KR20130001842A - Cosmetic composition and makeup method for the skin whitening comprising the styrax obassia extracts - Google Patents
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Abstract
Description
본 발명은 쪽동백 추출물을 포함하는 화장료 조성물에 관한 것으로서, 보다 상세하게는 쪽동백을 용매 추출법, 초음파 추출법, 초임계 추출법, 발효법 또는 포제법 등의 다양한 방법으로 처리하여 얻은 쪽동백 추출물을 유효성분으로 함유하는 쪽동백 추출물을 포함하는 피부 미백용 화장료 조성물 및 화장 방법에 관한 것이다.The present invention relates to a cosmetic composition comprising a camellia extract, and more particularly, a camellia extract obtained by treating the camellia in various ways such as solvent extraction, ultrasonic extraction, supercritical extraction, fermentation or foaming. It relates to a cosmetic composition for skin whitening and a cosmetic method comprising the extract camellia containing.
인간의 피부는 우리 몸을 보호해주는 기능을 수행하는 동시에 피부 미용과도 깊은 연관을 가지고 있다. 특히 피부색은 피부 색소에 의해 많은 영향을 받으며 피부 미용에서 가장 중요한 위치를 차지하고 있어 화장품업계의 많은 연구 대상이 되고 있다. 피부색에 영향을 주는 색소로는 멜라닌(Melanin), 카로틴(Carotene), 헤모글로빈(Hemoglobin) 등이 있는데 이중 가장 중요한 것은 멜라닌이라고 볼 수 있다. Human skin not only functions to protect our bodies, but also has a deep connection with skin beauty. In particular, the color of the skin is affected by the skin pigments and occupies the most important position in skin care, which has been the subject of much research in the cosmetic industry. The pigments that affect skin color include melanin, carotene, and hemoglobin, the most important of which is melanin.
또한 인체의 타로시나아제 효소는 인체의 피부색을 나타내는 멜라닌의 생성을 담당한다.In addition, the human tarosinase enzyme is responsible for the production of melanin, which represents the human skin color.
멜라닌은 자외선을 흡수 또는 산란시켜 자외선으로부터 피부가 손상되는 것을 방지하는데 큰 역할을 하며, 특별한 최대흡수파장이 없이 전 영역의 빛을 흡수한다. 또한 활성 산소종을 제거하는 기능이 탁월하나, 때로는 멜라닌 자체가 활성산소를 발생시키기도 하며, 멜라닌 구조내의 카테콜이나 퀴논에 의하여 다른 물질을 환원시키거나 산화시키고, 멜라닌 자체가 자유라디칼의 성질을 나타내기도 한다. Melanin plays an important role in preventing or damaging the skin from ultraviolet rays by absorbing or scattering ultraviolet rays, and absorbs light in all areas without a specific maximum absorption wavelength. In addition, the function of removing active oxygen species is excellent, but sometimes melanin itself generates free radicals, and other substances are reduced or oxidized by catechol or quinone in melanin structure, and melanin itself shows the properties of free radicals. Pray.
이렇게 중요한 역할을 수행하는 멜라닌은 외부 자극에 의해 피부내에 과생성되면 피부 색소 침착을 야기하여 피부 미용에 나쁜 영향을 줄 수 있다. Melanin, which plays such an important role, may cause skin pigmentation if it is overproduced in the skin by external stimuli, which may adversely affect skin beauty.
한편 쪽동백 추출물을 포함하는 피부미백화장료 조성물은 문헌상으로 발견되지 않았으며, 다만 쪽동백과 같은 과에 속하는 때죽나무(Styrax japonica)를 사용한 화장료 조성물이 국내특허등록 제 10-526888호로 알려졌으나, 이는 리그닌 글루코사이트를 주성분으로 함유하여 단순히 피부 노화방지를 위한 것으로, 미백효과를 제공할 수 없는 것이었다.On the other hand, the skin whitening cosmetic composition comprising the extract camellia has not been found in the literature, except that the cosmetic composition using Styrax japonica belonging to the same family as the camellia was known as a Korean Patent Registration No. 10-526888 It contains lignin glucosite as a main ingredient, simply to prevent skin aging, and could not provide a whitening effect.
본 발명자들은 이러한 현상에 주목하여 천연물을 이용하여 멜라닌 과생성을 억제하는 소재 개발을 해 왔으며, 대표적으로 쪽동백(Styrax obassia)추출물을 이용한 화장료 조성물이 티로시나아제 활성 저해 효과가 있고 멜라닌 생합성을 억제하여 피부 과색소 침착을 예방할 수 있도록 하며, 피부 미백을 효과적으로 개선할 수 있음을 확인함으로써 본 발명을 완성하였다. The present inventors have focused on such a phenomenon and have developed a material that suppresses melanin overproduction using natural products, and the cosmetic composition using Styrax obassia extract typically has tyrosinase activity inhibitory effect and inhibits melanin biosynthesis. The present invention was completed by confirming that skin hyperpigmentation can be prevented and skin whitening can be effectively improved.
본 발명에서의 쪽동백 추출은 용매 추출법, 초음파 추출법, 초임계 추출법, 발효법 또는 포제법 등에서 선택한 방법으로 추출가능하다.The extract of camellia in the present invention can be extracted by a method selected from a solvent extraction method, an ultrasonic extraction method, a supercritical extraction method, a fermentation method or a foaming method.
즉, 본 발명의 목적은 쪽동백 추출물을 포함하는 피부 미백용 화장료 조성물을 제공하는 것이다.That is, an object of the present invention is to provide a cosmetic composition for skin whitening comprising a camellia extract.
본 발명의 또 다른 목적은, 쪽동백 추출물을 포함하는 미백용 화장료 조성물을 피부에 도포하여 티로시나아제 활성을 저해 시키며, 멜라닌 생합성을 억제하여 피부 미백효과를 나타내는 것을 특징으로 하는 화장 방법을 제공하는 것이다.Still another object of the present invention is to provide a cosmetic method comprising applying a cosmetic composition for whitening camellia extract to the skin to inhibit tyrosinase activity and inhibit melanin biosynthesis to exhibit skin whitening effect. will be.
본 발명에서는 쪽동백을 이용하여 미백 화장료 조성물을 제공하기 위하여 다양한 추출법을 이용하여 쪽동백 추출물을 제조하고 이를 제품에 적용하고자 하였다. 이를 위하여 본 발명자들은 쪽동백을 일반 용매를 활용하여 추출하거나, 발효, 초음파, 초임계, 포제법등을 이용하여 수득한 쪽동백 추출물을 유효성분으로 포함하여 제조하였으며, 상기와 같은 본 발명의 목적은 쪽동백 추출물을 유효성분으로 함유하는 것을 특징으로 하는 쪽동백 추출물을 포함하는 피부 미백용 화장료 조성물에 의해 달성된다.In the present invention, in order to provide a whitening cosmetic composition using a camellia camellia extract was prepared by using a variety of extraction methods and applied to the product. To this end, the present inventors prepared the extract of the camellia by using a common solvent, including the extract of the camellia obtained by using fermentation, ultrasonic, supercritical, foaming method as an active ingredient, the object of the present invention as described above Silver is achieved by a cosmetic composition for skin whitening comprising a camellia extract, characterized in that it contains the extract as an active ingredient.
바람직하게는, 상기 쪽동백 추출물은 상기 화장료 조성물의 총 중량에 대하여 0.00001 내지 25.0중량%를 함유하는 것을 특징으로 한다.Preferably, the camellia extract is characterized in that it contains 0.00001 to 25.0% by weight based on the total weight of the cosmetic composition.
또한, 바람직하게는, 상기 쪽동백 추출물은 쪽동백을 물, 탄소수 1-4개의 무수 또는 함수 저급 알코올, 프로필렌글리콜, 부틸렌글리콜, 글리세린, 아세톤, 에틸 아세테이트, 부틸 아세테이트, 클로로포름, 디에틸에테르, 디클로로메탄, 헥산 및 이들의 혼합물로 구성된 군으로부터 선택되는 추출용매를 이용한 용매 추출법; 초음파 추출법; 초임계 추출법; 발효법; 또는 포제법을 이용하여 추출하는 것을 특징으로 한다.Also, preferably, the extract of Camellia camellia is water, anhydrous or hydrous lower alcohol having 1 to 4 carbon atoms, propylene glycol, butylene glycol, glycerin, acetone, ethyl acetate, butyl acetate, chloroform, diethyl ether, Solvent extraction using an extraction solvent selected from the group consisting of dichloromethane, hexane and mixtures thereof; Ultrasonic extraction method; Supercritical extraction method; zymotechnics; Or it extracts using the foaming method.
또한, 바람직하게는, 상기 발효법은 쪽동백을 효모로서 사카로마이세스 세레비시애(Saccharomyces cerevisiae)를 이용하여 배양하여 수득한 추출물인 것을 특징으로 한다.In addition, the fermentation method is characterized in that the extract obtained by culturing Saccharomyces cerevisiae as a yeast camellia as a yeast.
또한, 바람직하게는, 상기 화장료 조성물은 용액, 현탁액, 유탁액, 페이스트, 겔, 크림, 로션, 파우더, 비누, 계면활성제-함유 클렌징, 오일, 분말 파운데이션, 유탁액 파운데이션, 왁스 파운데이션 및 스프레이로 구성된 군으로부터 선택되는 제형을 갖는 것을 특징으로 한다.Also preferably, the cosmetic composition consists of a solution, suspension, emulsion, paste, gel, cream, lotion, powder, soap, surfactant-containing cleansing, oil, powder foundation, emulsion foundation, wax foundation and spray It is characterized by having a formulation selected from the group.
본 발명의 또 다른 목적은 상기한 화장료 조성물을 이용하여 피부에 도포함으로써, 티로시나아제 활성저해, 멜라닌 생합성 억제 및 미백효과를 갖는 것을 특징으로 하는 화장 방법에 의해 달성된다.Another object of the present invention is achieved by a cosmetic method characterized by having a tyrosinase activity inhibition, melanin biosynthesis and whitening effect by applying to the skin using the cosmetic composition described above.
본 발명은 쪽동백 추출물을 화장료에 첨가함으로써 멜라닌 과생성으로 인해 나타나는 피부 색소 침착을 억제해주어, 미백 효과가 매우 좋은 화장료 조성물을 얻을 수 있다.The present invention suppresses the skin pigmentation caused by melanin overproduction by adding the extract camellia extract to the cosmetic, it is possible to obtain a cosmetic composition with a very good whitening effect.
보다 상세하게는, 본 발명에 따른 쪽동백 추출물을 포함하는 피부 미백용 화장료 조성물은 티로시나아제 활성 저해 효과(실험예 1), 멜라닌 생합성 억제 효과(실험예 2) 및 미백 효과(실험예 3)가 우수하다.More specifically, the cosmetic composition for skin whitening containing the camellia extract according to the present invention has a tyrosinase activity inhibitory effect (Experimental Example 1), melanin biosynthesis inhibitory effect (Experimental Example 2) and a whitening effect (Experimental Example 3) Is excellent.
따라서, 본 발명의 쪽동백 추출물을 포함하는 화장료의 경우, 우수한 미백 효과를 가지고 있고, 이를 화장료 소재로 개발할 경우 탁월한 색소침착 개선 효과(피부 미백 효과)를 기대할 수 있다,Therefore, in the case of the cosmetic containing the extract camellia of the present invention, it has an excellent whitening effect, when developing it as a cosmetic material can be expected excellent pigmentation improvement effect (skin whitening effect),
상기 목적을 달성하기 위해, 본 발명은 쪽동백 추출물을 포함하는 피부 미백용 화장료 조성물을 제공한다.In order to achieve the above object, the present invention provides a cosmetic composition for skin whitening comprising a camellia extract.
본 발명의 조성물에서 유효성분으로 이용되는 쪽동백(Styrax obassia)은 때죽나무과 식물로서 낙엽활엽소교목 형태를 띄고 있다. 특징을 보면 다음과 같다.The camellia ( Styrax obassia ) used as an active ingredient in the composition of the present invention has a deciduous broad-leafed arborescent form as a deadwood plant. The features are as follows.
높이 10m 정도로 자라며 수피는 짙은 흑회색으로 매끄러운 편이며 노목은 세로로 갈라지기도 한다. 겨울눈은 잎자루 아래쪽에서 나온다. 잎은 어긋나고 끝이 좁은 타원형 또는 원형으로 위쪽에 흔히 3개로 갈라지는 잔톱니가 있다. 녹색의 표면은 맥 위에 털이 있고 뒷면은 흰빛이 돈다. 잎자루는 5~20mm 이다. 양성화로 5~6월에 새 가지 끝에서 총상화서로 20개 내외의 흰색 꽃이 아래를 향해 달린다. 화관은 끝이 4개로 갈라지며 꽃받침은 5~9개로 갈라진다. 수술은 여러 개이고 암술은 1개이며, 수술대와 암술대에 털이 없다. 열매는 핵과로 난형 또는 타원형이며 털이 있다. 9월에 익으며, 껍질이 불규칙하게 갈라지면서 갈색 씨가 드러난다. 표고 100~1,800m 의 전국 각지 산지 숲 속에서 자라는 낙엽활엽소교목이다. 원산지는 한국으로 중국, 일본, 만주 등지에 분포한다. It grows about 10m high, and the bark is dark blackish gray and smooth. Winter snow comes from the bottom of petioles. Leaves are alternate, narrow oval or round with jagged teeth on top, often divided into three. The green surface has hairs on the veins and the back is white. Petiole 5 ~ 20mm. In May-June, about 20 white flowers run downward from the end of new branches. Corollas are divided into four ends, and calyxes are divided into 5-9 parts. There are several stamens and one pistil, and there is no hair on the operating table and the pistil. Fruits are nucleus, ovate or oval, with hairs. Ripens in September, with uneven crusts and brown seeds. It is a deciduous broad-leaved arborescent growing in the forests of mountainous regions of 100 ~ 1,800m nationwide. It is native to Korea and is distributed in China, Japan, and Manchuria.
한편, 본 명세서에서 용어 “쪽동백”은 쪽동백의 다양한 부위“가지, 뿌리, 잎, 꽃”를 의미하며 그 중에서고 꽃 부분을 주재료로 하여 본 발명을 완성하였다. On the other hand, the term "p camellia" in the present specification means a variety of parts "branch, root, leaves, flowers" of the camellia, and completed the present invention with the flower part as the main material.
본 발명의 쪽동백 추출물은 당업계에 공지된 통상의 방법에 따라, 즉, 통상적인 온도와 압력의 조건하에서, 통상적인 용매를 사용하여(예컨대, 물, 탄소수 1-4개의 무수 또는 함수 저급 알코올(예를 들면, 메탄올, 에탄올, 프로판올 및 부탄올), 아세톤, 에틸 아세테이트, 클로로포름, 부틸 아세테이트, 1,3-부틸렌글리콜 및 이들의 혼합물로 구성된 군으로부터 선택되는 1종 이상의 추출 용매를 사용하여 얻을 수 있으며, 바람직하게는 에탄올, 70%(v/v) 에탄올 수용액 또는 물을 사용하여 얻어진 것이고, 가장 바람직하게는 70% 에탄올 수용액을 이용하여 얻어진 것이다. The camellia extract of the present invention is prepared according to conventional methods known in the art, i.e., under conditions of conventional temperature and pressure, using conventional solvents (e.g., water, anhydrous or hydrous lower alcohols). (E.g., methanol, ethanol, propanol and butanol), acetone, ethyl acetate, chloroform, butyl acetate, 1,3-butylene glycol and mixtures thereof, obtained using one or more extraction solvents selected from the group consisting of It is preferably obtained using ethanol, 70% (v / v) aqueous ethanol or water, most preferably obtained using 70% ethanol aqueous solution.
한편, 본 발명의 쪽동백 추출물은 상기한 추출 용매뿐만 아니라, 다른 추출 용매를 이용하여도 실질적으로 동일한 효과를 나타내는 추출물이 얻어질 수 있다는 것은 당업자에게 자명한 것이다.On the other hand, it is apparent to those skilled in the art that the camellia extract of the present invention can obtain an extract having substantially the same effect using not only the aforementioned extraction solvent but also other extraction solvents.
바람직한 구현예에 의하면, 본 발명의 쪽동백 추출물의 제조 방법은 다음과 같다. 먼저 쪽동백 꽃을 정제수로 세척한 후 건조하고 입자의 크기가 300메시 이하가 되도록 작은 조각으로 파쇄한 뒤, 여기에 건조 중량의 1∼10배의 물, 탄소수 1∼4개의 무수 또는 함수 저급 알코올, 아세톤, 에틸아세테이트, 부틸아세테이트 또는 1,3 부틸렌 글리콜 등을 가한다. 그 후 냉각 콘덴서가 장치되어 유효성분이 증발되는 것을 방지한 상태에서 40∼100℃에서 3∼20시간 가열하여 추출하거나, 4∼40℃에서 1∼15일간 추출하고 회전 감압 증발기로 완전히 건조시켜 제조한다. 이때 1,3 부틸렌 글리콜의 경우에는 회전 감압 증발기를 이용하여 건조시키기 어려우므로 직접 위의 조건에서 추출한 후 건조 감량이 1%(w/v)되도록 30℃~60℃ 열풍건조기에서 건조하여 수분함량을 조정하여 본 발명의 화장료에 이용한다.
According to a preferred embodiment, the method of preparing the camellia extract of the present invention is as follows. First, washed the camellia flowers with purified water, dried and crushed into small pieces so that the particle size is less than 300 mesh, and then 1 to 10 times the dry weight of water, 1 to 4 carbon atoms anhydrous or lower alcohol , Acetone, ethyl acetate, butyl acetate or 1,3 butylene glycol are added. After the cooling condenser is installed to prevent the active ingredient is evaporated in the state of extraction for 3 to 20 hours by heating at 40 to 100 ℃, or extracted for 1 to 15 days at 4 to 40 ℃ and completely dried by a rotary vacuum evaporator to prepare . In this case, 1,3 butylene glycol is difficult to dry by using a rotary vacuum evaporator, so the water content is dried in a hot air dryer at 30 ℃ ~ 60 ℃ to extract 1% (w / v) directly after extraction under the above conditions Is used for the cosmetic of the present invention.
한편, 본 발명의 쪽동백 추출물은 상술한 추출법에 의한 추출물뿐만 아니라, 이산화탄소에 의한 감압 및 고온에 의한 초임계 추출법 또는 초음파 추출법에 의한 추출물도 포함한다. 상기 이산화탄소에 의한 감압, 고온에 의한 초임계추출법에 의한 추출법은 초임계 유체 추출법(supercritical fluid extraction)을 의미하는 것으로, 일반적으로 초임계 유체는 기체가 고온 고압 조건에서 임계점에 도달하였을 때 갖는 액체 및 기체의 성질을 지니고 있으며, 화학적으로 비극성 용매와 유사한 극성을 지니고 있으며 이러한 특성으로 인해 초임계 유체는 지용성 물질의 추출에 사용되고 있다(J. Chromatogr . A. 1998;479:200-205). Meanwhile, the camellia extract of the present invention includes not only the extract by the above-described extraction method, but also an extract by supercritical extraction or ultrasonic extraction by reduced pressure and high temperature with carbon dioxide. The decompression by carbon dioxide and the supercritical extraction by high temperature mean supercritical fluid extraction. Generally, the supercritical fluid is a liquid having a gas when the gas reaches a critical point under high temperature and high pressure. It is gaseous, chemically similar in polarity to nonpolar solvents, and supercritical fluids are used for the extraction of fat-soluble substances ( J. Chromatogr . A. 1998; 479: 200-205).
이산화탄소는 초임계 유체기기의 작동으로 압력 및 온도가 임계점까지 이르는 과정을 거치면서 액체 및 기체 성질을 동시에 지닌 초임계 유체가 되고 그 결과 지용성 용질에 대한 용해도가 증가한다. 초임계 이산화탄소가 일정량의 시료를 함유한 추출 용기를 통과하게 되면 시료에 함유된 지용성 물질은 초임계 이산화탄소에 추출되어 나온다. Carbon dioxide becomes a supercritical fluid with both liquid and gaseous properties as the pressure and temperature reach a critical point through the operation of a supercritical fluid device, resulting in increased solubility in fat-soluble solutes. When supercritical carbon dioxide passes through an extraction vessel containing a certain amount of sample, the fat-soluble substance contained in the sample is extracted from the supercritical carbon dioxide.
지용성 물질을 추출한 후 추출 용기에 남아있는 시료에 다시 소량의 공용매가 함유된 초임계 이산화탄소를 흘려 통과시키면 순수한 초임계 이산화탄소만으로는 추출되지 않았던 성분들이 추출되어 나오게 할 수 있다. When the supernatant carbon dioxide containing a small amount of cosolvent is passed through the sample remaining in the extraction vessel after extracting the lipid-soluble substance, components that were not extracted by pure supercritical carbon dioxide can be extracted.
본 발명의 초임계 추출법에 사용되는 초임계 유체는 초임계 이산화탄소 또는 이산화탄소에 추가적으로 공용매를 혼합한 혼합유체를 사용함으로써 효과적으로 유효 성분을 추출할 수 있다. 이러한 공용매는 클로로포름, 에탄올, 메탄올, 물, 에틸아세테이트, 헥산 디에틸에테르로 및 이들의 혼합물로 이루어진 군에서 선택된다.The supercritical fluid used in the supercritical extraction method of the present invention can effectively extract the active ingredient by using supercritical carbon dioxide or a mixed fluid in which a co-solvent is added to carbon dioxide. Such cosolvents are selected from the group consisting of chloroform, ethanol, methanol, water, ethyl acetate, hexane diethyl ether and mixtures thereof.
추출된 시료는 대부분 이산화탄소를 함유하고 있는데 이산화탄소는 실온에서 공기 중으로 휘발되므로 상기 방법으로 얻은 추출물을 화장료 조성물로서 사용할 수 있으며, 공용매는 감압증발기로 제거할 수 있다.Most of the extracted samples contain carbon dioxide. Since carbon dioxide is volatilized into air at room temperature, the extract obtained by the above method may be used as a cosmetic composition, and the cosolvent may be removed by a reduced pressure evaporator.
초임계 추출법에 의한 쪽동백 추출물의 제조방법의 일예로서, 쪽동백 꽃을 정제수로 세척한 후 건조하고 300메시 이하의 작은 조각으로 파쇄한 뒤, 시료를 초임계 추출용기에 놓고 액체 크로마토그래피 펌프를 이용하여, 순수한 이산화탄소를 적당한 온도 및 압력에서 초임계 상태로 만들어 흘려보내면서 쪽동백 추출물을 시험관에 받는다. As an example of a method for producing a camellia extract by the supercritical extraction method, the camellia flowers are washed with purified water, dried and broken into small pieces of 300 mesh or less, and then the sample is placed in a supercritical extraction vessel and the liquid chromatography pump is By using pure carbon dioxide in supercritical state at a suitable temperature and pressure, the camellia extract is received in a test tube.
초임계 추출 시에 이산화탄소는 35 내지 100℃, 바람직하게는 50 내지 70℃, 더욱 바람직하게는 약 60℃의 온도에서, 100 내지 500 기압, 바람직하게는 200 내지 400 기압, 더욱 바람직하게는 약 300 기압의 압력 하에 초임계 상태로 만들어주는 것이 좋다.
In supercritical extraction, carbon dioxide is at a temperature of 35 to 100 ° C., preferably 50 to 70 ° C., more preferably about 60 ° C., 100 to 500 atmospheres, preferably 200 to 400 atmospheres, more preferably about 300 Supercritical is recommended under pressure.
본 발명의 쪽동백의 초음파 추출법은 쪽동백 또는 파쇄된 쪽동백을 클로로포름, 에탄올, 메탄올, 물, 에틸아세테이트, 헥산, 디에틸에테르 및 이들의 혼합물로부터 선택된 추출 용매에 넣은 후, 초음파 추출기(슈퍼노닉, 미합중국) 를 이용하여 25KHz의 강도로 30℃에서 약 1 내지 6시간 동안 추출하는 것이며, 상기 초음파 추출 시간은 추출하고자 하는 시료의 양에 따라 달라질 수 있다.
According to the ultrasonic extraction method of the camellia of the present invention, the camellia or the crushed camellia is placed in an extraction solvent selected from chloroform, ethanol, methanol, water, ethyl acetate, hexane, diethyl ether, and mixtures thereof, followed by an ultrasonic extractor (supernonic , The United States) to extract for about 1 to 6 hours at 30 ℃ with an intensity of 25KHz, The ultrasonic extraction time may vary depending on the amount of sample to be extracted.
초음파 추출법에 사용할 수 있는 추출용매는 클로로포름, 에탄올, 메탄올, 물, 에틸아세테이트, 헥산, 디에틸에테르 및 이들의 혼합물로 이루어진 군에서 선택된다.The extraction solvent that can be used in the ultrasonic extraction method is selected from the group consisting of chloroform, ethanol, methanol, water, ethyl acetate, hexane, diethyl ether and mixtures thereof.
추출된 시료는 진공 여과하여 여과액을 회수한 후 감압증발기로 제거하고, 동결 건조하는 통상의 추출물 제조방법을 통해 추출물을 얻을 수 있다.
The extracted sample is vacuum filtered to recover the filtrate, and then removed by a vacuum evaporator, the extract can be obtained through a conventional extract preparation method of freeze drying.
또한, 본 발명의 쪽동백 추출물은 통상적인 정제 과정 및/또는 발효 과정을 거친 추출물도 포함한다. 예컨대, 일정한 분자량 컷-오프 값을 갖는 한외 여과막을 이용한 분리, 다양한 크로마토그래피 (크기, 전하, 소수성 또는 친화성에 따른 분리를 위해 제작된 것)에 의한 분리 등, 추가적으로 실시된 다양한 정제 방법을 통해 얻어진 분획도 본 발명의 쪽동백 추출물에 포함된다고 해석된다.
The camellia extract of the present invention also includes an extract that has undergone conventional purification and / or fermentation. Obtained by various additional purification methods, such as, for example, separation using an ultrafiltration membrane having a constant molecular weight cut-off value, separation by various chromatography (manufactured for separation according to size, charge, hydrophobicity or affinity). The fraction is also interpreted to be included in the extract of Camellia of the present invention.
또한, 발효과정으로 효모균, 유산균, 바실러스속 균 및 이의 혼합물로 이루어지는 군 중에서 선택되는 균으로 20 내지 40 ℃의 온도 조건 하에서 pH 5 내지 7을 유지하면서, 1 내지 7일간 발효시켜 얻어지는 발효물도 본 발명의 쪽동백 추출물에 포함된다고 해석된다.In addition, the fermentation product obtained by fermentation for 1 to 7 days while maintaining a pH of 5 to 7 under temperature conditions of 20 to 40 ℃ as a bacterium selected from the group consisting of yeast, lactic acid bacteria, Bacillus bacteria and mixtures thereof as a fermentation process. It is interpreted to be included in the extract of camellia.
본 발명의 쪽동백을 발효시키는데 사용되는 효모는 진핵미생물(핵과 세포질이 핵막에 의하여 나누어져 있는 생물)에 속하며, 세포벽, 세포막, 핵, 사립체, 과립 등 세포 소기관을 갖추고 있다. 성의 구별이 없는 이들은 주로 budding(출아법)으로 번식하는데, 분리된 많은 효모들 중에는 발효능이 없는 것, budding 대신 fission(분열) 혹은 bud-fission 방법으로 증식하는 것, 자낭포자(ascospore)가 아닌 사출포자(ballistospore)를 형성하거나 포자(spore)형성이 관찰되지 않는 것 등 다양한 그룹의 효모도 존재한다. 크기는 보통5× 5-12 ~10× 5-12㎛로 세균의 5-10배 크기이며, 적정 pH는 4.5-5.5이나 1-10에서도 생존한다. pH 1에서 12시간 생존하는 효모는 박테리아보다 산에 강하므로 배지의 pH를 3.5~3.8 정도로 맞추면 박테리아의 오염을 어느 정도 억제할 수 있다. The yeast used for fermenting the camellia of the present invention belongs to eukaryotic microorganisms (organisms in which the nucleus and cytoplasm are divided by the nuclear membrane), and has cell organelles such as cell walls, cell membranes, nuclei, particulates, and granules. Those without sex distinction breed mainly by budding, among which many of the isolated yeasts have no fermentation capacity, multiply by fission or bud-fission instead of budding, and not ascospore. There are also various groups of yeasts, such as forming spores or not forming spores. The size is usually 5 × 5 -12 ~ 10 × 5 -12 ㎛, 5-10 times the size of bacteria, and the optimal pH survives at 4.5-5.5 but 1-10. Yeasts that survive 12 hours at pH 1 are more acid resistant than bacteria, so adjusting the pH of the medium to about 3.5 to 3.8 can reduce bacterial contamination.
효모는 균종에 따라서 조금씩 차이가 있으나, 대부분 20~25℃에서 잘 자란다. 보통은 50℃이상에서는 사멸한다고 하지만 그 온도 이상에서 합성이 되지 않는 성장요소를 배지에 직접 첨가해 줌으로써 어느 정도는 극복이 가능하다. 사카로마이세스 세레비시애(Saccharomyces cerevisiae)의 경우 40℃이상에서 사멸하지만 배지에 올레산(oleic acid)와 에르고스테롤(ergosterol)을 첨가해 줌으로써 이를 방지할 수 있다. 효모 균체 자체는 단세포 식물로서 단백질과 미량광물질을 다량 함유하고 있다. 본 발명의 쪽동백을 발효시키는데 사용하기에 바람직한 효모는 사카로마이세스 세레비시애이다.Yeast is slightly different depending on the species, but most grow well at 20 ~ 25 ℃. Usually, it is killed above 50 ℃, but it can be overcome to some extent by adding the growth factor which is not synthesized above the temperature directly to the medium. Saccharomyces cerevisiae ( Saccharomyces cerevisiae) is killed at 40 ℃ or more, but can be prevented by adding oleic acid (oleic acid) and ergosterol to the medium. Yeast cells themselves are single-celled plants that contain large amounts of protein and trace minerals. A preferred yeast for use in fermenting the camellia of the present invention is Saccharomyces cerevisiae.
또한 본 발명에서 쪽동백을 발효시키는데 사용될 수 있는 유산균은, 포도당 또는 유당과 같은 탄수화물을 분해하여 유산(젖산)이나 초산과 같은 유기산을 생성하는 인체에 매우 유익한 미생물의 일종이다. 일반적으로, 유산균이 당으로부터 유산을 만드는 것을 발효라 하며, 이러한 발효과정을 거쳐서 발효식품이 만들어 진다. 본 발명에서 사용될 수 있는 유산균은 바람직하게는 락토바실러스, 스트렙토코커스, 비피도 박테리움, 류코노스톡, 페디오 코커스, 락토 코커스 및 이들의 혼합물을 포함하며, 가장 바람직하게는 락토바실러스(Lactobacillus)이다. 락토바실러스 중에서도 본 발명의 쪽동백을 발효시키는데 사용하기에 가장 바람직한 유산균은 락토바실러스 플란타룸(Lactobacillus plantarum)이다.In addition, lactic acid bacteria that can be used to ferment the camellia in the present invention is a kind of microorganisms very beneficial to the human body to break down carbohydrates such as glucose or lactose to produce organic acids such as lactic acid (lactic acid) or acetic acid. Generally, lactic acid bacteria make lactic acid from sugar is called fermentation, and fermented food is made through this fermentation process. Lactic acid bacteria that can be used in the present invention preferably include Lactobacillus, Streptococcus, Bifido bacterium, Leukonostock, Pediococcus, Lactococcus and mixtures thereof, most preferably Lactobacillus . Among the Lactobacillus, the most preferred lactic acid bacteria for use in fermenting the camellia of the present invention is Lactobacillus plantarum .
또한 본 발명에서 쪽동백을 발효시키는데 사용된 발효균으로 바실러스(Bacillus)균을 사용할 수 있으며, 바실러스는 포자 형성균으로, 토양이나 물속에 서식하며 대부분 유기물 분해와 관련되어 있다. 본 발명에서 사용될 수 있는 바실러스균은 바람직하게는 바실러스 서브틸리스, 바실러스 푸밀리스, 바실러스 리케니포미스, 바실러스 메가테리움, 바실러스 폴리퍼멘티커스, 바실러스 메센테리커스 및 이들의 혼합물을 포함하며, 가장 바람직하게는 바실러스 서브틸리스(Bacillus subtilis)로서 이 균은 고초균으로도 알려져 있는데, 포도당과 같은 다양한 당류, 전분 등을 혐기적으로 대사하여, 메주나 청국장과 같은 발효 식품 제조에 이용되기도 하는 유기물 분해 미생물이다. In addition, Bacillus bacteria can be used as the fermentation bacteria used to ferment the camellia in the present invention, Bacillus is spore-forming bacteria, inhabits in soil or water and is mostly associated with organic matter decomposition. Bacillus bacteria that can be used in the present invention preferably include Bacillus subtilis, Bacillus pumilis, Bacillus rikenimomis, Bacillus megaterium, Bacillus polypermanticus, Bacillus mesentericus and mixtures thereof Most preferably, Bacillus subtilis is known as Bacillus subtilis , which anaerobicly metabolizes various sugars such as glucose, starch, etc., and is used for fermented foods such as Meju and Cheonggukjang. It is a microorganism that breaks down organic matter.
또한, 본 발명의 쪽동백 추출물은 포제법을 이용하여 얻어낸 추출물도 포함한다. 포제란 한방이론에 근거하여 약재를 가공 처리함으로써 약재 본래의 성질을 변화시키는 제약 기술이다. 주로 찌거나, 삶거나, 불에 볶거나, 불에 굽거나 달구는 공정 또는 이들이 혼합된 공정의 방법을 말한다. 처리 조건은 삶는 경우 60-100℃, 30분 내지 6시간이고, 찌는 경우 120∼180℃, 10분∼2시간이고, 굽는 경우 80-100℃, 10분 내지 2시간에서 용이하게 선정한다. 본 발명에서는 쪽동백을 쪄서 건조시킨 후 사용하였으며 이를 이용하여 추출물을 제조하였다. Moreover, the camellia extract of this invention also contains the extract obtained using the preparation method. Foaming agent is a pharmaceutical technology that changes the original properties of the medicine by processing the medicine based on the herbal theory. Mainly refers to the process of steaming, boiling, roasting, roasting or roasting or a process in which these are mixed. The treatment conditions are 60-100 ° C. for 30 minutes to 6 hours when boiled, 120 to 180 ° C. for 10 minutes to 2 hours for steaming, and 80-100 ° C. for 10 minutes to 2 hours for baking. In the present invention, the dried camellia was steamed and used to prepare an extract using the same.
본 발명에서는 쪽동백을 쪄서 건조시킨 후 사용하였으며 이를 이용하여 추출물을 제조하였다. 쪽동백을 쪄서 건조시키는 포제법을 이용하여 추출한 후 용매 추출법 뿐만 아니라, 이산화탄소에 의한 감압 및 고온에 의한 초임계 추출법 또는 초음파 추출법에 의한 추출 방법으로 추출할 수 있으며, 본 발명의 실시예에는 70% 에탄올을 이용하여 추출하여 실험에 사용하였다.
In the present invention, the dried camellia was steamed and used to prepare an extract using the same. After extracting the dried camellia by steaming and drying it, it can be extracted not only by the solvent extraction method, but also by the extraction method by the supercritical extraction method or the ultrasonic extraction method under reduced pressure with carbon dioxide and high temperature, 70% in the embodiment of the present invention. Extraction using ethanol was used for the experiment.
본 발명의 쪽동백 추출물은 감압 증류 및 동결 건조 또는 분무 건조 등과 같은 추가적인 과정에 의해 분말 상태로 제조될 수 있다.
The camellia extract of the present invention may be prepared in powder form by an additional process such as distillation under reduced pressure and freeze drying or spray drying.
본 발명의 보다 바람직한 구현예에 따르면, 본 발명의 쪽동백 추출물은 티로시나아제 활성 저해 효과와 멜라닌 생합성 억제 효과가 우수하다. According to a more preferred embodiment of the present invention, the extract camellia of the present invention is excellent in tyrosinase activity inhibitory effect and melanin biosynthesis inhibitory effect.
또한, 본 발명의 바람직한 구현예에 따르면, 본 발명의 쪽동백 추출물의 함량은 화장료 조성물의 총 중량에 대하여 0.00001∼25.0중량%, 바람직하게는 0.0001∼20.0중량%이다. 이때 쪽동백 추출물의 총 중량이 0.00001중량% 미만일 때에는 그 효과가 나타나기 어렵고, 25.0중량%를 초과할 때에는 피부에 자극을 유발할 가능성이 높으며 제형의 안정화에도 큰 영향을 미칠 수 있다. In addition, according to a preferred embodiment of the present invention, the content of the camellia extract of the present invention is 0.00001 to 25.0% by weight, preferably 0.0001 to 20.0% by weight relative to the total weight of the cosmetic composition. At this time, when the total weight of the camellia extract is less than 0.00001% by weight, the effect is less likely to appear, when it exceeds 25.0% by weight is likely to cause irritation to the skin and may have a significant effect on the stabilization of the formulation.
본 발명의 화장품 조성물에 포함되는 성분은 유효 성분으로서의 쪽동백 추출물 이외에 화장품 조성물에 통상적으로 이용되는 성분들을 포함하며, 예컨대 항산화제, 안정화제, 용해화제, 비타민, 안료 및 향료와 같은 통상적인 보조제, 그리고 담체를 포함한다.
The components included in the cosmetic composition of the present invention include components commonly used in cosmetic compositions in addition to the extract of camellia as an active ingredient, and include, for example, conventional auxiliaries such as antioxidants, stabilizers, solubilizers, vitamins, pigments and flavorings, And carriers.
본 발명의 화장료 조성물은 당 업계에서 통상적으로 제조되는 어떠한 제형으로도 제조될 수 있으며, 예를 들어, 용액, 현탁액, 유탁액, 페이스트, 겔, 크림, 로션, 파우더, 비누, 계면활성제-함유 클린싱, 오일, 분말 파운데이션, 유탁액 파운데이션, 왁스 파운데이션 및 스프레이로 구성된 군으로부터 선택되는 제형을 가지며, 이에 한정되는 것은 아니다. 보다 상세하게는, 유연 화장수(스킨), 영양 화장수(밀크로션), 영양 크림, 마사지 크림, 에센스, 아이 크림, 클렌징 크림, 클렌징 폼, 클렌징 워터, 팩, 스프레이 또는 파우더의 제형으로 제조될 수 있다.Cosmetic compositions of the present invention may be prepared in any formulation conventionally prepared in the art, for example, solutions, suspensions, emulsions, pastes, gels, creams, lotions, powders, soaps, surfactant-containing cleansing , Oils, powder foundations, emulsion foundations, wax foundations, and sprays. More specifically, it may be prepared in the form of a flexible lotion (skin), nutrition lotion (milk lotion), nutrition cream, massage cream, essence, eye cream, cleansing cream, cleansing foam, cleansing water, pack, spray or powder. .
본 발명의 제형이 페이스트, 크림 또는 겔인 경우에는 담체 성분으로서 동물성유, 식물성유, 왁스, 파라핀, 전분, 트라칸트, 셀룰로오스 유도체, 폴리에틸렌 글리콜, 실리콘, 벤토나이트, 실리카, 탈크 또는 산화아연 등이 이용될 수 있다.When the formulation of the present invention is a paste, cream or gel, an animal oil, vegetable oil, wax, paraffin, starch, tracant, cellulose derivative, polyethylene glycol, silicone, bentonite, silica, talc or zinc oxide may be used as the carrier component .
본 발명의 제형이 파우더 또는 스프레이인 경우에는 담체 성분으로서 락토스, 탈크, 실리카, 알루미늄 히드록시드, 칼슘 실리케이트 또는 폴리아미드 파우더가 이용될 수 있고, 특히 스프레이인 경우에는 추가적으로 클로로플루오로히드로카본, 프로판/부탄 또는 디메틸 에테르와 같은 추진체를 포함할 수 있다.In the case where the formulation of the present invention is a powder or a spray, lactose, talc, silica, aluminum hydroxide, calcium silicate or polyamide powder may be used as a carrier component. Especially, in the case of a spray, a mixture of chlorofluorohydrocarbons, propane / Propane or dimethyl ether.
본 발명의 제형이 용액 또는 유탁액인 경우에는 담체 성분으로서 용매, 용해화제 또는 유탁화제가 이용되고, 예컨대 물, 에탄올, 이소프로판올, 에틸 카보네이트, 에틸 아세테이트, 벤질 알코올, 벤질 벤조에이트, 프로필렌 글리콜, 1,3-부틸글리콜 오일, 글리세롤 지방족 에스테르, 폴리에틸렌 글리콜 또는 소르비탄의 지방산 에스테르가 있다.When the formulation of the present invention is a solution or an emulsion, a solvent, a dissolving agent or an emulsifying agent is used as a carrier component, and examples thereof include water, ethanol, isopropanol, ethyl carbonate, ethyl acetate, benzyl alcohol, benzyl benzoate, , 3-butyl glycol oil, glycerol aliphatic ester, polyethylene glycol or sorbitan fatty acid esters.
본 발명의 제형이 현탁액인 경우에는 담체 성분으로서 물, 에탄올 또는 프로필렌 글리콜과 같은 액상의 희석제, 에톡실화 이소스테아릴 알코올, 폴리옥시에틸렌 소르비톨 에스테르 및 폴리옥시에틸렌 소르비탄 에스테르와 같은 현탁제, 미소결정성 셀룰로오스, 알루미늄 메타히드록시드, 벤토나이트, 아가 또는 트라칸트 등이 이용될 수 있다.In the case where the formulation of the present invention is a suspension, a carrier such as water, a liquid diluent such as ethanol or propylene glycol, a suspending agent such as ethoxylated isostearyl alcohol, polyoxyethylene sorbitol ester and polyoxyethylene sorbitan ester, Cellulose, aluminum metahydroxide, bentonite, agar or tracant, etc. may be used.
본 발명의 제형이 계면-활성제 함유 클린징인 경우에는 담체 성분으로서 지방족 알코올 설페이트, 지방족 알코올 에테르 설페이트, 설포숙신산 모노에스테르, 이세티오네이트, 이미다졸리늄 유도체, 메틸타우레이트, 사르코시네이트, 지방산 아미드 에테르 설페이트, 알킬아미도베타인, 지방족 알코올, 지방산 글리세리드, 지방산 디에탄올아미드, 식물성 유, 라놀린 유도체 또는 에톡실화 글리세롤 지방산 에스테르 등이 이용될 수 있다.When the formulation of the present invention is an interfacial active agent-containing cleansing, the carrier component may include aliphatic alcohol sulfate, aliphatic alcohol ether sulfate, sulfosuccinic acid monoester, isethionate, imidazolinium derivative, methyltaurate, sarcosinate, fatty acid amide Ether sulfates, alkylamidobetaines, aliphatic alcohols, fatty acid glycerides, fatty acid diethanolamides, vegetable oils, lanolin derivatives, or ethoxylated glycerol fatty acid esters.
또한, 본 발명은 쪽동백 추출물을 포함하는 피부 미백용 화장료 조성물을 이용하여 멜라닌 생합성을 억제하고, 티로시나아제 활성을 저해하여 피부 미백효과를 갖는 것을 특징으로 하는 화장방법을 제공한다.In addition, the present invention provides a cosmetic method comprising the skin whitening effect by using a cosmetic composition for skin whitening containing the extract camellia inhibits melanin biosynthesis, inhibits tyrosinase activity.
본 발명의 화장 방법은 본 발명의 화장료 조성물을 인간의 피부에 도포하는 모든 화장 방법을 일컫는다. 즉, 화장료 조성물을 피부에 도포하는 당업계에 공지된 모든 방법이 본 발명의 화장 방법에 속한다.The cosmetic process of the present invention refers to all the cosmetic processes for applying the cosmetic composition of the present invention to human skin. That is, all methods known in the art for applying the cosmetic composition to the skin belong to the cosmetic method of the present invention.
본 발명의 화장료 조성물은 단독 또는 중복 도포하여 사용하거나, 본 발명 이외의 다른 화장료 조성물과 중복 도포하여 사용할 수 있다. 또한 본 발명에 따른 피부 미백 효과가 우수한 화장료 조성물은 통상적인 사용방법에 따라 사용될 수 있으며, 사용자의 피부 상태 또는 취향에 따라 그 사용횟수를 달리할 수 있다.The cosmetic composition of the present invention may be used alone or in combination, or may be used by overlapping with other cosmetic compositions other than the present invention. In addition, the cosmetic composition excellent in the skin whitening effect according to the present invention can be used according to a conventional method of use, the number of times of use can be varied according to the user's skin condition or taste.
본 발명의 화장료 조성물이 비누, 계면활성제 함유 클렌징 또는 계면활성제 비함유 클렌징 제형일 경우, 피부에 도포한 후 닦아내거나, 떼어내고 물로 씻어낼 수도 있다. 구체적인 예로서, 상기 비누는 액상비누, 가루비누, 고형비누 및 오일비누이며, 상기 계면활성제 함유 클린징 제형은 클렌징 폼, 클렌징 워터, 클렌징 수건 및 클렌징 팩이며, 상기 계면활성제 비함유 클렌징 제형은 클렌징크림, 클렌징 로션, 클렌징 워터 및 클렌징 겔이며, 이에 한정되는 것은 아니다.When the cosmetic composition of the present invention is a soap, a surfactant-containing cleansing or a surfactant-free cleansing formulation, it may be wiped off after application to the skin, or may be washed off with water. As a specific example, the soap is liquid soap, powdered soap, solid soap and oil soap, the surfactant-containing cleansing formulation is a cleansing foam, cleansing water, cleansing towels and cleansing pack, the surfactant-free cleansing formulation is a cleansing cream , Cleansing lotion, cleansing water and cleansing gel, but are not limited thereto.
본 발명의 쪽동백 추출물을 포함하는 화장료 조성물을 인간의 피부에 도포하는 화장방법을 수행하면, 티로시나아제 활성 저해 및 멜라닌 생합성을 억제하고, 피부 색소 침착을 개선하여 피부 미백 효과를 얻을 수 있다.Performing a cosmetic method comprising applying a cosmetic composition comprising the extract of the camellia of the present invention to human skin, inhibits tyrosinase activity and melanin biosynthesis, and improves skin pigmentation to obtain a skin whitening effect.
이하, 실시예를 통하여 본 발명을 더욱 상세히 설명하고자 한다. 이들 실시예는 오로지 본 발명을 보다 구체적으로 설명하기 위한 것으로, 본 발명의 요지에 따라 본 발명의 범위가 이들 실시예에 의해 제한되지 않는다는 것은 당업계에서 통상의 지식을 가진 자에 있어서 자명할 것이다.Hereinafter, the present invention will be described in more detail with reference to Examples. It is to be understood by those skilled in the art that these embodiments are only for describing the present invention in more detail and that the scope of the present invention is not limited by these embodiments in accordance with the gist of the present invention .
쪽동백Camellia 추출물 제조 I Extract Preparation I
건조된 쪽동백 꽃 200g에 물 및 에탄올의 비율을 7:3으로 조정한 70% 에탄올 수용액 1,000 ㎖를 가하여 실온에서 4일 동안 침출하였다. 이를 여과하고 여액을 진공 농축하여 건조 추출물을 얻었으며, 추출 수율은 15.8g/200g이었다. 상기 건조 추출물을 1%(w/v) 농도가 되도록 50% 1,3-부틸렌 글리콜 용액으로 용해하고 여과한 후 본 발명의 실험에 적용하였다. To 200 g of dried camellia flowers, 1,000 ml of an aqueous 70% ethanol solution having a ratio of water and ethanol 7: 3 was added thereto, and the mixture was leached at room temperature for 4 days. It was filtered and the filtrate was concentrated in vacuo to give a dry extract, the extraction yield was 15.8g / 200g. The dry extract was dissolved in 50% 1,3-butylene glycol solution to a concentration of 1% (w / v) and filtered and then subjected to the experiment of the present invention.
하기 표 1의 추출용매를 사용한 것을 제외하고는 상기 실시예 1과 같은 방법으로 추출하여 쪽동백 추출물을 얻었다.Except for using the extraction solvent of Table 1 was extracted in the same manner as in Example 1 to obtain a camellia extract.
하기 표 1의 추출용매를 사용한 것을 제외하고는 상기 실시예 1과 같은 방법으로 추출하여 쪽동백 추출물을 얻었다.Except for using the extraction solvent of Table 1 was extracted in the same manner as in Example 1 to obtain a camellia extract.
하기 표 1의 추출용매를 사용한 것을 제외하고는 상기 실시예 1과 같은 방법으로 추출하여 쪽동백 추출물을 얻었다.Except for using the extraction solvent of Table 1 was extracted in the same manner as in Example 1 to obtain a camellia extract.
하기 표 1의 추출용매를 사용한 것을 제외하고는 상기 실시예 1과 같은 방법으로 추출하여 쪽동백 추출물을 얻었다.Except for using the extraction solvent of Table 1 was extracted in the same manner as in Example 1 to obtain a camellia extract.
하기 표 1의 추출용매를 사용한 것을 제외하고는 상기 실시예 1과 같은 방법으로 추출하여 쪽동백 추출물을 얻었다.Except for using the extraction solvent of Table 1 was extracted in the same manner as in Example 1 to obtain a camellia extract.
하기 표 1의 추출용매를 사용한 것을 제외하고는 상기 실시예 1과 같은 방법으로 추출하여 쪽동백 추출물을 얻었다.Except for using the extraction solvent of Table 1 was extracted in the same manner as in Example 1 to obtain a camellia extract.
하기 표 1의 추출용매를 사용한 것을 제외하고는 상기 실시예 1과 같은 방법으로 추출하여 쪽동백 추출물을 얻었다.Except for using the extraction solvent of Table 1 was extracted in the same manner as in Example 1 to obtain a camellia extract.
하기 표 1의 추출용매를 사용한 것을 제외하고는 상기 실시예 1과 같은 방법으로 추출하여 쪽동백 추출물을 얻었다.Except for using the extraction solvent of Table 1 was extracted in the same manner as in Example 1 to obtain a camellia extract.
하기 표 1의 추출용매를 사용한 것을 제외하고는 상기 실시예 1과 같은 방법으로 추출하여 쪽동백 추출물을 얻었다.Except for using the extraction solvent of Table 1 was extracted in the same manner as in Example 1 to obtain a camellia extract.
하기 표 1의 추출용매를 사용한 것을 제외하고는 상기 실시예 1과 같은 방법으로 추출하여 쪽동백 추출물을 얻었다.Except for using the extraction solvent of Table 1 was extracted in the same manner as in Example 1 to obtain a camellia extract.
하기 표 1의 추출용매를 사용한 것을 제외하고는 상기 실시예 1과 같은 방법으로 추출하여 쪽동백 추출물을 얻었다.Except for using the extraction solvent of Table 1 was extracted in the same manner as in Example 1 to obtain a camellia extract.
하기 표 1의 추출용매를 사용한 것을 제외하고는 상기 실시예 1과 같은 방법으로 추출하여 쪽동백 추출물을 얻었다.Except for using the extraction solvent of Table 1 was extracted in the same manner as in Example 1 to obtain a camellia extract.
하기 표 1의 추출용매를 사용한 것을 제외하고는 상기 실시예 1과 같은 방법으로 추출하여 쪽동백 추출물을 얻었다.Except for using the extraction solvent of Table 1 was extracted in the same manner as in Example 1 to obtain a camellia extract.
하기 표 1의 추출용매를 사용한 것을 제외하고는 상기 실시예 1과 같은 방법으로 추출하여 쪽동백 추출물을 얻었다.Except for using the extraction solvent of Table 1 was extracted in the same manner as in Example 1 to obtain a camellia extract.
하기 표 1의 추출용매를 사용한 것을 제외하고는 상기 실시예 1과 같은 방법으로 추출하여 쪽동백 추출물을 얻었다.Except for using the extraction solvent of Table 1 was extracted in the same manner as in Example 1 to obtain a camellia extract.
쪽동백Camellia 추출물의 제조 Preparation of extract IIII
실시예 2 ∼ 실시예 16은 하기 표 1의 추출용매를 사용한 것을 제외하고는 상기 실시예 1과 같은 방법으로 추출하여 쪽동백 추출물을 얻었다. 또한, 실시예 15∼16은 통상적인 초임계 추출법(약 60℃의 온도에서 약 300 기압의 압력 하에 초임계 상태에서 공용매를 올리브오일을 이용하여 추출함), 초음파(슈퍼노닉 초음파기기를 이용하여 25KHz의 강도로 30℃에서 약 2시간 동안 추출) 방법을 이용한 추출을 통해 쪽동백 추출물을 얻었다. 단, 실시예 15의 경우에는 공용매로 올리브유를 사용하였으며 액상이며 실시예 16에서는 정제수를 사용하였다.
Example 2 to Example 16 was extracted in the same manner as in Example 1 except that the extraction solvent of Table 1 was used to obtain a camellia extract. In addition, Examples 15 to 16 are conventional supercritical extraction method (extracting cosolvent using olive oil in supercritical state under a pressure of about 300 atm at a temperature of about 60 ° C.), ultrasonic waves (superonic ultrasonic apparatus) To extract the camellia extract through the extraction method using a method of extracting for about 2 hours at 30 ℃ with an intensity of 25KHz. However, in Example 15, olive oil was used as a cosolvent, and in liquid form, purified water was used in Example 16.
얻은 추출물의 무게(단위: g)From 1 kg of camellia
Weight of extract obtained in g
쪽동백Camellia 효모 발효 추출물의 제조 Preparation of Yeast Fermented Extract
정제수로 세척하고 건조시킨 쪽동백 가지를 분말화한 후 300메시를 이용하여 미세하게 만들었다. 이것을 10g/L되게 효모 배양배지(Potato Dextrose Broth, 아큐메디아, 미합중국)에 첨가하였다. The dried camellia was washed with purified water and dried to make fine powder using 300 mesh. This was added to yeast culture medium (Potato Dextrose Broth, Accumedia, United States) to 10 g / L.
발효에 사용한 효모 균주는 사카로마이세스 세레비시애(Saccharomyces cerevisiae)를 사용하였으며, 배양액 당 50,000 cfu/L로 첨가하였다. 배양은 5L 발효조를 이용하여 7일간, 30℃, pH 5∼7로 유지하며 배양하였다. 배양이 완료된 쪽동백 효모 발효액을 원심분리하여 배양균을 1차 제거한 후 0.25 μM 여과지를 이용하여 최종여과 하였다. 이렇게 얻은 여과액을 다시 4℃의 저온 창고에서 약 10일간 숙성시킨 후 이 여과 숙성액을 다시 0.25μM의 여과기를 이용하여 여과하여 본 발명에 사용하였으며, 편의상 이 발효 여과액을 쪽동백 효모 발효 추출물이라 칭하였다. 이하 실험에 사용된 쪽동백 효모 발효 추출물은 최종농도가 1g/100mL가 되게 유지하여 사용하였다.
Saccharomyces cerevisiae was used as a yeast strain for fermentation, and was added at 50,000 cfu / L per culture. Cultivation was carried out using 5L fermenter for 7 days, maintained at 30 ℃, pH 5-7. Centrifugation of the cultured camellia yeast fermentation was centrifuged to remove the cultures first, and then filtered through 0.25 μM filter paper. The filtrate thus obtained was aged again for about 10 days in a low temperature warehouse at 4 ° C., and then the filtrate was filtered again using a filter of 0.25 μM, and used for the present invention. This is called. The camellia yeast fermented extract used in the following experiment was used to maintain a final concentration of 1g / 100mL.
쪽동백Camellia 유산균 발효 추출물의 제조 Preparation of Lactic Acid Bacteria Fermented Extract
정제수로 세척하고 건조시킨 쪽동백 가지를 분말화한 후 300메시를 이용하여 미세하게 만들었다. 이것을 10g/L되게 유산균 배양배지(Lactobacillus MRS Broth, 디프코, 미합중국)에 첨가하여 혼합한 후 121℃에서 멸균시킨 뒤 유산균을 접종하였다. The dried camellia was washed with purified water and dried to make fine powder using 300 mesh. Add 10 g / L of lactic acid bacteria culture medium (Lactobacillus MRS Broth, Difco, USA) and mix After sterilization at 121 ℃ was inoculated with lactic acid bacteria.
발효에 사용한 유산균주는 락토바실러스 플란타룸(Lactobacillus plantarum)을 사용하였으며, 배양액 당 50,000 cfu/L로 첨가하였다. 배양은 5L 발효조를 이용하여 3일간, 30℃, pH 5∼7로 유지하며 배양하였다. 배양이 완료된 쪽동백 발효액을 원심분리하여 배양균을 1차 제거 한 후 0.25μM 여과지를 이용하여 최종여과하였다. 이렇게 얻은 여과액을 다시 4℃의 저온 창고에서 약 10일간 숙성시킨 후 이 여과 숙성액을 다시 0.25μM의 여과기를 이용하여 여과하여 본 발명에 사용하였으며, 편의상 이 발효 여과액을 쪽동백 유산균 발효 추출물이라 칭하였다. 이하 실험에 사용된 쪽동백 유산균 발효 추출물은 최종농도가 1g/100mL가 되게 유지하여 사용하였다.
Lactobacillus used for fermentation was used Lactobacillus plantarum ( Lactobacillus plantarum ), was added at 50,000 cfu / L per culture. Cultivation was carried out using a 5L fermenter for 3 days, maintained at 30 ℃, pH 5-7. Centrifugation of the cultured camellia fermentation broth was centrifuged to remove primary cultures, followed by final filtration using 0.25 μM filter paper. The filtrate thus obtained was aged again in a low temperature warehouse at 4 ° C. for about 10 days, and the filtrate was filtered again using a filter of 0.25 μM, and used for the present invention. It is called. The camellia lactobacillus fermented extract used in the following experiment was used to maintain a final concentration of 1g / 100mL.
쪽동백Camellia 바실러스Bacillus 발효 추출물의 제조 Preparation of Fermented Extract
정제수로 세척하고 건조시킨 쪽동백 가지를 분말화한 후 300메시를 이용하여 미세하게 만들었다. 이것을 10g/L되게 바실러스 배양배지에 첨가하였다. The dried camellia was washed with purified water and dried to make fine powder using 300 mesh. This was added to the Bacillus culture medium at 10 g / L.
발효에 사용한 바실러스 균주는 바실러스 서브틸리스(고초균; Bacillus subtilis)를 사용하였으며, 배양액 당 50,000 cfu/L로 첨가하였다. 배양은 5L 발효조를 이용하여 3일간, 30℃, pH 5∼7로 유지하며 배양하였다. 배양이 완료된 쪽동백 발효액을 원심분리하여 배양균을 1차 제거 한 후 0.25 μM 여과지를 이용하여 최종여과 하였다. 이렇게 얻은 여과액을 다시 4℃의 저온 창고에서 약 10일간 숙성시킨 후 이 여과 숙성액을 다시 0.25μM의 여과기를 이용하여 여과하여 본 발명에 사용하였으며, 편의상 이 발효 여과액을 쪽동백 바실러스 발효 추출물이라 칭하였다. 이하 실험에 사용된 쪽동백 바실러스 발효 추출물은 최종농도가 1g/100mL가 되게 유지하여 사용하였다.
Bacillus strains used for fermentation were used Bacillus subtilis ( Bacillus subtilis ), was added at 50,000 cfu / L per culture. Cultivation was carried out using a 5L fermenter for 3 days, maintained at 30 ℃, pH 5-7. Centrifugation of the cultured camellia fermentation broth was centrifuged to remove primary cultures, followed by final filtration using 0.25 μM filter paper. The filtrate thus obtained was aged again in a cold warehouse at 4 ° C. for about 10 days, and then the filtrate was filtered again using a filter of 0.25 μM, and used for the present invention. This is called. The camellia Bacillus fermented extract used in the following experiment was used to maintain a final concentration of 1g / 100mL.
쪽동백Camellia 포제법A preparation method 추출 extraction
본 발명의 쪽동백의 포제법 추출물을 얻기 위해 삶거나, 찌거나, 불에 볶거나, 불에 굽거나 달구는 공정 또는 이들이 혼합된 공정은 다음과 같이 실시하였다. 즉, 정제수로 세척하고 건조시킨 쪽동백 가지를 분말화한 후 300메시를 이용하여 미세하게 만든 후, 찌기는 온도 100℃, 1시간 조건으로 실시한 후 음건하였다. 이렇게 하여 만든 쪽동백의 포제법 추출물은 추가로 70% 에탄올 용액을 이용하여 추출하였다.
Boiled, steamed, roasted, roasted or baked, or a process in which these were mixed to obtain the extract of the method of sapling camellia of the present invention was carried out as follows. In other words, after washing with purified water and dried dried camellia branches to make fine using 300 mesh, steaming was carried out under a condition of temperature 100 ℃, 1 hour and then dried. The extract of the prepared camellia was thus extracted using a 70% ethanol solution.
실험예Experimental Example 1: One: 쪽동백Camellia 추출물의 티로시나아제 활성 저해 실험 Inhibition of Tyrosinase Activity of Extracts
기질로는 인산나트륨 완충액(pH 6.8)에 용해한 1.5 mmol/ℓ의 티로신(시그마사, 미합중국) 40㎕를 사용하였다. 제조예 1∼18에서 제조한 쪽동백 추출물을 각각 0.05 M 인산나트륨 완충용액 (pH 6.8)으로 희석하여 각각 농도 1.0%(v/v)가 되도록 시료액을 제조하였다. 티로신 40㎕에 상기 농도별 시료액 240 ㎕을 각각 첨가하고, 상기 용액에 티로시나아제 (시그마사, 1,500 U/㎖) 20 ㎕을 첨가한 후 37℃에서 15분 동안 반응시킨 다음, 490 nm에서 흡광도를 측정하였다. 이때, 양성대조군으로는 쪽동백 추출물 대신에 통상적으로 티로시나아제 활성 저해 효과가 있는 것으로 알려진 물질인 알부틴 1.0%를 사용하였다. 흡광도 측정 시 대조군으로는 쪽동백 추출물 대신에 인산나트륨 완충용액(pH 6.8)을 사용하였다. 40 μl of 1.5 mmol / L tyrosine (Sigma, USA) dissolved in sodium phosphate buffer (pH 6.8) was used as the substrate. The sample camellia extracts prepared in Preparation Examples 1 to 18 were each diluted with 0.05 M sodium phosphate buffer solution (pH 6.8) to have a concentration of 1.0% (v / v), respectively. 240 μl of the sample solution for each concentration was added to 40 μl of tyrosine, and 20 μl of tyrosinase (Sigma, 1500 U / ml) was added to the solution, followed by reaction at 37 ° C. for 15 minutes, followed by 490 nm. Absorbance was measured. In this case, 1.0% of arbutin, a substance known to have an inhibitory effect on tyrosinase activity, was used instead of the extract of camellia as a positive control group. When the absorbance was measured, sodium phosphate buffer solution (pH 6.8) was used instead of the camellia extract.
하기 수학식 1에 의하여 티로시나아제의 활성 저해율(%)을 계산하였으며 실험 결과는 하기 표 2에 기재하였다.Inhibition rate (%) of tyrosinase activity was calculated by Equation 1 below, and the experimental results are shown in Table 2 below.
(=티로시나아제 활성 저해율(%))(= Tyrosinase activity inhibition rate (%))
상기 결과를 통해, 쪽동백 추출물(실시예 1, 15-20)은 양성대조군인 알부틴에 비하여 티로시나아제 활성 저해효과가 우수하거나 유사였으며, 이로부터 본 발명의 쪽동백 추출물이 티로시나아제 활성을 저해하여 피부 색소 문제를 해결할 수 있음을 알 수 있었다.
Through the above results, the camellia extract (Examples 1, 15-20) had a superior or similar inhibitory effect on tyrosinase activity compared to the arbutin, a positive control group, from which the camellia extract of the present invention exhibited tyrosinase activity. It can be seen that by inhibiting the skin pigment problem can be solved.
실험예Experimental Example 2 : 2 : 쪽동백Camellia 추출물의 멜라닌 생합성 억제 실험 Melanin Biosynthesis Inhibition Experiment
B-16 세포 (쥐 멜라노마 세포, 한국세포주은행)를 6-웰 플레이트 (well plate)에 1× 105 cell/well이 되도록 접종한 후에 24시간 배양하였다. 각 웰에 쪽동백 추출물을 각각 1%(v/v)를 처리하고 3-4일 동안 배양한 후 각 웰의 배양액을 원심 분리하였다. 분리된 세포는 디메틸설폭사이드(DMSO)에 용해한 1N NaOH 용액 500㎕로 용해하여 10분간 90℃ 수욕 (water bath)에서 가열하였다. 이 상등액을 490㎚에서 흡광도를 측정하였다. 양성대조군으로는 쪽동백 추출물 대신 통상적으로 멜라닌 생합성 억제 효과가 있는 것으로 알려진 알부틴 1.0%를 사용하였다. 대조군으로는 쪽동백 추출물 대신 디메틸설폭사이드(DMSO)에 용해한 1N NaOH 용액 을 사용하였다. 멜라닌 생합성 억제율(%)은 하기 수학식 2에 따라 계산하였으며, 그 결과는 표 3에 나타나 있다.
B-16 cells (rat melanoma cells, Korea Cell Line Bank) were seeded in 6-well plates to 1 × 10 5 cells / well and incubated for 24 hours. Each well was treated with 1% (v / v) of the camellia extract, and then cultured for 3-4 days, and the culture solution of each well was centrifuged. The isolated cells were lysed with 500 μl of 1N NaOH solution dissolved in dimethyl sulfoxide (DMSO) and heated in a 90 ° C. water bath for 10 minutes. This supernatant was measured for absorbance at 490 nm. As a positive control, 1.0% of arbutin, which is known to have melanin biosynthesis inhibitory effect, was used instead of the extract of camellia. As a control, 1N NaOH solution dissolved in dimethyl sulfoxide (DMSO) was used instead of the camellia extract. Melanin biosynthesis inhibition rate (%) was calculated according to the following equation (2), the results are shown in Table 3.
(=멜라닌 생합성 억제율(%)) (= Melanin biosynthesis inhibition rate (%))
상기 결과를 통해, 쪽동백 추출물을 처리한 경우는 양성대조군인 알부틴에 비하여 멜라닌 생합성 억제효과가 우수하였으며, 또한 이로부터 쪽동백 추출물이 멜라닌 생합성을 억제하여 피부 색소 문제를 해결할 수 있음을 알 수 있었다. Through the above results, the treatment of the camellia extract was superior to the melanin biosynthesis effect compared to the arbutin positive control group, and from this it was found that the camellia extract can solve the skin pigment problem by inhibiting melanin biosynthesis. .
이하 상기한 실험예의 결과를 근거로 하여 본 발명의 쪽동백 추출물을 포함하는 화장료를 조성하여 제시한다. 그러나 본 발명의 조성물을 하기의 처방예 들로 한정하고자 하는 것은 아니다.
Hereinafter, based on the results of the above experimental example, to present a cosmetic composition comprising the extract camellia of the present invention. However, the composition of the present invention is not intended to be limited to the following prescription examples.
처방예Prescription example 1: 유연화장수 1: softening longevity
쪽동백 추출물을 함유한 화장료 중 유연화장수의 처방예는 다음과 같다.Prescription examples of soft cosmetics in cosmetics containing the extract camellia as follows.
처방예Prescription example 2: 영양화장수 2: nutrition cosmetics
쪽동백 추출물을 함유한 화장료 중 영양화장수의 처방예는 다음과 같다. Prescription examples of nutrient cosmetics in cosmetics containing extract of camellia are as follows.
처방예Prescription example 3: 영양크림 3: Nourishing cream
쪽동백 추출물을 함유한 화장료 중 영양크림의 처방예는 다음과 같다. Prescription example of nutrition cream among cosmetics containing extract of camellia is as follows.
실험예Experimental Example 3: 3: 쪽동백Camellia 추출물을 함유한 Containing extract 화장료의Cosmetic 미백 효과 실험 Whitening effect experiment
20∼40세의 특히 피부가 검은 한국 여성 20명을 대상으로 본 발명의 화장료 조성물의 미백 효과 실험을 실시하였다. A whitening effect test of the cosmetic composition of the present invention was carried out on 20 Korean women aged 20 to 40 with dark skin.
실험군으로 실시예 17의 쪽동백 발효 추출물 3.0%를 함유한 화장료를 사용하였으며, 그 조성물 표 7에 나타내었다. 대조군으로 쪽동백 발효 추출물 대신 동량의 정제수를 함유한 화장료 및 양성대조군으로 미백효과가 있는 것으로 알려진 물질인 알부틴을 함유하는 화장료를 이용하여 실험을 실시하였다.
As a test group, a cosmetic containing 3.0% of camellia fermented extract of Example 17 was used, and the composition thereof is shown in Table 7. As a control, experiments were carried out using cosmetics containing the same amount of purified water and arbutin, a substance known to have a whitening effect as a positive control group, as a control, instead of the extract of the camellia fermentation.
실험은 먼저 대조군과 쪽동백 발효 추출물이 함유된 화장료 20명의 피검자에게 각각 얼굴의 양쪽면을 사용하였다. 측정 장비로는 Minolta CR 300을 사용하였으며 8주 동안 측정하였다. 실험 결과는 8주에 찍은 피부 밝기값(Lightness)인 L값과 실험 시작 전인 0주에 찍은 L값을 비교하였으며 그 결과는 하기 표 8에 나타나있다.
In the experiment, 20 subjects of 20 cosmetics containing a control and a camellia fermented extract were used on both sides of each face. Minolta CR 300 was used as a measuring instrument and was measured for 8 weeks. Experimental results were compared to L value taken at 8 weeks of skin lightness value (Lightness) and L value taken at 0 weeks before the start of the experiment and the results are shown in Table 8 below.
상기 표 8에 나타난 바와 같이, 쪽동백 추출물을 함유한 화장료의 △L 값이 대조군 화장료에 비하여 높게 측정되어, 본 발명의 쪽동백 발효 추출물을 함유하는 화장료의 미백 효과가 우수한 것으로 나타났다. 또한 양성대조군인 알부틴을 함유하는 화장료에 비해서 유사한/우수한 효과 따라서 본 발명의 쪽동백 발효 추출물을 포함하는 화장료 조성물은 매우 우수한 미백 효과를 갖고 있음을 알 수 있다.
As shown in Table 8, the △ L value of the cosmetic containing the extract camellia was measured higher than the control cosmetics, it was shown that the whitening effect of the cosmetic containing the extract camellia fermentation of the present invention. In addition, it can be seen that the cosmetic composition including the camellia fermented extract of the present invention has a very good whitening effect compared to the cosmetic containing the arbutin positive control group.
이상으로 본 발명의 특정한 부분을 상세히 기술하였는바, 당업계의 통상의 지식을 가진 자에게 있어서 이러한 구체적인 기술은 단지 바람직한 구현예일 뿐이며, 이에 본 발명의 범위가 제한되는 것이 아닌 점은 명백하다. 따라서, 본 발명의 실질적인 범위는 첨부된 청구항과 그의 등가물에 의하여 정의된다고 할 것이다.Having described the specific part of the present invention in detail, it is apparent to those skilled in the art that such a specific technology is only a preferred embodiment, and the scope of the present invention is not limited thereto. Accordingly, the actual scope of the present invention will be defined by the appended claims and their equivalents.
Claims (8)
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