KR20140138691A

KR20140138691A - 난소암의 치료를 위한 조합 치료

Info

Publication number: KR20140138691A
Application number: KR1020147024773A
Authority: KR
Inventors: 코라도 버나스코니; 데이비드 볼라그
Original assignee: 에프. 호프만-라 로슈 아게
Priority date: 2012-03-13
Filing date: 2013-03-11
Publication date: 2014-12-04
Also published as: JP6640288B2; JP2015511593A; IL234174B; JP6563197B2; TW201343178A; IL263781A; LT2825558T; AR090313A1; KR102082363B9; WO2013135602A3; MX365139B; EP2825558B1; EA201400996A1; AU2013231410A1; PH12014501543A1; PT2825558T; DK2825558T3; US20150098988A1; US20160289317A1; RS58964B1

Abstract

본 발명은, 백금 저항성 난소암으로 진단된 환자의 치료 방법으로서, 유효량의 항VEGF 항체 및 화학치료제를 상기 환자에게 투여하는 것을 포함하는 방법에 관한 것이다.

Description

난소암의 치료를 위한 조합 치료{COMBINATION THERAPY FOR THE TREATMENT OF OVARIAN CANCER}

본 발명은 항VEGF 항체를 사용한 질병 및 병적 상태의 일반적인 치료에 관한 것이다. 보다 구체적으로, 본 발명은 항VEGF 항체를 하나 이상의 추가의 항종양 치료제와 조합하여 사용하는, 난소암에 민감하거나 난소암으로 진단된 인간 환자의 치료에 관한 것이다.

상피성 난소암(epithelial ovarian cancer: EOC)은 원발성 복막암종 및 나팔관암종과 함께 유럽에서 여성의 암 관련 사망의 다섯 번째로 높은 원인이다. 또한, 상피성 난소암은 가장 높은 사망률을 보이는 부인과 암이다(Bray F. et al., Ovarian cancer in Europe: Cross-sectional trends in incidence and mortality in 28 countries, 1953-2000, Int. J. Cancer 113, 977-90 (2005); National Comprehensive Cancer Network, Clinical Practice Guidelines in Oncology: Ovarian cancer v.1 (2008) http://www.nccn.org/professionals/physician_gls/PDF/ovarian.pdf (2008)). 난소암의 치료의 개선에도 불구하고, 전체 생존(overall survival: OS)의 증가는 크지 않았으며(Chan J. K. et al., Patterns and progress in ovarian cancer over 14 years, Obstet. Gynecol. 108, 521-528 (2006); Engel J. et al., Moderate progress for ovarian cancer in the last 20 years: prolongation of survival, but no improvement in the cure rate, Eur. J. Cancer 38, 2435-2445 (2002)), 따라서 사망률은 여전히 높다. 이것은 진행된 단계로 진행시까지 난소암이 자주 진단되지 않는다는 사실에 부분적으로 기인한다. 난소암은 1차 세포감축 수술과 통합되어 실행시, 80%를 초과하는 전신적 화학치료 초기 반응률을 보이는, 화학치료에 반응하는 신생물로 간주되고 있다(Bookman M. A., Developmental chemotherapy and management of recurrent ovarian cancer, J. Clin. Oncol. 21, 149s-167s (2003)). 이러한 사실에도 불구하고, 상피성 난소암으로 진단된 여성의 50% 이상은 당해 질병으로 인해 사망한다(Harries M. & Gore M., Part I: chemotherapy for epithelial ovarian cancer-treatment at first diagnosis, Lancet Oncol. 3, 529-536 (2002)). 지난 15년 동안 발표된 주요 시험은 진행된 질병을 가진 환자의 중간 무진행 생존(progression free survival: PFS)이 16 내지 23개월이며, 중간 전체 생존은 31 내지 65개월인 것으로 보고했다(International Collaborative Ovarian Neoplasm Group, Paclitaxel plus carboplatin versus standard chemotherapy with either single-agent carboplatin or cyclophosphamide, doxorubicin, and cisplatin in women with ovarian cancer: the ICON3 randomised trial, Lancet 360, 505-515 (2002); Armstrong D. K. et al., Intraperitoneal cisplatin and paclitaxel in ovarian cancer, N. Engl. J. Med. 354, 34-43 (2006); McGuire W. P. et al., Cyclophosphamide and cisplatin compared with paclitaxel and cisplatin in patients with stage III and stage IV ovarian cancer, N. Engl. J. Med. 334, 1-6 (1996); Muggia F. M. et al., Phase III randomized study of cisplatin versus paclitaxel versus cisplatin and paclitaxel in patients with suboptimal stage III or IV ovarian cancer: a gynecologic oncology group study, J. Clin. Oncol. 18, 106-115 (2000); Piccart M. J. et al., Randomized intergroup trial of cisplatin-paclitaxel versus cisplatin-cyclophosphamide in women with advanced epithelial ovarian cancer: three-year results, J. Natl. Cancer Inst. 92, 699-708 (2000)).

일차 화학치료로 CR에 도달한 환자의 대부분은 궁극적으로 질병의 재발을 경험한다. 이러한 환자는 백금 민감성 또는 백금 저항성 군으로 세분화될 수 있다. 백금 민감성 환자에서, 질병 재발은 최초 백금 함유 화학치료 중단으로부터 6개월이 넘은 후에 발생한다. 백금 기반 치료는 일반적으로, 이러한 환자에게서 두 번째 백금 기반 치료의 결과 관찰된 임상적으로 유의한 반응에 근거하여, 이러한 환자를 재치료하는데 사용된다. 현재로서는, 최초 백금 기반 화학치료를 완료한 뒤 6개월 이내에 질병이 재발하는 백금 저항성 환자를 위한 최적 치료 전략은 없다. 넓은 범위의 가용한 치료가 존재함에도 불구하고, 이러한 상황에서 연장된 생존은 달성되지 않았고, 객관적 반응률(objective response rate: ORR)은 일반적으로 20%보다 적다. 저항성 질병은 완치 불가능하기 때문에, 이러한 환자를 위한 치료의 목표는 증상의 완화, 연장된 생존 및 삶의 질 향상을 포함한다.

따라서, 백금 저항성은 개선된 치료요법을 요하는 중요한 임상적 과제이다. 특히, 향(pro)-혈관형성 혈관내피 성장 인자(VEGF)에 대한 표적 모노클론 항체인 베바시주맙(아바스틴(AVASTIN, 등록상표))은 상당한 치료적 가능성을 갖는다.

본 발명은, 백금 저항성 난소암으로 진단된 환자의 치료 방법으로서, 유효량의 항VEGF 항체 및 화학치료제를 상기 환자에게 투여하는 것을 포함하되, 상기 환자는 이전에 2개 이하의 항암요법을 받았고, 상기 치료가 상기 화학치료제를 단독으로 투여받은 백금 저항성 난소암 환자에 비해 중간 무진행 생존 기간을 연장시키는 것인 방법을 제공한다. 일 양태에서, 상기 백금 저항성 난소암은 상피성 난소암(EOC), 나팔관암종(fallopian tube carcinoma: FTC), 또는 원발성 복막암종(primary peritoneal carcinoma: PPC)이다. 다른 일 양태에서, 상기 환자는 이전의 백금 치료에 내성이지 않고/않거나 RECIST(Response Evaluation Criteria in Solid Tumors: 고형 종양 반응 평가 기준) 1.0에 따라 측정가능한 질병 또는 GCIG(Gynecologic Cancer InterGroup) 기준에 따라 CA-125 평가가능한 질병을 갖는다. 또 다른 일 양태에서, 상기 환자는 0-2 수준의 ECOG 수행상태를 보이며, 적어도 12주의 예상 수명을 갖는다.

본 발명은, 백금 저항성 난소암으로 진단된 환자의 치료 방법으로서, 유효량의 항VEGF 항체 및 화학치료제를 상기 환자에게 투여하는 것을 포함하는 방법을 제공하되, 상기 화학치료제는 파클리탁셀, 토포테칸 및 페길화된 리포솜 독소루비신(pegylated liposomal doxorubicin: PLD)으로 구성된 군에서 선택된다. 추가의 양태에서, 상기 파클리탁셀의 유효량은 4주 중 제1, 8, 15 및 22일에 80 mg/m²으로 1시간 정맥내 주입으로 투여된다.

상기 방법의 또 다른 양태에서, 상기 토포테칸의 유효량은 4주 중 제1, 8 및 15일에 4 mg/m²으로 30분 정맥내 주입으로 투여된다. 상기 방법의 대안적인 양태에서, 상기 토포테칸의 유효량은 3주마다 제1-5일에 1.25 mg/m²으로 30분 정맥내 주입으로 투여된다.

상기 방법의 또 다른 양태에서, 상기 페길화된 리포솜 독소루비신의 유효량은, 4주 중 제1일에만 40 mg/m²으로 1 ㎎/분 정맥내 주입으로 투여되고 그 후로는 1시간 주입으로 투여된다.

백금 저항성 난소암으로 진단된 환자의 치료 방법으로서, 유효량의 항VEGF 항체 및 화학치료제를 상기 환자에게 투여하는 것을 포함하는 방법을 제공하는 상기 본 발명에서, 상기 항VEGF 항체는 A4.6.1 에피토프에 결합한다. 추가의 양태에서, 상기 항VEGF 항체는 베바시주맙이다. 추가의 양태에서, 상기 항VEGF 항체는 가변 중쇄(VH) 및 가변 경쇄(VL)를 포함하며, 상기 VH가 서열번호 2의 아미노산 서열을 갖고, 상기 VL이 서열번호 1의 아미노산 서열을 갖는다.

백금 저항성 난소암으로 진단된 환자의 치료 방법으로서, 유효량의 항VEGF 항체 및 화학치료제를 상기 환자에게 투여하는 것을 포함하는 방법을 제공하는 상기 본 발명에서, 상기 항VEGF 항체의 유효량은 2주마다 정맥내 10 ㎎/kg이며, 상기 항VEGF 항체의 유효량은 초기에 90분간 정맥내 투여되고 후속적으로 60분간 및 그 후로는 30분간 주입된다. 추가의 양태에서, 상기 항VEGF 항체의 유효량은 3주마다 정맥내 15 ㎎/kg이며, 상기 항VEGF 항체는 초기에 90분간 정맥내 투여되고 후속적으로 60분간 및 그 후로는 30분간 주입된다.

상기 본 발명에서, 상기 항VEGF 항체는 첫 번째 사이클에서 상기 환자에게 가장 먼저 투여되며, 상기 항VEGF 항체의 후속 투여는 상기 화학치료제의 전 또는 후에 이루어진다. 다른 일 양태에서, 상기 항VEGF 항체는 상기 화학치료제와 병행 투여된다.

백금 저항성 난소암으로 진단된 환자의 치료 방법으로서, 유효량의 항VEGF 항체 및 화학치료제를 상기 환자에게 투여하는 것을 포함하는 방법을 제공하는 상기 본 발명에서, 중간 무진행 생존 기간은, 상기 화학치료제를 단독으로 투여받은 백금 저항성 난소암 환자에 비해 0.48의 위해 비(hazard ratio: HR)로 약 3개월 연장된다. 또 다른 양태에서, 상기 중간 무진행 생존 기간은, 상기 화학치료제를 단독으로 투여받은 백금 저항성 난소암 환자에 비해 0.48의 위해 비로 적어도 3개월 이상 연장된다. 또 다른 양태에서, 상기 중간 무진행 생존 기간은, 상기 화학치료제를 단독으로 투여받은 백금 저항성 난소암 환자에 비해 약 0.32 내지 약 0.57의 위해 비로 약 3개월 연장된다. 또 다른 양태에서, 상기 중간 무진행 생존 기간은, 상기 화학치료제를 단독으로 투여받은 백금 저항성 난소암 환자에 비해 약 0.32 내지 약 0.57의 위해 비로 적어도 3개월 이상 연장된다. 또 다른 양태의 상기 방법에서, 상기 화학치료제는 파클리탁셀이며, 상기 환자의 중간 무진행 생존 기간은, 상기 화학치료제를 단독으로 투여받은 백금 저항성 난소암 환자에 비해 약 0.46의 위해 비로 적어도 6개월 이상 연장된다. 또 다른 양태의 상기 방법에서, 상기 화학치료제는 페길화된 리포솜 독소루비신이며, 상기 환자의 중간 무진행 생존 기간은, 상기 화학치료제를 단독으로 투여받은 백금 저항성 난소암 환자에 비해 약 0.57의 위해 비로 적어도 2개월 이상 연장된다. 또 다른 양태의 상기 방법에서, 상기 화학치료제는 토포테칸이며, 상기 환자의 중간 무진행 생존 기간은 상기 화학치료제를 단독으로 투여받은 백금 저항성 난소암 환자에 비해 약 0.32의 위해 비로 적어도 3개월 이상 연장된다. 또 다른 양태의 상기 방법에서, 상기 환자는 65세 미만이다. 또 다른 양태의 상기 방법에서, 상기 환자는 65세 이상이다. 일 양태의 상기 방법에서, 상기 환자는 3개월 미만의 무백금 간격(platinum free interval: PFI)을 갖는다. 대안적인 양태의 상기 방법에서, 상기 환자는 3 내지 6개월의 PFI를 갖는다. 일 양태의 상기 방법에서, 상기 환자는 복부 복수를 갖는다. 대안적인 양태의 상기 방법에서, 상기 환자는 복부 복수를 갖지 않는다.

또 다른 양태의 상기 방법에서, 상기 치료는, 상기 화학치료제를 단독으로 투여받은 백금 저항성 난소암 환자에 비해 상기 환자의 객관적 반응률을 증진시킨다. 일 양태에서, 상기 객관적 반응률은 상기 화학치료제를 단독으로 투여받은 백금 저항성 난소암 환자에 비해 적어도 1.5배 또는 적어도 2배 증진된다. 또 다른 양태에서, 상기 객관적 반응률은 상기 화학치료제를 단독으로 투여받은 백금 저항성 난소암 환자에 비해 약 30.9%까지 증진된다. 다른 양태의 상기 방법에서, 상기 객관적 반응률은 상기 화학치료제를 단독으로 투여받은 백금 저항성 난소암 환자에 비해 적어도 1.5배 증진되고, 상기 화학치료제는 파클리탁셀 또는 페길화된 리포솜 독소루비신이다. 또 다른 양태의 상기 방법에서, 상기 객관적 반응률은 상기 화학치료제를 단독으로 투여받은 백금 저항성 난소암 환자에 비해 적어도 2배 증진되고, 상기 화학치료제는 토포테칸이다.

본 발명은 또한, 에피토프 A4.6.1에 본질적으로 결합하는 항VEGF 항체; 화학치료제; 및 백금 저항성 난소암으로 진단된 환자를 치료하기 위해 상기 환자에게 유효량의 항VEGF 항체 및 화학치료제를 투여하는 것을 포함하는 지시사항이 구비된 패키지 삽입물 또는 라벨을 포함하되, 상기 환자는 이전에 2개 이하의 항암요법을 받았고, 상기 치료가 상기 화학치료제를 단독으로 투여받은 백금 저항성 난소암 환자에 비해 중간 무진행 생존 기간을 연장시키는 것인 키트를 제공한다. 일 양태의 상기 키트에서, 상기 백금 저항성 난소암은, 상피성 난소암, 나팔관암종 또는 원발성 복막암종이다. 또 다른 양태의 상기 키트에서, 상기 항VEGF 항체는 베바시주맙이며, 상기 화학치료제가 파클리탁셀, 토포테칸 및 페길화된 리포솜 독소루비신으로 구성된 군에서 선택된다.

본 발명은 또한, 에피토프 A4.6.1에 본질적으로 결합하는 항VEGF 항체 및 환자의 백금 저항성 난소암을 치료하는 화학치료제의 투여를 홍보하는 방법으로서, 상기 홍보가 인쇄물에 의한 것인 방법을 제공한다. 일 양태의 상기 홍보하는 방법에서, 상기 항VEGF항체는 베바시주맙이며, 상기 화학치료제가 파클리탁셀, 토포테칸 및 페길화된 리포솜 독소루비신으로 구성된 군에서 선택된다. 또 다른 양태의 상기 홍보하는 방법에서, 상기 인쇄물은, 상기 항VEGF 항체와 상기 화학치료제의 상업적 제형에 동반되는 패키지 삽입물 또는 라벨이다.

도 1은 실시예 1에서 보다 상세히 개시되는 바와 같이 2개 시험군 삼상(Phase III) 연구 디자인의 치료 순서를 나타낸다. 시험군 1과 2 둘 모두에서, 화학치료제로는, 파클리탁셀, 토포테칸 및 페길화된 리포솜 독소루비신(PLD) 중에서 선택가능하다. 시험군 2에 있어서, 화학치료제로서 토포테칸이 선택되고 1.25 mg/m²의 용량으로 3주마다 1 내지 5 회 일정으로 투여될 때, 베바시주맙의 대체 용량은 3주마다 15 ㎎/㎏이다.
도 2는 삼상 오렐리아(AURELIA) 시험의 무진행 생존(PFS) 결과에 대한 환자 계층화 분석을 나타내며, 상기 삼상 오렐리아 시험에서는 다양한 위험 인자에 기반하여 환자를 하위군으로 세분화하고, 어느 환자 하위군에서 베바시주맙과 화학치료의 조합 치료가 단독 화학치료에 비해 더 나은 PFS 결과를 초래하는지 비교분석하였다. CT = 화학치료; BEV + CT = 베바시주맙 + 화학치료; HR = 비조정 위해 비; PFI = 개월 단위로 측정된 무백금 간격, 총 8명의 환자의 정보가 누락됨.
도 3은 양면 카이(chi) 제곱 시험 및 스카우텐(Schouten) 보정에 의해 측정된, 최고 전체적 반응률(overall response rate: ORR)의 요약 결과이며, 2개의 치료 시험군 간 RECIST 및/또는 CA-125 반응자, RECIST 반응자 단독 및 CA-125 반응자 단독으로 측정된 환자의 비율을 비교하고, 각 경우에 있어 화학치료 단독(CT)은 회색 점채된 막대로 나타내었고 각 경우에 있어 베바시주맙과 화학치료의 조합(BEV + CT)은 회색 막대 바로 나타내었고, n은 시험한 각 군의 환자 수를 나타낸다.

정의

"항혈관신생제" 또는 "혈관신생 억제제"는 직접적으로 또는 간접적으로 혈관신생, 맥관신생, 또는 바람직하지 않은 혈관 투과성을 저해하는 소분자량 물질, 폴리뉴클레오티드, 폴리펩티드, 단리된 단백질, 재조합 단백질, 항체, 또는 그의 접합물 또는 융합 단백질을 의미한다. 항혈관신생제는 혈관신생 인자 또는 그의 수용체에 결합하고 그 혈관신생 활성을 억제하는 제제들을 포함하는 것으로 이해되어야 한다. 예컨대, 항혈관신생제는, 본 명세서에 의해 정의되었거나 당해 분야에 알려진 바와 같은 혈관신생 제제의 항체 또는 다른 길항제이며, 구체예로는 VEGF-A 또는 VEGF-A 수용체에 대한 항체(예를 들어, KDR 수용체 또는 Flt-1 수용체), VEGF 트랩, 글리벡(Gleevec, 상표)(이마티닙 메실레이트)과 같은 항PDGFR 억제제를 들 수 있으나, 이에 한정되지는 않는다. 항혈관신생제는 또한 천연 혈관신생 억제제, 예를 들어 안지오스타틴, 엔도스타틴 등을 포함한다. 예를 들어, [Klagsbrun & D'Amore, Annu. Rev. Physiol., 53: 217-39 (1991)]; [Streit & Detmar, Oncogene, 22: 3172-3179 (2003)](예를 들어, 악성 흑색종에서의 항혈관신생 치료를 열거한 표 3); [Ferrara & Alitalo, Nature Medicine, 5: 1359-1364 (1999)]; [Tonini et al., Oncogene, 22: 6549-6556 (2003)](예를 들어, 알려진 항혈관신생 인자를 열거한 표 2); 및 [Sato. Int. J. Clin. Oncol., 8: 200-206 (2003)](예를 들어, 임상 시험에 사용되는 항혈관신생제를 열거한 표 1)을 참조할 수 있다.

본원에서 사용함에 있어 용어 "항체"는 가장 광범위한 의미로 사용되며, 다양한 항체 구조를 아우르고, 모노클론 항체, 폴리클론 항체, 다중특이성 항체(예를 들어, 이중특이성 항체), 및 목적 항원-결합 활성을 보이는 항체 단편을 포함하되, 이에 한정되지는 않는다.

용어 "복수" 또는 복부 복수는 과량으로 복부에 축적된 액체를 의미한다. 난소암이 존재할 때, 복수액은 종종 암의 성장물에서부터 떨어져 나온 자유 부동 암 세포를 함유하기도 한다. 복부 복수의 발현은 일반적으로 복부 복수가 없는 환자에 비해 더 증상적인 질병과 불량한 예후를 나타낸다.

용어 "베바시주맙"은 [Presta et al., (1997) Cancer Res. 57: 4593-4599]에 따라 생성된 재조합 인간화된 항VEGF 모노클론 항체를 의미하며, "rhuMAb VEGF" 또는 "아바스틴(등록상표)"으로도 알려져 있다. 이는, 변이된 인간 IgG1 프레임워크 영역 및 인간 VEGF가 그의 수용체에 결합하는 것을 차단하는 쥐의 항-인간 VEGF 모노클론 항체 A.4.6.1로부터 유래하는 항원-결합 상보성 결정 영역을 포함한다. 대부분의 프레임워크 영역을 포함하여, 베바시주맙의 아미노산 서열의 약 93%는 인간 IgG1로부터 유래하고, 상기 서열의 약 7%는 쥐의 항체 A4.6.1로부터 유래하며, 베바시주맙은 하이브리도마 ATCC HB 10709에 의해 생산된 모노클론 항VEGF 항체 A4.6.1과 동일한 에피토프에 결합한다.

"CA-125"는 암 항원 125 또는 탄수화물 항원 125를 의미하며, 이는 치료에 대한 반응을 추적하고 치료후 예후를 예측하기 위한 임상적으로 승인된 혈액검사이다. 그것은 특히 난소암의 재발을 감지하는데 유용하다. 이는 난소암의 마커로 가장 잘 알려져 있는 한편, 자궁내막암, 나팔관암종, 폐암, 유방암 및 위장관암을 포함하는 다른 암에서도 증가될 수 있다.

용어 "암"과 "암적"은 조절되지 않는 세포 성장에 의해 일반적으로 특징지어지는 포유동물의 생리적 상태를 의미하거나 기술한다. 이 정의에는 휴면종양 또는 마이크로전이 뿐 아니라, 양성과 악성 암이 포함된다. 암의 예로는, 암종, 림프종, 모세포종, 육종 및 백혈병이 포함되나, 이에 한정되지는 않는다. 이러한 암의 보다 구체적인 예로는, 상피성 난소암을 포함하는 난소암, 나팔관암종, 또는 원발성 복막암종 또는 백금 저항성 난소암이 포함되나, 이에 한정되지는 않는다. 다른 암에는, 예를 들어, 유방암, 편평 세포암, 폐암(소세포 폐암, 비-소세포 폐암, 폐의 선암종, 폐의 편평 암종 포함), 복막암, 간세포암, 위암(위장관암 포함), 췌장암, 교모세포종, 자궁 경부암, 간암, 방광암, 간종양, 결장암, 결장직장암, 자궁내막암종 또는 자궁암종, 침샘암종, 신장암, 전립선암, 외음부암, 갑상선암, 간암종 및 두경부암의 다양한 유형이 포함되며, 또한 B세포 림프종(저급/여포성 비-호치킨 림프종(NHL); 소 림프구성(SL) NHL; 중급/여포성 NHL; 중급 미만성 NHL; 고급 면역모세포성 NHL; 고급 림프아구성 NHL; 고급 소 비분할세포 NHL; 거대 질병 NHL; 맨틀 세포 림프종; AIDS 관련 림프종; 및 발덴스트롬 마크로글로불린혈증); 만성 림프구성 백혈병(CLL); 급성 림프아세포성 백혈병(ALL); 털모양 세포 백혈병; 만성 골수아세포성 백혈병; 및 이식 후 림프세포 증식성 질환(PTLD)이 포함되며, 또한 모반증과 연관된 비정상적인 혈관 증식, 부종(예: 뇌종양과 연관된 것) 및 메이그스 증후군이 포함된다.

"화학치료제"는 암 치료에 유용한 화학적 화합물이다. 화학치료제의 예로는 암의 치료에 유용한 화학적 화합물이 포함된다. 화학치료제의 예로는, 예를 들어 파클리탁셀 또는 토포테칸 또는 페길화된 리포솜 독소루비신이 포함된다. 화학치료제의 다른 예로는, 알킬화제, 예컨대 티오테파 및 시톡산(CYTOXAN, 등록상표) 사이클로포스파미드; 알킬 설포네이트, 예컨대 부설판, 임프로설판 및 피포설판; 아지리딘, 예컨대 벤조도파, 카르보쿠온, 메투레도파 및 우레도파; 에틸렌이민 및 메틸아멜아민, 예컨대 알트레트아민, 트리에틸렌멜라민, 트리에틸렌포스포라미드, 트리에틸렌티오포스포라미드 및 트리메틸올로멜라민; 아세토제닌(특히 불라타신 및 불라타시논); 캄토테신; 브리오스타틴; 칼리스타틴; CC-1065(그의 아도젤레신, 카르젤레신 및 비젤레신 합성 유사체 포함); 크립토파이신(특히 크립토파이신 1 및 크립토파이신 8); 돌라스타틴; 듀오카르마이신(합성 유사체, KW-2189 및 CB1-TM1 포함); 엘레우테로빈; 판크라티스타틴; 사르코딕틴; 스폰지스타틴; 질소 머스타드, 예컨대 클로람부실, 클로나파진, 클로로포스파미드, 에스트라무스틴, 이포스파미드, 메클로르에타민, 메클로르에타민 옥사이드 하이드로클로라이드, 멜팔란, 노벰비신, 페네스테린, 프레드니무스틴, 트로포스파미드, 우라실 머스타드; 니트로스우레아, 예컨대 카르무스틴, 클로로조토신, 포테무스틴, 로무스틴, 니무스틴 및 라님누스틴; 항생제, 예컨대 에네디인 항생제(예를 들어, 칼리케아마이신, 특히 칼리케아마이신 감마II 및 칼리케아마이신 오메가ll(예를 들어, [Agnew, Chem. Intl. Ed. Engl., 33: 183-186 (1994)]을 참조); 디네마이신, 예컨대 디네마이신 A; 비스포스포네이트, 예컨대 클로드로네이트; 에스페라마이신; 및 네오카르지노스타틴 발색단 및 관련된 발색단백질 에네디인 항생제 발색단, 아클라시노마이신, 악티노마이신, 아우트라마이신, 아자세린, 블레오마이신, 칵티노마이신, 카라비신, 카미노마이신, 카르지노필린, 크로모마이신, 닥티노마이신, 다우노루비신, 데토루비신, 6-디아조-5-옥소-L-노르류신, 아드리아마이신(ADRIAMYCIN(등록상표)) 독소루비신(모르폴리노-독소루비신, 시아노모르폴리노-독소루비신, 2-피롤리노-독소루비신 및 데옥시독소루비신 포함), 에피루비신, 에소루비신, 이다루비신, 마르셀로마이신, 미토마이신, 예컨대 미토마이신 C, 미코페놀산, 노갈라마이신, 올리보마이신, 페플로마이신, 포트피로마이신, 퓨로마이신, 퀘라마이신, 로도루비신, 스트렙토니그린, 스트렙토조신, 투베르시딘, 우베니멕스, 지노스타틴, 조루비신; 항대사 물질, 예컨대 메토트렉세이트 및 5-플루오로우라실(5-FU); 엽산 유사체, 예컨대 데노테린, 메토트렉세이트, 테로테린, 트리메트렉세이트; 퓨린 유사체, 예컨대 플루다라빈, 6-머캅토퓨린, 티아미프린, 티오구아닌; 피리미딘 유사체, 예컨대 안시타빈, 아자시티딘, 6-아자우리딘, 카르모푸르, 시타라빈, 디데옥시우리딘, 독시플루리딘, 에노시타빈, 플록스우리딘; 안드로겐, 예컨대 칼루스테론, 드로모스타놀론 프로피오네이트, 에피티오스타놀, 메피티오스탄, 테스토락톤; 항-아드레날, 예컨대 아미노글루테티미드, 미토탄, 트릴로스탄; 엽산 보충제, 예컨대 프롤린산; 아세글라톤; 알도포스파미드 글리코시드; 아미노레불린산; 에닐우라실; 암사크린; 베스트라부실; 비산트렌; 에다트락세이트; 데포파민; 데메콜신; 디아지쿠온; 엘포르미틴; 엘립티늄 아세테이트; 에포틸론; 에토글루시드; 질산 갈륨; 하이드록시우레아; 렌티난; 로니다이닌; 메이탄시노이드, 예컨대 메이탄신 및 안사미토신; 미토구아존; 미톡산트론; 모피단몰; 니트라에린; 펜토스타틴; 페나메트; 피라루비신; 로속산트론; 포도필산; 2-에틸하이드라지드; 프로카바진; PSK(등록상표) 다당류 복합체(미국 오레곤주 유진 소재 제이에이치에스 내츄럴 프로덕츠(JHS Natural Products)); 라족산; 리족신; 시조푸란; 스피로게르마늄; 테누아존산; 트리아지쿠온; 2,2',2"-트리클로로트리에틸아민; 트리코테센(특히 T-2 독소, 베라큐린 A, 로리딘 A 및 앵구이딘); 우레탄; 빈데신; 다카바진; 마노무스틴; 미토브로니톨; 미토락톨; 피포브로만; 가시토신; 아라비노시드("Ara-C"); 사이클로포스파미드; 티오테파; 탁소이드, 예컨대, 탁솔(TAXOL, 등록상표) 파클리탁셀(미국 뉴저지주 프린스톤 소재 브리스톨-마이어스 스큅 온콜로지(Bristol-Myers Squibb Oncology)), 아브락산(ABRAXANE, 등록상표) 크레모포 프리, 파클리탁셀의 알부민 가공된 나노입자 제형(미국 일리노이주 스카움버그 소재 어메리컨 파마슈티컬 파트너스(American Pharmaceutical Partners)) 및 탁소텔(TAXOTERE, 등록상표) 도세탁셀(프랑스 안토니 소재 롱-플랑 로러(Rhone-Poulenc Rorer)); 클로란부실; 젬자르(GEMZAR, 등록상표) 젬시타빈, 6-티오구아닌, 머캅토퓨린, 메토트렉세이트; 백금 유사체, 예컨대 시스플라틴, 옥살리플라틴 및 카보플라틴, 빈블라스틴; 백금; 에토포시드(VP-16); 이포스파미드; 미톡산트론; 빈크리스틴; 나벨빈(NAVELBINE, 등록상표) 비노렐빈; 노반트론; 테니포시드; 에다트렉세이트; 다우노마이신; 아미노테린; 젤로다; 이반드로네이트; 이리노테칸(캄프토사(Camptosar), CPT-11)(5-FU 및 류코보린과의 이리노테칸 치료요법을 포함); 토포이소머라제 억제제 RFS 2000; 디플루오로메틸오르니틴(DMFO); 레티노이드, 예컨대 레티노산; 카페시타빈; 콤브레타스타틴; 류코보린(LV); 옥살리플라틴 치료요법(FOLFOX)을 포함하는 옥살리플라틴; 라파티닙(타이커브(Tykerb, 등록상표)); PKC-알파 억제제, Raf, H-Ras, EGFR(예: 엘로티닙(타세바(Tarceva, 등록상표)) 및 세포 증식을 감소시키는 VEGF-A 및 상기 어느 물질의 약학적으로 허용가능한 염, 산 또는 유도체가 포함된다.

본원에서 사용함에 있어 용어 "병행 투여"는, 투여의 적어도 일부분이 시간적으로 중첩되는 2개 이상의 치료제의 투여를 의미하는 것으로 사용된다. 따라서, 병행 투여는 1개 이상의 제제의 투여가 1개 이상의 다른 제제의 투여를 중단한 이후에 계속되는 투여 양생법을 포함한다.

용어 "유효량"은 포유동물의 질병 또는 장애를 치료하기에 효과적인 약물의 양을 의미한다. 암의 경우, 약물의 치료 유효량은, 암 세포의 수를 감소시키고/시키거나, 종양 크기를 감소시키고/시키거나, 암 세포가 주변 기관으로 침윤하는 것을 억제(즉, 어느 정도 지연시키거나, 바람직하게는 정지시킴)하고/하거나, 종양전이를 억제(즉, 어느 정도 지연시키거나, 바람직하게는 정지시킴)하고/하거나, 종양 성장을 어느 정도 억제하고/하거나, 장애와 관련된 1개 이상의 증상을 어느 정도 완화시키는 것일 수 있다. 존재하는 암 세포의 성장을 막고/막거나 존재하는 암 세포를 살해하는 정도로, 약물은 세포 정지적 및/또는 세포 독성인 것일 수 있다. 암 치료의 경우, 생체내 효능은, 예컨대, 생존 기간, 무진행 생존(PFS), 반응률(RR), 반응 지속기간, 및/또는 삶의 질을 평가함으로써 측정될 수 있다.

"에피토프 A4.6.1"은 항VEGF 항체 베바시주맙(아바스틴(등록상표))이 인식하는 에피토프를 의미한다(Muller Y. et al., Structure 15, September 1998, 6: 1153-1167 참조). 본 발명의 특정 양태에서 항VEGF 항체는, 하이브리도마 ATCC HB 10709에 의해 생산된 모노클론 항VEGF 항체 A4.6.1과 동일한 에피토프에 결합하는 모노클론 항체; [Presta et al., (1997) Cancer Res. 57: 4593-4599]에 따라 생성된 재조합 인간화된 항VEGF 모노클론 항체를 포함하나, 이에 한정되지는 않는다.

"인간 항체"는 인간 또는 인간 세포에 의해 생산된 항체, 또는 인간 항체 목록 또는 다른 인간 항체-인코딩 서열을 활용하는 비-인간 기원의 항체에 상응하는 아미노산 서열을 소유하는 것을 의미한다. 인간 항체의 본 정의는 비-인간 항체 결합 잔기를 포함하는 인간화된 항체를 특별히 배제한다.

"인간화된" 항체는 비-인간 HVR의 아미노산 잔기와 인간 FR의 아미노산 잔기를 포함하는 키메라 항체를 의미한다. 특정 양태에서, 인간화된 항체는, 실질적으로 적어도 하나의, 및 일반적으로는 2개의 모든 가변 도메인을 포함하며, 상기 항체의 모든 또는 실질적으로 모든 HVR(예를 들어, CDR)은 비-인간 항체의 HVR에 상응하고, 모든 또는 실질적으로 모든 FR은 인간 항체의 FR에 상응한다. 인간화된 항체는 임의적으로 인간 항체에서 유래하는 항체 불변 영역의 적어도 일부를 포함할 수 있다. 항체, 예를 들면, 비-인간 항체의 "인간화된 형태"는 인간화를 겪은 항체를 의미한다.

본원에서 사용함에 있어 용어 "초가변 영역" 또는 "HVR"은, 그 서열이 초가변성이고/이거나 구조적으로 정의된 루프("초가변성 루프")를 형성하는, 항체 가변 도메인의 각 영역을 의미한다. 일반적으로, 천연 4쇄 항체는 여섯 개의 HVR을 포함한다; 그 중 세 개는 VH(H1, H2, H3)에, 및 세 개는 VL(L1, L2, L3)에 존재한다. HVR은 일반적으로 초가변성 루프 및/또는 "상보성 결정 영역"(CDR) 유래 아미노산 잔기를 포함하며, 후자는 서열 가변성이 가장 높고/높거나 항원 인식에 연관되어 있다. 예시적인 초가변성 루프는 아미노산 잔기 26-32(L1), 50-52(L2), 91-96(L3), 26-32(H1), 53-55(H2) 및 96-101(H3)에서 발생한다(Chothia & Lesk, J. Mol. Biol. 196: 901-917 (1987)). 예시적인 CDR(CDR-L1, CDR-L2, CDR-L3, CDR-H1, CDR-H2 및 CDR-H3)은 아미노산 잔기 L1의 24-34, L2의 50-56, L3의 89-97, H1의 31-35B, H2의 50-65, 및 H3의 95-102에서 발생한다(Kabat et al., Sequences of Proteins of Immunological Interest, 5th Ed. Public Health Service, National Institutes of Health, Bethesda, MD (1991)). VH의 CDRl을 제외하면, CDR은 일반적으로 초가변성 루프를 형성하는 아미노산 잔기를 포함한다. CDR은 또한 "특이성 결정 잔기", 즉 "SDR"을 포함하며, 이는 항원에 접촉하는 잔기이다. SDR은 생략된-CDR, 즉 a-CDR로 불리는 CDR의 영역내에 함유되어 있다. 예시적인 a-CDR(a-CDR-L1, a-CDR-L2, a-CDR-L3, a-CDR-H1, a-CDR-H2, 및 a-CDR-H3)은 아미노산 잔기 L1의 31-34, L2의 50-55, L3의 89-96, H1의 31-35B, H2의 50-58, 및 H3의 95-102에서 발생한다(Almagro & Fransson, Front. Biosci. 13: 1619-1633 (2008) 참조). 달리 표기되지 않는 한, HVR 잔기와 가변 도메인에서의 다른 잔기들(예를 들어, FR 잔기)은 본원에서 사용함에 있어 위의 Kabat 등의 문헌에 따라 번호 매겨진다.

"개체" 또는 "대상"은 포유동물이다. 포유동물은 길들여진 동물(예를 들면, 소, 양, 고양이, 개, 및 말), 영장류(예를 들면, 인간, 및 원숭이 등 비-인간 영장류), 토끼, 및 설치류(예를 들어, 쥐 및 들쥐)를 포함하나 이에 한정되지는 않는다. 특정 양태에서, 상기 개체 또는 대상은 인간이다.

본 발명의 방법에 있어, 대상에게 "지시"라는 용어는, 어떠한 방법으로든, 적용가능한 치료, 약물, 처치, 치료요법 등을 제공하는 것을 의미하며, 바람직하게는, 패키지 삽입물 또는 다른 인쇄 판촉물과 같이 인쇄물 형태로 제공하는 것을 의미한다.

용어 "정맥내 주입"은, 비록 본 발명에 따른 정맥내 주입은 대안적으로 10시간 이하의 시간동안 투여되기는 하지만, 동물 또는 인간 대상의 정맥에 약 5분 이상, 바람직하게는 약 30 내지 90분 동안의 시간동안 약물을 도입하는 것을 의미한다.

용어 "정맥내 볼루스" 또는 "정맥내 푸시"는 신체가 약 15분 이내, 바람직하게는 5분 이내에 약물을 받아들일 수 있도록 동물 또는 인간의 정맥에 약물을 투여하는 것을 의미한다.

"단리된" 항체는 자연 환경의 구성요소에서 분리된 것을 의미한다. 특정 양태에서, 항체는 예를 들어, 전기영동(예를 들어 SDS-PAGE, 등전 포커싱(IEF), 모세관 전기영동) 또는 크로마토그래피(예를 들어 이온교환 또는 역상 HPLC)에 의해 결정되는 바와 같이 95% 또는 99% 보다 높은 순도로 정제된다. 항체의 순도를 평가하는 방법을 검토하기 위해서는 [Flatman et al., J. Chromatogr. B 848: 79-87 (2007)]을 참조할 수 있다.

본원에서 사용함에 있어 "유지" 용량은 치료 기간 동안 또는 그 후에 대상에게 투여되는 치료제의 하나 이상의 용량을 의미한다. 일반적으로, 유지 용량은 약 매주, 약 2주마다, 약 3주마다, 또는 약 4주마다와 같이 치료 간격을 두고 투여된다.

"유지 치료"는 질병의 재발 또는 진행의 가능성을 감소시키기 위한 치료요법을 의미한다. 유지 치료는, 대상의 수명까지 연장되는 기간을 포함하여 어떠한 길이의 기간 동안에라도 제공될 수 있다. 유지 치료는 초기 치료 후에, 또는 초기 또는 추가 치료와 결합하여 제공될 수 있다. 유지 치료에 사용되는 용량은 다양할 수 있고, 다른 종류의 치료에 사용되는 용량에 비하여 감소된 용량을 포함할 수 있다. 또한 본원의 "유지" 항목을 참조할 수 있다.

본원에서 사용함에 있어 용어 "마케팅"은 제품(예를 들어, 약물)의 판촉, 판매 또는 유통을 나타낸다. 마케팅은 구체적으로 포장, 광고, 및 제품의 상업화를 목적으로 하는 모든 사업 활동을 포함한다.

"전이" 또는 "전이성"은 암이 원발소에서부터 신체의 다른 곳으로 확산하는 것을 의미한다. 암 세포는 원발 종양에서 이탈하여, 림프와 혈관에 침투, 혈류를 통해 순환하고, 신체의 다른 곳에 있는 정상 조직의 원격 병소에서 성장(전이)할 수 있다. 전이는 국소 또는 원격일 수 있다. 전이는 원발 종양에서 이탈하여 혈류를 따라 이동하고, 원격 부위에서 정지하는 종양 세포를 전제로 하는 순차적인 과정이다. 새로운 부위에서, 세포는 혈액 공급을 확립하고 생명을 위협하는 종괴를 형성할 만큼 성장할 수 있다. 종양 세포내의 자극 및 억제 분자 경로는 두가지 모두 이러한 동작을 조절하며, 원격 부위에서의 종양 세포와 숙주 세포간 상호작용 역시 중요하다.

"단일 치료"는 치료기간의 경과 중에 암이나 종양의 치료를 위해 1개의 치료제만을 포함하는 치료요법을 의미한다. VEGF-특이성 길항제를 사용한 단일 치료는 VEGF-특이성 길항제가 치료기간 동안 추가적인 항암 치료없이 투여되는 것을 의미한다.

본원에서 사용함에 있어 용어 "모노클론 항체"는 실질적으로 균질적인 항체군으로부터 얻어진 항체를 의미한다. 즉, 상기 군을 구성하는 개별 항체는 가능한 변이형 항체를 제외하면 동일하고/하거나 동일한 에피토프에 결합하는데, 상기 변이형 항체는 예를 들어 자연적으로 발생하는 변이를 함유하거나 모노클론 항체 제제의 생산 중에 발생하며, 대체로 소량으로 존재한다. 일반적으로 상이한 결정인자(에피토프)에 대응하는 상이한 항체를 포함하는 폴리클론 항체 제제와 대조적으로, 모노클론 항체 제제의 각각의 모노클론 항체는 항원상의 단일 결정인자에 대응한다. 따라서, 수식어 "모노클론"은 실질적으로 균질한 항체군으로부터 수득되는 항체의 특성을 나타내는 것으로, 임의의 특정 방법에 의한 항체 생산이 요구되는 것으로 해석되어서는 안 된다. 예를 들어, 본 발명에 따라 사용되는 모노클론 항체는 다양한 기술에 의해 제조될 수 있는데, 이는 하이브리도마 방법, 재조합 DNA 방법, 파지 표시 방법 및 인간 면역글로불린 영역을 전부 또는 일부 함유하는 유전자이식 동물을 사용하는 방법을 포함하되 이에 한정되지는 않으며, 모노클론 항체를 제작하기 위한 그러한 방법과 다른 예시적 방법이 본원에서 설명된다.

용어 "약학적 제형"은 함유된 활성 성분의 생물학적 활성이 효과적일 수 있도록 허용하는 형태로 존재하는 제제이며, 이러한 제형을 투여받은 대상에게 허용할 수 없는 독성을 나타내는 부가 성분을 함유하지 않는 제제를 의미한다.

"약학적으로 허용가능한 담체"는 약학적 제형의 활성 성분이 아닌 성분으로서, 대상에게 무독성인 것을 의미한다. 약학적으로 허용가능한 담체는 완충제, 부형제, 안정제 또는 방부제를 포함하나, 이에 한정되지는 않는다.

"백금 저항성"이란, 최소 4 백금 치료 사이클의 완료로부터 6개월 미만에 발생하는, 난소암 질병의 진행을 의미한다. 날짜는 백금 치료의 마지막 투여량에서 계산된다.

용어 "무백금 간격"(PFI)은 백금 기반 치료의 완료 이후 경과된 시간을 의미한다. 일반적으로, 무백금 간격이 길수록, 재치료에 대한 반응이 높아진다.

본 발명의 방법에 있어서, 용어 "홍보"는 패키지 삽입물의 형태와 같은 인쇄물을 포함하여, 어떠한 방법으로든, 특정 약물, 약물의 조합, 또는 치료 방식을 제공, 광고, 판매 또는 설명하는 것을 의미한다. 본원에서 사용함에 있어 홍보는, VEGF 길항제, 예를 들어 항VEGF 항체 또는 화학치료제와 같은 치료제의, 유방암 치료와 같은 적응증을 위한 홍보를 의미하며, 이러한 홍보는 통계적으로 유의한 치료 효과 및 대상군에서의 허용가능한 안전성과 관계되는 것으로 식약청(FDA)에 의해 인가된 것이다.

"무진행 생존"(PFS)은 치료(또는 무작위화)로부터 첫 질병 진행 또는 사망까지의 시간을 의미한다. 예를 들어 그것은 대상이, 치료의 시작 또는 첫 진단에서부터 예컨대 약 1개월, 약 2개월, 약 3개월, 약 4개월, 약 5개월, 약 6개월, 약 7개월, 약 8개월, 약 9개월, 약 1년, 약 2년, 약 3년 등과 같은 정해진 기간 동안 암의 재발없이 대상이 생존해 있는 시간이다. 본 발명의 일 측면에서, 무진행 생존은 RECIST에 의해 평가될 수 있다.

대상 "군"은, 임상 시험에서, 또는 유방암 치료와 같은 특정 적응증에 대한 FDA의 승인을 받은 후 종양전문의의 시각에서 보는 바와 같이, 암에 이환된 대상의 군을 의미한다.

"대상"은 포유동물을 의미하며, 인간 또는 소, 말, 개, 양 또는 고양이와 같은 비-인간 포유동물을 포함하되 이에 한정되지는 않는다. 바람직하게는, 대상은 인간이다. 본원에서 사용함에 있어 환자 역시 대상이 된다.

"생존"은 살아있는 대상을 의미하며, 무진행 생존(PFS) 및 전체 생존(OS)을 포함한다. 생존은 카플란-메이어(Kaplan-Meier) 방법에 의해 측정될 수 있고, 생존의 어떠한 차이는 계층화된 로그-랭크 시험을 사용하여 계산된다.

"전체 생존"(OS)은 치료의 시작 또는 첫 진단에서부터 약 1년, 약 2년, 약 3년, 약 4년, 약 5년, 약 10년 등과 같은 정해진 기간 동안 살아있는 대상을 의미한다. 본 발명의 기초가 되는 연구에서 생존 분석에 사용되는 사건은 어떠한 원인에 의하건 사망이다.

"전체 반응률" 또는 "객관적 반응률"(ORR)은 최소한의 시간동안 암의 크기(또는 혈액암의 양)의 감소를 경험하는 사람의 비율로서, ORR은 완전 및 부분 반응률의 합이다.

"생존 연장" 또는 "생존가능성의 증대"는 치료받지 않은 대상에 비해(즉, VEGF 항체로 치료받지 않은 대상에 비해), 또는 예를 들어 파클리탁셀, 토포테칸 또는 페길화된 리포솜 독소루비신과 같이 난소암의 표준적인 관리에서 사용하는 것과 같은, 화학치료제만을 사용하여 치료하는 대조군 치료 프로토콜에 비해, 치료받은 대상의 무진행 생존 및/또는 전체 생존을 증가시키는 것을 의미한다. 생존은 치료의 시작 또는 첫 진단에서부터 적어도 약 1개월, 약 2개월, 약 4개월, 약 6개월, 약 9개월, 또는 적어도 약 1년, 또는 적어도 약 2년, 또는 적어도 약 3년, 또는 적어도 약 4년, 또는 적어도 약 5년, 또는 적어도 약 10년 등의 시간동안 모니터링된다.

"위해 비"(HR)는 사건의 비율에 대한 통계적인 정의이다. 본 발명의 목적에 따라서, 위해 비는 어떠한 특정 시점에서, 실험적 시험군에서의 사건의 가능성을 대조군 암에서의 사건의 가능성으로 나눈 값을 나타내는 것으로 정의된다. 무진행 생존 분석에서의 "위해 비"는 두 무진행 생존 곡선간 차이의 요약이고, 추적 기간에 걸쳐, 대조군에 비하여 치료에 의한 사망 위험의 감소를 나타낸다.

본원에서 사용함에 있어 "치료"(및 "치료하다" 또는 "치료하는"과 같은 문법적 변형)는 치료받는 개체의 자연적 경과를 변화시키기 위해 시도되는 임상 개입을 의미하며, 예방을 위해서 또는 임상 병리의 과정에서 수행될 수 있다. 치료의 바람직한 효과에는, 질병의 발생 또는 재발의 예방, 증상의 완해, 어떠한 직접적 또는 간접적 질병의 병리적 결과의 감소, 전이의 예방, 질병 진행 비율의 감소, 질병 상태의 개선 또는 경감, 및 완화 또는 개선된 예후가 포함되나 이에 한정되지는 않는다. 일부 양태에서, 본 발명의 항체는 질병의 발전을 지연시키거나 질병의 진행을 늦추기 위해 사용된다.

용어 "가변 영역" 또는 "가변 도메인"은 항체를 항원에 결합시키는데 관여하는 중쇄 또는 경쇄 항체 도메인을 의미한다. 천연 항체의 중쇄 및 경쇄(각각 VH 및 VL)의 가변 도메인은 일반적으로 비슷한 구조를 갖는데, 각 도메인은 네 개의 보존된 프레임워크 영역(FR) 및 세 개의 초가변 영역(HVR)을 포함한다(예를 들어, [Kindt et al., Kuby Immunology, 제6판, W.H. Freeman and Co., p.91 (2007)] 참조). 단일 VH 또는 VL 도메인은 항원-결합 특이성을 부여하기에 충분할 수 있다. 또한, 특정 항원에 결합하는 항체는, 각각 상보 VL 또는 VH 도메인의 라이브러리를 스크린하기 위해, 항원에 결합하는 항체의 VH 또는 VL 도메인을 사용함으로써 단리될 수 있다(예를 들어, [Portolano et. al., J. Immunol. 150: 880-887 (1993)] 및 [Clarkson et al., Nature 352: 624-628 (1991)] 참조).

용어 "VEGF" 또는 "VEGF-A"는 [Leung et al., Science, 246: 1306 (1989)] 및 [Houck et al., Mol. Endocrin., 5: 1806 (1991)]에 기술된 바와 같이, 자연적으로 발생하는 대립유전자 및 이의 처리된 형태와 함께, 165-아미노산 인간 혈관내피 세포 성장 인자 및 관련 121-, 145-, 189- 및 206-아미노산 인간 혈관내피 세포 성장 인자를 의미하는 것으로 사용된다. VEGF-A는 VEGF-B, VEGF-C, VEGF-D, VEGF-E, VEGF-F, 및 P1GF를 포함하는 유전자 과(family)의 일부이다. VEGF-A는 주로 2개의 고 친화성 수용체 타이로신 키나제인 VEGFR-1(F1t-1), 및 VEGFR-2(F1k-1/KDR)에 결합하고, 후자는 VEGF-A의 혈관내피 세포의 분열 신호의 주요 전달자이다. 또한 뉴로필린-1은 헤파린에 결합하는, VEGF-A 동종형을 위한 수용체로 밝혀졌으며, 혈관 발달에 일정 역할을 할 수 있다. 용어 "VEGF"또는 "VEGF-A"는 또한, 쥐, 들쥐, 또는 영장류와 같이 인간이 아닌 종에서의 VEGF를 의미한다. 때때로 특정 종에서의 VEGF는, hVEGF가 인간 VEGF를, 또는 mVEGF가 쥐의 VEGF를 지시하듯, 특정 용어에 의해 지시된다. 일반적으로, VEGF는 인간 VEGF를 의미한다. 용어 "VEGF"는 또한 165-아미노산 인간 혈관내피 세포 성장 인자의 아미노산 8 내지 109 또는 1 내지 109를 포함하는 폴리펩티드의 절단된(truncated) 형태 또는 단편을 의미하기도 한다. 본원에서, 어떠한 VEGF의 형태에 대한 참조는 예를 들어 "VEGF(8-109)", "VEGF(1-109)" 또는 "VEGF165"와 같이 확인될 수 있다. "절단된" 천연 VEGF의 아미노산 위치는 천연 VEGF 서열에 따라 숫자 매겨졌다. 예를 들어, 절단된 천연 VEGF에서의 아미노산 위치 17(메티오닌)은 또한 천연 VEGF의 위치 17(메티오닌)이기도 하다. 절단된 천연 VEGF는 천연 VEGF에 비교할 만한 정도로, KDR과 F1t-1 수용체에 대해 결합 친화성을 갖는다.

"항VEGF 항체"는 충분한 친화성과 특이성을 갖고 VEGF에 결합하는 항체이다. 선택된 항체는 일반적으로 VEGF에 대한 결합 친화성을 갖는데, 예를 들어 상기 항체는 hVEGF에 100 nM 내지 1 pM의 Kd 값으로 결합할 수 있다. 항체 친화성은 예컨대 표면 플라즈몬 공명 기반 분석(예: PCT 출원공개 제WO 2005/012359호에 기술된 비아코어(BIAcore) 분석); 효소 연결 면역흡수 분석(ELISA); 및 경쟁 분석(예: RIA)에 의해 결정될 수 있다. 특정 양태에서, 본 발명의 항VEGF 항체는 VEGF 활성이 연관된 질병 또는 상태를 표적 및 개입하는데 있어 치료제로 사용될 수 있다. 또한, 상기 항체는 예를 들어 치료제로서의 효과를 평가받기 위해, 다른 생물학적 활성 분석을 거칠 수 있다. 이러한 분석은 당해 분야에 알려져 있고, 표적 항원과 항체의 의도된 사용에 의존한다. 예로는 후벡(HUVEC)의 억제 분석; 종양 세포 성장 억제 분석(예를 들어, 제WO 89/06692호에 기술된 바와 같이); 항체-의존성 세포 독성(ADCC) 및 보체-매개 세포 독성(CDC) 분석(미국 특허 제5,500,362호); 및 작용제 활성 또는 조혈 분석(제WO 95/27062호 참조)이 포함된다. 항VEGF 항체는 일반적으로 VEGF-B 또는 VEGF-C와 같은 다른 VEGF 동족체와 결합하지 않으며, P1GF, PDGF 또는 bFGF와 같은 다른 성장 인자에도 결합하지 않는다.

"VEGF 길항제"는, 하나 이상의 VEGF 수용체에의 결합을 포함한 VEGF 활성의 중화, 차단, 억제, 폐기, 감소, 또는 개입이 가능한 분자를 의미한다. VEGF 길항제에는, 항VEGF 항체 및 그의 항원-결합 단편, 및 VEGF에 특이적으로 결합하여 그의 하나 이상의 수용체에의 결합을 격리시키는 수용체 분자 및 유도체, 항VEGF 수용체 항체 및 VEGFR 타이로신 키나제의 소분자 억제제와 같은 VEGF 수용체 길항제가 포함된다.

"키메라 VEGF 수용체 단백질"은, 최소 1개는 VEGF 수용체 단백질인 최소 2개의 상이한 단백질에서 유래한 아미노산 서열을 갖는 VEGF 수용체 분자이다. 특정 양태에서, 키메라 VEGF 수용체 단백질은 VEGF와 결합하고 그 생물학적 활성을 억제할 수 있다.

키메라 및 인간화된 항체

특정 양태에서, 본원에 제공된 항체는 키메라 항체이다. 특정 키메라 항체는 예를 들어 미국 특허 제4,816,567호; [Morrison et al., Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 81: 6851-6855 (1984)]에 의해 기술되어 있다. 일 예에서, 키메라 항체는 비-인간 가변 영역(예를 들어, 쥐, 들쥐, 햄스터, 토끼, 또는 원숭이와 같은 비-인간 영장류로부터 유래한 가변 영역)과 인간 불변 영역을 포함한다. 추가 예에서, 키메라 항체는 클래스 또는 서브클래스가 모 항체의 그것에서 변환된 "클래스 전환된" 항체이다. 키메라 항체는 그의 항원-결합 단편을 포함한다.

특정 양태에서, 키메라 항체는 인간화된 항체이다. 일반적으로, 비-인간 항체는 인간에 대한 면역원성을 감소시키기 위해 인간화되며, 비-인간 모 항체의 특이성과 친화성을 유지한다. 일반적으로, 인간화된 항체는, HVR, 예를 들어 CDR(또는 그 일부)은 비-인간 항체로부터 유래하고, FR(또는 그 일부)은 인간 항체 서열로부터 유래하는, 하나 이상의 가변 도메인을 포함한다. 인간화된 항체는 또한 임의적으로 인간 불변 영역의 적어도 일부를 포함할 것이다. 일부의 양태에서, 인간화된 항체의 일부 FR 잔기는, 비-인간 항체(예를 들어, HVR 잔기가 유래하는 항체)의 상응하는 잔기로 치환되는데, 이는 예를 들어, 항체 특이성 또는 친화성을 회복시키거나 개선시키기 위한 것이다.

인간화된 항체 및 그 제조 방법은 예를 들어 [Almagro & Fransson, Front. Biosci. 13: 1619-1633 (2008)]에 기술되어 있으며, [Riechmann et al., Nature 332: 323-329 (1988)]; [Queen et al., Proc. Nat'l Acad. Sci. USA 86: 10029-10033 (1989)]; 미국 특허 제5,821,337호, 제7,527,791호, 제6,982,321호 및 제7,087,409호; [Kashmiri et al., Methods 36: 25-34 (2005)](SDR(a-CDR) 이식을 기술함); [Padlan, Mol. Immunol. 28: 489-195 (1991)](재표면화를 기술함); [Dall'Acqua et al., Methods 36: 43-60 (2005)]("FR 셔플(shuffling)"); [Osbourn et al., Methods 36: 61-68 (2005)], 및 [Klimka et al., Br. J. Cancer, 83: 252-260 (2000)](FR 셔플에 대한 "안내된 선택" 접근법을 기술함)에 더 기술되어 있다.

인간화에 사용될 수 있는 인간 프레임워크 영역은 다음을 포함하나 이에 한정되지 않는다: '최적' 방법을 사용하여 선택된 프레임워크 영역(예를 들어, [Sims et al., J. Immunol. 151: 2296 (1993)] 참조); 경쇄 또는 중쇄 가변 영역의 특정 하위군의 인간 항체 공통 서열에서 유래하는 프레임워크 영역(예를 들어, [Carter et al., Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 89: 4285 (1992)]; 및 [Presta et al., J. Immunol., 151: 2623 (1993)] 참조); (신체적으로 변이된) 인간 성숙 프레임워크 영역 또는 인간 생식 프레임워크 영역(예를 들어, [Almagro & Fransson, Front, Biosci. 13: 1619-1633 (2008)] 참조); 및 FR 라이브러리를 스크리닝하여 얻어지는 프레임워크 영역(예를 들어, [Baca et al., J. Biol. Chem. 272: 10678-10684 (1997)] 및 [Rosok et al., J. Biol. Chem. 271: 22611-22618 (1996)] 참조).

인간 항체

특정 양태에서, 본원에서 제공되는 항체는 인간 항체이다. 인간 항체는 당업계에 알려진 다양한 기술을 이용하여 생산될 수 있다. 인간 항체는 [van Dijk & van de Winkel, Curr. Opin. Pharmacol. 5: 368-74 (2001)] 및 [Lonberg, Curr. Opin. Immunol. 20: 450-459 (2008)]에 일반적으로 기술되어 있다.

인간 항체는 항원 시험에 반응하여 온전한 인간 항체 또는 인간 가변 영역을 구비한 온전한 항체를 생산할 수 있도록 조작된 유전자이식 동물에게 면역원을 투여함으로써 조제될 수 있다. 그러한 동물은 일반적으로 인간 면역글로불린 위치의 전부 또는 일부를 함유하며, 이는 내인성 면역글로불린 위치를 대체하거나 염색체외에 존재하거나 동물의 염색체에 무작위로 통합된다. 이러한 유전자이식 쥐에서는 내인성 면역글로불린 위치가 일반적으로 불활성화된다. 유전자이식 동물에게서 인간 항체를 얻는 방법을 검토하기 위해서는 [Lonberg, Nat. Biotech. 23: 1117-1125 (2005)]을 참조할 수 있다. 또한, 예를 들어, 미국 특허 제6,075,181호 및 제6,150,584호(XENOMOUSETM 기술을 서술함); 미국 특허 제5,770,429호(HUMAB(등록상표) 기술을 서술함); 미국 특허 제7,041,870호(K-M MOUSE(등록상표) 기술을 서술함), 및 미국 특허출원공개 제2007/0061900호(VELOCIMOUSE(등록상표) 기술을 서술함)를 참조할 수 있다. 이러한 동물에게서 생성되는 온전한 항체의 인간 가변 영역은 예를 들어 상이한 인간 불변 영역과 조합함으로써 더 변경될 수 있다.

인간 항체는 또한 하이브리도마 기반 방법에 의해서도 조제될 수 있다. 인간 모노클론 항체의 생산에 필요한 인간 골수종과 쥐-인간 이조골수종 세포주가 기술되어 있다(예를 들어, [Kozbor, J. Immunol., 133: 3001 (1984)], [Brodeur et al., Monoclonal Antibody Production Techniques and Applications, pp. 51-63, Marcel Dekker, Inc., New York, 1987)] 및 [Boerner et al., J. Immunol., 147: 86 (1991)] 참조). 인간 B 세포 하이브리도마 기술로 생성된 인간 항체는 또한 [Li et al., Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 103: 3557-3562 (2006)]에 기술되어 있다. 추가적 방법에는 예컨대 미국 특허 제7,189,826호(하이브리도마 세포주에서 얻어지는 모노클론 인간 IgM 항체의 생산을 서술함) 및 [Ni, Xiandai Mianyixue, 26(4): 265-268 (2006)](인간과 인간의 하이브리도마를 서술함)에 기술된 것이 있다. 인간 하이브리도마 기술(트라이오마 기술)은 [Vollmers & Brandlein, Histology and Histopathology, 20(3): 927-937 (2005)] 및 [Vollmers & Brandlein, Methods and Findings in Experimental and Clinical Pharmacology, 27(3): 185-91 (2005)]에서도 기술되어 있다.

인간 항체는 또한 인간 유래 파지 표시 라이브러리에서 선택된 Fv 클론 가변 도메인 서열을 단리함으로써 생성될 수 있다. 이러한 가변 도메인 서열은 목적 인간 불변 도메인과 결합될 수 있다. 항체 라이브러리에서 인간 항체를 선별하는 기술이 아래에 기술되어 있다.

라이브러리 유래 항체

본 발명의 항체는 목적 활성을 수행하는 항체를 찾아서 혼합 라이브러리를 스크리닝함으로써 단리될 수 있다. 예를 들어, 파지 표시 라이브러리를 생성하고 목적 결합 특성을 갖는 항체를 찾아서 상기 라이브러리를 스크리닝하는 다양한 방법이 당업계에 알려져 있다. 그러한 방법은 예를 들어, [Hoogenboom et al., Methods in Molecular Biology, 178: 1-37, ed. by O'Brien et al., Human Press, Totowa, NJ, 2001], [McCafferty et al., Nature, 348: 552-554], [Clackson et al., Nature, 352: 624-628 (1991)], [Marks et al., J. Mol. Biol., 222: 581-597 (1992)], [Marks & Bradbury, Methods in Molecular Biology, 248:161-175, ed. by Lo, Human Press, Totowa, NJ, 2003], [Sidhu et al., J. Mol. Biol., 338(2): 299-310 (2004)], [Lee et al., J. Mol. Biol., 340(5): 1073-1093 (2004)], [Fellouse, Proc. Natl. Acad. Sci. USA 101(34): 12467-12472 (2004)] 및 [Lee et al., J. Immunol. Methods, 284(1-2): 119-132 (2004)]에 기술되어 있다.

특정 파지 표시 방법에서, VH와 VL 유전자의 목록은 중합효소 연쇄 반응(PCR)에 의해 개별적으로 복제되고 파지 라이브러리에 무작위로 재결합하여, [Winter et al., Ann. Rev. Immunol., 12: 433-455 (1994)]에 기술된 바와 같이 항원-결합 파지를 찾아서 스크리닝될 수 있다. 파지는 일반적으로 단일 쇄 Fv(scFv) 단편 또는 Fab 단편 중 하나로서 항체 단편을 표시한다. 면역된 원천에서 얻어지는 라이브러리는, 하이브리도마를 구축할 필요 없이, 면역원에 대한 높은 친화성을 갖는 항체를 제공한다. 대안적으로, [Griffiths et al., EMBO J, 12: 725-734 (1993)]에 기술된 바와 같이, 일체의 면역과정 없이, 광범위한 비-자체 및 자체 항원에 대한 항체의 단일 원천을 제공하기 위해 본래의 목록이 복제될 수 있다(예를 들어, 인간에게서). 마지막으로, 본래의 라이브러리는 [Hoogenboom & Winter, J. Mol. Biol., 227: 381-388 (1992)]에 기술된 바와 같이, 줄기세포 유래의 재배열되지 않은 V-유전자 절편을 복제하고, 고도로 가변적인 CDR3 영역을 인코딩하고 시험관내에서의 재배열을 위한 무작위 서열을 함유하는 PCR 프라이머를 활용함으로써, 합성적으로 제조될 수도 있다. 인간 항체 파지 라이브러리를 기술하는 특허 공보는 예를 들어 다음을 포함한다: 미국 특허 제5,750,373호, 및 미국 특허출원공개 제2005/0079574호, 제2005/0119455호, 제05/0266000호, 제2007/0117126호, 제2007/0160598호, 제2007/0237764호, 제07/0292936호 및 제2009/0002360호.

본원에 있어서, 인간 항체 라이브러리에서 단리된 항체 또는 항체 단편은 인간 항체 또는 인간 항체 단편으로 간주된다.

항 VEGF 항체 및 길항제

VEGF항체의 생산에 사용되는 VEGF 항원은 예를 들어 VEGF₁₆₅ 분자, 및 VEGF의 동종형, 또는 목적 에피토프를 함유한 그의 단편일 수 있다. 일 양태에서, 목적 에피토프는, 하이브리도마 ATCC HB 10709에 의해 생산되는 모노클론 항VEGF 항체 A4.6.1(본원에서 정의된 "에피토프 A.4.6.1"로 알려져 있음)과 동일한 에피토프에 결합하는, 베바시주맙에 의해 인식되는 것이다. 본 발명의 항VEGF 항체를 생성하는데 유용한 VEGF의 다른 형태는 당업자에게 명백할 것이다.

인간 VEGF는, 소의 VEGF cDNA를 교배 탐침으로 사용하여 인간 세포로부터 조제된 cDNA 라이브러리를 우선 스크리닝함으로써 얻어졌다(Leung et al., (1989) Science, 246: 1306). 그렇게 확인된 한 cDNA는 소의 VEGF와 95%보다 높은 상동을 보이는 165-아미노산 단백질을 인코딩한다; 상기 165-아미노산 단백질은 일반적으로 인간 VEGF(hVEGF) 또는 VEGF₁₆₅로지칭된다. 인간 VEGF의 분열원성 활성은 포유동물 숙주 세포의 인간 VEGF cDNA를 발현시킴으로써 확인되었다. 인간 VEGF cDNA에 형질감염된 세포로 조정을 한 배지는 모세혈관 내피 세포의 증식을 촉진한 반면 대조군 세포는 그렇지 않았다(Leung et al., (1989) Science, supra). 재조합 DNA 기술을 통해 VEGF를 복제하고 발현하는 더 많은 노력이 수행되었다([Ferrara, Laboratory Investigation, 72: 615-618 (1995)] 및 여기에 인용된 문헌들 참조).

VEGF는 다양한 조직에서, 대체 RNA 스플라이싱의 결과 다수의 단독이량체 형태(단량체 당 121, 145, 165, 189, 및 206 아미노산)로 발현된다. VEGF₁₂₁은 헤파린과 결합하지 않는 가용성 미토겐이다; VEGF의 더 긴 형태는 점차적으로 더 높은 친화성으로 헤파린과 결합한다. VEGF의 헤파린 결합 형태는, 플라스민에 의해 카복시 말단에서 절개되어 VEGF의 확산가능 형태를 방출할 수 있다. 플라스민 절개 후 확인되는 카복시 말단 펩티드의 아미노산 서열은 Arg₁₁₀-Ala₁₁₁이다. 아미노 말단 '핵심' 단백질인, 단독이량체로 단리된 VEGF(1-110)는 (4.6.1 및 3.2E3.1.1이라 불리는 항체와 같은) 중화 모노클론 항체 및 VEGF 수용체의 가용성 형태와, 온전한 VEGF₁₆₅단독이량체에 비해 유사한 친화성으로 결합한다.

VEGF와 구조적으로 연관된 몇몇 분자들 역시 최근 확인되었는데, 태반 성장 인자(P1GF), VEGF-B, VEGF-C, VEGF-D 및 VEGF-E가 포함된다([Ferrara & Davis-Smyth, (1987) Endocr., Rev., supra]; [Ogawa et al., J. Biological Chem., 273: 31273-31281 (1998)]; [Meyer et al., EMBO J., 18: 363-374 (1999)]). 타이로신 키나제 수용체인 Flt-4(VEGFR-3)가 VEGF-C 및 VEGF-D의 수용체로 확인되었다(Joukov et al., EMBO. J. 15: 1751 (1996); Lee et al., Proc. Natl. Acad. Sci. USA 93: 1988-1992 (1996); Achen et al., (1998) Proc. Natl. Acad. Sci. USA 95: 548-553). VEGF-C는 림프 혈관형성을 제어하는데 관련되어 있는 것으로 나타났다(Jeltsch et al., Science 276: 1423-1425 (1997)).

두 VEGF 수용체가 확인되었는데, F1t-1(VEGFR-1이라고도 불림) 및 KDR(VEGFR-2라고도 불림)이다(Shibuya et al., (1990) Oncogene 8: 519-527; de Vires et al., (1992) Science 255: 989-991; Terman et al., (1992) Biochem. Biophys. Res. Commun. 187: 1579-1586). 뉴로필린-1은 헤파린 결합 VEGF 동종형에 결합할 수 있는 선택적 VEGF 수용체인 것으로 나타났다(Soker et al., (1998) Cell 92: 735-45).

본 발명의 방법에서 유용한 항VEGF 항체에는, 임의의 항체 또는 충분한 친화성과 특이성을 가지고 VEGF와 결합하여 VEGF의 생물학적 활성을 감소시키거나 억제할 수 있는 그의 항원-결합 단편이 포함된다. 항VEGF 항체는 보통 VEGF-B 또는 VEGF-C와 같은 다른 VEGF 동족체와 결합하지 않으며 PlGF, PDGF 또는 bFGF와 같은 다른 성장 인자와도 결합하지 않는다.

본 발명의 특정 양태에서, 항VEGF 항체는, 하이브리도마 ATCC HB 10709에 의해 생산된 모노클론 항VEGF 항체 A4.6.1과 동일한 에피토프에 결합하는 모노클론 항체; [Presta et al., (1997), Cancer Res. 57: 4593-4599]에 따라 생성된 재조합 인간화된 항VEGF 모노클론 항체를 포함하나, 이에 한정되지 않는다. 일 양태에서 항VEGF 항체는 "rhuMAb VEGF" 또는 "아바스틴(등록상표)"으로도 알려져 있는 "베바시주맙(BV)"이다. 이는 돌연변이된 인간 IgG1 프레임워크 영역, 및 인간 VEGF가 그 수용체에 결합하는 것을 방해하는 쥐의 항hVEGF 모노클론 항체 A.4.6.1로부터의 항원-결합 상보성 결정 영역을 포함한다. 대부분의 프레임워크 영역을 포함하여 베바시주맙의 아미노산 서열의 약 93%가 인간 IgG1에서 유래하며, 서열의 약 7%가 쥐의 항체 A4.6.1에서 유래한다.

베바시주맙(아바스틴(등록상표))은 FDA가 승인한 최초의 혈관형성 억제 치료이며 전이성 결장직장암(정맥내로 주입되는 5-FU 기반 화학치료와 병행되는 1차 및 2차 치료), 진행된 비-편평, 비-소형 세포 폐암(NSCLC)(카보플라틴 및 파클리탁셀과 조합하여, 절제가 불가하고, 국소적으로 진행하며, 재발성 또는 전이성 NSCLC의 1차 치료), 및 전이성 HER2-음성 유방암(파클리탁셀과 조합하여, 이전에 치료하지 않은 전이성 HER2-음성 유방암)의 치료에 승인되었다.

베바시주맙과 다른 인간화된 항VEGF 항체는 2005년 2월 26일 허여된 미국 특허 제6,884,879호에 더 자세히 기술되어 있다. 추가적 항체로는 PCT 공개 제WO 2005/012359호 및 제WO 2005/044853호, 및 미국 특허출원 제60/991,302호에 기술된 바와 같은 G6 또는 B20 시리즈 항체(예를 들어 G6-31, B20-4.1)가 포함되며, 이러한 특허 출원의 내용은 본원에 참고로 명백히 혼입된다. 추가적 항체는, 미국 특허 제7,060,269호, 제6,582,959호, 제6,703,020호, 제6,054,297호; 제WO 98/45332호; 제WO 96/30046호; 제WO 94/10202호; EP 제0666868B1호; 미국 특허출원공개 제2006009360호, 제20050186208호, 제20030206899호, 제20030190317호, 제030203409호 및 제20050112126호; 및 [Popkov et al., Journal of Immunological Methods, 288: 149-164 (2004)]을 참조할 수 있다. 다른 항체에는 잔기 F17, M18, D19, Y21, Y25, Q89, I191, K101, E103, 및 C104 또는, 대안적으로, 잔기 F17, Y21, Q22, Y25, D63, I83 및 Q89를 포함하는 인간 VEGF의 기능적 에피토프에 결합하는 항체가 포함된다.

본 발명의 일 양태에서, 항VEGF 항체는 하기 서열번호 1의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 영역 및 하기 서열번호 2의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 영역을 구비한다:

DIQMTQSPSS LSASVGDRVT ITCSASQDIS NYLNWYQQKP GKAPKVLIYF TSSLHSGVPS RFSGSGSGTD FTLTISSLQP EDFATYYCQQ YSTVPWTFGQ GTKVEIKR(서열번호 1);

EVQLVESGGG LVQPGGSLRL SCAASGYTFT NYGMNWVRQA PGKGLEWVGW INTYTGEPTY AADFKRRFTF SLDTSKSTAY LQMNSLRAED TAVYYCAKYP HYYGSSHWYF DVWGQGTLVT VSS(서열번호 2).

본 발명에 따른 "G6 시리즈 항체"는, 그 전체 개시가 본원에 참고로 명백히 혼입된 PCT 공개 제WO 2005/012359호의 도 7, 24-26, 및 34-35 중 어느 하나에 따른 G6 항체 또는 G6 유래 항체의 서열에서 유래한 항VEGF 항체이다. 또한 그 전체 개시가 본원에 참고로 명백히 혼입된 PCT 공개 제WO 2005/044853호를 참조할 수 있다. 일 양태에서 G6 시리즈 항체는 잔기 F17, Y21, Q22, Y25, D63, I83 및 Q89를 포함하는 인간 VEGF의 기능적 에피토프에 결합한다.

본 발명에 따른 "B20 시리즈 항체"는, 그 전체 개시가 본원에 참고로 명백히 혼입된 PCT 공개 제WO 2005/012359호의 도 27-29 중 어느 하나에 따른 B20 항체 또는 B20 유래 항체의 서열에서 유래한 항VEGF 항체이다. 또한 그 전체 개시가 본원에 참고로 명백히 혼입된 PCT 공개 제WO 2005/044853호, 및 미국 특허출원 제60/991,302호를 참조할 수 있다. 일 양태에서, B20 시리즈 항체는 잔기 F17, M18, D19, Y21, Y25, Q89, I91, K101, E103, 및 C104를 포함한 인간 VEGF의 기능적 에피토프에 결합한다.

본 발명에 따르면 "기능적 에피토프"는 항체의 결합에 활동적으로 기여하는 항원의 아미노산 잔기를 의미한다. 활동적으로 기여하는 항원 잔기의 임의의 돌연변이(예를 들어, 알라닌에 의한 야생형 VEGF의 돌연변이 또는 상동 돌연변이)는 항체의 상대적 친화성 비(IC50 돌연변이 VEGF/IC50 야생형 VEGF)가 5보다 크도록 항체의 결합을 방해하게 된다(제WO 2005/012359호의 실시예 2 참조). 일 양태에서, 상대적 친화성 비는, 용액 결합 파지 표시 ELISA에 의해 결정된다. 간략히 기술하면, 96-웰 막시솝(Maxisorp) 면역플레이트(NUNC)를 PBS 2 μg/ml의 농도에서, 시험하고자 하는 항체의 Fab 형태로, 4℃에서 밤새 코팅하고, 실온에서 2시간 동안 PBS, 0.5% BSA, 및 0.05% 트윈20(PBT)으로 차단한다. 알라닌 포인트 돌연변이(잔기 8-109 형태) 또는 야생형 hVEGF(8-109)를 표시하는 파지의 PBT 계열 희석물을, 먼저 실온에서 15분 동안 Fab로 코팅된 판에서 배양하고, PBS, 0.05% 트윈20(PBST)으로 세척한다. 결합된 파지를 PBT에서 1:5000으로 희석된 항-M13 모노클론 항체 서양고추냉이 과산화효소(horseradish peroxidase)(아머샴 파마시아(Amersham Pharmacia)) 접합물로 검출하고, 약 5분 동안 3,3',5,5'-테트라메틸벤지딘(TMB, 미국 메릴랜드주 게이더스버그 소재 커크가드 앤 페리 랩스(Kirkegaard & Perry Labs)) 기질로 현상하며, 1.0 M H₃PO₄로 급랭하고, 450 nm에서 분광분석법으로 판독한다. IC50 값의 비(IC50,ala/IC50,wt)는 결합 친화성(상대적 결합 친화성) 감소를 배수로 나타낸 것이다.

VEGF 수용체 분자

가장 잘 특징지어진 2개의 VEGF 수용체는 VEGFR1(F1t-1이라고도 알려짐) 및 VEGFR2(쥐의 상동 물질에서는 KDR 및 FLK-1이라고도 알려짐)이다. 각각의 VEGF 과 구성원에 대한 각각의 수용체의 특이성은 다양하나 VEGF-A는 Flt-1 및 KDR 모두에 결합한다. Flt-1 및 KDR 모두 수용체 타이로신 키나제(RTK)의 과에 속한다. RTK는 다양한 생물학적 활성을 갖는 막 관통 수용체의 큰 과를 포함한다. 최소 19개의 다른 RTK 아과가 확인되었다. 수용체 타이로신 키나제(RTK) 과는 다양한 세포 유형의 성장과 분화에 핵심적인 수용체를 포함한다([Yarden & Ulrich, (1988) Ann. Rev. Biochem., 57: 433-478] 및 [Ulrich & Schlessinger, (1990) Cell 61: 243-254]). RTK의 내재성 기능은 리간드 결합에 의해서 활성화되는데, 이는 수용체와 다수의 세포 기질의 인산화 및 뒤이은 다양한 세포 반응을 초래한다([Ulrich & Schlessinger (1990) Cell 61: 203-212]). 그러므로, 수용체 타이로신 키나제 매개 신호 전달은 특정 성장 인자(리간드)와의 세포외 상호작용으로 인해 시작되며, 일반적으로 수용체 이합체화, 내재성 단백질 타이로신 키나제 활성의 자극 및 수용체의 인산전이반응이 그 뒤를 잇는다. 그 결과 세포내 신호 전달 분자를 위한 결합 부위가 만들어지며 이는 적절한 세포 반응을 촉진시키는 세포질 신호 전달 분자의 스펙트럼을 갖는 복합체의 형성을 유도한다(예를 들어, 세포 분열, 분화, 대사성 효과, 세포외 마이크로 환경에서 일어나는 변화; [Schlessinger & Ulrich (1992) Neuron 9: 1-20] 참조). 구조적으로는 F1t-1과 KDR 모두, 세포외 도메인에서 7개의 면역글로불린-유사 도메인, 하나의 막 관통 영역, 및 키나제 삽입 도메인에 의해 중단되는 공통 타이로신 키나제 서열을 갖는다([Matthews et al., (1991) Proc. Natl. Acad. Sci. USA 88: 9026-9030] 및 [Terman et al., (1991) Oncogene 6: 1677-1683]). 세포외 도메인은 VEGF와의 결합에 연관되며, 세포내 도메인은 신호 전달에 연관된다.

VEGF에 특이적으로 결합하는 VEGF 수용체 분자 또는 그의 단편은, VEGF 단백질에 결합하고 이를 격리시켜서 그것이 신호 전달을 하지 못하게 방해하도록 본 발명의 방법에서 사용될 수 있다. 특정 양태에서, VEGF 수용체 분자, 또는 그의 VEGF 결합 단편은, sF1t-1과 같은 가용성 형태이다. 수용체의 가용성 형태는 VEGF와의 결합을 통해 VEGF 단백질의 생물학적 활성에 억제 효과를 가져오며, 그 결과 표적 세포의 표면에 존재하는 자연 수용체에의 결합을 막는다. 또한 VEGF 수용체 융합 단백질도 포함되는데, 이에 대한 예는 아래에 기술된다.

키메라 VEGF 수용체 단백질은, 적어도 2개의 상이한 단백질에서 유래한 아미노산 서열을 갖는 수용체 분자이며, 상기 단백질 중 적어도 하나가 VEGF 수용체 단백질(예를 들어 f1t-1 또는 KDR 수용체)인데, 이는 VEGF에 결합하고 그 생물학적 활성을 억제할 수 있다. 특정 양태에서 본 발명의 키메라 VEGF 수용체 단백질은 단지 2개의 상이한 VEGF 수용체 분자에서 유래한 아미노산 서열로 구성된다; 그러나, f1t-1 및/또는 KDR 수용체의 세포외 리간드 결합 영역에서의 하나, 둘, 셋, 넷, 다섯, 여섯, 또는 일곱 개 모두의 Ig 유사 도메인을 포함한 아미노산 서열은, 예를 들어 면역글로불린 서열처럼 다른 관련되지 않은 단백질의 아미노산 서열에 연결될 수 있다. Ig 유사 도메인과 조합되는 다른 아미노산 서열은 당업자에게 명백할 것이다. 키메라 VEGF 수용체 단백질의 예로는 예를 들어, 가용성 F1t-1/Fc, KDR/Fc, 또는 F1t-1/KDR/Fc(VEGF Trap이라고도 알려져 있음)이 포함된다(예컨대 PCT 공개 제WO 97/44453호 참조).

본 발명의 가용성 VEGF 수용체 단백질 또는 키메라 VEGF 수용체 단백질은, 막 관통 도메인을 통해 세포의 표면에 고정되지 않은 VEGF 수용체 단백질을 포함한다. 즉, 키메라 수용체 단백질을 포함하는, VEGF 수용체의 가용 형태는, VEGF에 결합하여 이를 불활성화시킬 수 있으면서도, 막 관통 영역을 포함하지 않아서, 일반적으로 당해 분자가 발현되는 세포의 세포막과 연관되어 있지 않다.

치료적 용도 및 조성물

본 발명은 종양의 성장을 지원하기 위한 영양분의 제공에 필요한 종양 혈관의 발달을 억제하고자 하는 신규 암 치료 전략인 항혈관신생 치료를 포함한다. 혈관신생은 원발성 종양 성장 및 전이 둘 모두에 관련되어 있기 때문에, 본 발명에 의해 제공되는 항혈관신생 치료는 원발 부위에서의 종양의 신생물 성장을 억제할 뿐만 아니라 이차 부위에서의 전이를 예방할 수 있으며, 따라서 다른 치료에 의해 종양을 공격할 수 있게 한다.

구체적으로, 본원에서는 대상에게 유효량의 화학치료제 및 항VEGF 항체를 조합하는 치료요법을 투여하는 것을 포함하는, 백금 저항성 난소암으로 진단된 대상의 치료 방법이 제공된다. 또한, 대상은 난소암에 대한 이전의 치료에 내성이지 않고, 이전에 받은 항암요법은 2개 이하였다. 화학치료와 항VEGF 항체의 투여를 조합한 상기 치료요법은 대상의 무진행 생존을 연장시킨다.

조합 치료

본 발명은, 항VEGF 항체 및 하나 이상의 추가 항암요법의 조합의 용도 또는 조성물을 제공한다. 항암 치료의 예는 수술, 방사선치료, 생물치료, 면역치료, 화학치료, 또는 이러한 치료의 조합을 포함하나, 이에 제한되지는 않는다. 또한, 세포독성제, 항혈관신생제 및 항증식제는 항VEGF 항체와 조합하여 사용될 수 있다.

임의의 방법 및 용도의 특정 측면에서, 본 발명은 난소암으로 진단된 대상에게 유효량의 항VEGF 항체 및 화학치료제를 투여함으로써, 유방암의 치료를 제공한다. 다양한 화학치료제가 본 발명의 조합 치료 방법 및 용도에 활용될 수 있다. 고려되는 화학치료제의 예시적이고 비제한적인 목록은 본원의 "정의" 항목에 제공되거나 본원에 기술되어 있다. 일 양태에서, 화학치료제는 파클리탁셀이다. 또 다른 양태에서, 화학치료제는 토포테칸이다. 또 다른 양태에서, 화학치료제는 페길화된 리포솜 독소루비신이다.

일 예에서, 상술한 조합 치료는 개별 제형 또는 단일 약학 제형을 사용하는 동시 투여, 및 어떠한 순서이건, 바람직하게는 2개의(또는 모든) 활성 제제가 한 시점에서 그들의 생물학적 활성을 동시에 발휘할 수 있는, 순차 투여를 포함한다. 그러한 화학치료제의 조제 및 투약 일정은 제조사의 지침에 따라, 또는 숙련된 의사의 경험적 결정에 따라 사용될 수 있다. 화학치료제의 조제 및 투약 일정은 또한 [Chemotherapy Service Ed., M. C. Perry, Williams & Wilkins, Baltimore, Md. (1992)]에 기술되어 있다. 화학치료제는 항VEGF 항체의 투여에 앞서거나 뒤따르거나, 또는 동시에 투여될 수 있다.

임의의 방법 및 용도의 특정 측면에서, 본 발명의 항체와 함께 종양의 조합 치료에 유용한 다른 치료제로는 EGFR, ErbB3, ErbB4, 또는 TNF와 같이 종양의 성장에 관련된 다른 인자의 길항제를 포함한다. 때로, 대상에게 하나 이상의 사이토카인을 투여하는 것이 유익할 수 있다. 일 양태에서, VEGF 항체는 성장 억제제와 함께 투여된다. 예를 들어, 성장 억제제가 우선 투여되고, VEGF 항체가 뒤이어 투여될 수 있다. 그러나, 동시 투여 또는 VEGF 항체의 우선 투여도 고려된다. 성장 억제제의 적정 용량은 현재 사용되는 것에 준하지만, 성장 억제제 및 항VEGF 항체의 조합 작용(상승효과)으로 인하여 감소될 수도 있다.

본원의 상기 제형은 또한 치료되고 있는 특정 적응증에 필요한 하나 보다 많은 활성 화합물을 함유할 수 있고, 바람직하게는 서로에게 악영향을 미치지 않는 보완적인 활성을 갖는다. 예를 들어, 상기 중 일 제형에, EGFR, VEGF(예를 들어 VEGF의 상이한 에피토프 또는 동일한 에피토프에 결합), VEGFR, 또는 ErbB2(예를 들어 허셉틴(Herceptin, 등록상표))에 결합하는 항체를 더 제공하는 것이 바람직할 수 있다. 대안적으로 또는 부가적으로, 상기 조성물은 화학치료제, 또는 세포독성제를 포함할 수 있다. 이러한 분자들은 의도된 목적에 효과적인 양으로 조합되어 적절하게 존재한다.

임의의 방법 및 용도의 특정 측면에서, 본 발명의 항체와의 조합 암 치료에 유용한 다른 치료제에는 다른 항혈관신생제가 포함된다. 많은 항혈관신생제가 확인되었고, 당업계에서도 알려져 있으며, [Cameliet & Jain (2000)]에 의해 나열된 것들을 포함한다. 일 양태에서, 본 발명의 항VEGF 항체는, VEGF 변이체, 가용성 VEGF 수용체 단편, VEGF 또는 VEGFR을 차단할 수 있는 앱타머, 항VEGFR 중화 항체, VEGFR 타이로신 키나제의 저분자량 억제제, 및 이들의 임의의 조합과 같은, 다른 VEGF 길항제 또는 VEGF 수용체 길항제와 조합하여 사용된다. 대안적으로 또는 부가적으로, 둘 이상의 항VEGF 항체는 대상에게 함께 투여될 수 있다.

질병의 예방 또는 치료에 있어, VEGF-특이성 길항제의 적절한 용량은, 상기 정의된 바와 같은 치료하는 질병의 유형, 질병의 중증도 및 경과, VEGF-특이성 길항제가 예방 또는 치료적 목적에 의해 투여되는지 여부, 이전의 치료, 대상의 병력과 VEGF-특이성 길항제에 대한 반응, 및 담당 의사의 판단에 좌우된다. VEGF-특이성 길항제는 대상에게 한 번에 또는 일련의 치료과정에 걸쳐, 적절히 투여된다. 조합 치료요법에서, VEGF-특이성 길항제와 본 발명의 하나 이상의 항암 치료제가 치료적으로 유효한 또는 상승적인 양으로 투여된다. 본원에서 사용되는 바와 같이, 치료적으로 유효한 양은 VEGF-특이성 길항제와 하나 이상의 다른 치료제와 함께 투여, 또는 본 발명의 조성물의 투여로, 전술한 바와 같이 암의 감소 또는 억제를 초래하는 양이다. 치료적으로 상승적인 양은 특정 질병에 연관된 상태 또는 증상을 상승적으로 또는 현저하게 감소 또는 제거하는데 필요한 VEGF-특이성 길항제와 하나 이상의 다른 치료제의 양이다.

VEGF-특이성 길항제 및 하나 이상의 다른 치료제는 종양, 휴면종양 또는 미세전이의 발생 또는 재발을 감소 또는 제거하기에 충분한 양과 시간으로 동시 또는 순차 투여될 수 있다. VEGF-특이성 길항제 및 하나 이상의 다른 치료제는 종양 재발의 가능성을 방지하거나 감소하기 위한 유지요법으로서 투여될 수 있다.

당업자라면 이해할 수 있는 바와 같이, 화학치료제 또는 다른 항암제의 적절한 용량은 일반적으로, 예를 들어 화학치료제가 단독으로 또는 다른 화학치료제와 조합하여 투여되는, 임상 치료에 이미 사용된 용량과 유사하다. 용량의 변동은 치료를 받고 있는 상태에 따라 발생할 가능성이 있다. 치료를 투여하는 의사는 개별 대상에게 적절한 용량을 결정할 수 있을 것이다.

상기 치료요법에 덧붙여, 대상은 방사선 치료를 받을 수 있다.

임의의 방법, 용도 및 조성물의 특정 양태에서, 투여된 VEGF 항체는 온전한, 순수 항체이다. 그러나, VEGF 항체는 세포독성제와 접합될 수 있다. 임의의 방법 및 용도의 특정 양태에서, 접합된 항체 및/또는 그것이 결합하는 항원은 세포에 의해 내면화되며, 그 결과, 접합물이 결합하는 암 세포를 죽이는데 있어 증가된 치료 효능을 초래한다. 일 양태에서, 세포독성제는 암 세포의 핵산을 표적하거나 방해한다. 이러한 세포독성제의 예로는 메이탄시노이드, 칼리케아마이신, 리보뉴클레아제 및 DNA 엔도뉴클레아제가 포함된다.

본 발명은 또한 화학치료, 및 하나 이상의 다른 치료제와 조합한 항VEGF 항체 치료를 받도록 하는 지시를 제공함으로써 백금 저항성 난소암을 가진 인간 대상 또는 건강 관리 제공자에게 지시하는 방법을 제공하며, 이는 무진행 생존 기간을 증가시키거나, 대상의 암 재발 위험을 감소시키거나, 대상의 생존가능성을 증대시키기 위함이다. 일부 양태에서, 상기 방법은 적어도 하나의 화학치료제 치료를 받도록 하는 지시를 제공하는 것을 포함한다. 항VEGF 항체 치료는 화학치료제와 동시에 또는 순차적으로 시행될 수 있다. 특정 양태에서, 대상은 지시 방법에 의해 지시된 대로 치료받는다. 항VEGF 항체를 화학치료와 함께 또는 화학치료 없이 투여하는 백금 저항성 난소암의 치료는 암의 재발 또는 사망시까지 계속될 수 있다.

본 발명은 또한 인간 대상의 백금 저항성 난소암의 치료를 위한, 항VEGF 항체와 하나 이상의 다른 치료제의 투여를 홍보하는 것을 포함하는 홍보 방법을 제공한다. 일부 양태에서 상기 방법은 적어도 하나의 화학치료제의 투여를 홍보하는 것을 더 포함한다. 항VEGF 항체의 투여는 화학치료제와 병행 투여 또는 순차 투여될 수 있다. 홍보는 가능한 어떠한 수단에 의해서도 수행될 수 있다. 일부 양태에서, 상기 홍보는 항VEGF 항체의 상업적 제형에 동반되는 패키지 삽입물에 의한다. 상기 홍보는 또한 화학치료제의 상업적 제형에 동반되는 패키지 삽입물에 의할 수 있다. 홍보는 의사 또는 건강 관리 제공자에의 인쇄물 또는 구두 의사소통에 의할 수 있다. 일부 양태에서, 홍보는 하나 이상의 다른 치료제와 조합된 항VEGF 항체를 이용한 백금 저항성 난소암 치료를 받도록 하는 지시를 제공하는 삽입물에 의한다. 추가 양태에서, 삽입물은 아래 실시예 1의 결과의 일부 또는 전부를 포함한다. 일부 양태에서, 상기 홍보는 화학치료제와 항VEGF 항체를 사용하는, 대상의 치료로 이어진다.

본 발명은 대상의 무진행 생존 기간을 증가시키거나, 대상의 암 재발 위험을 감소시키거나, 대상의 생존가능성을 증대시키기 위한, 인간 대상의 백금 저항성 난소암의 치료에 사용되는 하나 이상의 다른 치료제와 조합한 항VEGF 항체의 마케팅을 포함하는 비즈니스 방법을 제공한다. 일부 양태에서, 상기 방법은 항VEGF 항체와 조합하여 사용하기 위한 화학치료제의 마케팅을 포함한다. 일부 양태에서, 상기 마케팅은 화학치료제와 항VEGF 항체를 사용하는, 대상의 치료로 이어진다.

또한, 본 발명은 대상의 무진행 생존 기간을 증가시키거나, 대상의 암 재발 위험을 감소시키거나, 대상의 생존가능성을 증대시키기 위한, 인간 대상의 난소암, 특히 백금 저항성 난소암의 치료를 위한 항VEGF 항체와 조합한 화학치료제의 마케팅을 포함하는 비즈니스 방법을 제공한다. 일부 양태에서, 마케팅은 화학치료제와 항VEGF 항체의 조합에 의한 대상의 치료로 이어진다.

용량 및 기간

본 발명은, 양호한 의료실무에 부합하는 방식으로 제형화, 용량결정 및 투여된다. 이러한 맥락에서 고려되어야 할 인자에는, 치료하는 특정 장애, 치료를 받는 특정 대상, 개별 대상의 임상 상태, 장애의 원인, 제제의 전달 부위, 투여의 방법, 투여의 일정, 및 의료 실무자들에게 알려진 다른 인자들이 포함된다. 본 발명에서 투여되는 "치료 유효량"에는 그러한 고려사항이 적용될 것이며, 암을 예방, 개선, 또는 치료, 또는 안정화하기 위해; 진행까지의 시간(무진행 생존 기간)을 증가시키기 위해; 또는 종양, 휴면종양 또는 미세전이의 발생 또는 재발을 치료하거나 예방하는데 필요한 최소한의 양이다. VEGF-특이성 길항제는 임의적으로, 암 또는 암의 발생 위험을 예방 또는 치료하기 위해 현재 사용되는 하나 이상의 제제와 함께 제형화될 수 있으나, 반드시 그럴 필요는 없다. 이러한 다른 제제의 유효량은 제형에 존재하는 VEGF-특이성 길항제의 양, 장애 또는 치료의 유형, 및 위에서 논의된 다른 인자들에 의해 결정된다. 이들은 일반적으로, 전술된 바와 같은 용량 및 투여 경로로, 또는 지금까지 사용된 용량의 약 1 내지 99% 용량으로 사용된다.

질병의 유형 및 중증도에 따라, 대상에게 투여하기 위한 초기 후보 용량으로서 항VEGF 항체 약 1 μg/kg 내지 100 ㎎/kg(예를 들어, 0.1 내지 20 ㎎/kg)을, 예를 들어 하나 이상의 개별 투여, 또는 연속 주입에 의해 투여된다. 일 양태에서, 바람직한 용량은, 예를 들어, 6 ㎎/kg, 8 ㎎/kg, 10 ㎎/kg, 및 15 ㎎/kg을 포함한다. 수 일 이상에 걸친 반복된 투여 또는 사이클에 대해서는, 상태에 따라, 상술한 또는 당해 분야에 알려진 방법에 의해 암이 치료된 것으로 판단될 때까지 치료가 유지된다. 그러나, 다른 투여 양생법이 유용할 수 있다. 일 예에서, 항VEGF 항체는 매주, 매 2주 또는 매 3주 1회씩, 6 ㎎/kg, 8 ㎎/kg, 10 ㎎/kg, 또는 15 ㎎/kg을 포함하나 이에 한정되지는 않는, 약 6 ㎎/kg 내지 약 15 ㎎/kg의 투여량 범위로 투여된다. 본 발명의 치료의 진행은 통상적인 기술 및 분석에 의해 쉽게 모니터링된다. 다른 양태에서, 이러한 투여 양생법은 백금 저항성 난소암의 화학치료요법과 병용된다. 적정 용량에 대한 더 자세한 정보는 아래의 실시예 1에 제공된다.

치료의 기간은 의학적인 적응증에 해당되는 한, 또는 목적 치료 효과(예를 들어, 본원에 기술된 것)가 달성될 때까지 계속된다. 특정 양태에서, 상기 치료는 1개월, 2개월, 4개월, 6개월, 8개월, 10개월, 1년, 2년, 3년, 4년, 5년, 또는 대상의 수명까지 계속된다.

본 발명의 VEGF-특이성 길항제는 대상, 예를 들어 인간 대상에게 투여되는데, 볼루스 또는 일정 시간에 걸친 연속 주입에 의한 정맥내 투여, 근육내, 복막내, 뇌척수내, 피하, 관절내, 활막내, 척수강내, 구강, 국소, 또는 흡입 경로와 같이 알려진 방법에 의해 투여된다. VEGF 길항제와 연관된 광범위한 부작용이나 독성이 있는 경우에는 국소 투여가 특히 바람직하다. 생체외 전략 역시 치료적 응용에 사용될 수 있다. 생체외 전략은 VEGF 길항제를 인코딩하는 폴리뉴클레오티드를 사용하여, 대상에게서 얻은 세포를 형질전환 또는 형질도입하는 것을 포함한다. 형질전환 또는 형질도입된 세포는 대상에게 복귀시킨다. 상기 세포는 조혈 세포(예를 들어, 골수 세포, 대식 세포, 단핵 세포, 수지상 세포, T 세포 또는 B 세포), 섬유아 세포, 상피 세포, 내피 세포, 각질 세포, 또는 근육 세포를 제한 없이 포함하는 넓은 범위의 유형 중 어떠한 것일 수 있다.

예를 들어, VEGF-특이성 길항제가 항체인 경우, 항체는 비경구, 피하, 복막내, 폐내 및 비강내, 및 국소 면역 억제 치료를 위해 바람직할 경우, 병소내 투여를 포함하는 임의의 적정 수단에 의해서 투여될 수 있다. 비경구 주입은 근육내, 정맥내, 동맥내, 복막내 또는 피하 투여를 포함한다. 또한, 상기 항체는 펄스 주입에 의해 적절히 투여되며, 특히 항체의 용량을 점감하면서 투여된다. 상기 용량은 바람직하게는 주사, 가장 바람직하게는 정맥내 주사 또는 피하 주사에 의해 투여되는데, 이는 투여가 단기적인지 만성적인지 여부에 의해 어느 정도 좌우된다.

다른 예에서, VEGF 항체는 장애 또는 종양의 위치가 허용한다면, 예를 들어 직접 주사에 의해 국소적으로 투여되며, 상기 주사는 주기적으로 반복될 수 있다. VEGF 항체는 또한 예를 들어 휴면종양 또는 미세전이의 국소적인 재발 또는 전이를 예방 또는 감소시키기 위하여, 대상에 전신적으로 전달되거나 종양 세포, 예를 들어, 종양 또는 종양의 수술 절제 후 종양 베드(bed)에 직접적으로 전달될 수 있다.

약학적 제형

본 발명에 따라 사용되는 본원에 기술된 항체의 치료 제형은, 목적 정도의 순도를 갖는 항체를, 임의적인 약학적으로 허용가능한 담체, 부형제 또는 안정화제(Remington's Pharmaceutical Sciences, 제16판, Osol A. Ed. (1980))와 혼합함으로써, 동결 건조된 제형 또는 수용액의 형태로, 저장을 위해 준비된다. 허용가능한 담체, 부형제 또는 안정화제는 사용되는 용량 및 농도에서 피투여자에게 무독성이며, 포스페이트, 시트레이트 및 다른 유기산과 같은 완충제; 아스코르브산 및 메티오닌을 포함하는 산화방지제; (옥타데실디메틸벤질 암모늄 클로라이드; 헥사메토늄 클로라이드; 벤잘코늄 클로라이드, 벤제토늄 클로라이드; 페놀, 부틸 또는 벤질 알콜; 알킬 파라벤, 예컨대 메틸 또는 프로필 파라벤; 카테콜; 레조르시놀; 사이클로헥산올; 3-펜탄올; 및 m-크레졸과 같은) 방부제; 저분자량(약 10 잔기 미만의) 폴리펩티드; 혈청 알부민, 젤라틴, 또는 면역글로불린과 같은 단백질; 폴리비닐피롤리돈과 같은 친수성 중합체; 글라이신, 글루타민, 아스파라긴, 히스티딘, 아르기닌 또는 라이신과 같은 아미노산; 단당류, 이당류, 및 글루코스, 만노스 또는 덱스트린을 포함하는 다른 탄수화물; EDTA와 같은 킬레이트제; 수크로스, 만니톨, 트레할로스 또는 소르비톨과 같은 당류; 나트륨과 같은 염-형성 반대-이온; 금속 착물(예를 들어 Zn-단백질 착물); 및/또는 트윈(TWEEN, 상표), 플루로닉스(PLURONICS, 상표) 또는 폴리에틸렌 글리콜(PEG)과 같은 비이온 계면 활성제를 포함한다. 동결건조된 항VEGF 항체 제형은 명백히 본원에 참고로 인용되는 제WO 97/04801호에 기술되어 있다.

임의적으로 그러나 바람직하게는, 제형은 약학적으로 허용가능한 염, 일반적으로, 예를 들어, 염화 나트륨을, 또한 바람직하게는 대략 생리적인 농도로 포함한다. 임의적으로, 본 발명의 제형은 약학적으로 허용가능한 방부제를 포함할 수 있다. 일부 양태에서, 방부제의 농도 범위는 0.1 내지 2.0%이고, 일반적으로는 v/v이다. 적합한 방부제는 약학 분야에 알려진 것들을 포함한다. 벤질 알코올, 페놀, m-크레졸, 메틸파라벤, 및 프로필파라벤이 방부제의 예이다. 임의적으로, 본 발명의 제형은 0.005 내지 0.02% 농도의 약학적으로 허용가능한 계면활성제를 포함할 수 있다.

일반적으로, 베바시주맙은 4 ml 또는 16 ml의 베바시주맙(25 mg/ml)을 전달하기 위한, 100 mg 및 400 mg의 방부제가 없는 일회용 바이알에 치료적 사용을 위해 제공된다. 100 mg 제품은 240 mg α,α-트레할로스 탈수물, 23.2 mg 인산 나트륨(일염기, 일수화물), 4.8 mg 인산 나트륨(이염기, 무수물), 1.6 mg 폴리소르베이트 20 및 주사용수(Water for Injection, USP)에 조성된다. 400 mg 제품은 960 mg α,α-트레할로스 탈수물, 92.8 mg 인산 나트륨(일염기, 일수화물), 19.2 mg 인산 나트륨(이염기, 무수물), 6.4 mg 폴리소르베이트 20 및 주사용수(Water for Injection, USP)에 조성된다. 또한 베바시주맙의 라벨을 참조할 수 있다.

본원에서 제형은 또한 치료를 하는 특정 적응증을 위해 필요한 하나보다 많은 활성 화합물, 바람직하게는 서로에게 악영향을 미치지 않는 보완적인 활동을 하는 것을 포함할 수 있다. 예를 들어, 하나의 제형에, VEGF에 결합하는 항체(예를 들어 VEGF의 상이한 에피토프에 결합하는 항체), VEGFR을 추가로 제공하는 것이 바람직할 수 있다. 대안적으로 또는 부가적으로, 상기 조성물은 세포독성제, 사이토카인, 성장 억제제 및/또는 VEGFR 길항제를 포함할 수 있다. 이러한 분자들은 의도된 목적에 효과적인 양으로 조합하여 적절히 존재한다.

활성 성분은 또한 예를 들어, 코아서베이션(coacervation) 기술 또는 계면간 중합반응에 의해 조제된 마이크로캡슐, 예를 들어, 하이드록시메틸셀룰로오스 또는 젤라틴-마이크로캡슐 및 폴리-(메틸메타실레이트) 마이크로캡슐에 각각 포획될 수 있으며, 교질의 약물 전달 시스템(예를 들어, 리포좀, 알부민 마이크로스피어, 마이크로에멀젼, 나노 입자 및 나노 캡슐), 또는 마크로에멀젼에 포획될 수 있다. 이러한 기술은 [Remington's Pharmaceutical Sciences, 제16판, Osol A. Ed. (1980)]에 개시되어 있다.

서방성 제제가 제조될 수 있다. 서방성 제제의 적합한 예로는 항체를 함유한 고형 혐수성 중합체의 반투과성 매트릭스가 포함되며, 상기 매트릭스는, 예를 들어 필름 또는 마이크로캡슐과 같이, 모양을 갖춘 물품의 형태를 가지고 있다. 서방성 매트릭스의 예로는 폴리에스테르, 하이드로겔(예를 들어, 폴리(2-하이드록시에틸-메타크릴레이트), 또는 폴리(비닐알코올)), 폴리락티드(미국 특허 제3,773,919호), L-글루타민산 및 에틸-L-글루타메이트의 공중합체, 분해되지 않는 에틸렌-비닐 아세테이트, 루프론 데포(LUPRON DEPOT, 상표)(락트산-글리콜산 공중합체 및 류프롤리드 아세테이트로 구성되는 주사가능한 마이크로스피어)와 같은 분해될 수 있는 락트산-글리콜산 공중합체 및 폴리-D-(-)-3-하이드록시뷰티르산이 포함된다. 에틸렌-비닐 아세테이트와 락트산-글리콜산과 같은 중합체가 100일 이상 분자의 방출을 가능하게 하는 반면, 특정 하이드로겔은 더 짧은 시간동안 단백질을 방출한다. 캡슐화된 항체가 장시간 체내에 남아있는 경우, 이들은 37℃에서 습기에 노출되어 변성하거나 응집하며, 그 결과 생물학적 활성의 손실 및 면역원성의 가능한 변화가 초래될 수 있다. 관련 기전에 따라 안정화를 위한 합리적인 전략이 고안될 수 있다. 예를 들어, 만약 응집 기전이 티오-디설파이드 상호교환을 통한 분자간 S-S 결합 형성으로 밝혀지면, 안정화는, 설프하이드릴 잔기를 변형하고, 산성 용액으로부터 동결건조하고, 수분함량을 조절하고, 적절한 첨가제를 사용하고, 특정 중합체 매트릭스 조성물을 개발함으로써 달성될 수 있다.

생체 내 투여에 사용될 제형은 멸균될 수 있다. 이것은 멸균 여과막을 통한 여과로 쉽게 수행된다.

치료의 효능

본원에서 제공된 임의의 방법, 용도 및 조성물의 주요 장점은, 현저한 독성 또는 부작용을 유발하지 않으면서 인간 대상에게 뛰어난 항암 효과를 제공하여, 상기 대상이 전체적으로 치료로부터 이득을 받게 할 수 있다는 점이다. 임의의 방법, 용도 또는 조성물 중 일 양태에서, 안전성 프로파일은 이전의 베바시주맙 삼상 연구에 비교할 만하다. 본 발명의 치료의 효능은 암 치료를 평가하는데 일반적으로 사용되는 다양한 종료점에 의해 측정될 수 있는데, 이는 종양 퇴행, 종양 무게 또는 크기의 축소, 진행까지의 시간, 생존 기간, 무진행 생존, 전체적 반응률, 반응 기간, 및 삶의 질을 포함하나 이에 한정되지는 않는다.

키트

본 발명의 다른 양태에서, 상술한 장애의 치료에 유용한 물질을 함유하는 제조물품이 제공된다. 상기 제조물품은 용기, 라벨 및 패키지 삽입물을 포함한다. 적절한 용기는 예를 들어, 병, 바이알, 주사기 등을 포함한다. 상기 용기는 유리 또는 플라스틱과 같은 다양한 물질로 형성될 수 있다. 상기 용기는 상태를 치료하는데 효과적인 조성물을 보유하며, 멸균 접근 포트(예를 들어 용기는 정맥내 용액 백(bag) 또는 피하주사 바늘로 뚫을 수 있는 마개를 갖는 바이알일 수 있다)를 가질 수 있다. 조성물내의 적어도 하나의 활성 제제는 항VEGF 항체이다. 용기 상에 있는, 또는 용기에 연관된 라벨은 조성물이 선택된 상태의 치료를 위해 사용됨을 나타낸다. 제조물품은, 포스페이트-완충 염수, 링거액, 및 덱스트로스 용액과 같은 약학적으로 허용가능한 완충제를 포함하는 제2용기를 더 포함할 수 있다. 그것은 상업적으로 또는 사용자의 관점에서 바람직한 다른 물질을 더 포함할 수 있는데, 이는 다른 완충제, 희석제, 필터, 바늘, 및 주사기를 포함한다. 또한, 제조물품은 예를 들어 조성물의 사용자가 대상에게 항VEGF 항체 조성물과 화학치료제, 예를 들어 파클리탁셀, 토포테칸 또는 페길화된 리포솜 독소루비신 또는 그의 조합을 투여하도록 지시하는 것을 포함하는 사용 지시를 구비한 패키지 삽입물을 포함한다. 패키지 삽입물은 임의적으로 실시예 1에서 발견된 결과의 일부 또는 전부를 포함할 수 있다.

항VEGF 항체는 단독으로 또는 다른 항암 치료제 화합물과 함께 키트로서 포장될 수 있다. 상기 키트는 분말 형태를 재구성하기 위한 바이알, 주사를 위한 주사기, 맞춤형 정맥내 전달 시스템, 흡입기 등과 같이 대상에게 단위 투여량을 투여하는 것을 보조하는 임의적 구성요소를 포함할 수 있다. 또한, 상기 단위 투여량 키트는 조성물의 조제 및 투여에 대한 지시를 포함할 수 있다. 특정 양태에서, 상기 지시는 예를 들어 조성물의 사용자가 대상에게 항VEGF 항체 조성물과 화학치료제, 예를 들어 파클리탁셀, 토포테칸 또는 페길화된 리포솜 독소루비신 또는 그의 조합을 투여하도록 지시하는 것을 포함하는 사용 지시를 포함한다. 상기 지시는 임의적으로 실시예 1에서 발견된 결과의 일부 또는 전부를 포함할 수 있다. 상기 키트는 한 대상을 위한 일회용 단위 투여량을 함유하거나 특정 대상을 위한 다양한 사용 용량을(일정한 용량으로 또는 개별 화합물이 치료 진행에 따라 다양한 역가를 갖도록) 함유하거나, 또는 상기 키트는 다수의 대상에게 투여하는데 적합한 다수의 용량을 함유할 수 있다(대량 포장). 키트의 구성요소는 판지, 블리스터 팩, 병, 튜브 등에 조립될 수 있다.

실시예

다음은 본 발명의 방법 및 조성물의 예시이다. 상기 제공된 일반적으로 기술된 내용을 고려할 때, 다양한 다른 양태가 시행될 수 있음이 이해될 것이다.

실시예 1 - 백금 저항성, 상피성 난소암, 나팔관암 또는 원발성 복막암 환자에 있어, 베바시주맙 + 화학치료 대 단독 화학치료의 다중심, 공개 라벨, 무작위, 2개 시험군 삼상 시험(오렐리아).

오렐리아 시험은 백금 저항성 난소암에 대한, 화학치료와 조합된 베바시주맙의 효능과 안전성을 평가하였다. 이 연구는, 베바시주맙 + 화학치료 대 단독 화학치료의 전향적, 공개 라벨, 무작위, 2개 시험군 삼상 평가로 설계되었다. 적격조건으로서, 이전의 백금 기반 치료로부터 6개월 이내에 진행된 난소암 환자이어야 한다. 파클리탁셀, 토포테칸 또는 페길화된 리포솜 독소루비신이, 일반적으로 백금 저항성 질병의 치료에 사용되기 때문에, 화학치료제의 조합 대상으로 선정되었다. 화학치료에 베바시주맙을 추가함으로써, 오렐리아 시험은 제한된 치료 옵션을 가지며 특히 불량한 예후에 직면한 본 환자군의 무진행 생존을 개선하는 것을 목표로 한다. 기본 목표는 선택된 화학치료만을 투여받도록 무작위로 할당된 환자군, 또는 선택된 화학치료 + 베바시주맙을 투여받도록 할당된 환자군의 무진행 생존을 비교하는 것이었다.

연구 설계 - 이 시험은 2개의 치료 시험군으로 구성되었다: 화학치료 단독(시험군 1) 및 화학치료 + 베바시주맙(시험군 2). 환자는 이들 시험군 중 어느 하나에 무작위로 할당되었다(1 : 1)(도 1 참조).

시험군 1(화학치료 단독): 적격 환자는 연구자의 재량에 따라 4주 사이클로 다음 화학치료 중 하나를 받았다:

(a) 4주 중 제1, 8, 15 및 22일에 파클리탁셀 80 mg/m²을 1시간 정맥내 주입.

(b) 4주 중 제1, 8 및 15일에 토포테칸 4 mg/m²을 30분간 정맥내 주입. 대안으로는, 3주마다 제1-5일에 1.25 ㎎/m²용량이 30분간 투여될 수 있다.

(c) 4주 중 제1일에만 페길화된 리포솜 독소루비신 40 ㎎/m²을 1 ㎎/분으로 정맥내 주입. 제1 사이클 이후, 상기 약물은 1시간 주입으로 전달될 수 있다.

선택된 화학치료에 따라 사전 약물(pre-medication)이 지역 의료관행에 따라 투여되었다. 질병이 진행할 경우, 시험군 1의 환자는 (i) 베바시주맙 단독(3주마다 5 mg/kg 정맥내 주입) 또는 (ii) 표준 치료 중 어느 하나를 선택할 수 있었다.

시험군 2(화학치료 + 베바시주맙 ): 화학치료는 연구자의 재량에 따라 시험군 1에 기술된 것 중 하나에서 선택되었다. 선택된 화학치료는 초기에 베바시주맙과 조합되어 격주로 10 ㎎/㎏(또는 3주 사이클마다 제1-5일에 토포테칸 1.25 ㎎/m²와 함께 사용될 경우, 3주마다 15 ㎎/㎏) 정맥내 주입되었다. 베바시주맙은 초기에 90분간 주입되고 후속적으로 60분간 및 그 후에 30분간에 걸쳐 주입되는데, 환자가 견디는 만큼 이루어졌다. 베바시주맙은 제1 사이클에서는 화학치료 전에 투여되었고, 그 후의 후속 사이클에서는 화학치료 전 또는 후에 투여되었다. 진행성 질병의 진단 이전에 화학치료가 완료된 경우에, 환자는 (a) 베바시주맙을 격주로 10 ㎎/㎏ 정맥 주입; 또는 (b) 토포테칸이 선택되고 3주 사이클마다 제1-5일에 1.25 ㎎/m²의 용량으로 투여될 경우, 베바시주맙을 3주마다 15 ㎎/㎏ 투여, 중 어느 하나의 방법으로 계속하여 투여받았다. 질병의 진행 이후, 환자는 표준 치료를 받았다.

PFS 및 ORR 분석은, 골반과 복부와(바람직하게는 CT 또는 조영제 알러지의 경우는 MRI에 의함) 흉부(X-선 또는 바람직하게는 CT 스캔에 의함)의 단면 영상을 이용하는 종양 평가(RECIST 기준에 기초함)에 기초했다. 동일한 평가 기술이 특정 병변을 평가하기 위해 연구 전반에 걸쳐 사용되었다.

종양의 평가는 기초선에서 수행되었고, 그 후로는 8주마다(매 3주 사이클의 제1-5일에 1.25 mg/m²의 토포테칸으로 치료받는 환자에 대해서는 9주마다) 수행되었다. 반응은, 반응 기준이 처음 충족되고 4주 이상 지난 뒤에 수행된 두 번째 CT 스캔에 의해 확인되었다.

혈청 CA-125의 진행성 계열 상승은 CA-125 반응 및 생물학적 무진행 간격(PFIbio)을 결정하는 데 사용되었다. 전체 생존은 무작위화 일자에서부터 어떠한 원인에 의해서건 사망한 일자까지 측정되었다.

연구 대상 - 포함 기준

18세 이상의 환자 연령, 및 조직학적으로 확인되었고 문서화된 질병. 다음의 조직학적 유형은 적격이다: 선암종 NOS; 투명세포 선암종; 자궁내막양 선암종; 악성 브레너 종양; 혼합 상피성 암종; 점액성 선암종; 장액성 선암종; 이행성 세포 암종; 미분화 암종.

환자는 백금 저항성 질병을 가지고 있어야만 한다(최소 4 백금 치료 사이클의 완료로부터 6개월 미만 이내의 진행으로 정의되고, 백금 치료의 마지막 용량 투여로부터 일자가 계산되어야 한다).

환자는 RECIST에 따라 측정가능하거나, GCIG CA-125 기준에 따라 평가가능하여야 하고, 화학치료, 및 ECOG PS 0-2 및 12주 이상의 예상 수명을 요하는 질병을 가지고 있어야 한다.

연구 대상 - 제외 기준

암 관련: 이전 백금 치료에 내성이었던 질병을 가진 환자. 내성 질병은 이전 백금 치료 도중에 진행을 보인 환자로 정의됨; 비상피성, 예컨대 악성 혼합 밀레리안 종양; 낮은 악성 잠재력을 가진 난소 종양(즉, 경계성 종양); 적절히 제어된 기저 세포암종 또는 피부 편평 세포암종 또는 자궁 경부나 유방의 상피내암종과 같은, 무시할 만한 전이 위험을 갖는 종양을 제외하고, 등록 5년 이내의 다른 임상적으로 활동적인 악성 종양의 병력.

이전, 현재 또는 계획된 치료: 2개 초과의 항암요법을 사용한 이전 치료; 골반이나 복부에 대한 임의의 이전의 방사선 치료; 연구 시작 전 4주 이내의 수술(개방 생검 포함), 또는 연구 치료 중의 주요(major) 수술의 필요성에 대한 예견; 쥐의 CA-125 항체(RECIST로 측정 불가능한 질병을 가진 환자에게만 적용가능)에 대한 이전의 노출; 현재 또는 최근(연구 약물의 최초 용량 투여 전 10일 이내)의 아스피린(> 325 mg/일)을 사용한 만성 매일 치료; 연구 약물의 최초 용량 투여 전 30일 이내 또 다른 연구용 약물을 사용한 현재 또는 최근의 치료 또는 본 연구에 이전에 참가; 흡입 스테로이드를 제외한, 코티코스테로이드(용량 > 10 mg/일 메틸프레드니졸론 당량)를 사용한 만성 매일 치료.

실험실 소견

부적절한 골수 기능: 예를 들어, ANC: < 1.5 x 10⁹/l, 또는 혈소판 < 100 X 10⁹/l, 또는 헤모글로빈 < 9 g/dl. 환자는 헤모글로빈 값 > 9 g/dl을 유지하기 위해 수혈받을 수 있다. 제외 기준에는 부적절한 응고 변수가 또한 포함된다: aPTT > 1.5 x ULN(헤파린 치료를 받고 있는 환자의 aPTT는 1.5 내지 2.5 x ULN이어야 한다), 또는 INR > 1.5. (항응고제(예: 와파린)를 받고 있는 환자의 INR은 1-4일 간격의 두 연속적인 측정에서 2.0 내지 3.0이어야 한다). 제외 기준에는 부적절한 간 기능이 포함되며, 이는 다음과 같이 정의된다: 혈청 (총) 빌리루빈 > 1.5 x ULN(기관의 기준에 의거); 알칼라인 포스파타제, AST/SGOT 또는 ALT/SGPT > 2.5 x ULN(또는 간 전이가 존재할 경우 5 x ULN). 제외 조건에는 부적절한 신장 기능이 포함되며, 이는 다음과 같이 정의된다: 혈청 크레아티닌 > 2.0 mg/dl 또는 > 177 μmol/l 또는 토포테칸으로 치료하고자 한 환자의 경우에는 계산된 크레아티닌 청소율(clearance) < 40 ml/분(Cockroft & Gault 공식에 의해); 또는 소변 계량봉 검사상 단백뇨 > 2+. 기초선 계량봉 분석상 ≥ 2+ 단백뇨를 갖는 환자는 24시간 소변 수집을 하여야 하며 24시간 소변에서 ≤ 1 g의 단백질을 보여야 한다. 대안으로, 단백뇨 검사는 지역 의료관행에 따라 수행될 수 있다.

이전 또는 동시적 상태 또는 절차

표준 의학 치료로 적절하게 치료되지 않는 한, 이학적/신경학적 검사상 암과 관련이 없는 중추신경계(CNS) 질병의 병력 또는 증거(예를 들어, 조절되지 않는 발작); 증상적 CNS 전이; 파클리탁셀을 투여받기로 계획된 환자의 경우, 기존의 말초 신경병증 ≥ CTC 2 등급; 임신 또는 수유중인 여성. 연구 치료 시작 전 7일 이내, 또는 14일 이내의(연구 치료 시작 전 7일 이내의 확실한 소변 임신 검사와 함께), 평가를 요하는 혈청 임신 검사; 연구 중 및 연구 약물의 마지막 용량 투여 이후 6개월 동안, 매우 효과적인, 호르몬 또는 비-호르몬 피임 수단(즉, 자궁내 피임 장치)을 사용하고 있지 않은 가임(마지막 생리 후 < 2년이 지났고 수술로 불임되지 않은 경우로 정의됨) 여성; 혈전성 또는 출혈성 장애의 병력 또는 증거; 첫 연구 치료 전 ≤ 6개월 이내의 뇌혈관 발작(CVA)/뇌졸중 또는 일과성 허혈성 발작(TIA) 또는 지주막하 출혈을 포함; 조절되지 않는 고혈압(고혈압 치료에도 불구하고 수축기 > 150 mmHg 및/또는 확장기 > 100 mmHg의 지속) 또는 임상적으로 유의한(즉, 활동적) 심혈관 질병이며 다음을 포함: 첫 연구 치료 전 ≤ 6개월 이내의 심근경색 또는 불안정형 협심증 또는 뉴욕 심장협회(NYHA) 등급 II 이상의 울혈성 심부전(CHF) 또는 약물치료를 요하는 심각한 심장 부정맥(심방 세동 또는 발작성 상심실성 빈맥 제외) 또는 말초 혈관 질병 > 등급 3(즉, 증상적이며 일상생활의 활동을 방해하며, 수복 또는 교정을 요함). 제외 조건에는 기관에서의 정상 하한치보다 낮은, MUGA/ECHO에 의해 정의되는 좌심실 박출계수(페길화된 리포솜 독소루비신으로 치료하기로 된 환자에게만 적용가능); 임박 폐쇄(subocclusive) 질병을 포함하는, 기저 질병에 연관된 장 폐쇄의 병력, 복부 누공, 위장관 천공 또는 복부내 농양의 병력. 골반 검사에 의한 직장S상결장 침범 또는 CT 스캔에 의한 장 침범의 증거, 또는 장 폐쇄의 임상적 증상; 비-치유 상처, 궤양 또는 골절; 연구 진입에 있어 정맥내 항생제 및/또는 입원을 요하는 심각한 활동성 감염; 연구 약물 또는 부형제 중 어느 것에 대한 알려진 과민 반응; 임의의 다른 의학적 상태의 증거(예: 정신과적 질환, 소화성 궤양 등), 계획된 치료를 방해할 수 있는, 환자의 순응에 영향을 미치거나 환자를 치료 관련 합병증에 대해 높은 위험에 처하게 할 수 있는 이학적검사 또는 실험실 검사 소견.

결과:

적격 환자는 백금 기반 치료의 ≥ 4 사이클 후 ≤ 6개월 이내 진행한 (RECIST 1.0에 의해 측정가능하거나 평가가능한) 난소암에 이환된 환자이었다. 내성 난소암, 장 폐쇄 또는 이전의 2개 초과의 항암요법 병력을 가진 환자는 부적격하였다. 화학치료의 선택 후(페길화된 리포솜 독소루비신[PLD], 토포테칸[TOP] 또는 매주 파클리탁셀[PAC]), 진행, 허용 불가능한 독성 또는 승낙 철회가 있기까지, 환자는 단독 화학치료 또는 베바시주맙(화학치료에 따라 매 2주 10 mg/kg 또는 매 3주 15 ㎎/㎏) + 화학치료 중 어느 하나에 무작위로 배정받았다. 단독 화학치료 시험군에 속한 환자는 진행시 베바시주맙 단독요법으로 넘어갈 수 있었다. 일차 종료점은 RECIST에 의한 무진행 생존(PFS)이었다. 이차 종료점은 객관적 반응률(ORR), 전체 생존, 안전 및 삶의 질을 포함하였다. 본 디자인은, 247 사건 이후의 양면 로그 순위 시험과 α = 0.05로 0.7의 PFS의 위해 비(HR)를 검출하기 위해 80%의 검출력을 제공하고, 중간 PFS는 화학치료의 경우 4.0개월, 화학치료 + 베바시주맙 치료의 경우는 5.7 개월로 추정하였다. IDMC 의해 제안된 바와 같이 표본 크기는 증가되었다; 일차 분석은 환자 361명 중 291명의 사건 이후로 계획되었다.

2009년 10월부터 2011년 4월 사이, 361명의 환자가 선택된 화학치료(PLD: 126; PAC: 115; TOP: 120)를 단독으로 또는 베바시주맙과 함께 투여받도록 무작위로 배정받았다. 중간 추적관찰 기간은 13.5개월이었다.

도 2는 다양한 위험 인자에 따라 환자를 하위군으로 세분화함으로써 시험 참가자의 환자 계층화를 한 것을 나타내며, 상기 위험 인자의 예는 다음과 같다: 65세 이상 또는 65세 미만 중 어느 하나에 해당하는 연령; 무백금 생존 기간(PFI)이 3개월 미만인 환자(이런 환자는 다른 환자에 비해 일반적으로 더 불량한 예후 인자를 가진다) 또는 PFI가 3 내지 6개월인 환자; 지시된 바와 같이 센티미터(cm) 단위로 측정하여 측정가능한 질병 또는 종양을 가진 환자; 복강의 액체를 의미하는, 복수를 가진 환자는, 복수를 갖지 않는 환자에 비해 일반적으로 더 증상적 질병을 가지며 더 불량한 결과를 갖는다; 및 환자의 주치의의 선택에 따라 파클리탁셀, 페길화된 리포솜 독소루비신, 또는 토포테칸의 세 화학치료 중 어느 하나를 받은 환자. 어느 하위군에 속한 환자가 치료받았는지와 관계없이, 모든 경우에 베바시주맙과 화학치료의 조합은 효능 및 환자 유익의 증가를 보였고, 각 하위군의 위해 비는 도 하단의 x 축에서 나타난 바와 같이 0.5 주변에 정렬되었다.

도 3은, CA-125 혈액 검사, 또는 방사선(RECIST) 또는 둘 모두의 조합(RECIST + CA 125) 중 어느 하나를 사용하는 치료에 대한 반응을 측정하는 2개의 가장 일반적인 방법을 비교한다. 모든 방법 사용에 있어, 데이터는 베바시주맙의 첨가가 화학치료를 단독으로 투여받은 환자에 비해 전체 반응률(ORR)을 증가시켰다는 것을 보여주며, 이는 조합 치료로 인해, 환자의 난소 종양이 단독 화학치료의 경우보다 더 많이 줄어든 것으로 보임을 나타낸다.

화학치료 코호트(cohort)에 의한 분석은 아래 표 2에 요약되어 있다. 백금 저항성 난소암에서 단일 제제 화학치료에 베바시주맙을 첨가함으로써 얻어진 PFS 및 ORR의 개선이 모든 화학치료 코호트에 걸쳐 관찰되었다.

백금 저항성 난소암에서, 단일 제제 화학치료에 베바시주맙을 첨가함으로써 얻어진 PFS 및 ORR의 개선이 모든 화학치료 코호트에 걸쳐 관찰되었다. 연장된 PFS와 연관되어 증가한 화학치료 노출이 누적 화학치료 독성의 일부 증가의 원인으로 설명된다.

오렐리아는 백금 저항성 난소암에서 베바시주맙의 첫 번째 무작위 시험이다. 베바시주맙 + 화학치료가 단독 화학치료에 비해 ORR과 PFS의 통계적으로 유의하고 임상적으로 의미있는 개선을 제공하는 것으로 나타났다. 주의깊은 환자의 선별은 베바시주맙의 유해 사건 위험을 최소화한다. 이것이 백금 저항성 난소암에 있어, 표적 치료의 유익과 단독치료 대비 조합 치료의 개선된 결과를 보이기 위한 첫 번째 삼상 시험이다.

SEQUENCE LISTING <110> F. Hoffmann-La Roche AG <120> COMBINATION THERAPY FOR THE TREATMENT OF OVARIAN CANCER <130> P4879R1 <140> PCT/EP2013/054818 <141> 2013-03-11 <150> US 61/610,128 <151> 2012-03-13 <150> US 61/653,598 <151> 2012-05-31 <150> US 61/672,987 <151> 2012-07-18 <160> 2 <210> 1 <211> 108 <212> PRT <213> Artificial sequence <220> <223> amino acid sequence of humanized antibody variable light chain <400> 1 Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val 1 5 10 15 Gly Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Ser Ala Ser Gln Asp Ile Ser 20 25 30 Asn Tyr Leu Asn Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys 35 40 45 Val Leu Ile Tyr Phe Thr Ser Ser Leu His Ser Gly Val Pro Ser 50 55 60 Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile 65 70 75 Ser Ser Leu Gln Pro Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln 80 85 90 Tyr Ser Thr Val Pro Trp Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Val Glu 95 100 105 Ile Lys Arg <210> 2 <211> 123 <212> PRT <213> Artificial sequence <220> <223> amino acid sequence of humanized antibody variable heavy chain <400> 2 Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly 1 5 10 15 Gly Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr 20 25 30 Asn Tyr Gly Met Asn Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu 35 40 45 Glu Trp Val Gly Trp Ile Asn Thr Tyr Thr Gly Glu Pro Thr Tyr 50 55 60 Ala Ala Asp Phe Lys Arg Arg Phe Thr Phe Ser Leu Asp Thr Ser 65 70 75 Lys Ser Thr Ala Tyr Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp 80 85 90 Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Ala Lys Tyr Pro His Tyr Tyr Gly Ser 95 100 105 Ser His Trp Tyr Phe Asp Val Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr 110 115 120 Val Ser Ser

Claims

백금 저항성 난소암으로 진단된 환자의 치료 방법으로서,
유효량의 항VEGF 항체 및 화학치료제를 상기 환자에게 투여하는 것을 포함하되, 상기 환자는 이전에 2개 이하의 항암요법을 받았고, 상기 치료가 상기 화학치료제를 단독으로 투여받은 백금 저항성 난소암 환자에 비해 중간 무진행 생존 기간을 연장시키는 것인, 방법.
제1항에 있어서,
상기 백금 저항성 난소암이 상피성 난소암, 나팔관암종 또는 원발성 복막암종인, 방법.
제1항에 있어서,
상기 환자가 이전의 백금 치료에 내성이지 않은, 방법.
제1항에 있어서,
상기 환자가 RECIST 1.0에 따라 측정가능한 질병 또는 GCIG 기준에 따라 CA-125 평가가능한 질병을 갖는, 방법.
제1항에 있어서,
상기 환자가 0-2 수준의 ECOG 수행상태를 보이는, 방법.
제1항에 있어서,
상기 환자가 12주 이상의 예상 수명을 갖는, 방법.
제1항에 있어서,
상기 화학치료제가 파클리탁셀, 토포테칸 및 페길화된 리포솜 독소루비신으로 구성된 군에서 선택되는, 방법.
제7항에 있어서,
상기 파클리탁셀의 유효량이 4주 중 제1, 8, 15 및 22일에 80 mg/m²으로 1시간 정맥내 주입으로 투여되는 것인, 방법.
제7항에 있어서,
상기 토포테칸의 유효량이 4주 중 제1, 8 및 15일에 4 mg/m²으로 30분 정맥내 주입으로 투여되는 것인, 방법.
제7항에 있어서,
상기 토포테칸의 유효량이 3주마다 제1-5일에 1.25 mg/m²으로 30분 정맥내 주입으로 투여되는 것인, 방법.
제7항에 있어서,
상기 페길화된 리포솜 독소루비신의 유효량이, 4주 중 제1일에만 40 mg/m²으로 1 ㎎/분 정맥내 주입으로 투여되고 그 후로는 1시간 주입으로 투여되는 것인, 방법.
제1항에 있어서,
상기 항VEGF 항체가 A4.6.1 에피토프에 결합하는 것인, 방법.
제1항에 있어서,
상기 항VEGF 항체가 베바시주맙인, 방법.
제1항에 있어서,
상기 항VEGF 항체가 가변 중쇄(VH) 및 가변 경쇄(VL)를 포함하며, 상기 VH가 서열번호 2의 아미노산 서열을 갖고, 상기 VL이 서열번호 1의 아미노산 서열을 갖는 것인, 방법.
제1항에 있어서,
상기 항VEGF 항체의 유효량이 2주마다 정맥내 10 ㎎/kg인, 방법.
제10항에 있어서,
상기 항VEGF 항체의 유효량이 3주마다 정맥내 15 ㎎/kg인, 방법.
제15항에 있어서,
상기 항VEGF 항체의 유효량이, 초기에 90분간 정맥내 투여되고 후속적으로 60분간 및 그 후로는 30분간 주입되는 것인, 방법.
제16항에 있어서,
상기 항VEGF 항체의 유효량이, 초기에 90분간 정맥내 투여되고 후속적으로 60분간 및 그 후로는 30분간 주입되는 것인, 방법.
제1항에 있어서,
상기 항VEGF 항체가 제1 사이클에서 상기 환자에게 가장 먼저 투여되는, 방법.
제19항에 있어서,
상기 항VEGF 항체의 후속 투여가 상기 화학치료제의 전 또는 후에 이루어지는, 방법.
제1항에 있어서,
상기 항VEGF 항체가 상기 화학치료제와 병행 투여되는, 방법.
제1항에 있어서,
상기 중간 무진행 생존 기간이, 상기 화학치료제를 단독으로 투여받은 백금 저항성 난소암 환자에 비해 0.48의 위해 비로 약 3개월 연장되는 것인, 방법.
제1항에 있어서,
상기 중간 무진행 생존 기간이, 상기 화학치료제를 단독으로 투여받은 백금 저항성 난소암 환자에 비해 0.48의 위해 비로 3개월 이상 연장되는 것인, 방법.
제1항에 있어서,
상기 중간 무진행 생존 기간이, 상기 화학치료제를 단독으로 투여받은 백금 저항성 난소암 환자에 비해 약 0.32 내지 약 0.57의 위해 비로 약 3개월 연장되는 것인, 방법.
제1항에 있어서,
상기 중간 무진행 생존 기간이, 상기 화학치료제를 단독으로 투여받은 백금 저항성 난소암 환자에 비해 약 0.32 내지 약 0.57의 위해 비로 3개월 이상 연장되는 것인, 방법.
제22항 내지 제25항 중 어느 한 항에 있어서,
상기 환자가 65세 미만인, 방법.
제22항 내지 제25항 중 어느 한 항에 있어서,
상기 환자가 65세 이상인, 방법.
제22항 내지 제25항 중 어느 한 항에 있어서,
상기 환자가 3개월 미만의 무백금 간격을 갖는, 방법.
제22항 내지 제25항 중 어느 한 항에 있어서,
상기 환자가 3 내지 6개월의 무백금 간격을 갖는, 방법.
제22항 내지 제25항 중 어느 한 항에 있어서,
상기 환자가 복부 복수를 갖는, 방법.
제22항 내지 제25항 중 어느 한 항에 있어서,
상기 환자가 복부 복수를 갖지 않는, 방법.
제1항에 있어서,
상기 치료가, 상기 화학치료제를 단독으로 투여받은 백금 저항성 난소암 환자에 비해 상기 환자의 객관적 반응률을 증진시키는 것인, 방법.
제32항에 있어서,
상기 객관적 반응률이 상기 화학치료제를 단독으로 투여받은 백금 저항성 난소암 환자에 비해 1.5배 이상 증진되는, 방법.
제32항에 있어서,
상기 객관적 반응률이 상기 화학치료제를 단독으로 투여받은 백금 저항성 난소암 환자에 비해 2배 이상 증진되는, 방법.
제32항에 있어서,
상기 객관적 반응률이 상기 화학치료제를 단독으로 투여받은 백금 저항성 난소암 환자에 비해 약 30.9%까지 증진되는, 방법.
제25항에 있어서,
상기 화학치료제가 파클리탁셀이며, 상기 환자의 중간 무진행 생존 기간이 상기 화학치료제를 단독으로 투여받은 백금 저항성 난소암 환자에 비해 약 0.46의 위해 비로 6개월 이상 연장되는 것인, 방법.
제24항에 있어서,
상기 화학치료제가 페길화된 리포솜 독소루비신이며, 상기 환자의 중간 무진행 생존 기간이 상기 화학치료제를 단독으로 투여받은 백금 저항성 난소암 환자에 비해 약 0.57의 위해 비로 2개월 이상 연장되는 것인, 방법.
제25항에 있어서,
상기 화학치료제가 토포테칸이며, 상기 환자의 중간 무진행 생존 기간이 상기 화학치료제를 단독으로 투여받은 백금 저항성 난소암 환자에 비해 약 0.32의 위해 비로 3개월 이상 연장되는 것인, 방법.
제33항에 있어서,
상기 화학치료제가 파클리탁셀인, 방법.
제33항에 있어서,
상기 화학치료제가 페길화된 리포솜 독소루비신인, 방법.
제34항에 있어서,
상기 화학치료제가 토포테칸인, 방법.
에피토프 A4.6.1에 본질적으로 결합하는 항VEGF 항체;
화학치료제; 및
백금 저항성 난소암으로 진단된 환자를 치료하기 위해 상기 환자에게 유효량의 항VEGF 항체 및 화학치료제를 투여하는 것을 포함하는 지시사항이 구비된 패키지 삽입물 또는 라벨을 포함하되,
상기 환자는 이전에 2개 이하의 항암요법을 받았고, 상기 치료가 상기 화학치료제를 단독으로 투여받은 백금 저항성 난소암 환자에 비해 중간 무진행 생존 기간을 연장시키는 것인, 키트.
제42항에 있어서,
상기 백금 저항성 난소암이 상피성 난소암, 나팔관암종 또는 원발성 복막암종인, 키트.
제42항에 있어서,
상기 항VEGF 항체가 베바시주맙이며, 상기 화학치료제가 파클리탁셀, 토포테칸 및 페길화된 리포솜 독소루비신으로 구성된 군에서 선택되는, 키트.
에피토프 A4.6.1에 본질적으로 결합하는 항VEGF 항체 및 환자의 백금 저항성 난소암을 치료하는 화학치료제의 투여를 홍보하는 방법으로서,
상기 홍보가 인쇄물에 의한 것인, 방법.
제45항에 있어서,
상기 항VEGF항체가 베바시주맙이며, 상기 화학치료제가 파클리탁셀, 토포테칸 및 페길화된 리포솜 독소루비신으로 구성된 군에서 선택되는, 방법.
제45항에 있어서,
상기 인쇄물이, 상기 항VEGF 항체와 상기 화학치료제의 상업적 제형에 동반되는 패키지 삽입물 또는 라벨인, 방법.