KR20180018016A

KR20180018016A - 피부 각질 제거, 가려움증 개선, 및 두피 비듬 개선 효과가 우수한 연어 비늘의 효소 가수 분해물을 포함하는 화장료 조성물

Info

Publication number: KR20180018016A
Application number: KR1020160102857A
Authority: KR
Inventors: 이혜경
Original assignee: 주식회사 한미인
Priority date: 2016-08-12
Filing date: 2016-08-12
Publication date: 2018-02-21
Also published as: KR101853927B1

Abstract

연어 비늘의 효소 가수 분해물을 포함하는 화장료 조성물에 관한 발명이 개시된다. 한 구체예에서 상기 연어 비늘의 효소 가수 분해물을 포함하는 화장료 조성물은 연어(Oncorhynchus keta .) 비늘 추출물을 유효성분으로 포함한다.

Description

연어 비늘의 효소 가수 분해물을 포함하는 화장료 조성물 {A COSMETIC COMPOSITION COMPRISING ENZYMATIC HYDROLYSATE OF SALMON SCALE}

본 발명은 연어 비늘의 효소 가수 분해물을 포함하는 화장료 조성물에 관한 것이다.

피부는 인체를 외부의 물리적, 화학적인 자극으로부터 보호하며, 크게 표피, 진피 및 피하지방 조직의 3개 층으로 구분된다. 특히 피부는 인체가 갖고 있는 약 65 내지 70%의 수분을 함유하는데, 이는 인체에 필요한 각종 생리 활성 물질을 운반하고 피부가 촉촉한 상태를 유지할 수 있도록 도와준다. 또한 피부는 이러한 수분이 체외로 증발되는 것을 조절해 주는 중요한 역할을 한다.

상기 표피는 각질층, 과립층, 유극층 및 기저층으로 구분된다. 표피의 각질층은 약 10% 내지 20%의 수분을 함유하며, 인체 최외각에 존재함으로써 피지선에서 나온 피지와 땀샘에서 나온 땀으로 만들어진 천연 보호막을 형성하여 체외로의 수분 증발을 막아주는 동시에 외부 물질의 침투를 차단한다. 이러한 각질층을 구성하고 있는 세포에는 수용성 성분인 고농도의 자연보습인자(NMF: Natural Moisturizing Factor)가 존재하여 피부가 유연성을 나타내도록 작용함은 물론 적절한 수분을 유지할 수 있도록 돕는다. 그러나, 환경의 변화 혹은 생활 패턴의 변화에 따른 냉/난방의 인위적인 온도 조절, 각종 스트레스와 환경 오염으로 인한 피부 스트레스, 화장 습관에 따른 잦은 세안 및 연령 증가에 따른 자연적인 피부 노화 등의 여러 가지 원인으로 인하여 각질층의 생성-탈락 속도(turn-over rate)가 늦어지고, 각질형성세포의 지질합성능력이 저하되거나, 표피에서 정상적인 세포의 분열, 성숙 및 분화가 원활하지 않음으로써, 각질층의 보습인자와 지질의 양이 감소되어 정상적인 각질층의 기능을 유지하지 못하는 상태, 즉 피부장벽기능이 와해된 상태의 피부를 갖고 있는 사람들이 점점 증가하는 추세이다.

한편, 비듬(dandruff)은 인체의 활발한 신진대사에 의해 생긴 두피의 죽거나 벗겨진 세포들이 두피 피지선의 분비물과 말라붙어서 생긴 각질 형태의 덩어리를 말한다. 비듬이 생기게 되면 두피가 붉어지면서 인설(scurf)이 증가하게 되며, 가려움과 염증을 유발하는 지루성 피부염으로 발전하기도 한다. 비듬의 발생원인은 명확하게 밝혀진 것은 아니나, 일반적으로 내분비 호르몬의 불균형, 영양대사의 불균형, 스트레스, 두피 세포의 지나친 증식에 의한 상피조직의 생화학적 변화, 두피 미생물의 증식 및 대기오염에 의한 염증 등과 같은 여러 요인들이 복합적으로 작용하는 것으로 알려져 있다. 이와 같은 다양한 요인들 중에서, 특히 청결하지 못한 두피에 존재하는 말라세시아 푸르푸르(Malassezia furfur) 균의 증식 내지 활성증대가 비듬과 가려움을 악화시키는 주요 원인인 것으로 알려져 있다.

따라서 비듬, 및 비듬으로 인해 유발되는 가려움증을 치료 내지 예방하기 위해서는, 비듬발생의 주요 원인균인 말라세시아 푸르푸르의 증식을 억제하고, 두피 세포의 대사활동을 정상적으로 조절할 수 있는 성분을 포함하는 샴푸 등의 제품을 사용하여야 한다.

한편, 연어(Oncorhynchus keta .)는 연어과에 속하는 어류로 몸체가 긴 세장형이고 두정부는 약간 상하로 종편되어 있다. 연어의 악골에는 매우 날카로운 이빨이 있으나 서골에는 이빨이 없다. 등지느러미는 몸의 거의 중앙에 위치하며 수컷은 턱이 심하게 구부러져 있다. 산란기가 되어 담수에 들어오면 은백색의 체색이 수컷은 등쪽이 흑청색으로 나머지 부분은 전체적으로 연한 청색이 된다. 체측에는 5~8개의 약간 짙은 청색 횡대무늬가 있고, 그 중간에 적색이나 황색의 색체를 띤다. 상기 연어는 우리나라에서는 북부 동해안으로 흐르는 하천에 회귀하며, 일본을 거쳐 북미의 캘리포니아와 남미의 칠레까지 분포한다.

본 발명과 관련한 배경기술은 대한민국 등록특허공보 제10-1211972호(2012.12.12. 공고, 발명의 명칭: 어류 눈 초고압 추출물을 함유하는 화장료 조성물)에 개시되어 있다.

본 발명의 목적은 인체에 무해하고 피부 자극이 없는 연어 비늘의 효소 가수 분해물을 포함하는 화장료 조성물을 제공하는 것이다.

본 발명의 다른 목적은 제형 안정성이 우수한 연어 비늘의 효소 가수 분해물을 포함하는 화장료 조성물을 제공하는 것이다.

본 발명의 또 다른 목적은 각질 제거 효과가 우수한 연어 비늘의 효소 가수 분해물을 포함하는 화장료 조성물을 제공하는 것이다.

본 발명의 또 다른 목적은 비듬 개선 및 예방 효과가 우수한 연어 비늘의 효소 가수 분해물을 포함하는 화장료 조성물을 제공하는 것이다.

본 발명의 또 다른 목적은 가려움증 개선 효과가 우수한 연어 비늘의 효소 가수 분해물을 포함하는 화장료 조성물을 제공하는 것이다.

본 발명의 하나의 관점은 연어 비늘의 효소 가수 분해물을 포함하는 화장료 조성물에 관한 것이다. 한 구체예에서 상기 화장료 조성물은 연어(Oncorhynchus keta.) 비늘 추출물을 유효성분으로 포함한다.

한 구체예에서 상기 연어 비늘의 효소 가수 분해물은 연어 비늘 열수 추출물을 제조하는 단계; 및 상기 연어 비늘 열수 추출물을 효소적 가수 분해하여 가수 분해물을 제조하는 단계;를 포함하여 제조될 수 있다.

한 구체예에서 상기 가수 분해물은 상기 연어 비늘 열수 추출물을 가수분해 효소를 이용하여 가수 분해하여 제조되는 것이며, 상기 가수분해 효소는 α-키모트립신(α-chymotrypsin), 알칼라아제(alcalase), 코지자임(kojiztme), 프로타멕스(protamex) 및 트립신(trypsin)중 하나 이상 포함할 수 있다.

한 구체예에서 상기 가수 분해물은, 상기 연어 비늘 열수 추출물을 가수분해 효소로 α-키모트립신, 코지자임 및 프로타멕스를 이용하여 가수 분해한 제1 가수 분해물, 제2 가수 분해물 및 제3 가수 분해물을 1:0.1~5:0.5~3 중량비로 포함할 수 있다.

한 구체예에서 상기 연어 비늘의 효소 가수 분해물은, 상기 가수 분해물을 활성탄 여과하여 1차 여과물을 제조하는 단계; 상기 1차 여과물을 0.1~0.5㎛ 기공 크기(pore size)의 여과막으로 여과하여 2차 여과물을 제조하는 단계; 상기 2차 여과물을 이온교환수지막으로 여과하여 3차 여과물을 제조하는 단계; 및 상기 3차 여과물을 한외여과막으로 분획하여 분획물을 제조하는 단계;를 더 포함하여 제조될 수 있다.

한 구체예에서 상기 연어 비늘의 효소 가수 분해물은 상기 화장료 조성물 전체중량에 대하여 0.01~50 중량% 포함될 수 있다.

한 구체예에서 화장료 조성물은 피부 각질 제거, 피부 가려움증 개선, 및 두피 비듬 개선 효과를 나타낼 수 있다.

한 구체예에서 상기 화장료 조성물은 화장수, 영양 로션, 마사지크림, 에센스, 헤어에센스, 스크럽, 팩, 파우더, 비누, 샴푸, 린스, 헤어젤 또는 헤어팩 제형일 수 있다.

본 발명의 연어 비늘의 효소 가수 분해물을 화장료 조성물은 인체에 무해하고 피부 자극이 없으며, 제형 안정성이 우수하여 일광 및 고온 조건에서 화장료 제형의 분리가 최소화되며, 피부 각질 제거 효과가 우수하고, 두피의 비듬 개선 및 예방 효과가 우수하며, 피부 가려움증 개선 효과가 우수할 수 있다.

도 1은 본 발명의 한 구체예에 따른 연어 비늘의 효소 가수 분해물을 제조하는 공정을 나타낸 것이다.
도 2는 본 발명의 다른 구체예에 따른 연어 비늘의 효소 가수 분해물을 제조하는 공정을 나타낸 것이다.

이하, 본 발명을 상세히 설명한다. 이때, 본 발명을 설명함에 있어서 관련된 공지기술 또는 구성에 대한 구체적인 설명이 본 발명의 요지를 불필요하게 흐릴 수 있다고 판단되는 경우에는 그 상세한 설명은 생략할 것이다.

그리고 후술되는 용어들은 본 발명에서의 기능을 고려하여 정의된 용어들로서 이는 사용자, 운용자의 의도 또는 관례 등에 따라 달라질 수 있으므로 그 정의는 본 발명을 설명하는 본 명세서 전반에 걸친 내용을 토대로 내려져야 할 것이다.

연어 비늘의 효소 가수 분해물을 포함하는 화장료 조성물

본 발명의 하나의 관점은 연어 비늘의 효소 가수 분해물을 포함하는 화장료 조성물에 관한 것이다. 본 발명의 화장료 조성물은 연어(Oncorhynchus keta .) 비늘 효소 가수 분해물을 유효성분으로 포함한다.

한편 본 발명에서 상기 연어 비늘의“효소 가수 분해물”은, 연어 비늘을 효소를 이용하여 가수 분해하여 수득되는 가수 분해물을 의미한다.

도 1은 본 발명의 한 구체예에 따른 연어 비늘의 효소 가수 분해물 제조하는 공정을 나타낸 것이다. 상기 도 1을 참조하면, 상기 연어 비늘의 효소 가수 분해물은 (S10) 연어 비늘 열수 추출물 제조 단계; 및 (S20) 가수 분해물 제조 단계;를 포함한다. 좀 더 구체적으로 상기 연어 비늘의 효소 가수 분해물은 (S10) 연어 비늘 열수 추출물을 제조하는 단계; 및 (S20) 상기 연어 비늘 열수 추출물을 효소적 가수 분해하여 가수 분해물을 제조하는 단계;를 포함한다.

이하, 상기 연어 비늘의 효소 가수 분해물 제조 공정을 단계별로 상세히 설명하도록 한다.

(S10) 연어 비늘 열수 추출물 제조 단계

상기 단계는 연어 비늘 열수 추출물을 제조하는 단계이다. 한 구체예에서 상기 연어 비늘 열수 추출물은 연어의 비늘을 물에 투입하고, 80℃~100℃에서 1~5 시간 동안 가열하여 추출할 수 있다. 상기 조건으로 가열시, 효소적 가수 분해 과정에서 유용 성분의 추출율이 우수할 수 있다. 예를 들면, 상기 연어 비늘을 물에 투입하고 90~100℃에서 1~3 시간 동안 추출하여 연어 비늘 열수 추출물을 제조할 수 있다.

본 발명의 한 구체예에서 상기 연어 비늘은, 연어의 비늘을 수세 후 건조시켜 사용할 수 있다. 한 구체예에서 상기 건조는, 상기 수세된 연어 비늘에 1~8㎛ 파장의 원적외선을 조사하여 건조할 수 있다. 상기 조건에서 상기 연어 비늘의 건조 효율이 우수할 수 있다.

(S20) 가수 분해물 제조 단계

상기 단계는 상기 연어 비늘 열수 추출물을 효소적 가수 분해하여 가수 분해물을 제조하는 단계이다. 한 구체예에서 상기 가수 분해물은, 상기 연어 비늘 열수 추출물을 가수분해 효소를 이용하여 가수 분해하여 제조되는 것이며, 상기 가수분해 효소는 α-키모트립신(α-chymotrypsin), 알칼라아제(alcalase), 코지자임(kojiztme), 프로타멕스(protamex) 및 트립신(trypsin)중 하나 이상 포함할 수 있다. 상기 종류의 가수분해 효소를 적용시, 상기 연어 비늘의 유용 성분을 용이하게 추출해낼 수 있다.

한 구체예에서 상기 가수 분해물은, 물 100 중량부에 상기 연어 비늘 열수 추출물 5~25 중량부를 투입하고, 25~40℃에서 1~30 시간 동한 효소적 가수분해 하여 제조할 수 있다. 상기 범위에서 유용 성분 추출 효율이 우수할 수 있다.

한 구체예에서 상기 연어 비늘 열수 추출물을 키모트립신을 사용하여 23~26℃ 및 pH 6.6~7.0 조건에서 효소적 가수 분해하여 가수 분해물을 제조할 수 있다.

다른 구체예에서 상기 연어 비늘 열수 추출물을 알칼라아제를 사용하여 48~55℃ 및 pH 6.9~7.2 조건에서 효소적 가수 분해하여 가수 분해물을 제조할 수 있다.

또 다른 구체예에서 상기 연어 비늘 열수 추출물을 코지자임을 사용하여 38~42℃ 및 pH 6.8~7.1 조건에서 효소적 가수 분해하여 가수 분해물을 제조할 수 있다.

또 다른 구체예에서 상기 연어 비늘 열수 추출물을 프로타멕스를 사용하여 38~42℃ 및 pH 6.2~6.4 조건에서 효소적 가수 분해하여 가수 분해물을 제조할 수 있다.

또 다른 구체예에서 상기 연어 비늘 열수 추출물을 트립신을 사용하여 23~26℃ 및 pH 7.7~8.0 조건에서 효소적 가수 분해하여 가수 분해물을 제조할 수 있다.

한 구체예에서 상기 연어 비늘 열수 추출물을 가수분해 효소로 α-키모트립신, 코지자임 및 프로타멕스를 이용하여 가수 분해한 제1 가수 분해물, 제2 가수 분해물 및 제3 가수 분해물을 1:0.1~5:0.5~3 중량비로 포함할 수 있다. 상기 중량 범위로 포함시 상기 제1 내지 제3 가수 분해물 사이에 예측할 수 없는 상승 효과가 발생하여, 본 발명 화장료 조성물의 제형 안정성이 우수하면서, 피부 각질 제거, 피부 가려움증 개선, 비듬 개선 및 예방 효과가 우수할 수 있다. 예를 들면 상기 제1 가수 분해물 내지 제3 가수 분해물은 1:0.5~3:1~2 중량비로 포함될 수 있다.

도 2는 본 발명의 다른 구체예에 따른 연어 비늘의 효소 가수 분해물을 제조하는 공정을 나타낸 것이다. 상기 도 2를 참조하면, 상기 연어 비늘의 효소 가수 분해물 제조 공정은 (S30) 1차 여과물 제조 단계; (S40) 2차 여과물 제조 단계; (S50) 3차 여과물 제조 단계; 및 (S60) 분획물 제조 단계;를 더 포함할 수 있다. 좀 더 구체적으로, 상기 연어 비늘의 효소 가수 분해물 제조 공정은 (S30) 상기 가수 분해물을 활성탄 여과하여 1차 여과물을 제조하는 단계; (S40) 상기 1차 여과물을 0.1~0.5㎛ 기공 크기(pore size)의 여과막으로 여과하여 2차 여과물을 제조하는 단계; (S50) 상기 2차 여과물을 이온교환수지막으로 여과하여 3차 여과물을 제조하는 단계; 및 (S60) 상기 3차 여과물을 한외여과막으로 분획하여 분획물을 제조하는 단계;를 더 포함할 수 있다.

(S30) 1차 여과물 제조 단계

상기 단계는 상기 가수 분해물을 활성탄 여과하여 1차 여과물을 제조하는 단계이다. 상기 활성탄 여과시 상기 가수 분해물에 포함된 중금속 및 이물질을 용이하게 제거할 수 있다. 한 구체예에서 상기 활성탄 여과는 활성탄막에 상기 가수 분해물을 통과시켜 이루어질 수 있다.

(S40) 2차 여과물 제조 단계

상기 단계는 상기 1차 여과물을 0.1~0.5㎛ 기공 크기(pore size)의 여과막으로 여과하여 2차 여과물을 제조하는 단계이다. 상기 기공 크기의 여과막으로 여과하여 2차 여과물 제조시, 중금속 및 기타 이물질의 제거 효과가 우수할 수 있다. 예를 들면 0.4~0.5㎛ 기공 크기의 여과막으로 여과할 수 있다.

(S50) 3차 여과물 제조 단계

상기 단계는 상기 2차 여과물을 이온교환수지막으로 여과하여 3차 여과물을 제조하는 단계이다. 상기 이온교환수지막으로 여과하여 3차 여과물 제조시, 중금속 및 기타 이물질의 제거 효과가 우수할 수 있다. 한 구체예에서 상기 이온교환수지막은 통상적인 것을 사용할 수 있다.

예를 들면, 이온교환이 가능한 이온을 포함하고, 수불용성 수지로 형성된 이온교환수지막을 사용할 수 있다. 예를 들면 상기 이온교환수지막은, 양이온 교환수지 및 음이온 교환수지 중에서 하나 이상을 포함할 수 있다.

(S60) 분획물 제조 단계

상기 단계는 상기 3차 여과물을 한외여과막으로 분획하여 분획물을 제조하는 단계이다. 한 구체예에서 상기 분획물은 상기 3차 여과물을 분획분자량(molecular weight cut-off): 1kDa 초과 10kDa 이하의 한외여과막으로 분획하여 제조할 수 있다. 상기 조건의 분획분자량을 갖는 한외여과막으로 분획시 본 발명의 피부 각질 제거, 피부 가려움증 개선, 비듬 개선 및 예방 효과가 우수할 수 있다.

한 구체예에서 상기 분획물을 농축하고 동결 건조 및 분쇄하여, 연어 비늘의 효소 가수 분해물을 제조할 수 있다.

본 발명의 화장료 조성물은 피부 각질 제거, 피부 가려움증 개선, 및 두피 비듬 개선 효과를 나타낼 수 있다. 본 발명의 연어 비늘의 효소 가수 분해물을 화장료 조성물은 인체에 무해하고 피부 자극이 없으며, 제형 안정성이 우수하여 일광 및 고온 조건에서 화장료 제형의 분리가 최소화되며, 피부 각질 제거 효과가 우수하고, 두피의 비듬 개선 및 예방 효과가 우수하며, 피부 가려움증 개선 효과가 우수할 수 있다.

한 구체예에서 상기 연어 비늘의 효소 가수 분해물은 상기 화장료 조성물 전체중량에 대하여 0.01~50 중량% 포함될 수 있다. 상기 중량범위로 포함시 본 발명의 화장료 조성물의 제형 안정성이 우수하면서, 피부 각질 제거, 피부 가려움증 개선, 비듬 개선 및 예방 효과가 우수할 수 있다.

본 발명에 따른 화장료 조성물은 화장품학적으로 허용되는 성분을 추가로 포함할 수 있다. 이때 상기 화장료 조성물에 포함되는 성분으로는 담체, 부형제 또는 희석제로 정제수, 오일, 왁스, 지방산, 지방산 알코올, 지방산 에스테르, 계면활성제, 흡습제(humectant), 증점제(thickening agent), 항산화제, 점도 안정화제(viscosity stabilizer), 킬레이팅제, 완충제 및 저급 알코올 등을 포함할 수 있지만, 이에 제한되는 것은 아니다.

본 발명의 화장료 조성물은 당업계에서 통상적으로 제조되는 어떠한 제형으로도 제조될 수 있다. 예를 들면, 상기 화장료 조성물은 화장수, 영양 로션, 마사지크림, 에센스, 헤어에센스, 스크럽, 팩, 파우더, 비누, 샴푸, 린스, 헤어젤 또는 헤어팩 제형일 수 있다.

한 구체예에서 크림 제형인 경우, 담체 성분으로서 동물성유, 식물성유, 왁스, 파라핀, 전분, 트라칸트, 셀룰로오스 유도체, 폴리에틸렌 글리콜, 실리콘, 벤토나이트, 실리카, 탈크 및 산화아연 중 하나 이상의 첨가제를 더 포함할 수 있다.

한 구체예에서 본 발명의 화장료 조성물은 젖산, 폴리소르베이트 60, 소르비탄세스퀴올레이트, 스테아릭산, 세틸알코올, 스쿠알란, 글리세린, 부틸렌글라이콜, 알지닌, 카보머, 토코페릴아세테이트 및 1,2-헥산디올 중 하나 이상을 더 포함할 수 있다.

이하, 본 발명의 바람직한 실시예를 통해 본 발명의 구성 및 작용을 더욱 상세히 설명하기로 한다. 다만, 이는 본 발명의 바람직한 예시로 제시된 것이며 어떠한 의미로도 이에 의해 본 발명이 제한되는 것으로 해석될 수는 없다.

실시예 및 비교예

연어 비늘의 성분 측정

건조된 연어 비늘의 조단백질, 수분 및 회분을 측정하였다. AOAC 방법에 준하여 수분 함량은 0.002g 이하의 유의차를 항량으로 하여 105℃ 상압가열건조법으로 측정하였고, 조단백질 함량은 Micro Kjeldahl 법으로 측정하였으며, 회분 함량은 건식법으로 측정하여 그 결과를 하기 표 1에 나타내었다.

성분	측정값(%)
조단백질	96.12±0.1
수분	3.41±0.01
회분	0.4±0.01
기타	0.07±0.01

실시예 1

연어 비늘의 효소 가수 분해물 제조

연어 비늘을 수세 후 1~8㎛ 파장의 원적외선을 조사하여 건조하였다. 상기 건조된 연어 비늘 10g을 증류수 100ml와 혼합한 후, 100℃에서 3시간 동안 추출한 다음, 여과지로 여과하여 연어 비늘 열수 추출물을 제조하였다. 상기 연어 비늘 열수 추출물을 효소적 가수 분해하여 가수 분해물을 제조하였다. 이때, 가수분해 효소로 α-키모트립신을 사용하여 하기 표 2와 같은 pH 및 온도 조건으로 24 시간 동안 상기 연어 비늘 열수 추출물을 효소적 가수 분해하였다. 상기 가수 분해물을 100℃에서 10분 동안 가열하여 효소 반응을 정지시키고, pH를 6~7로 조절한 다음, 원심분리(3500rpm, 10분) 및 감압여과로 상층액을 분리하였다. 그 다음에, 상기 가수 분해물을 활성탄막을 이용하여 활성탄 여과하여 1차 여과물을 제조하고, 상기 1차 여과물을 0.4~0.5㎛ 기공 크기(pore size)의 여과막으로 여과하여 2차 여과물을 제조하고; 상기 2차 여과물을 이온교환수지막으로 여과하여 3차 여과물을 제조한 다음, 상기 3차 여과물을 분획분자량: 1kDa 초과 10kDa 이하의 한외여과막으로 분획하여 분획물을 제조하였다. 그 다음에, 상기 분획물을 농축하고 동결 건조 및 분쇄하여, 연어 비늘의 효소 가수 분해물을 제조하였다.

가수 분해 효소	pH	온도(℃)
α-키모트립신	6.8	25
알칼라아제	7.1	50
코지자임	7.0	40
프로타멕스	6.3	40
트립신	7.9	25

실시예 2

가수 분해 효소로 코지자임을 사용하여 상기 표 2와 같은 조건으로 상기 연어 비늘 열수 추출물을 효소적 가수 분해 것을 제외하고, 상기 실시예 1과 동일한 방법으로 연어 비늘의 효소 가수 분해물을 제조하였다.

실시예 3

가수 분해 효소로 프로타멕스를 사용하여, 상기 표 2와 같은 조건으로 상기 연어 비늘 열수 추출물을 효소적 가수 분해 것을 제외하고, 상기 실시예 1과 동일한 방법으로 연어 비늘의 효소 가수 분해물을 제조하였다.

실시예 4

상기 연어 비늘 열수 추출물에 대하여, 가수 분해 효소로 α-키모트립신, 코지자임 및 프로타멕스를 하기 표 2의 조건으로 각각 적용하여 효소적 가수분해를 수행하여 제1 가수 분해물, 제2 가수 분해물 및 제3 가수 분해물을 제조하였다. 그 다음에, 상기 제1 가수 분해물, 제2 가수 분해물 및 제3 가수 분해물을 1:2:2 중량비로 혼합한 것을 제외하고, 상기 실시예 1과 동일한 방법으로 연어 비늘의 효소 가수 분해물을 제조하였다.

비교예

연어 비늘을 수세 후 1~8㎛ 파장의 원적외선을 조사하여 건조하였다. 상기 건조된 연어 비늘 10g을 증류수 100ml와 혼합한 후, 100℃에서 3시간 동안 추출한 다음, 여과지로 여과하여 연어 비늘 열수 추출물을 사용하였다.

실험예 1: 세포독성 효과 실험

WST 분석법은 살아있는 세포를 측정하는 방법으로 세포 내의 mitochondrial dehydrogenase 활성을 측정한다. WST는 수용성의 tetrazolium salt로서 살아있는 세포와 반응하여 오렌지색 수용성의 formzan을 생성한다. 상기 formazan의 흡광도을 측정하여 세포 독성을 확인한다. 상기 실시예 1~4에 대하여 크롬친화세포종에서 유래한 세포인 PC12에 대한 독성을 측정하였다. 상기 PC12를 96well 플레이트에 분주하여 24시간 동안 배양한 후 실시예 1~4에 대하여 각각 100㎍/ml 농도로 각 well에 넣고 24시간 배양하였다. 그 후, 상등액을 제거하고 WST solution을 혼합한 뒤 2시간 동안 반응시키고, 450nm에서 흡광도를 측정하였다. 세포 독성 정도는 세포의 활성 정도를 하기 식 1에 따라 계산하여 그 결과를 하기 표 3에 나타내었다:

[식 1]

세포 독성 활성도(Cell Viability) = (시료 처리군의 흡광도/시료 무처리(대조군)군의 흡광도) X 100

구분	세포독성 활성도(%)
대조군 (100㎍/ml)	100
실시예 1 (100㎍/ml)	97.3
실시예 2 (100㎍/ml)	96.2
실시예 3 (100㎍/ml)	96.5
실시예 4 (100㎍/ml)	99.4

상기 표 3의 결과를 참조하면, 본 발명의 실시예 1~4 크롬친화세포종에서 유래한 세포인 PC12에서 생존율 90% 이상으로 세포독성을 나타내지 않았음을 알 수 있었다.

실험예 2: 연어 비늘의 효소 가수 분해도 측정

상기 실시예 1~3에 사용된 가수분해 효소인 α-키모트립신, 코지자임 및 프로타멕스를 적용시 가수분해도를 TCA(trichloroacetic acid)법으로 측정하였다. 즉, 반응이 종료된 반응 혼합물을 원심분리(12000rpm, 15분)하여 상층액으로부터 2ml를 취하고, 여기에 20% TCA를 동량 첨가하여 원심분리(3500rpm, 10분)한 다음, 상층액의 일정량을 취하여 Lowry법으로 10% TCA 가용성 질소량을 측정하여 하기 식 2로 부터 가수분해도를 계산하여 그 결과를 하기 표 4에 나타내었다:

[식 2]

가수분해도(%)=(10% TCA 가용성 질소량/총질소량) X 100

구분(경과시간)	가수분해도(%)
구분(경과시간)	시작	3	6	12	18	24
실시예 1	0	33.5	52.5	58.5	59.5	60.5
실시예 2	0	31	49.5	53	54.5	55.2
실시예 3	0	27	45.5	49	50.5	51

상기 표 4의 결과를 참조하면, 실시예 1~3의 연어 비늘의 효소 가수 분해물은 24 시간까지 지속적으로 가수분해도의 증가를 보였으며, 24 시간 가수분해에서 약 60.5%, 55.2% 및 51%의 높은 가수분해도를 보임을 알 수 있었다.

실험예 3: 제형 안정성 평가

실시예 1~4 및 비교예에 대하여, 하기 표 5의 성분 및 함량을 적용하여 화장수 제형의 화장료 조성물을 제조하였다. 하기 표 5의 1~8번 성분을 투입하여 교반기를 이용하여 교반하면서, 하기 표 5의 9~15번 성분을 천천히 투입하며 교반하여 화장수 1kg을 제조하였다.

그 다음에 상기 실시예 1~4의 화장수를 한 달 동안 50℃, 40℃, 25℃, 5℃에서 각각 4주 동안 보관 후 분리 및 변색 정도를 비교 측정하고, 그 결과를 하기 표 6에 나타내었다. 이때 제품의 분리 및 변색 정도는 하기의 6 등급으로 분류하여 평가하였다.

* 분리 및 변색 평가 기준

0: 변화 없음, 1: 극히 조금 분리(변색), 2: 조금 분리(변색), 3: 조금 심하게 분리(변색), 4: 심하게 분리(변색), 5: 극히 심하게 분리(변색)

번호	성분	함량(중량%)
1	실시예 1~4 및 비교예	각 3.0
2	글리세린	5.0
3	부틸렌글라이콜	3.0
4	알란토인	0.1
5	디소듐이디티에이	0.05
6	베타인	1.0
7	소듐하이알루로네이트	2.0
8	잔탄검	1.0
9	하이드로제네이티드캐스터오일	2.0
10	디메치콘	5.0
11	알코올	3.0
14	방부제, 향	미량
15	증류수	잔량
합계		100

평가 항목	분리 및 변색정도
	실시예				비교예
	1	2	3	4	비교예
일광	1	1	1	0	1
50℃	1	1	1	1	2
40℃	0	1	0	0	1
25℃	0	0	0	0	0
5℃	0	0	0	0	0

상기 표 6의 결과를 참조하면, 본 발명의 실시예 1~4는 비교예에 비해 고온 및 일광 조건에서도 제형 안정성이 우수한 것을 알 수 있었다.

실험예 4: 비듬균 억제력 평가

상기 실시예 1~4의 비듬균 억제력을 평가하기 위하여 지루성피부염을 유발하는 비듬의 원인균으로 알려진 Malassezia furfur의 접종에 따른 챌린지 테스트(challenge test)를 실시하였다.

상기 실시예 1~4를 증류수에 용해시켜 준비하고, 상기 용해된 실시예 1~4에 대하여, Malassezia furfur를 3 x 10⁵(CFU/㎖) 수준으로 접종한 다음, 37℃의 Shaking incubator에서 48 시간 동안 배양하였다. 이때, 상기 M. furfur의 액체배양 시 균질화가 어려워 고체배양 후 생성된 colony를 이용하여 YM broth + 1% olive oil broth에 풀어 O.D 값을 측정한 후 시험균주로 이용하였다. 양성 대조군으로는 통상적으로 사용되는 방부제인 Phenoxyethanol을 사용하였다.

상기 접종되어 배양된 실시예 1~4를 항온조에 보관하면서 1 일, 3 일 및 7 일 후에 각각 YM broth + 1% olive oil broth에 도말하여 incubator에서 120시간 이상 배양한 후 생균수를 각각 측정하여 그 결과를 하기 표 7에 나타내었다.

구분/생균수(CFU/㎖)	1 일차	3 일차	7 일차
실시예 1	1.1×10²	불검출	불검출
실시예 2	1.1×10³	1.0×10²	불검출
실시예 3	1.1×10⁴	1.0×10²	불검출
실시예 4	1.1×10²	불검출	불검출
비교예	2.2×10⁴	2.5×10³	1.5×10²
양성 대조군	1.0×10²	불검출	불검출

상기 표 7의 결과를 참조하면, 상기 실시예 1~4는 비교예보다 비듬균 억제력이 우수함을 알 수 있었다.

실시예 5: 두피 가려움증 개선 평가

상기 실시예 1~4 및 비교예에 대하여 두피 가려움증 개선 효과를 실험하였다. 구체적으로, 하기 표 8의 2~12번 성분을 투입하여 교반하고, 유화기를 이용하여 유화 시킨 후 유화가 끝나면 교반기를 이용하여 교반하면서 40℃까지 냉각하고 1, 13, 및 14번 성분을 투입하여 25℃까지 냉각하여 헤어 샴푸 제형의 화장료 조성물 1kg를 제조하였다.

번호	성분	함량(중량%)
1	실시예 1~4 및 비교예	각 3.0
2	글리세린	5.0
3	부틸렌글라이콜	3.0
4	알란토인	0.1
5	디소듐이디티에이	0.05
6	베타인	1.0
7	소듐하이알루로네이트	2.0
8	소듐라우레스설페이트	20.0
9	코카미도프로필베타인	5.0
10	폴리쿼터늄-7	5.0
11	데실글루코사이드	3.0
12	시트릭애씨드	0.1
13	방부제, 향	미량
14	증류수	잔량
합계		100

상기 실시예 1~4 및 비교예의 샴푸를 20~50세의 남여 두피 지루 피부염 환자 50명을 대상으로 한 그룹당 10명씩 나누어 상기 실시예 1~4 및 비교예의 샴푸를 거품을 내어 두피 및 모발에 4 분 이상 접촉하여 마사지 한 후, 헹구어 내는 방법으로 주 3 회씩 4 주 동안 사용하여 두피가려움 변화를 평가하여 하기 표 9에 각각 나타내었다.

환자관찰 개선정도(명)	거의 개선	현저한 개선	약간의 개선	변화없음
실시예 1	9	1	-	-
실시예 2	8	2	-	-
실시예 3	8	2	-	-
실시예 4	10	-	-	-
비교예	2	5	2	1

상기 표 9의 결과를 참조하면, 실시예 1~4의 연어 비늘 가수 분해물을 적용시, 연어 비늘 열수 추출물을 사용한 비교예에 비하여 4주 치료 후 환자의 두피 가려움 개선도가 현저히 우수함을 알 수 있었다.

실험예 6: 각질량 감소 효능 평가

상기 실시예 1~4 및 비교예에 대하여, 각질량 감소 효능을 평가하였다. 구체적으로 하기 표 10의 1~10번 성분을 투입하여 교반하고, 유화기를 이용하여 유화 시킨 후 80℃에서 수분 증발하여 스크럽 제형의 화장료 조성물 1kg를 제조하였다.

상기 실시예 1~4 및 비교예의 스크럽 화장료 조성물에 대하여 20~50세의 남녀 50명을 대상으로, 한 그룹당 10명씩 나누어 상기 실시예 1~4 및 비교예의 스크럽을 사용하여, 주 2 회씩, 4 주 동안 사용하여 스크럽 적용시 발림성, 각질 제거력 및 종합적인 만족도를 5점 만점의 기호 척도도에 따라 평가하여 하기 표 11에 각각 나타내었다.

번호	성분	함량(중량%)
1	실시예 1~4 및 비교예	각 3.0
2	글리세린	5.0
3	부틸렌글라이콜	3.0
4	알란토인	0.1
5	디소듐이디티에이	0.05
6	베타인	1.0
7	소듐하이알루로네이트	2.0
8	셀룰로오스	30
9	디메치콘	0.1
10	방부제, 향 및 착색제	미량
11	증류수	잔량
합계		100

평가 항목	실시예				비교예
평가 항목	1	2	3	4	비교예
발림성	4	4	4	5	2
각질제거력	4	4	4	5	2
종합적인 만족도	4	4	4	5	2

상기 표 11의 결과를 참조하면, 상기 실시예 1~4의 스크럽 화장료 조성물을 적용시, 비교예보다 발림성, 각질 제거력 및 종합적인 만족도가 우수함을 알 수 있었다.

본 발명의 단순한 변형 내지 변경은 이 분야의 통상의 지식을 가진 자에 의하여 용이하게 실시될 수 있으며, 이러한 변형이나 변경은 모두 본 발명의 영역에 포함되는 것으로 볼 수 있다.

Claims

연어(Oncorhynchus keta .) 비늘의 효소 가수 분해물을 유효성분으로 포함하는 것을 특징으로 하는 연어 비늘의 효소 가수 분해물을 포함하는 화장료 조성물.
제1항에 있어서, 상기 연어 비늘의 효소 가수 분해물은 연어 비늘 열수 추출물을 제조하는 단계; 및
상기 연어 비늘 열수 추출물을 효소적 가수 분해하여 가수 분해물을 제조하는 단계;를 포함하여 제조되는 것을 특징으로 하는 연어 비늘의 효소 가수 분해물을 포함하는 화장료 조성물.
제2항에 있어서, 상기 가수 분해물은 상기 연어 비늘 열수 추출물을 가수분해 효소를 이용하여 가수 분해하여 제조되는 것이며,
상기 가수분해 효소는 α-키모트립신(α-chymotrypsin), 알칼라아제(alcalase), 코지자임(kojiztme), 프로타멕스(protamex) 및 트립신(trypsin)중 하나 이상 포함하는 것을 특징으로 하는 연어 비늘의 효소 가수 분해물을 포함하는 화장료 조성물.
제3항에 있어서, 상기 가수 분해물은,
상기 연어 비늘 열수 추출물을 가수분해 효소로 α-키모트립신, 코지자임 및 프로타멕스를 이용하여 가수 분해한 제1 가수 분해물, 제2 가수 분해물 및 제3 가수 분해물을 1:0.1~5:0.5~3 중량비로 포함하는 것을 특징으로 하는 연어 비늘의 효소 가수 분해물을 포함하는 화장료 조성물.
제2항에 있어서, 상기 연어 비늘의 효소 가수 분해물은,
상기 가수 분해물을 활성탄 여과하여 1차 여과물을 제조하는 단계;
상기 1차 여과물을 0.1~0.5㎛ 기공 크기(pore size)의 여과막으로 여과하여 2차 여과물을 제조하는 단계;
상기 2차 여과물을 이온교환수지막으로 여과하여 3차 여과물을 제조하는 단계; 및
상기 3차 여과물을 한외여과막으로 분획하여 분획물을 제조하는 단계;를 더 포함하여 제조되는 것을 특징으로 하는 연어 비늘의 효소 가수 분해물을 포함하는 화장료 조성물.
제1항에 있어서, 상기 연어 비늘의 효소 가수 분해물은 상기 화장료 조성물 전체중량에 대하여 0.01~50 중량% 포함되는 것을 특징으로 하는 연어 비늘의 효소 가수 분해물을 포함하는 화장료 조성물.
제1항에 있어서, 상기 화장료 조성물은 피부 각질 제거, 피부 가려움증 개선, 및 두피 비듬 개선 효과를 나타내는 것을 특징으로 하는 연어 비늘의 효소 가수 분해물을 포함하는 화장료 조성물.
제1항에 있어서, 상기 화장료 조성물은 화장수, 영양 로션, 마사지크림, 에센스, 헤어에센스, 스크럽, 팩, 파우더, 비누, 샴푸, 린스, 헤어젤 또는 헤어팩 제형인 것을 특징으로 하는 연어 비늘의 효소 가수 분해물을 포함하는 화장료 조성물.