KR20140071675A - 흑미 추출물을 포함하는 조성물 - Google Patents

Abstract

흑미 추출물을 포함하는 조성물이 제공된다. 본 발명의 일 실시예에 따른 조성물은, 흑미 추출물을 포함하며, 지방함유식이의 섭취에 의해 유발될 수 있는 비알콜성지방간(NAFLD) 질환을 예방하고 개선하는 효과를 갖는다.

Description

흑미 추출물을 포함하는 조성물{Composition comprising extract of black rice}

본 발명은 흑미 추출물을 포함하는 조성물에 관한 것으로, 보다 구체적으로 흑미 추출물을 포함하며, 지방함유식이의 섭취에 의해 유발될 수 있는 비알콜성지방간(NAFLD) 질환을 예방하고 개선하는 효과를 갖는 조성물에 관한 것이다.

지방간 질환(fatty liver disease)이란, 지방간이라고도 불리며 간세포에 지방(트리글리세리드 등)이 이상 축적되는 것에 기인하여 간 장애를 초래하는 질환이다. 지방간 질환의 초기 병태는 간세포에 지방 침착만을 인정하는 단순성 지방간이며, 그 후에 지방간염(간섬유증 포함), 간경변이나 간세포암으로 병태가 진행되는 것이 알려져 있다. 간장에 지방이 침착되는 원인으로는 알콜 섭취, 비만, 당뇨병, 지질대사 이상, 약제(스테로이드, 테트라사이클린 등), Cushing 증후군, 중독(황린 등), 고도의 영양 장애 등을 들 수 있다.

지방성 간 질환의 원인은 크게 알콜성과 비알콜성으로 나누어지며, 전자를 원인으로 하는 간 질환을 알콜성 지방간 질환(Alcoholic fatty liver disease), 후자를 원인으로 하는 간 질환을 비알콜성 지방간질환(nonalcoholic fatty liver disease: NAFLD)이라고 부른다.

알콜성 지방간질환은, 초기의 단순성 지방간에서 지방간염, 간경변으로 진행된다. 비알콜성 지방간질환은, 단순성 지방간에 머물며 병태가 진행되지 않는 것으로 알려져 있었지만, 근래에 비알콜성 지방간 질환도 단순성 지방간에서 지방간염이나 간경변으로 병태가 진행되는 경우가 있는 것으로 밝혀졌다.

최근 들어, 영양상태가 좋아지고 성인병이 늘어감에 따라 지방간 환자가 늘어나는 추세에 있다. 대한간학회에 따르면 최근 10년간 간질환 유병율은 감소하였으나, 지방간 유병율은 20년간 3배나 증가하였으며, 그 중에서도 비알콜성 지방간의 비율이 50%를 초과하여 비알콜성 지방간 비율이 급격히 증가하고 있는 것으로 나타났다.

비알콜성 지방간질환이란, 간에 유해할 정도로 인정되는 알콜 섭취 병력이 없음에도 불구하고 간 조직 검사에서 알콜성 간염의 특징적인 소견인 지방성 변화(fatty change, steatosis)와 소엽성간염(lobular hepatitis, steatohepatitis)등을 나타내는 경우를 말한다. 간의 병리소견은 단순 지방간(Non-Alcoholic Fatty Liver, NAFL)에서부터 지방간염(Non-Alcoholic Steatohepatits, NASH), 지방간염과 동반된 섬유화증, 간경변증 등의 다양한 스펙트럼을 나타내는데, 비알콜성 지방간질환은 이 모두를 포함하는 의미로 사용된다.

이러한 비알콜성 지방간질환은 대부분 인슐린 저항성, 비만, 당뇨병 및 고지혈증 등의 합병증을 동반한다. 이러한 합병증이 존재하는 경우에는 치료를 실시해야 하는데, 비알콜성 지방간질환에 대한 치료의 원칙은 식사 요법이나 운동요법 등 생활 습관의 개선이지만, 확실하게 실행하기 어려운 것이 현실이다. 이에 비알콜성 지방간염의 경우, 간경변 또는 간세포암으로 진전될 가능성이 높기 때문에 현재 약물 치료가 주류를 이루고 있다.

한편, 약물 치료의 경우 약제의 내성이나 부작용이 문제가 될 수 있다. 이에 의해, 비알콜성지방간을 개선하고 예방하기 위해, 천연물인 식물 소재와 같은 부작용이 없는 물질에 대한 연구가 거듭되고 있다.

이에 본 발명자들은 비알콜성지방간을 예방하거나 개선할 수 있는 조성물을 개발하던 중 흑미 추출물이 생체 내 비알콜성지방간을 예방하거나 개선하는 효과가 있음을 확인하고, 흑미 추출물을 포함하는 조성물을 제조하게 되었다.

이에, 본 발명이 해결하려는 과제는, 흑미 추출물을 포함하여 지방함유식이의 섭취에 의해 유발될 수 있는 비알콜성지방간(NAFLD) 질환을 예방하고 개선하는 효과를 갖는 조성물을 제공하는 것이다.

본 발명의 해결하려는 과제는 이상에서 언급한 기술적 과제로 제한되지 않으며, 언급되지 않은 또 다른 기술적 과제들은 아래의 기재로부터 당업자에게 명확하게 이해될 수 있을 것이다.

상기 해결하려는 과제를 달성하기 위한 본 발명의 일 실시예에 따른 조성물은, 흑미 추출물을 포함하며, 지방함유식이의 섭취에 의해 유발될 수 있는 비알콜성지방간(NAFLD) 질환을 예방하고 개선하는 효과를 갖는다.

상기 비알콜성지방간 질환을 예방하고 개선하는 효과는 간 조직내 지방산을 산화시키는 PPARα를 증가시키는 효과인 것을 특징으로 한다.

상기 PPARα의 증가에 의해, 상기 간 조직내에서 카르니틴 팔미토일 트랜스퍼라제(Carnitine palmitoyl transferase-1, CPT1) 또는 아실코에이옥시다아제(Acyl-CoA Oxidase, ACO)이 활성화 되거나, Cyp4A10 유전자 발현이 활성화 되는 것을 특징으로 한다.

상기 활성에 의해 상기 간 조직내의 지방 축적이 감소되는 것을 특징으로 한다.

상기 비알콜성지방간(NAFLD) 질환을 예방하고 개선하는 효과는 혈액내 중성지방과 콜레스테롤을 감소시키는 효과인 것을 특징으로 한다.

상기 흑미 추출물은 상기 조성물 총 중량에 대해 0.1중량% 내지 40중량%가 포함되는 것을 특징으로 한다.

본 발명에 의할 경우, 흑미 추출물을 포함하며, 지방함유식이의 섭취에 의해 유발될 수 있는 비알콜성지방간(NAFLD) 질환을 예방하고 개선하는 효과를 갖는 조성물이 제공된다.

도 1은 식이 제공후 7주 경과후 마우스의 간 조직을 촬영한 사진이다.
도 2는 7주간 식이를 투여한 후, 혈액 내 중성지방의 변화를 나타낸 그래프이다.
도 3은 7주간 식이를 투여한 후, 혈액 내 콜레스테롤의 변화를 나타낸 그래프이다.
도 4는 7주간 식이를 투여한 후, 간 조직내 PPARα의 변화를 나타낸 그래프이다.
도 5는 7주간 식이를 투여한 후, 간 조직내 CPT1의 활성 변화를 나타낸 그래프이다.
도 6은 7주간 식이를 투여한 후, 간 조직내 ACO의 활성 변화를 나타낸 그래프이다.
도 7은 7주간 식이를 투여한 후, 간 조직내 Cyp4A10 유전자 발현 활성 변화를 나타낸 그래프이다.

본 발명의 이점 및 특징, 그리고 그것들을 달성하는 방법은 상세하게 후술되어 있는 실시예들을 참조하면 명확해질 것이다. 그러나 본 발명은 이하에서 개시되는 실시예들에 한정되는 것이 아니라 서로 다른 다양한 형태로 구현될 것이며, 단지 본 실시예들은 본 발명의 개시가 완전하도록 하며, 본 발명이 속하는 기술분야에서 통상의 지식을 가진 자에게 발명의 범주를 완전하게 알려주기 위해 제공되는 것이며, 본 발명은 청구항의 범주에 의해 정의될 뿐이다.

다른 정의가 없다면, 본 명세서에서 사용되는 모든 용어(기술 및 과학적 용어를 포함)는 본 발명이 속하는 기술분야에서 통상의 지식을 가진 자에게 공통적으로 이해될 수 있는 의미로 사용될 수 있을 것이다. 또 일반적으로 사용되는 사전에 정의되어 있는 용어들은 명백하게 특별히 정의되어 있지 않는 한 이상적으로 또는 과도하게 해석되지 않는다.

이하, 본 발명의 실시예에 따른 흑미 추출물을 포함하는 조성물을 설명한다.

본 발명의 일 실시예에 따른 조성물은 흑미 추출물을 포함하며, 지방함유식이의 섭취에 의해 유발될 수 있는 비알콜성지방간(NAFLD) 질환을 예방하고 개선하는 효과를 갖는다.

흑미는 풍부한 영양성분, 기능성 색소 및 약용효과를 가지고 있다. 흑미의 영양 성분으로는 단백질, 섬유소, 인체에 필수적인 무기질 및 비타민 B군, 비타민 C와 니아신(Niacin)과 카로틴(carotene)등이 있으며, 약용효과로는 항산화 및 항암 효과가 알려져 있다. 일반적으로 흑미는 백미에 소량씩 혼합하여 밥으로 조리함으로써 섭취하거나 술, 식혜, 국수, 과자 및 떡 등의 원료로 이용되고 있다. 흑미의 색소성분은 안토시아닌계 색소로서 수용성이어서 인체에 흡수가 용이하다고 알려져 있다.

한편, 본 발명에서 비알콜성지방간 질환(non-alcoholic fatty liver disease, NAFLD)은 원발성과 속발성에 따른 비알콜성 지방간 질환을 모두 포함하나, 바람직하게는 원발성 고지혈증, 당뇨 또는 비만으로부터 발생되는 비알콜성 지방간 질환을 의미할 수 있다.

또한, 본 발명에서 비알콜성지방간 질환 (non-alcoholic fatty liver disease, NAFLD)은 단순 지방간 (simple steatosis), 비알콜성 지방간염 (non-alcoholic steatohepatitis, NASH) 및 이러한 질환의 진전에 의해 발생되는 간섬유화 (liver fibrosis)와 간경화 (liver cirrhosis)를 포함할 수 있다.

비알콜성지방간 질환은 예를들어 지방함량식이 섭취에 의해 유발될 수 있다. 여기서, 지방함유식이는 섭취에너지에 대한 지방이 차지하는 비율이 15% 이상인 것을 의미할 수 있으나, 이에 한정되는 것은 아니고, 지방을 함유하는 음식에 포괄적으로 적용될 수 있다. 한편, 지방함유식이중 섭취에너지에 대한 지방이 차지하는 비율이 15% 이상인 것을 특히, 고지방식이라 정의한다.

본 발명의 일 실시예에 따른 조성물은 간 조직내에서 간지질의 축적을 유의적으로 감소시키는 효과가 있다.

또한, 본 발명의 일 실시예에 따른 조성물은 혈액내 중성지방과 콜레스테롤의 함량을 유의적으로 감소시키는 효과가 있다.

또한, 본 발명의 일 실시예에 따른 조성물은 간 조직내에서 지방산을 산화시키는 퍼옥시좀 증식인자 활성화 수용체(peroxisom proliferator activated receptor; 이하 "PPAR"이라고 약칭함), 특히 PPARα를 증가시킬 수 있다.

이에 의해, 간 조직내에서 카르니틴 팔미토일 트랜스퍼라제(Carnitine palmitoyl transferase-1, CPT1) 또는 아실코에이옥시다아제(Acyl-CoA Oxidase, ACO)를 활성화시키거나 Cyp4A10 유전자 발현을 활성화시키는 효과가 있다.

한편, PPAR에 대해 보다 구체적으로 살펴보면 다음과 같다.

PPAR은 일종의 핵 전사인자 수용체(nuclear receptor) 단백질로 알려져 있다. 먼저, 퍼옥시좀(peroxisome)은 세포내 미세기관으로서 산화 작용에 관여하고 간과 신장에 풍부하게 존재하며 세포내 지방산을 산화시키고 과산화수소를 만들어 독성물질을 중화시킨다. 또한, 산화 효소인 카탈라제(catalase)를 이용하여 과다하게 생성된 과산화수소를 물과 산소로 분해하는 기능도 가진다. 둘째, 퍼옥시좀 증식인자(peroxisome proliferator)는 퍼옥시좀을 수적으로 증가시킬 수 있는 화합물을 일컫는다. 여기에는 지방과 지방산, 고지혈증 치료제인 피브레이트 (fibrate), 프로스타글란딘 (prostaglandin) 등이 속한다. 이러한 퍼옥시좀 증식인자를 리간드로 하는 핵 전사인자 수용체를 총칭하여 퍼옥시좀 증식인자 활성화 수용체 (PPAR)라고 부른다.

퍼옥시좀 증식인자 활성화 수용체는 크게 PPARα, PPARδ/β, PPARγ로 나뉘는데, PPARα는 주로 간에서 발현되고 지방산의 산화나 독성물질의 중화에 관여하며 염증 반응과 연관이 있다. PPARγ는 지방세포를 비롯한 몇몇 세포의 분화 및 지방 축적에 관여하는 것으로 알려져 있다. PPARδ/β는 아직까지 그 생리학적 기능이 잘 밝혀져 있지는 않지만, 생체 내에 고루 분포되어 있고 배아의 착상(embryo implantation)에 관여하는 것으로 보고되었다. 이와 같은 PPARs 각각의 독특한 역할들은 서로 다른 리간드(ligand)와의 결합에 의해 나타나는 것으로 보인다.

먼저, PPARα는 주로 에이코사노이드(eicosanoids), 카바프로스타사이클린(carbaprostacyclin), 피브레이트류 및 비스테로이드성 항염증 의약품(nonsteroidal anti-iNDlammatory drugs; NSAID)에 의해 그 활성이 유도된다. 또한, PPARγ는 당뇨병 치료제인 티아졸리딘디온(thiazolidinediones; TZDs)에 특이적으로 결합하고, 프로스타글란딘(prostaglandin)의 대사산물인 15-데옥시-Δ^12.14-프로스타글란딘 J₂ (PGJ₂), 불포화 지방산(polyunsaturated fatty acid) 및 상기 NSAID에 의해 그 활성이 유도된다. 또한, PPARδ/β는 몇몇의 불포화 지방산과 에이코사노이드들에 의해 그 활성이 유도된다.

이와 같이 리간드에 의해 활성화된 PPARγ는 지방생성 과정(lipogenesis)에서 중요한 유전자들의 발현을 증가시키고, 지방세포의 분화와 관련된 유전자들의 발현도 증가시키면서 지방세포의 지질방울들을 증가시킨다. 또한, PPARγ는 지방세포와 근육세포에서 포도당의 흡수를 증가시키고 염증성 사이토카인의 생성 및 그로 인한 염증 작용을 억제하며 동맥경화증을 억제하는 것으로 알려져 있다. 또한, PPARδ/β는 지질 흡수(lipid uptake)와 관련된 유전자 그리고 지질대사(lipid metabolism)와 관련된 유전자들의 발현을 증가시키고, 세포내 지질 조절을 담당하는 것으로 보고되어 있다. PPARα는 미토콘드리아와 퍼옥시좀에서의 β-산화(β-oxidation) 및 미토콘드리아에서의 ω-산화(ω-oxidation)와 관련된 몇몇 이화작용 효소(catabolic enzyme)들의 발현을 증가시키고 이에 따라 간이나 근육에서 지방산의 산화를 증진시킨다. 특히 PPARα가 지질대사, 염증 및 동맥경화증을 조절한다는 보고가 있으며 최근에는 염증, 동맥경화증, 비만 및 암 등을 개선시키고 치료하는 일종의 표적 단백질로서 PPARα에 대한 많은 연구가 진행되고 있다.

이에 본 발명자들은 흑미 추출물이 간 조직내에서 지방산을 산화시키는 PPARα를 증가시키는 것을 확인하였고, 이에 의해 카르니틴 팔미토일 트랜스퍼라제(Carnitine palmitoyl transferase-1, CPT1) 또는 아실코에이옥시다아제(Acyl-CoA Oxidase, ACO)를 활성화시키거나 Cyp4A10 유전자 발현을 활성화시키는 것을 알아내어 본 발명에 이르게 되었다.

한편, 상기의 효과들에 대해서는 후술할 실시예에서 보다 구체적으로 살펴보도록 한다.

흑미 추출물의 추출방법은 다음과 같다. 추출 방법으로는 예를 들어 용매 추출법을 사용할 수 있다. 예를 들어, 물, 에탄올 및 메탄올과 같은 알코올, 아세톤, 에틸아세테이트, n-핵산, 메탄올, 디에틸에테르, 아세톤, 벤젠과 같은 유기용매 중에서 선택된 어느 하나 또는 이들의 혼합용매를 이용하여 추출할 수 있다. 상기 용매 추출법에 의해 추출물을 제조하는 경우에는 열수 추출, 초음파 추출 및 환류 추출 방법을 사용할 수 있다. 본 발명의 일 실시예에 따른 흑미 추출물의 추출방법에 대해서는 후술하기로 한다.

한편, 본 발명의 일 실시예에 따른 조성물의 총중량에는 흑미 추출물이 0.1 중량% 내지 40중량%가 포함될 수 있다. 흑미 추출물의 함량이 0.1 중량% 미만이면, 흑미 추출물에 의한 비알콜성지방간 질환을 예방하고 개선하는 효과가 미미하게 발현되어 유효한 효과를 도출하기 어려울 수 있다. 한편, 흑미 추출물의 함량이 40중량%를 초과하면, 첨가되는 이상의 효과가 발현되지 않을 수 있다. 즉, 흑미 추출물의 함량이 대략 40중량%인 부근에서 비알콜성지방간 질환을 예방하고 개선하는 효과가 포화될 수 있다.

본 발명의 일 실시예에 의한 조성물은 약학적으로 허용되는 건강증진용 약학 조성물로 사용될 수 있다. 또한, 건강증진용 건강식품 조성물로도 사용될 수 있다.

상기에서 "약학적으로 허용되는" 이란 생리학적으로 허용되고 인간에게 투여될 때, 통상적으로 위장 장애, 현기증과 같은 알레르기 반응 또는 이와 유사한 반응을 일으키지 않는 조성물을 말한다. 상기 담체, 부형제 및 희석제의 예로는, 락토즈, 덱스트로즈, 수크로즈, 솔비톨, 만니톨, 자일리톨, 에리스리톨, 말티톨, 전분, 아카시아 고무, 알지네이트, 젤라틴, 칼슘 포스페이트, 칼슘 실리케이트, 셀룰로즈, 메틸 셀룰로즈, 폴리비닐피롤리돈, 물, 메틸하이드록시벤조에이트, 프로필하이드록시벤조에이트, 탈크, 마그네슘 스테아레이트 및 광물유를 들 수 있다. 또한, 충진제, 항응집제, 윤활제, 습윤제, 향료, 유화제 및 방부제 등을 추가로 포함할 수 있다.

또한, 본 발명의 조성물은 포유동물에 투여된 후 활성 성분의 신속, 지속 또는 지연된 방출을 제공할 수 있도록 제형화될 수 있다. 제형은 분말, 과립, 정제, 에멀젼, 시럽, 에어로졸, 연질 또는 경질 젤라틴 캅셀, 멸균 주사용액, 멸균 분말의 형태일 수 있다.

본 발명에 따른 비알콜성지방간 질환의 예방하고 개선 효과를 갖는 조성물은 경구, 경피, 피하, 정맥 또는 근육을 포함한 여러 경로를 통해 투여될 수 있으며, 활성 성분의 투여량은 투여 경로, 피투여자의 연령, 성별, 체중 및 피투여자의 중증도 등의 여러 인자에 따라 적절히 선택될 수 있다. 또한, 본 발명의 비알콜성지방간 질환의 예방 또는 개선치효과를 갖는 조성물은 비알콜성지방간 질환 증상을 예방, 개선 또는 치료하는 효과를 가지는 공지의 화합물과 병행하여 투여할 수 있다.

따라서 본 발명은 흑미 추출물을 유효성분으로 함유하는 조성물을 포함하는 비알콜성지방간 질환 증상을 예방하고 개선하는 약제에 제공될 수 있다.

나아가 본 발명은 상기 본 발명의 비알콜성지방간 질환을 예방하고 개선하는 조성물을 포함하는 건강기능식품에 제공될 수 있다.

본 발명에 따른 흑미 추출을 포함하고, 비알콜성지방간 질환을 예방하고 개선하는 조성물은 탁월한 간 수치 감소 효과 및 중성 지질의 감소 효과를 제공할 뿐만 아니라, 약물에 의한 독성 및 부작용도 없어 장기간 복용시에도 안심하고 사용할 수 있으며, 체내에서도 안전한 특징이 있다.

그러므로 본 발명에 따른 흑미 추출을 포함하고, 비알콜성지방간 질환을 예방하고 개선하는 조성물은 비알콜성지방간 질환의 예방 및 개선을 목적으로 하는 식품의 제조에 사용할 수 있으며, 상기 본 발명의 조성물을 비알콜성지방간의 예방 및 개선을 위한 식품에 사용할 수 있다. 즉, 본 발명의 비알콜성지방간의 예방 및 개선을 위한 식품은 비알콜성 지방간의 예방 및 개선에 효과가 있는 식품, 예컨대, 식품의 주원료, 부원료, 식품 첨가제, 기능성 식품 또는 음료로 용이하게 활용할 수 있다.

본원에서 상기 "식품" 이란, 영양소를 한 가지 또는 그 이상 함유하고 있는 천연물 또는 가공품을 의미하며, 바람직하게는 어느 정도의 가공 공정을 거쳐 직접 먹을 수 있는 상태가 된 것을 의미하며, 통상적인 의미로서, 식품, 식품 첨가제, 기능성 식품 및 음료를 모두 포함하는 것을 말한다.

본 발명에 따른 흑미 추출을 포함하고, 비알콜성지방간 질환을 예방하고 개선하는 조성물을 첨가할 수 있는 식품으로는 예를 들어, 각종 식품류, 음료, 껌, 차, 비타민 복합제, 기능성 식품 등이 있다. 추가로, 본원발명에서 식품에는 특수영양식품(예, 조제유류, 영, 유아식 등), 식육가공품, 어육제품, 두부류, 묵류, 면류(예, 라면류, 국수류 등), 빵류, 건강보조식품, 조미식품(예, 간장, 된장, 고추장, 혼합장 등), 소스류, 과자류(예, 스넥류), 캔디류, 쵸코렛류, 껌류, 아이스크림류, 유가공품(예, 발효유, 치즈 등), 기타 가공식품, 김치, 절임식품(각종 김치류, 장아찌 등), 음료(예, 과실 음료, 채소류 음료, 두유류, 발효음료류 등), 천연조미료(예, 라면 스프등)을 포함하나 이에 한정되지 않는다.

또한, 본 발명에서 "기능성 식품" 이란 식품에 물리적, 생화학적, 생물공학적 수법 등을 이용하여 해당 식품의 기능을 특정 목적에 작용, 발현하도록 부가가치를 부여한 식품군이나 식품 조성이 갖는 생체방어리듬조절, 질병방지와 회복 등에 관한 체내조절기능을 생체에 대하여 충분히 발현하도록 설계하여 가공한 식품을 의미하며, 구체적으로는 건강 기능 식품일 수 있다. 상기 기능성 식품에는 식품학적으로 허용 가능한 식품 보조 첨가제를 포함할 수 있으며, 기능성 식품의 제조에 통상적으로 사용되는 적절한 담체, 부형제 및 희석제를 더욱 포함할 수 있다.

또한, 본원발명에서 상기 "음료"란 갈증을 해소하거나 맛을 즐기기 위하여 마시는 것의 총칭을 의미하며 기능성 음료를 포함한다. 상기 음료는 지시된 비율로 필수 성분으로서 상기 비알콜성 지방간의 예방 및 개선용 조성물을 포함하는 것 외에 다른 성분에는 특별한 제한이 없으며 통상의 음료와 같이 여러 가지 향미제 또는 천연 탄수화물 등을 추가 성분으로서 함유할 수 있다.

나아가 상기 기술한 것 이외에 본 발명에 따른 흑미 추출을 포함하고, 비알콜성지방간 질환을 예방하고 개선하는 조성물을 함유하는 식품은 여러가지 영양제, 비타민, 광물(전해질), 합성 풍미제 및 천연 풍미제 등의 풍미제, 착색제 및 충진제(치즈, 초콜릿 등), 펙트산 및 그의 염, 알긴산 및 그의 염, 유기산, 보호성 콜로이드 증점제, pH 조절제, 안정화제, 방부제, 글리세린, 알코올, 탄산음료에 사용되는 탄산화제 등의 식품 첨가제를 더 함유할 수 있으며, 상기 성분은 독립적으로 또는 조합하여 사용될 수 있다.

한편, 흑미 추출물과 지방함유식이에 포함된 지방의 함량비는 1:20 내지 1:70인 것이 바람직하다. 함량비가 1:20 미만이면, 지방함유식이에 포함된 지방의 양이 상대적으로 적어, 정상식이에 근접하므로, 흑미 추출물의 함유 효과가 반감될 수 있다. 반면에, 함량비가 1:70을 초과하면, 지방의 함량이 너무 많은 초고지방식이가 되므로, 흑미 추출물을 첨가하더라도 비알콜성지방간 질환을 개선하는 효과가 미미하게 나타날 수 있다.

이하, 본 발명의 내용을 실시예에 의하여 상세하게 설명하지만, 본 발명의 권리범위가 이들 실시예로 한정되는 것은 아니며, 실시예는 본 발명의 내용을 용이하게 이해할 수 있도록 제시하는 것일 뿐이다.

< 실시예 1>

본 발명의 일 실시예에 따른 흑미 추출물의 제조

흑미의 추출은 상술한 바와 같이, 용매 추출법을 사용하였다. 보다 구체적으로 설명하면 다음과 같다. 용매로는 에탄올을 사용하였다. 흑미의 에탄올추출은 시료에 중량대비 10배의 80% 에탄올을 가하고 실온에서 16시간동안 2회 반복하여 교반 추출하였다. 추출 후 ADVANTEC paper(No.6)(ADVANTEC Co., CA, USA)을 이용하여 감압 여과하는 과정을 2번 거친 후 감압농축기(EYELA N-1000, Riakikai Co., Ltd., Tokyo, Japan)를 사용하여 농축한 후 동결건조(PVTFD 10R, Ilsin Lab, Yangju, Korea)하였다. 동결건조된 흑미 추출물을 인산완충식염수(phosphate buffered saline, PBS)에 녹여 액상의 흑미 추출물을 수득하여 사용 할 수 있으나, 본 실험에서는 동결건조된 상태의 흑미 파우더를 사용하였다. 흑미 파우더의 경우 흑미 추출물이 포함된 것으로 고려할 수 있는바, 하기에서는 흑미 파우더라는 용어를 사용하지 않고, 흑미 추출물로 통일하여 기재하였다.

< 실시예 2>

실험동물의 사육 및 실험설계

5주령의 웅성 C57BL/6J 마우스를 Charles River Laboratories Japan, Inc (Tsukuba, Japan) 에서 구입하여 사용하였다. 흰쥐는 플라스틱 마우스 케이지(plastic mouse cage)에 보관하여 동물실에서 23±2℃, 상대습도 50±10%, 명/암 주기(12/12 hr)의 조건하에서 사육하며, 물과 사료(LabDiet)는 자유로이 섭취하도록 하였다. 실험동물은 실험시작 전 열흘 동안 환경에 적응시킨 후 다음과 같이 3그룹으로 나누었으며 약물은 경구 투여하였다.

실험군은 정상지방식이군(ND), 고지방식이군(HF), 고지방식이(HF)+흑미 추출물(BRE)군으로 나누었다. 정상지방식이군(ND)은 16%의 지방식이를, 고지방식이군(HF)은 45%의 지방식이를, 고지방식이(HF)+흑미 추출물(BRE)군은 45%의 지방식이와 1%의 흑미 추출물을 공급하였다. 각각 7주간 마우스에게 제공하였다. 보다 구체적인 식이는 하기의 표 1과 같다.

성분	정상식이(ND)	고지방식이(HF)	고지방식이 + 흑미추출물(BRE)
콘스타치(Cornstarch)	397.49	266.5	256.5
카제인(Casein)	200	240.4	240.4
덱스트린(Dextrin)	132	88.5	88.5
수크로스(Sucrose)	100	67.1	67.1
섬유(Fiber)	50	50	50
콩기름(Corn oil)	70	11.34	11.34
우지(Beef tallow)	-	215.46	215.46
미네랄 혼합물1	35	42.1	42.1
비타민 혼합물2	10	12	12
L-시스테인(L-Cystein)	3	3.6	3.6
타르타르산수소콜린 (Choline bitartrate)	2.5	3	3
TBHQ3	0.014	0.017	0.017
흑미 추출물 (Black Rice Extract; BRE)	-	-	10

단위: g

1. 미네랄 혼합물(Mineral mixture): AIN-93M mineral mixture (ICN, CA, USA)

2. 비타민 혼합물(Vitamin mixture): AIN-93VX vitamin mixture (ICN, CA, USA)

3. TBHQ: 터트-부틸하이드로퀴논(Tert-butylhydroquinone)

< 실험예 3>

간 지질 축적 억제 효과

상기 실험예 2와 같이 7주가 경과한 후, 마우스의 체중과 간 조직을 관찰 하였다. 그 결과, 3개군에서 유의적인 체중 변화는 관찰되지 않았으나, 고지방식이군(HF)과 달리 고지방식이(HF)+흑미 추출물(BRE)군에서 혈중 지질 지표와 간지질 축적 억제 효과를 보였다.

도 1을 참조하면, 고지방식이(HF)+흑미 추출물(BRE)군은 정상지방식이군(ND)과 거의 유사한 간 조직 형태가 나타났다. 즉, 고지방식이군(HF)의 경우 간 조직내에서 간 지질의 축적이 유의적으로 증가하였으나, 고지방식이(HF)+흑미 추출물(BRE)군의 경우 정상지방식이군(ND)과 마찬가지로 간 조직내에서 간 지질의 축적이 유의적으로 감소하였음을 알 수 있다. 이러한 실험 결과를 통해 알 수 있듯이, 흑미 추출물은 고지방식이(HF) 섭취시 간 지질의 축적을 유의적으로 감소시킴을 알 수 있었다.

< 실험예 4>

혈액 내 중성지방 및 콜레스테롤 감소

7주간 식이를 투여한 후, 혈액 내 중성지방 및 콜레스테롤 감소 여부를 측정하였다. 측정된 결과는 Duncan's multiple range test 를 실시하여 각 군 간의 평균차이에 대한 유의성을 p<0.05 이상의 수준에서 검정하였으며 그 결과를 표준오차(standard error)와 함께 나타내었다. 그 결과를 도 2 및 3에 나타내었다.

도 2 및 3을 참조하면, 고지방식이(HF)를 섭취한 경우, 혈액 내 중성지방(도 2) 및 콜레스테롤(도 3)의 감소가 상대적으로 작게 나타났으나, 고지방식이(HF)+흑미 추출물(BRE) 섭취군의 경우 혈액 내 중성지방 및 콜레스테롤이 유의적으로 감소하는 경향을 보였다. 즉, 정상지방식이(ND)와 같이 혈액 내 중성지방 및 콜레스테롤이 유의적으로 감소하였다. 이에 의해, 고지방식이를 섭취하더라도, 흑미 추출물을 동시에 섭취하면, 정상지방식이와 유사하게 혈액 내 중성지방 및 콜레스테롤이 유의적으로 감소함을 알 수 있었다.

< 실험예 5>

PPAR α의 증가, 카르니틴 팔미토일 트랜스퍼라제( Carnitine palmitoyl transferase-1, CPT1 ) 또는 아실코에이옥시다아제 ( Acyl - CoA Oxidase , ACO ) 활성화 또는 Cyp4A10 유전자 발현 활성화 효과

7주간 식이를 투여한 후, PPARα의 증가여부를 측정하였다. 또한, 카르니틴 팔미토일 트랜스퍼라제(Carnitine palmitoyl transferase-1, CPT1) 또는 아실코에이옥시다아제(Acyl-CoA Oxidase, ACO)의 활성화 여부를 측정하였다. 또한, Cyp4A10 유전자 발현 활성화 여부를 측정하였다. 측정된 결과는 Duncan's multiple range test 를 실시하여 각 군 간의 평균차이에 대한 유의성을 p<0.05 이상의 수준에서 검정하였으며 그 결과를 표준오차(standard error)와 함께 나타내었다. 그 결과를 도 4 내지 7에 나타내었다.

도 4를 참조하면, 고지방식이(HF)를 섭취한 경우, PPARα의 증가가 상대적으로 가장 적게 나타났으나, 고지방식이(HF)+흑미 추출물(BRE) 섭취군의 경우 PPARα이 유의적으로 증가하는 경향을 보였다. 즉, 정상지방식이(ND)와 같이 PPARα이 유의적으로 증가하였다. 이에 의해, 고지방식이를 섭취하더라도, 흑미 추출물을 동시에 섭취하면, 정상지방식이와 유사하게 PPARα이 유의적으로 증가함을 알 수 있었다.

다음으로, 도 5를 참조하면 고지방식이(HF)를 섭취한 경우, CPT1의 활성이 상대적으로 가장 작게 나타났으나, 고지방식이(HF)+흑미 추출물(BRE) 섭취군의 경우 CPT1의 활성이 유의적으로 증가하는 경향을 보였다. 즉, 정상지방식이(ND)와 같이 CPT1의 활성이 유의적으로 증가하였다. 이에 의해, 고지방식이를 섭취하더라도, 흑미 추출물을 동시에 섭취하면, 정상지방식이와 유사하게 CPT1의 활성이 유의적으로 증가함을 알 수 있었다.

다음으로, 도 6을 참조하면 고지방식이(HF)를 섭취한 경우, ACO의 활성이 상대적으로 가장 작게 나타났으나, 고지방식이(HF)+흑미 추출물(BRE) 섭취군의 경우 ACO의 활성이 유의적으로 증가하는 경향을 보였다. 즉, 정상지방식이(ND)와 같이 ACO의 활성이 유의적으로 증가하였다. 이에 의해, 고지방식이를 섭취하더라도, 흑미 추출물을 동시에 섭취하면, 정상지방식이와 유사하게 ACO의 활성이 유의적으로 증가함을 알 수 있었다.

다음으로, 도 7을 참조하면 고지방식이(HF)를 섭취한 경우, Cyp4A10 유전자 발현의 활성이 상대적으로 가장 작게 나타났으나, 고지방식이(HF)+흑미 추출물(BRE) 섭취군의 경우 Cyp4A10 유전자 발현의 활성이 유의적으로 증가하는 경향을 보였다. 즉, 정상지방식이(ND)와 같이 Cyp4A10 유전자 발현의 활성이 유의적으로 증가하였다. 이에 의해, 고지방식이를 섭취하더라도, 흑미 추출물을 동시에 섭취하면, 정상지방식이와 유사하게 Cyp4A10 유전자 발현의 활성이 유의적으로 증가함을 알 수 있었다.

한편, PPARα의 증가, 카르니틴 팔미토일 트랜스퍼라제(Carnitine palmitoyl transferase-1, CPT1), 아실코에이옥시다아제(Acyl-CoA Oxidase, ACO)의 활성화, Cyp4A10 유전자 발현의 활성화는 간 조직내의 지방산을 산화시켜, 간 조직내에 지방산이 축적되는 것을 방지한다. 따라서, 이들 물질이 증가되과 활성화 되면, 간 조직내에 지방산의 축적이 최소화될 것이다.

상술한 바와 같이, 본 발명의 일 실시예에 따른 조성물은 흑미 추출물을 포함하며, 지방함유식이의 섭취에 의해 유발될 수 있는 비알콜성지방간 지환을 개선하고 예방하는 효과를 갖는다.

이상 본 발명의 실시예들을 설명하였으나, 본 발명은 상기 실시예들에 한정되는 것이 아니라 서로 다른 다양한 형태로 제조될 수 있으며, 본 발명이 속하는 기술분야에서 통상의 지식을 가진 자는 본 발명의 기술적 사상이나 필수적인 특징을 변경하지 않고서 다른 구체적인 형태로 실시될 수 있다는 것을 이해할 수 있을 것이다. 그러므로 이상에서 기술한 실시예들은 모든 면에서 예시적인 것이며 한정적이 아닌 것으로 이해해야만 한다.

Claims (6)

1. 흑미 추출물을 포함하며, 지방함유식이의 섭취에 의해 유발될 수 있는 비알콜성지방간(NAFLD) 질환을 예방하고 개선하는 효과를 갖는 조성물.
   
2. 제1 항에 있어서,
   상기 비알콜성지방간 질환을 예방하고 개선하는 효과는 간 조직내 지방산을 산화시키는 PPARα를 증가시키는 효과인 것을 특징으로 하는 조성물.
   
3. 제2 항에 있어서,
   상기 PPARα의 증가에 의해, 상기 간 조직내에서 카르니틴 팔미토일 트랜스퍼라제(Carnitine palmitoyl transferase-1, CPT1) 또는 아실코에이옥시다아제(Acyl-CoA Oxidase, ACO)이 활성화 되거나, Cyp4A10 유전자 발현이 활성화 되는 것을 특징으로 하는 조성물.
   
4. 제3 항에 있어서,
   상기 활성에 의해 상기 간 조직내의 지방 축적이 감소되는 것을 특징으로 하는 조성물.
   
5. 제1 항에 있어서,
   상기 비알콜성지방간(NAFLD) 질환을 예방하고 개선하는 효과는 혈액내 중성지방과 콜레스테롤을 감소시키는 효과인 것을 특징으로 하는 조성물.
   
6. 제1 항에 있어서,
   상기 흑미 추출물은 상기 조성물 총 중량에 대해 0.1중량% 내지 40중량%가 포함되는 것을 특징으로 하는 조성물.
   
   

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