KR20140135068A - 적하수오 추출물을 함유하는 피부주름개선 기능성 화장료 조성물 - Google Patents

Abstract

본 발명은 생약재 추출물을 함유하는 피부주름개선용 화장료 조성물 및 그 추출 방법에 관한 것이다. 본 발명은 적하수오로부터 추출된 유효성분을 이용하는 것을 특징으로 하며, 특히 적하수오추출물의 용매 분획물을 함유하는 것을 특징으로 하는 피부주름개선용 화장료 조성물에 관한 것이다. 본 발명에 따르면, 항산화, 엘라스테이즈활성저해, 섬유아세포증식 효과 및 피부주름개선 임상시험에서 우수한 효과를 발휘함으로써, 피부에 부작용이 없을 뿐만 아니라 피부주름개선 효과가 뛰어나다.

Description

적하수오 추출물을 함유하는 피부주름개선 기능성 화장료 조성물 {Anti-wrinkle cosmetic composition containing Polygonum multiflorum extract}

본 발명은 적하수오 추출물을 함유하는 피부주름개선용 화장료 조성물 및 그 제조방법에 관한 것이다.

피부는 우리가 살아가는데 있어서 없어서는 안 될 기관이며 최외각에 존재한다. 인체를 외부의 각종 위협으로부터 보호하는 기능을 하는 피부는 항상 다양한 외부자극과 접하기 때문에 다른 기관들에 비해 주름이 발생하기 쉽다. 그 중에서도 얼굴 피부는 태양광선, 건조 외기 및 공해 물질 등에 직접적으로 노출되어 있어 그렇지 않은 피부보다 주름 등의 노화현상이 조기에 발생한다.

피부조직의 노화에 따른 가장 특징적인 변화는 피부 기질(matrix)의 변화로서, 진피층에 있는 섬유아세포(human skin fibroblast)가 노화되어 섬유질과 기질의 생성능력이 줄어들게 된다. 기질의 양이 전반적으로 감소하여 피부의 두께가 얇아지며 피부의 탄력을 저하시켜 주름이 형성된다.

이와 함께 자외선(UV-B 및 UV-A)에 노출시 피부세포 손상의 주원인인 자유라디칼(free radical)과 활성산소종(Reactive oxygen species, ROS)이 피부에 생성된다. 이들은 DNA의 손상과 세포막구조를 공격하여 노화반점을 발생시키며 피부를 촉촉하고 부드러우며 유연하고 탄력을 유지시키는 교원질과 섬유질을 공격하여 주름생성을 가속화 할 수도 있다.

이러한 외부환경 또는 내부기작에 의하여 피부손상이 발생됨을, 최근 화장품 개발에 있어 천연물을 이용하여 피부에 영양을 공급하고, 화학적 합성에 의한 화장품이 피부에 미치는 독성 작용을 최소화하면서 부작용을 줄이고, 피부의 각종 증상을 치료하는 효과까지 갖춘 순수 한방 처방을 이용한 한방 화장품 개발에 높은 관심을 갖고 있는 실정이다. 그러나 다른 한편에서는 한방 약물이나 피부에 대한 올바른 지식 없이 단순히 미용만을 위한 미용팩 등을 전문가와 상의 없이 사용하고 있으며, 그로 인한 피부의 부작용 또한 심각한 실정이다.

본 발명의 피부주름개선용 화장료 조성물을 구성하는 생약재 추출물의 제조에 사용되는 적하수오는 약초의 성분과 이용(일월서각, 1991), 한국본초도감(교학사, 1998), 한약자원식물학(학문출판, 1999) 및 한약생약규격집(한국의약품수출입협회&한국의약시험연구소, 2000) 등에 공지되어 있다.

본 발명에서 사용하는 한방약재 원료 적하수오(赤何首烏, Polygonum multiflorum Thunberg)는 마디풀과에 속하는 다년생초로서 중국에서 들어온 것으로 알려져 있으며 오랫동안 재배되고 있는 덩굴성 약용식물로, 키는 3~4m에 이르며 뿌리는 옆으로 길게 뻗어 종종 덩이뿌리를 형성하며 심장형의 잎은 길이가 약 3~6 cm, 너비가 2.5~4.5cm 정도로 어긋나고 잎자루와 턱잎이 있지만 가장자리에 톱니가 없는 것이 특징이다. 꽃은 8~9월에 원추 꽃차례를 이루며 피고, 열매는 길이가 2.5 mm 정도로 세모진 난형이고 윤기가 난다. 적하수오는 일반적으로 백하수오로 알려진 백수오(Cynanchum wilfordii Hemsley)와 같은 하수오란 이름으로 혼동되기도 하지만, 백수오는 박주가리과의 은조롱이의 덩이뿌리로서 마디풀과의 식물인 적하수오와 완전히 다른 약재이다.

한방에서 사용되는 적하수오는 상기한 적하수오의 덩이뿌리로서 강정제, 통정제, 양혈제 및 진해제로 쓰이며, 감기, 토혈, 신경쇠약 및 관절염 등의 치료제로 쓰이는 것으로 알려져 있고, 최근에 화장품 분야에서 몇 가지 주요한 효능들이 소개된 바 있다.

적하수오추출물과 관련된 선행기술로는 피부미백과 관련하여 대한민국 공개특허 제10-2009-0120810호, 대한민국 등록특허 제10-1052189호가 공지되어 있고 피부노화와 관련하여서는 대한민국 등록특허 제10-0829846호가 공지되어 있다. 또, 대한민국 등록특허 제10-0966835호에는 감초, 승마, 하수오, 흑임자, 상황버섯, 당귀, 상백피, 백작약, 고삼, 황금으로 구성되어진 식물혼합 추출물이 미백 및 항주름 효과가 있다는 사실이 개시되어 있고 대한민국 등록특허 제10-1178594호에는 하수오추출물, 대추추출물 및 황촉규추출물을 함유하는 보습 및 항산화 효과의 화장료 조성물에 대하여 개시된 바 있다.

또한, 2011년도 한국식품영양과학회지에 발표되었던 하수오와 백하수오의 에탄올추출물에 의한 B16/F10 Melanoma 세포주의 멜라닌 생성억제효과, 2008년도 대한한방부인과학회지에 발표된 적하수오의 멜라닌 생성억제와 작용기전에 관한 연구에서는 적하수오추출물의 미백효과에 대하여 개시된 바 있고, 2002년도에 발표된 하수오의 stilbene glucoside의 라디칼저해효과에서 적하수오추출물의 항산화 효과에 대하여 기재된바 있다. 상기 선행 기술에는 본 발명의 화장료 조성물의 구성성분이 되는 적하수오추출물의 주름개선 효과에 대하여는 개시되거나 암시된 바 없으며 특히, 적하수 단일 한방 생약재 추출물의 분획물을 적용한 피부주름개선 기능성 화장료 조성물에 대하여는 전혀 암시되거나 개시된 바 없다.

따라서, 본 발명의 목적은 단일 한약재 적하수오추출물을 유효성분으로 함유하는 피부주름개선 기능성 화장료 조성물을 제공하는데 있다.

본 발명의 다른 목적은 피부에 부작용을 초래하지 않고, 피부자극이 없이 안전하며, 항산화, 엘라스테이즈활성저해, 섬유아세포증식 효과가 뛰어난 피부주름개선 기능성 화장료 조성물의 제조방법을 제공하는데 있다.

상기 본 발명의 목적은 건조분쇄한 적하수오분말의 에탄올 조추출물을 수득하는 단계와; 상기에서 얻은 에탄올 조추출물을 헥산으로 탈지처리하는 단계와; 상기 탈지처리된 조추출물에 에칠아세테이트와 부탄올의 순서로 순차적으로 분획한 분획물을 수득하는 단계와; 상기에서 수득한 각 단계의 추출물의 수율(yield)과 상기 적하수오추출물의 자유라디칼소거능, 활성산소소거능, 엘라스테이즈활성저해, 섬유아세포증식 효과를 평가 확인하는 단계와; 상기 평가결과 부탄올 분획물을 유효성분으로 화장료 조성물을 제조하고 평가함으로써 달성되었다.

본 발명 적하수오 부탄올 분획물을 함유한 화장료 조성물은 항산화, 엘라스테이즈활성저해 및 섬유아세포증식에 뛰어난 효과가 있다.

도 1은 본 발명에 따른 바람직한 제조공정도이다.
도 2는 적하수오 용매분획추출물의 엘라스테이즈활성저해 효과를 나타낸 그래프이다.

본 발명에 따른 적하수오추출물의 추출에 사용된 용매는 정제수, 탄소수 1내지 4인 무수 또는 함수 에탄올, 프리필렌글라이콜, 프로필알코올, 부틸렌글라이콜, 부틸알코올 및 글리세린을 포함한 용매군 중에서 선택된 하나의 순수용매 또는 이들 중 임의로 선택된 둘 이상이 조합된 혼합용매이며, 상기 선택된 추출용매는 상기 생약재 혼합물 전체 중량대비 1 내지 20배의 양으로 첨가하는 것이 바람직하다.

바람직하게, 상기 적하수오추출물은 에탄올과 물의 혼합용매로 추출한 일차 조추출물의 물 분산액에 대하여 에칠아세테이트 및 부탄올로 용매분획한 것과 그 잔류물인 물 분획물을 특징으로 하는 피부주름개선 화장료 조성물을 제공한다.

본 발명에 따르면, 적하수오추출물의 추출방법은 열수추출법으로 적용하였으나 이에 한정된 것은 아니며, 침지법, 초음파추출법, 초고압추출법 및 초임계추출법과 같이 통상적으로 알려진 추출방법을 적용하는 것도 가능하다.

한편, 상기 적하수오추출물을 화장료에 적용하는 경우에는 화장료 전체 조성물 중량을 기준으로 0.001 내지 10중량%이면 피부 주름개선에 충분한 효과를 발휘할 수 있다. 상기 추출된 화장료 유효성분의 함량이 전체 화장료 중량대비 0.001중량% 미만인 경우에는 본래 목적하는 효과를 충분하게 달성할 수 없어 바람직하지 못하며, 상기 추출된 화장료 유효성분의 함량이 전체 화장료 중량대비 10중량%를 초과하는 경우에는 화장료의 안정성에 문제를 발생시킬 수 있으며, 이로 인하여 화장료의 외관이나 사용시 충분한 화장효과를 발현시킬 수 없는 단점으로 인해 바람직하지 못하다.

본 발명은 적하수오추출물의 용매 분획물, 특히 부탄올 분획물이 안전하면서도 피부주름개선에 유용하다는 발견에 기초한다.

본 발명에 따르면 적하수오추출물로부터 항산화, 엘라스테이즈활성저해, 섬유아세포증식 효과 및 피부주름개선 효과가 있는 유효성분을 추출하여 이를 유효성분으로 하는 화장료 조성물을 제공하고 특히 피부주름개선을 위해 다양한 제형으로 사용될 수 있으며, 예컨대 스킨류, 로션류, 에센스류, 크림류, 팩류, 파운데이션류 및 메이크업베이스류와 같은 다양한 상품 유형으로 제조될 수 있다. 물성적인 측면에서는 액상, 크림상, 페이스트상 및 고체상 등 다양한 성상으로 적용가능하며, 통상적인 화장료 제조법에 적용시킬 수 있음은 또한 자명하다.

이하, 본 발명을 구체적으로 설명하기 위해 실시예, 실험예 등의 구체적인 예를 들어 설명하기로 한다. 그러나, 본 발명에 따른 실시예 또는 실험예들은 여러 가지 다른 형태로 변형될 수 있으며, 본 발명의 범위가 아래에서 상술하는 예들에 한정되는 것으로 해석되어지지 않아야 한다. 본 발명에 따른 실시예 및 실험예들은 당 업계에서 평균적인 지식을 가진 자에게 본 발명을 보다 완전하게 설명하기 위해서 제공 되어지는 것에 불과하므로, 본 출원시점에 있어서 이들을 대체할 수 있는 다양한 균등물과 변형예들이 있을 수 있음을 이해하여야 한다.

이하, 본 발명의 구체적인 내용을 실시예와 실험예를 들어 상세히 설명한다.

실시예 1 내지 4

본 발명의 실시예에 사용된 적하수오는 야생에서 채취한 적하수오(100년근 추정, 한국전통심마니협회)를 직접 구입하여 사용하였다.

적하수오로부터 용매추출 및 분획은 다음과 같이 실시하였다. 조분쇄한 건조 적하수오 100 g에 75% 에탄올 수용액 600 mL를 가한 후 1차 열수추출하고, 용매를 여과한 후 다시 75% 에탄올 수용액 600 mL를 가하여 2차 추출하고 용매를 여과한 후, 1차 및 2차 추출물을 합하고 감압농축기를 이용하여 용매를 제거함으로써 에탄올 조추출물을 얻었다.

상기 적하수오 에탄올 조추출물에 600 mL의 물을 가하고 초음파조사를 통해 적하수오 에탄올 조추출물이 고르게 분산된 현탁액을 제조한 후, 헥산으로 탈지 처리하고 에칠아세테이트(600 mL) 및 부탄올(600 mL)을 차례로 용매 분획하여, 적하수오 에탄올 조추출물 및 적하수오 에탄올 조추출물에 대한 에칠아세테이트 분획물, 부탄올 분획물 및 그 잔류물인 물 분획물을 차례로 수득하였다.

상기 실시예에 따른 각각의 적하수오추출물에 대하여 하기 [표 1]에 나타내었으며, 수득량을 표기하였다.

실험예 1 항산화효과시험

본 발명의 상기 실시예 1, 2, 3 및 4에 따라 수득된 적하수오추출물에 대하여 주름의 억제 및 개선 효과 검정시험으로 항산화효과를 알아보기 위하여 자유라디칼소거실험(Free Radical Scavenging Activity Test)과 활성산소(superoxide anion)소거활성실험을 실시하였다. 자유라디칼소거시험은 Kim 등(Kor. J. Pharmacogn., 24 (4), 299~303 (1993))의 방법을 변형한 것으로써, 안정한 자유라디칼인 DPPH (1,1-Diphenyl-2-picrylhydrazyl radical) (Sigma)을 사용하였다.

먼저, 0.2 mM DPPH 용액 1 mL에 상기 실시예 에 따라 수득된 각각의 적하수오추출물 각각의 시료를 메탄올에 적당한 농도로 희석하여 2 mL 혼합하고, 실온에서 10분간 방치한 후 517 nm에서 흡광도를 측정한다.

한편, 상기 자유라디칼소거시험에서의 대조군은 시료용액 대신 메탄올을 넣어 같은 방법으로 측정하며, DPPH 용액 대신 메탄올을 넣어 생약재 추출물 시료와 대조군에 대한 각각의 색 보정값을 얻는 것으로 설정하였고, 비교군으로서 일반적인 항산화제로 잘 알려진 α-tocopherol을 사용하였다(참고문헌: Muruhan, S. 외, In vitro antioxidant activities of solanum surattense leaf extract, Asian Pacific journal of tropical biomedicine, 3(1), 28-34 (2013)).

하기 [수학식 1]을 이용하여 자유라디칼소거율을 수치로 계산하여 하기 표 2에 나타내었다. 하기 [표 2]에서, SC₅₀은 자유라디칼소거율 50%를 달성하기 위해 소요되는 시료의 농도로서 다른 성분물질과 상대적으로 비교할 때 사용하는 수치로서 값이 작을수록 소거율이 높음을 나타낸다.

활성산소소거실험은 Noro 등(Chen. Pharm. Bull., 31, 3984~3987 (1983))의 방법을 변형한 것으로, 활성산소(superoxide anion)소거활성평가는 잔틴/잔틴옥시다제(xanthine/xanthine oxidase)효소반응에 의한 활성산소 발생계를 이용하여 활성산소에 의한 니트로블루 테트라졸리움(nitroblue tetrazolim, NBT)의 산화에 의한 흡광도의 변화를 측정하였다.

Na₂CO₃ 2.4 mL, xanthine 0.1 mL, EDTA 0.1 mL, BSA 0.1 mL, NBT 0.1 mL, 시료 0.1 mL을 넣고 잘 혼합하여 25℃에서 10분간 정치하였다. Xanthine oxidase 0.1 mL을 넣고 25℃에서 20분간 반응시킨 후, 6 mM CuCl₂를 넣어 반응을 정지시켰다. 광파장 560 nm에서 흡광도를 측정하였다.

한편, 상기 활성산소소거활성시험에서의 대조군은 시료용액 대신 정제수를 넣어 같은 방법으로 측정하며, xanthine oxidase 용액 대신 정제수를 넣어 생약재 추출물 시료와 대조군에 대한 각각의 색 보정값을 얻는 것으로 설정하였고, 비교군으로서 일반적인 항산화제로 잘 알려진 α-tocopherol을 사용하였다.

하기 [수학식 2]를 이용하여 활성산소소거율을 수치로 계산하여 하기 [표 2]에 나타내었다. 하기 [표 2]에서, IC₅₀은 활성산소소거율 50%를 달성하기 위해 소요되는 시료의 농도로서 다른 성분물질과 상대적으로 비교할 때 사용하는 수치로서 값이 작을수록 소거능이 높음을 나타낸다.

상기한 결과와 같이, 적하수오추출물의 항산화 효과는 실시예 대부분에서 좋은 효과를 보였으며, 특히 에칠아세테이트 분획물 및 부탄올 분획물에서 상대적으로 항산화 효과가 매우 우수한 것으로 확인되었으며, 이러한 결과는 일반적인 항산화제로 알려진 α-tocopherol의 효과보다 더 양호한 것으로 확인되었다.

실험예 2 엘라스테이즈활성저해 시험

본 발명의 상기 각 실시예 1, 2, 3 및 4에 따라 수득된 적하수오추출물을 시료로 하여 피부주름의 억제 및 개선효과 검정시험으로서 엘라스테이즈활성저해 시험(Elastase Inhibition Activity Test)을 실시하였다.

엘라스틴(Elastin)을 분해하는 효소인 엘라스테이즈의 활성을 측정하는 방법으로 엘라스테이즈 기질인 N-Succinyl-Ala-Ala-Ala ρ-nitroaniline을 이용하여 ρ-nitroaniline이 분해되면서 생기는 색의 변화를 410 nm의 파장에서 흡광도를 측정함으로써 엘라스테이즈 활성을 측정하는 방법이다. 완충액은 pH 8.0, 0.267 M Trizma-HCl (Sigma), 기질액은 8.8 mM N-Succinyl-(Ala)₃ ρ-nitroaniline (Sigma), 효소액은 돼지췌장 엘라스테이즈를 10 ㎍/mL (Sigma)의 농도로 사용하였다. 완충액 60 μL, 기질액 20 μL와 상기 각 실시예 1, 2, 3 및 4에 따라 수득된 각 적하수오추출물 각각을 농도별로 정제수에 녹여 100 μL로 한 시료액을 섞은 후, 효소액 20 μL를 넣어 25℃ 항온수조에서 15분간 반응시켜 ρ-nitroaniline의 생성량을 마이크로 플레이트 판독기를 이용하여 파장 405 nm에서 측정한다.

한편, 상기 엘라스테이즈 활성도를 측정하기 위한 대조군은 생약재 추출물 대신 정제수를 넣어 같은 방법으로 측정하였으며, 효소액 대신 정제수를 넣어 각각에 대한 색 보정값을 얻은 경우를 설정하였고, 비교군으로서 일반적인 엘라스타아제저해제로 잘 알려진 oleanolic acid와 ursolic acid를 사용하였다(참고문헌: Lim, Suk-Won외, The effect of two terpenoids, ursolic acid and oleanolic acid on epidermal permeability barrier and simultaneously on dermal functions, 대한화장품학회지, 29(2), 205-232, 2003).

하기 수학식 3를 이용하여 엘라스테이즈활성저해율을 수치로 계산하여 하기 [표 3]에 나타내었다. 하기 [표 3]에서, IC₅₀은 엘라스테이즈활성저해율 50%를 달성하기 위해 소요되는 추출물 시료의 농도로서 다른 성분물질과 상대적으로 비교할 때 사용하는 수치로서 값이 작을수록 저해능이 높음을 나타낸다.

상기한 [표 3]에 나타낸 결과와 같이, 적하수오추출물의 엘라스테이즈활성저해 효과는 에칠아세테이트 분획물을 제외하고 전체적으로 양호한 효과를 보였으며, 특히 부탄올 분획물의 엘라스테이즈활성저해 효과는 일반적인 엘라스테이즈저해제로 알려진 oleanolic acid 및 ursolic acid 보다 매우 우수한 것으로 확인되었다.

실험예 3 섬유아세포증식 효과 시험

본 발명의 상기 각 실시예 1, 2, 3 및 4에 따라 수득된 적하수오추출물을 시료로 하여 섬유아세포의 증식효과를 확인하기 위해 정상 사람 섬유아세포(normal human fibroblast)에 대한 증식 정도를 보고 판단하였다.

본 실험예에 사용된 정상 사람 섬유아세포(Detroit 551, KCLB 10110)는 한국세포주은행으로부터 분양받아 사용하였다.

세포를 10% 소혈청과 1% 항생제를 첨가한 DMEM (Dulbecco's Modified Eagle's Medium)에 1 x 10⁴ 세포의 밀도로 접종하고 하루 동안 5% CO₂, 37℃에서 배양시켰다. 시료를 농도별로 시럼을 함유하지 않은 배지에 희석하여 처리한다. 1 ~ 3일간 배양 후 세포 염색용 염료(MTT, 3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-2,5- diphenyltetrazolium bromide)를 사용하여 염색한 후, 4시간 동안 더 배양한다. 염색결정체를 디메틸설폭시드(dimethy sulfoxide)로 녹여내어 540 nm에서 흡광도를 측정하여 상대 비교하였다. 대조군으로는 시료를 처리하지 않은 배양액을 사용하였다. 하기 [수학식 4]를 이용하여 세포의 생존능력을 수치로 계산하여 하기 [표 4]에 나타내었다.

상기 [표 4]에 나타낸 결과에서와 같이, 적하수오추출물 실시예 1, 2, 3 및 4에서 전반적으로 세포증식효과가 확인되었으며, 특히 부탄올 분획물의 경우 매우 우수한 섬유아세포의 세포증식효과를 확인할 수 있었다.

이의 결과로 보아, 본 발명이 이루고자 하는 기술적 과제로서 본 발명에 따른 생약재 추출물은 주름개선효과를 검정하는 항산화, 엘라스테이즈활성저해 효과, 섬유아세포 증식 효과를 가지며, 특히 적하수오추출물 부탄올 분획물은 일반적으로 잘 알려진 항산화제인 α-tocopherol과 엘라스테이즈활성저해제인 oleanolic acid 및 ursolic acid의 효과 보다 더 우수한 효과를 확인함으로써, 우수한 피부 주름개선 효과가 있음을 확인할 수 있었다.

제형 실시예 1 및 비교예 1

상기 실시예 3에 따른 적하수오추출물을 함유한 피부 주름개선용 화장수의 성분구성을 하기 [표 5]과 같이 구성하여 제조하였다.

상기 [표 5]의 각 성분 번호로 구별된 성분 중에서, 먼저 성분 1(정제수)에 성분 2와 3을 교반 분산시킨 후, 성분 4 내지 6을 가하고, 성분 8 내지 10을 성분 7에 용해시킨 물질과 성분 11을 차례로 가하여 혼합하는 방식으로 제조하였다.

상기 제형 실시예 1에 대한 비교예 1은 성분 11인 실시예 3에 따른 적하수오추출물을 제외한 나머지 성분 구성이나 제조방법은 동일하게 진행하여 제조한 것을 설정하였다.

제형 실시예 2 및 비교예 2

상기 추출 실시예 3에 따른 적하수오추출물을 함유한 탄력로션의 성분구성을 하기 표 6과 같이 구성하여 제조하였다.

상기 [표 6]의 각 성분 번호로 구별된 성분 중에서, 먼저 성분 1 내지 7을 70의 온도에서 가열 용해시킨 다음, 성분 8 내지 11을 성분 12에 용해 분산시켜 70로 가열한 것에 유화한다. 이후, 상기 유화한 것을 성분 13으로 중화하고, 56의 온도로 냉각한 후, 성분 14를 가하여 교반하고 실온으로 냉각하여 제조하였다.

상기 제형 실시예 2에 대한 비교예 2는 성분 14인 실시예 3에 따른 적하수오추출물을 제외한 나머지 성분 구성이나 제조방법은 동일하게 진행하여 제조한 것을 설정하였다.

제형 실시예 3 및 비교예 3

상기 실시예 3에 따른 적하수오추출물을 함유한 탄력영양크림의 성분구성을 하기 [표 7]과 같이 구성하여 제조하였다.

상기 [표 7]의 각 성분 번호로 구별된 성분 중에서, 먼저 성분 1 내지 7을 70℃의 온도에서 가열 용해시킨 다음, 성분 9 내지 12를 성분 13에 용해 분산시켜 70℃로 가열한 것에 유화한다. 이후, 상기 유화한 것을 56℃의 온도로 냉각한 후, 성분 14를 가하여 교반하고 실온으로 냉각하여 제조하였다.

상기 제형 실시예 3에 대한 비교예 3은 성분 14인 실시예 3에 따른 적하수오추출물을 제외한 나머지 성분 구성이나 제조방법은 동일하게 진행하여 제조한 것을 설정하였다.

이상에서 설명된 본 발명의 최적 실시예들이 개시되었다. 여기서 특정한 용어들이 사용되었으나, 이는 단지 본 발명을 설명하기 위한 목적에서 사용된 것이지 의미한정이나 특허 청구범위에 기재된 본 발명의 범위를 제한하기 위해 사용된 것이 아니다.

실험예 4 : 피부노화 방지 및 피부자극 평가

본 발명에 따른 피부 주름 개선 및 노화방지용 화장료 조성물의 피부 주름개선효과 및 피부자극을 평가하기 위하여, 상기 제형 실시예 3과 비교예 3에서 제조된 탄력영양크림을 이용하여 관능시험을 실시하였다.

관능시험은 피부의 주름개선효과 항목에 대하여는 제형 실시예 3의 탄력영양크림을 기준으로 비교예 3의 탄력영양크림이 나타내는 주름개선효과를 상대적으로 평가하게 하였고, 피부자극에 대한 관능평가는 피부의 가려움, 따가움 및 홍반 등의 현상을 평가하게 하였다. 평가는 매우 우수(5점), 우수(4점), 보통(3점), 나쁨(2점), 매우 나쁨(1점)의 오점법 기준에 의거하여 수행하였으며, 그 결과를 하기 [표 8]에 나타내었다. 하기 [표 8]에서 피부자극은 피부자극이 없는 정도를 나타낸다.

상기 표 8에 나타난 바와 같이, 본 발명에 따른 제형예 3의 화장료 조성물에 대한 피부자극 평가점수는 4.50점으로 매우 양호하게 평가되어, 비교제형예 3과 마찬가지로 피부자극 정도가 낮아 피부 안전성이 우수함을 확인할 수 있었다.

또한, 비교제형예 3 대비 제형예 3의 화장료 조성물이 가진 상대적인 피부의 주름개선효과는 평가점수 4.60점으로 개선 정도가 매우 우수함을 알 수 있었다.

실험예 6. 피부의 안전성 실험

상기한 본 발명의 실시예 3에 따른 적하수오추출물과 상기 적하수오추출물을 포함하는 화장료 조성물인 제형 실시예3의 피부 안전성, 즉 피부반응의 관찰을 통해서 자극 혹은 알레르기성 반응의 발생 여부를 알아보기 위하여 한국식품의약품안전청 기준 피부안전성 검사법에 따라 인체첩포시험을 실시하였다.

피험자로 20세 이상 50세 이하의 건강한 성인 남, 여 30명을 선정하였고, 첩포시험은 대상자 상박 내측에 첩포를 부착하였으며 48시간이 지난 후 첩포를 제거하였다. 약 60분간 안정을 취하도록 한 후 첫 판독을 시행하였고, 첩포 부착 후 96시간이 경과한 후 2차 판독을 시행하였다. 판정기준은 하기 [표 9]에 나타낸 바와 같다.

첩포 부착 후 48시간과 96시간에 판독한 결과를 하기 [수학식 5]를 이용하여 시료에 대한 피부 반응도를 산출하였다.

첩포시험의 검사 결과에 근거하여 계산된 양성 반응을 보인 시료의 피부 자극도를 하기 [표 10]에 나타내었다.

상기한 [표 10]에 제시된 바와 같이, 본 발명의 적하수오추출물인 실시예 3과 상기 적하수오추출물을 포함하는 화장료 조성물인 제형 실시예3에 대한 인체첩포시험에서 하기 [표 11]에 따른 피부 반응도 판정 기준에 의하면 무자극으로 민감한 피부에 사용해도 좋은 결과로 나타났다. 따라서 상기한 본 발명의 생약재추출물 및 이를 포함하는 화장료 조성물은 피부부작용이 없는 안전한 성분으로 나타났다.

이상 설명한 바와 같이 본 발명은 적하수오 추출물을 유효성분으로 함유한 피부주름개선 기능성 화장료 조성물을 제공하는 뛰어난 효과가 있으므로 화장품 산업상 매우 유용한 발명인 것이다.

Claims (5)

1. 적하수오에 용매를 첨가하여 추출 후 용매로 순차적으로 분획함을 특징으로 하는 적하수오 추출물 제조방법
   
2. 제1항에 있어서, 상기 용매는 정제수, 탄소수 1내지 4인 무수 또는 함수 에탄올, 프리필렌글라이콜, 프로필알코올, 부틸렌글라이콜, 부틸알코올 및 글리세린을 포함한 용매군 중에서 선택된 하나의 순수용매 또는 이들 중 임의로 선택된 둘 이상이 조합된 혼합용매인 것을 특징으로 하는 방법
   
3. 제1항 또는 제2항의 방법으로 제조된 피부주름개선용 적하수오 추출물.
   
4. 제3항 기재의 적하수오 추출물을 화장료 조성물 총 중량을 기준으로 0.001 내지 10중량% 함유함을 특징으로 하는 피부주름개선 기능성 화장료 조성물.
   
5. 제3항에 있어서, 상기 화장료 조성물은 스킨류, 로션류, 에센스류, 크림류, 팩류, 파운데이션류 및 메이크업베이스류 중 선택된 어느 하나의 제형을 갖는 것을 특징으로 하는 피부주름개선용 화장료 조성물.

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