KR101927399B1 - 지방간 치료용 또는 예방용 조성물 - Google Patents

Abstract

본 발명은 커큐민 유도체의 지방간 예방, 개선 또는 치료 효과로서의 용도와 의약 및 식품 조성물에 관한 것으로, 본 발명의 커큐민 유도체는 기존의 지방간 억제제로서 치매 예방에 효과가 있다고 알려진 커큐민을 기준으로 지방간 유도 마우스 모델에서 커큐민을 투여 하였을 때에 비해 현저히 우수한 지방간 예방, 개선 또는 치료 효과를 가져, 지방간 치료용 제제 또는 개선용 식품으로 효과적으로 사용될 수 있다.

Description

지방간 치료용 또는 예방용 조성물{COMPOSITION FOR PREVENTING OR TREATING FATTY LIVER}

본 발명은 기존의 커큐민에 비하여 더 나은 지방간의 치료, 개선 또는 예방 효과를 가지는 커큐민 유도체를 포함하는 지방간 치료 또는 예방용 의약 조성물에 관한 것이다.

커큐민(diferuloylmethane)은 동인도산의 생강과(Zingiberaceae)에 속하는 식물인 울금(Curcuma longa Linn)의 뿌리에서 추출되어 인도음식에 널리 사용되어 온 폴리페놀(polyphenol)성분의 노란색 향신료로 심황(turmeric)의 커큐미노이드(curcuminoid)이다. 식품첨가물에서는 노란색 색소로 사용되며 향신료로 이용되고 있다. 세포 생리학에서 커큐민의 역할은 다양하고 염증 관련 단백질들, 세포 신호 물질, 전사 인자 등을 포함하는 많은 세포 구성요소와 관련된다. 커큐민은 항산화, 항암, 항돌연변이, 항염증, 치매 예방 등 각종 생리효능을 지닌 것으로 보고되고 있다. 이런 다양한 효능은 주로 항산화 작용에 의한 것인데, 항산화 작용이란 활성산소로 인한 인체의 손상을 막아주는 것이다. 활성산소란 호흡에 의해 체내에 들어온 산소가 대사과정에서 불안정한 형태로 변하면서 독성 성분이 되어 인체의 노화와 질병을 일으키는 것을 말한다. 활성 산소는 반응성이 매우 커서 체내에서 DNA 변성, 과도한 신호전달 유발 및 단백질 변성 등을 초래하여 건강에 해로운 영향을 누적하는 일련의 반응을 일으키게 된다. 따라서 활성산소는 거의 모든 질환과 연관되어, 암, 동맥경화, 허혈성 심장질환, 알츠하이머병, 파킨슨병, 면역부전, 당뇨병, 백내장, 노화 등을 유발하게 된다.

한편, 간은 신체 장기 중 생체 내 대사가 가장 활발하게 일어나는 장기로, 각종 대사작용, 해독, 분해, 합성 및 분비를 담당하는 매우 중요한 장기이다. 구체적으로, 음식물에서 흡수된 모든 영양소들이 간에서 에너지를 생산할 수 있는 물질로 대사되어 전신에 공급되거나 저장되며, 약 2,000 여종의 효소, 알부민, 응고인자들의 혈청 단백질, 담즙산, 인지질, 콜레스테롤 등의 지방 등이 간에서 합성, 저장 및 분배된다. 또한, 해독 및 분해 기능으로서 간에서 약물, 술, 독성물질 등이 해독되므로, 간세포는 이러한 물질에 의해 손상되기 쉬워 약물, 알코올 또는 독성에 의한 간질환이 발생할 가능성이 높다.

간은 재생능력이 우수한 장기 중 하나이나, 손상이 지속될 경우 간 조직의 일부가 완전히 파괴되고 간 기능도 저하되는 등 정상 간으로의 회복이 어려운 상태가 된다. 이러한 간 손상이 만성화되면 그 원인에 상관없이 간 섬유화 또는 간경화, 간암으로 진행될 확률이 높아진다. 따라서, 간 손상이 만성화되기 전에 이러한 간 손상을 치료하는 것이 간 섬유화, 간경화 또는 간암으로의 진행을 억제하는데 매우 중요하다.

그 중 지방간은 지방의 과도환 섭취와 간 내의 축적 및 합성 증가, 배출 감소 등의 원인에 의해 정상적인 지방 대사가 이루어지지 못함으로써, 지질 특히 중성지방이 과도하게 축적되어 간 내 지방의 비율이 5%를 초과하는 경우를 의미한다. 최근 영양상태가 좋아지고 성인병이 늘어감에 따라 지방간 환자가 늘어나는 추세에 있다.

지방간의 주 원인은 음주와 비만이며, 혈중 지방질의 농도가 높은 고지혈증이나 당뇨병 등의 질병에 동반되어 나타나기도 하고, 부신피질 호르몬제(스테이로이드제)나 여성 호르몬제 등의 약제도 원인이 될 수 있다. 또한, 심한 영양부족에 의해서도 지방간이 생길 수 있다. 지방간의 증상은 지방의 축적 정도와 축적기간, 그리고 다른 질환의 동반 유무에 따라 달라질 수 있다.

현재까지, 지방간의 치료제로서 폴리엔포스파티딜콜린이 임상에서 사용되고 있고, 고지혈증 치료제인 클로피브레이트로 대표되는 피브레이트계 약물, 스타틴계 약물이 지방간에 대한 효과가 있다고 알려져 있다. 그러나 피브레이트계 약물은 지방간 beta-산화계 효소를 매개로 고밀도지단백질 콜레스테롤을 증가시키는 등 지질대사를 개선시키는 것으로 알려져 있으나, 한편으로는 간기능 장애를 일으키는 부작용을 유발하기 때문에, 치료효과가 우수하면서도 부작용이나 내성과 같은 문제가 발생하지 않는 천연물질 유래의 새로운 지방간의 예방 및 치료를 위한 치료제의 개발이 필요한 실정이다.

따라서 본 발명의 주된 목적은 커큐민 유도체를 유효성분으로 포함하는 지방간 치료 또는 예방용 의약 조성물을 제공하는 것이다.

본 발명의 다른 목적은 커큐민 유도체를 유효성분으로 포함하는 지방간 개선용 식품 조성물을 제공하는 것이다.

상기 목적을 달성하기 위하여, 본 발명자들은 하기 화학식 1의 커큐민 유도체를 고지방 식이로 지방간이 유도된 마우스 모델에 투여하였을 때 기존의 커큐민 화합물을 투여하였을 때보다 우수한 지방간 억제 및 치료 효과가 우월하다는 것을 확인하였다.

[화학식 1]

구체적으로, 본 발명은 화학식 1의 커큐민 유도체를 유효성분으로 포함하는 지방간 치료 또는 예방용 의약 조성물을 제공한다.

한 구체예에서, 상기 의약 조성물은 비알콜성 지방간 치료 또는 예방용 의약 조성물을 제공한다.

다른 한 구체예에서, 상기 의약 조성물은 경구 투여 제제인 지방간 치료 또는 예방용 의약 조성물을 제공한다.

본 발명은 또한 상기 화학식 1의 커큐민 유도체를 유효성분으로 포함하는 지방간 예방 또는 개선용 식품 조성물을 제공한다.

한 구체예에서, 상기 지방간은 비알콜성 지방간 일 수 있다.

본 발명에 따른 커큐민 유도체는 종래의 커큐민과 비교해서 향상된 중성지방 축적 억제 및 체중 증가 억제 등의 효과를 통해서 지방간의 예방, 개선 및 치료 효과를 가지며 이를 통해 지방간의 치료, 개선 또는 예방하는 의약 또는 식품 제제로서 효과적으로 사용될 수 있다.

도 1은 본 발명의 일 실시예에 따른 처리 그룹별 마우스의 체중 및 체성분 변화를 확인한 사진이다.
도 2는 본 발명의 일 실시예에 따른 처리 그룹별 마우스의 체중 변화 및 먹이 섭취량을 확인한 그래프이다.
도 3a 및 3b는 본 발명의 일 실시예에 따른 마우스 처리 그룹별 혈중 포도당 농도(3a) 및 혈중 인슐린 수치(3b)의 변화를 확인한 그래프이다.
도 4는 본 발명의 일 실시예에 따른 마우스 처리 그룹별 혈액을 통해 인슐린 저항성 지표(HOMA-IR)의 차이를 확인한 그래프이다.
도 5 본 발명의 일 실시예에 따른 마우스 처리 그룹별 혈 중 AST 함량을 확인한 그래프이다.
도 6은 본 발명의 일 실시예에 따른 마우스 처리 그룹별 혈 중 ALT 함량을 확인한 그래프이다.
도 7은 본 발명의 일 실시예에 따른 처리 그룹별 마우스로부터 얻은 간 조직을 확인한 사진이다.
도 8은 본 발명의 일 실시예에 따른 처리 그룹별 마우스로부터 얻은 간 조직을 H&E 염색을 통해 확인한 사진이다.
도 9는 본 발명의 일 실시예에 따른 처리 그룹별 마우스로부터 얻은 간 조직 내 중성지방의 함량의 차이를 확인한 그래프이다.

이하, 본 발명의 구성을 구체적으로 설명한다.

본 발명은 커큐민 유도체를 유효성분으로 포함하는 조성물에 관한 것이다.

구체적으로 본 발명은 하기 화학식 1의 커큐민 유도체를 유효성분으로 포함하는 지방간 치료 또는 예방용 의약 조성물을 제공한다.

본 발명의 지방간은 간 내에 지방 축적 및 합성이 증가하여 나타나는 질환으로, 임상적으로 간세포의 5% 이상에서 지방이 관찰되거나 간 100g 당 지방이 5 mg 이상일 경우, 즉 지방이 전체 간 무게의 5% 이상을 차지하는 경우 지방간으로 분류된다.

지방간은 원인에 따라 알코올성 지방간 질활과 비알콜성 지방간 질환으로 구분될 수 있으며, 이 중 비알콜성 지방간이란 간에 유해할 정도의 알코올 섭취 이력이 없음에도 불구하고 간 조직 검사에서 알코올성 간염의 특징적인 소견인 지방성 변화, 소엽성간엽 등이 나타나는 경우를 말하며, 간의 병리소견은 단순 지방간, 지방간염, 지방간염과 동반된 섬유화증, 간경변증 등의 다양한 스펙트럼을 나타내는데, 비알콜성 지방간은 이를 모두 포함하는 의미이다.

본 발명은 일 실시예에서 고지방 식이를 통해 지방간을 유도한 마우스 모델에서 본 발명의 커큐민 유도체가 커큐민 화합물과 비교해서 간 조직 무게 증가 억제, 체중 증가 억제, 중성지방 수치 증가 억제 등에서 현저히 우수한 효과를 나타냄을 확인하였는바, 본 발명의 조성물은 커큐민 유도체를 포함하는 비알콜성 지방간 예방, 치료 또는 개선용 조성물 일 수 있다.

상기 비알콜성 지방간은 일반적인 비알콜성 질환을 포함하는 것으로, 지방간, 지방간염, 지방간염과 동방된 섬유화증 및 간경변증으로 이루어진 군에서 선택된 하나 이상 일 수 있고, 일 예로 비만성 지방간 질환 또는 당뇨병성 지방간 질환을 모두 포함할 수 있다. 바람직하게는, 본 발명의 일 실시예에서 당뇨병 유발을 통한 지방간 마우스 모델에서 본 발명의 커큐민 유도체의 중성지방 축적, AST, ALT 증가, 체중 증가 억제 효과가 종래 커큐민 화합물 보다 현저히 우수함을 확인 하였는 바, 본 발명은 당뇨병성 지방간 질환의 예방, 개선 또는 치료용 조성물 일 수 있다.

커큐민(diferuloylmethane)은 동인도산의 생강과(Zingiberaceae)에 속하는 식물인 울금(Curcuma longa Linn)의 뿌리에서 추출되어 인도음식에 널리 사용되어 온 폴리페놀(polyphenol)성분의 노란색 향신료로 심황(turmeric)의 커큐미노이드(curcuminoid)이다. 커큐민은 지방간에 개선 효과를 가지는 것으로 알려져 있다.

본 발명의 커큐민 유도체 화합물은 N-{3-[(2E)-3-(4-하이드록시-3-메톡시페닐)프로프-2-에노일]페닐}-2-메틸프로판아미드(N-{3-[(2E)-3-(4-hydroxy-3-methoxyphenyl)prop-2-enoyl]phenyl}-2-methylpropanamide)로, 하기 화학식 1의 구조를 갖는 것 일 수 있다. 또한, 본 발명의 커큐민 유도체 화합물은 본 명세서에서"커큐민 8"로 지칭될 수 있다.

[화학식 1]

상기 본 발명의 커큐민 유도체 화합물은 종래의 커큐민 화합물과 비교해서 현저히 우수한 지방간 예방, 개선 또는 치료 효과를 갖는다.

일 실시예에 있어서, 본 발명자들은 이러한 사실을 바탕으로 상기 커큐민 보다 우수한 지방간 억제 효과를 가지는 화합물을 얻고자 수 많은 실험을 실시한 결과, 하기 실시예에서 볼 수 있는 바와 같이 본 발명에 따른 화학식 1의 커큐민 유도체가 기존의 커큐민에 비해 현저히 우월한 중성지방 축적 억제, 알라닌 아미노 전환효소(ALT) 및 아스파르테이트 아미노 전환효소(AST)의 감소를 통한 지방간 예방, 개선 및 치료 효과가 있음을 확인하였다.

본 발명의 커큐민 유도체는 공지의 방법에 따라 합성하여 사용할 수 있고, 상업적으로 판매되는 것을 구입하여(일 예로, Sigma 등에서 입수 가능) 사용할 수 있다.

또한, 상기 조성물은 본 발명의 유효성분뿐만 아니라 기존에 지방간 치료효과, 간 질환 치료 효과, 간 보호 효과, 간 기능 개선 효과 등이 있는 것으로 인정된 물질, 일 예로 지방간 치료제, 간세포 보호용 물질, 간 질환 치료제 또는 간 기능 개선제 등으로 사용되는 물질을 더 포함하거나, 상기 물질과 함께 사용될 수 있다. 본 발명의 조성물이 종래 지방간 예방 또는 치료제와 함께 사용되는 경우, 동시 또는 순차적으로 투여될 수 있고, 그 횟수 및 순서의 영향을 받지 않는다.

본 발명의 커큐민 유도체를 포함하는 조성물은 인간을 포함한 동물에 직접 적용될 수 있다. 상기 동물은 식물에 대응하는 생물군으로, 바람직하게는 포유류, 더욱 바람직하게는 인간일 수 있다.

본 발명의 조성물 내 커큐민 유도체의 함량은 0.001 중량% 내지 99.999 중량%, 0.01 중량% 내지 99.99 중량%, 0.1 중량% 내지 99.9 중량% 또는 1중량% 내지 90중량% 일 수 있으나, 이에 한정되는 것은 아니고 투여 개체, 사용태양, 사용방법, 제제의 형태 등에 따라 본 발명의 커큐민 유도체의 함량이 적절히 조절하여 사용될 수 있다.

본 발명의 커큐민 유도체를 유효성분으로 포함하는 의약 조성물은 상기 유효성분 이외에 약제학적으로 적합하고 생리학적으로 허용되는 보조제를 사용할 수 있으며, 상기 보조제로는 부형제, 붕해제, 감미제, 결합제, 피복제, 팽창제, 윤활제, 활택제 또는 향미제 등을 사용할 수 있다.

상기 의약 조성물은 투여를 위해서 상기 기재한 유효성분 이외에 추가로 약제학적으로 허용 가능한 담체를 1종 이상 포함하여 의약 조성물로 바람직하게 제제화할 수 있다.

한 구체예에서, 상기 의약 조성물은 경구투여제제 또는 주사용제제인 것일 수 있다.

상기 의약 조성물의 제제 형태는 과립제, 산제, 정제, 피복정, 캡슐제, 좌제, 액제, 시럽, 즙, 현탁제, 유제, 점적제 또는 주사 가능한 액제 등이 될 수 있다. 예를 들어, 정제 또는 캡슐제의 형태로의 제제화를 위해, 유효 성분은 에탄올, 글리세롤, 물 등과 같은 경구, 무독성의 약제학적으로 허용 가능한 불활성 담체와 결합될 수 있다. 또한, 원하거나 필요한 경우, 적합한 결합제, 윤활제, 붕해제 및 발색제 또한 혼합물로 포함될 수 있다. 적합한 결합제는 이에 제한되는 것은 아니나, 녹말, 젤라틴, 글루코스 또는 베타-락토오스와 같은 천연 당, 옥수수 감미제, 아카시아, 트래커캔스 또는 소듐올레이트와 같은 천연 및 합성 검, 소듐 스테아레이트, 마그네슘 스테아레이트, 소듐 벤조에이트, 소듐 아세테이트, 소듐 클로라이드 등을 포함한다. 붕해제는 이에 제한되는 것은 아니나, 녹말, 메틸 셀룰로스, 아가, 벤토니트, 잔탄 검 등을 포함한다. 액상 용액으로 제제화되는 조성물에 있어서 허용 가능한 약제학적 담체로는, 멸균 및 생체에 적합한 것으로서, 식염수, 멸균수, 링거액, 완충 식염수, 알부민 주사용액, 덱스트로즈 용액, 말토 덱스트린 용액, 글리세롤, 에탄올 및 이들 성분 중 1 성분 이상을 혼합하여 사용할 수 있으며, 필요에 따라 항산화제, 완충액, 정균제 등 다른 통상의 첨가제를 첨가할 수 있다. 또한 희석제, 분산제, 계면활성제, 결합제 및 윤활제를 부가적으로 첨가하여 수용액, 현탁액, 유탁액 등과 같은 주사용 제형, 환약, 캡슐, 과립 또는 정제로 제제화할 수 있다. 더 나아가 해당분야의 적절한 방법으로 Remington's Pharmaceutical Science, Mack Publishing Company, Easton PA에 개시되어 있는 방법을 이용하여 각 질환에 따라 또는 성분에 따라 바람직하게 제제화 할 수 있다.

본 발명은 상기 본 발명의 커큐민 유도체를 유효성분으로 포함하는 조성물을 개체에 투여하는 것을 포함하는 지방간 개선 또는 치료방법을 제공한다. 상기 투여는 경구, 직장, 정맥내, 동맥내, 복강내, 근육내, 흉골내, 경피, 국소, 안구내 또는 피내 경로를 통해 통상적인 방식으로 투여할 수 있다. 바람직하게는, 경구 투여될 수 있다.

본 발명은 또한 화학식 1의 커큐민 유도체를 포함하는 지방간 예방 또는 개선용 식품 조성물을 제공한다.

본 발명의 커큐민 유도체 및 지방간에 대해서는 중복된 기재를 피하고자 상기 기재된 내용이 준용될 수 있다.

상기 식품 조성물은 기능성 식품 또는 건강기능식품 일 수 있고, 지방간 개선 또는 예방과 이에 추가로 간 보호 및 간 기능 개선을 위한 건강기능성 식품 조성물 일 수 있다.

본 발명에 따른 식품 조성물은 영양소를 한 가지 또는 그 이상 함유하고 있는 천연물 또는 가공품을 의미하며, 일 예로 어느 정도의 가공 공정을 거쳐 직접 먹을 수 있는 상태가 된 것을 의미할 수 있고, 통상적으로 식품, 식품첨가제, 건강기능성식품 및 음료를 모두 포함한다.

본 발명의 커큐민 유도체를 첨가할 수 있는 식품으로는 예를 들어, 각종 식품류, 음료, 껌, 차, 비타민 복합제, 기능성 식품 등이 있다. 추가로, 본 발명에서 식품은 특수영양식품(예, 조제유류, 영,유아식 등), 식육가공품, 어육제품, 두부류, 묵류, 면류(예, 라면류, 국수류 등), 건강보조식품, 조미식품(예, 간장, 된장, 고추장, 혼합장 등), 소스류, 과자류(예, 스넥류), 유가공품(예, 발효유, 치즈 등), 기타 가공식품, 김치, 절임식품(각종 김치류, 장아찌 등), 음료(예, 과실,채소류 음료, 두유류, 발효음료류 등), 천연조미료(예, 라면 스프 등)을 포함하나 이에 한정되지 않는다. 상기 식품, 음료 또는 식품첨가제는 통상의 제조방법으로 제조될 수 있다.

본 발명에서 기능성 식품이란 식품에 물리적, 생화학적, 생물공학적 수법 등을 이용하여 해당 식품의 기능을 특정 목적에 작용, 발현하도록 부가가치를 부여한 식품군이나 식품 조성이 갖는 생체방어리듬조절, 질병방지와 회복 등에 관한 체조절기능을 생체에 대하여 충분히 발현하도록 설계하여 가공한 식품을 의미한다. 상기 기능성 식품에는 식품학적으로 허용 가능한 식품 보조 첨가제를 포함할 수 있으며, 기능성 식품의 제조에 통상적으로 사용되는 적절한 담체, 부형제 및 희석제를 더욱 포함할 수 있다.

본 발명에서 음료란 갈증을 해소하거나 맛을 즐기기 위하여 마시는 것의 총칭을 의미하며 기능성 음료를 포함하는 의도이다. 상기 음료는 지시된 비율로 필수 성분으로서 상기 커큐민 유도체를 유효성분으로 포함하는 것 외에 다른 성분을 포함하는 것에는 특별한 제한이 없으며, 통상의 음료와 같이 여러 가지 향미제 또는 천연 탄수화물 등을 추가 성분으로서 함유할 수 있다. 상기의 천연 탄수화물의 예는 모노사카라이드, 예를 들어 포도당, 과당 등; 디사카라이드, 예를 들어 말토스, 수크로스 등; 및 폴리사카라이드, 예를 들어 덱스트린, 시클로덱스트린 등과 같은 통상적인 당, 및 자일리톨, 소르비톨, 에리트리톨 등의 당알콜이다. 상기한 것 이외의 향미제로서 천연 향미제(타우마틴, 스테비아 추출물(예를 들어 레바우디오시드 A, 글리시르히진 등) 및 합성 향미제(사카린, 아스파르탐 등)를 유리하게 사용할 수 있다. 상기 천연 탄수화물의 비율은 본 발명의 조성물 100 ㎖ 당 일반적으로 약 1 g 내지 20 g 또는 5 g내지 12 g이다. 그 밖에 본 발명의 조성물은 천연 과일 주스, 과일 쥬스 음료, 야채 음료의 제조를 위한 과육을 추가로 함유할 수 있다.

상기 외에 본 발명의 조성물은 여러 가지 영양제, 비타민, 광물(전해질), 합성 풍미제 및 천연 풍미제 등의 풍미제, 착색제 및 중진제(치즈, 초콜릿 등), 펙트산 및 그의 염, 알긴산 및 그의 염, 유기산, 보호성 콜로이드 증점제, pH 조절제, 안정화제, 방부제, 글리세린, 알코올, 탄산 음료에 사용되는 탄산화제 등을 함유할 수 있다. 이러한 성분을 독립적으로 또는 조합하여 사용할 수 있다. 이러한 첨가제의 비율은 그렇게 중요하지 않지만, 본 발명의 조성물 100 중량부 당 0 중량부 내지 200,000 중량부 범위에서 선택될 수 있다.

본 발명에서 기능성 음료란 음료에 물리적, 생화학적, 생물공학적 수법 등을 이용하여 해당 음료의 기능을 특정 목적에 작용, 발현하도록 부가가치를 부여한 음료 군이나 음료 조성이 갖는 생체방어리듬조절, 질병방지와 회복 등에 관한 체조절기능을 생체에 대하여 충분히 발현하도록 설계하여 가공한 음료를 의미한다.

상기 기능성 음료는 지시된 비율로 필수 성분으로서 본 발명 조성물의 유효성분을 함유하는 외에는 다른 성분에는 특별한 제한이 없으며, 통상의 음료와 같이 여러 가지 향미제 또는 천연 탄수화물 등을 추가 성분으로서 함유할 수 있다. 상기 천연 탄수화물의 예는 모노사카라이드, 예를 들어 포도당, 과당 등; 디사카라이드, 예를 들어 말토스, 수크로스 등; 및 폴리사카라이드, 예를 들어 덱스트린, 시클로덱스트린 등과 같은 통상적인 당, 및 자일리톨, 소르비톨, 에리트리톨 등의 당알콜이다. 상기한 것 이외의 향미제로서 천연 향미제(타우마틴, 스테비아 추출물(예를 들어 레바우디오시드 A, 글리시르히진 등) 및 합성 향미제(사카린, 아스파르탐 등)를 유리하게 사용할 수 있다. 상기 천연 탄수화물의 비율은 본 발명의 조성물 100㎖ 당 일반적으로 약 1 g 내지 20 g 또는 5 g 내지 12 g일 수 있다.

또한, 상기 커큐민 유도체를 유효성분으로 포함하는 지방간 질환의 개선 또는 예방용 식품 조성물에 있어서, 상기 유효성분의 함량은 전체 식품 중량의 0.0001 중량% 내지 99.99 중량% 또는 0.001 중량% 내지 99.9 중량% 또는 0.01 중량% 내지 90 중량% 또는 0.1 중량% 내지 50 중량%로 포함할 수 있으며, 음료 조성물은 100 ㎖를 기준으로 0.0002 g 내지 5 g 또는 0.03 g 내지 1 g의 비율로 포함할 수 있다.

또한, 상기 커큐민 유도체를 포함하는 비알콜성 지방간 질환의 개선 또는 예방용 식품 조성물의 섭취량은 섭취하고자 하는 개체의 상태 및 체중, 질병의 정도, 약물형태, 투여경로 및 기간에 따라 다르지만, 당업자에 의해 적절하게 선택될 수 있다. 일 예로, 본 발명의 식품 조성물은 유효성분을 기준으로 1일 0.0001 g/kg(유효성분의 양/체중) 내지 12 g/kg(유효성분의 양/체중) 또는 0.01 g/kg 내지 9 g/kg으로 투여될 수 있다. 투여방법은 하루에 한번 투여할 수 있고, 수회 나누어 투여할 수 있으며, 상기 투여량 및 투여방법은 어떠한 면으로든 본 발명의 범위를 한정하는 것은 아니다.

상기 의약 조성물과 동일한 방식으로 제제화되어 기능성 식품으로 이용하거나, 각종 식품에 첨가할 수 있다. 본 발명의 조성물을 첨가할 수 있는 식품으로는 예를 들어, 음료류, 육류, 초코렛, 식품류, 과자류, 피자, 라면, 기타 면류, 껌류, 아이스크림류, 알코올 음료류, 비타민 복합제, 건강보조식품류 등이 있다.

이하, 본 발명을 실시예를 통해 상세히 설명한다. 그러나 본 발명은 이하에서 개시되는 실시예들에 한정되는 것이 아니라 서로 다른 다양한 형태로 구현될 것이며, 단지 본 실시예들은 본 발명의 개시가 완전하도록 하고, 본 발명이 속하는 기술 분야에서 통상의 지식을 가진 자에게 발명의 범주를 완전하게 알려주기 위해 제공되는 것이며, 본 발명의 청구항의 범위에 의해 정의될 뿐이다.

[ 실시예 ]

[ 실험예 1] 실험 방법 및 통계분석

1) 시약 및 재료

커큐민((#sc-200509)은 Santa Cruz로부터 구입하여 사용하였고, 본 발명의 커큐민 유도체 화합물 N-{3-[(2E)-3-(4-하이드록시-3-메톡시페닐)프로프-2-에노일]페닐}-2-메틸프로판아미드(N-{3-[(2E)-3-(4-hydroxy-3-methoxyphenyl)prop-2-enoyl]phenyl}-2-methylpropanamide)은 ㈜ 유켐에서 합성하여 사용하였다.

2) 동물실험

생후 6주령 수컷 C57BL/6마우스를 공급받아 2주간의 적응 기간을 거친 후 생후 8주에 실험군을 확립하였다.

그룹(1): 정상먹이 공급, 그룹(2): 정상먹이 공급과 동시에 커큐민(curcumin) 100mg/kg/day 투여, 그리고 그룹(3): 정상먹이 공급과 동시에 커큐민 유도체(curcumin 8) 100mg/kg/day를 투여하였다.

당뇨군은 C57BL/6에 60%의 지방이 함유된 고지방 식이섭식을 하도록 하여 당뇨모델을 유도하였다.

그룹(4): 고지방 식이 공급, 그룹(5): 고지방 식이 공급과 동시에 커큐민(curcumin) 100mg/kg/day투여, 그룹(6): 고지방 식이 공급과 동시에 커큐민 유도체(curcumin 8) 100mg/kg/day를 투여하였다.

그룹당 마우스는 10마리로 하였고, 커큐민 (Curcumin)과 커큐민의 유도체 화합물인 Curcumin8은 주5회 13주동안 경구로 투여 하였으며, 실험 기간 동안 매주 체중 및 먹이 섭취량을 측정하였다.

약물 투여기간이 경과하면 식이종료 후 럼푼(Rompun, 10mg/kg)과 아베르틴(Avertin, 250mg/mg)을 섞어 복강 주사하여 마취 시키고, 복부를 절개 하여 심장채혈을 하였다. 수집된 혈액은 30분 동안 실온에 정치 시킨 후2000rpm에서 20분간 원심 분리하여 분리된 혈청을 수집하여 사용 전 까지 -80℃에 보관하였다. 심장 채혈 후 PBS로 관류하여 모든 혈액을 제거한 후 간, 지방 조직을 수집하여 일부 조직은 면역염색을 하기 위하여 4% 포르말린용액에 보관하고, 나머지는 -80℃에 보관하였다.

3) 통계학적 분석

데이터는 prism 5 소프트웨어(GraphPad)에서 one-way ANOVA 분석법을 사용하여 통계분석을 진행하였다.

[ 시험예 1] 체성분 분석을 통한 효과 확인

상기 실험예1의 방법에 따라 실험된 각 그룹 마우스의 실험 기간 동안 매주 체중 및 먹이 섭취량을 측정하였다.

도 1 및 도 2에 나타낸 바와 같이, 고지방식이로 지방간이 유도된 그룹에서는 실험기간이 경과함에 따라, 체중이 급격히 증가되는 결과를 보이며, 커큐민 또는 커큐민 8(커큐민 유도체)의 투여는 체중 증가와 고지방식이로 지방간이 유도된 그룹보다 적게 나타남을 확인할 수 있다. 특히, 먹이 섭취량에는 각 그룹간 차이를 보이고 있지 않았으나, 커큐민 8 투여 그룹에서는 커큐민 투여 그룹보다 체중의 증가가 낮은 것을 확인하였다. 따라서, 커큐민 8은 커큐민 보다 체중 증가를 억제하는 효과가 우수함을 확인 하였다.

[ 시험예 2] 혈액분석을 통한 효과 확인

상기 실험예 1의 각 그룹의 마우스로부터 수집된 혈청으로부터 글루코오스, 아스파르테이트아미노전달효소(aspartate transaminase, AST), 그리고 알라닌아미노전달효소(alanine transaminase, ALT)의 수치를 아산제약 (#AM101, Asan Co. Korea)의 효소키트(enzymatic kit)를 사용하여 각각 측정하였고, 인슐린 수치는 마우스 인슐린 ELISA 킷트(Shibayagi, Japan)를 사용하여 제조사의 지시에 따라 측정하였다. 측정된 글루코오스, 인슐린 수치로 인슐린 저항성의 지표인 HOMA-IR을 다음 [일반식 1]을 이용하여 값을 계산하였다.

[일반식 1]

공복 혈중 인슐린 (micro U/L) x 공복 혈당 (nmol/L)/22.5.

도 3a, 3b 및 4에 나타낸 바와 같이, 고지방식이로 지방간이 유도된 그룹에서 증가된 혈중 포도당 농도는 커큐민 8 투여에 의해 감소되는 경향성을 보이며, 증가된 인슐린의 수치는 유의하게 감소하였다. 즉, 인슐린 저항성 지표인 HOMA-IR의 수치는 커큐민 8의 투여에 의해 유의하게 개선되는 결과를 보였다.

또한, 도 5 및 6에 나타낸 바와 같이, 간기능의 지표인 AST와 ALT는 지방간일 때 증가되는데, 고지방식이로 지방간이 유도된 그룹에서 증가된 AST 수치는 커큐민 8에 의해서 감소되는 경향을 보였고, ALT의 수치는 고지방식이로 지방간이 유도된 그룹에서 유의하게 증가되었지만 커큐민 8에 의해 유의하게 감소되는 결과를 보였다.

[ 시험예 3] 조직학적 관찰에 따른 커큐민 8의 효과 확인

실험예 1 의 실험 마우스로부터 획득한 간조지을 4% 포르말린에 용액에 48시간 이상 고정시키고, 파라핀에 포매하여 블록을 제작 하였다. 파라핀 블록은4 ㎛ 두께로 박절하여 H&E(Hematoxylin and eosin) 염색을 실행하였으며, 슬라이드 제작 후 광학현미경으로(x 400) 시야에서 관찰 하였다.

도 7 및 도 8에 나타낸 바와 같이, 고지방 식이로 지방간이 유도된 그룹에서 보이는 지방간의 소견이, 커큐민을 투여하는 경우 지방간 형성을 억제시키지 못하였으나, 커큐민 8을 투여하면 지방산 형성이 억제되는 결과를 보이는 것을 확인 하였다.

[ 시험예 4] 간의 중성지방 측정

간에 포함된 중성지방을 측정하기 위하여 중성지방을 글리세롤로 전환하는 방법을 이용하여 중성지방을 측정하였다. 추출된 간 조직에서 일부분을 떼어내어 무게를 잰 후 튜브에 넣고 350㎕의 수산화칼륨(KOH)을 첨가하여, 55℃ 오븐에서 조직이 완전히 녹을 때까지 정치 시켰다. 조직이 완전히 녹은 후 50% 에탄올 용액을 650㎕ 넣고 잘 섞은 후 원심 분리하여 상층액을 새 튜브에 옮겨 1M MgCl₂를 넣어 준 후 4℃에서 10분간 정치하였다. 이후 원심분리를 5분간 실시한 뒤 상층액을 새로운 튜브에 옮겨주었다. 전환된 글리세롤을 분석하기 위하여 글리세롤 무첨가 시약(Free glycerol reagent, Sigma, #F6428)에 글라세롤 표준액(Sigma, #G7793)또는 준비된 샘플을 섞은 후 15분간 실온에서 정치 시킨 후 ELISA 리더기로 540nm파장에서 값을 측정 하고 다음 [일반식 2]의 공식을 사용하여 간의 중성지방 수치를 계산하였다.

[일반식 2]

2.5 mg/dL x (10/30) X (415/200) x 0.012 dL / 조직의 중량(tissue weights, g)

도 9에 나타낸 바와 같이, 간에서 중성지방을 측정한 결과, 고지방식이로 지방간이 유도된 그룹에서 증가된 간 중성지방의 수치가 커큐민 8을 투여하는 경우 유의적으로 감소됨을 확인하였다.

Claims (5)

1. 하기 화학식 1을 가지는 커큐민 유도체를 유효성분으로 포함하는 지방간 치료 또는 예방용 의약 조성물.
   [화학식 1]
   

   
2. 제1항에 있어서,
   상기 지방간은 비알콜성 지방간인 치료 또는 예방용 의약 조성물.
3. 제1항 또는 제2항에 있어서,
   상기 의약 조성물은 경구 투여 제제인 지방간 치료 또는 예방용 의약 조성물.
4. 화학식 1의 커큐민 유도체를 유효성분으로 포함하는 지방간 예방 또는 개선용 식품 조성물.
   [화학식 1]
   

   
5. 제4항에 있어서,
   지방간은 비알콜성 지방간인 예방 또는 개선용 식품 조성물.

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