BR112014028239B1

BR112014028239B1 - composições e métodos para solubilização, remodelagem e/ou remoção de células e/ou tecido e para recuperar analitos da membrana da mucosa, da pele ou outro tecido

Info

Publication number: BR112014028239B1
Application number: BR112014028239-0A
Authority: BR
Inventors: Byeong Hee Hwang; Samir Mitragotri; Russell M. Lebovitz
Original assignee: Dx Biosciences, Inc.; The Regents Of The University Of California
Priority date: 2012-05-16
Filing date: 2012-05-16
Publication date: 2021-05-11
Also published as: AU2012380348B2; CA2873707A1; MX2014013794A; EP2756061A4; EP3056559A2; IN2014MN02536A; WO2013172832A1; BR112014028239A2; JP2015528691A; CN104520418A; MX369625B; AU2012380348A1; KR102099487B1; EP2756061A1; EP3056559A3; EP3056559B1; KR20150023394A; AU2017203389A1

Abstract

COMPOSIÇÕES PARA SOLUBILIZAÇÃO DE CÉLULAS E/OU TECIDO. São fornecidas as composições de solubilização. As composições compreendem, pelo menos, um tensoativo zwitteriônico e, pelo menos, um tensoativo não iônico. Em uma modalidade, as composições podem ser úteis para solubilização e remodelagem e/ou remoção de tecido sobre ou abaixo da pele de um paciente, opcionalmente juntamente com a aplicação de energia a uma região de interesse da pele. Em uma modalidade, pelo menos um analito pode ser coletado e analisado, a partir do tecido solubilizado.

Description

DECLARAÇÃO RELATIVA À PESQUISA OU DESENVOLVIMENTO SUBVENCIONADOS PELO GOVERNO.

[0001] A presente invenção foi realizada com suporte do governo sob a subvenção federal número W81XWH-06-01-00400 concedido pelo Exército dos Estados Unidos. O governo dos Estados Unidos tem claros direitos na presente invenção.

ANTECEDENTES

[0002] A pele é a "janela" para corpo. A pele é única entre os órgãos do corpo por várias razões: (1) a pele é o maior órgão do corpo humano; (2) a pele é diretamente exposta ao ambiente; (3) a pele é um órgão excretório excelente; (4) a pele é o órgão mais visível e acessível do corpo; e (5) a pele é um órgão imune altamente ativo do corpo.

[0003] A pele tem outra qualidade importante: O perfil molecular da pele tem informação que é valiosa para o monitoramento fisiológico de, entre outras coisas, pequenas moléculas orgânicas, proteínas, DNA, RNA, e lipídios. Muito pode ser aprendido perfil molecular da pele. Por exemplo, os agentes patogênicos (por exemplo, bactérias) que crescem na pele podem permitir a identificação forense. O perfil molecular da pele pode revelar fatores ambientais aos quais o corpo foi passivamente exposto. Estes fatores ambientais podem variar desde o mais comum, por exemplo, alergenos, toxinas, e produtos cosméticos, até o industrial e/ou agrícola, por exemplo, solventes industriais, fertilizantes, e pesticidas, e aos perigosos, por exemplo, explosivos e outros agentes de guerra.

[0004] O perfil molecular da pele também pode revelar fatores aos quais, o corpo foi ativamente exposto. Mais particularmente, o perfil molecular da pele pode revelar o que o corpo consumiu. Por exemplo, substâncias de abuso (por exemplo, drogas ilegais ou narcóticos) e drogas terapêuticas (por exemplo, tramadol, fluconazol, barbitúricos, e esteróides anabólicos) podem ser encontradas na pele semanas depois do consumo.

[0005] O perfil molecular da pele também pode auxiliar no diagnóstico de condições e doenças. Por exemplo, o colesterol da pele é um representante da amplitude dos blocos arteriais. A glicação do colágeno da pele é um indicador de um histórico da diabete. A deposição de β-amiloides da pele pode indicar a existência e a amplitude do mal de Alzheimer. E proteínas globulares da pele (por exemplo, IgE) podem indicar alergias a alergenos específicos.

[0006] Vários métodos existem para amostragem de biomoléculas da pele. Por exemplo, um método atual é a biópsia da pele. Entretanto, a biópsia da pele é invasiva e a análise é difícil. Objetivamente falando, a biópsia da pele é projetada para peritos bem equipados e, assim, o seu uso em uma colocação de ponto de atendimento é limitado. Outro método atual para amostragem de biomoléculas da pele, fita de descascamento, sofre destas mesmas limitações e é geralmente inaceitável por causa da variabilidade nos resultados. Ainda outro método atual para amostragem de biomoléculas da pele é pegar um swab da pele. Enquanto desejável por causa da sua simplicidade, um swab da pele é superficial na sua profundidade de inspeção, e qualitativo nos seus resultados. Finalmente, o tecido foi submetido ao ultrassom na presença de tensoativos tal como sorbitanos ("SPANs"), sorbitanos de polioxietileno combinaram com ácidos graxos ("tweens"), brometo de cetil trimetilamômio ("CTAB"), e as suas misturas. Ver U.S. Patent No. 6,589,173 publicada para Mitragotri et al. Entretanto, SPANs, tweens e CTAB, individualmente e coletivamente, foram avaliados como sendo impróprios para recuperação de constituintes da pele. Os sorbitanos e tweens, que são tensoativos não iônicos, são brandos e sem características desnaturantes, mas são ineficazes para solubilização do tecido da pele. CTAB, um tensoativo catiônico, é eficaz para solubilização do tecido da pele, mas desnatura impropriamente as proteínas, modificando profundamente as propriedades das biomoléculas na solução, tornando-as inúteis para objetivos funcionais.

[0007] Junto com o fornecimento de uma abundante quantidade de informações, a pele também pode ser hospedeira de inumeráveis condições cosméticas indesejáveis, tais como manchas senis, marcas da pele, ceratose ceborreica, tecidos de cicatriz, xantomas, condições hiperproliferativas não cancerosas, impactos superficiais, e manchas escamosas; e condições terapêuticas indesejáveis tais como tumores da pele, ceratose actínica, leucoplasia, e cânceres superficiais que se relacionam com o esôfago de Barrett e à placa de pré-câncer do cólon direito. Para estas condições, solubilização e remodelagem ou remoção podem ser a preocupação inicial, com ou sem processamento diagnóstico subsequente.

[0008] Uma necessidade existe para composições de amostragem da pele, bem como de membrana da mucosa e outras amostragens de tecido, que, quando utilizadas juntamente com a energia aplicada, pelo menos solubilizam parcialmente tal pele, membrana da mucosa, e outro tecido. Uma necessidade adicional existe para preservar a funcionalidade e a integridade estrutural dos analitos, incluindo as biomoléculas, obtidas da pele solubilizada, da membrana da mucosa, e de outro tecido.

SUMÁRIO

[0009] Em uma modalidade, é fornecida uma composição, a composição compreendendo:

[00010] um tensoativo zwitteriônico, compreendendo:

[00011] em que n = 10, 12, 14, 16, ou 18; e

[00012] um tensoativo não iônico, compreendendo:

[00013] H (CH2)aO (CH2CH2O)bH

[00014] em que, a = 12 ou 16, e em que, b = 2, 4, 10, 20, ou 23.

[00015] Em uma modalidade, n = 12 (correspondendo a N-dodecil- N,N-dimetil-3-amônio-1-propanossulfonato ou "DDPS"), a = 16, e b = 10 (correspondendo a éter cetílico de polioxietileno (10) ou "Brij C10").

[00016] Em uma modalidade, n = 14 (correspondendo a N-tetradecil- N,N-dimetil-3-amônio-1-propanossulfonato ou "TPS"), a = 12, e b = 4 (correspondendo a éter laurílico de polioxietileno (4) ou "Brij 30"). Em outra modalidade, n = 14 (TPS), a = 16, e b = 2 (correspondendo a éter cetílico de polioxietileno (2) ou "Brij 52"). Em outra modalidade, n = 14 (TPS), a = 16, e b = 10 (Brij C10).

[00017] Em uma modalidade, n = 16 (correspondendo a N-hexadecil- N,N-dimetil-3-amônio-1-propanossulfonato ou "HPS"), a = 12, e b = 4 (Brij 30). Em outra modalidade, n = 16 (HPS), a = 16, e b = 2 (Brij 52). Em outra modalidade, n = 16 (HPS), a = 16, e b = 10 (Brij C10).

[00018] Em uma modalidade, n = 18 (correspondendo a N-octadecil- N,N-dimetil-3-amônio-1-propanossulfonato ou "OPS"), a = 12, e b = 4 (Brij 30). Em outra modalidade, n = 18 (OPS), a = 16, e b = 2 (Brij 52). Em outra modalidade, n = 18 (OPS), a = 16, e b = 10 (Brij C10). Em outra modalidade, n = 18 (OPS), a = 16, e b = 20 (correspondendo a éter cetílico de polioxietileno (20) ou "Brij 58").

[00019] Em uma modalidade, é fornecido um método para solubilização e/ou remodelagem e/ou remoção de tecido sobre ou abaixo da pele de um paciente, compreendendo opcionalmente aplicar energia a uma região de interesse da pele; e contatar a região com uma composição para solubilização de tecido.

[00020] Em outra modalidade, é fornecido um método para recuperar analitos da membrana da mucosa, da pele, ou de outro tecido, o método compreendendo: energia que se aplica opcionalmente a uma região de interesse da membrana da mucosa, da pele, ou de outro tecido contendo pelo menos um analito; contatar a região com uma composição para solubilização de tecido, desse modo solubilizando pelo menos um pouco da membrana da mucosa, da pele, ou de outro tecido contendo pelo menos um analito; e coletar o pelo menos um analito da membrana da mucosa, da pele, e de outro tecido solubilizados.

BREVE DESCRIÇÃO DOS DESENHOS

[00021] Nas figuras anexadas, os dados experimentais são fornecidos de modo que, juntamente com a descrição detalhada fornecida abaixo, descrevem modalidades de exemplo da invenção reivindicada.

[00022] A Figura 1 ilustra na forma gráfica a proteína total (mg/ml) recuperada da pele porcina quando a pele porcina é contatada com diversas combinações dos tensoativos zwitteriônicos e não iônicos na presença de ultrassom.

[00023] A Figura 2 ilustra na forma gráfica a proteína solúvel (mg/ml) recuperada da pele porcina quando a pele porcina é contatada com diversas combinações dos tensoativos zwitteriônicos e não iônicos na presença de ultrassom.

[00024] A Figura 3 ilustra a dependência da concentração da eficácia de extração de proteína da pele porcina de TPS:Brij C10.

[00025] A Figura 4 ilustra na forma gráfica a atividade preservada da enzima intracelular gliceraldeído 3-fosfato desidrogenase (GAPDH) em diversas combinações de tensoativos zwitteriônicos e não iônicos.

[00026] A Figura 5 ilustra na forma gráfica a dependência combinada de eficácia de extração de proteína solúvel e da estabilidade da GAPDH em diversas combinações de tensoativos zwitteriônicos e não iônicos.

[00027] A Figura 6 ilustra a recuperação da proteína total das células de Queratinócito Epidérmico Humano (HEK) em t = 0 (barras sólidas), t = 4 horas a 4°C (barras diagonais), e t = 4 horas na RT (barras sombreadas), utilizando diversos reagentes.

[00028] A Figura 7 ilustra a atividade de GAPDH medida em células HEK solubilizadas em diversos reagentes, em t = 0 (barras sólidas), t = 4 horas a 4°C (barras diagonais), e t = 4 horas na RT (barras sombreadas).

[00029] A Figura 8 ilustra a atividade de GAPDH medida em células HEK solubilizadas em diversos reagentes, na temperatura ambiente em t = 4 horas (barras sólidas), t = 24 horas (barras diagonais), 72 horas (barras sombreadas), e 7 dias (barras fixas).

[00030] A Figura 9 ilustra a proteína total recuperada da pele de camundongo homogeneizada utilizando diversos reagentes.

[00031] A Figura 10 ilustra a atividade específica de GAPDH medida na pele de camundongo homogeneizada utilizando diversos reagentes.

DESCRIÇÃO DETALHADA

[00032] Em uma modalidade, é fornecida uma composição, a composição compreendendo:

[00033] um tensoativo zwitteriônico, compreendendo:

[00034] em que n = 10, 12, 14, 16 ou 18; e

[00035] um tensoativo não iônico, compreendendo:

[00036] H (CH2) aO (CH2CH2O) bH

[00037] em que a = 12 ou 16, e em que b = 2, 4, 10, 20, ou 23.

[00038] Em uma modalidade, o tensoativo zwitteriônico compreende DPS e o tensoativo não iônico compreende pelo menos um de Brij 30, Brij 35, Brij 52, Brij C10, e Brij 58. Em uma modalidade, a combinação de DPS:Brij 30 é excluída.

[00039] Em outra modalidade, o tensoativo zwitteriônico compreende DDPS e o tensoativo não iônico compreende pelo menos um de Brij 30, Brij 35, Brij 52, Brij C10, e Brij 58.

[00040] Em outra modalidade, o tensoativo zwitteriônico compreende TPS e o tensoativo não iônico compreende pelo menos um de Brij 30, Brij 35, Brij 52, Brij C10, e Brij 58.

[00041] Em outra modalidade, o tensoativo zwitteriônico compreende HPS e o tensoativo não iônico compreende pelo menos um de Brij 30, Brij 35, Brij 52, Brij C10, e Brij 58. Em uma modalidade, a combinação de HPS:Brij 35 é excluída.

[00042] Em outra modalidade, o tensoativo zwitteriônico compreende OPS e o tensoativo não iônico compreende pelo menos um de Brij 30, Brij 35, Brij 52, Brij C10, e Brij 58.

[00043] O tensoativo zwitteriônico e o tensoativo não iônico podem ser dissolvidos em uma solução tampão. A solução tampão pode compreender, por exemplo, um ou mais tampões de fosfato salino (PBS) (pH = 7,2 - 7,6), salina tris-tamponada (pH = 7,4 - 8,0), tris-hidrocloreto (7,0 - 9,0), e ácido etilenodiaminotetracético (EDTA) (pH = 7,4-9,0). Assim, a combinação de tensoativo pode ter um pH maior do que aproximadamente 7,0 na solução tampão, entre aproximadamente 7,0 e 9,0 na solução tampão, entre aproximadamente 7,4 e 9,0 na solução tampão, entre aproximadamente 7,4 e 8,0 na solução tampão, e entre aproximadamente 7,2 e 7,6 na solução tampão.

[00044] O tensoativo zwitteriônico e o tensoativo não iônico podem ser apresentados em uma concentração total entre aproximadamente 0,01 % e aproximadamente 10 % (p/v) na solução tampão. Por exemplo, o tensoativo zwitteriônico e o tensoativo não iônico podem ser apresentados em uma concentração total de aproximadamente 0,01 % a aproximadamente 5 % (p/v) na solução tampão, incluindo concentrações totais de aproximadamente 0,1 % (p/v) a aproximadamente 2 % (p/v) na solução tampão, aproximadamente 1 % (p/v) na solução tampão, e aproximadamente 0,1 % (p/v) a aproximadamente 0,5 % (p/v) na solução tampão. Em uma modalidade, o tensoativo zwitteriônico e o tensoativo não iônico estão presentes em uma concentração total de aproximadamente 0,5 % (p/v) na solução tampão. Em outra modalidade, o tensoativo zwitteriônico e o tensoativo não iônico podem ser apresentados em uma razão de aproximadamente 3:1 a aproximadamente 1:3 ou aproximadamente 3:2 a aproximadamente 2:3. Em uma modalidade, o tensoativo zwitteriônico e o tensoativo não iônico podem ser apresentados em uma razão de aproximadamente 1:1.

[00045] A composição de tensoativo zwitteriônico:tensoativo não iônico pode ter várias aplicações.

[00046] Por exemplo, em uma modalidade, é fornecido um método para solubilização e/ou remodelagem e/ou remoção de tecido sobre ou abaixo da pele de um paciente, compreendendo aplicar de energia a uma região de interesse da pele; e contatar a região com uma composição para solubilização de tecido compreendendo pelo menos um de: (1) DPS e pelo menos um de Brij 30, Brij 35, Brij 52, Brij C10, e Brij 58; (2) DDPS e pelo menos um de Brij 30, Brij 35, Brij 52, Brij C10, e Brij 58; (3) TPS e pelo menos um de Brij 30, Brij 35, Brij 52, Brij C10, e Brij 58; (4) HPS e pelo menos um de Brij 30, Brij 35, Brij 52, Brij C10, e Brij 58; e (5) OPS e pelo menos um de Brij 30, Brij 35, Brij 52, Brij C10, e Brij 58.

[00047] Em outra modalidade, é fornecido um método para recuperar analitos da membrana da mucosa, da pele, ou de outro tecido, o método compreendendo: aplicar energia a uma região de interesse da membrana da mucosa, da pele, ou de outro tecido contendo pelo menos um analito; contatando com a região com uma composição para solubilização de tecido, a composição para solubilização de tecido compreendendo pelo menos um de: (1) DPS e pelo menos um de Brij 30, Brij 35, Brij 52, Brij C10, e Brij 58; (2) DDPS e pelo menos um de Brij 30, Brij 35, Brij 52, Brij C10, e Brij 58; (3) TPS e pelo menos um de Brij 30, Brij 35, Brij 52, Brij C10, e Brij 58; (4) HPS e pelo menos um de Brij 30, Brij 35, Brij 52, Brij C10, e Brij 58; e (5) OPS e pelo menos um de Brij 30, Brij 35, Brij 52, Brij C10, e Brij 58, desse modo solubilizando pelo menos um pouco da membrana da mucosa, da pele, ou de outro tecido contendo pelo menos um analito; e coletar o pelo menos um analito da membrana da mucosa, da pele, e de outro tecido solubilizados.

[00048] Em algumas modalidades, "outro tecido" pode incluir mama, próstata, olho, vagina, bexiga, unha, cabelo, cólon, testículos, intestino, pulmão, cérebro, pâncreas, fígado, coração, osso, ou parede de aorta.

[00049] Em algumas modalidades, um "analito" pode incluir quaisquer biomolécula, droga, molécula pequena, agente de guerra, contaminante ambiental, micróbio, e assim por diante, que esteja presente dentro ou sobre o tecido e possa ser extraído do tecido de interesse.

[00050] Em algumas modalidades, as "biomoléculas" podem incluir proteínas (por exemplo, biomarcadores de doença tal como biomarcadores de câncer, anticorpos: IgE, IgG, IgA, IgD, ou IgM, e assim por diante), peptídios, lipídios (por exemplo, colesterol, ceramidas, e ácidos graxos), ácidos nucleicos (por exemplo, RNA e DNA), pequenas moléculas (por exemplo, glicose, uréia, e creatina), drogas de moléculas pequenas ou metabólitos de drogas de moléculas pequenas, micróbios, moléculas inorgânicas, elementos, e íons (por exemplo, ferro, Ca2 +, K +, Na +, e assim por diante). Em algumas modalidades, a biomolécula é exclusiva de glicose e marcadores de câncer.

[00051] Em algumas modalidades, as "drogas" podem incluir drogas de abuso, tal como, por exemplo, cocaína, heroína, metil anfetamina, e medicamentos receitados tomados em excesso de dosagem, ou tomados sem uma prescrição (por exemplo, analgésicos tal como opioides); e drogas terapêuticas, tal como, por exemplo, tramadol, fluconazol, barbitúricos, e esteróides anabólicos.

[00052] Em algumas modalidades, os "agentes de guerra" podem incluir quaisquer molécula, composto, ou composição de origem biológica ou química que possam ser utilizados como uma arma. Os exemplos não limitantes de agentes de guerra incluindo explosivos, gases asfixiantes (por exemplo, VX e Sarin), fosgênio, toxinas, esporos (por exemplo, antraz), e assim por diante.

[00053] Em algumas modalidades, os "contaminantes ambientais" podem incluir quaisquer molécula, composto, ou composição que possam ser prejudiciais para um indivíduo, por exemplo, quando no momento de concentrações elevadas acima do limiar de risco. Os exemplos incluindo poluentes da água (por exemplo, fertilizantes, pesticidas, fungicidas, inseticida, herbicidas, metais pesados, e haletos), poluentes do solo (por exemplo, fertilizantes, pesticidas, fungicidas, inseticida, herbicidas, metais pesados, e haletos), e poluentes do ar (por exemplo, NOx, SOx, gases do efeito estufa, poluentes orgânicos persistentes, material particulado, e mistura de neblina e fumaça).

[00054] Em algumas modalidades, a solubilização das células e tecidos de objetivo inclui a aplicação de energia. Em algumas modalidades, a energia pode ser aplicada pelos diversos quaisquer métodos adequados, incluindo mecânicos (por exemplo, abrasão, cisalhamento, aspiração, pressão, sucção, ultrassom), ótico (por exemplo, laser), energia elétrica e térmica. Entretanto, em uma modalidade, a energia não inclui a energia térmica externamente fornecida (isto é, calor). Os aplicadores de energia adequados são divulgados no Pedido de Patentes dos Estados Unidos N° Seriais 12/664.994, 13/126.105, e 13/095.771, cada um dos quais é incorporado aqui pela referência em sua totalidade.

[00055] As composições podem ser utilizadas para solubilização de células para recuperação de proteína in vitro. Além da dissolução eficaz de células, as composições podem fornecer um benefício da preservação da bioatividade. As composições também podem possuir a capacidade de solubilizar rapidamente diversos tecidos, incluindo aqueles com propriedades mecânicas duráveis, tal como a pele. Para auxiliar na preservação da bioatividade, um inibidor de protease pode ser incluído nas composições. Entretanto, com ou sem a adição de inibidores de protease, as composições podem ser capazes de preservar a atividade biológica das proteínas. As composições são também aplicáveis in vivo. Especialmente, as composições podem ser capazes de recuperar a fosfoproteínas lábeis com RPPA, abrindo assim a possibilidade de rapidamente e não invasivamente sondar múltiplos caminhos sinalizadores.

[00056] Em uma modalidade, as composições podem ser úteis como composições antibacterianas. Assim, é fornecido um método para inibir o crescimento e a reprodução de bactérias e/ou tratar uma infecção bacteriana, o método compreendendo a aplicação de uma composição antibacteriana a uma área que é submetida ao ataque pelas bactérias, a composição antibacteriana compreendendo pelo menos um de: (1) DPS e pelo menos um de Brij 30, Brij 35, Brij 52, Brij C10, e Brij 58; (2) DDPS e pelo menos um de Brij 30, Brij 35, Brij 52, Brij C10, e Brij 58; (3) TPS e pelo menos um de Brij 30, Brij 35, Brij 52, Brij C10, e Brij 58; (4) HPS e pelo menos um de Brij 30, Brij 35, Brij 52, Brij C10, e Brij 58; e (5) OPS e pelo menos um de Brij 30, Brij 35, Brij 52, Brij C10, e Brij 58. O método pode incluir adicionalmente a aplicação de energia.

[00057] Em outra modalidade, é fornecido um método para solubilização de células e/ou tecidos, o método compreendendo contatar as células e/ou tecidos com uma composição, a composição compreendendo pelo menos um de: (1) DPS e pelo menos um de Brij 30, Brij 35, Brij 52, Brij C10, e Brij 58; (2) DDPS e pelo menos um de Brij 30, Brij 35, Brij 52, Brij C10, e Brij 58; (3) TPS e pelo menos um de Brij 30, Brij 35, Brij 52, Brij C10, e Brij 58; (4) HPS e pelo menos um de Brij 30, Brij 35, Brij 52, Brij C10, e Brij 58; e (5) OPS e pelo menos um de Brij 30, Brij 35, Brij 52, Brij C10, e Brij 58. Em uma modalidade, as proteínas, incluindo as proteínas citossólicas, as proteínas nucleares, e as proteínas superficiais, podem ser recuperadas das células e/ou tecidos solubilizados. Em algumas modalidades, tal como, por exemplo, as modalidades onde é desejável preservar a atividade biológica das proteínas, a composição pode compreender adicionalmente opcionalmente um inibidor de protease.

[00058] Em uma modalidade, as composições podem ser utilizadas para sondar os estados funcionais e relacionados com os caminhos sinalizadores da célula da pele. Os caminhos sinalizadores das células da pele podem ser induzidos por stress, e podem se alterar de minutos a horas. A fosforilação é uma modificação pós-translacional altamente lábil que regula muitos aspectos da função da proteína. A capacidade de sondar estes estados funcionais na epiderme exige um método rápido e eficiente para solubilizar e isolar as fosfoproteínas. Assim, em outra modalidade, é fornecido um método para recuperar proteínas sinalizadoras de células da pele, método compreendendo: contatar com as células da pele com uma composição compreendendo pelo menos um de: (1) DPS e pelo menos um de Brij 30, Brij 35, Brij 52, Brij C10, e Brij 58; (2) DDPS e pelo menos um de Brij 30, Brij 35, Brij 52, Brij C10, e Brij 58; (3) TPS e pelo menos um de Brij 30, Brij 35, Brij 52, Brij C10, e Brij 58; (4) HPS e pelo menos um de Brij 30, Brij 35, Brij 52, Brij C10, e Brij 58; e (5) OPS e pelo menos um de Brij 30, Brij 35, Brij 52, Brij C10, e Brij 58, para fornecer proteínas sinalizadoras solubilizadas; e submeter as proteínas sinalizadoras solubilizadas a uma sequência de proteínas de fase reversa.

[00059] Em uma modalidade, as composições compreendendo pelo menos um de: (1) DPS e pelo menos um de Brij 30, Brij 35, Brij 52, Brij C10, e Brij 58; (2) DDPS e pelo menos um de Brij 30, Brij 35, Brij 52, Brij C10, e Brij 58; (3) TPS e pelo menos um de Brij 30, Brij 35, Brij 52, Brij C10, e Brij 58; (4) HPS e pelo menos um de Brij 30, Brij 35, Brij 52, Brij C10, e Brij 58; e (5) OPS e pelo menos um de Brij 30, Brij 35, Brij 52, Brij C10, e Brij 58, podem ser úteis para, entre outras coisas, desagregação, solubilização, e estabilização de componentes celulares a serem utilizando como biomarcadores de doença, biomarcadores forenses, ou ambos. Em uma modalidade, as composições são úteis para desagregar, solubilizar, e estabilizar componentes de tecidos vivos in situ, de tecidos recentemente ressectados, tecidos ressectados congelados, tecidos preservados incorporados em parafina, extratos de tecidos e de células e células cultivadas derivados de linhagens celulares ou tecidos ressectados, e de agentes exógenos tal como vírus, bactérias, e prions.

[00060] Em uma modalidade, as composições compreendendo pelo menos um de: (1) DPS e pelo menos um de Brij 30, Brij 35, Brij 52, Brij C10, e Brij 58; (2) DDPS e pelo menos um de Brij 30, Brij 35, Brij 52, Brij C10, e Brij 58; (3) TPS e pelo menos um de Brij 30, Brij 35, Brij 52, Brij C10, e Brij 58; (4) HPS e pelo menos um de Brij 30, Brij 35, Brij 52, Brij C10, e Brij 58; e (5) OPS e pelo menos um de Brij 30, Brij 35, Brij 52, Brij C10, e Brij 58, podem ser úteis para a solubilização, remodelagem, e remoção de tecido doente sobre ou abaixo da superfície da pele, ou em outro lugar dentro do corpo. Por exemplo, as composições podem ser úteis para solubilização, remodelagem e remoção de tecido que apresente condições precancerosas tal como ceratose actínica, leucoplasia, esôfago de Barretts, e placa de pré-câncer do cólon direito, e cânceres superficiais que resultam qualquer destas condições precancerosas. Outros usos terapêuticos podem incluir a solubilização e a remoção de tumores de diversos sítios superficiais ou profundos, ou tratamento das margens cirúrgicas de tumor para remover células de tumor residuais de quaisquer destes sítios. Em alguns exemplos, depois de tratar tumores com as composições e solubilizar os marcadores constituintes de tumor, o sistema imune pode detectar os marcadores de tumor dissolvidos e iniciar uma resposta imunológica antitumor potente contra estes marcadores, levando a regressão do tumor local, bem como destruição de quaisquer células sistêmicas de tumor que transportam os marcadores de tumor detectados.

[00061] Em uma modalidade, as composições compreendendo pelo menos um de: (1) DPS e pelo menos um de Brij 30, Brij 35, Brij 52, Brij C10, e Brij 58; (2) DDPS e pelo menos um de Brij 30, Brij 35, Brij 52, Brij C10, e Brij 58; (3) TPS e pelo menos um de Brij 30, Brij 35, Brij 52, Brij C10, e Brij 58; (4) HPS e pelo menos um de Brij 30, Brij 35, Brij 52, Brij C10, e Brij 58; e (5) OPS e pelo menos um de Brij 30, Brij 35, Brij 52, Brij C10, e Brij 58, podem ser úteis para tratar lesões da pele e moléculas danificadas da pele com terapias e drogas que são incapazes de penetrar uma barreira da pele exterior intacta. Mais particularmente, as composições descritas aqui podem ser úteis para melhorar a absorção de produtos terapêuticos tópicos pela remoção de tecido doente, células inflamatórias, e pele tornada espessa, hiperqueratinizada que de outra maneira podem bloquear o acesso à terapia tópica eficaz. Um exemplo de tal uso é como um pré-tratamento da terapia tópica da psoríase, já que as lesões de psoríase tipicamente têm uma camada superior endurecida ou hiperceratose que inibe a absorção. Em uma modalidade, tal tratamento pode incluir a perturbação da barreira da pele exterior utilizando as composições, e em algumas circunstâncias aplicando energia, para romper a barreira por desagregação e solubilização de células e tecidos de barreira, seguidos da aplicação das moléculas e drogas terapêuticas diretamente na superfície da pele com a barreira perturbada. O exemplo as moléculas terapêuticas e as drogas podem incluir, por exemplo, drogas à base de DNA, drogas à base de RNA, drogas à base de proteína, drogas à base de peptídeo, drogas à base de lipídio, drogas à base de carboidrato, drogas de moléculas pequenas, drogas à base de nanopartículas, drogas encapsuladas pelo lipossoma, e combinações de tais classes de drogas.

[00062] Em uma modalidade, as composições compreendendo pelo menos um de: (1) DPS e pelo menos um de Brij 30, Brij 35, Brij 52, Brij C10, e Brij 58; (2) DDPS e pelo menos um de Brij 30, Brij 35, Brij 52, Brij C10, e Brij 58; (3) TPS e pelo menos um de Brij 30, Brij 35, Brij 52, Brij C10, e Brij 58; (4) HPS e pelo menos um de Brij 30, Brij 35, Brij 52, Brij C10, e Brij 58; e (5) OPS e pelo menos um de Brij 30, Brij 35, Brij 52, Brij C10, e Brij 58, podem ser úteis para introduzir moléculas terapêuticas ou diagnósticas e drogas no corpo e circulação sanguínea rompendo a camada da pele exterior. Em uma modalidade, a introdução pode incluir a perturbação da barreira da pele exterior utilizando as composições, e em algumas circunstâncias aplicando energia, para romper a barreira por desagregação e solubilização de células e tecidos de barreira, seguidos da aplicação das moléculas terapêuticas ou diagnósticas diretamente na superfície da pele com a barreira perturbada.

[00063] Em outra modalidade, as composições compreendendo pelo menos um de: (1) DPS e pelo menos um de Brij 30, Brij 35, Brij 52, Brij C10, e Brij 58; (2) DDPS e pelo menos um de Brij 30, Brij 35, Brij 52, Brij C10, e Brij 58; (3) TPS e pelo menos um de Brij 30, Brij 35, Brij 52, Brij C10, e Brij 58; (4) HPS e pelo menos um de Brij 30, Brij 35, Brij 52, Brij C10, e Brij 58; e (5) OPS e pelo menos um de Brij 30, Brij 35, Brij 52, Brij C10, e Brij 58, podem ser úteis para remover crescimentos malignos e benignos e obstruções em outros órgãos no corpo ou dentro dos sistemas nervosos centrais e periféricos, incluindo o olho, ouvido médio, cérebro, medula espinhal, raízes nervosas, e gânglios. Já que as composições podem dissociar e dissolver o tecido doente diretamente depois da injeção através uma agulha fina ou cateter, as composições podem permitir a cirurgia ablativa em áreas que não são acessíveis para abrir por cirurgia ou até a instrumentos cirúrgicos minimamente invasivos (tal como no sistema vascular, incluindo artérias e artérias coronárias).

[00064] Em outra modalidade, as composições compreendendo pelo menos um de: (1) DPS e pelo menos um de Brij 30, Brij 35, Brij 52, Brij C10, e Brij 58; (2) DDPS e pelo menos um de Brij 30, Brij 35, Brij 52, Brij C10, e Brij 58; (3) TPS e pelo menos um de Brij 30, Brij 35, Brij 52, Brij C10, e Brij 58; (4) HPS e pelo menos um de Brij 30, Brij 35, Brij 52, Brij C10, e Brij 58; e (5) OPS e pelo menos um de Brij 30, Brij 35, Brij 52, Brij C10, e Brij 58, podem ser úteis para diminuir ou reduzir adesões intraabdominais e peritoneal dissolvendo bandas específicas de tecido aderente entre tecidos intraabdominais e órgãos.

[00065] Em uma modalidade, as composições compreendendo pelo menos um de: (1) DPS e pelo menos um de Brij 30, Brij 35, Brij 52, Brij C10, e Brij 58; (2) DDPS e pelo menos um de Brij 30, Brij 35, Brij 52, Brij C10, e Brij 58; (3) TPS e pelo menos um de Brij 30, Brij 35, Brij 52, Brij C10, e Brij 58; (4) HPS e pelo menos um de Brij 30, Brij 35, Brij 52, Brij C10, e Brij 58; e (5) OPS e pelo menos um de Brij 30, Brij 35, Brij 52, Brij C10, e Brij 58, podem ser úteis para debridamento de feridas. Em uma modalidade, o tratamento pode incluir contatar com as composições, e em algumas circunstâncias aplicando energia, ao tecido circundante de uma ferida para remoção de tecido insalubre, incluindo, por exemplo, a escara necrótica e a necrose fibriginosa.

[00066] Em uma modalidade, as composições compreendendo pelo menos um de: (1) DPS e pelo menos um de Brij 30, Brij 35, Brij 52, Brij C10, e Brij 58; (2) DDPS e pelo menos um de Brij 30, Brij 35, Brij 52, Brij C10, e Brij 58; (3) TPS e pelo menos um de Brij 30, Brij 35, Brij 52, Brij C10, e Brij 58; (4) HPS e pelo menos um de Brij 30, Brij 35, Brij 52, Brij C10, e Brij 58; e (5) OPS e pelo menos um de Brij 30, Brij 35, Brij 52, Brij C10, e Brij 58, podem ser úteis como biocola para melhorar a cura pós-operatória.

[00067] Em uma modalidade, as composições compreendendo pelo menos um de: (1) DPS e pelo menos um de Brij 30, Brij 35, Brij 52, Brij C10, e Brij 58; (2) DDPS e pelo menos um de Brij 30, Brij 35, Brij 52, Brij C10, e Brij 58; (3) TPS e pelo menos um de Brij 30, Brij 35, Brij 52, Brij C10, e Brij 58; (4) HPS e pelo menos um de Brij 30, Brij 35, Brij 52, Brij C10, e Brij 58; e (5) OPS e pelo menos um de Brij 30, Brij 35, Brij 52, Brij C10, e Brij 58, podem ser úteis para promover a higiene oral e dental. Por exemplo, em uma modalidade, as composições podem ser úteis para amolecer e/ou dissolver depósitos duros e moles em dentes e dentaduras.

[00068] Em uma modalidade, as composições compreendendo pelo menos um de: (1) DPS e pelo menos um de Brij 30, Brij 35, Brij 52, Brij C10, e Brij 58; (2) DDPS e pelo menos um de Brij 30, Brij 35, Brij 52, Brij C10, e Brij 58; (3) TPS e pelo menos um de Brij 30, Brij 35, Brij 52, Brij C10, e Brij 58; (4) HPS e pelo menos um de Brij 30, Brij 35, Brij 52, Brij C10, e Brij 58; e (5) OPS e pelo menos um de Brij 30, Brij 35, Brij 52, Brij C10, e Brij 58, podem ser úteis para a solubilização, remodelagem, e remoção de estruturas cosmeticamente relevantes sobre ou abaixo da superfície da pele. Por exemplo, em uma modalidade, as composições podem ser úteis para tratar a pele envelhecida, escoriada, e danificada por UV, e remover e/ou remodelar manchas senis, marcas da pele, ceratose ceborreica, tecidos de cicatriz, xantomas, condições hiperproliferativas não cancerosas, impactos na superfície, e manchas escamosas. Em uma modalidade, o uso pode incluir a perturbação da barreira da pele exterior utilizando as composições, e em algumas circunstâncias aplicando energia, para romper a barreira por desagregação e solubilização de células e tecidos de barreira. Em uma modalidade, as composições podem ser introduzidas em camadas mais profundas da pele para facilitar a desagregação, a solubilização, e a remoção de estruturas associadas com enrugamento, escoriação, ou ambos, da superfície da pele. Outros usos cosméticos incluem a descamação dérmica ou o descoramento da pele. As composições podem ser utilizadas para remover o descoramento da pele associado a ferimento anterior, a dano por UV, ou ao envelhecimento. Em algumas modalidades, a perturbação pode ser seguida da aplicação de drogas terapêuticas ou produtos naturais e outras composições cosméticas que são acreditadas ou conhecidas por aumentar a suavidade, elasticidade, e resiliência da pele. Tais composições cosméticas podem incluir, por exemplo, elastina ou os seus peptídios (por exemplo, V-V-P-Q), colágeno ou os seus peptídios, resveratrol, idebenona, coenzima Q10, acetil hexapeptídio-3, glicosaminoglicanos, palmitoil pentapeptídio-4, hialuronato de sódio, e assim por diante, e combinações dos mesmos.

[00069] Em uma modalidade, os componentes celulares recuperados utilizando as composições podem ser introduzidos em ensaios bioquímicos para detectar, quantificar, e identificar os biomarcadores específicos associados com doenças específicas. Os ensaios bioquímicos podem incluir todos os ensaios diagnósticos moleculares para detectar DNA, RNA, proteínas, peptídios, lipídios, carboidratos, e pequenas moléculas, tanto endógenas como exógenas. Os ensaios bioquímicos a ser utilizando incluindo PCR, ELISA, cromatografia, análise de gel, eletroforese, Westernblot, Southernblot, Northernblot, e outros métodos utilizando em laboratórios clínicos para a identificação de biomarcadores moleculares da doença.

[00070] Em uma modalidade, as composições compreendendo pelo menos um de: (1) DPS e pelo menos um de Brij 30, Brij 35, Brij 52, Brij C10, e Brij 58; (2) DDPS e pelo menos um de Brij 30, Brij 35, Brij 52, Brij C10, e Brij 58; (3) TPS e pelo menos um de Brij 30, Brij 35, Brij 52, Brij C10, e Brij 58; (4) HPS e pelo menos um de Brij 30, Brij 35, Brij 52, Brij C10, e Brij 58; e (5) OPS e pelo menos um de Brij 30, Brij 35, Brij 52, Brij C10, e Brij 58, podem ser úteis no tratamento de lesões da mucosa e da pele. Tal uso pode envolver a impregnação de um swab abrasivo e absorvente (semelhante a uma esponja facial para o uso de esfoliamento diário) com uma ou mais das composições, e aplicação do swab à região de interesse com pressão média de torção ou o movimento para a frente e para trás sobre o tecido visado por um tempo predeterminado. A profundidade pode ser controlada pela quantidade de pressão, bem como pelo tempo de aplicação. Depois que a lesão é dissolvida e os biomarcadores liberados são absorvidos na almofada, o swab e o tecido dissolvido podem ser coletados e enviados a, por exemplo, um laboratório de patologia, para análise do biomarcador e de outro analito.

EXEMPLOS

[00071] Certas modalidades são descritas abaixo na forma de exemplos. É impossível descrever a aplicação de todo potencial da invenção. Assim, embora as modalidades sejam descritas em detalhes consideráveis, não é a intenção restringir ou de nenhum modo limitar o alcance das reivindicações anexadas para tal detalhe, ou para qualquer modalidade em particular.

Exemplo 1: Materiais.

[00072] DPS, DDPS, TPS, HPS, e OPS foram obtidos de Sigma- Aldrich como tensdoativos zwitteriônicos. Brij 35, Brij 52, Brij C10, e Brij 58 foram obtidos de Sigma-Aldrich como tensoativos não iônicos. Brij 30 foi obtido da América TCI. Todas as soluções foram preparadas acrescentando 0,25% p/v de tensoativo zwitteriônico e 0,25% p/v de tensoativo não iônico (0,25 % v/v B30), para uma concentração total de 0,5% p/v em PBS (pH = 7,4). Um controle positivo foi preparado colocando 1 % v/v de Triton X-100 (TX-1) em PBS.

Exemplo 2: Recuperação de proteína da pele porcina.

[00073] A proteína foi recuperada da pele porcina como um modelo de tecido. A pele foi obtida na forma congelada da Lampire Biological Laboratories Inc, e guardada em -70°C. Duas horas antes do uso, a pele foi descongelada em temperatura ambiente (RT) e cortada em pequenos pedaços (2,5 cm x 2,5 cm). Os pedaços de pele foram liberados da gordura subcutânea e utilizando sem arranhões ou abrasões visíveis. A recuperação de proteína foi executada montando o pedaço de pele em uma montagem de célula de difusão de Franz (FDC) (a área de exposição de tecido de 1,77 cm2; Permegear). A câmara receptora do FDC foi preenchida com PBS e a câmara doadora foram preenchidos com 1 mL da combinação de tensoativo como um tampão de amostragem. Este tampão também atuou como o fluido de união entre o transdutor de ultrassom e o tecido. A recuperação de proteína foi realizada na RT com uma sonda 600-W de ultrassom (Sonics & Materials) operando em uma frequência de 20 quilohertzes. O transdutor de ultrassom foi colocado em uma distância de 5 mm da superfície do tecido e uma intensidade ultrasônica de 2,4 Wcm2 no ciclo de trabalho de 50 % foi aplicada por 3 min. O tampão de amostragem, agora contendo constituintes de tecido solubilizados, foi aspirado e mantido em -70°C até a análise.

[00074] A capacidade de solubilização de cada formulação de tensoativo divulgada aqui foi quantificada pelas concentrações de proteína total e proteína solubilizada (mg/ml). Os sobrenadantes foram isolados das amostras utilizando uma centrífuga operando em 10.000 x g e 4°C por 15 min. A quantidade de proteína solubilizada foi medida no sobrenadante da mostra utilizando um kit de detecção colorimétrica (Micro BCA Protein Assay Kit; Fure).

[00075] A Tabela 1 ilustra que a proteína total (mg/ml) recuperada da pele porcina quando a pele porcina é contatada com diversas combinações dos tensoativos zwitteriônicos e não iônicos na presença de ultrassom. A Figura 1 ilustra os mesmos resultados na forma gráfica. Tabela 1

[00076] A Tabela 2 ilustra que a proteína solúvel (mg/ml) recuperada da pele porcina quando a pele porcina é contatada com aquelas mesmas combinações de tensoativos zwitteriônicos e não iônicos na presença de ultrassom. A Figura 2 ilustra os resultados na forma gráfica. Tabela 2

Exemplo 3: Dependência de concentração.

[00077] O TPS:Brij C10 foi investigado para o efeito de concentração. A concentração de tensoativo foi testada no momento de concentrações totais de 0,5 %, 1 %, e 2 % de TPS:Brij C10, em uma razão 1:1. A Figura 3 ilustra a dependência da concentração de TPS:Brij C10 na eficácia de extração de proteína solúvel e total da pele porcina.

Exemplo 4: Proteção da enzima.

[00078] GAPDH do coelho foi obtido como um modelo de enzima de Sigma-Aldrich. O GAPDH em pó foi dissolvido em ddH2O (Milipore) a 90 U/ml e distribuído em um E-tubo, depois guardados a -80 °C até o uso. A proteção da enzima foi executada pela incubação de GAPDH em cada combinação divulgada aqui, comparada com aquela em PBS como um controle positivo. A concentração de GAPDH foi fixada a 0,5 U/ml. GAPDH foi incubado a 37 oC por 10 min. A atividade da enzima de GAPDH (U/ml) foi avaliada por KDalert ™ GAPDH Assay Kit (Ambion, Inc, TX, USA). A Figura 4 ilustra na forma gráfica a atividade preservada de GAPDH em cada uma das diversas combinações dos tensoativos zwitteriônicos e não iônicos.

[00079] As atividades de GAPDH foram multiplicadas pela recuperação de proteína solúvel. A Figura 5 ilustra na forma gráfica a dependência combinada de eficácia de extração de proteína solúvel e estabilidade de GAPDH em cada uma das diversas combinações dos tensoativos zwitteriônicos e não iônicos.

Exemplo 5: Solubilização de célula.

[00080] As células de HEK (HEKa-APF, Invitrogen, CA, USA) foram cultivadas em um frasco tratado para cultivo de células da Corning® com uma Tampa com Abertura (75 cm2 Retangular de pescoço inclinado, da Corning®). As células HEK foram cultivadas entre a passagem 3 para 8 no Meio EpiLife® com 60 μM de cálcio acrescentado pelo Suplemento de Crescimento de Queratinócito Humano. A Figura 6 ilustra a recuperação da proteína total de células HEK em t = 0 (barras sólidas), t = 4 horas a 4 °C (barras diagonais), e t = 4 horas na RT (barras sombreadas), utilizando DPS:Brij 30, TPS:Brij C10, HPS:Brij 52, OPS:Brij 52, OPS:Brij C10, e OPS:Brij 58, comparando com TX-1.

Exemplo 6: Ensaio in vitro

[00081] A proteína total em células solubilizadas foi analisada utilizando um Micro BCA Protein Assay Kit (Pescador Científico, PA, USA). As células de Trypsinized foram contadas por hemocytometer (Pescador Científico, PA, USA) e acrescentaram a microplacas de 96 poços. Depois do crescimento noturno, o meio foi retirado e substituído por 100 μl de agentes de lise (TX-1, DPS:Brij 30, TPS:Brij C10, HPS:Brij 52, OPS:Brij 52, OPS:Brij C10, e OPS:Brij 58). A Figura 7 ilustra a atividade de GAPDH medida em células HEK solubilizadas naqueles mesmos reagentes, em t = 0 (barras sólidas), t = 4 horas a 4°C (barras diagonais), e t = 4 horas na RT (barras sombreadas).

[00082] Para um estudo adicional de estabilidade, as enzimas foram incubadas durante um dia na RT, três dias na RT, e sete dias na RT. A Figura 8 ilustra a atividade de GAPDH medida na RT, em t = 4 horas (barras sólidas), t = 24 horas (barras diagonais), t = 72 horas (barras sombreadas), e 7 dias (barras fixas).

Exemplo 7: Solubilização de tecido.

[00083] O tecido da pele foi coletado de camundongos eutanasiados e guardado em -80oC até o uso. Aproximadamente 10 mg de cada tecido foi colocado em um tubo de 2 ml. 400 μl do tampão de lise gelado (TX- 1, TPS:Brij C10, HPS:Brij 52, e OPS:Brij C10) e pastilhas do coquetel inibidor de protease (Roche Applied Science, USA) foram acrescentados ao tubo (uma pastilha por 50 ml; uma pastilha contém o di-hidrocloreto da Antipain 3 mg, Aprotinina 0,5 mg, Bestatina 0,5 mg, Quimostatina 1 mg, E-64 3 mg, EDTA-Na2 10 mg, Leupeptina 0,5 mg, Pefabloc SC 20 mg, Pepstatina 0,5 mg, e Fosforamidon 3 mg). O tecido foi homogeneizado utilizando um homogenizador (IKA, NC, USA) a 13.000 rpm por 1 min. A Figura 9 ilustra a proteína total recuperada da pele de camundongo homogeneizada utilizando TPS:Brij C10, HPS:Brij 52, e OPS:Brij C10, comparando com TX-1. A Figura 10 ilustra a atividade específica de GAPDH medida na pele de camundongo homogeneizada.

[00084] À amplitude que o termo "incluir" ou "incluindo" é usada no relatório descritivo ou as reivindicações, é destinado a ser inclusivo em uma maneira semelhante ao termo "compreendendo" como aquele termo é interpretado quando empregado como uma palavra transicional em uma reivindicação. Como usado no relatório descritivo e as reivindicações, as formas singulares "a", "um", e "o" incluem o plural. Além disso, na amplitude em que o termo "ou" é empregado (por exemplo, A ou B), se destina a significar "A ou B ou ambos". Finalmente, onde o termo "aproximadamente" é usado juntamente com um número, é destinado para incluir ± 10 % do número. Em outras palavras, "aproximadamente 10" pode significar de 9 a 11.

[00085] Como afirmado acima, embora o presente pedido tenha sido ilustrado pela descrição das modalidades do mesmo, e embora as modalidades tenham sido descritas em detalhes consideráveis, não é a intenção dos requerentes restringir ou de nenhum modo limitar o alcance das reivindicações anexadas em tal detalhe. As vantagens adicionais e as modificações aparecerão prontamente aos versados na técnica, com o benefício da descoberta fornecidos no presente Pedido. Desse modo, o Pedido, nos seus aspectos mais amplos, não está limitada aos detalhes específicos, exemplos ilustrativos mostrados, ou quaisquer aparelhos mencionados. Arranjos podem ser feitos a partir de tais detalhes, exemplos, e aparelhos sem fugir do espírito ou do alcance do conceito geral da invenção.

Claims

1. Composição, caracterizada pelo fato de que compreende: N-tetradecil-N,N-dimetil-3-amônio-1-propanossulfonato; e éter cetílico de polioxietileno (10).

2. Composição, de acordo com a reivindicação 1, caracterizada pelo fato de que a composição tem um pH mais básico do que 7,0 em uma solução tampão.

3. Composição, de acordo com a reivindicação 1, caracterizada pelo fato de que a composição tem um pH entre 7,0 e 9,0 em uma solução tampão.

4. Composição, de acordo com a reivindicação 1, caracterizada pelo fato de que o N-tetradecil-N,N-dimetil-3-amônio-1- propanossulfonato está presente na composição em uma concentração de 0,25% p/v, e o éter cetílico de polioxietileno (10) está presente na composição em uma concentração de 0,25% p/v.

5. Composição, de acordo com a reivindicação 1, caracterizada pelo fato de que o N-tetradecil-N,N-dimetil-3-amônio-1- propanossulfonato e o éter cetílico de polioxietileno (10) estão presentes na composição em uma razão de 1:1 entre si.

6. Composição, de acordo com a reivindicação 1, caracterizada pelo fato de que o N-tetradecil-N,N-dimetil-3-amônio-1- propanossulfonato e o éter cetílico de polioxietileno (10) estão presentes na composição em uma concentração total de 0,5% p/v em PBS em um pH de 7,4.

7. Método para solubilização e remodelagem e/ou remoção de tecido sobre ou abaixo da pele de um paciente, o método caracterizado pelo fato de que compreende: aplicar energia a uma região de interesse da pele; e contatar a região com uma composição para solubilização de tecido, a composição para solubilização de tecido compreendendo: N-tetradecil-N,N-dimetil-3-amônio-1-propanossulfonato; e éter cetílico de polioxietileno (10).

8. Método, de acordo com a reivindicação 7, caracterizado pelo fato de que compreende adicionalmente: remover pelo menos uma porção da região de interesse solubilizada para deixar uma área exposta na pele; e aplicar à área exposta, pelo menos um de uma composição terapêutica e uma composição cosmética.

9. Método, de acordo com a reivindicação 8, caracterizado pelo fato de que a aplicação compreende a aplicação à área exposta, de uma composição terapêutica compreendendo pelo menos uma droga à base de DNA, uma droga à base de RNA, uma droga à base de proteína, uma droga à base de peptídeo, uma droga à base de lipídio, uma droga à base de carboidrato, uma droga à base de molécula pequena, uma droga à base de nanopartícula, e uma droga encapsulada pelo lipossoma.

10. Método, de acordo com a reivindicação 8, caracterizado pelo fato de que a aplicação compreende a aplicação à área exposta, de uma composição cosmética compreendendo pelo menos um de elastina, um peptídeo à base de elastina, colágeno, um peptídeo à base de colágeno, resveratrol, idebenone, coenzima Q10, acetil hexapeptídio-3, glicosaminoglicanos, palmitoil pentapeptídio-4, hialuronato de sódio, e combinações dos mesmos.

11. Método para recuperar analitos da membrana da mucosa, da pele, ou de outro tecido, o método caracterizado pelo fato de que compreende: aplicar energia a uma região de interesse da membrana da mucosa, da pele, ou de outro tecido contendo pelo menos um analito; contatar a região com uma composição para solubilização de tecido, solubilizando desse modo pelo menos um pouco da membrana da mucosa, da pele, ou de outro tecido contendo, pelo menos um analito, em que a composição para solubilização de tecido compreende: N-tetradecil-N,N-dimetil-3-amônio-1-propanossulfonato; e éter cetílico de polioxietileno (10); e coletando o pelo menos um analito da membrana da mucosa, da pele, e de outro tecido solubilizado.

12. Método, de acordo com a reivindicação 11, caracterizado pelo fato de que o analito compreende uma proteína.

13. Método, de acordo com a reivindicação 11, caracterizado pelo fato de que o analito compreende um biomarcador de câncer.

14. Método, de acordo com a reivindicação 11, caracterizado pelo fato de que o analito compreende um anticorpo.

15. Método, de acordo com a reivindicação 11, caracterizado pelo fato de que o analito compreende um peptídeo.

16. Método, de acordo com a reivindicação 11, caracterizado pelo fato de que o analito compreende um lipídio.

17. Método, de acordo com a reivindicação 11, caracterizado pelo fato de que o analito compreende um ácido nucleico.

18. Método, de acordo com a reivindicação 11, caracterizado pelo fato de que o analito compreende uma pequena molécula.

19. Método, de acordo com a reivindicação 11, caracterizado pelo fato de que o analito compreende um micróbio.

20. Método, de acordo com a reivindicação 11, caracterizado pelo fato de que o analito compreende um agente de guerra.

21. Método, de acordo com a reivindicação 11, caracterizado pelo fato de que o analito compreende um contaminante ambiental.

22. Método, de acordo com a reivindicação 11, caracterizado pelo fato de que o analito compreende uma droga.