KR20150008110A

KR20150008110A - 뮤코노펩티드를 포함하는 화장품 조성물

Info

Publication number: KR20150008110A
Application number: KR1020147031924A
Authority: KR
Inventors: 레또 스톡크랭; 쟝-마끄 르 두쌀; 루이 라미; 베트자베 꾸따즈
Original assignee: 악티방
Priority date: 2012-04-13
Filing date: 2013-04-15
Publication date: 2015-01-21
Also published as: US9566227B2; WO2013153236A2; ES2678793T3; KR102072055B1; US20150132235A1; WO2013153236A3; CN104334155A; CN104334155B

Abstract

본 발명은 활성물질로서 하나 이상의 뮤-코노톡신 펩티드를 화장학적 유효량으로 포함하는 화장품 조성물에 관한 것이다. 또한, 본 발명은 뮤-코노톡신 펩티드가 아르기닌, 리신 폴리펩티드, CAS 번호: 937286-43-6, 분자식 C₉₂,H₁₃₉,N₃₅,0₂₈,S₆ 아세테이트 염(몰질량 2376 g/mol)인 조성물에 관한 것이다. 또한, 본 발명은 피부의 기계적 성질, 피부의 긴장성 및/또는 견고성 및/또는 탄성을 개선하기 위한 본 발명에 따른 조성물의 용도에 관한 것이다.

Description

뮤코노펩티드를 포함하는 화장품 조성물{COSMETIC COMPOSITION COMPRISING A MUCONOPEPTIDE}

얼굴 등의 피부 라인 및 주름은 노화, 유전, 근육 작용, 일광 노출 및 중력의 조합을 통해 발달된다. 얼굴 등의 피부 표현은 강한 근수축에 의해 만들어지며, 시간이 경과함에 따라 피부 주름, 예컨대 이마 라인, 눈가의 잔주름, 및 눈 사이의 세로 주름을 생성한다. 대부분 주름은 강한 근수축으로부터 야기되거나, 또는 그 지점에서의 지속된 시간으로부터 야기된다. 세포 수준에서, 텐션 라인을 따라 위치하는 세포외 기질 및 콜라겐을 합성하는 섬유아세포는 가로무늬근과 연관되는 특정 수축 성질을 근수축의 영향 아래 발달시킬 수 있다.

신경근과 가로무늬근 사이의 접합은, 운동 뉴런으로 알려진, 구심성 신경 경로의 업스트림에서, 신경근 판을 구성한다.

근수축은 신경전달물질인 아세틸콜린에 의해 야기된다. 아세틸콜린은 근육을 자극하는 신경에 의해 방출된다. 얼굴의 피부 근육은 운동 신경 구심성(afference)의 조절하에 있고, 하피(hypoderm)는 근조직을 구성하는 근육층이라고 불리우는 가늘고 편평한 가로무늬근 시트를 함유한다는 것이 공지되어 있다.

상기 미믹(mimic) 및 연령-관련 주름은 오늘날 보톡스(보툴리눔 톡신 A, 이는 병원성 미생물 클로스트리디움 보툴리눔에 의해 생산됨)로 종종 치료되고 있다. 보톡스는 아세틸콜린의 방출을 방지함으로써 작용한다. 이러한 톡신은 근육을 일시적으로 마비시키고 수축을 억제한다. 수축의 부재에 의해, 주름이 방지되고, 부드럽고 다시 젊어보이는 피부가 만들어진다. 상기 톡신은 프로테아제, 보다 구체적으로는 뉴런성 시토졸을 표적으로 하는 징크 엔도펩티다아제로서 작용하며: 보톡스 B, D 및 F, 뿐만 아니라 클로스트리디움 테타니 병원성 미생물에 의해 생산되는 파상풍 톡신은 특이적으로 시냅스 소포의 단백질 VAMP(이는 또한 시냅토브레빈이라고 지칭됨)를 공격하며; 보톡스 A 및 E는 SNAP-25를 분할하며, 보톡스 C는 신탁신에 대해 작용하며, 이들은 모두 전-시냅스 막의 단백질이다(예를 들어, 문헌 [Proc. West. Pharmacol. Soc. 43 : 71-74, 2000] 참조).

보톡스는 조직에 국소적으로 주입되고, 이에 따라 조직은 마비된다. 눈 또는 이마의 근육은 더 이상 작동하지 않으며, 이마 주름은 불가능하지는 않지만 발현하는 것이 어려워진다. 그러나, 피하 주입된 보톡스에 의한 처치는 의사가 수행해야 한다는 점, 그에 따른 높은 비용, 및 극히 높은 유독성은 상당한 단점들이 된다. 그 효과는 3개월 내지 6개월 지속되므로, 그 결과 처치가 반복적으로 수행되어야 한다.

단백질 SNAP25의 아미노산 서열로부터 유래된 아미노산 서열을 포함하는 펩티드는 N-말단을 모방하고 SNARE 복합체에 개입함으로써 SNAP 25와 경쟁할 수 있다는 것이 Lipotec의 유럽특허출원 EP 2123673 및 EP 1180524에 개시되어 있다. SNARE 복합체가 불안정해진다면, 시냅스 소포는 아세틸콜린을 효율적으로 방출할 수 없고, 근수축이 변경될 수 있다.

상기 펩티드의 작용 메카니즘은 아세틸콜린의 뉴런성 엑소사이토시스의 억제에 초점을 맞춘 보툴리눔 톡신의 작용 메카니즘과 유사하다.

INSERM의 특허출원 WO 2011/448441에서 El Far Oussama 등은 VATPase와 SNARE 시냅토브레빈(VAMP2) 사이의 직접 분자 상호작용을 개시하고 있다. VATPase 서브유닛의 부분에 상응하는 서열을 가진 가용성 펩티드는 신경전달물질 방출을 방해하는 성질을 갖는다.

OHIO STATE RES FOUND 대학의 특허출원 WO 2009/012376에는 감각 뉴런의 말초 과정에서 확인된 오피오이드 수용체에 대해 개시되어 있다. 펩티드는 델타 오피오이드 수용체 아고니스트로서 사용되었다. 이와 같은 수용체와의 결합은 신경 말단으로부터 GABA의 방출을 억제하고, 도파민 뉴런에 대한 GABA의 억제 효과를 감소시킨다.

Pentapharm의 특허출원 WO 2006/047900에는, Waglerin 1과 유사한 방식으로 작용할 수 있는 다른 펩티드, 근육 니코틴성 아세틸콜린 수용체의 안타고니스트로서 후-시냅스 막에서 작용하는 뱀독(snake venom) 단백질이 개시되어 있다.

또한, 세포막에는 많은 이온 채널들이 포함되어 있다. 칼슘 채널 억제제로서 작용하는 분자는 예를 들어 L'OREAL의 US 특허출원 2008/0050318에 개시되어 있다. 이러한 칼슘 채널은 인간 섬유아세포에서 발견될 수 있다(예를 들어, 문헌 [J. Biol. Chem 267; 10524-10530, 1992] 및 [Science 230 1024-1026, 1988] 참조).

뮤-코노톡신 또는 뮤-코노펩티드 패밀리에 속하는 바다 달팽이의 독에서 분리되고 나트륨 채널 억제제로서 작용하는 원(original) 펩티드가 특허출원 WO 2004/099238, WO 2002/07678, US 2003/050234 또는 WO 2007/054785에 개시되어 있다. 전압 민감성 채널은 활동전위상승운동을 형성함으로써 전기 여기성 세포에서 활동전위를 생성하는 중요한 요소이다. 매우 다양한 나트륨 이온 채널 타입과 서브타입이 존재한다. 이들 모두는 막 탈분극에 반응하여 열리고 닫히는 전압 민감성 나트륨 채널(VSSC)이다.

바다 달팽이 독으로부터의 뮤-코노펩티드는 예를 들어 마우스 및 강꼬치고기의 좌골신경 및 후신경에서 직접 활동전위를 차단함으로써 VSSC를 차단할 수 있다. 발생되는 약학적 효과는 전도도의 차단으로 이루어지며, 이는 ATHERIS의 특허출원 WO 2007/054785에 개시되어 있는 바와 같이 신경근 시스템의 기능 손상을 야기한다.

테트로도톡신(TTX)에 의해 차단되는 민감성에 기반하여, VGSC는 테트로도톡신 민감성(TTX-S) 및 TTX-내성(TTX-R) 클래스로 분류될 수 있다. 여기에는 뉴런성 TTX-S 타입 l/Nav1.1, IilNav1.2 III/Nav1.3, PN1/Nav1.7 및 PN4/Nav1.6, 및 골격근 TTX-S u1/Nav1.4가 포함된다.

뮤-코노펩티드는 다양한 전압 민감성 나트륨 채널을 표적으로 하며, 이는 주로 Navl.4 채널을 차단한다.

화장품 적용을 위한 나트륨 채널에 대한 억제 활성이 상기 펩티드에 대해서는 아직 개시도 되지 않았으며 제안된 바도 없다.

뮤-코노펩티드가 인간 얼굴에서 피부 주름의 발현이 형성되는 것을 중화시킬 수 있다는 것이 본 발명자들에 의해 입증되었다. 이는 주름 발현의 발생에 관여하는 것으로 추정되는 진피 수축성 섬유아세포를 이완시킴으로써 피부에서 마이크로텐션(microtension)의 효과를 중화시킬 수 있다.

특히 발견된 점은, 국소 제제로 제형화된, 전압-개폐 나트륨 채널, 특히 근육 서브타입 NaV1.4의 차단제(blocker)인, 3개의 이황화물 다리를 가진 23-잔기 펩티드인 뮤-코노펩티드 CnIIIC가 특이적 작용을 유도한다는 것이다. 예를 들어, CnIIIC는 노화, 유전, 일광 노출 및 중력을 통해 발달된 얼굴 라인 및 주름을 감소시킨다. 이들 얼굴 라인 또는 주름은, 얼굴 근육이 주변에 위치하고 있는 구멍의 주변, 즉 코(코생성 주름살), 입(입주변 라인 및 씁쓸할 때 생기는 라인), 이마 및 눈(눈가의 잔주름)에서의 주름살을 특징으로 한다.

본 발명은 활성물질로서 하기 아미노산 서열을 포함하는 하나 이상의 뮤-코노톡신 펩티드, 이의 생물학적 활성 단편, 이의 염, 이의 조합 및/또는 이의 변이체를 화장학적 유효량으로 포함하고, 선택적으로 화장학적으로 허용가능한 담체, 희석제 및/또는 아쥬반트를 조합하여 포함하는, 화장품 조성물로 이루어진다:

Xaa1-Xaa2-Cys-Cys-Xaa3-Xaa4-Xaa5-Xaa6-Xaa7-Cys-Xaa8-Xaa9-Xaa10-Xaa11-Cys-Xaa12-Xaa13-Xaa14-Xaa15-Xaa16-Cys-Cys-Xaa17 [서열번호 1]

여기서,

Xaa1은 임의의 N-개질된 아미노산이고,

Xaa2는 글리신이고,

Xaa3은 임의의 산성 아미노산 또는 이의 아미드 형태이고,

Xaa4는 글리신이고,

Xaa5는 프롤린 또는 3-히드록실-프롤린이고,

Xaa6은 임의의 염기성 아미노산이고,

Xaa7은 글리신이고,

Xaa8은 임의의 비방향족 히드록실 아미노산이고,

Xaa9는 임의의 비방향족 히드록실 아미노산이고,

Xaa10은 임의의 염기성 아미노산이고,

Xaa11은 임의의 방향족 아미노산이고,

Xaa12는 임의의 염기성 아미노산이고,

Xaa13은 임의의 산성 아미노산 또는 이의 아미드 형태이고,

Xaa14는 임의의 염기성 아미노산 또는 임의의 황함유 아미노산이고,

Xaa15는 임의의 소수성 또는 무극성 아미노산, 또는 임의의 비방향족 히드록실 아미노산이고,

Xaa16은 임의의 염기성 아미노산이고,

Xaa17은 결실(absent)이거나, 또는 임의의 무극성 아미노산 또는 아미드기임.

본 발명에 따른 조성물의 일구현예에서, 뮤-코노톡신 펩티드는 아미노산 Xaa3, Xaa4, Xaa5, Xaa6 및 Xaa7로 이루어진 하나 이상의 아미노산, 또는 이의 임의의 조합을 포함하지 않는다.

본 발명에 따른 조성물의 일구현예에서, 뮤-코노톡신 펩티드는 아미노산 Xaa8, Xaa9, Xaa10 및 Xaa11로 이루어진 하나 이상의 아미노산, 또는 이의 임의의 조합을 포함하지 않는다.

본 발명에 따른 조성물의 일구현예에서, 뮤-코노톡신 펩티드는 아미노산 Xaa12, Xaa13, Xaa14, Xaa15 및 Xaa16으로 이루어진 하나 이상의 아미노산, 또는 이의 임의의 조합을 포함하지 않는다.

본 발명에 따른 조성물의 일구현예에서, 뮤-코노톡신 펩티드의 아미노산 Xaa1의 N-개질은 아세틸화, 포르밀화, 미리스토일화 또는 아미드화를 포함하는 군에서 선택되고;

Xaa3 및 Xaa13은 아스파르트산(Asp), 아스파라긴(Asn), 글루탐산(Glu), 글루타민(Gln) 및 피로글루탐산(pGlu 또는 Z)를 포함하는 군에서 독립적으로 선택되고;

Xaa6, Xaa10, Xaa12 및 Xaa16은 아르기닌(Arg), 리신(Lys) 및 히스티딘(His)을 포함하는 군에서 독립적으로 선택되고;

Xaa8 및 Xaa9는 세린(Ser) 및 트레오닌(Thr)을 포함하는 군에서 독립적으로 선택되고;

Xaa11은 페닐알라닌(Phe), 티로신(Tyr) 및 트립토판(Trp)을 포함하는 군에서 선택되고;

Xaa14는 아르기닌(Arg), 리신(Lys) 및 히스티딘(His), 시스테인(Cys) 및 메티오닌(Met)을 포함하는 군에서 선택되고;

Xaa15는 글리신(Gly), 알라닌(Ala), 발린(Val), 류신(Leu) 및 이소류신(Ile), 세린(Ser), 트레오닌(Thr), 메티오닌(Met), 시스테인(Cys) 및 프롤린(Pro)을 포함하는 군에서 선택되고;

Xaa17은 글리신(Gly), 알라닌(Ala), 발린(Val), 류신(Leu), 이소류신(Ile), 트레오닌(Thr), 메티오닌(Met), 페닐알라닌(Phe) 및 프롤린(Pro)을 포함하는 군에서 선택된다.

본 발명에 따른 조성물의 일구현예에서, 뮤-코노톡신 펩티드에서 Xaa1은 피로글루타메이트(pGlu)이다.

본 발명에 따른 조성물의 일구현예에서, 뮤-코노톡신 펩티드는 아미노산 서열이 pGlu-Gly-Cys-Cys-Asn-Gly-Pro-Lys-Gly-Cys-Ser-Ser-Lys-Trp-Cys-Arg-Asp-His-Ala-Arg-Cys-Cys-아미드 [서열번호 2], 이의 생물학적 활성 단편, 이의 염, 이의 조합 및/또는 이의 변이체이다.

"변이체"라는 용어는 본래 서열 펩티드와 어느 정도 상이한 아미노산 서열을 갖는 펩티드, 즉 보존적 아미노산 치환(이에 따라 하나 이상의 아미노산이 동일한 특징과 형태적 역할을 가진 다른 아미노산으로 치환됨)에 의해 본래 서열과 달라진 아미노산 서열을 갖는 펩티드를 의미한다. 아미노산 서열 변이체는 본래 아미노산 서열 내의 특정 위치에서 치환, 결실, 측쇄 개질 및/또는 삽입을 갖는다.

본 발명에 따른 조성물의 일구현예에서, 뮤-코노톡신 펩티드는 아르기닌, 리신 폴리펩티드, CAS 번호: 937286-43-6, 분자식 C₉₂,H₁₃₉,N₃₅,0₂₈,S₆ 아세테이트 염(몰질량 2376 g/mol)이다.

일구현예에서, 하나 이상의 뮤-코노톡신 펩티드는 조성물의 총 중량의 0.05x10^-6 내지 1x10^-4 중량%의 양으로 존재한다.

추가 구현예에서, 조성물의 총 중량의 0.05x10^-4 내지 0.1x10^-4 중량%의 양으로 존재한다.

추가 구현예에서, 조성물의 총 중량의 0.1x10^-4 내지 1x10^-4 중량%의 양으로 존재한다.

추가 구현예에서, 조성물의 총 중량에 대해 0.05x10^-2내지 1 mg/kg의 양으로 존재한다.

추가 구현예에서, 조성물의 총 중량에 대해 0.01 내지 0.1 mg/kg의 양으로 존재한다.

추가 구현예에서, 조성물의 총 중량에 대해 0.1 내지 1 mg/kg의 양으로 존재한다.

일구현예에서, 하나 이상의 뮤-코노톡신 펩티드는 0.05 μM 내지 0.50 μM의 몰농도로 존재한다.

추가 구현예에서, 0.10 μM 내지 0.30 μM의 몰농도로 존재한다.

추가 구현예에서, 0.25 μM 내지 0.35 μM의 몰농도로 존재한다.

일구현예에서, 본 발명의 조성물은 양이온 계면활성제를 더 포함한다.

놀랍게도, 양이온 계면활성제는 뮤-코노톡신 펩티드의 피부 침투를 증대시킨다.

양이온 계면활성제는 화장품 조성물에서 사용될 수 있는 양이온 계면활성제, 예컨대 pH-의존 일차, 이차 또는 삼차 아민 또는 영구 하전된 사차 암모늄 양이온, 예컨대 알킬트리메틸암모늄 염, 벤즈알코늄 클로라이드, 디옥타데실디메틸암모늄 브로마이드 또는 세테아릴 알코올 및 베헨트리모늄 메토설페이트 중에서 선택된다.

일구현예에서, 양이온 계면활성제는 조성물의 총 중량에 대해 1 내지 6 중량%의 양으로 존재한다.

추가 구현예에서, 조성물의 총 중량에 대해 3 내지 5 중량%의 양으로 존재한다.

항-주름 효과는 피부에 상기 조성물을 적용하고 5분 후부터 관찰될 수 있다.

일구현예에서, 피부에 상기 조성물을 적용하고 10분 후부터 관찰될 수 있다.

일구현예에서, 피부에 상기 조성물을 적용하고 20분 후부터 관찰될 수 있다.

일구현예에서, 피부에 상기 조성물을 적용하고 20분 내지 48시간 후부터 관찰될 수 있다.

항-주름 효과는 표준 거칠기 파라미터를 산출하여 수행되는 피부 표면의 분석과 같이 당업계의 통상의 기술자에게 알려진 통상의 방법에 의해 관찰된다.

또한, 본 발명은 피부 노화의 내적 및 외적 징후, 즉 주름, 미세 라인, 피부의 불연속 및 거칠음, 피부 처짐, 피부 점 및/또는 안색의 손상을 처치 및/또는 예방하기 위한, 본 발명에 따른 조성물의 용도로 이루어진다.

일구현예에서, 본 발명에 따른 조성물의 용도는 피부의 긴장성 및/또는 견고성 및/또는 탄성의 측면에서 피부의 기계적 성질을 개선하기 위한 것이다.

일구현예에서, 본 발명에 따른 조성물의 용도는 진피 및 상피의 밀도를 개선하거나, 진피 및 상피에 볼륨을 제공하거나 회복시키기 위한 것이다.

일구현예에서, 본 발명은 본 발명에 따른 조성물을 피부에 국소적으로 적용하는 단계를 포함하는 주름을 처치하기 위한 화장 방법이다.

특히, 이는 주름이 나타난 얼굴 면적에 상기 조성물을 적용하는 것으로 이루어진다.

일구현예에서, 본 발명에 따른 조성물은 피부에 국소 적용하는데에 적합하며, 이에 따라 생리학적으로 허용가능한 매질, 즉 피부에 적합한 매질을 함유한다.

일구현예에서, 본 발명에 따른 조성물은 화장품에서 통상 사용되는 임의의 제공 형태일 수 있으며, 이는 예를 들어 선택적으로 겔화된 수용액, 로션 타입의 분산제, 선택적으로 2상 로션, 수상 중에 지방상을 분산시켜 수득된 에멀젼(O/W 에멀젼) 또는 그 반대 에멀젼(W/O 에멀젼), 또는 트리플 에멀젼(W/O/W 또는 0/W/O 에멀젼) 또는 이온성 및/또는 비이온성 타입의 소포성 분산제의 형태일 수 있다. 상기 조성물은 통상의 방법에 따라 전형적으로 제조된다.

일구현예에서, 본 발명에 따른 조성물은 크림, 연고, 밀크, 로션, 세럼, 페이스트 또는 폼의 형태일 수 있다.

일구현예에서, 본 발명에 따른 조성물은 브라이트닝제, 항-홍조 제제, 빛차단 및 UV 유기 또는 무기 필터, 수화제, 보습제, 습윤제, 박리제, 항-주름제, 항-노화제, 감량제, 항-여드름제, 항-염증제, 항산화제, 라디칼 스캐빈저, 셀프 태닝제, 탈모제 또는 면도제, 모발 성장 조절제, 타이트닝제, 펩티드 및 비타민 중에서 선택되는 하나 이상의 부가적 활성성분을 포함한다.

일구현예에서, 본 발명에 따른 조성물은 친수성 및 친유성 겔화제, 친수성 및 친유성 활제, 보존제, 항산화제, 용매, 방향제, 충진제, 스크리닝제, 색소, 흡취제 및 염료와 같은 아쥬반트 중에서 선택되는 하나 이상의 아쥬반트를 포함할 수 있다.

아쥬반트는 조성물의 총 중량에 대해 예를 들어 0.01 내지 50 중량%의 양으로 존재한다.

일구현예에서, 본 발명에 따른 조성물은 또한 UVA-활성 및 UVB-활성 유기 및 미네랄 광보호 제제 중에서 선택되는 하나 이상의 제제를 포함할 수 있다.

일구현예에서, 본 발명에 따른 조성물은 침투 강화 디바이스와 함께 사용된다.

추가 구현예에서, 상기 디바이스는 이온영동(ionophoresis) 장치이다.

도 1은 눈가의 잔주름 및 주름살에 대한 CnIIIC의 효과를 나타낸다.
도 2는 이마 주름 및 주름살에 대한 CnIIIC의 효과를 나타낸다.
도 3은 눈가의 잔주름 및 이마 주름에 대한 CnIIIC의 효과의 비교를 나타낸다.

하기 실시예에서 CnIIIC로서 언급되는 산물은 다음과 같다:

pGlu-Gly-Cys-Cys-Asn-Gly-Pro-Lys-Gly-Cys-Ser-Ser-Lys-Trp-Cys-Arg-Asp-His-Ala-Arg-Cys-Cys-아미드 [서열번호 2]

이는 또한 아르기닌, 리신 폴리펩티드, CAS 번호: 937286-43-6, 분자식 C₉₂,H₁₃₉,N₃₅,0₂₈,S₆ 아세테이트 염(몰질량 2376 g/mol)으로서 언급된다.

이는 농도가 10 μM인 모액(mother solution)으로서 사용된다.

모액은 최종 조성물에 1 내지 3 %의 양으로 첨가된다.

실시예 1 :

항-노화 진정 데이크림 성분 중량%

이소프로필 팔미테이트: 20%

세테아릴 알코올: 10%

세틸 알코올: 5%

세테아레스-33: 10%

디메티콘: 5%

방향제: 0.5%

보존제: 0.5%

CnIIIC: 0.6x10^-4 %(모액의 3%)

물: QSP100

실시예 2:

성인 피부용 크림

카보머: 0.2%

글리세린: 3.5%

소르브산 칼륨: 0.1%

스테아레스 10: 1.5%

세테아릴 알코올 디세틸 포스페이트: 3.5%

디메티콘: 2.0%

소르비탄 스테아레이트: 0.4%

나트륨 히드록사이드: 0.2%

CnIIIC: 0.2x10^-4 %(모액의 1%)

물: QSP 100

실시예 3:

암모늄 아크릴로일디메틸타우레이트/VP 코폴리머: 0.5%

글리세린: 3.0%

디프로필렌 글리콜: 4.0%

스테아릴 알코올: 4.0%

호호바 에스테르(Jojoba Ester): 3.0%

베헨트리모늄 메토설페이트 (및) 세틸 알코올 (및) 부틸렌 글리콜: 4.0%

디메티콘: 5.0%

디메틸 이소소르비드: 5.0%

페네틸 알코올 (및) 에틸헥실글리세린: 2.0%

CnIIIC: 0.6x10^-4 %(모액의 3%)

물: QSP 100

실시예 4:

인간에 대한 항-주름 효과의 정량화

그 원리는, 자원한 건강한 사람에 대해 연구할 때 표면에 대해 투영된 고-대조 라인 네트워크의 변형을 분석함으로써 마이크로 피부 릴리프를 정량화하는 것이다.

파라미터들은, 측정 영역에서 주름과 라인에 대해 수직인 일련의 프로파일에 대해 정량화된다.

상기 생성물은 매일 한번 적용하는 것이 계획되었다. 피부 생명공학 방법을 이용해 수행되는 생체내 평가 프로토콜, 즉 생체내 주변 투영 기법을 통해 국소 제품 vs 플라세보의 효과를 평가하는 것을 목적으로 하였다.

테스트된 조성물의 농도는 0.6 mg/kg, 따라서 0.6x10^-4 %(w/w)이다.

볼 주변에 대해 얼굴의 반쪽, 눈가의 잔주름, 및 이마 주름 모두에 대해 측정이 수행된다. 표면의 릴리프의 계측을 위한 광시스템을 사용하여 이들이 달성된다. 표면의 피부 지형의 분석은 표준 거칠기의 파라미터를 산출하여 수행된다.

상기 프로토콜은 8시간의 기간에 걸쳐 30명의 대상체에 대해 이중-맹검 활성물질 vs 플라세보 시험으로서 수행되었으며, 상기 기간 동안 자원자들은 임상적으로 그리고 피부 릴리프의 변화에 대해 각각 3회(TO, T2h 및 T8h) 측정되었다. 계측 표면의 릴리프를 위한 광시스템을 사용하여 측정이 수행되었다. 이 시스템은 획득 소프트웨어 Optocat(EoTech, 프랑스)와 결합된 투영기 및 CCD 고해상 카메라가 결합된 센서 - Dermatop 시스템(EoTech, 프랑스)을 포함한다.

평균 축 및 측면 분해능은 대략 10 미크론이다.

상기 시험 말기에, 내약성(tolerability)은 양호하였다. 등록된 자원자들이 연구되는 제품과 관련하여 충분한 만족을 표현하였다. 단일 획득(single acquisition)은 면적에 의해 이루어진다. 최초 획득(TO)의 스크린상 시각화는 Tn 면적의 보정 리포지셔닝을 가능하게 한다.

분석

피부 표면의 분석은 표준 거칠기 파라미터를 산출함으로써 수행된다. 이들 파라미터는 30 x 40 mm(12 cm²)의 면적에서 추출된다. 시험 면적에서 주변 투영 기법에 의해 획득된 데이터를 분석하는 것은 분석 시스템 및 Toposurf Optocat를 통해 수행된다.

프로파일 파라미터

SPt: 릴리프의 최대 진폭(mm).

눈가의 잔주름에 대해, SPt의 감소는 주요 주름의 감소를 의미한다. 이 파라미터는 아티팩트(artifacts)에 민감하다.

SPa: 평균 거칠기(mm). 이는 연구되는 표면의 릴리프의 진폭 변화를 의미한다. 이 파라미터의 감소는 표면 평탄화 및 주름과 미세 라인의 감소를 의미한다.

SPQ 또는 SQ: 제곱 편차를 사용한 릴리프의 변화의 분산 평균(mm). 이 파라미터는 아티팩트에 덜 민감하더라도 Spa와 동일한 해석.

형태 파라미터

형태를 제거하고 연구 영역을 편평화하기 위한 다항 보정 및 다중 필터를 사용한 후에 주름과 미세 라인이 검출된다.

주름의 평균 면적(mm²). 이 파라미터는 시험 영역에서 검출되는 목적물(라인 및 주름)의 평균 면적에 상응한다.

주름의 평균 용적(mm³). 이 파라미터는 시험 영역에서 검출되는 목적물(라인 및 주름)의 평균 용적에 상응한다.

주름의 평균 깊이(mm). 이 파라미터는 시험 영역에서 검출되는 목적물(라인 및 주름)의 평균 깊이에 상응한다.

그 결과들은 도 1, 2 및 3에 나타낸다.

도 1은 눈가의 잔주름 및 주름살에 대한 CnIIIC의 효과를 나타낸다.

도 2는 이마 주름 및 주름살에 대한 CnIIIC의 효과를 나타낸다.

도 3은 눈가의 잔주름 및 이마 주름에 대한 CnIIIC의 효과의 비교를 나타낸다.

각각의 도에서,

* p<0.05 student. CnIIIC에 유리한 통계적 유의 vs T0

○ p<0.05 Wilcoxont. 플라세보와 통계학적으로 상이한 CnIIIC.

도 1, 2 및 3에 나타난 결과들은 항-주름 효과가 유의적이라는 것을 입증한다. CnIIIC는 임상 평가에 따라 눈가의 주름과 미세 라인의 출현을 유의적으로 감소시킨다: 이마 및 눈가에 적용하고 2시간 후 5%, SA 파라미터들에 대해 플라세보에 대해 8% 이상.

SEQUENCE LISTING <110> ACTIVEN <120> COSMETIC COMPOSITION COMPRISING A MUCONOPEPTIDE <130> IP20142579FR <160> 3 <170> KopatentIn 2.0 <210> 1 <211 > 23 <212> PRT <213> Conus <220> <221 > SOURCE <222> 1..23 <223> /mol_type="protein" /organism="Conus" <220> <221> MOD_RES <222> 1 <223> X is any N-modified amino acid <220> <221 > MOD_RES <222> 5 <223> X is any acidic amino acid or any of its amide form <220> <221> MOD_RES <222> 7 <223> Proline or 3-hydroxyl proline <220> <221 > MOD_RES <222> 8 <223> X is any basic amino acid <220> <221 > MOD_RES <222> 12 <223> X is any non-aromatic hydroxyl amino acid <220> <221 > MOD_RES <222> 11 <223> X is any non-aromatic hydroxyl amino acid <220> <221 > MOD_RES <222> 13 <223> X is any basic amino acid <220> <221 > MOD_RES <222> 17 <223> X is any acidic amino acid or any of its amide form <220> <221 > MOD_RES <222> 18 <223> X is any basic amino acid, or any sulfur-containing amino acid <220> <221 > MOD_RES <222> 14 <223> X is any aromatic amino acid <220> <221 > MOD_RES <222> 16 <223> X is any basic amino acid <220> <221 > MOD_RES <222> 19 <223> X is any hydrophobic or apolar amino acid, or any non-aromatic hy droxyl amino acid <220> <221 > MOD_RES <222> 20 <223> X is any basic amino acid <220> <221> MOD_RES <222> 23 <223> X is any apolar amino acid, or an amide group <400> 1 Xaa Gly Cys Cys Xaa Gly Pro Xaa Gly Cys Xaa Xaa Xaa Xaa Cys Xaa 1 5 10 15 Xaa Xaa Xaa Xaa Cys Cys Xaa 20 <210> 2 <211 > 23 <212> PRT <213> Conus <220> <221 > SOURCE <222> 1..23 <223> /mol_type="protein" /organism = "Conus" <220> <221 > MOD_RES <222> 1 <223> X is pyroglutamate (pGlu) <220> <221 > MOD_RES <222> 23 <223> X is amide <400> 2 Xaa Gly Cys Cys ASn Gly Pro Lys Gly Cys Ser Ser Lys Trp Cys Arg 1 5 10 15 Asp His Ala Arg Cys Cys Xaa 20 <210> 3 <211 > 22 <212> PRT <213> Conus <220> <221 > SOURCE <222> 1..22 <223> /mol_type="protein" /organism ="Conus" <220> <221 > MOD_RES <222> 1 <223> X is any N-modified amino acid <220> <221 > MOD_RES <222> 5 <223> X is any acidic amino acid or any of its amide form <220> <221 > MOD_RES <222> 7 <223> Proline or 3-hydroxyl proline <220> <221 > MOD_RES <222> 8 <223> X is any basic amino acid <220> <221> MOD_RES <222> 11 <223> X is any non-aromatic hydroxyl amino acid <220> <221 > MOD_RES <222> 12 <223> X is any non-aromatic hydroxyl amino acid <220> <221> MOD_RES <222> 13 <223> X is any basic amino acid <220> <221> MOD_RES <222> 14 <223> X is any aromatic amino acid <220> <221> MOD_RES <222> 16 <223> X is any basic amino acid <220> <221 > MOD_RES <222> 17 <223> X is any acidic amino acid or any of its amide form <220> <221 > MOD_RES <222> 18 <223> X is any basic amino acid, or any sulfur-containing amino acid <220> <221 > MOD_RES <222> 19 <223> X is any hydrophobic or apolar amino acid, or any non-aromatic hy droxyl amino acid <220> <221 > MOD_RES <222> 20 <223> X is any basic amino acid <400> 3 Xaa Gly Cys Cys Xaa Gly Pro Xaa Gly Cys Xaa Xaa Xaa Xaa Cys Xaa 1 5 10 15 Xaa Xaa Xaa Xaa Cys Cys Xaa 20

Claims

활성물질로서 하기 아미노산 서열을 포함하는 하나 이상의 뮤-코노톡신 펩티드, 이의 생물학적 활성 단편, 이의 염, 이의 조합 및/또는 이의 변이체를 화장학적 유효량으로 포함하고, 이와 조합하여 화장학적으로 허용가능한 담체, 희석제 및/또는 아쥬반트를 포함할 수 있는, 화장품 조성물:
[서열번호 1]
Xaa1-Xaa2-Cys-Cys-Xaa3-Xaa4-Xaa5-Xaa6-Xaa7-Cys-Xaa8-Xaa9-Xaa10-Xaa11-Cys-Xaa12-Xaa13-Xaa14-Xaa15-Xaa16-Cys-Cys-Xaa17
여기서,
Xaa1은 N-개질된 아미노산이고,
Xaa2는 글리신이고,
Xaa3은 산성 아미노산 또는 이의 아미드 형태이고,
Xaa4는 글리신이고,
Xaa5는 프롤린 또는 3-히드록시-프롤린이고,
Xaa6은 염기성 아미노산이고,
Xaa7은 글리신이고,
Xaa8은 비방향족 히드록실 아미노산이고,
Xaa9는 비방향족 히드록실 아미노산이고,
Xaa10은 염기성 아미노산이고,
Xaa11은 방향족 아미노산이고,
Xaa12는 염기성 아미노산이고,
Xaa13은 산성 아미노산 또는 이의 아미드 형태이고,
Xaa14는 염기성 아미노산 또는 황함유 아미노산이고,
Xaa15는 소수성 또는 무극성 아미노산, 또는 비방향족 히드록실 아미노산이고,
Xaa16은 염기성 아미노산이고,
Xaa17은 결실(absent)이거나, 또는 무극성 아미노산 또는 아미드기임.
제1항에 있어서,
상기 뮤-코노톡신 펩티드는 아미노산 Xaa3, Xaa4, Xaa5, Xaa6 및 Xaa7로 이루어진 하나 이상의 아미노산, 또는 이의 임의의 조합을 포함하지 않는 것을 특징으로 하는 화장품 조성물.
제1항에 있어서,
상기 뮤-코노톡신 펩티드는 아미노산 Xaa8, Xaa9, Xaa10 및 Xaa11로 이루어진 하나 이상의 아미노산, 또는 이의 임의의 조합을 포함하지 않는 것을 특징으로 하는 화장품 조성물.
제1항에 있어서,
상기 뮤-코노톡신 펩티드는 아미노산 Xaa12, Xaa13, Xaa14, Xaa15 및 Xaa16으로 이루어진 하나 이상의 아미노산, 또는 이의 임의의 조합을 포함하지 않는 것을 특징으로 하는 화장품 조성물.
제1항 내지 제4항 중 어느 한 항에 있어서,
상기 뮤-코노톡신 펩티드에서 아미노산 Xaa1의 N-개질은 아세틸화, 포르밀화, 미리스토일화 또는 아미드화를 포함하는 군에서 선택되고;
Xaa3 및 Xaa13은 아스파르트산(Asp), 아스파라긴(Asn), 글루탐산(Glu), 글루타민(Gln) 및 피로글루탐산(pGlu 또는 Z)를 포함하는 군에서 독립적으로 선택되고;
Xaa6, Xaa10, Xaa12 및 Xaa16은 아르기닌(Arg), 리신(Lys) 및 히스티딘(His)을 포함하는 군에서 독립적으로 선택되고;
Xaa8 및 Xaa9는 세린(Ser) 및 트레오닌(Thr)을 포함하는 군에서 독립적으로 선택되고;
Xaa11은 페닐알라닌(Phe), 티로신(Tyr) 및 트립토판(Trp)을 포함하는 군에서 선택되고;
Xaa14는 아르기닌(Arg), 리신(Lys) 및 히스티딘(His), 시스테인(Cys) 및 메티오닌(Met)을 포함하는 군에서 선택되고;
Xaa15는 글리신(Gly), 알라닌(Ala), 발린(Val), 류신(Leu) 및 이소류신(Ile), 세린(Ser), 트레오닌(Thr), 메티오닌(Met), 시스테인(Cys) 및 프롤린(Pro)을 포함하는 군에서 선택되고;
Xaa17은 글리신(Gly), 알라닌(Ala), 발린(Val), 류신(Leu), 이소류신(Ile), 트레오닌(Thr), 메티오닌(Met), 페닐알라닌(Phe) 및 프롤린(Pro)을 포함하는 군에서 선택되는 것;을 특징으로 하는 화장품 조성물.
제1항 내지 제5항 중 어느 한 항에 있어서,
상기 뮤-코노톡신 펩티드에서 Xaa1은 피로글루타메이트(pGlu, Z)인 것을 특징으로 하는 화장품 조성물.
제1항 내지 제6항 중 어느 한 항에 있어서,
상기 뮤-코노톡신 펩티드, 이의 생물학적 활성 단편, 이의 염, 이의 조합 및/또는 이의 변이체에서 상기 아미노산 서열은 pGlu-Gly-Cys-Cys-Asn-Gly-Pro-Lys-Gly-Cys-Ser-Ser-Lys-Trp-Cys-Arg-Asp-His-Ala-Arg-Cys-Cys-아미드 [서열번호 2]인 것을 특징으로 하는 화장품 조성물.
제1항에 있어서,
상기 뮤-코노톡신 펩티드는 아르기닌, 리신 폴리펩티드, CAS 번호: 937286-43-6, 분자식 C₉₂,H₁₃₉,N₃₅,0₂₈,S₆ 아세테이트 염(몰질량 2376 g/mol)인 것을 특징으로 하는 화장품 조성물.
제1항 내지 제8항 중 어느 한 항에 있어서,
상기 하나 이상의 뮤-코노톡신 펩티드는 조성물의 총 중량의 0.05x10^-6 내지 1x10^-4 중량%의 양으로 존재하는 것을 특징으로 하는 화장품 조성물.
제1항 내지 제8항 중 어느 한 항에 있어서,
상기 하나 이상의 뮤-코노톡신 펩티드는 0.05 μM 내지 0.50 μM의 몰농도로 존재하는 것을 특징으로 하는 화장품 조성물.
제1항 내지 제8항 중 어느 한 항에 있어서,
양이온 계면활성제를 더 포함하는 것을 특징으로 하는 화장품 조성물.
제11항에 있어서,
상기 양이온 계면활성제는 조성물의 총 중량의 1 내지 6 중량%의 양으로 존재하는 것을 특징으로 하는 화장품 조성물.
제1항 내지 제12항 중 어느 한 항에 있어서,
약 20분 내지 48시간 또는 그 이상의 항주름 효과를 갖는 화장품 조성물.
제1항 내지 제13항 중 어느 한 항에 있어서,
브라이트닝제, 항홍조 제제, 빛차단 및 UV 유기 또는 무기 필터, 수화제, 보습제, 습윤제, 박리제, 항주름제, 항노화제, 감량제, 항여드름제, 항염증제, 항산화제, 라디칼 스캐빈저, 셀프 태닝제, 탈모제 또는 면도제, 모발 성장 조절제, 타이트닝제, 펩티드 및 비타민 중에서 선택되는 부가적 활성성분을 포함하는 것을 특징으로 하는 화장품 조성물.
제1항 내지 제14항 중 어느 한 항에 따른 화장품 조성물을 피부 노화의 내적 및 외적 징후에 해당하는 주름, 미세 라인, 피부의 불연속 및 거칠음, 피부 처짐, 피부 점 및/또는 안색의 손상을 예방 및/또는 처치하는데 사용하는 방법.
제1항 내지 제14항 중 어느 한 항에 따른 화장품 조성물을 피부의 기계적 성질, 피부의 긴장성 및/또는 견고성 및/또는 탄성을 개선하는데 사용하는 방법.
제1항 내지 제14항 중 어느 한 항에 따른 화장품 조성물을 진피 및 상피의 밀도를 개선하거나, 진피 및 상피에 볼륨을 제공하거나 회복하는데 사용하는 방법.
제1항 내지 제14항 중 어느 한 항에 따른 화장품 조성물을 피부에 국소적으로 적용하는 것을 포함하는, 주름을 처치하기 위한 화장 방법.
제15항 내지 제17항 중 어느 한 항에 있어서,
침투 강화용 디바이스를 함께 사용하는 것을 특징으로 하는 방법.
제19항에 있어서,
상기 디바이스는 이온영동 장치인 것을 특징으로 하는 방법.