KR20170093780A

KR20170093780A - 보툴리눔 톡신 및 콜로이드 은 입자

Info

Publication number: KR20170093780A
Application number: KR1020177008564A
Authority: KR
Inventors: 케이트 윌리엄 모엘러; 앤드류 제이.엠. 윌러비
Original assignee: 아메리칸 실버, 엘엘씨; 닥터. 앤드류 윌러비 인크.
Priority date: 2014-09-02
Filing date: 2015-08-28
Publication date: 2017-08-16
Also published as: US10864231B2; EP3188706A4; EP3188706B1; CN107205889A; US11304973B2; CN107205889B; SG11201701619TA; US20170196946A1; JP2017525749A; WO2016036618A1; DK3188706T3; US20170281678A1; CA2959859C; JP6643324B2; EP3188706A1; CA2959859A1

Abstract

보툴리눔 톡신은 의료 및 미용 요법으로 사용하기 위한 개선된 조성물을 제공하기 위하여 콜로이드 은 입자와 조합되었다.

Description

보툴리눔 톡신 및 콜로이드 은 입자{BOTULINUM TOXIN AND COLLOIDAL SILVER PARTICLES}

<관련 출원에 대한 상호-참조>

본 출원은 2014년 9월 2일에 출원된 미국 가출원 번호 62/044,926의 35 U.S.C. § 119(e) 하의 이익을 주장하고, 그 출원은 그 전체가 본 명세서에 참조로 인용된다.

본 발명은 개괄적으로 의료적 및 미용적 목적의 콜로이드 은 입자와 조합된 보툴리눔 톡신에 관한 것이다.

1950년대에, 과학자들은 보툴리눔 톡신이 근육 경련을 경감시킬 수 있다는 것을 발견했다. 1960년대 및 1970년대에, 사시(사시인 눈) 치료용으로 보툴리눔 톡신을 탐구하기 위한 연구가 수행되었다. 1989년에, 미국 캘리포니아주 어바인 소재 엘러간 인크.(Allergan Inc.)는 안검연축(눈꺼풀 경련) 및 사시 치료용으로 FDA가 승인한 첫 번째 보툴리눔 톡신인 보톡스(BOTOX)®를 출시했다. 2000년에, FDA는 비정상적인 머리 위치 및 목 통증의 중증도를 경감하기 위한 경부 근긴장이상에 대한 보톡스® 요법을 승인했다. 2002년에, FDA는 중간 내지 심각한 미간 주름에 특이적인 투약으로, 보톡스®와 동일한 제형, 보톡스® 코스메틱(오나보툴리눔톡신 A(onabotulinumtoxin A))을 승인했다. 2004년에, FDA는 국소 의약품이 충분히 잘 효과를 내지 못하는 심각한 겨드랑이 발한에 대해 보톡스®을 승인했다. 보툴리눔 톡신의 여러 다른 조제품이 이제 시판되고 있으며 다양한 상표명으로 판매되고 있다.

유감스럽게도, 보툴리눔 톡신의 치료적 및 미용적 투여는 각종 질환에 대한 치료법을 제공하지만 치유법은 제공하지 못한다. 따라서, 유익한 결과를 유지하기 위해서는 반복적인 투여가 필요하다. 예를 들어, 주름 제거와 같은 미용적 목적의 이용에서, 일반적으로 주름이 없는(혹은 주름이 줄어든) 외관을 달성하고 유지하기 위해서는 3-6 개월마다 보톡스®를 투여해야 한다. 인체가 보툴리눔 톡신을 분해하여 그 물질의 생물학적 효능을 없앨 수도 있다.

배경기술 부분에서 논의된 모든 주제가 반드시 선행 기술인 것은 아니며 단지 배경기술 부분에서 논하였다 하여 선행 기술로 간주하여서는 안 된다. 이러한 맥락에서, 배경기술에서 논의되거나 그러한 주제와 관련 있는 선행 기술에서의 문제의 인식은 선행 기술이라고 명확하게 나타나 있지 않은 한 선행 기술로 취급되어서는 안 된다. 대신, 배경기술에 있는 어떤 주제에 대한 논의는 특정 문제에 대한 발명가의 접근 방식의 일부로 취급되어야 하고, 그 자체로 또한 발명적일 수도 있다.

<요약>

본 개시내용은 콜로이드 은 입자 및 보툴리눔 톡신의 조합을 제공한다. 예시적인 양태에서, 본 개시내용은 콜로이드 은 입자 및 보툴리눔 톡신 모두를 포함하는 조성물, 키트, 및 사용 방법을 제공한다. 예를 들어, 본 개시내용의 한 양태는 보툴리눔 톡신 및 콜로이드 은 입자를 포함하는 조성물을 제공하고, 다음의 예시적인 실시양태를 포함한다:

1) 보툴리눔 톡신(BTX), 콜로이드 은 입자, 및 물을 포함하는 조성물.

2) 실시양태 1에 있어서, 상기 BTX는 보툴리눔 A형 뉴로톡신(neurotoxin)인 조성물.

3) 실시양태 1에 있어서, 상기 BTX는 보툴리눔 B형 뉴로톡신인 조성물.

4) 실시양태 1에 있어서, 100-600 단위의 BTX를 포함하는 조성물.

5) 실시양태 1에 있어서, 1 내지 100 ppm 농도의 콜로이드 은을 포함하는 조성물.

6) 실시양태 1에 있어서, 콜로이드 은은 입자 크기를 특징으로 하고, 콜로이드 은 입자의 50 % 초과가 0.015 마이크로미터 미만의 최대 치수를 갖는 조성물.

7) 실시양태 6에 있어서, 적어도 90 %의 콜로이드 은 입자가 0.005 마이크로미터 내지 0.015 마이크로미터 사이의 직경을 갖는 조성물.

8) 실시양태 1에 있어서, 상기 콜로이드 은 입자는 화학식이 Ag(0)인 금속 은 및 Ag(I), Ag(II), 및 Ag(III)에서 선택된 화학식을 갖는 은 이온을 포함하는 것인 조성물.

9) 실시양태 1에 있어서, 은의 전체 농도가 약 5 내지 40 ppm 사이이고, 상기 은은 금속 은으로 된 내부 및 이온성 산화 은으로 된 외부 표면을 갖는 은 입자의 무색의 안정한 콜로이드 현탁액 형태이며, 적어도 75 %의 은 입자가 0.005 마이크로미터 내지 0.015 마이크로미터 사이인 직경을 갖는 조성물.

또 다른 양태로, 본 개시내용은 별도의 용기에 보툴리눔 톡신 및 콜로이드 은 입자를 모두 포함하는 키트를 제공한다. 예를 들어, 본 개시내용은 다음의 예시적인 실시양태를 제공한다:

10) 보툴리눔 톡신(BTX)를 포함하는 용기, 콜로이드 은 입자 및 물을 포함하는 용기를 포함하는 키트.

11) 실시양태 10에 있어서, 콜로이드 은 입자를 BTX의 용기로 옮기는데 적당한 바늘 및 주사기를 더 포함하는 키트.

또 다른 양태로, 본 개시내용은 보툴리눔 톡신(BTX) 및 콜로이드 은 입자의 사용 방법을 제공한다. 예를 들어, 본 개시내용은 다음의 예시적인 실시양태를 제공한다:

12) 보툴리눔 톡신(BTX), 콜로이드 은 입자 및 물을 그것을 필요로 하는 대상에게 투여하는 것을 포함하는 미용 요법.

13) 보툴리눔 톡신(BTX), 콜로이드 은 입자, 및 물을 그것을 필요로 하는 대상에게 투여하는 것을 포함하는 의료 요법.

하나 이상의 양태 및 실시양태의 세부사항은 아래의 설명에 제시되어 있다. 예시적인 한 실시양태와 관련하여 도시된 또는 설명된 특징은 다른 실시양태의 특징과 결합될 수 있다. 다른 특징, 목적 및 장점은 설명 및 청구항으로부터 명백해질 것이다.

<본 발명에 대한 상세한 설명>

간략히 설명하면, 본 발명은 키트, 조성물, 및 그를 사용하는 방법을 포함하는, 콜로이드 은 입자 및 보툴리눔 톡신의 조합을 제공한다.

콜로이드 은 입자

"콜로이드 은 입자" 또는 "콜로이드 은"이라는 용어는 전체적으로 또는 부분적으로 은을 포함하는 입자를 의미하며, 여기서 입자는 수성 매질에 콜로이드 현탁 되어있다. 조성물 내 콜로이드 은 입자의 총량은 일반적으로 1 내지 100 ppm이다. 임의의 실시양태에서, 조성물 내 콜로이드 은 입자의 함유량은 약 30 ± 5 ppm, 또는 25 ± 5 ppm, 또는 20 ± 5 ppm, 또는 15 ± 5 ppm, 또는 10 ± 5 ppm이다. 입자가 작아질수록, 주어진 입자 농도는 더 많은 수의 입자에 해당할 것이다. 또한, 주어진 입자 농도에서 전체 표면 면적이 증가할 것이다. 따라서, 입자 크기 및 입자 크기의 범위는 본 발명의 조성물을 더욱 특징지을 수 있다. 추가적 실시양태에서, 본 개시내용은 입자의 50 % 초과가 0.015 마이크로미터 미만의 최대 치수를 갖는 것; 또는 입자의 75 % 초과가 0.015 마이크로미터 미만의 최대 치수를 갖는 것; 또는 입자의 90 % 초과가 0.02 마이크로미터 미만의 최대 치수를 갖는 것; 또는 입자의 75 % 초과가 0.005 마이크로미터 초과의 최소 치수를 갖는 것; 또는 입자의 90 % 초과가 0.005 마이크로미터 초과의 최소 치수를 갖는 것을 제공한다.

입자는 임의적으로 은의 원자가에 의하여 특징지을 수 있다. 한 실시양태에서, 은 입자는 [Ag(0)]로 표시되는 0가 상태, 즉, 금속 은, 및 Ag(I), Ag(II), 및 Ag(III)에서 선택되는 이온 산화 상태에 있는 은으로 된 코팅을 모두 포함한다. 임의적으로, 입자는 예컨대 AgO와 같은 산화 은을 포함할 수 있다. 예를 들어, 한 실시양태에서 입자는 Ag(0) 및 AgO를 포함하고, 여기서 AgO는 입자의 코팅으로서 존재한다. 한 실시양태에서, 입자의 산화 은이 적어도 부분적으로는 Ag4O4의 형태, 즉 산화 은(II)으로 존재할 수 있다. 이 물질의 분자에서 두 개의 은 원자는 1+ 상태(은 I)이고 나머지 두 개의 은 분자는 3+ 상태(은 III)이다. 특정한 조건에서 이 분자는 2+ 상태(은 II)인 은 원자를 생성시킬 수 있다. 따라서, 본 개시내용은 금속 은, 및 AgO 및 Ag4O4에서 선택된 산화 은을 포함하는 은 입자를 제공한다.

본 발명의 임의적 실시양태에서, 이들 입자의 크기는 1 내지 100 나노미터, 또는 1 내지 10 나노미터, 또는 5 내지 7 나노미터의 범위일 수 있다. 또한, 바람직한 실시양태에서, 입자는 Ag4O4 분자로 구성된 다가의 산화 은 코팅에 의해 둘러싸인다.

콜로이드 은 입자를 포함하는 예시적인 수성 조성물은 미국 특허 번호 6,214,299; 6,743,348; 7,135,195; 및 8,535,728뿐만 아니라 미국 공보 번호 2011/0262556에 설명되어 있고, 여기에 개시된 기술에 의해 제조될 수 있다. 예를 들어, 콜로이드 은 입자를 포함하는 조성물의 제조는 전극을 포함하는 전기화학 전지를 이용할 수 있다. 공정은 다음의 단계를 포함한다: (a) 은 전극을 다량의 고순도 물에 접촉하게 놓는 단계; (b) 은 전극을 통해 전류를 흘려보내고, 이에 따라 물에 현탁된 은 입자의 생산을 일으키기에 충분한 방식으로 상기 은 전극으로부터 입자를 분리하는 단계; 및 (c) 현탁된 은 입자의 상기 생산 단계 동안 물을 교반하고, 이에 따라 은 입자를 상기 물속에서 더욱 균일한 농도로 분산시켜 배치당 더 많은 양의 콜로이드 은 입자를 생산할 수 있는 단계.

또 다른 예시로, 콜로이드 은 입자를 포함하는 조성물의 제조는 다음과 같은 단계를 포함할 수 있다: (a) 전류원, 및 상기 전류원에 전기적으로 연결된 제1 도체, 및 상기 전류원에 전기적으로 연결된 제2 도체를 포함하고, 여기서 상기 제1 도체는 상기 제2 도체로부터 떨어지게 배치되어 있고, 적어도 하나의 도체가 원소 은으로 만들어져 있는 전기 회로를 설치하는 단계; (b) 제1 도체 및 제2 도체를 유체 저항기와 소통되게 배치하여 회로를 폐쇄하는 단계; (c) 제1 도체 및 제2 도체에 동시에 교류를 공급하기 위해 전류원을 작동시키면 제1 도체 및 제2 도체 내에서 전압이 차례로 번갈아가며 증가 및 감소하는 것에 의하여 은 입자가 첫 번째 전극에서 분리되어 유체 저항기로 들어가고 상기 유체 저항기 내에서 현탁액에 배치되는 단계; 및 (d) 전극에서 은 입자가 점차적으로 분리되어 전극의 길이가 짧아지는 것을 상쇄하기 위해 전극을 유체 저항기 쪽으로 이동시켜 전극을 선택적으로 조정하하고 이에 따라 상기 유체 저항기 및 상기 전극 사이에 아크가 발생하는 것이 방지되는 단계.

다른 적절한 콜로이드 은 입자 및 그들의 제조는, 예컨대, PCT 공보 번호 WO 2009/009143 및 미국 공보 번호 2010/0187091에 설명되어 있다. 콜로이드 은은 예컨대 미국 유타 소재 아메리칸 바이오테크 랩스 오브 알파인(American Biotech Labs of Alpine)으로부터 시판되고 있다.

한 실시양태에서, 콜로이드 은 입자는 계면활성제 등이 없이도 본질적으로 순수한 물에서 안정하다. 게다가, 또는 또 다른 실시양태에서는, 콜로이드 은 입자 용액은 본질적으로 무색이다. 콜로이드 은은 히드로졸(hydrosol)로 존재할 수 있다.

BTX

본 명세서에 사용된 "BTX"라는 용어는 일반적으로 보툴리눔 톡신을 나타낸다. 보툴리눔 톡신은 다양한 박테리아에 의해, 예컨대 아래에 설명된 것처럼 클로스트리디움 보툴리눔(Clostridium botulinum)에 의해 자연적으로 생산되는 뉴로톡신 단백질이다. 적어도 8 가지의 상이한 혈청형의 BTX가 알려져 있고, 일반적으로 A, B, C1, C2, D, E, F, 및 G로 표기한다. BTX의 예시적인 공급원으로는 C.아르젠티넨스(C.argentinense), C.바라티(C.baratii), C.보툴리눔(C.botulinum), 및 C.부티리쿰(C.butyricum)이 있다. 한 실시양태에서, BTX는 BTX-A이다. 한 실시양태에서 BTX는 BTX-B이다.

BTX-A 및 BTX-B 각각이 FDA에 의해 여러 증상에 대한 인체에의 사용에 승인 되었고 여러 공급원으로부터 시판되고 있다. 예를 들어, 보톡스®는 미국 캘리포니아주 어바인 소재 엘러간 인크.로부터 판매되고, 디스포트(DYSPORT)®는 캐나다 퀘벡 라발 소재 밸리언트 파마슈티컬즈 인터내셔널 인크.(Valeant Pharmaceuticals Int'l. Inc.)로부터 판매된다. 뉴로블록(NEUROBLOC)® 및 마이오블록(MYOBLOC)®은 둘 다 미국 펜실베니아주 맬번 소재 솔스티스 뉴로사이언시즈 인크.(Solstice Neurosciences Inc.)로부터 판매된다. 제오민(XEOMIN)®은 독일 프랑크푸르트 암 마인 소재 메르츠 파마 게엠베하 운트 코. 카가아(Merz PharmagmbH & Co. KGaA)로부터 판매된다.

BTX는 냉동건조분말(예를 들어, 미국 공보 번호 US 2014/0086900 참조)로 상업적 공급원으로부터 얻을 수 있다. BTX는 의도하는 미용적 또는 의료적 용도에 따라 적합한 농도로 생리학적 pH의 식염수 또는 물과 혼합될 수 있다. BTX 농도는 일반적으로 마우스 단위로 표현한다. 1 단위는 복강 내 주입시 18- 내지 22- g 스위스 웹스터(Swiss Webster) 마우스 집단의 50 %를 죽이는 BTX의 양과 동일하다. 상이한 BTX 물질은 단위당 상이한 중량의 BTX를 가질 것이다. 실제로, 한 BTX 물질의 상이한 제제는 단위당 상이한 중량의 BTX를 가질 수 있다. 100 단위 미만의 보톡스® 주입은 주로 미용적 목적으로, 다른 목적으로는 300-600 단위 미만이 사용된다. 냉동건조된 BTX에 첨가되는 수용액의 양은 의도하는 목적에 따라 결정될 것이다. 일반적으로 1-10 mL의 희석액에 100 단위를 재구성시킨다. 예를 들어, 눈성형수술 목적으로는 100 단위의 BTX당 1- mL 희석이 사용될 수 있다. 또 다른 예로, 피부과 및 성형외과 목적으로는, 100 단위당 1-4 mL 범위로 사용될 수 있다. 또 다른 예로, 미간 주름과 같은 주름을 치료하기 위해 환자에게 주사할 수 있는 조성물을 제공하기 위해서는 은 나노입자를 약 1 내지 약 50 ppm 농도로 포함하는 수성 조성물 약 1 mL에 BTX 100 단위를 희석할 수 있다. 수성 상은 주사기를 통해 분말로 된 BTX의 바이알로 조심스럽게 주입될 수 있다. 바이알은 일반적으로 제조사에서 음압을 갖게끔 제공하므로, 주입 시 유체가 바이알 안으로 끌어 당겨진다. 재구성 이후, 수성 BTX 조성물은 저장되는 동안 바람직하게는 2-8 ℃에서 유지된다.

대안으로, BTX는 나노에멀젼으로 제형화될 수도 있다(예를 들어, 미국 공보 번호 2014/0099342; 및 2012/0064136 참조).

BTX / Ag 조성물

한 실시양태에서, 본 개시내용은 물, BTX 및 콜로이드 은 입자를 포함하는 조성물을 제공한다. 또 다른 실시양태에서, 본 개시내용은 물, BTX 및 콜로이드 은을 포함하는 조성물을 만드는 방법을 제공한다. 이들 조성물은 재구성된 BTX를 콜로이드 은 입자와 조합하고 균질한 조성물을 제공하기 위해 그 조합물을 완전히 섞는 것에 의해 제조할 수 있다. 조성물 내 BTX의 양 또는 농도는 조성물의 의도하는 의료적 또는 미용적 용도에 적합해야 한다. 원하는 농도의 BTX를 제공하기 위해서는, 냉동건조된 BTX를 원하는 수성 상의 총량 미만과 재구성할 수 있고, 이후 재구성된 BTX에 수성 콜로이드 은 입자 분량을 첨가하여 원하는 농도의 BTX를 제공한다.

본 명세서에서 BB라고도 일컫는 BTX/Ag 조성물은 10 내지 600, 또는 50 내지 600, 또는 100 내지 600, 또는 10 내지 400, 또는 50 내지 400, 또는 100 내지 400, 또는 10 내지 200, 또는 50 내지 200, 또는 100 내지 200, 또는 약 100 단위의 BTX를 포함할 수 있다. 은 입자가 현탁된 물의 중량에 기초한 은 입자의 농도는 1 내지 100 ppm, 또는 1 내지 50 ppm, 또는 1 내지 30 ppm, 또는 5 내지 50 ppm, 또는 5 내지 40 ppm, 또는 5 내지 30 ppm, 또는 10 내지 100 ppm, 또는 10 내지 50 ppm, 또는 10 내지 30 ppm 범위일 수 있다. 앞서 언급한 바와 같이, 최종 조성물 내 은의 농도는, 예를 들어, 1 내지 100 ppm 범위일 수 있다.

키트

또 다른 양태에서, 본 개시내용은 별개의 용기에 담긴 보툴리눔 톡신 및 콜로이드 은 입자 모두를 포함하는 키트를 제공한다. 예를 들어, 본 개시내용은 보툴리눔 톡신(BTX)이 담긴 용기 및 콜로이드 은 입자 및 선택적으로 물도 담긴 용기를 포함하는 키트를 제공한다. 키트는 BTX 및 콜로이드 입자의 투여를 돕는 추가적 구성요소를 포함할 수 있다. 예를 들어, 키트는 콜로이드 은 입자를 BTX 용기로 옮기는 것에 사용할 수 있는 주사기 및 바늘을 포함할 수 있다. 또한, 키트는 BTX가 파우더 형태일 경우, BTX의 재구성에 사용될 수 있는 식염 또는 수성 완충제를 포함할 수 있다. 키트는 키트 내 구성 요소를 사용하는 것 및 환자에게 BTX 및 콜로이드 은 입자를 투여하는 것에 대한 설명도 포함할 수 있다.

임의적으로, 키트는 1 내지 500, 또는 10 내지 250, 또는 약 100 단위의 BTX를 포함하는 용기 및 약 1 내지 50 ppm, 또는 약 5 내지 40 ppm, 또는 약 10 내지 30 ppm 농도의 콜로이드 은을 포함하는 별개의 용기를 포함한다. BTX가 담긴 용기에 약 100 단위의 BTX가 들어있는 경우 임의적으로 콜로이드 은이 담긴 용기는 약 1 mL의 물과 약 1 내지 50 ppm의 콜로이드 은을 가진다. 키트는 콜로이드 은 없이 물을 포함하는, 예를 들어 완충액을 포함하는, 또 다른 용기를 선택적으로 포함할 수 있다.

사용 방법

본 개시내용의 조성물은 의료적 또는 미용적 목적으로 사용될 수 있다. 예를 들어, 그들은 사시, 편측얼굴 연축, 경부 근긴장이상 및 안검연축의 치료에 사용될 수 있다. 본 개시내용의 조성물은 비염 치료에 사용될 수 있다(예를 들어, PCT 공보 번호 WO 2014/066916 및 2014/037531 참조). 본 개시내용의 조성물은 조기 사정의 치료에 사용될 수 있다(예를 들어, WO 2014/031809 참조). 개시내용 조성물은 뇌혈관 질환의 치료에 사용될 수 있다(예를 들어, 미국 공보 번호 2014/0105883 참조). 본 개시내용의 조성물은 편두통의 치료에 사용될 수 있다(예를 들어, PCT 공보 번호 WO 2013/137969 참조). 본 개시내용의 조성물은 자율신경계질환의 치료에 사용될 수 있다(예를 들어, PCT 공보 번호 WO 2013/009625 참조). 본 개시내용의 조성물은 식도 연축의 치료에 사용될 수 있다(예를 들어, PCT 공보 번호 WO 2013/009584 참조). 본 개시내용의 조성물은 지속성 성기 흥분 장애의 치료에 사용될 수 있다(예를 들어, 미국 공보 번호 2012/0282241 참조). 본 개시내용 조성물은 감각 장애 질환의 치료에 사용될 수 있다(예를 들어, PCT 공보 번호 WO 2012/134897 참조). 본 개시내용의 조성물은 근육 또는 외분비선의 과잉활동에 관련하거나 또는 이에 의해 야기되는 병 또는 상태의 치료에 사용될 수 있다(예를 들어, PCT 공보 번호 WO 2011/160826 참조).

따라서, 본 개시내용은 BTX 및 콜로이드 은 입자를 포함하는 약학 조성물인 조성물을 제공하며, 여기서 약학 조성물은 살균한 것이다.

본 개시내용의 조성물은, 예를 들어, 노화와 관련된 외관의 변화를 경감하기 위하여, 즉, 노화 방지 효과를 위해 미용적 목적으로 사용할 수 있다(예를 들어, PCT 공보 번호 WO 2011/154126 참조). 노화는 광선 손상, 중력 효과, 슬립 라인(sleep line), 및 근육 활동에 의해 발생하는 주름살 및 주름의 발달과 관련되어 있다. 표정 안면 근육은 과기능성 당김에 이어 비대를 경험할 수 있다. BTX 주입은 과기능성 근육에 의해 발생한 안면 주름을 줄일 수 있다. 또한 그들은 눈썹과 같은 얼굴 외관에 윤곽을 그리는 데도 사용될 수 있다. 본 개시내용의 조성물은 BTX가 사용되는 미용적 목적으로 사용될 수 있다. 예를 들어, 본 개시내용의 조성물은 눈확아래의 다크서클을 치료하기 위해 사용될 수 있다(예를 들어, 미국 공보 번호 2012/0115792 참조).

의료 또는 미용 요법이 필요한 대상에게 본 개시내용의 조성물을 투여하는 것은 BTX 투여의 일반적인 방법에 따라 할 수 있다. 예를 들어, PCT 공보 번호 WO 2012/103415에 개시된 프로토콜을 참조하라. 투여 대상은 인간일 수 있고, 또는 비인간인 포유류 또는 새일 수 있다.

분석 방법

본 발명의 조성물 내 은 함량의 분석은 원자 흡수(AA), 유도 결합 플라즈마/ 원자 방출(ICP/AES), 또는 적절한 농도 범위의 은에 감도가 좋은 것으로 해당 기술 분야의 당업자에게 알려진 다른 기술에 의해 수행할 수 있다. 은 조성물의 입자가 작고 균일한 크기(예를 들어, 0.01 마이크로미터 이하)를 갖는 경우, 콜로이드를 AA 또는 ICP/AES로 직접 검사하여 상당히 정확한 분석을 얻을 수 있다. 이것은 AA를 위한 시료 준비가 본질적으로 모든 은을 이온화시켜 쉽게 검출할 수 있도록 하기 때문이다. 조성물이 0.2 마이크로미터 정도로 큰 입자를 포함하는 경우, 온침 절차(digestion procedure)를 사용하는 것이 바람직하다. 온침 절차는 할라이드 또는 미세하게 분쇄된 은과 반응하거나 단백질 또는 다른 젤라틴 물질과 결합할 수 있는 다른 음이온 종과 접촉하여 제조되거나 보관되었을 수 있는 은 조성물에 반드시 이상적인 것은 아니다.

온침 단계의 실시양태는 다음과 같다: (a) 완전히 혼합된 또는 섞인 분석할 은 조성물의 10 mL 분취액을 취하여, 깨끗한 폴리카보네이트 병 또는 꼭 맞는 뚜껑이 있고 적절한 재료로 된 다른 용기(일반적으로, 병)에 넣는다. 30-100 ml 크기가 바람직하다; (b) 마이크로 피펫 또는 점적기를 사용하여, 시약 등급 질산 0.1 ml를 병 속의 은 조성물에 첨가한다; (c) 병뚜껑을 제자리에 단단히 닫고, 은을 용해하기에 충분한 시간 동안 약하게 교반하면서 조성물을 80 ℃까지 가열한다--용해는 본질적으로 순간적이다; (d) 뚜껑을 제자리에 둔 채로 생성된 혼합물을 실온으로 냉각시킨다. 병을 충분히 흔든다; (e) AA, ICP/AES 또는 상응하는 방법을 이용하여 조성물의 은 함량을 분석한다. 바람직하게는, 필요에 따라 적절한 희석으로, 바람직하게는 장비 제조사의 지시에 따라 준비된, 새로 준비된 표준 또는 표준들을 사용할 수 있다. 결과를 보고할 때, 질산의 첨가로 인한 1 % 희석을 포함하여 준비하는 동안의 모든 희석을 고려해야 한다.

조성물 내 은의 물리적 및 화학적 형태는 비행시간 이차 이온 질량 분광분석법(TOF-SIMS)으로 분석할 수 있다. TOF-SIMS 기술은 미지의 시료의 조성을 알아내는 분석 도구로 적합하게 사용된다. 적절한 미소분석 표준을 검정에 이용할 수 있을 경우 정량화가 가능하다. TOF-SIMS 분석을 수행하기 위해, 몇 방울의 은 함유 조성물을 규소 기판상에서 건조될 때까지 상온에서 증발시킨다. 나머지는 TOF-SIMS에 의해 분석된다. 기준 산화 은(II) 물질(AgO)은 판매 회사로부터 수령한 기준 파우더 입자 소량을 규소 기판상에 놓음으로써 분석되고, 기준으로 표시된다. 비행시간 이차 이온 질량 분광분석법 기술(TOF-SIMS)은 고체 시료를 일차 이온의 미세하게 집중된 펄스 빔과 충돌시키고, 그 후 시료의 표면에서 생성된 이차 이온을 비행시간 질량 분광분석기를 통해 분석하는 원리에 기초한 것이다. 이 분석 기술은 표면 아래 약 20 내지 40 Å까지 뻗어있는 층으로부터 분석 정보를 얻으므로 표면에 민감하다.

크기/형태/조성 분석은 SEM, EDS(EDAX) 및 TEM 중 어느 하나에 의해 수행할 수 있다. 특히, 은/물 조성물은 건조시켜 EM 그리드 위에 놓고 SEM(즉, 주사 전자 현미경) 및 두 개의 다른 TEM(즉, 투과 전자 현미경)으로 관찰할 수 있다. 예를 들어, 은/물 조성물은 C-필름 위에 놓고 약 -100 ℃의 온도에서 약 100 kV의 전력 레벨을 사용하여 극저온-TEM으로 관찰할 수 있다. 따라서 본 발명의 은/물 조성물은 실질적으로 순간적으로 냉동되었다. 또 다른 예로, TEM 분석은 "SAD" 모드에서 수행할 수 있다. 또 다른 예로, 본 발명의 은/물 조성물로부터 취한 은 입자의 EDAX 스펙트럼(즉, 에너지 분산 스펙트럼 또는 "EDS")은 금속 불순물을 확인하기 위해 사용될 수 있다. 한 양태에서, 콜로이드 은 입자는 금 또는 백금을 함유하지 않는다.

실시예

배경:

보톡스 코스메틱(보툴리눔 톡신 A)는 100 단위 용량으로 시판된다. 종래에, 독성이 약화된 보툴리눔 톡신 A 코스메틱 100 단위의 용기를 약 1 mL의 불활성 수성 담체, 일반적으로 식염수에 희석한 다음 부드럽게 교반한다. 의도하는 환자의 주사 부위는 이소프로판올로 깨끗하게 한다. 원하는 양의 이 희석된 보톡스 코스메틱을 환자에게 주사한다. 아래의 실시예에서는, 종래의 식염수 담체를 본 명세서에 기재한 것과 같이 나노금속 은 입자의 수성 현탁액으로 대체하였고, 여기서 이 활성 수성 담체는 10 ppm 또는 30 ppm의 은 농도를 갖는다. 본 개시내용의 은 입자를 함유하는 희석된 보툴리눔 톡신 A는 본 명세서에서 편의에 의해 BB로 일컬을 것이다. 수성 나노금속 은 현탁액은 아메리칸 바이오테크 랩스에서 히드로졸(HYDROSOL) 제품으로 시판하고 있다. 또한, 의도하는 주사 부위는 이소프로판올 대신에 10 ppm 히드로졸의 멸균 용액으로 닦아냈다. 아래의 실시예의 모든 환자는 치료의 실험적 성격을 이해하고 치료를 위한 피험자 동의서 및 기밀유지 약정에 서명하였다. 각각의 주사는 10 단위의 희석된 보툴리눔 톡신 A를 함유했다.

은 나노입자로 희석된 총 1469 단위의 보톡스("BB")를 24 개월 기간에 걸쳐17 명의 다른 환자의 다양한 얼굴 근육에 주사하였다. 주사 당일, 그리고 주사 후 7 일째 및 21 일째에, 그 후에는 45 일 간격으로 환자들을 평가했다. 보톡스 효과의 평가는 나타난 것과 같이 주사 놓는 사람에 의해 주관적으로 결정되었다: 동작의 범위/ 근육 활동량 및 정적 또는 기능적 주름의 존재 또는 부재.

<실시예 1>

1번 환자는 30 ppm 히드로졸 현탁액으로 만든 44 단위의 BB를 투여받았다. 이들 단위는 눈, 입 및 이마 주변에 양방향으로 주사되었다. 보톡스의 효과는 8.5 개월 동안 지속되었다. 상기 환자는 주사 부위에 약간의 아픔 및 불편함이 있다고 보고했다. 44 단위의 BB를 주사 받은 지 약 10 개월 후에, 상기 환자는 10 ppm 히드로졸로 만든 40 단위의 BB를 투여받았고, 여기서 이들 단위는 눈 주변 및 이마/눈살근 및 인중에 양방향으로 주사되었다. 상기 환자는 주사로 인한 아픔이나 불편함을 보고하지 않았다. 보톡스의 효과는 10+ 개월 초과 동안 지속 되었다. 홍반은 관찰되지 않았다.

이 환자는 이전에 희석액이 0.9 % 중성 완충 식염수인 보톡스 치료를 같은 부위에 몇 번 받은 적이 있었다. 이들 주사로 인한 보톡스 효과의 평균 지속 기간은 4-5 개월이었다. 따라서, 청구된 발명에 따른 보톡스 및 은 나노입자의 조합은 종래의 보톡스 주사에 비교했을 때 상당히 더 오랜 기간 지속되는 보톡스 효과를 나타낸다.

<실시예 2>

2번 환자는 30 ppm 히드로졸 현탁액으로 만든 45 단위의 BB를 투여받았다. 이들 단위는 눈, 입 및 이마 주위에 양방향으로 주사되었다. 보톡스의 효과는 7.5 개월 동안 지속되었다. 상기 환자는 주사 부위에 약간의 아픔 및 불편함이 있다고 보고했다. 45 단위의 BB를 투여받은 지 약 10 개월 후에, 상기 환자는 10 ppm 히드로졸로 만든 42 단위의 BB를 투여받았고, 여기서 이들 단위는 눈 주위 및 이마에 양쪽으로 주사되었다. 상기 환자는 주사로 인한 아픔이나 불편함을 보고하지 않았다. 보톡스의 효과는 9 개월 동안 지속 되었다.

앞서 설명한 BB의 주사를 받기 전 5 년 동안, 이 환자는 이전에 희석액이 0.9 % 중성 완충 식염수인 보톡스 치료를 같은 부위에 여러 번 받은 적이 있었다. 이들 주사로 인한 보톡스 효과의 평균 지속 기간은 4-5 개월이었다. 따라서, 청구된 발명에 따른 보톡스 및 은 나노입자의 조합은 종래의 보톡스 주사에 비교했을 때 상당히 더 오랜 기간 지속되는 보톡스 효과를 나타낸다.

<실시예 3>

3번 환자는 30 ppm 히드로졸 현탁액으로 만든 34 단위의 BB를 투여받았다. 이들 단위는 눈 및 이마 주위에 양방향으로 주사되었다. 보톡스의 효과는 8.5 개월 동안 지속되었다. 상기 환자는 주사 부위에 약간의 아픔 및 불편함이 있다고 보고했다. 34 단위의 BB를 투여받은 지 약 50 주 후에, 상기 환자는 10 ppm 히드로졸로 만든 50 단위의 BB를 투여받았고, 여기서 이들 단위는 눈 주위 및 이마에 양쪽으로 주사되었다. 상기 환자는 주사 부위에 약간의 불편함이 있다고 보고했다. 보톡스의 효과는 적어도 11 개월 동안 지속 되었다. 홍반은 관찰되지 않았다.

이 환자는 이전에 희석액이 0.9 % 중성 완충 식염수인 보톡스 치료를 같은 부위에 두 번 받은 적이 있었다. 이들 주사로 인한 보톡스 효과의 평균 지속 기간은 5-6 개월이었다. 따라서, 청구된 발명에 따른 보톡스 및 은 나노입자의 조합은 종래의 보톡스 주사에 비교했을 때 상당히 더 오랜 기간 지속되는 보톡스 효과를 나타낸다.

<실시예 4>

4번 환자는 10 ppm 히드로졸 현탁액으로 만든 34 단위의 BB를 투여받았다. 이들 단위는 눈, 이마 및 윗 입술의 왼쪽 부분 주위에 양방향으로 주사되었다. 보톡스의 효과는 8.5 개월 동안 지속되었다. 상기 환자는 주사 부위에 약간의 아픔 및 불편함이 있다고 보고했다. 34 단위의 BB를 투여받은 지 약 11 개월 후에, 상기 환자는 10 ppm 히드로졸로 만든 50 단위의 BB를 투여받았고, 여기서 이들 단위는 눈 주위 및 이마에 양쪽으로 주사되었다. 상기 환자는 주사 부위에 약간의 불편함이 있다고 보고했다. 보톡스의 효과는 적어도 10 개월 동안 지속 되었다.

앞서 설명한 BB 주사를 맞기 전에 이 환자는 이전에 희석액이 0.9 % 중성 완충 식염수인 보톡스 치료를 같은 부위에 무수히 많이 받은 적이 있었다. 주사 부위에 아픔이나 불편함은 나타나지 않았다. 이들 주사로 인한 보톡스 효과의 평균 지속 기간은 5-6 개월이었다. 따라서, 청구된 발명에 따른 보톡스 및 은 나노입자의 조합은 종래의 보톡스 주사에 비교했을 때 상당히 더 오랜 기간 지속되는 보톡스 효과를 나타낸다.

선행하는 실시예는 예시적인 보툴리눔 톡신인 보톡스의 근 이완제 효능을 연장하기 위하여 콜로이드 은을 보툴리눔 톡신 A와 함께 사용할 수 있음을 보여준다. 또한, 이들 연구는 주사를 위해 멸균된 피부 표면을 제공하기 위해 이소프로판올 대신 콜로이드 은을 사용할 수 있음을 보여준다.

본 명세서에 언급되거나 및/또는 응용 데이터 시트에 열거된 모든 미국 특허, 미국 특허 출원 공보, 미국 특허 출원, 외국 특허, 외국 특허 출원 및 비 특허 공보는 그 전체가 본 명세서에 참고로 인용된다.

설명의 목적으로 본 발명의 구체적인 실시양태가 본 명세서에서 기술되었지만, 본 발명의 사상 및 범위를 벗어나지 않고 다양한 변형이 이루어질 수 있음을, 전술한 내용으로부터 이해할 수 있다. 따라서, 본 발명은 첨부된 청구범위를 제외하고는 제한되지 않는다.

Claims

보툴리눔 톡신(BTX), 콜로이드 은 입자 및 물을 포함하는 조성물.
제1항에 있어서, 상기 BTX는 보툴리눔 A형 뉴로톡신인 조성물.
제1항에 있어서, 상기 BTX는 보툴리눔 B형 뉴로톡신인 조성물.
제1항에 있어서, 100-600 단위의 BTX를 포함하는 조성물.
제1항에 있어서, 1 내지 100 ppm 농도의 콜로이드 은을 포함하는 조성물.
제1항에 있어서, 콜로이드 은은 입자 크기를 특징으로 하고, 상기 콜로이드 은 입자의 50 % 초과가 0.015 마이크로미터 미만의 최대 치수를 갖는 조성물.
제6항에 있어서, 적어도 90 %의 상기 콜로이드 은 입자가 0.005 마이크로미터 내지 0.015 마이크로미터 사이의 직경을 갖는 조성물.
제1항에 있어서, 상기 콜로이드 은 입자는 화학식이 Ag(0)인 금속 은 및 Ag(I), Ag(II), 및 Ag(III)에서 선택된 화학식을 갖는 은 이온을 포함하는 것인 조성물.
제1항에 있어서, 은의 전체 농도가 약 5 내지 40 ppm 사이이고, 상기 은은 금속 은으로 된 내부 및 이온성 산화 은으로 된 외부 표면을 갖는 은 입자의 무색의 안정한 콜로이드 현탁액 형태이며, 적어도 75 %의 은 입자가 0.005 마이크로미터 내지 0.015 마이크로미터 사이의 직경을 갖는 조성물.
보툴리눔 톡신(BTX)를 포함하는 용기 및 콜로이드 은 입자 및 물을 포함하는 용기를 포함하는 키트.
보툴리눔 톡신(BTX), 콜로이드 은 입자 및 물을 그것을 필요로 하는 대상에게 투여하는 것을 포함하는 미용 요법.
보툴리눔 톡신(BTX), 콜로이드 은 입자 및 물을 그것을 필요로 하는 대상에게 투여하는 것을 포함하는 의료 요법.