KR20190025905A

KR20190025905A - 인간 글루카곤 및 통계적 코폴리아미노산을 포함하는 주사가능한 수용액 형태의 조성물

Info

Publication number: KR20190025905A
Application number: KR1020197000540A
Authority: KR
Inventors: 알렉상드르 제이슬러; 세골렌느 라아쥬; 올리비에 술라; 다비드 뒤라셰르; 그레고리 메이프렌
Original assignee: 아도시아
Priority date: 2016-06-07
Filing date: 2017-06-07
Publication date: 2019-03-12
Also published as: SG11201810901VA; AU2017277589A1; KR20190026748A; AU2017277590A1; CA3026802A1; CN109562063A; EP3463294A1; US10383918B2; BR112018075250A2; CN109562064A; CA3027238A1; SG11201810939PA; WO2017211917A1; EP3463295B1; EP3463295A1; JP2019521107A; JP2019517560A; US20170348395A1; EP3463294B1; US10485851B2

Abstract

본 발명은 적어도:
a) 인간 글루카곤, 및
b) 카복실레이트 전하 및 소수성 라디칼 Hy를 지니는 코폴리아미노산을 포함하는, pH가 6.0 내지 8.0이고 주사가능한 수용액 형태인, 물리적으로 안정한 조성물에 관한 것이다.
일 구현예에서, 본 발명에 따른 조성물은 또한 위장 호르몬을 포함한다.

Description

인간 글루카곤 및 통계적 코폴리아미노산(Statistical CoPolyamino Acid)을 포함하는, 주사가능한 수용액 형태의 조성물

인간 글루카곤은 혈당증의 증가를 허용함으로써 인슐린 과다(insulin excess)로부터 초래될 수 있는 저혈당증 수준을 보완하는 단기-작용 고혈당증 호르몬이다. 이는 간 글리코겐분해의 자극에 의해 글루코즈의 방출을 가능하도록 하며 인슐린 길항 특성(저혈당증)을 갖는다. 인간 글루카곤은 일반적으로 저혈당증이 검출되는 경우 췌장 내에서 랑게르한스 섬(islets of Langerhans)의 알파 세포에 의해 분비된다.

인간 글루카곤은 "구조(rescue)"로서 또한 지칭되는, 심각한 저혈당증의 응급 처치와 같은 치료학적 목적을 위해 사용되지만, 또한 예를 들면, 위장 운동성을 억제하기 위하여, 의학 실험의 수행시 진단 맥락에서도 사용된다. 다른 적용이 인간 글루카곤, 특히 인공 췌장으로 또한 지칭되는 이중-호르몬성 혈당증 조절 시스템에서, 및 매우 높은 인슐린 수준에 의해 특징화되는 희귀 질환인, 선천성 과인슐린혈증에서의 이의 용도를 위해 고려되고 있다.

인간 글루카곤의 임상 용도는 치료학적 의도를 지닌 안정한 약제학적 생성물의 개발 측면에서 이의 불리한 특성중 일부로 인하여 제한되어 왔다. 실제로, 인간 글루카곤은 넓은 pH 범위에서 피브릴(fibril)을 형성하는 이의 경향성(propensity)으로 인하여, 생리학적 pH에서 매우 낮은 용해도, 및 높은 물리적 불안정성을 가진다. 이는 인간 글루카곤을 기반으로 하는 상업적인 제품(Glucagen^®, 없음VO 없음RDISK 및 주사용 글루카곤, ELI LILLY)이 즉석에서 재구성되는 동결건조된 형태인 이유이다.

오노우(Onoue) 등의 연구(Pharm. Res. 2004, 21(7), 1274-83)는 이러한 피브릴의 잠재적으로 위험한 특성을 밝혔다: 피브릴화된 인간 글루카곤은 배양물 속의 포유동물 세포 내에서 세포독성이다.

이의 물리적 불안정성 외에, 인간 글루카곤은 다양한 유형의 화학적 분해를 겪는다. 수용액 속에서 이는 신속하게 분해하여 몇가지 분해 생성물을 형성한다. 인간 글루카곤의 적어도 16개의 분해 생성물이 키르쉬(Kirsh) 등(International Journal of Pharmaceutics, 2000, 203, 115-125)에 의해 확인되었다. 따라서 이러한 인간 글루카곤의 화학적 분해는 신속하고 복잡하다.

용액 속에서 인간 글루카곤의 불량한 화학적 및 물리적 안정성은 없음VO 없음RDISK, ELI LILLY 및 보다 최근에 FRESENIUS KABI와 같은 제약회사가 이러한 인간 글루카곤을 주사 직전 산성 pH(pH < 3)에서 재구성되는 동결건조물의 형태로 시판하도록 하였다. 동결건조물 형태의 인간 글루카곤은 보다 안정하고, 사용 직전에 산성 pH에서 제형의 제조는 이것이 선명한 용액을 수득하는 것을 가능하도록 한다. 그러나, 일단 생성물이 재구성되면, 이는 조성물의 재구성 및/또는 겔화 후 24시간 내에 인간 글루카곤 피브릴의 외형으로, 신성 재구성 완충액 속에서 극도로 신속한 화학적 및 물리적 분해를 겪기 때문에, 신속하게 사용하여야만 한다. 그러나, 생성물의 이러한 발현은, 이것이 제형의 매우 신속한 사용을 필요로 하기 때문에 불만족스럽다. 이러한 불안정성은 이것을 펌프 속에서 사용하기에 불가능하도록 할 뿐만 아니라, 이는 또한 진단 사용시 많은 생성물 손실을 초래하는 단점도 나타낸다. 실제로, 이러한 유형의 조성물은 이의 제조 후 수 시간 내에 더 이상 사용할 수 없으므로, 이는 낭비를 유발한다.

최종적으로, 당뇨병 환자에서 인슐린 치료요법 동안 발생할 수 있는 심각한 저혈당증 반응에 대한 응급 처치의 적용 시에도, 재구성하여야 하는 제형은 길고 복잡한 제조를 포함하기 때문에 또한 이상적이지 않은데, 예를 들면, GlucaGen^®의 패키지 삽입물은 추천된 용량을 주사하기 위해 5-단계의 과정을 기술하고 있다. 더욱이, LOCEMIA 사의 연구는 응급시 재구성을 수행하는 것으로 여겨지는 극소수의 인간(참여자의 대략 10%)이 적절한 용량을 전달할 수 있었음을 입증하고 있다. 최종적으로, 인간 글루카곤의 용액의 산성 pH는 환자내 주사시 통증을 생성할 수 있다.

따라서, 즉시 사용하기 위한 인간 글루카곤 용액이 요구되고 있다. 오늘날, 인간 글루카곤을 전달할 수 있도록 하기 위해 임상적으로 일컬어지는 가장 진전된 용액은 수용액 속에서 인간 글루카곤의 안정성 문제를 상이한 방식으로 피하고 있다.

LOCEMIA 사는 현재 3상 임상 연구 중에 있는 동결건조된 인간 글루카곤 스프레이를 개발하였으며, 이는 비강내 경로로 투여되도록 의도된다. 이러한 스프레이는 소위 "구조"용으로 적합한데, 즉 다시 말해서 심각한 저혈당증의 경우에, 이는 즉시 사용되므로 재구성할 필요가 있는 용액과는 대조적으로 사용하기에 용이하다. 그러나, 이러한 생성물은 펌프에서 사용하거나 인간 글루카곤의 전달된 양의 정밀한 제어가 필요한 사용을 위해서는 적합하지 않다.

XERIS의 경우, DMSO와 같은 극성의 비양성자성 용매를 기반으로 한 인간 글루카곤의 액체 제형을 개발하였으며, 이는 현재 임상 연구에서 시험 중이다. 그러나, 심지어 "구조"용을 위한 유기 용매의 용액의 주사가 고려될 수 있다고 해도, 만성 사용을 위한 인간 글루카곤 수용액을 갖는 것이 매우 바람직하다. 다른 펩타이드, 특히 아밀린 또는 GLP-1 RA(글루카곤-유사 펩타이드-1 수용체 효능제)와의 조합을 포함하는 조성물이 고려되어 왔다.

최종적으로, 인간 글루카곤의 제형의 곤란성에 직면하여, 인간 글루카곤의 유사체는 약제학적 용도와 혼용성인 안정성을 갖는 제형을 수득하기 위하여, 없음VO 없음RDISK, SA없음FI 또는 ELI LILLY와 같은 거대 제약사에 의해 개발되는 과정 중에 있다. 그러나, 인간 기원의 펩타이드와 비교하여 이의 1차 서열이 변형된 이러한 펩타이드는 환자에 대해 안전성 위험을 나타낼 수 있다.

따라서, 생리학적 pH에 근접한 pH, 즉 다시 말해서 6.0 내지 8.0에서 수용액 속에 인간 글루카곤의 화학적 및 물리적 둘 다의 용해도 및 안정성을 개선시킬 수 있도록 하는 용액에서 주요 장점이 존재한다. 이는 환자가 응급시 사용하기 보다 용이한 약제학적 생성물을 초래할 수 있을 뿐 아니라, 예를 들면, 이중-호르몬성 인공 췌장(bi-hormonal artificial pancreas)에서 이의 사용과 같은, 인간 글루카곤의 새로운 치료학적 적용에 대한 분야를 열 수 있었다.

선행 기술은 이러한 문제를 해결하려고 시도하기 위한 용액을 제안한다.

일부 문서는 알칼리성 pH를 사용하는 것을 제안하고 있다. 예를 들면, 제US2015291680호는 8.8 내지 9.4의 pH를 사용하고 페룰산(perulic acid) 또는 테트라하이드로쿠르쿠민을 사용함으로써 1 mg/mL에서 인간 글루카곤의 용해도를 교시하고 있다. 그러나, 알칼리성 pH가 사용된다는 사실과는 별개로, 이러한 용액은 오히려 시간에 걸쳐 인간 글루카곤의 제한된 안정성을 초래하는 단점을 나타낸다. 잭슨(Jackson) 등의 문헌(Curr. Diab. Rep., 2012, 12, 705-710)은 피브릴의 형성을 제한하기 위하여, 알칼리성 pH(대략 10)에서 인간 글루카곤의 제형화를 제안하고 있다. 그러나, 이러한 용액은 인간 글루카곤의 신속한 화학적 분해를 방지하지 않는다.

한편, 출원 제WO2014096440호(NOVOZYME)는 피브릴 형성율을 감소시킴으로써 안정성을 증진시키기 위하여, 알부민 및 폴리소르베이트의 존재하에서 약산성 pH(대략 5.5)를 사용하는 것을 고려하고 있다. 그러나, 이러한 용액은 안정성의 제한된 개선을 나타낸다. 선행 기술에 기술된 용액 대부분은 인간 글루카곤의 선명한 용액을 수득하여 응집을 방지하는 것을 가능하도록 하며, 인간 글루카곤의 겔화 또는 침전은 계면활성제, 세제 또는 다른 공지된 가용화제의 사용을 포함한다.

예를 들면, 마틸라이넨(Matilainen) 등(J. Pharm. Sci., 2008, 97, 2720-2729 및 Eur. J. Pharm. Sci., 2009, 36, 412-420)은 인간 글루카곤의 피브릴의 형성율을 제한하기 위하여 사이클로덱스트린의 사용을 기술하였다. 그러나, 이러한 제공된 개선은 펌프에서 사용하는 것을 고려하기에 충분한 것으로 여겨지지 않는다.

제안된 용액은 친수성 계면활성제를 포함한다:

- 제GB1202607호(NOVO NORDISK)는 음이온성 또는 양이온성 세제의 사용을 기술하고 있다.

- 제US6384016호(NOVO NORDISK) 및 제US2011097386호(BIODEL)는 라이소인지질(또는 라이소레시틴)을 사용한다.

- 제WO2015095389호(AEGIS)는 점막 또는 표피에서의 적용에 의한 전달의 경우, 및 특히 눈, 비강, 경구 또는 비루 전달의 경우에, 치료제의 생이용능을 증진시키기 위한 도데실 말토시드와 같은 비-이온성 계면활성제를 기술하고 있다. 이러한 문서는 알킬 글루코시드의 존재가 안구 부위에서 인간 글루카곤의 흡수의 개선을 이끈다고 기술하고 있다.

- 출원 제WO2012059764호(ARECOR)는 양이온성 계면활성제 및, 보다 정밀하게는, 방향족 염화암모늄을 기술하고 있다.

상기 문서에 나타낸 계면활성제는 피하 경로에 의한 만성 사용을 위해서는 너무 독성이거나 자극성일 수 있다. 예를 들면, 라이소인지질(또는 라이소레시틴)은 이들의 용혈 특성으로 인하여 적혈구 세포를 용해하는 것으로 알려져 있다. 피하 주사시, 이는 조직에 국소 손상을 유발하며 주사 부위에 통증을 유발할 수 있다. 펌프를 사용한 연속 주사의 경우에, 이는 침(needle)의 삽입 부위에 통증 및/또는 자극을 초래할 수 있다. 국제 출원 제WO2011138802호(Sun Pharma)는 페길화된 지질(페길화된 디스테아로일포스파티딜에탄올아민)의 존재하에서 5 내지 7.5의 pH에서 미셀(micellar) 수용액 속에서 인간 글루카곤의 즉시 사용 용액을 기술하고 있다. 그러나, 가라이(Garay) 등(Expert Opin Drug Deliv (2012) 9, 1319-1323)은 폴리에틸렌 글리콜이 면역원성이고 항원성 둘 다임을 교시하고 있다. 이는 항-PEG 항체를 지닌 환자에게 유해할 수 있다. 그러나, 간슨(Ganson) 등(J. Allergy Clin. Immu없음l. (2015) doi: 10.1016/j.jaci.2015.10.034)은 40 kDa 메톡시폴리에틸렌 글리콜(mPEG)에 커플링된 페그니바코긴에 관한 임상 연구가 640명의 환자들 중 3명에서 페그니바코긴의 첫번째 용량으로 출발하여 염증 반응을 초래하였음을 기술하고 있다. 이들 3명의 환자 중에서, 2명은 과민증(anaphylaxis) 기준을 충족하였고 1명은 분리된 피부 반응을 가졌으며; 각각의 현상은 심각한 것으로 고려되었고, 한가지 현상은 심지어 환자의 생명을 위협하는 것으로 고려되었다. 이러한 부작용은 임상 시험의 중지를 초래하였으며 페길화된 화합물의 부작용 문제를 불러일으켰다.

문서 제WO2013101749호(LATITUDE)는 인간 글루카곤의 나노유액(na없음emulsion)을 기술하고 있다. 그러나, 비교적 중간의 성능이 화학적 안정성의 측면에서 청구되었는데, 다시 말해서, 조성물은 37℃에서 3 내지 7일 후 초기 농도의 적어도 75%를 포함한다.

또한, 지금까지, 출원인의 지식으로는, 수용액 형태의 인간 글루카곤을 포함하는 약제학적 제형이 임상 연구에서 시험되지 않고 있음에 주목하여야 한다.

따라서, 물리적 안정성 및 화학적 안정성 측면 둘 다에서, 인간 글루카곤의 용해도 및 만족스러운 안정성의 획득을 가능하도록 하는, 생리학적 pH에 근접한 pH인, 6.0 내지 8.0에서의 액체 수성 제형에 대한 요구가 남아있다. 보다 특히, 이중-호르몬 펌프(인슐린/인간 글루카곤)에서 사용될 수 있는 이러한 제형에 대한 요구가 있다.

이러한 요구는 특히 인간 글루카곤을 GLP-1 RA와 조합하는 것이 비만 및 당뇨병을 치료하기 위한 매력적인 제안임을 나타내는 탄(Tan) 등(Diabetes, 2013, 62, 1131-138)에 의해 명확하다. 여전히, 인간 글루카곤을 6.0 내지 8.0의 생리학적 pH에 근접한 pH에서 수용액 속에서 안정한 방식으로 제형화할 수 있도록 하는 것은 산성 또는 알칼리성 조건에 대해 민감한 GLP-1 RA의 안정성을 증진시킬 수 있도록 하는 보다 양호한 조건을 허용한다.

본 발명에 따른 카복실레이트 전하 및 소수성 라디칼 Hy를 지닌 코-폴리아미노산은 가수분해에 대해 탁월한 내성을 나타낸다. 이는 특히 가속화된 조건 하에서, 예를 들면, 알칼리성 pH(pH 12)에서의 가수분해 시험에서 입증될 수 있다.

또한, 예를 들면, 펜톤 산화형(Fenton oxidation type)의 강제적인 산화 시험은 카복실레이트 전하 및 소수성 라디칼 Hy를 지닌 코-폴리아미노산이 산화에 대해 우수한 내성을 나타냄을 보여준다.

따라서, 본 발명은 적어도:

a) 인간 글루카곤, 및

b) 카복실레이트 전하 및 소수성 라디칼 Hy를 지닌 코-폴리아미노산을 포함하는, pH가 6.0 내지 8.0인, 주사가능한 수용액 형태의 물리적으로 안정한 조성물에 관한 것이며, 상기 소수성 라디칼 Hy는 다음 화학식 I의 라디칼이다:

[화학식 I]

여기서,

- GpR은 화학식 II의 라디칼이고:

[화학식 II]

- GpA는 화학식 III 또는 III'의 라디칼이며:

[화학식 III]

, 또는

[화학식 III']

;

- GpC는 화학식 IV의 라디칼이고:

[화학식 IV]

;

- 상기 *는 상이한 그룹의 부착 지점을 나타내고;

- a는 0 또는 1과 동일한 정수이며;

- b는 0 또는 1과 동일한 정수이고;

- p는 1 또는 2와 동일한 정수이며,

o p가 1인 경우, a는 0 또는 1이고 GpA는 화학식 III'의 라디칼이며,

o p가 2인 경우, a는 1이고 GpA는 화학식 III의 라디칼이고;

- c는 0 또는 1과 동일한 정수이며, c가 0인 경우, d는 1 또는 2이고;

- d는 0, 내지 1 또는 2와 동일한 정수이고;

- r은 0 또는 1과 동일한 정수이며;

o r이 0과 동일한 경우, 화학식 I의 수소성 라디칼은 소수성 라디칼의 카보닐과 코-폴리아미노산의 N-말단 위치 내 질소 원자 사이의 공유 결합을 통해 코-폴리아미노산에 결합함으로써 코-폴리아미노산의 전구체의 N-말단 위치에서의 아민 기능 및 소수성 라디칼의 전구체에 의해 생성된 산 기능의 반응으로부터 기원하는 아미드 기능을 형성하고,

o r이 1과 동일한 경우, 화학식 I의 소수성 라디칼은 코-폴리아미노산에 결합하며:

■ 소수성 라디칼의 질소 원자와 코-폴리아미노산의 카보실 사이의 공유결합을 경유함으로써 소수성 라디칼의 전구체의 아미드 기능과 코-폴리아미노산의 전구체에 의해 생성된 산 기능 사이의 반응으로부터 기원한 아민 기능을 형성하거나,

■ 소수성 라디칼의 카보닐과 코-폴리아미노산의 N-말단 위치에서의 질소 원자 사이의 공유 결합을 경유함으로써 소수성 라디칼의 전구체의 산 기능과 코-폴리아미노산의 전구체에 의해 생성된 N 말단 위치에서의 아민 기능의 반응으로부터 기원한 아미드 기능을 형성하고;

- R은:

o GpR이 화학식 II의 라디칼인 경우 2 내지 12개의 탄소 원자를 포함하는 직쇄(linear) 또는 측쇄(branched)의 2가 알킬 라디칼;

o GpR가 화학식 II의 라디칼인 경우 2 내지 11개의 탄소 원자를 포함하는 직쇄 또는 측쇄의 2가 알킬 라디칼(상기 알킬 라디칼은 하나 이상의 -CONH₂ 기능을 지닌다); 및

o 4 내지 14개의 탄소 원자 및 1 내지 5개의 산소 원자를 포함하는 치환되지 않은 에테르 또는 폴리에테르 라디칼로 이루어진 그룹으로부터 선택된 라디칼이고;

- A는 1 내지 6개의 탄소 원자를 포함하는 직쇄 또는 측쇄된 알킬 라디칼이며;

- B는 1 내지 9개의 탄소 원자를 포함하는, 방향족 환을 임의로 포함하는, 직쇄 또는 측쇄된 알킬 라디칼이고;

- C_x는 직쇄 또는 측쇄된 1가 알킬 라디칼이며, 여기서 x는 탄소 원자의 수를 나타내고,

o p가 1과 동일한 경우, x는 11 내지 25 (11 ≤ x ≤ 25)이며;

o p가 2와 동일한 경우, x는 9 내지 15 (9 ≤ x ≤ 15)이고,

- 소수성 라디칼의 수와 글루타믹 또는 아스파르틱 단위의 수 사이의 비 i는 0 < i ≤ 0.5이며;

- 수개의 소수성 라디칼이 고-폴리아미노산에 의해 생성되는 경우, 이들은 동일하거나 상이하고,

- 글루탐산 또는 아스파르트산 단위에서 중합도(degree of polymerization: DP)는 5 내지 250이며;

- 유리산 기능은 Na⁺ 및 K⁺로 이루어진 그룹으로부터 선택된 알칼리성 양이온의 염의 형태이다.

일 구현예에서, 조성물은 pH가 6.6 내지 7.8임을 특징으로 한다.

일 구현예에서, 조성물은 pH가 7.0 내지 7.8임을 특징으로 한다.

일 구현예에서, 조성물은 pH가 6.8 내지 7.4임을 특징으로 한다.

일 구현예에서, 조성물은 상기 소수성 라디칼이 화학식 I의 소수성 라디칼로부터 선택됨을 특징으로 하고 여기서 p는 1과 동일하며, x가 14 이하인 경우(x ≤ 14), r은 0 또는 1이다.

일 구현예에서, 조성물은 상기 소수성 라디칼이 화학식 I의 소수성 라디칼로부터 선택됨을 특징으로 하며 여기서 p는 1과 동일하고, x가 15 내지 16(15 ≤ x ≤ 16)인 경우, r은 1이다.

일 구현예에서, 조성물은 상기 소수성 라디칼이 화학식 I의 소수성 라디칼로부터 선택됨을 특징으로 하며 여기서 p는 1과 동일하고, x가 17 이상인 경우(17 ≤ x), r은 1이고 R은 에테르 또는 폴리에테르 라디칼이다.

일 구현예에서, 조성물은 상기 소수성 라디칼이 화학식 I의 소수성 라디칼로부터 선택됨을 특징으로 하며 여기서 p는 1과 동일한 경우, x는 17 내지 25(17 ≤ x ≤ 25)이다.

일 구현예에서, 조성물은 상기 소수성 라디칼이 다음 화학식 V로 나타낸, 화학식 I의 소수성 라디칼로부터 선택됨을 특징으로 하며 여기서 p는 1이다:

[화학식 V]

여기서, GpR, GpA, GpC, r 및 a는 상기 제공된 정의를 갖는다.

일 구현예에서, 조성물은 소수성 라디칼이 화학식 V의 라디칼임을 특징으로 하며 여기서 r은 1과 동일하고(r = 1), a는 0과 동일하다(a = 0).

일 구현예에서, 조성물은 소수성 라디칼이 화학식 V의 라디칼임을 특징으로 하며 여기서 r은 1과 동일하고(r = 1), a는 1과 동일하다(a = 1).

일 구현예에서, 조성물은 소수성 라디칼이 화학식 V의 라디칼임을 특징으로 하며 여기서 GpR은 화학식 II의 라디칼이다.

일 구현예에서, 조성물은 소수성 라디칼이 화학식 V의 라디칼임을 특징으로 하며 여기서 GpR은 화학식 II의 라디칼이고, 여기서 R은 2 내지 12개의 탄소 원자를 포함하는 2가 직쇄 알킬 라디칼이다.

일 구현예에서, 조성물은 소수성 라디칼이 화학식 V의 라디칼임을 특징으로 하며 여기서 GpR은 화학식 II의 라디칼이고 여기서 R은 2 내지 6개의 탄소 원자를 포함하는 2가 알킬 라디칼이다.

일 구현예에서, 조성물은 소수성 라디칼이 화학식 V의 라디칼임을 특징으로 하며 여기서 GpR은 화학식 II의 라디칼이고 여기서 R은 2 내지 6개의 탄소 원자를 포함하는 2가의 직쇄 알킬 라디칼이다.

일 구현예에서, 조성물은 소수성 라디칼이 화학식 V의 라디칼임을 특징으로 하며 여기서 GpR은 화학식 II의 라디칼이고 여기서 R은 2 내지 4개의 탄소 원자를 포함하는 2가 알킬 라디칼이다.

일 구현예에서, 조성물은 소수성 라디칼이 화학식 V의 라디칼임을 특징으로 하며 여기서 GpR은 화학식 II의 라디칼이고 여기서 R은 2개의 탄소 원자를 포함하는 2가 알킬 라디칼이다.

일 구현예에서, 조성물은 소수성 라디칼이 화학식 V의 라디칼임을 특징으로 하며 여기서 GpR은 화학식 II'의 라디칼이다.

일 구현예에서, 조성물은 소수성 라디칼이 화학식 V의 라디칼임을 특징으로 하며 여기서 GpR은 화학식 II의 라디칼이고, 여기서 R은 2 내지 5개의 탄소 원자를 포함하고 하나 이상의 아미드 기능(-CONH₂)을 지닌 2가 알킬 라디칼이다.

일 구현예에서, 조성물은 소수성 라디칼이 화학식 V의 라디칼임을 특징으로 하며 여기서 GpR은 화학식 II의 라디칼이고 여기서 R은 2 내지 5개의 탄소 원자를 포함하고 하나 이상의 아미드 기능(-CONH₂)을 지닌 2가의 선형 알킬 라디칼이다.

일 구현예에서, 조성물은 소수성 라디칼이 화학식 V의 라디칼임을 특징으로 하며 여기서 GpR은 화학식 II의 라디칼이고 여기서 R은 하기 식으로 나타낸 라디칼로 이루어진 그룹으로부터 선택된다:

일 구현예에서, 조성물은 라디칼 R이 아미드 기능(-CONH₂)과 관련하여 델타 또는 엡실론 위치(또는 4 또는 5번 위치)에서 탄소가 지닌 아미드 기능을 통해 코-폴리아미노산에 결합됨을 특징으로 한다.

일 구현예에서, 조성물은 소수성 라디칼이 화학식 V의 라디칼이고 여기서 GpR이 화학식 II 또는 II'의 라디칼이며, 여기서 R이 4 내지 14개의 탄소 원자 및 1 내지 5개의 산소 원자를 포함하는 치환되지 않은 직쇄 에테르 또는 폴리에테르 라디칼임을 특징으로 한다.

일 구현예에서, 조성물은 소수성 라디칼이 화학식 V의 라디칼이고 여기서 GpR이 화학식 II 또는 II'의 라디칼이며, 여기서 R이 에테르 라디칼임을 특징으로 한다.

일 구현예에서, 조성물은 소수성 라디칼이 화학식 V의 라디칼이고 여기서 GpR이 화학식 II 또는 II'의 라디칼이며, 여기서 R이 4 내지 6개의 탄소 원자를 포함하는 에테르 라디칼임을 특징으로 한다.

일 구현예에서, 조성물은 소수성 라디칼이 화학식 V의 라디칼이고 여기서 GpR이 화학식 II의 라디칼이며, 여기서 R이 화학식 X7의

로 나타낸 에테르 라디칼임을 특징으로 한다.

일 구현예에서, 조성물은 소수성 라디칼이 화학식 V의 라디칼이고 여기서 GpR이 화학식 II 또는 II'의 라디칼이며, 여기서 R이 폴리에테르 라디칼임을 특징으로 한다.

일 구현예에서, 조성물은 소수성 라디칼이 화학식 V의 라디칼이고 여기서 GpR이 화학식 II 또는 II'의 라디칼이며, 여기서 R이 6 내지 10개의 탄소 원자 및 2 내지 3개의 산소 원자를 포함하는 직쇄 폴리에테르 라디칼임을 특징으로 한다.

일 구현예에서, 조성물은 소수성 라디칼이 화학식 V의 라디칼이고 여기서 GpR이 화학식 II 또는 II'의 라디칼이며, 여기서 R이 하기 화학식으로 나타낸 라디칼로 이루어진 그룹으로부터 선택된 폴리에테르 라디칼임을 특징으로 한다:

일 구현예에서, 조성물은 소수성 라디칼이 화학식 V의 라디칼이고 여기서 GpR이 화학식 II 또는 II'의 라디칼이며, 여기서 R이 화학식 X3의 라디칼임을 특징으로 한다.

일 구현예에서, 조성물은 소수성 라디칼이 화학식 V의 라디칼이고 여기서 GpR이 화학식 II 또는 II'의 라디칼이며, 여기서 R이 화학식 X4의 라디칼임을 특징으로 한다.

일 구현예에서, 조성물은 소수성 라디칼이 화학식 V의 라디칼이고 여기서 GpR이 화학식 II 또는 II'의 라디칼이며, 여기서 R이 화학식 X5의 라디칼임을 특징으로 한다.

일 구현예에서, 조성물은 소수성 라디칼이 화학식 V의 라디칼이고 여기서 GpR이 화학식 II 또는 II'의 라디칼이며, 여기서 R이 화학식 X6의 라디칼임을 특징으로 한다.

일 구현예에서, 조성물은 소수성 라디칼이 화학식 V의 라디칼이고 여기서 GpR이 화학식 II의 라디칼이며, 여기서 R은 하기 화학식으로 나타낸 라디칼로 이루어진 그룹으로부터 선택된 폴리에테르 라디칼임을 특징으로 한다:

일 구현예에서, 조성물은 소수성 라디칼이 화학식 V의 라디칼이고 여기서 GpR이 화학식 II의 라디칼이며, 여기서 R은 화학식 X5의 폴리에테르 라디칼임을 특징으로 한다.

일 구현예에서, 조성물은 소수성 라디칼이 화학식 V의 라디칼이고 여기서 GpR이 화학식 II의 라디칼이며, 여기서 R은 화학식 X6의 폴리에테르 라디칼임을 특징으로 한다.

일 구현예에서, 조성물은 소수성 라디칼이 화학식 V의 라디칼이고 여기서 a가 0과 동일하고(a = 0) r이 0과 동일함(r = 0)을 특징으로 한다.

일 구현예에서, 조성물은 소수성 라디칼이 화학식 V의 라디칼이고 여기서 a가 1과 동일하고(a = 1), 화학식 III'의 라디칼 GpA가 하기 화학식으로 나타낸 라디칼로 이루어진 그룹으로부터 선택됨을 특징으로 한다:

일 구현예에서, 조성물은 소수성 라디칼이 화학식 V의 라디칼이고 여기서 a가 1과 동일하고(a = 1), 화학식 III'의 라디칼 GpA가 화학식 Y1의 라디칼임을 특징으로 한다.

일 구현예에서, 조성물은 소수성 라디칼이 화학식 V의 라디칼이고 여기서 a가 1과 동일하고(a = 1), 화학식 III'의 라디칼 GpA가 화학식 Y2의 라디칼임을 특징으로 한다.

일 구현예에서, 조성물은 소수성 라디칼이 화학식 V의 라디칼이고 여기서 a가 1과 동일하고(a = 1), 화학식 III'의 라디칼 GpA가 화학식 Y3의 라디칼임을 특징으로 한다.

일 구현예에서, 조성물은 소수성 라디칼이 화학식 V의 라디칼이고 여기서 a가 1과 동일하고(a = 1), 화학식 III'의 라디칼 GpA가 화학식 Y4의 라디칼임을 특징으로 한다.

일 구현예에서, 조성물은 소수성 라디칼이 화학식 V의 라디칼이고 여기서 a가 1과 동일하고(a = 1), 화학식 III'의 라디칼 GpA가 화학식 Y5의 라디칼임을 특징으로 한다.

일 구현예에서, 조성물은 소수성 라디칼이 화학식 V의 라디칼이고 여기서 a가 1과 동일하고(a = 1), 화학식 III'의 라디칼 GpA가 화학식 Y6의 라디칼임을 특징으로 한다.

일 구현예에서, 조성물은 소수성 라디칼이 화학식 V의 라디칼이고 여기서 a가 1과 동일하고(a = 1), 화학식 III'의 라디칼 GpA가 화학식 Y7의 라디칼임을 특징으로 한다.

일 구현예에서, 조성물은 소수성 라디칼이 화학식 V의 라디칼이고 여기서 a가 1과 동일하고(a = 1), 화학식 III'의 라디칼 GpA가 화학식 Y8의 라디칼임을 특징으로 한다.

일 구현예에서, 조성물은 소수성 라디칼이 화학식 V의 라디칼이고 여기서 화학식 IV의 라디칼 GpC가 이후 나타낸 화학식 IVa, IVb 또는 IVc의 라디칼로 이루어진 그룹으로부터 선택됨을 특징으로 한다:

일 구현예에서, 조성물은 소수성 라디칼이 화학식 V의 라디칼이고 여기서 라디칼 GpC가 화학식 IVa의 것임을 특징으로 한다.

일 구현예에서, 조성물은 소수성 라디칼이 화학식 V의 라디칼이고 여기서 화학식 IV의 라디칼 GpC가 이후 나타낸, 화학식 IVd, IVe 및 IVf에 각각 상응하는 화학식 IVa, IVb 또는 IVc의 라디칼로 이루어진 그룹으로부터 선택되며 여기서 b는 0과 동일함을 특징으로 한다:

일 구현예에서, 조성물은 소수성 라디칼이 화학식 V의 라디칼이고 여기서 라디칼 GpC는 화학식 IV 또는 IVA에 상응하고, 여기서 b는 0이며, 화학식 IVd에 상응한다.

일 구현예에서, 조성물은 소수성 라디칼이 화학식 V의 라디칼이고 여기서 화학식 IV(여기서 b는 1이다)의 라디칼 GpC는 B가 하기 화학식으로 나타낸 라디칼로 이루어진 그룹으로부터 선택된 아미노산 잔기인 라디칼로 이루어진 그룹으로부터 선택된다:

일 구현예에서, 조성물은 소수성 라디칼이 화학식 V의 라디칼이고 여기서 화학식의 라디칼 GpC는 화학식 IV 또는 IVa에 상응하고, 여기서 b는 1이며, B가 하기 화학식으로 나타낸 라디칼로 이루어진 그룹으로부터 선택된 아미노산인 라디칼로 이루어진 그룹으로부터 선택된다:

일 구현예에서, 조성물은 소수성 라디칼이 화학식 V의 라디칼이고 여기서 화학식 IV의 라디칼 GpC는 Cx가 직쇄 알킬 라디칼로 이루어진 그룹으로부터 선택된 라디칼로 이루어진 그룹으로부터 선택됨을 특징으로 한다.

일 구현예에서, 조성물은 소수성 라디칼이 화학식 V의 라디칼이고 여기서 화학식 IV의 라디칼 GpC는 Cx가 측쇄 알킬 라디칼로 이루어진 그룹으로부터 선택된 라디칼로 이루어진 그룹으로부터 선택됨을 특징으로 한다.

일 구현예에서, 조성물은 소수성 라디칼이 화학식 V의 라디칼이고 여기서 화학식 IV의 라디칼 GpC는 Cx가 11 내지 14개의 탄소 원자를 포함하는 알킬 라디칼로 이루어진 그룹으로부터 선택된 알킬 라디칼로 이루어진 그룹으로부터 선택됨을 특징으로 한다.

일 구현예에서, 조성물은 소수성 라디칼이 화학식 V의 라디칼이고 여기서 화학식 IV의 라디칼 GpC는 Cx가 하기 화학식으로 나타낸 라디칼로 이루어진 그룹으로부터 선택된 라디칼로 이루어진 그룹으로부터 선택됨을 특징으로 한다.

일 구현예에서, 조성물은 소수성 라디칼이 화학식 V의 라디칼이고 여기서 화학식 IV의 라디칼 GpC는 Cx가 15 내지 16개의 탄소 원자를 포함하는 알킬 라디칼로 이루어진 그룹으로부터 선택된 라디칼로 이루어진 그룹으로부터 선택됨을 특징으로 한다.

일 구현예에서, 조성물은 소수성 라디칼이 화학식 V의 라디칼이고 여기서 화학식 IV의 라디칼 GpC는 하기 화학식으로 나타낸 라디칼로 이루어진 그룹으로부터 선택된 라디칼로 이루어진 그룹으로부터 선택됨을 특징으로 한다:

일 구현예에서, 조성물은 소수성 라디칼이 화학식 V의 라디칼이고 여기서 화학식 IV의 라디칼 GpC는 Cx가 17 내지 25개의 탄소 원자를 포함하는 알킬 라디칼로 이루어진 그룹으로부터 선택된 라디칼로 이루어진 그룹으로부터 선택됨을 특징으로 한다.

일 구현예에서, 조성물은 소수성 라디칼이 화학식 V의 라디칼이고 여기서 라디칼 IV의 라디칼 GpC는 Cx가 17 내지 18개의 탄소 원자를 포함하는 알킬 라디칼로 이루어진 그룹으로부터 선택된 라디칼로 이루어진 그룹으로부터 선택됨을 특징으로 한다.

일 구현예에서, 조성물은 소수성 라디칼이 화학식 V의 라디칼이고 여기서 화학식 IV의 라디칼 GpC는 Cx가 하기 화학식으로 나타낸 알킬 라디칼로 이루어진 그룹으로부터 선택된 라디칼로 이루어진 그룹으로부터 선택됨을 특징으로 한다:

일 구현예에서, 조성물은 소수성 라디칼이 화학식 V의 라디칼이고 여기서 화학식 IV의 라디칼 GpC는 Cx가 18 내지 25개의 탄소 원자를 포함하는 알킬 라디칼로 이루어진 그룹으로부터 선택된 라디칼로 이루어진 그룹으로부터 선택됨을 특징으로 한다.

일 구현예에서, 조성물은 상기 화학식 I의 소수성 라디칼이 다음 화학식 VI으로 나타낸, 화학식 I의 소수성 라디칼로부터 선택되고 여기서 a는 1이고 p는 2임을 특징으로 한다:

[화학식 VI]

여기서

GpR, GpA, GpC, r 및 a는 상기 제공된 정의를 갖는다.

일 구현예에서, 조성물은 소수성 라디칼이 화학식 VI의 라디칼이고 여기서 r은 1임을 특징으로 한다.

일 구현예에서, 조성물은 소수성 라디칼이 화학식 VI의 라디칼이고 여기서 라디칼 GpR은 화학식 II의 라디칼임을 특징으로 한다.

일 구현예에서, 조성물은 소수성 라디칼이 화학식 VI의 라디칼이고 여기서 GpR은 화학식 II의 라디칼이며 여기서 R은 2 내지 12개의 탄소 원자를 포함하는 직쇄 알킬 라디칼임을 특징으로 한다.

일 구현예에서, 조성물은 소수성 라디칼이 화학식 VI의 라디칼이고 여기서 GpR은 화학식 II의 라디칼이며 여기서 R은 2 내지 6개의 탄소 원자를 포함하는 2가의 알킬 라디칼임을 특징으로 한다.

일 구현예에서, 조성물은 소수성 라디칼이 화학식 VI의 라디칼이고 여기서 GpR은 화학식 II의 라디칼이며 여기서 R은 2 내지 6개의 탄소 원자를 포함하는 2가의 직쇄 알킬 라디칼임을 특징으로 한다.

일 구현예에서, 조성물은 소수성 라디칼이 화학식 VI의 라디칼이고 여기서 GpR은 화학식 II의 라디칼이며 여기서 R은 2 내지 4개의 탄소 원자를 포함하는 알킬 라디칼임을 특징으로 한다.

일 구현예에서, 조성물은 소수성 라디칼이 화학식 VI의 라디칼이고 여기서 GpR은 화학식 II의 라디칼이며 여기서 R은 2 내지 4개의 탄소 원자를 포함하는 2가의 직쇄 알킬 라디칼임을 특징으로 한다.

일 구현예에서, 조성물은 소수성 라디칼이 화학식 VI의 라디칼이고 여기서 GpR은 화학식 II의 라디칼이며 여기서 R은 2개의 탄소 원자를 포함하는 2가의 직쇄 알킬 라디칼임을 특징으로 한다.

일 구현예에서, 조성물은 소수성 라디칼이 화학식 VI의 라디칼이고 여기서 GpR은 화학식 II'의 라디칼임을 특징으로 한다.

일 구현예에서, 조성물은 소수성 라디칼이 화학식 VI의 라디칼이고 여기서 GpR은 화학식 II의 라디칼이며 여기서 R은 2 내지 5개의 탄소 원자를 포함하고 하나 이상의 아미드 기능(-CONH2)를 지닌 2가의 알킬 라디칼임을 특징으로 한다.

일 구현예에서, 조성물은 소수성 라디칼이 화학식 VI의 라디칼이고 여기서 GpR은 화학식 II의 라디칼이며 여기서 R은 2 내지 5개의 탄소 원자를 포함하고 하나 이상의 아미드 기능(-CONH2)을 지닌 2가의 직쇄 알킬 라디칼임을 특징으로 한다.

일 구현예에서, 조성물은 소수성 라디칼이 화학식 VI의 라디칼이고 여기서 GpR은 화학식 II의 라디칼이고 여기서 R은 하기 화학식으로 나타낸 라디칼로 이루어진 그룹으로부터 선택된 라디칼임을 특징으로 한다:

일 구현예에서, 조성물은 소수성 라디칼이 화학식 VI의 라디칼이고 여기서 상기 GpR 라디칼을 코-폴리아미노산에 결합시키는 아미드 기능의 형성에 관여하는 GpR 라디칼의 아민 기능이 아미드 기능(-CONH2)과 관련하여 델타 또는 엡실론 위치(또는 4번 또는 5번 위치)에서의 탄소에 의해 지니게 됨을 특징으로 한다.

일 구현예에서, 조성물은 소수성 라디칼이 화학식 VI의 라디칼이고 여기서 GpR은 화학식 II의 라디칼이며 여기서 R은 4 내지 14개의 탄소 원자 및 1 내지 5개의 산소 원자를 포함하는 치환되지 않은 직쇄 에테르 또는 폴리에테르 라디칼임을 특징으로 한다.

일 구현예에서, 조성물은 소수성 라디칼이 화학식 VI의 라디칼이고 여기서 GpR은 화학식 II의 라디칼이며 여기서 R은 에테르 라디칼임을 특징으로 한다.

일 구현예에서, 조성물은 에테르 라디칼 R이 4 내지 6개의 탄소 원자를 포함하는 라디칼임을 특징으로 한다.

일 구현예에서, 조성물은 에테르 라디칼이 화학식 X7의

임을 특징으로 한다.

일 구현예에서, 조성물은 소수성 라디칼이 화학식 VI의 라디칼이고 여기서 GpR은 화학식 II의 라디칼이며 여기서 R은 폴리에테르 라디칼임을 특징으로 한다.

일 구현예에서, 조성물은 소수성 라디칼이 화학식 IV의 라디칼이고, 여기서 GpR이 화학식 II의 라디칼이며, 여기서 R은 6 내지 10개의 탄소 원자 및 2 내지 3개의 산소 원자를 포함하는 직쇄 폴리에테르 라디칼임을 특징으로 한다.

일 구현예에서, 조성물은 소수성 라디칼이 화학식 VI의 라디칼이고 여기서 GpR은 화학식 II의 라디칼이며 여기서 R은 하기 화학식으로 나타낸 라디칼로 이루어진 그룹으로부터 선택된 직쇄 폴리에테르 라디칼임을 특징으로 한다:

일 구현예에서, 조성물은 소수성 라디칼이 화학식 VI의 라디칼이고 여기서 GpR은 화학식 II의 라디칼이며 여기서 R은 화학식 X3의 직쇄 폴리에테르 라디칼임을 특징으로 한다.

일 구현예에서, 조성물은 소수성 라디칼이 화학식 VI의 라디칼이고 여기서 GpR은 화학식 II의 라디칼이며 여기서 R은 화학식 X4의 직쇄 폴리에테르 라디칼임을 특징으로 한다.

일 구현예에서, 조성물은 소수성 라디칼이 화학식 VI의 라디칼이고 여기서 GpR은 화학식 II의 라디칼이며 여기서 R은 화학식 X5의 직쇄 폴리에테르 라디칼임을 특징으로 한다.

일 구현예에서, 조성물은 소수성 라디칼이 화학식 VI의 라디칼이고 여기서 GpR은 화학식 II의 라디칼이며 여기서 R은 화학식 X6의 직쇄 폴리에테르 라디칼임을 특징으로 한다.

일 구현예에서, 조성물은 소수성 라디칼이 화학식 VI의 라디칼이고 여기서 화학식 III의 라디칼 GpR은 이후 나타낸 화학식 IIIa, IIIb 및 IIIc의 라디칼로 이루어진 그룹으로부터 선택됨을 특징으로 한다:

일 구현예에서, 조성물은 소수성 라디칼이 화학식 VI의 라디칼이고 여기서 화학식 III의 라디칼 GpA는 이후 나타낸 화학식 IIIb의 라디칼임을 특징으로 한다:

일 구현예에서, 조성물은 소수성 라디칼이 화학식 VI의 라디칼이고 여기서 화학식 III의 라디칼 GpR은 화학식 IIIc의 라디칼임을 특징으로 한다.

일 구현예에서, 조성물은 소수성 라디칼이 화학식 VI의 라디칼이고 여기서 화학식 IV의 라디칼 GpR은 이후 나타낸 화학식 IVa, IVb 및 IVc의 라디칼로 이루어진 그룹으로부터 선택됨을 특징으로 한다:

일 구현예에서, 조성물은 소수성 라디칼이 화학식 VI의 라디칼이고 여기서 라디칼 GpC가 화학식 IVa의 라디칼임을 특징으로 한다.

일 구현예에서, 조성물은 소수성 라디칼이 화학식 VI의 라디칼이고 여기서 화학식 IV의 라디칼 GpC가 이후 나타낸 화학식 IVd, IVe 및 IVf에 각각 상응하는, 화학식 IVa, IVb 및 IVc의 라디칼(여기서 b는 0과 동일하다)로 이루어진 그룹으로부터 선택됨을 특징으로 한다:

일 구현예에서, 조성물은 소수성 라디칼이 화학식 VI의 라디칼이고 여기서 라디칼 GpC가 화학식 IV 또는 IVa(여기서 b는 0이다)에 상응하고, 화학식 IVd에 상응함을 특징으로 한다.

일 구현예에서, 조성물은 소수성 라디칼이 화학식 VI의 라디칼이고 여기서 화학식 IV의 라디칼 GpC는 Cx가 9 내지 15개의 탄소 원자를 포함하는 직쇄 알킬 라디칼로 이루어진 그룹으로부터 선택되는 라디칼로 이루어진 그룹으로부터 선택됨을 특징으로 한다.

일 구현예에서, 조성물은 소수성 라디칼이 화학식 VI의 라디칼이고 여기서 화학식 IV의 라디칼 GpC는 Cx가 9 내지 15개의 탄소 원자를 포함하는 측쇄 알킬 라디칼로 이루어진 그룹으로부터 선택되는 라디칼로 이루어진 그룹으로부터 선택됨을 특징으로 한다.

일 구현예에서, 조성물은 소수성 라디칼이 화학식 VI의 라디칼이고 여기서 화학식 IV의 라디칼 GpC는 Cx가 9 내지 10개의 탄소 원자를 포함하는 알킬 라디칼로 이루어진 그룹으로부터 선택되는 라디칼로 이루어진 그룹으로부터 선택됨을 특징으로 한다.

일 구현예에서, 조성물은 소수성 라디칼이 화학식 VI의 라디칼이고 여기서 화학식 IV의 라디칼 GpC는 Cx가 11 내지 15개의 탄소 원자를 포함하는 알킬 라디칼로 이루어진 그룹으로부터 선택되는 라디칼로 이루어진 그룹으로부터 선택됨을 특징으로 한다.

일 구현예에서, 조성물은 소수성 라디칼이 화학식 VI의 라디칼이고 여기서 화학식 IV의 라디칼 GpC는 Cx가 11 내지 13개의 탄소 원자를 포함하는 알킬 라디칼로 이루어진 그룹으로부터 선택되는 라디칼로 이루어진 그룹으로부터 선택됨을 특징으로 한다.

일 구현예에서, 조성물은 소수성 라디칼이 화학식 VI의 라디칼이고 여기서 화학식 IV의 라디칼 GpC는 Cx가 하기 화학식으로 나타낸 라디칼로 이루어진 그룹으로부터 선택되는 라디칼로 이루어진 그룹으로부터 선택됨을 특징으로 한다:

일 구현예에서, 조성물은 소수성 라디칼이 화학식 VI의 라디칼이고 여기서 화학식 IV의 라디칼 GpC는 Cx가 14 또는 15개의 탄소 원자를 포함하는 알킬 라디칼로 이루어진 그룹으로부터 선택되는 라디칼로 이루어진 그룹으로부터 선택됨을 특징으로 한다.

카복실레이트 전하 및 적어도 하나의 화학식 I의 소수성 라디칼을 지닌 코-폴리아미노산은 또한 본 명세서에서 "코-폴리아미노산"으로 지칭될 수 있다.

일 구현예에서, 조성물은 카복실레이트 전하 및 소수성 라디칼을 지닌 코-폴리아미노산이 다음의 화학식 VIIa의 코-폴리아미노산으로부터 선택됨을 특징으로 한다:

[화학식 VIIa]

여기서,

● D는, 독립적으로, -CH₂- 그룹(아스파르틱 단위) 또는 -CH₂-CH₂- 그룹(글루타믹 단위)을 나타내고,

● Hy는 화학식 I, V 또는 VI의 소수성 라디칼로부터 선택된 소수성 라디칼이며, 여기서 r은 1이고 GpR는 화학식 II의 라디칼이며,

● X는 H 또는 금속 양이온을 포함하는 그룹으로부터 선택된 양이온성 실체이고;

● n + m은 코-폴리아미노산의 중합도 DP, 다시 말해서, 코-폴리아미노산 쇄당 단량체 단위의 평균 수를 나타내며 5 ≤ n+m ≤ 250이고; R'1은 H, C2 내지 C10 직쇄 아실 그룹, C4 내지 C10 측쇄 아실 그룹, 벤질, 말단 "아미노산" 단위 및 피로글루타메이트로 이루어진 그룹으로부터 선택된 라디칼이고,

● R'2는 -NR'R" 라디칼이며, R' 및 R""는 동일하거나 상이하고, H, C2 내지 C10 직쇄 또는 측쇄 또는 사이클릭 알킬, 벤질로 이루어진 그룹으로부터 선택되고, 상기 알킬 R' 및 R"는 함께 임의로 하나 이상의 포화되고/되거나, 불포화되고/되거나 방향족 탄소 환을 형성하고/하거나 임의로 O, N 및 S로 이루어진 그룹으로부터 선택된 헤테로원자를 포함한다.

일 구현예에서, 본 발명에 따른 조성물은 카복실레이트 전하 및 소수성 라디칼을 지닌 코-폴리아미노산이 화학식 VIIa의 코-폴리아미노산으로부터 선택됨을 특징으로 하며: 여기서 Hy는 화학식 V 또는 화학식 VI의 라디칼이며, 여기서 r은 1이다.

일 구현예에서, 본 발명에 따른 조성물은 카복실레이트 전하 및 소수성 라디칼을 지닌 코-폴리아미노산이 화학식 VIIa의 코-폴리아미노산으로부터 선택됨을 특징으로 하며 여기서 Hy는 화학식 V 또는 화학식 VI의 라디칼이고, GpR은 화학식 II의 것이다.

일 구현예에서, 본 발명에 따른 조성물은 카복실레이트 전하 및 소수성 라디칼을 지닌 코-폴리아미노산이 화학식 VIIa의 코-폴리아미노산으로부터 선택됨을 특징으로 하며 여기서 Hy는 화학식 V의 소수성 라디칼이다.

일 구현예에서, 본 발명에 따른 조성물은 카복실레이트 전하 및 소수성 라디칼을 지닌 코-폴리아미노산이 화학식 VIIa의 코-폴리아미노산으로부터 선택됨을 특징으로 하며 여기서 Hy는 화학식 V이고 GpC는 화학식 IVd의 라디칼이다.

일 구현예에서, 본 발명에 따른 조성물은 카복실레이트 전하 및 소수성 라디칼을 지닌 코-폴리아미노산이 화학식 VIIa의 코-폴리아미노산으로부터 선택됨을 특징으로 하며 여기서 Hy는 화학식 V이고 GpC는 화학식 Vd의 라디칼이며 여기서 x는 13이다.

일 구현예에서, 본 발명에 따른 조성물은 카복실레이트 전하 및 소수성 라디칼을 지닌 코-폴리아미노산이 화학식 VIIa의 코-폴리아미노산으로부터 선택됨을 특징으로 하며 여기서 Hy는 화학식 V이고 GpC는 화학식 IVd의 라디칼이고 여기서 x는 15이다.

일 구현예에서, 본 발명에 따른 조성물은 카복실레이트 전하 및 소수성 라디칼을 지닌 코-폴리아미노산이 화학식 VIIa의 코-폴리아미노산으로부터 선택됨을 특징으로 하며 여기서 Hy는 화학식 V이고 GpC는 화학식 IVd의 라디칼이며, 여기서 x는 17이다.

일 구현예에서, 본 발명에 따른 조성물은 카복실레이트 전하 및 소수성 라디칼을 지닌 코-폴리아미노산이 화학식 VIIa의 코-폴리아미노산으로부터 선택됨을 특징으로 하며 여기서 Hy는 화학식 V이고 GpC는 화학식 IVd의 라디칼이며, 여기서 x는 19이다.

일 구현예에서, 본 발명에 따른 조성물은 카복실레이트 전하 및 소수성 라디칼을 지닌 코-폴리아미노산이 화학식 VIIa의 코-폴리아미노산으로부터 선택됨을 특징으로 하고 여기서 Hy는 화학식 VI의 라디칼이다.

일 구현예에서, 본 발명에 따른 조성물은 카복실레이트 전하 및 소수성 라디칼을 지닌 코-폴리아미노산이 화학식 VIIa의 코-폴리아미노산으로부터 선택됨을 특징으로 하며 여기서 Hy는 화학식 VI이고 여기서 r은 1이고, GpR은 화학식 II이다.

일 구현예에서, 본 발명에 따른 조성물은 카복실레이트 전하 및 소수성 라디칼을 지닌 코-폴리아미노산이 화학식 VIIa의 코-폴리아미노산으로부터 선택됨을 특징으로 하며 여기서 Hy는 화학식 VI의 라디칼이고 여기서 r은 1이며 GpR은 화학식 II의 라디칼이고 GpC의 경우 b는 0이다.

일 구현예에서, 본 발명에 따른 조성물은 카복실레이트 전하 및 소수성 라디칼을 지닌 코-폴리아미노산이 화학식 VIIa의 코-폴리아미노산으로부터 선택됨을 특징으로 하며 여기서 Hy는 화학식 VI이고 GpR은 화학식 II이며 GpC는 화학식 VId의 라디칼이다.

일 구현예에서, 본 발명에 따른 조성물은 카복실레이트 전하 및 소수성 라디칼을 지닌 코-폴리아미노산이 화학식 VIIa의 코-폴리아미노산으로부터 선택됨을 특징으로 하며 여기서 Hy는 화학식 VI이고, GPR은 화학식 II이며 GpC는 화학식 IVd의 라디칼이고 r은 1이다.

일 구현예에서, 본 발명에 따른 조성물은 카복실레이트 전하 및 소수성 라디칼을 지닌 코-폴리아미노산이 화학식 VIIa의 코-폴리아미노산으로부터 선택됨을 특징으로 하며 여기서 Hy는 화학식 VI이고 GpR은 화학식 II이며, 화학식 IVd이고, x는 11 내지 15이다.

일 구현예에서, 본 발명에 따른 조성물은 코-폴리아미노산이 아스파르테이트 단위를 포함하는 경우, 코-폴리아미노산이 또한 화학식 VIII 및/또는 화학식 VIII'의 단량체 단위를 포함할 수 있음을 특징으로 한다:

[화학식 VIII]

[화학식 VIII']

일 구현예에서, 조성물은

● R₁이 C₂ 내지 C₁₀ 직쇄 아실 그룹, C₄ 내지 C₁₀ 측쇄 아실 그룹, 벤질, 말단 "아미노산" 단위 및 피로글루타메이트로 이루어진 그룹으로부터 선택된 라디칼임을 특징으로 한다.

일 구현예에서, 조성물은 R₁이 C₂ 내지 C₁₀ 직쇄 아실 그룹 또는 C₄ 내지 C₁₀ 측쇄 아실 그룹으로 이루어진 그룹으로부터 선택된 라디칼임을 특징으로 한다.

일 구현예에서, 조성물은 카복실레이트 전하 및 소수성 라디칼을 지닌 코-폴리아미노산이 화학식 VIIa의 코-폴리아미노산으로부터 선택됨을 특징으로 하며 여기서 그룹 D는 그룹 -CH₂-(아스파르틱 단위)이다.

일 구현예에서, 조성물은 카복실레이트 전하 및 소수성 라디칼을 지닌 코-폴리아미노산이 화학식 VIIa의 코-폴리아미노산으로부터 선택됨을 특징으로 하며 여기서 D는 -CH₂-CH₂- 그룹(글루타믹 단위)이다.

일 구현예에서, 조성물은 소수성 라디칼의 수와 글루타믹 또는 아스파르틱 단위의 수 사이의 비 i가 0.007 내지 0.3임을 특징으로 한다.

일 구현예에서, 조성물은 소수성 라디칼의 수와 글루타믹 또는 아스파르틱 단위의 수 사이의 비 i가 0.01 내지 0.3임을 특징으로 한다.

일 구현예에서, 조성물은 소수성 라디칼의 수와 글루타믹 또는 아스파르틱 단위의 수 사이의 비 i가 0.02 내지 0.2임을 특징으로 한다.

일 구현예에서, 조성물은 소수성 라디칼이 화학식 VI에 상응하고 소수성 라디칼의 수와 글루타믹 또는 아스파르틱 단위의 수 사이의 비 i가 0.007 내지 0.15임을 특징으로 한다.

일 구현예에서, 조성물은 소수성 라디칼이 화학식 VI에 상응하고 소수성 라디칼의 수와 글루타믹 또는 아스파르틱 단위의 수 사이의 비 i가 0.01 내지 0.1임을 특징으로 한다.

일 구현예에서, 조성물은 소수성 라디칼이 화학식 VI에 상응하고 소수성 라디칼의 수와 글루타믹 또는 아스파르틱 단위의 수 사이의 비 i가 0.02 내지 0.08임을 특징으로 한다.

일 구현예에서, 조성물은 소수성 라디칼이 화학식 VI에 상응하고 여기서 라디칼 Cx는 9 내지 10개의 탄소 원자를 포함하며 소수성 라디칼의 수와 글루타믹 또는 아스파르틱 단위의 수 사이의 비 i가 0.03 내지 0.15임을 특징으로 한다.

일 구현예에서, 조성물은 소수성 라디칼이 화학식 VI에 상응하고 여기서 라디칼 Cx는 11 내지 12개의 탄소 원자를 포함하며 소수성 라디칼의 수와 글루타믹 또는 아스파르틱 단위의 수 사이의 비 i가 0.015 내지 0.1임을 특징으로 한다.

일 구현예에서, 조성물은 소수성 라디칼이 화학식 VI에 상응하고 여기서 라디칼 Cx는 11 내지 12개의 탄소 원자를 포함하며 소수성 라디칼의 수와 글루타믹 또는 아스파르틱 단위의 수 사이의 비 i가 0.02 내지 0.08임을 특징으로 한다.

일 구현예에서, 조성물은 소수성 라디칼이 화학식 VI에 상응하고 여기서 라디칼 Cx는 13 내지 15개의 탄소 원자를 포함하며 소수성 라디칼의 수와 글루타믹 또는 아스파르틱 단위의 수 사이의 비 i가 0.01 내지 0.1임을 특징으로 한다.

일 구현예에서, 조성물은 소수성 라디칼이 화학식 VI에 상응하고 여기서 라디칼 Cx는 13 내지 15개의 탄소 원자를 포함하며 소수성 라디칼의 수와 글루타믹 또는 아스파르틱 단위의 수 사이의 비 i가 0.01 내지 0.06임을 특징으로 한다.

일 구현예에서, 조성물은 소수성 라디칼이 화학식 V에 상응하고, 소수성 라디칼의 수와 글루타믹 또는 아스파르틱 단위의 수 사이의 비 i가 0.007 내지 0.3임을 특징으로 한다.

일 구현예에서, 조성물은 소수성 라디칼이 화학식 V에 상응하고 소수성 라디칼의 수와 글루타믹 또는 아스파르틱 단위의 수 사이의 비 i가 0.01 내지 0.3임을 특징으로 한다.

일 구현예에서, 조성물은 소수성 라디칼이 화학식 V에 상응하고, 소수성 라디칼의 수와 글루타믹 또는 아스파르틱 단위의 수 사이의 비 i가 0.015 내지 0.2임을 특징으로 한다.

일 구현예에서, 조성물은 소수성 라디칼이 화학식 V에 상응하고 여기서 라디칼 Cx는 11 내지 14개의 탄소 원자를 포함하며 소수성 라디칼의 수와 글루타믹 또는 아스파르틱 단위의 수 사이의 비 i가 0.1 내지 0.2임을 특징으로 한다.

일 구현예에서, 조성물은 소수성 라디칼이 화학식 V에 상응하고 여기서 라디칼 Cx는 15 내지 16개의 탄소 원자를 포함하며 소수성 라디칼의 수와 글루타믹 또는 아스파르틱 단위의 수 사이의 비 i가 0.04 내지 0.15임을 특징으로 한다.

일 구현예에서, 조성물은 소수성 라디칼이 화학식 V에 상응하고 여기서 라디칼 Cx는 17 내지 18개의 탄소 원자를 포함하며 소수성 라디칼의 수와 글루타믹 또는 아스파르틱 단위의 수 사이의 비 i가 0.02 내지 0.06임을 특징으로 한다.

일 구현예에서, 조성물은 소수성 라디칼이 화학식 V에 상응하고 여기서 라디칼 Cx는 19 내지 25개의 탄소 원자를 포함하며 소수성 라디칼의 수와 글루타믹 또는 아스파르틱 단위의 수 사이의 비 i가 0.01 내지 0.06임을 특징으로 한다.

일 구현예에서, 조성물은 소수성 라디칼이 화학식 V에 상응하고 여기서 라디칼 Cx는 19 내지 25개의 탄소 원자를 포함하며 소수성 라디칼의 수와 글루타믹 또는 아스파르틱 단위의 수 사이의 비 i가 0.01 내지 0.05임을 특징으로 한다.

일 구현예에서, 본 발명에 따른 조성물은 n + m이 10 내지 250임을 특징으로 한다.

일 구현예에서, 본 발명에 따른 조성물은 n + m이 10 내지 200임을 특징으로 한다.

일 구현예에서, 본 발명에 따른 조성물은 n + m이 15 내지 150임을 특징으로 한다.

일 구현예에서, 본 발명에 따른 조성물은 n + m이 15 내지 100임을 특징으로 한다.

일 구현예에서, 본 발명에 따른 조성물은 n + m이 15 내지 80임을 특징으로 한다.

일 구현예에서, 본 발명에 따른 조성물은 n + m이 15 내지 65임을 특징으로 한다.

일 구현예에서, 본 발명에 따른 조성물은 n + m이 20 내지 60임을 특징으로 한다.

일 구현예에서, 본 발명에 따른 조성물은 n + m이 20 내지 50임을 특징으로 한다.

일 구현예에서, 본 발명에 따른 조성물은 n + m이 20 내지 40임을 특징으로 한다.

본 발명은 또한 카복실레이트 전하 및 화학식 I의 소수성 라디칼을 지닌 상기 코-폴리아미노산 및 상기 소수성 라디칼의 전구체에 관한 것이다.

카복실레이트 전하 및 화학식 I의 소수성 라디칼을 지닌 코-폴리아미노산은 25℃의 온도에서 6 내지 8의 pH에서 및 100 mg/mL 미만의 농도에서 증류수 속에서 용해된다.

본 발명은 또한 안정한 주사가능한 조성물을 제조하는 방법에 관한 것이다.

"가용성"은 25℃에서 증류수 중 100 mg/mL 미만의 농도에서 선명한, 입자-유리된 용액의 제조를 가능하게 할 수 있음을 의미하는 것으로 이해된다.

"용액"은 2.9.20 점, 및 US <790> 하에서 약전(Pharmacopeia) EP 8.0에 따른 공정을 이용하여, 가시적인 입자가 없는 액체 조성물을 의미하는 것으로 이해된다.

"생리학적으로 안정한 조성물"은 특정의 저장 시간 후 특정 온도에서 유럽, 미국 및 국제 약전에 기술된 가시적 조사의 기준을 충족하는 조성물, 다시 말해서 선명하고 가시적인 입자가 없고 또한 무색인 용액을 의미하는 것으로 이해된다.

"화학적으로 안정한 조성물"은 특정의 저장 시간 후 특정의 온도에서 활성 성분의 최소의 회복을 나타내며 약제학적 생성물에 적용가능한 명세에 부합되는 조성물을 의미하는 것으로 이해된다.

단백질 또는 펩타이드의 안정성을 측정하기 위한 통상적인 방법은 또한 ThT로 지칭된, 티오플라빈 T의 보조로 피브릴의 형성을 측정하는 것으로 이루어진다. 이는 현상의 가속화를 가능하도록 하는 온도 및 교반 조건 하에서 형광성에 있어서의 증가를 측정함으로써 피브릴의 형성 전에 지체 시간(lag time)을 측정하는 것이 가능하도록 한다. 본 발명에 따른 조성물은 목적한 pH에서의 글루카곤의 지체 시간보다 명확하게 큰 피브릴의 형성 전 지체 시간을 갖는다.

"주사가능한 수용액"은 EP 및 US 약전의 조건을 충족하며, 주사되기에 충분히 액체인 수-계 용액을 의미하는 것으로 이해된다.

"글루타믹 또는 아스파르틱 단위로 이루어진 고-폴리아미노산"은 펩타이드 쇄에 의해 함께 결합된 글루탐산 또는 아스파르트산의 모노사이클릭 직쇄를 의미하는 것으로 이해되며, 상기 쇄는 하나의 말단의 카복실산에 상응하는 C-말단 부분 및 쇄의 다른 말단의 아민에 상응하는 N-말단부를 갖는다.

"알킬 라디칼"은 헤테로원자를 포함하지 않는 직쇄 또는 측쇄 탄소 쇄를 의미하는 것으로 이해된다.

코-폴리아미노산은 통계적 또는 차단 코-폴리아미노산이다.

코-폴리아미노산은 글루탐산 및/또는 아스파르트산 단위의 쇄내 통계적인 코-폴리아미노산이다.

화학식에서, *는 나타낸 상이한 요소의 부착 부위를 나타낸다.

화학식 I, V 및 VI에서, *는 코-폴리아미노산에 대한 소수성 라디칼의 부착 부위를 나타낸다. 라디칼 Hy는 아미드 기능을 통해 폴리아미노산에 부착된다.

화학식 II 및 II'에서, *는 좌측으로부터 우측까지 각각:

- 코-폴리아미노산에 대한 및

- a가 1인 경우 GpA에 대한, 또는 a가 0인 경우 GPC에 대한 GpR의 부착 부위를 나타낸다.

화학식 III 및 III'에서, *는 좌측으로부터 우측으로 각각:

- r이 1인 경우 GpR, 또는 r이 0인 경우 코-폴리아미노산에 대한, 및

- GpC에 대한 GpA의 부착 지점을 나타낸다.

화학식 IV에서, *는:

- a가 1인 경우 GpA, r이 1이고 a가 0인 경우 GpR, 또는 r이 0이고 a가 0인 경우 코-폴리아미노산에 대한 GpC의 부착 부위를 나타낸다.

상이한 그룹 GpR, GpA 및 GpC 사이의 모든 부착은 아미드 기능이다.

라디칼 Hy, GpR, GpA, GpC, 및 D는 각각 독립적으로 하나의 단량체 단위로부터 다음까지 동일하거나 상이하다.

코-폴리아미노산이 하나 이상의 아스파르틱 단위(들)을 포함하는 경우, 이(이들)은 구조적 재배열을 겪을 수 있다.

일 구현예에서, 본 발명에 따른 조성물은 수득된 코-폴리아미노산이 또한 화학식 VIII 및/또는 VIII'의 단량체 단위를 포함함을 특징으로 한다:

[화학식 VIII]

[화학식 VIII']

일 구현예에서, 화학식 I의 적어도 하나의 소수성 라디칼은 화학식 I의 라디칼로부터 선택되며 여기서, r은 1이고, a는 0이며, p는 1이고, GpR은 화학식 II에 상응하며 여기서 R은 -CH2-CH2-이고, GpC는 화학식 IVd에 상응하며 여기서 x는 15이고 Cx는

이다.

일 구현예에서, 화학식 I의 적어도 하나의 소수성 라디칼은 화학식 I의 라디칼로부터 선택되고 여기서, r은 1이고, a는 0이며, p는 1이고, GpR은 화학식 II에 상응하며 여기서 R은 -CH2-CH2-이고, GpC는 화학식 IVd에 상응하며 여기서 x는 16이고 Cx는

이다.

일 구현예에서, 화학식 I의 적어도 하나의 소수성 라디칼은 화학식 I의 라디칼로부터 선택되고 여기서 r은 1이고, a는 0이며, p는 1이고, GpR은 화학식 II에 상응하며 여기서 R은

이고, GpC는 화학식 IVd에 상응하며 여기서 x는 15이고 Cx는

이다.

이고, GpC는 화학식 IVd에 상응하며 여기서 x는 15이고 Cx는

이다.

이고, GpC는 화학식 IVd에상응하며 여기서 x는 15이고 Cx는

이다.

에 상응하고, GpC는 화학식 IVd에 상응하며 여기서 x는 17이고 Cx는

이다.

이며, GpC는 화학식 IVd에 상응하고 여기서 x는 19이고 Cx는

이다.

일 구현예에서, 화학식 I의 적어도 하나의 소수성 라디칼은 화학식 I의 라디칼로부터 선택되고 여기서 r은 1이고, a는 0이며, p는 1이고, GpR은 화학식 II에 상응하며 여기서 R은 -CH2-CH2-이고, GpC는 화학식 IVa에 상응하며 여기서 b는 1이고, B는

이며, x는 15이고 Cx는

이다.

이고, x는 11이고 Cx는

이다.

일 구현예에서, 화학식 I의 적어도 하나의 소수성 라디칼은 화학식 I의 라디칼로부터 선택되고 여기서 r은 1이고, a는 1이며, p는 2이고, GpR은 화학식 II에 상응하며 여기서 R은 -CH₂-CH₂-이고, GpA는 화학식 IIIb에 상응하며, GpC는 화학식 IVd에 상응하고 여기서 x는 9이고 Cx는

이다.

일 구현예에서, 화학식 I의 적어도 하나의 소수성 라디칼은 화학식 I의 라디칼로부터 선택되고 여기서 r은 1이고, a는 1이며, p는 2이고, GpR은 화학식 II에 상응하며 여기서 R은 -CH₂-CH₂-이고, GpA는 화학식 IIIb에 상응하며, GpC는 화학식 IVd에 상응하고 여기서 x는 11이며 Cx는

이다.

일 구현예에서, 화학식 I의 적어도 하나의 소수성 라디칼은 화학식 I의 라디칼로부터 선택되고 여기서 r은 1이고, a는 1이며, p는 2이고, GpR은 화학식 II에 상응하며 여기서 R은 -CH₂-CH₂-이고, GpA는 화학식 IIIb에 상응하며, GpC는 화학식 IVd에 상응하고 여기서 x는 13이며 Cx는

이다.

일 구현예에서, 화학식 I의 적어도 하나의 소수성 라디칼은 화학식 I의 라디칼로부터 선택되고 여기서 r은 1이고, a는 1이며, p는 2이고, GpR은 화학식 II에 상응하며 여기서 R은

이고, GpA는 화학식 IIIb에 상응하며, GpC는 화학식 IVd에 상응하고 여기서 x는 13이고 Cx는

이다.

일 구현예에서, 카복실레이트 전하 및 소수성 라디칼을 지닌 코-폴리아미노산은 화학식 I의 코-폴리아미노산이고 여기서 DP는 23 +/- 5이고, i는 0.05 +/- 0.02이며 화학식 I의 적어도 하나의 소수성 라디칼은 화학식 I의 라디칼이고 여기서 r은 1이고, a는 0이며, p는 1이고, GpR은 화학식 II에 상응하고 여기서 R은 -CH₂-CH₂이고, GpC는 화학식 IVd에 상응하며 여기서 x는 15이고 Cx는

이다.

중합도 DP 및 비 i의 값은 소수성 그룹으로부터 기원한 시그널의 통합을 코-폴리아미노산의 주요 쇄로부터 기원한 시그널의 통합과 비교함으로써 D₂0에서 ¹H NMR에 의해 평가된다.

일 구현예에서, 카복실레이트 전하 및 소수성 라디칼을 지닌 코-폴리아미노산은 화학식 VII 또는 VIIa의 코-폴리아미노산이고, 여기서 DP는 35 +/- 5이며, i는 0.05 +/- 0.02이고, 화학식 I의 적어도 하나의 소수성 라디칼은 화학식 I의 라디칼로부터 선택되고 여기서 r은 1이며, a는 0이고, p는 1이며, GpR은 화학식 II에 상응하고 여기서 R은 -CH₂-CH₂-이며, GpC는 화학식 IVd에 상응하고 여기서 x는 15이며 Cx는

이다.

일 구현예에서, 카복실레이트 전하 및 소수성 라디칼을 지닌 코-폴리아미노산은 화학식 VII 또는 VIIa의 코-폴리아미노산이고, 여기서 DP는 35 +/- 5이고, i는 0.10 +/- 0.02이며, 화학식 I의 적어도 하나의 소수성 라디칼은 화학식 I의 라디칼로부터 선택되고 여기서 r은 1이며, a는 0이고, p는 1이며, GpR은 화학식 II에 상응하고 여기서 R은 -CH₂-CH₂-이며, GpC는 화학식 IVd에 상응하고 여기서 x는 15이며 Cx는

이다.

일 구현예에서, 카복실레이트 전하 및 소수성 라디칼을 지닌 코-폴리아미노산은 화학식 VII 또는 VIIa의 코-폴리아미노산이고, 여기서 DP는 35 +/- 5이며, i는 0.05 +/- 0.02이고, 화학식 I의 적어도 하나의 소수성 라디칼은 화학식 I의 라디칼로부터 선택되고 여기서 r은 1이며, a는 0이고, p는 1이며, GpR은 화학식 II에 상응하고 여기서 R은 -CH₂-CH₂-이며, GpC는 화학식 IVd에 상응하고 여기서 x는 16이며 Cx는

이다.

일 구현예에서, 카복실레이트 전하 및 소수성 라디칼을 지닌 코-폴리아미노산은 화학식 VII 또는 VIIa의 코-폴리아미노산이며, 여기서 DP는 23 +/- 5이고, i는 0.05 +/- 0.02이며, 화학식 I의 적어도 하나의 소수성 라디칼은 화학식 I의 라디칼로부터 선택되고 여기서 r은 1이며, a는 0이고, p는 1이며, GpR은 화학식 II에 상응하고 여기서 R은

이며, GpC는 화학식 IVd에 상응하고 여기서 x는 17이며 Cx는

이다.

일 구현예에서, 카복실레이트 전하 및 소수성 라디칼을 지닌 코-폴리아미노산은 화학식 VII 또는 VIIa의 코-폴리아미노산이고, 여기서 DP는 22 +/- 5이며, i는 0.05 +/- 0.02이고, 화학식 I의 적어도 하나의 소수성 라디칼은 화학식 I의 라디칼로부터 선택되고 여기서 r은 1이며, a는 0이고, p는 1이며, GpR은 화학식 II에 상응하고 여기서 R은

이며, GpC는 화학식 IVd에 상응하고 여기서 x는 19이고 Cx는

이다.

일 구현예에서, 카복실레이트 전하 및 소수성 라디칼을 지닌 코-폴리아미노산은 화학식 VII 또는 VIIa의 코-폴리아미노산이고, 여기서 DP는 30 +/- 5이며, i는 0.10 +/- 0.03이고, 화학식 I의 적어도 하나의 소수성 라디칼은 화학식 I의 라디칼로부터 선택되고 여기서 r은 1이며, a는 0이고, p는 1이며, GpR은 화학식 II에 상응하고 여기서 R은

이며, GpC는 화학식 IVd에 상응하고 여기서 x는 15이며 Cx는

이다.

일 구현예에서, 카복실레이트 전하 및 소수성 라디칼을 지닌 코-폴리아미노산은 화학식 VII 또는 VIIa의 코-폴리아미노산이고, 여기서 DP는 23 +/- 5이고, i는 0.07 +/- 0.02이며, 화학식 I의 적어도 하나의 소수성 라디칼은 화학식 I의 라디칼로부터 선택되고 여기서 r은 1이고, a는 0이며, p는 2이고, GpR은 화학식 II에 상응하며 여기서 R은

이고, GpC는 화학식 IVd에 상응하며, 여기서 x는 15이고 Cx는

이다.

일 구현예에서, 카복실레이트 전하 및 소수성 라디칼을 지닌 코-폴리아미노산은 화학식 VII 또는 VIIa의 코-폴리아미노산이고, 여기서 DP는 23 +/- 5이고, i는 0.05 +/- 0.02이며, 화학식 I의 적어도 하나의 소수성 라디칼은 화학식 I의 라디칼로부터 선택되고 여기서 r은 1이고, a는 0이며, p는 1이고, GpR은 화학식 II에 상응하며 여기서 R은

이고, GpC는 화학식 IVd에 상응하며 여기서 x는 15이고 Cx는

이다.

일 구현예에서, 카복실레이트 전하 및 소수성 라디칼을 지닌 코-폴리아미노산은 화학식 VII 또는 VIIb의 코-폴리아미노산이고, 여기서 DP는 26 +/- 5이며, i는 0.04 +/- 0.02이고, 화학식 I의 적어도 하나의 소수성 라디칼은 화학식 I의 라디칼로부터 선택되고 여기서 r은 1이고, a는 0이며, p는 1이고, GpR은 화학식 II에 상응하며 여기서 R은 -CH₂-CH₂-이고, GpC는 화학식 IVa에 상응하고 여기서 b는 1이며 B는

이고, x는 15이며 Cx는

이다.

일 구현예에서, 카복실레이트 전하 및 소수성 라디칼을 지닌 코-폴리아미노산은 화학식 VII 또는 VIIa의 코-폴리아미노산이고, 여기서 DP는 35 +/- 10이고, i는 0.13 +/- 0.04이며, 화학식 I의 적어도 하나의 소수성 라디칼은 화학식 I의 라디칼로부터 선택되고 여기서 r은 1이고, a는 0이며, p는 1이고, GpR은 화학식 II에 상응하고 여기서 R은 -CH₂-CH₂-이며, GpC는 화학식 IVa에 상응하며 여기서 b는 1이고 B는

이고, x는 11이며 Cx는

이다.

일 구현예에서, 카복실레이트 전하 및 소수성 라디칼을 지닌 코-폴리아미노산은 화학식 VII 또는 VIIa의 코-폴리아미노산이고, 여기서 DP는 23 +/- 5이며, i는 0.05 +/- 0.02이고, 화학식 I의 적어도 하나의 소수성 라디칼은 화학식 I의 라디칼로부터 선택되고 여기서 r은 1이고, a는 0이며, p는 1이고, GpR은 화학식 II에 상응하고 여기서 R은

이고 GpC는 화학식 IVd에 상응하고 여기서 x는 19이며 Cx는

이다.

일 구현예에서, 카복실레이트 전하 및 소수성 라디칼을 지닌 코-폴리아미노산은 화학식 VII 또는 VIIb의 코-폴리아미노산이고, 여기서 DP는 25 +/- 5이며, 0.0033 ≤ i ≤ 0.05이고, 화학식 I의 적어도 하나의 소수성 라디칼은 화학식 I의 라디칼로부터 선택되고 여기서 r은 1이고, a는 0이며, p는 1이고, GpR은 화학식 II에 상응하고 여기서 R은 -CH₂-CH₂-이며, GpC는 화학식 IVd에 상응하고 여기서 x는 15이고 Cx는

이다.

일 구현예에서, 카복실레이트 전하 및 소수성 라디칼을 지닌 코-폴리아미노산은 화학식 VII 또는 VIIb의 코-폴리아미노산이고, 여기서 Dp는 30 +/- 5, 0.028 ≤ i ≤ 0.04이며, 화학식 I의 적어도 하나의 소수성 라디칼은 화학식 I의 라디칼로부터 선택되고 여기서 r은 1이고, a는 0이며, p는 1이고, GpR은 화학식 II에 상응하고 여기서 R은

이고, GpC는 화학식 IVd에 상응하고 여기서 x는 17이며 Cx는

이다.

일 구현예에서, 카복실레이트 전하 및 소수성 라디칼을 지닌 코-폴리아미노산은 화학식 VII 또는 VIIb의 코-폴리아미노산이고, 여기서 DP는 45 +/- 10이며, 0.018 ≤ i ≤ 0.028이고, 화학식 I의 적어도 하나의 소수성 라디칼은 화학식 I의 라디칼로부터 선택되고 여기서 r은 1이며, a는 0이고, p는 1이며, GpR은 화학식 II에 상응하고 여기서 R은

이며, GpC는 화학식 IVd에 상응하고 여기서 x는 17이며 Cx는

이다.

일 구현예에서, 카복실레이트 전하 및 소수성 라디칼을 지닌 코-폴리아미노산은 화학식 VII 또는 VIIb의 코-폴리아미노산이며, 여기서 DP는 60 +/- 10이고, 0.014 ≤ i ≤ 0.02이며, 화학식 I의 적어도 하나의 소수성 라디칼은 화학식 I의 라디칼로부터 선택되고 여기서 r은 1이며, a는 0이고, p는 1이며, GpR은 화학식 II에 상응하고 여기서 R은

이며, GpC는 화학식 IVd에 상응하고 여기서 x는 17이며 Cx는

이다.

일 구현예에서, 카복실레이트 전하 및 소수성 라디칼을 지닌 코-폴리아미노산은 화학식 VII 또는 VIIb의 코-폴리아미노산이고, 여기서 DP는 25 +/- 5이며, 0.033 ≤ i ≤ 0.05이고, 화학식 I의 적어도 하나의 소수성 라디칼은 화학식 I의 라디칼로부터 선택되고 여기서 r은 1이며, a는 0이고, p는 1이며, GpR은 화학식 II에 상응하고 여기서 R은

이며, GpC는 화학식 IVd에 상응하고 여기서 x는 19이고 Cx는

이다.

일 구현예에서, 카복실레이트 전하 및 소수성 라디칼을 지닌 코-폴리아미노산은 화학식 VII 또는 VIIb의 코-폴리아미노산이고, 여기서 DP는 22 +/- 5이며, i는 0.05 +/- 0.02이고, 화학식 I의 적어도 하나의 소수성 라디칼은 화학식 I의 라디칼로부터 선택되고 여기서 r은 1이며, a는 1이고, p는 2이며, GpR은 화학식 II에 상응하고 여기서 R은 -CH₂-CH₂-이며, GpA는 화학식 IIIb에 상응하고, GpC는 화학식 IVd에 상응하며 여기서 x는 11이며 Cx는

이다.

일 구현예에서, 카복실레이트 전하 및 소수성 라디칼을 지닌 코-폴리아미노산은 화학식 VII 또는 VIIa의 코-폴리아미노산이고, 여기서 DP는 35 +/- 5이고, i는 0.05 +/- 0.02이며, 화학식 I의 적어도 하나의 소수성 라디칼은 화학식 I의 라디칼로부터 선택되고 여기서 r은 1이고, a는 1이며, p는 2이고, GpR은 화학식 II에 상응하며 여기서 R은 -CH₂-CH₂-이고, GpA는 화학식 IIIb에 상응하며, GpC는 화학식 IVd에 상응하고 여기서 x는 11이고 Cx는

이다.

일 구현예에서, 카복실레이트 전하 및 소수성 라디칼을 지닌 코-폴리아미노산은 화학식 VII 또는 VIIa의 코-폴리아미노산이고, 여기서 DP는 65 +/- 5이고, i는 0.05 +/- 0.02이며, 화학식 I의 적어도 하나의 소수성 라디칼은 화학식 I의 라디칼로부터 선택되고 여기서 r은 1이고, a는 1이며, p는 2이고, GpR은 화학식 II에 상응하며 여기서 R은 -CH₂-CH₂-이고, GpA는 화학식 IIIb에 상응하고, GpC는 화학식 IVd에 상응하며 여기서 x는 11이고 Cx는

이다.

일 구현예에서, 카복실레이트 전하 및 소수성 라디칼을 지닌 코-폴리아미노산은 화학식 VII 또는 VIIa의 코-폴리아미노산이고, 여기서 DP는 22 +/- 5이며, i는 0.04 +/- 0.02이고, 화학식 I의 적어도 하나의 소수성 라디칼은 화학식 I의 라디칼로부터 선택되고 여기서 r은 1이고, a는 1이며, p는 2이고, GpR은 화학식 II에 상응하며 여기서 R은 -CH₂-CH2-이고, GpA는 화학식 IIIb에 상응하며, GpC는 화학식 IVd에 상응하고 여기서 x는 13이며 Cx는

이다.

일 구현예에서, 카복실레이트 전하 및 소수성 라디칼을 지닌 코-폴리아미노산은 화학식 VII 또는 VIIa의 코-폴리아미노산이고, 여기서 DP는 22 +/- 5이고, i는 0.03 +/- 0.01이며, 화학식 I의 적어도 하나의 소수성 라디칼은 화학식 I의 라디칼로부터 선택되고 여기서 r은 1이고, a는 1이며, p는 2이고, GpR은 화학식 II에 상응하고 여기서 R은

이며, GpA는 화학식 IIIb에 상응하고, GpC는 화학식 IVd에 상응하며 여기서 x는 13이고 Cx는

이다.

일 구현예에서, 카복실레이트 전하 및 소수성 라디칼을 지닌 코-폴리아미노산은 화학식 VII 또는 VIIa의 코-폴리아미노산이고, 여기서 DP는 22 +/- 5이고, i는 0.07 +/- 0.02이며, 화학식 I의 적어도 하나의 소수성 라디칼은 화학식 I의 라디칼로부터 선택되고 여기서 r은 1이고, a는 1이며, p는 2이고, GpR은 화학식 II에 상응하고 여기서 R은

이며, GpA는 화학식 IIIb에 상응하며, GpC는 화학식 IVd에 상응하고 여기서 x는 9이고 Cx는

이다.

일 구현예에서, 카복실레이트 전하 및 소수성 라디칼을 지닌 코-폴리아미노산은 화학식 VII 또는 VIIb의 코-폴리아미노산이고, 여기서 DP는 27 +/- 5이며, 0.031 ≤ i ≤ 0.045이고, 화학식 I의 적어도 하나의 소수성 라디칼은 화학식 I의 라디칼로부터 선택되고 여기서 r은 1이고, a는 1이며, p는 2이고, GpR은 화학식 II에 상응하고 여기서 R은 -CH₂-CH₂-이며, GpA는 화학식 IIIb에 상응하며, GpC는 화학식 IVd에 상응하고 여기서 x는 11이며 Cx는

이다.

일 구현예에서, 카복실레이트 전하 및 소수성 라디칼을 지닌 코-폴리아미노산은 화학식 VII 또는 VIIb의 코-폴리아미노산이고, 여기서 DP는 22 +/- 5이고, 0.037 ≤ i ≤ 0.055이며, 화학식 I의 적어도 하나의 소수성 라디칼은 화학식 I의 라디칼로부터 선택되고 여기서 r은 1이고, a는 1이며, p는 2이고, GpR은 화학식 II에 상응하고 여기서 R은 -CH₂-CH₂-이고, GpA는 화학식 IIIb에 상응하며, GpC는 화학식 IVd에 상응하고 여기서 x는 13이고 Cx는

이다.

일 구현예에서, 카복실레이트 전하 및 소수성 라디칼을 지닌 코-폴리아미노산은 화학식 VII 또는 VIIb의 코-폴리아미노산이고, 여기서 DP는 22 +/- 5이며, 0.037 ≤ i ≤ 0.055이고, 화학식 I의 적어도 하나의 소수성 라디칼은 화학식 I의 라디칼로부터 선택되고 여기서 r은 1이고, a는 1이며, p는 2이고, GpR은 화학식 II에 상응하고 여기서 R은

이다.

일 구현예에서, 카복실레이트 전하 및 소수성 라디칼을 지닌 코-폴리아미노산은 화학식 VII 또는 VIIb의 코-폴리아미노산이고, 여기서 DP는 60 +/- 10이며, 0.014 ≤ i ≤ 0.02이고, 화학식 I의 적어도 하나의 소수성 라디칼은 화학식 I의 라디칼로부터 선택되고 여기서 r은 1이고, a는 1이며, p는 2이고, GpR은 화학식 II에 상응하고 여기서 R은 -CH₂-CH₂-이고, GpA는 화학식 IIIb에 상응하며, GpC는 화학식 IVd에 상응하고 여기서 x는 13이며 Cx는

이다.

일 구현예에서, 카복실레이트 전하 및 소수성 라디칼을 지닌 코-폴리아미노산은 화학식 VII 또는 VIIb의 코-폴리아미노산이고, 여기서 DP는 40 +/- 5이며, 0.022 ≤ i ≤ 0.029이고, 화학식 I의 적어도 하나의 소수성 라디칼은 화학식 I의 라디칼로부터 선택되고 여기서 r은 1이고, a는 1이며, p는 2이고, GpR은 화학식 II에 상응하고 여기서 R은 -CH₂-CH₂-이며, GpA는 화학식 IIIb에 상응하며, GpC는 화학식 IVd에 상응하고 여기서 x는 13이며 Cx는

이다.

일 구현예에서, 본 발명에 따른 조성물은 코-폴리아미노산이 중합에 의해 수득된 폴리아미노산으로부터 기원함을 특징으로 한다.

일 구현예에서, 본 발명에 따른 조성물은 코-폴리아미노산이 글루탐산 N-카복시무수물(carboxyanhydride) 유도체 또는 아스파르트산 N-카복시무수물 유도체의 개환(ring-opening) 중합에 의해 수득된 폴리아미노산으로부터 기원함을 특징으로 한다.

일 구현예에서, 본 발명에 따른 조성물은 참고 논문 Adv. Polym. Sci. 2006, 202, 1-18 (Deming, T.J.)에 기술된 글루탐산 N-카복시무수물 유도체 또는 아스파르트산 N-카복시무수물 유도체의 중합에 의해 수득된 폴리아미노산으로부터 기원함을 특징으로 한다.

일 구현예에서, 본 발명에 따른 조성물은 코-폴리아미노산이 글루탐산 N-카복시무수물 유도체의 중합에 의해 수득된 폴리아미노산으로부터 기원함을 특징으로 한다.

일 구현예에서, 본 발명에 따른 조성물은 코-폴리아미노산이 메틸 글루타메이트 N-카복시무수물(GluOMe-NCA), 벤질 글루타메이트 N-카복시무수물(GluOBzl-NCA), 및 t-부틸 글루타메이트 N-카복시무수물(GluOtBu-NCA)로 이루어진 그룹으로부터 선택된 글루탐산 N-카복시무수물 유도체의 중합에 의해 수득된 폴리아미노산으로부터 기원함을 특징으로 한다.

일 구현예에서, 글루탐산 N-카복시무수물 유도체는 메틸 L-글루타메이트 N-카복시무수물(L-GluOMe-NCA)이다.

일 구현예에서, 글루탐산 N-카복시무수물 유도체는 벤질 L-글루타메이트 N-카복시무수물(L-GluOBzl-NCA)이다.

일 구현예에서, 본 발명에 따른 조성물은 코-폴리아미노산이 공보 Nature 1997, 390, 386-389 (Deming, T.J.)에 기술된 바와 같이, 개시제로서 전이 금속의 유기금속성 복합체를 사용하여 글루탐산 N-카복시무수물 유도체 또는 아스파르트산 N-카복시무수물 유도체의 중합에 의해 수득된 폴리아미노산으로부터 기원함을 특징으로 한다.

일 구현예에서, 본 발명에 따른 조성물은 코-폴리아미노산이 개시제로서 특허 제FR 2,801,226호(Touraud, F. et al.) 및 이러한 특허에 인용된 참고 문헌에 기술된 바와 같은 1차 아민 또는 암모니아를 사용하여 글루탐산 N-카복시무수물 유도체 또는 아스파르트산 N-카복시무수물 유도체의 중합화에 의해 수득된 폴리아미노산으로부터 기원함을 특징으로 한다.

일 구현예에서, 본 발명에 따른 조성물은 코-폴리아미노산이 개시제로서 공보 J. Am. Chem. Soc. 2007, 129, 14114-14115 (Lu H. et al.)에 기술된 바와 같은 헥사메틸디실라잔 또는 공보 J. Am. Chem. Soc. 2008, 130, 12562-12563 (Lu H. et al.)에 기술된 바와 같은 시알릴화된 아민을 사용하여 글루탐산 N-카복시무수물 유도체 또는 아스파르트산 N-카복시무수물 유도체의 중합에 의해 수득된 폴리아미노산으로부터 기원함을 특징으로 한다.

일 구현예에서, 본 발명에 따른 조성물은 이로부터 코-폴리아미노산이 기원하는 글루탐산 N-카복시무수물 유도체 또는 아스파르트산 N-카복시무수물 유도체의 중합에 의해 수득된 폴리아미노산을 합성하기 위한 방법이 에스테르 기능의 가수분해 단계를 포함함을 특징으로 한다.

일 구현예에서, 에스테르 기능의 이러한 가수분해 단계는 산성 매질 속에서의 가수분해 또는 알칼리성 매질 속에서의 가수분해로 이루어질 수 있거나 수소첨가반응에 의해 수행될 수 있다.

일 구현예에서, 에스테르 그룹의 이러한 가수분해 단계는 산성 매질 속에서의 가수분해이다.

일 구현예에서, 에스테르 그룹의 이러한 가수분해 단계는 수소첨가반응에 의해 수행된다.

일 구현예에서, 본 발명에 따른 조성물은 코-폴리아미노산이 고 분자량의 폴리아미노산의 해중합(depolymerization)에 의해 수득된 폴리아미노산으로부터 기원함을 특징으로 한다.

일 구현예에서, 본 발명에 따른 조성물은 코-폴리아미노산이 고 분자량의 폴리아미노산의 효소적 해중합에 의해 수득된 폴리아미노산으로부터 기원함을 특징으로 한다.

일 구현예에서, 본 발명에 따른 조성물은 코-폴리아미노산이 고 분자량의 폴리아미노산의 화학적 해중합에 의해 수득된 폴리아미노산으로부터 기원함을 특징으로 한다.

일 구현예에서, 본 발명에 따른 조성물은 코-폴리아미노산이 고 분자량의 폴리아미노산의 효소적 및 화학적 해중합에 의해 수득된 폴리아미노산으로부터 기원함을 특징으로 한다.

일 구현예에서, 본 발명에 따른 조성물은 코-폴리아미노산이 나트륨 폴리글루타메이트 및 나트륨 폴리아스파르테이트로 이루어진 그룹으로부터 선택된 고 분자량의 폴리아미노산의 해중합에 의해 수득된 폴리아미노산으로부터 기원함을 특징으로 한다.

일 구현예에서, 본 발명에 따른 조성물은 코-폴리아미노산이 고 분자량의 나트륨 폴리글루타메이트의 해중합에 의해 수득된 폴리아미노산으로부터 기원함을 특징으로 한다.

일 구현예에서, 본 발명에 따른 조성물은 코-폴리아미노산이 고 분자량의 나트륨 폴리아스파르테이트의 해중합에 의해 수득된 폴리아미노산으로부터 기원함을 특징으로 한다.

일 구현예에서, 본 발명에 따른 조성물은 코-폴리아미노산이 당해 분야의 기술자에게 잘 공지된, 아미드 결합을 형성하는 방법을 사용하여 소수성 그룹을 폴리-L-글루탐산 또는 폴리-L-아스파르트산으로 그래프트시켜 수득함을 특징으로 한다.

일 구현예에서, 본 발명에 따른 조성물은 코-폴리아미노산이 펩타이드 합성에 사용된, 아미드 결합을 형성하는 방법을 사용하여 소수성 그룹을 폴리-L-글루탐산 또는 폴리-L-아스파르트산으로 그래프트시켜 수득함을 특징으로 한다.

일 구현예에서, 본 발명에 따른 조성물은 특허 제FR 2,840,614호(Chan, Y.P.; et al.)에 기술된 바와 같이 소수성 그룹을 폴리-L-글루탐산 또는 폴리-L-아스파르트산으로 그래프트시켜 수득함을 특징으로 한다.

일 구현예에서, 카복실레이트 전하 및 소수성 라디칼을 지닌 코-폴리아미노산의 농도는 최대 40 mg/mL이다.

일 구현예에서, 카복실레이트 전하 및 소수성 라디칼을 지닌 코-폴리아미노산의 농도는 최대 30 mg/mL이다.

일 구현예에서, 카복실레이트 전하 및 소수성 라디칼을 지닌 코-폴리아미노산의 농도는 최대 20 mg/mL이다.

일 구현예에서, 카복실레이트 전하 및 소수성 라디칼을 지닌 코-폴리아미노산의 농도는 최대 10 mg/mL이다.

일 구현예에서, 카복실레이트 전하 및 소수성 라디칼을 지닌 코-폴리아미노산의 농도는 최대 5 mg/mL이다.

일 구현예에서, 카복실레이트 전하 및 소수성 라디칼을 지닌 코-폴리아미노산의 농도는 최대 2.5 mg/mL이다.

일 구현예에서, 카복실레이트 전하 및 소수성 라디칼을 지닌 코-폴리아미노산의 농도는 최대 1 mg/mL이다.

일 구현예에서, 카복실레이트 전하 및 소수성 라디칼을 지닌 코-폴리아미노산의 농도는 최대 0.5 mg/mL이다.

일 구현예에서, 글루카곤에 대한 카복실레이트 전하 및 소수성 라디칼을 지닌 코-폴리아미노산의 중량 비는 1.5 내지 25이다.

일 구현예에서, 글루카곤에 대한 카복실레이트 전하 및 소수성 라디칼을 지닌 코-폴리아미노산의 중량 비는 2 내지 20이다.

일 구현예에서, 글루카곤에 대한 카복실레이트 전하 및 소수성 라디칼을 지닌 코-폴리아미노산의 중량 비는 2.5 내지 15이다.

일 구현예에서, 글루카곤에 대한 카복실레이트 전하 및 소수성 라디칼을 지닌 코-폴리아미노산의 중량 비는 2 내지 10이다.

일 구현예에서, 글루카곤에 대한 카복실레이트 전하 및 소수성 라디칼을 지닌 코-폴리아미노산의 중량 비는 2 내지 7이다.

인간 글루카곤은 적용에 따라 변하는 용량에서 사용된다.

저혈당증의 응급 치료시, 추천되는 투여량은 근육내 또는 정맥내 경로로 1 mg(체중이 25 kg 미만인 경우 0.5 mg)이다. 이러한 투여는 1 mg/mL의 농도에서의 인간 글루카곤의 용액으로 수행한다.

펌프에서, 고려되는 1일 용량은 대략 0.5 mg이므로; 용액은 0.25 mg/mL 내지 5 mg/mL의 인간 글루카곤을 포함할 수 있다.

일 구현예에서, 용액은 0.5 mg/mL 내지 3 mg/mL의 인간 글루카곤을 포함할 수 있다.

비만의 치료 시, 고려되는 1일 용량은 대략 0.5 mg이므로, 용액은 0.25 mg/mL 내지 5 mg/mL의 인간 글루카곤을 포함할 수 있다.

일 구현예에서, 인간 글루카곤의 농도는 0.25 내지 5 mg/mL이다.

일 구현예에서, 인간 글루카곤의 농도는 0.5 내지 4 mg/mL이다.

일 구현예에서, 인간 글루카곤의 농도는 0.75 내지 3 mg/mL이다.

일 구현예에서, 인간 글루카곤의 농도는 0.75 내지 2.5 mg/mL이다.

일 구현예에서, 인간 글루카곤의 농도는 0.75 내지 2 mg/mL이다.

일 구현예에서, 인간 글루카곤의 농도는 1 내지 2 mg/mL이다.

일 구현예에서, 몰비 [소수성 라디칼]/[인간 글루카곤]은 20 미만이다.

일 구현예에서, 몰비 [소수성 라디칼]/[인간 글루카곤]은 15 미만이다.

일 구현예에서, 몰비 [소수성 라디칼]/[인간 글루카곤]은 10 미만이다.

일 구현예에서, 몰비 [소수성 라디칼]/[인간 글루카곤]은 5 미만이다.

일 구현예에서, 몰비 [소수성 라디칼]/[인간 글루카곤]은 2.5 미만이다.

일 구현예에서, 몰비 [소수성 라디칼]/[인간 글루카곤]은 1.5 미만이다.

인간 글루카곤은 다음의 서열을 갖는 29개 아미노산 잔기의 단순한 쇄를 포함하는 고도로 보존된 폴리펩타이드이다: H-His-Ser-Gln-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Tyr-Ser-Lys-Tyr-Leu-Asp-Ser-Arg-Arg-Ala-Gln-Asp-Phe-Val-Gln-Trp-Leu-Met-Asn-Thr-OH.

이는 재조합 펩타이드 합성에 의해, 상이한 방식으로 수득될 수 있다.

인간 글루카곤은 다수의 공급원으로부터 이용가능하다. 예를 들면, 펩타이드 합성을 통해 Bachem에 의해 생산된 인간 글루카곤이 특히 참고 407473 하에서 이용가능하다.

일 구현예에서, 조성물은 또한 니코틴성 화합물 또는 이의 유도체 중 하나를 포함한다.

일 구현예에서, 조성물은 니코틴아미드를 포함한다.

일 구현예에서, 니코틴아미드의 농도는 10 내지 160 mM의 범위이다.

일 구현예에서, 니코틴아미드의 농도는 20 내지 150 mM의 범위이다.

일 구현예에서, 니코틴아미드의 농도는 40 내지 120 mM의 범위이다.

일 구현예에서, 니코틴아미드의 농도는 60 내지 100 mM의 범위이다.

일 구현예에서, 조성물은 또한 다가음이온 화합물(polyanionic compound)을 포함한다.

일 구현예에서, 다가음이온 화합물은 카복실성 폴리산(polyacid) 및 이의 Na⁺, K⁺, Ca²⁺ 또는 Mg²⁺ 염으로 이루어진 그룹으로부터 선택된다.

일 구현예에서, 카복실산은 시트르산, 타르타르산 및 이의 Na⁺, K⁺, Ca²⁺ 또는 Mg²⁺ 염으로 이루어진 그룹으로부터 선택된다.

일 구현예에서, 다가음이온 화합물은 포스포릭 폴리산 및 이의 Na⁺, K⁺, Ca²⁺ 또는 Mg²⁺ 염으로 이루어진 그룹으로부터 선택된다.

일 구현예에서, 포스포릭 폴리산은 트리포스페이트 및 이의 Na⁺, K⁺, Ca²⁺ 또는 Mg²⁺ 염이다.

일 구현예에서, 다가음이온 화합물은 시트르산 및 이의 Na⁺, K⁺, Ca²⁺ 또는 Mg²⁺ 염이다.

일 구현예에서, 다가음이온 화합물은 타르타르산 및 이의 Na⁺, K⁺, Ca²⁺ 또는 Mg²⁺ 염이다.

일 구현예에서, 다가음이온 화합물은 트리인산 및 이의 Na⁺, K⁺, Ca²⁺ 또는 Mg²⁺ 염이다.

일 구현예에서, 다음이온성 화합물의 농도는 1 내지 20 mM이다.

일 구현예에서, 다음이온성 화합물의 농도는 2 내지 15 mM이다.

일 구현예에서, 다음이온성 화합물의 농도는 3 내지 12 mM이다.

일 구현예에서, 다음이온성 화합물의 농도는 10 mM이다.

일 구현예에서, 다음이온성 화합물의 농도는 5 mM이다.

일 구현예에서, 다음이온성 화합물의 농도는 0.5 mg/mL 내지 3 mg/mL의 글루카곤의 농도에 대해 10 mM이다.

일 구현예에서, 다음이온성 화합물의 농도는 0.5 mg/mL 내지 2 mg/mL의 글루카곤의 농도에 대해 10 mM이다.

일 구현예에서, 다음이온성 화합물의 농도는 1 mg/mL 내지 2 mg/mL의 글루카곤의 농도에 대해 10 mM이다.

일 구현예에서, 다음이온성 화합물의 농도는 0.5 mg/mL 내지 3 mg/mL의 글루카곤의 농도에 대해 5 mM이다.

일 구현예에서, 다음이온성 화합물의 농도는 0.5 mg/mL 내지 2 mg/mL의 글루카곤의 농도에 대해 5 mM이다.

일 구현예에서, 다음이온성 화합물의 농도는 1 mg/mL 내지 2 mg/mL의 글루카곤의 농도에 대해 5 mM이다.

일 구현예에서, 시트르산 및 이의 Na⁺, K⁺, Ca²⁺ 또는 Mg²⁺ 염의 농도는 1 내지 20 mM이다.

일 구현예에서, 시트르산 및 이의 Na⁺, K⁺, Ca²⁺ 또는 Mg²⁺ 염의 농도는 2 내지 15 mM이다.

일 구현예에서, 시트르산 및 이의 Na⁺, K⁺, Ca²⁺ 또는 Mg²⁺ 염의 농도는 3 내지 12 mM이다.

일 구현예에서, 시트르산 및 이의 Na⁺, K⁺, Ca²⁺ 또는 Mg²⁺ 염의 농도는 10 mM이다.

일 구현예에서, 시트르산 및 이의 Na⁺, K⁺, Ca²⁺ 또는 Mg²⁺ 염의 농도는 5 mM이다.

일 구현예에서, 시트르산 및 이의 Na⁺, K⁺, Ca²⁺ 또는 Mg²⁺ 염의 농도는 0.5 mg/mL 내지 3 mg/mL의 글루카곤의 농도에 대해 10 mM이다.

일 구현예에서, 시트르산 및 이의 Na⁺, K⁺, Ca²⁺ 또는 Mg²⁺ 염의 농도는 0.5 mg/mL 내지 2 mg/mL의 글루카곤의 농도에 대해 10 mM이다.

일 구현예에서, 시트르산 및 이의 Na⁺, K⁺, Ca²⁺ 또는 Mg²⁺ 염의 농도는 1 mg/mL 내지 2 mg/mL의 글루카곤의 농도에 대해 10 mM이다.

일 구현예에서, 시트르산 및 이의 Na⁺, K⁺, Ca²⁺ 또는 Mg²⁺ 염의 농도는 0.5 mg/mL 내지 3 mg/mL의 글루카곤의 농도에 대해 5 mM이다.

일 구현예에서, 시트르산 및 이의 Na⁺, K⁺, Ca²⁺ 또는 Mg²⁺ 염의 농도는 0.5 mg/mL 내지 2 mg/mL의 글루카곤의 농도에 대해 5 mM이다.

일 구현예에서, 시트르산 및 이의 Na⁺, K⁺, Ca²⁺ 또는 Mg²⁺ 염의 농도는 1 mg/mL 내지 2 mg/mL의 글루카곤의 농도에 대해 5 mM이다.

일 구현예에서, 본 발명에 따른 조성물은 또한 위장 호르몬을 포함한다.

"위장 호르몬"은 인간 글루카곤-유사 펩타이드-1 수용체(글루카곤 유사 펩타이드-1 수용체 효능제)(글루카곤 유사) 및 GIP(글루코즈-의존성 인슐리노트로픽 펩타이드(insulinotropic peptide)), 옥신토모둘린(인간 프로글루카곤의 유도체), 펩타이드 YY, 아밀린, 콜레시스토키닌, 판크레아틱 폴리펩타이드(PP), 그렐린 및 엔테로스타틴, 이의 유사체 또는 유도체 및/또는 약제학적으로 허용되는 이의 염으로 이루어진 그룹으로부터 선택된 호르몬을 의미하는 것으로 이해된다.

일 구현예에서, 위장 호르몬은 엑세나티드 또는 Byetta^®(ASTRA-ZENECA), 리라글루티드 또는 Victoza^®(NOVO NORDISK), 릭시세나티드 또는 Lyxumia^®(SANOFI), 알비글루티드 또는 Tanzeum^®(GSK) 또는 둘라글루티드 또는 Trulicity^®(ELI LILLY & CO), 이의 유사체 또는 유도체 및 약제학적으로 허용되는 이의 염으로 이루어진 그룹으로부터 선택된 GLP-1 RA(글루카곤 유사 펩타이드-1 수용체 효능제)의 유사체 또는 유도체이다.

일 구현예에서, 위장 호르몬은 프라믈린티드 또는 Symlin^®(ASTRA-ZENECA)이다.

일 구현예에서, 위장 호르몬은 엑세나티드 또는 Byetta^®, 이의 유사체 또는 유도체 및 약제학적으로 허용되는 이의 염이다.

일 구현예에서, 위장 호르몬은 이라글루티드 또는 Victoza^®, 이의 유사체 또는 유도체 및 약제학적으로 허용되는 이의 염이다.

일 구현예에서, 위장 호르몬은 릭시세나티드 또는 Lyxumia^®, 이의 유사체 또는 유도체 및 약제학적으로 허용되는 이의 염이다.

일 구현예에서, 위장 호르몬은 알비글루티드 또는 Tanzeum^®, 이의 유사체 또는 유도체 및 약제학적으로 허용되는 이의 염이다.

일 구현예에서, 위장 호르몬은 둘라글루티드 또는 Trulicity^®, 이의 유사체 또는 유도체 및 약제학적으로 허용되는 이의 염이다.

일 구현예에서, 위장 호르몬은 프람믈린티드 또는 Symlin^®, 이의 유사체 또는 유도체 및 약제학적으로 허용되는 이의 염이다.

펩타이드 또는 단백질을 참고로 사용된 경우 "유사체"는 펩타이드 또는 단백질을 의미하는 것으로 이해되며, 여기서 아미노산의 하나 이상의 구성 잔기는 아미노산의 다른 잔기로 치환되었고/되었거나 여기서 아미노산의 하나 이상의 구성 잔기는 제거되었고/되었거나 여기서 아미노산의 하나 이상의 구성 잔기는 첨가되었다. 유사체의 본 정의의 경우 상동성의 허용되는 퍼센트는 50%이다.

펩타이드 또는 단백질을 참조로 사용된 경우 "유도체"는 참고 펩타이드 또는 단백질 또는 유사체 속에 존재하지 않은 치환체에 의해 화학적으로 변형된 펩타이드 또는 단백질 또는 유사체, 다시 말해서, 치환을 도입하기 위하여, 공유결합의 생성으로 변형시킨 단백질 또는 펩타이드를 의미하는 것으로 이해된다.

일 구현예에서, 치환체는 지방 쇄로 이루어진 그룹으로부터 선택된다.

일 구현예에서, 위장 호르몬의 농도는 0.01 내지 10 mg/mL의 범위 내이다.

일 구현예에서, 엑세나티드, 이의 유사체 또는 유도체 및 약제학적으로 허용되는 이의 염의 농도는 0.04 내지 0.5 mg/mL의 범위 내이다.

일 구현예에서, 리라글루티드, 이의 유사체 또는 유도체 및 약제학적으로 허용되는 이의 염의 농도는 1 내지 10 mg/mL의 범위 내이다.

일 구현예에서, 릭시세나티드, 이의 유사체 또는 유도체 및 약제학적으로 허용되는 이의 염의 농도는 0.01 내지 1 mg/mL의 범위 내이다.

일 구현예에서, 프라믈린티드, 이의 유사체 또는 유도체 및 약제학적으로 허용되는 이의 염의 농도는 0.1 내지 5 mg/mL의 범위 내이다.

일 구현예에서, 본 발명에 따른 조성물은 GLP-1 RA(글루카곤 유사 펩타이드-1 수용체 효능제) GLP-1 RA, GLP-1 RA의 유사체 또는 유도체의 동결건조물 및 용액의 재구성에 의해 수득된 인간 글루카곤 용액을 혼합시켜 생산되며, 상기 GLP-1 RA의 용액은 시판되거나 동결건조물로부터 재구성된다.

일 구현예에서, 본 발명에 따른 조성물은 또한, 완충제를 포함한다.

일 구현예에서, 본 발명에 따른 조성물은 0 내지 100 mM의 농도의 완충제를 포함한다.

일 구현예에서, 본 발명에 따른 조성물은 15 내지 50 mM의 농도의 완충제를 포함한다.

일 구현예에서, 본 발명에 따른 조성물은 인산염 완충액, 트리스(트리스하이드록시메틸아미노메탄) 또는 시트르산나트륨으로 이루어진 그룹으로부터 선택된 완충제를 포함한다.

일 구현예에서, 완충제는 인산나트륨이다.

일 구현예에서, 완충제는 트리스(트리스하이드록시메틸아미노메탄)이다.

일 구현예에서, 완충제는 시트르산나트륨이다.

일 구현예에서, 조성물은 또한 아연 염, 특히 염화아연을 포함한다.

일 구현예에서, 아연 염의 농도는 50 내지 5000 μM이다.

일 구현예에서, 아연 염의 농도는 100 내지 2000 μM이다.

일 구현예에서, 아연 염의 농도는 200 내지 1500 μM이다.

일 구현예에서, 아연 염의 농도는 200 내지 1000 μM이다.

일 구현예에서, 아연 농도는 몰 비 [아연]/[글루카곤]가 0.1 내지 2.5이도록 한다.

일 구현예에서, 아연 농도는 몰 비 [아연]/[글루카곤]가 0.2 내지 2이도록 한다.

일 구현예에서, 아연 농도는 몰 비 [아연]/[글루카곤]가 0.5 내지 1.5이도록 한다.

일 구현예에서, 아연 농도는 몰 비 [아연]/[글루카곤]가 1이도록 한다.

일 구현예에서, 본 발명에 따른 조성물은 또한 방부제를 포함한다.

일 구현예에서, 방부제는 단독 또는 혼합물의, m-크레졸 및 페놀로 이루어진 그룹으로부터 선택된다.

일 구현예에서, 본 발명에 따른 조성물은 또한 항산화제를 포함한다.

일 구현예에서, 항산화제는 메티오닌으로부터 선택된다.

일 구현예에서, 방부제의 농도는 10 내지 50 mM이다.

일 구현예에서, 방부제의 농도는 10 내지 40 mM이다.

일 구현예에서, 본 발명에 따른 조성물은 또한 계면활성제를 포함한다.

일 구현예에서, 계면활성제는 프로필렌 글리콜 또는 폴리소르베이트로 이루어진 그룹으로부터 선택된다.

본 발명에 따른 조성물은 또한 강직제(tonicity agent)와 같은 첨가제를 포함할 수 있다.

일 구현예에서, 강직제는 염화나트륨, 만니톨, 사카로즈, 소르비톨 및 글리세롤로 이루어진 그룹으로부터 선택된다.

본 발명에 따른 조성물은 또한 약전에 따른 모든 부형제를 포함할 수 있으며 통상의 농도로 사용된, 인간 글루카곤 및 GLP-1 RA와 혼화성일 수 있다.

본 발명은 또한 건조 및/또는 동결건조에 의해 수득됨을 특징으로 하는, 본 발명에 따른 약제학적 조성물에 관한 것이다.

국소 및 전신계 방출의 경우에, 고려되는 투여 방식은 정맥내, 피하, 피내 또는 근육내 경로에 의한다.

경피, 경구, 비강, 질내, 안구, 볼내, 폐 투여 경로가 또한 고려된다.

본 발명은 또한 인간 글루카곤을 포함하는 pH가 6.6 내지 7.8인 단일-용량 제형에 관한 것이다.

본 발명은 또한 상기 정의한 바와 같은, 인간 글루카곤 및 위장 호르몬을 포함하는 6.6 내지 7.8의 pH에서 단일 용량 제형에 관한 것이다.

일 구현예에서, 단일 용량 제형은 또한 상기 정의한 바와 같은 치환된 코-폴리아미노산을 포함한다.

일 구현예에서, 제형은 주사가능한 용액의 형태이다. 일 구현예에서, GLP-1 RA, GLP-1 RA의 유사체 또는 유도체는 엑세나티드(Byetta®), 리라글루티드(Victoza®), 릭시세나티드(Lyxumia®), 알비글루티드(Tanzeum®), 둘라글루티드(Trulicity®) 또는 이의 유도체 중 하나를 포함하는 그룹으로부터 선택된다.

일 구현예에서, 위장 호르몬은 엑세나티드이다.

일 구현예에서, 위장 호르몬은 리라글루티드이다.

일 구현예에서, 위장 호르몬은 릭시세나티드이다.

일 구현예에서, 위장 호르몬은 알비글루티드이다.

일 구현예에서, 위장 호르몬은 둘라글루티드이다.

더욱이 및 중요하게도, 본 출원인은 본 발명에 따른 카복실레이트 전하 및 적어도 하나의 소수성 라디칼을 지닌 코-폴리아미노산의 존재하에서 인간 글루카곤이 단독으로 또는 위장 호르몬과 함께, 이의 작용을 보존하는 것을 입증할 수 있었다.

본 발명에 따른 조성물의 제조는 인간 글루카곤의 용액, GLP-1 RA의 용액, GLP-1 RA의 유사체 또는 유도체, 및 본 발명에 따른 카복실레이트 전하 및 적어도 하나의 소수성 라디칼을 수용액 속에서 또는 동결건조된 형태로 단순 혼합함으로써 수행될 수 있다는 장점을 갖는다. 경우에 따라, 제제의 pH는 pH 7로 조절된다.

일 구현예에서, 인간 글루카곤 및 치환된 코-폴리아미노산의 혼합물은 수용액 속에서 및 동결건조된 형태로 GLP-1 RA, GLP-1 RA의 유사체 또는 유도체를 혼합하기 전에 한외여과에 의해 농축시킨다.

경우에 따라, 혼합물의 조성물은 혼합물 속에 이들 부형제의 농축된 용액을 첨가함으로써 글리세롤, m-크레졸 및 폴리소르베이트(Tween^®)와 같은 부형제의 측면에서 조절된다. 경우에 따라, pH는 7로 조절된다.

부분 A

AA: 소수성 분자(여기서 p는 1임)의 합성

소수성 라디칼은 코-폴리아미노산에 그래프트하기 전에 상응하는 소수성 분자에 의해 다음의 표에 나타낸다.

[표 1A] 본 발명에 따라 합성된 소수성 분자의 목록 및 구조

실시예 AA1: 분자 AA1

분자 A1: 팔미토일 클로라이드와 L-프롤린 사이의 반응에 의해 수득된 생성물.

아세톤(167 mL) 중 팔미토일 클로라이드(23.0 g, 83.7 mmol)의 용액을 1 N 수성 수산화나트륨(230 mL; 230 mmol)중 L-프롤린(10.6 g, 92.1 mmol)의 용액에 90분 내에 적가한다. 실온에서 14시간 교반 후, 이종 혼합물을 0℃로 냉각시킨 후, 소결된 여과기(sintered filter)를 통해 여과하여 백색 고체를 수득하고 이를 물(2 x 100 mL)에 이어서, 디이소프로필 에테르(100 mL)로 세척한다. 고체를 감압하게 건조시킨다. 이후에, 고체를 환류 하에 200 mL의 물 속에 용해한 후, 8 mL의 37% 염산 용액을 pH = 1이 수득될 때가지 가한다. 이후에, 유백색의 반응 혼합물을 0℃로 냉각한다. 수득된 침전물을 소결된 여과기를 통해 여과한 후, 6.0 내지 8.0의 생리학적 pH의 여과물이 수득될 때까지 물(5 x 50mL)로 세척하여 진공 하에 50℃에서 밤새 오븐 속에서 후속적으로 건조되도록 한다. 생성물을 디이소프로필 에테르 속에서 재결정화에 의해 정제한다. 백색 고체를 수득한다.

수율: 22.7 g (77%).

¹H NMR (CDCl₃, ppm): 0.88 (3H); 1.19-1.45 (24H); 1.58-1.74 (2H); 1.88-2.14 (3H); 2.15-2.54 (3H); 3.47 (1H); 3.58 (1H); 4.41 (0.1H); 4.61 (0.9H) 6.60-8.60 (1H).

분자 A2: 분자 A1과 Boc-에틸렌디아민 사이의 반응에 의해 수득된 생성물.

N,N-디이소프로필에틸아민(DIPEA)(68.8 g, 532.3 mmol), 1-하이드록시벤조트리아졸(HOBt)(37.1 g, 274.6 mmol)에 이어 N-(3-디메틸아미노프로필)-N'-에틸카보디이미드(EDC)(53.1 g, 277.0 mmol)를 연속적으로 및 실온에서 1500 mL의 클로로포름 중 분자 A1의 용액(75.1 g, 212.4 mmol)에 가한다. 실온에서 15분 교반 후, 35 mL의 클로로포름 중 Boc-에틸렌디아민(Boc-에틸렌디아민)(37.6 g, 234.7 mmol)의 용액을 가한다. 실온에서 18시간 교반 후, 0.1 N HCl 용액(2.1 L)에 이어서, 포화된 NaCl 용액(1 L)을 가한다. 상을 분리한 후, 유기 상을 0.1 N HCl/포화된 NaCl 용액(2.1 L/1 L), 포화된 NaCl 용액(2 L), 포화된 NaHCO3 용액(2 L)에 이어서, 포화된 NaCl 용액(2 L)으로 연속적으로 세척한다. 유기 상을 무수 황산나트륨 위에서 건조시키고, 여과한 후 감압하에 농축시킨다. 수득된 고체를 디이소프로필 에테르(3 x 400 mL) 속에서 연마시켜 정제함으로써 40℃에서 진공 하에 건조 후 고체를 수득한다.

수율: 90.4 g(86%).

¹H NMR (CDCl₃, ppm): 0.88 (3H); 1.20-1.37 (24H); 1.44 (9H); 1.54-1.70 (2H);　1.79-1.92 (1H); 1.92-2.04 (1H); 2.03-2.17 (1H); 2.17-2.44 (3H); 3.14-3.36 (4H); 3.43 (1H); 3.56 (1H); 4.29 (0.1 H); 4.51 (0.9 H); 4.82 (0.1H); 5.02 (0.9H); 6.84 (0.1H); 7.22 (0.9H).

분자 AA1

디옥산(100 mL, 400 mmol) 중 4 M 염산 용액을 0℃에서 330 mL의 디클로로메탄 중 분자 A2(20.1 g, 40.5 mmol)의 용액에 적가한다. 실온에서 3시간 30분 교반 후, 용액을 감압하에 농축시킨다. 잔사를 섬광 크로마토그래피(메탄올, 디클로로메탄)으로 정제하여 하이드로클로라이드 염으로서 분자 AA1의 백색 고체를 수득한다.

수율: 16.3 g (93%).

¹H NMR (CDCl₃, ppm): 0.88 (3H); 1.07-1.40 (24H); 1.49-1.63 (2H); 1.77-2.18 (4H); 2.18-2.45 (2H); 3.14-3.32 (2H); 3.42-3.63 (2H); 3.63-3.84 (2H); 4.37 (0.1H); 4.48 (0.9H); 6.81-8.81 (4H).

LC/MS (ESI): 396.5; (계산된 ([M+H]⁺): 396.4).

실시예 AA2: 분자 AA2

분자 A3: 15-메틸헥사데칸-1-올.

칩(chip) 형태의 마그네슘(9.46 g, 389 mmol)을 아르곤 하에 3구 플라스크내로 도입한다. 마그네슘을 무수 THF(40 mL)로 덮고, 1-브로모-3-메틸부탄의 소적(drop)을 실온에서 첨가하여 반응을 개시한다. 발열성 반응 및 매질의 약간의 혼탁도의 관찰 후, 1-브로모-3-메틸부탄(53.87 g, 357 mmol)의 나머지를 90분 내에 적가하며, 이 동안 매질의 온도는 50 내지 60℃로 안정하게 유지된다. 이후에 반응 매질을 70℃에서 2시간 동안 가열한다.

THF(60 mL) 중 12-브로모-1-도데칸올(43 g, 162.1 mmol)의 용액을 3구 플라스크 속에 0℃에서 NMP(62 mL) 속에 용해된 CuCl (482 mg, 4.86 mmol)의 용액에 아르곤 하에 적가한다. 즉석에서 제조된 더운 유기 마그네슘 용액의 용액을 이후에 이러한 용액에 매질의 온도가 20℃ 이하로 유지되도록 하는 방식으로 적가한다. 혼합물을 이후에 실온에서 16시간 동안 교반한다. 매질을 0℃로 냉각시키고 반응을 1N 수성 HCl 용액을 pH가 1이 될 때까지 첨가시켜 중지시키고, 매질을 에틸 아세테이트로 추출한다. 유기 상을 포화된 NaCl 용액으로 세척하고 Na₂SO₄ 위에서 건조시킨 후, 용액을 여과하고 진공 하에 농축시켜 오일을 수득한다. 실리카 겔(사이클로헥산, 에틸 아세테이트) 위에서 DCVC로 정제 후, 실온에서 결정화하는 오일을 수득한다.

수율: 32.8 g (74%)

¹H NMR (CDCl₃, ppm): 0.87 (6H); 1.14 (2H); 1.20-1.35 (22H); 1.50-1.55 (3H); 3.64 (2H).

분자 A4: 15-메틸헥사데카노산

과망간산칼륨(38.2 g, 241.5 mmol)을 아세트산/디클로로에탄/물(124/400/320 mL)의 혼합물 속에서 실온에서 분자 A3(20.65 g, 80.5 mmol) 및 테트라부틸암모늄 브로마이드(14.02 g, 42.5 mmol)의 용액에 실온에서 소 부위씩 가한다. 환류하에 5시간 동안 교반하고 실온으로 되돌린 후, 매질을 pH 1에서 5N HCl을 서서히 가하여 산성화한다. Na₂SO₃(44.6 g, 354.3 mmol)을 이후에 매질이 변색될 때까지 서서히 가한다. 수성 상을 디클로로메탄으로 추출하고, 합한 유기 상을 Na₂SO₄ 위에서 건조시키고, 여과하며 진공하에 농축시킨다. 실리카 겔(사이클로헥산, 에틸 아세테이트, 아세트산) 위에서 크로마토그래피로 정제한 후, 백색 고체를 수득한다.

수율: 19.1 g (정량적)

¹H NMR (CDCl₃, ppm): 0.87 (6H); 1.14 (2H); 1.22-1.38 (20H); 1.51 (1H); 1.63 (2H); 2.35 (2H).

분자 A5: 분자 A4와 L-프롤린 사이의 반응에 의해 수득된 생성물.

디사이클로헥실 카보디이미드(DCC)(8.01 g, 38.8 mmol) 및 N-하이드록시석신이미드(NHS)(4.47 g, 38.8 mmol)를 THF(360 mL) 중 분자 A4(10 g, 37 mmol)의 용액에 0℃에서 연속적으로 가한다. 실온에서 17시간 교반 후, 매질을 0℃로 20분 동안 냉각시키고, 소결된 여과기를 통해 여과한다. L-프롤린(4 g, 37.7 mmol), 트리메틸아민(34 mL) 및 물(30 mL)을 여액에 가한다. 실온에서 20시간 동안 교반 후, 매질을 pH가 1이 될 때까지 1N 수성 HCl 용액으로 처리한다. 수성 상을 디클로로메탄(2 x 125 ml)으로 추출한다. 합한 유기 상을 1N 수성 HCl 용액(2 x 100 ml), 물(100 mL)에 이어서, 포화된 수성 NaCl 용액(100 mL)으로 세척한다. Na₂SO₄ 위에서 건조시킨 후, 유기 상을 여과하고, 진공하에 농축시키고, 잔사를 실리카 겔(사이클로헥산, 에틸 아세테이트, 아세트산) 위에서 크로마토그래피로 정제한다.

수율: 9.2 g (72%)

¹H NMR (CDCl₃, ppm): 0.86 (6H); 1.14 (2H); 1.22-1.38 (20H); 1.50 (1H); 1.67 (2H); 1.95-2.10 (3H); 2.34 (2H); 2.49 (1H); 3.47 (1H); 3.56 (1H); 4.61 (1H).

LC/MS (ESI): 368.3; (계산된 ([M+H]⁺): 368.6).

분자 A6: 분자 A5와 Boc-에틸렌디아민 사이의 반응에 의해 수득된 생성물.

실온에서 트리에틸아민(TEA)(5.23 mL) 및 2-(1H-벤조트리아졸-1-일)-1,1,3,3-테트라메틸우로늄 테트라플루오로보레이트(TBTU)를 THF/DMF(200/50 mL)의 혼합물 중 분자 A5 (9.22 g, 25.08 mmol)의 용액에 가한다. 10분 교반 후, Boc-에틸렌디아민(4.42 g, 27.6 mmol)을 가한다. 실온에서 17시간 동안 교반 후, 혼합물을 물(300 mL)로 0℃에서 희석시키고 20분 동안 냉 교반시킨다. 형성된 침전물을 소결된 여과기를 통해 여과하고, 여액을 에틸 아세테이트로 추출한다. 합한 유기 상을 NaHCO₃의 포화 용액으로 세척하고, Na₂SO₄ 위에서 세척하고, 여과하고, 진공 하에 농축시키고, 잔사를 섬광 크로마토그래피(에틸 아세테이트, 메탄올)로 정제한다.

수율: 6.9 g (54%)

¹H NMR (CDCl₃, ppm): 0.86 (6H); 1.15 (2H); 1.22-1.38 (20H); 1.43 (9H); 1.50 (1H); 1.64 (4H); 1.85 (1H); 1.95 (1H); 2.10 (1H); 2.31 (2H); 3.20-3.35 (3H); 3.45 (1H); 3.56 (1H); 4.51 (1H); 5.05 (1H); 7.24 (1H).

LC/MS (ESI): 510.6; (계산된 ([M+H]⁺): 510.8).

분자 AA2

디옥산(13 mL) 중 4N HCl 용액을 디클로로메탄(50 mL) 중 분자 A6 (5.3 g, 10.40 mmol)의 용액에 0℃에서 가한다. 0℃에서 5시간 교반 후, 매질을 감압하에 농축시키고, 물에 넣고 동결건조시켜 하이드로클로라이드 염으로서 분자 AA2의 백색 고체를 수득한다.

수율: 4.6 g (99%)

¹H NMR (D₂O, ppm): 0.91 (6H); 1.22 (2H); 1.22-1.50 (20H); 1.63 (3H); 1.98 (1H); 2.10 (2H); 2.26 (1H); 2.39 (1H); 2.43 (1H); 3.22 (2H); 3.45-3.60 (3H); 3.78 (1H); 4.42 (1H).

LC/MS (ESI): 410.4; (계산된 ([M+H]⁺): 410.7).

실시예 AA3: 분자 AA3

분자 A7: 분자 A1과 Boc-트리(에틸렌 글리콜)디아민 사이의 반응에 의해 수득된 생성물

분자 A2의 제조를 위해 사용된 것과 유사한 방법에 의해, 분자 A1(4.0 g, 11.3 mmol) 및 Boc-트리(에틸렌 글리콜)디아민(3.1 g, 12.4 mmol)에 적용하여, 무색 오일을 섬광 크로마토그래피(메탄올, 톨루엔)에 의한 정제 후 수득한다.

수율: 5.5 g (84%).

¹H NMR (CDCl₃, ppm): 0.88 (3H); 1.09-1.39 (24H); 1.44 (9H); 1.64 (2H); 1.79-2.01 (2H); 2.06-2.43 (4H); 3.23-3.68 (14H); 4.33 (0.2H); 4.56 (0.8H); 5.25 (1H); 6.49 (0.2H); 7.13-7.50 (0.8H)

분자 AA3

분자 AA1의 제조에 사용된 것과 유사한 방법에 의해, 분자 A7(5.5 g, 9.4 mmol)에 적용하여, 하이드로크로라이드 염으로서 분자 AA3의 백색 고체를 섬광 크로마토그래피(메탄올, 디클로로메탄)에 의해 정제한 후 수득한다.

수율: 4.3 g (92%).

¹H NMR (DMSO-d6, ppm): 0.85 (3H); 1.08-1.40 (24H); 1.40-1.52 (2H); 1.71-2.02 (4H); 2.02-2.31 (2H); 2.90-2.98 (2H); 3.15-3.47 (5H); 3.50-3.66 (7H); 4.24 (0.6H); 4.32 (0.4H); 7.83 (0.6H); 7.95 (3H); 8.17 (0.4H).

LC/MS (ESI): 484.6; (계산된 ([M+H]⁺ ): 484.4).

실시예 AA4: 분자 AA4

분자 A8: 분자 A1과 Boc-1-아미노-4,7,10-트리옥사-13-트리데칸아민 사이의 반응에 의해 수득된 생성물.

분자 A2의 제조에 사용된 것과 유사한 방법에 의해, 분자 A1(4.5 g, 12.7 mmol) 및 Boc-1-아미노-4,7,10-트리옥사-13-트리데칸아민(4.5 g, 14.0 mmol)에 적용하여, 황색 오일을 섬광 크로마토그래피(메탄올, 디클로로메탄)에 의한 정제 후 수득한다.

수율: 7.7 g (92%).

¹H NMR (CDCl₃, ppm): 0.88 (3H); 1.22-1.37 (24H); 1.44 (9H); 1.59-1.67 (2H); 1.67-2.00 (6H); 2.06-2.45 (4H); 3.18-3.76 (18H); 4.28 (0.2H); 4.52 (0.8H); 4.69-5.04 (1H); 6.77 (0.2H); 7.20 (0.8H).

분자 AA4

분자 AA1의 제조를 위해 사용된 것과 유사한 방법에 의해, 분자 A8(7.7 g, 11.8 mmol)에 적용시켜, 황색 오일을 섬광 크로마토그래피(메탄올, 디클로로메탄)에 의한 정제 후 수득한다. 디이소프로필 에테르와 동시증발시켜 50℃에서 진공 하에 건조된 백색 고체의 형태인 하이드로크로라이드 염으로서 분자 AA4를 수득한다.

수율: 5.4 g (76%).

¹H NMR (CDCl₃, ppm): 0.88 (3H); 1.08-1.40 (24H); 1.49-1.65 (2H); 1.76-2.39 (10H); 3.07-3.28 (3H); 3.34-3.80 (15H); 4.34 (0.05H); 4.64 (0.95H); 7.35 (0.05H); 7.66-8.58 (3.95H).

LC/MS (ESI): 556.7; (계산된 ([M+H]⁺): 556.5).

실시예 AA5: 분자 AA5

분자 A9: 분자 A1과 N-Boc-L-라이신 메틸 에스테르 사이의 반응에 의해 수득된 생성물.

분자 A2의 제조에 사용된 것과 유사한 방법에 의해, 분자 A1(4 g, 11.3 mmol) 및 N-Boc-L-라이신 메틸 에스테르(3.2 g, 12.4 mmol)에 적용시켜, 무색 오일을 섬광 크로마토그래피(메탄올, 디클로로메탄)에 의한 정제 후 수득한다.

수율: 4.9 g (73%).

¹H NMR (CDCl₃, ppm): 0.88 (3H); 0.99-1.54 (37H); 1.54-1.75 (3H); 1.75-2.04 (3H); 2.04-2.41 (4H); 2.94-3.19 (2H); 3.19-3.81 (5H); 4.28-4.64 (2H); 4.94 (1H); 6.45 (0.1H); 7.36 (0.9H).

LC/MS (ESI): 596.7; (계산된 ([M+H]⁺): 596.5).

분자 A10: 분자 A9를 암모니아로 처리하여 수득한 생성물.

메탄올 중 320 mL의 7N 암모니아 용액을 10 mL의 메탄올 중 분자 A9(4.9 g, 8.2 mmol)의 현탁액에 가한다. 밀폐된 대기 하에서 실온에서 19시간 교반 후, 추가로 100 mL의 암모니아 용액을 가한다. 밀폐된 대기 속에서 실온으로 24시간 교반 후, 반응 매질을 감압에서 농축시킨다. 잔사를 환류하는 디이소프로필 에테르(100 mL) 속에서 연마하여 정제함으로써 백색 고체를 수득하고 이를 50℃에서 진공 하에 건조시킨다.

수율: 4.1 g (85%).

¹H NMR (CDCl₃, ppm): 0.88 (3H); 1.06-1.57 (37H); 1.57-1.79 (3H); 1.88-2.41 (7H); 3.09 (2H); 3.49 (1H); 3.62 (1H); 4.34 (1H); 4.51 (1H); 4.69-4.81 (1H); 5.43 (0.95H); 5.57 (0.05H); 6.25 (0.05H); 6.52 (0.95H); 6.83 (0.05H); 7.11 (0.95H).

분자 AA5

분자 AA1의 제조에 사용된 것과 유사한 방법에 의해, 분자 A10(388 mg, 0.67 mmol)에 적용하여, 하이드로클로라이드 염으로서 분자 AA5의 백색 고체를 디이소프로필 에테르 속에서 연마에 의한 정제 후 수득한다.

수율: 292 mg (85%).

¹H NMR (DMSO-d6, ppm): 0.85 (3H); 1.06-2.34 (38H); 2.61-2.81 (2H); 3.29-3.68 (2H); 4.05-4.17 (1.7H); 4.42 (0.3H); 7.00 (1H); 7.16 (0.7H); 7.43 (0.3H); 7.73-8.04 (3.7H); 8.16 (0.3H).

LC/MS (ESI): 481.6; (계산된 ([M+H]⁺): 481.4).

실시예 AA6: 분자 AA6

분자 A11: 스테아로일 클로라이드와 L-프롤린 사이의 반응에 의해 수득된 생성물.

분자 A1의 제조에 사용된 것과 유사한 방법에 의해, L-프롤린(5.0 g, 43.4 mmol) 및 스테아릴 클로라이드(12.0 g, 39.6 mmol)에 적용하여, 섬광 크로마토그래피(메탄올, 디클로로메탄)에 의한 정제 후 백색 고체를 수득한다.

수율: 5.37 g (36%)

¹H NMR (CDCl₃, ppm): 0.88 (3H); 1.26-1.37 (28H); 1.64-1.70 (2H); 1.88-2.10 (3H); 2.36 (2H); 2.54-2.58 (1H).; 3.46 (1H); 3.56 (1H); 4.62 (1H).

LC/MS (ESI): 382.6; (계산된 ([M+H]⁺): 382.3).

분자 A12: 분자 A11과 Boc-트리(에틸렌글리콜)디아민 사이의 반응에 의해 수득된 생성물.

분자 A6의 제조에 사용된 것과 유사한 방법에 의해, THF 중 분자 A11(33.81 g, 88.6 mmol) 및 Boc-트리(에틸렌 글리콜)디아민(26.4 g, 106.3 mmol)에 TEA 대신에 DIPEA를 적용하여, 섬광 크로마토그래피(에틸 아세테이트, 메탄올)에 의한 정제 후 백색 고체를 수득한다.

수율: 43.3 g (80%)

¹H NMR (CDCl₃, ppm): 0.87 (3H); 1.24 (30H); 1.43 (9H); 1.61 (2H); 1.82 (1H); 1.96 (1H); 2.25-2.45 (2H); 3.25-3.65 (14H); 4.30 (0.15H); 4.53 (0.85H); 5.25 (1H); 6.43 (0.15H); 7.25 (0.85H).

LC/MS (ESI): 612.6; (계산된 ([M+H]⁺): 612.9).

분자 AA6

분자 AA2의 제조에 사용된 것과 유사한 방법에 의해, 분자 A12(43 g, 70.3 mmol)에 적용시켜, 진공 하에 농축 후 수득된 잔사를 아세토니트릴 속에서 연마한다. 현탁액을 여과하고, 고체를 아세토니트릴에 이어 아세톤으로 세척한다. 진공 하에 건조시킨 후, 하이드로클로라이드 염으로서 분자 AA6의 백색 고체를 수득한다.

수율: 31.2 g (81%)

¹H NMR (DMSO-d₆, ppm): 0.85 (3H); 1.23 (28H); 1.45 (2H); 1.70-2.05 (4H); 2.13 (1H); 2.24 (1H); 2.95 (2H); 3.10-3.25 (2H); 3.30-3.65 (10H); 4.20-4.45 (1H); 7.85-8.25 (4H).

LC/MS (ESI): 512.4; (계산된 ([M+H]⁺): 512.8).

실시예 AA7: 분자 AA7

분자 A13: 아라키돈산과 L-프롤린 사이의 반응에 의해 수득된 생성물.

분자 A5의 제조에 사용된 것과 유사한 방법에 의해, 아라키돈산(15.51 g, 49.63 mmol) 및 L-프롤린(6 g, 52.11 mmol)에 TEA 대신 DIPEA를 사용하여 적용시켜, 백색 고체를 실리카 겔(사이클로헥산, 에틸 아세테이트, 아세트산)에 의한 정제 후 수득한다.

수율: 12.9 g (63%)

¹H NMR (CDCl₃, ppm): 0.88 (3H); 1.28 (34H); 1.66 (2H); 1.95-2.15 (2H); 2.34 (2H); 2.45 (1H); 3.47 (1H); 3.56 (1H); 4.60 (1H).

LC/MS (ESI): 410.4; (계산된 ([M+H]⁺): 410.6).

분자 A14: 분자 A13과 Boc-1-아미노-4,7,10-트리옥사-13-트리데칸 사이의 반응에 의해 수득한 생성물.

분자 A12의 제조에 사용된 것과 유사한 방법에 의해, 분자 A13(10.96 g, 26.75 mmol) 및 Boc-1-아미노-4,7,10-트리옥사-13-트리데칸(10.29 g, 32.11 mmol)에 적용시켜, 실리카 겔(사이클로헥산, 에틸 아세테이트, 메탄올) 위에서 컬럼 크로마토그래피에 의한 정제 후 고체를 수득한다.

수율: 14.2 g (75%)

¹H NMR (CDCl₃, ppm): 0.88 (3H); 1.24 (32H); 1.43 (9H); 1.57-2.00 (8H); 2.10-2.45 (4H); 3.20-3.75 (18H); 4.30 (0.20H); 4.55 (0.80H); 5.03 (1H); 6.75 (0.20H); 7.20 (0.80H).

LC/MS (ESI): 712.8; (계산된 ([M+H]⁺): 713.1).

분자 AA7

분자 AA2의 제조에 사용된 것과 유사한 방법 후, 분자 A14(14.25 g, 20.01 mmol)에 적용시켜, 반응 매질의 진공 하에 농축 후 수득된 잔사를 메탄올 속에 용해하고 감압 하에 증발시키고, 작동을 4회 반복하여 하이드로클로라이드 염으로서 분자 AA7의 백색 고체를 수득한다.

수율: 12.7 g (98%)

¹H NMR (DMSO-d₆, ppm): 0.85 (3H); 1.23 (32H); 1.45 (2H); 1.64 (2H); 1.70-2.05 (6H); 2.10-2.30 (2H); 2.82 (2H); 3.08 (2H); 3.30-3.60 (14H); 4.15-4.30 (1H); 7.73-8.13 (4H).

LC/MS (ESI): 612.7; (계산된 ([M+H]⁺): 612.9).

실시예 AA8: 분자 AA8

분자 A15: L-루이신과 팔미토일 클로라이드 사이의 반응에 의해 수득된 생성물.

분자 A1의 제조에 사용된 것과 유사한 방법에 의해, L-루이신(15.0 g, 114.4 mmol) 및 팔미토일 클로라이드(34.5 g, 125 mmol)에 적용시켜, 디이소프로필 에테르 속에서 연마함으로써 백색 고체를 수득한다.

수율: 13.0 g (31%)

¹H NMR (CDCl₃, ppm): 0.88 (3H); 0.96 (6H); 1.16-1.35 (24H); 1.55-1.77 (5H); 2.23 (2H); 4.55-4.60 (1H); 5.88 (1H).

분자 A16: 분자 A15와 L-프롤린 메틸 에스테르 사이의 반응에 의해 수득된 생성물

분자 A2의 제조에 사용된 것과 유사한 방법에 의해, 분자 A15(6.00 g, 16.2 mmol) 및 L-프롤린 메틸 에스테르(3.23 g, 19.5 mmol)에 적용하여, 연황색 오일을 섬광 크로마토그래피(메탄올, 디클로로메탄)에 의한 정제 후 수득한다.

수율: 5.8 g (74%)

¹H NMR (CDCl₃, ppm): 0.83-1.00 (9H); 1.18-1.32 (24H); 1.40-1.73 (5H); 1.84-2.33 (6H); 3.47-3.89 (2H); 3.70 (1.14H); 3.71 (1.21H); 3.74 (0.53H); 3.76 (0.12H); 4.40-4.56 (1H); 4.63-4.67 (0.04H); 4.84 (0.38); 4.90 (0.40); 5.06 (0.18); 5.99 (0.18H); 6.08-6.21 (0.82).

LC/MS (ESI): 481.6; (계산된 ([M+H]⁺): 481.4).

분자 A17: 분자 A16의 메틸 에스테르의 비누화에 의해 수득된 생성물.

1N 수산화나트륨(13.5 mL, 13.5 mmol)을 30 mL의 메탄올 중 분자 A16의 용액(5.8 g, 12.06 mmol)에 가한다. 실온에서 20시간 교반 후, 용액을 물로 희석시킨 후, 0℃에서 20 mL의 1 N 염산으로 산성화한다. 침전물을 여과한 후, 50 mL의 디클로로메탄 속에 용해시키기 전에, 물(50 mL)로 세정한다. 유기 상을 Na2SO4 위에서 건조시키고, 여과한 후, 감압하에 농축시켜 무색 오일을 수득한다.

수율: 4.5 g (80%)

¹H NMR (CDCl₃, ppm): 0.85-0.99 (9H); 1.14-1.41 (24H); 1.43-1.72 (5H); 1.87-2.47 (7H); 3.48-3.55 (0.6H); 3.56-3.62 (0.4H); 3.83-3.90 (0.4H); 3.90-3.96 (0.6H); 4.52-4.56 (0.6H); 4.56-4.59 (0.4H); 4.80-4.86 (0.4H); 4.86-4.91 (0.6H); 6.05 (0.4H); 6.11 (0.6H).

LC/MS (ESI): 467.6; (계산된 ([M+H]⁺): 467.4).

분자 A18: Boc-에틸렌디아민과 분자 A17 사이의 반응에 의해 수득된 생성물.

분자 A2의 제조에 사용된 것과 유사한 방법에 의해, 분자 A17(4.5 g, 9.64 mmol) 및 Boc-에틸렌디아민(1.70 g, 10.61 mmol)에 적용시켜, 섬광 크로마토그래피(메탄올, 디클로로메탄)에 의한 정제 후 무색 오일을 수득한다.

수율: 2.0 g (34%)

¹H NMR (CDCl₃, ppm): 0.83-0.99 (9H); 1.19-1.32 (24H); 1.44 (9H); 1.48-2.37 (14H); 3.09-3.99 (4H); 4.28-5.01 (2H); 5.64-6.04 (1H); 6.87-7.06 (1H).

LC/MS (ESI): 609.7; (계산된 ([M+H]⁺): 609.5).

분자 AA8

분자 AA1의 제조에 사용된 것과 유사한 방법에 의해, 분자 A18(2 g, 3.28 mmol)에 적용시켜, 하이드로클로라이드 염으로서 분자 AA8의 고체를 섬광 크로마토그래피(메탄올, 디클로로메탄)에 의한 정제 후 수득한다.

수율: 1.5 g (90%)

¹H NMR (CDCl₃, ppm): 0.83-1.00 (9H); 1.18-1.32 (24H); 1.37-1.77 (5H); 1.93-2.41 (6H); 3.07-3.97 (6H); 4.44-4.77 (2H); 7.66-8.21 (2H).

LC/MS (ESI): 509.6; (계산된 ([M+H]⁺): 509.4).

실시예 AA9: 분자 AA9

분자 A19: 라우르산과 L-페닐알라닌 사이의 반응에 의해 수득된 생성물.

분자 A5의 제조에 사용된 것과 유사한 방법에 의해, 라우르산(8.10 g, 40.45 mmol) 및 L-페닐알라닌(7 g, 42.38 mmol)을 적용시켜, 백색 고체를 수득한다.

수율: 12.7 g (98%)

¹H NMR (DMSO-d₆, ppm): 0.86 (3H); 1.10-1.30 (16H); 1.36 (2H); 2.02 (2H); 2.82 (1H); 3.05 (1H); 4.42 (1H); 7.15-7.30 (5H); 8.05 (1H); 12.61 (1H).

LC/MS (ESI): 348.2; (계산된 ([M+H]⁺): 348.5).

분자 A20: 분자 A19와 L-프롤린의 메틸 에스테르의 하이드로클로라이드 염 사이의 반응에 의해 수득된 생성물.

분자 A6의 제조에 사용된 것과 유사한 방법에 의해, 분자 A19(9.98 g, 28.72 mmol) 및 L-프롤린의 메틸 에스테르의 하이드로클로라이드 염(5.23 g, 31.59 mmol)에 적용시켜, 무색 오일을 실리카 겔(사이클로헥산, 에틸 아세테이트) 위에서 컬럼 프로마토그래피에 의한 정제 후 수득한다.

수율: 5.75 g (44%)

¹H NMR (CDCl₃, ppm): 0.88 (3H); 1.10-1.30 (16H); 1.50-1.75 (3H); 1.80-2.02 (3H); 2.17 (2H); 2.65 (0.5H); 2.95 (1H); 3.05-3.20 (1.5H); 3.50-3.65 (1H); 3.75 (3H); 4.29 (0.5H); 4.46 (0.5H); 4.70 (0.1H); 4.95 (0.9H); 6.20-6.30 (1H); 7.15-7.30 (5H).

LC/MS (ESI): 459.2; (계산된 ([M+H]⁺): 459.6).

분자 A21: 분자 A20의 비누화에 의해 수득된 생성물.

수산화리튬(LiOH)(600.49 mg, 25.07 mmol)을 THF/메탄올/물(40/40/40 mL)의 혼합물 중 분자 A20의 용액(5.75 g, 12.54 mmol)에 0℃에서 가한 후, 혼합물을 실온에서 20시간 동안 교반한다. 진공 하에서 유기 용매의 증발 후, 수성 상을 물 속에서 희석시키고, 1 N 수성 HCl 용액으로 pH가 1이 될 때까지 산성화시킨다. 이후에, 생성물을 에틸 아세테이트로 추출한다. 합한 유기 상을 포화된 수성 NaCl 용액으로 세척하고, Na₂SO₄ 위에서 건조시키고 여과하며, 감압하에 농축시켜 무색 오일을 수득한다.

수율: 5.7 g (정량적)

¹H NMR (CDCl₃, ppm): 0.88 (3H); 1.10-1.30 (16H); 1.50-1.80 (3H); 1.67-2.02 (2H); 2.20 (2H); 2.25 (0.4H); 2.60 (0.6H); 2.85-3.10 (2.6H); 3.55-3.65 (1.4H); 4.35 (0.6H); 4.55 (0.4H); 4.94 (1H); 6.28 (0.4H); 6.38 (0.6H); 7.20-7.30 (5H).

LC/MS (ESI): 445.2; (계산된 ([M+H]⁺): 445.6).

분자 A22: Boc-에틸렌디아민과 분자 A21 사이의 반응에 의해 수득된 생성물.

분자 A6의 제조에 사용된 것과 유사한 방법에 의해, 분자 A21(5.67 g, 12.75 mmol) 및 Boc-에틸렌디아민(2.25 g, 14.03 mmol)에 적용시켜, 무색 오일을 실리카 겔(디클로로메탄, 메탄올) 위에서 컬럼 크로마토그래피에 의한 정제 후 수득한다.

수율: 5.7 g (76%)

¹H NMR (CDCl₃, ppm): 0.88 (3H); 1.25 (16H); 1.43 (9H); 1.58 (2.6H); 1.75-1.95 (1.4H); 2.15-2.30 (3H); 2.64 (0.5H); 2.95-3.10 (2.5H); 3.20-3.40 (4H); 3.45 (0.5H); 3.55 (0.2H); 3.66 (1H); 4.44 (1H); 4.50 (0.2H); 4.60 (0.6H); 4.99 (0.7H); 5.54 (0.5H); 5.95 (0.2H); 6.17 (1H); 6.60 (0.5H); 7.07 (0.5H); 7.20-7.40 (5H).

LC/MS (ESI): 587.4; (계산된 ([M+H]⁺): 587.8).

분자 AA9

분자 AA2의 제조에 사용된 것과 유사한 방법 후, 분자 A22(5.66 g, 9.65 mmol)에 적용시켜, 반응 매질의 진공 하에 농축 후 수득된 잔사를 메탄올에 용해시키고 감압하에 증발시키며, 공정을 4회 반복하여 하이드로클로라이드 염으로서 분자 AA9의 백색 발포체를 수득한다.

수율: 4.9 g (97%)

¹H NMR (DMSO-d₆, 120℃, ppm): 0.89 (3H); 1.26 (16H); 1.43 (2H); 1.68 (0.6H); 1.75-2.00 (3H); 2.05-2.25 (2.4H); 2.82-3.05 (5H); 3.38 (2H); 3.50-3.70 (1.4H); 4.25 (0.6H); 4.63 (0.4H); 4.77 (0.6H); 7.25-7.50 (5H); 7.55-8.20 (4H).

LC/MS (ESI): 487.4; (계산된 ([M+H]⁺): 487.7).

실시예 AA10: 분자 AA10

분자 A23: 니페코트산과 아라키돈산 사이의 반응에 의해 수득된 생성물

분자 A5의 제조에 사용된 것과 유사한 방법에 의해, 아라키돈산(2.30 g, 7.37 mmol) 및 니페코트산(1.00 g, 7.74 mmol)에 적용시켜, 백색 고체를 pH가 1이 될 때까지 산성화된 수성 상의 여과 후 수득하고, 고체를 물에 이어, 디클로로메탄으로 세척한다.

수율: 1.65 g (53%)

1H NMR (CDCl₃, ppm): 0.88 (3H); 1.07-1.88 (37H); 2.10 (1H); 2.28-2.45 (2H); 2.52 (1H); 2.91-3.17 (1.5H); 3.42 (0.5H); 3.72 (0.5H); 3.84 (0.5H); 4.08 (0.5H); 4.56 (0.5H).

LC/MS (ESI): 424.4; 848.0; (계산된 ([M+H]⁺): 424.4; ([2M+H]⁺): 847.8).

분자 A24: 분자 A23과 Boc-1-아미노-4,7,10-트리옥사-13-트리데칸아민 사이의 반응에 의해 수득된 생성물.

DIPEA(1.01 g, 7.79 mmol) 및 TBTU(1.31 g, 4.09 mmol)를 20 mL의 THF 중 분자 A23(1.65 g, 3.89 mmol)의 현탁액에 연속적으로 및 실온에서 가한다. 30분 교반 후, Boc-1-아미노-4,7,10-트리옥사-13-트리데칸아민(1.37 g, 4.28 mmol)을 가하고, 반응 매질을 실온에서 18시간 동안 교반한다. 용매를 감압하에 증발시킨 후, 잔사를 에틸 아세테이트(100 mL)로 희석시키고, 유기 상을 포화된 수성 NaHCO₃ 용액, 1 N 수성 HCl 용액, 포화된 수성 NaCl 용액으로 연속적으로 세척하고, Na₂SO₄ 위에서 건조시키며, 여과하고 감압하에 농축시킨다. 백색 고체를 섬광 크로마토그래피(사이클로헥산, 에틸 아세테이트, 메탄올)에 의한 정제 후 수득한다.

수율: 1.97 g (70%)

¹H NMR (CDCl₃, ppm): 0.88 (3H); 1.15-2.70 (54H); 3.10-3.46 (6H); 3.46-3.71 (12.6H); 3.92 (0.4H); 4.17 (0.6H); 4.49 (0.4H); 4.80-5.16 (1H); 6.35-6.76 (1H).

LC/MS (ESI): 726.8; (계산된 ([M+H]⁺): 726.6).

분자 AA10

분자 AA1의 제조에 사용된 것과 유사한 방법에 의해, 분자 A24(1.97 g, 2.71 mmol)에 적용시켜, 분자 AA10의 백색 고체를 용매의 증발, 아세톤 속에서 연마, 여과 및 아세톤을 사용한 세척에 이어, 감압하에서 50℃에서 건조 후 수득한다.

수율: 1.66 g (92%)

¹H NMR (DMSO-d₆, ppm): 0.86 (3H); 1.09-1.90 (42H); 2.05-2.68 (5H); 2.45-2.68 (1H); 2.78-3.19 (6H); 3.36-3.44 (2H); 3.44-3.60 (10H); 3.69-3.87 (1H); 4.20 (0.4H); 4.35 (0.6H).

LC/MS (ESI): 626.7; (계산된 ([M+H]⁺): 626.5).

실시예 AA12: 분자 AA12

분자 A26: 미리스토일 클로라이드와 L-프롤린 사이의 반응에 의해 수득된 생성물

디클로로메탄(1.63 L) 속의 용액 중 미리스토일 클로라이드(322 g, 1.30 mol)를 1시간 내에 2 N 수성 수산화나트륨(1.63 L) 중 L-프롤린(300.40 g, 2.61 mol)의 용액에 0℃에서 서서히 가한다. 첨가가 종료되면, 반응 매질의 온도를 2시간 내에 20℃로 다시 오게 한 후, 추가로 2시간 동안 교반한다. 혼합물을 0℃로 냉각시킨 후, 37% HCl 용액(215 mL)을 15분 내에 가한다. 반응 매질을 10분 동안 0℃에서 교반한 다음, 1시간 동안 0℃ 내지 20℃에서 교반한다. 유기 상을 분리하고, 10% HCl 용액(3 x 430 mL), 포화된 수성 NaCl 용액(430 mL)으로 세척하고, Na₂SO₄ 위에서 건조시키고, 면(cotton)을 통해 여과한 후, 감압하에 농축시킨다. 잔사를 헵탄(315 mL) 속에 용해한 후, 펜탄(1.6 L)을 기계적 교반 하에 가한다. 백색 고체를 소결된 여과기를 통한 여과 및 감압에서의 건조 후 수득한다.

수율: 410.6 g (97%)

¹H NMR (CDCl₃, ppm): 0.88 (3H); 1.28 (20H); 1.70 (2H); 1.90-2.10 (3H); 2.36 (2H); 2.51 (1H); 3.47 (1H); 3.56 (1H); 4.61 (1H).

LC/MS (ESI): 326.4; 651.7; (계산된 ([M+H]⁺): 326.3; ([2M+H]⁺): 651.6).

분자 A27: 분자 A26과 Boc-에틸렌디아민 사이의 반응에 의해 수득된 생성물.

HOBt(1.83 g, 11.98 mmol)에 이어, Boc-에틸렌디아민(1.62 g, 10.14 mmol)을 실온에서 메틸-THF(50 mL) 중 분자 A26(3.00 g, 9.21 mmol)의 용액에 연속적으로 가하고, 매질을 0℃로 냉각시킨다. EDC(2.29 g, 11.98 mmol)를 가한 후, 혼합물을 17시간 동안 0℃ 내지 실온에서 교반한다. 이후에 반응 매질을 포화된 수성 NH₄Cl 용액(50 mL), 포화된 수성 NaHCO₃ 용액(50 mL)에 이어, 포화된 수성 NaCl 용액(50 mL)으로 세척하고, Na₂SO₄ 위에서 건조시키고, 여과하며 감압하에 농축시킨다. 백색 고체를 메탄올 속에서 재결정화후 수득한다.

수율: 2.34 g (49%).

¹H NMR (CDCl₃, ppm): 0.88 (3H); 1.16-1.38 (20H); 1.44 (9H); 1.56-1.71 (2H); 1.78-2.45 (6H); 3.11-3.72 (6H); 4.30 (0.1H); 4.51 (0.9H); 4.87 (0.1H); 5.04 (0.9H); 6.87 (0.1H); 7.23 (0.9H).

LC/MS (ESI): 468.0; (계산된 ([M+H]⁺): 468.4).

분자 AA12

분자 AA1의 제조에 사용된 것과 유사한 방법에 의해, 분자 A27(2.34 g, 5.00 mmol)에 적용시켜, 분자 AA12의 백색 고체를 용매의 증발 및 디이소프로필 에테르 속에서의 연마 후 수득한다.

수율: 1.5 g (74%)

¹H NMR (MeOD-d4, ppm): 0.90 (3H); 1.21-1.43 (20H); 1.54-1.66 (2H); 1.85-2.28 (4H); 2.39 (2H); 3.00-3.17 (2H); 3.30-3.40 (1H); 3.43-3.71 (3H); 4.29 (0.94H); 4.48 (0.06H).

LC/MS (ESI): 368.2; (계산된 ([M+H]⁺): 368.3).

실시예 AA14: 분자 AA14

수지 AA14- 1: 4,7,10-트리옥사-1,13-트리데칸디아민과 수지 2-Cl-트리틸 클로라이드 사이의 반응에 의해 수득된 생성물

DIPEA(8.64 mL, 49.60 mmol)를 디클로로메탄(50 mL) 중 4,7,10-트리옥사-1,13-트리데칸디아민(10.87 mL, 49.60 mmol)의 용액에 실온에서 가한다. 이러한 용액을 수지 2-Cl-트리틸 클로라이드에 붓고 이를 고체 지지체 상에서 펩타이드 합성을 위해 채택된 반응기 속에서 디클로로메탄(100-200 메쉬, 1% DVB, 1.24 mmol/g)(4.00 g, 4.96 mmol)으로 먼저 세척하였다. 실온에서 2시간 교반 후, HPLC 등급의 메탄올(0.8 mL/g 수지, 3.2 mL)을 가하고, 혼합물을 실온에서 15분 동안 교반한다. 수지를 여과하고, 디클로로메탄(3 x 50 mL), DMF(2 x 50 mL), 디클로로메탄(2 x 50 mL), 이소프로판올(1 x 50 mL) 및 디클로로메탄(3 x 50 mL)으로 연속적으로 세척한다.

수지 AA14-2: 수지 AA14-1과 Fmoc-글리신 사이의 반응에 의해 수득된 생성물.

DIPEA(5.18 mL, 29.76 mmol)를 DMF/디클로로메탄 1:1(60 mL)의 혼합물 중 Fmoc-글리신(4.42 g, 14.88 mmol) 및 1-[비스(디메틸아미노)메틸렌]-1H-1,2,3-트리아졸로[4,5-b]피리디늄 3-옥사이드-헥사플루오로포스페인트(HATU, 5.66 g, 14.88 mmol)의 용액에 가한다. 완전한 용해 후, 수득된 용액을 수지 AA14-1에 붓는다. 실온에서 2시간 교반 후, 수지를 여과하고, DMF(3 x 60 mL), 이소프로판올(1 x 60 ml) 및 디클로로메탄(3 x 60 mL)으로 연속적으로 세척한다.

수지 AA14-3: 수지 AA14-2와 DMF/피페리딘 80:20의 혼합물 사이의 반응에 의해 수득된 생성물. 수지 AA14-2를 DMF/피페리딘 80:20(50 mL)의 혼합물로 처리한다. 실온에서 30분 교반 후, 수지를 여과하고, DMF(3 x 50 mL), 이소프로판올(1 x 50 mL) 및 디클로로메탄(3 x 50 mL)으로 연속적으로 세척한다.

수지 AA14-4: 수지 AA14-3와 Fmoc-프롤린 사이의 반응에 의해 수득된 생성물.

수지 AA14-2에 대해 사용된 것과 유사한 방법에 의해, DMF(50 mL) 중 수지 AA14-3 및 Fmoc-프롤린(5.02 g, 14.88 mmol)에 적용하여, 수지 AA14-4를 수득한다.

수지 AA14-5: 수지 AA14-4와 DMF/피페리딘 80:20의 혼합물 사이의 반응에 의해 수득된 생성물.

수지 AA14-3에 대해 사용된 것과 유사한 방법에 의해, 수지 AA14-4 및 DMF/피페리딘 80:20(50 mL)의 혼합물에 적용시켜, 수지 AA14-5를 수득한다.

수지 AA14-6: 수지 AA14-5와 팔미트산 사이의 반응에 의해 수득된 생성물.

수지 AA14-4의 제조에 사용된 것과 유사한 방법에 의해, 수지 AA14-5 및 팔미트산(3.82 g, 14.88 mmol)에 적용하여, 수지 AA14-6을 수득한다.

분자 AA14 수지 AA14-6을 TFA/디클로로메탄 1:1 (50 mL)의 혼합물로 처리한다. 실온에서 30분 교반 후, 수지를 여과하고 디클로로메탄(3 x 50 mL)으로 세척한다. 용매를 진공하에 증발시킨다. 2개의 동시증발을 이후 잔사(residue) 상에서 디클로로메탄(50 mL)에 이어 디이소프로필에테르(50 mL)를 사용하여 수행한다. 잔사를 디클로로메탄(50 mL) 속에 용해시키고, 유기 상을 1N 수성 NaOH 용액(1 x 50 mL)에 이어, 포화된 NaCl 용액(2 x 50 mL)으로 세척한다. Na₂SO₄ 위에서 건조시킨 후, 유기 상을 여과하고, 진공하에 농축시키며, 잔사를 실리카 겔(디클로로메탄, 메탄올, NH4OH) 위에서 크로마토그래피로 여과한다.

수율: 1.65 g (7 단계에 걸쳐 전반적으로 54%)

¹H NMR (CDCl₃, ppm): 0.88 (3H); 1.18-2.39 (38H); 2.79 (2H); 3.23-3.44 (2H); 3.47-3.69 (14H); 3.76 (0.92H); 3.82 (0.08H); 3.98 (0.08H); 4.03 (0.92H); 4.34 (0.08H); 4.39 (0.92H); 7.00-7.40 (2H).

LC/MS (ESI): 613.7; (계산된 ([M+H]⁺): 613.5).

AB: 코-폴리아미노산의 합성

부분 AB: 코-폴리아미노산의 합성

실시예 AB1: 분자 AA1에 의해 변형되고 수 평균 분자량(Mn)이 2900 g/mol인 코-폴리아미노산 AB1 - 나트륨 폴리-L-글루타메이트

코- 폴리아미노산 AB1-1: 헥실아민에 의해 개시된 γ-벤질-L-글루타메이트 N-카복시하이드라이드의 중합으로부터 기원한 상대적인 수 평균 분자량(Mn)이 3861 g/mol인 폴리-L-글루탐산.

γ-벤질-L-글루타메이트 N-카복시무수물(89.9 g, 341 mmol)을 진공 하에 30분 동안 오븐 속에서 건조시킨 환저 플라스크 속에 둔 후, 무수 DMF(200 mL)를 도입한다. 이후에 혼합물을 용해가 완료될 때까지 아르곤 하에 교반하고, 4℃로 냉각시킨 후, 헥실아민(2.05 mL; 15.5 mmol)을 신속하게 도입한다. 혼합물을 4℃와 실온 사이에서 2일 동안 교반한다. 반응 혼합물을 이후 65℃에서 2시간 동안 가열하고, 실온으로 냉각시킨 후, 디이소프로필 에테르(3 L)에 교반 하에 적가식으로 붓는다. 백색 침전물을 여과로 회수하고 디이소프로필 에테르(2 x 200 mL)로 세척한 후, 진공 하에 30℃에서 건조시켜 폴리(감마-벤질-L-글루탐)산(PBLG)을 수득한다.

4℃에서 트리플루오로아세트산(TFA, 340 mL), 아세트산 중 33% 브롬화수소산 용액(HBr)(240 mL, 1.37 mol)을 PBLG(74.8 g)의 용액에 적가한다. 혼합물을 실온에서 2시간 동안 교반한 후, 디이소프로필 에테르 및 물의 1:1(v/v) 혼합물에 교반 하에 적가식으로 붓는다(4 L). 2시간 교반 후, 이종 혼합물을 밤새 정치시킨다. 백색 침전물을 여과로 회수하고, 디이소프로필 에테르 및 물(340 mL)의 1:1(v/v) 혼합물에 이어서, 물(340 mL)로 세척한다.

이후에 수득된 고체를 10N 수성 수산화나트륨 용액에 이어서, 1N 수성 수산화나트륨 용액을 첨가하여 pH를 7로 조절함으로써 물(1.5 L) 속에 용해시킨다. 용해 후, 이론적인 농도를 물을 첨가하여 이론적으로 20 g/L로 조정함으로써 2.1 L의 최종 용적을 수득한다.

용액을 0.45-μm 여과기를 통해 여과한 후, 0.9% NaCl 용액에 대해 한외여과로 정제하여 투과물의 전기전도도가 50 μS/cm 미만인 최종 용적을 수득한다. 코-폴리아미노산의 용액을 1.8L의 최종 용적이 수득될 때까지 농축시킨다.

이후에, 수용액을 pH가 2가 될 때까지 37% 염산 용액을 첨가하여 산성화한다. 4시간 교반 후, 수득된 침전물을 여과하고, 물(2x340 mL)로 세척한 후, 30℃에서 진공하에 건조시켜 폴리옥시에틸렌 표준(PEG)에 대해 수 평균 분자량(Mn)이 3861 g/mol인 폴리-L-글루탐산을 수득한다.

코-폴리아미노산 AB1

코-폴리아미노산 AB-1(10.0 g)을 30℃ 내지 40℃에서 DMF(700 mL) 속에 용해시킨 후, 0℃로 냉각시킨다. 염산염 형태의 분자 AA1(1.64 g, 3.8 mmol)을 DMF(23 mL) 속에 현탁시킨 후, 트리에틸아민(0.39g, 3.8 mmol)을 가하고 혼합물을 용해가 완료될 때까지 교반 하에 약하게 가열시킨다. 0℃에서 코-폴리아미노산의 용액에, DMF(14 mL) 중 N-메틸모르폴린(NMM, 7.6 g, 75 mmol) 및 에틸 클로로포르메이트(ECF, 8.2g, 75 mmol)을 가한다. 0℃에서 10분 후, 분자 AA1을 함유하는 용액을 가하고, 혼합물을 30℃에서 2시간 동안 유지시킨다. 반응 혼합물을 15 중량%의 염화나트륨 및 HCl (pH 2)을 함유하는 5.5 L의 물에 적가한 후, 이를 밤새 정치시킨다. 침전물을 여과로 수집하고 진공하에 대략 30분 동안 건조시킨다. 수득된 백색 고체를 물(500 mL) 속에 넣고 1N NaOH 수용액을 서서히 첨가함으로써 pH를 7로 조절한다. 0.45-μm 여과기를 통해 여과한 후, 수득된 선명한 용액을 투과물의 전기전도도가 50 μS/cm 미만일 때까지 0.9% NaCl 용액 및 물에 대해 한외여과로 정제한다. 배출 후, 용액을 0.2-μm 여과기를 통해 여과하고 2 내지 8℃에서 저장한다.

건조 추출물(Dry extract): 24.9 mg/g

23의 평균 중합도(DP)는 주요 쇄로부터 기원하는 시그널의 통합에 그래프트된 소수성 물질로부터 기원한 시그널의 통합을 주요 쇄로부터 기원하는 시그널의 통합을 비교함으로써 D₂O에서 ¹H NMR에 의해 평가된다.

¹H NMR을 기반으로: i= 0.05

코-폴리아미노산 AB1의 계산된 평균 분자량은 라디칼 R₁ 및 R₂, 아스파르테이트 및/또는 글루타메이트 잔기(들)(아미드 결합 포함), 소수성 라디칼, DS 및 DP를 기준으로 계산한다.

코-폴리아미노산 AB1의 계산된 평균 분자량은 3945 g/mol이다.

HPLC-수성 SEC(캘리브런트(calibrant PEG)): Mn = 2900 g/mol.

실시예 AB2: 코-폴리아미노산 AB2 - 분자 AA1에 의해 변형되고 수 평균 분자량(Mn)이 3700 g/mol인 나트륨 폴리-L-글루타메이트

코-폴리아미노산 AB11의 제조에 사용된 것과 유사한 방법에 의해, 분자 AA1의 하이드로클로라이드 염(1.64 g, 3.8 mmol) 및 코-폴리아미노산 AB1-1의 제조에 사용된 것과 유사한 방법에 의해 수득된 상대적인 Mn이 5200 g/mol(10.0 g)인 폴리-L-글루탐산에 적용하여, 분자 AA1에 의해 변형된 나트륨 폴리-L-글루타메이트를 수득한다.

건조 추출물: 14.1 mg/g

DP(¹H NMR을 기준으로 평가): 35

¹H NMR을 기준으로: i = 0.05

코-폴리아미노산 AB2의 계산된 평균 분자량은 5972 g/mol이다.

HPLC-수성 SEC (캘리브런트 PEG): Mn = 3700 g/mol.

실시예 AB3: 코-폴리아미노산 AB3 - 분자 AA1에 의해 변형되고 수 평균 분자량(Mn)이 4900 g/mol인 나트륨 폴리-L-글루타메이트

코-폴리아미노산 AB1의 제조에 사용된 것과 유사한 방법에 의해, 분자 AA1의 하이드로클로라이드 염(3.30 g, 7.6 mmol) 및 코-폴리아미노산 AB1-1의 제조에 사용된 것과 유사한 방법에 의해 수득된 상대적인 수 평균 중량 (Mn)이 5200 g/mol(10.0g)인 폴리-L-글루탐산에 적용시켜, 분자 AA1에 의해 변형된 나트륨 폴리-L-글루타메이트를 수득한다.

건조 추출물: 23.4 mg/g

DP(¹H NMR을 기준으로 평가): 35

코-폴리아미노산 AB3의 계산된 평균 분자량은 6594 g/mol이다.

¹H NMR을 기준으로: i = 0.10

HPLC-수성 SEC(캘리브런트 PEG): Mn = 4900 g/mol.

실시예 AB4: 코-폴리아미노산 AB4 - 분자 AA2에 의해 변형되고 수 평균 분자량(Mn)이 1800 g/mol인 나트륨 폴리-L-글루타메이트

코-폴리아미노산 AB1의 제조에 사용된 것과 유사한 방법에 의해, 분자 AA2의 하이드로클로라이드 염(1.09 g, 2.4 mmol) 및 코-폴리아미노산 AB1-1의 제조를 위해 사용된 것과 유사하지만 공보(J. Am. Chem. Soc. 2000, 122, 26-34 (Subramanian G. et al.)에 기술된 프로토콜에 따라 트리메틸실란 요오다이드를 사용한 벤질 에스테르의 탈보호 단계에 의해 수득한 평균 중량 Mn이 5600(6.3 g)인 폴리-L-글루탐산에 적용하여, 분자 AA2에 의해 변형된 나트륨 폴리-L-글루타메이트를 수득한다.

건조 추출물: 21.5 mg/g

DP (¹H NMR에 의해 평가됨): 35

¹H NMR을 기준으로: i = 0.052

코-폴리아미노산 AB4의 계산된 평균 분자량은 6022 g/mol이다.

HPLC-수성 SEC (캘리브런트 PEG): Mn = 1800 g/mol.

실시예 AB5: 코-폴리아미노산 AB5 - 분자 AA6에 의해 변형되고 수 평균 분자량(Mn)이 2600 g/mol인 나트륨 폴리-L-글루타메이트

분자 AB1의 제조에 사용된 것과 유사한 방법에 의해, 분자 AA6의 하이드로클로라이드 염(2.06 g, 3.8 mmol) 및 코-폴리아미노산 AB1-1의 제조에 사용된 것과 유사한 방법에 의해 수득된 폴리-L-글루탐산(9.8 g)에 적용시켜, 분자 AA6에 의해 변형된 나트륨 폴리-L-글루타메이트를 수득한다.

건조 추출물: 20.9 mg/g

DP (¹H NMR을 기준으로 평가): 23

¹H NMR을 기준으로: i =0.05

코-폴리아미노산 AB5의 계산된 평균 분자량은 4079 g/mol이다.

HPLC-수성 SEC(캘리브런트 PEG): Mn = 2600 g/mol.

실시예 AB6: 코-폴리아미노산 AB6 - 분자 AA7에 의해 변형되고 수 평균 분자량(Mn)이 4000 g/mol인 나트륨 폴리-L-글루타메이트

코-폴리아미노산 AB1-1의 제조에 사용된 것과 유사한 방법에 의해 수득된, 평균 분자량 Mn이 3500 g/mol이고 중합도가 22(10.0 g)인 폴리-L-글루탐산을 DMF(420 mL) 속에 30℃ 내지 40℃에서 용해시킨 후 이러한 온도에서 유지시킨다. 동시에 분자 AA7의 하이드로크로라이드 염(1.47 g, 2.3 mmol), 및 트리에틸아민(0.23 g, 2.3 mmol)을 가한 후, 혼합물을 용해가 완료될 때까지 교반 하에 약하게 가열한다. DMF 중 코-폴리아미노산의 용액에, NMM(7.6 g, 75 mmol), AA7의 용액에 이어서 2-하이드록시피리딘 N-옥사이드(HOPO, 0.84 g, 7.5 mmol)을 가하고 배지의 온도를 실온으로 2시간에 걸쳐 증가시킨다. 반응 배지를 제직된 0.2-mm 여과기를 통해 여과하고 교반 하에 15 중량%의 NaCl 및 HCl(pH 2)를 함유하는 3.5L의 물에 적가하며 붓는다. 첨가 완료 후, pH를 37% HCl 용액을 사용하여 2로 재조정하고, 현탁액을 밤새 정치시킨다. 침전물을 여과로 수집한 후, 100 mL의 물로 세정한다. 수득된 백색 고체를 pH가 교반 하에 7이 될 때까지 1N 수성 NaOH 용액을 서서히 첨가하여 500 mL의 물 속에 용해시킨 후, 용액을 0.45-μm 여과기를 통해 여과한다. 수득된 선명한 용액을 침투물의 전도도가 50μS/cm 미만으로 될 때까지 0.9% NaCl 용액에 이어서 물에 대해 한외여과로 정제한다. 용액을 0.2-μm 여과기를 통해 여과하고 2 내지 8℃에서 저장한다.

건조 추출물: 21.6 mg/g

DP(¹H NMR을 기준으로 평가): 20

¹H NMR을 기준으로: i = 0.025

코-폴리아미노산 AB6의 계산된 평균 분자량은 3369 g/mol이다.

HPLC-수성 SEC(캘리브런트 PEG): Mn = 4000 g/mol.

실시예 AB7: 코-폴리아미노산 AB7 - 아세틸 그룹에 의해 이의 말단 중 하나에서 캡핑되고(capped) 분자 AA7에 의해 변형되고 수 평균 분자량(Mn)이 3300 g/mol인 나트륨 폴리-L-글루타메이트

코-폴리아미노산 AB7-1: 상대적인 수 평균 분자량(Mn)이 3600 g/mol이고 DP가 21이며, 헥실 아민에 의해 개시되고, 아세틸 그룹에 의해 이의 말단 중 하나에서 캡핑된 γ-벤질-L-글루타메이트 N-카복시무수물의 중합으로부터 기원한 폴리-L-글루탐산.

γ-벤질-L-글루타메이트 N-카복시무수물(Glu(OBn)-NCA, 100.0 g, 380 mmol)을 진공 하에 30분 동안 오븐 속에 미리 건조시킨 환저 플라스크 내에 둔 다음, 무수 DMF(225 mL)를 도입시킨다. 이후 혼합물을 용해가 완료될 때까지 아르곤 하에 교반하고, 4℃로 냉각시킨 후, 헥실아민(1.78 g, 17 mmol)을 신속하게 도입한다. 혼합물을 4℃ 내지 실온에서 2일 동안 교반한 다음, 디이소프로필 에테르(3.4 L) 속에 침전시킨다. 침전물을 여과로 회수하고, 디이소프로필 에테르(225 mL)로 2회 세척한 다음, 건조시켜 백색 고체를 수득하고 이를 450 mL의 THF 속에 용해시킨다. 이러한 용액에, DIPEA(31 mL, 176 mmol)에 이어서, 아세트산 무수물(17 mL, 176 mmol)을 연속적으로 가한다. 실온에서 일야(one night) 교반한 후, 용액을 디이소프로필 에테르(3 L) 속에 교반 하에 서서히 붓는다. 1시간 교반 후, 침전물을 여과하고, 디이소프로필 에테르(250 mL)로 2회 세척한 후, 진공 하에 30℃에서 건조시켜 아세틸 그룹에 의해 이의 말단 중 하나에서 캡핑된 폴리(감마-벤질-L-글루탐)산을 수득한다.

아세트산(235 mL) 중 33% 브롬화수소산의 용액(HBr)을 4℃에서 트리플루오로아세트산(TFA, 335 mL) 중 상기 코-폴리아미노산(72 g)의 용액에 적가한다. 혼합물을 실온에서 3시간 30분 동안 교반한 후, 디이소프로필 에테르 및 물의 1:1(v/v) 혼합물에 교반(4 L) 하에 적가식으로 붓는다. 2시간 교반 후, 이종 혼합물을 일야 동안 정치시킨다. 백색 침전물을 여과로 회수하고, 디이소프로필 에테르 및 물(340 mL)의 1:1(v/v) 혼합물에 이어 물(340 mL)로 연속적으로 세척한다.

수득된 고체를 10 N 수성 수산화나트륨 용액에 이어서 1 N 수성 수산화나트륨 용액을 첨가하여 pH 7로 조절함으로써 물 (1.5 L) 속에서 용해한다. 용해 후, 혼합물을 물을 첨가하여 2.1 L의 최종 용적을 수득한다. 용액을 0.45-μm 여과기를 통해 여과한 후, 0.9% NaCl 용액에 이어, 물에 대해 투과물의 전기전도도가 50 μS/cm 미만이 될 때까지 한외여과로 정제한다. 이후에 코-폴리아미노산의 용액을 1.8 L의 최종 용적이 수득될 때까지 농축시킨다.

이어서 수용액을 pH 가 2가 될 때까지 37% 염산 용액을 첨가하여 산성화한다. 4시간 교반 후, 수득된 침전물을 여과하고, 물(330 mL)로 세척한 후, 30℃에서 진공 하에 건조시켜 폴리에틸렌 표준물(PEG)과 관련한 수 평균 분자량(Mn)이 3600 g/mol이고 평균 중합도가 21인 폴리-L-글루탐산을 수득한다.

코-폴리아미노산 AB7: 코-폴리아미노산 AB6의 제조에 사용된 것과 유사한 방법에 의해, 분자 AA7의 하이드로클로라이드 염(1.43 g, 12.2 mmol) 및 코-폴리아미노산 AB7-1(10.0g) 및 코-폴리아미노산 AB7-1(10.0 g)에 적용하여, 분자 AA7에 의해 변형된 나트륨 폴리-L-글루타메이트를 수득한다.

건조 추출물: 24.3 mg/g

DP(¹H NMR를 기준으로 평가): 21

¹H NMR을 기준으로: i = 0.03

코-폴리아미노산 AB7의 계산된 평균 분자량은 3677 g/mol이다.

HPLC-수성 SEC(캘리브런트 PEG): Mn = 3300 g/mol.

실시예 AB8: 코- 폴리아미노산 AB8 - 분자 AA7에 의해 변형되고 수 평균 분자량(Mn)이 3600 g / mol인 나트륨 폴리 -L- 글루타메이트

코-폴리아미노산 AB8-1: 수평균 분자량 (Mn)이 3800 g/mol이고 중합도가 24이며, 암모니아에 의해 개시된 γ-벤질-L-글루타메이트 N-카복시무수물의 중합으로부터 기원한, 폴리-L-글루탐산.

프랑스 특허 제FR-A-2 801 226호에 기술된 것과 유사한 방법에 의해, γ-메틸-L-글루탐산 N-카복시무수물(25.0 g, 133.6 mmol) 및 디옥산(12.1 mL, 6.05 mmol) 중 0.5 N 암모니아 용액에 적용시켜, 폴리-L-글루탐산을 수득한다.

코-폴리아미노산 AB8:

코-폴리아미노산 AB6의 제조에 사용된 것과 유사한 방법에 의해, 분자 AA7의 하이드로클로라이드 염(2.1 g, 3.24 mmol) 및 코-폴리아미노산 AB8-1(14.3 g)에 적용시켜, 분자 AA7에 의해 변형된 나트륨 폴리-L-글루타메이트를 수득한다.

건조 추출물: 25.2 mg/g

DP(¹H NMR을 기준으로 평가): 24

¹H NMR을 기준으로: i = 0.03

코-폴리아미노산 AB8의 계산된 평균 분자량은 4099 g/mol이다.

HPLC-수성 SEC(캘리브런트 PEG): Mn = 3600 g/mol.

실시예 AB9: 코- 폴리아미노산 AB9 - 분자 AA3에 의해 변형되고 수 평균 분자량(Mn)이 3200 g / mol인 나트륨 폴리 -L- 글루타메이트

코-폴리아미노산 AB1의 제조에 사용된 것과 유사한 방법에 의해, 분자 AA3의 하이드로클로라이드 염 및 코-폴리아미노산 AB1-1의 제조에 사용된 것과 유사한 방법에 의해 수득된 폴리-L-글루탐산에 적용시켜, 분자 AA3에 의해 변형된 나트륨 폴리-L-글루타메이트를 수득한다.

건조 추출물: 14.7 mg/g

DP(¹H NMR을 기준으로 평가): 30

¹H NMR을 기준으로: i = 0.12

코-폴리아미노산 AB9의 계산된 평균 분자량은 6192 g/mol이다.

HPLC-수성 SEC(캘리브런트 PEG): Mn = 3200 g/mol.

실시예 AB10: 코- 폴리아미노산 AB10 - 분자 AA4에 의해 변형되고 수 평균 분자량(Mn)이 2600 g / mol인 나트륨 폴리 -L- 글루타메이트

코-폴리아미노산 AB7의 제조에 사용된 것과 유사한 방법에 의해, 분자 AA4의 하이드로클로라이드 염 및 코-폴리아미노산 AB1-1의 제조에 사용된 것과 유사한 방법에 의해 수득된 폴리-L-글루탐산에 적용시켜, 분자 AA4에 의해 변형된 나트륨 폴리-L-글루타메이트를 수득한다.

건조 추출물: 18.3 mg/g

DP(¹H NMR을 기준으로 평가): 25

¹H NMR을 기준으로: i = 0.08

코-폴리아미노산 AB10의 계산된 평균 분자량은 4870 g/mol이다.

HPLC-수성 SEC(캘리브런트 PEG): Mn = 2600 g/mol.

실시예 AB11: 코- 폴리아미노산 AB11 - 분자 AA5에 의해 변형되고 수 평균 분자량(Mn)이 2700 g / mol인 나트륨 폴리 -L- 글루타메이트

코-폴리아미노산 AB6의 제조에 사용된 것과 유사한 방법에 의해, 분자 AA5의 하이드로클로라이드 염 및 코-폴리아미노산 AB1-1의 제조에 사용된 것과 유사한 방법에 의해 수득된 폴리-L-글루탐산에 적용시켜, 분자 AA5에 의해 변형된 나트륨 폴리-L-글루타메이트를 수득한다.

건조 추출물: 20.2 mg/g

DP(¹H NMR을 기준으로 평가): 23

¹H NMR을 기준으로: i = 0.05

코-폴리아미노산 AB11의 계산된 평균 분자량은 4072 g/mol이다.

HPLC-수성 SEC(캘리브런트 PEG): Mn = 2700 g/mol.

실시예 AB12: 코-폴리아미노산 AB12 - 분자 AA8에 의해 변형되고 수 평균 분자량(Mn)이 3000 g/mol인 나트륨 폴리-L-글루타메이트

코-폴리아미노산 AB1의 제조에 사용된 것과 유사한 방법에 의해, 분자 AA8의 하이드로클로라이드 염 및 코-폴리아미노산 AB1-1의 제조에 사용된 것과 유사한 방법에 의해 수득된 폴리-L-글루탐산에 적용시켜, 분자 AA8에 의해 변형된 나트륨 폴리-L-글루타메이트를 수득한다.

건조 추출물: 19.5 mg/g

DP(¹H NMR을 기준으로 평가): 26

¹H NMR을 기준으로: i = 0.04

코-폴리아미노산 AB12의 계산된 평균 분자량은 4477 g/mol이다.

HPLC-수성 SEC(캘리브런트 PEG): Mn = 3000 g/mol.

실시예 AB13: 코- 폴리아미노산 AB13 - 분자 AA9에 의해 변형되고 수 평균 분자량(Mn)이 3300 g / mol인 나트륨 폴리 -L- 글루타메이트

코-폴리아미노산 AB6의 제조에 사용된 것과 유사한 방법에 의해, 분자 AA9의 하이드로클로라이드 염 및 코-폴리아미노산 AB1-1의 제조에 사용된 것과 유사한 방법에 의해 수득된 폴리-L-글루탐산에 적용시켜, 분자 AA9에 의해 변형된 나트륨 폴리-L-글루타메이트를 수득한다.

건조 추출물: 22.3 mg/g

DP(¹H NMR을 기준으로 평가): 35

¹H NMR을 기준으로: i = 0.12

코-폴리아미노산 AB13의 계산된 평균 분자량은 7226 g/mol이다.

HPLC-수성 SEC(캘리브런트 PEG): Mn = 3300 g/mol.

실시예 AB21: 코- 폴리아미노산 AB21 - 분자 AA7에 의해 변형되고 수 평균 분자량(Mn)이 3400 g / mol인 나트륨 폴리 -L- 글루타메이트

코-폴리아미노산 AB6의 제조에 사용된 것과 유사한 방법에 의해, 분자 AA7의 하이드로클로라이드 염(2.44 g, 2.4 mmol) 및 코-폴리아미노산 AB1-1의 제조에 사용된 것과 유사한 방법에 의해 수득된 폴리-L-글루탐산(10 g)에 적용시켜, 분자 AA7에 의해 변형된 나트륨 폴리-L-글루타메이트를 수득한다.

건조 추출물: 22.7 mg/g

DP(¹H NMR을 기준으로 평가): 22

¹H NMR을 기준으로: i = 0.056

코-폴리아미노산 AB21의 계산된 평균 분자량은 4090 g/mol이다.

HPLC-수성 SEC(캘리브런트 PEG): Mn = 3400 g/mol.

실시예 AB24: 코- 폴리아미노산 AB24 - 이의 말단 중 하나에서 아세틸 그룹에 의해 캡핑되고 분자 AA1에 의해 변형되며 수 평균 분자량(Mn)이 3900 g / mol인 나트륨 폴리-L-글루타메이트

코-폴리아미노산 AB6의 제조에 사용된 것과 유사한 방법에 의해, 분자 AA1의 하이드로클로라이드 염(1.330 g, 3.08 mmol) 및 코-폴리아미노산 AB7-1의 제조에 사용된 것과 유사한 방법에 의해 수득된, 상대적인 Mn이 5400 g/mol(4.0 g)인 폴리-L-글루탐산에 적용시켜, 이의 말단 중 하나에서 아세틸 그룹에 의해 캡핑되고 분자 AA1에 의해 변형된 나트륨 폴리-L-글루타메이트를 수득한다.

건조 추출물: 18.7 mg/g

DP(¹H NMR을 기준으로 평가): 38

¹H NMR을 기준으로: i = 0.089

코-폴리아미노산 AB24의 계산된 평균 분자량은 7088 g/mol이다.

HPLC-수성 SEC(캘리브런트 PEG): Mn = 3900 g/mol.

실시예 AB25: 코- 폴리아미노산 AB25 - 이의 말단 중 하나에서 아세틸 그룹에 의해 캡핑되고 분자 AA12에 의해 변형되며 수 평균 분자량(Mn)이 3700 g / mol인 나트륨 폴리-L-글루타메이트

코-폴리아미노산 AB7-1의 제조에 사용된 것과 유사한 방법에 의해 수득된 상대적인 평균 분자량 Mn이 5400 g/mol이고 중합도가 38(10.0 g)인 폴리-L-글루탐산을 30℃에서 DMF(420 mL) 속에 용해한 후, 이러한 온도에서 유지시킨다. 동시에, 분자 AA12의 하이드로클로라이드 염(4.56 g, 11.29 mmol)을 클로로포름(60 mL) 속에 용해하고, 트리에틸아민(1.14 g, 11.29 mmol)에 가한다. DMF 중 코-폴리아미노산의 용액에, NMM(7.6 g, 75.29 mmol)에 이어서 HOPO(2.51 g, 22.58 mmol)을 연속적으로 가한다. 이후에, 반응 매질을 0℃로 냉각시킨 후, EDC(4.33 g, 22.58 mmol)를 가하고, 혼합물을 0℃에서 1시간 동안 교반한 후, 분자 AA12의 용액을 가한다. 반응 매질을 2시간 동안 0℃ 내지 실온 사이에서 교반한다. 반응 매질을 제직된 0.2-mm 여과기를 통해 여과하고 15 중량%의 NaCl 및 HCl(pH 2)을 함유하는 3.95L의 물에 교반하여 적가식으로 붓는다. 첨가 말기에, pH를 37% HCl 용액으로 재조정하고 현탁액을 밤새 정지시킨다. 침전물을 여과로 수집한 후, pH가 교반 하에 7이 될 때까지 1N 수성 NaOH 용액을 서서히 첨가하여 780 mL의 물 속에 용해시킨다. 0.45-μm 여과기를 통해 여과한 후, 용액을 물을 첨가하여 희석시킨으로써 900 mL의 용적을 수득한 후, 아세톤(485 mL)을 가하여 30 중량%의 아세톤을 함유하는 용액을 수득한다. 이러한 용액을 활성탄 여과기(3M R53SLP)를 통해 여과한 후, 아세톤을 증류(40℃, 100mbar) 시킨다. 0.45-μm 여과기를 통해 여과한 후, 생성물을 침투물의 전기전도도가 50μS/cm 미만이 될 때까지 0.9% 수성 NaCl 용액, 탄산염 완충액 용액(150 mM), 0.9% 수성 NaCl 용액에 이어서 물에 대해 한외여과로 정제한다. 이후에 용액을 600 mL의 최종 용적이 수득될 때까지 농축시킨다. 용액을 0.2-μM 여과기를 통해 여과하고 2 내지 8℃에서 저장한다.

건조 추출물: 19.7 mg/g

DP(¹H NMR을 기준으로 평가): 38

¹H NMR을 기준으로: i = 0.16

코-폴리아미노산 AB25의 계산된 평균 분자량은 7877 g/mol이다.

HPLC-수성 SEC(캘리브런트 PEG): Mn = 3700 g/mol.

실시예 AB28: 코- 폴리아미노산 AB28 - 이의 말단 중 하나에서 아세틸 그룹에 의해 캡핑되고 분자 AA14에 의해 변형되며 수 평균 분자량(Mn)이 4700 g / mol인 나트륨 폴리 -L- 글루타메이트

코-폴리아미노산 AB6의 제조에 사용된 것과 유사한 방법에 의해, 분자 AA14(1.51 g, 2.46 mmol) 및 코-폴리아미노산 AB7-1의 제조에 사용된 것과 유사한 방법에 의해 수득된 상대적인 Mn이 5400 g/mol인 폴리-L-글루탐산에 적용시켜, 이의 말단 중 하나에서 아세틸 그룹에 의해 캡핑되고 분자 AA41에 의해 변형된 나트륨 폴리-L-글루타메이트를 투과물의 전도도가 50 μS/cm 미만이 될 때까지 0.9% 수성 NaCl 용액, 탄산염 완충액 용액(150 mM), 0.9% 수성 NaCl 용액에 이어서 물에 대한 한외여과에 의한 정제 후 수득한다. 이후에 코-폴리아미노산의 용액은 이론적으로 대략 20 g/L로 농축되며 pH는 7로 조정된다. 수용액을 0.2-μm 여과기를 통해 여과하고 4℃에서 저장한다.

건조 추출물: 6.1 mg/g

DP(¹H NMR을 기준으로 평가): 38

¹H NMR을 기준으로: i = 0.1

코-폴리아미노산 AB28의 계산된 평균 분자량은 8062 g/mol이다.

HPLC-수성 SEC(캘리브런트 PEG): Mn = 4700 g/mol.

부분 B:

BB: 소수성 분자(여기서 p는 2)의 합성

라디칼을 코-폴리아미노산 위로 그래프트하기 전에 상응하는 소수성 분자에 의해 다음 표에 나타낸다.

[표 1d] 본 발명에 따라 합성된 소수성 분자의 목록

부분 BA: 소수성 분자(여기서 p는 2이다)의 합성

실시예 BA1: 분자 BA1

분자 B1: 데카노산과 L-프롤린 사이의 반응에 의해 수득된 생성물.

디사이클로헥실 카보디이미드(DCC)(16.29 g, 78.96 mmol) 및 N-하이드록시석신이미드(NHS)(9.09 g, 78.96 mmol)를 THF(520 mL) 중 데카노산의 용액(14.28 g, 82.91 mmol)에 0℃에서 연속적으로 가한다. 실온에서 60시간 교반 후, 혼합물을 0℃로 20분 동안 교반한 후, 소결된 여과기를 통해 여과한다. L-프롤린(10 g, 86.86 mmol), 디이소프로필에틸아민(DIPEA)(68.8 mL) 및 물(60 mL)을 여액에 가한다. 실온에서 24시간 교반한 후, 매질을 물(300 mL)로 희석시킨다. 수성 상을 에틸 아세테이트(2 x 250 mL)로 세척하고, 1 N 수성 HCl 용액을 사용하여 pH ~1로 산성화한 후, 디클로로메탄(3 x 150 mL)으로 추출한다. 합한 유기 상을 Na₂SO₄ 위에서 건조시키고, 여과하고, 진공하에 농축시키며, 잔사를 실리카 겔 위에서 크로마토그래피(사이클로헥산, 에틸 아세테이트)로 정제한다.

수율: 14.6 g (69%)

¹H NMR (CDCl₃, ppm): 0.87 (3H); 1.26 (12H); 1.65 (2H); 2.02 (3H); 2.34 (2H); 2.41 (1H); 3.48 (1H); 3.56 (1H); 4.58 (1H).

LC/MS (ESI): 270.2; (계산된 ([M+H]⁺): 270.4)

분자 B2: 분자 B1과 L-라이신 사이의 반응에 의해 수득된 생성물.

분자 B1의 제조에 사용된 것과 유사한 방법에 의해, 분자 B1(14.57 g, 54.07 mmol) 및 L-라이신(4.15 g, 28.39 mmol)에 적용하여, 황색 오일을 수득한다.

수율: 16.4 g (93%)

¹H NMR (CDCl₃, ppm): 0.88 (6H); 1.26 (24H); 1.35-1.65 (8H); 1.85-2.35 (12H); 2.53 (0.2H); 2.90 (0.8H); 3.45-3.75 (5H); 4.50-4.70 (3H); 7.82 (1H).

LC/MS (ESI): 649.6; (계산된 ([M+H]⁺): 649.9).

분자 B3: 분자 B2와 Boc-에틸렌디아민 사이의 반응에 의해 수득된 생성물.

실온에서 DIPEA(8.80 mL) 및 2-(1H-벤조트리아졸-1-일)-1,1,3,3-테트라메틸우로늄 테트라플루오로보레이트(TBTU, 8.52 g, 26.54 mmol)를 THF(170 mL) 중 분자 B2(16.4 g, 25.27 mmol)의 용액에 가한다. 30분 교반 후, Boc-에틸렌디아민(4.45 g, 27.8 mmol)을 가한다. 실온에서 2시간 교반 후, 용매를 감압하에 증발시키고 잔사를 에틸 아세테이트(400 mL)로 희석시킨다. 유기 상을 물(250 mL), 포화된 수성 NaHCO3 용액(250 mL), 1 N 수성 HCl 용액(250 mL), 포화된 수성 NaCl 용액(250 mL)으로 세척하고 Na₂SO₄ 위에서 건조시킨다. 여과 및 진공 하에 농축 후, 수득된 잔사를 실시카 겔 위에서 크로마토그래피(에틸 아세테이트, 메탄올)로 정제하여 무색 오일을 수득한다.

수율: 12.8 g (64%)

¹H NMR (CDCl₃, ppm): 0.87 (6H); 1.25-1.60 (42H); 1.80-2.05 (4H); 2.15-2.45 (9H); 3.10-3.75 (10H); 4.30 (1H); 4.50 (2H); 5.50 (0.6H); 5.89 (0.2H); 6.15 (0.2H); 7.03 (1H); 7.47 (1H).

LC/MS (ESI): 791.8; (계산된 ([M+H]⁺): 792.1).

분자 BA1

디옥산(20.2 mL) 중 4 N HCl 용액을 디클로로메탄(110 ml) 중 분자 B3의 용액(12.78 g, 16.15 mmol)에 5℃에서 가한다. 5℃에서 20시간 교반한 후, 매질을 진공하에 농축시킨다. 수득된 잔사를 메탄올 속에 용해하고 진공하에 증발시키고, 이러한 작업을 4회 반복하여 하이드로클로라이드 염으로서 분자 BA1의 백색 고체를 수득한다.

수율: 11.4 g (97%)

¹H NMR (DMSO-d₆, ppm): 0.85 (6H); 1.25-1.50 (33H); 1.57 (1H); 1.70-2.40 (12H); 2.82 (2H); 3.00 (2H); 3.25-3.70 (6H); 4.05-4.50 (3H); 7.75-8.45 (6H).

LC/MS (ESI): 691.6; (계산된 ([M+H]⁺): 692.0).

실시예 BA2: 분자 BA2

분자 B4: 라우르산과 L-프롤린 사이의 반응에 의해 수득된 생성물.

분자 B1의 제조에 사용된 것과 유사한 방법에 의해, 라우르산(31.83 g, 157.9 mmol) 및 L-프롤린(20 g, 173.7 mmol)에 적용하여, 황색 오일을 수득한다.

수율: 34.3 g (73%)

¹H NMR (CDCl₃, ppm): 0.87 (3H); 1.26 (16H); 1.70 (2H); 1.90-2.10 (3H); 2.35 (2H); 2.49 (1H); 3.48 (1H); 3.56 (1H); 4.60 (1H).

LC/MS (ESI): 298.2; (계산된 ([M+H]⁺): 298.4).

분자 B5: 분자 B4와 L-라이신 사이의 반응에 의해 수득된 생성물.

분자 B1의 제조에 사용된 것과 유사한 방법에 의해, 분자 B4(33.72 g, 113.36 mmol) 및 L-라이신(8.70 g, 59.51 mmol)에 적용시켜, 백색 고체를 수득한다.

수율: 26.2 g (66%)

¹H NMR (CDCl₃, ppm): 0.88 (6H); 1.26 (32H); 1.35-1.65 (8H); 1.85-2.35 (15H); 2.87 (1H); 3.40-3.75 (5H); 4.50-4.75 (3H); 7.87 (1H).

LC/MS (ESI): 705.6; (계산된 ([M+H]⁺): 706.0).

분자 B6: Boc-에틸렌디아민과 분자 B5 사이의 반응에 의해 수득된 생성물.

분자 B3의 제조에 사용된 것과 유사한 방법에 의해, 분자 B5(25.74 g, 36.51 mmol) 및 Boc-에틸렌디아민(6.43 g, 40.16 mmol)에 적용시켜, 무색 오일을 수득한다.

수율: 30.9 g(정량적)

¹H NMR (CDCl₃, ppm): 0.88 (6H); 1.35-1.65 (50H); 1.85-2.35 (13H); 3.05-3.75 (10H); 4.25-4.65 (3H); 5.50 (0.4H); 5.88 (0.2H); 6.16 (0.2H); 7.08 (1H); 7.26 (1H); 7.49 (0.2H)

LC/MS (ESI): 847.8; (계산된 ([M+H]⁺): 848.2).

분자 BA2

분자 BA1의 제조에 사용된 것과 유사한 방법 후, 분자 B6(30.9 g, 36.47 mmol)에 적용시켜, 진공 하에 농축시켜 수득된 잔사를 메탄올 속에 용해하고 감압하에 증발시키며, 이러한 작업을 4회 반복하여 감압에서 건조 후 하이드로클로라이드 염으로서 분자 BA2의 백색 고체를 수득한다.

수율: 27.65 g (97%)

¹H NMR (DMSO-d₆, ppm): 0.85 (6H); 1.10-2.40 (54H); 2.75-3.15 (4H); 3.25-3.60 (6H); 4.05-4.50 (3H); 7.50-8.50 (6H).

LC/MS (ESI): 747.6; (계산된 ([M+H]⁺): 748.1).

실시예 BA3: 분자 BA3

분자 B7: 미리스트산과 L-프롤린 사이의 반응에 의해 수득된 생성물.

분자 B1의 제조에 사용된 것과 유사한 방법에 의해, 미리스트산(18.93 g, 82.91 mmol) 및 L-프롤린(10 g, 86.86 mmol)에 적용시켜, 황색 오일을 수득한다.

수율: 20 g (78%)

LC/MS (ESI): 326.2; (계산된 ([M+H]⁺): 326.6).

분자 B8: 분자 B7과 L-라이신 사이의 반응에 의해 수득된 생성물

분자 B1의 제조에 사용된 것과 유사한 방법에 의해, 분자 B7(20.02 g, 61.5 mmol) 및 L-라이신(4.72 g, 32.29 mmol)에 적용시켜, 백색 고체를 수득한다.

수율: 12.3 g (53%)

¹H NMR (DMSO-d₆, ppm): 0.85 (6H); 1.26 (40H); 1.35-1.50 (6H); 1.50-2.10 (10H); 2.10-2.25 (4H); 3.01 (2H); 3.31-3.55 (4H); 4.10-4.40 (3H); 7.68 (0.6H); 7.97 (1H); 8.27 (0.4H); 12.50 (1H).

LC/MS (ESI): 761.8; (계산된 ([M+H]⁺): 762.1).

분자 B9: Boc-에틸렌디아민과 분자 B8 사이의 반응에 의해 수득된 생성물.

분자 B3의 제조에 사용된 것과 유사한 방법에 의해, 분자 B8(12 g, 15.77 mmol) 및 Boc-에틸렌디아민(3.03 g, 18.92 mmol)에 적용시켜, 실시카 겔(에틸 아세테이트, 메탄올) 위에서 컬럼 크로마토그래피에 의한 정제 후 무색 오일을 수득한다.

수율: 12.5 g (88%)

¹H NMR (DMSO-d₆, ppm): 0.85 (6H); 1.20-1.55 (55H); 1.50-2.25 (14H); 2.95-3.10 (6H); 3.31-3.55 (4H); 4.10-4.40 (3H); 6.74 (1H); 7.60-8.25 (3H).

LC/MS (ESI): 904.1; (계산된 ([M+H]⁺): 904.3).

분자 BA3

분자 BA1의 제조에 사용된 것과 유사한 방법에 의해 수득된 잔사를 메탄올에 용해시키고 진공 하에 증발시키고, 이러한 작업을 4회 반복하여 감압에서의 건조 후에 하이드로크로라이드 염으로서 분자 BA3의 백색 고체를 수득한다.

수율: 9.2 g (79%)

¹H NMR (DMSO-d₆, ppm): 0.85 (6H); 1.10-1.65 (48H); 1.70-2.35 (12H); 2.85 (2H); 3.01 (2H); 3.25-3.65 (6H); 4.10-4.50 (3H); 7.70-8.40 (6H).

LC/MS (ESI): 803.9; (계산된 ([M+H]⁺): 804.2).

실시예 BA4: 분자 BA4

분자 B10: 분자 B8과 Boc-1-아미노-4,7,10-트리옥사-13-트리데칸 사이의 반응에 의해 수득된 생성물.

분자 B3의 제조에 사용된 것과 유사한 방법에 의해, 분자 B8(29.80 g, 39.15 mmol) 및 Boc-1-아미노-4,7,10-트리옥사-13-트리데칸(15.05 g, 46.96 mmol)에 적용시켜, 진한 무색 오일을 수득한다.

수율: 25.3 g (61%)

¹H NMR (DMSO-d₆, ppm): 0.85 (6H); 1.25-2.35 (75H); 2.85-3.20 (6H); 3.25-3.65 (16H); 4.10-4.45 (3H); 6.38 (0.1H); 6.72 (0.9H); 7.50-8.25 (3H).

LC/MS (ESI): 1064.2; (계산된 ([M+H]⁺): 1064.5).

분자 BA4

분자 BA1의 제조에 사용된 것과 유사한 방법에 의해, 분자 B10(25.3 g, 23.8 mmol)에 적용시켜, 진공 하에 농축 후 수득된 잔사를 메탄올 속에 용해하고 진공 하에 증발시키고, 이러한 작업을 4회 반복하여 감압 하에서 건조 후 하이드로클로라이드 염으로서 분자 BA4의 백색 고체를 수득한다.

수율: 20.02 g (84%)

¹H NMR (DMSO-d₆, ppm): 0.85 (6H); 1.15-2.35 (66H); 2.80-3.20 (6H); 3.30-3.65 (16H); 4.10-4.45 (3H); 7.55-8.60 (6H).

LC/MS (ESI): 964.9; (계산된 ([M+H]⁺): 964.6).

실시예 BA5: 분자 BA5

분자 B11: 팔미토일 클로라이드와 L-프롤린 사이의 반응에 의해 수득된 생성물.

분자 A26의 제조에 사용된 것과 유사한 방법에 의해, 팔미토일 클로라이드(15.39 g, 55.99 mmol) 및 L-프롤린(12.89 g, 111.98 mmol)에 적용시켜, 분자 B11의 백색 고체를 수득한다.

수율: 19.10 g (96%)

LC/MS (ESI): 354.4; 707.8; (계산된 ([M+H]⁺): 354.3; ([2M+H]⁺): 707.6).

분자 B12: 분자 B11과 L-라이신 사이의 반응에 의해 수득된 생성물.

분자 B1의 제조에 사용된 것과 유사한 방법에 의해, 분자 B11(19.10 g, 54.02 mmol) 및 L-라이신(4.15 g, 28.36 mmol)에 적용시켜, 오일성 잔사를 감압 하에 반응 매질의 농축 후 수득한다. 이러한 잔사를 물(150 mL) 속에 희석시키고, 에틸 아세테이트(2 x 75 mL)로 세척한 후, 수성 상을 6 N HCl을 서서히 첨가함으로써 pH가 1이 될 때까지 산성화한다. 생성물을 디클로로메탄으로 3회 추출하고, 유기 상을 Na₂SO₄ 위에서 건조시킨 후 여과하고 감압하에 농축시켜 11.2 g의 황색 오일성 잔사를 수득한다. 동시에, 에틸 아세테이트의 앞서의 유기 상을 2 N 수성 HCl 용액(2 x 75 mL), 포화된 수성 NaCl 용액(75 mL)으로 세척하고, Na₂SO₄ 위에서 건조시키며, 여과하고 농축시켜 10.2 g의 황색 오일성 잔사를 수득한다. 백색 고체를 아세톤 중 이들 잔사 중 각각 하나의 재결정 후 수득한다.

수율: 11.83 g (54%)

¹H NMR (CDCl₃, ppm): 0.87 (6H); 1.06-2.44 (70H); 2.78-2.96 (1H); 3.35-3.75 (5H); 4.28-4.43 (0.1H); 4.43-4.52 (0.2H); 4.52-4.61 (1.8H); 4.61-4.75 (0.9H); 7.74-8.02 (2H).

LC/MS (ESI): 818.0; (계산된 ([M+H]⁺): 818.7).

분자 B13: 분자 B12와 Boc-에틸렌디아민 사이의 커플링에 의해 수득된 생성물

분자 A27의 제조에 사용된 것과 유사한 방법에 의해, THF 중 용액 속의 분자 B12(18.00 g, 22.02 mmol) 및 Boc-에틸렌디아민(4.23 g, 26.43 mmol)에 적용시켜 아세토니트릴 속에서 2회 재결정 후, 백색 고체를 수득한다.

수율: 17.5 g (83%)

¹H NMR (DMSO-d6, ppm): 0.85 (6H); 1.15-2.29 (79H); 2.92-3.12 (6H); 3.30-3.59 (4H); 4.06-4.13 (0.65H); 4.16-4.29 (2H); 4.38-4.42 (0.35H); 6.71-6.76 (1H); 7.60-7.69 (1.3H); 7.76-7.81 (0.65H); 7.93-7.97 (0.35H); 8.00-8.04 (0.35H); 8.10-8.17 (0.35H).

LC/MS (ESI): 960.4; (계산된 ([M+H]⁺): 960.8).

분자 BA5

분자 BA1의 제조에 사용된 것과 유사한 방법에 의해, 분자 B13(24.4 g, 25.43 mmol)에 적용하여, 진공 하에 농축 후 수득된 잔사를 디클로로메탄(150 mL) 속에 용해하고, 유기 상을 2 M 수성 수산화나트륨 용액(90 mL)으로 2회 세척한다. 아세토니트릴(120 mL)을 가하고, 디클로로메탄을 감압 하에서 농축시켜 제거한다. 이후에, 매질을 72 시간 동안 정치시키고, 백색 고체를 여과 및 아세토니트릴로 세정 후, 감압하에 건조시켜 수득한다. 이러한 작업을 4회 반복한다.

수율: 14.28 g (65%)

¹H NMR (DMSO-d6, ppm): 0.85 (6H); 1.06-2.32 (70H); 2.53-2.63 (2H); 2.89-3.61 (10H); 4.04-4.43 (3H); 7.55-7.62 (0.65H); 7.65-7.72 (0.65H); 7.80 (0.65H); 7.91 (0.35H); 8.03 (0.35H); 8.14-8.23 (0.35H).

LC/MS (ESI): 860.0; (계산된 ([M+H]⁺): 860.8).

실시예 BA6: 분자 BA6

분자 B14: 분자 A26과 2,3-디아미노프로피온산 사이의 커플링에 의해 수득된 생성물

분자 B1의 제조에 사용된 것과 유사한 방법에 의해, 분자 A26(80.00 g, 245.78 mmol) 및 2,3-디아미노프로피오닉 디하이드로클로라이드(22.84 g, 129.04 mmol)에 적용하여, 아세토니트릴 속에서 재결정 후 백색 고체를 수득한다.

수율: 69 g (78%)

¹H NMR (DMSO-d6, ppm): 0.86 (6H); 1.08-1.38 (40H); 1.40-1.55 (4H); 1.68-2.30 (12H); 3.16-3.66 (6H); 4.20-4.39 (3H); 7.67-8.31 (2H); 12.70 (1H).

LC/MS (ESI): 719.4; 741.5; (계산된 ([M+H]⁺): 719.6; ([M+Na]⁺): 741.6).

분자 B15: 분자 B14와 Boc-에틸렌디아민 사이의 커플링에 의해 수득된 생성물

분자 A27의 제조에 사용된 것과 유사한 방법에 의해, 디클로로메탄 중 용액 속의 분자 B14(32.00 g, 44.50 mmol) 및 Boc-에틸렌디아민(8.56 g, 53.40 mmol)에 적용하여, 실리카 겔(에틸 아세테이트, 메탄올) 위에서 크로마토그래피에 의한 정제 후 무색 오일을 수득한다.

수율: 24.5 g (64%)

¹H NMR (DMSO-d6, ppm): 0.85 (6H); 1.16-2.42 (65H); 2.89-3.14 (4H); 3.17-3.66 (6H); 4.11-4.43 (3H); 6.77 (1H); 7.38-8.23 (3H).

LC/MS (ESI): 861.7; (계산된 ([M+H]⁺): 861.7).

분자 BA6

분자 BA5의 제조에 사용된 것과 유사한 방법에 의해, 분자 B15(24.50 g, 28.45 mmol)에 적용시켜, 백색 고체를 아세토니트릴 속에서 재결정 후 수득한다.

수율: 19.7 g (91%)

¹H NMR (DMSO-d6, ppm): 0.85 (6H); 1.10-2.40 (58H); 2.51-2.62 (2H); 2.90-3.16 (2H); 3.16-3.67 (6H); 4.04-4.47 (3H); 7.33-8.27 (3H).

LC/MS (ESI): 761.5;　(계산된 ([M+H]⁺): 761.6).

실시예 BA7: 분자 BA7

분자 B16: N-(3급-부톡시카보닐)-1.6-디아미노헥산과 분자 B8 사이의 반응에 의해 수득된 생성물

분자 A27의 제조에 사용된 것과 유사한 방법에 의해, 디클로로메탄 중 분자 B8(10 g, 13.14 mmol) 및 N-(3급-부톡시카보닐)-1,6-디아미노헥산(3.41 g, 15.77 mmol)에 적용시켜, 백색 고체를 아세토니트릴 속에서 재결정 후 수득한다.

수율: 10.7 g (85%)

¹H NMR (CDCl₃, ppm): 0.88 (6H); 1.17-2.40 (79H); 3.00-3.71 (10H); 4.26-4.58 (3H); 4.67 (1H); 6.74 (1H); 7.34-7.49 (2H).

LC/MS (ESI): 959.9; (계산된 ([M+H]⁺): 959.8).

분자 BA7

분자 BA1의 제조에 사용된 것과 유사한 방법 후에, 분자 B16(10.5 g, 10.94 mmol)에 적용시켜, 2 N 수성 NaOH 용액을 0℃로 냉각된 반응 매질에 적가한다. 수성 상을 디클로로메탄으로 추출한 후, 유기 상을 5% 수성 NaCl 용액으로 추출한다. Na2SO4 위에서 건조시킨 후, 유기 상을 여과하고, 진공 하에 농축시키고 잔사를 아세토니트릴 속에서 재결정한다.

수율: 5.4 g (58%)

¹H NMR (CDCl₃, ppm): 0.88 (6H); 1.19-2.40 (72H); 2.67 (2H); 3.03-3.70 (8H); 4.26-4.57 (3H); 6.71 (1H); 7.39-7.49 (2H).

LC/MS (ESI): 859.8; (계산된 ([M+H]⁺): 859.7).

BB: 코-폴리아미노산의 합성

화학식 VII 또는 화학식 VIIa의 통계적 코-폴리아미노산

[표 1e]

부분 BB: 코-폴리아미노산의 합성

실시예 BB1: 코-폴리아미노산 BB1 - 분자 BA2에 의해 변형되고 수 평균 분자량(Mn)이 2400 g/mol인 나트륨 폴리-L-글루타메이트

코- 폴리아미노산 BB1-1: 헥실아민에 의해 개시된 γ-벤질-L-글루타메이트 N-카복시무수물의 중합으로부터 기원한 상대적인 수 평균 분자량(Mn)이 3860 g/mol인 폴리-L-글루탐산

γ-벤질-L-글루타메이트 N-카복시무수물(90 g, 342 mmol)을 진공 하에 오븐 속에서 미리 건조시킨 환저 플라스크 속에 30분 동안 둔 다음, 무수 DMF(465 mL)를 도입한다. 이후에 혼합물을 용해가 완료될 때까지 아르곤 하에서 교반하고, 4℃로 냉각시킨 후, 헥실아민(1.8 mL, 14 mmol)을 신속하게 도입한다. 혼합물을 4℃와 실온 사이에서 2일 동안 교반한다. 반응 혼합물을 65℃에서 4시간 동안 가열한 후, 실온으로 냉각한 다음, 냉 디이소프로필 에테르(6 L)에 교반하에 적가식으로 붓는다. 백색 침전물을 여과로 회수하고, 디이소프로필 에테르(500 mL)로 2회 세척한 후, 진공 하에 30℃에서 건조시켜 폴리(γ-벤질-L-글루탐)산(PBLG)을 수득한다.

아세트 산(135 mL, 0.77 mol) 중 33% 브롬화수소산 용액(HBr)을 4℃에서 트리플루오로아세트산(TFA, 325 mL) 중의 PBLG(42.1 g)의 용액에 적가한다. 혼합물을 실온에서 2시간 동안 교반한 다음, 디이소프로필 에테르 및 물의 1:1 (v/v) 혼합물에 교반 하에 붓는다(1.6 L). 1시간 30분 교반 후, 이종 혼합물을 밤새 정치시킨다. 백색 침전물을 여과로 회수하고, 디이소프로필 에테르 및 물(200 mL)의 1:1 (v/v) 혼합물로 세척한다.

수득된 고체를 10 N 수성 수산화나트륨 용액을 첨가한 후, 1 N 수성 수산화나트륨 용액을 첨가함으로써 pH를 7로 조절하여 물(1 L) 속에 용해시킨다. 용해 후, 최종 용적이 1.5 L가 될 때까지 물을 첨가하여 이론적 농도를 이론적으로 25 g/L로 조절한다.

용액을 0.45-μm 여과기를 통해 여과한 후, 0.9% NaCl 용액에 이어 물에 대해 투과물의 전기전도도가 50 μS/cm 미만으로 될 때까지 한외여과로 정제한다.

이후에 수성 용액을 pH가 2로 될 때까지 37% 염산 용액을 첨가하여 산성화한다. 4시간 교반 후, 수득된 침전물을 여과한 후, 30℃에서 진공하에 건조시켜 폴리옥시에틸렌 표준물(PEG)와 관련하여 수 평균 분자량(Mn)이 3860 g/mol인 폴리-L-글루탐산을 수득한다.

코- 폴리아미노산 BB1

코-폴리아미노산 BB-1(10.0 g)을 DMF(700 mL) 속에 30 내지 40℃에서 용해한 후 0℃로 냉각시킨다. 분자 BA2의 하이드로클로라이드 염(2.95 g, 3.8 mmol)을 CMF(45 mL) 속에 현탁시킨 후, 트리에틸아민(0.39 g, 3.8 mmol)을 이러한 현탁액에 가한 후, 혼합물을 용해가 완료될 때까지 교반 하여 약하게 가열한다. DMF(14 mL)중 N-메틸모르폴린(NMM, 7.6 g, 75 mmol) 및 에틸 클로로포르메이트(ECF, 8.1 g, 75 mmol)을 0℃에서 코-폴리아미노산의 용액에 가한다. 0℃에서 10분 후, 분자 BA2의 용액을 가하고 매질을 30℃에서 1시간 동안 유지시킨다. 반응 매질을 15 중량%의 염화나트륨 및 HCl(pH 2)을 함유하는 물 6 L에 적가한 후, 이를 밤새 휴지시킨다. 침전물을 여과로 수집하고, 염화나트륨 용액으로 pH 2(1 L)에서 세척하고 진공하에 대략 1시간 동안 건조시킨다. 수득된 백색 고체를 물(600 mL) 속에 넣고 pH를 1N 수성 NaOH 용액을 서서히 첨가하여 7로 조절한다. 용적을 물을 첨가하여 700 mL로 조절한다. 0.45-μm 여과기를 통해 여과한 후, 수득된 선명한 용액을 투과물의 전기전도도가 50μS/cm 미만이 될 때까지 0.9% NaCl 용액에 대해 한외여과로 정제한다. 배출 후, 용액을 0.2-μm 여과기를 통해 여과하고 2 내지 8℃에서 저장한다.

건조 추출물: 19.7 mg/g

DP(¹H NMR을 기준으로 평가): 23

¹H NMR을 기반으로: i= 0.05

코-폴리아미노산 BB1의 계산된 평균 분자량은 4350 g/mol이다.

HPLC-수성 SEC(캘리브런트(calibrant PEG)): Mn = 2400 g/mol.

실시예 BB2: 코-폴리아미노산 BB2 - 분자 BA2에 의해 변형되고 수 평균 분자량(Mn)이 4900 g/mol인 나트륨 폴리-L-글루타메이트

코-폴리아미노산 BB1-1의 제조에 사용된 것과 유사한 방법에 의해 수득한 수평균 분자량(Mn)이 4100 g/mol(5.0g)인 폴리-L-글루탐산을 30 내지 40℃에서 DMF (205 mL) 속에 용해한 후 실온에서 유지시킨다. 동시에, 분자 BA2(1.44 g, 1.84 mmol)의 하이드로클로라이드 염을 DMF(10mL) 속에 현탁시키고, 트리에틸아민(0.19 g, 1.84 mmol)을 가한 다음, 혼합물을 용해가 완료될 때까지 교반 하에 약하게 가열한다. DMF 중 코-폴리아미노산의 용액에, NMM(3.7g, 36.7 mmol), 분자 BA2의 용액에 이어서, 2-하이드록시피리딘 N-옥사이드(HOPO, 0.31 g, 2.76 mmol)을 연속적으로 가한다. 이후에 반응 매질을 0℃로 냉각시킨 후, EDC (0.53 g, 2.76 mmol)을 가하고 매질의 온도를 실온으로 3시간 동안 다시 상승시킨다. 반응 매질을 15 중량%의 NaCl 및 HCl (pH 2)을 함유하는 1.55 L의 물에 교반하여 적가식으로 붓는다. 첨가가 완료되면, pH를 1N HCl 용액으로 2로 재조정하고 현탁액을 밤새 거의 휴지시킨다. 침전물을 여과로 수집한 후 100 mL의 물로 세정한다. 수득된 백색 고체를 pH가 교반 하에 7이 될 때까지 1N 수성 NaOH 용액을 서서히 첨가하여 200 mL의 물 속에 용해한 다음, 용액을 0.45-μm 여과기를 통해 여과한다. 수득된 선명한 용액을 투과물의 전기전도도가 50 μS/cm 미만이 될 때까지 0.9% NaCl 용액에 이어 물에 대해 한외여과로 정제한다. 수득된 용액을 0.2-μm 여과기를 통해 여과하고 2 내지 8℃에서 저장한다.

건조 추출물: 16.3 mg/g

DP(¹H NMR을 기준으로 평가): 21

¹H NMR을 기준으로: i = 0.047

코-폴리아미노산 BB2의 계산된 평균 분자량은 3932 g/mol이다.

HPLC-수성 SEC (캘리브런트 PEG): Mn = 4900 g/mol.

실시예 BB3: 코-폴리아미노산 BB3 - 분자 BA2 의해 변형되고 수 평균 분자량(Mn)이 6400 g/mol인 나트륨 폴리-L-글루타메이트

코- 폴리아미노산 BB3-1: L-루이신아미드에 의해 개시된 γ-메틸-L-글루타메이트 N-카복시무수물의 중합화로부터 기원한, 상대적인 수 평균 분자량(Mn)이 17500 g/mol인 폴리-L-글루탐산

메틸 폴리메타크릴레이트 표준물(PMMA)에서 상대적인 수 평균 분자량(Mn)이 17500 g/mol인 폴리-L-글루탐산을 특허원 제FR-A-2 801 226호에 기술된 방법에 따라 37% 염산 용액을 사용함으로써 메틸 에스테르의 탈보호를 수행하여 글루탐산의 γ-메틸 N-카복시무수물의 중합에 의해 수득한다.

코-폴리아미노산 BB2의 제조에 사용된 것과 유사한 방법에 의해, 분자 BA2의 하이드로클로라이드 염(3.23 g, 4.1 mmol) 및 코-폴리아미노산 BB301 (11g)에 적용하여, 분자 BA2에 의해 변형된 나트륨 폴리-L-글루타메이트를 수득한다.

건조 추출물: 27.5 mg/g

DP(¹H NMR을 기준으로 평가): 34

¹H NMR을 기준으로: li = 0.049

코-폴리아미노산 BB3의 계산된 평균 분자량은 6405 g/mol이다.

HPLC-수성 SEC(캘리브런트 PEG): Mn = 6400 g/mol.

실시예 BB4: 코-폴리아미노산 BB4 - 분자 BA2에 의해 변형되고 수 평균 분자량(Mn)이 10500 g/mol인 나트륨 폴리-L-글루타메이트

코-폴리아미노산 BB2의 제조에 사용된 것과 유사한 방법에 의해, 분자 BA2의 하이드로클로라이드 염(5 g, 6.35 mmol) 및 코-폴리아미노산 BB1-1의 제조에 사용된 것과 유사한 방법에 의해 수득된, 수 평균 분자량 Mn이 10800 g/mol(21.7g)인 폴리-L-글루탐산에 적용시켜, 분자 BA2에 의해 변형된 나트륨 폴리-L-글루타메이트를 수득한다.

건조 추출물: 28.2 mg/g

DP (¹H NMR을 기준으로 평가): 65

¹H NMR을 기준으로: i = 0.04

코-폴리아미노산 BB4의 계산된 평균 분자량은 11721 g/mol이다.

HPLC-수성 SEC (캘리브런트 PEG): Mn = 10500 g/mol.

실시예 BB5: 코-폴리아미노산 BB5 - 아세틸 그룹에 의해 이의 말단 중 하나에서 캡핑되고 분자 BA2에 의해 변형된 수 평균 분자량(Mn)이 3600 g/mol인 나트륨 폴리-L-글루타메이트

코- 폴리아미노산 BB5-1: 헥실아민에 의해 개시되고 이의 말단에서 아세틸 그룹에 의해 캡핑되는 γ-벤질-L-글루타메이트 N-카복시무수물의 중합으로부터 기원하는 Mn이 3700 g/mol인 폴리-L-글루탐산.

γ-벤질-L-글루타메이트 N-카복시무수물(100 g, 380 mmol)을 진공 하에 오븐 속에서 미리 건조시킨 환저 플라스크 속에 30분 동안 둔 다음, 무수 DMF(250 mL)를 도입한다. 이후에 혼합물을 용해가 완료될 때까지 아르곤 하에서 교반하고, 4℃로 냉각시킨 후, 헥실아민(2.3 mL, 17 mmol)을 신속하게 도입한다. 혼합물을 4℃와 실온 사이에서 2일 동안 교반한 후, 디이소프로필 에테르(3.4 L) 속에 침전시킨다. 침전물을 여과로 회수하고, 디이소프로필 에테르(225 mL)로 2회 세척한 다음 건조시켜 백색 고체를 수득하고 이를 450 mL의 THF 속에 용해시킨다. 이러한 용액에, N,N-디이소프로필에텔아민(DIPEA, 31 mL, 176 mmol)에 이어, 아세틱 무수물(17 mL, 176 mmol)을 연속적으로 가한다. 실온에서 일야 교반한 후, 용액을 디이소프로필 에테르(43 L)에 30분이 기간 동안 및 교반하에 서서히 붓는다. 1시간 교반 후, 침전물을 여과하고, 디이소프로필 에테르(200 mL)로 2회 세척한 후, 진공 하에 30℃에서 건조시켜 아세틸 그룹에 의해 이의 말단 중 하나가 캡핑된 폴리(γ-벤질-L-글루탐)산(PBLG)을 수득한다.

아세트 산(235 mL, 1.34 mol) 중 33% 브롬화수소산 용액(HBr)을 트리플루오로아세트산(TFA, 335 mL) 중 캡핑된 코-폴리아미노산 (72 g)의 용액에 적가한다. 혼합물을 실온에서 3시간 30분 동안 교반한 후, 디이소프로필 에테르와 물의 1:1(v/v) 혼합물(4 L)에 적가한다. 혼합물을 실온에서 3시간 30분 동안 교반한 다음, 디이소프로필 에테르 및 물의 1:1 (v/v) 혼합물에 교반 하에 붓는다(4 L). 2시간 교반 후, 이종 혼합물을 밤새 정치시킨다. 백색 침전물을 여과로 회수하고, 디이소프로필 에테르 및 물(340 mL)의 1:1 (v/v) 혼합물에 이어서 물(340 mL)로 세척한다. 이후에, 수득된 고체를 10 N 수성 수산화나트륨 용액을 첨가한 후, 1 N 수성 수산화나트륨 용액을 첨가함으로써 pH를 7로 조절하여 물(1.5 L) 속에 용해시킨다. 용해 후, 최종 용적이 2.1 L로 될 때까지 물을 첨가하여 이론적 농도를 이론적으로 20 g/L로 조절한다. 용액을 0.45-μm 여과기를 통해 여과한 후, 0.9% NaCl 용액에 이어 물에 대해 투과물의 전기전도도가 50 μS/cm 미만으로 될 때까지 한외여과로 정제한다. 이후에 코-폴리아미노산의 용액을 1.8 L의 최종 용적이 수득될 때까지 농축시킨다. 이후에 수용액을 pH가 2가 될 때까지 37% 염산 용액을 첨가하여 산성화한다. 4시간 교반 후, 수득된 침전물을 여과한 후, 물(330 mL)로 세척한 후 30℃에서 진공하에 건조시켜 폴리옥시에틸렌 표준물(PEG)와 관련하여 수 평균 분자량(Mn)이 3700 g/mol인 폴리-L-글루탐산을 수득한다.

코- 폴리아미노산 BB5

코-폴리아미노산 BB2의 제조에 사용된 것과 유사한 방법에 의해, 분자 BA2의 하이드로클로라이드 염(6.92 g, 8.8 mmol) 및 코-폴리아미노산 BB5-1(30.0g)의 적용시켜, 아세틸 그룹에 의해 이의 말단 중 하나에서 캡핑되고 분자 BA2에 의해 변형된 나트륨 폴리-L-글루타메이트를 수득한다.

건조 추출물: 29.4 mg/g

DP (¹H NMR을 기준으로 평가): 23

¹H NMR을 기준으로: i =0.042

코-폴리아미노산 BB5의 계산된 평균 분자량은 4302 g/mol이다.

HPLC-수성-SEC(캘리브런트 PEG): Mn = 3600 g/mol.

실시예 BB6: 코-폴리아미노산 BB6 - 아세틸 그룹에 의해 이의 말단 중 하나에서 캡핑되고 분자 BA2에 의해 변형되고 수 평균 분자량(Mn)이 4100 g/mol인 나트륨 폴리-L-글루타메이트

코-폴리아미노산 BB2의 제조에 사용된 것과 유사한 방법에 의해, 분자 BA2의 하이드로클로라이드 염(5.8g, 7.4mmol) 및 헥실아민 대신에 암모니아를 사용하여 코-폴리아미노산 BB5-1의 제조에 사용된 것과 유사한 방법에 의해 수득된 수 평균 분자량 Mn이 3800 g/mol인 폴리-L-글루탐산에 적용시켜, 아세틸 그룹에 의해 이의 말단 중 하나에서 캡핑되고 분자 BA2에 의해 변형된 나트륨 폴리-L-글루타메이트를 수득한다.

건조 추출물: 27.6 mg/g

DP(¹H NMR을 기준으로 평가): 24

¹H NMR을 기준으로: i = 0.04

코-폴리아미노산 BB6의 계산된 평균 분자량은 4387 g/mol이다.

HPLC-수성-SEC(캘리브런트 PEG): Mn = 4100 g/mol.

실시예 BB7: 코-폴리아미노산 BB7 - 분자 BA2에 의해 변형되고 수 평균 분자량(Mn)이 4200 g/mol인 나트륨 폴리-L-글루타메이트

코-폴리아미노산 BB2의 제조에 사용된 것과 유사한 방법에 의해, 분자 BA2의 하이드로클로라이드 염(7.07 g, 9.0 mmoL) 및 코-폴리아미노산 BB1-1의 제조에 사용된 것과 유사한 방법에 의해 수득된 수 평균 분자량 Mn이 3600 g/mol (30.0 g)인 폴리-L-글루탐산에 적용시켜 분자 BA2에 의해 변형된 나트륨 폴리-L-글루타메이트를 수득한다.

건조 추출물: 28.3 mg/g

DP(¹H NMR를 기준으로 평가): 22

¹H NMR을 기준으로: i = 0.042

코-폴리아미노산 BB7의 계산된 평균 분자량은 4039 g/mol이다.

HPLC-수성 SEC(캘리브런트 PEG): Mn = 4200 g/mol.

실시예 BB8: 코-폴리아미노산 BB8 - 분자 BA2에 의해 변형되고 수 평균 분자량(Mn)이 5200 g/mol인 나트륨 폴리-L-글루타메이트

코-폴리아미노산 BB2의 제조에 사용된 것과 유사한 방법에 의해, 분자 BA2의 하이드로클로라이드 염(0.85 g, 1.1 mmoL) 및 코-폴리아미노산 BB1-1의 제조에 사용된 것과 유사한 방법에 의해 수득된 수 평균 분자량 Mn이 4100 g/mol (5.0 g)인 폴리-L-글루탐산에 적용시켜 분자 BA2에 의해 변형된 나트륨 폴리-L-글루타메이트를 수득한다.

건조 추출물: 28.6 mg/g

DP(¹H NMR를 기준으로 평가): 21

¹H NMR을 기준으로: i = 0.026

코-폴리아미노산 BB8의 계산된 평균 분자량은 3620 g/mol이다.

HPLC-수성 SEC(캘리브런트 PEG): Mn = 5200 g/mol.

실시예 BB9: 코-폴리아미노산 BB9 - 분자 BA3에 의해 변형되고 수 평균 분자량(Mn)이 4700 g/mol인 나트륨 폴리-L-글루타메이트

코-폴리아미노산 BB2의 제조에 사용된 것과 유사한 방법에 의해, 분자 BA3의 하이드로클로라이드 염(3.05 g, 3.6 mmoL) 및 코-폴리아미노산 BB1-1의 제조에 사용된 것과 유사한 방법에 의해 수득된 수 평균 분자량 Mn이 4100 g/mol (10.0 g)인 폴리-L-글루탐산에 적용시켜 분자 BA3에 의해 변형된 나트륨 폴리-L-글루타메이트를 수득한다.

건조 추출물: 28.6 mg/g

DP(¹H NMR를 기준으로 평가): 26

¹H NMR을 기준으로: i = 0.05

코-폴리아미노산 BB9의 계산된 평균 분자량은 4982 g/mol이다.

HPLC-수성 SEC(캘리브런트 PEG): Mn = 4700 g/mol.

실시예 BB10: 코-폴리아미노산 BB10 - 분자 BA3에 의해 변형되고 수 평균 분자량(Mn)이 4200 g/mol인 나트륨 폴리-L-글루타메이트

코-폴리아미노산 BB2의 제조에 사용된 것과 유사한 방법에 의해, 분자 BA3의 하이드로클로라이드 염(1.90 g, 2.3 mmoL) 및 코-폴리아미노산 BB1-1의 제조에 사용된 것과 유사한 방법에 의해 수득된 수 평균 분자량 Mn이 3500 g/mol (10.0 g)인 폴리-L-글루탐산에 적용시켜 분자 BA3에 의해 변형된 나트륨 폴리-L-글루타메이트를 수득한다.

건조 추출물: 25.9 mg/g

DP(¹H NMR를 기준으로 평가): 22

¹H NMR을 기준으로: i = 0.029

코-폴리아미노산 BB10의 계산된 평균 분자량은 3872 g/mol이다.

HPLC-수성 SEC(캘리브런트 PEG): Mn = 4200 g/mol.

실시예 BB11: 코-폴리아미노산 BB11 - 아세틸 그룹에 의해 이의 말단 중 하나에서 캡핑되고 분자 BA4에 의해 변형되고 수 평균 분자량(Mn)이 3900 g/mol인 나트륨 폴리-L-글루타메이트

코-폴리아미노산 BB2의 제조에 사용된 것과 유사한 방법에 의해, 분자 BA4의 하이드로클로라이드 염(2.21 g, 2.2 mmoL) 및 코-폴리아미노산 BB5-1의 제조에 사용된 것과 유사한 방법에 의해 수득된 수 평균 분자량 Mn이 3700 g/mol (10 g)인 폴리-L-글루탐산에 적용시켜 분자 BA4에 의해 변형된 나트륨 폴리-L-글루타메이트를 수득한다.

건조 추출물: 28.1 mg/g

DP(¹H NMR를 기준으로 평가): 22

¹H NMR을 기준으로: i = 0.032

코-폴리아미노산 BB11의 계산된 평균 분자량은 4118 g/mol이다.

HPLC-수성 SEC(캘리브런트 PEG): Mn = 3900 g/mol.

실시예 BB12: 코-폴리아미노산 BB12 - 아세틸 그룹에 의해 이의 말단 중 하나에서 캡핑되고 분자 BA3에 의해 변형되고 수 평균 분자량(Mn)이 3900 g/mol인 나트륨 폴리-L-글루타메이트

코-폴리아미노산 BB2의 제조에 사용된 것과 유사한 방법에 의해, 분자 BA3의 하이드로클로라이드 염(1.9 g, 2.3 mmoL) 및 코-폴리아미노산 BB5-1의 제조에 사용된 것과 유사한 방법에 의해 수득된 수 평균 분자량 Mn이 3600 g/mol (10 g)인 폴리-L-글루탐산에 적용시켜 분자 BA3에 의해 변형된 나트륨 폴리-L-글루타메이트를 수득한다.

건조 추출물: 26.7 mg/g

DP(¹H NMR를 기준으로 평가): 23

¹H NMR을 기준으로: i = 0.03

코-폴리아미노산 BB12의 계산된 평균 분자량은 4145 g/mol이다.

HPLC-수성 SEC(캘리브런트 PEG): Mn = 3900 g/mol.

실시예 BB13: 코-폴리아미노산 BB13 - 분자 BA1에 의해 변형되고 수 평균 분자량(Mn)이 2800 g/mol인 나트륨 폴리-L-글루타메이트

코-폴리아미노산 BB1의 제조에 사용된 것과 유사한 방법에 의해, 분자 BA1의 하이드로클로라이드 염(3.65 g, 5 mmoL) 및 코-폴리아미노산 BB1-1의 제조에 사용된 것과 유사한 방법에 의해 수득된 수 평균 분자량 Mn이 3600 g/mol (10 g)인 폴리-L-글루탐산에 적용시켜 분자 BA1에 의해 변형된 나트륨 폴리-L-글루타메이트를 수득한다.

건조 추출물: 25.6 mg/g

DP(¹H NMR를 기준으로 평가): 25

¹H NMR을 기준으로: i = 0.08

코-폴리아미노산 BB13의 계산된 평균 분자량은 5253 g/mol이다.

HPLC-수성 SEC(캘리브런트 PEG): Mn = 2800 g/mol.

부분 C:

사용된 글루카곤은 펩타이드 합성 과정으로부터 기원한 인간 글루카곤이다. 이는 Bachem 사(company)(참고 407473)로부터 기원한다.

실시예 C1: 2 mg/mL에서의 글루카곤의 용액

분말화된 글루카곤(80 mg)을 45-mL 플라스크 내로 도입한다. 0.003 N 수성 염산 용액(40 mL)을 가한다. 글루카곤 분말을 글루카곤이 완전히 용해될 때까지 튜브를 반복하여 역위시켜 혼합한다. 2 mg/mL에서의 글루카곤의 용액을 이후에 막(0.22 μm)을 통해 여과한다.

실시예 C2: 4 mg/mL에서의 글루카곤의 용액

분말화된 글루카곤(160 mg)을 45-mL 플라스크내로 도입한다. 0.006 N 수성 염산 용액(40 mL)을 가한다. 글루카곤 분말을 글루카곤이 완전히 용해될 때까지 튜브를 반복하여 역위시켜 혼합한다. 4 mg/mL에서의 글루카곤의 용액을 이후에 막(0.22 μm)을 통해 여과한다.

실시예 C3: 6 mg/mL에서의 글루카곤의 용액

분말화된 글루카곤(240 mg)을 45-mL 플라스크내로 도입한다. 0.01 N 수성 염산 용액(40 mL)을 가한다. 글루카곤 분말을 글루카곤이 완전히 용해될 때까지 튜브를 반복하여 역위시켜 혼합한다. 6 mg/mL에서의 글루카곤의 용액을 이후에 막(0.22 μm)을 통해 여과한다.

실시예 C4: 10 mg/mL에서의 글루카곤의 용액

분말화된 글루카곤(400 mg)을 45-mL 플라스크내로 도입한다. 0.01 N 수성 염산 용액(40 mL)을 가한다. 글루카곤 분말을 글루카곤이 완전히 용해될 때까지 튜브를 반복하여 역위시켜 혼합한다. 10 mg/mL에서의 글루카곤의 용액을 이후에 막(0.22 μm)을 통해 여과한다.

시험을 수행하여 폴리아미노산이 글루카곤을 용해시킬 수 있는지를 입증하고, 글루카곤을 용해시키는데 필요한 코-폴리아미노산의 최소 농도를 측정하였다.

실시예 CA2: 다양한 농도에서의 코-폴리아미노산 AB21 및 1 mg/mL의 글루카곤 농도의 조성물.

X' mg의 코-폴리아미노산 AB21을 정밀한 규모로 칭량하고, 2 mL의 m-크레졸(46 mM), 글리세롤(548 mM)을 포함하는 10 mM 인산염 완충액 용액에 가하였다. 조성물을 코-폴리아미노산이 용해될 때까지 교반한 후, 용액을 막(0.22 μm)을 통해 여과한다.

실시예 C1에서 제조된 2 mL의 글루카곤 용액을 2 mL의 상기 제조한 바와 같은 코-폴리아미노산의 용액과 혼합하여, 조성물이 X mg/mL의 코-폴리아미노산 및 1 mg/mL의 글루카곤을 포함하도록 한다.

가시적인 관측(visual inspection)을 수행하여 선명한 용액이 수득되는지의 여부를 측정하였다. 최소 농도의 결과를 표 5에 나타낸다.

실시예 CA4: 다양한 농도에서의 코-폴리아미노산 BB2 및 1 mg/mL의 글루카곤 농도의 조성물.

실시예 CA2에 기술한 바와 동일한 방법으로, X mg/mL의 코-폴리아미노산 BB2 및 1 mg/mL의 글루카곤의 조성물을 제조한다.

가시적 관측을 수행하여 선명한 용액이 수득되는지의 여부를 측정하였다. 최소 농도의 결과를 표 5에 나타낸다.

실시예 CA6: 다양한 농도에서의 코-폴리아미노산 BB9 및 1 mg/mL의 글루카곤 농도의 조성물.

실시예 CA2에 기술한 바와 동일한 방법으로, X mg/mL의 코-폴리아미노산 BB9 및 1 mg/mL의 글루카곤을 포함하는 조성물을 제조한다.

[표 5] 인간 글루카곤(1 mg/mL)의 용해를 위한 코-폴리아미노산의 최소 농도(mg/mL).

실시예	코-폴리아미노산	인간 글루카곤(1mg/mL)의 용해를 위한 코-폴리아미노산(mg/mL)의 최소 농도(x mg/mL)
CA2	AB21	≤ 1.25
CA4	BB2	≤ 0.82
CA6	BB9	≤ 1.25

농도 시리즈를 본 발명에 따른 코-폴리아미노산으로 제조하여, 다음의 안정한 용액을 수득한다.

실시예 CB2: 15 mg/mL에서의 코-폴리아미노산 AB1 및 1 mg/mL에서의 글루카곤의 용액

60 mg의 코-폴리아미노산 AB1을 정밀한 규모로 칭량하고, 2 mL의 m-크레졸(46mM), 글리세롤(548 mM)을 포함하는 10 mM 인산염 완충액에 가한다. 조성물을 코-폴리아미노산이 용해될 때까지 교반한 다음, 용액을 막(0.22 μm)을 통해 여과한다.

실시예 C1에서 제조한 2 mL의 글루카곤 용액을 상기 제조한 바와 같은 2 mL의 코-폴리아미노산 AB1의 용액과 혼합한다. 이후에 1 mL의 각각의 이러한 용액 3개의 샘플을 제조하고 37℃에서 안정한 조건 하에 둔다.

실시예 CB3: 10 mg/mL에서의 코-폴리아미노산 AB5 및 1 mg/mL에서의 글루카곤의 용액

40 mg의 코-폴리아미노산 AB5를 정밀한 규모로 칭량하고, m-크레졸(46 mM), 글리세롤(548 mM)을 포함하는 10 mM 인산염 완충액 2 mL를 가한다. 조성물을 코-폴리아미노산이 용해될 때까지 교반한 후, 용액을 막(0.22 μm)을 통해 여과한다.

실시예 C1에서 제조한 2 mL의 글루카곤 용액을 상기 제조한 바와 같은 2 mL의 코-폴리아미노산의 용액과 혼합한다. 이후에, 이러한 용액 각각 1 mL의 샘플 3개를 제조하여 37℃에서 정적 조건 하에 둔다.

실시예 CB4: 8.6 mg/mL에서의 코-폴리아미노산 AB7 및 1 mg/mL에서의 글루카곤의 용액

34.4 mg의 코-폴리아미노산 AB7을 정밀한 규모로 칭량하고, m-크레졸(46 mM), 글리세롤(548 mM)을 포함하는 10 mM 인산염 완충액 2 mL를 가한다. 조성물을 코-폴리아미노산이 용해될 때까지 교반한 후, 용액을 막(0.22 μm)을 통해 여과한다.

실시예 CB8: 8 mg/mL에서의 코-폴리아미노산 BB2 및 1 mg/mL에서의 글루카곤의 용액

32 mg의 코-폴리아미노산 BB2를 정밀한 규모로 칭량하고, m-크레졸(46 mM), 글리세롤(548 mM)을 포함하는 10 mM 인산염 완충액 2 mL를 가한다. 조성물을 코-폴리아미노산이 용해될 때까지 교반한 후, 용액을 막(0.22 μm)을 통해 여과한다.

실시예 CB9: 9 mg/mL에서의 코-폴리아미노산 BB5 및 1 mg/mL에서의 글루카곤의 용액

36 mg의 코-폴리아미노산 BB5를 정밀한 규모로 칭량하고, m-크레졸(46 mM), 글리세롤(548 mM)을 포함하는 10 mM 인산염 완충액 2 mL에 가한다. 조성물을 코-폴리아미노산이 용해될 때까지 교반한 후, 용액을 막(0.22 μm)을 통해 여과한다.

실시예 CB10: 15.4 mg/mL에서의 코-폴리아미노산 BB7 및 1 mg/mL에서의 글루카곤의 용액

61.6 mg의 코-폴리아미노산 BB7을 정밀한 규모로 칭량하고, m-크레졸(46 mM), 글리세롤(548 mM)을 포함하는 10 mM 인산염 완충액 2 mL를 가한다. 조성물을 코-폴리아미노산이 용해될 때까지 교반한 후, 용액을 막(0.22 μm)을 통해 여과한다.

실시예 CB11: 7.6 mg/mL에서의 코-폴리아미노산 BB8 및 1 mg/mL에서의 글루카곤의 용액

30.4 mg의 코-폴리아미노산 BB8을 정밀한 규모로 칭량하고, m-크레졸(46 mM), 글리세롤(548 mM)을 포함하는 10 mM 인산염 완충액 2 mL에 가한다. 조성물을 코-폴리아미노산이 용해될 때까지 교반한 후, 용액을 막(0.22 μm)을 통해 여과한다.

실시예 CB12: 4.3 mg/mL에서의 코-폴리아미노산 BB9 및 1 mg/mL에서의 글루카곤의 용액

17.2 mg의 코-폴리아미노산 BB9를 정밀한 규모로 칭량하고, m-크레졸(46 mM), 글리세롤(548 mM)을 포함하는 10 mM 인산염 완충액 2 mL에 가한다. 조성물을 코-폴리아미노산이 용해될 때까지 교반한 후, 용액을 막(0.22 μm)을 통해 여과한다.

실시예 CB13: 5.9 mg/mL에서의 코-폴리아미노산 BB11 및 1 mg/mL에서의 글루카곤의 용액

23.6 mg의 코-폴리아미노산 BB11을 정밀한 규모로 칭량하고, m-크레졸(46 mM), 글리세롤(548 mM)을 포함하는 10 mM 인산염 완충액 2 mL에 가한다. 조성물을 코-폴리아미노산이 용해될 때까지 교반한 후, 용액을 막(0.22 μm)을 통해 여과한다.

실시예 CB14: 8.6 mg/mL에서의 코-폴리아미노산 BB11 및 1 mg/mL에서의 글루카곤의 용액

34.4 mg의 코-폴리아미노산 BB11의 용액을 m-크레졸(46 mM), 글리세롤(548 mM)을 포함하는 10 mM 인산염 완충액 2mL에 가한다. 조성물을 코-폴리아미노산이 용해될 때까지 교반한 후 용액을 막(0.22 μm)을 통해 여과한다.

실시예 CB25: 8.6 mg/mL에서의 코-폴리아미노산 AB21 및 1 mg/mL에서의 글루카곤의 용액

34.4 mg의 코-폴리아미노산 AB21의 용액을 정밀하게 칭량하고 m-크레졸(46 mM), 글리세롤(548 mM)을 포함하는 10 mM 인산염 완충액 2mL에 가한다. 조성물을 코-폴리아미노산이 용해될 때까지 교반한 후 용액을 막(0.22 μm)을 통해 여과한다.

부분 C' - 반대-실시예 제형

세틸트리메틸암모늄 브로마이드(CTAB)는 Sigma-Aldrich사로부터 기원한다(참고: A6909).

도데실 말토시드(DDM)는 Sigma-Aldrich사(참고: D4641)로부터 기원한다.

명칭(mPEG-DSPE 2000)은 Interchim사(참고: KV5081)로부터 기원한다.

미리스토일 라이소포스파티딜 콜린(LMPC)은 Combi-Block사(참고: QE-2488)로부터 기원한다.

실시예 CA2에 기술된 조성물과 유사한 방식으로, 조성물 CEC1 내지 CEC10을 또한 목적한 농도를 수득하도록 하는 방식으로 제조한다(표 6d).

[표 6d] 상이한 농도에서 시판되는 생성물의 존재하에 pH 7.2에서 1 mg/mL의 글루카곤의 조성물

조성물	글루카곤 (mg/mL)	선행 기술의 화합물	농도 (mg/mL)	인산염 완충액 (mM)	pH
CEC1	1	CTAB	0.3	2	7.13
CEC2	1	CTAB	15.7	2	7.14
CEC3	1	CTAB	39.3	2	7.16
CEC4	1	DDM	0.4	2	ND
CEC5	1	DDM	3.2	2	7.15
CEC6	1	DDM	10.7	2	7.34
CEC7	1	PEG-DSPE	2.4	2	7.20
CEC8	1	PEG-DSPE	10.9	2	7.12
CEC9	1	LMPC	0.4	2	ND
CEC10	1	LMPC	2.1	2	7.13

부분 D: 안정성

실시예 D1: 코-폴리아미노산/글루카곤의 조성물의 물리적 안정성

37℃에서 정적 조건 하에 둔 샘플의 가시적 관찰을 37℃에서 0, 7, 14 및 21일째에 수행하여 가시적인 입자의 외형 또는 혼탁도를 측정한다. 이러한 관찰을 유럽 약전(EP 2.9.20)의 추천에 따라 수행하며: 샘플을 적어도 2000 lux의 조명에 적용시키고 백색 배경 및 흑색 배경을 관찰한다. 입자가 3개의 샘플 중 적어도 2개에서 가시성인 경우, 조성물은 불안정한 것으로 고려한다. 따라서, 안정한은 관측일에 적어도 2개의 샘플이 입자를 포함하지 않았음을 의미한다.

가시적인 관찰의 결과는 다음의 표 7에 기록한다.

하기 표에 기술된 실시예 CB2 내지 CEC9의 조성물의 물리적 안정성의 연구는 3 mL 용량의 플라스크(Adelphi - 참고: VCDIN2RDLS1) 속에서 1 mL의 용적의 조성물에서 수행하였다.

[표 7] 코-폴리아미노산 및 글루카곤을 포함하는 조성물의 가시적 관찰의 결과

" - "는 관찰할 수 없음을 의미한다.

실시예 D2: 코-폴리아미노산/글루카곤의 조성물의 화학적 안정성

USP 지시사항을 기반으로 하여 채택된 RP-HPLC 방법을 사용하여 글루카곤 및 이의 분해 생성물의 농도를 측정하였다. 당해 방법을 사용하여 조성물의 글루카곤의 화학적 안정성을 평가하였다. HPLC 조건은 다음과 같다:

- 컬럼: 4.6 x 150 mm, C-18

- 이동 상(mobile phase) A: 용액 S/아세토니트릴 80/20 (v/v), 용액 S는 85% 인산 용액으로 pH 2.7로 조절한, 물 속의 150 mM 인산이수소칼륨이다.

- 이동 상 B: 물/아세토니트릴 60/40 (v/v)

- 이동 상 C: 물/아세토니트릴 10/90 (v/v)

- 컬럼 온도: 45℃

- 검출: UV 210 nm

- 자동샘플러(autosampler)의 온도: 4℃

회복을 정적 조건 하에서 37℃에서 7, 14 및 21일째에 샘플에서 측정하였다. 화학적 안정성 데이타, 다시 말해서, RP-HPLC에 의해 수득된 글루카곤 회수는 다음 표 8에 나타낸다.

하기 표에 기술된 조성물의 화학적 안정성의 연구는 플라스크 속의 조성물(용량이 3 mL(Adelphi - 참고: VCDIN2RDLS1)인 플라스크 속에서 1 mL의 조성물)에서 수행하였다.

[표 8] 코-폴리아미노산 및 글루카곤을 포함하는 조성물의 회수의 측정

"-"는 측정되지 않음을 의미한다.

원리

펩타이드의 불량한 안정성은 주문된 거대분자 구조로 정의된 아밀로이드 피브릴의 형성을 초래할 수 있다. 이러한 구조는 가능하게는 샘플 내 겔의 형성으로부터 생성될 수 있다.

티오플라빈 T(ThT)의 형광성을 모니터링하는 시험을 사용하여 용액의 물리적 안정성을 분석한다. 티오플라빈은 아밀로이드 유형의 피브릴에 결합하는 경우 특징적인 형광성 신호를 갖는 소 분자 프로브(probe)이다(Naiki et al. (1989) Anal. BioChem. 177, 244-249, LeVine (1999) Methods. Enzymol. 309, 274-284).

이러한 방법은 희석되지 않은 용액 내에서 낮은 ThT 농도에 대한 피브릴의 형성을 모니터링할 수 있도록 한다. 이러한 모니터링은 가속화된 안정성 조건 하에서 수행된다: 37℃에서 교반하에.

실험 조건

샘플을 측정 시작 직전에 제조한다. 각각의 조성물의 제조는 관련 실시예에 기술되어 있다. 티오플라빈 T를 농축된 스톡 용액(stock solution)으로부터의 조성물에 가하여 조성물의 무시가능한 희석을 유도하였다. 조성물 속의 티오플라빈 T의 농도는 40 μM이다.

150 μL의 용적의 조성물을 96-웰 플레이트(96-well plate)의 웰에 도입한 후, 2.7 μL의 농축된 ThT 용액을 도입하였다. 각각의 조성물을 하나의 플레이트에 수행된 3개의 시험(3회)에서 분석하였다. 플레이트를 투명한 필름으로 밀봉하여 조성물의 증발을 방지하였다.

이러한 플레이트를 이후에 플레이트 판독기(EnVision 2104 Multilabel, Perkin Elmer)의 동봉물 내에 두었다. 온도를 37℃에서 조절하고, 1 mm의 진폭으로 960 rpm에서 측면 교반을 수행하였다.

각각의 웰 속의 형광성 강도의 판독을 442 nm의 여기 파장(excitation wavelength) 및 482 nm의 방출 파장으로 시간에 걸쳐 수행하였다.

피브릴 형성 과정은 지체 시간으로 언급되는 지연 후 형광성에 있어서 자체적으로 강력한 증가를 나타낸다.

지체 시간은 형광성 시그널이 기본선 이상으로 유의적으로 증가하기 시작하는 경우 시간을 고려하여 가시적으로 측정한다.

기록된 지체 시간 값은 3개의 웰에서 수행된 지체 시간 측정치들의 평균에 상응한다.

수득된 지체 시간 결과는 하기 표에 나타낸다.

결과는 하기 표 9에 나타낸다.

[표 9] 1 mg/mL의 글루카곤의 존재하에서 코-폴리아미노산의 조성물 또는 시판되는 생성물을 사용하여 수득된 지체 시간의 결과

글루카곤의 존재 하에서 코-폴리아미노산의 조성물로 수득된 지체 시간의 결과는 글루카곤의 존재 하에서 시판되는 생성물의 제형의 지체 시간의 결과보다 더 높다.

Claims

적어도 하기를 포함하는, pH가 6.0 내지 8.0인, 주사가능한 수용액 형태의 조성물:
a) 인간 글루카곤;
b) 카복실레이트 전하 및 소수성 라디칼 Hy를 지닌 코-폴리아미노산, 상기 코-폴리아미노산은 글루타믹 또는 아스파르틱 단위로 이루어지고, 상기 소수성 라디칼 Hy는 다음 화학식 I의 라디칼임:
[화학식 I]

여기서,
- GpR는 화학식 II의 라디칼이고:
[화학식 II]

;
- GpA는 화학식 III 또는 III'의 라디칼이며:
[화학식 III]

, 또는
[화학식 III']

;
- GpC는 화학식 IV의 라디칼이고:
[화학식 IV]

;
- 상기 *는 아미드 기능(amide function)에 의해 결합된 상이한 그룹의 부착 부위를 나타내고;
- a는 0 또는 1과 동일한 정수이며;
- b는 0 또는 1과 동일한 정수이고;
- p는 1 또는 2와 동일한 정수이며,
o p가 1인 경우, a는 0 또는 1이고 GpA는 화학식 III'의 라디칼이며,
o p가 2인 경우, a는 1이고 GpA는 화학식 III의 라디칼이고;
- c는 0 또는 1과 동일한 정수이며, c가 0인 경우, d는 1 또는 2이고;
- d는 0, 내지 1 또는 2와 동일한 정수이고;
- r은 0 또는 1과 동일한 정수이며;
o r이 0과 동일한 경우, 화학식 I의 수소성 라디칼은 소수성 라디칼의 카보닐과 코-폴리아미노산의 N-말단 위치 내 질소 원자 사이의 공유 결합을 통해 코-폴리아미노산에 결합함으로써 코-폴리아미노산의 전구체의 N-말단 위치에서의 아민 기능 및 소수성 라디칼의 전구체에 의해 생성된 산 기능의 반응으로부터 기원한 아미드 기능을 형성하고,
o r이 1과 동일한 경우,
■ 화학식 I의 소수성 라디칼은 소수성 라디칼의 질소 원자와 코-폴리아미노산의 카보닐 사이의 공유결합을 통해 코-폴리아미노산에 결합함으로써 소수성 라디칼의 전구체의 아민 기능과 코-폴리아미노산의 전구체에 의해 생성된 산 기능 사이의 반응으로부터 기원한 아미드 기능을 형성하거나, 또는
■ 화학식 I의 소수성 라디칼은 소수성 라디칼의 카보닐과 코-폴리아미노산의 N-말단 위치에서의 질소 원자 사이의 공유 결합을 통해 코-폴리아미노산에 결합함으로써 소수성 라디칼의 전구체의 산 기능과 코-폴리아미노산의 전구체에 의해 생성된 N 말단 위치에서 아민 기능의 반응으로부터 기원한 아미드 기능을 형성하고;
- R은 하기로 이루어진 그룹으로부터 선택된 라디칼이고:
o GpR가 화학식 II의 라디칼인 경우 2 내지 12개의 탄소 원자를 포함하는 직쇄 또는 측쇄의 2가 알킬 라디칼;
o GpR가 화학식 II의 라디칼인 경우 2 내지 11개의 탄소 원자를 포함하는 직쇄 또는 측쇄의 2가 알킬 라디칼로, 상기 알킬 라디칼이 하나 이상의 -CONH₂ 기능을 지니는 라디칼; 및
o 4 내지 14개의 탄소 원자 및 1 내지 5개의 산소 원자를 포함하는 치환되지 않은 에테르 또는 폴리에테르 라디칼;
- A는 1 내지 6개의 탄소 원자를 포함하는 직쇄 또는 측쇄의 알킬 라디칼이며;
- B는 1 내지 9개의 탄소 원자를 포함하는, 방향족 환을 임의로 포함하는, 직쇄 또는 측쇄의 알킬 라디칼이고;
- C_x는 직쇄 또는 측쇄의 1가 알킬 라디칼이며, 여기서 x는 탄소 원자의 수를 나타내고,
o p가 1과 동일한 경우, x는 11 내지 25(11 ≤ x ≤ 25)이며;
o p가 2와 동일한 경우, x는 9 내지 15(9 ≤ x ≤ 15)이고,
- 소수성 라디칼의 수와 글루타믹 또는 아스파르틱 단위의 수 사이의 비 i는 0 < i ≤ 0.5이며;
- 수개의 소수성 라디칼이 코-폴리아미노산에 의해 생성(borne by)되는 경우, 이들은 동일하거나 상이하고,
- 글루타믹 또는 아스파르틱 단위에서 중합도(degree of polymerization: DP)는 10 내지 250이며;
- 유리산 기능은 Na⁺ 및 K⁺로 이루어진 그룹으로부터 선택된 알칼리성 양이온의 염의 형태임.
청구항 1에 있어서,
상기 소수성 라디칼이 다음 화학식 V로 나타내어지는, p는 1인 화학식 I의 소수성 라디칼로부터 선택되는 것을 특징으로 하는 조성물:
[화학식 V]

여기서,
GpR, GpA, GpC, r 및 a는 상기 제공된 정의를 갖는다.
청구항 1에 있어서,
상기 소수성 라디칼이 화학식 VI으로 나타내어지는, a는 1이고 p는 2인 화학식 I의 소수성 라디칼로부터 선택되는 것을 특징으로 하는 조성물:
[화학식 VI]

여기서,
GpR, GpA, GpC, r 및 a는 상기 제공된 정의를 갖는다.
청구항 1 내지 청구항 3 중 어느 한 항에 있어서,
상기 카복실레이트 전하 및 소수성 라디칼을 지닌 코-폴리아미노산이 다음의 화학식 VIIa의 코-폴리아미노산으로부터 선택됨을 특징으로 하는 조성물:
[화학식 VIIa]

여기서,
● D는, 독립적으로, -CH₂- 그룹(아스파르틱 단위) 또는 -CH₂-CH₂- 그룹(글루타믹 단위)을 나타내고,
● Hy는 화학식 I, V 또는 VI의 소수성 라디칼로부터 선택된 소수성 라디칼이며, 여기서 r은 1이고 GpR는 화학식 II의 라디칼이며,
● X는 H 또는 금속 양이온을 포함하는 그룹으로부터 선택된 양이온성 실체(cationic entity)이고;
● n + m은 코-폴리아미노산의 중합도 DP, 다시 말해서 쇄 당 단량체 단위의 평균 수를 나타내고, 5 ≤ n + m ≤ 250이며;
R'1은 H, C2 내지 C10 직쇄 아실 그룹, C4 내지 C10 측쇄 아실 그룹, 벤질, 말단 "아미노산" 단위 및 피로글루타메이트로 이루어진 그룹으로부터 선택된 라디칼이고,
● R'2는 -NR'R" 라디칼이며, R' 및 R"는 동일하거나 상이하고, H, C2 내지 C10 직쇄 또는 측쇄 또는 사이클릭 알킬, 벤질로 이루어진 그룹으로부터 선택되고, 상기 알킬 R' 및 R"는 함께 임의로 하나 이상의 포화되고/되거나, 불포화되고/되거나 방향족 탄소 환을 형성하고/하거나 임의로 O, N 및 S로 이루어진 그룹으로부터 선택된 헤테로원자를 포함한다.
청구항 4에 있어서,
카복실레이트 전하 및 소수성 라디칼을 지닌 코-폴리아미노산이 다음 화학식 VIIa의, R₁이 R'₁이고 R₂가 R'₂인 화학식 VII의 코-폴리아미노산으로부터 선택됨을 특징으로 하는 조성물:
[화학식 VIIa]

여기서,
- m, n, X, D 및 Hy는 상기 제공된 정의를 가지며
- R'₁은 H, C2 내지 C10 직쇄 아실 그룹, C4 내지 C10 측쇄 아실 그룹, 벤질, 말단 "아미노산" 단위 및 피로글루타메이트로 이루어진 그룹으로부터 선택된 라디칼이고,
R'₂는 -NR'R" 라디칼이며, R' 및 R""는 동일하거나 상이하고, H, C2 내지 C10 직쇄 또는 측쇄 또는 사이클릭 알킬, 벤질로 이루어진 그룹으로부터 선택되고, 상기 알킬 R' 및 R"는 함께 임의로 하나 이상의 포화되고/되거나, 불포화되고/되거나 방향족인 환을 형성하고/하거나 임의로 O, N 및 S로 이루어진 그룹으로부터 선택된 헤테로원자를 포함한다.
청구항 4 내지 청구항 7 중 어느 한 항에 있어서,
카복실레이트 전하 및 소수성 라디칼을 지닌 코-폴리아미노산이 화학식 VII 또는 VIIa의 코-폴리아미노산으로부터 선택되고, 여기서 적어도 하나의 코-폴리아미노산은 그룹 D가 -CH₂- 그룹(아스파르틱 단위)인 코-폴리아미노산으로부터 선택됨을 특징으로 하는 조성물.
청구항 4 내지 청구항 7 중 어느 한 항에 있어서,
카복실레이트 전하 및 소수성 라디칼을 지닌 코-폴리아미노산이 화학식 VII 또는 화학식 VIIa의 코-폴리아미노산으로부터 선택되고, 여기서 적어도 하나의 코-폴리아미노산은 그룹 D가 -CH₂-CH₂-(글루타믹 단위)인 코-폴리아미노산으로부터 선택됨을 특징으로 하는 조성물.
청구항 1 내지 청구항 7 중 어느 한 항에 있어서,
카복실레이트 전하 및 소수성 라디칼을 지닌 코-폴리아미노산의 농도가 최대 40 mg/mL임을 특징으로 하는 조성물.
청구항 1 내지 청구항 8 중 어느 한 항에 있어서,
인간 글루카곤의 농도가 0.25 내지 5 mg/mL임을 특징으로 하는 조성물.
청구항 1 내지 청구항 9 중 어느 한 항에 있어서,
[소수성 라디칼]/[인간 글루카곤] 몰 비가 15 미만임을 특징으로 하는 조성물.
청구항 1 내지 청구항 10 중 어느 한 항에 있어서,
다가음이온성 화합물을 또한 포함함을 특징으로 하는 조성물.
청구항 1 내지 청구항 11 중 어느 한 항에 있어서,
아연 염을 또한 포함함을 특징으로 하는 조성물.
청구항 1 내지 청구항 12 중 어느 한 항에 있어서,
위장 호르몬(gastrointestinal hormone)을 또한 포함함을 특징으로 하는 조성물.
청구항 13에 있어서,
위장 호르몬이 엑세나티드, 리라글루티드, 릭시세나티드, 알비글루티드 및 둘라글루티드, 이들의 유사체 또는 유도체 및 이들의 약제학적으로 허용되는 염으로 이루어진 그룹으로부터 선택됨을 특징으로 하는 조성물.
청구항 13 또는 청구항 14에 있어서,
위장 호르몬의 농도가 0.01 내지 10 mg/mL의 간격 이내 임을 특징으로 하는 조성물.