KR20170032348A - 저 치환된 폴리믹신 및 이의 조성물 - Google Patents

저 치환된 폴리믹신 및 이의 조성물 Download PDF

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KR20170032348A
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Abstract

본 발명은 신규의 저 치환된 폴리믹신 및 이의 조성물에 관한 것이다.

Description

저 치환된 폴리믹신 및 이의 조성물 {LOW SUBSTITUTED POLYMYXINS AND COMPOSITIONS THEREOF}
본 발명은 신규의 저 치환된 폴리믹신(low substituted polymyxin) 및 이의 조성물에 관한 것이다.
배경
폴리믹신은 바실러스 폴리믹사(Bacillus polymyxa)에 의해 제조된 항생제로서 1947년에 발견되었다. 폴리믹신은 헵타펩타이드 고리 및 N-말단 아미드 결합 지방산을 함유하는 항생제 데카펩티드이다. 오늘날, 두 개의 상업적 폴리믹신 혼합물, 즉, 폴리믹신 B 및 폴리믹신 E (콜리스틴(Colistin))이 임상에 사용된다. 두 혼합물은 문헌(J Chromatogr A. 2002 Nov 8;976(1-2):65-78, Goevaerts 등 및 Talanta 2011 Feb 15;83(5):1521-9, Van den Bossche 등)에 기술된 바와 같이 여러 성분들을 포함한다. 유럽 약전(European pharmacopoeia)에 따르면, 콜리스틴은 77% 초과의 폴리믹신 E1, E2, E3, E1-i 및 E1-7MOA를 포함해야 하지만, 중요하지 않은 성분인 폴리믹신 E3, E1-i 및 E1-7MOA은 각각 10% 미만으로 포함해야 한다.
콜리스틴과 관련된 독성으로 인해, 혼합물은 1950년대에 설포메틸화(sulfomethylation)에 의해 개선되었다. 설포메틸화된 콜리스틴은 콜리스티메테이트 소듐(CMS)으로 불리우며, 이는 콜리스틴의 프로드러그(prodrug)인 것으로 간주되었다. CMS는 여전히 다약제-내성 유기체(multidrug-resistant organism), 예컨대 슈도모나스 아에루기노사(Pseudomonas aeruginosa), 아시네토박터 바우만니(Acinetobacter baumannii), 클렘시엘라 뉴모니아(Klemsiella pneumonia), 및 그 밖의 음성 병원균에 대한 마지막 치료 옵션(last-line treatment option)으로서 임상적으로 사용된다. 오랫동안, 또한 CMS 용액이 분무에 의해 낭포성 섬유증 (CF)이 있는 환자의 폐내로 투여되어 P. 아에루기노사에 의해 야기된 콜로니화(to manage colonization) 또는 감염증(infection)을 처리하였다.
오늘날, 항생제 내성 병원균에 의해 야기되는 감염증으로 인한 문제의 증가는 콜리스틴과 같은 생성물의 사용 증가를 야기하였다.
상업적 CMS 생성물이 상이한 폴리믹신의 유도체의 복잡한 혼합물을 함유한다는 사실은 몇몇 불행한 결과를 갖는다. 이것들 중 맨 앞은 어떠한 시판되는 제품의 치료 가치에 관한 것이다. CMS가 체내로 주사되거나 흡입되면 항생제-저장소인 것으로 간주될 수 있기 때문에, 활성화된 화합물의 치료 수준이 신장 또는 대사 청소율에 앞서 도달되는 것이 중요하다. 따라서, 두 개의 설포메틸 치환체 만을 함유하는 설포메틸화된 폴리믹신은 분자량 및 전하에 대해 잘-규정된 생성물을 제공한다.
따라서, 본 발명의 목적은 항미생물제(antimicrobial agent)로서 유용한 개선된 폴리믹신 화합물 및 조성물을 제공하고, 종래 기술 생성물의 단점을 극복하거나 적어도 경감시키는 것이다.
발명의 요약
본 발명은 폴리믹신의 폴리펩티드 모이어티(moiety)내 DAB 또는 DAP 잔기 상의 γ-아미노기에 결합된 총 두 개의 설포메틸기를 포함하는 폴리믹신에 관한 것이다. 이들 화합물 및 이의 조성물은 세균 감염증의 치료에 사용될 수 있다.
일 양태에서, 본 발명은 폴리믹신 E 및 폴리믹신 B 보다 더 수용성인 신규의 폴리믹신을 제공한다. 또 다른 양태에서, 본 발명은 시판되는 CMS보다 수용액 중에서 더욱 안정한 설포메틸화된 폴리믹신을 제공한다. 또 다른 양태에서, 본 발명은 시판되는 CMS보다 더욱 균일한 설포메틸화된 폴리믹신의 혼합물을 제공한다. 끝으로, 본 발명의 화합물, 또는 이의 혼합물 또는 조성물은 현재 잘-규정되어 있지 않은 종래 기술의 폴리믹신 조성물과 비교하여 개선된 폴리믹신 투여 및 치료법을 제공한다.
따라서, 본 발명은 하기 화학식(I)에 의해 표현되는 신규한 폴리믹신을 제공한다:
Figure pct00001
상기 식에서,
R1은 지방족 선형 또는 분지형 C6-C10 아실기, 또는
Figure pct00002
이고;
R5는 -CH(CH3)2, -CH2CH(CH3)2 , -CH(CH3)CH2CH3, 또는 -CH2C6H5이고;
R6는 -CH(CH3)2, -CH2CH(CH3)2, 또는 -CH(CH3)CH2CH3이고;
각각의 R2, R3, R4, R7 및 R8은 -(CH2)xCH2NH2 또는 -(CH2)xCH2N(CH2SO3M)2이고; 여기서
x는 0 또는 1이고;
M은 양이온이고;
단, R2, R3, R4, R7 및 R8 중 하나는 -(CH2)xCH2N(CH2SO3M)2이다.
본 발명의 일 구체예에 따르면, 화학식(I)에 의해 표현되는 폴리믹신으로서, 두 개의 설포메틸기가 동일한 γ-아미노기에 결합되어 있는 폴리믹신이 제공된다.
본 발명의 또 다른 구체예에 따르면, 화학식(I)에 의해 표현되는 폴리믹신으로서, R1은 지방족 선형 또는 분지형 C6-C10 아실기이고;
R5 및 R6은 -CH2CH(CH3)2이고;
각각의 R3, R4, R7 및 R8은 -CH2CH2NH2이고;
R2는 -CH2CH2N(CH2SO3M)2이고, 여기서, M은 일가 양이온인 폴리믹신이 제공된다.
본 발명의 또 다른 구체예에 따르면, 화학식(I)에 의해 표현되는 폴리믹신으로서, R1은 지방족 선형 또는 분지형 C6-C10 아실기이고;
R5 및 R6은 -CH2CH(CH3)2이고;
각각의 R2, R4, R7 및 R8은 -CH2CH2NH2이고;
R3는 -CH2CH2N(CH2SO3M)2이고, 여기서, M은 일가 양이온인 폴리믹신이 제공된다.
본 발명의 또 다른 구체예에 따르면, 화학식(I)에 의해 표현되는 폴리믹신으로서, R1은 지방족 선형 또는 분지형 C6-C10 아실기이고;
R5 및 R6은 -CH2CH(CH3)2이고;
각각의 R2, R3, R7 및 R8은 -CH2CH2NH2이고;
R4는 -CH2CH2N(CH2SO3M)2이고, 여기서, M은 일가 양이온인 폴리믹신이 제공된다.
본 발명의 또 다른 구체예에 따르면, 화학식(I)에 의해 표현되는 폴리믹신으로서, R1은 지방족 선형 또는 분지형 C6-C10 아실기이고;
R5 및 R6은 -CH2CH(CH3)2이고;
각각의 R2, R3, R4 및 R8은 -CH2CH2NH2이고;
R7은 -CH2CH2N(CH2SO3M)2이고, 여기서, M은 일가 양이온인 폴리믹신이 제공된다.
본 발명의 또 다른 구체예에 따르면, 화학식(I)에 의해 표현되는 폴리믹신으로서, R1은 지방족 선형 또는 분지형 C6-C10 아실기이고;
R5 및 R6은 -CH2CH(CH3)2이고;
각각의 R2, R3, R4 및 R7은 -CH2CH2NH2이고;
R8은 -CH2CH2N(CH2SO3M)2이고, 여기서, M은 일가 양이온인 폴리믹신이 제공된다.
본 발명의 또 다른 구체예에 따르면, 화학식(I)에 의해 표현되는 폴리믹신으로서, R1은 지방족 선형 또는 분지형 C6-C10 아실기이고;
R5 및 R6은 -CH2CH(CH3)2 또는 CH2C6H5이고;
각각의 R3, R4, R7 및 R8은 -CH2CH2NH2이고;
R2는 -CH2CH2N(CH2SO3M)2이고, 여기서, M은 일가 양이온인 폴리믹신이 제공된다.
본 발명의 또 다른 구체예에 따르면, 화학식(I)에 의해 표현되는 폴리믹신 으로서, R1은 지방족 선형 또는 분지형 C6-C10 아실기이고;
R5 및 R6은 -CH2CH(CH3)2 또는 CH2C6H5이고;
각각의 R2, R4, R7 및 R8은 -CH2CH2NH2이고;
R3은 -CH2CH2N(CH2SO3M)2이고, 여기서, M은 일가 양이온인 폴리믹신이 제공된다.
본 발명의 또 다른 구체예에 따르면, 화학식(I)에 의해 표현되는 폴리믹신으로서, R1은 지방족 선형 또는 분지형 C6-C10 아실기이고;
R5 및 R6은 -CH2CH(CH3)2 또는 CH2C6H5이고;
각각의 R2, R3, R7 및 R8은 -CH2CH2NH2이고;
R4는 -CH2CH2N(CH2SO3M)2이고, 여기서, M은 일가 양이온인 폴리믹신이 제공된다.
본 발명의 또 다른 구체예에 따르면, 화학식(I)에 의해 표현되는 폴리믹신으로서, R1은 지방족 선형 또는 분지형 C6-C10 아실기이고;
R5 및 R6은 -CH2CH(CH3)2 또는 CH2C6H5이고;
각각의 R2, R3, R4 및 R8은 -CH2CH2NH2이고;
R7은 -CH2CH2N(CH2SO3M)2이고, 여기서, M은 일가 양이온인 폴리믹신이 제공된다.
본 발명의 또 다른 구체예에 따르면, 화학식(I)에 의해 표현되는 폴리믹신으로서, R1은 지방족 선형 또는 분지형 C6-C10 아실기이고;
R5 및 R6은 -CH2CH(CH3)2 또는 CH2C6H5이고;
각각의 R2, R3, R4 및 R7은 -CH2CH2NH2이고;
R8는 -CH2CH2N(CH2SO3M)2이고, 여기서, M은 일가 양이온인 폴리믹신이 제공된다.
본 발명의 상기 구체예의 또 다른 양태에 따르면, R1은 6-메틸옥타노일이다.
본 발명의 상기 구체예의 또 다른 양태에 따르면, R1은 6-메틸-헵타노일이다.
본 발명의 또 다른 구체예에 따르면, 화학식(I)의 폴리믹신으로서, R1은 지방족 선형 또는 분지형 C6-C10 아실기 또는,
Figure pct00003
이고;
R5는 -CH(CH3)2, -CH2CH(CH3)2 , -CH(CH3)CH2CH3, 또는 -CH2C6H5이고;
R6는 -CH(CH3)2, -CH2CH(CH3)2, 또는 -CH(CH3)CH2CH3이고;
각각의 R2, R3, R4, R7 및 R8은 -CH2NH2 또는 -CH2N(CH2SO3M)2이고;
여기서, M은 양이온이고;
단, R2, R3, R4, R7 및 R8 중 하나는 CH2N(CH2SO3M)2인 폴리믹신이 제공된다.
또한, 본 발명은 본 발명에 따른 하나 이상의 폴리믹신을 포함하는 약제 조성물을 제공한다.
본 발명에 따른 조성물은 하나 이상의 약제학적으로 허용되는 부형제를 추가로 포함할 수 있다.
일 구체예에 따르면, 본 발명에 따른 약제 조성물은 HPLC에 의해 측정되는 경우 50% 초과의 본 발명에 따른 폴리믹신을 포함한다.
또 다른 구체예에 따르면, 본 발명에 따른 약제 조성물은 HPLC에 의해 측정되는 경우 50% 초과의 화학식(I)에 의해 표현되는 폴리믹신을 포함한다.
또 다른 구체예에 따르면, 본 발명에 따른 약제 조성물은 HPLC에 의해 측정되는 경우 80% 초과의 화학식(I)에 의해 표현되는 폴리믹신을 포함한다.
또 다른 구체예에 따르면, 본 발명에 따른 약제 조성물은 HPLC에 의해 측정되는 경우 90% 초과의 화학식(I)에 의해 표현되는 폴리믹신을 포함한다.
또 다른 구체예에 따르면, 본 조성물은 HPLC에 의해 측정되는 경우 50% 초과의 도 1 내지 5의 화학식에 의해 표현되는 하나 이상의 폴리믹신을 포함한다.
또 다른 구체예에 따르면, 본 조성물은 HPLC에 의해 측정되는 경우 80% 초과의 도 1 내지 5의 화학식에 의해 표현되는 하나 이상의 폴리믹신을 포함한다.
또 다른 구체예에 따르면, 본 조성물은 HPLC에 의해 측정되는 경우 90% 초과의 도 1 내지 5의 화학식에 의해 표현되는 하나 이상의 폴리믹신을 포함한다.
제1 구체예는 하기 화학식(I)에 의해 표현되는 폴리믹신에 대한 것이다:
Figure pct00004
상기 식에서,
R1은 지방족 선형 또는 분지형 C6-C10 아실기, 또는
Figure pct00005
이고;
R5는 -CH(CH3)2, -CH2CH(CH3)2 , -CH(CH3)CH2CH3, 또는 -CH2C6H5이고;
R6는 -CH(CH3)2, -CH2CH(CH3)2, -CH(CH3)CH2CH3 또는 -CH2CH2CH3이고;
각각의 R2, R3, R4, R7 및 R8은 -(CH2)xCH2NH2 또는 -(CH2)xCH2N(CH2SO3M)2이고; 여기서,
x는 0 또는 1이고;
M은 양이온이고;
R2, R3, R4, R7 및 R8 중 하나는 -(CH2)xCH2N(CH2SO3M)2이다.
제1 구체예의 제1 양태에서, R1은 헵타노일, 메틸헵타노일, 옥타노일, 메틸옥타노일, 노나노일, 메틸노나노일 또는 데카노일이다.
제1 구체예의 제2 양태에서, R1은 헵타노일, 6-메틸헵타노일, 옥타노일, (S)-6-메틸옥타노일, 7-메틸옥타노일, 3-하이드록시-6-메틸옥타노일, 노나노일, (8-메틸노나노일 또는 데카노일이다.
제1 구체예의 제3 양태에서, 앞서 기술된 폴리믹신은 M이 Na+, K+, ½ Mg2 +, HmN(C1-4알킬)n +, 또는 이들의 조합(여기서, m은 0 내지 4이고, n은 0 내지 4이고, 단 m+n=4임)으로 이루어진 군으로부터 선택됨을 특징으로 한다.
제1 구체예의 제4 양태에서, x는 1이고, M은 H+, Na+ 또는 K+이다.
제1 구체예의 제5 양태에서, x는 1이고, M은 Na+ 또는 K+이다.
제2 구체예는 하기 화학식(I)에 의해 표현되는 적어도 하나의 폴리믹신을 포함하는 조성물에 대한 것이다:
Figure pct00006
상기 식에서,
R1은 지방족 선형 또는 분지형 C6-C10 아실기, 또는
Figure pct00007
이고;
R5는 -CH(CH3)2, -CH2CH(CH3)2 , -CH(CH3)CH2CH3, 또는 -CH2C6H5이고;
R6는 -CH(CH3)2, -CH2CH(CH3)2, -CH(CH3)CH2CH3 또는 -CH2CH2CH3이고;
각각의 R2, R3, R4, R7 및 R8은 -(CH2)xCH2NH2 또는 -(CH2)xCH2N(CH2SO3M)2이고; 여기서,
x는 0 또는 1이고;
M은 양이온이고;
R2, R3, R4, R7 및 R8 중 하나는 -(CH2)xCH2N(CH2SO3M)2이다.
제2 구체예의 제1 양태에서, R1은 헵타노일, 메틸헵타노일, 옥타노일, 메틸옥타노일, 3-하이드록시-6-메틸옥타노일, 노나노일, 메틸노나노일 또는 데카노일이다.
제2 구체예의 제2 양태에서, R1은 헵타노일, 6-메틸헵타노일, 옥타노일, (S)-6-메틸옥타노일, 3-하이드록시-6-메틸옥타노일, 7-메틸옥타노일, 노나노일, (8-메틸노나노일 또는 데카노일이다.
제2 구체예의 제3 양태에서, 앞서 기술된 폴리믹신은 M이 Na+, K+, ½ Mg2 +, HmN(C1-4알킬)n +, 또는 이들의 조합(여기서, m은 0 내지 4이고, n은 0 내지 4이고, 단 m+n=4임)으로 이루어진 군으로부터 선택됨을 특징으로 한다.
제2 구체예의 제4 양태에서, x는 1이고, M은 H+, Na+ 또는 K+이다.
제2 구체예의 제5 양태에서, x는 1이고, M은 Na+ 또는 K+이다.
제2 구체예의 제6 양태에서, 약제 조성물은 HPLC에 의해 측정되는 경우, 50% 초과의 화학식(I)에 의해 표현되는 폴리믹신을 포함한다.
제2 구체예의 제7 양태에서, 약제 조성물은 HPLC에 의해 측정되는 경우, 50% 초과의 화학식(I)에 의해 표현되고, x는 1이고, M은 Na+ 또는 K+인 폴리믹신을 포함한다.
제3 구체예는 하기 화학식(I)에 의해 표현되는 폴리믹신에 대한 것이다:
Figure pct00008
상기 식에서,
R1은 지방족 선형 또는 분지형 C6-C10 아실기이고;
R5는 -CH2CH(CH3)2, 또는 -CH2C6H5이고;
R6는 -CH2CH(CH3)2이고;
각각의 R2, R3, R4, R7 및 R8은 -CH2CH2NH2 또는 -CH2CH2N(CH2SO3M)2이고; 여기서, M은 양이온이고;
R2, R3, R4, R7 및 R8 중 하나만이 -CH2CH2N(CH2SO3M)2이다.
제3 구체예의 제1 양태에서, 지방족 C6-C10 아실기 또는 분지형 C6-C10 아실기는 임의로 하이드록실기를 함유한다.
제4 구체예는 하기 화학식(I)에 의해 표현되는 적어도 하나의 폴리믹신을 포함하는 조성물에 대한 것이다:
Figure pct00009
상기 식에서,
R1은 지방족 선형 또는 분지형 C6-C10 아실기이고;
R5는 -CH2CH(CH3)2, 또는 -CH2C6H5이고;
R6는 -CH2CH(CH3)2이고;
각각의 R2, R3, R4, R7 및 R8은 -CH2CH2NH2 또는 -CH2CH2N(CH2SO3M)2이고; 여기서, M은 양이온이고;
R2, R3, R4, R7 및 R8 중 하나만이 -CH2CH2N(CH2SO3M)2이다.
제4 구체예의 제1 양태에서, 약제 조성물은 HPLC에 의해 측정되는 경우, 50% 초과의 화학식(I)에 의해 표현되는 폴리믹신을 포함한다.
제4 구체예의 제2 양태에서, 약제 조성물은 HPLC에 의해 측정되는 경우, 80% 초과의 화학식(I)에 의해 표현되는 폴리믹신을 포함한다.
제4 구체예의 제3 양태에서, 약제 조성물은 HPLC에 의해 측정되는 경우, 50% 초과의 화학식(I)에 의해 표현되는 폴리믹신을 포함하고, 그람-음성균(Gram-negative bacteria)에 의한 감염증의 치료에 사용된다.
제4 구체예의 제4 양태에서, 약제 조성물은 HPLC에 의해 측정되는 경우, 50% 초과의 화학식(I)에 의해 표현되는 폴리믹신을 포함하고, M은 약제학적으로 허용되는 양이온으로부터 선택된다.
제4 구체예의 제5 양태에서, 약제 조성물은 HPLC에 의해 측정되는 경우, 50% 초과의 화학식(I)에 의해 표현되는 폴리믹신을 포함하고, M은 약제학적으로 허용되는 일가 양이온으로부터 선택된다.
제4 구체예의 제6 양태에서, 지방족 C6-C10 아실기 또는 분지형 C6-C10 아실기는 임의로 하이드록실기를 함유한다.
제5 구체예는 화학식(I)에 의해 표현되는 적어도 하나의 폴리믹신을 포함하는 조성물에 대한 것이다:
Figure pct00010
상기 식에서,
R1은 6-메틸옥타노일, 6-메틸헵타노일 또는 옥타노일이고;
R5는 -CH2CH(CH3)2, 또는 -CH2C6H5이고;
R6는 -CH2CH(CH3)2이고;
각각의 R2, R3, R4, R7 및 R8은 -CH2CH2NH2 또는 -CH2CH2N(CH2SO3Na)2이고;
R2, R3, R4, R7 및 R8 중 하나만이 -CH2CH2N(CH2SO3Na)2이다.
제5 구체예의 제1 양태에서, 약제 조성물은 HPLC에 의해 측정되는 경우, 50% 초과의 화학식(I)에 의해 표현되는 폴리믹신을 포함한다.
제5 구체예의 제2 양태에서, 약제 조성물은 HPLC에 의해 측정되는 경우, 80% 초과의 화학식(I)에 의해 표현되는 폴리믹신을 포함한다.
제5 구체예의 제3 양태에서, 약제 조성물은 HPLC에 의해 측정되는 경우, 50% 초과의 화학식(I)에 의해 표현되는 폴리믹신을 포함하고, 그람-음성균에 의한 감염증의 치료에 사용된다.
도 1은 PE1-(SM)2 1의 디소듐 염의 구조식을 나타낸 것이다.
도 2는 PE1-(SM)2 3의 디소듐 염의 구조식을 나타낸 것이다.
도 3은 PE1-(SM)2 5의 디소듐 염의 구조식을 나타낸 것이다.
도 4는 PE1-(SM)2 8의 디소듐 염의 구조식을 나타낸 것이다.
도 5는 PE1-(SM)2 9의 디소듐 염의 구조식을 나타낸 것이다.
도 6은 PE1-(SM)10 1,3,5,8,9의 크로마토그램(chromatogram)을 나타낸 것이다.
도 7은 비-평형 조건 하에 90분 후, pH 9에서의 PE1-(SM)10 1,3,5,8,9의 분해를 나타낸 것이다.
도 8은 비-평형 조건 하에 3일 후, pH 8.0에서의 PE1-(SM)10 1,3,5,8,9의 분해를 나타낸 것이다.
도 9는 비-평형 조건 하에 3일 후, pH 7.0에서의 PE1-(SM)10 1,3,5,8,9의 분해를 나타낸 것이다.
도 10은 비-평형 조건 하에 3일 후, pH 6.5에서의 PE1-(SM)10 1,3,5,8,9의 분해를 나타낸 것이다.
도 11은 비-평형 조건 하에 3일 후, pH 6.0에서의 PE1-(SM)10 1,3,5,8,9의 분해를 나타낸 것이다.
도 12는 두 개의 치환된 폴리믹신 E1에 대해 얻어진 MS 스펙트럼을 나타낸 것이다. m/z 677.3 [-2] 및 1355.5 [-1]은 네가티브 모드(negative mode)에서 얻어졌다.
도 13(상부)는 두 개의 설포메틸기(215 nm에서 UV 시그널)를 포함하는, 5개의 개별 폴리믹신 성분의 존재를 확인시켜 주는 크로마토그램을 나타낸 것이다.
도 13(저부)는 모노(비스-설포메틸화된) 폴리믹신 E1(677.62, 1356.2, 1378.06의 m/z)에 상응하는 질량(mass)에 대한 추출 이온 전류(extracted ion current)(EIC)를 나타낸 것이다.
도 14는 모노(비스-설포메틸화된) 폴리믹신 E1의 질량 스펙트럼을 나타낸 것이다.
상세한 설명
정의
본 명세서 및 첨부되는 청구범위 전반에 사용되는 바와 같이, 하기 용어는 하기 의미를 갖는다:
본원에서 기술되는 바와 같은 용어 "폴리믹신"은 지방산 모이어티에 아미드-결합된 펩티드 모이어티를 포함하는 항생제(antibiotic) 화합물을 나타낸다.
본원에서 기술되는 바와 같은 용어 "Dab 잔기"는 적어도 하나의 아미노산에 아미드-결합된 2,4-디아미노부티레이트 화합물을 나타낸다. 천연 폴리믹신은 일반적으로 6개의 Dab 잔기를 포함하며, 그 중 5개가 유리 γ-아미노기를 갖는다.
본원에서 기술되는 바와 같은 용어 "Dab"는 2,4-디아미노부탄산으로부터 유래된 라디칼이며, 이중 카보닐 탄소(즉, α-탄소)에 인접한 탄소 원자는 L-배열로서 지칭되는 입체화학을 갖는다. L-Dab는 대안적으로 문헌에서 L-Dbu로서 지칭된다.
화학식(I)에 의해 표현되는 폴리믹신에서 6번 위치에 있는 아미노산은 D-배열, 즉, R5가 결합되어 있는 아미노산 잔기를 갖는다.
본원에서 기술되는 바와 같은 용어 "DAP 잔기"는 적어도 하나의 아미노산에 아미드-결합된 2,3-디아미노프로피오네이트 화합물을 나타낸다.
본원에서 기술되는 바와 같은 용어 "DAP"는 화합물 2,3-디아미노프로피오네이트를 나타낸다.
본원에서 기술되는 바와 같은 용어 "설포메틸"은-CH2SO3M 모이어티(여기서, M은 하기에서 정의되는 바와 같음)를 나타낸다. 설포네이트(-SO3) 모이어티는 산성 형태일 수 있으나, 생리학적 환경(생체내)에서는, 음전하를 띨 것이고, M과 같은 관련 양이온을 지닐 것이다.
본원에서 기술되는 바와 같은 용어 "CMS"는 설포메틸화된 콜리스틴을 포함하는 조성물을 나타낸다. 화학 초록(Chemical abstracts)은 이러한 조성물에 CMS에 대한 번호 8068-28-8를 할당하였다.
본원에서 기술되는 바와 같은 용어 "CMS E1"는 비교적 순수한 폴리믹신 E1 (HPLC에 의해 >80% 순수)의 설포메틸화로부터 제조된 조성물을 나타낸다.
본원에서 기술되는 바와 같은 용어 "콜리스틴"은 폴리믹신 E1 및 폴리믹신 E2를 포함하는 조성물을 나타낸다. 화학 초록은 콜리스틴에 대해 번호 1066-17-7를 할당하였다. 유럽 약전에 따르면, 콜리스틴은 77% 초과의 폴리믹신 E1, E2, E3, E1i 및 E1-7MOA를 포함해야 하지만, 중요하지 않은 성분인 폴리믹신 E3, E1-i 및 E1-7MOA은 각각 10% 미만으로 포함해야 한다.
본원에서 기술되는 바와 같은 용어 "폴리믹신 E"는 "콜리스틴"과 상호교환가능하게 사용된다.
본원에서 기술되는 바와 같은 용어 "폴리믹신 E1"는 CAS 번호 7722-44-3를 갖는 화합물을 나타낸다. 폴리믹신 E1는 콜리스틴 A와 상호교환가능하게 사용된다.
본원에서 기술되는 바와 같은 용어 "폴리믹신 E2"는 CAS 번호 7239-48-7를 갖는 화합물을 나타낸다. 폴리믹신 E2는 콜리스틴 B와 상호교환가능하게 사용된다.
본원에서 기술되는 바와 같은 표현 "설포메틸화된 폴리믹신"은 L-DAB 잔기 상의 γ-아미노기 결합된 적어도 하나의 설포메틸기를 포함하는 폴리믹신을 나타낸다.
용어 "M"는 양이온이고, 1 또는 2의 양전하를 함유하는 양이온 종, 예를 들어, Li+, Na+, K+, ½Mg2 +, HmN(C1-4알킬)n +(여기서, m은 0 내지 4이고, n은 0 내지 4이고, 단 m+n = 4임)를 포함하나, 이로 제한되는 것은 아니다.
본원에서 기술되는 바와 같은 표현 "지방족 선형 또는 분지형 C6-C10 아실기"는 총 6 내지 10개의 탄소 원자를 함유하는 카보닐 모이어티 및 비-카보닐 모이어티를 함유하는 치환체를 나타낸다. 그것은 공지된 폴리믹신 화합물에서 발견되는 아실기를 포함한다. 또한, 그것은 헵타노일, 메틸헵타노일((S)-6-메틸헵타노일 포함), 옥타노일, 메틸옥타노일((S)-6-메틸옥타노일, 7-메틸옥타노일 포함), 노나노일, 메틸노나노일 및 데카노일을 포함하나, 이로 제한되는 것은 아니다.
본원에서 기술되는 바와 같은 용어 "염" 또는 "이의 염"은 예를 들어, 양성자-수용(proton-accepting) 모이어티의 양성자화(protonation) 및/또는 양성자-공여(proton-donating) 모이어티의 탈양성자화(deprotonation)에 의해 당업자에게 공지된 어떠한 공정에 의해 제조될 수 있는, 양이온 및 음이온을 포함하는 화합물을 나타낸다. 대안적으로, 염은 양이온/음이온 복분해(metathesis) 또는 양이온/음이온 교환 반응 중 어느 하나에 의해 제조될 수 있다.
본원에서 기술되는 바와 같은 용어 "HPLC에 의해 측정되는 경우 X% 초과의"는 본 출원의 실시예에서 기술되는 바와 같은, 또는 대안적으로 WO2014195405A1에서 기술되는 바와 같은 HPLC 방법으로 얻은 크로마토그램에서의 관련 피크(들)의 상대적 적분 면적으로서 이해해야 한다.
본 발명에 따르면, 유리 γ-아민을 갖는 상기 구조식의 Dab 잔기 중 어느 하나, 즉, Dab 잔기 Dab1, Dab3, Dab5, Dab8 또는 Dab9 중 어느 하나에 결합된 두 개의 설포메틸기를 포함하는 신규 폴리믹신이 제공된다. 따라서, 화학식(I)은 모노(비스-설포메틸화된) 폴리믹신을 포함하나, 트리-, 테트라- 또는 펜타(비스-설포메틸화된) 폴리믹신은 포함하지 않는 것으로 여겨진다.
신규 폴리믹신의 예는 본원에서 화학식 I의 치환체가, R1이 6-메틸옥타노일이고, R5 및 R6가 -CH2CH(CH3)2이고; 각각의 R2, R3, R4, 및 R7가 -CH2CH2NH2이고; R8이 -CH2CH2N(CH2SO3M)2(여기서, M은 Na+임)인 것으로 표현되는, 모노(Nγ-비스-설포메틸), 즉 Dab9 폴리믹신 E1으로 지칭된다. 이러한 화합물의 예가 도 5에 도시된다. 이 화합물의 약칭이 PE1-(SM)2 9이다.
모노 비스-설포메틸화된 폴리믹신의 다른 예는 모노 (Nγ-비스-설포메틸) Dab1 폴리믹신 E1, 모노 (Nγ-비스-설포메틸) Dab3 폴리믹신 E1, 모노 (Nγ-비스-설포메틸) Dab5 폴리믹신 E1, 모노 (Nγ-비스-설포메틸) Dab8 폴리믹신 E1이 있으며, 이의 디소듐 구조식이 각각 도 1 내지 4에 도시되어 있다.
표현 "-CH2CH2NH2"는 매질의 pH에 따라 -CH2CH2NH2 또는 -CH2CH2NH3 +를 포함하는 것으로 이해해야 한다.
표현 "-CH2NH2"는 매질의 pH에 따라 -CH2NH2 또는 -CH2NH3 +를 포함하는 것으로 이해해야 한다.
본원에서 기술되는 바와 같은 폴리믹신은 다수의 분자 종을 포함한다. 예를 들어 수용액 상태에서, 전하는 pH에 의거할 것이다. 본원에서 기술되는 바와 같은 폴리믹신 화합물은 모든 약제학적으로 허용되는 염 및 이의 이온을 포함한다. 이러한 폴리믹신 중에 물론 디-소듐 염이 있다. 또한, 다른 약제학적으로 허용되는 염, 예를 들어, 칼륨, 리튬 및 암모늄 염(예컨대 HmN(C1-4알킬)n+(여기서, m은 0 내지 4이고, n은 0 내지 4이고, 단, m+n=4임), 또는 이들의 조합물이 포함된다.
본원에서 기술되는 바와 같은 폴리믹신은 감염성 질환, 특히 그람-음성균, 예컨대 비제한적으로, 슈도모나스 아에루기노사(Pseudomonas aeruginosa), 클렘시 엘라 뉴모니아(Klemsiella pneumonia), 및 아시네토박터 바우만니(Acinetobacter baumannii), 에스케리시아 콜리(Eschericia coli), 및 엔터박터 아에로게네 스(Enterobacter aerogenes)에 의해 야기된 감염증의 치료 또는 예방에 사용될 수있다. 일 양태에 따르면, 본 발명은 그람 음성균 감염증의 치료에서의, 유효량의 본원에서 기술된 조성물 중 어느 하나를 포함하는 약제 조성물의 용도를 포함한다.
본 화합물은 치료 유효량으로 투여될 수 있다. "치료 유효량"은 감염증을 치료하기 위한 화합물의 충분량을 기술하는 것으로 의도된다. 당업자들은 특정 환자의 적합한 일일 용량이 치료받는 질병, 및 이의 중증도; 사용되는 조성물, 연령, 체중, 성별 및 환자의 식이요법, 및 관련 의료 종사자의 선호도 및 경험 등과 같은 인자에 따라 달라질 수 있음을 인지할 것이다.
본 발명에 따른 조성물은 사람 뿐만 아니라 수의학에 사용하기 위해 투여될 수 있다. 본원에서 기술되는 조성물은 다양한 경로, 예컨대 피하, 흡입, 경구, 비경구 또는 국소 경로에 의해 이를 필요로 하는 환자에게 투여될 수 있다. 조성물은 당업자들에게 널리 공지되어 있는 어떠한 형태로 존재할 수 있으며, 예를 들어, 정제, 캡슐, 분말, 과립, 로젠지(lozenge), 크림 또는 액상 제제, 예컨대 멸균 비경구 용액 또는 현탁액을 포함한다.
일 양태에서, 조성물은 정맥내 주입 또는 주사에 의한 투여에 유용하다. 정맥내 또는 주사 제형은 당업자들에게 널리 공지되어 있는 방법에 따라 제조될 수 있다. 예를 들어, 본원에서 기술되는 화합물은 주사용 물에 용해된 후, 여과 멸균되고, 이어서 상기 여과된 조성물을 적합한 바이알에 옮겨질 수 있다.
일 양태에 따르면, 조성물은 동결건조된다. 동결건조된 분만은 사용 전에, 예를 들어, 주사에 의한 투여 전에, 또는 흡입(예를 들어, 분무기(nebulizer) 또는 어떠한 다른 적합한 흡입 디바이스(device) 사용)에 의한 투여 전에 예를 들어 주사용 물에서 재구성된다. 따라서, 또 다른 양태에 따르면, 조성물은 흡입에 의한 투여를 위해 제형된다. 본원에서 기술되는 화합물은 비제한적으로, 보존제, 완충제 및 산화방지제 또는 희석제를 포함하는 하나 이상의 약제학적으로 허용되는 부형제를 추가로 포함할 수 있다. 적합한 희석제는 예를 들어, 주사용 물, 0.9 % NaCl, 0.9 % NaCl 중 5% 덱스트로스, 수중 5 % 덱스트로스, 0.45 % NaCl 중 5 % 덱스트로스, 0.225 % NaCl 중 5 % 덱스트로스 및 락테이트화 링거 용액(Lactated Ringer's solution)을 포함한다.
본원에서 기술되는 화합물은 또한 하나 이상의 추가의 항균제와 함께 투여될 수 있다. 본원에서 기술되는 화합물은 또 다른 항균제와 함께 사용되는 경우, 하나 이상의 다른 항균제와 동시에, 별개로, 또는 순차적으로 투여될 수 있다.
본 발명은 하기에서 실시예에 의해 추가로 예시된다. 본 발명의 범위는 하기 실시예의 범위에 의해 어떠한 식으로든 제한되는 것으로 이해해야 한다.
실시예
본 발명은 하기 실험 섹션에 의해 추가로 지지되며 예시되지만, 이로 한정되는 것은 아니다.
실시예 1:
출발 물질.
분리된 폴리믹신 E1 설페이트 (3.5 g) 및 소듐 하이드록시메탄설포네이트 (11.3 g)의 45% w/w 수용액을 혼합하고, 교반하면서 60℃로 가온시켰다. 이후, 2 M NaOH를 여러번 첨가함으로써 pH를 7.0 내지 7.5에서 유지시켰다. 18시간 후, 혼합물을 주위 온도로 냉각시키고, 미정제 생성물을 200mL의 메탄올/아세토니트릴 1/1 v/v 중에서 침전시킴으로써 백색 고형물로서 얻었다.
생성물을 탈염시키고, 하기 절차에 따라 폴리싱(polishing)하였다: A C18 컬럼 6 μ, 예를 들어 Phenomenex X Bridge Prep Shield 10 x 250 mm 또는 이와 유사한 컬럼을 세척하고, 5% MeCN (무 염(no salt))으로 평형을 이루었다. 컬럼을 Waters Delta Prep HPLC 시스템(150 mL/min 최대 유속)에 탑재하였다. 디텍터(detector)는 280 nm로 조절된 5개의 Waters 2487이었다. 230 mg PE1-(SM)10 1,3,5,8,9의 9 mL 5% MeCN 용액과 1 mL 2M NaCl의 혼합물을 컬럼에 로딩하였으며, 유속은 6-8 mL/min이었다.
컬럼을 용리시키고, 5% MeCN를 사용하여 6-8 mL/min로 탈염시키고, PE1-(SM)10 1,3,5,8,9의 분획을 수거하였다. 공정 동안 컬럼 상에서 소정의 분해가 일어났지만, 거두절미함으로써, 고순도를 유지시켰다. 상부 분획, 약 35 mL를 직접 450 mL 100% MeCN에 수거하고, 추가로 550 mL 100% MeCN를 첨가한 후, 2L 배 모양(pear shaped) 증발 플라스크에서 97:3 MeCN:H2O 용액을 진공-증발시켰다.
Buechi 15 Rotavapor로 증류 공정을 수행하였다. 94:6 공비혼합물을 증류시켜 2 L 진공-증류 플라스크에서 물 비함유 PE1-(SM)10 1,3,5,8,9-잔기를 제조하였다. 잔기를 3 x 8 mL 100% MeOH (무수)로 제거하고, 50 mL 진공 증발 플라스크에 붓고, 1-2 mL MeOH-PE1-(SM)10 1,3,5,8,9 현탁액으로 진공-증발시켰다. 15 mL 100% MeCN을 첨가하고, 20 용액/현탁액을 35℃의 수욕 온도로 추가로 진공-증발 건조시켰다. 공정 동안 압력을 70-60 Torr에서 20-15 Torr로 감소시켰다. 진공이 유지된 채로 35℃ 수욕에서 천천히 교반하면서 30분 동안 추가의 진공-건조를 수행하였다. PE1-(SM)10 1,3,5,8,9의 150 mg 물질이 얻어졌다.
실시예 2
모노 (Nγ-비스-설포메틸) 폴리믹신 E1를 포함하는 혼합물의 제조
설포메틸화된 폴리믹신이 콜리스틴 쪽으로 분해될 때, 하이드록시메탄-설포네이트가 유리된다. 이 공정은 하이드록시메탄설포네이트가 모(parent) 설포메틸화된 분자를 용이하게 재생함에 따라 가역적이다.
이 연구의 목적은 나노여과(nanofiltration)를 사용하는 하이드록시메탄설포네이트의 연속 제거에 의한 비평형 조건 하에서의 설포메틸화된 폴리믹신의 분해를 조사하는 것이었다.
2 L 10 mM PE1-(SM)10 1,3,5,8,9 in RO 물 중 2 L 10 mM PE1-(SM)10 1,3,5,8,9로 실험을 세팅하고, RO 물의 빈번한 첨가에 의해 여과 유닛에서 용액의 용적을 일정하게 유지시켰다. 나노여과 유닛을 3 bar의 압력 하에 40℃에서 매일 작동으로 가동시켜 매회 대략 5ℓ의 유출물을 제거하였다. pH는 8.0, 7.0, 6.5 및 6.0에 대해 안정할 때까지 0.1 M HCl로 조절하였다. 결과가 도 6 내지 11에서 도시된다.
MS 데이터는 폴리믹신의 디-설포메틸화를 확인시켜 준다. 도 12는 네가티브 모드에서 얻어진 MS 스펙트럼, m/z 677.3 [-2] 및 1355.5 [-1]을 도시한 것이다.
실시예 3: 저 치환된 콜리스틴의 합성.
콜리스틴 설페이트 (1.0g, 0.71 mmol)를 20 ml 물에 용해시켰다. 45% 소듐 하이드록시메탄설포네이트 (0.847g, 2.841 mmol) 및 NaHCO3 (0.12g, 1,40 mmol)를 첨가하였다. 등명한 용액을 25℃에서 12시간 동안 교반하였다. 100ml 아세토니트릴 및 메탄올 (50:50)을 서서히 첨가하여 생성물을 침전시켰다. 생성물이 백색 고형물로서 분리되었다.
실시예 4a: 저 치환된 폴리믹신 E1의 합성.
폴리믹신 E1 (1.0g, 0.71 mmol)을 20 ml 물에 용해시켰다. 45% 소듐 하이드록시메탄설포네이트 (0.847g, 2.841 mmol) 및 NaHCO3 (0.12g, 1.40 mmol)를 첨가하였다. 등명한 용액을 25℃에서 12시간 동안 교반하였다. 100ml 아세토니트릴 및 메탄올 (50:50)을 서서히 첨가하여 생성물을 침전시켰다. 생성물이 백색 고형물로서 분리되었다.
실시예 4b: 저 치환된 폴리믹신 E1의 크로마토그래피 및 MS
실시예 4a에 의해 제조된 바와 같은 모노(비스-설포메틸화된) 폴리믹신 E1를 분리가 pH 6.6 에서 수행되는 질량 분석(네거티브 모드에서의 MS) 및 UV 호환가능한 방법(UV compatible method)을 사용하여 분석하였다. 도 13의 상부는 두 개의 설포메틸기 (215 nm에서 UV 시그널)를 포함하는 5개의 개별 폴리믹신 성분의 존재를 확인시켜 주는 크로마토그램을 도시한 것이다. 도 13의 저부는 모노(비스-설포메틸화된) 폴리믹신 E1(677.62, 1356.2, 1378.06의 m/z)에 상응하는 질량에 대한 추출 이온 전류(EIC)를 도시한 것이다.
도 14는 모노(비스-설포메틸화된) 폴리믹신 E1의 개별 질량 스펙트럼을 도시한 것이다. 677의 m/z는 모노(비스-설포메틸화된) 폴리믹신 E1의 [M+2H]2+에 상응하고, 1356는 [M+H]+에 상응하고, 1378는 [M+Na]+에 상응한다.
실시예 5: MIC
약 93% 모노(Nγ-비스-설포메틸) 폴리믹신 E1을 포함하는 샘플을 보르데텔라 브론키셉티카(Bordetella bronchiseptica), ATCC 4617에 대한 MIC 분석을 받게 하였으며, 미생물 역가가 611 ㎍/g인 것으로 측정되었다.
MIC 검정
시험 유기체를 슈도모나스 아에루기노사(Pseudomonas aeruginosa)에 대해 34℃에서, 그리고 클레브시엘라 바우만니(Klebsiella baumannii) 및 아시네토박터 바 우 만니(Acinetobacter baumannii)에 대해 37℃에서 대략 16시간 동안 250rpm에서 진탕 플라스크(shakeflask)에서 배양시켰다. 이들을 후기 로그(late log)로 재배양시키고, 사용할 준비가 된 농도로 희석시키고, -75℃에서 글리세롤을 사용하여 동결시켰다. 사용된 매질은 뮐러 힌튼 배양액(Mueller Hinton Broth)이었다.
1ml의 뮐로 힌튼 배양액 중에 5 mg의 화합물을 용해시킴으로써 샘플을 제조하였다. 샘플을 희석시키고, 웰(well)에 첨가하고, 시험 유기체를 첨가하고, 슈도모나스 아에루기노사에 대해서는 진탕 없이 34℃에서, 클레브시엘라 바우만니 및 아시네토박터 바우만니에 대해서는 진탕하면서 37℃에서 대략 16시간 인큐베이션한 후, OD600에 의해 성장 억제를 측정하였다. 결과가 표 1에 제시된다.
표 1
Figure pct00011
실시예 6: 본 발명의 화합물의 독성
급성 관상 괴사(acute tubular necrosis)의 바이오마커(biomarker)로서 KIM-1(신장 손상 분자-1)을 사용하여 신독성(nephrotoxicity)을 측정하였다.
마우스를 5일 동안 93% 모노(Nγ-비스-설포메틸) 폴리믹신 E1 또는 CMS를 포함하는 혼합물로 처리하고, 독성의 임상 징후 및 KIM-1의 소변 농도에 대해 모니터링하였다. 5일의 처리 동안, 마우스는 독성에 대한 임상 징후를 나타내지 않았다. 소변 중 KIM-1 수준은 비히클 치료와 비교하여 약간 증가함을 나타내었다. 마우스 소변에서의 KIM-1의 정상 범위는 ELISA 키트 지침에 명시된 바와 같은 456-8048 pg/ml이었다.
혼합물은 건조 분말로 받고, 주사 직전에 표 1에 명시된 농도로 바이알에서 무균 염수에 용해시켰다.
5일 동안 하루에 한번, 마우스를 표 1에 명시된 용량에 상응하는 0.2 ml로 목 부위에 피하 처리하였다. 투여는 28g의 평균 무게에 기초한 것이다.
2차 투여 후 24시간 및 5차 투여 후 4시간에 소변 샘플을 수거하였다. KIM-1 농도에 대해 분석할 때까지 샘플을 -80℃에서 저장하였다.
소변 샘플을 해동시키고, 5분 동안 2000 g에서 원심분리시키고, Quantikine ELISA 마우스 TIM-1/KIM-1/HAVCR 면역검정 키트의 지침에 따라 ELISA를 수행하기 전에 x50으로 희석하였다
표 1. 치료 스케쥴
Figure pct00012
시험한 모든 혼합물은 체중 및 임상 채점(clinical scoring)에 의해 결정되는 바와 같이 마우스에 의해 내성이 잘 나타났다. 93% 모노 (Nγ-비스-설포메틸) 폴리믹신 E1을 포함하는 혼합물이 주사된 마우스 군에서 주사 부위에서의 두꺼운 피부가 관찰되었다. 그러나, 소변 KIM-1 수준에서의 증가가 약간만 있었지만 유의하지는 않은 것으로 관찰되었다.
표 2. 5회 투여 후 소변의 KIM-1 농도.
Figure pct00013
실시예 6: 모노 비스 - 설포메틸화된 폴리믹신 E1의 생체 내 활성
슈도모나스 아에루기노사 (균주 PAX11045)의 폐감염 마우스 모델을 폴리믹신 E1, CMS E1 및 모노 비스-설포메틸화된 폴리믹신 E1의 복강내 투여로 치료하였다. CFU는 비치료 마우스 군을 제외하고 22시간 후 폐조직에서 계산된 콜로니 형성 단위의 수이다. 임상 점수는 표 3에 도시된 바와 같이 각 시점에서의 관찰을 기반으로 한다:
표 3:
Figure pct00014
점수 0 건강
점수 1 피부에 털세움, 괴로움, 사회적 위축과 같은 감염 및 염증의 심각하지 않은 임상 징후
점수 2 자세 변화, 움직임 패턴 변화, 호기심 부족 또는 활동 변화와 같은 감염의 중간 정도의 징후
점수 3 뻣뻣한 움직임, 강제 환기와 같은 감염의 심각한 징후
점수 4 심한 통증, 고통을 최소화하기 위해 마우스를 즉시 희생시킴
점수 5 마우스 치사

Claims (10)

  1. 하기 화학식(I)에 의해 표현되는 폴리믹신:

    Figure pct00015

    상기 식에서,
    R1은 지방족 선형 또는 분지형 C6-C10 아실기, 또는
    Figure pct00016
    이고;
    R5는 -CH(CH3)2, -CH2CH(CH3)2 , -CH(CH3)CH2CH3, 또는 -CH2C6H5이고;
    R6는 -CH(CH3)2, -CH2CH(CH3)2, 또는 -CH(CH3)CH2CH3이고;
    각각의 R2, R3, R4, R7 및 R8은 -(CH2)xCH2NH2 또는 -(CH2)xCH2N(CH2SO3M)2이고; 여기서
    x는 0 또는 1이고;
    M은 양이온이고;
    단, R2, R3, R4, R7 및 R8 중 하나 만이 -(CH2)xCH2N(CH2SO3M)2이다.
  2. 제1항에 있어서, R1이 지방족 선형 또는 분지형 C6-C10 아실기인 폴리믹신.
  3. 제2항에 있어서, R1이 헵타노일, 6-메틸헵타노일, 옥타노일, (S)-6-메틸옥타노일, 3-하이드록시-6-메틸옥타노일, 7-메틸옥타노일, 노나노일, 8-메틸노나노일 또는 데카노일인 폴리믹신.
  4. 제1항 내지 제3항 중 어느 한 항에 있어서, 각각의 R2, R3, R4, R7 및 R8이 -CH2CH2NH2 또는 -CH2CH2N(CH2SO3M)2(여기서 M은 양이온임)이고; R2, R3, R4, R7 및 R8 중 하나 만이 -CH2CH2N(CH2SO3M)2인 폴리믹신.
  5. 제1항 내지 제3항 중 어느 한 항에 있어서, 각각의 R2, R3, R4, R7 및 R8이 -CH2CH2NH2 또는 -CH2CH2N(CH2SO3M)2(여기서 M은 약제학적으로 허용되는 일가 양이온임)이고; R2, R3, R4, R7 및 R8 중 하나 만이 -CH2CH2N(CH2SO3M)2인 폴리믹신.
  6. 제1항 내지 제3항 중 어느 한 항에 있어서, 각각의 R2, R3, R4, R7 및 R8이 -CH2CH2NH2 또는 -CH2CH2N(CH2SO3M)2(여기서 M은 Na+임)이고; R2, R3, R4, R7 및 R8 중 하나 만이 -CH2CH2N(CH2SO3M)2인 폴리믹신.
  7. HPLC에 의해 측정되는 경우 50% 초과의 제1항 내지 제6항 중 어느 한 항에 따른 폴리믹신을 포함하는 조성물.
  8. HPLC에 의해 측정되는 경우 80% 초과의 제1항 내지 제6항 중 어느 한 항에 따른 폴리믹신을 포함하는 조성물.
  9. HPLC에 의해 측정되는 경우 90% 초과의 제1항 내지 제6항 중 어느 한 항에 따른 폴리믹신을 포함하는 조성물.
  10. 제7항 내지 제9항 중 어느 한 항에 있어서, 그람-음성균(Gram-negative bacteria)에 의해 야기된 감염증의 치료에 사용하기 위한 조성물.
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