KR20180100854A - Production method of amino acids powder using hydrolysis of Tenebrio molitor and the amino acids powder by this method - Google Patents

Production method of amino acids powder using hydrolysis of Tenebrio molitor and the amino acids powder by this method Download PDF

Info

Publication number
KR20180100854A
KR20180100854A KR1020170027190A KR20170027190A KR20180100854A KR 20180100854 A KR20180100854 A KR 20180100854A KR 1020170027190 A KR1020170027190 A KR 1020170027190A KR 20170027190 A KR20170027190 A KR 20170027190A KR 20180100854 A KR20180100854 A KR 20180100854A
Authority
KR
South Korea
Prior art keywords
amino acid
brown
acid powder
amino acids
producing
Prior art date
Application number
KR1020170027190A
Other languages
Korean (ko)
Other versions
KR101898711B1 (en
Inventor
주영진
Original Assignee
주식회사 한성바이오파마
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by 주식회사 한성바이오파마 filed Critical 주식회사 한성바이오파마
Priority to KR1020170027190A priority Critical patent/KR101898711B1/en
Publication of KR20180100854A publication Critical patent/KR20180100854A/en
Application granted granted Critical
Publication of KR101898711B1 publication Critical patent/KR101898711B1/en

Links

Classifications

    • AHUMAN NECESSITIES
    • A23FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23JPROTEIN COMPOSITIONS FOR FOODSTUFFS; WORKING-UP PROTEINS FOR FOODSTUFFS; PHOSPHATIDE COMPOSITIONS FOR FOODSTUFFS
    • A23J3/00Working-up of proteins for foodstuffs
    • A23J3/04Animal proteins
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A23FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23JPROTEIN COMPOSITIONS FOR FOODSTUFFS; WORKING-UP PROTEINS FOR FOODSTUFFS; PHOSPHATIDE COMPOSITIONS FOR FOODSTUFFS
    • A23J3/00Working-up of proteins for foodstuffs
    • A23J3/30Working-up of proteins for foodstuffs by hydrolysis
    • A23J3/32Working-up of proteins for foodstuffs by hydrolysis using chemical agents
    • A23J3/34Working-up of proteins for foodstuffs by hydrolysis using chemical agents using enzymes
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A23FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23VINDEXING SCHEME RELATING TO FOODS, FOODSTUFFS OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES AND LACTIC OR PROPIONIC ACID BACTERIA USED IN FOODSTUFFS OR FOOD PREPARATION
    • A23V2250/00Food ingredients
    • A23V2250/20Natural extracts
    • A23V2250/204Animal extracts
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A23FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23VINDEXING SCHEME RELATING TO FOODS, FOODSTUFFS OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES AND LACTIC OR PROPIONIC ACID BACTERIA USED IN FOODSTUFFS OR FOOD PREPARATION
    • A23V2300/00Processes
    • A23V2300/10Drying, dehydrating
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A23FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23VINDEXING SCHEME RELATING TO FOODS, FOODSTUFFS OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES AND LACTIC OR PROPIONIC ACID BACTERIA USED IN FOODSTUFFS OR FOOD PREPARATION
    • A23V2300/00Processes
    • A23V2300/31Mechanical treatment
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A23FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23VINDEXING SCHEME RELATING TO FOODS, FOODSTUFFS OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES AND LACTIC OR PROPIONIC ACID BACTERIA USED IN FOODSTUFFS OR FOOD PREPARATION
    • A23V2300/00Processes
    • A23V2300/50Concentrating, enriching or enhancing in functional factors

Landscapes

  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Nutrition Science (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Food Science & Technology (AREA)
  • Polymers & Plastics (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Coloring Foods And Improving Nutritive Qualities (AREA)

Abstract

The present invention relates to a method for producing amino acid powder through hydrolysis of Tenebrio molitor, and amino acid powder produced thereby. More specifically, the method comprises: 1) sterilizing Tenebrio molitor for medical and food uses, selected from the group consisting of larva, pre-pupa, and pupa, and preprocessing the same via freeze-drying if needed; 2) adding ethanol to the Tenebrio molitor to extract proteins therefrom; 3) treating the extracted proteins with proteolytic enzymes to hydrolyze the proteins into amino acids; and 4) filtering the amino acids obtained through hydrolysis, and concentrating the amino acids into solids. The Tenebrio molitor amino acid powder produced according to the present invention is amino acid powder of good quality with an increased content of essential amino acids, and thus is suitable for medical and food uses.

Description

갈색거저리의 가수분해를 통한 아미노산 분말의 제조 방법 및 상기 방법으로 제조된 아미노산 분말 {Production method of amino acids powder using hydrolysis of Tenebrio molitor and the amino acids powder by this method}[0001] The present invention relates to a method for producing amino acid powder by hydrolysis of brown gruel and an amino acid powder prepared by the above method,

본 발명은 갈색거저리의 가수분해를 통한 아미노산 분말의 제조 방법 및 상기 방법으로 제조된 아미노산 분말에 관한 것으로서, 보다 상세하게는 갈색거저리를 전처리한 후 단백질을 추출하고 이로부터 아미노산을 가수분해한 후 이를 고형분으로 농축하는 갈색거저리의 아미노산 분말의 제조 방법 및 상기 방법으로 제조된 아미노산 분말에 관한 것이다.The present invention relates to a process for producing amino acid powders by hydrolysis of brown gorges and to amino acid powders prepared by the method. More particularly, the present invention relates to a process for preparing amino acids by hydrolyzing amino acids, The present invention relates to a method for producing an amino acid powder of brown gruel which is concentrated to a solid content and an amino acid powder prepared by the above method.

갈색거저리(Tenebrio molitor)는 딱정벌레목 거저리과에 속하는 곤충으로 원산지는 남미주이며 중국에서는 약 100여 년의 사육역사가 있고 1950년대에 북경동물원에서 구소련으로부터 들여와 사육하기 시작하여 최근까지 널리 확산되어 사육중에 있다.The brown goose (Tenebrio molitor) belongs to the beetle family. It is native to South America. It has a history of about 100 years of breeding in China. It began to be imported from the Soviet Union in the Beijing Zoo in the 1950s. .

중국에서는 황분충(黃分蟲)으로 영어로는 Yellow mealworm이라고 불리며 흔히 저장곡물 해충으로 알려져 있는 다른 거저리종류(외미거저리, lesser mealworm) 등과 달리 식용, 사료용 및 산업용으로 활용할 수 있는 산업곤충으로 인식되고 있다. 갈색거저리의 연구는 주로 유럽 등에서 면역기능과 관련한 생리학적 연구들이 진행되어져 왔으며 성충의 수명이 부화율에 미치는 영향, 갈색거저리의 성페로몬에 대한 연구, 산소농도와 생존률에 관한 연구 등을 비롯한 생리학적 연구가 대부분이었다. 최근에는 산업화를 위한 연구들도 진행되고 있어 일처다부의 교미 행동 습성, 면역기능과 체색이 수명 및 산란수에 미치는 영향 등과 같은 연구들이 있으며 중국에서는 대량생산에 대한 많은 연구들이 진행중에 있다. 자연 상태의 갈색거저리는 연중 1세대 발육하는 것으로 알려져 있으나 사육온도에 따라 연중 다세대 발육이 가능하다. 주로 유충태로 월동하여 이듬해 번데기가 된 후 우화 하여 번식한다. 성충의 수명은 50~160일이며 일반적으로 60~90일로 알려져 있고 산란기는 22~137일로 암컷의 평균 산란양은 400~500개이며 알 기간은 약 1~2주 정도이다. 갈색거저리 알은 유백색으로 성충의 체장은 1.25㎜이며 긴 타원형에 유백색을 띈다. 알껍데기는 무르고 약하며 산란할 때 점액이 분비되어 먹이나 배설물 등을 붙여 보호막역할을 한다.In China, it is recognized as yellow insect, which is called yellow mealworm in English and can be used for edible, feed and industrial purposes, unlike other kinds of gourd commonly known as stored grain insects (eg, lesser mealworm) have. Studies on brown ducks have been carried out mainly on physiological studies related to immune function in Europe, and studies on the effects of adult life on hatching rate, sex pheromone on brown duck, study on oxygen concentration and survival rate, . In recent years, studies for industrialization have been carried out, and there have been studies such as mating behavior behavior of the first dwarf, the effect of immune function and body color on the life span and the number of eggs, and many studies on mass production in China are under way. It is known that natural brown ducks grow first in the year, but it is possible to develop multi-generations during the year depending on the temperature of rearing. It grows largely after it grows to the pupa of the next year. The adult life span is between 50 and 160 days, commonly known as 60 to 90 days, the spawning period is between 22 and 137 days, and the average egg scattering is between 400 and 500, with an egg duration of about 1 to 2 weeks. It is milky white with an egg length of 1.25㎜ and has long oval shape and milky white color. Egg shell is weak and weak, and secretes mucus when it is spawning and attaches food or excretion to protect it.

유충은 완전 탈바꿈하며 탈피시 연한 유백색에서 황갈색으로 변하며 유충기간은 약 4~10개월로 14~15회 탈피하는 것으로 알려져 있다. 용화된 번데기는 15~19㎜정도의 크기로 황갈색이며 복부 끝의 돌기(유두)로 암컷과 수컷을 구별할 수 있다. 용화된지 1~2주 후에 우화 하며 우화 후 4~5일 후부터는 교미와 산란을 시작한다. 갈색거저리는 일생동안 여러 번 교미를 하며 1회 산란양은 5~15개(최대 30개)로 알려져 있다.The larvae are completely transformed and change from milky white to yellowish brown when ripened. The larval period is about 4 ~ 10 months and it is known to peel out 14 ~ 15 times. The littered pupa is about 15-19 mm in size and is tawny buff. It can distinguish between male and female with the nipple (nipple) at the end of the abdomen. After 1 ~ 2 weeks, it is alienated. After 4 ~ 5 days after mating, mating and spawning are started. Brown ducks are mating several times throughout their lives, and the amount of spawning is known to be 5 to 15 (up to 30).

갈색거저리의 몸길이는 약 15mm정도이며, 몸 빛깔이 구룡충(구룡거저리)과 비슷해 어두운 갈색이며 광택이 난다. 머리에 점들이 있으나 촘촘히 나 있지 않으며, 촉각(더듬이)의 끝마디는 길이와 나비가 같다. 앞가슴등판은 정사각형이고, 뒷가두리의 새로홈은 뚜렷하며, 복판은 나비가 넓은 오각형이다. 딱지날개는 갈색으로 8줄의 새로홈이 있고 간실은 볼록하며 작은 점들이 촘촘히 있다. 성충은 주로 곡류 속에 알을 낳는데, 알은 매우 작아 눈으로 쉽게 찾을 수 없으며 12주일 후 부화한다. 갈색거저리의 추출물은 밀웜(mealworm)이라 하여 먹이곤충이나 애완용으로 많이 사육하는데, 추출물 기간은 약 10주이나 인공 사육할 때에는 약 2주 정도이다. 밀웜이 애완용으로 이용되는 이유는 변태기간이 비교적 짧아 곤충을 쉽게 체험할 수 있고 곡식을 먹이로 하는 매우 청결한 곤충이기 때문이다. 추출물은 번데기가 되기까지 먹이와 온도에 따라 920번 탈피한다. 번데기가 되고 23주가 지나면 성충으로 우화하며 처음으로 우화할 때에는 연한 갈색이나 점차 검게 변한다. 성충은 야행성으로 낮에는 구멍 속에 숨어 지내다가 밤에 활동한다. 주로 인가 근처의 곡식부대 속에서 추출물로 월동하다가 봄에 번데기와 성충으로 변태한다. 곡식의 해충으로 유명하며 최근 동물원에서 새나 고슴도치와 같은 작은 동물의 먹이로 많이 기르고 있으며, 한국을 비롯하여 전 세계에 분포한다.The body length of the brown goose is about 15mm, and the color of the body is dark brown and glossy like Kowloon Chowder. There are dots on the head but not densely. The tip of tactile sense is the same length and butterfly. The back of the breast is square, the new groove of the rear rim is distinct, and the middle is a pentagram with a wide bow. The wing wings are brown, with eight new grooves, the convex side of the liver, and small dots. Adult larvae lay eggs mainly in grains, eggs are so small that they can not be easily found by the eyes and hatch after 12 weeks. Extracts of brown goats are called mealworm, and they are largely reared in food insects and pets. The duration of the extract is about 10 weeks, but about two weeks when artificially raising. The reason that wheat worms are used for pets is that they are relatively clean insects because they have relatively short periods of transformation, and they are very clean insects that feed on grain. The extract is molted 920 times depending on the prey and temperature until it becomes a pupa. It becomes a pupa and becomes an adult after 23 weeks. When it first becomes allegory, it changes to light brown or gradually black. Adults are nocturnal, hiding in the hole during the daytime and active at night. It grows in pupa and adultery in spring when it is wintering with extract in the grain bag near the main shrine. It is famous for grain pests and has been growing in recent zoos as food for small animals such as birds and hedgehogs, and is distributed throughout Korea and around the world.

현재 갈색거저리를 이용한 특허로는 갈색거저리를 함유하는 사료(공개특허 10-2011-0054692), 갈색거저리 추출물에서 분리한 항진균 단백질(대한민국 등록특허 10-0230959) 등이 있고, 밝혀진 용도는 아직 많지 않다.Currently, the patent using brown gurus includes a brown gurr-containing feed (Patent Publication No. 10-2011-0054692), an antifungal protein isolated from a brown gurr extract (Korean Patent No. 10-0230959) .

이에, 본 발명자들은 양질의 필수 아미노산 함량이 높은 갈색거저리에서 아미노산을 얻는 방법을 강구하던 중, 단백질 가수분해 효소를 이용한 가수분해로 높은 고형분의 아미노산 분말의 제조가 가능함을 확인함으로써 본 발명을 완성하였다.Accordingly, the inventors of the present invention have completed the present invention by confirming that it is possible to produce a high-solids amino acid powder by hydrolysis using a protein hydrolyzing enzyme while obtaining a method for obtaining an amino acid from a brown gourd having a high essential amino acid content .

본 발명의 목적은 갈색거저리를 단백질 가수분해 효소를 이용한 가수분해로 양질의 필수 아미노산과 고형분의 함량이 높은 아미노산 분말의 제조 방법 및 상기 방법으로 제조된 아미노산 분말을 제공하는 것이다.It is an object of the present invention to provide a process for producing an amino acid powder having a high content of essential amino acids and solids with good quality by hydrolysis of a brown gruel with a protein hydrolyzing enzyme and an amino acid powder prepared by the above method.

상기 목적을 달성하기 위하여, 본 발명은 1) 유충(larva), 용화직전 번데기(pre-pupa) 및 번데기(pupa)로 이루어진 군중에서 선택된 갈색거저리를 절식시켜 장내 이취물을 제거하고, 식의료용으로 사용하기 위해 살균하고, 필요에 따라 동결건조하는 전처리 단계; 2) 상기 갈색거저리에 주정을 가하여 단백질을 추출하는 단계; 3) 상기 추출된 단백질에 단백질 분해효소를 처리하여 아미노산으로 가수분해시키는 단계; 및 4) 상기 가수분해로 얻어진 아미노산을 여과하고 고형분으로 농축하는 단계;를 포함하는 갈색거저리 아미노산 분말의 제조 방법을 제공한다.In order to accomplish the above object, the present invention provides a method for preparing a medicament for the purpose of: 1) eliminating intestinal odor by fasting a brown duck selected from the group consisting of a larva, a pre-pupa and a pupa, A pretreatment step of sterilizing for use and lyophilizing if necessary; 2) extracting the protein by adding alcohol to the brown gourd; 3) hydrolyzing the extracted protein by treatment with a proteolytic enzyme to an amino acid; And 4) filtering the amino acid obtained by the hydrolysis and concentrating the amino acid by solidification.

또한, 본 발명은 상기 방법으로 제조된 갈색거저리 아미노산 분말을 제공한다.In addition, the present invention provides a brownish rough amino acid powder prepared by the above method.

이하, 본 발명을 상세히 설명한다.Hereinafter, the present invention will be described in detail.

본 발명은 1) 유충(larva), 용화직전 번데기(pre-pupa) 및 번데기(pupa)로 이루어진 군중에서 선택된 갈색거저리를 절식시켜 장내 이취물을 제거하고, 식의료용으로 사용하기 위해 살균하고, 필요에 따라 동결건조하는 전처리 단계; 2) 상기 갈색거저리에 주정을 가하여 단백질을 추출하는 단계; 3) 상기 추출된 단백질에 단백질 분해효소를 처리하여 아미노산으로 가수분해시키는 단계; 및 4) 상기 가수분해로 얻어진 아미노산을 여과하고 고형분으로 농축하는 단계;를 포함하는 갈색거저리 아미노산 분말의 제조 방법을 제공한다.The present invention relates to: 1) a method for removing intestinal odor by fasting a brown duck selected from the group consisting of a larva, a pre-pupa, and a pupa, sterilizing it for use in a food medical application, A pretreatment step of freeze-drying according to 2) extracting the protein by adding alcohol to the brown gourd; 3) hydrolyzing the extracted protein by treatment with a proteolytic enzyme to an amino acid; And 4) filtering the amino acid obtained by the hydrolysis and concentrating the amino acid by solidification.

본 발명의 갈색거저리 아미노산 분말의 제조 방법에 있어서, 상기 1) 단계의 전처리 단계는 추가적으로 상기 갈색거저리를 절식(絶食)시켜 장내 이취물을 제거하는 단계를 포함하는 것이 바람직하고, 상기 1) 단계의 살균은 110℃에서 1.0 kgf/cm2의 압력으로 5분 및 120℃에서 1.3 kgf/cm2의 압력으로 10분 동안의 고온고압 멸균인 것이 바람직하면, 상기 1) 단계의 동결건조는 동결건조기를 사용하여 48시간 동안 수분이 제거될 때 까지 건조하고 이를 분말로 분쇄하는 것이 바람직하다.Preferably, the pretreatment step of step 1) further comprises a step of removing the intestinal odorant by fasting the brown gorilla. In the method of the first step, It is preferable that the sterilization is performed at 110 ° C for 5 minutes at a pressure of 1.0 kgf / cm 2 and at a pressure of 1.3 kgf / cm 2 at 120 ° C for 10 minutes. The lyophilization in the above step 1) It is preferable to dry the mixture for 48 hours to remove moisture and pulverize it into powder.

또한, 본 발명의 갈색거저리 아미노산 분말의 제조 방법에 있어서, 상기 2) 단계의 단백질 추출은 30% 주정의 상기 갈색거저리 중량의 10배수를 가하여 90℃에서 3시간씩 2회 추출하여 이루어지는 것이 바람직하고, 이때 상기 추출은 와트만 여과지(Wattman filter; No. 2) 또는 원심분리(5,000 rpm, 30분)로 잔류물을 제거하고 추출액을 회수하는 단계를 포함하는 것이 보다 바람직하다.In addition, in the method for preparing the brownish rough amino acid powder of the present invention, the protein extraction in the step 2) is preferably performed by adding 10 times the weight of the brown gruel of 30% alcohol, and extracting twice at 90 ° C for 3 hours , Wherein the extraction comprises removing the residues with a Wattman filter (No. 2) or centrifugation (5,000 rpm, 30 minutes) and recovering the extract.

또한, 본 발명의 갈색거저리 아미노산 분말의 제조 방법에 있어서, 상기 3) 단계의 단백질 분해효소로 Protamex 0.5%(w/w)를 사용하고 가수분해는 상기 효소를 4시간 동안 처리하는 것이 바람직하다.In addition, in the method for producing the brownish-tinged amino acid powder of the present invention, Protamex 0.5% (w / w) is preferably used as the protease of step 3) and hydrolysis is preferably performed for 4 hours.

또한, 본 발명의 갈색거저리 아미노산 분말의 제조 방법에 있어서, 상기 4) 단계의 고형분으로의 농축은 70℃ 이하의 온도에서 회전 진공 증발기(Rotatory vacuum evaporator)를 이용한 감압 회전농축으로 15~50%의 고형분 함량인 것이 바람직하다.In addition, in the method for producing the brownish-tinged amino acid powder of the present invention, the concentration to the solid content in the step 4) may be carried out at a temperature of 70 ° C or lower under reduced pressure rotary evaporation using a rotary vacuum evaporator to a concentration of 15-50% Solid content.

또한, 본 발명의 갈색거저리 아미노산 분말의 제조 방법에 있어서, 상기 4) 단계 이후에, 여과, 분무건조 및 과립 시드(seed) 제조 단계를 추가적으로 포함하는 것이 바람직하고, 이때 상기 분무건조는 상기 고형분 100g에 증류수 1,000 mL(10배, v/w)를 가하여 분무건조(200℃) 및 동결건조한 후 50 mesh로 사별하여 제조하는 것이 보다 바람직하고, 상기 과립 시드의 제조는 고형분 250 g에 85.5% 주정 50 mL을 가하여 혼합하고, 과립기(oscillator)로 미세과립을 제조한 후, 50℃ 이하에서 4시간 동안 열풍건조로 0.1-0.5 mm의 입자 크기로 제조하는 것이 보다 바람직하다.In addition, in the method for producing the brownish-tinged amino acid powder of the present invention, it is preferable to further include a step of filtration, spray drying and granule seed preparation after the step 4) (200 占 폚), lyophilized, and then sieved to 50 mesh by adding 1,000 ml (10 times, v / w) of distilled water to the solid. mL, and the mixture is granulated with an oscillator to prepare fine granules having a particle size of 0.1-0.5 mm by hot air drying at 50 ° C or lower for 4 hours.

또한, 본 발명의 갈색거저리 아미노산 분말의 제조 방법에 있어서, 상기 4) 단계 이후에, 여과 및 분무용 농축액의 제조 단계를 추가적으로 포함하는 것이 바람직하고, 이때 상기 분무용 농축액은 15~40%의 고형분의 농축액에 갈색거저리로부터 추출된 휘발성 농축액과 부형제를 혼합 및 교반하여 제조되는 것이 보다 바람직하다.In addition, in the method for producing the brownish rough amino acid powder of the present invention, after the step 4), it is preferable to further include a step of producing a filtrate and a concentrate for spraying, wherein the concentrate for spraying comprises 15 to 40% By mixing and stirring the volatile concentrate extracted from the brown shoemaker with an excipient.

또한, 본 발명의 갈색거저리 아미노산 분말의 제조 방법에 있어서, 추가적으로 수분함량 5% 이내로 건조하고 알루미늄파우치 또는 Fiber drum를 사용하여 벌크 포장하는 단계를 포함하는 것이 보다 바람직하다.In addition, in the method for producing the brownish rough amino acid powder of the present invention, it is more preferable to include a step of further drying in a moisture content of 5% or less and bulk packing using an aluminum pouch or a fiber drum.

또한, 본 발명은 상기 방법으로 제조된 갈색거저리 아미노산 분말을 제공한다.In addition, the present invention provides a brownish rough amino acid powder prepared by the above method.

상기와 같이 구성되는 본 발명은 필수 아미노산 함량이 증가된 품질이 우수한 양질의 아미노산 분말을 제공함으로써 식의료용으로 사용하기에 적합하다.The present invention having the above-described structure is suitable for use in food and medicine by providing a high-quality amino acid powder having an increased quality of essential amino acids.

이하, 본 발명에 따른 바람직한 실시예를 더욱 구체적으로 제시하여 상세하게 설명하기로 한다. 그러나, 이하의 실시예는 이 기술분야에서 통상적인 지식을 가진 자에게 본 발명이 충분히 이해되도록 제공되는 것으로서 여러 가지 다른 형태로 변형될 수 있으며, 상기와 같은 실시예들에 의하여 본 발명이 한정되는 것은 아니다.Hereinafter, preferred embodiments of the present invention will be described in detail with reference to the drawings. However, it should be understood that the following embodiments are provided so that those skilled in the art may understand the present invention without departing from the scope and spirit of the present invention. It is not.

<실시예 1> 갈색거저리 아미노산 분말의 제조 1&Lt; Example 1 > Preparation of brownish rough amino acid powder 1

본 발명자들은 갈색거저리 성충이 산란한 알을 약 26℃, 상대습도 45%로 유지되는 조건에서 약 10일 간 방치하여 갈색거저리 유충을 사육하였다. 갈색거저리 유충을 사육하는 동안 밀기울과 배추잎을 사료로 주었다.The present inventors breed brown goose larvae by allowing the brown egg-laying adults to lay eggs at about 26 ° C and a relative humidity of 45% for about 10 days. Bran and cabbage leaves were fed for feeding while brown goat larvae were raised.

이렇게 사육된 갈색거저리 유충을 분리하여 수거하기 전 사흘 동안 절식(絶食)을 시켜 장내 이취물을 제거하였다. 상기 유충을 멸균기를 이용하여 110℃ 1.0 kgf/cm2와 120℃, 1.3 kgf/cm2으로 각 5 및 10분 동안 고온고압 멸균으로 살균한 후, 동결건조기(PVTFD30R)에서 약 48시간 동안 수분이 제거될 때 까지 건조 후 분쇄하였다.The brown duck larvae raised in this way were fasted for three days before collecting and removing the foreign body odor. The larvae were sterilized at 110 ° C. and 1.0 kgf / cm 2 at 120 ° C. and 1.3 kgf / cm 2 for 5 and 10 minutes, respectively, using a sterilizer, and then subjected to moisture in a freeze dryer (PVTFD30R) Dried and crushed until removed.

분쇄된 갈색거저리에 30% 주정 10배수를 가하여 90℃에서 3시간씩 2회 추출한 후, 이 추출액을 Wattman filter(No. 2)로 여과하거나 5,000 rpm에서 30분 동안 원심분리로 잔류물을 제거하였다.The extract was subjected to filtration through a Wattman filter (No. 2) or centrifugation at 5,000 rpm for 30 minutes to remove residues. The extract was washed twice with 30% ethanol for 3 hours at 90 ° C .

상기 추출액에 0.5%(w/w) Protamex 단백질 분해 효소를 4시간 동안 처리하여 가수분해시킨 후, 다시 Wattman filter(No. 2)로 여과하였다.The extract was hydrolyzed with 0.5% (w / w) Protamex protease for 4 hours, and then filtered with a Wattman filter (No. 2).

상기 추출액을 70℃ 이하에서 Rotatory vacuum evaporator를 이용하여 감압 회전농축하여, 고형분 함량 15~50%로 농축하였다. 고형분 함량은 당도계(refractometer)로 측정 후, 20 mL을 회수하여 동결건조방법을 사용하여 무게로 확인하여 측정하였다.The extract was concentrated under reduced pressure using a rotary vacuum evaporator at a temperature of 70 ° C or less to a solid content of 15 to 50%. The solid content was measured with a refractometer and then 20 mL was recovered and measured by freeze drying.

이 추출액을 다시 Wattman filter(No. 2)로 여과한 후, 추출액 100g에 증류수 1,000 mL(10배, v/w)를 가하여 분무건조(200℃), 동결건조한 후 50 mesh로 사별하여 분말을 제조하였다. 상기 분말 250 g에 85.5% 주정을 50 mL을 가하여 잘 혼합하고, oscillator(과립기)로 미세과립을 제조한 후, 50oC 이하에서 4시간 동안 열풍건조하고, 이것을 크기별로 다른 체(sieve)를 통과시켜 입자크기가 0.1-0.5 mm가 되도록 과립 시드 입자를 제조하였다. 제조된 입자를 유동층 과립기 내에서 수분함량 5% 이내로 조절하도록 건조시켰다. 최종적으로, 알루미늄파우치를 이용한 벌크 포장하였고, 필요에 따라 Fiber drum을 사용하였다.The extract was filtered again with a Wattman filter (No. 2), spray-dried (200 ° C) with 1,000 mL (10 times, v / w) of distilled water, and lyophilized Respectively. 50 g of 85.5% alcohol was added to 250 g of the powder, mixed well, and microgranules were prepared with an oscillator. Then, the granules were hot-air dried at 50 ° C or less for 4 hours, To prepare granular seed particles having a particle size of 0.1-0.5 mm. The prepared particles were dried to adjust the moisture content within the fluidized bed granulator to within 5%. Finally, bulk packing was carried out using an aluminum pouch, and a fiber drum was used if necessary.

<실시예 2> 갈색거저리 아미노산 분말의 제조 2&Lt; Example 2 > Preparation of brown gummy amino acid powder 2

상기 실시예 1과 동일하나 과립 시드 입자 대신에 15~40%의 고형분의 농축액에 동일한 원료로부터 추출된 휘발성 농축액과 부형제를 시험 비율에 따라 혼합하고, 교반하여 분무용 농축액으로 제조한 후 건조시켜 분말을 제조하였다. 나머지 제조 과정은 모두 동일하다.The same as Example 1, except that the volatile concentrate and the excipient extracted from the same raw material were mixed in a concentrate having a solid content of 15 to 40% instead of the granular seed particles according to the test ratio and stirred to prepare a spray concentrate, . The rest of the manufacturing process is the same.

<실험예 1> 효소 처리방법에 따른 품질특성 확인 <Experimental Example 1> Determination of quality characteristics according to an enzyme treatment method

실시예 1에서 Protamex 단백질 분해 효소 처리 후에 pH meter를 사용하여 pH를 측정하고, 굴절당도계를 사용하여 Brix를 측정하였다. 그 결과, pH 7.0이고, 13~15 Brix 값을 확인하였다.After Protamex protease treatment in Example 1, the pH was measured using a pH meter and the Brix was measured using a refractometer. As a result, a pH of 7.0 and a Brix value of 13 to 15 were confirmed.

고형분 함량은 수기에 시료액 2 mL를 취하여 105℃에서 증발 건조시킨 후 무게를 측정하여 시료액에 대한 건물량(%) 측정하였다. 그 결과, 35.4%의 건물량을 확인하였다.The solids content was determined by evaporating the dried sample at 2OmL at 105 ℃ and measuring the weight (%) of the sample solution. As a result, 35.4% of dry matter was confirmed.

조단백질 함량은 semimicro-Kjedahl법을 사용하였다. semimicro-Kjedahl (mg/g)법은

Figure pat00001
를 사용하여 계산된다.Crude protein content was determined by semimicro-Kjedahl method. Semimicro-Kjedahl (mg / g) method
Figure pat00001
&Lt; / RTI &gt;

이때, S = 시료 중량(g)At this time, S = sample weight (g)

T = 0.1 N HCl의 소모양 (mL)T = shape of beef in 0.1 N HCl (mL)

그 결과, 상기 실시예 1의 갈색거저리 분말의 조단백질 함량은 96.5% 이상의 단백질 함량을 갖는 것으로 확인되었다.As a result, the crude protein content of the brown gruel powder of Example 1 was found to have a protein content of 96.5% or more.

<실험예 2> 효소가수분해물 품질특성 확인<Experimental Example 2> Confirmation of quality characteristics of enzyme hydrolyzate

아미노산 분석은 amino acid analyzer를 이용하여 효소처리한 가수분해물의 아미노산 조성을 확인하였다. 그 결과, 본 발명의 갈색거저리 아미노산 분말에는 필수 아미노산 10종류가 모두 포함되어 있었으며, 아미노산 제조 수율이 매우 높은 것을 확인하였다.Amino acid composition of the hydrolyzate treated with enzyme was confirmed by amino acid analyzer. As a result, all of the essential amino acids were contained in the brownish brown amino acid powder of the present invention, and it was confirmed that the yield of amino acid production was very high.

<실험예 3> 효소가수분해물 항산화 관련 효능 검증<Experimental Example 3> Effectiveness of enzyme hydrolyzate-related antioxidation

<3-1> ACE 저해활성&Lt; 3-1 > ACE inhibitory activity

식용곤충 가수분해물의 ACE(angioensin I converting enzyme) 저해활성은 ACE 효소액에 기질인 5mM Hippuryl-L-His-L-Leu 를 취하여 반응시키고, 가수분해물의 상층액을 가하여 37℃에서 30분 동안 반응시킨다. 1 N HCl을 가하여 반응을 정지시키고, ethyl acetate를 가하여 15분간 교반한 후 상층액을 취하여 120℃에서 30분간 건조시킨 다음 증류수를 가하여 용해시킨 후 228 nm에서 흡광도를 측정하여 ACE저해활성을 측정하였다.The ACE (angioensin I converting enzyme) inhibitory activity of edible insect hydrolysates was determined by reacting 5 mM Hippuryl-L-His-L-Leu, which is a substrate, with ACE enzyme solution and reacting the supernatant of hydrolyzate at 37 ° C. for 30 minutes . The reaction was stopped by adding 1 N HCl, and the mixture was stirred for 15 minutes with ethyl acetate. The supernatant was then dried at 120 ° C for 30 minutes, and dissolved in distilled water. The absorbance was measured at 228 nm to measure ACE inhibitory activity .

그 결과, 상기 실시예 1에서 제조한 갈색거저리 분말의 ACE 저해율은 각각 56.7%로, 일반적인 단백질 가수분해물의 ACE 저해율 (9.91%)에 비해 월등히 높은 수치였다.As a result, the ACE inhibition rate of the brown gruel powder prepared in Example 1 was 56.7%, which was much higher than the ACE inhibition rate (9.91%) of the general protein hydrolyzate.

Protamex를 이용한 갈색거저리의 가수분해는 0-8시간까지 1시간 단위로 샘플링을 실시하였고, 샘플링 한 시료는 water bath에서 100℃, 15분간 가열하여 가수분해를 중지시킨 후, ACE 저해효과를 측정하였다.Hydrolysis of brown goats using Protamex was performed at 1 hour intervals from 0 to 8 hours. The samples were heated in a water bath at 100 ° C for 15 minutes to stop the hydrolysis, and the ACE inhibition effect was measured .

가수분해를 실시하였을 때 ACE 저해효과가 높으면서, 가수분해 시간에 따른 ACE 저해효과를 확인하였다. Protamex를 첨가한 후 ACE 저해효과가 급격하게 증가하는 것을 확인할 수 있었다. ACE 저해효과는 가수분해 시간이 5시간 일 때 55.5%로 가장 높게 나타났으며, 그 이후에는 유지되는 것을 확인할 수 있었다When hydrolysis was carried out, ACE inhibition effect was high, and ACE inhibition effect according to hydrolysis time was confirmed. After addition of Protamex, the ACE inhibitory effect was increased rapidly. The ACE inhibitory effect was the highest at 55.5% when the hydrolysis time was 5 hours, and it was confirmed to be maintained thereafter

<3-2> 전자공여능(electro donating ability, EDA) 측정<3-2> Measurement of electro-donating ability (EDA)

가수분해물을 1,1-diphenyl-2-picrylhydrazy(DPPH) 용액을 잘 혼합한 후, 실온에서 30분간 방치 후 520 nm에서 측정하였다.The hydrolyzate was mixed well with 1,1-diphenyl-2-picrylhydrazy (DPPH) solution, left at room temperature for 30 minutes and measured at 520 nm.

가수분해물의 전자공여능은 시료첨가구와 비첨가구의 흡광도 차이를 백분율로 구하였으며, 가수분해물의 EDA(%)를 50% 감소시키는 IC50 (inhibition concentration)으로 구하였다.The electron donating ability of the hydrolyzate was determined as the percentage difference between the absorbance of the sample and the non-adhered sample, and the IC 50 (inhibition concentration) was used to reduce the EDA (%) of the hydrolyzate by 50%.

그 결과, 본 발명의 갈색거저리 아미노산 분말의 DPPH 라디칼에 대한 IC50은 2.63 ± 0.74로서, 아스코르브산의 8.39 ± 0.50보다 우수함을 확인하였다.As a result, it was confirmed that the IC 50 of DPPH radical of the brownish rough amino acid powder of the present invention was 2.63 ± 0.74, which is higher than that of ascorbic acid of 8.39 ± 0.50.

이상, 본 발명의 바람직한 실시예를 들어 상세하게 설명하였으나, 본 발명은 상기 실시예에 한정되는 것은 아니며, 본 발명의 기술적 사상의 범위내에서 당 분야에서 통상의 지식을 가진 자에 의하여 여러 가지 변형이 가능하다.While the present invention has been particularly shown and described with reference to exemplary embodiments thereof, it is to be understood that the invention is not limited to the disclosed exemplary embodiments, This is possible.

Claims (15)

1) 유충(larva), 용화직전 번데기(pre-pupa) 및 번데기(pupa)로 이루어진 군중에서 선택된 갈색거저리를 절식시켜 장내 이취물을 제거한 후 살균하는 전처리 단계;
2) 상기 갈색거저리에 주정을 가하여 단백질을 추출하는 단계;
3) 상기 추출된 단백질에 단백질 분해효소를 처리하여 아미노산으로 가수분해시키는 단계; 및
4) 상기 가수분해로 얻어진 아미노산을 여과하고 고형분으로 농축하는 단계;를 포함하는 갈색거저리 아미노산 분말의 제조 방법.
1) Pre-treatment step in which the intestinal odor is removed by pausing the larvae, a pre-pupa and a pupa, and sterilized;
2) extracting the protein by adding alcohol to the brown gourd;
3) hydrolyzing the extracted protein by treatment with a proteolytic enzyme to an amino acid; And
4) The amino acid obtained by the hydrolysis is filtered and concentrated to a solid content.
제 1항에 있어서, 상기 1) 단계에서 갈색거저리를 살균한 후에 동결건조하고 분쇄하는 단계를 더 포함하는 갈색거저리 아미노산 분말의 제조 방법.
The method according to claim 1, further comprising a step of sterilizing the brown gill in step 1), followed by lyophilization and pulverization.
제 1항에 있어서, 상기 1) 단계의 살균은 110℃에서 1.0 kgf/cm2의 압력으로 5분 및 120℃에서 1.3 kgf/cm2의 압력으로 10분 동안의 고온고압 멸균인 것을 특징으로 하는 갈색거저리 아미노산 분말의 제조 방법.
The method according to claim 1, wherein the sterilization in the step (1) is a high-temperature high-pressure sterilization for 10 minutes at a pressure of 1.0 kgf / cm 2 at 110 ° C for 5 minutes and a pressure of 1.3 kgf / cm 2 at 120 ° C A method for producing an amino acid powder of brownish dough.
제 2항에 있어서, 동결건조는 동결건조기를 사용하여 48시간 동안 수분이 제거될 때까지 건조하고 이를 분말로 분쇄하는 것을 특징으로 하는 갈색거저리 아미노산 분말의 제조 방법.
The method according to claim 2, wherein the freeze-drying is carried out using a freeze drier for 48 hours until the moisture is removed, and the powder is pulverized into powder.
제 1항에 있어서, 상기 2) 단계의 단백질 추출은 30% 주정의 상기 갈색거저리 중량의 10배수를 가하여 90℃에서 3시간씩 2회 추출하여 이루어지는 것을 특징으로 하는 갈색거저리 아미노산 분말의 제조 방법.
The method according to claim 1, wherein the protein extraction in step 2) is performed by adding 10 times the weight of the brown germ of the 30% alcohol, and extracting twice at 90 ° C for 3 hours.
제 5항에 있어서, 상기 추출은 와트만 여과지(Wattman filter; No. 2) 또는 원심분리(5,000 rpm, 30분)로 잔류물을 제거하고 추출액을 회수하는 단계를 포함하는 것을 특징으로 하는 갈색거저리 아미노산 분말의 제조 방법.
6. The method according to claim 5, wherein the extraction comprises removing residues with a Wattman filter (No. 2) or centrifugation (5,000 rpm, 30 minutes) and recovering the extract. A method for producing an amino acid powder.
제 1항에 있어서, 상기 3) 단계의 단백질 분해효소로 Protamex 0.5%(w/w)를 사용하고, 가수분해는 상기 효소를 4시간 동안 처리하는 것을 특징으로 하는 갈색거저리 아미노산 분말의 제조 방법.
The method according to claim 1, wherein Protamex 0.5% (w / w) is used as the protease in step 3), and the enzyme is treated for 4 hours.
제 1항에 있어서, 상기 4) 단계의 고형분으로의 농축은 70℃ 이하의 온도에서 회전 진공 증발기(Rotatory vacuum evaporator)를 이용한 감압 회전농축으로 15~50%의 고형분 함량인 것을 특징으로 하는 갈색거저리 아미노산 분말의 제조 방법.
The method according to claim 1, wherein the concentration of the solid in the step 4) is a solid content of 15 to 50% at a temperature of 70 ° C or less under reduced pressure rotary evaporation using a rotary vacuum evaporator. A method for producing an amino acid powder.
제 1항에 있어서, 상기 4) 단계 이후에, 여과, 분무건조 및 과립 시드(seed) 제조 단계를 추가적으로 포함하는 것을 특징으로 하는 갈색거저리 아미노산 분말의 제조 방법.
The method according to claim 1, further comprising, after step (4), filtering, spray drying and granulating a seed.
제 9항에 있어서, 상기 분무건조는 상기 고형분 100g에 증류수 1,000 mL(10배, v/w)를 가하여 분무건조(200℃) 및 동결건조한 후 50 mesh로 사별하여 제조하는 것을 특징으로 하는 갈색거저리 아미노산 분말의 제조 방법.
10. The method according to claim 9, wherein the spray drying is performed by spray drying (200 DEG C) by adding 1,000 mL (10 times, v / w) of distilled water to 100 g of the solid, A method for producing an amino acid powder.
제 9항에 있어서, 상기 과립 시드의 제조는 고형분 250 g에 85.5% 주정 50 mL을 가하여 혼합하고, 과립기(oscillator)로 미세과립을 제조한 후, 50℃ 이하에서 4시간 동안 열풍건조로 0.1-0.5 mm의 입자 크기로 제조하는 것을 특징으로 하는 갈색거저리 아미노산 분말의 제조 방법.
10. The method of claim 9, wherein the granule seed is prepared by mixing 50 g of 85.5% alcohol in a solid content of 250 g, mixing the granules with an oscillator to prepare fine granules, -0.5 &lt; RTI ID = 0.0 &gt; mm. &Lt; / RTI &gt;
제 1항에 있어서, 상기 4) 단계 이후에, 여과 및 분무용 농축액의 제조 단계를 추가적으로 포함하는 것을 특징으로 하는 갈색거저리 아미노산 분말의 제조 방법.
The method according to claim 1, further comprising, after the step (4), a step of producing a filtration and spray concentrate.
제 12항에 있어서, 상기 분무용 농축액은 15~40%의 고형분의 농축액에 갈색거저리로부터 추출된 휘발성 농축액과 부형제를 혼합 및 교반하여 제조되는 것을 특징으로 하는 갈색거저리 아미노산 분말의 제조 방법.
[14] The method of claim 12, wherein the spray concentrate is prepared by mixing and agitating a volatile concentrate and an excipient extracted from a brown gruel to a concentrate having a solid content of 15 to 40%.
제 9항 또는 제 12항에 있어서,상기 단계 이후에 추가적으로 수분함량 5% 이내로 건조하고 알루미늄파우치 또는 Fiber drum를 사용하여 벌크 포장하는 단계를 포함하는 것을 특징으로 하는 갈색거저리 아미노산 분말의 제조 방법.
The method according to claim 9 or 12, further comprising, after the step, further drying in a moisture content of 5% or less and bulk packing using an aluminum pouch or a fiber drum.
제 1항 내지 제 14항 중 어느 한 항의 방법으로 제조된 갈색거저리 아미노산 분말.14. A brown gross amino acid powder prepared by the method of any one of claims 1 to 14.
KR1020170027190A 2017-03-02 2017-03-02 Production method of amino acids powder using hydrolysis of Tenebrio molitor and the amino acids powder by this method KR101898711B1 (en)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
KR1020170027190A KR101898711B1 (en) 2017-03-02 2017-03-02 Production method of amino acids powder using hydrolysis of Tenebrio molitor and the amino acids powder by this method

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
KR1020170027190A KR101898711B1 (en) 2017-03-02 2017-03-02 Production method of amino acids powder using hydrolysis of Tenebrio molitor and the amino acids powder by this method

Publications (2)

Publication Number Publication Date
KR20180100854A true KR20180100854A (en) 2018-09-12
KR101898711B1 KR101898711B1 (en) 2018-09-13

Family

ID=63593208

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
KR1020170027190A KR101898711B1 (en) 2017-03-02 2017-03-02 Production method of amino acids powder using hydrolysis of Tenebrio molitor and the amino acids powder by this method

Country Status (1)

Country Link
KR (1) KR101898711B1 (en)

Cited By (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
KR20200069621A (en) * 2018-12-07 2020-06-17 건국대학교 글로컬산학협력단 Composition for enhancing exercise capacity comprising mealworm protein
WO2021201507A1 (en) * 2020-03-30 2021-10-07 고려대학교 산학협력단 Composition for preventing, improving, or treating sarcopenia, comprising tenebrio molitor larval protein or hydrolysate thereof as active ingredient

Family Cites Families (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JP2005187395A (en) 2003-12-25 2005-07-14 Shimaya Co Ltd Method for producing fish essence having activity for reducing blood pressure, and fish essence having activity for reducing blood pressure
KR101603171B1 (en) * 2015-08-13 2016-03-14 대동고려삼 주식회사 Method for producing red ginseng-concentrated granule with enhanced ginsenoside content

Cited By (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
KR20200069621A (en) * 2018-12-07 2020-06-17 건국대학교 글로컬산학협력단 Composition for enhancing exercise capacity comprising mealworm protein
WO2021201507A1 (en) * 2020-03-30 2021-10-07 고려대학교 산학협력단 Composition for preventing, improving, or treating sarcopenia, comprising tenebrio molitor larval protein or hydrolysate thereof as active ingredient

Also Published As

Publication number Publication date
KR101898711B1 (en) 2018-09-13

Similar Documents

Publication Publication Date Title
Kennedy The dietary factors operating in the production of polyneuritis
KR101949105B1 (en) Chicken feed composition and preparing method thereof
CN102894186B (en) Albumen powder richening in antimicrobial peptide fly maggot, preparation method for albumen powder and feed additive of albumen powder
KR101341704B1 (en) Manufacturing process of collagen by using by-products
KR101341721B1 (en) Manufacturing process of amino acid fertilizer compositions by using marine by-products
CN101632412A (en) Compound aquatic product attractant and processing method thereof
CN108220191A (en) A kind of probiotics and preparation method and application
KR101898711B1 (en) Production method of amino acids powder using hydrolysis of Tenebrio molitor and the amino acids powder by this method
KR20200078093A (en) The composition for preventing patella luxation and muscle strengthening for companion animals
KR102399971B1 (en) Composition for Silkworm-collagen and manufacturing method thereof
RU2751227C2 (en) Feed and method for production thereof
RU2538393C2 (en) Method for production of sea-cucumber dry hydrolysate and biologically active food additive produced by such method
JP2003252775A (en) Nk cell activation agent
RU2310344C2 (en) Method for production of extract for biologically active additive
KR101922385B1 (en) Powder of water deer for mixed feed and manufacturing method using thereof
JP2012020993A (en) Glucagon-like peptide-1 secretagogue
CN110710620A (en) Mixed feed for improving turtle quality and shell color and preparation method thereof
CN105309842A (en) Fish feed additive and preparation method thereof
KR20210056858A (en) Pharmaceutical composition comprising the extract of black soldier fly as an effective component for prevention or treatment of thrombosis and health functional food comprising the same
JP2886327B2 (en) Processed soybean for animal feed and method for producing the same
JPH0967265A (en) Antiviral agent against pathogenic virus of fishes
KR102380291B1 (en) Composition Comprising Locusta migratoria extract for preventing or treating Obesity
KR102386488B1 (en) Method for improving saponin content
CN109805375B (en) Functional food for improving oxidation resistance of visual organs and preparation method thereof
KR102347294B1 (en) Method of manufacturing compposition comprising product of enzyme reaction to white grub for reducing hepatotoxicity and composition for for reducing hepatotoxicity manufactured by the same

Legal Events

Date Code Title Description
GRNT Written decision to grant