KR20180106155A - 천연 혼합물의 발효물질을 포함하는 미백 및 보습기능성 조성물 - Google Patents
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Abstract
본 발명은 천연 혼합물의 발효물질을 포함하여 미백 및 보습 효과를 갖는 조성물에 관한 것으로서, 승마, 진피, 감초, 치자 및 오배자 혼합물의 유산균 발효물을 유효성분으로 포함하며, 혼합물은 오배자의 중량에 대하여, 승마를 2∼4, 진피를 1.5∼3.5, 감초를 1∼3, 치자를 0.5∼2.5의 중량비로 포함할 수 있다.
Description
본 발명은 천연 혼합물의 발효물질을 포함하여 미백 및 보습 효과를 갖는 조성물에 관한 것이다.
피부흑화(melanogenesis)는 멜라닌 색소생성세포(melanocyte)에서 자외선 등의 자극에 대한 방어기작으로 멜라닌 생성활동이 증가되고 이에 따라 만들어진 다량의 멜라닌이 각질형성세포(keratinocyte)로 전이되어 피부표피층에 축척된 결과이다. 멜라닌의 생성목적은 피부보호일 수 있으나, 멜라닌 생성으로 인한 피부 과색소침착은 기미, 주근깨, 노인성 색소반점 등을 일으킬 수 있고 이에 따라 당사자에게 미용상의 불편과 부정적인 정신적 영향을 초래할 수 있다. 한편, 멜라닌은 아미노산의 일종인 티로신(tyrosine)에 티로시나제(tyrosinase)라는 효소가 작용하여 도파(DOPA), 도파퀴논(dopaquinone)으로 바뀐 후비효소적인 산화 반응을 거쳐 만들어지는 것으로 알려져 있다.
표피층은 기저층과 유극층에 약 70%, 과립층에는 30∼50%, 각질층에는 15∼30%로 수분을 포함한다. 즉, 표피 내 수분함량은 상부로 갈수로 점차 감소하는 피부 수분 기울기(skin water gradient)를 나타내며, 이러한 수분 기울기를 통해 피부는 지속적인 삼투압 스트레스를 받게 된다. 또한, 피부는 인체의 최외각층에 존재하기 때문에 대기오염, 건조한 환경, 자외선, 바람, 화학물질등에 만성적으로 노출되어 있어 쉽게 건조해 진다.
본 발명은 미백 및 보습효과를 가지는 천연물질의 발효물을 포함하는 조성물을 제공함에 그 목적이 있다.
전술한 목적을 달성하기 위하여, 본 발명은 승마, 진피, 감초, 치자 및 오배자 혼합물의 유산균 발효물을 유효성분으로 포함하는 미백용 조성물을 제공한다.
또한, 전술한 목적을 달성하기 위하여, 본 발명은 승마, 진피, 감초, 치자 및 오배자 혼합물의 유산균 발효물을 유효성분으로 포함하는 보습용 조성물을 제공한다.
본 발명의 일 특징에 의하면, 상기 유산균은 락토바실러스 사케이 (Lactobacillus sakei)일 수 있다.
본 발명의 다른 특징에 의하면, 상기 혼합물은, 오배자의 중량에 대하여, 승마를 2∼4, 진피를 1.5∼3.5, 감초를 1∼3, 치자를 0.5∼2.5의 중량비로 포함할 수 있다.
본 발명에 따른 조성물은 유효성분으로 천연 혼합물의 유산균 발효물을 포함하여 멜라닌의 생성과 관련된 것으로 알려진 기작을 제어할 수 있어서 멜라닌 생성을 억제할 수 있으며, 구체적으로 티로시나제의 활성을 억제할 수 있어서 멜라닌 생성을 근본적으로 억제할 수 있다. 이에 따라, 본 발명에 따른 조성물은 피부 미백을 위한 화장료 조성물 또는 건강식품 조성물로 유용하게 사용할 수 있으며, 과다 멜라닌에 따라 발병하는 흑색종 등의 질병을 예방하거나 치료하는 약학 조성물로 유용하게 사용할 수 있다는 장점이 갖는다.
본 발명에 따른 조성물은 이상과 같은 미백 효과에 더하여, 피부 수분 함량을 증가시키고 피부결을 개선시킬 수 있는 보습 효과를 가지므로, 피부 보습 개선을 위한 화장료 조성물 또는 건강식품 조성물로 유용하게 사용할 수 있으며, 건선이나 아토피 등의 질병을 예방하거나 치료하는 약학 조성물로도 사용할 수 있다.
나아가, 본 발명에 따른 조성물은 천연 유래 성분을 유효성분으로 포함하여 장기간 사용시에도 부작용이 없고 세포 독성을 일으키지 않는다는 장점도 갖는다.
도 1 및 도 2는 본 발명의 유효성분인 발효물의 항산화 효과를 확인한 결과를 보인 도면.
도 3은 본 발명의 유효성분인 발효물에 포함되어 있는 천연 혼합물과 유산균 최소배지 간의 부피비에 따른 발효 정도의 차이를 확인한 도면.
도 4 및 도 5는 본 발명의 유효성분인 발효물의 미백 효과를 확인한 결과를 보인 도면.
도 6 및 도 7은 본 발명의 유효성분인 발효물의 세포 독성을 평가한 결과를 보인 도면.
도 8은 본 발명의 유효성분인 발효물이 멜라닌 생합성을 억제하는 것을 확인한 결과를 보인 도면.
도 9, 10은 본 발명의 유효성분인 발효물이 피부의 수분 함량을 증가시킨다는 결과를 보인 도면.
도 11 및 도 12는 본 발명의 유효성분인 발효물이 피부결을 개선시켜서 부드러운 피부를 갖게 한다는 결과를 보인 도면.
도 3은 본 발명의 유효성분인 발효물에 포함되어 있는 천연 혼합물과 유산균 최소배지 간의 부피비에 따른 발효 정도의 차이를 확인한 도면.
도 4 및 도 5는 본 발명의 유효성분인 발효물의 미백 효과를 확인한 결과를 보인 도면.
도 6 및 도 7은 본 발명의 유효성분인 발효물의 세포 독성을 평가한 결과를 보인 도면.
도 8은 본 발명의 유효성분인 발효물이 멜라닌 생합성을 억제하는 것을 확인한 결과를 보인 도면.
도 9, 10은 본 발명의 유효성분인 발효물이 피부의 수분 함량을 증가시킨다는 결과를 보인 도면.
도 11 및 도 12는 본 발명의 유효성분인 발효물이 피부결을 개선시켜서 부드러운 피부를 갖게 한다는 결과를 보인 도면.
이하, 본 발명에 관하여 상세하게 설명한다.
본 명세서에서 “승마(升麻)”는 미나리아재비과에 속하는 Cimicifugaheracleifolia 또는 그 동속의 식물의 뿌리를 의미할 수 있다.
본 명세서에서 “진피(陳皮)”는 운향과의 귤(Citrus unshiu Markovich) 또는 동속 식물의 성숙한 과피를 의미할 수 있다.
본 명세서에서 “감초(甘草)”는 Glycyrrhiza uralensis라는 학명을 가지는 다년생 초본 식물일 수 있다.
본 명세서에서 “치자(梔子)”는 Gardenia jasminoides과 같은 학명을 가지며 꼭두서니과(Rubiaceae)에 속하는 상록활엽 관목일 수 있다.
본 명세서에서 “오배자(五倍子)”는 오배자 진딧물과의 오배자면충이 옻나무과의 붉나무(Rhus javanica Linne) 잎에 기생하여 만들어지는 벌레집일 수 있다.
본 발명에서의 “혼합물”은 상기 승마, 진피, 감초, 치자 및 오배자를 모두 포함하는 것으로, 구체적으로 승마, 진피, 감초, 치자 및 오배자의 열수 추출물일 수 있다. 더 구체적으로, 혼합물은, 오배자의 중량에 대하여, 승마를 2∼4, 진피를 1.5∼3.5, 감초를 1∼3, 치자를 0.5∼2.5의 중량비로 포함할 수 있다. 이러한 중량비에서 본 발명의 일 목적인 피부 미백 및 보습 효과가 극대화될 수 있다. 이와 같은 관점에서 혼합물은, 오배자의 중량에 대하여, 승마를 1.5∼3.5, 진피를 2∼3, 감초를 1.5∼2.5, 치자를 1∼2의 중량비로 포함할 수 있다. 더 구체적으로 설명하면, 본 발명의 혼합물은 위와 같은 비율의 천연물을 열수 추출한 후 이를 10∼12시간 동안 상온에서 숙성시켜 얻어질 수 있다.
“발효”는 유산균의 번식에 필요한 최소배지에 유산균과 상기 혼합물을 넣어 유기물을 분해시키는 과정을 의미하는 것으로, 발효 과정에서 사용 가능한 유산균은 락토바실러스 사케이 (Lactobacillus sakei)일 수 있고, 유산균 최소배지는 유산균이 잘 배양될 수 있는 것으로 알려진 조성이라면 제한없이 사용 가능하다.
유산균 발효물은 특히 혼합물과 유산균 최소배지를 1 : 2.5∼4.5의 부피비로 첨가하여 발효시킨 결과물일 수 있다. 이러한 부피비로 유산균 발효물이 제조되었을 때 가장 우수한 발효 효율을 나타내었고, 발효에 따른 유익한 부산물이 대량으로 발생하였다. 이와 같은 관점에서, 유산균 발효물은 혼합물과 유산균 최소배지를 1 : 4∼3.5의 부피비로 첨가하여 발효시킬 수 있다.
아울러, 유산균 발효물은 특히 상기 혼합물과 유산균을 1.5∼2.5 : 1의 부피비로 첨가하여 발효시킨 결과물일 수 있다. 이러한 부피비로 유산균 발효물이 제조되었을 때 가장 우수한 발효 효율을 나타내었고, 발효에 따른 유익한 부산물이 대량으로 발생하였다. 이와 같은 관점에서, 유산균 발효물은 혼합물과 유산균을 2 : 1의 부피비로 첨가하여 발효시킨 것일 수 있다.
또한, 유산균 발효물은 특히 유산균과 유산균 최소배지를 1 : 6.5∼7.5의 부피비로 첨가하여 발효시킨 결과물일 수 있다. 이러한 부피비로 유산균 발효물이 제조되었을 때 가장 우수한 발효 효율을 나타내었고, 발효에 따른 유익한 부산물이 대량으로 발생하였다. 이와 같은 관점에서, 유산균 발효물은 특히 유산균과 유산균 최소배지를 1 : 7의 부피비로 첨가하여 발효시킨 것일 수 있다.
본 발명에서의 “발효물”은 형태 및 성질 등에 제한을 두지 않고, 혼합물의 발효과정 도중 또는 발효과정이 완료된 후 얻어지는 생성물을 제한 없이 포함하는 것이다.
"유효성분"은 단독으로 목적하는 활성을 나타내거나 또는 그 자체 활성이 없는 담체와 함께 활성을 나타낼 수 있는 성분을 의미하는 것이다.
“미백”은 피부의 미백을 의미하는 것으로 멜라닌 생성을 저해시킴에 따른 결과로 이해될 수 있다. “미백”은 구체적으로 멜라닌의 생성에 의한 증상 또는 질환, 예컨대 기미, 주근깨, 흑색종 등의 예방, 치료 및/또는 개선을 의미하는 것일 수 있다. 아울러, “미백”은 멜라닌 생성과 관계있는 유전자, 단백질 등을 조절하여 멜라닌 생성을 억제하거나 저해시키는 것을 의미할 수 있다.
“보습”은 피부 수분 함량 증가 또는 피부결 개선을 의미하는 것이다.
본 발명은 일 관점에서 승마, 진피, 감초, 치자 및 오배자 혼합물의 유산균 발효물을 유효성분으로 포함하는 미백용 화장료 조성물, 약학 조성물, 건강식품 조성물 등에 관한 것이다.
본 발명은 다른 관점에서 승마, 진피, 감초, 치자 및 오배자 혼합물의 유산균 발효물을 유효성분으로 포함하는 피부 보습용 화장료 조성물, 약학 조성물, 건강식품 조성물 등에 관한 것이다.
본 발명의 일 관점인 조성물에서, 유산균은 락토바실러스 사케이 (Lactobacillus sakei)일 수 있다.
본 발명의 일 관점인 조성물에서, 혼합물은 오배자의 중량에 대하여 승마 2∼4, 진피 1.5∼3.5, 감초 1∼3, 치자를 0.5∼2.5의 중량비로 포함할 수 있다.
본 발명의 일 관점인 조성물에서, 유산균 발효물은 혼합물과 유산균 최소배지를 1 : 2.5∼4.5의 부피비로 첨가하여 발효시킨 발효물일 수 있다.
본 발명의 일 관점인 조성물에서, 유산균 발효물은 혼합물과 유산균을 1.5∼2.5 : 1의 부피비로 첨가하여 발효시킨 발효물일 수 있다.
본 발명의 일 관점인 조성물에서, 유산균 발효물은 유산균과 유산균 최소배지를 1 : 6.5∼7.5의 부피비로 첨가하여 발효시킨 발효물일 수 있다.
본 발명의 일 관점인 화장료 조성물은 제형이 특별히 한정되지 않으며, 목적하는 바에 따라 적절히 선택할 수 있다. 예를 들어, 유연화장수(스킨로션 및 밀크로션), 영양화장수, 에센스, 영양크림, 마사지크림, 팩, 젤, 에센스, 아이크림, 아이에센스, 클렌징크림, 클렌징폼, 클렌징워터, 팩, 파우더, 보디로션, 보디크림, 보디오일 및 보디 에센스로 이루어진 군으로부터 선택된 어느 하나 이상의 제형으로 제조될 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다. 아울러, 화장료 조성물은 연고, 패치 등의 형태로 피부 외용제의 제형으로 사용하는 것을 포함할 수 있다.
본 발명의 일 관점인 화장료 조성물은 국소 적용에 적합한 모든 제형으로 제공될 수 있다. 예를 들면, 용액, 수상에 유상을 분산시켜 얻은 에멀젼, 유상에 수상을 분산시켜 얻은 에멀젼, 현탁액, 고체, 겔, 분말, 페이스트, 포말(foam) 또는 에어로졸 조성물의 제형으로 제공될 수 있다. 이러한 제형의 조성물은 당해 분야의 통상적인 방법에 따라 제조될 수 있다.
본 발명의 일 관점인 화장료 조성물은 상기한 물질 이외에 주 효과를 손상시키지 않는 범위 내에서, 바람직하게는 주 효과에 상승효과를 줄 수 있는 다른 성분들을 포함할 수 있다. 또한, 본 발명의 일 관점인 화장료 조성물은 보습제, 에몰리언트제, 자외선 흡수제, 방부제, 살균제, 산화 방지제, pH 조정제, 유기 및 무기 안료, 향료, 냉감제 또는 제한제를 더 포함할 수 있다. 이러한 성분들의 배합량은 본 발명의 목적 및 효과를 손상시키지 않는 범위 내에서 통상의 기술자가 용이하게 선정 가능하며, 그 배합량은 조성물 전체 중량을 기준으로 0.01∼5 중량%, 구체적으로 0.01∼3 중량%일 수 있다.
본 발명의 다른 관점인 약학 조성물에서, 혼합물의 유산균 발효물을 의약품에 적용할 경우에는, 조성물을 유효성분으로 하여 상용되는 무기 또는 유기의 담체를 가하여 고체, 반고체 또는 액상의 형태로 경구 투여제 혹은 비경구 투여제로 제제화 할 수 있다.
경구 투여를 위한 제재로서는 정제, 환제, 과립제, 캡슐제, 산제, 세립제, 분제, 유탁제, 시럽제, 펠렛제 등을 들 수 있다. 또한, 비경구 투여를 위한 제재로는 주사제, 점적제, 연고, 로션, 스프레이, 현탁제, 유제, 좌제 등을 들 수 있다. 본 발명의 유효성분을 제제화하기 위해서는 상법에 따라서 실시하면 용이하게 제제화할 수 있으며, 계면활성제, 부형제, 착색료, 향신료, 보존료, 안정제, 완충제, 현탁제, 기타 상용하는 보조제를 적당히 사용할 수 있다.
본 발명에 따른 약학 조성물은 경구, 비경구, 직장, 국소, 경피, 정맥 내, 근육 내, 복강 내, 피하 등으로 투여될 수 있다.
본 발명에 따른 약학 조성물의 유효 성분은 투여받을 대상의 연령, 성별, 체중, 병리 상태 및 그 심각도, 투여 경로 또는 처방자의 판단에 따라 달라질 것이다. 이러한 인자에 기초한 적용량 결정은 통상의 기술자의 수준 내에 있으며, 이의 1일 투여 용량은 예를 들어 0.1mg/kg/일 내지 100mg/kg/일, 보다 구체적으로는 5 mg/kg/일 내지 50 mg/kg/일이 될 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다.
본 발명은 또 다른 관점인 건강식품 조성물은 다양한 형태의 식품 첨가제 또는 기능성 식품을 제공한다. 이러한 조성물을 포함하는 침출차, 액상차, 음료, 발효유, 치즈, 요구르트, 주스, 생균제제 및 건강보조식품 등으로 가공될 수 있으며, 그 외 다양한 식품 첨가제의 형태로 사용될 수 있다.
일 예로, 건강식품 조성물은, 본 발명이 목적으로 하는 주 효과를 손상시키지 않는 범위 내에서 주 효과에 상승효과를 줄 수 있는 다른 성분 등을 함유할 수 있다. 예를 들어, 물성 개선을 위하여 향료, 색소, 살균제, 산화방지제, 방부제, 보습제, 점증제, 무기염류, 유화제 및 합성 고분자 물질 등의 첨가제를 더 포함할 수 있다. 그 외에도, 수용성 비타민, 유용성 비타민, 고분자 펩티드, 고분자 다당 및 해초 엑기스 등의 보조 성분을 더 포함할 수도 있다. 이러한 성분들은 제형 또는 사용 목적에 따라서 통상의 기술자가 어려움 없이 적절하게 선정하여 배합할 수 있으며, 그 첨가량은 본 발명의 목적 및 효과를 손상시키지 않는 범위 내에서 선택될 수 있다. 예를 들어, 상기 성분들의 첨가량은, 조성물 전체 중량을 기준으로, 0.01∼5 중량%, 보다 구체적으로는 0.01∼3 중량%일 수 있다.
본 발명에 따른 조성물의 제형은 용액, 유화물, 점성형 혼합물, 타블렛, 분말 등의 다양한 형태일 수 있으며, 이는 단순 음용, 주사 투여, 스프레이 방식 또는 스퀴즈 방식 등의 다양한 방법으로 투여될 수 있다.
이하, 실시예를 통하여 본 발명을 더욱 상세히 설명하고자 한다. 이들 실시예는 오로지 본 발명을 예시하기 위한 것으로, 본 발명의 범위가 이들 실시예에 의해 제한되는 것으로 해석되지 않는 것은 당업계에서 통상의 지식을 가진 자에게 있어서 자명할 것이다.
[
실시예
1] 승마, 진피, 감초, 치자 및 오배자 혼합물의 제조
승마, 진피, 감초, 치자, 오배자를 30:25:20:15:10의 비율로 혼합한 후, 멸균하였다. 원료 부피의 10배만큼 증류수를 첨가하여 추출은 4시간 동안 80℃에서 고온 중탕한 후 10~12시간 숙성하였다.
[
실시예
2] 유산균
발효물의
제조
실시예 1에서 얻어진 혼합물에 유산균 락토바실러스 사케이를 1.8*108CFU/ml로 100ml접종을 한 후, [표 1]과 같은 부피비의 유산균 최소배지(2% whole milk powder)에 넣어 주었다. 3일 동안 35℃에서 배양시킨 후 얻어진 결과물을 감압여과시키고 4℃에서 3,000rpm으로 10분간 원심분리하여 여액을 취한 후 진공농축기(EYELA)로 감압농축시키고 동결건조하여 이하의 실험예에서 사용하였다.
실시예 | 실시예 1의 혼합물 | 최소배지 | 유산균 |
A | 5 | 4 | 1 |
B | 4 | 5 | 1 |
C | 3 | 6 | 1 |
D | 2 | 7 | 1 |
E | 1 | 8 | 1 |
[
실험예
1] 유산균
발효물의
항산화능
평가
실시예 2에서 제조한 유산균 발효물 각각의 항산화 효과를 알아보기 위하여, DPPH(1,1-diphenyl-2-picryl-hydrazyl) assay와 ABTS assay로 자유 라디컬 소거능을 측정하였다. 당업계에 알려진 항산화제인 L-아스코르빈산(L-ascobic acid, L-A)을 양성대조군으로 사용하였다. 각각의 실험군은 각각 50μℓ/ml, 100μℓ/ml, 200μℓ/ml 씩 사용하여 실험하였고, 그 결과 도 1 및 2를 얻게 되었다.
이렇게 얻어진 도 1 및 도 2에 의할 때, 본 발명의 유효성분인 혼합물의 유산균 발효물이 항산화능을 가지는 것을 확인할 수 있었다. 특히, 도 1 및 도 2에 의할 때, 혼합물이나 배지 성분의 양에 따라 농도 의존적으로 항산화능이 증가하는 것이 아니라, 특정 실험군, 구체적으로 실시예 D에서 가장 우수한 항산화능을 나타내는 것을 확인할 수 있었다.
[
실험예
2] 유산균
발효물의
발효 정도 평가
실시예 2에서 제조한 유산균 발효물 각각의 발효 정도를 확인하기 위해 Bernfeld의 방법으로 α-Amylase 활성을 측정하였고, 그 결과 도 3이 얻어졌다.
도 3에서 볼 수 있는 바와 같이, 혼합물이나 배지 성분의 양에 따라 농도 의존적으로 항산화능이 증가하는 것이 아니라 특정 실험군, 구체적으로 실시예 D에서 가장 우수한 발효 정도를 나타내는 것을 확인할 수 있었다.
[
실험예
3] 유산균
발효물의
티로시나제
활성
억제능
및 L-
dopa
산화
억제능
평가
0.175M 소듐 포스페이트 버퍼(pH 6.8) 0.5 mL에 10 mM L-dopa 를 녹여준 기질액 0.2 mL 과 각각의 실험시료 0.1 mL를 혼합한 후, 버섯의 티로시나제 (110 U/mL) 0.2 mL을 첨가하여 25℃에서 2분간 반응시켰다. 각각의 실험시료는 당업계에 티로시나제 활성 억제 및 L-dopa 산화 억제 효과를 갖는 것으로 알려진 알부틴(Arb), 실험예 2에서 제조한 각각의 유산균 발효물을 100μg/ml, 200μg/ml, 400μg/ml의 농도로 사용하였다. 그 후 생성된 도파크롬(dopachrome)의 생성량을 475nm에서 흡광도를 측정하여 이로부터 L-dopa 산화 억제율을 계산한 것을 도 5에 나타내었고, 각각의 실험시료에서 얻어진 흡광도와 시료를 첨가하지 않은 실험군에서의 흡광도 감소율로부터 티로시나제 억제율을 구한 것을 도 4에 나타내었다.
그 결과, 혼합물이나 배지 성분의 양에 따라 농도 의존적으로 산화 억제율이나 티로시나제 억제율이 증가하는 것이 아니라, 특정 실험군, 구체적으로 실시예 D에서 가장 우수한 효과를 나타내는 것을 확인하였다.
[
실험예
4] 유산균
발효물의
세포 독성 유무 확인
세포 독성을 확인하기 위하여 마우스 유래 B16/F1세포(한국 세포주 은행)와 Raw264.7세포(한국 세포주 은행)를 사용하였다. 페니실린/스트렙토마이신 (penicillin/streptomycin, GIBCO) 1%와 소 태아 혈청(fetal bovine serum, GIBCO) 10%가 함유된 DMEM(Lonza) 배지에서 각각의 세포에 실험예 2에서 얻어진 각각의 시료를 처리하고 37°C, 5% CO2항온기에서 배양시켰다. 그 후 각각의 배양세포에서 MTT(3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyltetrazolium bromide) 어세이를 이용하여 세포 독성 여부를 확인하여 도 6 및 도 7에 나타내었다. MTT는 담황색의 기질로 살아있는 세포의 미토콘드리아 내 효소와 반응하여 포르마잔(Formazan)을 형성하는데, 이 포르마잔을 DMSO(Dimethyl sulfoxide)에 녹여 570nm의 흡광도를 측정하면 세포 생존율을 측정할 수 있다.
그 결과, 도 6 및 도 7에서 확인할 수 있는 바와 같이, 본 발명의 유효성분인 유산균 발효물은 세포 독성을 나타내지 않았다.
[
실험예
5] 유산균
발효물의
멜라닌 생성
억제능
평가
세포 내 멜라닌의 함량을 측정하여 멜라노사이트에서의 멜라닌 생합성 량을 알아 보았다. 1 × 105개의 B16/F1세포(한국 세포주 은행)를 세포 배양 디쉬에 분주하여 24시간 동안 배양하였고, 멜라노사이트 세포에서 멜라닌 생성을 가져오는 α-MSH(α-Melanocyte-stimulating hormone, α-M) 100nM을 각각의 세포에 처리하여 멜라닌 생성을 유발시켰다.
α-MSH(α-Melanocyte-stimulating hormone, α-M) 100nM만을 처리한 실험군을 음성 대조군으로 사용하였고, 당업계에 멜라닌 생성 억제 효과를 갖는 것으로 알려져 있는 알부틴(Arb) 50μg/ml 및 100μg/ml 각각을 멜라닌 생성 유발 세포에 처리한 실험군을 양성 대조군으로 하였으며, 실시예 2에서 제조한유산균 발효물 각각을 50μg/ml 및 100μg/ml씩 처리하였다. 3일이 경과한 후 각각의 실험군을 PBS (phosphate buffered saline)로 씻어주었고 10% DMSO (dimethyl sulfoxide)를 포함하는 1 N NaOH 용액으로 처리한 후 80℃에서 1시간 동안 반응시켰다. 그 후, 475 nm에서 흡광도를 측정하여 도 8을 얻었다.
그 결과, 혼합물이나 배지 성분의 양에 따라 농도 의존적으로 산화 억제율이나 티로시나제 억제율이 증가하는 것이 아니라, 특정 실험군, 구체적으로 실시예 D에서 가장 우수한 효과를 나타내는 것을 확인하였다.
[
실험예
6] 유산균
발효물
보습효과
평가(임상)
실시예 D의 발효물을 아래 제형예 1의 제형으로 제조한 로션을 피시험자 안면부에 도포하고 일정시간(4시간)이 지난 후 피부의 수분함량과 피부결 개선 정도를 확인하였다(대한피부과학연구소 진행 의뢰). 그 결과, 도 9 내지 도 12와 같은 결과를 얻었다. 이로부터 본 발명의 유효성분인 유산균 발효물이 우수한 피부 보습 및 피부결 개선 효과를 가진다는 것을 알 수 있었다.
이하, 본 발명에 따른 조성물의 제형 예를 설명하나, 이는 여러 가지 제형으로 응용 가능하며, 이는 본 발명을 한정하고자 함이 아닌 단지 구체적으로 설명하고자 함이다.
[
제제예
1]
연질캅셀제
실시예 D의 유산균 발효물150 mg, 팜유 2 mg, 팜경화유 8 mg, 황납 4 mg 및 레시틴 6 mg을 혼합하고, 통상의 방법에 따라 1 캡슐당 400 mg씩 충진하여 연질캅셀을 제조하였다.
[
제제예
2] 정제
실시예 D의 유산균 발효물150 mg, 포도당 100 mg, 홍삼추출물 50 mg, 전분 96 mg 및 마그네슘 스테아레이트 4 mg을 혼합하고 30% 에탄올을 40 mg 첨가하여 과립을 형성한 후, 60℃에서 건조하고 타정기를 이용하여 정제로 타정하였다.
[
제제예
3] 과립제
실시예 D의 유산균 발효물150 mg, 포도당 100 mg, 홍삼추출물 50 mg 및 전분 600 mg을 혼합하고 30% 에탄올을 100 mg 첨가하여 과립을 형성한 후, 60℃에서 건조하여 과립을 형성한 다음 포에 충진하였다. 내용물의 최종 중량은 1g으로 하였다.
[
제제예
4] 드링크제
실시예 D의 유산균 발효물150 mg, 포도당 10 g, 홍삼추출물 50 mg, 구연산 2 g 및 정제수 187.8 g을 혼합하고 병에 충진하였다. 내용물의 최종 용량은 200 ml로 하였다.
[
제제예
5]
건강 식품의
제조
실시예 D의 유산균 발효물.............................. 1000 ㎎
비타민 혼합물
비타민 A 아세테이트...................................70 ㎍
비타민 E ............................................ 1.0 ㎎
비타민 B1............................................ 0.13 ㎎
비타민 B2 ........................................... 0.15 ㎎
비타민 B6............................................ 0.5 ㎎
비타민 B12........................................... 0.2 ㎍
비타민 C............................................. 10 ㎎
비오틴............................................... 10 ㎍
니코틴산아미드....................................... 1.7 ㎎
엽산................................................. 50 ㎍
판토텐산 칼슘........................................ 0.5 ㎎
무기질 혼합물
황산제1철........................................... 1.75 ㎎
산화아연............................................ 0.82 ㎎
탄산마그네슘........................................ 25.3 ㎎
제1인산칼륨......................................... 15 ㎎
제2인산칼슘......................................... 55 ㎎
구연산칼륨.......................................... 90 ㎎
탄산칼슘............................................ 100 ㎎
염화마그네슘........................................ 24.8 ㎎
상기의 비타민 및 미네랄 혼합물의 조성비는 비교적 건강식품에 적합한 성분을 바람직한 실시예로 혼합 조성하였지만, 그 배합비를 임의로 변형 실시하여도 무방하며, 통상의 건강식품 제조방법에 따라 상기의 성분을 혼합한 다음, 과립을 제조하고, 통상의 방법에 따라 건강식품 조성물 제조에 사용할 수 있다.
[
제제예
6] 건강 음료의 제조
실시예 D의 유산균 발효물............................ 1000 ㎎
구연산.............................................. 1000 ㎎
올리고당............................................ 100 g
매실농축액.......................................... 2 g
타우린.............................................. 1 g
정제수를 가하여 전체................................ 900 ㎖
통상의 건강음료 제조방법에 따라 상기의 성분을 혼합한 다음, 약 1시간 동안 85℃에서 교반 가열한 후, 만들어진 용액을 여과하여 멸균된 2ℓ용기에 취득하여 밀봉 멸균한 뒤 냉장 보관한 다음 본 발명의 건강음료 조성물 제조에 사용한다.
상기 조성비는 비교적 기호음료에 적합한 성분을 바람직한 실시예로 혼합 조성하였지만 수요계층이나, 수요국가, 사용 용도 등 지역적, 민족적 기호도에 따라서 그 배합비율을 임의로 변형 실시하여도 무방하다. 본 발명이 속한 기술 분야에서 통상의 지식을 가진 자라면 상기 내용을 바탕으로 본 발명의 범주 내에서 다양한 응용 및 변형을 행하는 것이 가능할 것이다.
[
제형예
1] 로션
배합성분 | 중량% |
실시예 D의 유산균 발효물 | 3.00 |
L-아스코르빈산-2-인산마그네슘염 | 1.00 |
수용성 콜라겐 (1% 수용액) | 1.00 |
시트르산나트륨 | 0.10 |
시트르산 | 0.05 |
백굴채엑기스 | 0.20 |
1,3-부틸렌글리콜 | 3.00 |
정제수 | to 100 |
[
제형예
2] 크림
배합성분 | 중량% |
실시예 D의 유산균 발효물 | 1.00 |
폴리에틸렌글리콜모노스테아레이트 | 2.00 |
자기유화형모노스테아르산글리세린 | 5.00 |
세틸알코올 | 4.00 |
스쿠알렌 | 6.00 |
트리2-에틸헥산글리세릴 | 6.00 |
스핑고당지질 | 1.00 |
1,3-부틸렌글리콜 | 7.00 |
정제수 | to 100 |
[
제형예
3] 팩
배합성분 | 중량% |
실시예 D의 유산균 발효물 | 5.00 |
폴리비닐알코올 | 13.00 |
L-아스코르빈산-2-인산마그네슘염 | 1.00 |
라우로일히드록시프롤린 | 1.00 |
수용성 콜라겐 (1% 수용액) | 2.00 |
1,3-부틸렌글리콜 | 3.00 |
에탄올 | 5.00 |
정제수 | to 100 |
[
제형예
4] 미용액
배합성분 | 중량% |
실시예 D의 유산균 발효물 | 2.00 |
히드록시에틸렌셀룰로오스 (2% 수용액) | 12.00 |
크산탄검 (2% 수용액) | 2.00 |
1,3-부틸렌글리콜 | 6.00 |
진한 글리세린 | 4.00 |
히알루론산나트륨 (1% 수용액) | 5.00 |
정제수 | to 100 |
[
제형예
5] 연고
배합 성분 | 함량(중량%) |
실시예 D의 유산균 발효물 | 0.1 |
글리세린 | 8.0 |
부틸렌글리콜 | 4.0 |
유동파라핀 | 15.0 |
베타글루칸 | 7.0 |
카보머 | 0.1 |
카프릴릭/카프릭트리글리세라이드 | 3.0 |
스쿠알란 | 1.0 |
세테아릴글루코사이드 | 1.5 |
소르비탄스테아레이트 | 0.4 |
세테아릴 알코올 | 1.0 |
밀납 | 4.0 |
방부제, 색소, 향료 | 적량 |
정제수 | 잔량 |
이상으로 본 발명 내용의 특정한 부분을 상세히 기술하였는 바, 당업계의 통상의 지식을 가진 자에게 있어서 이러한 구체적 기술은 단지 바람직한 실시태양일 뿐이며, 이에 의해 본 발명의 범위가 제한되는 것이 아닌 점은 명백할 것이다. 따라서, 본 발명의 실질적인 범위는 첨부된 청구항들과 그것들의 등가물에 의하여 정의된다고 할 것이다.
Claims (11)
- 승마, 진피, 감초, 치자 및 오배자 혼합물의 유산균 발효물을 유효성분으로 포함하는 미백용 화장료 조성물.
- 승마, 진피, 감초, 치자 및 오배자 혼합물의 유산균 발효물을 유효성분으로 포함하는 미백용 약학 조성물.
- 승마, 진피, 감초, 치자 및 오배자 혼합물의 유산균 발효물을 유효성분으로 포함하는 미백용 건강식품 조성물.
- 승마, 진피, 감초, 치자 및 오배자 혼합물의 유산균 발효물을 유효성분으로 포함하는 보습용 화장료 조성물.
- 승마, 진피, 감초, 치자 및 오배자 혼합물의 유산균 발효물을 유효성분으로 포함하는 보습용 약학 조성물.
- 승마, 진피, 감초, 치자 및 오배자 혼합물의 유산균 발효물을 유효성분으로 포함하는 보습용 건강식품 조성물.
- 청구항 1 내지 청구항 6 중 어느 한 항에 있어서,
상기 유산균은 락토바실러스 사케이(Lactobacillus sakei)인 것을 특징으로 하는 조성물. - 청구항 7에 있어서,
상기 혼합물은, 오배자의 중량에 대하여, 승마를 2∼4, 진피를 1.5∼3.5, 감초를 1∼3, 치자를 0.5∼2.5의 중량비로 포함하는 것을 특징으로 하는 조성물. - 청구항 8에 있어서,
상기 유산균 발효물은 상기 혼합물과 유산균 최소배지를 1 : 2.5∼4.5의 부피비로 발효시킨 발효물인 것을 특징으로 하는 조성물. - 청구항 8에 있어서,
상기 유산균 발효물은 상기 혼합물과 상기 유산균을 1.5∼2.5 : 1의 부피비로 발효시킨 발효물인 것을 특징으로 하는 조성물. - 청구항 8에 있어서,
상기 유산균 발효물은 상기 유산균과 유산균 최소배지를 1: 6.5∼7.5의 부피비로 발효시킨 발효물인 것을 특징으로 하는 조성물.
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