KR20180120836A - 시쿠아사 종자 오일 및 이를 포함하는 피부개선용 화장료 조성물 - Google Patents
시쿠아사 종자 오일 및 이를 포함하는 피부개선용 화장료 조성물 Download PDFInfo
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Abstract
본 발명은 피부개선용 화장료 조성물에 관한 것으로서, 더욱 상세하게는 피부미백, 피부염증억제 효능이 있는 화장료 조성물에 관한 것이다. 본 발명의 시쿠아사 종자 오일을 유효성분으로 함유하는 피부개선용 화장료 조성물 및 건강기능식품을 제공함으로써, 시쿠아사 종자를 천연물 유래 미백 및 항염증 기능성 소재로의 활용방안을 제공한다. 또한 시쿠아사 종자를 기능성 화장품 및 뷰티 푸드와 같은 고부가가치 산업에 적용할 수 있다.
Description
본 발명은 피부개선용 화장료 조성물에 관한 것으로서, 더욱 상세하게는 피부미백, 피부염증억제 효능이 있는 화장료 조성물에 관한 것이다.
최근 기미, 주근깨, 반점 및 과잉 색소 등의 치료와 흰 피부를 원하는 사람들을 위하여 다양한 피부 미백용 화장품이 개발되고 있다.
종래에는 하이드로퀴논(hydroquinone)이나 아스콜빈산(ascorbic acid), 코지산(kojic acid), 글루타티온(glutathione)과 같은 티로시나제에 대해 저해 활성을 갖는 물질을 연고, 에센스 등의 화장료에 배합함으로써 피부 미백 또는 항염증 효과를 실현하였다.
그러나 하이드로퀴논은 소정의 미백효과를 발휘하지만, 피부 자극성이 심하여 배합량을 극소량으로 제한해야 하는 문제점이 있고, 아스코르빈산은 산화되기 쉬워 이를 배합한 화장료는 변색, 변취되는 등의 문제가 발생하며, 코지산은 용액 내에서 불안전하여 화장료의 제조공정이 복잡해진다는 단점이 있다. 또한, 글루타티온, 시스테인 등의 티올계 화합물은 특유의 불쾌한 냄새를 가질 뿐만 아니라 경피 흡수에도 문제점이 있고, 이들의 배당체 및 유도체들도 극성이 높으므로 화장료의 배합 성분으로 사용하기는 어렵다. 한편, 태반 추출물 등은 피부에 자극이 없으나, 미백 효과가 불충분하다.
따라서, 현재 세계 여러 나라에서는 특정성분을 이용한 미백화장품의 제조가 전면 금지되었거나, 제한적인 농도에서만 사용이 허가되고 있다. 국내에서 피부치료제로 미백제를 사용하기 위해서는 의사의 처방이 필수적이고, 시판중인 미백치료제는 미백성분을 5%미만으로 포함하고 있다는 한계가 있다.
또한, 멜라닌의 생합성 대사는 미백활성 효과뿐만 아니라 피부암과의 관련성 때문에 다양한 연구가 진행되고 있다. 그럼에도 불구하고 멜라닌의 생합성을 저해하고 부작용이 없는 새로운 저해물질이 발견되지 않아 기존의 멜라닌 저해제를 대체할 수 있는 피부미백 물질의 탐색과 개발이 필요한 실정이다.
본 발명의 목적은, 시쿠아사(Citrus depressa) 종자 오일을 포함하는 피부미백용 화장료 조성물 및 건강기능식품을 제공함에 있다.
본 발명의 다른 목적은 시쿠아사 종자 오일을 유효성분으로 포함하는 피부 염증억제용 화장료 조성물 및 건강기능식품을 제공함에 있다.
본 발명의 또 다른 목적은 시쿠아사 종자 오일을 제공함으로써, 천연물 유래 미백 및 항염증 효능을 가진 기능성 소재로서의 시쿠아사 종자를 활용하는 방안을 제공함에 있다.
상기 목적을 달성하기 위하여, 본 발명의 일실시예에 따른 피부 개선용 화장료 조성물은 시쿠아사(Citrus depressa) 종자 오일, 시쿠아사 종자 오일을 포화시켜 얻은 응고물 또는 시쿠아사 종자 착유 부산물을 유효성분으로 함유한다.
상기 시쿠아사 종자 오일의 농도는 1.25 내지 10%(v/v)인 것을 특징으로 한다.
상기 화장료 조성물은 화장수, 페이스트, 젤, 크림, 로션, 파우더, 비누, 계면활성제 함유 클린징 오일, 분말 파운데이션, 유탁액 파운데이션, 왁스 파운데이션, 팩, 연고 및 스프레이로 이루어진 군에서 1이상 선택되는 제형인 것을 특징으로 한다.
상기 피부 개선용은 피부미백용 또는 피부 염증억제용인 것을 특징으로 한다.
또한 본 발명의 다른 실시예에 따른 피부 개선용 건강기능식품은 시쿠아사(Citrus depressa) 종자 오일, 시쿠아사 종자 오일을 포화시켜 얻은 응고물 또는 시쿠아사 종자 착유 부산물을 유효성분으로 함유한다.
상기 피부개선용은 피부미백용 또는 피부 염증억제용인 것을 특징으로 한다.
상기와 같은 본 발명에 따르면, 본 발명의 시쿠아사 종자 오일을 유효성분으로 함유하는 피부개선용 화장료 조성물 및 건강기능식품을 제공함으로써, 피부세포의 멜라닌(melanin) 생성 및 피부염증을 억제하는 효과가 있다.
또한 본 발명의 시쿠아사 종자 오일을 유효성분으로 함유하는 피부개선용 화장료 조성물 및 건강기능식품을 제공함으로써, 시쿠아사 종자를 천연물 유래 미백 및 항염증 기능성 소재로의 활용방안을 제공한다. 또한 시쿠아사 종자를 기능성 화장품 및 뷰티 푸드와 같은 고부가가치 산업에 적용할 수 있다.
도 1은 본 발명의 실시예에 따른 시쿠아사(Citrus depressa) 종자 오일 추출 공정도이다.
도 2는 멜라닌 형성세포(melanocyte)에서 본 발명의 실시예에 따른 시쿠아사 종자 오일의 세포독성을 측정한 것이다.
도 3은 멜라닌 형성세포(melanocyte)에서 본 발명의 실시예에 따른 시쿠아사 종자 오일의 멜라닌 생성 저해 활성을 측정한 것이다.
도 4는 대식세포(macrophage)에서 본 발명의 실시예에 따른 시쿠아사 종자 오일의 세포독성을 측정한 결과이다.
도 5는 대식세포(macrophage)에서 본 발명의 실시예에 따른 시쿠아사 종자 오일의 일산화질소(nitric oxide) 저해활성을 측정한 결과이다.
도 2는 멜라닌 형성세포(melanocyte)에서 본 발명의 실시예에 따른 시쿠아사 종자 오일의 세포독성을 측정한 것이다.
도 3은 멜라닌 형성세포(melanocyte)에서 본 발명의 실시예에 따른 시쿠아사 종자 오일의 멜라닌 생성 저해 활성을 측정한 것이다.
도 4는 대식세포(macrophage)에서 본 발명의 실시예에 따른 시쿠아사 종자 오일의 세포독성을 측정한 결과이다.
도 5는 대식세포(macrophage)에서 본 발명의 실시예에 따른 시쿠아사 종자 오일의 일산화질소(nitric oxide) 저해활성을 측정한 결과이다.
이하, 본 발명을 상세히 설명한다.
본 발명의 일 형태에 따른 피부개선용 화장료 조성물을 제공한다. 상기 피부개선용 화장료 조성물은 시쿠아사(Citrus depressa) 종자 오일, 시쿠아사 종자 오일을 포화시켜 얻은 응고물 또는 시쿠아사 종자 착유 부산물을 유효성분으로 함유한다.
상기 시쿠아사(Citrus depressa)는 감귤류의 일종으로 플랫레몬 또는 히라미 레몬으로 불린다. 시쿠아사는 대만과 오키나와 지역에서 자생하며, 크기가 작고 녹색을 띤다. 또한 시쿠아사는 비타민 C와 플라보노이드의 함량이 높다. 시쿠아사의 피부에 대한 효능은 확인된 바가 없다.
상기 피부 개선용은 피부미백용 또는 피부 염증억제용인 것을 특징으로 한다.
상기 시쿠아사 종자 오일의 농도는 1.25 내지 10%(v/v)인 것을 특징으로 한다. 시쿠아사 종자 오일의 농도가 1.25%(v/v) 미만인 경우 피부개선 효과가 미미하며, 10%(v/v)를 초과할 경우 세포생존율에 영향을 미쳐 바람직하지 않다.
상기 화장료 조성물은 화장수, 페이스트, 젤, 크림, 로션, 파우더, 비누, 계면활성제 함유 클린징 오일, 분말 파운데이션, 유탁액 파운데이션, 왁스 파운데이션, 팩, 연고 및 스프레이로 이루어진 군에서 1 이상 선택되는 제형인 것을 특징으로 한다.
본 발명의 다른 형태에 따른 피부 개선용 건강기능식품은 시쿠아사(Citrus depressa) 종자 오일, 시쿠아사 종자 오일을 포함시켜 얻은 응고물 또는 시쿠아사 종자 착유 부산물을 유효성분으로 함유한다.
상기 시쿠아사 종자 오일의 농도는 1.25 내지 10%(v/v)인 것을 특징으로 한다.
상기 피부개선용은 피부미백용 또는 피부 염증억제용인 것을 특징으로 한다.
이하, 실시예를 통하여 본 발명을 더욱 상세히 설명하고자 한다. 이들 실시예는 오로지 본 발명을 예시하기 위한 것으로서, 본 발명의 범위가 이들 실시예에 의해 제한되는 것으로 해석되지는 않는 것은 당업계에서 통상의 지식을 가진 자에게 있어서 자명할 것이다.
실시예
1.
시쿠아사
종자 오일 추출
시쿠아사 종자 오일은 도 1의 공정도에 따라 제조하였다.
시쿠아사 열매에서 종자를 분리하였다(S100). 분리 된 종자를 세척하여 추출원료를 준비하였다. 준비 된 추출원료를 40℃에서 건조하여 추출원료 내의 수분을 제거하였다(S200). 건조된 추출원료를 압착하여 시쿠아사 종자 오일을 추출하였다(S300). 추출된 시쿠아사 종자 오일에 활성탄을 처리하여 불순물을 제거하였다(S400). 또한 활성탄 처리 후 여과 공정을 통해 시쿠아사 종자 오일의 순도를 높였다(S500).
실시예
2. 멜라닌 형성세포(
melanocyte
)에서
시쿠아사
종자 오일의 세포독성 측정
멜라닌 형성세포에서 시쿠아사 종자 오일의 세포 독성 측정은 B16F10세포주를 이용하였다. 상기 B16F10세포주는 10% 소태아혈청(FBS), 1% 페니실린/스트렙토마이신(pen/strep)을 포함한 MEM alpha modification으로 37℃, 5% CO2 인큐베이터에서 배양하였다.
멜라닌 형성세포에서 시쿠아사 종자 오일의 세포독성 측정을 위하여 96웰 플레이트에 1웰 당 2.0 x 103/200μl이 되도록 접종하여 24시간동안 배양한다. 배양된 세포에 상기 실시예 1에서 제조한 시쿠아사 종자 오일을 농도 1.25, 2.5, 5, 10%(v/v)로 하여 각각 처리하여 48시간동안 배양한다. 배양 완료 후 PBS에 5mg/ml로 제조된 MTT 시약을 20μl 처리한다. MTT 시약을 처리 후 3시간동안 배양한다. 배양 후 96웰 플레이트의 배지를 제거하고, DMSO 200μl를 각각 분주하여 570nm에서 흡광도를 측정하였다.
멜라닌 형성세포에서 시쿠아사 종자 오일의 세포독성 측정 결과는 도 2에 도시하였다. 상기 결과에 따르면, 시쿠아사 종자 오일 1.25 내지 10%(v/v) 범위에서 세포독성이 나타나지 않는 것을 알 수 있다.
실시예
3. 멜라닌 형성세포에서
시쿠아사
종자 오일의 멜라닌 생성 저해 활성 측정
멜라닌 형성세포에서 시쿠아사 종자 오일의 멜라닌 생성 저해활성 측정은 B16F10세포주를 이용하였다. 상기 B16F10세포주는 6웰 플레이트에 3.0x105cells/well의 농도로 접종하여 배양하였다. 상기 세포는 10% 소태아혈청(FBS), 1% 페니실린/스트렙토마이신(pen/strep)을 포함한 MEM alpha modification에 α-MSH를 첨가하여 37℃, 5% CO2 인큐베이터에서 24시간동안 배양하였다. 배양 후 MEM modification 2ml로 교체하고, 상기 실시예 1에서 제조한 시쿠아사 종자 오일을 각 농도(1.25, 2.5, 5, 10%(v/v)) 별로 처리하여 48시간 동안 배양하였다. 양성대조군은 알부틴을 동량 처리하였다. 48시간 후 6웰 플레이트의 세포 펠릿을 회수하였다. 회수된 세포 펠릿을 1.5ml 튜브에 옮겨 13000rpm으로 15분간 원심분리하여 상등액을 제거하였다. 상등액이 제거된 펠릿에 1N NaOH를 50μl를 넣고 60℃에서 2시간동안 반응시켜 세토내의 멜라닌을 용해시켰다. 용해된 멜라닌을 96웰 플레이트에 분주하고, 405nm에서 멜라닌의 흡광도를 측정한다.
멜라닌 형성세포에서 시쿠아사 종자 오일의 멜라닌 생성 저해 활성 측정 결과는 도 3에 도시하였다. 상기 결과에 따르면, 멜라닌 형성세포에 α-MSH를 처리할 경우 멜라닌 함량이 약 2.5배 증가하였으며, 멜라닌 함량이 증가된 세포에 알부틴을 처리한 대조군은 멜라닌 함량이 감소하였다. 또한 멜라닌 형성세포에 α-MSH을 처리하고 시쿠아사 종자 오일을 처리하였을 경우 멜라닌 함량이 대조군과 같은 수준으로 감소하였다.
실시예
4. 대식세포(macrophage)에서
시쿠아사
종자 오일의 세포독성 측정
대식세포에서 시쿠아사 종자 오일의 세포독성 측정은 Raw264.7세포주를 이용하였다. 상기 Raw264.7세포주는 1%페니실린/스트렙토마이신 및 불활성화 시킨 10% 소태아혈청(FBS)가 함유 된 1X α-MEM 배지에서 배양하였다. 또한 상기 Raw264.7세포주는 5% CO2, 37℃ 조건의 인큐베이터에서 배양하였다.
대식세포에서 시쿠아사 종자 오일의 세포독정 측정을 위하여 96웰 플레이트에 1웰 당 2.0 x 104/200μl이 되도록 접종하여 24시간동안 배양한다. 이 후 96웰 플레이트의 배지를 교체하고, 상기 실시예 1에서 제조한 시쿠아사 종자 오일을 농도 1.25, 2.5, 5, 10%(v/v)로 하여 각각 처리하여 24시간동안 배양한다. 배양 완료 후 PBS에 5mg/ml로 제조된 MTT 시약을 20μl 처리한다. MTT 시약을 처리 후 3시간동안 배양한다. 배양 후 96웰 플레이트의 배지를 제거하고, DMSO 200μl를 각각 분주하여 570nm에서 흡광도를 측정하였다.
대식세포에서 시쿠아사 종자 오일의 세포독성 측정 결과는 도 4에 도시하였다. 상기 결과에 따르면, 시쿠아사 종자 오일 1.25 내지 10%(v/v) 범위에서 세포독성이 나타나지 않는 것을 알 수 있다.
실시예
5. 대식세포에서
시쿠아사
종자 오일의 일산화질소(Nitric oxide) 저해 활성 측정
대식세포에서 시쿠아사 종자 오일의 일산화질소 저해활성 측정은 Raw264.7세포주를 이용하였다.
상기 Raw264.7세포주는 1%페니실린/스트렙토마이신 및 불활성화 시킨 10% 소태아혈청(FBS)가 함유 된 1X α-MEM 배지에서 배양하였다. 또한 상기 Raw264.7세포주는 5% CO2, 37℃ 조건의 인큐베이터에서 배양하였다.
대식세포에서 시쿠아사 종자 오일의 세포독정 측정을 위하여 96웰 플레이트에 1웰 당 2.0 x 104/200μl이 되도록 접종하여 24시간동안 배양한다. 이 후 LPS 0.005μg/ml가 함유된 배지에 상기 실시예 1에서 제조한 시쿠아사 종자 오일을 농도 1.25, 2.5, 5, 10%(v/v)로 하여 각각 처리하여 24시간동안 배양한다. 배양 후 상층액 50μl를 다른 96웰 플레이트에 옮겨 술파닐아미드(sulfanilamide) 50μl를 첨가하여 암조건에서 10분간 반응시킨다. 암조건에서 반응시킨 96웰 플레이트를 540nm 파장에서 흡광도를 측정한다.
양성대조군으로는 덱사메타손(dexamethasone)을 사용하였다.
대식세포에서 시쿠아사 종자 오일의 일산화질소 저해 활성 측정 결과는 도 5에 도시하였다. 상기 결과에 따르면, 대식세포에 LPS를 처리할 경우 일산화질소 활성이 약 3.5배 증가하였으며, 덱사메타손을 처리한 양성대조군은 일산화질소 활성이 감소하였다. 또한 대식세포에 LPS를 처리하고 시쿠아사 종자 오일을 처리하였을 경우 일산화탄소 활성 저해효과가 대조군보다 더 낮은 수준으로 감소하였다.
이상, 본 발명내용의 특정한 부분을 상세히 기술하였는바, 당업계의 통상의 지식을 가진 자에게 있어서, 이러한 구체적인 기술은 단지 바람직한 실시양태일 뿐이며, 이에 의해 본 발명의 범위가 제한되는 것이 아닌 점은 명백할 것이다. 따라서 본 발명의 실질적인 범위는 첨부된 청구항들과 그것들의 등가물에 의해 정의된다고 할 것이다.
Claims (6)
- 시쿠아사(Citrus depressa) 종자 오일, 시쿠아사 종자 오일을 포화시켜 얻은 응고물 또는 시쿠아사 종자 착유 부산물을 유효성분으로 함유하는 피부 개선용 화장료 조성물.
- 제1항에 있어서,
상기 피부 개선용은 피부미백용 또는 피부 염증억제용인 것을 특징으로 하는 화장료 조성물.
- 제1항에 있어서,
상기 시쿠아사 종자 오일의 농도는 1.25 내지 10 %(v/v)인 것을 특징으로 하는 피부개선용 화장료 조성물.
- 제1항에 있어서,
상기 화장료 조성물은 화장수, 페이스트, 젤, 크림, 로션, 파우더, 비누, 계면활성제 함유 클린징 오일, 분말 파운데이션, 유탁액 파운데이션, 왁스 파운데이션, 팩, 연고 및 스프레이로 이루어진 군에서 1이상 선택되는 제형인 것을 특징으로 하는 화장료 조성물.
- 시쿠아사(Citrus depressa) 종자 오일, 시쿠아사 종자 오일을 포화시켜 얻은 응고물 또는 시쿠아사 종자 착유 부산물을 유효성분으로 함유하는 피부 개선용 건강기능식품.
- 제5항에 있어서,
상기 피부 개선용은 피부미백용 또는 피부 염증억제용인 것을 특징으로 하는 피부 개선용 건강기능식품.
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