KR20170057580A - Cosmetic Composition for Reducing Skin Wrinkle - Google Patents

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Abstract

The present invention relates to a composition for external skin application for promoting collagen biosynthesis containing a Pimenta racemosa extract as an active ingredient, and a cosmetic composition. Since the composition promotes synthesis of collagen, wrinkles on skin can be reduced and keeps skin more firm and elastic.

Description

주름개선용 화장료 조성물{Cosmetic Composition for Reducing Skin Wrinkle}[0001] Cosmetic Composition for Reducing Skin Wrinkle [

본 발명은 피멘타 라세모사(Pimenta racemosa)의 추출물을 포함하는 콜라겐 생성 촉진용 피부 외용제 조성물 및 화장료 조성물에 관한 것이다.The present invention relates to Pimenta < RTI ID = 0.0 > Racemosa ) and a cosmetic composition for enhancing collagen production.

피부는 체내의 근육들과 기관을 보호하는 다수의 상피조직으로 이루어진 외피 체계에서 가장 큰 조직으로, 외부 환경으로부터 신체 내부를 보호하여 체내의 항상성을 유지시키는데 중요한 역할을 한다. 그 결과 피부는 외부에서 주어지는 물리적, 화학적 자극, 스트레스, 영양 결핍 등에 의해 피부의 정상기능이 저하되고 탄력 저하, 주름 생성 등의 피부 노화 현상이 촉진된다.Skin is the largest tissue in the epidermal system consisting of multiple epithelial tissues that protects the muscles and organs in the body and plays an important role in maintaining the body's homeostasis by protecting the inside of the body from the external environment. As a result, the skin is exposed to external physical and chemical stimuli, stress, nutritional deficiencies, such as the normal function of the skin degraded, elasticity and wrinkles, such as skin aging phenomenon is promoted.

피부의 노화는 내인적 노화(innate age)와 외인적 노화(extrinsic age)로 구분할 수 있다. 상기 내인적 노화는 연령이 증가함에 따라 발생하는 노화로, 신체의 생리적인 기능이 저하되어 나타나는 노화이다. 또한, 상기 외인적 노화는 외부 자외선, 활성산소, 스트레스 등에 의해 발생하는 노화 현상을 말한다. 이러한 내인적 및 외인적 노화 요인에 의해 피부의 노화가 진행되고, 그 결과 피부 표면에 주름이 생성되어 피부결이 거칠어지고 탄력이 감소한다.Skin aging can be divided into innate age and extrinsic age. The above-mentioned internal aging is an aging caused by an increase in age, and aging resulting from a decrease in the physiological function of the body. The external aging refers to the aging phenomenon caused by external ultraviolet rays, active oxygen, stress, and the like. These internal and external aging factors aging the skin promote wrinkles on the skin surface, resulting in rough skin texture and reduced elasticity.

주름이 생성되는 기작에 따르면, 진피 내의 콜라겐(collagen), 엘라스틴(elastin) 등은 분해 및 생성이 계속해서 이루어지는데, 이때 분해작용 후 생성작용으로 인한 보충이 원활하지 않으면 피부가 탄력을 잃고 주름이 생성된다.According to the mechanism of wrinkle formation, the collagen (collagen) and elastin in the dermis continue to be decomposed and produced. If the supplement after the decomposition is not smooth, the skin loses elasticity and wrinkles .

지금까지 연구보고된 대표적인 주름완화 및 피부 노화 예방 물질로는 레티노익산(retinoic acid), 레티놀(retinol), 아스코르브산(ascorbic acid), α-히드록시산(α-hydroxy acid) 등이 있다.Retinoic acid, retinol, ascorbic acid, and? -Hydroxy acid are among the representative anti-wrinkle and anti-aging substances reported so far.

레티노익산은 지질과산화(lipid per-oxidation) 및 오르니틴 디카복실라아제 반응(ornithine decarboxylase response)을 억제한다. 그러나 자외선에 의해 민감한 반응을 보이며 자극이 높아 피부가 붉어지는 부작용이 보고되어 사용이 제한되고 있으며, 또한, 6개월 이상 계속 사용해야만 효과가 나타나는 문제점이 있다.Retinoic acid inhibits lipid per-oxidation and ornithine decarboxylase response. However, it is sensitive to ultraviolet rays and has a high irritation, so it has been reported that side effects of redness of the skin have been reported, and its use is restricted.

레티놀은 레티노익산에 비해 주름개선 효과가 약하지만 상대적으로 안전성이 높아 널리 사용되고 있다. 그러나 레티놀을 고농도로 사용하면 피부자극이 발생하며, 자외선에 노출 시 피부 색소 침착을 일으키며, 공기 중의 산소, 열 및 빛 등에 의해 쉽게 산화되므로 안정성에 문제가 있다.Retinol is less effective for wrinkle improvement than retinoic acid, but is widely used because of its relatively high safety. However, when retinol is used at a high concentration, skin irritation occurs, skin pigmentation occurs upon exposure to ultraviolet rays, and oxidation is easily caused by oxygen, heat and light in the air.

아스코르브산은 공기, 수분, 고온 등 외부 환경에 의해 쉽게 산화되어 그에 따라 활성이 많이 감소하므로 주름개선 정도가 낮아지고, 제형의 변색 및 변취를 유발하는 문제점이 있다. Ascorbic acid is easily oxidized by the external environment such as air, water, and high temperature, and thus the activity is greatly reduced, thereby lowering the degree of wrinkle improvement and causing discoloration and deterioration of the formulation.

또한, α-히드록시산도 항주름제로 공시되어 있으나, 가려움, 홍반, 자외선에 민감성 반응 등 피부자극 부작용이 수반되어 제품의 안전성 측면에 문제점이 있다.Although α-hydroxy acid is also disclosed as an anti-wrinkle agent, there are side effects of skin irritation such as itching, erythema, and sensitivity to ultraviolet rays, thereby causing a problem of safety of the product.

이외에도, 주름 방지를 위해 자외선 차단제, 보습제, 항산화제 등을 함유한 화장품들이 널리 사용되고 있으나 이 제품들의 실질적인 주름 개선 효과는 미미한 편이다.In addition, cosmetic products containing sunscreen agents, moisturizers, and antioxidants are widely used to prevent wrinkles, but the effect of wrinkles on these products is minimal.

한편, 정유(essential oil)는 존재하는 수목의 열매, 잎, 꽃, 줄기, 나무껍질과 뿌리 등에서 추출하며, 추출한 식물의 이름을 따서 명명한다. 식물에서 추출되는 정유는 단일 화학성분이 아닌 휘발성분이 강한 monoerpene 계와 phenolics 계 화합물의 혼합물로 추출 식물 종의 유전적 특성과 재배지역의 환경 및 채취시기에 따라 정유성분의 조성에 차이가 나타난다. 이러한 정유는 식물의 생장과 분화에 직접적인 영향을 미치지는 않으나 다양한 기능을 나타내는 물질이며, 의약, 향료, 생활용품 등에 광범위하게 이용되고 있다.On the other hand, essential oil is extracted from the fruit, leaf, flower, stem, bark and root of the existing tree and named after the extracted plant. Essential oils extracted from plants are a mixture of monoerpene and phenolic compounds which are not a single chemical component but strong volatile components. The genetic characteristics of the extracted plant species and the composition of the essential oil components are different according to the environment and harvesting season in the cultivation area. These essential oils do not directly affect the growth and differentiation of plants, but they have various functions and are widely used in medicines, fragrances, household goods and the like.

일 예로 대한민국 특허공개 제2014-0062958호는 세신 추출물로부터 추출되는 정유(essential oil) 분획물을 포함하는 체지방 또는 셀룰라이트 감소 및 예방효과를 갖는 아로마 오일 조성물 및 화장료 조성물 우울증의 예방 및 개선 용 화장료 조성물을 개시하고 있다. For example, Korean Patent Laid-Open Publication No. 2014-0062958 discloses an aroma oil composition and a cosmetic composition having body fat or cellulite reducing and preventing effect including an essential oil fraction extracted from a sesamin extract, and a cosmetic composition for preventing and improving depression Lt; / RTI >

대한민국 특허공개 제2014-0062958호Korean Patent Publication No. 2014-0062958

본 발명자들은 피멘타 라세모사(Pimenta racemosa)의 추출물이 콜라겐 생성을 촉진하여 실질적으로 피부에 적용되는 경우 피부 주름 개선 효과를 나타냄을 확인함으로써 본 발명을 완성하였다.The present inventors have found that Pimenta Racemosa extract promotes collagen production and is effective for improving skin wrinkles when applied to skin substantially. The present invention has been completed based on this finding.

따라서, 본 발명은 피멘타 라세모사(Pimenta racemosa)의 추출물을 유효성분으로 포함하는 콜라겐 합성 촉진용 피부 외용제 조성물을 제공하는 것을 그 목적으로 한다.Thus, the present invention is based on the discovery that Pimenta It is an object of the present invention to provide a composition for promoting collagen synthesis comprising an extract of racemosa as an active ingredient.

또한, 본 발명은 피멘타 라세모사(Pimenta racemosa)의 추출물을 유효성분으로 포함하는 주름 개선용 화장료 조성물을 제공하는 것을 다른 목적으로 한다The present invention also relates to a process for the preparation of Pimenta < RTI ID = 0.0 > Another object of the present invention is to provide a cosmetic composition for improving wrinkles containing an extract of racemosa as an active ingredient

상기한 과제를 달성하기 위해, 본 발명은In order to achieve the above object,

피멘타 라세모사(Pimenta racemosa)의 추출물을 유효성분으로 함유하는 콜라겐 생합성 촉진용 피부 외용제 조성물을 제공한다. Pimenta The present invention provides a composition for external application for skin for promoting collagen biosynthesis, which comprises an extract of racemosa as an active ingredient.

또한 본 발명은Also,

피멘타 라세모사(Pimenta racemosa)의 추출물을 유효성분으로 함유하는 주름 개선용 화장료 조성물을 제공한다. Pimenta The present invention provides a cosmetic composition for improving wrinkles containing an extract of Racemosa as an active ingredient.

본 발명에 따른 외용제 조성물 및 화장료 조성물은 피부 진피 층의 섬유아세포에 작용하여 콜라겐 생성을 촉진하므로, 피부 주름, 피부 탄력 저하, 또는 노화를 예방 또는 개선에 유용하게 사용될 수 있다. The external application composition and cosmetic composition according to the present invention act on fibroblasts of the dermal layer to promote collagen production, and thus can be usefully used for preventing or improving skin wrinkles, skin elasticity, or aging.

도 1은 실험예 1에서 인간 피부섬유아세포에 대한 베이유(bay oil)의 세포독성결과를 나타낸 그래프이다.
도 2는 실험예 2에서 진피 섬유아세포 내 콜라겐에 대한 베이유(bay oil)의 생성 증가활성을 나타낸 그래프이다.
FIG. 1 is a graph showing the cytotoxicity results of bay oil against human skin fibroblasts in Experimental Example 1. FIG.
FIG. 2 is a graph showing the activity of increasing the production of bay oil against collagen in dermal fibroblasts in Experimental Example 2. FIG.

본 발명의 조성물은 유효성분으로 피멘타 라세모사(Pimenta racemosa) 추출물을 함유한다. The composition of the present invention contains, as an active ingredient, Pimenta racemosa extract.

본 발명에 있어서, 상기 피멘타 라세모사(Pimenta racemosa) 추출물은 다양한 기관 또는 부분으로부터 추출하여 얻은 것으로, 피멘타 라세모사(Pimenta racemosa)의 잎, 꽃, 줄기, 가지, 뿌리, 전초 및 열매 중 선택된 어느 하나 이상에 용매를 가하여 추출한 것을 특징으로 한다. 바람직하기로 잎을 사용한다. In the present invention, the Pimenta racemosa extract is obtained by extracting from various organs or parts and is characterized in that a solvent is added to at least one selected from leaves, flowers, stems, branches, roots, outposts and fruits of Pimenta racemosa . Leaves are preferably used.

본 발명에서 원료로 사용하는 피멘타 라세모사(Pimenta racemosa) 추출물은 피멘타 라세모사(Pimenta racemosa)로부터 침출, 전출하여 얻은 침출액, 또는 그 침출액을 다시 일부 또는 전부 농축하여 얻은 농축물, 또는 다시 그 농축물을 건조시켜 제조한 추출 엑기스 및 추출액 중에 함유되고 있는 주 효과를 발휘하는 화학물질 그 자체를 포함한다.In the present invention, Pimenta < RTI ID = 0.0 > racemosa extracts were obtained from Pimenta racemosa , or a concentrate obtained by partially or entirely concentrating the leach solution, or an extract obtained by drying the concentrate again, and a chemical substance exhibiting the main effect contained in the extract liquid Including itself.

본 발명의 추출물은, 당업계에 공지된 통상의 방법에 따라, 즉, 통상적인 용매를 사용하여, 통상적으로 이용되는 증류추출, 냉침, 환류 냉각추출, 열수추출, 실온추출, 가온추출, 초음파추출, 초임계추출 등의 방법으로 제조될 수 있다.The extract of the present invention can be isolated and purified by conventional methods known in the art, that is, by using conventional solvents such as distillation extraction, cold extraction, reflux cooling extraction, hot water extraction, room temperature extraction, , Supercritical extraction, and the like.

구체적으로는 정제수, 탄소수 1 내지 6의 알코올, 글리세린, 탄소수 2 내지 6의 알킬렌글리콜, 탄소수 1 내지 6의 알칸, 탄소수 1 내지 6의 할로겐화 탄화수소, 탄소수 2 내지 6의 알킬 알카노에이트 및 그의 혼합물로부터 선택된 추출용매를 사용할 수 있다. 좀 더 구체적으로 예시하면 정제수, 메탄올, 에탄올, 1,2-프로판디올, 글리세린, 에틸렌글리콜, 부틸렌글리콜, 프로필렌글리콜, 디클로로메탄, 디클로로에탄, 헥산, 에틸아세테이트 및 그의 혼합물로부터 선택된 추출용매를 사용할 수 있다. 이때 추출용매의 사용량은 원료 중량의 5 내지 30 배 부피량이며, 보다 바람직하게는 5 내지 20 배이다.Specific examples thereof include purified water, alcohols having 1 to 6 carbon atoms, glycerin, alkylene glycols having 2 to 6 carbon atoms, alkanes having 1 to 6 carbon atoms, halogenated hydrocarbons having 1 to 6 carbon atoms, alkylalkanoates having 2 to 6 carbon atoms, and mixtures thereof Can be used. More specifically, extraction solvents selected from purified water, methanol, ethanol, 1,2-propanediol, glycerin, ethylene glycol, butylene glycol, propylene glycol, dichloromethane, dichloroethane, hexane, ethyl acetate and mixtures thereof . In this case, the amount of the extraction solvent used is 5 to 30 times the volume of the raw material, more preferably 5 to 20 times.

추출온도는 당업자가 추출 방법에 적절한 다양한 온도 범위를 채택할 수 있으며, 예를 들어, 20 ℃ 내지 100 ℃ 등에서 수행될 수 있으나, 이에 국한되지 않는다. 또한, 추출시간은 추출방법에 따라 상이하며, 당업자가 적절한 추출 시간을 채택할 수 있으며, 이에 국한되지 않으나, 약 1 시간 내지 수일의 범위에서 단회 또는 복수회로 수행될 수 있다. 상기 1차 추출용매로 추출을 수행하여 얻어진 추출물은 통상의 방법에 따라 여과하여 불순물을 제거한 액상 형태로 얻거나, 얻어진 액상 형태의 추출물을 통상의 방법에 따라 감압농축 및/또는 건조하여 분말 형태로 얻을 수 있다.The extraction temperature can be varied by a person skilled in the art in a variety of temperature ranges suitable for the extraction method, for example, but not limited to, from 20 캜 to 100 캜. In addition, the extraction time differs depending on the extraction method, and a person skilled in the art can adopt an appropriate extraction time, and can be performed in a single or multiple cycles in a range of about 1 hour to several days, though it is not limited thereto. The extract obtained by performing the extraction with the primary extraction solvent may be obtained in the form of a liquid in which impurities are removed by filtration according to a conventional method, or the obtained liquid form extract may be concentrated under reduced pressure and / Can be obtained.

본 발명은 일 구현예에 따르면, 상기 추출물은 피멘타 라세모사(Pimenta racemosa) 잎의 증기 증류에 의해 얻은 베이유(bay oil)이다. According to one embodiment of the present invention, the extract is bay oil obtained by steam distillation of Pimenta racemosa leaves.

또한, 본 발명에 따른 추출물을 조성 성분으로 사용함에 있어서는 동결 건조된 분말 형태로는 물론이고, 물 또는 통상의 유기용매에 분산 또는 용해된 액체 형태로도 사용될 수 있다.In addition, when the extract according to the present invention is used as a constituent component, it can be used not only in the form of a lyophilized powder, but also in the form of a liquid dispersed or dissolved in water or a common organic solvent.

또한, 본 발명에 따른 조성물은 상기 추출물 성분 외에 본 발명이 목적으로 하는 주 효과를 손상시키지 않는 범위 내에서 바람직하게는 주 효과에 상승 효과를 줄 수 있는 다른 성분을 함유할 수 있다.In addition, the composition according to the present invention may contain, in addition to the above-mentioned extract components, other components which can give a synergistic effect to the main effect, within a range not impairing the intended main effect of the present invention.

본 발명에 따른 실험예 2를 통해 베이유(bay oil)의 콜라겐 합성 효과를 알아보기 위해 실험한 결과, 24시간 처리시 104% 이상, 48시간 처리시 140% 이상 콜라겐 합성량이 증가하였다.Experimental Example 2 according to the present invention was conducted to examine the effect of collagen synthesis on bay oil. As a result, the amount of collagen synthesis increased by more than 104% in 24 hours treatment and 140% in 48 hours treatment.

이러한 결과를 통해 본 발명에서 제시하는 피멘타 라세모사(Pimenta racemosa)의 추출물은 피부 외용제 조성물 및 화장료 조성물로 적용이 가능하고, 이를 피부에 적용시 콜라겐 합성을 촉진함으로써, 피부 주름을 더욱 완화할 수 있고, 피부를 보다 견고하며 탄력 있게 유지해주는 효과를 얻을 수 있다.From these results, it can be seen that the extract of Pimenta racemosa proposed in the present invention can be applied as a composition for external application for skin and a cosmetic composition, and promotes collagen synthesis when applied to skin, And the effect of keeping the skin more firm and elastic can be obtained.

피멘타 라세모사(Pimenta racemosa)의 추출물은 전체 외용제 조성물 중량 대비 0.0001 내지 30.0 중량% 포함할 수 있으며, 바람직하게는 0.001 내지 30.0 중량%를 포함할 수 있다. 만약, 상기 화합물의 함량이 제안 범위 미만일 경우 뚜렷한 효과를 기대할 수 없고, 반대로 제안 범위를 초과하는 경우 함량의 증가에 비해 효과의 증가가 미미하며 약간의 세포 독성을 야기할 수 있다. Pimenta racemosa may contain from 0.0001 to 30.0% by weight, preferably from 0.001 to 30.0% by weight, based on the weight of the total external preparation composition. If the content of the compound is below the recommended range, no significant effect can be expected. On the contrary, if the content exceeds the recommended range, the increase of the effect is insignificant and may cause slight cytotoxicity compared with the increase of the content.

상기 외용제 조성물은 그 제형에 있어서 특별히 한정되는 바가 없으며, 예를 들어 바디 로션, 연고, 겔, 크림, 패취 또는 분무제의 제형을 갖는 외용제 조성물일 수 있다. 이때 각 제형의 외용제 조성물에 있어서, 상기한 피멘타 라세모사(Pimenta racemosa)의 추출물 이외의 다른 성분들은 기타 외용제의 제형 또는 사용목적 등에따라 당업자가 적의 선정하여 배합할 수 있다.The external preparation composition is not particularly limited in its formulation and may be, for example, an external preparation composition having a formulation of a body lotion, ointment, gel, cream, patch or spray. At this time, in the composition for external application for each formulation, components other than the extract of Pimenta racemosa may be selected by those skilled in the art according to the formulation or purpose of use of the other external preparation.

특히, 본 발명에 따른 피멘타 라세모사(Pimenta racemosa)의 추출물은 콜라겐 합성 촉진 효과를 통해 이를 유효성분으로 포함하는 화장료 조성물로서 적용이 가능하다.In particular, Pimenta < RTI ID = 0.0 > racemosa extract can be applied as a cosmetic composition containing it as an active ingredient through promoting collagen synthesis.

피멘타 라세모사(Pimenta racemosa)의 추출물은 전체 화장료 조성물 중량 대비 0.0001 내지 30.0 중량%로 포함할 수 있으며, 바람직하게는 0.001 내지 30.0 중량%를 포함할 수 있다. 만약, 상기 화합물의 함량이 제안 범위 미만일 경우 뚜렷한 효과를 기대할 수 없고, 이와 반대로 상기 범위를 초과하는 경우 포함량의 증가에 비해 효과의 증가가 미치지 못하며 약간의 세포 독성을 나타낼 수 있다. Pimenta racemosa may be contained in an amount of 0.0001 to 30.0% by weight, preferably 0.001 to 30.0% by weight, based on the total weight of the cosmetic composition. If the content of the compound is below the recommended range, no significant effect can be expected. On the other hand, if the content of the compound exceeds the above range, the effect is not increased as compared with the content of the compound, and slight cytotoxicity may be exhibited.

상기 화장료 조성물은 조성물은 그 제형에 있어서 특별히 한정되는 바가 없으며, 예를 들어 화장수, 유액, 크림, 폼, 에센스, 세럼, 유연수, 유액, 파운데이션, 메이크업 베이스, 비누, 선 스크린크림 및 선 오일 등의 제형으로 제조할 수 있다.The composition of the cosmetic composition is not particularly limited in its formulation and may be in the form of a lotion such as a lotion, a milky lotion, a cream, a foam, an essence, a serum, a soft water, an emulsion, a foundation, a makeup base, a soap, ≪ / RTI >

또한, 각 제형의 조성들은 그 제형의 제제화에 필요하고 적절한 각종의 기제와 첨가물을 함유할 수 있으며, 그 효과를 떨어트리지 않는 범위 내에서 비이온 계면활성제, 실리콘 폴리머, 체질안료, 향료, 방부제, 살균제, 산화 안정화제, 유기 용매, 이온성 또는 비이온성 증점제, 유연화제, 산화방지제, 자유 라디칼파괴제, 불투명화제, 안정화제, 에몰리언트(emollient), 실리콘, α-히드록시산, 소포제, 보습제, 비타민, 곤충 기피제, 향료, 보존제, 계면활성제, 소염제, 물질 P 길항제, 충전제, 중합체, 추진제, 염기성화 또는 산성화제, 또는 착색제 등 공지의 화합물을 포함하여 제조된다.In addition, the compositions of each formulation may contain various bases and additives necessary for formulation of the formulation, and may contain non-ionic surfactants, silicone polymers, extender pigments, flavorings, preservatives, But are not limited to, disinfectants, oxidative stabilizers, organic solvents, ionic or nonionic thickeners, plasticizers, antioxidants, free radical scavengers, opacifiers, stabilizers, emollients, silicones, A preservative, a surfactant, an anti-inflammatory agent, a substance P antagonist, a filler, a polymer, a propellant, a basicizing or acidifying agent, or a coloring agent.

이하, 본 발명의 이해를 돕기 위하여 바람직한 실시예를 제시한다. 그러나 하기의 실시예는 본 발명을 더욱 쉽게 이해하기 위하여 제공되는 것일 뿐, 실시예에 의해 본 발명의 내용이 한정되는 것은 아니다.Hereinafter, preferred embodiments of the present invention will be described in order to facilitate understanding of the present invention. However, the following examples are provided to further understand the present invention, and the present invention is not limited by the examples.

실험예Experimental Example 1:  One: 베이유의Bay 세포 독성 확인 Cytotoxicity check

1. 인간 피부 섬유 아세포의 배양1. Culture of human skin fibroblasts

인간 피부 섬유 아세포(Human dermal fibroblast)는 Gibco사(Life Technologies, Carlsbad, CA, USA)로부터 구입하였다. 세포들은 DMEM 배지(Gibco사) 중에서 37℃에서 배양하였다. 배지는 부착된 세포들이 80% 합류(confluence) 때까지 유지하고 80 % 합류시기에 계대 배양을 수행하였다. 합류 때까지 배지는 2일 마다 교체하였다. 상기 계대 배양은 배양액을 제거한 플라스크를 인산완충식염수(phosphate buffer saline, PBS)로 세척하고 0.25 % 트립신-EDTA (Gibco BRL, Grand Island, NY, USA)로 세포를 떨어뜨린 후 세포 부유액을 원심분리한 후, 세포 수를 측정하고, 배양액에서 다시 3 배로 계대 배양하였다. Human dermal fibroblast was purchased from Gibco (Life Technologies, Carlsbad, Calif., USA). The cells were cultured in DMEM medium (Gibco) at 37 ° C. The medium was maintained until the adhered cells were confluent at 80% and subcultured at 80% confluence. The medium was replaced every two days until confluence. For the subculture, the flask in which the culture solution had been removed was washed with phosphate buffered saline (PBS), and the cells were suspended in 0.25% trypsin-EDTA (Gibco BRL, Grand Island, NY, USA) After that, the number of cells was measured and subcultured again in the culture solution three times.

2. 세포 독성 측정2. Cytotoxicity measurement

96 웰 플레이트에 10% 혈청이 첨가된 DMEM 배지(Gibco사)를 각각 넣고, 인간 피부 섬유아세포 5 X 102를 접종하여, 5% CO2 및 37℃ 조건에서 배양하여 세포를 배양 접시에 부착시킨 다음, 24시간 동안 혈청을 제거한 배양액에서 배양한 후, 음성대조군(DMSO처리)과 베이유 처리군으로 나누었다. 베이유를 DMSO에 농도별로 용해시켜 10㎕을 처리하였다(처리농도 0.00001 wt%~0.08 wt%). DMEM medium (Gibco) supplemented with 10% serum was added to each well of a 96-well plate, human fibroblasts were inoculated with 5 x 10 2 cells, cultured at 5% CO 2 and 37 ° C, Then, the cells were cultured in a serum-free medium for 24 hours, and then divided into negative control (DMSO treatment) and bee treatment. The beads were dissolved in DMSO at a concentration of 10 μl (treatment concentration 0.00001 wt% to 0.08 wt%).

상기 처리 후, 5% CO2 및 37℃ 조건에서 24 시간 동안 배양하였다. 이후 MTT 시약을 넣고 4시간 후 배지를 제거하고 DMSO 200 ㎕를 가하여 포마잔 결정체 (formazan crystal)를 용해 시킨 후 마이크로평판 판독기 (microplate reader)로 570 nm에서 흡광도를 측정하였다. 그 결과는 도 1에 나타내었다.After the treatment, the cells were cultured at 5% CO 2 and 37 ° C for 24 hours. After 4 hours, MTT reagent was added and the medium was removed. 200 μl of DMSO was added to dissolve the formazan crystal, and the absorbance was measured at 570 nm with a microplate reader. The results are shown in Fig.

도 1의 결과로부터, 대조군을 기준으로 하였을 때, 베이유를 처리한 조건에서 최종 농도 0.005 wt% 이하에서 세포 독성이 없으며, 매우 낮은 농도에서 약 10% 가량 세포증식이 증가함을 알 수 있었다. From the results shown in FIG. 1, it can be seen that the cells are not cytotoxic at a final concentration of 0.005 wt% or less, and that the cell proliferation is increased by about 10% at a very low concentration when the control group is used as a reference.

실험예Experimental Example 2: 진피 섬유아세포 내 콜라겐 합성량 증가 효과 2: Increased amount of collagen synthesis in dermal fibroblasts

베이유(bay oil)가 진피 섬유아세포 내 콜라겐 합성량에 미치는 영향을 확인하기 위하여 콜라겐 측정 실험을 진행하였다. 진피 섬유아세포주를 10% 우태혈청과 100 U/㎖ 페니실린, 100 ㎍/㎖ 스트렙토마이신이 보충된 DMEM 배지에 첨가하여 37℃, 5% CO2,조건에서 배양하였다. 1일 배양 후에 베이유 0.0005 wt% 적용 배지로 바꾼 후 24시간, 48시간 각각 배양하였다. 웰을 PBS로 3회 세척하고 항체-POD 공액 용액(conjugate solution)을 웰에 100㎕ 넣고 37℃에서 1시간 방치하였다. 웰을 PBS로 3회 세척하고 기질용액(TMB)을 웰에 100㎕ 넣고 25℃에서 30분 방치하였다. 1N H2SO4를 웰에 100㎕ 넣고 콜라겐의 양을 ELISA 판독기(Bio-Tek instrument)를 이용하여 450 nm에서 흡광도를 측정하였다. 이때 DMSO를 처리한 대조군과의 상대적인 흡광도 차이에 따라 콜라겐 생성 증가활성을 계산하여 결과를 도출하고, 그 결과는 도 2에 나타내었다. To investigate the effect of bay oil on the amount of collagen synthesis in dermal fibroblasts, a collagen measurement experiment was conducted. Dermal fibroblast cells were added to DMEM medium supplemented with 10% fetal bovine serum, 100 U / ml penicillin, and 100 μg / ml streptomycin, and cultured at 37 ° C and 5% CO 2 . After 1 day of culture, the medium was changed to 0.0005 wt% of bee culture medium and cultured for 24 hours and 48 hours, respectively. The wells were washed 3 times with PBS, and 100 쨉 l of antibody-POD conjugate solution was added to the wells and left at 37 째 C for 1 hour. The wells were washed three times with PBS, and 100 μl of the substrate solution (TMB) was added to the wells and left at 25 ° C for 30 minutes. 1N H 2 SO 4 was added to the well and the absorbance of the collagen was measured at 450 nm using an ELISA reader (Bio-Tek instrument). At this time, the activity of increasing collagen production was calculated according to the difference in absorbance relative to the control group treated with DMSO, and the results are shown in Fig.

도 2를 참조하면, 콜라겐 합성량 정도를 측정하였을 때, 베이유 24시간 처리 했을 때 약 104 % 콜라겐 합성량을 보여 그 증가 정도가 미약한 반면, 48시간 처리했을 때 콜라겐 합성량은 약 140% 증가하였다. 이는 베이유를 지속적으로 사용할 경우에 콜라겐 합성 효과가 증대됨을 나타낸다. 2, when the degree of collagen synthesis was measured, the amount of collagen synthesis was about 104% when the bean curd was treated for 24 hours, whereas the amount of collagen synthesis was about 140% when treated for 48 hours. Respectively. This indicates that the collagen synthesis effect is increased when the bean is continuously used.

이하, 본 발명의 이해를 돕기 위하여 바람직한 제형예를 제시한다. 그러나 하기의 제형예는 본 발명을 보다 쉽게 이해하기 위하여 제공되는 것일 뿐, 제형예에 의해 본 발명의 내용이 한정되는 것은 아니다. Hereinafter, a preferred formulation example is provided to facilitate understanding of the present invention. However, the following formulation examples are provided only for a better understanding of the present invention, and the present invention is not limited by the formulation examples.

제형예Formulation Example 1: 유연화장수 ( 1: Softening longevity ( 스킨skin ))

하기의 표 1과 같이 베이유(bay oil)를 함유하는 유연화장수를 통상의 방법에 따라 제조하였다.The softening water containing bay oil was prepared according to a conventional method as shown in Table 1 below.

성분ingredient 함량 (중량%)Content (% by weight) 베이유(bay oil)Bay oil 0.30.3 글리세린glycerin 5.05.0 1,3-부틸렌글리콜1,3-butylene glycol 3.03.0 베타인Betaine 1.01.0 알란토인Allantoin 0.10.1 EDTA-2NaEDTA-2Na 0.020.02 소듐 히아루로네이트 파우더Sodium hyaruronate powder 0.050.05 에탄올ethanol 5.05.0 옥틸도데세스-16Octyldodec-16 0.20.2 폴리옥시에칠렌경화피마자유Polyoxyethylene hardened castor oil 0.20.2 방부제antiseptic 적량Suitable amount 정제수Purified water 잔량Balance 합계Sum 100100

제형예Formulation Example 2: 영양화장수 (로션) 2: Nourishing lotion (lotion)

하기의 표 2와 같이 베이유(bay oil)를 함유하는 영양화장수를 통상의 방법에 따라 제조하였다.A nutrition lotion containing bay oil was prepared according to a conventional method as shown in Table 2 below.

성분ingredient 함량 (중량%)Content (% by weight) 베이유(bay oil)Bay oil 0.50.5 글리세릴 스테아레이트 SEGlyceryl stearate SE 1.51.5 세테아릴알코올 Cetearyl alcohol 1.01.0 쉐어버터Sheer butter 1.51.5 폴리솔베이트 60Polysorbate 60 1.31.3 솔비탄스테아레이트Sorbitan stearate 0.50.5 경화식물유Hardened vegetable oil 1.01.0 광물유Mineral oil 5.05.0 스쿠알란Squalane 3.03.0 사이클로메치콘Cyclomethicone 2.02.0 디메치콘Dimethicone 0.80.8 초산 토코페롤Tocopheryl acetate 0.50.5 카보머Carbomer 0.120.12 글리세린glycerin 5.05.0 1,3-부틸렌글리콜1,3-butylene glycol 3.03.0 소듐 히아루로네이트 파우더Sodium hyaruronate powder 0.050.05 트리에탄올아민Triethanolamine 0.120.12 방부제antiseptic 적량Suitable amount 정제수Purified water 잔량Balance 합계Sum 100100

제형예Formulation Example 3 : 마사지 크림 3: Massage cream

하기의 표 3과 같이 베이유(bay oil)를 함유하는 마사지 크림을 통상의 방법에 따라 제조하였다.A massage cream containing bay oil was prepared according to a conventional method as shown in Table 3 below.

성분ingredient 함량 (중량%)Content (% by weight) 베이유(bay oil)Bay oil 0.50.5 모노스테아린산 글리세린Glycerin monostearate 1.51.5 세테아릴알코올Cetearyl alcohol 1.51.5 스테아린산Stearic acid 1.01.0 폴리솔베이트 60Polysorbate 60 1.51.5 솔비탄스테아레이트Sorbitan stearate 0.60.6 이소스테아릴 이소스테레이트Isostearyl isoserate 5.05.0 스쿠알란Squalane 5.05.0 광물유Mineral oil 35.035.0 디메치콘Dimethicone 0.50.5 히드록시에틸셀룰로오스Hydroxyethylcellulose 0.120.12 글리세린glycerin 6.06.0 1,3-부틸렌글리콜1,3-butylene glycol 3.03.0 트리에탄올아민Triethanolamine 0.30.3 방부제antiseptic 적량Suitable amount 정제수Purified water 잔량Balance 합계Sum 100100

제형예Formulation Example 4 : 에센스 4: essence

하기의 표 4와 같이 베이유(bay oil)를 함유하는 에센스를 통상의 방법에 따라 제조하였다.Essences containing bay oil were prepared according to the conventional method as shown in Table 4 below.

성분ingredient 함량 (중량%)Content (% by weight) 베이유(bay oil)Bay oil 0.50.5 글리세린glycerin 6.06.0 베타인Betaine 5.05.0 PEG 1500PEG 1500 2.02.0 알란토인Allantoin 0.10.1 EDTA-2NaEDTA-2Na 0.020.02 하이드로제네이티드 레시친Hydrogenated lecithin 0.60.6 히드록시에틸 셀룰로오스Hydroxyethylcellulose 0.10.1 소듐 히아루로네이트 파우더Sodium hyaruronate powder 0.080.08 카르복 시비닐폴리머Carboxyvinyl polymer 0.20.2 트리에탄올아민Triethanolamine 0.20.2 세라마이드Ceramide 0.20.2 옥틸도데칸올Octyldodecanol 3.03.0 스쿠알란Squalane 3.03.0 폴리소르베이트 60Polysorbate 60 0.40.4 글리세릴 스테아레이트 SEGlyceryl stearate SE 1.51.5 방부제antiseptic 적량Suitable amount 정제수Purified water 잔량Balance 합계Sum 100100

제형예Formulation Example 5: 연고 5: Ointment

하기 표 5와 같이 베이유(bay oil)를 함유하는 연고를 통상의 방법에 따라 제조하였다.Ointment containing bay oil was prepared according to a conventional method as shown in Table 5 below.

성분ingredient 함량(중량%)Content (% by weight) 정제수Purified water 잔량Balance 베이유(bay oil)Bay oil 0.50.5 글리세린glycerin 8.08.0 부틸렌글리콜Butylene glycol 4.04.0 유동파라핀Liquid paraffin 15.015.0 카보머Carbomer 0.10.1 카프릴릭/카프릭 트리글리세라이드Caprylic / capric triglyceride 3.03.0 스쿠알린Squueline 1.01.0 세테아릴 글루코사이드Cetearyl glucoside 1.51.5 소르비탄 스테아레이트Sorbitan stearate 0.40.4 세테아릴 알코올Cetearyl alcohol 1.01.0 밀납Wax 4.04.0

Claims (9)

피멘타 라세모사(Pimenta racemosa)의 추출물을 유효성분으로 함유하는 콜라겐 생합성 촉진용 피부 외용제 조성물. Pimenta Racemosa extract as an active ingredient for promoting collagen biosynthesis. 제1항에 있어서, 상기 추출물은 베이유(bay oil)인 것을 특징으로 하는 콜라겐 생합성 촉진용 피부 외용제 조성물.The composition for external application for skin for promoting collagen biosynthesis according to claim 1, wherein the extract is bay oil. 제1항 또는 제2항에 있어서, 상기 조성물은 추출물을 전체 조성물 중량에 대해서 0.0001 내지 30.0 중량%의 함량으로 포함하는 것을 특징으로 하는 콜라겐 생합성 촉진용 피부 외용제 조성물.The composition for external application for skin for promoting collagen biosynthesis according to claim 1 or 2, wherein the composition comprises the extract in an amount of 0.0001 to 30.0% by weight based on the total weight of the composition. 제1항 또는 제2항에 있어서, 상기 콜라겐 생성 촉진용 피부 외용제 조성물은 연고, 겔, 크림, 패취 또는 분무제 제형인 것을 특징으로 하는 콜라겐 생합성 촉진용 피부 외용제 조성물.The composition for external application for skin for promoting collagen biosynthesis according to claim 1 or 2, wherein the composition for promoting collagen production is an ointment, a gel, a cream, a patch or a spray. 피멘타 라세모사(Pimenta racemosa)의 추출물을 유효성분으로 포함하는 주름 개선용 화장료 조성물. Pimenta A cosmetic composition for improving wrinkles comprising an extract of Racemosa as an active ingredient. 제5항에 있어서, 상기 상기 추출물은 베이유(bay oil)인 것을 특징으로 하는 주름 개선용 화장료 조성물.The cosmetic composition for wrinkle improvement according to claim 5, wherein the extract is bay oil. 제5항 또는 제6항에 있어서, 상기 추출물은 콜라겐 합성 촉진 효과를 갖는 것을 특징으로 하는 주름 개선용 화장료 조성물.The cosmetic composition for improving wrinkles according to claim 5 or 6, wherein the extract has an effect of promoting collagen synthesis. 제5항 또는 제6항에 있어서, 상기 조성물은 추출물을 전체 조성물 중량에 대해서 0.0001 내지 30.0 중량%의 함량으로 포함하는 것을 특징으로 하는 주름 개선용 화장료 조성물.The cosmetic composition for wrinkle improvement according to claim 5 or 6, wherein the composition contains the extract in an amount of 0.0001 to 30.0% by weight based on the total weight of the composition. 제5항 또는 제6항에 있어서, 상기 주름 개선용 화장료 조성물은 화장수, 유액, 크림, 폼, 에센스, 세럼, 유연수, 유액, 파운데이션, 메이크업 베이스, 비누, 선 스크린크림 및 선 오일로 이루어진 군으로부터 선택되는 1종의 제형을 갖는 것을 특징으로 하는 주름 개선용 화장료 조성물.The cosmetic composition for wrinkle improvement according to claim 5 or 6, wherein the wrinkle improving cosmetic composition is at least one selected from the group consisting of lotion, milky lotion, cream, foam, essence, serum, soft water, emulsion, foundation, makeup base, soap, sunscreen cream, Wherein the cosmetic composition has one type of formulation selected.
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