KR20190062157A - 피지 조절 및 모공 축소용 조성물 - Google Patents
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Abstract
본 발명은 피지 조절 및 모공 축소용 조성물에 관한 것으로서, 보다 상세하게는 승마, 용규, 감초, 위령선, 가시오가피, 토목향 및 산약으로 이루어진 군으로부터 선택되는 1종 이상의 생약재의 추출물을 유효성분으로 함유함으로써 피지의 생성을 조절할 수 있으며, 이와 함께 피부 트러블을 개선할 수 있을 뿐만 아니라, 항산화 효과를 제공하고, 모공이 넓어지는 것을 예방하며, 또한 피부 자극의 생성을 방어할 수 있는 피부 외용제 조성물에 관한 것이다.
Description
관련 출원의 상호 참조
본원은 한국 특허출원 제2017-0160504호(출원일: 2017년 11월 28일)에 대한 우선권을 주장하며, 상기 기초출원의 내용은 참조를 위해 전체로 본 명세서에 포함된다.
본 발명은 피지 조절 및 모공 축소용 조성물에 관한 것으로서, 보다 상세하게는 승마, 용규, 감초, 위령선, 가시오가피, 토목향 및 산약으로 이루어진 군으로부터 선택되는 1종 이상의 생약재의 추출물을 유효성분으로 함유함으로써 피지의 생성을 조절할 수 있으며, 이와 함께 피부 트러블을 개선할 수 있을 뿐만 아니라, 항산화 효과를 제공하고, 모공이 넓어지는 것을 예방하며, 또한 피부 자극의 생성을 방어할 수 있는 피부 외용제 조성물에 관한 것이다. 본 발명은 화장료 조성물, 바람직하게는 피지 조절 및 모공 축소용 조성물의 제조에 있어서, 유효성분으로서 승마, 용규, 감초, 위령선, 가시오가피, 토목향 및 산약으로 이루어진 군으로부터 선택되는 1종 이상의 생약재의 추출물의 용도에 관한 것이다. 또한, 본 발명은 승마, 용규, 감초, 위령선, 가시오가피, 토목향 및 산약으로 이루어진 군으로부터 선택되는 1종 이상의 생약재의 추출물 유효성분으로 함유하는 화장료 조성물을 피검체의 피부에 국소적으로 적용하는 것을 포함하는, 상기 피검체의 피지를 조절하고/거나 모공을 축소시키는 방법에 관한 것이다.
일반적으로 두피 및 얼굴을 포함한 피부에서 피지는 피부의 보습 유지나 미생물의 침입을 막는 역할을 담당하지만, 피지가 과잉으로 분비되면 탈모가 촉진되고 여드름이 악화되며 여드름에 의한 모공 확대가 촉진되고 지루성 피부염이 발생하는 등 여러 가지 질환이 유발된다.
이러한 피지의 과분비는 여러 원인에 의해서 발생하는데 그 중에서도 가장 중요한 것은 피지선의 활성에 있어 피지 분비를 촉진하는데 관여하는 호르몬 가운데 하나인 디하이드로테스토스테론(dihydrotestosterone: DHT)의 양에 의해서 피지선 세포가 활성화되어 피지가 과분비되는 것이다. 즉, 탈모에 있어서는 세포내에서 테스토스테론(testosterone: T)이 5-알파-리덕타아제 타입 2(5-α-reductase type 2)에 의해서 남성 호르몬 중에 하나인 디하이드로테스토스테론으로 전환됨과 동시에 세포질 내에 있는 수용체 단백질(receptor)과 결합하여 핵 내로 들어가 탈모를 유발하지만 피부나 피지선에서는 테스토스테론이 5-알파-리덕타아제 타입 1(5-α-reductase type 1)에 의해서 디하이드로테스토스테론으로 전환되어 피지선 세포를 활성화하여 분화가 촉진됨으로써 피지선내의 피지(sebum)를 과분비하여 여드름을 유발하게 된다(J. Invest Dermatol 105:209-214 Diane etc.).
단순한 피지의 과분비외에 발생되는 피부 트러블인 여드름, 탈모 등은 피부의 미세한 염증 반응에 의해서 더욱 악화된다. 여드름의 발생 과정을 살펴보면 과도한 피지가 모낭에 축적되어서 여드름균이 활성화되고 염증이 유발된다.
한편, 노화가 진행됨에 따라 T존 부위를 중심으로 모공의 크기가 넓어져 미용상의 문제를 일으키게 된다. 모공의 크기가 커진 것은 병원 시술을 통해 개선이 가능하지만, 개인차가 있고 만족도가 좋지 않으며 효과가 일시적이라는 문제점이 여전히 존재한다. 또한, 모공 케어용 화장품이 존재하지만, 이의 사용시 일시적으로 모공이 조여지는 듯한 느낌이 들 뿐이고, 장기적인 모공 개선 효과는 적다.
그러나, 피부에 안전한 천연 소재로서 피지 분비를 근본적인 원인을 통해서 감소시킬 수 있으면서, 모공을 축소시킬 수 있는 원료는 많지 않은 실정이다.
이에 본 발명자들은 승마, 용규, 감초, 위령선, 가시오가피, 토목향 및 산약으로 이루어진 군으로부터 선택되는 1종 이상의 생약재의 추출물이 피지 조절, 항산화 효능, 모공 확대 예방 및 모공 축소, 피부 탄력 개선과 관련이 있음을 확인하고 본 발명을 완성하게 되었다.
따라서, 본 발명의 목적은 피지 조절 및 모공 축소에 효과적인 피부 외용제 조성물을 제공하는 것이다.
상기한 목적을 달성하기 위하여 본 발명은 승마, 용규, 감초, 위령선, 가시오가피, 토목향 및 산약으로 이루어진 군으로부터 선택되는 1종 이상의 생약재의 추출물을 유효성분으로 함유하는 피지 조절 또는 모공 축소용 피부 외용제 조성물을 제공한다.
본 발명의 조성물은 승마, 용규, 감초, 위령선, 가시오가피, 토목향 및 산약으로 이루어진 군으로부터 선택되는 1종 이상의 생약재의 추출물을 함유함으로써 우수한 피지 조절 효과뿐만 아니라, 활성 산소 제거와 콜라겐 합성 촉진을 통하여 피부 탄력 개선과 더불어 모공을 축소시키는 효과가 탁월하다.
본 발명에 의한 조성물은 승마, 용규, 감초, 위령선, 가시오가피, 토목향 및 산약으로 이루어진 군으로부터 선택되는 1종 이상의 생약재의 추출물을 유효성분으로 함유함으로써 우수한 피지 조절 또는 모공 축소 효과를 제공할 수 있다.
본 발명은 화장료 조성물, 바람직하게는 피지 조절 및 모공 축소용 조성물의 제조에 있어서, 유효성분으로서 승마, 용규, 감초, 위령선, 가시오가피, 토목향 및 산약으로 이루어진 군으로부터 선택되는 1종 이상의 생약재의 추출물의 피지 조절 또는 모공 축소 용도를 제공한다.
또한, 본 발명은 승마, 용규, 감초, 위령선, 가시오가피, 토목향 및 산약으로 이루어진 군으로부터 선택되는 1종 이상의 생약재의 추출물 유효성분으로 함유하는 화장료 조성물을 피검체의 피부에 국소적으로 적용하는 것을 포함하는, 상기 피검체의 피지를 조절하고/거나 모공을 축소시키는 방법에 관한 것이다.
본 발명에서 사용되는 승마(Cimicifugae Rhizoma)는 미나리아재비과(Ranunculaceae)에 속하는 다년생 초본인 황새승마(Cimicifuga foetida) 또는 승마(Cimicifuga heracleifolia)의 근경으로서, 항균, 해독, 진정효능이 있어 전염병, 두통치료 등의 목적으로 사용된다.
본 발명에서 사용되는 용규(Solani Nigri Herba)는 가지과(Solanaceae)에 속하는 일년생 초본인 까마중(Solanum nigrum)의 전초로서, 항염, 청열, 해독, 활혈, 소종 등의 효능이 있다.
본 발명에서 사용되는 감초(Glycyrrhiza uralensis)는 리코라이스(Licorice)라고 불리기도 하며, 콩과의 다년생 초본의 약용 식물이며, 글리시리진, 플라보노이드, 사포닌, 쿠마린, 탄닌 및 효소 등을 많이 함유하고 있어 자외선에 의해 만들어진 유해 산소를 제거하고, 멜라닌의 광산화를 방지하여 주며 피부를 하얗고 투명하게 가꿔 주는 역할을 한다.
본 발명에서 사용되는 위령선(Clematis mandshurica)은 미나리재비과에 속하는 식물로서, 한방에서는 뿌리를 위령선이라 하며, 신경통, 근육통, 편두통 등의 치료제로 사용되어 왔고, 혈압강하, 평활근 흥분, 이뇨작용, 혈당강하작용, 진통, 항균작용에 대해 보고되어 있다.
본 발명에서 사용되는 가시오가피(Acanthopanax senticosus)는, 두릅나무과의 낙엽 관목으로, 예로부터 신경통, 관절염, 고혈압, 신경쇠약, 당뇨 및 강장제로 널리 이용되고 있다.
본 발명에서 사용되는 토목향은 국화과 식물인 목향(Inula helenium L.)의 뿌리를 말긴 것으로, 기의 순환을 촉진하고 통증을 멎게 하며 비(脾)를 튼튼하게 하고 위(胃)의 기능을 좋게 하며 간기(肝氣)를 잘 통하게 하는 효능이 있다.
본 발명에서 사용되는 산약(Dioscorea Japonica)은 지혈, 항균 작용, 피부가 갈라지는 피부염(갖가지 피부병)에 효과, 모발 성장 촉진, 모발을 검게 해 주고, 관상 동맥의 혈류량 촉진 작용과 진정, 진통 작용, 항암작용(자궁암, 식도암, 피부암 등)이 있다고 알려져 있다.
본 발명에서 사용되는 승마, 용규, 감초, 위령선, 가시오가피, 토목향 및 산약으로 이루어진 군으로부터 선택되는 1종 이상의 생약재의 추출물은 당업계에 공지된 방법에 의해 제조될 수 있으며, 그 방법이 특별히 한정되지는 않지만, 바람직하게는 추출 용매로서 주정(에탄올)과 열수를 사용하고 용매와 건조 시료의 비율을 10:1로 추출한 다음 감압, 여과, 및 건조하여 추출물을 제조할 수 있다.
본 발명에 의한 조성물은 승마, 용규, 감초, 위령선, 가시오가피, 토목향 및 산약으로 이루어진 군으로부터 선택되는 1종 이상의 생약재의 추출물을 0.001 ~ 10중량%의 양으로 함유할 수 있다. 상기 추출물의 함량이 0.001중량% 미만이면 상기 성분에 의한 효능, 효과가 미약하고, 10중량%를 초과하면 피부 안전성 또는 제형상의 문제가 있기 때문이다.
본 발명의 조성물은 5α-리덕테이즈 유전자의 발현을 방해하여 억제 또는 저해시키거나, 5α-리덕테이즈 단백질의 활성을 저해하여 그 작용을 방해할 수 있으며, 상기 조성물을 피부에 적용시 과잉으로 분비되는 피지를 효과적으로 억제할 수 있다.
또한 본 발명의 조성물은 피부에 적용 시 활성 산소 제거와 콜라겐 합성을 촉진하여 모공을 축소시키며, 염증 인자의 발현 감소로 피부 트러블을 억제하는 효과가 탁월하다. 또한, 우수한 항산화력으로 인해 피부 자극의 생성을 방어할 수 있다.
본 발명의 조성물은 피부 외용제 조성물, 특히 화장료 조성물로서 제형화될 수 있으며, 화장품학 또는 피부과학적으로 허용 가능한 매질 또는 기제를 함유하여 제형화될 수 있다. 또한, 본 발명의 조성물은 국소 적용에 적합한 모든 제형으로 제공될 수 있으며, 예를 들어 용액, 수상에 유상을 분산시켜 얻은 에멀젼, 유상에 수상을 분산시켜 얻은 에멀젼, 현탁액, 고체, 겔, 분말, 페이스트, 포말(foam) 또는 에어로졸 조성물의 제형으로 제공될 수 있다. 구체적으로 본 발명의 조성물은 크림, 스킨, 로션, 파우더, 연고, 스프레이 또는 콘실 스틱의 형태로 제공될 수 있다. 이러한 제형의 조성물은 당해 분야의 통상적인 방법에 따라 제조될 수 있다.
이하, 실시예를 통하여 본 발명을 더욱 상세히 설명하고자 한다. 이들 실시예는 오로지 본 발명을 예시하기 위한 것으로, 본 발명의 범위가 이들 실시예에 의해 제한되는 것으로 해석되지 않는 것은 당업계에서 통상의 지식을 가진 자에게 있어서 자명할 것이다.
[참고예 1] 승마 추출물의 준비
본 발명의 승마 추출물의 제조 방법은 다음과 같다. 한국식물추출은행(Plant Extract Bank, 대한민국 대전)에서 구입한 승마 천연물(100g)에 무수 에탄올 1000ml를 가하여 환류 냉각기가 달린 추출기(모델명:HB 4 basic, 제조사:IKA)를 사용하여 80℃에서 2시간 동안 가온 추출하였다. 추출물을 Whatman No.2 여과지로 여과한 후 남은 잔사물(Residue)을 위와 동일한 방법으로 1회 이상 더 추출하고, 얻은 추출액을 합하여 감압농축(모델명:Rotavapor, 제조사:Buchi, 온도: 40℃한 후 동결건조하여 승마의 건조 추출물을 수득하였다.
[참고예 2] 용규 추출물의 준비
본 발명의 용규 추출물의 제조 방법은 다음과 같다. 한국식물추출은행(Plant Extract Bank, 대한민국 대전)에서 구입한 용규 천연물(100g)에 무수 에탄올 1000ml를 가하여 환류 냉각기가 달린 추출기(모델명:HB 4 basic, 제조사:IKA)를 사용하여 80℃에서 2시간 동안 가온 추출하였다. 추출물을 Whatman No.2 여과지로 여과한 후 남은 잔사물(Residue)을 위와 동일한 방법으로 1회 이상 더 추출하고, 얻은 추출액을 합하여 감압농축(모델명: Rotavapor, 제조사: Buchi, 온도: 40℃한 후 동결건조하여 용규의 건조 추출물을 수득하였다.
[참고예 3] 감초 추출물의 준비
본 발명의 감초 추출물의 제조 방법은 다음과 같다. 한국식물추출은행(Plant Extract Bank, 대한민국 대전)에서 구입한 감초 천연물(100g)에 무수 에탄올 1000ml를 가하여 환류 냉각기가 달린 추출기(모델명:HB 4 basic, 제조사:IKA)를 사용하여 80℃에서 2시간 동안 가온 추출하였다. 추출물을 Whatman No.2 여과지로 여과한 후 남은 잔사물(Residue)을 위와 동일한 방법으로 1회 이상 더 추출하고, 얻은 추출액을 합하여 감압농축(모델명:Rotavapor, 제조사:Buchi, 온도: 40℃한 후 동결건조하여 감초의 건조 추출물을 수득하였다.
[참고예 4] 위령선 추출물의 준비
본 발명의 위령선 추출물의 제조 방법은 다음과 같다. 한국식물추출은행(Plant Extract Bank, 대한민국 대전)에서 구입한 위령선 천연물(100g)에 무수 에탄올 1000ml를 가하여 환류 냉각기가 달린 추출기(모델명:HB 4 basic, 제조사:IKA)를 사용하여 80℃에서 2시간 동안 가온 추출하였다. 추출물을 Whatman No.2 여과지로 여과한 후 남은 잔사물(Residue)을 위와 동일한 방법으로 1회 이상 더 추출하고, 얻은 추출액을 합하여 감압농축(모델명:Rotavapor, 제조사:Buchi, 온도: 40℃한 후 동결건조하여 위령선의 건조 추출물을 수득하였다.
[참고예 5] 가시오가피 추출물의 준비
본 발명의 가시오가피 추출물의 제조 방법은 다음과 같다. 한국식물추출은행(Plant Extract Bank, 대한민국 대전)에서 구입한 가시오가피 천연물(100g)에 무수 에탄올 1000ml를 가하여 환류 냉각기가 달린 추출기(모델명:HB 4 basic, 제조사:IKA)를 사용하여 80℃에서 2시간 동안 가온 추출하였다. 추출물을 Whatman No.2 여과지로 여과한 후 남은 잔사물(Residue)을 위와 동일한 방법으로 1회 이상 더 추출하고, 얻은 추출액을 합하여 감압농축(모델명:Rotavapor, 제조사:Buchi, 온도: 40℃한 후 동결건조하여 가시오가피의 건조 추출물을 수득하였다.
[참고예 6] 토목향 추출물의 준비
본 발명의 토목향 추출물의 제조 방법은 다음과 같다. 한국식물추출은행(Plant Extract Bank, 대한민국 대전)에서 구입한 토목향 천연물(100g)에 무수 에탄올 1000ml를 가하여 환류 냉각기가 달린 추출기(모델명:HB 4 basic, 제조사:IKA)를 사용하여 80℃에서 2시간 동안 가온 추출하였다. 추출물을 Whatman No.2 여과지로 여과한 후 남은 잔사물(Residue)을 위와 동일한 방법으로 1회 이상 더 추출하고, 얻은 추출액을 합하여 감압농축(모델명:Rotavapor, 제조사:Buchi, 온도: 40℃한 후 동결건조하여 토목향의 건조 추출물을 수득하였다.
[참고예 7] 산약 추출물의 준비
본 발명의 산약 추출물의 제조 방법은 다음과 같다. 한국식물추출은행(Plant Extract Bank, 대한민국 대전)에서 구입한 산약 천연물(100g)에 무수 에탄올 1000ml를 가하여 환류 냉각기가 달린 추출기(모델명:HB 4 basic, 제조사:IKA)를 사용하여 80℃에서 2시간 동안 가온 추출하였다. 추출물을 Whatman No.2 여과지로 여과한 후 남은 잔사물(Residue)을 위와 동일한 방법으로 1회 이상 더 추출하고, 얻은 추출액을 합하여 감압농축(모델명:Rotavapor, 제조사:Buchi, 온도: 40℃한 후 동결건조하여 산약의 건조 추출물을 수득하였다.
[시험예 1] 피지 생성 저해력 평가
본 발명의 식물 추출물의 피지 생성 억제 효과를 효율적으로 평가하기 위해서, 피지선 세포와 각질 세포를 함께 사용하여, 사람의 모피지선과 유사한 환경의 in vitro 모델을 사용하였다. 24 웰(well)의 배양 플레이트에 HaCaT(ATCC, VA, USA), 각질형성(Cellprogen, CA, USA) 세포와 사람의 피지선 세포를 각각 3.75×104개와 6.0×104개씩 접종하였다. 접종 후, 배양 플레이트 바닥에 세포가 붙을 수 있도록 하루 동안 기다렸다. 이 때 배지는 DMEM 배지(Invitrogen, Carlsbad, CA))에 우태혈청(fetal bovine serum; JRH Bioscience, Tokyo, Japan)을 10% 첨가하고, 페니실린(penicillin) 100mg/ml, 스트렙토마이신(streptomycin) 100mg/ml(상기 시약 모두, GIBCO, Milan, Italy)를 첨가하여 사용하였다.
하루 지난 세포에 지루성 피부 염증을 일으키기 위한 자극원으로 리놀레산(linoleic acid) 50μM, 아라키돈산(arachidonic acid) 50μM, 디하이드로테스토스테론(dihydrotestosterone) 10nM을 처리하였다. 동시에 실험군에 상기 참고예 1 내지 7에서 수득한 각각의 식물 추출물을 DMSO에 녹여 1% 용액을 만든 뒤, DMEM 배지에 희석하여 최종 농도가 50ppm이 되도록 처리하여 하루 경과한 후, 세포 안에 생성된 중성 지방의 양을 오일 레드 오(Oil Red O) 염색법을 사용해 측정하였다. 또한, 비교를 위하여, 피지 생성 저해 효과가 있는 것으로 알려진 레티놀을 사용하여 식물 추출물 대신에 0.3ppm의 농도로 처리하였다.
피지 생성 저해 효과를 측정하기 위하여 보다 구체적으로는 다음의 과정을 실행하였다: 참고예 1 내지 7, 또는 레티놀을 처리한 다음 하루 경과한 후, PBS로 세척한 세포를 30분간 3.7% 포름알데히드(formaldehyde) 용액으로 고정하였다. 고정된 세포는 PBS로 3회, 70% 에탄올로 1회 세척하고 0.4% 오일 레드 오(Oil Red O) 용액으로 30분간 염색하였다. 염색된 세포는 70% 에탄올로 1회, PBS로 3회 세척하였다. 그런 다음, 이소프로판올로 염색된 오일 레드 오(Oil Red O) 용액을 다시 녹여내어 분광광도계(spectrophotometer)를 사용하여 520nm에서 흡광도를 측정하여 정량하였다.
측정 결과는 하기 표 1에 나타내었다.
| 성분 | 피지 생성 저해율(%) |
| 승마 | 61.9 |
| 용규 | 93.1 |
| 감초 | 66.8 |
| 위령선 | 98.8 |
| 가시오가피 | 81.6 |
| 토목향 | 113.5 |
| 산약 | 83.1 |
| 레티놀 | 42.1 |
상기 표 1에 나타낸 바와 같이, 본 발명의 조성물에서 유효성분으로 사용되는 물질인 승마, 용규, 감초, 위령선, 가시오가피, 토목향 및 산약으로 이루어진 군으로부터 선택되는 추출물은 우수한 피지 생성 저해 효과를 나타낸다.또한, 공지된 피지 생성 저해 물질인 레티놀의 경우, 빛, 온도, 산소 등의 외부 요인에 의해 쉽게 파괴되고, 피부 자극을 유발하는 문제가 있어 우수한 효능을 가짐에도 다량으로 사용하는데 제한이 있고, 소량의 사용으로는 높은 수준의 피지 생성 저해 효과를 얻기에 한계가 있는 반면, 본 발명의 조성물에서 사용되는 승마, 용규, 감초, 위령선, 가시오가피, 토목향 및 산약으로 이루어진 군으로부터 선택되는 추출물은 피부에 안전한 천연 소재이므로, 충분한 양의 사용을 통해 보다 높은 피지 생성 저해 효과를 얻을 수 있다.
또한, 상기한 바와 동일한 방법이되, 참고예 1 내지 7 중 2종의 추출물을 선택한 조합을 각각 25ppm씩, 최종 50ppm의 농도로 세포에 처리했을 때 측정 결과는 하기 표 2에 나타내었다.
| 성분 | 피지 생성 저해율(%) |
| 승마, 용규 | 82.5 |
| 승마, 감초 | 75.1 |
| 승마, 위령선 | 88.8 |
| 승마, 가시오가피 | 65.5 |
| 승마, 토목향 | 82.5 |
| 승마, 산약 | 77.8 |
| 용규, 감초 | 75.8 |
| 용규, 위령선 | 100.5 |
| 용규, 가시오가피 | 90.5 |
| 용규, 토목향 | 108.8 |
| 용규, 산약 | 92.1 |
| 감초, 위령선 | 88.9 |
| 감초, 가시오가피 | 90.8 |
| 감초, 토목향 | 88.8 |
| 감초, 산약 | 77.2 |
| 위령선, 가시오가피 | 87.8 |
| 위령선, 토목향 | 120.3 |
| 위령선, 산약 | 92.1 |
| 가시오가피, 토목향 | 101.4 |
| 가시오가피, 산약 | 78.7 |
| 토목향, 산약 | 95.2 |
상기 표 2를 보면, 승마, 용규, 감초, 위령선, 가시오가피, 토목향 및 산약으로 이루어진 군으로부터 선택되는 2종 이상의 추출물은 우수한 피지 생성 저해 효과를 나타내며, 상기 효과는 1종의 추출물을 처리한 경우에 비하여 현저하게 높은 수준임을 알 수 있다.
[시험예 2] 프로콜라겐-I 형성력 평가
본 발명의 식물 추출물에 의한 프로콜라겐-I의 생성량을 확인하기 위하여 enzyme-linked immunosorbent assay(ELISA)법을 사용하였다(Youngren et al., 1999). 프로콜라겐-I은 세포 밖으로 분비되는 물질이므로 세포 배양액을 이용하여 발현 변화를 확인하는 측정법으로 시료가 처리된 섬유아세포의 배양액을 회수하여 실험에 적용하였다.
구체적으로, 24웰(well)의 배양 플레이트에 사람 섬유아세포(Cell biologics, IL, USA)를 각각 2.5×104개 접종하였다. 접종 후, 배양 플레이트 바닥에 세포가 붙을 수 있도록 하루 동안 기다렸다. 이 때 배지는 106 배지(Thermo Fisher, MA, USA)에 LSGS(low serum growth supplement; Thermo Fisher, MA, USA)를 2% 첨가하고, 페니실린(penicillin) 100mg/ml, 스트렙토마이신(streptomycin) 100mg/ml(상기 시약 모두, GIBCO, Milan, Italy)를 첨가하여 사용하였다. 실험군에 상기 참고예 1 내지 7에서 수득한 각각의 식물 추출물을 DMSO에 녹여 1% 용액을 만든 뒤, DMEM 배지에 희석하여 최종 농도가 50ppm이 되도록 처리하였다. 또한, 비교를 위하여, 프로콜라겐-I 형성 능력이 있는 것으로 알려진 TGF-β1을 사용하여 식물 추출물 대신에 0.005ppm의 농도로 처리하였다. 시료를 처리하고 이틀 지난 후, 프로콜라겐-I의 형성을 측정하였다.
프로콜라겐-I 형성 정도를 측정하기 위하여 보다 구체적으로는 다음의 과정을 실행하였다: 프로콜라겐-I 항체(Santa Cruz Biotechnology, USA)를 탄산염/중탄산염(15mM Na2CO3, 35mM NaHCO3, pH9.6) 버퍼에 1:100으로 희석하여 96-웰 immulon-1 flat-bottomed-plate에 코팅을 한 후 1% BSA를 처리하여 상온에서 1시간 차단하였다. 차단이 끝난 플레이트에 세포 배양액을 넣고 4℃에서 18시간 동안 반응 처리하였다. 반응 후 0.05% Tween 20이 함유된 PBS로 세척하고. 프로콜라겐-I 항체를 첨가하여 상온에서 1시간 반응 후 100μL PBS로 세척하였다. 그리고 프로콜라겐-I 항체에 해당하는 2차 항체(horse reddish peroxidase, HRP)를 상온에서 1시간 반응시키고 100μL PBS로 세척하였다. TMB 기질 용액(Pierce, USA)을 이용하여 반응 후 490㎚ 파장에서 흡광도를 측정하여 발색정도를 확인함으로써 프로콜라겐-I의 생성량을 확인하였다. 측정 결과는 하기 표 3에 나타내었다.
| 성분 | 프로콜라겐-I 형성율(%) |
| 승마 | 51.4 |
| 용규 | 49.3 |
| 감초 | 47.0 |
| 위령선 | 35.6 |
| 가시오가피 | 31.7 |
| 토목향 | 17.3 |
| 산약 | 9.8 |
| TGF-β1 | 52.1 |
상기 표 3에 나타낸 바와 같이, 본 발명의 조성물에서 유효성분으로 사용되는 물질인 승마, 용규, 감초, 위령선, 가시오가피, 토목향 및 산약으로 이루어진 군으로부터 선택되는 1종 이상의 추출물은 우수한 프로콜라겐 형성 촉진 효과를 나타내며, 일부 추출물은 공지된 프로콜라겐-I 형성 물질인 TGF-β1을 처리한 경우와 비교하여서도 상당한 수준의 프로콜라겐 형성 촉진 효과를 나타낸다는 것을 확인할 수 있다.또한, 상기한 바와 동일한 방법이되, 참고예 1 내지 7 중 2종의 추출물을 선택한 조합을 각각 25ppm씩, 최종 50ppm의 농도로 세포에 처리했을 때 측정 결과는 하기 표 4에 나타내었다.
| 성분 | 프로콜라겐-I 형성율(%) |
| 승마, 용규 | 45 |
| 승마, 감초 | 55.2 |
| 승마, 위령선 | 40.5 |
| 승마, 가시오가피 | 32.2 |
| 승마, 토목향 | 60.2 |
| 승마, 산약 | 45.2 |
| 용규, 감초 | 60.8 |
| 용규, 위령선 | 78.8 |
| 용규, 가시오가피 | 60.2 |
| 용규, 토목향 | 42.5 |
| 용규, 산약 | 32.2 |
| 감초, 위령선 | 45.1 |
| 감초, 가시오가피 | 49.7 |
| 감초, 토목향 | 35.6 |
| 감초, 산약 | 21.6 |
| 위령선, 가시오가피 | 55.2 |
| 위령선, 토목향 | 47.1 |
| 위령선, 산약 | 42.3 |
| 가시오가피, 토목향 | 31.2 |
| 가시오가피, 산약 | 17.6 |
| 토목향, 산약 | 35.8 |
상기 표 4를 보면, 승마, 용규, 감초, 위령선, 가시오가피, 토목향 및 산약으로 이루어진 군으로부터 선택되는 2종 이상의 추출물은 우수한 프로콜라겐 형성 촉진 효과를 나타내며, 상기 효과는 1종의 추출물을 처리한 경우에 비하여 현저하게 높은 수준임을 알 수 있다.
상기 결과로부터, 본 발명에서 사용되는 승마, 용규, 감초, 위령선, 가시오가피, 토목향 및 산약으로 이루어진 군으로부터 선택되는 1종 이상의 추출물은 피지 생성 저해 효과를 나타내면서 프로콜로겐-I의 합성을 증진시켜 모공 축소에 효과적으로 작용할 수 있을 것임을 알 수 있다.
[참고예 8] 실시예 1 내지 28의 제조
하기 표 5의 조성으로 통상의 방법에 따라 영양 크림을 제조하였다. 이 때, 포함되는 추출물의 조합은 하기 표 6에 나타내어져 있으며, 조합물은 각각의 추출물을 동량으로 포함한다.
| 성분 | 실시예 |
| 승마, 용규, 감초, 위령선, 가시오가피, 토목향 및 산약으로 이루어진 군에서 선택되는 추출물 | 2 |
| 폴리솔베이트 60 | 1.5 |
| 솔비탄세스퀴올리에이트 | 0.5 |
| PEG 60 경화피마자유 | 2 |
| 유동파라핀 | 10 |
| 스쿠알란 | 5 |
| 카프릴릭/카프락트리글리세라이드 | 5 |
| 글리세린 | 5 |
| 부틸렌글리콜 | 3 |
| 프로필렌글리콜 | 3 |
| 트리에탄올아민 | 0.2 |
| 방부제, 색소, 향료 | 적량 |
| 정제수 | 잔량 |
| 실시예 | 성분 |
| 실시예 1 | 참고예 1(승마) |
| 실시예 2 | 참고예 2(용규) |
| 실시예 3 | 참고예 3(감초) |
| 실시예 4 | 참고예 4(위령선) |
| 실시예 5 | 참고예 5(가시오가피) |
| 실시예 6 | 참고예 6(토목향) |
| 실시예 7 | 참고예 7(산약) |
| 실시예 8 | 참고예 1(승마) + 참고예 2(용규) |
| 실시예 9 | 참고예 1(승마) + 참고예 3(감초) |
| 실시예 10 | 참고예 1(승마) + 참고예 4(위령선) |
| 실시예 11 | 참고예 1(승마) + 참고예 5(가시오가피) |
| 실시예 12 | 참고예 1(승마) + 참고예 6(토목향) |
| 실시예 13 | 참고예 1(승마) + 참고예 7(산약) |
| 실시예 14 | 참고예 2(용규) + 참고예 3(감초) |
| 실시예 15 | 참고예 2(용규) + 참고예 4(위령선) |
| 실시예 16 | 참고예 2(용규) + 참고예 5(가시오가피) |
| 실시예 17 | 참고예 2(용규) + 참고예 6(토목향) |
| 실시예 18 | 참고예 2(용규) + 참고예 7(산약) |
| 실시예 19 | 참고예 3(감초) + 참고예 4(위령선) |
| 실시예 20 | 참고예 3(감초) + 참고예 5(가시오가피) |
| 실시예 21 | 참고예 3(감초) + 참고예 6(토목향) |
| 실시예 22 | 참고예 3(감초) + 참고예 7(산약) |
| 실시예 23 | 참고예 4(위령선) + 참고예 5(가시오가피) |
| 실시예 24 | 참고예 4(위령선) + 참고예 6(토목향) |
| 실시예 25 | 참고예 4(위령선) + 참고예 7(산약) |
| 실시예 26 | 참고예 5(가시오가피) + 참고예 6(토목향) |
| 실시예 27 | 참고예 5(가시오가피) + 참고예 7(산약) |
| 실시예 28 | 참고예 6(토목향) + 참고예 7(산약) |
[시험예 3] 인체 모공 평가
얼굴에 피지분비가 많고 얼굴 모공이 크다고 느끼는 남녀 280명을 선정하여 무작위로 10명씩 28개 그룹으로 나누고, 상기 표 5 및 6에 따른 처방의 영양 크림을 피지가 많고 모공이 큰 부위, 주로 뺨과 코 주위 피부에 매일 저녁 세안 후 4주 동안 바르도록 하였다. 측정은 항온항습 조건에서 시험 제품 사용 전과 사용 후 육안 평가와 기기 측정으로 수행하였다. 육안 평가는 시험에 참가한 본인이 느끼는 정도에 따라 점수화하여 하기 표 7에 나타내었고, 피부 모공 크기는 모공크기 측정 기기(Skin touch, 자사 개발)를 사용하여 측정하였고 하기 표 8에 나타내었다. 피지는 피지측정기(sebumeter)를 이용하여 피지량을 측정하였고 하기 표 9에 나타내었다.
| 성분 | 모공 평가 점수 |
| 실시예 1 | 1.37 |
| 실시예 2 | 1.92 |
| 실시예 3 | 1.55 |
| 실시예 4 | 1.63 |
| 실시예 5 | 1.25 |
| 실시예 6 | 1.61 |
| 실시예 7 | 0.98 |
| 실시예 8 | 1.58 |
| 실시예 9 | 1.63 |
| 실시예 10 | 1.63 |
| 실시예 11 | 1.28 |
| 실시예 12 | 1.88 |
| 실시예 13 | 1.75 |
| 실시예 14 | 1.82 |
| 실시예 15 | 2.15 |
| 실시예 16 | 1.92 |
| 실시예 17 | 1.88 |
| 실시예 18 | 1.72 |
| 실시예 19 | 1.68 |
| 실시예 20 | 1.92 |
| 실시예 21 | 1.63 |
| 실시예 22 | 1.51 |
| 실시예 23 | 1.88 |
| 실시예 24 | 1.88 |
| 실시예 25 | 1.66 |
| 실시예 26 | 1.68 |
| 실시예 27 | 1.22 |
| 실시예 28 | 1.78 |
<효과 판정 기준>
0:효과 거의 없음, 1: 약간의 효과 있음, 2: 많이 좋아짐, 3: 완전히 만족함
| 성분 | 사용전 모공크기(픽셀) | 사용후 모공크기(픽셀) |
| 실시예 1 | 208 | 197 |
| 실시예 2 | 206 | 192 |
| 실시예 3 | 207 | 198 |
| 실시예 4 | 207 | 188 |
| 실시예 5 | 208 | 201 |
| 실시예 6 | 206 | 193 |
| 실시예 7 | 208 | 199 |
| 실시예 8 | 210 | 192 |
| 실시예 9 | 208 | 193 |
| 실시예 10 | 209 | 194 |
| 실시예 11 | 207 | 199 |
| 실시예 12 | 206 | 188 |
| 실시예 13 | 208 | 192 |
| 실시예 14 | 209 | 193 |
| 실시예 15 | 211 | 189 |
| 실시예 16 | 208 | 191 |
| 실시예 17 | 206 | 190 |
| 실시예 18 | 205 | 193 |
| 실시예 19 | 208 | 196 |
| 실시예 20 | 206 | 191 |
| 실시예 21 | 204 | 195 |
| 실시예 22 | 206 | 199 |
| 실시예 23 | 202 | 187 |
| 실시예 24 | 208 | 185 |
| 실시예 25 | 209 | 195 |
| 실시예 26 | 208 | 199 |
| 실시예 27 | 206 | 201 |
| 실시예 28 | 205 | 199 |
| 성분 | 사용전 피지량(㎍/㎠h) | 사용후 피지량(㎍/㎠h) |
| 실시예 1 | 71.5 | 65.8 |
| 실시예 2 | 70.8 | 59.1 |
| 실시예 3 | 72.8 | 65.1 |
| 실시예 4 | 73.6 | 62.1 |
| 실시예 5 | 72.1 | 61.3 |
| 실시예 6 | 71.1 | 59.8 |
| 실시예 7 | 73.2 | 65.2 |
| 실시예 8 | 72.1 | 60.1 |
| 실시예 9 | 71.5 | 59.8 |
| 실시예 10 | 70.8 | 57.2 |
| 실시예 11 | 70.8 | 65.2 |
| 실시예 12 | 72.1 | 57.2 |
| 실시예 13 | 71.6 | 61.2 |
| 실시예 14 | 72.4 | 62.3 |
| 실시예 15 | 71.4 | 55.8 |
| 실시예 16 | 71.9 | 58.1 |
| 실시예 17 | 72.5 | 59.3 |
| 실시예 18 | 70.5 | 60.2 |
| 실시예 19 | 73.8 | 63.8 |
| 실시예 20 | 71.5 | 58.4 |
| 실시예 21 | 69.5 | 62.2 |
| 실시예 22 | 73.1 | 66.9 |
| 실시예 23 | 76.2 | 56.3 |
| 실시예 24 | 72.1 | 53.9 |
| 실시예 25 | 75.8 | 61.2 |
| 실시예 26 | 74.8 | 61.7 |
| 실시예 27 | 74.1 | 65.3 |
| 실시예 28 | 72.9 | 63.1 |
상기 표 7 내지 9에 나타낸 바와 같이, 승마, 용규, 감초, 위령선, 가시오가피, 토목향 및 산약으로 이루어진 군으로부터 선택되는 1종 이상의 추출물을 유효성분으로 함유하는 조성물을 사용함으로써 실제로 사용 전과 비교하여 모공 크기가 감소하고, 피지량이 감소한다는 것을 확인할 수 있으며, 사용자들도 효과가 있는 것으로 느낀다는 것을 알 수 있다.
[제조예 1] 화장수
아래 표 10에 기재된 조성으로 통상의 방법에 따라 화장수를 제조한다.
| 함량(중량%) | |
| 승마, 용규, 감초, 위령선, 가시오가피, 토목향 및 산약으로 이루어진 군에서 선택되는 1종 이상의 추출물 | 1.0 |
| 글리세린 | 3.0 |
| 부틸렌글리콜 | 2.0 |
| 프로필렌글리콜 | 2.0 |
| 카르복시비닐폴리머 | 0.1 |
| PEG 12 노닐페닐에테르 | 0.2 |
| 폴리솔베이트 80 | 0.4 |
| 에탄올 | 10.0 |
| 트리에탄올아민 | 0.1 |
| 방부제, 색소, 향료 | 적량 |
| 정제수 | 잔량 |
[제형예 2] 마사지 크림
아래 표 11에 기재된 조성으로 통상의 방법에 따라 마사지 크림을 제조한다.
| 함량(중량%) | |
| 승마, 용규, 감초, 위령선, 가시오가피, 토목향 및 산약으로 이루어진 군에서 선택되는 1종 이상의 추출물 | 1.0 |
| 밀납 | 10.0 |
| 폴리솔베이트 60 | 1.5 |
| PEG 60 경화피마자유 | 2.0 |
| 솔비탄세스퀴올레이트 | 0.8 |
| 유동파라핀 | 40.0 |
| 스쿠알란 | 5.0 |
| 카프릴릭/카프릭트리글리세라이드 | 4.0 |
| 글리세린 | 5.0 |
| 부틸렌글리콜 | 3.0 |
| 프로필렌글리콜 | 3.0 |
| 트리에탄올아민 | 0.2 |
| 방부제, 색소, 향료 | 적량 |
| 정제수 | 잔량 |
[제조예 3] 팩
아래 표 1211에 기재된 조성으로 통상의 방법에 따라 팩을 제조한다.
| 함량(중량%) | |
| 승마, 용규, 감초, 위령선, 가시오가피, 토목향 및 산약으로 이루어진 군에서 선택되는 1종 이상의 추출물 | 1.0 |
| 폴리비닐알콜 | 13.0 |
| 소듐카르복시메틸셀룰로오스 | 0.2 |
| 글리세린 | 5.0 |
| 알란토인 | 0.1 |
| 에탄올 | 6.0 |
| PEG 12 노닐페닐에테르 | 0.3 |
| 폴리솔베이트 60 | 0.3 |
| 방부제, 색소, 향료 | 적량 |
| 정제수 | 잔량 |
[제조예 4] 젤
아래 표 13에 기재된 조성으로 통상의 방법에 따라 젤을 제조한다.
| 함량(중량%) | |
| 승마, 용규, 감초, 위령선, 가시오가피, 토목향 및 산약으로 이루어진 군에서 선택되는 1종 이상의 추출물 | 1.0 |
| 에틸렌디아민초산나트륨 | 0.05 |
| 글리세린 | 5.0 |
| 카르복시비닐폴리머 | 0.3 |
| 에탄올 | 5.0 |
| PEG 60 경화피마자유 | 0.5 |
| 트리에탄올아민 | 0.3 |
| 방부제, 색소, 향료 | 적량 |
| 정제수 | 잔량 |
[제형예 5] 연고
아래 표 1413에 기재된 조성으로 통상적인 방법으로 연고를 제조하였다.
| 함량(중량%) | |
| 승마, 용규, 감초, 위령선, 가시오가피, 토목향 및 산약으로 이루어진 군에서 선택되는 1종 이상의 추출물 | 1.0 |
| 글리세린 | 8.0 |
| 부틸렌글리콜 | 4.0 |
| 유동파라핀 | 15.0 |
| 베타글루칸 | 7.0 |
| 카보머 | 0.1 |
| 카프릴릭/카프릭 트리글리세라이드 | 3.0 |
| 스쿠알란 | 1.0 |
| 세테아릴 글루코사이드 | 1.5 |
| 소르비탄 스테아레이트 | 0.4 |
| 세테아릴 알코올 | 1.0 |
| 밀납 | 4.0 |
| 방부제, 색소, 향료 | 적량 |
| 정제수 | 잔량 |
이상으로 본 발명 내용의 특정한 부분을 상세히 기술하였는 바, 당업계의 통상의 지식을 가진 자에게 있어서 이러한 구체적 기술은 단지 바람직한 실시태양일 뿐이며, 이에 의해 본 발명의 범위가 제한되는 것이 아닌 점은 명백할 것이다. 따라서, 본 발명의 실질적인 범위는 첨부된 청구항들과 그것들의 등가물에 의하여 정의된다고 할 것이다.
Claims (4)
- 승마, 용규, 감초, 위령선, 가시오가피, 토목향 및 산약으로 이루어진 군으로부터 선택되는 1종 이상의 생약재의 추출물을 유효성분으로 포함하는 피지 조절 또는 모공 축소용 피부 외용제 조성물.
- 제1항에 있어서, 상기 생약재의 추출물은 조성물 총 중량에 대하여 0.001 ~ 10중량%의 양으로 포함됨을 특징으로 하는 조성물.
- 제1항에 있어서, 상기 생약재의 추출물은 추출 용매로 에탄올 또는 열수를 사용하여 추출된 것임을 특징으로 하는 조성물.
- 제1항에 있어서, 상기 조성물은 화장료 조성물임을 특징으로 하는 조성물.
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