KR20190082842A - 신규 프리오노이드병용 치료약 - Google Patents

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제노미디아 가부시키가이샤
고에키 자이단 호징 고베 이료 산교 도시 스이신 기코
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Abstract

본 발명은, 센다이 바이러스 엔벨로프를 유효 성분으로 하는 프리오노이드의 축적을 수반하는 인지 기능 장애 및/또는 신경 변성 질환을 예방 및/또는 치료하기 위한 의약, 및 상기 의약과 면역 체크 포인트 저해제의 병용에 관한 것이다.

Description

신규 프리오노이드병용 치료약
관련 출원:
본 명세서는, 본원 우선권의 기초인 일본 특허 출원 제2016-236536호(2016년 12월 6일 출원)의 명세서에 기재된 내용을 포함한다.
기술 분야:
센다이 바이러스 엔벨로프를 유효 성분으로 하는 인지 기능 장애 및/또는 신경 변성 질환을 치료하기 위한 의약, 및 상기 의약과 면역 체크 포인트 저해제의 병용에 관한 것이다.
인지증이란, 후천적인 뇌의 기질적 장애에 의해, 정상적으로 발달한 각종 정신 기능이 만성적으로 감퇴·소실됨으로써, 일상 생활·사회 생활을 경영할 수 없는 상태가 되는 인지 기능 장애의 일종이다. 인지증에는, 알츠하이머형 인지증, 뇌혈관형 인지증, 루이소체형 인지증, 전두측두형 인지증 등 몇 가지의 종류가 있지만, 그 중에서도 알츠하이머형 인지증이 가장 많고, 인지증 원인의 60％를 차지한다고 여겨지고 있다.
알츠하이머형 인지증의 원인에 대해서는, 아밀로이드 β의 축적에서 기인하는 신경 변성이 가장 유력하지만, 각종 설이 있고, 면역계와의 관련도 시사되어 있다(비특허문헌 1 및 2). 인지증, 특히 알츠하이머형 인지증에 대하여 몇 가지의 약물 치료도 개발되어 있지만, 아직 근본적인 치료에는 이르지 못하였다.
센다이 바이러스(Hemaglutinating virus of Japan(HVJ))는 에리히 종양 세포를 융합시키는 것으로서 주목받아, 세포막 융합 활성(이하, 융합 활성이라 함)의 해석이 진행됨과 함께 유전자 도입 벡터로서의 이용이 검토되어 왔다. 그러나, HVJ는 면역원성이 높고, 특히 NP 단백질이 대량으로 산생되면 CTL을 유도하는 것이 알려져 있고, 또한 숙주의 단백질 합성이 저해될 우려도 있다. 여기에서 유전자나 단백질을 봉입한 리포솜과 미리 자외선 조사에 의해 불활성화하여 둔 HVJ를 융합함으로써, 융합 입자(HVJ-리포솜)를 제작하는 방법이 고안되고, 이에 의해 세포나 생체로의 비침습의 유전자 도입이 가능하게 되었다(특허문헌 1, 비특허문헌 3 및 4).
본 발명자들은 지금까지 효과적인 유전자 송달 능력을 갖는(고효율) 바이러스, 및 세포 상해성 및 면역원성이 보다 적은(저독성) 비바이러스 벡터를 조합함으로써, 신규 하이브리드 유전자 도입 벡터를 개발하여, HVJ 유래의 융합 형성성 엔벨로프를 갖는 융합 형성성 바이러스 리포솜을 구축하였다. 이 송달 시스템에서는, DNA 충전 리포솜을, UV 불활성화 HVJ와 융합시켜, 융합 형성성 바이러스-리포솜인 HVJ-리포솜(직경 400 내지 500nm)을 형성시킨다. 융합 매개 송달의 이점은, 트랜스펙트된 DNA가, 수용체 세포에 있어서의 엔도솜 분해 및 리소좀 분해로부터 보호되는 데 있다. 예를 들어, HVJ-리포솜 중에 도입된 DNA는, 포유 동물 세포에 안전하게 송달할 수 있다(특허문헌 2). 또한, RNA, 올리고뉴클레오티드 및 약물도, 시험관 내 및 생체 내에서 세포 중에 효율적으로 도입될 수 있다. 또한, 본 발명자들은 바이러스 엔벨로프를 사용하는, 안전, 안정하면서 광범위한 생체 내 조직에 유전자 도입 가능한, 고유전자 도입 활성을 갖는 유전자 도입 벡터로서, HVJ 엔벨로프(HVJ-E)를 동결 융해 처리 또는 계면 활성제와 혼합함으로써, 외래 유전자를 봉입한 유전자 도입 벡터를 발명하였다(특허문헌 3 및 4). 이에 의해, HVJ-E를 사용하여 뇌 또는 중추 신경에도 물질을 효율적으로 도입하는 것이 가능해졌다(특허문헌 5 및 6). 또한, 발명자들은 HVJ-E에 항암제 등의 화학 요법제를 봉입하여, 그것을 세포 내 또는 생체 내에 이입함으로써, 면역 아쥬반트 효과를 발휘하는 것도 발견하였다(특허문헌 7 및 8).
발명자들은, HVJ-E가 그 자체 항종양 면역 활성화 작용, 암세포 특이적 세포사 유도 작용을 가지고, 항암제로서 유용한 것을 발견하여(특허문헌 8 및 9), 악성 흑색종 환자, 전립선암 환자, 악성 흉막 중피종 환자를 대상으로 하여 의사 주도 치험도 실시하고 있다.
미국 특허 제5631237호 WO2001/057204호 일본 특허 공개 제2002-065278호 WO2004/035779호 WO2006/011600호 WO2005/095613호 WO2004/039406호 WO2005/094878호 WO2010/032764호
Schenk et al., Nature. 1999 Jul 8;400(6740), p173-177 Baruch et al., Nature Medicine, 2016 Feb vol.22, No.2, p135-137 Dzau et al., PNAS 1996, Vol.93, No.21, p11421-11425 Kaneda et al., Mol. Med. Today, 1999, Vol.5, Issue 7, p298-303
본 발명의 과제는, HVJ-E의 신규 효과를 발견하고, 그의 임상 응용을 확립하는 데에 있다.
발명자들은, β 아밀로이드의 투여에 의해 제작한 알츠하이머병의 모델 마우스에 HVJ-E를 투여함으로써, 유의한 단기 기억의 개선이 보이는 것을 확인하였다. 또한, HVJ-E에 항PD-1 항체를 병용함으로써, 효과의 상승적인 향상이 보이는 것을 확인하였다.
본 발명은 상기 지견에 기초하여 완성된 것이며, 이하의 (1) 내지 (11)에 관한 것이다.
(1) 센다이 바이러스 엔벨로프를 유효 성분으로서(즉, 유효 투여량으로) 포함하는, 프리오노이드의 축적을 수반하는 인지 기능 장애 및/또는 신경 변성 질환을 예방 및/또는 치료하기 위한 의약.
(2) 센다이 바이러스 엔벨로프가 야생형 센다이 바이러스 엔벨로프인, (1)에 기재된 의약.
(3) 센다이 바이러스 엔벨로프가 불활성화된 센다이 바이러스 엔벨로프인, (1) 또는 (2)에 기재된 의약.
(4) 프리오노이드의 축적을 수반하는 인지 기능 장애 및/또는 신경 변성 질환이, 알츠하이머형 인지증, 경증 인지 기능 장애(MCI), 뇌 아밀로이드 혈관증, 다운 증후군, 황반 변성, 루이소체형 인지증, 파킨슨병, 다계통 위축증, 타우병증, 전두측두엽 변성증, 기은(嗜銀) 과립성 인지증, 근위축성 측색 경화증, 자폐증, 당뇨병, 근위축성 측색 경화증(ALS) 및 크로이츠펠트·야곱병으로부터 선택되는 어느 것인, (1) 내지 (3) 중 어느 하나에 기재된 의약.
(5) 프리오노이드의 축적을 수반하는 인지 기능 장애 및/또는 신경 변성 질환이 알츠하이머형 인지증인, (4)에 기재된 의약.
(6) 프리오노이드가 아밀로이드 β인, (1) 내지 (5) 중 어느 하나에 기재된 의약.
(7) 면역 체크 포인트 저해제와 병용되는, (1) 내지 (6) 중 어느 하나에 기재된 의약.
(8) 센다이 바이러스 엔벨로프와 면역 체크 포인트 저해제가 동시 또는 순차로 투여되는 것을 특징으로 하는, (7)에 기재된 의약.
(9) 센다이 바이러스 엔벨로프와 면역 체크 포인트 저해제를 조합하여 포함하는, (1) 내지 (8) 중 어느 하나에 기재된 의약.
(10) 면역 체크 포인트 저해제가, 항PD-1 항체, 항PD-L1 항체, 항PD-L2 항체, 항CTLA-4 항체, 항KIR 항체, 항CD137 항체, 항LAG-3 항체, 항OX40 항체, 항CD80 항체, 항CD86 항체, 항B7-H3 항체, 항B7-H4 항체, 항B7-H5 항체, 항TIM-3 항체, 항TIGIT 항체 및 항BTLA 항체로 이루어지는 군에서 선택되는 임의의 1 또는 2 이상인, (7) 내지 (9) 중 어느 하나에 기재된 의약.
(11) 면역 체크 포인트 저해제가, 항PD-1 항체, 항PD-L1 항체 또는 항CTLA-4 항체, 바람직하게는 항PD-1 항체인, (10)에 기재된 의약.
본 발명에 의해, 알츠하이머형 인지증을 비롯한 인지 기능 장애 및/또는 신경 변성 질환을 치료 및/또는 예방하는 새로운 치료 방법이 제공된다. HVJ-E는 면역 체크 포인트 저해제와 병용함으로써, 더 효과적으로 β 아밀로이드와 같은 프리오노이드의 축적을 수반하는 인지 기능 장애 또는 신경 변성 질환, 예를 들어 알츠하이머형 인지증을 치료할 수 있다. HVJ-E와 면역 체크 포인트 저해제의 병용 효과는 상승적이며, 그 때문에 단독 투여에 비교하여 각 약제의 투여량을 감소시켜, 부작용의 저감을 도모할 수 있다.
도 1은, Y 미로 시험의 장치와 자발적 교체 행동율의 산출 방법을 나타낸다. 도면 중, 계산예에 나타내는 대로, Y자형 미로의 각 암을 A, B, C라 하고, 동물이 ACBABACBAB의 순서로 이동한 경우에는, 자발적 교체 행동수는 ACB, CBA, BAC, ACB, CBA의 5가 되고, 이것을 총 엔트리수 10으로부터 2를 뺀 8로 나눈 값에 100을 곱한 수치 62.5를 자발적 교체 행동율로 하였다. 자발적 교체 행동율(％)=[5/(10-2)]×100=62.5％
도 2는, Y 미로 시험의 결과(HVJ-E는 피하 투여)를 나타낸다. 도 2의 A: 총 엔트리수, 도 2의 B: 자발적 교체 행동수(정답수), 도 2의 C: 자발적 교체 행동율(정답율). 모두, 좌측으로부터 음성 대조군(매체 투여군), HVJ-E 투여군, 항PD-1 항체 투여군, HVJ-E+항PD-1 항체 병용군, 양성 대조군(도네페질 투여군).
도 3은, 수동 시험(반응 잠복 시간)의 결과(HVJ-E는 피하 투여)를 나타낸다. 도 3의 A: 첫날(피검 물질 투여 후 10일째), 도 3의 B: 2일째(피검 물질 투여 후 11일째). 모두, 좌측으로부터 음성 대조군(매체 투여군), HVJ-E 투여군, 항PD-1 항체 투여군, HVJ-E+항PD-1 항체 병용군, 양성 대조군(도네페질 투여군).
도 4는, Y 미로 시험의 결과(HVJ-E는 경비 투여)를 나타낸다. 도 4의 A: 총 엔트리수, 도 4의 B: 자발적 교체 행동수(정답수), 도 4의 C: 자발적 교체 행동율(정답율). 모두, 좌측으로부터 위(僞)수술군, 음성 대조군(매체 투여군), HVJ-E 경비 투여군, HVJ-E(경비)+항PD-1 항체 병용군, 양성 대조군(도네페질 투여군), HVJ-E(피하)+항PD-1 항체 병용군. 또한, 도 4에 있어서, Sham-operation은 위수술을 가리키고, Vehicle는 매체 투여군을 가리키고, i.n.은 경비 투여를 가리키고, s.c.은 피하 투여를 가리킨다.
도 5는, Y 미로 시험의 결과(HVJ-E는 경비 투여)를 나타낸다. 도 5의 A: 총 엔트리수, 도 5의 B: 자발적 교체 행동수(정답수), 도 5의 C: 자발적 교체 행동율(정답율). 모두, 좌측으로부터 음성 대조군(매체 투여군), HVJ-E(10mNAU/body) 경비 투여군, HVJ-E(50mNAU/body) 경비 투여군, HVJ-E(100mNAU/body) 경비 투여군, 양성 대조군(도네페질 투여군). 또한, 도 5에 있어서, Vehicle는 매체 투여군을 가리킨다.
본 발명은, 센다이 바이러스 엔벨로프(HVJ-E)를 유효 성분으로 하는, 프리오노이드의 축적을 수반하는 인지 기능 장애 및/또는 신경 변성 질환을 예방 및/또는 치료하기 위한 의약에 관한 것이다.
1. 센다이 바이러스 엔벨로프를 포함하는 의약
「센다이 바이러스(HVJ)」
「센다이 바이러스(HVJ)」는 파라믹소바이러스과 레스피로바이러스속의 단일쇄 마이너스쇄 RNA 바이러스이며, 마우스나 래트에 감염되어, 호흡기병을 야기한다. 바이러스 입자의 외측에는, 막상 구조인 엔벨로프가 존재하고, 바이러스 게놈, 카프시드 단백질을 덮고 있다. 엔벨로프 단백질은, 바이러스가 숙주 세포에 흡착·침입할 때의 세포 융합 활성을 담당하는 막 성분이며, 면역 회피 등 바이러스 감염에 있어서 중요한 역할을 하고 있다.
「센다이 바이러스 엔벨로프(HVJ-E)」
본 발명에 따른 「센다이 바이러스 엔벨로프(HVJ-E)」란, 불활성화되어 복제 능력을 상실시킨 불활성화 센다이 바이러스이다(Kaneda et al., Hemagglutinating Virus of Japan(HVJ) Envelope Vector as a Versatile Gene Delivery System. Mol. Ther. 2002, 6, 219-226). HVJ-E에서는, 바이러스의 게놈 RNA는 완전히 불활성화되어 있기 때문에, 숙주에 있어서의 감염성이나 증식성을 갖지 않는다.
HVJ-E의 막상 단백질인 헤마글루티닌-뉴라미니다제(Hemagglutinin-Neuraminidase)(HN) 단백질과 융합(Fusion)(F) 단백질은, 바이러스 RNA 불활성화 후에도 세포막 융합능을 갖고 있다. 그 때문에, 불활성화된 HVJ의 엔벨로프 내에 유전자나 약물을 봉입하고, 대상의 세포에 송달하는 것이 가능해진다. 또한 HVJ-E는, 그 자체 종양 면역을 증강시키는 아쥬반트 효과를 갖고 있기 때문에, 단독으로 또는 그 내부에 항암제를 봉입하여, 암의 치료에 사용할 수 있다(전술한, WO2005/094878, WO2010/032764). HVJ-E가 알츠하이머병 등의 프리오노이드의 축적을 수반하는 인지 기능 장애나 신경 변성 질환에 대한 예방·치료 효과를 갖는 것은 본원 이전에는 알려져 있지 않았다.
「HVJ-E의 제조」
본 발명의 HVJ-E는 HVJ를 불활성화함으로써 얻을 수 있다. 사용되는 HVJ는, 의약으로서의 목적을 손상시키지 않는 한, 야생형이어도, 적당한 개변이 가해진 변이형이어도 된다. 야생형 HVJ로서는, 예를 들어 ATCC(등록 상표) VR-105TM, ATCC(등록 상표) VR-907TM 등을 구입하여 사용할 수 있다. 바이러스는 불활성화에 앞서, 원심 분리 또는 한외 여과와 이온 교환 칼럼의 병용 등에 의해 정제하는 것이 바람직하다.
변이형 HVJ로서는, 예를 들어 mRNA에 특이적인 siRNA를 사용하거나 하여 HN을 결손시킨 HVJ-E; HVJ-E를 구성하는 HN 단백질의 특정 영역의 C 말단측에 원하는 폴리펩티드를 연결시킴으로써 개변 HN 단백질과 원하는 단백질의 융합 단백질을 HVJ-E의 외측 표면에 발현하도록 개변된 HVJ-E(일본 특허 공개 제2011-050292 참조); 그 밖에도, 막 단백질을 개변한 HVJ-E 등을 들 수 있다.
바이러스의 불활성화는 숙주 세포, 바람직하게는 인간 세포 내에서의, 바이러스의 복제 능력을 상실시키는 것이면 특별히 한정되지 않고, 자외선 조사, γ선 조사, 화학 처리(알킬화제 처리), 열처리 등에 의해 행할 수 있지만, 엔벨로프의 막 상 단백질에 대한 영향이 작다는 점에서 자외선 조사나 γ선 조사가 바람직하다. 자외선 조사나 γ선 조사의 경우, HVJ의 현탁액에 자외선(통상 90 내지 200밀리주울/cm2 정도) 또는 γ선(통상 5 내지 20글레이 정도)을 조사함으로써 바이러스를 불활성화할 수 있다. 또한, 알킬화제 처리의 경우, HVJ의 현탁액에 β 프로피오락톤 등의 알킬화제를 첨가하여, 인큐베이트함으로써 바이러스를 불활성화할 수 있다. HVJ-E의 구체적인 제조 방법은, 전술한 Kaneda et al., 2002, WO01/57204(실시예 8), 일본 특허 공개 제2002-065278호, WO03/014338 등에 상세하게 설명되어 있다.
「HVJ-E를 포함하는 의약」
본 발명의 HVJ-E를 포함하는 의약은, 약리학상 허용되는 담체나 첨가물을 포함하는 것이어도 된다. 그러한 담체나 첨가물로서는, 예를 들어 부형제, 결합제, 활택제, 용제, 붕괴제, 용해 보조제, 현탁화제, 유화제, 등장화제, 안정화제, 무통화제, 방부제, 항산화제, 교미제, 착색제, 완충제, 유동성 촉진제 등을 들 수 있지만, 이들에 제한되지 않고, 기타 상용되는 담체나 첨가물을 적절히 사용할 수 있다.
구체적으로는 부형제로서는, 유당, 포도당, D-만니톨 등의 당류, 전분류, 결정 셀룰로오스 등의 셀룰로오스류 등의 유기계 부형제, 탄산칼슘, 카올린 등의 무기계 부형제 등을 들 수 있다.
결합제로서는, α화 전분, 젤라틴, 아라비아 고무, 메틸셀룰로오스, 카르복시메틸셀룰로오스, 카르복시메틸셀룰로오스나트륨, 결정 셀룰로오스, D-만니톨, 트레할로오스, 히드록시프로필셀룰로오스, 히드록시프로필메틸셀룰로오스, 폴리비닐피롤리돈, 폴리비닐알코올 등을 들 수 있다.
활택제로서는, 스테아르산, 스테아르산염 등의 지방산염, 탈크, 규산염류 등을 들 수 있다.
용제로서는, 정제수, 생리적 식염수, 인산 완충액 등을 들 수 있다.
붕괴제로서는, 저치환도 히드록시프로필셀룰로오스, 화학 수식된 셀룰로오스나 전분류 등을 들 수 있다.
용해 보조제로서는, 폴리에틸렌글리콜, 프로필렌글리콜, 트레할로오스, 벤조산벤질, 에탄올, 탄산나트륨, 시트르산나트륨, 살리실산나트륨, 아세트산나트륨 등을 들 수 있다.
현탁화제 또는 유화제로서는, 라우릴황산나트륨, 아라비아 고무, 젤라틴, 레시틴, 모노스테아르산글리세린, 폴리비닐알코올, 폴리비닐피롤리돈, 카르복시메틸셀룰로오스나트륨 등의 셀룰로오스류, 폴리소르베이트류, 폴리옥시에틸렌 경화 피마자유 등을 들 수 있다.
등장화제로서는, 염화나트륨, 염화칼륨, 당류, 글리세린, 요소 등을 들 수 있다.
안정화제로서는, 폴리에틸렌글리콜, 덱스트란황산나트륨, 기타 아미노산류 등을 들 수 있다.
무통화제로서는, 포도당, 글루콘산칼슘, 염산프로카인 등을 들 수 있다.
방부제로서는, 파라옥시벤조산에스테르류, 클로로부탄올, 벤질알코올, 페네틸알코올, 데히드로아세트산, 소르브산 등을 들 수 있다.
항산화제로서는, 수용성 항산화제인 아스코르브산, 시스테인히드로클로라이드, 중황산나트륨, 메타중아황산나트륨, 아황산나트륨, 지용성 항산화제인 아스코르빌팔미테이트, 부틸화 하이드록시아니솔(BHA), 부틸화 하이드록시톨루엔(BHT), 레시틴, 프로필갈레이트, α-토코페롤 및 금속 킬레이트제인 시트르산, 에틸렌디아민사아세트산(EDTA), 소르비톨, 타르타르산, 인산을 들 수 있다.
교미 교취제로서는, 의약 분야에 있어서 통상적으로 사용되는 감미료, 향료 등을, 착색제로서는, 의약 분야에 있어서 통상적으로 사용되는 착색료를 들 수 있다.
상기한 것 이외에도, 히알루론산, 폴리락트산, 알긴산, 젤라틴 등의 폴리머나, 양이온화 젤라틴(일본 특허 공개 제2008-308440호) 등의 양이온화제와 함께 HVJ-E를 제제화해도 된다.
본 발명의 의약의 투여 경로는 특별히 한정되지 않고, 경구여도 비경구 투여여도 된다. 비경구 투여로서는, 구체적으로는 주사 투여, 경비 투여, 경폐 투여, 경피 투여 등을 들 수 있다. 주사 투여로서는, 정맥내 주사, 근육내 주사, 복강내 주사, 피하 주사, 골수내 주사, 수강내 주사, 피부내 주사를 예시할 수 있다. 투여 방법은 환자의 연령, 증상에 따라 적절히 선택할 수 있다.
본 발명의 의약의 투여량은 그의 사용 목적, 투여 경로 등에 의해 적절히 결정된다. 인간에게 투여하는 경우에는, 예를 들어 1회의 투여에 대하여 HVJ-E로서 200mNAU 내지 20,000mNAU의 범위에서 투여량을 선택할 수 있다. 또는, 예를 들어 환자당 3,000 내지 60,000mNAU/body의 범위에서 투여량을 선택할 수 있다.
본 발명의 의약은, 본 발명의 목적을 손상시키지 않는 한, 다른 약제와 병용해도 된다. 전술한 바와 같이, HVJ-E의 내부에는 핵산이나 약제 등을 봉입할 수 있다. 본 발명에 있어서도, 본 발명의 목적을 손상시키지 않는 범위에 있어서, 인지 기능 장애 또는 신경 변성 질환의 치료에 유용한 약제 등을 HVJ-E에 봉입해도 된다.
「인지 기능 장애 및/또는 신경 변성 질환」
HVJ-E를 포함하는 의약은, 프리오노이드의 축적을 수반하는 인지 기능 장애 및/또는 프리오노이드의 축적을 수반하는 신경 변성 질환의 치료 및/또는 예방에 유용하다.
「프리오노이드」란, 방출된 미스폴딩 단백질이 이웃 세포에 전파됨으로써 병소의 확대를 일으킨다고 여겨지는 단백질로, 예를 들어 아밀로이드 β, α 시뉴클레인, 헌팅틴, 인산화 타우 등을 들 수 있다. 프리오노이드의 대표예는, 후술하는 「아밀로이드 β」와 「α 시뉴클레인」이다.
「아밀로이드 β」란, 알츠하이머형 인지증의 주요한 병리 변화인 노인성 반점의 주요 구성 성분인 펩티드이다. 아밀로이드 β(이하, 「Aβ」라고도 기재함)는 β- 및 γ-세크레타제에 의해 전구체 단백(APP: Amyloid β protein precursor)으로부터 잘라내어져 생성되는 소수성이 높은 펩티드이며, 40 아미노산으로 이루어지는 Aβ1 -40과 42 아미노산으로 이루어지는 Aβ1 -42가 있다. Aβ1 -42는 Aβ1 -40보다도 응집하기 쉬워, Aβ1 -42가 응집하고, 이것을 핵으로 하여 Aβ1 -40이 응집하여 섬유 형성을 행한다는 설이 제창되어 있지만, 그의 축적에는 다른 위험 인자(아포 E, 프레세닐린 1·2 등)에 의한 수식이 필요하다고 여겨지고 있다. Aβ는 신경 세포 독성을 가지고, 네크로시스 등을 야기한다.
「α 시뉴클레인」이란, 주로 신경 조직 내에 보이고, SNCA 유전자에 의해 코딩되는 아미노산 140 잔기로 이루어지는 기능 불명의 단백질이다. α 시뉴클레인은, 최초로 그의 단편이 알츠하이머병에서 축적되는 아밀로이드 중의 성분으로서 발견되었지만, 파킨슨병을 비롯한 신경 변성 질환의 원인이라고 여겨지고 있다.
「프리오노이드의 축적을 수반하는 인지 기능 장애 및/또는 신경 변성 질환」으로서는, 예를 들어 알츠하이머형 인지증, 경증 인지 기능 장애(MCI), 뇌 아밀로이드 혈관증, 다운 증후군, 황반 변성, 루이소체형 인지증, 파킨슨병, 다계통 위축증, 타우병증, 전두측두엽 변성증, 기은 과립성 인지증, 근위축성 측색 경화증, 자폐증, 당뇨병, 근위축성 측색 경화증(ALS), 크로이츠펠트·야곱병 등을 들 수 있지만, 이들에 한정되지 않는다.
본 발명에 있어서, 「치료」라는 용어는 본 발명에 따른 의약이 피험자에 투여됨으로써, 프리오노이드의 축적을 수반하는 인지 기능 장애 및/또는 신경 변성 질환에서 기인하는 각종 증상이 개선되는 것을 의미한다. 또한, 「예방」이라는 단어는, 프리오노이드의 축적을 수반하는 인지 기능 장애 및/또는 신경 변성 질환의 발병이나 증오를 방지하는 것을 의미한다.
2. HVJ-E와 면역 체크 포인트 저해제의 조합
발명자들은, 면역 체크 포인트 저해제를 알츠하이머병의 모델 마우스에 투여 함으로써, 행동학적 개선이 보이는 것을 확인함과 함께, 그 효과는 HVJ-E와 병용함으로써, 상승적으로 효과를 나타내는 것도 실증하였다. 즉, 본 발명은, 센다이 바이러스 엔벨로프(HVJ-E)와 면역 체크 포인트 저해제를 조합하여(병용 또는 배합하여), 프리오노이드의 축적을 수반하는 인지 기능 장애 및/또는 신경 변성 질환을 예방 및/또는 치료하기 위한 의약도 제공한다.
「HVJ-E와 면역 체크 포인트 저해제를 조합하여 포함하는 의약」
본 발명에 있어서, 「HVJ-E와 면역 체크 포인트 저해제를 조합하여 포함하는, 프리오노이드의 축적을 수반하는 인지 기능 장애 및/또는 신경 변성 질환을 예방 및/또는 치료하기 위한 의약」이란, HVJ-E와 면역 체크 포인트 저해제를, 신경 변성 질환의 예방 및/또는 치료에 있어서, 동시에, 따로따로 또는 순차로 투여하기 위해 조합한 의약을 의미한다. 하나의 실시 형태에 있어서, 본 발명의 의약은, HVJ-E와 면역 체크 포인트 저해제가 모두 함유되는 배합제의 형태로 제공된다. 또한, 다른 실시 형태에 있어서, 본 발명의 의약은, HVJ-E와 면역 체크 포인트 저해제를 함유하는 별도 약제의 병용으로서 제공되고, 동시에 또는 순차적으로 사용된다. 또한, 다른 실시 형태에 있어서, 본 발명의 의약은, HVJ-E와 면역 체크 포인트 저해제를 함유하는 약제로 구성되는 키트로서 제공되어도 된다.
본 발명에 있어서, HVJ-E와 면역 체크 포인트 저해제의 「병용」이란, HVJ-E와 면역 체크 포인트 저해제가 모두 투여 또는 사용되는 것을 의미하는 것이며, 투여의 순서나 투여 간격 등이 한정 해석되는 것은 아니다. 또한, HVJ-E와 면역 체크 포인트 저해제의 「배합제」란, HVJ-E와 면역 체크 포인트 저해제를 일정량으로 조합하여 제제화한 의약(fixed dose combination drug)을 의미한다.
HVJ-E 및 면역 체크 포인트 저해제는, 조합하여 투여(사용)됨으로써, 어느 한쪽이 단독으로 사용되는 투여량보다도, 적은 투여량으로 투여되고, 따라서 부작용의 가능성을 저감시킬 수 있다.
「면역 체크 포인트 저해제」
「면역 체크 포인트 저해제」란, 면역 체크 포인트를 저해하고, 획득 면역 방어 시스템을 억제하는 물질·분자의 작용을 저해하는 것을 의미한다. 면역 체크 포인트란, 암 세포, 세균이나 바이러스 등의 병원체에 대한 획득 면역 방어 시스템을 억제하는 분자이며, 예를 들어 이펙터 T 세포 표면에 발현하는 PD-1이나, 종양 세포 표면에 발현하는 PD-L1이나 PD-L2, 활성화 T 세포 또는 억제성 T 세포 Treg의 표면에 발현하는 CTLA-4, 수지상 세포 표면에 발현하는 CD80(B7-1)이나 CD86(B7-2) 이외에도, B7-H3, B7-H4, B7-H5(VISTA), KIR, CD137, LAG-3, TIM-3, TIGIT, OX40, BTLA 등을 들 수 있다.
상기 면역 체크 포인트 저해제의 아미노산 서열이나 이것을 코딩하는 유전자의 염기 서열은 이미 공지되어 있고, 공공 데이터베이스에서 공개되어 있다(핵산 서열: GenBank, DDBJ, EMBL, 아미노산 서열: SwissProt, PIR, PDB). 예를 들어, 인간 PD-1의 유전자(Homo sapiens programmed cell death 1(PDCD 1), mRNA)에 대해서는, GenBank Accession No. NM_005018로서, 단백질(programmed cell death protein 1 precursor [Homo sapiens])에 대해서는, Accession No. NP_005009로서 정보가 공개되어 있다(https://www.ncbi.nlm.nih.gov/nuccore/NM_005018.2 및 https://www.ncbi.nlm.nih.gov/protein/167857792). 후술하는 면역 체크 포인트 저해제(예를 들어, 안티센스 핵산, siRNA, shRNA, 항체 등)은 이들 공표된 정보에 기초하여, 당해 분야에서 공지된 기술을 사용하여 설계하고, 취득할 수 있다. 이하에, 면역 체크 포인트 저해제에 관한 정보를 정리하여 나타낸다.
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본 발명에 있어서 「면역 체크 포인트 저해제」는, 상기 면역 체크 포인트의 발현 또는 활성을 억제하는 물질이면 특별히 제한되지 않는다.
「면역 체크 포인트의 발현을 억제하는 물질」은, 면역 체크 포인트의 유전자의 전사 레벨, 전사 후 조절의 레벨, 단백질로의 번역 레벨, 번역 후 수식의 레벨 등의 어떤 단계에서 작용하는 것이어도 된다. 따라서, 면역 체크 포인트의 발현을 억제하는 물질로서는, 예를 들어 해당 유전자의 전사를 저해하는 물질, 초기 전사 산물로부터 mRNA로의 프로세싱을 저해하는 물질, mRNA의 세포질로의 수송을 저해하는 물질, mRNA의 분해를 촉진시키는 물질, mRNA로부터 단백질로의 번역을 저해하는 물질, 면역 체크 포인트의 번역 후 수식을 저해하는 물질 등이 포함된다. 어느 단계에서 작용하는 것이어도 바람직하게 사용할 수 있지만, 면역 체크 포인트의 산생을 직접적으로 저해한다는 의미에서는, mRNA로부터 단백질로의 번역을 저해하는 물질이 바람직하다.
면역 체크 포인트의 mRNA로부터 단백질로의 번역을 특이적으로 저해하는 물질로서는, 예를 들어 면역 체크 포인트를 코딩하는 mRNA의 염기 서열과 상보적 혹은 실질적으로 상보적인 염기 서열 또는 그의 일부를 포함하는 핵산을 들 수 있다.
면역 체크 포인트의 mRNA의 염기 서열과 상보적 혹은 실질적으로 상보적인 염기 서열로서는,
(a) 면역 체크 포인트를 코딩하는 염기 서열과 상보적 혹은 실질적으로 상보적인 염기 서열, 또는
(b) 면역 체크 포인트를 코딩하는 염기 서열의 상보쇄 서열과 고도의 엄격한 조건 하에서 하이브리다이징하는 염기 서열이며, 면역 체크 포인트와 실질적으로 동질의 활성을 갖는 단백질을 코딩하는 염기 서열과, 상보적 혹은 실질적으로 상보적인 염기 서열을 들 수 있다.
「실질적으로 상보적」이란, 염기 서열간에서 약 70％ 이상, 바람직하게는 약 80％ 이상, 보다 바람직하게는 약 90％ 이상, 가장 바람직하게는 약 95％ 이상의 상보성을 갖는 것을 말한다. 또한, 「활성」이란, T 세포의 암세포에 대한 항종양 활성을 억제하는 작용 등을 말한다. 「실질적으로 동질」이란, 그러한 활성이 정성적(예를 들어, 생리학적 또는 약리학적)으로 동일한 것을 나타낸다. 따라서, 이들의 활성의 정도(예를 들어, 약 0.1 내지 약 10배, 바람직하게는 약 0.5 내지 약 2배)나 단백질의 분자량 등의 양적 요소는 상이해도 된다. 면역 체크 포인트의 활성 측정은 자체 공지된 방법에 준하여 행할 수 있다.
고도의 엄격한 조건으로서는, 예를 들어 6×SSC(염화나트륨(sodium chloride)/시트르산나트륨(sodium citrate)) 중 45℃에서의 하이브리다이제이션 반응 후, 0.2×SSC/0.1％ SDS 중 65℃에서의 1회 이상의 세정 등을 들 수 있다.
「면역 체크 포인트의 mRNA의 염기 서열과 상보적 혹은 실질적으로 상보적인 염기 서열의 일부」란, 면역 체크 포인트의 mRNA에 특이적으로 결합할 수 있고, 또한 해당 mRNA로부터의 단백질의 번역을 저해할 수 있는 것이면, 그의 길이나 위치에 특별히 제한은 없지만, 서열 특이성의 면에서, 표적 서열에 상보적 혹은 실질적으로 상보적인 부분을 적어도 10 염기 이상, 바람직하게는 약 15 염기 이상, 보다 바람직하게는 약 20 염기 이상 포함하는 것이다.
구체적으로는, 면역 체크 포인트의 mRNA의 염기 서열과 상보적 혹은 실질적으로 상보적인 염기 서열 또는 그의 일부를 포함하는 핵산으로서, 이하의 (i) 내지 (iii) 중 어느 것이 바람직하게 예시된다.
(i) 면역 체크 포인트의 mRNA에 대한 안티센스 핵산
(ii) 면역 체크 포인트의 mRNA에 대한 siRNA
(iii) 면역 체크 포인트의 mRNA에 대한 siRNA를 생성할 수 있는 핵산
(i) 면역 체크 포인트의 mRNA에 대한 안티센스 핵산
본 발명에 있어서의, 면역 체크 포인트의 mRNA에 대한 안티센스 핵산(본 발명의 안티센스 핵산)과, 해당 mRNA의 염기 서열과 상보적 혹은 실질적으로 상보적인 염기 서열 또는 그의 일부를 포함하는 핵산이며, 표적 mRNA와 특이적이면서 안정된 2중쇄를 형성하여 결합함으로써, 단백질 합성을 억제하는 기능을 갖는 것이다. 안티센스 핵산은 이중쇄 DNA, 단일쇄 DNA, 이중쇄 RNA, 단일쇄 RNA, DNA: RNA 하이브리드 중 어느 것이어도 된다.
안티센스 핵산의 표적 영역은, 해당 안티센스 핵산이 하이브리다이징됨으로써, 결과적으로 면역 체크 포인트의 번역이 저해되는 것이면 그의 길이에 특별히 제한은 없고, 이들 단백질을 코딩하는 mRNA의 전체 서열이어도 부분 서열이어도 되고, 짧은 것이면 약 10 염기 정도, 긴 것이면 mRNA 또는 초기 전사 산물의 전체 서열을 들 수 있다. 합성의 용이함이나 항원성, 세포 내 이행성의 문제 등을 고려하면, 약 10 내지 약 40 염기, 특히 약 15 내지 약 30 염기로 이루어지는 올리고뉴클레오티드가 바람직하지만, 거기에 한정되지 않는다. 구체적으로는, 면역 체크 포인트의 유전자의 5'말단 헤어핀 루프, 5'말단 6-베이스 페어·리피트, 5'말단 비번역 영역, 번역 개시 코돈, 단백질 코딩 영역, ORF 번역 종지 코돈, 3'말단 비번역 영역, 3'말단 팔린드롬 영역 또는 3'말단 헤어핀 루프 등을, 안티센스 핵산의 바람직한 표적 영역으로서 선택할 수 있지만, 그들에 한정되지 않는다.
안티센스 핵산을 구성하는 뉴클레오티드 분자는, 천연형 DNA 또는 RNA이어도 되지만, 안정성(화학적 및/또는 효소에 대한)이나 비활성(RNA와의 친화성)을 향상시키기 위해서, 각종 화학 수식을 포함할 수 있다. 안티센스 핵산은 안티진 형태여도 된다. 이러한 각종 수식을 포함하는 안티센스 핵산은, 모두 자체 공지된 방법에 의해 화학적으로 합성할 수 있다.
(ii) 면역 체크 포인트의 mRNA에 대한 siRNA
본 명세서에 있어서는, 면역 체크 포인트의 mRNA에 상보적인 올리고 RNA와 그의 상보쇄로 이루어지는 이중쇄 RNA, 소위 siRNA도 또한, 면역 체크 포인트의 mRNA의 염기 서열과 상보적 혹은 실질적으로 상보적인 염기 서열 또는 그의 일부를 포함하는 핵산에 포함되는 것으로서 정의된다. siRNA는 표적이 되는 mRNA의 염기 서열 정보에 기초하여, 시판되고 있는 소프트웨어(예: RNAi Designer; Invitrogen)를 사용하여 적절히 설계할 수 있다.
siRNA를 구성하는 리보뉴클레오티드 분자도 또한, 안정성, 비활성 등을 향상시키기 위해서, 상기 안티센스 핵산의 경우와 동일한 수식을 받고 있어도 된다. 단, siRNA의 경우, 천연형 RNA 중의 모든 리보뉴클레오티드 분자를 수식형으로 치환하면, RNAi 활성이 상실되는 경우가 있으므로, RISC 복합체가 기능할 수 있는 최소한의 수식 뉴클레오티드의 도입이 필요하다.
siRNA는, mRNA 상의 표적 서열의 센스쇄 및 안티센스쇄를 DNA/RNA 자동 합성기로 각각 합성하고, 적당한 어닐링 완충액 내, 약 90 내지 약 95℃에서 약 1분 정도 변성시킨 후, 약 30 내지 약 70℃에서 약 1 내지 약 8시간 어닐링시킴으로써 제조할 수 있다. 또한, siRNA의 전구체가 되는 숏헤어핀 RNA(shRNA)를 합성하고, 이것을 다이서(dicer)를 사용하여 절단함으로써 제조할 수도 있다.
(iii) 면역 체크 포인트의 mRNA에 대한 siRNA를 생성할 수 있는 핵산
본 명세서에 있어서는, 생체 내에서 상기 면역 체크 포인트의 mRNA에 대한 siRNA를 생성할 수 있도록 디자인된 핵산도 또한, 면역 체크 포인트의 mRNA의 염기 서열과 상보적 혹은 실질적으로 상보적인 염기 서열 또는 그의 일부를 포함하는 핵산에 포함되는 것으로서 정의된다. 그러한 핵산으로서는, 상기한 shRNA나 그것을 발현하도록 구축된 발현 벡터 등을 들 수 있다. shRNA는, mRNA 상의 표적 서열의 센스쇄 및 안티센스쇄를 적당한 루프 구조를 형성할 수 있는 길이(예를 들어 15 내지 25 염기 정도)의 스페이서 서열을 사이에 삽입하여 연결한 염기 서열을 포함하는 올리고 RNA를 디자인하고, 이것을 DNA/RNA 자동 합성기로 합성함으로써 제조할 수 있다. shRNA의 발현 카세트를 포함하는 발현 벡터는, 상기 shRNA를 코딩하는 이중쇄 DNA를 통상적인 방법에 의해 제작한 후, 적당한 발현 벡터 중에 삽입함으로써 제조할 수 있다. shRNA의 발현 벡터로서는, U6이나 H1 등의 Pol III계 프로모터를 갖는 것이 사용될 수 있다.
이들 핵산의 면역 체크 포인트 발현 저해 활성은, 면역 체크 포인트의 유전자를 도입한 형질 전환체, 생체 내나 생체 외의 면역 체크 포인트의 유전자 발현계, 또는 생체 내나 생체 외의 면역 체크 포인트질의 단백질 번역계를 사용하여 조사할 수 있다.
본 발명에 있어서의 면역 체크 포인트의 발현을 억제하는 물질은, 상기와 같은 핵산에 한정되지 않고, 면역 체크 포인트의 산생을 직접적 또는 간접적으로 저해하는 한, 저분자 화합물 등의 다른 물질이어도 된다.
본 발명에 있어서 「면역 체크 포인트의 활성을 억제하는 물질」이란, T 세포의 암세포에 대한 항종양 활성을 제어하는 작용을 억제하는 한, 어떠한 것이어도 된다.
구체적으로는, 「면역 체크 포인트의 활성을 억제하는 물질」로서는, 면역 체크 포인트에 특이적인 항체를 들 수 있다. 항체는 폴리클로날 항체, 모노클로날 항체 중 어느 것이어도 된다. 이들 항체는 자체 공지된 항체 또는 항혈청의 제조법에 따라서 제조할 수 있다. 항체의 이소타입은 특별히 한정되지 않지만, 바람직하게는 IgG, IgM 또는 IgA, 특히 바람직하게는 IgG를 들 수 있다. 또한, 항체는, 표적 항원을 특이적으로 인식하여 결합하기 위한 상보성 결정 영역(CDR)을 적어도 갖는 것이면 특별히 제한은 없고, 완전 항체 분자 이외에도, Fab, Fab', F(ab')2 등의 프래그먼트, scFv, scFv-Fc, 미니보디, 다이아보디 등의 유전자 공학적으로 제작된 콘쥬게이트 분자, 또는 폴리에틸렌글리콜(PEG) 등의 단백질 안정화 작용을 갖는 분자 등으로 수식된 그들의 유도체 등이어도 된다.
「면역 체크 포인트 저해제」의 바람직한 예로서는, 예를 들어 항PD-1 항체, 항PD-L1 항체, 항PD-L2 항체, 항CTLA-4 항체, 항KIR 항체, 항CD137 항체, 항LAG-3 항체, 항OX40 항체, 항CD80 항체, 항CD86 항체, 항B7-H3 항체, 항B7-H4 항체, 항B7-H5 항체, 항TIM-3 항체, 항TIGIT 항체 및 항BTLA 항체를 들 수 있다. 그 중에서도, 항PD-1 항체, 항PD-L1 항체, 항CTLA-4 항체가 바람직하고, 항PD-1 항체가 보다 바람직하다.
본 발명에서 사용되는 「항PD-1 항체」는, PD-1에 결합하여, 그의 면역 체크 포인트로서의 기능을 저해할 수 있는 것이면 특별히 한정되지 않는다. 항PD-1 항체로서는, 이미 의약으로서 승인 판매되고 있는 것이나, 개발 중인 것이 있고, 이들을 적합하게 이용할 수 있다. 그러한 「항PD-1 항체」로서는, 니볼루맙(옵디보(GSK/오노 야쿠힝)), 인간화 IgG4형 항체인 펨브롤리주맙(MK-3475(Merck)), 디피리주맙(CT-011(CureTech)), REGN-2810/SAR-439684(Regeneron), PDR-001(Novartis), AMP-514/MEDI-0680(Amplimmune), TSR-042(AnaptyBio), PF-06801591(Pfizer), JS-001(Shanghai Junshi Biosciences), IBI-308(Innovent Biologics), BGB-A317(BeiGene)을 들 수 있지만, 이들에 한정되지 않는다.
본 발명에서 사용되는 「항PD-L1 항체」는, PD-L1에 결합하여, 그의 면역 체크 포인트로서의 기능을 저해할 수 있는 것이면 특별히 한정되지 않는다. 항PD-L1 항체로서는, 이미 의약으로서 승인(판매)되고 있는 것이나, 개발 중인 것이 있고, 이들을 적합하게 이용할 수 있다. 그러한 「항PD-L1 항체」로서는, 아테졸리주맙(MPDL3280A/RG-7446(Roche/쥬가이), Durvalumab(MEDI4736(아스트라제네카)), 아벨루맙(MSB0010718C(Merck)), MED10680/AMP-514(Medimmune), MDX-1105/BMS-936559(BMS), INCAGN-1876(Agenus), LY-3300054(Eli Lilly), CA-170(Aurigene Discovery Tcehcnology) 등을 들 수 있지만, 이들에 한정되지 않는다.
본 발명에서 사용되는 「항CTLA-4 항체」는, CTLA-4에 결합하여, 그의 면역 체크 포인트로서의 기능을 저해할 수 있는 것이면 특별히 한정되지 않는다. 항CTLA-4 항체로서는, 이미 의약으로서 승인(판매)되고 있는 것이나 개발 중인 것이 있고, 이들을 적합하게 이용할 수 있다. 그러한 「항CTLA-4 항체」로서는, 이필리무맙(MDX-010), 트레멜리무맙(CP675/206(Pfizer)), AGEN-1884(4-Antibody)를 들 수 있지만, 이들에 한정되지 않는다.
상기 이외에도, 항 킬러 세포 면역 글로불린 유사 수용체(KIR) 항체인 리리루맙(IPH2102/BMS-986015), 항CD137 항체인 우레루맙(BMS-663513), PF-05082566, 항LAG-3 항체인 BMS-986016; 항OX40 항체인 MEDI6469, PD-LA와 TGF-β를 표적으로 한 이중기능적(bi-functional) 융합 단백질인 MSB0011359C/M-7824(Merck) 등이, 면역 체크 포인트 저해제로서 개발 중이다.
상기한 항체는 통상적인 방법에 기초하여 제작해도 된다. 그 경우, 항체는 인간에 대한 이종 항원성을 저하시키기 때문에, 키메라(Chimeric) 항체, 인간화(Humanized) 항체이거나, 또는 완전 인간 항체인 것이 바람직하다.
본 발명의 「면역 체크 포인트 저해제」는, 약리학상 허용되는 담체나 첨가물을 포함하는 것이어도 된다. 그러한 담체나 첨가물로서는, 예를 들어 부형제, 결합제, 활택제, 용제, 붕괴제, 용해 보조제, 현탁화제, 유화제, 등장화제, 안정화제, 무통화제, 방부제, 항산화제, 교미제, 착색제, 완충제, 유동성 촉진제 등을 들 수 있지만, 이들에 제한되지 않고, 기타 상용되는 담체나 첨가물을 적절히 사용할 수 있다. 담체나 첨가물의 구체예는 전술한 바와 같다.
본 발명의 「면역 체크 포인트 저해제」의 투여 경로는 특별히 한정되지 않지만, 비경구 투여가 바람직하고, 구체적으로는 주사 투여, 경비 투여, 경폐 투여, 경피 투여 등을 들 수 있다. 주사 투여로서는, 정맥내 주사, 근육내 주사, 복강내 주사, 피하 주사를 예시할 수 있다. 투여 방법은 환자의 연령, 증상에 따라 적절히 선택할 수 있다.
본 발명의 의약에 있어서, 면역 체크 포인트 저해제와 HVJ-E가 따로 따로 약제에 함유되어 제공되는 경우에는, 이들 약제의 제형이나 투여 경로는 동일해도 상이한 것이어도 된다. 또한, 추가로 상이한 1종 이상의 제제를 조합해도 된다.
본 발명의 「면역 체크 포인트 저해제」의 투여량은, 그의 사용 목적, 투여 경로 등에 의해 적절히 결정된다. 목적으로 하는 최적인 응답(예를 들어, 치료 응답)을 초래하도록 조정된다. 유효 성분은 항체이기 때문에, 투여량은 약 0.0001 내지 100mg/kg, 일반적으로는 0.01 내지 5mg/kg환자 체중의 범위이다. 예를 들어, 투여량은 약 0.3mg/kg체중, 1mg/kg체중, 3mg/kg체중, 5mg/kg체중 또는 10mg/kg체중이거나 또는 1 내지 10mg/kg의 범위이다. 전형적인 치료 방법에는, 예를 들어 주 1회 투여, 2주 간격으로 1회 투여, 3주 간격으로 1회 투여, 4주 간격으로 1회 투여, 월 1회 투여, 3개월 간격으로 1회 투여 또는 3 내지 6개월 간격으로 1회 투여 등이다. 예를 들어, 정맥 주사 투여의 경우, 1mg/kg체중 또는 3mg/kg체중이다. 투여 횟수는 증상에 따라서 적절히 설정되고, 단회의 볼루스로 투여해도 되고, 수회로 나누어 시간을 두고 투여해도 된다. 예를 들어, 투여 6회를 4주 간격으로, 이어서 3주 간격으로 투여하는 경우도 있으면, 3주 간격으로 투여하는 경우도 있으면, 3mg/kg체중을 1회, 다음에 3주 간격으로 1mg/kg체중으로 투여되는 경우도 있다.
본 발명에 따른 HVJ-E와 면역 체크 포인트 저해제를 병용하는 경우, 그의 투여의 순서는 한정되지 않고, 면역 체크 포인트 저해제의 투여 후에 HVJ-E가 투여되어도, 양자가 동시에 투여되어도, HVJ-E의 투여 후에 면역 체크 포인트 저해제가 투여되어도 된다. 바람직하게는, HVJ-E의 투여 후에 면역 체크 포인트 저해제를 투여한다.
HVJ-E와 면역 체크 포인트 저해제가 순차로 투여되는 경우, HVJ-E와 면역 체크 포인트 저해제의 투여 간격은 특별히 한정되지 않고, 투여 경로나 제형, 투여량, 잔류 농도 등을 고려하여, 원하는 병용 효과가 얻어지도록 설정될 수 있다. 예를 들어, 투여 간격은 0시간 내지 7일, 바람직하게는 0시간 내지 3일, 보다 바람직하게는 0 내지 24시간, 더욱 바람직하게는 0시간 내지 12시간이다. 투여 간격은, 예를 들어 환자에 있어서의 약제나 그의 대사물의 혈중 농도를 공지된 방법으로 분석한 결과에 기초하여 결정할 수 있다.
실시예
이하, 실시예를 사용하여 본 발명을 의해 상세하게 설명하지만, 본 발명은 이들 실시예에 한정되는 것은 아니다.
실시예 1: β 아밀로이드 단회 투여 모델 마우스의 학습 장애에 대한 HVJ-E 및 항PD-1 항체의 단제 및 병용 투여에 있어서의 개선 작용
1. 재료 및 방법
시험 물질:
(1) HVJ-E(로트 번호: 140523, 제노미디아 가부시키가이샤)
(2) LEAFTM 정제된 항-마우스(Purified anti-mouse) CD279(항PD-1 항체, 로트 번호: B203991, BioLegend Inc.)
양성 대조 물질
아리셉트(등록 상표)정 5mg(도네페질 염산염, 로트 번호: 61A53K, 에자이 가부시키가이샤)
매체:
(1) 메톨로오즈(등록 상표) SM-100(메틸셀룰로오스(이하 MC), 로트 번호: 5065340, 신에쯔 가가꾸 고교 가부시키가이샤)
(2) 주사용수(로트 번호: 5C74N, 가부시키가이샤 오츠카 세이야쿠 고죠)
5％ 트레할로오스 용액(로트 번호: 160523, 제노미디아 가부시키가이샤)
(3) 인산 완충염(로트 번호: 1259290, DS 파마바이오메디칼 가부시키가이샤)
모델 제작용 물질:
아밀로이드-β 단백질(Amyloid-β Protein)(25-35)(β 아밀로이드, 로트 번호: AW14089, PolyPeptide Laboratories)
모델 제작용 물질용 매체:
주사용수(로트 번호: K5F71, 가부시키가이샤 오츠카 세이야쿠 고죠)
투여 검체:
매체(0.5％ MC)의 제조
필요량의 MC를 칭량(전자 천칭: XP205DR, PB3002-S/FACT 중 어느 것을 사용, 메틀러·톨레도 가부시키가이샤) 후, 주사용수로 0.5w/v％ 농도가 되도록 교반 제조한다. 제조 후의 0.5％ MC 용액은 냉장(관리 온도: 2.0 내지 8.0℃)의 조건 하에서 보관하고, 제조 후 7일 이내에 사용한다.
매체(PBS)의 제조
인산 완충염 1정당 100mL의 주사용수에 용해시키고, 0.22㎛의 필터(MILLIPORE)로 여과 멸균한다.
피검 물질(HVJ-E)의 제조
필요수의 피검 물질을 실온으로 복귀시키고, 바이알로부터 고무 마개만을 남지고 알루미늄캡을 완전히 떼어낸다. 주사 바늘(데루모 가부시키가이샤)을 설치한 1mL의 폴리프로필렌제 디스포저블 주사통(데루모 가부시키가이샤)에 주사용수를 1mL 충전한다. 고무 마개의 외측을 에탄올면으로 닦아낸 후, 상기 주사 바늘을 설치한 1mL의 폴리프로필렌제 디스포저블 주사통을 고무 마개에 찌르고, 주사용수를 벽면으로 전달되도록 바이알당 1mL 첨가한다. 액이 거품이 일지 않도록 또한 고무 마개에 붙지 않도록 주의하면서, 원을 그리도록 바이알을 돌리고, 완전히 용해시켜 균일한 백색의 용액으로 한다. 이 때의 HVJ-E의 농도를 10,000mNAU/mL(5％ 트레할로오스 함유)로 한다. 고무 마개를 떼어내고, 액을 거품이 일지 않도록 주의하면서 마이크로피펫을 사용하여 전체량을 폴리프로필렌제 튜브에 옮긴다.
용해액을 옮긴 튜브는 즉시 얼음 상에 정치하고, 5％ 트레할로오스 수용액을 사용하여 소정 농도(2,000mNAU/mL)의 투여액을 희석 제조한다. 제조 후에는 얼음 상에 보존하고, 투여 직전에 실온으로 복귀시킨다.
피검 물질(항PD-1 항체)의 제조
그대로(1바이알: 1mg/mL) 사용한다. 투여까지는 얼음 상에 보존하고, 투여 직전에 실온으로 복귀시킨다.
양성 대조 물질의 제조
염 환산을 하여 제조한다(환산 계수: 1.10).
도네페질의 필요 정수를 마노 유발에 넣어 잘 마쇄하고, 소량씩 0.5％ MC를 첨가하여 소정 농도로 한다.
모델 제작용 물질의 제조
β 아밀로이드를 주사용수로 2mM이 되도록 용해시키고, 37℃에서 4일간 인큐베이션하여 β 아밀로이드 용액을 제조한다. 또한, 조작은 클린 벤치 내에서 행하고, 사용하는 기구 및 용기는 멸균 완료된 것을 사용한다.
제조 빈도
0.5％ MC는 1주일에 1회 이상, 모델 제작용 물질은 투여 4일 전에 1회, 매체(PBS), 피검 물질 및 양성 대조 물질은 용시로 한다.
시험계
동물종 및 계통
마우스(SPF): Slc: ddY
수컷, 5주령, 50마리
입수 후 1일의 체중 범위(23 내지 28g)
공급원: 닛본 에스엘씨 가부시키가이샤
검역 및 순화
입수한 동물은 5일간의 검역 기간, 그 후 4일간의 순화 기간을 설정한다. 이 사이에 체중 측정(전자 천칭: PB3002, PG2002-S, PB3002-S/FACT, MS1602S/02 중 어느 것을 사용, 메틀러·톨레도 가부시키가이샤)을 3회 및 일반 상태의 관찰을 1일 1회 행하여 검역 및 순화로 한다. 체중 추이 및 일반 상태에 이상이 확인되지 않는 동물을 군 나눔에 사용한다. 체중 추이 및 일반 상태에 이상이 확인된 동물은, 탄산 가스를 사용하여 안락사시킨다.
군 나눔법
군 나눔은 컴퓨터 시스템(IBUKI, 가부시키가이샤 닛본 바이오리서치 센터)을 사용하여, 체중을 층별로 나눈 후, 무작위 추출법에 의해 각 군의 평균 체중이 거의 동등해지도록 행한다. 군 나눔 후의 잔여 동물은, 군 나눔일에 탄산 가스를 사용하여 안락사시킨다.
개체 식별 방법
동물은 입수일에 유성 잉크에 의한 꼬리에의 기입법 및 사지에의 색소 도포법을 병용하여 식별한다. 군 나눔 후에는 케이지 라벨과 동색(단, 위수술군은 흑색)의 유성 잉크를 사용하여 꼬리에 동물 번호의 기입에 의해 식별한다. 각 케이지에는, 검역·순화 기간 중에는 시험 번호, 입수 연월일, 검역·순화 동물 번호를 기입한 라벨을, 군 나눔 후에는 시험 번호, 군 명칭, 투여량 및 동물 번호를 기입하여, 군마다 색 구분한 라벨을 설치한다.
환경 조건 및 사육 방법
관리 온도: 20.0 내지 26.0℃, 관리 습도: 40.0 내지 70.0％, 명암 각 12시간(조명: 오전 6시 내지 오후 6시), 환기 횟수: 12회/시(필터를 통과시킨 신선한 공기)로 유지된 사육실(E동 9호실, 단, 검역 기간 중에는 E동 10호실)에서 동물을 사육한다. 동물은 오토클레이브 처리한 깔개를 넣은 플라스틱제 케이지(W: 310×D: 360×H: 175mm)를 사용하여 1케이지당 10마리까지, 군 나눔 후에는 1케이지당 5마리까지의 군 사육으로 한다. 먹이 공급기의 교환은 2주일에 1회 이상 행하고, 급수병, 플라스틱제 케이지의 교환은 1주일에 2회 이상 행한다. 동물 사육실의 청소·소독은 매일 행한다.
사료
제조 후 5개월 이내의 유단백질을 포함하지 않는 고형 사료(MF, 오리엔탈 고우보 고교 가부시키가이샤)를, 먹이 공급기에 넣어 자유롭게 섭취시킨다. 사용한 사료의 전체 로트에 대하여, 사료 중의 오염 물질 농도, 세균수 및 영양 성분 함량이 시험 시설의 허용 기준에 적합한 것을 확인한다.
분석 기관: Eurofins Scientific Analytics(오염 물질) 및 오리엔탈 고우보 고교 가부시키가이샤(세균수 및 영양 성분)
투여 경로
매체(0.5％ MC) 및 양성 대조 물질: 경구
디스포저블 마우스용 경구 존데(유겐가이샤 후치가미 기카이)를 설치한 폴리프로필렌제 디스포저블 주사통(데루모 가부시키가이샤)을 사용하여 강제 경구 투여한다. 투여 조작 시에는, 각 투여 검체를 1마리마다 전도 혼화하고, 주사통에 흡인한다.
투여 액량: 투여일의 체중값으로부터 10mL/kg으로 산출한다.
투여 횟수: 1일 1회, 합계 11회로 한다.
투여 시각: 오전 9시 내지 오전 12시 사이로 한다. 단, β 아밀로이드 주입일 및 검사일은 하기와 같이 행한다.
β 아밀로이드 주입일은 β 아밀로이드 주입 후(각성 후)에 투여한다.
검사일은 측정의 약 1시간(+10분) 전에 투여한다.
선택 이유: 시험 시설에서 사용되고 있는 통상적인 방법이다.
매체(5％ 트레할로오스 용액) 및 HVJ-E: 피하(경배부)
디스포저블 주사 바늘(데루모 가부시키가이샤)을 설치한 폴리프로필렌제 디스포저블 주사통(데루모 가부시키가이샤)을 사용하여 경배부에 피하 투여한다. 투여 조작 시에는, 각 투여 검체를 1마리마다 전도 혼화하고, 주사통에 흡인한다.
투여 액량: 투여일의 체중값으로부터 5mL/kg로 산출한다.
투여 횟수: 격일 1일 1회, 합계 6회로 한다.
투여 시각: 오전 9시 내지 오전 12시 사이로 한다. 단, β 아밀로이드 주입일 및 검사일은 하기와 같이 행한다.
β 아밀로이드 주입일은 β 아밀로이드 주입 후(각성 후)에 투여한다.
검사일은 측정의 약 1시간(+10분) 전에 투여한다.
매체(PBS) 및 항PD-1 항체: 복강내
디스포저블 주사 바늘(데루모 가부시키가이샤)을 설치한 폴리프로필렌제 디스포저블 주사통(데루모 가부시키가이샤)을 사용하여 복강내 투여한다. 투여 조작 시에는, 각 투여 검체를 1마리마다 전도 혼화하고, 주사통에 흡인한다.
투여 액량: 1마리당 0.25mL를 투여한다.
투여 횟수: 1일 1회, 투여 1일 및 투여 4일의 합계 2회로 한다.
투여 시각: 오전 9시 내지 오전 12시 사이로 한다.
선택 이유: 시험 시설에서 사용되고 있는 통상적인 방법이다.
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투여량 설정의 이유
HVJ-E 및 항PD-1 항체의 투여량은 충분한 약리 작용이 발현될 것으로 예상되는 용량을 포함하여 설정하였다. 도네페질은 시험 시설의 백그라운드 데이터에 기초하여, 충분한 약리 작용을 나타내는 용량을 설정하였다.
관찰 및 검사 항목
실험 스케줄
투여 검체의 투여 개시일을 투여 1일로 하고, 투여 3일에 β 아밀로이드를 주입한다. 그 후, 투여 9일에 Y 미로 시험, 투여 10 내지 11일에 수동 회피 시험을 행하고, 수동 회피 시험(유지 시행) 종료 후에 뇌를 적출한다.
일반 상태
일반 상태는 1일 1회, 투여 전에 관찰한다.
또한, 빈사(자발 운동이 저하되고, 호흡이나 맥박의 이상, 체온 저하, 횡와(橫臥), 복와(背臥) 등의 자세를 취하고, 외부로부터의 자극에 대한 반응이 저하된 상태)가 보인 경우를 인도적 엔드포인트로 하고, 그 동물에 대해서는 탄산 가스를 사용하여 안락사시킨다.
체중 측정
체중은 투여일마다 측정(전자 천칭: PB3002, PG2002-S, PB3002-S/FACT, MS1602S/02 중 어느 것을 사용, 메틀러·톨레도 가부시키가이샤)한다. 체중 측정은 투여 전에 행한다.
β 아밀로이드의 주입
동물을 펜토바르비탈나트륨(도꾜 가세이 고교 가부시키가이샤) 40mg/kg으로 복강내 투여(투여 액량: 10mL/kg)하고, 마취한다. 마취 후, 두피에 염산레보부피바카인(포프스카인(등록 상표) 0.25％ 주입, 마루이시 세이야쿠 가부시키가이샤)을 피하 투여(0.1mL)한다. 동물의 두정부의 털을 깎고, 두부를 뇌정위 고정 장치에 고정한다. 두피를 요오드팅크로 소독 후에 절개하여, 두개골을 노출시키고, 두개골 상의 결합 조직을 면봉으로 제거한 후, 블로워로 건조시켜 브레그마(bregma)의 위치를 보기 쉽게 한다. 치과용 드릴을 사용하여 브레그마로부터 측방 1mm(우측), 후방 0.2mm의 두개골에 스테인리스 파이프 자입용 구멍을 뚫는다. 뼈 표면으로부터 2.5mm의 깊이까지 외경 0.5mm의 실리콘 튜브 및 마이크로시린지에 접속된 스테인리스 파이프를 수직으로 자입한다. 뇌실 내에 β 아밀로이드 용액 3μL(6㎛ol/3μL)를 마이크로시린지 펌프로 3분간에 걸쳐 주입한다. 주입 후에는 스테인리스 파이프를 삽입한 채 3분간 정치하고, 스테인리스 파이프를 천천히 떼어낸다. 그 후, 스테인리스 파이프를 제거하고, 두개 구멍을 비흡수성 골수 지혈제(네스토프(등록 상표), 알프레사파마 가부시키가이샤)로 막고, 두피를 봉합한다. 동물을 뇌정위 고정 장치로부터 꺼내고, 사육 케이지로 복귀시킨다. 또한, 스테인리스 파이프 및 실리콘 튜브는 멸균 완료된 것을 사용한다.
Y 미로 시험(자발적 교체 행동 시험)
장치(도 1)
시험에는, 1개의 암 길이가 39.5cm, 바닥 폭이 4.5cm, 벽 높이가 12cm이며, 3암이 각각 120도로 분기되어 있는 플라스틱제 Y자형 미로(유겐가이샤 유니콤)를 사용한다. 측정 전에, 장치의 바닥면의 조도가 10 내지 40Lux가 되도록 조절한다.
측정 방법
투여 약 1시간 후에 행한다. 동물을 Y자형 미로 중 어느 하나의 암에 놓고, 8분간 미로 내를 자유롭게 탐색시킨다. 동물이 측정 시간 내에 이동한 암의 순서를 기록하고, 암에 이동한 횟수를 세어, 총 엔트리수로 한다. 이어서, 이 중에서 연속해서 다른 3개의 암을 선택한 조합을 조사하고, 이 수를 자발적 교체 행동수로 한다. 또한 하기 식을 사용하여 자발적 교체 행동율을 산출한다.
자발적 교체 행동율(％)=[자발적 교체 행동수/(총 엔트리수-2)]×100
수동 회피 시험
시험에는, 중앙의 기요틴 도어로 구획된 명실(W: 100×D: 100×H: 300mm)과 바닥의 그리드로부터 전기 자극을 주는 암실(W: 240×D: 245×H: 300mm)을 구비한 스텝 스루(step through)형 수동적 회피 반응 장치(명암 상자: 자사제, SHOCK SCRAMBLER: 유겐가이샤 유니콤)를 사용한다. 동물을 명실에 넣어 10초 후에 기요틴 도어를 살짝 열고, 동물이 암실에 들어갈 때까지의 시간(반응 잠복 시간)을 측정한다.
획득 시행(1일째)은, 동물이 암실에 들어감과 동시에 기요틴 도어를 닫아 전기 자극(0.2mA, 2sec, 스크램블 방식)을 주고, 전기 자극 부하 시의 동물의 울음소리의 유무를 확인한다. 반응 잠복 시간은 최고 300초까지로 한다.
유지 시행(2일째)은, 동물이 암실에 들어가거나, 명실에서 300초 경과하면 종료로 한다.
유지 시행 종료 후의 동물은, 탄산 가스를 사용하여 안락사시킨다.
결과의 해석
각 평가 항목에 있어서, 각 군의 평균 및 표준 오차를 산출하고, 이하와 같이 해석을 행한다.
통계 해석 방법
유의차 검정은 매체 대조군과 HVJ-E군, 매체 대조군과 항PD-1 항체군, 매체 대조군과 HVJ-E+항PD-1 항체군, HVJ-E군과 HVJ-E+항PD-1 항체군, 항PD-1 항체군과 HVJ-E+항PD-1 항체군, 매체 대조군과 도네페질군의 2군간 비교 검정을 행한다.
2군간 비교 검정은 F 검정에 의한 등분산성의 검정을 행하고, 등분산의 경우에는 Student의 t 검정, 부등분산의 경우에는 Aspin-Welch 검정을 행한다.
유의 수준은 5％로 하고, 5％ 미만(p<0.05)과 1％ 미만(p<0.01)으로 나누어 표시한다. 또한, 유의차 검정에는, 시판되고 있는 통계 프로그램(SAS 시스템, SAS Institute Japan 가부시키가이샤)을 사용한다.
결과
(1) Y 미로 시험(자발적 교체 행동수, 자발적 교체 행동율)
Y 미로 시험의 결과를 도 2에 도시한다. HVJ-E+항PD-1 항체 병용군은, 매체 대조군에 비교하여 유의미하게 높은 자발적 교환 행동율을 나타내고(P<0.01), 그 수치는 도네페질군에 필적하는 것이었다. 또한, HVJ-E+항PD-1 항체 병용군의 자발적 교체 행동율은, 각 단독 투여(HVJ-E군 또는 항PD-1 항체군)에 비교하여 유의미하게 높은 자발적 교환 행동율을 나타내고, 상가 작용(Additive interaction)과 상호증진 작용(Multiplicative interaction)에 있어서 정(正)의 상호 작용이 보여, 상승적인 효과를 나타내었다.
(2) 수동 회피 시험(반응 잠복 시간)
수동 시험(반응 잠복 시간)의 결과를 도 3에 도시한다. 항PD-1 항체군 및 HVJ-E+항PD-1 항체 병용군에서는, 도네페질군보다 조금 떨어지기는 하지만, 매체 대조군에 비교하여 유의미하게 높은 효과를 나타내었다. 또한, HVJ-E+항PD-1 항체 병용군의 반응 잠복 시간는, HVJ-E 단독 투여군에 비교하여 유의한 차를 나타내었다.
고찰
Schenk 등은, Aβ과잉 산생의 알츠하이머 모델 마우스에 Aβ1 -42로 면역을 행함으로써 병학적 개선(전술한 Nature 400: 173-, 1999) 및 행동학적 개선(Nature 408: 979- and 982-, 2000)이 확인되는 것, 또한 항Aβ 항체를 말소 투여함으로써 병리학적 개선이 확인되는 것을 보고하였다(Nature Med 6: 916-, 2000). 또한, Baruch 등은, 알츠하이머 모델 마우스에 PD-1 항체를 투여함으로써 병리학적 개선이 확인되는 것을 보고하였다(전술한 Nature Med 22: 135-, 2016).
본 실시예의 결과와 상기 사실로부터, HVJ-E와 항PD-1 항체(면역 체크 포인트 저해제)는, 모두 자연 및 획득 면역을 부활화함으로써, 이물인 Aβ를 배제하고, 알츠하이머의 병태를 개선시킨다고 생각된다. 그러나, HVJ-E와 항PD-1 항체를 병용함으로써 단독 투여에 비교하여 유의미하게 높은 효과가 얻어진 것은, 양자의 작용 기서가 상이할 가능성을 시사한다. 또한, HVJ-E가 단독 투여에서도 높은 개선 효과를 나타낸 것은, HVJ-E가 단순히 획득 면역의 부활 이외의 경로에서 병태 개선에 기여하고 있는 것을 시사한다. 본 실험에 의해, HVJ-E 단독 또는 HVJ-E에 면역 체크 포인트 저해제를 병용함으로써, 알츠하이머형 인지증을 비롯한 Aβ 등의 프리오노이드의 축적을 수반하는 인지 기능 장애나 신경 변성 질환의 보다 효과적인 치료가 가능해지는 것을 기대할 수 있음이 나타났다.
실시예 2: β 아밀로이드 단회 투여 모델 마우스의 학습 장애에 대한 HVJ-E 및 항PD-1 항체의 단제 및 병용 투여에 있어서의 개선 작용(HVJ-E 피하 투여와 경비 투여의 비교)
HVJ-E를 피하 투여하는 군에 더하여, 경비 투여하는 군을 설정하는 것 이외에는, 실시예 1과 동일한 방법으로 Y 미로 시험을 실시하였다. 투여 경로 및 군 구성을 이하에 나타낸다.
투여 경로
매체(0.5％ MC) 및 양성 대조 물질: 경구
실시예 1과 같음
매체(5％ 트레할로오스 용액) 및 HVJ-E: 비강내 또는 피하
경비 투여는, 마이크로피펫(에펜도르프 가부시키가이샤)을 사용하여 비강내에 투여한다. 피하 투여는, 실시예 1과 동일하게, 디스포저블 주사 바늘(데루모 가부시키가이샤)을 설치한 폴리프로필렌제 디스포저블 주사통(데루모 가부시키가이샤)을 사용하여 피하에 투여한다. 투여 조작 시에는, 각 투여 검체를 1마리마다 혼화하고, 주사통에 흡인한다.
경비 투여는 이하의 조건에서 투여를 행한다.
투여 액량: 1마리당 한쪽 코 5μL의 액량으로 양쪽 비강내(10μL/양쪽 코)에 투여한다.
투여 횟수: 1일 1회, 합계 9회로 한다.
피하 투여는 이하의 조건에서 투여를 행한다.
투여 액량: 투여일의 체중값으로부터 5mL/kg로 산출한다.
투여 횟수: 격일 1일 1회, 합계 6회로 한다.
경비 투여와 피하 투여 중 어느 것에 대해서도 투여 시각은, 오전 9시 내지 오전 12시 사이로 한다. 단, β 아밀로이드 주입일 및 검사일은 하기와 같이 행한다.
β 아밀로이드 주입일은 β 아밀로이드 주입 후(각성 후)에 투여한다.
검사일은 측정의 약 1시간(+10분) 전에 투여한다.
매체(PBS) 및 항PD-1 항체: 복강내
실시예 1과 같음
Figure pct00003
결과
Y 미로 시험(자발적 교체 행동수, 자발적 교체 행동율)
Y 미로 시험의 결과를 도 4에 도시한다. HVJ-E 경비 투여군은, 매체 대조군에 비교하여 유의미하게 높은 자발적 교환 행동수(P<0.05) 및 자발적 교환 행동율(P<0.01)을 나타내고, 그 수치는 도네페질군에 필적하는 것이었다. 한편, 항PD-1 항체의 병용에서는, HVJ-E(경비 투여)+항PD-1 항체 투여군은, 매체 대조군과 유의차가 확인되지 않는 것에 비해, HVJ-E(피하 투여)+항PD-1 항체 투여군은, 매체 대조군에 비교하여 유의미하게 높은 자발적 교환 행동율(P<0.01)이 확인되었다.
고찰
본 실시예 기재된 시험에 있어서, 매체 투여군과 비교하여, HVJ-E 경비 투여군(항PD-1 항체가 투여되지 않은 군)에서는, 마우스의 학습 장애가 현저하게 개선되는 것이 확인되었다. 또한, 본 실시예 기재된 시험에 있어서, HVJ-E와 항PD-1 항체의 병용은, 경비 투여와 피하 투여에서 효과에 상이가 있음이 확인되었다. HVJ-E는 종양 세포나 수지상 세포, 마크로파지 등으로부터의 케모카인 산생 유도에 의해, NK 세포나 CD4+ T 세포, CD8+ T 세포를 종양소에 가까이 끌어들여, Th1 우위의 형질 전환을 유도하고, NK 세포나 이펙터 T 세포(Effector T cell)의 항종양 효과를 높인다고 여겨지고 있다(Cancer Res. 2007). 또한, HVJ-E는 호중구에 대해서도 작용하고, N1 우위한 형질 전환을 유도하여 항종양 효과를 높이는 것도 보고되어 있다(Chang CY, et al., Oncotarget. 2016 Jul 5;7(27):42195-42207). PD-1은, 주로 T 세포, B 세포 등의 림프구에 더하여, 골수계 세포나 마크로파지에서도 발현되고 있다고 여겨지고 있고(Yuan B, et al., Immunol Lett. 2016 Nov; 179:114-121), HVJ-E도 상기와 같이 다종류의 면역 세포에 대하여 작용한다고 여겨지는 HVJ-E나 HVJ-리포솜의 경비 투여에서는, 점막 면역과 전신성 면역이 동시에 활성화된다고 여겨지고 있는 점에서(Yasuoka E, et al., J Mol Med(Berl). 2007 Mar;85(3):283-92, Sakaue G, et al., J Immunol. 2003 Jan 1;170(1):495-502), 경비 투여와 피하 투여의 상이는, 이 HVJ-E의 작용 기서에 관련되어 있다고도 생각된다. 어느 것으로 해도, 제제 처방이나 투여 경로를 최적화함으로써, HVJ-E는 알츠하이머형 인지증을 비롯한 Aβ 등의 프리오노이드 축적을 수반하는 인지 기능 장애나 신경 변성 질환을 더 효과적으로 치료할 수 있을 것이 기대된다.
실시예 3: β 아밀로이드 단회 투여 모델 마우스의 학습 장애에 대한 HVJ-E의 단제 경비 투여에 있어서의 개선 작용(용량 반응성 시험)
실시예 1 및 2에서는, β 아밀로이드의 뇌실내 단회 투여에 의해 학습 장애가 유발된 동물에 HVJ-E 및 항PD-1 항체의 단제 및 병용 투여한 바, HVJ-E 단제 경비 투여에 의해 Y 미로 시험(단기 기억 장애)에 대하여 개선 작용을 나타내었다. 여기에서 금회, HVJ-E 단제 경비 투여에 의한 용량 반응성을 확인하기 위해 알츠하이머병 모델인 β 아밀로이드 뇌실내 단회 투여 마우스를 사용하여 학습 장애에 대한 각 농도의 HVJ-E 단제 경비 투여에 있어서의 개선 작용을, Y 미로 시험을 사용하여 평가하였다.
HVJ-E의 투여량을 바꾸는 것 이외에는, 실시예 1과 동일한 방법으로 Y 미로 시험을 실시하였다. 투여 경로 및 군 구성을 이하에 나타낸다.
투여 경로
양성 대조 물질: 경구
실시예 1과 같음
매체(5％ 트레할로오스 용액) 및 HVJ-E: 비강내
경비 투여는, 마이크로피펫(에펜도르프 가부시키가이샤)을 사용하여 비강내에 투여한다. 피하 투여는, 실시예 1과 동일하게, 디스포저블 주사 바늘(데루모 가부시키가이샤)을 설치한 폴리프로필렌제 디스포저블 주사통(데루모 가부시키가이샤)을 사용하여 피하에 투여한다. 투여 조작 시에는, 각 투여 검체를 1마리마다 혼화하고, 주사통에 흡인한다.
경비 투여는 이하의 조건에서 투여를 행한다.
투여 액량: 1마리당 한쪽 코 5μL의 액량으로 양쪽 비강내(10μL/양쪽 코)에 투여한다.
투여 횟수: 1일 1회, 합계 9회로 한다.
투여 시각은 오전 9시 내지 오전 12시 사이로 한다. 단, β 아밀로이드 주입일 및 검사일은 하기와 같이 행한다.
β 아밀로이드 주입일은 β 아밀로이드 주입 후(각성 후)에 투여한다.
검사일은 측정의 약 1시간(+10분) 전에 투여한다.
Figure pct00004
결과
Y 미로 시험(자발적 교체 행동수, 자발적 교체 행동율)
Y 미로 시험의 결과를 도 5에 도시한다. 실시예 2의 결과와 동일하게, HVJ-E(100mNAU/body) 경비 투여군은, 매체 대조군에 비교하여 유의미하게 높은 자발적 교환 행동율(P<0.01)을 나타내고, 그 수치는 도네페질군에 필적하는 것이었다.
HVJ-E 투여군과 Vehicle군의 2군간의 t 검정을 행한 바, 50mNAU/body와 10mNAU/body의 p값은 각각 0.0204와 0.0515가 되고, 50mNAU/body에 대해서는 유의차가 있고, 10mNAU/body에 대해서도 그 경향이 확인되었다(100mNAU/body의 p값은 0.0000368). 이상으로부터, HVJ-E 단제 경비 투여에 의한 용량 의존적인 효과를 확인할 수 있었다. 또한, 투여량이나 투여 경로를 최적화함으로써, HVJ-E의 효과를 높일 것도 기대할 수 있다.
본 발명은, 프리오노이드의 축적을 수반하는 인지 기능 장애 및/또는 신경 변성 질환의 예방 및/또는 치료에 유용하다.
본 명세서 중에서 인용한 모든 간행물, 특허 및 특허 출원을 그대로 참고로 하여 본 명세서 중에 있어서 원용하는 것으로 한다.
SEQUENCE LISTING <110> Osaka University GenomIdea Inc. Foundation for Biomedical Research and Innovation at Kobe <120> Novel Therapeutic Agent for Prionoid Disease <130> PS86-9001WO <150> JP2016-236536 <151> 2016-12-06 <160> 32 <170> PatentIn version 3.5 <210> 1 <211> 867 <212> DNA <213> Homo sapiens <220> <221> CDS <222> (1)..(867) <400> 1 atg cag atc cca cag gcg ccc tgg cca gtc gtc tgg gcg gtg cta caa 48 Met Gln Ile Pro Gln Ala Pro Trp Pro Val Val Trp Ala Val Leu Gln 1 5 10 15 ctg ggc tgg cgg cca gga tgg ttc tta gac tcc cca gac agg ccc tgg 96 Leu Gly Trp Arg Pro Gly Trp Phe Leu Asp Ser Pro Asp Arg Pro Trp 20 25 30 aac ccc ccc acc ttc tcc cca gcc ctg ctc gtg gtg acc gaa ggg gac 144 Asn Pro Pro Thr Phe Ser Pro Ala Leu Leu Val Val Thr Glu Gly Asp 35 40 45 aac gcc acc ttc acc tgc agc ttc tcc aac aca tcg gag agc ttc gtg 192 Asn Ala Thr Phe Thr Cys Ser Phe Ser Asn Thr Ser Glu Ser Phe Val 50 55 60 cta aac tgg tac cgc atg agc ccc agc aac cag acg gac aag ctg gcc 240 Leu Asn Trp Tyr Arg Met Ser Pro Ser Asn Gln Thr Asp Lys Leu Ala 65 70 75 80 gcc 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190 tcc cgg gcc gca cga ggg aca ata gga gcc agg cgc acc ggc cag ccc 624 Ser Arg Ala Ala Arg Gly Thr Ile Gly Ala Arg Arg Thr Gly Gln Pro 195 200 205 ctg aag gag gac ccc tca gcc gtg cct gtg ttc tct gtg gac tat ggg 672 Leu Lys Glu Asp Pro Ser Ala Val Pro Val Phe Ser Val Asp Tyr Gly 210 215 220 gag ctg gat ttc cag tgg cga gag aag acc ccg gag ccc ccc gtg ccc 720 Glu Leu Asp Phe Gln Trp Arg Glu Lys Thr Pro Glu Pro Pro Val Pro 225 230 235 240 tgt gtc cct gag cag acg gag tat gcc acc att gtc ttt cct agc gga 768 Cys Val Pro Glu Gln Thr Glu Tyr Ala Thr Ile Val Phe Pro Ser Gly 245 250 255 atg ggc acc tca tcc ccc gcc cgc agg ggc tca gct gac ggc cct cgg 816 Met Gly Thr Ser Ser Pro Ala Arg Arg Gly Ser Ala Asp Gly Pro Arg 260 265 270 agt gcc cag cca ctg agg cct gag gat gga cac tgc tct tgg ccc ctc 864 Ser Ala Gln Pro Leu Arg Pro Glu Asp Gly His Cys Ser Trp Pro Leu 275 280 285 tga 867 <210> 2 <211> 288 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 2 Met Gln Ile Pro Gln Ala Pro Trp Pro Val Val Trp Ala Val Leu Gln 1 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Phe Gln Trp Arg Glu Lys Thr Pro Glu Pro Pro Val Pro 225 230 235 240 Cys Val Pro Glu Gln Thr Glu Tyr Ala Thr Ile Val Phe Pro Ser Gly 245 250 255 Met Gly Thr Ser Ser Pro Ala Arg Arg Gly Ser Ala Asp Gly Pro Arg 260 265 270 Ser Ala Gln Pro Leu Arg Pro Glu Asp Gly His Cys Ser Trp Pro Leu 275 280 285 <210> 3 <211> 531 <212> DNA <213> Homo sapiens <220> <221> CDS <222> (1)..(531) <400> 3 atg agg ata ttt gct gtc ttt ata ttc atg acc tac tgg cat ttg ctg 48 Met Arg Ile Phe Ala Val Phe Ile Phe Met Thr Tyr Trp His Leu Leu 1 5 10 15 aac gcc cca tac aac aaa atc aac caa aga att ttg gtt gtg gat cca 96 Asn Ala Pro Tyr Asn Lys Ile Asn Gln Arg Ile Leu Val Val Asp Pro 20 25 30 gtc acc tct gaa cat gaa ctg aca tgt cag gct gag ggc tac ccc aag 144 Val Thr Ser Glu His Glu Leu Thr Cys Gln Ala Glu Gly Tyr Pro Lys 35 40 45 gcc gaa gtc atc tgg aca agc agt gac cat caa gtc ctg agt ggt aag 192 Ala Glu Val Ile Trp Thr Ser Ser Asp His Gln Val Leu Ser Gly Lys 50 55 60 acc acc acc acc aat tcc aag aga gag gag aag ctt ttc 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48 Met Ile Phe Leu Leu Leu Met Leu Ser Leu Glu Leu Gln Leu His Gln 1 5 10 15 ata gca gct tta ttc aca gtg aca gtc cct aag gaa ctg tac ata ata 96 Ile Ala Ala Leu Phe Thr Val Thr Val Pro Lys Glu Leu Tyr Ile Ile 20 25 30 gag cat ggc agc aat gtg acc ctg gaa tgc aac ttt gac act gga agt 144 Glu His Gly Ser Asn Val Thr Leu Glu Cys Asn Phe Asp Thr Gly Ser 35 40 45 cat gtg aac ctt gga gca ata aca gcc agt ttg caa aag gtg gaa aat 192 His Val Asn Leu Gly Ala Ile Thr Ala Ser Leu Gln Lys Val Glu Asn 50 55 60 gat aca tcc cca cac cgt gaa aga gcc act ttg ctg gag gag cag ctg 240 Asp Thr Ser Pro His Arg Glu Arg Ala Thr Leu Leu Glu Glu Gln Leu 65 70 75 80 ccc cta ggg aag gcc tcg ttc cac ata cct caa gtc caa gtg agg gac 288 Pro Leu Gly Lys Ala Ser Phe His Ile Pro Gln Val Gln Val Arg Asp 85 90 95 gaa gga cag tac caa tgc ata atc atc tat ggg gtc gcc tgg gac tac 336 Glu Gly Gln Tyr Gln Cys Ile Ile Ile Tyr Gly Val Ala Trp Asp Tyr 100 105 110 aag tac ctg act ctg aaa gtc aaa gct tcc tac agg aaa ata aac act 384 Lys Tyr Leu Thr Leu Lys Val Lys Ala Ser Tyr Arg Lys Ile Asn Thr 115 120 125 cac atc cta aag gtt cca gaa aca gat gag gta gag ctc acc tgc cag 432 His Ile Leu Lys Val Pro Glu Thr Asp Glu Val Glu Leu Thr Cys Gln 130 135 140 gct aca ggt tat cct ctg gca gaa gta tcc tgg cca aac gtc agc gtt 480 Ala Thr Gly Tyr Pro Leu Ala Glu Val Ser Trp Pro Asn Val Ser Val 145 150 155 160 cct gcc aac acc agc cac tcc agg acc cct gaa ggc ctc tac cag gtc 528 Pro Ala Asn Thr Ser His Ser Arg Thr Pro Glu Gly Leu Tyr Gln Val 165 170 175 acc agt gtt ctg cgc cta aag cca ccc cct ggc aga aac ttc agc tgt 576 Thr Ser Val Leu Arg Leu Lys Pro Pro Pro Gly Arg Asn Phe Ser Cys 180 185 190 gtg ttc tgg aat act cac gtg agg gaa ctt act ttg gcc agc att gac 624 Val Phe Trp Asn Thr His Val Arg Glu Leu Thr Leu Ala Ser Ile Asp 195 200 205 ctt caa agt cag atg gaa ccc agg acc cat cca act tgg ctg ctt cac 672 Leu Gln Ser Gln Met Glu Pro Arg Thr His Pro Thr Trp Leu Leu His 210 215 220 att ttc atc ccc ttc tgc atc att gct ttc att ttc ata gcc aca 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Ser Tyr Arg Lys Ile Asn Thr 115 120 125 His Ile Leu Lys Val Pro Glu Thr Asp Glu Val Glu Leu Thr Cys Gln 130 135 140 Ala Thr Gly Tyr Pro Leu Ala Glu Val Ser Trp Pro Asn Val Ser Val 145 150 155 160 Pro Ala Asn Thr Ser His Ser Arg Thr Pro Glu Gly Leu Tyr Gln Val 165 170 175 Thr Ser Val Leu Arg Leu Lys Pro Pro Pro Gly Arg Asn Phe Ser Cys 180 185 190 Val Phe Trp Asn Thr His Val Arg Glu Leu Thr Leu Ala Ser Ile Asp 195 200 205 Leu Gln Ser Gln Met Glu Pro Arg Thr His Pro Thr Trp Leu Leu His 210 215 220 Ile Phe Ile Pro Phe Cys Ile Ile Ala Phe Ile Phe Ile Ala Thr Val 225 230 235 240 Ile Ala Leu Arg Lys Gln Leu Cys Gln Lys Leu Tyr Ser Ser Lys Asp 245 250 255 Thr Thr Lys Arg Pro Val Thr Thr Thr Lys Arg Glu Val Asn Ser Ala 260 265 270 Ile <210> 7 <211> 525 <212> DNA <213> Homo sapiens <220> <221> CDS <222> (1)..(525) <400> 7 atg gct tgc ctt gga ttt cag cgg cac aag gct cag ctg aac ctg gct 48 Met Ala Cys Leu Gly Phe Gln Arg His Lys Ala Gln Leu Asn Leu Ala 1 5 10 15 acc agg acc tgg ccc tgc act ctc ctg ttt ttt ctt ctc ttc atc cct 96 Thr Arg Thr Trp Pro Cys Thr Leu Leu Phe Phe Leu Leu Phe Ile Pro 20 25 30 gtc ttc tgc aaa gca atg cac gtg gcc cag cct gct gtg gta ctg gcc 144 Val Phe Cys Lys Ala Met His Val Ala Gln Pro Ala Val Val Leu Ala 35 40 45 agc agc cga ggc atc gcc agc ttt gtg tgt gag tat gca tct cca ggc 192 Ser Ser Arg Gly Ile Ala Ser Phe Val Cys Glu Tyr Ala Ser Pro Gly 50 55 60 aaa gcc act gag gtc cgg gtg aca gtg ctt cgg cag gct gac agc cag 240 Lys Ala Thr Glu Val Arg Val Thr Val Leu Arg Gln Ala Asp Ser Gln 65 70 75 80 gtg act gaa gtc tgt gcg gca acc tac atg atg ggg aat gag ttg acc 288 Val Thr Glu Val Cys Ala Ala Thr Tyr Met Met Gly Asn Glu Leu Thr 85 90 95 ttc cta gat gat tcc atc tgc acg ggc acc tcc agt gga aat caa gtg 336 Phe Leu Asp Asp Ser Ile Cys Thr Gly Thr Ser Ser Gly Asn Gln Val 100 105 110 aac ctc act atc caa gga ctg agg gcc atg gac acg gga ctc tac atc 384 Asn Leu Thr Ile Gln Gly Leu Arg Ala Met Asp Thr Gly Leu Tyr Ile 115 120 125 tgc aag gtg gag ctc atg tac cca ccg cca tac tac ctg ggc ata ggc 432 Cys Lys Val Glu Leu Met Tyr Pro Pro Pro Tyr Tyr Leu Gly Ile Gly 130 135 140 aac gga acc cag att tat gta att gct aaa gaa aag aag ccc tct tac 480 Asn Gly Thr Gln Ile Tyr Val Ile Ala Lys Glu Lys Lys Pro Ser Tyr 145 150 155 160 aac agg ggt cta tgt gaa aat gcc ccc aac aga gcc aga atg tga 525 Asn Arg Gly Leu Cys Glu Asn Ala Pro Asn Arg Ala Arg Met 165 170 <210> 8 <211> 174 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 8 Met Ala Cys Leu Gly Phe Gln Arg His Lys Ala Gln Leu Asn Leu Ala 1 5 10 15 Thr Arg Thr Trp Pro Cys Thr Leu Leu Phe Phe Leu Leu Phe Ile Pro 20 25 30 Val Phe Cys Lys Ala Met His Val Ala Gln Pro Ala Val Val Leu Ala 35 40 45 Ser Ser Arg Gly Ile Ala Ser Phe Val Cys Glu Tyr Ala Ser Pro Gly 50 55 60 Lys Ala Thr Glu Val Arg Val Thr Val Leu Arg Gln Ala Asp Ser Gln 65 70 75 80 Val Thr Glu Val Cys Ala Ala Thr Tyr Met Met Gly Asn Glu Leu Thr 85 90 95 Phe Leu Asp Asp Ser Ile Cys Thr Gly Thr Ser Ser Gly Asn Gln Val 100 105 110 Asn Leu Thr Ile Gln Gly Leu Arg Ala Met Asp Thr Gly Leu Tyr Ile 115 120 125 Cys Lys Val Glu Leu Met Tyr Pro Pro Pro Tyr Tyr Leu Gly Ile Gly 130 135 140 Asn Gly Thr Gln Ile Tyr Val Ile Ala Lys Glu Lys Lys Pro Ser Tyr 145 150 155 160 Asn Arg Gly Leu Cys Glu Asn Ala Pro Asn Arg Ala Arg Met 165 170 <210> 9 <211> 867 <212> DNA <213> Homo sapiens <220> <221> CDS <222> (1)..(867) <400> 9 atg ggc cac aca cgg agg cag gga aca tca cca tcc aag tgt cca tac 48 Met Gly His Thr Arg Arg Gln Gly Thr Ser Pro Ser Lys Cys Pro Tyr 1 5 10 15 ctc aat ttc ttt cag ctc ttg gtg ctg gct ggt ctt tct cac ttc tgt 96 Leu Asn Phe Phe Gln Leu Leu Val Leu Ala Gly Leu Ser His Phe Cys 20 25 30 tca ggt gtt atc cac gtg acc aag gaa gtg aaa gaa gtg gca acg ctg 144 Ser Gly Val Ile His Val Thr Lys Glu Val Lys Glu Val Ala Thr Leu 35 40 45 tcc tgt ggt cac aat gtt tct gtt gaa gag ctg gca caa act cgc atc 192 Ser Cys Gly His Asn Val Ser Val Glu Glu Leu Ala Gln Thr Arg Ile 50 55 60 tac tgg caa aag gag aag aaa atg gtg ctg act atg atg tct ggg gac 240 Tyr Trp Gln Lys Glu Lys Lys Met Val Leu Thr Met Met Ser Gly Asp 65 70 75 80 atg aat ata tgg ccc gag tac aag aac cgg acc atc ttt gat atc act 288 Met Asn Ile Trp Pro Glu Tyr Lys Asn Arg Thr Ile Phe Asp Ile Thr 85 90 95 aat aac ctc tcc att gtg atc ctg gct ctg cgc cca tct gac gag ggc 336 Asn Asn Leu Ser Ile Val Ile Leu Ala Leu Arg Pro Ser Asp Glu Gly 100 105 110 aca tac gag tgt gtt gtt ctg aag tat gaa aaa gac gct ttc aag cgg 384 Thr Tyr Glu Cys Val Val Leu Lys Tyr Glu Lys Asp Ala Phe Lys Arg 115 120 125 gaa cac ctg gct gaa gtg acg tta tca gtc aaa gct gac ttc cct aca 432 Glu His Leu Ala Glu Val Thr Leu Ser Val Lys Ala Asp Phe Pro Thr 130 135 140 cct agt ata tct gac ttt gaa att cca act tct aat att aga agg ata 480 Pro Ser Ile Ser Asp Phe Glu Ile Pro Thr Ser Asn Ile Arg Arg Ile 145 150 155 160 att tgc tca acc tct gga ggt ttt cca gag cct cac ctc tcc tgg ttg 528 Ile Cys Ser Thr Ser Gly Gly Phe Pro Glu Pro His Leu Ser Trp Leu 165 170 175 gaa aat gga gaa gaa tta aat gcc atc aac aca aca gtt tcc caa gat 576 Glu Asn Gly Glu Glu Leu Asn Ala Ile Asn Thr Thr Val Ser Gln Asp 180 185 190 cct gaa act gag ctc tat gct gtt agc agc aaa ctg gat ttc aat atg 624 Pro Glu Thr Glu Leu Tyr Ala Val Ser Ser Lys Leu Asp Phe Asn Met 195 200 205 aca acc aac cac agc ttc atg tgt ctc atc aag tat gga cat tta aga 672 Thr Thr Asn His Ser Phe Met Cys Leu Ile Lys Tyr Gly His Leu Arg 210 215 220 gtg aat cag acc ttc aac tgg aat aca acc aag caa gag cat ttt cct 720 Val Asn Gln Thr Phe Asn Trp Asn Thr Thr Lys Gln Glu His Phe Pro 225 230 235 240 gat aac ctg ctc cca tcc tgg gcc att acc tta atc tca gta aat gga 768 Asp Asn Leu Leu Pro Ser Trp Ala Ile Thr Leu Ile Ser Val Asn Gly 245 250 255 att ttt gtg ata tgc tgc ctg acc tac tgc ttt gcc cca aga tgc aga 816 Ile Phe Val Ile Cys Cys Leu Thr Tyr Cys Phe Ala Pro Arg Cys Arg 260 265 270 gag aga agg agg aat gag aga ttg aga agg gaa agt gta cgc cct gta 864 Glu Arg Arg Arg Asn Glu Arg Leu Arg Arg Glu Ser Val Arg Pro Val 275 280 285 taa 867 <210> 10 <211> 288 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 10 Met Gly His Thr Arg Arg Gln Gly Thr Ser Pro Ser Lys Cys Pro Tyr 1 5 10 15 Leu Asn Phe Phe Gln Leu Leu Val Leu Ala Gly Leu Ser His Phe Cys 20 25 30 Ser Gly Val Ile His Val Thr Lys Glu Val Lys Glu Val Ala Thr Leu 35 40 45 Ser Cys Gly His Asn Val Ser Val Glu Glu Leu Ala Gln Thr Arg Ile 50 55 60 Tyr Trp Gln Lys Glu Lys Lys Met Val Leu Thr Met Met Ser Gly Asp 65 70 75 80 Met Asn Ile Trp Pro Glu Tyr Lys Asn Arg Thr Ile Phe Asp Ile Thr 85 90 95 Asn Asn Leu Ser Ile Val Ile Leu Ala Leu Arg Pro Ser Asp Glu Gly 100 105 110 Thr Tyr Glu Cys Val Val Leu Lys Tyr Glu Lys Asp Ala Phe Lys Arg 115 120 125 Glu His Leu Ala Glu Val Thr Leu Ser Val Lys Ala Asp Phe Pro Thr 130 135 140 Pro Ser Ile Ser Asp Phe Glu Ile Pro Thr Ser Asn Ile Arg Arg Ile 145 150 155 160 Ile Cys Ser Thr Ser Gly Gly Phe Pro Glu Pro His Leu Ser Trp Leu 165 170 175 Glu Asn Gly Glu Glu Leu Asn Ala Ile Asn Thr Thr Val Ser Gln Asp 180 185 190 Pro Glu Thr Glu Leu Tyr Ala Val Ser Ser Lys Leu Asp Phe Asn Met 195 200 205 Thr Thr Asn His Ser Phe Met Cys Leu Ile Lys Tyr Gly His Leu Arg 210 215 220 Val Asn Gln Thr Phe Asn Trp Asn Thr Thr Lys Gln Glu His Phe Pro 225 230 235 240 Asp Asn Leu Leu Pro Ser Trp Ala Ile Thr Leu Ile Ser Val Asn Gly 245 250 255 Ile Phe Val Ile Cys Cys Leu Thr Tyr Cys Phe Ala Pro Arg Cys Arg 260 265 270 Glu Arg Arg Arg Asn Glu Arg Leu Arg Arg Glu Ser Val Arg Pro Val 275 280 285 <210> 11 <211> 654 <212> DNA <213> Homo sapiens <220> <221> CDS <222> (1)..(654) <400> 11 atg gat ccc cag tgc act atg gga ctg agt aac att ctc ttt gtg atg 48 Met Asp Pro Gln Cys Thr Met Gly Leu Ser Asn Ile Leu Phe Val Met 1 5 10 15 gcc ttc ctg ctc tct gct aac ttc agt caa cct gaa ata gta cca att 96 Ala Phe Leu Leu Ser Ala Asn Phe Ser Gln Pro Glu Ile Val Pro Ile 20 25 30 tct aat ata aca gaa aat gtg tac ata aat ttg acc tgc tca tct ata 144 Ser Asn Ile Thr Glu Asn Val Tyr Ile Asn Leu Thr Cys Ser Ser Ile 35 40 45 cac ggt tac cca gaa cct aag aag atg agt gtt ttg cta aga acc aag 192 His Gly Tyr Pro Glu Pro Lys Lys Met Ser Val Leu Leu Arg Thr Lys 50 55 60 aat tca act atc gag tat gat ggt att atg cag aaa tct caa gat aat 240 Asn Ser Thr Ile Glu Tyr Asp Gly Ile Met Gln Lys Ser Gln Asp Asn 65 70 75 80 gtc aca gaa ctg tac gac gtt tcc atc agc ttg tct gtt tca ttc cct 288 Val Thr Glu Leu Tyr Asp Val Ser Ile Ser Leu Ser Val Ser Phe Pro 85 90 95 gat gtt acg agc aat atg acc atc ttc tgt att ctg gaa act gac aag 336 Asp Val Thr Ser Asn Met Thr Ile Phe Cys Ile Leu Glu Thr Asp Lys 100 105 110 acg cgg ctt tta tct tca cct ttc tct ata gag ctt gag gac cct cag 384 Thr Arg Leu Leu Ser Ser Pro Phe Ser Ile Glu Leu Glu Asp Pro Gln 115 120 125 cct ccc cca gac cac att cct tgg att aca gct gta ctt cca aca gtt 432 Pro Pro Pro Asp His Ile Pro Trp Ile Thr Ala Val Leu Pro Thr Val 130 135 140 att ata tgt gtg atg gtt ttc tgt cta att cta tgg aaa tgg aag aag 480 Ile Ile Cys Val Met Val Phe Cys Leu Ile Leu Trp Lys Trp Lys Lys 145 150 155 160 aag aag cgg cct cgc aac tct tat aaa tgt gga acc aac aca atg gag 528 Lys Lys Arg Pro Arg Asn Ser Tyr Lys Cys Gly Thr Asn Thr Met Glu 165 170 175 agg gaa gag agt gaa cag acc aag aaa aga gaa aaa atc cat ata cct 576 Arg Glu Glu Ser Glu Gln Thr Lys Lys Arg Glu Lys Ile His Ile Pro 180 185 190 gaa aga tct gat gaa gcc cag cgt gtt ttt aaa agt tcg aag aca tct 624 Glu Arg Ser Asp Glu Ala Gln Arg Val Phe Lys Ser Ser Lys Thr Ser 195 200 205 tca tgc gac aaa agt gat aca tgt ttt taa 654 Ser Cys Asp Lys Ser Asp Thr Cys Phe 210 215 <210> 12 <211> 217 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 12 Met Asp Pro Gln Cys Thr Met Gly Leu Ser Asn Ile Leu Phe Val Met 1 5 10 15 Ala Phe Leu Leu Ser Ala Asn Phe Ser Gln Pro Glu Ile Val Pro Ile 20 25 30 Ser Asn Ile Thr Glu Asn Val Tyr Ile Asn Leu Thr Cys Ser Ser Ile 35 40 45 His Gly Tyr Pro Glu Pro Lys Lys Met Ser Val Leu Leu Arg Thr Lys 50 55 60 Asn Ser Thr Ile Glu Tyr Asp Gly Ile Met Gln Lys Ser Gln Asp Asn 65 70 75 80 Val Thr Glu Leu Tyr Asp Val Ser Ile Ser Leu Ser Val Ser Phe Pro 85 90 95 Asp Val Thr Ser Asn Met Thr Ile Phe Cys Ile Leu Glu Thr Asp Lys 100 105 110 Thr Arg Leu Leu Ser Ser Pro Phe Ser Ile Glu Leu Glu Asp Pro Gln 115 120 125 Pro Pro Pro Asp His Ile Pro Trp Ile Thr Ala Val Leu Pro Thr Val 130 135 140 Ile Ile Cys Val Met Val Phe Cys Leu Ile Leu Trp Lys Trp Lys Lys 145 150 155 160 Lys Lys Arg Pro Arg Asn Ser Tyr Lys Cys Gly Thr Asn Thr Met Glu 165 170 175 Arg Glu Glu Ser Glu Gln Thr Lys Lys Arg Glu Lys Ile His Ile Pro 180 185 190 Glu Arg Ser Asp Glu Ala Gln Arg Val Phe Lys Ser Ser Lys Thr Ser 195 200 205 Ser Cys Asp Lys Ser Asp Thr Cys Phe 210 215 <210> 13 <211> 1605 <212> DNA <213> Homo sapiens <220> <221> CDS <222> (1)..(1605) <400> 13 atg ctg cgt cgg cgg ggc agc cct ggc atg ggt gtg cat gtg ggt gca 48 Met Leu Arg Arg Arg Gly Ser Pro Gly Met Gly Val His Val Gly Ala 1 5 10 15 gcc ctg gga gca ctg tgg ttc tgc ctc aca gga gcc ctg gag gtc cag 96 Ala Leu Gly Ala Leu Trp Phe Cys Leu Thr Gly Ala Leu Glu Val Gln 20 25 30 gtc cct gaa gac cca gtg gtg gca ctg gtg ggc acc gat gcc acc ctg 144 Val Pro Glu Asp Pro Val Val Ala Leu Val Gly Thr Asp Ala Thr Leu 35 40 45 tgc tgc tcc ttc tcc cct gag cct ggc ttc agc ctg gca cag ctc aac 192 Cys Cys Ser Phe Ser Pro Glu Pro Gly Phe Ser Leu Ala Gln Leu Asn 50 55 60 ctc atc tgg cag ctg aca gat acc aaa cag ctg gtg cac agc ttt gct 240 Leu Ile Trp Gln Leu Thr Asp Thr Lys Gln Leu Val His Ser Phe Ala 65 70 75 80 gag ggc cag gac cag ggc agc gcc tat gcc aac cgc acg gcc ctc ttc 288 Glu Gly Gln Asp Gln Gly Ser Ala Tyr Ala Asn Arg Thr Ala Leu Phe 85 90 95 ccg gac ctg ctg gca cag ggc aac gca tcc ctg agg ctg cag cgc gtg 336 Pro Asp Leu Leu Ala Gln Gly Asn Ala Ser Leu Arg Leu Gln Arg Val 100 105 110 cgt gtg gcg gac gag ggc agc ttc acc tgc ttc gtg agc atc cgg gat 384 Arg Val Ala Asp Glu Gly Ser Phe Thr Cys Phe Val Ser Ile Arg Asp 115 120 125 ttc ggc agc gct gcc gtc agc ctg cag gtg gcc gct ccc tac tcg aag 432 Phe Gly Ser Ala Ala Val Ser Leu Gln Val Ala Ala Pro Tyr Ser Lys 130 135 140 ccc agc atg acc ctg gag ccc aac aag gac ctg cgg cca ggg gac acg 480 Pro Ser Met Thr Leu Glu Pro Asn Lys Asp Leu Arg Pro Gly Asp Thr 145 150 155 160 gtg acc atc 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gag cct ggc ttc agc ctg gca cag ctc aac ctc atc tgg cag ctg aca 864 Glu Pro Gly Phe Ser Leu Ala Gln Leu Asn Leu Ile Trp Gln Leu Thr 275 280 285 gac acc aaa cag ctg gtg cac agt ttc acc gaa ggc cgg gac cag ggc 912 Asp Thr Lys Gln Leu Val His Ser Phe Thr Glu Gly Arg Asp Gln Gly 290 295 300 agc gcc tat gcc aac cgc acg gcc ctc ttc ccg gac ctg ctg gca caa 960 Ser Ala Tyr Ala Asn Arg Thr Ala Leu Phe Pro Asp Leu Leu Ala Gln 305 310 315 320 ggc aat gca tcc ctg agg ctg cag cgc gtg cgt gtg gcg gac gag ggc 1008 Gly Asn Ala Ser Leu Arg Leu Gln Arg Val Arg Val Ala Asp Glu Gly 325 330 335 agc ttc acc tgc ttc gtg agc atc cgg gat ttc ggc agc gct gcc gtc 1056 Ser Phe Thr Cys Phe Val Ser Ile Arg Asp Phe Gly Ser Ala Ala Val 340 345 350 agc ctg cag gtg gcc gct ccc tac tcg aag ccc agc atg acc ctg gag 1104 Ser Leu Gln Val Ala Ala Pro Tyr Ser Lys Pro Ser Met Thr Leu Glu 355 360 365 ccc aac aag gac ctg cgg cca ggg gac acg gtg acc atc acg tgc tcc 1152 Pro Asn Lys Asp Leu Arg Pro Gly Asp Thr Val Thr Ile Thr Cys Ser 370 375 380 agc tac cgg ggc tac cct gag gct gag gtg ttc tgg cag gat ggg cag 1200 Ser Tyr Arg Gly Tyr Pro Glu Ala Glu Val Phe Trp Gln Asp Gly Gln 385 390 395 400 ggt gtg ccc ctg act ggc aac gtg acc acg tcg cag atg gcc aac gag 1248 Gly Val Pro Leu Thr Gly Asn Val Thr Thr Ser Gln Met Ala Asn Glu 405 410 415 cag ggc ttg ttt gat gtg cac agc gtc ctg cgg gtg gtg ctg ggt gcg 1296 Gln Gly Leu Phe Asp Val His Ser Val Leu Arg Val Val Leu Gly Ala 420 425 430 aat ggc acc tac agc tgc ctg gtg cgc aac ccc gtg ctg cag cag gat 1344 Asn Gly Thr Tyr Ser Cys Leu Val Arg Asn Pro Val Leu Gln Gln Asp 435 440 445 gcg cac ggc tct gtc acc atc aca ggg cag cct atg aca ttc ccc cca 1392 Ala His Gly Ser Val Thr Ile Thr Gly Gln Pro Met Thr Phe Pro Pro 450 455 460 gag gcc ctg tgg gtg acc gtg ggg ctg tct gtc tgt ctc att gca ctg 1440 Glu Ala Leu Trp Val Thr Val Gly Leu Ser Val Cys Leu Ile Ala Leu 465 470 475 480 ctg gtg gcc ctg gct ttc gtg tgc tgg aga aag atc aaa cag agc tgt 1488 Leu Val Ala Leu Ala Phe Val Cys Trp Arg Lys Ile Lys Gln Ser Cys 485 490 495 gag gag gag aat gca gga gct gag gac cag gat ggg gag gga gaa ggc 1536 Glu Glu Glu Asn Ala Gly Ala Glu Asp Gln Asp Gly Glu Gly Glu Gly 500 505 510 tcc aag aca gcc ctg cag cct ctg aaa cac tct gac agc aaa gaa gat 1584 Ser Lys Thr Ala Leu Gln Pro Leu Lys His Ser Asp Ser Lys Glu Asp 515 520 525 gat gga caa gaa ata gcc tga 1605 Asp Gly Gln Glu Ile Ala 530 <210> 14 <211> 534 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 14 Met Leu Arg Arg Arg Gly Ser Pro Gly Met Gly Val His Val Gly Ala 1 5 10 15 Ala Leu Gly Ala Leu Trp Phe Cys Leu Thr Gly Ala Leu Glu Val Gln 20 25 30 Val Pro Glu Asp Pro Val Val Ala Leu Val Gly Thr Asp Ala Thr Leu 35 40 45 Cys Cys Ser Phe Ser Pro Glu Pro Gly Phe Ser Leu Ala Gln Leu Asn 50 55 60 Leu Ile Trp Gln Leu Thr Asp Thr Lys Gln Leu Val His Ser Phe Ala 65 70 75 80 Glu Gly Gln Asp Gln Gly Ser Ala Tyr Ala Asn Arg Thr Ala Leu Phe 85 90 95 Pro Asp Leu Leu Ala Gln Gly Asn Ala Ser Leu Arg Leu Gln Arg Val 100 105 110 Arg Val Ala Asp Glu Gly Ser Phe 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Arg Val Arg Val Ala Asp Glu Gly 325 330 335 Ser Phe Thr Cys Phe Val Ser Ile Arg Asp Phe Gly Ser Ala Ala Val 340 345 350 Ser Leu Gln Val Ala Ala Pro Tyr Ser Lys Pro Ser Met Thr Leu Glu 355 360 365 Pro Asn Lys Asp Leu Arg Pro Gly Asp Thr Val Thr Ile Thr Cys Ser 370 375 380 Ser Tyr Arg Gly Tyr Pro Glu Ala Glu Val Phe Trp Gln Asp Gly Gln 385 390 395 400 Gly Val Pro Leu Thr Gly Asn Val Thr Thr Ser Gln Met Ala Asn Glu 405 410 415 Gln Gly Leu Phe Asp Val His Ser Val Leu Arg Val Val Leu Gly Ala 420 425 430 Asn Gly Thr Tyr Ser Cys Leu Val Arg Asn Pro Val Leu Gln Gln Asp 435 440 445 Ala His Gly Ser Val Thr Ile Thr Gly Gln Pro Met Thr Phe Pro Pro 450 455 460 Glu Ala Leu Trp Val Thr Val Gly Leu Ser Val Cys Leu Ile Ala Leu 465 470 475 480 Leu Val Ala Leu Ala Phe Val Cys Trp Arg Lys Ile Lys Gln Ser Cys 485 490 495 Glu Glu Glu Asn Ala Gly Ala Glu Asp Gln Asp Gly Glu Gly Glu Gly 500 505 510 Ser Lys Thr Ala Leu Gln Pro Leu Lys His Ser Asp Ser Lys Glu Asp 515 520 525 Asp Gly Gln Glu Ile Ala 530 <210> 15 <211> 564 <212> DNA <213> Homo sapiens <220> <221> CDS <222> (1)..(564) <400> 15 atg ttc aga ggc cgg aca gca gtg ttt gct gat caa gtg ata gtt ggc 48 Met Phe Arg Gly Arg Thr Ala Val Phe Ala Asp Gln Val Ile Val Gly 1 5 10 15 aat gcc tct ttg cgg ctg aaa aac gtg caa ctc aca gat gct ggc acc 96 Asn Ala Ser Leu Arg Leu Lys Asn Val Gln Leu Thr Asp Ala Gly Thr 20 25 30 tac aaa tgt tat atc atc act tct aaa ggc aag ggg aat gct aac ctt 144 Tyr Lys Cys Tyr Ile Ile Thr Ser Lys Gly Lys Gly Asn Ala Asn Leu 35 40 45 gag tat aaa act gga gcc ttc agc atg ccg gaa gtg aat gtg gac tat 192 Glu Tyr Lys Thr Gly Ala Phe Ser Met Pro Glu Val Asn Val Asp Tyr 50 55 60 aat gcc agc tca gag acc ttg cgg tgt gag gct ccc cga tgg ttc ccc 240 Asn Ala Ser Ser Glu Thr Leu Arg Cys Glu Ala Pro Arg Trp Phe Pro 65 70 75 80 cag ccc aca gtg gtc tgg gca tcc caa gtt gac cag gga gcc aac ttc 288 Gln Pro Thr Val Val Trp Ala Ser Gln Val Asp Gln Gly Ala Asn Phe 85 90 95 tcg gaa gtc tcc aat acc agc ttt gag ctg aac tct gag aat gtg acc 336 Ser 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Lys Gly Asn Ala Asn Leu 35 40 45 Glu Tyr Lys Thr Gly Ala Phe Ser Met Pro Glu Val Asn Val Asp Tyr 50 55 60 Asn Ala Ser Ser Glu Thr Leu Arg Cys Glu Ala Pro Arg Trp Phe Pro 65 70 75 80 Gln Pro Thr Val Val Trp Ala Ser Gln Val Asp Gln Gly Ala Asn Phe 85 90 95 Ser Glu Val Ser Asn Thr Ser Phe Glu Leu Asn Ser Glu Asn Val Thr 100 105 110 Met Lys Val Val Ser Val Leu Tyr Asn Val Thr Ile Asn Asn Thr Tyr 115 120 125 Ser Cys Met Ile Glu Asn Asp Ile Ala Lys Ala Thr Gly Asp Ile Lys 130 135 140 Val Thr Glu Ser Glu Ile Lys Arg Arg Ser His Leu Gln Leu Leu Asn 145 150 155 160 Ser Lys Ala Ser Leu Cys Val Ser Ser Phe Phe Ala Ile Ser Trp Ala 165 170 175 Leu Leu Pro Leu Ser Pro Tyr Leu Met Leu Lys 180 185 <210> 17 <211> 936 <212> DNA <213> Homo sapiens <220> <221> CDS <222> (1)..(936) <400> 17 atg ggc gtc ccc acg gcc ctg gag gcc ggc agc tgg cgc tgg gga tcc 48 Met Gly Val Pro Thr Ala Leu Glu Ala Gly Ser Trp Arg Trp Gly Ser 1 5 10 15 ctg ctc ttc gct ctc ttc ctg gct gcg tcc cta ggt ccg gtg gca gcc 96 Leu Leu Phe Ala Leu Phe Leu Ala Ala Ser Leu Gly Pro Val Ala Ala 20 25 30 ttc aag gtc gcc acg ccg tat tcc ctg tat gtc tgt ccc gag ggg cag 144 Phe Lys Val Ala Thr Pro Tyr Ser Leu Tyr Val Cys Pro Glu Gly Gln 35 40 45 aac gtc acc ctc acc tgc agg ctc ttg ggc cct gtg gac aaa ggg cac 192 Asn Val Thr Leu Thr Cys Arg Leu Leu Gly Pro Val Asp Lys Gly His 50 55 60 gat gtg acc ttc tac aag acg tgg tac cgc agc tcg agg ggc gag gtg 240 Asp Val Thr Phe Tyr Lys Thr Trp Tyr Arg Ser Ser Arg Gly Glu Val 65 70 75 80 cag acc tgc tca gag cgc cgg ccc atc cgc aac ctc acg ttc cag gac 288 Gln Thr Cys Ser Glu Arg Arg Pro Ile Arg Asn Leu Thr Phe Gln Asp 85 90 95 ctt cac ctg cac cat gga ggc cac cag gct gcc aac acc agc cac gac 336 Leu His Leu His His Gly Gly His Gln Ala Ala Asn Thr Ser His Asp 100 105 110 ctg gct cag cgc cac ggg ctg gag tcg gcc tcc gac cac cat ggc aac 384 Leu Ala Gln Arg His Gly Leu Glu Ser Ala Ser Asp His His Gly Asn 115 120 125 ttc tcc atc acc atg cgc aac ctg acc ctg ctg gat agc ggc ctc tac 432 Phe Ser Ile Thr Met Arg Asn Leu Thr Leu Leu Asp Ser Gly Leu Tyr 130 135 140 tgc tgc ctg gtg gtg gag atc agg cac cac cac tcg gag cac agg gtc 480 Cys Cys Leu Val Val Glu Ile Arg His His His Ser Glu His Arg Val 145 150 155 160 cat ggt gcc atg gag ctg cag gtg cag aca ggc aaa gat gca cca tcc 528 His Gly Ala Met Glu Leu Gln Val Gln Thr Gly Lys Asp Ala Pro Ser 165 170 175 aac tgt gtg gtg tac cca tcc tcc tcc cag gat agt gaa aac atc acg 576 Asn Cys Val Val Tyr Pro Ser Ser Ser Gln Asp Ser Glu Asn Ile Thr 180 185 190 gct gca gcc ctg gct acg ggt gcc tgc atc gta gga atc ctc tgc ctc 624 Ala Ala Ala Leu Ala Thr Gly Ala Cys Ile Val Gly Ile Leu Cys Leu 195 200 205 ccc ctc atc ctg ctc ctg gtc tac aag caa agg cag gca gcc tcc aac 672 Pro Leu Ile Leu Leu Leu Val Tyr Lys Gln Arg Gln Ala Ala Ser Asn 210 215 220 cgc cgt gcc cag gag ctg gtg cgg atg gac agc aac att caa ggg att 720 Arg Arg Ala Gln Glu Leu Val Arg Met Asp Ser Asn Ile Gln Gly Ile 225 230 235 240 gaa aac ccc ggc ttt gaa gcc tca cca cct gcc cag ggg ata ccc gag 768 Glu Asn Pro Gly Phe Glu Ala Ser Pro Pro Ala Gln Gly Ile Pro Glu 245 250 255 gcc aaa gtc agg cac ccc ctg tcc tat gtg gcc cag cgg cag cct tct 816 Ala Lys Val Arg His Pro Leu Ser Tyr Val Ala Gln Arg Gln Pro Ser 260 265 270 gag tct ggg cgg cat ctg ctt tcg gag ccc agc acc ccc ctg tct cct 864 Glu Ser Gly Arg His Leu Leu Ser Glu Pro Ser Thr Pro Leu Ser Pro 275 280 285 cca ggc ccc gga gac gtc ttc ttc cca tcc ctg gac cct gtc cct gac 912 Pro Gly Pro Gly Asp Val Phe Phe Pro Ser Leu Asp Pro Val Pro Asp 290 295 300 tct cca aac ttt gag gtc atc tag 936 Ser Pro Asn Phe Glu Val Ile 305 310 <210> 18 <211> 311 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 18 Met Gly Val Pro Thr Ala Leu Glu Ala Gly Ser Trp Arg Trp Gly Ser 1 5 10 15 Leu Leu Phe Ala Leu Phe Leu Ala Ala Ser Leu Gly Pro Val Ala Ala 20 25 30 Phe Lys Val Ala Thr Pro Tyr Ser Leu Tyr Val Cys Pro Glu Gly Gln 35 40 45 Asn Val Thr Leu Thr Cys Arg Leu Leu Gly Pro Val Asp Lys Gly His 50 55 60 Asp Val Thr Phe Tyr Lys Thr Trp Tyr Arg Ser Ser Arg Gly Glu Val 65 70 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Tyr Gly Ser Val Thr His Thr Pro Tyr Gln Leu Ser Ala 195 200 205 ccc agt gat ccc ctg gac atc gtg gtc aca ggt cca tat gag aaa cct 672 Pro Ser Asp Pro Leu Asp Ile Val Val Thr Gly Pro Tyr Glu Lys Pro 210 215 220 tct ctc tca gcc cag ccg ggc ccc aag gtt cag gca gga gag agc gtg 720 Ser Leu Ser Ala Gln Pro Gly Pro Lys Val Gln Ala Gly Glu Ser Val 225 230 235 240 acc ttg tcc tgc agc tcc cgg agc tcc tat gac atg tac cat cta tcc 768 Thr Leu Ser Cys Ser Ser Arg Ser Ser Tyr Asp Met Tyr His Leu Ser 245 250 255 agg gag ggg gga gcc cat gaa cgt agg ctc cct gca gtg cgc aag gtc 816 Arg Glu Gly Gly Ala His Glu Arg Arg Leu Pro Ala Val Arg Lys Val 260 265 270 aac aga aca ttc cag gca gat ttc cct ctg ggc cct gcc acc cac gga 864 Asn Arg Thr Phe Gln Ala Asp Phe Pro Leu Gly Pro Ala Thr His Gly 275 280 285 ggg acc tac aga tgc ttc ggc tct ttc cgt cac tct ccc tac gag tgg 912 Gly Thr Tyr Arg Cys Phe Gly Ser Phe Arg His Ser Pro Tyr Glu Trp 290 295 300 tca gac ccg agt gac cca ctg ctt gtt tct gtc aca gga aac cct tca 960 Ser Asp Pro Ser Asp Pro Leu Leu Val Ser Val Thr Gly Asn Pro Ser 305 310 315 320 agt agt tgg cct tca ccc aca gaa cca agc tcc aaa tct ggt aac ccc 1008 Ser Ser Trp Pro Ser Pro Thr Glu Pro Ser Ser Lys Ser Gly Asn Pro 325 330 335 aga cac ctg cac att ctg att ggg acc tca gtg gtc atc atc ctc ttc 1056 Arg His Leu His Ile Leu Ile Gly Thr Ser Val Val Ile Ile Leu Phe 340 345 350 atc ctc ctc ctc ttc ttt ctc ctt cat ctc tgg tgc tcc aac aaa aaa 1104 Ile Leu Leu Leu Phe Phe Leu Leu His Leu Trp Cys Ser Asn Lys Lys 355 360 365 aat gct gct gta atg gac caa gag cct gca ggg aac aga aca gcc aac 1152 Asn Ala Ala Val Met Asp Gln Glu Pro Ala Gly Asn Arg Thr Ala Asn 370 375 380 agc gag gac tct gat gaa caa gac cct gag gag gtg aca tac gca cag 1200 Ser Glu Asp Ser Asp Glu Gln Asp Pro Glu Glu Val Thr Tyr Ala Gln 385 390 395 400 ttg gat cac tgc gtt ttc aca cag aga aaa atc act cgc cct tct cag 1248 Leu Asp His Cys Val Phe Thr Gln Arg Lys Ile Thr Arg Pro Ser Gln 405 410 415 agg ccc aag aca ccc cct aca gat acc atc ttg tac acg gaa ctt cca 1296 Arg Pro Lys Thr Pro Pro Thr Asp Thr Ile Leu Tyr Thr Glu Leu Pro 420 425 430 aat gct aag ccc aga tcc aaa gtt gtc tcc tgc cca tga 1335 Asn Ala Lys Pro Arg Ser Lys Val Val Ser Cys Pro 435 440 <210> 20 <211> 444 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 20 Met Leu Leu Met Val Val Ser Met Ala Cys Val Gly Phe Phe Leu Val 1 5 10 15 Gln Arg Ala Gly Pro His Val Gly Gly Gln Asp Lys Pro Phe Leu Ser 20 25 30 Ala Trp Pro Ser Ala Val Val Pro Arg Gly Gly His Val Thr Leu Arg 35 40 45 Cys His Tyr Arg His Arg Phe Asn Asn Phe Met Leu Tyr Lys Glu Asp 50 55 60 Arg Ile His Val Pro Ile Phe His Gly Arg Leu Phe Gln Glu Ser Phe 65 70 75 80 Asn Met Ser Pro Val Thr Thr Ala His Ala Gly Asn Tyr Thr Cys Arg 85 90 95 Gly Ser His Pro His Ser Pro Thr Gly Trp Ser Ala Pro Ser Asn Pro 100 105 110 Val Val Ile Met Val Thr Gly Asn His Arg Lys Pro Ser Leu Leu Ala 115 120 125 His Pro Gly Pro Leu Val Lys Ser Gly Glu Arg Val Ile Leu Gln Cys 130 135 140 Trp Ser Asp Ile Met Phe Glu His Phe Phe Leu His Lys Glu Gly 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Ala Ser Ser Val Thr Pro Pro Ala 165 170 175 cct gcg aga gag cca gga cac tct ccg cag atc atc tcc ttc ttt ctt 576 Pro Ala Arg Glu Pro Gly His Ser Pro Gln Ile Ile Ser Phe Phe Leu 180 185 190 gcg ctg acg tcg act gcg ttg ctc ttc ctg ctg ttc ttc ctc acg ctc 624 Ala Leu Thr Ser Thr Ala Leu Leu Phe Leu Leu Phe Phe Leu Thr Leu 195 200 205 cgt ttc tct gtt gtt aaa cgg ggc aga aag aaa ctc ctg tat ata ttc 672 Arg Phe Ser Val Val Lys Arg Gly Arg Lys Lys Leu Leu Tyr Ile Phe 210 215 220 aaa caa cca ttt atg aga cca gta caa act act caa gag gaa gat ggc 720 Lys Gln Pro Phe Met Arg Pro Val Gln Thr Thr Gln Glu Glu Asp Gly 225 230 235 240 tgt agc tgc cga ttt cca gaa gaa gaa gaa gga gga tgt gaa ctg tga 768 Cys Ser Cys Arg Phe Pro Glu Glu Glu Glu Gly Gly Cys Glu Leu 245 250 255 <210> 22 <211> 255 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 22 Met Gly Asn Ser Cys Tyr Asn Ile Val Ala Thr Leu Leu Leu Val Leu 1 5 10 15 Asn Phe Glu Arg Thr Arg Ser Leu Gln Asp Pro Cys Ser Asn Cys Pro 20 25 30 Ala Gly Thr Phe Cys Asp Asn Asn 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ggt ccc gga ggc ctg cgc agc ggg 336 Arg Arg Tyr Thr Val Leu Ser Val Gly Pro Gly Gly Leu Arg Ser Gly 100 105 110 agg ctg ccc ctg cag ccc cgc gtc cag ctg gat gag cgc ggc cgg cag 384 Arg Leu Pro Leu Gln Pro Arg Val Gln Leu Asp Glu Arg Gly Arg Gln 115 120 125 cgc ggg gac ttc tcg cta tgg ctg cgc cca gcc cgg cgc gcg gac gcc 432 Arg Gly Asp Phe Ser Leu Trp Leu Arg Pro Ala Arg Arg Ala Asp Ala 130 135 140 ggc gag tac cgc gcc gcg gtg cac ctc agg gac cgc gcc ctc tcc tgc 480 Gly Glu Tyr Arg Ala Ala Val His Leu Arg Asp Arg Ala Leu Ser Cys 145 150 155 160 cgc ctc cgt ctg cgc ctg ggc cag gcc tcg atg act gcc agc ccc cca 528 Arg Leu Arg Leu Arg Leu Gly Gln Ala Ser Met Thr Ala Ser Pro Pro 165 170 175 gga tct ctc aga gcc tcc gac tgg gtc att ttg aac tgc tcc ttc agc 576 Gly Ser Leu Arg Ala Ser Asp Trp Val Ile Leu Asn Cys Ser Phe Ser 180 185 190 cgc cct gac cgc cca gcc tct gtg cat tgg ttc cgg aac cgg ggc cag 624 Arg Pro Asp Arg Pro Ala Ser Val His Trp Phe Arg Asn Arg Gly Gln 195 200 205 ggc cga gtc cct gtc cgg gag tcc ccc cat cac cac tta gcg gaa agc 672 Gly Arg Val Pro Val Arg Glu Ser Pro His His His Leu Ala Glu Ser 210 215 220 ttc ctc ttc ctg ccc caa gtc agc ccc atg gac tct ggg ccc tgg ggc 720 Phe Leu Phe Leu Pro Gln Val Ser Pro Met Asp Ser Gly Pro Trp Gly 225 230 235 240 tgc atc ctc acc tac aga gat ggc ttc aac gtc tcc atc atg tat aac 768 Cys Ile Leu Thr Tyr Arg Asp Gly Phe Asn Val Ser Ile Met Tyr Asn 245 250 255 ctc act gtt ctg ggt ctg gag ccc cca act ccc ttg aca gtg tac gct 816 Leu Thr Val Leu Gly Leu Glu Pro Pro Thr Pro Leu Thr Val Tyr Ala 260 265 270 gga gca ggt tcc agg gtg ggg ctg ccc tgc cgc ctg cct gct ggt gtg 864 Gly Ala Gly Ser Arg Val Gly Leu Pro Cys Arg Leu Pro Ala Gly Val 275 280 285 ggg acc cgg tct ttc ctc act gcc aag tgg act cct cct ggg gga ggc 912 Gly Thr Arg Ser Phe Leu Thr Ala Lys Trp Thr Pro Pro Gly Gly Gly 290 295 300 cct gac ctc ctg gtg act gga gac aat ggc gac ttt acc ctt cga cta 960 Pro Asp Leu Leu Val Thr Gly Asp Asn Gly Asp Phe Thr Leu Arg Leu 305 310 315 320 gag gat gtg agc cag gcc cag gct ggg acc tac acc tgc cat atc cat 1008 Glu Asp Val Ser Gln Ala Gln Ala Gly Thr Tyr Thr Cys His Ile His 325 330 335 ctg cag gaa cag cag ctc aat gcc act gtc aca ttg gca atc atc aca 1056 Leu Gln Glu Gln Gln Leu Asn Ala Thr Val Thr Leu Ala Ile Ile Thr 340 345 350 gtg act ccc aaa tcc ttt ggg tca cct gga tcc ctg ggg aag ctg ctt 1104 Val Thr Pro Lys Ser Phe Gly Ser Pro Gly Ser Leu Gly Lys Leu Leu 355 360 365 tgt gag gtg act cca gta tct gga caa gaa cgc ttt gtg tgg agc tct 1152 Cys Glu Val Thr Pro Val Ser Gly Gln Glu Arg Phe Val Trp Ser Ser 370 375 380 ctg gac acc cca tcc cag agg agt ttc tca gga cct tgg ctg gag gca 1200 Leu Asp Thr Pro Ser Gln Arg Ser Phe Ser Gly Pro Trp Leu Glu Ala 385 390 395 400 cag gag gcc cag ctc ctt tcc cag cct tgg caa tgc cag ctg tac cag 1248 Gln Glu Ala Gln Leu Leu Ser Gln Pro Trp Gln Cys Gln Leu Tyr Gln 405 410 415 ggg gag agg ctt ctt gga gca gca gtg tac ttc aca gag ctg tct agc 1296 Gly Glu Arg Leu Leu Gly Ala Ala Val Tyr Phe Thr Glu Leu Ser Ser 420 425 430 cca ggt gcc caa cgc tct ggg aga gcc cca ggt gcc ctc cca gca ggc 1344 Pro Gly Ala Gln Arg Ser Gly Arg Ala Pro Gly Ala Leu Pro Ala Gly 435 440 445 cac ctc ctg ctg ttt ctc atc ctt ggt gtc ctt tct ctg ctc ctt ttg 1392 His Leu Leu Leu Phe Leu Ile Leu Gly Val Leu Ser Leu Leu Leu Leu 450 455 460 gtg act gga gcc ttt ggc ttt cac ctt tgg aga aga cag tgg cga cca 1440 Val Thr Gly Ala Phe Gly Phe His Leu Trp Arg Arg Gln Trp Arg Pro 465 470 475 480 aga cga ttt tct gcc tta gag caa ggg att cac cct ccg cag gct cag 1488 Arg Arg Phe Ser Ala Leu Glu Gln Gly Ile His Pro Pro Gln Ala Gln 485 490 495 agc aag ata gag gag ctg gag caa gaa ccg gag ccg gag ccg gag ccg 1536 Ser Lys Ile Glu Glu Leu Glu Gln Glu Pro Glu Pro Glu Pro Glu Pro 500 505 510 gaa ccg gag ccc gag ccc gag ccc gag ccg gag cag ctc tga 1578 Glu Pro Glu Pro Glu Pro Glu Pro Glu Pro Glu Gln Leu 515 520 525 <210> 24 <211> 525 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 24 Met Trp Glu Ala Gln Phe Leu Gly Leu Leu Phe Leu Gln Pro Leu Trp 1 5 10 15 Val Ala Pro Val Lys Pro Leu Gln Pro Gly Ala Glu Val Pro Val Val 20 25 30 Trp Ala Gln Glu Gly Ala Pro Ala Gln Leu Pro Cys Ser Pro Thr Ile 35 40 45 Pro Leu Gln Asp Leu Ser Leu Leu Arg Arg Ala Gly Val Thr Trp Gln 50 55 60 His Gln Pro Asp Ser Gly Pro Pro Ala Ala Ala Pro Gly His Pro Leu 65 70 75 80 Ala Pro Gly Pro His Pro Ala Ala Pro Ser Ser Trp Gly Pro Arg Pro 85 90 95 Arg Arg Tyr Thr Val Leu Ser Val Gly Pro Gly Gly Leu Arg Ser Gly 100 105 110 Arg Leu Pro Leu Gln Pro Arg Val Gln Leu Asp Glu Arg Gly Arg Gln 115 120 125 Arg Gly Asp Phe Ser Leu Trp Leu Arg Pro Ala Arg Arg Ala Asp Ala 130 135 140 Gly Glu Tyr Arg Ala Ala Val His Leu Arg Asp Arg Ala Leu Ser Cys 145 150 155 160 Arg Leu Arg Leu Arg Leu Gly Gln Ala Ser Met Thr Ala Ser Pro Pro 165 170 175 Gly Ser Leu Arg Ala Ser Asp Trp Val Ile Leu Asn Cys Ser Phe Ser 180 185 190 Arg Pro Asp Arg Pro Ala Ser Val His Trp Phe Arg Asn Arg Gly Gln 195 200 205 Gly Arg Val Pro Val Arg Glu Ser Pro His His His Leu Ala Glu Ser 210 215 220 Phe Leu Phe Leu Pro 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Ser Gly Arg Ala Pro Gly Ala Leu Pro Ala Gly 435 440 445 His Leu Leu Leu Phe Leu Ile Leu Gly Val Leu Ser Leu Leu Leu Leu 450 455 460 Val Thr Gly Ala Phe Gly Phe His Leu Trp Arg Arg Gln Trp Arg Pro 465 470 475 480 Arg Arg Phe Ser Ala Leu Glu Gln Gly Ile His Pro Pro Gln Ala Gln 485 490 495 Ser Lys Ile Glu Glu Leu Glu Gln Glu Pro Glu Pro Glu Pro Glu Pro 500 505 510 Glu Pro Glu Pro Glu Pro Glu Pro Glu Pro Glu Gln Leu 515 520 525 <210> 25 <211> 906 <212> DNA <213> Homo sapiens <220> <221> CDS <222> (1)..(906) <400> 25 atg ttt tca cat ctt ccc ttt gac tgt gtc ctg ctg ctg ctg ctg cta 48 Met Phe Ser His Leu Pro Phe Asp Cys Val Leu Leu Leu Leu Leu Leu 1 5 10 15 cta ctt aca agg tcc tca gaa gtg gaa tac aga gcg gag gtc ggt cag 96 Leu Leu Thr Arg Ser Ser Glu Val Glu Tyr Arg Ala Glu Val Gly Gln 20 25 30 aat gcc tat ctg ccc tgc ttc tac acc cca gcc gcc cca ggg aac ctc 144 Asn Ala Tyr Leu Pro Cys Phe Tyr Thr Pro Ala Ala Pro Gly Asn Leu 35 40 45 gtg ccc gtc tgc tgg ggc aaa gga gcc tgt cct gtg ttt gaa tgt 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aca caa ata 528 Glu Thr Gln Thr Leu Gly Ser Leu Pro Asp Ile Asn Leu Thr Gln Ile 165 170 175 tcc aca ttg gcc aat gag tta cgg gac tct aga ttg gcc aat gac tta 576 Ser Thr Leu Ala Asn Glu Leu Arg Asp Ser Arg Leu Ala Asn Asp Leu 180 185 190 cgg gac tct gga gca acc atc aga ata ggc atc tac atc gga gca ggg 624 Arg Asp Ser Gly Ala Thr Ile Arg Ile Gly Ile Tyr Ile Gly Ala Gly 195 200 205 atc tgt gct ggg ctg gct ctg gct ctt atc ttc ggc gct tta att ttc 672 Ile Cys Ala Gly Leu Ala Leu Ala Leu Ile Phe Gly Ala Leu Ile Phe 210 215 220 aaa tgg tat tct cat agc aaa gag aag ata cag aat tta agc ctc atc 720 Lys Trp Tyr Ser His Ser Lys Glu Lys Ile Gln Asn Leu Ser Leu Ile 225 230 235 240 tct ttg gcc aac ctc cct ccc tca gga ttg gca aat gca gta gca gag 768 Ser Leu Ala Asn Leu Pro Pro Ser Gly Leu Ala Asn Ala Val Ala Glu 245 250 255 gga att cgc tca gaa gaa aac atc tat acc att gaa gag aac gta tat 816 Gly Ile Arg Ser Glu Glu Asn Ile Tyr Thr Ile Glu Glu Asn Val Tyr 260 265 270 gaa gtg gag gag ccc aat gag tat tat tgc 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gga 432 Ser Ser Val Ala Glu His Gly Ala Arg Phe Gln Ile Pro Leu Leu Gly 130 135 140 gcc atg gcc gcg acg ctg gtg gtc atc tgc aca gca gtc atc gtg gtg 480 Ala Met Ala Ala Thr Leu Val Val Ile Cys Thr Ala Val Ile Val Val 145 150 155 160 gtc gcg ttg act aga aag aag aaa gcc ctc aga atc cat tct gtg gaa 528 Val Ala Leu Thr Arg Lys Lys Lys Ala Leu Arg Ile His Ser Val Glu 165 170 175 ggt gac ctc agg aga aaa tca gct gga cag gag gaa tgg agc ccc agt 576 Gly Asp Leu Arg Arg Lys Ser Ala Gly Gln Glu Glu Trp Ser Pro Ser 180 185 190 gct ccc tca ccc cca gga agc tgt gtc cag gca gaa gct gca cct gct 624 Ala Pro Ser Pro Pro Gly Ser Cys Val Gln Ala Glu Ala Ala Pro Ala 195 200 205 ggg ctc tgt gga gag cag cgg gga gag gac tgt gcc gag ctg cat gac 672 Gly Leu Cys Gly Glu Gln Arg Gly Glu Asp Cys Ala Glu Leu His Asp 210 215 220 tac ttc aat gtc ctg agt tac aga agc ctg ggt aac tgc agc ttc ttc 720 Tyr Phe Asn Val Leu Ser Tyr Arg Ser Leu Gly Asn Cys Ser Phe Phe 225 230 235 240 aca gag act ggt tag 735 Thr Glu Thr Gly 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75 80 tgc aag ccc tgc acg tgg tgt aac ctc aga agt ggg agt gag cgg aag 288 Cys Lys Pro Cys Thr Trp Cys Asn Leu Arg Ser Gly Ser Glu Arg Lys 85 90 95 cag ctg tgc acg gcc aca cag gac aca gtc tgc cgc tgc cgg gcg ggc 336 Gln Leu Cys Thr Ala Thr Gln Asp Thr Val Cys Arg Cys Arg Ala Gly 100 105 110 acc cag ccc ctg gac agc tac aag cct gga gtt gac tgt gcc ccc tgc 384 Thr Gln Pro Leu Asp Ser Tyr Lys Pro Gly Val Asp Cys Ala Pro Cys 115 120 125 cct cca ggg cac ttc tcc cca ggc gac aac cag gcc tgc aag ccc tgg 432 Pro Pro Gly His Phe Ser Pro Gly Asp Asn Gln Ala Cys Lys Pro Trp 130 135 140 acc aac tgc acc ttg gct ggg aag cac acc ctg cag ccg gcc agc aat 480 Thr Asn Cys Thr Leu Ala Gly Lys His Thr Leu Gln Pro Ala Ser Asn 145 150 155 160 agc tcg gac gca atc tgt gag gac agg gac ccc cca gcc acg cag ccc 528 Ser Ser Asp Ala Ile Cys Glu Asp Arg Asp Pro Pro Ala Thr Gln Pro 165 170 175 cag gag acc cag ggc ccc ccg gcc agg ccc atc act gtc cag ccc act 576 Gln Glu Thr Gln Gly Pro Pro Ala Arg Pro Ile Thr Val Gln Pro Thr 180 185 190 gaa gcc tgg ccc aga acc tca cag gga ccc tcc acc cgg ccc gtg gag 624 Glu Ala Trp Pro Arg Thr Ser Gln Gly Pro Ser Thr Arg Pro Val Glu 195 200 205 gtc ccc ggg ggc cgt gcg gtt gcc gcc atc ctg ggc ctg ggc ctg gtg 672 Val Pro Gly Gly Arg Ala Val Ala Ala Ile Leu Gly Leu Gly Leu Val 210 215 220 ctg ggg ctg ctg ggc ccc ctg gcc atc ctg ctg gcc ctg tac ctg ctc 720 Leu Gly Leu Leu Gly Pro Leu Ala Ile Leu Leu Ala Leu Tyr Leu Leu 225 230 235 240 cgg agg gac cag agg ctg ccc ccc gat gcc cac aag ccc cct ggg gga 768 Arg Arg Asp Gln Arg Leu Pro Pro Asp Ala His Lys Pro Pro Gly Gly 245 250 255 ggc agt ttc cgg acc ccc atc caa gag gag cag gcc gac gcc cac tcc 816 Gly Ser Phe Arg Thr Pro Ile Gln Glu Glu Gln Ala Asp Ala His Ser 260 265 270 acc ctg gcc aag atc tga 834 Thr Leu Ala Lys Ile 275 <210> 30 <211> 277 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 30 Met Cys Val Gly Ala Arg Arg Leu Gly Arg Gly Pro Cys Ala Ala Leu 1 5 10 15 Leu Leu Leu Gly Leu Gly Leu Ser Thr Val Thr Gly Leu His Cys Val 20 25 30 Gly 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Arg Leu Pro Pro Asp Ala His Lys Pro Pro Gly Gly 245 250 255 Gly Ser Phe Arg Thr Pro Ile Gln Glu Glu Gln Ala Asp Ala His Ser 260 265 270 Thr Leu Ala Lys Ile 275 <210> 31 <211> 726 <212> DNA <213> Homo sapiens <220> <221> CDS <222> (1)..(726) <400> 31 atg aag aca ttg cct gcc atg ctt gga act ggg aaa tta ttt tgg gtc 48 Met Lys Thr Leu Pro Ala Met Leu Gly Thr Gly Lys Leu Phe Trp Val 1 5 10 15 ttc ttc tta atc cca tat ctg gac atc tgg aac atc cat ggg aaa gaa 96 Phe Phe Leu Ile Pro Tyr Leu Asp Ile Trp Asn Ile His Gly Lys Glu 20 25 30 tca tgt gat gta cag ctt tat ata aag aga caa tct gaa cac tcc atc 144 Ser Cys Asp Val Gln Leu Tyr Ile Lys Arg Gln Ser Glu His Ser Ile 35 40 45 tta gca gga gat ccc ttt gaa cta gaa tgc cct gtg aaa tac tgt gct 192 Leu Ala Gly Asp Pro Phe Glu Leu Glu Cys Pro Val Lys Tyr Cys Ala 50 55 60 aac agg cct cat gtg act tgg tgc aag ctc aat gga aca aca tgt gta 240 Asn Arg Pro His Val Thr Trp Cys Lys Leu Asn Gly Thr Thr Cys Val 65 70 75 80 aaa ctt gaa gat aga caa aca agt tgg aag gaa 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Cys Ser Ala Asn Phe Gln Ser Asn Leu Ile Glu Ser His Ser 115 120 125 Thr Thr Leu Tyr Val Thr Gly Lys Gln Asn Glu Leu Ser Asp Thr Ala 130 135 140 Gly Arg Glu Ile Asn Leu Val Asp Ala His Leu Lys Ser Glu Gln Thr 145 150 155 160 Glu Ala Ser Thr Arg Gln Asn Ser Gln Val Leu Leu Ser Glu Thr Gly 165 170 175 Ile Tyr Asp Asn Asp Pro Asp Leu Cys Phe Arg Met Gln Glu Gly Ser 180 185 190 Glu Val Tyr Ser Asn Pro Cys Leu Glu Glu Asn Lys Pro Gly Ile Val 195 200 205 Tyr Ala Ser Leu Asn His Ser Val Ile Gly Pro Asn Ser Arg Leu Ala 210 215 220 Arg Asn Val Lys Glu Ala Pro Thr Glu Tyr Ala Ser Ile Cys Val Arg 225 230 235 240 Ser

Claims (11)

  1. 센다이 바이러스 엔벨로프를 유효 성분으로서 포함하는, 프리오노이드의 축적을 수반하는 인지 기능 장애 및/또는 신경 변성 질환을 예방 및/또는 치료하기 위한 의약.
  2. 제1항에 있어서, 센다이 바이러스 엔벨로프가 야생형 센다이 바이러스 엔벨로프인 의약.
  3. 제1항 또는 제2항에 있어서, 센다이 바이러스 엔벨로프가 불활성화된 센다이 바이러스 엔벨로프인 의약.
  4. 제1항 내지 제3항 중 어느 한 항에 있어서, 프리오노이드의 축적을 수반하는 인지 기능 장애 및/또는 신경 변성 질환이, 알츠하이머형 인지증, 경증 인지 기능 장애(MCI), 뇌 아밀로이드 혈관증, 다운 증후군, 황반 변성, 루이소체형 인지증, 파킨슨병, 다계통 위축증, 타우병증, 전두측두엽 변성증, 기은(嗜銀) 과립성 인지증, 근위축성 측색 경화증, 자폐증, 당뇨병, 근위축성 측색 경화증(ALS) 및 크로이츠펠트·야곱병으로부터 선택되는 어느 것인 의약.
  5. 제4항에 있어서, 프리오노이드의 축적을 수반하는 인지 기능 장애 및/또는 신경 변성 질환이 알츠하이머형 인지증인 의약.
  6. 제1항 내지 제5항 중 어느 한 항에 있어서, 프리오노이드가 아밀로이드 β인 의약.
  7. 제1항 내지 제6항 중 어느 한 항에 있어서, 면역 체크 포인트 저해제와 병용되는 의약.
  8. 제7항에 있어서, 센다이 바이러스 엔벨로프와 면역 체크 포인트 저해제가 동시 또는 순차로 투여되는 것을 특징으로 하는 의약.
  9. 제1항 내지 제8항 중 어느 한 항에 있어서, 센다이 바이러스 엔벨로프와 면역 체크 포인트 저해제를 조합하여 포함하는 의약.
  10. 제7항 내지 제9항 중 어느 한 항에 있어서, 면역 체크 포인트 저해제가, 항PD-1 항체, 항PD-L1 항체, 항PD-L2 항체, 항CTLA-4 항체, 항KIR 항체, 항CD137 항체, 항LAG-3 항체, 항OX40 항체, 항CD80 항체, 항CD86 항체, 항B7-H3 항체, 항B7-H4 항체, 항B7-H5 항체, 항TIM-3 항체, 항TIGIT 항체 및 항BTLA 항체로 이루어지는 군에서 선택되는 임의의 1 또는 2 이상인 의약.
  11. 제10항에 있어서, 면역 체크 포인트 저해제가, 항PD-1 항체, 항PD-L1 항체 또는 항CTLA-4 항체인 의약.
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