KR20180004094A - 암 및 자가면역 질환을 위한 면역 요법 - Google Patents
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Abstract
증식성 질환, 자가면역 질환 및 동종면역 반응의 치료를 위해 키메라 융합 단백질 및 키메라 융합 단백질을 코딩하는 폴리펩티드가 제공된다. 키메라 융합 단백질은 CD24 세포외 도메인, EBV-유도 3(EBV-induced 3, EBI3) 폴리펩티드 서브유닛, 및 p28 IL-27 폴리펩티드 서브유닛을 포함하고, EBI3 폴리펩티드 서브유닛 및 p28 IL-27 폴리펩티드 서브유닛은 유연한 펩티드 링커에 의해 공유 결합된다.
Description
본 출원은 2014 년 11 월 6 일자로 출원된 미국 가출원 제 62/076,182 호에 대한 우선권을 주장한다. 상기한 출원은 그 전체가 본원에 참고로 포함된다.
본 출원은 일반적으로, 증식성 질환, 자가면역 질환 및 동종면역 반응의 치료를 위한 키메라 IL-27 융합 단백질을 이용하거나 발현시키는 조성물 및 방법에 관한 것이다.
수십 년에 걸친 연구 끝에, 암과의 전쟁에서 암 면역 요법이 마침내 주요 무기로 등장했다. 현재의 면역 요법은 암 세포를 직접 표적으로 하는 방법과 숙주 면역계를 직접 표적으로 하는 방법으로 나눌 수 있다. 전자는 유방암의 HER-2, 백혈병의 CD19 또는 CD20과 같이 종양 세포 상에서 풍부하게 발현되는 분자에 특이적인 항체를 포함한다. 후자는 CTLA-4 및 PD-1과 같은 음성 확인 조절자(negative checkpoint regulator)와 상호 작용하는 항체를 포함한다. 조합의 힘은 항-CTLA-4 및 항-PD-1 항체를 결합함으로써 반응 속도가 현저하게 증가하는 것으로 설명된다. 최근 몇 년 동안 PD-L1, PD-L2, B7-1, B7-2, LAG-3, TIM-3, TIGIT, BTLA 및 VISTA를 포함하는 새로운 표적을 제공하기 위해 음성 확인 조절자의 수가 확대되었다(Le Mercier et al., Front. Immunol., (6), Article 418, August 2015)에서 검토됨). 제약 회사들은 추가 조합을 간절히 추구하고 있다.
IL-27은 EBV-유도된 유전자 3(EBI3)이라고 불리는 IL-12 p40-관련 단백질 서브유닛 및 p35-관련 서브유닛인 p28로 이루어진 IL-12 사이토카인 계열의 구성원이다. 수지상 세포(DC) 및 대식세포와 같은 활성화된 항원 제시 세포(activated antigen presenting cell, APC)에 의해 생성된 IL-27은, T, NK, B 세포 및 골수 세포를 포함하는 다양한 세포 유형에서 WSX-1 및 gp130 서브유닛으로 구성된 이종 이량체 수용체(IL-27R)를 통해 신호를 전달한다. IL-27R 신호 전달은 여러 Jak 계열 키나제의 동원 및 STAT 계열 전사 인자 1 및 3의 활성화를 향상시킨다. IL-27은 Th1, Th2, Th17 및 FoxP3+ Treg(조절 T 세포) 반응을 조절하는데 강력한 활성을 갖는 것으로 나타났다. IL-27의 특성을 고려하여, 증식성 질환, 자가면역 질환 및 동종면역 반응의 치료를 위한 IL-27-계 치료제가 필요하다.
IL-27은 EBV-유도된 유전자 3(EBI3)이라고 불리는 IL-12 p40-관련 단백질 서브유닛 및 p35-관련 서브유닛인 p28로 이루어진 IL-12 사이토카인 계열의 구성원이다. 수지상 세포(DC) 및 대식세포와 같은 활성화된 항원 제시 세포(activated antigen presenting cell, APC)에 의해 생성된 IL-27은, T, NK, B 세포 및 골수 세포를 포함하는 다양한 세포 유형에서 WSX-1 및 gp130 서브유닛으로 구성된 이종 이량체 수용체(IL-27R)를 통해 신호를 전달한다. IL-27R 신호 전달은 여러 Jak 계열 키나제의 동원 및 STAT 계열 전사 인자 1 및 3의 활성화를 향상시킨다. IL-27은 Th1, Th2, Th17 및 FoxP3+ Treg(조절 T 세포) 반응을 조절하는데 강력한 활성을 갖는 것으로 나타났다. IL-27의 특성을 고려하여, 증식성 질환, 자가면역 질환 및 동종면역 반응의 치료를 위한 IL-27-계 치료제가 필요하다.
본 출원의 일 양태는 CD24 세포외 도메인, EBV-유도 3(EBV-induced 3, EBI3) 폴리펩티드, p28 IL-27 폴리펩티드 서브유닛을 포함하는 IL-27 융합 단백질에 관한 것으로, EBI3 폴리펩티드 및 p28 IL-27 폴리펩티드 서브유닛은 유연한 펩티드 링커에 의해 공유 결합된다.
일 실시형태에서, IL-27 융합 단백질은 아미노에서 카르복시 말단까지 CD24 세포외 도메인, EBV-유도 3(EBI3) 폴리펩티드 서브유닛, 펩티드 링커 및 p28 IL-27 폴리펩티드 서브유닛을 포함한다.
또 다른 실시형태에서, IL-27 융합 단백질은 아미노에서 카르복시 말단까지 CD24 세포외 도메인, p28 IL-27 폴리펩티드 서브유닛, 펩티드 링커 및 EBV-유도 3(EBI3) 폴리펩티드를 포함한다.
특정 실시형태에서, IL-27 융합 단백질은 CD24 세포외 도메인의 2 내지 10 개 또는 2 내지 5 개의 나란히 배열된 카피를 포함한다.
다른 실시형태에서, IL-27 융합 단백질은 상기한 세포외 도메인의 2 내지 5 개의 나란히 배열 카피를 포함할 수 있다.
또 다른 실시형태에서, IL-27 융합 단백질은 면역글로불린 Fc 도메인을 포함한다. 일 실시형태에서, 면역글로불린 Fc 도메인은 IgG1 중쇄 불변 영역을 포함한다. 또 다른 실시형태에서, 면역글로불린 Fc 도메인은 Fcγ 수용체에 대한 결합을 방해하거나 제거하는 돌연변이를 포함한다. 특정 실시형태에서, 융합 단백질은 서열번호 77 내지 84 또는 88 내지 101 중 어느 하나에 따른 아미노산 서열을 포함한다.
본 출원의 또 다른 양태는 본 개시에 따른 IL-27 융합 단백질 및 항-PD-1 작용제, 항-PD-L1 작용제, 항-PD-L2 작용제, 또는 이들의 조합으로 이루어진 군에서 선택되는 하나 이상의 구성원을 포함하는 약학적 조성물에 관한 것이다. 특정 실시형태에서, 항-PD-1 작용제, 항-PD-L1 작용제 또는 항-PD-L2 작용제는 항체이다. 다른 실시형태에서, 항-PD-1 작용제, 항-PD-L1 작용제 또는 항-PD-L2 작용제는 우성 음성 돌연변이 단백질이다. 다른 실시형태에서, 항-PD-1 작용제, 항-PD-L1 작용제 또는 항-PD-L2 작용제는 siRNA이다.
본 출원의 또 다른 양태는 본원에 기재된 IL-27 융합 단백질을 코딩하는 폴리뉴클레오티드 및 세포 내에서 융합 단백질을 발현하는데 적합한 뉴클레오티드 서열에 작동 가능하게 연결된 IL-27 융합 단백질-코딩 폴리펩티드를 포함하는 발현 벡터에 관한 것이다. 각각의 폴리뉴클레오티드 또는 발현 벡터는 N-말단 신호 펩티드 서열을 추가로 포함한다.
특정 실시형태에서, 폴리뉴클레오티드 또는 발현 벡터는 융합 단백질 서열의 카르복시 말단에 융합 단백질을 세포 막에 고정시키기 위한 GPI 앵커 신호 서열을 추가로 포함한다.
다른 실시형태에서, 폴리뉴클레오티드 또는 발현 벡터는 융합 단백질을 세포막에 고정하기 위한 막 횡단 도메인을 추가로 포함한다.
특정 실시형태에서, 폴리뉴클레오티드 또는 발현 벡터, 또는 추가의 폴리뉴클레오티드 또는 발현 벡터는 항-PD-1 작용제, 항-PD-L1 작용제, 항-PD-L2 작용제, 또는 이들의 조합을 발현하는데 적합한 하나 이상의 서열을 더 포함한다.
특정 실시형태에서, 항-PD-1/항-PD-L1/항-PD-L2 서열은 항체를 코딩한다.
다른 실시형태에서, 항-PD-1/항-PD-L1/항-PD-L2 서열은 막 변형 도메인 및/또는 세포질 꼬리 없이 세포외 도메인을 포함하는 우성 음성 돌연변이 단백질 또는 가용성 단백질을 코딩한다.
항체, 우성 음성 돌연변이 단백질 또는 가용성 단백질을 코딩하는 폴리뉴클레오티드 또는 발현 벡터는 항-PD-1/항-PD-L1/항-PD-L2 서열(예를 들어 항체 또는 Fc 융합 단백질)이거나, PD-1, PD-L1 및/또는 PD-L2 변이체를 세포막에 고정시키기 위해 C-말단 GPI-연결 앵커 신호 서열 또는 막 횡단 도메인으로 조작될 수 있다.
다른 실시형태에서, 항-PD-1/항-PD-L1/항-PD-L2 서열은 하나 이상의 siRNA를 생성하기 위해 하나 이상의 shRNA를 포함한다.
다른 실시형태에서, 폴리뉴클레오티드 또는 발현 벡터, 또는 추가의 폴리뉴클레오티드 또는 발현 벡터는 B7-1, B7-2, CTLA-4, LAG-3, TIM-3, TIGIT에 대한 항체 또는 BTLA, VISTA 또는 B7-1, B7-2, CTLA-4, LAG-3, TIME-3, TIGIT, BTLA, VISTA 또는 이들의 조합으로부터의 세포외 도메인을 포함하는 단백질 변이체를 발현하기에 적합한 하나 이상의 서열을 더 포함한다. 단백질 변이체는 분비를 위해 조작되거나(예를 들어, Fc 융합 단백질), 또는 단백질 변이체를 세포막에 고정하기 위해 GPI-연결 앵커 신호 서열 또는 막 횡단 도메인으로 조작될 수 있다.
발현 벡터는 바이러스 벡터 또는 비-바이러스 벡터일 수 있다.
특정 바람직한 실시형태에서, 발현 벡터는 재조합 아데노바이러스-관련 바이러스(adenovirus-associated virus, AAV) 벡터이다.
본 출원의 또 다른 양태는 IL-27 융합 단백질-코딩 폴리뉴클레오티드 또는 IL-27 융합 단백질-코딩된 발현 벡터를 포함하는 세포에 관한 것으로, 상기 세포는 IL-27 융합 단백질을 발현한다. 특정 실시형태에서, 세포는 항-PD-1 작용제, 항-PD-L1 작용제, 항-PD-L2 작용제, 또는 이들의 조합을 발현하는 폴리뉴클레오티드 또는 발현 벡터를 추가로 포함하며, 항-PD-1/PD-L1/PD-L2 작용제는 항체, 우성 음성 단백질 또는 siRNA이다. 바람직한 실시형태에서, 세포는 인간 또는 마우스 세포와 같은 포유동물 세포이다.
본 출원의 또 다른 양태는 증식성 질환을 치료하는 방법에 관한 것이다. 상기 방법은 본 개시의 유효량의 IL-27 융합 단백질을 이를 필요로 하는 개체에 투여하는 단계를 포함한다.
본 출원의 또 다른 양태는 자가면역 질환 또는 동종면역 반응을 치료하는 방법에 관한 것이다. 상기 방법은 본 개시의 유효량의 IL-27 융합 단백질을 이를 필요로 하는 개체에 투여하는 단계를 포함한다.
본 출원의 또 다른 양태는 증식성 질환을 치료하는 방법에 관한 것이다. 상기 방법은 본 개시의 유효량의 IL-27-코딩 발현 벡터를 이를 필요로 하는 개체에 투여하는 단계를 포함한다.
본 출원의 또 다른 양태는 자가면역 질환 또는 동종면역 반응을 치료하는 방법에 관한 것이다. 상기 방법은 본 개시의 유효량의 IL-27-코딩 발현 벡터를 이를 필요로 하는 개체에 투여하는 단계를 포함한다.
특정 실시형태에서, 치료 방법은 유효량의 항-PD-1 mAb, 항-PD-L1 mAb, 항-PD-L2 mAb또는 이들의 조합; 항-PD-1 mAb, 항-PD-L1 mAb, 항-PD-L2 mAb또는 이들의 조합을 발현하는 발현 벡터; 항-PD-1 mAb, 항-PD-L1 mAb, 항-PD-L2 mAb또는 이들의 조합의 우성-음성 단백질; PD-1, PD-L1, PD-L2, 또는 이들의 조합을 발현하는 발현 벡터; PD-1, PD-L1 또는 PD-L2에 대한 하나 이상의 siRNA; 또는 PD-1, PD-L1 또는 PD-L2에 대한 하나 이상의 siRNA를 발현하는 발현 벡터를 개체에 투여하는 단계를 더 포함한다.
다른 실시형태에서, 치료 방법은 유효량의 B7-1, B7-2, CTLA-4, LAG-3, TIM-3, TIGIT, BTLA, VISTA, 또는 이들의 조합에 대한 mAb; B7-1, B7-2, CTLA-4, LAG-3, TIM-3, TIGIT, BTLA, VISTA, 또는 이들의 조합에 대한 mAb를 발현하는 발현 벡터; B7-1, B7-2, CTLA-4, LAG-3, TIM-3, TIGIT, BTLA, VISTA, 또는 이들의 조합으로부터의 우성-음성 단백질 또는 세포외 도메인; B7-1, B7-2, CTLA-4, LAG-3, TIM-3, TIGIT, BTLA, VISTA, 또는 이들의 조합으로부터의 우성-음성 단백질 또는 세포외 도메인을 발현하는 발현 벡터; B7-1, B7-2, CTLA-4, LAG-3, TIM-3, TIGIT, BTLA, VISTA, 또는 이들의 조합에 대한 하나 이상의 siRNA; B7-1, B7-2, CTLA-4, LAG-3, TIM-3, TIGIT, BTLA, VISTA, 또는 이들의 조합에 대한 하나 이상의 siRNA를 발현하는 발현 벡터를 개체에 투여하는 단계를 더 포함한다.
본 출원의 또 다른 양태는 증식성 질환을 치료하는 방법에 관한 것이다. 상기 방법은 본 개시의 IL-27 융합 단백질을 발현하는 유효량의 세포를 단독으로, 또는 하나 이상의 항-PD-1 작용제, 항-PD-L1 작용제, 항-PD-L2 작용제, 항-B7-1 작용제, 항-B7-2 작용제, 항-CTLA-4 작용제, 항-LAG-3 작용제, 항-TIM-3 작용제, 항-TIGIT 작용제, 항-BTLA 작용제, 항-VISTA 작용제, 또는 이들의 조합과 함께 증식성 질환을 치료하는데 효과적인 양으로 이를 필요로 하는 개체에 투여하는 단계를 포함한다.
본 출원의 또 다른 양태는 자가면역 질환 또는 동종면역 반응을 치료하는 방법에 관한 것이다. 상기 방법은 본 개시의 IL-27 융합 단백질을 발현하는 유효량의 세포를 단독으로, 또는 하나 이상의 항-PD-1 작용제, 항-PD-L1 작용제, 항-PD-L2 작용제, 항-B7-1 작용제, 항-B7-2 작용제, 항-CTLA-4 작용제, 항-LAG-3 작용제, 항-TIM-3 작용제, 항-TIGIT 작용제, 항-BTLA 작용제, 항-VISTA 작용제, 또는 이들의 조합과 함께 자가면역 질환 또는 동종면역 반응을 치료하는데 효과적인 양으로 이를 필요로 하는 개체에 투여하는 단계를 포함한다.
도 1. AAV-IL-27 처리는 B16 흑색종의 성장 및 폐 전이를 억제한다. 패널 A: C57BL/6 마우스에 AAV-IL-27 또는 AAV-Ctrl 바이러스 벡터를 근육내(i.m.) 주사하였다. 마우스는 시간이 지남에 따라 출혈이 있었고 혈청의 IL-27의 농도를 ELISA에 의해 검출하였다. 패널 B: 2×105 개의 B16.F10 세포를 C57BL/6 마우스에 피하(s.c.) 주사하였다. 4 일 후 마우스를 AAV-IL-27 또는 AAV-Ctrl 바이러스 벡터로 처리하였다. 종양의 크기를 시간에 따라 측정하였다. 막대는 각각의 그룹에서 5 개의 종양이 있는 SD를 나타낸다. 표시된 데이터는 유사한 결과를 보이는 세 번의 실험을 나타낸다. 패널 C: 2×105 개의 B16.F10 세포를 C57BL/6 마우스에 정맥내(i.v.) 주사하였다. 4 일 후 마우스를 AAV-IL-27 또는 AAV-Ctrl 바이러스 벡터로 근육내(i.m.) 처리하였다. 종양 세포 주입 후 21 일째 마우스를 희생시키고 폐의 종양 전이를 확인하였다. 마우스 각각의 그룹에서 폐의 평균 무게를 오른쪽 패널에 나타내었다. 막대기는 각각의 그룹에서 4 마리의 마우스의 폐의 무게의 SD를 나타낸다. 표시된 데이터는 유사한 결과를 보이는 두 번의 실험을 나타낸다.
도 2. AAV-IL-27 처리는 Treg 세포를 고갈시키고 IFN-γ 생산 T 세포의 종양 침윤을 증가시킨다. 2×105 개의 B16.F10 세포를 C57BL/6 마우스에 피하(s.c.) 주사하였다. 4 일 후 마우스를 AAV-IL-27 또는 AAV-Ctrl 바이러스 벡터로 처리하였다. 마우스를 18 일째에 희생시키고, FoxP3+ Treg 세포(패널 A) 및 IFN-γ 생산 종양 침윤 T 세포를 분석하기 위해 유동 세포 분석을 사용하였다(패널 B). 그룹당 5 마리의 마우스를 실험에 사용하였다. 표시된 데이터는 유사한 결과를 보이는 적어도 세 번의 실험을 나타낸다. *P<0.05; **P<0.01; ***P<0.001(스튜던트 t-검정).
도 3. AAV-IL-27 처리는 T 세포 상에서 PD-L1 발현을 유도한다. 패널 A: AAV-IL-27(적색) 또는 AAV-Ctrl 바이러스성(청색) 벡터로 처리한 마우스의 혈액(n = 3-4/그룹), 비장(n = 7-8/그룹) 및 종양(n = 7-8/그룹)의 CD4+ 및 CD8+ T 세포의 유동 세포 분석. 마우스의 각각의 그룹에서 T 세포 상에서의 PD-L1 발현의 평균 형광 강도(mean fluorescence intensity, MFI)는 오른쪽 패널에 나타나 있다. 막대는 각각의 그룹에서 PD-L1 MFI의 SD를 나타낸다. 표시된 데이터는 유사한 결과를 보이는 두 번의 실험을 나타낸다. 패널 B: AAV-IL-27 또는 AAV-Ctrl 바이러스 벡터로 처리한 마우스의 종양에서 PD-1+ CD8 T 세포의 유동 세포 분석. 막대는 그룹당 5 마리의 마우스로부터 PD-1 MFI의 SD를 나타낸다. 표시된 데이터는 유사한 결과를 보이는 두 번의 실험을 나타낸다. *P<0.05; ***P<0.001(스튜던트 t-검정).
도 4. AAV-IL-27 및 항-PD1의 병용 요법은 마우스에서 종양을 제거한다. 패널 A: 2×105 개의 B16.F10 세포를 각각의 C57BL6 마우스 피하(s.c.) 주사하였다. 4 일 후 마우스를 AAV-IL-27 또는 AAV-Ctrl 벡터로 근육내(i.m.) 처리하였다. 4 일째부터 마우스를 최대 네 번 4 일 간격으로 300 μg/마우스의 항-PD-1(RMP1-14) 또는 동형 대조 항체(2A3)로 처리하였다. 각각의 그룹의 마우스(n = 5)의 종양 크기를 시간에 따라 측정하였다. 패널 B: 2×105 개의 B16.F10 세포를 각각의 C57BL6 마우스에 피하(s.c.) 주사하였다. 4 일 후 마우스를 AAV-IL-27 벡터로 근육내(i.m.) 처리하였다. 4 일째부터 마우스를 300 μg/마우스의 항-PD-1(RMP1-14) 또는 항-CTLA4(4F10) 또는 대조 IgG(2A3)로 처리하였다. 각각의 그룹의 마우스(n = 5)의 종양 크기를 시간에 따라 측정하였다. *P<0.05; **P<0.01(스튜던트 t-검정). 표시된 데이터는 유사한 결과를 보이는 세 번의 실험을 나타낸다.
도 5. AAV-IL-27 및 항-PD1의 병용 요법은 항-종양 Th1/Tc1 반응을 향상시킨다. 2×105 개의 B16.F10 세포를 각각의 C57BL6 마우스에 피하(s.c.) 주사하였다. 4 일 후 마우스를 AAV-IL-27 또는 AAV-Ctrl 벡터로 근육내(i.m.) 처리하였다. 4 일째부터 마우스를 최대 네 번 4 일 간격으로 300 μg/마우스의 항-PD-1(RMP1-14) 또는 동형 대조 항체(2A3)로 처리하였다. 종양 세포 주입 후 18 일째 마우스를 희생시키고 이들의 종양을 분리한 후 CD4(패널 A) 및 CD8(패널 B) T 세포에 의한 IFN-γ의 생산을 분석하였다. 마우스의 각각의 그룹(n = 5)에서 평균 IFN-γ-양성 T 세포가 오른쪽 패널에 나타나 있다. *P<0.05; **p<0.01(스튜던트 t-검정).
도 6. AAV-IL-27 처리는 FoxP3+ Treg 세포를 제거한다. 마우스 B16 흑색종 형성 및 처리 프로토콜은 도 3 및 도 4에 기재된 것과 동일하였다. 종양 세포 주입 후 18 일째 마우스를 희생시키고 이들의 비장(패널 A) 및 종양(패널 B)을 분리한 후 CD4 T 세포 내에서 Foxp3 및 IL-10의 발현을 분석하였다. 마우스의 각각의 그룹(n = 5)에서 평균 FoxP3-양성 및 IL-10-양성 T 세포가 오른쪽 패널에 나타나 있다. *P<0.05; **p<0.01(스튜던트 t-검정).
도 7. AAV-IL-27 및 항-PD-1의 병용 요법은 T 세포 내에서 IL-10 생산을 유도한다. 마우스 B16 흑색종 형성 및 처리 프로토콜은 도 3 및 도 4에 기재된 것과 동일하였다. 종양 세포 주입 후 18 일째 마우스를 희생시키고 이들의 비장(패널 A) 및 종양(패널 B)을 분리한 후 CD8 T 세포 내에서 IL-10의 발현을 분석하였다. 마우스의 각각의 그룹(n = 5)에서 평균 IL-10-양성 T 세포가 오른쪽 패널에 나타나 있다. *P<0.05; **p<0.01(스튜던트 t-검정).
도 8. AAV-IL-27은 실험적 자가면역 뇌척수염(experimental autoimmune encephalomyelitis, EAE)을 억제한다. C57BL6/마우스(n = 5/그룹)를 AAV-IL-27 또는 AAV-Ctrl 바이러스(2 ×1011 DVP/마우스, 근육내 주사)로 처리하였다(패널 A). 2 주 후 실험적 자가면역 질환을 유도하기 위해 마우스를 MOG 펩티드로 면역화시켰다. 마우스를 격일로 관찰하였고 중간 점수에 대해 0.5의 차이로 0에서 5까지의 수치로 점수를 매겼다: 0, 임상 징후 없음; 1, 꼬리 탄력의 손실; 2, 비틀거리는 걸음 걸이; 3, 뒷다리 마비; 4, 뒷다리 및 앞다리 마비; 및 5 사망. 패널 B는 AAV 감염 후 45 일째 패널 A의 마우스의 비장으로부터 CD4+ 세포 분획의 유동 세포 분석을 나타낸다. 비장 세포를 골지 차단제(Golgi blocker)의 존재 하에 4 시간 동안 PMA로 자극한 후 사이토카인 또는 Foxp3의 세포내 염색에 의해 평가하였다. Th1, IFN-γ-생산 세포; TH2, IL4+ 세포; Th17, IL-17 생산 세포; Tr1, IL-10-생산 세포. ***P<0.001(스튜던트 t-검정).
도 9. AAV-IL-27은 염증성 장 질환(inflammatory bowel disease, IBD)을 억제한다. 0.3×106 개의 CD45RB high CD4+ T 세포를 복강내(i.p.) 주사하여 대장염을 유발시켰다. 세포 주입 1 주 후 마우스를 바이러스 벡터 2×1011 DVP/마우스로 근육내(i.m.) 처리하였다. 패널 A는 T 세포 전달 후 체중 변화를 나타낸다. 시작 무게는 100%로 정의된다. 패널 B는 마우스 장의 육안 해부학의 예를 나타낸다. 패널 C는 세 가지 파라미터, 즉 소모성 증후군의 유무(0 또는 1), 결장 벽 두께의 범위(정상, 경증, 중등도 및 중증 비후에 대해 0-3) 및 대변(정상. 묽은 변, 설사 및 혈변 각각에 대해 0-3)을 기반으로 축적된 임상 점수를 나타낸다.
도 10. 면역 요법을 위한 융합 단백질 생산. 도 10은 IL27Fc 및 CD24IL27Fc의 생성을 나타낸다. 패널 A의 IL27Fc 융합 단백질은 N에서 C 말단까지 신호 펩티드, EBI3, GGVPGVGVPGV(서열번호 7) "PV" 링커 또는 GGGGSGGGGSGGGGS(서열번호 8) "GS" 링커, p24 및 Fc로 구성된다. 패널 A는 하나는 PV 링커(왼쪽 패널) 및 다른 하나는 GS 링커(오른쪽 패널)인 두 개의 융합 단백질의 생산을 나타낸다. 왼쪽 패널은 서열번호 71의 아미노산 서열을 갖는 융합 단백질을 나타내는 반면, 오른쪽은 서열번호 73의 아미노산 서열과의 융합 단백질을 나타낸다. 단백질은 환원(왼쪽 레인) 및 비-환원(오른쪽 레인) 조건 하에서 SDS-PAGE로 분석하였다. 단백질 수율은 겔 사진 아래에 제공되어 있다. 패널 B는 CD24IL24Fc 융합 단백질의 생성을 나타낸다. CD24IL24Fc 융합 단백질은 N에서 C 말단까지 신호 펩티드, 인간 CD24, EBI3, 링커, PV 링커 펩티드, p28 및 Fc로 구성된다. 패널 B는 서열번호 79의 아미노산 서열을 갖는 CD24IL24Fc 융합 단백질의 생산을 나타낸다. 단백질은 환원(오른쪽 레인) 및 비-환원(왼쪽 레인) 조건 하에서 SDS-PAGE로 분석하였다. 단백질 수율은 겔 사진 아래에 제공되어 있다.
도 11. 도 10의 IL27Fc 융합 단백질의 생체외 활성(패널 A). B6 비장 세포(2×105/웰)를 소정 농도의 IL-27 융합 단백질의 존재 하에 항-CD3(1 μg/ml)로 자극하였다. 상청액을 3 일째에 수득하고 IL-10(패널 A) 및 IFNγ(패널 B) 수준을 분석하였다. 유사한 데이터가 두 번의 독립적인 실험으로부터 얻어졌다.
도 12. 서열번호 71(PV)의 아미노산 서열을 갖는 항-PD-1 및 IL27Fc 융합 단백질을 사용하는 병용 요법은 종양 성장 속도 및 CD25+FoxP3+ Treg의 수를 감소시킨다. 항-PD-1을 8 일째 주입(하루 걸러 한번 100 μg/주사×5 회)한 반면, B16.F10 종양 세포 시험(2.5 μg/마우스 × 매일 5회 주사) 후 11 일째에 PV 주사를 개시하였다. 패널 A는 종양 성장률 감소를 나타낸다. 종양은 캘리퍼스로 일주일에 두 번씩 측정했다. 표시된 데이터는 종양 영역이다. 패널 B는 Treg 감소를 나타낸다. 첫 번째 PV 처리 후 7 일째 말초 혈액을 수득했다. PBL을 CD4, CD25 및 Foxp3에 특이적인 항체로 염색하였다. 표시된 데이터는 CD4 분획 중 % CD25+FoxP3+ 세포이다; 대조군 n=4, 처리군 n=5. *P<0.05, **P<0.01.
도 13. CD24IL27mFcPV 융합 단백질(서열번호 79)을 단독으로 또는 항-PD1 mAb와 함께 투여했을 때 종양 성장 및 생존 연장의 억제. 패널 A는 종양 성장의 억제를 나타낸다. B16 흑색종 세포(2×105/마우스)를 C57BL/6 마우스에 피하 주사하였다. 종양 세포 이식 후 8 일째부터 시작하여 Fc(200 μg x 3), 항-PD-1(200 μg x 3), CD24IL27mFcPV(30 μg x 3) 또는 PD-1+ CD24IL27mFcPV를 마우스에 매일 3회 주사하였다. 종양 면적은 일주일에 두 번씩 측정하였다. P 값은 이원 분산 분석(two way ANOVA analysis) 및 본페로니(Bonferroni)에 의해 사후 검증(post hoc test)으로 결정하였다. 패널 B는 병용 요법이 종양 보유 마우스에서 생존을 연장시킨다는 것을 보여준다. 이 데이터는 2 cm의 종양 직경을 종점으로 사용하여 카플란 마이어(Kaplan Meier) 생존 분석을 사용한다. P 값은 로그-순위 검정(log-rank test)에 의해 결정하였다.
도 14. 면역 조절 장애, 다발성 내분비병증, 장질환 X-연관 증후군(immune dysfunction, polyendocrinopathy, enteropathy, X-linked (IPEX) syndrome))의 마우스 모델에서 IL-27-rAAV의 치료 효과. IPEX 증후군은 남성에서 독점적인 발현이 있는 X-연관 열성 질환이다. Foxp3 유전자의 돌연변이는 마우스와 인간에서 치명적인 자가면역 질환을 유발한다. 대부분의 어린이들은 출생 후 2 년 이내에 사망한다. Foxp3 유전자(Foxp3sf)에서 돌연변이가 있는 Scurfy 마우스가 인간 IPEX와 유사한 병인을 보이기 때문에 이 모델을 사용하여 IL-27-rAAV가 IPEX를 치료할 수 있는지 여부를 결정했다. 패널 A에 나타난 바와 같이, IL-27-rAAV의 단일 주사는 출생 전후기 동안 증가된 체중에 의해 입증된 바와 같이 마우스의 발달을 크게 개선시켰다. 또한 Scurfy 마우스(패널 B)에서 치료 효과가 거의 두 배가 되었다.
도 2. AAV-IL-27 처리는 Treg 세포를 고갈시키고 IFN-γ 생산 T 세포의 종양 침윤을 증가시킨다. 2×105 개의 B16.F10 세포를 C57BL/6 마우스에 피하(s.c.) 주사하였다. 4 일 후 마우스를 AAV-IL-27 또는 AAV-Ctrl 바이러스 벡터로 처리하였다. 마우스를 18 일째에 희생시키고, FoxP3+ Treg 세포(패널 A) 및 IFN-γ 생산 종양 침윤 T 세포를 분석하기 위해 유동 세포 분석을 사용하였다(패널 B). 그룹당 5 마리의 마우스를 실험에 사용하였다. 표시된 데이터는 유사한 결과를 보이는 적어도 세 번의 실험을 나타낸다. *P<0.05; **P<0.01; ***P<0.001(스튜던트 t-검정).
도 3. AAV-IL-27 처리는 T 세포 상에서 PD-L1 발현을 유도한다. 패널 A: AAV-IL-27(적색) 또는 AAV-Ctrl 바이러스성(청색) 벡터로 처리한 마우스의 혈액(n = 3-4/그룹), 비장(n = 7-8/그룹) 및 종양(n = 7-8/그룹)의 CD4+ 및 CD8+ T 세포의 유동 세포 분석. 마우스의 각각의 그룹에서 T 세포 상에서의 PD-L1 발현의 평균 형광 강도(mean fluorescence intensity, MFI)는 오른쪽 패널에 나타나 있다. 막대는 각각의 그룹에서 PD-L1 MFI의 SD를 나타낸다. 표시된 데이터는 유사한 결과를 보이는 두 번의 실험을 나타낸다. 패널 B: AAV-IL-27 또는 AAV-Ctrl 바이러스 벡터로 처리한 마우스의 종양에서 PD-1+ CD8 T 세포의 유동 세포 분석. 막대는 그룹당 5 마리의 마우스로부터 PD-1 MFI의 SD를 나타낸다. 표시된 데이터는 유사한 결과를 보이는 두 번의 실험을 나타낸다. *P<0.05; ***P<0.001(스튜던트 t-검정).
도 4. AAV-IL-27 및 항-PD1의 병용 요법은 마우스에서 종양을 제거한다. 패널 A: 2×105 개의 B16.F10 세포를 각각의 C57BL6 마우스 피하(s.c.) 주사하였다. 4 일 후 마우스를 AAV-IL-27 또는 AAV-Ctrl 벡터로 근육내(i.m.) 처리하였다. 4 일째부터 마우스를 최대 네 번 4 일 간격으로 300 μg/마우스의 항-PD-1(RMP1-14) 또는 동형 대조 항체(2A3)로 처리하였다. 각각의 그룹의 마우스(n = 5)의 종양 크기를 시간에 따라 측정하였다. 패널 B: 2×105 개의 B16.F10 세포를 각각의 C57BL6 마우스에 피하(s.c.) 주사하였다. 4 일 후 마우스를 AAV-IL-27 벡터로 근육내(i.m.) 처리하였다. 4 일째부터 마우스를 300 μg/마우스의 항-PD-1(RMP1-14) 또는 항-CTLA4(4F10) 또는 대조 IgG(2A3)로 처리하였다. 각각의 그룹의 마우스(n = 5)의 종양 크기를 시간에 따라 측정하였다. *P<0.05; **P<0.01(스튜던트 t-검정). 표시된 데이터는 유사한 결과를 보이는 세 번의 실험을 나타낸다.
도 5. AAV-IL-27 및 항-PD1의 병용 요법은 항-종양 Th1/Tc1 반응을 향상시킨다. 2×105 개의 B16.F10 세포를 각각의 C57BL6 마우스에 피하(s.c.) 주사하였다. 4 일 후 마우스를 AAV-IL-27 또는 AAV-Ctrl 벡터로 근육내(i.m.) 처리하였다. 4 일째부터 마우스를 최대 네 번 4 일 간격으로 300 μg/마우스의 항-PD-1(RMP1-14) 또는 동형 대조 항체(2A3)로 처리하였다. 종양 세포 주입 후 18 일째 마우스를 희생시키고 이들의 종양을 분리한 후 CD4(패널 A) 및 CD8(패널 B) T 세포에 의한 IFN-γ의 생산을 분석하였다. 마우스의 각각의 그룹(n = 5)에서 평균 IFN-γ-양성 T 세포가 오른쪽 패널에 나타나 있다. *P<0.05; **p<0.01(스튜던트 t-검정).
도 6. AAV-IL-27 처리는 FoxP3+ Treg 세포를 제거한다. 마우스 B16 흑색종 형성 및 처리 프로토콜은 도 3 및 도 4에 기재된 것과 동일하였다. 종양 세포 주입 후 18 일째 마우스를 희생시키고 이들의 비장(패널 A) 및 종양(패널 B)을 분리한 후 CD4 T 세포 내에서 Foxp3 및 IL-10의 발현을 분석하였다. 마우스의 각각의 그룹(n = 5)에서 평균 FoxP3-양성 및 IL-10-양성 T 세포가 오른쪽 패널에 나타나 있다. *P<0.05; **p<0.01(스튜던트 t-검정).
도 7. AAV-IL-27 및 항-PD-1의 병용 요법은 T 세포 내에서 IL-10 생산을 유도한다. 마우스 B16 흑색종 형성 및 처리 프로토콜은 도 3 및 도 4에 기재된 것과 동일하였다. 종양 세포 주입 후 18 일째 마우스를 희생시키고 이들의 비장(패널 A) 및 종양(패널 B)을 분리한 후 CD8 T 세포 내에서 IL-10의 발현을 분석하였다. 마우스의 각각의 그룹(n = 5)에서 평균 IL-10-양성 T 세포가 오른쪽 패널에 나타나 있다. *P<0.05; **p<0.01(스튜던트 t-검정).
도 8. AAV-IL-27은 실험적 자가면역 뇌척수염(experimental autoimmune encephalomyelitis, EAE)을 억제한다. C57BL6/마우스(n = 5/그룹)를 AAV-IL-27 또는 AAV-Ctrl 바이러스(2 ×1011 DVP/마우스, 근육내 주사)로 처리하였다(패널 A). 2 주 후 실험적 자가면역 질환을 유도하기 위해 마우스를 MOG 펩티드로 면역화시켰다. 마우스를 격일로 관찰하였고 중간 점수에 대해 0.5의 차이로 0에서 5까지의 수치로 점수를 매겼다: 0, 임상 징후 없음; 1, 꼬리 탄력의 손실; 2, 비틀거리는 걸음 걸이; 3, 뒷다리 마비; 4, 뒷다리 및 앞다리 마비; 및 5 사망. 패널 B는 AAV 감염 후 45 일째 패널 A의 마우스의 비장으로부터 CD4+ 세포 분획의 유동 세포 분석을 나타낸다. 비장 세포를 골지 차단제(Golgi blocker)의 존재 하에 4 시간 동안 PMA로 자극한 후 사이토카인 또는 Foxp3의 세포내 염색에 의해 평가하였다. Th1, IFN-γ-생산 세포; TH2, IL4+ 세포; Th17, IL-17 생산 세포; Tr1, IL-10-생산 세포. ***P<0.001(스튜던트 t-검정).
도 9. AAV-IL-27은 염증성 장 질환(inflammatory bowel disease, IBD)을 억제한다. 0.3×106 개의 CD45RB high CD4+ T 세포를 복강내(i.p.) 주사하여 대장염을 유발시켰다. 세포 주입 1 주 후 마우스를 바이러스 벡터 2×1011 DVP/마우스로 근육내(i.m.) 처리하였다. 패널 A는 T 세포 전달 후 체중 변화를 나타낸다. 시작 무게는 100%로 정의된다. 패널 B는 마우스 장의 육안 해부학의 예를 나타낸다. 패널 C는 세 가지 파라미터, 즉 소모성 증후군의 유무(0 또는 1), 결장 벽 두께의 범위(정상, 경증, 중등도 및 중증 비후에 대해 0-3) 및 대변(정상. 묽은 변, 설사 및 혈변 각각에 대해 0-3)을 기반으로 축적된 임상 점수를 나타낸다.
도 10. 면역 요법을 위한 융합 단백질 생산. 도 10은 IL27Fc 및 CD24IL27Fc의 생성을 나타낸다. 패널 A의 IL27Fc 융합 단백질은 N에서 C 말단까지 신호 펩티드, EBI3, GGVPGVGVPGV(서열번호 7) "PV" 링커 또는 GGGGSGGGGSGGGGS(서열번호 8) "GS" 링커, p24 및 Fc로 구성된다. 패널 A는 하나는 PV 링커(왼쪽 패널) 및 다른 하나는 GS 링커(오른쪽 패널)인 두 개의 융합 단백질의 생산을 나타낸다. 왼쪽 패널은 서열번호 71의 아미노산 서열을 갖는 융합 단백질을 나타내는 반면, 오른쪽은 서열번호 73의 아미노산 서열과의 융합 단백질을 나타낸다. 단백질은 환원(왼쪽 레인) 및 비-환원(오른쪽 레인) 조건 하에서 SDS-PAGE로 분석하였다. 단백질 수율은 겔 사진 아래에 제공되어 있다. 패널 B는 CD24IL24Fc 융합 단백질의 생성을 나타낸다. CD24IL24Fc 융합 단백질은 N에서 C 말단까지 신호 펩티드, 인간 CD24, EBI3, 링커, PV 링커 펩티드, p28 및 Fc로 구성된다. 패널 B는 서열번호 79의 아미노산 서열을 갖는 CD24IL24Fc 융합 단백질의 생산을 나타낸다. 단백질은 환원(오른쪽 레인) 및 비-환원(왼쪽 레인) 조건 하에서 SDS-PAGE로 분석하였다. 단백질 수율은 겔 사진 아래에 제공되어 있다.
도 11. 도 10의 IL27Fc 융합 단백질의 생체외 활성(패널 A). B6 비장 세포(2×105/웰)를 소정 농도의 IL-27 융합 단백질의 존재 하에 항-CD3(1 μg/ml)로 자극하였다. 상청액을 3 일째에 수득하고 IL-10(패널 A) 및 IFNγ(패널 B) 수준을 분석하였다. 유사한 데이터가 두 번의 독립적인 실험으로부터 얻어졌다.
도 12. 서열번호 71(PV)의 아미노산 서열을 갖는 항-PD-1 및 IL27Fc 융합 단백질을 사용하는 병용 요법은 종양 성장 속도 및 CD25+FoxP3+ Treg의 수를 감소시킨다. 항-PD-1을 8 일째 주입(하루 걸러 한번 100 μg/주사×5 회)한 반면, B16.F10 종양 세포 시험(2.5 μg/마우스 × 매일 5회 주사) 후 11 일째에 PV 주사를 개시하였다. 패널 A는 종양 성장률 감소를 나타낸다. 종양은 캘리퍼스로 일주일에 두 번씩 측정했다. 표시된 데이터는 종양 영역이다. 패널 B는 Treg 감소를 나타낸다. 첫 번째 PV 처리 후 7 일째 말초 혈액을 수득했다. PBL을 CD4, CD25 및 Foxp3에 특이적인 항체로 염색하였다. 표시된 데이터는 CD4 분획 중 % CD25+FoxP3+ 세포이다; 대조군 n=4, 처리군 n=5. *P<0.05, **P<0.01.
도 13. CD24IL27mFcPV 융합 단백질(서열번호 79)을 단독으로 또는 항-PD1 mAb와 함께 투여했을 때 종양 성장 및 생존 연장의 억제. 패널 A는 종양 성장의 억제를 나타낸다. B16 흑색종 세포(2×105/마우스)를 C57BL/6 마우스에 피하 주사하였다. 종양 세포 이식 후 8 일째부터 시작하여 Fc(200 μg x 3), 항-PD-1(200 μg x 3), CD24IL27mFcPV(30 μg x 3) 또는 PD-1+ CD24IL27mFcPV를 마우스에 매일 3회 주사하였다. 종양 면적은 일주일에 두 번씩 측정하였다. P 값은 이원 분산 분석(two way ANOVA analysis) 및 본페로니(Bonferroni)에 의해 사후 검증(post hoc test)으로 결정하였다. 패널 B는 병용 요법이 종양 보유 마우스에서 생존을 연장시킨다는 것을 보여준다. 이 데이터는 2 cm의 종양 직경을 종점으로 사용하여 카플란 마이어(Kaplan Meier) 생존 분석을 사용한다. P 값은 로그-순위 검정(log-rank test)에 의해 결정하였다.
도 14. 면역 조절 장애, 다발성 내분비병증, 장질환 X-연관 증후군(immune dysfunction, polyendocrinopathy, enteropathy, X-linked (IPEX) syndrome))의 마우스 모델에서 IL-27-rAAV의 치료 효과. IPEX 증후군은 남성에서 독점적인 발현이 있는 X-연관 열성 질환이다. Foxp3 유전자의 돌연변이는 마우스와 인간에서 치명적인 자가면역 질환을 유발한다. 대부분의 어린이들은 출생 후 2 년 이내에 사망한다. Foxp3 유전자(Foxp3sf)에서 돌연변이가 있는 Scurfy 마우스가 인간 IPEX와 유사한 병인을 보이기 때문에 이 모델을 사용하여 IL-27-rAAV가 IPEX를 치료할 수 있는지 여부를 결정했다. 패널 A에 나타난 바와 같이, IL-27-rAAV의 단일 주사는 출생 전후기 동안 증가된 체중에 의해 입증된 바와 같이 마우스의 발달을 크게 개선시켰다. 또한 Scurfy 마우스(패널 B)에서 치료 효과가 거의 두 배가 되었다.
달리 정의되지 않는 한, 본원에서 사용된 모든 기술 및 과학 용어는 개시된 방법 및 조성물이 속하는 기술 분야의 숙련자가 일반적으로 알고 있는 것과 동일한 의미를 갖는다. 본 명세서 및 첨부된 청구 범위에서 사용되는 단수 형태는 문맥상 명확하게 다르게 지시하지 않는 한 복수를 포함한다. 따라서, 예를 들어, "펩티드"에 대한 언급은 이러한 펩티드를 다수 포함하며, "펩티드"는 하나 이상의 펩티드 및 본 기술 분야의 숙련자에게 공지된 이의 등가물들에 대한 언급이다.
IL
-27 융합 단백질 조성물
IL-27은 EBV-유도 3(EBI3) 단백질 서브유닛이라 불리는 IL-12 p40-관련 단백질 서브유닛 및 p35-관련 서브유닛인 p28로 이루어진 IL-12 사이토카인 계열의 구성원이다. 일 양태에서, 증식성 질환, 자가면역 질환 및 동종면역 반응을 치료하기 위한 IL-27 융합 단백질은 CD24 세포외 도메인(CD24 ECD), EBI3 폴리펩티드 서브유닛 및 p28 IL-27 폴리펩티드 서브유닛을 포함하며, EBI3 폴리펩티드 서브유닛 및 p28 IL-27 폴리펩티드 서브유닛은 펩티드 링커(PL)에 의해 공유 결합된다. 본원에서 사용된 용어 "IL-27 융합 단백질"은 EBI3, p28 및 CD24 세포외 도메인을 최소한으로 포함하는 본원에 기재된 임의의 융합 단백질을 광범위하게 의미한다. 일부 실시형태에서, 융합 단백질은 변형된 인간 p28 펩티드(서열번호 10) 또는 이의 기능적 변이체를 포함한다. 다른 실시형태에서, 융합 단백질은 야생형 인간 p28 펩티드(서열번호 142, 등록 번호 NP_663634의 아미노산 잔기 28-243) 또는 기능적 변이체를 포함한다. 이하에서 사용되는 펩티드의 "기능적 변이체"는 원래의 펩티드와 아미노산 서열이 다르지만 원래의 펩티드의 생물학적 기능을 유지하는 펩티드이다. 일부 실시형태에서, 기능적 변이체는 원래의 펩티드의 생물학적 활성 또는 구조 기능의 적어도 70%, 75%, 80%, 85%, 90% 또는 95%를 유지한다.
특정 실시형태에서, IL-27 융합 단백질은 아미노에서 카르복시 말단까지 CD24 세포외 도메인, EBI3 폴리펩티드 서브유닛, 펩티드 링커 및 p28 IL-27 폴리펩티드 서브유닛을 포함한다.
또 다른 실시형태에서, IL-27 융합 단백질은 아미노에서 카르복시 말단까지 CD24 세포외 도메인, p28 IL-27 폴리펩티드 서브유닛, 펩티드 링커 및 EBI3 폴리펩티드 서브유닛을 포함한다.
특정 실시형태에서, IL-27 융합 단백질은 CD24 세포외 도메인의 2 내지 10 개 또는 2 내지 5 개의 나란히 배열된 카피를 포함할 수 있다.
또 다른 실시형태에서, IL-27 융합 단백질은 면역글로불린 Fc 도메인을 더 포함한다. 일 실시형태에서, 면역글로불린 Fc 도메인은 IgG1 중쇄 불변 영역을 포함한다. 또 다른 실시형태에서, 면역글로불린 Fc 도메인은 Fcγ 수용체에 대한 결합을 방해하거나 제거하는 돌연변이를 포함한다.
다른 실시형태에서, IL-27 융합 단백질은 융합 단백질을 세포막에 고정하기 위한 GPI-연결 글리칸 또는 막 횡단 도메인을 포함한다.
특정 실시형태에서, IL-27 융합 단백질은 아미노 말단에 CD24 세포외 도메인 및/또는 카르복시 말단에 B7-1 막 관통 도메인-세포질 꼬리를 포함한다.
일부 실시형태에서, IL-27 융합 단백질은 PD-1, PD-L1, PD-L2, B7-1, B7-2, CTLA-4, LAG-3, TIM-3, TIGIT, BTLA, VISTA, 또는 이들의 조합으로부터의 세포외 도메인(extracellular domain, ECD)을 더 포함한다. 특정 실시형태에서, IL-27 융합 단백질은 이들 하나 이상의 ECD의 2 내지 5 개의 나란히 배열된 카피를 포함할 수 있다.
본 개시의 IL-27 융합 단백질은 상이한 구성으로 함께 연결된 다양한 비제한적 공급원(예를 들어, 마우스 및 인간)으로부터의 다양한 구조적 및 기능적 영역을 갖는 모듈러 도메인 구성을 갖는다. IL-27 융합 단백질에 포함되는 예시적인 도메인 및 이의 공급원이 표 1에 나타나 있다. 표 1의 등록 번호와 단백질 서열 이름은 이들 아미노산 서열에 상응하는 핵산 데이터베이스에서 상응하는 핵산 서열을 찾는데 사용될 수 있다. 서열번호 71, 75, 77 및 80의 아미노산 서열을 코딩하는 예시적인 핵산 서열은 각각 서열번호 135, 136, 137 및 138로 제시되어 있다. 이들 구조물 내의 이들 핵산 서열은 본원에 기술된 다른 IL-27 융합 단백질-코딩 구조물의 제조에 사용될 수 있다.
표 1에 기재된 도메인은 서열번호 67 내지 101(표 2 참조)의 아미노산 서열을 포함하지만 이에 제한되지 않는 다양한 구조적 형태로 배열될 수 있다. 본원에서 사용된 바와 같이, 표 1에 열거된 폴리펩티드 또는 폴리펩티드 도메인(들)은 상응하는 서열 번호 및 이의 "기능적 변이체"를 포함한다. 본원에서 사용된 용어 "기능적 변이체(functional variant)"는 이의 기능적 활성을 유지하고 융합 단백질에 포함된 상응하는 야생형 폴리펩티드 또는 폴리펩티드 도메인과 적어도 80%, 85%, 90%, 95%, 98% 또는 99%의 서열 동일성을 갖는 폴리펩티드 또는 폴리펩티드 도메인을 의미하며, 나열된 서열 번호에 대해 아미노 및/또는 카르복시 말단 영역에서 절단된 폴리펩티드 또는 폴리펩티드 도메인을 더 포함하며, 결합된 절단(들)은 표 1에 열거된 각각의 서열 번호의 총 아미노산의 1% 미만, 2% 미만, 3% 미만, 4% 미만, 5% 미만 또는 10% 미만을 차지한다.
서열번호 67 내지 101에 상응하는 아미노산 서열을 함유하는 융합 단백질이 본 개시의 조성물 및 방법에 사용될 수 있다. 또한, 이들 아미노산 서열은 추가로 재배열되거나, 기능적으로 대체 가능한 도메인으로 대체되거나, 또는 서열번호 15 내지 66에 나열된 또는 본 개시에 달리 기술된 하나 이상의 폴리펩티드 도메인과 결합될 수 있다. 융합 단백질의 생물학적 활성 및/또는 발현을 증가시키기 위해 개시된 도메인으로부터의 하나 이상의 아미노산의 결실을 포함하는 추가 변형이 이용될 수 있다. 일반적으로, 각각의 도메인에 대해 적어도 90%의 동일성, 바람직하게는 본원에 기재된 특정 서열에 대해 95% 이상의 동일성이 보존되는 것이 바람직하다. 다음의 실시예 6에서 더 설명되는 생체외 분석은 임상 용도로 융합 단백질 조성물을 최적화하는데 사용될 수 있는 유용한 기능 분석을 제공한다.
CD24는 글리코실-포스파티딜-이노시톨(glycosyl-phosphatidyl-inositol, GPI)-고정 분자로 발현되며 다양한 계통에서 넓은 분포를 갖는다. CD24 세포외 도메인(ECD)은 심하게 당화되고 시알산-결합 면역글로불린-유사 렉틴(sialic-acid-binding immunoglobulin-like lectin, Siglec) 계열의 구성원과 상호 작용하여 염증 반응, 특히 위험-연관 분자 패턴(danger-associated molecular pattern, DAMP)에 대한 조직 손상-유발 면역 반응을 억제하는 것으로 알려져 있다. 예를 들어 Siglec 10에 결합한 CD24는 고-이동성 그룹 박스 1(high mobility group box 1, HMGB1), 열 충격 단백질 70(HSP70) 및 열 충격 단백질 90(HSP90)을 포함하는, CD24의 DAMP와의 연관성을 감소시킨다. 이는 DAMP의 자극 활성을 부정적으로 조절하고 핵 인자-카파 B(NF-κB) 활성화를 억제하는 역할을 한다. 또한 Siglec-G에 결합하는 CD24는 이식편-대 숙주 질환(graft-versus-host disease, GVHD)을 약화시키는 것으로 알려져 있다.
항-염증 활성 외에도 CD24의 세포외 도메인(CD24 ECD)은 본원에 기술된 IL-27 융합 단백질의 발현을 증가시킨다.
CD24 ECD는 인간 CD24 또는 마우스 CD24에서 유래할 수 있는데, 이 둘 모두는 DAMP와의 상호 작용 측면에서 기능적으로 동등한 것으로 보이기 때문이다. 인간 CD24의 세포외 도메인(등록 번호 NP_037362)은 아미노산 서열 SETTTGTSSNSSQSTSNSGLAPNPTNATTKV(서열번호 102), SETTTGTSSNSSQSTSNSGLAPNPTNATTK(서열번호 4), SETTTGTSSNSSQSTSNSGLAPNPTNATT(서열번호 103), SETTTGTSSNSSQSTSNSGLAPNPTNAT(서열번호 104) 또는 이들의 기능적 변이체를 포함할 수 있다. 마우스 CD24의 세포외 도메인은 아미노산 서열 NQTSVAPFPGNQNISASPNPTNATTRG(서열번호 105), NQTSVAPFPGNQNISASPNPTNATTR(서열번호 106), NQTSVAPFPGNQNISASPNPTNATT(서열번호 107), NQTSVAPFPGNQNISASPNPTNAT(서열번호 108), 또는 이들의 기능적 변이체를 포함할 수 있다.
일부 실시형태에서, "CD24 ECD"란 용어는 인간 CD24(서열번호 4)의 전장 세포외 도메인 또는 마우스 CD24의 전장 세포외 도메인(서열번호 3)과 같은 CD24의 전장 세포외 도메인뿐만 아니라 이들의 기능적 변이체를 포함한다. CD24 ECD의 "기능적 변이체"는 적어도 1 또는 2개의 잠재적인 N-연결된 글리코실화 부위 및 전장 야생형 CD24 ECD의 적어도 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12 또는 14 개의 잠재적인 O-결합 글리코실화 부위를 포함하는 10 내지 60 개 아미노산의 폴리펩티드이다.
CD24 ECD는 EBI-PL-p28(또는 p28-PL-EBI)의 N 말단 부분 또는 EBI-PL-p28(또는 p28-PL-EBI)의 C 말단 부분에 융합될 수 있다. 일부 실시형태에서, CD24 ECD는 IL-27 융합 단백질의 N-말단 및 C-말단 모두에 융합될 수 있다. 다른 실시형태에서, IL-27 융합 단백질은 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9 또는 10 개의 나란히 배열된 CD24 ECD의 다수의 카피를 함유할 수 있다.
유연한 펩티드 링커는 IL-27 융합 단백질에 포함된 임의의 하나 이상의 폴리펩티드 도메인 사이에 포함될 수 있다. 유연한 펩티드 링커는 글리신, 알라닌, 프롤린, 세린, 트레오닌 및/또는 메티오닌 잔기와 같은 작은 아미노산을 포함한다. 대안적으로, 펩티드 링커는 IgG 힌지 영역을 포함할 수 있다. 펩티드 링커는 길이가 3 내지 40 개의 아미노산, 바람직하게는 6 내지 15 개의 아미노산일 수 있다. 일반적으로, 펩티드 링커는 단백질의 유연성을 증가시키고, 확장된 형태의 채택을 용이하게 하며 및/또는 입체 장애를 완화시킬 수 있다. 링커의 변형 또는 다른 공지된 링커의 사용은 IL-27 융합 단백질에 포함된 도메인의 안정성 및/또는 기능의 증가를 제공할 수 있다.
바람직한 펩티드 링커는 아미노산인 프롤린, 라이신, 글리신, 알라닌 및 세린, 및 이들의 조합으로 구성된다. 일부 실시형태에서, 펩티드 링커는 다수의 글리신 잔기를 포함하며, 예를 들어, 링커 내의 아미노산의 40% 내지 70% 또는 70% 내지 100%는 글리신 잔기이다. 다른 실시형태에서, 펩티드 링커는 다수의 세린 잔기를 포함하며, 예를 들어, 링커 내의 아미노산의 40% 내지 70% 또는 70% 내지 100%는 세린 잔기(또는 예를 들어, 이러한 양의 알라닌 및/또는 프롤린 잔기)이다. 특정 실시형태에서, 스페이서는 화학식 [(Gly)n-Ser/Ala]m을 갖고, 여기서, n은 1 내지 4이고, m은 1 내지 4 이다. 특정 펩티드 링커는 GGVPGVGVPGV(서열번호 7); GGGGSGGGGSGGGGS(서열번호 8); GGSSRSSSSGGGGSGGGG(서열번호 109); GSGRSGGGGSGGGGS(서열번호 110); GGGGAGGG(서열번호 111); AAAGGMPPAAAGGM(서열번호 112); AAAGGM(서열번호 113); 및 PPAAAGGMM(서열번호 114)을 포함하지만 이에 제한되지 않는다.
다른 실시형태에서, IL-27 융합 단백질은 면역글로불린 Fc 폴리펩티드 도메인을 더 포함한다. Fc 부분은 인간 IgG1, IgG2, IgG3, IgG4 또는 IgA의 힌지 영역 및 CH2 및 CH3 도메인; IgM의 힌지 영역 및 CH3 및 CH4 영역; 또는 IgG1, IgG2, IgG3 및 IgG4의 키메라를 포함할 수 있다. 바람직하게, Fc 수용체 결합 도메인은 인간 기원이다. 다른 실시형태에서, Fc 도메인은 마우스, 래트, 토끼, 원숭이, 침팬지, 햄스터 등을 포함하지만 이에 제한되지 않는 비인간 포유동물에서 유래된 것이다. 특정 실시형태에서, IL-27 융합 단백질은 IgG1 중쇄 불변 영역으로부터의 면역글로불린 Fc 폴리펩티드 도메인을 포함한다.
일부 실시형태에서, Fc영역은 하나 이상의 아미노산 잔기를 상이한 아미노산 잔기(들)로 치환함으로써 Fc 부분의 작동 기능을 변경시킴으로써 변형된다. 예를 들어, Fc 부분이 (Fc 수용체와 같은) 작동 리간드에 대해 변경된 친화력을 갖도록 및/또는 Fc 부분이 Fcγ 수용체(예를 들어, FcγRI, FcγRII, FcγRIII and FcRn)와의 결합이 결여되어 있고 따라서 항체-의존성 세포독성(antibody-dependent cellular cytotoxicity, ADCC)을 매개하는 능력을 상실하거나 현저하게 방해되도록 하나 이상의 아미노산이 상이한 아미노산 잔기로 대체될 수 있다. 본 개시의 IL-27 융합 단백질의 Fc 영역에 포함되는 예시적인 Fcγ 수용체 결합 음성 IgG1 동형 돌연변이는 서열번호 12와 관련하여 돌연변이 L17A, L17F, L18A, L18E, D48A, N80A, N80Q 또는 P114S 중 임의의 하나 또는 이들의 조합에 대응하는 돌연변이를 포함한다. 다른 실시형태에서, 하나 이상의 Fc 영역 아미노산은 결과적인 Fc 부분이 C1q 결합 및/또는 감소된 또는 폐지된 보체 의존성 세포독성(complement dependent cytotoxicity, CDC)을 변경시키거나 보체를 고정하는 Fc 영역의 능력을 변경시키도록 하나 이상의 잔기로 대체될 수 있다.
일부 실시형태에서, IL-27 융합 단백질 또는 IL-27 융합 단백질을 코딩하는 폴리뉴클레오티드는 신호 펩티드 서열, GPI 앵커 단일 서열, 막 횡단 도메인, 표적 도메인 또는 친화성 태그를 각각 코딩하는 추가 아미노산 서열 또는 폴리펩티드 서열을 더 포함할 수 있다.
특정 실시형태에서, 융합 단백질은 GPI 앵커 신호 서열 또는 막 횡단 도메인 서열을 포함할 수 있다. GPI 앵커 신호 또는 막 횡단 도메인 서열의 포함에 의해 세포 원형질 막 상에 IL-27 융합 단백질을 고정시키면, 이들의 생체내 반감기를 증가시키고 국소적으로 높은 농도의 IL-27 융합 단백질을 생산하며, 예를 들어, IL-27 융합 단백질이 환자의 종양 덩어리에 직접 주입될 때 높은 용량의 투여를 가능하도록 이들을 고정시킬 수 있다. 또한, 정제된 GPI-고정 단백질은 사실상 모든 세포의 세포막에 자발적으로 통합하는 능력을 보유한다.
효소, 외피 단백질, 표면 항원 및 접착 분자를 포함하는 광범위한 세포-표면 단백질이 GPI 앵커를 통해 원형질 막에 부착된다. 본원에서 사용된 용어 "GPI"는 글리코이노시톨 인지질(glycoinositol phospholipid), 특히 글리코실포스파티딜이노시톨(glycosylphosphatidlyinositol)과 관련하여 사용된다. 이러한 인지질-유사 앵커는 단백질 기능에 관계 없이 막 부착을 위한 공통 구조를 갖는다. GPI 고정 유닛은 포스포에탄올아민을 함유하는 선형 글리칸, 세 개의 만노스 잔기, 및 이노시톨 인지질에 연결된 비-아세틸화 글루코사민으로 구성된다. GPI는 번역 후에 추가되는 지질 앵커이고; 따라서 다른 막 횡단 도메인을 갖고 특정 세포질 확장에 연결되는 기존의 폴리펩티드 앵커와는 달리 GPI 앵커는 공통 지질 구조를 사용하여 막에 부착되며, 이는 연결된 단백질과 관계 없다.
GPI 부착 부위 및 바로 뒤의 잔기는 일반적으로 Ala, Asn, Asp, Gly, Cys 또는 Ser와 같은 작은 아미노산이다. 부착 잔기 뒤에, 부착 점 이후의 7 내지 10 개의 잔기로 시작하여 대략 10 내지 20 개 잔기의 소수성 서열이 존재한다. GPI 앵커 신호 서열은 다른 GPI 비-고정 단백질의 C-말단에 성공적으로 조작되었으며, 이러한 GPI 고정 단백질은 세포 표면에 코팅되어 기능적이다.
GPI 앵커 신호 서열은 알칼리성 포스파타제, 아세틸콜린에스테라제, 5' 뉴클레오티다제(CO73)와 같은 효소; 림프구 기능-관련 항원(lymphocyte function-associated antigen, LFA-3; CD58) 및 신경 세포 접착 분자(neural cell adhesion molecule, NCAM)와 같은 접착 분자; 붕괴 촉진 인자(DAF 또는 CD55)와 같은 보체 조절 단백질, 또는 Fcγ 수용체 유형 III B(Fc-γ-RIII 또는 CD16b), Thy-1(CD90), Qa-2, Ly-6A 및 반응성 용해의 막 억제제(MIRL 또는 CD59)와 같은 것들을 포함하지만 이에 제한되지 않는 임의의 GPI-고정 단백질로부터 수득될 수 있다.
GPI 앵커는, C-말단 GPI-부착 신호가 GPI 잔기의 첨가와 동시에 절단되는 반응인 트랜스아미드화(transamidation)에 의해 소포체(endoplasmic reticulum) 내의 단백질에 부착된다. 따라서, GPI 앵커 서열은 IL-27 융합 단백질의 C-말단에 포함될 수 있다. 천연 CD24 단백질은 GPI 고정 단백질이다. 따라서, 일 실시형태에서, CD24 프로-펩티드 서열로부터의 CD24 GPI 앵커 신호 서열은 C-말단에서 IL-27 융합 단백질의 핵산 코딩 영역에 포함된다. 특정 실시형태에서, 신호 서열을 제외한 CD24 프로-펩티드의 전체 부분은 IL-27 융합 단백질의 C-말단에 융합된다(예를 들어, 서열번호 60, 서열번호 62).
일부 실시형태에서, 막 횡단 도메인은 세포로의 안정적인 부착을 위해 IL-27 융합 단백질에 도입될 수 있다. 일 실시형태에서, 이종 막 횡단 도메인은 IL-27 융합 단백질의 C-말단에 포함된다. 막 횡단 도메인은 다른 공지된 막 횡단 단백질 상에서 모델링되거나 고도의 친유성(lipophilicity)을 갖는 인위적으로 설계된 펩티드를 포함할 수 있다.
예시적인 막 횡단 도메인은 마우스 B7-1(PPDSKNTLVLFGAGFGAVITVVVIVVI, 서열번호 63), 인간 B7-1(LLPSWAITLISVNGIFVICCL, 서열번호 64), P-카데린(FILPILGAVLALLLLLTLLALLLLV, 서열번호 115), CD2(IYLIIGICGGGSLLMVEFVALLVFYIT, 서열번호 116), CD40(ALVVIPIIFGILFAILLVLVFT, 서열번호 117), 컨택틴(Contactin )(ISGATAGVPTLLLGLVLPAP), 서열번호 118), IL-4 수용체(LLLGVSVSCIVILAVCLLCYVSIT, 서열번호 119), 만노스 수용체(VAGVVIIVILLILTGAGLAAYFFY, 서열번호 120), CSF-1 수용체(FLFTPVVVACMSIMALLLLLLLLLL, 서열번호 121), PDGFβ 사슬 수용체(VVVISAILALVVLTIISLIILIMLWQKKPR, 서열번호 122), PDGFα 사슬 수용체(ELTVAAAVLVLLVIVSISLIVLVVTW, 서열번호 123), P-셀렉틴(LTYFGGAVASTIGLIMGGTLLALL, 서열번호 124), TNFR-1(TVLLPLVIFFGLCLLSLLFIGLM, 서열번호 125) 및 VCAM-1(LLVLYFASSLIIPAIGMIIYFAR, 서열번호 126)에서 유래된 것들을 포함하지만 이에 제한되지는 않는다.
일 실시형태에서, IL-27 융합 단백질은 C-말단에서 공동 자극 단백질인 B7-1로부터의 막 횡단 도메인 및 세포질 꼬리(cytoplasmic tail, CT)를 함유한다(Pan et al., Mol. Ther., vol. 20(5):927-937, 2012). B7-1 막 횡단 도메인(TM)/세포질 꼬리(CT)에 상응하는 예시적인 단백질 서열은 서열번호 65(마우스) 및 서열번호 66(인간)에 제시되어 있다.
세포 표적 도메인은 세포형 특이적 또는 세포 분화 특이적 표적화를 부여하기 위해 IL-27 융합 단백질에 포함될 수 있다. 표적 도메인은 항체 또는 항체 유도체, 펩티드 리간드, 수용체 리간드, 수용체 단편, 호르몬 등을 포함할 수 있다. 일부 실시형태에서, 표적 도메인은 파지 디스플레이 라이브러리(phage display library)로부터의 항체-유래 또는 펩티드-유래 표적 도메인을 포함한다. 결합 세포 표면 분자 또는 수용체에 대해 조작된 파지 디스플레이 라이브러리는 본 기술 분야의 숙련자에게 잘 알려져 있다.
예시적인 항체 또는 항체 유래 표적 도메인은 IgG, 항체 가변 영역; 분리된 CDR 영역; 항원 결합 부위를 형성하기 위해 두 도메인 사이의 결합을 가능하게 하는 펩티드 링커에 의해 연결된 VH 및 VL 도메인을 포함하는 단일 쇄 Fv 분자(scFv); 이중 특이성 scFv 다이머; CH3 도메인에 결합된 scFv, 단쇄 다이아바디(diabody) 단편, VH 또는 VL 도메인으로 이루어진 dAb 단편을 포함하는 미니바디(minibody); VL, VH, CL 및 CH1 도메인으로 이루어진 Fab 단편; 항체 힌지 영역으로부터의 하나 이상의 시스테인을 포함하는, 중쇄 CH1 도메인의 카르복실 말단에서 약간의 잔기의 첨가에 의해 Fab 단편과는 다른 Fab' 단편; 불변 도메인의 시스테인 잔기가 자유 티올 그룹을 갖는 Fab' 단편인 Fab'-SH 단편; 두 개의 연결된 Fab 단편을 포함하는 2가 단편인 F(ab')2; VH 및 CH1 도메인으로 이루어진 Fd 단편; 이의 유도체 및 항원 결합 기능을 보유하는 임의의 다른 항체 단편(들)을 포함한다. Fv, scFv 또는 다이아바디 분자는 VH 및 VL 도메인을 연결하는 디설파이드 브리지(disulphide bridge)의 포함에 의해 안정화될 수 있다. 항체-유래 표적화 작용제를 사용할 때, 내부의 하나 또는 모든 표적 도메인 및/또는 Fc 영역은 본 기술 분야의 숙련자에게 공지된 방법을 사용하여 "인간화"될 수 있다.
다른 실시형태에서, 친화성 태그는 친화성 크로마토그래피에 의한IL-27 융합 단백질 및/또는 목표 단백질의 정제를 용이하게 위해 포함될 수 있다. 친화성 태그는 글루타티온 S-트랜스퍼라제(glutathione S-transferase, GST), 히스티딘 태그(예를 들어, 6xHis), 말토스 결합 단백질(maltose binding protein, MBP), 단백질 A, 티오레독신(thioredoxin), 유비퀴틴(ubiquitin), 비오틴(biotin), 칼모듈린 결합 펩티드(calmodulin binding peptide), 스트렙타비딘 태그(streptavidin tag), 및 FLAG 옥타펩티드 태그(FLAG octapeptide tag), 헤마글루티닌A(hemaglutinin A(HA) 태그, myc tag 등 다양한 면역원성 펩티드 tag를 포함하는, 본 기수 분야의 숙련자에게 공지된 친화성 태그를 포함할 수 있지만 이에 제한되지 않는다.
본 개시에서 프로그램된 세포 사멸 단백질 -1(PD-1) 차단과 함께 IL-27 융합 단백질은 항-종양 활성 및 자가면역 또는 동종면역 반응을 상승적으로 증가시킬 수 있다는 것을 예기치 않게 확인하였다. 따라서, 일 양태에서, 증식성 질환, 자가면역 질환 및 동종면역 반응을 치료하기 위한 약학적 조성물은 본 개시에 따른 IL-27 융합 단백질 및 항-PD작용제, 항-PD-L1 작용제, 항-PD-L2 작용제 또는 이들의 조합으로 이루어진 군에서 선택되는 하나 이상의 구성원을 포함한다.
PD-1 및 이의 그 리간드는 면역 반응을 부정적으로 조절할 수 있다. PD-1은 B7 계열의 구성원인 프로그램된 세포 사멸 리간드 2(PD-L1)와 프로그램 세포 사멸 리간드 2(PD-L2)의 두 가지 리간드를 갖는다. PD-L1 단백질은 LPS 및 GM-CSF 처리에 반응하여 그리고 TCR 및 B 세포 수용체 신호 전달 과정에서 대식세포 및 수지상 세포(DC)상에서 상향 조절되는 반면, 휴식 마우스에서 PD-L1 mRNA는 심장, 폐, 흉선, 비장, 신장에서 검출될 수 있다. PD-L1은 IFN-γ 처리시 PA1 골수종, P815 비만세포종 및 B16 흑색종을 포함하는 거의 모든 쥐 종양 세포주에서 발현된다. PD-L1은 또한 공동 자극 단백질인 B7-1에 결합하는 것으로 알려져 있다. 이러한 결합 상호 작용은 T 세포 활성화 및 증식뿐만 아니라 사이토카인 생산을 억제할 수 있다. PD-L2 발현은 더욱 제한적이고 주로 DCs 및 몇몇 종양 세포주에 의해 발현된다.
PD-1 활성은 PD-1에 선택적으로 결합하고 PD-1의 활성을 차단하고 또는 PD-L1 또는 PD-L2에 선택적으로 결합하고 PD-1에 대한 PD-L1 또는 PD-L2의 결합을 방지하는 항체에 의해 방해될 수 있다. 따라서, 특정 실시형태에서, 항-PD-1 작용제, 항-PD-L1 작용제 또는 항-PD-L2 작용제는 항체이다. 예시적인 항-PD-1 항체는 BMS-936558(Bristol-Meyers Squibb사에 의해 개발 중이고 MDX-1106 또는 ONO-4538으로도 알려짐), CT-011 또는 피딜리주맙(pidilizumab, CureTech사에 의해 개발 중임), MK-3475(Merck사에 의해 개발 중이고 SCH 900475로도 알려짐)을 포함하지만 이에 제한되지는 않는다. 예시적인 항-PD-L1 항체는 MPDL3280A 또는 RG7446(Genentech/Roche사에 의해 개발 중임) 및 인간 PD-L1에 친화성을 갖고 결합하고 PD-1 및 B7-1 모두에 대한 결합을 차단하는 완전 인간 면역글로불린 G4(IgG4) mAb인 BMS-936559(MDX-1105; Bristol-Myers Squibb)를 포함한다.
일부 실시형태에서, 항-PD-1 작용제, 항-PD-L1 작용제 또는 항-PD-L2 작용제는 PD-1 mRNA, PD-L1 mRNA 또는 PD-L2 mRNA를 표적으로 하는 siRNA이다. siRNA는 mRNA의 서열-특이적 전사-후 유전자 침묵을 유도하도록 조작할 수 있는 이중 가닥 RNA이다. 합성적으로 생산된 siRNA는 다이서(Dicer) 효소에 의해 세포 내에서 정상적으로 처리되는 siRNA 유형을 구조적으로 모방한다. 합성 siRNA는 잘 알려진 알고리즘을 사용하여 설계되고 기존의 DNA/RNA 합성기를 사용하여 합성될 수 있다. 또한, siRNA는 적합한 발현 벡터로부터 발현될 수 있다. 발현 벡터로부터 발현될 때, 발현 벡터는 세포 내에서 표적화된 siRNA로 가공되는 짧은 이중 가닥 헤어핀-유사 RNA(shRNA)를 전사하도록 조작된다. 합성 shRNA는 잘 알려진 알고리즘을 사용하여 설계되고 기존의 DNA/RNA 합성기를 사용하여 합성될 수 있다.
다른 실시형태에서, 항-PD-1 작용제, 항-PD-L1 작용제 또는 항-PD-L2 작용제는 PD-1, PD-L1 또는 PD-L2의 우성 음성 돌연변이 형태이다. 본원에서 사용된 용어 "우성 음성 돌연변이(dominant negative mutant)"는 정상 결합 파트너 중 하나에 돌연변이 단백질의 결합을 간섭하는 돌연변이 비-항체 단백질을 의미하고, 또는 상기 돌연변이는 자신의 결합 파트너에 결합함으로써, 생성된 복합체가 생물학적 활성이 결여되도록 한다. 예를 들어, 우성-음성 PD-1은 더 이상 PD-L1 또는 PD-L2에 결합될 수 없는 돌연변이를 가질 수 있다. 대안적으로, 우성-음성 단백질은 이의 표적에 결합할 수 있지만, 생성된 복합체는 신호 전달이 결여된다. 예시적인 우성 음성 돌연변이는 AMP-224(Glaxo Smith Kline사 및 Amplimmune사에 의해 공동 개발 중임)이다. AMP-224는 PD-L2의 세포외 도메인 및 인간 IgG의 Fc 영역으로 구성된 재조합 융합 단백질이다.
특정 실시형태에서, 본 개시의 IL-27 융합 단백질(또는 상응하는 폴리뉴클레오티드)은 상응하는 세포질 꼬리 없이 PD-1, PD-L1 또는 PD-L2의 세포외 도메인을 추가로 포함하거나 이를 코딩할 수 있다. 대안적으로, 별도의 우성 음성 항-PD-1 단백질, 항-PD-L1 단백질 또는 항-PD-L2 단백질(또는 이의 융합 단백질)이 IL-27 융합 단백질과 함께 공동 투여될 수 있고, 또는 이러한 우성 음성 단백질을 발현하는 별도의 폴리뉴클레오티드가 폴리뉴클레오티드를 발현하는 IL-27과 함께 공동 투여될 수 있다.
일부 실시형태에서, IL-27 융합 단백질은 IL-27 및 항-PD-1 항체, 항-PD-L1 항체, 항-PD-L2 항체 또는 이의 단편 간의 융합을 포함한다. 다른 실시형태에서, IL-27 융합 단백질은 항-PD-1 항체, 항-PD-L1 항체, 항-PD-L2 항체 또는 이의 단편에 화학적으로 연결된다.
일부 실시형태에서, 항-PD-1 작용제, 항-PD-L1 작용제 또는 항-PD-L2 작용제는 PD-1에 결합하지만 PD를 활성화하지 않는 PD-L1 또는 PD-L2의 소분자 또는 펩티드 모방체이다.
PD-1 길항제는 미국 특허 공개 공보 2015/0232555, 2015/0216970, 2015/0210772, 2015/0210769, 2015/0203579, 2013/0280265, 2013/0237580, 2013/0230514, 2013/0109843, 2013/0108651, 2013/0017199, 2012/0251537, 2012/0039906 2011/0271358, US 2011/0171215 및 EP 2170959B1에 개시된 것들을 포함한다.
본 개시의 IL-27 융합 단백질 중 상기한 구조적 및/또는 기능적 도메인 중 임의의 것들은 서로에 대해 각각의 펩타이드 부분의 독립적인 접힘을 용이하게 하고 융합 단백질 내의 개별 펩타이드 부분이 서로 간섭하지 않는 것을 보장하도록 본원에 기재된 하나 이상의 유연한 펩티드 링커에 의해 서로 분리될 수 있다.
IL
-27 융합 단백질-코딩 폴리뉴클레오티드
또 다른 양태에서, 본 개시는 본원에 기재된 바와 같은 IL-27 융합 단백질을 코딩하는 폴리뉴클레오티드를 제공한다. 항-PD-1 작용제, 항-PD-L1 작용제 및/또는 항-PD-L2 작용제를 코딩하는 추가의 폴리뉴클레오티드는 IL-27 융합 단백질-코딩 폴리뉴클레오티드와 함께 공동 투여될 수 있다.
일 실시형태에서, 발현 벡터는 세포 내에서 융합 단백질(및/또는 PD-1/PD-L1/PD-L2 작용제(들))를 발현시키기에 적합한 하나 이상의 조절 서열에 작동 가능하게 연결된 IL-27 융합 단백질(및/또는 PD-1/PD-L1/PD-L2 작용제)를 코딩한다.
특정 실시형태에서, IL-27 융합 단백질을 코딩하는 발현 벡터를 단독으로 또는 본 개시의 PD-1/PD-L1/PD-L2 작용제와 함께 환자에게 직접 투여하여 생체내에서 IL-27 융합 단백질(및 PD-1/PD-L1/PD-L2 작용제)을 발현시킨다. "생체내 발현 벡터(in vivo expression vector)"라는 용어는 본 개시의 IL-27 융합 단백질 또는 PD-1/PD-L1/PD-L2 작용제를 코딩하는 폴리뉴클레오티드를, 숙주 세포 내에서 폴리뉴클레오티드(들)로부터의 생체내 발현에 적합한 형태로 포함하는 바이러스 또는 비-바이러스 벡터를 의미한다.
다른 실시형태에서, 증식성 질환, 자가면역 질환 또는 원치 않는 동종면역 반응을 나타내는 개체로의 생체외 투여를 위한 안정적인 또는 일시적인 세포주를 생산하도록 세포는 IL-27 융합 단백질을 코딩하는 하나 이상의 발현 벡터 단독 또는 본 개시의 항-PD-1 작용제, 항-PD-L1 작용제 및/또는 항-PD-L1 작용제를 코딩하는 하나 이상의 발현 벡터와의 조합에 의해 형질감염되거나 감염될 수 있다.
핵산 서열은 다른 핵산 서열과 기능적 관계에 있을 때 이에 "작동 가능하게 연결"된다. 예를 들어, 전 서열(presequence)또는 신호 펩티드에 대한 DNA는 폴리펩티드의 분비에 참여하는 전구 단백질(preprotein)로서 발현되는 경우 폴리펩티드에 대한 DNA에 작동 가능하게 연결되고; 프로모터 또는 인핸서는 서열의 전사에 영향을 미치는 경우 코딩 서열에 작동 가능하게 연결되고; 또는 리보솜 결합 부위가 번역을 용이하게 하도록 위치되는 경우 코딩 서열에 작동 가능하게 연결된다. 일반적으로, "작동 가능하게 연결된"은 연결된 DNA 서열이 연속적이며, 신호 펩티드의 경우 인접하고 판독 단계에 있는 것을 의미한다. 그러나 인핸서는 인접하지 않아도 된다. 연결(linking)은 편리한 제한 사이트에서 라이게이션(ligation)에 의해 수행된다. 이러한 부위가 존재하지 않는 경우, 합성 올리고뉴클레오티드 어댑터 또는 링커가 통상적인 관행에 따라 사용될 수 있다.
IL-27 융합 단백질을 발현하기 위한 핵산 서열은 아미노 말단 신호 펩티드 서열(예를 들어, 서열번호 1 및 서열번호 2)을 포함하고, 이는 성숙 단백질로부터 제거된다. 신호 펩티드 서열이 발현 수준에 영향을 줄 수 있기 때문에, 폴리뉴클레오티드는 MELGLSWIFLLAILKGVQC(서열번호 127); MELGLRWVFLVAILEGVQC(서열번호 128); MKHLWFFLLLVAAPRWVLS(서열번호 129); MDWTWRILFLVAAATGHSQ(서열번호 130), MDWTWRFLFVVAAATGVQS(서열번호 131), MEFGLSWLFLVAILKGVQC(서열번호 132) 및 MDLLHKNMKHLWFFLLLVAAPRWVLS(서열번호 133)를 포함하지만 이에 제한되지 않는 다양한 N-말단 신호 펩티드 서열을 코딩할 수 있다.
또한, 상기한 바와 같이, GPI-연결 IL-27 융합 단백질을 발현하기 위한 핵산 서열은 C-말단 GPI 앵커 신호 서열을 포함할 것이며, 이는 성숙 단백질로부터 제거된다. 예시적인 GPI 앵커 신호 서열은 알칼라인 포스파타제, 아세틸콜린에스테라제, 5' 뉴클레오티다제(CO73)와 같은 효소; 림프구 기능-관련 항원(lymphocyte function-associated antigen, LFA-3; CD58) 및 신경 세포 접착 분자(neural cell adhesion molecule, NCAM)와 같은 접착 분자; 붕괴 촉진 인자(DAF 또는 CD55) 와 같은 보체 조절 단백질, 또는 Fcγ 수용체 유형 III B(Fc-γ-RIII 또는 CD16b), Thy-1(CD90), Qa-2, Ly-6A 및 반응성 용해의 막 억제제(MIRL 또는 CD59)와 같은 것들을 포함하지만 이에 제한되지 않는 천연 GPI-연결 단백질에 상응하는 단백질 서열로부터 수득될 수 있다.
발현 벡터의 설계는 형질전환될 숙주 세포의 선택, 목적하는 단백질의 발현 수준 등과 같은 인자에 좌우될 수 있음을 본 기술 분야의 숙련자는 알 것이다. 본 개시의 발현 벡터는 숙주 세포에 도입됨으로써, 본 개시의 IL-27 융합 단백질 및 항-PD-1 작용제, 항-PD-L1 작용제 및/또는 항-PD-L2 작용제와 같은 단백질 또는 펩티드를 생산할 수 있다.
상기한 "조절 서열"은 하나 이상의 숙주 유기체에서 작동 가능하게 연결된 코딩 서열의 발현에 필요한 DNA 서열을 의미한다. "조절 서열(regulatory sequence)"이란 용어는 프로모터, 인핸서 및 다른 발현 조절 요소(예를 들어, 폴리아데닐화 신호)를 포함하는 것으로 의도된다. 조절 서열은 많은 유형의 숙주 세포 내에서 뉴클레오티드 서열의 구성적 발현을 지시하는 서열 또는 특정 숙주 세포 내에서만 뉴클레오티드 서열의 발현을 지시하는 서열(예를 들어, 조직-특이적 조절 서열)을 포함한다. 발현 벡터는 일반적으로 전사 종결 서열을 포함하고, mRNA 안정성에 긍정적인 영향을 미치는 하나 이상의 요소를 추가로 포함할 수 있다.
발현 벡터는 IL-27 융합 단백질의 발현을 지시하기 위해 프로모터 및/또는 인핸서를 포함하는 하나 이상의 전사 조절 요소를 함유한다. 프로모터는 전사 개시 부위와 관련하여 비교적 고정된 위치로부터 전사를 개시하는 기능을 하는 DNA 서열을 포함한다. 프로모터는 RNA 폴리머라제와 전사 인자의 기본적인 상호 작용에 필요한 핵심 요소를 포함하며, 다른 상류 요소 및 응답 요소와 함께 작동할 수 있다.
본원에서 사용된 용어 "프로모터(promoter)"는 이의 가장 넓은 맥락에서 취해져야 하고, 정확한 전사 개시를 위한 TATA 박스 또는 개시제 요소를 포함하여, 게놈 유전자 또는 키메라 TRE로부터의 전사 조절 요소(transcriptional regulatory element, TRE)를 포함하며, 이는 발달 및/또는 외부 자극 및 트랜스-작용 조절 단백질 또는 핵산에 반응하여 작동 가능하게 연결된 유전자의 활성화 또는 억제를 조절하는 TRE(즉, 상류 활성화 서열, 전사 인자 결합 부위, 인핸서 및 사일런서)를 갖거나 갖지 않는다. 프로모터는 게놈 단편을 함유할 수 있거나 또는 함께 결합된 하나 이상의 TRE의 키메라를 함유할 수 있다.
바람직한 프로모터는 해당 표적 세포 내에서 발현을 지시할 수 있는 프로모터이다. 프로모터는 구성적인 프로모터(예를 들어, HCMV, SV40, 신장 인자(elongation factor)-1α(EF-1α)) 또는 해당 특정 세포 유형에서 특이적 발현을 나타내는 프로모터를 포함할 수 있다. 인핸서는 일반적으로 전사 개시 부위로부터 기능을 하는 DNA 서열을 말하며 전사 단위에 대해 5' 또는 3'일 수 있다. 또한, 인핸서는 코딩 서열 내뿐만 아니라 인트론 내에 존재할 수 있다. 이들은 일반적으로 길이가 10 내지 300 bp이며 cis에서 기능한다. 인핸서는 근처의 프로모터로부터의 전사를 증가 및/또는 조절하는 기능을 한다. 바람직한 인핸서는 엑소좀 발현 세포 내에서 높은 발현을 유도하는 인핸서이다.
프로모터 및/또는 인핸서는 광 또는 특정 화학 유도제에 의해 특이적으로 활성화될 수 있다. 일부 실시형태에서, 예를 들어, 테트라사이클린 또는 덱사메타손의 투여에 의해 조절되는 유도성 발현 시스템이 사용될 수 있다. 다른 실시형태에서, 유전자 발현은 감마 조사 및 외부 방사선 치료(external beam radiotherapy, EBRT) 또는 알킬화 화학요법 약물을 포함하는 방사선 노출에 의해 강화될 수 있다.
세포 또는 조직-특이적 전사 조절 요소(TRE)는 발현 벡터에 통합되어 발현을 원하는 세포 유형으로 제한할 수 있다. 발현 벡터는 하나 이상의 세포 유형에서 IL-27 융합 단백질의 발현을 촉진하도록 설계될 수 있다. Pol III 프로모터(H1 또는 U6)는 특히 shRNA를 발현하는데 유용하다.
또한, 발현 벡터는 리포터 생성물 또는 선별 마커를 코딩하는 핵산 서열을 더 포함할 수 있다. 유전자가 세포에 전달되어 발현되고 있는지 여부를 결정하기 위해 리포터 제품을 사용할 수 있다. 예시적인 마커 유전자는 β-갈락토시다제를 코딩하는 대장균 lacZ 유전자 및 녹색 형광 단백질을 포함한다.
특정 실시형태에서, 발현 벡터는 IL-27 융합 단백질 및 PD-1, PD-L1 및/또는 PD-L2를 표적으로 하는 siRNA 모두를 발현하도록 조작될 수 있다. siRNA는 mRNA의 서열-특이적 전사-후 유전자 침묵을 유도하도록 조작할 수 있는 이중 가닥 RNA이다. 합성적으로 생산된 siRNA는 다이서(Dicer) 효소에 의해 세포 내에서 정상적으로 처리되는 siRNA 유형을 구조적으로 모방한다. 발현 벡터로부터 발현될 때, 발현 벡터는 세포 내에서 표적화된 siRNA로 가공되는 짧은 이중 가닥 헤어핀-유사 RNA(shRNA)를 전사하도록 조작된다. 합성 siRNA 및 shRNA는 잘 알려진 알고리즘을 사용하여 설계되고 기존의 DNA/RNA 합성기를 사용하여 합성될 수 있다.
IL-27 융합 단백질 및 PD-1, PD-L1 및/또는 PD-L2를 표적으로 하는 적합한 shRNA를 공동 발현시키기 위해, 적당한 스플라이스 공여체 및 스플라이스 수용체 서열을 IL-27 융합 단백질 전사체(IL-27 융합 단백질을 생산) 및 shRNA 전사체 모두를 발현하도록 포함될 수 있고, 이에 따라 IL-27 융합 단백질 코딩 서열은 shRNA 코딩 서열의 상류(5' 말단)에 위치한다. 대안으로, shRNA가 IL-27 코딩 서열의 상류에 포함될 때, 내부 리보솜 결합 서열(internal ribosome binding sequence, IRES) 또는 2A 펩티드 서열이 shRNA 서열과 IL-27 융합 단백질의 하류 코딩 서열 사이에 삽입될 수 있다.
IRES는 mRNA의 5' 말단에 있을 필요가 없는 리보솜이 결합할 수 있는 구조를 제공한다. 따라서 리보솜은 하나의 mRNA로부터 하나 이상의 폴리펩티드가 생산되도록 mRNA 내의 두 번째 개시 코돈에서 번역을 시작하도록 지시할 수 있다. 2A 펩티드는 2A 사이트의 상류 및 하류의 펩티드의 동시 번역 자가-절단(self-cleavage)을 매개하는 짧은 서열을 포함함으로써, 동량의 단일 전사체로부터 두 개의 상이한 단백질을 생산할 수 있게 한다. CHYSEL은 번역되고 있는 림프구 리보솜이 성장하고 있는 폴리펩티드 사슬을 방출하도록 유도하는 2A 펩티드의 비제한적인 예로서, mRNA로부터 분리되지 않고 합성한다. 리보솜은 계속해서 번역되어 두 번째 폴리펩티드를 생산한다. 필요한 것은 2A의 코딩 서열을 복제한 다음, 공동 발현하고자 하는 두 유전자 사이의 프레임 내에서 다음 FMDV 단백질(예를 들어, 2B)의 첫 번째 아미노산에 대한 코돈을 복제하는 것이다. 2A의 마지막 아미노산(Gly)과 2B의 첫 번째 아미노산(Gly) 사이의 펩티드 결합의 합성은 생략되어, 18aa(2A)의 C-말단 꼬리를 갖는 상류 단백질 및 N-말단(VKQTLNFDLLKLAGDVESNPGP, 서열번호 134)에서 Pro를 갖는 하류 단백질을 생성한다.
일 실시형태에서, IL-27 융합 단백질 서열과 PD-1, PD-L1 또는 PD-L2에 대한 코딩 서열 사이에 내부 리보솜 결합 서열(IRES) 또는 2A 펩티드 서열(예를 들어, CHYSEL)을 삽입함으로써, IL-27 융합 단백질은PD-1, PD-L1 및/또는 PD-L2에 대한 재조합 항체와 함께 공동 발현된다. 본 실시형태에서, IL-27 융합 단백질은 재조합 항체 서열의 상류 또는 하류에 포함될 수 있다. 또 다른 실시형태에서, 발현 벡터는 두 개의 별개의 발현 카세트를 포함하며, 각각은 그 자체의 조절 요소 세트에 의해 조절된다. 대안적으로, 동시 투여를 위해 제 1 발현 벡터가 IL-27 융합 단백질을 코딩하고 하나 이상의 추가 현 벡터가 PD-1, PD-L1 및/또는 PD-L2에 대한 재조합 항체(또는 PD-1, PD-L1 및/또는 PD-L2에 대해 지시된 shRNA)를 코딩하는 다수의 상이한 발현 벡터가 구성될 수 있다.
발현 벡터는 바이러스 벡터 또는 비-바이러스 벡터를 포함할 수 있다. 바이러스 벡터는 아데노-관련 바이러스(AAV), 아데노바이러스, 헤르페스바이러스(herpesvirus), 우두 바이러스(vaccinia virus), 폴리오바이러스(poliovirus), 폭스바이러스(poxvirus), 레트로바이러스(HIV-1 및 HIV-2와 같은 렌티바이러스를 포함함), 신드비스(Sindbis) 및 그 밖의 RNA 바이러스, 알파바이러스(alphavirus), 아스트로바이러스(astrovirus), 코로나바이러스(coronavirus), 오르토믹소바이러스(orthomyxovirus), 파포바바이러스(papovavirus), 파라믹소바이러스(paramyxovirus), 파르보바이러스(parvovirus), 피코르나바이러스(picornavirus), 토가바이러스(togavirus) 등으로부터 유래할 수 있다. 비-바이러스 벡터는 바이러스로 유도된 성분(예를 들어, 캡시드 및/또는 외피 단백질)으로 패키징되지 않은 간단히 "노출된(naked)" 발현 벡터이다.
특정 경우에, 이들 벡터는 바이러스 벡터 본래의 또는 바이러스 벡터 내부로 조작된 표적 특성을 사용하여 특정 질환 및 세포 집단을 표적으로 하도록 조작될 수 있다. 특정 세포는 폴리뉴클레오티드의 전달뿐만 아니라 발현을 위해 "표적화"될 수 있다. 따라서, 이러한 경우, "표적화(targeting)"라는 용어는 캡시드, 외피 단백질, 또는 특정 세포에 전달하기 위한 항체의 형태인 내인성 또는 이종 결합제의 사용, 특정 부분 집합의 세포에 대한 발현을 제한하기 위한 조직-특이적 조절 요소의 사용, 또는 둘 모두를 기반으로 할 수 있다.
어떤 경우, 재조합 바이러스 입자의 생산은 하나 이상의 "헬퍼 기능"을 필요로 한다. "헬퍼 기능"은 바이러스 벡터의 복제 또는 패키징에 필요한 기능을 코딩하는 핵산 서열이다. 헬퍼 기능은 자연 발생 핵산 서열뿐만 아니라 이로부터의 돌연변이된 또는 변형된 핵산 서열을 포함할 수 있다. 일반적으로, 헬퍼 기능(들)은 필요한 헬퍼 기능을 제공하는 폴리펩티드의 발현을 조절하는 발현 조절 서열에 작동 가능하게 연결된 뉴클레오티드 서열을 포함한다. 재조합 바이러스에 필요한 헬퍼 기능은 재조합 바이러스의 종류에 따라 다르다. 통상적으로 사용되는 재조합 바이러스에 대해 요구되는 헬퍼 기능은 본 기술 분야에 공지되어 있다.
특정 바람직한 실시형태에서, IL-27 융합 단백질은 아데노-관련 바이러스(AAV) 벡터로부터 전달된다. AAV는 세포 내에서의 복제를 위해 아데노바이러스 또는 헤르페스 바이러스 또는 적절한 헬퍼 기능과 같은 두 번째 바이러스의 존재에 의존하는 작은(20-26 nm) 복제-결함, 비-외피형 바이러스이다. AAV는 질병을 일으키는 것으로 알려지지 않았고, 아주 약한 면역 반응을 유도한다. AAV는 분열 세포 및 비-분열 세포 모두를 감염시킬 수 있으며 이의 게놈을 숙주 세포의 게놈으로 포함할 수 있다. 30 가지 이상의 자연적으로 발생하는 AAV의 혈청형을 이용할 수 있다. AAV 캡시드의 많은 천연 변이체가 존재하므로, 세포 전달 표적에 특히 적합한 특성을 갖는 AAV 벡터의 확인 및 사용이 가능하다. AAV 벡터는 상대적으로 독성이 없고, 효율적인 유전자 전달을 제공하며 특정 목적에 맞게 쉽게 최적화될 수 있다. AAV 바이러스는 면역원성을 최소화하고, 안정성, 핵으로 전달 등을 위해, IL-27 융합 단백질의 세포 특이적 전달을 위한 재조합 AAV 입자의 생성을 최적화하기 위해 통상적인 분자 생물학 기술을 사용하여 조작될 수 있다.
일반적으로, AAV 벡터는 포유동물에 대해 비병원성인 단일 가닥(single-stranded, ss) DNA 파르보바이러스로부터 유래된다. 인간 또는 비인간 영장류로부터 분리된 AAV의 혈청형 중에서 인간 혈청형 2는 유전자 전달 벡터로 개발된 최초의 가장 잘 특성화된 AAV이다. 그 밖의 유용한 AAV 혈청형은 AAV1, AAV3, AAV4, AAV5, AAV6, AAV7, AAV8, AAV9, AAV10, AAV11 및 AAV12를 포함한다. 일반적으로, 재조합 AAV-기반 벡터는, 바이러스 DNA 복제, 패키징 및 통합을 개시하기 위해 사용되는 두 개의 측면 145-염기쌍(bp) 반전 말단 반복(inverted terminal repeat, ITR)을 남기고 제거된 rep 및 cap(캡시드) 바이러스 유전자(바이러스 게놈의 96%를 차지함)를 갖는다. 일반적으로, AAV 벡터는 발현을 위해 하나 이상의 조절 요소에 작동 가능하게 연결된 형질전환 유전자(즉, 본원에 기술된 융합 단백질)를 포함하는 길이가 대략 4.5 kb인 "미니유전자(minigene)"를 수용할 수 있다.
AAV1, AAV2, AAV3, AAV4, AAV5, AAV6, AAV7, AAV8, AAV9, AAV10, AAV11, AAV12 및 이들의 위형(pseudotyped) 조합을 포함하지만 이에 제한되지 않는 임의의 적합한 AAV 혈청형이 재조합 AAV에 이용될 수 있다. 위형(또는 키메라) AAV 벡터는 하나 이상의 혈청형으로부터의 일부를 포함하며, 예를 들어, 하나의 AAV 혈청형으로부터의 캡시드의 일부가 다른 AAV 혈청형 캡시드의 제 2 부분에 융합되어, 위형 AAV2/AAV5 캡시드를 코딩하는 벡터를 생성할 수 있다. 대안적으로, 위형 AAV 벡터는 또 다른 AAV 혈청형의 배경 구조에서 하나의 AAV 혈청형으로부터의 캡시드를 함유할 수 있다. 예를 들어, 위형 AAV 벡터는 하나의 혈청형으로부터의 캡시드 및 다른 AAV 혈청형으로부터의 반전 말단 반복(ITR)을 포함할 수 있다. 예시적인 AAV 벡터는 재조합 위형 AAV2/1, AAV2/2, AAV2/5, AAV2/7, AAV2/8 및 AAV2/9 혈청형 벡터를 포함한다. 달리 명시하지 않는 한, AAV ITR 및 본원에 기술된 그 밖의 선택된 AAV 성분은 AAV1, AAV2, AAV3, AAV4, AAV5, AAV6, AAV7, AAV8, AAV9, AAV10 또는 그 밖의 공지된 또는 아직 알려지지 않은 AAV 혈청형을 제한 없이 포함하는 임의의 AAV 혈청형 중에서 용이하게 선택될 수 있다. 이러한 ITR 또는 그 밖의 AAV 성분은 본 기술 분야의 숙련자가 이용 가능한 기술을 사용하여 AAV 혈청형으로부터 용이하게 분리될 수 있다. 또한, AAV 서열은 학술, 상업 또는 공개 출처(예를 들어, the American Type Culture Collection, Manassas, VA)에서 분리되거나 수득될 수 있고, 또는 문헌 또는 예를 들어 GenBank, PubMed 등과 같은 데이터베이스에서 이용할 수 있는 것과 같은 공개된 서열을 참조하여 합성 또는 그 밖의 수단을 통해 수득될 수 있다.
다양한 서브타입의 AAV 벡터 또는 다양한 AAV 위형은 생체외 또는 생체내 세포에서 IL-27 융합 단백질을 발현하는데 사용될 수 있다. 생체내 전달용 벡터 유형은 바람직하게는 선별된 AAV 서브타입에 대한 숙주에서의 기존 면역의 결핍 및 생체내 융합 단백질의 안정한 발현을 기반으로 선택된다.
벡터 및/또는 헬퍼 세포로의 조립을 위한 예시적인 AAV 단편은 캡시드 서브유닛 단백질인 vp1, vp2, vp3, 초가변 영역, 및 rep 단백질인 rep78, rep68, rep52 및 rep40을 포함한다. AAV rep 및 cap 제품을 제공할 때, AAV rep 및 AAV cap 서열은 모두 하나의 혈청형, 예를 들어, 모든 AAV8 기원일 수 있거나 다수의 AAV 혈청형으로부터 유래될 수 있다. 일 실시형태에서, rep 및 cap 서열은 별도의 공급원(예를 들어, 별도의 벡터, 또는 숙주 세포 및 벡터)으로부터 발현된다. 일부 실시형태에서, 이들 rep 서열은 다른 AAV 혈청형의 cap 서열에 프레임 내에서 융합되어, 미국 특허 제 7,282,199호에 개시된 AAV2/8과 같은 키메라 AAV 벡터를 생성한다.
재조합 아데노-관련 바이러스(AAV)는 본원에 정의된 바와 같은 아데노-관련 바이러스(AAV) 혈청형 캡시드 단백질 또는 이의 단편을 코딩하는 핵산 서열; 기능적 rep 유전자; 적어도 AAV 반전 말단 반복 서열(ITR) 및 융합 단백질 코딩 핵산 서열로 구성된 벡터; 및 AAV 캡시드 단백질로의 미니유전자의 패키징을 가능하게 하는 충분한 헬퍼 기능을 갖는 숙주 세포를 배양함으로써 생성될 수 있다. AAV 캡시드 내에서 AAV 미니유전자를 패키징하기 위해 숙주 세포 내에서 배양될 필요가 있는 성분들이 인 트랜스(in trans)로 숙주 세포에 제공될 수 있다. 대안적으로, 하나 이상의 필요한 성분(예를 들어, 미니유전자, rep 서열, cap 서열 및/또는 헬퍼 기능)은 본 기술 분야의 숙련자에게 공지된 방법을 사용하여 하나 이상의 필요한 성분을 함유하도록 조작된 안정한 숙주 세포에 의해 제공될 수 있다. 예를 들어, 293 세포(구성적 프로모터의 조절 하에 E1 헬퍼 기능을 포함 함)로부터 유래하지만, 구성적 또는 유도성 프로모터의 조절 하에 rep 및/또는 cap 단백질을 함유하는 안정한 숙주 세포가 생성될 수 있다.
본 개시의 재조합 AAV(rAAV)를 생산하는데 필요한 미니유전자, rep 서열, cap 서열 및 헬퍼 기능은 패키징 숙주 세포 또는 헬퍼 세포에 전달되거나 포함될 수 있다. 선택된 유전 요소는 본원에 기술된 것들 및 본 기술 분야에서 이용 가능한 그 밖의 것들을 포함하는 임의의 적합한 방법을 사용하여 전달될 수 있다. rAAV 비리온을 생성하는 비제한적인 방법은 본 기술 분야에 잘 알려져 있다.
일부 실시형태에서, 융합 단백질 형질전환 유전자는 조직 특이성 또는 유비쿼터스 프로모터와 같은 조절 요소의 제어 하에 있다. 일부 실시형태에서, 융합 단백질 형질전환 유전자의 발현을 조절하기 위해 CMV 프로모터 또는 CMV-치킨 베타-액틴 하이브리드(CAG) 프로모터와 같은 유비쿼터스 프로모터가 있다. 다른 실시형태에서, 근육과 같은 조직 특이적 프로모터(예를 들어, 간 특이적 프로모터)가 형질전환 유전자의 발현을 조절하는데 사용된다. 근육 특이적 프로모터의 비제한적인 예는 인간 근육 크레아틴 키나제(muscle creatine kinase, MCK) 프로모터이고; 적합한 간 특이적 프로모터는 포스포에놀피루베이트 카르복시키나제(phosphoenolpyruvate carboxykinase, PEPCK) 프로모터이다.
rAAV는 예를 들어 척수강내 및/또는 뇌내 주사를 통해 뇌척수액(cerebrospinal fluid, CSF)에 직접 투여한 후 CNS 조직 전체에 퍼질 수 있다. 일부 실시형태에서, (AAV-9 및 AAV-10과 같은) rAAV는 혈액-뇌 장벽을 가로지르고 정맥내 투여 후 개체의 CNS 조직 전체에 걸쳐 광범위한 분포를 달성한다. 일부 경우, 혈관내(예를 들어, 정맥내) 투여는 다른 투여 형태(예를 들어, 척수강내, 뇌내)보다 큰 부피의 사용을 용이하게 한다. 따라서, 다량의 rAAV(예를 들어, 1015 개의 rAAV 게놈 카피(GC)/개체)가 혈관내(예를 들어, 정맥 내) 투여에 의해 한 번에 전달될 수 있다. 혈관내 투여 방법은 본 기술 분야에 잘 알려져 있으며, 예를 들어, 피하 바늘, 말초 캐뉼라, 중심 정맥관 등의 사용을 포함한다.
특정 실시형태에서, 동시 투여를 위해 제 1 rAAV가 IL-27 융합 단백질을 코딩하고 제 2 rAAV가 PD-1, PD-L1 및/또는 PD-L2를 표적으로 하는 재조합 항체를 코딩하는 다수의 상이한 rAAV가 구축될 수 있다.
비-바이러스 발현 벡터는 노출된 DNA의 직접 주입 또는 IL-27 융합 단백질-코딩 폴리뉴클레오티드 및/또는 리포좀, 마이크로 입자, 마이크로 캡슐, 바이러스-유사 입자 또는 적혈구 고스트에서 PD-1/PD-L1/PD-L2 표적 폴리뉴클레오티드를 캡슐화함으로써 비-바이러스 유전자 전달을 위해 이용될 수 있다. 이러한 조성물은 원하는 세포의 핵으로의 핵산의 표적 전달 및/또는 진입을 용이하게 하여 유전자 발현을 촉진시킬 수 있도록, 예를 들어, 미생물 전위 도메인 및/또는 표적 도메인에 대한 화학적 결합에 의해 더 연결될 수 있다. 또한, 플라스미드 벡터는 폴리리신, 프로타민 및 알부민 등의 중합체 DNA-결합 양이온과 같은 합성 유전자 전달 분자와 함께 배양될 수 있고, 아시알로오로소뮤코이드(asialoorosomucoid), 인슐린, 갈락토스, 락토스 또는 트랜스페린과 같은 세포 표적 리간드에 연결될 수 있다.
대안적으로, 노출된 DNA가 사용될 수 있다. 노출된 DNA의 흡수 효율은 압축 또는 생분해성 라텍스 비드를 사용하여 향상될 수 있다. 이러한 전달은 비드를 처리하여 소수성을 증가시킴으로써 엔도솜의 파괴 및 DNA의 세포질로의 방출을 촉진시키도록 더 개선될 수 있다.
치료 방법
일 양태에서, 세포 증식성 질환을 치료하는 방법은 본원에 기재된 IL-27 융합 단백질 또는 IL-27 융합 단백질을 발현하는 발현 벡터를 증식성 질환을 치료하는데 효과적인 양으로 이를 필요로 하는 개체에 투여하는 단계를 포함한다.
또 다른 양태에서, 자가면역 질환 또는 동종면역 반응을 치료하는 방법은 본원에 기재된 IL-27 융합 단백질 또는 IL-27 융합 단백질을 발현하는 발현 벡터를 자가면역 질환 또는 동종면역 반응을 치료하는데 효과적인 양으로 이를 필요로 하는 개체에 투여하는 단계를 포함한다.
본원에서 사용된 용어 "치료하는" 및 "치료"는 세포 증식성 질환, 자가면역 질환 또는 동종면역 반응과 관련된 하나 이상의 증상의 개선; 세포 증식성 질환, 자가면역 질환 또는 동종면역 반응의 하나 이상의 증상의 발병의 예방 또는 지연; 및/또는 세포 증식성 질환, 자가면역 질환 또는 동종면역 반응의 하나 이상의 증상의 중증도 또는 빈도의 완화를 의미한다.
이러한 문맥에 사용된 용어 "개선하다", "증가하다" 또는 "감소하다"는 본원에 기술된 치료의 개시 이전에 동일한 개인에서의 측정, 도는 본원에 기술된 치료가 없는 대조군 개인(또는 다수의 대조군 개인들)에서의 측정과 같이 기본 측정과 관련된 값 또는 파라미터를 나타낸다.
"대조군 개인"이란 치료 중인 개인과 동일한 암에 걸린 사람으로서, (치료받는 개인 및 대조군 개인(들)의 질병 단계가 비슷하다는 것을 보장하기 위해) 치료 중인 개인과 거의 동일한 나이이다. 치료 중인 개인("환자" 또는 "개체"라고도 함)은 암에 걸린 태아, 유아, 아동, 청소년 또는 성인일 수 있다.
"세포 증식성 질환(cell proliferative disorder)"이란 용어는 세포의 비정상적인 증식을 특징으로 하는 질환을 의미한다. 증식성 질환은 세포 성장률에 대한 어떠한 제한도 의미하지 않지만 단순히 성장과 세포 분열에 영향을 미치는 정상 대조군의 손실을 나타낼 뿐이다. 따라서, 일부 실시형태에서, 증식성 질환의 세포는 정상 세포와 동일한 세포 분열 속도를 가질 수 있지만 이러한 성장을 제한하는 신호에는 반응하지 않는다. "세포 증식성 질환"의 범위 내에는 조직의 비정상적인 성장인 신생물(neoplasm) 또는 종양이 있다. "암"은 주변 조직을 침윤하거나 새로운 집락 부위로 전이할 수 있는 세포의 증식을 특징으로 하는 다양한 악성 신생물 중 하나를 의미하며, 백혈병, 림프종, 암종, 흑색종, 육종, 생식 세포 종양 및 모세포종 포함한다. 본 개시의 방법으로 치료하기 위한 예시적인 암은 뇌종양, 방광암, 유방암, 자궁 경부암, 결장암, 두경부암, 신장암, 폐암, 비소 세포 폐암, 중피종, 난소암, 전립선암, 위암 및 자궁암, 백혈병, 및 수모세포종을 포함한다.
"백혈병(leukemia)"이란 용어는 혈액 생성 기관의 진행성 악성 질환을 의미하며 일반적으로 혈액 및 골수에서 백혈구 및 이의 전구체의 왜곡된 증식 및 발달을 특징으로 한다. 예시적인 백혈병은, 예를 들어, 급성 비림프구성 백혈병(acute nonlymphocytic leukemia), 만성 림프구성 백혈병(chronic lymphocytic leukemia), 급성 과립구성 백혈병(acute granulocytic leukemia), 만성 과립구성 백혈병(chronic granulocytic leukemia), 급성 전골수성 백혈병(acute promyelocytic leukemia), 성체 T-세포 백혈병(adult T-cell leukemia), 무백혈성 백혈병(aleukemic leukemia), 백혈구성 백혈병(leukocythemic leukemia), 호염기성 백혈병(basophilic leukemia), 모 세포 백혈병(blast cell leukemia), 소 백혈병(bovine leukemia), 만성 골수성 백혈병(chronic myelocytic leukemia), 피부 백혈병(leukemia cutis), 배아 백혈병(embryonal leukemia), 호산구성 백혈병(eosinophilic leukemia), 그로스 백혈병(Gross' leukemia), 모상세포 백혈병(hairy-cell leukemia), 혈모세포성 백혈병(hemoblastic leukemia), 혈구아세포성 백혈병(hemocytoblastic leukemia), 조직구성 백혈병(histiocytic leukemia), 줄기세포 백혈병(stem cell leukemia), 급성 단구성 백혈병(acute monocytic leukemia), 백혈구 감소성 백혈병(leukopenic leukemia), 림프성 백혈병(lymphatic leukemia), 림프모구성 백혈병(lymphoblastic leukemia), 림프구성 백혈병(lymphocytic leukemia), 림프행성 백혈병(lymphogenous leukemia), 림프구양 백혈병(lymphoid leukemia), 림프육종 세포 백혈병(lymphosarcoma cell leukemia), 비만세포성 백혈병(mast cell leukemia), 거대핵세포성 백혈병(megakaryocytic leukemia), 소골수아구성 백혈병(micromyeloblastic leukemia), 단구성 백혈병(monocytic leukemia), 골수모세포성 백혈병(myeloblastic leukemia), 골수성 백혈병(myelocytic leukemia), 골수과립구성 백혈병(myeloid granulocytic leukemia), 골수단구성 백혈병(myelomonocytic leukemia), 네겔리 백혈병(Naegeli leukemia), 형질세포성 백혈병(plasma cell leukemia), 형질구성 백혈병(plasmacytic leukemia), 전골수성 백혈병(promyelocytic leukemia), 리이더세포 백혈병(Rieder cell leukemia), 쉴링 백혈병(Schilling's leukemia), 줄기세포 백혈병(stem cell leukemia), 아백혈성 백혈병(subleukemic leukemia), 및 미분화세포 백혈병(undifferentiated cell leukemia)을 포함한다.
"암종(carcinoma)"이란 용어는 주위 조직에 침투하여 전이를 일으키는 경향이 있는 상피 세포의 악성 종양을 의미한다. 예시적인 암종은, 예를 들어, 선방 암종(acinar carcinoma), 선포 암종(acinous carcinoma), 선양낭성 암종(adenocystic carcinoma), 선양낭성 암종(adenoid cystic carcinoma), 선암종(carcinoma adenomatosum), 부신피질 암종(carcinoma of adrenal cortex), 폐포성 암종(alveolar carcinoma), 폐포세포 암종(alveolar cell carcinoma), 기저세포 암종(basal cell carcinoma), 기저세포성 암종(carcinoma basocellulare), 기저세포모양 암종(basaloid carcinoma), 바닥편평세포 암종(basosquamous cell carcinoma), 기관지폐포 암종(bronchioalveolar carcinoma), 세기관지성 암종(bronchiolar carcinoma), 기관지원성 암종(bronchogenic carcinoma), 대뇌양 암종(cerebriform carcinoma), 담관세포성 암종(cholangiocellular carcinoma), 융모막 암종(chorionic carcinoma), 콜로이드 암종(colloid carcinoma), 면포 암종(comedo carcinoma), 자궁체부 암종(corpus carcinoma), 상 암종(cribriform carcinoma), 흉부 갑옷 암종(carcinoma en cuirasse), 내피종 암종(carcinoma cutaneum), 원주상 암종(cylindrical carcinoma), 원통형 세포 암종(cylindrical cell carcinoma), 관 암종(duct carcinoma), 경성 암종(carcinoma durum), 배아 암종(embryonal carcinoma), 뇌질모양 암종(encephaloid carcinoma), 에피에노이드 암종(epiennoid carcinoma), 선양 상피 암종(carcinoma epitheliale adenoides), 외장성 암종(exophytic carcinoma), 전궤양 암종(carcinoma ex ulcere), 섬유구조 암종(carcinoma fibrosum), 섬유 암종(gelatiniform carcinoma), 젤리 유사 암종(gelatinous carcinoma), 거대세포 암종(giant cell carcinoma), 거대세포핵 암종(carcinoma gigantocellulare), 샘 암종(glandular carcinoma), 과립세포 암종(granulosa cell carcinoma), 모상 암종(hair-matrix carcinoma), 헤마토이드 암종(hematoid carcinoma), 간세포 암종(hepatocellular carcinoma), 허슬세포 암종(Hurthle cell carcinoma), 유리질 암종(hyaline carcinoma), 하이페메프로이드 암종(hypemephroid carcinoma), 영아성 배아 암종(infantile embryonal carcinoma), 상피내 암종(carcinoma in situ), 표피내 암종(intraepidermal carcinoma), 상피내 암종(intraepithelial carcinoma), 크롬페처 암종(Krompecher's carcinoma), 쿨치츠키-세포 암종(Kulchitzky-cell carcinoma), 대세포 암종(large-cell carcinoma), 수정체 암종(lenticular carcinoma), 수정체성 암종(carcinoma lenticulare), 지방종성 암종(lipomatous carcinoma), 림프상피성 암종(lymphoepithelial carcinoma), 수질성 암종(carcinoma medullare), 수질 암종(medullary carcinoma), 멜라닌 암종(melanotic carcinoma), 연성 암종(carcinoma molle), 점액 암종(mucinous carcinoma), 뮤시파룸 암종(carcinoma muciparum), 점액세포 암종(carcinoma mucocellulare), 점액표피모양 암종(mucoepidermoid carcinoma), 점액 암종(carcinoma mucosum), 점액성 암종(mucous carcinoma), 점액종성 암종(carcinoma myxomatodes), 비인두 암종(naspharyngeal carcinoma), 귀리세포 암종(oat cell carcinoma), 화골성 암종(carcinoma ossificans), 유골 암종(osteoid carcinoma), 유두상 암종(papillary carcinoma), 문맥주위 암종(periportal carcinoma), 전-침습성 암종(preinvasive carcinoma), 가시세포 암종(prickle cell carcinoma), 풀타세우스 암종(pultaceous carcinoma), 신장세포 암종(renal cell carcinoma of kidney), 예비세포 암종(reserve cell carcinoma), 육종성 암종(carcinoma sarcomatodes), 슈나이더 암종(schneiderian carcinoma), 경성 암종(scirrhous carcinoma), 음낭 암종(carcinoma scroti), 반지세포 암종(signet-ring cell carcinoma), 단순 암종(carcinoma simplex), 소세포 암종(small-cell carcinoma), 솔라노이드 암종(solanoid carcinoma), 회전타원체세포 암종(spheroidal cell carcinoma), 방추세포 암종(spindle cell carcinoma), 해면양 암종(carcinoma spongiosum), 폐편평 암종(squamous carcinoma), 편평세포 암종(squamous cell carcinoma), 스트링 암종(string carcinoma), 모세혈관 확장성 암종(carcinoma telangiectaticum), 모세혈관 확장성 암종(carcinoma telangiectodes), 이행세포 암종(transitional cell carcinoma), 결절성 암종(carcinoma tuberosum), 결절성 암종(tuberous carcinoma), 사마귀모양 암종(verrucous carcinoma), 및 융모상 암종(carcinoma villosum)을 포함한다.
"육종(sarcoma)"이란 용어는 배아 결합 조직과 같은 물질로 구성된 종양을 의미하며 일반적으로 원섬유성 또는 균질 물질에 삽입되어 있는 박혀있는 밀집된 세포로 구성된다. 예시적인 육종은, 예를 들어, 연골육종(chondrosarcoma), 섬유육종(fibrosarcoma), 림프육종(lymphosarcoma), 흑색육종(melanosarcoma), 점액육종(myxosarcoma), 골육종(osteosarcoma), 아베메티스 육종(Abemethy's sarcoma), 지방육종(adipose sarcoma), 지방육종(liposarcoma), 포상연부 육종(alveolar soft part sarcoma), 법랑아 육종(ameloblastic sarcoma), 포도상 육종(botryoid sarcoma), 녹색종 육종(chloroma sarcoma), 융모막 육종(chorio carcinoma), 배아 육종(embryonal sarcoma), 윌름스 종양 육종(Wilns' tumor sarcoma), 자궁내막 육종(endometrial sarcoma), 간질성 육종(stromal sarcoma), 유잉 육종(Ewing's sarcoma), 근막 육종(fascial sarcoma), 섬유모세포 육종(fibroblastic sarcoma), 거대세포 육종(giant cell sarcoma), 과립구성 육종(granulocytic sarcoma), 호치킨 육종(Hodgkin's sarcoma), 특발성 다발 색소침착 출혈 육종(idiopathic multiple pigmented hemorrhagic sarcoma), B세포의 면역아세포 육종(immunoblastic sarcoma of B cells), 림프종(lymphomas(예를 들어, 비-호치킨 림프종(Non-Hodgkin Lymphoma)), T세포의 면역아세포 육종(immunoblastic sarcoma of T-cells), 얀센 육종(Jensen's sarcoma), 카포시 육종(Kaposi's sarcoma), 쿠퍼세포 육종(Kupffer cell sarcoma), 혈관육종(angiosarcoma), 백혈육종(leukosarcoma), 악성 간엽세포 육종(malignant mesenchymoma sarcoma), 방골성 육종(parosteal sarcoma), 망상내피 육종(reticulocytic sarcoma), 라우스 육종(Rous sarcoma), 혈청세포 육종(serocystic sarcoma), 활막 육종(synovial sarcoma), 및 혈관확장 육종(telangiectaltic sarcoma)을 포함한다.
"흑색종(melanoma)"이란 용어는 피부 및 다른 기관의 멜라닌 세포계(melanocytic system )에서 발생하는 종양을 의미한다. 흑색종은, 예를 들어, 말단 흑자성 흑색종(acral-lentiginous melanoma), 무색소성 흑색종(amelanotic melanoma), 양성 소아 흑색종(benign juvenile melanoma), 클라우드만 흑색종(Cloudman's melanoma), S91 흑색종(S91 melanoma), 하당-파세이 흑색종(Harding-Passey melanoma), 소아 흑색종(juvenile melanoma), 악성 흑자 흑색종(lentigo maligna melanoma), 악성 흑색종(malignant melanoma), 결절성 흑색종(nodular melanoma), 조갑하 흑색종(subungal melanoma), 및 표재 확장성 흑색종(superficial spreading melanoma)을 포함한다.
추가적인 암은, 예를 들어, 호치킨 병(Hodgkin's Disease), 다발성 골수종(multiple myeloma), 신경아세포종(neuroblastoma), 유방암, 난소암, 폐암, 횡문근육종(rhabdomyosarcoma), 원발성 혈소판증가증(primary thrombocytosis), 원발성 고분자글로불린혈증(primary macroglobulinemia), 소세포 폐암(small-cell lung tumor), 원발성 뇌종양(primary brain tumor), 위암, 대장암, 악성 췌장 인슐린종(malignant pancreatic insulinoma), 악성 유암종(malignant carcinoid), 전암성 피부 병변(premalignant skin lesion), 고환암, 갑상선암, 신경아세포종(neuroblastoma), 식도암, 비뇨생식관암(genitourinary tract cancer), 악성 고칼슘혈증(malignant hypercalcemia), 자궁경부암, 자궁내막암, 및 부신피질암을 포함한다.
본원에서 사용된 용어 "자가면역 질환(autoimmune disease)"은 개인의 면역계(예를 들어, 활성화된 T 세포)가 자신의 조직 및 세포를 공격하는 상태를 의미한다. "동종면역 반응(alloimmune response)"이란 용어는 개인의 면역 체계가 이식된(graft 또는 transplant) 조직이나 세포를 공격하는 상태를 의미한다.
본 개시의 방법으로 치료하기 위한 예시적인 자가면역 질환은 관절염, 원형탈모증, 강직성 척추염(ankylosing spondylitis), 자가면역 용혈성 빈혈(autoimmune hemolytic anemia), 자가면역 간염, 베체트병(Behcet's disease), 크론병(Crohn's disease), 피부근염(dermatomyositis), 제1형 당뇨병, 사구체신염(glomerulonephritis), 그레이브병(Grave's disease), 길랑-바레 증후군(Guillain-Barre syndrome), 염증성 장질환(inflammatory bowel disorder), IBD), 루푸스 신염(lupus nephritis), 다발성 경화증(multiple sclerosis), 중증 근무력증(myasthenia gravis), 심근염(myocarditis), 천포창/유사천포창(pemphigus/pemphigoid), 악성 빈혈(pernicious anemia), 결절성 다발동맥염(polyarteritis nodosa), 다발근육염(polymyositis), 원발성 담즙성 간경변증(primary biliary cirrhosis), 건선(psoriasis), 류마티스성 관절염(rheumatoid arthritis), 류마티스 열(rheumatic fever), 유육종증(sarcoidosis), 피부경화증(scleroderma), 쇼그렌 증후군(Sjogren's syndrome), 전신성 홍반성 루푸스(systemic lupus erythematosus, SLE), 갑상선염(thyroiditis)(예를 들어, 하시모토 갑상선염(Hashimoto's thyroiditis) 및 오드 갑상선염(Ord's thyroiditis)), 궤양성 대장염(ulcerative colitis), 포도막염(uveitis), 백반(vitiligo), 및 베게너 육아종증(Wegener's granulomatosis)을 포함한다. 본 개시의 방법으로 치료하기 위한 예시적인 동종면역 반응은 이식편-대 숙주 질환(graft-versus-host disease, GVHD) 및 이식 거부를 포함한다.
일 실시형태에서, IL-27 융합 단백질 또는 IL-27 코딩 발현 벡터는 단독으로 투여된다.
또 다른 실시형태에서, IL-27 융합 단백질 또는 IL-27 코딩 발현 벡터는 하나 이상의 항-PD-1 작용제, 항-PD-L1 작용제 및/또는 항-PD-L2 작용제와 함께 증식성 질환, 자가면역 질환 또는 동종면역 반응을 치료하는데 효과적인 양으로 투여된다. 항-PD-1 작용제, 항-PD-L1 작용제 또는 항-PD-L2 작용제는 PD-1, PD-L1 또는 PD-L2를 표적으로 하는 항체, 우성 음성 단백질 또는 siRNA의 형태일 수 있다.
특정 실시형태에서, 항-PD-1 작용제, 항-PD-L1 작용제 또는 항-PD-L2 작용제는 PD-1, PD-L1 또는 PD-L2의 세포외 도메인을 포함하는 가용성 Fc 융합 단백질을 포함한다. 대안적으로, PD-1, PD-L1 및/또는 PD-L2로부터의 하나 이상의 세포외 도메인은 본 개시의 IL-27 융합 단백질 중 임의의 것으로 포함될 수 있다.
또 다른 실시형태에서, IL-27 융합 단백질 또는 발현 벡터는 증식성 질환, 자가면역 질환 또는 동종면역 반응을 치료하는데 효과적인 양의 하나 이상의 항-B7-1 작용제, 항-B7-2 작용제, 항-CTLA-4 작용제, 항-LAG-3 작용제, 항-TIM-3 작용제, 항-TIGIT 작용제, 항-BTLA 작용제, 항-VISTA 작용제와 함께 투여된다. 항-B7-1 작용제, 항-B7-2 작용제, 항-CTLA-4 작용제, 항-LAG-3 작용제, 항-TIM-3 작용제, 항-TIGIT 작용제, 항-BTLA 작용제 또는 항-VISTA 작용제는 B7-1, B7-2, CTLA-4, LAG-3, TIM-3, TIGIT, BTLA 및/또는 VISTA를 표적으로 하는 항체, 우성 음성 단백질 또는 siRNA의 형태일 수 있다.
특정 실시형태에서, 항-B7-1 작용제, 항-B7-2 작용제, 항-CTLA-4 작용제, 항-LAG-3 작용제, 항-TIM-3 작용제, 항-TIGIT 작용제, 항-BTLA 작용제 또는 항-VISTA 작용제는 B7-1, B7-2, CTLA-4, LAG-3, TIM-3, TIGIT, BTLA 또는 VISTA의 세포외 도메인을 포함하는 가용성 Fc 융합 단백질을 포함한다. 대안적으로, B7-1, B7-2, CTLA-4, LAG-3, TIM-3, TIGIT, BTLA 및/또는 VISTA로부터의 세포외 도메인 중 하나 이상은 본 개시의 임의의 IL-27 융합 단백질에 포함될 수 있다.
예시적인 항-PD-1 항체는 니볼루맙(nivolumab; Bristol-Myers Squibb), 펨브롤리주맙(pembrolizumab; Merck), MK-3475, BMS-936558(Bristol-Myers Squibb) 및 피딜리주맙(pidilizumab)/CT-011(CureTech), MDX-1106(Medarex)을 포함한다.
예시적인 항-PD-L1 항체는 BMS-936559(Bristol-Myers Squibb), MEDI4736(Medimmune/AstraZeneca), MPDL33280A(Genentech/Roche), MSB0010718C(EMD Serono)를 포함한다.
예시적인 항-CTLA-4 항체는 이필리무맙(ipilimumab) 및 트레멜리무맙(tremelimumab)을 포함한다. 예시적인 항-CTLA-4 우성 음성 단백질은 CTLA-4 ECD에 융합된 IgG1의 Fc 영역을 포함하는 인간화 융합 단백질인 아바타셉트(Abatacept; Orencia) 및 아바타셉트에 비해 CTLA-4 ECD에서 두 개의 아미노산 치환을 갖는 제2세대 고친화성 CTLA-4-Ig 변이체인 벨라타셉트(Belatacept; Nulojix®)를 포함한다.
환자에게 치료적 또는 예방적 유효량의 융합 단백질 또는 발현 벡터를 제공하기 위해 임의의 적합한 투여 경로 또는 방식이 사용될 수 있다. 예시적인 투여 경로 또는 방식은 비경구(예를 들어, 정맥내(intravenous), 동맥내(intraarterial), 근육내(intramuscular), 피하(subcutaneous), 종양내(intratumoral)), 경구, 국소(비강(nasal), 경피(transdermal), 피내(intradermal) 또는 안구내(intraocular)), 점막(예를 들어, 비강(nasal), 설하(sublingual), 협측(buccal), 직장(rectal), 질(vaginal)), 흡입, 림프관내(intralymphatic), 척수내(intraspinal), 두개내(intracranial), 복강내(intraperitoneal), 기관내(intratracheal), 방광내(intravesical), 척수강내(intrathecal), 장관내(enteral), 폐내(intrapulmonary), 림프관내(intralymphatic), 체강내(intracavital), 안와내(intraorbital), 낭내(intracapsular) 및 요도경유(transurethral)뿐만 아니라 카테터 또는 스텐트를 이용한 국소 전달을 포함한다.
본 개시에 따른 융합 단백질 또는 발현 벡터를 포함하는 약학적 조성물은 임의의 약학적으로 허용 가능한 담체(들) 또는 부형제(들)로 제형화될 수 있다. 본원에서 사용된 용어 "약학적으로 허용 가능한 담체"는 생리학적으로 상용될 수 있는 임의의 및 모든 용매, 분산 매질, 코팅제, 항균제 및 항진균제, 등장제 및 흡수 지연제 등을 포함한다. 약학적 조성물은 적합한 고체 또는 겔 상태의 담체 또는 부형제를 포함할 수 있다. 예시적인 담체 또는 부형제는 탄산칼슘, 인산칼슘, 각종 당, 전분, 셀룰로즈 유도체, 젤라틴, 및 폴리에틸렌 글리콜과 같은 중합체를 포함하지만 이에 제한되지 않는다. 예시적인 약학적으로 허용 가능한 담체는 하나 이상의 물, 식염수, 인산 완충 식염수, 덱스트로스, 글리세롤, 에탄올 등 및 이들의 조합을 포함한다. 많은 경우에, 등장제, 예를 들면 설탕 또는 만니톨, 소르비톨 또는 염화나트륨과 같은 폴리알콜을 조성물에 포함시키는 것이 바람직할 것이다. 약학적으로 허용 가능한 담체는 습윤제 또는 유화제, 보존제 또는 완충제와 같은 소량의 보조 물질을 더 포함할 수 있으며, 이들 치료제의 유통 기한 또는 효과를 향상시킨다.
융합 단백질 또는 재조합 발현 벡터는 비경구 투여에 적합한 약학적 조성물에 포함될 수 있다. 적합한 완충제는 숙신산 나트륨, 시트르산 나트륨, 인산 나트륨 또는 인산 칼륨을 포함하지만 이에 제한되지 않는다. 염화나트륨은 0-300 mM의 농도에서 용액의 독성을 조절하는데 사용될 수 있다(액체 제형의 경우 최적으로는 150 mM). 동결 건조된 제형에 대해 동결 방지제(cryoprotectant)로서 주로 0-10%의 자당(최적으로는 0.5-1.0%)이 포함될 수 있다. 그 밖의 적합한 동결 방지제는 트레할로스 및 락토스를 포함한다. 동결 건조된 제형에 대해 증량제(bulking agent)로서 주로 1-10%의 만니톨(최적으로는 2-4%)이 포함될 수 있다. 액체 및 동결 건조된 제형 모두에 대해 안정제로서 주로 1-50 mM의 L-메티오닌(최적으로는 5-10 mM)이 사용될 수 있다. 그 밖의 적합한 증량제는 글리신, 아르기닌을 포함하며, 0-0.05%의 폴리소르베이트-80(최적으로는 0.005-0.01%)로 포함될 수 있다. 추가 계면활성제는 폴리소르베이트 20 및 BRIJ 계면활성제를 포함하지만 이에 제한되지 않는다.
치료용 융합 단백질 제제는 동결 건조하여 바람직하게는 진공 하에 멸균 분말로 저장한 다음 주사 전에 정균수(예를 들어, 벤질 알코올 방부제 함유) 또는 멸균수에서 재구성할 수 있다. 약학적 조성물은 주사, 예를 들어, 급속 정맥 주사(bolus injection) 또는 연속 주입에 의한 비경구 투여를 위해 제형화될 수 있다.
약학적 조성물 중의 치료제는 "치료적 유효량" 또는 "예방적 유효량"으로 제형화될 수 있다. "치료적 유효량"은 원하는 치료 효과를 달성하는데 필요한 투여량 및 기간 동안의 효과적인 양을 의미한다. 재조합 벡터의 치료적 유효량은 치료될 질환, 질환의 중증도 및 경과, 투여 방식, 항체 또는 작용제가 예방 또는 치료 목적으로 투여되는지 여부, 특정 작용제(들)의 생체 이용률, 개인에서 원하는 반응을 유도하는 융합 단백질 또는 벡터의 능력, 이전 치료, 환자의 연령, 체중 및 성별, 환자의 임상 내력 및 항체에 대한 반응, 융합 단백질 또는 발현 벡터의 유형, 담당 의사의 재량 등에 따라 변할 수 있다. 치료적 유효량은 또한 재조합 벡터의 임의의 독성 또는 악영향보다 치료적으로 유익한 효과가 훨씬 큰 경우이다. "예방적 유효량"은 원하는 예방적 결과를 달성하는데 필요한 투여량 및 기간 동안의 효과적인 양을 의미한다.
바람직하게, 융합 단백질 또는 폴리뉴클레오티드 내의 폴리펩티드 도메인은 투여된 치료제에 대한 염증 반응을 감소시키기 위해 투여될 동일한 숙주로부터 유래된다.
융합 단백질 또는 발현 벡터는 한 번에 또는 일련의 치료를 통해 환자에 적절하게 투여되며 진단 이후부터 언제든지 환자에게 투여될 수 있다. 융합 단백질 또는 발현 벡터는 단독 치료로서 또는 해당 질환을 치료하는데 유용한 다른 약물 또는 치료법과 함께 투여될 수 있다.
일반적으로, 치료적 유효량 또는 예방적 유효량의 융합 단백질은 하나 이상의 투여에 관계없이 대략 1 ng/kg 체중/일 내지 대략 100 mg/kg 체중/일의 범위로 투여될 것이다. 특정 실시형태에서, 각각의 융합 단백질 또는 발현 벡터는 대략 1 ng/kg 체중/일 내지 대략 10 mg/kg 체중/일, about 1 ng/kg 체중/일 내지 대략 1 mg/kg 체중/일, 대략 1 ng/kg 체중/일 내지 대략 100 μg/kg 체중/일, 대략 1 ng/kg 체중/일 내지 대략 10 μg/kg 체중/일, 대략 1 ng/kg 체중/일 내지 대략 1 μg/kg 체중/일, 대략 1 ng/kg 체중/일 내지 대략 100 ng/kg 체중/일, 대략 1 ng/kg 체중/일 내지 대략 10 ng/kg 체중/일, 대략 10 ng/kg 체중/일 내지 대략 100 mg/kg 체중/일, 대략 10 ng/kg 체중/일 내지 대략 10 mg/kg 체중/일, 대략 10 ng/kg 체중/일 내지 대략 1 mg/kg 체중/일, 대략 10 ng/kg 체중/일 내지 대략 100 μg/kg 체중/일, 대략 10 ng/kg 체중/일 내지 대략 10 μg/kg 체중/일, 대략 10 ng/kg 체중/일 내지 대략 1 μg/kg 체중/일, 10 ng/kg 체중/일 내지 대략 100 ng/kg 체중/일, 대략 100 ng/kg 체중/일 내지 대략 100 mg/kg 체중/일, 대략 100 ng/kg 체중/일 내지 대략 10 mg/kg 체중/일, 대략 10 ng/kg 체중/일 내지 대략 100 mg/kg 체중/일, 대략 10 ng/kg 체중/일 내지 대략 10 mg/kg 체중/일, 대략 10 ng/kg 체중/일 내지 대략 1 mg/kg 체중/일, 대략 10 ng/kg 체중/일 내지 대략 100 μg/kg 체중/일, 대략 10 ng/kg 체중/일 내지 대략 10 μg/kg 체중/일, 대략 10 ng/kg 체중/일 내지 대략 1 μg/kg 체중/일, 10 ng/kg 체중/일 내지 대략 100 ng/kg 체중/일, 대략 100 ng/kg 체중/일 내지 대략 100 mg/kg 체중/일, 대략 100 ng/kg 체중/일 내지 대략 10 mg/kg 체중/일, 대략 10 μg /kg 체중/일 내지 대략 10 mg/kg 체중/일, 대략 10 μg /kg 체중/일 내지 대략 1 mg/kg 체중/일, 대략 10 μg /kg 체중/일 내지 대략 100 μg/kg 체중/일, 대략 100 μg/kg 체중/일 내지 대략 100 mg/kg 체중/일, 대략 100 μg /kg 체중/일 내지 대략 10 mg/kg 체중/일, 대략 100 μg /kg 체중/일 내지 대략 1 mg/kg 체중/일, 대략 1 mg/kg 체중/일 내지 대략 100 mg/kg 체중/일, 대략 1 mg/kg 체중/일 내지 대략 10 mg/kg 체중/일, 대략 10 mg/kg 체중/일 내지 대략 100 mg/kg 체중/일의 범위로 포함된다.
다른 실시형태에서, 융합 단백질은 3 일마다 500 μg 내지 20 g, 또는 3 일마다 25 mg/kg 체중으로 투여된다.
다른 실시형태에서, 각각의 융합 단백질은 개별 투여당 대략10 ng 내지 대략 100 ng, 개별 투여당 대략 10 ng 내지 대략 1 μg, 개별 투여당 대략 10 ng 내지 대략 10 μg, 개별 투여당 대략 10 ng 내지 대략 100 μg, 개별 투여당 대략 10 ng 내지 대략 1 mg, 개별 투여당 대략 10 ng 내지 대략 10 mg, 개별 투여당 대략 10 ng 내지 대략 100 mg, 주사당 대략 10 ng 내지 대략 1000 mg, 개별 투여당 대략 10 ng 내지 대략 10,000 mg, 개별 투여당 대략 100 ng 내지 대략 1 μg, 개별 투여당 대략 100 ng 내지 대략 10 μg, 개별 투여당 대략 100 ng 내지 대략 100 μg, 개별 투여당 대략 100 ng 내지 대략 1 mg, 개별 투여당 대략 100 ng 내지 대략 10 mg, 개별 투여당 대략 100 ng 내지 대략 100 mg, 주사당 대략 100 ng 내지 대략 1000 mg, 개별 투여당 대략 100 ng 내지 대략 10,000 mg, 개별 투여당 대략 1 μg 내지 대략 10 μg, 개별 투여당 대략 1 μg 내지 대략 100 μg, 개별 투여당 대략 1 μg 내지 대략 1 mg, 개별 투여당 대략 1 μg 내지 대략 10 mg, 개별 투여당 대략 1 μg 내지 대략 100 mg, 주사당 대략 1 μg 내지 대략 1000 mg, 개별 투여당 대략 1 μg 내지 대략 10,000 mg, 개별 투여당 대략 10 μg 내지 대략 100 μg, 개별 투여당 대략 10 μg 내지 대략 1 mg, 개별 투여당 대략 10 μg 내지 대략 10 mg, 개별 투여당 대략 10 μg 내지 대략 100 mg, 주사당 대략 10 μg 내지 대략 1000 mg, 개별 투여당 대략 10 μg 내지 대략 10,000 mg, 개별 투여당 대략 100 μg 내지 대략 1 mg, 개별 투여당 대략 100 μg 내지 대략 10 mg, 개별 투여당 대략 100 μg 내지 대략 100 mg, 주사당 대략100 μg 내지 대략 1000 mg, 개별 투여당 대략 100 μg 내지 대략 10,000 mg, 개별 투여당 대략 1 mg 내지 대략 10 mg, 개별 투여당 대략 1 mg 내지 대략 100 mg, 주사당 대략 1 mg 내지 대략 1000 mg, 개별 투여당 대략 1 mg 내지 대략 10,000 mg, 개별 투여당 대략 10 mg 내지 대략 100 mg, 주사당 대략 10 mg 내지 대략 1000 mg, 개별 투여당 대략 10 mg 내지 대략 10,000 mg, 주사당 대략 100 mg 내지 대략 1000 mg, 개별 투여당 대략 100 mg 내지 대략 10,000 mg 및 개별 투여당 대략 1000 mg 내지 대략 10,000 mg의 범위로 투여된다. 융합 단백질 또는 발현 벡터는 매일, 2, 3, 4, 5, 6 또는 7 일마다, 또는 1, 2, 3 또는 4 주마다 투여될 수 있다.
다른 특정 실시형태에서, 융합 단백질의 양은 대략 0.0006 mg/일, 0.001 mg/일, 0.003 mg/일, 0.006 mg/일, 0.01 mg/일, 0.03 mg/일, 0.06 mg/일, 0.1 mg/일, 0.3 mg/일, 0.6 mg/일, 1 mg/일, 3 mg/일, 6 mg/일, 10 mg/일, 30 mg/일, 60 mg/일, 100 mg/일, 300 mg/일, 600 mg/일, 1000 mg/일, 2000 mg/일, 5000 mg/일 또는 10,000 mg/일의 투여량으로 투여될 수 있다. 예상대로, 투여량은 환자의 질환, 크기, 연령 및 상태에 따라 달라질 것이다.
특정 실시형태에서, 약학적 조성물은 유효량의 재조합 바이러스, 예컨대 rAAV를 kg당 적어도 1010 개, 적어도 1011 개, 적어도 1012 개, 적어도 1013 개 또는 적어도 1014 개의 게놈 카피(GC) 또는 재조합 바이러스 입자, 또는 이의 임의의 범위를 포함하는 양으로 포함한다. 특정 실시형태에서, 약학적 조성물은 유효량의 재조합 바이러스, 예컨대 rAAV를 개체당 적어도 1010 개, 적어도 1011 개, 적어도 1012 개, 적어도 1013 개, 적어도 1014 개, 적어도 1015 개의 게놈 카피 또는 재조합 바이러스 입자 게놈 카피, 또는 이의 임의의 범위의 양으로 포함한다.
투여량은 특정 암, 자가면역 질환 또는 동종면역 반응에 적합한, 기술 분야에서 허용된 여러 동물 모델에서 테스트될 수 있다.
전달 방법은 또한 사멸된 바이러스에 연결되거나 연결되지 않은 다가양이온 응축된 DNA(polycationic condensed DNA), 리간드 연결된 DNA, 리포좀, 진핵 세포 전달 비히클 세포의 이용, 광중합된 하이드로겔 물질의 증착, 휴대용 유전자 전달 입자 총의 사용, 전리 방사선, 세포 막과의 핵 전하 중화 또는 융합, 입자 매게 유전자 전달 등을 포함한다.
또 다른 양태에서, 증식성 질환, 자가면역 질환 또는 동종면역 반응을 치료하는 방법은 본 개시의 IL-27 융합 단백질을 발현하는 세포를 단독으로 또는 항-PD-1 작용제, 항-PD-L1 작용제, 항-PD-L2 작용제, 또는 이들의 조합의 발현과 함께 이를 필요로 하는 개체에 투여하는 단계를 포함한다.
특정 실시형태에서, 융합 단백질, 발현 벡터 및/또는 세포는 T 세포의 자극 및 결과적인 치료 효능을 향상시키기 위해 종양 항원 또는 키메라 항원-수용체 형질도입된 T 세포와 함께 투여될 수 있다.
IL
-27 융합 단백질을 생산하는 방법
본 출원의 또 다른 양태는 IL-27 융합 구조물을 일시적으로 또는 안정적으로 발현하는 세포를 배양하는 단계; 및 배양된 세포로부터 IL-27 융합 단백질을 정제하는 단계를 포함하는, IL-27 융합 단백질을 생산하는 방법에 관한 것이다. 기능적 IL-27 융합 단백질을 생산할 수 있는 임의의 세포가 사용될 수 있다. 바람직한 실시형태에서, IL-27 융합 단백질-발현 세포는 진핵생물 또는 포유동물 기원이다. 특정 실시형태에서, IL-27 융합 단백질-생산 세포는 인간 세포이다. IL-27 융합 단백질을 단독으로 또는 하나 이상의 항-PD-1 작용제, 항-PD-L1 작용제 및/또는 항-PD-L2 작용제와 함께 발현하기 위해 다양한 조직 세포 유형으로부터의 세포가 사용될 수 있다. 다른 실시형태에서, 세포는 효모 세포, 곤충 세포 또는 박테리아 세포이다.
일부 실시형태에서, IL-27 융합 단백질-생산 세포는 IL-27 융합 단백질을 발현하는 벡터로 안정적으로 형질전환된다. 다른 실시형태에서, 엑소좀-생산 세포는 융합 단백질을 발현하는 벡터로 일시적으로 형질감염된다.
발현 벡터는 노출된 DNA 기술, 양이온 지질-매개 형질감염, 중합체-매개 형질감염, 펩티드-매개 형질감염, 바이러스-매개 감염, 물리적 또는 화학적 작용제 또는 처리, 전기 천공법 등과 같은 임의의 통상적인 방법에 의해 세포 내로 도입될 수 있다. 일 실시형태에서, 벡터로 형질감염된 세포는 엑소좀의 공급원으로서 직접적으로 사용될 수 있다(일시적 형질감염). 대안적으로, 세포는 융합 단백질을 발현하는 안정적으로 형질전환된 클론의 선택을 용이하게 하는 선별 마커와 함께, IL-27 융합 단백질을 발현하는 벡터로 형질감염될 수 있다. 이러한 세포에 의해 생성된 엑소좀은 본원의 인용 문헌 및 실시예에서 추가로 기술된 바와 같이 원심분리, 크로마토그래피 등에 의해 본 기술 분야에 공지된 기술에 따라 수집 및/또는 정제될 수 있다.
포유동물 세포에 적합한 선별 마커의 예는 디하이드로폴레이트 리덕타제(dihydrofolate reductase, DHFR), 티미딘 키나제, 네오마이신, 네오마이신 유사체 G418, 하이드로마이신 및 퓨로마이신을 포함한다. 이러한 선별 마커가 포유동물 숙주 세포로 성공적으로 전달될 때, 형질전환된 포유동물 숙주 세포는 선택적인 압력하에 놓이는 경우 생존할 수 있다. 선택적 체제의 널리 사용되는 두 가지의 구분된 카테고리가 있다. 첫 번째 카테고리는 세포의 신진 대사 및 보충된 배치와 독립적으로 성장할 수 있는 능력이 결여된 돌연변이 세포주의 사용을 기반으로 한다. 두 가지 예는 CHO DHFR- 세포와 마우스 LTK- 세포이다. 이들 세포는 티미딘 또는 하이포크산틴(hypoxanthine)과 같은 영양소를 첨가하지 않는 경우 성장할 수 있는 능력이 부족하다. 이들 세포는 완전한 뉴클레오티드 합성 경로에 필요한 특정 유전자가 부족하기 때문에, 누락된 뉴클레오티드가 보충된 배지에서 제공되지 않으면 살아남을 수 없다. 배지를 보충하는 대안은 각각의 유전자가 결핍된 세포에 온전한 DHFR 또는 TK 유전자를 도입하여 이들의 성장 요구 조건을 변경하는 것이다. DHFR 또는 TK 유전자로 형질전환되지 않은 개별 세포는 보충되지 않은 배지에서 생존할 수 없다.
두 번째 카테고리는 모든 세포 유형에서 사용되는 선택 방식을 의미하고 돌연변이 세포주의 사용을 필요로 하지 않는 우성 선택이다. 이러한 방식은 일반적으로 숙주 세포의 성장을 억제하기 위해 약물을 사용한다. 새로운 유전자를 갖는 이들 세포는 약물 내성을 전달하는 단백질을 발현하고 선택을 견뎌낼 것이다. 이러한 우성 선택의 예는 네오마이신, 마이코페놀산 또는 하이그로마이신을 사용한다. 세 가지 예는 적절한 약물 G418 또는 네오마이신(게네티신), xgpt(마이코페놀산) 또는 하이그로마이신 각각에 대한 내성을 전달하기 위해 진핵생물 제어 하에 박테리아 유전자를 사용한다. 그 밖에 네오마이신 유사체 G418과 퓨로마이신을 포함된다.
예시적인 IL-27 융합 단백질-발현 세포는 인간 주르카트(Jurkat), 인간 배아 신장(human embryonic kidney, HEK) 293, 중국 햄스터 난소(Chinese hamster ovary, CHO) 세포, 마우스 WEHI 섬유육종 세포 및 레이시마니아 타렌톨라에(Leishmania tarentolae)와 같은 단세포 원생동물 종을 포함한다. 또한, 안정적으로 형질전환된 융합 단백질 생산 세포주는 c-myc 또는 다른 불멸화 제제(immortalizing agent)로 불멸화된 일차 세포를 사용하여 생산될 수 있다.
일 실시형태에서, 세포주는 레이시마니아 타렌톨라에와 같은 안정적으로 형질전환된 레이시마니아 세포주를 포함한다. 레이시마니아는 포유동물형 글리코실화 패턴을 나타내는 진핵생물 단백질의 높은 수준의 발현을 위해 견고하고 빠르게 성장하는 단세포 숙주를 제공하는 것으로 알려져 있다. 상업적으로 이용 가능한 레이시마니아 진핵생물 발현 키트가 사용될 수 있다(Jena Bioscience GmbH, Jena, Germany).
일부 실시형태에서, 세포주는 배양 리터당 적어도 1 mg, 적어도 2 mg, 적어도 5 mg, 적어도 10 mg, 적어도 20 mg, 적어도 50 mg, 또는 적어도 100 mg의 IL-27 융합 단백질을 발현한다.
IL-27 융합 단백질은 RPMI, DMEM 및 AIM V®와 같은 임의의 적절한 배양 배지에서 배양 및 유지 이후 IL-27 융합 단백질 발현 세포로부터 분리될 수 있다. IL-27 융합 단백질은 본 기술 분야의 숙련자에게 공지된 통상적인 단백질 정제 방법(예를 들어, 친화성 정제, 크로마토그래피 등)을 사용하여 정제될 수 있다. 일부 실시형태에서, IL-27 융합 단백질은 배양 상등액으로부터의 분리를 위해 배양 상등액 내로 분비하도록 조작된다. IL-27 융합 단백질은 Fc 결합 영역을 포함하는 IL-27 융합 단백질의 단백질-A 또는 단백질-G 면역 친화성 정제의 사용을 포함하는 통상적인 단백질 정제 방법을 사용하여 분리될 수 있다.
상기한 방법은 PD-1, PD-L1 및 PD-L2에 대한 항체 및 우성 음성 단백질을 포함하는 단백질을 발현하는데 유사하게 사용될 수 있다.
본 발명은 다음의 실시예에 의해 더 설명되며, 이들 실시예는 본 발명을 제한하는 것으로 해석되어서는 안 된다. 본 출원 전반에 걸쳐 인용된 모든 참고 문헌, 특허 및 공개된 특허 출원의 내용 및 도면과 표가 본원에 참고로 포함된다.
실시예
실시예
1. 재조합
아데노
-관련 바이러스(
AAV
) 벡터에 의한
IL
-27 융합 단백질의 발현
EBI3, p28 및 이들 사이의 링커를 함유하는 cDNA를 프라이머 mIL-27(Xho1): 5'-AAT CTA CTC GAG ATC ACC GGT AGG AGG GCC AA-3'(서열번호 139) 및 mIL-27(EcoRV): 5'-ATG TAT GAT ATC ATG TCG AGC TAG CTT AGG AA-3'(서열번호 140)을 사용하여 pUNO1-mIL27(ebi3p28)(Invivogen)로 PCR 증폭하였다. 일 실시형태에서, PCR 증폭 산물을 XhoI/EcoRV로 절단하고, CMV-치킨 베타-액틴 하이브리드(CAG) 프로모터의 제어 하에 AAV-8 발현 벡터(pAM/CBA-pl-WPRE-bGH, 서열번호 141)에 연결하여 IL-27 발현 벡터를 형성하였다. 기재된 바와 같이 293K 세포에서 pAAV-RC 벡터(AAV 혈청형 8, AAV8) 및 아데노바이러스 헬퍼 벡터를 사용하여 IL-27 발현 벡터를 패키징하여(Wang Z et al., Nat Biotechnol. 2005;23(3):321-8; and Qiao C, et al. Hum Gene Ther. 2008;19(3):241-54), pUNO1-mIL27(ebi3p28) 벡터 내에서 코딩된 IL-27 융합 단백질을 발현하는 AAV8-기반 재조합 AAV 벡터인 AAV-IL-27을 생성하였다.
실시예
2. 암 면역 요법을 위한 치료제로서의
AAV
-
IL
-27의 사용
IL-27이 잠재적인 암 치료제로서 사용될 수 있는지를 결정하기 위해, IL-27을 발현하는 재조합 아데노-관련 바이러스 벡터(AAV-IL-27)의 근육내(i.m.) 주사를 수행하였고, 그 결과를 실시예 1의 대조군 AAV 벡터(AAV-Ctrl)와 비교하였다. AAV-IL-27 마우스당 2×1011 개의 결함 바이러스 입자(defective viral particle, DVP)의 근육내 주사는 마우스의 말초 혈액에서 높고 안정한 IL-27 생산을 달성하였다(도 1A).
AAV-IL-27이 B16 흑색종을 갖는 마우스를 치료하는데 사용될 수 있는지 여부를 테스트하기 위해, B16.F10 흑색종 세포(2×105/마우스)를 C57BL/6 마우스에 피하(s.c.) 주사하였다. 종양 세포 주입 4 일 후, 마우스에 AAV-IL-27 또는 AAV-Ctrl 바이러스를 마우스당 2×1011 DVP의 용량으로 근육내 주사하였다. 도 1B에 나타낸 바와 같이, AAV-Ctrl 바이러스 처리된 마우스에서 종양이 점차적으로 증가하는 반면, B16 종양 성장은 AAV-IL-27 처리된 마우스에서 유의하게 억제되었다. 또한, B16.F10 세포를 B6 마우스에 정맥내(i.v.) 주사하고, 4 일 후 단일 용량(2×1011 DVP/마우스)의 AAV-IL-27 또는 AAV-Ctrl 대조 바이러스를 근육내(i.m.) 주사하였다. 도 1C에 나타낸 바와 같이, AAV-IL-27 처리를 받은 마우스는 AAV-Ctrl 바이러스로 처리된 마우스에 비해 폐에서 종양 병소가 현저하게 감소되었다. 결과적으로, 두 그룹의 쥐의 폐의 무게는 크게 달랐다. 따라서, AAV-IL-27 처리는 B16 흑색종 종양 성장 및 폐 전이를 유의하게 억제한다.
IL-27은 Th1/Tc1 반응을 향상시키는 것으로 알려져 있기 때문에, T 세포 반응이 AAV-IL-27과 AAV-Ctrl 바이러스 처리된 마우스 간에 차이가 있는지 조사하는 것이 흥미로웠다. 유동 세포 분석을 사용하여 AAV-IL-27 처리된 마우스 및 대조군의 비장 및 종양에서의 T 세포 반응을 분석하였다. 현저하게, FoxP3+ Treg 세포는 비장에서 고갈되었고 AAV-IL-27 처리된 마우스의 종양에서 크게 감소한 것이 밝혀졌다(도 2A). 또한, AAV-IL-27 처리는 종양에서 IFN-γ 생산 CD4+ 및 CD8+ T 세포의 비율을 유의하게 증가시키는 것으로 밝혀졌다(도 2B). 이러한 결과는 AAV-IL-27 처리가 말초 림프 기관에서 Treg 세포를 고갈시키고 종양에서 Th1/Tc1 반응을 향상 시키는 것을 보여준다.
실시예
3.
AAV
-
IL
-27 및 다른 면역 요법을 포함하는 병용 요법
AAV-IL-27 처리가 Treg 세포를 감소시키고 종양 특이적 Th1/Tc1 세포를 증가시키긴 하였지만, AAV-IL-27의 항-종양 효능은 불완전했는데, 이는 모든 AAV-IL-27 처리된 마우스에서 종양이 결국 성장하였기 때문이다. 따라서, AAV-IL-27 처리의 효능을 제한하는 요인을 조사하는 것이 흥미로웠다.
최근에, IL-27은 T 세포에서 PD1과의 상호 작용을 통해 T 세포 내성을 유도하는, T 세포에서의 PD-L1의 발현을 유도하는 것으로 나타났다. 이러한 관찰은 AAV-IL-27 처리를 받은 혈액, 비장 및 종양으로부터의 CD4+ 및 CD8+ T 세포에서 확인되었다(도 3A). 또한, 종양 침윤성 CD4+ 및 CD8+ T 세포의 상당한 비율이 PD1을 발현하는 것으로 밝혀졌고, AAV-IL-27 처리는 T 세포에서 PD1 발현을 상향 조절하는 것으로 밝혀졌다(도 3B).
T 세포에서 IL-27에 의해 유도된 PD-L1 발현이 IL-27 처리의 효과를 감소시키는지를 결정하기 위해, C57BL/6 마우스의 네 그룹(n = 5 마우스/그룹)에 2×105 개의 B16.F10 세포를 피하 주사하였고, 이어서 다음의 네 가지 상이한 처리 중 하나를 받게 하였다: (1) AAV-Ctrl 바이러스 + 대조군 mAb; (2) AAV-Ctrl 바이러스 + 항-PD1; (3) AAV-IL-27 바이러스 + 대조군 mAb; 및 (4) AAV-IL-27 바이러스 + 항-PD1. 종양 세포 주입 후 4 일째에 2×1011 DVP의 용량으로 각각의 마우스에 AAV 바이러스를 근육내(i.m.) 주사하였다. 4 일째부터 시작하여 3일 간격으로 마우스당 300 μg의 용량으로 항체를 마우스에 복강내(i.p.) 주입하였다. 도 4A에 나타낸 바와 같이, AAV-IL-27 + 대조군 mAb로 처리된 마우스는 AAV-Ctrl 바이러스 + 대조군 mAb 또는 AAV-Ctrl 바이러스 + 항-PD1로 처리된 마우스와 비교하여 종양 성장이 유의하게 감소되었다.
가장 유의미한 종양 성장 억제는 AAV-IL-27 + 항-PD-1로 처리된 마우스에서 관찰되었다(도 4A). AAV-IL-27 + 항-PD-1로 처리된 마우스의 효능을 AAV-IL-27 + 항-CTLA4-4 처리를 받은 마우스와 비교하였다. 이 분석은 PD1 차단과 함께 IL-27 발현이 B16 흑색종 종양 성장을 억제하는데 상당한 상승 효과를 나타냄을 보였다(도 4B). 대조적으로, AAV-IL-27 투여는 B16 흑색종 종양 성장 억제에서 CTLA4 차단과의 어떠한 상승 효과도 나타내지 않았다(도 4B).
AAV-매개 IL-27 발현 및 PD1 차단의 병용 요법이 종양 억제를 유도하는 메커니즘을 조사하기 위해, AAV-IL-27 + 항-PD1 처리된 마우스 및 다른 대조군 마우스의 종양 침윤 림프구(tumor infiltrating lymphocyte, TIL)를 분석하였다. AAV-IL-27 또는 항-PD1 처리만으로 IFN-γ 생산 CD4+(도 5A) 및 CD8+(도 5B) T 세포의 비율을 증가시키는 것으로 밝혀졌다. 그러나, AAV-IL-27 + 항-PD-1 병용 요법은 IFN-γ 생산 CD4+(도 5A) 및 CD8+(도 5B) T 세포의 비율을 크게 증가시켰다. 그러나, 항-PD-1 처리에 관계없이, AAV-IL-27은 비장(도 6A) 및 종양 미세 환경(도 6B) 모두에서 FoxP3+ Treg를 억제하였다.
B16 종양의 종양 미세 환경에서, Treg는 IL-10의 주요 공급원인 것으로 나타났다(도 6B). 그러나, AAV-IL-27 및 AAV-IL-27 + 항-PD-1 처리된 마우스에서, 종래의 TIL CD4+ T 세포가 아닌 종래의 TIL CD4+ T 세포가 비장에서 IL-10를 생산하도록 유도되었고, AAV -IL-27 및 항-PD1 처리는 CD4+ T 세포에서 IL-10 분비를 상승적으로 유도하는 것으로 나타났다(도 6B). IL-27은 비장 CD8+ T 세포에서 IL-10을 유도하지 못했지만(도 7A), 종양의 CD8+ T 세포에서 IL-10의 강력한 유도가 관찰되었고(도 7B), AAV-IL-27 및 항-PD1의 병용 요법은 TIL CD8+ T 세포에서의 IL-10 유도에 상승 효과를 나타냈다.
실시예
4. 자가면역 질환 치료를 위한
AAV
-
IL
-27의 사용
AAV-IL-27이 자가면역 질환을 악화시키는지 또는 약화시키는지를 테스트하기 위해, C57BL/6 마우스에서 실험적 자가면역 뇌척수염(experimental autoimmune encephalomyelitis, EAE)을 유도한 다음, 통상적인 절차에 따라 MOG 펩티드를 사용하여 대조군 AAV 또는 AAV-IL-27로 처리하였다. 도 8A에 나타낸 바와 같이, 대조군 AAV로 처리된 EAE 마우스는 강력한 자가면역 질환을 생성하였다. 대조적으로, AAV-IL-27로 처리된 EAE 마우스는 Th1의 생성 증가 및 Treg의 생성 감소에도 불구하고 임상 징후를 나타내지 않았다(도 8B). AAV-IL-27 처리된 마우스에서 EAE의 감소는 Th17+ 세포 비율의 감소 및 Tr1+ 세포 비율의 증가와 관련이 있었다(도 8B).
자가면역 질환 치료에 AAV-IL-27의 일반적인 유용성을 테스트하기 위해 면역 결핍 Rag1-결핍 마우스에 CD45RBhi CD4 T 세포의 입양 전달에 의해 염증성 장질환을 유발하였다. 도 9에 나타낸 바와 같이, AAV-IL-27 처리는 체중 감소를 방지하였고(도 9A), 결장 팽창을 감소시켰으며(도 9B) 및 염증성 장질환의 모든 임상 징후를 제거하였다(도 9C). 대조적으로, IL-27의 p28 서브유닛과 동일한 AAV-IL30은 거의 또는 전혀 영향을 미치지 않았다.
도 8 및 도 9의 결과는 IL-27 및 본원에 개시된 IL-27로 구성되는 다양한 형태의 융합 단백질이 자가면역 질환을 치료하는데 사용될 수 있음을 보여준다. IL-27 처리는 활동성 질환 발병을 보이는 환자 또는 자가면역 질환에 대해 차도가 있는 환자에게 사용될 수 있다.
실시예
5.
IL
-27 융합 단백질
GS
-
IL27Fc
,
PV
-
IL27Fc
,
GS
-
IL27mFc
및
PV
-IL27mFc의 조성 및 생산
바이러스 벡터와 비교하여, 재조합 단백질은 임상적 용도로 표준화하기가 쉬우며 규제 승인을 위한 더욱 쉬운 경로를 갖는다. 그러나 복잡한 단백질의 생성에는 몇 가지 문제가 있다. 첫째, IL-27은 두 개의 사슬로 이루어져 있으므로 별도로 발현하면 함께 정확한 접힘이 어려울 수 있다. 장래에 대규모 생산 및 정제를 보장하고 증가된 생체내 안정성을 제공하기 위해, IL-27 융합 구조물을 면역글로불린 Fc 단편에 융합시켰다. 특정 실시형태에서, 돌연변이는 항체 의존성 세포 독성(ADCC)을 포함하는, Fc 결합과 관련된 바람직하지 않은 생물학적 효과를 방지하기 위해 도입되었다. 따라서, 두 개의 IL-27 융합 단백질이 생성되었다(서열번호 71 및 서열번호 73).
도면의 상부에 나타낸 바와 같이, 도 10A의 IL27Fc 융합 단백질은 N에서 C 말단까지 신호 펩티드, EBI3, PV(서열번호 7) 또는 GS 링커(서열번호 8), p24 및 Fc로 구성된다. 도 10A는 하나는 PV 링커(왼쪽 패널)이고 다른 하나는 GS 링커(오른쪽 패널)인 두 개의 융합 단백질의 생성을 나타내고 있다. 왼쪽 패널은 서열번호 71의 아미노산 서열을 갖는 융합 단백질을 나타내는 반면, 오른쪽은 서열번호 73의 아미노산 서열을 갖는 융합 단백질을 나타낸다. 단백질은 환원(왼쪽 레인) 및 비-환원(오른쪽 레인) 조건 하에서 SDS-PAGE로 분석하였다. 이 분석은 융합 단백질이 다이머를 형성하는 것을 확인했다. 단백질 수율은 겔 사진 아래에 제공되어 있다.
이들 두 개의 융합 단백질의 성공적인 정제는 친화성 정제에 의해 달성되었고; 두 개의 융합 단백질(서열번호 71, 서열번호 73)을 유사한 수율로 발현시키고 정제하였다(도 10A). 이러한 데이터는 돌연변이 Fc 형태가 정제에 심각한 악영향 없이 생성될 수 있음을 보여 주었다.
상기한 바와 같이, 표 1 및 표 2를 포함하여, 여러 추가적인 구조적 구성이 고려된다. 실시예 5에서 IgG1의 사용은 IgG Fc(즉, IgG 중쇄 불변 영역)에 대한 예시적인 IgG 동형 소스일 뿐이며; 도 10에 나타낸 동일한 설계를 기반으로 다른 Fc 서브 클래스가 또한 사용될 수 있다.
실시예
6.
IL
-27 융합 단백질 활성의 기능 분석
IL-27 융합 단백질의 생물학적 활성을 테스트하기 위해, IL-10 생산의 유도를 시험관내 스크리닝에 사용하였는데, 이러한 활성은 IL-27 유도된 T 세포 생존 및 종양 거부에 필수적이기 때문이다. 도 11A에 나타낸 바와 같이, 실시예 5에 기재된 IL-27 융합 단백질은 항-CD3 자극된 비장 세포에서 IL-10의 강력한 유도제인 것으로 밝혀졌다. 또한, 저용량의 IL-27 융합 단백질은 IFNγ 생산을 완만하게 향상시키는 반면, 고용량은 IFNγ 생산을 억제하는데, 이는 고용량에서 융합 단백질이 자가면역 질환을 억제하는데 사용될 수 있음을 시사한다(도 11B).
이러한 기능 분석은 IL-27 융합 단백질의 생물학적 활성을 모니터링하는데 사용될 수 있으며 높은 수율 및 효과적인 생물학적 활성을 보장하기 위해 아미노산 조성을 최적화하는데 사용될 수 있다.
실시예
7.
IL
-27 융합 단백질의
생체내
직접 주입
IL27mFc가 종양 거부를 촉진시킬 수 있는지 여부를 테스트하기 위해, C57BL/6 마우스에게 B16F10 종양 세포주를 투여하였다. IL-27은 항-PD-1 항체와 함께 상승 작용을 하고 항-PD-1만이 마우스의 종양 성장에 영향을 미치지 않기 때문에(도 4), 항-PD1 mAb와 함께 IL27mFc의 융합 단백질의 직접 주입을 이용한 병용 요법을 테스트하였다. 도 12A에 나타낸 바와 같이, 항-PD1 항체와 함께 IL-27mFc 융합 단백질의 직접 주입은 종양 성장을 유의하게 지연시켰다. 이러한 데이터는 IL-27Fc가 항-PD1과 함께 사용될 때 종양 성장의 강력한 억제제라는 것을 보여 주었다. 바람직하게, 인간의 구성 성분에 가장 상응하는 융합 단백질 조성물이 암 치료에 사용될 것이다.
실시예
8.
CD24
-
IL
-27-
Fc
융합 단백질의 생산
항-CTLA-4 mAb와 같은 많은 암 면역 요법은 부정적인 자가면역 효과를 야기한다. 따라서, 암 치료 효과를 감소시키지 않으면서 자가면역 질환에 대한 치료 효과를 더욱 증진시키는 것이 바람직하다. 따라서, 일 실시형태에서, CD24의 세포외 도메인이 IL27Fc에 삽입된 IL-27 융합 단백질을 구축하였다(도 10B). 도 10B(상부 패널)에 나타낸 바와 같이, CD24IL27Fc 프로-단백질은 신호 펩티드, CD24 세포외 도메인(CD24 ECD), 링커에 의해 연결된 EBI3 및 p28 서브유닛, 및 IgG Fc를 함유한다. 서열번호 79의 아미노산 서열을 함유하는 이들 단백질 중 하나가 CHO 세포로의 형질감염에 의해 성공적으로 발현되었다. 도 10B(하부 패널)에 나타낸 바와 같이, 이 융합 단백질은 IL27Fc(서열번호 71, 서열번호 73)와 비교할 때 대략 6 배 더 높은 수준으로 발현되는 것으로 밝혀졌다. 이러한 데이터는 CD24 ECD의 포함이 아마도 증가된 안정성 및/또는 용해도를 통해 발현 및 수율을 증가시킬 수 있음을 입증했다.
실시예
9. 암 치료제로서의
CD24IL27Fc
암 치료를 위한 치료제로서의 CD24IL27mFc(서열번호 79)의 가능성을 테스트하기 위해, B10F10 종양 세포를 동계 C57BL/6 마우스에 피하 이식하였다. 종양이 분명하게 뚜렷해지는 8 일째에, 마우스를 Fc 대조군인 CD24IL27mFc 융합 단백질(서열번호79), 항-PD1, 또는 CD24IL27mFc및 항-PD1로 처리하였다. 3 일간 처리한 후 4 주 이상 관찰하였다. 도 13A에 나타낸 바와 같이, 항-PD-1은 종양 성장을 감소시키지 않은 반면, CD24IL27mFc는 단독으로 또는 항-PD1과 조합하여 종양 성장을 유의하게 감소시켰다(도 13A). 항-PD-1 및 CD24IL27mFc 둘 다를 사용하는 경우 통계적으로 유의한 생존 연장이 관찰되었다(도 13B). 또한, 이러한 데이터는 CD24IL24Fc가 단독 요법 또는 항-PD-1과 같은 다른 면역요법과의 병용 요법에서 사용될 수 있다는 개념을 실행할 수 있게 한다.
실시예
10.
IPEX
증후군 치료를 위한 모델 시스템
Foxp3 유전자의 돌연변이는 마우스와 인간에서 치명적인 자가면역 질환을 유발한다. 증상은 면역 조절 장애, 다발성 내분비병증, 장질환 X-연관 증후군(immune dysfunction, polyendocrinopathy, enteropathy, X-linked (IPEX) syndrome))로서 IPEX라고 불린다. 골수 이식이 최선의 치료법으로 등장했지만 아직 치유는 가능하지 않다. 이 질환에 걸린 대부분의 아이들은 출생 후 2 년 이내에 사망한다. IPEX 증후군은 남성에서 독점적인 발현이 있는 X 연관 열성 장애이다. Foxp3 유전자(Foxp3sf)에서 돌연변이가 있는 Scurfy 마우스가 인간 IPEX와 유사한 병인을 보이기 때문에 이 모델을 사용하여 IL-27-rAAV가 IPEX를 치료할 수 있는지 여부를 확인했다. 도 14에 나타낸 바와 같이, IL-27-rAAV의 단일 주입은 출생 전후 기간 동안 증가된 체중에 의해 입증된 바와 같이 마우스의 발달을 크게 개선시켰다(도 14A). 또한, 치료는 Scurfy 마우스에서 생존율을 거의 두 배로 증가시켰다(도 14B).
상기 설명은 본 기술 분야의 숙련자에게 본 발명을 실시하는 방법을 교시하기 위한 것이며, 설명을 읽을 때 숙련된 기술자에게 분명해지도록 모든 명백한 수정 및 변형을 상세히 설명하기 위한 것은 아니다. 그러나, 이러한 모든 명백한 수정 및 변형은 다음의 청구 범위에 의해 한정되는 본 발명의 범위 내에 포함되기 위한 것이다. 청구 범위는 문맥이 구체적으로 반대를 나타내는 경우를 제외하고 청구된 구성 요소 및 단계를 의도된 목적을 달성하는데 효과적인 임의의 순서로 포함하기 위한 것이다.
SEQUENCE LISTING
<110> Children's National Medical Center
Liu, Yang
Bai, Xue-Feng
<120> Immunotherapeutics For Cancer and Autoimmune Diseases
<130> 2005-004 PCT (227543)
<150> 62/076,182
<151> 2014-11-06
<160> 142
<170> PatentIn version 3.5
<210> 1
<211> 19
<212> PRT
<213> Artificial sequence
<220>
<223> Synthetic
<400> 1
Met Glu Trp Ser Trp Val Phe Leu Phe Phe Leu Ser Val Thr Thr Gly
1 5 10 15
Val His Ser
<210> 2
<211> 19
<212> PRT
<213> Homo sapiens
<400> 2
Met Glu Phe Gly Leu Ser Trp Val Phe Leu Val Ala Leu Leu Arg Gly
1 5 10 15
Val Gln Cys
<210> 3
<211> 27
<212> PRT
<213> Mus musculus
<400> 3
Asn Gln Thr Ser Val Ala Pro Phe Pro Gly Asn Gln Asn Ile Ser Ala
1 5 10 15
Ser Pro Asn Pro Ser Asn Ala Thr Thr Arg Gly
20 25
<210> 4
<211> 30
<212> PRT
<213> Homo sapiens
<400> 4
Ser Glu Thr Thr Thr Gly Thr Ser Ser Asn Ser Ser Gln Ser Thr Ser
1 5 10 15
Asn Ser Gly Leu Ala Pro Asn Pro Thr Asn Ala Thr Thr Lys
20 25 30
<210> 5
<211> 206
<212> PRT
<213> Mus musculus
<400> 5
Ala Leu Val Ala Leu Ser Gln Pro Arg Val Gln Cys His Ala Ser Arg
1 5 10 15
Tyr Pro Val Ala Val Asp Cys Ser Trp Thr Pro Leu Gln Ala Pro Asn
20 25 30
Ser Thr Arg Ser Thr Ser Phe Ile Ala Thr Tyr Arg Leu Gly Val Ala
35 40 45
Thr Gln Gln Gln Ser Gln Pro Cys Leu Gln Arg Ser Pro Gln Ala Ser
50 55 60
Arg Cys Thr Ile Pro Asp Val His Leu Phe Ser Thr Val Pro Tyr Met
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<212> PRT
<213> Mus musculus
<400> 25
Leu Phe Thr Val Thr Ala Pro Lys Glu Val Tyr Thr Val Asp Val Gly
1 5 10 15
Ser Ser Val Ser Leu Glu Cys Asp Phe Asp Arg Arg Glu Cys Thr Glu
20 25 30
Leu Glu Gly Ile Arg Ala Ser Leu Gln Lys Val Glu Asn Asp Thr Ser
35 40 45
Leu Gln Ser Glu Arg Ala Thr Leu Leu Glu Glu Gln Leu Pro Leu Gly
50 55 60
Lys Ala Leu Phe His Ile Pro Ser Val Gln Val Arg Asp Ser Gly Gln
65 70 75 80
Tyr Arg Cys Leu Val Ile Cys Gly Ala Ala Trp Asp Tyr Lys Tyr Leu
85 90 95
Thr Val Lys Val Lys Ala Ser Tyr Met Arg Ile Asp Thr Arg Ile Leu
100 105 110
Glu Val Pro Gly Thr Gly Glu Val Gln Leu Thr Cys Gln Ala Arg Gly
115 120 125
Tyr Pro Leu Ala Glu Val Ser Trp Gln Asn Val Ser Val Pro Ala Asn
130 135 140
Thr Ser His Ile Arg Thr Pro Glu Gly Leu Tyr Gln Val Thr Ser Val
145 150 155 160
Leu Arg Leu Lys Pro Gln Pro Ser Arg Asn Phe Ser Cys Met Phe Trp
165 170 175
Asn Ala His Met Lys Glu Leu Thr Ser Ala Ile Ile Asp Pro Leu Ser
180 185 190
Arg Met Glu Pro Lys Val Pro Arg Thr Trp Pro Leu His Val Phe Ile
195 200 205
Pro Ala Cys Thr Ile Ala Leu Ile Phe Leu Ala Ile Val Ile Ile
210 215 220
<210> 26
<211> 222
<212> PRT
<213> Homo sapiens
<400> 26
Leu Phe Thr Val Thr Val Pro Lys Glu Leu Tyr Ile Ile Glu His Gly
1 5 10 15
Ser Asn Val Thr Leu Glu Cys Asn Phe Asp Thr Gly Ser His Val Asn
20 25 30
Leu Gly Ala Ile Thr Ala Ser Leu Gln Lys Val Glu Asn Asp Thr Ser
35 40 45
Pro His Arg Glu Arg Ala Thr Leu Leu Glu Glu Gln Leu Pro Leu Gly
50 55 60
Lys Ala Ser Phe His Ile Pro Gln Val Gln Val Arg Asp Glu Gly Gln
65 70 75 80
Tyr Gln Cys Ile Ile Ile Tyr Gly Val Ala Trp Asp Tyr Lys Tyr Leu
85 90 95
Thr Leu Lys Val Lys Ala Ser Tyr Arg Lys Ile Asn Thr His Ile Leu
100 105 110
Lys Val Pro Glu Thr Asp Glu Val Glu Leu Thr Cys Gln Ala Thr Gly
115 120 125
Tyr Pro Leu Ala Glu Val Ser Trp Pro Asn Val Ser Val Pro Ala Asn
130 135 140
Thr Ser His Ser Arg Thr Pro Glu Gly Leu Tyr Gln Val Thr Ser Val
145 150 155 160
Leu Arg Leu Lys Pro Pro Pro Gly Arg Asn Phe Ser Cys Val Phe Trp
165 170 175
Asn Thr His Val Arg Glu Leu Thr Leu Ala Ser Ile Asp Leu Gln Ser
180 185 190
Gln Met Glu Pro Arg Thr His Pro Thr Trp Leu Leu His Ile Phe Ile
195 200 205
Pro Phe Cys Ile Ile Ala Phe Ile Phe Ile Ala Thr Val Ile
210 215 220
<210> 27
<211> 209
<212> PRT
<213> Mus musculus
<400> 27
Val Asp Glu Gln Leu Ser Lys Ser Val Lys Asp Lys Val Leu Leu Pro
1 5 10 15
Cys Arg Tyr Asn Ser Pro His Glu Asp Glu Ser Glu Asp Arg Ile Tyr
20 25 30
Trp Gln Lys His Asp Lys Val Val Leu Ser Val Ile Ala Gly Lys Leu
35 40 45
Lys Val Trp Pro Glu Tyr Lys Asn Arg Thr Leu Tyr Asp Asn Thr Thr
50 55 60
Tyr Ser Leu Ile Ile Leu Gly Leu Val Leu Ser Asp Arg Gly Thr Tyr
65 70 75 80
Ser Cys Val Val Gln Lys Lys Glu Arg Gly Thr Tyr Glu Val Lys His
85 90 95
Leu Ala Leu Val Lys Leu Ser Ile Lys Ala Asp Phe Ser Thr Pro Asn
100 105 110
Ile Thr Glu Ser Gly Asn Pro Ser Ala Asp Thr Lys Arg Ile Thr Cys
115 120 125
Phe Ala Ser Gly Gly Phe Pro Lys Pro Arg Phe Ser Trp Leu Glu Asn
130 135 140
Gly Arg Glu Leu Pro Gly Ile Asn Thr Thr Ile Ser Gln Asp Pro Glu
145 150 155 160
Ser Glu Leu Tyr Thr Ile Ser Ser Gln Leu Asp Phe Asn Thr Thr Arg
165 170 175
Asn His Thr Ile Lys Cys Leu Ile Lys Tyr Gly Asp Ala His Val Ser
180 185 190
Glu Asp Phe Thr Trp Glu Lys Pro Pro Glu Asp Pro Pro Asp Ser Lys
195 200 205
Asn
<210> 28
<211> 208
<212> PRT
<213> Homo sapiens
<400> 28
Val Ile His Val Thr Lys Glu Val Lys Glu Val Ala Thr Leu Ser Cys
1 5 10 15
Gly His Asn Val Ser Val Glu Glu Leu Ala Gln Thr Arg Ile Tyr Trp
20 25 30
Gln Lys Glu Lys Lys Met Val Leu Thr Met Met Ser Gly Asp Met Asn
35 40 45
Ile Trp Pro Glu Tyr Lys Asn Arg Thr Ile Phe Asp Ile Thr Asn Asn
50 55 60
Leu Ser Ile Val Ile Leu Ala Leu Arg Pro Ser Asp Glu Gly Thr Tyr
65 70 75 80
Glu Cys Val Val Leu Lys Tyr Glu Lys Asp Ala Phe Lys Arg Glu His
85 90 95
Leu Ala Glu Val Thr Leu Ser Val Lys Ala Asp Phe Pro Thr Pro Ser
100 105 110
Ile Ser Asp Phe Glu Ile Pro Thr Ser Asn Ile Arg Arg Ile Ile Cys
115 120 125
Ser Thr Ser Gly Gly Phe Pro Glu Pro His Leu Ser Trp Leu Glu Asn
130 135 140
Gly Glu Glu Leu Asn Ala Ile Asn Thr Thr Val Ser Gln Asp Pro Glu
145 150 155 160
Thr Glu Leu Tyr Ala Val Ser Ser Lys Leu Asp Phe Asn Met Thr Thr
165 170 175
Asn His Ser Phe Met Cys Leu Ile Lys Tyr Gly His Leu Arg Val Asn
180 185 190
Gln Thr Phe Asn Trp Asn Thr Thr Lys Gln Glu His Phe Pro Asp Asn
195 200 205
<210> 29
<211> 231
<212> PRT
<213> Mus musculus
<400> 29
Val Asp Glu Gln Leu Ser Lys Ser Val Lys Asp Lys Val Leu Leu Pro
1 5 10 15
Cys Arg Tyr Asn Ser Pro His Glu Asp Glu Ser Glu Asp Arg Ile Tyr
20 25 30
Trp Gln Lys His Asp Lys Val Val Leu Ser Val Ile Ala Gly Lys Leu
35 40 45
Lys Val Trp Pro Glu Tyr Lys Asn Arg Thr Leu Tyr Asp Asn Thr Thr
50 55 60
Tyr Ser Leu Ile Ile Leu Gly Leu Val Leu Ser Asp Arg Gly Thr Tyr
65 70 75 80
Ser Cys Val Val Gln Lys Lys Glu Arg Gly Thr Tyr Glu Val Lys His
85 90 95
Leu Ala Leu Val Lys Leu Ser Ile Lys Ala Asp Phe Ser Thr Pro Asn
100 105 110
Ile Thr Glu Ser Gly Asn Pro Ser Ala Asp Thr Lys Arg Ile Thr Cys
115 120 125
Phe Ala Ser Gly Gly Phe Pro Lys Pro Arg Phe Ser Trp Leu Glu Asn
130 135 140
Gly Arg Glu Leu Pro Gly Ile Asn Thr Thr Ile Ser Gln Asp Pro Glu
145 150 155 160
Ser Glu Leu Tyr Thr Ile Ser Ser Gln Leu Asp Phe Asn Thr Thr Arg
165 170 175
Asn His Thr Ile Lys Cys Leu Ile Lys Tyr Gly Asp Ala His Val Ser
180 185 190
Glu Asp Phe Thr Trp Glu Lys Pro Pro Glu Asp Pro Pro Asp Ser Lys
195 200 205
Asn Thr Leu Val Leu Phe Gly Ala Gly Phe Gly Ala Val Ile Thr Val
210 215 220
Val Val Ile Val Val Ile Ile
225 230
<210> 30
<211> 229
<212> PRT
<213> Homo sapiens
<400> 30
Val Ile His Val Thr Lys Glu Val Lys Glu Val Ala Thr Leu Ser Cys
1 5 10 15
Gly His Asn Val Ser Val Glu Glu Leu Ala Gln Thr Arg Ile Tyr Trp
20 25 30
Gln Lys Glu Lys Lys Met Val Leu Thr Met Met Ser Gly Asp Met Asn
35 40 45
Ile Trp Pro Glu Tyr Lys Asn Arg Thr Ile Phe Asp Ile Thr Asn Asn
50 55 60
Leu Ser Ile Val Ile Leu Ala Leu Arg Pro Ser Asp Glu Gly Thr Tyr
65 70 75 80
Glu Cys Val Val Leu Lys Tyr Glu Lys Asp Ala Phe Lys Arg Glu His
85 90 95
Leu Ala Glu Val Thr Leu Ser Val Lys Ala Asp Phe Pro Thr Pro Ser
100 105 110
Ile Ser Asp Phe Glu Ile Pro Thr Ser Asn Ile Arg Arg Ile Ile Cys
115 120 125
Ser Thr Ser Gly Gly Phe Pro Glu Pro His Leu Ser Trp Leu Glu Asn
130 135 140
Gly Glu Glu Leu Asn Ala Ile Asn Thr Thr Val Ser Gln Asp Pro Glu
145 150 155 160
Thr Glu Leu Tyr Ala Val Ser Ser Lys Leu Asp Phe Asn Met Thr Thr
165 170 175
Asn His Ser Phe Met Cys Leu Ile Lys Tyr Gly His Leu Arg Val Asn
180 185 190
Gln Thr Phe Asn Trp Asn Thr Thr Lys Gln Glu His Phe Pro Asp Asn
195 200 205
Leu Leu Pro Ser Trp Ala Ile Thr Leu Ile Ser Val Asn Gly Ile Phe
210 215 220
Val Ile Cys Cys Leu
225
<210> 31
<211> 221
<212> PRT
<213> Mus musculus
<400> 31
Val Ser Val Glu Thr Gln Ala Tyr Phe Asn Gly Thr Ala Tyr Leu Pro
1 5 10 15
Cys Pro Phe Thr Lys Ala Gln Asn Ile Ser Leu Ser Glu Leu Val Val
20 25 30
Phe Trp Gln Asp Gln Gln Lys Leu Val Leu Tyr Glu His Tyr Leu Gly
35 40 45
Thr Glu Lys Leu Asp Ser Val Asn Ala Lys Tyr Leu Gly Arg Thr Ser
50 55 60
Phe Asp Arg Asn Asn Trp Thr Leu Arg Leu His Asn Val Gln Ile Lys
65 70 75 80
Asp Met Gly Ser Tyr Asp Cys Phe Ile Gln Lys Lys Pro Pro Thr Gly
85 90 95
Ser Ile Ile Leu Gln Gln Thr Leu Thr Glu Leu Ser Val Ile Ala Asn
100 105 110
Phe Ser Glu Pro Glu Ile Lys Leu Ala Gln Asn Val Thr Gly Asn Ser
115 120 125
Gly Ile Asn Leu Thr Cys Thr Ser Lys Gln Gly His Pro Lys Pro Lys
130 135 140
Lys Met Tyr Phe Leu Ile Thr Asn Ser Thr Asn Glu Tyr Gly Asp Asn
145 150 155 160
Met Gln Ile Ser Gln Asp Asn Val Thr Glu Leu Phe Ser Ile Ser Asn
165 170 175
Ser Leu Ser Leu Ser Phe Pro Asp Gly Val Trp His Met Thr Val Val
180 185 190
Cys Val Leu Glu Thr Glu Ser Met Lys Ile Ser Ser Lys Pro Leu Asn
195 200 205
Phe Thr Gln Glu Phe Pro Ser Pro Gln Thr Tyr Trp Lys
210 215 220
<210> 32
<211> 224
<212> PRT
<213> Homo sapiens
<400> 32
Ala Pro Leu Lys Ile Gln Ala Tyr Phe Asn Glu Thr Ala Asp Leu Pro
1 5 10 15
Cys Gln Phe Ala Asn Ser Gln Asn Gln Ser Leu Ser Glu Leu Val Val
20 25 30
Phe Trp Gln Asp Gln Glu Asn Leu Val Leu Asn Glu Val Tyr Leu Gly
35 40 45
Lys Glu Lys Phe Asp Ser Val His Ser Lys Tyr Met Gly Arg Thr Ser
50 55 60
Phe Asp Ser Asp Ser Trp Thr Leu Arg Leu His Asn Leu Gln Ile Lys
65 70 75 80
Asp Lys Gly Leu Tyr Gln Cys Ile Ile His His Lys Lys Pro Thr Gly
85 90 95
Met Ile Arg Ile His Gln Met Asn Ser Glu Leu Ser Val Leu Ala Asn
100 105 110
Phe Ser Gln Pro Glu Ile Val Pro Ile Ser Asn Ile Thr Glu Asn Val
115 120 125
Tyr Ile Asn Leu Thr Cys Ser Ser Ile His Gly Tyr Pro Glu Pro Lys
130 135 140
Lys Met Ser Val Leu Leu Arg Thr Lys Asn Ser Thr Ile Glu Tyr Asp
145 150 155 160
Gly Val Met Gln Lys Ser Gln Asp Asn Val Thr Glu Leu Tyr Asp Val
165 170 175
Ser Ile Ser Leu Ser Val Ser Phe Pro Asp Val Thr Ser Asn Met Thr
180 185 190
Ile Phe Cys Ile Leu Glu Thr Asp Lys Thr Arg Leu Leu Ser Ser Pro
195 200 205
Phe Ser Ile Glu Leu Glu Asp Pro Gln Pro Pro Pro Asp His Ile Pro
210 215 220
<210> 33
<211> 242
<212> PRT
<213> Mus musculus
<400> 33
Val Ser Val Glu Thr Gln Ala Tyr Phe Asn Gly Thr Ala Tyr Leu Pro
1 5 10 15
Cys Pro Phe Thr Lys Ala Gln Asn Ile Ser Leu Ser Glu Leu Val Val
20 25 30
Phe Trp Gln Asp Gln Gln Lys Leu Val Leu Tyr Glu His Tyr Leu Gly
35 40 45
Thr Glu Lys Leu Asp Ser Val Asn Ala Lys Tyr Leu Gly Arg Thr Ser
50 55 60
Phe Asp Arg Asn Asn Trp Thr Leu Arg Leu His Asn Val Gln Ile Lys
65 70 75 80
Asp Met Gly Ser Tyr Asp Cys Phe Ile Gln Lys Lys Pro Pro Thr Gly
85 90 95
Ser Ile Ile Leu Gln Gln Thr Leu Thr Glu Leu Ser Val Ile Ala Asn
100 105 110
Phe Ser Glu Pro Glu Ile Lys Leu Ala Gln Asn Val Thr Gly Asn Ser
115 120 125
Gly Ile Asn Leu Thr Cys Thr Ser Lys Gln Gly His Pro Lys Pro Lys
130 135 140
Lys Met Tyr Phe Leu Ile Thr Asn Ser Thr Asn Glu Tyr Gly Asp Asn
145 150 155 160
Met Gln Ile Ser Gln Asp Asn Val Thr Glu Leu Phe Ser Ile Ser Asn
165 170 175
Ser Leu Ser Leu Ser Phe Pro Asp Gly Val Trp His Met Thr Val Val
180 185 190
Cys Val Leu Glu Thr Glu Ser Met Lys Ile Ser Ser Lys Pro Leu Asn
195 200 205
Phe Thr Gln Glu Phe Pro Ser Pro Gln Thr Tyr Trp Lys Glu Ile Thr
210 215 220
Ala Ser Val Thr Val Ala Leu Leu Leu Val Met Leu Leu Ile Ile Val
225 230 235 240
Cys His
<210> 34
<211> 245
<212> PRT
<213> Homo sapiens
<400> 34
Ala Pro Leu Lys Ile Gln Ala Tyr Phe Asn Glu Thr Ala Asp Leu Pro
1 5 10 15
Cys Gln Phe Ala Asn Ser Gln Asn Gln Ser Leu Ser Glu Leu Val Val
20 25 30
Phe Trp Gln Asp Gln Glu Asn Leu Val Leu Asn Glu Val Tyr Leu Gly
35 40 45
Lys Glu Lys Phe Asp Ser Val His Ser Lys Tyr Met Gly Arg Thr Ser
50 55 60
Phe Asp Ser Asp Ser Trp Thr Leu Arg Leu His Asn Leu Gln Ile Lys
65 70 75 80
Asp Lys Gly Leu Tyr Gln Cys Ile Ile His His Lys Lys Pro Thr Gly
85 90 95
Met Ile Arg Ile His Gln Met Asn Ser Glu Leu Ser Val Leu Ala Asn
100 105 110
Phe Ser Gln Pro Glu Ile Val Pro Ile Ser Asn Ile Thr Glu Asn Val
115 120 125
Tyr Ile Asn Leu Thr Cys Ser Ser Ile His Gly Tyr Pro Glu Pro Lys
130 135 140
Lys Met Ser Val Leu Leu Arg Thr Lys Asn Ser Thr Ile Glu Tyr Asp
145 150 155 160
Gly Val Met Gln Lys Ser Gln Asp Asn Val Thr Glu Leu Tyr Asp Val
165 170 175
Ser Ile Ser Leu Ser Val Ser Phe Pro Asp Val Thr Ser Asn Met Thr
180 185 190
Ile Phe Cys Ile Leu Glu Thr Asp Lys Thr Arg Leu Leu Ser Ser Pro
195 200 205
Phe Ser Ile Glu Leu Glu Asp Pro Gln Pro Pro Pro Asp His Ile Pro
210 215 220
Trp Ile Thr Ala Val Leu Pro Thr Val Ile Ile Cys Val Met Val Phe
225 230 235 240
Cys Leu Ile Leu Trp
245
<210> 35
<211> 126
<212> PRT
<213> Mus musculus
<400> 35
Glu Ala Ile Gln Val Thr Gln Pro Ser Val Val Leu Ala Ser Ser His
1 5 10 15
Gly Val Ala Ser Phe Pro Cys Glu Tyr Ser Pro Ser His Asn Thr Asp
20 25 30
Glu Val Arg Val Thr Val Leu Arg Gln Thr Asn Asp Gln Met Thr Glu
35 40 45
Val Cys Ala Thr Thr Phe Thr Glu Lys Asn Thr Val Gly Phe Leu Asp
50 55 60
Tyr Pro Phe Cys Ser Gly Thr Phe Asn Glu Ser Arg Val Asn Leu Thr
65 70 75 80
Ile Gln Gly Leu Arg Ala Val Asp Thr Gly Leu Tyr Leu Cys Lys Val
85 90 95
Glu Leu Met Tyr Pro Pro Pro Tyr Phe Val Gly Met Gly Asn Gly Thr
100 105 110
Gln Ile Tyr Val Ile Asp Pro Glu Pro Cys Pro Asp Ser Asp
115 120 125
<210> 36
<211> 126
<212> PRT
<213> Homo sapiens
<400> 36
Lys Ala Met His Val Ala Gln Pro Ala Val Val Leu Ala Ser Ser Arg
1 5 10 15
Gly Ile Ala Ser Phe Val Cys Glu Tyr Ala Ser Pro Gly Lys Ala Thr
20 25 30
Glu Val Arg Val Thr Val Leu Arg Gln Ala Asp Ser Gln Val Thr Glu
35 40 45
Val Cys Ala Ala Thr Tyr Met Met Gly Asn Glu Leu Thr Phe Leu Asp
50 55 60
Asp Ser Ile Cys Thr Gly Thr Ser Ser Gly Asn Gln Val Asn Leu Thr
65 70 75 80
Ile Gln Gly Leu Arg Ala Met Asp Thr Gly Leu Tyr Ile Cys Lys Val
85 90 95
Glu Leu Met Tyr Pro Pro Pro Tyr Tyr Leu Gly Ile Gly Asn Gly Thr
100 105 110
Gln Ile Tyr Val Ile Asp Pro Glu Pro Cys Pro Asp Ser Asp
115 120 125
<210> 37
<211> 147
<212> PRT
<213> Mus musculus
<400> 37
Glu Ala Ile Gln Val Thr Gln Pro Ser Val Val Leu Ala Ser Ser His
1 5 10 15
Gly Val Ala Ser Phe Pro Cys Glu Tyr Ser Pro Ser His Asn Thr Asp
20 25 30
Glu Val Arg Val Thr Val Leu Arg Gln Thr Asn Asp Gln Met Thr Glu
35 40 45
Val Cys Ala Thr Thr Phe Thr Glu Lys Asn Thr Val Gly Phe Leu Asp
50 55 60
Tyr Pro Phe Cys Ser Gly Thr Phe Asn Glu Ser Arg Val Asn Leu Thr
65 70 75 80
Ile Gln Gly Leu Arg Ala Val Asp Thr Gly Leu Tyr Leu Cys Lys Val
85 90 95
Glu Leu Met Tyr Pro Pro Pro Tyr Phe Val Gly Met Gly Asn Gly Thr
100 105 110
Gln Ile Tyr Val Ile Asp Pro Glu Pro Cys Pro Asp Ser Asp Phe Leu
115 120 125
Leu Trp Ile Leu Val Ala Val Ser Leu Gly Leu Phe Phe Tyr Ser Phe
130 135 140
Leu Val Ser
145
<210> 38
<211> 147
<212> PRT
<213> Homo sapiens
<400> 38
Lys Ala Met His Val Ala Gln Pro Ala Val Val Leu Ala Ser Ser Arg
1 5 10 15
Gly Ile Ala Ser Phe Val Cys Glu Tyr Ala Ser Pro Gly Lys Ala Thr
20 25 30
Glu Val Arg Val Thr Val Leu Arg Gln Ala Asp Ser Gln Val Thr Glu
35 40 45
Val Cys Ala Ala Thr Tyr Met Met Gly Asn Glu Leu Thr Phe Leu Asp
50 55 60
Asp Ser Ile Cys Thr Gly Thr Ser Ser Gly Asn Gln Val Asn Leu Thr
65 70 75 80
Ile Gln Gly Leu Arg Ala Met Asp Thr Gly Leu Tyr Ile Cys Lys Val
85 90 95
Glu Leu Met Tyr Pro Pro Pro Tyr Tyr Leu Gly Ile Gly Asn Gly Thr
100 105 110
Gln Ile Tyr Val Ile Asp Pro Glu Pro Cys Pro Asp Ser Asp Phe Leu
115 120 125
Leu Trp Ile Leu Ala Ala Val Ser Ser Gly Leu Phe Phe Tyr Ser Phe
130 135 140
Leu Leu Thr
145
<210> 39
<211> 126
<212> PRT
<213> Homo sapiens
<400> 39
Lys Ala Met His Val Ala Gln Pro Ala Val Val Leu Ala Ser Ser Arg
1 5 10 15
Gly Ile Ala Ser Phe Val Cys Glu Tyr Ala Ser Pro Gly Lys Tyr Thr
20 25 30
Glu Val Arg Val Thr Val Leu Arg Gln Ala Asp Ser Gln Val Thr Glu
35 40 45
Val Cys Ala Ala Thr Tyr Met Met Gly Asn Glu Leu Thr Phe Leu Asp
50 55 60
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65 70 75 80
Ile Gln Gly Leu Arg Ala Met Asp Thr Gly Leu Tyr Ile Cys Lys Val
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Glu Leu Met Tyr Pro Pro Pro Tyr Tyr Glu Gly Ile Gly Asn Gly Thr
100 105 110
Gln Ile Tyr Val Ile Asp Pro Glu Pro Cys Pro Asp Ser Asp
115 120 125
<210> 40
<211> 147
<212> PRT
<213> Homo sapiens
<400> 40
Lys Ala Met His Val Ala Gln Pro Ala Val Val Leu Ala Ser Ser Arg
1 5 10 15
Gly Ile Ala Ser Phe Val Cys Glu Tyr Ala Ser Pro Gly Lys Tyr Thr
20 25 30
Glu Val Arg Val Thr Val Leu Arg Gln Ala Asp Ser Gln Val Thr Glu
35 40 45
Val Cys Ala Ala Thr Tyr Met Met Gly Asn Glu Leu Thr Phe Leu Asp
50 55 60
Asp Ser Ile Cys Thr Gly Thr Ser Ser Gly Asn Gln Val Asn Leu Thr
65 70 75 80
Ile Gln Gly Leu Arg Ala Met Asp Thr Gly Leu Tyr Ile Cys Lys Val
85 90 95
Glu Leu Met Tyr Pro Pro Pro Tyr Tyr Glu Gly Ile Gly Asn Gly Thr
100 105 110
Gln Ile Tyr Val Ile Asp Pro Glu Pro Cys Pro Asp Ser Asp Phe Leu
115 120 125
Leu Trp Ile Leu Ala Ala Val Ser Ser Gly Leu Phe Phe Tyr Ser Phe
130 135 140
Leu Leu Thr
145
<210> 41
<211> 420
<212> PRT
<213> Mus musculus
<400> 41
Ser Gly Pro Gly Lys Glu Leu Pro Val Val Trp Ala Gln Glu Gly Ala
1 5 10 15
Pro Val His Leu Pro Cys Ser Leu Lys Ser Pro Asn Leu Asp Pro Asn
20 25 30
Phe Leu Arg Arg Gly Gly Val Ile Trp Gln His Gln Pro Asp Ser Gly
35 40 45
Gln Pro Thr Pro Ile Pro Ala Leu Asp Leu His Gln Gly Met Pro Ser
50 55 60
Pro Arg Gln Pro Ala Pro Gly Arg Tyr Thr Val Leu Ser Val Ala Pro
65 70 75 80
Gly Gly Leu Arg Ser Gly Arg Gln Pro Leu His Pro His Val Gln Leu
85 90 95
Glu Glu Arg Gly Leu Gln Arg Gly Asp Phe Ser Leu Trp Leu Arg Pro
100 105 110
Ala Leu Arg Thr Asp Ala Gly Glu Tyr His Ala Thr Val Arg Leu Pro
115 120 125
Asn Arg Ala Leu Ser Cys Ser Leu Arg Leu Arg Val Gly Gln Ala Ser
130 135 140
Met Ile Ala Ser Pro Ser Gly Val Leu Lys Leu Ser Asp Trp Val Leu
145 150 155 160
Leu Asn Cys Ser Phe Ser Arg Pro Asp Arg Pro Val Ser Val His Trp
165 170 175
Phe Gln Gly Gln Asn Arg Val Pro Val Tyr Asn Ser Pro Arg His Phe
180 185 190
Leu Ala Glu Thr Phe Leu Leu Leu Pro Gln Val Ser Pro Leu Asp Ser
195 200 205
Gly Thr Trp Gly Cys Val Leu Thr Tyr Arg Asp Gly Phe Asn Val Ser
210 215 220
Ile Thr Tyr Asn Leu Lys Val Leu Gly Leu Glu Pro Val Ala Pro Leu
225 230 235 240
Thr Val Tyr Ala Ala Glu Gly Ser Arg Val Glu Leu Pro Cys His Leu
245 250 255
Pro Pro Gly Val Gly Thr Pro Ser Leu Leu Ile Ala Lys Trp Thr Pro
260 265 270
Pro Gly Gly Gly Pro Glu Leu Pro Val Ala Gly Lys Ser Gly Asn Phe
275 280 285
Thr Leu His Leu Glu Ala Val Gly Leu Ala Gln Ala Gly Thr Tyr Thr
290 295 300
Cys Ser Ile His Leu Gln Gly Gln Gln Leu Asn Ala Thr Val Thr Leu
305 310 315 320
Ala Val Ile Thr Val Thr Pro Lys Ser Phe Gly Leu Pro Gly Ser Arg
325 330 335
Gly Lys Leu Leu Cys Glu Val Thr Pro Ala Ser Gly Lys Glu Arg Phe
340 345 350
Val Trp Arg Pro Leu Asn Asn Leu Ser Arg Ser Cys Pro Gly Pro Val
355 360 365
Leu Glu Ile Gln Glu Ala Arg Leu Leu Ala Glu Arg Trp Gln Cys Gln
370 375 380
Leu Tyr Glu Gly Gln Arg Leu Leu Gly Ala Thr Val Tyr Ala Ala Glu
385 390 395 400
Ser Ser Ser Gly Ala His Ser Ala Arg Arg Ile Ser Gly Asp Leu Lys
405 410 415
Gly Gly His Leu
420
<210> 42
<211> 422
<212> PRT
<213> Homo sapiens
<400> 42
Val Pro Val Val Trp Ala Gln Glu Gly Ala Pro Ala Gln Leu Pro Cys
1 5 10 15
Ser Pro Thr Ile Pro Leu Gln Asp Leu Ser Leu Leu Arg Arg Ala Gly
20 25 30
Val Thr Trp Gln His Gln Pro Asp Ser Gly Pro Pro Ala Ala Ala Pro
35 40 45
Gly His Pro Leu Ala Pro Gly Pro His Pro Ala Ala Pro Ser Ser Trp
50 55 60
Gly Pro Arg Pro Arg Arg Tyr Thr Val Leu Ser Val Gly Pro Gly Gly
65 70 75 80
Leu Arg Ser Gly Arg Leu Pro Leu Gln Pro Arg Val Gln Leu Asp Glu
85 90 95
Arg Gly Arg Gln Arg Gly Asp Phe Ser Leu Trp Leu Arg Pro Ala Arg
100 105 110
Arg Ala Asp Ala Gly Glu Tyr Arg Ala Ala Val His Leu Arg Asp Arg
115 120 125
Ala Leu Ser Cys Arg Leu Arg Leu Arg Leu Gly Gln Ala Ser Met Thr
130 135 140
Ala Ser Pro Pro Gly Ser Leu Arg Ala Ser Asp Trp Val Ile Leu Asn
145 150 155 160
Cys Ser Phe Ser Arg Pro Asp Arg Pro Ala Ser Val His Trp Phe Arg
165 170 175
Asn Arg Gly Gln Gly Arg Val Pro Val Arg Glu Ser Pro His His His
180 185 190
Leu Ala Glu Ser Phe Leu Phe Leu Pro Gln Val Ser Pro Met Asp Ser
195 200 205
Gly Pro Trp Gly Cys Ile Leu Thr Tyr Arg Asp Gly Phe Asn Val Ser
210 215 220
Ile Met Tyr Asn Leu Thr Val Leu Gly Leu Glu Pro Pro Thr Pro Leu
225 230 235 240
Thr Val Tyr Ala Gly Ala Gly Ser Arg Val Gly Leu Pro Cys Arg Leu
245 250 255
Pro Ala Gly Val Gly Thr Arg Ser Phe Leu Thr Ala Lys Trp Thr Pro
260 265 270
Pro Gly Gly Gly Pro Asp Leu Leu Val Thr Gly Asp Asn Gly Asp Phe
275 280 285
Thr Leu Arg Leu Glu Asp Val Ser Gln Ala Gln Ala Gly Thr Tyr Thr
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Ala Ile Ile Thr Val Thr Pro Lys Ser Phe Gly Ser Pro Gly Ser Leu
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Gly Lys Leu Leu Cys Glu Val Thr Pro Val Ser Gly Gln Glu Arg Phe
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Glu Leu Ser Ser Pro Gly Ala Gln Arg Ser Gly Arg Ala Pro Gly Ala
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<212> PRT
<213> Mus musculus
<400> 43
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Thr Val Tyr Ala Ala Glu Gly Ser Arg Val Glu Leu Pro Cys His Leu
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260 265 270
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275 280 285
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Leu Pro Ala Gly His Leu Leu Leu Phe Leu Ile Leu Gly Val Leu Ser
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<213> Homo sapiens
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<213> Homo sapiens
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<213> Homo sapiens
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His Ala Leu Leu Gly Gly Leu Gly Thr Gln Gly Arg Trp Thr Asn Met
355 360 365
Glu Arg Met Gln Leu Trp Ala Met Arg Leu Asp Leu Arg Asp Leu Gln
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Arg His Leu Arg Phe Gln Val Leu Ala Ala Gly Phe Asn Leu Pro Glu
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Glu Glu Glu Glu Glu Glu Glu Glu Glu Glu Glu Glu Arg Lys Gly Leu
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Leu Pro Gly Ala Leu Gly Ser Ala Gly Pro Ala Gln Val Ser Trp Pro
420 425 430
Gln Leu Leu Ser Thr Tyr Arg Leu Leu His Ser Leu Glu Leu Val Leu
435 440 445
Ser Arg Ala Val Arg Glu Leu Leu Leu Leu Ser Lys Ala Gly His Ser
450 455 460
Val Trp Pro Leu Gly Phe Pro Thr Leu Ser Pro Gln Pro Lys Ser Cys
465 470 475 480
Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly
485 490 495
Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met
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Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Ala Val Ser His
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Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val
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Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly
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Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile
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Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro
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Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val
660 665 670
Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met
675 680 685
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Leu Pro Arg Arg Pro Gly Ser Ala Trp Asp Ser Gly Gly Gly Gly Ala
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Leu Ala Arg Lys Leu Leu Ser Glu Val Arg Gly Gln Ala His Arg Phe
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<212> PRT
<213> synthetic
<400> 112
Ala Ala Ala Gly Gly Met Pro Pro Ala Ala Ala Gly Gly Met
1 5 10
<210> 113
<211> 6
<212> PRT
<213> synthetic
<400> 113
Ala Ala Ala Gly Gly Met
1 5
<210> 114
<211> 9
<212> PRT
<213> synthetic
<400> 114
Pro Pro Ala Ala Ala Gly Gly Met Met
1 5
<210> 115
<211> 25
<212> PRT
<213> synthetic
<400> 115
Phe Ile Leu Pro Ile Leu Gly Ala Val Leu Ala Leu Leu Leu Leu Leu
1 5 10 15
Thr Leu Leu Ala Leu Leu Leu Leu Val
20 25
<210> 116
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<212> PRT
<213> synthetic
<400> 116
Ile Tyr Leu Ile Ile Gly Ile Cys Gly Gly Gly Ser Leu Leu Met Val
1 5 10 15
Glu Phe Val Ala Leu Leu Val Phe Tyr Ile Thr
20 25
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<213> synthetic
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Ala Leu Val Val Ile Pro Ile Ile Phe Gly Ile Leu Phe Ala Ile Leu
1 5 10 15
Leu Val Leu Val Phe Thr
20
<210> 118
<211> 20
<212> PRT
<213> synthetic
<400> 118
Ile Ser Gly Ala Thr Ala Gly Val Pro Thr Leu Leu Leu Gly Leu Val
1 5 10 15
Leu Pro Ala Pro
20
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<211> 24
<212> PRT
<213> synthetic
<400> 119
Leu Leu Leu Gly Val Ser Val Ser Cys Ile Val Ile Leu Ala Val Cys
1 5 10 15
Leu Leu Cys Tyr Val Ser Ile Thr
20
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<211> 24
<212> PRT
<213> synthetic
<400> 120
Val Ala Gly Val Val Ile Ile Val Ile Leu Leu Ile Leu Thr Gly Ala
1 5 10 15
Gly Leu Ala Ala Tyr Phe Phe Tyr
20
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<211> 25
<212> PRT
<213> synthetic
<400> 121
Phe Leu Phe Thr Pro Val Val Val Ala Cys Met Ser Ile Met Ala Leu
1 5 10 15
Leu Leu Leu Leu Leu Leu Leu Leu Leu
20 25
<210> 122
<211> 30
<212> PRT
<213> synthetic
<400> 122
Val Val Val Ile Ser Ala Ile Leu Ala Leu Val Val Leu Thr Ile Ile
1 5 10 15
Ser Leu Ile Ile Leu Ile Met Leu Trp Gln Lys Lys Pro Arg
20 25 30
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<213> synthetic
<400> 123
Glu Leu Thr Val Ala Ala Ala Val Leu Val Leu Leu Val Ile Val Ser
1 5 10 15
Ile Ser Leu Ile Val Leu Val Val Thr Trp
20 25
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<211> 24
<212> PRT
<213> synthetic
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Leu Thr Tyr Phe Gly Gly Ala Val Ala Ser Thr Ile Gly Leu Ile Met
1 5 10 15
Gly Gly Thr Leu Leu Ala Leu Leu
20
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<213> synthetic
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Thr Val Leu Leu Pro Leu Val Ile Phe Phe Gly Leu Cys Leu Leu Ser
1 5 10 15
Leu Leu Phe Ile Gly Leu Met
20
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<211> 23
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<213> synthetic
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Leu Leu Val Leu Tyr Phe Ala Ser Ser Leu Ile Ile Pro Ala Ile Gly
1 5 10 15
Met Ile Ile Tyr Phe Ala Arg
20
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<212> PRT
<213> synthetic
<400> 127
Met Glu Leu Gly Leu Ser Trp Ile Phe Leu Leu Ala Ile Leu Lys Gly
1 5 10 15
Val Gln Cys
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<213> synthetic
<400> 128
Met Glu Leu Gly Leu Arg Trp Val Phe Leu Val Ala Ile Leu Glu Gly
1 5 10 15
Val Gln Cys
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<211> 19
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<213> synthetic
<400> 129
Met Lys His Leu Trp Phe Phe Leu Leu Leu Val Ala Ala Pro Arg Trp
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Val Leu Ser
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<211> 19
<212> PRT
<213> synthetic
<400> 130
Met Asp Trp Thr Trp Arg Ile Leu Phe Leu Val Ala Ala Ala Thr Gly
1 5 10 15
Ala His Ser
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<211> 19
<212> PRT
<213> synthetic
<400> 131
Met Asp Trp Thr Trp Arg Phe Leu Phe Val Val Ala Ala Ala Thr Gly
1 5 10 15
Val Gln Ser
<210> 132
<211> 19
<212> PRT
<213> synthetic
<400> 132
Met Glu Phe Gly Leu Ser Trp Leu Phe Leu Val Ala Ile Leu Lys Gly
1 5 10 15
Val Gln Cys
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<211> 26
<212> PRT
<213> synthetic
<400> 133
Met Asp Leu Leu His Lys Asn Met Lys His Leu Trp Phe Phe Leu Leu
1 5 10 15
Leu Val Ala Ala Pro Arg Trp Val Leu Ser
20 25
<210> 134
<211> 22
<212> PRT
<213> synthetic
<400> 134
Val Lys Gln Thr Leu Asn Phe Asp Leu Leu Lys Leu Ala Gly Asp Val
1 5 10 15
Glu Ser Asn Pro Gly Pro
20
<210> 135
<211> 2022
<212> DNA
<213> synthetic
<400> 135
atggaatgga gctgggtctt tctcttcttc ctgtcagtaa cgactggtgt ccactccgct 60
ctggtggctc tgtcccagcc tagagtgcag tgccacgcct ccagataccc tgtggccgtg 120
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cggatcatca agcctgatcc ccctgaaggc gtgcggctga gaaccgctgg acagagactg 420
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cggctgcggt acaggcggag aggcgccagc cactttagac aagtgggccc catcgaggcc 540
accaccttca ccctgcggaa ctccaagccc cacgccaagt actgcatcca ggtgtccgcc 600
caggacctga ccgactacgg caagccttct gactggtccc tgcccggcca ggtggaatct 660
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caccatactg agaagagcct ctcccactct cctggtaaat ag 2022
<210> 136
<211> 2031
<212> DNA
<213> synthetic
<400> 136
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ctggtggctc tgtcccagcc tagagtgcag tgccacgcct ccagataccc tgtggccgtg 120
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aacgtgaccg ctgtgcatcc tggcggcgct tccagttctc tgctggcctt tgtggccgag 360
cggatcatca agcctgatcc ccctgaaggc gtgcggctga gaaccgctgg acagagactg 420
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accaccttca ccctgcggaa ctccaagccc cacgccaagt actgcatcca ggtgtccgcc 600
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<210> 137
<211> 2112
<212> DNA
<213> synthetic
<400> 137
atggaatgga gctgggtctt tctcttcttc ctgtcagtaa cgactggtgt ccactcctct 60
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gactggtccc tgcccggcca ggtggaatct gctcctcata agcctggcgg agtgcctggc 780
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<212> DNA
<213> synthetic
<400> 138
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ctctccctgt ctccgggtaa atga 2124
<210> 139
<211> 32
<212> DNA
<213> synthetic
<400> 139
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<210> 140
<211> 32
<212> DNA
<213> synthetic
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<210> 141
<211> 5373
<212> DNA
<213> synthetic
<400> 141
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cctccttgta taaatcctgg ttgctgtctc tttatgagga gttgtggccc gttgtcaggc 1380
aacgtggcgt ggtgtgcact gtgtttgctg acgcaacccc cactggttgg ggcattgcca 1440
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cttcccgcgg cctgctgccg gctctgcggc ctcttccgcg tcttcgcctt cgccctcaga 1740
cgagtcggat ctccctttgg gccgcctccc cgcatcgata ccgtcgactc gctgatcagc 1800
ctcgactgtg ccttctagtt gccagccatc tgttgtttgc ccctcccccg tgccttcctt 1860
gaccctggaa ggtgccactc ccactgtcct ttcctaataa aatgaggaaa ttgcatcgca 1920
ttgtctgagt aggtgtcatt ctattctggg gggtggggtg gggcaggaca gcaaggggga 1980
ggattgggaa gacaatagca ggcatgctgg ggatgcggtg ggctctatgg cttctgaggc 2040
ggaaagaacc agctggggct cgactagagc atggctacgt agataagtag catggcgggt 2100
taatcattaa ctacaaggaa cccctagtga tggagttggc cactccctct ctgcgcgctc 2160
gctcgctcac tgaggccggg cgaccaaagg tcgcccgacg cccgggcttt gcccgggcgg 2220
cctcagtgag cgagcgagcg cgcagagctt tttgcaaaag cctaggcctc caaaaaagcc 2280
tcctcactac ttctggaata gctcagaggc cgaggcggcc tcggcctctg cataaataaa 2340
aaaaattagt cagccatggg gcggagaatg ggcggaactg ggcggagtta ggggcgggat 2400
gggcggagtt aggggcggga ctatggttgc tgactaattg agatgcatgc tttgcatact 2460
tctgcctgct ggggagcctg gggactttcc acacctggtt gctgactaat tgagatgcat 2520
gctttgcata cttctgcctg ctggggagcc tggggacttt ccacacccta actgacacac 2580
attccacagc tgcattaatg aatcggccaa cgcgcgggga gaggcggttt gcgtattggg 2640
cgctcttccg cttcctcgct cactgactcg ctgcgctcgg tcgttcggct gcggcgagcg 2700
gtatcagctc actcaaaggc ggtaatacgg ttatccacag aatcagggga taacgcagga 2760
aagaacatgt gagcaaaagg ccagcaaaag gccaggaacc gtaaaaaggc cgcgttgctg 2820
gcgtttttcc ataggctccg cccccctgac gagcatcaca aaaatcgacg ctcaagtcag 2880
aggtggcgaa acccgacagg actataaaga taccaggcgt ttccccctgg aagctccctc 2940
gtgcgctctc ctgttccgac cctgccgctt accggatacc tgtccgcctt tctcccttcg 3000
ggaagcgtgg cgctttctca tagctcacgc tgtaggtatc tcagttcggt gtaggtcgtt 3060
cgctccaagc tgggctgtgt gcacgaaccc cccgttcagc ccgaccgctg cgccttatcc 3120
ggtaactatc gtcttgagtc caacccggta agacacgact tatcgccact ggcagcagcc 3180
actggtaaca ggattagcag agcgaggtat gtaggcggtg ctacagagtt cttgaagtgg 3240
tggcctaact acggctacac tagaagaaca gtatttggta tctgcgctct gctgaagcca 3300
gttaccttcg gaaaaagagt tggtagctct tgatccggca aacaaaccac cgctggtagc 3360
ggtggttttt ttgtttgcaa gcagcagatt acgcgcagaa aaaaaggatc tcaagaagat 3420
cctttgatct tttctacggg gtctgacgct cagtggaacg aaaactcacg ttaagggatt 3480
ttggtcatga gattatcaaa aaggatcttc acctagatcc ttttaaatta aaaatgaagt 3540
tttaaatcaa tctaaagtat atatgagtaa acttggtctg acagttacca atgcttaatc 3600
agtgaggcac ctatctcagc gatctgtcta tttcgttcat ccatagttgc ctgactcccc 3660
gtcgtgtaga taactacgat acgggagggc ttaccatctg gccccagtgc tgcaatgata 3720
ccgcgagacc cacgctcacc ggctccagat ttatcagcaa taaaccagcc agccggaagg 3780
gccgagcgca gaagtggtcc tgcaacttta tccgcctcca tccagtctat taattgttgc 3840
cgggaagcta gagtaagtag ttcgccagtt aatagtttgc gcaacgttgt tgccattgct 3900
acaggcatcg tggtgtcacg ctcgtcgttt ggtatggctt cattcagctc cggttcccaa 3960
cgatcaaggc gagttacatg atcccccatg ttgtgcaaaa aagcggttag ctccttcggt 4020
cctccgatcg ttgtcagaag taagttggcc gcagtgttat cactcatggt tatggcagca 4080
ctgcataatt ctcttactgt catgccatcc gtaagatgct tttctgtgac tggtgagtac 4140
tcaaccaagt cattctgaga atagtgtatg cggcgaccga gttgctcttg cccggcgtca 4200
atacgggata ataccgcgcc acatagcaga actttaaaag tgctcatcat tggaaaacgt 4260
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aaaacaggaa ggcaaaatgc cgcaaaaaag ggaataaggg cgacacggaa atgttgaata 4440
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ggatacatat ttgaatgtat ttagaaaaat aaacaaatag gggttccgcg cacatttccc 4560
cgaaaagtgc cacctgacgt ctaagaaacc attattatca tgacattaac ctataaaaat 4620
aggcgtatca cgaggccctt tcgtctcgcg cgtttcggtg atgacggtga aaacctctga 4680
cacatgcagc tcccggagac ggtcacagct tgtctgtaag cggatgccgg gagcagacaa 4740
gcccgtcagg gcgcgtcagc gggtgttggc gggtgtcggg gctggcttaa ctatgcggca 4800
tcagagcaga ttgtactgag agtgcaccat tcgacgctct cccttatgcg actcctgcat 4860
taggaagcag cccagtagta ggttgaggcc gttgagcacc gccgccgcaa ggaatggtgc 4920
atgcaaggag atggcgccca acagtccccc ggccacgggg cctgccacca tacccacgcc 4980
gaaacaagcg ctcatgagcc cgaagtggcg agcccgatct tccccatcgg tgatgtcggc 5040
gatataggcg ccagcaaccg cacctgtggc gccggtgatg ccggccacga tgcgtccggc 5100
gtagaggatc tggctagcga tgaccctgct gattggttcg ctgaccattt ccgggtgcgg 5160
gacggcgtta ccagaaactc agaaggttcg tccaaccaaa ccgactctga cggcagttta 5220
cgagagagat gatagggtct gcttcagtaa gccagatgct acacaattag gcttgtacat 5280
attgtcgtta gaacgcggct acaattaata cataacctta tgtatcatac acatacgatt 5340
taggtgacac tatagaatac acggaattaa ttc 5373
<210> 142
<211> 216
<212> PRT
<213> Homo sapiens
<400> 142
Gly Phe Pro Arg Pro Pro Gly Arg Pro Gln Leu Ser Leu Gln Glu Leu
1 5 10 15
Arg Arg Glu Phe Thr Val Ser Leu His Leu Ala Arg Lys Leu Leu Ser
20 25 30
Glu Val Arg Gly Gln Ala His Arg Phe Ala Glu Ser His Leu Pro Gly
35 40 45
Val Asn Leu Tyr Leu Leu Pro Leu Gly Glu Gln Leu Pro Asp Val Ser
50 55 60
Leu Thr Phe Gln Ala Trp Arg Arg Leu Ser Asp Pro Glu Arg Leu Cys
65 70 75 80
Phe Ile Ser Thr Thr Leu Gln Pro Phe His Ala Leu Leu Gly Gly Leu
85 90 95
Gly Thr Gln Gly Arg Trp Thr Asn Met Glu Arg Met Gln Leu Trp Ala
100 105 110
Met Arg Leu Asp Leu Arg Asp Leu Gln Arg His Leu Arg Phe Gln Val
115 120 125
Leu Ala Ala Gly Phe Asn Leu Pro Glu Glu Glu Glu Glu Glu Glu Glu
130 135 140
Glu Glu Glu Glu Glu Arg Lys Gly Leu Leu Pro Gly Ala Leu Gly Ser
145 150 155 160
Ala Leu Gln Gly Pro Ala Gln Val Ser Trp Pro Gln Leu Leu Ser Thr
165 170 175
Tyr Arg Leu Leu His Ser Leu Glu Leu Val Leu Ser Arg Ala Val Arg
180 185 190
Glu Leu Leu Leu Leu Ser Lys Ala Gly His Ser Val Trp Pro Leu Gly
195 200 205
Phe Pro Thr Leu Ser Pro Gln Pro
210 215
Claims (34)
- CD24 세포외 도메인, EBV-유도 3(EBV-induced 3, EBI3) 폴리펩티드 서브유닛, 및 p28 IL-27 폴리펩티드 서브유닛을 포함하는 IL-27 융합 단백질에 있어서, 상기 EBI3 폴리펩티드 서브유닛 및 p28 IL-27 폴리펩티드 서브유닛은 펩티드 링커에 의해 공유 결합되는 것을 특징으로 하는 융합 단백질.
- 제 1 항에 있어서,
상기 단백질은 아미노에서 카르복시 단말까지 CD24 세포외 도메인, EBI3 폴리펩티드 서브유닛, 펩타이드 링커, 및 p28 IL-27 폴리펩티드 서브유닛을 포함하는 것을 특징으로 하는 융합 단백질.
- 제 1 항에 있어서,
상기 단백질은 아미노에서 카르복시 단말까지 CD24 세포외 도메인, p28 IL-27 폴리펩티드 서브유닛, 펩타이드 링커, 및 EBI3 폴리펩티드 서브유닛을 포함하는 것을 특징으로 하는 융합 단백질.
- 제 1 항에 있어서,
CD24 세포외 도메인의 2 내지 5 개의 나란히 배열된 카피를 포함하는 것을 특징으로 하는 융합 단백질.
- 제 1 항 내지 제 4 항 중 어느 한 항에 있어서,
면역글로불린 Fc 도메인을 더 포함하는 것을 특징으로 하는 융합 단백질.
- 제 5 항에 있어서,
상기 면역글로불린 Fc 도메인은 IgG1 중쇄 불변 영역을 포함하는 것을 특징으로 하는 융합 단백질.
- 제 6 항에 있어서,
상기 IgG1 중쇄 불변 영역은 Fcγ 수용체에 대한 결합을 방해하거나 제거하는 돌연변이를 포함하는 것을 특징으로 하는 융합 단백질.
- 제 1 항 내지 제 7 항 중 어느 한 항에 있어서,
상기 단백질은 PD-1 세포외 도메인, PD-L1 세포외 도메인 또는 PD-L2 세포외 도메인을 더 포함하는 것을 특징으로 하는 융합 단백질.
- 제 1 항에 있어서,
상기 융합 단백질은 서열번호 77 내지 서열번호 84 및 서열번호 88 내지 서열번호 95 중 하나의 아미노산 서열을 포함하는 것을 특징으로 하는 융합 단백질.
- 항-PD-1 작용제, 항-PD-L1 작용제, 항-PD-L2 작용제, 또는 이들의 조합과 함께 제 1 항 내지 제 9 항 중 어느 한 항의 융합 단백질을 포함하는 약학적 조성물.
- 제 10 항에 있어서,
상기 항-PD-1 작용제, 항-PD-L1 작용제 또는 항-PD-L2 작용제는 항체인 것을 특징으로 하는 약학적 조성물.
- 제 10 항에 있어서,
상기 항-PD-1 작용제, 항-PD-L1 작용제 또는 항-PD-L2 작용제는 siRNA인 것을 특징으로 하는 약학적 조성물.
- 제 10 항에 있어서,
상기 항-PD-1 작용제, 항-PD-L1 작용제 또는 항-PD-L2 작용제는 우성-음성 단백질인 것을 특징으로 하는 약학적 조성물.
- 제 1 항 내지 제 9 항 중 어느 한 항의 융합 단백질을 코딩하는 융합 단백질 서열을 포함하는 폴리펩티드에 있어서, 상기 융합 단백질 서열은 IL-27 융합 단백질을 분비하는데 적합한 N-말단 신호 펩티드 서열을 포함하는 것을 특징으로 하는 폴리펩티드.
- 제 14 항에 있어서,
상기 융합 단백질 서열의 카르복시-말단은 IL-27 융합 단백질을 세포 막에 고정시키기 위한 GPI 앵커 신호 서열을 포함하는 것을 특징으로 하는 폴리펩티드.
- 제 14 항 또는 제 15 항의 폴리뉴클레오티드를 포함하는 발현 벡터에 있어서, 융합 단백질은 세포 내에서 융합 단백질을 발현시키기에 충분한 하나 이상의 조절 서열에 작동 가능하게 연결되는 것을 특징으로 하는 발현 벡터.
- 제 18 항에 있어서,
항-PD-1 작용제, 항-PD-L1 작용제, 항-PD-L2 작용제, 또는 이들의 조합을 발현하는데 적합한 하나 이상의 서열을 더 포함하는 것을 특징으로 하는 발현 벡터.
- 제 16 항 또는 제 17 항에 있어서,
상기 발현 벡터는 바이러스 벡터인 것을 특징으로 하는 발현 벡터.
- 제 18 항에 있어서,
상기 바이러스 벡터는 재조합 아데노-관련 바이러스인 것을 특징으로 하는 발현 벡터.
- 제 14 항 내지 19 항 중 어느 한 항의 폴리펩티드 또는 발현 벡터를 포함하는 세포에 있어서, 상기 세포는 융합 단백질을 발현하는 것을 특징으로 하는 세포.
- 제 20 항에 있어서,
항-PD-1 작용제, 항-PD-L1 작용제, 항-PD-L2 작용제, 또는 이들의 조합을 코딩하는 폴리펩티드 또는 발현 벡터를 더 포함하고, 상기 세포는 항-PD-1 작용제, 항-PD-L1 작용제, 항-PD-L2 작용제, 또는 이들의 조합을 발현하는 것을 특징으로 하는 세포.
- 제 21 항에 있어서,
항-PD-1 작용제, 항-PD-L1 작용제 또는 항-PD-L2 작용제는 항체인 것을 특징으로 하는 세포.
- 제 21 항에 있어서,
상기 항-PD-1 작용제, 항-PD-L1 작용제 또는 항-PD-L2 작용제는 우성-음성 단백질인 것을 특징으로 하는 세포.
- 제 21 항에 있어서,
상기 항-PD-1 작용제, 항-PD-L1 작용제 또는 항-PD-L2 작용제는 siRNA인 것을 특징으로 하는 세포.
- 제 23 항 내지 제 27 항 중 어느 한 항에 있어서,
상기 세포는 포유동물 세포인 것을 특징으로 하는 세포.
- 제 1 항 내지 제 12 항 중 어느 한 항의 융합 단백질을 증식성 질환을 치료하는데 효과적인 양으로 이를 필요로 하는 개체에 투여하는 단계를 포함하는, 증식성 질환을 치료하는 방법.
- 제 1 항 내지 제 12 항 중 어느 한 항의 융합 단백질을 자가면역 질환 또는 동종면역 반응을 치료하는데 효과적인 양으로 이를 필요로 하는 개체에 투여하는 단계를 포함하는, 자가면역 질환 또는 동종면역 반응을 치료하는 방법.
- 제 16 항 내지 제 19 항 중 어느 한 항의 발현 벡터를 증식성 질환을 치료하는데 효과적인 양으로 이를 필요로 하는 개체에 투여하는 단계를 포함하는, 증식성 질환을 치료하는 방법.
- 제 16 항 내지 제 19 항 중 어느 한 항의 발현 벡터를 자가면역 질환 또는 동종면역 반응을 치료하는데 효과적인 양으로 이를 필요로 하는 개체에 투여하는 단계를 포함하는, 자가면역 질환 또는 동종면역 반응을 치료하는 방법.
- 제 25 항 내지 제 28 항 중 어느 한 항에 있어서,
항-PD-1 mAb, 항-PD-L1 mAb, 항-PD-L2 mAb, 또는 이들의 조합;
항-PD-1 mAb, 항-PD-L1 mAb, 항-PD-L2 mAb, 또는 이들의 조합을 발현하는 발현 벡터;
PD-1, PD-L1, PD-L2, 또는 이들의 조합의 우성-음성 단백질;
PD-1, PD-L1, PD-L2, 또는 이들의 조합을 발현하는 발현 벡터;
PD-1, PD-L1, PD-L2, 또는 이들의 조합에 대한 siRNA; 또는
PD-1, PD-L1, PD-L2 또는 이들의 조합에 대한 하나 이상의 siRNA를 발현하는 발현 벡터를 투여하는 단계를 더 포함하는 것을 특징으로 하는 방법.
- 제 20 항 내지 제 25 항 중 어느 한 항의 세포를 증식성 질환을 치료하는데 효과적인 양으로 이를 필요로 하는 개체에 투여하는 단계를 포함하는, 증식성 질환을 치료하는 방법
- 제 20 항 내지 제 25 항 중 어느 한 항의 세포를 자가면역 질환 또는 동종면역 반응을 치료하는데 효과적인 양으로 이를 필요로 하는 개체에 투여하는 단계를 포함하는, 자가면역 질환 또는 동종면역 반응을 치료하는 방법.
- 펩티드 링커에 의해 공유 결합된 EBV-유도 3(EBI3) 폴리펩티드 서브유닛 및 p28 IL-27 폴리펩티드 서브유닛을 포함하는 융합 단백질에 대한 코딩 서열을 포함하는 AAV 벡터.
- 제 33 항에 있어서,
상기 AAV 벡터는 AAV-IL-27인 것을 특징으로 하는 AAV 벡터.
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Cited By (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
KR20200078193A (ko) * | 2018-12-21 | 2020-07-01 | 가톨릭대학교 산학협력단 | p40-EBI3의 복합체 및 이의 용도 |
Families Citing this family (26)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
PL3081576T3 (pl) | 2013-12-12 | 2020-03-31 | Shanghai Hengrui Pharmaceutical Co., Ltd. | Przeciwciało anty pd-1, jego fragment wiążący antygen i ich zastosowanie medyczne |
DK3283508T3 (en) | 2015-04-17 | 2021-05-31 | Alpine Immune Sciences Inc | Immunomodulatory Proteins with Tunable Affinities |
WO2017181152A2 (en) | 2016-04-15 | 2017-10-19 | Alpine Immune Sciences, Inc. | Cd80 variant immunomodulatory proteins and uses thereof |
SG11201808457PA (en) | 2016-04-15 | 2018-10-30 | Alpine Immune Sciences Inc | Icos ligand variant immunomodulatory proteins and uses thereof |
US11471488B2 (en) | 2016-07-28 | 2022-10-18 | Alpine Immune Sciences, Inc. | CD155 variant immunomodulatory proteins and uses thereof |
US11834490B2 (en) | 2016-07-28 | 2023-12-05 | Alpine Immune Sciences, Inc. | CD112 variant immunomodulatory proteins and uses thereof |
JP2019524144A (ja) * | 2016-08-17 | 2019-09-05 | オービス ヘルス ソリューションズ エルエルシー | 腫瘍標的化型ビーズベクターおよびその使用方法 |
EP3528834A4 (en) * | 2016-10-21 | 2020-07-01 | Merck Sharp&Dohme Corp. | TREATMENT OF CANCER USING A COMBINATION OF A PD-1 ANTAGONIST AND AN IL-27 ANTAGONIST |
US11571461B2 (en) | 2017-03-07 | 2023-02-07 | Oncoimmune, Inc. | Methods of use of soluble CD24 for treating lupus nephritis |
AU2018235835A1 (en) | 2017-03-16 | 2019-09-05 | Alpine Immune Sciences, Inc. | PD-L2 variant immunomodulatory proteins and uses thereof |
AU2018235838B2 (en) | 2017-03-16 | 2023-12-14 | Alpine Immune Sciences, Inc. | CD80 variant immunomodulatory proteins and uses thereof |
TW201900212A (zh) * | 2017-05-22 | 2019-01-01 | 美商昂科免疫公司 | 使用可溶性cd24治療癌症療法中之免疫相關不良事件的方法 |
CA3077509A1 (en) | 2017-10-10 | 2019-04-18 | Alpine Immune Sciences, Inc. | Ctla-4 variant immunomodulatory proteins and uses thereof |
US20200283500A1 (en) | 2017-10-18 | 2020-09-10 | Alpine Immune Sciences, Inc. | Variant icos ligand immunomodulatory proteins and related compositions and methods |
CA3084985A1 (en) * | 2017-12-06 | 2019-06-13 | Ovid Therapeutics Inc. | Use of mir101 or mir128 in the treatment of seizure disorders |
MA51289A (fr) * | 2017-12-18 | 2021-03-24 | Regeneron Pharma | Molécules de liaison à l'antigène bispécifiques se liant au récepteur de la leptine et/ou à gp130, et leurs procédés d'utilisation |
EP3735417A1 (en) * | 2018-01-03 | 2020-11-11 | Alpine Immune Sciences, Inc. | Multi-domain immunomodulatory proteins and methods of use thereof |
KR20210021317A (ko) * | 2018-06-04 | 2021-02-25 | 온코이뮨, 아이앤씨. | 백혈병 재발의 예방 및 치료를 위한 cd24의 사용 방법 |
CN109002689B (zh) * | 2018-07-23 | 2020-10-09 | 西安交通大学医学院第一附属医院 | T细胞数据处理方法及装置 |
AU2019324170A1 (en) | 2018-08-23 | 2021-02-18 | Seagen, Inc. | Anti-TIGIT antibodies |
CN109651514A (zh) * | 2019-02-26 | 2019-04-19 | 王仁喜 | p28-Fc融合蛋白及其编码核酸分子、重组表达载体、重组细胞和应用 |
CA3173768A1 (en) * | 2020-10-13 | 2022-04-21 | Brian Furmanski | Viral vector constructs for delivery of nucleic acids encoding cytokines and uses thereof for treating cancer |
AU2022331241A1 (en) * | 2021-08-16 | 2024-03-28 | Regeneron Pharmaceuticals, Inc. | Novel il27 receptor agonists and methods of use thereof |
CN113694201B (zh) * | 2021-08-26 | 2022-09-02 | 暨南大学 | 用于控制生物体内热量产生的组合物、方法及用途 |
WO2023051480A1 (en) * | 2021-09-28 | 2023-04-06 | Acroimmune Guangzhou Biotech Ltd | Fusion proteins comprising 071 core peptide and use thereof |
WO2023143443A1 (en) * | 2022-01-25 | 2023-08-03 | BRL Medicine Inc. | Modified cells and uses thereof |
Family Cites Families (6)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
ATE475428T1 (de) * | 2000-03-29 | 2010-08-15 | Univ Ohio State Res Found | Verfahren zur blockierung der zerstörung von gewebe mittels autoreaktiver t-zellen |
ES2311560T3 (es) * | 2000-12-07 | 2009-02-16 | Eli Lilly And Company | Proteinas de fusion glp-1. |
CA2648849A1 (en) * | 2006-04-14 | 2007-10-25 | Trubion Pharmaceuticals, Inc. | Binding proteins comprising immunoglobulin hinge and fc regions having altered fc effector functions |
CA2789446A1 (en) * | 2010-02-12 | 2011-08-18 | Oncomed Pharmaceuticals, Inc. | Methods for identifying and isolating cells expressing a polypeptide |
AU2011268146A1 (en) * | 2010-06-17 | 2013-01-10 | Actogenix Nv | Compositions and methods for treating inflammatory conditions |
WO2014039523A1 (en) * | 2012-09-04 | 2014-03-13 | Cellectis | Multi-chain chimeric antigen receptor and uses thereof |
-
2015
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