KR20150092109A - 주사용 암 조성물 - Google Patents

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KR20150092109A
KR20150092109A KR1020157012889A KR20157012889A KR20150092109A KR 20150092109 A KR20150092109 A KR 20150092109A KR 1020157012889 A KR1020157012889 A KR 1020157012889A KR 20157012889 A KR20157012889 A KR 20157012889A KR 20150092109 A KR20150092109 A KR 20150092109A
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glu
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앤드류 엑스. 첸
얄리 차이
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젠스페라, 아이엔씨.
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Abstract

환자에서 암 세포, 예를 들면, 전립선, 간 또는 유방암 세포를 포함하는 세포 증식성 질환과 관련된, 선택된 프로테아제에 의해 효율적 및 특이적으로 절단되는 펩티드에 결합된 치료 약물을 포함하는 주사용 에멀젼을 통해 환자에게 전달될 수 있는 치료적 전구약물 조성물이 본 명세서에서 제공된다. 또한 치료적 전구약물 조성물에 의해 암을 포함하는 세포 증식성 질환을 치료하는 방법이 제공된다.

Description

주사용 암 조성물 {INJECTABLE CANCER COMPOSITIONS}
우선권
본 출원은 본 명세서에서 그 전체 내용이 참조로 인용되는, 미국 가출원 제61/714,662호의 우선권을 주장한다.
서열 목록
본 출원은 ASCII 포맷으로 전자 제출되고, 본 명세서에서 그 전체 내용이 참조로 인용되는 서열 목록을 포함한다. 2013년 10월 14에 생성된 상기 ASCII 사본은, GENS0004PCT_SL.txt라 명명되고, 크기가 113,192 바이트이다.
발명의 분야
본 발명은 일반적으로 환자에서 특정 종류의 종양-관련 세포 또는 암세포, 예를 들면, 섬유아세포 활성 단백질 (FAP), 전립선 특이적 막 항원 (PSMA), 전립선 특이적 항원 (PSA) 및 인간 선 칼리크레인(human glandular kallikrein 2: hK2)을 위해 선택된 단백질 (즉, 프로테아제), 또는 마커를 생산하는 세포에 대한 치료 약물의 표적화된 활성화 및 전달에 관한 것이다. 본 발명은 또한 선택된 단백질, 예를 들면, FAP, PSMA, PSA 및 hK2에 대한 특이적 절단 부위를 포함하는 아미노산 서열에 결합된 치료제를 포함하는 전구약물을 포함하는 주사가능한 에멀젼 조성물에 관한 것이다. 본 발명은 또한 선택된 단백질에 대한 특이적 절단 부위를 포함하는 아미노산 서열에 결합된 치료제를 포함하는 전구약물을 포함하는 주사가능한 에멀젼 조성물을 이용하여 개체를 이미징하기 위한 방법 및 조성물에 관한 것이다.
발명의 배경
펩티드 전구약물은 환자에서 세포 증식성 질환과 관련된 세포, 종양-관련 세포 (예를 들면, 종양-관련 내피 및 기질 세포), 및 암 세포에 직접적으로 치료 약물을 전달하도록 설계되었다. 이 신규 펩티드 전구약물은 세포 증식성 질환과 관련된 세포, 암 세포 또는 종양과 연관된 세포에 의해 발현되는 특정 단백질에 의해 절단되도록 특이적으로 설계된 절단 부위를 포함한다. 예를 들면, 미국 특허 번호 제7,906,477호, 제7,053,042호 및 제8,450,280호는 인간 선 칼리크레인 2 (hK2)에 의해 특이적으로 절단되는 펩티드 전구약물을 기재하고; 미국 특허 번호 제7,767,648호 및 제7,468,354호는 전립선 특이적 막 항원 (PSMA)에 의해 특이적으로 절단되는 펩티드 전구약물을 기재하고; 미국 특허 번호 제6,265,540호; 제6,504,014호; 제6,410,514호; 제6,545,131호; 및 제7,635,682호는 전립선 특이적 항원 (PSA) 에 의해 특이적으로 절단되는 펩티드 전구약물을 기재하고; 및 미국 특허 출원 번호 제12/087,398호 및 제13/471,316호는 섬유아세포 활성 단백질 (FAP)에 의해 특이적으로 절단되는 펩티드 전구약물 조성물을 기재한다.
본 명세서에 기재된, 펩티드 전구약물에 이용될 수 있는 치료 약물은 일차 아민을 포함할 수 있는 특정한 치료 약물을 포함한다 (예를 들면, 미국 특허 출원 번호 제13/471,316호를 참조한다). 예를 들면, 전립선 및 유방암에 대한 펩티드 특이적 전구약물에서 치료적 활성 성분으로서, 탭시가르긴 및 탭시가르기신과 같은 세스퀴테르펜-락톤, 및 그들의 유도체 및 유사체의 용도가 다수의 등록 특허 및 특허 출원에서 기재되었다. 예를 들면, 미국 특허 번호 제7,906,477호, 제7,767,648호, 및 제6,545,131호를 참조한다.
본 명세서에 기재된 전구약물은 또한 세포 증식성 질환 및 암의 이미징, 진단 및 표적화 치료의 결합 접근법(combined approach)에서 이용될 수 있다. 미국 특허 출원 번호 제13/257,131호는 예를 들면, PSA-, PSMA- 및 hK2-특이적 펩티드 전구약물을 이용하여 개체를 이미징하기 위한 방법 및 조성물을 기술한다.
현재 개시된 치료 약물 화합물 및 그의 전구약물 (예를 들면, 펩티드 전구약물), 및 그들의 변형 (예를 들면,검출가능한 표지 및 이미징 화합물을 갖는 전구약물)은 때때로 "활성 화합물"로 본 명세서에서 총괄하여 지칭된다.
본 명세서에 기재된 활성 화합물은 물에서 제한된 용해도를 갖는다. 그들의 제한된 용해도로 인해, 본 발명의 활성 화합물의 수용액은 활성 화합물을 용해시키기 위한 가용화제를 필요로 한다. 약물 제제에서 통상적으로 이용되는 약물 가용화제는 통상적으로 에탄올과 같은, 물-가용성/혼화성(miscible) 유기 용매, 폴리소르베이트 80 또는 크레모포어와 같은 계면활성제, 또는 사이클로덱스트린 등을 포함한다. 그러나, 거의 모든 이 가용화제들이 주사 부위에서의 통증 및 염증(irritation)을 포함하는 특정한 독성, 과민반응(hypersensitivity) 또는 아나필락시 반응과 관련되기 때문에, 이 제제들은 본 명세서에 기재된 활성 화합물의 주사-기반 전달에 바람직하지 않다. 따라서, 임의의 수용성 또는 유독성의 가용화제의 사용 없이, 원하는 농도로 본 발명의 활성 화합물을 가용화시키는 주사용 에멀젼 조성물이 요구된다.
본 발명의 활성 화합물은 또한 물에서 불안정하다. 수성 환경에서, 60℃에서 저장될 경우 본 발명의 활성 화합물은 7일 안에 약 12% 이상 분해될 수 있다. 약물 제품으로서 유용한 제제를 위해, 제제에서 원료 약물(drug substance)의 분해는 실온 (25-30℃) 또는 냉장 온도 (2-8℃)와 같은 정규 저장 온도에서 1-2년 안에 약 10% 미만이어야 한다.
따라서 본 발명의 활성 화합물이 장기간 동안 저장되고 주사용 제형으로 환자에게 제공될 수 있는 본 발명의 활성 화합물의 수중유 에멀젼을 제조하는 것이 바람직하다.
본 발명의 잇점은 사용의 용이성을 포함한다. 본 발명의 주사용 에멀젼 조성물은 동결건조된 제품으로 저장 및 수송될 수 있고, 물을 이용하여 환자 투여 부위에서 재-현탁될 수 있다. 또한, 본 명세서에 기재된 주사가능한 에멀젼 조성물은 주입(infusion)과는 대조적으로, 본 발명의 활성 화합물이 주사에 적합한 농도로 투여되게 한다. 또한, 본 명세서에 기재된 주사용 에멀젼 조성물은 환자 또는 약물 투여자 측에서 성분의 정확한 혼합 또는 조제를 필요로 하지 않고, 투여를 위해 오직 물 만이 첨가되어야 하는 단일 즉시 사용가능한(ready-to-use) 바이얼로 저장 및 수송될 수 있다. 마지막으로, 본 발명의 활성 화합물의 동결건조된 제제는 화학적으로 안정하다.
본 발명의 기타 잇점은 본 개시된 사항에 근거하여 당해 기술분야의 통상의 기술자에게 이해될 것이다.
발명의 요약
본 발명은 환자에서 세포 증식성 질환 및/또는 암 세포, 예를 들면, 전립선, 간 또는 유방 암 세포, 또는 종양-관련 세포와 관련된 선택된 프로테아제에 의해 효율적 및 특이적으로 절단된 펩티드에 결합된 치료 약물을 포함하는, 주사용 에멀젼을 통해 환자에 전달될 수 있는 치료적 전구약물 조성물을 제공한다. 결합은 실질적으로 치료 약물의 비-특이적 세포독성을 저해하고, 펩티드의 절단은 약물을 방출하여, 그것을 활성화시키거나 또는 그것의 비-특이적 세포독성을 회복시킨다.
본 발명은 또한 치료적 전구약물 (즉, 활성 화합물)을 (a) 유기 용매 또는 계면활성제와 같은 임의의 수용성 및 독성적 가용화제가 없고, (b) 허용가능한 유통기한을 제공하도록 충분히 안정하고, (c) 작은 유적(oil droplet)으로 이루어지고 0.2 미크론 필터를 통해 여과가능하고, (d) 투명하거나 또는 반투명하고, 및 (e) 동결건조가능한, 안전하고 상업적으로 이용가능한 주사용 에멀젼으로 제공한다.
본 발명은 또한 세포 증식성 질환을 갖거나 또는 가질 위험이 있는 개체에서 예를 들면, FAP, PSMA, PSA 또는 hK2의 생산에 관여하는 것을 포함하는, 세포 증식성 질환을 치료하는 방법을 제공한다. 상기 방법은 본 발명의 활성 화합물의 치료적 유효량을 개체에게 투여하는 단계를 포함한다. 이 구체예에서, 활성 화합물은 주사를 통해 투여될 수 있다.
일 양태에서 본 발명은 선택된 프로테아제, 예를 들면, FAP, PSMA, PSA 또는 hK2, 또는 선택된 프로테아제의 단백질분해 활성을 갖는 효소에 대해 특이적인 절단 부위를 포함하는 아미노산 서열을 포함하는 펩티드를 특징으로 한다. 본 발명의 펩티드는 바람직하게는 20개 이하의 아미노산으로 이루어진 길이이고, 보다 바람직하게는 10개 이하의 아미노산으로 이루어진 길이이고, 보다 더 바람직하게는 약 6개의 아미노산으로 이루어진 길이, 약 5개의 아미노산으로 이루어진 길이 또는 약 4개의 아미노산으로 이루어진 길이이다. 본 발명의 아미노산 서열은 직쇄형이거나, 및/또는 측쇄 결합을 가질 수 있다.
일 구체예에서, 펩티드는 펩티드에 대한 엔도펩티다제 활성을 억제하는, 펩티드의 N-말단에 부착된 캡핑기(capping group)를 더 포함한다. 일부 구체예에서, 캡핑기는 아세틸, 모르폴리노카르보닐, 벤질옥시카르보닐, 글루타릴 및 숙시닐 치환기로 이루어진 군으로부터 선택된다. 다른 구체예에서, 캡핑기는 하나 이상의 아세틸, 모르폴리노카르보닐, 벤질옥시카르보닐, 글루타릴 또는 숙시닐 치환기를 포함한다.
일 양태에 있어서, 전구약물, 즉 치료적 활성 약물을 포함하는 전구약물, 및 선택된 프로테아제, 예를 들면, FAP, PSMA, PSA, 및 hK2의 단백질분해 활성을 갖는 효소에 대해 특이적인 절단 부위를 갖는 아미노산 서열을 포함하는 펩티드를 포함하는 주사용 에멀젼의 조성물로서, 상기 펩티드는 20개의 이하의 아미노산으로 이루어진 길이이고, 상기 펩티드는 치료적 활성 약물의 치료적 활성을 억제하기 위해 상기 약물에 결합되고, 상기 치료적 활성 약물은 선택된 프로테아제의 단백질분해 활성을 갖는 효소에 의한 단백질분해에 의해 상기 펩티드로부터 절단되는 것인, 주사용 에멀젼의 조성물이 본 명세서에서 제공된다.
일 구체예에서, 치료적 활성 약물은 일차 아민을 갖는다. 일 구체예에서, 펩티드는 치료 약물에 직접적으로 결합된다. 다른 구체예에서, 펩티드는 약물의 일차 아민기에 직접적으로 결합된다.
다른 구체예에서, 펩티드는 링커를 통해 치료 약물에 결합된다. 연관된 구체예에서, 링커는 하나 이상의 아미노산 서열, 일차 아민 또는 카르복실-함유 알킬, 알케닐 또는 아레닐 기를 포함한다.
일 구체예에서, 치료적 활성 약물은 세스퀴테르펜 락톤이다. 이 구체예의 변형에서, 치료적 활성 약물은 탭시가르긴 또는 탭시가르긴 유도체이다. 이 구체예의 추가 변형에서, 탭시가르긴 또는 탭시가르긴 유도체는 일차 아민을 포함한다. 이 구체예에서, 바람직한유도체는 8-0-(12-아미노도데카노일)-8-0-데부타노일 탭시가르긴 (12ADT)이다. 또한, 이 구체예에서, 다른 바람직한 유도체는 8-0-(12-[L-류시노일아미노]도데카노일)-8-0-데부타노일탭시가르긴 (L12ADT)이다.
일 구체예에서, 치료적 활성 약물은 근소포체 및 소포체 Ca2 +-ATPase (SERCA) 펌프를 억제한다.
일 구체예에서, 치료적 활성 약물은 FAP-, PSMA-, PSA-, 또는 hK2-생산 조직에 대해 최대 20 μM의 LC50을 갖는다. 연관된 구체예에서, 치료적 활성 약물은 FAP-, PSMA-, PSA- 또는 hK2- 생산 조직에 대해 2.0 μM 이하의 LC50을 갖는다.
본 발명의 일 양태에 있어서, 치료적 활성 약물과 선택된 프로테아제, 예를 들면, FAP, PSMA, PSA 또는 hK2의 단백질분해 활성을 갖는 효소에 대해 특이적인 절단 부위를 갖는 아미노산 서열을 포함하는 펩티드를 결합하는 단계를 포함하는 전구약물을 생산하는 방법으로서, 상기 펩티드는 20개 이하의 아미노산으로 이루어진 길이이고, 상기 펩티드는 치료적 활성 약물의 치료적 활성을 억제하기 위해 상기 약물에 연결되고, 상기 치료적 활성 약물은 선택된 프로테아제의 단백질분해 활성을 갖는 효소에 의한 단백질분해에 의해 상기 펩티드로부터 절단되는 것인, 전구약물을 생산하는 방법이 본 명세서에서 제공된다.
일 양태에 있어서, 치료적 유효량으로 본 명세서에 기재된 조성물을 세포 증식성 질환을 갖는 개체에게 투여하는 단계를 포함하는, 세포 증식성 질환을 치료하는 방법이 본 명세서에서 제공된다.
일 구체예에서, 상기 질환은 양성이다. 다른 구체예에서, 상기 질환은 악성이다. 이 구체예에서, 악성 질환은 상피암일 수 있다. 또한, 이 구체예에서, 악성 질환은 추가로 본 발명의 활성 화합물을 선택적으로 절단하는 프로테아제(예를 들면, PSA, hK2, FAP 또는 PSMA)를 발현하는 임의의 상피암, 또는 그것의 맥관구조에서 본 발명의 활성 화합물을 선택적으로 절단하는 프로테아제(예를 들면, PSA, hK2, FAP 또는 PSMA)를 발현하는 임의의 상피암일 수 있다.
다른 구체예에서, 악성 질환은 육종이다. 예를 들면, 이 구체예에서, 악성 종양은 암성 뼈(cancerous bone), 연골, 지방, 근육, 혈관, 또는 조혈 조직일 수 있다. 이 구체예에서, 악성 질환은 또한 본 발명의 활성 화합물을 선택적으로 절단하는 프로테아제(예를 들면, PSA, hK2, FAP 또는 PSMA)를 발현하는 육종일 수 있다.
또 다른 구체예에서, 질환은 염증성 질환(예를 들면, 류마티스 관절염)일 수 있다.
본 발명의 이 구체예의 일 양태에서, 친지성 이미징 표지와 결합된 본 발명의 펩티드를 선택된 프로테아제의 생산과 연관된 세포 증식성 질환을 갖거나 또는 가질 것으로 의심되는 개체에게 투여하는 단계; b) 선택된 프로테아제에 의한 펩티드의 절단을 허용하도록 충분한 통과 시간을 허용하는 단계; c) 친지성 이미징 표지가 조직에 축적되는 것을 허용하는 단계; d) 이미징 표지의 신뢰가능한 이미징을 제공하기 위해 개체로부터 절단되지 않은 펩티드의 클리어런스를 허용하는 단계; 및 e) 진단 목적을 위해 개체를 이미징하는 단계를 포함하는, 선택된 프로테아제-생산 조직, 예를 들면 FAP-, PSMA-, PSA-, 및 hK2-생산 조직을 이미징하는 방법이 본 명세서에서 제공된다.
본 발명의 추가 일 양태에서, 상기 방법은 선택된 프로테아제를 생산하는 연조직 및/또는 골 전이를 이미징하는 방법이다.
본 발명의 다른 추가 양태에서, 본 발명의 활성 화합물은 세포 증식성 질환 또는 암을 이미지화 및 진단하는데 이용될 수 있다. 이 구체예에서, 바람직한 유도체는 8-0-(12-아미노도데카노일)-8-0-데부타노일 탭시가르긴 (12ADT)이다. 이 구체예에서, 다른 바람직한 유도체는 8-0-(12-[L-류시노일아미노]도데카노일)-8-0-데부타노일탭시가르긴 (L12ADT)이다.
본 발명의 추가 양태에서, 세포 증식성 질환은 이미지화 및 표적화된다. 일 대안적 구체예에서, 세포 증식성 질환은 암이다. 이 구체예의 추가 양태에서, 이미지화 및 표적화된 암은 상피암이다. 본 발명의 다른 양태에서, 세포 증식성 질환은 PSA, PSMA, hK2 또는 FAP를 발현할 수 있다.
본 발명의 이 구체예의 다른 추가 양태에서, 이미지화 및 표적화된 암은 육종이다. 본 발명의 이 양태에서, 악성 질환은 추가로 PSA, PSMA, hK2 또는 FAP를 발현하는 육종일 수 있다.
또한, 현재 개시된 주제는 PSA, FAP, hK2 또는 PSMA와 같은, 특이적 프로테아제의 선택적 표적화를 제공하고, 이미징 신호를 증폭하도록 프로테아제의 단백질분해 활성을 이용한다.
도 1은 인간 칼리크레인 2에 대한 절단 부위를 보여주는, 시메노젤린 I (서열번호 21-24) 및 시메노젤린 II (서열번호 25-31)의 아미노산 서열의 일부이다.
도 2는 인간 선 칼리크레인2 (hK2) 에 의해 가수분해되는 펩티드의 아미노산 서열을 보여주는 표 (표 1)이다 (각각, 출현 순으로, 서열번호 144-157). 도 2는 서열번호 485로서 "NO2-Y-G-K-A-Xl-X2-X3-Dap-F-K(ABZ)"를 개시한다.
도 3은 치료 약물의 아민기와 결합될 수 있는 링커의 특정 구체예에 대한 일련의 구조를 나타낸다.
도 4는 PSMA-활성화된 탭시가르긴 전구약물의 일 구체예의 구조를 보여준다. 도 4는 서열번호 487을 개시한다.
도 5는 인간 콜라겐 I으로부터 제조된 재조합 인간 젤라틴의 8.5 kDa 단편 내의 FAP 절단 부위의 전체적인 지도를 나타낸다. 도 5는, 각각, 출현 순으로, 서열번호 221, 237, 238, 222, 239, 223, 240, 224, 241, 242, 225, 243, 226, 244, 227, 245, 228, 246, 229, 247, 230, 248, 231, 249, 232, 250, 233, 251, 234, 252, 235, 253, 236, 및 254를 개시한다.
도 6은 인간 콜라겐 I으로부터 제조된 100 kDa 재조합 인간 젤라틴 내의 FAP 절단 부위의 전체적인 지도를 나타낸다. 도 6은, 각각, 출현 순으로, 서열번호 358, 384, 359, 385, 360, 386, 361, 387, 362, 388, 363, 389, 364, 390, 365, 391, 366, 392, 367, 393, 368, 394, 369, 395, 370, 396, 371, 397, 372, 398, 373, 399, 374, 400, 375, 401, 376, 402, 377, 403, 378, 404, 379, 405, 380, 406, 381, 407, 382, 408, 383, 및 409로서, 왼쪽 컬럼 절단 단편을 개시한다. 도 6은, 각각, 출현 순으로, 서열번호 410, 435, 411, 436, 412, 437, 413, 438, 414, 439, 415, 440, 416, 441, 417, 442, 418, 443, 419, 444, 420, 445, 421, 446, 422, 447, 423, 448, 424, 449, 425, 450, 426, 451, 427, 452, 428, 453, 429, 454, 430, 455, 431, 456, 432, 457, 433, 458, 434, 및 459로서 오른쪽 컬럼 절단 단편을 개시한다.
도 7은 아미노산의 카르복실기와 커플링된 12-아미노도데카노일 측쇄를 갖는 O-8 위치에서 변형된 탭시가르긴 유사체의 화학적 구조를 보여준다.
도 8은 12ADT-Asp-Glu*Glu*Glu*Glu (서열번호 486) 전구약물 (G-202)의 순차적 PSMA 가수분해를 보여주는 모식도이다.
도 9는 본 발명의 주사용 에멀젼 조성물의 일 구체예에 대한 약동학적 파라미터를 제공하는 표 5를 보여준다.
도 10은 본 발명의 주사용 에멀젼 조성물의 일 구체예에 대한 동물과 비교한 농도 대 시간을 보여준다.
도 11은 본 발명의 주사용 에멀젼 조성물의 일 구체예에 대한 평균 농도 대 시간을 보여준다.
본 발명은 치료 약물을 직접적으로 종양 내의 표적 세포 또는 종양 부위에 전달하는 주사용 에멀젼의 치료적 전구약물 조성물이다. 치료 약물은 세포에 대해 비-특이적 세포독성을 가질 수 있으나, FAP, PSMA, PSA 및 hK2와 같은 조직- 특이적 프로테아제에 의해 절단되는 펩티드와 결합된다. 일 구체예에서, 본 발명의 치료적 전구약물은 (a) 유기 용매 또는 계면활성제와 같은 임의의 수용성 및 독성 가용화제가 없고, (b) 허용가능한 유통 기한을 제공하도록 충분히 안정하고, (c) 작은 유적으로 이루어지고, (d) 0.2-미크론 필터를 통해 여과가능하고, (e) 투명하거나 또는 반투명하고, 및 (f) 동결건조가능한, 안전하고 상업적으로 이용할 수 있는 주사용 에멀젼 조성물로 제제화된다.
오랜 기간 동안의 특허법 상의 관행(patent law convention)에 따라, 청구항을 포함하여 본원에 사용되는 'a', 'an' 및 'the'는 '하나 또는 그 이상'을 의미한다. 따라서, 예를 들면, "개체(a subject)"는 문맥이 분명하게 반대 의미 등이 되지 않는 한 (예를 들면, 다수의 개체), 다수의 개체를 포함한다 .
이 명세서 및 첨부된 청구항의 목적을 위해, 달리 지시하지 않는 한, 본 명세서 및 청구항에서 사용된 양(amount), 크기, 부피, 비율, 모양, 공식, 파라미터, 퍼센트, 변수, 수량(quantity), 특징, 및 기타 수치 값을 표현하는 모든 숫자는 비록 용어 "약"이 값(value), 양 또는 범위로 분명하게 나타날 수 없더라도, 용어 "약(about)"에 의해, 모든 경우에서 변형되는 것으로서 이해된다. 따라서, 반대로 지시되지 않는 한, 다음 명세서 및 첨부된 청구항에서 제시된 수치 파라미터는 정확하지 않으며 정확할 필요가 없으나, 적절한 반영 오차, 전환 요인, 반올림, 측정 오차 등, 및 현재 개시된 주제에 의해 수득되기 위해 구하는 적절한 특징에 의존한 당해 기술 분야에서 공지된 기타 요인과 같은 근사치 및/또는 보다 큰 또는 보다 작을 수 있다. 예를 들면, 용어 "약"이 수치를 의미할 경우, 그의 변형, 구체적인 양으로부터 일부 구체예에서, +/- 100%, 일부 구체예에서 +/- 50%, 일부 구체예에서 +/- 20%, 일부 구체예에서 +/- 10%, 일부 구체예에서 +/- 5%, 일부 구체예에서 +/- 1%, 일부 구체예에서 +/- 0.5%, 및 일부 구체예에서 +/- 0.1%을 포함하는 것으로 의도될 수 있으며, 그러한 변형은 개시된 방법을 수행하거나 또는 개시된 조성물을 이용하는 데 적절하다.
또한, 용어 "약"은 하나 이상의 숫자 또는 수치 범위와 관련하여 사용될 경우, 제시된 수치 값 위 및 아래의 경계를 확장하는 것에 의해 이르는 범위 및 변형 내의 모든 수를 포함하는, 그러한 수 모두를 의미하는 것으로 이해되어야 한다. 종점에 의한 수치 범위의 언급은 모든 숫자, 예를 들면, 분수를 포함하여, 그 범위 안에 포함되는, 모든 수 (예를 들면, 1 내지 5의 언급은 1, 2, 3, 4, 및 5, 및 그것의 분수, 예를 들면, 1.5, 2.25, 3.75, 4.1 등을 포함한다) 및 그 범위 내의 임의의 범위를 포함한다.
달리 정의되지 않는 한, 본 명세서에서 사용된 모든 기술적 및 과학적 용어는 본 발명이 속하는 당해 기술 분야의 통상의 기술자에 의해 일반적으로 이해되는 바와 동일한 의미를 갖는다. 본 명세서에 기술된 것과 유사하거나 또는 동등한 임의의 기계, 물질 및 방법이 본 발명을 실시하거나 또는 시험하기 위해 이용될 수 있더라도, 바람직한 기계, 재료 및 방법이 이제 기술된다. 본 명세서에서 언급된 모든 공개문헌은 공개문헌에서 보고되고 발명의 다양한 구체예와 관련되어 이용될 수 있는 세포주, 프로토콜, 시약 및 벡터를 기술 및 개시하는 목적을 위해 인용된다. 본 명세서의 어떤 것도 본 발명이 선행 발명에 의해 그러한 개시가 선행할 수 없다고 해석되지 않는다.
본 명세서에서 사용된 용어 "섬유아세포-활성화 단백질-알파(fibroblast-activation protein-alpha)" (FAP)는 섬유아세포-활성화 단백질-알파 및 FAP와 같거나 또는 실질적으로 동일한 단백질분해의 절단 특이성을 갖는 기타 프로테아제를 의미한다. 본 명세서에서 사용된, 용어 "측쇄(side chain)"는 아미노산 측쇄의 번역 후 변형에 의해 생산된 것을 포함하는, 단백질에서 존재하는 것과 같은 당해 기술 분야에서 공지된 아미노산의 측쇄를 의미한다.
본 명세서에서 사용된, 용어 "전립선 특이적 막 항원(prostate specific membrane antigen)" (PSMA)은 전립선 특이적 막 항원, 및 전립선 특이적 막 항원과 동일하거나 또는 실질적으로 동일한 단백질분해의 절단 특이성을 갖는 모든 다른 프로테아제를 의미한다.
본 명세서에서 사용된 용어 "인간 선 칼리크레인 2(human glandular kallikrein 2)" (hK2)는 인간 선 칼리크레인 2, 및 hK2와 동일하거나 또는 실질적으로 동일한 단백질분해의 절단 특이성을 갖는 모든 다른 프로테아제를 의미한다.
본 명세서에서 사용된, 용어 "전립선 특이적 항원" (PSA)은 전립선 특이적 항원, 및 전립선 특이적 항원과 동일하거나 또는 실질적으로 동일한 단백질분해의 절단 특이성을 갖는 모든 다른 프로테아제를 의미한다.
본 명세서에서 사용된, "충분히 독성적(sufficiently toxic)"은 본 발명의 전구약물의 LC50 농도 (즉, 클론 형성 세포의 50%를 죽이는데 요구되는 농도) 보다 3배 이상 낮은, 보다 바람직하게는 20배 이상 낮은, LC50 농도를 갖는 세포에 대해 비특이적 독성을 보이는 치료 약물을 의미하며, 치료 약물은 가장 바람직하게는 본 발명의 전구약물의 LC50 농도보다 100배 이상 낮은 LC50 농도를 갖는다.
용어 "접촉하는(contacting)"은 본 발명의 펩티드, 치료 약물 또는 전구약물이 효율적으로 세포 과정(cellular processe)을 저해하거나, 또는 세포를 살상할 수 있도록 본 발명의 펩티드, 치료 약물 또는 전구약물에 조직을 노출시키는 것을 의미한다.
"펩티드(peptide)" 또는 "폴리펩티드(polypeptide)"에 의해, 길이 또는 번역 후 변형 (예를 들면, 글리콜화 또는 인산화)과 상관없이, 아미노산의 임의의 사슬을 의미한다. 본 명세서에서 쓰여진, 아미노산 서열은 즉, 펩티드의 아미노-말단은 왼쪽에 있고, 카르복시 말단은 오른쪽에 있다는, 표준 규약에 따라 제시된다. "아미노산 서열" 및 "폴리펩티드" 또는 "단백질"과 같은 용어는 아미노산 서열을 인용된 단백질 분자와 관련된, 완전한 천연 아미노산 서열로 제한하는 것으로 의미하지 않는다.
본 명세서에서 사용된, 용어 "산성화제(acidifying agent)"는 에멀젼의 안정성을 강화하기 위해 에멀젼의 pH를 아래로 조절하기 위해 이용되는 염산 또는 황산과 같은 산성 시약을 의미한다.
본 명세서에서 사용된, 용어 "알칼리화제(alkalizing agent)"는 에멀젼의 안정성을 강화하기 위해 에멀젼의 pH를 위로 조절하기 위해 이용되는 소듐 히드록사이드 또는 바람직하게는 아르기닌과 같은 염기성 시약을 의미한다.
본 발명에서 사용된, 용어 "항산화제(antioxidant)"는 주사용 제품에서 이용하기에 안전한 금속 이온 킬레이터를 주로 의미한다. 금속 이온 킬레이터는 메탈 이온에 결합하는 것에 의해 항산화제로 작용하고, 그로 인해 테스트 물질의 산화 반응에서 금속 이온의 촉매적 효과를 감소시킨다. 본 발명에서 유용한 금속 킬레이터는 EDTA, 글리신 및 시트르산 또는 그의 염을 포함할 수 있다.
본 발명에서 사용된 "보존제(preservative)"는 크레졸, 파라벤, 페놀, 벤잘코늄 클로라이드, 벤조산, 벤조에이트, 벤질 알코올, 클로로부탄올, 티메로살, 소르브산, 소르베이트, EDTA 또는 그의 조합, 또는 당해 기술분야의 통상의 기술자에 의해 인식될 임의의 유사 화합물을 포함하는 군으로부터 선택되는 임의의 보존제를 의미한다.
조성물 안의 활성 화합물이 한달 이상 동안 적절한 조건 하에 저장 후 실질적으로 화학적 분해되지 않을 경우, 조성물은 "화학적으로 안정하다". 특정 구체예에서, 조성물 안의 온전한 활성 화합물의 농도는 3달 이상 동안 적절한 저장 조건 하에서 (예를 들면, -20℃, 2-8℃, 또는 실온에서) 약 10% 미만, 바람직하게는 약 8% 미만, 바람직하게는 약 6% 미만, 및 보다 바람직하게는 약 5% 미만으로 감소된다.
본 발명에서 사용된 용어 "동결-보호제(cryo-protectant)"는 동결 동안 주변 환경에서 분리되는 서브-미크론 크기의 액적을 유지함으로써 에멀젼을 보호하는 임의의 안전하고 생체적합한 시약(들)을 의미한다. 본 발명에 유용한 동결-보호제는 모노사카라이드, 디사카라이드, 폴리사카라이드, 폴리-올, 또는 그의 혼합물, 또는 당해 기술 분야의 통상의 기술자에 의해 인식될 임의의 기타 유사 화합물을 포함하나, 이에 제한되는 것은 아니다. 예를 들면, 특정 구체예에서, 동결-보호제는 수크로스, 트레할로스, 말토오스, 또는 그의 혼합물이다. 특정 구체예에서, 동결-보호제는 수크로스, 수크로스 및 만니톨의 조합, 또는 수크로스 및 트레할로스의 조합이다.
본 명세서에서 사용된 용어 "에멀젼(emulsion)"은 수중유(oil-in-water) 에멀젼을 의미한다.
본 발명에서 사용된 용어 "주사용(injectable)"은 주사용 약물에서 성분의 사용을 허용하는 약물 규제 당국(예를 들면, 미국식품의약국(미국 Food and Drug Administration))에 의한 성분의 승인을 의미한다.
본 명세서에서 사용된 용어 "레시틴(lecithin)"은 통상적으로 포스파티딜클로린으로 불리는, 인산의 클로린 에스테르에 결합된 스테아르산, 팔미트산, 및 올레산의 다글리세리드의 천연적으로 발생하는 혼합물이다. 미국약전(United States Pharmacopoeia: USP)에 따르면, 레시틴은 트리글리세리드, 지방산, 및 탄수화물과 같은 다양한 양의 기타 물질과 결합된, 포스파티딜클로린, 포스파티딜에탄올아민, 포스파티딜세린 및 포스파티딜이노시톨로 주로 이루어지는, 아세톤-불용성 포스포리피드의 복합적 혼합물을 설명하는 일반명(non-proprietary name)이다. 본 발명에서 유용한 레시틴은 콩 레시틴, 계란 레시틴, 경화된 콩 레시틴, 경화된 계란 레시틴, 및 그의 조합을 포함한다. 레시틴은 본 발명의 에멀젼에서 유화제로서 이용된다.
본 명세서에서 사용된 용어 "광 투과율(light transmittance) (%)"은 에멀젼의 투명도의 척도이며, 시료를 통해 통과하는 특정 파장(예를 들면, 600 nm)에서의 입사광의 분수(fraction)로 정의된다. 그것은 하기 식을 이용하여 계산된다:
T λ = I÷I 0 x 100
여기서 I 0 는 입사광의 강도이고, I는 시료 밖으로 나오는 광의 강도이며, T λ 는 투과율이다. T λ 값은 고정된 파장에서 UV-분광 분석기(UV-visible spectrophotomer)에 의해 쉽게 측정될 수 있다. 600 nm와 같은 가시 파장이 통상적으로 이용된다.
에멀젼의 광 투과율 값은 직접적으로 그것의 액적 크기와 연관되고, 선행기술의 에멀젼으로부터 본 발명의 에멀젼을 차별화하는데 이용할 수 있는 본 발명의 일 양태이다. 프로포폴 주사용 에멀젼과 같은 선행기술 에멀젼에 대한, 600 nm에서 측정되는 광 투과율 값은 일반적으로 5-10% 미만이며, 그것은 이 에멀젼의 빛을 반사하는 하얗고 불투명한 특징에서 기인한다.
본 명세서에서 사용된 용어 "중쇄 트리글리세리드(medium chain triglyceride)" (MCT)는 천연적으로 얻거나 또는 합성적으로 생산될 수 있는 다른 유형의 트리글리세리드 오일을 의미한다. MCT는 대개 약 8 내지 약 12개의 탄소로 이루어진 길이의 지방산으로부터 만들어진다. 식물 오일처럼, MCT는 주사용 에멀젼 제제에서 장관외 영양(parenteral nutrition)이 요구되는 환자를 위한 칼로리의 공급원으로서 광범위하게 이용되어 왔다. 그러한 오일은 독일, SASOL GmbH의 Miglyol 812, 뉴저지, 파시패니의 Croda, Inc.의 CRODAMOL GTCC-PN, 또는 뉴저지, 분턴의 PVO International, Inc.의 Neobees M- 5 oil과 같이 상업적으로 이용가능하다. 기타 저-융점 중쇄 오일이 또한 본 발명에서 이용될 수 있다.
본 명세서에서 사용된, 본 발명의 에멀젼 조성물은 그것이 3달 이상 동안 적절한 조건 하에서 동결건조된 에멀젼으로 저장될 수 있고, 재구성에 의해 약 100% 초과의 그것의 평균 액적 크기로의 증가를 보여주지 않거나, 또는 상 분리, 크리밍(creaming), 또는 응집의 증거가 없을 경우, "물리적으로 안정하다". 특정 구체예에서, 본 발명의 조성물의 액적의 평균 크기는 3달 동안 적절한 저장 조건 하에서 (예를 들면, -20℃, 2-8℃, 또는 실온에서) 약 100% 초과, 바람직하게는 약 75% 초과, 바람직하게는 약 50% 초과, 바람직하게는 약 40% 초과, 바람직하게는 약 30% 초과, 바람직하게는 약 25% 초과, 바람직하게는 약 20% 초과, 또는 바람직하게는 약 10% 초과로 증가하지 않는다.
본 명세서에서 사용된, "식물 오일(vegetable oil)"은 잘 이용될 수 있는, 아몬드 오일, 보리지 오일, 블랙커런트 씨드 오일, 옥수수유, 홍화유, 참기름, 면실유, 땅콩 오일, 올리브 오일, 유채씨유, 코코넛 오일, 팜유, 카놀라유, 등을 포함하나, 이에 제한되는 것은 아니다. 이용되는 식물 오일의 특정 종류(예를 들면, 대두유, 옥수수유, 또는 홍화유, 등)는 그것이 안전하고, 잘 용인되고(well tolerated), 약학적으로 허용가능하고, 화학적으로 안정하고, 원하는 크기 범위를 갖는 액적으로 형성될 수 있는 한, 중요하지 않다.
실시예와 같이, 본 명세서에서 사용된 용어 "대두유(soybean oil)"는 대두로부터 추출된 정제된 오일을 의미한다. 다른 실시예와 같이, 본 명세서에서 사용된 "아몬드 오일(almond oil)"은 아몬드 등으로부터 추출된 정제된 오일을 의미한다. 주사 용도를 위해, 본 발명에서 이용되는 모든 그와 같은 오일은 순도, 미생물 및 내독소 제한을 포함하고, 특정 공정서 표준을 충족하고, cGMP 표준을 충족하는 설비에서 제조되는, 특정 품질 기준을 통과해야 한다.
특정 구체예에서, 식물 오일 대 MCT 오일 비는 약 2:1 내지 약 1:2의 범위 내이며, 바람직하게는 약 1:1 이다.
본 명세서에서 사용된 용어 "삼투압 조절제(osmotic pressure modifying agent)"는 수크로스, 글리세롤, 또는 그의 혼합물을 의미한다. 특정 구체예에서, 본 발명의 에멀젼은 대략 300 내지 1000 mOsm의 삼투압 또는 삼투압몰농도(osmolality) 를 갖는다.
용어 "항체(antibody)"는 온전한 면역글로불린 분자 및 에피토프 결정인자(epitopic determinant)에 결합할 수 있는, Fab, F(ab')2 , 및 Fv 단편과 같은, 그의 단편을 의미한다. 본 발명의 폴리펩티드, 예를 들면, FAP, PSMA, PSA 또는 hK2에 결합하는 항체는 온전한 폴리펩티드를 이용하거나 또는 면역항원(immunizing antigen)으로서 관심대상의 작은 펩티드를 포함하는 단편을 이용하여 제조될 수 있다. 동물 (예를 들면, 마우스, 랫트, 또는 토끼)을 면역화하기 위해 이용되는 폴리펩티드 또는 올리고펩티드는 RNA의 번역으로부터 유래하거나, 또는 화학적으로 합성되고, 원할 경우, 담체 단백질과 접합될 수 있다. 펩티드와 화학적으로 커플링되는 일반적으로 이용되는 담체는 소 혈청 알부민, 티로글로불린, 및 키홀 림펫 헤모시아닌 (KLH)을 포함한다. 커플링된 펩티드는 그 후 동물을 면역화하는데 이용된다.
용어 "생물학적 활성(biologically active)"은 천연으로 발생하는 분자의 구조적, 조절적, 또는 생화학적 기능을 갖는 단백질을 의미한다. 또한, "면역학적 활성(immunologically active)" 또는 "면역원성(immunogenic)"은 적절한 동물 또는 세포에 특이적 면역 반응을 유도하고 특이적 항체와 결합하는, 천연, 재조합, 또는 합성 프로테아제 (예를 들면, FAP, hK2, PSMA, 또는 PSA), 또는 그의 임의의 올리고펩티드의 능력을 의미한다.
"보존적 아미노산 치환기(Conservative 아미노 acid substitution)" 및 "보존적 변이체(conservative variation)"는 원 단백질의 특성을 가장 덜 방해하는 것으로 예측되는 그 치환기 및 변형체로, 예를 들면, 단백질의 구조 및 특히 기능이 보존되고 그러한 치환체에 의해 유의하게 변화되지 않는다. 보존적 아미노산 치환기는 일반적으로 (a) 예를 들면, 베타 시트 또는 알파 나선형 배열과 같은, 치환 영역에서 폴리펩티드 골격의 구조, (b) 치환 부위의 분자의 전하 또는 소수성, 및/또는 (c) 측쇄의 대부분을 유지한다.
"검출가능한 표지(detectable label)"는 측정가능한 신호를 생성할 수 있고, 폴리뉴클레오티드 또는 폴리펩티드와 공유적 또는 비공유적으로 연결된 리포터 분자 또는 효소를 의미한다.
용어 "실질적으로 정제된(substantially purified)"은 천연 환경으로부터 제거되고 단리되거나 또는 분리되고, 천연적으로 관련된 다른 성분이 약 60% 이상 없고, 바람직하게는 적어도 약 75% 이상 없고, 바람직하게는 약 80% 이상 없고, 가장 바람직하게는 약 90% 이상 없는 핵산 또는 아미노산 서열을 의미한다.
용어 "치료하다(treat)" 또는 "치료(treatment)"는 목적이 암을 포함하는, 증식성 질환의 발병 또는 확산과 같이, 원하지 않는 생리적 변화 또는 질환을 예방하거나 또는 늦추는(경감시키는) 것인, 치료적 및 예방학적, 또는 예방적 조치를 의미한다. 본 발명의 목적을 위해, 이로운 또는 원하는 임상 결과는, 검출가능하건 또는 검출불가능하건 간에, 증상의 완화, 질병 정도의 감소, 질병의 안정화된(예를 들면, 악화되지 않는) 상태, 질병 진행의 지연 또는 둔화, 질병 상태의 개선 또는 일시적 완화(palliation), 및 완화 (부분 또는 전체)를 포함하나, 이제 제한되지 않는다. "치료"는 또한 치료를 받지 않을 경우 예측된 생존에 비해 생존을 연장시키는 것을 의미할 수 있다. 치료를 필요로 하는 사람들은 상태(condition) 또는 질환을 이미 갖는 사람들 및 또는 상태 또는 질환을 갖기 쉽거나 갖고 있는 사람들 또는 상태 또는 질환이 예방될 사람들을 포함한다. 용어 "치료하는(treating)", "치료하다(treat)", 또는 "치료(treatment)"는 예방적(preventative), 예를 들면, 예방학적(prophylactic), 및 대기적(palliative) 치료를 모두 수용한다.
구절 "치료적 유효량(therapeutically effective amount)" 및 "치료적 유효용량(therapeutically effective dose)"은 (i) 특정 질병, 상태 또는 질환을 치료 또는 예방하거나, (ii) 특정 질병, 상태 또는 질환의 하나 이상의 증상을 경감, 완화, 또는 제거하거나, 또는 (iii) 본 명세서에 기재된 특정 질병, 상태, 또는 질환의 하나 이상의 증상의 발병을 예방, 감소 또는 지연하는 본 발명의 활성 화합물의 양을 의미한다. 감소는 완전할 필요가 없다. 즉, 증상에서 부분적 감소가 고려된다. 추가적으로, 증상이 영원히 감소될 필요는 없다. 하나 이상의 증상에서 일시적 감소가 본 발명에 의해 고려된다. 암의 경우, 약물의 치료적 유효량은 암 세포 또는 종양-관련 세포의 수를 감소시키고; 종양 크기를 감소시키고; 말초 기관으로 암 세포 침투를 억제하고(예를 들면, 어느 정도까지 늦추고 바람직하게는 정지시키고); 종양 전이를 억제하고 (예를 들면, 어느 정도까지 늦추고 바람직하게는 정지시키고); 종양 성장을 어느 정도까지 저해하고; 암과 관련된 생물학적 마커에서 개선을 보여주고; 및/또는 암과 관련된 하나 이상의 증상을 어느 정도까지 완화시킬 수 있다. 약물이 성장을 예방하고 및/또는 존재하는 암세포를 살상할 수 있을 정도까지 그것은 세포억제적(cytostatic) 및/또는 세포독성적일 수 있다. 암 치료를 위해, 약효는, 예를 들면, 질환 진행 시간(time to disease progression: TTP)의 평가 및/또는 반응율(response rate: RR)의 결정에 의해 측정될 수 있다.
용어 "암(cancer)" 및 "암성(cancerous)"은 통상적으로 조절되지 않는 세포 성장을 특징으로 하는 포유류의 생리적 상태를 의미하거나 또는 설명한다. "종양(tumor)"은 하나 이상의 암성 세포(cancerous cell)를 포함한다. 암의 예는 암종,흑색종, 림프종, 아세포종, 육종, 및 백혈병 또는 림프 악성종양을 포함하나, 이에 제한되지 않는다. 그와 같은 암의 보다 특정한 예는 상피암, 유방, 자궁경관, 간, 난소, 전립선, 폐, 결장 및 직장, 췌장, 위 또는 신장의 암을 포함하나, 이에 제한되지 않는다. 암의 추가 예는 미국 출원번호 제12/087,398호에서 제공되고 일반적으로 당해 기술분야에서 공지된다.
용어 "세포 증식성 질환(cell proliferative disorder)"은 예를 들면, 과형성(hyperplasia) (예를 들면 양성 전립성 비대증(BPH)), 및 악성 및 양성 신생물에서와 같이, 형태학 및 유전학적 모두 주변 조직과는 상이한 것으로 종종 나타나는, 악성 (즉, 암성) 및 비-악성 세포 집단을 나타낸다. 악성 세포(즉, 암)는 다단계 과정의 결과로서 세포 집단으로부터 발전할 수 있다 (그러나 그의 발전은 본 명세서에 기재된 본 발명에서 요구되지는 않는다). 따라서, 본 명세서에서 사용된, "세포 증식성 질환"은 암을 포함하나, 이에 제한되지 않는다.
본 명세서에서 사용된 용어 "종양과 관련된 세포(cell associated with a tumor)" 또는 "종양-관련 세포(tumor-associated cell)"는 암 세포 그 자체, 예를 들면, 종양 내피 세포, 기질 세포, 섬유아세포 또는 혈관 내피의 세포와 대조적으로, 종양 덩어리의 일부가 되는 비-전이된 세포를 의미한다.
본 출원에서 사용된 용어 "전구약물(prodrug)"은 모(parent) 약물과 비교하여 종양 세포에 덜 세포독성적이고 효소적 또는 가수분해적으로 활성화될 수 있거나 또는 더욱 활성적인 모 형태로 전환될 수 있는 약학적 활성 물질의 전구체 또는 유도체 형태를 의미한다. 예를 들면, Wilman, "Prodrugs in Cancer Chemotherapy", Biochemical Society Transactions , 14, pp. 375-382, 615th Meeting Belfast (1986) 및 Stella et al., " Prodrugs: A Chemical Approach to Targeted Drug Delivery," Directed Drug Delivery , Borchardt et al., (ed.), pp. 247-267, Humana Press (1985)를 참조한다. 본 발명의 전구약물은 보다 활성적인 무세포독성 약물로 전환될 수 있는, 포스페이트-함유 전구약물, 티오포스페이트-함유 전구약물, 술페이트-함유 전구약물, 펩티드-함유 전구약물, D-아미노산-변형된 전구약물, 글리코실화된 전구약물, β-락탐-함유 전구약물, 선택적으로 치환된 페녹시아세트아미드-함유 전구약물 또는 선택적으로 치환된 페닐아세트아미드-함유 전구약물, 5-플루오로시토신 및 기타 5-플루오로우리딘 전구약물을 포함하나, 이에 제한되지 않는다. 본 발명에서 사용을 위해 전구약물 형태로 유도화될 수 있는 세포독성 약물의 예는 본 명세서에 기재된 그 화학요법제들을 포함하나, 이에 제한되지 않는다.
용어 "보호기(protecting group)" 또는 "Pg"는 화합물 상의 다른 작용기와 반응하는 동안 특정 작용기를 차단하거나 또는 보호하기 위해 통상적으로 이용되는 치환기를 의미한다. 예를 들면, "아미노-보호기"는 화합물에서 아미노 작용기 를 차단하거나 또는 보호하도록 아미노기에 결합되는 치환체이다. 적합한 아미노-보호기는 아세틸, 트리플루오로아세틸, t-부톡시카르보닐 (Boc), 벤질옥시카르보닐 (CBz) 및 9-플루오레닐메틸렌옥시카르보닐 (Fmoc)을 포함한다. 유사하게, "히드록시-보호기"는 히드록시 작용기를 차단하거나 또는 보호하는 히드록시기의 치환기를 의미한다. 적합한 보호기는 아세틸 및 실릴을 포함한다. "카르복시-보호기"는 카르복시 작용기를 차단하거나 또는 보호하는 카르복시기의 치환기를 의미한다. 일반적인 카르복시-보호기는 --CH2CH2S02Ph, 시아노에틸, 2-(트리메틸실릴)에틸, 2-(트리메틸실릴)에톡시메틸, 2-(p-톨루엔술포닐)에틸, 2-(p-니트로페닐술페닐)에틸, 2-(디페닐포스피노)-에틸, 니트로에틸 등을 포함한다. 보호기 및 그들의 용도의 일반적인 설명을 위해, T. W. Greene, Protective Groups in Organic Synthesis, John Wiley & Sons, New York, 1991를 참조한다.
용어 "동물(animal)"은 인간 (남성 또는 여성), 비-인간 영장류, 반려동물 (예를 들면, 개, 고양이 및 말), 식량-공급원 동물 (예를 들면, 소, 돼지, 양 및 가금), 동물원 동물, 해양 동물, 새, 설치류 및 기타 유사 동물 종을 의미한다.
현재 개시된 주제에 따른 조성물의 염, 담체, 부형제 또는 희석제와 같은 성분과 관련하여, 용어 "약학적으로 허용가능한(pharmaceutically acceptable)"은 화합물의 치료적 효능을 제거하지 않고 현재 개시된 활성 화합물과 조합될 수 있는 조성물의 기타 성분과 양립할 수 있고, 특정 화합물이 투여되는 개체에게 지나친 부작용 (독성, 염증 및 알러지 반응을 포함하나, 이에 제한되지 않음) 없이 본 명세서에서 제공된 주제로 사용하기에 적합한 성분을 의미한다. 약학적으로 허용가능한 성분의 예는 인산 완충 식염수, 물, 오일/물 에멀젼과 같은 에멀젼, 마이크로에멀젼, 및 다양한 종류의 습윤제와 같은, 임의의 표준 약학적 담체를 포함하나, 이에 제한되지 않는다.
용어 "비-천연적으로 발생하는 아미노산(non-naturally occurring amino acid)"은 살아있는 유기체에서 정상적으로 발견되지 않는 아미노산을 의미한다.
용어 "하나 이상의 증상이 감소된다(at least one symptom is reduced)"는 치료 후, 하나 이상의 임의의 수의 증상이 감소되는 것을 의미한다. 상기 감소는 완전할 필요가 없다. 즉, 증상에서 부분적 감소가 고려된다. 추가적으로, 증상이 영원히 감소될 필요가 없다. 하나 이상의 증상에서 일시적 감소가 본 발명에 의해 고려된다.
용어 "개체(subject)"는 특정 치료의 수용자가 되거나, 또는 암 줄기세포가 수거되는 임의의 동물을 의미한다. 통상적으로, 용어 "개체(subject)" 및 "환자(patient)"는 본 명세서에서 달리 지시되지 않는 한, 혼용되어 사용된다.
본 명세서에서 사용된, 용어 "암을 갖는 것으로 의심되는 개체(subject suspected of having cancer)"는 세포 증식성 질환 또는 암을 나타내는 하나 이상의 신호 또는 증상을 보이거나 (예를 들면, 뚜렷한 혹 또는 덩어리) 또는 세포 증식성 질환 또는 암에 대해 스크리닝되는 (예를 들면, 일상적인 신체 활동 동안) 개체를 의미한다. 암을 갖는 것으로 의심되는 개체는 또한 세포 증식성 질환 또는 암에 대한 하나 이상의 위험 요인을 가질 수 있다. 암을 갖는 것으로 의심되는 개체는 일반적으로 암에 대해 테스트되지 않았다. 그러나, "암을 갖는 것으로 의심되는 개체"는 예비 진단(예를 들면, 덩어리를 보여주는 CT 스캔)을 받았으나, 확진 검사(예를 들면, 조직검사 및/또는 조직학(histology))가 행해지지 않았거나 암의 단계가 알려지지 않은 개체를 포함한다. 용어는 또한 일단 암을 가졌던 사람들(예를 들면, 차도를 보인 개체)을 포함한다. "암을 갖는 것으로 의심되는 개체"는 때때로 암으로 진단되고, 때때로 암을 갖지 않는 것으로 발견된다.
본 명세서에서 사용된, 용어 "암으로 진단된 개체(subject diagnosed with a cancer)"는 암성 세포를 갖는 것으로 테스트되고 발견된 개체를 의미한다. 암은 조직검사, x-레이, 혈액 테스트, 및 본 발명의 진단 방법을 포함하나, 이에 제한되지 않는 임의의 적합한 방법을 이용하여 진단될 수 있다. "예비 진단(preliminary diagnosis)"은 오직 시각 (예를 들면, CT 스캔 또는 혹의 존재) 및 항원 테스트에 근거하는 것이다.
용어 "암에 대한 위험이 있는 개체(subject at risk for cancer)"는 세포 증식성 질환 또는 암의 증가된 기회를 갖는 개인 또는 환자 (일반 집단에 비해)이다. 그러한 개체는, 예를 들면, 세포 증식성 질환 또는 암의 역사를 갖는 가족 출신일 수 있다. 다른 실시예에서, 위험이 있는 개체는 인종, 민족 또는 전통 또는 환경적 유발에 대한 노출과 관련된 특정 암의 유전적 역사가 있는 개체가 될 수 있다.
본 명세서에서 사용된, 용어 "투여(administration)"는 약물, 전구약물, 활성 화합물, 또는 기타 제제, 또는 치료적 처리 (예를 들면, 본 발명의 조성물)를 개체 (예를 들면, 개체 또는 인 비보, 인 비트로, 엑스 비보 세포, 조직, 및 기관)에게 제공하는 활동을 의미한다. 인간 몸체로의 투여의 예시적 경로는 주사 등에 의해 (예를 들면, 정맥내, 피하, 종양내, 복강내, 등), 눈 (안), 입 (경구), 피부 (경피), 코 (비강), 폐 (흡입(inhalant)), 경구 점막 (구강), 귀 등을 통하는 것일 수 있다.
본 명세서에서 사용된, 용어 "병용-투여(co-administration)"는 개체에게 2개 이상의 작용제(들) 또는 요법의 투여를 의미한다. 일부 구체예에서, 2개 이상의 작용제 또는 요법의 병용-투여는 동시에 발생한다. 다른 구체예에서, 제1 작용제/요법은 제2 작용제/요법 전에 투여된다. 당해 기술 분야의 통상의 기술자는 이용되는 다양한 작용제 또는 요법의 제제 및/또는 투여 경로가 다양할 수 있다는 것을 이해한다. 병용-투여를 위한 적절한 용량은 당해 분야의 통상의 기술자에 의해 쉽게 결정될 수 있다. 일부 구체예에서, 작용제 또는 요법이 병용-투여될 경우, 각각의 작용제 또는 요법은 그들의 단독 투여에 적절한 용량 보다 더 낮은 용량으로 투여된다. 따라서, 병용-투여는 작용제 또는 요법의 병용-투여가 잠재적으로 해로운 (예를 들면, 독성적인) 작용제(들)의 필요한 용량을 낮추는 구체예에서 특히 바람직하다.
프로테아제-특이적 펩티드
예를 들면, FAP, hK2, PSMA 및 PSA에 대해 특이적인 절단 부위를 포함하는 신규한 종류의 펩티드가 기술되었다. 예를 들면, 미국 특허 번호 제7,906,477호; 제7,053,042호; 제8,450,280호; 제7,767,648호; 제7,468,354호; 제6,265,540호; 제6,504,014호; 제6,410,514호; 제6,545,131호; 및 제7,635,682호; 및 미국 특허 출원 번호 제12/087,398호 및 제13/471,316호를 참조한다. 이러한 펩티드들, 및 선택된 프로테아제에 대해 특이적인 절단 부위를 갖는 다른 펩티드들은 치료제가 선택된 프로테아제를 포함하는 조직에 접촉하기 전에 치료제의 비-특이적 독성을 실질적으로 억제하는데 유용하다. 일부 구체예에서, 그러한 조직은 세포 증식성 질환의 신호를 보이고, 암성일 수 있다.
일 양태에서 본 발명은 선택된 프로테아제, 예를 들면, PSMA, PSA, hK2 또는 FAP, 또는 선택된 프로테아제의 단백질분해 활성을 갖는 효소에 대해 특이적인 절단 부위를 포함하는 아미노산 서열을 포함하는 펩티드를 특징으로 한다. 본 발명의 펩티드는 바람직하게는 20개 이하의 아미노산으로 이루어진 길이이고, 보다 바람직하게는 약 10개 이하의 아미노산으로 이루어진 길이이고, 보다 더 바람직하게는 약 6개 이하의 아미노산으로 이루어진 길이이다. 일 구체예에서, 본 발명의 바람직한 아미노산 서열은 직쇄형이다. 본 발명의 일 구체예에서 아미노산 서열은 서열의 주기적 형태(cyclical form)가 선택된 프로테아제에 의한 절단 및 선형화에 의해 활성화된 약물이 될 수 있는 비활성 약물이되는 주기일 수 있다.
본 발명이 선택된 단백질분해 활성과 관련된 프로테아제에 의해 선택적으로 절단될 수 있는 임의의 펩티드 전구약물을 포함하더라도, FAP, PSMA, PSA 및 hK2에 대한 하기의 실시예가 예시된다.
PSA 펩티드
본 발명은 PSA 또는 PSA의 단백질분해 활성을 갖는 효소에 대해 특이적인 절단 부위를 포함하는 아미노산 서열을 포함하는 펩티드를 포함하는 전구약물을 특징으로 한다. PSA에 대한 절단 부위가, 예를 들면, 미국 특허 번호 제6,265,540호; 제6,410,514호; 제6,504,014호; 제6,545,131호 및 제7,635,682호에 기재되었다. 예를 들면, PSA에 의해 인식되는 절단 부위는 적어도 아미노산 서열, X5X4X3X2X1에 의해 플랭크된다(flanked). 이 펩티드는 X1 위치에서 아미노산 글루타민, 아스파라긴 또는 티로신을 포함한다. X2는 류신, 티로신, 또는 라이신일 수 있다. X3은 세린 또는 라이신일 수 있다. X4는 세린, 이소류신, 또는 라이신일 수 있다. X5는 0 내지 16개의 추가적인 아미노산일 수 있다. 일부 바람직한 구체예는 야생형 시메노젤린(semenogelin) I 또는 시메노젤린 II 서열에서 16개의 남아있는 아미노산과 실질적으로 동일한 X5에 대한 서열을 포함한다. 아미노산 서열은 아미노산 서열 X5X4X3X2X1X-1을 생성하도록 X1의 카르복시 말단에 결합된, X1을 더 포함할 수 있다. X-1은 10개 이하의 추가적인 아미노산이다. 바람직하게는, X-1은 X1의 카르복시 말단에 결합된 히스티딘, 류신, 쓰레오닌 또는 세린을 갖는다. X-1이 X1의 카르복시 말단에 연결된 히스티딘을 갖지 않는다면, PSA 절단 부위가 히스티딘의 카르복시 말단 쪽인 경우, PSA 절단 부위는 X1의 카르복시 말단 쪽에 위치한다.
다른 아미노산 서열은 X5 가 세린 또는 라이신이고, X6은 0 내지 15개의 추가 아미노산이며, 다른 아미노산은 상기한 바와 같은, X6X5X4X3X2X1이다. X-1은 또한 상기에서 언급한 바와 같이 존재할 수 있다. 다른 아미노산 서열은 X6이 히스티딘 또는 아스파라긴이고, X7이 0 내지 14개의 추가 아미노산이고, 다른 아미노산은 상기와 같은, X7X6X5X4X3X2X1이다. X-1은 또한 상기에서 언급한 바와 같이 존재할 수 있다.
바람직한 펩티드의 일부 예는 Ser-Lys-Leu-Gln (서열번호 1), Ile-Ser-Tyr-Gln (서열번호 2), 및 Lys-Ser-Lys-Gln (서열번호 3)과 같은 테트라아미노산 서열을 포함한다. 바람직한 펜타아미노산 서열의 일부 예는 Ser-Ser-Lys-Leu-Gln (서열번호 4), Lys-Ile-Ser-Tyr-Gln (서열번호 5), 및 Thr-Lys-Ser-Lys-Gln (서열번호 6)이다. 바람직한 헥사아미노산 서열의 일부 예는 His-Ser-Ser-Lys-Leu-Gln (서열번호 7), Asn-Lys-Ile-Ser-Tyr-Gln (서열번호 8), 및 Ala-Thr-Lys-Ser-Lys-Gln (서열번호 9)이다. 바람직한 헵타아미노산 서열의 일부 예는 Glu-His-Ser-Ser-Lys-Leu-Gln (서열번호 10), Gln-Asn-Lys-Ile-Ser-Tyr-Gln (서열번호 11), Glu-Asn-Lys-Ile-Ser-Tyr-Gln (서열번호 12), Ala-Thr-Lys-Ser-Lys-Gln-His (서열번호 13), 및 His-Ser-Ser-Lys-Leu-Gln-Leu (서열번호 481)이다. 이와 같이, 추가 아미노산은 X-1을 포함할 수 있다.
PSA에 대해 특이적인 절단 부위를 포함하는 펩티드의 다른 예는 아미노산 서열 Ser-Ser-Lys-Tyr-Gln (SSKYQ) (서열번호 18), Gly-Lys-Ser-Gln-Tyr-Gln (GKSQYQ) (서열번호 19) 및 Gly-Ser-Ala-Lys-Tyr-Gln (GSAKYQ) (서열번호 20)으로 이루어지거나 또는 이를 포함하는 펩티드를 포함한다.
일 구체예에서, 탭시가르긴 유도체 8-0-(12-[L-류시노일아미노]도데카노일)-8-O-데부타노일탭시가르긴 (L12ADT)은 PSA-특이적 아미노산 서열의 카르복시 말단에 결합된다.
hK2 펩티드
본 발명은 또한 hK2 또는 hK2의 단백질분해 활성을 갖는 효소에 대해 특이적인 절단 부위를 포함하는 아미노산 서열을 포함하는 펩티드를 포함하는 전구약물을 특징으로 한다. hK2에 대한 절단 부위는 예를 들면, 미국 특허 번호 7,906,477; 7,053,042 및 8,450,280에 기재되었다. 도 1은, 예를 들면, 인간 칼리크레인 2에 대한 절단 부위를 나타내는, 시메노젤린 I (서열번호 21 - 24) 및 시메노젤린 II (서열번호 25 - 31)의 아미노산 서열의 부분을 보여준다.
hK2에 의해 인식되는 절단 부위는 적어도 아미노산 서열, X4X3X2X1에 의해 플랭크된다. 이 올리고펩티드는 X1위치에서 아미노산 아르기닌, 히스티딘 또는 라이신을 포함한다. X2는 아르기닌, 페닐알라닌, 라이신, 또는 히스티딘일 수 있다. X3는 라이신, 세린, 알라닌, 히스티딘 또는 글루타민일 수 있다. X4는 0 내지 20개의 추가적인 아미노산, 바람직하게는 2개 이상의 추가적인 아미노산일 수 있다. 일부 바람직한 구체예는 인식된 시메노젤린 절단 부위의 N-말단 쪽의 4번째부터 24번째까지의 아미노산인 야생형 시메노젤린 I 또는 시메노젤린 II 서열 내의 20개의 아미노산과 실질적으로 동일한 X4에 대한 서열을 포함한다. 아미노산 서열은 아미노산 서열 X4X3X2X1X-1을 생성하도록 X1의 카르복시 말단에 결합된, X-1을 더 포함할 수 있다. X-1은 추가적인 10개 이하의 아미노산이고, 임의의 아미노산을 포함할 수 있다. 바람직하게는 X1은 X1의 카르복시 말단에 결합된 류신, 알라닌 또는 세린을 갖는다. X-1은 L- 또는 D-아미노산을 포함할 수 있다. hK2 절단 부위는 X1의 카르복시 말단 부위에 위치된다.
일부 바람직한 펩티드에서, X1 및 X2 둘 다 아르기닌이다.
바람직한 펩티드의 일부 예는 다음을 포함한다 (기호 ][ 는 hK2 절단 부위를 표시한다는 것을 알린다):
1. Lys-Arg-Arg][(서열번호 32)
2. Ser-Arg-Arg][(서열번호 33)
3. Ala-Arg-Arg][(서열번호 34)
4. His-Arg-Arg][(서열번호 35)
5. Gln-Arg-Arg][(서열번호 36)
6. Ala-Phe-Arg][(서열번호 37)
7. Ala-Gln-Arg][(서열번호 38)
8. Ala-Lys-Arg][(서열번호 39)
9. Ala-Arg-Lys][(서열번호 40)
10. Ala-His-Arg][(서열번호 41)
보다 긴 서열 길이의 추가적인 바람직한 펩티드는 다음을 포함한다:
11. Gln-Lys-Arg-Arg][(서열번호 42)
12. Lys-Ser-Arg-Arg][(서열번호 43)
13. Ala-Lys-Arg-Arg][(서열번호 44)
14. Lys-Lys-Arg-Arg][(서열번호 45)
15. His-Lys-Arg-Arg][(서열번호 46)
16. Lys-Ala-Phe-Arg][(서열번호 47)
17. Lys-Ala-Gln-Arg][(서열번호 48)
18. Lys-Ala-Lys-Arg][(서열번호 49)
19. Lys-Ala-Arg-Lys][(서열번호 50)
20. Lys-Ala-His-Arg][(서열번호 51)
X-1 아미노산을 포함하는 추가적인 바람직한 펩티드는 다음과 같다:
21. Lys-Arg-Arg][Leu (서열번호 52)
22. Ser-Arg-Arg][Leu (서열번호 53)
23. Ala-Arg-Arg][Leu (서열번호 54)
24. Ala-Arg-Arg][Ser (서열번호 55)
25. His-Arg-Arg][Ala (서열번호 56)
26. Gln-Arg-Arg][Leu (서열번호 57)
27. Ala-Phe-Arg][Leu (서열번호 58)
28. Ala-Gln-Arg][Leu (서열번호 59)
29. Ala-Lys-Arg][Leu (서열번호 60)
30. Ala-Arg-Lys][Leu (서열번호 61)
31. Ala-His-Arg][Leu (서열번호 62)
X-1을 갖는 훨씬 더 긴 서열 길이의 바람직한 펩티드는 다음을 포함한다:
32. His-Ala-Gln-Lys-Arg-Arg][Leu (서열번호 63)
33. Gly-Gly-Lys-Ser-Arg-Arg][Leu (서열번호 64)
34. His-Glu-Gln-Lys-Arg-Arg][Leu (서열번호 65)
35. His-Glu-Ala-Lys-Arg-Arg][Leu (서열번호 66)
36. Gly-Gly-Gln-Lys-Arg-Arg][Leu (서열번호 67)
37. His-Glu-Gln-Lys-Arg-Arg][Ala (서열번호 68)
38. Gly-Gly-Ala-Lys-Arg-Arg][Leu (서열번호 69)
39. His-Glu-Gln-Lys-Arg-Arg][Ser (서열번호 70)
40. Gly-Gly-Lys-Lys-Arg-Arg][Leu (서열번호 71)
41. Gly-Gly-His-Lys-Arg-Arg][Leu (서열번호 72)
hK2 및 hK2의 가수분해 활성을 갖는 프로테아제에 의한 절단에 유용한 펩티드 서열의 기타 구체예는 서열목록에 기재된다 (서열번호 73-142).
다른 바람직한 구체예에서, 본 발명의 hK2 펩티드 서열은 X1, X2, 및 X3 중 적어도 하나는 아르기닌 잔기이고, X1,X2, 및 X3의 다른 두 개의 위치에 있는 아미노산 잔기는 임의의 아미노산 잔기인, 서열 G-K-A-X1-X2-X3 (서열번호 143)를 포함한다. hK2는 X1, X2, 또는 X3 뒤의 펩티드를 절단할 수 있고, 일 바람직한 구체예에서, hK2는 아르기닌 잔기 뒤의 펩티드를 절단한다. 특정 바람직한 서열 (절단 부위를 포함하는)은 도 2 (서열번호 144-157)에 표시된다. 추가적인 바람직한 서열은 X3 위치 (서열번호 158-171) 뒤에 추가적인 류신 잔기를 가지고, 도 2에서 표시된 서열에 포함된다.
PSMA 펩티드
본 발명은 또한 PSMA 또는 PSMA의 단백질분해 활성을 갖는 효소에 대해 특이적인 절단 부위를 포함하는 아미노산 서열을 포함하는 펩티드를 포함하는 전구약물을 특징으로 한다. PSMA에 대한 절단 부위는 예를 들면, 미국 특허 번호 제7,767,648호 및 제7,468,354호에 기재되었다. PSMA 활성화된 전구약물을 이용하는 치료 방법은 제PCT/US13/56523호에 기재되었다. 또한, PSMA 활성화된 전구약물을 제조하는 방법은 미국 출원 번호 제61/791,909호에 기재되었다. 전구약물은 PSMA의 프테로일 폴리-γ-글루타밀 카르복시펩티다제 (폴레이트 히드롤라제) 활성에 의해 활성화될 수 있도록 설계된다. 감마 글루타밀 히드롤라제(Gamma glutamyl hydrolase: GGH)는 간세포 및 다양한 종양 세포 유형에 의해 분비되며, GGH 활성은 인간 혈청에 존재한다. 그러므로, 효과적인 측쇄-결합된 기질은 GGH에 의한 최소 가수분해로 PSMA에 의해 바람직하게 특이적으로 가수분해된다.
PSMA 절단 부위는 적어도 디펩티드, X1X2를 포함한다. 이 펩티드는 X1 위치에서 아미노산 Glu, Asp, Gln 또는 Asn을 포함하나, 바람직한 구체예에서 X1은 아미노산 Glu 또는 Asp를 포함한다. X2는 Glu, Asp, Gln, 또는 Asn일 수 있다. 아미노산 서열은 X2의 카르복시 말단에 결합되는 X3를 더 포함할 수 있다. X3는 Glu, Asp, Gln 또는 Asn일 수 있다. 아미노산 서열은 X3의 카르복시 말단에 결합되는 X4를 더 포함할 수 있다. X4는 Glu, Asp, Gln 또는 Asn일 수 있다. 아미노산 서열은 X4의 카르복시 말단에 결합된 X5를 더 포함할 수 있다. X5는 Glu, Asp, Gln 또는 Asn일 수 있다. 아미노산 서열은 X5의 카르복시 말단에 결합된 X6를 더 포함할 수 있다. X6는 Glu, Asp, Gln 또는 Asn일 수 있다. 보다 긴 서열 길이의 추가 펩티드는 유사한 방식으로 구축될 수 있다.
예를 들면, 본 발명의 일 구체예는 X1,X2, X3, X4, X5 및 X6은 전술한 바와 같고, X7은 24개 이하의 추가적인 아미노산, 바람직하게는 14 개 이하의 아미노산, 및 보다 바람직하게는 9개 이하의 추가적인 아미노산인, 펩티드 서열 X1X2X3X4X5X6X7을 포함한다.
다른 실시예에서, 본 발명의 PSMA 펩티드는 다음의 서열이다: X1 . . . Xn, 여기서 n은 2부터 30까지의 범위, 바람직하게는 2부터 20까지의 범위, 보다 바람직하게는 2부터 15까지의 범위, 및 보다 더 바람직하게는 2부터 6까지의 범위인 임의의 정수이고, X1은 Glu, Asp, Gln 또는 Asn이나, 바람직하게는 Glu 또는 Asp이고, Xn까지 남아있는 펩티드는 (예를 들면, n=2일 경우 X2; n=3일 경우 X2X3; n=4 일 경우 X2X3X4, 등) Glu, Asp, Gln 및 Asn으로부터 독립적으로 선택된다. 펩티드 서열의 일부 바람직한 실시예는 상기한 바와 같다. 다른 실시예에서, X2 내지 Xn -1은 Glu, 및 Asp로부터 독립적으로 선택되고, Xn은 Glu, Asp, Gln 및 Asn으로부터 독립적으로 선택된다.
본 발명의 PSMA 펩티드의 길이는 효율적인 PSMA 가수분해, 필요할 경우 수용액에서 치료 약물의 강화된 용해도, 및 인 비트로에서 제한된 비-특이적 세포독성을 허용하도록 최적화될 수 있다.
α-결합된 디펩티드 중, Asp-Glu, Asp-Asp, Asp-Asn 및 Asp-Gln은 본 명세서에서 기재된 PSMA 전구약물에서 이용을 위해 바람직하게 사용된다. 모든 α-결합된 트리펩티드 중, Glu-Glu-Glu, Glu-Asp-Glu, Asp-Glu-Glu, Glu-Glu-Asp, Glu-Asp-Asp, Asp-Glu-Asp, Asp-Asp-Glu, Asp-Asp-Asp, Glu-Glu-Gln, Glu-Asp-Gln, Asp-Glu-Gln, Glu-Glu-Asn, Glu-Asp-Asn, Asp-Glu-Asn, Asp-Asp-Gln, 및 Asp-Asp-Asn은 본 명세서에 기재된 PSMA 전구약물에서 이용을 위해 바람직하게 사용된다. X2 위치에서 Gln 또는 Asn을 포함하는 트리펩티드가 또한 바람직하게 사용될 수 있다. 보다 긴 모든 α-결합 펩티드는 또한 본 명세서에 기재된 전구약물에서 이용을 위해 사용될 수 있고, 임의의 위치 X2 내지 Xn에서 Gln 또는 Asn을 갖는 그와 같은 펩티드가 바람직하게 사용될 수 있다.
측쇄 결합(Side-chain Linkage)
PSMA는 또한 다양한 측쇄-결합된 펩티드를 가수분해할 수 있다. 특정 측쇄- 결합, 예를 들면, γ-결합된 펩티드는 PSMA에 대해 특이적이지 않으나, GOH에 의해 또한 가수분해될 수 있다. 일부 바람직한펩티드는 아스파틸, 및 글루타밀 잔기들 사이의 특정 α- 및 측쇄 결합을 가수분해하는 PSMA의 이중 능력을 이용한다.
측쇄-결합된 디펩티드 중, Glu*Asp, Glu*Asn, Glu*Glu, Glu*Gln, Asp*Asp, Asp*Glu, Asp*Asn, 및 Asp*Gln은 본 명세서에 기재된 PSMA 전구약물에서 이용을 위해 사용될 수 있다. 모든 측쇄-결합된 트리펩티드 중, Glu*Glu*Glu, Glu*Asp*Glu, Asp*Glu*Glu, Glu*Glu*Asp, Glu*Asp*Asp, Asp*Glu*Asp, Asp*Asp*Glu, Asp*Asp*Asp, Glu*Glu*Gln, Glu*Asp*Gln, Asp*Glu*Gln, Glu*Glu*Asn, Glu*Asp*Asn, Asp*Glu*Asn, Asp*Asp*Gln, 및 Asp*Asp*Asn은 바람직하게는 본 명세서에 기재된 PSMA 전구약물에서 이용을 위해 사용될 수 있다. 유사 서열의 보다 긴 펩티드는 본 명세서에 기재된 PSMA 전구약물에서 이용하기 위해 사용될 수 있다.
혼합된 펩티드
일부 바람직한 펩티드는 GOH에 대한 기질이 아니며, 보다 특이적인 PSMA 기질인 PSMA-가수분해성, α-결합된 디펩티드 "캡(cap)"을 포함한다. 조합 α- 및 측쇄-결합 PSMA 기질은 매우 효율적이고 특이적일 수 있다. 예를 들면, Glu*Glu*Glu* Asp-Glu (서열번호 487), 및 Glu*Glu*Glu*Asp-Gln (서열번호 488)은 혈청에서 높은 안정성을 갖는다. 2개의 α-결합 및 2개의 γ-결합을 포함하는 펩티드, 예를 들면, Asp-Glu*Glu*Asp-Glu (서열번호 489)는 인간 및 마우스 혈장에서 가수분해에 대해 완전하게 안정할 수 있다. 수많은 아스파르테이트- 및 글루타메이트-함유 링커들이 미국 특허 번호 제7,767,648호에 도시된다. 이 특정한 링커들은 치료 약물의 아민기와 결합될 수 있다.
나열된 펩티드는 바람직한 것들이다: Glu*Glu*Glu*Asp-Glu (서열번호 487), Asp-Glu*Glu*Asp-Glu (서열번호 489), 및 Glu-Glu*Glu*Asp-Glu (서열번호 490). 혼합된 α- 및 측쇄 결합을 갖는 다수의 기타 펩티드들 및 본 명세서 설명에 해당하는 다른 것들은 당해 기술 분야의 통상의 기술자에 의해 쉽게 예상되고 추론될 수 있다.
본 발명의 일 구체예에서, 펩티드는 서열 Asp-Glu*Glu*Glu*Glu (서열번호 486)를 포함하고, 여기서 *로 표시된 적어도 하나의 결합은 감마 카르복시 결합이다. 본 발명의 다른 양태에서, 펩티드는 도 8에 나타난 바와 같이, 아스파르트산을 통해 8-O-(12-아미노도데카노일)-데부타노일 탭시가르긴 (12ADT)의 치료적 유효량을 포함하는 조성물에 결합된다. 일 구체예에서, 본 발명의 전구약물은 전구약물 12ADT-β-Asp-α-Glu-γ-Glu-γ-Glu-γ-GluOH (즉, G-202)을 생산하기 위해 마스킹 펩티드 Asp-Glu-g-Glu-γ-Glu-γ-Glu (하이픈은 알파 결합을 나타내고 감마 기호는 감마 결합을 나타낸다)의 N 말단 끝에서 Asp의 베타 카르복실과 8-O-(12-아미노도데카노일)-데부타노일 탭시가르긴 (12ADT)의 커플링에 의해 생산된다 (도 8).
다른 구체예에서, 도 3에서 보여준, 12-탄소 링커 12-카르복시도데카노에이트, 예를 들면, 12-CDT-Asp와 같은, 디카르복실산 링커가 이용될 수 있다.
본 발명의 펩티드는 바람직하게 20개 이하의 아미노산으로 이루어진 길이, 바람직하게는 10개 이하의 아미노산으로 이루어진 길이, 보다 바람직하게는 6개 이하의 아미노산으로 이루어진 길이이다. 오직 2 또는 3개의 아미노산으로 이루어진 길이인 일부 펩티드는 본 명세서에 기재된 PSMA 전구약물에서 이용하기에 아주 적합하다. 본 발명의 일부 바람직한 아미노산 서열은 직쇄형이다. 그러나, 디카르복실 아미노산에 존재하는 다중 결합 부위는 또한 분지된 펩티드를 생산하는데 이용될 수 있다. 이 분지된 펩티드는 펩티드 사슬의 각 아미노산에 커플링된 치료제를 포함할 수 있어, PSMA의 효소적 활성에 의한 펩티드 사슬로부터 개별적 아미노산의 절단이 다수 분자의 치료제를 방출한다.
도 4는 PSMA-활성화된 탭시가르긴 전구약물의 특정 구체예의 구조이다. DBTG는 나타낸 바와 같이 전구약물의 나머지에 산소원자를 통해 결합되는, 8-O-데부타노일탭시가르긴을 의미한다. 따라서, 바람직한 기질은 γ-결합의 강화된 효율과 α-결합의 특이성을 조합한다. 보다 긴-길이의, 음으로-하전된, 기질은 2개의 추가적인 목적을 제공할 수 있다: 첫번째, 그들은 고 친지성 독소, 예를 들면, 탭시가르긴 유사체를 보다 수용성으로 만드는 것을 돕는다; 두번째, 고 하전된 전구약물은 혈장 막을 가로지를 가능성이 더 적어, 비-특이적 세포독성을 더 제한한다.
하기의 전구약물들은 바람직한 구체예의 예이다:
(1) 12ADT-Glu*Glu*Glu*Asp-Glu (서열번호 487)
(2) 12ADT*Glu-Glu*Glu*Asp-Glu (서열번호 490)
(3) 12CDT-Glu*Glu*Glu*Asp-Glu (서열번호 487)
(4) 12ADT-Asp-Glu*Glu*Asp-Glu (서열번호 489)
(5) 12CDT-Asp-Glu*Glu*Asp-Glu (서열번호 489)
(6) 12ADT-Asp-Glu*Glu*Glu*Glu (서열번호 486) (도 8)
전구약물은 PSMA에 의해 가수분해되고 해당 Asp- 또는 Glu-함유 탭시가르긴 유사체, 또는 탭시가르긴 유사체 그 자체를 방출하고, 또한 PSMA에 대사되지 않을 경우 강력한 세포독성이 부족하다. 비-PSMA 생산 TSU-Prl 인간 전립선 암 세포주는 해당하는 유리의 탭시가르긴 유사체에 대해 대략 50-배 LD50인 용량으로 각각의 PSMA 전구약물에 노출된다. TSU 전립선 암 세포주에 대해, 12ADT-Glu는 약 50 nM의 살상을 위한 LD50 값을 갖는다.
FAP 펩티드
본 발명은 또한 FAP 또는 FAP의 단백질분해 활성을 갖는 효소에 대해 특이적인 절단 부위를 포함하는 아미노산 서열을 포함하는 펩티드를 포함하는 전구약물을 특징으로 한다. 절단 부위 및 FAP에 대한 활성은, 예를 들면, 미국 특허 출원 번호 제12/087,398호 및 제13/471,316호에 기재되었고, FAP-활성화된 항-종양 화합물들은 미국 특허 출원 번호 제10/039,781호, 제10/036,111호, 제10/336,378호, 및 제10/036,224호, 및 미국 특허 번호 제6,613,879호에 기재되었다.
일 구체예에서, FAP의 기질을 포함하는 작용제는 서열 VGPAGK (서열번호 172); GARGQA (서열번호 173); PPGPPGPA (서열번호 174); (D/E)RG(E/A)(T/S)GPA (서열번호 175); DRGETGPA (서열번호 176); RTGDAGPA (서열번호 177); ASGPAGPA (서열번호 178); DRGETGPA (서열번호 179); DKGESGPA (서열번호 180); AKGEAGPA (서열번호 181); PPGPPGPA (서열번호 182); EPGPPGPA (서열번호 183); DAGPPGPA (서열번호 184); GETGPAGA (서열번호 185); QPSGPAGA (서열번호 186); ERGETGPA (서열번호 187); DRGATGPA (서열번호 188); DRGESGPA (서열번호 189); DPGETGPA (서열번호 190); LNGLPGA (서열번호 191); PSGPAGPA (서열번호 192); PAGAAGPA (서열번호 193); FPGARGPA (서열번호 194); FQGLPGPA (서열번호 195); PLGAPGPA (서열번호 196); PPGAVGPA (서열번호 197); MGFPGPA (서열번호 198); RVGPPGPA (서열번호 199); AGPVGPPA (서열번호 200); AGPPGPPA (서열번호 201); EPGASGPA (서열번호 202); ETGPAGPA (서열번호 203); PPGAVGPA (서열번호 204); AQGPPGPA (서열번호 205); KTGPPGPA (서열번호 206); VMGFPGPA (서열번호 207); 또는 SGEAGPA (서열번호 208), 및 그의 부분 및 변이체를 포함하는 펩티드를 포함한다.
다른 구체예에서, FAP의 기질은 서열 XXXXX-A (서열번호 209); XXXX-AG (서열번호 210); XXXX-AGG (서열번호 211); XXXXX-AGG (서열번호 482); XXXX-S (서열번호 212); XXXX-SG (서열번호 213); XXXX-V (서열번호 214); 또는 XXXXVG (SEQ ID NO: 215)를 포함하는 펩티드를 포함하고, 여기서 X는 임의의 아미노산, 및 그의 부분 및 변이체이다.
본 발명의 범위 내에 포함되는 FAP의 다른 펩티드 기질은 FAP에 의한 대부분의 절단이 Pro 뒤에서 관찰되었기 때문에 프롤린을 갖는 펩티드를 포함한다. 다른 펩티드들은 FAP가 그 뒤를 절단하는 것으로 확인된 하기 아미노산을 포함할 수 있다: Ala (예를 들면 A/A, A/G, A/P, A/R), Asp (예를 들면, D/G, D/T), Gly (예를 들면, G/A, G/E, G/L, G/Q, G/P, G/V), Glu (예를 들면, E/P), Lys (예를 들면, K/A, K/G), Ser (예를 들면, S/P) 및 Val (예를 들면, V/G).
기타 구체예는 P' 위치 (예를 들면, P'1 -P'3)에서 다양한 길이를 갖는 FAP 기질 펩티드를 포함한다. 그것은 Pl에서 프롤린을 갖지만, P'1에서 어떤 것도 갖지 않거나, P'1에서 Ala, Ser, Val 또는 P'1에서 Ala, Ser Val 및 P'2에서 Gly을 갖는 서열이다.
기타 펩티드들은 P7에서 Asp 또는 Glu, Arg 또는 Ala 잔기, P6 에서 Arg 또는 Ala 잔기, P4 에서 Ala, Asp 또는 Glu, P3에서 Ala, Ser 또는 Thr 및 P'1 에서 Ala, Ser 또는 Val 및 P'2에서 Gly가 바람직함을 나타내는, FAP에 대해 하기 서열을 가질 것이다.
FAP-선택적 절단 부위는 미국 특허 출원 번호 제12/087,398호에 기재된 방법을 이용하여 확인되었다. 재조합 인간 젤라틴의 8.5 kDa 단편에서 확인된 FAP 절단 부위가 표 2에 표시된다.
재조합 인간 젤라틴의 8.5 kDa 단편 내의 FAP 절단 부위 (P7 - P'3)
절단 단편 MH+ 평균 이온 전류
PPGAVGP/ AGK . . . AQGPPGP/ AGP
(서열번호 221 및 237)		 1308.62 234.8
-- GLP . . . SPGSPGP/ DGK
(서열번호 238)		 1449.77 76.3
KTGPPGP/ AGQ . . . PPGPPGA/ RGQ
(서열번호 222 및 239)		 1330.65 57.2
VMGFPGP/ KGA . . . PPGAVGP/ AGK
(서열번호 223 및 240)		 2113.12 46.8
VMGFPGP/ KGA . . . GEPGKAG/ ERG
(서열번호 224 및 241)		 942.5 14.7
-- GLP . . . KTGPPGP/ AGQ
(서열번호 242)		 2256.16 12.7
GFPGPKG / AAG . . . PPGAVGP/ AGK
(서열번호 225 및 243)		 1928 10.1
FPGPKGA / AGE . . . PPGAVGP/ AGK
(서열번호 226 및 244)		 1856.96 6.6
LTGSPGS/ PGP . . . KTGPPGP/ AGQ
(서열번호 227 및 245)		 1076.54 6.0
KTGPPGP/ AGQ . . . GPPGPPG/ ARG
(서열번호 228 및 246)		 1259.61 5.0
VMGFPGP/ KGA . . . AGEPGKA/ GER
(서열번호 229 및 247)		 885.48 4.7
GLPGAKG/ LTG . . . SPGSPGP/ DGK
(서열번호 230 및 248)		 869.44 2.7
MGFPGPK / GA- AGEPGKA/ GER
(서열번호 231 및 249)		 757.38 2.5
PGPPGAR/ GQA . . . VMGFPGP KGA
(서열번호 232 및 250)		 1017.48 2.4
PGARGQA/ G- VMGFPGP/ KGA
(서열번호 233 및 251)		 761.37 1.7
GPPGPPG / ARG . . . VMGFPGP/ KGA
(서열번호 234 및 252)		 1244.62 1.7
PPGPPGA / RGQ . . . VMGFPGP/ KGA
(서열번호 235 및 253)		 1173.58 1.3
KTGPPGP/ AGQ . . . GARGOAG/ VMG
(서열번호 236 및 254)		 1799.89 1.0
표 2에서 데이터의 분석은 FAP 절단이 주로 프롤린 (P) 뒤에 발생하나, FAP는 또한 글리신 (G), 알라닌 (A), 라이신 (K) 및 아르기닌 (R)을 포함하는 다른 아미노산 뒤를 절단할 수 있다는 것을 (표 2에서 밑줄그어진 서열) 입증한다. 정규화된 이온 전류에 근거하여, 보다 풍부한 이온들은 절단 부위로서 프롤린을 갖는 것들로 이루어진 것으로 여겨진다. 그 서열들에서, G는 P2 위치에서 바람직한 아미노산이다.
8.5 kDa 젤라틴 개열 지도에 근거하여, 일련의 형광 ?칭된 기질은 메톡시쿠마린 (Methoxycoumarin: MCA)/디니트로페닐 (DNP) FRET 조합을 이용하는 것에 의해 제조된다 (표 2에서 채색된 서열). 예를 들면, Matsushita, O., et al . J Bacterial, 176, 149-156 ('1994)를 참조한다. 펩티드의 합성은 0.4 mmole/g의 치환 수준을 갖는 NovaTagTM Dnp 레진 (Novabiochem, San Diego, Calif.) 상에서 표준 Fmoc 고상 펩티드 합성 커플링을 이용하여 행해진다. N-말단 캡핑은 N-메틸 2 피롤리돈 (NMP) 중 N-(7-메톡시쿠마린-4-아세틸옥시)숙신이미드 (MCA-Osu) 및 1-히드록시벤조트리아졸 (HOBt)에 의해 밤새 2회 행해진다. 이 합성 방법은 서열 MCA-AAl-AA2-AA3-AAx-DNP을 갖는 펩티드를 생산한다. 이 연구는 정규화된 이온 전류에 근거한 기질 순위를 지지하고, FAP가 프롤린 뒤를 절단하는 것을 선호하나 또한 Pl 위치에서 다른 아미노산 뒤를 절단할 수 있다는 것을 확인하였다, 도 5. 그 결과는 또한 FAP 가수분해가 VGP//AGK 절단>GAVGP//A>PAGP// (각각, 서열번호 464, 466, 및 468)을 갖는 P' 위치에서의 아미노산 수의 증가와 함께 증가한다는 것을 시사한다, 도 5.
추가적인 절단 부위가 확인되었고, 표 3 및 4에서 표시되었으며, FibroGen에 의해 생산된 100KDa 젤라틴 내의 FAP 절단 부위의 전체 지도가 도 6에서 표시된다.
8.5 KDa 젤라틴의 소화( digest )를 위한 MALDI 질량의 FindPept 정렬
유저(user) 질량 DB 질량 Δmass
(달톤)		 펩티드 서열번호 위치 누락된(Missed) 절단
2144.530 2144.530 -1.451 (K) GAAGEPGKAGERGVPGPPGA VGPAG (K) 255 55-79 0
2114.530 2113.115 -1.415 (P) GPKGAAGEPGKAGERGVPGP PGAV (G) 256 52-75 0
2114.530 2113.11 -1.415 (G) PKGAAGEPGKAGERGVPGPP GAVG (P) 257 53-76 0
2114.530 2113.115 -1.415 (P) KGAAGEPGKAGERGVPGPPG AVGP (A) 258 54-77 0
2114.530 2113.115 -1.415 (A) AGEPGKAGERGVPGPPGA VG PAGK (D) 259 57-80 0
2114.530 2114.071 -0.458 (D) GRPGPPGPPGARGQAGVMGF PGP (K) 260 31-53 0
2114.530 2115.010 0.480 (G) AVGPAGKDGEAGAQGPPGPA GPAGE R 261 74-98 0
2449.780 2448.245 -1.534 (Q) AGVMGFPGPKGAAGEPGKAG ERGVPGP (P) 262 45-71 0
2449.780 2451.165 1.384 (T) GSPGSPGPDGKTGPPGPAGQ DGRPGPPG (P) 263 10-37 0
2449.780 2451.220 1.439 (P) PGARGQAGVMGFPGPKGAAG EPGKAGE R 264 39-65 0
3402.320 3402.678 0.358 (K) GAAGEPGKAGERGVPGPPGA VGPAGKDGEAGAQGPPGP AG (P) 265 55-94 0
3402.320 3402.715 0.394 (F) PGPKGAAGEPGKAGERGVPG PPGAVGPAGKDGEAGAQGP (P) 266 51-89 0
3402.320 3402.715 0.394 (P) GPKGAAGEPGKAGERGVPGP PGAVGPAGKDGEAGAQGPP (G) 267 52-90 0
3402.320 3402.715 0.394 (G) PKGAAGEPGKAGERGVPGPP GAVGPAGKDGEAGAQGPPG (P) 268 53-91 0
3402.320 3402.715 0.394 (P) KGAAGEPGKAGERGVPGPPG AVGPAGKDGEAGAQGPPGP (A) 269 54-92 0
3402.320 3403.671 1.351 (T) GPPGPAGQDGRPGPPGPPGA RGQAGVMGFPGPKGAAGE (P) 270 22-59 0
3402.320 3403.671 1.351 (P) PGPAGQDGRPGPPGPPGARG
QAGVMGFPGPKGAAGEPG (K)		 483 24-61 0
Figure pct00001
Figure pct00002
Figure pct00003

본 발명의 전구약물은 세포에 의해 흡수되지 않으나, 특이적 표적화 프로테아제 (예를 들면, PSMA, PSA, hK2 또는 FAP)에 의해 세포외에서 절단되어 특이적 프로테아제의 밀리그램 당 분당 5 피코몰 이상, 바람직하게는 10 피코몰 이상, 및 보다 바람직하게는 15 피코몰 이상의 치료 약물을 생산한다. 바람직하게는, 본 발명의 전구약물은 특이적 표적화 프로테아제 (예를 들면, PSMA, PSA, hK2 또는 FAP) 보다 세포외 프로테아제에 의해 절단되어, 정제된 세포외 비-특이적 프로테아제 (즉 특이적 표적화 프로테아제와 다른 임의의 프로테아제)의 밀리그램당 분당 4.0 피코몰 이하, 바람직하게는 2.0 피코몰 이하, 및 보다 바람직하게는 1.0 피코몰 이하의 치료 약물을 생산한다.
따라서, 예를 들면, PSMA에 의해 절단가능한 본 발명의 펩티드 전구약물은 세포에 의해 흡수되지 않으나, PSMA에 의해 세포외에서 절단되어, PSMA의 밀리그램당 분당 5 피코몰 이상, 바람직하게는 10 피코몰 이상, 및 보다 바람직하게는 15 피코몰 이상의 치료 약물을 생산한다. 바람직하게는, 본 발명의 PSMA-특이적 전구약물은 PSMA와 다른 세포외 프로테아제에 의해 절단되어, 정제된 세포외 비-PSMA 프로테아제의 밀리그램당 분당 4.0 피코몰 이하, 바람직하게는 2.0 피코몰 이하, 및 보다 바람직하게는 1.0 피코몰 이하의 치료 약물을 생산한다.
본 발명의 전구약물은 24-시간 기간 초과의 인간 혈청에서 치료 약물로서 최대 5%, 바람직하게는 최대 2.5%, 및 보다 바람직하게는 최대 1.0%의 전구약물을 생산한다.
본 발명의 펩티드는 당해 기술분야에서 공지된 방법에 의해 합성될 수 있다. 예를 들면, 본 발명의 펩티드 및 전구약물은 미국 특허 번호 제6,632,922호; 제6,649,136호; 제6,310,180호; 제4,749,742호 및 미국 출원 번호 제61/791,909호의 방법에 의해 합성될 수 있다. 펩티드는 또한 자동화된 펩티드 합성 기계(예를 들면, Symphony/Multiplex TM 자동화 펩티드 합성기 (Protein Technologies, Inc, Tucson, Ariz.) 또는 Perkin-Elmer (Applied Biosystems, Foster City, Calif.) Model 433A 자동화 펩티드 합성기)에서 합성될 수 있다.
하나 이상의 아미노산의 결실은 또한 그것의 생물학적 활성을 유의하게 변경하지 않고 그 결과로 생긴 분자의 구조의 변형을 가져올 수 있다. 이것은 또한 유용성을 가질 보다 작은 활성 분자의 개발을 이끌 수 있다. 예를 들면, 특정 펩티드의 생물학적 활성이 요구될 수 없는 아미노 또는 카르복시 말단 아미노산은 제거될 수 있다. 본 발명의 펩티드는 본 명세서에 기재된 생활성이 남아 있는 한, 본 발명에 개시된 펩티드의 임의의 유사체, 동족체, 변이체, 이성질체 또는 유도체를 포함한다. 일 구체예에서 기재된 펩티드는 L-아미노산을 포함하는 서열을 갖는다; 그러나, 아미노산의 D 형태는 합성으로 생산되고 본 명세서에 기재된 펩티드에서 이용될 수 있다. 또 다른 구체예에서, 아미노산은 당해 기술 분야의 통상의 기술자에게 공지된 비-천연적으로 발생하는 아미노산이다.
본 발명의 펩티드는 본 명세서에서 특이적으로 예시된 그 펩티드들의 보존적 변이체인 펩티드를 포함한다. 보존적 변이체는 또한 치환된 폴리펩티드로 발생된(raised to) 항체가 또한 비치환된 폴리펩티드와 면역반응한다면 비치환된 모 아미노산 대신 치환된 아미노산의 사용을 포함할 수 있다. 그러한 보존적 아미노산 치환은 임의의 수의 아미노산일 수 있는 X 위치에 대한 본 발명의 펩티드의 종류의 정의 안에 있다. 그러한 보존적 변형에 의해 생산된 펩티드는 본 명세서에서 제공된 전구약물을 선택하는 방법에 따라 본 발명의 전구약물에서 용도의 적합성에 대해 스크리닝될 수 있다.
본 발명의 펩티드의 추가 실시예는 본 명세서에서 개시된 아미노산 서열의 유사체, 유도체, 및 아미노산 서열에 대한 보존적 변이체로 구성된다. 따라서, 친지성 및 소수성 치환기를 갖는 펩티드의 광범위한 그룹 및 보존적 변이체는 본 발명에 의해 포함된다. 당해 기술 분야의 통상의 기술자는 더 큰 활성 및/또는 본 명세서에 기재된 프로테아제에 대한 특이성을 갖는 펩티드를 얻기 위해 유사한 치환을 만들 수 있다. 예를 들면, 본 발명은 펩티드의 생활성이 남아 있는 한, 전술된 펩티드 서열, 및 그의 유사체 또는 유도체를 포함한다. 본 발명의 펩티드의 일차 아미노산 서열의 작은 변형이 본 명세서에 기재된 특이적인 펩티드와 비교하여 실질적으로 동등한 활성을 갖는 펩티드를 초래할 수 있다. 그와 같은 변형은 부위-지정 돌연변이유발 또는 화학적 합성에 의할 때, 의도적일 수 있거나 또는 자발적일 수 있다. 원(original) 펩티드의 생물학적 활성, 즉, 선택된 프로테아제, 즉, PSMA, PSA, hK2 또는 FAP에 의한 절단에 대한 민감성이 남아 있는 한, 이 변형에 의해 생산된 모든 펩티드는 본 명세서에 포함된다.
일 구체예에서, 매우 다양한 그룹들이 PSA, hK2 및 FAP에 의해 절단되기 쉬운 펩티드를 갖는, 본 명세서에 개시된 펩티드의 카르복시 말단에 결합될 수 있다. 예를 들면, 미국 특허 번호 제7,906,477호, 제7,053,042호, 제6,265,540호, 제6,410,514호, 제6,504,014호, 제6,545,131호, 제7,635,682호, 및 미국 특허 출원 번호 제12/087,398호 및 제13/471,316호를 참조한다. 특히, 치료 약물은 이 위치에 결합될 수 있다.
다른 구체예에서, 예를 들면, PSMA에 의해 절단되기 쉬운 펩티드를 갖는, 치료 약물을 포함하는 매우 다양한 실물체(entity)는 미국 특허 번호 제7,767,648호 및 제 7,468,354호에 기재된 α-아미노 말단, α-카르복시 말단, 또는 펩티드의 측쇄에 결합될 수 있다. 이 구체예 중 더 바람직한 구체예에서, 실물체 (예를 들면, 치료 약물)와 펩티드 사이의 결합은 펩티드의 아미노 말단, 또는 측쇄에서 발생한다. 이 구체예의 일 실시예에서, 본 발명의 PSMA 전구약물을 갖는 엔티티는 바람직하게는 X1에 결합되나, 실물체는 X1 부터 Xn -1까지의 임의의 위치에 결합될 수 있다.
상기 구체예들 모두에서, 절단 부위의 프로테아제-특이성 및 본 발명의 펩티드의 기타 기능적 특징의 잇점이 있다. 바람직하게는, 치료 약물은 경우에 따라, 직접 또는 링커 그룹을 통해 카르복시 말단 또는 α-아미노 말단에 결합된다. 프로테아제의 단백질분해 활성 및 특이성을 이용하기 위해, 아미드 결합을 통한 직접적 결합이 바람직하다. 치료 약물과 아미노산 서열 사이의 연결이 링커를 통해 만들어질 경우, 이 연결은 또한 동일한 이유로 아미드 결합을 통해 바람직하게 만들어진다. 링커는 당해 기술 분야의 통상의 기술자에게 공지된 임의의 결합 유형 및 화학적 그룹을 통해 치료 약물에 연결될 수 있다. 링커는 절단 후에 무기한으로 치료약물에 잔류하거나, 또는 외부 작용제와의 추가적인 반응에 의해 또는 자가-절단 단계에서, 그 후 바로 제거될 수 있다. 자가-절단 링커는 약물을 분자내 순환(cyclize) 및 방출할 수 있거나, 또는 자발적인 SN1 가용매분해를 겪고 펩티드 절단에 의해 약물을 방출할 수 있는 링커이다.
검출가능한 표지 또는 이미징 화합물과 같은 기타 재료가 펩티드에 연결될 수 있다. 또한 펩티드에 연결될 수 있는 다양한 그룹들은 항체, 및 예를 들면, 26개의 아미노산 독소 멜리틴 및 35개의 아미노산 독소 세크로핀 B를 포함하는 펩티드 독소와 같은 그러한 모이어티를 포함한다. 이 펩티드 독소들 모두는 암세포주에 대해 독성을 나타낸다. 추가적으로, 펩티드는 단백질과 커플링될 수 있다. 이 커플링은 선택된 프로테아제에 의한 절단이 그것을 활성화하는 단백질에서 입체형태적 변화를 야기하도록 비활성 전구효소를 생성하는데 이용될 수 있다. 펩티드 서열은 또한 약물과 항체를 커플링하는데 이용될 수 있다. 항체는 세포 표면 단백질과 결합하고, 세포외액에서 존재하는 조직-특이적 프로테아제는 펩티드 링커로부터 약물을 절단할 수 있다. 예를 들면, 미국 특허 번호 제7,906,477호 및 제7,053,042호, 및 미국 출원 번호 제12/087,398호 및 제13/471,316호를 참조한다.
바람직한 아미노산 서열은 본 발명의 선택된 프로테아제, 예를 들면, PSMA, PSA, FAP 또는 hK2에 의한 절단에 대해 매우 특이적이 되도록 구성될 수 있다. 또한 펩티드 서열은 정제된 세포외 및 세포내 프로테아제와 비교하여 선택된 프로테아제에 의한 절단에 대해 매우 선택적이 되도록 구축될 수 있다. 고-특이적 프로테아제-특이적 펩티드 서열은 또한 인간 혈청 내 절단에 대해 또한 안정적이 되도록 구성될 수 있다. 본 발명의 기질, 예를 들면, FAP-, PSMA-, PSA- 또는 hK2-기질을 구성 및 선택하는 방법은 당해 기술분야에서 공지되고, 본 명세서에 기재된다.
일부 구체예에서, 본 발명은 본 발명의 펩티드가 프로테아제-내성 및 분해 내성적이라고 의도된다. 본 발명의 펩티드 및 다양한 보호기를 포함하는 펩티드의 그러한 구체예가 미국 특허 출원 번호 제12/087,398호 및 제13/471,316호에 기재된다.
펩티드 및 기질의 표지화 및 스크리닝
프로테아제-특이적 기질인 펩티드를 표지화하는 과정은 예를 들면, 미국 특허 출원 번호 제12/087,398호 및 제13/471,316호에 기재된다. 또한, 본 발명에서 이용을 위한 잠재적 전구약물을 선택하는 방법 및 조직의 스크리닝 및 선택된 프로테아제의 활성의 측정 방법은 당해 기술분야에 알려져 있다.
이미징 및 진단적 적용
일 구체예에서, 본 명세서에 기재된 주사용 에멀젼은 암을 갖는 것으로 의심되는 개체, 암으로 진단받은 개체 또는 암을 가질 위험이 있는 개체에서 세포 증식성 질환 또는 암을 이미징 및 진단하기 위해 본 발명의 활성 화합물을 투여하는데 이용될 수 있다. 본 발명의 활성 화합물을 이용하여 환자에서 세포 증식성 질환 또는 암을 진단 및 이미징하는 방법은 미국 출원 번호 제13/257,131호에 기재된다. 일 구체예에서, 본 명세서에 기재된 주사용 에멀젼은 암종, 흑색종, 림프종, 아세포종, 육종, 및 백혈병 또는 악성 림프종을 갖는다고 의심되거나, 이들을 갖는다고 진단받거나 또는 이들에 대한 위험이 있는 개체에서 암을 포함하는, 세포 증식성 질환을 이미징 및 진단하기 위해 본 발명의 활성 화합물을 투여하는데 이용될 수 있다. 또한, 이 구체예에서, 본 명세서에 기재된 주사용 에멀젼은 상피암으로 진단받거나 또는 상피암에 대한 위험이 있는 개체에서 암을 이미징 및 진단하기 위해 본 발명의 활성 화합물을 투여하는데 이용될 수 있다. 이 구체예의 추가 변형에서, 본 명세서에 기재된 주사용 에멀젼은 전립선, 간 또는 유방암으로 진단받거나 또는 이에 대한 위험이 있는 개체에서 암을 이미징 및 진단하기 위해 본 발명의 활성 화합물을 투여하는데 이용될 수 있다. 다른 구체예에서, 본 명세서에 기재된 주사용 에멀젼은 세포 증식성 질환, 예를 들면, BPH를 이미징 및 진단하기 위해 본 발명의 활성 화합물을 투여하는데 이용될 수 있다.
일 구체예에서, 본 발명의 활성 화합물은 치료 약물과 펩티드 사이의 페놀계 링커를 포함한다. 페놀계 링커는 방사성으로 표지될 수 있다. 특정 구체예에서, 방사성 표지는 125I, 124I 또는 131I이다. 또한, 이 구체예의 기타 양태에서, 알파 또는 베타 방사선의 짧은 범위는 아이오딘 방사성표지와 같은, 감마 방사체에게 유리한 알파 또는 베타 방사체에 의한 표지화를 만든다. 트리튬 (3H)은 본 개시된 방법 및 조성물과 함께 사용하기에 적합한 대표적인 베타 방사체이다. 본 발명의 펩티드는 선택된 프로테아제, 예를 들면, PSMA, PSA, hK2 및 FAP에 의해 절단가능한 임의의 펩티드일 수 있다.
이 구체예의 추가 양태에서, 치료 약물은 세스퀴테르펜-γ-락톤 (예를 들면, 탭시가르긴 또는 탭시가르긴 유도체)이다.
본 발명의 일 대안적 이 구체예에서, 개체를 이미징하는 방법은 단일광자방출 단층촬영(SPECT) 이미징의 이용을 포함한다. 또 다른 대안적 이 구체예에서, 이미징은 양전자방출 단층촬영 (PET)일 수 있다. 예를 들면, 페놀계 링커는 SPECT 이미징을 위한 125I, PET 이미징을 위한 124I, 및 조합 약물/방사선 요법을 위한 131I 로 표지될 수 있다.
추가 양태에서, 암을 포함하는, 세포 증식성 질환을 이미징 및 진단하는 방법은, 세스퀴테르펜-γ-락톤 (일부 바람직한 구체예에서, 탭시가르긴 또는 탭시가르긴 유도체), 방사성 표지를 갖는 페놀계 링커 및 PSA, FAP, hK2 또는 PSMA에 의해 절단가능한 펩티드, 또는 선택된 프로테아제에 의해 절단될 수 있는 임의의 다른 펩티드를 포함하는 전구약물을 포함하는 본 발명의 주사용 에멀젼을 개체에 제공하는 단계를 포함할 수 있다.
이 구체예의 일 변형에서, 탭시가르긴 유도체는 8-O-(12-[L-류시노일아미노]도데카노일)8-O-데부타노일탭시가르긴 (L12ADT)이다. 이 구체예의 다른 변형에서, 탭시가르긴 유도체는 8-O-(12-아미노도데카노일)-8-O-데부타노일 탭시가르긴 (1 2ADT)이다.
본 발명은 또한 이미징 기법, 예를 들면, PET에 의해 검출될 수 있는 친지성 이미징 표지에 결합되는 본 발명의 펩티드를 제공하는 것에 의한 연조직 또는 골 전이를 이미징하는 방법을 제공한다. 이 방법은 본 발명의 펩티드를 절단할 수 있는 프로테아제, 예를 들면, PSA, PSMA, hK2 또는 FAP와 관련된 세포 증식성 질환을 갖거나 또는 갖는 것으로 의심받는 개체에게 일차 아민-함유 친지성 표지와 결합된 본 발명의 펩티드를 투여하는 것에 의해 일반적으로 완성된다. 바람직한 구체예에서, 표지된 펩티드는 본 발명의 주사용 에멀젼을 이용하여 투여되고, 세스퀴테르펜-γ-락톤 (일부 바람직한 구체예에서, 탭시가르긴 또는 탭시가르긴 유도체)과 같은, 치료 약물에 커플링된다. 펩티드는 절단되는 펩티드에 특이적인 효소적 활성 프로테아제가 존재하는 친지성 이미징 표지로부터 (예를 들면, PSMA, PSA, hK2 또는 FAP 생산 조직) 선택적으로 절단된다. 친지성 이미징 표지는 그 후 부근에서 세포의 막 안으로 들어간다.
선택된 프로테아제에 의해 펩티드의 절단을 허용하고, 신뢰할 수 있는 이미지를 허용하도록 절단되지 않은 펩티드가 개체로부터 충분히 제거되도록 허용하는 충분한 기간 후, 개체는 이미지화된다. 친지성 표지는 선택된 프로테아제를 생산하는 연조직 또는 뼈에서 축적하고, 개체의 진단을 허용한다. PET 스캐닝에 적합한 표지는 18F, 11C, 13N 및 15O 및 당해 기술 분야에서 공지된 임의의 기타 양전자 방출핵과 같은 방사성 핵종이다. 친지성은 당해 기술 분야의 통상의 기술자에게 공지된 방법에 의해 친지성 단편 또는 당해 기술 분야의 통상의 기술자에게 공지된 모이어티로 표지를 도입하는 것에 의해 표지 안으로 조작될 수 있다.
본 발명의 펩티드 전구약물과 함께 이용될 수 있는 다양한 링커의 실시예는 미국 출원 번호 제13/257,131호에서 개시된다. 본 발명의 펩티드 전구약물을 이용하여 암을 이미징 및 검출하기 위한 조성물을 제조하는 방법의 실시예는 또한 본 명세서에 기재되고 당해 기술분야에 일반적으로 알려져 있다.
전구약물 조성물
본 발명은 또한 선택된 프로테아제, 예를 들면, FAP, PSMA, PSA 및 hK2, 또는 그러한 프로테아제의 효소적 활성을 갖는 임의의 효소에 특이적인 절단 부위를 포함하는 펩티드에 결합되는 치료약물을 포함하는 전구약물 조성물을 특징으로 한다. 상기에서 언급한 바와 같이, 본 발명의 펩티드는 선택된 프로테아제를 생산하는 조직 또는 세포, 또는 종양-연관 세포에서 또는 그 안에서 활성화를 위해 치료 약물을 표적화하는데 이용될 수 있다. 본 발명의 전구약물에서 유용한 펩티드는 전술된 것이다.
본 발명의 전구약물에서 이용될 수 있는 치료 약물은 세스퀴테르페노이드의 과이어놀리드(guaianolide), 이누키네올리드(inuchineolide), 저마크라놀리드(germacranolide), 및 유데스마노라이드(eudesmanolide) 계에 속하는 것과 같은, 예를 들면, 세스퀴테르펜-y-락톤을 포함한다. 이것은 에스타피아틴, 그로스헤이민(grossheimin), 이누키네놀리드(inuchinenolide), 아르글라빈(arglabin), 탭시가르기신 및 당해 기술 분야의 통상의 기술자에게 공지된 많은 다른 것들과 같은, 그들의 유도체를 포함한다. 예를 들면, 미국 특허 번호 제6,545,131호를 참조한다.
일 구체예에서, 본 발명의 바람직한 세스퀴테르펜-γ-락톤은 탭시가르긴 또는 탭시가르긴 유도체이다. 상기에서 설명된 바와 같이, 탭시가르긴 및 그것의 유도체는 많은 세포에서 발견된 SERCA 펌프를 억제하는 것에 의해 작용한다고 믿어진다. 탭시가르긴은 환형과의 탭시아 속의 종으로부터 단리된 천연 산물의 그룹이다.
탭시가르긴은 세포독성의 특유한 작용 기전을 갖는다. 임의의 특정한 과학적 이론에 의해 구애받지 않기를 바라지만, 그것은 대사적 생존을 유지하도록 모든 세포에 의해 요구되는 중요한 세포내 단백질인 근소체/소포체 칼슘 ATPase 펌프의 잠재적인 억제제이다. 탭시가르긴에 의한 SERCA 펌프의 억제는 ER-스트레스 및 미토콘드리아 세포사멸적 경로를 모두 활성화하는 세포내 칼슘의 지속적 상승을 초래한다.
탭시가르긴은 미국 특허 번호 제6,545,131호에 개시된 구조를 갖는다. 추가적으로, 세스퀴테르펜-γ-락톤의 기타 치료적 유사체는 또한 미국 특허 번호 제6,265,540호, 제6,504,014호, 제6,410,514호, 및 제6,545,131호에 기재된다. 이 유사체는 세포에 대한 비-특이적 세포독성을 갖는다. 이 세포독성은 클론형성 세포의 50%를 살상하는데 필요한 세포독성 (LC50)으로서 측정된다. 일부 구체예에서, 본 발명의 유사체의 LC50은 바람직하게 최대 10 μM, 바람직하게는 최대 2 μM, 및 보다 바람직하게는 최대 200 nM 의 유사체이다.
일 실시예에서, 탄소 8 또는 탄소 2에서 알카노일, 알케노일, 및 아레노일 기를 갖는 탭시가르긴은 본 명세서에서 개시된 본 발명의 실시에 사용될 수 있다. CO--(CH==CH)n1--(CH2)n2-Ar--NH2, CO--(CH2)n2--(CH==CH)n1--Ar--NH2, CO--(CH2)n2-(CH==CH)n1--CO--NH--Ar--NH2 및 CO--(CH==CH)n1--(CH2)n2-CO--NH--Ar--NH2 와 같은 그룹 및 그의 치환된 변이체는 탄소 8 치환기로 이용될 수 있고, 여기서 n1 및 n2는 0 내지 5이고, Ar은 임의의 치환된 또는 비치환된 아릴 그룹이다. Ar에서 존재될 수 있는 치환기는 단쇄 및 중쇄 알킬, 알칸옥시, 아릴, 아릴옥시, 및 알켄옥시 그룹, 니트로, 할로, 및 일차 이차 또는 삼차 아민 그룹, 및 에스테르 또는 아민 결합에 의해 Ar에 연결된 그러한 그룹을 포함한다.
탭시가르긴 유사체의 다른 구체예에서, 이 치환기 그룹은 비치환, 또는 알킬-, 아릴-, 할로-, 알콕시-, 알케닐-, 아미노-, 또는 아미노-치환된 CO-(CH2)n3-NH2에 의해 대표되며, 여기서 n3는 0 내지 15, 바람직하게는 3-15, 및 또한 바람직하게는 6-12이다. 이러한 종류의 특히 바람직한 치환기 그룹은 6-아미노헥사노일, 7-아미노헵타노일, 8-아미노옥타노일, 9-아미노노나노일, 10-아미노데카노일, 11-아미노운데카노일, 및 12-아미노도데카노일이다. 이 치환기는 일반적으로 해당 아미노산, 6-아미노헥산산, 등으로부터 합성된다. 아미노산은 표준 방법, 예를 들면 Boc 보호에 의해 N-말단 보호된다. N-말단 보호된 치환기와 탭시가르긴의 디시클로헥실카르보디이미드 (DCCI)-촉진된 커플링 뒤에 일차 아민-함유 탭시가르긴 유사체를 생산하는 표준 탈보호 반응이 따른다.
치환기는 또한 알카노일-, 알케노일-, 또는 아레노일 치환기에 부착된 아미노 아미드기의 형태에서 일차 아민을 나를 수 있다. 예를 들면, 메탄올 및 티오닐 클로라이드의 처리에 의한 메틸 에스테르 형성과 같은 표준 C-말단 보호 기법에 의해, 6-아미노헥산산 등과 같은 제 1 아미노산의 C-말단 보호 뒤에 N-보호된 제 2 아미노산의 임의의 유형으로 제 1 아미노산의 N-말단이 커플링될 수 있다.
바람직한 구체예에서, 탭시가르긴 유사체 또는 유도체는 본 명세서에서 "L12ADT"로 또한 지칭되는, 8-0-(12-[L-류시노일아미노]도데카노일)8-0-데부타노일탭시가르긴이다. 도 7은, 예를 들면, 아미노산의 카르복실기와 커플링된 12-아미노도데카노일 측쇄를 갖는 O-8 위치에서 변형된 탭시가르긴 유사체의 화학적 구조를 보여준다.
다른 바람직한 구체예에서, 탭시가르긴 유사체 또는 유도체는 8-O-(12-아미노도데카노일)-8-0-데부타노일 탭시가르긴 (12ADT)이다 (도 8).
일부 구체예에서, 예를 들면 PSA, hK2 및 FAP에 의해 절단되기 쉬운 펩티드를 갖는, 펩티드 및 치료 약물은 펩티드의 카르복시 말단을 통해 직접적 또는 간접적으로 (링커에 의해) 연결된다. 예를 들면, 미국 특허 번호 제7,906,477호, 제7,053,042호, 제6,265,540호, 제6,410,514호, 제6,504,014호, 제6,545,131호, 제7,635,682호, 및 미국 특허 출원 번호 제12/087,398호 및 제13/471,316호를 참조한다.
다른 구체예에서, 예를 들면 PSMA에 의해 절단되기 쉬운 펩티드를 갖는, 펩티드 및 치료 약물은 미국 특허 번호 제7,767,648호 및 제7,468,354호에서 기재된 바와 같이, 펩티드의 α-아미노 말단, α-카르복시 말단, 또는 측쇄에 직접적으로 또는 간접적으로 (링커에 의해) 결합된다. 이 구체예 중 더 바람직한 구체예에서, 치료 약물과 펩티드 사이의 결합은 펩티드의 아미노 말단 또는 측쇄에서 발생하는 직접적 결합이다.
상기 구체예의 모두에서, 치료 약물의 부착 부위는 펩티드와 커플링될 경우, 약물의 비-특이적 세포독성은 실질적으로 억제될 정도이어야 한다. 따라서 전구약물은 유의하게 독성적이지 않아야 한다.
본 발명의 활성 화합물은 또한 활성 화합물이 이용되는 용매에서 활성 화합물의 용해도를 강화하는 그룹을 포함할 수 있다. 대개 용매는 물이지만, 또한 폴리사카라이드 또는 기타 폴리히드록실화 모이어티를 포함할 수 있다. 예를 들면, 덱스트란, 사이클로덱스트린, 전분 및 그러한 그룹의 유도체가 본 발명의 펩티드 또는 전구약물에 포함될 수 있다. 바람직한 구체예에서, 펩티드 또는 전구약물에 대한 용해도를 제공하는 그룹은 폴리머, 예를 들면, 폴리라이신 또는 폴리에틸렌 글리콜 (PEG)이다.
약학적 제제
본 발명의 화합물을 위한 약학적 제제는 예를 들면, 미국 특허 출원 번호 제 12/087,398호 및 제13/257,131호에서 개시된다.
본 발명의 활성 화합물을 포함하는 약학적 조성물이 본 명세서에서 제공된다. 이 약학적 조성물은 약학적으로 허용가능한 담체에서 현재 개시된 활성 화합물을 치료적 유효량으로 포함한다.
약학적 제제는 하기에서 더 구체적으로 논의되는 바와 같이, 경구, 정맥 또는 에어로졸 투여를 위해 제조될 수 있다. 바람직한 구체예에서, 현재 기재된 주제는 정맥 또는 근육내 주사에 의할 때, 약학적으로 허용가능한 제제를 형성하기 위해 동결건조되고 재구성될 수 있는 활성 화합물을 제공한다.
비경구 투여에 적합한 제제는 항-산화제, 완충제, 세균발육 저지제(bacteriostat) 및 제제가 의도된 수용자의 혈액과 등장성이 되게 하는 용질을 포함할 수 있는 수성 및 비-수성 멸균 주사 용액; 및 현탁제 및 증점제를 포함할 수 있는 수성 및 비-수성 멸균 현탁액을 포함한다.
유용한 주사용 조성물은 수성 또는 유성 비히클에서 활성 화합물의 멸균 현탁액, 용액 또는 에멀젼을 포함한다. 일 구체예에서, 조성물은 또한 현탁제, 안정화제 및/또는 분산제와 같은, 제제화 작용제를 포함할 수 있다. 주사에 적합한 조성물은 단위 용량 제형, 예를 들면, 앰플 또는 다용량 용기로 존재될 수 있고, 추가된 보존제를 포함할 수 있다. 대안적으로, 주사용 조성물은 사용 전, 멸균수, 완충제, 덱스트로스 용액 등을 포함하나, 이에 제한되지 않는 적합한 비히클과 함께 재구성을 위한 분말 제형으로 제공될 수 있다. 이를 위해, 본 발명의 활성 화합물은 동결건조와 같은 임의의 공지된 기법에 의해 건조되고, 사용전에 재구성될 수 있다.
연장된 전달을 위해, 활성 화합물은 이식 또는 근육내 주사에 의한 투여를 위해 데포 제제로서 제제화될 수 있다. 활성 화합물은 적합한 폴리머 또는 소수성 물질 (예를 들면, 허용가능한 오일 중 에멀젼과 같이) 또는 이온 교환 레진과 함께, 또는 예를 들면, 난용성 염과 같은 난용성 유도체로서 제제화될 수 있다.
제품용 약학적 조성물 (또는 제제)은 약물 투여에 이용되는 방법에 따른 다양한 방식으로 포장될 수 있다. 일반적으로, 키트 또는 배포용 제품은 적절한 제형으로 약학적 제제를 거기에 보관하는 용기를 포함한다. 적합한 용기는 당해 기술 분야의 통상의 기술자에게 잘 알려져 있고, 병 (플라스틱 및 유리), 사쉐(sachet), 앰플, 비닐봉지, 금속 실린더, 등과 같은 재료를 포함한다. 용기는 또한 포장의 내용물에 무분별한 접근을 막기 위해 쉽게-변경할 수 없는 조립체를 포함할 수 있다. 또한, 용기는 용기의 내용물을 설명하는 라벨을 거기에 부착한다. 라벨은 또한 적절한 경고를 포함할 수 있다.
본 발명의 활성 화합물의 약학적 제제는 다양한 투여 경로 및 유형을 위해 제조될 수 있다. 원하는 정도의 순도를 갖는 화합물은 동결건조된 제제, 가공된 분말(milled powder), 또는 수성 용액의 제형으로, 약학적으로 허용가능한 희석제, 담체, 부형제, 또는 안정화제와 선택적으로 혼합된다 (Remington's Pharmaceutical Sciences (1980) 16th edition, Osol, A. Ed.). 제제는 적절한 pH로 상온에서, 생리적으로 허용가능한 담체, 예를 들면, 사용되는 투여량 및 농도에서 수용자에게 비-독성적인 담체와 함께 원하는 정도의 순도에서 혼합함으로써 수행될 수 있다. 제제의 pH는 주로 특정한 용도 및 화합물의 농도에 의존하나, 약 3 내지 약 8의 범위일 수 있다. pH 5에서 아세테이트 완충제 중 제제는 적합한 구체예이다.
본 명세서의 용도를 위한 활성 화합물은 바람직하게는 멸균된다. 활성 화합물은 고형 조성물, 동결건조된 제제, 또는 수성 용액으로서 저장될 수 있다. 본 명세서에 기재된 약학적 제제는 당해 기술 분야에서 잘 알려진 기법을 이용하여 동결건조될 수 있다. 그러한 구체예에서, 활성 화합물은 개체 안으로 그의 주사에 적합한 액체 제제를 형성하는데 적합한 약학적으로 허용가능한 담체와 재구성될 수 있는 동결건조물의 제형으로 제공된다.
본 발명의 바람직한 구체예에서, 본 발명의 활성 화합물의 약학적 제제는 본 발명의 활성 화합물을 포함하는 주사용 에멀젼 조성물을 포함한다.
일 구체예에서, 본 발명은 (a) 유기 용매 또는 계면활성제와 같은 임의의 수-용성 및 독성 가용화제가 없고, (b) 허용가능한 유통기한을 제공할 만큼 충분히 안정하고, (c) 작은 유적으로 구성되고 0.2-미크론 필터를 통해 여과가능하고, (d) 투명하거나 또는 반투명하고 및 (e) 동결건조가능한, 안전하고 상업적으로 이용가능한 주사용 에멀젼으로 본 발명의 활성 화합물을 제공한다.
일 구체예에서, 본 발명의 에멀젼은 약 200 나노미터 미만, 또는 보다 바람직하게는, 약 150 nm 미만, 또는 보다 바람직하게는, 약 75 nm 미만 직경의 평균 크기의 유적을 포함하는, 황백색, 반-투명한 조성물이다. 에멀젼은 안정하고, 동결건조된 제형에서 우수한 장-기간 안정성을 갖는다. 화학적으로 그것은 본 발명의 활성 화합물의 보전성을 유지하고, 물리적으로 그것은 반-투명하거나(semi-transparent) 또는 반투명한(translucent) 채로 유지되고, 연장된 저장(예를 들면, 실시예 6 및 7에서 나타난 바와 같은, 3개월 이상)에 따른 나노미터 액적 크기를 유지한다. 또한, 일부 구체예에서, 에멀젼은 3회 동결-융해 처리 주기 (예를 들면, 실시예 2 및 4를 참조한다) 이후에도 높은 광 투과율 및 작은 액적 크기를 특징으로 한다. 생물학적으로, 활성 화합물의 부분을 제외하고, 에멀젼은 비-알러지성이고, 과민반응 또는 아나필락시 반응을 유발하지 않고, 비-용혈성이다. 임의의 특정 이론에 결합되지 않고, 개시된 주사용 에멀젼은 본 발명의 친지성 전구약물을, 아마도 유적에서, 용해시킨다.
일 구체예에서, 본 발명은 선행 기술 주사용 에멀젼 (약 10-20%)에서 개시된 것보다 훨씬 낮은 오일 농도 (약 2-3%)를 포함하는 주사용 에멀젼 조성물을 제공한다.
다른 구체예에서, 본 발명은 선행 기술 주사용 에멀젼 (약 2% 미만)에서 현재 개시된 것보다 훨씬 높은 레시틴 농도 (약 5-10%)를 포함하는 주사용 에멀젼 조성물을 제공한다.
바람직한 구체예에서, 본 발명은 선행 기술 주사용 에멀젼 (약 10-20%)에서 개시된 것보다 훨씬 낮은 오일 농도 (약 2-3%)를 포함하고, 선행 기술 주사용 에멀젼 (약 2% 미만)에서 현재 개시된 것보다 훨씬 높은 레시틴 농도 (약 5-10%)를 포함하는 주사용 에멀젼 조성물을 제공한다.
이 구체예의 변형에서, 본 발명은 오일 상을 형성하도록 오일 (예를 들면, 대두유) 및 중쇄 트리글리세리드 오일로 이루어지는 두 개의 오일을 이용하는 주사용 에멀젼 조성물을 제공하고, 여기서 총 오일 농도는 3% 이하, 및 바람직한 구체예에서 약 1-3%이다.
이 구체예의 또 다른 변형에서, 본 발명은 선행기술 주사용 에멀젼에서 이용되는 2.2% 글리세롤 대신에 삼투압 조절제로서 약 10-15% 수크로스를 이용하는 주사용 에멀젼 조성물을 제공한다.
이 구체예의 추가 변형에서, 본 발명은 약 1.5% 내지 약 2.5%, 바람직하게는 약 2%의 본 발명의 활성 화합물, 약 1.5% 이하, 바람직하게는 약 0.5-1%의 오일 (예를 들면, 대두유), 약 1.5% 이하, 바람직하게는 약 0.5-1%의 의 중쇄 트리글리세리드, 약 5-15%, 바람직하게는 약 5-10%의 레시틴, 및 약 10-15%의 수크로스를 포함하는 에멀젼 조성물을 포함한다 (모든 퍼센트는 조성물의 총 질량에 기반함).
이 구체예의 다른 변형에서, 레시틴-대-전구약물 중량비는 약 5:1 내지 약 7.5:1이다. 추가 양태에서, 레시틴-대-오일 중량비는 약 10:1 내지 약 5:1일 수 있다.
이 구체예의 또 다른 변형에서, 레시틴-대-전구약물 중량비는 약 2.5:1 내지 약 5:1이다. 이 구체예의 변형에서, 레시틴-대-오일비는 약 10:1 내지 약 5:2일 수 있다.
본 명세서에 개시된 주사용 에멀젼 조성물은 상업적으로 이용가능한 약물에 충분한 본 발명의 활성 화합물에 대한 장-기간 유통기한을 제공할 수 있다.
수중유 에멀젼인, 본 발명의 주사용 에멀젼 조성물은 다른 선행 기술 주사용 에멀젼 조성물과 그들의 조성물 및 특성에서 유의하게 다르다. 일 실시예에서, 정맥 주사를 위한 전통적인 주사용 에멀젼은 오일상으로서, 10% 식물 오일, 유화제로서 1.8% 계란 레시틴 및 삼투압 조절제로서 2.25% 글리세롤을 포함하고, 여기서 약물은 유적에서 용해되고, 유적은 수성상에서 현탁되는, 프로포폴 주사용 에멀젼의 조성물 (DIPRIVAN®)에 의해 대표될 수 있다. 유사한 조성물은 20% 식물 오일, 1.8% 계란 레시틴 및 2.25% 글리세롤을 포함하는 (예를 들면, www.cleviprex.com/clev-pdfs/1%2014_Proposed_PI-S-003%20(clean%20ver).pdf)를 참조한다), 클레비디핀 주사용 에멀젼 (Cleviprex®) 및 15% 식물 오일, 1.2% 계란 레시틴 및 2.2% 글리세롤을 포함하는 (예를 들면,www.pfizer.ca/en/our_products/products/monograph/203를 참조한다), 디아제팜 주사용 에멀젼 (DIAZEMULS®)에서와 같이, 기타 불용성 약물을 가용화하는데 이용된다. 이 선행 기술 주사용 에멀젼의 일반적인 조성물은 약 10-20% 식물 오일, 2% 미만 레시틴 및 약 2.2% 글리세롤을 갖는 것으로 요약될 수 있다. 또한, 이 선행기술 주사용 에멀젼은, 즉 그들은 외관에서 유-백색 및 불투명하고, 약 300-400 nm의 평균 액적 크기를 갖고, 및 수성 액체로서 제공되는, 유사한 물리적 특성을 공유한다. 이 선행 기술 에멀젼 조성물의 어느 것도 건조 분말로서 이용가능하지 않으며, 따라서 본 발명의 활성 화합물과 같이 물에 민감한 약물에 대해 이용될 수 없다.
일 구체예에서, 본 발명의 주사용 에멀젼은 "유백색 및 불투명(opaque)" 대신에 반-투명 외관이다. 반-투명 외관 또는 높은 광 투과율을 갖는 것은 사용자들이 주사 전 임의의 오염 또는 외부 물질의 존재에 대한 에멀젼을 조사하는 것을 가능하게 한다. 이것은 에멀젼 약물의 안정성을 보장하도록 도울 것이다. 본 발명의 주사용 에멀젼은 프로포폴 주사용 에멀젼과 같은 선행기술 에멀젼의 약 20% 미만과 비교하여, 바람직하게는 약 30% 이상, 보다 바람직하게는 약 40% 이상, 보다 더 바람직하게는 약 50% 이상, 및 보다 더 바람직하게는 약 60% 이상, 및 보다 더 바람직하게는 약 80% 이상의 광 투과율을 갖는다.
다른 구체예에서, 본 발명의 주사용 에멀젼은 선행 기술 에멀젼보다 훨씬 작은 평균 액적 크기를 갖는다. 본 발명의 화합물을 위한 주사용 에멀젼에 대한 통상적인 액적 크기는 100 내지 200 nm 직경이고, 100 nm 미만 직경일 수 있다. 대조적으로, 프로포폴 주사용 에멀젼과 같은 선행기술에서 개시된, 에멀젼 제품은 300 내지 400 nm의 통상적 액적 크기를 갖는다. 본 발명의 에멀젼의 더 작은 액적 크기는 0.2-미크론 필터를 통한 여과에 의한 에멀젼의 멸균을 가능하게 한다. 그러한 여과 멸균은 열, 오토클레이브, 방사성 또는 가스와 같은 다른 멸균 방법은 본 발명의 활성 화합물을 파괴할 수 있기 때문에 본 발명의 전구약물의 주사용 조성물에서 중요하다.
일 구체예에서, 본 발명의 에멀젼 조성물은 약 200 nm 이하 직경, 바람직하게는 약 175 nm 이하 직경, 바람직하게는 약 150 nm 이하 직경, 바람직하게는 100 nm 이하 직경, 및 바람직하게는 75 nm 이하 직경의 평균 초기 액적 크기를 갖는다.
다른 구체예에서, 본 발명의 에멀젼 조성물은 동결-융해 스트레스 후 약 200 nm 이하 직경, 바람직하게는 약 175 nm 이하 직경, 바람직하게는 약 150 nm 이하 직경, 바람직하게는 100 nm 이하 직경, 및 바람직하게는 75 nm 이하 직경의 평균 액적 크기를 유지한다.
다른 구체예에서, 본 발명의 에멀젼 조성물은 약 200 nm 이하 직경의 초기 액적 크기를 갖고, 동결-융해 스트레스 후 약 200 nm 이하 직경의 초기 액적 크기를 유지한다. 바람직하게는, 본 발명의 에멀젼 조성물은 약 150 nm 이하 직경의 초기 액적 크기를 갖고, 동결-융해 스트레스 후 약 200 nm 이하 직경의 초기 액적 크기를 유지한다.
본 명세서에 개시된 본 발명의 구체예의 다른 변형에서, 본 발명의 주사용 에멀젼은 동결건조될 수 있고, 건조 형태로 제공될 수 있다. 대조적으로, 선행 기술 에멀젼은 동결건조될 수 없고 오직 수성 에멀젼으로만 제공될 수 있다. 본 발명의 에멀젼의 동결건조가능한 본성은 본 발명의 활성 화합물의 장-기간 안정성을 제공하고, 본 발명의 에멀젼이 약물 제품으로서 상업적으로 이용가능하게 한다. 일 구체예에서, 본 발명의 주사용 에멀젼은 3 개월 이상, 바람직하게는 6 개월 이상, 바람직하게는 12 개월 이상, 바람직하게는 24 개월 이상 동안 본 발명의 활성 화합물에 대한 안정성을 제공하고, 일부 구체예에서, 동결건조된 형태로 적어도 48개월 동안 안정하다. 재구성에 의해, 본 발명의 에멀젼 조성물은 그들의 미리-동결건조된 퍼센트로 에멀젼 조성물의 성분을 바람직하게 유지할 것이다. 일부 구체예에서, 에멀젼 조성물은 재구성 후 약 6 시간 내지 약 48 시간 동안 안정하다.
일 구체예에서, 본 명세서에서 개시된 에멀젼 조성물은 조성물의 총 중량의 약 1.5% 내지 약 2.5%, 바람직하게는 약 2%의 본 발명의 활성 화합물; 조성물의 총 중량의 약 5% 이하, 바람직하게는 약 0.5% 내지 약 3%, 보다 바람직하게는 약 0.5% 내지 약 1%의 대두유 또는 유사 오일; 조성물의 총 중량의 약 5% 이하, 바람직하게는 약 0.5% 내지 약 3%, 보다 바람직하게는 약 0.5% 내지 약 1%의 중쇄 트리글리세리드, 조성물의 총 중량의 약 5% 내지 약 15%, 바람직하게는 약 5% 내지 약 12%, 보다 바람직하게는 약 5% 내지 약 10%의 레시틴; 및 조성물의 총 중량의 약 8% 내지 약 17%, 바람직하게는 약 10% 내지 약 15%의 수크로스를 포함하는 수중유 에멀젼이다.
일 구체예에서, 본 명세서에서 개시된 에멀젼 조성물은, 물과 혼합함으로써, 조성물의 총 중량의 약 1.5% 내지 약 2.5%, 바람직하게는 약 2%의 본 발명의 활성 화합물; 조성물의 총 중량의 약 5% 이하, 바람직하게는 약 0.5% 내지 약 3%, 및 보다 바람직하게는 약 0.5% 내지 약 1%의 대두유 또는 유사 오일; 조성물의 총 중량의 약 5% 이하, 바람직하게는 약 0.5% 내지 약 3%, 및 보다 바람직하게는 약 0.5% 내지 약 1%의 중쇄 트리글리세리드, 조성물의 총 중량의 약 5% 내지 약 15%, 바람직하게는 약 5% 내지 약 12%, 및 보다 바람직하게는 약 5% 내지 약 10%의 레시틴; 및 수크로스 조성물의 총 중량의 약 8% 내지 약 17%, 바람직하게는 약 10% 내지 약 15%의 수크로스를 포함하는 수중유 에멀젼을 형성하는 건조 (예를 들면, 동결건조된) 조성물이다.
본 발명은 또한 조성물의 총 중량의 약 1.5% 내지 약 2.5%, 바람직하게는 약 2%의 본 발명의 활성 화합물; 조성물의 총 중량의 약 5% 이하, 바람직하게는 약 0.5% 내지 약 3%, 및 보다 바람직하게는 약 0.5% 내지 약 1%의 대두유 또는 유사 오일; 조성물의 총 중량의 약 5% 이하, 바람직하게는 약 0.5% 내지 약 3%, 및 보다 바람직하게는 약 0.5% 내지 약 1%의 중쇄 트리글리세리드, 조성물의 총 중량의 약 5% 내지 약 15%, 바람직하게는 약 5% 내지 약 12%, 및 보다 바람직하게는 약 5% 내지 약 10%의 레시틴; 및 조성물의 총 중량의 약 8% 내지 약 17%, 바람직하게는 약 10% 내지 약 15%의 수크로스를 포함하는 수중유 에멀젼을 제조하는 방법을 제공한다.
본 발명은 또한 조성물의 총 중량의 약 1.5% 내지 약 2.5%, 바람직하게는 약 2%의 본 발명의 활성 화합물; 조성물의 총 중량의 약 5% 이하, 바람직하게는 약 0.5% 내지 약 3%, 및 보다 바람직하게는 약 0.5% 내지 약 1%의 대두유 또는 유사한 오일; 조성물의 총 중량의 약 5%, 바람직하게는 약 0.5% 내지 약 3%, 및 보다 바람직하게는 약 0.5% 내지 약 1%의 중쇄 트리글리세리드, 조성물의 총 중량의 약 5% 내지 약 15%, 바람직하게는 약 5% 내지 약 12%, 및 보다 바람직하게는 약 5% 내지 약 10%의 레시틴; 및 조성물의 총 중량의 약 8% 내지 약 17%, 바람직하게는 약 10% 내지 약 15%의 수크로스 (모든 퍼센트는 조성물의 총 중량에 기반한다)을 포함하는 수중유 에멀젼을 형성하는 물과 혼합하는 것에 의한 건조 (예를 들면, 동결건조된) 조성물을 제조하는 공정을 제공한다.
본 발명의 에멀젼은 산성화제, 알칼리화제, 항산화제, 항미생물 보존제, 삼투압 조절제, 동결-보호제, 및 기타 주사용 성분을 포함하나, 이에 제한되지 않는 약학적으로 허용가능한 첨가제를 더 포함할 수 있다. 특정 구체예에서, 그러한 첨가제는 에멀젼을 안정화하고 본 발명의 조성물에 대해 충분한 유통기한이 되도록 돕는다. 바람직한 구체예에서, 본 조성물은 화학적으로 물리적으로 모두 안정하다.
투여량(Dosage)
본 발명의 전구약물, 또는 그의 조성물은 일반적으로 의도된 목적을 달성하기 위해 유효한 양으로 사용될 것이다. 물론, 사용되는 양이 특정한 적용에 의존할 것이라는 것은 이해된다.
종양 또는 표적 세포 성장 또는 그와 연관된 질병을 치료 또는 예방하기 위한 용도를 위해, 본 발명의 전구약물 또는 그의 조성물은 치료적 유효량으로 투여되거나 또는 적용된다.
전신 투여를 위해, 치료적 유효한 투여량이 인 비트로 분석으로부터 초기에 추정될 수 있다. 예를 들면, 투여량은 세포 배양에서 측정된 IC50 (예를 들면, 세포 배양의 50%에 치명적인 테스트 화합물의 농도), 세포 배양에서 측정된 MIC (예를 들면, 성장에 대해 최소 억제 농도) 또는 세포 배양에서 측정된 IC100 (예를 들면, 세포 배양의 50%에 치명적인 펩티드의 농도)을 포함하는 순환하는 전구약물 농도 범위를 얻도록 동물 모델에서 제제화될 수 있다. 그와 같은 정보는 인간에서 유용한 투여량을 보다 정확하게 측정하는데 이용될 수 있다.
초기 투여량은 또한 인 비보 데이터, 예를 들면, 동물 모델로부터 당해 기술분야에서 잘 알려진 기법을 이용하여, 추정될 수 있다. 당해 기술분야의 통상의 기술자는 동물 데이터에 근거하여 인간에 대한 투여를 쉽게 최적화할 수 있다.
투여되는 활성 화합물의 양은, 물론, 치료받는 개체, 개체의 질량, 고통의 강도, 투여 방식 및 처방한 의사의 판단에 따라 의존할 것이다.
치료는 간헐적으로 반복될 수 있다. 치료는 단독으로 또는 예를 들면 항종양성 실물체 또는 기타 약학적으로 유효한 실물체와 같은, 다른 약물과 조합으로 제공될 수 있다.
독성
바람직하게는, 본 명세서에 기재된 활성 화합물의 치료적 유효 용량은 잠재적 독성을 유발하지 않고 치료적 이득을 제공할 것이다.
본 명세서에 기재된 활성 화합물의 독성은 세포 배양 또는 실험 동물에서 표준 약학적 절차에 의해, 예를 들면, LD50 (집단의 50%에 치사적 용량) 또는 LD100 (집단의 100%에 치사적 용량)을 측정하는 것에 의해 결정된다. 독성적 효과와 치료적 효과 사이의 용량 비는 치료적 지수이다. 높은 치료적 지수를 보이는 화합물이 바람직하다. 이 세포 배양 분석 및 동물 연구로부터 수득한 데이터는 인간에서 사용에 독성적이지 않는 범위의 투여량을 제제화하는데 이용될 수 있다. 본 명세서에 기재된 활성 화합물의 투여량은 바람직하게는 약간 또는 전혀 독성이 없는 유효한 용량을 포함하는 순환하는 농도의 범위에 놓여있다. 투여량은 사용되는 투여량 형태 및 이용되는 투여 경로에 의존하는 범위에서 다양할 수 있다. 정확한 제제, 투여 경로, 및 용량은 환자의 상태를 고려하여 각 의사에 의해 선택될 수 있다 (예를 들면, Fingi et al., 1975, In: The Pharmacological Basis of Therapeutics, Ch. 1, p.l 를 참조한다).
제조 물품
본 발명의 다른 구체예에서, 전술된 질환의 치료에 유용한 물질을 포함하는 제조 물품, 또는 "키트"가 제공된다. 제조 물품은 용기 및 용기에 또는 용기와 연관된 라벨 또는 의약품 첨부문서(package insert)를 포함한다. 적합한 용기는 예를 들면, 병, 바이얼, 주사기, 블리스터 팩 등을 포함한다. 용기는 유리 또는 플라스틱과 같은 다양한 재료로부터 형성될 수 있다. 용기는 상태를 치료하는데 유효한 활성 화합물 또는 그의 제제를 (예를 들면, 본 발명의 주사용 에멀젼의 동결건조된, 수화되거나 또는 재수화된 버전) 담고, 멸균 접근 포트 (예를 들면 용기는 정맥내 용액 백 또는 피하 주사 바늘에 의해 뚫을 수 있는 마개를 갖는 바이얼일 수 있다)를 가질 수 있다. 조성물에서 하나 이상의 활성 작용제는 본 발명의 활성 화합물이다. 라벨 또는 의약품 첨부문서는 조성물이 세포 증식성 질환 또는 암과 같은 선택의 상태를 치료하는데 이용된다는 것을 나타낸다. 일 구체예에서, 라벨 또는 의약품 첨부문서는 사용을 위한 지침서를 포함하고, 본 발명의 화합물이 세포 증식성 질환 또는 암을 치료하는데 이용될 수 있다는 것을 나타낸다.
다른 구체예에서, 키트는 (a) 본 발명의 활성 화합물 또는 거기에 포함된 그의 제제를 갖는 제1 용기; 및 (b) 거기에 포함된 제2 약학적 제제를 갖는 제2 용기를 포함할 수 있으며, 상기 제2 약학적 제제는 항-종양 또는 항-증식성 활성을 갖는 제2 화합물을 포함할 수 있다. 본 발명의 구체예에서 제조 물품은 제1 및 제2 화합물이 암과 같은, 세포 증식성 질환을 갖는 환자를 치료하는데 이용될 수 있다는 것을 나타내는 의약품 첨부문서를 더 포함할 수 있다. 대안적으로, 또는 추가적으로, 제조 물품은 주사용 정균수(bacteriostatic water for injection: BWFI), 인산-완충 식염수, 링거액 및 덱스트로스 용액과 같은 약학적으로 허용가능한 완충제를 포함하는 제2 (또는 제3) 용기를 더 포함할 수 있다. 그것은 기타 완충제, 희석제, 필터, 바늘, 주사기를 포함하는, 상업적이고 사용자 관점에 적절한 기타 재료를 더 포함할 수 있다.
치료 방법
본 발명은 또한 본 발명의 활성 화합물에 의해 본 발명의 펩티드 서열 (예를 들면, FAP, hK2, PSMA 및 PSA)을 표적화하는 프로테아제를 생산하는 세포 증식성 질환 또는 암을 치료하는 방법을 제공한다. 본 발명의 활성 화합물 및/또는 그의 유사체 또는 유도체는 인간 또는 비-인간 동물을 포함하는, 임의의 숙주에게, 그러한 질환을 치료하는 유효한 양으로 투여될 수 있다.
상기에서 언급한 바와 같이, 본 발명의 활성 화합물은 주사 또는 시간에 걸친 점진적 주입에 의해 비경구로 투여될 수 있다. 전구약물은 정맥내, 복강내, 근육내, 피하, 공강내(intracavity), 또는 경피로 투여될 수 있다. 본 발명의 활성 화합물의 전달을 위한 바람직한 방법은 정맥내 또는 피하 투여를 포함한다. 일 구체예에서, 본 발명의 활성 화합물의 바람직한 전달 방법은 주사용 에멀젼을 통하는 것이다. 기타 투여 방법, 및 용량 요법은 당해 기술 분야의 통상의 기술자에게 공지될 것이다.
일 구체예에서, 본 명세서에 기재된 주사용 에멀젼은 암을 갖는 것으로 의심되는 개체, 암으로 진단받은 개체 또는 암을 가질 위험이 있는 개체에서 세포 증식성 질환 또는 암을 치료하기 위해 본 발명의 활성 화합물을 투여하는데 이용될 수 있다.
일 구체예에서, 본 명세서에 기재된 주사용 에멀젼은 암종, 흑색종, 림프종, 아세포종, 육종, 및 백혈병 또는 악성 림프종을 갖는 것으로 의심되거나, 그로 진단 받거나, 그에 대한 위험이 있는 개체에서 암을 포함하는 세포 증식성 질환을 치료하기 위해 본 발명의 활성 화합물을 투여하는데 이용될 수 있다. 또한, 이 구체예에서, 본 명세서에 기재된 주사용 에멀젼은 상피암으로 진단받거나, 그에 대한 위험이 있는 개체에서 암을 치료하기 위해 본 발명의 활성 화합물을 투여하는데 이용될 수 있다.이 구체예의 추가적인 변형에서, 본 명세서에 기재된 주사용 에멀젼은 전립선, 간 또는 유방 암으로 진단받거나, 그에 대한 위험이 있는 개체에서 암을 치료하기 위해 본 발명의 활성 화합물을 투여하는데 이용될 수 있다. 다른 구체예에서, 본 명세서에 기재된 주사용 에멀젼은 세포 증식성 질환, 예를 들면, BPH를 치료하기 위해 본 발명의 활성 화합물을 투여하는데 이용될 수 있다.
조합 치료 방법
본 발명의 화합물은 약학적 조합 제제, 또는 조합 치료로서 용량 용법에서, 항-증식성 특성 또는 암을 포함하는 세포 증식성 질환을 치료하는데 유용한 제2 화합물과 함께 조합될 수 있다. 약학적 조합 제제 또는 용량 요법의 제2 화합물은 바람직하게는 그들이 역으로 다른 것(들)에게 영향을 미치지 않도록 본 발명의 활성 화합물에 대한 상보적 활성을 갖는다. 그와 같은 분자는 의도된 목적을 위해 유효한 양으로 조합하여 적절하게 존재한다.
조합 요법은 동시 또는 순차 용법으로서 투여될 수 있다. 순차적으로 투여될 경우, 조합은 2 이상의 투여로 투여될 수 있다. 조합된 투여는 분리 투여 또는 단일 약학적 제제를 이용하는, 병용투여, 및 단일 약학적 제제, 및 활성 작용제 둘 다 (또는 모두)가 동시에 그들의 생물학적 활성을 가하는 순서에서 연이은 투여를 포함한다. 상기 임의의 병용투여된 작용제에 적합한 용량은 현재 이용되는 것이며, 새롭게 확인된 작용제와 기타 화학요법제 또는 치료의 조합 작용(시너지) 때문에 더 낮아질 수 있다.
조합 치료는 "상승작용(synergy)"을 제공하고, "상승적(synergistic)"을 입증하는데, 예를 들면 활성 성분이 함께 이용될 경우 수득되는 효과가 화합물을 별도로 사용하는 것으로부터 기인하는 효과의 합계보다 더 크다. 상승적 효과는 활성 성분이: (1) 동시-제제화되고 조합된 단일 용량 제제로 동시에 투여되거나; (2) 분리 제제로서 교대로 또는 동시에 투여되거나; 또는 (3) 일부 기타 요법에 의할 경우 달성될 수 있다. 대체요법에서 전달될 경우, 상승 효과는 순차적으로, 예를 들면 개별 주사기로 상이한 주사에 의해 투여되거나 전달될 경우, 달성될 수 있다. 일반적으로, 대체 요법 중, 각 활성 성분의 효율적인 용량은 순차적으로, 예를 들면 연속적으로, 투여되는 반면, 조합 용법에서는 2 이상의 활성 성분의 유효 투여량이 함께 투여된다.
예로서, 작용제는 비정상적 증식성 세포 덩어리를 제거하는 수술과 조합하여 투여될 수 있다. 본 명세서에서 사용된, "수술과 조합(in combination with surgery)"은 작용제가 수술 과정 이전, 중, 또는 이후에 투여될 수 있다는 것을 의미한다. 상피 종양 상태를 치료하는 방법은 오른쪽 또는 왼쪽 반결장절제술, S자 결장, 부분 또는 전체 대장절제술 및 위절제술, 철저한 또는 부분적 유방절제술, 전립선적제술 및 자궁절제술과 같은 복강 내의 수술을 포함한다. 이 구체예에서, 작용제는 지속 주입에 의하거나 또는 단일 볼러스(bolus)로 투여될 수 있다. 수술 중 또는 바로 뒤의 투여는 약학적으로 허용가능한 담체에서 작용제의 약학적 제제와 함께 종양 절단 부위의 세척, 담그기 또는 관류를 포함할 수 있다. 일부 구체예에서, 작용제는 전이 병변의 형성 및 발달을 저해하기 위해 수술 시간 및 후속 수술에 투여된다. 작용제의 투여는 종양 덩어리를 제거하는 수술 절차 후 수시간, 수일, 수주, 또는 일부 경우에, 수개월 동안 지속할 수 있다.
개체는 비-수술 항-증식성 (예를 들면, 항-암) 약물 요법과 조합하여 작용제를 투여받을 수 있다. 일 구체예에서, 작용제는 세포증식억제성(cytostatic) 화합물과 같은 항-암 화합물과 조합하여 투여될 수 있다. 세포증식억제성 화합물은 세포 성장 및/또는 증식을 억제하는 화합물 (예를 들면, 핵산, 단백질)이다. 일부 구체예에서, 세포증식억제성 화합물은 종양의 악성 세포에 대한 것이다. 또 다른 구체예에서, 세포증식억제성 화합물은 혈관 평활근 세포 또는 섬유아세포의 성장 및/또는 증식을 저해하는 화합물이다.
본 발명의 작용제와 조합하여 사용되는 적합한 항-증식성 약물 또는 세포증식억제성 화합물은 항-암 약물을 포함한다. 항-암 약물은 당해 기술 분야에서 잘 알려져 있고, 예를 들면, 미국 특허 출원 번호 제12/087,398호에 기술된다.
본 발명의 방법에 따라, 본 발명의 작용제는 다른 항-암 화합물 전에, 동시에, 뒤에 투여될 수 있다. 투여 스케줄은 대안적 방식으로 상이한 작용제를 투여하는 것을 포함할 수 있다. 다른 구체예에서, 작용제는 다른 요법에 의한 치료 이전과 동안 또는 동안과 이후, 또는 이전과 이후에 전달될 수 있다. 일부 경우에, 작용제는 다른 항-증식성 치료의 투여 24시간 초과 전에 투여된다. 다른 구체예에서, 하나 이상의 항-증식성 치료는 개체에게 투여될 수 있다. 예를 들면, 개체는 외과 수술 및 하나 이상의 다른 항-증식성 화합물과 조합하여, 본 발명의 작용제를 받아들일 수 있다. 대안적으로, 작용제는 하나 이상의 항-암 약물과 조합하여 투여될 수 있다.
전구약물 화합물을 제조하는 방법
본 발명은 본 발명의 활성 화합물을 생산하는 방법을 제공한다. 이 방법은 치료적 활성 약물을 전술된 본 발명의 펩티드에 결합하는 것을 포함한다. 특정 구체예에서 펩티드는 약물에 직접적으로 연결된다; 다른 구체예에서 펩티드는 링커를 통해 약물에 간접적으로 연결된다. 특정 구체예에서, 펩티드의 카르복시 말단은 PSA, hK2 및 FAP에 의해 절단되기 쉬운 전구약물과 연결을 위해 이용된다. 다른 구체예에서, 펩티드의 아미노 말단은 PSMA에 의해 절단되기 쉬운 전구약물과 연결을 위해 이용된다. 본 발명의 PSMA 전구약물을 제조하는 일 실시예가 미국 출원 번호 제61/791,909호에서 개시된다.
일부 구체예에서, 치료 약물은 펩티드와 아미드 결합의 형성을 용이하게 하기 위해 일차 아민을 포함한다. 아미드 결합을 형성하기 위한 카르복실기와 아미노기의 커플링을 위한 많은 허용가능한 방법이 당해 기술 분야의 통상의 기술자에게 공지된다.
펩티드는 링커를 통해 치료 약물과 커플링될 수 있다. 적합한 링커는 일차 아민을 포함하는 임의의 화학적 그룹을 포함하나, 이제 제한되지 않고, 아미노산, 일차 아민-함유 알킬, 알케닐 또는 아레닐 기를 포함한다. 링커와 치료 약물 사이의 결합은 당해 기술 분야에서 알려진 임의의 형태, 바람직하게는 공유 결합일 수 있다.
본 발명의 펩티드 전구약물과 함께 이용될 수 있는 링커는 미국 특허 번호 제7,906,477호; 제7,053,042호; 제7,767,648호; 제7,468,354호; 제6,265,540호; 제6,504,014호; 제6,410,514호; 제6,545,131호; 및 제7,635,682호, 및 미국특허 출원 번호 제12/087,398호, 제13/471,316호 및 제13/257,131호에서 기술되었다.
특정 구체예에서, 링커는 아미노산 또는 아미노산 서열을 포함한다. 서열은 임의의 길이일 수 있으나, 바람직하게는 1 내지 10 개의 아미노산, 가장 바람직하게는 1 내지 5개의 아미노산이다.
전구약물 화합물은 당해 기술 분야의 통상의 기술자에게 공지된 표준 합성 또는 재조합 기법에 따라 제조될 수 있다. 예를 들면, 모이어티와 결합하는 펩티드는 종래 고상 또는 용액상 펩티드 화학에 의해 합성될 수 있다. 생물학적 활성 실물체 및 마스킹 모이어티는 상업적 공급원 또는 천연 공급원으로부터 정제, 재조합 발현, 및 기타 기법과 같은 다른 잘 알려진 방법으로부터 수득될 수 있다. 이중 극성 링커 및 스페이서 모이어티는 상업적 공급원 또는 다른 잘 알려진 방법으로부터 합성되거나 수득될 수 있다.
통상적으로, 전구약물은 마스킹 모이어티 및 생물학적 활성 모이어티와 결합 모이어티를 축합하는 것에 의해 합성적으로 제조된다. 잘 알려진 보호 그룹이 전구약물 화합물의 제조에 유리하게 이용될 수 있다. 결합 모이어티가 펩티드이고, 생물학적 활성 실물체가 폴리펩티드이고, 결합 모이어티의 말단이 아미드 결합을 통해 생물학적으로 활성 실물체의 상보적 말단에 결합될 경우, 전구약물, 또는 그의 부분은 알맞게는 재조합 합성에 의해 제조될 수 있다. 결합 모이어티의 아미노산 서열을 코딩하는 핵산 및 생물학적 활성 작용제는 표준 기법 (예를 들면, Ausubel et al., 1987, Current Protocols in Molecular Biology, John Wiley & Sons, Inc., New York를 참조한다)에 의해 공유 결합 모이어티-생물학적 활성 작용제 복합체로 제조되고 이용될 수 있다. 마스킹 모이어티는 그 후 표준 용액상 펩티드 화학에 의해, 예를 들면, 결합 모이어티의 아미노 말단에 결합될 수 있다. 마스킹 모이어티가 또한 펩티드 또는 폴리펩티드이고 마스킹 모이어티의 말단이 아미드 결합을 통해 결합 모이어티의 상보적 말단에 결합될 경우, 전체 전구약물은 재조합 합성 기법에 의해 알맞게 제조될 수 있다. 전구약물을 발현하는 핵산은 마스킹 모이어티, 결합 모이어티 및 생물학적 활성 실물체의 아미노산 서열을 나란히 코딩해야 한다. 재조합 합성에 의해 생산된 전구약물은 결합 모이어티가 프로테아제, 펩티다제 도는 기타 요인에 의해 절단되지 않는 진핵 또는 원핵 시스템에서 발현될 수 있다.
본 발명은 이제 하기의 비-제한적인 실시예를 참조로 더 구체적으로 설명될 것이다.
실시예 1. Ser - Ser - Lys - Tyr - Gln - L12ADT (서열번호 18)을 포함하는 에멀젼의 제조
펩티드 Ser-Ser-Lys-Tyr-Gln (서열번호 18) ("G-115"로서 본 명세서에서 지칭됨) 의 카르복시 말단에 결합된 탭시가르긴 유도체 8-O-(12-[L-류시노일아미노]도데카노일)-8-O-데부타노일탭시가르긴 (L12ADT)을 포함하는 에멀젼을 하기 조성물 및 절차를 이용하여 제조하였다:
G-115 F9 조성물
Figure pct00004
절차
1. 대두유, 중쇄 트리글리세리드, 콩 레시틴, 및 수크로스를, 약 80% 배치 크기의 탈이온수와 함께, 적합한 크기의 용기 안으로 덜어서 옮긴다. 첨가된 각 성분의 질량을 기록한다.
2. 약 2분 동안 약 5000 RPM에서 고속 전단 믹서(예를 들면, Silverson Model LS)를 이용하여 균질화하여 조(crude) 에멀젼을 수득한다.
3. G-115의 배치 양을 덜어서 에멀젼으로 옮긴다. 고속 전단하여 모든 고체를 용해시킨다.
4. 균질화하고, 1N 염산 또는 소듐 히드록사이드를 이용하여 pH를 3 - 4로 조정한다.
5. 전체 배치 중량에 탈이온수를 첨가한다.
6. 레이저 광 산란 (LLS) 방법 (예를 들면, Model NanoZS, Malvern Zeta sizer)에 의해 측정된 평균 액적 크기가 150nm 미만일 때까지, 마이크로플루다이저 (예를 들면, Model M110EH, Microfluidics Corporation)를 이용하여 균질화한다.
7. 에멀젼을 멸균하기 위해 0.22 μM 필터를 통해 에멀젼을 여과한다.
8. 무균적으로, 멸균 바이얼 안으로 여과된 에멀젼을 채운다.
9. 바이얼을 크림프(crimp) 밀봉한다.
이에 따라 제조된 G-115 F9 에멀젼은 150 nm 미만의 액적 크기를 갖는 황백색 및 반-투명한 용액이다.
실시예 2. G-115을 포함하는 조성물 및 에멀젼의 액적 크기
2% w/w G-115를 포함하는 다양한 에멀젼을 실시예 1에서 기술된 절차에 의해 하기 조성물을 이용하여 제조하였다:
Figure pct00005
평균 액적 크기를 레이저 광 산란 (LLS) 방법 (예를 들면, Model NanoZS, Malvern Zeta sizer)에 의해 각 조성물에 대해 측정하였다.
3번의 동결-융해 주기 후 150 nm 미만의 초기 액적 크기 및 200 nm 미만의 액적 크기를 보이는 조성물을 F2, F3, F4, F9 및 FlO에서 관찰하였다. 이 조성물은 약 2%의 G-115, 약 0-1%의 대두유, 약 0-1%의 중쇄 트리글리세리드, 약 10-15%의 레시틴 및 약 10-15%의 수크로스를 포함하였다. 이 조성물에서 레시틴-대-약물 중량비는 약 5:1 내지 7.5:1인 것으로 측정되었다. F9 및 FlO의 조성물에 대해, 레시틴-대-오일 비는 약 10:1 내지 5:1인 것으로 측정되었다. 조성물에 오일이 포함된, 조성물 F9 및 FlO이 F2, β, 및 F4 보다 3번의 동결-융해 주기 후 더 작은 초기 액적 크기 및 더 작은 액적 크기를 보인다는 것을 또한 관찰하였다.
실시예 3. 서열 Asp - Glu * Glu * Glu * Glu (서열번호 486) (본 명세서에서 "G-202"로 지칭됨)을 갖는 펩티드의 아스파르트산에 결합된 탭시가르긴 유도체 8-O-(12-아 미노도데카 노일)-8-0- 데부타노일 탭시가르긴 (12 ADT )을 포함하는 에멀젼의 제조.
2%의 G-202를 포함하는 에멀젼을 다음 조성물 및 실시예 1에서 기재된 바와 유사한 절차를 이용하여 제조하였다:
G-202 F9 조성물
Figure pct00006
● 측정된 밀도는 실온에서 1.026 g/mL이다
** 2.052 mg/mL와 동일
절차:
1. 레시틴, 대두유, 중쇄 트리글리세리드, 수크로스의 배치 양 및 WFI의 약 80% 배치 양을 덜어서 적합한 크기의 용기로 옮긴다. 추가된 각 성분의 중량을 기록한다.
2. 일차 에멀젼을 형성하기 위해 고속 절단 믹서 (예를 들면 Silverson Model L5)를 이용하여 약 5000 RPM에서 약 2분 동안 균질화한다.
3. G-202의 배치 양을 덜어서 에멀젼으로 옮긴다. 모든 고체를 용해시키기 위해 고속 전단한다.
4. WFI의 1-2% 배치 크기를 갖는 믹서 헤드를 헹군다. 헹굼액을 수거하고 일차 에멀젼으로 다시 옮긴다.
5. 1N 아르기닌 용액으로 조 에멀젼의 pH를 6.5 +/- 0.2로 조정한다.
6. 보다 많은 WFI를 표적 배치 크기로 첨가한다. 균일한 일차 에멀젼을 형성하도록 고속 전단한다.
7. 레이저 광 산란 (LLS) 방법 (Model NanoZS, Malvern Zeta sizer)에 의해 측정된 평균 직경이 150nm 미만으로 액적 크기를 줄이기 위해 마이크로플루다이저 (Model M110EH, Microfluidics Corporation)를 이용하여, 10번의 통과 동안 일차 에멀젼을 마이크로플루다이즈한다 .
8. pH를 측정한다. 필요에 따라 1N 아르기닌에 의해 pH를 6.0 +/- 0.2로 조정한다.
9. 생물안전 후드에서, 마이크로플루다이즈화된 에멀젼을 멸균 0.2 μM 필터 (Polyethersulfone, Nalgene)를 통해 멸균 수납 용기 안으로 무균성으로 여과한다.
10. 멸균 USP Type I 2-mL 유리 바이얼 (공급자: Schott, cat#:68000314) 안으로 여과된 에멀젼을 채우고, 멸균 고무 클로져(closure) (공급자: Fisher Scientific, cat#:06447D)로 크림프 밀봉한다.
이에 따라 제조된 G-202 F9 에멀젼은 150nm 미만의 액적 크기를 갖는 황백색 및 반투명 용액이다.
실시예 4. G-202을 포함하는 조성물 및 에멀젼의 액적 크기
2% G-202을 포함하는 에멀젼을 실시예 3에서 기술된 절차에 의해 하기 조성물을 이용하여 제조하였다:
Figure pct00007
평균 액적 크기를 레이저 광 산란(LLS) 방법 (예를 들면, Model NanoZS, Malvern Zeta sizer)에 의해 각 조성물에 대해 측정하였다. 150 nm 미만의 초기 액적 크기 및 3번의 동결-융해 주기 후 200 nm 미만의 액적 크기를 보이는 조성물을 F9, F105, 및 F106에서 관찰하였다. 이 조성물은 약 2%의 G-202, 약 0.5-1%의 대두유, 약 0.5-1%의 중쇄 트리글리세리드, 약 5-10%의 레시틴 및 약 10-15%의 수크로스를 포함하였다. 레시틴-대-약물의 중량비는 약 2.5:1 내지 5:1이고, 레시틴-대-오일의 비는 약 10:1 내지 5:2이다.
실시예 5. 동결건조
G-115 (실시예 1) 및 G-202 (실시예 3)를 포함하는 F9 조성물을 아래 기술된 공정을 이용하여 추가로 동결건조하였다:
1. 1.0 mL의 여과된 에멀젼을 2-mL USP type I 유리 바이얼(Schott, cat# 68000314)안에 채운다. 바이얼의 절반 아래(half-way down)에 스토퍼(stopper)를 위치시킨다 (13mm 회색 부틸 스토퍼, Wheaton, cat#06447E).
2. 하기 동결-건조 주기 조건을 갖는 동결 건조기(FTS System Model:Dura Stop μP) 안에 바이얼을 둔다:
동결상 파라미터:
Figure pct00008
건조상 파라미터:
Figure pct00009
3. 동결 건조 후, 바이얼을 여과된 질소 기체, NF로 다시 채우고, 약 95% 대기압에서 바이얼을 밀봉한다.
4. 재구성 후, 0.75 mL WFI을 바이얼 안에 첨가한다. 2분 이상 동안 또는 모든 고체 덩어리가 용해될 때까지 손으로 반복적으로 바이얼을 뒤집어서 균일한 에멀젼을 형성시킨다.
이 동결 건조 방법은 각각의 제제에 대한 바이얼에서 황백색, 균일한 케이크-유사 건조 형태를 생산하였다. 전(pre)-동결건조 중량에 대한 동결건조물을 포함하는 바이얼에 물을 첨가시, 동결건조물은 황백색 및 반-투명한 용액을 형성하였다. 재구성된 에멀젼의 액정 크기를 실시예 2 및 4에서 나타낸 바와 같이, 각 조성물에 대해 측정하였다.
실시예 6. G-115을 포함하는 에멀젼의 안정성
많은 G-115 F9 동결건조된 에멀젼 (lot# 141-1-46)을 실시예 1 내지 5에 따라 제조하고 안정성에 대해 테스트하였다. 안정성 테스트는 외관, pH, G-115 분석 및 HPLC에 의한 순도, 및 레이저 광 산란에 의해 측정된 평균 액적 크기를 포함하였다.
동결건조된 케이크의 외관
Figure pct00010
재구성된 에멀젼의 외관
Figure pct00011
재구성된 에멀젼의 광학 현미경 관찰 (200X 배율)
Figure pct00012
pH
Figure pct00013
G-115 어세이 (mg/바이얼)
Figure pct00014
% 라벨 클레임(Label claim) (라벨 클레임 = 20 mg/바이얼)
Figure pct00015
크로마토그래피 순도% (% 피크 면적)
Figure pct00016
레이저 빛 산란 방법에 의한 평균 액적 크기 (nm)
Figure pct00017
결론: 동결건조된 제형에서 G-115 F9는 3.5 개월 동안 -20, 2-8 및 25℃에서 물리적 및 화학적으로 안정하다.
실시예 7. G-202를 포함하는 에멀젼의 안정성
많은 G-202 F9 동결건조된 에멀젼 (lot# 141-2-1)을 실시예 3 및 5에 따라 제조하고, 안정성에 대해 테스트하였다. 안정성 테스트는 외관, pH, G-220 분석 및 HPLC에 의한 순도, 및 레이저 광 산란에 의해 측정된 평균 액적 크기를 포함하였다.
동결건조된 케이크의 외관
Figure pct00018
재구성된 에멀젼의 외관
Figure pct00019
현미경 관찰 (200X 배율)
Figure pct00020
pH
Figure pct00021
G-202 분석 (mg/바이얼)
Figure pct00022
% 라벨 클레임 (라벨 클레임 = 20 mg/바이얼)
Figure pct00023
크로마토그래피 순도 % (% 피크 면적)
Figure pct00024
레이저 광 산란 방법에 의한 평균 액적 크기 (nm)
Figure pct00025
결론: 동결건조된 형태에서 G-202 F9는 -20, 2-8 및 25℃에서 3 개월 동안 물리적 및 화학적으로 안정하다.
실시예 8: 광 투과율 값 측정
많은 G-202 F9 동결건조된 에멀젼 (lot# 141-2-lL)을 약 20 mg/mL로 주사용수에 의해 재구성하였다. 재구성된 에멀젼을 광 투과율 측정 (Model: Pharmacia LKB, Ultraspec III)을 위해 1-mm 셀 안에 넣었다. 600 nm에서 측정된 광 투과율는 91.6%이었다.
실시예 9: 약동학적 프로파일의 비교
이 연구의 목적은 남성 사이노몰구스 원숭이에 단일-용량 정맥 주입 후 폴리프로필렌 글리콜/폴리소르베이트 20 (제제 A)로 제제화된 G-202 대(versus) 나노 에멀젼 (G-202 F9, 제제 B)으로서 제제화된 G-202의 약동학적 프로파일을 평가하고 비교하는 것이었다. 희석제는 제제 A를 위해 폴리프로필렌 글리콜, 폴리소르베이트 20, 및 0.9% 소듐 클로라이드이고, 제제 B를 위해 주사용수 및 5% 덱스트로스이다. 이 연구는 테스트 제품의 2개의 상이한 제제 및 2개의 투여 사건(dosing event)을 이용하는 교차형 디자인이다. 동물들은 밤새 금식시켰고, 투여 약 2-시간 이후 먹이를 주었다. 투여 사건 사이에 대략 3-주의 워쉬아웃(washout) 기간이 있었다. 원숭이는 이전 약물 처리에 관하여 무경험이었지만 연구의 초기화 전에 완성된 물리적 실험 및 임상 병상 평가에 기반하여 양호한 건강에 있을 것으로 고려되었다. 동물은 하기 표에서 나타낸 실험 디자인에 따라 투여되었다. 테스트 제품의 2개의 상이한 제제를 두개의 투여 세션(사건)의 각각에서 이용하였다. 동물들을 밤새 금식시켰고, 투여 대략 2 시간 후 먹였다. 1 및 20일 차에 투여 사건 사이에 대략 3-주의 워쉬아웃 기간이 있었다.
Figure pct00026
각각의 투여일에, 혈액 시료 (대략 1 mL/시료)를 각 원숭이로부터 하기 나열된 시점에서 취하였다. 모든 시료를 명시된 창(specified window)에서 수거하였다.
시료 수거 스케줄
Figure pct00027
농도를 각 투여 사건 후 각 제제에 대해 측정하였다. 또한, 제제 A 및 B를 제조하는데 이용된 각 비히클 제제의 시료를 수거하였다. 제제 B의 투여 용액은 허용가능한 기준 (0.4 mg/mL 약물 농도의 96 및 95%)을 충족하였다. 제제 A에 대한, 약물 농도의 분석은 허용가능한 기준 (±10%) 보다 더 낮았다 (정상 0.4 mg/mL의 77 및 79%); 그러므로, 실제 농도를 이용하였고, 투여량의 정규화된 값을 선택된 약동학적 값의 비교를 위해 이용하였다.
혈액 시료 (대략 1 mL/시료)를 대퇴부 정맥을 통해 투여 전 및 투여 후 0.25, 0.5, 1, 3, 9, 12, 24, 및 48 시간에 각 원숭이로부터 수거하였다. 혈장은 LC-MS/MS 방법을 통해 분석할 때까지 냉동 저장하였다.
2개의 제제에서 G-202에 대한 약동학적 파라미터를 표 5 (도 9)에 나타낸다. 개개의 동물 G-202 농도 대 시간에 대한 그래프를 도 10에 나타낸다. 평균 G-202 농도 대 시간의 그래프를 도 11에 나타낸다.
두 제제에 대한 평균 (±SD) 약동학적 파라미터를 하기 표에 나타낸다.
Figure pct00028
두 제제에 대해, 평균 Tmax를 첫번째 투여 후 샘플링 시점, 0.25 시간에서 관찰하였다. G-202 제거 반감기는 제제들 사이에서 유사하였다; 제제 A에 대한 평균 반감기는 9.87 시간이었고, 제제 B에 대한 평균 반감기는 9.93 시간이었다. 분포 부피 또한 두 개의 제제 사이에서 유사하였다 (제제 A에 대해 54.8 mL/kg, 제제 B에 대해 58.8 mL/kg). 클리어런스 값은 두개의 제제 사이에서 유사하였다 (제제 A에 대해 3.83 mL/hr/kg, 제제 B에 대해 4.14 mL/hr/kg).
두 제제 사이의 용량 수준 차이 때문에, Cmax 및 AUC0 - 8를 투여량-정규화된 기준에서 비교하였다. 평균 투여량-정규화된 AUC0 -∞ 값은 두 개의 제제 사이에서 유사하였다 (제제 A에 대해 265,000 hr*kg*ng/mL/mg, 제제 B에 대해 252,000 hr*kg*ng/mL/mg). 평균 투여량-정규화된 Cmax 값은 제제 A보다 약간 높다 할지라도 또한 두 개의 제제 사이에서 유사하였다 (제제 A에 대해 29,300 kg*ng/mL/mg, 제제 B에 대해 25,100 kg*ng/mL/mg).
이 연구의 데이터에 근거하여, 2개의 제제의 약동학성은 유사하다.
논문, 특허, 및 특허 출원의 내용, 및 본 명세서에서 언급되거나 또는 인용된 모든 기타 문서 및 전자적으로 이용가능한 정보는, 각 개개의 공개문헌이 구체적으로 및 개별적으로 참조로 포함될 것이 지시되는 경우 동일한 정도로 그것의 전체 내용이 여기에 참조로 포함된다. 출원인은 임의의 그러한 논문, 특허, 특허 출원, 또는 다른 문서들로부터 일부 및 모든 재료 및 정보를 본 출원으로 물리적으로 포함될 권리를 보유한다.
예시적으로 본 명세서에 기재된 본 발명은, 본 명세서에 구체적으로 개시되어 있지 않은 임의의 요소 또는 요소들, 한정 또는 한정들의 부재 하에서 적절하게 실시될 수 있다. 따라서 예를 들면, 용어 "포함하는(comprising)", "포함하는(including)", "포함하는(containing)" 등은 확장적이고 한정 없이 읽어져야 한다. 추가적으로, 본 명세서에서 사용된 용어 및 표현들은 제한이 아닌 설명의 관점에서 사용되고, 이러한 용어 및 표현의 사용에는, 도시되고 설명된 특성(feature) 또는 이들의 일부에 대한 임의의 동등한 것(equivalent)을 배제하려는 어떠한 의도도 없으나, 청구된 발명의 범위 내에서 다양한 수정이 가능한 것으로 인식된다. 그러므로 비록 본 발명이, 본 발명에서 구체화된 본 발명의 바람직한 구체예 및 선택적 특징, 수정 및 변형에 의해 구체적으로 개시되어 있으나, 여기에 개시된 것은 당업자에게 의존될 수 있고, 그러한 수정 및 변형이 첨부된 청구항에 의해 정의된 본 발명의 범위 내에서 고려될 수 있다.
본 발명은 여기에 광범위하고 일반적으로 설명되어 있다. 범용적으로 공지된 것(generic disclosure)에 속하는 각각의 좁은 종(narrower species) 및 아속(subgeneric) 분류(grouping)가 또한 본 발명의 일부를 형성한다. 이는, 제거된 것(material)이 특히 여기에 언급되었는지 여부와 관계없이, 속(genus)으로부터의 임의의 주제(subject matter)를 제거하는 단서(proviso) 또는 부정적 한정(negative limitation)과 함께 본 발명의 일반적인 설명을 포함한다.
본 명세서에서 개시되고 청구된 모든 조성물 및 방법은 본 개시를 고려하여 만들어지고 지나친 실험 없이 실행될 수 있다. 본 발명의 조성물 및 방법은 바람직한 구체예 측면에서 기술되었으나, 변형이 조성물 및 방법에 및 본 발명의 개념, 정신 및 범주를 벗어나는 것 없이 본 명세서에 기재된 방법의 단계의 순서의 단계 내에서 적용될 수 있다는 것은 당해 기술 분야의 통상의 기술자에게 명백할 것이다. 보다 구체적으로, 화학적 및 생리적으로 모두 연관된 특정 작용제가 동일하거나 또는 유사한 결과가 얻어지는 동안 본 명세서에 기재된 작용제로 치환될 수 있다는 것은 명백할 것이다. 당해 분야의 통상의 기술자에게 명백한 모든 그와 같은 유사한 치환 및 변형은 첨부된 청구항에 의해 정의된 바와 같은 본 발명의 정신, 범위 및 개념 안에 있다고 여겨진다.
기타 구체예가 하기 청구항 안에서 설명된다.
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sapiens <400> 110 Gly Ala Glu Gln Lys Arg Arg Leu 1 5 <210> 111 <211> 7 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 111 Gly Gly Lys Ala Gln Arg Leu 1 5 <210> 112 <211> 7 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 112 Gly Gly Lys Ala Arg Arg Leu 1 5 <210> 113 <211> 7 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 113 Gly Gly Lys Gln Arg Arg Leu 1 5 <210> 114 <211> 7 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 114 Gly Gly Lys His Arg Arg Leu 1 5 <210> 115 <211> 8 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 115 Gly His Glu Gln Ala Arg Arg Leu 1 5 <210> 116 <211> 7 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 116 Gly Gly Lys Ala Lys Arg Leu 1 5 <210> 117 <211> 8 <212> PRT <213> Homo sapiens <220> <221> MOD_RES <222> (8)..(8) <223> dL which is an isomer of Leu <400> 117 Gly His Glu Gln Lys Arg Arg Leu 1 5 <210> 118 <211> 7 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 118 Gly Gly Lys Ala Arg Arg Ser 1 5 <210> 119 <211> 7 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 119 Gly Gly Lys Ala Arg Lys Leu 1 5 <210> 120 <211> 8 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 120 Gly His Glu Gln Lys Arg Arg Glu 1 5 <210> 121 <211> 7 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 121 Gly Gly Lys Ala His Arg Leu 1 5 <210> 122 <211> 7 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 122 Gly Gly Lys Ala Asn Arg Leu 1 5 <210> 123 <211> 7 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 123 Gly Gly Lys Ala Arg Gln Leu 1 5 <210> 124 <211> 7 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 124 Gly Gly Lys Ala Arg His Leu 1 5 <210> 125 <211> 7 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 125 Gly Gly Lys Ala Arg Asn Leu 1 5 <210> 126 <211> 7 <212> PRT <213> Homo sapiens <220> <221> MOD_RES <222> (5)..(5) <223> dR which is an isomer of Arg <400> 126 Gly Gly Lys Ala Arg Arg Leu 1 5 <210> 127 <211> 7 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 127 Gly Gly Lys Ala Lys Lys Leu 1 5 <210> 128 <211> 7 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 128 Gly Gly Lys Ala His Lys Leu 1 5 <210> 129 <211> 7 <212> PRT <213> Homo sapiens <220> <221> MOD_RES <222> (6)..(6) <223> dR which is an isomer of Arg <400> 129 Gly Gly Lys Ala Arg Arg Leu 1 5 <210> 130 <211> 7 <212> PRT <213> Homo sapiens <220> <221> MOD_RES <222> (5)..(6) <223> dR which is an isomer of Arg <400> 130 Gly Gly Lys Ala Arg Arg Leu 1 5 <210> 131 <211> 5 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 131 Ala Gln Lys Arg Arg 1 5 <210> 132 <211> 5 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 132 Gly Lys Ser Arg Arg 1 5 <210> 133 <211> 5 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 133 Glu Gln Lys Arg Arg 1 5 <210> 134 <211> 5 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 134 Glu Ala Lys Arg Arg 1 5 <210> 135 <211> 5 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 135 Gly Gln Lys Arg Arg 1 5 <210> 136 <211> 5 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 136 Gly Ala Lys Arg Arg 1 5 <210> 137 <211> 5 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 137 Gly Lys Lys Arg Arg 1 5 <210> 138 <211> 5 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 138 Gly His Lys Arg Arg 1 5 <210> 139 <211> 5 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 139 Gly Lys Ala Phe Arg 1 5 <210> 140 <211> 5 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 140 Glu Lys Ala Gln Arg 1 5 <210> 141 <211> 5 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 141 Glu Lys Ala Arg Arg 1 5 <210> 142 <211> 7 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 142 Gly Gly Lys Ala Arg Arg Leu 1 5 <210> 143 <211> 6 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Description of Artificial Sequence: Synthetic peptide <220> <221> MOD_RES <222> (4)..(6) <223> Any amino acid wherein at least one residue at positions 4, 5, or 6 is Arg <400> 143 Gly Lys Ala Xaa Xaa Xaa 1 5 <210> 144 <211> 6 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Description of Artificial Sequence: Synthetic peptide <400> 144 Gly Lys Ala Arg Ala Phe 1 5 <210> 145 <211> 6 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Description of Artificial Sequence: Synthetic peptide <400> 145 Gly Lys Ala Val Arg Gln 1 5 <210> 146 <211> 6 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Description of Artificial Sequence: Synthetic peptide <400> 146 Gly Lys Ala Tyr Phe Met 1 5 <210> 147 <211> 6 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Description of Artificial Sequence: Synthetic peptide <400> 147 Gly Lys 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<213> Artificial Sequence <220> <223> Description of Artificial Sequence: Synthetic peptide <400> 154 Gly Lys Ala Met Arg Gln 1 5 <210> 155 <211> 6 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Description of Artificial Sequence: Synthetic peptide <400> 155 Gly Lys Ala Ala Leu Met 1 5 <210> 156 <211> 6 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Description of Artificial Sequence: Synthetic peptide <400> 156 Gly Lys Ala Gln Gly Phe 1 5 <210> 157 <211> 6 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Description of Artificial Sequence: Synthetic peptide <400> 157 Gly Lys Ala Asn Met Asn 1 5 <210> 158 <211> 7 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Description of Artificial Sequence: Synthetic peptide <400> 158 Gly Lys Ala Arg Ala Phe Leu 1 5 <210> 159 <211> 7 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Description of Artificial Sequence: Synthetic peptide <400> 159 Gly Lys Ala Val Arg Gln Leu 1 5 <210> 160 <211> 7 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Description of Artificial Sequence: Synthetic peptide <400> 160 Gly Lys Ala Tyr Phe Met Leu 1 5 <210> 161 <211> 7 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Description of Artificial Sequence: Synthetic peptide <400> 161 Gly Lys Ala Glu Lys Val Leu 1 5 <210> 162 <211> 7 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Description of Artificial Sequence: Synthetic peptide <400> 162 Gly Lys Ala Phe Arg Lys Leu 1 5 <210> 163 <211> 7 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Description of Artificial Sequence: Synthetic peptide <400> 163 Gly Lys Ala Lys Pro Arg Leu 1 5 <210> 164 <211> 7 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Description of Artificial Sequence: Synthetic peptide <400> 164 Gly Lys Ala Ala Tyr Tyr Leu 1 5 <210> 165 <211> 7 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Description of Artificial Sequence: Synthetic peptide <400> 165 Gly Lys Ala Trp Tyr His Leu 1 5 <210> 166 <211> 7 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Description of Artificial Sequence: Synthetic peptide <400> 166 Gly Lys Ala Phe Arg Arg Leu 1 5 <210> 167 <211> 7 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Description of Artificial Sequence: Synthetic peptide <400> 167 Gly Lys Ala Ile Gln Arg Leu 1 5 <210> 168 <211> 7 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Description of Artificial Sequence: Synthetic peptide <400> 168 Gly Lys Ala Met Arg Gln Leu 1 5 <210> 169 <211> 7 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Description of Artificial Sequence: Synthetic peptide <400> 169 Gly Lys Ala Ala Leu Met Leu 1 5 <210> 170 <211> 7 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Description of Artificial Sequence: Synthetic peptide <400> 170 Gly Lys Ala Gln Gly Phe Leu 1 5 <210> 171 <211> 7 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Description of Artificial Sequence: Synthetic peptide <400> 171 Gly Lys Ala Asn Met Asn Leu 1 5 <210> 172 <211> 6 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Description of Artificial Sequence: Synthetic peptide <400> 172 Val Gly Pro Ala Gly Lys 1 5 <210> 173 <211> 6 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Description of Artificial Sequence: Synthetic peptide <400> 173 Gly Ala Arg Gly Gln Ala 1 5 <210> 174 <211> 8 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Description of Artificial Sequence: Synthetic peptide <400> 174 Pro Pro Gly Pro Pro Gly Pro Ala 1 5 <210> 175 <211> 8 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Description of Artificial Sequence: Synthetic peptide <220> <221> MOD_RES <222> (1)..(1) <223> Asp or Glu <220> <221> MOD_RES <222> (4)..(4) <223> Glu or Ala <220> <221> MOD_RES <222> (5)..(5) <223> Thr or Ser <400> 175 Xaa Arg Gly Xaa Xaa Gly Pro Ala 1 5 <210> 176 <211> 8 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Description of Artificial Sequence: Synthetic peptide <400> 176 Asp Arg Gly Glu Thr Gly Pro Ala 1 5 <210> 177 <211> 8 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Description of Artificial Sequence: Synthetic peptide <400> 177 Arg Thr Gly Asp Ala 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<211> 7 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Description of Artificial Sequence: Synthetic peptide <400> 208 Ser Gly Glu Ala Gly Pro Ala 1 5 <210> 209 <211> 6 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Description of Artificial Sequence: Synthetic peptide <220> <221> MOD_RES <222> (1)..(5) <223> Any amino acid <400> 209 Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Ala 1 5 <210> 210 <211> 6 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Description of Artificial Sequence: Synthetic peptide <220> <221> MOD_RES <222> (1)..(4) <223> Any amino acid <400> 210 Xaa Xaa Xaa Xaa Ala Gly 1 5 <210> 211 <211> 7 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Description of Artificial Sequence: Synthetic peptide <220> <221> MOD_RES <222> (1)..(4) <223> Any amino acid <400> 211 Xaa Xaa Xaa Xaa Ala Gly Gly 1 5 <210> 212 <211> 5 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Description of Artificial Sequence: Synthetic peptide <220> <221> MOD_RES <222> (1)..(4) <223> Any amino acid <400> 212 Xaa Xaa Xaa Xaa Ser 1 5 <210> 213 <211> 6 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Description of Artificial Sequence: Synthetic peptide <220> <221> MOD_RES <222> (1)..(4) <223> Any amino acid <400> 213 Xaa Xaa Xaa Xaa Ser Gly 1 5 <210> 214 <211> 5 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Description of Artificial Sequence: Synthetic peptide <220> <221> MOD_RES <222> (1)..(4) <223> Any amino acid <400> 214 Xaa Xaa Xaa Xaa Val 1 5 <210> 215 <211> 6 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Description of Artificial Sequence: Synthetic peptide <220> <221> MOD_RES <222> (1)..(4) <223> Any amino acid <400> 215 Xaa Xaa Xaa Xaa Val Gly 1 5 <210> 216 <211> 15 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Description of Artificial Sequence: Synthetic peptide <400> 216 Ala Gly Lys Asp Gly Glu Ala Gly Ala Gln Gly Pro Pro Gly Pro 1 5 10 15 <210> 217 <211> 38 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> Description of Artificial Sequence: Synthetic primer <400> 217 ggaagatctc atcatcacca tcaccatcgc ccttcaag 38 <210> 218 <211> 37 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> Description of Artificial Sequence: Synthetic primer <400> 218 ggcctcgagt cattagtctg acaaagagaa acactgc 37 <210> 219 <211> 17 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Description of Artificial Sequence: Synthetic peptide <400> 219 Pro Ala Gly Lys Asp Gly Glu Ala Gly Ala Gln Gly Pro Pro Gly Pro 1 5 10 15 Ala <210> 220 <211> 17 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Description of Artificial Sequence: Synthetic peptide <400> 220 Pro Val Gly Pro Pro Gly Pro Pro Gly Pro Pro Gly Pro Pro Gly Pro 1 5 10 15 Pro <210> 221 <211> 10 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Description of Artificial Sequence: Synthetic peptide <400> 221 Pro Pro Gly Ala Val Gly Pro Ala Gly Lys 1 5 10 <210> 222 <211> 10 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Description of Artificial Sequence: Synthetic peptide <400> 222 Lys Thr Gly Pro Pro Gly Pro Ala Gly Gln 1 5 10 <210> 223 <211> 10 <212> PRT 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Artificial Sequence: Synthetic peptide <400> 234 Gly Pro Pro Gly Pro Pro Gly Ala Arg Gly 1 5 10 <210> 235 <211> 10 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Description of Artificial Sequence: Synthetic peptide <400> 235 Pro Pro Gly Pro Pro Gly Ala Arg Gly Gln 1 5 10 <210> 236 <211> 10 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Description of Artificial Sequence: Synthetic peptide <400> 236 Lys Thr Gly Pro Pro Gly Pro Ala Gly Gln 1 5 10 <210> 237 <211> 10 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Description of Artificial Sequence: Synthetic peptide <400> 237 Ala Gln Gly Pro Pro Gly Pro Ala Gly Pro 1 5 10 <210> 238 <211> 10 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Description of Artificial Sequence: Synthetic peptide <400> 238 Ser Pro Gly Ser Pro Gly Pro Asp Gly Lys 1 5 10 <210> 239 <211> 10 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Description of Artificial Sequence: Synthetic peptide <400> 239 Pro Pro Gly Pro Pro Gly Ala Arg Gly Gln 1 5 10 <210> 240 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of Artificial Sequence: Synthetic peptide <400> 256 Pro Gly Pro Lys Gly Ala Ala Gly Glu Pro Gly Lys Ala Gly Glu Arg 1 5 10 15 Gly Val Pro Gly Pro Pro Gly Ala Val Gly 20 25 <210> 257 <211> 26 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Description of Artificial Sequence: Synthetic peptide <400> 257 Gly Pro Lys Gly Ala Ala Gly Glu Pro Gly Lys Ala Gly Glu Arg Gly 1 5 10 15 Val Pro Gly Pro Pro Gly Ala Val Gly Pro 20 25 <210> 258 <211> 26 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Description of Artificial Sequence: Synthetic peptide <400> 258 Pro Lys Gly Ala Ala Gly Glu Pro Gly Lys Ala Gly Glu Arg Gly Val 1 5 10 15 Pro Gly Pro Pro Gly Ala Val Gly Pro Ala 20 25 <210> 259 <211> 26 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Description of Artificial Sequence: Synthetic peptide <400> 259 Ala Ala Gly Glu Pro Gly Lys Ala Gly Glu Arg Gly Val Pro Gly Pro 1 5 10 15 Pro Gly Ala Val Gly Pro Ala Gly Lys Asp 20 25 <210> 260 <211> 25 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Description of Artificial Sequence: Synthetic peptide <400> 260 Asp Gly Arg Pro Gly Pro Pro Gly Pro Pro Gly Ala Arg Gly Gln Ala 1 5 10 15 Gly Val Met Gly Phe Pro Gly Pro Lys 20 25 <210> 261 <211> 27 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Description of Artificial Sequence: Synthetic peptide <400> 261 Gly Ala Val Gly Pro Ala Gly Lys Asp Gly Glu Ala Gly Ala Gln Gly 1 5 10 15 Pro Pro Gly Pro Ala Gly Pro Ala Gly Glu Arg 20 25 <210> 262 <211> 29 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Description of Artificial Sequence: Synthetic peptide <400> 262 Gln Ala Gly Val Met Gly Phe Pro Gly Pro Lys Gly Ala Ala Gly Glu 1 5 10 15 Pro Gly Lys Ala Gly Glu Arg Gly Val Pro Gly Pro Pro 20 25 <210> 263 <211> 30 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Description of Artificial Sequence: Synthetic polypeptide <400> 263 Thr Gly Ser Pro Gly Ser Pro Gly Pro Asp Gly Lys Thr Gly Pro Pro 1 5 10 15 Gly Pro Ala Gly Gln Asp Gly Arg Pro Gly Pro Pro Gly Pro 20 25 30 <210> 264 <211> 29 <212> PRT 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polypeptide <400> 267 Pro Gly Pro Lys Gly Ala Ala Gly Glu Pro Gly Lys Ala Gly Glu Arg 1 5 10 15 Gly Val Pro Gly Pro Pro Gly Ala Val Gly Pro Ala Gly Lys Asp Gly 20 25 30 Glu Ala Gly Ala Gln Gly Pro Pro Gly 35 40 <210> 268 <211> 41 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Description of Artificial Sequence: Synthetic polypeptide <400> 268 Gly Pro Lys Gly Ala Ala Gly Glu Pro Gly Lys Ala Gly Glu Arg Gly 1 5 10 15 Val Pro Gly Pro Pro Gly Ala Val Gly Pro Ala Gly Lys Asp Gly Glu 20 25 30 Ala Gly Ala Gln Gly Pro Pro Gly Pro 35 40 <210> 269 <211> 41 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Description of Artificial Sequence: Synthetic polypeptide <400> 269 Pro Lys Gly Ala Ala Gly Glu Pro Gly Lys Ala Gly Glu Arg Gly Val 1 5 10 15 Pro Gly Pro Pro Gly Ala Val Gly Pro Ala Gly Lys Asp Gly Glu Ala 20 25 30 Gly Ala Gln Gly Pro Pro Gly Pro Ala 35 40 <210> 270 <211> 40 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Description of Artificial Sequence: Synthetic polypeptide <400> 270 Thr 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of Artificial Sequence: Synthetic polypeptide <400> 282 Pro Ala Gly Phe Ala Gly Pro Pro Gly Ala Asp Gly Gln Pro Gly Ala 1 5 10 15 Lys Gly Glu Pro Gly Asp Ala Gly Ala Lys Gly Asp Ala Gly Pro Pro 20 25 30 Gly Pro Ala Gly Pro Ala 35 <210> 283 <211> 38 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Description of Artificial Sequence: Synthetic polypeptide <400> 283 Glu Thr Gly Pro Ala Gly Pro Pro Gly Ala Pro Gly Ala Pro Gly Ala 1 5 10 15 Pro Gly Pro Val Gly Pro Ala Gly Lys Ser Gly Asp Arg Gly Glu Thr 20 25 30 Gly Pro Ala Gly Pro Ala 35 <210> 284 <211> 21 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Description of Artificial Sequence: Synthetic peptide <400> 284 Leu Thr Gly Pro Ile Gly Pro Pro Gly Pro Ala Gly Ala Pro Gly Asp 1 5 10 15 Lys Gly Glu Ser Gly 20 <210> 285 <211> 26 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Description of Artificial Sequence: Synthetic peptide <400> 285 Leu Thr Gly Pro Ile Gly Pro Pro Gly Pro Ala Gly Ala Pro Gly Asp 1 5 10 15 Lys Gly Glu Ser Gly Pro Ser 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Sequence: Synthetic peptide <400> 303 Arg Gly Glu Thr Gly Pro Ala Gly Arg Pro Gly Glu Val Gly Pro Pro 1 5 10 15 Gly Pro Pro Gly Pro Ala Gly Glu Lys 20 25 <210> 304 <211> 31 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Description of Artificial Sequence: Synthetic polypeptide <400> 304 Ser Gly Pro Gln Gly Pro Gly Gly Pro Pro Gly Pro Lys Gly Asn Ser 1 5 10 15 Gly Glu Pro Gly Ala Pro Gly Ser Lys Gly Asp Thr Gly Ala Lys 20 25 30 <210> 305 <211> 18 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Description of Artificial Sequence: Synthetic peptide <400> 305 Gly Pro Arg Gly Leu Pro Gly Pro Pro Gly Pro Ala Gly Pro Gln Gly 1 5 10 15 Phe Gln <210> 306 <211> 22 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Description of Artificial Sequence: Synthetic peptide <400> 306 Gly Arg Val Gly Pro Pro Gly Pro Ser Gly Asn Ala Gly Pro Pro Gly 1 5 10 15 Pro Pro Gly Pro Ala Gly 20 <210> 307 <211> 28 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Description of Artificial Sequence: Synthetic peptide 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Synthetic peptide <400> 314 Arg Gly Ser Glu Gly Pro Gln Gly Val Arg Gly Glu Pro Gly Pro Pro 1 5 10 15 Gly Pro Ala Gly Ala Ala 20 <210> 315 <211> 31 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Description of Artificial Sequence: Synthetic polypeptide <400> 315 Ser Gly Pro Ala Gly Pro Arg Gly Pro Pro Gly Ser Ala Gly Ala Pro 1 5 10 15 Gly Lys Asp Gly Leu Asn Gly Leu Pro Gly Pro Ile Gly Pro Pro 20 25 30 <210> 316 <211> 31 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Description of Artificial Sequence: Synthetic polypeptide <400> 316 Pro Gly Leu Pro Gly Pro Ser Gly Glu Pro Gly Lys Gln Gly Pro Ser 1 5 10 15 Gly Ala Ser Gly Glu Arg Gly Pro Pro Gly Pro Met Gly Pro Pro 20 25 30 <210> 317 <211> 22 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Description of Artificial Sequence: Synthetic peptide <400> 317 Val Gly Pro Pro Gly Pro Ser Gly Asn Ala Gly Pro Pro Gly Pro Pro 1 5 10 15 Gly Pro Ala Gly Lys Glu 20 <210> 318 <211> 28 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Description of Artificial Sequence: Synthetic peptide <400> 318 Ser Gly Pro Ala Gly Pro Thr Gly Ala Arg Gly Ala Pro Gly Asp Arg 1 5 10 15 Gly Glu Pro Gly Pro Pro Gly Pro Ala Gly Phe Ala 20 25 <210> 319 <211> 20 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Description of Artificial Sequence: Synthetic peptide <400> 319 Thr Gly Asp Ala Gly Pro Val Gly Pro Pro Gly Pro Pro Gly Pro Pro 1 5 10 15 Gly Pro Pro Gly 20 <210> 320 <211> 22 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Description of Artificial Sequence: Synthetic peptide <400> 320 Thr Gly Asp Ala Gly Pro Val Gly Pro Pro Gly Pro Pro Gly Pro Pro 1 5 10 15 Gly Pro Pro Gly Pro Pro 20 <210> 321 <211> 19 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Description of Artificial Sequence: Synthetic peptide <400> 321 Lys Gly Glu Pro Gly Pro Val Gly Val Gln Gly Pro Pro Gly Pro Ala 1 5 10 15 Gly Glu Glu <210> 322 <211> 19 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Description of Artificial Sequence: Synthetic peptide <400> 322 Gly Asp Ala Gly Pro 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Artificial Sequence: Synthetic peptide <400> 356 Val Met Gly Phe Pro Gly Pro Lys Gly Ala 1 5 10 <210> 357 <211> 10 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Description of Artificial Sequence: Synthetic peptide <400> 357 Gly Ala Arg Gly Gln Ala Gly Val Met Gly 1 5 10 <210> 358 <211> 10 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Description of Artificial Sequence: Synthetic peptide <400> 358 Arg Thr Gly Asp Ala Gly Pro Val Gly Pro 1 5 10 <210> 359 <211> 10 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Description of Artificial Sequence: Synthetic peptide <400> 359 Ala Ser Gly Pro Ala Gly Pro Arg Gly Pro 1 5 10 <210> 360 <211> 10 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Description of Artificial Sequence: Synthetic peptide <400> 360 Asp Arg Gly Glu Thr Gly Pro Ala Gly Pro 1 5 10 <210> 361 <211> 10 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Description of Artificial Sequence: Synthetic peptide <400> 361 Asp Arg Gly Glu Thr Gly Pro Ala Gly Pro 1 5 10 <210> 362 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Synthetic peptide <400> 384 Pro Gly Pro Pro Gly Pro 1 5 <210> 385 <211> 10 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Description of Artificial Sequence: Synthetic peptide <400> 385 Leu Asn Gly Leu Pro Gly Pro Ile Gly Pro 1 5 10 <210> 386 <211> 10 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Description of Artificial Sequence: Synthetic peptide <400> 386 Ala Pro Gly Ala Pro Gly Pro Val Gly Pro 1 5 10 <210> 387 <211> 10 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Description of Artificial Sequence: Synthetic peptide <400> 387 Asp Arg Gly Glu Thr Gly Pro Ala Gly Pro 1 5 10 <210> 388 <211> 10 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Description of Artificial Sequence: Synthetic peptide <400> 388 Asp Ala Gly Pro Pro Gly Pro Ala Gly Pro 1 5 10 <210> 389 <211> 10 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Description of Artificial Sequence: Synthetic peptide <400> 389 Pro Gly Pro Pro Gly Pro Pro Gly Pro Pro 1 5 10 <210> 390 <211> 10 <212> PRT <213> Artificial Sequence 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Description of Artificial Sequence: Synthetic peptide <400> 418 Ala Pro Gly Ala Pro Gly Ala Pro Gly Pro 1 5 10 <210> 419 <211> 10 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Description of Artificial Sequence: Synthetic peptide <400> 419 Pro Arg Gly Ser Glu Gly Pro Gln Gly Val 1 5 10 <210> 420 <211> 9 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Description of Artificial Sequence: Synthetic peptide <400> 420 Thr Gly Asp Ala Gly Pro Val Gly Pro 1 5 <210> 421 <211> 10 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Description of Artificial Sequence: Synthetic peptide <400> 421 Gly Pro Ala Gly Phe Ala Gly Pro Pro Gly 1 5 10 <210> 422 <211> 9 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Description of Artificial Sequence: Synthetic peptide <400> 422 Ala Lys Gly Glu Pro Gly Pro Val Gly 1 5 <210> 423 <211> 10 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Description of Artificial Sequence: Synthetic peptide <400> 423 Ala Gly Pro Pro Gly Ala Asp Gly Gln Pro 1 5 10 <210> 424 <211> 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Artificial Sequence: Synthetic peptide <400> 435 Ala Pro Gly Thr Pro Gly Pro Gln Gly Ile 1 5 10 <210> 436 <211> 10 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Description of Artificial Sequence: Synthetic peptide <400> 436 Asp Lys Gly Glu Ser Gly Pro Ser Gly Pro 1 5 10 <210> 437 <211> 10 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Description of Artificial Sequence: Synthetic peptide <400> 437 Gly Glu Asn Gly Ala Pro Gly Gln Met Gly 1 5 10 <210> 438 <211> 10 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Description of Artificial Sequence: Synthetic peptide <400> 438 Ala Gln Gly Pro Pro Gly Pro Ala Gly Pro 1 5 10 <210> 439 <211> 10 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Description of Artificial Sequence: Synthetic peptide <400> 439 Asp Lys Gly Glu Ser Gly Pro Ser Gly Pro 1 5 10 <210> 440 <211> 10 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Description of Artificial Sequence: Synthetic peptide <400> 440 Glu Gly Ser Pro Gly Arg Asp Gly Ser Pro 1 5 10 <210> 441 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Description of Artificial Sequence: Synthetic peptide <400> 476 Glu Arg Gly Glu Thr Gly Pro Ala Gly 1 5 <210> 477 <211> 10 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Description of Artificial Sequence: Synthetic peptide <400> 477 Glu Arg Gly Glu Thr Gly Pro Ala Gly Gly 1 5 10 <210> 478 <211> 9 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Description of Artificial Sequence: Synthetic peptide <400> 478 Glu Arg Gly Glu Thr Gly Pro Ser Gly 1 5 <210> 479 <211> 4 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Description of Artificial Sequence: Synthetic peptide <400> 479 Pro Ala Gly Pro 1 <210> 480 <211> 6 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Description of Artificial Sequence: Synthetic peptide <400> 480 Gly Ala Arg Gly Gln Ala 1 5 <210> 481 <211> 7 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 481 His Ser Ser Lys Leu Gln Leu 1 5 <210> 482 <211> 8 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Description of Artificial Sequence: Synthetic peptide <220> <221> MOD_RES <222> (1)..(5) <223> Any amino acid <400> 482 Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Ala Gly Gly 1 5 <210> 483 <211> 40 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Description of Artificial Sequence: Synthetic polypeptide <400> 483 Pro Pro Gly Pro Ala Gly Gln Asp Gly Arg Pro Gly Pro Pro Gly Pro 1 5 10 15 Pro Gly Ala Arg Gly Gln Ala Gly Val Met Gly Phe Pro Gly Pro Lys 20 25 30 Gly Ala Ala Gly Glu Pro Gly Lys 35 40 <210> 484 <211> 18 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Description of Artificial Sequence: Synthetic peptide <400> 484 Gly Pro Arg Gly Leu Pro Gly Pro Pro Gly Ala Pro Gly Pro Gln Gly 1 5 10 15 Phe Gln <210> 485 <211> 10 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Description of Artificial Sequence: Synthetic peptide <220> <221> MOD_RES <222> (1)..(1) <223> NO2-Tyr <220> <221> MOD_RES <222> (5)..(7) <223> Any natural L-amino acid except Cys <220> <221> MOD_RES <222> (8)..(8) <223> Dap <220> <221> MOD_RES <222> (10)..(10) <223> Lys(ABZ) <400> 485 Tyr Gly Lys Ala Xaa Xaa Xaa Xaa Phe Lys 1 5 10 <210> 486 <211> 5 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Description of Artificial Sequence: Synthetic peptide <220> <221> misc_feature <222> (2)..(3) <223> Gamma carboxy linkage between residues <220> <221> misc_feature <222> (3)..(4) <223> Gamma carboxy linkage between residues <220> <221> misc_feature <222> (4)..(5) <223> Gamma carboxy linkage between residues <220> <223> see specification as filed for detailed description of substitutions and preferred embodiments <400> 486 Asp Glu Glu Glu Glu 1 5 <210> 487 <211> 5 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Description of Artificial Sequence: Synthetic peptide <220> <221> misc_feature <222> (1)..(2) <223> Gamma carboxy linkage between residues <220> <221> misc_feature <222> (2)..(3) <223> Gamma carboxy linkage between residues <220> <221> misc_feature <222> (3)..(4) <223> Gamma carboxy linkage between residues <220> <223> see specification as filed for detailed description of substitutions and preferred embodiments <400> 487 Glu Glu Glu Asp Glu 1 5 <210> 488 <211> 5 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Description of Artificial Sequence: Synthetic peptide <220> <221> misc_feature <222> (1)..(2) <223> Gamma carboxy linkage between residues <220> <221> misc_feature <222> (2)..(3) <223> Gamma carboxy linkage between residues <220> <221> misc_feature <222> (3)..(4) <223> Gamma carboxy linkage between residues <220> <223> see specification as filed for detailed description of substitutions and preferred embodiments <400> 488 Glu Glu Glu Asp Gln 1 5 <210> 489 <211> 5 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Description of Artificial Sequence: Synthetic peptide <220> <221> misc_feature <222> (2)..(3) <223> Gamma carboxy linkage between residues <220> <221> misc_feature <222> (3)..(4) <223> Gamma carboxy linkage between residues <220> <223> see specification as filed for detailed description of substitutions and preferred embodiments <400> 489 Asp Glu Glu Asp Glu 1 5 <210> 490 <211> 5 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Description of Artificial Sequence: Synthetic peptide <220> <221> misc_feature <222> (2)..(3) <223> Gamma carboxy linkage between residues <220> <221> misc_feature <222> (3)..(4) <223> Gamma carboxy linkage between residues <220> <223> see specification as filed for detailed description of substitutions and preferred embodiments <400> 490 Glu Glu Glu Asp Glu 1 5

Claims (186)

  1. (a) 세스퀴테르펜-γ-락톤, 그의 유사체 또는 유도체를 포함하는 치료적 활성 약물, 및
    세포 증식성 질환과 연관된 프로테아제에 특이적인 절단 부위를 갖는 아미노산 서열을 포함하는 펩티드를 포함하는 전구약물로서,
    상기 펩티드는 20개 이하의 아미노산으로 이루어진 길이를 갖고,
    상기 펩티드는 상기 치료적 활성 약물의 치료적 활성을 억제하도록 상기 약물에 결합되고, 및 상기 치료적 활성 약물은 상기 프로테아제에 의한 단백질분해에 의해 상기 펩티드로부터 절단되는 것인 전구약물; 및
    (b) 약학적으로 허용가능한 비히클을 포함하는, 정맥 투여에 적합한 약학적 조성물로서,
    상기 전구약물은 총 조성물의 중량 기준 약 1.5% 내지 약 2.5%의 양으로 존재하는 것인 약학적 조성물.
  2. 청구항 1에 있어서, 상기 약학적으로 허용가능한 비히클은
    총 조성물의 중량 기준 약 5% 내지 약 15%의 양의 레시틴 또는 인지질, 및
    총 조성물의 중량 기준 약 8% 내지 약 17%의 양의 수크로스를 포함하는 것인 조성물.
  3. 청구항 2에 있어서, 상기 약학적으로 허용가능한 비히클은
    총 조성물의 중량 기준 약 5% 이하의 양의 오일, 및
    총 조성물의 중량 기준 약 5% 이하의 양의 중쇄 트리글리세리드를 더 포함하는 것인 조성물.
  4. 청구항 3에 있어서, 상기 약학적으로 허용가능한 비히클은
    총 조성물의 중량 기준 약 0.5% 내지 약 3%의 양의 오일,
    총 조성물의 중량 기준 약 0.5% 내지 약 3%의 양의 중쇄 트리글리세리드,
    총 조성물의 약 5% 내지 약 12%의 양의 레시틴 또는 인지질, 및
    총 조성물의 중량 기준 약 10% 내지 약 15%의 양의 수크로스를 포함하는 것인 조성물.
  5. 청구항 4에 있어서, 상기 약학적으로 허용가능한 비히클은
    총 조성물의 중량 기준 약 0.5% 내지 약 1%의 양의 오일,
    총 조성물의 중량 기준 약 0.5% 내지 약 1%의 양의 중쇄 트리글리세리드,
    총 조성물의 중량 기준 약 5% 내지 약 10%의 양의 레시틴 또는 인지질, 및
    총 조성물의 중량 기준 약 10% 내지 약 15%의 양의 수크로스를 포함하는 것인 조성물.
  6. 청구항 5에 있어서, 상기 전구약물은 총 조성물의 중량 기준 약 2%의 양으로 존재하는 것인 조성물.
  7. 청구항 2에 있어서, 레시틴-대-전구약물 중량비는 약 5:1 내지 7.5:1인 것인 조성물.
  8. 청구항 3에 있어서, 레시틴-대-전구약물 중량비는 약 5:1 내지 7.5:1인 것인 조성물.
  9. 청구항 3에 있어서, 레시틴-대-오일 중량비는 약 10:1 내지 5:1인 것인 조성물.
  10. 청구항 8에 있어서, 레시틴-대-오일 중량비는 약 10:1 내지 5:1인 것인 조성물.
  11. 청구항 7에 있어서, 상기 전구약물은 Ser-Ser-Lys-Tyr-Gln (서열번호 18)의 서열을 포함하는 펩티드의 카르복시 말단에 결합된 탭시가르긴 유도체 8-0-(12-[L-류시노일아미노]도데카노일)-8-0-데부타노일탭시가르긴 (L12ADT)을 포함하는 것인 조성물.
  12. 청구항 10에 있어서, 상기 전구약물은 Ser-Ser-Lys-Tyr-Gln (서열번호 18)의 서열을 포함하는 펩티드의 카르복시 말단에 결합된 탭시가르긴 유도체 8-0-(12-[L- 류시노일아미노]도데카노일)-8-0-데부타노일 탭시가르긴 (L12ADT)을 포함하는 것인 조성물.
  13. 청구항 2에 있어서, 레시틴-대-전구약물 중량비가 약 2.5:1 내지 5:1인 것인 조성물.
  14. 청구항 3에 있어서, 레시틴-대-전구약물 중량비가 약 2.5:1 내지 5:1인 것인 조성물.
  15. 청구항 3에 있어서, 레시틴-대-오일 중량비가 약 10:1 내지 5:2인 것인 조성물.
  16. 청구항 14에 있어서, 레시틴-대-오일 중량비가 약 10:1 내지 5:2인 것인 조성물.
  17. 청구항 13에 있어서, 상기 전구약물은 서열 Asp-Glu*Glu*Glu*Glu (서열번호 486)를 갖는 펩티드의 아스파르트산에 결합된 탭시가르긴 유도체 8-0-(12-아미노도데카노일)-8-0-데부타노일 탭시가르긴 (12ADT)을 포함하고, *로 표시된 결합 중 하나 이상은 감마 카르복시 결합인 것인 조성물.
  18. 청구항 16에 있어서, 상기 전구약물은 서열 Asp-Glu*Glu*Glu*Glu (서열번호 486)를 갖는 펩티드의 아스파르트산에 결합된 탭시가르긴 유도체 8-0-(12-아미노도데카노일)-8-0-데부타노일 탭시가르긴 (12ADT)을 포함하고, *로 표시된 결합 중 하나 이상은 하나는 감마 카르복시 결합인 것인 조성물.
  19. 청구항 2에 있어서, 상기 조성물은 0.2-미크론 필터를 통해 여과될 수 있는 것인 조성물.
  20. 청구항 3에 있어서, 상기 조성물은 0.2-미크론 필터를 통해 여과될 수 있는 것인 조성물.
  21. 청구항 2에 있어서, 상기 조성물은 동결-해동 스트레스 후 0.2-미크론 필터를 통해 여과될 수 있는 것인 조성물.
  22. 청구항 3에 있어서, 상기 조성물은 동결-해동 스트레스 후 0.2-미크론 필터를 통해 여과될 수 있는 것인 조성물.
  23. 청구항 19에 있어서, 상기 조성물은 동결-해동 스트레스 후 0.2-미크론 필터를 통해 여과될 수 있는 것인 조성물.
  24. 청구항 20에 있어서, 상기 조성물은 동결-해동 스트레스 후 0.2-미크론 필터를 통해 여과될 수 있는 것인 조성물.
  25. 청구항 10에 있어서, 상기 조성물은 0.2-미크론 필터를 통해 여과될 수 있는 것인 조성물.
  26. 청구항 10에 있어서, 상기 조성물은 동결-해동 스트레스 후 0.2-미크론 필터를 통해 여과될 수 있는 것인 조성물.
  27. 청구항 25에 있어서, 상기 조성물은 동결-해동 스트레스 후 0.2-미크론 필터를 통해 여과될 수 있는 것인 조성물.
  28. 청구항 16에 있어서, 상기 조성물은 0.2-미크론 필터를 통해 여과될 수 있는 것인 조성물.
  29. 청구항 16에 있어서, 상기 조성물은 동결-해동 스트레스 후 0.2-미크론 필터를 통해 여과될 수 있는 것인 조성물.
  30. 청구항 28에 있어서, 상기 조성물은 동결-해동 스트레스 후 0.2-미크론 필터를 통해 여과될 수 있는 것인 조성물.
  31. 청구항 2에 있어서, 상기 조성물의 유적(oil drop)은 약 200 나노미터 미만의 평균 직경을 갖는 것인 조성물.
  32. 청구항 31에 있어서, 상기 조성물의 유적은 약 150 나노미터 미만의 평균 직경을 갖는 것인 조성물.
  33. 청구항 3에 있어서, 상기 조성물의 유적은 약 200 나노미터 미만의 평균 직경을 갖는 것인 조성물.
  34. 청구항 33에 있어서, 상기 조성물의 유적은 약 150 나노미터 미만의 평균 직경을 갖는 것인 조성물.
  35. 청구항 2에 있어서, 상기 조성물의 유적은 동결-해동 스트레스 후 약 200 나노미터 미만의 평균 직경을 갖는 것인 조성물.
  36. 청구항 3에 있어서, 상기 조성물의 유적은 동결-해동 스트레스 후 약 200 나노미터 미만의 평균 직경을 갖는 것인 조성물.
  37. 청구항 32 또는 34에 있어서, 상기 조성물의 유적은 동결-해동 스트레스 후 약 200 나노미터 미만의 평균 직경을 갖는 것인 조성물.
  38. 청구항 10에 있어서, 상기 조성물의 유적은 약 200 나노미터 미만의 평균 직경을 갖는 것인 조성물.
  39. 청구항 38에 있어서, 상기 조성물의 유적은 약 150 나노미터 미만의 평균 직경을 갖는 것인 조성물.
  40. 청구항 10에 있어서, 상기 조성물의 유적은 동결-해동 스트레스 후 약 200 나노미터 미만의 평균 직경을 갖는 것인 조성물.
  41. 청구항 39에 있어서, 상기 조성물의 유적은 동결-해동 스트레스 후 약 200 나노미터 미만의 평균 직경을 갖는 것인 조성물.
  42. 청구항 16에 있어서, 상기 조성물의 유적은 약 200 나노미터 미만의 평균 직경을 갖는 것인 조성물.
  43. 청구항 42에 있어서, 상기 조성물의 유적은 약 150 나노미터 미만의 평균 직경을 갖는 것인 조성물.
  44. 청구항 16에 있어서, 상기 조성물의 유적은 동결-해동 스트레스 후 약 200 나노미터 미만의 평균 직경을 갖는 것인 조성물.
  45. 청구항 43에 있어서, 상기 조성물의 유적은 동결-해동 스트레스 후 약 200 나노미터 미만의 평균 직경을 갖는 것인 조성물.
  46. 청구항 2에 있어서, 약 30% 이상의 600nm에서의 광 투과율 값을 보이는 것인 조성물.
  47. 청구항 3에 있어서, 약 30% 이상의 600nm에서의 광 투과율 값을 보이는 것인 조성물.
  48. 청구항 46 또는 47에 있어서, 약 60% 이상의 600nm에서의 광 투과율 값을 보이는 것인 조성물.
  49. 청구항 10에 있어서, 약 30% 이상의 600nm에서의 광 투과율 값을 보이는 것인 조성물.
  50. 청구항 49에 있어서, 약 60% 이상의 600nm에서의 광 투과율 값을 보이는 것인 조성물.
  51. 청구항 16에 있어서, 약 30% 이상의 600nm에서의 광 투과율 값을 보이는 것인 조성물.
  52. 청구항 51에 있어서, 약 60% 이상의 600nm에서의 광 투과율 값을 보이는 것인 조성물.
  53. 청구항 2에 있어서, 상기 조성물은 동결건조할 수 있는 것인 조성물.
  54. 청구항 3에 있어서, 상기 조성물은 동결건조할 수 있는 것인 조성물.
  55. 청구항 53 또는 54에 있어서, 상기 조성물은 3개월 이상 동안 화학적으로 안정한 것인 조성물.
  56. 청구항 2에 있어서, 상기 세스퀴테르펜-γ-락톤은 탭시가르긴 또는 탭시가르긴 유도체인 것인 조성물.
  57. 청구항 3에 있어서, 상기 세스퀴테르펜-γ-락톤은 탭시가르긴 또는 탭시가르긴 유도체인 것인 조성물.
  58. 청구항 56에 있어서, 상기 탭시가르긴 유도체는 8-0-(12-아미노도데카노일)-8-0-데부타노일 탭시가르긴 (12ADT)인 것인 조성물.
  59. 청구항 57에 있어서, 상기 탭시가르긴 유도체는 8-0-(12-아미노도데카노일)-8-0-데부타노일 탭시가르긴 (12ADT)인 것인 조성물.
  60. 청구항 56에 있어서, 상기 탭시가르긴 유도체는 8-0-(12-[L-류시노일아미노]도데카노일)-8-0-데부타노일탭시가르긴 (L12ADT)인 것인 조성물.
  61. 청구항 57에 있어서, 상기 탭시가르긴 유도체는 8-0-(12-[L-류시노일아미노]도데카노일)-8-0-데부타노일탭시가르긴 (L12ADT)인 것인 조성물.
  62. 청구항 2에 있어서, 상기 펩티드는 PSA, PSMA, hK2 및 FAP로 이루어진 군으로부터 선택되는 프로테아제 또는 PSA, PSMA, hK2 또는 FAP의 단백질분해 활성을 갖는 효소에 특이적인 절단 부위를 갖는 아미노산 서열을 포함하는 것인 조성물.
  63. 청구항 3에 있어서, 상기 펩티드는 PSA, PSMA, hK2 및 FAP로 이루어진 군으로부터 선택되는 프로테아제 또는 PSA, PSMA, hK2 또는 FAP의 단백질분해 활성을 갖는 효소에 특이적인 절단 부위를 갖는 아미노산 서열을 포함하는 것인 조성물.
  64. 청구항 56에 있어서, 상기 펩티드는 PSA, PSMA, hK2 및 FAP로 이루어진 군으로부터 선택되는 프로테아제 또는 PSA, PSMA, hK2 또는 FAP의 단백질분해 활성을 갖는 효소에 특이적인 절단 부위를 갖는 아미노산 서열을 포함하는 것인 조성물.
  65. 청구항 57에 있어서, 상기 펩티드는 PSA, PSMA, hK2 및 FAP로 이루어진 군으로부터 선택되는 프로테아제 또는 PSA, PSMA, hK2 또는 FAP의 단백질분해 활성을 갖는 효소에 특이적인 절단 부위를 갖는 아미노산 서열을 포함하는 것인 조성물.
  66. 청구항 60에 있어서, 상기 탭시가르긴 유도체는 Ser-Ser-Lys-Tyr-Gln (서열번호 18)의 서열을 포함하는 펩티드의 카르복시 말단에 결합되는 것인 조성물.
  67. 청구항 61에 있어서, 상기 탭시가르긴 유도체는 Ser-Ser-Lys-Tyr-Gln (서열번호 18)의 서열을 포함하는 펩티드의 카르복시 말단에 결합되는 것인 조성물.
  68. 청구항 58에 있어서, 상기 탭시가르긴 유도체는 서열 Asp-Glu*Glu*Glu*Glu (서열번호 486)를 갖는 펩티드의 아스파르트산에 결합되고, *로 표시된 결합의 하나 이상은 감마 카르복시 결합인 것인 조성물.
  69. 청구항 59에 있어서, 상기 탭시가르긴 유도체는 서열 Asp-Glu*Glu*Glu*Glu (서열번호 486)를 갖는 펩티드의 아스파르트산에 결합되고, *로 표시된 결합의 하나 이상은 감마 카르복시 결합인 것인 조성물.
  70. 청구항 3에 있어서, 상기 레시틴은 콩 레시틴, 계란 레시틴, 또는 그의 조합 또는 염으로 이루어진 군으로부터 선택되는 것인 조성물.
  71. 청구항 3에 있어서, 상기 오일은 대두 오일인 것인 조성물.
  72. 청구항 3에 있어서, 주사용 동결보호제(cryoprotecant), 또는 항산화제를 추가적으로 포함하는 것인 조성물.
  73. 청구항 72에 있어서, 상기 동결보호제는 수크로스이고, 상기 항산화제는 EDTA 또는 그의 염인 것인 조성물.
  74. 청구항 2에 있어서, 상기 세포 증식성 질환은 암인 것인 조성물.
  75. (a) 세스퀴테르펜-γ-락톤, 그의 유사체 또는 유도체를 포함하는 치료적 활성 약물, 및
    세포 증식성 질환과 연관된 프로테아제에 특이적인 절단 부위를 갖는 아미노산 서열을 포함하는 펩티드를 포함하는 전구약물로서,
    상기 펩티드는 20개 이하의 아미노산으로 이루어진 길이를 갖고,
    상기 펩티드는 상기 치료적 활성 약물의 치료적 활성을 억제하도록 상기 약물에 결합되고, 상기 치료적 활성 약물은 상기 프로테아제에 의한 단백질분해에 의해 상기 펩티드로부터 절단되는 것인 전구약물; 및
    (b) 약학적으로 허용가능한 비히클을 포함하는, 물에 의한 재구성에 의해 정맥 투여에 적합한 약학적 조성물을 형성하는 동결건조된 조성물로서,
    상기 전구약물은 총 조성물의 중량 기준 약 1.5% 내지 약 2.5%의 양으로 존재하는 것인 동결건조된 조성물.
  76. 청구항 75에 있어서, 상기 약학적으로 허용가능한 비히클은
    총 조성물의 중량 기준 약 5% 내지 약 15%의 양의 레시틴 또는 인지질, 및
    총 조성물의 중량 기준 약 8% 내지 약 17%의 양의 수크로스를 포함하는 것인 조성물.
  77. 청구항 76에 있어서, 상기 약학적으로 허용가능한 비히클은
    총 조성물의 중량 기준 약 5% 이하의 양의 오일, 및
    총 조성물의 중량 기준 약 5% 이하의 양의 중쇄 트리글리세리드를 더 포함하는 것인 조성물.
  78. 청구항 77에 있어서, 상기 약학적으로 허용가능한 비히클은
    총 조성물의 중량 기준 약 0.5% 내지 약 3%의 양의 오일,
    총 조성물의 중량 기준 약 0.5% 내지 약 3%의 양의 중쇄 트리글리세리드,
    총 조성물의 중량 기준 약 5% 내지 약 12%의 양의 레시틴 또는 인지질, 및
    총 조성물의 중량 기준 약 10% 내지 약 15%의 양의 수크로스를 포함하는 것인 조성물.
  79. 청구항 78에 있어서, 상기 약학적으로 허용가능한 비히클은
    총 조성물의 중량 기준 약 0.5% 내지 약 1%의 양의 오일,
    총 조성물의 중량 기준 약 0.5% 내지 약 1%의 양의 중쇄 트리글리세리드,
    총 조성물의 중량 기준 약 5% 내지 약 10%의 양의 레시틴 또는 인지질, 및
    총 조성물의 중량 기준 약 10% 내지 약 15%의 양의 수크로스를 포함하는 것인 조성물.
  80. 청구항 79에 있어서, 상기 전구약물은 총 조성물의 중량 기준 약 2%의 양으로 존재하는 것인 조성물.
  81. 청구항 76에 있어서, 레시틴-대-전구약물 중량비는 약 5:1 내지 7.5:1인 것인 조성물.
  82. 청구항 77에 있어서, 레시틴-대-전구약물 중량비는 약 5:1 내지 7.5:1인 것인 조성물.
  83. 청구항 77에 있어서, 레시틴-대-오일 중량비는 약 10:1 내지 5:1인 것인 조성물.
  84. 청구항 82에 있어서, 레시틴-대-오일 중량비는 약 10:1 내지 5:1인 것인 조성물.
  85. 청구항 81에 있어서, 상기 전구약물은 Ser-Ser-Lys-Tyr-Gln (서열번호 18)의 서열을 포함하는 펩티드의 카르복시 말단에 결합된 탭시가르긴 유도체 8-0-(12-[L-류시노일아미노]도데카노일)-8-0-데부타노일탭시가르긴 (L12ADT)을 포함하는 것인 조성물.
  86. 청구항 82에 있어서, 상기 전구약물은 Ser-Ser-Lys-Tyr-Gln (서열번호 18)의 서열을 포함하는 펩티드의 카르복시 말단에 결합된 탭시가르긴 유도체 8-0-(12-[L-류시노일아미노]도데카노일)-8-0-데부타노일탭시가르긴 (L12ADT)을 포함하는 것인 조성물.
  87. 청구항 76에 있어서, 레시틴-대-전구약물 중량비는 약 2.5:1 내지 5:1인 것인 조성물.
  88. 청구항 77에 있어서, 레시틴-대-전구약물 중량비는 약 2.5:1 내지 5:1인 것인 조성물.
  89. 청구항 77에 있어서, 레시틴-대-오일 중량비는 약 10:1 내지 5:2인 것인 조성물.
  90. 청구항 88에 있어서, 레시틴-대-오일 중량비는 약 10:1 내지 5:2인 것인 조성물.
  91. 청구항 88에 있어서, 상기 전구약물은 서열 Asp-Glu*Glu*Glu*Glu (서열번호 486)를 갖는 펩티드의 아스파르트산에 결합된 탭시가르긴 유도체 8-0-(12-아미노도데카노일)-8-0-데부타노일 탭시가르긴 (12ADT)을 포함하고, *로 표시된 결합의 하나 이상은 감마 카르복시 결합인 것인 조성물.
  92. 청구항 90에 있어서, 상기 전구약물은 서열 Asp-Glu*Glu*Glu*Glu (서열번호 486)를 갖는 펩티드의 아스파르트산에 결합된 탭시가르긴 유도체 8-0-(12-아미노도데카노일)-8-0-데부타노일 탭시가르긴 (12ADT)을 포함하고, *로 표시된 결합의 하나 이상은 감마 카르복시 결합인 것인 조성물.
  93. 청구항 76에 있어서, 상기 조성물은 0.2-미크론 필터를 통해 여과될 수 있는 것인 조성물.
  94. 청구항 77에 있어서, 상기 조성물은 0.2-미크론 필터를 통해 여과될 수 있는 것인 조성물.
  95. 청구항 84에 있어서, 상기 조성물은 0.2-미크론 필터를 통해 여과될 수 있는 것인 조성물.
  96. 청구항 90에 있어서, 상기 조성물은 0.2-미크론 필터를 통해 여과될 수 있는 것인 조성물.
  97. 청구항 76에 있어서, 상기 조성물의 유적은 약 200 나노미터 미만의 평균 직경을 갖는 것인 조성물.
  98. 청구항 97에 있어서, 상기 조성물의 유적은 약 150 나노미터 미만의 평균 직경을 갖는 것인 조성물.
  99. 청구항 77에 있어서, 상기 조성물의 유적은 약 200 나노미터 미만의 평균 직경을 갖는 것인 조성물.
  100. 청구항 99에 있어서, 상기 조성물의 유적은 약 150 나노미터 미만의 평균 직경을 갖는 것인 조성물.
  101. 청구항 84에 있어서, 상기 조성물의 유적은 약 200 나노미터 미만의 평균 직경을 갖는 것인 조성물.
  102. 청구항 101에 있어서, 상기 조성물의 유적은 약 150 나노미터 미만의 평균 직경을 갖는 것인 조성물.
  103. 청구항 90에 있어서, 상기 조성물의 유적은 약 200 나노미터 미만의 평균 직경을 갖는 것인 조성물.
  104. 청구항 103에 있어서, 상기 조성물의 유적은 약 150 나노미터 미만의 평균 직경을 갖는 것인 조성물.
  105. 청구항 76에 있어서, 약 30% 이상의 600 nm에서의 광 투과율 값을 보이는 것인 조성물.
  106. 청구항 105에 있어서, 약 60% 이상의 600 nm에서의 광 투과율 값을 보이는 것인 조성물.
  107. 청구항 77에 있어서, 약 30% 이상의 600 nm에서의 광 투과율 값을 보이는 것인 조성물.
  108. 청구항 107에 있어서, 약 60% 이상의 600 nm에서의 광 투과율 값을 보이는 것인 조성물.
  109. 청구항 84에 있어서, 약 30% 이상의 600 nm에서의 광 투과율 값을 보이는 것인 조성물.
  110. 청구항 109에 있어서, 약 60% 이상의 600 nm에서의 광 투과율 값을 보이는 것인 조성물.
  111. 청구항 90에 있어서, 약 30% 이상의 600 nm에서의 광 투과율 값을 보이는 것인 조성물.
  112. 청구항 111에 있어서, 약 60% 이상의 600 nm에서의 광 투과율 값을 보이는 것인 조성물.
  113. 청구항 76에 있어서, 상기 조성물은 3개월 이상 동안 화학적으로 안정한 것인 조성물.
  114. 청구항 77에 있어서, 상기 조성물은 적어도 3개월 이상 동안 화학적으로 안정한 것인 조성물.
  115. 청구항 76에 있어서, 상기 세스퀴테르펜-γ-락톤은 탭시가르긴 또는 탭시가르긴 유도체인 것인 조성물.
  116. 청구항 77에 있어서, 상기 세스퀴테르펜-γ-락톤은 탭시가르긴 또는 탭시가르긴 유도체인 것인 조성물.
  117. 청구항 115에 있어서, 상기 탭시가르긴 유도체는 8-0-(12-아미노도데카노일)-8-0-데부타노일 탭시가르긴 (12ADT)인 것인 조성물.
  118. 청구항 116에 있어서, 상기 탭시가르긴 유도체는 8-0-(12-아미노도데카노일)-8-0-데부타노일 탭시가르긴 (12ADT)인 것인 조성물.
  119. 청구항 115에 있어서, 상기 탭시가르긴 유도체는 8-0-(12-[L-류시노일아미노]도데카노일)-8-0-데부타노일탭시가르긴 (L12ADT)인 것인 조성물.
  120. 청구항 116에 있어서, 상기 탭시가르긴 유도체는 8-0-(12-[L-류시노일아미노]도데카노일)-8-0-데부타노일탭시가르긴 (L12ADT)인 것인 조성물.
  121. 청구항 76에 있어서, 상기 펩티드는 PSA, PSMA, hK2 및 FAP로 이루어진 군으로부터 선택되는 프로테아제 또는 PSA, PSMA, hK2 또는 FAP의 단백질분해 활성을 갖는 효소에 특이적인 절단 부위를 갖는 아미노산 서열을 포함하는 것인 조성물.
  122. 청구항 77에 있어서, 상기 펩티드는 PSA, PSMA, hK2 및 FAP로 이루어진 군으로부터 선택되는 프로테아제 또는 PSA, PSMA, hK2 또는 FAP의 단백질분해 활성을 갖는 효소에 특이적인 절단 부위를 갖는 아미노산 서열을 포함하는 것인 조성물.
  123. 청구항 115에 있어서, 상기 펩티드는 PSA, PSMA, hK2 및 FAP로 이루어진 군으로부터 선택되는 프로테아제 또는 PSA, PSMA, hK2 또는 FAP의 단백질분해 활성을 갖는 효소에 특이적인 절단 부위를 갖는 아미노산 서열을 포함하는 것인 조성물.
  124. 청구항 116에 있어서, 상기 펩티드는 PSA, PSMA, hK2 및 FAP로 이루어진 군으로부터 선택되는 프로테아제 또는 PSA, PSMA, hK2 또는 FAP의 단백질분해 활성을 갖는 효소에 특이적인 절단 부위를 갖는 아미노산 서열을 포함하는 것인 조성물.
  125. 청구항 119에 있어서, 상기 탭시가르긴 유도체는 Ser-Ser-Lys-Tyr-Gln (서열번호 18)의 서열을 포함하는 펩티드의 카르복시 말단에 결합되는 것인 조성물.
  126. 청구항 120에 있어서, 상기 탭시가르긴 유도체는 Ser-Ser-Lys-Tyr-Gln (서열번호 18)의 서열을 포함하는 펩티드의 카르복시 말단에 결합되는 것인 조성물.
  127. 청구항 117에 있어서, 상기 탭시가르긴 유도체는 서열 Asp-Glu*Glu*Glu*Glu (서열번호 486)를 갖는 펩티드의 아스파르트산에 결합되고, *로 표시된 결합의 하나 이상은 감마 카르복시 결합인 것인 조성물.
  128. 청구항 118에 있어서, 상기 탭시가르긴 유도체는 서열 Asp-Glu*Glu*Glu*Glu (서열번호 486)를 갖는 펩티드의 아스파르트산에 결합되고, *로 표시된 결합의 하나 이상은 감마 카르복시 결합인 것인 조성물.
  129. 청구항 77에 있어서, 상기 레시틴은 콩 레시틴, 계란 레시틴, 또는 그의 조합 또는 염으로 이루어진 군으로부터 선택되는 것인 조성물.
  130. 청구항 77에 있어서, 상기 오일은 대두 오일인 것인 조성물.
  131. 청구항 77에 있어서, 주사용 동결보호제, 또는 항산화제를 추가적으로 포함하는 것인 조성물.
  132. 청구항 131에 있어서, 상기 동결보호제는 수크로스이고, 상기 항산화제는 EDTA 또는 그의 염인 것인 조성물.
  133. (a) 청구항 2의 조성물을 물과 합치는 단계,
    (b) 수득된 혼합물을 직경 200 nm 미만의 평균 액적 크기로 균질화시키는 단계,
    (c) 0.2-미크론 필터를 통해 통과시키는 단계를 포함하는, 약학적 조성물을 제조하는 방법.
  134. (a) 청구항 3의 조성물을 물과 합치는 단계,
    (b) 수득된 혼합물을 직경 200 nm 미만의 평균 액적 크기로 균질화시키는 단계,
    (c) 0.2-미크론 필터를 통해 통과시키는 단계를 포함하는, 약학적 조성물을 제조하는 방법.
  135. 청구항 133에 있어서, 상기 평균 액적 크기는 직경이 150 nm 미만인 것인 방법.
  136. 청구항 134에 있어서, 상기 평균 액적 크기는 직경이 150 nm 미만인 것인 방법.
  137. 청구항 133에 있어서, 레시틴-대-전구약물 중량비는 약 5:1 내지 7.5:1인 것인 방법.
  138. 청구항 134에 있어서, 레시틴-대-전구약물 중량비는 약 5:1 내지 7.5:1인 것인 방법.
  139. 청구항 134에 있어서, 레시틴-대-오일 중량비는 약 10:1 내지 5:1인 것인 방법.
  140. 청구항 138에 있어서, 레시틴-대-오일 중량비는 약 10:1 내지 5:1인 것인 방법.
  141. 청구항 137에 있어서, 상기 전구약물은 Ser-Ser-Lys-Tyr-Gln (서열번호 18)의 서열을 포함하는 펩티드의 카르복시 말단에 결합된 탭시가르긴 유도체 8-0-(12-[L-류시노일아미노]도데카노일)-8-0-데부타노일탭시가르긴 (L12ADT)을 포함하는 것인 방법.
  142. 청구항 140에 있어서, 상기 전구약물은 Ser-Ser-Lys-Tyr-Gln (서열번호 18)의 서열을 포함하는 펩티드의 카르복시 말단에 결합된 탭시가르긴 유도체 8-0-(12-[L-류시노일아미노]도데카노일)-8-0-데부타노일탭시가르긴 (Ll2ADT)을 포함하는 것인 방법.
  143. 청구항 133에 있어서, 레시틴-대-전구약물 중량비는 약 2.5:1 내지 5:1인 것인 방법.
  144. 청구항 134에 있어서, 레시틴-대-전구약물 중량비는 약 2.5:1 내지 5:1인 것인 방법.
  145. 청구항 134에 있어서, 레시틴-대-오일 중량비는 약 10:1 내지 5:2인 것인 방법.
  146. 청구항 144에 있어서, 레시틴-대-오일 중량비는 약 10:1 내지 5:2인 것인 방법.
  147. 청구항 143에 있어서, 상기 전구약물은 서열 Asp-Glu*Glu*Glu*Glu (서열번호 486)를 갖는 펩티드의 아스파르트산에 결합된 탭시가르긴 유도체 8-0-(12-아미노도데카노일)-8-0-데부타노일 탭시가르긴 (12ADT)을 포함하고, *로 표시된 결합의 하나 이상은 감마 카르복시 결합인 것인 방법.
  148. 청구항 146에 있어서, 상기 전구약물은 서열 Asp-Glu*Glu*Glu*Glu (서열번호 486)를 갖는 펩티드의 아스파르트산에 결합된 탭시가르긴 유도체 8-0-(12-아미노도데카노일)-8-0-데부타노일 탭시가르긴 (12ADT)을 포함하고, *로 표시된 결합의 하나 이상은 감마 카르복시 결합인 것인 방법.
  149. 청구항 133에 있어서, 상기 조성물은 동결-해동 스트레스 후 0.2-미크론 필터를 통해 여과될 수 있는 것인 방법.
  150. 청구항 134에 있어서, 상기 조성물은 동결-해동 스트레스 후 0.2-미크론 필터를 통해 여과될 수 있는 것인 방법.
  151. 청구항 140에 있어서, 상기 조성물은 동결-해동 스트레스 후 0.2-미크론 필터를 통해 여과될 수 있는 것인 방법.
  152. 청구항 146에 있어서, 상기 조성물은 동결-해동 스트레스 후 0.2-미크론 필터를 통해 여과될 수 있는 것인 조성물.
  153. 청구항 133에 있어서, 상기 조성물은 동결건조할 수 있는 것인 방법.
  154. 청구항 134에 있어서, 상기 조성물은 동결건조할 수 있는 것인 방법.
  155. 청구항 153 또는 154에 있어서, 상기 조성물은 3개월 이상 동안 화학적으로 안정한 것인 방법.
  156. 청구항 133에 있어서, 상기 세스퀴테르펜-γ-락톤은 탭시가르긴 또는 탭시가르긴 유도체인 것인 방법.
  157. 청구항 134에 있어서, 상기 세스퀴테르펜-γ-락톤은 탭시가르긴 또는 탭시가르긴 유도체인 것인 방법.
  158. 청구항 156에 있어서, 상기 탭시가르긴 유도체는 8-0-(12-아미노도데카노일)-8-0-데부타노일 탭시가르긴 (12ADT)인 것인 방법.
  159. 청구항 157에 있어서, 상기 탭시가르긴 유도체는 8-0-(12-아미노도데카노일)-8-0-데부타노일 탭시가르긴 (12ADT)인 것인 방법.
  160. 청구항 156에 있어서, 상기 탭시가르긴 유도체는 8-0-(12-[L-류시노일아미노]도데카노일)-8-0-데부타노일탭시가르긴 (L12ADT)인 것인 방법.
  161. 청구항 157에 있어서, 상기 탭시가르긴 유도체는 8-0-(12-[L-류시노일아미노]도데카노일)-8-0-데부타노일탭시가르긴 (L12ADT)인 것인 방법.
  162. 청구항 133에 있어서, 상기 펩티드는 PSA, PSMA, hK2 및 FAP로 이루어진 군으로부터 선택되는 프로테아제 또는 PSA, PSMA, hK2 또는 FAP의 단백질분해 활성을 갖는 효소에 특이적인 절단 부위를 갖는 아미노산 서열을 포함하는 것인 방법.
  163. 청구항 134에 있어서, 상기 펩티드는 PSA, PSMA, hK2 및 FAP로 이루어진 군으로부터 선택되는 프로테아제 또는 PSA, PSMA, hK2 또는 FAP의 단백질분해 활성을 갖는 효소에 특이적인 절단 부위를 갖는 아미노산 서열을 포함하는 것인 방법.
  164. 청구항 156에 있어서, 상기 펩티드는 PSA, PSMA, hK2 및 FAP로 이루어진 군으로부터 선택되는 프로테아제 또는 PSA, PSMA, hK2 또는 FAP의 단백질분해 활성을 갖는 효소에 특이적인 절단 부위를 갖는 아미노산 서열을 포함하는 것인 방법.
  165. 청구항 157에 있어서, 상기 펩티드는 PSA, PSMA, hK2 및 FAP로 이루어진 군으로부터 선택되는 프로테아제 또는 PSA, PSMA, hK2 또는 FAP의 단백질 가수분해 활성을 갖는 효소에 특이적인 절단 부위를 갖는 아미노산 서열을 포함하는 것인 방법.
  166. 청구항 160에 있어서, 상기 탭시가르긴 유도체는 Ser-Ser-Lys-Tyr-Gln (서열번호 18)의 서열을 포함하는 펩티드의 카르복시 말단에 결합되는 것인 방법.
  167. 청구항 161에 있어서, 상기 탭시가르긴 유도체는 Ser-Ser-Lys-Tyr-Gln (서열번호 18)의 서열을 포함하는 펩티드의 카르복시 말단에 결합되는 것인 방법.
  168. 청구항 158에 있어서, 상기 탭시가르긴 유도체는 서열 Asp-Glu*Glu*Glu*Glu (서열번호 486)를 갖는 펩티드의 아스파르트산에 결합되고, *로 표시된 결합의 하나 이상은 감마 카르복시 결합인 것인 방법.
  169. 청구항 159에 있어서, 상기 탭시가르긴 유도체는 서열 Asp-Glu*Glu*Glu*Glu (서열번호 486)를 갖는 펩티드의 아스파르트산에 결합되고, *로 표시된 결합의 하나 이상은 감마 카르복시 결합인 것인 방법.
  170. 청구항 133 또는 134에 있어서, (d) 조성물을 동결건조시키는 단계를 더 포함하는 것인 방법.
  171. 청구항 2 또는 3의 조성물의 치료적 유효량을 환자에게 투여하는 단계를 포함하는, 환자에서 세포 증식성 질환을 치료하는 방법.
  172. 청구항 171에 있어서, 상기 세포 증식성 질환은 암인 것인 방법.
  173. 청구항 4 내지 74 중 어느 한 항의 조성물의 치료적 유효량을 환자에게 투여하는 단계를 포함하는 환자에서 세포 증식성 질환을 치료하는 방법.
  174. 청구항 76 내지 132 중 어느 한 항의 조성물의 치료적 유효량을 환자에게 투여하는 단계를 포함하는 환자에서 세포 증식성 질환을 치료하는 방법.
  175. 청구항 2 내지 74 중 어느 한 항의 조성물 및 페놀계 링커를 포함하는, 개체에서 세포 증식성 질환을 검출 및 이미징하기 위한 조성물.
  176. 청구항 175에 있어서, 상기 페놀계 링커는 방사성표지를 더 포함하는 것인 조성물.
  177. 청구항 176에 있어서, 상기 방사성표지는 하나 이상의 125 I, 124I, 131I, 또는 3H인 것인 조성물.
  178. 청구항 2 내지 74 중 어느 한 항의 조성물 및 친지성 표지를 포함하는, 개체에서 세포 증식성 질환을 검출 및 이미징하기 위한 조성물.
  179. 청구항 178에 있어서, 상기 친지성 표지는 하나 이상의 18F, 11C, 13N 또는 15O인 것인 조성물.
  180. 청구항 76 내지 132 중 어느 한 항의 조성물 및 페놀계 링커를 포함하는, 개체에서 세포 증식성 질환을 검출 및 이미징하기 위한 조성물.
  181. 청구항 180에 있어서, 상기 폐놀계 링커는 방사성표지를 더 포함하는 것인 조성물.
  182. 청구항 181에 있어서,상기 방사성 표지는 하나 이상의 125I, 124I, 131I, 또는 3H인 것인 조성물.
  183. 청구항 76 내지 132 중 어느 한 항의 조성물 중 어느 하나 및 친지성 표지를 포함하는, 개체에서 세포 증식성 질환을 검출 및 이미징하기 위한 조성물.
  184. 청구항 183에 있어서, 상기 친지성 표지는 하나 이상의 18F, 11C, 13N 또는 15O 인 것인 조성물.
  185. 청구항 175 내지 184 중 어느 한 항의 조성물을 개체에게 투여하는 단계 및 상기 개체를 이미징하는 단계를 포함하는, 개체에서 세포 증식성 질환을 이미징 및 검출하는 방법.
  186. 청구항 185에 있어서, 상기 세포 증식성 질환은 암인 것인 방법.
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* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US9737556B2 (en) 2014-06-13 2017-08-22 Trustees Of Tufts College FAP-activated therapeutic agents, and uses related thereto
FR3031678B1 (fr) * 2015-01-19 2019-07-26 Universite Des Sciences Et Technologies De Lille Utilisation conjointe de asp-8adt et d'un inhibiteur d'autophagie dans le traitement de cancer.
JP2023554520A (ja) 2020-12-22 2023-12-27 コビオレス エヌヴイ テトラペプチド部分を含む化合物
WO2022167664A1 (en) 2021-02-07 2022-08-11 Cobiores Nv Compounds comprising a tetrapeptidic moiety

Family Cites Families (10)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US20030055052A1 (en) * 2000-11-10 2003-03-20 Stefan Peters FAP-activated anti-tumor compounds
WO2002043773A2 (en) * 2000-12-01 2002-06-06 The Johns Hopkins University Tissue specific prodrugs
US20050049209A1 (en) * 2003-08-06 2005-03-03 Chen Andrew Xian Pharmaceutical compositions for delivering macrolides
US8557861B2 (en) * 2004-09-28 2013-10-15 Mast Therapeutics, Inc. Low oil emulsion compositions for delivering taxoids and other insoluble drugs
JP2009514800A (ja) * 2005-10-12 2009-04-09 トロヤノン・ゲゼルシャフト・ミト・ベシュレンクテル・ハフツング・ウント・コンパニー・コマンデイトゲゼルシャフト 相乗作用的な薬学的組成物
WO2007087131A2 (en) * 2006-01-05 2007-08-02 The Johns Hopkins University Peptide prodrugs
US7635682B2 (en) * 2006-01-06 2009-12-22 Genspera, Inc. Tumor activated prodrugs
NZ590730A (en) * 2008-07-23 2012-10-26 Bharat Serums & Vaccines Ltd Stable injectable oil-in-water docetaxel nanoemulsion
EP2408465A4 (en) * 2009-03-17 2012-11-28 Univ Johns Hopkins METHOD AND COMPOSITIONS FOR DETECTING CANCER
WO2011153513A2 (en) * 2010-06-03 2011-12-08 Latitude Pharma Nanoemulsion composition containing vitamin k

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