KR20180037163A - Sugar-free pineapple extract, method for producing the extract, and application of the extract - Google Patents

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Abstract

The present invention relates to a sugar-free pineapple extract which is obtained by extracting edible pineapple using a solvent and does not contain glucose and fructose. According to the present invention, it is possible to secure stability and productivity.

Description

당 비함유 파인애플 추출물과 그 제조 방법 및 그 용도{SUGAR-FREE PINEAPPLE EXTRACT, METHOD FOR PRODUCING THE EXTRACT, AND APPLICATION OF THE EXTRACT}SUGAR-FREE PINEAPPLE EXTRACT, METHOD FOR PRODUCING THE EXTRACT, AND APPLICATION OF THE EXTRACT < RTI ID = 0.0 >

본 발명은 당 비함유 파인애플 추출물과 그 제조 방법, 및 라미닌-5 생산 촉진제, 표피 히알루론산 생산 촉진제, 히알루로니다아제 활성 저해제, 트랜스 글루타미나아제-1 생산 촉진제, 멜라닌 생산 억제제, 모유두세포 증식 촉진제, 음식품, 피부 외용제 및 육모제에 관한 것이다.The present invention relates to a sugar-free pineapple extract, a method for producing the same, and a method for producing a laminin-5 production accelerator, a skin hyaluronic acid production promoter, a hyaluronidase activity inhibitor, a transglutaminase-1 production promoter, a melanin production inhibitor, Accelerators, food and drinks, external skin preparations and hair restorers.

피부는 표피, 기저막 및 진피로 구성되어 있다. 진피는 섬유아세포와, 이 세포로부터 분비되는 콜라겐(교원 섬유), 엘라스틴(탄성 섬유), 히알루론산 등의 세포외 매트릭스에 의해 구성되어 있다. 기저막은 표피와 진피 경계부에 존재하며 표피와 진피를 이어줄 뿐 아니라, 피부 기능의 유지에 중요한 역할을 하고 있다(Marinkovich MP et al., J. Cell. Bio 1. 1992 199:695-703 참조). 젊은 피부에서는 이들 피부 조직의 상호 작용이 항상성을 유지함으로써, 수분 유지력, 유연성 및 탄력성 등이 확보되어, 외견적으로도 팽팽함 미 광택이 있어 촉촉한 상태로 유지된다.The skin consists of epidermis, basement membrane and dermis. The dermis is composed of fibroblasts, extracellular matrix such as collagen (collagen fiber), elastin (elastic fiber) and hyaluronic acid secreted from these cells. The basement membrane is present at the epidermis and dermis boundary and not only connects the epidermis and the dermis, but also plays an important role in the maintenance of skin function (Marinkovich MP et al., J. Cell. Bio 1. 1992 199: 695-703) . In the young skin, the interaction of these skin tissues maintains homeostasis, thereby securing water retention, flexibility, and elasticity. As a result, the skin is not taut, glossy and remains moist.

그러나, 자외선, 현저한 공기의 건조, 과도한 피부 세정, 스트레스 또는 흡연 등의 외적 인자의 영향을 받거나 나이가 들어가면, 세포외 매트릭스의 주요 구성 성분인 콜라겐의 분해나 변질이 생기거나, 섬유아세포의 증식이 늦어지거나, 혹은 기저막의 주요 구성 성분인 라미닌-5가 분해나 변질을 일으켜 기저막 구조가 파괴되거나 한다(Lavker et al., J. Invest. Dermatol. 1979 73: 59-66 참조). 또한, 천연 보습 인자인 히알루론산 생산량의 저하를 유발한다. 그 결과, 피부의 보습 기능이나 탄력성이 저하되고, 각질의 이상 박리가 일어나며, 주름, 칙칙함, 피부결의 상실, 탄력성 저하 등의 노화 증상을 나타내게 된다.However, when affected by external factors such as ultraviolet rays, remarkable air drying, excessive skin washing, stress or smoking, or aging, collagen degradation or deterioration, which is a major component of the extracellular matrix, (Lavker et al., J. Invest. Dermatol., 1979 73: 59-66). In addition, laminin-5 is a major constituent of the basement membrane. In addition, the production of hyaluronic acid, which is a natural moisturizing factor, is lowered. As a result, the moisturizing function and elasticity of the skin are lowered, abnormal exfoliation of the keratin is caused, and aging symptoms such as wrinkles, dullness, loss of skin texture and elasticity are exhibited.

따라서, 라미닌-5의 생산 및 히알루론산의 생산을 촉진함으로써 피부의 노화를 방지 내지 개선할 수 있을 것이다. 그런 점에서, 라미닌-5 생산 촉진 작용 및 히알루론산 생산 촉진 작용을 갖는 물질을 안전성이 높은 천연물로부터 입수하는 것이 요구되고 있다. Thus, by accelerating the production of laminin-5 and the production of hyaluronic acid, aging of the skin can be prevented or improved. In view of this, it is required to obtain a substance having a laminin-5 production promoting action and a hyaluronic acid production promoting action from a highly safe natural product.

이제까지, 라미닌-5 생산 촉진 작용을 갖는 것으로는 예를 들면, 갈근 추출물, 감초 추출물 또는 그 플라보노이드 분획, 범부채 추출물, 풀라이 추출물, 티노스포라 추출물, 호로파 추출물, 유청 추출물(이상, 일본 특허공개 2003-137767호 공보 참조), 오노니스 추출물, 메리로트 추출물, 숙주 추출물, 팥 추출물(이상, 일본 특허공개 2003-137768호 공보 참조) 및 대두 추출물(일본 특허공개 2004-217618호 공보 참조) 등이 보고되어 있다. 또한, 히알루론산 생산 촉진 작용을 갖는 물질을 천연물로부터 추출하는 것이 시도되고 있다('fragrance 저널' 1992년, No. 11, p43 참조).Examples of those having laminin-5 production promoting action so far include, for example, Puerariae Radix extract, Licorice root extract or its flavonoid fraction, Anabolic extract, Pulai extract, Tinospora extract, Fenugreek extract, (Japanese Unexamined Patent Application Publication No. 2003-137768) and soybean extract (Japanese Unexamined Patent Publication (Kokai) No. 2004-217618), etc. have been reported in the past, such as Onnis extract, Merriot extract, host extract, have. In addition, attempts have been made to extract substances having hyaluronic acid production promoting action from natural products (see " fragrance journal ", 1992, No. 11, p43).

한편, 염증성의 질환, 예를 들면, 접촉성 피부염, 건선, 심상성 천연두, 그 외 피부 거칠음을 동반하는 각종 피부 질환 등의 원인 및 발증 기구는 각양각색이다. 그 원인으로서 히알루로니다아제 활성에 의한 것이 알려져 있다.On the other hand, inflammatory diseases such as contact dermatitis, psoriasis, psittacian smallpox, various skin diseases accompanied by skin roughness, and the causes and manifestations are various colors. It is known that the cause is hyaluronidase activity.

체조직으로의 친화성을 갖는 히알루론산염은 함수계 안에서는 자외선, 효소 등에 의해 분해되고, 분자량의 저하에 따라 보수 효과도 감소한다. 또한, 히알루론산은 세포간 조직으로서 존재하여, 혈관 투과성에도 관여하고 있다. 또한, 히알루로니다아제는 비만 세포 내에 있어 활성에 의해 비만 세포로부터의 탈과립에 관여하고 있는 것으로 여겨진다. 따라서, 히알루론산의 가수 분해 효소인 히알루로니다아제의 활성을 저해함으로써, 히알루론산의 안정화를 도모하고, 비만 세포로부터의 히스타민 등의 화학적 매개체의 방출을 방지하며, 보습의 강화 및 항염증을 기대할 수 있다.Hyaluronate having affinity to body tissues is decomposed by ultraviolet rays and enzymes in the water system, and the maintenance effect is also reduced as the molecular weight is lowered. In addition, hyaluronic acid exists as an intercellular tissue and is also involved in vascular permeability. It is also believed that hyaluronidase is involved in degranulation from mast cells by activity in mast cells. Therefore, by inhibiting the activity of hyaluronidase, the hydrolytic enzyme of hyaluronic acid, it is possible to stabilize hyaluronic acid, prevent the release of chemical mediators such as histamine from mast cells, enhance moisturization and antifouling .

이러한 히알루로니다아제 활성 저해 작용을 갖는 생약으로는 예를 들면, 오스벡키아속 식물의 추출물(일본 특허공개 2003-055242호 공보 참조), 후지차 추출물(일본 특허공개 2003-012532호 공보 참조), 로즈마리 추출물, 타임 추출물 및 멜리사 추출물(일본 특허공개 평 8-333267호 공보 참조) 등이 보고되어 있다.Examples of the herbal medicine having hyaluronidase activity inhibiting activity include extracts of Osbeksy subspecies (Japanese Patent Laid-Open Publication No. 2003-055242), Fuji tea extract (Japanese Patent Application Laid-Open No. 2003-012532) Rosemary extract, time extract, and melissa extract (see JP-A-8-333267).

또한, 표피는 각화 세포의 분열과 그 후의 분화에 의해, 항상 새로운 각질 세포를 만들어 냄으로써, 외계로부터의 각종 자극으로부터 피부를 보호하는 방어 기능을 갖는다. 특히, 각화 세포의 분화 과정에 있어서, 유극층으로부터 과립층에 걸쳐 인볼루크린 등의 단백질이 발현하여, 효소 트랜스글루타미나아제-1의 작용에 의해 가교되고, 각화 세포를 감싸는 불용성의 세포막 유사 구조체인 각질 비후막(cornified envelope;CE)을 형성하여, 각질 세포의 세포 골격 및 구조의 안정성에 기여한다.In addition, the epidermis has a defensive function of protecting the skin from various stimuli from the outside world by making new keratinocytes always by cleavage and subsequent differentiation of keratinocytes. Particularly, in the differentiation process of keratinocytes, proteins such as phosphorylcholine are expressed from the porous layer to the granule layer, cross-linked by the action of the enzyme transglutaminase-1, and the insoluble cell membrane- (Corneal envelope; CE), which contributes to the stability of the cytoskeleton and structure of keratinocytes.

그러나, 다양한 요인으로 표피에서의 트랜스글루타미나아제-1의 생산량이 감소하면, 각질 비후막(CE) 형성이 불완전한 상태가 되어 각화가 정상적으로 일어나지 않게 된다. 그 결과, 각질 배리어 기능 및 피부의 보습 기능이 저하되어, 피부 거칠어짐이나 건조 피부 등의 피부 증상을 나타내는 것으로 사료된다.However, if the production of transglutaminase-1 in the epidermis is decreased due to various factors, formation of keratin-free thick film (CE) becomes incomplete and keratinization will not occur normally. As a result, the function of the keratin barrier and the moisturizing function of the skin are lowered, and the skin symptoms such as skin roughness and dry skin are considered to be exhibited.

이러한 점에서, 각화 세포의 표피에서의 트랜스글루타미나아제-1의 생산을 높이고, 각질 비후막의 형성을 촉진하여 각화를 정상화함으로써, 건조나 자외선 등의 외부 자극에 따른 피부 배리어 기능의 저하를 억제하여, 피부의 건조나 피부 거칠어짐 등, 다양한 피부 증상을 예방 내지 개선할 수 있을 것으로 사료된다.In this respect, by increasing the production of transglutaminase-1 in the epidermis of keratinocytes and promoting the formation of keratin-free thick films to normalize the keratinization, degradation of the skin barrier function due to external stimuli such as drying or ultraviolet rays It is considered that various skin symptoms such as drying of the skin and roughness of the skin can be prevented or improved.

피부에 있어서 멜라닌은 자외선으로부터 생체를 보호하는 역할도 하고 있지만, 과잉 생성이나 불균일한 축적은 피부의 흑화 내지 기미의 원인이 된다. 일반적으로 멜라닌은 색소 세포 내에서 생합성되는 효소 티로시나아제의 작용에 의해 티로신으로부터 도파, 도파로부터 도파키논으로 변화하고, 이어서 5, 6-디하이드록시인도페놀 등의 중간체를 거쳐 형성된다. 따라서, 피부의 색흑(피부 색소 침착증)을 예방 내지 개선하기 위해, 즉 미백을 위해서는, 멜라닌의 생산을 억제하는 것, 또는 이미 생산된 멜라닌을 담색 표백하는 것이 유효할 것으로 생각된다. 이러한 배경에서, 멜라닌 생산을 억제하여 미백 효과를 이끌어내는 물질의 개발이 활발하게 수행되고 있다.In the skin, melanin also protects the body from ultraviolet rays, but overproduction or uneven accumulation causes skin darkening or stain. In general, melanin is transformed from tyrosine by tyrosine by the action of enzyme tyrosinase biosynthesized in the pigment cells, and then from the waveguide to dopakinone, and then through intermediates such as 5,6-dihydroxyindophenol. Therefore, in order to prevent or ameliorate the dark color of the skin (skin pigmentosis), that is, for whitening, it is considered effective to inhibit the production of melanin, or to bleach already produced melanin. In this background, development of a substance that inhibits melanin production and leads to a whitening effect is actively performed.

모발의 성장은 성장기, 퇴행기, 휴지기로 이루어지는 주기적인 헤어 사이클(모주기)에 따라 성장 및 탈락을 반복하고 있다. 이 헤어 사이클 중, 휴지기에서 성장기에 걸친 새로운 모포가 형성되는 스테이지가 발모에 가장 중요한 것으로 여겨지고 있다. 그리고, 이 스테이지에서의 모포 상피계 세포의 증식 내지 분화에 중요한 역할을 하고 있는 것이 모유두세포인 것으로 생각되어지고 있다. 모유두세포는 모근 근방에 있는 외모근초 세포와 매트릭스 세포로 이루어지는 모포상피계 세포의 내측에 있으며, 기저막에 싸여 있는 모근의 근간 부분에 위치하는 세포로서, 모포 상피계 세포에 작용하여 그 증식을 돕는 등, 모발로의 분화에 중요한 역할을 담당하고 있다('Trends Genet', 1992년, 제 8권, p. 56-61 참조).Growth of hair grows and drops repeatedly according to periodic hair cycle (mother cycle) consisting of growing period, regenerating period, and resting period. In this hair cycle, a stage in which new blanks are formed from the resting stage to the growing stage is considered to be most important for hair growth. It is believed that the papilla cells play an important role in the proliferation and differentiation of the boll epithelial cells in this stage. The dermal papilla cells are located inside the hair follicle epithelium cells, which are composed of matrix cells and outer root cells in the vicinity of the hair follicles. They are located in the base part of the hair follicle wrapped around the basement membrane. They act on the hair follicle epithelial cells to help their proliferation , And plays an important role in hair differentiation ('Trends Genet', 1992, Vol.8, p. 56-61).

한편, 파인애플 과실 착즙액 내지 파인애플 과실 추출물을 미백, 피부 개선 성분으로서 함유하는 피부 외용제가 보고되어 있다(일본 특허공개 2002-275081호 공보 참조).On the other hand, a skin external preparation containing a pineapple fruit juice extract or pineapple fruit extract as a whitening and skin improving ingredient has been reported (see Japanese Patent Application Laid-Open No. 2002-275081).

그러나, 안전성 및 생산성이 우수하여 일상적으로 섭취 가능하며, 동시에 저가이면서, 우수한 라미닌-5 생산 촉진 작용, 표피 히알루론산 생산 촉진 작용, 히알루로니다아제 활성 저해 작용, 트랜스글루타미나아제-1 생산 촉진 작용, 멜라닌 생산 억제 작용 및 모유두세포 증식 촉진 작용 중 적어도 어느 하나를 갖는 천연계의 각종 제제에 대한 수요자의 요망은 매우 강하지만, 아직 충분히 만족할 만한 것이 제공되고 있지 않은 것이 현실이다.However, it can be consumed on a daily basis because of its excellent safety and productivity, and at the same time, it is inexpensive and has excellent laminin-5 production promoting action, epidermal hyaluronic acid production promoting action, hyaluronidase activity inhibiting action, transglutaminase- A melanin production-inhibiting action, and a dermal papilla cell proliferation-stimulating action, is very strong, but a satisfactory one is not yet provided.

본 발명은 종래의 상기 과제를 해결하고, 이하의 목적을 달성하는 것을 과제로 한다. 즉, 본 발명은 안전성 및 생산성이 우수하여 일상적으로 섭취 가능하며, 동시에 저가이면서, 우수한 라미닌-5 생산 촉진 작용, 표피 히알루론산 생산 촉진 작용, 히알루로니다아제 활성 저해 작용, 트랜스글루타미나아제-1 생산 촉진 작용, 멜라닌 생산 억제 작용, 및 모유두세포 증식 촉진 작용 중 적어도 어느 하나를 갖는 당 비함유 파인애플 추출물 및 그 제조 방법을 제공하는 것을 목적으로 한다.SUMMARY OF THE INVENTION The present invention has been made to solve the above-mentioned conventional problems and to achieve the following objects. That is, the present invention relates to a pharmaceutical composition which is excellent in safety and productivity and can be routinely consumed, and at the same time, it is inexpensive and has excellent laminin-5 production promoting action, epidermal hyaluronic acid production promoting action, hyaluronidase inhibiting action, transglutaminase- 1 production promoting action, a melanin production inhibiting action, and a papilla cell proliferation promoting action, and a process for producing the same.

또한, 본 발명은 우수한 라미닌-5 생산 촉진 작용을 가지며, 안전성이 높은 라미닌-5 생산 촉진제를 제공하는 것을 목적으로 한다. 또한, 본 발명은 우수한 표피 히알루론산 생산 촉진 작용을 가지며, 안전성이 높은 표피 히알루론산 생산 촉진제를 제공하는 것을 목적으로 한다. 또한, 본 발명은 우수한 히알루로니다아제 활성 저해 작용을 가지며, 안전성이 높은 히알루로니다아제 활성 저해제를 제공하는 것을 목적으로 한다. 또한, 본 발명은 우수한 트랜스글루타미나아제-1 생산 촉진 작용을 가지며, 안전성이 높은 트랜스글루타미나아제-1 생산 촉진제를 제공하는 것을 목적으로 한다. 또한, 본 발명은 우수한 멜라닌 생산 억제 작용을 가지며, 안전성이 높은 멜라닌- 생산 억제제를 제공하는 것을 목적으로 한다. 또한, 본 발명은 우수한 모유두세포 증식 작용을 가지며, 안전성이 높은 모유두세포 증식 촉진제를 제공하는 것을 목적으로 한다. 또한, 본 발명은 상기 당 비함유 파인애플 추출물을 함유하는 것을 특징으로 하는 음식품, 피부 외용제 및 육모제를 제공하는 것을 목적으로 한다. It is another object of the present invention to provide a laminin-5 production promoter having an excellent laminin-5 production promoting action and a high safety. It is another object of the present invention to provide an accelerator for production of epidermal hyaluronic acid having a superior skin hyaluronic acid production promoting action and a high safety. It is another object of the present invention to provide a highly safe hyaluronidase activity inhibitor having an excellent hyaluronidase activity inhibiting action. It is another object of the present invention to provide a transglutaminase-1 production promoter having an excellent transglutaminase-1 production promoting action and a high safety. It is another object of the present invention to provide a melanin-producing inhibitor having a superior melanin production inhibitory action and a high safety. It is another object of the present invention to provide an agent for promoting proliferation of a dermal papilla cell having an excellent dermal papilla cell proliferation action and a high safety. It is another object of the present invention to provide a food and drink, an external preparation for skin and a hair restorer, which contain the sugar-free pineapple extract.

상기 과제를 해결하기 위하여, 본 발명자들은 거듭 연구 검토한 결과, 다음과 같은 지견을 얻었다. 즉, 파인애플의 식용부를 용매에 의해 추출함으로써 얻어지는 파인애플 추출물이 우수한 라미닌-5 생산 촉진 작용, 표피 히알루론산 생산 촉진 작용, 히알루로니다아제 활성 저해 작용, 트랜스글루타미나아제-1 생산 촉진 작용, 멜라닌 생산 억제 작용 및 모유두세포 증식 촉진 작용을 갖는다는 사실로부터, 상기 파인애플 추출물이 라미닌-5 생산 촉진제, 표피 히알루론산 생산 촉진제, 히알루로니다아제 활성 저해제, 트랜스글루타미나아제-1 생산 촉진제, 멜라닌 생산 억제제 및 모유두세포 증식 촉진제, 그리고 음식품, 피부 외용제 및 육모제로서의 용도에 적합함으로 발견하였다.In order to solve the above problems, the inventors of the present invention have conducted extensive research and have found the following findings. Namely, the pineapple extract obtained by extracting the edible part of pineapple with a solvent has excellent laminin-5 production promoting action, epidermal hyaluronic acid production promoting action, hyaluronidase activity inhibiting action, transglutaminase-1 production promoting action, melanin Production inhibitory action and promoting the proliferation of the dermal papilla cell, the pineapple extract is effective for the production of laminin-5 production promoter, epidermal hyaluronic acid production promoter, hyaluronidase activity inhibitor, transglutaminase-1 production promoter, melanin production Inhibitors and dermal papilla cell proliferation accelerators, and as food and beverages, external dermatological preparations and hair restorers.

본 발명은 본 발명자들에 의한 상기 지견에 기초한 것으로, 상기 과제를 해결하기 위한 수단은 다음과 같다. 즉,The present invention is based on the above knowledge by the present inventors, and means for solving the above problems are as follows. In other words,

(1) 파인애플 식용부를 용매에 의해 추출함으로써 얻어지며, 포도당 및 과당을 함유하지 않는 것을 특징으로 하는 당 비함유 파인애플 추출물이다.(1) A sugar-free pineapple extract, which is obtained by extracting a pineapple edible portion with a solvent, and does not contain glucose and fructose.

(2) 파인애플 식용부의 압착 후의 잔사를 용매에 의해 추출함으로써 얻어지는 상기 (1)에 기재된 당 비함유 파인애플 추출물이다.(2) The sugar-free pineapple extract according to the above (1), which is obtained by extracting the residue after the compression of the pineapple edible portion with a solvent.

(3) 용매가 70 체적%-100 체적% 에탄올 수용액인 상기 (1) 또는 (2)에 기재된 당 비함유 파인애플 추출물이다.(3) The sugar-free pineapple extract according to the above (1) or (2), wherein the solvent is an aqueous solution of 70 volume% -100 volume% ethanol.

(4) 파인애플 식용부를 용매에 의해 추출하여, 포도당 및 과당을 제거하는 것을 특징으로 하는 당 비함유 파인애플 추출물의 제조 방법이다.(4) A method for producing a sugar-free pineapple extract, which comprises extracting a pineapple edible portion with a solvent to remove glucose and fructose.

(5) 파인애플 식용부의 압착 후의 잔사를 용매에 의해 추출하는 상기 (4)에 기재된 당 비함유 파인애플 추출물의 제조 방법이다.(5) The method for producing a sugar-free pineapple extract according to (4), wherein the residue after the compression of the pineapple edible portion is extracted with a solvent.

(6) 용매가 70 체적%-100 체적% 에탄올 수용액인 상기 (4) 또는 (5)에 기재된 당 비함유 파인애플 추출물의 제조 방법이다.(6) The method for producing a sugar-free pineapple extract according to (4) or (5), wherein the solvent is an aqueous solution of 70 volume% -100 volume% ethanol.

(7) 상기 (1) 내지 (3) 중 어느 한 항에 따른 당 비함유 파인애플 추출물을 함유하는 것을 특징으로 하는 라미닌-5 생산 촉진제이다.(7) A laminin-5 production promoter comprising the sugar-free pineapple extract according to any one of (1) to (3) above.

(8) 상기 (1) 내지 (3) 중 어느 한 항에 따른 당 비함유 파인애플 추출물을 함유하는 것을 특징으로 하는 표피 히알루론산 생산 촉진제이다.(8) The epidermal hyaluronic acid production promoter according to any one of (1) to (3), which contains the sugar-free pineapple extract.

(9) 상기 (1) 내지 (3) 중 어느 한 항에 따른 당 비함유 파인애플 추출물을 함유하는 것을 특징으로 하는 히알루로니다아제 활성 저해제이다.(9) A hyaluronidase activity inhibitor characterized by containing a saccharide-free pineapple extract according to any one of (1) to (3) above.

(10) 상기 (1) 내지 (3) 중 어느 한 항에 따른 당 비함유 파인애플 추출물을 함유하는 것을 특징으로 하는 트랜스글루타미나아제-1 생산 촉진제이다.(10) A transglutaminase-1 production promoter comprising the sugar-free pineapple extract according to any one of (1) to (3) above.

(11) 상기 (1) 내지 (3) 중 어느 한 항에 따른 당 비함유 파인애플 추출물을 함유하는 것을 특징으로 하는 멜라닌 생산 억제제이다.(11) A melanin production inhibitor characterized by containing a saccharide-free pineapple extract according to any one of (1) to (3) above.

(12) 상기 (1) 내지 (3) 중 어느 한 항에 따른 당 비함유 파인애플 추출물을 함유하는 것을 특징으로 하는 모유두세포 증식 촉진제이다.(12) A papilla cell proliferation promoter which comprises the sugar-free pineapple extract according to any one of (1) to (3) above.

(13) 상기 (1) 내지 (3) 중 어느 한 항에 따른 당 비함유 파인애플 추출물을 함유하는 것을 특징으로 하는 음식품이다.(13) A food or drink containing the sugar-free pineapple extract according to any one of (1) to (3).

(14) 상기 (1) 내지 (3) 중 어느 한 항에 따른 당 비함유 파인애플 추출물을 함유하는 것을 특징으로 하는 피부 외용제이다.(14) An external preparation for skin, which comprises the sugar-free pineapple extract according to any one of (1) to (3) above.

(15) 상기 (1) 내지 (3) 중 어느 한 항에 따른 당 비함유 파인애플 추출물을 함유하는 것을 특징으로 하는 육모제이다.(15) A hair restorer comprising the sugar-free pineapple extract according to any one of (1) to (3) above.

본 발명의 당 비함유 파인애플 추출물 및 그 제조 방법에 따르면, 안전성 및 생산성이 우수하여 일상적으로 섭취 가능하며, 동시에 저가이면서, 우수한 라미닌-5 생산 촉진 작용, 표피 히알루론산 생산 촉진 작용, 히알루로니다아제 활성 저해 작용, 트랜스글루타미나아제-1 생산 촉진 작용, 멜라닌 생산 억제 작용, 및 모유두세포 증식 촉진 작용 중 적어도 어느 하나를 갖는 당 비함유 파인애플 추출물 및 그 제조 방법을 제공할 수 있다.According to the saccharide-free pineapple extract of the present invention and its preparation method, it is possible to obtain daily consumption with excellent safety and productivity, and at the same time to provide an excellent laminin-5 production promoting action, a skin hyaluronic acid production promoting action, a hyaluronidase Containing pineapple extract having at least any one of an activity inhibiting action, a transglutaminase-1 production promoting action, a melanin production inhibiting action, and a dermal papilla cell proliferation promoting action, and a process for producing the same.

본 발명의 라미닌-5 생산 촉진제에 따르면, 종래의 많은 문제를 해결할 수 있는, 우수한 라미닌-5 생산 촉진 작용을 가지며, 안전성이 높은 라미닌-5 생산 촉진제를 제공할 수 있다. According to the laminin-5 production promoter of the present invention, it is possible to provide a laminin-5 production promoter having excellent laminin-5 production promoting action and high safety which can solve many conventional problems.

본 발명의 표피 히알루론산 생산 촉진제에 따르면, 종래의 많은 문제를 해결할 수 있는, 우수한 표피 히알루론산 생산 촉진 작용을 가지며, 안전성이 높은 표피 히알루론산 생산 촉진제를 제공할 수 있다.INDUSTRIAL APPLICABILITY According to the epidermal hyaluronic acid production promoter of the present invention, it is possible to provide an accelerator for production of epidermal hyaluronic acid having a superior action of promoting epidermal hyaluronic acid production and capable of solving many conventional problems and having high safety.

본 발명의 히알루로니다아제 활성 저해제에 따르면, 종래의 많은 문제를 해결할 수 있는, 우수한 히알루로니다아제 활성 저해 작용을 가지며, 안전성이 높은 히알루로니다아제 활성 저해제를 제공할 수 있다.According to the hyaluronidase activity inhibitor of the present invention, it is possible to provide a hyaluronidase activity inhibitor having excellent hyaluronidase activity inhibiting action and capable of solving many conventional problems and having high safety.

본 발명의 트랜스글루타미나아제-1 생산 촉진제에 따르면, 종래의 많은 문제를 해결할 수 있는, 우수한 트랜스글루타미나아제-1 생산 촉진 작용을 가지며, 안전성이 높은 트랜스글루타미나아제-1 생산 촉진제를 제공할 수 있다. According to the transglutaminase-1 production promoter of the present invention, there is provided a transglutaminase-1 production promoter having excellent transglutaminase-1 production promoting action and capable of solving many conventional problems, Can be provided.

본 발명의 멜라닌 생산 억제제에 따르면, 종래의 많은 문제를 해결할 수 있는, 우수한 멜라닌 생산 억제 작용을 가지며, 안전성이 높은 멜라닌 생산 억제제를 제공할 수 있다.According to the melanin production inhibitor of the present invention, it is possible to provide a melanin production inhibitor having excellent melanin production inhibiting action and high safety, which can solve many conventional problems.

본 발명의 모유두세포 증식 촉진제에 따르면, 종래의 많은 문제를 해결할 수 있는, 우수한 모유두세포 증식 작용을 가지며, 안전성이 높은 모유두세포 증식 촉진제를 제공할 수 있다. According to the dermal papilla cell growth promoter of the present invention, it is possible to provide a dermal papilla cell growth promoter having excellent dermal papilla cell proliferation action and high safety, which can solve many conventional problems.

(파인애플)(pineapple)

파인애플(Pinapple)은 파인애플과 파인애플속에 속하는 다생년의 식물로, 학명: Ananas comosus(L.) Merr. 내지 Ananas sativus Schult이고, 중국에서는 펑리(鳳梨)라고도 불리고 있다. 과실은 대각형으로 다육, 노랗게 숙성되어 향을 방출하며, 식용으로 이용된다. 파인애플의 산지는 미국, 필리핀, 말레이시아, 브라질, 오스트레일리아 등이 주된 산지이나, 본 발명에 이용되는 추출물을 얻음에 있어서는 그 종류나 산지는 특별히 한정되지 않는다.Pineapple (Pinapple) belongs to the genus Pineapple and Pineapple, the scientific name of the plant: Ananas comosus (L.) Merr. Ananas sativus Schult, also known as Fengli in China. The fruits are large-angled, fleshy, yellow-ripened and emit fragrance, and are used for food. The origin of pineapples is mainly produced in the United States, the Philippines, Malaysia, Brazil, Australia and the like. In obtaining the extract used in the present invention, the kind and origin of pineapple are not particularly limited.

(당 비함유 파인애플 추출물 및 당 비함유 파인애플 추출물의 제조 방법)(Method for producing sugar-free pineapple extract and sugar-free pineapple extract)

본 발명의 당 비함유 파인애플 추출물은 추출 원료로서의 파인애플 식용부를 용매에 의해 추출함으로써 얻어진다. 이 당 비함유 파인애플 추출물은 포도당 및 과당을 함유하지 않아야 한다.The sugar-free pineapple extract of the present invention is obtained by extracting a pineapple edible portion as an extraction raw material with a solvent. This sugar-free pineapple extract should not contain glucose and fructose.

본 발명의 당 비함유 파인애플 추출물의 제조 방법은 파인애플 식용부를 용매에 의해 추출하여, 포도당 및 과당을 제거하는 것을 포함하며, 필요에 따라 적절히 선택한, 그 외의 공정을 포함한다.The method for producing the sugar-free pineapple extract of the present invention includes extracting the pineapple edible portion with a solvent to remove glucose and fructose, and includes other processes appropriately selected as necessary.

상기 당 비함유 파인애플 추출물의 추출 원료로는 과육, 과심부(심) 등 파인애플 식용부이면 특별히 제한없이 목적에 따라 적절하게 선택할 수 있지만, 파인애플 식용부의 압착 후의 잔사, 즉 파인애플 과즙을 섭취한 후에 잔류한 섬유질(파인애플 펄프)이 특히 바람직하다.As the raw material for extracting the sugar-free pineapple extract, it is possible to appropriately select it according to the purpose without limitation, as long as it is a pineapple edible part such as flesh and core (core). However, the residue after the compression of the pineapple edible part, Fibers (pineapple pulp) are particularly preferred.

상기 추출 원료는, 섭취 후 세척하고 건조하여 분쇄한 것을 이용하는 것이 바람직하다. 여기에서 건조는 햇볕에 건조하여도, 통상 사용되는 건조기를 사용하여도 무방하다.It is preferable that the above-mentioned raw material for extraction is washed, dried, and pulverized after ingestion. Here, the drying may be performed in the sun or in a commonly used dryer.

상기 당 비함유 파인애플 추출물은 상기 파인애플 식용부를 상기 용매에 투입하여, 실온 내지 용매의 비점 이하의 온도에서 임의의 장치를 이용하여 추출함으로써 용이하게 얻을 수 있다.The sugar-free pineapple extract can be easily obtained by adding the pineapple edible portion to the solvent and extracting the mixture at room temperature or below the boiling point of the solvent using an arbitrary apparatus.

상기 용매는 특별한 제한없이 목적에 따라 적절하게 선택할 수 있으며, 예를 들면 메탄올, 에탄올, 프로판올, 이소프로판올 등의 탄소수 1-5의 저급 지방족 알콜; 아세톤, 메틸에틸케톤 등의 저급 지방족 케톤; 1, 3-부틸렌글리콜, 프로필렌글리콜, 글리세린 등의 탄소수 2-5의 다가알콜; 헥산; 저급 지방족 알콜, 저급 지방족 케톤, 다가 알콜 등의 친수성 유기 용매와 물과의 혼합 용매 등을 들 수 있다. 이들 중에서도, 친수성 유기 용매와 물과의 혼합 용매가 바람직하다. 상기 친수성 유기 용매로는 특별히 제한은 없으며, 목적에 따라 적절히 선택할 수 있지만, 메탄올, 에탄올, 프로판올, 1, 3-부틸렌글리콜, 글리세린, 프로필렌글리콜 등이 바람직하며, 에탄올이 보다 바람직하다.The solvent may be appropriately selected according to the purpose without particular limitation, and examples thereof include lower aliphatic alcohols having 1 to 5 carbon atoms such as methanol, ethanol, propanol and isopropanol; Lower aliphatic ketones such as acetone and methyl ethyl ketone; Polyhydric alcohols having 2 to 5 carbon atoms such as 1, 3-butylene glycol, propylene glycol and glycerin; Hexane; And a mixed solvent of a hydrophilic organic solvent such as a lower aliphatic alcohol, a lower aliphatic ketone, or a polyhydric alcohol, and water. Of these, a mixed solvent of a hydrophilic organic solvent and water is preferable. The hydrophilic organic solvent is not particularly limited and may be appropriately selected according to the purpose. Preferred examples of the hydrophilic organic solvent include methanol, ethanol, propanol, 1, 3-butylene glycol, glycerin, propylene glycol and the like. Ethanol is more preferable.

물과 친수성 유기 용매와의 혼합 용매에 있어서, 상기 친수성 유기 용매로서 저급 알콜을 이용하는 경우, 상기 저급 지방족 알콜의 상기 혼합 용매에 있어서의 함유량은 10 체적%-100 체적%가 바람직하며, 70 체적%-100 체적%가 보다 바람직하고, 90 체적%가 특히 바람직하다. 상기 친수성 유기 용매로서 저급 지방산 케톤을 이용하는 경우, 상기 저급 지방족 케톤의 상기 혼합 용매에서의 함유량은 10 체적%-80 체적%가 바람직하다. 상기 친수성 유기 용매로서 다가 알콜을 이용하는 경우, 상기 다가 알콜의 상기 혼합 용매에서의 함유량은 10 체적%- 90 체적%가 바람직하다.When a lower alcohol is used as the hydrophilic organic solvent in a mixed solvent of water and a hydrophilic organic solvent, the content of the lower aliphatic alcohol in the mixed solvent is preferably 10 vol% to 100 vol%, more preferably 70 vol% , More preferably -100 vol%, and particularly preferably 90 vol%. When a lower fatty acid ketone is used as the hydrophilic organic solvent, the content of the lower aliphatic ketone in the mixed solvent is preferably 10% by volume to 80% by volume. When a polyhydric alcohol is used as the hydrophilic organic solvent, the content of the polyhydric alcohol in the mixed solvent is preferably 10% by volume to 90% by volume.

상기 당 비함유 파인애플 추출물의 추출 방법은 상기 파인애플 식용부에 포함되는 지용성 성분을 상기 용매에 용출시키는 것이 가능하다면 특별히 한정되지 않고 통상법에 따라 수행할 수 있다. 또한, 추출 처리시에는 특수한 추출 방법을 채용할 필요는 없으며, 실온 내지 환류 가열 하에서 임의의 장치를 사용할 수 있다.The method for extracting sugar-free pineapple extract is not particularly limited as long as it is possible to elute a lipid soluble component contained in the pineapple edible part in the solvent, and can be carried out according to a conventional method. It is not necessary to employ a special extraction method in the extraction process, and any device may be used under room temperature to reflux heating.

구체적으로는 상기 당 비함유 파인애플 추출물의 추출 방법으로는, 예를 들면 에탄올 수용액 등의 상기 용매를 채운 처리조에, 파인애플 식용부를 압착한 후의 잔사(파인애플 펄프) 등의 상기 추출 원료를 투입하여, 필요에 따라 적절하게 교반하면서 환류 추출기로 80℃에서 2시간 가열 추출하고, 열 여과하여 지용성 성분을 용출한 후, 증발기를 이용하여 감압하에서 농축하고, 다시 동일한 여과 처리를 수행하여, 얻어진 중간 추출물을 물로 세척하여 포도당 및 과당 등의 당질을 제거함으로써, 목적으로 하는 당 비함유 파인애플 추출물을 얻는 방법을 들 수 있다.Specifically, as the method of extracting sugar-free pineapple extract, for example, the extraction raw material such as a residue (pineapple pulp) after pressing the pineapple portion is put into a treatment tank filled with the above-mentioned solvent such as an aqueous ethanol solution, , The mixture was heated and extracted with a reflux extractor at 80 ° C for 2 hours, and the resulting mixture was heated to elute a lipophilic component by heat filtration. The resulting mixture was concentrated under reduced pressure using an evaporator and then subjected to the same filtration treatment. Followed by washing to remove saccharides such as glucose and fructose to obtain an objective sugar-free pineapple extract.

이 때, 추출 조건은 상기 추출 원료 등에 따라 적절하게 조정할 수 있으나, 상기 추출 용매량은 상기 추출 원료로서의 파인애플 식용부에 대하여 5배량 - 20배량(질량비)이 바람직하며, 추출 시간은 1시간 - 3시간이 바람직하고, 추출 온도는 상온 - 95℃가 바람직하다.At this time, the extraction conditions can be appropriately adjusted according to the extraction raw materials, etc., but the amount of the extraction solvent is preferably 5 times to 20 times (mass ratio) to the pineapple edible part as the extraction raw material, and the extraction time is 1 hour to 3 hours And the extraction temperature is preferably from room temperature to 95 ° C.

또한, 얻어진 상기 당 비함유 파인애플 추출물은 상기 당 비함유 파인애플 추출물의 희석물, 농축물, 건조물, 초벌 정제물, 정제물 등을 얻기 위하여, 상법에 따라 희석, 농축, 건조, 정제 등의 처리를 실시할 수도 있다.The obtained sugar-free pineapple extract is subjected to diluting, concentrating, drying, and purification treatments according to a conventional method to obtain a diluted product, concentrated product, dried product, crude purified product and purified product of the sugar-free pineapple extract .

또한, 얻어진 상기 당 비함유 파인애플 추출물은 그대로도 라미닌-5 생산 촉진제, 표피 히알루론산 생산 촉진제, 히알루로니다아제 활성 저해제, 트랜스글루타미나아제-1 생산 촉진제, 멜라닌 생산 억제제, 모유두세포 증식 촉진제 중 어느 하나로서 사용할 수 있지만, 이용하기 쉽다는 점에서 상기 농축액, 상기 건조물이 바람직하다. 상기 건조물을 얻는데 있어서, 흡습성을 개선하기 위하여 덱스트린, 시클로덱스트린 등의 캐리어를 가할 수도 있다.In addition, the sugar-free pineapple extract thus obtained can be used as a laminin-5 production promoter, epidermal hyaluronic acid production promoter, hyaluronidase activity inhibitor, transglutaminase-1 production promoter, melanin production inhibitor, Any one of them may be used, but the concentrated liquid and the dried material are preferable in view of ease of use. In order to obtain the dried product, a carrier such as dextrin, cyclodextrin or the like may be added to improve hygroscopicity.

(비함유 성분)(Non-content component)

본 발명에 있어서, '당 비함유'의 '당'이라 함은 포도당 및 과당을 의미한다. 또한, '비함유', '당을 함유하지 않는다', '당을 제거한다'라 함은 각 당의 상기 당 비함유 파인애플 추출물에 대한 함유량이 0.5 질량% 이하임을 의미하지만, 0.2 질량% 이하가 바람직하다.In the present invention, the term " sugar " of " sugar-free " means glucose and fructose. The term "not containing", "not containing sugar", "removing sugar" means that the content of each sugar in the sugar-free pineapple extract is 0.5 mass% or less, but 0.2 mass% or less is preferable Do.

상기 포도당 및 과당의 함유량은 예를 들면, 글루코오스/프룩토오스 분석 키트(F-키트(글루코오스/프룩토오스), 주식회사 J. K. 인터내셔널제)를 이용하여, 키트 첨부된 프로토콜에 따라 측정할 수 있다. 또한, 피험 시료로는 상기 당 비함유 파인애플 추출물을 50 체적% 에탄올 수용액에 샘플 농도 5 체적%가 되도록 용해한 것을 이용할 수 있다.The content of the glucose and fructose may be measured according to the kit attached protocol, for example, using a glucose / fructose assay kit (F-kit (glucose / fructose), manufactured by J. K. International). As a test sample, the sugar-free pineapple extract may be dissolved in an aqueous 50% by volume ethanol solution to a concentration of 5% by volume of the sample.

(라미닌-5 생산 촉진제, 표피 히알루론산 생산 촉진제, 히알루로니다아제 활성 저해제, 트랜스글루타미나아제-1 생산 촉진제, 멜라닌 생산 억제제, 모유두세포 증식 촉진제)(Laminin-5 production promoter, epidermal hyaluronic acid production promoter, hyaluronidase activity inhibitor, transglutaminase-1 production promoter, melanin production inhibitor, and papillary cell proliferation promoter)

본 발명의 라미닌-5 생산 촉진제는 상기 당 비함유 파인애플 추출물을 함유하고 있으며, 필요에 따라 그 외의 성분을 더 함유하여 이루어진다.The laminin-5 production promoter of the present invention contains the above sugar-free pineapple extract and, if necessary, further contains other components.

본 발명의 표피 히알루론산 생산 촉진제는 상기 당 비함유 파인애플 추출물을 함유하고 있으며, 필요에 따라 그 외의 성분을 더 함유하여 이루어진다.The epidermal hyaluronic acid production promoter of the present invention contains the above sugar-free pineapple extract and, if necessary, further contains other ingredients.

본 발명의 히알루로니다아제 활성 저해제는 상기 당 비함유 파인애플 추출물을 함유하고 있으며, 필요에 따라 그 외의 성분을 더 함유하여 이루어진다.The hyaluronidase activity inhibitor of the present invention contains the above sugar-free pineapple extract and, if necessary, further contains other components.

본 발명의 트랜스글루타미나아제-1 생산 촉진제는 상기 당 비함유 파인애플 추출물을 함유하고 있으며, 필요에 따라 그 외의 성분을 더 함유하여 이루어진다.The transglutaminase-1 production promoter of the present invention contains the above sugar-free pineapple extract and, if necessary, further contains other components.

본 발명의 멜라닌 생산 억제제는 상기 당 비함유 파인애플 추출물을 함유하고 있으며, 필요에 따라 그 외의 성분을 더 함유하여 이루어진다.The melanin production inhibitor of the present invention contains the sugar-free pineapple extract and, if necessary, further contains other ingredients.

본발명의 모유두세포 증식 촉진제는 상기 당 비함유 파인애플 추출물을 함유하고 있으며, 필요에 따라 그 외의 성분을 더 함유하여 이루어진다.The dermal papilla cell growth promoting agent of the present invention contains the above sugar-free pineapple extract and, if necessary, further contains other components.

본 발명의 라미닌-5 생산 촉진제는 상기 당 비함유 파인애플 추출물만으로 이루어진 것일 수도 있고, 그 외의 성분을 포함하는 것일 수도 있다.The laminin-5 production promoter of the present invention may be composed of only the sugar-free pineapple extract, or may contain other ingredients.

상기 라미닌-5 생산 촉진제 중의 상기 당 비함유 파인애플 추출물의 함유량은 특별히 제한은 없으며, 목적에 따라 적절하게 선택할 수 있다.The content of the sugar-free pineapple extract in the laminin-5 production promoter is not particularly limited and may be appropriately selected depending on the purpose.

본 발명의 표피 히알루론산 생산 촉진제는 상기 당 비함유 파인애플 추출물만으로 이루어진 것일 수도 있고, 그 외의 성분을 포함하는 것일 수도 있다.The epidermal hyaluronic acid production promoter of the present invention may be composed of only the sugar-free pineapple extract or may contain other ingredients.

상기 표피 히알루론산 생산 촉진제 중의 상기 당 비함유 파인애플 추출물의 함유량은 특별히 제한은 없으며, 목적에 따라 적절하게 선택할 수 있다.The content of the sugar-free pineapple extract in the epidermal hyaluronic acid production promoting agent is not particularly limited and may be appropriately selected depending on the purpose.

본 발명의 히알루로니다아제 활성 저해제는 상기 당 비함유 파인애플 추출물만으로 이루어진 것일 수도 있고, 그 외의 성분을 포함하는 것일 수도 있다.The hyaluronidase activity inhibitor of the present invention may be composed of only the sugar-free pineapple extract, or may contain other ingredients.

상기 히알루로니다아제 활성 저해제 중의 상기 당 비함유 파인애플 추출물의 함유량은 특별히 제한은 없으며, 목적에 따라 적절하게 선택할 수 있다.The content of the sugar-free pineapple extract in the hyaluronidase activity inhibitor is not particularly limited and may be appropriately selected depending on the purpose.

본 발명의 트랜스글루타미나아제-1 생산 촉진제는 상기 당 비함유 파인애플 추출물만으로 이루어진 것일 수도 있고, 그 외의 성분을 포함하는 것일 수도 있다.The transglutaminase-1 production promoting agent of the present invention may be composed of only the sugar-free pineapple extract, or may contain other components.

상기 트랜스글루타미나아제-1 생산 촉진제 중의 상기 당 비함유 파인애플 추출물의 함유량은 특별히 제한은 없으며, 목적에 따라 적절하게 선택할 수 있다.The content of the sugar-free pineapple extract in the transglutaminase-1 production promoter is not particularly limited and may be appropriately selected depending on the purpose.

본 발명의 멜라닌 생산 억제제는 상기 당 비함유 파인애플 추출물만으로 이루어진 것일 수도 있고, 그 외의 성분을 포함하는 것일 수도 있다.The melanin production inhibitor of the present invention may be composed of only the sugar-free pineapple extract, or may contain other components.

상기 멜라닌 생산 억제제 중의 상기 당 비함유 파인애플 추출물의 함유량은 특별히 제한은 없으며, 목적에 따라 적절하게 선택할 수 있다.The content of the sugar-free pineapple extract in the melanin production inhibitor is not particularly limited and may be appropriately selected depending on the purpose.

본 발명의 모유두세포 증식 촉진제는 상기 당 비함유 파인애플 추출물만으로 이루어진 것일 수도 있고, 그 외의 성분을 포함하는 것일 수도 있다.The dermal papilla cell growth promoter of the present invention may be composed of only the sugar-free pineapple extract or may contain other components.

상기 모유두세포 증식 촉진제 중의 상기 당 비함유 파인애플 추출물의 함유량은 특별히 제한은 없으며, 목적에 따라 적절하게 선택할 수 있다.The content of the sugar-free pineapple extract in the dermal papilla cell growth promoter is not particularly limited and may be appropriately selected according to the purpose.

(그 외의 성분)(Other components)

상기 당 비함유 파인애플 추출물은 덱스트린, 시클로덱스트린 등의 약학적으로 허용할 수 있는 캐리어, 그 외의 임의의 보조제를 이용하여, 상법에 따라 분말상, 과립상, 정제상, 액상 등의 임의의 제형으로 제제화하여 제공할 수 있으며, 다른 조성물(예를 들면, 경구 의약품 등)에 배합하여 사용할 수 있는 외에도, 연고제, 외용액제, 첩부제 등으로 사용할 수 있다. 이 때, 보조제로는 예를 들면 부형제, 결합제, 붕괴제, 활택제, 안정제, 교미제, 교취제 등을 이용할 수 있다.The sugar-free pineapple extract may be formulated into a desired formulation such as powder, granule, tablet, liquid or the like according to a conventional method using a pharmaceutically acceptable carrier such as dextrin, cyclodextrin or the like or any other auxiliary agent And may be used in combination with other compositions (for example, oral medicines, etc.), as well as ointments, external liquid preparations, patches and the like. At this time, examples of the adjuvant include excipients, binders, disintegrators, lubricants, stabilizers, mating agents, and fodders.

상기 부형제로는 예를 들면, 유당, 백당, 염화나트륨, 포도당, 전분, 탄산칼슘, 카올린, 미결정 셀룰로오스, 규산 등을 들 수 있다. 또한, 상기 결합제로는 예를 들면, 물, 에탄올, 프로판올, 단일 시럽, 포도당, 전분액, 젤라틴액, 카르복시메틸셀룰로오스, 하이드록시프로필셀룰로오스, 하이드록시프로필스타치, 메틸셀룰로오스, 에틸셀룰로오스, 셸락, 인산칼슘, 폴리비닐피롤리돈 등을 들 수 있다. 상기 붕괴제로는 예를 들면, 건조 전분, 알긴산나트륨, 한천말, 탄산수소나트륨, 탄산칼슘, 라우릴황산나트륨, 스테아린산모노글리세리드, 유당 등을 들 수 있다. 상기 활택제로는 예를 들면, 정제 탈크, 스테아린산염, 붕사, 폴리에틸렌글리콜 등을 들 수 있다. 상기 안정화제로는 예를 들면 피로아황산나트륨, EDTA, 티오글리콜산, 티오유산 등을 들 수 있다. 상기 교미제 내지 교취제로는 예를 들면 백당, 등피(橙皮), 구연산, 주석산 등을 들 수 있다.Examples of the excipient include lactose, white sugar, sodium chloride, glucose, starch, calcium carbonate, kaolin, microcrystalline cellulose and silicic acid. Examples of the binder include water, ethanol, propanol, single syrup, glucose, starch solution, gelatin solution, carboxymethylcellulose, hydroxypropylcellulose, hydroxypropyl starch, methylcellulose, ethylcellulose, shellac, Calcium phosphate, and polyvinyl pyrrolidone. Examples of the disintegrators include dry starch, sodium alginate, agar, sodium hydrogen carbonate, calcium carbonate, sodium lauryl sulfate, stearic acid monoglyceride, and lactose. Examples of the lubricant include purified talc, stearate, borax, polyethylene glycol, and the like. Examples of the stabilizer include sodium pyrophosphate, EDTA, thioglycolic acid, and thioerythritol. Examples of the mating agents and the fibrillating agent include white sugar, orange peel, citric acid, tartaric acid and the like.

또한, 본 발명의 라미닌-5 생산 촉진제, 표피 히알루론산 생산 촉진제, 히알루로니다아제 활성 저해제, 트랜스글루타미나아제-1 생산 촉진제, 멜라닌 생산 억제제 및 모유두세포 증식 촉진제는, 필요에 따라 라미닌-5 생산 촉진 작용, 표피 히알루론산 생산 촉진 작용, 히알루로니다아제 활성 저해 작용, 트랜스글루타미나아제-1 생산 촉진 작용, 멜라닌 생산 억제 작용 및 모유두세포 증식 촉진 작용 중 어느 하나를 갖는 다른 천연 추출물 등을 함께 배합하여 이용할 수 있다.The laminin-5 production promoter, epidermal hyaluronic acid production promoter, hyaluronidase activity inhibitor, transglutaminase-1 production promoter, melanin production inhibitor and dermal papilla cell growth promoter of the present invention may be added to the laminin- Other natural extracts having any one of production-promoting action, epidermal hyaluronic acid production promoting action, hyaluronidase activity inhibiting action, transglutaminase-1 production promoting action, melanin production inhibiting action and dermal papilla cell growth promoting action And can be used in combination.

상기 라미닌-5 생산 촉진제는 유효 성분으로서 함유되는 상기 당 비함유 파인애플 추출물의 작용에 의해 라미닌-5 생산 촉진 작용을 발휘한다. The laminin-5 production promoter exhibits laminin-5 production promoting action by the action of the sugar-free pineapple extract contained as an active ingredient.

상기 표피 히알루론산 생산 촉진제는 유효 성분으로서 함유되는 상기 당 비함유 파인애플 추출물의 작용에 의해 표피 히알루론산 생산 촉진 작용을 발휘한다. The epidermal hyaluronic acid production promoter exerts the epidermal hyaluronic acid production promoting action by the action of the sugar-free pineapple extract contained as an active ingredient.

상기 히알루로니다아제 활성 저해제는 유효 성분으로서 함유되는 상기 당 비함유 파인애플 추출물의 작용에 의해 히알루로니다아제 활성 저해 작용을 발휘한다. The hyaluronidase activity inhibitor exerts the hyaluronidase inhibitory action by the action of the sugar-free pineapple extract contained as an active ingredient.

상기 트랜스글루타미나아제-1 생산 촉진제는 유효 성분으로서 함유되는 상기 당 비함유 파인애플 추출물의 작용에 의해 트랜스글루타미나아제-1 생산 촉진 작용을 발휘한다. The transglutaminase-1 production promoter exhibits a transglutaminase-1 production promoting action by the action of the sugar-free pineapple extract contained as an active ingredient.

상기 멜라닌 생산 억제제는 유효 성분으로서 함유되는 상기 당 비함유 파인애플 추출물의 작용에 의해 멜라닌 생산 억제 작용을 발휘한다. The melanin production inhibitor exhibits an action of inhibiting melanin production by the action of the sugar-free pineapple extract contained as an active ingredient.

상기 모유두세포 증식 촉진제는 유효 성분으로서 함유되는 상기 당 비함유 파인애플 추출물의 작용에 의해 모유두세포 증식 촉진 작용을 발휘한다. The dermal papilla cell proliferation promoter exerts the dermal papilla cell proliferation promoting action by the action of the sugar-free pineapple extract contained as an active ingredient.

본 발명의 라미닌-5 생산 촉진제에 따르면, 우수한 라미닌-5 생산 촉진 작용을 통하여, 예를 들면 피부의 기저막 형성을 촉진하여, 주름, 탄력성 저하 등 피부의 노화 증상을 예방 및 개선할 수 있게 된다. 단, 본 발명의 라미닌-5 생산 촉진제는 이들 용도 이외에도 라미닌-5 생산 촉진 작용을 발휘하는 것에 의의가 있는 모든 용도로 이용할 수 있다.According to the laminin-5 production promoter of the present invention, it is possible to prevent or ameliorate the aging symptoms of the skin such as wrinkles and elasticity degradation by promoting the formation of basement membrane of the skin, for example, through an excellent laminin-5 production promoting action. However, the laminin-5 production promoter of the present invention can be used for all purposes which have a significance to exert the laminin-5 production promoting action in addition to these uses.

본 발명의 표피 히알루론산 생산 촉진제에 따르면, 우수한 표피 히알루론산 생산 촉진 작용을 통하여, 예를 들면 보습력, 탄력성을 향상시켜, 피부 거칠어짐, 주름, 탄력성 저하 등 피부의 노화 증상을 예방 및 개선할 수 있게 된다. 단, 본 발명의 표피 히알루론산 생산 촉진제는 이들 용도 이외에도 표피 히알루론산 생산 촉진 작용을 발휘하는 것에 의의가 있는 모든 용도로 이용할 수 있다.According to the epidermal hyaluronic acid production promoter of the present invention, it is possible to prevent and improve aging symptoms of the skin such as skin roughness, wrinkles and elasticity by improving the moisture and elasticity through the action of promoting the production of excellent epidermal hyaluronic acid . However, the epidermal hyaluronic acid production promoter of the present invention can be used for all purposes that have an effect of promoting the production of epidermal hyaluronic acid in addition to these uses.

본 발명의 히알루로니다아제 활성 저해제에 따르면, 우수한 히알루로니다아제 활성 저해 작용을 통하여, 예를 들면 히알루론산의 분해를 억제하고, 히스타민 유리를 촉진하여, 보습의 강화를 도모하고, 염증이나 알러지를 예방 및 개선할 수 있게 된다. 단, 본 발명의 히알루로니다아제 활성 저해제는 이들 용도 이외에도 히알루로니다아제 활성 저해 작용을 발휘하는 것에 의의가 있는 모든 용도로 이용할 수 있다.According to the hyaluronidase activity inhibitor of the present invention, excellent hyaluronidase inhibitory activity is inhibited, for example, by inhibiting the degradation of hyaluronic acid, promoting histamine release, enhancing moisturization, Can be prevented and improved. However, the hyaluronidase activity inhibitor of the present invention can be used for all purposes that have an effect of inhibiting hyaluronidase activity in addition to these uses.

본 발명의 트랜스글루타미나아제-1 생산 촉진제에 따르면, 우수한 트랜스글루타미나아제-1 생산 촉진 작용을 통하여, 예를 들면 피부 표피의 배리어 기능을 향상시켜, 피부 거칠어짐, 피부결의 상실, 탄력성의 저하 등 피부의 노화 증상을 예방 및 개선할 수 있게 된다. 단, 본 발명의 트랜스글루타미나아제-1 생산 촉진제는 이들 용도 이외에도 트랜스글루타미나아제-1 생산 촉진 작용을 발휘하는 것에 의의가 있는 모든 용도로 이용할 수 있다.According to the transglutaminase-1 production promoter of the present invention, the excellent transglutaminase-1 production promoting action improves, for example, the barrier function of the skin epidermis, thereby improving skin roughness, loss of skin texture, It is possible to prevent or ameliorate the aging symptoms of the skin, such as lowering of the age. However, the transglutaminase-1 production promoter of the present invention can be used for all purposes that have a significance to exhibit transglutaminase-1 production promoting action in addition to these uses.

본 발명의 멜라닌 생산 억제제에 따르면, 우수한 멜라닌 생산 억제 작용을 통하여, 예를 들면 자외선으로부터 피부를 보호하여, 피부의 흑화, 기미 등 피부의 노화 증상을 예방 및 개선할 수 있게 된다. 단, 본 발명의 멜라닌 생산 억제제는 이들 용도 이외에도 멜라닌 생산 억제 작용을 발휘하는 것에 의의가 있는 모든 용도로 이용할 수 있다.According to the melanin production inhibitor of the present invention, it is possible to prevent and improve the symptoms of aging of the skin such as darkening of the skin, stain and the like by protecting the skin from ultraviolet rays, for example, through an excellent melanin production inhibiting action. However, the melanin production inhibitor of the present invention can be used for all purposes which have a significance to exhibit melanin production inhibitory action in addition to these uses.

본 발명의 모유두세포 증식 촉진제에 따르면, 우수한 모유두세포 증식 촉진 작용을 통하여, 예를 들면 모포 상피계 세포의 증식 및 모발의 분화를 촉진하여, 세모(細毛)화를 예방 및 개선할 수 있게 된다. 단, 본 발명의 모유두세포 증식 촉진제는 이들 용도 이외에도 모유두세포 증식 촉진 작용을 발휘하는 것에 의의가 있는 모든 용도로 이용할 수 있다.According to the dermal papilla cell growth promoter of the present invention, it is possible to prevent and improve fine hairs by promoting proliferation of hair cell epithelial cells and differentiation of hair through excellent dermal papilla cell proliferation promoting action. However, the agent for promoting proliferation of the dermal papilla cell can be used for all purposes which have a significance to exert the action of promoting the growth of the papilla cell, in addition to these uses.

본 발명의 라미닌-5 생산 촉진제, 표피 히알루론산 생산 촉진제, 히알루로니다아제 활성 저해제, 트랜스 글루타미나아제-1 생산 촉진제, 멜라닌 생산 억제제 및 모유두세포 증식 촉진제는 우수한 작용을 가짐과 동시에 식용이 되는 파인애플로부터 얻어진 추출물로서, 안전성이 우수하기 때문에 음식품, 피부 외용제 및 육모제에 배합하기에 매우 적합하다.The laminin-5 production promoter, epidermal hyaluronic acid production promoter, hyaluronidase activity inhibitor, transglutaminase-1 production promoter, melanin production inhibitor and papillary cell proliferation promoter of the present invention are excellent in action As an extract obtained from pineapple, it is excellent in safety and is therefore very suitable for compounding in food and drink, external preparation for skin and hair restorer.

또한, 본 발명의 라미닌-5 생산 촉진제, 표피 히알루론산 생산 촉진제, 히알루로니다아제 활성 저해제, 트랜스 글루타미나아제-1 생산 촉진제, 멜라닌 생산 억제제 및 모유두세포 증식 촉진제는 우수한 작용을 갖기 때문에, 라미닌-5, 표피 히알루론산, 히알루로니다아제, 트랜스글루타미나아제-1 및 모유두세포의 연구나, 히알루로니다아제, 라미닌-5, 표피 히알루론산, 트랜스글루타미나아제-1, 멜라닌 및 모유두세포에 관련된 기능 내지 질환의 연구를 위한 시약으로서 매우 적합하게 이용할 수 있다.In addition, since the laminin-5 production promoter, epidermal hyaluronic acid production promoter, hyaluronidase activity inhibitor, transglutaminase-1 production promoter, melanin production inhibitor and dermal papilla cell growth promoter of the present invention have excellent action, -5, epidermal hyaluronic acid, hyaluronidase, transglutaminase-1 and dermal papilla cells, hyaluronidase, laminin-5, epidermal hyaluronic acid, transglutaminase-1, melanin and breast milk It can be suitably used as a reagent for studying functions or diseases related to cells.

또한, 본 발명의 라미닌-5 생산 촉진제, 표피 히알루론산 생산 촉진제, 히알루로니다아제 활성 저해제, 트랜스 글루타미나아제-1 생산 촉진제, 멜라닌 생산 억제제 및 모유두세포 증식 촉진제는 인간에 대하여 매우 적합하게 적용되는 것이지만, 각각의 작용 효과가 발휘되는 한, 인간 이외의 동물에 대하여 적용할 수도 있다.In addition, the laminin-5 production promoter, epidermal hyaluronic acid production promoter, hyaluronidase activity inhibitor, transglutaminase-1 production promoter, melanin production inhibitor and dermal papilla cell growth promoter of the present invention are suitably applied to human beings However, it may be applied to animals other than humans as long as each action and effect is exerted.

(음식품)(Food and drink)

본 발명의 음식품은, 본 발명의 당 비함유 파인애플 추출물과, 라미닌-5 생산 촉진제, 표피 히알루론산 생산 촉진제, 히알루로니다아제 활성 저해제, 트랜스 글루타미나아제-1 생산 촉진제, 멜라닌 생산 억제제 및 모유두세포 증식 촉진제 중 적어도 어느 하나를 함유하여 이루어지며, 필요에 따라 그 외의 성분을 더 함유하여 이루어진다.The food or drink of the present invention is characterized by containing the sugar-free pineapple extract of the present invention, the laminin-5 production promoter, epidermal hyaluronic acid production promoter, hyaluronidase activity inhibitor, transglutaminase-1 production promoter, melanin production inhibitor, And a cell proliferation promoting agent, and further contains other components as necessary.

상기 음식품은 상기 당 비함유 파인애플 추출물을, 그 활성을 방해하지 않도록 임의의 음식품에 배합한 것일 수도 있고, 상기 당 비함유 파인애플 추출물을 주성분으로 한 음식품일 수도 있다. 또한, 상기 음식품은 상기 당 비함유 파인애플 추출물 그 자체일 수도 있다.The food or beverage may be a food or beverage containing the sugar-free pineapple extract as an active ingredient, or a food or beverage containing the sugar-free pineapple extract as a main ingredient, so as not to interfere with its activity. The food product may be the sugar-free pineapple extract itself.

상기 음식품이라 함은 인간의 건강에 위해를 가할 위험이 적고, 통상적인 사회 생활에 있어서 경구 또는 소화관 투여에 의해 섭취되는 것을 말하며, 행정 구분 상의 식품, 의약품, 의약부외품 등의 구분으로 제한되는 것이 아니라, 예를 들면, 경구적으로 섭취되는 일반 식품, 건강 식품, 보건 기능 식품, 미용용 식품, 의약부외품, 의약품 등을 폭넓게 포함하는 것을 의미한다.The term "food or drink" refers to a substance that is ingested by the oral or gastrointestinal tract administration in ordinary social life, and is limited to the classification of foods, medicines, quasi-drugs, etc. For example, it means to include a wide range of general foods, health foods, health functional foods, cosmetics, quasi-drugs and medicines that are ingested orally.

또한, 본 발명의 음식품은 음료, 하드 캡슐, 소프트 캡슐, 과립 등의 형상으로 가공함으로써 간편하게 섭취할 수 있어 광범위하게 이용 가능하다.Further, the food or drink of the present invention can be easily ingested by processing into a shape such as a beverage, a hard capsule, a soft capsule or a granule, so that it can be widely used.

상기 음식품은 특별한 제한없이 목적에 따라 적절하게 선정할 수 있으며, 예를 들면 청량음료, 탄산음료, 영양음료, 과일음료, 유산음료 등의 음료(이들 음료의 농축액 및 조정용 분말을 포함한다.); 아이스크림, 아이스셔벗, 팥빙수 등의 냉동 과자; 소바, 우동, 녹두 국수, 만두피, 슈마이피, 중화면, 즉석면 등의 면류; 사탕, 캔디, 껌, 쵸콜렛, 정과, 스낵 과자, 비스켓, 젤리, 쨈, 크림, 구운 과자, 빵 등의 과자류; 게, 연어, 바지락, 참치, 정어리, 새우, 가다랑어, 고등어, 고래, 굴, 꽁치, 오징어, 피조개, 가리비, 전복, 성게, 연어알, 오분자기 등의 수산물; 어묵, 햄, 소시지 등의 수산/축산 가공 식품; 가공유, 발효유 등의 유제품; 샐러드유, 튀김유, 마가린, 마요네즈, 쇼트닝, 휘핑크림, 드레싱 등의 유지 및 유지 가공 식품; 소스, 양념장 등의 조미료; 카레, 시튜, 닭고기계란 덮밥, 죽, 영양죽, 중화 덮밥, 돈까스 덮밥, 튀김 덮밥, 장어 덮밥, 해시라이스, 오뎅, 마파두부, 불고기 덮밥, 미트소스, 계란 스프, 오므라이스, 만두, 슈마이, 햄버거, 미트볼 등의 레토르트 파우치 식품; 샐러드, 장아찌 등의 반찬; 각종 형태의 건강/미용/영양 보조 식품; 정제, 과립제, 캡슐제, 드링크제, 트로키 등의 의약품, 의약부외품 등을 들 수 있다. 또한, 상기 음식품은 상기 예시에 한정되는 것이 아니다. The food or drink can be appropriately selected according to the purpose without any particular limitation, and examples thereof include beverages such as soft drinks, carbonated beverages, nutritional drinks, fruit drinks, lactic drinks, etc. (including concentrates and adjusting powders of these drinks); Frozen confectionery such as ice cream, ice sherbet, and bean curd; Noodles such as soba, udon, mung bean noodle, dumpling, shamapi, Chinese noodle, instant noodle; Confectionery such as candy, candy, gum, chocolate, jelly, snack, biscuit, jelly, 쨈, cream, baked confection, bread; Aquatic products such as crab, salmon, clam, tuna, sardine, shrimp, bonito, mackerel, whale, oyster, saury, squid, egg shell, scallop, abalone, sea urchin, salmon roe, Fish / livestock processed foods such as fish paste, ham, sausage; Dairy products such as processed milk and fermented milk; Preserved and preserved processed foods such as salad oil, tempura oil, margarine, mayonnaise, shortening, whipping cream, dressing; Seasonings such as sauces, sauces and the like; Curry, situ, chicken egg bowl, porridge, nutritional porridge, Chinese bowl, pork cutlet, fried rice bowl, eel rice bowl, hash rice, oden, maple tofu, roasted meatballs, meat sauce, egg soup, omelet rice, dumplings, , Retort pouch foods such as meatballs; Side dishes such as salads and pickles; Various forms of health / beauty / nutritional supplements; Tablets, granules, capsules, drinks, medicines such as troches, and quasi drugs. Further, the food or drink is not limited to the above example.

상기 음식품에 있어서, 상기 당 비함유 파인애플 추출물, 라미닌-5 생산 촉진제, 표피 히알루론산 생산 촉진제, 히알루로니다아제 활성 저해제, 트랜스 글루타미나아제-1 생산 촉진제, 멜라닌 생산 억제제 및 모유두세포 증식 촉진제 중 어느 하나의 함유량은, 첨가하는 음식품에 따라 달라 일률적으로 규정할 수는 없지만, 정제, 캡슐제 등의 경우에는 상기 당 비함유 파인애플 추출물의 양으로 환산하여 1 질량% - 90 질량%가 바람직하고, 그 외의 음식품에서는 상기 당 비함유 파인애플 추출물의 양으로 환산하여 0.001 질량% - 50 질량%가 바람직하다. 또한, 첨가 대상 음식품의 일반적 섭취량을 고려하여, 성인 1일당 상기 당 비함유 파인애플 추출물의 섭취량이 약 1㎎ - 1,000㎎ 정도가 되도록 조제하는 것이 바람직하다.The food or drink according to any one of claims 1 to 3, wherein the food or drink contains at least one of sugar-free pineapple extract, laminin-5 production promoter, epidermal hyaluronic acid production promoter, hyaluronidase activity inhibitor, transglutaminase- 1 production promoter, melanin production inhibitor, Can not be uniformly defined depending on the food or drink to be added. In the case of tablets, capsules, etc., the content is preferably 1% by mass to 90% by mass in terms of the amount of the sugar-free pineapple extract , And in other foods and drinks, it is preferably 0.001% by mass to 50% by mass in terms of the amount of the sugar-free pineapple extract. It is preferable that the intake amount of the sugar-free pineapple extract per adult is about 1 mg to 1,000 mg per day considering the general intake amount of the food to be added.

상기 그 외의 성분으로는 상기 음식품을 제조하는데 통상적으로 이용되는 보조적 원료, 첨가물 등을 들 수 있다.Examples of the other components include auxiliary raw materials and additives commonly used for producing the food and drink.

상기 보조적 원료 내지 첨가물은 특별한 제한없이 목적에 따라 적절하게 선정할 수 있으며, 예를 들면, 포도당, 과당, 자당, 말토스, 솔비톨, 스테비오사이드, 루부소사이드, 콘시럽, 유당, 구연산, 주석산, 사과산, 호박산, 유산, L-아스코르빈산, d1-α-토코페롤, 에리소르빈산나트륨, 글리세린, 프로필렌글리콜, 글리세린지방산에스테르, 폴리글리세린지방산에스테르, 자당지방산에스테르, 솔비탄지방산에스테르, 아라비아검, 카라기난, 카제인, 젤라틴, 펙틴, 한천, 비타민B류, 니코틴산아미드, 판토텐산칼슘, 아미노산류, 칼슘염류, 색소, 향료, 보존제 등을 들 수 있다.The auxiliary raw materials and additives may be appropriately selected according to the purpose without any particular limitation, and examples thereof include glucose, fructose, sucrose, maltose, sorbitol, stevioside, rubusoide, corn syrup, lactose, citric acid, But are not limited to, malic acid, succinic acid, lactic acid, L-ascorbic acid, d1-? -Tocopherol, sodium erishorbate, glycerin, propylene glycol, glycerin fatty acid esters, polyglycerin fatty acid esters, sucrose fatty acid esters, sorbitan fatty acid esters, Casein, gelatin, pectin, agar, vitamin B, nicotinic acid amide, calcium pantothenate, amino acids, calcium salts, coloring matters, fragrances and preservatives.

본 발명의 음식품은 일상적으로 경구 섭취하는 것이 가능하며, 유효 성분인 상기 파인애플 추출물의 작용에 의해, 히알루로니다아제 활성 저해 작용, 라미닌-5 생산 촉진 작용, 표피 히알루론산 생산 촉진 작용, 트랜스글루타미나아제-1 생산 촉진 작용 및 모유두세포 증식 촉진 작용 중 적어도 어느 하나를 매우 효과적으로 달성할 수 있다.The food or drink according to the present invention can be orally ingested on a routine basis. By the action of the pineapple extract as an active ingredient, the hyaluronidase activity inhibiting action, the laminin-5 production promoting action, the epidermal hyaluronic acid production promoting action, It is possible to achieve at least one of the further production promotion action and the dermal papilla cell proliferation promotion action very effectively.

또한, 본 발명의 음식품은 인간에 대하여 매우 적합하게 적용되는 것이지만, 각각의 작용 효과가 발휘되는 한, 인간 이외의 동물에 대하여 적용할 수도 있다.In addition, the food or drink of the present invention is suitably applied to humans, but may be applied to animals other than humans as long as the respective action and effect are exerted.

(피부외용제)(External preparation for skin)

본 발명의 피부 외용제는 본 발명의 당 비함유 파인애플 추출물과, 라미닌-5 생산 촉진제, 표피 히알루론산 생산 촉진제, 히알루로니다아제 활성 저해제, 트랜스 글루타미나아제-1 생산 촉진제, 멜라닌 생산 억제제 및 모유두세포 증식 촉진제 중 적어도 어느 하나를 함유하여 이루어지며, 필요에 따라 그 외의 성분을 더 함유하여 이루어진다.The external preparation for skin of the present invention is characterized by containing the sugar-free pineapple extract of the present invention, the laminin-5 production promoter, epidermal hyaluronic acid production promoter, hyaluronidase activity inhibitor, transglutaminase-1 production promoter, melanin production inhibitor, And a cell proliferation promoting agent, and further contains other components as necessary.

여기에서 상기 피부외용제라 함은 피부에 적용되는 각종 약제를 의미하며, 그 구분은 특별히 제한되는 것이 아니라, 예를 들면 피부화장료, 의약부외품, 의약품 등을 폭넓게 포함하는 것이다.Herein, the external preparation for skin refers to various medicines to be applied to the skin. The classification is not particularly limited, and includes, for example, skin cosmetics, quasi-drugs, medicines and the like in a wide range.

상기 피부외용제는 상기 당 비함유 파인애플 추출물을, 그 활성을 방해하지 않도록 임의의 피부외용제에 배합한 것일 수도 있고, 상기 당 비함유 파인애플 추출물을 주성분으로 한 피부외용제일 수도 있다. 또한, 상기 피부외용제는 상기 당 비함유 파인애플 추출물 그 자체일 수도 있다.The external preparation for skin may be an external preparation for skin which contains the sugar-free pineapple extract as an active ingredient, or a skin external preparation containing the sugar-free pineapple extract as a main component so as not to interfere with its activity. In addition, the external preparation for skin may be the sugar-free pineapple extract itself.

상기 피부외용제는 특별한 제한없이 목적에 따라 적절히 선택할 수 있으며, 예를 들면 연고, 크림, 유액, 미용액, 로션, 팩, 파운데이션, 립크림, 입욕제, 헤어토닉, 헤어로션, 비누, 바디샴푸 등을 들 수 있다.The external preparation for skin may be appropriately selected according to the purpose without any particular limitation and examples thereof include ointments, creams, emulsions, essences, lotions, packs, foundation, lip balm, bath salts, hair tonic, hair lotion, soap, body shampoo, have.

상기 그 외의 성분으로는 특별한 제한없이 목적에 따라 적절히 선택할 수 있으며, 피부외용제를 제조함에 있어서 통상적으로 이용되는 성분, 예를 들면 수렴제, 살균, 항균제, 미백제, 자외선 흡수제, 보습제, 세포 부활제, 항노화제, 소염/항알러지제, 항산화제, 활성산소 제거제, 유지류, 납류, 탄화수소류, 지방산류, 알콜류, 에스테르류, 계면활성제, 향료 등을 들 수 있다.The above-mentioned other components can be appropriately selected according to the purpose without particular limitation, and can be appropriately selected in accordance with the purpose and can be appropriately selected in accordance with the components conventionally used in the preparation of the external preparation for skin such as astringent, antiseptic, antibacterial agent, whitening agent, ultraviolet absorber, An antioxidant, an active oxygen scavenger, a fat, a lead, a hydrocarbon, a fatty acid, an alcohol, an ester, a surfactant, and a fragrance.

상기 피부외용제에 있어서, 상기 당 비함유 파인애플 추출물, 라미닌-5 생산 촉진제, 표피 히알루론산 생산 촉진제, 히알루로니다아제 활성 저해제, 트랜스 글루타미나아제-1 생산 촉진제, 멜라닌 생산 억제제 및 모유두세포 증식 촉진제 중 어느 하나의 함유량은 특별한 제한없이 피부외용제의 종류 등에 따라 적절히 선택할 수 있지만, 예를 들면 상기 당 비함유 파인애플 추출물의 양으로 환산하여 0.0001 질량% - 10 질량%가 바람직하고, 0.001 질량% - 5 질량%가 보다 바람직하다. The external preparation for skin according to any one of claims 1 to 3, wherein the dermal pineapple extract, laminin-5 production accelerator, epidermal hyaluronic acid production accelerator, hyaluronidase activity inhibitor, transglutaminase-1 production accelerator, melanin production inhibitor, May be appropriately selected depending on the kind of the external preparation for skin and the like without particular limitation. For example, it is preferably 0.0001% by mass to 10% by mass in terms of the amount of the sugar-free pineapple extract, more preferably 0.001% by mass to 5% % By mass is more preferable.

(육모제)(Hair restoration)

본 발명의 육모제는 본 발명의 당 비함유 파인애플 추출물과, 라미닌-5 생산 촉진제, 표피 히알루론산 생산 촉진제, 히알루로니다아제 활성 저해제, 트랜스 글루타미나아제-1 생산 촉진제, 멜라닌 생산 억제제 및 모유두세포 증식 촉진제 중 적어도 어느 하나를 함유하여 이루어지며, 필요에 따라 그 외의 성분을 더 함유하여 이루어진다.The hair restorer of the present invention is a hair restorer comprising the saccharide-free pineapple extract of the present invention, a laminin-5 production promoter, a skin hyaluronic acid production promoter, a hyaluronidase activity inhibitor, a transglutaminase-1 production promoter, a melanin production inhibitor, And a growth promoting agent, and further contains other components as necessary.

상기 육모제는 상기 당 비함유 파인애플 추출물을, 그 활성을 방해하지 않도록 임의의 육모제에 배합한 것일 수도 있고, 상기 당 비함유 파인애플 추출물을 주성분으로 한 육모제일 수도 있다. 또한, 상기 육모제는 상기 당 비함유 파인애플 추출물 그 자체일 수도 있다.The hair restoring agent may be one which is blended with an optional hair restorer so as not to interfere with the activity of the sugar-free pineapple extract, or may be a hair growth agent containing the sugar-free pineapple extract as a main component. In addition, the hair restorer may be the sugar-free pineapple extract itself.

본 발명의 육모제에 따르면, 우수한 라미닌-5 생산 촉진 작용, 표피 히알루론산 생산 촉진 작용, 히알루로니다아제 활성 저해 작용, 트랜스글루타미나아제-1 생산 촉진 작용, 멜라닌 생산 억제 작용 및 모유두세포 증식 촉진 작용 등을 통하여, 예를 들면 유두세포 및 모포 상피계 세포의 증식, 모발의 분화 등을 촉진하여, 세모화, 탈모 등을 예방 및 개선하는데 매우 적합하게 이용할 수 있다.According to the hair restoration of the present invention, excellent hair laminin-5 production promoting action, epidermal hyaluronic acid production promoting action, hyaluronidase activity inhibiting action, transglutaminase-1 production promoting action, melanin production inhibiting action, For example, by promoting the proliferation of papillary cells and embryonic epithelial cells, differentiation of hair, and the like, and can be suitably used for preventing and improving hair loss, hair loss and the like.

또한, 본 명세서의 '육모제'라 함은 모를 발육시키는 것, 모의 발육을 촉진하는 것, 모의 건강 상태를 유지하는 것, 탈모를 예방하는 것 및 탈모를 저감시키는 것 중 어느 하나의 효과를 갖는 약제를 의미하며, '양모제'도 포함한다. 따라서, 본 발명의 육모제는 양모제로서도 매우 적합하게 이용할 수 있다.The term "hair restorer" as used herein refers to a hair restorer that can be used to develop a hair, to promote hair growth, to maintain a mock health condition, to prevent hair loss, and to reduce hair loss Quot; and " hair dye ". Therefore, the hair restorer of the present invention can be suitably used as a hair restorer.

본 발명의 육모제는 우수한 작용을 가짐과 동시에, 피부에 적용한 경우의 사용감과 안전성이 우수하기 때문에, 두발용 육모제, 두발 화장료 등의 피부외용제에 배합하기에 매우 적합하다. 상기 피부외용제의 투여 부위는 예를 들면, 두발, 두발의 모근, 두피, 두피의 피지선 등의 두부가 바람직하다. 상기 피부외용제의 제형으로는, 예를 들면 연고, 크림, 로션, 겔, 졸, 스프레이, 용액 등을 들 수 있다. 두발 화장료로는 예를 들면, 헤어토닉, 헤어리퀴드, 샴푸, 포마드, 린스 등을 들 수 있다.The hair restorer of the present invention has an excellent action, and is excellent in feeling and safety when applied to the skin, and therefore, is well suited for compounding in external preparations for skin such as hair restorers and hair cosmetics. The administration site of the external preparation for skin is preferably, for example, hair such as hair, scalp hair, scalp, sebaceous gland of scalp, and the like. Examples of the formulations of the external preparation for skin include ointments, creams, lotions, gels, sols, sprays, solutions and the like. Hair cosmetics include, for example, hair tonic, hair liquid, shampoo, pomade, and rinse.

상기 육모제에 있어서, 상기 당 비함유 파인애플 추출물, 라미닌-5 생산 촉진제, 표피 히알루론산 생산 촉진제, 히알루로니다아제 활성 저해제, 트랜스 글루타미나아제-1 생산 촉진제, 멜라닌 생산 억제제 및 모유두세포 증식 촉진제 중 어느 하나의 함유량은 특별한 제한없이 피부외용제의 종류 등에 따라 적절히 선택할 수 있지만, 예를 들면 상기 당 비함유 파인애플 추출물의 양으로 환산하여 0.0001 질량% - 10 질량%가 바람직하고, 0.001 질량% - 5 질량%가 보다 바람직하다. In the hair restorer, it is preferred that the sugar-free pineapple extract, laminin-5 production promoter, epidermal hyaluronic acid production promoter, hyaluronidase activity inhibitor, transglutaminase-1 production promoter, melanin production inhibitor, The content of any one can be appropriately selected according to the kind of the external preparation for skin and the like without particular limitation. For example, it is preferably 0.0001% by mass to 10% by mass in terms of the amount of the sugar-free pineapple extract, more preferably 0.001% % Is more preferable.

(실시예)(Example)

이하, 제조예 및 시험예를 통하여 본 발명을 보다 구체적으로 설명하겠지만, 본 발명은 이들에 제한되는 것이 아니다.Hereinafter, the present invention will be described more specifically by way of Production Examples and Test Examples, but the present invention is not limited thereto.

(제조제 1: 당 비함유 파인애플 추출물의 제조)(Preparation 1: Preparation of sugar-free pineapple extract)

파인애플 식용부의 압착 후의 잔사(파인애플 펄프) 100g을 90 체적% 에탄올 1,000㎖에 가하여, 환류 추출기로 80℃에서 2시간 가열 추출하고, 열 여과하였다. 그 후, 에버포레이터를 이용하여 감압 하에서 농축하고, 다시 동일한 여과 처리를 수행하였다. 얻어진 잔사에 대하여 500㎖의 물로 세정하고, 당질을 제거한 페이스트상의 당 비함유 파인애플 추출물 1.5g을 얻었다. 추출물의 수율은 1.5(질량%)였다.100 g of the residue (pineapple pulp) after the compression of the pineapple edible portion was added to 1,000 ml of 90% by volume ethanol, and the mixture was heated and extracted with a reflux extractor at 80 DEG C for 2 hours, followed by thermal filtration. Thereafter, the mixture was concentrated under reduced pressure using an evaporator, and the same filtration treatment was carried out again. The obtained residue was washed with 500 ml of water to obtain 1.5 g of paste-free pineapple extract in the form of a saccharified saccharide-free paste. The yield of the extract was 1.5 (mass%).

얻어진 당 비함유 파인애플 추출물에 대하여 이하와 같이 성분 분석을 수행하였다.The resulting sugar-free pineapple extract was subjected to component analysis as follows.

상기 당 비함유 파인애플 추출물을 50 체적% 에탄올에 샘플 농도 20 체적%가 되도록 용해한 것을 피험 시료로서 이용하여, 글루코오스/프룩토오스 분석 키트(F-키트(글루코오스/프룩토오스), 주식회사 J.K. 인터내셔널제)에 의해 포도당 및 과당의 함유량을 측정하였다. 측정 결과, 상기 당 비함유 파인애플 추출물은 0.03 질량%의 포도당, 0.01 질량%의 과당을 함유함을 알 수 있었다.The glucose / fructose assay kit (F-kit (glucose / fructose), manufactured by JK International, Inc., Japan) was prepared by dissolving the sugar-free pineapple extract in 50 vol% ethanol at a sample concentration of 20 vol% ) To measure the content of glucose and fructose. As a result of the measurement, it was found that the sugar-free pineapple extract contained 0.03 mass% of glucose and 0.01 mass% of fructose.

상기의 제조예 1에서 얻어진 당 비함유 파인애플 추출물을 피험 시료로 이용하여, 이하의 시험예 1-6에 나타낸 바와 같이, 당 비함유 파인애플 추출물에 관한 피부 개선, 미백 및 육모에 관한 평가를 수행하였다.Using the sugar-free pineapple extract obtained in Preparation Example 1 as a test sample, evaluation of skin improvement, whitening, and hair growth of the sugar-free pineapple extract was carried out as shown in Test Example 1-6 below .

또한, 대조 파인애플 추출물로서, 100% 파인애플 과즙(시판 파인애플 착즙물) 200㎖를 에버포레이터를 이용하여 감압 하에서 농축하고, 동결 건조를 수행하여 얻어진 26.3g의 파인애플 착즙 동결 건조물을 이용하였다. 이 파인애플 착즙 동결 건조물 0.413g/L에 대하여 상기 당 비함유 파인애플 추출물과 마찬가지로 포도당 및 과당의 함유량을 측정한 결과, 이 파인애플 착즙 동결 건조물은 29.1 질량%의 포도당, 26.6 질량%의 과당을 함유함을 알 수 있었다.Further, as the control pineapple extract, 26.3 g of the frozen pineapple frozen product obtained by concentrating 200 ml of 100% pineapple juice (commercially available pineapple juice) under reduced pressure using an evaporator and using freeze-drying was used. The content of glucose and fructose was measured in the same manner as in the sugar-free pineapple extract to 0.413 g / L of the pineapple freeze-dried product. The pineapple frozen product contained 29.1 mass% glucose and 26.6 mass% fructose Could know.

(시험예 1: 라미닌-5 생산 촉진 작용 시험)(Test Example 1: Laminin-5 production promoting action test)

<시험 방법)<Test Method>

인간 정상 신생아 피부 표피 각화세포(NHEK, 쿠라시키 방적 주식회사제)를 인간 정상 신생아 표피 각화세포용 배지(KGM, 쿠라시키 방적 주식회사제)를 이용하여 배양한 후, 트립신 처리에 의해 세포를 회수하였다. 회수한 세포를 1×105세포/mL의 농도가 되도록 BPE 무첨가 KGM(KGM-BPE, 쿠라시키 방적 주식회사제)으로 희석한 후, 24웰 플레이트에 1웰당 500㎕씩 파종하여 2일간 배양하였다. 배양 종료 후, 배지를 빼고, KGM-BPE로 용해한 피험 시료를 각 웰에 500㎕ 첨가하여 48시간 배양하였다. 배양 종료 후, 상청액 100㎕를 ELISA 플레이트에 옮겨 37℃에서 2시간 플레이트에 흡착시킨 후, 용액을 버리고, 0.05 체적%의 Tween20을 포함하는 인생산리완충액(0.05% PBS-T, pH 7.4)으로 세정하였다.The human normal neonatal skin epidermal keratinocytes (NHEK, manufactured by Kuraray Co., Ltd.) were cultured using a medium for human normal normal neonatal epidermal keratinocytes (KGM, Kurashiki Denshi Co., Ltd.), and cells were recovered by trypsin treatment. The recovered cells were diluted with KGM-BPE (KGM-BPE, manufactured by Kurashiki Denshi Co., Ltd.) so as to have a concentration of 1 × 10 5 cells / mL, and then seeded at 500 μl per well in a 24-well plate and cultured for 2 days. After completion of the culture, the medium was removed and 500 μl of a test sample dissolved in KGM-BPE was added to the wells and cultured for 48 hours. After completion of the incubation, 100 상 of the supernatant was transferred to an ELISA plate and adsorbed on a plate at 37 캜 for 2 hours. The solution was discarded and washed with a 0.05% (v / v) PBS Respectively.

그 후, 1 체적% 소혈청 알부민을 포함하는 인생산리완충액(pH 7.4)으로 블록킹 조작을 수행하였다. 용액을 버리고 0.05% PBS-T로 세정을 수행하여, 항 인간라미닌-5 항체(마우스 IgG, 니폰 케미콘 주식회사제)를 반응시켰다. 용액을 버리고 0.05% PBS-T로 세정한 후, 발색 반응을 수행하였다. 얻어진 측정 결과로부터, 하기식에 의해 라미닌-5 생산 촉진율(%)을 산출하였다.Thereafter, the blocking operation was performed with a living-sanri buffer (pH 7.4) containing 1 vol% bovine serum albumin. The solution was discarded and washed with 0.05% PBS-T to react with an anti-human laminin-5 antibody (mouse IgG, manufactured by Nippon Chemicon Co., Ltd.). The solution was discarded and washed with 0.05% PBS-T, followed by color development. From the obtained measurement results, the laminin-5 production promotion rate (%) was calculated by the following formula.

라미닌-5 생산 촉진 작용의 계산 방법은 하기와 같다. 결과를 표 1에 나타낸다.The calculation method of laminin-5 production promoting action is as follows. The results are shown in Table 1.

[수학식 1][Equation 1]

라미닌-5 생산 촉진률(%)=A/B×100Laminin-5 production promotion rate (%) = A / B x 100

(단, 상기 식 1 중, A: 피험 시료 첨가시의 파장 405nm에서의 흡광도(Wherein, in the above formula 1, A: absorbance at a wavelength of 405 nm when a test sample is added

B: 피험 시료 무첨가시(컨트롤)의 파장 405nm에서의 흡광도를 각각 나타낸다.)B: absorbance at a wavelength of 405 nm (control) at the time of no sample addition)

농도(㎍/㎖)Concentration (/ / ml) 라미닌-5 생산 촉진율(%)Laminin-5 production promotion rate (%) 당 비함유 파인애플 추출물Sugar-free pineapple extract 파인애플 착즙 동결 건조물Pineapple juice lyophilisate 2.52.5 114.3±3.3** 114.3 ± 3.3 ** 91.3±5.891.3 ± 5.8 1010 121.3±3.0** 121.3 ± 3.0 ** 88.7±2.288.7 ± 2.2

Mean±S.E., n=4, **: p<0.01Mean ± SE, n = 4, ** : p <0.01

표 1의 결과로부터, 당 비함유 파인애플 추출물에, 농도 의존적인 라미닌-5 생산 촉진 작용이 인정되었다.From the results shown in Table 1, concentration-dependent stimulation of laminin-5 production was recognized in the sugar-free pineapple extract.

(시험예 2: 표피 히알루론산 생산 촉진 작용 시험)(Test Example 2: Test for promoting epidermal hyaluronic acid production)

<시험 방법><Test Method>

인간 정상 신생아 피부 표피 각화세포(NHEK)를 인간 정상 신생아 표피 각화세포용 배지(KGM)를 이용하여 배양한 후, 트립신 처리에 의해 세포를 회수하였다. 회수한 세포를 1×105세포/mL의 농도가 되도록 KGM으로 희석한 후, 96웰 플레이트에 1웰당 100㎕씩 파종하여 24시간 배양하였다. 배양 종료 후, KGM으로 용해한 피험 시료를 각 웰에 100㎕ 첨가하여 7일간 배양하였다. 배양 후, 각 웰의 배지 중의 히알루론산량을, 히알루론산 결합 단백(HABP, 생화학 바이오비지니스 주식회사제)을 이용한 샌드위치법에 의해 측정하였다. Human normal neonatal skin epidermal keratinocytes (NHEK) were cultured using human normal neonatal epidermal keratinocyte medium (KGM), and then cells were recovered by trypsin treatment. The recovered cells were diluted with KGM to a concentration of 1 × 10 5 cells / mL, and then seeded in a 96-well plate at a rate of 100 μl per well, followed by culturing for 24 hours. After completion of the cultivation, 100 μl of a test sample dissolved in KGM was added to each well and cultured for 7 days. After culturing, the amount of hyaluronic acid in the medium of each well was measured by a sandwich method using hyaluronic acid binding protein (HABP, manufactured by Biochemical Bio-business Co., Ltd.).

히알루론산 생산 촉진 작용의 계산 방법은 하기와 같다. 결과를 표 2에 나타낸다.The calculation method of hyaluronic acid production promoting action is as follows. The results are shown in Table 2.

[수학식 2]&Quot; (2) &quot;

1웰당 히알루론산 생산 촉진률(%)=A/B×100Acceleration rate of hyaluronic acid production per well (%) = A / B x 100

(단, 상기 식 2 중,(Wherein, in the formula 2,

A: 피험 시료 첨가시의 히알루론산량A: Amount of hyaluronic acid at the time of addition of the test sample

B: 피험 시료 무첨가시의 히알루론산량을 나타낸다.)B: the amount of hyaluronic acid at the time of no sample addition)

농도(㎍/㎖)Concentration (/ / ml) 표피 히알루론산 생산 촉진율(%)Promotion rate of epidermal hyaluronic acid production (%) 당 비함유 파인애플 추출물Sugar-free pineapple extract 파인애플 착즙 동결 건조물Pineapple juice lyophilisate 2525 108.5±1.3** 108.5 ± 1.3 ** 78.8±4.478.8 ± 4.4 100100 149.7±2.1*** 149.7 ± 2.1 *** 79.6±4.679.6 ± 4.6

Mean±S.E., n=5, **: p<0.01, ***: p<0.001Mean ± SE, n = 5, ** : p <0.01, *** : p <0.001

표 2의 결과로부터, 당 비함유 파인애플 추출물에, 유의한 표피 히알루론산 생산 촉진 작용이 인정되었다.From the results shown in Table 2, significant action of promoting epidermal hyaluronic acid production was recognized in the sugar-free pineapple extract.

(시험예 3: 히알루로니다아제 활성 저해 작용 시험)(Test Example 3: Hyaluronidase Inhibitory Activity Test)

<시험 방법><Test Method>

시험 시료를 용해한 0.1mol/L 초산 완충액(pH 3.5) 0.2mL에 히알루로니다아제 용액(Type IV-S(소 정소 유래), 400 NF units/mL; Sigma-Aldrich Japan제) 0.1mL을 가하여 37℃에서 20분간 반응시켰다. 또한, 활성제로서 2.5mmol/L 염화칼슘 0.2mL을 가하여 37℃에서 20분간 반응시켰다. 여기에 0.4mg/ml 히알루론산나트륨 용액(닭볏 유래 히알루론산나트륨, 와코준야쿠 공업 주식회사제) 0.5mL을 가하여 37℃에서 40분간 반응시켰다. 그 후, 0.4mol/L 수산화나트륨 0.2mL을 가하여 반응을 중지하고 냉각한 후, 각 반응 용액에 붕산 용액 0.2mL을 가하여 3분간 끓였다. 냉각 후, p-DABA 시약(p-디메틸아미노벤즈알데히드, 와코준야쿠 공업 주식회사제) 6mL을 가하여 37℃에서 20분간 반응시켰다. 그 후, 파장 585nm에서의 흡광도를 측정하였다. 동일한 방법으로 공시험을 수행하여 보정하였다.0.1 mL of a hyaluronidase solution (Type IV-S (origin of origin), 400 NF units / mL; manufactured by Sigma-Aldrich Japan) was added to 0.2 mL of a 0.1 mol / L acetic acid buffer solution (pH 3.5) Lt; 0 &gt; C for 20 minutes. Further, 0.2 mmol of 2.5 mmol / L calcium chloride as an activator was added and the mixture was reacted at 37 캜 for 20 minutes. To this was added 0.5 mL of a 0.4 mg / ml sodium hyaluronate solution (sodium hyaluronate from chicken cow, manufactured by Wako Pure Chemical Industries, Ltd.), and the mixture was reacted at 37 캜 for 40 minutes. Thereafter, 0.2 mL of 0.4 mol / L sodium hydroxide was added to stop the reaction. After cooling, 0.2 mL of a boric acid solution was added to each reaction solution, followed by boiling for 3 minutes. After cooling, 6 mL of p-DABA reagent (p-dimethylaminobenzaldehyde, manufactured by Wako Pure Chemical Industries, Ltd.) was added and the mixture was reacted at 37 ° C for 20 minutes. Thereafter, the absorbance at a wavelength of 585 nm was measured. Blank tests were carried out in the same way and corrected.

히알루로니다아제 활성 저해 작용의 계산 방법은 하기와 같다. 결과를 표 3에 나타낸다.The calculation method of hyaluronidase activity inhibitory action is as follows. The results are shown in Table 3.

[수학식 3]&Quot; (3) &quot;

히알루로니다아제 활성 저해율(%)={1-(St-Sb)/(Ct-Cb)}×100Hyaluronidase activity inhibition rate (%) = {1- (St-Sb) / (Ct-Cb)} 100

(단, 상기 식 3 중,(Wherein, in the above formula (3)

St: 피험 시료 용액의 파장 585nm에서의 흡광도St: absorbance at wavelength of 585 nm of the test sample solution

Sb: 피험 시료 용액 블랭크의 파장 585nm에서의 흡광도Sb: wavelength of test sample solution blank absorbance at 585 nm

Ct: 컨트롤 용액의 파장 585nm에서의 흡광도Ct: absorbance of the control solution at a wavelength of 585 nm

Cb: 컨트롤 용액 블랭크의 파장 585nm에서의 흡광도를 각각 나타낸다.)Cb: absorbance of the control solution blank at a wavelength of 585 nm)

농도(㎍/㎖)Concentration (/ / ml) 히알루로니다아제 활성 저해율(%)Hyaluronidase activity inhibition rate (%) 당 비함유 파인애플 추출물Sugar-free pineapple extract 파인애플 착즙 동결 건조물Pineapple juice lyophilisate 2.52.5 27.627.6 -22.6-22.6

표 3의 결과로부터, 당 비함유 파인애플 추출물에 히알루로니다아제 활성 저해 작용이 인정되었다. 또한, 파인애플 착즙 동결 건조물에는 반대로 히알루로니다아제 활성을 촉진하는 작용이 있음이 확인되었다. From the results in Table 3, hyaluronidase inhibitory action was recognized in the sugar-free pineapple extract. In addition, it was confirmed that the frozen pineapple frozen product had an action to promote hyaluronidase activity.

(시험예 4: 트랜스글루타미나아제-1 생산 촉진 작용 시험)(Test Example 4: Transglutaminase-1 Production Promotion Test)

<시험 방법><Test Method>

인간 정상 신생아 피부 표피 각화세포(NHEK)를 인간 정상 신생아 표피 각화세포용 배지(KGM)를 이용하여 배양한 후, 트립신 처리에 의해 세포를 회수하였다. 회수한 세포를 1×105세포/mL의 농도가 되도록 KGM으로 희석한 후, 96웰 플레이트에 1웰당 100㎕씩 파종하여 2일간 배양하였다. 배양 종료 후, KGM으로 용해한 피험 시료를 각 웰에 100㎕ 첨가하여 24시간 배양하였다. 배양 후, 배지를 빼고, 세포를 플레이트에 고정시켜 세포 표면에 발현한 트랜스글루타미나아제-1의 양을 모노클로널 항 인간 트랜스글루타미나아제-1 항체(Anti-Keratinocyte Transglutaminase, Biomedical Technologies. Inc제)를 이용한 ELISA법에 의해 측정하였다. Human normal neonatal skin epidermal keratinocytes (NHEK) were cultured using human normal neonatal epidermal keratinocyte medium (KGM), and then cells were recovered by trypsin treatment. The recovered cells were diluted with KGM to a concentration of 1 × 10 5 cells / mL, and then seeded at 100 μl per well in a 96-well plate and cultured for 2 days. After the completion of cultivation, 100 μl of a test sample dissolved in KGM was added to each well and cultured for 24 hours. After the incubation, the medium was removed, and the cells were fixed on a plate. The amount of transglutaminase-1 expressed on the cell surface was measured with a monoclonal anti-keratinocyte transglutaminase-1 antibody (Biomedical Technologies. Inc.).

트랜스글루타미나아제-1 생산 촉진 작용의 계산 방법은 하기와 같다. 결과를 표 4에 나타낸다.The calculation method of the transglutaminase-1 production promoting action is as follows. The results are shown in Table 4.

[수학식 4]&Quot; (4) &quot;

트랜스글루타미나아제-1 생산 촉진률(%)=A/B×100Transglutaminase-1 production promotion rate (%) = A / B x 100

(단, 상기 식 4 중,(Wherein, in the formula 4,

A: 피험 시료 첨가시의 파장 405nm에서의 흡광도A: absorbance at a wavelength of 405 nm upon addition of a test sample

B: 피험 시료 무첨가시(컨트롤)의 파장 405nm에서의 흡광도를 각각 나타낸다.)B: absorbance at a wavelength of 405 nm (control) at the time of no sample addition)

농도(㎍/㎖)Concentration (/ / ml) 트랜스글루타미나아제-1 생산 촉진율(%)Transglutaminase -1 production promotion rate (%) 당 비함유 파인애플 추출물Sugar-free pineapple extract 파인애플 착즙 동결 건조물Pineapple juice lyophilisate 100100 122.2±2.8*** 122.2 ± 2.8 *** 99.5±1.099.5 ± 1.0

Mean±S.E., n=6, ***: p<0.001Mean ± SE, n = 6, *** : p <0.001

표 4의 결과로부터, 당 비함유 파인애플 추출물에, 유의한 트랜스글루타미나아제-1 생산 촉진 작용이 인정되었다.From the results in Table 4, significant transglutaminase-1 production promoting action was recognized in the sugar-free pineapple extract.

(시험예 5: 멜라닌 생산 억제 작용 시험)(Test Example 5: Test for inhibiting melanin production)

<시험 방법><Test Method>

B16 멜라노머 세포를 10 체적% FBS(STANDARD FETAL BOVINE SERUM, HyClone제) 함유 둘베코 MEM(둘베코 변법 이글 배지(1), 닛스이 제약 주식회사제)를 이용하여 배양한 후, 트립신 처리에 의해 세포를 회수하였다. 회수한 세포를 10 체적% FBS 및 1mmol/L 테오필린(Theophylline, 와코준야쿠 공업 주식회사제) 함유 둘베코 MEM으로 24.0×104 세포/mL의 농도로 희석한 후, 48웰 플레이트에 1웰당 300㎕씩 파종하여 6시간 배양하였다. 배양 종료 후, 10 체적% FBS 및 1mmol/L 테오필린 함유 둘베코 MEM으로 용해한 피험 시료를 각 웰에 300㎕ 첨가하여 4일간 배양하였다. 배양 종료 후, 각 웰로부터 배지를 제거하고, 2mol/L의 NaOH 용액 200㎕를 첨가하여 초음파 파쇄기에 의해 세포를 파괴하고, 파장 475nm에서의 흡광도를 측정하여 멜라닌 생산량으로 하였다.B16 melanoma cells were cultured using Dulbecco's MEM (Dulbecco's modified Eagle's medium (1), Nissui Pharmaceutical Co., Ltd.) containing 10 vol% FBS (STANDARD FETAL BOVINE SERUM, made by HyClone) Respectively. The recovered cells were diluted with Dulbecco's MEM containing 10% FBS and 1 mmol / L theophylline (manufactured by Wako Pure Chemical Industries, Ltd.) to a concentration of 24.0 × 10 4 cells / mL, And cultured for 6 hours. After completion of the culture, 300 μL of a test sample dissolved in Dulbecco's MEM containing 10% by volume of FBS and 1 mmol / L of theophylline was added to each well and cultured for 4 days. After completion of the culturing, the medium was removed from each well, 200 쨉 l of a 2 mol / L NaOH solution was added thereto, the cells were destroyed by an ultrasonic disrupter, and the absorbance at a wavelength of 475 nm was measured to determine the amount of melanin production.

또한, 세포 생존률의 측정을 위하여, 동일하게 배양 후, 400㎕의 PBS(-) 인산 생리 완충액으로 세정하여, 최종 농도 0.05mg/㎖로 10 체적% FBS 함유 둘베코 MEM에 용해한 13.8mmol/L 뉴트럴 레드를 각 웰에 200㎕ 첨가하였다. 2.5시간 배양한 후, 뉴트럴 레드 용액을 버리고, 에탄올/초산 용액(에탄올:초산:물=50:1:49)을 각 웰에 200㎕ 첨가하여 색소를 추출하였다. 추출 후, 파장 540nm에서의 흡광도를 측정하였다.In order to measure the cell viability, the cells were incubated in the same manner and then washed with 400 μl of PBS (-) phosphate physiological buffer to obtain 13.8 mmol / L neutral solution in Dulbecco's MEM containing 10% by volume FBS at a final concentration of 0.05 mg / 200 쨉 l of red was added to each well. After 2.5 hours of incubation, the neutral red solution was discarded, and 200 μl of an ethanol / acetic acid solution (ethanol: acetic acid: water = 50: 1: 49) was added to each well to extract the pigment. After the extraction, the absorbance at a wavelength of 540 nm was measured.

공시료로서, 10 체적% FBS 및 1mmol/L 테오필린 함유 둘베코 MEM만으로 배양한 세포를 동일한 방법으로 시험하였다.Cells cultured with Dulbecco's MEM containing 10 vol% FBS and 1 mmol / L theophylline were also tested in the same manner.

멜라닌 생산 억제 작용의 계산 방법은 하기와 같다. 결과를 표 5에 나타낸다.The calculation method of the melanin production inhibitory action is as follows. The results are shown in Table 5.

[수학식 5]&Quot; (5) &quot;

멜라닌 생산 억제율(%)={1-(B/D)/(A/C)}×100Melanin production inhibition rate (%) = {1- (B / D) / (A / C)} 100

(단, 식 5 중,(In the formula 5,

A: 피험 시료를 첨가하지 않은 세포에서의 파장 475nm에서의 흡광도A: Absorbance at a wavelength of 475 nm in cells to which no test sample was added

B: 피험 시료를 첨가한 세포에서의 파장 475nm에서의 흡광도B: Absorbance at a wavelength of 475 nm in the cells to which the test sample was added

C: 피험 시료를 첨가하지 않은 세포에서의 파장 540nm에서의 흡광도C: Absorbance at a wavelength of 540 nm in a cell to which no test sample is added

D: 피험 시료를 첨가한 세포에서의 파장 540nm에서의 흡광도를 각각 나타낸다.)And D: the absorbance at 540 nm in the wavelength of the cell to which the test sample is added.

농도(㎍/㎖)Concentration (/ / ml) 멜라닌 생산 억제율(%)Melanin production inhibition (%) 당 비함유 파인애플 추출물Sugar-free pineapple extract 파인애플 착즙 동결 건조물Pineapple juice lyophilisate 12.512.5 14.2±1.414.2 ± 1.4 6.5±0.56.5 ± 0.5 2525 13.8±1.313.8 ± 1.3 8.8±4.68.8 ± 4.6 5050 20.4±1.620.4 ± 1.6 11.6±1.811.6 ± 1.8 100100 23.0±1.623.0 ± 1.6 15.4±2.815.4 ± 2.8

표 5의 결과로부터, 당 비함유 파인애플 추출물에, 대조군인 파인애플 착즙 동결 건조물보다도 강하고 농도 의존적인 멜라닌 생산 억제 작용이 인정되었다.From the results in Table 5, it was recognized that the sugar-free pineapple extract had a stronger and more concentration-dependent inhibitory action on melanin production than the pineapple frozen lyophilized product of the control group.

(시험예 6: 모유두세포 증식 촉진 작용 시험)(Test Example 6: Test for promoting the proliferation of the dermal papilla cell)

<시험 방법><Test Method>

정상 인간 두발 모유두세포(동양 방적 주식회사제)를 모유두세포 증식 배지(동양 방적 주식회사제)를 이용하여 배양한 후, 트립신 처리에 의해 세포를 회수하였다. 회수한 세포를 10 체적% FBS 함유 둘베코 MEM(둘베코 변법 이글 배지(1), 닛스이 제약 주식회사제)을 이용하여 1.0×104 세포/mL의 농도로 희석한 후, 콜라겐 코팅한 96웰 플레이트에 1웰당 200㎕ 파종하여 3일간 배양하였다. 배양 후, 배지를 빼고, 무혈청 DMEM(둘베코 변법 이글 배지(1), 닛스이 제약 주식회사제)에 용해한 피험 시료를 각 웰에 200㎕ 첨가하여 4일간 더 배양하였다. 모유두세포 증식 작용은 MTT 어세이를 이용하여 측정하였다. 배양 종료 후, 배지를 빼고 최종 농도 0.4mg/mL로 무혈청의 DMEM에 용해한 3-(4, 5-디메틸-티아졸-2-일)-2, 5-디페닐테트라졸륨브로마이드(MTT, 주식회사 도진 화학연구소제)를 각 웰에 100㎕ 첨가하였다. 2시간 배양한 후에, 세포 내에 생성한 블루 포르마잔을 2-프로판올 100㎕로 추출하였다. 추출 후, 파장 570nm에서의 흡광도(OD570)를 측정하였다. 동시에 탁도로서 파장 650nm에서의 흡광도(OD650)를 측정하여, 양자의 차를 블루 포르마잔 생성량으로 하였다.Normal human hair dermal papilla cells (manufactured by Dong Yang Dairy Co., Ltd.) were cultured using a dermal papilla cell growth medium (manufactured by Dong Yang Dairy Co., Ltd.), and cells were recovered by trypsin treatment. The recovered cells were diluted to a concentration of 1.0 x 10 4 cells / mL using Dulbecco's MEM (Dulbecco's modified Eagle medium (1), manufactured by Nissui Pharmaceutical Co., Ltd.) containing 10 vol% FBS, 200 [mu] l per well of the plate was inoculated and cultured for 3 days. After the culture, the medium was removed, and 200 μl of a test sample dissolved in serum-free DMEM (Dulbecco's modified Eagle medium (1), manufactured by Nissui Pharmaceutical Co., Ltd.) was added to each well and further cultured for 4 days. The proliferation of dermal papilla cells was measured using an MTT assay. After the completion of the incubation, the medium was removed and 3- (4,5-dimethylthiazol-2-yl) -2,5-diphenyltetrazolium bromide (MTT, manufactured by Mitsubishi Chemical Corporation) dissolved in serum-free DMEM to a final concentration of 0.4 mg / Ltd.) was added to each well. After incubation for 2 hours, the blue formazan produced in the cells was extracted with 100 2- of 2-propanol. After the extraction, the absorbance (OD 570 ) at a wavelength of 570 nm was measured. At the same time, the absorbance (OD 650 ) at a wavelength of 650 nm was measured as turbidity, and the difference between them was defined as the amount of blue formazan produced.

모유두세포 증식 촉진 작용의 계산 방법은 하기와 같다. 결과를 표 6에 나타낸다.The calculation method of promoting the proliferation of the dermal papilla cell is as follows. The results are shown in Table 6.

[수학식 6]&Quot; (6) &quot;

모유두세포 증식 촉진율(%)=A/B×100Promoting rate of proliferation of dermal papilla cells (%) = A / B x 100

(단, 상기 식 6 중,(Wherein, in the formula 6,

A: 피험 시료 첨가시의 OD570-OD650 A: OD 570- OD 650 at the time of addition of the test sample

B: 피험 시료 무첨가시의 OD570-OD650을 각각 나타낸다.)B: OD 570 - OD 650 at the time of no addition of the test sample).

농도(㎍/㎖)Concentration (/ / ml) 모유두세포 증식 촉진율(%)Promoting rate of proliferation of dermal papilla cells (%) 당 비함유 파인애플 추출물Sugar-free pineapple extract 파인애플 착즙 동결 건조물Pineapple juice lyophilisate 2525 114.3±1.1*** 114.3 ± 1.1 *** 99.0±1.899.0 ± 1.8

Mean±S.E., n=6, ***: p<0.001Mean ± SE, n = 6, *** : p <0.001

표 6의 결과로부터, 당 비함유 파인애플 추출물에서만 유의한 모유두세포 증식 촉진 작용이 확인되었다.From the results in Table 6, it was confirmed that the promoting action of the papilla cell proliferation was significant only in the sugar-free pineapple extract.

산업상 이용 가능성Industrial availability

본 발명의 당 비함유 파인애플 추출물, 라미닌-5 생산 촉진제, 표피 히알루론산 생산 촉진제, 히알루로니다아제 활성 저해제, 트랜스글루타미나아제-1 생산 촉진제, 멜라닌 생산 억제제 및 모유두세포 증식 촉진제는 안전성 및 생산성이 우수하여 일상적으로 섭취 가능하며, 동시에 저가이면서, 우수한 라미닌-5 생산 촉진 작용, 표피 히알루론산 생산 촉진 작용, 히알루로니다아제 활성 저해 작용, 트랜스글루타미나아제-1 생산 촉진 작용, 멜라닌 생산 억제 작용, 및 모유두세포 증식 촉진 작용 중 적어도 어느 하나를 갖기 때문에, 미용용 음식품에 배합하거나, 피부외용제 및 육모제에 배합하거나, 연구용 시약으로서 아주 적합하게 이용할 수 있다.The present invention relates to a method for producing a saccharide-free pineapple extract, a laminin-5 production accelerator, a epidermal hyaluronic acid production accelerator, a hyaluronidase activity inhibitor, a transglutaminase-1 production accelerator, a melanin production inhibitor, 5, which is capable of being consumed on a daily basis, and at the same time being inexpensive, has excellent laminin-5 production promoting action, epidermal hyaluronic acid production promoting action, hyaluronidase activity inhibiting action, transglutaminase-1 production promoting action, melanin production inhibiting action And at least one of the action of promoting the proliferation of papilla cells, it can be suitably used as a reagent for research, or it can be blended with a cosmetic food or drink, blended with an external preparation for skin and hair restorer, or used as a research reagent.

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