KR20150084397A - Composition for whitening containing fermented ginseng seed oil - Google Patents

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KR20150084397A
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김경탁
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홍희도
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Abstract

The present invention relates to a cosmetic composition comprising fermented ginseng seed oil as an active ingredient for skin whitening. In addition, the present invention relates to a food composition comprising fermented ginseng seed oil as an active ingredient for skin whitening. The composition of the present invention comprises fermented ginseng seed oil as an active ingredient, thereby exhibiting excellent skin whitening effects as safely inhibiting melanin production in a melanin producing cell without cytotoxicity.

Description

발효인삼종자 오일을 함유하는 미백용 조성물{COMPOSITION FOR WHITENING CONTAINING FERMENTED GINSENG SEED OIL}FIELD OF THE INVENTION The present invention relates to a whitening composition containing a fermented ginseng seed oil,

본 발명은 발효인삼종자 오일을 유효성분으로 함유하는 피부 미백용 화장료 조성물에 관한 것이다. 또한, 본 발명은 발효인삼종자 오일을 유효성분으로 함유하는 피부 미백용 식품 조성물에 관한 것이다.The present invention relates to a skin whitening cosmetic composition containing fermented ginseng seed oil as an active ingredient. The present invention also relates to a skin whitening food composition containing fermented ginseng seed oil as an active ingredient.

두릅나무과(Araliaceae)의 인삼(Panax ginseng)은 동양의 전통 약초로 잘 알려져 있고, 동아시아에서는 여러 질병을 치료하는 용도로 오랫동안 사용되어 왔다. 인삼은 이의 중추 신경계, 심혈관계, 면역조절 기능, 당뇨, 염증, 노화, 항산화, 저혈압, 항종양, 인지, 진정, 진통 및 암 등을 아우르는 다양한 약리 및 치료 효과로 인해 많은 관심을 받고 있으며, 항암, 항부정맥 효과를 갖는 많은 담마란 유형(dammarane-type)의 트리테르펜 올리고글리코시드가 발견되고 보고된바 있다.Ginseng of the Araliaceae ( Panax ginseng is well known as a traditional oriental herb, and has long been used in many Asian countries for the treatment of many diseases. Ginseng has attracted much attention due to its various pharmacological and therapeutic effects including its central nervous system, cardiovascular system, immune regulation function, diabetes, inflammation, aging, antioxidation, hypotension, antitumor, cognition, sedation, pain and cancer, , And many dammarane-type triterpene oligoglycosides having an antiarrhythmic effect have been discovered and reported.

인삼종자는 약 15~26 %의 오일을 함유하고 있으며(Beveridge 등 2002; Matsumoto 등 1986), 주요 지방산 성분으로 단일 불포화지방산인 올레산(C18:1)의 함량이 높아 올리브 오일과 비슷한 지방산 조성을 갖는 것으로 나타났다. 또한 인삼종자 오일에 혈중 콜레스테롤을 감소시키는 효능이 있는 스쿠알렌, 옥시도스쿠알렌, 캄페스테롤, 스티그마스테롤, 시토스테롤 등과 같은 다양한 피토스테롤이 존재하는 것으로 밝혀져 기능성 원료로서의 인삼종자 오일의 이용가능성이 대두되고 있다. 그밖에 현재까지 이루어진 인삼종자에 관한 연구로는 인삼종자와 인삼근의 진세노사이드 조성에 관한 연구(Hu 등 2008), 인삼종자와 과육의 사포닌 조성에 관한 연구, 산지별 인삼종자 오일의 조성과 산화안정성 비교 연구, 고압살균처리에 따른 인삼종자의 항산화 효과 등 주로 인삼종자의 진세노사이드 조성과 인삼종자 오일의 조성에 관한 연구가 보고되고 있다. 또한, 한국 공개특허공보 제2008-0073000호에는 인삼을 슬라이스하고 발효하여 오일을 분리하고, 분쇄하고 반죽하여 발효 인삼을 제조하는 방법이 개시되어 있으나, 발효인삼종자 오일의 미백 효과에 대해서는 기재되어 있지 않다.Ginseng seeds contain about 15-26% of oil (Beveridge et al., 2002; Matsumoto et al., 1986). The content of oleic acid (C18: 1), a monounsaturated fatty acid as a major fatty acid component, appear. In addition, it has been found that various phytosterols such as squalene, oxydosqualene, campesterol, stigmasterol, sitosterol and the like, which have an effect of reducing blood cholesterol, are present in ginseng seed oil, and the possibility of using ginseng seed oil as a functional raw material is emerging. Studies on the ginseng seeds of the ginseng seeds and flesh of the ginseng seeds and ginseng roots (Hu et al. 2008), studies on the saponin composition of the ginseng seeds and pulp, Studies on the comparison of ginsenoside composition and composition of ginseng seed oil have been reported mainly on the comparison of stability and antioxidative effect of ginseng seeds under high pressure sterilization treatment. Korean Patent Laid-Open Publication No. 2008-0073000 discloses a method for producing fermented ginseng by slicing and fermenting ginseng to separate, crush and knead the oil, but the whitening effect of the fermented ginseng seed oil is disclosed not.

한편, 인체의 피부는 표피와 진피, 피하조직의 세 개의 층으로 구성되어 있으며, 이중 가장 바깥에 위치한 표피의 하부인 기저층에 피부 색소인 멜라닌을 생성시키는 멜라노사이트(melanocyte)가 존재한다. 피부의 색은 주로 멜라닌에 의하여 결정되며 멜라닌의 생성은 멜라닌 생성세포의 멜라노솜(melanosome)에서 이루어진다. 멜라닌의 생합성은 티로신의 산화로 시작되어 L-dopa, 도파퀴논 및 도파크롬이 생성된 후 디히드록시인돌이나 디히드록시인돌-2-카르복실산이 생성되는 과정을 거쳐 진행되며, 초기의 티로신으로부터 도파퀴논의 생성까지는 티로시나아제가 큰 역할을 한다.On the other hand, the human skin consists of three layers of epidermis, dermis, and subcutaneous tissue, and melanocytes that produce melanin, a skin pigment, are present in the basal layer, which is the lower part of the outermost epidermis. The color of the skin is mainly determined by melanin, and the production of melanin occurs in the melanosome of the melanin-producing cells. The biosynthesis of melanin begins with the oxidation of tyrosine and proceeds through the process of producing dihydroxyindole or dihydroxyindole-2-carboxylic acid after the generation of L-dopa, dopaquinone and dopachrome, Tyrosinase plays a major role in the production of dopaquinone.

피부의 흑화는 피부 세포 내에 존재하는 멜라닌 생성세포(melanocyte)에서 생성된 멜라닌이 각질 형성 세포(keratinocyte)로 전달되어 피부 표피층에 축적되어 일어나게 된다. 피부의 멜라닌 색소 과침착은 기미, 주근깨, 검은 반점 등을 일으키는 요인이 된다. 이러한 피부의 흑화를 예방 및 개선하기 위하여 코지 산(kojic acid), 알부틴(arbutin), 비타민 C 유도체 등이 미백제로 개발되었다.Blackening of the skin occurs when melanin produced in melanocytes in skin cells is transferred to keratinocytes and accumulates in skin surface layer. Melanin pigmentation and deposition of the skin cause spots, freckles, and black spots. Kojic acid, arbutin, vitamin C derivatives and the like have been developed as a whitening agent in order to prevent and improve the blackening of such skin.

하지만, 코지 산의 경우는 시험관 내(in vitro) 티로시나아제 억제 효과에 비해 세포 상이나 생체 내(in vivo)의 멜라닌 생성 억제 효과가 미미할 뿐만 아니라, 또한 장기간 사용시 간암을 유발할 수 있다는 보고가 있었다. 또한 비타민 C 유도체 역시 화학적 안정성에 대한 문제가 있어 장기간 보관이 어렵다는 문제점이 있다.However, in the case of Koji acids in vitro (in vitro ) tyrosinase inhibitory effect compared with the cytosolic or in vivo ( in vivo of melanin synthesis inhibitory effect is not only small, but also can cause liver cancer when used for a long period of time. In addition, vitamin C derivatives have a problem of chemical stability, which makes it difficult to store them for a long period of time.

상기 언급한 바와 같이 최근 미백 활성 물질의 부작용 등이 알려짐에 따라 그 대체 원료로서 천연물 추출물을 이용한 기능성 미백 소재에 대한 연구가 활발히 진행되고 있다. 예를 들어, 한국 특허 제0864174호에는 인삼, 당귀, 감초 등이 미백 효과가 있다고 제시된 바 있고, 국내외에 특허 출원된 피부 미백 활성 식품 추출물에는 포도, 마늘, 상황버섯, 검은콩, 박, 녹두, 쌀, 쑥, 도토리, 겨, 아세로라 버찌, 콩 등이 있다. As mentioned above, it is known that side effects of whitening active materials have recently been investigated, and active whitening materials using natural extracts have been actively studied as alternative raw materials. For example, in Korean Patent No. 0864174, it has been suggested that ginseng, Angelica gigas, licorice, etc. have a whitening effect. In addition, grape, garlic, mushroom, black bean, Rice, wormwood, acorns, chestnut, acerola cherries, and beans.

지금까지 알려진 천연물 추출물을 이용한 미백 조성물은 그 효능이나 독성에 대한 확실한 검증이 충분치 못한 현실이다. 따라서 안전성 및 효과를 모두 입증할 수 있는 우수한 대체 천연 미백제의 개발이 시급한 실정이다. 따라서, 본 발명에서는 피부 미백 용도로 사용할 수 있는 천연 기능성 소재를 발굴하는 것을 목적으로 한다.It is a reality that the whitening composition using natural extracts so far has not been sufficiently verified for its efficacy and toxicity. Therefore, it is urgent to develop an alternative natural whitening agent that can demonstrate both safety and efficacy. Accordingly, it is an object of the present invention to discover natural functional materials which can be used for skin whitening.

이에 본 발명자들은 상기와 같은 목적을 달성하기 위하여 예의 연구를 거듭한 결과, 인삼종자를 특정 미생물로 발효하고 특정의 방법으로 추출한 오일에 현저한 미백 활성이 있음을 발견하여 본 발명을 완성하기에 이르렀다.Accordingly, the present inventors have conducted intensive studies to achieve the above object, and as a result, they found that the oil obtained by fermenting ginseng seeds with a specific microorganism and extracted by a specific method has remarkable whitening activity, and thus completed the present invention.

본 발명의 조성물은 유효 성분으로서 발효인삼종자 오일을 함유함으로써, 세포 독성 없이 안전하게 멜라닌 생성 세포에서의 멜라닌 생성을 억제하여 우수한 피부 미백 효과를 발휘할 수 있다.By containing the fermented ginseng seed oil as an active ingredient, the composition of the present invention can safely inhibit the production of melanin in melanin-producing cells without cytotoxicity, and exert an excellent skin whitening effect.

도 1은 압착 추출 방법을 이용하여 추출한 발효인삼종자 오일의 색도를 나타낸다.
도 2는 용매 추출 방법을 이용하여 추출한 발효인삼종자 오일의 색도를 나타낸다.
도 3은 초임계 유체 추출 방법을 이용하여 추출한 발효인삼종자 오일의 색도를 나타낸다.
도 4는 발효인삼종자 오일 시료의 melan-a 세포주에서 세포의 생존율에 미치는 영향을 나타낸다.
도 5는 발효인삼종자 오일 시료의 melan-a 세포주에서 멜라닌 생성량에 미치는 영향을 나타낸다.
도 6 내지 도 10은 발효인삼종자 오일 시료를 피부에 적용한 후에 피부의 수분량(도 6), 유분량(도 7), 거칠기(도 8), 탄력도(도 9), 투명도(도 10)를 각각 측정한 결과를 나타낸다.
도 11은 발효인삼종자 오일 시료를 피부에 적용한 후의 기호도를 조사한 결과를 나타낸다.
도 12는 발효인삼종자 오일 시료를 피부에 적용한 후의 설문조사 결과를 나타낸다.
Fig. 1 shows the chromaticity of the fermented ginseng seed oil extracted using the compression extraction method.
2 shows the chromaticity of the fermented ginseng seed oil extracted using the solvent extraction method.
FIG. 3 shows the chromaticity of the fermented ginseng seed oil extracted using the supercritical fluid extraction method.
FIG. 4 shows the effect of the fermented ginseng seed oil sample on cell viability in the melan-a cell line.
FIG. 5 shows the effect of the fermented ginseng seed oil sample on melanin production in the melan-a cell line.
Figs. 6 to 10 show the results of measurement of moisture content (Fig. 6), oil content (Fig. 7), roughness (Fig. 8), elasticity (Fig. 9) and transparency (Fig. 10) of skin after application of a fermented ginseng seed oil sample to skin .
Fig. 11 shows the result of examining the preference after application of the fermented ginseng seed oil sample to the skin.
Fig. 12 shows the result of a questionnaire survey after applying a fermented ginseng seed oil sample to the skin.

이하, 본 발명을 상세히 설명하기로 한다. 다만, 본 발명은 다양한 형태로 변경되어 구현될 수 있으며, 여기에서 설명하는 구현예에 한정되는 것은 아니다.Hereinafter, the present invention will be described in detail. However, it should be understood that the present invention may be embodied in many other specific forms without departing from the spirit or essential characteristics thereof.

일 측면에서, 본 발명은 발효인삼종자 오일을 유효성분으로 함유하는 피부 미백용 화장료 조성물에 관한 것이다.In one aspect, the present invention relates to a cosmetic composition for skin whitening comprising fermented ginseng seed oil as an active ingredient.

다른 측면에서, 본 발명은 발효인삼종자 오일을 유효성분으로 함유하는 피부 미백용 식품 조성물에 관한 것이다.In another aspect, the present invention relates to a skin whitening food composition containing fermented ginseng seed oil as an active ingredient.

일 구현예에서, 발효인삼종자는 락토바실러스 가세리(Lactobacillus gasseri), 페디오코쿠스 펜토사세우스(Pediococcus pentosaceus) 및 바실러스 서브틸리스(Bacillus subtilis)로 이루어지는 군으로부터 선택되는 하나 이상의 미생물을 인삼종자에 접종하여 발효된 것일 수 있다.In one embodiment, the fermented ginseng seeds are selected from the group consisting of Lactobacillus gasseri , Pediococcus pentosaceus , and Bacillus subtilis . The microorganism may be fermented by inoculating the ginseng seeds with one or more microorganisms selected from the group consisting of Bacillus subtilis and Bacillus subtilis .

바람직한 구현예에서, 발효인삼종자는 락토바실러스 가세리 KCTC 3162(Lactobacillus gasseri KCTC 3162), 페디오코쿠스 펜토사세우스 LY 011(Pediococcus pentosaceus LY 011), 바실러스 서브틸리스 KFRI 1124(Bacillus subtilis KFRI 1124) 또는 바실러스 서브틸리스 KFRI 1127(Bacillus subtilis KFRI 1127)를 인삼종자에 접종하여 발효된다.In a preferred embodiment, the fermented ginseng seeds are selected from the group consisting of Lactobacillus gasseri KCTC 3162, Pediococcus pentosaceus LY 011 LY 011), Bacillus subtilis KFRI 1124, or Bacillus subtilis KFRI 1127 are inoculated into ginseng seeds.

락토바실러스 균주는 요거트, 치즈, 피클, 맥주, 김치 등 발효식품에 주로 이용되는 균주로서, 락토오스와 설탕 등의 당을 이용하여 발효시켜 젖산으로 전환시키는 이유로 젖산균이라 불리고 있다. 본 발명의 실시예에서 사용한 락토바실러스 가세리 KCTC 3162는 한국생명공학연구원 생물자원센터에서 분양받아 계대하여 사용하였다.Lactobacillus strains are strains mainly used for fermented foods such as yoghurt, cheese, pickles, beer, and kimchi. They are called lactic acid bacteria because they are fermented by using sugars such as lactose and sugar and converted into lactic acid. The Lactobacillus cassia KCTC 3162 used in the examples of the present invention was purchased from the BRC at the Korea Research Institute of Bioscience and Biotechnology.

페디오코쿠스 균주는 독일 김치의 일종인 사우어크라우트(sauerkraut)를 만들 때 주로 사용되는 균주로서, 양배추 등의 야채를 젖산 발효시켜 시큼한 향이 나게 하고 저장성을 향상시키는 것으로 알려져 있다. 본 발명의 실시예에서 사용한 페디오코쿠스 펜토사세우스 LY 011은 한국식품연구원에서 김치에서 분리한 균주를 분양받아 실험에 사용하였다.Pediococcus strain is a strain mainly used for making sauerkraut, a kind of German kimchi, and it is known that vegetables such as cabbage are fermented by lactic acid to make a sour flavor and improve shelf life. The Pediococcus pentosaceus LY 011 used in the examples of the present invention was purchased from the Korea Food Research Institute and used for the experiment.

고초균으로 알려진 바실러스 서브틸리스는 자연계에 널리 분포하는 비병원성 세균으로 공기, 마른풀, 하수, 토양 속에 존재한다. 균주가 형성하는 호기성 내생포자는 건조나 고온에 대한 저항력이 강하며, 사람과 동물에 병원성이 없으며 배지 중에 다량의 단백질을 분비한다. 균체는 글리코겐을 함유하는 그람 양성균으로 다수의 탄수화물을 분해하여 산을 생성하는 것으로 알려져 있다. 본 발명의 실시예에서 사용한 바실러스 서브틸리스 KFRI 1124, KFRI 1127은 한국식품연구원에서 분양받아 계대하여 사용하였다.Bacillus subtilis, known as Bacillus subtilis, is a non-pathogenic bacterium widely distributed in nature and exists in air, dry grass, sewage and soil. The aerobic endospores formed by the strain are resistant to drying and high temperature, are not pathogenic to humans and animals, and secrete large amounts of protein in the medium. The bacteria are glycogen-containing Gram-positive bacteria, which are known to decompose a large number of carbohydrates to generate acids. Bacillus subtilis KFRI 1124 and KFRI 1127 used in the examples of the present invention were purchased from Korea Food Research Institute.

본 발명의 화장료 조성물에서 발효인삼종자 오일은 조성물 총 중량에 대하여 0.001% 내지 20%로 함유될 수 있으나, 함량은 제형 또는 화장료 조성물에 함유되는 기타 성분의 함량에 따라 적절히 조절할 수 있다. 하지만, 화장료 조성물 내 발효인삼종자 오일의 함량이 0.001% 미만인 경우 화장료 조성물에서 실질적인 미백 효과를 기대하기 어려울 수 있으며, 20%를 초과하는 경우에는 기대 효능 대비 비경제적일 수 있다. 따라서, 조성물 총 중량에 대하여 0.001% 내지 20%로 함유되는 것이 바람직하다.In the cosmetic composition of the present invention, the fermented ginseng seed oil may be contained in an amount of 0.001% to 20% based on the total weight of the composition, but the content thereof can be appropriately adjusted according to the content of the other ingredients contained in the formulation or cosmetic composition. However, if the content of the fermented ginseng seed oil in the cosmetic composition is less than 0.001%, it may be difficult to expect a substantial whitening effect in the cosmetic composition, and if it exceeds 20%, it may be uneconomical to the expected efficacy. Therefore, it is preferable that the content is in the range of 0.001% to 20% based on the total weight of the composition.

본 발명의 일 구현예에서, 본 발명의 화장료 조성물은 화장용으로 허용되는 하나 이상의 첨가제를 추가로 함유할 수 있다. 화장용으로 허용되는 하나 이상의 첨가제는 특별히 제한되지 않으며 일반 화장료에 배합되는 통상적인 성분, 예를 들어 유분, 물, 계면활성제, 보습제, 알코올, 증점제, 색소, 방부제, 향료, 킬레이트제, 부형제, 희석제, 자외선 차단제, 지방산 등일 수 있다.In one embodiment of the present invention, the cosmetic composition of the present invention may further contain at least one cosmetically acceptable additive. The at least one additive that is acceptable for cosmetics is not particularly limited and may be selected from conventional ingredients incorporated in common cosmetics such as oil, water, a surfactant, a moisturizer, an alcohol, a thickener, a colorant, an antiseptic, a flavor, a chelating agent, , Sunscreen agents, fatty acids, and the like.

본 발명의 화장료 조성물은, 특별한 제한 없이, 스킨, 로션, 크림, 젤, 에센스, 파운데이션, 화장수, 패치, 팩, 비누, 세안제 및 세정제로 이루어지는 군으로부터 선택되는 어느 하나의 제형일 수 있다.The cosmetic composition of the present invention may be any one selected from the group consisting of a skin, a lotion, a cream, a gel, an essence, a foundation, a lotion, a patch, a pack, a soap, a cleanser and a detergent without particular limitation.

본 발명의 일 구현예에서, 본 발명의 화장료 조성물은 유효 성분인 발효인삼종자 오일 이외에, 효과를 상승 또는 보강시킬수 있도록 미백 효과가 있다고 이미 알려졌거나 앞으로 알려질 여타의 공지된 화합물이나 천연 추출물을 함께 포함할 수 있다.In one embodiment of the present invention, the cosmetic composition of the present invention includes, in addition to the fermented ginseng seed oil as an active ingredient, other known compounds or natural extracts already known or to be known to have a whitening effect so as to enhance or reinforce the effect can do.

본 발명의 식품 조성물에서 발효인삼종자 오일은 조성물 총 중량에 대하여 0.001% 내지 20%로 함유될 수 있으나, 함량은 식품 조성물에 함유되는 기타 성분의 함량에 따라 적절히 조절할 수 있다. 하지만, 식품 조성물 내 발효인삼종자 오일의 함량이 0.001% 미만인 경우 실질적인 미백 효과를 기대하기 어려울 수 있으며, 20%를 초과하는 경우에는 기대 효능 대비 비경제적일 수 있다. 따라서, 조성물 총 중량에 대하여 0.001% 내지 20%로 함유되는 것이 바람직하다.In the food composition of the present invention, the fermented ginseng seed oil may be contained in an amount of 0.001% to 20% based on the total weight of the composition, but the content thereof can be appropriately adjusted according to the content of other ingredients contained in the food composition. However, if the content of the fermented ginseng seed oil in the food composition is less than 0.001%, it may be difficult to expect a substantial whitening effect, and if it exceeds 20%, it may be uneconomical to the expected efficacy. Therefore, it is preferable that the content is in the range of 0.001% to 20% based on the total weight of the composition.

본 발명의 일 구현예에서, 본 발명의 식품 조성물은 식품용으로 허용되는 하나 이상의 첨가제를 추가로 함유할 수 있다. 식품용으로 허용되는 하나 이상의 첨가제는 특별히 제한되지 않으며 식품에 배합될 수 있는 통상적인 성분, 예를 들어 물, 풍미제, 향미제, 착색제, 안정화제, 방부제, 알코올, 탄산화제, 과육, 증점제, 비타민, 식물 추출물, 유기산, 미네랄, 영양제 등일 수 있다.In one embodiment of the invention, the food composition of the present invention may additionally contain one or more additives which are acceptable for food use. The at least one additive that is acceptable for foodstuffs is not particularly limited and may contain conventional ingredients that can be incorporated into foods, such as water, flavor, flavor, colorant, stabilizer, preservative, alcohol, Vitamins, plant extracts, organic acids, minerals, nutrients, and the like.

본 발명의 식품 조성물의 형태는 특별히 제한되지 않으나, 음료, 껌, 차, 과자, 비타민 복합체 및 건강 보조식품으로 이루어지는 군으로부터 선택되는 어느 하나의 형태일 수 있다.The form of the food composition of the present invention is not particularly limited, but may be any form selected from the group consisting of beverage, gum, tea, confectionery, vitamin complex and health supplement.

본 발명의 일 구현예에서, 본 발명의 식품 조성물은 주요 성분인 발효인삼종자 추출물 이외에, 효과를 상승 또는 보강시킬수 있도록 미백 효과가 있다고 이미 알려졌거나 앞으로 알려질 여타의 공지된 화합물이나 천연 추출물을 함께 포함할 수 있다.In one embodiment of the present invention, the food composition of the present invention includes, in addition to the main ingredient, fermented ginseng seed extract, other known compounds or natural extracts known or later to be known to have a whitening effect so as to enhance or reinforce the effect can do.

일 구현예에서, c) 단계의 추출은 150℃ 내지 180℃의 온도 및 1 kg/cm2 내지 5 kg/cm2의 압력 조건에서 압착하여 추출하는 것이 추출 수율의 측면에서 바람직하다.In one embodiment, the extraction of step c) is preferably carried out by compression at a temperature of 150 ° C to 180 ° C and a pressure of 1 kg / cm 2 to 5 kg / cm 2 in terms of extraction yield.

일 구현예에서, c) 단계의 추출은 n-헥산을 이용한 용매 추출이다.In one embodiment, the extraction of step c) is solvent extraction with n-hexane.

일 구현예에서, c) 단계의 추출은 추출 수율을 고려할 때 120 bar 내지 180 bar 및 20℃ 내지 80℃ 조건 범위에서의 초임계 유체 추출이며, 150 bar에서 추출된 발효인삼종자 오일이 미백 효과 등의 생리 활성 측면에서 가장 바람직하다.In one embodiment, the extraction of step c) is a supercritical fluid extraction in the range of 120 bar to 180 bar and 20 to 80 캜, taking into account the extraction yield, and the fermented ginseng seed oil extracted at 150 bar has a whitening effect In terms of physiological activity.

본 발명에서는 발효인삼종자의 오일의 멜라닌 생성 세포에서의 멜라닌 생성 억제 효과 등을 실험하였다. 본 발명의 발효인삼종자 오일은 특히 초임계 추출 오일은 멜라닌 생성세포에서 세포독성 없이 멜라닌 생성량을 크게 감소시킴을 확인하였다.In the present invention, the effect of the oil of fermented ginseng seeds on melanin production in melanin-producing cells was examined. The fermented ginseng seed oil of the present invention confirmed that the supercritical extract oil significantly reduced melanin production without cytotoxicity in melanin-producing cells.

또한, 본 발명의 발효인삼종자 오일은 세포 내에서의 우수한 멜라닌 생성억제 효과뿐만 아니라, 인체 피부에서 피부색 감소 및 유분량 증가 효과를 나타내었다. 또한 피부 자극감이나 부작용이 관찰되지 않아 천연 화장품으로서 우수한 경쟁력을 가질 것으로 예상된다.In addition, the fermented ginseng seed oil of the present invention showed not only excellent melanogenesis inhibitory effect in cells, but also decreased skin color and increased oil content in human skin. In addition, skin irritation and side effects are not observed, and it is expected to have superior competitiveness as natural cosmetics.

하기의 실시예를 통하여 본 발명을 보다 상세하게 설명한다. 그러나 하기 실시예는 본 발명의 내용을 구체화하기 위한 것일 뿐 실시예에 의해 본 발명이 한정되는 것은 아니다.The present invention will be described in more detail with reference to the following examples. However, the following examples are for the purpose of illustrating the present invention and are not intended to limit the scope of the present invention.

[실시예][Example]

인삼종자의 발효Fermentation of ginseng seeds

충청남도 금산에서 2012년에 수확한 4 년근 인삼종자를 구입하여 50℃ 열풍건조기에서 48 시간 건조시킨 후 실험에 사용하였다.Four-year-old ginseng seeds harvested in Geumsan, Chungcheongnam-do in 2012 were purchased and dried for 48 hours in a 50 ° C hot air dryer.

압착추출용 시료의 경우 인삼종자를 충분히 건조시킨 후 껍질을 제거하여 얻은 배유(endosperm) 부분을 발효에 사용하였다. 용매추출 및 초임계 유체 추출용 시료의 경우 껍질을 포함한 인삼종자 전체를 분쇄기(독일 FRITSCH사 제조)를 사용하여 껍질과 배유 부분을 모두 분쇄하였고, 입자 크기는 1 mm trapezoidal을 통과시켜 균일하게 하여 분쇄하여 사용하였다.In the case of the sample for compression extraction, the endosperm portion obtained by thoroughly drying the ginseng seeds and removing the husks was used for fermentation. In the case of solvent extraction and supercritical fluid extraction, all of the ginseng seeds, including the husks, were pulverized using a pulverizer (manufactured by FRITSCH, Germany) and the particle size was uniformly passed through a 1 mm trapezoidal Respectively.

인삼종자 발효에 사용된 균주는 미호기성 젖산간균인 락토바실러스 가세리(Lactobacillus gasseri) KCTC 3162, 호기성 젖산 발효형 구균인 페디오코쿠스 펜토사세우스(Pediococcus pentosaceus) LY 011, 호기성 포자형성 간균인 바실러스 서브틸리스(Bacillus subtilis) KFRI 1124 및 바실러스 서브틸리스(Bacillus subtilis) KFRI 1127을 한국생명공학연구원 생물자원센터와 한국식품연구원에서 분양받아 3 회 계대배양하여 사용하였다. 시험 균주와 사용 배지 및 배양 온도를 하기 표 1에 나타내었다. Lactobacillus gasseri KCTC 3162, an aerobic lactic acid bacterium, Pediococcus pentosaceus LY 011, an aerobic lactic acid fermenting type staphylococcus, Lactobacillus pentosaceus LY 011, which is a aerobic spore bacterium, Bacillus sp. Bacillus subtilis KFRI 1124 and Bacillus subtilis KFRI 1127 were purchased from Korea Research Institute of Bioscience and Biotechnology, Korea Food Research Institute and used for subculture three times. The test strains, used medium and culture temperature are shown in Table 1 below.

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인삼종자의 발효는 각 균주별 특성과 멸균처리시 증류수의 양을 다르게 하여 멸균하고 균주를 접종하였다. 바실러스 균주(KFRI 1124, KFRI 1127)의 경우 수분 함량이 적은 조건에서도 잘 자라기 때문에 수분함량을 최소화하였고, 유산균 균주(KCTC 3162, LY 011)는 수분 함량을 시료 대비 2 ~ 3 배로 증량하여 멸균처리 하였다. 유산균(A)에 속하는 락토바실러스 가세리 KCTC 3162와 페디오코쿠스 펜토사세우스 LY 011 그리고 고초균(B)에 속하는 바실러스 서브틸리스 KFRI 1124와 바실러스 서브틸리스 KFRI 1127 두 그룹으로 나누어 실험한 조건은 다음 표 2와 같다.The fermentation of ginseng seeds was sterilized by varying the characteristics of each strain and the amount of distilled water at the time of sterilization, and the strain was inoculated. The water content of the Bacillus strain (KFRI 1124, KFRI 1127) was minimized because it grew well under low water content conditions. The lactic acid bacterial strain (KCTC 3162, LY 011) was sterilized by increasing the moisture content by 2 to 3 times . Lactobacillus gasseri KCTC 3162, Pediococcus pentosaceus LY 011 and Bacillus subtilis KFRI 1124 belonging to Bacillus subtilis (B) and Bacillus subtilis KFRI 1127 belonging to lactic acid bacteria (A) Table 2 shows the results.

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상기 조건에 따라 멸균한 인삼종자에 각 균주를 1 % 씩 접종하고 균주가 시료에 잘 퍼지도록 멸균한 스패튤라(spatula)로 잘 섞어준 다음 30℃ 인큐베이터에서 24 시간 배양하여 발효인삼종자를 제조하였다. 이를 냉동시켜 동결건조하고 분쇄하여 발효인삼종자 오일 추출용 시료로 사용하였다.1% of each strain was inoculated to the sterilized ginseng seeds according to the above conditions and mixed well with a sterilized spatula so that the strain spread well in the sample. Then, the strain was cultured in a incubator at 30 ° C for 24 hours to prepare fermented ginseng seeds . It was frozen, lyophilized and pulverized and used as a sample for extraction of fermented ginseng seed oil.

인삼종자 분말의 멸균 후 pH는 5.98로 측정되었다. 락토바실러스 가세리 KCTC 3162를 접종하여 발효시킨 후의 pH는 5.01로 낮아지는 것을 확인하였다. 페디오코쿠스 펜토사세우스 LY 011를 접종하여 발효시킨 후의 pH는 5.53으로 측정되었다. 또한, 바실러스 서브틸리스 1124 균주 접종 후에는 pH가 6.13로 상대적으로 높았고, 바실러스 서브틸리스 KFRI 1127 균주의 경우는 발효 후 pH가 5.11로 상대적으로 낮게 측정되었다.After sterilization of ginseng seed powder, the pH was 5.98. It was confirmed that the pH after inoculation with Lactobacillus casei KCTC 3162 and fermented was lowered to 5.01. The pH after inoculation with Pediococcus pentosaceus LY 011 and fermentation was 5.53. In addition, the pH was relatively high at 6.13 after the inoculation of Bacillus subtilis strain 1124, and the pH of fermented Bacillus subtilis KFRI 1127 strain was relatively low at 5.11.

발효인삼종자 오일 추출Fermented ginseng seed oil extract

1. 압착 추출1. Crimp extraction

발효인삼종자 오일의 압착추출은 발효 후 동결건조시킨 발효인삼종자 배유를 사용하였다. 발효인삼종자의 압착은 스크루(screw) 압착 방식의 채유기(한국 내쇼날이엔지(주) 제조)를 사용하여, 60℃ 내지 70℃의 온도에서 전처리 단계를 거친 후, 150℃ 내지 180℃의 온도 및 1 kg/cm2 내지 5 kg/cm2의 압력 조건에서 가열 압착하여 얻은 오일을 8,000 rpm에서 20 분간 원심분리하여 불순물을 제거하였고 상층 오일의 무게를 측정하여 수율을 계산하였다. 이때 추출 전 제거한 껍질 무게를 감안하여 수율을 계산하였다.Fermented ginseng seed oil was extracted by freeze - drying after fermentation. The pressure of the fermented ginseng seed is subjected to a pretreatment step at a temperature of 60 ° C to 70 ° C by using a screw press method Chicken Organ (Korea National Instruments Co., Ltd.) The oil obtained by heating and compression at a pressure of 1 kg / cm 2 to 5 kg / cm 2 was centrifuged at 8,000 rpm for 20 minutes to remove impurities. The yield of the oil was measured by weighing the upper layer oil. At this time, the yield was calculated considering the weight of the husks removed before extraction.

2. 용매 추출2. Solvent Extraction

발효인삼종자 오일의 용매 추출은 발효 후 동결건조시킨 인삼종자 분말을 사용하였고, 식물유지 추출에 주로 사용하는 n-헥산을 사용하여 추출하였다. 추출용 2 L 보틀(bottle)에 발효인삼종자 분말 200 g과 n-헥산 800 mL을 넣고 70℃에서 3 시간 추출하였다. 추출물은 감압여과장치로 여과한 후 50℃에서 감압농축하여 발효인삼종자 오일을 얻었고 오일의 무게를 측정하여 수율을 계산하였다.Solvent extraction of fermented ginseng seed oil was carried out by using freeze - dried ginseng seed powder after fermentation and extracted with n - 200 g of fermented ginseng seed powder and 800 mL of n-hexane were added to a 2 L bottle for extraction and extracted at 70 ° C for 3 hours. The extract was filtered with a vacuum filter and concentrated under reduced pressure at 50 ° C to obtain fermented ginseng seed oil. The yield of the oil was measured by weighing the oil.

3. 3. 초임계Supercritical 유체 추출 Fluid extraction

발효인삼종자 오일의 초임계 유체 추출은 발효 후 동결건조시킨 인삼종자 분말을 사용하였다. 발효인삼종자 중의 오일성분 추출을 위해 초임계 이산화탄소 추출장치(한국 Greentek21사 제조)를 이용하여 추출을 진행하였다. 추출조는 내용량 500 mL으로 분쇄한 발효인삼종자 분말 230 g을 투입하여 에너자이드 씰(energized seal)로 밀봉하였으며, 추출조의 헤드(head) 부분과 본체는 클램프(clamp) 채결 방식을 사용하였다. CO2 실린더에서 나온 CO2 가스는 콘덴서(condenser)를 거쳐 액화되어 CO2 펌프에서 압축된 뒤 추출조로 들어가게 된다. 추출조에서 나온 이산화탄소와 추출물은 압력이 상압으로 낮아지면서 이산화탄소는 날아가고 리시버(receiver)에 모인 추출물을 발효인삼종자 초임계 추출물 시료로 하였다. 초임계 유체 추출은 150 bar, 65℃ 조건으로 설정하였다.The supercritical fluid extraction of fermented ginseng seed oil was performed by using freeze - dried ginseng seed powder after fermentation. Extraction was carried out using a supercritical carbon dioxide extraction device (manufactured by Greentek21 Korea) for extracting oil components in fermented ginseng seeds. 230 g of fermented ginseng seed powder pulverized into 500 mL of an extracting tank was sealed and sealed with an energized seal. The head of the extraction tank and the main body were clamped. CO 2 gas from the CO 2 cylinder is liquefied through the condenser (condenser) is put twos extracted after being compressed in the CO 2 pump. The carbon dioxide and extracts from the extraction tank were lowered to normal pressure and the carbon dioxide was blown. The extract collected in the receiver was used as a sample of the fermented ginseng seed supercritical extract. Supercritical fluid extraction was set at 150 bar and 65 ℃.

또한, 미백 효과와 관련된 실험을 위해서 150 bar, 35℃ 조건, 500 bar, 35℃ 조건 및 500 bar, 65℃의 조건으로 추출한 시료를 추가하였다.For the experiments related to the whitening effect, samples extracted at 150 bar, 35 ℃, 500 bar, 35 ℃ and 500 bar and 65 ℃ were added.

발효인삼종자 오일 수율Fermented ginseng seed oil yield

발효인삼종자 오일의 추출방법에 따른 수율을 표 3에 나타내었다.The yields of the fermented ginseng seed oil according to the extraction method are shown in Table 3.

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압착 추출한 오일의 수율은 발효하지 않은 인삼종자 오일(5.2 %) 보다 발효 처리한 인삼종자 오일이 높게 나타났는데, 특히 바실러스 균주로 발효한 인삼종자의 수율이 7 % 이상으로 나타났다. 용매 추출은 반대로 발효처리 하지 않은 대조구의 수율이 16.68 %로 높게 나타났고, 바실러스 균주로 발효한 인삼종자의 수율이 13 % 대로 낮은 결과를 보였다. 락토바실러스 균주로 발효한 인삼종자의 용매 추출 수율은 16.35 %로 대조구 인삼종자 오일과 유사한 수치를 나타냈다. 초임계 추출의 경우 압착 추출과 용매 추출 방법으로 추출한 오일과 반대로 발효하지 않은 대조구 인삼종자의 추출 수율이 4.87 %로 발효한 인삼종자보다 높게 나타났고, 발효인삼종자 오일은 발효 균주에 따라 수율 차이를 보였다. 발효인삼종자로 초임계 추출한 오일 중 가장 높은 수율을 보인 발효 균주는 바실러스 서브틸리스 KFRI 1127로 4.11 %의 수율을 나타냈다.The yield of squeezed oil was higher than that of non - fermented ginseng seed oil (5.2%). The yield of ginseng seed fermented with Bacillus strain was over 7%. In contrast, the yield of non - fermented control was high at 16.68%, and the yield of ginseng seeds fermented with Bacillus strains was as low as 13%. Solvent extraction yield of ginseng seed fermented with Lactobacillus strains was 16.35%, similar to that of control ginseng seed oil. In the case of supercritical extraction, the extraction yield of the non - fermented control ginseng seeds was higher than that of the ginseng seeds fermented at 4.87%. In contrast, the fermented ginseng seed oil showed a difference in yield It looked. The highest yield of the supernatant extracted from the fermented ginseng seeds was 4.11% for Bacillus subtilis KFRI 1127.

발효인삼종자 오일의 분석Analysis of Fermented Ginseng Seed Oil

색도Chromaticity

색도는 색차계(CR-200, 일본 Minolta사 제조)를 이용하여 L 값(밝기), a 값(+: 적색, -: 청색), b 값(+: 황색, -: 녹색) 및 총 색차 ΔE(Total color difference, ΔE=

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)값을 측정하였다. 색도 측정은 6 웰 플레이트(Nunclon™)에 시료 일정량을 담아 측정하였고, 각각 5 회 반복 측정한 수치를 평균한 값으로 나타내었으며, 표준 백색판(L: 97.83, a: -0.36, b: 1.94)으로 보정하여 색도를 측정하였다.The chromaticity was measured by using a color difference meter (CR-200, manufactured by Minolta Co., Ltd.) and calculating L value (brightness), a value (+: red, -: blue), b value (+: yellow, (Total color difference,? E =
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) Were measured. (L: 97.83, a: -0.36, b: 1.94) was measured by averaging the values measured five times repeatedly, and the colorimetric measurement was carried out in a 6-well plate (Nunclon ™) And the chromaticity was measured.

압착 추출 방법을 이용하여 추출한 발효인삼종자 오일의 색도를 표 4 및 도 1에 나타내고, 용매 추출 방법을 이용하여 추출한 발효인삼종자 오일의 색도를 표 5 및 도 2에 나타내고, 초임계 유체 추출 방법을 이용하여 추출한 발효인삼종자 오일의 색도를 표 6 및 도 3에 나타내었다.The chromaticity of the fermented ginseng seed oil extracted using the compression extraction method is shown in Table 4 and FIG. 1, and the chromaticity of the fermented ginseng seed oil extracted using the solvent extraction method is shown in Tables 5 and 2, and the supercritical fluid extraction method The chromaticity of the fermented ginseng seed oil extracted using this method is shown in Table 6 and FIG.

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지방산 분석Fatty acid analysis

유리지방산 분석은 AOAC 공정분석법에 준하여 가스 크로마토그래피(GC; Agilent 6890)를 사용하여 분석하였다. GC 분석의 컬럼은 HP-FFAP(폴리에틸렌 글리콜-테레프탈산; 25 m × 0.32 mm × 0.5 ㎛)를 사용하였고, 컬럼의 온도는 150℃에서 1 분간 유지 후 230℃까지 1 분당 4℃씩 승온하여 10 분간 유지하였다. 주입 온도는 230℃, 검출기 온도는 250℃로 하였으며, 운반 가스는 He(1.5 mL/min), H2(30 mL/min), 공기(300 mL/min)를 사용하였다. 시료는 메탄올성 수산화나트륨 용액으로 처리하여 알칼리염을 만든 후 트리플루오로보란메탄올(메탄올 중 BF3)을 가하고 가열하여 에스테르화하여 생성된 지방산에스테르를 이소옥탄에 녹여 시료로 사용하였다. 시료는 1 ㎕씩 주입하였으며, 불꽃이온화 검출기(flame ionization detector, FID)를 사용하여 분석하였다. 지방산 확인을 위한 표준물질은 Supelco 37 component FAME(지방산 메틸 에스테르) mix C4~C24(Supelco)를 사용하여 체류 시간(retention time)을 비교하여 확인하였다.Free fatty acid analysis was carried out by gas chromatography (GC; Agilent 6890) according to AOAC process analysis. The temperature of the column was maintained at 150 ° C for 1 minute and then the temperature was raised to 230 ° C at 4 ° C / min for 10 minutes. The column was maintained at 25 ° C Respectively. Injection temperature was 230 ℃, the detector temperature was to 250 ℃, carrier gas was used He (1.5 mL / min), H 2 (30 mL / min), air (300 mL / min). The sample was treated with sodium hydroxide solution in methanol to make an alkali salt, then trifluoroborane methanol (BF 3 in methanol) was added, and the ester was heated to dissolve the fatty acid ester in isooctane and used as a sample. Samples were injected at 1 μl and analyzed using a flame ionization detector (FID). The standard substances for fatty acid identification were confirmed by comparing the retention time using Supelco 37 component FAME (fatty acid methyl ester) mix C4 ~ C24 (Supelco).

발효인삼종자 오일의 추출 방법에 따른 지방산 조성 및 함량을 분석한 결과를 하기 표 7에 나타내었다.The results of analysis of fatty acid composition and content according to the extraction method of fermented ginseng seed oil are shown in Table 7 below.

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전반적으로 인삼종자의 발효 및 추출 방법에 의한 지방산 조성의 차이는 크지 않았다. 발효인삼종자 오일의 지방산 조성은 불포화지방산인 올레산(C18:1)를 78 %, 리놀레산(C18:2)이 18 % 정도로 전체 지방산 함량의 90 % 이상 차지한 것을 알 수 있었고, 특히 올레산의 비중이 높게 나타났다. 이외에 팔미트산(C16:0)을 약 2 %, 그리고 일부 팔미톨레산(C16:1), 스테아르산(C18:0), α-리놀렌산(C18:3, ω3), γ-리놀렌산(C18:3, ω6), 가돌레산(C20:1)을 함유하고 있었다. 표 7에 나타난 것과 같이 압착 추출 방법과 용매 추출 방법으로 추출한 오일의 지방산 조성은 처리구간 거의 차이가 나타나지 않았다. 반면 초임계 추출 방법으로 추출한 오일의 경우 다른 추출 방법과 비교하여 포화지방산인 팔미트산과 스테아르산이 높게 나타났다. 특히 페디오코쿠스 펜토사세우스 LY 011 균주로 발효하여 추출한 오일의 수치가 가장 높게 증가하였고, 포화 지방산의 증가에 따라 올레산이 상대적으로 감소한 것을 확인하였다.In general, the difference in fatty acid composition by the fermentation and extraction method of ginseng seeds was not significant. The fatty acid composition of the fermented ginseng seed oil was found to be 78% of unsaturated fatty acid (C18: 1) and 18% of linoleic acid (C18: 2), accounting for more than 90% of total fatty acid content. Especially, appear. (C18: 0), α-linolenic acid (C18: 3, ω3), γ-linolenic acid (C18: 0) and palmitoleic acid 3, omega 6) and carbolic acid (C20: 1). As shown in Table 7, the fatty acid compositions of the oils extracted by the squeeze extraction method and the solvent extraction method showed almost no difference between the treatment sections. On the other hand, saturated fatty acids such as palmitic acid and stearic acid were higher in the oil extracted with the supercritical extraction method than the other extraction methods. Especially, the value of oil extracted by fermentation with Pediococcus pentosaceus strain LY 011 was the highest and oleic acid was decreased with increasing saturated fatty acid.

발효인삼종자 오일의 미백 효과Whitening effect of fermented ginseng seed oil

melanmelanin -a -a 세포생존률Cell survival rate 및 멜라닌 생성 억제 And melanin production inhibition

하기 표 8에 따른 발효인삼종자 오일 시료 15 종이 마우스 유래의 멜라닌 생성 세포인 melan-a 세포주에서 세포의 생존율과 멜라닌 생성량에 미치는 영향을 측정하였다.The effect of 15 samples of the fermented ginseng seed oil according to Table 8 on cell viability and melanin production in the melanocyte-derived melan-a cell line derived from mouse was measured.

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10 % 소태아혈청(fetal bovine serum)과 1 % 페니실린-스트렙토마이신, 200 nM의 포르볼-12 미리스테이트 13-아세테이트가 함유된 RPMI 1640 배지로 37℃, 5 % CO2 조건에서 배양하여 EtOH / H2O = 6 / 4 용액에 녹인 각각의 시료를 1 ㎍/mL, 10 ㎍/mL, 100 ㎍/mL의 농도로 3 일간 처리하였다.The cells were cultured in RPMI 1640 medium containing 10% fetal bovine serum and 1% penicillin-streptomycin and 200 nM of phorbol-12 myristate 13-acetate at 37 ° C and 5% CO 2 , Each sample dissolved in H 2 O = 6/4 solution was treated for 3 days at concentrations of 1 ㎍ / mL, 10 ㎍ / mL and 100 ㎍ / mL.

세포생존률은 배지 제거 후 PBS로 세정하고 웰 당 crystal violet(CV 0.1 %, 10 % EtOH, 나머지 PBS)를 200 ㎕ 첨가하여 5 분간 상온에서 인큐베이션한 후, EtOH 1 mL를 첨가하고 상온에서 10 분간 진탕(shaking)한 후 590 nm에서 UV 흡수도를 측정하여 결정하였다. 15 종의 시료 모두 100 ppm 이하의 농도에서 세포독성을 나타내지 않았다(도 4).Cell viability was washed with PBS, and 200 ㎕ of crystal violet (CV 0.1%, 10% EtOH, remaining PBS) was added per well. After incubation for 5 minutes at room temperature, 1 mL of EtOH was added and incubated at room temperature for 10 minutes shaking and UV absorption at 590 nm. All 15 samples did not show cytotoxicity at concentrations below 100 ppm (FIG. 4).

멜라닌 생성량은 배지 제거 후 PBS로 세척하고 웰 당 1 N NaOH 1 mL를 가하여 멜라닌을 녹인 후 400 nm에서 UV 흡수도를 측정하여 결정하였다. 멜라닌 생성에 미치는 영향을 측정한 결과는 3-1 시료와 KFRI 1124 균주로 발효시킨 3-2 시료가 100 ppm에서 60 % 이상의 멜라닌 생성억제 활성을 나타내었다(도 5). 이는 미백기능성 고시물질인 알부틴보다 동일 농도에서 더 우수한 효과를 나타냄을 의미한다.Melanin production was determined by washing the media with PBS after removing the medium, dissolving melanin in 1 mL of 1 N NaOH per well, and measuring UV absorbance at 400 nm. The results of measuring the effect on the melanin production showed that the 3-1 sample and the 3-2 sample fermented with the KFRI 1124 strain showed a melanin formation inhibitory activity of more than 60% at 100 ppm (FIG. 5). This means that it exerts more excellent effects at the same concentration than arbutin, a whitening functional substance.

피부 적용 실험Skin application experiment

시료 3-2의 2 % 수용액을 제조하여 11 명의 피험자에게 5 주간 매일 2 회씩 팔의 일정 부위에 도포하면서 피부의 수분량, 유분량, 거칠기, 탄력도, 투명도를 피부측정기(Aramo-TS, 한국 Aramhuvis사 제조)를 이용하여 1 주일에 한 번씩 측정하였다. 그 결과, 시료 3-2는 비도포 부위에 비하여 피부의 색도를 감소, 유분량을 증가시키는 경향을 나타내었고, 수분량, 탄력도 및 거칠기에는 영향이 없었다(도 6 내지 도 10).Water content, roughness, elasticity and transparency of the skin were measured using a skin tester (Aramo-TS, manufactured by Aramhuvis Co., Ltd., Korea) by applying 2% aqueous solution of Sample 3-2 to 11 subjects for 2 weeks ) Were measured once a week. As a result, Sample 3-2 showed a tendency to decrease the chromaticity of the skin and increase the amount of oil compared to the non-applied region, and did not affect the moisture content, elasticity and roughness (FIGS. 6 to 10).

또한, 피험자들에게 사용 후 기호도를 조사한 결과, 시료 3-2는 향 부분에 낮은 기호도를 나타내었으나, 색상, 끈적임, 피부흡수도 및 종합적 기호도 측면에서 5 점 이상의 점수를 나타내었다(도 11).Also, as a result of examining the preference of the subjects, the sample 3-2 showed a low preference in the fragrance portion but showed a score of 5 or more in terms of color, stickiness, skin absorption and overall preference (FIG. 11).

또한, 피험자들에 대한 설문조사 결과, 시료 3-2는 종합적 피부상태, 수분 개선, 탄력 개선, 피부색 개선, 각질 감소, 모공 감소 항목에서 4.5 점 이상의 점수를 받았고, 피부 트러블 유발 및 피부자극감 유발 항목에서 1.5 점 이하의 점수분포를 나타내어 피부안전성이 높은 것으로 나타났다(도 12). In addition, as a result of the questionnaire survey, sample 3-2 was rated 4.5 or higher in the comprehensive skin condition, moisture improvement, improvement of elasticity, improvement of skin color, reduction of dead skin and reduction of pore, and the skin trouble inducing and skin irritation inducing item And the score was 1.5 points or less, indicating high skin safety (FIG. 12).

Claims (12)

발효인삼종자 오일을 유효성분으로 함유하는 피부 미백용 화장료 조성물.A cosmetic composition for skin whitening comprising fermented ginseng seed oil as an active ingredient. 제 1 항에 있어서,
발효인삼종자가 락토바실러스 가세리(Lactobacillus gasseri), 페디오코쿠스 펜토사세우스(Pediococcus pentosaceus) 및 바실러스 서브틸리스(Bacillus subtilis)로 이루어지는 군으로부터 선택되는 하나 이상의 미생물을 인삼종자에 접종하여 발효된 것임을 특징으로 하는 화장료 조성물.
The method according to claim 1,
The fermented ginseng seed is inoculated into ginseng seeds by inoculating one or more microorganisms selected from the group consisting of Lactobacillus gasseri , Pediococcus pentosaceus and Bacillus subtilis , Wherein the cosmetic composition is a cosmetic composition.
제 2 항에 있어서,
발효인삼종자가 락토바실러스 가세리 KCTC 3162(Lactobacillus gasseri KCTC 3162)를 인삼종자에 접종하여 발효된 것임을 특징으로 하는 화장료 조성물.
3. The method of claim 2,
Wherein the fermented ginseng seed is fermented by inoculation of ginseng seeds with Lactobacillus gasseri KCTC 3162 ( Lactobacillus gasseri KCTC 3162).
제 2 항에 있어서,
발효인삼종자가 페디오코쿠스 펜토사세우스 LY 011(Pediococcus pentosaceus LY 011)을 인삼종자에 접종하여 발효된 것임을 특징으로 하는 화장료 조성물.
3. The method of claim 2,
Wherein the fermented ginseng seed is fermented by inoculation of ginseng seeds with Pediococcus pentosaceus LY 011.
제 2 항에 있어서,
발효인삼종자가 바실러스 서브틸리스 KFRI 1124(Bacillus subtilis KFRI 1124) 또는 바실러스 서브틸리스 KFRI 1127(Bacillus subtilis KFRI 1127)을 인삼종자에 접종하여 발효된 것임을 특징으로 하는 화장료 조성물.
3. The method of claim 2,
Wherein the fermented ginseng seed is fermented by inoculation of ginseng seeds with Bacillus subtilis KFRI 1124 or Bacillus subtilis KFRI 1127.
제 1 항에 있어서,
발효인삼종자 오일이 120 bar 내지 180 bar 및 20℃ 내지 80℃에서의 초임계 유체 추출로 수득된 것임을 특징으로 하는 화장료 조성물.
The method according to claim 1,
Wherein the fermented ginseng seed oil is obtained by supercritical fluid extraction at 120 to 180 bar and at 20 to 80 占 폚.
발효인삼종자 오일을 유효성분으로 함유하는 피부 미백용 식품 조성물.A skin whitening food composition containing fermented ginseng seed oil as an active ingredient. 제 7 항에 있어서,
발효인삼종자가 락토바실러스 가세리(Lactobacillus gasseri), 페디오코쿠스 펜토사세우스(Pediococcus pentosaceus) 및 바실러스 서브틸리스(Bacillus subtilis)로 이루어지는 군으로부터 선택되는 하나 이상의 미생물을 인삼종자에 접종하여 발효된 것임을 특징으로 하는 식품 조성물.
8. The method of claim 7,
The fermented ginseng seeds were identified as Lactobacillus gasseri , Pediococcus, pentosaceus , and Bacillus subtilis . The food composition according to claim 1, wherein the microorganism is fermented by inoculating the ginseng seed.
제 8 항에 있어서,
발효인삼종자가 락토바실러스 가세리 KCTC 3162(Lactobacillus gasseri KCTC 3162)를 인삼종자에 접종하여 발효된 것임을 특징으로 하는 식품 조성물.
9. The method of claim 8,
The fermented ginseng seeds were treated with Lactobacillus gasseri KCTC 3162 ( Lactobacillus gasseri KCTC 3162) is fermented by inoculating the ginseng seeds.
제 8 항에 있어서,
발효인삼종자가 페디오코쿠스 펜토사세우스 LY 011(Pediococcus pentosaceus LY 011)을 인삼종자에 접종하여 발효된 것임을 특징으로 하는 식품 조성물.
9. The method of claim 8,
Fermented ginseng seeds were identified as Pediococcus pentosaceus LY 011 ( Pediococcus pentosaceus Lt; RTI ID = 0.0 > LY < / RTI > 011).
제 8 항에 있어서,
발효인삼종자가 바실러스 서브틸리스 KFRI 1124(Bacillus subtilis KFRI 1124) 또는 바실러스 서브틸리스 KFRI 1127(Bacillus subtilis KFRI 1127)을 인삼종자에 접종하여 발효된 것임을 특징으로 하는 화장료 조성물.
9. The method of claim 8,
Fermented ginseng seeds Bacillus subtilis KFRI 1124 (Bacillus subtilis KFRI 1124) or Bacillus subtilis KFRI 1127 ( Bacillus < RTI ID = 0.0 > subtilis KFRI 1127) is fermented by inoculation on ginseng seeds.
제 7 항에 있어서,
발효인삼종자 오일이 120 bar 내지 180 bar 및 20℃ 내지 80℃에서의 초임계 유체 추출로 수득된 것임을 특징으로 하는 식품 조성물.
8. The method of claim 7,
Wherein the fermented ginseng seed oil is obtained by supercritical fluid extraction at 120 to 180 bar and at 20 to < RTI ID = 0.0 > 80 C. < / RTI >
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