KR20150086982A - 원지 추출물을 유효성분으로 함유하는 아토피 피부염의 예방 또는 치료용 조성물 - Google Patents

Abstract

본 발명은 원지 추출물을 유효성분으로 함유하는 아토피 피부염의 예방, 치료 또는 개선용 약학적 조성물, 건강기능식품 조성물, 의약외품 조성물 및 화장료 조성물에 관한 것이다.
본 발명의 원지 추출물을 포함하는 조성물은 아토피 피부염을 예방, 치료 또는 개선할 수 있는 효능을 가지며, 현재 사용되는 아토피 피부염 치료제의 부작용을 발생시키지 않으므로, 아토피 피부염을 예방, 치료 또는 개선하기 위한 의약품, 건강기능식품, 의약외품 또는 화장료 등의 다양한 방면에서 유용하게 사용될 수 있다.

Description

원지 추출물을 유효성분으로 함유하는 아토피 피부염의 예방 또는 치료용 조성물{Composition comprising Polygala tenuifolia extract for preventing or treating atopic dermatitis}

본 발명은 원지 추출물을 유효성분으로 함유하는 아토피 피부염의 예방, 치료 또는 개선용 약학적 조성물, 건강기능식품 조성물, 의약외품 조성물 및 화장료 조성물에 관한 것이다.

아토피 피부염(atopic dermatitis)은 만성적으로 재발하는 가려움성 피부염으로, 영유아기에 흔히 발생하고 환자나 가족 중에 가려움증, 피부건조증 또는 특징적인 습진을 동반하는 질환이다. 아토피 피부염의 전형적인 증상은 손, 두피, 얼굴, 목, 팔꿈치, 무릎 등에서 나타나며, 피부가 매우 건조해지고 가려움증과 염증이 생기며 비늘처럼 벗겨지다가 심하게 긁으면 피부가 두꺼워지면서 깊게 주름이 잡히는 태선화 현상이다.

아토피 피부염이 발생하게 되는 직접적인 원인은 아직까지 명확하지 않기 때문에 이에 대한 연구가 계속적으로 진행되고 있다. 이러한 아토피를 치료하기 위하여, 종래 세라마이드, 리놀레산, 식물유 또는 광물성 오일 등의 성분, 하이드로코티손(hydrocortisone) 등의 스테로이드(steroid) 제제 또는 이들에 항균 및 항염 기능을 강화한 물질들이 제안된 바 있다. 그러나, 상기 스테로이드 제제는 표피의 성장억제나 부작용 등의 역효과를 유발할 수 있으며, 우레아 퍼록사이드 등은 피부의 과다 자극을 야기할 수 있고, 균의 내성(resistance) 및 광과민 등의 부작용을 유발할 가능성이 높은 문제점이 있다. 또한, 장기간 피부에 적용시 모세 혈관 확장증 및/또는 각질층의 두께 증가 내지 확장을 유발하는 등의 심각한 부작용을 발생시킬 염려가 있으며, 최근 아토피 완화에 많이 쓰이는 감마-리놀레산은 쉽게 산화되므로 안정성이 낮을 뿐만 아니라, 피부 자극성이 비교적 강하여 민감한 피부에는 사용하기 곤란한 문제점이 있다.

원지(Polygala tenuifolia WILLD.)는 원지과에 속한 다년생 초본인 원지의 뿌리를 건조한 것으로, 뿌리에는 테뉴이딘(tenuidine) 및 폴리갈리톨(polygalitol) 등이 함유되어 있으며, 약리작용으로는 거담 작용, 진정 작용, 혈압강하 작용, 용혈 작용 등의 효과가 알려져 있다. 전술한 원지의 약리 작용에 기초하여 다양한 용도가 연구되어 왔으며, 구체적으로는 뇌졸중(대한민국공개특허 제2004-0013365호), 허혈성 심질환(대한민국공개특허 제2005-0117026호), 치매(대한민국공개특허 제2007-0018571호), 발기부전(대한민국공개특허 제2010-0070493호) 등의 예방 또는 치료효과에 대하여는 알려져 있으나, 아토피 피부염의 예방 또는 치료효과에 대하여는 아직까지 알려진 바가 없다.

이에 본 발명자들은, 인체에 부작용이 없는 천연물 유래의 아토피 피부염 치료제를 개발하기 위하여 예의 노력한 결과, 원지 추출물이 아토피 피부염의 예방 또는 치료에 유용하게 사용될 수 있음을 확인하고 본 발명을 완성하였다.

본 발명의 하나의 목적은, 원지 추출물을 유효성분으로 함유하는, 아토피 피부염의 예방, 치료 또는 개선용 약학적 조성물, 건강기능식품 조성물, 의약외품 조성물 및 화장료 조성물을 제공하는 것이다.

본 발명의 또 다른 목적은, 상기 약학적 조성물을 아토피 피부염의 발병 가능성이 있거나 아토피 피부염을 앓고 있는 개체에 투여하는 단계를 포함하는, 아토피 피부염의 예방 또는 치료방법을 제공하는 것이다.

상기 목적을 달성하기 위한 하나의 양태로서, 본 발명은 원지 추출물을 유효성분으로 함유하는, 아토피 피부염의 예방 또는 치료용 약학적 조성물을 제공한다.

구체적으로, 본 발명의 아토피 피부염 예방 또는 치료용 약학적 조성물은 원지 추출물을 포함할 수 있다.

본 발명에서 용어, "원지(Polygala tenuifolia Willd.)"는 한국, 중국북부 등지에 분포하는 원지과 여러해살이풀이다. 주요성분으로는 사포닌(Saponin), 원지사포닌 A-G(Onjisaponin A-G), 테뉴이폴린(Tenuifolin), 잔톤(Xanthones), 2,6,7,8-테트라메톡시잔톤(2,6,7,8-Tetramethoxyxanthone), 3-하이드록시-2,6,7,8-테트라메톡시 폴리자일리톨(3-Hydroxy-2,6,7,8-Tetramethoxy polygalitol) 등이 함유되어 있으며, 한방에서는 뿌리부분을 원지라 칭하기도 하며 거담제, 강장제, 강정제로 사용된다.

본 발명에서 용어, "원지 추출물"은 원지를 적절한 침출액으로 짜내고 침출액을 증발시켜 농축한 제제를 총칭하는 것으로서, 상기 원지 추출물은 원지 분쇄물을 물, 유기용매, 또는 이들의 혼합용매를 이용하는 추출과정으로 획득할 수 있으며, 추출액, 이의 희석액 또는 농축액, 또는 추출액의 건조 분말 또는 이를 이용하여 제형화된 모든 형태를 포함할 수 있다. 또한 추출 방법에 있어서, 열탕 추출, 열수 추출, 냉침 추출, 온침 추출, 가압 추출, 환류 냉각 추출 또는 초음파 추출 등의 방법을 사용할 수 있으며, 이에 제한되지 않는다.

원지 추출물을 수득함에 있어, 바람직하게는 물, 유기용매 또는 이들의 혼합용매를 사용하여 추출할 수 있다. 유기용매를 사용하여 추출하는 경우, 메탄올, 에탄올, 이소프로판올, 부탄올, 에틸렌, 아세톤, 헥산, 에테르, 클로로포름, 에틸아세테이트, 부틸아세테이트, 디클로로메탄, N, N-디메틸포름아미드(DMF), 디메틸설폭사이드(DMSO), 1,3-부틸렌글리콜, 프로필렌글리콜 또는 이들의 혼합용매인 유기용매를 사용할 수 있으며, 생약의 유효 성분이 파괴되지 않거나 최소화된 조건에서 실온 또는 가온하여 추출할 수 있다. 추출하는 유기용매에 따라 약제의 유효성분의 추출정도와 손실 정도가 차이가 날 수 있으므로, 적절한 유기용매를 선택하여 사용하도록 한다.

상기 용매 추출물은 부유하는 고체 입자를 제거하기 위하여 추출물을 여과시키는 단계를 추가로 포함할 수 있다. 면, 나일론 등을 이용하여 입자를 걸러내거나 한외여과, 냉동여과법, 원심분리법 등을 사용할 수 있다.

추출액의 농축에는 감압농축, 역삼투압 농축 등의 방법이 사용될 수 있다.

농축 후 건조 단계는 동결건조, 진공건조, 열풍건조, 분무건조, 감압건조, 포말건조, 고주파건조, 또는 적외선건조 등을 포함한다. 경우에 따라, 최종 건조된 추출물을 분쇄하는 공정을 추가로 포함할 수 있다.

또한, 상기 추출물은 추가의 분획 공정을 수행할 수 있다. 예를 들어, 상기 추출물을 증류수에 현탁시켜 비극성 유기용매, 예를 들어, 헥산, 에테르, 디클로로메탄, 클로로포름, 에틸아세테이트 또는 이들의 혼합 용매로 비극성용매 가용층을 추출, 분리하여 수득하도록 하고, 이를 농축 및/또는 건조하여 사용할 수 있다.

본 발명의 일 실시예에서는, 원지의 건조된 뿌리를 경동시장으로부터 구입하였고, 원지의 열수 추출물을 수득하기 위하여, 원지 120 g을 정제수에 넣고 회전 증발기로 감압농축하여 100℃에서 열수 추출하였고, 이후 동결건조시켜 수득하였다.

본 발명에 의해 원지 추출물은 아토피 피부염 동물모델에서 긁는 행동의 감소, 혈중 히스타민 및 IgE의 농도 감소 및 TNF-α와 IL-4의 발현 억제활성이 있음을 확인함으로써, 아토피 피부염의 예방 또는 치료에 효과적으로 사용될 수 있음이 확인되었다.

본 발명에서 용어, "예방"은 본 발명의 조성물의 투여로 아토피 피부염의 발병을 억제 또는 지연시키는 모든 행위를 의미하며, "치료"는 본 발명의 조성물에 의해 아토피 피부염에 의한 증세가 호전되거나 이롭게 변경되는 모든 행위를 의미한다.

본 발명에서 용어, "아토피 피부염"은 만성적이고 재발성의 염증성 피부질환으로 가려움증(가려움증)과 피부건조증, 특징적인 습진을 동반하는 질병을 의미한다. 아토피 피부염의 급성 병소에서는 혈청 면역글로불린 E(IgE)의 유의한 증가현상이 특징으로 나타나며, 이에 부가하여 병소의 조직병리학적인 변화 및 피부염 병변에 대한 관능평가 등을 행하여 아토피 피부염의 진단 및 심각도를 판정하기도 한다. 아토피 피부염의 정확한 원인은 아직까지 완전히 이해되고 있지 않지만 유전적 소인과 함께 면역학적, 비면역학적 기전이 관여한다고 보고 있다.

아토피 피부염은 발병 대상의 연령에 따라, 영·유아 아토피(0~3세), 유·소아 아토피(3세~12세), 성인 아토피(13세~50세)으로 구분될 수 있다. 구체적으로 영·유아 아토피는 습진형으로 발병하는 것이 일반적이며, 자극성 피부염이 반복적으로 나타나거나, 계란, 우유, 대두 등의 음식에 의해 발병하는 것이 특징이다. 유·소아 아토피는 영·유아 아토피 피부염보다는 건조한 것이 특징이고, 가려움증이 심해 계속적으로 피부를 긁게 되어 딱딱하게 되며 색소 침착이 일어날 수 있다. 환절기에 증상이 더욱 악화되는 경향이 있으며, 주로 주변 환경의 먼지, 진드기, 곰팡이균, 섬유, 쓰레기, 꽃가루 등이 피부 또는 호흡기관을 통해 체내로 들어오는 것에 기인한다. 마지막으로, 성인 아토피의 경우 피부가 건조하고 거친 증상이 악화되는 것이 특징이며, 흔히 천식 또는 알러지성 비염을 동반하기도 한다. 주로 생활방식, 환경, 스트레스가 주요 악화요인이다. 본 발명에서의 아토피 피부염은 바람직하게는 성인 아토피 피부염일 수 있다.

또한 아토피 피부염은 증상에 따라, 열성아토피, 만성아토피, 건성아토피, 스트레스성 아토피로 구분될 수 있다. 구체적으로 열성아토피는 주로 세포 기능 이상으로 인한 열과 독소의 과잉에 의해 발병하며, 이에 따라 심폐기능 저하, 해독기능 및 면역이 불안정하게 된다. 이것이 피부 열사화로 이어져 아토피 피부염이 발생하게 되며, 특히 열이 과잉 발생할 수 있는 상황이나 환경에서 악화될 수 있다. 만성아토피는 5~10년 이상의 기간 동안 아토피 피부염이 호전악화를 반복하며 지속된 경우를 말하며, 피부 변형 정도가 심하고 피부가 태선화되어 있거나 반복적인 피부염으로 피부착색이 될 수 있다. 건성아토피는 피부가 매우 건조하고 마른 각질이 일어나는 경우가 많은 아토피 피부염으로서, 피부 건조로 인한 가려움증으로 고통을 겪으며, 환절기, 겨울 등 습도가 낮은 계절에 특히 악화된다. 마지막으로 스트레스성 아토피는 스트레스 정도나 심리 상태에 따라 피부염의 증상이 악화 혹은 호전되는 아토피 피부염으로서, 심리적 원인에 의해 아토피 증성이 갑자기 악화되며 병변부위가 붉어지고 가려움증이나 진물이 심해질 수 있다. 본 발명에서의 아토피 피부염은 바람직하게는 스트레스성 아토피 피부염일 수 있다.

바람직하게는, 본 발명의 원지 추출물은 p38의 인산화를 억제시킴으로써 세포신호전달을 차단하여 아토피 피부염을 예방 또는 치료할 수 있다. 본 발명의 일 실시예에서는 원지 추출물에 의한 MAPK 인산화(phosphorylation) 기전양상을 분석한 결과, 500 μg/㎖의 원지 추출물을 처리하였을 때, p38의 인산화를 유의하게 감소시킴을 확인하였다. 이는 원지 추출물이 세포신호전달을 억제시킴으로써 스트레스 유도로 악화되는 아토피 증상의 치료효능을 보이는 것을 시사한다.

본 발명의 원지 추출물을 포함하는 약학적 조성물은, 약학적 조성물의 제조에 통상적으로 사용하는 적절한 담체, 부형체 또는 희석제를 추가로 포함할 수 있다. 이때, 상기 조성물에 포함되는 원지 추출물의 함량은 특별히 이에 제한되지 않으나, 조성물 총 중량에 대하여 0.01 중량% 내지 100 중량%로, 바람직하게는 1 중량% 내지 50 중량%를 포함할 수 있다.

상기 약학적 조성물은 정제, 환제, 산제, 과립제, 캡슐제, 현탁제, 내용액제, 유제, 시럽제, 멸균된 수용액, 비수성용제, 현탁제, 유제, 동결 건조제 및 좌제으로 이루어진 군으로부터 선택되는 어느 하나의 제형을 가질 수 있으며, 경구 또는 비경구의 여러 가지 제형일 수 있다. 제제화할 경우에는 보통 사용하는 충진제, 증량제, 결합제, 습윤제, 붕해제, 계면활성제 등의 희석제 또는 부형제를 사용하여 조제된다. 경구투여를 위한 고형제제에는 정제, 환제, 산제, 과립제, 캡슐제 등이 포함되며, 이러한 고형제제는 하나 이상의 화합물에 적어도 하나 이상의 부형제 예를 들면, 전분, 탄산칼슘, 수크로오스(sucrose) 또는 락토오스(lactose), 젤라틴 등을 섞어 조제된다. 또한, 단순한 부형제 이외에 스테아린산 마그네슘, 탈크 등과 같은 윤활제들도 사용된다. 경구투여를 위한 액상제제로는 현탁제, 내용액제, 유제, 시럽제 등이 해당되는데 흔히 사용되는 단순희석제인 물, 리퀴드 파라핀 이외에 여러 가지 부형제, 예를 들면 습윤제, 감미제, 방향제, 보존제 등이 포함될 수 있다. 비경구투여를 위한 제제에는 멸균된 수용액, 비수성용제, 현탁제, 유제, 동결건조 제제, 좌제가 포함된다. 비수성용제, 현탁용제로는 프로필렌글리콜(propylene glycol), 폴리에틸렌 글리콜, 올리브 오일과 같은 식물성 기름, 에틸올레이트와 같은 주사 가능한 에스테르 등이 사용될 수 있다. 좌제의 기제로는 위텝솔(witepsol), 마크로골, 트윈(tween) 61, 카카오지, 라우린지, 글리세로젤라틴 등이 사용될 수 있다.

또 하나의 양태로서, 본 발명은 상기 약학적 조성물을 아토피 피부염의 의심개체에 투여하는 단계를 포함하는, 아토피 피부염의 예방 또는 치료 방법을 제공한다.

본 발명에서 상기 아토피 피부염의 의심 개체는 아토피 피부염이 발병하였거나 발병할 수 있는 인간을 포함한 모든 동물을 의미하며, 본 발명의 원지 추출물을 포함하는 약학적 조성물을 아토피 피부염 의심 개체에 투여함으로써, 개체를 효율적으로 치료할 수 있다. 아토피 피부염에 대해서는 상기에서 설명한 바와 같다.

본 발명에서 용어, "투여"는 어떠한 적절한 방법으로 아토피 피부염 의심 개체에게 본 발명의 약학적 조성물을 도입하는 것을 의미하며, 투여 경로는 목적 조직에 도달할 수 있는 한 경구 또는 비경구의 다양한 경로를 통하여 투여될 수 있다. 구체적으로, 국소도포 등을 통한 경피투여 방식으로 투여될 수 있으나 이에 제한되지 않는다.

본 발명의 치료 방법은 원지 추출물을 포함하는 약학적 조성물을 약학적으로 유효한 양으로 투여하는 것을 포함할 수 있다.

본 발명에서 용어, "약학적으로 유효한 양"은 의학적 치료에 적용 가능한 합리적인 수혜/위험 비율로 질환을 치료하기에 충분한 양을 의미하며, 유효 용량 수준은 개체 종류 및 중증도, 연령, 성별, 질병의 종류, 약물의 활성, 약물에 대한 민감도, 투여 시간, 투여 경로 및 배출 비율, 치료기간, 동시 사용되는 약물을 포함한 요소 및 기타 의학 분야에 잘 알려진 요소에 따라 결정될 수 있다. 본 발명의 조성물은 개별 치료제로 투여하거나 다른 치료제와 병용하여 투여될 수 있고 종래의 치료제와 순차적 또는 동시에 투여될 수 있다. 그리고 단일 또는 다중 투여될 수 있다. 상기 요소를 모두 고려하여 부작용없이 최소한의 양으로 최대 효과를 얻을 수 있는 양을 투여하는 것이 중요하며, 당업자에 의해 용이하게 결정될 수 있다. 본 발명의 조성물의 바람직한 투여량은 환자의 상태 및 체중, 질병의 정도, 약물 형태, 투여경로 및 기간에 따라 다르며, 적합한 총 1일 사용량은 올바른 의학적 판단범위 내에서 처치의에 의해 결정될 수 있다.

본 발명의 일 실시예에서는, 원지 추출물의 비만세포의 탈과립 억제활성 및 IL-4를 비롯한 염증·면역 관련 사이토카인의 분비 억제 활성을 확인하였고(도 1), 또한 무수 트리멜리트(trimellitic anhydride, TMA) 도포 및 구속스트레스를 통해 유도한 스트레스성 아토피 피부염 동물모델에서 원지 추출물의 긁는 행동(scratching behavior) 감소, 혈중 히스타민 및 IgE의 농도 감소 및 TNF-α와 IL-4의 발현 억제활성을 확인하였다(도 3 및 도 4). 이는 상기 원지 추출물이 아토피 피부염의 치료에 유효함을 잘 보여주는 것이다.

또 하나의 양태로서, 본 발명은 원지 추출물을 유효성분으로 함유하는, 아토피 피부염의 예방 또는 개선용 건강기능식품 조성물을 제공한다.

구체적으로, 본 발명의 원지 추출물을 아토피 피부염의 예방 또는 개선을 목적으로 건강기능식품 조성물에 포함시킬 수 있다.

상기 원지 추출물 및 아토피 피부염에 대해서는 상기에서 설명한 바와 같다.

본 발명에서 용어, "개선"은 상기 조성물을 이용하여 아토피 피부염의 의심 및 발병 개체의 증상이 호전되거나 이롭게 되는 모든 행위를 말한다.

본 발명의 조성물을 건강기능식품에 포함하여 사용할 경우, 상기 조성물을 그대로 첨가하거나 다른 건강기능식품 또는 건강기능식품 성분과 함께 사용할 수 있고, 통상적인 방법에 따라 적절하게 사용할 수 있다. 유효성분의 혼합량은 사용 목적에 따라 적합하게 결정될 수 있다. 일반적으로, 식품 또는 음료의 제조 시에 본 발명의 조성물은 원료에 대하여 바람직하게는 15 중량부 이하, 보다 바람직하게는 10 중량부 이하의 양으로 첨가할 수 있다. 그러나, 건강 조절 및 위생을 목적으로 하는 장기간의 섭취의 경우에는 상기 양은 상기 범위 이하일 수 있으며, 안전성 면에서 문제가 없기 때문에 유효성분은 상기 범위 이상의 양으로도 사용할 수 있다.

본 발명의 조성물을 포함할 수 있는 건강기능식품의 종류에는 특별한 제한은 없으며, 구체적인 예로는 육류, 소세지, 빵, 쵸코렛, 캔디류, 스넥류, 과자류, 피자, 라면, 기타 면류, 껌류, 아이스크림류를 포함한 낙농제품, 각종 스프, 음료수, 차, 드링크제, 알코올 음료 및 비타민 복합제 등이 있고, 통상적인 의미에서의 건강기능식품을 모두 포함할 수 있으며, 동물을 위한 사료로 이용되는 식품을 포함할 수 있다.

본 발명의 건강기능식품 조성물은 여러 가지 영양제, 비타민, 전해질, 풍미제, 착색제, 펙트산 및 그의 염, 알긴산 및 그의 염, 유기산, 보호성 콜로이드 증점제, pH 조절제, 안정화제, 방부제, 글리세린, 알코올, 탄산음료에 사용되는 탄산화제 등을 함유할 수 있다. 그밖에 천연 과일쥬스, 과일쥬스 음료 및 야채 음료의 제조를 위한 과육을 함유할 수 있다.

또 하나의 양태로서, 본 발명은 원지 추출물을 유효성분으로 함유하는, 아토피 피부염의 예방 또는 개선용 의약외품 조성물을 제공한다.

구체적으로, 본 발명의 원지 추출물을 아토피 피부염의 예방 또는 개선을 목적으로 의약외품 조성물에 포함시킬 수 있다.

상기 원지 추출물 및 아토피 피부염에 대해서는 상기에서 설명한 바와 같다.

본 발명에서 용어, "의약외품"은 사람이나 동물의 질병을 치료, 경감, 처치 또는 예방할 목적으로 사용되는 섬유, 고무제품 또는 이와 유사한 것, 인체에 대한 작용이 약하거나 인체에 직접 작용하지 않으며, 기구 또는 기계가 아닌 것과 이와 유사한 것, 감염 예방을 위하여 살균, 살충 및 이와 유사한 용도로 사용되는 제제 중 하나에 해당하는 물품으로서, 사람이나 동물의 질병을 진단, 치료, 경감, 처치 또는 예방할 목적으로 사용하는 물품 중 기구, 기계 또는 장치가 아닌 것 및 사람이나 동물의 구조와 기능에 약리학적 영향을 줄 목적으로 사용하는 물품 중 기구, 기계 또는 장치가 아닌 것을 제외한 물품을 총칭하며, 여기에는 피부 외용제 및 개인위생용품도 포함한다.

본 발명의 조성물을 아토피 피부염의 예방 또는 개선을 목적으로 의약외품에 포함시킬 경우, 상기 조성물을 그대로 포함하여 사용하거나 다른 의약외품 성분과 함께 사용할 수 있고, 통상적인 방법에 따라 적절하게 사용할 수 있다. 유효 성분의 혼합량은 사용 목적에 따라 적합하게 결정할 수 있다.

상기 피부외용제는 특별히 이에 제한되지 않으나, 예를 들어 연고제, 로션제, 스프레이제, 패치제, 크림제, 산제, 현탁제 또는 젤제의 형태로 제조되어 사용될 수 있다.

또 하나의 양태로서, 본 발명은 원지 추출물을 유효성분으로 함유하는, 아토피 피부염의 예방 또는 개선용 화장료 조성물을 제공한다.

구체적으로, 본 발명의 원지 추출물을 아토피 피부염의 예방 또는 개선을 목적으로 화장료 조성물에 포함시킬 수 있다.

상기 원지 추출물 및 아토피 피부염에 대해서는 상기에서 설명한 바와 같다.

본 발명의 아토피 피부염의 예방 또는 개선용 화장료 조성물은 전체 조성물 중량에 대하여 0.001 내지 100 중량％의 원지 추출물을 포함할 수 있으며, 바람직하게는 0.01 내지 50 중량％의 원지 추출물을 포함할 수 있으며, 이에 제한되는 것은 아니다.

또한, 본 발명의 화장료 조성물은 상기 유효성분 이외에 통상적으로 허용되는 성분들을 제한없이 포함할 수 있으며, 예컨대 항산화제, 안정화제, 용해화제, 비타민, 안료 및 향료와 같은 통상적인 보조제, 그리고 담체를 포함할 수 있다.

본 발명에 따른 화장료 조성물은 용액, 외용연고, 크림, 폼, 영양화장수, 유연화장수, 팩, 유연수, 유액, 메이크업베이스, 에센스, 비누, 액체 세정료, 입욕제, 선 스크린크림, 선오일, 현탁액, 유탁액, 페이스트, 겔, 로션, 파우더, 비누, 계면활성제-함유 클렌징, 오일, 분말 파운데이션, 유탁액 파운데이션, 왁스 파운데이션, 패치 및 스프레이 등의 제형으로 제조할 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다.

또한, 본 발명의 화장료 조성물은 일반 피부 화장료에 배합되는 화장품학적으로 허용 가능한 담체를 1 종 이상 추가로 포함할 수 있으며, 통상의 성분으로 예를 들면 유분, 물, 계면활성제, 보습제, 저급 알콜, 증점제, 킬레이트제, 색소, 방부제, 향료 등을 적절히 배합할 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다. 본 발명의 화장료 조성물에 포함되는 화장품학적으로 허용가능한 담체는 제형에 따라 다양하다.

본 발명의 제형이 연고, 페이스트, 크림 또는 젤인 경우에는, 담체성분으로서 동물성 유, 식물성 유, 왁스, 파라핀, 전분, 트라칸트, 셀룰로오스 유도체, 폴리에틸렌 글리콜, 실리콘, 벤토나이트, 실리카, 탈크, 산화아연 또는 이들의 혼합물이 이용될 수 있다.

본 발명의 제형이 파우더 또는 스프레이인 경우에는, 담체 성분으로서 락토스, 탈크, 실리카, 알루미늄 히드록사이드, 칼슘 실케이트, 폴리아미드 파우더 또는 이들의 혼합물이 이용될 수 있고, 특히 스프레이인 경우에는 추가적으로 클로로플루오로히드로카본, 프로판/부탄 또는 디메틸 에테르와 같은 추진제를 포함할 수 있다.

본 발명의 제형이 용액 또는 유탁액인 경우에는, 담체 성분으로서 용매, 용해화제 또는 유탁화제가 이용되며, 예컨대 물, 에탄올, 이소프로판올, 에틸 카보네이트, 에틸 아세테이트, 벤질 알콜, 벤질 벤조에이트, 프로필렌 글리콜, 1,3-부틸글리콜 오일이 이용될 수 있으며, 특히, 목화씨 오일, 땅콩 오일, 옥수수 배종 오일, 올리브 오일, 피마자 오일 및 참깨 오일, 글리세롤 지방족 에스테르, 폴리에틸렌 글리콜 또는 소르비탄의 지방산 에스테르가 이용될 수 있다.

본 발명의 제형이 현탁액인 경우에는, 담체 성분으로서 물, 에탄올 또는 프로필렌 글리콜과 같은 액상의 희석제, 에톡실화 이소스테아릴 알콜, 폴리옥시에틸렌 소르비톨 에스테르 및 폴리옥시에틸렌 소르비탄 에스테르와 같은 현탁제, 미소결정성 셀룰로오스, 알루미늄 메타히드록시드, 벤토나이트, 아가 또는 트라칸트 등이 이용될 수 있다.

본 발명의 제형이 비누인 경우에는 담체 성분으로서 지방산의 알칼리 금속 염, 지방산 헤미에스테르 염, 지방산 단백질 히드롤리제이트, 이세티오네이트, 라놀린 유도체, 지방족 알콜, 식물성 유, 글리세롤, 당 등이 이용될 수 있다.

본 발명의 제형이 계면-활성제 함유 클렌징인 경우에는 담체 성분으로서 지방족 알코올 설페이트, 지방족 알코올 에테르 설페이트, 설포숙신산 모노에스테르, 이세티오네이트, 이미다졸리늄 유도체, 메틸타우레이트, 사르코시테이트, 지방산 아미드 에테르 설페이트, 알킬아미도베타인, 지방족 알코올, 지방산 글리세리드, 지방산 디에탄올아미드, 식물성 오일, 라놀린 유도체 또는 에톡실화 글리세롤 지방산 에스테르 등이 이용될 수 있다.

본 발명의 원지 추출물을 포함하는 조성물은 아토피 피부염을 예방, 치료 또는 개선할 수 있는 효능을 가지며, 현재 사용되는 아토피 피부염 치료제의 부작용을 발생시키지 않으므로, 아토피 피부염을 예방, 치료 또는 개선하기 위한 의약품, 건강기능식품, 의약외품 또는 화장료 등의 다양한 방면에서 유용하게 사용될 수 있다.

도 1의 A는 CRF(corticotrophin releasing factor) 및/또는 SP 처리에 의해 증가된 HMC-1 세포의 탈과립에 대하여, 원지 추출물의 처리에 의한 HMC-1 세포의 탈과립 억제활성을 나타낸 도이다.
도 1의 B는 CRF 및/또는 SP 처리에 의해 증가된 트립테이즈의 분비에 대하여, 원지 추출물의 처리에 의한 트립테이즈의 분비 억제활성을 트립테이즈 어세이(tryptase assay)를 통해 관찰한 도이다.
도 2는 본 발명에서 무수 트리멜리트(trimellitic anhydride, TMA) 처리에 의해 유발한 아토피 동물모델 및 이에 구속스트레스를 가함으로써 더욱 악화된 아토피 동물모델의 제작과정을 나타낸 모식도이다.
도 3의 A는 구속스트레스를 가하여 악화시킨 아토피 질환 동물모델에서 원지 추출물의 투여에 따른 긁는 행동(Scratching behaviors)의 감소효과를 나타낸 도이다.
도 3의 B는 구속스트레스를 가하여 악화시킨 아토피 질환 동물모델에서 원지 추출물의 투여에 따른 피부조직의 수분 함유량의 증가효과를 나타낸 도이다.
도 3의 C는 구속스트레스를 가하여 악화시킨 아토피 질환 동물모델에서 원지 추출물의 투여에 따른 혈중 IgE 농도의 감소효과를 나타낸 도이다.
도 3의 D는 구속스트레스를 가하여 악화시킨 아토피 질환 동물모델에서 원지 추출물의 투여에 따른 혈중 히스타민 농도의 감소효과를 나타낸 도이다.
도 4의 A는 구속스트레스를 가하여 악화시킨 아토피 질환 동물모델에서 원지 추출물의 투여에 따른 TNF-α 발현의 감소효과를 나타낸 도이다.
도 4의 B는 구속스트레스를 가하여 악화시킨 아토피 질환 동물모델에서 원지 추출물의 투여에 따른 IL-4 발현의 감소효과를 나타낸 도이다.
도 5의 A는 CRF 처리에 의해 증가된 p38, ERK(extracellular signal-regulated kinase) 및 JNK(C-Jun N-terminal kinase)의 인산화에 대하여, 원지 추출물의 처리에 의한 상기 인자의 인산화 억제활성을 나타낸 도이다.
도 5의 B는 SP 처리에 의해 증가된 p38, ERK 및 JNK의 인산화에 대하여, 원지 추출물의 처리에 의한 p38의 인산화 억제활성을 나타낸 도이다.
도 5의 C는 CRF 및 SP 처리에 의해 증가된 p38, ERK 및 JNK의 인산화에 대하여, 원지 추출물의 처리에 의한 p38의 인산화 억제활성을 나타낸 도이다.
도 5의 D는 CRF 및 SP 처리에 의해 증가된 p38, ERK 및 JNK의 인산화에 대하여, 양성대조군인 SB203580의 처리에 의한 p38의 인산화 억제활성을 나타낸 도이다.
도 5의 E는 CRF 및 SP 처리에 의해 증가된 트립테이즈의 분비에 대하여, 양성대조군인 SB203580의 처리에 의한 트립테이즈의 분비 억제활성을 나타낸 도이다.

이하, 실시예를 통하여 본 발명을 더욱 상세히 설명하고자 한다. 이들 실시예는 본 발명을 보다 구체적으로 설명하기 위한 것으로, 본 발명의 범위가 이들 실시예에 의해 제한되는 것은 아니다.

실시예 1: 원지 추출물의 제조

원지의 건조된 뿌리를 경동시장으로부터 구입하였다. 원지의 열수 추출물을 수득하기 위하여, 원지 120 g을 정제수에 넣고, 회전 증발기(Rotavapor R-124, Buchi, Flawil, Switzerland)로 감압농축하여 100℃에서 열수 추출하였고, 이후 동결건조하였다(Eyela, Tokyo, Japan). 상기 원지 추출물의 고형분은 14.16%의 수율로 수득하였으며, 상기 원지 추출물은 모든 실험에서 탈이온수(deionized H₂O)로 희석한 후에 사용하였다.

실시예 2: 생체 외( in vitro ) 세포주( cell line ) 모델에서의 원지 추출물에 의한 비만세포의 탈과립 억제 및 면역 관련 사이토카인 분비의 억제 효과

실시예 2-1: 생체 외 세포주 모델 제작

스트레스성 아토피 피부염을 표방하는 생체 외(in vitro) 세포주(cell line) 모델을 구축하기 위하여, 인간 비만세포인 HMC-1 세포주에 다양한 농도와 방법으로 CRF(corticotrophin releasing factor)와 substance P(SP)를 처리하여 최적의 모델 구축방법을 모색하였다.

결과적으로, HMC-1 cell line에 48시간 동안 SP 10μM를 전처리한 후, 다시 CRF 200μM을 24시간 동안 처리한 경우에, 이들을 각각 처리하거나 동시에 처리하였을 경우보다, HMC-1 세포의 탈과립이 크게 증가하였으며(도 1의 A), 트립테이즈 어세이(tryptase assay)를 통해 트립테이즈의 분비도 유의하게 증가하였음을 확인하였다(도 1의 B). 따라서, 본 발명에서의 in vitro 세포주 모델은 상기와 같은 방법으로 구축하였다.

실시예 2-2: 원지 추출물에 의한 비만세포의 탈과립 억제 및 면역 관련 사이토카인 분비의 억제 효과

원지 추출물의 스트레스성 아토피 피부염의 예방 또는 치료활성을 관찰하기 위하여, 상기 실시예 2-1에서 구축한 in vitro cell line 모델에서 200 μM의 CRF를 처리하기 30분 전에, 상기 실시예 1에서 제조한 원지 추출물을 처리하였고, 이에 따른 HMC-1 세포의 탈과립 억제활성 및 염증·면역 관련 사이토카인인 TNF-α, IL-1β, IL-4 및 IL-8의 분비 억제 활성을 관찰하였다.

그 결과, HMC-1 세포의 탈과립 억제활성 및 염증·면역 관련 사이토카인 분비 억제 활성 모두 500 μg/㎖의 원지 추출물을 처리하였을 때, 가장 효과적으로 감소시키는 결과를 확인하였다(도 1의 A). 특히 IL-4의 분비 수준을 현저히 감소시킴으로써 스트레스로 악화되는 성인 아토피 피부염의 치료효과가 유효함을 확인하였다. 또한, CRF 및/또는 SP 처리에 의해 증가한 트립테이즈의 분비도 원지 추출물 처리에 의해 유의하게 억제되었음을 확인하였다(도 1의 B).

실시예 3: 아토피 피부염 동물모델에서의 원지 추출물의 아토피 피부염 치료 효과

실시예 3-1: 아토피 피부염 동물모델의 제작

스트레스성 아토피 피부염 동물모델의 제작을 위하여, Balb/c 마우스를 사용하였고, 감작(sensitization)을 위하여 마우스의 등 부위에 5% 무수 트리멜리트(trimellitic anhydride, TMA)를 1회 도포하고, 5일째 되는 날에 양쪽 귀 부위에 2% TMA를 1회 도포하였으며, 다시 6일째부터 14일째 되는 날까지 9일간 1% TMA를 양쪽 귀 부위에 매일 도포하였으며, 스트레스를 가하는 9일째부터 14일째 되는 날에는 1% TMA 도포 후 2시간 동안 구속스트레스를 매일 가하였다(도 2). 동물모델에서의 아토피 증상은 긁는 행동(scratching behavior), 혈중 히스타민과 IgE 수준분석을 통해 평가하였다.

그 결과, 상기 동물모델 마우스에 구속 스트레스를 가한 후 아토피의 대표적인 행동증상인 긁는 행동이 증가하기 시작하여, 스트레스 시행 후 2일째부터 유의적으로 증가하였다(도 3의 A). 혈중 히스타민과 IgE 농도 또한 스트레스 가한 후 증가하기 시작하여, 실험 종료시에 아토피 대조군보다 유의하게 증가하는 것을 확인하였다(도 3의 C 및 D). 따라서, 본 발명에서의 동물모델은 상기와 같은 방법으로 구축하였다.

실시예 3-2: 동물 모델에서의 원지 추출물의 아토피 피부염 치료 효과

동물모델에서의 원지 추출물의 스트레스성 아토피 피부염의 예방 또는 치료활성을 관찰하기 위하여, 상기 실시예 3-1에서 구축한 구속스트레스를 가하여 악화시킨 아토피 질환 마우스모델의 긁는 행동 분석, 귀 조직의 두께와 형태학적 변화, 피부조직의 수분 함유량 및 림프절(lymph node)의 무게를 측정하였다.

구체적으로, 긁는 행동분석을 위하여 비디오 카메라로 10분 동안 녹화하면서 뒷발로 1초 동안 긁는 행동의 수를 측정하였다. 또한, 귀 조직의 두께를 측정하기 위하여 dial thickness gauge를 사용하여 측정하였으며, 형태학적인 변화를 관찰하기 위하여 귀의 외형을 디지털 카메라를 사용하여 기록하였음과 동시에, 귀 조직의 변화를 관찰하기 위하여 hematoxylin-eosin 염색을 통하여 형태학적인 변화를 관찰하였다. 수분 함유량을 측정하기 위하여 Corneometer^® CM 825의 기계를 사용하여 귀 부위의 수분 함유량을 측정하였으며, 림프절의 무게를 측정하기 위하여 귀 밑 림프절을 절제하여 디지털 밸런스로 무게를 측정하였다.

그 결과, 250 mg/kg의 투여량으로 원지 추출물을 투여한 실험군에서 상기 내용이 유의하게 감소하는 것을 확인하였다(도 3의 A 및 B).

혈액은 마우스의 안구 안쪽 망(retro-orbital plexus)의 모세혈관으로부터 수집하였다. 혈청은 6500 rpm에서 20분간 원심분리를 하여 수득하였고, 이후 -70℃에서 보관하였다.

히스타민 수준(level)은 histamine ELISA kit (Labor Diagnostika, Nord GmbH & Co. KG, Nordhorn, Germany)을 사용하여 측정하였다. 반응 생성물을 ELISA reader (MutiRead 400; Authos Co., Vienna, Austria)기를 사용하여 450 nm 에서 측정하였고, 측정된 히스타민의 양을 프로토콜 가이드라인에 따라 ng/ml 단위로 표현하였다.

IgE 수준은 IgE ELISA kit (Bethyl Laboratories Inc., TX, USA)를 사용하여 측정하였다. 반응 생성물을 ELISA reader (MutiRead 400)기를 사용하여 450 nm 에서 측정하였고, 측정된 IgE의 양을 프로토콜 가이드라인에 따라 ng/ml 단위로 표현하였다.

상기 동물모델의 혈중 히스타민과 IgE의 농도를 측정한 결과, 마찬가지로 250 mg/kg의 투여량으로 원지 추출물을 투여한 실험군에서 유의하게 감소하였다(도 3의 C 및 D). 또한, 염증·면역의 대표 사이토카인인 TNF-α와 IL-4의 발현도 250 mg/kg의 투여량으로 원지 추출물을 투여한 실험군에서 모두 억제됨을 확인하였다(도 4).

실시예 4: 원지 추출물의 p38 의 인산화 억제 활성 확인

상기 다양한 지표에서 보여주는 원지 추출물의 아토피 피부염의 치료효과에 대한 작용 기전을 분석하기 위해, SP 10μM를 전처리한 후 다시 CRF 200μM을 처리한 HMC-1 세포에, CRF 처리 30분 전에 500 μg/㎖의 원지 추출물을 처리하였다.

그 결과, 원지 추출물을 처리하지 않은 대조군은 세포신호전달 상위 경로인 PKA와 PKC 발현이 모두 증가한 반면, 원지 추출물의 처리군은 PKA만 유의적으로 감소하였다. 이러한 PK(Protein Kinase)의 발현은 하위 신호단계인 MAPK의 신호전달 기전을 자극함으로써 유도되는 MAPK 인산화(phosphorylation)를 분석한 결과, 500 μg/㎖의 원지 추출물을 처리하였을 때, p38의 인산화를 유의하게 감소시킴을 확인하였다(도 5의 A 내지 C). 이는 원지 추출물이 CRF 처리에 의해 강화되는 세포신호전달을 억제시킴으로써, 스트레스 유도로 악화되는 아토피 증상의 치료효능을 보이는 것을 시사한다. 상기 500 μg/㎖의 원지 추출물을 처리하였을 때의 효과는 양성대조군인 p38 MAPK 억제자 SB203580 1μM을 처리하였을 때의 수준과 유사한 결과를 보였다(도 5의 D).

이상의 설명으로부터, 본 발명이 속하는 기술분야의 당업자는 본 발명이 그 기술적 사상이나 필수적 특징을 변경하지 않고서 다른 구체적인 형태로 실시될 수 있다는 것을 이해할 수 있을 것이다. 이와 관련하여, 이상에서 기술한 예들은 모든 면에서 예시적인 것이며, 한정적인 것이 아닌 것으로서 이해해야만 한다. 본 발명의 범위는 상기 상세한 설명보다는 후술하는 특허청구범위의 의미 및 범위, 그리고 그 등가 개념으로부터 도출되는 모든 변경 또는 변형된 형태가 본 발명의 범위에 포함되는 것으로 해석되어야 한다.

Claims (9)

1. 원지 추출물을 유효성분으로 함유하는, 아토피 피부염의 예방 또는 치료용 약학적 조성물.
   
2. 제1항에 있어서, 상기 추출물은 물, 탄소수 1 내지 4의 알코올 또는 이들의 혼합용매로 추출한 것인, 조성물.
   
3. 제1항에 있어서, 상기 아토피 피부염의 예방 또는 치료는 p38의 인산화 억제에 의해 달성되는 것인, 조성물.
   
4. 제1항에 있어서, 상기 아토피 피부염은 성인 아토피 피부염인 것인 조성물.
   
5. 제1항에 있어서, 상기 아토피 피부염은 스트레스성 아토피 피부염인 것인 조성물.
   
6. 원지 추출물을 유효성분으로 함유하는, 아토피 피부염의 예방 또는 개선용 건강기능식품 조성물.
   
7. 원지 추출물을 유효성분으로 함유하는, 아토피 피부염의 예방 또는 개선용 의약외품 조성물.
   
8. 원지 추출물을 유효성분으로 함유하는, 아토피 피부염의 예방 또는 개선용 화장료 조성물.
   
9. 제1항 내지 제5항 중 어느 한 항의 조성물을 비인간 개체에 투여하는 단계를 포함하는, 아토피 피부염의 예방 또는 치료방법.
   
   

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