KR20150070102A

KR20150070102A - mGluR5 수용체 활성의 조절제로서 에틴일 유도체

Info

Publication number: KR20150070102A
Application number: KR1020157006701A
Authority: KR
Inventors: 게오르그 재슈케; 로타르 린데만; 안토니오 리치; 다니엘 뤼어; 하인즈 스타들러; 에릭 비에이라
Original assignee: 에프. 호프만-라 로슈 아게
Priority date: 2012-10-18
Filing date: 2013-10-15
Publication date: 2015-06-24
Also published as: CR20150158A; EP2909178A1; TWI504593B; ES2599507T3; AR093029A1; MA38010A1; EP2909178B1; HK1206715A1; WO2014060384A1; CA2879489A1; AU2013331782A1; CN104603110B; CL2015000890A1; IL237217A0; AU2013331782B2; NZ703537A; EA201590676A1; JP6263542B2; ZA201500343B; JP2015534961A

Abstract

본 발명은 하기 화학식 I의 에틴일 유도체, 또는 이의 약학적으로 허용되는 산부가 염, 이의 라세미체 혼합물, 또는 이의 상응하는 거울상이성질체 및/또는 광학이성질체 및/또는 입체이성질체에 관한 것이다:
[화학식 I]

상기 식에서,
Y는 N 또는 CH이고;
R¹은 플루오로 또는 클로로이다.
놀랍게도, 현재 화학식 I의 화합물이 불안증, 통증, 우울증, 취약 X 증후군, 자폐 범주성 장애, 파킨슨병 및 위식도 역류병(GERD)의 치료에 사용되는 대사자극성 글루타메이트 수용체 길항제(음성 알로스테릭 조절제)임이 발견되었다.

Description

mGluR5 수용체 활성의 조절제로서 에틴일 유도체{ETHYNYL DERIVATIVES AS MODULATORS OF MGLUR5 RECEPTOR ACTIVITY}

본 발명은 하기 화학식 I의 에틴일 유도체, 또는 이의 약학적으로 허용되는 산부가 염, 또는 이의 라세미체 혼합물, 또는 이의 상응하는 거울상이성질체 및/또는 광학이성질체 및/또는 입체이성질체에 관한 것이다:

[화학식 I]

상기 식에서,

Y는 N 또는 CH이고;

R¹은 플루오로 또는 클로로이다.

놀랍게도, 현재 화학식 I의 화합물이 대사자극성 글루타메이트 수용체 길항제(NAM = 음성 알로스테릭 조절제)임이 발견되었다. 화학식 I의 화합물은 가치있는 치료적 특성을 가짐으로써 구별된다. 이는 mGluR5 수용체 매개 장애의 치료 또는 예방에 사용될 수 있다.

중추 신경계(CNS)에서 자극의 전달은 뉴런에 의해 전달되는 신경전달물질과 신경수용체의 상호 작용에 의해 발생한다.

글루타메이트는 뇌에서 주요 흥분성 신경전달물질이고 다양한 CNS 기능에서 고유의 역할을 한다. 글루타메이트-의존 자극 수용체는 2개의 주요 군으로 나누어진다. 이온성 수용체로 명명된 제1주요 군은 리간드-조절된 이온 채널을 형성한다. 대사자극성 글루타메이트 수용체(mGluR)는 제2주요 군에 속하고, 더욱이 G-단백질 커플링된 수용체 부류에 속한다.

현재, 상기 mGluR의 8개의 상이한 구성원이 공지되어 있고, 이들 중 일부는 아류형을 가진다. 이들의 서열 상동성, 신호 전달 메카니즘 및 작용제 선택성에 따라 상기 8개 수용체를 3개의 하위군으로 세분할 수 있다:

mGluR1 및 mGluR5는 군 I에 속하고, mGluR2 및 mGluR3은 군 II에 속하고, mGluR4, mGluR6, mGluR7 및 mGluR8은 군 III에 속한다.

군 I에 속하는 대사자극성 글루타메이트 수용체의 음성 알로스테릭 조절제는 급성 및/또는 만성 신경 장애, 예컨대 파킨슨병, 취약 X 증후군, 자폐 장애, 인지 장애 및 기억 결함, 뿐만 아니라 만성 및 급성 통증 및 위식도 역류병(GERD)의 치료 또는 예방에 사용될 수 있다.

이와 관련하여 다른 치료가능한 적응증은 우회 수술 또는 이식으로 인한 제한된 뇌 기능, 불충분한 뇌 혈액 공급, 척수 손상, 두부 손상, 임신으로 인한 저산소증, 심장 마비 및 저혈당증이다. 또한, 치료가능한 적응증은 국소 빈혈, 헌팅톤 무도병, 근위축성 측삭 경화증(ALS), AIDS로 인한 치매, 안구 손상, 망막증, 특발성 파킨슨병 또는 약제로 인한 파킨슨병뿐만 아니라 글루타메이트-결핍 기능으로 이어지는 증상, 예컨대 근육 연축, 경련, 편두통, 요실금, 니코틴 중독, 아편 중독, 불안증, 구토, 운동장애 및 우울증이다.

mGluR5에 의해 완전히 또는 부분적으로 매개되는 장애는 예를 들어, 신경계의 급성, 외상성 및 만성 퇴행 과정, 예컨대 알츠하이머병, 노인성 치매, 파킨슨병, 헌팅톤 무도병, 근위축성 측삭 경화증 및 다발성 경화증, 정신 질환, 예컨대 조현병 및 불안증, 우울증, 통증 및 약물 의존증이다(문헌[Expert Opin. Ther. Patents (2002), 12, (12)]).

선택적 mGluR5 길항제는 mGluR5 수용체 활성화의 감소가 바람직한 장애, 예컨대 불안증, 통증, 우울증, 취약 X 증후군, 자폐 범주성 장애, 파킨슨병 및 위식도 역류병(GERD)의 치료에 특히 유용하다.

본 발명의 목적은 화학식 I의 화합물 및 이의 약학적으로 허용되는 염, 약학적 활성 물질로서 상기 화합물 및 이의 제조이다. 본 발명의 추가적 목적은 본 발명에 따른 화합물을 기초로 한 약제 및 이의 제조, 뿐만 아니라 mGluR5 수용체(NAM) 매개 장애, 예컨대 불안증, 통증, 우울증, 취약 X 증후군, 자폐 범주성 장애, 파킨슨병 및 위식도 역류병(GERD)의 제어 또는 예방에서 각각 당해 약제의 제조를 위한 상기 화합물의 용도이다.

본 발명의 한 실시양태는 Y가 N인, 화학식 I의 화합물이다.

상기 화합물은 5-(3-플루오로-페닐에틴일)-피리미딘-2-카르복시산 tert-부틸-에틸-아미드 또는 5-(3-클로로-페닐에틴일)-피리미딘-2-카르복시산 tert-부틸-에틸-아미드이다.

또한, 본 발명의 한 실시양태는 Y가 CH인, 화학식 I의 화합물이다.

상기 화합물은 5-(3-플루오로-페닐에틴일)-피리딘-2-카르복시산 tert-부틸-에틸-아미드 또는 5-(3-클로로-페닐에틴일)-피리딘-2-카르복시산 tert-부틸-에틸-아미드이다.

본 발명의 특정 실시양태는 하기 화합물로 이루어진다:

5-(3-플루오로-페닐에틴일)-피리딘-2-카르복시산 tert-부틸-에틸-아미드;

5-(3-클로로-페닐에틴일)-피리딘-2-카르복시산 tert-부틸-에틸-아미드;

5-(3-플루오로-페닐에틴일)-피리미딘-2-카르복시산 tert-부틸-에틸-아미드; 및

5-(3-클로로-페닐에틴일)-피리미딘-2-카르복시산 tert-부틸-에틸-아미드.

본 발명의 것과 유사한 화합물은 일반적으로 mGluR5 수용체의 양성 알로스테릭 조절제로서 개시되어 있다. 놀랍게도, 매우 강한 mGluR5 길항제가 mGluR5 양성 알로스테릭 조절제를 대신하여 수득됨이 발견되었고, 이는 양성 알로스테릭 조절제와 비교된 경우, 완전히 반대의 약리학을 가진다.

양성- 및 음성 알로스테릭 조절제 사이의 주요 차이점을 도 1에서 찾아볼 수 있다. mGluR5 양성 알로스테릭 조절제(PAM)는 고정된 농도의 글루타메이트의 존재하에 증가된 수용체 활성(Ca² ⁺가동화)을 야기하는 반면, 알로스테릭 길항제(음성 알로스테릭 조절제, NAM)는 수용체 활성화의 감소를 야기한다. 도 1은 동일한 조건하에 NAM 및 PAM의 일반적 행동을 나타낸다. 도 1에서 수용체에 대한 친화도는 PAM에 대해 약 10^-7 M이고 NAM에 대해 10^-7 내지 10^-8 M이다. 또한, 이 값은 방사리간드를 대체하는 결합 분석(= MPEP)을 사용하여 측정될 수 있다(분석 서술 참조).

도 1은 mGluR5 양성 알로스테릭 조절제(PAM) 및 mGluR5 길항제(음성 알로스테릭 조절제 = NAM)의 비교를 나타낸다.

화합물에 의해 언급될 수 있는 적응증은 동일하지 않다. mGluR5-NAM은 과량의 수용체 활성의 감소가 바람직한 적응증, 예컨대 불안증, 통증, 우울증, 취약 X 증후군, 자폐 범주성 장애, 파킨슨병 및 위식도 역류병(GERD)에 대해 유익하다. 다른 한편으로 mGluR5 PAM은 감소된 수용체 활성의 정상화가 바람직한 적응증, 예컨대 정신병, 간질, 조현병, 알츠하이머병 및 관련된 인지 장애, 뿐만 아니라 결절성 경화증에 유용하다.

상기 차이점은 예를 들어 불안증 동물 모델, 예컨대 "래트 보겔 충돌 흡음 시험(rat Vogel conflict drinking test)"에서 실제 나타날 수 있고, 여기서 본 발명의 화합물은 불안 완화 활성을 나타내는 반면, mGluR-PAM은 상기 동물 모델에서 활성을 나타내지 않는다.

생물학적 분석 및 데이터

세포내 Ca ² ⁺ 가동화 분석

인간 mGlu5a 수용체에 대하여 암호화하는 cDNA로 안정되게 형질감염된 단클론 HEK-293 세포주를 생성하고, mGlu5 양성 알로스테릭 조절제(PAM)와 작업하기 위해, 낮은 수용체 발현 수준 및 낮은 구성적 수용체 활성을 가지는 세포주를 선택하여 작용성 대 PAM 활성의 분화를 허용하였다. 세포를 1 mM 글루타민, 10 %(부피/부피) 열-불활성화된 소 태아 혈청, 페니실린/스트렙토마이신, 50 μg/ml 하이그로마이신 및 15 μg/ml 블라스티시딘이 보충된 고 글루코스를 가지는 둘벡코 개질 이글 배지(Dulbecco's Modified Eagle Medium) 중에서 표준 프로토콜(문헌[Freshney, 2000])에 따라 배양하였다(모든 세포 배양 시약 및 항생제는 스위스 바젤 소재의 인비트로젠(Invitrogen)으로부터 입수가능함).

실험 약 24시간 전에, 5 x 10⁴ 세포/웰을 폴리-D-리신 코팅된 흑색/투명한-바닥 96-웰 플레이트에 시딩하였다. 세포를 1시간 동안 37 ℃에서 로딩 완충액(1 x HBSS, 20 mM HEPES) 중의 2.5 μM 플루오(Fluo)-4AM으로 로딩하고 로딩 완충액으로 5회 세척하였다. 세포를 기능적 약물 스크리닝 시스템 7000(하마마츠(Hamamatsu), 프랑스 파리 소재)에 옮기고, 37 ℃에서 시험 화합물의 11개의 절반 대수적 연속 희석을 추가하고 세포를 형광의 온라인 기록하에 10 내지 30 분 동안 항온처리하였다. 이러한 사전 항온처리 단계 후, 작용제 L-글루타메이트를 형광의 온라인 기록하에 EC₂₀에 상응하는 농도(전형적으로 약 80 μM)로 세포에 첨가하고, 세포의 민감성의 매일 변화를 고려하기 위해 각 실험의 바로 전에 글루타메이트의 EC₂₀을 글루타메이트의 완전 용량-반응 곡선의 기록하에 측정하였다.

반응을 기저를 뺀 형광(즉, L-글루타메이트를 첨가하지 않은 형광)의 피크 증가로서 측정하고, L-글루타메이트의 농도 포화에 의해 수득된 최대 자극 효과로 표준화하였다. 레벤부르그 마르콰르트(Levenburg Marquardt) 알고리즘을 사용하는 데이터를 반복적으로 구상하는 곡선 맞춤 프로그램인 XLfit를 사용하여 최대 자극률(%)로 그래프를 구상하였다. 사용된 단일 부위 경쟁 분석 식은 하기 수학식 1이다:

[수학식 1]

y = A +((B-A)/(1+((x/C)D)))

상기 식에서,

y는 최대 자극 효과율(%)이고, A는 최소 y이고, B는 최대 y이고, C는 EC₅₀이고, x는 경쟁 화합물의 농도의 로그10이고, D는 곡선의 기울기(힐 계수)이다.

상기 곡선으로부터 EC₅₀(최대 자극의 ½ 이 달성된 농도), 힐 계수뿐만 아니라 L-글루타메이트의 농도 포화에 의해 수득된 최대 자극 효과의 최대 반응률(%)을 계산하였다.

PAM 시험 화합물을 사용한 사전 항온처리 동안 수득된(즉, L-글루타메이트의 EC₂₀ 농도의 적용 전) 양성 신호는 작용적 활성을 나타내었고, 상기 신호의 부재는 작용적 활성의 결핍을 입증하였다. L-글루타메이트의 EC₂₀ 농도를 첨가한 후 관찰된 신호의 감소는 시험 화합물의 억제 활성을 나타내었다.

하기 실시예의 목록에서 100 nM 이하의 EC₅₀을 가지는 모든 화합물에 상응하는 결과를 나타내었다.

MPEP 결합 분석

결합 실험에 대해, cDNA 암호화 인간 mGlu 5a 수용체를 문헌[Schlaeger and Christensen, Cytotechnology, 15:1-13 (1998)]에 개시된 절차를 사용하여 일시적으로 EBNA 세포에 형질감염시켰다. 세포막 균질액이 해동되는 분석의 날까지 세포막 균질액을 -80 ℃에서 저장하고, 15 mM 트리스-HCl, 120 mM NaCl, 100 mM KCl, 25 mM CaCl₂, 25 mM MgCl₂ 결합 완충액에서 pH 7.4에서 20 μg 단백질/웰의 최종 분석 농도까지 재현탁화 및 폴리트로나이징(polytronising)하였다.

포화 동온선을 1시간 동안 4 ℃에서 12개의 [³H]MPEP의 농도(0.04 내지 100 nM)를 막에 첨가(총 부피: 200 μl)함으로써 측정하였다. 경쟁 실험을 [³H]MPEP의 고정된 농도(2 nM)로 수행하고 시험 화합물의 IC₅₀ 값을 11개의 농도(0.3 내지 10,000 nM)를 사용하여 평가하였다. 항온처리를 1시간 동안 4 ℃에서 수행하였다.

항온처리의 말에, 막을 필터메이트 96 하비스터(Filtermate 96 harvester, 패커드 바이오사이언스(Packard BioScience))를 사용하여 유니필터(세척 완충제 중 0.1 % PEI에서 1시간 동안 사전 항온처리된 결합된 GF/C 여과기를 갖춘 96-웰 백색 마이크로플레이트, 패커드 바이오사이언스, 미국 코네티컷주 메리든 소재)에 여과시키고 찬 50 mM 트리스-HCl(pH 7.4 완충제)로 3회 세척하였다. 비특이적 결합을 10 μM MPEP의 존재하에 측정하였다. 여과기 상의 방사능을 마이크로신트(microscint) 40(캔베라 패커드 에스에이(Canberra Packard S.A.), 스위스 취리히 소재)(45 μl)의 첨가후에 소광 보정, 및 20분 동안 진탕하면서 패커드 탑-카운트 마이크로플레이트 신틸레이션 계수기 상에 계수하였다(3분).

본 발명의 화합물 대 참조 화합물 1 및 2의 비교

하기 표에서 알 수 있듯이, 본 발명의 화합물(NAM)은 구조적으로 유사한 참조 화합물 1 및 2(PAM)와 비교하여 분명하게 다른 프로필을 나타낸다.

화학식 I의 화합물은 하기 제공된 방법으로, 실시예에 제공된 방법으로, 또는 유사한 방법으로 제조될 수 있다. 개별적인 반응 단계에 대한 적절한 반응 조건은 당업자에게 공지되어 있다. 반응 순서는 반응식에 나타낸 것에 제한되지 않지만, 출발 물질 및 이의 각각의 반응성에 따라 반응 단계의 순서는 자유롭게 변할 수 있다. 출발 물질은 시판중이거나 하기 제공된 방법과 유사한 방법으로, 상세한 설명에 또는 실시예에 언급된 참조문헌에 개시된 방법으로, 또는 당분야에 공지된 방법으로 제조될 수 있다.

본 발명의 화학식 I의 화합물 및 이의 약학적으로 허용되는 염은 당분야에 공지된 방법, 예를 들어 하기 화학식 3의 화합물을 하기 화학식 4의 화합물과 반응시켜 하기 화학식 I의 화합물을 형성하는 단계를 포함하는 하기에 개시된 변형 방법으로 제조될 수 있다:

[화학식 3]

[화학식 4]

[화학식 I]

상기 식에서,

치환기는 상기에 개시된 바와 같다.

또한, 화학식 I의 화합물의 제조는 반응식 1 및 실시예 1 내지 4에 보다 상세히 개시되어 있다.

[반응식 1]

5-브로모-피리딘-2-카르복시산 메틸 에스테르 또는 5-브로모-피리미딘-2-카르복시산 메틸 에스테르(1)를 적절하게 치환된 아릴아세틸렌(2)과 소노가시라(Sonogashira) 커플링한 후에, 염기, 예컨대 LiOH를 사용하여 비누화하여 상응하는 산(3)을 수득하거나 5-브로모-피리딘-2-카르복시산 또는 5-브로모-피리미딘-2-카르복시산(1)을 적절하게 치환된 아릴아세틸렌(2)과 소노가시라 커플링하여 직접 상응하는 산(3)을 수득함으로써 화학식 I의 에틴일-피리딘 또는 에틴일-피리미딘 화합물을 제조할 수 있다. 염기, 예컨대 휘니히 염기(Hunig's Base) 및 펩티드 커플링 시약, 예컨대 TBTU의 존재하에 용매, 예컨대 다이옥산 중에서 상응하는 산(3)을 tert-부틸에틸아민(4)과 반응시키거나, 제자리에 옥살릴 클로라이드 및 DMF(촉매)를 사용하여 용매, 예컨대 다이클로로메탄 중에서 상응하는 산 클로라이드를 제조한 후에, 염기, 예컨대 피리딘의 존재하에 tert-부틸에틸아민(4)과 반응시켜 목적하는 화학식 I의 에틴일 화합물을 수득한다(반응식 1).

화학식 I의 화합물의 약학적으로 허용되는 염은 그 자체로 공지된 방법에 따르고 염으로 전환될 수 있는 화합물의 성질을 고려하여 용이하게 제조될 수 있다. 무기산 또는 유기산, 예컨대 염산, 브롬화수소산, 황산, 질산, 인산, 시트르산, 포름산, 푸마르산, 말레산, 아세트산, 석신산, 타르타르산, 메탄설폰산, p-톨루엔설폰산 등이 염기성 화학식 I의 화합물의 약학적으로 허용되는 염의 형성에 적합하다. 알칼리 금속 또는 알칼리 토금속, 예를 들어 나트륨, 칼륨, 칼슘, 마그네슘 등을 함유하는 화합물인 염기성 아민 또는 염기성 아미노산이 산성 화합물의 약학적으로 허용되는 염의 형성에 적합하다.

또한, 본 발명은 본 발명의 하나 이상의 화합물 및 약학적으로 허용되는 부형제를 함유하는, mGluR5 수용체 매개 장애(NAM), 예컨대 불안증, 통증, 우울증, 취약 X 증후군, 자폐 범주성 장애, 파킨슨병 및 위식도 역류병(GERD)의 치료용 및 예방용 약제에 관한 것이다. 또한, 본 발명은 상기에 서술된 mGluR5 수용체 매개 장애(NAM)의 치료용 및 예방용 약제의 제조를 위한, 본 발명에 따른 화합물 및 이의 약학적으로 허용되는 염의 용도에 관한 것이다.

화합물의 약리학적 활성은 하기 방법을 사용하여 시험되었다:

래트 mGlu 5a 수용체 암호화 cDNA를 문헌[E.-J. Schlaeger and K. Christensen, Cytotechnology 1998, 15, 1-13]에 개시된 절차를 사용하여 EBNA 세포에 일시적으로 형질감염시킨다. 플루오 3-AM(플루카(FLUKA)에서 수득가능, 0.5 μM 최종 농도)을 사용하여 1시간 동안 37 ℃에서 세포의 항온처리 후에, 분석 완충제(행크(Hank) 염 및 20 mM HEPES로 보충된 DMEM)로 4회 세척 후에, mGlu 5a 형질감염된 EBNA 세포 상에서 [Ca² ⁺]i 측정을 수행하였다. [Ca² ⁺]i 측정은 형광 영상 플레이트 판독기(FLIPR, 몰레큘러 디바이시즈 코포레이션, 미국 캘리포니아주 라 졸라 소재)를 사용하여 수행되었다. 화합물이 길항제로서 평가된 경우, 이는 작용제로서 10 μM 글루타메이트에 대해 시험되었다.

억제(길항제) 곡선을 반복적 비선형 커프 피팅 소프트웨어 오리진(Origin, 마이크로컬 소프트웨어 인코포레이티드(Microcal Software Inc.), 미국 매사추세츠주 노쓰앰튼 소재)을 사용하여, IC₅₀을 제공하는 4개의 파라미터 방정식 및, 힐 계수로 구상하였다.

시험된 화합물의 K_i 값이 주어진다. K_i 값은 하기 수학식 2에 의해 정의된다:

[수학식 2]

상기 수학식에서,

IC₅₀ 값은 화합물의 효과의 50 %가 저해되는 시험된 화합물의 농도(μM)이다. [L]은 농도이고, EC₅₀ 값은 50 % 자극을 야기하는 화합물의 농도(μM)이다.

본 발명의 화합물은 mGluR5a 수용체 길항제이다. 상기에 개시된 분석에서 측정된 화학식 I의 화합물의 활성은 K_i < 100 μM의 범위이다.

화학식 I의 화합물 및 이의 약학적으로 허용되는 염은 약제로서, 예를 들어 약학 제제의 형태로 사용될 수 있다. 약학 제제는 경구로, 예를 들어 정제, 코팅된 정제, 당의정, 경질 및 연질 젤라틴 캡슐, 용액, 유화액 또는 현탁액의 형태로 투여될 수 있다. 그러나, 직장으로, 예를 들어 좌제의 형태로, 또는 비경구로, 예를 들어 주사 용액의 형태로 투여될 수도 있다.

화학식 I의 화합물 및 이의 약학적으로 허용되는 염은 약학 제제의 생성을 위해 약학적으로 불활성, 무기 또는 유기 담체와 함께 가공될 수 있다. 락토스, 옥수수 전분 또는 이의 유도체, 활석, 스테아르산 또는 이의 염 등은 예를 들어 정제, 코팅된 정제, 당의정 및 경질 젤라틴 캡슐용 담체로서 사용될 수 있다. 연질 젤라틴 캡슐용으로 적합한 담체는 예를 들어, 식물성 오일, 왁스, 지방, 반고체 및 액체 폴리올 등이지만, 활성 물질의 특성에 따라 일반적으로 연질 젤라틴 캡슐의 경우에는 담체가 요구되지 않는다. 용액 및 시럽의 제조용으로 적합한 담체는 예를 들어, 물, 폴리올, 수크로스, 전화당, 글루코스 등이다. 알코올, 폴리올, 글리세롤, 식물성 오일 등과 같은 어쥬번트는 화학식 I의 화합물의 수용성 염의 수성 주사 용액으로 사용될 수 있지만, 원칙적으로는 필요하지 않다. 좌제용으로 적합한 담체는 예를 들어, 천연 또는 경화 오일, 왁스, 지방, 반고체 또는 액체 폴리올 등이다.

또한, 약학 제제는 보존제, 용해제, 안정화제, 습윤제, 유화제, 감미제, 착색제, 향미제, 삼투압을 변화시키기 위한 염, 완충제, 마스킹제 또는 산화방지제를 함유할 수 있다. 또한, 약학 제제는 다른 치료적 가치있는 물질도 함유할 수 있다.

상술한 바와 같이, 화학식 I의 화합물 또는 이의 약학적으로 허용되는 염 및 치료 불활성 부형제를 함유하는 약제, 및 화학식 I의 하나 이상의 화합물 또는 이의 약학적으로 허용되는 염 및 필요에 따라 하나 이상의 다른 치료 가치있는 물질을 하나 이상의 치료 불활성 담체와 함께 생약 투여량 형태로 만듦을 포함하는 상기 약제의 제조 방법이 또한 본 발명의 목적이다.

투여량은 넓은 제한내에서 달라질 수 있고 물론, 각각의 특정 경우에 개별적인 요구조건에 맞춰질 수 있다. 일반적으로, 경구 또는 비경구 투여를 위한 효과적인 투여량은 개시된 모든 적응증에 대하여 0.01 내지 20 mg/kg/일, 바람직하게는 0.1 내지 10 mg/kg/일의 투여량이다. 따라서, 체중 70 kg인 성인에 대한 일일 투여량은 0.7 내지 1400 mg/일, 바람직하게는 7 내지 700 mg/일이다.

하기 실시예는 본 발명을 추가로 설명하기 위해 제공된다:

실시예 1

5-(3-플루오로-페닐에틴일)-피리딘-2-카르복시산 tert-부틸-에틸-아미드

단계 1: 5-(3-플루오로-페닐에틴일)-피리딘-2-카르복시산 메틸 에스테르

비스-(트라이페닐포스핀)-팔라듐(II)다이클로라이드(406 mg, 580 μmol, 0.05 당량)를 DMF(25 ml)에 용해시켰다. 5-브로모-피리딘-2-카르복시산 메틸 에스테르(2.5 g, 11.6 mmol) 및 3-플루오로페닐아세틸렌(2.22 g, 18.5 mmol, 1.6 당량)을 실온에서 첨가하였다. 트라이에틸아민(3.5 g, 4.84 ml, 34.7 mmol, 3 당량), 트라이페닐포스핀(91 mg, 347 μmol, 0.03 당량) 및 구리(I)요오드화물(66 mg, 347 μmol, 0.03 당량)을 첨가하고, 혼합물을 20시간 동안 80 ℃에서 교반하였다. 반응 혼합물을 냉각하고 이소루트(Isolute, 등록상표) 흡수제를 사용하여 건조상태로 증발시켰다. 미가공 생성물을 에틸 아세테이트:헵탄 구배 0:100 내지 80:20로 용리하는 실리카겔(70 g) 상에 플래쉬 크로마토그래피로 정제하였다. 목적하는 5-(3-플루오로-페닐에틴일)-피리딘-2-카르복시산 메틸 에스테르(1.95 g, 66 % 수율)를 옅은 황색 고체로 수득하였다, MS: m/e = 256.3 (M+H⁺).

단계 2: 5-(3-플루오로-페닐에틴일)-피리딘-2-카르복시산

5-(3-플루오로-페닐에틴일)-피리딘-2-카르복시산 메틸 에스테르(실시예 1, 단계 1, 1.9 g, 7.44 mmol)를 THF(30 ml) 및 물(30 ml)에 용해시키고, LiOH(357 mg, 24.9 mmol, 2 당량)를 실온에서 첨가하였다. 혼합물을 16시간 동안 실온에서 교반하였다. 반응 혼합물을 HCl(4 N)을 사용하여 pH 2.5로 산성화시키고, THF를 증발시켜 황색 현탁액을 형성하였다. 현탁액을 0 내지 5 ℃로 냉각시키고 여과하였다. 결정을 냉수로 세척하고 건조상태로 증발시켰다. 목적하는 5-(3-플루오로-페닐에틴일)-피리딘-2-카르복시산(1.71 g, 95 % 수율)을 옅은 황색 고체로 수득하였다, MS: m/e = 239.9 (M+H⁺).

단계 3: 5-(3-플루오로-페닐에틴일)-피리딘-2-카르복시산 tert-부틸-에틸-아미드

5-(3-플루오로-페닐에틴일)-피리딘-2-카르복시산(실시예 1, 단계 2, 100 mg, 0.41 mmol)을 다이옥산(1 ml)에 용해시키고, 휘니히 염기(217 μl, 1.24 mmol, 3 당량), tert-부틸에틸아민(63 mg, 0.62 mmol, 1.5 당량) 및 TBTU(146 mg, 0.45 mmol, 1.1 당량)를 실온에서 첨가하였다. 혼합물을 16시간 동안 실온에서 교반하였다. 반응 혼합물을 증발시키고 포화 NaHCO₃용액 및 2회 소량의 다이클로로메탄으로 추출하였다. 다이클로로메탄층을 실리카겔 컬럼 상에 직접 로딩하고 에틸 아세테이트:헵탄 구배 0:100 내지 0:100으로 용리하는 플래쉬 크로마토그래피로 미가공 생성물을 정제하였다. 목적하는 5-(3-플루오로-페닐에틴일)-피리딘-2-카르복시산 tert-부틸-에틸-아미드(102 mg, 76 % 수율)를 옅은 황색 오일로 수득하였다, MS: m/e = 325.3 (M+H⁺).

실시예 2

5-(3-클로로-페닐에틴일)-피리딘-2-카르복시산 tert-부틸-에틸-아미드

단계 1: 5-(3-클로로-페닐에틴일)-피리딘-2-카르복시산

5-브로모-피리딘-2-카르복시산 및 3-클로로페닐아세틸렌으로부터 실시예 1, 단계 1에 개시된 바와 유사한 화학을 사용하여 표제 화합물을 백색 고체로 수득하였다, MS: m/e = 258.4/260.4 (M+H⁺).

단계 2: 5-(3-클로로-페닐에틴일)-피리딘-2-카르복시산 tert-부틸-에틸-아미드

5-(3-클로로-페닐에틴일)-피리딘-2-카르복시산(실시예 2, 단계 1) 및 tert-부틸에틸아민으로부터 실시예 1, 단계 3에 개시된 바와 유사한 화학을 사용하여 표제 화합물을 옅은 황색 오일로 수득하였다, MS: m/e = 341.5/343.5 (M+H⁺).

실시예 3

5-(3-플루오로-페닐에틴일)-피리미딘-2-카르복시산 tert-부틸-에틸-아미드

단계 1: 5-(3-플루오로-페닐에틴일)-피리미딘-2-카르복시산

5-브로모-피리미딘-2-카르복시산 및 3-플루오로페닐아세틸렌으로부터 실시예 1, 단계 1에 개시된 바와 유사한 화학을 사용하여 표제 화합물을 옅은 황색 고체로 수득하였다, MS: m/e = 243.4 (M+H⁺).

단계 2: 5-(3-플루오로-페닐에틴일)-피리미딘-2-카르복시산 tert-부틸-에틸-아미드

5-(3-플루오로-페닐에틴일)-피리미딘-2-카르복시산(실시예 3, 단계 1, 100 mg, 0.41 mmol)을 다이클로로메탄(1 ml) 및 DMF(10 μl)에 현탁화하였다. 옥살릴 클로라이드(40 μl, 0.45 mmol, 1.1 당량)를 실온에서 적가하고, 혼합물을 1시간 동안 환류에서 교반하였다. 이어서, 반응 혼합물을 THF(2 ml) 중의 다이이소프로필에틸아민(235 μl, 1.34 mmol, 3.3 당량) 및 tert-부틸에틸아민(43 mg, 0.41 mmol, 1 당량)의 혼합물에 첨가하였다. 혼합물을 16시간 동안 실온에서 교반하고 이소루트(등록상표) 흡수제의 존재하에 건조상태로 증발시켰다. 미가공 생성물을 헵탄:에틸 아세테이트 100:0 -> 0:100으로 용리하는 실리카겔 컬럼(20 g)을 사용하여 플래쉬 크로마토그래피로 정제하였다. 목적하는 5-(3-플루오로-페닐에틴일)-피리미딘-2-카르복시산 tert-부틸-에틸-아미드(97 mg, 78 % 수율)를 백색 고체로 수득하였다, MS: m/e = 326.5 (M+H⁺).

실시예 4

5-(3-클로로-페닐에틴일)-피리미딘-2-카르복시산 tert-부틸-에틸-아미드

단계 1: 5-(3-클로로-페닐에틴일)-피리미딘-2-카르복시산

5-브로모-피리미딘-2-카르복시산 및 3-클로로페닐아세틸렌으로부터 실시예 1, 단계 1에 개시된 바와 유사한 화학을 사용하여 표제 화합물을 백색 고체로 수득하였다, MS: m/e = 259.4/261.4 (M+H⁺).

단계 2: 5-(3-클로로-페닐에틴일)-피리미딘-2-카르복시산 tert-부틸-에틸-아미드

5-(3-클로로-페닐에틴일)-피리미딘-2-카르복시산(실시예 4, 단계 1) 및 tert-부틸에틸아민으로부터 실시예 3, 단계 2에 개시된 바와 유사한 화학을 사용하여 표제 화합물을 백색 고체로 수득하였다, MS: m/e = 342.6/344.6 (M+H⁺).

Claims

하기 화학식 I의 화합물, 또는 이의 약학적으로 허용되는 산부가 염, 이의 라세미체 혼합물, 또는 이의 상응하는 거울상이성질체 및/또는 광학이성질체 및/또는 입체이성질체:
[화학식 I]

상기 식에서,
Y는 N 또는 CH이고;
R¹은 플루오로 또는 클로로이다.
제1항에 있어서,
Y가 N인, 화학식 I의 화합물.
제2항에 있어서,
5-(3-플루오로-페닐에틴일)-피리미딘-2-카르복시산 tert-부틸-에틸-아미드; 또는
5-(3-클로로-페닐에틴일)-피리미딘-2-카르복시산 tert-부틸-에틸-아미드
인 화학식 I의 화합물.
제1항에 있어서,
Y가 CH인, 화학식 I의 화합물.
제4항에 있어서,
5-(3-플루오로-페닐에틴일)-피리딘-2-카르복시산 tert-부틸-에틸-아미드; 또는
5-(3-클로로-페닐에틴일)-피리딘-2-카르복시산 tert-부틸-에틸-아미드
인 화학식 I의 화합물.
제1항 내지 제5항 중 어느 한 항에 있어서,
치료적 활성 물질로서 사용하기 위한 화학식 I의 화합물.
하기 화학식 3의 화합물을 하기 화학식 4의 화합물과 반응시켜 하기 화학식 I의 화합물을 형성하는 단계를 포함하는, 제1항에 따른 화학식 I의 화합물의 제조 방법:
[화학식 3]

[화학식 4]

[화학식 I]

상기 식에서,
치환기는 상기에 개시된 바와 같다.
제1항 내지 제5항 중 어느 한 항에 따른 화합물 및 치료적 활성 담체를 포함하는 약학적 조성물.
불안증, 통증, 우울증, 취약 X 증후군, 자폐 범주성 장애, 파킨슨병 및 위식도 역류병(GERD)의 치료를 위한, 제1항 내지 제5항 중 어느 한 항에 따른 화합물의 용도.
불안증, 통증, 우울증, 취약 X 증후군, 자폐 범주성 장애, 파킨슨병 및 위식도 역류병(GERD)의 치료용 약제의 제조를 위한, 제1항 내지 제5항 중 어느 한 항에 따른 화합물의 용도.
제1항 내지 제5항 중 어느 한 항에 있어서,
불안증, 통증, 우울증, 취약 X 증후군, 자폐 범주성 장애, 파킨슨병 및 위식도 역류병(GERD)의 치료용 화합물.
제1항 내지 제5항 중 어느 한 항에 따른 화합물의 유효량을 투여하는 단계를 포함하는, 불안증, 통증, 우울증, 취약 X 증후군, 자폐 범주성 장애, 파킨슨병 및 및 위식도 역류병(GERD)의 치료 방법.
상기에 개시된 바와 같은 발명.