KR20140146086A - 티로신 키나제 억제제 조합물 및 그의 용도 - Google Patents

티로신 키나제 억제제 조합물 및 그의 용도 Download PDF

Info

Publication number
KR20140146086A
KR20140146086A KR1020147027542A KR20147027542A KR20140146086A KR 20140146086 A KR20140146086 A KR 20140146086A KR 1020147027542 A KR1020147027542 A KR 1020147027542A KR 20147027542 A KR20147027542 A KR 20147027542A KR 20140146086 A KR20140146086 A KR 20140146086A
Authority
KR
South Korea
Prior art keywords
tyrosine kinase
combination
met
fgfr
kinase activity
Prior art date
Application number
KR1020147027542A
Other languages
English (en)
Inventor
랄프 티트
알랜 버클러
프레드 하빈스키
스네하 상하비
더글라스 제프리
크리스토퍼 윌슨
Original Assignee
노파르티스 아게
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by 노파르티스 아게 filed Critical 노파르티스 아게
Publication of KR20140146086A publication Critical patent/KR20140146086A/ko

Links

Images

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/53—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with three nitrogens as the only ring hetero atoms, e.g. chlorazanil, melamine
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/495—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with two or more nitrogen atoms as the only ring heteroatoms, e.g. piperazine or tetrazines
    • A61K31/50—Pyridazines; Hydrogenated pyridazines
    • A61K31/5025—Pyridazines; Hydrogenated pyridazines ortho- or peri-condensed with heterocyclic ring systems
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/495—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with two or more nitrogen atoms as the only ring heteroatoms, e.g. piperazine or tetrazines
    • A61K31/505—Pyrimidines; Hydrogenated pyrimidines, e.g. trimethoprim
    • A61K31/506—Pyrimidines; Hydrogenated pyrimidines, e.g. trimethoprim not condensed and containing further heterocyclic rings
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K45/00—Medicinal preparations containing active ingredients not provided for in groups A61K31/00 - A61K41/00
    • A61K45/06—Mixtures of active ingredients without chemical characterisation, e.g. antiphlogistics and cardiaca
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
  • Acyclic And Carbocyclic Compounds In Medicinal Compositions (AREA)

Abstract

본 발명은 (i) MET 억제제 및 (ii) FGFR 억제제 또는 각각의 그의 제약상 허용되는 염 또는 각각의 그의 전구약물, 및 하나 이상의 제약상 허용되는 담체를 포함하는 제약 조합 제품에 관한 것이다.

Description

티로신 키나제 억제제 조합물 및 그의 용도 {TYROSINE KINASE INHIBITOR COMBINATIONS AND THEIR USE}
본 발명은 증식성 질환의 치료에서 연합 활성인 (i) MET 억제제 및 (ii) FGFR 억제제 또는 각각의 그의 제약상 허용되는 염 또는 그의 전구약물을 포함하는 제약 조합물, 상응하는 제약 제제, 용도, 방법, 공정, 상업용 패키지 및 관련된 본 발명의 실시양태에 관한 것이다.
원종양유전자 cMET (MET)는 티로신 키나제 활성을 가지며 배아 발생 및 상처 치유에 필수적인 단백질 간세포 성장 인자 수용체 (HGFR)를 코딩한다. 간세포 성장 인자 (HGF) 자극시, MET는 침습성 성장을 일으키는 여러 생물학적 반응을 유도한다. 비정상적 MET 활성화는 신장, 간, 위, 유방 및 뇌의 암을 비롯한 다양한 유형의 악성종양에서 종양 성장, 새로운 혈관의 형성 (혈관신생) 및 전이를 유발한다. 다수의 MET 키나제 억제제가 공지되어 있고, 대안적으로 HGF-유도 MET (=HGFR) 활성화의 억제제가 있다. 정상 조직 및 인간 악성종양, 예컨대 암에서의 c-MET의 생물학적 기능 (또는 c-MET 신호전달 경로)은 널리 기록되어 있다 (문헌 [Christensen, J.G. et al., Cancer Lett. 2005, 225(1):1-26; Corso, S. et al., Trends in Mol. Med. 2005, 11(6):284-292]).
지금까지, 티로신 키나제 활성을 갖는 여러 독특한 막 FGFR이 척추동물에서 확인되었고, 이들 모두는 티로신 키나제 슈퍼패밀리에 속한다: FGFR1 (= CD331, 또한 섬유모세포 성장 인자 수용체 1 참조); FGFR2 (= CD332, 또한 섬유모세포 성장 인자 수용체 2 참조); FGFR3 (= CD333, 또한 섬유모세포 성장 인자 수용체 3 참조); FGFR4 (= CD334, 또한 섬유모세포 성장 인자 수용체 4 참조); 및 FGFR6.
역학적 연구에서 인간 암에서의 FGF/ FGFR의 유전자 변경 및/또는 비정상적 발현이 보고된 바 있다: FGFR1 키나제의 구성적 활성화를 일으키는 FGFR1의 다른 유전자로의 전위 및 융합은 8p11 골수증식성 장애의 원인이 된다 (문헌 [MacDonald D & Cross NC, Pathobiology 74:81-8 (2007)]). 유전자 증폭 및 단백질 과다-발현이 유방 종양에서 FGFR1, FGFR2 및 FGFR4에 대해 보고된 바 있다 (문헌 [Adnane J et al., Oncogene 6:659-63 (1991); Jaakkola S et al., Int. J. Cancer 54:378-82 (1993); Penault-Llorca F et al., Int. J. Cancer 61: 170-6 (1995); Reis-Filho JS et al., Clin. Cancer Res. 12:6652-62 (2006)]). FGFR2의 체성 활성화 돌연변이가 위암 (문헌 [Jang JH et al., Cancer Res. 61:3541-3 (2001)]) 및 자궁내막암 (문헌 [Pollock PM et al., Oncogene (May 21, 2007)])에 공지되어 있다. 14q32에서의 이뮤노글로불린 중쇄 스위치 영역 내로의 4p16의 반복적 염색체 전위는 다발성 골수종에서 FGFR3의 탈조절된 과다-발현을 초래하며 (문헌 [Chesi M et al., Nature Genetics 16:260-264 (1997); Chesi M et al., Blood 97:729-736 (2001)]), 수용체의 리간드-독립적 구성적 활성화를 일으키는 FGFR3의 특정한 도메인에서의 체세포 돌연변이가 방광 암종 및 다발성 골수종에서 확인되었다 (문헌 [Cappellen D et al., Nature Genetics 23:18-20 (1999); Billerey C et al., Am. J. Pathol. 158(6):1955-9 (2001); van Rhijn BWG et al., Eur. J. Hum. Genet. 10: 819-824 (2002); Ronchetti C et al., Oncogene 20: 3553-3562 (2001)]).
본래 MET 또는 FGFR에 의존성인 암 세포의 사용시, 놀랍게도 대안적 수용체 티로신 키나제 (RTK)의 리간드-매개 활성화를 통한 의존성의 우회가 관찰되었다. MET- 또는 FGFR-의존성 세포주를 상응하는 선택적 억제제로 (즉, MET-의존성 세포주를 MET 억제제로, FGFR-의존성 세포주를 FGFR 억제제로) 처리하고 동시에 다양한 분비형 단백질을 코딩하는 cDNA로 형질감염된 세포로부터의 상청액을 첨가한 경우에 우회 메카니즘이 발견되었다. MET 및 FGFR RTK가 억제로 인한 다른 것의 기능 상실을 보상할 수 있으며 따라서 이들 RTK 중 단 하나만이 적절한 약물에 의해 억제되는 경우에 증식하는 세포의 "구출"을 일으킨다는 것을 밝혀낼 수 있었다. 이는 FGFR 및 MET 억제제의 조합물이, MET의 활성이 FGFR의 억제를 보상하고/거나 FGFR의 활성이 MET 억제를 보상하는 질환의 유효 치료를 가능하게 할 것이라는 일반적 개념 및 교시를 추론할 수 있게 한다.
따라서, 이들 RTK의 조합된 억제가, 특히 MET 및 FGFR RTK가 둘 다 활성이며 이어서 본 발명에 따라 동시에 또는 연합하여 순차적으로 억제될 수 있는 경우에 상승작용적 항암 활성을 생성할 수 있는 것으로 밝혀졌다.
제1 실시양태에 따르면, 본 발명은 (i) MET 억제제 및 (ii) FGFR 억제제 또는 각각의 그의 제약상 허용되는 염 또는 각각의 그의 전구약물, 및 하나 이상의 제약상 허용되는 담체를 포함하는 제약 조합물에 관한 것이다.
본 발명의 추가 실시양태는 FGFR 티로신 키나제 활성 및/또는 MET 티로신 키나제 활성 매개 질환, 특히 암에 대한 연합 치료 유효량의, (i) FGFR 티로신 키나제 억제제 및 (ii) MET 티로신 키나제 억제제 또는 각각의 그의 제약상 허용되는 염, 및 하나 이상의 제약상 허용되는 담체를 포함하는 조합물을 제공한다.
추가 실시양태는 FGFR 티로신 키나제 활성 및/또는 MET 티로신 키나제 활성 매개 질환, 특히 암을 치료하기 위한 본 발명의 조합물의 용도에 관한 것이다.
추가 실시양태는 FGFR 티로신 키나제 활성 및/또는 MET 티로신 키나제 활성 매개 질환, 특히 암을 치료하기 위한 의약 또는 제약 제품의 제조를 위한, (i) FGFR 티로신 키나제 억제제 및 (ii) MET 티로신 키나제 억제제 또는 각각의 그의 제약상 허용되는 염의 조합물의 용도에 관한 것이다.
추가 실시양태는 (i) FGFR 티로신 키나제 억제제 및 (ii) MET 티로신 키나제 억제제 또는 각각의 그의 제약상 허용되는 염의 조합물을 사용하여 FGFR 티로신 키나제 활성 및/또는 MET 티로신 키나제 활성 매개 질환, 특히 암을 치료하는 방법에 관한 것이다.
추가 실시양태는 FGFR 티로신 키나제 활성 및/또는 MET 티로신 키나제 활성 매개 질환, 특히 암의 치료를 필요로 하는 대상체, 예컨대 온혈 동물, 특히 인간에게 (i) FGFR 티로신 키나제 억제제 및 (ii) MET 티로신 키나제 억제제를 포함하는 조합물 또는 조합 제품의 유효량을 투여하는 것을 포함하는, FGFR 티로신 키나제 활성 및/또는 MET 티로신 키나제 활성 매개 질환, 특히 암을 치료하는 방법에 관한 것이다.
본 발명의 추가 실시양태는 본원에 기재된 본 발명에 따른 조합물을, 특히 FGFR 티로신 키나제 활성 및/또는 MET 티로신 키나제 활성 매개 질환, 특히 암의 치료에서의 그의 동시, 개별 또는 순차적 사용을 위한 (특히 연합 활성이 되도록) 지침과 함께 포함하는, 특히 FGFR 티로신 키나제 활성 및/또는 MET 티로신 키나제 활성 매개 질환, 특히 암의 치료에서의 사용을 위한 제약 제품 또는 상업용 패키지에 관한 것이다.
본 발명의 추가 실시양태는 본 발명에 따른 조합 제품의 제조를 위한, (i) FGFR 티로신 키나제 억제제 및 (ii) MET 티로신 키나제 억제제 또는 각각의 그의 제약상 허용되는 염의 용도에 관한 것이다.
WO 2011/018454에는 MET 티로신 키나제 억제제가 개시되어 있으며, 하기 화학식을 갖는 (E)-2-(1-(3-((7-플루오로퀴놀린-6-일)메틸)이미다조[1,2-b]피리다진-6-일)에틸리덴)히드라진카르복스아미드 명칭의 화합물 (또한 하기에 화합물 A로 칭해짐)이 특히 유용하다:
Figure pct00001
WO 11 018454, 실시예 1을 참조한다.
WO 2008/064157에는 MET 티로신 키나제 억제제가 개시되어 있으며, 하기 화학식을 갖는 2-플루오로-N-메틸-4-[(7-퀴놀린-6-일-메틸)-이미다조[1,2-b]트리아진-2-일]벤즈아미드 명칭의 화합물 (또한 이하 화합물 B로 명명됨)이 특히 유용하다:
Figure pct00002
WO 2008/064157, 실시예 7을 참조한다.
다른 MET 억제제, 그의 제약상 허용되는 염 및 그의 전구약물 (이는 또한 HGF에 대해 활성인 화합물 또는 항체를 포함함)은 하기와 같이 예시된다:
하기 화학식을 갖는 크리조티닙 (화이자(Pfizer)) (일명 PF02341066)
Figure pct00003
;
하기 화학식을 갖는 카보잔티닙 (엑셀릭시스(Exelixis)) (일명 XL-184)
Figure pct00004
;
하기 화학식을 갖는 티바티닙 (아큘(ArQule), 다이이치(daiichi), 교와(Kyowa)) (일명 ARQ-197)
Figure pct00005
;
하기 화학식을 갖는 포레티닙 (엑셀릭시스, 글락소스미스클라인(GlaxoSmithKline)) (일명 XL-880)
Figure pct00006
;
하기 화학식을 갖는 MGCD-265 (메틸젠(MethylGene))
Figure pct00007
;
하기 화학식을 갖는 AMG-208 (암젠(Amgen)) (또한 WO 2008/008539 참조)
Figure pct00008
;
AMG-337 (암젠);
하기 화학식을 갖는 JNJ-38877605 (존슨 앤 존슨(Johnson & Johnson)) (일명 BVT051, 또한 WO 2007/075567 참조)
Figure pct00009
;
하기 화학식을 갖는 MK-8033 (머크 앤 캄파니(Merck & Co))
Figure pct00010
;
하기 화학식을 갖는 E-7050 (에이사이(Eisai))
Figure pct00011
;
EMD-1204831 (머크 세로노(Merck Serono));
하기 화학식을 갖는 EMD-1214063 (머크 세로노, 또한 WO 2007/019933 참조)
Figure pct00012
;
하기 화학식을 갖는 아무바티닙 (슈퍼젠(SuperGen), 일명 MP-470)
Figure pct00013
;
LY-2875358 (일라이 릴리(Eli Lilly));
하기 화학식을 갖는 BMS-817378 (브리스톨마이어스스큅(BristolMyersSquibb), 심시어(Simcere))
Figure pct00014
;
DP-3590 (데시페라(Deciphera));
ASP-08001 (수조우 아세피온 파마슈티칼스(Suzhou Ascepion Pharmaceuticals));
HM-5016504 (허치슨 메디파마(Hutchison Medipharma));
하기 화학식을 갖는 PF-4217903 (화이자, 또한 US2007/0265272 참조)
Figure pct00015
; 또는
하기 화학식을 갖는 SGX523 (SGX, 또한 WO 2008/051808 참조)
Figure pct00016
;
또는 항체 또는 관련된 분자, 예를 들어
HGF에 대한 피클라투주맙 (아베오(AVEO)) 모노클로날 항체; MET에 대한 오나르투주맙 (로슈(Roche)) 모노클로날 항체; HGF에 대한 릴로투주맙 (암젠(Amgen)) 모노클로날 항체; HGF에 대한 Tak-701 (다케다(Takeda)) 모노클로날 항체; MET에 대한 LA-480 (일라이 릴리) 모노클로날 항체; 및/또는 MET에 대한 LY.2875358 (일라이 릴리) 모노클로날 항체.
WO 2006/000420에는 FGFR 티로신 키나제 억제제가 개시되어 있으며, 특히 화학식 II의 화합물 및 그의 염, 에스테르, N-옥시드 또는 전구약물이 특정한 실시양태이다.
하기 화학식을 갖는 3-(2,6-디클로로-3,5-디메톡시-페닐)-1-{6-[4-(4-에틸피페라진-1-일)-페닐아미노]-피리미딘-4-일}-1-메틸-우레아 (BGJ398, 또한 화합물 C로 명명됨)가 특히 바람직하다:
Figure pct00017
WO2006/000420, 실시예 145를 참조한다.
다른 FGFR 티로신 키나제 억제제 또는 그의 제약상 허용되는 염 또는 전구약물은 다음을 포함하나, 이에 제한되는지 않는다:
하기 화학식을 갖는 AZD-4547 (아스트라제네카(AstraZeneca)):
Figure pct00018
;
하기 화학식을 갖는 PD173074 (임페리얼 칼리지 런던(Imperial College London)) (N-[2-[[4-(디에틸아미노)부틸]아미노-6-(3,5-디메톡시페닐)피리도[2,3-d]피리미딘-7-일]-N'-(1,1-디메틸에틸)우레아:
Figure pct00019
;
또는 보다 덜 특이적인 FGFR 티로신 키나제 억제제, 예를 들어 하기 화학식의 인테다닙, 도비티닙, 브리바닙 (특히 알라니네이트), 세디라닙, 마시티닙, 오란티닙, 포나티닙 및 E-7080:
Figure pct00020
;
또는 예를 들어 다음으로 이루어진 군으로부터 선택된 항체 또는 관련된 분자:
HGS1036/FP-1039 (휴먼 게놈 사이언스(Human Genome Science)/파이브 프라임(Five Prime)) (또한 문헌 [J. Clin. Oncol. 28:15s, 2010] 참조): 다양한 FGF 리간드를 격리시키고 그에 결합하고 다양한 FGF 수용체의 활성화를 잠그도록 설계된, 인간 이뮤노글로불린 G1 (IgG1)의 Fc 영역에 연결된 인간 FGFR1의 세포외 도메인으로 이루어진 가용성 융합 단백질; MFGR1877S (제넨테크(Genentech)/로슈): 모노클로날 항체; AV-370 (아베오): 인간화 항체; GP369/AV-396b (아베오): FGFR-IIIb-특이적 항체; 및 HuGAL-FR21 (갤럭시 바이오테크(Galaxy Biotech)): 모노클로날 항체 (FGFR2).
본 발명에 따라 유용한 화합물은 또한 중간체 또는 최종 화합물 내에서 발생하는 원자의 모든 동위원소를 포함할 수 있다. 동위원소는 동일한 원자 번호를 갖지만 상이한 질량수를 갖는 원자를 포함한다. 본 발명의 화합물 내로 혼입될 수 있는 동위원소의 예는 수소, 탄소, 질소, 산소, 인, 플루오린 및 염소의 동위원소, 예컨대 각각 2H, 3H, 11C, 13C, 14C, 15N, 18F, 31P, 32P, 35S, 36Cl, 125I를 포함한다.
본 발명의 실시양태는 또한 본원에 기재된 본 발명에 따라 유용한 화합물의 제약상 허용되는 염을 포함한다. 본원에 사용된 "제약상 허용되는 염"은 모 화합물이 기존의 산 또는 염기 모이어티를 그의 염 형태로 전환시킴으로써 변형된 것인 개시된 화합물의 유도체를 지칭한다. 제약상 허용되는 염의 예는 염기성 잔기, 예컨대 아민의 무기 또는 유기 산 염; 산성 잔기, 예컨대 카르복실산의 알칼리 또는 유기 염 등을 포함하나, 이에 제한되지는 않는다. 본 발명의 제약상 허용되는 염은, 예를 들어 비-독성 무기 또는 유기 산으로부터 형성된 모 화합물의 통상의 비-독성 염을 포함한다. 본 발명의 제약상 허용되는 염은 통상의 화학적 방법에 의해 염기성 또는 산성 모이어티를 함유하는 모 화합물로부터 합성될 수 있다. 일반적으로, 이러한 염은 물 또는 유기 용매 중에서, 또는 둘의 혼합물 중에서 유리 산 또는 염기 형태의 이들 화합물을 화학량론적 양의 적절한 염기 또는 산과 반응시킴으로써 제조할 수 있고; 일반적으로, 에테르, 에틸 아세테이트, 에탄올, 이소프로판올 또는 아세토니트릴과 같은 비수성 매질이 바람직하다. 적합한 염의 목록은 문헌 [Remington's Pharmaceutical Sciences, 17th ed., Mack Publishing Company, Easton, Pa., 1985, p. 1418; 및 Journal of Pharmaceutical Science, 66, 2 (1977)]에서 발견되며, 이들 각각은 그 전문이 본원에 참고로 포함된다.
어구 "제약상 허용되는"은 합리적인 의학적 판단의 범주 내에서, 합당한 유익/유해 비에 상응하는, 과도한 독성, 자극, 알레르기 반응, 또는 다른 문제 또는 합병증이 없이 인간 및 동물의 조직과의 접촉에 사용하기에 적합한 화합물, 물질, 조성물 및/또는 투여 형태를 지칭하기 위해 본원에 사용된다.
본 발명은 또한 본 발명에 따라 유용한 화합물의 전구약물을 포함한다. 본원에 사용된 "전구약물"은 포유동물 대상체에게 투여된 경우에 활성 모 약물을 방출하는 임의의 공유 결합된 담체를 지칭한다. 전구약물은 상용 조작으로 또는 생체내에서 모 화합물로 절단되도록 하는 방식으로, 화합물 내에 존재하는 관능기를 변형시킴으로써 제조할 수 있다. 전구약물은 포유동물 대상체에게 투여된 경우에 절단되어 각각 유리 히드록실, 아미노, 술프히드릴 또는 카르복실 기를 형성하는, 히드록실, 아미노, 술프히드릴 또는 카르복실 기가 임의의 기에 결합된 화합물을 포함한다. 전구약물의 예는 본 발명의 화합물 내의 알콜 및 아민 관능기의 아세테이트, 포르메이트 및 벤조에이트 유도체를 포함하나, 이에 제한되지는 않는다. 전구약물의 제조 및 용도는 문헌 [T. Higuchi and V. Stella, "Pro-drugs as Novel Delivery Systems," Vol. 14 of the A.C.S. Symposium Series, 및 Bioreversible Carriers in Drug Design, ed. Edward B. Roche, American Pharmaceutical Association and Pergamon Press, 1987]에서 논의되며, 상기 문헌은 둘다 그 전문이 본원에 본원에 참조로 포함된다.
본 발명에 따라 유용한 화합물, 뿐만 아니라 그의 제약상 허용되는 염 또는 전구약물은 또한 호변이성질체, N-옥시드 또는 용매화물, 예를 들어 수화물로서 존재할 수 있다. 모든 이들 변이체, 뿐만 아니라 그의 임의의 단일 변이체, 또는 둘 이상 내지 이러한 변이체의 전체 미만의 조합물이 포함되며, 본원에서 본 발명의 조합 제품 내에 포함된 화합물, 예를 들어 FGFR 티로신 키나제 억제제 및/또는 MET 티로신 키나제 억제제가 언급되는 경우에 이들로 해석되어야 한다.
상기 및 하기 언급된 제1 실시양태에 따른 본 발명은 언급된 조합 파트너 및 하나 이상의 제약상 허용되는 담체를 포함하는 제약 조합물, 특히 제약 조합 제품에 관한 것이다.
"조합물"은 조합 사용을 위한 지침을 포함하거나 포함하지 않는 개별 파트너의 제제, 또는 조합 제품을 지칭한다. 따라서, 조합 파트너는 완전 개별 제약 투여 형태 또는 제약 조성물일 수 있고, 이는 또한 서로 독립적으로 시판되며, 여기서 단지, 특히 하기 정의된 바와 같이 연합 활성이 되도록 동시에 또는 순차적으로 사용하기 위한 그의 조합 사용을 위한 지침이 패키지 용품, 예를 들어 전단 등, 또는 예를 들어 의사 및 의료진에게 제공되는 다른 정보 (예를 들어 구두 전달, 기록으로의 전달 등)에 제공된다.
"조합 제품"은 특히 하나의 투여 단위 형태 내의 고정 조합물을 지칭하거나, 또는 FGFR 티로신 키나제 억제제 및 MET 티로신 키나제 억제제 및 임의로 추가의 조합 파트너 (예를 들어 "공동-작용제"로도 지칭되는, 하기 설명된 바와 같은 기타 약물)를 독립적으로 동시에 또는 시간 간격을 두고 개별적으로 투여할 수 있으며 특히 여기서 이들 시간 간격은 조합 파트너가 협동 (= 연합) 효과, 예를 들어 상승작용 효과를 나타내도록 하는 것인 조합 투여를 위한 부분들의 키트를 지칭한다. 본원에 사용된 용어 "공-투여" 또는 "조합 투여" 등은 선택된 조합 파트너들을 이를 필요로 하는 단일 대상체 (예를 들어, 환자)에게 투여하는 것을 포함하도록 의도되고, 작용제들이 반드시 동일한 투여 경로에 의해 및/또는 동시에 투여되지는 않는 것인 치료 요법을 포함하도록 의도된다.
따라서, 본원에 사용된 용어 "조합 제품"은 하나 초과의 활성 성분의 혼합 또는 조합으로부터 생성된 제약 제품을 의미하고, 활성 성분 (또한 조합될 수 있음)의 고정 및 비-고정 조합물 둘 다를 포함한다.
용어 "고정 조합물"은 활성 성분, 예를 들어 FGFR 티로신 키나제 억제제 및 MET 티로신 키나제 억제제를 둘 다 환자에게 단일 개체 또는 투여량의 형태로 동시에 투여하는 것을 의미한다. 달리 말하면: 활성 성분들은 하나의 투여 형태 내에, 예를 들어 하나의 정제 내에 또는 하나의 캡슐 내에 존재한다.
용어 "비-고정 조합물"은, 활성 성분을 둘 다 환자에게 개별 개체로서 동시에, 공동으로, 또는 특정 시간 제한없이 순차적으로 투여하며 여기서 이러한 투여가 환자의 체내에서 두 화합물의 치료상 유효한 수준을 제공하는 것을 의미한다. 후자는 또한 칵테일 요법, 예를 들어 3종 이상의 활성 성분의 투여에 적용된다. 따라서, 용어 "비-고정 조합물"은 특히, 본원에 정의된 바와 같은 조합 파트너 (i) FGFR 티로신 키나제 억제제 및 (ii) MET 티로신 키나제 억제제 (및 존재하는 경우에 추가의 하나 이상의 공동-작용제)가 서로 독립적으로 또는 구별되는 양의 조합 파트너를 함유하는 상이한 고정 조합물의 사용에 의해, 즉 동시에 또는 상이한 시점에 투여될 수 있으며 여기서 조합 파트너가 또한 완전 개별 제약 투여 형태 또는 제약 제제로서 사용될 수 있고 이는 또한 서로 독립적으로 시판되며 단지 그의 조합 사용의 가능성의 지침이 패키지 용품, 예를 들어 전단 등, 또는 예를 들어 의사 및 의료진에게 제공되는 다른 정보 내에 있거나 그에 제공된다는 관점에서 "부분들의 키트"를 규정한다. 이어서, 독립적 제제 또는 부분들의 키트의 부분은, 예를 들어 동시에, 또는 시차를 두고, 즉 상이한 시점에, 및 부분들의 키트의 임의의 부분에 대해 동일하거나 상이한 시간 간격으로 투여될 수 있다. 매우 바람직하게는, 시간 간격은, 부분들의 조합 사용에 있어서 치료되는 질환에 대한 효과가 조합 파트너 (i) 및 (ii) 중 어느 하나만을 사용하여 얻는 효과보다 더 크도록, 따라서 연합 활성이 되도록 선택된다. 예를 들어, 치료되는 환자 하위-집단의 요구 또는 단일 환자의 요구 (환자의 연령, 성별, 체중 등으로 인해 다양한 요구가 있을 수 있음)에 대처하기 위해, 조합 제제로 투여될 조합 파트너 (i) 대 조합 파트너 (ii)의 총량의 비가 달라질 수 있다.
본 발명은 또한 FGFR 티로신 키나제 활성 및/또는 MET 티로신 키나제 활성 매개 질환, 특히 암의 치료 방법에서의 조합 사용을 위한, (i) MET 억제제 및 (ii) FGFR 억제제 또는 그의 제약상 허용되는 염에 관한 것이다.
추가 실시양태에서, 상기 단락에 따른 사용을 위한 MET 억제제 및 FGFR 억제제는 다음과 같이 선택된다: MET 티로신 키나제 억제제는 (E)-2-(1-(3-((7-플루오로퀴놀린-6-일)메틸)이미다조[1,2-b]피리다진-6-일)에틸리덴)히드라진카르복스아미드 및 2-플루오로-N-메틸-4-[(7-퀴놀린-6-일-메틸)-이미다조[1,2-b]트리아진-2-일]벤즈아미드 또는 각각의 그의 제약상 허용되는 염 또는 전구약물로 이루어진 군으로부터 선택되고,
FGR-R 티로신 키나제 억제제는 3-(2,6-디클로로-3,5-디메톡시-페닐)-1-{6-[4-(4-에틸피페라진-1-일)-페닐아미노]-피리미딘-4-일}-1-메틸-우레아 또는 그의 제약상 허용되는 염 또는 전구약물이다.
임의의 본 발명의 실시양태에서, 조합 파트너 (i) 및 (ii)는 바람직하게는 연합 (예방 또는 특히 치료) 활성이도록 제제화되거나 사용된다. 이는 특히, 하나 이상의 유익한 효과, 예를 들어 조합 파트너 (i) 및 (ii)의 효과의 상호 증진, 특히 상승작용, 예를 들어 상가 효과를 초과하는 효과, 추가의 유리한 효과 (예를 들어 추가의 치료 효과는 임의의 단일 화합물에 대해서는 발견되지 않음), 더 적은 부작용, 조합 파트너 (i) 및 (ii) 중 하나 또는 둘 다의 비-유효 투여량에서의 조합 치료 효과, 및 매우 바람직하게는 조합 파트너 (i) 및 (ii)의 명백한 상승작용이 있음을 의미한다.
예를 들어, 용어 "연합 (치료) 활성"은 화합물이 바람직하게는 치료되는 온혈 동물, 특히 인간에서 여전히 (바람직하게는 상승작용적) 상호작용 (연합 치료 효과)을 나타내도록 하는 시간 간격으로 개별적으로 또는 순차적으로 (시차를 두는 방식, 특히 순서-특이적 방식으로) 제공될 수 있다는 것을 의미할 수 있다. 특히, 연합 치료 효과는 화합물 둘 다가 적어도 특정 시간 간격 동안에 치료되는 인간의 혈액 내에 존재하는 것을 보여주는 혈액 수준에 따라 결정될 수 있으나, 이는 화합물이 연합 활성임에도 혈액 중에 동시에 존재하지 않는 경우를 배제하지는 않는다.
따라서, 본 발명은 동시, 개별 또는 순차적 사용을 위한 조합 제품, 예컨대 조합 제제 또는 제약 고정 조합물, 또는 이러한 제제 및 조합물의 조합물에 관한 것이다.
본 발명의 조합 요법에서, 본 발명에 따라 유용한 화합물은 동일하거나 상이한 제조업체에 의해 제조 및/또는 제제화될 수 있다. 더욱이, 조합 파트너는 함께 (i) 의사로부터 조합 제품으로 배포되기 전에 (예를 들어, 본 발명의 화합물 및 다른 치료제를 포함하는 키트의 경우); (ii) 투여 직전에 의사에 의해 (또는 의사 지시 하에서); (iii) 예를 들어 본 발명의 화합물 및 다른 치료제의 순차 투여 동안에 환자 자신 내에서, 조합 요법으로 사용될 수 있다.
특정 실시양태에서, 임의의 상기 방법은 하나 이상의 다른 (예를 들어 제3) 공동-작용제, 특히 화학요법제를 추가로 투여하는 것을 포함한다.
따라서, 추가 실시양태에서 본 발명은 치료 유효량의 (i) FGFR 티로신 키나제 억제제 및 (ii) MET 티로신 키나제 억제제 또는 각각의 그의 제약상 허용되는 염, 및 하나 이상의 제3 치료 활성제 (공동-작용제), 예를 들어 또 다른 화합물 (i) 및/또는 (ii) 또는 상이한 공동-작용제를 포함하는 조합 제품, 특히 제약 조성물에 관한 것이다. 추가의 공동-작용제는 바람직하게는 항암제; 및 항염증제로 이루어진 군으로부터 선택된다.
또한, 이 경우에, 본 발명에 따른 상응하는 제품을 형성하는 조합 파트너는 혼합되어 고정 제약 조성물을 형성할 수 있거나, 또는 이들은 개별적으로 또는 쌍을 이루어 (즉, 다른 약물 물질(들) 전에, 그와 동시에 또는 그 후에) 투여될 수 있다.
게다가 또는 추가로, 본 발명에 따른 조합 제품은 화학요법, 방사선요법, 면역요법, 외과적 개입 또는 이들의 조합과 조합되어 특히 암 요법을 위해 투여될 수 있다. 장기 요법이 상기 기재된 바와 같은 다른 치료 전략과 관련하여 아주반트 요법과 동등하게 가능하다. 다른 가능한 치료는 종양 퇴행 후에 환자의 상태를 유지하기 위한 요법, 또는 심지어 예를 들어 위험에 있는 환자에서의 화학예방 요법이다.
공동-작용제로서 가능한 항암제 (예를 들어 화학요법용)는 아로마타제 억제제; 항에스트로겐; 토포이소머라제 I 억제제; 토포이소머라제 II 억제제; 미세관 활성 화합물; 알킬화 화합물; 히스톤 데아세틸라제 억제제; 세포 분화 과정을 유도하는 화합물; 시클로옥시게나제 억제제; MMP 억제제; mTOR 억제제; 항신생물성 항대사물; 플라틴 화합물; 단백질 또는 지질 키나제 활성을 표적화하는/감소시키는 화합물; 항혈관신생 화합물; 단백질 또는 지질 포스파타제의 활성을 표적화하거나, 감소시키거나 또는 억제하는 화합물; 고나도렐린 효능제; 항안드로겐; 메티오닌 아미노펩티다제 억제제; 비스포스포네이트; 생물학적 반응 조절제; 항증식성 항체; 헤파라나제 억제제; Ras 종양원성 이소형의 억제제; 텔로머라제 억제제; 프로테아솜 억제제; 혈액 악성종양의 치료에 사용되는 화합물; Flt-3의 활성을 표적화하거나, 감소시키거나 또는 억제하는 화합물; Hsp90 억제제; 키네신 스핀들 단백질 억제제; MEK 억제제; 류코보린; EDG 결합제; 항백혈병 화합물; 리보뉴클레오티드 리덕타제 억제제; S-아데노실메티오닌 데카르복실라제 억제제; 혈관신생억제 스테로이드; 코르티코스테로이드; 다른 화학요법 화합물 (하기 정의된 바와 같음); 광증감 화합물을 포함하나, 이에 제한되지는 않는다.
또한, 대안적으로 또는 추가로, 본 발명에 따른 조합 제품은 수술, 이온화 방사선, 광역학 요법, 예를 들어 코르티코스테로이드, 호르몬을 갖는 이식물을 비롯한 다른 종양 치료 접근법과 조합되어 사용될 수 있거나, 또는 이들은 방사선증감제로서 사용될 수 있다.
본원에 사용된 용어 "상업용 패키지"는 특히, 상기 및 하기 정의된 바와 같은 성분 (a) MET 티로신 키나제 억제제 및 (b) FGFR 티로신 키나제 억제제, 및 임의로 추가의 공동-작용제가 독립적으로 또는 구별되는 양의 성분 (a) 및 (b)를 함유하는 상이한 고정 조합물의 사용에 의해, 즉 동시에 또는 상이한 시점에 투여될 수 있다는 관점에서 "부분들의 키트"를 규정한다. 더욱이, 이들 용어는 활성 성분으로서의 성분 (a) 및 (b)를 (특히, 조합하여) 증식성 질환의 진행의 지연 또는 치료에서의 그의 동시, 순차 (시차를 두고, 시간-특이적 순서로) 또는 개별적 사용을 위한 지침과 함께 포함하는 상업용 패키지를 포함한다. 이어서, 부분들의 키트의 부분들은, 예를 들어 동시에 또는 시차를 두고 (즉, 상이한 시점에), 부분들의 키트의 임의의 부분에 대해서 동일하거나 상이한 시간 간격으로 투여될 수 있다. 매우 바람직하게는, 시간 간격은, 부분들의 조합 사용에 있어서 치료되는 질환에 대한 효과가 조합 파트너 (a) 및 (b) 중의 어느 하나만을 사용하여 얻는 효과보다 더 크도록 선택된다 (표준 방법에 따라 결정될 수 있음). 조합 제제로 투여되는 조합 파트너 (a) 대 조합 파트너 (b)의 총량의 비는, 예를 들어 치료되는 환자 하위-집단의 요구 또는 단일 환자의 요구 (환자의 특정한 질환, 연령, 성별, 체중 등으로 인해 다양한 요구가 있을 수 있음)에 대처하기 위해 달라질 수 있다. 바람직하게는, 하나 이상의 유익한 효과, 예를 들어 조합 파트너 (a) 및 (b)의 효과의 상호 증진, 특히 상가 효과를 초과하는 효과 (따라서 이는 조합되지 않은 개별 약물만으로 치료한 경우에 허용되는 것보다 낮은 용량의 각각의 조합된 약물 각각에 의해 달성될 수 있음), 추가의 유리한 효과의 창출, 예를 들어 더 적은 부작용 또는 조합 파트너 (성분) (a) 및 (b) 중 하나 또는 둘 다의 비-유효 투여량에서의 조합 치료 효과, 및 매우 바람직하게는 조합 파트너 (a) 및 (b)의 강한 상승작용이 있다.
성분 (a) 및 (b)의 조합물 및 상업용 패키지를 사용하는 경우 둘 다에서 동시, 순차적 및 개별 사용의 임의의 조합이 또한 가능하며, 이는 성분 (a) 및 (b)를 하나의 시점에서 동시에 투여한 후에 이후의 시점에서는 더 낮은 숙주 독성을 갖는 하나의 성분만을 장기적으로, 예를 들어 3-4주 초과의 1일 투여로 투여하고, 보다 이후의 시점에는 다른 성분 또는 성분 둘 다의 조합물을 후속으로 투여하는 것 (최적 효과를 위한 후속적 약물 조합물 치료 과정) 등을 의미한다.
본 발명에 따른 조합 제품은 각각의 FGFR 및/또는 MET 티로신 키나제의 활성에 의해 매개되는, 특히 그에 의존적인 다양한 질환의 치료에 적절하다. 따라서, 이들은 FGFR 티로신 키나제 억제제 및 MET 티로신 키나제 억제제에 의해 치료될 수 있는 임의의 질환의 치료에 사용될 수 있다.
용어 "FGFR 티로신 키나제 활성 및/또는 MET 티로신 키나제 활성 매개 질환"은 특히, 하나의 또는 둘 다의 키나제의 활성이 두 키나제 중 하나를 포함하는 조절 경로의 비정상적 활성을 유발하는 질환, 특히 키나제 중 하나 또는 둘 다가 예를 들어 과다발현, 돌연변이, 또는 세포 내 다른 조절 경로의 상대적 활성 결여로 인해 과다활성인 질환, 예를 들어 선행 또는 후속 조절 요소의 증폭, 구성적 활성화 및/또는 과다활성화가 있는 질환을 지칭한다.
FGFR 억제제는 예를 들어 FGFR 활성의 억제에 반응하는 질환, 특히 신생물성 또는 종양 질환, 특히 고형 종양, 보다 특히 FGFR 키나제가 관여된 암, 예를 들어 유방암, 위암, 폐암, 전립선의 암, 방광암 및 자궁내막암 중 하나 이상의 치료에 유용하다. 추가의 암은 신장, 간, 부신, 위, 난소, 결장, 직장, 췌장, 질 또는 갑상선의 암, 육종, 교모세포종 및 두경부의 다수의 종양, 뿐만 아니라 백혈병 및 다발성 골수종을 포함한다. FGFR 억제제는 또한 섬유모세포 성장 인자 수용체에 의해 매개되는 장애, 특히 8p11 골수증식성 증후군 (EMS), 뇌하수체 종양, 망막모세포종, 활막 육종, 만성 폐쇄성 폐 질환 (COPD), 지루성 각화증, 비만, 당뇨병 및 관련 장애, 상염색체 우성 저인산혈증성 구루병 (ADHR), X-염색체 연관 저인산혈증성 구루병 (XLH), 종양-유발 (TIO) 골연화증 및 골의 섬유성 이형성증 (FD)을 갖는 온혈 동물의 치료, 뿐만 아니라 국소적 신연골재생의 촉진 방법, 뿐만 아니라 간세포성 암종, 폐암, 특히 폐 선암종, 구강 편평 세포 암종 또는 식도 편평 세포 암종 또는 2종 이상의 이러한 질환의 임의의 조합의 치료 방법에 유용하다.
MET 억제제는 예를 들어 MET 관련 질환, 특히 유전자 증폭, 활성화 돌연변이, 동족 RTK 리간드의 발현, 활성화를 나타내는 잔기에서의 RTK의 인산화를 비롯한, MET 및 FGFR의 동시 활성화에 대한 증거를 나타내는 암의 치료에 유용하고, 예를 들어 여기서 암은 뇌암, 위암, 생식기암, 비뇨기암, 전립선암, (비뇨기) 방광암 (표재성 및 근육 침습성), 유방암, 자궁경부암, 결장암, 결장직장암, 신경교종 (교모세포종, 역형성 성상세포종, 핍지교성상세포종, 핍지교종 포함), 식도암, 위암, 위장암, 간암, 간세포성 암종 (HCC), 예를 들어 소아 HCC, 두경부암 (두경부 편평-세포 암종, 비인두 암종 포함), 휘르틀레 세포 암종, 상피암, 피부암, 흑색종 (악성 흑색종 포함), 중피종, 림프종, 골수종 (다발성 골수종 포함), 백혈병, 폐암 (비소세포 폐암 (모든 조직학적 하위유형: 선암종, 편평 세포 암종, 기관지폐포 암종, 대세포 암종 및 선편평상피 혼합 유형 포함), 소세포 폐암 포함), 난소암, 췌장암, 전립선암, 신장암 (유두상 신세포 암종을 포함하나, 이에 제한되지는 않음), 장암, 신세포암 (유전성 및 산발성 유두상 신세포암, 제I형 및 제II형, 및 투명 세포 신세포암 포함); 육종, 특히 골육종, 투명 세포 육종 및 연부 조직 육종 (폐포 및 (예를 들어 배아성) 횡문근육종, 폐포 연부 육종 포함); 갑상선 암종 (유두상 및 다른 하위유형)으로 이루어진 군으로부터 선택된다.
MET 억제제는 또한 예를 들어 위암, 결장암, 간암, 생식기암, 비뇨기암, 흑색종 또는 전립선암인 암의 치료에 유용하다. 특정한 실시양태에서, 암은 간암 또는 식도암이다.
MET 억제제는 또한 예를 들어 전이 (예를 들어 간에서의)를 포함하는 결장암, 및 비소세포 폐 암종의 치료에 유용하다.
MET 억제제는 또한 예를 들어 유전성 유두상 신세포 암종 (문헌 [Schmidt, L. et al. Nat. Genet. 16, 68-73, 1997]) 및 c-MET가 돌연변이 (문헌 [Jeffers and Vande Woude. Oncogene 18, 5120-5125, 1999]; 및 여기에 인용된 참고문헌) 또는 염색체 재배열 (예를 들어 TPR-MET; 문헌 [Cooper et al. Nature 311, 29-33, 1984; Park. et al. Cell 45, 895-904, 1986])에 의해 과다발현되거나 또는 구성적으로 활성화되는 다른 증식성 질환의 치료에 사용될 수 있다.
본 발명의 조합 제품은 특히 FGFR 또는 Met 억제제 치료에 순응하는 상기 언급된 임의의 암, 특히 선암종 (특히 유방의 또는 보다 특히 폐의 선암종), 횡문근육종, 골육종, 방광 암종 및 신경교종으로부터 선택된 암의 치료에 적절하다.
용어 본 발명의 화합물의 "치료 유효량"은 대상체의 생물학적 또는 의학적 반응, 예를 들어 효소 또는 단백질 활성의 감소 또는 억제, 또는 증상의 개선, 상태의 완화, 질환 진행의 둔화 또는 지연, 또는 질환의 예방 등을 도출할 본 발명의 화합물의 양을 지칭한다. 한 비제한적 실시양태에서, 용어 "치료 유효량"은 대상체에게 투여되는 경우에, (1) (i) cMet에 의해 매개되고/거나 FGFR 활성에 의해 매개되거나, 또는 (ii) cMet 및/또는 FGFR의 활성 (정상 또는 비정상)을 특징으로 하는 상태 또는 장애 또는 질환을 적어도 부분적으로 완화, 억제, 예방 및/또는 개선시키는데 효과적이거나; 또는 (2) cMet 및/또는 FGFR의 활성을 감소 또는 억제하는데 효과적이거나; 또는 (3) cMet 및/또는 FGFR의 발현을 감소 또는 억제하는데 효과적인 본 발명의 화합물의 양을 지칭한다. 또 다른 비제한적 실시양태에서, 용어 "치료 유효량"은, 세포, 또는 조직, 또는 비-세포 생물학적 물질, 또는 배지에 투여되는 경우에 cMet 및/또는 FGFR의 활성을 적어도 부분적으로 감소 또는 억제하는데 효과적이거나; 또는 Met 및/또는 FGFR의 발현을 적어도 부분적으로 감소 또는 억제하는데 효과적인 본 발명의 화합물의 양을 지칭한다.
본원에 사용된 용어 "대상체"는 동물을 지칭한다. 전형적으로, 동물은 포유동물이다. 대상체는 또한, 예를 들어 영장류 (예를 들어, 인간), 소, 양, 염소, 말, 개, 고양이, 토끼, 래트, 마우스, 어류, 조류 등을 지칭한다. 특정 실시양태에서, 대상체는 영장류이다. 또 다른 실시양태에서, 대상체는 인간이다.
"및/또는"은 목록의 성분 또는 특징 중 각각의 하나 또는 둘 다 또는 모두가, 특히 그 중 둘 이상이 대안적 또는 누가적 방식으로 가능한 변수임을 의미한다.
본원에 사용된 용어 "억제하다", "억제" 또는 "억제하는"은 주어진 상태, 증상 또는 장애 또는 질환의 감소 또는 억제, 또는 생물학적 활성 또는 과정의 기저 활성에서의 유의한 감소를 지칭한다.
본원에 사용된 용어 임의의 질환 또는 장애를 "치료하다", "치료하는" 또는 그의 "치료"는, 한 실시양태에서, 질환 또는 장애의 개선 (즉, 질환 또는 그의 하나 이상의 임상적 증상의 발달의 둔화 또는 정지 또는 감소)을 지칭한다. 또 다른 실시양태에서, "치료하다", "치료하는" 또는 "치료"는 하나 이상의 물리적 파라미터 (환자에 의해 인식가능하지 않을 수 있는 것들 포함)의 완화 또는 개선을 지칭한다. 또 다른 실시양태에서, "치료하다", "치료하는" 또는 "치료"는 질환 또는 장애를 물리적으로 (예를 들어, 인식가능한 증상의 안정화), 생리학적으로 (예를 들어, 물리적 파라미터의 안정화) 또는 둘 다의 방식으로 조절하는 것을 지칭한다. 또 다른 실시양태에서, "치료하다", "치료하는" 또는 "치료"는 질환 또는 장애의 발병 또는 발달 또는 진행의 예방 또는 지연을 지칭한다.
용어 "치료"는 예를 들어 질환을 치유하거나, 또는 질환 퇴행 또는 질환의 진행의 지연에 대한 효과를 갖도록 하는 목표를 갖는 치료를 필요로 하는 온혈 동물, 바람직하게는 인간에 대한 조합 파트너의 예방적 또는 특히 치료적 투여를 포함한다.
본원에 사용된 바와 같이, 대상체가 치료로부터 생물학적으로, 의학적으로 또는 삶의 질에 있어 유익할 경우에, 상기 대상체는 이러한 치료를 "필요로 한다".
본원에 사용된 바와 같이, 본 발명의 문맥에서 (특히, 특허청구범위의 문맥에서) 사용된 단수 용어 및 유사한 용어들은, 본원에 달리 나타내거나 또는 문맥상 명백히 모순되지 않는 한, 단수형 및 복수형 둘 다를 포함하는 것으로 해석되어야 한다.
본 발명에 따른 조합물은 그 자체로 공지된 방식으로 제조될 수 있으며, 이는 치료 유효량의 하나 이상의 약리학적 활성 조합 파트너를 단독으로, 또는 특히 경장 또는 비경구 적용에 적합한 하나 이상의 제약상 허용되는 담체와 조합하여 포함하는, 인간을 비롯한 포유동물 (온혈 동물)로의 경장, 예컨대 경구 또는 직장, 및 비경구 투여에 적합한 것들이다. 본 발명의 한 실시양태에서, 활성 성분 중 하나 이상은 경구로 투여된다.
본원에 사용된 용어 "담체" 또는 "제약상 허용되는 담체"는 당업자에게 공지된 임의의 및 모든 용매, 분산 매질, 코팅, 계면활성제, 항산화제, 보존제 (예를 들어, 항박테리아제, 항진균제), 등장화제, 흡수 지연제, 염, 보존제, 약물, 약물 안정화제, 결합제, 부형제, 붕해제, 윤활제, 감미제, 향미제, 염료 등, 및 그의 조합을 포함한다 (예를 들어, 문헌 [Remington's Pharmaceutical Sciences, 18th Ed. Mack Printing Company, 1990, pp. 1289- 1329] 참조). 임의의 통상의 담체가 활성 성분과 상용적이지 않은 경우를 제외하고는, 치료 또는 제약 조성물에서의 사용이 고려된다.
본 발명에 따른 제약 조합 제품은 (고정 조합물로서, 또는 키트로서, 예를 들어 고정 조합물 및 하나 또는 둘 다의 조합 파트너에 대한 개별 제제의 조합물로서, 또는 조합 파트너의 개별 제제의 키트로서) 본 발명의 조합 파트너 (하나 이상의 MET 티로신 키나제 억제제, 하나 이상의 FGFR 티로신 키나제 억제제, 및 임의로 하나 이상의 추가의 공동-작용제) 및 하나 이상의 제약상 허용되는 담체 물질 (담체, 부형제)을 포함한다. 이를 구성하는 조합 제품 또는 조합 파트너는 특정한 투여 경로, 예컨대 경구 투여, 비경구 투여 및 직장 투여 등을 위해 제제화될 수 있다. 또한, 본 발명의 조합 제품은 고체 형태 (비제한적으로 캡슐, 정제, 환제, 과립, 분말 또는 좌제 포함), 또는 액체 형태 (비제한적으로 용액, 현탁액 또는 에멀젼 포함)로 제조될 수 있다. 조합 제품 및/또는 그의 조합 파트너는 통상의 제약 작업, 예컨대 멸균에 적용될 수 있고/거나, 통상의 불활성 희석제, 윤활제 또는 완충제, 뿐만 아니라 아주반트, 예컨대 보존제, 안정화제, 습윤제, 유화제 및 완충제 등을 함유할 수 있다.
모든 제제에서, 본 발명에 따른 조합 제품의 부분을 형성하는 활성 성분(들)은 각각 상응하는 제제 (포장 및 전단이 없는 그대로의 제제에 관함)의 0.5 내지 95 중량%, 예를 들어 각각 1 내지 90, 5 내지 95, 10 내지 98 또는 10 내지 60 또는 40 내지 80 중량%의 상대적 양으로 존재할 수 있다.
본 발명의 제약 조합 제품은 예를 들어 약 50-70 kg의 대상체에 대해 약 1-1000 mg의 활성 성분(들)의 단위 투여량으로, 또는 각각 약 1-500 mg 또는 약 1-250 mg 또는 약 1-150 mg 또는 약 0.5-100 mg, 또는 약 1-50 mg, 또는 50 내지 900, 60 내지 850, 75 내지 800 또는 100 내지 600 mg의 활성 성분 중 임의의 하나 또는 특히 활성 성분의 합의 단위 투여량으로 있을 수 있다. 화합물, 제약 조성물 또는 그의 조합물의 치료 유효 투여량은 대상체의 종, 체중, 연령 및 개별 상태, 치료할 장애 또는 질환, 또는 그의 중증도에 따라 달라진다. 통상의 기술을 가진 의사, 임상의 또는 수의사는 장애 또는 질환의 진행을 예방, 치료 또는 억제하는데 필요한 각 활성 성분의 유효량을 용이하게 결정할 수 있다.
<도면의 설명>
도 1: MET-억제제 (E)-2-(1-(3-((7-플루오로퀴놀린-6-일)메틸)이미다조[1,2-b]피리다진-6-일)에틸리덴)히드라진카르복스아미드 (화합물 A)의 존재 하에서의 cMET 증폭 및 MET-의존성 성장을 갖는 MKN-45 세포의 일차 세크레톰 구출.
도 2: FGFR 억제제 3-(2,6-디클로로-3,5-디메톡시-페닐)-1-{6-[4-(4-에틸피페라진-1-일)-페닐아미노]-피리미딘-4-일}-1-메틸-우레아 모노포스페이트 (BGJ398)의 존재 하에서의 FGFR3 유전자 증폭 및 FGFR3-의존성 성장을 갖는 RT-112 세포의 일차 세크레톰 구출.
도 3: MET 억제제 화합물 B가 활성이며, BGJ398 (FGFR 억제제)과의 조합물도 그러하지만, BGJ398 및 (이중 Erb2 및) EGFR 억제제 라파티닙은 충분하지 않다는 것을 보여주는, MET-의존성 MKN-45 세포에서 선택적 억제제를 사용한 구출의 역전. 화합물 B = 2-플루오로-N-메틸-4-[(7-퀴놀린-6-일-메틸)-이미다조[1,2-b]트리아진-2-일]벤즈아미드 (MET 억제제), FGF7 = 섬유모세포 성장 인자 7 (FGFR의 활성화제), 라파티닙 = (ErbB2 및) EGFR 억제제, NRG1 = 뉴레귤린 1 (ERBB2 티로신 인산화를 증가시킴).
도 4: MET 억제제 화합물 A가 활성이며, BGJ398 (FGFR 억제제)과의 조합물도 그러하지만, BGJ398 및 (이중 Erb2 및) EGFR 억제제 라파티닙은 충분하지 않다는 것을 보여주는, MET-의존성 MKN-45 세포에서 선택적 억제제를 사용한 구출의 역전. FGF7 = 섬유모세포 성장 인자 7 (FGFR의 활성화제), 라파티닙 = (ErbB2 및) EGFR 억제제, NRG1 = 뉴레귤린 1 (EGFR-활성화제).
도 5: EGFR-억제제 BGJ398이 활성이며, 화합물 B와의 조합물도 그러하지만, 화합물 B 단독 뿐만 아니라 (이중 ErbB2 및) EGFR 억제제 라파티닙은 충분하지 않다는 것을 보여주는, EGFR-의존성 RT-112 세포에서 선택적 억제제를 사용한 구출의 역전. HGF 및 NRG1은 도 3에 대해 정의된 바와 같다.
도 6: EGFR-억제제 BGJ398이 활성이며, 화합물 A와의 조합물도 그러하지만, 화합물 A 단독 뿐만 아니라 (이중 ErbB2 및) EGFR 억제제 라파티닙은 충분하지 않다는 것을 보여주는, EGFR-의존성 RT-112 세포에서 선택적 억제제를 사용한 구출의 역전. HGF 및 NRG1은 도 3에 대해 정의된 바와 같다.
도 7: 다양한 조합물에 대한 상승작용을 보여준다 (굵은 테두리로 표시된 영역이 상승작용을 나타냄):
a) KYM-1 단층 배양물에서의 화합물 B 및 BGJ398;
b) KYM-1 비부착 배양물에서의 화합물 B 및 BGJ298;
c) KYM-1 연질 한천 배양물에서의 화합물 B 및 BGJ398;
d) MG-63 단층 배양물에서의 화합물 B 및 BGJ298;
e) M-63 연질 한천 배양물에서의 화합물 B 및 BGJ298;
f) Hs 683 단층 배양물에서의 화합물 B 및 BGJ398.
도 8: 로에베(Loewe) 모델을 기초로 하는, 약물 자체 조합물에 상대적인 퍼센트로 요약된 유효 수준의 관점에서 상승작용을 보여준다. 마이크로몰 단위의 화합물 농도는 도 7에서와 같이 배치된다.
도 9: 원발성 폐암 이종이식편 모델에서의 FGFR 및 MET 억제제 조합물의 항종양 활성. (A) 지정된 요법으로 치료된 종양-보유 마우스의 코호트에서의 종양 성장 곡선. 화살표는 1일 2회에서 1회로의 화합물 B의 투여 빈도의 감소를 표시한다. 1 = 비히클 대조군 (원형), 2 = 10 mg/kg 화합물 B bid/qd, 3 = 40 mg/kg BGK398 qd, 4 = 조합물. (B) 최종 화합물 B 용량 2시간 또는 12시간 후의 종양에서의 ELISA에 의한 MET 인산화의 분석. 1 = 비히클 대조군 (원형), 0 = 10 mg/kg 화합물 B bid, 3 = 40 mg/kg BGJ398 qd, 4 = 조합물.
도면의 설명은 또한 본 발명의 개시내용의 일부이다.
실시예
하기 실시예는 본 발명을 예시하고 구체적 실시양태를 제공하는데 도움을 주지만, 이는 본 발명의 범주를 제한하지 않는다:
BCA 단백질 검정 = 뷰렛 반응 (발색제로서 비신코닌산을 함유하는 알칼리성 용액 중에서 단백질에 의해 구리(II)가 구리(I) 양이온으로 환원되며, 이는 환원된 구리를 킬레이트화하고, 따라서 562 nm에서 강한 흡광도를 갖는 자주색 복합체를 생성함) 기반의 검정.
ECL = 증진된 화학발광 (루미놀의 양고추냉이 퍼옥시다제 및 과산화수소 촉매화된 산화 동안의 광의 방출)
세포 배양물 및 시약
MET-의존성 선암종 세포주 MKN-45, KYM-1 횡문근육종 세포주 및 MG-63 골육종 세포주를 헬스 사이언스 리서치 리소시스 뱅크(Health Science Research Resources Bank) (재팬 헬스 사이언시스 파운데이션(Japan Health Sciences Foundation))로부터 입수하였다. FGFR-의존성 방광 암종 RT-112를 라이프니츠-인스티튜트 도이체 잠룽 폰 미크로오르가니스멘 운트 첼쿨투렌(Leibniz-Institut Deutsche Sammlung von Mikroorganismen und Zellkulturen)으로부터 입수하였다. Hs-683 신경교종 세포주 및 HEK 293T/17 세포, SV40 대형 T 항원을 발현하는 인간 신장 세포주를 아메리칸 타입 컬쳐 콜렉션(American Type Culture Collection)으로부터 입수하였다. 화합물 A, 화합물 B 및 BGJ398을 노파르티스(Novartis)에서 내부적으로 합성하였다.
세크레톰 라이브러리의 생성
분비형 및 단일 통과 막횡단 단백질을 확인하기 위해 이전에 기재된 방법 (문헌 [Gonzalez, R., et al., PNAS, 2010; Lin, H., et al., Science, 2008])과 유사한 생물정보학 파이프라인을 구축하였다. 간략하게, 모든 인간 RefSeq 단백질 서열 (27,959개의 단백질을 포함하는 2004년 6월 버전)을 분비형 또는 막횡단으로서 이전 주해에 대해 데이터베이스 SWISSPROT 및 INTERPRO를 통해 필터링하였다 (문헌 [Hunter, S., et al., Nucleic Acids Res, 2009; O'Donovan, C., et al., Brief Bioinform, 2002]). 이어서, 단백질 서열을 신호 서열 및 막횡단 나선을 확인하는 알고리즘으로 분석하였다: TMHMM, SIGNALP 및 PHOBIUS (문헌 [Bendtsen, J. D., et al., J Mol Biol, 2004; Kall, L., et al., J Mol Biol,2004; Krogh, A., et al., J Mol Biol, 2001]). 2,803개의 고유 유전자 ID를 선택하고, 3,432개의 클론에 맵핑하였으며; 이들 모두는 인비트로젠 울티메이트(Invitrogen Ultimate) ORF 콜렉션으로부터 구입하였고, DNA는 표준 기술을 사용하여 단리하였다. pcDNA-DEST40은 모든 클론에 대한 플라스미드 벡터였고, 모든 클론 삽입물을 전체 서열분석에 의해 확인하였다.
실시예 A) 세크레토믹스 스크리닝 (도 1 및 도 2)
상청액 생성: 상기 언급된 클론으로부터의 DNA를 7.5ng/ul에서 투명한, 조직-배양물 처리된 384-웰 플레이트에 4ul/웰로 스탬핑하였다. 스탬프를 사용시까지 -20℃에서 냉동 보관하였다. 실험 당일에 스탬핑된 cDNA 플레이트를 해동하고, 실온으로 평형화시켰다. HEK293T/17 세포를 다음과 같이 역형질감염시켰다: 퓨젠(Fugene) HD를 옵티멤(Optimem)으로 희석하여 4:1 (nl 퓨젠 HD : ng DNA)의 최종 비를 달성하였다. 희석된 형질감염 시약을 스탬핑된 DNA 플레이트에 10ul/웰로 첨가하고, 실온에서 30분간 인큐베이션하였다. 이어서, HEK293T/17 세포를 7,000개 세포/50ul/웰로 첨가하고, 표준 조직 배양 조건 하에 4일간 인큐베이션하여 배지 상청액 중에 분비형 단백질이 축적되도록 하였다.
MKN-45 세크레톰 스크린: MKN-45 세포를 3000개 세포/20ul DMEM + 10% FBS/웰로 백색, 조직-배양물 처리된 384-웰 플레이트 (그라이너(Greiner))에 플레이팅하여 밤새 부착되도록 하였다. 이어서, 라이브러리-형질감염된 HEK293T/17 세포로부터의 상청액을 바이오멕(Biomek) FX 액체 핸들러 (베크만 쿨터(Beckman Coulter))를 사용하여, HEK293T/17 단층의 교란이 최소화되도록 감소시킨 피펫팅 속도로, 30ul/웰로 MKN-45 세포에 전달하였다. 양성 대조군으로서, 정제된 단백질 rhEGF 및 rhNRG1-β1 (알앤디 시스템즈(R&D Systems))을 150ng/ml의 최종 농도에 대해 각각의 플레이트 상의 고립된 웰에 첨가하고; 모의-형질감염된 HEK293T/17 웰로부터의 상청액을 중성 대조군으로서 전달하였다. 상청액 및 정제된 단백질 대조군의 첨가 후, DMEM 중에 희석된 화합물 A를 100nM의 최종 검정 농도에 대해 10ul/웰로 첨가하였다. 96시간 인큐베이션 후, 성장을 셀타이터-글로(CellTiter-Glo) 발광 세포 생존율 검정 시스템 (프로메가(Promega))을 사용하여 측정하였다. 간략하게, 30ul 셀타이터-글로 시약을 모든 웰에 첨가하고, 이어서 실온에서 15분 동안 인큐베이션한 후, 뷰럭스(Viewlux) 플레이트 판독기 (퍼킨 엘머(Perkin Elmer)) 상에서 발광을 판독하였다 (도 1).
RT-112 세크레톰 스크린: 기본 포맷은 MKN-45 세크레톰 스크린과 동일하였고 약간의 변형이 있었다. RT-112 세포를 1000개 세포/20ul/웰로 백색, 조직-배양물 처리된 384-웰 플레이트 내의 EMEM+10%에 플레이팅하고 밤새 부착되도록 하였다. 라이브러리-형질감염된 HEK293T/17 세포로부터의 상청액을 MKN-45 세크레톰 스크린에 대해 상기 기재된 바와 같이 전달하였다. 정제된 단백질 rhNRG1-β1 및 rhTGFα를 150ng/ml의 최종 농도에서 양성 대조군으로서 첨가하였다. 상청액 및 정제된 단백질 대조군의 첨가 후, DMEM 중에 희석된 BGJ398을 100nM의 최종 검정 농도에 대해 10ul/웰로 첨가하였다. 세포 생존율을 상기 기재된 바와 같이 셀타이터-글로를 사용하여 72시간 후에 측정하였다 (도 2).
두 스크린 모두에서, 검정 데이터를 하기 식을 사용하여 벡터 단독 대조군에 대해 정규화하였다:
Figure pct00021
상기 식에서, X는 원시 값이고, 벡터중앙값은 주어진 플레이트에 대한 벡터 대조군 웰의 중앙값이다.
정제된 단백질 확인: 정제된 단백질 확인을 위한 검정 포맷은, HEK293T/17 상청액 대신에 정제된 단백질을 100ng/ml의 최종 농도에 대해 30ul/웰로 첨가한 것을 제외하고는 일차 스크리닝에 대해 사용된 포맷과 동일하였다.
실시예 B) 선택적 억제제를 사용한 구출의 역전 (도 3, 도 4, 도 5, 도 6)
MKN-45 이중 억제: MKN-45 세포를 384-웰 플레이트에 3000개 세포/20ul/웰로 시딩하고, 밤새 인큐베이션하였다. rhFGF7 및 rhNRG-1의 용액을 DMEM+10%FBS 중에서 제조하고, 이어서 30ul/웰로 첨가하여 250ng/ml의 최종 농도 (처리당 하나의 정제된 단백질)를 달성하였다. 하기 단일 및 이중 억제 처리물을 DMEM 중에서 제조하고, 10μL/웰로 첨가하였다: 화합물 A, 화합물 B, BGJ398, 라파티닙, 화합물 A 및 BGJ398, 화합물 B 및 BGJ398, 화합물 A 및 라파티닙, 화합물 B 및 라파티닙. 단일 또는 조합 여부에 관계없이 각각의 화합물에 대한 최종 농도는 다음과 같았다: 화합물 A 및 B에 대해 100nM, BGJ398에 대해 500nM 및 라파티닙에 대해 1.5uM. 96시간 후, 세포 생존율을 상기 기재된 바와 같이 셀타이터-글로에 의해 측정하였다 (도 3, 도 4).
RT-112 이중 억제: RT-112 이중 억제 실험을 위한 포맷은 MKN-45에 대해 기재된 것과 유사하였고, 하기 변형이 있었다. RT-112 세포를 1000개 세포/ 20ul/웰로 플레이팅하였다. rhHGF 및 rhNRG-1의 용액을 첨가하여 250ng/ml의 최종 농도를 달성하였다. 단일 및 이중 억제 상태를 다음과 같이 제조하였다: BGJ398, 화합물 A, 화합물 B, 라파티닙, BGJ398 및 화합물 A, BGJ398 및 화합물 B, BGJ398 및 라파티닙. 단일 또는 조합 여부에 관계없이 각각의 화합물에 대한 최종 농도는 다음과 같았다: BGJ398에 대해 100nM, 화합물 A 및 화합물 B에 대해 500nM, 및 라파티닙에 대해 1.5uM. 96시간 후, 세포 생존율을 상기 기재된 바와 같이 셀타이터-글로에 의해 측정하였다 (도 5, 도 6).
웨스턴 블롯 (도면은 제시하지 않음)
MKN-45 및 RT-112 세포를 정제된 단백질 (rhFGF7, rhNRG1-β1 또는 rhHGF) 및/또는 억제제 (화합물 B, 화합물 A, BGJ398)의 존재 또는 부재 하에 2시간 및 18시간 동안 6-웰 플레이트에서 처리하였다. 빙냉 PBS로 세척한 후, 세포를 포스파타제 (써모(Thermo)) 및 프로테이나제 (로슈) 억제제 칵테일을 함유하는 RIPA 완충제 (써모)로 용해시켰다. 총 단백질을 비신코닌산 단백질 검정 (피어스(Pierce))에 의해 정량화하였다. 20 μg의 분취액을 NuPAGE SDS-PAGE 4-12% 비스-트리스 겔 상에서의 전기영동에 의해 분해한 후, 니트로셀룰로스 막으로 전달하였다. 막을 실온에서 1시간 동안 차단한 후, 하기 일차 항체 (공급원 토끼, 1:1000 최종 희석)와 함께 4℃에서 밤새 인큐베이션하였다: 항-포스포-Akt (Ser473), 항-포스포-MET (Tyr1234/1235), 항-포스포-MAPK/ERK(1/2) (Thr202/Tyr204), 항-AKT, 항-MAPK/Erk(1/2), 및 항-α/β-튜불린. 항-MET를 1:800 최종 희석으로 프로빙하였다. 내부 항체를 포스포-FRS2(Y346) (1:1500 희석)에 대해 사용하였다. 이어서, 막을 PBS + 0.1% 트윈 중에서 3회 세척 한 후, 이차 항체, IRDye 680LT 염소 항-토끼 IgG (희석 1:15000)를 첨가하였다. 실온에서 1시간 후, 막을 세척하고, 오디세이(Odyssey) 적외선 영상화기를 사용하여 밴드를 가시화하였다.
결과 및 논의: 본 발명자들에게 활성 단백질이 cDNA 형질감염에 의해 충분한 양으로 생산되었다는 증거가 없었기 때문에, 본 발명자들은 스크린 동안 관찰된 구출 효과가 사실상 예상된 분비형 단백질에 의해 매개되었다는 것을 수직적으로 확인하기 위한 모색을 하였다. 이를 위해, 본 발명자들은 동일한 세포 증식 검정에서 상업적 공급원으로부터의 재조합 단백질을 시험하였다. 본 발명자들은 처음에 MET 억제제 화합물 B의 존재 하에 MKN-45를 구출하기 위해, 재조합 FGF 뿐만 아니라 EGF 및 NRG1-β의 팔레트의 잠재력을 시험하였다 (데이터는 제시하지 않음). 구출을 여러 FGF 및 EGF 패밀리 구성원에 의해 확인할 수 있었다. 추가의 확인 단계로서, 본 발명자들은 리간드 효과가 그의 동족 RTK의 활성화에 의해 매개되었다는 것을 입증하기 위한 모색을 하였다. 이를 위해, 본 발명자들은 구출을 역전시키기 위해 특이적 억제제를 - FGFR1/2/3에 대해 BGJ398 및 HER1/2에 대해 라파티닙 - 사용하였다 (도 3, 4). 이들 실험은 화합물 A (도 4) 및 동등한 선택적 MET 억제제 화합물 B (도 3) 둘 다를 사용하여 수행하였다. 예상대로, BGJ398은 FGF7에 의해 매개된 구출을 선택적으로 역전시킬 수 있었고, 반면에 라파티닙은 NRG1에 의한 구출을 역전시켰다. 공통 하류 신호가 관찰된 구출 효과에 내재되어 있는지의 여부를 조사하기 위해, 본 발명자들은 웨스턴 블롯팅에 의해 단백질 인산화의 수준에 대한 MET 억제, 리간드-매개 구출 및 억제제-매개 역전의 결과를 분석하였다. 첨가된 리간드의 부재 하에, BGJ398 또는 라파티닙이 아닌, 단지 화합물 A 및 화합물 B만이 MET-증폭된 세포주 MKN-45에서 여러 단백질 (MET, ERK1/2, AKT, FRS2)의 인산화에 대해 깊은 영향을 가졌다. FGF7의 첨가는 FGFR의 특이적 하류 마커인 FRS2 인산화를 재활성화시켰고, 동시에 AKT 인산화에 대한 효과 없이 또는 그에 대한 최소 효과를 가지면서 ERK1/2 인산화를 부분적으로 재활성화시켰다. 이러한 구출 효과는 라파티닙이 아닌 BGJ398에 의해 역전될 수 있었다. NRG1은 라파티닙에 특이적으로 감수성인 보다 두드러진 포스포-AKT 재활성화를 가지면서 유사한 효과를 일으켰다. 요약하면, 단백질 인산화에 대해 관찰된 효과는 세포 증식에 대한 효과와 일치한다. ERK 인산화의 재활성화는 FGF7 및 NRG1 둘 다에 의해 보다 일관적으로 재활성화되고, 따라서 이러한 세포주의 지속적 세포 성장에서 지배적인 역할을 하는 것으로 보인다. 이어서, 본 발명자들은 본래 FGFR-의존성인 암 세포주 RT-112로 전환하여, 유사한 확인 실험을 수행하였다. 재조합 HER 리간드 뿐만 아니라 HGF는 세크레톰 스크리닝에서 관찰된 구출 효과를 재현하는 것으로 밝혀졌다. 또한, 동족 RTK의 선택적 억제는 HGF 또는 NRG1에 의해 매개된 구출을 역전시킬 수 있었다 (도 5, 6). 최종적으로, 선택된 단백질의 인산화에 대한 효과를 웨스턴 블롯에 의해 평가하였다. RT-112 세포에서, 본 발명자들은 기초 AKT 인산화를 관찰하지 않았다. 리간드의 부재 하에, 화합물 A 및 B는 MET 인산화를 특이적으로 억제한 반면, BGJ398은 FRS2 및 ERK 인산화를 둘 다 감소시켰다. HGF의 첨가는 BGJ398의 존재 하에 ERK 인산화를 복원한 반면, 화합물 A 또는 B의 동시 첨가는 이러한 구출 효과를 방지하였다. 마찬가지로, NGR1은 ERK 인산화 및 또한 AKT의 자극된 인산화의 라파티닙-감수성 복원을 유발하였다. 다시, ERK의 인산화는 세포 성장, 이어서 AKT 인산화와 보다 상호관련되는 것으로 보였다.
이들 결과는 함께 HER, MET 및 FGFR 억제제의 쌍별 조합이 이들 RTK 중 2가지가 유전자 변경에 의해 또는 동족 리간드에 의해 동시에 활성화되는 경우에 치료 효능을 위해 필요할 수 있음을 시사한다. 기재된 실험에서 지금까지의 리간드는 외인성 공급원으로부터 첨가된 반면, 암 환자에서 리간드는 종양 자체로부터 (자가분비 자극) 또는 다른 공급원, 예를 들어 종양-연관 기질 (주변분비 자극)로부터 유래될 수 있다.
실시예 C) 조합 검정 (도 7 참조)
화합물 B (하기 표의 "B") 및 BGJ398 (하기 표의 "C")의 조합 항증식성 효과를 하기 도시된 농도 매트릭스를 사용하여 96-웰-플레이트 상에서 KYM-1, MG-63 및 Hs-683 세포에서 측정하였다:
Figure pct00022
사용된 농도:
Figure pct00023
하이픈으로 표지된 웰을 일치하는 부피의 성장 배지로 채웠다. 일부 실험에서, 화합물 A의 최대 농도는 10배 더 낮았으나, 희석 단계는 상기와 같이 유지하였다.
세포를 세 가지 상이한 조건 하에 성장시켰다 (참조 도 7): "단층" 표지된 실험을 표준 조직 배양 플레이트 상에서 수행하여, 세포가 부착되도록 하고 최종적으로 단층이 형성되도록 하였다. 세포를 웰당 5000의 밀도로 상기 기재된 바와 같은 표준 성장 배지에 실험당 3개의 플레이트 상에 (3중) 시딩하였다. 화합물 첨가의 시점에 개별 플레이트 상의 6 내지 8개의 웰에 시딩하여 생존 세포의 양을 정량화하였다. 24시간 후, 각각의 화합물에 대한 개별 희석 시리즈를 성장 배지 중에서 10 mM DMSO 원액으로부터 출발하여 10배의 최종 농도로 제조하였다. 나타낸 바와 같이 DMSO-단독 대조군을 포함시켰다. 각각의 화합물 희석물에 대한 10 μL의 분취액을 상기 나타낸 매트릭스를 따라 첨가하여 100 μL의 최종 부피를 생성하였다. 동시에, 상기 언급된 개별 플레이트 상의 생존 세포를 레자주린 나트륨 염 염료 환원 판독을 사용하여 정량화하였다. 구체적으로, 0.13 mg/ml 원액 10 mL를 웰당 첨가하고, 플레이트를 세포 배양물 인큐베이터에서 2시간 동안 인큐베이션한 후, 흡수 (여기 560 nm, 방출 590 nm)를 측정하였다. 화합물-처리된 세포를 72시간 동안 인큐베이션 한 후, 상기와 같이 레자주린 검정을 수행하였다. (a) 화합물 첨가 시점에서의 시딩된 세포의 판독치를 차감하고, (b) DMSO-단독 처리된 세포를 0% 억제로, 시딩된 세포의 판독치를 100% 억제로 설정함으로써 억제 퍼센트를 계산하였다. 따라서, 100% 초과의 값은 화합물과의 인큐베이션 과정에 걸친 세포 사멸을 시사한다. 문헌 [G. R. Zimmermann et al., Drug Discovery Today, Vol. 12, No. ½, 2007, pages 34 to 42, 및 특히 J. Lehar et al., Nature Biotechnology Vol. 27, No. 7, 2009, pages 659 to 666]에 기재된 방법을 사용하여, 요컨대 단일-작용제 반응 곡선으로부터 각각의 용량 매트릭스 점에서의 로에베(Loewe) 상가 반응 아이로에베(ILoewe) (X, Y)를 반복적으로 계산하고, 이어서 아이로에베 및 실험 데이터 사이의 차를 합하여 상승작용의 정량화를 수행하였다. 합이 단순 첨가의 아이로에베 데이터로부터의 것보다 큰 경우, 상승작용으로 제시하였다 (X, Y는 각각 X 및 Y 축 상의 약물 X 및 약물 Y의 약물 농도임).
"비-부착"으로 표지된 KYM-1 세포에서의 실험을, 코스타(Costar)® 울트라 저 부착 96-웰-플레이트를 사용한 것을 제외하고는 동일하게 수행하였다. 이들 플레이트 상에서, 세포는 플라스틱에 부착할 수 없었고, 2차원 응집체로 성장하였다. 다른 두 세포주는 이들 조건 하에 성장하지 않았다.
"연질 한천" 표지된 실험을 위해, 세포를 반-고체 배지에 포매시켜 3차원 응집체가 형성되도록 하였다. 구체적으로, 아가로스 유형 VII을 2.7%의 농도로 PBS 중에 용해시켰다. 이어서, 용액을 플레이팅 직전까지 50℃에서 유지하고, 상기 기재된 바와 같이 2배 부피의 세포주-특이적 성장 배지로 희석하였다. 이어서, 희석된 아가로스를 각각의 세포를 함유하는 2배 부피와 혼합하고, 3000개의 세포를 함유하는 150 μL 분취액을 코스타 울트라 저 부착 96-웰-플레이트 상에 신속하게 분포시켰다. 따라서, 최종 아가로스 농도는 0.3%였다. 다시, 화합물 첨가의 시점에 개별 플레이트 상의 웰에 시딩하여 세포의 양을 정량화하였다. 24시간 후, 성장 배지 중 희석된 화합물 총 80 μL의 오버레이가 상기 식에 나타낸 최종 농도로 생성되도록 화합물 희석 시리즈를 제조하여, 총 230 μL 부피를 생성하였다. 20 μL 레자주린 용액을 첨가하고 5시간 동안 인큐베이션하여 시딩된 세포를 정량화하였다. 화합물-처리된 세포를 7 내지 10일 동안 인큐베이션하고, 레자주린을 사용하여 콜로니를 정량화하였다. 억제 퍼센트 및 상승작용을 상기와 같이 계산하였다.
웨스턴 블롯 (데이터는 제시하지 않음)
지정된 세포주를 500000개 세포/웰의 밀도로 6-웰-플레이트에 시딩하고, 24시간 동안 방치하여 부착시킨 후, 최종 농도 1 μM의 지정된 화합물로 추가로 24시간 동안 처리하였다. 이어서, 성장 배지를 제거하고, 세포를 빙냉 PBS로 2회 세척하고, 50 mmol/L 트리스 pH 7.5, 120 mmol/L NaCl, 20 mmol/L NaF, 1 mmol/L EDTA, 6 mmol/L EGTA, 1 mmol/L 벤즈아민딘, 0.2 mmol/L PMSF, 100 mmol/L 바나듐산나트륨, 1% NP-40 중에서 용해시켰다. 투명한 용해물의 단백질 농도를 BCA 단백질 검정 키트를 사용하여 결정하였다. 각각의 샘플 80 μg 단백질을 NuPage 4-12% 트리스-비스 미디(Midi) 겔 상에서 SDS-PAGE에 의해 분리하고, PVDF-막으로 전달하고, 상기 나열된 바와 같은 항체로 프로빙하였다. 세척하고 이차 HRP-연결 항체와 함께 인큐베이션한 후, ECL 검출 시약을 사용하여 밴드를 가시화하였다.
결과는 다음과 같았다: 유전자 발현 패턴은 MET 및 FGFR1의 자가분비 활성화를 시사한다.
두 RTK의 동시 활성은 선택적 키나제 억제제에 대한 원발성 또는 후천성 내성의 원인이 될 수 있다. 자가분비 루프를 통한 또는 다른 유전자 변경에 의한 RTK의 공동-활성화가 확립된 암 세포주에서 발견되었는지의 여부, 및 이것이 선택적 RTK 억제제에 대한 반응을 조절하는지의 여부를 조사하기 위해, 본 발명자들은 대규모 세트의 암 세포주, 즉 브로드-노파르티스(Broad-Novartis) 암 세포주 백과사전 (http://www.broadinstitute.org/ccle/home)으로부터 이용가능한 발현 및 카피수 프로파일을 분석하였다. 본 발명자들은 상대적 단순성 - 하나의 수용체, 하나의 리간드 - 때문에 MET에 대해, 뿐만 아니라 MET와의 교차-대화의 신규 발견으로 인해 FGFR 패밀리에 대해 본 발명자들의 분석을 집중시켰다. MET (MKN-45에서와 같이) 및 임의의 FGFR (RT-112에서와 같이)의 높은 수준의 증폭이 상호 배타적인 것으로 밝혀졌기 때문에, 본 발명자들은 본 발명자들의 주의를 잠재적 자가분비 루프로 전환하였다. MET, HGF, FGFR 및 FGF에 대한 발현 값을 사용하는 단순 등급-순위 알고리즘을 적용함으로써, 본 발명자들은 이중 자가분비 RTK 활성화에 대한 잠재력을 갖는 세포주를 확인하였다. 이어서, 3개의 유망하고 실험적으로 다루기 쉬운 후보를 조합 연구를 위해 선택하였다 (도 7). KYM-1 횡문근육종 세포주는 높은 MET 및 HGF 수준 뿐만 아니라 높은 FGFR1 및 FGF20을 발현하는 것으로 밝혀졌다. 본 발명자들은 여러 실험 세팅에서 이들 세포를 시험관내에서 시험하였다: 먼저, 본 발명자들은 부착 플레이트 상에서 세포를 단층으로 성장시켰다. 다음 단계로서, 본 발명자들은 반-고체 배지의 존재 또는 부재 하에, 비-부착 플레이트를 사용하였다. 이들 조건, 특히 반-고체 배지 하에, 세포는 보다 군집성 방식으로 성장하였고, 이는 잠재적으로 자가분비 자극을 시사하며 생체내 종양과 보다 밀접하게 유사하였다. 본 발명자들은 "바둑판" 배치를 사용하여 세포를 여러 농도에서의 화합물 B 및 BGJ398의 조합물과 함께 인큐베이션하였다 (도 7). MET 억제는 그 자체로 어떠한 효과도 갖지 않지만, FGFR 억제는 부분적 성장 억제를 유발하였다. 중요하게는, RTK 둘 다의 조합된 억제는 어느 단일 작용제보다 더 크게 성장을 억제하였다. 이러한 발견은 세포가 군집으로 성장한 경우에 보다 명백하였고, RTK의 공동-활성화가 단일 RTK에 대한 의존성을 완화할 수 있다는 가설을 뒷받침하였다. 골육종 세포주 MG-63 (고 MET/HGF, 고 FGFR1/FGF18)에서, 본 발명자들은 단층 증식 검정에서 유사한 조합 효과를 관찰하였다. 예상밖에, 반-고체 배지에서 BGJ398 단독에 의한 강한 성장 억제가 관찰되었고, 화합물 B와의 조합물은 FGFR1의 억제가 불완전할 수 있는 저농도의 BGJ398에서 오히려 유익하였다. 이러한 결과는 여전히 MG-63 세포에서의 FGFR1 및 MET의 동시 활성을 주장하지만, FGFR1이 성장에 대해 지배적인 유도인자인 것으로 보인다. 마지막으로, 본 발명자들은 신경교종 세포주 Hs 683 (고 MET/HGF, 고 FGFR1/FGF7)을 시험하였고, RTK 둘 다를 동시에 억제하는 경우에 단층 검정에서 성장 억제를 명백히 증진시키는 것으로 관찰되었다 (도 7f). 본 발명자들은 단일 작용제로서의 각각의 화합물이 그 자체의 표적을 효과적으로 억제하였음을 밝혀냈으나, 하류 신호 전달자 AKT 및 MAPK에 대한 효과는 덜 명백하였다. 중요하게는, 조합 효과는 각각의 세포주에서 ERK 인산화 억제의 수준에 대해 명백한 반면, AKT 인산화는 영향을 받지 않았다. 비-부착 플레이트에서 성장된 KYM-1 세포에서 동일한 분석을 수행한 경우에, 본 발명자들은 약물 조합물의 사용시에 ERK 인산화에 대한 훨씬 더 명백한 조합 효과 및 AKT 인산화에서의 적절한 감소를 관찰하였다 (데이터는 제시하지 않음).
도 8은 로에베 모델을 기초로 하여 추가의 (또는 감소된) 효과 수준을 약물 자체 조합물에 대한 퍼센트로 보여준다. 화합물 농도는 마이크로몰 단위이다. 배치는 도 7에 대해 기재된 바와 같다.
실시예 D) 생체내 마우스 연구 (도 8)
환자-유래 비소세포 폐암 이종이식편 LXFL 1121에서의 생체내 항종양 효능 연구를 수행하였다. 이종이식편을 누드 마우스의 피하에서 성장시켰다. 8마리의 종양-보유 마우스를 각각 비히클 대조군, 화합물 B 단독, BGJ398 단독 또는 약물 둘 다의 조합물로 지정된 용량 및 빈도로 처리하였다. 화합물 B 투여 빈도가 조합물 군에서 체중 손실이 관찰된 후 연구 제14일에 1일 2회로부터 1회로 감소되었음을 유념한다. 조합물 군에서, 알 수 없는 이유로 1마리의 동물은 연구 제7일 후에, 1마리는 연구 제18일 후에 사망하였다. 종양 부피를 지정된 날에 측정하였고, 조합 치료의 상승작용을 문헌 [Clarke, R., Breast Cancer Res. Treat., 41997]의 방법에 의해 평가하였다.
약동학적/약역학적 분석을 위해, 비히클 및 화합물 B-단독 군의 동물을 연구 제21일 후에, 동물의 절반씩을 각각 최종 투여 2시간 또는 12시간 후에 안락사시켰다. 혈장 및 종양 샘플을 수집하였다. 2개의 나머지 군에서의 처리를 제21일 후에 중지하고, 약역학적 분석에 충분한 물질을 획득하기 위해 종양이 재성장하도록 하였다. 제61일에, BGJ398 또는 BGJ398/화합물 B 조합물의 최종 용량을 투여하고, 나머지 마우스의 절반을 2시간 후에 안락사시켰다. 화합물 B의 제2 용량을 제1 용량 12시간 후에 조합물 군에 투여하고, 나머지 동물을 BGJ398 24시간 후에 = 최종 화합물 B 투여 12시간 후에 안락사시켰다.
순간-동결 종양 샘플을 액체 질소를 사용하여 냉각시킨 강철 막자사발에서 손으로 분쇄하였다. 이어서, 단백질 추출물을 제조하였다. 포스포-MET / 총 MET 수준을 정량화하기 위해, MSD 96-웰 멀티-스폿 포스포 (Tyr1349)/총 MET 검정 (메조 스케일 디스커버리(Meso Scale Discovery))를 제조업체의 지침에 따라 사용하였다
혈장 및 종양 균질화물 중 화합물 B 및 BGJ398의 농도를 UPLC/MS-MS 검정에 의해 동시에 결정하였다. 혈장 (25μl) 또는 종양 균질물 (100μl)의 분석 분취액에 내부 표준 혼합물 (1μg/ml) 25 μl를 첨가한 후, 단백질을 200μl 아세토니트릴의 첨가에 의해 침전시켰다. 상청액을 새로운 바이알로 이동시켰다. 증발 건조시킨 후, 샘플을 60μl 아세토니트릴/ 물 (1/1 v/v) 중에 재용해시켰다. 상기 용액의 분취액 (5μl)을 물 중 0.1 % 포름산 (용매 A) 및 아세토니트릴 중 0.1% 포름산 (용매 B)의 혼합물로 이루어진 이동상을 사용하는 액퀴티(ACQUITY) UPLC BEH C18 칼럼 상에서 분리하였다. 구배 프로그래밍은 600μl/분의 유량으로 사용하였다. 95% 용매 A로 평형화시킨 후, 샘플 5μl를 주입하였다. 0.25분의 잠복 기간에 후, 샘플을 0.65분의 기간에 걸쳐 5 - 100% 용매 B의 선형 구배로 용리시키고 이어서 0.35분 유지하였다. 0.25분에 걸쳐 출발 조건으로 재평형화시킴으로써 다음 샘플을 위해 칼럼을 준비시켰다. 칼럼 용리액을 매스링스(Masslynx)™ 4.1 소프트웨어에 의해 제어되는 삼중 사중극자 질량 분광계 TQD™의 이온 공급원 내로 직접 도입시켰다. 분석물의 MS/MS 검출을 위해 전기분무 양성 이온화 (ESI +) 다중 반응 모니터링을 사용하였다. 화합물 둘 다에 대한 정량 한계 (LOQ)는 혈장 및 종양 균질화물에 대해 각각 2 ng/mL 및 1 ng/g으로 설정하였다 (CV 및 전체적 편중은 30% 미만임). 회귀 분석 및 추가의 계산을 퀀링스(QuanLynx)™ 4.1 및 엑셀(Excel)™ 2007을 사용하여 수행하였다. 비히클로 처리된 동물로부터 수득한 블랭크 혈장 또는 조직 중에 스파이킹된 보정 샘플을 사용하여 작성된 보정 곡선으로부터 분석물/IS의 피크 면적비를 기초로 미지의 샘플 농도를 역계산하였다.
결과: 본 발명자들은 예외적으로 높은 FGFR1 발현을 높은 MET및 HGF 발현과 조합하여 나타내는 폐암 모델을 확인하였다. 상기 모델로부터 유도된 이종이식편을 보유하는 마우스를 4개의 군으로 무작위로 분류하고, 이어서 비히클 대조군, 단일 작용제로서의 화합물 B, 단일 작용제로서의 BGJ398, 또는 약물 둘 다의 조합물로 처리하였다. 화합물 B를 1일 2회 10 mg/kg의 용량으로 시작하였다. BGJ398을 1일 1회 40 mg/kg의 용량으로 경구 투여하였고, 약물 둘 다에 대한 동일한 요법을 조합물에서 사용하였다. 조합물 군에서의 체중 손실로 인해, 화합물 B의 투여 빈도를 2주 후에 임의로 1일 1회로 감소시켰다. 연구를 이러한 설정에서 제18일까지 계속하였다.
비히클 대조군과 비교하여, 화합물 B 단독은 단지 매우 평이한, 통계적으로 유의하지 않은 항종양 효과를 가졌다 (도 8). 대조적으로, 단일 작용제로서의 BGJ398로의 처리는 18일 과정에 걸쳐 강한 종양 성장 억제를 일으켜 안정한 질환 (정지 또는 약간의 퇴행)을 유도하였다. RTK 억제제 둘 다의 조합물은 종양을 실질적으로 퇴행시킬 수 있었다. 클라크(Clarke)의 방법을 사용한 통계적 분석은 상승작용을 나타냈다.
<표>
Figure pct00024
조합 데이터의 유의성을 제한된 데이터로부터 상호작용을 추정할 수 있는, 클라크 (2)에 의해 제시된 방법을 사용하여 평가하였다. 화합물 A, B 또는 조합물 AB (대조군 C 포함)에 대해, 마지막 값을 수집하였다. 계산 AB/C > A/C x B/C인 경우에 길항작용이 예상되고, AB/C = A/C x B/C인 경우에 상가 작용, AxB/C < A/C x B/C인 경우에 상승작용적 상호작용이 일어날 것으로 예상된다.
세포주 MG-63에서 유사한 시험관내 결과를 얻었다.

Claims (17)

  1. (i) MET 억제제 및 (ii) FGFR 억제제 또는 각각의 그의 제약상 허용되는 염 또는 각각의 그의 전구약물, 및 하나 이상의 제약상 허용되는 담체를 포함하는 제약 조합물.
  2. 제1항에 있어서, 성분 (i) 및 (ii)의 동시, 개별 또는 순차적 사용을 위한 제약 조합물.
  3. 제1항에 있어서, 고정 조합물 형태인 제약 조합물.
  4. 제1항에 있어서, FGFR 티로신 키나제 억제제 및 MET 티로신 키나제 억제제가 독립적으로 동시에 또는 시간 간격을 두고 개별적으로 투여될 수 있는 조합 투여, 특히 이들 시간 간격이 조합 파트너가 연합 활성이 되도록 하는 조합 투여를 위한 형태 또는 부분들의 키트인 제약 조합물.
  5. 제1항 내지 제4항 중 어느 한 항에 있어서,
    MET 티로신 키나제 억제제가 (E)-2-(1-(3-((7-플루오로퀴놀린-6-일)메틸)이미다조[1,2-b]피리다진-6-일)에틸리덴)히드라진카르복스아미드 및 2-플루오로-N-메틸-4-[(7-퀴놀린-6-일-메틸)-이미다조[1,2-b]트리아진-2-일]벤즈아미드 또는 각각의 그의 제약상 허용되는 염 또는 전구약물로 이루어진 군으로부터 선택되고,
    FGR-R 티로신 키나제 억제제가 3-(2,6-디클로로-3,5-디메톡시-페닐)-1-{6-[4-(4-에틸피페라진-1-일)-페닐아미노]-피리미딘-4-일}-1-메틸-우레아 또는 그의 제약상 허용되는 염 또는 전구약물인
    제약 조합물.
  6. 제1항 내지 제5항 중 어느 한 항에 있어서, 추가의 공동-작용제 또는 그의 제약상 허용되는 염 또는 전구약물을 포함하는 제약 조합물.
  7. 제1항 내지 제6항 중 어느 한 항에 있어서, FGFR 티로신 키나제 활성 및/또는 MET 티로신 키나제 활성 매개 질환에 대한 연합 치료 유효량을 포함하는, 암의 치료에 사용하기 위한 제약 조합물.
  8. 제1항 내지 제7항 중 어느 한 항에 있어서, 조합 제품 형태인 제약 조합물.
  9. FGFR 티로신 키나제 활성 및/또는 MET 티로신 키나제 활성 매개 질환, 특히 암을 치료하는 방법에서의 조합 사용을 위한, MET 억제제 및 FGFR 억제제 또는 그의 제약상 허용되는 염.
  10. 제9항에 있어서, MET 티로신 키나제 억제제가 (E)-2-(1-(3-((7-플루오로퀴놀린-6-일)메틸)이미다조[1,2-b]피리다진-6-일)에틸리덴)히드라진카르복스아미드 및 2-플루오로-N-메틸-4-[(7-퀴놀린-6-일-메틸)-이미다조[1,2-b]트리아진-2-일]벤즈아미드 또는 각각의 그의 제약상 허용되는 염 또는 전구약물로 이루어진 군으로부터 선택되고,
    FGR-R 억제제가 3-(2,6-디클로로-3,5-디메톡시-페닐)-1-{6-[4-(4-에틸피페라진-1-일)-페닐아미노]-피리미딘-4-일}-1-메틸-우레아 또는 그의 제약상 허용되는 염 또는 전구약물인
    MET 억제제 및 FGFR 억제제.
  11. FGFR 티로신 키나제 활성 및/또는 MET 티로신 키나제 활성 매개 질환, 특히 암을 치료하기 위한, 제1항 내지 제8항 중 어느 한 항에 따른 조합물 또는 조합 제품의 용도.
  12. FGFR 티로신 키나제 활성 및/또는 MET 티로신 키나제 활성 매개 질환, 특히 암을 치료하기 위한 의약 또는 제약 제품, 특히 제1항 내지 제8항 중 어느 한 항에 따른 조합물 또는 조합 제품의 제조를 위한, (i) FGFR 티로신 키나제 억제제 및 (ii) MET 티로신 키나제 억제제 또는 각각의 그의 제약상 허용되는 염의 조합물.
  13. FGFR 티로신 키나제 활성 및/또는 MET 티로신 키나제 활성 매개 질환, 특히 암의 치료를 필요로 하는 환자에게 (i) FGFR 티로신 키나제 억제제 및 (ii) MET 티로신 키나제 억제제 또는 각각의 그의 제약상 허용되는 염의 조합물을 투여하는 것을 포함하는, FGFR 티로신 키나제 활성 및/또는 MET 티로신 키나제 활성 매개 질환, 특히 암을 치료하는 방법.
  14. 제13항에 있어서, 상기 MET 억제제가 (E)-2-(1-(3-((7-플루오로퀴놀린-6-일)메틸)이미다조[1,2-b]피리다진-6-일)에틸리덴)히드라진카르복스아미드 및 2-플루오로-N-메틸-4-[(7-퀴놀린-6-일-메틸)-이미다조[1,2-b]트리아진-2-일]벤즈아미드 또는 각각의 그의 제약상 허용되는 염 또는 전구약물로 이루어진 군으로부터 선택되고,
    상기 FGFR 억제제가 3-(2,6-디클로로-3,5-디메톡시-페닐)-1-{6-[4-(4-에틸피페라진-1-일)-페닐아미노]-피리미딘-4-일}-1-메틸-우레아 또는 그의 제약상 허용되는 염 또는 전구약물인
    방법.
  15. FGFR 티로신 키나제 활성 및/또는 MET 티로신 키나제 활성 매개 질환, 특히 암의 치료를 필요로 하는 대상체, 예컨대 온혈 동물, 특히 인간에게 (i) FGFR 티로신 키나제 억제제 및 (ii) MET 티로신 키나제 억제제를 포함하는 제1항 내지 제8항 중 어느 한 항에 따른 조합물 또는 조합 제품의 유효량을 투여하는 것을 포함하는, FGFR 티로신 키나제 활성 및/또는 MET 티로신 키나제 활성 매개 질환, 특히 암의 치료 방법.
  16. 제1항 내지 제8항 중 어느 한 항에 따른 조합물을, 특히 FGFR 티로신 키나제 활성 및/또는 MET 티로신 키나제 활성 매개 질환, 특히 암의 치료에서의 그의 동시, 개별 또는 순차적 사용을 위한 지침과 함께 포함하는, 특히 FGFR 티로신 키나제 활성 및/또는 MET 티로신 키나제 활성 매개 질환, 특히 암의 치료에서의 사용을 위한 제약 제품 또는 상업용 패키지.
  17. FGFR 티로신 키나제 활성 및/또는 MET 티로신 키나제 활성 매개 질환, 특히 암의 치료를 위한 조합물, 특히 제1항 내지 제8항 중 어느 한 항에 따른 조합물의 제조를 위한, (i) FGFR 티로신 키나제 억제제 및 (ii) MET 티로신 키나제 억제제 또는 각각의 그의 제약상 허용되는 염의 용도.
KR1020147027542A 2012-04-03 2013-04-01 티로신 키나제 억제제 조합물 및 그의 용도 KR20140146086A (ko)

Applications Claiming Priority (3)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US201261619502P 2012-04-03 2012-04-03
US61/619,502 2012-04-03
PCT/US2013/034759 WO2013151913A1 (en) 2012-04-03 2013-04-01 Tyrosine kinase inhibitor combinations and their use

Publications (1)

Publication Number Publication Date
KR20140146086A true KR20140146086A (ko) 2014-12-24

Family

ID=48184451

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
KR1020147027542A KR20140146086A (ko) 2012-04-03 2013-04-01 티로신 키나제 억제제 조합물 및 그의 용도

Country Status (11)

Country Link
US (1) US20150051210A1 (ko)
EP (1) EP2833917A1 (ko)
JP (1) JP2015512447A (ko)
KR (1) KR20140146086A (ko)
CN (1) CN104244982A (ko)
AU (1) AU2013243737B2 (ko)
CA (1) CA2866321A1 (ko)
IN (1) IN2014DN07410A (ko)
MX (1) MX2014011987A (ko)
RU (1) RU2014143213A (ko)
WO (1) WO2013151913A1 (ko)

Families Citing this family (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
AU2015238301B2 (en) * 2014-03-26 2020-06-25 Astex Therapeutics Ltd Combinations
US10195208B2 (en) * 2014-07-31 2019-02-05 Novartis Ag Combination therapy

Family Cites Families (13)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
GB0512324D0 (en) 2005-06-16 2005-07-27 Novartis Ag Organic compounds
DE102005038537A1 (de) 2005-08-16 2007-02-22 Merck Patent Gmbh 1-Acyldihydropyrazolderivate
DK1966214T3 (en) 2005-12-21 2017-02-13 Janssen Pharmaceutica Nv TRIAZOLPYRIDAZINES AS TYROSINKINASA MODULATORS
NL2000613C2 (nl) 2006-05-11 2007-11-20 Pfizer Prod Inc Triazoolpyrazinederivaten.
PE20080403A1 (es) 2006-07-14 2008-04-25 Amgen Inc Derivados heterociclicos fusionados y metodos de uso
AU2007309149C1 (en) 2006-10-23 2013-04-04 Sgx Pharmaceuticals, Inc. Bicyclic triazoles as protein kinase modulators
JP5572388B2 (ja) * 2006-11-22 2014-08-13 インサイト・コーポレイション キナーゼ阻害剤としてのイミダゾトリアジンおよびイミダゾピリミジン
JP4994044B2 (ja) * 2007-01-05 2012-08-08 シェブロンジャパン株式会社 潤滑油組成物
EP2076289B1 (en) * 2007-04-13 2014-11-12 Dana-Farber Cancer Institute, Inc. Methods for treating cancer resistant to erbb therapeutics
NZ609066A (en) * 2008-04-29 2014-07-25 Novartis Ag Methods of monitoring the modulation of the kinase activity of fibroblast growth factor receptor and uses of said methods
CA2723617A1 (en) * 2008-05-14 2009-11-19 Amgen Inc. Combinations vegf(r) inhibitors and hepatocyte growth factor (c-met) inhibitors for the treatment of cancer
BR112012003262A8 (pt) * 2009-08-12 2016-05-17 Novartis Ag compostos de hidrazona heterocíclica e seus usos para tratar câncer e inflamação
WO2012044577A1 (en) * 2010-09-27 2012-04-05 Exelixis, Inc. Dual inhibitors of met and vegf for the treatment of castration resistant prostate cancer and osteoblastic bone metastases

Also Published As

Publication number Publication date
AU2013243737A1 (en) 2014-09-25
CN104244982A (zh) 2014-12-24
AU2013243737B2 (en) 2016-06-30
EP2833917A1 (en) 2015-02-11
IN2014DN07410A (ko) 2015-04-24
CA2866321A1 (en) 2013-10-10
MX2014011987A (es) 2014-11-10
JP2015512447A (ja) 2015-04-27
WO2013151913A1 (en) 2013-10-10
RU2014143213A (ru) 2016-05-27
US20150051210A1 (en) 2015-02-19

Similar Documents

Publication Publication Date Title
US20190134033A1 (en) Pharmaceutical combinations
US20210100812A1 (en) Methods for Treating EGFR Mutant Cancers
TW202045171A (zh) 包含tno155和瑞博西尼之藥物組合
EP2834246B1 (en) Combination products with tyrosine kinase inhibitors and their use
JP2020079243A (ja) ＰＩ３Ｋインヒビターとｃ−Ｍｅｔインヒビターの組み合わせ
MXPA06008157A (es) Tratamiento de gliomas malignos con inhibidores de factor de crecimiento transformante-beta.
AU2018236813A1 (en) Combination of an ALK inhibitor and a CDK inhibitor for the treatment of cell proliferative diseases
JP2023504046A (ja) ジアリール大環状化合物を含む併用療法
EA030808B1 (ru) ПРИМЕНЕНИЕ 1-ЭТИЛ-7-(2-МЕТИЛ-6-(1Н-1,2,4-ТРИАЗОЛ-3-ИЛ)ПИРИДИН-3-ИЛ)-3,4-ДИГИДРОПИРАЗИНО[2,3-b]ПИРАЗИН-2(1Н)-ОНА В ЛЕЧЕНИИ МУЛЬТИФОРМНОЙ ГЛИОБЛАСТОМЫ
JP2019038821A (ja) Ｐｉｍキナーゼ阻害剤の組合せ
Pattarozzi et al. The inhibition of FGF receptor 1 activity mediates sorafenib antiproliferative effects in human malignant pleural mesothelioma tumor-initiating cells
JP6526789B2 (ja) 組み合わせ療法
JP2020097588A (ja) セリチニブとｅｇｆｒ阻害剤の組合せ
JP2019508460A (ja) 増殖性疾病の組み合せ療法
KR20140146086A (ko) 티로신 키나제 억제제 조합물 및 그의 용도
JP2022532383A (ja) 増殖状態に対する組み合わせ療法
WO2023190748A1 (ja) 腫瘍治療用医薬組成物
US20240269136A1 (en) Egfr inhibitor and perk activator in combination therapy and their use for treating cancer
WO2023242099A1 (en) Novel ras inhibitors
WO2023242104A1 (en) Diaminoacridine derivatives as inhibitors of ras
WO2023242103A1 (en) Novel ras inhibitors
WO2023242097A1 (en) Mitoxanthrone derivatives as ras inhibitors
AU2011293315A1 (en) Use of a receptor-type kinase modulator for treating polycystic kidney disease
WO2016035023A1 (en) Pharmaceutical combinations and their use

Legal Events

Date Code Title Description
WITN Application deemed withdrawn, e.g. because no request for examination was filed or no examination fee was paid