KR20150043897A

KR20150043897A - 캄페롤-3,7-β-D-비스글루코사이드의 화학적 대량 합성 방법 및 그 용도

Info

Publication number: KR20150043897A
Application number: KR20130122881A
Authority: KR
Inventors: 정유훈; 임융호; 배온누리; 김경도; 김미경
Original assignee: 건국대학교 산학협력단
Priority date: 2013-10-15
Filing date: 2013-10-15
Publication date: 2015-04-23
Also published as: KR101549700B1

Abstract

본 발명은 캄페롤-3,7-β-D-비스글루코사이드의 화학적 대량 합성 방법 및 그 용도에 관한 것이다.

Description

캄페롤-3,7-β-D-비스글루코사이드의 화학적 대량 합성 방법 및 그 용도{Synthetic method of kaempferol-3,7-β-D-bisglucoside and use thereof}

천연물에서 추출되는 플라보노이드는 일반적으로 항바이러스, 항암, 항산화 등의 생물학적 활성이 있는 것으로 널리 알려져 있다.

캄페롤의 3번과 7번 위치에 당이 결합한 캄페롤-3,7-β-D-비스글루코사이드(Kaempferol-3,7-β-D-bisglucoside)는 항산화(Jung, H. A.; Woo, J. J.; Jung, M. J.; Hwang, G.-S.; Choi, J. S. Arch. Pharmacol. Res. 2009, 32, 1379~1384. Mariani, C.; Braca, A.; Vitalini, S.; De Tommasi, N.; Visioli, F.; Fico, G. Phytochemistry 2008, 69, 1220~1226), 항진균(Rao, K. S.; Babu, G. V.; Ramnareddy, Y. V. Molecules 2007, 12, 328~344), 글루코시다제 저해(Phuwapraisirisan, P.; Puksasook, T.; Kokpol, U.; Suwanboriux, K. Tetrahedron Lett. 2009, 50, 5864~5867), 항암(Ibrahim, L. F.; Kawashty, S. A.; El-Hagrassy, A. M.; Nassar, M. I.; Mabry, T. J. Carbohydr. Res. 2008, 343, 155~158), 혈당강하(de Sousa, E.; Zanatta, L.; Seifriz, I.; Creczynski-Pasa, T. B.; Pizzolatti, M. G.; Szpoganicz, B.; Silva, F. R. M. B. J. Nat. Prod. 2004, 67, 829~832) 등의 효능이 알려져 있다.

현재까지 캄페롤-3,7-β-D-비스글루코사이드와 같은 당화 플라보노이드를 화학적으로 합성하기 위한 방법은 세 가지가 알려져 있다(Urgaonkar, S.; Shaw, J. T. J. Org. Chem. 2007, 72, 4582~4585. Liu, Q.; Li, W.; Guo, T.; Li, D.; Fan, Z.; Yan, S. Chem. Lett. 2011, 40, 324~325. Yang, W.; Sun, J.; Yang, Z.; Han, W.; Zhang, W. -D.; Yu, B. Tetrahedron Lett. 2012, 53, 2773~2776). 이 중, Liu 등과 Yang 등에 의해 고안된 방법은 모두 캄페롤을 출발물질로 이용하는 방법이나 캄페롤은 매우 고가이므로 시장 구입에 의한 대량합성에 적절치 않은 방법이다. Urgaonkar 등에 의해 고안된 방법은 캄페롤을 출발물질로 사용하지 않고 캄페롤 모핵구조를 순차적으로 합성하는 방법을 이용하고 있으나 복잡한 합성과정을 거치므로 이 역시 목적하는 캄페롤-3,7-β-D-비스글루코사이드의 대량합성에는 적합한 방법이라 할 수 없다.

일반적으로, 화학적 합성 방법을 이용한 당화 플라보노이드의 합성에 있어서는 당기를 플라보노이드의 특정 위치에 위치선택적으로 도입하는 것이 큰 문제가 되며 따라서 이러한 문제를 극복하기 위해 다양한 가리움기를 이용하게 되는데, 이 경우 합성의 단계가 늘어나게 됨은 물론 합성 비용도 크게 증가하게 되어 궁극적으로 상업적 이용을 위한 대량 생산에 적합하지 않게 된다.

관련 선행특허로 대한민국 특허공개번호 제1020070094638호는 케르세틴 배당체 조성물 및 그의 제조방법에 관한 것으로, 해당 선행특허는 체내흡수성이 우수하고 그 결과, 체내에서 우수한 항산화활성을 발휘하는 -글리코실 이소케르시트린의 신규 조성물 및 상기 조성물의 조제방법을 제공하고, 케르세틴 배당체의 혼합물로 이루어지는 조성물로서, 상기 조성물은 효소처리 이소케르시트린을 -아밀라아제로 처리함으로써 조제할 수 있다고 기재되어 있으며,

또 다른 관련 선행특허는 대한민국 특허공개번호 제1019930002369호는 알파-글리코실케르세틴과 그 제조방법 및 용도에 관한 것으로, 케르세틴과 -글리코실 당화합물을 함유하는 용액에 당전이 효소를 작용시켜 -글리코실 케르세틴을 생성시키고, 수득한 -글리코실 케르세틴을 회수함을 특징으로 하는 케르세틴에 D-글루코오스 잔기가 등몰 이상 결합한 글리코실 케르세틴의 제조방법이 기재되어 있다.

본 발명은 상기의 문제점을 해결하고, 상기의 필요성에 의하여 안출된 것으로서 본 발명의 목적은 항산화, 항진균, 글루코시다제 저해, 항암, 혈당강하 등의 효능이 알려진 캄페롤-3,7-β-D-비스글루코사이드를 상업적으로 활용할 수 있도록 하기 위한 화학적 대량합성법을 제공하는 것이다.

상기의 목적을 달성하기 위하여 본 발명은 케르세틴을 출발물질로 하여 4-위치에 메톡시메틸 가리움기를 갖는 캄페롤 모핵구조를 합성하는 과정과 합성된 캄페롤 모핵구조의 3번과 7번 위치에 위치선택적으로 -D-글루코사이드를 도입하는 단계를 포함하는 하기 화학식 1의 캄페롤-3,7-β-D-비스글루코사이드의 화학적 합성 방법을 제공한다.

[화학식 1]

또 본 발명은 a)케르세틴을 벤질브로마이드와 반응시켜 케르세틴의 3,5,7,3,4 위치에 있는 다섯 개의 수산화기를 모두 벤질기로 가리운 다음 이 화합물을 수산화칼륨 수용액에서 가열하여 케르세틴의 고리 C가 절단된 화학식 3의 화합물을 얻는 단계;b)4-히드록시벤조산을 출발물질로 하여 메톡시메틸 가리움기를 도입한 후, 가수분해하여 화학식 2의 벤조산 유도체를 얻는 단계;c)상기 화학식 2와 3 화합물을 에틸렌디클로라이드(EDC) 축합반응을 통해 화학식 4의 화합물로 전환하고, 플라보노이드 고리 합성법을 활용하여 화합물 5를 얻는 단계;d)상기 화학식 5의 화합물의 3번과 7번 위치에 있는 벤질기를 수소첨가 반응을 통해 선택적으로 제거한 화학식 6의 화합물의 3번과 7번 위치에서 글리코실 주게인 화학식 7의 화합물과의 글리코실 반응을 통해 화학식 8의 화합물을 얻는 단계; 및 e)상기 화학식 8의 화합물의 4-메톡시메틸 가리움기를 트리플루오로아세트산을 이용한 가리움기 제거반응을 통해, 그리고 글루코스의 아세틸 가리움기는 암모니아를 이용한 가리움기 제거반응을 통해 제거하는 단계를 포함하는 화학식 1의 캄페롤-3,7-β-D-비스글루코사이드의 화학적 합성 방법을 제공한다.

[화학식 1]

[화학식 2]

[화학식 3]

[화학식 4]

[화학식 5]

[화학식 6]

[화학식 7]

[화학식 8]

또한 본 발명은 상기 본 발명의 방법에 의하여 제조된 캄페롤-3,7-β-D-비스글루코사이드를 제공한다.

또한 본 발명은 상기 본 발명의 방법에 의하여 제조된 캄페롤-3,7-β-D-비스글루코사이드를 유효성분으로 포함하는 약학 조성물을 제공한다.

또한 본 발명은 상기 본 발명의 방법에 의하여 제조된 캄페롤-3,7-β-D-비스글루코사이드를 유효성분으로 포함하는 글루코시다제 저해용 조성물을 제공한다.

또한 본 발명의 약학 조성물은 약학적으로 허용되는 부형제, 담체, 희석제 등을 추가로 포함할 수 있다.

본 발명에서 사용가능한 담체로는 리포좀, 다당, 폴리락트산, 폴리글리콜산,중합체성아미노산, 및 아미노산 공중합체와 같이 천천히 대사되는 거대분자를 들 수 있다. 예를 들면, 하이드로클로라이드, 하이드로브로마이드, 포스페이트 및 설페이트와 같이 무기산의 염; 아세테이트, 프로피오네이트, 말로네이트 및 벤조에이트와 같은 유기산의 염과 같은 약제학적으로 허용가능한 염; 물, 염수, 글리세롤 및 에탄올과 같은 액체, 및 수화제, 유화제 또는 pH 완충 물질과 같은 보조적 물질을 사용할 수 있다.

약제학적으로 허용가능한 담체에 관해서는 문헌 [Remingtion's Pharmaceutical Sciences, Mack Publishing Company, 1991]에 기재되어 있다.

또한, 상기 조성물은 약학적 분야에서 통상의 방법에 따라 환자의 신체 내 투여에 적합한 단위투여형의 제제, 바람직하게는 화합물 의약품의 투여에 유용한 제제 형태로 제형화시켜 당업계에서 통상적으로 사용하는 투여방법을 이용하여 경구, 또는 피부, 정맥내, 근육내, 동맥내, 골수내, 수막강내, 심실내, 폐, 경피, 피하, 복강내, 비강내, 소화관내, 국소, 설하, 질내 또는 직장 경로를 포함하는 비경구투여 경로에 의하여 투여될 수 있으나, 이들에 한정되는 것은 아니다.

본 발명의 적용증 치료에 유효한 화합물 용량은 1일 수용체 체중 1kg 당 약 0.1 내지 500mg 또는 0.1 내지 200 mg,보다 일반적으로 수용체 체중 1 kg 당 1일 0.1 내지 약 100mg 이다. 약제학적으로 허용되는 염 및 프로드럭의 유효 용량 범위는 전달되는 모 화합물의 중량에 기초하여 산출될 수 있다. 염 또는 프로드럭이 자체적으로 활성을 나타내는 경우, 유효 용량은 염 또는 프로드럭의 중량을 이용하여 상기 언급된 바와 같이, 또는 당업자들에 공지된 다른 수단에 의해 추정될 수 있다.

경구 치료 투여의 경우, 활성 화합물은 하나 이상의 부형제와 배합되어 섭취가능한 정제, 협측 정제, 트로키, 캅셀, 엘릭시르, 현탁액, 시럽, 와퍼 등의 형태로 사용될 수 있다.

정제, 트로키제, 환제, 캅셀제 등은 하나 이상의 하기 성분을 함유할 수 있다: 결합제, 예를 들어 미정질 셀룰로즈, 트라가칸트검, 아카시아, 옥수수 전분 또는 젤라틴; 부형제, 예를 들어 인산이칼슘, 전분 또는 락토스; 붕해제, 예를 들어 옥수수 전분, 감자 전분, 알긴산, 프리모겔(Primogel) 등; 윤활제, 예를 들어 마그네슘 스테아레이트 또는 스테로테스(Sterotes); 활제, 예를 들어 콜로이드성 이산화규소; 감미료, 예를 들어 수크로스, 프럭토스, 락토스, 사카린 또는 아스파탐; 향미제, 예를들어 페퍼민트, 메틸살리실레이트, 윈터그린 오일 또는 체리향; 및 펩티드 항균제, 예를 들어 엔부비르타이드(FuzeonTM).

단위 제형이 캅셀제인 경우, 이는 상기 타입의 물질 이외에, 식물성 오일 또는 폴리에틸렌 글리콜과 같은 액체 담체를 함유할 수 있다. 기타 다양한 물질이 코팅제로 또는 고체 단위 제형의 물리적 형태를 변경시키기 위하여 존재할 수 있다.

본 발명의 약제학적 조성물은 직장 투여용으로 적합한 제제로 제조, 포장 또는 시판될 수 있다. 이러한 조성물은 예를 들어, 좌제, 정체 관장 제제 및 직장 또는 결장 세척용 용액 형태일 수 있다. 본 발명의 약제학적 조성물은 또한 질 투여용으로 적합한 제제로 제조, 포장 또는 시판될 수 있다. 이러한 조성물은 예를 들어, 좌제, 함입 또는 코팅된 질 삽입용 물질, 예컨대 탐폰, 세척 제제, 질 세척용 용액 형태일 수 있다.

본 발명의 약제학적 조성물은 눈에 투여하기에 적합한 제제로 제조, 포장 또는 시판될 수 있다. 국소 투여의 경우, 본 발명의 화합물은 순수한 형태, 즉 액체로 적용될 수 있다. 그러나, 전형적으로, 화합물은 피부과적으로 허용되는 담체와 배합된 조성물 또는 제제로서 피부에 투여될 수 있다. 유용한 고체 담체는 미분 고체, 예컨대 활석, 점토, 미결정성 셀룰로즈, 실리카, 알루미나 등을 포함한다. 유용한 액체 담체는 물, 알콜, 글리콜, 및 두개 이상의 이들 혼합물을 포함하며, 이때 본 발명의 화합물은 임의로 비독성 계면활성제를 사용하여 유효 수준으로 용해 또는 분산될 수 있다.

이하 본 발명을 설명한다.

본 발명자들은 상업적으로 이용 가능한 케르세틴을 출발 물질로 하여 [도 1]에서 보여주는 바와 같이 보다 효율적이고 짧은 단계의 합성 방법을 통하여 캄페롤-3,7-β-D-비스글루코사이드를 대량 합성할 수 있는 신규한 화학적 방법을 개발하여 발명을 완성하였다.

이하 본 발명을 상세하게 설명한다.

상기의 목적을 달성하기 위하여, 본 발명은 화학식 1 로 표기되는 캄페롤-3,7-β-D-비스글루코사이드의 제조 방법을 제공한다.

[화학식 1]

구체적으로, 본 발명은 [도 1]에 나타낸 바와 같이 케르세틴을 출발물질로 하여 4-위치에 메톡시메틸 가리움기를 갖는 캄페롤 모핵구조(6, 도 1)를 합성하여 -D-글루코사이드와의 위치 선택적 당화 반응을 통하여 과아세틸화 당화캄페롤 (8, 도 1)을 합성한 후, 트리플루오로아세트산과 암모니아를 이용한 연쇄적인 가리움기 제거반응을 통해 효과적으로 캄페롤-3,7-β-D-비스글루코사이드를 합성하는 방법을 제공한다.

우선, 케르세틴을 벤질브로마이드와 반응시켜 케르세틴의 3,5,7,3,4 위치에 있는 다섯 개의 수산화기를 모두 벤질기로 가리운다. 이 화합물을 수산화칼륨 수용액에서 가열하면 케르세틴의 고리 C가 절단된 중간체 3을 손쉽게 얻을 수 있다. 한편, 벤조산 유도체 2는 4-히드록시벤조산을 출발물질로 하여 메톡시메틸 가리움기를 도입한 후, 가수분해하여 얻을 수 있다. 이렇게 얻어진 화합물 2와 3을 EDC 축합반응을 통해 에스테르 4로 전환하고, 전형적인 플라보노이드 고리 C 합성법을 활용하여 화합물 5를 얻는다. 화합물 5의 3번과 7번 위치에 있는 벤질기는 수소첨가 반응을 통해 선택적으로 제거할 수 있으며, 이렇게 하여 얻어진 주중간체 6의 3번과 7번 위치에서 글리코실 주게인 화합물 7과의 글리코실 반응을 통해 화합물 8을 얻는다. 화합물 8의 4-메톡시메틸 가리움기는 트리플루오로아세트산을 이용한 가리움기 제거반응을 통해, 그리고 글루코스의 아세틸 가리움기는 암모니아를 이용한 가리움기 제거반응을 통해 손쉽게 제거할 수 있으며 그 결과 목적하는 화합물 캄페롤-3,7-β-글루코사이드(도 1의 10)를 얻을 수 있다.

본 발명을 통하여 알 수 있는 바와 같이, 본 발명은 케르세틴을 시작물질로 하여 캄페롤-3,7-β-D-비스글루코사이드를 효과적으로 대량 제조할 수 있었다.

도 1은 본 발명에 따른 제조 방법을 요약해 보여준다.
도면에서 하단의 번호는 각 화합물의 화학식 번호를 의미한다.

이하, 실시예를 통하여 본 발명을 더욱 상세히 설명하고자 한다. 이들 실시 예는 오로지 본 발명을 예시하기 위한 것으로서, 본 발명의 범위가 이들 실시 예에 의해 제한되는 것으로 해석되지 아니하는 것은 당업계에서 통상의 지식을 가진 자에게 있어서 자명할 것이다.

[도 1]은 본 발명에 따른 제조 방법을 시중 구입 가능한 출발물질로부터 그림으로 나타낸 것이다.

실시예 1: 4-( 메톡시메톡시 )벤조산 메톡시메틸 에스테르 (1)의 제조

4-히드록시벤조산 (3 g, 21.72 mmol)을 아세톤(30 ml)에 녹인 용액에 탄산칼륨 (K₂CO₃) (15 g, 0108 mol)을 가하고, 클로로메틸에테르 (8.25 ml, 0.108 mol)을 0 ℃에서 천천히 첨가한다. 반응 혼합물을 5시간 동안 상온에서 교반한다. 탄산칼륨을 여과지로 걸러 감압 농축하여 화합물 1 (4.59 g, 93% 수율)을 흰색의 오일 형태로 얻었다: ¹H NMR (400 MHz, Acetone-d ₆ ) δ (ppm) 8.02 (d, J = 8.8 Hz, 2H), 7.14 (d, J = 8.8 Hz, 2H), 5.44 (s, 2H), 5.29 (s, 1H), 3.50 (s, 3H), 3.45 (s, 3H).

실시예 2: 4-(메톡시메톡시)벤조산 (2)의 제조

도 1의 화합물 1 (9.58 g, 42.34 mmol)을 메탄올 (100 ml)에 녹인 용액에 수산화칼륨 수용액 (22.4 g, 물 100 ml, 4 M)을 첨가한 후, 5시간 동안 상온에서 교반한다. 이 혼합물을 감압 농축한 뒤 2N HCl을 과량 첨가한 후, 여과지에 걸러 물로 충분히 씻어 화합물 2 (7.53 g, 97% 수율)를 흰색의 고체 형태로 얻었다: ¹H NMR (400 MHz, Acetone-d ₆ ) δ (ppm) 7.99 (d, J = 8.8 Hz, 2H), 7.12 (d, J = 8.8 Hz, 2H), 5.29 (s, 2H), 3.45 (s, 3H).

실시예 3: 2-(벤질옥시)-1-(2,4-비스벤질옥시-6-히드록시페닐)에타논 (3)의 제조

케르세틴 (20 g, 66.17 mmol)을 디메틸포름아미드 (150 ml)에 녹인 용액에 탄산칼륨 (91.45 g, 0.066 mol)을 엉키지 않도록 천천히 첨가한 후, 벤질브로마이드 (78.6 ml, 0.066 mol)을 첨가하여 4일 동안 80℃에서 환류 교반한다. 탄산칼륨을 여과지로 걸러 얻어진 여과액을 감압 농축 후, 디클로로메탄/에틸아세테이트로 재결정한다. 이 결정 (10 g, 13.28 mmol)을 피리딘 (40 ml)에 녹인 용액에 디에틸렌글리콜 (40 ml)과 18 M 수산화칼륨 (20 ml)를 첨가한 후, 12 시간동안 80℃에서 환류 교반한다. 반응 용액을 상온으로 냉각한 후 과량의 2N HCl을 첨가하고 아세트산에틸로 2회 추출한다. 얻어진 유기층을 황산마그네슘 (MgSO₄)을 첨가하여 탈수한 뒤, 여과지를 사용하여 걸러낸다. 이 혼합물을 감압농축하여 얻어진 농축액을 실리카겔 관크로마토그래피 (헥산:디클로로메탄:아세트산에틸 = 16:1:1)로 정제하여 화합물 3을 노란색의 고체 형태로 얻었다 (1.2 g, 20% 수율): ¹H NMR (400 MHz, Acetone-d ₆ ) δ (ppm) 13.73 (s, OH), 7.27-7.54 (m, 15H), 6.30 (t, J = 2.3 Hz, 1H), 6.21 (d, J = 1.8 Hz, 1H), 5.21 (d, J = 9.1 Hz, 4H), 4.67 (s, 2H), 4.53 (s, 2H).

실시예 4: 3,5-비스벤질옥시-2-(2-(벤질옥시아세틸)페닐 4-(메톡시메톡시)벤조에이트 (4)의 제조

화합물 3 (920 mg, 2.02 mmol)을 디클로로메탄 (30 ml)에 녹인 용액에 화합물 2 (553.11 mg, 3.03 mmol)와 4-디메틸아미노피리딘 (DMAP) (741.57 mg, 6.07 mmol), 그리고 1-(3-dimethylaminopropyl)-3-ethylcarbodiimide hydrochloride (EDCI) (1.16 g, 6.07 mmol)을 차례로 첨가한 후, 4시간 동안 상온에서 교반한다. 반응 혼합물을 감압 농축하여 얻어진 농축액을 실리카겔 관크로마토그래피 (헥산:아세트산에틸 = 5:1)로 정제하여 화합물 4를 노란색의 오일 형태로 얻었다(950 mg, 76% 수율)

실시예 5: 3,7-비스벤질옥시-5-히드록시-2-(4-메톡시메톡시페닐)-4H-크로멘-4-온 (5)의 제조

화합물 4 (1.43 g, 2.32 mmol)를 톨루엔 (25 ml)에 녹인 용액에 탄산칼륨(1.28 g, 9.28)과 tetra-n-butylammonium bromide (TBAB) (1.12 g, 3.48 mmol)을 첨가한 후, 4시간 동안 80℃에서 환류 교반한다. 반응혼합물을 여과지로 거른 후, 감압 농축하여 얻어진 농축액을 실리카겔 관크로마토그래피 (헥산:아세트산에틸 = 8:1)로 정제하여 화합물 5를 노란색의 고체 형태로 얻었다 (840 mg, 71 % 수율): ¹H NMR (400 MHz, Acetone-d ₆ ) δ (ppm) 12.77 (s, 1H, OH), 8.06 (d, J = 8.8 Hz, 2H), 7.31 ~ 7.54 (m, 10H), 7.16 (d, J = 8.4 Hz, 2H), 6.78 (brs, 1H), 6.46 (brs, 1H), 5.30 (d, J = 10.9 Hz, 4H), 5.16 (s, 2H), 3.48 (s, 3H).

실시예 6: 3,5,7-트리히드록시-2-(4-메톡시메톡시페닐)-4H-크로멘-4-온 (6)의 제조

화합물 5 (400 mg, 0.78 mmol)를 메탄올 (15 ml)과 테트라하이드로퓨란 (THF) (10 ml)에 녹인 용액에 palladium/charcoal (10% 0.06 mmol)을 첨가한다. 이 혼합물을 수소 존재 하에 3시간 동안 교반한다. 반응 혼합물을 규조토로 걸러 얻어진 여과액을 감압 농축시켜 노란색의 고체 형태를 얻었다 (250 mg, 97% 수율): ¹H NMR (400 MHz, Acetone) δ (ppm) 12.12 (s, 1H, OH), 8.22 (d, J = 8.7 Hz, 2H), 7.21 (d, J = 8.7 Hz, 2H), 6.55 (s, 1H), 6.28 (s, 1H), 5.30 (s, 2H), 3.47 (s, 3H).

실시예 7: ( 2R,3R,4S,5R )-2- 아세톡시메틸 -6- 브로모테트라히드로 -2H-피란-3,4,5-트리일 트리아세테이트 (7)의 제조

β-D-글루코스 펜타아세테이트 (2 g, 5.12 mmol)를 디클로로메탄 (10 ml)에 녹인 용액에 브롬화수소 (33% 아세트산 용액, 4.17 ml, 23.06 mmol)를 0℃에서 천천히 첨가한 후, 4시간 동안 상온에서 교반한다. 반응혼합액을 디클로로메탄과 티오황산나트륨 (Na₂S₂O₃)를 이용해서 희석시켜 얻어진 유기층을 황산마그네슘 (MgSO₄)을 첨가하여 탈수한 뒤, 여과지를 사용하여 걸러낸다. 여과액을 감압 농축하여 얻어진 잔류물을 디클로로메탄/헥산 혼합액으로 재결정하여 흰색 고체 형태를 얻었다 (1.53 g, 73% 수율): ¹H NMR (400 MHz, CDCl₃) δ (ppm) 6.61 (d, J = 4.0 Hz, 1H), 5.56 (t, J = 9.7 Hz, 1H), 5.17 (t, J = 9.7 Hz, 1H), 4.84 (dd, J = 4.0, 9.9 Hz, 1H), 4.28-4.35 (m, 2H), 4.13 (d, J = 11.1 Hz, 1H), 2.10 (s, 6H), 2.06 (s, 3H), 2.04 (s, 3H).

실시예 8: 3,7- 비스 (2,3,4,6- 테트라아세틸 - D - 글루코실 )-4- 메톡시메틸 - 캄페롤 (8)의 제조

화합물 6 (1 g, 3.03 mmol)을 클로로포름 (30 ml)과 물( 30 ml)에 녹인 용액에 탄산칼륨(K₂CO₃) (4.2 g, 30.3 mmol), 화합물 7 (3.7 g, 9.1 mmol), 그리고 Aliquat 336 (0.6 ml, 1.33 mmol)를 차례로 첨가한 후, 하루 정도 50℃에서 환류 교반한다. 이 혼합물을 상온으로 식힌 후 2N 염산을 이용하여 pH를 5~6으로 맞춘다. 디클로로메탄을 이용해서 반응 혼합액을 희석시켜 얻어진 유기층을 황산마그네슘(MgSO₄)으로 탈수한 뒤, 여과지를 사용하여 걸러낸다. 감압 농축하여 얻어진 농축액을 실리카겔 관크로마토그래피(헥산:아세트산에틸 = 2:1)로 정제하여 화합물 8을 노란색의 고체 형태로 얻었다 (1.1 g, 37% 수율): ¹H NMR (400 MHz, CDCl₃) δ (ppm) 12.52 (s, OH), 7.95 (d, J = 8.8 Hz, 2H), 6.92(d, J = 8.8 Hz, 2H), 6.56 (d, J = 2.1 Hz, 1H), 6.42 (d, J = 2.1 Hz, 1H), 5.56 (d, J = 7.7 Hz, 1H), 5.07-5.35 (m, 7H), 4.26 (dd, J = 5.8, 12.3 Hz, 1H), 4.20 (dd, J = 2.2, 12.3 Hz, 1H), 3.99 (d, J = 3.2 Hz, 2H), 3.91-3.95 (m, 1H), 3.63-3.67 (m, 1H), 3.51 (s, 3H), 2.11 (s, 3H), 2.10 (s, 3H), 2.07 (s, 3H), 2.06 (s, 3H), 2.05 (s, 3H), 2.02 (s, 3H), 2.01 (s, 3H), 1.91 (s, 3H).

실시예 9 3,7- 비스 (2,3,4,6- 테트라아세틸 - D - 글루코실 )- 캄페롤 (9)의 제조

화합물 8 (1.61 g, 1.61 mmol)을 디클로로메탄 (15 ml)에 녹인 용액에 테트리플루오로아세트산(TFA) (1.48 ml, 19.32 mmol)을 0℃에서 천천히 첨가한 후, 8시간 동안 상온에서 교반한다. 반응 혼합액을 감압 농축하여 얻어진 농축액을 실리카겔 관크로마토그래피 (디클로로메탄:아세트산에틸 = 2:1)로 정제하여 화합물 9를 노란색의 오일 형태로 얻었다 (872 mg, 57% 수율): ¹H NMR (400 MHz, CDCl₃) δ (ppm) 12.55 (s, OH), 7.95 (d, J = 8.8 Hz, 2H), 6.92 (d, J = 8.8 Hz, 2H), 6.56 (d, J = 2.1 Hz, 1H), 6.42 (d, J = 2.1 Hz, 1H), 5.56 (d, J = 7.7 Hz, 1H), 5.07-5.35 (m, 7H), 4.28 (dd, J = 5.8, 12.3 Hz, 1H), 4.21 (dd, J = 2.2, 12.3 Hz, 1H), 3.91-3.99 (m, 3H), 3.62-3.66 (m, 1H), 2.11 (s, 3H), 2.10 (s, 3H), 2.07 (s, 3H), 2.06 (s, 3H), 2.05 (s, 3H), 2.02 (s, 3H), 2.01 (s, 3H), 1.92 (s, 3H).

실시예 10: 3,7- 비스 (- D - 글루코실 )- 캄페롤 (10)의 제조

화합물 9 (872 mg, 1.43 mmol)에 암모니아 메탄올 용액 (20 ml)을 0℃에서 천천히 첨가한 후, 1시간 동안 상온에서 교반한다. 반응 혼합액을 감압 농축시켜 노란색의 고체 형태를 얻었다 (480 mg, 85% 수율): ¹H NMR (400 MHz, MeOD) δ (ppm) 8.08 (d, J = 8.8 Hz, 2H), 6.89 (d, J = 8.9 Hz, 2H), 6.78 (d, J = 2.1 Hz, 1H), 6.49 (d, J = 2.1 Hz, 1H), 5.32 (d, J = 7.4 Hz, 1H), 5.06 (m, 1H), 3.91 (dd, J = 2.2, 12.3 Hz, 1H), 3.70 (dd, J = 5.7, 12.3 Hz, 1H), 3.37-3.56 (m, 8H), 3.27-3.28 (m, 1H), 3.19-3.23 (m, 1H).

이상으로 본 발명 내용의 특정한 부분을 상세히 기술하였는바, 당업계의 통상의 지식을 가진 자에게 있어서, 이러한 구체적 기술은 단지 바람직한 실시양태일 뿐이며, 이에 의해 본 발명의 범위가 제한되는 것이 아닌 점은 명백할 것이다. 따라서 본 발명의 실질적인 범위는 첨부된 청구항들과 그것들의 등가물에 의하여 정의된다고 할 것이다.

Claims

케르세틴을 출발물질로 하여 4-위치에 메톡시메틸 가리움기를 갖는 캄페롤 모핵구조를 합성하는 과정과 합성된 캄페롤 모핵구조의 3번과 7번 위치에 위치선택적으로 -D-글루코사이드를 도입하는 단계를 포함하는 하기 화학식 1의 캄페롤-3,7-β-D-비스글루코사이드의 화학적 합성 방법.
[화학식 1]
제1항의 방법에 의하여 제조된 캄페롤-3,7-β-D-비스글루코사이드.
a)케르세틴을 벤질브로마이드와 반응시켜 케르세틴의 3,5,7,3,4 위치에 있는 다섯 개의 수산화기를 모두 벤질기로 가리운 다음 이 화합물을 수산화칼륨 수용액에서 가열하여 케르세틴의 고리 C가 절단된 화학식 3의 화합물을 얻는 단계;
b)4-히드록시벤조산을 출발물질로 하여 메톡시메틸 가리움기를 도입한 후, 가수분해하여 화학식 2의 벤조산 유도체를 얻는 단계;
c)상기 화학식 2와 3 화합물을 에틸렌디클로라이드(EDC) 축합반응을 통해 화학식 4의 화합물로 전환하고, 플라보노이드 고리 합성법을 활용하여 화합물 5를 얻는 단계;
d)상기 화학식 5의 화합물의 3번과 7번 위치에 있는 벤질기를 수소첨가 반응을 통해 선택적으로 제거한 화학식 6의 화합물의 3번과 7번 위치에서 글리코실 주게인 화학식 7의 화합물과의 글리코실 반응을 통해 화학식 8의 화합물을 얻는 단계; 및
e)상기 화학식 8의 화합물의 4-메톡시메틸 가리움기를 트리플루오로아세트산을 이용한 가리움기 제거반응을 통해, 그리고 글루코스의 아세틸 가리움기는 암모니아를 이용한 가리움기 제거반응을 통해 제거하는 단계를 포함하는 화학식 1의 캄페롤-3,7-β-D-비스글루코사이드의 화학적 합성 방법.
[화학식 1]

[화학식 2]

[화학식 3]

[화학식 4]

[화학식 5]

[화학식 6]

[화학식 7]

[화학식 8]
제3항의 방법에 의하여 제조된 캄페롤-3,7-β-D-비스글루코사이드.
제2항 또는 제4항의 화합물을 유효성분으로 포함하는 약학 조성물.
제2항 또는 제4항의 화합물을 유효성분으로 포함하는 글루코시다제 저해용 조성물.