KR20150078868A - Cosmetic composition containing ginsenoside Rd, Rb2 and Bambusae Caulis in Taeniam extracts - Google Patents

Cosmetic composition containing ginsenoside Rd, Rb2 and Bambusae Caulis in Taeniam extracts Download PDF

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Abstract

The present invention relates to an anti-wrinkle and skin moisturizing cosmetic composition containing ginsenoside Rd and Rb2, and a Bambusae caulis in Taeniam extract as active ingredients. If a mixture of ginsenoside Rd and Rb2 is mixed with the Bambusae caulis in Taeniam extract and then used, a synergistic effect is created and accordingly, provided are effects of proliferating an excellent fibroblast cell, promoting biosynthesis of collagen, inhibiting MMP-1 generation, inhibiting activity against elastase, increasing a skin moisture content, thereby exhibiting complex effects of reducing and ameliorating wrinkles and improving skin moisturizing. Accordingly, the invention can be usefully used as an anti-wrinkle and skin moisturizing cosmetic composition.

Description

진세노사이드 Rd, Rb2와 죽여추출물을 유효성분으로 함유하는 주름개선 및 보습용 화장료 조성물{Cosmetic composition containing ginsenoside Rd, Rb2 and Bambusae Caulis in Taeniam extracts}(Cosmetic composition containing ginsenoside Rd, Rb2 and Bambusae Caulis in Taeniam extracts containing an active ingredient of ginsenosides Rd, Rb2,

본 발명은 인삼유래 성분 진세노사이드와 죽여추출물을 유효성분으로 포함하는 주름 개선 및 피부 보습용 화장료 조성물에 관한 것으로, 더욱 상세하게는 진세노사이드 Rd, Rb2 및 죽여추출물을 함유함으로써 주름 개선 및 보습 효과를 가지는 화장료 조성물에 관한 것이다.The present invention relates to a cosmetic composition for improving wrinkles and skin moisturizing comprising ginseng-derived component ginsenoside and kiss extract as an active ingredient, and more particularly to a cosmetic composition for ginsenoside Rd, Rb2 and kiss extract, The present invention also relates to a cosmetic composition having the above-mentioned effect.

피부노화는 생리학적 노화에 의한 내인성 노화와 지속적인 자외선 노출에 의해 일어나는 외인성 노화로 구분된다. 내인성 노화는 나이가 들어감에 따라 섬유아세포의 작용과 세포수가 감소하여 콜라겐, 엘라스틴, 피브릴린등 세포외 기질 단백질 섬유의 합성양이 줄어들고 구조가 느슨해져서 탄력이 감소되며 피부세포 내 수분이 손실되고 각질층의 구조가 변한다. 외인성 노화는 자외선과 같은 외부요인이 reactive oxygen species(ROS)을 발생시켜 여러 가지 신호 전달 체계를 활성화시킴으로써 activator protein-1(AP-1)의 활성화에 의해 염증반응과 작용이 증가되며 피부를 구성하는 지질, 단백질, 핵산, 효소 등이 손상되어 노화가 일어난다. 노화는 모두 피부 진피층에 존재하는 세포 외기질(extracellular matrix)의 구조적인 변화로 발생하게 된다. 그 구성요소의 대표적 증상은 탄력저하에 의해 유발된 잔주름 및 주름의 발생이며, 이는 피부 진피조직의 교원질 중 피부 탄력 성분 단백질인 콜라겐의 현저한 감소에 의해서라고 할 수 있다. Skin aging is divided into endogenous aging by physiological aging and exogenous aging by continuous UV exposure. Endogenous aging decreases fibroblast action and cell number with age, reduces the amount of synthesis of extracellular matrix protein fibers such as collagen, elastin and fibrillin, loosens the structure, decreases elasticity, The structure of the stratum corneum varies. Exogenous aging is caused by the activation of activator protein-1 (AP-1) by activation of various signal transduction systems by external reactive factors such as ultraviolet rays, causing reactive oxygen species (ROS) Lipids, proteins, nucleic acids, enzymes, etc. are damaged and aging occurs. Aging is caused by structural changes of the extracellular matrix in the dermal layer of the skin. The representative symptom of the component is the occurrence of fine lines and wrinkles caused by the reduction in elasticity, which can be attributed to a marked reduction in the collagen content of the skin elastic component protein in the collagen of the dermal tissue of the skin.

또한, 피부의 각질층에는 피지성분과 천연보습인자가 존재하여 피부를 항상 촉촉한 상태로 만들어주는데, 나이가 들거나 건조한 계절이 되면 이러한 천연보습인자만으로 각질층에 충분한 수분을 유지할 수 없기 때문에 화장품으로 수분을 공급해주어야 한다. 특히, 보습제를 통해 손상된 표피층의 경피수분손실(Transepidermal Water Loss)을 막아주거나 수분을 공급하여 거칠어진 피부를 부드럽게 하고, 박리된 각질세포(corneocytes)에 의해 생긴 불규칙적인 공간을 채워서 피부의 유연성을 증가시키는 것이 필요하다. In addition, the horny layer of the skin contains a sebum component and a natural moisturizing factor to make the skin always moist. When the skin becomes old or dry, such natural moisturizing factors can not maintain sufficient moisture in the stratum corneum. You must. In particular, it prevents the transepidermal water loss of the damaged skin layer by moisturizing agent or moisturizes the rough skin by supplying moisture, and fills the irregular space created by the peeled corneocytes, thereby increasing the flexibility of the skin .

최근에 피부노화현상으로부터 피부 고유의 기능을 회복시키고 피부세포를 활성화 시켜 피부주름생성을 억제하고 보습효과가 뛰어난, 인삼의 진세노사이드 성분을 활용한 화장료 조성물들이 개발되고 있다. 대한민국 공개특허 제2013-0135222호 "주름개선용 화장료 조성물"에는 '홍삼의 발효 추출물을 유효성분으로 포함하는 주름개선용 화장료 조성물'이 개시되어 있고, 대한민국 공개특허 제2013-0028456호 "효소-처리 홍삼 추출물 및 맥아 추출물을 함유하는 피부노화방지 및 피부주름개선용 조성물"에는 '누룩 곰팡이 유래 효소로 처리된 홍삼 추출물, 및 맥아추출물을 포함하는 피부노화방지 및 피부주름개선용 약학적 조성물'이 개시되어 있다.In recent years, cosmetic compositions using ginsenoside components of ginseng, which are excellent in moisturizing effect by restoring the skin's inherent functions from skin aging and activating skin cells to suppress skin wrinkle formation, have been developed. Korean Patent Laid-Open Publication No. 2013-0135222 entitled " Cosmetic Composition for Improving Wrinkles "discloses a cosmetic composition for improving wrinkles containing a fermented extract of red ginseng as an active ingredient. Korean Patent Publication No. 2013-0028456 entitled & A composition for preventing skin aging and improving skin wrinkles containing red ginseng extract and malt extract "includes" Red ginseng extract treated with koji mold-derived enzyme and malt extract, and a pharmaceutical composition for preventing skin aging and improving skin wrinkles " .

본 발명자들은 인삼유래의 다양한 진세노사이드 중에서 특정의 진세노사이드만을 선택, 조합하여 사용함으로써, 그 효능의 극대화를 이루기 위한 연구를 계속하였으며, 그 결과 진세노사이드 Rd와 Rb2를 특정의 조합비로 조합하고, 여기에 죽여추출물을 혼합사용하는 경우에 그 상승작용에 의하여 주름개선 및 보습효과가 우수하다는 것을 확인하여 본 발명을 완성하였다.The present inventors continued research to achieve maximization of the efficacy by selecting and combining specific ginsenosides from various ginsenosides derived from ginseng. As a result, they found that combinations of ginsenosides Rd and Rb2 in a specific combination ratio When the extract is mixed with the extract, the wrinkle is improved and the moisturizing effect is excellent by the synergistic action. Thus, the present invention has been completed.

그러므로 본 발명은 진세노사이드 Rd, Rb2와 죽여추출물을 유효성분으로 함유하여 주름 개선 및 피부 보습 효과가 우수한 화장료조성물을 제공하는 것을 목적으로 한다.Therefore, it is an object of the present invention to provide a cosmetic composition which contains ginsenosides Rd and Rb2 and a killed extract as an active ingredient, thereby improving wrinkles and skin moisturizing effect.

상기의 목적을 달성하기 위하여, 본 발명에 따르면 진세노사이드 Rd, Rb2의 혼합물 및 죽여추출물을 유효성분으로 함유하는 주름개선 및 보습용 화장료 조성물이 제공된다. 이 경우 유효성분인 상기 진세노사이드 Rd, Rb2 혼합물은 진세노사이드 Rd, Rb2가 각각 2:1의 중량비로 혼합되는 것이 바람직하다. 상기 진세노사이드 Rd, Rb2의 혼합물과 죽여추출물은 1:1~10의 중량비로 함유되는 것이 바람직하며, 더욱 바람직하게는 1:5의 중량비로 함유되는 것이다. 상기 유효성분으로서의 진세노사이드 Rd, Rb2의 혼합물 및 죽여추출물은 화장료조성물 전체중량에 대하여 각각 0.1~15중량% 함유되는 것이 바람직하다.In order to achieve the above object, the present invention provides a cosmetic composition for improving and moisturizing wrinkles containing a mixture of ginsenosides Rd and Rb2 and a killed extract as an active ingredient. In this case, it is preferable that the ginsenosides Rd and Rb2, which are effective components, are mixed in a weight ratio of 2: 1 each of ginsenosides Rd and Rb2. The mixture of the ginsenosides Rd and Rb2 and the killed extract are preferably contained in a weight ratio of 1: 1 to 10, more preferably 1: 5. It is preferable that the mixture of the ginsenosides Rd and Rb2 and the kiss extract as the active ingredient are each contained in an amount of 0.1 to 15% by weight based on the total weight of the cosmetic composition.

본 발명의 진세노사이드 Rd, Rb2 및 죽여추출물을 특정의 조합비로 포함하는 화장료조성물은 그 혼합 사용에 의하여 단일성분으로서의 사용시 보다 더욱 우수한 섬유아세포 증식 효과, 콜라겐 생성 효과, 엘라스타제 활성저해 효과, 수분 손실 억제 효과, 수분 함유량 증가효과를 나타낸다.The cosmetic composition containing the ginsenosides Rd, Rb2, and Killer extract of the present invention in a specific combination ratio is more excellent in fibroblast proliferation effect, collagen production effect, elastase activity inhibition effect, Water-loss-inhibiting effect, and moisture content-increasing effect.

이하, 본 발명을 상세히 설명한다.Hereinafter, the present invention will be described in detail.

본 발명의 진세노사이드 Rd 및 Rb2는 다음과 같이 제조할 수 있다. 예를 들면, 먼저, 건조된 인삼에 에탄올 등의 저급알코올을 가하여 추출온도 100℃에서 2시간 추출하고, 여과한 후 알코올을 증발시켜 인삼추출 엑기스를 제조한다. 인삼추출 엑기스에 락토바실러스 펙티나아제를 가하여 20~60℃에서 1~72시간 반응시킨다. 반응시켜 얻어진 아글리콘(Aglycon)을 유기용매에 녹인 후, 감압증발기로 건조함으로써 진세노사이드 Rd 및 Rb2에 해당하는 파우더를 수득할 수 있다.The ginsenosides Rd and Rb2 of the present invention can be prepared as follows. For example, a ginseng extract is first prepared by adding a lower alcohol such as ethanol to dried ginseng, extracting it at an extraction temperature of 100 ° C for 2 hours, filtering it, and then evaporating the alcohol. Lactobacillus pectinase is added to ginseng extract and reacted at 20 to 60 ° C for 1 to 72 hours. Aglycon obtained by the reaction is dissolved in an organic solvent and then dried with a vacuum evaporator to obtain a powder corresponding to ginsenosides Rd and Rb2.

본 발명의 진세노사이드 Rd 및 Rb2를 다양한 비율로 혼합하여 시험해 본 결과, 본 발명의 주름개선 및 보습용 화장료의 원료로서의 바람직한 혼합비는 2:1임을 확인하였다. 한편, 본 발명의 진세노사이드 혼합물의 제조에 있어서, 인삼의 효소반응으로부터 고함량의 Rd와 Rb2가 혼합되어 있는 파우더를 얻을 수도 있고, 각각의 진세노사이드를 얻은 후 혼합할 수도 있다. The ginsenosides Rd and Rb2 of the present invention were mixed and tested at various ratios. As a result, it was confirmed that the preferred mixing ratio of the cosmetic material for improving wrinkles and moisturizing of the present invention was 2: 1. On the other hand, in the preparation of the ginsenoside mixture of the present invention, a powder in which a high content of Rd and Rb2 are mixed can be obtained from the enzyme reaction of ginseng, or may be mixed after obtaining each ginsenoside.

본 발명의 일 유효성분으로 사용되는 죽여(竹茹, Bambusae Caulis in Taeniam)는 벼과의 솜대(Phllostachys nigra Munro var. henosis Stapf) 또는 왕대 (Phllostachys bambusoides Sieb. et Zucc.)의 겉껍질을 제거한 중간층을 말한다. 죽여는 폐열로 인한 해수와 가래, 담열로 인한 담과 위 기능 부조화로 가슴이 답답하고 잠을 못 이룰 때 하는 구토, 위열과 위허로 인한 구토, 딸꾹질, 임신구토에 효과적이며 태아를 편안하게 하는 효능이 있다. 약리작용으로 대장균 등에 강력한 억제작용이 보고되었다. Bambusae Caulis in Taeniam, which is used as one active ingredient of the present invention, is an intermediate layer obtained by removing the crust of Phylostachys nigra Munro var. Henosis Stapf or Phllostachys bambusoides Sieb. Et Zucc. It says. It is effective for vomiting, hiccups, hiccups, vomiting due to vaginal discharge and vomiting, and for relaxing the fetus. . A strong inhibitory action on E. coli was reported by pharmacological action.

본 발명의 유효성분으로 사용되는 죽여추출물은 당업계의 통상적인 방법에 따라 수득될 수 있으며, 그 제조방법은 특별히 한정되지 않는다. 예를 들면, 죽여를 물, 메탄올 또는 메탄올 수용액, 에탄올 또는 에탄올 수용액, 아세톤, 에틸아세테이트, 1,3-부틸렌글리콜 또는 1,3-부틸렌글리콜 수용액, 헥산, 디에틸 에테르, 노말 프로판올, 이소-프로판올 및 노말 부탄올로 이루어지는 군으로부터 선택되는 적어도 하나의 용매를 추출용매로 사용하여 20~80℃ 추출하고 감압 농축하여 분말 또는 액상으로 수득할 수 있다.The killing extract used as an active ingredient of the present invention can be obtained according to a conventional method in the art, and the production method thereof is not particularly limited. For example, it is preferable to use a solvent such as water, an aqueous solution of methanol or methanol, an aqueous solution of ethanol or ethanol, acetone, ethyl acetate, 1,3-butylene glycol or 1,3-butylene glycol aqueous solution, hexane, diethyl ether, -Propanol and n-butanol as an extraction solvent at 20 to 80 캜 and concentrating under reduced pressure to obtain a powder or a liquid.

본 발명의 유효성분인 진세노사이드 Rd, Rb2의 혼합물 및 죽여추출물은 화장료조성물 총 중량에 대하여 각각 0.1~15중량%의 양으로 함유된다. 0.1중량%미만이면 그 효과가 미미하고, 15중량%를 초과하면 함량 증가에 비교하여 그 효능의 증가가 크지 않아 오히려 비효율적이기 때문이다.The mixture of the ginsenosides Rd and Rb2, which are effective ingredients of the present invention, and the killed extract are contained in an amount of 0.1 to 15% by weight based on the total weight of the cosmetic composition. If the content is less than 0.1% by weight, the effect is insignificant. If the content is more than 15% by weight, the increase in the effect is not large compared with the content, which is rather inefficient.

본 발명의 유효성분인 진세노사이드 Rd, Rb2 혼합물 및 죽여추출물은 각각 1:1~10의 중량비로 함유되며, 더욱 바람직하게는 1:5의 중량비로 함유된다. 1:1 미만이거나 1:10을 초과하는 경우에는 유효성분들간의 시너지 효과가 나타나지 않기 때문에 바람직하지 않다.The active ingredient of the present invention, ginsenoside Rd, Rb2 mixture and killed extract, are contained in a weight ratio of 1: 1 to 10, more preferably 1: 5, respectively. When the ratio is less than 1: 1 or exceeds 1:10, synergistic effects between the active ingredients are not exhibited.

만약 상기 진세노사이드 Rd와 Rb2 및 죽여추출물이 파우더 형태 또는 나노캡슐, 마이크로캡슐, 나노좀등의 제형으로 용액 형태로 존재한다면 당업자는 상기 농도 범위 내에서 본 발명에 따른 조성물 내에 이 용액 또는 파우더의 양을 조절할 수 있을 것이다.If the ginsenosides Rd and Rb2 and the killed extract are in the form of a powder or a solution in the form of a nanocapsule, a microcapsule, a nanosome or the like, a person skilled in the art will understand that the concentration of the solution or powder You will be able to control the amount.

본 발명 진세노사이드 Rd, Rb2 혼합물 및 죽여추출물을 유효성분으로 함유하는 화장료 조성물로 제조되는 화장품은 일반적인 유화 제형 및 가용화 제형의 형태로 제조할 수 있다. 유화 제형의 화장품으로는 영양화장수, 크림, 에센스 등이 있으며, 가용화 제형의 화장품으로는 유연화장수가 있다. 또한, 본 발명의 진세노사이드 Rd 와 Rb2 및 죽여추출물은 화장품 이외에도 피부 과학적으로 허용 가능한 매질 또는 기제를 함유함으로써 피부과학 분야에서 통상적으로 사용되는 국소 적용 또는 전신 적용할 수 있는 보조제 형태로 제조될 수 있다.The present invention can be manufactured in the form of a general emulsified formulation and a solubilized formulation in the form of a cosmetic composition comprising the ginsenoside Rd, Rb2 mixture and kiss extract as an active ingredient. Cosmetics of emulsified form include nutrition lotion, cream, essence, etc., and cosmetics of solubilized form have softening longevity. In addition, the ginsenosides Rd and Rb2 of the present invention and the kiss extract can be prepared in the form of a topical or systemic adjuvant commonly used in the skin science field by containing a dermatologically acceptable medium or base in addition to cosmetics have.

또한, 본 발명의 화장료 조성물은 진세노사이드 Rd, Rb2 혼합물 및 죽여추출물의 혼합물에 추가로 지방 물질, 유기용매, 용해제, 농축제 및 겔화제, 연화제, 항산화제, 현탁화제, 안정화제, 발포제(foaming agent), 방향제, 계면활성제, 물, 이온형 또는 비이온형 유화제, 충전제, 금속이온 봉쇄제 및 킬레이트화제, 보존제, 비타민, 차단제, 습윤화제, 필수 오일, 염료, 안료, 친수성 또는 친유성 활성제, 지질 소낭 또는 화장품에 통상적으로 사용되는 임의의 다른 성분과 같은 화장품학 또는 피부과학 분야에서 통상적으로 사용되는 보조제를 함유할 수 있다. 그리고 상기의 성분들은 피부 과학 분야에서 일반적으로 사용되는 양으로 도입될 수 있다. In addition, the cosmetic composition of the present invention may further comprise, in addition to the mixture of ginsenoside Rd, Rb2 mixture and kiss extract, a lipid, an organic solvent, a solubilizing agent, a thickening agent and a gelling agent, a softening agent, an antioxidant, a suspending agent, surfactants, water, ionic or nonionic emulsifiers, fillers, sequestering and chelating agents, preservatives, vitamins, blockers, wetting agents, essential oils, dyes, pigments, hydrophilic or lipophilic active agents , Lipid vesicles, or any other ingredient commonly used in cosmetics, as well as adjuvants commonly used in the cosmetics or dermatological sciences. And the above ingredients may be introduced in amounts commonly used in the dermatology field.

본 발명의 화장료 조성물은 스킨로션, 스킨 소프너, 스킨토너, 아스트린젠트, 로션, 밀크로션, 모이스처 로션, 영양로션, 맛사지 크림, 영양크림, 모이스처 크림, 핸드크림, 에센스, 영양에센스, 팩, 비누, 샴푸, 클렌징폼, 클렌징로션, 클렌징크림, 바디로션, 바디클렌저, 유액, 프레스파우더, 루스파우더, 아이섀도 등의 제형으로 적용될 수 있다.
The cosmetic composition of the present invention can be used as a skin lotion, a skin softener, a skin toner, an astringent, a lotion, a milk lotion, a moisturizing lotion, a nutrition lotion, a massage cream, a nutritive cream, a moisturizing cream, a hand cream, , Cleansing foam, cleansing lotion, cleansing cream, body lotion, body cleanser, emulsion, press powder, loose powder, eye shadow and the like.

[실시예][Example]

이하, 본 발명을 하기 실시예 및 시험예에 의거하여 더욱 상세하게 설명하고자 한다. 단, 하기 실시예는 본 발명을 예시하기 위한 것일 뿐, 본 발명은 하기 실시예에 의해 한정되는 것이 아니다.
Hereinafter, the present invention will be described in more detail based on the following examples and test examples. However, the following examples are for illustrative purposes only and are not intended to limit the scope of the present invention.

제조예Manufacturing example 1 :  One : 진세노사드Jinse Nosad RdRd 제조 Produce

인삼을 정제수로 세척한 후 작은 조각으로 파쇄한 뒤, 여기에 그 건조 중량의 7~8배의 에탄올을 가한다. 100℃에서 2시간 환류시켜 끓인 다음 여과해서 추출액을 얻은 다음 에탄올을 증발하여 인삼엑기스를 얻었다. 인삼추출 엑기스를 수성용매에 용해시키고 미생물 유래의 락토바실러스 펙티나아제를 가하고 20 ~ 60℃에서 1~72시간 반응시킨 후 진세노사이드 Rd가 함유된 아글리콘(aglycon)을 얻었다. 이 아글리콘(aglycon)을 유기용매에 용해시킨 후, 감압증발기로 유기용매를 증발시킨 후 진세노사이드 Rd를 제조하였다.
After washing the ginseng with purified water, the ginseng is crushed into small pieces, and ethanol is added to the ginseng 7-8 times its dry weight. The mixture was refluxed at 100 ° C for 2 hours, boiled, and then filtered to obtain an extract. Ethanol was evaporated to obtain ginseng extract. The extract of ginseng extract was dissolved in an aqueous solvent, lactobacillus pectinase derived from microorganism was added thereto, and reacted at 20 to 60 ° C for 1 to 72 hours to obtain aglycon containing ginsenoside Rd. This aglycon was dissolved in an organic solvent, and then the organic solvent was evaporated with a reduced pressure evaporator to prepare ginsenoside Rd.

제조예Manufacturing example 2 :  2 : 진세노사드Jinse Nosad Rb2Rb2 제조 Produce

인삼을 정제수로 세척한 후 작은 조각으로 파쇄한 뒤, 여기에 그 건조 중량의 7~8배의 에탄올을 가한다. 100℃에서 2시간 환류시켜 끓인 다음 여과해서 추출액을 얻은 다음 에탄올을 증발하여 인삼엑기스를 얻었다. 인삼추출 엑기스를 수성용매에 용해시키고 미생물 유래의 락토바실러스 펙티나아제를 가하고 20 ~ 60℃에서 1~72시간 반응시킨 후 진세노사이드 Rb2가 함유된 아글리콘(aglycon)을 얻었다. 이 아글리콘(aglycon)을 유기용매에 용해시킨 후, 감압증발기로 유기용매를 증발시킨 후 진세노사이드 Rb2를 제조하였다.
After washing the ginseng with purified water, the ginseng is crushed into small pieces, and ethanol is added to the ginseng 7-8 times its dry weight. The mixture was refluxed at 100 ° C for 2 hours, boiled, and then filtered to obtain an extract. Ethanol was evaporated to obtain ginseng extract. The extract of ginseng extract was dissolved in an aqueous solvent, lactobacillus pectinase derived from microorganism was added thereto, and reacted at 20 to 60 ° C for 1 to 72 hours to obtain aglycon containing ginsenoside Rb2. The aglycon was dissolved in an organic solvent, and the organic solvent was evaporated using a vacuum evaporator to prepare ginsenoside Rb2.

제조예Manufacturing example 3 :  3: 죽여추출물Kill Extract 제조 Produce

정제수로 세척하고 건조시킨 다음 죽여를 세절하여 죽여 중량의 10배에 해당하는 물에 넣고 20~80℃에서 3시간이상 추출한 후 여과하였다. 이 추출물을 냉각 콘덴서가 달린 증류장치에서 60℃로 감압 농축하여 분말 또는 액상으로 제조하였다.
After washing with purified water, drying, killing, killing, killing, adding to water 10 times the weight, extracting at 20 ~ 80 ℃ for more than 3 hours and filtering. The extract was concentrated under reduced pressure at 60 DEG C in a distillation apparatus equipped with a cooling condenser to prepare powder or liquid.

상기 제조예 1과 2에서 제조한 진세노사이드 Rd, Rb2 그리고 이들의 1:1, 2:1, 3:1, 5:1 혼합물, 그리고 상기 진세노사이드 혼합물과 죽여추출물을 각각 1:1, 1:5, 1:10으로 혼합한 혼합물 그리고 홍삼추출물을 농도별로 디메틸설폭사이드에 희석하여 제조한 희석용액을 실험에 사용하였다.
1: 1, 2: 1, 3: 1, 5: 1 mixture of the ginsenosides Rd and Rb2 prepared in Preparation Examples 1 and 2 and the ginsenoside mixture and the killing extract were mixed at a ratio of 1: 1: 5, 1:10, and diluted solution prepared by diluting red ginseng extract with dimethylsulfoxide by concentration.

시험예Test Example 1 :  One : 엘라스타제Elastase 제어 활성시험 Control active test

0.1 중량% Elastin-Congo red(Sigma, USA)가 포함된 2.5 중량% agar에 시험시료 및 엘라스테이즈 효소 용액(1,000 units/mL, Sigma, USA)을 혼합하고 상온에서 10분간 반응시킨 용액 10 ul 씩 주입 후 37℃에서 18시간 배양하였다. 배양 종료 후 엘라스테이즈의 활성에 의해 Elastin-Congo red agar 주변에 투명대가 형성되면 그 헤일로(halo)의 직경을 측정하여 엘라스테이즈 활성 저해 효과를 측정할 수 있다.
10 μl of a solution prepared by mixing test sample and Elastase enzyme solution (1,000 units / mL, Sigma, USA) in 2.5% by weight agar containing 0.1% by weight of Elastin-Congo red (Sigma, USA) and reacting at room temperature for 10 minutes And then cultured at 37 ° C for 18 hours. After the end of the culture, when a zona tangle is formed around the Elastin-Congo red agar due to the activity of the Elastinase, the diameter of the halo can be measured to measure the inhibitory effect of the Elastinase activity.

진세노사이드Gin Senocide RdRd , , Rb2Rb2 혼합물의 저해활성 Inhibitory activity of the mixture

엘라스틴을 포함하는 한천배지에 엘라스타제만을 적가하는 한편, 상기 진세노사이드 Rd와 Rb2 그리고 이들의 혼합물의 엘라스타제 저해 활성을 확인하고자, 하기 표 1에 나타난 바와 같이 그 농도가 0.01, 0.05, 0.1 및 0.5%되는 용액을 시료로 하여 엘라스타제와 함께 적가하여 배지 상에 나타나는 헤일로(halo)의 직경을 측정하여 엘라스타제 저해활성을 측정하였으며, 대조예로서 retinol crystal을 엘라스타제와 함께 적가하여 비교하였다. 그 결과를 하기의 표 1에 나타내었다.
In order to confirm the elastase inhibitory activity of the above-mentioned ginsenosides Rd and Rb2 and the mixture thereof, the concentration of the elastase was adjusted to 0.01, 0.05, 0.1 and 0.5% of the solution was added dropwise with the elastase to measure the diameter of the halo appearing on the medium to measure the inhibitory activity of the elastase. As a control, retinol crystal was mixed with the elastase Respectively. The results are shown in Table 1 below.

시료
농도
(%)
sample
density
(%)
Halo diameter(cm)Halo diameter (cm)
홍삼
추출물
Red ginseng
extract
Gins. RdGins. Rd Gins.
Rb2
Gins.
Rb2
Gins. Rd + Rb2Gins. Rd + Rb2 ElastaseElastase Retinol
crystal
Retinol
crystal
1:11: 1 2:12: 1 3:13: 1 5:15: 1 0.010.01 1.81.8 1.61.6 1.81.8 1.71.7 1.51.5 1.61.6 1.61.6 1.81.8 0.90.9 0.050.05 1.81.8 1.51.5 1.61.6 1.61.6 1.31.3 1.41.4 1.51.5 0.100.10 1.71.7 1.21.2 1.61.6 1.41.4 1.11.1 1.11.1 1.21.2 0.500.50 1.51.5 1.21.2 1.41.4 1.31.3 1.01.0 1.11.1 1.11.1

헤일로 직경(Halo diameter)이 클수록 엘라스틴의 분해가 많이 된 것인데, 상기 표 1에서 확인되는 바와 같이, 진세노사이드 Rd, Rb2 혼합물은 홍삼전체추출물에 비하여 우수한 엘라스타제 저해활성을 나타내었다.As shown in Table 1 above, the mixture of ginsenosides Rd and Rb2 exhibited excellent elastase inhibitory activity as compared with the whole extract of red ginseng.

진세노사이드 Rd, Rb2 혼합물 중 특히 그 중량비가 2:1인 시료에서 헤일로 직경(halo diameter)이 크게 감소하여 우수한 엘라스타제 억제 효과를 나타냄을 알 수 있었고, 각각의 진세노사이드를 처리한 경우에 비하여 진세노사이드 Rd와 Rb2의 혼합으로 처리하였을 때 상승적인 효과가 있음을 알 수 있었다.
It was found that the halosilane (Rx) and the Rb2 mixture, especially in the weight ratio of 2: 1, showed a remarkable decrease in the halo diameter and showed a superior elastase inhibitory effect. When each of the ginsenosides was treated , It was found that there was a synergistic effect when the mixture was treated with a mixture of ginsenoside Rd and Rb2.

진세노사이드Gin Senocide RdRd , , Rb2Rb2 혼합물과  Mixture 죽여추출물의Kill the extract of 활성 activation

가장 우수한 저해활성을 가지는 것으로 확인된 진세노사이드 Rd, Rb2의 2:1 혼합물을 사용하여 죽여추출물과의 혼합사용에 따른 엘라스타제 저해활성을 측정하였다. 상기 시험예와 동일한 방법으로 측정하였으며, 그 결과를 하기의 표 2에 나타내었다.
The 2: 1 mixture of ginsenosides Rd and Rb2, which has been confirmed to have the most excellent inhibitory activity, was killed and the inhibitory activity of elastase according to mixing with the extract was measured. The results are shown in Table 2 below. ≪ tb >< TABLE >

시료
농도
(%)
sample
density
(%)
Halo diameter (cm)Halo diameter (cm)
홍삼
추출물
Red ginseng
extract
Gins. RdGins. Rd Gins.
Rb2
Gins.
Rb2
Gins.(Rd+Rb2=2:1) :
죽여추출물
Gins. (Rd + Rb2 = 2: 1):
Kill Extract
Elastase
Elastase
Retinol
crystal
Retinol
crystal
1:11: 1 1:51: 5 1:101:10 0.010.01 1.81.8 1.61.6 1.81.8 1.51.5 1.51.5 1.61.6 1.81.8 0.90.9 0.050.05 1.81.8 1.51.5 1.61.6 1.31.3 1.21.2 1.31.3 0.100.10 1.71.7 1.21.2 1.61.6 1.11.1 1.01.0 1.11.1 0.500.50 1.51.5 1.21.2 1.41.4 1.01.0 0.90.9 1.01.0

헤일로 직경(Halo diameter)이 클수록 엘라스틴의 분해가 많이 된 것인데, 상기 표 2에서 확인되는 바와 같이, 진세노사이드 Rd, Rb2 혼합물과 죽여 추출물을 혼합사용하는 경우에 그 저해활성이 우수하게 나타났으며, 특히 1:5 비율에서 효과가 가장 우수한 것으로 나타났다.
As shown in the above Table 2, when the mixture of ginsenoside Rd and Rb2 mixture was mixed with killing extract, the inhibition activity was excellent , Especially 1: 5 ratio.

시험예Test Example 2: 콜라겐 생합성 촉진효과시험 2: Collagen biosynthesis promoting effect test

섬유아세포를 10% FBS를 첨가한 IMDM 배지에 5×105의 세포농도로 접종하여 37℃, 5% CO2배양기에서 24시간 동안 배양하였다. 24시간 배양하여 하기 표 3에 나타난 바와 같이 홍삼추출물, 제조예 1, 2에서 제조한 진세노사이드 Rd와 Rb2, 그 혼합물 및 이 혼합물에 죽여 추출물을 혼합한 혼합물을 최종 농도가 50, 100, 500, 1000㎍/㎖가 되도록 디메틸설폭시드에 희석하여 제조한 희석용액을 첨가하여 18시간 동안 동일 조건에서 배양 후 1시간 동안 UV를 조사시켜 세포에 스트레스를 주었다. 이후 Trizol reagent(invitrogen, USA)를 이용하여 섬유아세포를 회수하여 mRNA를 추출하여 일련의 과정을 거쳐 cDNA를 합성하였다. 합성된 cDNA로부터 PROCOLLAGEN TYPEⅠ유전자 부위를 증폭시켜 전기영동을 통해 유전자 발현 양을 확인하였으며, 유전자 증폭은 thermal cycler (GenePro, Hangzhou bioer tech., CHINA)를 사용하여 10x taq polymerase buffer, 10 mM dNTP, 10 pmol primer (F: AGC CAG CAG ATC GAG AAC AT, R: TCT TGT CCT TGG GGT TCT TG), taq polymerase를 혼합하고 증류수를 더하여 50 uL로 조정 후 95도 5분 1cycle/95도 1분/51도 2분/72도 1분 28 cycle 증폭, 72도에서 5분간 반응하는 조건으로 수행하였다. 생성된 procollagen의 발현율은 아래식에 따라 계산하였으며 대조구로는 시료를 처리하지 않고 UV를 조사하지 않은 정상 섬유아세포를 사용하였다.
Fibroblasts were inoculated into IMDM medium supplemented with 10% FBS at a cell concentration of 5 × 10 5 cells and cultured in a 5% CO 2 incubator at 37 ° C. for 24 hours. And cultured for 24 hours. As shown in the following Table 3, red ginseng extract, ginsenoside Rd and Rb2 prepared in Preparation Examples 1 and 2, a mixture thereof, and a mixture prepared by mixing the extract with the extract were mixed at final concentrations of 50, 100 and 500 , Diluted in dimethyl sulfoxide to give a concentration of 1000 μg / ml, and incubated for 18 hours under the same conditions. The cells were then exposed to UV light for 1 hour to stress the cells. After that, fibroblasts were recovered using Trizol reagent (Invitrogen, USA), and mRNA was extracted and cDNA was synthesized through a series of procedures. Gene amplification was carried out using 10x taq polymerase buffer, 10 mM dNTP, 10 mM Tris-HCl buffer (pH 7.0) using a thermal cycler (GenePro, Hangzhou Bioer tech., CHINA). The amplified product was amplified by electrophoresis The PCR reaction was carried out by adding 50 μL of distilled water to 95 ° C for 5 min and 1 cycle / 95 ° C for 1 min / 51 ° C. 2 minutes / 72 degrees 1 minute, 28 cycles amplification and 72 degrees for 5 minutes. The expression rate of the generated procollagen was calculated according to the following equation. As a control, normal fibroblasts without UV irradiation were used.

procollagen 발현율(%) = B/A × 100(%)
procollagen expression rate (%) = B / A × 100 (%)

A: 상기 대조군에서의 procollagen 발현 량A: The amount of procollagen expression in the control group

B: 시료 처리 및 UV조사 섬유아세포의 procollagen 발현 량
B: The amount of procollagen expressed in the sample treated and UV irradiated fibroblasts

상기 시험결과 하기의 표 3과 같은 결과를 얻었다.As a result of the test, the results shown in Table 3 were obtained.

시료
농도
(㎍/㎖)
sample
density
(占 퐂 / ml)
procollagen 발현율(%)procollagen expression rate (%)
홍삼추출물Red ginseng extract Gins. RdGins. Rd Gins. Rb2Gins. Rb2 진세노사이드 Rd + R2Gin Senocide Rd + R2 Gins.(Rd+Rb2=2:1) : 죽여추출물Gins. (Rd + Rb2 = 2: 1): Kill the extract TGF-βTGF-beta 1:11: 1 2:12: 1 3:13: 1 5:15: 1 1:11: 1 1:51: 5 1:101:10 00 2.632.63 2.632.63 2.632.63 2.632.63 2.632.63 2.632.63 2.632.63 2.632.63 2.632.63 2.632.63 2.632.63 5050 13.8313.83 26.5226.52 18.4818.48 28.0428.04 41.2041.20 40.9240.92 35.0535.05 41.3541.35 43.6243.62 41.3541.35 44.1544.15 100100 29.5729.57 49.1249.12 35.8635.86 47.2547.25 57.8257.82 53.8753.87 51.6651.66 58.7458.74 59.4359.43 57.9757.97 59.9959.99 500500 63.1063.10 83.0783.07 70.2170.21 81.1081.10 96.1896.18 94.0594.05 88.2388.23 97.1697.16 98.7598.75 96.9196.91 99.0799.07 10001000 90.9990.99 118.47118.47 102.67102.67 119.03119.03 140.36140.36 138.76138.76 124.14124.14 141.98141.98 143.61143.61 140.96140.96 143.91143.91

상기 표 3의 결과에서 보는 바와 같이, 진세노사이드 Rd와 Rb2를 단독으로 적용한 경우보다 진세노사이드 Rd와 Rb2를 2:1 비율로 혼합해 적용한 시료가 피부 주름에 관련 있는 콜라겐 생합성 촉진효과가 더 높았으며, 보다 우수한 시너지 효과를 보여주었다. 또한 진세노사이드 Rd와 Rb2의 2:1 혼합물에 죽여추출물을 1:1~10으로 혼합 사용했을 때 더 우수한 효과를 나타내었으며 대조군 TGF-β와도 유사한 경향의 우수한 효과를 보여주었다.
As can be seen from the results of Table 3 above, the sample in which the ginsenosides Rd and Rb2 were mixed at a ratio of 2: 1, compared with the case where the ginsenosides Rd and Rb2 were applied alone, was more effective in promoting collagen biosynthesis , And showed synergistic effects. In addition, when the mixture of 2: 1 mixture of ginsenosides Rd and Rb2 was killed and the extracts were mixed in a ratio of 1: 1 to 10, the effect was more excellent and the effect was similar to that of the control TGF-β.

시험예Test Example 3:  3: MMPMMP -1 생성 억제 효과-1 production inhibitory effect

인간 정상 피부세포인 섬유아세포(한국 세포주 은행, 대한민국)를 48-웰 마이크로 플레이트(Nunc. 덴마크)에 각 웰 당 1st 106세포가 되도록 접종하고, DMEM 배지(Sigma, 미합중국) 및 37℃의 조건에서 24시간 동안 배양한 후 홍삼추출물, 상기 제조예 1과 2에서 제조한 진세노사이드 Rd와 Rb2 그리고 그 혼합물, 이 혼합물에 죽여 추출물을 혼합한 혼합물을 최종 농도가 50, 100, 500, 1000㎍/㎖가 되도록 디메틸설폭시드에 희석하여 제조한 희석용액을 첨가한 후 무혈청 DMEM 배지에서 48시간 동안 배양하였다. 배양 후, 각 웰의 상층액을 모아 MMP-1 분석 킷트(Amersham, 미합중국)를 이용하여 새로 합성된 MMP-1의 양(㎍/㎖)을 측정하고, 하기식에 따라 MMP-1 생성 억제율을 계산하였으며, 그 결과는 하기 표 4에 나타내었다. 이때, MMP-1 생성 억제율의 양성 대조군으로 TGF-β(10㎎/㎖, Roche, 미합중국)을 사용하였다.Human normal skin cells, fibroblasts (Korean Cell Line Bank, Korea), were inoculated into 48-well microplates (Nunc, Denmark) to be 10 < 6 > cells per well and cultured in DMEM medium (Sigma, After 24 hours of incubation, the red ginseng extract, the ginsenosides Rd and Rb2 prepared in Preparation Examples 1 and 2, and the mixture thereof, and the mixture of the extract and the mixture of the extracts, were mixed at final concentrations of 50, 100, / Ml, and the cells were cultured in serum-free DMEM medium for 48 hours. After the incubation, the supernatant of each well was collected and the amount (쨉 g / ml) of the newly synthesized MMP-1 was measured using an MMP-1 assay kit (Amersham, USA) And the results are shown in Table 4 below. At this time, TGF-beta (10 mg / ml, Roche, USA) was used as a positive control for the inhibition rate of MMP-1 production.

Figure pat00001

Figure pat00001

시료
농도
(㎍/㎖)
sample
density
(占 퐂 / ml)
MMP-1 생성 억제율(%)Inhibition rate of MMP-1 production (%)
홍삼 추출물Red ginseng extract 진세노사이드 RdGin Senocide Rd 진세노사이드
Rb2
Gin Senocide
Rb2
진세노사이드 Rd + Rb2Gin Senocide Rd + Rb2 Gins(Rd+Rb2=2:1) : 죽여추출물Gins (Rd + Rb2 = 2: 1): Kill the extract TGF-βTGF-beta
1:11: 1 2:12: 1 3:13: 1 5:15: 1 1:11: 1 1:51: 5 1:101:10 5050 9.79.7 16.916.9 12.812.8 14.014.0 25.425.4 18.718.7 17.117.1 27.627.6 29.229.2 26.626.6 21.421.4 100100 13.413.4 25.725.7 18.918.9 20.920.9 47.547.5 44.844.8 33.933.9 48.048.0 48.748.7 47.747.7 48.648.6 500500 24.924.9 44.644.6 36.736.7 43.243.2 63.363.3 59.959.9 45.445.4 65.965.9 67.167.1 64.264.2 64.764.7 10001000 37.637.6 56.856.8 44.544.5 57.357.3 82.182.1 81.381.3 58.558.5 83.483.4 85.585.5 82.682.6 83.283.2

상기 표 4의 결과에서 보는 바와 같이, 진세노사이드 Rd와 Rb2를 단독으로 적용한 경우보다 진세노사이드 Rd와 Rb2를 혼합해 적용한 시료가 MMP-1 생성 억제율 효과가 더 높았다. 진세노사이드 Rd와 Rb2를 2:1로 혼합한 시료에 죽여추출물을혼합한 경우 대조군 TGF-β 보다도 우수한 경향의 효과를 보여주었다.
As shown in the results of Table 4 above, the effect of inhibiting the MMP-1 production was higher in the case of mixing ginsenoside Rd and Rb2 than when using ginsenoside Rd and Rb2 alone. When the extract was mixed with 2: 1 mixture of ginsenoside Rd and Rb2, the effect of TGF-β was better than that of control TGF-β.

시험예Test Example 4: 세포독성시험 4: Cytotoxicity test

섬유아세포를 10% FBS를 첨가한 IMDM 배지에 5×105의 세포농도로 접종하여 37℃, 5% CO2배양기에서 24시간 동안 배양하였다. 배양 후 배지를 제거하고 제조예 1과 2에서 제조한 진세노사이드 Rd와 Rb2 그리고 혼합물, 이 혼합물에 죽여 추출물을 혼합한 혼합물을 최종 농도가 50, 100, 500, 1000㎍/㎖가 되도록 디메틸설폭시드에 희석하여 제조한 희석용액을 처리하여 24시간 배양한 후에 MTT(3-[4,5-dimethylthiazol-2yl]-2,5-diphenyltetrazolium boromide, Sigma, U.S.A.)용액을 각 well에 100㎕씩 첨가한 후(3㎎/㎖) 4시간 동안 더 배양하였다. 이후 상층액을 제거하고, 150㎕의 디메틸설폭시드를 첨가한 후, 30분간 shaking하여 생성된 formazan을 녹여 multimicroplate reader(Molecular device Spectra max190)를 이용하여 540nm에서 흡광도를 측정하였다. 세포생존율은 아래의 식에 따라 계산하였으며 그 결과는 하기의 표 5에 나타내었다.
Fibroblasts were inoculated into IMDM medium supplemented with 10% FBS at a cell concentration of 5 × 10 5 cells and cultured in a 5% CO 2 incubator at 37 ° C. for 24 hours. After the culture, the culture medium was removed, and the mixture of the ginsenosides Rd and Rb2 prepared in Preparation Examples 1 and 2, and the mixture obtained by killing this mixture and the mixture of the extracts was added to a final concentration of 50, 100, 500 and 1000 μg / After incubation for 24 hours, 100 μl of MTT (3- [4,5-dimethylthiazol-2yl] -2,5-diphenyltetrazolium boromide, Sigma, USA) was added to each well (3 mg / ml) for 4 hours. After removing the supernatant, 150 μl of dimethylsulfoxide was added, and the resulting formazan was shaken by shaking for 30 minutes. Absorption was measured at 540 nm using a multimicroplate reader (Molecular device Spectra max 190). Cell viability was calculated according to the following equation and the results are shown in Table 5 below.

세포 생존율(%)=시료첨가군의 흡광도 / 대조군의 흡광도 × 100
Cell survival rate (%) = absorbance of sample-added group / absorbance of control group 100

시료
농도
(㎍/㎖)
sample
density
(占 퐂 / ml)
세포 생존율(%)Cell survival rate (%)
홍삼
추출물
Red ginseng
extract
진세노사이드 RdGin Senocide Rd 진세노사이드 Rb2Ginsenoside Rb2 진세노사이드 Rd + Rb2Gin Senocide Rd + Rb2 Gins(Rd+Rb2=2:1) : 죽여추출물Gins (Rd + Rb2 = 2: 1): Kill the extract
1:11: 1 2:12: 1 3:13: 1 5:15: 1 1:11: 1 1:51: 5 1:101:10 00 100100 100100 100100 100100 100100 100100 100100 100100 100100 100100 5050 100100 100100 100100 100100 100100 100100 100100 100100 100100 100100 100100 100100 100100 100100 100100 100100 100100 100100 100100 100100 100100 500500 99.899.8 100100 100100 100100 100100 100100 100100 100100 100100 100100 10001000 98.698.6 100100 99.499.4 99.799.7 100100 100100 100100 100100 100100 100100

상기 표 5의 결과에서 보는 바와 같이, 진세노사이드 Rd, Rb2 그리고 진세노사이드 Rd와 Rb2, 죽여추출물을 혼합해 적용한 시료 모두 1000㎍/㎖ 농도에서 세포 독성이 없는 것으로 확인되었다.
As shown in the results of Table 5, it was confirmed that the samples which were mixed with the ginsenosides Rd, Rb2, and ginsenosides Rd and Rb2, and the extracts were not cytotoxic at the concentration of 1000 μg / ml.

실시예Example 1 : 크림 제조 1: Cream production

본 발명의 진세노사이드 Rd와 Rb2 혼합물 및 죽여추출물을 함유하는 화장료의 피부 주름 개선효과와 피부안전성에 대한 임상시험을 위해 하기 표 6의 조성에 따라 크림을 제조하였다.
Creams were prepared according to the composition of Table 6 below for the clinical test of skin wrinkle-reducing effect and skin safety of cosmetic compositions containing the mixture of ginsenosides Rd and Rb2 of the present invention and kiss extract.

비교예Comparative Example 1 ~ 3 : 크림 제조 1 ~ 3: Cream production

하기의 표 6의 조성과 같이 진세노사이드 Rd와 Rb2의 2:1 혼합물만을 함유하거나, 홍삼추출물만을 함유하거나, 정제수로 대체한 크림을 제조하여 비교예로 하였다.
A cream containing only a 2: 1 mixture of ginsenoside Rd and Rb2, containing only red ginseng extract or replaced with purified water was prepared as a comparative example as shown in the following Table 6.

성 분ingredient 함량(중량%)Content (% by weight) 실시예 1Example 1 비교예 1Comparative Example 1 비교예 2Comparative Example 2 비교예 3Comparative Example 3 진세노사이드 (Rd+Rb2)Ginsenoside (Rd + Rb2) 2.02.0 2.02.0 -- -- 죽여추출물Kill Extract 10.010.0 -- -- -- 홍삼추출물Red ginseng extract -- -- 4.54.5 -- 친유형 모노스테아린산글리세린Pro-type glycerin monostearate 2.02.0 2.02.0 2.02.0 2.02.0 스테아릴알콜Stearyl alcohol 2.22.2 2.22.2 2.22.2 2.22.2 스테아린산Stearic acid 1.51.5 1.51.5 1.51.5 1.51.5 밀납Wax 1.01.0 1.01.0 1.01.0 1.01.0 폴리솔베이트 60Polysorbate 60 1.51.5 1.51.5 1.51.5 1.51.5 솔비탄스테아레이트Sorbitan stearate 0.60.6 0.60.6 0.60.6 0.60.6 정화식물유Purified vegetable oil 1.01.0 1.01.0 1.01.0 1.01.0 스쿠알란Squalane 3.03.0 3.03.0 3.03.0 3.03.0 광물유Mineral oil 5.05.0 5.05.0 5.05.0 5.05.0 트리옥타노인Trioctanoin 5.05.0 5.05.0 5.05.0 5.05.0 디메치콘Dimethicone 1.01.0 1.01.0 1.01.0 1.01.0 소듐마그네슘실리케이트Sodium magnesium silicate 0.10.1 0.10.1 0.10.1 0.10.1 글리세린glycerin 5.05.0 5.05.0 5.05.0 5.05.0 베타인Betaine 3.03.0 3.03.0 3.03.0 3.03.0 트리에탄올아민Triethanolamine 1.01.0 1.01.0 1.01.0 1.01.0 소듐히아루로네이트Sodium hyaruronate 4.04.0 4.04.0 4.04.0 4.04.0 방부제,향,색소Preservative, fragrance, pigment 미량a very small amount 미량a very small amount 미량a very small amount 미량a very small amount 정제수Purified water 잔량Balance 잔량Balance 잔량Balance 잔량Balance 합계Sum 100100 100100 100100 100100

시험예Test Example 5: 피부주름 개선 효과 5: Skin wrinkle improvement effect

본 발명의 진세노사이드 Rd와 Rb2, 죽여추출물을 함유하는 화장료 조성물의 피부주름 개선 효과를 건강한 35세에서 50세의 여성 60명을 대상으로 측정하였다. 먼저, 네 그룹으로 나누고, A 그룹에는 실시예 1을, B 그룹에는 비교예 1을, C 그룹에는 비교예 2을, D 그룹에는 비교예 3의 제형을 안면부에 하루 2회씩 (아침 및 저녁) 3개월간 도포하였다. 3개월 후 주름의 개선 정도를 피험자의 설문 및 주름의 영상 분석을 통해 평가하였다. The skin wrinkle improving effect of the cosmetic composition containing the ginsenosides Rd and Rb2 and the extract of the present invention was measured in 60 healthy women aged 35 to 50 years. First, Example 1 was applied to Group A, Comparative Example 1 was applied to Group B, Comparative Example 2 was applied to Group C, and Formulations of Comparative Example 3 were applied to the face portion twice a day (morning and evening) 3 months. After 3 months, the improvement of wrinkles was evaluated by image analysis of questionnaires and wrinkles.

피험자의 설문은 사용전과 비교하여 개선 없음, 약간의 개선, 중등도의 개선, 상당한 개선의 4단계로 판단하였으며 결과를 하기의 표 7에 나타내었다.The subjects' questionnaires were judged to be four stages of no improvement, slight improvement, moderate improvement, and considerable improvement as compared with before use. The results are shown in Table 7 below.

주름의 영상분석에 의한 평가는 실험이 시작되기 전 눈 밑의 레플리카를 채취하고 실험이 종료된 직후의 레플리카를 눈 밑의 동일 부위에서 채취하여 영상분석을 통해 주름의 2차원적 분석으로 주름의 밀도를 측정하였다. 영상분석에 의한 주름 밀도의 측정 결과는 사용 전과 비교한 주름 밀도에 대한 감소율로 하기의 표 8에 나타내었다.
The evaluation of the wrinkles by the image analysis was performed by taking replica under the eyes before the start of the experiment and collecting the replica immediately after the end of the experiment from the same area under the eyes and by analyzing the image by two dimensional analysis of the wrinkles, Were measured. The results of the measurement of the wrinkle density by image analysis are shown in Table 8 below as a reduction rate relative to the wrinkle density before use.

시료sample 개선없음No improvement 약간의 개선Slight improvement 중등도의 개선Moderate improvement 상당한 개선A significant improvement 실시예 1Example 1 22 33 55 55 비교예 1Comparative Example 1 44 55 44 22 비교예 2Comparative Example 2 1010 44 1One -- 비교예 3Comparative Example 3 1111 44 -- --

시료sample 주름 밀도 감소율 (%)Wrinkle density reduction rate (%) 실시예 1Example 1 4949 비교예 1Comparative Example 1 3636 비교예 2Comparative Example 2 1818 비교예 3Comparative Example 3 1111

상기 표 7 및 8로부터, 진세노사이드 Rd와 Rb2 혼합물 및 죽여추출물을 함유한 실시예 1의 피부주름 개선 효과가 매우 우수함을 알 수 있었다.
From Tables 7 and 8, it can be seen that the effect of improving the skin wrinkles of Example 1 containing a mixture of ginsenoside Rd and Rb2 and killing extract was excellent.

시험예Test Example 6: 피부 보습 개선 효과 6: Skin moisturizing effect

본 발명의 진세노사이드 Rd와 Rb2, 죽여추출물을 함유하는 화장료 조성물의 피부 보습 개선 효과를 건강한 35세에서 50세의 여성 60명을 대상으로 측정하였다.먼저, 네 그룹으로 나누고, A 그룹에는 실시예 1을, B 그룹에는 비교예 1을, C 그룹에는 비교예 2을, D 그룹에는 비교예 3의 제형을 안면부에 하루 2회씩 (아침 및 저녁) 4주간 도포하였다. 실험이 시작되기 전, 측정하고자 하는 2부위를 정하고 피부의 수분량을 각각 3회에 걸쳐 측정한 후 4주간 도포(2회/일) 한 후, 피부 수분함량 측정장치를 이용하여 각질층 바로 아래의 표피층의 수분을 측정하였다. 상기 측정결과를 표 9에 정리하였다.
The skin moisturizing effect of the cosmetic composition containing the ginsenosides Rd and Rb2 and the extract of Killenia rata according to the present invention was measured in 60 healthy women aged 35 to 50. Firstly divided into four groups and group A Example 1 was applied to Group B, Comparative Example 1 was applied to Group B, Comparative Example 2 was applied to Group C, and Formulations of Comparative Example 3 were applied to the face group for 4 weeks twice a day (morning and evening). Before the start of the experiment, the two sites to be measured were determined, and the moisture content of the skin was measured three times and then applied (2 times / day) for 4 weeks. Then, using the skin moisture content measuring device, Was measured. The measurement results are summarized in Table 9.

시료sample 초기(D0) 평균 The initial (D0) average 4주(D28) 평균4 weeks (D28) Average 수분 증가량(%)Moisture Increase (%) 실시예 1Example 1 3535 4545 28.628.6 비교예 1Comparative Example 1 3636 4444 22.222.2 비교예 2Comparative Example 2 3434 3939 14.714.7 비교예 3Comparative Example 3 3636 3939 8.38.3

상기 표 9로부터, 진세노사이드 Rd와 Rb2 혼합무 및 죽여추출물을 함유한 실시예 1의 피부 보습 개선 효과가 매우 우수함을 알 수 있었다.
From Table 9, it can be seen that the skin moisturizing effect of Example 1 containing ginsenoside Rd and Rb2 mixed extract and killed extract was excellent.

시험예Test Example 7: 제형의 안정성 실험 7: Stability test of formulation

본 발명의 화장료 조성물의 제형의 안정성 시험을 위하여, 상기 실시예와 비교예를 45℃로 일정하게 유지되는 항온조에서 불투명 초자 용기에 담아 12주동안 보관하고 또한 4℃로 일정하게 유지되는 완전히 차광된 냉장고 내에서 불투명 초자 용기에 담아 12주 동안 보관한 후, 변색 및 변취, 분리정도를 비료 측정하여 그 결과를 하기 표 10에 기재하였다. 이때 제품 변색 및 변취, 분리정도를 다음의 6등급으로 분류하여 평가하였다.
For the stability test of the formulation of the cosmetic composition of the present invention, the above Examples and Comparative Examples were stored in an opaque glass container in a thermostat kept constant at 45 캜 for 12 weeks, and kept at 4 캜 for a completely shielded After being stored for 12 weeks in an opaque glazed container in a refrigerator, the degree of discoloration, separation, and separation were measured, and the results are shown in Table 10 below. At this time, the degree of discoloration, separation and separation of the product was classified into the following six grades and evaluated.

0:변화없음 1:극히 조금 분리(변색, 변취)0: No change 1: Very little separation (discoloration, change)

2:조금 분리(변색, 변취) 3:조금 심하게 분리(변색, 변취)2: little separation (discoloration, discoloration) 3: slight separation (discoloration, discoloration)

4:심하게 분리(변색, 변취) 5:극히 심하게 분리(변색, 변취)
4: Severely separated (discolored, detached) 5: Severely separated (discolored, detached)

구 분division 제형의 안정성Stability of formulation 실시예 1Example 1 비교예 1Comparative Example 1 비교예 2Comparative Example 2 비교예 3Comparative Example 3 45℃45 ° C 4℃4 ℃ 45℃45 ° C 4℃4 ℃ 45℃45 ° C 4℃4 ℃ 45℃45 ° C 4℃4 ℃ 변색discoloration 00 00 00 00 00 00 00 00 변취Fling 00 00 00 00 00 00 00 00 분리detach 00 00 00 00 00 00 00 00

상기 표 10으로부터 알 수 있는 바와 같이, 실시예와 비교예는 45℃와 4℃에서 변색이나 변취, 분리 현상이 거의 없이 안정하였고, 진세노사이드 Rd와 Rb2 및 죽여추출물이 제형 내에서 안정한 상태로 존재함을 나타낸다.As can be seen from Table 10, the examples and the comparative examples were stable at 45 ° C and 4 ° C with almost no discoloration, separation, and separation, and the ginsenosides Rd and Rb2 and the killed extract were stable in the formulation .

본 발명의 진세노사이드 Rd와 Rb2 및 죽여추출물을 함유하는 화장료 조성물은 하기의 여러 제형으로 제조될 수 있다.
The cosmetic composition containing the ginsenosides Rd and Rb2 of the present invention and the killed extract can be prepared in the following various formulations.

실시예Example 2: 유연 화장수  2: Flexible lotion

하기 표 11에 기재된 조성으로 진세노사이드 Rd와 Rb2 및 죽여추출물을 함유하는 유연 화장수를 통상의 방법으로 제조하였다.
Flexible lotions containing ginsenosides Rd and Rb2 and killing extracts in the compositions listed in Table 11 below were prepared in a conventional manner.

성분ingredient 함량(중량%)Content (% by weight) 진세노사이드 Rd+Rb2(2:1)Ginsenoside Rd + Rb2 (2: 1) 1.51.5 죽여추출물Kill Extract 7.57.5 1,3-부틸렌 글리콜1,3-butylene glycol 5.25.2 올레일알코올Oleyl alcohol 1.51.5 에탄올ethanol 3.23.2 폴리솔베이트 20Polysorbate 20 3.23.2 벤조페논-9Benzophenone-9 2.02.0 카르복실비닐폴리머Carboxyl vinyl polymer 1.01.0 글리세린glycerin 3.53.5 incense 미량a very small amount 방부제antiseptic 미량a very small amount 정제수Purified water 잔량Balance system 100100

실시예Example 3: 영양 화장수( 3: Nourishing lotion ( 밀크로션Milk lotion ))

하기 표 12에 기재된 조성으로 진세노사이드 Rd와 Rb2 및 죽여추출물을 함유하는 영양 화장수를 통상의 방법으로 제조하였다.
Nutritional lotions containing ginsenosides Rd and Rb2 and killing extracts in the compositions listed in Table 12 below were prepared in a conventional manner.

성분ingredient 함량 (중량%)Content (% by weight) 진세노사이드 Rd+Rb2(2:1)Ginsenoside Rd + Rb2 (2: 1) 3.03.0 죽여추출물Kill Extract 15.015.0 글리세린glycerin 5.15.1 프로필렌글리콜Propylene glycol 4.24.2 토코페릴아세테이트Tocopheryl acetate 3.03.0 유동파라핀Liquid paraffin 4.64.6 트리에탄올아민Triethanolamine 1.01.0 스쿠알란Squalane 3.13.1 마카다미아너트오일Macadamia nut oil 2.52.5 폴리솔베이트 20Polysorbate 20 1.61.6 솔비탄세스퀴롤레이트Sorbitan sesquiterate 1.61.6 프로필파라벤Propylparaben 0.60.6 카르복실비닐폴리머Carboxyl vinyl polymer 1.51.5 incense 미량a very small amount 방부제antiseptic 미량a very small amount 정제수Purified water 잔량Balance system 100100

실시예Example 4:  4: 에멀젼emulsion 베이스  Base

하기 표 13에 기재된 조성으로 진세노사이드 Rd와 Rb2 혼합물 및 죽여추출물을 함유하는 에멀젼 베이스를 통상의 방법으로 제조하였다.
Emulsion bases containing mixtures of ginsenosides Rd and Rb2 and killing extracts in the compositions listed in Table 13 below were prepared in a conventional manner.

성분ingredient 함량(중량%) Content (% by weight) 글리세린glycerin 3.003.00 디소듐이디티에이Disodium iodide 0.020.02 폴리글리세릴-3-메틸글루코스 디스테아레이트Polyglyceryl-3-methylglucoside distearate 1.501.50 세테아릴알코올Cetearyl alcohol 0.500.50 카프릴릭/카프릭트리글리세라이드Caprylic / capric triglyceride 7.007.00 폴리아크릴아마이드 & C13-14이소파라핀 & 라우레스-7Polyacrylamide & C13-14 Isoparaffin & Laureth-7 0.600.60 진세노사이드 Rd+Rb2(2:1)Ginsenoside Rd + Rb2 (2: 1) 3.03.0 죽여추출물Kill Extract 15.015.0 향, 방부제Incense, preservative 미량a very small amount 정제수Purified water 잔량Balance system 100100

실시예Example 5:  5: 맛사지Massage 크림 cream

하기 표 14에 기재된 조성으로 진세노사이드 Rd와 Rb2 혼합물 및 죽여추출물을 함유하는 맛사지 크림을 통상의 방법으로 제조하였다.
Massage creams containing mixtures of ginsenosides Rd and Rb2 and killing extracts in the compositions listed in Table 14 below were prepared in a conventional manner.

성 분ingredient 함량(중량%)Content (% by weight) 진세노사이드 Rd+Rb2(2:1)Ginsenoside Rd + Rb2 (2: 1) 3.03.0 죽여추출물Kill Extract 15.015.0 글리세린glycerin 4.04.0 바셀린vaseline 3.53.5 트리에탄올아민Triethanolamine 0.50.5 유동파라핀Liquid paraffin 24.024.0 스쿠알란Squalane 3.03.0 밀납Wax 2.12.1 토코페릴아세테이트Tocopheryl acetate 0.10.1 폴리솔베이트 60Polysorbate 60 2.42.4 카르복실비닐폴리머Carboxyl vinyl polymer 1.01.0 솔비탄세스퀴올레이트Sorbitan sesquioleate 2.32.3 incense 미량a very small amount 방부제antiseptic 미량a very small amount 정제수Purified water 잔량Balance system 100100

실시예Example 6:팩 6: Pack

하기 표 15에 기재된 조성으로 진세노사이드 Rd와 Rb2 및 죽여추출물을 함유하는 팩을 통상의 방법으로 제조하였다.
A pack containing ginsenosides Rd and Rb2 and killing extracts in the compositions described in Table 15 below was prepared in a conventional manner.

성 분ingredient 함량(중량%)Content (% by weight) 진세노사이드 Rd+Rb2(2:1)Ginsenoside Rd + Rb2 (2: 1) 4.54.5 죽여추출물Kill Extract 22.522.5 에틸알코올Ethyl alcohol 3.03.0 EDTA-2NaEDTA-2Na 0.020.02 프로필렌 글리콜Propylene glycol 5.15.1 글리세린glycerin 4.54.5 카보폴Carbopol 1.01.0 폴리옥사이드Polyoxide 0.10.1 방부제antiseptic 미량a very small amount incense 미량a very small amount 정제수Purified water 잔량Balance system 100100

이상으로 본 발명의 특정한 부분을 상세히 기술하였는 바, 당업계의 통상의 지식을 가진 자에게 있어서 이러한 구체적인 기술은 단지 구현예일 뿐이며, 이에 본 발명의 범위가 제한되는 것이 아닌 점은 명백하다. 따라서, 본 발명의 실질적인 범위는 첨부된 청구항과 그의 등가물에 의하여 정하여 진다고 할 것이다.While the present invention has been particularly shown and described with reference to exemplary embodiments thereof, it is to be understood that the technical scope of the present invention is not limited to the disclosed exemplary embodiments. Accordingly, the actual scope of the present invention will be defined by the appended claims and their equivalents.

Claims (6)

진세노사이드 Rd, Rb2의 혼합물 및 죽여추출물을 유효성분으로 함유하는 주름개선 및 보습용 화장료 조성물.A cosmetic composition for improving and moisturizing wrinkles containing a mixture of ginsenosides Rd and Rb2 and killed extract as an active ingredient. 제1항에 있어서, 상기 진세노사이드 Rd, Rb2의 혼합물은 진세노사이드 Rd, Rb2가 각각 2:1의 중량비로 혼합되는 것임을 특징으로하는 주름개선 및 보습용 화장료 조성물.The cosmetic composition according to claim 1, wherein the mixture of ginsenosides Rd and Rb2 is a mixture of ginsenosides Rd and Rb2 in a weight ratio of 2: 1, respectively. 제1항에 있어서, 상기 진세노사이드 Rd, Rb2의 혼합물과 죽여추출물은 1:1~10의 중량비로 함유되는 것임을 특징으로 하는 주름개선 및 보습용 화장료 조성물.The cosmetic composition for improving and improving wrinkles according to claim 1, wherein the mixture of ginsenosides Rd and Rb2 and the killed extract are contained in a weight ratio of 1: 1 to 10. 제1항에 있어서, 상기 진세노사이드 Rd, Rb2 및 죽여추출물은 나노캡슐화, 마이크로캡슐화 또는 나노좀화된 것임을 특징으로하는 주름개선 및 보습용 화장료 조성물.[Claim 3] The cosmetic composition according to claim 1, wherein the ginsenosides Rd, Rb2 and kiss extract are nanocapsulated, microencapsulated or nano-sized. 제1항 내지 제4항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 진세노사이드 Rd, Rb2의 혼합물과 죽여추출물은 화장료조성물 전체중량에 대하여 각각 0.1~15중량% 함유되는 것임을 특징으로하는 주름개선 및 보습용 화장료 조성물.The cosmetic composition according to any one of claims 1 to 4, wherein the mixture of ginsenosides Rd and Rb2 and the killed extract are contained in an amount of 0.1 to 15% by weight based on the total weight of the cosmetic composition, Cosmetic composition. 제1항 내지 제4항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 화장료 조성물은 스킨로션, 스킨 소프너, 스킨토너, 아스트린젠트, 로션, 밀크로션, 모이스처 로션, 영양로션, 맛사지 크림, 영양크림, 모이스처 크림, 핸드크림, 에센스, 팩, 비누, 샴푸, 클렌징폼, 클렌징로션, 클렌징크림, 바디로션, 바디클렌저, 유액, 프레스파우더, 루스파우더 및 아이섀도로 구성된 그룹에서 선택된 어느 하나의 제형으로 이루어지는 것임을 특징으로 하는 주름개선 및 보습용 화장료 조성물.The cosmetic composition according to any one of claims 1 to 4, wherein the cosmetic composition is at least one selected from the group consisting of a skin lotion, a skin softener, a skin toner, an astringent, a lotion, a milk lotion, a moisturizing lotion, Characterized in that it consists of any one of the formulations selected from the group consisting of creams, essences, packs, soaps, shampoos, cleansing foams, cleansing lotions, cleansing creams, body lotions, body cleansers, emulsions, press powders, loose powders and eye shadows (EN) Cosmetic composition for improvement and moisturizing.
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