KR20160020453A

KR20160020453A - 돼지생식기호흡기증후군 바이러스(prrsv) 변이주 및 이를 포함하는 돼지 생식기 호흡기 증후군 예방 또는 치료용 백신 조성물

Info

Publication number: KR20160020453A
Application number: KR1020160003490A
Authority: KR
Inventors: 김원일
Original assignee: 전북대학교산학협력단
Priority date: 2016-01-12
Filing date: 2016-01-12
Publication date: 2016-02-23

Abstract

본 발명은 돼지생식기호흡기증후군 바이러스(porcine reproductive and respiratory syndrome virus, PRRSV) 변이주 및 이를 유효성분으로 포함하는 돼지 생식기 호흡기 증후군 예방 또는 치료용 백신 조성물에 관한 것으로, 효능과 안전성이 보장된 약독화 바이러스를 보다 신속하게 생산하고 다양한 바이러스를 짧은 시간에 효능과 안전성이 보장된 약독화 백신으로 개발하는 데 많은 도움이 될 것으로 기대된다.

Description

돼지생식기호흡기증후군 바이러스(PRRSV) 변이주 및 이를 포함하는 돼지 생식기 호흡기 증후군 예방 또는 치료용 백신 조성물{Porcine reproductive and respiratory syndrome virus mutant strain and vaccine composition for preventing or treating porcine reproductive and respiratory syndrome comprising the same}

본 발명은 돼지생식기호흡기증후군 바이러스(porcine reproductive and respiratory syndrome virus, PRRSV) 변이주 및 이를 유효성분으로 포함하는 돼지 생식기 호흡기 증후군 예방 또는 치료용 백신 조성물에 관한 것으로, 더욱 상세하게는 GP2 단백질, M 단백질, GP5 단백질, nsp10 단백질 및 nsp1β 단백질 중 어느 하나의 단백질의 특정 아미노산이 변이된 약독화된 돼지생식기호흡기증후군 바이러스(PRRSV) 변이주; GP2 단백질, M 단백질, GP5 단백질, nsp10 단백질 및 nsp1β 단백질 중 어느 하나의 단백질의 특정 아미노산이 변이된 단백질을 코딩하는 유전자를 포함하는 재조합 벡터; 상기 약독화된 돼지생식기호흡기증후군 바이러스(PRRSV) 변이주를 유효성분으로 포함하는 돼지 생식기 호흡기 증후군의 예방 또는 치료용 백신 조성물; 및 상기 백신 조성물을 돼지에 투여하여 돼지 생식기 호흡기 증후군을 예방 또는 치료하는 방법에 관한 것이다.

돼지생식기호흡기증후군은 1987년 미국에서 첫 발생이 보고된 이후 1989년 가을에는 캐나다에서 1990년 6월에는 독일의 뮌스터 지방에서 유사한 증상의 발생이 보고되었고 1991년에는 네덜란드, 벨기에, 스페인, 영국에서도 발생하였다. 이후 아시아, 동유럽 등의 국가에서도 발생에 대한 보고가 이어졌으며, 전세계적으로 분포하고 있는 새로운 돼지 질병이다. 우리나라에서는 이 질병과 유사한 증상의 유행보고는 없었으나 1992년부터 이 질병에 대한 연구를 시작하여 진단법을 확립하고, 국내 양돈장에 대한 역학조사를 실시하여 국내에도 유입된 것을 확인하였으며 국내의 감염농장에서 원인 바이러스를 분리하였다. 아시아 지역에서는 우리나라 외에도 일본, 대만에서 발생의 확인 및 원인 바이러스의 분리를 보고하였다.

발생 보고 이후에도 정확한 원인을 알 수 없어 양돈업계를 더욱 혼란에 빠뜨렸었는데, 1991년 6월 네덜란드 중앙수의연구소의 Wensvoort 박사가 돼지 폐포대식세포를 이용하여 원인 바이러스를 처음으로 분리하였다. 이 바이러스는 네덜란드 중앙수의연구소가 위치한 지명을 따서 렐리스타트 바이러스(Lelystad virus)라고 명명되었으며, 곧이어 미국을 비롯한 많은 나라에서 원인 바이러스를 분리하였고, 성상과 병원성 등을 조사한 결과 그동안 미국과 유럽에서 번식장애와 호흡기 감염을 복합적으로 일으키던 새로운 돼지질병이 이 바이러스에 의한 것임이 밝혀졌다. 유럽에서는 렐리스타트 바이러스(Lelystad virus), 미국에서는 SIRS 바이러스(Swine infertility and respiratory syndrome virus)라고 흔히 부르는 돼지생식기호흡기증후군 바이러스(PRRSV)는 외막을 갖고 있으며, 직경 45~80㎚인 작은 구형 바이러스로 표면에는 작은 돌기들이 나와있다. 유전자가 들어있는 부위는 직경 25~35㎚로 단쇄 RNA 유전자가 자리하고 있다. 외부환경에는 그다지 강하지 못해서 산도 5 이하 또는 7 이상에서 바이러스 감염 역가가 90% 이상 감소되며, 37℃에서 10~24시간, 20℃에서는 6일 정도 경과하면 감염 역가가 10배 이상 감소된다. 이 바이러스에 감염되었을 경우 병을 일으키는 정도는 매우 다양하여, 단지 혈청 검사에 의해서만 감염을 알 수 있을 정도로 임상증상 및 경제적 손실이 전혀 없는 경우부터 농장의 생산에 20% 정도 손실을 입힐 정도로 심한 경우까지 있다.

돼지 생식기 호흡기 증후군(porcine reproductive and respiratory syndrome, PRRS)은 돼지에서 유산, 생식기능 저하, 호흡기 증상에 의한 비육저하 및 폐사를 일으키는 질병으로, 우리나라를 포함한 전 세계 양돈 산업에 엄청난 경제적인 피해를 주고 있으며 현재 가장 중요한 바이러스 질병중의 하나로 간주되고 있다. 이 같은 질병의 중요성 때문에 돼지 생식기 호흡기 증후군(PRRS)의 원인체인 돼지생식기호흡기증후군 바이러스(PRRSV)를 발견한 이후 약 20년 동안 이 바이러스에 대한 예방법을 개발하기 위하여 많은 노력이 투자되었음에도 아직까지 효과적인 예방법 및 관리법이 개발되지 않은 실정이다. 돼지생식기호흡기증후군 바이러스(PRRSV) 제어를 위해 불활화 백신과 약독화 생백신 등 다양한 백신이 개발되었으나 오직 감염성이 확보된 약독화 백신만이 만족스러운 수준의 방어 효과를 유도하는 것으로 밝혀졌다. 하지만, 돼지생식기호흡기증후군 바이러스(PRRSV)가 유전적으로 매우 다양하게 존재하기 때문에 다양한 바이러스들 간의 교차면역의 부재함으로 하나의 백신으로 다양한 돼지생식기호흡기증후군 바이러스(PRRSV)를 방어하기는 어렵다. 또한 현재 약독화 백신은 다른 동물 종의 세포주에서 100~200 계대 이상의 연속 계대를 통해서만 생산이 가능하므로 생산 기간이 길고 효능과 안전성의 보장이 어려운 문제가 있다.

한국공개특허 제2007-0064666호에는 '돼지의 생식 및 호흡 증후군 바이러스 돌연변이'가 개시되어 있고, 한국등록특허 제1152012호에서는 '돼지 생식기 및 호흡기 증후군 바이러스 균주 및 조성물'이 개시되어 있으나, 본 발명에서와 같이 돼지생식기호흡기증후군 바이러스 변이주 및 돼지 생식기 호흡기 증후군 예방 또는 치료용 백신 조성물에 관해서는 밝혀진 바가 없다.

본 발명은 상기와 같은 요구에 의해 도출된 것으로서, 본 발명은 연속적인 계대 배양에 의해 약독화된 북미형 돼지생식기호흡기증후군(PRRS) 바이러스에서 발견되는 변이 부분이 포함된 GP2 단백질, M 단백질, GP5 단백질, nsp10 단백질 및 nsp1β 단백질 코딩 유전자를 사용함으로써 연속적인 계대 배양 없이 짧은 시간에 돼지 생식기 호흡기 증후군에 대한 약독화 백신을 만들고자 하였다. 변이 부분이 포함된 GP2 단백질, M 단백질, GP5 단백질, nsp10 단백질 및 nsp1β 단백질을 포함하는 북미형 돼지생식기호흡기증후군(PRRS) 표준 바이러스 변이주를 돼지에 접종한 후 돼지들의 혈중 및 비강 바이러스 농도, 돼지들의 증체량 변화, 폐 바이러스 농도 및 돼지들의 폐 병변을 관찰함으로써, 변이 부분이 포함된 GP2 단백질, M 단백질, GP5 단백질, nsp10 단백질 및 nsp1β 단백질을 포함하는 북미형 돼지생식기호흡기증후군(PRRS) 표준 바이러스 변이주의 백신으로서의 효과를 확인하였다. 그 결과, 독성이 있는 북미형 돼지생식기호흡기증후군(PRRS) 표준 바이러스주를 접종한 경우와 비교하여 변이 부분이 포함된 GP2 단백질, M 단백질, GP5 단백질, nsp10 단백질 및 nsp1β 단백질을 포함하는 북미형 돼지생식기호흡기증후군(PRRS) 표준 바이러스 변이주를 접종했을 때, 돼지들의 혈중, 비강 및 폐에서의 바이러스 농도 감소, 돼지들의 증체량 변화율 증가 및 돼지들의 폐 병변 감소가 관찰되어 북미형 돼지생식기호흡기증후군(PRRS) 표준 바이러스 변이주의 약독화 백신으로서의 효과를 확인함으로써, 본 발명을 완성하게 되었다.

상기 과제를 해결하기 위해, 본 발명은 서열번호 6의 아미노산 서열의 10번째 아미노산이 루신(leucine)에서 페닐알라닌(phenylalanine)으로 치환된 GP2 단백질, 서열번호 7의 아미노산 서열의 16번째 아미노산이 글루타민(glutamin)에서 글루탐산(glutamic acid)으로 치환된 M 단백질 및 서열번호 10의 아미노산 서열의 331번째 아미노산이 세린(serine)에서 페닐알라닌(phenylalanine)으로 치환된 nsp1β 단백질을 포함하는 약독화된 돼지생식기호흡기증후군 바이러스(PRRSV) 변이주를 제공한다.

또한, 본 발명은 서열번호 6의 아미노산 서열의 10번째 아미노산이 루신(leucine)에서 페닐알라닌(phenylalanine)으로 치환된 GP2 단백질 코딩 유전자, 서열번호 7의 아미노산 서열의 16번째 아미노산이 글루타민(glutamin)에서 글루탐산(glutamic acid)으로 치환된 M 단백질 코딩 유전자 및 서열번호 10의 아미노산 서열의 331번째 아미노산이 세린(serine)에서 페닐알라닌(phenylalanine)으로 치환된 nsp1β 단백질 코딩 유전자를 포함하는 재조합 벡터를 제공한다.

또한, 본 발명은 상기 약독화된 돼지생식기호흡기증후군 바이러스(PRRSV) 변이주를 유효성분으로 포함하는 돼지 생식기 호흡기 증후군의 예방 또는 치료용 백신 조성물을 제공한다.

또한, 상기 백신 조성물을 돼지에 투여하여 돼지 생식기 호흡기 증후군을 예방 또는 치료하는 방법을 제공한다.

본 발명은 북미형 돼지생식기호흡기증후군(PRRS) 표준 바이러스주를 MARC-145에서 연속적으로 계대함으로써 바이러스 약독화 과정에 발생하는 바이러스 유전자의 변화를 관찰하여 바이러스 약독화에 책임이 있는 유전자 염기서열을 실험실적인 방법과 동물실험을 통해 증명한 것으로 5개의 해당 유전자를 야생형 바이러스의 유전자에 분자생물학적인 기술을 통해 도입하여 생산한 변이 바이러스의 독력이 현재 시판되고 있는 약독화 백신과 비교하여 동일한 수준으로 약화되는 것을 증명하였고, 본 발명은 효능과 안전성이 보장된 약독화 바이러스를 보다 신속하게 생산하고 다양한 바이러스를 짧은 시간에 효능과 안전성이 보장된 약독화 백신으로 개발하는 데 많은 도움이 될 것으로 기대된다.

도 1은 변이된 GP2 단백질, M 단백질, GP5 단백질, nsp10 단백질 또는 nsp1β 단백질을 포함하는 변이 바이러스들을 접종한 돼지들의 혈중 바이러스 농도(A) 및 비강 바이러스 농도(B)를 측정한 결과이다. VR2332E는 북미형 돼지생식기호흡기증후군(PRRS) 표준 바이러스주 기반의 감염성 클론에서 아무런 변이 없이 생산된 바이러스를 나타내며, MLV는 상용 약독화 백신인 Ingelvac 돼지생식기호흡기증후군(PRRS) 백신 바이러스를 나타내고, Neg는 생리식염수를 접종한 음성 대조구를 나타내며, 각각의 변이 바이러스의 명칭에 대한 설명은 표 2에 나타냈다. 각각의 처치 후 혈중 바이러스 농도 또는 비강 바이러스 농도 결과 전체를 repeated measures ANOVA를 적용하여 통계적으로 분석하고 농도의 차이에 유의성이 있는(p<0.05) 그룹을 a-d로 각각 표시하였다.
도 2는 변이된 GP2 단백질, M 단백질, GP5 단백질, nsp10 단백질 또는 nsp1β 단백질을 포함하는 변이 바이러스들을 접종했을 때 돼지들의 폐 바이러스 농도를 측정한 결과이다. VR2332E는 북미형 돼지생식기호흡기증후군(PRRS) 표준 바이러스주 기반의 감염성 클론에서 아무런 변이 없이 생산된 바이러스를 나타내며, MLV는 상용 약독화 백신인 Ingelvac 돼지생식기호흡기증후군(PRRS) 백신 바이러스를 나타내고, Neg는 생리식염수를 접종한 음성 대조구를 나타내며, 각각의 변이 바이러스의 명칭에 대한 설명은 표 2에 나타냈다. *는 감염성을 가지고 있는 VR2332E가 접종된 그룹과의 유의차를 나타낸다. (p<0.05; Wilcoxon test)

본 발명의 목적을 달성하기 위하여, 본 발명은 서열번호 6의 아미노산 서열의 10번째 아미노산이 변이된 GP2 단백질, 서열번호 7의 아미노산 서열의 16번째 아미노산이 변이된 M 단백질, 서열번호 8의 아미노산 서열의 151번째 아미노산이 변이된 GP5 단백질, 서열번호 9의 아미노산 서열의 946번째 아미노산이 변이된 nsp10 단백질 및 서열번호 10의 아미노산 서열의 331번째 아미노산이 변이된 nsp1β 단백질로 이루어진 군에서 선택된 1종 이상의 단백질을 포함하는 약독화된 돼지생식기호흡기증후군 바이러스(PRRSV) 변이주를 제공한다.

상기 서열번호 6 내지 서열번호 10으로 기재된 아미노산 서열을 가지는 단백질 코딩 유전자는 돼지생식기호흡기증후군 바이러스를 약독화시킬 수 있으며, 돼지 호흡기 생식기 증후군 바이러스의 약독화에 필요한 시간을 단축시킬 수 있다.

질병 원인 바이러스인 북미형 돼지생식기호흡기증후군 바이러스(PRRSV)의 약독화는 통상적인 방법으로 시행될 수 있다. 즉, 약독화는 질병 원인균의 자외선(UV) 조사, 약품처리 또는 시험관 내 연속적인 계대 배양에 의해 달성될 수 있다. 약독화는 명확한 유전 변화를 만듦으로써, 예를 들어 독성을 제공하는 것으로 알려진 균주의 염기서열의 특정 결실 또는 균주의 게놈 내로의 서열의 삽입에 의해 달성될 수 있다.

본 발명의 일 구현 예에 따른 약독화된 돼지생식기호흡기증후군 바이러스(PRRSV) 변이주는 바람직하게는 서열번호 6의 아미노산 서열의 10번째 아미노산이 루신(leucine)에서 페닐알라닌(phenylalanine)으로 치환된 단백질, 서열번호 7의 아미노산 서열의 16번째 아미노산이 글루타민(glutamin)에서 글루탐산(glutamic acid)으로 치환된 단백질, 서열번호 8의 아미노산 서열의 151번째 아미노산이 아르기닌(arginine)에서 글리신(glycine)으로 치환된 단백질, 서열번호 9의 아미노산 서열의 946번째 아미노산이 타이로신(tyrosine)에서 히스티딘(histidine)으로 치환된 단백질, 서열번호 10의 아미노산 서열의 331번째 아미노산이 세린(serine)에서 페닐알라닌(phenylalanine)으로 치환된 단백질 중 어느 하나 이상의 단백질을 포함할 수 있으나, 이에 제한되지 않는다.

또한, 본 발명의 일 구현 예에서, 상기 변이주는 서열번호 6의 아미노산 서열의 10번째 아미노산이 루신(leucine)에서 페닐알라닌(phenylalanine)으로 치환된 GP2 단백질, 서열번호 7의 아미노산 서열의 16번째 아미노산이 글루타민(glutamin)에서 글루탐산(glutamic acid)으로 치환된 M 단백질 및 서열번호 10의 아미노산 서열의 331번째 아미노산이 세린(serine)에서 페닐알라닌(phenylalanine)으로 치환된 nsp1β 단백질을 포함하는 약독화된 돼지생식기호흡기증후군 바이러스(PRRSV) 변이주일 수 있으나, 이에 제한되지 않는다.

또한, 본 발명의 일 구현 예에서, 상기 변이주는 서열번호 6의 아미노산 서열의 10번째 아미노산이 루신(leucine)에서 페닐알라닌(phenylalanine)으로 치환된 GP2 단백질 및 서열번호 7의 아미노산 서열의 16번째 아미노산이 글루타민(glutamin)에서 글루탐산(glutamic acid)으로 치환된 M 단백질을 포함하는 약독화된 돼지생식기호흡기증후군 바이러스(PRRSV) 변이주; 서열번호 6의 아미노산 서열의 10번째 아미노산이 루신(leucine)에서 페닐알라닌(phenylalanine)으로 치환된 GP2 단백질, 서열번호 7의 아미노산 서열의 16번째 아미노산이 글루타민(glutamin)에서 글루탐산(glutamic acid)으로 치환된 M 단백질 및 서열번호 8의 아미노산 서열의 151번째 아미노산이 아르기닌(arginine)에서 글리신(glycine)으로 치환된 GP5 단백질을 포함하는 약독화된 돼지생식기호흡기증후군 바이러스(PRRSV) 변이주; 서열번호 6의 아미노산 서열의 10번째 아미노산이 루신(leucine)에서 페닐알라닌(phenylalanine)으로 치환된 GP2 단백질, 서열번호 7의 아미노산 서열의 16번째 아미노산이 글루타민(glutamin)에서 글루탐산(glutamic acid)으로 치환된 M 단백질, 서열번호 8의 아미노산 서열의 151번째 아미노산이 아르기닌(arginine)에서 글리신(glycine)으로 치환된 GP5 단백질 및 서열번호 9의 아미노산 서열의 946번째 아미노산이 타이로신(tyrosine)에서 히스티딘(histidine)으로 치환된 nsp10 단백질을 포함하는 약독화된 돼지생식기호흡기증후군 바이러스(PRRSV) 변이주; 또는 서열번호 6의 아미노산 서열의 10번째 아미노산이 루신(leucine)에서 페닐알라닌(phenylalanine)으로 치환된 GP2 단백질, 서열번호 7의 아미노산 서열의 16번째 아미노산이 글루타민(glutamin)에서 글루탐산(glutamic acid)으로 치환된 M 단백질, 서열번호 8의 아미노산 서열의 151번째 아미노산이 아르기닌(arginine)에서 글리신(glycine)으로 치환된 GP5 단백질, 서열번호 9의 아미노산 서열의 946번째 아미노산이 타이로신(tyrosine)에서 히스티딘(histidine)으로 치환된 nsp10 단백질 및 서열번호 10의 아미노산 서열의 331번째 아미노산이 세린(serine)에서 페닐알라닌(phenylalanine)으로 치환된 nsp1β 단백질을 포함하는 약독화된 돼지생식기호흡기증후군 바이러스(PRRSV) 변이주일 수 있으나, 이에 제한되지 않는다.

본 발명에 따른 GP2 단백질, M 단백질, GP5 단백질, nsp10 단백질 및 nsp1β 단백질의 범위는 서열번호 6 내지 서열번호 10으로 표시되는 아미노산 서열을 갖는 단백질 및 상기 단백질의 기능적 동등물을 포함한다. "기능적 동등물"이란 아미노산의 부가, 치환 또는 결실의 결과, 상기 서열번호 6 내지 서열번호 10으로 표시되는 아미노산 서열과 적어도 70% 이상, 바람직하게는 80% 이상, 더욱 바람직하게는 90% 이상, 더 더욱 바람직하게는 95% 이상의 서열 상동성을 갖는 것으로, 서열번호 6 내지 서열번호 10으로 표시되는 단백질과 실질적으로 동질의 생리활성을 나타내는 단백질을 말한다. "실질적으로 동질의 생리활성"이란 돼지 호흡기 생식기 증후군 바이러스를 약독화시키는 활성을 의미한다.

또한, 본 발명의 일 구현 예에서, GP2 단백질, M 단백질, GP5 단백질, nsp10 단백질 및 nsp1β 단백질을 암호화하는 유전자를 제공한다. 본 발명의 유전자는 GP2 단백질, M 단백질, GP5 단백질, nsp10 단백질 및 nsp1β 단백질을 암호화하는 게놈 DNA 또는 cDNA를 모두 포함한다. 바람직하게는, 본 발명의 유전자는 서열번호 1 내지 서열번호 5로 표시되는 염기서열을 포함할 수 있고, 돼지 호흡기 생식기 증후군 바이러스를 약독화시키기 위해 서열번호 1 내지 서열번호 5의 염기서열을 변이시킬 수 있다.

본 발명은 서열번호 6의 아미노산 서열의 10번째 아미노산이 변이된 GP2 단백질 코딩 유전자, 서열번호 7의 아미노산 서열의 16번째 아미노산이 변이된 M 단백질 코딩 유전자, 서열번호 8의 아미노산 서열의 151번째 아미노산이 변이된 GP5 단백질 코딩 유전자, 서열번호 9의 아미노산 서열의 946번째 아미노산이 변이된 nsp10 단백질 코딩 유전자 및 서열번호 10의 아미노산 서열의 331번째 아미노산이 변이된 nsp1β 단백질 코딩 유전자로 이루어진 군에서 선택된 1종 이상의 유전자를 포함하는 재조합 벡터를 제공한다.

본 발명의 일 구현 예에서, 상기 재조합 벡터는 서열번호 6의 아미노산 서열의 10번째 아미노산이 루신(leucine)에서 페닐알라닌(phenylalanine)으로 치환된 GP2 단백질 코딩 유전자, 서열번호 7의 아미노산 서열의 16번째 아미노산이 글루타민(glutamin)에서 글루탐산(glutamic acid)으로 치환된 M 단백질 코딩 유전자 및 서열번호 10의 아미노산 서열의 331번째 아미노산이 세린(serine)에서 페닐알라닌(phenylalanine)으로 치환된 nsp1β 단백질 코딩 유전자를 포함할 수 있으나, 이에 제한되지 않는다.

본 발명의 일 구현 예에서, 상기 유전자는 서열번호 6의 아미노산 서열의 10번째 아미노산이 루신(leucine)에서 페닐알라닌(phenylalanine)으로 치환된 단백질 코딩 유전자, 상기 서열번호 7의 아미노산 서열의 16번째 아미노산이 글루타민(glutamin)에서 글루탐산(glutamic acid)으로 치환된 단백질 코딩 유전자, 상기 서열번호 8의 아미노산 서열의 151번째 아미노산이 아르기닌(arginine)에서 글리신(glycine)으로 치환된 단백질 코딩 유전자, 상기 서열번호 9의 아미노산 서열의 946번째 아미노산이 타이로신(tyrosine)에서 히스티딘(histidine)으로 치환된 단백질 코딩 유전자 및 상기 서열번호 10의 아미노산 서열의 331번째 아미노산이 세린(serine)에서 페닐알라닌(phenylalanine)으로 치환된 단백질 코딩 유전자인 것을 의미한다.

용어 "재조합"은 세포가 이종의 핵산을 복제하거나, 상기 핵산을 발현하거나 또는 펩티드, 이종의 펩티드 또는 이종의 핵산에 의해 암호된 단백질을 발현하는 세포를 지칭하는 것이다. 재조합 세포는 상기 세포의 천연 형태에서는 발견되지 않는 유전자 또는 유전자 절편을, 센스 또는 안티센스 형태 중 하나로 발현할 수 있다. 또한 재조합 세포는 천연 상태의 세포에서 발견되는 유전자를 발현할 수 있으며, 그러나 상기 유전자는 변형된 것으로서 인위적인 수단에 의해 세포내 재도입된 것이다.

상기 백신 조성물은 서열번호 6의 아미노산 서열의 10번째 아미노산이 루신(leucine)에서 페닐알라닌(phenylalanine)으로 치환된 GP2 단백질, 서열번호 7의 아미노산 서열의 16번째 아미노산이 글루타민(glutamin)에서 글루탐산(glutamic acid)으로 치환된 M 단백질 및 서열번호 10의 아미노산 서열의 331번째 아미노산이 세린(serine)에서 페닐알라닌(phenylalanine)으로 치환된 nsp1β 단백질을 포함하는 약독화된 돼지생식기호흡기증후군 바이러스(PRRSV) 변이주; 서열번호 6의 아미노산 서열의 10번째 아미노산이 루신(leucine)에서 페닐알라닌(phenylalanine)으로 치환된 GP2 단백질 및 서열번호 7의 아미노산 서열의 16번째 아미노산이 글루타민(glutamin)에서 글루탐산(glutamic acid)으로 치환된 M 단백질을 포함하는 약독화된 돼지생식기호흡기증후군 바이러스(PRRSV) 변이주; 서열번호 6의 아미노산 서열의 10번째 아미노산이 루신(leucine)에서 페닐알라닌(phenylalanine)으로 치환된 GP2 단백질, 서열번호 7의 아미노산 서열의 16번째 아미노산이 글루타민(glutamin)에서 글루탐산(glutamic acid)으로 치환된 M 단백질 및 서열번호 8의 아미노산 서열의 151번째 아미노산이 아르기닌(arginine)에서 글리신(glycine)으로 치환된 GP5 단백질을 포함하는 약독화된 돼지생식기호흡기증후군 바이러스(PRRSV) 변이주; 서열번호 6의 아미노산 서열의 10번째 아미노산이 루신(leucine)에서 페닐알라닌(phenylalanine)으로 치환된 GP2 단백질, 서열번호 7의 아미노산 서열의 16번째 아미노산이 글루타민(glutamin)에서 글루탐산(glutamic acid)으로 치환된 M 단백질, 서열번호 8의 아미노산 서열의 151번째 아미노산이 아르기닌(arginine)에서 글리신(glycine)으로 치환된 GP5 단백질 및 서열번호 9의 아미노산 서열의 946번째 아미노산이 타이로신(tyrosine)에서 히스티딘(histidine)으로 치환된 nsp10 단백질을 포함하는 약독화된 돼지생식기호흡기증후군 바이러스(PRRSV) 변이주; 또는 서열번호 6의 아미노산 서열의 10번째 아미노산이 루신(leucine)에서 페닐알라닌(phenylalanine)으로 치환된 GP2 단백질, 서열번호 7의 아미노산 서열의 16번째 아미노산이 글루타민(glutamin)에서 글루탐산(glutamic acid)으로 치환된 M 단백질, 서열번호 8의 아미노산 서열의 151번째 아미노산이 아르기닌(arginine)에서 글리신(glycine)으로 치환된 GP5 단백질, 서열번호 9의 아미노산 서열의 946번째 아미노산이 타이로신(tyrosine)에서 히스티딘(histidine)으로 치환된 nsp10 단백질 및 서열번호 10의 아미노산 서열의 331번째 아미노산이 세린(serine)에서 페닐알라닌(phenylalanine)으로 치환된 nsp1β 단백질을 포함하는 약독화된 돼지생식기호흡기증후군 바이러스(PRRSV) 변이주를 포함할 수 있으나, 이에 제한되지 않는다.

또한, 본 발명의 일 구현 예에서, 상기 백신 조성물은 당업자에 공지된 기술에 따라 약리학적으로 허용가능한 담체, 희석제, 보존제 및 면역 보조제로 이루어진 군으로부터 선택된 1종 이상을 추가로 포함할 수 있다.

상기 약제학적으로 허용 가능한 담체는 활성 성분의 생물학적 활성의 유효성을 방해하지 않고, 화학적으로 불활성이며, 투여되는 피험체에게 독성을 띠지 않는 담체 매질을 의미한다. 각종 담체들이 당 기술분야에 공지되어 있으며, 증류수, 염수 또는 미네랄수 등이 포함될 수 있고, 보존제로는, 예컨데, EDTA염, 메티올레이트 등이 포함될 수 있으며, 면역 보조제로, 예컨데, 수산화알루미늄과 같은 광물겔, 리조레시틴과 같은 계면활성제, 사포닌이나 사포닌 유도체와 같은 글리코시드, 란티딘, 아브리딘(avridine), 카보폴(carbopol), 폴리포스파젠, DDA(dimethyldioctadecylammonium bromide), 퀼 에이(quil A), 암피겐, 광물유 등이 포함될 수 있으나, 이에 제한되지 않는다.

또한, 본 발명은 상기 백신 조성물을 돼지에 투여하여 돼지 생식기 호흡기 증후군을 예방 또는 치료하는 방법을 제공한다.

본 발명의 백신 조성물은 제약기술 분야 및 수의학 기술분야의 당업자에게 잘 알려진 표준기술에 따라 제조될 수 있다. 이러한 백신의 함량은 의학기술분야 및 수의학 기술분야의 당업자들이 투여 대상 개체의 연령, 성별, 체중, 종족 및 상태와 같은 인자 및 투여 경로를 고려하여 결정할 수 있다. 이 조성물은 단독으로 투여하거나 또는 다른 면역학적 항원, 백신 조성물 또는 치료제 조성물과 함께 투여하거나 후속투여를 할 수 있다.

본 발명의 백신이 사용될 수 있는 제형의 예로는 구강, 비강, 항문, 질, 위 내 투여용의 현탁액 또는 시럽 등과 같은 액상 제제 및 피하, 내피, 근육 내, 또는 정맥 내 투여용의 멸균 현탁 또는 에멀션 제제를 포함할 수 있다.

또한 사용 전에 약제학적으로 허용 가능한 희석제에 재현탁되는 가용성 성분 또는 미립자의 고체 제제일 수 있다. 가용성 성분 또는 미립자는 코아세르베이션, 바이아세르베이션, 응고, 분무건조, 기포건조, 침전, 동결건조 등 약제학 분야 및 수의학 분야의 당업자에게 공지된 기술에 따라 제조할 수 있다.

상기 백신은 수의학적으로 허용되는 다양한 경로를 통해 돼지에 투여될 수 있다. 예를 들어, 근육주사 또는 피내주사 등으로 투여될 수 있다. 투여경로에 따라 수의학 분야의 당업자들이 투여량을 결정할 수 있다.

이하, 본 발명을 실시예에 의해 상세히 설명한다. 단, 하기 실시예는 본 발명을 예시하는 것일 뿐, 본 발명의 내용이 하기 실시예에 한정되는 것은 아니다.

실시예 1: 돼지생식기호흡기증후군 바이러스(PRRSV)의 약독화 관련 유전자 선별

북미형 돼지생식기호흡기증후군(PRRS) 바이러스주인 VR-2332^TM(ATCC, 미국)를 장시간 원숭이 신장세포유래 주화세포인 MARC-145(ATCC, 미국)에 계대하여 생산된 약독화 MLV 백신의 전체 유전자 염기서열(gene bank accession number AF066183)을 원래 VR-2332^TM(AY150564)와 비교하여 차이가 나는 염기서열들을 VR-2332^TM 기반의 감염성 클론에 차례로 도입하여 생산한 변이 바이러스들을 실험실적인 방법으로 평가하여 약독화에 관련 가능성이 높은 5개의 유전자를 표 1과 같이 선별하였다.

약독화 유전자의 위치 및 정보

유전자 이름	염기서열 번호	염기서열	단백질 이름	아미노산 번호	아미노산
ORF2 (서열번호 1)	28-30	TTG→TTT	GP2 (서열번호 6)	10	루신→페닐알라닌
ORF6 (서열번호 2)	46-48	CAA→GAA	M (서열번호 7)	16	글루타민→글루탐산
ORF5 (서열번호 3)	451-453	AGA→GGA	GP5 (서열번호 8)	151	아르기닌→글리신
ORF1b (서열번호 4)	2836-2838	TAC→CAC	nsp10 (서열번호 9)	946	타이로신→히스티딘
ORF1a (서열번호 5)	991-993	TCC→TTC	nsp1β (서열번호 10)	331	세린→페닐알라닌

실시예 2: 약독화 유전자를 포함하는 변이 바이러스의 약독화 증명

가. 약독화 유전자에 의해 변이 바이러스의 생산과 동물 실험

표 1의 유전자를 차례로 VR-2332^TM 기반의 감염성 클론에 도입하여 표 2와 같이 P26, P256, P1b256 및 P1ab256 등 4개의 변이 바이러스를 생산하고 상용 약독화 백신인 Ingelvac 돼지생식기호흡기증후군(PRRS) MLV 백신 바이러스(MLV, Beriger-Ingelheim, 독일)와 VR-2332^TM 기반의 감염성 클론에서 아무런 변이 없이 생산된 바이러스(VR2332E)와 함께 각각 5마리씩의 돼지 생식기 호흡기 증후군(PRRS) 음성인 4주령의 돼지들에 접종하고 병원성을 평가했다.

약독화 유전자 증명을 위한 동물 실험에 사용된 변이 바이러스 정보

변이 바이러스	변이 유전자	변이 내용
P26	ORF2 및 6	VR-2332^TM에 GP2 단백질의 10번 아미노산인 루신을 페닐알라닌으로 변이시키고 M 단백질의 16번 아미노산인 글루타민을 글루탐산으로 동시에 변이시킨 바이러스
P256	ORF2, 5 및 6	P26 변이 바이러스에 GP5 단백질의 151번 아미노산인 아르기닌을 글리신으로 추가로 변이시킨 바이러스
P1b256	ORF1b, 2, 5 및 6	P256 변이 바이러스에 ORF1b 단백질의 946번 아미노산인 타이로신을 히스티딘으로 추가로 변이시킨 바이러스
P1ab256	ORF1a,1b, 2, 5 및 6	P1b256 변이 바이러스에 ORF1a 단백질의 331번 아미노산인 세린을 페닐알라닌으로 추가로 변이시킨 바이러스

나. 약독화 유전자를 포함하는 변이 바이러스의 약독화 증명

약독화 유전자 도입 변이 바이러스들을 접종한 동물들은 백신 바이러스인 MLV와 비교하여 비슷한 수준의 높은 일당 증체량(표 3)을 보였고 MLV와 비슷한 수준으로 낮은 수준의 혈중 또는 비강 바이러스 농도를 보였으며(도 1) 부검 후 낮은 수준의 병변(표 4)과 폐 내 낮은 바이러스 농도(도 2)를 보였다. 이상의 결과들에서 표 1에서 보여진 약독화 유전자들이 차례로 하나씩 야생형 바이러스의 유전자에 도입될 때마다 바이러스 독력의 약화가 점차적으로 관찰되어 모든 유전자가 도입된 P1ab256 변이 바이러스의 경우 MLV와 동일한 수준의 약화된 독력을 보이는 것으로 관찰되었다.

변이 바이러스들을 접종한 돼지들의 바이러스 접종 후 10일에서 28일까지의 일당 증체량

변이 바이러스	일당 증체량(kg)^a
변이 바이러스	10 dpi	28 dpi
VR2332E	0.22 ± 0.08	0.29 ± 0.06
P26	0.15 ± 0.06	0.28 ± 0.05
P256	0.15 ± 0.05*	0.32 ± 0.02
P1b256	0.23 ± 0.07	0.29 ± 0.07
P1ab256	0.25 ± 0.06	0.35 ± 0.02*
MLV	0.20 ± 0.09	0.38 ± 0.13
Neg	0.19 ± 0.08	0.34 ± 0.07*

- a는 (평균 ± 표준편차) 값으로 나타냈음을 의미한다.

- *는 감염성이 있는 VR2332E가 접종된 그룹과의 유의차를 나타낸다.(p<0.05; Wilcoxon test)

- VR2332E는 북미형 돼지생식기호흡기증후군(PRRS) 표준 바이러스주 기반의 감염성 클론에서 아무런 변이 없이 생산된 바이러스를 나타내며, MLV는 상용 약독화 백신인 Ingelvac 돼지생식기호흡기증후군(PRRS) 백신 바이러스를 나타내고, Neg는 생리식염수를 접종한 음성 대조구를 나타낸다.

변이 바이러스들을 접종한 돼지들의 폐에서 평가된 현미경적인 병변과 면역조직화학검사법(IHC) 병변 점수

변이 바이러스	현미경적인 병변 점수^a		면역조직화학검사법 병변 점수^a
변이 바이러스	10 dpi	28 dpi	10 dpi	28 dpi
VR2332E	1.33 ± 1.15	1.33 ± 0.58	1.33 ± 1.15	0.33 ± 0.58
P26	1.00 ± 0.00	1.00 ± 0.00	0.33 ± 0.58	1.00 ± 0.00*
P256	0.67 ± 0.58	1.00 ± 0.00	0.33 ± 0.58	1.33 ± 0.58*
P1b256	0.67 ± 0.58	1.50 ± 0.58	0.00 ± 0.00*	1.25 ± 1.26
P1ab256	0.00 ± 0.00*	0.50 ± 0.58	0.00 ± 0.00*	0.25 ± 0.50
MLV	0.67 ± 0.58	1.00 ± 1.00	0.67 ± 1.15	0.67 ± 1.15
Neg	0.00 ± 0.00*	0.00 ± 0.00*	0.00 ± 0.00*	0.00 ± 0.00*

- a는 (평균 ± 표준편차) 값으로 나타냈음을 의미한다.

<110> INDUSTRIAL COOPERATION FOUNDATION CHONBUK NATIONAL UNIVERSITY <120> Porcine reproductive and respiratory syndrome virus mutant strain and vaccine composition for preventing or treating porcine reproductive and respiratory syndrome comprising the same <130> PN15465 <160> 10 <170> KopatentIn 2.0 <210> 1 <211> 771 <212> DNA <213> Porcine reproductive and respiratory syndrome virus <400> 1 atgaaatggg gtccatgcaa agcctttttg acaaaattgg ccaacttttt gtggatgctt 60 tcacggagtt cttggtgtcc attgttgata tcattatatt tttggccatt ttgtttggct 120 tcaccatcgc cggttggctg gtggtctttt gcatcagatt ggtttgctcc gcgatactcc 180 gtacgcgccc tgccattcac tctgagcaat tacagaagat cttatgaggc ctttctttcc 240 cagtgccaag tggacattcc cacctgggga actaaacatc ctttggggat gctttggcac 300 cataaggtgt caaccctgat tgatgaaatg gtgtcgcgtc gaatgtaccg catcatggaa 360 aaagcagggc aggctgcctg gaaacaggtg gtgagcgagg ctacgctgtc tcgcattagt 420 agtttggatg tggtggctca ttttcagcat ctagccgcca ttgaagccga gacctgtaaa 480 tatttggcct cccggctgcc catgctacac aacctgcgca tgacagggtc aaatgtaacc 540 atagtgtata atagcacttt gaatcaggtg tttgctattt ttccaacccc tggttcccgg 600 ccaaagcttc atgattttca gcaatggtta atagctgtac attcctccat attttcctct 660 gttgcagctt cttgtactct ttttgttgtg ctgtggttgc gggttccaat actacgtact 720 gtttttggtt tccgctggtt aggggcaatt tttctttcga actcacagtg a 771 <210> 2 <211> 525 <212> DNA <213> Porcine reproductive and respiratory syndrome virus <400> 2 atggggtcgt ccttagatga cttctgtcat gatagcacgg ctccacaaaa ggtgcttttg 60 gcgttttcta ttacctacac gccagtgatg atatatgccc taaaggtgag tcgcggccga 120 ctgctagggc ttctgcacct tttgatcttc ctgaattgtg ctttcacctt cgggtacatg 180 actttcgcgc actttcagag tacaaataag gtcgcgctca ctatgggagc agtagttgca 240 ctcctttggg gggtgtactc agccatagaa acctggaaat tcatcacctc cagatgccgt 300 ttgtgcttgc taggccgcaa gtacattctg gcccctgccc accacgttga aagtgccgca 360 ggctttcatc cgattgcggc aaatgataac cacgcatttg tcgtccggcg tcccggctcc 420 actacggtca acggcacatt ggtgcccggg ttaaaaagcc tcgtgttggg tggcagaaaa 480 gctgttaaac agggagtggt aaaccttgtc aaatatgcca aataa 525 <210> 3 <211> 603 <212> DNA <213> Porcine reproductive and respiratory syndrome virus <400> 3 atgttggaga aatgcttgac cgcgggctgt tgctcgcgat tgctttcttt gtggtgtatc 60 gtgccgttct gttttgctgt gctcgccaac gccagcaacg acagcagctc ccatctacag 120 ctgatttaca acttgacgct atgtgagctg aatggcacag attggctagc taacaaattt 180 gattgggcag tggagagttt tgtcatcttt cccgttttga ctcacattgt ctcctatggt 240 gccctcacta ccagccattt ccttgacaca gtcgctttag tcactgtgtc taccgccggg 300 tttgttcacg ggcggtatgt cctaagtagc atctacgcgg tctgtgccct ggctgcgttg 360 acttgcttcg tcattaggtt tgcaaagaat tgcatgtcct ggcgctacgc gtgtaccaga 420 tataccaact ttcttctgga cactaagggc agactctatc gttggcggtc gcctgtcatc 480 atagagaaaa ggggcaaagt tgaggtcgaa ggtcatctga tcgacctcaa aagagttgtg 540 cttgatggtt ccgtggcaac ccctataacc agagtttcag cggaacaatg gggtcgtcct 600 tag 603 <210> 4 <211> 4374 <212> DNA <213> Porcine reproductive and respiratory syndrome virus <400> 4 ctagccgcca gcgacttgac ccgctgtggt cgcggcggct tggttgttac tgaaacagcg 60 gtaaaaatag tcaaatttca caaccggacc ttcaccctgg gacctgtgaa tttaaaagtg 120 gccagtgagg ttgagctaaa agacgcggtt gagcacaacc aacacccggt tgcgagaccg 180 atcgatggtg gagttgtgct cctgcgttcc gcggttcctt cgcttataga cgtcttgatc 240 tccggtgctg atgcatctcc caagttactt gcccatcacg ggccgggaaa cactgggatc 300 gatggcacgc tctgggattt tgagtccgaa gccactaaag aggaagtcgc actcagtgcg 360 caaataatac aggcttgtga cattaggcgc ggcgacgctc ctgaaattgg tctcccttac 420 aagctgtacc ctgttagggg taaccctgag cgggtgaaag gagttctgca gaatacaagg 480 tttggagaca taccttacaa aacccccagt gacactggaa gcccagtgca cgcggctgcc 540 tgccttacgc ccaacgccac tccggtgact gatgggcgct ccgtcttggc cacgaccatg 600 ccccccgggt ttgagttata tgtaccgacc ataccagcgt ctgtccttga ttaccttgac 660 tctaggcctg actgccctaa acagctgaca gagcacggct gcgaagatgc cgcactgaaa 720 gacctctcta aatatgactt gtccacccaa ggctttgttt tacctggagt tcttcgcctt 780 gtgcggaaat acctgtttgc ccatgtaggt aagtgcccac ccgttcatcg gccttctact 840 taccctgcta agaattctat ggctggaata aatgggaaca ggttcccaac caaggacatt 900 cagagcgtcc ctgaaatcga cgttctgtgc gcacaggctg tgcgagaaaa ctggcaaact 960 gtcacccctt gtactcttaa gaaacagtat tgcgggaaga agaagactag gaccatactc 1020 ggcaccaata acttcatcgc actagcccac cgagcagtgt tgagtggtgt tacccagggc 1080 ttcatgaaaa aggcgtttaa ctcgcccatc gccctcggaa agaacaagtt taaggagcta 1140 cagactccgg tcctgggcag gtgccttgaa gctgatctcg catcctgcga tcgatccacg 1200 cctgcaattg tccgctggtt tgccgccaac cttctttatg aacttgcctg tgctgaagag 1260 catctaccgt cgtacgtgct gaactgctgc cacgacttac tggtcacgca gtccggcgca 1320 gtgactaaga gaggtggcct gtcgtctggc gacccgatca cctctgtgtc taacaccatt 1380 tatagtttgg tgatctatgc acagcatatg gtgcttagtt acttcaaaag tggtcacccc 1440 catggccttc tgttcttaca agaccagcta aagtttgagg acatgctcaa ggttcaaccc 1500 ctgatcgtct attcggacga cctcgtgctg tatgccgagt ctcccaccat gccaaactat 1560 cactggtggg ttgaacatct gaatttgatg ctggggtttc agacggaccc aaagaagaca 1620 gcaataacag actcgccatc atttctaggc tgtagaataa taaatgggcg ccagctagtc 1680 cccaaccgtg acaggatcct cgcggccctc gcctatcaca tgaaggcgag taatgtttct 1740 gaatactatg cctcagcggc tgcaatactc atggacagct gtgcttgttt ggagtatgat 1800 cctgaatggt ttgaagaact tgtagttgga atagcgcagt gcgcccgcaa ggacggctac 1860 agctttcccg gcacgccgtt cttcatgtcc atgtgggaaa aactcaggtc caattatgag 1920 gggaagaagt cgagagtgtg cgggtactgc ggggccccgg ccccgtacgc tactgcctgt 1980 ggcctcgacg tctgcattta ccacacccac ttccaccagc attgtccagt cacaatctgg 2040 tgtggccatc cagcgggttc tggttcttgt agtgagtgca aatcccctgt agggaaaggc 2100 acaagccctt tagacgaggt gctggaacaa gtcccgtata agcccccacg gaccgttatc 2160 atgcatgtgg agcagggtct cacccccctt gatccaggta gataccaaac tcgccgcgga 2220 ttagtctctg tcaggcgtgg aattagggga aatgaagttg aactaccaga cggtgattat 2280 gctagcaccg ccttgctccc tacctgcaaa gagatcaaca tggtcgctgt cgcttccaat 2340 gtattgcgca gcaggttcat catcggccca cccggtgctg ggaaaacata ctggctcctt 2400 caacaggtcc aggatggtga tgttatttac acaccaactc accagaccat gcttgacatg 2460 attagggctt tggggacgtg ccggttcaac gtcccggcag gcacaacgct gcaattcccc 2520 gtcccctccc gcaccggtcc gtgggttcgc atcctagccg gcggttggtg tcctggcaag 2580 aattccttcc tagatgaagc agcgtattgc aatcaccttg atgttttgag gcttcttagt 2640 aaaactaccc tcacctgtct aggagacttc aagcaactcc acccagtggg ttttgattct 2700 cattgctatg tttttgacat catgcctcaa actcaactga agaccatctg gaggtttgga 2760 cagaatatct gtgatgccat tcagccagat tacagggaca aactcatgtc catggtcaac 2820 acaacccgtg tgacctacgt ggaaaaacct gtcaggtatg ggcaggtcct caccccctac 2880 cacagggacc gagaggacga cgccatcact attgactcca gtcaaggcgc cacattcgat 2940 gtggtcacat tgcatttgcc cactaaagat tcactcaaca ggcaaagagc ccttgttgcc 3000 atcaccaggg caagacacgc tatctttgtg tatgacccac acaggcagct gcagggcttg 3060 tttgatcttc ctgcaaaagg cacacccgtc aacctcgcag tgcaccgcga cgggcagctg 3120 atcgtgctgg atagaaataa caaagaatgc acggttgctc aggctctagg caacggggat 3180 aaatttaggg ccacagacaa gcgtgttgta gattctctcc gcgccatttg tgctgatcta 3240 gaagggtcga gctctccgct ccccaaggtc gcacacaact tgggatttta tttctcacct 3300 gatttaacac agtttgctaa actcccagta gaacttgcac ctcactggcc cgtggtgaca 3360 acccagaaca atgaaaagtg gccagatcgg ctggttgcca gccttcgccc tatccataaa 3420 tacagccgcg cgtgcatcgg tgccggctat atggtgggcc cttcggtgtt tctaggcact 3480 cctggggtcg tgtcatacta tctcacaaaa tttgttaagg gcgaggctca agtgcttccg 3540 gagacggttt tcagcaccgg ccgaattgag gtagactgcc gggaatatct tgatgatcgg 3600 gagcgagaag ttgctgcgtc cctcccacac gctttcattg gcgacgtcaa aggcactacc 3660 gttggaggat gtcatcatgt cacctccaga tacctcccgc gcgtccttcc caaggaatca 3720 gttgcggtag tcggggtttc aagccccgga aaagccgcga aagcattgtg cacactgaca 3780 gatgtgtacc tcccagatct tgaagcctat ctccacccgg agacccagtc caagtgctgg 3840 aaaatgatgt tggacttcaa agaagttcga ctaatggtct ggaaagacaa aacagcctat 3900 ttccaacttg aaggtcgcta tttcacctgg tatcagcttg ccagctatgc ctcgtacatc 3960 cgtgttcctg tcaactctac ggtgtacttg gacccctgca tgggccccgc cctttgcaac 4020 aggagagtcg tcgggtccac ccactggggg gctgacctcg cggtcacccc ttatgattac 4080 ggcgctaaaa ttatcctgtc tagcgcgtac catggtgaaa tgccccccgg atacaaaatt 4140 ctggcgtgcg cggagttctc gttggatgac ccagttaagt acaaacatac ctgggggttt 4200 gaatcggata cagcgtatct gtatgagttc accggaaacg gtgaggactg ggaggattac 4260 aatgatgcgt ttcgtgcgcg ccaggaaggg aaaatttata aggccactgc caccagcttg 4320 aagttttatt ttcccccggg ccctgtcatt gaaccaactt taggcctgaa ttga 4374 <210> 5 <211> 7512 <212> DNA <213> Porcine reproductive and respiratory syndrome virus <400> 5 atgtctggga tacttgatcg gtgcacgtgt acccccaatg ccagggtgtt tatggcggag 60 ggccaagtat actgcacacg atgcctcagt gcacggtctc tccttcccct gaacctccaa 120 gtttctgagc tcggggtgct aggcctattc tacaggcccg aagagccact ccggtggacg 180 ttgccacgtg cattccccac tgttgagtgc tcccccgccg gggcctgctg gctttctgca 240 atctttccaa tcgcacgaat gaccagtgga aacctgaact tccaacaaag aatggtacgg 300 gtcgcagctg agctttacag agccggccag ctcacccctg cagtcttgaa ggctctacaa 360 gtttatgaac ggggttgccg ctggtacccc attgttggac ctgtccctgg agtggccgtt 420 ttcgccaatt ccctacatgt gagtgataaa cctttcccgg gagcaactca cgtgttgacc 480 aacctgccgc tcccgcagag acccaagcct gaagactttt gcccctttga gtgtgctatg 540 gctactgtct atgacattgg tcatgacgcc gtcatgtatg tggccgaaag gaaagtctcc 600 tgggcccctc gtggcgggga tgaagtgaaa tttgaagctg tccccgggga gttgaagttg 660 attgcgaacc ggctccgcac ctccttcccg ccccaccaca cagtggacat gtctaagttc 720 gccttcacag cccctgggtg tggtgtttct atgcgggtcg aacgccaaca cggctgcctt 780 cccgctgaca ctgtccctga aggcaactgc tggtggagct tgtttgactt gcttccactg 840 gaagttcaga acaaagaaat tcgccatgct aaccaatttg gctatcagac caagcatggt 900 gtctctggca agtacctaca gcggaggctg caagttaatg gtctccgagc agtaactgac 960 ctaaacggac ctatcgtcgt acagtacttc tccgttaagg agagttggat ccgccatttg 1020 aaactggcgg gagaacccag ctactctggg tttgaggacc tcctcagaat aagggttgag 1080 cctaacacgt cgccattggc tgacaaggaa gaaaaaattt tccggtttgg cagtcacaag 1140 tggtacggcg ctggaaagag agcaagaaaa gcacgctctt gtgcgactgc tacagtcgct 1200 ggccgcgctt tgtccgttcg tgaaacccgg caggccaagg agcacgaggt tgccggcgcc 1260 aacaaggctg agcacctcaa acactactcc ccgcctgccg aagggaattg tggttggcac 1320 tgcatttccg ccatcgccaa ccggatggtg aattccaaat ttgaaaccac ccttcccgaa 1380 agagtgagac ctccagatga ctgggctact gacgaggatc ttgtgaatgc catccaaatc 1440 ctcagactcc ctgcggcctt agacaggaac ggtgcttgta ctagcgccaa gtacgtactt 1500 aagctggaag gtgagcattg gactgtcact gtgacccctg ggatgtcccc ttctttgctc 1560 cctcttgaat gtgttcaggg ctgttgtggg cacaagggcg gtcttggttc cccagatgca 1620 gtcgaggtct ccggatttga ccctgcctgc cttgaccggc tggctgaggt gatgcacctg 1680 cctagcagtg ctatcccagc cgctctggcc gaaatgtctg gcgattccga tcgttcggct 1740 tctccggtca ccaccgtgtg gactgtttcg cagttctttg cccgtcacag cggagggaat 1800 caccctgacc aagtgcgctt agggaaaatt atcagccttt gtcaggtgat tgaggactgc 1860 tgctgttccc agaacaaaac caaccgggtc accccggagg aggtcgcagc aaagattgac 1920 ctgtacctcc gtggtgcaac aaatcttgaa gaatgcttgg ccaggcttga gaaagcgcgc 1980 ccgccacgcg taatcgacac ctcctttgat tgggatgttg tgctccctgg ggttgaggcg 2040 gcaacccaga cgatcaagct gccccaggtc aaccagtgtc gtgctctggt ccctgttgtg 2100 actcaaaagt ccttggacaa caactcggtc cccctgaccg ccttttcact ggctaactac 2160 tactaccgtg cgcaaggtga cgaagttcgt caccgtgaaa gactaaccgc cgtgctctcc 2220 aagttggaaa aggttgttcg agaagaatat gggctcatgc caaccgagcc tggtccacgg 2280 cccacactgc cacgcgggct cgacgaactc aaagaccaga tggaggagga cttgctgaaa 2340 ctggctaacg cccagacgac ttcggacatg atggcctggg cagtcgagca ggttgaccta 2400 aaaacttggg tcaagaacta cccgcggtgg acaccaccac cccctccgcc aaaagttcag 2460 cctcgaaaaa cgaagcctgt caagagcttg ccggagagaa agcctgtccc cgccccgcgc 2520 aggaaggttg ggtccgattg tggcagcccg gtttcattag gcggcgatgt ccctaacagt 2580 tgggaagatt tggctgttag tagccccttt gatctcccga ccccacctga gccggcaaca 2640 ccttcaagtg agctggtgat tgtgtcctca ccgcaatgca tcttcaggcc ggcgacaccc 2700 ttgagtgagc cggctccaat tcccgcacct cgcggaactg tgtctcgacc ggtgacaccc 2760 ttgagtgagc cgatccctgt gcccgcaccg cggcgtaagt ttcagcaggt gaaaagattg 2820 agttcggcgg cggcaatccc accgtaccag gacgagcccc tggatttgtc tgcttcctca 2880 cagactgaat atgaggcctc tcccccagca ccgccgcaga gcgggggcgt tctgggagta 2940 gaggggcatg aagctgagga aaccctgagt gaaatctcgg acatgtcggg taacattaaa 3000 cctgcgtccg tgtcatcaag cagctccttg tccagcgtga gaatcacacg cccaaaatac 3060 tcagctcaag ccatcatcga ctcgggcggg ccctgcagtg ggcatctcca agaggtaaag 3120 gaaacatgcc ttagtgtcat gcgcgaggca tgtgatgcga ctaagcttga tgaccctgct 3180 acgcaggaat ggctttctcg catgtgggat cgggtggaca tgctgacttg gcgcaacacg 3240 tctgtttacc aggcgatttg caccttagat ggcaggttaa agttcctccc aaaaatgata 3300 ctcgagacac cgccgcccta tccgtgtgag tttgtgatga tgcctcacac gcctgcacct 3360 tccgtaggtg cggagagcga ccttaccatt ggctcagttg ctactgaaga tgttccacgc 3420 atcctcgaga aaatagaaaa tgtcggcgag atggccaacc agggaccctt ggccttctcc 3480 gaggataaac cggtagatga ccaacttgtc aacgaccccc ggatatcgtc gcggaggcct 3540 gacgagagca catcagctcc gtccgcaggc acaggtggcg ccggctcttt taccgatttg 3600 ccgccttcag atggcgcgga tgcggacggg ggggggccgt ttcggacggt aaaaagaaaa 3660 gctgaaaggc tctttgacca actgagccgt caggtttttg acctcgtctc ccatctccct 3720 gttttcttct cacgcctttt ctaccctggc ggtggttatt ctccgggtga ttggggtttt 3780 gcagctttta ctctattgtg cctcttttta tgttacagtt acccagcctt tggtattgct 3840 cccctcttgg gtgtgttttc tgggtcttct cggcgcgttc gaatgggggt ttttggctgc 3900 tggttggctt ttgctgttgg tctgttcaag cctgtgtccg acccagtcgg cgctgcttgt 3960 gagtttgact cgccagagtg tagaaacatc cttcattctt ttgagcttct caaaccttgg 4020 gaccctgttc gcagccttgt tgtgggcccc gtcggtctcg gtcttgccat tcttggcagg 4080 ttactgggcg gggcacgctg catctggcac tttttgctta ggcttggcat tgttgcagac 4140 tgtatcttgg ctggagctta cgtgctttct caaggtaggt gtaaaaagtg ctggggatct 4200 tgtataagaa ctgctcctaa tgaggtcgct tttaacgtgt ttcctttcac acgtgcgacc 4260 aggtcgtcac ttatcgacct gtgcgatcgg ttttgtgcgc caaaaggaat ggaccccatt 4320 tttctcgcca ctgggtggcg cgggtgctgg gccggccgaa gccccattga gcaaccctct 4380 gaaaaaccca tcgcgtttgc ccaattggat gaaaagaaga ttacggctag gactgtggtc 4440 gcccagcctt atgaccccaa ccaagccgta aagtgcttgc gggtattgca ggcgggtggg 4500 gcgatggtgg ctaaggcggt cccaaaagtg gtcaaggttt ccgctgttcc attccgagcc 4560 cccttctttc ccactggagt gaaagttgac cctgattgca gggtcgtggt tgaccctgac 4620 actttcactg cagctctccg gtctggctac tccaccacaa acctcgtcct tggtgtaggg 4680 gactttgccc agctgaatgg attaaaaatc aggcaaattt ccaagccttc agggggaggc 4740 ccacatctca tggctgccct gcatgttgcc tgctcgatgg ctctgcacat gcttgctggg 4800 atttatgtga ctgcggtggg ttcttgcggc accggcacca acgacccgtg gtgcgctaac 4860 ccgtttgccg tccctggcta cggacctggc tctctctgca cgtccagatt gtgcatttcc 4920 caacacggcc ttaccctgcc cttgacagca cttgtggcgg gattcggtat tcaagaaatt 4980 gccttggtcg ttttgatttt tgtttccatc ggaggcatgg ctcataggtt gagctgtaag 5040 gctgacatgc tgtgtgtttt gcttgcaatt gccagctatg tttgggtacc tcttacctgg 5100 ttgctttgtg tgtttccttg ctggttgcgc tgtttttctt tgcaccccct caccatccta 5160 tggttggtgt ttttcttgat ttctgtgaat atgccttcag gaatcttggc catggtgttg 5220 ttggtttctc tttggcttct tggtcgttat actaatgttg ctggccttgt caccccctac 5280 gacattcatc attacaccag tggcccccgc ggtgttgccg ccttggctat cgcaccagat 5340 gggacctact tggccgctgt ccgccgcgct gcgttgactg gccgcaccat gctgtttacc 5400 ccgtcccagc ttgggtctct acttgagggt gctttcagaa ctcgaaagcc ctcactgaac 5460 accgtcaatg tgatcgggtc ctccatgggc tctggcgggg tgtttaccat cgacgggaaa 5520 gtcaagtgcg taactgccgc acatgtcctt acgggcaatt cagctcgggt ttccggggtc 5580 ggcttcaatc aaatgcttga ctttgacgta aagggagatt tcgctatagc tgattgcccg 5640 aattggcaag gggctgcccc caagacccaa ttctgcacgg atggatggac tggccgtgcc 5700 tattggctaa catcctctgg cgtcgaaccc ggcgtcattg gaaaaggatt cgccttctgc 5760 ttcaccgcat gtggcgattc cgggtcccca gtgatcaccg aggccggtga gcttgtcggc 5820 gttcacacgg gatcgaataa acaagggggg ggcattgtta cgcgcccctc aggccagttt 5880 tgtaatgtgg cacccatcaa gctaagcgaa ttaagtgaat tctttgctgg gcctaaggtc 5940 ccgctcggtg atgtgaaggt cggcagccac ataattaaag acataagcga ggtgccttca 6000 gatctttgtg ccttgcttgc tgccaaacct gaactggaag gaggcctctc caccgtccaa 6060 cttctttgtg tgttttttct cctgtggaga atgatgggac atgcctggac gcccttggtt 6120 gctgtgagtt tctttatttt gaatgaggtt ctcccagccg tcctggtccg gagtgttttc 6180 tcctttggaa tgtttgtgct atcctggctc acgccatggt ctgcgcaagt tctgatgatc 6240 aggcttctga cagcagctct taacaggaac agatggtcac ttgccttttt cagcctcggt 6300 gcagtgaccg gttttgtcgc agatcttgcg gccactcagg ggcatccgtt gcaggcagtg 6360 atgaatttga gcacctatgc attcctgcct cggatgatgg ttgtgacctc accagtccca 6420 gtgatcacgt gtggtgtcgt gcacctactt gccatcattt tgtacttgtt taagtaccgt 6480 ggcccgcacc atatccttgt tggcgatgga gtgttctctg cggctttctt cttgagatac 6540 tttgccgagg gaaagttgag ggaaggggtg tcgcaatcct gcggaatgaa tcatgagtct 6600 ctgactggtg ccctcgctat gagactcaat gacgaggact tggatttcct tatgaaatgg 6660 actaatttta agtgctttgt ttctgcgtcc aacatgagga atgcagcggg tcaatttatc 6720 gaggctgcct atgctaaagc acttagagta gaactggccc agttggtgca ggttgacaaa 6780 gttcgaggta ctttggccaa acttgaagct tttgctgata ccgtggcacc tcaactctcg 6840 cccggtgaca ttgttgtcgc tctcggccac acgcctgttg gcagtatctt cgacctaaag 6900 gttggtagca ccaagcatac cctccaagcc attgagacca gagtccttgc tgggtccaaa 6960 atgaccgtgg cgcgcgtcgt cgacccgacc cccacgcccc cacccgcacc cgtgcccatc 7020 cccctcccac cgaaagttct ggagaatggc cccaacgctt ggggggatga ggaccgtttg 7080 aataagaaga agaggcgcag gatggaagcc ctcggcatct atgttatggg cgggaaaaag 7140 taccagaaat tttgggacaa gaattccggt gatgtgtttt atgaggaggt ccataataac 7200 acagatgagt gggagtgtct cagagttggc gaccctgccg actttgaccc tgagaaggga 7260 actctgtgtg gacatgtcac cattgaaaac aaggcttacc atgtttacac ctccccatct 7320 ggtaagaagt tcttggtccc cgtcaaccca gagaatggaa gagtccaatg ggaagctgca 7380 aagctttccg tggagcaggc cctaggtatg atgaatgtcg acggcgaact gactgccaaa 7440 gaactggaga aactgaaaag aataattgac aaactccagg gcctgactaa ggagcagtgt 7500 ttaaactgct ag 7512 <210> 6 <211> 256 <212> PRT <213> Porcine reproductive and respiratory syndrome virus <400> 6 Met Lys Trp Gly Pro Cys Lys Ala Phe Leu Thr Lys Leu Ala Asn Phe 1 5 10 15 Leu Trp Met Leu Ser Arg Ser Ser Trp Cys Pro Leu Leu Ile Ser Leu 20 25 30 Tyr Phe Trp Pro Phe Cys Leu Ala Ser Pro Ser Pro Val Gly Trp Trp 35 40 45 Ser Phe Ala Ser Asp Trp Phe Ala Pro Arg Tyr Ser Val Arg Ala Leu 50 55 60 Pro Phe Thr Leu Ser Asn Tyr Arg Arg Ser Tyr Glu Ala Phe Leu Ser 65 70 75 80 Gln Cys Gln Val Asp Ile Pro Thr Trp Gly Thr Lys His Pro Leu Gly 85 90 95 Met Leu Trp His His Lys Val Ser Thr Leu Ile Asp Glu Met Val Ser 100 105 110 Arg Arg Met Tyr Arg Ile Met Glu Lys Ala Gly Gln Ala Ala Trp Lys 115 120 125 Gln Val Val Ser Glu Ala Thr Leu Ser Arg Ile Ser Ser Leu Asp Val 130 135 140 Val Ala His Phe Gln His Leu Ala Ala Ile Glu Ala Glu Thr Cys Lys 145 150 155 160 Tyr Leu Ala Ser Arg Leu Pro Met Leu His Asn Leu Arg Met Thr Gly 165 170 175 Ser Asn Val Thr Ile Val Tyr Asn Ser Thr Leu Asn Gln Val Phe Ala 180 185 190 Ile Phe Pro Thr Pro Gly Ser Arg Pro Lys Leu His Asp Phe Gln Gln 195 200 205 Trp Leu Ile Ala Val His Ser Ser Ile Phe Ser Ser Val Ala Ala Ser 210 215 220 Cys Thr Leu Phe Val Val Leu Trp Leu Arg Val Pro Ile Leu Arg Thr 225 230 235 240 Val Phe Gly Phe Arg Trp Leu Gly Ala Ile Phe Leu Ser Asn Ser Gln 245 250 255 <210> 7 <211> 174 <212> PRT <213> Porcine reproductive and respiratory syndrome virus <400> 7 Met Gly Ser Ser Leu Asp Asp Phe Cys His Asp Ser Thr Ala Pro Gln 1 5 10 15 Lys Val Leu Leu Ala Phe Ser Ile Thr Tyr Thr Pro Val Met Ile Tyr 20 25 30 Ala Leu Lys Val Ser Arg Gly Arg Leu Leu Gly Leu Leu His Leu Leu 35 40 45 Ile Phe Leu Asn Cys Ala Phe Thr Phe Gly Tyr Met Thr Phe Ala His 50 55 60 Phe Gln Ser Thr Asn Lys Val Ala Leu Thr Met Gly Ala Val Val Ala 65 70 75 80 Leu Leu Trp Gly Val Tyr Ser Ala Ile Glu Thr Trp Lys Phe Ile Thr 85 90 95 Ser Arg Cys Arg Leu Cys Leu Leu Gly Arg Lys Tyr Ile Leu Ala Pro 100 105 110 Ala His His Val Glu Ser Ala Ala Gly Phe His Pro Ile Ala Ala Asn 115 120 125 Asp Asn His Ala Phe Val Val Arg Arg Pro Gly Ser Thr Thr Val Asn 130 135 140 Gly Thr Leu Val Pro Gly Leu Lys Ser Leu Val Leu Gly Gly Arg Lys 145 150 155 160 Ala Val Lys Gln Gly Val Val Asn Leu Val Lys Tyr Ala Lys 165 170 <210> 8 <211> 200 <212> PRT <213> Porcine reproductive and respiratory syndrome virus <400> 8 Met Leu Glu Lys Cys Leu Thr Ala Gly Cys Cys Ser Arg Leu Leu Ser 1 5 10 15 Leu Trp Cys Ile Val Pro Phe Cys Phe Ala Val Leu Ala Asn Ala Ser 20 25 30 Asn Asp Ser Ser Ser His Leu Gln Leu Ile Tyr Asn Leu Thr Leu Cys 35 40 45 Glu Leu Asn Gly Thr Asp Trp Leu Ala Asn Lys Phe Asp Trp Ala Val 50 55 60 Glu Ser Phe Val Ile Phe Pro Val Leu Thr His Ile Val Ser Tyr Gly 65 70 75 80 Ala Leu Thr Thr Ser His Phe Leu Asp Thr Val Ala Leu Val Thr Val 85 90 95 Ser Thr Ala Gly Phe Val His Gly Arg Tyr Val Leu Ser Ser Ile Tyr 100 105 110 Ala Val Cys Ala Leu Ala Ala Leu Thr Cys Phe Val Ile Arg Phe Ala 115 120 125 Lys Asn Cys Met Ser Trp Arg Tyr Ala Cys Thr Arg Tyr Thr Asn Phe 130 135 140 Leu Leu Asp Thr Lys Gly Arg Leu Tyr Arg Trp Arg Ser Pro Val Ile 145 150 155 160 Ile Glu Lys Arg Gly Lys Val Glu Val Glu Gly His Leu Ile Asp Leu 165 170 175 Lys Arg Val Val Leu Asp Gly Ser Val Ala Thr Pro Ile Thr Arg Val 180 185 190 Ser Ala Glu Gln Trp Gly Arg Pro 195 200 <210> 9 <211> 1457 <212> PRT <213> Porcine reproductive and respiratory syndrome virus <400> 9 Leu Ala Ala Ser Asp Leu Thr Arg Cys Gly Arg Gly Gly Leu Val Val 1 5 10 15 Thr Glu Thr Ala Val Lys Ile Val Lys Phe His Asn Arg Thr Phe Thr 20 25 30 Leu Gly Pro Val Asn Leu Lys Val Ala Ser Glu Val Glu Leu Lys Asp 35 40 45 Ala Val Glu His Asn Gln His Pro Val Ala Arg Pro Ile Asp Gly Gly 50 55 60 Val Val Leu Leu Arg Ser Ala Val Pro Ser Leu Ile Asp Val Leu Ile 65 70 75 80 Ser Gly Ala Asp Ala Ser Pro Lys Leu Leu Ala His His Gly Pro Gly 85 90 95 Asn Thr Gly Ile Asp Gly Thr Leu Trp Asp Phe Glu Ser Glu Ala Thr 100 105 110 Lys Glu Glu Val Ala Leu Ser Ala Gln Ile Ile Gln Ala Cys Asp Ile 115 120 125 Arg Arg Gly Asp Ala Pro Glu Ile Gly Leu Pro Tyr Lys Leu Tyr Pro 130 135 140 Val Arg Gly Asn Pro Glu Arg Val Lys Gly Val Leu Gln Asn Thr Arg 145 150 155 160 Phe Gly Asp Ile Pro Tyr Lys Thr Pro Ser Asp Thr Gly Ser Pro Val 165 170 175 His Ala Ala Ala Cys Leu Thr Pro Asn Ala Thr Pro Val Thr Asp Gly 180 185 190 Arg Ser Val Leu Ala Thr Thr Met Pro Pro Gly Phe Glu Leu Tyr Val 195 200 205 Pro Thr Ile Pro Ala Ser Val Leu Asp Tyr Leu Asp Ser Arg Pro Asp 210 215 220 Cys Pro Lys Gln Leu Thr Glu His Gly Cys Glu Asp Ala Ala Leu Lys 225 230 235 240 Asp Leu Ser Lys Tyr Asp Leu Ser Thr Gln Gly Phe Val Leu Pro Gly 245 250 255 Val Leu Arg Leu Val Arg Lys Tyr Leu Phe Ala His Val Gly Lys Cys 260 265 270 Pro Pro Val His Arg Pro Ser Thr Tyr Pro Ala Lys Asn Ser Met Ala 275 280 285 Gly Ile Asn Gly Asn Arg Phe Pro Thr Lys Asp Ile Gln Ser Val Pro 290 295 300 Glu Ile Asp Val Leu Cys Ala Gln Ala Val Arg Glu Asn Trp Gln Thr 305 310 315 320 Val Thr Pro Cys Thr Leu Lys Lys Gln Tyr Cys Gly Lys Lys Lys Thr 325 330 335 Arg Thr Ile Leu Gly Thr Asn Asn Phe Ile Ala Leu Ala His Arg Ala 340 345 350 Val Leu Ser Gly Val Thr Gln Gly Phe Met Lys Lys Ala Phe Asn Ser 355 360 365 Pro Ile Ala Leu Gly Lys Asn Lys Phe Lys Glu Leu Gln Thr Pro Val 370 375 380 Leu Gly Arg Cys Leu Glu Ala Asp Leu Ala Ser Cys Asp Arg Ser Thr 385 390 395 400 Pro Ala Ile Val Arg Trp Phe Ala Ala Asn Leu Leu Tyr Glu Leu Ala 405 410 415 Cys Ala Glu Glu His Leu Pro Ser Tyr Val Leu Asn Cys Cys His Asp 420 425 430 Leu Leu Val Thr Gln Ser Gly Ala Val Thr Lys Arg Gly Gly Leu Ser 435 440 445 Ser Gly Asp Pro Ile Thr Ser Val Ser Asn Thr Ile Tyr Ser Leu Val 450 455 460 Ile Tyr Ala Gln His Met Val Leu Ser Tyr Phe Lys Ser Gly His Pro 465 470 475 480 His Gly Leu Leu Phe Leu Gln Asp Gln Leu Lys Phe Glu Asp Met Leu 485 490 495 Lys Val Gln Pro Leu Ile Val Tyr Ser Asp Asp Leu Val Leu Tyr Ala 500 505 510 Glu Ser Pro Thr Met Pro Asn Tyr His Trp Trp Val Glu His Leu Asn 515 520 525 Leu Met Leu Gly Phe Gln Thr Asp Pro Lys Lys Thr Ala Ile Thr Asp 530 535 540 Ser Pro Ser Phe Leu Gly Cys Arg Ile Ile Asn Gly Arg Gln Leu Val 545 550 555 560 Pro Asn Arg Asp Arg Ile Leu Ala Ala Leu Ala Tyr His Met Lys Ala 565 570 575 Ser Asn Val Ser Glu Tyr Tyr Ala Ser Ala Ala Ala Ile Leu Met Asp 580 585 590 Ser Cys Ala Cys Leu Glu Tyr Asp Pro Glu Trp Phe Glu Glu Leu Val 595 600 605 Val Gly Ile Ala Gln Cys Ala Arg Lys Asp Gly Tyr Ser Phe Pro Gly 610 615 620 Thr Pro Phe Phe Met Ser Met Trp Glu Lys Leu Arg Ser Asn Tyr Glu 625 630 635 640 Gly Lys Lys Ser Arg Val Cys Gly Tyr Cys Gly Ala Pro Ala Pro Tyr 645 650 655 Ala Thr Ala Cys Gly Leu Asp Val Cys Ile Tyr His Thr His Phe His 660 665 670 Gln His Cys Pro Val Thr Ile Trp Cys Gly His Pro Ala Gly Ser Gly 675 680 685 Ser Cys Ser Glu Cys Lys Ser Pro Val Gly Lys Gly Thr Ser Pro Leu 690 695 700 Asp Glu Val Leu Glu Gln Val Pro Tyr Lys Pro Pro Arg Thr Val Ile 705 710 715 720 Met His Val Glu Gln Gly Leu Thr Pro Leu Asp Pro Gly Arg Tyr Gln 725 730 735 Thr Arg Arg Gly Leu Val Ser Val Arg Arg Gly Ile Arg Gly Asn Glu 740 745 750 Val Glu Leu Pro Asp Gly Asp Tyr Ala Ser Thr Ala Leu Leu Pro Thr 755 760 765 Cys Lys Glu Ile Asn Met Val Ala Val Ala Ser Asn Val Leu Arg Ser 770 775 780 Arg Phe Ile Ile Gly Pro Pro Gly Ala Gly Lys Thr Tyr Trp Leu Leu 785 790 795 800 Gln Gln Val Gln Asp Gly Asp Val Ile Tyr Thr Pro Thr His Gln Thr 805 810 815 Met Leu Asp Met Ile Arg Ala Leu Gly Thr Cys Arg Phe Asn Val Pro 820 825 830 Ala Gly Thr Thr Leu Gln Phe Pro Val Pro Ser Arg Thr Gly Pro Trp 835 840 845 Val Arg Ile Leu Ala Gly Gly Trp Cys Pro Gly Lys Asn Ser Phe Leu 850 855 860 Asp Glu Ala Ala Tyr Cys Asn His Leu Asp Val Leu Arg Leu Leu Ser 865 870 875 880 Lys Thr Thr Leu Thr Cys Leu Gly Asp Phe Lys Gln Leu His Pro Val 885 890 895 Gly Phe Asp Ser His Cys Tyr Val Phe Asp Ile Met Pro Gln Thr Gln 900 905 910 Leu Lys Thr Ile Trp Arg Phe Gly Gln Asn Ile Cys Asp Ala Ile Gln 915 920 925 Pro Asp Tyr Arg Asp Lys Leu Met Ser Met Val Asn Thr Thr Arg Val 930 935 940 Thr Tyr Val Glu Lys Pro Val Arg Tyr Gly Gln Val Leu Thr Pro Tyr 945 950 955 960 His Arg Asp Arg Glu Asp Asp Ala Ile Thr Ile Asp Ser Ser Gln Gly 965 970 975 Ala Thr Phe Asp Val Val Thr Leu His Leu Pro Thr Lys Asp Ser Leu 980 985 990 Asn Arg Gln Arg Ala Leu Val Ala Ile Thr Arg Ala Arg His Ala Ile 995 1000 1005 Phe Val Tyr Asp Pro His Arg Gln Leu Gln Gly Leu Phe Asp Leu Pro 1010 1015 1020 Ala Lys Gly Thr Pro Val Asn Leu Ala Val His Arg Asp Gly Gln Leu 1025 1030 1035 1040 Ile Val Leu Asp Arg Asn Asn Lys Glu Cys Thr Val Ala Gln Ala Leu 1045 1050 1055 Gly Asn Gly Asp Lys Phe Arg Ala Thr Asp Lys Arg Val Val Asp Ser 1060 1065 1070 Leu Arg Ala Ile Cys Ala Asp Leu Glu Gly Ser Ser Ser Pro Leu Pro 1075 1080 1085 Lys Val Ala His Asn Leu Gly Phe Tyr Phe Ser Pro Asp Leu Thr Gln 1090 1095 1100 Phe Ala Lys Leu Pro Val Glu Leu Ala Pro His Trp Pro Val Val Thr 1105 1110 1115 1120 Thr Gln Asn Asn Glu Lys Trp Pro Asp Arg Leu Val Ala Ser Leu Arg 1125 1130 1135 Pro Ile His Lys Tyr Ser Arg Ala Cys Ile Gly Ala Gly Tyr Met Val 1140 1145 1150 Gly Pro Ser Val Phe Leu Gly Thr Pro Gly Val Val Ser Tyr Tyr Leu 1155 1160 1165 Thr Lys Phe Val Lys Gly Glu Ala Gln Val Leu Pro Glu Thr Val Phe 1170 1175 1180 Ser Thr Gly Arg Ile Glu Val Asp Cys Arg Glu Tyr Leu Asp Asp Arg 1185 1190 1195 1200 Glu Arg Glu Val Ala Ala Ser Leu Pro His Ala Phe Ile Gly Asp Val 1205 1210 1215 Lys Gly Thr Thr Val Gly Gly Cys His His Val Thr Ser Arg Tyr Leu 1220 1225 1230 Pro Arg Val Leu Pro Lys Glu Ser Val Ala Val Val Gly Val Ser Ser 1235 1240 1245 Pro Gly Lys Ala Ala Lys Ala Leu Cys Thr Leu Thr Asp Val Tyr Leu 1250 1255 1260 Pro Asp Leu Glu Ala Tyr Leu His Pro Glu Thr Gln Ser Lys Cys Trp 1265 1270 1275 1280 Lys Met Met Leu Asp Phe Lys Glu Val Arg Leu Met Val Trp Lys Asp 1285 1290 1295 Lys Thr Ala Tyr Phe Gln Leu Glu Gly Arg Tyr Phe Thr Trp Tyr Gln 1300 1305 1310 Leu Ala Ser Tyr Ala Ser Tyr Ile Arg Val Pro Val Asn Ser Thr Val 1315 1320 1325 Tyr Leu Asp Pro Cys Met Gly Pro Ala Leu Cys Asn Arg Arg Val Val 1330 1335 1340 Gly Ser Thr His Trp Gly Ala Asp Leu Ala Val Thr Pro Tyr Asp Tyr 1345 1350 1355 1360 Gly Ala Lys Ile Ile Leu Ser Ser Ala Tyr His Gly Glu Met Pro Pro 1365 1370 1375 Gly Tyr Lys Ile Leu Ala Cys Ala Glu Phe Ser Leu Asp Asp Pro Val 1380 1385 1390 Lys Tyr Lys His Thr Trp Gly Phe Glu Ser Asp Thr Ala Tyr Leu Tyr 1395 1400 1405 Glu Phe Thr Gly Asn Gly Glu Asp Trp Glu Asp Tyr Asn Asp Ala Phe 1410 1415 1420 Arg Ala Arg Gln Glu Gly Lys Ile Tyr Lys Ala Thr Ala Thr Ser Leu 1425 1430 1435 1440 Lys Phe Tyr Phe Pro Pro Gly Pro Val Ile Glu Pro Thr Leu Gly Leu 1445 1450 1455 Asn <210> 10 <211> 2503 <212> PRT <213> Porcine reproductive and respiratory syndrome virus <400> 10 Met Ser Gly Ile Leu Asp Arg Cys Thr Cys Thr Pro Asn Ala Arg Val 1 5 10 15 Phe Met Ala Glu Gly Gln Val Tyr Cys Thr Arg Cys Leu Ser Ala Arg 20 25 30 Ser Leu Leu Pro Leu Asn Leu Gln Val Ser Glu Leu Gly Val Leu Gly 35 40 45 Leu Phe Tyr Arg Pro Glu Glu Pro Leu Arg Trp Thr Leu Pro Arg Ala 50 55 60 Phe Pro Thr Val Glu Cys Ser Pro Ala Gly Ala Cys Trp Leu Ser Ala 65 70 75 80 Ile Phe Pro Ile Ala Arg Met Thr Ser Gly Asn Leu Asn Phe Gln Gln 85 90 95 Arg Met Val Arg Val Ala Ala Glu Leu Tyr Arg Ala Gly Gln Leu Thr 100 105 110 Pro Ala Val Leu Lys Ala Leu Gln Val Tyr Glu Arg Gly Cys Arg Trp 115 120 125 Tyr Pro Ile Val Gly Pro Val Pro Gly Val Ala Val Phe Ala Asn Ser 130 135 140 Leu His Val Ser Asp Lys Pro Phe Pro Gly Ala Thr His Val Leu Thr 145 150 155 160 Asn Leu Pro Leu Pro Gln Arg Pro Lys Pro Glu Asp Phe Cys Pro Phe 165 170 175 Glu Cys Ala Met Ala Thr Val Tyr Asp Ile Gly His Asp Ala Val Met 180 185 190 Tyr Val Ala Glu Arg Lys Val Ser Trp Ala Pro Arg Gly Gly Asp Glu 195 200 205 Val Lys Phe Glu Ala Val Pro Gly Glu Leu Lys Leu Ile Ala Asn Arg 210 215 220 Leu Arg Thr Ser Phe Pro Pro His His Thr Val Asp Met Ser Lys Phe 225 230 235 240 Ala Phe Thr Ala Pro Gly Cys Gly Val Ser Met Arg Val Glu Arg Gln 245 250 255 His Gly Cys Leu Pro Ala Asp Thr Val Pro Glu Gly Asn Cys Trp Trp 260 265 270 Ser Leu Phe Asp Leu Leu Pro Leu Glu Val Gln Asn Lys Glu Ile Arg 275 280 285 His Ala Asn Gln Phe Gly Tyr Gln Thr Lys His Gly Val Ser Gly Lys 290 295 300 Tyr Leu Gln Arg Arg Leu Gln Val Asn Gly Leu Arg Ala Val Thr Asp 305 310 315 320 Leu Asn Gly Pro Ile Val Val Gln Tyr Phe Ser Val Lys Glu Ser Trp 325 330 335 Ile Arg His Leu Lys Leu Ala Gly Glu Pro Ser Tyr Ser Gly Phe Glu 340 345 350 Asp Leu Leu Arg Ile Arg Val Glu Pro Asn Thr Ser Pro Leu Ala Asp 355 360 365 Lys Glu Glu Lys Ile Phe Arg Phe Gly Ser His Lys Trp Tyr Gly Ala 370 375 380 Gly Lys Arg Ala Arg Lys Ala Arg Ser Cys Ala Thr Ala Thr Val Ala 385 390 395 400 Gly Arg Ala Leu Ser Val Arg Glu Thr Arg Gln Ala Lys Glu His Glu 405 410 415 Val Ala Gly Ala Asn Lys Ala Glu His Leu Lys His Tyr Ser Pro Pro 420 425 430 Ala Glu Gly Asn Cys Gly Trp His Cys Ile Ser Ala Ile Ala Asn Arg 435 440 445 Met Val Asn Ser Lys Phe Glu Thr Thr Leu Pro Glu Arg Val Arg Pro 450 455 460 Pro Asp Asp Trp Ala Thr Asp Glu Asp Leu Val Asn Ala Ile Gln Ile 465 470 475 480 Leu Arg Leu Pro Ala Ala Leu Asp Arg Asn Gly Ala Cys Thr Ser Ala 485 490 495 Lys Tyr Val Leu Lys Leu Glu Gly Glu His Trp Thr Val Thr Val Thr 500 505 510 Pro Gly Met Ser Pro Ser Leu Leu Pro Leu Glu Cys Val Gln Gly Cys 515 520 525 Cys Gly His Lys Gly Gly Leu Gly Ser Pro Asp Ala Val Glu Val Ser 530 535 540 Gly Phe Asp Pro Ala Cys Leu Asp Arg Leu Ala Glu Val Met His Leu 545 550 555 560 Pro Ser Ser Ala Ile Pro Ala Ala Leu Ala Glu Met Ser Gly Asp Ser 565 570 575 Asp Arg Ser Ala Ser Pro Val Thr Thr Val Trp Thr Val Ser Gln Phe 580 585 590 Phe Ala Arg His Ser Gly Gly Asn His Pro Asp Gln Val Arg Leu Gly 595 600 605 Lys Ile Ile Ser Leu Cys Gln Val Ile Glu Asp Cys Cys Cys Ser Gln 610 615 620 Asn Lys Thr Asn Arg Val Thr Pro Glu Glu Val Ala Ala Lys Ile Asp 625 630 635 640 Leu Tyr Leu Arg Gly Ala Thr Asn Leu Glu Glu Cys Leu Ala Arg Leu 645 650 655 Glu Lys Ala Arg Pro Pro Arg Val Ile Asp Thr Ser Phe Asp Trp Asp 660 665 670 Val Val Leu Pro Gly Val Glu Ala Ala Thr Gln Thr Ile Lys Leu Pro 675 680 685 Gln Val Asn Gln Cys Arg Ala Leu Val Pro Val Val Thr Gln Lys Ser 690 695 700 Leu Asp Asn Asn Ser Val Pro Leu Thr Ala Phe Ser Leu Ala Asn Tyr 705 710 715 720 Tyr Tyr Arg Ala Gln Gly Asp Glu Val Arg His Arg Glu Arg Leu Thr 725 730 735 Ala Val Leu Ser Lys Leu Glu Lys Val Val Arg Glu Glu Tyr Gly Leu 740 745 750 Met Pro Thr Glu Pro Gly Pro Arg Pro Thr Leu Pro Arg Gly Leu Asp 755 760 765 Glu Leu Lys Asp Gln Met Glu Glu Asp Leu Leu Lys Leu Ala Asn Ala 770 775 780 Gln Thr Thr Ser Asp Met Met Ala Trp Ala Val Glu Gln Val Asp Leu 785 790 795 800 Lys Thr Trp Val Lys Asn Tyr Pro Arg Trp Thr Pro Pro Pro Pro Pro 805 810 815 Pro Lys Val Gln Pro Arg Lys Thr Lys Pro Val Lys Ser Leu Pro Glu 820 825 830 Arg Lys Pro Val Pro Ala Pro Arg Arg Lys Val Gly Ser Asp Cys Gly 835 840 845 Ser Pro Val Ser Leu Gly Gly Asp Val Pro Asn Ser Trp Glu Asp Leu 850 855 860 Ala Val Ser Ser Pro Phe Asp Leu Pro Thr Pro Pro Glu Pro Ala Thr 865 870 875 880 Pro Ser Ser Glu Leu Val Ile Val Ser Ser Pro Gln Cys Ile Phe Arg 885 890 895 Pro Ala Thr Pro Leu Ser Glu Pro Ala Pro Ile Pro Ala Pro Arg Gly 900 905 910 Thr Val Ser Arg Pro Val Thr Pro Leu Ser Glu Pro Ile Pro Val Pro 915 920 925 Ala Pro Arg Arg Lys Phe Gln Gln Val Lys Arg Leu Ser Ser Ala Ala 930 935 940 Ala Ile Pro Pro Tyr Gln Asp Glu Pro Leu Asp Leu Ser Ala Ser Ser 945 950 955 960 Gln Thr Glu Tyr Glu Ala Ser Pro Pro Ala Pro Pro Gln Ser Gly Gly 965 970 975 Val Leu Gly Val Glu Gly His Glu Ala Glu Glu Thr Leu Ser Glu Ile 980 985 990 Ser Asp Met Ser Gly Asn Ile Lys Pro Ala Ser Val Ser Ser Ser Ser 995 1000 1005 Ser Leu Ser Ser Val Arg Ile Thr Arg Pro Lys Tyr Ser Ala Gln Ala 1010 1015 1020 Ile Ile Asp Ser Gly Gly Pro Cys Ser Gly His Leu Gln Glu Val Lys 1025 1030 1035 1040 Glu Thr Cys Leu Ser Val Met Arg Glu Ala Cys Asp Ala Thr Lys Leu 1045 1050 1055 Asp Asp Pro Ala Thr Gln Glu Trp Leu Ser Arg Met Trp Asp Arg Val 1060 1065 1070 Asp Met Leu Thr Trp Arg Asn Thr Ser Val Tyr Gln Ala Ile Cys Thr 1075 1080 1085 Leu Asp Gly Arg Leu Lys Phe Leu Pro Lys Met Ile Leu Glu Thr Pro 1090 1095 1100 Pro Pro Tyr Pro Cys Glu Phe Val Met Met Pro His Thr Pro Ala Pro 1105 1110 1115 1120 Ser Val Gly Ala Glu Ser Asp Leu Thr Ile Gly Ser Val Ala Thr Glu 1125 1130 1135 Asp Val Pro Arg Ile Leu Glu Lys Ile Glu Asn Val Gly Glu Met Ala 1140 1145 1150 Asn Gln Gly Pro Leu Ala Phe Ser Glu Asp Lys Pro Val Asp Asp Gln 1155 1160 1165 Leu Val Asn Asp Pro Arg Ile Ser Ser Arg Arg Pro Asp Glu Ser Thr 1170 1175 1180 Ser Ala Pro Ser Ala Gly Thr Gly Gly Ala Gly Ser Phe Thr Asp Leu 1185 1190 1195 1200 Pro Pro Ser Asp Gly Ala Asp Ala Asp Gly Gly Gly Pro Phe Arg Thr 1205 1210 1215 Val Lys Arg Lys Ala Glu Arg Leu Phe Asp Gln Leu Ser Arg Gln Val 1220 1225 1230 Phe Asp Leu Val Ser His Leu Pro Val Phe Phe Ser Arg Leu Phe Tyr 1235 1240 1245 Pro Gly Gly Gly Tyr Ser Pro Gly Asp Trp Gly Phe Ala Ala Phe Thr 1250 1255 1260 Leu Leu Cys Leu Phe Leu Cys Tyr Ser Tyr Pro Ala Phe Gly Ile Ala 1265 1270 1275 1280 Pro Leu Leu Gly Val Phe Ser Gly Ser Ser Arg Arg Val Arg Met Gly 1285 1290 1295 Val Phe Gly Cys Trp Leu Ala Phe Ala Val Gly Leu Phe Lys Pro Val 1300 1305 1310 Ser Asp Pro Val Gly Ala Ala Cys Glu Phe Asp Ser Pro Glu Cys Arg 1315 1320 1325 Asn Ile Leu His Ser Phe Glu Leu Leu Lys Pro Trp Asp Pro Val Arg 1330 1335 1340 Ser Leu Val Val Gly Pro Val Gly Leu Gly Leu Ala Ile Leu Gly Arg 1345 1350 1355 1360 Leu Leu Gly Gly Ala Arg Cys Ile Trp His Phe Leu Leu Arg Leu Gly 1365 1370 1375 Ile Val Ala Asp Cys Ile Leu Ala Gly Ala Tyr Val Leu Ser Gln Gly 1380 1385 1390 Arg Cys Lys Lys Cys Trp Gly Ser Cys Ile Arg Thr Ala Pro Asn Glu 1395 1400 1405 Val Ala Phe Asn Val Phe Pro Phe Thr Arg Ala Thr Arg Ser Ser Leu 1410 1415 1420 Ile Asp Leu Cys Asp Arg Phe Cys Ala Pro Lys Gly Met Asp Pro Ile 1425 1430 1435 1440 Phe Leu Ala Thr Gly Trp Arg Gly Cys Trp Ala Gly Arg Ser Pro Ile 1445 1450 1455 Glu Gln Pro Ser Glu Lys Pro Ile Ala Phe Ala Gln Leu Asp Glu Lys 1460 1465 1470 Lys Ile Thr Ala Arg Thr Val Val Ala Gln Pro Tyr Asp Pro Asn Gln 1475 1480 1485 Ala Val Lys Cys Leu Arg Val Leu Gln Ala Gly Gly Ala Met Val Ala 1490 1495 1500 Lys Ala Val Pro Lys Val Val Lys Val Ser Ala Val Pro Phe Arg Ala 1505 1510 1515 1520 Pro Phe Phe Pro Thr Gly Val Lys Val Asp Pro Asp Cys Arg Val Val 1525 1530 1535 Val Asp Pro Asp Thr Phe Thr Ala Ala Leu Arg Ser Gly Tyr Ser Thr 1540 1545 1550 Thr Asn Leu Val Leu Gly Val Gly Asp Phe Ala Gln Leu Asn Gly Leu 1555 1560 1565 Lys Ile Arg Gln Ile Ser Lys Pro Ser Gly Gly Gly Pro His Leu Met 1570 1575 1580 Ala Ala Leu His Val Ala Cys Ser Met Ala Leu His Met Leu Ala Gly 1585 1590 1595 1600 Ile Tyr Val Thr Ala Val Gly Ser Cys Gly Thr Gly Thr Asn Asp Pro 1605 1610 1615 Trp Cys Ala Asn Pro Phe Ala Val Pro Gly Tyr Gly Pro Gly Ser Leu 1620 1625 1630 Cys Thr Ser Arg Leu Cys Ile Ser Gln His Gly Leu Thr Leu Pro Leu 1635 1640 1645 Thr Ala Leu Val Ala Gly Phe Gly Ile Gln Glu Ile Ala Leu Val Val 1650 1655 1660 Leu Ile Phe Val Ser Ile Gly Gly Met Ala His Arg Leu Ser Cys Lys 1665 1670 1675 1680 Ala Asp Met Leu Cys Val Leu Leu Ala Ile Ala Ser Tyr Val Trp Val 1685 1690 1695 Pro Leu Thr Trp Leu Leu Cys Val Phe Pro Cys Trp Leu Arg Cys Phe 1700 1705 1710 Ser Leu His Pro Leu Thr Ile Leu Trp Leu Val Phe Phe Leu Ile Ser 1715 1720 1725 Val Asn Met Pro Ser Gly Ile Leu Ala Met Val Leu Leu Val Ser Leu 1730 1735 1740 Trp Leu Leu Gly Arg Tyr Thr Asn Val Ala Gly Leu Val Thr Pro Tyr 1745 1750 1755 1760 Asp Ile His His Tyr Thr Ser Gly Pro Arg Gly Val Ala Ala Leu Ala 1765 1770 1775 Ile Ala Pro Asp Gly Thr Tyr Leu Ala Ala Val Arg Arg Ala Ala Leu 1780 1785 1790 Thr Gly Arg Thr Met Leu Phe Thr Pro Ser Gln Leu Gly Ser Leu Leu 1795 1800 1805 Glu Gly Ala Phe Arg Thr Arg Lys Pro Ser Leu Asn Thr Val Asn Val 1810 1815 1820 Ile Gly Ser Ser Met Gly Ser Gly Gly Val Phe Thr Ile Asp Gly Lys 1825 1830 1835 1840 Val Lys Cys Val Thr Ala Ala His Val Leu Thr Gly Asn Ser Ala Arg 1845 1850 1855 Val Ser Gly Val Gly Phe Asn Gln Met Leu Asp Phe Asp Val Lys Gly 1860 1865 1870 Asp Phe Ala Ile Ala Asp Cys Pro Asn Trp Gln Gly Ala Ala Pro Lys 1875 1880 1885 Thr Gln Phe Cys Thr Asp Gly Trp Thr Gly Arg Ala Tyr Trp Leu Thr 1890 1895 1900 Ser Ser Gly Val Glu Pro Gly Val Ile Gly Lys Gly Phe Ala Phe Cys 1905 1910 1915 1920 Phe Thr Ala Cys Gly Asp Ser Gly Ser Pro Val Ile Thr Glu Ala Gly 1925 1930 1935 Glu Leu Val Gly Val His Thr Gly Ser Asn Lys Gln Gly Gly Gly Ile 1940 1945 1950 Val Thr Arg Pro Ser Gly Gln Phe Cys Asn Val Ala Pro Ile Lys Leu 1955 1960 1965 Ser Glu Leu Ser Glu Phe Phe Ala Gly Pro Lys Val Pro Leu Gly Asp 1970 1975 1980 Val Lys Val Gly Ser His Ile Ile Lys Asp Ile Ser Glu Val Pro Ser 1985 1990 1995 2000 Asp Leu Cys Ala Leu Leu Ala Ala Lys Pro Glu Leu Glu Gly Gly Leu 2005 2010 2015 Ser Thr Val Gln Leu Leu Cys Val Phe Phe Leu Leu Trp Arg Met Met 2020 2025 2030 Gly His Ala Trp Thr Pro Leu Val Ala Val Ser Phe Phe Ile Leu Asn 2035 2040 2045 Glu Val Leu Pro Ala Val Leu Val Arg Ser Val Phe Ser Phe Gly Met 2050 2055 2060 Phe Val Leu Ser Trp Leu Thr Pro Trp Ser Ala Gln Val Leu Met Ile 2065 2070 2075 2080 Arg Leu Leu Thr Ala Ala Leu Asn Arg Asn Arg Trp Ser Leu Ala Phe 2085 2090 2095 Phe Ser Leu Gly Ala Val Thr Gly Phe Val Ala Asp Leu Ala Ala Thr 2100 2105 2110 Gln Gly His Pro Leu Gln Ala Val Met Asn Leu Ser Thr Tyr Ala Phe 2115 2120 2125 Leu Pro Arg Met Met Val Val Thr Ser Pro Val Pro Val Ile Thr Cys 2130 2135 2140 Gly Val Val His Leu Leu Ala Ile Ile Leu Tyr Leu Phe Lys Tyr Arg 2145 2150 2155 2160 Gly Pro His His Ile Leu Val Gly Asp Gly Val Phe Ser Ala Ala Phe 2165 2170 2175 Phe Leu Arg Tyr Phe Ala Glu Gly Lys Leu Arg Glu Gly Val Ser Gln 2180 2185 2190 Ser Cys Gly Met Asn His Glu Ser Leu Thr Gly Ala Leu Ala Met Arg 2195 2200 2205 Leu Asn Asp Glu Asp Leu Asp Phe Leu Met Lys Trp Thr Asn Phe Lys 2210 2215 2220 Cys Phe Val Ser Ala Ser Asn Met Arg Asn Ala Ala Gly Gln Phe Ile 2225 2230 2235 2240 Glu Ala Ala Tyr Ala Lys Ala Leu Arg Val Glu Leu Ala Gln Leu Val 2245 2250 2255 Gln Val Asp Lys Val Arg Gly Thr Leu Ala Lys Leu Glu Ala Phe Ala 2260 2265 2270 Asp Thr Val Ala Pro Gln Leu Ser Pro Gly Asp Ile Val Val Ala Leu 2275 2280 2285 Gly His Thr Pro Val Gly Ser Ile Phe Asp Leu Lys Val Gly Ser Thr 2290 2295 2300 Lys His Thr Leu Gln Ala Ile Glu Thr Arg Val Leu Ala Gly Ser Lys 2305 2310 2315 2320 Met Thr Val Ala Arg Val Val Asp Pro Thr Pro Thr Pro Pro Pro Ala 2325 2330 2335 Pro Val Pro Ile Pro Leu Pro Pro Lys Val Leu Glu Asn Gly Pro Asn 2340 2345 2350 Ala Trp Gly Asp Glu Asp Arg Leu Asn Lys Lys Lys Arg Arg Arg Met 2355 2360 2365 Glu Ala Leu Gly Ile Tyr Val Met Gly Gly Lys Lys Tyr Gln Lys Phe 2370 2375 2380 Trp Asp Lys Asn Ser Gly Asp Val Phe Tyr Glu Glu Val His Asn Asn 2385 2390 2395 2400 Thr Asp Glu Trp Glu Cys Leu Arg Val Gly Asp Pro Ala Asp Phe Asp 2405 2410 2415 Pro Glu Lys Gly Thr Leu Cys Gly His Val Thr Ile Glu Asn Lys Ala 2420 2425 2430 Tyr His Val Tyr Thr Ser Pro Ser Gly Lys Lys Phe Leu Val Pro Val 2435 2440 2445 Asn Pro Glu Asn Gly Arg Val Gln Trp Glu Ala Ala Lys Leu Ser Val 2450 2455 2460 Glu Gln Ala Leu Gly Met Met Asn Val Asp Gly Glu Leu Thr Ala Lys 2465 2470 2475 2480 Glu Leu Glu Lys Leu Lys Arg Ile Ile Asp Lys Leu Gln Gly Leu Thr 2485 2490 2495 Lys Glu Gln Cys Leu Asn Cys 2500

Claims

서열번호 6의 아미노산 서열의 10번째 아미노산이 루신(leucine)에서 페닐알라닌(phenylalanine)으로 치환된 GP2 단백질, 서열번호 7의 아미노산 서열의 16번째 아미노산이 글루타민(glutamin)에서 글루탐산(glutamic acid)으로 치환된 M 단백질 및 서열번호 10의 아미노산 서열의 331번째 아미노산이 세린(serine)에서 페닐알라닌(phenylalanine)으로 치환된 nsp1β 단백질을 포함하는 약독화된 돼지생식기호흡기증후군 바이러스(PRRSV) 변이주.
서열번호 6의 아미노산 서열의 10번째 아미노산이 루신(leucine)에서 페닐알라닌(phenylalanine)으로 치환된 GP2 단백질 코딩 유전자, 서열번호 7의 아미노산 서열의 16번째 아미노산이 글루타민(glutamin)에서 글루탐산(glutamic acid)으로 치환된 M 단백질 코딩 유전자 및 서열번호 10의 아미노산 서열의 331번째 아미노산이 세린(serine)에서 페닐알라닌(phenylalanine)으로 치환된 nsp1β 단백질 코딩 유전자를 포함하는 재조합 벡터.
제1항에 따른 약독화된 돼지생식기호흡기증후군 바이러스(PRRSV) 변이주를 유효성분으로 포함하는 돼지 생식기 호흡기 증후군의 예방 또는 치료용 백신 조성물.
제3항의 백신 조성물을 돼지에 투여하여 돼지 생식기 호흡기 증후군을 예방 또는 치료하는 방법.