KR20150023394A - 세포 및/또는 조직을 가용화시키기 위한 조성물 - Google Patents

세포 및/또는 조직을 가용화시키기 위한 조성물 Download PDF

Info

Publication number
KR20150023394A
KR20150023394A KR20147035225A KR20147035225A KR20150023394A KR 20150023394 A KR20150023394 A KR 20150023394A KR 20147035225 A KR20147035225 A KR 20147035225A KR 20147035225 A KR20147035225 A KR 20147035225A KR 20150023394 A KR20150023394 A KR 20150023394A
Authority
KR
South Korea
Prior art keywords
brij
composition
skin
tissue
analyte
Prior art date
Application number
KR20147035225A
Other languages
English (en)
Other versions
KR102099487B1 (ko
Inventor
병희 황
사미르 미트라고트리
러셀 엠. 레보비츠
Original Assignee
더 리젠츠 오브 더 유니버시티 오브 캘리포니아
디엑스 바이오사이언시스, 인코포레이티드
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by 더 리젠츠 오브 더 유니버시티 오브 캘리포니아, 디엑스 바이오사이언시스, 인코포레이티드 filed Critical 더 리젠츠 오브 더 유니버시티 오브 캘리포니아
Publication of KR20150023394A publication Critical patent/KR20150023394A/ko
Application granted granted Critical
Publication of KR102099487B1 publication Critical patent/KR102099487B1/ko

Links

Images

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K8/00—Cosmetics or similar toiletry preparations
    • A61K8/18—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition
    • A61K8/30—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition containing organic compounds
    • A61K8/46—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition containing organic compounds containing sulfur
    • A61K8/466—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition containing organic compounds containing sulfur containing sulfonic acid derivatives; Salts
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K1/00—General methods for the preparation of peptides, i.e. processes for the organic chemical preparation of peptides or proteins of any length
    • C07K1/14—Extraction; Separation; Purification
    • C07K1/145—Extraction; Separation; Purification by extraction or solubilisation
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K8/00—Cosmetics or similar toiletry preparations
    • A61K8/18—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition
    • A61K8/72—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition containing organic macromolecular compounds
    • A61K8/84—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition containing organic macromolecular compounds obtained by reactions otherwise than those involving only carbon-carbon unsaturated bonds
    • A61K8/86—Polyethers
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61Q—SPECIFIC USE OF COSMETICS OR SIMILAR TOILETRY PREPARATIONS
    • A61Q19/00—Preparations for care of the skin
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61Q—SPECIFIC USE OF COSMETICS OR SIMILAR TOILETRY PREPARATIONS
    • A61Q19/00—Preparations for care of the skin
    • A61Q19/02—Preparations for care of the skin for chemically bleaching or whitening the skin
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K2800/00—Properties of cosmetic compositions or active ingredients thereof or formulation aids used therein and process related aspects
    • A61K2800/40—Chemical, physico-chemical or functional or structural properties of particular ingredients
    • A61K2800/54—Polymers characterized by specific structures/properties
    • A61K2800/542—Polymers characterized by specific structures/properties characterized by the charge
    • A61K2800/5422—Polymers characterized by specific structures/properties characterized by the charge nonionic
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K2800/00—Properties of cosmetic compositions or active ingredients thereof or formulation aids used therein and process related aspects
    • A61K2800/40—Chemical, physico-chemical or functional or structural properties of particular ingredients
    • A61K2800/54—Polymers characterized by specific structures/properties
    • A61K2800/542—Polymers characterized by specific structures/properties characterized by the charge
    • A61K2800/5428—Polymers characterized by specific structures/properties characterized by the charge amphoteric or zwitterionic

Abstract

가용화 조성물이 제공된다. 해당 조성물은 적어도 1종의 쯔비터이온성 계면활성제 및 적어도 1종의 비이온성 계면활성제를 포함한다. 일 실시형태에 있어서, 상기 조성물은, 선택적으로 피부 위의 관심 대상 영역에 에너지의 인가와 함께, 환자의 피부 위 또는 아래쪽에 있는 조직을 가용화시키고, 리모델링 및/또는 제거하는데 유용할 수 있다. 일 실시형태에 있어서, 적어도 하나의 분석물이 가용화된 조직으로부터 수거되어 분석될 수 있다.

Description

세포 및/또는 조직을 가용화시키기 위한 조성물{COMPOSITIONS FOR SOLUBILIZING CELLS AND/OR TISSUE}
연방 정부 지원 연구 또는 개발에 관한 진술
본 발명은 미국 육군에 의해 수여된 연방 보조금 제W81XWH-06-01-00400호 하에 정부 지원에 의해 이루어졌다. 미국 정부는 본 발명에 있어서 소정의 권리를 갖는다.
피부는 신체에 대한 "창"(window)이다. 피부는 다음과 같은 수개의 이유 때문에 신체의 기관 중에 독특하다: (1) 피부는 인간 신체의 가장 큰 기관이다; (2) 피부는 환경에 직접 노출된다; (3) 피부는 우수한 배설 기관이다; (4) 피부는 신체의 가장 가시적이고도 접근 가능한 기관이다; 그리고 (5) 피부는 신체의 고도로 활성인 면역 기관이다.
피부는 다른 중요한 품질을 지닌다: 피부의 분자 프로파일은, 특히, 유기 소분자, 단백질, DNA, RNA 및 지질의 생리적인 모니터링을 위하여 가치가 있는 정보를 지닌다. 피부의 분자 프로파일링으로부터 더 많이 학습될 수 있다. 예를 들어, 피부 상에서 성장하는 병원체(예컨대, 세균)는 법의학적 동정을 허용할 수 있다. 피부의 분자 프로파일은 신체가 수동적으로 노출되는 환경적 인자들을 밝힐 수 있다. 이들 환경적 인자는, 예컨대, 일상적인 것, 예컨대, 알레르겐, 독소 및 화장품에서부터, 공업적 및/또는 농업적인 것, 예컨대, 공업적 용매, 비료 및 살충제를 거쳐, 위험물, 예컨대, 폭발물 및 기타 무기 작용제(warfare agent)까지 다양할 수 있다.
피부의 분자 프로파일은 또한 신체가 능동적으로 노출되는 인자들을 밝힐 수도 있다. 특히, 피부의 분자 프로파일은 신체가 무엇을 소모하는지를 밝힐 수 있다. 예를 들어, 남용 물질(예컨대, 불법 약물 혹은 마약) 및 치료적 약물(예컨대, 트라마돌, 플루코나졸, 바비탈 및 아나볼릭 스테로이드)은 소모 후 수주에 피부에서 발견될 수 있다.
피부의 분자 프로파일은 또한 병태 및 질환의 진단을 도울 수 있다. 예를 들어, 피부 콜레스테롤은 동맥 차단의 정도의 대용물이다. 피부 콜라겐의 당화반응은 당뇨병의 이력의 지표이다. β-아밀로이드의 피부 침착은 알츠하이머병의 존재와 정도를 나타낼 수 있다. 그리고 피부 구형 단백질(예컨대, IgE)은 특정 알레르겐에 대해서 알러지를 나타낼 수 있다.
피부로부터 생체분자를 샘플링하기 위한 수개의 방법이 존재한다. 예를 들어, 현재의 하나의 방법은 피부 생검이다. 그러나, 피부 생검은 침습적이어서 분석이 어렵다. 실제적으로 말하면, 피부 생검은 우수한 장비를 갖춘 전문가를 위하여 설계되며, 따라서 현장 이용 설비에서의 그의 이용은 제한된다. 피부로부터 생체분자를 샘플링하기 위한 다른 현재의 방법인 테이프 스트리핑(tape stripping)은 이들 동일한 제한을 겪으며, 결과의 변동성 때문에 일반적으로 허용 불가능하다. 피부로부터 생체분자를 샘플링하기 위한 또 다른 현재의 방법은 피부 면봉(skin swab)을 이용하는 것이다. 피부 면봉은, 그의 간단성 때문에 바람직하지만, 그의 검사 깊이 및 그의 결과 품질에 있어서 피상적이다. 마지막으로, 조직은 솔비탄(sorbitan)("스팬"(SPAN")), 지방산과 조합된 폴리옥시에틸렌 솔비탄("트윈"(tween)), 세틸 트라이메틸암모늄 브로마이드("CTAB") 및 이들의 혼합물 등과 같은 계면활성제의 존재 하에 초음파 처리되었다. 이에 대해서는 미국 특허 제6,589,173호(발명자: Mitragotri 등)를 참조하면 된다. 그러나, 스팬, 트윈 및 CTAB는 개별적으로 그리고 일괄적으로 피부 구성성분을 회복시키기에 적합하지 않은 것으로 판명되었다. 비이온성 계면활성제인 솔비탄 및 트윈은 특성 상 순하고 비변성이지만, 피부 조직을 안정화시키는데 효과적이지 않다. 양이온성 계면활성제인 CTAB은, 피부 조직을 가용화시키는데 효과적이지만, 단백질을 부적절하게 변성시켜, 용액 중 생체분자들의 특성을 완전히 변화시켜서, 이들을 기능적 목적을 위하여 사용할 수 없게 만든다.
피부는, 정보의 보고를 제공함과 함께, 또한 검버섯, 피부 폴립, 지루각화증, 반흔 조직, 황색종, 비암성 과증식성 상태, 표면 요철, 및 미늘성 패취 등과 같은 수많은 바람직하지 않은 미용 상태; 및 피부 종양, 광선 각화증, 그리고 바렛 식도 및 우측 결장 전암 플라크와 관련된 표면 암(surface cancer) 등과 같은 치료적 상태에 대한 수용자일 수 있다. 이들 상태를 위하여, 가용화 및 리모델링 또는 제거는 후속의 진단 처리과정과 함께 혹은 이 과정 없이 일차적 관심사일 수 있다.
피부 샘플링을 위한, 게다가 점막 및 기타 조직 샘플링을 위한 조성물에 대한 요구가 존재하며, 해당 조성물은 에너지 인가와 함께 이용될 경우, 이러한 피부, 점막 및 기타 조직을 적어도 부분적으로 가용화시킨다. 또한 가용화된 피부, 점막 및 기타 조직으로부터 얻어진, 생체분자를 비롯하여 분석물(analyte)의 기능적 및 구조적 무결을 보존하기 위한 추가의 요구가 존재한다.
일 실시형태에 있어서, 조성물이 제공되되, 해당 조성물은,
하기 구조식을 포함하는 쯔비터이온성 계면활성제(zwitterionic surfactant):
Figure pct00001
(식 중, n = 10, 12, 14, 16 또는 18); 및
하기 구조식을 포함하는 비이온성 계면활성제:
H(CH2)aO(CH2CH2O)bH
(식 중, a = 12 또는 16, 그리고 b = 2, 4, 10, 20 또는 23)
를 포함한다.
일 실시형태에 있어서, n = 12(N-도데실-N,N-다이메틸-3-암모니오-1-프로판설포네이트 또는 "DDPS"에 대응함), a = 16, 그리고 b = 10(폴리옥시에틸렌(10) 세틸 에터 또는 "Brij C10"에 대응함).
일 실시형태에 있어서, n = 14(N-테트라데실-N,N-다이메틸-3-암모니오-1-프로판설포네이트 또는 "TPS"에 대응함), a = 12, 그리고 b = 4(폴리옥시에틸렌(4) 라우릴 에터 또는 "Brij 30"에 대응함). 다른 실시형태에 있어서, n = 14 (TPS), a = 16, 그리고 b = 2(폴리옥시에틸렌(2) 세틸 에터 또는 "Brij 52"에 대응함). 다른 실시형태에 있어서, n = 14 (TPS), a = 16, 그리고 b = 10(Brij C10).
일 실시형태에 있어서, n = 16(N-헥사데실-N,N-다이메틸-3-암모니오-1-프로판설포네이트 또는 "HPS"에 대응함), a = 12, 그리고 b = 4(Brij 30). 다른 실시형태에 있어서, n = 16(HPS), a = 16, 그리고 b = 2(Brij 52). 다른 실시형태에 있어서, n = 16(HPS), a = 16, 그리고 b = 10(Brij C10).
일 실시형태에 있어서, n = 18(N-옥타데실-N,N-다이메틸-3-암모니오-1-프로판설포네이트 또는 "OPS"에 대응함), a = 12, 그리고 b = 4(Brij 30). 다른 실시형태에 있어서, n = 18(OPS), a = 16, 그리고 b = 2(Brij 52). 다른 실시형태에 있어서, n = 18(OPS), a = 16, 그리고 b = 10(Brij C10). 다른 실시형태에 있어서, n = 18(OPS), a = 16, 그리고 b = 20(폴리옥시에틸렌(20) 세틸 에터 또는 "Brij 58"에 대응함).
일 실시형태에 있어서, 환자의 피부 위 혹은 밑에 있는 조직을 가용화시키고, 리모델링 및/또는 제거하는 방법이 제공되되, 상기 방법은, 상기 피부 위의 관심 대상 영역에 에너지를 가하는 단계; 및 상기 영역을 조직 가용화 조성물과 접촉시키는 단계를 포함한다.
다른 실시형태에 있어서, 점막, 피부 또는 기타 조직으로부터 분석물을 회수하는 방법이 제공되되, 상기 방법은, 적어도 하나의 분석물을 포함하는 상기 점막, 피부 또는 기타 조직 상의 관심 대상 영역에 에너지를 가하는 단계; 상기 영역을 조직 가용화 조성물과 접촉시킴으로써, 상기 적어도 하나의 분석물을 포함하는 점막, 피부 또는 기타 조직의 적어도 일부를 가용화시키는 단계; 및 가용화된 상기 점막, 피부 또는 기타 조직으로부터 상기 적어도 하나의 분석물을 수거하는 단계를 포함한다.
첨부 도면에 있어서, 이하에 제공된 상세한 설명과 함께, 청구된 본 발명의 예시적인 실시형태를 기술하는 실험 데이터가 부여된다.
도 1은 돼지 피부를 초음파의 존재 하에 쯔비터이온성 계면활성제와 비이온성 계면활성제의 각종 조합물과 접촉시킨 경우 해당 돼지 피부로부터 회수된 총 단백질(㎎/㎖)을 그래프 형태로 나타낸 도면;
도 2는 돼지 피부를 초음파의 존재 하에 쯔비터이온성 계면활성제와 비이온성 계면활성제의 각종 조합물과 접촉시킨 경우 해당 돼지 피부로부터 회수된 가용성 단백질(㎎/㎖)을 그래프 형태로 나타낸 도면;
도 3은 TPS:Brij C10의 돼지 피부로부터의 단백질 추출 효능의 농도에 대한 의존성을 나타낸 도면;
도 4는 쯔비터이온성 계면활성제와 비이온성 계면활성제의 각종 조합물에서 세포내 효소인 글라이세르알데하이드 3-포스페이트 탈수소효소(GAPDH)의 보존된 활성을 그래프 형태로 나타낸 도면;
도 5는 쯔비터이온성 계면활성제와 비이온성 계면활성제의 각종 조합물에서 가용성 단백질 추출 효능과 GAPDH 안정성의 조합된 의존성을 그래프 형태로 나타낸 도면;
도 6은 각종 시약을 이용해서 t = 0(검은색 막대), t = 4℃에서 4시간(빗금친 막대) 및 t = 실온에서 4시간(십자형 막대)에서 인간 상피 케라티노사이트(Human Epidermal Keratinocyte: HEK) 세포로부터의 총 단백질 회수량을 나타낸 도면;
도 7은 t = 0(검은색 막대), t = 4℃에서 4시간(빗금친 막대) 및 t = 실온에서 4시간(십자형 막대)에서 각종 시약에서 가용화된 HEK 세포에서 측정된 GAPDH 활성을 나타낸 도면;
도 8은 t = 4시간(검은색 막대), t = 24시간(빗금친 막대), 72시간(십자형 막대) 및 7일(수평선 막대)에 실온에서 각종 시약에서 가용화된 HEK 세포에서 측정된 GAPDH 활성을 나타낸 도면;
도 9는 각종 시약을 이용해서 균질화된 마우스 피부로부터 회수된 총 단백질을 나타낸 도면;
도 10은 각종 시약을 이용해서 균질화된 마우스 피부에서 측정된 GAPDH 비활성(specific GAPDH activity)을 나타낸 도면.
일 실시형태에 있어서, 조성물이 제공되되, 해당 조성물은,
하기 구조식을 포함하는 쯔비터이온성 계면활성제:
Figure pct00002
(식 중, n = 10, 12, 14, 16 또는 18); 및
하기 구조식을 포함하는 비이온성 계면활성제:
H(CH2)aO(CH2CH2O)bH
(식 중, a = 12 또는 16, 그리고 b = 2, 4, 10, 20 또는 23)
를 포함한다.
일 실시형태에 있어서,쯔비터이온성 계면활성제는 DPS를 포함하고, 비이온성 계면활성제는 Brij 30, Brij 35, Brij 52, Brij C10 및 Brij 58 중 적어도 하나를 포함한다. 일 실시형태에 있어서, DPS:Brij 30의 조합은 배제된다.
다른 실시형태에 있어서, 쯔비터이온성 계면활성제는 DDPS를 포함하고, 비이온성 계면활성제는 Brij 30, Brij 35, Brij 52, Brij C10 및 Brij 58 중 적어도 하나를 포함한다.
다른 실시형태에 있어서, 쯔비터이온성 계면활성제는 TPS를 포함하고, 비이온성 계면활성제는 Brij 30, Brij 35, Brij 52, Brij C10 및 Brij 58 중 적어도 하나를 포함한다.
다른 실시형태에 있어서, 쯔비터이온성 계면활성제는 HPS를 포함하고, 비이온성 계면활성제는 Brij 30, Brij 35, Brij 52, Brij C10 및 Brij 58 중 적어도 하나를 포함한다. 일 실시형태에 있어서, HPS:Brij 35의 조합은 배제된다.
다른 실시형태에 있어서, 쯔비터이온성 계면활성제는 OPS를 포함하고, 비이온성 계면활성제는 Brij 30, Brij 35, Brij 52, Brij C10 및 Brij 58 중 적어도 하나를 포함한다.
쯔비터이온성 계면활성제와 비이온성 계면활성제는 완충 용액 중에 용해될 수 있다. 완충 용액은, 예를 들어, 인산염-완충 식염수(PBS)(pH = 7.2 내지 7.6), 트리스(tris)-완충 식염수(pH = 7.4 내지 8.0), 트리스-염산염(7.0 내지 9.0) 및 에틸렌다이아민테트라아세트산(EDTA)(pH = 7.4 내지 9.0) 중 1종 이상을 포함할 수 있다. 이와 같이 해서, 계면활성제 조합은 완충 용액 중 약 7.0 이상, 완충 용액 중 약 7.0 내지 9.0, 완충 용액 중 약 7.4 내지 9.0, 완충 용액 중 약 7.4 내지 8.0, 그리고 완충 용액 중 약 7.2 내지 7.6의 pH를 지닐 수 있다.
쯔비터이온성 계면활성제와 비이온성 계면활성제는 완충 용액 중 약 0.01% 내지 약 10% (w/v)의 총 농도로 존재할 수 있다. 예를 들어, 쯔비터이온성 계면활성제와 비이온성 계면활성제는, 완충 용액 중 약 0.1% (w/v) 내지 약 2% (w/v), 완충 용액 중 약 1% (w/v) 및 완충 용액 중 약 0.1% (w/v) 내지 약 0.5% (w/v)의 총 농도를 비롯하여, 완충 용액 중 약 0.01% 내지 약 5% (w/v)의 총 농도로 존재할 수 있다. 일 실시형태에 있어서, 쯔비터이온성 계면활성제와 비이온성 계면활성제는 완충 용액 중 약 0.5% (w/v)의 총 농도로 존재한다. 다른 실시형태에 있어서, 쯔비터이온성 계면활성제와 비이온성 계면활성제는 약 3:1 내지 약 1:3 또는 약 3:2 내지 약 2:3의 비로 존재할 수 있다. 일 실시형태에 있어서, 쯔비터이온성 계면활성제와 비이온성 계면활성제는 약 1:1의 비로 존재할 수 있다.
쯔비터이온성 계면활성제:비이온성 계면활성제 조성물은 수개의 용도를 지닐 수 있다.
예를 들어, 일 실시형태에 있어서, 환자의 피부 위 혹은 밑에 있는 조직을 가용화시키고, 리모델링 및/또는 제거하는 방법이 제공되되, 상기 방법은, 상기 피부 위의 관심 대상 영역에 에너지를 가하는 단계; 및 상기 영역을 (1) Brij 30, Brij 35, Brij 52, Brij C10 및 Brij 58 중 적어도 하나와 DPS; (2) Brij 30, Brij 35, Brij 52, Brij C10 및 Brij 58 중 적어도 하나와 DPS; (3) Brij 30, Brij 35, Brij 52, Brij C10 및 Brij 58 중 적어도 하나와 TPS; (4) Brij 30, Brij 35, Brij 52, Brij C10 및 Brij 58 중 적어도 하나와 HPS; 및 (5) Brij 30, Brij 35, Brij 52, Brij C10 및 Brij 58 중 적어도 하나와 OPS 중 적어도 하나를 포함하는 조직 가용화 조성물과 접촉시키는 단계를 포함한다.
다른 실시형태에 있어서, 점막, 피부 또는 기타 조직으로부터 분석물을 회수하는 방법이 제공되되, 상기 방법은, 적어도 하나의 분석물을 포함하는 상기 점막, 피부 또는 기타 조직 상의 관심 대상 영역에 에너지를 가하는 단계; 상기 영역을 조직 가용화 조성물과 접촉시킴으로써, 상기 적어도 하나의 분석물을 포함하는 점막, 피부 또는 기타 조직의 적어도 일부를 가용화시키는 단계; 및 가용화된 상기 점막, 피부 또는 기타 조직으로부터 상기 적어도 하나의 분석물을 수거하는 단계를 포함하며, 상기 조직 가용화 조성물은 (1) Brij 30, Brij 35, Brij 52, Brij C10 및 Brij 58 중 적어도 하나와 DPS; (2) Brij 30, Brij 35, Brij 52, Brij C10 및 Brij 58 중 적어도 하나와 DDPS; (3) Brij 30, Brij 35, Brij 52, Brij C10 및 Brij 58 중 적어도 하나와 TPS; (4) Brij 30, Brij 35, Brij 52, Brij C10 및 Brij 58 중 적어도 하나와 HPS; 및 (5) Brij 30, Brij 35, Brij 52, Brij C10 및 Brij 58 중 적어도 하나와 OPS 중 적어도 하나를 포함한다.
몇몇 실시형태에 있어서, "기타 조직"은 유방, 전립선, 눈, 질, 방광, 손톱, 모발, 결장, 고환, 창자, 폐, 뇌, 췌장, 간, 심장, 골 혹은 대동맥 벽을 포함할 수 있다.
몇몇 실시형태에 있어서, "분석물"은, 조직 내 혹은 상에 존재하고 관심 조직으로부터 추출될 수 있는, 임의의 생체분자, 약물, 소분자, 무기 작용제, 환경 오염물, 미생물 등을 포함할 수 있다.
몇몇 실시형태에 있어서, "생체분자"는 단백질(예컨대, 암 바이오마커 등과 같은 질환 바이오마커, 항체: IgE, IgG, IgA, IgD 또는 IgM 등), 펩타이드, 지질(예컨대, 콜레스테롤, 세라마이드 및 지방산), 핵산(예컨대, RNA 및 DNA), 소분자(예컨대, 글루코스, 우레아 및 크레아틴), 소분자 약물 또는 소분자 약물의 대사산물, 미생물, 무기 분자, 원소 및 이온(예컨대, 철, Ca2+, K+, Na+ 등)을 포함할 수 있다. 몇몇 실시형태에 있어서, 생체분자는 글루코스 및 암 마커를 제외한다.
몇몇 실시형태에 있어서, "약물"은, 남용 약물, 예를 들어, 코카인, 헤로인, 메틸 암페타민, 및 과잉의 용량으로 취해지거나 혹은 처방전 없이 취해진 처방 약물(예컨대, 오피노이드 등과 같은 진통제); 및 예를 들어, 트라마돌, 플루코나졸, 바비탈 및 아나볼릭 스테로이드 등과 같은 치료적 약물을 포함할 수 있다.
몇몇 실시형태에 있어서, "무기 작용제"는 무기로서 사용될 수 있는 생물학적 혹은 화학적 기원의 임의의 분자, 화합물 또는 조성물을 포함할 수 있다. 무기 작용제의 비제한적인 예로는 폭발물, 신경 가스(예컨대, VX 및 사린(Sarin)), 포스젠, 독소, 포자(예컨대, 탄저병) 등을 포함한다.
몇몇 실시형태에 있어서, "환경 오염물"은, 예컨대, 위험 임계치를 넘어 상승된 농도에 있을 때, 개체에게 치명적일 수 있는 임의의 분자, 화합물 또는 조성물을 포함할 수 있다. 그 예로는 수질 오염물질(예컨대, 비료, 살충제, 살진균제, 살충제, 제초제, 중금속 및 할로겐화물), 토양 오염물질(예컨대, 비료, 살충제, 살진균제, 살충제, 제초제, 중금속 및 할로겐화물), 및 공기 오염물질(예컨대, NOx, SOx, 온실 가스, 영구적인 유기 오염물질, 입상 물질 및 스모그)을 포함한다.
몇몇 실시형태에 있어서, 표적 세포 및 조직을 가용화시키는 단계는 에너지의 인가를 포함한다. 몇몇 실시형태에 있어서, 기계적 에너지(예컨대, 연마, 전단, 진공, 압력, 흡인, 초음파), 광학적 에너지(예컨대, 레이저), 열 에너지 및 전기 에너지를 비롯한 에너지는, 임의의 많은 적절한 방법에 의해 인가될 수 있다. 그러나, 일 실시형태에 있어서, 에너지는 외부에서 공급되는 열 에너지(예컨대, 열)를 포함하지 않는다. 적절한 에너지 인가기구는 미국 특허 출원 제12/664,994호, 제13/126,105호 및 제13/095,771호에 개시되어 있으며, 이들 각각은 참조로 그들의 전문이 본 명세서에 포함된다.
조성물은 시험관내 단백질 회수를 위하여 세포를 가용화시키는데 이용될 수 있다. 세포의 효과적인 용해에 부가해서, 조성물은 생체활성의 보존의 유익을 제공할 수 있다. 조성물은, 또한 피부 등과 같이, 이중 기계적 특성을 지니는 것을 비롯하여 각종 조직을 신속하게 가용화시키는 능력을 지닐 수 있다. 생체활성의 보존을 돕기 위하여, 프로테아제 저해제가 조성물에 포함될 수 있다. 그러나, 프로테아제 저해제의 첨가와 함께 혹은 첨가 없이, 조성물은 단백질의 생물학적 활성을 보존할 수 있다. 조성물은 또한 생체내에서 적용 가능하다. 특히, 조성물은 불안정한 인단백질을 RPPA로 회수할 수 있으므로, 다수의 신호전달 경로를 신속하고도 비침습적으로 프로빙하는 가능성을 열어두고 있다.
일 실시형태에 있어서, 조성물은 항균성 조성물로서 이용될 수 있다. 이와 같이 해서, 세균의 성장 및 재생을 저해하고/하거나 세균 감염을 치료하는 방법이 제공되되, 해당 방법은 세균에 의해 공격을 받는 구역에 항균성 조성물을 도포하는 단계를 포함하며, 상기 항균성 조성물은 (1) Brij 30, Brij 35, Brij 52, Brij C10 및 Brij 58 중 적어도 하나와 DPS; (2) Brij 30, Brij 35, Brij 52, Brij C10 및 Brij 58 중 적어도 하나와 DDPS; (3) Brij 30, Brij 35, Brij 52, Brij C10 및 Brij 58 중 적어도 하나와 TPS; (4) Brij 30, Brij 35, Brij 52, Brij C10 및 Brij 58 중 적어도 하나와 HPS; 및 (5) Brij 30, Brij 35, Brij 52, Brij C10 및 Brij 58 중 적어도 하나와 OPS 중 적어도 하나를 포함한다. 상기 방법은 에너지의 인가를 더 포함할 수 있다.
다른 실시형태에 있어서, 세포 및/또는 조직을 가용화시키는 방법이 제공되되, 해당 방법은 세포 및/또는 조직을 조성물과 접촉하는 단계를 포함하며, 해당 조성물은 (1) Brij 30, Brij 35, Brij 52, Brij C10 및 Brij 58 중 적어도 하나와 DPS; (2) Brij 30, Brij 35, Brij 52, Brij C10 및 Brij 58 중 적어도 하나와 DDPS; (3) Brij 30, Brij 35, Brij 52, Brij C10 및 Brij 58 중 적어도 하나와 TPS; (4) Brij 30, Brij 35, Brij 52, Brij C10 및 Brij 58 중 적어도 하나와 HPS; 및 (5) Brij 30, Brij 35, Brij 52, Brij C10 및 Brij 58 중 적어도 하나와 OPS 중 적어도 하나를 포함한다. 일 실시형태에 있어서, 세포질 단백질, 핵 단백질 및 표면 단백질을 비롯한 단백질은 가용화된 세포 및/또는 조직으로부터 회수될 수 있다. 몇몇 실시형태에 있어서, 예를 들어, 단백질의 생물학적 활성을 보존하는 것이 바람직한 실시형태 등과 같이, 조성물은 프로테아제 저해제를 더욱 선택적으로 포함할 수 있다.
일 실시형태에 있어서, 조성물은 단백질 기능 성태 및 관련된 피부 세포 신호전달 경로를 프로빙하는데 이용될 수 있다. 피부 세포 신호전달 경로는 응력-유발될 수 있고, 수 분에서 수 시간에 걸쳐서 변화될 수 있다. 인산화는 단백질 기능의 많은 양상을 조절하는 고도로 불안정한 번역후 변형이다. 표피에서 이들 기능적 상태를 프로빙하는 능력은 인단백질을 가용화시켜 단리시키는 신속하고도 효과적인 방법을 필요로 한다. 이와 같이 해서, 다른 실시형태에 있어서, 피부 세포로부터 신호전달 단백질을 회수하는 방법이 제공되되, 해당 방법은, 피부 세포를, (1) Brij 30, Brij 35, Brij 52, Brij C10 및 Brij 58 중 적어도 하나와 DPS; (2) Brij 30, Brij 35, Brij 52, Brij C10 및 Brij 58 중 적어도 하나와 DDPS; (3) Brij 30, Brij 35, Brij 52, Brij C10 및 Brij 58 중 적어도 하나와 TPS; (4) Brij 30, Brij 35, Brij 52, Brij C10 및 Brij 58 중 적어도 하나와 HPS; 및 (5) Brij 30, Brij 35, Brij 52, Brij C10 및 Brij 58 중 적어도 하나와 OPS 중 적어도 하나를 포함하는 조성물과 접촉시켜 가용화된 신호전달 단백질을 제공하는 단계; 및 가용화된 신호전달 단백질에 역상 단백질 어레이를 적용시키는 단계를 포함한다.
일 실시형태에 있어서, (1) Brij 30, Brij 35, Brij 52, Brij C10 및 Brij 58 중 적어도 하나와 DPS; (2) Brij 30, Brij 35, Brij 52, Brij C10 및 Brij 58 중 적어도 하나와 DDPS; (3) Brij 30, Brij 35, Brij 52, Brij C10 및 Brij 58 중 적어도 하나와 TPS; (4) Brij 30, Brij 35, Brij 52, Brij C10 및 Brij 58 중 적어도 하나와 HPS; 및 (5) Brij 30, Brij 35, Brij 52, Brij C10 및 Brij 58 중 적어도 하나와 OPS 중 적어도 하나를 포함하는 조성물은, 특히, 질환 바이오마커, 법의학적 바이오마커 또는 둘 모두로서 이용될 세포 성분을 분해, 가용화 및 안정화시키는데 유용할 수 있다. 일 실시형태에 있어서, 이 조성물은 인시츄로 살아있는 조직으로부터, 새롭게 절제된 조직, 동결 절제된 조직, 보존된 파라핀 포매 조직, 조직 및 세포 추출물 그리고 세포주 혹은 절제된 조직으로부터 유래된 배양 조직으로부터, 그리고 바이러스, 세균 및 프리온 등과 같은 외인성 제제로부터 성분을 분해, 가용화 및 안정화시키는데 유용하다.
일 실시형태에 있어서, (1) Brij 30, Brij 35, Brij 52, Brij C10 및 Brij 58 중 적어도 하나와 DPS; (2) Brij 30, Brij 35, Brij 52, Brij C10 및 Brij 58 중 적어도 하나와 DDPS; (3) Brij 30, Brij 35, Brij 52, Brij C10 및 Brij 58 중 적어도 하나와 TPS; (4) Brij 30, Brij 35, Brij 52, Brij C10 및 Brij 58 중 적어도 하나와 HPS; 및 (5) Brij 30, Brij 35, Brij 52, Brij C10 및 Brij 58 중 적어도 하나와 OPS 중 적어도 하나를 포함하는 조성물은, 피부의 표면 위 혹은 밑, 또는 그밖에 신체 내의 병든 조직을 가용화, 리모델링 및 제거하는데 유용할 수 있다. 예를 들어, 상기 조성물은, 광선 각화증, 백반증, 바렛 식도 및 우측 결장 전암 플라크 등과 같은 전암 상태, 그리고 이러한 전암 상태들 중 어느 것인가로부터 일어나는 표면 암을 지니는 조직을 가용화, 리모델링 및 제거하는데 유용할 수 있다. 기타 치료적 용도는 각종 표면 혹은 깊은 부위로부터 종양을 가용화시켜 제거하거나, 또는 종양 수술 절제면(tumor surgical margin)을 치료하여 이들 부위에서 임의의 잔류 종양 세포를 제거하는 것을 포함할 수 있다. 몇몇 경우에, 조성물을 이용해서 종양을 치료하고 구성 종양 마커를 가용화시킨 후, 면역계는 용해된 종양 마커를 검출하고, 이들 마커에 대한 강력한 항종양 면역 반응을 개시하여, 국소 종양의 퇴행뿐만 아니라 검출된 종양 마커를 보유하는 임의의 조직 종양 세포의 파괴를 유발할 수 있다.
일 실시형태에 있어서, (1) Brij 30, Brij 35, Brij 52, Brij C10 및 Brij 58 중 적어도 하나와 DPS; (2) Brij 30, Brij 35, Brij 52, Brij C10 및 Brij 58 중 적어도 하나와 DDPS; (3) Brij 30, Brij 35, Brij 52, Brij C10 및 Brij 58 중 적어도 하나와 TPS; (4) Brij 30, Brij 35, Brij 52, Brij C10 및 Brij 58 중 적어도 하나와 HPS; 및 (5) Brij 30, Brij 35, Brij 52, Brij C10 및 Brij 58 중 적어도 하나와 OPS 중 적어도 하나를 포함하는 조성물은, 온전한 외부 피부 장벽을 침투할 수 없는 치료적 분자 및 약물로 피부 병변 및 손상된 피부를 치료하는데 유용할 수 있다. 특히, 본 명세서에 기재된 조성물은 병든 조직, 염증성 세포, 그리고 다르게는 효과적인 국소 요법에 대한 접근을 차단할 수 있는 두꺼운 과잉각화된 피부를 제거함으로써, 국소 치료의 흡수를 증대시키는 데 유용할 수 있다. 이러한 용도의 예는, 건선 병변이 전형적으로 흡수를 저해하는 경화된 상부층 혹은 과각화증을 지니므로, 건선 국소 요법을 위한 사전치료이다. 일 실시형태에 있어서, 이러한 치료는, 장벽 세포 및 조직의 분해 및 가용화에 의해 장벽을 파괴하고 나서 장벽-교란된 피부의 표면에 직접 치료적 분자 및 약물의 적용할 수 있도록 하기 위하여, 조성물을 이용한 외부 피부 장벽의 섭동(perturbation) 및 소정 환경에서는 인가된 에너지를 포함할 수 있다. 예시적인 치료적 분자 및 약물로는, 예를 들어, DNA-기반 약물, RNA-기반 약물, 단백질-기반 약물, 펩타이드-기반 약물, 지질-기반 약물, 탄수화물-기반 약물, 소분자 약물, 나노입자 기반 약물, 리포솜-캡슐화 약물, 및 이러한 부류의 약물의 조합을 포함할 수 있다.
일 실시형태에 있어서, (1) Brij 30, Brij 35, Brij 52, Brij C10 및 Brij 58 중 적어도 하나와 DPS; (2) Brij 30, Brij 35, Brij 52, Brij C10 및 Brij 58 중 적어도 하나와 DDPS; (3) Brij 30, Brij 35, Brij 52, Brij C10 및 Brij 58 중 적어도 하나와 TPS; (4) Brij 30, Brij 35, Brij 52, Brij C10 및 Brij 58 중 적어도 하나와 HPS; 및 (5) Brij 30, Brij 35, Brij 52, Brij C10 및 Brij 58 중 적어도 하나와 OPS 중 적어도 하나를 포함하는 조성물은, 외부 피부 층을 파괴함으로써 치료적 혹은 진단 분자 및 약물을 신체 및 혈류에 도입하는데 유용할 수 있다. 일 실시형태에 있어서, 이 도입은, 장벽 세포 및 조직의 분해 및 가용화에 의해 장벽을 파괴하고 나서 장벽-교란된 피부의 표면에 직접 치료적 분자 및 약물의 적용할 수 있도록 하기 위하여, 조성물을 이용한 외부 피부 장벽의 섭동(perturbation) 및 소정 환경에서는 인가된 에너지를 포함할 수 있다.
다른 실시형태에 있어서, (1) Brij 30, Brij 35, Brij 52, Brij C10 및 Brij 58 중 적어도 하나와 DPS; (2) Brij 30, Brij 35, Brij 52, Brij C10 및 Brij 58 중 적어도 하나와 DDPS; (3) Brij 30, Brij 35, Brij 52, Brij C10 및 Brij 58 중 적어도 하나와 TPS; (4) Brij 30, Brij 35, Brij 52, Brij C10 및 Brij 58 중 적어도 하나와 HPS; 및 (5) Brij 30, Brij 35, Brij 52, Brij C10 및 Brij 58 중 적어도 하나와 OPS 중 적어도 하나를 포함하는 조성물은, 눈, 중이, 뇌, 척수, 신경근 및 신경절을 비롯한 중추 신경계와 말초 신경계 내 또는 신체 내 기타 기관에서 악성 및 양성 성장 및 장애를 제거하는 데 유용할 수 있다. 상기 조성물은 얇은 바늘 혹은 카테터를 통한 주입 후 직접 병든 조직을 분리 및 해리시킬 수 있으므로, 조성물은 개복 수술 혹은 심지어 최소 침습적 수술 기구에 접근할 수 없는 구역 내(동맥 및 관상 동맥을 포함하는 혈관계 내 등)에서 절제 수술을 가능하게 할 수 있다.
다른 실시형태에 있어서, (1) Brij 30, Brij 35, Brij 52, Brij C10 및 Brij 58 중 적어도 하나와 DPS; (2) Brij 30, Brij 35, Brij 52, Brij C10 및 Brij 58 중 적어도 하나와 DDPS; (3) Brij 30, Brij 35, Brij 52, Brij C10 및 Brij 58 중 적어도 하나와 TPS; (4) Brij 30, Brij 35, Brij 52, Brij C10 및 Brij 58 중 적어도 하나와 HPS; 및 (5) Brij 30, Brij 35, Brij 52, Brij C10 및 Brij 58 중 적어도 하나와 OPS 중 적어도 하나를 포함하는 조성물은, 복강내 조직과 장기 사이의 유착 조직의 특이적 띠를 용해시킴으로써 복강내 유착 및 복막 유착을 감소 혹은 저감시키는데 유용할 수 있다.
일 실시형태에 있어서, (1) Brij 30, Brij 35, Brij 52, Brij C10 및 Brij 58 중 적어도 하나와 DPS; (2) Brij 30, Brij 35, Brij 52, Brij C10 및 Brij 58 중 적어도 하나와 DDPS; (3) Brij 30, Brij 35, Brij 52, Brij C10 및 Brij 58 중 적어도 하나와 TPS; (4) Brij 30, Brij 35, Brij 52, Brij C10 및 Brij 58 중 적어도 하나와 HPS; 및 (5) Brij 30, Brij 35, Brij 52, Brij C10 및 Brij 58 중 적어도 하나와 OPS 중 적어도 하나를 포함하는 조성물은, 상처난 죽은 조직제거술에 유용할 수 있다. 일 실시형태에 있어서, 치료는, 예를 들어, 괴저성 가피 및 섬유소성 딱지를 비롯한 병적 조직을 제거하기 위하여, 창상의 주변 조직에 조성물을 접촉시키고, 소정 환경에서는 에너지를 인가시키는 것을 포함할 수 있다.
일 실시형태에 있어서, (1) Brij 30, Brij 35, Brij 52, Brij C10 및 Brij 58 중 적어도 하나와 DPS; (2) Brij 30, Brij 35, Brij 52, Brij C10 및 Brij 58 중 적어도 하나와 DDPS; (3) Brij 30, Brij 35, Brij 52, Brij C10 및 Brij 58 중 적어도 하나와 TPS; (4) Brij 30, Brij 35, Brij 52, Brij C10 및 Brij 58 중 적어도 하나와 HPS; 및 (5) Brij 30, Brij 35, Brij 52, Brij C10 및 Brij 58 중 적어도 하나와 OPS 중 적어도 하나를 포함하는 조성물은, 수술후 치유를 증대시키기 위하여 바이오-글루로서 유용할 수 있다.
일 실시형태에 있어서, (1) Brij 30, Brij 35, Brij 52, Brij C10 및 Brij 58 중 적어도 하나와 DPS; (2) Brij 30, Brij 35, Brij 52, Brij C10 및 Brij 58 중 적어도 하나와 DDPS; (3) Brij 30, Brij 35, Brij 52, Brij C10 및 Brij 58 중 적어도 하나와 TPS; (4) Brij 30, Brij 35, Brij 52, Brij C10 및 Brij 58 중 적어도 하나와 HPS; 및 (5) Brij 30, Brij 35, Brij 52, Brij C10 및 Brij 58 중 적어도 하나와 OPS 중 적어도 하나를 포함하는 조성물은, 경구 및 치과 위생을 촉진시키는데 유용할 수 있다. 예를 들어, 일 실시형태에 있어서, 조성물은 치아 및 의치 상의 경질 및 연질 침착물을 연화 및/또는 용해시키는데 이용될 수 있다.
일 실시형태에 있어서, (1) Brij 30, Brij 35, Brij 52, Brij C10 및 Brij 58 중 적어도 하나와 DPS; (2) Brij 30, Brij 35, Brij 52, Brij C10 및 Brij 58 중 적어도 하나와 DDPS; (3) Brij 30, Brij 35, Brij 52, Brij C10 및 Brij 58 중 적어도 하나와 TPS; (4) Brij 30, Brij 35, Brij 52, Brij C10 및 Brij 58 중 적어도 하나와 HPS; 및 (5) Brij 30, Brij 35, Brij 52, Brij C10 및 Brij 58 중 적어도 하나와 OPS 중 적어도 하나를 포함하는 조성물은, 피부의 표면 위 혹은 아래에 있는 화장 관련 구조물을 가용화, 리모델링 및 제거하는데 유용할 수 있다. 예를 들어, 일 실시형태에 있어서, 조성물은 노화된, 반흔성 및 UV-손상된 피부를 치료하고, 그리고 검버섯, 피부 폴립(skin tag), 지루각화증, 반흔 조직, 황색종, 비암성 과증식성 상태, 표면 요철 및 미늘성 패취를 제거 및/또는 리모델링하는데 유용할 수 있다. 일 실시형태에 있어서, 이 용도는, 장벽 세포 및 조직의 분해 및 가용화에 의해 장벽을 붕괴시키기 위하여, 조성물을 이용한 외부 피부 장벽의 섭동, 및 소정 환경에서 인가된 에너지를 포함할 수 있다. 일 실시형태에 있어서, 상기 조성물은 피부의 보다 깊은 층에 도입되어, 피부 표면의 주름, 반흔 혹은 이들 둘 모두와 연관된 구조의 분해, 가용화 및 제거를 용이하게 할 수 있다. 기타 미용 용도는 진피 박리 혹은 피부 미백을 포함한다. 조성물은 이전의 손상, UV-손상 또는 노화와 연관된 피부의 변색을 제거하는데 이용될 수 있다. 몇몇 실시형태에 있어서, 섭동에 이어서, 피부의 평활도, 탄성 및 탄력을 증가시키는 것으로 믿어지거나 알려진, 치료적 약물 혹은 천연 산물, 그리고 기타 화장료 조성물(cosmetic composition)의 도포가 뒤따를 수 있다. 이러한 화장료 조성물은, 예를 들어, 엘라스틴 또는 그의 펩타이드(예컨대, V-V-P-Q), 콜라겐 또는 그의 펩타이드, 레스베라트롤(resveratrol), 이데베논(idebenone), 보조효소 Q10, 아세틸 헥사펩타이드-3, 글라이코사미노글라이칸, 팔미토일 펜타펩타이드-4, 히알루론산 나트륨 등 및 이들의 조합을 포함할 수 있다.
일 실시형태에 있어서, 상기 조성물을 이용해서 회수된 세포 성분은 특정 질환과 연관된 특정 바이오마커를 검출, 정량화 및 확인하기 위하여 생화학적 검정에 도입될 수 있다. 생화학적 검정은 내인성 및 외인성의 양쪽 모두인 DNA, RNA, 단백질, 펩타이드, 지질, 탄수화물 및 소분자를 검출하기 위한 모든 분자 진단 검정을 포함할 수 있다. 이용되는 생화학적 검정으로는 PCR, ELISA, 크로마토그래피, 겔 분석, 전기 영동, 웨스턴 블롯, 서던 블롯, 노던 블롯, 및 질환의 분자 바이오마커의 동정을 위하여 병원 실험실에서 이용되는 기타 방법을 포함한다.
일 실시형태에 있어서, (1) Brij 30, Brij 35, Brij 52, Brij C10 및 Brij 58 중 적어도 하나와 DPS; (2) Brij 30, Brij 35, Brij 52, Brij C10 및 Brij 58 중 적어도 하나와 DDPS; (3) Brij 30, Brij 35, Brij 52, Brij C10 및 Brij 58 중 적어도 하나와 TPS; (4) Brij 30, Brij 35, Brij 52, Brij C10 및 Brij 58 중 적어도 하나와 HPS; 및 (5) Brij 30, Brij 35, Brij 52, Brij C10 및 Brij 58 중 적어도 하나와 OPS 중 적어도 하나를 포함하는 조성물은, 점막 및 피부 병변의 치료에 유용할 수 있다. 이러한 용도는 조성물들 중 하나 이상을 연마 및 흡수 면봉(일용 안면 박리 스펀지와 유사)에 함침시키고, 미리 결정된 시간 동안 표적 조직에 대한 트위스트 혹은 전후진 이동으로 관심 대상 영역에 면봉을 중간 압력으로 적용하는 것을 포함할 수 있다. 깊이는 압력의 양뿐만 아니라 적용 시간에 의해 조절될 수 있다. 병변이 용해되고 방출된 바이오마커가 패드에 흡수된 후에, 면봉 및 용해된 조직을 회수하여, 예컨대, 바이오마커 및 기타 분석물 분석을 위하여 병리 검사실로 보낼 수 있다.
실시예
소정의 실시형태가 실시예의 형태로 이하에 설명된다. 본 발명의 잠재적인 모든 응용을 묘사하는 것은 불가능하다. 따라서, 실시형태들은 상당히 자세히 기술되지만, 여하한 첨부된 특허청구범위의 범주를 이러한 상세로 혹은 임의의 특정 실시형태로 제한하기 위한 의도는 아니다.
실시예 1: 재료
DPS, DDPS, TPS, HPS 및 OPS는 쯔비터이온성 계면활성제로서 시그마-알드리치사(Sigma-Aldrich)로부터 구입하였다. Brij 35, Brij 52, Brij C10 및 Brij 58은 비이온성 계면활성제로서 시그마-알드리치사로부터 구입하였다. Brij 30은 TCI 아메리카사(TCI America)로부터 구입하였다. 모든 용액은, PBS(pH = 7.4) 중 0.5% w/v의 총 농도를 위하여, 0.25% w/v 쯔비터이온성 계면활성제 및 0.25% w/v 비이온성 계면활성제(0.25% v/v B30)를 첨가함으로써 제조하였다. 양성 대조군은 PBS 중 1% v/v 트리톤(Triton) X-100(TX-1)을 넣음으로써 제조하였다.
실시예 2: 돼지 피부로부터의 단백질 회수
단백질은 모델 조직으로서 돼지 피부로부터 회수하였다. 피부는 람파이어 바이올로지컬 라보라토리즈사(Lampire Biological Laboratories Inc.)로부터 냉동 상태로 구입하여, -70℃에서 보존하였다. 사용 2시간 전에, 피부를 실온(RT)에서 해동시키고, 작은 조각(2.5㎝×2.5㎝)으로 잘랐다. 이 피부 조각을 피하 지방으로부터 벗겨, 가시적인 스크래치나 찰과상 없이 사용하였다. 단백질 회수는 경피용출시험기(Franz diffusion cell: FDC) 조립체(조직 노출 면적 1.77㎠; 펌기어사(Permegear)) 상에 피부 조각을 올려 놓고 수행하였다. FDC의 수용기 챔버는 PBS로 채우고 공여기 챔버는 샘플링 완충액으로서 계면 활성제 조합물 1㎖로 채웠다. 이 완충액은 또한 초음파 변환기와 조직 간에 결합 유체로서 작용하였다. 단백질 회수는 20㎑의 주파수에서 작동하는 600-W 프로브 초음파분쇄기(소닉스 앤 머티어리얼즈사(Sonics & Materials))를 이용해서 실온에서 수행하였다. 초음파 변환기는 조직 표면으로부터 5㎜ 거리에 배치하고, 50% 듀티 사이클에서 2.4 W/㎠의 초음파 강도를 3분 동안 인가하였다. 이제는 가용화된 조직 구성요소들을 함유하는 샘플링 완충액을 흡인하여 분석할 때까지 -70℃에서 유지시켰다.
본 명세서에 개시된 각 계면활성제 제형에 대한 가용화 능력은 총 단백질 및 가용화된 단백질의 농도(㎎/㎖)에 의해 정량화하였다. 10,000×g에서 작동하는 원심분리기를 이용해서 4℃에서 15분 동안 샘플로부터 상청액을 단리시켰다. 가용화된 단백질량은 열량 검출 키트(마이크로 BCA 단백질 검정 키트(Micro BCA Protein Assay Kit): 피어스사(Pierce))를 이용해서 샘플 상청액 중에서 측정하였다.
표 1은 돼지 피부가 초음파의 존재 하에 쯔비터이온성 계면활성제와 비이온성 계면활성제의 각종 조합물과 접촉되는 경우 해당 돼지 피부로부터 회수된 총 단백질(㎎/㎖)을 나타낸다. 도 1은 이 결과를 그래프 형식으로 나타낸다.
Figure pct00003
표 2는 돼지 피부가 초음파의 존재 하에 쯔비터이온성 계면활성제와 비이온성 계면활성제의 동일한 조합물과 접촉되는 경우 해당 돼지 피부로부터 회수된 가용성 단백질(㎎/㎖)을 나타낸다. 도 2는 그 결과를 그래픽 형태로 나타낸다.
Figure pct00004
실시예 3: 농도 의존성
TPS:Brij C10은 농도 효과에 대해서 연구되었다. 계면활성제 농도는 TPS:Brij C10(1:1비)의 0.5%, 1% 및 2%의 총 농도에서 검사되었다. 도 3은 돼지 피부로부터 가용성 및 총 단백질 추출 효능에 대한 TPS:Brij C10의 농도에 대한 의존성을 나타낸다.
실시예 4: 효소 보호
토끼로부터의 GAPDH는 시그마-알드리치사로부터 모델 효소로서 구입하였다. GAPDH 분말을 ddH2O(밀리포어사(Milipore)) 중에 90 U/㎖로 용해시키고, E-관 내에 분배시키고 나서, 사용할 때까지 -80℃에서 보존하였다. 효소 보호는, 양성 대조군으로서의 PBS 중에서의 것과 비교해서, 본 명세서에 개시된 각 조합물 중에서의 GAPDH의 인큐베이션에 의해 수행하였다. GAPDH의 농도는 0.5 U/㎖로 고정시켰다. GAPDH는 37℃에서 10분 동안 인큐베이션시켰다. GAPDH 효소의 활성(U/㎖)은 KD얼라트(KDalert)(상표명) GAPDH 검정 키트(미국 텍사스주에 소재한 암비온사(Ambion, Inc))에 의해 평가하였다. 도 4는 쯔비터이온성 계면활성제와 비이온성 계면활성제의 각종 조합의 각각 중에서의 GAPDH의 보존 활성을 그래프 형식으로 나타낸다.
GAPDH 활성은 가용성 단백질 회수에 의해 증대되었다. 도 5는 쯔비터이온성 계면활성제와 비이온성 계면활성제의 각종 조합의 각각에서의 가용성 단백질 추출 효능과 GAPDH 안정성의 조합된 의존성을 그래프 형식으로 나타낸다.
실시예 5: 세포 가용화
HEK 세포(HEKa-APF, 미국 캘리포니아주에 소재한 인비트로젠사(Invitrogen))를, 벤트 캡(Vent Cap)을 구비한 코닝(Corning)(등록상표) 세포 배양 처리된 플라스크(75㎠ 직사각형 경사 넥(Rectangular Canted Neck), 코닝사)에서 배양하였다. HEK 세포는 인간 각질세포 성장 보충제(Human Keratinocyte Growth Supplement)가 첨가된 60μM 칼슘을 지니는 에피라이프(EpiLife)(등록상표) 중에서 3 내지 8계대 성장시켰다. 도 6은, TX-1에 비해서, DPS:Brij 30, TPS:Brij C10, HPS:Brij 52, OPS:Brij 52, OPS:Brij C10 및 OPS:Brij 58을 이용해서 t = 0(검은색 막대), t = 4℃에서 4시간(빗금친 막대) 및 t = 실온에서 4시간(십자형 막대)에서 HEK 세포로부터의 총 단백질 회수량을 나타낸다.
실시예 6: 시험관내 검정
가용화된 세포 중의 총 단백질은 마이크로 BCA 단백질 검정 키트(Micro BCA Protein Assay Kit)(미국 펜실베니아주에 소재한 피셔 사이언티픽사(Fisher Scientific))를 이용해서 분석하였다. 트립신화된 세포를 혈구계(hemocytometer)(미국 펜실베니아주에 소재한 피셔 사이언티픽사 피어스사)에 의해 계수하고, 96-웰 플레이트에 가하였다. 하룻밤 성장 후, 배지를 제거하고 100㎕의 용해제(lysis agent)(TX-1, DPS:Brij 30, TPS:Brij C10, HPS:Brij 52, OPS:Brij 52, OPS:Brij C10 및 OPS:Brij 58)로 교체하였다. 도 7은 t = 0(검은색 막대), t = 4℃에서 4시간(빗금친 막대) 및 t = 실온에서 4시간(십자형 막대)에서, 동일 시약 중에 가용화된 HEK 세포에서 측정된 GAPDH 활성을 나타낸다.
안정성의 추가의 연구를 위하여, 효소는 실온에서 1일, 실온에서 3일, 그리고 실온에서 7일 동안 인큐베이션시켰다. 도 8은 t = 4시간(검은색 막대), t = 24시간(빗금친 막대), t = 72시간(십자형 막대) 및 7일(수평선 막대)에 실온에서 측정한 GAPDH 활성을 나타낸다.
실시예 7: 조직 가용화
피부 조직은 안락사시킨 마우스로부터 회수하여 사용할 때까지 -80℃에서 보존하였다. 각 조직 약 10㎎을 2㎖ 관에 넣었다. 400㎕의 차가운 용해 완충액(TX-1, TPS:Brij C10, HPS:Brij 52 및 OPS:Brij C10) 및 프로테아제 저해제 칵테일 정제(미국 인디아나주의 로슈 어플라이드 사이언스사(Roche Applied Science))를 상기 관에 첨가하였다(1개의 정제/50㎖; 1개의 정제는 안티페인-다이하이드로클로라이드(Antipain-dihydrochloride) 3㎎, 아프로티닌(Aprotinin) 0.5㎎, 베스타틴(Bestatin) 0.5㎎, 키모스타틴(Chymostatin) 1㎎, E-64 3㎎, EDTA-Na2 10㎎, 류펩틴(Leupeptin) 0.5㎎, 페파블록(Pefabloc) SC 20㎎, 펩스타틴(Pepstatin) 0.5㎎ 및 포스포르아미돈(Phosphoramidon) 3㎎을 함유한다). 조직은 균질화기(미국 노스캐롤라이나주에 소재한 이카사(IKA))를 이용해서 13,000 rpm에서 1분 동안 균질화시켰다. 도 9는, TX-1에 비해서, TPS:Brij C10, HPS:Brij 52 및 OPS:Brij C10을 이용해서 균질화된 마우스 피부로부터 회수한 총 단백질을 나타낸다. 도 10은 균질화된 마우스 피부에서 측정된 GAPDH 비활성을 나타낸다.
본 명세서 혹은 특허청구범위에서 "포함하다"(include) 또는 "포함하는"(including)이란 용어가 사용되는 정도에 대해서, 특허청구범위에서 전통적인 용어로서 이용될 경우 그 용어가 해석되는 것처럼 "포함하는"(comprising)이란 용어와 유사한 방식으로 포함하는 것으로 의도된다. 본 명세서 및 특허청구범위에서 이용되는 바와 같이, 단수 형태는 복수를 포함한다. 또한, "또는(혹은)"이란 용어가 이용되는 정도(예컨대, A 또는 B)에 대해서, "A 또는 B 또는 둘 모두"를 의미하도록 의도된다. 최종적으로, "약"이란 용어가 숫자와 함께 이용될 경우, 그 숫자의 ±10%를 포함하도록 의도된다. 즉, "약 10"은 9에서 11까지를 의미할 수 있다.
위에서 기술된 바와 같이, 본 출원은 그의 실시형태의 설명에 의해 예시되어 있고 또한 그 실시형태가 상당히 상세히 설명되어 있지만, 첨부된 특허청구범위의 범주를 이러한 상세로 규제 혹은 어쨌든 제한하는 것이 본 출원의 의도는 아니다. 추가의 이점 및 변형이 당업자에게 용이하게 명백해질 것이며, 본 개시 내용의 유익은 본 출원에서 제공된다. 따라서, 본 출원은, 그의 보다 넓은 양상에 있어서, 구체적인 상세, 나타낸 예시적인 실시예 혹은 임의의 인용되는 장치로 제한되는 것은 아니다. 일반적인 발명적인 개념의 사상 혹은 범주로부터 벗어나는 일 없이 이러한 상세, 실시예 및 장치로부터 변경이 행해질 수 있다.

Claims (30)

  1. 하기 구조식을 포함하는 쯔비터이온성 계면활성제(zwitterionic surfactant):
    Figure pct00005

    (식 중, n은 10, 12, 14, 16 및 18로부터 선택됨); 및
    하기 구조식을 포함하는 비이온성 계면활성제:
    H(CH2)aO(CH2CH2O)bH
    (식 중, a는 12 및 16으로부터 선택되고, b는 2, 4, 10, 20 및 23으로부터 선택되지만,
    단,
    (i) n이 10인 경우, a 및 b는 각각 동시에 12 및 4가 아니며; 그리고
    (ii) n이 16인 경우, a 및 b는 각각 동시에 12 및 23이 아님)
    를 포함하는 조성물.
  2. 제1항에 있어서, n은 12이고, a는 16이며, b는 10인 것인 조성물.
  3. 제1항에 있어서, n은 14이고, a는 12이며, b는 4인 것인 조성물.
  4. 제1항에 있어서, n은 14이고, a는 16이며, b는 2인 것인 조성물.
  5. 제1항에 있어서, n은 14이고, a는 16이며, b는 10인 것인 조성물.
  6. 제1항에 있어서, n은 16이고, a는 12이며, b는 4인 것인 조성물.
  7. 제1항에 있어서, n은 16이고, a는 16이며, b는 2인 것인 조성물.
  8. 제1항에 있어서, n은 16이고, a는 16이며, b는 10인 것인 조성물.
  9. 제1항에 있어서, n은 18이고, a는 12이며, b는 4인 것인 조성물.
  10. 제1항에 있어서, n은 18이고, a는 16이며, b는 2인 것인 조성물.
  11. 제1항에 있어서, n은 18이고, a는 16이며, b는 10인 것인 조성물.
  12. 제1항에 있어서, n은 18이고, a는 16이며, b는 20인 것인 조성물.
  13. 제1항에 있어서, 상기 조성물은 완충 용액 중 약 7.0보다 높은 염기성 pH를 지니는 것인 조성물.
  14. 제1항에 있어서, 상기 조성물은 완충 용액 중 약 7.0 내지 약 9.0 사이의 pH인 것인 조성물.
  15. 환자의 피부 위 혹은 밑에 있는 조직을 가용화시키고, 리모델링 및/또는 제거하는 방법으로서, 상기 방법은,
    상기 피부 위의 관심 대상 영역에 에너지를 가하는 단계; 및
    상기 영역을 조직 가용화 조성물과 접촉시키는 단계를 포함하되, 상기 조직 가용화 조성물은,
    하기 구조식을 포함하는 쯔비터이온성 계면활성제:
    Figure pct00006

    (식 중, n은 10, 12, 14, 16 및 18로부터 선택됨); 및
    하기 구조식을 포함하는 비이온성 계면활성제:
    H(CH2)aO(CH2CH2O)bH
    (식 중, a는 12 및 16으로부터 선택되고, b는 2, 4, 10, 20 및 23으로부터 선택되지만,
    단, n이 10인 경우, a 및 b는 각각 동시에 12 및 4가 아님)
    를 포함하는 것인 방법.
  16. 제15항에 있어서,
    관심 대상 가용화 영역의 적어도 일부를 제거하여 상기 피부 위에 노출된 구역을 남기는 단계; 및
    상기 노출된 구역에 치료적 조성물과 화장료 조성물(cosmetic composition) 중 적어도 한쪽을 도포하는 단계를 더 포함하는 방법.
  17. 제16항에 있어서, 상기 도포하는 단계는, DNA-기반 약물, RNA-기반 약물, 단백질-기반 약물, 펩타이드-기반 약물, 지질-기반 약물, 탄수화물-기반 약물, 소분자 약물, 나노입자-기반 약물 및 리포솜-캡슐화 약물 중 적어도 1종을 포함하는 치료적 조성물을 상기 노출된 구역에 도포하는 단계를 포함하는 것인 방법.
  18. 제16항에 있어서, 상기 도포하는 단계는, 상기 노출된 구역에 엘라스틴, 엘라스틴-기반 펩타이드, 콜라겐, 콜라겐-기반 펩타이드, 레스베라트롤(resveratrol), 이데베논(idebenone), 보조효소 Q10, 아세틸 헥사펩타이드-3, 글라이코사미노글라이칸, 팔미토일 펜타펩타이드-4, 히알루론산 나트륨, 및 이들의 조합 중 적어도 1종을 포함하는 화장료 조성물을 도포하는 단계를 포함하는 방법.
  19. 점막, 피부 또는 기타 조직으로부터 분석물(analyte)을 회수하는 방법으로서, 상기 방법은,
    적어도 하나의 분석물을 포함하는 상기 점막, 피부 또는 기타 조직 상의 관심 대상 영역에 에너지를 가하는 단계;
    상기 영역을 조직 가용화 조성물과 접촉시킴으로써, 상기 적어도 하나의 분석물을 포함하는 점막, 피부 또는 기타 조직의 적어도 일부를 가용화시키는 단계; 및
    가용화된 상기 점막, 피부 또는 기타 조직으로부터 상기 적어도 하나의 분석물을 수거하는 단계를 포함하되, 상기 조직 가용화 조성물은,
    하기 구조식을 포함하는 쯔비터이온성 계면활성제:
    Figure pct00007

    (식 중, n은 10, 12, 14, 16 및 18로부터 선택됨); 및
    하기 구조식을 포함하는 비이온성 계면활성제:
    H(CH2)aO(CH2CH2O)bH
    (식 중, a는 12 및 16으로부터 선택되고, b는 2, 4, 10, 20 및 23으로부터 선택되지만,
    단, n이 10인 경우, a와 b는, 각각 동시에 12 및 4가 아님)를 포함하는 것인 방법.
  20. 제19항에 있어서, 상기 분석물은 단백질을 포함하는 것인 방법.
  21. 제19항에 있어서, 상기 분석물은 암 바이오마커를 포함하는 것인 방법.
  22. 제19항에 있어서, 상기 분석물은 항체를 포함하는 것인 방법.
  23. 제19항에 있어서, 상기 분석물은 펩타이드를 포함하는 것인 방법.
  24. 제19항에 있어서, 상기 분석물은 지질을 포함하는 것인 방법.
  25. 제19항에 있어서, 상기 분석물은 핵산을 포함하는 것인 방법.
  26. 제19항에 있어서, 상기 분석물은 소분자를 포함하는 것인 방법.
  27. 제19항에 있어서, 상기 분석물은 미생물을 포함하는 것인 방법.
  28. 제19항에 있어서, 상기 분석물은 무기 작용제(warfare agent)를 포함하는 것인 방법.
  29. 제19항에 있어서, 상기 분석물은 환경 오염물을 포함하는 것인 방법.
  30. 제19항에 있어서, 상기 분석물은 약물을 포함하는 것인 방법.
KR1020147035225A 2012-05-16 2012-05-16 세포 및/또는 조직을 가용화시키기 위한 조성물 KR102099487B1 (ko)

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
PCT/US2012/038169 WO2013172832A1 (en) 2012-05-16 2012-05-16 Compositions for solubilizing cells and/or tissue

Publications (2)

Publication Number Publication Date
KR20150023394A true KR20150023394A (ko) 2015-03-05
KR102099487B1 KR102099487B1 (ko) 2020-04-09

Family

ID=49584087

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
KR1020147035225A KR102099487B1 (ko) 2012-05-16 2012-05-16 세포 및/또는 조직을 가용화시키기 위한 조성물

Country Status (10)

Country Link
EP (2) EP3056559B1 (ko)
JP (1) JP2015528691A (ko)
KR (1) KR102099487B1 (ko)
CN (1) CN104520418A (ko)
AU (2) AU2012380348B2 (ko)
BR (1) BR112014028239B1 (ko)
CA (1) CA2873707A1 (ko)
IN (1) IN2014MN02536A (ko)
MX (1) MX369625B (ko)
WO (1) WO2013172832A1 (ko)

Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2010093861A2 (en) * 2009-02-13 2010-08-19 The Regents Of The University Of Calfornia System, method and device for tissue-based diagnosis
US20120004592A1 (en) * 2007-08-06 2012-01-05 The Regents Of The University Of California Compositions for solubilizing tissue

Family Cites Families (18)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JPS5358492A (en) * 1976-11-08 1978-05-26 Kao Corp Anti-foggig agent composition with lng lasting effect
US5639630A (en) * 1995-05-16 1997-06-17 Bayer Corporation Method and reagent composition for performing leukocyte differential counts on fresh and aged whole blood samples, based on intrinsic peroxidase activity of leukocytes
ATE229817T1 (de) * 1996-10-24 2003-01-15 Alza Corp Penetrationsfördernde substanzen für die transdermale verabreichung von wirkstoffen, vorrichtungen und verfahren zur herstellung
US7776542B1 (en) * 1997-08-04 2010-08-17 Advanced Life Science Institute Methods for the detection of hepatitis B and C viruses
US6589173B1 (en) 2000-07-17 2003-07-08 The Regents Of The University Of California Ultrasound system for disease detection and patient treatment
FR2848848B1 (fr) * 2002-12-19 2005-01-28 Oreal Composition de lavage des matieres keratiniques a base de tensioactif amphotere et de peg modifie par un groupe hydrophobe
US7186522B2 (en) * 2003-03-31 2007-03-06 Cytyc Corporation Papanicolau staining process
WO2005012549A2 (en) * 2003-08-01 2005-02-10 Fqubed, Inc. Apparatus and methods for evaluating the barrier properties of a membrane
US7608278B2 (en) * 2003-12-30 2009-10-27 Wyeth Formulations of hydrophobic proteins in an immunogenic composition having improved tolerability
JP4422550B2 (ja) * 2004-05-25 2010-02-24 日華化学株式会社 親水性フッ素樹脂粒子の製造方法
WO2006026248A1 (en) * 2004-08-25 2006-03-09 Sigma-Aldrich Co. Compositions and methods employing zwitterionic detergent combinations
WO2009048681A2 (en) * 2007-08-06 2009-04-16 The Regents Of The University Of California Methods of tissue-based diagnosis
EP2278997B1 (en) * 2008-04-21 2016-08-10 Nanobio Corporation Nanoemulsion influenza vaccine
AU2009240389A1 (en) * 2008-04-25 2009-10-29 Nanobio Corporation Nanoemulsions for treating fungal, yeast and mold infections
US7700530B2 (en) * 2008-06-30 2010-04-20 Kimberly Clark Worldwide, Inc. Polysensorial personal care cleanser comprising a quaternary silicone surfactant
JP5382687B2 (ja) * 2008-11-12 2014-01-08 独立行政法人産業技術総合研究所 ルシフェリン−ルシフェラーゼ反応における発光強度の低下を抑制するための組成物及び方法
CA2750233A1 (en) * 2009-01-28 2010-08-05 Nanobio Corporation Compositions for treatment and prevention of acne, methods of making the compositions, and methods of use thereof
US20120064136A1 (en) * 2010-09-10 2012-03-15 Nanobio Corporation Anti-aging and wrinkle treatment methods using nanoemulsion compositions

Patent Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US20120004592A1 (en) * 2007-08-06 2012-01-05 The Regents Of The University Of California Compositions for solubilizing tissue
WO2010093861A2 (en) * 2009-02-13 2010-08-19 The Regents Of The University Of Calfornia System, method and device for tissue-based diagnosis

Also Published As

Publication number Publication date
BR112014028239B1 (pt) 2021-05-11
EP3056559B1 (en) 2019-07-10
CN104520418A (zh) 2015-04-15
CA2873707A1 (en) 2013-11-21
MX369625B (es) 2019-11-14
AU2017203389A1 (en) 2017-06-08
EP3056559A3 (en) 2016-10-12
KR102099487B1 (ko) 2020-04-09
AU2012380348B2 (en) 2017-02-23
WO2013172832A1 (en) 2013-11-21
AU2012380348A1 (en) 2015-01-22
EP2756061A4 (en) 2014-08-13
MX2014013794A (es) 2015-04-08
IN2014MN02536A (ko) 2015-09-04
BR112014028239A2 (pt) 2017-06-27
EP3056559A2 (en) 2016-08-17
JP2015528691A (ja) 2015-10-01
EP2756061A1 (en) 2014-07-23

Similar Documents

Publication Publication Date Title
EP3073263B1 (en) Device, composition and method for tissue-based diagnosis
AU2015296412B2 (en) Applications of surfactin in cosmetic products and thereof
Vejnovic et al. Investigation of different formulations for drug delivery through the nail plate
Archer Functions of the skin
US20170105673A1 (en) Methods for Solubilizing Cells and/or Tissue
JP2008026092A (ja) 皮膚バリア機能の改善のための素材の有用性の鑑別方法。
JP6527195B2 (ja) 細胞および／または組織を可溶化するための組成物
KR102099487B1 (ko) 세포 및/또는 조직을 가용화시키기 위한 조성물
Mohammad Seyed Mansour et al. The effects of sulfur mustard on the skin and their management: reviewing the studies conducted on Iranian chemical victims
Tan et al. Nephrotoxicity of hump-nosed pit viper (Hypnale hypnale) venom in mice is preventable by the paraspecific Hemato polyvalent antivenom (HPA)
Polefka Surfactant interactions with skin
Cunliffe et al. An explanation fro chloracne--an industrial hazard
JP2023522068A (ja) 毛包関連状態を処置するための組成物および方法
US20160235791A1 (en) Bacteria of the stenotrophomonas genus and/or growth inducer of said bacteria for preventing and/or treating atopic dermatitis
WO2022009873A1 (ja) Ｒｎａ安定化剤
EP3922714A1 (en) Use of 3d skin model for assessing treatment of sars-coronavirus skin infection
Kim et al. Skin microbiota and its role in health and disease with an emphasis on wound healing and chronic wound development
Kim High Levels of Oxidative Stress and the Skin Microbiota Contribute Towards Initiation and Development of Chronic Wounds in Diabetic Mice
Lundgren Bridging microbiology and therapy in conditions with damaged skin barrier
Svoboda Adaptation of conventional and modern non-invasive methods for analysis of photoaged human skin barrier
Kahsay Formulation and characterization of colloidal formulations loaded with free amino acids for dermal delivery
WO2015162552A2 (en) Composition for topic use
Nova TINJAUAN FARMAKOTERAPI IKTIOSIS LAMELARIS (IL): LAPORAN KASUS
JP2024033640A (ja) Ｔｅｅｒを指標とした口唇改善剤のスクリーニング方法及びそれにより選抜された薬剤
Barrett-Hill et al. A corneotherapeutic view of the skin microbiome

Legal Events

Date Code Title Description
A201 Request for examination
E902 Notification of reason for refusal
E701 Decision to grant or registration of patent right