KR20140107784A

KR20140107784A - 탈모 방지 및 모발 성장 촉진용 조성물

Info

Publication number: KR20140107784A
Application number: KR1020130021771A
Authority: KR
Inventors: 김성준; 장영수; 나진상; 조길래; 이기수
Original assignee: 주식회사 크라운진; 주식회사 엔베코팜
Priority date: 2013-02-28
Filing date: 2013-02-28
Publication date: 2014-09-05

Abstract

본 발명은 탈모 방지 및 모발 성장 촉진용 조성물에 관한 것으로, 구체적으로 코퍼트리펩타이드(copper tripeptide), 니코티노일트리펩타이드(nicotinoyl tripeptide), 옥타펩타이드(octapeptide), 피롤리디닐디아미노피리미딘옥사이드(pyrrolidinyl diamino pyrimidine oxide), 아르기닌(arginine), 아젤라익산(azelaic acid), 완두콩추출물 및 사발팜열매추출물을 유효성분으로 함유하는 탈모 방지 및 모발 성장 촉진용 조성물에 관한 것이다.
본 발명의 조성물은 MAPK pathway, 특히 세포 성장 인자(cell growth factor)인 Erk 및 세포 생존 인자(cell survival factor)인 Akt를 활성화하여 모유두세포 및 케라티노사이트의 세포증식을 촉진하고, 세포자멸사 유발인자(pro-apoptotic factor)인 Bax 단백질 발현 억제 및 세포자멸사 억제인자(anti-apoptotic factor)인 Bcl-2 단백질 발현 증가를 유도하여 세포의 자기사멸을 억제하며, 또한 항산화력을 통해 우수한 탈모 방지 및 모발 성장 촉진 효과를 나타낸다.
따라서 본 발명의 조성물을 모발 외용제, 화장료, 세정제 등으로 이용하면, 부작용 없이 우수한 탈모 방지 및 모발 성장 촉진 효과를 기대할 수 있다.

Description

탈모 방지 및 모발 성장 촉진용 조성물{Composition for preventing falling out of the hair and promoting growth of the hair}

본 발명은 탈모 방지 및 모발 성장 촉진용 조성물에 관한 것으로, 구체적으로 코퍼트리펩타이드(copper tripeptide), 니코티노일트리펩타이드(nicotinoyl tripeptide), 옥타펩타이드(octapeptide), 피롤리디닐디아미노피리미딘옥사이드(pyrrolidinyl diamino pyrimidine oxide), 아르기닌(arginine), 아젤라익산(azelaic acid), 완두콩추출물(pisum sativum pea extract) 및 사발팜열매추출물(serenoa serrulata fruit extract)을 유효성분으로 함유하는 탈모 방지 및 모발 성장 촉진용 조성물에 관한 것이다.

인체의 모발은 일정한 주기를 가지고 성장하고 탈모가 발생되고 나서 동일한 모낭에서 계속 모발이 생성된다. 즉 일정 기간 동안만 성장하다 탈모되고 다시 새로운 성장주기가 시작된다. 이러한 성장주기는 성장기, 퇴행기, 휴지기, 발생기로 나눌 수 있다.

보통 인체의 모발 수는 10 ~ 12만개이며 하루에도 평균 30 ~ 100개 정도의 정상 탈모가 발생되는데, 모발주기의 성장기간 변화에 의해 경모가 가늘어지고 결국 탈모로 이어진다. 탈모의 원인으로 남성호르몬의 요인이 지적되고 있으며 해밀턴에 의해 남성호르몬의 관여와 유전적인 소인이 탈모와 관계가 있다는 것이 밝혀졌다.

남성호르몬인 테스토스테론(testosterone)은 두피의 모낭 주위에 있는 5알파 리덕타아제(5-α-reductase)에 의해 더욱 생물활성이 높은 5알파 디하이드로테스토스테론(5-α-dihydrotestosterone)으로 변환된다. 현재에는 이 디하이드로테스토스테론의 작용이 탈모의 주원인으로 여겨지고 있다. 그러므로 테스토스테론을 디하이드로테스토스테론으로 전환시키는 5알파 리덕타아제의 작용을 억제하는 물질이 탈모 방지제로 주목을 받고 있다.

탈모의 여러 가지 원인 중에서 모발 주변의 모세혈관 분포도 매우 중요하다. 모모세포는 모유두 내에 분포하고 있는 모유두 모세혈관에 의해 세포분열에 필요한 각종 영양물질의 공급을 받고 있다. 성장기의 모낭에서는 모낭의 밑에 혈관망이 분포되어 있으며 모낭에 혈액을 공급하여 모발의 성장을 돕는다. 따라서 모유두 및 모낭을 둘러싸고 있는 모세혈관의 발달은 모발의 성장에 연관이 있는 요소이다. 만약 모낭과 모유두을 둘러싸고 있는 말초혈관의 혈류량이 부족하면 모유두 부위 및 모모세포의 영양물질 공급의 부족에 의해 신진대사의 저하가 발생되고 모발의 성장에 장애가 된다.

또한 비듬의 과잉 발생에 의해 모발의 출구인 모구가 막혀 모근의 기능이 떨어질 수 있다. 비듬이 과잉 생성되면 세균 등이 이를 분해하고 이 과정에서 생성되는 분비물이 가려움증이나 염증을 동반하게 된다. 그리고 피지선으로부터 피지가 과다하게 분비되면 두피 상재균에 의해 분해되어 분해물의 두피 자극에 의해 지루성 탈모증을 유발할 수 있다.

탈모의 다른 원인으로 현대 사회에서 가장 큰 요인은 스트레스이다. 스트레스로 인한 탈모 가능성은 점점 더 높아지고 있다. 인체가 스트레스에 노출되면 자율신경계의 기능이 무너져 긴장을 관할하는 교감신경이 이완을 관할하는 부교감 신경보다 활발해진다. 이러한 작용은 시상하부에서 부신피질 자극 호르몬을 통하여 뇌하수체에서 부신피질자극호르몬(adrenocoticotropic hormone)을 분비하게 하며 이 호르몬이 부신에 작용하여 디하이드로에피안드로스테론 설페이트( dehydroepiandrosterone sulfate), 안드로스텐디온(androstenedion)을 분비토록 하고 이러한 물질들이 5알파 리덕타아제에 의해 디하이드로테스토스테론으로 환원되어 탈모를 증가시킨다. 결국 스트레스는 안드로겐 증가에 의한 호르몬경로에 의해 탈모에 큰 영향을 주는 것이다.

탈모의 또 다른 원인으로는 패스트푸드나 가공식품, 지나친 육류섭취가 있는데, 이는 영양의 불균형을 초래하여 모발 기능을 악화시킬 수 있다. 그 밖에 수면부족으로 인한 산소 결핍도 탈모를 일으키기 쉽다.

탈모 치료제로써 FDA의 공인을 받은 경구 투여제인 피나스테라이드(finasteride)는 탈모를 유발하는 남성 호르몬인 5알파 리덕타아제의 생성 억제 작용을 갖고 있으며 발모효과와 탈모방지 효과가 나타나는 것으로 알려져 있지만, 복용을 중단하면 다시 탈모가 진행이 되며 부작용으로는 성욕감퇴, 발기부전 등이 있고, 여성은 기형아 출산의 가능성이 있어 원칙적으로 복용이 금지되어 있다. 미녹시딜(minoxidil)의 경우 일부 환자에서 알레르기성 접속성 피부염(allergic contact dermatitis)이 발생되기도 하며 부정맥, 부종 등의 부작용이 발생할 수 있고, 원하지 않은 부위의 발모현상이 발생하기도 한다.

현재까지 6-(1-피페리디닐)-2,4-피리미딘디아민-3-옥시드(미녹시딜)를 유효성분으로 한 육모제(미국 특허 제4139619호), 섬유아세포증식인자-10(FGF-10)을 유효성분으로서 함유한 육모제(일본국 특개평10-279501호), 구리-펩타이드를 함유한 발모촉진제(대한민국 특허 제10-0387461호) 등이 공개된바 있다. 이들 육모제는 일부 효과를 인정받고 있는 것도 있지만 모든 탈모 증상에 대해서 완전히 대응할 수 있는 것은 아니다.

일반적으로 펩타이드는 생리활성이 우수하고 안정성이 높으나 가격이 고가이며 단독성분으로는 발모 촉진기능이 우수하지 못하는 단점이 있다. 반면 천연 추출물은 다양한 두피 영양성분이 함유되어 있고 가격이 비교적 저렴하지만 안정성이 낮은 단점이 있다. 또한 탈모개선 관련 생약제제들의 탈모증 개선 효과가 보고된 바 있으나, 그 결과는 미비한 수준이다(Kim, S. 등 In Vivo 12: 219-222(1998), Matsuda, H. 등 Promotion of hair growth by ginseng radix on cultured mouse vibrissal hair follocles. Phytother. Res. 17: 797-800(2003).

모발의 성장과 퇴화 과정은 매우 복잡하고 여러 많은 요인들이 서로 연계되어 있어, 만족할 만한 효과를 나타내는 육모제를 개발하는 것이 결코 쉽지 않다. 지금까지 개발된 육모제는 주로 제한된 특정 요인에만 영향을 미치기 때문에 효과가 그다지 높지 않거나 부작용이 발생하는 문제가 있는데, 이러한 이유로 새로운 우수한 육모제의 개발이 요망되고 있다.

이에 본 발명자들은 상기와 같은 기존 육모제의 문제점을 보완할 수 있는 새로운 육모제를 개발하기 위하여 예의 연구 노력하였으며, 이의 결과 코퍼트리펩타이드, 니코티노일트리펩타이드, 옥타펩타이드, 피롤리디닐디아미노피리미딘옥사이드, 아르기닌, 아젤라익산, 완두콩추출물 및 사발팜열매추출물이 함유된 조성물이 탈모 방지 및 발모와 양모에 효과가 우수하며 피부 자극이 적음을 확인하고 본 발명을 완성하게 되었다.

미국등록특허 제4139619호 일본 공개특허공보 특개평 제10-279501호 대한민국 등록특허 제10-0387461호

본 발명의 주된 목적은 부작용이 적고 효과가 우수한 탈모 방지 및 모발 성장 촉진용 조성물을 제공하는데 있다.

본 발명의 한 양태에 따르면, 본 발명은 Ala-His-Lys의 트리펩타이드에 구리 이온이 결합된 코퍼트리펩타이드(copper tripeptide), Gly-His-Lys의 트리펩타이드에 니코티노일기가 결합된 니코티노일트리펩타이드(nicotinoyl tripeptide), Lys-Leu-Lys-Lys-Thr-Glu-Thr-Gln의 옥타펩타이드(octapeptide), 피롤리디닐디아미노피리미딘옥사이드(pyrrolidinyl diamino pyrimidine oxide), 아르기닌(arginine), 아젤라익산(azelaic acid), 완두콩추출물(pisum sativum pea extract) 및 사발팜열매추출물(serenoa serrulata fruit extract)을 유효성분으로 함유하는 탈모 방지 및 모발 성장 촉진용 조성물을 제공한다.

이때 본 발명의 조성물에서 상기 각 성분의 함량은 조성물 총 중량을 기준으로 코퍼트리펩타이드 0.001 ~ 3중량%, 니코티노일트리펩타이드 0.001 ~ 3중량%, 옥타펩타이드 0.001 ~ 3중량%, 피롤리디닐디아미노피리미딘옥사이드 0.01 ~ 5중량%, 아르기닌 0.01 ~ 2중량%, 아젤라익산 0.01 ~ 2중량%, 완두콩추출물 0.01 ~ 5중량%, 사발팜열매추출물 0.001 ~ 5중량%인 것이 바람직하다.

본 발명의 조성물은 피부 외용제 또는 세정제로 사용되는 것이 바람직하며, 이때 피부 외용제는 로션(lotion), 에멀젼(emulsion), 젤(gel), 연고(ointment), 크림(cream), 액체(liquid) 및 에어로졸(aerosol)로 이루어진 군에서 선택된 제형, 세정제는 비누, 샴푸 및 린스로 이루어진 군에서 선택된 제형인 것이 바람직하다.

본 발명에 사용되는 코퍼트리펩타이드는 구리(Cu)에 Ala-His-Lys(A-H-K)의 트리펩타이드가 결합되어 이루어지며, 모유두세포(dermal papilla cells; DPCs)의 증식을 도와주어 탈모기능을 완화시키는 효과가 있다. 펩타이드의 아미노산 서열에 따라 효과가 다른 것으로 나타났으며, 특히 아미노산 서열이 Gly-His-Lys(G-H-K)인 코퍼트리펩타이드와 비교하여 탈모 방지 및 발모 효과가 우수한 것으로 나타났다.

본 발명에 사용되는 니코티노일트리펩타이드는 모발 성장에 중요한 영양성분이며 두피의 노화방지, 신경 기능 향상, 세포의 에너지 대사, 효소 생성 등에 있어서 필수 영양소인 나이아신(vitamin B3)에 Gly-His-Lys(G-H-K)의 트리펩타이드가 결합되어 있는 것으로, 세포독성이 없고 항염, 항산화 기능이 우수하며 인체에 안전하다. 니코티노일트리펩타이드는 비타민 B3와 트리펩타이드의 결합을 통해 효능과 안정성을 강화시킨 기능성 펩타이드이다.

본 발명에 사용되는 옥타펩타이드는 티모신 베타-4(Tβ-4)로부터 유래한 Lys-Leu-Lys-Lys-Thr-Glu-Thr-Gln(K-L-K-K-T-E-T-Q)의 아미노산 서열로 이루어진 모발 성장을 촉진하는 펩타이드이다. 천연의 Tβ-4와 동일한 기능을 나타내면서도, Tβ-4 보다 온도, 산, 알칼리 등에 안정성을 나타낼 뿐만 아니라, 장기보존성 등도 뛰어나다. 이 옥타펩타이드는 대한민국 등록특허 제10-0716119에 개시된 제조방법에 따라 제조할 수 있다.

피롤리디닐디아미노피리미딘옥사이드(pyrrolidinil diamino pyrimidine oxide)는 미국 FDA에서 승인되어 안전성이 확보되었으며, 최초 고혈압 치료제로 개발된 미녹시딜과 유사한 구조를 나타내고 혈관 확장 작용으로 모낭(hair bulb)부위 혈액 순환을 촉진하는 효과가 있다.

아르기닌은 아미노산의 일종이며, 모발성장을 촉진시켜주는 산화질소(nitric oxide)의 대사 전구물질로 피지 분비와 두피 가려움을 억제한다.

아젤라익산(azelaic acid)은 5-알파-리덕타아제 활성을 저해하는 성질이 있어 탈모 방지에 효과를 나타내고 피지 생성 억제 효과가 우수하다.

상기 코퍼트리펩타이드, 니코티노일트리펩타이드, 옥타펩타이드, 피롤리디닐디아미노피리미딘옥사이드, 아르기닌, 아젤라익산은 공지된 방법에 따라 제조하여 사용하거나 시판되는 것을 구입하여 사용할 수 있다.

완두콩은 당질 약 56%, 단백질 약 22%를 함유하고 있으며, 단백질의 반이상이 글로불린(globulin)이다. 이는 레구민(legumin)이라 불리우는 단백질이며 아미노산도 다량함유한다. 무기질로는 칼슘과 인이 많으며 그 밖에 비타민 B1, B6, 비오틴, 콜린, 엽록소 등이 풍부하다. 다양한 항산화 효소(superoxide dismutase)와 갈산프로필(propyl gallate), 토코페롤(tocopherol), 셀레늄(selenium)과 같은 항산화제가 포함되어 있기 때문에 생체에서는 활성 산소종을 소거하여 세포를 보호한다. 완두콩은 녹황색 채소류로 특히 비타민 C와 카로티노이드 및 엽록소 등이 풍부하여 생체 내에서 생리활성에도 중요한 영향을 미치며 영양적인 평가가 매우 높다. 본 발명에서는 이러한 완두콩으로부터 수득하는 완두콩추출물을 사용한다.

본 발명에서는 에탄올, 부틸렌글라이콜 등의 저급알코올, 다가알코올 또는 이들을 물과 혼합한 혼합용액을 용매로 사용한 완두콩추출물을 사용하는 것이 바람직하며, 완두콩을 분쇄하여 수득한 분말에 저급알코올, 다가알코올 또는 이 저급알코올, 다가알코올과 물의 혼합용액을 가한 다음 교반하여 추출하는 방법으로 제조할 수 있다. 이때 용매는 에탄올과 물의 혼합용액을 사용하는 것이 바람직하며, 완두콩 분말의 5 ~ 20배 중량을 사용하는 것이 바람직하다. 추출시간은 2 ~ 10일로 하는 것이 바람직하며, 상온에서 추출하는 것이 좋다. 추출 후 추출혼합물을 여과하여 고형분을 제외한 액상부를 사용하는 것이 바람직하며, 감압농축 과정을 거쳐 분말형태로 제조하는 것이 좋다.

사발팜열매추출물은 디하이드로테스토스테론(dihydrotestosterone; DHT) 생성을 억제하는 효과를 가지며 양모보조제로 기능을 가지고 있다. 사발팜메토의 열매에서 추출한 것으로 전립선 치료와 탈모치료에 사용되고 있는 천연물로써 염증 치료에 사용되어 왔으며 현재는 발모촉진 효과가 밝혀지고 있는 천연물이다. 본 발명에서는 에탄올, 부틸렌글라이콜 등의 저급알코올, 다가알코올 또는 이들을 물과 혼합한 혼합용액을 용매로 사용한 추출물을 사용하는 것이 바람직하다. 추출물의 제조는 상기 완두콩추출물의 경우와 동일하게 하는 것이 바람직하다.

일반적으로 헤어 펩타이드는 활성기의 환원력에 의해 효과를 나타내는 것이 아니라 아미노산의 서열에 의해 특정한 기능을 나타내므로 우수한 안정성과 효과를 나타낸다. 또한 펩타이드는 생체물질이므로 빠른 대사를 나타내고 생리활성이 우수하다. 본 발명의 조성물은 이러한 기능을 가진 최신 활성 헤어 펩타이드에 5-알파-리덕타아제 활성 저해제, 혈관 확장성분 및 우수한 세포영양성분이 추가 함유되어 각 구성성분의 효과를 적절히 발휘하고 상호 보완될 수 있도록 이루어진다.

본 발명의 조성물은 상기 각 재료를 적절한 함량으로 혼합하여 제조할 수 있다. 본 발명에 따르면 조성물 총 중량을 기준으로 코퍼트리펩타이드 0.001 ~ 3중량%, 니코티노일트리펩타이드 0.001 ~ 3중량%, 옥타펩타이드 0.001 ~ 3중량%, 피롤리디닐디아미노피리미딘옥사이드 0.01 ~ 5중량%, 아르기닌 0.01 ~ 2중량%, 아젤라익산 0.01 ~ 2중량%, 완두콩추출물 0.01 ~ 5중량%, 사발팜열매추출물 0.001 ~ 5중량%가 되도록 제조하는 것이 바람직하다.

보다 바람직하게는 코퍼트리펩타이드 0.05 ~ 2.0중량%, 니코티노일트리펩타이드 0.01 ~ 1.0중량%, 옥타펩타이드 0.02 ~ 1.0중량%, 피롤리디닐디아미노피리미딘옥사이드 0.02 ~ 2.0중량%, 아르기닌 0.02 ~ 1.0중량%, 아젤라익산 0.02 ~ 1.0중량%, 완두콩추출물 0.20 ~ 3.0중량%, 사발팜열매추출물 0.20 ~ 3.0중량%의 함량, 더욱 바람직하게는 코퍼트리펩타이드 약 0.5중량%, 니코티노일트리펩타이드 약 0.4중량%, 옥타펩타이드 약 0.2중량%, 피롤리디닐디아미노피리미딘옥사이드 약 0.2중량%, 아르기닌 약 0.2중량%, 아젤라익산 약 0.2중량%, 완두콩추출물 약 2.0중량%, 사발팜열매추출물 약 2.0중량%인 것이 바람직하다.

상기 각 재료의 함량은 실험을 통해 확인된 가장 높은 효과를 나타내는 함량을 기준으로 한 것이며 적정 함량을 초과할 경우 제형의 안정성 문제가 발생하고 함량이 미달할 경우 효과가 미흡하다.

본 발명의 조성물은 이를 구성하는 각 성분이 인체 또는 피부에 안전한 물질이므로, 탈모 방지 및 모발 성장 촉진을 위한 모발용 화장료, 모발용 세척제, 모발 외용제 등으로 사용될 수 있으며, 모발 또는 피부에 유해한 효과를 끼치지 않는 한, 조성물의 모발 성장 촉진 효과 기능 강화와 사용자의 체질 등 상황에 따라 모발 영양성분, 산화방지제, 피지 분비 억제제, 비듬 방지제, 보습제 등의 보조 성분들을 첨가할 수 있다. 상기 모발 영양 성분, 비듬 방지제, 보습제 등의 성분으로는 콜라겐, 케라틴, 아이오도프로피닐부틸카바메이트 등을 예로들 수 있다. 이들 보조 성분은 주성분의 효과에 방해를 주지 않고 제형을 유지할 수 있는 범위에서 사용 가능하며 바람직하게는 조성물 총 중량에 대하여 50 ~ 90중량%로 첨가될 수 있다.

피부외용제의 제형은 로션(lotion), 에멀젼(emulsion), 젤(gel), 연고(ointment), 크림(cream), 액체(liquid), 에어로졸(aerosol) 등의 제형을 가질 수 있다.

화장료로 사용 시 제형 또는 사용목적 등에 맞게 임의로 선정한 물질을 첨가할 수 있다. 예를 들어, 정제수, 오일성분, 계면활성제, 보습제, 고급 지방산, 고급 알코올, 증점제, 킬레이트제, 색소, 산화방지제, 방부제, 왁스, pH조절제, 향료 등이 첨가될 수 있다.

상기 오일 성분으로는 실리콘오일, 아보카도오일, 세틸에칠헥사노에이트, 부틸렌글라이콜디카프릴레이트/디카프레이트, 마카다미아씨오일, 미네랄 오일, 살구씨유칼립투스 오일, 미리스틴산 이소프로필, 에뮤 오일, 밍크 오일, 해바라기씨 오일, 아몬드 오일, 녹차씨 오일 등이 배합될 수 있다.

상기 계면활성제로는 세테아릴올리베이트, 소르비탄올리베이트, 폴리소르베이트80, 글리세릴스테아레이트, 하이드로제네이티드포스파티딜콜린, 폴리소르베이트20, 피이지-100스테아레이트, 피이지-60캐스터오일, 코카마이드디이에이 등이 배합될 수 있다.

상기 보습제로는 소듐하이알루로네이트, 글리세린, 솔비톨, 디프로필렌 글라이콜, 부틸렌글라이콜, 풀루란, 베타인 등이 배합될 수 있다.

상기 고급 알코올로는 세토스테아릴알코올, 세틸알콜, 스테아릴 알코올, 옥틸도데칸올, 이소스테아릴 알코올 등이 사용될 수 있다. 상기 증점제로는 하이드록시에칠셀룰로오스, 소듐아크릴레이트/소듐아크릴로일디메칠타우레이트코폴리머, 암모늄폴리아크릴로일디메칠타우레이트/브이피코폴리머, 카보머, 잔탄검, 글리세릴아크릴레이트/아크릴릭애씨드코폴리머, 폴리쿼터늄-10, 아크릴레이트코폴리머, 하이드록시프로필구아하이드록시프로필트리모늄클로라이드 등이 배합될 수 있다.

상기 킬레이트제로는 디소듐이디티에이, 테트라소듐이디티에이 등이 사용될 수 있다.

상기 색소로는 블랙 401호, 청색1호, 청색 적색102호, 적색 106호, 황색4호, 황색 5호 등이 배합될 수 있다.

상기 지방산으로는 라우릭애씨드, 스테아릭애씨드, 미리스틱애씨드, 팔미틱애씨드, 이소스테아릭애씨드 등이 배합될 수 있다.

상기 산화방지제로는 아스코빅애씨드, 토코페릴아세테이드, 부틸레이티드하이드록시톨루엔 등이 배합될 수 있다.

상기 방부제로는 메칠파라벤, 부틸파라벤, 프로필파라벤, 페녹시에탄올 등이 배합될 수 있다.

상기 왁스로는 세레신, 호호바왁스, 마이크로크리스탄린왁스, 오조케라이트, 카나우바왁스, 칸데닐라왁스, 밀납, 경납 등이 배합될 수 있다.

상기 pH조절제로는 수산화나트륨, 수산화칼륨, 디에탄올아민, 모노에탄올아민, 트리에탄올아민, 구연산나트륨, 구연산 등이 배합될 수 있다.

상기 향료로는 로즈마리, 라벤다, 카모마일 등의 천연향료와 합성향료 등이 배합될 수 있다.

본 발명의 제형은 특별히 제한되지 않으나 헤어토닉, 헤어트리트먼트, 삼푸, 린스 등의 통상적으로 두피 및 모발에 적용시킬 수 있는 모든 제형의 형태로부터 선택되는 제형일 수 있으며, 두피나 모발에 직접 도포하거나 살포하는 등의 방법으로 적용할 수 있다.

본 발명 조성물의 사용량은 그 제형 및 적용대상의 상태에 따라 조절될 수 있어 한정되지 않으나, 적용대상이 성인인 경우를 기준으로 하루에 0.2 ~ 2.0g을 연속적 또는 간헐적으로 적용 가능할 것으로 예상된다.

본 발명의 조성물은 MAPK pathway, 특히 세포 성장 인자(cell growth factor)인 Erk 및 세포 생존 인자(cell survival factor)인 Akt를 활성화하여 모유두세포 및 케라티노사이트의 세포증식을 촉진하고, 세포자멸사 유발인자(pro-apoptotic factor)인 Bax 단백질 발현 억제 및 세포자멸사 억제인자(anti-apoptotic factor)인 Bcl-2 단백질 발현 증가를 유도하여 세포의 자기사멸을 억제하며, 또한 항산화력을 통해 우수한 탈모 방지 및 모발 성장 촉진 효과를 나타낸다.

따라서 본 발명의 조성물을 피부 외용제, 화장료, 세정제 등으로 이용하면, 부작용 없이 우수한 탈모 방지 및 모발 성장 촉진 효과를 기대할 수 있다.

도 1은 본 발명의 탈모 방지 및 모발 성장 촉진용 조성물의 인간모유두세포 및 케라티노사이트 세포 증식 효과를 나타낸 그래프이다. A는 인간모유두세포, B는 케라티노사이트에 대한 결과이다.
도 2는 본 발명의 탈모 방지 및 모발 성장 촉진용 조성물의 ERK 활성화 효과를 나타낸 Western blot 결과이다. A는 인간모유두세포, B는 케라티노사이트에 대한 결과이다.
도 3은 본 발명의 탈모 방지 및 모발 성장 촉진용 조성물의 Akt 활성화 효과를 나타낸 Western blot 결과이다. A는 인간모유두세포, B는 케라티노사이트에 대한 결과이다.
도 4는 본 발명의 탈모 방지 및 모발 성장 촉진용 조성물의 Bcl-2 발현 증가 효과 및 Bax 발현 억제 효과를 나타낸 Western blot 결과이다.
도 5는 본 발명의 탈모 방지 및 모발 성장 촉진용 조성물의 항산화능을 측정하여 나타낸 그래프이다.
도 6은 본 발명의 헤어토닉의 실제 탈모 방지 및 모발 성장 촉진 효과를 나타낸 임상실험 결과 사진이다. A는 본 발명의 헤어토닉, B는 비교예에 대한 결과이다.

이하, 실시예를 통하여 본 발명을 더욱 상세히 설명하기로 한다. 이들 실시예는 단지 본 발명을 예시하기 위한 것이므로, 본 발명의 범위가 이들 실시예에 의해 제한되는 것으로 해석되지는 않는다.

실시예 1. 복합혼합물(TPC) 제조

다음 표 1의 조성에 따라 복합혼합물(TPC)을 제조하였다.

	원료명	함량(중량%)
복합혼합물(TPC)	코퍼트리펩타이드	0.5
	니코티노일트리펩타이드	0.4
	옥타펩타이드	0.2
	피롤리디닐디아미노피리미딘옥사이드	0.2
	아르기닌	0.2
	아젤라익산	0.2
	완두콩추출물	2.0
	사발팜열매추출물	2.0
	에탄올	5.0
	트윈80	0.5
	정제수	적량

코퍼트리펩타이드 및 니코티노일트리펩타이드는 각각 아래 화학식 1 및 2와 같이 합성한 것을 사용하였으며, 옥타펩타이드(K-L-K-K-T-E-T-Q)는 대한민국 등록특허 제10-0716119에 개시된 제조방법에 따라 제조된 것을 사용하였다.

[화학식 1]

[화학식 2]

또한, 완두콩추출물과 사발팜열매추출물은 다음과 같이 제조하여 사용하였다.

< 완두콩추출물 >

완두콩을 흐르는 물에 3회 이상 세척하여 불순물을 완전히 제거 건조하고, 분쇄기를 이용하여 분쇄 후 분쇄물인 분말을 수득하였다. 얻어진 분말 100g에 94% 에탄올 수용액(대정화금) 1ℓ를 가하여 7일간 실온에서 교반하면서 추출하였다. 상기 과정을 3회 반복하였으며, 얻어진 추출액을 합하여 40℃ 이하에서 감압 농축하여 추출물 7.8g(수득율 7.8%)을 얻었다.

< 사발팜열매추출물 >

완두콩 대신 사발팜열매를 사용하는 것을 제외하고, 상기 완두콩추출물과 동일 방법으로 하여 추출물 8.2g(수득율 8.2%)을 얻었다.

시험예 1. 복합혼합물에 대한 세포의 성장효과 확인

본 시험예에 사용된 인간모유두세포(human hair dermal papilla cell)는 ScienceCell Research Laboratory(USA)로부터, 케라티노사이트(keratinocyte)는 ATCC(USA)로부터 분양받아 사용하였으며, 10% FBS(Gibco BRL, Grand Island, NY, USA)와 1% antibiotics(Gibco BRL)가 첨가된 Dulbecco's Modified Eagle's Medium(DMEM; Gibco BRL) 배지를 사용하여 37℃, 5% CO₂의 조건에서 배양하였다. 세포의 성장효과를 확인하기위해서는 Cell Counting Kit(Dojindo, Japan)를 이용하여 WST assay하는 방법을 사용하였다.

인간모유두세포 및 케라티노사이트를 96 well plate에 1.5×10⁴ cells/well이 되도록 분주하고 12시간 배양한 다음, 상기 실시예 1의 복합혼합물을 농도별(0, 10, 50, 100, 500 및 1,000ppm)로 처리하여 24시간 배양하였다. Well 당 10㎕의 WST-8 용액을 첨가하여 37℃, 5% CO₂의 조건에서 3시간동안 반응시킨 후, ELISA reader(BIO-TEK Instruments Inc., Power wave X340, Winooski, VT, USA)를 이용하여 450nm에서 흡광도를 측정하였다. 실험값은 시료를 처리하지 않은 대조군에 대한 백분율로 표시하여 도 1에 나타내었다.

인간모유두세포(A) 및 케라티노사이트(B) 모두에서 복합혼합물 농도에 의존적으로 세포증식이 촉진되는 것을 확인하였으며, 이러한 세포증식 촉진효과는 케라티노사이트보다 인간모유두세포에서 더욱 두드러지는 것으로 나타났다.

시험예 2. 세포내 단백질 발현 분석

본 발명의 조성물이 p-ERK1/2, t-ERK1/1, p-Akt, t-Akt, Bcl-2 및 Bax 단백질 발현에 미치는 영향을 알아보기 위하여 웨스턴블롯(Western blot) 분석을 실시하였다.

인간모유두세포 및 케라티노사이트를 6 well plate에 분주하고 12시간 배양한 다음, 실시예 1의 복합혼합물을 농도별(0, 100, 500 및 1,000ppm)로 처리하여 30분 또는 24시간 배양하였다. 배양 후, Phosphate buffered saline(PBS; Gibco BRL)으로 2회 세척하고 RIPA buffer(Cell Signaling, Danvers, MA, USA)를 이용하여 세포 내 단백질을 얻었다. BCA protein assay reagent kit(Pierce, Rockford, IL, USA)를 이용하여 단백질 농도를 측정한 후, 동량(20㎍)의 각 단백질을 10% SDS-PAGE gel에 전기영동하고, nitrocellulose membrane(Whatman, Dassel, Germany)으로 transfer하였다. 항체의 비특이적 결합을 차단하기 위하여 membrane을 5% skim milk를 이용하여 1시간 반응시킨 후, p-ERK1/2, t-ERK1/2, p-Akt, t-Akt, Bcl-2 및 Bax(Cell Signaling, USA) 항체가 첨가된 5% skim milk로 교체하고, 4℃에서 12시간 반응시켰다. TBST(50mM Tris-HCl(pH 7.5), 150mM NaCl, 0.1% Tween-20)로 5분간 3회 세척하고 각각에 대한 이차항체로 실온에서 1시간 반응시킨 후, ECL(Amersham Pharmacia Biotech., NJ, USA)을 이용하여 각각의 단백질 발현을 확인하였다. 이의 결과를 도 2 내지 4에 나타내었다.

ERK1/2의 활성화 형태인 p-ERK1/2 단백질 발현이 실시예 1 복합혼합물 농도에 의존적으로 증가되는 것을 확인하였으며 TPC의 세포증식 효과는 TPC가 MAPK pathway, 특히 cell growth factor인 Erk를 활성화시킴으로써 이루어지는 것으로 나타났다.

ERK1/2 경우와 마찬가지로 Akt의 활성화 형태인 p-Akt 단백질 발현이 실시예 1의 복합혼합물 농도에 의존적으로 증가되는 것을 확인하였으며 따라서 실시예 1의 복합혼합물이 cell survival factor인 Akt 또한 활성화시킴으로써, 인간모유두세포 및 케라티노사이트의 세포증식을 촉진시키는 것으로 나타났다.

실시예 1의 복합혼합물이 세포자멸사 유발인자(pro-apoptotic factor)인 Bax 단백질 발현은 억제시키는 한편, 세포자멸사 억제인자(anti-apoptotic factor)인 Bcl-2 단백질 발현은 증가시키는 것으로 나타났다.

따라서 본 발명의 조성물이 세포증식 효과는 물론 세포자멸사 억제효과 또한 가지므로, 탈모방지에 효과적일 것으로 판단되었다.

시험예 3. DPPH 라디칼 소거능 측정

본 발명 조성물의 항산화능을 알아보기 위하여 Kilani 등의 방법(Kilani et al., 2004)에 따라 DPPH 라디칼 소거능을 측정하였다.

다양한 농도(10, 50, 100, 500 및 1,000ppm)의 실시예 1 복합혼합물 100㎕와 0.2mM DPPH 용액 100㎕를 잘 혼합하여 실온에서 10분간 반응시킨 후, ELISA reader를 이용하여 517nm에서 흡광도를 측정하여 도 5에 나타내었다. 측정값은 다음과 같이 전자공여능으로 표시하였다.

전자공여능(%) = (1-시료첨가군의 흡광도/무첨가군의 흡광도) × 100

통계분석 : 본 시험에서 얻은 정량적인 결과는 평균값과 표준편차로 표시하였다. 통계처리는 Student's t-test 방법을 사용하였다.

실시예 1 복합혼합물의 항산화력이 항산화제로 널리 사용 중인 비타민 C 주성분인 ascorbic acid의 약 75% 수준임을 확인하였으며, 이러한 항산화력은 농도에 의존적으로 증가되는 것으로 나타났다.

실시예 2. 헤어토닉 제조

상기 실시예 1의 복합혼합물을 이용하여 다음 표 2와 같이 헤어토닉을 제조하였다.

각각의 원료(중량%)를 계량하여 Agi Mixer 100rpm으로 10분간 교반한 후 여과하였다.

배합순서	배합목적	원료명	실시예	비교예
1	용제	정제수	적량	적량
2	용제	에탄올	5.0	5.0
3	보습제	부틸렌글라이콜	2.0	2.0
4	보습제	글리세린	1.0	1.0
5	킬레이트제	디소듐이디티에이	0.02	0.02
6	헤어영양제	복합혼합물(TPC)	20.0	-
7	방부제	페녹시에탄올	0.2	0.2
8	방부제	메칠파라벤	0.1	0.1
9	계면활성제	트윈80	0.5	0.5
10	착향제	향료	적량	적량

시험예 4. 임상실험평가

상기 실시예 2 헤어토닉의 탈모방지, 양모, 발모의 효과를 평가하였다.

탈모증이 있는 40대 남성 환자에게 탈모 부위에 1회/1일 0.40 ~ 0.70g 도포한 후 1달 간격으로 두피 상태를 측정하여 도 6에 나타내었다.

이의 결과 탈모증 남성환자에게서 탈모증 억제효과를 확인하였다.

Claims

Ala-His-Lys의 트리펩타이드에 구리 이온이 결합된 코퍼트리펩타이드(copper tripeptide), Gly-His-Lys의 트리펩타이드에 니코티노일기가 결합된 니코티노일트리펩타이드(nicotinoyl tripeptide), Lys-Leu-Lys-Lys-Thr-Glu-Thr-Gln의 옥타펩타이드(octapeptide), 피롤리디닐디아미노피리미딘옥사이드(pyrrolidinyl diamino pyrimidine oxide), 아르기닌(arginine), 아젤라익산(azelaic acid), 완두콩추출물 및 사발팜열매추출물을 유효성분으로 함유하는 탈모 방지 및 모발 성장 촉진용 조성물.
제 1항에 있어서,
상기 조성물은 상기 코퍼트리펩타이드 0.001 ~ 3중량%, 니코티노일트리펩타이드 0.001 ~ 3중량%, 옥타펩타이드 0.001 ~ 3중량%, 피롤리디닐디아미노피리미딘옥사이드 0.01 ~ 5중량%, 아르기닌 0.01 ~ 23중량%, 아젤라익산 0.01 ~ 2중량%, 완두콩추출물 0.01 ~ 5중량%, 사발팜열매추출물 0.001 ~ 5중량%를 함유하는 것을 특징으로 하는 탈모 방지 및 모발 성장 촉진용 조성물.
제 1항 또는 제 2항에 있어서,
상기 조성물은 피부 외용제 또는 세정제로 사용되는 것을 특징으로 하는 탈모 방지 및 모발 성장 촉진용 조성물.
제 3항에 있어서,
상기 피부 외용제는 로션(lotion), 에멀젼(emulsion), 젤(gel), 연고(ointment), 크림(cream), 액체(liquid) 및 에어로졸(aerosol)로 이루어진 군에서 선택된 제형인 것을 특징으로 하는 탈모 방지 및 모발 성장 촉진용 조성물.
제 3항에 있어서,
상기 세정제는 비누, 샴푸 및 린스로 이루어진 군에서 선택된 제형인 것을 특징으로 하는 탈모 방지 및 모발 성장 촉진용 조성물.