번호: 64)에 대해 적어도 90% 동일성을 포함하는 VHCDR3; 및/또는
하기를 포함하는 경쇄 가변 영역: 아미노산 서열 RASENIYGALN (서열번호: 74)에 대해 적어도 90% 동일성을 포함하는 VLCDR1, 아미노산 서열 GATNLAE (서열번호: 75)에 대해 적어도 90% 동일성을 포함하는 VLCDR2 및 아미노산 서열 QNVLSTPWT (서열번호: 76)에 대해 적어도 90% 동일성을 포함하는 VLCDR3.
일 구현예에서, 하기를 포함하는 항체, 단편 또는 그것의 변이체가 제공된다:
아미노산 서열 DSEIH (서열번호: 62)을 포함하는 VHCDR1, 아미노산 서열 EIDPETGGTAYNQKFQG (서열번호: 63)을 포함하는 VHCDR2 및 아미노산 서열 ETDYFFDY (서열번호: 64)을 포함하는 VHCDR3을 포함하는 중쇄 가변 영역; 및/또는
하기를 포함하는 경쇄 가변 영역: 아미노산 서열 RASENIYGALN (서열번호: 74)을 포함하는 VLCDR1, 아미노산 서열 GATNLAE (서열번호: 75)을 포함하는 VLCDR2 및 아미노산 서열 QNVLSTPWT (서열번호: 76)을 포함하는 VLCDR3.
3d12, 무거운 3, 가벼운 4, var 15
일 구현예에서, 하기를 포함하는 항체, 단편 또는 그것의 변이체가 제공된다:
하기를 포함하는 중쇄 가변 영역: 아미노산 서열 DSEIH (서열번호: 70)에 대해 적어도 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 91 %, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98% 또는 99% 동일성을 포함하는 VHCDR1, 하기에 대해 적어도 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 91 %, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98% 또는 99% 동일성을 포함하는 VHCDR2: 아미노산 서열
EIDPETGGTAYAQKFQG (서열번호: 71) 및 아미노산 서열 ETDYFFDY (서열번호: 72)에 대해 적어도 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 91 %, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98% 또는 99% 동일성을 포함하는 VHCDR3; 및/또는
하기를 포함하는 경쇄 가변 영역: 아미노산 서열 RASENIYGALN (서열번호: 74)에 대해 적어도 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 91 %, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98% 또는 99% 동일성을 포함하는 VLCDR1, 아미노산 서열 GATNLAE (서열번호: 75)에 대해 적어도 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 91 %, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98% 또는 99% 동일성을 포함하는 VLCDR2 및 아미노산 서열 QNVLSTPWT (서열번호: 76)에 대해 적어도 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 91 %, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98% 또는 99% 동일성을 포함하는 VLCDR3.
일 구현예에서, 하기를 포함하는 항체, 단편 또는 그것의 변이체가 제공된다:
하기를 포함하는 중쇄 가변 영역: 아미노산 서열 DSEIH (서열번호: 70)에 대해 적어도 90% 동일성을 포함하는 VHCDR1, 아미노산 서열 EIDPETGGTAYAQKFQG (서열번호: 71)에 대해 적어도 90% 동일성을 포함하는 VHCDR2 및 아미노산 서열 ETDYFFDY (서열번호: 72)에 대해 적어도 90% 동일성을 포함하는 VHCDR3; 및/또는
하기를 포함하는 경쇄 가변 영역: 아미노산 서열 RASENIYGALN (서열번호: 74)에 대해 적어도 90% 동일성을 포함하는 VLCDR1, 아미노산 서열 GATNLAE (서열번호: 75)에 대해 적어도 90% 동일성을 포함하는 VLCDR2 및 아미노산 서열 QNVLSTPWT (서열번호: 76)에 대해 적어도 90% 동일성을 포함하는 VLCDR3.
일 구현예에서, 하기를 포함하는 항체, 단편 또는 그것의 변이체가 제공된다:
하기를 포함하는 중쇄 가변 영역: 아미노산 서열 DSEIH (서열번호: 70)을 포함하는 VHCDR1, 아미노산 서열 EIDPETGGTAYAQKFQG (서열번호: 71)을 포함하는 VHCDR2 및 아미노산 서열 ETDYFFDY (서열번호: 72)을 포함하는 VHCDR3; 및/또는
하기를 포함하는 경쇄 가변 영역: 아미노산 서열 RASENIYGALN (서열번호: 74)을 포함하는 VLCDR1, 아미노산 서열 GATNLAE (서열번호: 75)을 포함하는 VLCDR2 및 아미노산 서열 QNVLSTPWT (서열번호: 76)을 포함하는 VLCDR3.
3d12 무거운 4, 가벼운 4, var 16
일 구현예에서, 하기를 포함하는 항체, 단편 또는 그것의 변이체가 제공된다:
하기를 포함하는 중쇄 가변 영역: 아미노산 서열 DSEMH (서열번호: 78)에 대해 적어도 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 91 %, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98% 또는 99% 동일성을 포함하는 VHCDR1, 아미노산 서열 EIDPETGGTAYAQKFQG (서열번호: 79)에 대해 적어도 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 91 %, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98% 또는 99% 동일성을 포함하는 VHCDR2 및 아미노산 서열 ETDYFFDY (서열번호: 80)에 대해 적어도 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 91 %, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98% 또는 99% 동일성을 포함하는 VHCDR3; 및/또는
하기를 포함하는 경쇄 가변 영역: 아미노산 서열 RASENIYGALN (서열번호: 74)에 대해 적어도 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 91 %, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98% 또는 99% 동일성을 포함하는 VLCDR1, 아미노산 서열 GATNLAE (서열번호: 75)에 대해 적어도 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 91 %, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98% 또는 99% 동일성을 포함하는 VLCDR2 및 아미노산 서열 QNVLSTPWT (서열번호: 76)에 대해 적어도 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 91 %, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98% 또는 99% 동일성을 포함하는 VLCDR3.
일 구현예에서, 하기를 포함하는 항체, 단편 또는 그것의 변이체가 제공된다:
하기를 포함하는 중쇄 가변 영역: 아미노산 서열 DSEMH (서열번호: 78)에 대해 적어도 90% 동일성을 포함하는 VHCDR1, 아미노산 서열 EIDPETGGTAYAQKFQG (서열번호: 79)에 대해 적어도 90% 동일성을 포함하는 VHCDR2 및 아미노산 서열 ETDYFFDY (서열번호: 80)에 대해 적어도 90% 동일성을 포함하는 VHCDR3; 및/또는
하기를 포함하는 경쇄 가변 영역: 아미노산 서열 RASENIYGALN (서열번호: 74)에 대해 적어도 90% 동일성을 포함하는 VLCDR1, 아미노산 서열 GATNLAE (서열번호: 75)에 대해 적어도 90% 동일성을 포함하는 VLCDR2 및 아미노산 서열 QNVLSTPWT (서열번호: 76)에 대해 적어도 90% 동일성을 포함하는 VLCDR3.
일 구현예에서, 하기를 포함하는 항체, 단편 또는 그것의 변이체가 제공된다:
하기를 포함하는 중쇄 가변 영역: 아미노산 서열 DSEMH (서열번호: 78)을 포함하는 VHCDR1, 아미노산 서열 EIDPETGGTAYAQKFQG (서열번호: 79)을 포함하는 VHCDR2 및 아미노산 서열 ETDYFFDY (서열번호: 80)을 포함하는 VHCDR3; 및/또는
하기를 포함하는 경쇄 가변 영역: 아미노산 서열 RASENIYGALN (서열번호: 74)을 포함하는 VLCDR1, 아미노산 서열 GATNLAE (서열번호: 75)을 포함하는 VLCDR2 및 아미노산 서열 QNVLSTPWT (서열번호: 76)을 포함하는 VLCDR3.
중쇄 및/또는 경쇄 가변 영역
일 구현예에서, 본 발명은 항원 결합 분자, 특히 LIGHT에 결합하는 항체를 제공하고, 서열번호: 5, 서열번호: 13, 서열번호: 21, 서열번호: 29, 서열번호: 37, 서열번호: 45, 서열번호: 53, 서열번호: 61, 서열번호: 69, 서열번호: 77, 서열번호: 85, 서열번호: 93, 서열번호: 101, 서열번호: 109, 서열번호: 117로 구성된 군으로부터 선택된 아미노산 서열에 대해 적어도 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 91 %, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98% 또는 99% 동일성을 갖는 중쇄 가변 영역, 및/또는 서열번호: 1, 서열번호: 9, 서열번호: 17, 서열번호: 25, 서열번호: 33, 서열번호: 41, 서열번호: 49, 서열번호: 57, 서열번호: 65, 서열번호: 73, 서열번호: 81, 서열번호: 89, 서열번호: 97, 서열번호: 105, 서열번호: 113으로 구성된 군으로부터 선택된 아미노산 서열에 대해 적어도 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 91 %, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98% 또는 99% 동일성을 갖는 경쇄 가변 영역을 포함한다.
일 구현예에서, 상기 항체는 LIGHT에 결합하고 서열번호: 5, 서열번호: 45, 서열번호: 85, 서열번호: 93, 서열번호: 101, 서열번호: 109, 서열번호: 117로 구성된 군으로부터 선택된 아미노산 서열을 갖는 중쇄 가변 영역, 및/또는 서열번호: 1, 서열번호: 41, 서열번호: 81, 서열번호: 89, 서열번호: 97, 서열번호: 105, 서열번호: 113으로 구성된 군으로부터 선택된 아미노산 서열을 갖는 경쇄 가변 영역을 포함한다.
일 구현예에서, 항원 결합 분자, 예를 들어 항체, 변이체 또는 이의 단편이 제공되되, 상기 항원 결합 분자는 하기로부터 선택된 중쇄 가변 영역 및 경쇄 가변 영역을 포함한다:
(a) 서열번호: 5의 아미노산 서열을 포함하는 VH 및 서열번호: 1의 아미노산 서열을 포함하거나 (또는 서열번호: 5 및 서열번호: 1 각각에 대해 적어도 90% 동일한 VH 및 VL 서열을 포함하는) VL;
(b) 서열번호: 45의 아미노산 서열을 포함하는 VH 및 서열번호: 41의 아미노산 서열을 포함하거나 (또는 서열번호: 45 및 서열번호: 41 각각에 대해 적어도 90% 동일한 VH 및 VL 서열을 포함하는) VL;
(c) 서열번호: 85의 아미노산 서열을 포함하는 VH 및 서열번호: 81의 아미노산 서열을 포함하거나 (또는 서열번호: 85 및 서열번호: 81 각각에 대해 적어도 90% 동일한 VH 및 VL 서열을 포함하는) VL;
(d) 서열번호: 93의 아미노산 서열을 포함하는 VH 및 서열번호: 89의 아미노산 서열을 포함하거나 (또는 서열번호: 93 및 서열번호: 89 각각에 대해 적어도 90% 동일한 VH 및 VL 서열을 포함하는) VL;
(d) 서열번호: 101의 아미노산 서열을 포함하는 VH 및 서열번호: 97의 아미노산 서열을 포함하거나 (또는 서열번호: 101 및 서열번호: 97 각각에 대해 적어도 90% 동일한 VH 및 VL 서열을 포함하는) VL;
(e) 서열번호: 109의 아미노산 서열을 포함하는 VH 및 서열번호: 105의 아미노산 서열을 포함하거나 (또는 서열번호: 109 및 서열번호: 105 각각에 대해 적어도 90% 동일한 VH 및 VL 서열을 포함하는) VL;
(f) 서열번호: 117의 아미노산 서열을 포함하는 VH 및 서열번호: 113의 아미노산 서열을 포함하거나 (또는 서열번호: 117 및 서열번호: 113 각각에 대해 적어도 90% 동일한 VH 및 VL 서열을 포함하는) VL;
(g) 서열번호: 13의 아미노산 서열을 포함하는 VH 및 서열번호: 9의 아미노산 서열을 포함하거나 (또는 서열번호: 13 및 서열번호: 9 각각에 대해 적어도 90% 동일한 VH 및 VL 서열을 포함하는) VL;
(h) 서열번호: 21의 아미노산 서열을 포함하는 VH 및 서열번호: 9의 아미노산 서열을 포함하거나 (또는 서열번호: 21 및 서열번호: 9 각각에 대해 적어도 90% 동일한 VH 및 VL 서열을 포함하는) VL;
(i) 서열번호: 29의 아미노산 서열을 포함하는 VH 및 서열번호: 9의 아미노산 서열을 포함하거나 (또는 서열번호: 29 및 서열번호: 9 각각에 대해 적어도 90% 동일한 VH 및 VL 서열을 포함하는) VL;
(j) 서열번호: 37의 아미노산 서열을 포함하는 VH 및 서열번호: 9의 아미노산 서열을 포함하거나 (또는 서열번호: 37 및 서열번호: 9 각각에 대해 적어도 90% 동일한 VH 및 VL 서열을 포함하는) VL;
(k) 서열번호: 13의 아미노산 서열을 포함하는 VH 및 서열번호: 17의 아미노산 서열을 포함하거나 (또는 서열번호: 13 및 서열번호: 17 각각에 대해 적어도 90% 동일한 VH 및 VL 서열을 포함하는) VL;
(l) 서열번호: 21의 아미노산 서열을 포함하는 VH 및 서열번호: 17의 아미노산 서열을 포함하거나 (또는 서열번호: 21 및 서열번호: 17 각각에 대해 적어도 90% 동일한 VH 및 VL 서열을 포함하는) VL;
(m) 서열번호: 37의 아미노산 서열을 포함하는 VH 및 서열번호: 17의 아미노산 서열을 포함하거나 (또는 서열번호: 37 및 서열번호: 17 각각에 대해 적어도 90% 동일한 VH 및 VL 서열을 포함하는) VL;
(n) 서열번호: 13의 아미노산 서열을 포함하는 VH 및 서열번호: 25의 아미노산 서열을 포함하거나 (또는 서열번호: 13 및 서열번호: 25 각각에 대해 적어도 90% 동일한 VH 및 VL 서열을 포함하는) VL;
(o) 서열번호: 21의 아미노산 서열을 포함하는 VH 및 서열번호: 25의 아미노산 서열을 포함하거나 (또는 서열번호: 21 및 서열번호: 25 각각에 대해 적어도 90% 동일한 VH 및 VL 서열을 포함하는) VL;
(p) 서열번호: 29의 아미노산 서열을 포함하는 VH 및 서열번호: 25의 아미노산 서열을 포함하거나 (또는 서열번호: 37 및 서열번호: 25 각각에 대해 적어도 90% 동일한 VH 및 VL 서열을 포함하는) VL;
(q) 서열번호: 29의 아미노산 서열을 포함하는 VH 및 서열번호: 25의 아미노산 서열을 포함하거나 (또는 서열번호: 37 및 서열번호: 25 각각에 대해 적어도 90% 동일한 VH 및 VL 서열을 포함하는) VL;
(r) 서열번호: 13의 아미노산 서열을 포함하는 VH 및 서열번호: 33의 아미노산 서열 (또는 서열번호: 13 및 서열번호: 33 각각에 대해 적어도 90% 동일한 VH 및 VL 서열)을 포함하는 VL;
(s) 서열번호: 21의 아미노산 서열을 포함하는 VH 및 서열번호: 33의 아미노산 서열 (또는 서열번호: 21 및 서열번호: 33 각각에 대해 적어도 90% 동일한 VH 및 VL 서열)을 포함하는 VL;
(t) 서열번호: 29의 아미노산 서열을 포함하는 VH 및 서열번호: 33의 아미노산 서열 (또는 서열번호: 29 및 서열번호: 33 각각에 대해 적어도 90% 동일한 VH 및 VL 서열)을 포함하는 VL;
(u) 서열번호: 37의 아미노산 서열을 포함하는 VH 및 서열번호: 33의 아미노산 서열 (서열번호: 37 및 서열번호: 33 각각에 대해 적어도 90% 동일한 VH 및 VL 서열)을 포함하는 VL;
(v) 서열번호: 53의 아미노산 서열을 포함하는 VH 및 서열번호: 49의 아미노산 서열 (또는 서열번호: 53 및 서열번호: 49 각각에 대해 적어도 90% 동일한 VH 및 VL 서열)을 포함하는 VL;
(x) 서열번호: 61의 아미노산 서열을 포함하는 VH 및 서열번호: 49의 아미노산 서열 (또는 서열번호: 61 및 서열번호: 49 각각에 대해 적어도 90% 동일한 VH 및 VL 서열)을 포함하는 VL;
(y) 서열번호: 69의 아미노산 서열을 포함하는 VH 및 서열번호: 49의 아미노산 서열 (또는 서열번호: 69 및 서열번호: 49 각각에 대해 적어도 90% 동일한 VH 및 VL 서열)을 포함하는 VL;
(z) 서열번호: 77의 아미노산 서열을 포함하는 VH 및 서열번호: 49의 아미노산 서열 (또는 서열번호: 77 및 서열번호: 49 각각에 대해 적어도 90% 동일한 VH 및 VL 서열)을 포함하는 VL;
(aa) 서열번호: 53의 아미노산 서열을 포함하는 VH 및 서열번호: 57의 아미노산 서열 (또는 서열번호: 53 및 서열번호: 57 각각에 대해 적어도 90% 동일한 VH 및 VL 서열)을 포함하는 VL;
(ab) 서열번호: 61의 아미노산 서열을 포함하는 VH 및 서열번호: 57의 아미노산 서열 (또는 서열번호: 61 및 서열번호: 57 각각에 대해 적어도 90% 동일한 VH 및 VL 서열)을 포함하는 VL;
(ac) 서열번호: 69의 아미노산 서열을 포함하는 VH 및 서열번호: 57의 아미노산 서열 (또는 서열번호: 69 및 서열번호: 57 각각에 대해 적어도 90% 동일한 VH 및 VL 서열)을 포함하는 VL;
(ad) 서열번호: 77의 아미노산 서열을 포함하는 VH 및 서열번호: 57의 아미노산 서열 (또는 서열번호: 77 및 서열번호: 57 각각에 대해 적어도 90% 동일한 VH 및 VL 서열)을 포함하는 VL;
(ae) 서열번호: 77의 아미노산 서열을 포함하는 VH 및 서열번호: 57의 아미노산 서열 (또는 서열번호: 77 및 서열번호: 57 각각에 대해 적어도 90% 동일한 VH 및 VL 서열)을 포함하는 VL;
(af) 서열번호: 53의 아미노산 서열을 포함하는 VH 및 서열번호: 65의 아미노산 서열 (또는 서열번호: 53 및 서열번호: 65 각각에 대해 적어도 90% 동일한 VH 및 VL 서열)을 포함하는 VL;
(ag) 서열번호: 61의 아미노산 서열을 포함하는 VH 및 서열번호: 65의 아미노산 서열 (또는 서열번호: 61 및 서열번호: 65 각각에 대해 적어도 90% 동일한 VH 및 VL 서열)을 포함하는 VL;
(ah) 서열번호: 69의 아미노산 서열을 포함하는 VH 및 서열번호: 65의 아미노산 서열 (또는 서열번호: 69 및 서열번호: 65. 각각에 대해 적어도 90% 동일한 VH 및 VL 서열)을 포함하는 VL;
(ai) 서열번호: 77의 아미노산 서열을 포함하는 VH 및 서열번호: 65의 아미노산 서열 (또는 서열번호: 77 및 서열번호: 65 각각에 대해 적어도 90% 동일한 VH 및 VL 서열)을 포함하는 VL;
(aj) 서열번호: 53의 아미노산 서열을 포함하는 VH 및 서열번호: 73의 아미노산 서열 (또는 서열번호: 53 및 서열번호: 73 각각에 대해 적어도 90% 동일한 VH 및 VL 서열)을 포함하는 VL;
(ak) 서열번호: 61의 아미노산 서열을 포함하는 VH 및 서열번호: 73의 아미노산 서열 (또는 서열번호: 61 및 서열번호: 73 각각에 대해 적어도 90% 동일한 VH 및 VL 서열)을 포함하는 VL;
(al) 서열번호: 69의 아미노산 서열을 포함하는 VH 및 서열번호: 73의 아미노산 서열 (또는 서열번호: 69 및 서열번호: 73 각각 각각에 대해 적어도 90% 동일한 VH 및 VL 서열)을 포함하는 VL; 및
(am) 서열번호: 77의 아미노산 서열을 포함하는 VH 및 서열번호: 73의 아미노산 서열 (또는 서열번호: 77 및 서열번호: 73 각각 각각에 대해 적어도 90% 동일한 VH 및 VL 서열)을 포함하는 VL.
명시된 서열(들)에 대해 더 작은 또는 그 초과 % 동일성 또는 상동성, 예를 들어 적어도 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 91 %, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98% 또는 99% 동일성 또는 상동성을 갖는 인간화된 및 그의 친화도 성숙된 변이체, 및 변이체들을 포함하는상기에 논의된 바와 같은 변이체가 또한 제공된다. 하나 이상의 아미노산 치환을 갖는 변이체가 또한 제공된다.
항원 결합 분자를 인코딩하는 핵산 서열
본 발명의 일 양태에서, 단편 및 변이체를 포함하는 본 발명의 항원 결합 분자를 인코딩하는 핵산 서열이 제공된다.
일 구현예에서, 서열번호: 5, 서열번호: 13, 서열번호: 21, 서열번호: 29, 서열번호: 37, 서열번호: 45, 서열번호: 53, 서열번호: 61, 서열번호: 69, 서열번호: 77, 서열번호: 85, 서열번호: 93, 서열번호: 101, 서열번호: 109, 및 서열번호: 117로 구성된 군으로부터 선택된 아미노산 서열에 대해 적어도 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 91 %, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98% 또는 99% 동일성을 갖는 중쇄 가변 영역, 및/또는 서열번호: 1, 서열번호: 9, 서열번호: 17, 서열번호: 25, 서열번호: 33, 서열번호: 41, 서열번호: 49, 서열번호: 57, 서열번호: 65, 서열번호: 73, 서열번호: 81, 서열번호: 89, 서열번호: 97, 서열번호: 105, 및 서열번호: 113으로 구성된 군으로부터 선택된 아미노산 서열에 대해 적어도 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 91 %, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98% 또는 99% 동일성을 갖는 경쇄 가변 영역을 포함하는 LIGHT에 결합하는 항원 결합 분자를 인코딩하는 핵산 분자가 제공된다.
일 구현예에서, 서열번호: 5, 서열번호: 13, 서열번호: 21, 서열번호: 29, 서열번호: 37, 서열번호: 45, 서열번호: 53, 서열번호: 61, 서열번호: 69, 서열번호: 77, 서열번호: 85, 서열번호: 93, 서열번호: 101, 서열번호: 109, 및 서열번호: 117로 구성된 군으로부터 선택된 아미노산 서열을 갖는 중쇄 가변 영역, 및/또는 서열번호: 1, 서열번호: 9, 서열번호: 17, 서열번호: 25, 서열번호: 33, 서열번호: 41, 서열번호: 49, 서열번호: 57, 서열번호: 65, 서열번호: 73, 서열번호: 81, 서열번호: 89, 서열번호: 97, 서열번호: 105, 및 서열번호: 113으로 구성된 군으로부터 선택된 아미노산 서열을 갖는 경쇄 가변 영역을 포함하는 LIGHT에 결합하는 항체를 인코딩하는 핵산 분자가 제공된다.
본 발명은 또한 하기 CDRH 및 CDRL 서열을 갖는 항-라이트 항원 결합 분자를 제공한다:
Figure pct00007
식 중, 각각의 X1 내지 X8는 임의의 아미노산, 바람직하게는 임의의 자연 발생 아미노산이다. 바람직한 구현예에서 각각의 X1 내지 X8는 G, R, D, E, Y, S, M, I, A, N, K 및 Q로 구성된 군으로부터 선택된다. 더 바람직한 구현예에서:
X1는 G 또는 R 또는 이의 보존적 아미노산 치환이고;
X2는 D 또는 E 또는 이의 보존적 아미노산 치환이고;
X3는 Y 또는 S 또는 이의 보존적 아미노산 치환이고;
X4는 M 또는 I 또는 이의 보존적 아미노산 치환이고;
Х6는 D 또는 G 또는 이의 보존적 아미노산 치환이고;
X7는 S, A 또는 N 또는 이의 보존적 아미노산 치환이고; 그리고
X8는 K 또는 Q 또는 이의 보존적 아미노산 치환이다.
서열번호 1 내지 120 중 임의의 하나에 따른 아미노산 서열을 인코딩하는 핵산 분자가 또한 제공된다.
본 발명의 항원 결합 분자를 인코딩하는 핵산 서열을 포함하는 플라스미드 및 벡터가 또한 제공된다. 핵산은 발현을 위하여 플라스미드 또는 벡터 안으로, 특히 진핵 발현 시스템, 더 구체적으로, 포유동물 세포주 안에 편입될 수 있다. 따라서, 본 발명의 플라스미드 또는 벡터로 형질감염된 숙주 세포, 예컨대 NSO쥣과 골수종 세포 또는 CHO 세포가 또한 제공된다.
항-LIGHT 항원 결합 분자의 생산 방법이 또한 제공되고, 상기 방법은 세포 배양 배지에서 본 발명의 숙주세포를, 상기 세포 내부의 플라스미드 또는 벡터의 인코딩 핵산 서열을 발현시키는 조건하에서 배양시키는 단계를 포함한다. 상기 방법은 상기 세포배양 상청액으로부터 항-LIGHT 항원 결합 분자를 수득하는 단계를 추가로 포함할 수 있다. 또한, 항-LIGHT 항원 결합 분자를 발현시키는 세포를 생산하는 방법이 제공되되, 상기 방법은 상기 세포를 본 발명의 플라스미드 또는 벡터로 형질감염시키는 단계를 포함한다. 상기 세포는 그런 다음 항원 결합 분자의 생산을 위해 배양될 수 있다.
항원
본 발명의 항원 결합 분자는 LIGHT, 특히 인간 LIGHT, 또는 hLIGHT에 특이적으로 결합한다. 가장 바람직하게는, 본 발명의 항원 결합 분자는 막-결합 인간 LIGHT에 특이적으로 결합한다.
본 발명의 항원 결합 분자는 일반적으로 마우스 LIGHT에 결합하지 않는다.
LIGHT는 종양 괴사인자 슈퍼패밀리 일원 14 (TNFSF14), LTg, CD258 및 HVEML로도 알려져 있다. 이것은 헤르페스바이러스 유입 매개체 (HVEM 또는 TNFRSF14) 뿐만 아니라 LTβR및 유인 수용체 3에 의해 인식된다. 본 발명의 항원 결합 분자 중 일부는 따라서 LIGHT와, 예를 들어, HVEM 및LTβR 사이의 상호작용을 파괴할 수 있다. 본 발명의 항원 결합 분자는 또한 유인 수용체 3에 대해 LIGHT, 특히 막 LIGHT의 결합을 부분적으로 억제할 수 있다.
LIGHT 단백질은 림프양 세포의 활성화를 위한 공동자극 인자 및 헤르페스바이러스에 의한 감염에 대한 억제로서 기능할 수 있다. 이 단백질은 T 세포의 증식을 자극하고, 그리고 다양한 종양 세포의 세포자멸사를 유발하는 것으로 밝혀졌다. 이 단백질은 또한 일차 간세포에서 종양 괴사인자 알파 매개된 세포자멸사를 방지하는 것으로 보고되어 있다.
뚜렷한 동형체를 인코딩하는 적어도 2개의 대안적으로 스플라이싱된 전사 변이체가 다음과 같이 보고되었다: 204 아미노산 스플라이스 변이체 (NCBI 기준 서열 NM_172014.3 / XM_005259670) 및240 아미노산 스플라이스 변이체 (NCBI 기준 서열 NM_003807.4). 240 아미노산 스플라이스 변이체는 비록 이들이 양자를 인지할 수 있지만, 본 발명의 결합 분자에 대한 항원으로서 바람직하다.
E214K 및 S32L을 포함하는 LIGHT의 다형성 변이체가 또한 알려져 있다. 본 발명의 항원 결합 분자는 하나 또는 둘 모두의 변이체뿐만 아니라 LIGHT의 214E 및 32S 변이체에 결합할 수 있다.
본 발명의 항원 결합 분자가 결합하는 3가지 인간 LIGHT 변이체의 아미노산 서열이 아래에 제공된다.
인간 LIGHT-214E
아미노산 서열 (서열번호: 121)
Figure pct00008
인간 LIGHT-214K
아미노산 서열 (서열번호: 122)
Figure pct00009
인간 LIGHT-32L (서열번호: 123)
Figure pct00010
생체내에서, LIGHT 단백질은 막-결합 (즉 전장 LIGHT)일 수 있거나 또는 이것은 가용성일 수 있다. 본 발명자들는 본 발명의 항원 결합 분자가 가용성 LIGHT보다는 막 LIGHT (즉 전장 LIGHT)에 더 큰 친화성으로 결합한다는 것을 놀랍게도 발견하였다. 항원 결합 분자는 따라서 막 LIGHT를 발현하는 세포를 인지하고 표적화할 수 있다.
막 LIGHT는 막-결합 LIGHT 단백질을 지칭한다. 특히, 본 발명의 항원 결합 분자 (특히 3B04 및 3D12 및 이의 항체 단편 및 변이체)는 막 LIGHT에 비교된 가용성 LIGHT (예를 들어 전장 LIGHT의 아미노산 잔기 74 내지 240 및/또는 64 내지 240)에 대해 10 미만, 50 미만 또는 100-배 미만 교차-반응성을 갖는다. 막 LIGHT 대 가용성 LIGHT에 대한 이 상대 결합 친화도는 가용성 LIGHT가 항-염증성 효과를 갖는 것으로 간주되고, 반면에 막 LIGHT는 생체내에서 전-염증 효과를 갖는 것으로 간주되기 때문에 유의성 있다. 따라서, 본 발명의 항원 결합 분자는 특히 잠재적인 항-염증제로 유용하다. 예를 들어, 교차-반응성 또는 결합 선호에서의 차이는 HeLa-NF-kB 리포터 세포를 사용하여 NF-kB 루시퍼라아제 리포터 검정에서 500pg/ml의 가용성 LIGHT에 대한 본 발명의 항원 결합 분자의 결합을 결정함에 의해 측정될 수 있다. 더 구체적으로, 검정은 500pg/ml의 가용성 LIGHT를 최대 1 ug/ml의 테스트 항원 결합 분자로 20분 동안 4°C에서 인큐베이션하는 단계, 이어서 37°C에서 24시간 동안 10μl의 LIGHT/항체 용액을 세포로의 인큐베이션을 포함할 수 있다.
막 LIGHT에 결합하는 본 발명의 항원 결합 분자는 또한 따라서 LIGHT를 발현하는 세포에 결합할 것이다. 따라서, 본 발명은 또한 식 TM-Ln-AM을 갖는 결합 분자를 제공하고, 여기서 TM은 표적화 모이어티로 본 발명의 항원 결합 분자이고, L은 링커이고, n은 0 내지 1 사이의 수이고 (따라서 링커는 존재할 수 있거나 하지 않을 수 있음), 그리고 AM을 활성 모이어티이다. 본 발명의 항원 결합 분자는 막-LIGHT를 발현하는 세포에 대해 활성 모이어티를 표적화하기 위해 사용될 수 있다. 적합한 링커는 하이드라진기, 폴리펩타이드, 디설파이드기, 및 티오에테르기를 포함하고, 그리고 링커는 효소 작용에 의해 절단 가능할 수 있다. 적합한 활성 모이어티는 약제학적으로 활성인 성분, 예컨대 항-염증제, 면역억제제 또는 본 발명의 항원 결합 분자와 조합하여 사용하기에 적합하거나 또는 바람직한 다른 이러한 성분을 포함한다. 적합한 이러한 제제는 또한 다른 곳에 논의되어 있다.
일 구현예에서, 본 발명의 항원 결합 분자는 약 5nM 미만의 막 LIGHT에 대한 KD 값을 갖는다. 바람직한 구현예에서, 본 발명의 항원 결합 분자는 약 1 nM 미만의 막 LIGHT에 대한KD 값을 갖는다. 더 바람직한 구현예에서, 본 발명의 항원 결합 분자는 약 0.5nM 미만의 막 LIGHT에 대한KD 값을 갖는다. 용어 KD는 숙련가에게 잘 알려져 있고 항체와 항원 사이의 결합 상호작용의 강도를 측정하는 평형 해리 상수를 지칭한다. KD는 임의의 적당한 수단에 따라 측정될 수 있다. 예를 들어, 적합한 검정은 최대 70 μg/mL의 농도에서 30 내지 40분 동안 4°C에서 테스트 항원 결합 분자로 EL4-LIGHT 세포를 인큐베이션하는 것을 포함하는 유동-세포측정 검정일 수 있다.
본 발명의 일부 구현예들에서, 본 발명의 항원 결합 분자는 약 1 nM 초과의 가용성 LIGHT에 대한 KD 값을 갖는다. 더 바람직한 구현예에서, 본 발명의 항원 결합 분자는 약 5nM 초과의 가용성 LIGHT에 대한 KD 값을 갖는다. 더 바람직한 구현예에서, 본 발명의 항원 결합 분자는 약 10nM 초과의 가용성 LIGHT에 대한 KD 값을 갖는다.
본 발명의 특정 구현예들에서, 항원 결합 분자는 약 1 nM 미만의 막 LIGHT에 대한 KD 값 및 약 1 nM 초과의 가용성 LIGHT에 대한 KD 값을 갖는다. 바람직한 구현예에서, 항원 결합 분자는 약 1 nM 미만의 막 LIGHT에 대한 KD 값 및 약 5nM 초과의 가용성 LIGHT에 대한 KD 값을 갖는다. 가장 바람직한 구현예에서, 항원 결합 분자는 약 0.5nM 미만의 막 LIGHT에 대한 KD 값 및 약 10nM 초과의 가용성 LIGHT에 대한 KD 값, 또는 약 0.1 nM의 막 LIGHT에 대한 KD 값 및 약 10nM 초과의 가용성 LIGHT에 대한 KD 값을 갖는다.
본 발명의 일부 구현예들에서, 발 명자들은 항원 결합 분자가 IL-8의 분비를 감소시킨다는 것을 발견하였다. 본 발명의 추가 구현예들에서, LIGHT, 특히 막 LIGHT에 DcR3 (유인수용체 3)의 결합은 본 발명의 항원 결합 분자에 의해 부분적으로 억제된다. 현저히, 선행 기술의 일부 항체 (예컨대 F19)와 달리, 본 발명의 항원 결합 분자는 LIGHT에 결합하는 DcR3의 완전한 억제를 나타내지 않는다. 예를 들어, 본 발명의 항원 결합 분자는, 예를 들어 DcR3-Fc와 항-막 LIGHT 항체의 경쟁 결합 검정을 사용하여 측정될 때, 최대 약 60%, 또는 최대 약 40%까지 DcR3에 대한 LIGHT (또는 DcR3에 대해 LIGHT를 발현하는 세포)의 결합을 억제한다. 그와 같은 경쟁 결합 검정은 아래와 같을 수 있다: 최대 128 μg/ml의 농도에서 40분 동안 4°C에서 lgG1의 Fc 부분에 대해 접합된 DcR3으로 공동-인큐베이션된 EL4-LIGHT 세포의 유세포측정 분석을 사용하여 측정되고, 그리고 대조군으로 F19 항체에 대해 비교될 때, DcR3에 대해 결합하는 LIGHT의 억제 퍼센트.
대안적으로, 본 발명의 항원 결합 분자는 His 태깅된 DcR3 (DcR3-His)으로 항-막 LIGHT 항체의 경쟁 결합 검정을 사용하여 측정될 때 최대 약 45%, 또는 최대 약 35%까지 DcR3에 대한 LIGHT (또는 DcR3에 대한 세포 발현 LIGHT)의 결합을 억제한다. 그와 같은 경쟁 결합 검정은 아래와 같을 수 있다: 최대 100nM의 농도에서 15분 동안 4°C에서 테스트 항원 결합 분자로 사전 인큐베이션되고 이어서 1 nM 히스티딘-태깅된 DcR3으로 30분 동안 4°C에서 인큐베이션된 EL4-LIGHT 세포의 유세포측정 분석을 사용하여 측정되고, 그리고 대조군으로 항-hen 에그 리소자임 (HEL) 항체에 대해 비교될 때, DcR3에 대해 결합하는 LIGHT의 억제 퍼센트.
본 발명자들은 또한 본 발명의 항원 결합 분자가 HVEM 및/또는 LTβR에 대한 막 LIGHT 발현 세포의 결합을 억제한다는 것을 발견하였다. 일부 구현예에서, 본 발명의 항원 결합 분자는 적어도 약 25%, 적어도 약 50% 또는 바람직하게는 적어도 약 75%까지 결합을 억제한다. 일부 구현예에서, 결합은 완전히 억제된다. HVEM에 대한 결합의 억제에 대한 IC50은, 예를 들어 EL4 세포에서 측정될 때, 약 50nM 미만, 또는 30mM 미만, 또는 약 0.1 nM 내지 약 30nM, 또는 약 0.1 nM 내지 5nM일 수 있다. LTβR에 대한 결합의 억제에 대한 IC50은, 예를 들어 EL4 세포에서 측정될 때, 약 50nM 미만, 또는 약 0.1 내지 약 40nM 사이일 수 있다. EL4-LIGHT 세포를 사용하여 IC50을 측정하기 위한 적합한 검정은 아래와 같을 수 있다: 최대 300 nM까지 50 μl의 테스트 항원 결합 분자가 EL4-LIGHT 세포로 30분 동안 4°C에서 인큐베이션되고, 이어서 50 μl의 표지된 테스트 리간드 (HVEM 또는 LTBR)로, 예를 들어 LIGHT에 결합하는 테스트 리간드에 대한 EC50의 2배의 농도에서, 90분 동안 4°C에서 인큐베이션되고, 대조군으로 항-HEL mAb에 비교된다.
IL-8 분비의 억제에 대한 IC50은, 예를 들어 EL4-NC-LIGHT 세포에서 발현된 막 LIGHT에 의해 자극된 HT-29 세포로부터 IL-8 분비의 억제에서 측정될 때, 약 50nM 미만, 또는 약 0.05nM 내지 약 2.5nM 일 수 있다. 예를 들어, 적합한 검정은 15분 동안 37°C에서 EL4-NC-LIGHT 세포로 최대 100 nM 테스트 항원 결합 분자의 인큐베이션, 이어서 2시간 동안 37°C 및 5% CO2에서 HT-29 세포로의 인큐베이션일 수 있고, 대조군으로 HT29 세포 단독에 비교될 수 있다.
일 양태에서, 항-LIGHT 항원 결합 분자, 예를 들어 그것의 항체, 단편 또는 변이체가 제공되되, 상기 항원 결합 분자는LIGHT에 결합하기 위해 상기에서 정의된 바와 같은 본 발명의 항원 결합 분자와 경쟁한다.
예를 들어, 일 구현예에서 본 발명은 항원 결합 분자 (바람직하게는 항체)를 제공하되, 상기 항원 결합 분자는LIGHT, 특히 막 LIGHT에 특이적으로 결합하고, (막) LIGHT에 결합하기 위해 하기로 구성된 군으로부터 선택된 항체와 경쟁한다: 2E08, 3A07, 3B04, 3C10, 3D12, 3E09, 2B11, 3B04_var1, 3B04_var2, 3B04_var3, 3B04_var4, 3B04_var5, 3B04_var6, 3B04_var7, 3B04_var8, 3B04_var9, 3B04_var10, 3B04_var11, 3B04_var12, 3B04_var13, 3B04_var14, 3B04_var15, 3B04_var16, 3D12_var1, 3D12_var2, 3D12_var3, 3D12_var4, 3D12_var5, 3D12_var6, 3D12_var7, 3D12_var8, 3D12_var9, 3D12_var10, 3D12_var11, 3D12_var12, 3D12_var13, 3D12_var14, 3D12_var15 및 3D12_var16. 막 LIGHT에 결합하기 위해 이의 단편 및 변이체와 경쟁하는 항원 결합 분자가 또한 제공된다 (예를 들어 상기 항체, 뿐만 아니라 다른 변이체의 6개의 CDR 영역 또는 VH 및 VL 서열을 포함하는 항원 결합 분자).
테스트 항원 결합 분자가 본 발명의 항체에 의해 결합된 에피토프와 동일한 에피토프에 대한 결합에 대해 경쟁할 수 있는지를 결정하기 위해, 교차-차단 검정, 예를 들어, 경쟁적 ELISA 검정이 수행될 수 있다. 예시적인 경쟁적 ELISA 검정에 있어서, 미세적정 플레이트의 LIGHT-코팅된 웰들, 또는 LIGHT-코팅된 세파로스 비드가 후보 경쟁 항체로 또는 없이 사전-인큐베이션되고 그 다음 본 발명의 바이오틴-표지된 항-LIGHT 항체를 첨가했다. 웰들에서 또는 비드 상에서 LIGHT 항원에 결합된 표지된 항-LIGHT 항체의 양은 아비딘 페록시다아제 콘주게이트 및 적절한 기질을 사용하여 측정될 수 있다.
대안적으로, 항-LIGHT 항체는, 예를 들어, 방사성 또는 형광 표지 또는 일부 다른 검출가능한 및 측정가능한 표지로 표지될 수 있다. 항원에 결합하는 표지된 항-LIGHT 항체의 양은 항원 상의 동일한 에피토프에 대한 결합에 대해 경쟁하는 후보 경쟁 항체 (테스트 항원 결합 분자)의 능력에 대해 역 상관관계를 가질 것이고, 즉, 동일한 에피토프에 대한 테스트 항원 결합 분자의 친화성이 클수록, 보다 적은 표지된 항- LIGHT 항체가 항원-코팅된 웰들에 결합될 것이다.
후보 경쟁 항체는 만일 후보 경쟁 항체가 후보 경쟁 항체의 부재에서 (그러나 알려진 비경쟁 항체의 존재에서 일 수 있음) 병렬적으로 수행된 대조군에 비교될 때 적어도 20%, 바람직하게는 적어도 20-50%, 더욱 더 바람직하게는, 적어도 50%로 항- LIGHT 항체의 결합을 차단할 수 있는 경우 실질적으로 동일한 에피토프에 결합하거나, 또는 본 발명의 항- LIGHT 항체와 동일한 에피토프에 대한 결합에 대해 경쟁하는 항체로 간주된다. 이 검정의 변이는 동일한 정량적 값에 도달하도록 수행될 수 있다는 것이 이해될 것이다.
본 발명의 일 구현예에서, 항-LIGHT 항원 결합 분자, 예를 들어 그것의 항체, 단편 또는 변이체가 제공되되, 상기 항원 결합 분자는 상기에서 정의된 바와 같은 본 발명의 항원 결합 분자와 LIGHT에 결합하기 위해 경쟁하고, 상기 경쟁 항체는 경쟁적 ELISA 검정에서 측정될 때 적어도 50%까지 본 발명의 항- LIGHT 항체의 결합을 차단할 수 있다.
막 LIGHT에 특이적으로 결합되고 막 LIGHT의 본 발명의 항원 결합 분자에의 결합을 억제하는 항원 결합 분자가 또한 제공된다.
예를 들어, 일 구현예에서, 항원 결합 분자 (바람직하게는 항체)는 막 LIGHT에 특이적으로 결합하고 막 LIGHT의, 하기로 구성된 군으로부터 선택된 항체에의 결합을 억제한다: 2E08, 3A07, 3B04, 3C10, 3D12, 3E09, 2B11, 3B04_var1, 3B04_var2, 3B04_var3, 3B04_var4, 3B04_var5, 3B04_var6, 3B04_var7, 3B04_var8, 3B04_var9, 3B04_var10, 3B04_var11, 3B04_var12, 3B04_var13, 3B04_var14, 3B04_var15, 3B04_var16, 3D12_var1, 3D12_var2, 3D12_var3, 3D12_var4, 3D12_var5, 3D12_var6, 3D12_var7, 3D12_var8, 3D12_var9, 3D12_var10, 3D12_var11, 3D12_var12, 3D12_var13, 3D12_var14, 3D12_var15 및 3D12_var16. 막 LIGHT에 특이적으로 결합하고 및 막 LIGHT의 이의 단편 및 변이체에의 결합을 억제하는 항원 결합 분자 가 또한 제공된다 (예를 들어 상기 항체, 뿐만 아니라 다른 변이체의 6개의 CDR 영역 또는 VH 및 VL 서열을 포함하는 항원 결합 분자).
본 발명의 항원 결합 분자에 의해 결합된 LIGHT의 에피토프에 특이적으로 결합하는 항원 결합 분자가 또한 제공된다.
예를 들어, 일 구현예에서 본 발명은 provide 항원 결합 분자 (바람직하게는 항체)를 제공하되, 상기 항원 결합 분자는 하기로 구성된 군으로부터 선택된 항체에 의해 결합된 LIGHT의 에피토프에 특이적으로 결합한다: 2E08, 3A07, 3B04, 3C10, 3D12, 3E09, 2B11, 3B04_var1, 3B04_var2, 3B04_var3, 3B04_var4, 3B04_var5, 3B04_var6, 3B04_var7, 3B04_var8, 3B04_var9, 3B04_var10, 3B04_var11, 3B04_var12, 3B04_var13, 3B04_var14, 3B04_var15, 3B04_var16, 3D12_var1, 3D12_var2, 3D12_var3, 3D12_var4, 3D12_var5, 3D12_var6, 3D12_var7, 3D12_var8, 3D12_var9, 3D12_var10, 3D12_var11, 3D12_var12, 3D12_var13, 3D12_var14, 3D12_var15 및 3D12_var16. 이의 단편 및 변이체에 의해 결합된 LIGHT의 에피토프에 특이적으로 결합하는 항원 결합 분자가 또한 제공된다 (예를 들어 상기 항체, 뿐만 아니라 다른 변이체의 6개의 CDR 영역 또는 VH 및 VL 서열을 포함하는 항원 결합 분자).
일 양태에서, 또한 DcR3 결합 영역 (즉 아미노산 170 내지 178 of 인간 LIGHT)과 상이한 LIGHT의 에피토프에 특이적으로 결합하는 항원 결합 분자가 제공된다.
예를 들어, 일 구현예에서 본 발명은 인간 LIGHT의 에피토프에 특이적으로 결합하는 항원 결합 분자를 제공하되, 상기 에피토프는 아미노산 스트레치 GRATSSSRVW (서열번호: 124) 내에 포함된 하나 이상의 아미노산 잔기를 포함한다. 일 구현예에서, 본 발명은 인간 LIGHT의 에피토프에 특이적으로 결합하는 항원 결합 분자를 제공하되, 상기 에피토프는 아미노산 서열 GRATSSSRVW (서열번호: 124)을 포함한다. 에피토프 GRATSSSRVW은 막 형태의 LIGHT (즉 그것의 삼량체 형태의 LIGHT)에 우선적으로 결합하는 항-LIGHT 항원 결합 분자에 대한 특정 관련성일 수 있다. 에피토프는 당업계에서 알려진 임의의 적당한 방법, 예를 들어 알라닌 스캐닝 방법에 의해 결정될 수 있다.
일 구현예에서, 인간 LIGHT의 에피토프에 특이적으로 결합하는 항원 결합 분자가 제공되되, 상기 에피토프는 서열번호: 121, 122 또는 123 (GRATSSSRVW)의 아미노산 188 내지 197의 아미노산 스트레치에 포함된 하나 이상의 아미노산 잔기를 포함한다.
일 구현예에서 본 발명은 인간 LIGHT의 에피토프에 특이적으로 결합하는 항원 결합 분자를 제공하되, 상기 에피토프는 아미노산 스트레치 GRATSSSRVW (서열번호: 124) 내에 포함된 하나 이상의 아미노산 잔기를 포함하고, 그리고 상기 항원 결합 분자는 하기로부터 선택된다: 2E08, 3A07, 3B04, 3C10, 3D12, 3E09, 2B11, 3B04_var1, 3B04_var2, 3B04_var3, 3B04_var4, 3B04_var5, 3B04_var6, 3B04_var7, 3B04_var8, 3B04_var9, 3B04_var10, 3B04_var11, 3B04_var12, 3B04_var13, 3B04_var14, 3B04_var15, 3B04_var16, 3D12_var1, 3D12_var2, 3D12_var3, 3D12_var4, 3D12_var5, 3D12_var6, 3D12_var7, 3D12_var8, 3D12_var9, 3D12_var10, 3D12_var11, 3D12_var12, 3D12_var13, 3D12_var14, 3D12_var15 및 3D12_var16, 또는 이의 단편 또는 변이체.
일 구현예에서, 본 발명은 인간 LIGHT의 에피토프에 특이적으로 결합하는 항원 결합 분자를 제공하되, 상기 에피토프는 아미노산 GRATSSSRVW (서열번호: 124)를 포함하고, 그리고 상기 항원 결합 분자는 하기로부터 선택된다: 2E08, 3A07, 3B04, 3C10, 3D12, 3E09, 2B11, 3B04_var1, 3B04_var2, 3B04_var3, 3B04_var4, 3B04_var5, 3B04_var6, 3B04_var7, 3B04_var8, 3B04_var9, 3B04_var10, 3B04_var11, 3B04_var12, 3B04_var13, 3B04_var14, 3B04_var15, 3B04_var16, 3D12_var1, 3D12_var2, 3D12_var3, 3D12_var4, 3D12_var5, 3D12_var6, 3D12_var7, 3D12_var8, 3D12_var9, 3D12_var10, 3D12_var11, 3D12_var12, 3D12_var13, 3D12_var14, 3D12_var15 및 3D12_var16, 또는 이의 단편 또는 변이체.
일 구현예에서, 인간 LIGHT에 특이적으로 결합하는 항원 결합 분자가 제공되되, 상기 항원-결합 분자에 의해 결합된 에피토프는 GRATSSSRVW (서열번호: 124)를 포함하고, 그리고 상기 항원 결합 분자는 3B04_var16, 또는 변이체 또는 이의 단편이다. 일 구현예에서, 인간 LIGHT에 특이적으로 결합하는 항원 결합 분자가 제공되되, 상기 항원-결합 분자에 의해 결합된 에피토프는 GRATSSSRVW (서열번호: 124)를 포함하고, 그리고 상기 항원 결합 분자는 3B04, 또는 변이체 또는 이의 단편이다. 일 구현예에서, 인간 LIGHT에 특이적으로 결합하는 항원 결합 분자가 제공되되, 상기 항원-결합 분자에 의해 결합된 에피토프는 GRATSSSRVW (서열번호: 124)를 포함하고, 그리고 상기 항원 결합 분자는 3D12, 또는 변이체 또는 이의 단편이다.
결합된 3개의 항체 대 하나의 원래 LIGHT 삼량체의 비 (항체 분자 대 LIGHT 삼량체의 3:1 비)로 원래의 삼량체 LIGHT에 결합할 수 있는 LIGHT에 대한 알려진 항체와는 대조적으로, 본 발명의 항원 결합 분자는 1:1의 결합 비를 가지며, 즉 발명의 하나의 항원 결합 분자는 하나의 원래의 LIGHT 삼량체에 결합한다. 일 구현예에서, 인간 LIGHT에 특이적으로 결합하는 항원 결합 분자가 제공되되, 상기 항원 결합 분자의 결합 대 인간 LIGHT 삼량체의 결합은 1:1이다.
일 구현예에서, 인간 LIGHT에 특이적으로 결합하는 항원 결합 분자가 제공되되, 상기 항원-결합 분자는 1:1의 비로 인간 LIGHT의 삼량체에 결합되고, 상기 항원 결합 분자는 하기로부터 선택된다: 2E08, 3A07, 3B04, 3C10, 3D12, 3E09, 2B11, 3B04_var1, 3B04_var2, 3B04_var3, 3B04_var4, 3B04_var5, 3B04_var6, 3B04_var7, 3B04_var8, 3B04_var9, 3B04_var10, 3B04_var11, 3B04_var12, 3B04_var13, 3B04_var14, 3B04_var15, 3B04_var16, 3D12_var1, 3D12_var2, 3D12_var3, 3D12_var4, 3D12_var5, 3D12_var6, 3D12_var7, 3D12_var8, 3D12_var9, 3D12_var10, 3D12_var11, 3D12_var12, 3D12_var13, 3D12_var14, 3D12_var15 및 3D12_var16, 또는 이의 단편 또는 변이체.
일 구현예에서, 인간 LIGHT에 특이적으로 결합하는 항원 결합 분자가 제공되되, 상기 항원-결합 분자는 1:1의 비로 인간 LIGHT의 삼량체에 결합되고, 상기 항원 결합 분자는 3B04_var16, 또는 변이체 또는 이의 단편이다. 일 구현예에서, 인간 LIGHT에 특이적으로 결합하는 항원 결합 분자가 제공되되, 상기 항원-결합 분자는 1:1의 비로 인간 LIGHT의 삼량체에 결합되고, 상기 항원 결합 분자는 3B04, 또는 변이체 또는 이의 단편이다. 일 구현예에서, 인간 LIGHT에 특이적으로 결합하는 항원 결합 분자가 제공되되, 상기 항원-결합 분자는 1:1의 비로 인간 LIGHT의 삼량체에 결합되고, 상기 항원 결합 분자는 3D12, 또는 변이체 또는 이의 단편이다.
일 구현예에서, 인간 LIGHT의 에피토프에 특이적으로 결합하는 항원 결합 분자가 제공되되, 상기 항원-결합 분자는 1:1의 비로 인간 LIGHT의 삼량체에 결합되고, 상기 항원-결합 분자에 의해 결합된 에피토프는 GRATSSSRVW (서열번호: 124)를 포함한다.
일 구현예에서, 인간 LIGHT에 특이적으로 결합된 항원 결합 분자가 제공되고, 상기 항원 결합 분자는 가용성 LIGHT와 비교하여 막-결합 LIGHT에 대해 더 높은 친화도 (예를 들어 막 LIGHT에 대해 적어도 50-배 선호)를 가지며, 상기 항원-결합 분자에 의해 결합된 에피토프는 GRATSSSRVW (서열번호: 124)을 포함한다.
일 구현예에서, 인간 LIGHT에 특이적으로 결합된 항원 결합 분자가 제공되되, 상기 항원-결합 분자는 1:1의 비로 인간 LIGHT의 삼량체에 결합되고, 상기 항원 결합 분자는 가용성 LIGHT와 비교하여 막-결합 LIGHT에 대해 더 높은 친화도 (예를 들어 막 LIGHT에 대해 적어도 50-배 선호)를 갖는다.
일 구현예에서, 인간 LIGHT의 에피토프에 특이적으로 결합하는 항원 결합 분자가 제공되고;
상기 항원-결합 분자는 1:1의 비로 인간 LIGHT의 삼량체에 결합되고 (예를 들어 막 LIGHT에 대해 적어도 50-배 선호); 그리고
상기 항원 결합 분자는 가용성 LIGHT와 비교하여 막-결합 LIGHT에 대해 더 높은 친화도를 가지며다;
그리고, 상기 항원-결합 분자에 의해 결합된 에피토프는 GRATSSSRVW (서열번호: 124)를 포함한다.
조성물
본 발명의 일 양태에서, 본 발명의 항원 결합 분자를 포함하는 약제학적 조성물이 제공된다.
본 발명의 조성물은 임의의 편리한 경로에 의한 사용을 위해 제형화될 수 있다. 본 발명의 약제학적 조성물은 정상적으로 본 발명의 항원 결합 분자에 부가하여, 약제학적으로 허용가능한 담체, 부형제, 희석제, 아쥬반트, 비히클, 완충액 또는 안정제를 포함할 것이다. 그와 같은 담체는, 비제한적으로, 염수, 완충 식염수, 덱스트로스, 리포좀, 물, 글리세롤, 폴리에틸렌 글리콜, 에탄올 및 이들의 조합을 포함한다.
약제학적 조성물은 그것을 환자에게 투여하는 원하는 방법에 의존하여 임의의 적합한 형태로 될 수 있다.
본 발명의 약제학적 조성물은 용량당 각각의 활성 성분의 사전결정된 양을 함유하는 단위 용량 형태로 제시될 수 있다. 그와 같은 단위는 화합물 5-100mg/1일, 바람직하게는 5-15mg/1일, 10-30mg/1일, 25-50mg/1일 40-80mg/1일 또는 60-100mg/1일 중 어느 하나를 제공하도록 적응될 수 있다. 식 I의 화합물에 대해, 100-1000mg/1일의 범위인 용량이 제공되고, 바람직하게는 100-400mg/1일, 300-600mg/1일 또는 500-1 OOOmg/1일 중 어느 하나이다. 그와 같은 용량은 단일 용량으로 또는 수많은 별개의 용량으로 제공될 수 있다. 궁극적인 용량은 물론 치료되고 있는 병태, 투여 경로 및 환자의 연령, 체중 및 증상에 의존할 것이고 의사의 재량에 따를 것이다.
본 발명의 약제학적 조성물은 임의의 적절한 경로, 예를 들어 경구 (볼 또는 설하를 포함한), 직장, 비강, 국소 (볼, 설하 또는 경피를 포함함), 질 또는 비경구 (피하, 근육내, 정맥내 또는 진피내를 포함함) 경로에 의한 투여에 대해 적합할 수 있다. IV 투여가 바람직할 수 있다. 그와 같은 제형은 조제 기술 분야에 알려진 임의의 방법, 예를 들어, 활성 성분을 담체(들) 또는 부형제(들)와 회합함에 의해 제조될 수 있다.
경구 투여에 대해 적합한 약제학적 제형은 별개의 단위 예컨대 캡슐 또는 정제; 분말 또는 과립; 수성 또는 비수성 액체 내 용액 또는 현탁액; 식용 포옴 또는 휘프; 또는 수중유 액체 에멀션 또는 유중수 액체 에멀션으로 제시될 수 있다.
경피 투여에 대해 적합한 약제학적 제형은 장기적인 기간 동안 수령체의 표피와 긴밀한 접촉을 유지하도록 의도된 별개의 패치로 제시될 수 있다. 예를 들어, 활성 성분은 일반적으로 문헌 [Pharmaceutical Research, 3(6), 318 (1986)]에 기재된 바와 같이 패치로부터 이온침투요법에 의해 전달될 수 있다.
국소 투여에 대해 적합한 약제학적 제형은 연고, 크림, 현탁액, 로션, 분말, 용액, 페이스트, 겔, 스프레이, 에어로졸 또는 오일로 제형화될 수 있다.
눈 또는 다른 외부 조직, 예를 들어 입 및 피부에 적용하는 경우, 제형은 바람직하게는 국소 연고 또는 크림으로 적용된다. 연고로 제형화될 때, 활성 성분은 파라핀성 또는 수-혼화성 연고 기재 중 어느 하나로 이용될 수 있다. 대안적으로, 활성 성분은 수중유 크림 기재 또는 유중수 기재로 크림으로 제형화될 수 있다.
눈에 대한 국소 투여에 적합한 약제학적 제형은 활성 성분이 적합한 담체, 특히 수성 용매에 용해 또는 현탁된 안약을 포함한다.
입에 국소 투여하기에 적합한 약제학적 제형은 로젠지, 사탕형알약 및 구세액을 포함한다.
직장 투여에 대해 적합한 약제학적 제형은 좌약 또는 관장제로 제시될 수 있다.
담체가 고체인 비강 투여에 대해 적합한 약제학적 제형은 예를 들어 코담배로 취해지는, 즉 코에 밀접하여 유지된 분말 용기로부터 콧구멍을 통한 신속한 흡입에 의한 방식으로 투여되는 20 내지 500 마이크론의 범위인 입자 크기를 갖는 조립 분말을 포함한다. 비강 스프레이 또는 점비액과 같이 투여를 위한 담체가 액체인 적합한 제형은 활성 성분의 수성 또는 오일 용액을 포함한다.
흡입에 의한 투여에 대해 적합한 약제학적 제형은 다양한 유형의 정량 가압 에어로졸, 분무기 또는 취입기의 수단에 의해 생성될 수 있는 미세 입자 분진 또는 미스트를 포함한다.
질 투여에 대해 적합한 약제학적 제형은 페서리, 탐폰, 크림, 겔, 페이스트, 포옴 또는 스프레이 제형으로 제시될 수 있다.
비경구 투여에 대해 적합한 약제학적 제형은 제형에 의도된 수령체의 혈액과 등장성을 부여하는 산화방지제, 완충액, 정균제 및 용질을 함유할 수 있는 수성 및 비수성 멸균 주사 용액; 및 현탁화제 및 증점제를 포함할 수 있는 수성 및 비-수성 멸균 현탁액을 포함한다. 제형은 단위-용량 또는 다중-용량 용기, 예를 들어 밀봉된 앰풀 및 바이알에 제시될 수 있고, 사용 직전 멸균 액체 담체, 예를 들어 주사용 물의 첨가만을 필요로 하는 냉동건조된 (동결건조된) 상태에서 저장될 수 있다. 즉석 주사 용액 및 현탁액은 멸균 분말, 과립 및 정제로부터 제조될 수 있다.
본 발명의 약제학적 조성물은 또한 본 발명의 분자에 부가하여 하나 이상의 다른 치료적 활성제를 함유할 수 있다.
일부 구현예에서, 활성 약물 농축물의 제형은 약제학적으로 허용가능한 긴장제, 완충제, 및 약제학적으로 허용가능한 계면활성제를 포함할 수 있다.
대안적으로, 제형은 활성 성분 플러스 인산 나트륨, 일염기성, 제이인산 나트륨, 염화나트륨, 폴리소르베이트 80 또는 폴리소르베이트 20 (진탕-유도된 응집의 위험을 최소화하기 위한 계면활성제) 및, 선택적으로 약 6.0 내지 7.0, 예를 들어 약 6.5로 pH 조정된, 물 (USP/Ph.Eur)을 포함할 수 있다.
바람직한 단위 투약 제형은 활성 성분의, 상기 본 명세서에서 인용된 바와 같은 1일 용량 또는 하위-용량, 또는 이들의 적절한 분획을 함유하는 것이다.
특히 상기 언급된 성분에 부가하여, 제형은 또한 문제의 제형의 유형을 고려하여 당 업계에서 통상적인 다른 제제를 포함 할 수 있고, 예를 들어 경구 투여에 적합한 제형은 향료제제를 포함할 수 있음을 이해해야 한다.
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치료방법
본 발명의 항원 결합 분자는 LIGHT-매개된 장애 또는 질환, 특히 염증성 장애 또는 질환을 예방 및/또는 치료하는데 유용하다. 본 발명의 이 양태는 따라서 또한 대상체에 있어서 LIGHT-매개된 장애 또는 질환 (예컨대 염증성 장애 또는 질환)의 치료에 대한 방법을 포함하고, 상기 방법은 상기 대상체에게 본 발명의 항원 결합 분자를 투야하는 것을 포함한다. 본 발명은 따라서 또한 LIGHT-매개된 장애 또는 질환 (예컨대 염증성 장애 또는 질환)의 치료 및/또는 예방에 사용하기 위한 약제의 제조에서 본 발명의 항원 결합 분자의 사용 및 그와 같은 병태의 예방 및/또는 치료에서 본 발명의 항원 결합 분자의 사용으로 확장된다.
치료 방법은 인간 또는 동물 대상체의 것일 수 있고 그리고 본 발명은 인간 및/또는 수의과 의약 둘 모두에서의 사용에 대해 동등하게 확장된다. 본 발명의 항원 결합 분자는 바람직하게는 "치료적 유효량"으로 개체에게 투여되고, 이것은 개체에 대해 이점을 나타내기에 충분하다. 본 명세서에서 사용된 바와 같은, "치료"는 인간 또는 비-인간 동물, 바람직하게는 포유동물에 유익할 수 있는 임의의 요법을 포함한다. 치료는 현존하는 상태에 관한 것일 수 있거나 또는 예방적 (예방적 치료)일 수 있다.
일 구현예에서, 본 발명의 항원 결합 분자는 염증에 사용하기 위한 것이고, 염증성 장애는 자가면역 질환을 포함한다. 바람직한 구현예에서, 본 발명의 항원 결합 분자는 염증성 장 질환을 치료하는데 사용하기 위한 것이다. 본 명세서에서 사용된 바와 같이 "염증성 장 질환" (IBD)는 결장 및 소장의 염증성 병태에 관한 것이다. 이들은 강직 척추염, 아토피 피부염, 만성적 소화장애증, 염증성 장 질환 (IBD), 크론병, 류마티스성 관절염, 건선, 세기관지염, 치은염, 이식 거부, 동종이계 이식 거부, 이식편 대 숙주 질환 (GvHD), 천식, 성인 호흡 곤란 증후군 (ARDS), 만성 심부전, 만성적 폐쇄성 폐 질환, 신장 질환, 패혈성 쇼크, 궤양성 대장염, 섬유증 (즉 섬유성 질환), 다발성 경화증, 쇼그렌 증후군, 낭창, 기도 염증, 간 질환, 간염, 만성적 소화장애증, 피부염, 호산구증가증 및 원발성 담도 간경변증을 포함한다. 특히 관심의 대상은 염증성 장 질환 예컨대 궤양성 대장염 및 크론병의 치료이다.
치료되고 있는 병태에 따라, 본 발명의 항원 결합 분자는 동시, 별개의 또는 순차적인 사용을 위해 다른 약제학적 활성 성분과 함께 사용될 수 있다. 예를 들어, 염증성 질환 또는 장애를 치료할 때, 본 발명의 항원 결합 분자는 항-염증제 와 함께 사용될 수 있다. 적합한 항-염증제는 비-스테로이드 항-염증성 약물 (NSAIDS) 및 스테로이드를 포함한다. NSAIDS가 바람직할 수 있고, 살리실레이트 (예컨대 아스피린 (아세틸살리실 산), 디플루니살, 살리실산, 살살레이트), 프로피온산 유도체 (이부프로펜, 덱시부프로펜, 나프록센), 아세트산 유도체 (인도메타신, 디클로페낙), 에놀산 유도체, 안트라닐산 유도체 (페나메이트), 선택적 COX-2 억제제, 및 설폰아닐라이드를 비제한적으로 포함한다.
면역-매개 장애 또는 질환을 치료할 때, 면역억제제는 사될 수 있고, 그 예는 글루코코르티코이드, 세포증식억제성 (예컨대 알킬화제, 항대사물질, 메토트렉세이트, 아자티오프린, 머캅토퓨린, 또는 세포독성 항생제)이다. GvHD와 특히 관련된 것은 글루코코르티코이드, 예컨대 코르티솔, 코르티손, 프레드니손, 프레드니솔론, 메틸프레드니솔론, 덱사메타손, 베타메타손, 트리암시놀론, 베클로메타손, 플루드로코르티손, 데옥시코르티코스테론 및 알도스테론)이다.
본 발명의 항원 결합 분자와 함께 사용하는데 바랒기한 추가 성분은 TNF-억제제, IL-12 억제제, IL-23 억제제 및 α4β7 인테그린 억제제를 포함한다. 억제제는 자체가 항원 결합 분자, 예컨대 항체 및 바람직하게는 단클론성 항체일 수 있다.
적합한 TNF 억제제는 인플릭시맙 (Remicade), 아달리무맙 (Humira), 세르톨리주맙 페골 (Cimzia), 및 골리무맙 (Simponi)를 포함한다. 적합한 IL-12 및 IL-23 억제제는 상기 둘 모두의 억제제인 우스테키누맙 (Stelara)를 포함한다. 적합한 α4β7 인테그린 억제제는 베돌리주맙 (Entyvio)를 포함한다.
본 발명의 약제학적 조성물은 하나 이상의 추가의 약제학적으로 활성 성분, 예컨대 상기에 열거된 것들을 포함하도록 제형화될 수 있다. 본 발명의 항원 결합 분자는 키트의 일부로서 제공될 수 있다. 그와 같은 키트은 사용 지침 및/또는 추가의 약제학적으로 활성 성분을 포함할 수 있다. 항원 결합 분자 및 추가의 약제학적으로 활성 성분은 키트 내에 별도로 배치될 수 있거나, 또는 일부 구현예에서 항원 결합 분자 및 추가의 약제학적으로 활성 성분은 제형화된 함께 제형화될 수 있다.
본 발명의 일 구현예에서 LIGHT에 특이적으로 결합하는 항체, 특히 단클론성 항체가 제공된다. 항체는 하기로 구성된 군으로부터 선택된다: 2E08, 3A07, 3B04, 3C10, 3D12, 3E09, 2B11, 3B04_var1, 3B04_var2, 3B04_var3, 3B04_var4, 3B04_var5, 3B04_var6, 3B04_var7, 3B04_var8, 3B04_var9, 3B04_var10, 3B04_var11, 3B04_var12, 3B04_var13, 3B04_var14, 3B04_var15, 3B04_var16, 3D12_var1, 3D12_var2, 3D12_var3, 3D12_var4, 3D12_var5, 3D12_var6, 3D12_var7, 3D12_var8, 3D12_var9, 3D12_var10, 3D12_var11, 3D12_var12, 3D12_var13, 3D12_var14, 3D12_var15 및 3D12_var16. 항체는 IBD를 포함하는 염증성 질환의 치료에 사용된다.
일 구현예에서, 본 발명은 인간 LIGHT의 에피토프에 특이적으로 결합하는 항원 결합 분자를 제공하되, 상기 항원 결합 분자는 강직 척추염, 아토피 피부염, 만성적 소화장애증, 염증성 장 질환 (IBD), 크론병, 류마티스성 관절염, 건선, 세기관지염, 치은염, 이식 거부, 동종이계 이식 거부, 이식편 대 숙주 질환 (GvHD), 천식, 성인 호흡 곤란 증후군 (ARDS), 만성 심부전, 만성적 폐쇄성 폐 질환, 신장 질환, 패혈성 쇼크, 궤양성 대장염, 섬유성 질환, 다발성 경화증, 쇼그렌 증후군, 낭창, 기도 염증, 간 질환, 간염, 만성적 소화장애증, 피부염, 호산구증가증 및 원발성 담도 간경변증의 치료에 사용하기 위해 2E08, 3A07, 3B04, 3C10, 3D12, 3E09, 2B11, 3B04_var1, 3B04_var2, 3B04_var3, 3B04_var4, 3B04_var5, 3B04_var6, 3B04_var7, 3B04_var8, 3B04_var9, 3B04_var10, 3B04_var11, 3B04_var12, 3B04_var13, 3B04_var14, 3B04_var15, 3B04_var16, 3D12_var1, 3D12_var2, 3D12_var3, 3D12_var4, 3D12_var5, 3D12_var6, 3D12_var7, 3D12_var8, 3D12_var9, 3D12_var10, 3D12_var11, 3D12_var12, 3D12_var13, 3D12_var14, 3D12_var15 및 3D12_var16, 또는 이의 단편 또는 변이체 로부터 선택된다.
일 구현예에서, 본 발명은 인간 LIGHT의 에피토프에 특이적으로 결합하는 항원 결합 분자를 제공하되, 상기 항원 결합 분자는 염증성 장 질환의 치료에 사용하기 위해 3B04, 3D12, 및 3B04_var16, 또는 이의 단편 또는 변이체로부터 선택된다. 일 구현예에서, 항원 결합 분자는 3B04_var16이다.
일 구현예에서, 본 발명은 인간 LIGHT의 에피토프에 특이적으로 결합하는 항원 결합 분자를 제공하되, 상기 항원 결합 분자는 크론병 의 치료에 사용하기 위해 3B04, 3D12, 및 3B04_var16, 또는 이의 단편 또는 변이체로부터 선택된다. 일 구현예에서, 항원 결합 분자는 3B04_var16이다.
일 구현예에서, 본 발명은 인간 LIGHT의 에피토프에 특이적으로 결합하는 항원 결합 분자를 제공하되, 상기 항원 결합 분자는 궤양성 대장염 의 치료에 사용하기 위해 3B04, 3D12, 및 3B04_var16, 또는 이의 단편 또는 변이체 으로부터 선택된다. 일 구현예에서, 항원 결합 분자는 3B04_var16이다.
본 발명의 이 양태는 따라서 또한, 본 발명의 항원-결합 분자를 대상체에게 투여를 포함하는, 염증성 창자 장애의 치료 방법으로 확장된다. 일 구현예에서, 염증성 장 질환은 크론병일 수 있다. 일 구현예에서, 염증성 장 질환은 궤양성 대장염일 수 있다. 대안적인 구현예에서, 본 발명은 염증성 창자 장애의 치료를 위한 약제의 제조에 본 발명의 항원 결합 분자의 사용을 제공하는 것으로 보여질 수 있다. 일 구현예에서, 염증성 장 질환은 크론병일 수 있다. 일 구현예에서, 염증성 장 질환은 궤양성 대장염일 수 있다.
본 발명은 이제 예시된 목적을 위해서 제시되고 본 발명의 범위를 한정하는 것으로 해석되지 않는 수많은 특정 실시예와 관련하여 추가로 기재될 것이다.
실시예
항원 준비, 면역화 절차, RNA 추출 및 Fab 생성
하기 실시예는 항-인간 막 LIGHT Fab의 패널의 생성 및 확인의 상세한 설명을 제공한다. 인간 가용성 재조합인간 LIGHT (아미노산 74-240), 사이클로포스파마이드, 및 LIGHT를 발현하는 재조합 세포주의 순차적인 주입을 포함하는 변형된 면역화 절차를 사용하여 항-인간 막 LIGHT Fab를 생성하기 위해 면역-용인 프로토콜이 이용되었다. 이 프로토콜은 막 LIGHT 에피토프에 대한 반응성을 갖는 클론을 효과적으로 증폭시켰다. 이용된 방법은 Salata RA 등 (Application of an immune-tolerizing procedure to generate monoclonal antibodies specific to an alternate protein isoform of bovine growth hormone. Anal Biochem. 1992 Nov 15; 207(1):142-9) 및 Chin NW 등 (A novel monoclonal antibody to cytokeratin 18 with reactivity toward lung squamous cell carcinomas and adenocarcinomas of various sites. Am J Pathol. 1992 May; 140(5):1061 -9)에서 기재된 프로토콜에 유사하다.
재조합 인간 LIGHT (214E) 및 사이노몰구스 LIGHT의 클로닝 및 발현
전장 인간 LIGHT (214E 대립유전자) 및 사이노몰구스 (마카카파스시컬라리스) LIGHT 단백질에 대해 인코딩하는 cDNA를 제조자의 지침에 따라 리포펙타민 2000 형질감염 시약 (Invitrogen, 11668019)를 사용하여 30 마이크로그램의 인간 또는 사이노몰구스 원숭이 LIGHT 작제물로 형질감염된 CHO-K1 세포 (ATCC® CCL-61TM)와 HEK293FF 세포 (Invitrogen, R79007)의 Kpnl/Notl.0.5-5.0+06 세포를 통해 pCDNA3.1 (+) 발현벡터 안으로 클로닝하였다. 24시간 후, 형질감염된 및 비-형질감염된 세포는 마우스 항-LIGHT 항체 (R&D Systems, MAB664)와 이어서 염소 항-마우스 APC 접합된 항체 (BD Biosciences, 550826)를 사용하여 유세포측정 검정에 의하여 인간 및 사이노몰구스 원숭이 LIGHT의 세포 표면 발현에 대해 분석되었다. 결과는 인간 작제물로 형질감염된 CHO-K1 및 HEK293FF 세포의 26% 및 50%가 각각 LIGHT 단백질의 발현을 나타낸다는 것을 보여주었다. 사이노몰구스 작제물로 형질감염된 세포의 경우에 있어서, 형질감염된 CHO-K1 및 HEK293FF 세포의 36% 및 53%가 각각 LIGHT 단백질의 발현을 나타냈다. LIGHT 발현은 임의의 비-형질감염된 세포주에서는 검출되지 않았다.
면역화 절차
Balb/c 마우스는 총 3회 주사 동안 매 2주 마다 Sigma 아쥬반트시스템 (SAF, Sigma-Aldrich, S6322-1 VL) 내에 10ug의 재조합 인간 가용성 LIGHT 단백질 (R&D SYSTEMS, 664-LI-025)로 i.p.로 면역화되었다. 사이클로포스파마이드 일수화물 (Sigma cat.no. C0768)을 가용성 LIGHT 1 및 2 일 후 15분에서 0.1 ml/마우스 (PBS 내 20mg/ml)로 i.p.로 주사하였다. 이 절차는 2주 간격으로 2회 반복되었다. 42일째에, SAF 내 200μl의 CHO-LIGHT 세포 (6x106)를 각각의 마우스 안으로 i.p.로 주사하였고 56일 및 70일째에 반복했다. 87일째에 CHO-LIGHT 세포 (6x106)를 i.v.로 주사하고 91일째에 비장을 수확했다.
HEK293FF 인간 LIGHT 세포를 사용하여 FACS에 의한 혈청 역가의 결정
100 μl FACS 완충액 (1xPBS + 0.5% Hi-FBS) 내 2x105 WT HEK293FF 세포, HEK293FF-인간 LIGHT 세포 또는 HEK293FF-사이노몰구스 LIGHT 세포를 96 웰 U-바닥 플레이트 (Greiner)에 분배하고 기준 항체, (인간 LIGHT/TNFSF14 MAb664, R&D SYSTEMS)로 염색하거나, 또는 60분 동안 4°C에서, FACS 완충액에서 미리 제조되고 희석된 마우스 혈청의 적정으로 인큐베이션하였다. 인큐베이션 후, 세포 플러스 혈청 샘플을 FACS 완충액으로 3회 세정하고 30분 동안 4°C에서 1:500 희석 (BD Biosciences, 550826)에서 50 μl의 이차 염소 항-마우스 APC 접합된 항체로 인큐베이션하고 광으로부터 보호했다. 인큐베이션 후 세포는 FACS 완충액에서 3회 세정하고 그 다음 100 μl FACS 완충액에 재현탁시켰다. 양성 APC 신호 강도 (기하평균 및 결합 퍼센트)를 FL4 채널에서 FACS Accuri C6 기기를 사용하여 유세포측정에 의해 측정하였다.
RNA 추출, 및 Fab 생성
각각의 면역화된 마우스에 대해, DNAse/RNAse 유리 조직 그라인더 및 TRIzol 시약 (AMBION, cat. nr.15596026)을 사용하여 기계적 및 열적 처리에 의해 비장 절반으로부터 세포 현탁액을 제조하였다. 세포 현탁액으로부터 RNA 추출은 제조자의 사양서에 따라 Direct-zol RNA MiniPrep 키트 (Zymo Research, cat. nr. R2050)를 사용하여 수행하였다. 추출된 RNA의 순도 및 완전성은 260 및 280 nm에서 광학 밀도를 측정함에 의해 그리고 28S 및 18S rRNA에 상응하는 밴드의 1 % 아가로스/TAE 겔에서 시각적 분석에 의해 확인되었다.
Fab 라이브러리 구축
면역 레퍼토리로부터 항체 유전자의 증폭. 추출된 RNA로부터, 상첨자 III 제1 가닥 합성 시스템 (Invitrogen, cat. nr. 18080-051)을 사용하여 RT-PCR에 의해 cDNA가 합성되었다. 중쇄의 가변 도메인 (VH), lgG1 중쇄 및 힌지의 부분의 제1 불변 도메인 (CH1-힌지), 항체 카파 경쇄의 가변 도메인 (Vk) 및 불변도메인 (Ck)에 대해 코딩하는 유전자가 Expand High Fidelity 시스템 (Roche, cat. nr. 4738268001)을 사용하여 cDNA로부터 PCR 증폭되었다. 이들 PCR 반응에서 사용된 프라이머는 마우스 힌지에서 그리고 상이한 마우스 V 유전자의 프레임워크 일 영역의 3'의 CK 영역뿐만아니라 5 영역에서 어닐링하도록 설계되었다. 내포된 PCR은 템플레이트로서 이전의 증폭 생성물과 파아지미드로 추가의 클로닝을 위해 필요한 제한 부위로 태깅된 상기에 사용된 것과 동일한 프라이머를 사용하여 수행되었다.
마우스 당 VH1, CH1 및 힌지의 작은 부분을 코딩하는 유전자와 VK 및 CK에 대해 코딩하는 유전자가 파아지미드 안으로 별도로 클로닝되고 중쇄 및 경쇄 하위-라이브러리로 유도하는 E. 콜리 TG1 세포 안으로 전환되었다.
최종 Fab 라이브러리는 경쇄 하위-라이브러리를 함유하는 파아지미드 벡터 안으로 중쇄 하위-라이브러리 DNA를 단리함에 의해 수득된 VHCH1 -힌지 인서트를 클로닝하고 E. 콜리 TG1 세포로 전환함에 의해 구축되었다. 총 4개 Fab 파아지 디스플레이 라이브러리에서, 파아지 입자는 C-말단 His6-c-myc tag 및 유전자-Ill 단백질을 갖는 융합 단백질로 Fab를 발현하고, 4.0E+08로부터 8.8E+09 cfu's로 다양한 크기로 생성되었다.
HEK293FF 인간 LIGHT 세포에서 원형질막주위 추출물 스크리닝
원형질막주위 추출물 (P.E.)을 FACS 완충액 (1xPBS + 0.5% Hi-FBS)에서 1:5로 희석하고 플레이트 진탕기 상에서 30분 동안 실온에서 100 μl의 최종 용적에서 1:1000 희석 (Gentaur CMYC-9E10, 0.5 mg/ml)으로 마우스 항-c-myc로 인큐베이션하였다. 2.0E+05 HEK293FF 인간 LIGHT 형질감염된 세포는 플레이트 진탕기 상에서 60분 동안 4°C에서 100 μl의 믹스 P.E. 및 마우스 항-c-myc로 인큐베이션하였다. 세포는 그런 다음 FACS 완충액으로 3회 세정하고 플레이트 진탕기 상에서 30분 동안 4°C에서1:500 희석에서 50 μl의 염소 항-마우스 APC로 염색하였다. 종단에서 세포는 FACS 완충액으로 3회 세정하고 100 μl FACS 완충액에서 재현탁시키고 그리고 양성 결합제는 FACS Accuri C6 기기를 사용하여 유세포측정에 의해 FL4 채널에서 판독한다.
HEK293FF 인간 LIGHT 세포에서 특이적 Fab 클론의 선택을 위한 경쟁 검정
각각의8개 양성 선별된 클론 (EC50 농도)의 정제된 Fab를 30분 동안 실온에서 1 μg 가용성 LIGHT 단백질이 있거나 없이 인큐베이션하였다. 인큐베이션 후 Fab 플러스 가용성 LIGHT 단백질의 100 μl 혼합물을 플레이트 진탕기 상에서 60분 동안 4°C에서 2.0E+05 HEK293FF 인간 LIGHT 세포로 인큐베이션하였다. 세포는 FACS 완충액으로 3회 세정하고 플레이트 진탕기 상에서 30분 동안 4°C에서1:500 희석에서 50 μl의 염소 항-마우스 APC로 염색하였다. 마지막에서 세포는 FACS 완충액으로 3회 세정하고 그리고 양성 결합제는 FACS Accuri C6 기기를 사용하여 유세포측정에 의해 FL4 채널에서 판독한다.
LIGHT 특이적 Fab의 선택 및 스크리닝
Fab를 발현하는 파아지를 VCSM13 헬퍼 파아지를 사용하여 표준 프로토콜에 따라 생산하고, PEG/NaCI에 침전시키고 인간 LIGHT를 발현하는 세포 상에서 2개의 연속적인 라운드의 패닝을 수행하는데 사용하였다. 형질감염된 HEK293FF 및 CHO-K1 세포는 각각 제1 및 제2 라운드에 사용하였다. 파아지는 1시간 동안 4°C에서 용액 내 세포로 인큐베이션하였고 그 다음 10% FBS/PBS로 수 회 세정하였다. 결합된 파아지는 트립신을 사용하여 실온에서 회수하였다. 프로테아제 활성은 프로테아제 억제제 AEBSF에 의해 즉시 중화하였다. 모든 파아지 산출물은 대수적으로 성장된 E. 콜리 TG1 세포 안으로 형질감염되었고 개별 E. 콜리 세포에서 가용성 Fab의 생산은 이소프로필 1 -티오-p-D-갈락토피라노시드에 의해 유도되었다. 가용성 Fab를 함유하는 박테리아 원형질막주위 추출물 (P.E.s)은 냉동/해동 사이클에 의해 추출하고, 박테리아는 펠릿화되어 -20°C에서 밤새 냉동되고 그 다음 실온에서 해동되고 PBS에 재현탁시켰다. 가용성 Fab를 함유하는 상청액 (P.E.)을 실온에서 30분 쉐이킹 및 원심분리 후 수집하였다. 가용성 Fab를 함유하는 총 380 P.E.s를 인간 LIGHT 형질감염된 및 비-형질감염된 HEK293FF 세포에 대한 결합에 대해 FAC에서 시험하였다. 가용성 Fab의 결합은 항-myc 항체 (Gentaur, cat. nr. 04-CMYC-9E10) 및 염소 항-마우스 APC 접합된 항체 (BD Biosciences, cat. nr. 550826)를 사용하여 연관된 c-myc tag를 검출함에 의해 평가하였다. 결과는 흐름세포측정기 (Accuri C6, BD Biosciences)의 FL4-A 채널 검출기에서 양성 세포의 백분율 (%) 및 평균 강도 형광 수준 (MFI)을 검색함에 의해 분석하였다 총 70개 클론이 형질감염된 세포에 결합을 나타냈고, 하나의 클론은 또한 비-형질감염된 세포에도 결합을 보였다.
HEK293FF 인간 LIGHT 세포에서 특이적 P.E. 클론의 선택을 위한 중화 검정
HEK293FF 인간 LIGHT 형질감염된 세포를 플레이트 진탕기 상에서 30분 실온에서 마우스 항-c-myc (1:1000)로 미리 인큐베이션된 선택된 클론 (1:5)으로부터의 50 μl의 P.E. 및 50 μl의 LTβR-Fc 리간드 (15 nM- EC50; R&D SYSTEMS cat. no. 356-HV-100) 또는 50 μl HVEM-Fc (45 nM-EC50; R&D SYSTEMS cat. no. 629-LR-100)로 플레이트 진탕기 상에서 120분 동안 4°C에서 인큐베이션하였다. 세포는 FACS 완충액으로 3회 세정하고 플레이트 진탕기 상에서 30분 동안 4°C에서 1:500 희석으로 50 μl의 염소 항-마우스 APC로 염색하였다. 종단에 세포는 FACS 완충액으로 3회 세정하고 양성 결합제는 FACS Accuri C6 기기를 사용하여 유세포측정에 의해 FL4 채널에서 판독한다. 대조군으로, 세포를 단지 리간드로만 인큐베이션하고 50 μl의 염소 항-인간 IgG FITC (Sigma Cat. No. F9512-2ML, 1:1500) (FL1 채널)를 사용하여 검출하였다. 주된 스크린에서 69개 양성 결합제로부터, HEK293FF 세포 상에서 발현된 LIGHT에 결합하는 LTβR-Fc 및 HVEM-Fc 둘 모두를 억제한 24개의 중화하는 Fab가 발명자들에 의해 선택되었다.
가용성 LIGHT 및 사이노몰구스 원숭이 교차 반응성으로 경쟁 검정
HEK293FF 세포를 발현하는 인간 LIGHT에 대한 특이적 결합을 보이는 69 클론의 P.E.를 가용성 LIGHT 단백질 (R&D SYSTEMS, cat. no. 664-LI0252)의 존재 및 부재에서 동일한 세포에 대한 결합에 대해 재-시험하였다. 경쟁 검정에서 사용되는 가용성 LIGHT의 양 (10 g/ml)은 세포에 대해 항-LIGHT 항체 (R&D SYSTEMS, cat. no. MAB664)의 결합을 차단할 수 있는 가용성 LIGHT의 상이한 양을 시험함에 의해 결정하였다. 69 클론으로부터의 P.E.들을 10 μg/ml의 LIGHT 단백질의 존재 또는 부재에서 마우스 항-c-myc 항체 (Gentaur, cat. no. 04-CMYC-9E10)로 사전-인큐베이션하고 그 다음 인간 LIGHT HEK293FF 형질감염된 세포에 첨가했다. 특이적 막 LIGHT 결합제의 결정을 위해, 막 LIGHT 특이적 결합제로 고려되는 0.70 이상의 값을 나타내는 클론으로, 가용성 LIGHT의 존재 또는 부재에서 P.E의 MFI 값과 결합의 %의 비를 계산하였다.
총 24개 막 LIGHT 특이적 결합제 클론이 확인되었다. 이들 클론은 또한 사이노몰구스 원숭이 LIGHT 작제물로 형질감염된 HEK293FF 세포를 결합하는 것에 대해 시험되었다. 그 결과, 7개 항-LIGHT Fab가 인간/사이노몰구스 교차-반응성인 것으로 분류되었다.
키메라 mAb의 생성
무관한 Fab의 7개 항-LIGHT 마우스 Fab 플러스의 가변 도메인에 대해 코딩하는 합성 유전자를 인간 lgG4 HC (lgG4 스위칭을 방지하기 위해 위치 214에서 S-대-P 전환 및 잔존 Fc 수용체 결합 활성을 제거하기 위해 위치 248에서 L-대-E 전환을 가짐) 및 인간 CL 도메인을 포함하는 포유동물 발현 벡터 안으로 재클로닝하였다. 포유동물 발현 시스템에서 벡터를 함유하는 중쇄 및 경쇄의 공동-형질감염을 수행하고, 이어서 키메라 IgG의 단백질 A-기재 정제, 변성 및 비-변성 PAGE에 대해 정량화 및 QC를 수행하였다. Nu-Page 분석은 환원 조건하에서 2개의 밴드 (50 및 25 KDa)와 비-환원 조건에 대한 150 KDa 밴드의 존재와 순도를 확인한다.
EL4 세포 상에서 LIGHT에 대한 항-LIGHT lgG4의 평형 결합.
안정적으로 형질도입된 LIGHT 발현 EL4 세포 (마우스 림프종 세포주; EL4-LIGHT; Cheung 등 J. Immunol. 2009; 183:7286-7296)를 유세포측정-기반 결합 분석에 사용하였다. EL4-LIGHT 세포는 40분 동안 4 ℃에서 항-LIGHT lgG4 클론 (0.017 ng/ml로부터 70 μg/ml로 단계적인 농도)으로 인큐베이션하였다. 세포를 세정하고 EL4-LIGHT 세포 상에 결합된 항-LIGHT IgG를 검출하기 위해 Alexa Fluor 647 접합된 염소 항-인간 IgG (Fab)2 단편 특이적 다클론성 항체 (Jackson Immuno Research, 미국 웨스트 그로브 소재)을 사용하였다.
항-막 LIGHT mAb에 의한 EL4-LIGHT 세포에 대한 HVEM 및 LTBR 결합의 억제
바이오틴-LTβR-Fc 및 바이오틴-HVEM-Fc를 제조자의 지침에 따라 ThermoFisher (EZ-Link NHS-LC- Biotin; cat. no. 21336)로부터 구매된 키트를 사용하여 제조하였다. EL4-LIGHT 세포에서 항-막 LIGHT 항체와 결합 경쟁 검정은 아래와 같았다: 50 μl/웰의 항체 3D12, 3B04, 3E09, 2B11, 2E08, 3A07, 3C10; (3-배희석 300 nM 내지0,005 nM)을 EL4-LIGHT 세포 (0.25 x 106)에 첨가하고 30분 동안 4 ℃에서 인큐베이션하고 그 다음 50 μl/웰의 각각의 리간드 (바이오틴-LTβR-Fc 또는 바이오틴-HVEM-Fc)를 EC50 농도로 2회로 EL4-LIGHT 세포 단독에 또는 플러스 항체에 첨가하고 그리고 90분 동안 4 ℃에서 인큐베이션한다. 사용된 희석제는 FACS 완충액이었다. 세포를 FACS 완충액으로 3회 세정하고 그리고 세포에 대한 바이오틴-LTβR-Fc 및 바이오틴-HVEM-Fc 결합 검출은 30분 동안 4 ℃에서 스트렙타비딘-APC (1 :400; BioLegend cat. No. 405207)으로 수행하고 형광은 RL-1 채널에서 판독한다. 항-HEL mAb 2A11을 배경 대조군으로 이용하였다.
항-막 LIGHT mAb에 의한 HT-29 세포로부터 IL-8 분비의 억제
CHO K1 LIGHT 세포 검정
HT29 세포 (미국종균협회, ATCC #HTB-38)를 McCoys 5a 배지 (GIBCO) + 10% v/v FBS (GIBCO)에 유지시켰다. 세포를 일상적인 배양에 대해 100% 밀집도로부터 1:4 내지 1:12 사이로 분할하였다. 100μl 0.03x106 일시적으로 형질감염된 LIGHT CHO K1 세포를 세포 배양 배지에서 30분 동안 37 ℃에서 항-막 LIGHT 항체 (또는 음성 대조군 항-HEL, hen 에그 리소좀 항체)로 인큐베이션하고 그 다음 100μl 1x105 HT29 세포에 첨가하고 그리고 CO2 세포 인큐베이터 챔버에서 6시간 동안 37 ℃에서 인큐베이션했다. 상청액을 회수하고 IL-8 수준을 인간 IL-8 Duo-세트 ELISA 키트 (R&D SYSTEMS)를 사용하여 결정했다. HT29 세포의 음성 대조군뿐만 아니라 HT-29 세포 플러스 TNFα (10 ng/ml) 또는 LTα1□2 (O.5μg/ml)의 양성 대조군을 포함했다.
EL4-NC-LIGHT 세포 검정
HT29 세포 (미국종균협회, ATCC #HTB-38)을 McCoys 5a 배지 (GIBCO) + 10% v/v FBS (GIBCO)에 유지시켰다. 세포를 일상적인 배양에 대해 100% 밀집도로부터 1:4 내지 1:12 사이로 분할하였다. 100μl 1x105 HT-29 세포를 배지 내 5% CO2로 가습된 분위기 챔버에서 37 ℃에서 밤새 인큐베이션했다.
EL4- NC-LIGHT 세포 (LIGHT 절단을 제한하기 위해 잔사 81 -84 없이 안정적으로 형질감염된 LIGHT를 사용하는 것을 제외하고 EL4-LIGHT 세포와 같이 제조됨)를 원심분리하고 배양 배지로 세정하고 그런 다음 세포 배양 배지에 최종농도 2.5 x106세포/ml로 재현탁시키고 100 μl (2.5 x105세포/웰)는 15분 동안 37 ℃에서 둥근바닥 96 웰 플레이트에서 100 μl/웰의 항-LIGHT 항체로 사전인큐베이션했다. HT-29 씨딩된 세포를 함유하는 96-웰 플레이트로부터의 배양 배지는 흡인되고 항-LIGHT 항체 플러스 EL4-NC-LIGHT 세포, (200 μl의 총 용적)는 HT29-세포에 첨가되고 그리고 37 ℃에서 가습된 분위기 및 5% CO2로 세포 배양 인큐베이터에서 2시간 동안 인큐베이션했다. 상청액을 회수하고 IL-8 수준을 인간 IL-8 Duo-세트 ELISA 키트 (R&D SYSTEMS)를 사용하여 결정했다. HT29 세포의 음성 대조군뿐만 아니라 HT-29 세포 플러스 TNFα (10 ng/ml) 또는 LTα1 p2 (0.5 μg/ml)의 양성 대조군을 포함했다.
DcR3과 항-막 LIGHT 항체의 경쟁 결합
DcR3 (TNFRSF6B)은 리간드 결합에 대해 수용체와 경쟁하는 유인 수용체이다. DcR3은 LIGHT에 높은 친화성으로 그리고 TL1 A 및 FasL에는 낮은 친화성으로 결합하고 중화할 수 있다 (Zhan C 등 Structure. 2011, 19:162-71 "Decoy strategies: the structure of TL1A:DcR3 complex"). 안정적으로 형질도입된 LIGHT-발현 EL4 세포 (마우스 림프종 세포주; EL4-LIGHT)를 유세포측정-기반 경쟁-결합 분석을 위해 사용하였다.
DcR3-Fc으로 검정
EL4-LIGHT 세포를 Alexa Fluor 647 접합된 DcR3-Fc (DcR3-Fc-AF647; 0.8 μg/ml) 및 단계적인 농도 (31 pg/ml 내지 128 μg/ml)의 항-막 LIGHT 항체 (3B04, 03D12 및 02B11)로 40분 동안 4 ℃에서 공동-인큐베이션하였다. 가용성 및 막 LIGHT 둘 모두에 결합하는 mAb의 대조군이 포함되었다 (EP2292663으로부터의 F19). 샘플을 3회 세정하고 유세포측정 분석을 수행하였다. 경쟁 결합의 수준을 결정하기 위해 EL4 세포 상의 LIGHT에 대한 DcR3-Fc-AF647의 결합으로부터 수득된 특이적 평균 형광 강도 (MFI)를 사용했다.
DcR3-His 태깅된 것으로 검정
EL4-LIGHT 세포 (0.25 x 106)를 15분 동안 4 ℃에서 항-막 LIGHT mAb (0-300nM)로 사전인큐베이션하고 이어서 DcR3-His 태깅된 (1 nM, Creative BioMart; ref:TNFRSF6B-552H, lot:962512) 것으로 30분 동안 4 ℃에서 인큐베이션했다. 샘플을 그런 다음 마우스항-histag 항체 (1:500 희석됨, Biolegend, cat. no.652502)로 30분 동안 4 ℃에서 인큐베이션하고, 이어서 항-마우스 APC (1:500 희석, BDBiosciences, cat. no. 550826)로 30분 동안 4 ℃에서 인큐베이션했다. 각각의 검출 항체 단계 후 튜브를 3회 세정하고 유세포측정 분석을 수행했다. 경쟁 결합의 수준을 결정하기 위해 EL4 세포 상의 LIGHT에 대한 DcR3-His의 결합으로부터 수득된 특이적 평균 형광 강도 (MFI)를 사용했다.
자극된 CD8 세포 상에 고유 LIGHT에 대한 항-막 LIGHT mAb 결합의 측정
40ml의 혈액을 정상 혈액 공여체로부터 수집하고, 세포를 다형체 프렙 (10ml) 구배인 Percoll (10ml) 상에 20ml의 혈액 (PBS에서 1:1 희석됨)을 층화함에 의해 단리를 위한 제조하였다. 구배를 500g에서 30분 동안 257 ℃에서 최소 가속으로 그리고 브레이크 없이 원심분리하였다. 단핵 세포 (MNC)는 혈액과 Percoll 사이의 계면으로부터 50ml 원뿔형 튜브 안으로 수확하고 포스페이트 완충 식염수 (PBS)를 50ml의 총 용적으로 첨가하고, 그리고 세포를 1500rpm에서 10분 동안 4 ℃에서 원심분리하였다. 상청액을 경사 분리하고 세포를 50ml PBS에서 재현탁시키고 1200rpm에서 5분 동안 4 ℃에서 다시 원심분리했다. 상청액을 경사 분리하고 세포를 1x106/ml로 10% RPMI에 재현탁했다. 100uL의 세포를 그런 다음 1 ug/ml 항-CD3으로 사전-코팅된 편평한 바닥 96-웰 플레이트의 웰들에 첨가하고 그 다음 100uL의 2ug/ml 가용성 항-CD28을 그런 다음 각 웰에 첨가했다. 플레이트는 37 ℃에서, 5% CO2에서 5일 동안 인큐베이션하고 그 다음 세포는 U-바닥 96-웰 플레이트로 이전하고 1800rpm에서 2분 동안 원심분리하여 세포를 펠릿화하고 상청액은 경사 분리했다. 세포를 그런 다음 1800rpm에서 2분 동안 원심분리에 의해 FACS 완충액에서 1회 세정하고 그 다음 30분 동안 실온에서 FACS 완충액에서 1:100 인간 Fc 블록으로 차단했다.
하기 유동 패널의 항체들이 세포의 각 웰에 첨가되었다:
TCR-PE, CD14-eVolve 605, CD8-APCe780, CD4-V450, CD19-Alexa 700, CD16-BV711, CD15-PerCPe710, CD11 b-PECy7, CD45-V500 및 APC로 표지된 항-막 LIGHT mAb (ThermoFisher, 각각 1 ug). 어둠에서 30분 동안 실온에서 인큐베이션한 후 세포를 1800rpm에서 2분 동안 FACS 완충액으로 1회 세정하고 그 다음 어둠에서 20분 동안 4 ℃에서 2% 파라포름알데하이드에 고정하고 그 다음 유동 세포측정기에서 판독하였다.
LIGHT 다형성에 대한 항-막 LIGHT mAb 결합의 측정
LIGHT SNP's에 대한 mAb의 특이성을 결정하기 위해 하기 세포주를 이용하였다: II23, II23-LIGHT 214E, II23-LIGHT 214K 및 II23-LIGHT 32L. 세포를 1x107세포/ml로 현탁하고 100uL 분취액을 96-웰 플레이트의 웰들에 배치하고, 세포를 스핀 다운하고 그리고 1800rpm에서 2분 동안 FACS 완충액에서 세정하였다. 세포를 20분 동안 실온에서 FACS 완충액 내 항-CD16/CD32 (eBioscience, 미국 샌디에고 소재)의 1:100 희석으로 차단하고 그 다음 1800rpm에서 2분 동안 FACS 완충액으로 1회 세정하였다. 세포를 그런 다음 30분 동안 어둠에서 실온에서 100uL FACS 완충액 + 4ug 항-막 LIGHT mAb 또는 항-LIGHT-PE (eBioscience, lot: E01621 -1632)에 재현탁시키고, 이어서 1800rpm에서 2분 동안 FACS 완충액에서 1회 세정하고 그 다음 4 ℃에서 어둠에서 30분 동안 100uL FACS 완충액 플러스1:100 염소 항-인간 Fcγ-PE 이차 항체 또는 무 이차 항체에서 재현탁시켰다. 세포를 다시1800rpm에서 2분 동안 FACS 완충액으로 1회 세정하고 그리고 200uL 2% 파라포름알데하이드에서 밤새 4 ℃에서 고정하고 유동 세포측정기에서 판독하였다.
가용성 및 막 LIGHT에 대한 항체 친화성의 측정
본 명세서에서 사용된 바와 같은 용어 "표면 플라즈몬 공명"은, 예를 들어 BIAcore 시스템 (GE Healthcare)을 사용하여 바이오센서 매트릭스 내의 단백질 농도에서의 변경의 검출에 의해 실시간 생체특이적 상호작용의 분석을 허용하는 광학 현상을 지칭한다. 추가의 설명은 하기 문헌을 참고한다: Jonsson, U., 등 (1993) Ann. Biol. Clin. 51:19-26; Joensson, U., 등 (1991) Biotechniques11 :620-627; Johnsson, B., 등 (1995) J. Mol. Recognit. 8:125-131; and Johnnson, B., 등 (1991) Anal. Biochem. 198:268-277.
가용성 LIGHT
염소 항-인간 Fc IgG를 통한 바이오센서 매트릭스 상에 포착된 포착 항체 (키메라 항-막 LIGHT 단클론성 항체)와 재조합 가용성 LIGHT 사이의 실시간 결합 상호작용을 제조자의 지침 및 표준절차에 따라 BIAcore 시스템(GE HEALTHCARE)을 사용하여 표면 플라즈몬 공명 (SPR)에 의해 측정하였다. 간단히, 가용성 LIGHT를 HBS 작동 완충제 (GE HEALTHCARE)에서 희석하고 분취액은 30 ul/mm의 유량으로 고정된 단백질 매트릭스를 통해 주입하였다. BIAevaluation 소프트웨어를 사용하여 결합 속도 (ka), 해리 속도 (kd) 및 친화성 (KD)을 계산하였다.
가용성 LIGHT에 대한 교차-반응성
안정한 HeLa-NF-kB 리포터 세포를 NF-kB 루시퍼라아제 리포터 (문헌 ["Discovery and characterization of 2-aminobenzimidazole derivatives as selective NOD1 inhibitors". Correa RG 등, Chemistry and Biology 2011,18:825-832]에서 기재된 바와 같음)를 함유하는 렌티바이러스 벡터로 형질도입함에 의해 생성하였다. 형질도입된 세포를 10% FBS를 갖는 DMEM에서 48시간 동안 37 ℃에서 인큐베이션하였다. 세포를 그런 다음 10% FBS를 갖는 DMEM에서 5회 세정하고 37 ℃ CO2 인큐베이터 내에서 3-4hr 동안 100μl의 10% FBS를 갖는 DMEM에서 20,000 세포/웰의 밀도로 96-웰 플레이트에서 배양하였다. 가용성 LIGHT (R&D SYSTEMS, 664-LI/CF, 74-240)는 20분 동안 4 ℃에서 완충액 또는 항체로 인큐베이션되고 그리고 100μl의 LIGHT/항체 혼합물을 세포에 첨가하고 37 ℃에서 24시간 동안 인큐베이션하였다. 배지를 제거하고 세포를 PBS로 2회 세정하였다. 50ul의 1X 수동적인 용융 완충액을 그런 다음 각 웰에 첨가하고 약한 흔들림을 30분 동안 실온에서 인큐베이션하고 이어서 50μl의 루시퍼라아제 시약을 각 웰에 첨가하였다 (프로메가 듀얼-루시퍼라아제 리포터 검정, E1960). 그런 다음 플레이트 리더 상에서 발광을 판독하였다.
에피토프 맵핑
고유한 질량 분광분석법 방법
LIGHT 단백질 (R&D SYSTEMS 664-LI-025)을 PBS 완충액에 4 μM의 최종 농도로 용해시키고, 반면에 mAb는 PBS 내에 20 μ
Figure pct00011
로 유지시켰다. 샘플은 질량 분광분석법 최적화 이전에 40 kDa의 컷-오프로 칼럼을 통해 상이한 농도에서 pH 7.4 암모늄 아세테이트 안으로 완충액 교환시켰다. LIGHT 단백질 및 항체에 대해 최대 6번 탈염 단계를 수행한, 반면에 최적의 암모늄 아세테이트 농도는 200 mM인 것으로 밝혀졌다. 샘플은 4 ℃에 저장하고 1주 이내에 사용하였다. 항체는 MS분석 이전에 1 μ
Figure pct00012
로 희석하였다. 착물 형성을 위해 LIGHT 단백질을 얼음 상에서 1:5비에서 각각의 항체를 별도로 인큐베이션하고 고유한 질량 측정을 인큐베이션 30분 후에 수행하였다. 높은 m/z 이온의 전달 및 검출에 대해 변형된 Q Exactive 하이브리드 사중극자-오비트랩 질량 분광분석기 (Thermo Fisher Scientific)를 사용하여 나노 전기분무 이온화 측정을 수행하였다. 샘플은 높은 콘 및 모세관 전압 및 고온에서 금-코팅된 모세관으로부터 전기분무되어, 고유한 올리고머의 부분적인 해리를 초래했다. 고압이 전방 광학에 적용되었고 질량 스펙트럼은 최적화된 충돌 에너지에서 기록되었다. 고해상도 측정은 35000의 분할로 수행된 반면에 낮은 해상도의 스펙트럼은 2000의 분할로 수득되었다. 데이터는 Xcaliber 소프트웨어로 분석되고 수작업으로 디콘볼류션되었다.
수소-중수소 교환 (HDX) 질량 분광분석법
LIGHT 단백질 (R&D SYSTEMS 664-LI-025)을 PBS 완충액에 8 μ
Figure pct00013
의 최종 농도로 용해시키고, 반면에 항체는 PBS 내에 20 μ
Figure pct00014
로 유지시켰다. 착물 형성을 위해 LIGHT 단백질을 얼음 상에서 1:5비에서 각각의 항체를 별도로 인큐베이션하고 HDX 측정을 인큐베이션 30분 후에 수행하였다. 모든 데이터는 HDX 플랫폼이 구비된 워터스 Synapt G2Si 상에 기록되었다. 각각의 샘플의 장입은 샘플을 저온에서 유지하기 위해 수작업으로 수행하였고, 이것은 단백질 안정성에 대해 중요한 것으로 밝혀졌다. 중수소 라벨링은 65의 중수소화된 PBS 완충액에 대해 5 μß의 샘플을 부가함에 의해 수행되고 4개 시점인, 20s, 60s, 300s 및 1800s에서 평형화되었다. 후속으로 각각의 샘플은 pH 2에서 50의 2M 구아니디늄 염화물로 켄칭하였다. 샘플을 5분 동안 펩신 칼럼을 통과시켜 단백질을 단리시키고 역상 크로마토그래피를 사용하여 펩타이드를 분리하였다. 데이터는 DynamX 소프트웨어로 분석하였다. 15개 아미노산의 최대 길이 및5ppm 질량 정확도 에러를 갖는 펩타이드를 선택하였다. 이들 필터 설정은 LIGHT 단백질에 대해 48개 고유의 펩타이드를 수득했다. 분석은 각각의 mAb에 대해 3회 반복되었다.
막 LIGHT의 알라닌 스캐닝
항체의 에피토프인 LIGHT 내에 특정 잔기 또는 영역의 확인을 위한 유용한 방법은 문헌 [Cunningham and Wells in Science, 244:1081 -1085 (1989)]에 의해 기재된 바와 같은 "알라닌 스캐닝 돌연변이유발"로 지칭된다. 여기서, 잔기 또는 표적 잔기의 그룹은 항체와 아미노산의 상호작용에 영향을 주는 중성 아미노산 (가장 바람직하게는 알라닌)에 의해 확인되고 대체된다. 치환에 대해 기능적 민감성을 입증하는 이들 아미노산 위치가 그런 다음 확인되었다.
전장 LIGHT 유전자가 GeneArt (ThermoFisher Scientific)에 의해 합성되고 포유동물 발현 벡터 pcDNA 3.1 (+) 안으로 클로닝되었다. 하기 Ala 돌연변이가 LIGHT 유전자 안으로 도입되었다: F57A로부터 E86A까지 30개 단일 아미노산 알라닌 치환; 2개 단일 아미노산 알라닌 치환; G188A, R189A; 하나의 세린 치환, A190S; 17개 단일 아미노산 알라닌 치환; T191A 내지 V207A 및 10가지 4개 아미노산 알라닌 치환, 60-63, 64-67, 68-71, 72-75, 76-79, 80-83, 84-87, 88-91, 92-95 및 96-99. DEPC-처리되고 멸균여과된 물을 사용하여 제작자 지침에 따라 작제물을 재구성하였다. 능숙한 TOP10 E. 콜리 세포를 100 ng의 각각의 작제물로 형질전환시키고 각각의 작제물로부터 단일 콜로니를 선정하고 이를 사용하여 10 mL의LB/carb100/glu2% 배지를 접종하고, 밤새 37 ℃에서, 200 rpm에서 성장시켰다. Qiagen QIAprep Spin Miniprep 키트 (250)를 사용하여 작제물DNA의 추출을 수행하고 분광측정기에서 260 nm에서 O.D.를 측정함에 의해 농도를 결정하였다.
HEK293FF 세포를 2mM L-글루타민이 보충된 Freestyle?293 발현 배지 (ThermoFisher Scientific cat. no. 12338018)에서 배양하였다. 형질감염의 날자에 세포를 0.6x106세포/웰로 24-웰 플레이트에 씨딩하였다. 리포펙타민 2000 (ThermoFisher Scientific), 3ul를 50μl OptiMEM 배지 (GIBCO)와 혼합하고 그 다음 3ug 플라스미드 DNA를 함유하는 50μl Opti-MEM 배지에 첨가하고 20분 동안 실온에서 인큐베이션하여 DNA-리포펙타민 2000 복합체를 형성하고, 이것은 그런 다음 HEK293FF 세포에 첨가되고 37 ℃에서, 5% CO2에서 24시간 동안 인큐베이션된다. 각각의 작제물에 대해, 반복하여, 0.60x106세포/웰을 96 웰 둥근 바닥 플레이트에 사용하였다. 세포를 3분 동안 300 x g에서 4 ℃에서 원심분리하고, 상청액을 버리고 그리고 세포를 150μl FACS 완충액 (포스페이트 완충 식염수 내 0.5% FBS) 세정하였다. 이 과정은 3회 반복하였다. 각각의 작제물에 대해, 1x106 세포/웰을 EC50 농도에서 항-LIGHT 항체로, 그리고 항-LIGHT mAb MAB664 (R&D SYSTEMS), mAb F19 (EP2292663) 또는 LTBR-Fc (R&D SYSTEMS)의 양성 대조군으로, 50 μl/웰의 최종 용적으로 30분 동안 4 ℃에서, 쉐이킹하면서 인큐베이션하였다. 웰들은 상기와 같이 3회 세정하였고 50 μl/웰의 염소 항-인간 IgG FITC (FACS 완충액에서 1:1500 희석, SIGMA F9512-2ML) 또는 염소 항-마우스 APC (FACS 완충액에서 1/500 희석, BDBioscience 550826)를 적절하게 웰들에 첨가하고, 쉐이킹하면서 광으로부터 보호하여 30분 동안 4 ℃에서 인큐베이션하였다. 세포는 그런 다음 상기에서와 같이 세정하고, 100 μl의 FACS 완충액에서 재현탁시키고 작제물에 대한 항체의 결합을 유세포측정을 사용하여 측정하고 각각의 샘플에 대해 총 10,000 세포를 획득하였다. 완충액 및 이차 항체 단독의 대조군뿐만 아니라 HEK293FF 비 형질감염된 세포를 또한 사용하였다.
인간화된 마우스에서의 덱스트란 설페이트 나트륨 (DSS)-유도된 급성 결장염에서 mAb 3B04 변이체 16 생체내 효능의 평가
실험은 Manfroi B 등 (Cancer Res. 2017; 77:1097-1107)에서 기재된 바와 같이 인간 제대혈로부터 단리된 CD34+ 조혈 줄기 세포가 접목된 NOD/Shi-scid/IL-2RYnull 면역결핍된 마우스 균주 (NOG)로 수행하였다. 마우스에서 인간 면역계의 재구성은 적어도 14주 동안 일어났고, 적어도 25% 인간 CD45+/총 CD45 세포를 갖는 hu-마우스를 사용하였다. 암컷 hu-NOG 마우스를 인간화 비 및 CD34+ 세포 공여체를 고려하여 3개 군 (n=10)으로 무작화시켰다. 이 연구에 기재된 모든 동물 연구는 지역 윤리 위원회 (CELEAG)에 의해 검토되고 승인되었다. 실험을 시작하기 이전 5일 동안 마우스를 실험적 환경에 순응되도록 하였다. DSS는 2일째 내지 8일째까지 7일 동안 투여하였다. DSS (3%)는 (선택적으로) 음용수에 첨가되고 2일 마다 신선한 것으로 교체되었다.
모든 치료는 DSS-유도된 결장염 전에 개시했다. 3B04 var16 (5mg/kg) 및 아이소타입 대조군과 항-TNF (휴미라) 항체 (10mg/kg)를 i.p.로 0, 3, 6, 9일째에 투여했다. 실험은 12일째에 종결하였다. 하기 파라미터를 12일 동안 매일 기록하였다: 신체 그램 중량 (g); 설사 및 대변 점조도; 출혈 및 사망률. 전반적인 임상 점수는 다음과 같이 계산되었다:
Figure pct00015
최대 누적적 전반적인 임상 점수는15이고 체중 감소가 >35%인 경우 동물을 희생시켰다.
결과
막형태의 LIGHT 마우스에 대해 편향된 면역 반응을 생성하기 위해 먼저 가용성 LIGHT에 대한 면역화로 내성화시키고 이어서 CHO 세포 상에 발현된 LIGHT로 면역화 요법에 의해 내성화시켰다. 모든 4마리의 마우스는 FACS 분석에 의해 측정된 1/4000 내지 1/39000의 인간 LIGHT 및 사이노몰구스 LIGHT 특이적 IgG 역가의 범위로 항-LIGHT 특이적 항체를 상승했다. Fab 라이브러리는 그런 다음 모든 4마리 비장으로부터 생산되었다. 총 380개 가용성 Fab를 HEK293 세포 상에 발현된 막 LIGHT에 대한 특이적 결합에 대해 시험하였다. 이들 중, 69개 Fab를 HVEM-Fc 및LTβR과 중화 검정에서 시험하기 위해 선택하였다. HEK293FF 세포 상에 발현된 LIGHT에 대해 둘 모두의 수용체 결합을 억제한 24개 중화하는 Fab를 선택하였다. 이들 24개 클론은 그런 다음 사이노몰구스 막 LIGHT에 대한 교차-반응성 및 가용성 LIGHT에 대한 반응성에 대해 시험하였다. 막 LIGHT에 대한 선택성의 원하는 특성을 가지고, 막 LIGHT에 대한 HVEM 및 LTBR 결합을 중화하고 그리고 사이노몰구스 막 LIGHT 교차-반응성인 7개 항-막 Fab를 단리하였다. 이들 Fab는 추가의 시험을 하기 위해 키메라 lgG4 mAb 안으로 전환되었다.
인간 및 사이노몰구스 LIGHT 둘 모두에 대한 mAb의 교차-반응성을 비교하기 위해, 대략 50%의 세포 발현된 LIGHT 및 결합된 mAb가 염소 항-인간 IgG FITC로 검출된 일시적으로 형질감염된 인간 또는 사이노몰구스 LIGHT-HEK293FF 세포를 이용하였다. 각각의 mAb의 EC50은 비형질감염된 세포에 대한 배경 결합에 대한 보정 후 표 6에 묘사되어 있다. (수용체 점유와 반응 사이의 관계가 선형인 경우, EC50은 KD에 동등하거나 또는 실질적으로 동등할 수 있다는 것에 주의한다).
표 6. 인간 및 사이노몰구스 막 LIGHT에 대한 mAb의 교차 반응성.
Figure pct00016
7개 항-막 LIGHT mAb가 안정한 인간 LIGHT 발현 세포주 EL4-LIGHT에는 결합하지만, 친계 EL4 세포에는 결합하지 않는 것으로 나타났다. 7개 mAb의 EC50은 EL4-LIGHT 세포에 대한 결합으로부터 계산되었다 (도 1). 이들 항-LIGHT 항체 중 6개의 결합은 포화에 도달하였고 각각의 항체의 기능적 평형 결합 친화도는 EL4-LIGHT 세포를 표지하는데 필요한 항체의 양을 적정함에 의해 결정되었다. 비-선형 회귀 분석을 수행하여 각각의 mAb에 대한 기능적 결합 친화도 측정 또는 EC50을 결정하였다. 기능적 친화성의 범위를 관측하였다.
표 7. EL4 세포 상에 안정적으로 발현된 LIGHT에 대한 7개 리드 mAb의 EC50 계산.
Figure pct00017
생리적 및 질환 농도로 가용성 LIGHT를 결합하는 항-막 LIGHT mAb의 능력이 도 1 B에 묘사되어 있다. 루시퍼라아제 리포터 검정으로 커플링된 LTBR을 발현하는 HeLa 세포를 사용하여 가용성 LIGHT 신호전달의 활성을 측정하였다. 가용성 LIGHT의 생리적 농도 (25 또는 75pg/ml)에서 항-막 LIGHT mAb 3B04 및 3D12는 가용성 LIGHT 활성을 억제하지 않았다. 이에 반해 가용성 LIGHT 및 막 LIGHT를 동등하게 결합하는 항-LIGHT mAb, F19, (EP2292663으로부터 lgG4 mAb)는 가용성 LIGHT 신호전달을 매우 완전히 억제했다. 가용성 LIGHT의 질환 농도 (150, 300 또는 500pg/ml)에서 항-막 LIGHT mAb 3B04 및 3D12은 0.5 및 1 ug/ml에서 가용성 LIGHT 신호전달을 억제하지 않았다 (도 1 B에 도시된 500pg/ml 가용성 LIGHT에 대한 데이터). 이에 반해 가용성 LIGHT 반응성 mAb인, F19는 가용성 LIGHT 유도된 루시퍼라아제를 억제했다. 또한, 검정에서 과잉의 mAb를 사용하여, 17X 또는 34X는 mAb의 EC50보다 더 높고 (표 6, 3B04 및 3D12, 및 F19에 대한 2.5nM) 항-막 LIGHT mAb 3B04 및 3D12는 가용성 LIGHT 신호전달에 대한 효과가 없었다. 이들 결과는 본 발명의 mAb인, 3B04 및 3D12는 가용성 LIGHT의 생리적 및 질환 수준에서 막 LIGHT에 특이적이다는 것을 나타낸다.
가용성 LIGHT에 대한 2개의 리드 항-막 LIGHT mAb의 특이성은 BIAcore 분석에 의해 결정되고 (표 9를 초래하는) 표 7에서의 EC50 값으로부터 계산된 KD에 비교되었다. 간단히 말해서, mAb 3D12, 3B04는 가용성 및 막 LIGHT, F19, (EP2292663으로부터의 F19 lgG4 mAb) 양자에 결합하는 mAb에 비교되었다. 무관한 항-HEL mAb인, 2A11은 음성 대조군으로 사용되었다. mAb는 항-인간 Fc mAb 코팅된 칩 상에 포착되고 가용성 LIGHT는 표면 위로 통과하고 BIAcore 3000 소프트웨어를 사용하여 동력학 파라미터가 계산되었다. 아미노산 74-240 LIGHT (R&D SYSTEMS, 664-LI-025) 및 64-240 LIGHT (Abcam, ab82123)가 가용성 LIGHT 제조에 사용되었다. 결과는 표 8에 묘사되어 있다.
표 8. BIAcore 분석으로부터 가용성 LIGHT에 대한 mAb 결합의 반응속도 상수
Figure pct00018
표 9로부터 알 수 있는 바와 같이 F19 mAb는 2.3-5.4nM의 KD로, 동등한 정도로 가용성 및 막 LIGHT를 결합한다 (이 mAb는 가용성 LIGHT로 면역화에 의해 상승되었다). 본 발명의 리드 mAb는 적어도 50 내지 100-배 특이성으로 막 LIGHT에 우선적으로 결합한다.
표 9. 막 LIGHT에 대한 mAb 결합의 KD 비교
Figure pct00019
유세포측정 기반 검정을 사용하여 LIGHT 발현된 세포 표면에 대해 바이오틴-HVEM:Fc및 바이오틴-LTβR:Fc 융합 단백질을 차단하는 7개 키메라 mAb의 능력이 각각 도 2A 및 2B에 도시되어 있다. 이들 실험에서, 각각의 항체의 단계적인 양이 수용체 융합 단백질의 50% 포화 양으로 HEK293FF 세포에 첨가되었다. 나타낸 바와 같이, 각각의 항체는 어느 하나의 Fc-수용체 결합에 대해 효과가 없는 무관한 항체 대조군에 대조적으로 어느 하나의 수용체 융합 단백질이 LIGHT를 결합하는 것을 차단했다. 각각의 실험에서, 모든 항체는 표 10A에서 나타낸 바와 같이 IC50 용량을 결정하는 비-선형 회귀에 의한 분석을 가능하게 하는 용량 의존 방식으로 수용체 결합을 차단했다.
표 10A HEK293FF 세포 상에 일시적으로 발현된 막 LIGHT에 대한 HVEM 및 LTβR 결합의 mAb 억제에 대한 IC50 용량.
Figure pct00020
상기 실험은 EL4-세포 상에 안정적으로 발현된 LIGHT를 사용하여 반복하였고 결과는 표 10B에 묘사되었다.
표 10B EL4-LIGHT 세포 상에 안정적으로 발현된 막 LIGHT에 대한 HVEM 및 LTβR 결합의 억제에 대한 IC50 용량.
Figure pct00021
LIGHT가 HEK293FF 세포 상에 일시적으로 발현될 때 대략 50%의 세포가 LIGHT를 발현하여 IC50을 계산하는데 잠정적인 가변성 및 부정확성을 초래한다. 표 10B는 안정적으로 발현된 EL4-LIGHT 세포에서의 IC50 값을 반영하고 동일한 세포에서 계산된 EC50 값 (표 7)과 상관된다. (경쟁 세포 기반 검정 및 EC50 결정이 4 ℃에서 수행되기 때문에 막 LIGHT는 안정하고 내인성 프로테아제로부터 절단에 기인하여 가용성 LIGHT는 방출되지 않는다).
본 발명의 길항적 항-막 LIGHT 항체가 막 LIGHT-매개된 자극을 차단한다는 것을 직접적으로 결정하기 위해, 시험관내 막 LIGHT-매개된 신호전달을 측정하는 검정이 확립되었다. LTβR및 HVEM 둘 모두를 발현하는 세포주 HT29는 LIGHT를 발현하는 고정된 수의 CHO K1 세포로 처리되고 6h 시간경과에 걸쳐 분비된 IL-8의 존재에 대해 성장 배지가 분석되었다. TNF는 TNF 수용체를 통한 IL-8 유도에 대해 양성 대조군으로 사용된 반면, 림프독소는 LTβR을 통한 신호전달에 대해 양성 대조군으로 사용되었다. 세포를 LIGHT와 접촉함에 의해 생산된 IL-8의 수준은 TNF 또는 림프독소에 의해 생산된 것들과 동등하였다. 도 3에서 볼 수 있듯이 10 nM의 단일 농도에서 시험된 모든 mAb는 IL-8 분비를 억제했다.
37 ℃에서 6 시간 배양 기간 동안 CHO K1 -LIGHT 세포가 막 LIGHT의 내인성 효소적 클리핑을 통해 가용성 LIGHT를 생산할 수 있다는 것이 발견되었다. 이 상황에서 막 LIGHT 및 가용성 LIGHT 둘 모두는 이 검정에서 HT-29 세포 상에 발현된 HVEM 및 LTBR에 대해 경쟁한다. 본 발명의 mAb가 선택적으로 단지 막 LIGHT를 억제하기 때문에 그 다음 부분적인 억제가 도 3에서 분명한 바와 같이 관측될 것이다. 이 제한을 극복하기 위해 막 LIGHT의 내인성 효소적 절단에 보다 저항성인 EL4-NC-LIGHT 세포가 제조되었다. 37 ℃에서 EL4-NC-LIGHT 세포의 2시간 인큐베이션을 이용하여 가용성 LIGHT는 이 기간 동안 검출되지 않았다는 것을 드러냈다. 따라서, 2h 동안 37 ℃에서 본 발명의 mAb의 존재에서 EL4-NC- LIGHT 세포 및 HT-29 세포를 인큐베이팅하는 것은 막 형태의 LIGHT 신호전달의 억제만을 검출하는 것을 초래할 것이다. mAb의 IC50은 EL4-NC-LIGHT 세포를 이용하여 표11에 나타나 있다.
표 11 EL4-NC-LIGHT 세포에서 안정적으로 발현된 막 LIGHT에 의해 자극된 HT-29 세포로부터 IL-8 분비의 mAb 억제에 대한 IC50 용량
Figure pct00022
HT-29 세포에 존재하는 HVEM 및 LTBR 신호전달 (IL-8 방출)의 막 LIGHT 자극을 억제하는 본 발명의 mAb에 대한 IC50 값은 EC50 (표 7) 및 EL4-LIGHT 세포에 대한 LTBR/HVEM 결합의 IC50 억제 (표 10B)와 다시 밀접하게 상관된다.
이 세포 반응 검정은 막 LIGHT 신호전달을 측정하고 시험관내 막 LIGHT-매개된 신호전달 사건을 차단하는 본 개시내용의 항체의 수용력을 평가하기 위해 사용된다. 다른 세포 상에 그것의 동족 수용체에 결합하는 세포 표면 LIGHT에 의해 개시된 신호전달은 소화관, 비장 또는 림프절에서 기질 또는 상피성 기원의 세포 상에 발현된 LTβR을 통해 증가된 IL-8 생산 또는 HVEM 상호작용을 통해 관측된 T 세포 공통자극 활성을 발현하는데 중요할 수 있다고 여겨진다.
인간에서, LIGHT는 LIGHT (가용성 및 막 형태 둘 모두)에 단단히 결합하고 HVEM 및LTβR과의 그것의 상호작용을 억제하는 TNFR 상과의 고유의 가용성 구성원인 DcR3에 의해 중화된다. DcR3 중화에 결정적인 주요한 결합은 LIGHT 상의 영역 T170-E178이다 (Liu 등 Structure 2014: 9; 1252-1262). (EP2292663으로부터의) mAb F19는 LIGHT에 결합하는 DcR3을 완전히 억제하여 (도 4) mAb F19가 DcR3과 유사한 또는 중첩 에피토프를 갖는다는 것을 나타낸다. EL4 세포 상에 안정적으로 발현된 LIGHT에 결합하는 DcR3과 경쟁하는 항-LIGHT mAb의 능력이 도 4에 묘사되어 있다. 본 발명의 항-막 mAb (특히 3D12, 3B04, 및 2B11) 만이 막 LIGHT에 결합하는 DcR3을 부분적으로 억제한다. 가용성 LIGHT 및 막 LIGHT 둘 모두에 동등하게 결합하는 항-LIGHT mAb (EP2292663으로부터의 F19)는 막 LIGHT에 대한 결합으로부터 DcR3을 아주 완전히 대체한다.
이 검정은 단백질의 보다 고유한 배치형태를 나타낼 수 있는 DcR3-His 태깅된 변이체 (DcR3-Fc 융합 단백질 대신)를 이용하여 반복되었다 (표 12). 본 발명의 mAb (3B04, 3D12, 2E08, 3A07, 3C10, 2B11및 3E09) 만이 최대 100nM에서 LIGHT의 천연 가용성 억제제인, DcR3을 막 LIGHT에 결합하는 것을 부분적으로 억제한다. 이에 반해 가용성 LIGHT 및 막 LIGHT 둘 모두에 동등하게 결합하는 (EP2292663으로부터의) 항-LIGHT mAb F19는 막 LIGHT에 대한 결합으로부터 DcR3을 아주 완전히 대체하여 가용성 LIGHT에 대해 상승되거나 또는 선별된 본 발명의 항-막 LIGHT mAb와 다른 항-LIGHT mAb 사이의 놀라운 중요한 기능적 차이를 강조한다.
표 12. 막 LIGHT (EL4-LIGHT) 세포에 대하여 결합하는 것에 대한 DcR3-His에 대항한 항-막 LIGHT mAb 3B04, 3D12, 2E08, 3A07, 3C10, 2B11및 3E09의 경쟁 결합. 비교를 위해 EP2292663으로부터의 mAb F19가 포함되어 있다. 결과는 무관한 (Irr, 항-HEL) mAb의 평균 결합의 백분율로 표현되어 있다.
Figure pct00023
이 결과의 의미는 두 가지이다. 먼저, 본 발명의 mAb 만이 막 LIGHT와 내인성 LIGHT 억제제인, DcR3과 부분적으로 경쟁한다는 것. 두 번째로, DcR3은 헤파란설페이트 프로테오글리칸과 상호작용을 통해 세포에 결합하는 세포 유착 단백질이다 (Y-C Chang 등 J. Immunol. 2006: 176; 173-180). 이 기전을 통해 DcR3은 활성화된 면역 세포로부터 프로테아제 절단에 의해 방출된 가용성 LIGHT에 대한 데포일 수 있다. 가용성 LIGHT에 결합하는 mAb 또는 수용체 융합 (LTBR-lg)은 경쟁 결합을 통해 DcR3으로부터의 가용성 LIGHT를 대체할 수 있다. 사실상, 증가된 수준의 가용성 LIGHT가 LTBR-lg (Bienkowska J 등 PLoS ONE 9: e112545) 또는 항-LIGHT mAb (Zhang M 등 Clin Pharmacol Drug Dev. 2017; 6:292-301)로 처리된 연구에서 보고되었다. 가용성 LIGHT에 결합하고 및/또는 가용성 LIGHT에 대해 DcR3과 경쟁하는 제제로의 장기간 치료는 유해할 수 있다. 본 발명의 mAb (3B04, 3D12, 2E08, 3A07, 3C10, 2B11 및 3E09) 만이 DcR3에 대한 결합으로부터 막 LIGHT를 부분적으로 억제하고, 부가하여 막 LIGHT보다 가용성 LIGHT에 >100 배 덜 특이적이고 그리고 따라서 생체내에서 DcR3으로부터 가용성 LIGHT를 대체할 것으로 기대되지 않는다.
본 발명의 mAb가 공여체 세포 상에 발현된 고유한 LIGHT에 결합하는 것을 결정하기 위해, CD8 T 세포가 항-CD3 및 항-CD8로 자극되었고 결합이 유세포측정에 의해 평가되었다 (도 5). 각각의 히스토그램은 지시된 항체로 염색된 자극된 세포, 무관한 항체 2A11로 염색된 자극된 세포, 및 지시된 항체로 염색된 비자극된 세포를 나타낸다. 모든 7개 항-막 LIGHT mAb는 CD8 세포에 특이적으로 결합했다. 동일한 실험에서 모든 7개 항-막 LIGHT mAb에 대한 양성 결합이 자극된 CD4 세포, 중성구, 단핵구 및 대식세포에서 또한 관측되었다.
LIGHT의 단일 뉴클레오타이드 다형성 (SNP) 변이체에 결합하는 항체
적어도 3개 비-동의 단일 뉴클레오타이드 다형성 (SNP) 변이체가 인간 LIGHT에 대해 존재한다. 하나의 SNP 변이체는 아미노산 위치 214에서 글루탐산 (E) 또는 라이신 (K) 중 어느 하나를 인코딩하고, 다른 SNP 변이체는 아미노산 위치 32에서 세린 (S) 또는 류신 (L) 중 어느 하나를 인코딩한다. 다양한 종의 모집단에 걸친 각각의 SNP 변이체의 대립유전자 빈도는 다양하고, 따라서, 주어진 SNP 변이체에 결합하는 항-막 LIGHT 항체는 주어진 SNP 변이체의 더 높은 발병률을 갖는 이들 종의 모집단에서 이들의 LIGHT-매개된 질환, 또는 증상의 치료 또는 예방에 보다 유효할 수 있다.
이 실시예에서 (도 6), 본 명세서에서 제공된 항-막 LIGHT 항체는 LIGHT 세포외 및 세포질 도메인에 존재하는 비-동의 LIGHT SNP 변이체를 결합하는 것으로 나타났다. 실험은 각각의 LIGHT SNP 변이체 상의 각각의 mAb로 3회 반복되었다. 무관한 항-HEL mAb가 음성 대조군으로 사용되었고 상업적 항-LIGHT mAb는 양성 대조군으로 사용되었다. mAbs 3C10, 3B04, 3A07, 3D12 및 2B11은 모든 LIGHT SNP 변이체를 아주 동등하게 결합했다. mAb 2E08 및 3E09은 E214 SNP에 대한 보다 낮은 결합을 나타냈다.
인간화된 3B04 및 3D12 lgG4 mAb의 분석
mAb 3B04 및 3D12의 인간화된 및 탈면역화된 변이체의 서열이 도 9 및 10에 묘사되어 있다. 3B04 및 3D12의 모든 16개 변이체가 인간 lgG4 (S241 P 및 L248E, Kabat)으로 제조되었고 2개의 검정인; EL4 세포 상에 안정적으로 발현된 LIGHT에 대해 결합하는 mAb의 EC50 분석 및 막 LIGHT에 의해 자극된 HT-29 세포 (EL4-NC-LIGHT 세포)로부터 IL-8 분비의 mAb 억제에 대한 IC50 계산에서 시험되었다. 분석 결과는 표 13에 나타나 있다.
표 13 - 도 9 및 10으로부터 3B04 및 3D12 (lgG4)의 16개 인간화된 및 탈면역화된 변이체에 대한 EC50 및 IC50 값
Figure pct00024
모든 3B04 변이체 및 모든 3D12 변이체는 HT-29 세포로부터 막 LIGHT 자극된 IL-8 분비의 억제에 대한 IC50과 막 LIGHT에 결합하는 EC50의 관점에서 유사한 활성을 가진다. 또한, 모든 3B04 변이체 및 모든 3D12 변이체는 모 키메라 항체에 대해 동등한 활성을 가진다 (표 13). 막 LIGHT에 결합하는 LTBR-Fc 또는 HVEM-Fc에 대한 인간화된 mAb와 경쟁 검정은 또한 3B04 및 3D12의 모든 변이체에 대해 유사한 억제와 모 키메라 mAb에 대해 동등한 활성을 제공했다.
질량 분광분석법에 의한 LIGHT에 결합된 mAb의 결합 비
고유한 질량 분광법을 이용하여 고유한 삼량체 LIGHT에 결합된 mAb의 비를 결정하였다. 3B04_ (lgG4)의 측정된 질량은 147256 ± 0.7 Da이었고 F19 항-LIGHT mAb (EP2292663으로부터 lgG4 mAb)는 147364 ± 6.6 Da이었다. 단클론성 항체와 달리 LIGHT 단백질은 번역후 당화에 기인하여 기대된 대로 극히 불균질하였다. 가벼운 단백질 중 2개의 주요한 모집단은 68 kDa 및 71 kDa의 측정된 질량을 갖는 것으로 기록되었다. 양자의 이들 다변형태는 62827.38 Da인 단백질의 이론적 삼량체 질량보다 질량이 더 높다. 첨가된 질량 값은 상이한 글리칸에 기인하여 각각 단량체당 2000 Da 및 3002 Da이다. LIGHT는 각각의 항체와 1:5몰비 (단백질 :항체)로 인큐베이션되어 LIGHT-항체 복합체를 형성하였다. F19 mAb로 LIGHT의 인큐베이션은 하나의 LIGHT 단백질 및 3개의 F19 항체의 화학양론 (504370 ± 57 Da)을 갖는 큰 복합체의 형성을 초래하여, (가용성 및 막 LIGHT에 동등하게 결합하는) F19 mAb가 삼량체에서 LIGHT 중 하나의 카피에 결합한다는 것을 나타낸다 (즉 3:1 비). 3B04와 결합하는 LIGHT의 경우에 있어서, 화학양론은 하나의 LIGHT 단백질 당 하나의 항체에 배정될 수 있다 (219630 ± 221 Da 및 216960 ± 380의 질량이 기록되었다).
유세포측정에 의한 막 LIGHT에 결합된 mAb의 결합 비
도11은 EL4 세포 상에 안정적으로 발현된 LIGHT에 결합하는 항-막 LIGHT mAb (3B04 및 3D12)의 유세포측정 분석을 묘사한다. 막 LIGHT에 결합하는 lgG4 mAb 3B04 및 3D12의 최대 신호는 대략 40000 MFI이다. 이에 반하여 항-LIGHT mAb F19 및 F23 (EP2292663으로부터 lgG4 mAb)은 대략 120000 MFI의 최대 신호를 제공하였다. mAb F19 및 mAb F23의 결합의 비는 항-막LIGHT mAb 3B04 및 3D12의 것에 대략 3배이다. 이 데이터는 mAbs 3B04 및 3D12가 1:1비로 막 LIGHT를 결합하고, 3:1 비로 LIGHT에 결합하는 막 및 가용성 LIGHT 둘 모두에 결합하는 다른항-LIGHT mAb에 직접적으로 대비된다는 것을 입증한다. 본 발명의 다른 mAb; 2E08, 3A07, 3C10, 3E09 및 2B11도 또한 유세포측정에 의해 mAb F19 및 F23에 비교될 때 1:1비로 LIGHT를 결합한다.
수소 중수소 교환 ( HDX ) HDX 질량 분광분석법으로부터 에피토프 확인
HDX는 LIGHT 단백질에 결합하는 항체 3B04의 에피토프를 동정하기 위한 개시점으로 사용되었다. LIGHT 단백질 중 69.2%의 서열 적용범위가 달성되었고 관측되지 않은 영역은 디설페이트 결합 및 당화의 존재에 기인하였다. 글리칸은 원 상태로 단백질의 구조를 보전하기 위해 LIGHT로부터 제거되지 않았다. 총 50개 펩타이드 및 이들 펩타이드 중 48개에서 초래된 LIGHT의 소화가 분석을 위해 사용되었다 (LIGHT의 잔기 84-238을 커버함). 표 14에서의 데이터는 3중으로 4개 시점으로부터의 것이고 48개 LIGHT 펩타이드의 5개 결과 및 mAb 3B04 및 대조군 mAb의 존재에서 중수소의 흡수를 나타낸다. 3B04와 대조군 mAb 사이의 흡수에서의 유의차가 없다는 것을 입증하는 펩타이드 203-209 및 203-219가 도시되어 있다. 다른 43개 펩타이드도 또한 중수소의 존재 또는 부재에서 mAb 3B04의 흡수에서의 차이를 나타내지 않았다 (데이터 도시되지 않음). LIGHT 및 중수소화된 LIGHT에 결합하는 mAb 3B04를 비교함에 의해 3B04는 특히 아미노산 R195, V196 및 W197에서 보다 낮은 흡수를 초래했다는 것이 관측되었다. (3B04와 대조군 mAb 사이의 흡수에서의 차이, 표 14, 굵게 표시된 값). HDX에 의해 정의된 mAb 3B04의 에피토프는 가용성 LIGHT의 잔사 195-197에 집중되었다. HDX 분광분석법으로부터의 결과는 알라닌 스캐닝을 사용하여 후속으로 분석된 관심 있는 영역을 동정하기 위한 지표로 사용되었다.
표 14. mAb 3B04 (n= 3)으로 인큐베이션 후 LIGHT 펩타이드의 평균 중수소 흡수 및 대조군 mAb에 비교된 흡수에서의 차이
Figure pct00025
알라닌 스캐닝 돌연변이유발 및 유세포측정에 의한 에피토프 확인
HDX 질량 분광분석법으로부터의 결과는 195-197 에피토프뿐만 아니라 HDX에 의해 커버되지 않은 펩타이드 (예를 들어 LIGHT의 아미노산 188-193)를 포함한 알라닌 스캐닝 돌연변이유발을 위한 펩타이드를 디자인하는데 보조되었다. 또한, 이 방법론은 고유한 막 LIGHT에서 에피토프를 정의하기 위해 사용될 수 있다.
HEK293 세포 안으로 형질감염된 전장 LIGHT 안으로 알라닌 돌연변이를 도입한 결과는 F57A로부터 E86A까지의 30개 단일 아미노산 알라닌 치환 및 10가지 4개의 아미노산 알라닌 치환, 60-63, 64-67, 68-71, 72-75, 76-79, 80-83, 84-87, 88-91, 92-95 및 96-99는 본 발명와 mAb 3B04 및 3D12와 WT LIGHT 대조군 사이의 결합에 있어서의 차이를 생성하지 않았다는 것을 밝혔다. 또한, LTBR-Fc는 또한 상기 알라닌 치환 LIGHT 작제물과 WT LIGHT 사이의 결합에 있어서의 차이를 나타내지 않았다. 이것은 mAb 3B04 및 3D12의 에피토프는 LIGHT 아미노산 57-99의 영역에 있지 않다는 것을 나타낸다. 2개의 단일 아미노산 알라닌 치환; G188A, R189A; 하나의 세린 치환, A190S 및 17개의 단일 아미노산 알라닌 치환; T191A 내지 V207A는 본 발명의 mAb에 의해 인식된 에피토프의 확인을 초래했고 결과는 표 15에 제시되어 있다. 잔사 D199A 내지 V207A에서 알라닌 치환을 이용한 WT 대조군에 비교하여 본 발명의 mAb들 간의 결합에 있어서의 차이는 없었고 이들 결과는 도시되지 않았다. 또한, LTBR-Fc는 WT LIGHT에 비교하여 아미노산 치환 G188A 내지 V207A에 대한 결합에 있어서의 차이는 없어, 아미노산 치환이 그것의 수용체 LTBR에 결합하는 LIGHT를 손상시키지 않았다는 것을 나타낸다. WT 대조군에 대비하여 결합에서 상당한 감소를 나타내고 표 15에서 굵은 글씨로 강조된 이들 치환. 본 발명의 모든mAb는 그것의 에피토프가 LIGHT의 아미노산 188-197에 위치한다는 점에서 유사한 프로파일을 나타낸다. LIGHT에서 A190S, S192A 및 V196A의 보존적 치환은 WT 대조군에 비교하여 mAb의 결합에 있어서의 차이를 나타내지 않았다. 알라닌 스캐닝 돌연변이유발에 의해 정의된 본 발명의 mAb의 에피토프는 LIGHT의 잔사 188-197이다. 이것은 Liu 등 (Structure 22: 1252-62; 2014)으로부터의 LIGHT의 결정 구조로부터 LIGHT 삼량체의 3D 시각화를 이용하여 도 12에 시각적으로 묘사되어 있다. 이것은 LIGHT 삼량체의 "선단"에 결합하는 mAb를 초래할 것이고 1:1 결합을 설명한다. 이 에피토프의 영향은, 예를 들어, 가용성 및 막 LIGHT 둘 모두에 동등하게 결합하고, 비 3:1로 LIGHT를 결합하는 mAbs F19 및 F23 (EP2292663의 것)에 비교될 때 막 LIGHT를 중화하기 위해 요구되는 mAb 3B04의 33.3% 낮은 투약을 초래할 것이다.
표 15. 야생형 (WT) 막 LIGHT 및 잔사 G188A 내지 W198A에서 돌연변이유발을 포괄하는 막 LIGHT에 대한 mAbs 3B04, 3D12, 2E08, 3A07, 3C10, 2B11및 3E09의 결합. WT LIGHT에 대한 결합은 100%로 묘사되고 다른 LIGHT 작제물에 대한 결합은 WT 결합의 백분율로 나타나 있다. 굵은 글씨로 된 작제물은 WT에 비교하여 결합에서 상당한 감소를 보였다.
Figure pct00026
mAb 3B04 var16의 생체내 효능
항-막 LIGHT mAb 3B04 var16의 생체내 효능이 hu-NOG 마우스에서의 DSS-유도된 결장염 모델에서 시험되었다 (도 13). 이 모델에서 양성 대조군인, 휴미라 (항-TNF)는 일반적으로 IgG 대조군에 비교하여 9 내지 11일 째에 전반적인 임상 점수에서의 상당한 하락을 유도한다. 놀라운 것은 mAb 3B04 var16이 IgG 및 휴미라 대조군에 대비하여 이 모델에서 2일 빨리 전반적인 임상 점수에서의 상당한 (p<0.05) 감소를 유도했다는 것이다. 3B04 var16은 실험적 프로토콜 전반에 걸쳐 지속된 질환 퇴행의 빠른 조기 발현을 유도했다. 3B04 var16의 효과는 또한 이 모델에서 항-TNF 양성 대조군에 대해 상당히 우월하였다 (p<0.05). 적어도 3B04, 3D12, 3B04_var1, 3B04_var2, 3B04_var3, 3B04_var4, 3B04_var5, 3B04_var6, 3B04_var7, 3B04_var8, 3B04_var9, 3B04_var10, 3B04_var11, 3B04_var12, 3B04_var13, 3B04_var14, 3B04_var15, 3D12_var1, 3D12_var2, 3D12_var3, 3D12_var4, 3D12_var5, 3D12_var6, 3D12_var7, 3D12_var8, 3D12_var9, 3D12_var10, 3D12_var11, 3D12_var12, 3D12_var13, 3D12_var14, 3D12_var15 및 3D12_var16의 투여는 hu-NOG 마우스에서의 DSS-유도된 결장염 모델에서 전반적인 임상 점수에서의 유사하게 상당한 (p<0.05) 감소를 초래하는 것이 기대된다.
절
본 발명은 본 발명의 다른 특징 및 양태와 조합될 수 있는 넘버링된 절에서 열거된 하기 구현예를 추가로 제공한다:
1. 하기를 포함하는 항-LIGHT 항원 결합 분자:
서열번호 8, 16, 24, 32, 40, 48, 56, 64, 72, 80, 88, 96, 104, 112 및 120 중 임의의 하나의 아미노산 서열에 대해 적어도 80% 동일성을 갖는 VHCDR3; 및/또는
서열번호 4, 12, 20, 28, 36, 44, 52, 60, 68, 76, 84, 92, 100, 108, 및 116 중 임의의 하나의 아미노산 서열에 대해 적어도 80% 동일성을 갖는 VLCDR3.
2. 하기를 포함하는 절 1의 항-LIGHT 항원 결합 분자:
서열번호 8, 16, 24, 32, 40, 48, 56, 64, 72, 80, 88, 96, 104, 112 및 120 중 임의의 하나의 아미노선 서열에 대해 적어도 85%, 90%, 91 %, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98% 또는 99% 동일성을 갖는 VHCDR3; 및/또는
서열번호 4, 12, 20, 28, 36, 44, 52, 60, 68, 76, 84, 92, 100, 108, 및 116 중 임의의 하나의 아미노산 서열에 대해 적어도 85%, 90%, 91 %, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98% 또는 99% 동일성을 갖는 VLCDR3.
3. 하기를 포함하는 절 1의 항-LIGHT 항원 결합 분자:
서열번호 8, 16, 24, 32, 40, 48, 56, 64, 72, 80, 88, 96, 104, 112 및 120 중 임의의 하나의 아미노산 서열을 포함하는 VHCDR3; 및/또는
서열번호 4, 12, 20, 28, 36, 44, 52, 60, 68, 76, 84, 92, 100, 108, 및 116 중 임의의 하나의 아미노산 서열을 포함하는 VLCDR3.
4. 하기를 포함하는, 절 1 내지 3 중 임의의 하나의 항-LIGHT 항원 결합 분자:
서열번호 6, 14, 22, 30, 38, 46, 54, 62, 70, 78, 86, 94, 102, 110, 118 중 임의의 하나의 아미노산 서열에 대해 적어도 80% 동일성을 갖는 VHCDR1;
서열번호 7, 15, 23, 31, 39, 47, 55, 63, 71, 79, 87, 95, 103, 111, 119 중 임의의 하나의 아미노산 서열에 대해 적어도 80% 동일성을 갖는 VHCDR2; 및
서열번호 8, 16, 24, 32, 40, 48, 56, 64, 72, 80, 88, 96, 104, 112 및 120 중 임의의 하나의 아미노산 서열에 대해 적어도 80% 동일성을 갖는 VHCDR3;
및/또는
서열번호 2, 10, 18, 26, 34, 42, 50, 58, 66, 74, 82, 90, 98, 106, 114 중 임의의 하나의 아미노산 서열에 대해 적어도 80% 동일성을 갖는 VLCDR1;
서열번호; 3, 11, 19, 27, 35, 43, 51, 59, 67, 75, 83, 91, 99, 107, 115 중 임의의 하나의 아미노산 서열에 대해 적어도 80% 동일성을 갖는 VLCDR2; 및
서열번호 4, 12, 20, 28, 36, 44, 52, 60, 68, 76, 84, 92, 100, 108, 및 116 중 임의의 하나의 아미노산 서열에 대해 적어도 80% 동일성을 갖는 VLCDR3.
5. 하기를 포함하는, 절 1 내지 4 중 임의의 하나의 항-LIGHT 항원 결합 분자:
서열번호 6, 14, 22, 30, 38, 46, 54, 62, 70, 78, 86, 94, 102, 110, 118 중 임의의 하나의 아미노산 서열에 대해 적어도 85%, 90%, 91 %, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98% 또는 99% 동일성을 갖는 VHCDR1;
서열번호 7, 15, 23, 31, 39, 47, 55, 63, 71, 79, 87, 95, 103, 111, 119 중 임의의 하나의 아미노산 서열에 대해 적어도 85%, 90%, 91 %, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98% 또는 99% 동일성을 갖는 VHCDR2; 및
서열번호 8, 16, 24, 32, 40, 48, 56, 64, 72, 80, 88, 96, 104, 112 및 120 중 임의의 하나의 아미노선 서열에 대해 적어도 85%, 90%, 91 %, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98% 또는 99% 동일성을 갖는 VHCDR3;
및/또는
서열번호 2, 10, 18, 26, 34, 42, 50, 58, 66, 74, 82, 90, 98, 106, 114 중 임의의 하나의 아미노산 서열에 대해 적어도 85%, 90%, 91 %, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98% 또는 99% 동일성을 갖는 VLCDR1;
서열번호; 3, 11, 19, 27, 35, 43, 51, 59, 67, 75, 83, 91, 99, 107, 115 중 임의의 하나의 아미노산 서열에 대해 적어도 85%, 90%, 91 %, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98% 또는 99% 동일성을 갖는 VLCDR2; 및
서열번호 4, 12, 20, 28, 36, 44, 52, 60, 68, 76, 84, 92, 100, 108, 및 116 중 임의의 하나의 아미노산 서열에 대해 적어도 85%, 90%, 91 %, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98% 또는 99% 동일성을 갖는 VLCDR3.
6. 절 1 내지 5 중 임의의 하나의 항-LIGHT 항원 결합 분자로서, 상기 분자는 하기를 포함한다:
서열번호 6, 14, 22, 30, 38, 46, 54, 62, 70, 78, 86, 94, 102, 110, 118 중 임의의 하나의 아미노산 서열을 포함하는 VHCDR1;
서열번호 7, 15, 23, 31, 39, 47, 55, 63, 71, 79, 87, 95, 103, 111, 119 중 임의의 하나의 아미노산 서열을 포함하는 VHCDR2; 및
서열번호 8, 16, 24, 32, 40, 48, 56, 64, 72, 80, 88, 96, 104, 112 및 120 중 임의의 하나의 아미노산 서열을 포함하는 VHCDR3;
및/또는
서열번호 2, 10, 18, 26, 34, 42, 50, 58, 66, 74, 82, 90, 98, 106, 114 중 임의의 하나의 아미노산 서열을 포함하는 VLCDR1;
서열번호; 3, 11, 19, 27, 35, 43, 51, 59, 67, 75, 83, 91, 99, 107, 115 중 임의의 하나의 아미노산 서열을 포함하는 VLCDR2; 및
서열번호 4, 12, 20, 28, 36, 44, 52, 60, 68, 76, 84, 92, 100, 108, 및 116 중 임의의 하나의 아미노산 서열을 포함하는 VLCDR3.
7. 하기를 포함하는, 절 1 내지 6 중 임의의 하나의 항-LIGHT 항원 결합 분자:
서열번호: 5, 서열번호: 13, 서열번호: 21, 서열번호: 29, 서열번호: 37, 서열번호: 45, 서열번호: 53, 서열번호: 61, 서열번호: 69, 서열번호: 77, 서열번호: 85, 서열번호: 93, 서열번호: 101, 서열번호: 109, 서열번호: 117로 구성된 군으로부터 선택된 아미노산 서열에 대해 적어도 80% 동일성을 갖는 중쇄 가변 영역;
및/또는
서열번호: 1, 서열번호: 9, 서열번호: 17, 서열번호: 25, 서열번호: 33, 서열번호: 41, 서열번호: 49, 서열번호: 57, 서열번호: 65, 서열번호: 73, 서열번호: 81, 서열번호: 89, 서열번호: 97, 서열번호: 105, 서열번호: 113으로 구성된 군으로부터 선택된 아미노산 서열에 대해 적어도 80% 동일성을 갖는 경쇄 가변 영역.
8. 절 1 내지 7 중 임의의 하나의 항-LIGHT 항원 결합 분자 로서, 상기 분자는 하기를 포함한다:
서열번호: 5, 서열번호: 13, 서열번호: 21, 서열번호: 29, 서열번호: 37, 서열번호: 45, 서열번호: 53, 서열번호: 61, 서열번호: 69, 서열번호: 77, 서열번호: 85, 서열번호: 93, 서열번호: 101, 서열번호: 109, 서열번호: 117로 구성된 군으로부터 선택된 아미노산 서열에 대해 적어도 85%, 90%, 91 %, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98% 또는 99% 동일성을 갖는 중쇄 가변 영역;
및/또는
서열번호: 1, 서열번호: 9, 서열번호: 17, 서열번호: 25, 서열번호: 33, 서열번호: 41, 서열번호: 49, 서열번호: 57, 서열번호: 65, 서열번호: 73, 서열번호: 81, 서열번호: 89, 서열번호: 97, 서열번호: 105, 서열번호: 113으로 구성된 군으로부터 선택된 아미노산 서열에 대해 적어도 85%, 90%, 91 %, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98% 또는 99% 동일성을 갖는 경쇄 가변 영역.
9. 절 1 내지 8 중 임의의 하나의 항-LIGHT 항원 결합 분자로서, 상기 분자는 하기를 포함한다:
서열번호: 5, 서열번호: 13, 서열번호: 21, 서열번호: 29, 서열번호: 37, 서열번호: 45, 서열번호: 53, 서열번호: 61, 서열번호: 69, 서열번호: 77, 서열번호: 85, 서열번호: 93, 서열번호: 101, 서열번호: 109, 서열번호: 117로 구성된 군으로부터 선택된 아미노산 서열을 갖는 중쇄 가변 영역;
및/또는
서열번호: 1, 서열번호: 9, 서열번호: 17, 서열번호: 25, 서열번호: 33, 서열번호: 41, 서열번호: 49, 서열번호: 57, 서열번호: 65, 서열번호: 73, 서열번호: 81, 서열번호: 89, 서열번호: 97, 서열번호: 105, 서열번호: 113으로 구성된 군으로부터 선택된 아미노산 서열을 갖는 경쇄 가변 영역.
10. 이전의 임의의 절의 항-LIGHT 항원 결합 분자로서, 상기 항원 결합 분자는 하기로 구성된 군으로부터 선택된다:
(a) 하기를 포함하는 항-LIGHT 항원 결합 분자: 아미노산 서열 DYEMH (서열번호: 6)을 포함하는 VHCDR1, 아미노산 서열 EIDPETGDTAYSQKFKG (서열번호: 7)을 포함하는 VHCDR2, 아미노산 서열 ETDYFFDY (서열번호: 8)을 포함하는 VHCDR3을 포함하는 중쇄 가변 영역; 및
하기를 포함하는 경쇄 가변 영역: 아미노산 서열 GASENIYGALN (서열번호: 2)을 포함하는 VLCDR1, 아미노산 서열 GATNLAD (서열번호: 3)을 포함하는 VLCDR2 및 아미노산 서열 QNVLTTPWT (서열번호: 4)을 포함하는 VLCDR3;
또는 그것에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99% 동일한 VHCDR 및 VLCDR 서열;
(b) 하기를 포함하는 항-LIGHT 항원 결합 분자: 아미노산 서열 DSEIH (서열번호: 46)을 포함하는 VHCDR1, 아미노산 서열 EIDPETGGTAYNQKFKG (서열번호: 47)을 포함하는 VHCDR2, 아미노산 서열 ETDYFFDY (서열번호: 48)을 포함하는 VHCDR3을 포함하는 중쇄 가변 영역; 및
아미노산 서열 GASENIYGALN (서열번호: 42)을 포함하는 VLCDR1, 아미노산 서열 GATNLAD (서열번호: 43)을 포함하는 VLCDR2 및 아미노산 서열 QNVLSTPWT (서열번호: 44)을 포함하는 VLCDR3을 포함하는 경쇄 가변 영역;
또는 그것에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99% 동일한 VHCDR 및 VLCDR 서열;
(c) 하기를 포함하는 항-LIGHT 항원 결합 분자: 아미노산 서열 DYAIH (서열번호: 86)을 포함하는 VHCDR1, 아미노산 서열 VISTYYGDASYNQKFKG (서열번호: 87)을 포함하는 VHCDR2, 아미노산 SRGEYGNYDAMDY 서열 (서열번호: 88)을 포함하는 VHCDR3을 포함하는 중쇄 가변 영역; 및
하기를 포함하는 경쇄 가변 영역: 아미노산 서열 KASQSVDYDGDSYMN (서열번호: 82)을 포함하는 VLCDR1, 아미노산 서열 AASNLES (서열번호: 83)을 포함하는 VLCDR2 및 아미노산 서열 QQSNEDPLT (서열번호: 84)을 포함하는 VLCDR3;
또는 그것에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99% 동일한 VHCDR 및 VLCDR 서열;
(d) 하기를 포함하는 항-LIGHT 항원 결합 분자: 아미노산 서열 DSEIH (서열번호: 94)을 포함하는 VHCDR1, 아미노산 서열 EIDPETGGTAYNQKFKG (서열번호: 95)을 포함하는 VHCDR2, 아미노산 서열 ETDYFFDY (서열번호: 96)을 포함하는 VHCDR3을 포함하는 중쇄 가변 영역; 및
하기를 포함하는 경쇄 가변 영역: 아미노산 서열 SASSSVSYMY (서열번호: 90)을 포함하는 VLCDR1, 아미노산 서열 DTSNLAS (서열번호: 91)을 포함하는 VLCDR2 및 아미노산 서열 QQWSSYPLT (서열번호: 92)을 포함하는 VLCDR3;
또는 그것에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99% 동일한 VHCDR 및 VLCDR 서열;
(e) 하기를 포함하는 항-LIGHT 항원 결합 분자: 아미노산 서열 DSEIH (서열번호: 102)을 포함하는 VHCDR1, 아미노산 서열 EIDPETGGTAYNQKFKG (서열번호: 103)을 포함하는 VHCDR2, 아미노산 서열 ETDYFFDY (서열번호: 104)을 포함하는 VHCDR3을 포함하는 중쇄 가변 영역; 및
아미노산 서열 SASSSVSYMY (서열번호: 98)을 포함하는 VLCDR1, 아미노산 서열 DTSNLAS (서열번호: 99)을 포함하는 VLCDR2 및 아미노산 서열 QQWSSYPLT (서열번호: 100)을 포함하는 VLCDR3을 포함하는 경쇄 가변 영역;
또는 그것에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99% 동일한 VHCDR 및 VLCDR 서열;
(f) 하기를 포함하는 항-LIGHT 항원 결합 분자: 아미노산 서열 DYYMY (서열번호: 110)을 포함하는 VHCDR1, 아미노산 서열 AIGDGGIYTYYADTVKG (서열번호: 111)을 포함하는 VHCDR2, 아미노산 서열 GTGDGFAY (서열번호: 112)을 포함하는 VHCDR3을 포함하는 중쇄 가변 영역; 및
하기를 포함하는 경쇄 가변 영역: 아미노산 서열 RASESVDSYGNSFMH (서열번호: 106)을 포함하는 VLCDR1, 아미노산 서열 LASNLES (서열번호: 107)을 포함하는 VLCDR2 및 아미노산 서열 QQNNEDPYT (서열번호: 108)을 포함하는 VLCDR3;
또는 그것에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99% 동일한 VHCDR 및 VLCDR 서열; 및
(g) 하기를 포함하는 항-LIGHT 항원 결합 분자: 아미노산 서열 DYAIH (서열번호: 118)을 포함하는 VHCDR1, 아미노산 서열 VISTYYGDASYNQKFKG (서열번호: 119)을 포함하는 VHCDR2, 아미노산 서열 SRGEYGNYDAMDY (서열번호: 120)을 포함하는 VHCDR3을 포함하는 중쇄 가변 영역; 및
하기를 포함하는 경쇄 가변 영역: 아미노산 서열 RASESVDSYGNSFMH (서열번호: 114)을 포함하는 VLCDR1, 아미노산 서열 RASNLES (서열번호: 115)을 포함하는 VLCDR2 및 아미노산 서열 QQSNEDPYT (서열번호: 116)을 포함하는 VLCDR3;
또는 그것에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99% 동일한 VHCDR 및 VLCDR 서열.
11. 이전의 임의의 절의 항-LIGHT 항원 결합 분자로서, 상기 항원 결합 분자는 하기로 구성된 군으로부터 선택된다:
(a) 하기를 포함하는 항-LIGHT 항원 결합 분자: 아미노산 서열 DYEMH (서열번호: 14)을 포함하는 VHCDR1, 아미노산 서열 EIDPETGDTAYSQKFKG (서열번호: 15)을 포함하는 VHCDR2 및 아미노산 서열 ETDYFFDY (서열번호: 16)을 포함하는 VHCDR3을 포함하는 중쇄 가변 영역; 및
하기를 포함하는 경쇄 가변 영역: 아미노산 서열 GASENIYGALN (서열번호: 10)을 포함하는 VLCDR1, 아미노산 서열 GATNLAD (서열번호: 11)을 포함하는 VLCDR2 및 아미노산 서열 QNVLTTPWT (서열번호: 12)을 포함하는 VLCDR3;
또는 그것에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99% 동일한 VHCDR 및 VLCDR 서열;
(b) 하기를 포함하는 항-LIGHT 항원 결합 분자: 아미노산 서열 DYEMH (서열번호: 22)을 포함하는 VHCDR1, 아미노산 서열 EIDPETGDTAYSQKFQG (서열번호: 23)을 포함하는 VHCDR2 및 아미노산 서열 ETDYFFDY (서열번호: 24)을 포함하는 VHCDR3을 포함하는 중쇄 가변 영역; 및
하기를 포함하는 VLCDR1: 아미노산 서열
GASENIYGALN (서열번호: 10), 아미노산 서열 GATNLAD (서열번호: 11)을 포함하는 VLCDR2 및 아미노산 서열 QNVLTTPWT (서열번호: 12)을 포함하는 VLCDR3을 포함하는 경쇄 가변 영역;
또는 그것에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99% 동일한 VHCDR 및 VLCDR 서열;
(c) 하기를 포함하는 항-LIGHT 항원 결합 분자: 아미노산 서열 DYEMH (서열번호: 30)을 포함하는 VHCDR1, 아미노산 서열 EIDPETGDTAYSQKFQG (서열번호: 31)을 포함하는 VHCDR2 및 아미노산 서열 ETDYFFDY (서열번호: 32)을 포함하는 VHCDR3을 포함하는 중쇄 가변 영역; 및
하기를 포함하는 경쇄 가변 영역: 아미노산 서열 GASENIYGALN (서열번호: 10)을 포함하는 VLCDR1, 아미노산 서열 GATNLAD (서열번호: 11)을 포함하는 VLCDR2 및 아미노산 서열 QNVLTTPWT (서열번호: 12)을 포함하는 VLCDR3;
또는 그것에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99% 동일한 VHCDR 및 VLCDR 서열;
(d) 하기를 포함하는 항-LIGHT 항원 결합 분자: 아미노산 서열 DYEMH (서열번호: 38)을 포함하는 VHCDR1, 아미노산 서열 EIDPETGDTAYSQKFQG (서열번호: 39)을 포함하는 VHCDR2 및 아미노산 서열 ETDYFFDY (서열번호: 40)을 포함하는 VHCDR3을 포함하는 중쇄 가변 영역; 및
하기를 포함하는 경쇄 가변 영역: 아미노산 서열 GASENIYGALN (서열번호: 10)을 포함하는 VLCDR1, 아미노산 서열 GATNLAD (서열번호: 11)을 포함하는 VLCDR2 및 아미노산 서열 QNVLTTPWT (서열번호: 12)을 포함하는 VLCDR3;
또는 그것에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99% 동일한 VHCDR 및 VLCDR 서열;
(e) 하기를 포함하는 항-LIGHT 항원 결합 분자: 아미노산 서열 DYEMH (서열번호: 14)을 포함하는 VHCDR1, 아미노산 서열 EIDPETGDTAYSQKFKG (서열번호: 15)을 포함하는 VHCDR2 및 아미노산 서열 ETDYFFDY (서열번호: 16)을 포함하는 VHCDR3을 포함하는 중쇄 가변 영역; 및
하기를 포함하는 경쇄 가변 영역: 아미노산 서열 GASENIYGALN (서열번호: 18)을 포함하는 VLCDR1, 아미노산 서열 GATNLAD (서열번호: 19)을 포함하는 VLCDR2 및 아미노산 서열 QNVLTTPWT (서열번호: 20)을 포함하는 VLCDR3;
또는 그것에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99% 동일한 VHCDR 및 VLCDR 서열;
(f) 하기를 포함하는 항-LIGHT 항원 결합 분자: 아미노산 서열 DYEMH (서열번호: 22)을 포함하는 VHCDR1, 아미노산 서열 EIDPETGDTAYSQKFQG (서열번호: 23)을 포함하는 VHCDR2 및 아미노산 서열 ETDYFFDY (서열번호: 24)을 포함하는 VHCDR3을 포함하는 중쇄 가변 영역; 및
하기를 포함하는 경쇄 가변 영역: 아미노산 서열 GASENIYGALN (서열번호: 18)을 포함하는 VLCDR1, 아미노산 서열 GATNLAD (서열번호: 19)을 포함하는 VLCDR2 및 아미노산 서열 QNVLTTPWT (서열번호: 20)을 포함하는 VLCDR3;
또는 그것에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99% 동일한 VHCDR 및 VLCDR 서열;
(g) 하기를 포함하는 항-LIGHT 항원 결합 분자: 아미노산 서열 DYEMH (서열번호: 30)을 포함하는 VHCDR1, 아미노산 서열 EIDPETGDTAYSQKFQG (서열번호: 31)을 포함하는 VHCDR2 및 아미노산 서열 ETDYFFDY (서열번호: 32)을 포함하는 VHCDR3을 포함하는 중쇄 가변 영역; 및
하기를 포함하는 경쇄 가변 영역: 아미노산 서열 GASENIYGALN (서열번호: 18)을 포함하는 VLCDR1, 아미노산 서열 GATNLAD (서열번호: 19)을 포함하는 VLCDR2 및 아미노산 서열 QNVLTTPWT (서열번호: 20)을 포함하는 VLCDR3;
또는 그것에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99% 동일한 VHCDR 및 VLCDR 서열;
(h) 하기를 포함하는 항-LIGHT 항원 결합 분자: 아미노산 서열 DYEMH (서열번호: 38)을 포함하는 VHCDR1, 아미노산 서열 EIDPETGDTAYSQKFQG (서열번호: 39)을 포함하는 VHCDR2 및 아미노산 서열 ETDYFFDY (서열번호: 40)을 포함하는 VHCDR3을 포함하는 중쇄 가변 영역; 및
하기를 포함하는 경쇄 가변 영역: 아미노산 서열 GASENIYGALN (서열번호: 18)을 포함하는 VLCDR1, 아미노산 서열 GATNLAD (서열번호: 19)을 포함하는 VLCDR2 및 아미노산 서열 QNVLTTPWT (서열번호: 20)을 포함하는 VLCDR3;
또는 그것에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99% 동일한 VHCDR 및 VLCDR 서열;
(i) 하기를 포함하는 항-LIGHT 항원 결합 분자: 아미노산 서열 DYEMH (서열번호: 14)을 포함하는 VHCDR1, 아미노산 서열 EIDPETGDTAYSQKFKG (서열번호: 15)을 포함하는 VHCDR2 및 아미노산 서열 ETDYFFDY (서열번호: 16)을 포함하는 VHCDR3을 포함하는 중쇄 가변 영역; 및
하기를 포함하는 경쇄 가변 영역: 아미노산 서열 GASENIYGALN (서열번호: 26)을 포함하는 VLCDR1, 아미노산 서열 GATNLAD (서열번호: 27)을 포함하는 VLCDR2 및 아미노산 서열 QNVLTTPWT (서열번호: 28)을 포함하는 VLCDR3;
또는 그것에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99% 동일한 VHCDR 및 VLCDR 서열;
(j) 하기를 포함하는 항-LIGHT 항원 결합 분자: 아미노산 서열 DYEMH (서열번호: 22)을 포함하는 VHCDR1, 아미노산 서열 EIDPETGDTAYSQKFQG (서열번호: 23)을 포함하는 VHCDR2 및 아미노산 서열 ETDYFFDY (서열번호: 24)을 포함하는 VHCDR3을 포함하는 중쇄 가변 영역; 및
하기를 포함하는 경쇄 가변 영역: 아미노산 서열 GASENIYGALN (서열번호: 26)을 포함하는 VLCDR1, 아미노산 서열 GATNLAD (서열번호: 27)을 포함하는 VLCDR2 및 아미노산 서열 QNVLTTPWT (서열번호: 28)을 포함하는 VLCDR3;
또는 그것에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99% 동일한 VHCDR 및 VLCDR 서열;
(k) 하기를 포함하는 항-LIGHT 항원 결합 분자: 아미노산 서열 DYEMH (서열번호: 30)을 포함하는 VHCDR1, 아미노산 서열 EIDPETGDTAYSQKFQG (서열번호: 31)을 포함하는 VHCDR2 및 아미노산 서열 ETDYFFDY (서열번호: 32)을 포함하는 VHCDR3을 포함하는 중쇄 가변 영역; 및
하기를 포함하는 경쇄 가변 영역: 아미노산 서열 GASENIYGALN (서열번호: 26)을 포함하는 VLCDR1, 아미노산 서열 GATNLAD (서열번호: 27)을 포함하는 VLCDR2 및 아미노산 서열 QNVLTTPWT (서열번호: 28)을 포함하는 VLCDR3;
또는 그것에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99% 동일한 VHCDR 및 VLCDR 서열;
(l) 하기를 포함하는 항-LIGHT 항원 결합 분자: 아미노산 서열 DYEMH (서열번호: 38)을 포함하는 VHCDR1, 아미노산 서열 EIDPETGDTAYSQKFQG (서열번호: 39)을 포함하는 VHCDR2 및 아미노산 서열 ETDYFFDY (서열번호: 40)을 포함하는 VHCDR3을 포함하는 중쇄 가변 영역; 및
하기를 포함하는 경쇄 가변 영역: 아미노산 서열 GASENIYGALN (서열번호: 26)을 포함하는 VLCDR1, 아미노산 서열 GATNLAD (서열번호: 27)을 포함하는 VLCDR2 및 아미노산 서열 QNVLTTPWT (서열번호: 28)을 포함하는 VLCDR3;
또는 그것에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99% 동일한 VHCDR 및 VLCDR 서열;
(m) 하기를 포함하는 항-LIGHT 항원 결합 분자: 아미노산 서열 DYEMH (서열번호: 14)을 포함하는 VHCDR1, 아미노산 서열 EIDPETGDTAYSQKFKG (서열번호: 15)을 포함하는 VHCDR2 및 아미노산 서열 ETDYFFDY (서열번호: 16)을 포함하는 VHCDR3을 포함하는 중쇄 가변 영역; 및
하기를 포함하는 경쇄 가변 영역: 아미노산 서열 RASENIYGALN (서열번호: 34)을 포함하는 VLCDR1, 아미노산 서열 GATNLAE (서열번호: 35)을 포함하는 VLCDR2 및 아미노산 서열 QNVLTTPWT (서열번호: 36)을 포함하는 VLCDR3;
또는 그것에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99% 동일한 VHCDR 및 VLCDR 서열;
(n) 하기를 포함하는 항-LIGHT 항원 결합 분자: 아미노산 서열 DYEMH (서열번호: 22)을 포함하는 VHCDR1, 아미노산 서열 EIDPETGDTAYSQKFQG (서열번호: 23)을 포함하는 VHCDR2 및 아미노산 서열 ETDYFFDY (서열번호: 24)을 포함하는 VHCDR3을 포함하는 중쇄 가변 영역; 및
하기를 포함하는 경쇄 가변 영역: 아미노산 서열 RASENIYGALN (서열번호: 34)을 포함하는 VLCDR1, 아미노산 서열 GATNLAE (서열번호: 35)을 포함하는 VLCDR2 및 아미노산 서열 QNVLTTPWT (서열번호: 36)을 포함하는 VLCDR3;
또는 그것에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99% 동일한 VHCDR 및 VLCDR 서열;
(o) 하기를 포함하는 항-LIGHT 항원 결합 분자: 아미노산 서열 DYEMH (서열번호: 30)을 포함하는 VHCDR1, 아미노산 서열 EIDPETGDTAYSQKFQG (서열번호: 31)을 포함하는 VHCDR2 및 아미노산 서열 ETDYFFDY (서열번호: 32)을 포함하는 VHCDR3을 포함하는 중쇄 가변 영역; 및
하기를 포함하는 경쇄 가변 영역: 아미노산 서열 RASENIYGALN (서열번호: 34)을 포함하는 VLCDR1, 아미노산 서열 GATNLAE (서열번호: 35)을 포함하는 VLCDR2 및 아미노산 서열 QNVLTTPWT (서열번호: 36)을 포함하는 VLCDR3;
또는 그것에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99% 동일한 VHCDR 및 VLCDR 서열; 및
(p) 하기를 포함하는 항-LIGHT 항원 결합 분자: 아미노산 서열 DYEMH (서열번호: 38)을 포함하는 VHCDR1, 아미노산 서열 EIDPETGDTAYSQKFQG (서열번호: 39)을 포함하는 VHCDR2 및 아미노산 서열 ETDYFFDY (서열번호: 40)을 포함하는 VHCDR3을 포함하는 중쇄 가변 영역; 및
하기를 포함하는 경쇄 가변 영역: 아미노산 서열 RASENIYGALN (서열번호: 34)을 포함하는 VLCDR1, 아미노산 서열 GATNLAE (서열번호: 35)을 포함하는 VLCDR2 및 아미노산 서열 QNVLTTPWT (서열번호: 36)을 포함하는 VLCDR3;
또는 그것에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99% 동일한 VHCDR 및 VLCDR 서열.
12. 이전의 임의의 절의 항-LIGHT 항원 결합 분자로서, 상기 항원 결합 분자는 하기로 구성된 군으로부터 선택된다:
(a) 하기를 포함하는 항-LIGHT 항원 결합 분자: 아미노산 서열 DSEIH (서열번호: 54)을 포함하는 VHCDR1, 아미노산 서열 EIDPETGGTAYNQKFKG (서열번호: 55)을 포함하는 VHCDR2 및 아미노산 서열 ETDYFFDY (서열번호: 56)을 포함하는 VHCDR3을 포함하는 중쇄 가변 영역; 및
GASENIYGALN (서열번호: 50), 아미노산 서열 GATNLAD (서열번호: 51)을 포함하는 VLCDR2 및 아미노산 서열 QNVLSTPWT (서열번호: 52)을 포함하는 VLCDR3을 포함하는 경쇄 가변 영역;
또는 그것에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99% 동일한 VHCDR 및 VLCDR 서열;
(b) 하기를 포함하는 항-LIGHT 항원 결합 분자: 아미노산 서열 DSEIH (서열번호: 62)을 포함하는 VHCDR1, 아미노산 서열 EIDPETGGTAYNQKFQG (서열번호: 63)을 포함하는 VHCDR2 및 아미노산 서열 ETDYFFDY (서열번호: 64)을 포함하는 VHCDR3을 포함하는 중쇄 가변 영역; 및
GASENIYGALN (서열번호: 50), 아미노산 서열 GATNLAD (서열번호: 51)을 포함하는 VLCDR2 및 아미노산 서열 QNVLSTPWT (서열번호: 52)을 포함하는 VLCDR3을 포함하는 경쇄 가변 영역;
또는 그것에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99% 동일한 VHCDR 및 VLCDR 서열;
(c) 하기를 포함하는 항-LIGHT 항원 결합 분자: 아미노산 서열 DSEIH (서열번호: 70)을 포함하는 VHCDR1, 아미노산 서열 EIDPETGGTAYAQKFQG (서열번호: 71)을 포함하는 VHCDR2 및 아미노산 서열 ETDYFFDY (서열번호: 72)을 포함하는 VHCDR3을 포함하는 중쇄 가변 영역; 및
하기를 포함하는 경쇄 가변 영역: 아미노산 서열 GASENIYGALN (서열번호: 50)을 포함하는 VLCDR1, 아미노산 서열 GATNLAD (서열번호: 51)을 포함하는 VLCDR2 및 아미노산 서열 QNVLSTPWT (서열번호: 52)을 포함하는 VLCDR3;
또는 그것에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99% 동일한 VHCDR 및 VLCDR 서열;
(d) 하기를 포함하는 항-LIGHT 항원 결합 분자: 아미노산 서열 DSEMH (서열번호: 78)을 포함하는 VHCDR1, 아미노산 서열 EIDPETGGTAYAQKFQG (서열번호: 79)을 포함하는 VHCDR2 및 아미노산 서열 ETDYFFDY (서열번호: 80)을 포함하는 VHCDR3을 포함하는 중쇄 가변 영역; 및
하기를 포함하는 경쇄 가변 영역: 아미노산 서열 GASENIYGALN (서열번호: 50)을 포함하는 VLCDR1, 아미노산 서열 GATNLAD (서열번호: 51)을 포함하는 VLCDR2 및 아미노산 서열 QNVLSTPWT (서열번호: 52)을 포함하는 VLCDR3;
또는 그것에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99% 동일한 VHCDR 및 VLCDR 서열;
(e) 하기를 포함하는 항-LIGHT 항원 결합 분자: 아미노산 서열 DSEIH (서열번호: 54)을 포함하는 VHCDR1, 아미노산 서열 EIDPETGGTAYNQKFKG (서열번호: 55)을 포함하는 VHCDR2 및 아미노산 서열 ETDYFFDY (서열번호: 56)을 포함하는 VHCDR3을 포함하는 중쇄 가변 영역; 및
하기를 포함하는 경쇄 가변 영역: 아미노산 서열 GASENIYGALN (서열번호: 58)을 포함하는 VLCDR1, 아미노산 서열 GATNLAD (서열번호: 59)을 포함하는 VLCDR2 및 아미노산 서열 QNVLSTPWT (서열번호: 60)을 포함하는 VLCDR3;
또는 그것에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99% 동일한 VHCDR 및 VLCDR 서열;
(f) 하기를 포함하는 항-LIGHT 항원 결합 분자: 아미노산 서열 DSEIH (서열번호: 62)을 포함하는 VHCDR1, 아미노산 서열 EIDPETGGTAYNQKFQG (서열번호: 63)을 포함하는 VHCDR2 및 아미노산 서열 ETDYFFDY (서열번호: 64)을 포함하는 VHCDR3을 포함하는 중쇄 가변 영역; 및
하기를 포함하는 경쇄 가변 영역: 아미노산 서열 GASENIYGALN (서열번호: 58)을 포함하는 VLCDR1, 아미노산 서열 GATNLAD (서열번호: 59)을 포함하는 VLCDR2 및 아미노산 서열 QNVLSTPWT (서열번호: 60)을 포함하는 VLCDR3;
또는 그것에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99% 동일한 VHCDR 및 VLCDR 서열;
(g) 하기를 포함하는 항-LIGHT 항원 결합 분자: 아미노산 서열 DSEIH (서열번호: 70)을 포함하는 VHCDR1, 아미노산 서열 EIDPETGGTAYAQKFQG (서열번호: 71)을 포함하는 VHCDR2 및 아미노산 서열 ETDYFFDY (서열번호: 72)을 포함하는 VHCDR3을 포함하는 중쇄 가변 영역; 및
하기를 포함하는 경쇄 가변 영역: 아미노산 서열 GASENIYGALN (서열번호: 58)을 포함하는 VLCDR1, 아미노산 서열 GATNLAD (서열번호: 59)을 포함하는 VLCDR2 및 아미노산 서열 QNVLSTPWT (서열번호: 60)을 포함하는 VLCDR3;
또는 그것에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99% 동일한 VHCDR 및 VLCDR 서열;
(h) 하기를 포함하는 항-LIGHT 항원 결합 분자: 아미노산 서열 DSEMH (서열번호: 78)을 포함하는 VHCDR1, 아미노산 서열 EIDPETGGTAYAQKFQG (서열번호: 79)을 포함하는 VHCDR2 및 아미노산 서열 ETDYFFDY (서열번호: 80)을 포함하는 VHCDR3을 포함하는 중쇄 가변 영역; 및
하기를 포함하는 경쇄 가변 영역: 아미노산 서열 GASENIYGALN (서열번호: 58)을 포함하는 VLCDR1, 아미노산 서열 GATNLAD (서열번호: 59)을 포함하는 VLCDR2 및 아미노산 서열 QNVLSTPWT (서열번호: 60)을 포함하는 VLCDR3;
또는 그것에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99% 동일한 VHCDR 및 VLCDR 서열;
(i) 하기를 포함하는 항-LIGHT 항원 결합 분자: 아미노산 서열 DSEIH (서열번호: 54)을 포함하는 VHCDR1, 아미노산 서열 EIDPETGGTAYNQKFKG (서열번호: 55)을 포함하는 VHCDR2 및 VHCDR3을 포함하는 중쇄 가변 영역; 및
하기를 포함하는 경쇄 가변 영역: 아미노산 서열 GASENIYGALN (서열번호: 66)을 포함하는 VLCDR1, 아미노산 서열 GATNLAD (서열번호: 67)을 포함하는 VLCDR2 및 아미노산 서열 QNVLSTPWT (서열번호: 68)을 포함하는 VLCDR3;
또는 그것에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99% 동일한 VHCDR 및 VLCDR 서열;
(j) 하기를 포함하는 항-LIGHT 항원 결합 분자: 아미노산 서열 DSEIH (서열번호: 62)을 포함하는 VHCDR1, 아미노산 서열 EIDPETGGTAYNQKFQG (서열번호: 63)을 포함하는 VHCDR2 및 아미노산 서열 ETDYFFDY (서열번호: 64)을 포함하는 VHCDR3을 포함하는 중쇄 가변 영역; 및
하기를 포함하는 경쇄 가변 영역: 아미노산 서열 GASENIYGALN (서열번호: 66)을 포함하는 VLCDR1, 아미노산 서열 GATNLAD (서열번호: 67)을 포함하는 VLCDR2 및 아미노산 서열 QNVLSTPWT (서열번호: 68)을 포함하는 VLCDR3;
또는 그것에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99% 동일한 VHCDR 및 VLCDR 서열;
(k) 하기를 포함하는 항-LIGHT 항원 결합 분자: 아미노산 서열 DSEIH (서열번호: 70)을 포함하는 VHCDR1, 아미노산 서열 EIDPETGGTAYAQKFQG (서열번호: 71)을 포함하는 VHCDR2 및 아미노산 서열 ETDYFFDY (서열번호: 72)을 포함하는 VHCDR3을 포함하는 중쇄 가변 영역; 및
하기를 포함하는 경쇄 가변 영역: 아미노산 서열 GASENIYGALN (서열번호: 66)을 포함하는 VLCDR1, 아미노산 서열 GATNLAD (서열번호: 67)을 포함하는 VLCDR2 및 아미노산 서열 QNVLSTPWT (서열번호: 68)을 포함하는 VLCDR3;
또는 그것에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99% 동일한 VHCDR 및 VLCDR 서열;
(l) 하기를 포함하는 항-LIGHT 항원 결합 분자: 아미노산 서열 DSEMH (서열번호: 78)을 포함하는 VHCDR1, 아미노산 서열 EIDPETGGTAYAQKFQG (서열번호: 79)을 포함하는 VHCDR2 및 아미노산 서열 ETDYFFDY (서열번호: 80)을 포함하는 VHCDR3을 포함하는 중쇄 가변 영역; 및
하기를 포함하는 경쇄 가변 영역: 아미노산 서열 GASENIYGALN (서열번호: 66)을 포함하는 VLCDR1, 아미노산 서열 GATNLAD (서열번호: 67)을 포함하는 VLCDR2 및 아미노산 서열 QNVLSTPWT (서열번호: 68)을 포함하는 VLCDR3;
또는 그것에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99% 동일한 VHCDR 및 VLCDR 서열;
(m) 하기를 포함하는 항-LIGHT 항원 결합 분자: 아미노산 서열 DSEIH (서열번호: 54)을 포함하는 VHCDR1, 아미노산 서열 EIDPETGGTAYNQKFKG (서열번호: 55)을 포함하는 VHCDR2 및 VHCDR3을 포함하는 중쇄 가변 영역; 및
하기를 포함하는 경쇄 가변 영역: 아미노산 서열 RASENIYGALN (서열번호: 74)을 포함하는 VLCDR1, 아미노산 서열 GATNLAE (서열번호: 75)을 포함하는 VLCDR2 및 아미노산 서열 QNVLSTPWT (서열번호: 76)을 포함하는 VLCDR3;
또는 그것에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99% 동일한 VHCDR 및 VLCDR 서열;
(n) 하기를 포함하는 항-LIGHT 항원 결합 분자: 아미노산 서열 DSEIH (서열번호: 62)을 포함하는 VHCDR1, 아미노산 서열 EIDPETGGTAYNQKFQG (서열번호: 63)을 포함하는 VHCDR2 및 아미노산 서열 ETDYFFDY (서열번호: 64)을 포함하는 VHCDR3을 포함하는 중쇄 가변 영역; 및
하기를 포함하는 경쇄 가변 영역: 아미노산 서열 RASENIYGALN (서열번호: 74)을 포함하는 VLCDR1, 아미노산 서열 GATNLAE (서열번호: 75)을 포함하는 VLCDR2 및 아미노산 서열 QNVLSTPWT (서열번호: 76)을 포함하는 VLCDR3;
또는 그것에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99% 동일한 VHCDR 및 VLCDR 서열;
(o) 하기를 포함하는 항-LIGHT 항원 결합 분자: 아미노산 서열 DSEIH (서열번호: 70)을 포함하는 VHCDR1, 아미노산 서열 EIDPETGGTAYAQKFQG (서열번호: 71)을 포함하는 VHCDR2 및 아미노산 서열 ETDYFFDY (서열번호: 72)을 포함하는 VHCDR3을 포함하는 중쇄 가변 영역; 및
하기를 포함하는 경쇄 가변 영역: 아미노산 서열 RASENIYGALN (서열번호: 74)을 포함하는 VLCDR1, 아미노산 서열 GATNLAE (서열번호: 75)을 포함하는 VLCDR2 및 아미노산 서열 QNVLSTPWT (서열번호: 76)을 포함하는 VLCDR3; 및
또는 그것에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99% 동일한 VHCDR 및 VLCDR 서열;
(p) 하기를 포함하는 항-LIGHT 항원 결합 분자: 아미노산 서열 DSEMH (서열번호: 78)을 포함하는 VHCDR1, 아미노산 서열 EIDPETGGTAYAQKFQG (서열번호: 79)을 포함하는 VHCDR2 및 아미노산 서열 ETDYFFDY (서열번호: 80)을 포함하는 VHCDR3을 포함하는 중쇄 가변 영역; 및
하기를 포함하는 경쇄 가변 영역: 아미노산 서열 RASENIYGALN (서열번호: 74)을 포함하는 VLCDR1, 아미노산 서열 GATNLAE (서열번호: 75)을 포함하는 VLCDR2 및 아미노산 서열 QNVLSTPWT (서열번호: 76)을 포함하는 VLCDR3.
13. 이전의 임의의 절의 항-LIGHT 항원 결합 분자로서, 상기 항원-결합 분자는 하기로부터 선택된 중쇄 가변 영역 및 경쇄 가변 영역을 포함한다:
(a) 서열번호: 5의 아미노산 서열을 포함하는 VH 및 서열번호: 1의 아미노산 서열을 포함하거나 서열번호: 5 및 서열번호: 1 각각에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99% 동일한 VH 및 VL 서열을 포함하는 VL;
(b) 서열번호: 45의 아미노산 서열을 포함하는 VH 및 서열번호: 41의 아미노산 서열을 포함하거나 서열번호: 45 및 서열번호: 41 각각에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99% 동일한 VH 및 VL 서열을 포함하는 VL;
(c) 서열번호: 85의 아미노산 서열을 포함하는 VH 및 서열번호: 81의 아미노산 서열을 포함하거나 서열번호: 85 및 서열번호: 81 각각에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99% 동일한 VH 및 VL 서열을 포함하는 VL;
(d) 서열번호: 93의 아미노산 서열을 포함하는 VH 및 서열번호: 89의 아미노산 서열을 포함하거나 서열번호: 93 및 서열번호: 89 각각에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99% 동일한 VH 및 VL 서열을 포함하는 VL;
(d) 서열번호: 101의 아미노산 서열을 포함하는 VH 및 서열번호: 97의 아미노산 서열을 포함하거나 서열번호: 101 및 서열번호: 97 각각에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99% 동일한 VH 및 VL 서열을 포함하는 VL;
(e) 서열번호: 109의 아미노산 서열을 포함하는 VH 및 서열번호: 105의 아미노산 서열을 포함하거나 서열번호: 109 및 서열번호: 105 각각에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99% 동일한 VH 및 VL 서열을 포함하는 VL;
(f) 서열번호: 117의 아미노산 서열을 포함하는 VH 및 서열번호: 113의 아미노산 서열을 포함하거나 서열번호: 117 및 서열번호: 113 각각에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99% 동일한 VH 및 VL 서열을 포함하는 VL;
14. 이전의 임의의 절의 항-LIGHT 항원 결합 분자로서, 상기 항원-결합 분자는 하기로부터 선택된 중쇄 가변 영역 및 경쇄 가변 영역을 포함한다:
(a) 서열번호: 13의 아미노산 서열을 포함하는 VH 및 서열번호: 9의 아미노산 서열을 포함하거나 서열번호: 13 및 서열번호: 9 각각에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99% 동일한 VH 및 VL 서열을 포함하는 VL;
(b) 서열번호: 21의 아미노산 서열을 포함하는 VH 및 서열번호: 9의 아미노산 서열을 포함하거나 서열번호: 21 및 서열번호: 9 각각에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99% 동일한 VH 및 VL 서열을 포함하는 VL;
(c) 서열번호: 29의 아미노산 서열을 포함하는 VH 및 서열번호: 9의 아미노산 서열을 포함하거나 서열번호: 29 및 서열번호: 9 각각에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99% 동일한 VH 및 VL 서열을 포함하는 VL;
(d) 서열번호: 37의 아미노산 서열을 포함하는 VH 및 서열번호: 9의 아미노산 서열을 포함하거나 서열번호: 37 및 서열번호: 9 각각에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99% 동일한 VH 및 VL 서열을 포함하는 VL;
(e) 서열번호: 13의 아미노산 서열을 포함하는 VH 및 서열번호: 17의 아미노산 서열을 포함하거나 (또는 서열번호: 13 및 서열번호: 17 각각에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99% 동일한 VH 및 VL 서열을 포함하는) VL;
(f) 서열번호: 21의 아미노산 서열을 포함하는 VH 및 서열번호: 17의 아미노산 서열을 포함하거나 서열번호: 21 및 서열번호: 17 각각에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99% 동일한 VH 및 VL 서열을 포함하는 VL;
(g) 서열번호: 37의 아미노산 서열을 포함하는 VH 및 서열번호: 17의 아미노산 서열을 포함하거나 서열번호: 37 및 서열번호: 17 각각에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99% 동일한 VH 및 VL 서열을 포함하는 VL;
(h) 서열번호: 13의 아미노산 서열을 포함하는 VH 및 서열번호: 25의 아미노산 서열을 포함하거나 서열번호: 13 및 서열번호: 25 각각에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99% 동일한 VH 및 VL 서열을 포함하는 VL;
(i) 서열번호: 21의 아미노산 서열을 포함하는 VH 및 서열번호: 25의 아미노산 서열을 포함하거나 서열번호: 21 및 서열번호: 25 각각에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99% 동일한 VH 및 VL 서열을 포함하는 VL;
(j) 서열번호: 29의 아미노산 서열을 포함하는 VH 및 서열번호: 25의 아미노산 서열을 포함하거나 서열번호: 37 및 서열번호: 25 각각에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99% 동일한 VH 및 VL 서열을 포함하는 VL;
(k) 서열번호: 29의 아미노산 서열을 포함하는 VH 및 서열번호: 25의 아미노산 서열을 포함하거나 서열번호: 37 및 서열번호: 25 각각에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99% 동일한 VH 및 VL 서열을 포함하는 VL;
(l) 서열번호: 13의 아미노산 서열을 포함하는 VH 및 서열번호: 13 및 서열번호: 33 각각에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99% 동일한 VH 및 VL 서열을 포함하는 VL;
(m) 서열번호: 21의 아미노산 서열을 포함하는 VH 및 서열번호: 21 및 서열번호: 33 각각에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99% 동일한 VH 및 VL 서열을 포함하는 VL;
(n) 서열번호: 29의 아미노산 서열을 포함하는 VH 및 서열번호: 29 및 서열번호: 33 각각에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99% 동일한 VH 및 VL 서열을 포함하는 VL;
(o) 서열번호: 37의 아미노산 서열을 포함하는 VH 및 서열번호: 33의 아미노산 서열을 포함하거나 (서열번호: 37 및 서열번호: 33 각각에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99% 동일한 VH 및 VL 서열 포함하는) VL;
15. 이전의 임의의 절의 항-LIGHT 항원 결합 분자로서, 상기 항원-결합 분자는 하기로부터 선택된 중쇄 가변 영역 및 경쇄 가변 영역을 포함한다:
(a) 서열번호: 53의 아미노산 서열을 포함하는 VH 및 서열번호: 49의 아미노산 서열을 포함하거나 서열번호: 53 및 서열번호: 49 각각에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99% 동일한 VH 및 VL 서열을 포함하는 VL;
(b) 서열번호: 61의 아미노산 서열을 포함하는 VH 및 서열번호: 49의 아미노산 서열을 포함하거나 서열번호: 61 및 서열번호: 49 각각에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99% 동일한 VH 및 VL 서열을 포함하는 VL;
(c) 서열번호: 69의 아미노산 서열을 포함하는 VH 및 서열번호: 49의 아미노산 서열을 포함하거나 서열번호: 69 및 서열번호: 49 각각에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99% 동일한 VH 및 VL 서열을 포함하는 VL;
(d) 서열번호: 77의 아미노산 서열을 포함하는 VH 및 서열번호: 49의 아미노산 서열을 포함하거나 서열번호: 77 및 서열번호: 49 각각에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99% 동일한 VH 및 VL 서열을 포함하는 VL;
(e) 서열번호: 53의 아미노산 서열을 포함하는 VH 및 서열번호: 57의 아미노산 서열을 포함하거나 서열번호: 53 및 서열번호: 57 각각에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99% 동일한 VH 및 VL 서열을 포함하는 VL; (f) 서열번호: 61의 아미노산 서열을 포함하는 VH 및 서열번호: 57의 아미노산 서열을 포함하거나 서열번호: 61 및 서열번호: 57 각각에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99% 동일한 VH 및 VL 서열을 포함하는 VL;
(g) 서열번호: 69의 아미노산 서열을 포함하는 VH 및 서열번호: 57의 아미노산 서열을 포함하거나 또는 서열번호: 69 및 서열번호: 57 각각에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99% 동일한 VH 및 VL 서열을 포함하는 VL;
(h) 서열번호: 77의 아미노산 서열을 포함하는 VH 및 서열번호: 57의 아미노산 서열을 포함하거나 서열번호: 77 및 서열번호: 57 각각에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99% 동일한 VH 및 VL 서열을 포함하는 VL;
(i) 서열번호: 53의 아미노산 서열을 포함하는 VH 및 서열번호: 65의 아미노산 서열을 포함하거나 서열번호: 53 및 서열번호: 65 각각에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99% 동일한 VH 및 VL 서열을 포함하는 VL;
(j) 서열번호: 69의 아미노산 서열을 포함하는 VH 및 서열번호: 65의 아미노산 서열을 포함하거나 서열번호: 69 및 서열번호: 65 각각에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99% 동일한 VH 및 VL 서열을 포함하는 VL;
(k) 서열번호: 77의 아미노산 서열을 포함하는 VH 및 서열번호: 65의 아미노산 서열을 포함하거나 서열번호: 77 및 서열번호: 65 각각에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99% 동일한 VH 및 VL 서열을 포함하는 VL;
(l) 서열번호: 53의 아미노산 서열을 포함하는 VH 및 서열번호: 73의 아미노산 서열을 포함하거나 서열번호: 53 및 서열번호: 73 각각에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99% 동일한 VH 및 VL 서열을 포함하는 VL;
(m) 서열번호: 61의 아미노산 서열을 포함하는 VH 및 서열번호: 73의 아미노산 서열을 포함하거나 서열번호: 61 및 서열번호: 73 각각에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99% 동일한 VH 및 VL 서열을 포함하는 VL;
(n) 서열번호: 69의 아미노산 서열을 포함하는 VH 및 서열번호: 73의 아미노산 서열을 포함하거나 서열번호: 69 및 서열번호: 73 각각에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99% 동일한 VH 및 VL 서열을 포함하는 VL; 및
(o) 서열번호: 77의 아미노산 서열을 포함하는 VH 및 서열번호: 73의 아미노산 서열을 포함하거나 서열번호: 77 및 서열번호: 73 각각을 포함하는 VL.
16. 임의의 이전의 절의 항-LIGHT 항원 결합 분자로서, 상기 항-LIGHT 항원 결합 분자는 2E08, 3A07, 3B04, 3C10, 3D12, 3E09, 2B11, 3B04_var1, 3B04_var2, 3B04_var3, 3B04_var4, 3B04_var5, 3B04_var6, 3B04_var7, 3B04_var8, 3B04_var9, 3B04_var10, 3B04_var11, 3B04_var12, 3B04_var13, 3B04_var14, 3B04_var15, 3B04_var16, 3D12_var1, 3D12_var2, 3D12_var3, 3D12_var4, 3D12_var5, 3D12_var6, 3D12_var7, 3D12_var8, 3D12_var9, 3D12_var10, 3D12_var11, 3D12_var12, 3D12_var13, 3D12_var14, 3D12_var15 및 3D12_var16으로 구성된 군으로부터 선택된 항체이다.
17. 절 16의 항-LIGHT 항원 결합 분자로서, 상기 항체는 모두 6개의 CDR 영역에 걸쳐 1 내지 10, 1 내지 5 또는 1 내지 2개의 보존적 아미노산 치환을 포함한다.
18. 절 16의 항-LIGHT 항원 결합 분자로서, 상기 항체는 가변 중쇄 및 경쇄 영역 중 하나 또는 둘 모두에서 1 내지 10, 1 내지 5 또는 1 내지 2개의 보존적 아미노산 치환을 포함한다.
19. 절 16의 항-LIGHT 항원 결합 분자로서, 상기 항체는 프레임워크 영역에서 1 내지 10, 1 내지 5, 또는 1 내지 2개의 보존적 아미노산 치환을 포함한다.
20. LIGHT에 특이적으로 결합하고 LIGHT의 절 1 내지 19 중 임의의 하나의 항원-결합 분자에의 결합을 억제하는 항원-결합 분자.
21. 절 20의 항원-결합 분자로서, 상기 항원-결합 분자는 LIGHT에 특이적으로 결합하고 LIGHT의, 하기로 구성된 군으로부터 선택된 항체에의 결합을 억제한다: 2E08, 3A07, 3B04, 3C10, 3D12, 3E09, 2B11, 3B04_var1, 3B04_var2, 3B04_var3, 3B04_var4, 3B04_var5, 3B04_var6, 3B04_var7, 3B04_var8, 3B04_var9, 3B04_var10, 3B04_var11, 3B04_var12, 3B04_var13, 3B04_var14, 3B04_var15, 3B04_var16, 3D12_var1, 3D12_var2, 3D12_var3, 3D12_var4, 3D12_var5, 3D12_var6, 3D12_var7, 3D12_var8, 3D12_var9, 3D12_var10, 3D12_var11, 3D12_var12, 3D12_var13, 3D12_var14, 3D12_var15 및 3D12_var16.
22. 절 1 내지 19 중 임의의 하나의 항원-결합 분자에 의해 결합된 LIGHT의 에피토프에 특이적으로 결합하는 항원-결합 분자.
23. 절 22의 항원-결합 분자로서, 상기 항원-결합 분자는 하기로 구성된 군으로부터 선택된 항체에 의해 결합된 LIGHT의 에피토프에 특이적으로 결합한다: 2E08, 3A07, 3B04, 3C10, 3D12, 3E09, 2B11, 3B04_var1, 3B04_var2, 3B04_var3, 3B04_var4, 3B04_var5, 3B04_var6, 3B04_var7, 3B04_var8, 3B04_var9, 3B04_var10, 3B04_var11, 3B04_var12, 3B04_var13, 3B04_var14, 3B04_var15, 3B04_var16, 3D12_var1, 3D12_var2, 3D12_var3, 3D12_var4, 3D12_var5, 3D12_var6, 3D12_var7, 3D12_var8, 3D12_var9, 3D12_var10, 3D12_var11, 3D12_var12, 3D12_var13, 3D12_var14, 3D12_var15 및 3D12_var16.
24. 인간 LIGHT의 에피토프에 특이적으로 결합하는, 항원-결합 분자 로서, 상기 에피토프는 아미노산 GRATSSSRVW (서열번호: 124)를 포함한다.
25. 절 24의 항원-결합 분자로서, 상기 항원 결합 분자는 하기로 구성된 군으로부터 선택된다: 2E08, 3A07, 3B04, 3C10, 3D12, 3E09, 2B11, 3B04_var1, 3B04_var2, 3B04_var3, 3B04_var4, 3B04_var5, 3B04_var6, 3B04_var7, 3B04_var8, 3B04_var9, 3B04_var10, 3B04_var11, 3B04_var12, 3B04_var13, 3B04_var14, 3B04_var15, 3B04_var16, 3D12_var1, 3D12_var2, 3D12_var3, 3D12_var4, 3D12_var5, 3D12_var6, 3D12_var7, 3D12_var8, 3D12_var9, 3D12_var10, 3D12_var11, 3D12_var12, 3D12_var13, 3D12_var14, 3D12_var15 및 3D12_var16, 및 이의 단편 및 변이체.
26. 절 25의 항원-결합 분자로서, 상기 항원-결합 분자는 3B04 var16이다.
27. 인간 LIGHT에 특이적으로 결합하는 항원-결합 분자로서, 상기 항원-결합 분자는 1:1의 비로 인간 LIGHT의 삼량체에 결합된다.
28. 절 27의 항원-결합 분자로서, 상기 항원-결합 분자는 하기로부터 선택된다: 3B04, 3D12, 3B04_var1, 3B04_var2, 3B04_var3, 3B04_var4, 3B04_var5, 3B04_var6, 3B04_var7, 3B04_var8, 3B04_var9, 3B04_var10, 3B04_var11, 3B04_var12, 3B04_var13, 3B04_var14, 3B04_var15, 3B04_var16, 3D12_var1, 3D12_var2, 3D12_var3, 3D12_var4, 3D12_var5, 3D12_var6, 3D12_var7, 3D12_var8, 3D12_var9, 3D12_var10, 3D12_var11, 3D12_var12, 3D12_var13, 3D12_var14, 3D12_var15 및 3D12_var16, 및 이의 단편 및 변이체.
29. 절 33의 항원-결합 분자로서, 상기 항원-결합 분자는 3B04_var16이다. 상기 항원-결합 분자는 LIGHT에 특이적으로 결합하고 절 1 내지 19 중 임의의 하나의 항원-결합 분자로 LIGHT에의 결합과 경쟁한다.
30. 절 29의 항원-결합 분자로서, 상기 항원-결합 분자 LIGHT에 특이적으로 결합하고 LIGHT에 결합하기 위해 하기로 구성된 군으로부터 선택된 항체와 경쟁한다: 2E08, 3A07, 3B04, 3C10, 3D12, 3E09, 2B11, 3B04_var1, 3B04_var2, 3B04_var3, 3B04_var4, 3B04_var5, 3B04_var6, 3B04_var7, 3B04_var8, 3B04_var9, 3B04_var10, 3B04_var11, 3B04_var12, 3B04_var13, 3B04_var14, 3B04_var15, 3B04_var16, 3D12_var1, 3D12_var2, 3D12_var3, 3D12_var4, 3D12_var5, 3D12_var6, 3D12_var7, 3D12_var8, 3D12_var9, 3D12_var10, 3D12_var11, 3D12_var12, 3D12_var13, 3D12_var14, 3D12_var15 및 3D12_var16.
31. 절 1 내지 16 중 임의의 하나에 따른 항-LIGHT 항원 결합 분자로서, 명시된 서열 또는 서열들에서 1 내지 10개의 아미노산 치환을 포함한다.
32. 절 31 에 따른 항-LIGHT 항원 결합 분자로서, 명시된 서열 또는 서열들에서1 내지 5개의 아미노산 치환을 포함한다.
33. 절 31 에 따른 항-LIGHT 항원 결합 분자로서, 명시된 서열 또는 서열들에서1 내지 2개의 아미노산 치환을 포함한다.
34. 절 31 내지 33 중 임의의 하나에 따른 항-LIGHT 항원 결합 분자로서, 상기 하나 이상의 아미노산 치환은 항원 결합 분자의 CDR 영역 또는 CDR 영역들에 있다.
35. 절 31 내지 33 중 임의의 하나에 따른 항-LIGHT 항원 결합 분자로서, 상기 하나 이상의 아미노산 치환은 항원 결합 분자의 가변 영역 중 한 또는 둘 모두에 있다.
36. 절 31 내지 33 중 임의의 하나에 따른 항-LIGHT 항원 결합 분자로서, 상기 하나 이상의 아미노산 치환은 항원 결합 분자의 프레임워크 영역 에 있다.
37. 절 31 내지 33 중 임의의 하나에 따른 항-LIGHT 항원 결합 분자로서, 상기 항원-결합 분자는 하기로 구성된 군으로부터 선택된 항체로부터 유래된 변이체이다: 2E08, 3A07, 3B04, 3C10, 3D12, 3E09, 2B11, 3B04_var1, 3B04_var2, 3B04_var3, 3B04_var4, 3B04_var5, 3B04_var6, 3B04_var7, 3B04_var8, 3B04_var9, 3B04_var10, 3B04_var11, 3B04_var12, 3B04_var13, 3B04_var14, 3B04_var15, 3B04_var16, 3D12_var1, 3D12_var2, 3D12_var3, 3D12_var4, 3D12_var5, 3D12_var6, 3D12_var7, 3D12_var8, 3D12_var9, 3D12_var10, 3D12_var11, 3D12_var12, 3D12_var13, 3D12_var14, 3D12_var15 및 3D12_var16.
38. 절 17 내지 19 또는 31 내지 33 중 임의의 하나의 항-LIGHT 항원 결합 분자로서, 상기 아미노산 치환은 보존적 아미노산 치환이다.
39. 임의의 이전의 절의 항-LIGHT 항원 결합 분자로서, 상기 항원 결합 분자는 항체 또는 단편 또는 이의 유도체이다.
40. 절 39 의 항-LIGHT 항원 결합 분자로서, 상기 항체 단편 또는 유도체는 Fab, F(ab')2, Fv, scFv, dAb, Fd, 또는 디아바디이다.
41. 절 39의 항-LIGHT 항체 로서, 항체는 단클론성 항체이다.
42. 절 41의 항-LIGHT 항체로서, 상기 단클론성 항체는 인간화된다.
43. 절 41의 항-LIGHT 항체로서, 상기 단클론성 항체는 탈면역화된다.
44. 절 39 내지 43 중 임의의 하나의 항-LIGHT 항체 또는 항체 단편로서, 상기 항체 또는 항체 단편은 IgA, IgD, IgE, IgG, IgM 또는 IgY 항체 또는 항체 단편이다.
45. 절 39 내지 44 중 임의의 하나의 항-LIGHT 항체 또는 항체 단편로서, 상기 항체는 IgG 항체이다.
46. 절 45의 항-LIGHT 항체 또는 항체 단편로서, 상기 IgG 항체 또는 항체 단편은 lgG4 항체 또는 항체 단편이다.
47. 항-LIGHT 항원 결합 분자로서, 상기 항-LIGHT 항원 결합 분자는 절 1 내지 19 중 임의의 하나의 항-LIGHT 항원 결합 분자의 인간화된 또는 탈면역화된 유도체 이다.
48. 절 47에 따른 항-LIGHT 항원 결합 분자로서, 상기 항-LIGHT 항원 결합 분자는 2E08, 3A07, 3B04, 3C10, 3D12, 3E09 및 2B11로 구성된 군으로부터 선택된 항체의 인간화된 또는 탈면역화된 유도체이다.
49. 절 1 내지 19 중 임의의 하나에 따른 항원-결합 분자 또는 항체의 친화성 성숙된 돌연변이체.
50. 절 49의 친화성 성숙된 돌연변이체로서, 상기 친화성 성숙된 돌연변이체는 모 항체와 비교하여 LIGHT에 대한 더 높은 친화도를 갖는다.
51. 절 49 또는 절 50 의 친화성 성숙된 돌연변이체로서, 상기 친화성 성숙된 돌연변이체는 하기로 구성된 군으로부터 선택된 항체로부터 유래된 친화성 성숙된 돌연변이체이다: 2E08, 3A07, 3B04, 3C10, 3D12, 3E09, 2B11, 3B04_var1, 3B04_var2, 3B04_var3, 3B04_var4, 3B04_var5, 3B04_var6, 3B04_var7, 3B04_var8, 3B04_var9, 3B04_var10, 3B04_var11, 3B04_var12, 3B04_var13, 3B04_var14, 3B04_var15, 3B04_var16, 3D12_var1, 3D12_var2, 3D12_var3, 3D12_var4, 3D12_var5, 3D12_var6, 3D12_var7, 3D12_var8, 3D12_var9, 3D12_var10, 3D12_var11, 3D12_var12, 3D12_var13, 3D12_var14, 3D12_var15 및 3D12_var16.
52. 임의의 이전의 절의 항원 결합 분자 또는 친화성 성숙된 돌연변이체로서, 상기 항원 결합 분자 또는 친화성 성숙된 돌연변이체는 인간 LIGHT 에 특이적으로 결합한다.
53. 임의의 이전의 절의 항원 결합 분자 또는 친화성 성숙된 돌연변이체로서, 상기 항원 결합 분자 또는 친화성 성숙된 돌연변이체는 막-결합 LIGHT 에 특이적으로 결합한다.
54. 임의의 이전의 절의 항원 결합 분자 또는 친화성 성숙된 돌연변이체로서, 상기 항원 결합 분자 또는 친화성 성숙된 돌연변이체는 막-결합 인간 LIGHT 에 특이적으로 결합한다.
55. 임의의 이전의 절의 항원 결합 분자 또는 친화성 성숙된 돌연변이체로서, 상기 항원 결합 분자 또는 친화성 성숙된 돌연변이체는 가용성 LIGHT와 비교하여 막-결합 LIGHT에 대해 더 높은 친화도를 갖는다.
56. 절 55의 항원 결합 분자 또는 친화성 성숙된 돌연변이체로서, 상기 항원 결합 분자 또는 친화성 성숙된 돌연변이체는 가용성 LIGHT와 비교하여 막-결합 LIGHT에 대해 적어도 약 10배 더 높은 친화도를 갖는다.
57. 절 55의 항원 결합 분자 또는 친화성 성숙된 돌연변이체로서, 상기 항원 결합 분자 또는 친화성 성숙된 돌연변이체는 가용성 LIGHT와 비교하여 막-결합 LIGHT에 대해 적어도 약 50배 더 높은 친화도를 갖는다.
58. 절 55의 항원 결합 분자 또는 친화성 성숙된 돌연변이체로서, 상기 항원 결합 분자 또는 친화성 성숙된 돌연변이체는 가용성 LIGHT와 비교하여 막-결합 LIGHT에 대해 적어도 약 100배 더 높은 친화도를 갖는다.
59. 임의의 이전의 절의 항원 결합 분자 또는 친화성 성숙된 돌연변이체로서, 상기 항원 결합 분자 또는 친화성 성숙된 돌연변이체는 약 5nM 미만 의 막 LIGHT에 대한 KD 값을 갖는다.
60. 절 59의 항원 결합 분자 또는 친화성 성숙된 돌연변이체로서, 상기 항원 결합 분자 또는 친화성 성숙된 돌연변이체는 약 1 nM 미만 의 막 LIGHT에 대한 KD 값을 갖는다.
61. 절 59의 항원 결합 분자 또는 친화성 성숙된 돌연변이체로서, 상기 항원 결합 분자 또는 친화성 성숙된 돌연변이체는 약 0.5nM 미만 의 막 LIGHT에 대한 KD 값을 갖는다.
62. 임의의 이전의 절의 항원 결합 분자 또는 친화성 성숙된 돌연변이체로서, 상기 항원 결합 분자 또는 친화성 성숙된 돌연변이체는 약 1 nM 초과 의 가용성 LIGHT에 대한 KD 값을 갖는다.
63. 임의의 이전의 절의 항원 결합 분자 또는 친화성 성숙된 돌연변이체로서, 상기 항원 결합 분자 또는 친화성 성숙된 돌연변이체는 약 5nM 초과 의 가용성 LIGHT에 대한 KD 값을 갖는다.
64. 임의의 이전의 절의 항원 결합 분자 또는 친화성 성숙된 돌연변이체로서, 상기 항원 결합 분자 또는 친화성 성숙된 돌연변이체는 약 10nM 초과 의 가용성 LIGHT에 대한 KD 값을 갖는다.
65. 항-LIGHT 항원 결합 분자 또는 이의 친화성 성숙된 돌연변이체로서, 상기 항원 결합 분자 또는 친화성 성숙된 돌연변이체는 약 1 nM 미만의 막 LIGHT에 대한 KD 값을 가지며 약 1 nM 초과의 가용성 LIGHT에 대한 KD 값을 갖는다.
66. 항-LIGHT 항원 결합 분자 또는 이의 친화성 성숙된 돌연변이체로서, 상기 항원 결합 분자 또는 친화성 성숙된 돌연변이체는 약 1 nM 미만의 막 LIGHT에 대한 KD 값을 가지며 약 5nM 초과의 가용성 LIGHT에 대한 KD 값을 갖는다.
67. 항-LIGHT 항원 결합 분자 또는 이의 친화성 성숙된 돌연변이체로서, 상기 항원 결합 분자 또는 친화성 성숙된 돌연변이체는 약 0.5nM 미만의 막 LIGHT에 대한 KD 값 및 약 10nM 초과의 가용성 LIGHT에 대한 KD 값, 또는 약 0.1 nM 미만의 막 LIGHT에 대한 KD 값 및 약 10nM 초과의 가용성 LIGHT에 대한 KD 값을 갖는다.
68. 임의의 이전의 절의 항원 결합 분자 또는 친화성 성숙된 돌연변이체로서, 상기 항원 결합 분자 또는 친화성 성숙된 돌연변이체는 막 LIGHT의 HVEM 및/또는 LTβR에의 결합 또는 LIGHT 발현 세포의 HVEM 및/또는 LTβR에의 결합을 억제한다.
69. 절 68의 항원 결합 분자 또는 친화성 성숙된 돌연변이체로서, 상기 항원 결합 분자 또는 친화성 성숙된 돌연변이체는 적어도 25%, 적어도 50% 또는 적어도 75%까지 결합을 억제한다.
70. 임의의 이전의 절의 항원 결합 분자 또는 친화성 성숙된 돌연변이체로서, 상기 항원 결합 분자 또는 친화성 성숙된 돌연변이체 막 LIGHT의 유인 수용체 3에의 또는 막 LIGHT 발현 세포의 유인 수용체 3에의 결합을 부분적으로 억제한다.
71. 임의의 이전의 절의 항원 결합 분자 또는 친화성 성숙된 돌연변이체로서, 상기 항원 결합 분자 또는 친화성 성숙된 돌연변이체는 생체내 또는 시험관내에서 투여될 때 IL-8의 분비를 감소시킨다.
72. 절 1 내지 71 중 임의의 하나의 항원 결합 분자 또는 절 49 내지 71 중 임의의 하나의 친화성 성숙된 돌연변이체를 포함하는 약제학적 조성물.
73. 절 72의 약제학적 조성물로서, 또 다른 치료적 활성제를 추가로 포함하거나, 또는 상기 약제학적 조성물은 또 다른 치료적 활성제와 함께 사용하기 위한 것이다.
74. 절 73의 약제학적 조성물로서, 상기 다른 치료적 활성제는 항-염증제이다.
75. 절 74의 약제학적 조성물로서, 상기 항-염증제는 NSAID 또는 스테로이드이다.
76. 절 75의 약제학적 조성물로서, 상기 NSAID는 살리실레이트 (예컨대 아스피린 (아세틸살리실 산), 디플루니살, 살리실산, 살살레이트), 프로피온산 유도체 (이부프로펜, 덱시부프로펜, 나프록센), 아세트산 유도체 (인도메타신, 디클로페낙), 에놀산 유도체, 안트라닐산 유도체 (페나메이트), 선택적 COX-2 억제제, 및 설폰아닐라이드로 구성된 군으로부터 선택된다.
77. 절 73의 약제학적 조성물로서, 상기 다른 치료적 활성제는 면역억제제이다.
78. 절 77의 약제학적 조성물로서, 상기 면역억제제는 글루코코르티코이드 및 세포증식억제제로 구성된 군으로부터 선택된다.
79. 절 78의 약제학적 조성물로서, 상기 글루코코르티코이드는 코르티솔, 코르티손, 프레드니손, 프레드니솔론, 메틸프레드니솔론, 덱사메타손, 베타메타손, 트리암시놀론, 베클로메타손, 플루드로코르티손, 데옥시코르티코스테론 및 알도스테론으로 구성된 군으로부터 선택된다.
80. 절 78의 약제학적 조성물로서, 상기 세포증식억제제는 알킬화제, 항대사물질, 메토트렉세이트, 아자티오프린, 머캅토퓨린, 및 세포독성 항생제로 구성된 군으로부터 선택된다.
81. 절 73의 약제학적 조성물로서, 상기 다른 약제학적으로 활성제는 억제제이되, 상기 억제제는 TNF-억제제, IL-12 억제제, IL-23 억제제 및 α4β7 인테그린 억제제로 구성된 군으로부터 선택된다.
82. 절 81의 약제학적 조성물로서, 상기 억제제는 단클론성 항체이다.
83. 절 81의 약제학적 조성물로서, 상기 억제제는 인플릭시맙 (레미케이드), 아달리무맙 (휴미라), 세르톨리주맙 페골 (Cimzia), 및 골리무맙 (Simponi), 우스테키누맙 (Stelara) 및 베돌리주맙 (Entyvio)로 구성된 군으로부터 선택된다.
84. 절 1 내지 66 중 임의의 하나의 항원 결합 분자 또는 절 49 내지 71 중 임의의 하나의 친화성 성숙된 돌연변이체 또는 절 72 내지 83의 임의의 하나에 다른 약제학적 조성물을 포함하고, 추가로 추가의 치료적 활성제를 포함하는 키트.
85. 절 84의 키트로서, 사용 지침을 추가로 포함한다.
86. 절 84 또는 절 85의 키트로서, 상기 약제학적 성분은 키트 내에 별도로 배치된다.
87. 임의의 이전의 절의 키트로서, 상기 추가의 치료적 활성제는 항-염증제, 면역억제제 또는 저해제이다.
88. 절 87의 키트로서, 상기 항-염증제는 NSAID 또는 스테로이드이다.
89. 절 88 의 키트로서, 상기 NSAID는 살리실레이트 (예컨대 아스피린 (아세틸살리실 산), 디플루니살, 살리실산, 살살레이트), 프로피온산 유도체 (이부프로펜, 덱시부프로펜, 나프록센), 아세트산 유도체 (인도메타신, 디클로페낙), 에놀산 유도체, 안트라닐산 유도체 (페나메이트), 선택적 COX-2 억제제, 및 설폰아닐라이드로 구성된 군으로부터 선택된다.
90. 절 87 의 키트로서, 상기 면역억제제는 글루코코르티코이드 및 세포증식억제제로 구성된 군으로부터 선택된다.
91. 절 90 의 키트로서, 상기 글루코코르티코이드는 코르티솔, 코르티손, 프레드니손, 프레드니솔론, 메틸프레드니솔론, 덱사메타손, 베타메타손, 트리암시놀론, 베클로메타손, 플루드로코르티손, 데옥시코르티코스테론 및 알도스테론으로 구성된 군으로부터 선택된다.
92. 절 91의 키트로서, 상기 세포증식억제제는 알킬화제, 항대사물질, 메토트렉세이트, 아자티오프린, 머캅토퓨린, 및 세포독성 항생제로 구성된 군으로부터 선택된다.
93. 절 87 의 키트로서, 상기 추가의 치료적 활성제는 TNF-억제제, IL-12 억제제, IL-23 억제제 및 α4β7 인테그린 억제제로 구성된 군으로부터 선택된 억제제이다.
94. 절 87 또는 93의 키트로서, 상기 억제제는 단클론성 항체이다.
95. 절 94의 키트로서, 상기 억제제는 인플릭시맙 (Remicade), 아달리무맙 (Humira), 세르톨리주맙 페골 (Cimzia), 및 골리무맙 (Simponi) 및 에타네르셉트 (Enbrel), 우스테키누맙 (Stelara) 및 베돌리주맙 (Entyvio)로 구성된 군으로부터 선택된다.
96. 임의의 이전의 절의 키트로서, 상기 항원 결합 분자, 친화성 성숙된 돌연변이체 또는 약제학적 조성물 및 추가의 치료적 활성제는 별개의, 순차적인 또는 동시 투여를 위한 것이다.
97. 의약에 사용하기 위한 절 1 내지 71 중 임의의 하나의 항원 결합 분자, 절 49 내지 71 중 임의의 하나의 친화성 성숙된 돌연변이체, 또는 절 72 내지 83 중 임의의 하나의 약제학적 조성물.
98. 염증성 장애 또는 질환 또는 자가면역 장애 또는 질환의 치료 또는 예방에 사용되는 절 1 내지 71 중 임의의 하나의 항원 결합 분자, 절 49 내지 71 중 임의의 하나의 친화성 성숙된 돌연변이체, 또는 절 72 내지 83 중 임의의 하나의 약제학적 조성물.
99. 절 98에서와 같이 사용되는 항원 결합 분자, 친화성 성숙된 돌연변이체 또는 약제학적 조성물로서, 상기 염증성 또는 자가면역 장애 또는 질환은 하기로 구성된 군으로부터 선택된다: 강직 척추염, 아토피 피부염, 만성적 소화장애증, 염증성 장 질환 (IBD), 크론병, 류마티스성 관절염, 건선, 세기관지염, 치은염, 이식 거부, 동종이계 이식 거부, 이식편 대 숙주 질환 (GvHD), 천식, 성인 호흡 곤란 증후군 (ARDS), 만성 심부전, 만성적 폐쇄성 폐 질환, 신장 질환, 패혈성 쇼크, 궤양성 대장염, 섬유증, 다발성 경화증, 쇼그렌 증후군, 낭창, 기도 염증, 간 질환, 간염, 만성적 소화장애증, 피부염, 호산구증가증 및 원발성 담도 간경변증.
100. 절 99에서와 같이 사용되는 항원 결합 분자, 친화성 성숙된 돌연변이체 또는 약제학적 조성물로서, 염증성 질환은 궤양성 대장염이다.
101. 절 100에서와 같이 사용되는 항원 결합 분자, 친화성 성숙된 돌연변이체 또는 약제학적 조성물로서, 상기 염증성 질환은 크론병이다.
102. 염증성 장애 또는 질환 또는 자가면역 장애 또는 질환 의 치료에 사용하기 위한 약제의 제조에서의, 절 1 내지 66 중 임의의 하나의 항원 결합 분자 또는 절 44 내지 66 중 임의의 하나의 친화성 성숙된 돌연변이체의 용도.
103. 청구항 102에 따른 항원 결합 분자의 용도로서, 상기 염증성 또는 자가면역 장애 또는 질환은 하기로 구성된 군으로부터 선택된다: 강직 척추염, 아토피 피부염, 만성적 소화장애증, 염증성 장 질환 (IBD), 크론병, 류마티스성 관절염, 건선, 세기관지염, 치은염, 이식 거부, 동종이계 이식 거부, 이식편 대 숙주 질환 (GvHD), 천식, 성인 호흡 곤란 증후군 (ARDS), 만성 심부전, 만성적 폐쇄성 폐 질환, 신장 질환, 패혈성 쇼크, 궤양성 대장염, 섬유증, 다발성 경화증, 쇼그렌 증후군, 낭창, 기도 염증, 간 질환, 간염, 만성적 소화장애증, 피부염, 호산구증가증 및 원발성 담도 간경변증.
104. 청구항 103에 따른 항원 결합 분자의 용도로서, 상기 염증성 질환은 궤양성 대장염이다.
105. 청구항 103에 따른 항원 결합 분자의 용도로서, 상기 염증성 질환은 크론병이다.
106. LIGHT-매개된 질환 또는 장애의 치료 또는 예방 방법으로서, 상기 방법은 상기 대상체에게 절 1 내지 71 중 임의의 하나의 항원 결합 분자 또는 절 49 내지 71 중 임의의 하나의 친화성 성숙된 돌연변이체 또는 절 72 내지 83의 임의의 하나에 다른 약제학적 조성물을 투여하는 것을 포함한다.
107. 절 106의 방법으로서, 상기 LIGHT-매개된 질환 또는 장애는 염증성 질환 또는 장애 또는 면역 질환 또는 장애이다.
108. 절 107의 치료 방법으로서, 상기 염증성 또는 자가면역 장애 또는 질환은 하기로 구성된 군으로부터 선택된다: 강직 척추염, 아토피 피부염, 만성적 소화장애증, 염증성 장 질환 (IBD), 크론병, 류마티스성 관절염, 건선, 세기관지염, 치은염, 이식 거부, 동종이계 이식 거부, 이식편대 숙주 질환 (GvHD), 천식, 성인 호흡 곤란 증후군 (ARDS), 만성 심부전, 만성적 폐쇄성 폐 질환, 신장 질환, 패혈성 쇼크, 궤양성 대장염, 섬유증, 다발성 경화증, 쇼그렌 증후군, 낭창, 기도 염증, 간 질환, 간염, 만성적 소화장애증, 피부염, 호산구증가증 및 원발성 담도 간경변증.
109. 절 108의 치료 방법으로서, 상기 염증성 질환은 궤양성 대장염이다.
110. 절 108의 치료 방법으로서, 상기 염증성 질환은 크론병이다.
111. LIGHT 단백질의 HVEM 및/또는 LTβR에의 결합 또는 LIGHT 발현 세포의 HVEM 및/또는 LTβR에의 결합을 억제하는 방법으로서, 상기 방법은 상기 LIGHT 단백질 또는 LIGHT 발현 세포를 절 1 내지 71 중 임의의 하나에 따른 항원-결합 분자 또는 절 49 내지 71 중 임의의 하나에 따른 친화성 성숙된 돌연변이체 과 접촉시키는 단계를 포함한다.
112. 절 111의 방법으로서, 상기 방법은 시험관내 방법이다.
113. 절 111의 방법으로서, 상기 방법은 생체내 방법이다.
114. 절 1 내지 71 중 임의의 하나의 항원 결합 분자를 인코딩하는 핵산.
115. 절 114의 핵산을 포함하는 플라스미드.
116. 절 114의 핵산을 포함하는 벡터.
117. 절 115 또는 절 116에 따른 벡터 또는 플라스미드를 포함하는 숙주세포.
118. 항-LIGHT 항원 결합 분자를 발현시키는 세포를 생산하는 방법으로서, 상기 방법은 상기 세포를 절 115 또는 절 116에 따른 플라스미드 또는 벡터로 형질감염시키는 것을 포함한다.
119. 항-LIGHT 항원 결합 분자에 대한 생산 방법으로서, 세포 내의 플라스미드 또는 벡터의 인코딩 핵산 서열을 발현시키는 조건 하에서 세포 배양 배지에서 절 117에 따른 숙주세포를 배양하는 단계를 포함한다.
120. 절 119의 방법으로서, 상기 방법은 상기 세포 배양 상청액으로부터 항-LIGHT 항원 결합 분자를 얻는 단계를 추가로 포함한다.

Claims (32)

  1. 항-LIGHT 항원 결합 분자로서, 가용성 LIGHT와 비교하여 막-결합 LIGHT에 대해 더 높은 친화도를 갖는, 항-LIGHT 항원 결합 분자.
  2. 청구항 1에 있어서, 상기 항원 결합 분자는 가용성 LIGHT와 비교하여 막-결합 LIGHT에 대해 적어도 약 10배 더 높은 친화도를 갖는, 항-LIGHT 항원 결합 분자.
  3. 청구항 1에 있어서, 상기 항원 결합 분자는 가용성 LIGHT와 비교하여 막-결합 LIGHT에 대해 적어도 약 50배 더 높은 친화도를 갖는, 항-LIGHT 항원 결합 분자.
  4. 청구항 1 내지 3 중 어느 한 항에 있어서, 상기 항원 결합 분자는 하기를 포함하는, 항-LIGHT 항원 결합 분자:
    서열번호 40, 8, 48, 16, 24, 32, 56, 64, 72, 80, 88, 96, 104, 112 및 120 중 임의의 하나의 아미노산 서열에 대해 적어도 80% 동일성을 갖는 VHCDR3; 및/또는
    서열번호 36, 4, 44, 12, 20, 28, 52, 60, 68, 76, 84, 92, 100, 108, 및 116 중 임의의 하나의 아미노산 서열에 대해 적어도 80% 동일성을 갖는 VLCDR3.
  5. 청구항 1 내지 3 중 어느 한 항에 있어서, 상기 항원 결합 분자는 하기를 포함하는, 항-LIGHT 항원 결합 분자:
    서열번호 40, 8, 48, 16, 24, 32, 56, 64, 72, 80, 88, 96, 104, 112 및 120 중 임의의 하나의 아미노산 서열을 포함하는 VHCDR3; 및/또는
    서열번호 36, 4, 44, 12, 20, 28, 52, 60, 68, 76, 84, 92, 100, 108, 및 116 중 임의의 하나의 아미노산 서열을 포함하는 VLCDR3.
  6. 청구항 1 내지 3 중 어느 한 항에 있어서, 상기 항원 결합 분자는 하기를 포함하는, 항-LIGHT 항원 결합 분자:
    서열번호 38, 6, 46, 14, 22, 30, 54, 62, 70, 78, 86, 94, 102, 110, 118 중 임의의 하나의 아미노산 서열에 대해 적어도 80% 동일성을 갖는 VHCDR1;
    서열번호 39, 7, 47, 15, 23, 31, 55, 63, 71, 79, 87, 95, 103, 111, 119 중 임의의 하나의 아미노산 서열에 대해 적어도 80% 동일성을 갖는 VHCDR2; 및
    서열번호 40, 8, 48, 16, 24, 32, 56, 64, 72, 80, 88, 96, 104, 112 및 120 중 임의의 하나의 아미노산 서열에 대해 적어도 80% 동일성을 갖는 VHCDR3;
    및/또는
    서열번호 34, 2, 42, 10, 18, 26, 50, 58, 66, 74, 82, 90, 98, 106, 114 중 임의의 하나의 아미노산 서열에 대해 적어도 80% 동일성을 갖는 VLCDR1;
    서열번호 35, 3, 43, 11, 19, 27, 51, 59, 67, 75, 83, 91, 99, 107, 115 중 임의의 하나의 아미노산 서열에 대해 적어도 80% 동일성을 갖는 VLCDR2; 및
    서열번호 36, 4, 44, 12, 20, 28, 52, 60, 68, 76, 84, 92, 100, 108, 및 116 중 임의의 하나의 아미노산 서열에 대해 적어도 80% 동일성을 갖는 VLCDR3.
  7. 청구항 1 내지 3 중 어느 한 항에 있어서, 상기 항원 결합 분자는 하기를 포함하는, 항-LIGHT 항원 결합 분자:
    서열번호 38, 6, 46, 14, 22, 30, 54, 62, 70, 78, 86, 94, 102, 110, 118 중 임의의 하나의 아미노산 서열을 포함하는 VHCDR1;
    서열번호 39, 7, 47, 15, 23, 31, 55, 63, 71, 79, 87, 95, 103, 111, 119 중 임의의 하나의 아미노산 서열을 포함하는 VHCDR2; 및
    서열번호 40, 8, 48, 16, 24, 32, 56, 64, 72, 80, 88, 96, 104, 112 및 120 중 임의의 하나의 아미노산 서열을 포함하는 VHCDR3;
    및/또는
    서열번호 34, 2, 42, 10, 18, 26, 50, 58, 66, 74, 82, 90, 98, 106, 114 중 임의의 하나의 아미노산 서열을 포함하는 VLCDR1;
    서열번호 35, 3, 43, 11, 19, 27, 51, 59, 67, 75, 83, 91, 99, 107, 115 중 임의의 하나의 아미노산 서열을 포함하는 VLCDR2; 및
    서열번호 36, 4, 44, 12, 20, 28, 52, 60, 68, 76, 84, 92, 100, 108, 및 116 중 임의의 하나의 아미노산 서열을 포함하는 VLCDR3.
  8. 청구항 1 내지 3 중 어느 한 항에 있어서, 상기 항원 결합 분자는 하기를 포함하는, 항-LIGHT 항원 결합 분자:
    서열번호 37, 서열번호 5, 서열번호 45, 서열번호 13, 서열번호 21, 서열번호 29, 서열번호 53, 서열번호 61, 서열번호 69, 서열번호 77, 서열번호 85, 서열번호 93, 서열번호 101, 서열번호 109, 서열번호 117로 구성된 군으로부터 선택된 아미노산 서열에 대해 적어도 80% 동일성을 갖는 중쇄 가변 영역;
    및/또는
    서열번호 33, 서열번호 1, 서열번호 41, 서열번호 9. 서열번호 17, 서열번호 25, 서열번호 49, 서열번호 57, 서열번호 65, 서열번호 73, 서열번호 81, 서열번호 89, 서열번호 97, 서열번호 105, 서열번호 113으로 구성된 군으로부터 선택된 아미노산 서열에 대해 적어도 80% 동일성을 갖는 경쇄 가변 영역.
  9. 청구항 1 내지 3 중 어느 한 항에 있어서, 상기 항원 결합 분자는 하기를 포함하는, 항-LIGHT 항원 결합 분자:
    서열번호 37, 서열번호 5, 서열번호 45, 서열번호 13, 서열번호 21, 서열번호 29, 서열번호 53, 서열번호 61, 서열번호 69, 서열번호 77, 서열번호 85, 서열번호 93, 서열번호 101, 서열번호 109, 서열번호 117로 구성된 군으로부터 선택된 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 영역;
    및/또는
    서열번호 33, 서열번호 1, 서열번호 41, 서열번호 9, 서열번호 17, 서열번호 25, 서열번호 49, 서열번호 57, 서열번호 65, 서열번호 73, 서열번호 81, 서열번호 89, 서열번호 97, 서열번호 105, 서열번호 113으로 구성된 군으로부터 선택된 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 영역.
  10. 청구항 1 내지 3 중 어느 한 항에 있어서, 상기 항원 결합 분자는 하기로 구성된 군으로부터 선택되는, 항-LIGHT 항원 결합 분자:
    (a) 아미노산 서열 DYEMH(서열번호 38)를 포함하는 VHCDR1, 아미노산 서열 EIDPETGDTAYSQKFQG(서열번호 39)를 포함하는 VHCDR2 및 아미노산 서열 ETDYFFDY(서열번호 40)를 포함하는 VHCDR3을 포함하는 중쇄 가변 영역; 및
    아미노산 서열 RASENIYGALN(서열번호 34)을 포함하는 VLCDR1, 아미노산 서열 GATNLAE(서열번호 35)를 포함하는 VLCDR2 및 아미노산 서열 QNVLTTPWT(서열번호 36)를 포함하는 VLCDR3을 포함하는 경쇄 가변 영역
    을 포함하는 항-LIGHT 항원 결합 분자;
    (b) 아미노산 서열 DYEMH(서열번호 6)를 포함하는 VHCDR1, 아미노산 서열 EIDPETGDTAYSQKFKG(서열번호 7)를 포함하는 VHCDR2, 아미노산 서열 ETDYFFDY(서열번호 8)를 포함하는 VHCDR3을 포함하는 중쇄 가변 영역; 및
    아미노산 서열 GASENIYGALN(서열번호 2)을 포함하는 VLCDR1, 아미노산 서열 GATNLAD(서열번호 3)를 포함하는 VLCDR2 및 아미노산 서열 QNVLTTPWT(서열번호 4)를 포함하는 VLCDR3을 포함하는 경쇄 가변 영역
    을 포함하는 항-LIGHT 항원 결합 분자;
    (c) 아미노산 서열 DSEIH(서열번호 46)를 포함하는 VHCDR1, 아미노산 서열 EIDPETGGTAYNQKFKG(서열번호 47)를 포함하는 VHCDR2, 아미노산 서열 ETDYFFDY(서열번호 48)를 포함하는 VHCDR3을 포함하는 중쇄 가변 영역; 및
    아미노산 서열 GASENIYGALN(서열번호 42)을 포함하는 VLCDR1, 아미노산 서열 GATNLAD(서열번호 43)를 포함하는 VLCDR2 및 아미노산 서열 QNVLSTPWT(서열번호 44)를 포함하는 VLCDR3을 포함하는 경쇄 가변 영역
    을 포함하는 항-LIGHT 항원 결합 분자;
    (d) 아미노산 서열 DYAIH(서열번호 86)를 포함하는 VHCDR1, 아미노산 서열 VISTYYGDASYNQKFKG(서열번호 87)를 포함하는 VHCDR2, 아미노산 SRGEYGNYDAMDY 서열(서열번호 88)을 포함하는 VHCDR3을 포함하는 중쇄 가변 영역; 및
    아미노산 서열 KASQSVDYDGDSYMN(서열번호 82)을 포함하는 VLCDR1, 아미노산 서열 AASNLES(서열번호 83)를 포함하는 VLCDR2 및 아미노산 서열 QQSNEDPLT(서열번호 84)를 포함하는 VLCDR3을 포함하는 경쇄 가변 영역
    을 포함하는 항-LIGHT 항원 결합 분자;
    (e) 아미노산 서열 DSEIH(서열번호 94)를 포함하는 VHCDR1, 아미노산 서열 EIDPETGGTAYNQKFKG(서열번호 95)를 포함하는 VHCDR2, 아미노산 서열 ETDYFFDY(서열번호 96)를 포함하는 VHCDR3을 포함하는 중쇄 가변 영역; 및
    아미노산 서열 SASSSVSYMY(서열번호 90)를 포함하는 VLCDR1, 아미노산 서열 DTSNLAS(서열번호 91)를 포함하는 VLCDR2 및 아미노산 서열 QQWSSYPLT(서열번호 92)를 포함하는 VLCDR3을 포함하는 경쇄 가변 영역
    을 포함하는 항-LIGHT 항원 결합 분자;
    (f) 아미노산 서열 DSEIH(서열번호 102)를 포함하는 VHCDR1, 아미노산 서열 EIDPETGGTAYNQKFKG(서열번호 103)를 포함하는 VHCDR2, 아미노산 서열 ETDYFFDY(서열번호 104)를 포함하는 VHCDR3을 포함하는 중쇄 가변 영역; 및
    아미노산 서열 SASSSVSYMY(서열번호 98)를 포함하는 VLCDR1, 아미노산 서열 DTSNLAS(서열번호 99)를 포함하는 VLCDR2 및 아미노산 서열 QQWSSYPLT(서열번호 100)를 포함하는 VLCDR3을 포함하는 경쇄 가변 영역
    을 포함하는 항-LIGHT 항원 결합 분자;
    (g) 아미노산 서열 DYYMY(서열번호 110)를 포함하는 VHCDR1, 아미노산 서열 AIGDGGIYTYYADTVKG(서열번호 111)를 포함하는 VHCDR2, 아미노산 서열 GTGDGFAY(서열번호 112)를 포함하는 VHCDR3을 포함하는 중쇄 가변 영역; 및
    아미노산 서열 RASESVDSYGNSFMH(서열번호 106)를 포함하는 VLCDR1, 아미노산 서열 LASNLES(서열번호 107)를 포함하는 VLCDR2 및 아미노산 서열 QQNNEDPYT(서열번호 108)를 포함하는 VLCDR3을 포함하는 경쇄 가변 영역
    을 포함하는 항-LIGHT 항원 결합 분자;
    (h) 아미노산 서열 DYAIH(서열번호 118)를 포함하는 VHCDR1, 아미노산 서열 VISTYYGDASYNQKFKG(서열번호 119)를 포함하는 VHCDR2, 아미노산 서열 SRGEYGNYDAMDY(서열번호 120)를 포함하는 VHCDR3을 포함하는 중쇄 가변 영역; 및
    아미노산 서열 RASESVDSYGNSFMH(서열번호 114)를 포함하는 VLCDR1, 아미노산 서열 RASNLES(서열번호 115)를 포함하는 VLCDR2 및 아미노산 서열 QQSNEDPYT(서열번호 116)를 포함하는 VLCDR3을 포함하는 경쇄 가변 영역
    을 포함하는 항-LIGHT 항원 결합 분자;
    (i) 아미노산 서열 DYEMH(서열번호 14)를 포함하는 VHCDR1, 아미노산 서열 EIDPETGDTAYSQKFKG(서열번호 15)를 포함하는 VHCDR2 및 아미노산 서열 ETDYFFDY(서열번호 16)를 포함하는 VHCDR3을 포함하는 중쇄 가변 영역; 및
    아미노산 서열 GASENIYGALN(서열번호 10)을 포함하는 VLCDR1, 아미노산 서열 GATNLAD(서열번호 11)를 포함하는 VLCDR2 및 아미노산 서열 QNVLTTPWT(서열번호 12)를 포함하는 VLCDR3을 포함하는 경쇄 가변 영역
    을 포함하는 항-LIGHT 항원 결합 분자;
    (j) 아미노산 서열 DYEMH(서열번호 22)를 포함하는 VHCDR1, 아미노산 서열 EIDPETGDTAYSQKFQG(서열번호 23)를 포함하는 VHCDR2 및 아미노산 서열 ETDYFFDY(서열번호 24)를 포함하는 VHCDR3을 포함하는 경쇄 가변 영역; 및
    아미노산 서열 GASENIYGALN(서열번호 10)을 포함하는 VLCDR1, 아미노산 서열 GATNLAD(서열번호 11)를 포함하는 VLCDR2 및 아미노산 서열 QNVLTTPWT(서열번호 12)를 포함하는 VLCDR3을 포함하는 경쇄 가변 영역
    을 포함하는 항-LIGHT 항원 결합 분자;
    (k) 아미노산 서열 DYEMH(서열번호 30)를 포함하는 VHCDR1, 아미노산 서열 EIDPETGDTAYSQKFQG(서열번호 31)를 포함하는 VHCDR2 및 아미노산 서열 ETDYFFDY(서열번호 32)를 포함하는 VHCDR3을 포함하는 중쇄 가변 영역; 및
    아미노산 서열 GASENIYGALN(서열번호 10)을 포함하는 VLCDR1, 아미노산 서열 GATNLAD(서열번호 11)를 포함하는 VLCDR2 및 아미노산 서열 QNVLTTPWT(서열번호 12)를 포함하는 VLCDR3을 포함하는 경쇄 가변 영역
    을 포함하는 항-LIGHT 항원 결합 분자;
    (l) 아미노산 서열 DYEMH(서열번호 38)를 포함하는 VHCDR1, 아미노산 서열 EIDPETGDTAYSQKFQG(서열번호 39)를 포함하는 VHCDR2 및 아미노산 서열 ETDYFFDY(서열번호 40)를 포함하는 VHCDR3을 포함하는 중쇄 가변 영역; 및
    아미노산 서열 GASENIYGALN(서열번호 10)을 포함하는 VLCDR1, 아미노산 서열 GATNLAD(서열번호 11)를 포함하는 VLCDR2 및 아미노산 서열 QNVLTTPWT(서열번호 12)를 포함하는 VLCDR3을 포함하는 경쇄 가변 영역
    을 포함하는 항-LIGHT 항원 결합 분자;
    (m) 아미노산 서열 DYEMH(서열번호 14)를 포함하는 VHCDR1, 아미노산 서열 EIDPETGDTAYSQKFKG(서열번호 15)를 포함하는 VHCDR2 및 아미노산 서열 ETDYFFDY(서열번호 16)를 포함하는 VHCDR3을 포함하는 중쇄 가변 영역; 및
    아미노산 서열 GASENIYGALN(서열번호 18)을 포함하는 VLCDR1, 아미노산 서열 GATNLAD(서열번호 19)를 포함하는 VLCDR2 및 아미노산 서열 QNVLTTPWT(서열번호 20)를 포함하는 VLCDR3을 포함하는 경쇄 가변 영역
    을 포함하는 항-LIGHT 항원 결합 분자;
    (n) 아미노산 서열 DYEMH(서열번호 22)를 포함하는 VHCDR1, 아미노산 서열 EIDPETGDTAYSQKFQG(서열번호 23)를 포함하는 VHCDR2 및 아미노산 서열 ETDYFFDY(서열번호 24)를 포함하는 VHCDR3을 포함하는 중쇄 가변 영역; 및
    아미노산 서열 GASENIYGALN(서열번호 18)을 포함하는 VLCDR1, 아미노산 서열 GATNLAD(서열번호 19)를 포함하는 VLCDR2 및 아미노산 서열 QNVLTTPWT(서열번호 20)를 포함하는 VLCDR3을 포함하는 경쇄 가변 영역
    을 포함하는 항-LIGHT 항원 결합 분자;
    (o) 아미노산 서열 DYEMH(서열번호 30)를 포함하는 VHCDR1, 아미노산 서열 EIDPETGDTAYSQKFQG(서열번호 31)를 포함하는 VHCDR2 및 아미노산 서열 ETDYFFDY(서열번호 32)를 포함하는 VHCDR3을 포함하는 중쇄 가변 영역; 및
    아미노산 서열 GASENIYGALN(서열번호 18)을 포함하는 VLCDR1, 아미노산 서열 GATNLAD(서열번호 19)를 포함하는 VLCDR2 및 아미노산 서열 QNVLTTPWT(서열번호 20)를 포함하는 VLCDR3을 포함하는 경쇄 가변 영역
    을 포함하는 항-LIGHT 항원 결합 분자;
    (p) 아미노산 서열 DYEMH(서열번호 38)를 포함하는 VHCDR1, 아미노산 서열 EIDPETGDTAYSQKFQG(서열번호 39)를 포함하는 VHCDR2 및 아미노산 서열 ETDYFFDY(서열번호 40)를 포함하는 VHCDR3을 포함하는 중쇄 가변 영역; 및
    아미노산 서열 GASENIYGALN(서열번호 18)을 포함하는 VLCDR1, 아미노산 서열 GATNLAD(서열번호 19)를 포함하는 VLCDR2 및 아미노산 서열 QNVLTTPWT(서열번호 20)를 포함하는 VLCDR3을 포함하는 경쇄 가변 영역
    을 포함하는 항-LIGHT 항원 결합 분자;
    (q) 아미노산 서열 DYEMH(서열번호 14)를 포함하는 VHCDR1, 아미노산 서열 EIDPETGDTAYSQKFKG(서열번호 15)를 포함하는 VHCDR2 및 아미노산 서열 ETDYFFDY(서열번호 16)를 포함하는 VHCDR3을 포함하는 중쇄 가변 영역; 및
    아미노산 서열 GASENIYGALN(서열번호 26)을 포함하는 VLCDR1, 아미노산 서열 GATNLAD(서열번호 27)를 포함하는 VLCDR2 및 아미노산 서열 QNVLTTPWT(서열번호 28)를 포함하는 VLCDR3을 포함하는 경쇄 가변 영역
    을 포함하는 항-LIGHT 항원 결합 분자;
    (r) 아미노산 서열 DYEMH(서열번호 22)를 포함하는 VHCDR1, 아미노산 서열 EIDPETGDTAYSQKFQG(서열번호 23)를 포함하는 VHCDR2 및 아미노산 서열 ETDYFFDY(서열번호 24)를 포함하는 VHCDR3을 포함하는 중쇄 가변 영역; 및
    아미노산 서열 GASENIYGALN(서열번호 26)을 포함하는 VLCDR1, 아미노산 서열 GATNLAD(서열번호 27)를 포함하는 VLCDR2 및 아미노산 서열 QNVLTTPWT(서열번호 28)를 포함하는 VLCDR3을 포함하는 경쇄 가변 영역
    을 포함하는 항-LIGHT 항원 결합 분자;
    (s) 아미노산 서열 DYEMH(서열번호 30)를 포함하는 VHCDR1, 아미노산 서열 EIDPETGDTAYSQKFQG(서열번호 31)를 포함하는 VHCDR2 및 아미노산 서열 ETDYFFDY(서열번호 32)를 포함하는 VHCDR3을 포함하는 중쇄 가변 영역; 및
    아미노산 서열 GASENIYGALN(서열번호 26)을 포함하는 VLCDR1, 아미노산 서열 GATNLAD(서열번호 27)를 포함하는 VLCDR2 및 아미노산 서열 QNVLTTPWT(서열번호 28)를 포함하는 VLCDR3을 포함하는 경쇄 가변 영역
    을 포함하는 항-LIGHT 항원 결합 분자;
    (t) 아미노산 서열 DYEMH(서열번호 38)를 포함하는 VHCDR1, 아미노산 서열 EIDPETGDTAYSQKFQG(서열번호 39)를 포함하는 VHCDR2 및 아미노산 서열 ETDYFFDY(서열번호 40)를 포함하는 VHCDR3을 포함하는 중쇄 가변 영역; 및
    아미노산 서열 GASENIYGALN(서열번호 26)을 포함하는 VLCDR1, 아미노산 서열 GATNLAD(서열번호 27)를 포함하는 VLCDR2 및 아미노산 서열 QNVLTTPWT(서열번호 28)를 포함하는 VLCDR3을 포함하는 경쇄 가변 영역
    을 포함하는 항-LIGHT 항원 결합 분자;
    (u) 아미노산 서열 DYEMH(서열번호 14)를 포함하는 VHCDR1, 아미노산 서열 EIDPETGDTAYSQKFKG(서열번호 15)를 포함하는 VHCDR2 및 아미노산 서열 ETDYFFDY(서열번호 16)를 포함하는 VHCDR3을 포함하는 중쇄 가변 영역; 및
    아미노산 서열 RASENIYGALN(서열번호 34)을 포함하는 VLCDR1, 아미노산 서열 GATNLAE(서열번호 35)를 포함하는 VLCDR2 및 아미노산 서열 QNVLTTPWT(서열번호 36)를 포함하는 VLCDR3을 포함하는 경쇄 가변 영역
    을 포함하는 항-LIGHT 항원 결합 분자;
    (v) 아미노산 서열 DYEMH(서열번호 22)를 포함하는 VHCDR1, 아미노산 서열 EIDPETGDTAYSQKFQG(서열번호 23)를 포함하는 VHCDR2 및 아미노산 서열 ETDYFFDY(서열번호 24)를 포함하는 VHCDR3을 포함하는 중쇄 가변 영역; 및
    아미노산 서열 RASENIYGALN(서열번호 34)을 포함하는 VLCDR1, 아미노산 서열 GATNLAE(서열번호 35)를 포함하는 VLCDR2 및 아미노산 서열 QNVLTTPWT(서열번호 36)를 포함하는 VLCDR3을 포함하는 경쇄 가변 영역
    을 포함하는 항-LIGHT 항원 결합 분자;
    (w) 아미노산 서열 DYEMH(서열번호 30)를 포함하는 VHCDR1, 아미노산 서열 EIDPETGDTAYSQKFQG(서열번호 31)를 포함하는 VHCDR2 및 아미노산 서열 ETDYFFDY(서열번호 32)를 포함하는 VHCDR3을 포함하는 중쇄 가변 영역; 및
    아미노산 서열 RASENIYGALN(서열번호 34)을 포함하는 VLCDR1, 아미노산 서열 GATNLAE(서열번호 35)를 포함하는 VLCDR2 및 아미노산 서열 QNVLTTPWT(서열번호 36)를 포함하는 VLCDR3을 포함하는 경쇄 가변 영역
    을 포함하는 항-LIGHT 항원 결합 분자;
    (x) 아미노산 서열 DSEIH(서열번호 54)를 포함하는 VHCDR1, 아미노산 서열 EIDPETGGTAYNQKFKG(서열번호 55)를 포함하는 VHCDR2 및 아미노산 서열 ETDYFFDY(서열번호 56)를 포함하는 VHCDR3을 포함하는 중쇄 가변 영역; 및
    GASENIYGALN(서열번호 50), 아미노산 서열 GATNLAD(서열번호 51)를 포함하는 VLCDR2 및 아미노산 서열 QNVLSTPWT(서열번호 52)를 포함하는 VLCDR3을 포함하는 경쇄 가변 영역
    을 포함하는 항-LIGHT 항원 결합 분자;
    (y) 아미노산 서열 DSEIH(서열번호 62)를 포함하는 VHCDR1, 아미노산 서열 EIDPETGGTAYNQKFQG(서열번호 63)를 포함하는 VHCDR2 및 아미노산 서열 ETDYFFDY(서열번호 64)를 포함하는 VHCDR3을 포함하는 중쇄 가변 영역; 및
    GASENIYGALN(서열번호 50), 아미노산 서열 GATNLAD(서열번호 51)를 포함하는 VLCDR2 및 아미노산 서열 QNVLSTPWT(서열번호 52)를 포함하는 VLCDR3을 포함하는 경쇄 가변 영역을 포함하거나; 또는
    이들에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99% 동일한 VHCDR 및 VLCDR 서열
    을 포함하는 항-LIGHT 항원 결합 분자;
    (z) 아미노산 서열 DSEIH(서열번호 70)를 포함하는 VHCDR1, 아미노산 서열 EIDPETGGTAYAQKFQG(서열번호 71)를 포함하는 VHCDR2 및 아미노산 서열 ETDYFFDY(서열번호 72)를 포함하는 VHCDR3을 포함하는 중쇄 가변 영역; 및
    아미노산 서열 GASENIYGALN(서열번호 50)을 포함하는 VLCDR1, 아미노산 서열 GATNLAD(서열번호 51)를 포함하는 VLCDR2 및 아미노산 서열 QNVLSTPWT(서열번호 52)를 포함하는 VLCDR3을 포함하는 경쇄 가변 영역
    을 포함하는 항-LIGHT 항원 결합 분자;
    (I) 아미노산 서열 DSEMH(서열번호 78)를 포함하는 VHCDR1, 아미노산 서열 EIDPETGGTAYAQKFQG(서열번호 79)를 포함하는 VHCDR2 및 아미노산 서열 ETDYFFDY(서열번호 80)를 포함하는 VHCDR3을 포함하는 중쇄 가변 영역; 및
    아미노산 서열 GASENIYGALN(서열번호 50)을 포함하는 VLCDR1, 아미노산 서열 GATNLAD(서열번호 51)를 포함하는 VLCDR2 및 아미노산 서열 QNVLSTPWT(서열번호 52)를 포함하는 VLCDR3을 포함하는 경쇄 가변 영역
    을 포함하는 항-LIGHT 항원 결합 분자;
    (II) 아미노산 서열 DSEIH(서열번호 54)를 포함하는 VHCDR1, 아미노산 서열 EIDPETGGTAYNQKFKG(서열번호 55)를 포함하는 VHCDR2 및 아미노산 서열 ETDYFFDY(서열번호 56)를 포함하는 VHCDR3을 포함하는 중쇄 가변 영역; 및
    아미노산 서열 GASENIYGALN(서열번호 58)을 포함하는 VLCDR1, 아미노산 서열 GATNLAD(서열번호 59)를 포함하는 VLCDR2 및 아미노산 서열 QNVLSTPWT(서열번호 60)를 포함하는 VLCDR3을 포함하는 경쇄 가변 영역
    을 포함하는 항-LIGHT 항원 결합 분자;
    (III) 아미노산 서열 DSEIH(서열번호 62)를 포함하는 VHCDR1, 아미노산 서열 EIDPETGGTAYNQKFQG(서열번호 63)를 포함하는 VHCDR2 및 아미노산 서열 ETDYFFDY(서열번호 64)를 포함하는 VHCDR3을 포함하는 중쇄 가변 영역; 및
    아미노산 서열 GASENIYGALN(서열번호 58)을 포함하는 VLCDR1, 아미노산 서열 GATNLAD(서열번호 59)를 포함하는 VLCDR2 및 아미노산 서열 QNVLSTPWT(서열번호 60)를 포함하는 VLCDR3을 포함하는 경쇄 가변 영역
    을 포함하는 항-LIGHT 항원 결합 분자;
    (IV) 아미노산 서열 DSEIH(서열번호 70)를 포함하는 VHCDR1, 아미노산 서열 EIDPETGGTAYAQKFQG(서열번호 71)를 포함하는 VHCDR2 및 아미노산 서열 ETDYFFDY(서열번호 72)를 포함하는 VHCDR3을 포함하는 중쇄 가변 영역; 및
    아미노산 서열 GASENIYGALN(서열번호 58)을 포함하는 VLCDR1, 아미노산 서열 GATNLAD(서열번호 59)를 포함하는 VLCDR2 및 아미노산 서열 QNVLSTPWT(서열번호 60)를 포함하는 VLCDR3을 포함하는 경쇄 가변 영역
    을 포함하는 항-LIGHT 항원 결합 분자;
    (V) 아미노산 서열 DSEMH(서열번호 78)를 포함하는 VHCDR1, 아미노산 서열 EIDPETGGTAYAQKFQG(서열번호 79)를 포함하는 VHCDR2 및 아미노산 서열 ETDYFFDY(서열번호 80)를 포함하는 VHCDR3을 포함하는 중쇄 가변 영역; 및
    아미노산 서열 GASENIYGALN(서열번호 58)을 포함하는 VLCDR1, 아미노산 서열 GATNLAD(서열번호 59)를 포함하는 VLCDR2 및 아미노산 서열 QNVLSTPWT(서열번호 60)를 포함하는 VLCDR3을 포함하는 경쇄 가변 영역
    을 포함하는 항-LIGHT 항원 결합 분자;
    (VI) 아미노산 서열 DSEIH(서열번호 54)를 포함하는 VHCDR1, 아미노산 서열 EIDPETGGTAYNQKFKG(서열번호 55)를 포함하는 VHCDR2 및 VHCDR3을 포함하는 중쇄 가변 영역; 및
    아미노산 서열 GASENIYGALN(서열번호 66)을 포함하는 VLCDR1, 아미노산 서열 GATNLAD(서열번호 67)를 포함하는 VLCDR2 및 아미노산 서열 QNVLSTPWT(서열번호 68)를 포함하는 VLCDR3을 포함하는 경쇄 가변 영역
    을 포함하는 항-LIGHT 항원 결합 분자;
    (VII) 아미노산 서열 DSEIH(서열번호 62)를 포함하는 VHCDR1, 아미노산 서열 EIDPETGGTAYNQKFQG(서열번호 63)를 포함하는 VHCDR2 및 아미노산 서열 ETDYFFDY(서열번호 64)를 포함하는 VHCDR3을 포함하는 중쇄 가변 영역; 및
    아미노산 서열 GASENIYGALN(서열번호 66)을 포함하는 VLCDR1, 아미노산 서열 GATNLAD(서열번호 67)를 포함하는 VLCDR2 및 아미노산 서열 QNVLSTPWT(서열번호 68)를 포함하는 VLCDR3을 포함하는 경쇄 가변 영역
    을 포함하는 항-LIGHT 항원 결합 분자;
    (VIII) 아미노산 서열 DSEIH(서열번호 70)를 포함하는 VHCDR1, 아미노산 서열 EIDPETGGTAYAQKFQG(서열번호 71)를 포함하는 VHCDR2 및 아미노산 서열 ETDYFFDY(서열번호 72)를 포함하는 VHCDR3을 포함하는 중쇄 가변 영역; 및
    아미노산 서열 GASENIYGALN(서열번호 66)을 포함하는 VLCDR1, 아미노산 서열 GATNLAD(서열번호 67)를 포함하는 VLCDR2 및 아미노산 서열 QNVLSTPWT(서열번호 68)를 포함하는 VLCDR3을 포함하는 경쇄 가변 영역
    을 포함하는 항-LIGHT 항원 결합 분자;
    (IX) 아미노산 서열 DSEMH(서열번호 78)를 포함하는 VHCDR1, 아미노산 서열 EIDPETGGTAYAQKFQG(서열번호 79)를 포함하는 VHCDR2 및 아미노산 서열 ETDYFFDY(서열번호 80)를 포함하는 VHCDR3을 포함하는 중쇄 가변 영역; 및
    아미노산 서열 GASENIYGALN(서열번호 66)을 포함하는 VLCDR1, 아미노산 서열 GATNLAD(서열번호 67)를 포함하는 VLCDR2 및 아미노산 서열 QNVLSTPWT(서열번호 68)를 포함하는 VLCDR3을 포함하는 경쇄 가변 영역
    을 포함하는 항-LIGHT 항원 결합 분자;
    (X) 아미노산 서열 DSEIH(서열번호 54)를 포함하는 VHCDR1, 아미노산 서열 EIDPETGGTAYNQKFKG(서열번호 55)를 포함하는 VHCDR2 및 VHCDR3을 포함하는 중쇄 가변 영역; 및
    아미노산 서열 RASENIYGALN(서열번호 74)을 포함하는 VLCDR1, 아미노산 서열 GATNLAE(서열번호 75)를 포함하는 VLCDR2 및 아미노산 서열 QNVLSTPWT(서열번호 76)를 포함하는 VLCDR3을 포함하는 경쇄 가변 영역
    을 포함하는 항-LIGHT 항원 결합 분자;
    (XI) 아미노산 서열 DSEIH(서열번호 62)를 포함하는 VHCDR1, 아미노산 서열 EIDPETGGTAYNQKFQG(서열번호 63)를 포함하는 VHCDR2 및 아미노산 서열 ETDYFFDY(서열번호 64)를 포함하는 VHCDR3을 포함하는 중쇄 가변 영역; 및
    아미노산 서열 RASENIYGALN(서열번호 74)을 포함하는 VLCDR1, 아미노산 서열 GATNLAE(서열번호 75)를 포함하는 VLCDR2 및 아미노산 서열 QNVLSTPWT(서열번호 76)를 포함하는 VLCDR3을 포함하는 경쇄 가변 영역
    을 포함하는 항-LIGHT 항원 결합 분자;
    (XII) 아미노산 서열DSEIH(서열번호 70)를 포함하는 VHCDR1, 아미노산 서열EIDPETGGTAYAQKFQG(서열번호 71)를 포함하는 VHCDR2 및 아미노산 서열 ETDYFFDY(서열번호 72)를 포함하는 VHCDR3을 포함하는 중쇄 가변 영역; 및
    아미노산 서열 RASENIYGALN(서열번호 74)을 포함하는 VLCDR1, 아미노산 서열 GATNLAE(서열번호 75)를 포함하는 VLCDR2 및 아미노산 서열 QNVLSTPWT(서열번호 76)를 포함하는 VLCDR3을 포함하는 경쇄 가변 영역
    을 포함하는 항-LIGHT 항원 결합 분자; 및
    (XIII) 아미노산 서열 DSEMH(서열번호 78)를 포함하는 VHCDR1, 아미노산 서열 EIDPETGGTAYAQKFQG(서열번호 79)를 포함하는 VHCDR2 및 아미노산 서열 ETDYFFDY(서열번호 80)를 포함하는 VHCDR3을 포함하는 중쇄 가변 영역; 및
    아미노산 서열 RASENIYGALN(서열번호 74)을 포함하는 VLCDR1, 아미노산 서열 GATNLAE(서열번호 75)를 포함하는 VLCDR2 및 아미노산 서열 QNVLSTPWT(서열번호 76)를 포함하는 VLCDR3을 포함하는 경쇄 가변 영역
    을 포함하는 항-LIGHT 항원 결합 분자.
  11. 청구항 1 내지 10 중 어느 한 항에 있어서, 상기 항-LIGHT 항원 결합 분자는 3B04_var16, 3B04, 3D12, 2E08, 3A07, 3C10, 3E09 2B11, 3B04_var1, 3B04_var2, 3B04_var3, 3B04_var4, 3B04_var5, 3B04_var6, 3B04_var7, 3B04_var8, 3B04_var9, 3B04_var10, 3B04_var11, 3B04_var12, 3B04_var13, 3B04_var14, 3B04_var15, 3D12_var1, 3D12_var2, 3D12_var3, 3D12_var4, 3D12_var5, 3D12_var6, 3D12_var7, 3D12_var8, 3D12_var9, 3D12_var10, 3D12_var11, 3D12_var12, 3D12_var13, 3D12_var14, 3D12_var15 및 3D12_var16으로 구성된 군으로부터 선택된 항체인, 항-LIGHT 항원 결합 분자.
  12. 청구항 11에 있어서, 상기 항체는 모두 6개의 CDR 영역에 걸쳐 1 내지 10, 1 내지 5 또는 1 내지 2개의 보존적 아미노산 치환을 포함하는, 항-LIGHT 항원 결합 분자.
  13. 청구항 1 내지 12 중 어느 한 항에 있어서, 상기 항-LIGHT 항원 결합 분자는 아미노산 서열 GRATSSSRVW(서열번호 124)를 포함하는 인간 LIGHT의 에피토프에 결합되는, 항-LIGHT 항원 결합 분자.
  14. 청구항 1 내지 13 중 어느 한 항에 있어서, 상기 항-LIGHT 항원 결합 분자는 1:1의 비로 인간 LIGHT의 삼량체에 결합되는, 항-LIGHT 항원 결합 분자.
  15. 아미노산 서열 GRATSSSRVW(서열번호 124)를 포함하는 인간 LIGHT의 에피토프에 특이적으로 결합하는, 항-LIGHT 항원 결합 분자.
  16. 인간 LIGHT에 특이적으로 결합하는 항-LIGHT 항원 결합 분자로서, 상기 항원-결합 분자는 1:1의 비로 인간 LIGHT의 삼량체에 결합되는, 항-LIGHT 항원 결합 분자.
  17. LIGHT에 특이적으로 결합하고 청구항 1 내지 16 중 어느 한 항의 항원-결합 분자로 LIGHT에의 결합과 경쟁하는, 항-LIGHT 항원 결합 분자.
  18. 청구항 1 내지 17 중 어느 한 항에 있어서, 상기 항원 결합 분자는 항체 또는 단편 또는 이의 유도체인, 항-LIGHT 항원 결합 분자.
  19. 청구항 18에 있어서, 상기 항체 단편 또는 유도체는 Fab, F(ab')2, Fv, scFv, dAb, Fd, 또는 디아바디인, 항-LIGHT 항원 결합 분자.
  20. 청구항 1 내지 18 중 어느 한 항에 있어서, 상기 항-LIGHT 항원 결합 분자는 단클론성 항체인, 항-LIGHT 항원 결합 분자.
  21. 청구항 18 내지 20 중 어느 한 항에 있어서, 상기 항체 또는 항체 단편은 IgA, IgD, IgE, IgG, IgM 또는 IgY 항체 또는 항체 단편이고, 선택적으로 상기 항체 또는 항체 단편은 IgG 항체 또는 항체 단편이고, 추가로 선택적으로 상기 항체 또는 항체 단편은 lgG4 항체 또는 항체 단편인, 항-LIGHT 항원 결합 분자.
  22. 청구항 1 내지 21 중 어느 한 항에 있어서, 상기 항원 결합 분자는 막 LIGHT의 HVEM 및/또는 LTβR에의 결합 또는 LIGHT 발현 세포의 HVEM 및/또는 LTβR에의 결합을 억제하는, 항-LIGHT 항원 결합 분자.
  23. 청구항 1 내지 22 중 어느 한 항에 있어서, 상기 항원 결합 분자는 막 LIGHT의 유인 수용체 3에의 또는 막 LIGHT 발현 세포의 유인 수용체 3에의 결합을 부분적으로 억제하는, 항-LIGHT 항원 결합 분자.
  24. 청구항 1 내지 23 중 어느 한 항에 있어서, 상기 항원 결합 분자는 생체내 또는 시험관내에서 투여될 때 IL-8의 분비를 감소시키는, 항-LIGHT 항원 결합 분자.
  25. 청구항 1 내지 24 중 어느 한 항의 항-LIGHT 항원 결합 분자 및 약제학적으로 허용가능한 부형제를 포함하는 약제학적 조성물.
  26. 청구항 1 내지 24 중 어느 한 항의 항-LIGHT 항원 결합 또는 청구항 25에 따른 약제학적 조성물을 포함하고, 추가의 치료적 활성제를 추가로 포함하는 키트.
  27. 의약에서 사용하기 위한, 청구항 1 내지 24 중 어느 한 항의 항-LIGHT 항원 결합 분자, 또는 내지 청구항 25에 따른 약제학적 조성물, 또는 청구항 26에 따른 키트.
  28. 염증성 장애 또는 질환 또는 자가면역 장애 또는 질환의 치료 또는 예방에 사용하기 위한, 청구항 1 내지 24 중 어느 한 항의 항-LIGHT 항원 결합 분자, 또는 청구항 25에 따른 약제학적 조성물, 또는 청구항 26에 따른 키트.
  29. 청구항 28에 있어서, 상기 염증성 또는 자가면역 장애 또는 질환은 강직 척추염, 아토피 피부염, 만성적 소화장애증, 염증성 장 질환(IBD), 크론병, 류마티스성 관절염, 건선, 세기관지염, 치은염, 이식 거부, 동종이계 이식 거부, 이식편 대 숙주 질환(GvHD), 천식, 성인 호흡 곤란 증후군(ARDS), 만성 심부전, 만성적 폐쇄성 폐 질환, 신장 질환, 패혈성 쇼크, 궤양성 대장염, 섬유증, 다발성 경화증, 쇼그렌 증후군, 낭창, 기도 염증, 간 질환, 간염, 만성적 소화장애증, 피부염, 호산구증가증 및 원발성 담도 간경변증으로 구성된 군으로부터 선택되는, 항-LIGHT 항원 결합 분자 또는 약제학적 조성물 또는 키트.
  30. 청구항 28에 있어서, 상기 염증성 질환은 궤양성 대장염 또는 크론병인, 항-LIGHT 항원 결합 분자 또는 약제학적 조성물 또는 키트.
  31. LIGHT-매개된 질환 또는 장애의 치료 또는 예방 방법으로서, 대상체에게 청구항 1 내지 24 중 어느 한 항의 항-LIGHT 항원 결합 분자, 또는 청구항 25에 따른 약제학적 조성물, 또는 청구항 26의 키트의 요소를 투여하는 단계를 포함하는, 방법.
  32. LIGHT 단백질의 HVEM 및/또는 LTβR에의 결합 또는 LIGHT 발현 세포의 HVEM 및/또는 LTβR에의 결합을 억제하는 방법으로서, 상기 LIGHT 단백질 또는 LIGHT 발현 세포를 청구항 1 내지 24 중 어느 한 항의 항-LIGHT 항원 결합 분자와 접촉시키는 단계를 포함하는, 방법.
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Families Citing this family (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN114516913B (zh) * 2020-11-19 2023-04-28 东莞市朋志生物科技有限公司 抗n末端脑钠肽前体的抗体和检测试剂盒

Family Cites Families (27)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US3734795A (en) 1971-04-23 1973-05-22 Lindsay Wire Weaving Co Patch and seam for plastic belts
US6635743B1 (en) 1996-03-22 2003-10-21 Human Genome Sciences, Inc. Apoptosis inducing molecule II and methods of use
US7964190B2 (en) 1996-03-22 2011-06-21 Human Genome Sciences, Inc. Methods and compositions for decreasing T-cell activity
EP0985033A4 (en) 1997-04-04 2005-07-13 Biosite Inc POLYVALENT AND POLYCLONAL LIBRARIES
US6998108B1 (en) 1997-07-07 2006-02-14 La Jolla Institute For Allergy And Immunology Antibodies to p30 polypeptides and methods making and using same
US7118742B2 (en) 1997-07-07 2006-10-10 La Jolla Institute For Allergy And Immunology Ligand for herpes simplex virus entry mediator and methods of use
US6140467A (en) 1997-07-07 2000-10-31 La Jolla Institute For Allergy And Immunology Ligand for herpes simplex virus entry mediator and methods of use
AU5338701A (en) 2000-04-12 2001-10-30 Jolla Inst Allergy Immunolog Ligand for herpes simplex virus entry mediator and methods of use
EP1336619A3 (en) 2002-02-19 2003-12-10 Millenium Pharmaceuticals, Inc. Combination of a HVEM-LIGHT inhibitor and an immunosuppressive agent in the treatment or prevention of immune disorders
EP1499353A4 (en) 2002-04-15 2006-04-05 Human Genome Sciences Inc SPECIFIC TO TL5 BINDING ANTIBODIES
UA99714C2 (ru) * 2006-08-28 2012-09-25 Ля Хойя Інстітьют Фор Еллерджи Енд Іммьюнолоджи Моноклональное антитело, которое специфически связывается с light
ES2439994T3 (es) 2006-08-28 2014-01-27 Kyowa Hakko Kirin Co., Ltd. Anticuerpos antagonistas monoclonales humanos específicos de LIGHT humano
WO2008083169A2 (en) 2006-12-26 2008-07-10 The Johns Hopkins University Compositions and methods for the treatment of immunologic disorders
US20100267934A1 (en) 2007-05-31 2010-10-21 Genmab A/S Stable igg4 antibodies
EP3750554A3 (en) 2007-09-18 2021-07-28 La Jolla Institute for Allergy and Immunology Light inhibitors for asthma, lung and airway inflammation, respiratory, interstitial, pulmonary and fibrotic disease treatment
US8734795B2 (en) 2008-10-31 2014-05-27 Biogen Idec Ma Inc. Light targeting molecules and uses thereof
RU2542394C2 (ru) 2009-03-24 2015-02-20 ТЕВА БИОФАРМАСЬЮТИКАЛЗ ЮЭсЭй, ИНК. Гуманизированные антитела против light и их применение
EP3431104A1 (en) 2012-03-26 2019-01-23 Sanofi Stable igg4 binding agent formulations
US20130315913A1 (en) 2012-03-26 2013-11-28 Sanofi Anti-light antibody therapy for inflammatory bowel disease
US9592289B2 (en) 2012-03-26 2017-03-14 Sanofi Stable IgG4 based binding agent formulations
US10370350B2 (en) 2013-09-06 2019-08-06 Research Development Foundation Alpha-TEA salt forms: compositions and uses for treating disease
CA2927794A1 (en) 2013-10-25 2015-04-30 Pharmacyclics Llc Treatment using bruton's tyrosine kinase inhibitors and immunotherapy
EP3094651B1 (en) * 2014-01-14 2020-03-11 Kymab Limited Anti-light antibodies
CA2945263A1 (en) 2014-04-09 2015-10-15 Christopher Rudd Use of gsk-3 inhibitors or activators which modulate pd-1 or t-bet expression to modulate t cell immunity
WO2016127059A2 (en) 2015-02-05 2016-08-11 La Jolla Institute For Allergy And Immunology Light inhibitors for scleroderma and skin fibrotic disease treatment
JP2018523488A (ja) 2015-08-21 2018-08-23 ザ・チルドレンズ・ホスピタル・オブ・フィラデルフィアＴｈｅ Ｃｈｉｌｄｒｅｎ’Ｓ Ｈｏｓｐｉｔａｌ Ｏｆ Ｐｈｉｌａｄｅｌｐｈｉａ 自己免疫疾患の治療及び診断のために組み合わせて使用するための組成物及び方法
US11312781B2 (en) * 2018-01-24 2022-04-26 Capella Bioscience Ltd. Antigen binding molecules that bind LIGHT

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