KR20190003493A - 조성물 - Google Patents

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Abstract

경구 투여에 의해 장관 영역에 약학적으로 활성인 결합 폴리펩티드를 전달하기 위한, 압축된 코어를 포함하는 고형 약학 조성물을 제공하며, 여기에서 상기 압축된 코어는 약학적으로 활성인 결합 폴리펩티드를 포함하고, 상기 압축된 코어는 pH 민감성 장용 코팅으로 코팅된다.

Description

조성물
본 발명은 약학적으로 활성인 결합 폴리펩티드를 경구 투여에 의해 장관 영역에 전달하기 위한 고형 약학 조성물에 관한 것이다. 상기 조성물은 유리한 방출 프로파일로부터 이익을 얻으며 상기 장관의 질병의 치료에 사용될 수 있다. 본 발명은 또한 약학적으로 활성인 결합 폴리펩티드를 경구 투여에 의해 장관 영역에 전달하는 방법에 관한 것이다.
염증성 장 질병과 같은 질병은 장관의 다양한 영역, 예를 들어 소장 영역에서 징후를 나타낸다. 전신 투여시 염증성 장 질병의 치료에 유효한 약학적으로 활성인 결합 폴리펩티드가 존재한다. 예를 들어, 항-TNF-알파 항체는 염증성 장 질병의 치료에서 효능이 입증되었다. 그러나, 상기 항체는 통상적으로 주사(즉 정맥내, 피하 또는 근육내)에 의해 전달되고 TNF-알파를 전신적으로 중화시키기 때문에, 그의 사용은 결핵의 재활성화 및 장기적인 암 위험성을 비롯한 심한 부작용과 관련될 수 있다. 더욱이, 상기 비경구 투여 경로 및 대용량 요구는 상기 항체요법을 값비싸게 만들고 환자가 좀처럼 다가갈 수 없게 한다.
상기 장관의 표적 영역에서의 국소 효과를 위한 상기와 같은 폴리펩티드의 경구 투여가 상기 투여형의 감소된 비용 및 편의성으로 인해 바람직할 수 있다. 또한, 경구 투여는 비경구 투여형에 비해 감소된 면역원성을 제공할 수 있으며 상기 폴리펩티드에의 불필요한 전신 노출을 감소시키거나 제거할 수 있다.
상기 목적을 성취하기 위해서, 적합한 방출 프로파일이 성취되어야 한다. 즉, 상기 폴리펩티드의 활성이 위 및 적합하게는 십이지장을 포함한 상부 장관을 통한 수송후에 유지되어야 하며 활성 폴리펩티드의 목적하는 투여량이 상기 장관의 목적하는 장소에 전달되어야 한다.
본 발명의 약학 조성물은 적어도 일부 실시태양에서 종래 기술의 이점에 비해 하기의 이점 중 하나 이상을 가질 수 있다:
(i) 서방성 방출 프로파일,
(ii) 지연 방출 프로파일,
(iii) 장관의 하나 이상의 영역으로의 표적화된 방출,
(iv) 십이지장에서부터 항문관까지의 모든 장관 영역으로의 실질적으로 일관된 방출(즉 '약물의 과량방출'을 피한다),
(v) 비경구 투여에 비해 전달된 폴리펩티드에 대해 감소된 숙주 면역반응,
(vi) 약학적 활성제에의 감소된 전신 노출,
(vii) 치료학적 효과에 요구되는 감소된 투여량,
(viii) 감소된 생산 비용,
(ix) 폴리펩티드의 유지되거나 개선된 열 안정성.
종래 기술
WO2014/030049(D1)는 단일 가변 도메인, 및 특히 위 및 장과 같은 프로테아제-풍부 환경에서 단일 가변 도메인을 안정화시키는 수단으로서 카모스타트 메실레이트를 포함하는 조성물을 개시한다. D1은 마우스의 위장관에 직접 주사되는 액체 조성물을 예시한다.
US2010/260857(D2)은 코팅된 소화 효소 제제를 개시한다. D2는 액체로 코팅되고 샤쉐 또는 캡슐 중에 패키징된 자유-유동 소화 효소 입자를 예시한다.
WO2008/122965(D3)는 용해된 액체 형태의 사이클로스포린 조성물을 개시한다.
US2006/057197(D4)은 비-폴리펩티드, 소분자에 대한 약학적 투여형을 개시한다. D4 중의 모든 예시는 바클로펜의 전달 및 혈장 프로파일의 후속적인 모니터링에 관한 것이다.
문헌[Hussan et al 2012 IOSR Journal of Pharmacy 2(6):5-11](D5)은 장용 코팅(enteric coating)의 최근의 진보에 대한 리뷰이다.
문헌[Harmsen et al 2006 Applied Microbiology and Biotechnology 72(3):544-551](D6)은 경구 면역요법을 위한 단백질분해 안정성 라마 단일-도메인 항체 단편의 선택 및 최적화를 개시한다.
문헌[Hussack et al 2011 PLOS ONE 6(11):e28218](D7)은 높은 프로테아제 내성 및 열 안정성을 갖는 조작된 단일-도메인 항체를 개시한다. D7은 고체 투여형에 대한 정보는 제공하지 않는다.
상기 중 어느 것도 약학적으로 활성인 결합 폴리펩티드를 지속적으로 장 전달할 수 있는 압축된 코어(compressed core)를 포함하는 고형 조성물을 개시하지 않는다.
본 발명자들은 놀랍게도 약학적으로 활성인 결합 폴리펩티드를 경구 투여에 의해 장관 영역에 전달하기에 적합한 유리한 고형 약학 제형을 생성시켰다. 상기 약학 제형은 그의 지연 및/또는 서방성 방출 프로파일로 인해 특히 유리하다. 상기 약학 제형은 장관의 질병, 예를 들어 자가면역 및/또는 염증성 질병, 예를 들어 염증성 장 질병의 예방 또는 치료에, 또는 장관 상주 병원성 미생물로부터의 감염의 예방 또는 치료에 특히 유용함을 예상할 수 있다.
본 발명은 압축된 코어를 포함하는, 약학적으로 활성인 결합 폴리펩티드를 경구 투여에 의해 장관 영역에 전달하기 위한 고형 약학 조성물을 제공하며, 여기에서 상기 압축된 코어는 약학적으로 활성인 결합 폴리펩티드를 포함하고 상기 압축된 코어는 pH 민감성 장용 코팅으로 코팅된다.
또한 압축된 코어를 포함하는, 장관 영역에의 경구 투여에 의한 상기 장관 질병의 치료에 사용하기 위한 고형 약학 조성물을 제공하며, 여기에서 상기 압축된 코어는 약학적으로 활성인 결합 폴리펩티드를 포함하고 상기 압축된 코어는 pH 민감성 장용 코팅으로 코팅된다.
또한 압축된 코어를 포함하는 고형 약학 조성물을 경구 투여함을 포함하는, 약학적으로 활성인 결합 폴리펩티드를 장관 영역에 전달하는 방법을 제공하며, 여기에서 상기 압축된 코어는 약학적으로 활성인 결합 폴리펩티드를 포함하고 상기 압축된 코어는 pH 민감성 장용 코팅으로 코팅된다.
또한 고형 약학 조성물용의 압축된 코어를 제공하며, 여기에서 상기 조성물은 약학적으로 활성인 결합 폴리펩티드를 경구 투여에 의해 장관 영역에 전달하기 위한 것이며, 여기에서 상기 압축된 코어는 국소 치료 효과를 위한 약학적으로 활성인 결합 폴리펩티드를 포함한다.
도 1 - 약전 용해 시험(Pharmacopeial Dissolution Test)에서 약학적으로 활성인 결합 폴리펩티드의 용해%(개별적인 데이터 점들)
도 2 - 약전 용해 시험에서 약학적으로 활성인 결합 폴리펩티드의 용해%(데이터 점들의 평균)
도 3 - 동적인 용해 시험(Dynamic Dissolution Test)에 사용된 절식 상태에 대해 시뮬레이션된 위 및 장 pH 프로파일
도 4 - 동적인 용해 시험에서 약학적으로 활성인 결합 폴리펩티드의 용해%(배치 A)
도 5 - 동적인 용해 시험에서 약학적으로 활성인 결합 폴리펩티드의 용해%(배치 B)
도 6 - 약학적으로 활성인 결합 폴리펩티드의 Tm에 대한 부형제의 영향을 입증하는 열 이동 분석
도 7 - 키노몰구스 원숭이 위장관 섹션 중에서 산정된 관강[항-TNF ICVD]
도 8 - 키노몰구스 원숭이 위장관으로부터 항-TNF ICVD의 총 회수%
도 9 - 휴미라(Humira) 경쟁적 ELISA OD450 데이터
도 10 - 모아놓은 키노몰구스 원숭이 대변 중의 항-TNF ICVD 농도
도 11 - 모아놓은 키노몰구스 원숭이 대변으로부터 회수된 산정된 항-TNF ICVD
도 12 - 분무건조 및 동결건조된 출발 물질들을 비교하는 동적인 용해 시험
서열의 기재
서열번호: 1 - Q62E10의 폴리펩티드 서열
서열번호: 2 - Q65F2의 폴리펩티드 서열
서열번호: 3 - Q65F3의 폴리펩티드 서열
서열번호: 4 - Q62F2의 폴리펩티드 서열
서열번호: 5 - Q65G1의 폴리펩티드 서열
서열번호: 6 - Q65H6의 폴리펩티드 서열
서열번호: 7 - Q65F1의 폴리펩티드 서열
서열번호: 8 - Q65D1의 폴리펩티드 서열
서열번호: 9 - Q65C7의 폴리펩티드 서열
서열번호: 10 - Q65D3의 폴리펩티드 서열
서열번호: 11 - Q65B1의 폴리펩티드 서열
서열번호: 12 - Q65F6의 폴리펩티드 서열
서열번호: 13 - Q65F11의 폴리펩티드 서열
서열번호: 14 - Q65E12의 폴리펩티드 서열
서열번호: 15 - Q65C12의 폴리펩티드 서열
서열번호: 16 - Q65A6의 폴리펩티드 서열
서열번호: 17 - Q65A3의 폴리펩티드 서열
서열번호: 18 - Q62F10의 폴리펩티드 서열
서열번호: 19 - ID7F-EV의 폴리펩티드 서열
서열번호: 20 - ID8F-EV의 폴리펩티드 서열
서열번호: 21 - ID9F-EV의 폴리펩티드 서열
서열번호: 22 - ID13F-EV의 폴리펩티드 서열
서열번호: 23 - ID14F-EV의 폴리펩티드 서열
서열번호: 24 - ID15F-EV의 폴리펩티드 서열
서열번호: 25 - Q62E10-DVQLV의 폴리펩티드 서열
서열번호: 26 - ID34F의 폴리펩티드 서열
서열번호: 27 - ID37F의 폴리펩티드 서열
서열번호: 28 - ID38F의 폴리펩티드 서열
방출 프로파일
약학적으로 활성인 결합 폴리펩티드를 포함하는 조성물의 방출 프로파일은, 상기 조성물로부터 방출되고 따라서 시간에 걸쳐 그의 표적에 자유롭게 결합하는 약학적으로 활성인 결합 폴리펩티드의 양이다. 본 출원은 위에서부터 직장까지의 장관에서의 고형 약학 조성물의 방출 프로파일에 관한 것이다. 방출 프로파일은 위에서부터 직장까지의 수송 동안 생체내에서 성취되는 프로파일, 또는 위에서 직장까지의 수송의 시험관내 모델에서 성취되는 프로파일을 지칭할 수 있다. 방출 프로파일을 적합한 용해 기구를 사용하는 용해 시험, 예를 들어 하기에 기재된 것들에 의해 시험관내에서 시험할 수 있다. 보다 적합하게, 본 출원은 십이지장에서부터 직장까지 및 보다 적합하게는 공장에서부터 직장까지의 장관에서의 고형 약학 조성물의 방출 프로파일에 관한 것이다.
유럽 의약청의 "3.2. 셋팅 명세서" 섹션하의 "경구용 변형 방출 제품의 품질에 대한 지침"은 위-내성 제품의 시험관내 용해에 대해 적어도 2개의 시점: 산성 매질에서의 방출을 배제시키는 초기 시점(2시간후에 10% 미만 용해) 및 활성 물질의 대부분이 (근)중성 배지에서 방출되도록 하는 시점이 명세서에 포함되어야 한다고 서술하고 있다.
"지연 방출"은 (a) 약학적으로 활성인 결합 폴리펩티드를 외부 환경(예를 들어 산성 pH)으로부터 보호하고 (b) 조성물이 장관의 목적하는 영역에 도달할 때까지 어떠한 약학적으로 활성인 결합 폴리펩티드도 외부 환경에 방출되지 않게 하는 상기 약학적으로 활성인 결합 폴리펩티드를 포함하는 조성물의 능력을 지칭한다. 지연 방출은 pH 민감성 장용 코팅에 의해 성취된다. 상기 pH 민감성 장용 코팅이 완전성을 오래 유지할수록, 지연 방출 기간이 길어진다. 상기 pH 민감성 장용 코팅의 성질을, 방출이 추가로 지연되도록(예를 들어 상기 조성물이 십이지장을 통과하여 공장에 진입할 때까지 방출되지 않도록) 맞출 수 있다. 한편으로, 상기 pH 민감성 장용 코팅의 성질을, 방출이 진행될 수 있도록(예를 들어 약학적으로 활성인 결합 폴리펩티드가 위를 나온 후 여전히 십이지장내에 있는 동안에만 방출되도록) 맞출 수도 있다.
"서방성 방출"은 약학적으로 활성인 결합 폴리펩티드를, 장관의 목적하는 영역들(또는 목적하는 영역)을 통해 수송되는 동안 목적하는, 이상적으로는 실질적으로 일정한 속도로 외부 환경에 방출시키는, 상기 약학적으로 활성인 결합 폴리펩티드를 포함하는 조성물을 능력을 지칭한다.
본 발명의 조성물은 지연 방출 및 서방성 방출을 모두 적합하게 성취할 것이다.
약전에 포괄적으로 한정된 지연 및 서방성 방출의 공식적인 시험관내 시험이 존재한다. 정제 용해는 투여형으로부터 약물 방출의 속도를 측정하는 표준화된 방법이다. 시험관내 용해 시험을 사용하여 생체내 약물 용해를 예측할 수 있다. 적합한 시험관내 용해 시험을 하기에 상세히 기재한다.
지연 방출: 장용 코팅 방출 프로파일
지연 방출의 측정: 약전 장용 코팅 시험
적합하고 광범위하게 사용되는 장용 코팅의 표준 시험 방법은, 본 명세서에서 "약전 장용 코팅 시험"이라 지칭되는 유럽 약전 8.0 "2.9.3 고체 투여형의 용해 시험"(상기는 미국 약전 및 일본 약전의 상응하는 교과서와 조화를 이룬다)에 의해 제공되는 것이다. 상기 장용 코팅 시험을 하기와 같이 수행한다.
1. 시험하고자 하는 조성물을 USP2 기구(캡슐 중에 존재하는 경우 밴드 싱커와 함께)에서 900 ㎖의 0.1 M HCl에 가한다.
2. 상기 조성물 및 산을 100 rpm에서 2시간 동안 교반한다.
상기 용해 매질을 샘플링하고 2시간째에 분석한다. 적합하게 상기 약학 조성물은 2시간 후에 상기 약학적으로 활성인 결합 폴리펩티드의 10 중량% 미만을 방출한다. 보다 적합하게 상기 약학 조성물은 2시간 후에 상기 약학적으로 활성인 결합 폴리펩티드의 5 중량% 미만을 방출한다. 보다 적합하게 상기 약학 조성물은 2시간 후에 상기 약학적으로 활성인 결합 폴리펩티드의 1 중량% 미만을 방출한다. 보다 적합하게 상기 약학 조성물은 2시간 후에 상기 약학적으로 활성인 결합 폴리펩티드를 방출하지 않는다.
2시간 후에 약학적으로 활성인 결합 폴리펩티드의 10 중량% 미만의 방출은 상기 장용 코팅이 상기 폴리펩티드의 목적하는 장관 영역으로의 전달에 선행하여 상기 폴리펩티드에 적합한 보호를 제공함을 가리킨다. 상기 방출 프로파일을 갖는 조성물은 지연 방출을 성취한다.
경우에 따라, 상기 약전 장용 코팅 시험을 2시간을 초과하여 계속 실행되도록 변형시킬 수도 있다. 이는 pH 민감성 장용 코팅이 완전하게 남아있는 최대 시간을 분석할 수 있게 한다. 소량의 조성물을 사용하는 경우, 사용되는 HCl의 분량을 감소시킴으로써 시험의 정확성을 증가시킬 수 있다.
pH 민감성 장용 코팅은, 시각적 검사에 기반하여, 조성물이 내용물의 이탈을 허용하는 붕해 또는 균열의 징후를 보이지 않을 때(유럽 약전 8.0 2.9.3에 개략된 바와 같이) '완전하다'고 한다. 한편으로, pH 민감성 장용 코팅을, 약학적으로 활성인 결합 폴리펩티드의 1% 이하, 보다 적합하게는 0.5% 이하가 상기 조성물이 존재하는 용해 매질에서 검출될 수 있거나 또는 보다 적합하게는 검출될 수 없을 때 '완전하다'고 할 수 있다. 적합하게, 상기 pH 민감성 장용 코팅은 상기 약전 장용 코팅 시험 동안 적어도 2시간, 보다 적합하게는 적어도 3시간, 보다 적합하게는 적어도 4시간, 보다 적합하게는 적어도 5시간, 보다 적합하게는 적어도 6시간 동안 완전하게 남아있는다.
서방성 방출: 코어 방출 프로파일
서방성 성질을 적합하게는, 조성물을 상술한 약전 장용 코팅 시험을 사용하여 지연 방출 성질에 대해 시험한 후 바로 시험한다. 이 경우, 상기 조성물을 지연 방출 시험 완료후 0.1 M HCl로부터 체질하여 새로운 0.1 M HCl로 세척하고, 그 후에 최종적으로 상기 조성물을 하기에 기재된 서방성 방출 시험에 기재된 용해 매질(포스페이트 완충제)로 옮긴다.
서방성 방출의 측정: 약전 용해 시험
적합하고 광범위하게 사용되는 표준 용해 시험 방법은 유럽 약전 8.0 "2.9.3 고체 투여형의 용해 시험"(상기는 미국 약전 및 일본 약전의 상응하는 교과서와 조화를 이룬다)에 의해 제공되는 것이다. 상기 용해 시험을 본 명세서에서는 "약전 용해 시험"으로서 지칭한다. 상기 용해 시험을 하기와 같이 수행한다.
1. 시험하고자 하는 조성물을 USP2 기구(캡슐 중에 존재하는 경우 밴드 싱커와 함께)에서 900 ㎖의 0.05 M pH 7.4 포스페이트 완충제에 가한다.
2. 상기 조성물 및 완충제를 100 rpm에서 2시간 동안 교반한다.
3. 이어서 상기 조성물 및 완충제를 200 rpm에서 30분 동안 교반한다.
상기 용해 매질을 샘플링하고 5, 10 15, 30, 45, 60, 90 및 120분(이 동안 100 rpm 교반 기간) 및 150분(이 동안 200 rpm 교반 기간)째에 분석한다.
적합하게, 약전 용해 시험에서 분석시, 본 발명의 약학 조성물은 하기를 방출한다:
(i) 30분 후에 약학적으로 활성인 결합 폴리펩티드의 10-40 중량%,
(ii) 60분 후에 약학적으로 활성인 결합 폴리펩티드의 30-60 중량%, 및
(iii) 120분 후에 약학적으로 활성인 결합 폴리펩티드의 60 중량% 이상.
도 2는 약전 용해 시험에서 실시예 1의 조성물에 의해 성취되는 용해% 프로파일을 예시한다. 상기 용해 범위는 도 2에서 화살표에 의해 예시된다.
보다 적합하게, 약전 용해 시험에서 분석시, 본 발명의 약학 조성물은 하기를 방출한다:
(i) 30분 후에 약학적으로 활성인 결합 폴리펩티드의 10-25 중량%,
(ii) 60분 후에 약학적으로 활성인 결합 폴리펩티드의 30-50 중량%, 및
(iii) 120분 후에 약학적으로 활성인 결합 폴리펩티드의 60 중량% 이상.
보다 적합하게, 약전 용해 시험에서 분석시, 본 발명의 약학 조성물은 하기를 방출한다:
(i) 30분 후에 약학적으로 활성인 결합 폴리펩티드의 13-20 중량%,
(ii) 60분 후에 약학적으로 활성인 결합 폴리펩티드의 35-45 중량%, 및
(iii) 120분 후에 약학적으로 활성인 결합 폴리펩티드의 65 중량% 이상.
지연 및 서방성 방출: 연합 장용 코팅 및 코어 방출 프로파일
동적인 용해 시험
한편으로, 또는 상술한 약전 시험 외에, 장용 코팅 및 코어 방출 프로파일의 적합한 연합 시험 방법을 본 명세서에서는 "동적인 용해 시험"이라 칭한다.
도 3은 상기 동적인 용해 시험에 사용되는 시뮬레이션된 절식 상태 동안의 pH 프로파일을 예시한다. 상기 시험에 대한 추가의 정보를 주로 문헌[Garbacz et al 2014] 및 또한 문헌[Fadda et al 2009], [Merchant et al 2014], 및 [Goyanes et al 2015]에서 입수할 수 있다. 상기 시험을 하기와 같이 수행한다.
1. 시험하고자 하는 조성물을 USP2 기구에서 900 ㎖의 0.1 M HCl에 가한다.
2. 상기 조성물 및 산을 50 rpm에서 2시간 동안 교반한다.
상기 0.1 M HCl 중에서의 2시간의 기간을 도 3에서 점선에 선행하는 영역에 의해 나타낸다.
상기 용해 매질을 샘플링하고 2시간째에 분석한다. 적합하게 상기 약학 조성물은 2시간 후에 상기 약학적으로 활성인 결합 폴리펩티드의 10 중량% 미만을 방출한다. 보다 적합하게 상기 약학 조성물은 2시간 후에 상기 약학적으로 활성인 결합 폴리펩티드의 5 중량% 미만을 방출한다. 보다 적합하게 상기 약학 조성물은 2시간 후에 상기 약학적으로 활성인 결합 폴리펩티드의 1 중량% 미만을 방출한다. 보다 적합하게 상기 약학 조성물은 2시간 후에 상기 약학적으로 활성인 결합 폴리펩티드를 방출하지 않는다.
2시간 후에 약학적으로 활성인 결합 폴리펩티드의 10 중량% 미만의 방출은 상기 장용 코팅이 상기 폴리펩티드의 목적하는 장관 영역으로의 전달에 선행하여 상기 폴리펩티드에 적합한 보호를 제공함을 가리킨다. 상기 방출 프로파일을 갖는 조성물은 지연 방출을 성취한다.
상기 시험의 다음 단계는 위장관을 따라 존재하는 변하는 pH 프로파일을 통해 수송 중 조성물의 용해를 확인한다. 도 3(점선 이후의 곡선)은 사용되는 시뮬레이션된 절식 상태 동안의 pH 프로파일을 예시한다. 상기 시험의 이 단계를 하기와 같이 수행한다.
1. 시험하고자 하는 조성물을 USP2 기구에서 900 ㎖의 pH 5.79 행크스 탄산 수소 완충제(세부사항은 하기 표 1)로 옮긴다(상기 행크스 완충제로 옮기는 순간을 도 3에서 점선에 의해 나타낸다).
2. 상기 조성물 및 완충제를 50 rpm에서 16시간 동안 교반하고, 이 시간 동안 상기 용해 매질의 pH는 도 3에 따라 변한다. 상기 용해 매질 pH의 변화를 기상 이산화 탄소(pH를 낮추기 위해) 또는 기상 질소(pH를 상승시키기 위해)에의 노출에 의해 변화시킬 수 있다. 상기 pH 프로파일은 절식 중 소장 통로의 중간 pH 프로파일뿐만 아니라 결장 수송의 모델 pH 프로파일을 시뮬레이션한다.
3. 이어서 상기 조성물 및 완충제를 200 rpm에서 2시간 동안 교반한다.
1 L에 대한 양 (g) 화합물 CAS 번호
0.06 인산 이수소 칼륨 7778-77-0
8.00 염화 나트륨 7647-14-5
0.03 인산 이수소 나트륨 이수화물 13472-35-0
0.04 염화 칼슘 10035-04-8
0.40 염화 칼륨 7447-40-7
0.20 황산 마그네슘 10034-99-8
0.35 탄산 수소 나트륨 144-55-8
샘플을 방출된 약학적으로 활성인 결합 폴리펩티드 량의 분석을 위해 시험 기간 동안 10분마다 채취할 수 있다.
적합하게 상기 약학적으로 활성인 결합 폴리펩티드의 방출 시작은 상기 조성물의 행크스 완충제에의 첨가로부터 90 내지 120분 사이에 발생한다. 본 명세서에 사용되는 바와 같은 '방출 시작'은 약학적으로 활성인 결합 폴리펩티드가 행크스 완충제에의 첨가 후 동적인 용해 시험에서 1% 넘게 코어로부터 방출되는 첫 번째 시점을 지칭한다.
적합하게, 동적 용해 시험에서 분석시, 상기 약학 조성물은 하기를 방출한다:
(i) 방출 시작으로부터 60분 후에 약학적으로 활성인 결합 폴리펩티드의 10-30 중량%,
(ii) 방출 시작으로부터 120분 후에 약학적으로 활성인 결합 폴리펩티드의 40-70 중량%, 및
(iii) 방출 시작으로부터 180분 후에 약학적으로 활성인 결합 폴리펩티드의 60 중량% 이상.
적합하게, 동적 용해 시험에서 분석시, 상기 약학 조성물은 하기를 방출한다:
(i) 방출 시작으로부터 60분 후에 약학적으로 활성인 결합 폴리펩티드의 10-30 중량%,
(ii) 방출 시작으로부터 120분 후에 약학적으로 활성인 결합 폴리펩티드의 40-60 중량%, 및
(iii) 방출 시작으로부터 180분 후에 약학적으로 활성인 결합 폴리펩티드의 60 중량% 이상.
보다 적합하게, 동적 용해 시험에서 분석시, 상기 약학 조성물은 하기를 방출한다:
(i) 방출 시작으로부터 60분 후에 약학적으로 활성인 결합 폴리펩티드의 12-25 중량%,
(ii) 방출 시작으로부터 120분 후에 약학적으로 활성인 결합 폴리펩티드의 45-48 중량%, 및
(iii) 방출 시작으로부터 180분 후에 약학적으로 활성인 결합 폴리펩티드의 65 중량% 이상.
때때로, 폴리펩티드의 소량의 조기 방출이 행크스 완충제에의 첨가시 즉시 발생한 다음, 잠시후에 서방성 방출이 개시될 수 있다. 따라서 '서방성 방출의 시작'은 약학적으로 활성인 결합 폴리펩티드가 1% 넘게 방출된 시점으로서 정의될 수 있으며 여기에서 방출된 약학적으로 활성인 결합 폴리펩티드 량의 점진적인 증가는 그후 10, 20 및 30분째에 각 시점에서 발생한다.
적합하게, 동적 용해 시험에서 분석시, 상기 약학 조성물은 하기를 방출한다:
(i) 서방성 방출 시작으로부터 60분 후에 약학적으로 활성인 결합 폴리펩티드의 10-30 중량%,
(ii) 서방성 방출 시작으로부터 120분 후에 약학적으로 활성인 결합 폴리펩티드의 40-70 중량%, 및
(iii) 서방성 방출 시작으로부터 180분 후에 약학적으로 활성인 결합 폴리펩티드의 60 중량% 이상.
방출된 약학적으로 활성인 결합 폴리펩티드 량의 측정(용해%)
상기 시험에서 약학적으로 활성인 결합 폴리펩티드의 용해%의 측정을 예를 들어 상기 용해 매질의 UV 또는 HPLC 분석에 의해 수행할 수 있다. 적합하게는, 상술한 시험에서, 약학적으로 활성인 결합 폴리펩티드의 용해%의 측정을 상기 용해 매질의 UV 분석에 의해 수행한다. 적합하게는 10 ㎜의 UV 경로 길이 및 279 ㎚의 분광광도계 파장이 사용된다. 기지량의 폴리펩티드를 함유하는 표준 용액의 흡광도를 측정하여 표준 곡선을 생성시키고, 이로부터 상기 방출된 약학적으로 활성인 결합 폴리펩티드의 %를 확인한다. 한편으로, 상기 곡선은 선형이며 상기 표준의 단일점 측정을 수행할 수 있는 것으로 가정할 수 있다.
이론에 얽매이고자 하는 것은 아니지만, 상기 약학 조성물과 수성 환경과의 접촉시 야기된 젤화 현상이 본 발명의 조성물 중에 통합된 약학적으로 활성인 결합 폴리펩티드의 서방성 프로파일에 기여하며, 따라서 상기 폴리펩티드가 높은 수 용해도를 갖는 화합물로부터 예상되는 경우보다 더 느리고 더 일관된 속도로 상기 용해 매질 또는 생체내 환경으로 방출되는 것으로 여겨진다.
장 체류시간
절식 상태에서 소장의 각 영역을 통한 대략적인 인간 장 체류시간(시간)은 하기와 같다:
십이지장 통과 0.3
공장 통과 1.7
회장 통과 1.3
급식 상태에서의 체류시간은 상기 시간과 유사하다. 이러한 체류시간에 비추어, 폴리펩티드가 시험관내에서 보다 높은 pH 완충제 환경 진입으로부터 대략 18분 후에 방출되기 시작하도록 제형화된 pH 민감성 장용 코팅을 갖는 조성물은 폴리펩티드를 생체내 공장에서 첫 번째로 방출함을 예상할 수 있다. 유사하게, 폴리펩티드가 시험관내에서 보다 높은 pH 완충제 환경 진입으로부터 대략 120분 후에 방출되기 시작하도록 제형화된 pH 민감성 장용 코팅을 갖는 조성물은 폴리펩티드를 생체내 회장에서 첫 번째로 방출함을 예상할 수 있다. 방출이 계속될 것이며 이어서 상기 조성물이 상기 장관의 나머지 하부 영역을 통과하는 동안 안정상태를 유지할 것이다.
정제 성분
약학적으로 활성인 결합 폴리펩티드
폴리펩티드는 하나의 쇄에 함께 결합된 다수의 아미노산 잔기로 이루어지는 유기 중합체이다. 본 명세서에 사용되는 바와 같이, '폴리펩티드'는 '단백질' 및 '펩티드'와 호환 가능하게 사용된다. 폴리펩티드는 상기가 친화성(본 명세서에서 추가로 기재되는 바와 같이, 적합하게는 Kd 값, Ka 값, kon-속도 및/또는 koff-속도로서 나타낸다)으로 표적 항원상의 에피토프에 결합할 수 있는, 항원-결합 영역을 형성하는 아미노산 잔기들의 하나 이상의 신장부를 함유할 때 결합 폴리펩티드라고 한다. '결합 폴리펩티드' 및 '항원-결합 폴리펩티드'는 본 명세서에서 유의어로 사용된다. 결합 폴리펩티드는 상기 결합 폴리펩티드가 피실험자에게 투여시 이로운 약물학적 효과를 발휘할 수 있는 경우 약학적으로 활성이다. 적합하게 폴리펩티드는 상기 폴리펩티드가 생물학적 표적(전형적으로 단백질, 예를 들어 수용체, 이온 채널, 효소, 구조 단백질 또는 사이토킨)에 결합하고, 보다 적합하게는 상기 표적을 길항하거나 중화시키도록 약학적으로 활성인 결합 폴리펩티드이다. 일부 실시태양에서, 상기 약학적으로 활성인 결합 폴리펩티드는 상기 생물학적 표적(예를 들어 수용체)과 작용할 수 있다. 약학적으로 활성인 결합 폴리펩티드는 폴리펩티드, 예를 들어 항체(하기에 추가로 기재된다), 추가적인 결합 영역을 포함하도록 변형된 항체, 항체 유사물질 및 항원-결합 항체 단편(하기에 추가로 기재된다)을 포함할 수 있다. 추가로 약학적으로 활성인 결합 폴리펩티드는 DARPin(Binz et al. Journal of Molecular Biology 332(2):489-503), 애피머(Affimer)(상표), 파이노머(Fynomer)(상표), 센티린(Centyrin), 나노피틴(Nanofitin)(등록상표), 및 환상 펩티드를 포함할 수 있다.
통상적인 항체 또는 면역글로불린(Ig)은 4개의 폴리펩티드 쇄: 2개의 중(H)쇄 및 2개의 경(L)쇄를 포함하는 단백질이다. 각각의 쇄는 불변 영역 및 가변 도메인으로 분류된다. 상기 중쇄 가변 도메인을 본 명세서에서 VHC로서 약기하고, 상기 경(L)쇄 가변 도메인은 본 명세서에서 VLC로서 약기한다. 이들 도메인, 상기와 관련된 도메인 및 이들로부터 유래된 도메인을 본 명세서에서 면역글로불린 쇄 가변 도메인("ICVD")이라 칭한다. 상기 VHC 및 VLC 도메인을 "프레임워크 영역"("FR")이라 칭하는, 보다 보존된 영역들과 산재된, "상보성 결정 영역"("CDR")이라 칭하는 고가변성 영역으로 추가로 분류할 수 있다. 상기 프레임워크 및 상보성 결정 영역은 정확하게 정의되었다(Kabat et al., 1991, 내용 전체가 본 명세서에 참고로 인용된다). 통상적인 항체에서, 각각의 VHC 및 VLC는 하기의 순서로 아미노-말단에서부터 카복시-말단으로 배열된 3개의 CDR 및 4개의 FR로 구성된다: FR1, CDR1, FR2, CDR2, FR3, CDR3, FR4. 상기 2개의 면역글로불린 중쇄 및 2개의 면역글로불린 경쇄의 통상적인 항체 사량체는 예를 들어 디설파이드 결합에 의해 상호-연결된 상기 면역글로불린 중쇄 및 경쇄, 및 유사하게 연결된 중쇄로 형성된다. 상기 중쇄 불변 영역은 3개의 도메인, CH1, CH2 및 CH3를 포함한다. 상기 경쇄 불변 영역은 하나의 도메인, CL로 구성된다. 상기 중쇄의 가변 도메인 및 상기 경쇄의 가변 도메인은 항원과 상호작용하는 결합 도메인이다. 상기 항체의 불변 영역은 전형적으로 면역계의 다양한 세포(예를 들어 효과기 세포) 및 고전적인 보체계의 제1 성분(C1q)을 포함하여, 숙주 조직 또는 인자에 대한 항체의 결합을 매개한다. 항체란 용어는 IgA, IgG, IgE, IgD, IgM 유형(뿐만 아니라 이들의 하위유형)의 면역글로불린을 포함하며, 여기에서 상기 면역글로불린의 경쇄는 카파 또는 람다 유형일 수 있다. 2개의 동일한 중(H)-쇄 및 2개의 동일한 경(L)-쇄 폴리펩티드로부터 조립된 면역글로불린-감마(IgG) 항체의 전체 구조는 충분히 확립되어 있으며 포유동물에서 고도로 보존된다(Padlan 1994).
통상적인 항체 구조에 대한 예외가 낙타과의 혈청에서 발견된다. 상기 혈청은 통상적인 항체 외에 특수 IgG 항체를 갖는다. 중쇄 항체(HCAb)로서 공지된 상기 IgG 항체는 L 쇄 폴리펩티드가 없으며 제1 불변 도메인(CH1)이 없다. 동종이량체성 단백질의 H 쇄는 그의 N-말단 영역에 VHH라 칭하는 전용 면역글로불린 쇄 가변 도메인을 함유하며, 이는 그의 동족 항원과 결합하는 작용을 한다(Muyldermans 2013, Hamers-Casterman et al., 1993, Muyldermans et al., 1994, 이들은 내용 전체가 본 명세서에 참고로 인용된다).
본 명세서에 사용되는 바와 같은 항원-결합 항체 단편(또는 "항체 단편", "면역글로불린 단편" 또는 "항원-결합 단편")은 표적에 특이적으로 결합하는 항체의 일부(예를 들어 하나 이상의 면역글로불린 쇄가 완전길이는 아니지만 표적에 특이적으로 결합하는 분자)를 지칭한다. 항원-결합 항체 단편이란 용어내에 포함되는 단편의 예는 하기를 포함한다:
(i) Fab 단편(VLC, VHC, CL 및 CH1 도메인으로 이루어지는 1가 단편);
(ii) F(ab')2 단편(힌지 영역에서 디설파이드 가교에 의해 연결되는 2개의 Fab 단편을 포함하는 2가 단편);
(iii) Fd 단편(VHC 및 CH1 도메인으로 이루어진다);
(iv) Fv 단편(항체의 단일 가지의 VLC 및 VHC 도메인으로 이루어진다);
(v) scFv 단편(재조합 방법을 사용하여, 단일 단백질 쇄로서 만들 수 있는 합성 링커에 의해 결합된 VLC 및 VHC 도메인으로 이루어지며, 여기에서 상기 VLC 및 VHC 영역은 짝을 이루어 1가 분자를 형성한다);
(vi) VH(VHC 도메인으로 이루어지는 면역글로불린 쇄 가변 도메인(Ward et al., 1989));
(vii) VL(VLC 도메인으로 이루어지는 면역글로불린 쇄 가변 도메인);
(viii) V-NAR(연골어류 IgNAR로부터의 VHC 도메인으로 이루어지는 면역글로불린 쇄 가변 도메인((Roux et al., 1998 및 Griffiths et al., 2013, 내용 전체가 본 명세서에 참고로 인용된다))
(ix) VHH.
약학적으로 활성인 결합 폴리펩티드 중의 아미노산 잔기의 총수는 50 내지 3000, 보다 적합하게는 100 내지 1500, 보다 적합하게는 100 내지 1000, 보다 적합하게는 100 내지 500, 보다 적합하게는 100 내지 200의 범위일 수 있다. VHH 또는 VH 중의 아미노산 잔기의 총수는 110 내지 140의 범위일 수 있으며, 112 내지 130 및 보다 적합하게는 115 내지 125이다.
본 명세서에 제공된 예들은 그 자체가 면역글로불린 쇄 가변 도메인을 포함하는 조성물에 관한 것이다. 그러나, 본 명세서에 개시된 본 발명의 원리를 임의의 약학적으로 활성인 결합 폴리펩티드를 포함하는 본 발명에 따른 조성물에 동등하게 적용시킬 수 있다. 예를 들어, 본 명세서에 개시된 예들에서 특징을 이루는 항-TNF-알파 면역글로불린 쇄 가변 도메인은 완전길이 항체와 같은 폴리펩티드내에 통합될 수 있다. 상기와 같은 접근법은 이량체 구조물로서 발현된, 인간 Fc 영역(힌지, CH2 및 CH3 도메인 포함)과 융합물로서 조작된 항-HIV VHH를 제공하는 맥코이(McCoy) 등(2014)에 의해 입증된다.
적합하게, 상기 약학적으로 활성인 결합 폴리펩티드는 면역글로불린 쇄 가변 도메인으로 이루어진다. 적합하게, 상기 약학적으로 활성인 결합 폴리펩티드는 항체 또는 항체 단편이다. 적합하게 상기 항체 단편은 VHH, VH, VL, V-NAR, Fab 단편, VL 또는 F(ab')2 단편(예를 들어 VHH 또는 VH, 가장 적합하게는 VHH)이다.
적합하게 상기 약학적으로 활성인 결합 폴리펩티드의 분자량은 1-200kD, 보다 적합하게 5-200 kDa, 보다 적합하게 10-200 kDa, 보다 적합하게 10-180 kDa, 보다 적합하게 10-150 kDa, 보다 적합하게 10-100 kDa, 보다 적합하게 10-50 kDa, 보다 적합하게 10-20 kDa, 보다 적합하게 12-15 kDa, 보다 적합하게 약 13 kDa이다.
적합하게 상기 약학적으로 활성인 결합 폴리펩티드는 1 ㎎/㎖ 초과, 보다 적합하게는 5 ㎎/㎖ 초과, 보다 적합하게는 10 ㎎/㎖ 초과, 보다 적합하게는 15 ㎎/㎖ 초과, 보다 적합하게는 20 ㎎/㎖ 초과, 보다 적합하게는 25 ㎎/㎖ 초과, 보다 적합하게는 30 ㎎/㎖ 초과의 수 용해도를 갖는다.
적합하게 상기 약학적으로 활성인 결합 폴리펩티드의 등전점은 6-8, 보다 적합하게 6.5-7.5, 보다 적합하게 6.7-6.9, 보다 적합하게 약 6.8이다.
서열번호 1 내지 28은 본 발명에 따른 예시적인 약학적으로 활성인 결합 폴리펩티드인 특정한 ICVD의 폴리펩티드 서열이다. 적합하게 상기 약학적으로 활성인 결합 폴리펩티드는 서열번호 1 내지 28 중 임의의 하나 이상으로 이루어진다.
적합하게 상기 약학적으로 활성인 결합 폴리펩티드는 장관 영역으로의 국소 전달을 위한 것이다. 적합하게 상기 약학적으로 활성인 결합 폴리펩티드는 국소적인 치료 효과를 위한 것이다. "국소적인 치료 효과"는 오직 약학적으로 활성인 결합 폴리펩티드가 최초로 전달된 영역에서만 발생하거나 또는 상기 영역에서만 감지될 수 있는 이로운 생물학적 영향으로서 정의된다. 국소적인 치료 효과는 전신 효과(이롭거나 또는 다른)는 제외한다. 예를 들어 TNF-알파를 표적화하는 약학적으로 활성인 결합 폴리펩티드는 본 발명의 조성물 중에서 전달될 때 적합하게는 상기가 최초로 방출된 장관 영역(들) 중에 존재하는 TNF-알파에 결합하여 상기의 효과를 중화시킨다. 그러나, 상기 약학적으로 활성인 결합 폴리펩티드는 신체의 다른 영역 중의 상당량의 TNF-알파에 그다지 결합하지 않으며 따라서 현저한 전신 영향을 갖지 않는다.
본 발명의 약학 조성물은 약학적으로 활성인 결합 폴리펩티드가 장관의 표적 영역 중에서 방출될 때까지 위 및 적합하게는 또한 십이지장을 통한 수송 중에 상기 약학적으로 활성인 결합 폴리펩티드에 보호를 제공한다. 상응하게, 특히 적합한 약학적으로 활성인 결합 폴리펩티드는 위 및/또는 십이지장에 노출시 실질적으로 불활성화되고 따라서 본 발명의 조성물의 pH 민감성 장용 코팅에 의해 불활성화로부터 보호되는 것들이다.
폴리펩티드의 조물질 샘플은 단지 폴리펩티드 샘플의 일부만이 약학적으로 활성인 결합 폴리펩티드이도록 불순물(예를 들어 불활성 폴리펩티드)을 함유할 수 있음이 가능하다.
상기 약학적으로 활성인 결합 폴리펩티드는 약학적으로 허용 가능한 염의 형태일 수 있다. 적합하게 상기 약학적으로 활성인 결합 폴리펩티드는 인슐린이 아니다. 적합하게 상기 약학적으로 활성인 결합 폴리펩티드는 과립내에 있다.
약학적으로 활성인 결합 폴리펩티드를 예를 들어 문헌[Green and Sambrook 2012]에 개시된 기법을 사용하여 수득하고 조작할 수 있다. 예를 들어, 면역글로불린 쇄 가변 도메인을, 핵산 합성 기법을 사용하여 면역글로불린 쇄 가변 도메인을 암호화하는 핵산을 제조한 다음 상기와 같이 수득된 핵산을 발현시킴으로써 획득할 수 있다.
특이성 및 친화성
특이성은 특정한 항원-결합 폴리펩티드가 결합할 수 있는 상이한 유형의 항원 또는 항원 결정인자의 수를 지칭한다. 항원-결합 폴리펩티드의 특이성은 독특한 분자 존재로서 특정 항원을 인식하고 이를 또 다른 것으로부터 구별하는 상기 항원-결합 폴리펩티드의 능력이다.
항원과 항원-결합 폴리펩티드와의 해리에 대한 평형 상수에 의해 나타내는 친화성(Kd)은 항원 결정인자와 상기 항원-결합 폴리펩티드상의 항원-결합 부위간의 결합 강도의 정도이다: 상기 Kd 값이 작을수록, 항원 결정인자와 항원-결합 폴리펩티드간의 결합 강도가 강하다(한편으로, 상기 친화성을 또한 친화성 상수(Ka)(이는 1/Kd이다)로서 나타낼 수 있다). 친화성을 관심 특이 항원에 따라 공지된 방법에 의해 측정할 수 있다.
적합하게, 약학적으로 활성인 결합 폴리펩티드는 적어도 1x10-6 M, 보다 적합하게는 적어도 1x10-7 M, 보다 적합하게는 적어도 1x10-8 M, 보다 적합하게는 적어도 1x10-9 M의 해리 상수(Kd)로 결합할 것이다.
10-6 미만의 임의의 Kd 값은 결합을 가리키는 것으로 간주된다. 항원 또는 항원 결정인자에의 약학적으로 활성인 결합 폴리펩티드의 특이적인 결합을 임의의 적합한 공지된 방식으로, 예를 들어 스캐차드 분석 및/또는 경쟁결합 분석, 예를 들어 방사성면역분석(RIA), 효소 면역분석(EIA), 및 샌드위치 경쟁분석, 및 당해 분야에 공지된 이들의 상이한 변형들로 측정할 수 있다.
항-표적 폴리펩티드, 표적과 상호작용하는 폴리펩티드, 또는 표적에 대한 폴리펩티드 모두 표적에 결합하는 유효한 폴리펩티드들이다. 폴리펩티드는 선형 또는 입체형태적 에피토프에 결합할 수 있다.
적합하게 상기 약학적으로 활성인 결합 폴리펩티드는 장관 중의 표적, 예를 들어 장관 중의 하나 이상의 영역 중의 표적, 예를 들어 인터류킨(예를 들어 IL-1, IL-1ra, IL-4, IL-5, IL-6, IL-7, IL-8, IL-9, IL-10, IL-11, IL-12, IL-13, IL-15, IL-17, IL-18 및 IL-23), 인터류킨 수용체(예를 들어 IL-6R 및 IL-7R), 전사인자(예를 들어 NF-kB), 사이토킨(예를 들어 TNF-알파, IFN-감마 TGF-베타 및 TSLP), 막관통 단백질(예를 들어 gp130 및 CD3), 표면 당단백질(예를 들어 CD4, CD20, CD40), 용해성 단백질(예를 들어 CD40L), 인테그린(예를 들어 a4b7 및 알파E베타7), 부착 분자(예를 들어 MAdCAM), 케모킨(예를 들어 IP10 및 CCL20), 케모킨 수용체(예를 들어 CCR2 및 CCR9), 억제성 단백질(예를 들어 SMAD7), 키나제(예를 들어 JAK3),G 단백질-결합된 수용체(예를 들어 스핑고신-1-P 수용체) 및 위장 병원체의 생성물에 결합한다.
링커 및 다량체
약학적으로 활성인 결합 폴리펩티드는 다수의 폴리펩티드를 포함하는 구조물일 수 있으며 따라서 적합하게는 다가일 수 있다. 상기와 같은 구조물은 적어도 2개의 동일한 폴리펩티드를 포함할 수 있다. 한편으로, 구조물은 상이한 적어도 2개의 폴리펩티드를 포함할 수 있다. 구조물은 다가이고/이거나 다중특이성일 수 있다. 다가 구조물(예를 들어 2가 구조물)은 2개 이상의 결합 폴리펩티드를 포함하며 따라서 하나 이상의 항원에의 부착이 발생할 수 있는 2개 이상의 부위를 제공한다. 다중특이성 구조물(예를 들어 이중특이성 구조물)은 (a) 2개 이상의 상이한 항원에의 부착이 발생하거나 또는 (b) 동일한 항원상의 2개 이상의 상이한 에피토프에의 부착이 발생할 수 있는 2개 이상의 부위를 제공하는 2개 이상의 상이한 결합 폴리펩티드를 포함한다. 다중특이성 구조물은 다가이다.
상기 구조물 중의 폴리펩티드는 서로에 대해 직접(즉 링커의 사용 없이) 또는 링커를 통해 결합될 수 있다. 적합하게, 상기 링커는 프로테아제-불안정성 또는 비-프로테아제-불안정성 링커이다. 상기 링커는 적합하게는 폴리펩티드이며 상기 폴리펩티드의 그의 에피토프에의 결합을 허용하도록 선택될 것이다. 상기 링커는 치료학적 목적에 사용되는 경우 적합하게는 상기 폴리펩티드가 투여되는 피실험자에서 비-면역원성이다. 적합하게 상기 폴리펩티드는 모두 비-프로테아제-불안정성 링커에 의해 연결된다. 적합하게 상기 비-프로테아제-불안정성 링커는 화학식 (G4S)x를 갖는다. 적합하게 x는 1 내지 10이고, 가장 적합하게 x는 6이다. 적합하게 상기 프로테아제-불안정성 링커는 화학식 [-(GaS)x-B-(GbS)y-]z (여기에서 a는 1 내지 10이고; b는 1 내지 10이고; x는 1 내지 10이고, y는 1 내지 10이고, z는 1 내지 10이고, B는 K 또는 R이다)을 갖는다. 적합하게 a는 2 내지 5이고, 보다 적합하게 a는 4이다. 적합하게 b는 2 내지 5이고, 보다 적합하게 b는 4이다. 적합하게 x는 1 내지 5이고, 보다 적합하게 x는 1이다. 적합하게 y는 1 내지 5이고, 보다 적합하게 y는 1이다. 적합하게 z는 1 내지 3이고, 보다 적합하게 z는 1이다. 적합하게 B는 K이다. 상기 구절에서 대문자는 단일문자 아미노산 코드를 지칭한다.
pH 민감성 장용 코팅
본 발명의 약학 조성물에 pH 민감성 장용 코팅을 제공한다. 장용 코팅에 사용되는 물질은 지방산, 왁스, 쉘락, 플라스틱 및 식물 섬유를 포함한다. 적합하게 상기 pH 민감성 장용 코팅은 장관 영역에 노출될 때 약학적으로 활성인 결합 폴리펩티드를 방출한다. 적합하게 상기 장관 영역은 소장 및/또는 대장 영역, 예를 들어 십이지장, 공장, 회장, 맹장, 결장, 직장 및 항문관 중 적어도 하나로부터 선택되는 영역이다. 보다 적합하게 상기 영역은 십이지장, 공장 및 회장 중 적어도 하나로부터 선택된다.
상기 pH 민감성 장용 코팅의 두께는, 상기 코팅이 위장관을 통하여 수송 중 목적하는 기간 동안 및 코트의 용해를 생성시키는 pH에의 노출에 이은 목적하는 기간 동안 완전하게 남아있도록 선택된다. 적합하게 상기 pH 민감성 장용 코팅(예를 들어 폴리(메트아크릴산-코-메틸 메트아크릴레이트를 포함하는 pH 민감성 장용 코팅) 1:1의 두께는 10-300 um, 예를 들어 50-200 um, 예를 들어 70-170 um, 예를 들어 100-170 um이다.
적합하게, 본 발명의 조성물에 사용되는 pH 민감성 장용 코팅의 양은 전체로서 상기 조성물의 10-30, 보다 적합하게 15-26%, 보다 적합하게 17-23%, 보다 적합하게 18-22%, 보다 적합하게 약 20% w/w로 존재한다. 적합하게 이들 양은 3 ㎜ 직경 압축된 코어의 상황에서이다.
적합하게 본 발명의 조성물에 사용되는 pH 민감성 장용 코팅의 양은 코어의 15-35%, 보다 적합하게 20-30%, 보다 적합하게 22-28%, 보다 적합하게 24-26%, 보다 적합하게 약 25%로 존재한다. 적합하게 이들 양은 3 ㎜ 직경 압축된 코어의 상황에서이다.
한편으로, 본 발명의 조성물에 사용되는 pH 민감성 장용 코팅의 양은 pH 민감성 장용 코팅의 첨가시 압축된 코어(또는 적합하게는 서브-코팅된 압축된 코어)에 의해 얻은 중량%에 의해 한정될 수 있다. 상기 예에서 pH 민감성 장용 코팅의 25% w/w의 중량 증가는 동적인 용해 시험 중 대략 2시간 후에 제거되는 코팅을 생성시켰고 pH 민감성 장용 코팅의 17% w/w의 중량 증가는 동적인 용해 시험 중 대략 90분 후에 제거되는 코팅을 생성시켰음이 입증된다. 따라서 pH 민감성 장용 코팅으로 코팅시 얻은 14%-30%, 보다 적합하게 17%-27%, 또는 보다 적합하게 20-27% 중량의 범위는 소장에서의 용해에 최적인 코팅을 제공할 것이다. 더욱 또한, 보다 구체적으로 경우에 따라 pH 민감성 장용 코팅과 접촉시 얻은 17% 내지 20% 중량은 십이지장에서의 용해에 최적인 코팅을 제공하거나 또는 pH 민감성 장용 코팅과 접촉시 얻은 20% 내지 27% 중량은 회장에서의 용해에 최적인 코팅을 제공할 것이다. 적합하게 이들 양은 3 ㎜ 직경 압축된 코어의 상황에서이다.
압축된 코어가 원통형 프로파일(예를 들어 원통형 미니정제)을 갖는 경우, 두께 치수를 적합하게는 상기 미니정제를 축방향 및 방사상 모두로 슬라이싱함으로써 획득한다(상기 정제 코너상의 코팅 두께는 무시한다).
pH 민감성 장용 중합체 코트
상기 pH 민감성 장용 코팅은 pH 민감성 장용 중합체 코트를 포함할 수 있다. pH 민감성 장용 중합체 코트는, 상기 pH 민감성 장용 코트 중에 포함되고 폴리펩티드를 위 및 적합하게는 또한 십이지장의 낮은 pH로부터 보호하기 위한 장벽으로서 작용하는 중합체이다. pH 민감성 장용 중합체 코트는 위에서 발견되는 고도로 산성인 pH에서 불용성이나, 덜 산성인 pH에서는 빠르게 용해된다. 따라서, 적합하게, 상기 pH 민감성 장용 중합체 코트는 산성 위액(pH 1.5-4)에서 용해되지 않고 소장(6 초과의 pH) 또는 결장(7.0 초과의 pH) 중에 존재하는 보다 높은 pH 환경에서 그렇게 될 것이다. 상기 pH 민감성 장용 중합체 코트를 상기 폴리펩티드가 대략 투여량이 소장, 특히 십이지장, 공장 및 회장에 도달하는 시간에; 가장 적합하게는 상기 투여량이 공장에 도달할 때 방출되기 시작하도록 선택한다. 적합하게 상기 pH 민감성 장용 중합체 코트는 2시간 또는 더 오래(적합하게는 적어도 6시간, 보다 적합하게 2-4시간, 보다 적합하게 2-3시간) 0.5-3.5, 보다 적합하게 0.6-3.0, 보다 적합하게 0.7-2.5, 보다 적합하게 0.8-2.0, 보다 적합하게 0.9-1.5, 보다 적합하게 약 또는 정확히 1의 pH에 노출후까지 용해되지 않는다. 숙련가는 양성자 펌프 억제제, H2 억제제 및 산 중화제가 위 pH를 대략 4 또는 훨씬 더 상승시킬 수 있으며 따라서 이들을 보다 높은 pH에서 용해되는 pH 민감성 장용 중합체 코트를 양성자 펌프 억제제와 동시에 사용하는 경우 본 발명의 조성물에 적합하게 사용할 수 있음을 알 것이다. 유사하게, 상기 숙련가는 예를 들어 무산증을 앓고 있는 피실험자가 상승된 위 pH(5 초과의)를 가질 것이며 따라서 보다 높은 pH에서 용해되는 pH 민감성 장용 중합체 코트를 상기와 같은 상태를 앓고 있는 피실험자에게 투여하는 경우 본 발명의 조성물에 적합하게 사용할 수 있음을 알 것이다.
적합하게 상기 pH 민감성 장용 중합체 코트는 하기 중 하나 이상을 포함한다: 메틸 아크릴레이트-메트아크릴산 공중합체, 셀룰로스 아세테이트 숙시네이트, 하이드록시 프로필 메틸 셀룰로스 프탈레이트, 하이드록시 프로필 메틸 셀룰로스 아세테이트 숙시네이트(하이프로멜로스 아세테이트 숙시네이트), 폴리비닐 아세테이트 프탈레이트(PVAP), 메틸 메트아크릴레이트-메트아크릴산 공중합체, 나트륨 알기네이트 및 스테아르산. 보다 적합하게 상기 pH 민감성 장용 중합체 코트는 메트아크릴산 및 메틸 메트아크릴레이트를 기본으로 하는 음이온성 공중합체를 포함하거나 또는 상기 공중합체로 이루어진다. 보다 적합하게 상기 pH 민감성 장용 중합체 코트는 폴리(메트아크릴산-코-메틸 메트아크릴레이트) 1:1(예를 들어 유드라지트(Eudragit) L100/L12.5) 또는 폴리(메트아크릴산-코-에틸 아크릴레이트) 1:1(예를 들어 유드라지트 L100-55/L30-D55); 가장 적합하게 폴리(메트아크릴산-코-메틸 메트아크릴레이트) 1:1을 포함하거나 또는 상기로 이루어진다.
본 발명의 조성물에 사용되는 pH 민감성 장용 중합체 코트의 양을 상기 pH 민감성 장용 코팅(즉 상기 pH 민감성 장용 코팅의 총 고체)의 백분율 w/w로서 나타낼 수 있다. 적합하게 상기 pH 민감성 장용 중합체 코트는 상기 pH 민감성 장용 코팅에 대한 중량을 기준으로 40-70%, 보다 적합하게 55-65%로 존재한다.
본 발명의 조성물에 사용되는 pH 민감성 장용 중합체 코트의 양을 또한 전체로서 상기 조성물의 백분율 w/w로서 나타낼 수 있다. 적합하게 본 발명의 조성물에 사용되는 pH 민감성 장용 중합체 코트의 양은 전체로서 상기 조성물의 10-30%, 보다 적합하게 약 12% w/w로 존재한다.
혼합된 수성 및 유기 용매 방법과 상반되게 전적으로 수성인 코팅 방법을 사용하여 본 발명의 조성물을 생성시키는 경우, 균등한 방출 프로파일을 성취하기 위해서 pH 민감성 장용 중합체 코팅의 양을 수성 및 유기 용매 방법에 사용되는 경우에 비해 증가시켜야 한다.
pH 민감성 장용 코트의 추가로 가능한 성분
적합하게 상기 pH 민감성 장용 코팅은 임의로 가소제, 점착방지제 및 계면활성제 중 하나 이상과 함께 pH 민감성 장용 중합체 코트를 포함하거나 또는 이들로 이루어진다. 보다 적합하게 상기 pH 민감성 장용 코팅은 pH 민감성 장용 중합체 코트, 가소제, 점착방지제 및 계면활성제로 이루어진다.
적합하게 상기 pH 민감성 장용 코팅은 트리에틸 시트레이트인 가소제, 활석인 점착방지제 및/또는 나트륨 라우릴 설페이트인 계면활성제를 포함한다. 적합하게 상기 가소제는 상기 pH 민감성 장용 코팅의 중량에 대한 중량을 기준으로 5-20%로 존재하고/하거나 상기 점착방지제는 상기 pH 민감성 장용 코팅의 중량에 대한 중량을 기준으로 20-40 중량%로 존재하고/하거나 상기 계면활성제는 상기 pH 민감성 장용 코팅의 중량에 대한 중량을 기준으로 0.05-0.5 중량%로 존재한다.
적합하게 상기 pH 민감성 장용 코팅은 상기 pH 민감성 장용 코팅의 중량에 대한 중량을 기준으로, 50-70%의 하나 이상의 pH 민감성 장용 중합체 코트, 7-17%의 하나 이상의 가소제, 20-40%의 하나 이상의 점착방지제 및 0.05-0.2%의 계면활성제를 포함하거나, 이들로 필수적으로 이루어지거나, 또는 이들로 이루어진다.
적합하게 본 발명의 조성물은 압축된 코어와 pH 민감성 장용 코팅 사이에 서브-코팅을 포함할 수 있다. 상기와 같은 서브-코팅은 상기 pH 민감성 장용 코팅의 상기 코어에의 부착을 개선시킬 수 있다. 적합하게 상기 서브-코팅은 하이드록시프로필메틸셀룰로스를 포함하거나 또는 상기로 이루어진다.
부형제
본 발명의 약학 조성물은 적합하게는 적어도 하나의 부형제를 포함한다. 적합하게 상기 적어도 하나의 부형제는 (i) 하나 이상의 압축 보조제, (ii) 하나 이상의 붕해제, (iii) 하나 이상의 윤활제, (iv) 하나 이상의 활주제, (v) 하나 이상의 희석제 및 (iv) 하나 이상의 결합제 중 하나 이상으로부터 선택된다. 이들 부형제를 하기와 같이 상세히 기재한다. 하기에 나타낸 %값은 압축된 코어의 중량%로서 표현된다.
압축 보조제
압축 보조제는 코어의 성분들을 함께 결합시켜 형태 및 기계적 강도를 제공하는 작용을 한다. 적합하게 상기 하나 이상의 압축 보조제는 과립-내 및 과립-외에 있다.
적합하게 본 발명의 조성물은 하나 이상의 압축 보조제를 포함한다. 적합하게 상기 하나 이상의 압축 보조제는 합성 중합체, 예를 들어 크로스포비돈, 사카라이드, 예를 들어 슈크로스, 글루코스, 락토스 및 프럭토스, 당 알콜, 예를 들어 만니톨, 자일리톨, 말티톨, 에리쓰리톨, 솔비톨, 수용성 폴리사카라이드, 예를 들어 셀룰로스, 예를 들어 결정질 셀룰로스, 미정질 셀룰로스, 분말화된 셀룰로스, 하이드록시프로필셀룰로스 및 메틸 셀룰로스, 전분, 합성 중합체, 예를 들어 폴리비닐피롤리돈, 나트륨 전분 글리콜레이트, 크로스포비돈 및 무기 화합물, 예를 들어 칼슘 카보네이트로 이루어지는 목록 중에서 선택된다.
적합하게 상기 하나 이상의 압축 보조제는 코어의 중량에 대한 중량을 기준으로 20-55%, 예를 들어 30-40%로 존재한다.
놀랍게도, 만니톨이 실시예 1에 상세히 기재된 약학적으로 활성인 결합 폴리펩티드의 열 안정성을 개선시키는 것으로 밝혀졌다(실시예 6 참조). 따라서 적합하게는 상기 하나 이상의 압축 보조제는 만니톨이다.
결합제
결합제는 압축 보조제와 기능이 유사하다. 적합하게 본 발명 조성물의 코어는 하나 이상의 결합제를 포함한다. 적합하게 상기 하나 이상의 결합제는 과립-내 및 과립-외에 있다. 적합하게 상기 하나 이상의 결합제는 아카시아, 알긴산, 암모니오 메트아크릴레이트 공중합체, 암모니오 메트아크릴레이트 공중합체 분산제, 카보머 공중합체, 카보머 단독중합체, 카보머 혼성중합체, 카복시메틸셀룰로스 나트륨, 미정질 셀룰로스, 코포비돈, 슈크로스, 덱스트린, 에틸셀룰로스, 젤라틴, 글루코스, 구아검, 저-치환된 하이드록시프로필 셀룰로스, 하이프로멜로스, 하이드로멜로스 아세테이트 숙시네이트, 말토덱스트린, 말토스, 메틸셀룰로스, 폴리에틸렌 옥사이드, 포비돈, 전분, 예를 들어 옥수수 전분; 감자 전분; 예비젤라틴화된 전분; 타피오카 전분; 밀 전분으로 이루어지는 목록 중에서 선택된다.
적합하게 상기 하나 이상의 결합제는 코어의 중량에 대한 중량을 기준으로 20-55%, 예를 들어 30-40%로 존재한다. 적합하게 상기 하나 이상의 결합제 및 압축 보조제는 코어의 중량에 대한 중량을 기준으로 20-55%, 예를 들어 30-40%로 존재한다.
붕해제
붕해제는 위장관에서 코어의 분산을 도와, 상기 약학적으로 활성인 결합 폴리펩티드의 방출을 지원하고 용해를 위해 표면적을 증가시키는 작용을 한다. 붕해제는 초붕해제를 포함한다. 적합하게 본 발명의 조성물의 코어는 하나 이상의 붕해제를 포함한다. 적합하게 상기 하나 이상의 붕해제는 과립외에 있다.
붕해제는 폴리펩티드 젤화 효과에 반대로 작용할 수 있으며, 그 자체로서 붕해제는 본 발명 조성물의 방출 프로파일을 미세하게 조절하는데 사용될 수 있다.
적합하게 상기 하나 이상의 붕해제는 카복시메틸 셀룰로스, 나트륨 카복시메틸 셀룰로스, 크로스카멜로스 나트륨, 셀룰로스, 예를 들어 저치환도 하이드록시프로필셀룰로스, 전분, 예를 들어 나트륨 카복시메틸 전분, 하이드록시프로필 전분, 쌀 전분, 밀 전분, 감자 전분, 옥수수 전분, 부분적으로 예비젤라틴화된 전분으로 이루어지는 목록 중에서 선택된다. 적합하게 상기 붕해제는 크로스카멜로스 나트륨이다. 적합하게 상기 하나 이상의 붕해제는 코어의 중량에 대한 중량을 기준으로 2-6%, 예를 들어 약 4%로 존재한다.
놀랍게도, 크로스카멜로스 나트륨이 실시예 1에 상세히 기재된 약학적으로 활성인 결합 폴리펩티드의 열 안정성을 개선시키는 것으로 밝혀졌다(실시예 6, 'D' 참조). 따라서 적합하게는 상기 하나 이상의 붕해제는 크로스카멜로스 나트륨이다.
활주제
활주제는 입자간의 마찰 및 부착을 감소시킴으로써 정제 제조 중 분말의 흐름을 개선시킨다. 본 발명 조성물의 코어는 하나 이상의 활주제를 포함할 수 있다. 상기 활주제는 존재하는 경우 과립-내 또는 과립-외에 있을 수 있다. 적합하게 상기 하나 이상의 활주제는 존재하는 경우 칼슘 실리케이트, 마그네슘 실리케이트, 콜로이드성 이산화 규소 및 활석으로 이루어지는 목록 중에서 선택된다. 가장 적합하게 상기 하나 이상의 활주제는 존재하는 경우 콜로이드성 이산화 규소이다. 적합하게 상기 하나 이상의 활주제는 존재하는 경우 코어의 중량에 대한 중량을 기준으로 0.1-1.0%, 보다 적합하게는 약 0.5%로 존재한다.
윤활제
윤활제는 활주제와 유사한 작용을 갖는다. 윤활제는 주로 타정 동안 다이 중의 펀치들이 들러붙는 것을 방지하기 위해 첨가된다. 상기는 또한 붕해 및 용해를 늦출 수 있다. 적합하게 본 발명 조성물의 코어는 하나 이상의 윤활제를 포함한다. 적합하게 상기 윤활제는 과립-내 및 과립-외에 있다. 적합하게 상기 하나 이상의 윤활제는 글리세릴 베헤네이트, 스테아르산염, 예를 들어 칼슘 스테아레이트; 마그네슘 스테아레이트; 아연 스테아레이트, 무기 오일, 폴리에틸렌 글리콜, 나트륨 라우릴 설페이트, 나트륨 스테아릴 푸마레이트, 전분, 예를 들어 옥수수 전분; 감자 전분; 예비젤라틴화된 전분; 타피오카 전분; 밀 전분, 스테아르산, 활석, 식물성 오일 및 아연 스테아레이트로 이루어지는 목록 중에서 선택된다.
적합하게 상기 코어는 하나 이상의 윤활제를 포함하며, 여기에서 상기 하나 이상의 윤활제는 코어의 중량에 대한 중량을 기준으로 0.1-2%, 예를 들어 약 1%로 존재한다.
놀랍게도, 마그네슘 스테아레이트가 실시예 1에 상세히 기재된 약학적으로 활성인 결합 폴리펩티드의 열 안정성을 개선시키는 것으로 밝혀졌다(실시예 6, 'E' 참조). 따라서 적합하게는 상기 하나 이상의 윤활제는 마그네슘 스테아레이트이다.
다른 성분들
본 발명 조성물의 유리한 방출 프로파일을, 통상적으로 약학적으로 활성인 결합 폴리펩티드의 방출을 지연시키거나 또는 약학적으로 활성인 결합 폴리펩티드를 보호하는 물질, 예를 들어 하이드로젤의 첨가 없이 성취할 수 있다. 하이드로젤은, 상당량의 물을 흡수하고 개별적인 중합체 쇄의 물리적 또는 화학적 가교결합의 결과로서 젤같은 기질을 형성하는 친수성 중합체를 함유하는 네트워크같은 3차원 메쉬이다. 적합하게 본 발명의 조성물은 중량 기준으로 1% 미만, 보다 적합하게 0.5% 미만, 보다 적합하게 0.1% 미만의 하이드로젤을 포함하며, 보다 적합하게 본 발명의 조성물은 하이드로젤을 포함하지 않는다. 더욱 또한, 본 발명 조성물의 유리한 방출 프로파일을, 상기 조성물의 압축된 코어 중에 알기네이트, 하이드록시프로필 메틸셀룰로스(HPMC) 및/또는 메트아크릴산 및 메틸 메트아크릴레이트를 기본으로 하는 공중합체를 포함시키지 않고 성취할 수 있다. 더욱 또한 본 발명 조성물의 유리한 방출 프로파일을 서방성 코팅(예를 들어 상기 pH 민감성 장용 코팅과 압축된 코어 사이에 위치할 수 있는, 활성제의 확산을 허용하는 코트)의 첨가 없이 적합하게 성취한다. 유사하게, 본 발명의 조성물은 적합하게는 활성 성분의 흡수를 성취하기 위해 제형에 첨가될 수 있는 하기의 성분들 중 임의의 하나 이상을 포함하지 않는다: 침투/침투성 증진제(세포 침투 펩티드 또는 막 변형 물질 포함); 담체 시스템(나노입자, 사이클로덱스트린, 중합체성 담체 또는 지질계 시스템 포함); 점액 개질, 접착 또는 침투 부형제; 또는 당 미세 바늘.
표출 형태 및 구조
본 발명의 약학 조성물을 다양한 형태로 제공할 수 있다. 여기에는 pH 민감성 장용 코팅 및 압축된 코어를 포함하는 고체 경구 투여형, 예를 들어 정제 또는 미니-정제가 포함된다.
미니-정제는 모양이 둥글거나, 원통형인 정제 또는 원반형일 수 있다. 미니-정제는 적합하게 직경이 1 내지 5 ㎜, 보다 적합하게는 직경이 1-4 ㎜, 보다 적합하게는 직경이 1-3 ㎜, 보다 적합하게는 직경이 2-3 ㎜, 보다 적합하게는 직경이 약 3 ㎜, 보다 적합하게는 직경이 약 2 ㎜이다. 미니-정제는 전형적으로 압축에 의해 생성된다. 상기는 예를 들어 통상적인 천공된 코팅 팬 또는 유동-베드 기구를 사용하여 장용 코팅을 위한 매끄러운 기질을 제공한다. 미니-정제는 캡슐 또는 샤쉐내에서 전달될 수 있다는 점에서 완성된 투여형에 융통성을 제공한다.
상기와 같은 미니-정제는 캡슐 중에서 제공될 수도 있다. 캡슐은 경질-쉘 캡슐일 수 있으며, 이는 전형적으로 젤라틴 또는 HPMC를 사용하여 제조되고(가장 적합하게는 HPMC) 건조한, 분말화된 성분 또는 예를 들어 압출 또는 스페로이드화의 공정에 의해 제조된 미니어처 펠릿을 함유한다. 이들은 양쪽 절반: 충전되고 이어서 보다 큰-직경의 "캡"을 사용하여 밀봉되는 보다 작은-직경의 "바디"로 제조된다. 한편으로 캡슐은 연질-쉘 캡슐일 수 있다. 이들 캡슐 부류는 모두 젤화제, 예를 들어 동물 단백질(주로 젤라틴) 또는 식물 폴리사카라이드 또는 그의 유도체(예를 들어 카라기난 및 전분 및 셀룰로스의 변형된 형태)의 수용액으로부터 제조된다.
본 발명의 약학 조성물은 압축된 코어 및 pH-민감성 장용 코팅을 포함하며, 여기에서 상기 압축된 코어는 약학적으로 활성인 결합 폴리펩티드를 포함한다.
본 명세서에 사용되는 바와 같은 "압축된"은 압축, 즉 압착 탈수 또는 압착을 겪은 물질을 지칭한다.
적합하게 상기 압축된 코어는 하나 이상의 압축 보조제; 하나 이상의 붕해제; 하나 이상의 윤활제 약학적으로 활성인 결합 폴리펩티드로 필수적으로 이루어지거나 또는 이루어진다.
적합하게 상기 압축된 코어의 경도는 20-110 N, 보다 적합하게 40-100 N, 가장 적합하게 60-90 N이다.
적합하게 상기 압축된 코어는 하기를 포함하거나, 하기로 필수적으로 이루어지거나 또는 하기로 이루어진다: 코어의 중량에 대한 중량을 기준으로, 20-55%의 하나 이상의 압축 보조제(예를 들어 만니톨 및 미정질 셀룰로스); 2-6%의 하나 이상의 붕해제(예를 들어 크로스카멜로스 나트륨); 0.1-2%의 하나 이상의 윤활제(예를 들어 마그네슘 스테아레이트) 및 40-80%의 약학적으로 활성인 결합 폴리펩티드(예를 들어 면역글로불린 쇄 가변 도메인). 보다 적합하게 상기 압축된 코어는 하기를 포함하거나, 하기로 필수적으로 이루어지거나 또는 하기로 이루어진다: 코어의 중량에 대한 중량을 기준으로, 30-40%의 하나 이상의 압축 보조제(예를 들어 만니톨 및 미정질 셀룰로스); 3-5%의 하나 이상의 붕해제(예를 들어 크로스카멜로스 나트륨); 0.5-1.5%의 하나 이상의 윤활제(예를 들어 마그네슘 스테아레이트) 및 50-70%의 약학적으로 활성인 결합 폴리펩티드(예를 들어 면역글로불린 쇄 가변 도메인).
적합하게 상기 약학적으로 활성인 결합 폴리펩티드는 코어의 중량에 대한 중량을 기준으로 30-80%, 예를 들어 40-75%, 예를 들어 약 50%-60%로 존재한다.
치료학적 용도 및 전달
본 발명의 약학 조성물은 적합하게는 인간에게 투여하기 위한 것이다. 본 발명의 약학 조성물의 치료 유효량은 피실험자에게 단일 또는 수회 용량 투여시 피실험자에서 질병을 치료하거나 예방하는데 유효한 양이다. 치료 유효량은 개인의 질병 상태, 연령, 성별 및 체중, 및 상기 개인에서 목적하는 응답을 이끌어내는 상기 약학 조성물의 능력과 같은 인자들에 따라 변할 수 있다. 치료 유효량은 또한 상기 약학 조성물의 임의의 독성 또는 유해 효과가 치료학적으로 이로운 효과에 의해 압도되는 양이다.
본 발명의 약학 조성물을 경구 전달용으로 제형화한다. 경구 전달에 핵심 문제는 충분한 약학적으로 활성인 결합 폴리펩티드가 상기가 필요한 장관 구역에 확실히 도달되게 하는 것이다. 상기 폴리펩티드가 요구되는 장관 구역에 도달하는 것을 막는 인자는 상기 폴리펩티드를 분해시킬 수 있는 소화제 분비액 중 프로테아제의 존재를 포함한다. 적합하게, 상기 폴리펩티드는 상기 폴리펩티드 자체의 본래의 성질 덕분에 상기와 같은 프로테아제 중 하나 이상의 존재하에서 실질적으로 안정성이다. 적합하게, 상기 폴리펩티드는 상기 장관 영역에 노출시 실질적으로 안정성이다. 한편으로, 다용량의 폴리펩티드를 투여하여 상기 장관에서 분해되게 되는 폴리펩티드의 양을 보충할 수도 있다.
회장에 직접 전달된 단백질은 면역원성일 수 있는 반면, 경구 전달되어 위 및 십이지장 소화가 가해진 동일한 단백질은 면역학적 관용을 유도하는 것으로 공지되어 있다(Michael 1989 참조). 본 발명의 조성물을 장용 코팅한 결과, 경구 투여시 회장과 같은 장관 영역에 방출될 때 약학적으로 활성인 결합 폴리펩티드가 피실험자의 면역계에 처음으로 노출되게 된다. 숙련가는 상기와 같은 전달 방법을 회장으로의 직접 전달과 면역학적으로 동등한 것으로 여길 수 있다. 따라서 면역학적으로 관용성인 응답이 본 발명의 경구-투여된 조성물에 관하여 관찰되었음은 놀랍고도 매우 유리한 것이다.
계면활성제를 또한 상기 폴리펩티드의 응집을 감소시키고/시키거나 제형 중 미립자의 형성을 최소화하고/하거나 흡착을 감소시키기 위해 상기 약학 조성물에 첨가할 수 있다. 예시적인 계면활성제는 폴리옥시에틸렌솔비탄 지방산 에스테르(트윈), 폴리옥시에틸렌 알킬 에테르(브리즈(Brij)), 알킬페놀폴리옥시에틸렌 에테르(트리톤-X), 폴리옥시에틸렌-폴리옥시프로필렌 공중합체(폴록사머(Poloxamer), 플루로닉(Pluronic)), 및 나트륨 도데실 설페이트(SDS)를 포함한다. 적합한 폴리옥시에틸렌솔비탄-지방산 에스테르의 예는 폴리솔베이트 20 및 폴리솔베이트 80이다. 계면활성제의 예시적인 농도는 약 0.001% 내지 약 10% w/v의 범위일 수 있다.
상기 약학적으로 활성인 결합 폴리펩티드를 동결건조시킬 수 있다. 동결건조보호제를, 상기 동결건조 공정 동안 상기 폴리펩티드를 탈안정화 조건에 대해 보호하기 위해서 첨가할 수 있다. 예를 들어, 공지된 동결건조보호제는 당(글루코스, 슈크로스, 만노스 및 트레할로스 포함); 폴리올(만니톨, 솔비톨 및 글리세롤 포함); 및 아미노산(알라닌, 글리신 및 글루탐산 포함)을 포함한다. 동결건조보호제를 약 10 mM 내지 500 mM의 양으로 포함시킬 수 있다.
한편으로, 상기 약학적으로 활성인 결합 폴리펩티드를 분무 건조시킬 수 있다.
본 발명의 약학 조성물의 투여를 위한 투여량 범위는 목적하는 치료 효과를 생성시키는 범위이다. 상기 필요한 투여량 범위는 상기 약학 조성물의 정확한 성질, 환자의 연령, 환자 상태의 성질, 정도 또는 중증도, 금기(존재하는 경우), 및 주치의의 판단에 따라 변한다. 이들 투여량 수준의 변화를 최적화를 위한 표준 실험 루틴을 사용하여 조절할 수 있다.
상기 약학적으로 활성인 결합 폴리펩티드의 적합한 인간 투여량 범위는 10 ㎎-5000 ㎎, 예를 들어 50 ㎎-1500 ㎎, 예를 들어 100 ㎎-500 ㎎이다. 체중 ㎏당 상기 약학적으로 활성인 결합 폴리펩티드의 적합한 투여량 범위는 1 ㎎-500 ㎎, 예를 들어 5 ㎎-150 ㎎, 예를 들어 10 ㎎-50 ㎎이다. 인간 용량 또는 체중 ㎏당 용량을 매일 또는 보다 빈번히, 예를 들어 하루에 2, 3 또는 4회, 또는 덜 빈번히, 예를 들어 2일마다 또는 주당 1회, 2주당 1회 또는 개월당 1회 투여할 수 있다. 보다 적합하게 상기 용량을 하루에 3회 투여한다.
본 발명의 하나의 태양에서, 위장관의 자가면역 및/또는 염증성 질병의 치료를 위한 약제의 제조에서 상기 약학 조성물의 용도를 제공한다. 본 발명의 추가의 태양에서 장관의 자가면역 및/또는 염증성 질병의 치료가 필요한 사람에게 치료 유효량의 상기 약학 조성물을 투여함을 포함하는 상기 질병의 치료 방법을 제공한다.
'치료'란 단어는 치료학적 치료뿐만 아니라 예방학적 치료도 포함하고자 한다. 질병의 치료는 또한 그의 악화의 치료를 포함하고 또한 질병 증상의 재발을 방지하기 위해서 환자의 질병 증상 완화 치료도 포함한다.
장관의 질병
적합하게 본 발명의 약학 조성물은 장관 질병의 치료 또는 예방에 사용하기 위한 것이다. 상기 장관의 질병은 소장 및 대장을 침범하는 질병에 관한 것이다. 상기 소장 및 대장은 감염성, 자가면역 및 다른 유형의 질병에 의해 침범될 수 있다.
장관(IT)의 자가면역 질병 및/또는 염증성 질병
만성 염증성 장 질환(IBD) 크론병 및 궤양성 대장염(아동 및 성인 모두가 걸린다)은 IT의 자가면역 및 염증성 질병의 예이다(Hendrickson et al., 2002, 내용 전체가 본 명세서에 참고로 인용된다). 궤양성 대장염은 염증 반응 및 형태적 변화가 결장에 국한된 채로 있는 상태로서 정의된다. 직장은 환자의 95%에서 관련된다. 염증은 주로 점막으로 제한되며 결장의 길이를 따라 궤양, 부종 및 출혈과 함께 가변적인 중증도의 연속적인 연루로 이루어진다(Hendrickson et al., 2002, 내용 전체가 본 명세서에 참고로 인용된다). 궤양성 대장염은 대개 장운동 중에 가장 심한 하복부 통증과 함께, 혈액 및 점액질이 섞인 대변의 존재에 의해 증상을 나타낸다. 임상적으로, 혈액 및 점액질이 있는 설사의 존재는 궤양성 대장염을 과민성 장 증후군(여기에서는 혈액이 존재하지 않는다)과 구분짓는다. 궤양성 대장염과 달리, 크론병의 표출은 대개 감지가 힘들며, 이는 나중에 진단으로 이어진다. 연루의 위치, 정도 및 중증도와 같은 인자는 위장 증상의 정도를 결정한다. 회결장 연루를 갖는 환자는 대개 우측 하복부의 압통 및 때때로 염증성 덩어리와 함께 식후 복부 통증을 갖는다. 위십이지장 크론병과 관련된 증상은 조기 포만감, 오심, 구토, 심와부 통증, 또는 연하곤란을 포함한다. 항문주위 질병은 항문 꼬리(anal tag), 심부 항문 열상(deep anal fissure), 및 치루(fistulae)와 함께 흔하다(Hendrickson et al., 2002, 내용 전체가 본 명세서에 참고로 인용된다).
적합하게 본 발명의 폴리펩티드, 약학 조성물 또는 구조물은 크론병(Crohn's disease), 궤양성 대장염(ulcerative colitis), 과민성 장 질환(irritable bowel disease), II형 당뇨병(diabetes type II), 사구체신염(glomerulonephritis), 자가면역 간염(autoimmune hepatitis), 쇼그렌 증후군(Sjogren's syndrome), 셀리악병(celiac disease) 및 약물- 또는 방사선-유발된 점막염(mucositis)으로 이루어지는 목록 중에서 선택된 IT의 자가면역 및/또는 염증성 질병; 보다 적합하게 크론병, 궤양성 대장염, 과민성 장 질환, 셀리악병 및 약물- 또는 방사선-유발된 점막염; 보다 적합하게 크론병, 궤양성 대장염 및 과민성 장 질환; 가장 적합하게는 크론병의 치료에 사용하기 위한 것이다.
병용 요법
본 발명의 약학 조성물을, 자가면역 질병의 치료에 통상적으로 사용되는 다른 확립된 치료법에 대한 부가물로서 또는 상기와 함께 자가면역 질병의 치료를 위한 치료 방법에 사용하는 것은 본 발명의 범위내에 있다.
IBD(예를 들어 크론병 또는 궤양성 대장염)의 치료를 위해, 가능한 조합은 예를 들어 5-아미노살리실산, 또는 그의 전구약물(예를 들어 설파살라진, 올살라진 또는 비살라지드); 코르티코스테로이드(예를 들어 프레드니솔론, 메틸프레드니솔론, 또는 부데소니드); 면역억제제(예를 들어 사이클로스포린, 타크로리무스, 메토트렉세이트, 아자티오프린 또는 6-머캅토퓨린); 항-IL-6R 항체(예를 들어 토실리주맵), 항-IL-6 항체, 항-TNF-알파 항체(예를 들어 인플릭시맵, 아달리무맵, 세르톨리주맵 페골 또는 골리무맵); 항-IL12/IL23 항체(예를 들어 우스테키누맵); 항-IL6R 항체 또는 소분자 IL12/IL23 억제제(예를 들어 아필리모드); 항-알파-4-베타-7 항체(예를 들어 베돌리주맵); MAdCAM-1 차단제(예를 들어 PF-00547659); 세포 부착 분자 알파-4-인테그린에 대한 항체(예를 들어 나탈리주맵); IL2 수용체 알파 서브유닛에 대한 항체(예를 들어 다클리주맵 또는 바실릭시맵); JAK3 억제제(예를 들어 토파시티니브 또는 R348); Syk 억제제 및 그의 전구약물(예를 들어 포스타마티니브 및 R-406); 포스포디에스테라제-4 억제제(예를 들어 테토밀라스트); HMPL-004; 프로바이오틱스; 데르살라진; 세마피모드/CPSI-2364; 및 단백질 키나제 C 억제제(예를 들어 AEB-071)를 포함하는 목록 중에서 선택된 하나 이상의 활성제와의 조합을 포함한다. 가장 적합한 병용제는 토실리주맵, 인플릭시맵, 아달리무맵, 세르톨리주맵 페골 또는 골리무맵이다.
따라서 본 발명의 또 다른 태양은 본 발명의 약학 조성물을 하나 이상의 추가적인 활성제, 예를 들어 상술한 하나 이상의 활성제와 함께 제공한다.
본 발명의 추가의 태양에서, 상기 약학 조성물을 상기 목록 중에서 선택된 적어도 하나의 활성제와 연속적으로, 동시에 또는 별도로 투여한다.
유사하게, 본 발명의 또 다른 태양은 하기를 포함하는 배합물을 제공하며:
(A) 본 발명의 약학 조성물; 및
(B) 하나 이상의 다른 활성제,
여기에서 성분 (A) 및 (B)는 각각 약학적으로 허용 가능한 보조제, 희석제 또는 담체와의 혼합물로 제형화된다. 본 발명의 상기 태양에서, 상기 배합물은 단일(병용) 제형 또는 키트-오브-파트(kit-of-parts)일 수 있다. 따라서, 본 발명의 상기 태양은 본 발명의 약학 조성물 및 또 다른 치료제를 약학적으로 허용 가능한 보조제, 희석제 또는 담체와의 혼합물로 포함하는 병용 제형을 포함한다.
본 발명은 또한 성분:
(i) 약학적으로 허용 가능한 보조제, 희석제 또는 담체와 혼합된 본 발명의 약학 조성물; 및
(ii) 약학적으로 허용 가능한 보조제, 희석제 또는 담체와 혼합된 하나 이상의 다른 활성제를 포함하는 제형
을 포함하는 키트-오브-파트를 포함하며, 상기 성분 (i) 및 (ii)는 각각 다른 것과 함께 투여하기에 적합한 형태로 제공된다.
상기 키트 오브 파트의 성분 (i)는 따라서 약학적으로 허용 가능한 보조제, 희석제 또는 담체와 혼합된 상기 성분 (A)이다. 유사하게, 성분 (ii)는 약학적으로 허용 가능한 보조제, 희석제 또는 담체와 혼합된 상기 성분 (B)이다. 상기 하나 이상의 다른 활성제(즉 상기 성분 (B))는 예를 들어 IBD(예를 들어 크론병 및/또는 궤양성 대장염)와 같은 자가면역 질병의 치료와 관련하여 상기 언급된 작용제들 중 어느 하나일 수 있다. 성분 (B)가 하나 초과의 추가의 활성제인 경우, 이들 추가의 활성제를 서로 제형화하거나 또는 성분 (A)와 제형화하거나 또는 별도로 제형화할 수 있다. 하나의 실시태양에서 성분 (B)는 하나의 다른 치료제이다. 또 다른 실시태양에서 성분 (B)는 2개의 다른 치료제이다. 본 발명의 상기 태양의 배합물(병용 제제 또는 키트-오브-파트)을 자가면역 질병(예를 들어 상기 언급된 자가면역 질병)의 치료 또는 예방에 사용할 수 있다.
적합하게 본 발명의 약학 조성물은 약제로서 및 보다 적합하게는 자가면역 및/또는 염증 질병의 치료에 사용하기 위한 것이다.
제조 방법
건조 과립화에 이은 압축 또는 한편으로 직접적인 압축을 사용하여 상기 압축된 코어를 제조할 수 있다. 충분히 혼합될 수 있는 분말은 과립화가 필요하지 않으며 직접 압축을 통해 정제로 압축시킬 수 있다. 상기 방법은 특히 본 발명의 조성물을 정제, 예를 들어 미니-정제로 전달하고자 하는 경우 적합하다.
과립화 공정은 저압하에서 분말 블렌드의 가벼운 압밀에 의해 과립을 생성시킨다. 그렇게 형성된 압축물을 약하게 붕괴시켜 과립(응집체)을 생성시킨다. 상기 공정은 종종 과립화하려는 생성물이 수분 및 열에 민감한 경우 사용된다. 건조 과립화를 슬러깅 툴링을 사용하여 정제 프레스상에서 또는 롤러 콤팩터라 칭하는 롤 프레스상에서 수행할 수 있다. 압력을, 적합한 치밀화 및 과립 형성을 획득하기 위해 변화시킬 수 있다.
성분들을 상기 성분들이 과립외 또는 과립내에 있도록 제조 중에 상기 약학 조성물에 첨가할 수 있다. 상기 성분을 과립화(이는 추가로 코어를 형성하기 위한 정제 압축에 선행한다)에 앞서 다른 성분과 혼합하는 경우, 상기 성분은 상기 과립에 혼입될 것이며 따라서 과립내에 있을 것이다. 상기 성분을 코어의 형성을 위한 정제 압축 전에 형성된 건조 과립과 혼합하는 경우, 상기 성분은 과립외에 있을 것이다.
압축된 코어를, 타정 프레스에 장착된 펀치 및 다이에 의한 직접 압축, 분출 또는 압축 성형, 과립화에 이은 압축에 의해 제조하거나, 또는 페이스트를 형성시키고 상기 페이스트를 금형내로 압출시키거나 또는 상기 압출물을 짧은 길이로 절단하고 임의로 스피로나이저(spheroniser)를 사용하여 상기와 같이 형성된 길이의 테두리를 둥글게함으로써 제조할 수 있다. 적합하게, 상기 압축된 코어의 제조에 사용된 공정은 상기 성분 혼합물의 건조 과립화에 이은, 바람직하게는 미니-정제로의 압축이다. 적합하게 압축을 타정 프레스, 예를 들어 단일 펀치기(예를 들어 마네스티(Manesty) F3) 또는 회전 정제 프레스(예를 들어 마네스티 테크니프레스(Manesty Technipress), 적합하게는 29의 탑 캠 압축력 설정을 사용한다)를 사용하여 수행한다.
본 발명의 약학 조성물의 제조에서, 적합하게 상기 약학적으로 활성인 결합 폴리펩티드를 건조 과립화시켜 과립을 형성시킨다. 보다 적합하게 상기 약학적으로 활성인 결합 폴리펩티드(예를 들어 면역글로불린 쇄 가변 도메인) 및 하나 이상의 압축 보조제(예를 들어 만니톨)를 함께 과립화시킨다. 보다 적합하게 상기 약학적으로 활성인 결합 폴리펩티드(예를 들어 면역글로불린 쇄 가변 도메인), 하나 이상의 압축 보조제(예를 들어 만니톨) 및 하나 이상의 윤활제(예를 들어 마그네슘 스테아레이트)를 함께 과립화시킨다. 따라서 이들 성분은 과립-내에 있게 된다. 이어서 그렇게 생성된 과립을 적합하게는 압축시켜 압축된 코어를 형성시킬 수 있다.
한편으로, 과립화 후에, 적합하게 상기 하나 이상의 압축 보조제(예를 들어 미정질 셀룰로스), 상기 하나 이상의 붕해제(예를 들어 크로스카멜로스 나트륨) 및 상기 하나 이상의 윤활제(예를 들어 마그네슘 스테아레이트)를 상기 과립과 블렌딩한 다음 압축시켜 압축된 코어를 형성시킨다.
본 명세서에 사용되는 바와 같이, '과립-내'는 과립내에 존재함(압축 전)을 의미하고 '과립-외'는 과립들 사이에 존재함(압축 후)을 의미한다.
본 발명의 하나의 태양에서, 본 발명의 약학 조성물의 제조 방법을 제공하며 여기에서 (i) 약학적으로 활성인 결합 폴리펩티드, 하나 이상의 압축 보조제 및 하나 이상의 윤활제를 함께 건조 과립화시켜 과립을 형성시키고(여기에서 상기 약학적으로 활성인 결합 폴리펩티드는 면역글로불린 쇄 가변 도메인이고, 상기 하나 이상의 압축 보조제는 만니톨이고 상기 하나 이상의 윤활제는 마그네슘 스테아레이트이다), 이어서 (ii) 하나 이상의 압축 보조제, 하나 이상의 붕해제 및 하나 이상의 윤활제를 상기 과립과 블렌딩하고(여기에서 상기 하나 이상의 압축 보조제는 미정질 셀룰로스이고, 상기 하나 이상의 붕해제는 크로스카멜로스 나트륨이고, 상기 하나 이상의 윤활제는 마그네슘 스테아레이트이다), 이어서 (iii) 상기 블렌드를 압축시켜 압축된 코어를 형성시키고(여기에서 상기 압축된 코어는 상기 코어의 중량에 대한 중량을 기준으로 20-55% 만니톨 및 미정질 셀룰로스; 2-6% 크로스카멜로스 나트륨; 0.1-2% 마그네슘 스테아레이트 및 40-75% 면역글로불린 쇄 가변 도메인으로 이루어진다), 이어서 (iv) 상기 압축된 코어를 pH 민감성 장용 코팅으로 코팅시킨다. 추가의 태양에서 본 발명은 선행 방법에 의해 수득될 수 있는 약학 조성물을 제공한다.
pH 민감성 장용 코팅을 유기 용매를 사용하거나, 수용액을 사용하거나, 또는 유기 용매와 물의 혼합물을 사용하여 적용할 수 있다. 전적으로 수용액 코팅 공정을 사용하는 경우 보다 많은 양의 pH 민감성 장용 중합체 코트를 포함시켜야 한다.
본 발명의 하나의 태양에 따라, 상기 약학적으로 활성인 결합 폴리펩티드 및 상기 하나 이상의 부형제의 블렌드를 압축시켜 코어를 형성시킨 다음 상기 코어를 pH 민감성 장용 코팅으로 코팅시킴을 포함하는 본 발명에 따른 약학 조성물의 제조 방법을 제공한다. 적합하게 상기 코어를 pH 민감성 장용 코팅으로 코팅 전에 서브-코트로 코팅시킨다.
이제 본 발명을 하기 비제한적인 실시예에 의해 추가로 기재할 것이다.
실시예
실시예 1: 제형화
본 발명에 따른 고형 약학 조성물을 건조 과립화 및 압축에 의해 미니-정제의 형태로 제조하였다. 이어서 상기 미니-정제를 상이한 표출로 제공하였으며, 여기에서 각각의 표출은 상이한 크기의 캡슐 중에 상이한 양의 미니 정제를 함유하였다. 하기 상세한 실시예들에 사용된 주요 표출은 15개의 장용 코팅된 미니-정제를 함유하는 00 크기 HPMC 캡슐이었다(총 185 ㎎의 약학적으로 활성인 결합 폴리펩티드). 상기 미니-정제 코어는 3 ㎜의 직경(코팅 두께 제외) 및 대략적으로 90 N의 경도를 가졌다.
상기 캡슐에 함유된 각각의 미니-정제 및 따라서 15개의 미니-정제에 함유된 성분들을 하기 표 2에 나열한다.
미니 정제 성분의 명칭 기능 조성물 중의
% w/w 		양
(㎎/캡슐)
185 ㎎ 용량
(15개 미니-정제) 		양 (㎎)
12 ㎎ 용량
(1개 미니-정제)
미니-정제 코어
총 폴리펩티드 활성 약학 성분 (API) 45.7 225 15
만니톨 압축 보조제 12.0 59.25 3.95
미정질 셀룰로스 압축 보조제 14.6 72
4.8
크로스카멜로스 나트륨 초붕해제 3.1 15 1
마그네슘 스테아레이트 윤활제 0.8 3.75 0.25
서브 코팅
하이드록시프로필메틸 셀룰로스 중합체 코트 3.8 18.75 1.25
pH 민감성 장용 코팅
유드라지트(등록상표) L100 장용 중합체 코트 11.7 57.76 3.85
트리에틸 시트레이트 가소제 2.3 11.51 0.77
활석 점착방지제 5.9 28.93 1.93
나트륨 라우릴 설페이트 계면활성제 0.04 0.20 0.01
상기 조성물 중의 총 폴리펩티드는 225 ㎎의 폴리펩티드가 185 ㎎의 약학적으로 활성인 결합 폴리펩티드를 함유하도록 대략 70-90%의 순도를 갖는다.
실시예 전체를 통해 사용되는 약학적으로 활성인 결합 폴리펩티드는 서열번호 1-28에 인용된 ICVD 중 하나이다. 이는 115 아미노산, 12.6 kDa 폴리펩티드이다. 상기 폴리펩티드의 pI는 6.8이고 상기 폴리펩티드는 30 ㎎/㎖ 초과의 수 용해도를 갖는다. 상기 ICVD는 고 친화성으로 인간 및 키노몰구스 원숭이 TNF-알파에 결합하고 상기에 대해 효능있는 중화 활성을 갖는다.
상기 미니-정제를 하기의 방법에 의해 생성시켰다.
동결건조된 폴리펩티드를 만니톨 및 마그네슘 스테아레이트의 일부와 블렌딩하고 건조 슬러깅하여 그의 밀도를 증가시켰다. 이어서 상기 물질을 스크린에 통과시키고, 다른 미니-정제 부형제(미정질 셀룰로스, 크로스카멜로스 나트륨 및 나머지 마그네슘 스테아레이트)와 블렌딩하고 압축시켜 미니-정제를 생성시켰다. 이어서 상기 미니-정제를 에탄올:수 80:20 중의 하이드록시프로필 메틸 셀룰로스 5% 용액으로 코팅하고, 건조시키고 용매 제거하여 서브-코트 및 보다 매끄러운 표면을 생성시켰다. 이어서 상기 미니-정제를 이소프로필 알콜 및 수 중의 유기 용액으로서 트리에틸 시트레이트, 활석 및 나트륨 라우릴 설페이트와 함께 유드라지트(등록상표) L100 중합체로 코팅하고 건조시켜 pH-민감성 장용 코트를 생성시켰으며, 따라서 각각의 미니-정제는 25 중량%가 증가하였다. 이어서 생성된 대략 3 ㎜ 직경의 미니-정제를 캡슐에 상기 제공된 용량으로 충전하였다.
미니-정제의 2개의 별도의 배치를 상이한 때에 생성시켰다. 이들 배치를 본 명세서에서 배치 A 및 배치 B로서 지칭한다. 상기 두 배치는 모두 표 1에 나열된 바와 같은 동일한 양의 성분들을 함유한다. 배치 A상의 pH 민감성 장용 코팅은 100-170 um의 두께를 갖는 반면 배치 B상의 pH 민감성 장용 코팅은 70-170 um의 두께를 가졌다.
실시예 2: 약전 장용 코팅 시험
선행 연구(도시 안 됨)는 서브-코팅된 압축된 코어가 pH 민감성 장용 코팅 최적 방출 타이밍 첨가시 17% 초과의 추가적인 중량 획득이 필요함을 확립시켰다.
배치 A로부터의 미니-정제를 함유하는 실시예 1의 6개 캡슐에 용기당 1 캡슐로, 약전 장용 코팅 시험을 가하였다.
0.0206 ㎎/㎖ 및 0.206 ㎎/㎖의 ICVD를 함유하는 참조 표준을 제조하였다.
상기 캡슐은 예상한 대로 정확히 용해되어 산 환경에 상기 미니-정제를 방출시켰다.
상기 미니-정제는 2시간의 시험 기간 동안 ICVD의 10% 미만을 방출하는 것으로 밝혀졌다(데이터 도시 안 됨). 따라서 상기 조성물은 유럽 약전 8.0, 2.9.3, "고체 투여형에 대한 용해 시험"에 제시된 경구 투여된 지연-방출 고체 투여형에 대한 용해 요건에 부응한다.
반복 시험 동안, 상기 조성물을 2시간을 초과하여 계속 교반하면서 시험 매질 중에 방치시, 시각적 검사(및 UV280 ㎚에서 증가되지 않음)에 의해 상기 장용 코트가 6시간 이상 동안 완전성을 유지함이 확립되었다.
실시예 3: 약전 용해 시험
실시예 2에 상세히 기재된 바와 같은 약전 장용 코팅 시험에서 6개의 용기 각각으로부터의 미니-정제를 시험한 후에, 이어서 상기 6개의 용기 각각으로부터의 미니-정제를 상기 상세히 기재된 바와 같이 약전 용해 시험을 사용하여 시험하였다. 상기 시험의 결과를 표 3, 도 1(개별적인 용기 1-6에 대한 데이터 점들) 및 도 2(화살표로 예시된, 상기 "서방성 방출의 측정: 약전 용해 시험"하에 인용된 용해 범위와 함께 용기 1-6에 대한 평균)에 도시한다.
시간(분) 용해%
5 0.6
10 1.5
15 2.3
30 16.6
45 29.0
60 41.6
90 63.1
120 71.3
150 73.5
요약하면, 약학적으로 활성인 결합 폴리펩티드의 서방성 방출이 성취되었음을 알 수 있다. 서방성 방출은 대략 2 내지 2.5시간의 과정에 걸쳐 성취되었다. 상기 방출 프로파일은 생체내에서 이상적인 서방성 방출 프로파일로 번역되는 것으로 예상되었다. 이러한 예상은 하기 상세히 기재한 생체내 실험에 의해 확인되었다.
실시예 4: 동적인 용해 시험
상기 실시예 1하에 상세히 기재된 고형 약학 조성물을 동적인 용해 시험을 사용하여 시험하였다. 각각 배치 A로부터 15개의 미니-정제를 함유하는 6개의 샘플, 및 각각 배치 B로부터 11개의 미니-정제를 함유하는 6개의 샘플을 시험하였다. 15개의 배치 A 미니 정제의 각 샘플에 사용된 조건은 상기 상세히 기재된 동적인 용해 시험과 비슷하였다. 11개의 배치 B 미니-정제의 각 샘플에 사용된 조건은 샘플당 800 ㎖의 0.1 M HCl이 사용된 점에서 상기 동적인 용해 시험과 달랐다.
배치 A(도 4, 2시간 점에 선행하는 곡선) 또는 배치 B(도 5, 2시간 점에 선행하는 곡선)의 임의의 샘플에 대한 산 단계 동안 상기 미니-정제로부터 ICVD의 용해는 발생하지 않았다.
이어서 상기 동일한 미니-정제들을 상기 동적인 용해 시험에 따라 행크스 완충제로 옮겼다. 행크스 완충제로의 이동(2 시간 점)은 도 3, 4 및 5에서 수직 점선에 의해 나타낸다.
모액 및 실행 용액을 제조하였다. 상기 모액은 1.50 ㎖ ICVD 표준 용액(기지의 양 및 농도의 ICVD)의 첨가에 의해 798.5 ㎖의 pH 5.79의 예비 순화된 행크스 탄산수소 완충액이 충전된 용해 용기 중에서 제조되었다. 상기 용해 매질의 샘플을 샘플링 중에 1 ㎛ 포로플라스트(Poroplast)-필터(PES, 디솔루션 액세서리즈(Dissolution Accessories), 네덜란드 암스테르담 소재)상에서 여과하고 추가의 전-처리 없이 측정하였다. 상기 용해된 약물의 양을 고리 폐쇄 방식으로 UV-Vis 분광학(에이질런트(Agilent) 8453, 에이질런트 테크놀로지스(Agilent Technologies), 미국 산타클라라 소재)에 의해 측정하였다. 흡광도를 279(신호) 및 450-550 ㎚(범위 밖 배경 공제)에서 상이한 방식으로 10 ㎜ 광 경로를 갖는 셀(헬마(Hellma), 독일 뮐하임 소재)을 통한 석영 흐름을 사용하여 측정하였다.
상기 용해된 ICVD의 양을 개별적으로 하기에 제공된 수학식에 따른 평균 표준 흡광도를 기준으로 산정하였다:
용해된 ICVD = A*V*F
상기에서:
A - 샘플의 측정된 흡광도
V - 보정된 부피
F - 표준 용액의 흡광도를 기준으로 획득된 교정 인자
상기 샘플 및 표준 용액의 부피 보정을 개별적으로 수행하였다. 상기 표준 및 시험 용액의 용해 매질의 부피를 상기 시험의 끝에서 측정하였다. 증발로 인한 부피 축소는 시간에 대해 선형인 것으로 추정되었으며 상기 샘플 및 표준 용액의 부피를 개별적으로 각각의 샘플링 시점에 대해 산정하고 이를 상기 산정에 상응하게 고려하였다.
상기 배치 A 미니-정제 샘플 시험시, 상기 폴리펩티드의 1% 초과가 처음 행크스 완충제로의 이동으로부터 1.67시간 후에 처음으로 방출되기 시작하는 것으로 밝혀졌다(도 4, 2시간째의 행크스 완충제로의 이동 후 영역 참조). 배치 B 시험시, 상기 폴리펩티드의 1% 초과가 처음 행크스 완충제로의 이동으로부터 3.17시간 후에 처음으로 방출되기 시작하는 것으로 밝혀졌다(도 5, 2시간째의 행크스 완충제로의 이동 후 영역 참조).
상기 약학적으로 활성인 결합 폴리펩티드의 1% 초과가 처음으로 방출되기 시작한 상기 시점이 '방출의 시작'이다. 상기 방출의 시작을 도 4 및 5에서 화살표에 의해 나타낸다. 상기 두 배치 모두에 대한 이들 기간은 지연 방출 생성물에 적합하다.
이어서 방출의 시작에 따른 ICVD의 용해%를 기록하였다. 배치 A에 대한 결과를 도 4에 도시하고(2시간째에 행크스 완충제로의 처음 이동에 이어서 1.67시간째에 방출의 시작에 이은 영역) 배치 B에 대한 결과를 도 5에 도시한다(2시간째에 행크스 완충제로의 처음 이동에 이어서 3.17시간째에 방출의 시작에 이은 영역).
방출의 시작후 60, 120 및 180분의 시점에서 ICVD의 용해%의 요약을 하기 표 4에 제공한다.
방출의 시작후 방출된 ICVD의 % 배치 A에 대한 평균 결과 배치 B에 대한 평균 결과
방출의 시작후 60분째에 방출된 % 14.3 23.1
방출의 시작후 120분째에 방출된 % 47.1 57.7
방출의 시작후 180분째에 방출된 % 67.6 68.4
위에서 나간 후에, 십이지장 및 공장을 통한 수송은 대략 2시간이 걸린다(상기 "장 체류시간" 참조). 상응하게, 상기 시험관내 방출 프로파일은 생체내에서 서방성 방출 프로파일로 번역될 것이며 여기에서 방출은 원위 공장 주변에서 발생하기 시작하여 결장에서 실질적으로 완전한 방출이 성취되는 것으로 예상되었다. 이어서 모든 방출된 ICVD는 장관의 나머지 하부 영역을 통해 이동할 것으로 예상될 수 있었다. 이러한 예상은 하기 생체내 실시예에 의해 확인되었다.
실시예 5: 부형제 상용성
ICVD의 용융 온도(Tm)에 대한 상기 조성물 중에 사용된 부형제의 영향을 조사하였다.
열 이동 분석(TSA)은 단백질의 구조에 대한 용질의 영향을 조사하기 위해 단백질 생화학에 사용되는 통상적인 방법이다. 몇몇 용질(염, 부형제 등)은 상기 단백질과 상호작용하여 상기 단백질의 안정화 또는 탈안정화를 야기할 수 있다. 이러한 영향을, 상기 단백질의 용융 온도(Tm)를 문제의 화합물과 함께 또는 상기 화합물 없이 비교함으로써 평가할 수 있다. Tm의 증가는 안정화, 즉 상기 단백질의 모양을 유지시키는 힘의 강화를 가리킨다. Tm의 감소는 그 반대를 가리킨다.
상기 분석에서, 상기 단백질을 소수성 염료 사이프로 오렌지와 혼합하고 25 ℃에서부터 98 ℃로 점차적으로 가열한다. 상기 단백질이 용융(풀림, a.k.a. 변성)됨에 따라, 그의 소수성 코어가 노출되고 사이프로 오렌지가 소수성 상호작용을 통해 상기 잔기에 결합한다. 사이프로 오렌지는 상기 단백질에 결합시에만 형광을 발하며, 이와 같은 방식으로, 상기 단백질의 풀림을 qPCR 기계에서 레이저에 의해 실시간으로 측정한다. 상기 기계로부터의 데이터를 볼츠만(Boltzmann) 곡선 정합을 사용하여 그래프패드 프리즘에서 처리한다. 상기 Tm은 상기 볼츠만 곡선의 변곡점으로부터 얻는다. 부형제를 1xPBS, pH 7.4 또는 수중에서 와동에 의해 혼합하였다. 임의의 불용성 물질을 원심분리에 의해 제거하고 상등액을 분석을 위해 채취하였다.
하기의 부형제들을 시험하였다(표지는 도 6의 범례를 지칭한다).
A - (-0.1 ℃) 8.88 uM ICVD; 1 중의 대조용 (1xPBS pH 7.4)
B - (0.1 ℃) 8.88 uM ICVD; 1 중의 17 ㎎/㎖ 아비셀(Avicel) PH102 (1xPBS pH 7.4)
C - (0.5 ℃) 8.88 uM ICVD; 1 중의 17 ㎎/㎖ 만니톨 (1xPBS pH 7.4)
D - (0.6 ℃) 8.88 uM ICVD; 1 중의 8 ㎎/㎖ AcDiSol (1xPBS pH 7.4)
E - (1.2 ℃) 8.88 uM ICVD; 1 중의 2 ㎎/㎖ 마그네슘 스테아레이트 (1xPBS pH 7.4)
F - (0.2 ℃) 8.88 uM ICVD; 1 중의 17 ㎎/㎖ 아비셀 PH112 (1xPBS pH 7.4)
아비셀 PH102 및 아비셀 PH112는 미정질 셀룰로스의 유형들이며 AcDiSol은 크로스카멜로스 나트륨의 한 유형이다.
결과를 도 6에 나타낸다. 요약하면, 이들 부형제는 부형제 노출로 생성된 대부분의 Tm 곡선이 대조용(대조용은 Tm 곡선 'A'로서 도시된다)과 실질적으로 동일하게 남았으므로, 상기 단백질의 Tm에 대해 영향(유해 또는 달리)을 미치지 않는 것으로 밝혀졌다. 놀랍게도, 상기 단백질의 열 안정성의 작은 개선이 만니톨(+0.5 ℃), AciDiSol(+0.6 ℃) 및 마그네슘 스테아레이트(+1.2 ℃)에 노출시 성취됨이 주목되었다.
실시예 6: 키노몰구스 원숭이에의 투여: 상이한 장관 구획 및 대변 중 폴리펩티드 농도
6.1 상이한 장관 구획 중 폴리펩티드 농도
키노몰구스 원숭이에게 경구 투여시 장관 영역들을 통한 실시예 1 배치 A의 방출 프로파일과 유사한 조성물의 방출 프로파일을 평가하기 위한 연구를 수행하였다. 상기 방출 프로파일을 상이한 장관 구획 중 폴리펩티드 농도의 분석에 의해 평가하였다.
11개 미니-정제를 함유하는 단일 캡슐을 3마리의 키노몰구스 원숭이(상기 원숭이들을 M234, M236 및 M238로서 지칭한다) 각각에게 경구 투여하였다. 상기 미니-정제 조성물은 각각의 미니-정제가 추가적인 1 ㎎의 메틸렌 블루(염료) 및 141 ㎎ 용량의 ICVD를 함유한다는 점에서 실시예 1의 경우와 달랐다. 상기 미니-정제 중 8개는 또한 0.7 ㎎의 이소프레날린을 함유하였다. 상기 메틸렌 블루 염료는 위장(GI)관을 통한 용해된 미니-정제의 분포에 대한 시각적 분석(본 명세서에서 논의되지 않았다)을 위한 것이고 상기 이소프레날린은 심박수를 모니터하는 연구(본 명세서에서 논의되지 않았다)에 사용하기 위한 것이었다.
경구 투여 4시간 후에, 상기 동물들을 살처분하였다. 위장관을 조심스럽게 제거하고, 상이한 GI 구획들을 결찰시키고 이어서 절단하고 관강 내용물 및 세척물을 수집하였다. 용해되지 않은 및 부분적으로 용해된 미니 정제의 수를 기록하고 이들 미니 정제를 제거하였다. 이어서 상기 샘플을 균질화하고 분석시까지 동결시켰다. 상기 슬러리를 10 ℃에서 5000 rpm에서 5분간 초기 원심분리시킨 후에, 1 ㎖의 상등액을 각 샘플로부터 제거하여 동일한 온도에서 5분간 미세원심분리기에서 13300 rpm에서 원심분리시켰다. 이어서 상등액을 다시 동일한 조건하에서, 그러나 20분 동안 원심분리시키고, 그 후에 표준 휴미라 경쟁적 ELISA(휴미라는 또한 아달리무맵으로서 공지된 항-TNF-알파 항체이다)를 사용하여 분석하였다. 상기 샘플 및 휴미라 및 ICVD 표준의 모든 희석물을 1% BSA, 0.6 M NaCl, 1% 인간 AB 혈청, 0.05% 트윈 20 및 2x 프로테아제 억제제를 함유하는 PBS 중에서 제조하였다. ICVD 농도를 그래프패드 프리즘에서 4 매개변수, 비-선형 곡선 정합 방정식을 사용하여 표준 곡선으로부터 보간하였다. 희석되지 않은 GI 관 샘플 및 0-4h 대변 상등액 중의 ICVD 농도는 가장 잘 보간된 데이터의 평균에 상등액 희석 인자를 곱하여 유도되었다.
M236 또는 M238의 위, 십이지장, 공장 또는 회장에서 완전한 미니-정제는 발견되지 않았다. M234에서, 4개의 완전한 미니-정제가 위에서, 1개가 십이지장에서, 1개가 공장에서 발견되었다. 부분적으로 용해된 미니-정제는 어떠한 원숭이의 어떠한 GI 관 영역에서도 발견되지 않았다.
상기 슬러리 상등액의 제조는 불가피한 ICVD의 희석 때문에 다량의 완충제를 첨가할 필요가 있었다. 도 7에서, ICVD의 예상된 관강 농도가 제공된다. 이는 관강 GI관 내용물이 1의 비중을 갖는 것으로 가정하여, 상등액 ICVD 농도에 완충제 첨가시 희석배수를 곱하여 산정되었다. 나타낸 바와 같이, 매우 높은 ICVD(0.1 -> 1 mM)가 일부 원숭이 GI관 구획의 관강에서 존재하는 듯하다.
ICVD는 오직 하나의 키노몰구스 원숭이 위(M234)의 내용물에서만 검출되었다. ICVD는 또한 모든 원숭이의 회장, 맹장 및 상부 결장의 내용물에서 고농도로 발견되었다. 또한, M234 및 M238은 공장의 내용물에서 고농도로 검출되었다(도 7 참조).
최종적으로, 상기 회수된 ICVD%를, 4h째에 실제 용량이 오직 용해된 미니-정제에 의해서만 전달된 것으로 가정하여 산정하였다. 도 8에 도시된 바와 같이, 51.5 내지 74.9%의 ICVD 용량이 밝혀졌다.
본 연구는 약학적으로 활성인 결합 폴리펩티드를 키노몰구스 원숭이의 하부 GI관에 고농도로 전달할 수 있음을 입증하였다. 일부 미니-정제가 투여후 4h째에 완전하게 남아있었다는 발견은 상기 용량이 일정 기간에 걸쳐 전달되어, 연장된 노출의 가능성을 제공할 것임을 암시한다. 이러한 발견을 항-TNF-알파 결합 폴리펩티드를 사용하는 IBD 환자의 치료에 반영하는 경우, 하부 GI 관에 노출된 항-TNF-알파 폴리펩티드의 농도가 유효 TNF-알파 중화에 적합한 경우보다 더 많을 것임을 예상하는 것은 합당하다.
6.2 대변 중 폴리펩티드 농도
11개 미니-정제를 함유하는 단일 캡슐을 3마리의 각각의 키노몰구스 원숭이에게 경구 투여하였다. 상기 미니-정제 조성물은 각각의 미니-정제가 추가로 1 ㎎의 메틸렌 블루(염료)를 함유하였고 상기 미니-정제 중 8개가 또한 0.7 ㎎의 이소프레날린을 함유한다는 점에서 실시예 1의 경우와 달랐다. 상기 메틸렌 블루 염료는 대변 중 미니-정제의 용해에 대한 시각적 분석을 위한 것이고 상기 이소프레날린은 심박수를 모니터하는 연구(본 명세서에서 논의되지 않았다)에 사용하기 위한 것이었다.
상기 원숭이들로부터 모은 대변은 8, 12, 20, 24 및 36h째에 수집되었다(16h째에는 샘플이 수집되지 않았다). 미니-정제는 상기 대변 샘플 중 어느 것에서도 발견되지 않았다. 이를 추출 완충제(PBS 중의 0.1% BSA, 0.6 M NaCl, 0.05% 트윈 20, 1x 프로테아제 억제제, 5 mM EDTA)와 1 g 대변/4 ㎖ 완충제로 혼합하고, 이어서 균질화하고 상기 슬러리를 분석전에 보관을 위해 -80 ℃에서 동결시켰다. 시각적 검사는 상기 12h, 20h, 24h 및 36h 슬러리의 청색 착색을 밝혀내었다. 선행의 시험관내 실험(도시 안 됨)은 상기 미니-정제의 용해시 증가하는 메틸렌 블루 농도가 ICVD 농도와 밀접하게 연관됨을 입증하였다.
슬러리를 해동시키고 4,000 rpm(3,200 g)에서 5분간 원심분리시켜 미립자 물질의 덩어리를 제거하였다. 약 1 ㎖의 각각의 상등액을 에펜도르프 튜브로 옮기고 13.5K, 10 ℃에서 5분간 미세원심분리기에서 원심분리시키고, 그 후에 상등액을 새로운 튜브에 넣고 10 ℃에서 20분간 원심분리시켰다. 이어서 상등액을 휴미라 경쟁적 ELISA를 사용하여 ICVD 측정에 바로 사용하였다.
상이한 대변 상등액에 대한 ELISA OD450 판독을 도 9에 도시한다. 상기 데이터는 ICVD가, 가능하게는 36h 상등액을 제외하고(최저 희석시 약간의 활성을 볼 수 있지만), 모든 시점에서 대변 상등액 샘플 중에 존재함을 명백히 나타낸다.
그래프패드 프리즘을 사용하는 ICVD에 대한 표준 곡선에 대한 상기 데이터의 보간 및 첨가된 완충제의 희석 인자에 의한 곱은, 1 g 대변이 1 ㎖ 액체 부피와 동등하고 폴리펩티드가 상기 대변 중의 균일하게 분포된다는 가정을 사용하여, 각 대변 샘플 중의 ICVD 농도를 제공하였다. 이를 도 10에 도시한다.
슬러리 부피(1 g 대변 = 1 ㎖, + 추출을 위한 완충제의 부피를 기준으로 산정됨)를 사용하여 각 샘플 중 ICVD의 ㎍량을 측정하였다(도 11)).
요약하면, 약학적으로 활성인 결합 폴리펩티드의 지속적인 상당한 농도가 8시간을 초과하여 키노몰구스 원숭이 장관을 통해 성취되었다.
실시예 7: 인간에의 투여: 회장-맹장 접합부 및 대변 중 폴리펩티드 농도
7.1 회장-맹장 접합부의 폴리펩티드 농도
본 연구의 목적은 실시예 1의 조성물에 통합된 약학적으로 활성인 결합 폴리펩티드가 인간에서 크론병의 주요 부위 및 다수 환자의 장에서 크론 병변의 근위 부위인 회장-맹장 접합부에 고농도로 전달됨을 입증하기 위한 것이었다.
말단 회장루 주머니를 장착한 4명의 인간 자원자에게 각각 미니-정제 내부 크기 00 캡슐(총 9개 캡슐)로 제형화된 단일 경구 용량의 1665 ㎎ ICVD를 제공하였다. 달리는 건강한 이들 개인에서, 상기 말단 회장의 전체 내용물은 탈착 가능한 외부 주머니내로 배액된다. 각각의 투여-후 시간당 시점에서, 전체 회장 유출물을 함유하는 상기 장착된 주머니를 제거하고, 동결시키고, 새로운 주머니를 장착시켰다. 회장루 샘플을 상기 방식으로 투여후 12시간의 기간동안 매시간 수집하였다. 이어서, 회장루 샘플을 투여후 24시간까지 매시간마다 수집하였다. 투여-전 샘플(-1일)을 또한 대조용으로서 채취하였다. 상기 주머니에서 관찰된 모든 부분적으로 용해된 미니-정제를, 오직 완전 용해성 ICVD만을 분석하기 위해서 분석전에 제거하였다. 상기 ICVD를 상기 회장액으로부터 추출하고 활성 ICVD의 농도를, 1 g 회장액이 1 ㎖ 액체 부피와 동등한 것으로 가정하여, 기능성 ELISA에 의해 측정하였다.
상기 데이터는 200 nM에서 1 mM 범위로 상기 회장루 주머니 중에 존재하는 고농도의 활성 ICVD를 밝혀내었다. 또한, 각각의 피실험자에 대해서 수시간의 주머니 교환에 걸쳐 고농도가 관찰되었다(표 5 참조).
피실험자 투여후 시간 회장액 중 ICVD 농도(nM)
31001 2 406350
31001 3 305560
31001 4 791
31002 2 32780
31002 3 1130000
31002 4 792060
31002 5 81750
31002 6 12780
31002 7 1300
31002 8 422
31002 9 1410
31002 10 7520
31002 11 10080
31002 12 9210
31002 16 6980
31003 3 1060000
31003 4 496030
31003 5 7080
31003 8 46110
31003 9 75480
31003 10 16030
31003 11 72940
31003 12 15870
31003 16 881
31004 2 126190
31004 3 235
31004 4 11110
31004 5 3770
31004 6 6730
ICVD는 임의의 피실험자로부터의 투여전(-1일) 샘플 중 어느 것에서도 검출되지 않았다.
요약하면, 약학적으로 활성인 결합 폴리펩티드의 지속적이고 높은 농도가 이들 인간 자원자의 회장-맹장 접합부에서 성취되었다.
7.2 대변 중 폴리펩티드 농도
18 내지 45세의 건강한 남성 피실험자에게 실시예 1에 상세히 기재된 조성물을 사용하여 단일 용량의 62, 555, 1665 또는 4995 ㎎의 ICVD를 경구 투여하였다. 피실험자당 각각의 단일 용량을 1일째에 8:30 내지 12:00에 투여하였다. 대변 샘플을 투여전(-1일째, 또는 1일째 투여 전) 및 투여후부터 4일(연구의 끝) 아침까지 모든 가능한 시간에 수집하였다. ICVD를 상기 대변으로부터 추출하고 활성 ICVD의 농도를, 1 g 대변이 1 ㎖ 액체 부피와 동등한 것으로 가정하여, 기능성 ELISA에 의해 측정하였다.
180 nM 내지 724 μM 범위의 높은 농도가 피실험자의 대변에서 획득되었다(표 6 참조).
피실험자 ID ICVD 용량 ㎎ 대변 샘플
수집일 		투여전 또는 투여후 대변 중 [ICVD](nM)
11001 62 -1 투여전 0
11001 　 1 투여후 1013
13001 555 -1 투여전 0
13001 　 2 투여후 1052
13003 555 -1 투여전 0
13003 　 1 투여후 1938
13003 　 2 투여후 1511
14002 1665 -1 투여전 0
14002 　 1 투여후 5491
14002 　 2 투여후 558
14004 1665 -1 투여전 0
14004 　 2 투여후 27532
14006 1665 -1 투여전 0
14006 　 2 투여후 62579
15001 4995 -1 투여전 0
15001 　 1 투여후 10047
15001 　 2 투여후 135285
15001 　 3 투여후 330
15004 4995 -1 투여전 0
15004 　 3 투여후 273
15005 4995 1 투여전 0
15005 　 1 투여후 724684
15005 　 2 투여후 258703
15005 　 3 투여후 3536
15006 4995 -1 투여전 0
15006 　 1 투여후 57120
15006 　 2 투여후 358
15006 　 2 투여후 186
크론병의 치료에 임상적으로 사용되는 항-TNF제, 예를 들어 아달리무맵(휴미라) 및 인플릭시맵(레미케이드(Remicade))을 정맥내 주입 또는 피하 주사에 의해 투여한다. 문헌[Ungar et al. (2016) Clin Gastroenterol Hepatol. 14(4):550-557]은 IBD 환자의 80%-90%에서 점막 치유를 성취하기 위해 아달리무맵의 경우 56-83 nM(8-12 ㎍/㎖) 및 인플릭시맵의 경우 42-70 nM(6-10 ㎍/㎖)의 최저 혈청 수준이 요구되며 이를 "치료창"으로서 간주할 수 있음을 서술한다. 상기 최저 혈청 수준을 또한 도 7에서 상기 6.1하에서 설정된 키노몰구스 원숭이 위장관 섹션 중 산정된 관강 항-TNF-알파 ICVD 농도에 관하여 나타낸다.
7.1 및 7.2에 상세히 기재된 임상 연구 동안 인간 자원자의 회장-맹장 접합부에 전달되고 대변에서 회수된 항-TNF-알파 ICVD의 농도는 상기 수준보다 현저하게 더 높았으며 따라서 상기는 크론병에 대한 치료제로서 유효한 것으로 예상된다. 이는 항-TNF-알파 ICVD의 장 관강 농도가 장 점막 및 점막-하로의 접근/침투에 관하여 시판되는 항-TNF제의 혈청 농도에 필적함을 가정한다. 그러나, 추가의 실험 연구(도시 안 됨)에서 DSS 결장염 마우스에서 경구 투여된 본 발명의 상기 항-TNF-알파 ICVD는 마우스에서 표적(TNF) 관여가 없음에도 불구하고 점막고유층(여기에서 수시간 동안 상주한다)에 침투할 수 있음이 입증되었다.
상기 7.1하에 제공된 데이터와 함께, 이러한 결과는 회장-맹장 접합부로부터 항문으로의 치료학적 수준의 ICVD의 성공적인 전달을 입증한다.
실시예 8: 인간에의 투여: 면역원성 연구
치료 항체를 포함한 단백질 약물은 환자에서 항체 반응을 이끌어낼 수 있다. 단백질 약물의 에피토프를 인식한 환자에서 생성된 항체(다중 Ig 부류의)를 항-약물 항체(ADA)라 칭한다. ADA의 존재는 약물 효능/역가의 상실 또는 부작용을 생성시킬 수 있다(van Schie et al., 2015).
인간에서 본 발명 조성물의 지속적인 경구 투여가 ADA 반응을 이끌어낼 수 있는지의 여부를 평가하기 위한 연구를 수행하였다. 18-45세의 건강한 남성 피실험자에게 실시예 1에 따라 미니-정제로 제형화된, 1665 ㎎(하루에 총 4995 ㎎) ICVD 또는 위약을 함유하는 캡슐을 14일 동안 매일 3회 경구 투여하였다. 피실험자로부터의 혈청 샘플을 투여 전, 투여-후 7 및 14일째 및 최종적으로 28일째(치료 중지후 14일째)에 채취하였다. 이들 샘플을 ICVD 항-약물 항체(ADA)의 존재에 대해 샌드위치 ELISA에 의해 분석하였다. 상기 분석은 4명의 자원자(이 중 2명은 위약을 수용하였다)로부터, 낮은 역가이지만, ADA 양성 혈청을 밝혀내었다. 이들 개인 모두에서 ADA가 ICVD 투여 전의(기존 ADA) 약간의 수준으로 존재하였다.
TNF-TNFR2 ELISA에서 ICVD 효능의 분석은 TNF-알파에 대한 ICVD 활성이 5%의 모든 ADA-양성 인간 혈청 샘플의 존재에 의해 영향을 받지 않음을 밝혀내었다. 따라서, ADA를 중화시키는 ICVD의 증거는 임의의 자원자의 혈청에서 임의의 시점에서 발견되지 않았다(표 7 참조).
피실험자 ID 활성 또는 위약 샘플 ADA 샌드위치 ELISA 선별 ADA
역가/혈청 희석 		ICVD
중화
21001 활성 투여전 음성 　 　
21001 활성 7일째 음성 　 　
21001 활성 14일째 음성 　 　
21001 활성 28일째 음성 　 　
21002 활성 투여전 음성 　 　
21002 활성 7일째 음성 　 　
21002 활성 14일째 음성 　 　
21002 활성 28일째 음성 　 　
21003 활성 투여전 음성 　 　
21003 활성 7일째 음성 　 　
21003 활성 14일째 음성 　 　
21003 활성 28일째 음성 　 　
21004 위약 투여전 양성 64 없음
21004 위약 7일째 양성 64 없음
21004 위약 14일째 양성 64 없음
21004 위약 28일째 양성 64 없음
21005 활성 투여전 양성 64 없음
21005 활성 7일째 양성 32 없음
21005 활성 14일째 양성 32 없음
21005 활성 28일째 양성 32 없음
21006 활성 투여전 음성 　 　
21006 활성 7일째 음성 　 　
21006 활성 14일째 음성 　 　
21006 활성 28일째 음성 　 　
21007 활성 투여전 음성 　 　
21007 활성 7일째 음성 　 　
21007 활성 14일째 음성 　 　
21007 활성 28일째 음성 　 　
21008 활성 투여전 양성 4 없음
21008 활성 7일째 양성 4 없음
21008 활성 14일째 양성 8 없음
21008 활성 28일째 양성 128 없음
21009 위약 투여전 양성 8 없음
21009 위약 7일째 양성 8 없음
21009 위약 14일째 양성 16 없음
21009 위약 28일째 양성 8 없음
21010 활성 투여전 음성 　 　
21010 활성 7일째 음성 　 　
21010 활성 14일째 음성 　 　
21010 활성 28일째 음성 　 　
실시예 9: 동결건조에 대한 대안으로서 분무 건조
예시된 조성물에 사용된 ICVD를 초기에, 본 발명의 조성물에 통합시키기 전에, 동결건조 대신에 분무 건조에 의해 제조할 수 있음을 확인하기 위한 연구를 수행하였다.
분무 건조를 수행하기 위해서 상기 ICVD를 함유하는 용액을 분무기를 통해 공급하여 분무를 생성시키고, 이를 적합한 기체 스트림에 노출시켜 신속한 증발을 촉진한다. 충분한 액체 질량이 휘발되었을 때, 소적 중 남아있는 고체 물질은 개별적인 입자를 형성하며, 이를 필터 또는 사이클론을 사용하여 상기 기체 스트림으로부터 분리시킨다.
ICVD 용액의 3,000 ㎖ 샘플을 상기 분무-건조 공정에 사용하였다. 상기는 20 mM 나트륨 아세테이트 중의 대략 22 ㎎/㎖ ICVD의 용액으로 이루어졌다(3,000 ㎖의 20 mM 나트륨 아세테이트(MWt 82.0)는 4.92 g의 고체와 동일하다. 3000 ㎖ 중의 22 ㎎/㎖ ICVD는 66 g과 동일하다. 따라서 총 고체는 70.92 g이며, 이 중 93.1%는 ICVD이다). 상기 소량의 완충제 성분은 상기 분무 건조 공정 또는 상기 약물 물질 특성에 영향을 미치는 것으로 간주되지 않는다.
상기 사용된 공정 조건의 세부사항을 하기 표 8에 제공한다. 80.4 g의 분무-건조된 물질을 4.4%의 수 함량으로 수집하였다. 따라서 상기는 76.86 g의 건조 물질(대략 66 g의 ICVD, 4.92 g의 나트륨 아세테이트 + 잔량의 염, 탄수화물 및 숙주 세포 단백질로 이루어진다)을 함유하였다.
배치 크기 (㎖) 3,000
노즐 유형 2-유동
분무압 (psig) 10
액체 흐름 (g/분) 10
건조 기체 흐름 (g/분) 500
유입구 온도 (℃) 145
유출구 온도 (℃) 60
유출구 상대 습도 (%) 15.8
수집된 건조 분말 (g) 80.4
노즐 세부사항: 스프레잉 시스템스(Spraying Systems) ¼ J 시리즈, 1650/64 액체 캡/공기 캡
상기 분무-건조된 물질로부터의 미니-정제의 제조는 동결건조된 물질에 대해 상기에 논의된 표준 공정을 따랐다. 분무-건조된 물질을 소량으로 입수할 수 있고 따라서 생성된 미니-정제의 수로 인해, 상기를 유사한 크기의 위약 미니-정제로 더 부풀려야 했다. 상기 위약 미니-정제를 갈색으로 착색하여 상기를 상기 분무-건조된 정제와 구별하였다. 먼저 HPMC 베이스로 코팅하고 이어서 유드라지트 장용 코트로 코팅시 상기 위약의 갈색 착색은 불충분한 대조를 나타내었으며 상기 위약을 활성물질과 구별하기가 어려워졌다. 결과적으로, 상기가 '과-코팅되지' 않도록 하기 위해서 대략 18%의 중량 증가가 성취된 후(25% 중량 증가의 표적에 대해)에 상기 장용 코팅을 중단하였다.
상기 분무-건조된 물질로부터 생성된 15개 미니-정제를 00 크기 불투명 분홍 HPMC 캡슐에 충전시켜, 벌크화를 위한 위약 미니-정제와 함께 공칭 용량의 185 ㎎ ICVD를 제공하였다.
시험을 상기 미니-정제상에서 수행하였으며 결과를 하기 표 9에 상세히 기재한다.
시험 결과
붕해(산 중에서) 미니-정제가 2시간 후에 완전하게 남아있는다
붕해(포스페이트 완충제 중에서) 1시간 후에 충분히 붕해된다.
RP-HPLC에 의한 함량 99%
RP-HPLC에 의한 순도 92%
ELISA에 의한 ICVD 정량분석 125.1%
SDS-PAGE에 의한 ICVD 순도 100%
또한, 상기 동적인 용해 시험을 수행하였다. 상기 분무-건조된 물질을 사용하여 생성시킨 미니-정제의 용해 프로파일을 앞서 동결건조된 물질을 사용하여 생성시킨 미니-정제의 경우와 비교하였다(도 12).
상기 분무-건조된 물질에 대한 용해 데이터는 예상된 바와 같이 일단 매질의 pH가 상승했을 때 코트가 제거되기 전 최적의 지연 시간을 충족시키지 않았다. 이는 상기 미니-정제상의 표적 코트보다 더 얇은 것에 기인하였다. 이 때문에, 동결건조된 및 분무 건조된 샘플 모두에 대한 도 12의 곡선들은 T=0가 상기 두 경우 모두에서 방출의 시작이도록 상쇄되었다. 일단 상기 코트가 제거되면 상기 분무-건조에 의해 제조된 미니-정제 코어로부터의 ICVD의 방출 프로파일은 동결건조에 의해 제조된 미니-정제 코어로부터의 ICVD에 필수적으로 필적하였다.
요약하면, 상기 분무-건조된 물질은 미니-정제를 제조하기 위한 슬러깅 및 압축 단계에서 잘 가공되었으며 특히 생성된 건조-과립 물질은 양호한 유동 특성을 갖는다는 결론이 내려졌다. 더욱 또한, 상기 분무 건조된 물질로부터 생성된 미니-정제의 동적인 용해 프로파일의 약물 방출 부분은 필수적으로, 동결건조된 물질로부터 생성된 미니-정제의 경우에 필적하였다.
본 명세서 및 하기의 특허청구범위 전체를 통해서, 문맥상 달리 요구되지 않는 한, '포함하다'란 단어 및 '포함하는'과 같은 어미변형은 서술된 정수, 단계, 정수들의 그룹 또는 단계들의 그룹을 포함하지만 임의의 다른 정수, 단계, 정수들의 그룹 또는 단계들의 그룹을 제외하지 않음을 의미하는 것으로 이해될 것이다. 본 발명의 명세서 전체를 통해 언급된 모든 특허 및 특허 출원은 내용 전체가 본 명세서에 참고로 인용된다. 본 발명은 바람직한 및 보다 바람직한 그룹들 및 적합한 및 보다 적합한 그룹들 및 상기 언급한 그룹들의 실시태양들의 모든 조합을 포함한다.
참고 문헌
Binz et al Journal of Molecular Biology 332(2):489-503
Fadda H M et al Int J Pharm 2009 382(1-2):56-60
Garbacz et al European journal of pharmaceutical sciences 2014 51:224-231
Green and Sambrook Molecular Cloning: A Laboratory Manual 2012 4th Edition Cold Spring Harbour Laboratory Press
Goyanes et al Int J Pharm 2015 484(1-2):103-108
Griffiths et al Antibodies 2013 2:66-81
Hamers-Casterman et al Nature 1993 363(6428):446-448
Harmsen et al 2006 Applied Microbiology and Biotechnology 72(3):544-551
Hendrickson et al Clin Microbiol Rev 2002 15(1):79-94
Hussack et al 2011 PLOS ONE 6(11):e28218
Hussan et al 2012 IOSR Journal of Pharmacy 2(6):2319-4219
Kabat et al Sequences of Proteins of Immunological Interest, Fifth Edition U.S. Department of Health and Human Services, 1991 NIH Publication Number 91-3242
McCoy et al Retrovirology 2014 11:83
Merchant et al Int J Pharm 2014 475(1-2):585-591
Michael Immunol Invest 1989 18(9-10):1049-54
Muyldermans et al Protein Eng 1994 7(9):1129-1135
Muyldermans Annu Rev Biochem 2013 82:775-797
Padlan Mol Immunol 1994 31:169-217
Roux et al Proc Natl Acad Sci USA 1998 95:11804-11809
Ungar et al Clin Gastroenterol Hepatol. 2016 14(4):550-557
van Schie et al., Ann Rheum Dis 2015 74:311-314
Ward et al., Nature 1989 341(6242):544-546
Ordas et al. 2012. Clin Pharmacol Ther. 91(4). 635-46
Guerra and Bermejo 2014 Clin Exp Gastroenterol. 7: 359-367
SEQUENCE LISTING <110> VHsquared Limited <120> COMPOSITIONS <130> IPA181031-GB <150> EP16163178.3 <151> 2016-03-31 <150> PCT/EP2017/057775 <151> 2017-03-31 <160> 28 <170> BiSSAP 1.3 <210> 1 <211> 115 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Q62E10 <400> 1 Gln Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly 1 5 10 15 Ser Leu Arg Leu Ser Cys Thr Thr Ser Gly Leu Asp Phe Gly Ile His 20 25 30 Trp Met Tyr Trp Phe Arg Gln Ala Pro Gly Lys Glu Leu Glu Trp Val 35 40 45 Ala Glu Ile Asn Thr Asn Ala Leu Ile Thr Lys Tyr Ala Asp Ser Val 50 55 60 Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Thr Leu Phe 65 70 75 80 Leu Gln Met Asn Asp Leu Lys Ser Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95 Ser Asn Thr Gln Asn Gly Ala Ala Lys Gly Gln Gly Val Gln Val Thr 100 105 110 Val Ser Ser 115 <210> 2 <211> 115 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Q65F2 <400> 2 Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly 1 5 10 15 Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Asp 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85 90 95 Ala Arg Asn Gln Lys Gly Leu Asn Lys Gly Gln Gly Thr Gln Val Thr 100 105 110 Val Ser Ser 115 <210> 9 <211> 115 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Q65C7 <400> 9 Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Arg 1 5 10 15 Ser Leu Arg Leu Ser Cys Thr Ala Ser Gly Phe Asp Phe Ser Ser His 20 25 30 Trp Met Tyr Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val 35 40 45 Ser Glu Ile Asn Thr Asn Gly Leu Ile Thr Lys Tyr Ala Asp Phe Val 50 55 60 Lys Gly Arg Phe Thr Val Ser Arg Asp Asn Ala Ala Asn Thr Leu Tyr 65 70 75 80 Leu Glu Ile Thr Arg Leu Glu Pro Glu Asp Thr Ala Leu Tyr Tyr Cys 85 90 95 Ala Arg Asn Gln Lys Gly Leu Asn Lys Gly Gln Gly Thr Gln Val Thr 100 105 110 Val Ser Ser 115 <210> 10 <211> 115 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Q65D3 <400> 10 Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly 1 5 10 15 Ser Leu Arg Leu Ser Cys Val Ala Ser Gly Phe Asp Phe Ser Ser His 20 25 30 Trp Met Tyr Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu 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Sequence <220> <223> Q65F6 <400> 12 Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly 1 5 10 15 Ser Leu Arg Leu Ser Cys Thr Ala Ser Gly Phe Asp Phe Gly Ile His 20 25 30 Trp Met Tyr Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Glu Leu Glu Trp Val 35 40 45 Ala Glu Ile Asn Thr Asn Gly Leu Ile Thr Leu Tyr Ser Asp Ser Val 50 55 60 Arg Gly Arg Phe Thr Ala Ser Arg Asp Asn Ala Asn Asn Ala Leu Phe 65 70 75 80 Leu Gln Met Asn Asp Leu Lys Phe Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95 Ala Lys Ser Arg Asn Gly Ala Ala Lys Gly Gln Gly Thr Gln Val Thr 100 105 110 Val Ser Ser 115 <210> 13 <211> 115 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Q65F11 <400> 13 Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly 1 5 10 15 Ser Leu Arg Leu Ser Cys Thr Ala Ser Gly Phe Asp Phe Gly Ile His 20 25 30 Trp Met Tyr Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Glu Leu Glu Trp Val 35 40 45 Ala Glu Ile Asn Thr Asn Gly Leu Ile Thr Leu Tyr Ser Asp Ser Val 50 55 60 Arg Gly Arg Phe Thr Ala Ser Arg Asp Asn Ala Asn Asn 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Gly Phe Pro Phe Asp Ile His 20 25 30 Trp Met Tyr Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Glu Leu Glu Trp Val 35 40 45 Ala Glu Ile Asn Thr Asn Ala Leu Ile Thr Thr Tyr Ala Asp Ser Val 50 55 60 Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Thr Leu Phe 65 70 75 80 Leu Gln Met Asn Asp Leu Lys Phe Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95 Thr His Ser Arg Asn Gly Ala Ala Lys Gly Gln Gly Thr Gln Val Thr 100 105 110 Val Ser Ser 115 <210> 16 <211> 115 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Q65A6 <400> 16 Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly 1 5 10 15 Ser Leu Arg Leu Ser Cys Thr Ala Ser Gly Leu Asp Phe Gly Ile His 20 25 30 Trp Met Tyr Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Glu Leu Glu Trp Val 35 40 45 Ala Glu Ile Asn Thr Asn Gly Leu Ile Thr His Tyr Thr Asp Ser Val 50 55 60 Ser Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Thr Leu Phe 65 70 75 80 Leu Gln Met Asn Asp Leu Lys Phe Glu Asp Thr Ala Val Tyr Ala Cys 85 90 95 Ala Thr Ser Arg Asn Gly Ala Ala Lys Gly Gln Gly Thr Gln Val Thr 100 105 110 Val Ser Ser 115 <210> 17 <211> 115 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Q65A3 <400> 17 Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly 1 5 10 15 Ser Leu Arg Pro Ser Cys Thr Thr Ser Gly Leu Asp Phe Gly Ile His 20 25 30 Trp Met Tyr Trp Phe Arg Gln Ala Pro Gly Lys Glu Leu Glu Trp Val 35 40 45 Ala Glu Ile Asn Thr Asn Ala Leu Ile Thr Lys Tyr Ala Asp Ser Val 50 55 60 Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Thr Leu Phe 65 70 75 80 Leu Gln Met Asn Asp Leu Lys Ser Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95 Ser Asn Thr Gln Asn Gly Ala Ala Lys Gly Gln Gly Val Gln Val Thr 100 105 110 Val Ser Ser 115 <210> 18 <211> 115 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Q62F10 <400> 18 Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly 1 5 10 15 Ser Leu Arg Leu Ser Cys Val Ala Ser Gly Phe Asp Phe Asn Ile His 20 25 30 Trp Met Tyr Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Glu Leu Glu Trp Val 35 40 45 Ala Glu Ile Asn Thr Asn Gly Leu Ile Thr Val Tyr Pro Asp Ser Val 50 55 60 Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Thr Leu Phe 65 70 75 80 Leu Gln Met Asn Asn Leu Lys Phe Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95 Thr Asn Thr Gln Asn Gly Lys Thr Lys Gly Gln Gly Thr Gln Val Thr 100 105 110 Val Ser Ser 115 <210> 19 <211> 115 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> ID7F-EV <400> 19 Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Ala 1 5 10 15 Ser Leu Lys Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Asp Phe Ser Ser His 20 25 30 Trp Met Tyr Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Glu Leu Glu Trp Leu 35 40 45 Ser Glu Ile Asn Thr Asn Gly Leu Ile Thr Lys Tyr Gly Asp Ser Val 50 55 60 Lys Gly Arg Phe Thr Val Ser Arg Asn Asn Ala Ala Asn Lys Met Tyr 65 70 75 80 Leu Glu Leu Thr Arg Leu Glu Pro Glu Asp Thr Ala Leu Tyr Tyr Cys 85 90 95 Ala Arg Asn Gln Lys Gly Leu Asn Lys Gly Gln Gly Thr Gln Val Thr 100 105 110 Val Ser Ser 115 <210> 20 <211> 115 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> ID8F-EV <400> 20 Glu Val Gln Leu Val Glu 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Asp Thr Ala Leu Tyr Tyr Cys 85 90 95 Ala Arg Asn Gln Lys Gly Leu Asn Lys Gly Gln Gly Thr Gln Val Thr 100 105 110 Val Ser Ser 115 <210> 22 <211> 115 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> ID13F-EV <400> 22 Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly 1 5 10 15 Ser Leu Lys Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Asp Phe Ser Ser His 20 25 30 Trp Met Tyr Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Glu Leu Glu Trp Leu 35 40 45 Ser Glu Ile Asn Thr Asn Gly Leu Ile Thr Lys Tyr Gly Asp Ser Val 50 55 60 Lys Gly Arg Phe Thr Val Ser Arg Asn Asn Ala Ala Asn Lys Met Tyr 65 70 75 80 Leu Glu Leu Thr Arg Leu Glu Pro Glu Asp Thr Ala Leu Tyr Tyr Cys 85 90 95 Ala Arg Asn Gln His Gly Leu Asn Lys Gly Gln Gly Thr Gln Val Thr 100 105 110 Val Ser Ser 115 <210> 23 <211> 115 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> ID14F-EV <400> 23 Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly 1 5 10 15 Ser Leu Lys Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Asp Phe Ser Ser His 20 25 30 Trp Met Tyr Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Glu Leu Glu Trp Leu 35 40 45 Ser Glu Ile Asn Thr Asn Gly Leu Ile Thr Lys Tyr Gly Asp Ser Val 50 55 60 Lys Gly Arg Phe Thr Val Ser Arg Asn Asn Ala Ala Asn Lys Met Tyr 65 70 75 80 Leu Glu Leu Thr Arg Leu Glu Pro Glu Asp Thr Ala Leu Tyr Tyr Cys 85 90 95 Ala Arg Asn Gln Lys Gly Leu Asn His Gly Gln Gly Thr Gln Val Thr 100 105 110 Val Ser Ser 115 <210> 24 <211> 115 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> ID15F-EV <400> 24 Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly 1 5 10 15 Ser Leu Lys Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Asp Phe Ser Ser His 20 25 30 Trp Met Tyr Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Glu Leu Glu Trp Leu 35 40 45 Ser Glu Ile Asn Thr Asn Gly Leu Ile Thr Lys Tyr Gly Asp Ser Val 50 55 60 Lys Gly Arg Phe Thr Val Ser Arg Asn Asn Ala Ala Asn Lys Met Tyr 65 70 75 80 Leu Glu Leu Thr Arg Leu Glu Pro Glu Asp Thr Ala Leu Tyr Tyr Cys 85 90 95 Ala Arg Asn Gln His Gly Leu Asn His Gly Gln Gly Thr Gln Val Thr 100 105 110 Val Ser Ser 115 <210> 25 <211> 115 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Q62E10-DVQLV <400> 25 Asp Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly 1 5 10 15 Ser Leu Arg Leu Ser Cys Thr Thr Ser Gly Leu Asp Phe Gly Ile His 20 25 30 Trp Met Tyr Trp Phe Arg Gln Ala Pro Gly Lys Glu Leu Glu Trp Val 35 40 45 Ala Glu Ile Asn Thr Asn Ala Leu Ile Thr Lys Tyr Ala Asp Ser Val 50 55 60 Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Thr Leu Phe 65 70 75 80 Leu Gln Met Asn Asp Leu Lys Ser Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95 Ser Asn Thr Gln Asn Gly Ala Ala Lys Gly Gln Gly Val Gln Val Thr 100 105 110 Val Ser Ser 115 <210> 26 <211> 115 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> ID34F <400> 26 Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly 1 5 10 15 Ser Leu Lys Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Asp Phe Ser Ser His 20 25 30 Trp Met Tyr Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Glu Leu Glu Trp Leu 35 40 45 Ser Glu Ile Asn Thr Asn Gly Leu Ile Thr His Tyr Gly Asp Ser Val 50 55 60 Lys Gly Arg Phe Thr Val Ser Arg Asn Asn Ala Ala Asn Lys Met Tyr 65 70 75 80 Leu Glu Leu Thr Arg Leu Glu Pro Glu Asp Thr Ala Leu Tyr Tyr Cys 85 90 95 Ala Arg Asn Gln His Gly Leu Asn Lys Gly Gln Gly Thr Gln Val Thr 100 105 110 Val Ser Ser 115 <210> 27 <211> 115 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> ID37F <400> 27 Asp Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly 1 5 10 15 Ser Leu Lys Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Asp Phe Ser Ser His 20 25 30 Trp Met Tyr Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Glu Leu Glu Trp Leu 35 40 45 Ser Glu Ile Asn Thr Asn Gly Leu Ile Thr His Tyr Gly Asp Ser Val 50 55 60 Lys Gly Arg Phe Thr Val Ser Arg Asn Asn Ala Ala Asn Lys Met Tyr 65 70 75 80 Leu Glu Leu Thr Arg Leu Glu Pro Glu Asp Thr Ala Leu Tyr Tyr Cys 85 90 95 Ala Arg Asn Gln Lys Gly Leu Asn Lys Gly Gln Gly Thr Gln Val Thr 100 105 110 Val Ser Ser 115 <210> 28 <211> 115 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> ID38F <400> 28 Asp Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly 1 5 10 15 Ser Leu Lys Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Asp Phe Ser Ser His 20 25 30 Trp Met Tyr Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Glu Leu Glu Trp Leu 35 40 45 Ser Glu Ile Asn Thr Asn Gly Leu Ile Thr His Tyr Gly Asp Ser Val 50 55 60 Lys Gly Arg Phe Thr Val Ser Arg Asn Asn Ala Ala Asn Lys Met Tyr 65 70 75 80 Leu Glu Leu Thr Arg Leu Glu Pro Glu Asp Thr Ala Leu Tyr Tyr Cys 85 90 95 Ala Arg Asn Gln His Gly Leu Asn Lys Gly Gln Gly Thr Gln Val Thr 100 105 110 Val Ser Ser 115

Claims (57)

  1. 압축된 코어(compressed core)를 포함하는, 약학적으로 활성인 결합 폴리펩티드를 경구 투여에 의해 장관 영역에 전달하기 위한 고형 약학 조성물로, 상기 압축된 코어가 약학적으로 활성인 결합 폴리펩티드를 포함하고 상기 압축된 코어가 pH 민감성 장용 코팅으로 코팅되는 고형 약학 조성물.
  2. 압축된 코어를 포함하는, 장관 영역에의 경구 투여에 의해 상기 장관의 질병의 치료에 사용하기 위한 고형 약학 조성물로서, 상기 압축된 코어가 약학적으로 활성인 결합 폴리펩티드를 포함하고 상기 압축된 코어가 pH 민감성 장용 코팅(enteric coating)으로 코팅되는 고형 약학 조성물.
  3. 압축된 코어를 포함하는, 장관 영역에의 경구 투여에 의해 상기 장관의 질병의 치료에 사용하기 위한 고형 약학 조성물로서, 상기 압축된 코어가
    (i) 상기 코어의 중량에 대한 중량을 기준으로 40-75%로 존재하는 약학적으로 활성인 결합 폴리펩티드,
    (ii) 하나 이상의 압축 보조제,
    (iii) 하나 이상의 붕해제
    를 포함하고, 상기 압축된 코어가 pH 민감성 장용 코팅으로 코팅되는 고형 약학 조성물.
  4. 압축된 코어를 포함하는, 장관 영역에의 경구 투여에 의해 상기 장관의 질병의 치료에 사용하기 위한 고형 약학 조성물로서, 상기 압축된 코어가
    (iv) 상기 코어의 중량에 대한 중량을 기준으로 40-75%로 존재하는 약학적으로 활성인 결합 폴리펩티드,
    (v) 상기 코어의 중량에 대한 중량을 기준으로 20-55%로 존재하는 하나 이상의 압축 보조제,
    (vi) 상기 코어의 중량에 대한 중량을 기준으로 2-6%로 존재하는 하나 이상의 붕해제
    를 포함하고, 상기 압축된 코어가 pH 민감성 장용 코팅으로 코팅되는 고형 약학 조성물.
  5. 약학적으로 활성인 결합 폴리펩티드를 장관 영역에 경구 투여에 의해 전달하기 위한, 하나 이상의 미니정제(minitablet)를 포함하는 캡슐로서, 상기 미니정제가 압축된 코어를 포함하고, 상기 압축된 코어가 약학적으로 활성인 결합 폴리펩티드를 포함하며, 상기 압축된 코어가 pH 민감성 장용 코팅으로 코팅되는 캡슐.
  6. 압축된 코어를 포함하는 고형 약학 조성물을 경구로 투여함을 포함하는, 약학적으로 활성인 결합 폴리펩티드를 장관 영역에 전달하는 방법으로서, 상기 압축된 코어가 약학적으로 활성인 결합 폴리펩티드를 포함하고 상기 압축된 코어가 pH 민감성 장용 코팅으로 코팅되는 방법.
  7. 제1항 내지 제6항 중 어느 한 항에 있어서,
    pH 민감성 장용 코팅이 장관 영역에 노출시 약학적으로 활성인 결합 폴리펩티드를 방출시키는 약학 조성물, 사용하기 위한 약학 조성물, 캡슐 또는 방법.
  8. 제1항 내지 제7항 중 어느 한 항에 있어서,
    장관 영역이 십이지장, 공장, 회장, 맹장, 결장, 직장 및 항문관 중 적어도 하나로부터 선택된 영역과 같은 소장 및/또는 대장의 영역인 약학 조성물, 사용하기 위한 약학 조성물, 캡슐 또는 방법.
  9. 제1항 내지 제8항 중 어느 한 항에 있어서,
    압축된 코어와 pH 민감성 장용 코팅 사이에 서브-코팅을 또한 포함하는 약학 조성물, 사용하기 위한 약학 조성물, 캡슐 또는 방법.
  10. 제9항에 있어서,
    서브-코팅이 하이드록시프로필메틸셀룰로스를 포함하거나 또는 상기로 이루어지는 약학 조성물, 사용하기 위한 약학 조성물, 캡슐 또는 방법.
  11. 제1항, 제2항 및 제5항 내지 제10항 중 어느 한 항에 있어서,
    압축된 코어가 적어도 하나의 부형제를 포함하는 약학 조성물, 사용하기 위한 약학 조성물, 캡슐 또는 방법.
  12. 제11항에 있어서,
    적어도 하나의 부형제가
    (i) 하나 이상의 압축 보조제,
    (ii) 하나 이상의 붕해제,
    (iii) 하나 이상의 윤활제,
    (iv) 하나 이상의 활주제,
    (v) 하나 이상의 희석제 및
    (vi) 하나 이상의 결합제
    중 하나 이상으로부터 선택되는 약학 조성물, 사용하기 위한 약학 조성물, 캡슐 또는 방법.
  13. 제12항에 있어서,
    하나 이상의 압축 보조제를 포함하고, 상기 하나 이상의 압축 보조제가 합성 중합체, 예를 들어 크로스포비돈, 사카라이드, 예를 들어 슈크로스, 글루코스, 락토스 및 프럭토스, 당 알콜, 예를 들어 만니톨, 자일리톨, 말티톨, 에리쓰리톨, 솔비톨, 수용성 폴리사카라이드, 예를 들어 셀룰로스, 예를 들어 결정질 셀룰로스, 미정질 셀룰로스, 분말화된 셀룰로스, 하이드록시프로필셀룰로스 및 메틸 셀룰로스, 전분, 합성 중합체, 예를 들어 폴리비닐피롤리돈, 나트륨 전분 글리콜레이트, 크로스포비돈 및 무기 화합물, 예를 들어 칼슘 카보네이트로 이루어지는 목록 중에서 선택되는 약학 조성물, 사용하기 위한 약학 조성물, 캡슐 또는 방법.
  14. 제12항 또는 제13항에 있어서,
    하나 이상의 압축 보조제를 포함하고, 상기 하나 이상의 압축 보조제가 코어의 중량에 대한 중량을 기준으로 20-55%, 예를 들어 30-40%로 존재하는 약학 조성물, 사용하기 위한 약학 조성물, 캡슐 또는 방법.
  15. 제12항 내지 제14항 중 어느 한 항에 있어서,
    하나 이상의 압축 보조제를 포함하고, 상기 하나 이상의 압축 보조제가 과립-내 또는 과립-외에 있는 약학 조성물, 사용하기 위한 약학 조성물, 캡슐 또는 방법.
  16. 제12항 내지 제15항 중 어느 한 항에 있어서,
    하나 이상의 붕해제를 포함하고, 상기 하나 이상의 붕해제가 카복시메틸 셀룰로스, 나트륨 카복시메틸 셀룰로스, 크로스카멜로스 나트륨, 셀룰로스, 예를 들어 저치환도 하이드록시프로필셀룰로스, 전분, 예를 들어 나트륨 카복시메틸 전분, 하이드록시프로필 전분, 쌀 전분, 밀 전분, 감자 전분, 옥수수 전분, 부분적으로 예비젤라틴화된 전분으로 이루어지는 목록 중에서 선택되는 약학 조성물, 사용하기 위한 약학 조성물, 캡슐 또는 방법.
  17. 제12항 내지 제16항 중 어느 한 항에 있어서,
    하나 이상의 붕해제를 포함하고, 상기 하나 이상의 붕해제가 코어의 중량에 대한 중량을 기준으로 2-6%, 예를 들어 약 4%로 존재하는 약학 조성물, 사용하기 위한 약학 조성물, 캡슐 또는 방법.
  18. 제12항 내지 제17항 중 어느 한 항에 있어서,
    하나 이상의 붕해제를 포함하고, 상기 하나 이상의 붕해제가 과립-내 또는 과립-외에 있는 약학 조성물, 사용하기 위한 약학 조성물, 캡슐 또는 방법.
  19. 제12항 내지 제18항 중 어느 한 항에 있어서,
    하나 이상의 윤활제를 포함하고, 상기 하나 이상의 윤활제가 글리세릴 베헤네이트, 스테아르산염, 예를 들어 칼슘 스테아레이트; 마그네슘 스테아레이트; 아연 스테아레이트, 무기 오일, 폴리에틸렌 글리콜, 나트륨 라우릴 설페이트, 나트륨 스테아릴 푸마레이트, 전분, 예를 들어 옥수수 전분; 감자 전분; 예비젤라틴화된 전분; 타피오카 전분; 밀 전분, 스테아르산, 활석, 식물성 오일 및 아연 스테아레이트로 이루어지는 목록 중에서 선택되는 약학 조성물, 사용하기 위한 약학 조성물, 캡슐 또는 방법.
  20. 제12항 내지 제19항 중 어느 한 항에 있어서,
    하나 이상의 윤활제를 포함하고, 상기 하나 이상의 윤활제가 코어의 중량에 대한 중량을 기준으로 0.1-2%, 예를 들어 약 1%로 존재하는 약학 조성물, 사용하기 위한 약학 조성물, 캡슐 또는 방법.
  21. 제12항 내지 제20항 중 어느 한 항에 있어서,
    하나 이상의 윤활제를 포함하고, 상기 하나 이상의 윤활제가 과립-외에 있는 약학 조성물, 사용하기 위한 약학 조성물, 캡슐 또는 방법.
  22. 제1항, 제2항 및 제5항 내지 제21항 중 어느 한 항에 있어서,
    약학적으로 활성인 결합 폴리펩티드가 코어의 중량에 대한 중량을 기준으로 30-80%, 예를 들어 40-75%, 예를 들어 약 50%-60%로 존재하는 약학 조성물, 사용하기 위한 약학 조성물, 캡슐 또는 방법.
  23. 제1항, 제2항 및 제5항 내지 제22항 중 어느 한 항에 있어서,
    압축된 코어가, 상기 코어의 중량에 대한 중량을 기준으로
    20-55%의 하나 이상의 압축 보조제;
    2-6%의 하나 이상의 붕해제;
    0.1-2%의 하나 이상의 윤활제 및
    40-75%의 약학적으로 활성인 결합 폴리펩티드
    를 포함하거나, 이들로 필수적으로 이루어지거나, 또는 이들로 이루어지는 약학 조성물, 사용하기 위한 약학 조성물, 캡슐 또는 방법.
  24. 제12항 내지 제23항 중 어느 한 항에 있어서,
    하나 이상의 활주제를 포함하고, 상기 하나 이상의 활주제가 칼슘 실리케이트, 마그네슘 실리케이트, 콜로이드성 이산화 규소 및 활석으로 이루어지는 목록 중에서 선택되는 약학 조성물, 사용하기 위한 약학 조성물, 캡슐 또는 방법.
  25. 제12항 내지 제24항 중 어느 한 항에 있어서,
    하나 이상의 희석제를 포함하고, 상기 하나 이상의 희석제가 칼슘 카보네이트, 이염기성 칼슘 포스페이트, 삼염기성 칼슘 포스페이트, 칼슘 설페이트, 미정질 셀룰로스, 분말화된 셀룰로스, 덱스트레이트, 덱스트린, 덱스트로스 부형제, 프럭토스, 카올린, 락티톨, 무수 락토스, 락토스 일수화물, 말티톨, 말토덱스트린, 말토스, 만니톨, 솔비톨, 전분, 예를 들어 옥수수 전분; 감자 전분; 예비젤라틴화된 전분; 타피오카 전분; 밀 전분, 및 슈크로스로 이루어지는 목록 중에서 선택되는 약학 조성물, 사용하기 위한 약학 조성물, 캡슐 또는 방법.
  26. 제12항 내지 제25항 중 어느 한 항에 있어서,
    하나 이상의 결합제를 포함하고, 상기 하나 이상의 결합제가 아카시아, 알긴산, 암모니오 메트아크릴레이트 공중합체, 암모니오 메트아크릴레이트 공중합체 분산제, 카보머 공중합체, 카보머 단독중합체, 카보머 혼성중합체, 카복시메틸셀룰로스 나트륨, 미정질 셀룰로스, 코포비돈, 슈크로스, 덱스트린, 에틸셀룰로스, 젤라틴, 글루코스, 구아검, 저-치환된 하이드록시프로필 셀룰로스, 하이프로멜로스, 하이드로멜로스 아세테이트 숙시네이트, 말토덱스트린, 말토스, 메틸셀룰로스, 폴리에틸렌 옥사이드, 포비돈, 전분, 예를 들어 옥수수 전분; 감자 전분; 예비젤라틴화된 전분; 타피오카 전분; 밀 전분으로 이루어지는 목록 중에서 선택되는 약학 조성물, 사용하기 위한 약학 조성물, 캡슐 또는 방법.
  27. 제1항 내지 제26항 중 어느 한 항에 있어서,
    pH 민감성 장용 코팅이 10-300 um의 두께를 갖는 약학 조성물, 사용하기 위한 약학 조성물, 캡슐 또는 방법.
  28. 제1항 내지 제27항 중 어느 한 항에 있어서,
    pH 민감성 장용 코팅이 임의로 가소제, 점착방지제 및 계면활성제 중 하나 이상과 함께 pH 민감성 장용 중합체 코트(coat)를 포함하거나 또는 상기로 이루어지는 약학 조성물, 사용하기 위한 약학 조성물, 캡슐 또는 방법.
  29. 제28항에 있어서,
    pH 민감성 장용 중합체 코트가 메틸 아크릴레이트-메트아크릴산 공중합체, 셀룰로스 아세테이트 숙시네이트, 하이드록시 프로필 메틸 셀룰로스 프탈레이트, 하이드록시 프로필 메틸 셀룰로스 아세테이트 숙시네이트(하이프로멜로스 아세테이트 숙시네이트), 폴리비닐 아세테이트 프탈레이트(PVAP), 메틸 메트아크릴레이트-메트아크릴산 공중합체, 나트륨 알기네이트 및 스테아르산 중 하나 이상을 포함하는 약학 조성물, 사용하기 위한 약학 조성물, 캡슐 또는 방법.
  30. 제29항에 있어서,
    pH 민감성 장용 중합체 코트가 메트아크릴산 및 메틸 메트아크릴레이트를 기본으로 하는 음이온성 공중합체를 포함하거나 또는 상기로 이루어지는 약학 조성물, 사용하기 위한 약학 조성물, 캡슐 또는 방법.
  31. 제30항에 있어서,
    pH 민감성 장용 중합체 코트가 폴리(메트아크릴산-코-메틸 메트아크릴레이트) 1:1 또는 폴리(메트아크릴산-코-에틸 아크릴레이트) 1:1을 포함하거나 또는 상기로 이루어지는 약학 조성물, 사용하기 위한 약학 조성물, 캡슐 또는 방법.
  32. 제28항 내지 제31항 중 어느 한 항에 있어서,
    pH 민감성 장용 중합체 코트가 pH 민감성 장용 코팅에 대한 중량을 기준으로 40-70%로 존재하는 약학 조성물, 사용하기 위한 약학 조성물, 캡슐 또는 방법.
  33. 제28항 내지 제32항 중 어느 한 항에 있어서,
    pH 민감성 장용 중합체 코트가 0.5 내지 3.5의 pH에 2시간 이상 노출후까지 용해되지 않는 약학 조성물, 사용하기 위한 약학 조성물, 캡슐 또는 방법.
  34. 제28항 내지 제33항 중 어느 한 항에 있어서,
    pH 민감성 장용 코팅이, 트리에틸 시트레이트인 가소제, 활석인 점착방지제 및/또는 나트륨 라우릴 설페이트인 계면활성제를 포함하는 약학 조성물, 사용하기 위한 약학 조성물, 캡슐 또는 방법.
  35. 제28항 내지 제34항 중 어느 한 항에 있어서,
    가소제가 pH 민감성 장용 코팅에 대한 중량을 기준으로 5-20%로 존재하고/하거나 점착방지제가 상기 pH 민감성 장용 코팅에 대한 중량을 기준으로 20-40%로 존재하고/하거나 계면활성제가 상기 pH 민감성 장용 코팅에 대한 중량을 기준으로 0.05-0.5%로 존재하는 약학 조성물, 사용하기 위한 약학 조성물 또는 방법.
  36. 제1항 내지 제35항 중 어느 한 항에 있어서,
    약학적으로 활성인 결합 폴리펩티드의 분자량이 5-200 kD인 약학 조성물, 사용하기 위한 약학 조성물, 캡슐 또는 방법.
  37. 제1항 내지 제36항 중 어느 한 항에 있어서,
    약학적으로 활성인 결합 폴리펩티드가 10 ㎎/㎖ 초과, 예를 들어 30 ㎎/㎖ 초과의 수 용해도를 갖는 약학 조성물, 사용하기 위한 약학 조성물 또는 방법.
  38. 제1항 내지 제37항 중 어느 한 항에 있어서,
    약학적으로 활성인 결합 폴리펩티드의 용량이 하루에 3회 100-500 ㎎인 약학 조성물, 사용하기 위한 약학 조성물, 캡슐 또는 방법.
  39. 제1항 내지 제4항 및 제6항 내지 제38항 중 어느 한 항에 있어서,
    조성물이 미니정제의 형태로 제공되는 약학 조성물, 사용하기 위한 약학 조성물 또는 방법.
  40. 제1항 내지 제4항 및 제6항 내지 제39항 중 어느 한 항에 있어서,
    조성물이 캡슐내에 포함되는 약학 조성물, 사용하기 위한 약학 조성물 또는 방법.
  41. 제1항 내지 제40항 중 어느 한 항에 있어서,
    조성물이 하나 이상의 링커에 의해 연결된 2개 이상의 약학적으로 활성인 결합 폴리펩티드를 포함하는 약학 조성물, 사용하기 위한 약학 조성물, 캡슐 또는 방법.
  42. 제41항에 있어서,
    하나 이상의 링커가 하나 이상의 프로테아제에 불안정한 약학 조성물, 사용하기 위한 약학 조성물, 캡슐 또는 방법.
  43. 제41항에 있어서,
    링커가 하나 이상의 프로테아제에 불안정하지 않은 약학 조성물, 사용하기 위한 약학 조성물, 캡슐 또는 방법.
  44. 제1항 내지 제43항 중 어느 한 항에 있어서,
    약학적으로 활성인 결합 폴리펩티드가 면역글로불린, 바람직하게는 도메인 항체인 약학 조성물, 캡슐 또는 방법.
  45. 제44항에 있어서,
    약학적으로 활성인 결합 폴리펩티드가 ICVD, 예를 들어 VH 또는 VHH인 약학 조성물, 사용하기 위한 약학 조성물, 캡슐 또는 방법.
  46. 제1항 내지 제45항 중 어느 한 항에 있어서,
    약학적으로 활성인 결합 폴리펩티드가 국소 치료 효과용인 약학 조성물, 사용하기 위한 약학 조성물, 캡슐 또는 방법.
  47. 제1항 내지 제46항 중 어느 한 항에 있어서,
    약전 장용 코팅 시험에서 분석시, 약학 조성물이 2시간 후에 약학적으로 활성인 결합 폴리펩티드의 10 중량% 미만을 방출하는 약학 조성물, 사용하기 위한 약학 조성물, 캡슐 또는 방법.
  48. 제47항에 있어서,
    pH 민감성 장용 코트가 적어도 6시간 후에 완전한 약학 조성물, 사용하기 위한 약학 조성물, 캡슐 또는 방법.
  49. 제1항 내지 제48항 중 어느 한 항에 있어서,
    약전 용해 시험(Pharmacopeial Dissolution Test)에서 분석시, 약학 조성물이
    (i) 30분 후에 약학적으로 활성인 결합 폴리펩티드의 10-40 중량%,
    (ii) 60분 후에 약학적으로 활성인 결합 폴리펩티드의 30-60 중량%, 및
    (iii) 120분 후에 약학적으로 활성인 결합 폴리펩티드의 60 중량% 이상
    을 방출하는 약학 조성물, 사용하기 위한 약학 조성물, 캡슐 또는 방법.
  50. 제1항 내지 제49항 중 어느 한 항에 있어서,
    동적인 용해 시험(Dynamic Dissolution Test)에서 분석시:
    약학 조성물의 방출의 시작이 90 내지 210분째에 발생하고,
    약학 조성물이
    (i) 방출의 시작으로부터 60분 후에 약학적으로 활성인 결합 폴리펩티드의 10-30 중량%,
    (ii) 방출의 시작으로부터 120분 후에 약학적으로 활성인 결합 폴리펩티드의 40-70 중량%, 및
    (iii) 방출의 시작으로부터 180분 후에 약학적으로 활성인 결합 폴리펩티드의 60 중량% 이상
    을 방출하는 약학 조성물, 사용하기 위한 약학 조성물, 캡슐 또는 방법.
  51. 압축된 코어를 포함하는, 장관 영역에의 경구 투여에 의해 상기 장관의 질병의 치료에 사용하기 위한 고형 약학 조성물로, 상기 압축된 코어가 약학적으로 활성인 결합 폴리펩티드를 포함하고 상기 압축된 코어가 pH 민감성 장용 코팅으로 코팅되고;
    상기 약학적으로 활성인 결합 폴리펩티드가 국소 치료 효과용이고;
    상기 약학적으로 활성인 결합 폴리펩티드가 ICVD이고;
    약전 장용 코팅 시험에서 분석시, 2시간 후에 약학적으로 활성인 결합 폴리펩티드의 10 중량% 미만을 방출하고;
    동적인 용해 시험에서 분석시,
    (i) 30분 후에 상기 약학적으로 활성인 결합 폴리펩티드의 10-40 중량%,
    (ii) 60분 후에 상기 약학적으로 활성인 결합 폴리펩티드의 30-60 중량%, 및
    (iii) 120분 후에 상기 약학적으로 활성인 결합 폴리펩티드의 60 중량% 이상
    을 방출하는 상기 고형 약학 조성물.
  52. 약학적으로 활성인 결합 폴리펩티드를 압축시켜 압축된 코어를 형성시킨 다음 상기 코어를 pH 민감성 장용 코팅으로 코팅시킴을 포함하는, 제1항 내지 제51항 중 어느 한 항에 따른 약학 조성물의 제조 방법.
  53. 제52항에 있어서,
    약학적으로 활성인 결합 폴리펩티드(예를 들어 면역글로불린 쇄 가변 도메인)를 하나 이상의 부형제와 블렌딩하고 과립화시켜 과립을 형성시킨 다음 임의로 상기 과립을 하나 이상의 부형제와 블렌딩하고, 이어서 상기 과립을 압축시켜 압축된 코어를 형성시키고, 이어서 상기 코어를 pH 민감성 장용 코팅으로 코팅시키는 방법.
  54. 제53항에 있어서
    과립화 단계의 부형제가 하나 이상의 압축 보조제(예를 들어, 만니톨) 및 하나 이상의 윤활제(예를 들어, 마그네슘 스테아레이트) 중에서 선택되는 방법.
  55. 제53항 또는 제54항에 있어서,
    과립화 후에 상기 과립을, 압축된 코어를 형성시키기 위한 압축에 앞서 하나 이상의 압축 보조제(예를 들어, 미정질 셀룰로스), 하나 이상의 붕해제(예를 들어, 크로스카멜로스 나트륨) 및 하나 이상의 윤활제(예를 들어, 마그네슘 스테아레이트) 중에서 선택된 하나 이상의 부형제와 블렌딩하는 방법.
  56. 제52항 내지 제55항 중 어느 한 항의 방법에 의해 수득될 수 있는 약학 조성물.
  57. 고형 약학 조성물의 압축된 코어로, 상기 조성물이 경구 투여에 의해 장관 영역에 약학적으로 활성인 결합 폴리펩티드를 전달하기 위한 것이고, 상기 압축된 코어가 국소 치료 효과를 위한 약학적으로 활성인 결합 폴리펩티드를 포함하는 상기 압축된 코어.
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Families Citing this family (16)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US8188223B2 (en) * 2005-05-18 2012-05-29 Ablynx N.V. Serum albumin binding proteins
CA2981096A1 (en) * 2015-03-31 2016-10-06 Vhsquared Limited Tnf-alpha binding polypeptides
JP7224917B2 (ja) 2016-03-31 2023-02-20 ソリッソ ファーマシューティカルズ，インク． 組成物
WO2018060453A1 (en) * 2016-09-30 2018-04-05 Vhsquared Limited Compositions
MX2019006864A (es) 2016-12-14 2019-10-15 Progenity Inc Tratamiento de una enfermedad del tracto gastrointestinal con un inhibidor de factor de necrosis tumoral (tnf).
CA3054632A1 (en) * 2017-03-30 2018-10-04 Progenity, Inc. Treatment of a disease of the gastrointestinal tract with an immune modulatory agent released using an ingestible device
EP3459527B1 (en) * 2017-09-20 2022-11-23 Tillotts Pharma Ag Method for preparing a solid dosage form comprising antibodies by wet granulation, extrusion and spheronization
US20230312700A1 (en) 2018-06-20 2023-10-05 Progenity, Inc. Treatment of a disease of the gastrointestinal tract with a tnf inhibitor
US11291654B2 (en) * 2018-09-13 2022-04-05 Syneurx International (Taiwan) Corp. Formulations of cycloserine compounds and applications thereof
US20220249814A1 (en) 2018-11-19 2022-08-11 Progenity, Inc. Methods and devices for treating a disease with biotherapeutics
WO2020243393A1 (en) * 2019-05-30 2020-12-03 Vta Labs, Llc Design of a single oral delivery system containing a monoclonal antibody for the simultaneous treatment of chron's disease and ulcerative colitis
MX2021015763A (es) 2019-06-21 2022-04-18 Sorriso Pharmaceuticals Inc Polipeptidos.
JP2022537780A (ja) 2019-06-21 2022-08-29 ソリッソ ファーマシューティカルズ，インク． ポリペプチド
EP4309722A2 (en) 2019-12-13 2024-01-24 Biora Therapeutics, Inc. Ingestible device for delivery of therapeutic agent to the gastrointestinal tract
US20230174554A1 (en) * 2020-05-18 2023-06-08 Shenzhen TargetRx. Inc. Solid form of macrocyclic compound, preparation therefor and use thereof
CN113768051B (zh) * 2020-06-09 2024-03-19 中粮营养健康研究院有限公司 饲料添加剂及其制备方法和其在饲料中的应用以及替抗饲料

Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US20100260857A1 (en) * 2009-04-13 2010-10-14 Joan Fallon Enzyme delivery systems and methods of preparation and use
KR20150043342A (ko) * 2012-08-21 2015-04-22 글락소 그룹 리미티드 단일 가변 도메인 및 카모스타트 메실레이트 (cm)를 포함하는 조성물

Family Cites Families (30)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US2010126A (en) 1934-03-19 1935-08-06 Frank L Mclaughlin Measuring and dispensing can
DE69222306T2 (de) 1991-06-21 1998-04-09 Univ Cincinnati Oral verabreichbare therapeutische proteine und herstellungsverfahren
WO1995008562A1 (en) * 1993-09-20 1995-03-30 Anadis Ltd. Method of obtaining immunoglobulins from colostrum and their use in pharmaceutical composition
AU2003286002B2 (en) 2002-11-08 2011-06-16 Ablynx N.V. Single domain antibodies directed against tumour necrosis factor-alpha and uses therefor
US8007827B2 (en) * 2004-04-02 2011-08-30 Impax Laboratories, Inc. Pharmaceutical dosage forms having immediate release and/or controlled release properties
US8105592B2 (en) * 2004-11-25 2012-01-31 Vhsquared Limited Heavy chain and single domain antibodies
CA2610839C (en) 2005-06-14 2019-06-25 Amgen Inc. Self-buffering protein formulations
RU2009113557A (ru) 2006-09-12 2010-10-20 Космо Текнолоджиз Лтд (Ie) Фармацевтические композиции для перорального или ректального введения белковых веществ
EP2066350A4 (en) 2006-09-25 2010-04-07 Medimmune Llc STABILIZED ANTIBODY FORMULATIONS AND THEIR USES
US20080145420A1 (en) 2006-12-13 2008-06-19 Simon Michael R HUMAN SECRETORY IgA FOR THE TREATMENT OF CLOSTRIDIUM DIFFICILE ASSOCIATED DISEASES
JP5966202B2 (ja) * 2007-02-20 2016-08-10 アラガン ファーマシューティカルズ インターナショナル リミテッド 安定な消化酵素組成物
ES2400964T3 (es) * 2007-04-04 2013-04-15 Sigmoid Pharma Limited Composiciones famacéuticas de ciclosporina
US20080260820A1 (en) 2007-04-19 2008-10-23 Gilles Borrelly Oral dosage formulations of protease-resistant polypeptides
GB0724331D0 (en) 2007-12-13 2008-01-23 Domantis Ltd Compositions for pulmonary delivery
US20100239682A1 (en) 2007-09-17 2010-09-23 Antoine Andremont Colonic delivery of antimicrobial agents
CA2705681C (en) 2007-11-13 2013-06-18 Meritage Pharma, Inc. Corticosteroid compositions
AR073997A1 (es) 2008-10-29 2010-12-15 Wyeth Corp Formulaciones de moleculas de union a antigeno de dominio unico. metodo. kit
CN101964403A (zh) 2009-07-23 2011-02-02 比克国际(天津)有限公司 一种电池组的封装方法及电池组
WO2011112229A2 (en) 2010-03-10 2011-09-15 Incube Labs, Llc Therapeutic agent preparations for delivery into a lumen of the intestinal tract using a swallowable drug delivery device
EP2533814A2 (en) 2010-02-11 2012-12-19 Ablynx N.V. Delivery of immunoglobulin variable domains and constructs thereof
CN105521491B (zh) 2010-03-01 2020-03-24 西托戴恩有限公司 浓缩蛋白制剂及其用途
US9468679B2 (en) 2011-03-28 2016-10-18 Ablynx N.V. Method for producing solid formulations comprising immunoglobulin single variable domains
CN103501825B (zh) 2011-05-02 2017-03-15 免疫医疗公司 用于小体积施用的同种异型选择的抗体的超滤浓缩
ES2682761T3 (es) 2012-05-18 2018-09-21 Genentech, Inc. Formulaciones de anticuerpos monoclonales de alta concentración
SG11201506499YA (en) 2013-03-15 2015-09-29 Glaxosmithkline Ip No 2 Ltd Low concentration antibody formulations
WO2015058173A1 (en) 2013-10-18 2015-04-23 Abbvie Inc. Stable solid units and methods of making the same
CA2949236C (en) 2014-05-15 2023-06-13 Incube Labs, Llc Pharmaceutical compositions and methods for fabrication of solid masses comprising polypeptides and/or proteins
IL254591B (en) 2015-03-31 2022-07-01 Vhsquared Ltd polypeptides
CA2981096A1 (en) * 2015-03-31 2016-10-06 Vhsquared Limited Tnf-alpha binding polypeptides
JP7224917B2 (ja) 2016-03-31 2023-02-20 ソリッソ ファーマシューティカルズ，インク． 組成物

Patent Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US20100260857A1 (en) * 2009-04-13 2010-10-14 Joan Fallon Enzyme delivery systems and methods of preparation and use
KR20150043342A (ko) * 2012-08-21 2015-04-22 글락소 그룹 리미티드 단일 가변 도메인 및 카모스타트 메실레이트 (cm)를 포함하는 조성물

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