KR20190012388A - 디(뉴클레오시드 5'-)폴리포스페이트의 제조 방법 - Google Patents

디(뉴클레오시드 5'-)폴리포스페이트의 제조 방법 Download PDF

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KR20190012388A
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Abstract

하기 화학식 1로 표시되는 디(뉴클레오시드 5'-)폴리포스페이트의 제조 방법이 제공된다. 디(뉴클레오시드 5'-)폴리포스페이트의 제조 방법은 뉴클레오시드 5'-트리포스페이트(NTP) 및 뉴클레오시드 5'-모노포스페이트(NMP)로 이루어진 군에서 각각 독립적으로 선택되는 두 물질을 구리 금속염의 존재하에서 반응시키는 단계를 포함한다.
[화학식 1]
Figure pat00010

(상기 화학식 1에서, B1 및 B2는 각각 독립적으로 피리미딘 염기이고, n은 0~4의 자연수이다)

Description

디(뉴클레오시드 5'-)폴리포스페이트의 제조 방법{PROCESS FOR PRODUCING DI(NUCLEOSIDE 5'-)POLYPHOSPHATE}
본 발명은 디(뉴클레오시드 5'-)폴리포스페이트의 제조 방법에 관한 것으로서, 구체적으로는 구리 금속염의 존재하에서 뉴클레오시드 5'-트리포스페이트와 뉴클레오시드 5'-모노포스페이트를 반응시켜 디(뉴클레오시드 5'-)폴리포스페이트를 제조하는 방법에 관한 것이다.
하기 화학식 1로 표시되는 디(뉴클레오시드 5'-)폴리포스페이트 중에서, 예를 들면, P1,P4-디(우리딘 5'-)테트라포스페이트(Diquafosol, Up4U) 또는 그의 염은 안구건조증에 수반하는 각결막 상피장해의 치료약으로서 이용되고 있으며, 또한 담 배출 유도작용을 가지기 때문에 거담제 또는 폐렴 치료약으로서의 개발이 기대되는 화합물이다.
[화학식 1]
Figure pat00001
(상기 화학식 1에서, B1 및 B2는 각각 독립적으로 피리미딘 염기이고, n은 0~4의 자연수이다)
이와 같은 디(피리미딘 뉴클레오시드 5'-)폴리포스페이트의 합성법은, 예를 들면, Up4U의 경우 우리딘 5'-모노포스페이트(UMP)를 출발원료로 하고, 디 페닐포스포클로리데이트(DPC) 등의 활성화제와 피로포스페이트(PPi) 등의 인산화제를 이용하여 합성하는 방법이 특허문헌 1 등에 개시되어 있으나, 이와 같은 공지된 합성법은 목적 화합물의 합성수율이 약 10% 미만으로 지극히 낮다는 문제점이 있었다.
W0 1999/005155
본 발명이 해결하고자 하는 과제는 높은 합성 효율 및 수율로 디(뉴클레오시드 5'-)폴리포스페이트를 제조하는 방법을 제공하는 데 있다.
본 발명의 과제들은 이상에서 언급한 기술적 과제로 제한되지 않으며, 언급되지 않은 또 다른 기술적 과제들은 아래의 기재로부터 당업자에게 명확하게 이해될 수 있을 것이다.
상기 과제를 해결하기 위한 본 발명의 일 실시예에 따른 하기 화학식 1로 표시되는 디(뉴클레오시드 5'-)폴리포스페이트의 제조 방법은 뉴클레오시드 5'-트리포스페이트(NTP) 및 뉴클레오시드 5'-모노포스페이트(NMP)로 이루어진 군에서 각각 독립적으로 선택되는 두 물질을 구리 금속염의 존재하에서 반응시키는 단계를 포함한다.
[화학식 1]
Figure pat00002
상기 화학식 1에서, B1 및 B2는 각각 독립적으로 피리미딘 염기이고, n은 0~4의 자연수이다.
상기 NTP는 우리딘 5'-트리포스페이트(UTP)이고, 상기 NMP는 우리딘 5'-모노포스페이트(UMP)일 수 있다.
상기 디(뉴클레오시드 5'-)폴리포스페이트는 하기 화학식 2로 표시될 수 있다.
[화학식 2]
Figure pat00003
상기 구리 금속염은 구리의 염화물, 브롬화물, 질산화물, 황산화물, 요오드화물, 아세트산화물 및 이들의 수화물로 이루어진 군에서 선택되는 하나 이상을 포함할 수 있다.
상기 구리 금속염은 브롬화구리 및 염화구리 중 하나 이상을 포함할 수 있다.
상기 NTP 1 당량에 대해 상기 NMP 1~5당량을 사용할 수 있다.
상기 다른 과제를 해결하기 위한 본 발명의 일 실시예에 따른 하기 화학식 2로 표시되는 디(우리딘 5'-)테트라포스페이트의 제조 방법은 우리딘 5'-트리포스페이트(UTP)와 우리딘 5'-모노포스페이트(UMP)를 구리 금속염의 존재하에서 반응시키는 단계를 포함한다.
[화학식 2]
Figure pat00004
상기 구리 금속염은 상기 UTP 1당량 대비 1~6당량으로 사용될 수 있다.
상기 구리 금속염은 브롬화구리 및 염화구리 중 하나 이상을 포함할 수 있다.
상기 구리 금속염은 염화구리 수화물을 포함할 수 있다.
상기 UTP 1 당량에 대해 상기 UMP는 1~5당량으로 사용될 수 있다.
기타 실시예의 구체적인 사항들은 상세한 설명 및 도면들에 포함되어 있다.
본 발명의 실시예들에 의하면 높은 합성 효율 및 수율로 디(뉴클레오시드 5'-)폴리포스페이트, 특히 P1,P4-디(우리딘 5'-)테트라포스페이트(Up4U)를 합성할 수 있다.
본 발명의 실시예들에 따른 효과는 이상에서 예시된 내용에 의해 제한되지 않으며, 더욱 다양한 효과들이 본 명세서 내에 포함되어 있다.
도 1 및 2는 실험예에서 브롬화구리 3당량을 사용하여 반응시킨 후의 HPLC 크로마토그램이다.
도 3 및 4는 실험예에서 브롬화구리 2.4당량을 사용하여 반응시킨 후의 HPLC 크로마토그램이다.
도 5 및 6은 실험예에서 브롬화구리 2당량을 사용하여 반응시킨 후의 HPLC 크로마토그램이다.
도 7 및 8은 실험예에서 브롬화구리 1.2당량을 사용하여 반응시킨 후의 HPLC 크로마토그램이다.
도 9 및 10은 실험예에서 황산구리 2당량을 사용하여 반응시킨 후의 HPLC 크로마토그램이다.
도 11은 실험예에서 황산구리 1.2당량을 사용하여 반응시킨 후의 HPLC 크로마토그램이다.
도 12 및 13은 실험예에서 염화구리 2당량을 사용하여 반응시킨 후의 HPLC 크로마토그램이다.
도 14 및 15는 실험예에서 염화구리이수화물 3당량과 UMP 1.2당량을 사용하여 반응시킨 후의 HPLC 크로마토그램이다.
도 16 및 17은 실험예에서 염화구리이수화물 3당량과 UMP 2당량을 사용하여 반응시킨 후의 HPLC 크로마토그램이다.
본 발명의 이점 및 특징, 그리고 그것들을 달성하는 방법은 첨부되는 도면과 함께 상세하게 후술되어 있는 실시예들을 참조하면 명확해질 것이다. 그러나 본 발명은 이하에서 개시되는 실시예들에 한정되는 것이 아니라 서로 다른 다양한 형태로 구현될 것이며, 단지 본 실시예들은 본 발명의 개시가 완전하도록 하며, 본 발명이 속하는 기술분야에서 통상의 지식을 가진 자에게 발명의 범주를 완전하게 알려주기 위해 제공되는 것이며, 본 발명은 청구항의 범주에 의해 정의될 뿐이다.
어떤 부분이 어떤 구성요소를 "포함" 한다고 할 때, 이는 특별히 반대되는 기재가 없는 한 다른 구성요소를 제외하는 것이 아니라 다른 구성 요소를 더 포함할 수 있는 것을 의미한다.
비록 제1, 제2 등이 다양한 구성요소들을 서술하기 위해서 사용되나, 이들 구성요소들은 이들 용어에 의해 제한되지 않음은 물론이다. 이들 용어들은 단지 하나의 구성요소를 다른 구성요소와 구별하기 위하여 사용하는 것이다. 따라서, 이하에서 언급되는 제1 구성요소는 본 발명의 기술적 사상 내에서 제2 구성요소일 수도 있음은 물론이다.
본 발명에서 사용되는 모든 기술용어는 달리 정의되지 않는 이상, 본 발명의 관련 분야에서 통상의 당업자가 일반적으로 이해하는 바와 같은 의미로 사용된다. 또한 본 명세서에는 바람직한 방법이나 시료가 기재되나, 이와 유사하거나 동등한 것들도 본 발명의 범주에 포함된다. 본 명세서에 참고문헌으로 기재되는 모든 간행물의 내용은 본 발명에 도입된다.
이하, 본 발명의 실시예들에 대해 상세히 설명한다.
본 발명의 일 실시예에 따른 디(뉴클레오시드 5'-)폴리포스페이트(di(nucleoside 5'-)polyphosphate)의 제조 방법은 뉴클레오시드 5'-트리포스페이트(nucleoside 5'-triphosphate, NTP) 및 뉴클레오시드 5'-모노포스페이트(nucleoside 5'-monophosphate, NMP)로 이루어진 군에서 각각 독립적으로 선택되는 두 물질을 구리 금속염의 존재하에서 반응시키는 단계를 포함한다.
디(뉴클레오시드 5'-)폴리포스페이트(di(nucleoside 5'-)polyphosphate)는 하기 화학식 1로 표시될 수 있다.
[화학식 1]
Figure pat00005
상기 화학식 1에서, B1 및 B2는 각각 독립적으로 피리미딘 염기이고, n은 0~4의 자연수일 수 있다.
구체적으로, 구리 금속염을 촉매로 하여 NTP와 NTP를 반응시키거나, NMP와 NMP를 반응시키거나, 또는 NTP와 NMP를 반응시켜 디(뉴클레오시드 5'-)폴리포스페이트를 제조할 수 있다.
예시적인 실시예에서, NTP와 NMP를 구리 금속염의 존재하에서 반응시켜 디(뉴클레오시드 5'-)테트라포스페이트를 제조할 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다.
구리 금속염은 구리의 염화물, 브롬화물, 질산화물, 황산화물, 요오드화물, 아세트산화물 및 이들의 수화물 중 하나 이상을 포함할 수 있다. 예시적인 실시예에서, 구리 금속염은 브롬화구리(Ⅰ), 브롬화구리(Ⅱ), 염화구리(Ⅰ), 염화구리(Ⅱ) 또는 이들 중 2 이상의 혼합물일 수 있다. 다른 실시예에서, 구리 금속염은 염화구리 수화물을 포함할 수 있다. 다만, 이에 제한되는 것은 아니다.
뉴클레오시드는 피리미딘(pyrimidine) 염기를 포함하는 피리미딘뉴클레오시드일 수 있고, 구체적으로는 우리딘(uridine)일 수 있다. 몇몇 실시예에서, NTP는 우리딘 5'-트리포스페이트(UTP)일 수 있고, NMP는 우리딘 5'-모노포스페이트(UMP)일 수 있다. UTP와 UMP를 구리 금속염 하에서 반응시킬 경우, 하기 화학식 2와 같은 디(우리딘 5'-)테트라포스페이트(Up4U)를 얻을 수 있다.
[화학식 2]
Figure pat00006
이하에서는, UTP와 UMP를 구리 금속염 하에서 반응시켜 Up4U를 제조하는 실시예에 대해 보다 구체적으로 설명한다.
Up4U의 제조 방법은 다음과 같은 제조 단계들을 포함할 수 있다.
(1) UTP, 3급아민염, 수용성 유기용매 및 축합제를 포함하는 UTP 용액을 제조하는 단계
(2) UMP, 3급아민염 및 수용성 유기용매를 포함하는 UMP 용액을 제조하는 단계
(3) 구리 금속염의 존재하에서 상기 UTP 용액과 상기 UMP 용액을 반응시켜 Up4U 3급아민염을 생성하는 단계 및
(4) 상기 Up4U 3급아민염을 정제하여 Up4U 테트라나트륨을 제조하는 단계
구체적으로, 상기 (1) 단계는 UTP 트리나트륨 수용액을 양이온 교환 수지로 채워진 관(column)에 통과시키고 3급아민과 반응시켜 UTP 3급아민염을 생성한 후, 감압 농축으로 물을 제거하고 수용성 유기용매로 용해함으로써 상기 UTP 용액을 제조하는 단계일 수 있다.
3급아민염은 반응성이 없는 3급아민의 염일 수 있다. '반응성이 없다'는 의미는 반응성이 매우 낮아 공정을 설계함에 있어 3급아민에 의한 반응 메커니즘을 실질적으로 무시할 수 있는 경우도 포함할 수 있다. 이러한 3급아민의 예로서, 트리-n-부틸아민, 디이소프로필에틸아민을 들 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다.
3급아민은 UTP 1당량 대비 3~5당량으로 포함될 수 있다. 3급아민이 UTP 1당량 대비 3당량 미만으로 포함될 경우 UTP의 안정성이 낮아질 수 있고, 5당량을 초과하여 포함될 경우 공정 효율 및 산업성 측면에서 불리할 수 있다.
수용성 유기용매는 구리 금속염을 용해할 수 있는 용매로서, 예를 들면 디메틸포름아미드(DMF), 디메틸아세트아미드(DMA), 포름아미드(FA), 피리딘, 디옥산, 디메틸술폭시드 또는 이들 중 2 이상의 혼합물을 포함할 수 있다. 다만, 이에 제한되지 않고, 구리 금속염을 용해할 수 있는 기타 다양한 용매들이 사용될 수도 있다.
축합제는 디이소프로필카르보디이미드(DIPC), 디시클로헥실카르보디이미드(DCC), 1-에틸-3-(3-디메틸아미노프로필)카르보디이미드와 같은 카르보디이미드류, 카르보닐디이미다졸(CDI), 디페닐포스포클로리데이트(DPC) 등의 인산 할로겐화물 및 염화 톨루엔술포닐 등의 술포산 할로겐화물 중 하나 이상을 포함할 수 있고, 특히 카르보디이미드류를 포함할 수있다.
축합제는 UTP 1당량 대비 1~4당량, 바람직하게는 1~2당량으로 포함될 수 있다. 축합제가 UTP 1당량 대비 1당량 미만으로 포함될 경우 반응이 완결되지 않는 문제가 발생할 수 있고, 4당량을 초과하여 포함될 경우 반응 후 잉여분이 발생함에 따라 이를 제거하는 단계가 수반되어야 하기 때문에 공정 효율 및 산업적 측면에서 불리할 수 있다.
상기 (2) 단계는 유리형 UMP(UMP 프리)에 3급아민과 수용성 유기용매를 가하여 상기 UMP 용액을 제조하는 단계일 수 있다.
3급아민과 수용성 유기용매는 상기에서 예시된 물질을 사용할 수 있으며, UTP 용액의 3급아민 및/또는 수용성 유기용매와 동일할 수도 있고, 상이할 수도 있다.
3급아민은 UMP 1당량 대비 1~1.5당량, 바람직하게는 1~1.2당량으로 포함될 수 있다. 3급아민이 UTP 1당량 대비 1당량 미만으로 포함될 경우 수용성 유기용매에 대한 용해도가 낮아져 반응이 느리게 진행되는 문제점이 발생할 수 있고, 1.5당량을 초과하여 포함될 경우 pH가 높아지고, 잔여물을 제거해야 함에 따라 공정 효율 측면에서 불리할 수 있다.
상기 (3) 단계는 UTP 용액에 UMP 용액과 구리 금속염을 가하여 Up4U 3급아민염을 제조하는 단계일 수 있으며, 구리 금속염은 UTP와 UMP간의 반응에 대한 촉매 역할을 할 수 있다.
UMP 용액은 UMP가 UTP 용액 내 UTP의 1당량 대비 1~5당량, 바람직하게는 1~3당량이 되도록 혼합될 수 있다. UMP가 UTP 1당량 대비 1당량 미만으로 혼합될 경우 수율이 낮아지는 문제가 발생할 수 있고, 5당량을 초과하여 혼합될 경우 반응 후 남게 되어 제거하여야 하기 때문에 공정 효율 측면 및 산업적 측면에서 불리할 수 있다.
구리 금속염은 구리의 염화물, 브롬화물, 질산화물, 황산화물, 요오드화물, 아세트산화물 또는 이들 중 2 이상의 혼합물일 수 있고, 바람직하게는 브롬화구리(Ⅰ), 브롬화구리(Ⅱ), 염화구리(Ⅰ), 염화구리(Ⅱ) 또는 이들 중 2 이상의 혼합물일 수 있다.
구리 금속염은 UTP 용액 내 UTP의 1당량 대비 1~6당량으로 포함될 수 있다. 구리 금속염이 UTP 1당량 대비 1당량 미만으로 혼합되면 UTP와 UMP간의 반응 진행이 미미할 수 있고, 구리 금속염의 당량이 증가할수록 UTP와 UMP간의 반응 효율은 높아질 수 있으나, 6당량을 초과하면 구리 금속염의 증가량에 비해 반응 효율의 증가 폭이 작고, 반응 후 남은 구리 금속염을 제거해야 하기 때문에 공정 효율 측면에서 불리할 수 있다.
구리 금속염을 UTP 용액에 가할 때 수용성 유기용매에 녹인 용액의 형태로 가할 수 있으며, 이에 따라 구리 금속염을 고체로 가할 경우 불순물이 생기는 문제를 방지할 수 있다.
상기 (4) 단계는 감압 농축과 음이온 수지 흡착으로 Up4U 3급아민염에서 수용성 유기용매와 디메틸포름아미드를 제거하여 Up4U 암모늄염을 얻고, 이를 양이온 교환 수지에 통과시키고 에탄올로 결정화한 후 건조하여 Up4U 테트라나트륨을 얻는 단계일 수 있다.
음이온 수지에 Up4U 3급아민염을 흡착시킬 경우, 끓는점이 높은 디메틸포름아미드를 용출시킴으로써 제거할 수 있는 이점이 있다.
<제조예: P1,P4-디(우리딘 5'-)테트라포스페이트(Up4U)의 제조>
(1) 우리딘 5'-트리포스페이트(UTP) 용액의 제조
UTP 트리나트륨 5.5g (함량 92.2%, 제조처: HANGZHOU MEIYA PHARMACEUTICAL CO. LTD)을 증류수 55mL에 용해하여 양이온 교환 수지 55mL (SCR-BH H type, 삼양사)를 충진한 컬럼에 통과시키고, 증류수 55mL로 세척한 후, 트리-n-부틸아민 9.5mL로 중화하였다. 40℃에서 감압 농축 후 잔사에 1,4-디옥산을 가하고 감압 농축하여 물을 제거하였다. 여기에 디메틸포름아미드 50mL를 가하여 UTP 트리-n-부틸아민염 디메틸포름아미드 용액을 제조한 후, 디이소프로필카르보디이미드 2.35mL를 가하고 3시간 동안 교반하여 UTP 트리-n-부틸아민염 디메틸포름아미드 디이소프로필카르보디이미드 용액을 제조하였다.
(2) 우리딘 5'-모노포스페이트(UMP) 용액의 제조
UMP 3.84g (함량 96.6%, 제조처: HANGZHOU MEIYA PHARMACEUTICAL CO. LTD)에 디메틸포름아미드 55mL를 가한 후 트리-n-부틸아민 4.99mL를 가하여 UMP 트리-n-부틸아민염 디메틸포름아미드 용액을 제조하였다.
(3) Up4U 3급아민염의 제조
상기 (1)에서 제조한 UTP 트리-n-부틸아민염 디메틸포름아미드 디이소프로필카르보디이미드 용액에 상기 (2)에서 제조한 UMP 트리-n-부틸아민염 디메틸포름아미드 용액과 하기 표 1의 각종 구리 금속염을 디메틸포름아미드 40mL에 녹인 용액을 가한 후, 실온에서 하기 표 1에 기재된 시간 동안 반응시켰다.
구리 금속염 구리 금속염 당량 UMP 당량 반응시간
브롬화구리(Ⅱ) 3당량 1.2당량 3 시간
브롬화구리(Ⅱ) 2.4당량 1.2당량 6 시간
브롬화구리(Ⅱ) 2당량 1.2당량 6 시간
브롬화구리(Ⅱ) 1.2당량 1.2당량 6 시간
황산구리(Ⅱ) 1.2당량 1.2당량 6 시간
황산구리(Ⅱ) 2당량 1.2당량 6 시간
염화구리(Ⅱ) 2당량 1.2당량 6 시간
염화구리이수화물(Ⅱ) 3당량 1.2당량 3 시간
염화구리이수화물(Ⅱ) 3당량 2당량 3 시간
(4-1) Up4U 테트라나트륨의 제조 (브롬화구리(Ⅱ) 3당량, UMP 1,2당량)
상기 (3)에서 브롬화구리(Ⅱ) 3당량으로 3시간 반응시켜 생성된 Up4U 3급아민염 반응액에 증류수 140mL를 가한 후 음이온 교환 수지 220mL (Amberlite IRA 67 Cl 염화물 이온형)에 흡착시킨 후, 50% DMF 수용액, 증류수, 0.1N 염산 및 증류수로 세척하고, 탄산수소암모늄 0.3몰 수용액, 0.4몰 수용액 및 0.6몰 수용액으로 순차적으로 용출한 후 Up4U 암모늄염을 함유하는 분획을 취하여 감압 농축하고 잔사에 증류수를 가하고 50℃에서 감압 농축하였다. 이 잔사를 증류수로 용해하여 양이온 교환 수지 220mL (SCR-BH Na type 나트륨 형, 삼양사)에 통과시키고 증류수로 세척한 후, 감압 농축하였다. 잔사에 증류수 10mL를 가하여 용해한 후, 에탄올 80mL 가하여 석출된 결정을 여과하고 40℃에서 진공 건조하여 Up4U 테트라나트륨 5.45g (수율: 62.1%)을 얻었다.
(4-2) Up4U 테트라나트륨의 제조 (염화구리(Ⅱ)이수화물 3당량, UMP 2당량)
상기 (3)에서 염화구리(Ⅱ)이수화물 3당량을 사용하고, UMP 트리-n-부틸아민염-디메틸포름아미드 용액의 제조시에 UMP를 2당량(UMP 6.4g)을 사용한 것을 제외하고는 상기 (4-1)와 동일하게 진행하여 Up4U 테트라나트륨 6.93g (수율: 78.9%)을 얻었다.
<실험예: 구리 금속염의 종류 및 당량에 따른 Up4U 합성 효율 분석>
상기 제조예의 (3)에서 반응액을 HPLC(측정파장 262nm)로 출발물질인 UTP 트리 나트륨 (retention time: 약 6.7분) 및 UMP (retention time: 약 2.5분)의 감소와 Up4U (retention time: 약 14분)의 생성 진행 척도인 면적% (area percent)를 분석하였다. 그 결과는 하기 표 2와 같았고, 각 HPLC 크로마토그램은 도 1 내지 13과 같았다.
구리 금속염 당량 반응시간 UTP 면적% UMP 면적% Up4U 면적%
브롬화구리(Ⅱ) 3당량 3 시간 0.11 9.96 64.62
브롬화구리(Ⅱ) 2.4당량 6 시간 3.93 19.996 52.96
브롬화구리(Ⅱ) 2당량 6 시간 2.79 14.298 51.71
브롬화구리(Ⅱ) 1.2당량 6 시간 0 23.88 34.12
황산구리(Ⅱ) 1.2당량 6 시간 39.39 30.61 14.98
황산구리(Ⅱ) 2당량 6 시간 9.12 29.11 31.35
염화구리(Ⅱ) 2당량 6 시간 2.5 11.07 58.38
상기 표 2에 나타난 바와 같이, 구리 금속염의 당량이 증가할수록 HPLC 크로마토그램에서 Up4U의 면적%이 증가하는 바, 반응이 더 많이 진행된다는 것을 알 수 있다. 또한, 브롬화구리와 염화구리가 황산구리보다 더 반응에 효과적임을 알 수 있는데, 이는 브롬화구리와 염화구리가 황산구리보다 수용성 유기용매인 디메틸포름아미드에 잘 용해되기 때문인 것으로 이해된다.
또한, 염화구리이수화물(Ⅱ)을 사용한 경우, 하기 표 3과 같이 UMP의 당량이 증가할수록 수율이 향상되었다. 도 14 및 15는 UMP 1.2당량을 사용한 HPLC 크로마토그램이고, 도 16 및 17은 UMP 2당량을 사용한 HPLC 크로마토그램이다.
구리 금속염 및 당량 UMP 당량 반응시간 Up4U 수율
염화구리이수화물(Ⅱ) 3당량 1.2 3 시간 49.3 %
염화구리이수화물(Ⅱ) 3당량 2.0 3 시간 78.9 %
이상 첨부된 도면을 참조하여 본 발명의 실시예들을 설명하였지만, 본 발명이 속하는 기술분야에서 통상의 지식을 가진 자는 본 발명의 그 기술적 사상이나 필수적인 특징을 변경하지 않고서 다른 구체적인 형태로 실시될 수 있다는 것을 이해할 수 있을 것이다. 그러므로 이상에서 기술한 실시예들은 모든 면에서 예시적인 것이며 한정적이 아닌 것으로 이해해야만 한다.

Claims (11)

  1. 뉴클레오시드 5'-트리포스페이트(NTP) 및 뉴클레오시드 5'-모노포스페이트(NMP)로 이루어진 군에서 각각 독립적으로 선택되는 두 물질을 구리 금속염의 존재하에서 반응시키는 단계를 포함하는, 하기 화학식 1로 표시되는 디(뉴클레오시드 5'-)폴리포스페이트의 제조 방법.
    [화학식 1]
    Figure pat00007

    (상기 화학식 1에서, B1 및 B2는 각각 독립적으로 피리미딘 염기이고, n은 0~4의 자연수이다)
  2. 제1항에 있어서,
    상기 NTP는 우리딘 5'-트리포스페이트(UTP)이고, 상기 NMP는 우리딘 5'-모노포스페이트(UMP)인 디(뉴클레오시드 5'-)폴리포스페이트의 제조 방법.
  3. 제1항에 있어서,
    상기 디(뉴클레오시드 5'-)폴리포스페이트는 하기 화학식 2로 표시되는 디(우리딘 5'-)테트라포스페이트(Up4U)인 디(뉴클레오시드 5'-)폴리포스페이트의 제조 방법.
    [화학식 2]
    Figure pat00008
  4. 제1항에 있어서,
    상기 구리 금속염은 구리의 염화물, 브롬화물, 질산화물, 황산화물, 요오드화물, 아세트산화물 및 이들의 수화물로 이루어진 군에서 선택되는 하나 이상을 포함하는 디(뉴클레오시드 5'-)폴리포스페이트의 제조 방법.
  5. 제4항에 있어서,
    상기 구리 금속염은 브롬화구리 및 염화구리 중 하나 이상을 포함하는 디(뉴클레오시드 5'-)폴리포스페이트의 제조 방법.
  6. 제1항에 있어서,
    상기 NTP 1 당량에 대해 상기 NMP 1~5당량을 사용하여 상기 디(뉴클레오시드 5'-)폴리포스페이트를 제조하는 방법.
  7. 우리딘 5'-트리포스페이트(UTP)와 우리딘 5'-모노포스페이트(UMP)를 구리 금속염의 존재하에서 반응시키는 단계를 포함하는, 하기 화학식 2로 표시되는 디(우리딘 5'-)테트라포스페이트의 제조 방법.
    [화학식 2]
    Figure pat00009
  8. 제7항에 있어서,
    상기 구리 금속염은 상기 UTP 1당량 대비 1~6당량으로 사용되는 디(우리딘 5'-)테트라포스페이트의 제조 방법.
  9. 제7항에 있어서,
    상기 구리 금속염은 브롬화구리 및 염화구리 중 하나 이상을 포함하는 디(우리딘 5'-)테트라포스페이트의 제조 방법.
  10. 제7항에 있어서,
    상기 구리 금속염은 염화구리 수화물을 포함하는 디(우리딘 5'-)테트라포스페이트의 제조 방법.
  11. 제7항에 있어서,
    상기 UTP 1 당량에 대해 상기 UMP는 1~5당량으로 사용되는 디(우리딘 5'-)테트라포스페이트의 제조 방법.
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