KR20140007865A - 낭포성 섬유증의 치료를 위한 신규 조성물 - Google Patents

낭포성 섬유증의 치료를 위한 신규 조성물 Download PDF

Info

Publication number
KR20140007865A
KR20140007865A KR1020137022407A KR20137022407A KR20140007865A KR 20140007865 A KR20140007865 A KR 20140007865A KR 1020137022407 A KR1020137022407 A KR 1020137022407A KR 20137022407 A KR20137022407 A KR 20137022407A KR 20140007865 A KR20140007865 A KR 20140007865A
Authority
KR
South Korea
Prior art keywords
inhibitors
prostacyclin
composition
treprostinil
inhibitor
Prior art date
Application number
KR1020137022407A
Other languages
English (en)
Other versions
KR101852222B1 (ko
Inventor
마이클 프라이스무스
크리스티나 글뢰켈
사버 퀘닉
시몬 쿠에르레버
Original Assignee
에스씨아이팜 에스에이알엘
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Family has litigation
First worldwide family litigation filed litigation Critical https://patents.darts-ip.com/?family=43799687&utm_source=google_patent&utm_medium=platform_link&utm_campaign=public_patent_search&patent=KR20140007865(A) "Global patent litigation dataset” by Darts-ip is licensed under a Creative Commons Attribution 4.0 International License.
Application filed by 에스씨아이팜 에스에이알엘 filed Critical 에스씨아이팜 에스에이알엘
Publication of KR20140007865A publication Critical patent/KR20140007865A/ko
Application granted granted Critical
Publication of KR101852222B1 publication Critical patent/KR101852222B1/ko

Links

Images

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/185—Acids; Anhydrides, halides or salts thereof, e.g. sulfur acids, imidic, hydrazonic or hydroximic acids
    • A61K31/19—Carboxylic acids, e.g. valproic acid
    • A61K31/192—Carboxylic acids, e.g. valproic acid having aromatic groups, e.g. sulindac, 2-aryl-propionic acids, ethacrynic acid 
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/335—Heterocyclic compounds having oxygen as the only ring hetero atom, e.g. fungichromin
    • A61K31/34—Heterocyclic compounds having oxygen as the only ring hetero atom, e.g. fungichromin having five-membered rings with one oxygen as the only ring hetero atom, e.g. isosorbide
    • A61K31/343—Heterocyclic compounds having oxygen as the only ring hetero atom, e.g. fungichromin having five-membered rings with one oxygen as the only ring hetero atom, e.g. isosorbide condensed with a carbocyclic ring, e.g. coumaran, bufuralol, befunolol, clobenfurol, amiodarone
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/335—Heterocyclic compounds having oxygen as the only ring hetero atom, e.g. fungichromin
    • A61K31/365—Lactones
    • A61K31/366—Lactones having six-membered rings, e.g. delta-lactones
    • A61K31/37—Coumarins, e.g. psoralen
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/40—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having five-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom, e.g. sulpiride, succinimide, tolmetin, buflomedil
    • A61K31/4015—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having five-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom, e.g. sulpiride, succinimide, tolmetin, buflomedil having oxo groups directly attached to the heterocyclic ring, e.g. piracetam, ethosuximide
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/41—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having five-membered rings with two or more ring hetero atoms, at least one of which being nitrogen, e.g. tetrazole
    • A61K31/4164—1,3-Diazoles
    • A61K31/4166—1,3-Diazoles having oxo groups directly attached to the heterocyclic ring, e.g. phenytoin
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/435—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom
    • A61K31/4353—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom ortho- or peri-condensed with heterocyclic ring systems
    • A61K31/437—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom ortho- or peri-condensed with heterocyclic ring systems the heterocyclic ring system containing a five-membered ring having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. indolizine, beta-carboline
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/435—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom
    • A61K31/44—Non condensed pyridines; Hydrogenated derivatives thereof
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/557—Eicosanoids, e.g. leukotrienes or prostaglandins
    • A61K31/5575—Eicosanoids, e.g. leukotrienes or prostaglandins having a cyclopentane, e.g. prostaglandin E2, prostaglandin F2-alpha
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/557—Eicosanoids, e.g. leukotrienes or prostaglandins
    • A61K31/5578—Eicosanoids, e.g. leukotrienes or prostaglandins having a pentalene ring system, e.g. carbacyclin, iloprost
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/557—Eicosanoids, e.g. leukotrienes or prostaglandins
    • A61K31/558—Eicosanoids, e.g. leukotrienes or prostaglandins having heterocyclic rings containing oxygen as the only ring hetero atom, e.g. thromboxanes
    • A61K31/5585—Eicosanoids, e.g. leukotrienes or prostaglandins having heterocyclic rings containing oxygen as the only ring hetero atom, e.g. thromboxanes having five-membered rings containing oxygen as the only ring hetero atom, e.g. prostacyclin
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K45/00—Medicinal preparations containing active ingredients not provided for in groups A61K31/00 - A61K41/00
    • A61K45/06—Mixtures of active ingredients without chemical characterisation, e.g. antiphlogistics and cardiaca
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
    • A61K9/20—Pills, tablets, discs, rods
    • A61K9/28—Dragees; Coated pills or tablets, e.g. with film or compression coating
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
    • A61K9/48—Preparations in capsules, e.g. of gelatin, of chocolate
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P1/00—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system
    • A61P1/18—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system for pancreatic disorders, e.g. pancreatic enzymes
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P11/00—Drugs for disorders of the respiratory system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P3/00—Drugs for disorders of the metabolism
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P3/00—Drugs for disorders of the metabolism
    • A61P3/12—Drugs for disorders of the metabolism for electrolyte homeostasis
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Obesity (AREA)
  • Hematology (AREA)
  • Diabetes (AREA)
  • Pulmonology (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
  • Acyclic And Carbocyclic Compounds In Medicinal Compositions (AREA)
  • Medicinal Preparation (AREA)

Abstract

본 발명은 기관지상피 세포에서 cAMP 수준을 선택적으로 증가시킴으로써 낭포성 섬유증을 예방 또는 치료하는데 사용하기 위한 적어도 하나의 프로스타사이클린 또는 프로스타사이클린 유사체 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염 및 적어도 하나의 포스포디에스테라제 억제제(PDE)4 및 선택적으로 추가적인 PDE 억제제를 포함하는 조성물을 제공한다.

Description

낭포성 섬유증의 치료를 위한 신규 조성물{Novel composition for the treatment of Cystic Fibrosis}
본 발명은 낭포성 섬유증을 예방 또는 치료하는데 사용하기 위한 포스포디에스테라제 억제제 4와 조합되게 프로스타사이클린 또는 프로스타사이클린 유사체를 포함하는 조성물, 뿐만 아니라 구체적인 조성물을 제공한다.
프로스타글란딘 I2(프로스타사이클린; 에포프로스테놀, PGI2)는 사이클로옥시게나제 및 PGI 신타제 효소의 순차적 활성화에 의해 효소적으로 형성된 아라키돈산의 산화된 대사물이다. 이는 혈관 내피 세포 및 평활근 세포에 의해 구성적으로 생성되며, 혈관 세포 및 대식세포에서 염증성 조건 하에 유도된다.
PGI2는 강력한 혈관확장제 및 항혈전제이며, 그의 효과는 I 프로스타노이드(IP)4 수용체로 불리는 독특한 7중나선형 G 단백질-커플링 수용체와의 결합으로부터 유도된다. 이 수용체는 Gs-와 커플링되며, 아데닐레이트 사이클라제를 활성화시켜, 세포내 cAMP의 급성 방출을 초래한다. CFTR 및 돌연변이된 CFTR의 발현은 cAMP-의존적이기 때문에, cAMP의 세포내 수준을 향상시키는 물질은 CF의 치료에 대한 약물의 개발에 있어서 흥미로운 것이다. 그러나, 포스콜린과 같은 대부분의 이들 물질은 cAMP의 다소 비특이적인 증가를 유도하는데, 이는 또한 염증과 같은 매우 유해한 효과를 가질 수 있다. 따라서, 폐 상피 세포에서 cAMP의 특이적 인핸서에 대한 충족되지 않은 필요성이 존재한다.
트레프로스티닐은 강력한 IP 수용체 작용제이지만, 이 수용체에 대한 그의 특이성은 알려져 있지 않다. Sprague R.S. 등[Microcirculation 2008 Jul;15(5):461-71]은 프로스타사이클린 유사체(UT-15, 리모듈린)가 수용체-매개된 cAMP 합성 및 토끼 및 인간 적혈구로부터의 ATP 방출을 자극하는 것을 보여주었다.
핵 포스포디에스테라제(PDE)는 불활성 5'-뉴클레오티드 생성물에 대한 cAMP 및 사이클릭 3',5-구아노신 모노포스페이트(cGMP)의 가수분해를 촉매하는 효소이다. cAMP 및 cGMP는 대체로 복합기질 단백질 키나제에 대한 이들의 자극성 효과를 통해 주로 매개되는, 많은 세포내 효과를 나타낸다. PDE를 억제함으로써, cAMP 및 cGMP의 수준은 증가하며, 기도 평활근의 완화 및 염증성 세포 활성화의 억제를 초래한다. PDE4, PDE7 및 PDE8은 cAMP에 대해 특이적이다.
포스포디에스테라제 억제제는 효소 포스포디에스테라제(PDE)의 하나 이상의 아형을 억제하며, 따라서 각각의 PDE 아형(들)에 의해 세포내 제2 메신저인 사이클릭 아데노신 모노포스페이트(cAMP) 및 사이클릭 구아노신 모노포스페이트(cGMP)의 불활성화를 방지한다. 사이클릭-3',5'-뉴클레오티드 PDE의 동종효소는 cAMP 단백질 키나제 A(PKA) 시그널링 경로의 아주 중요한 구성성분이다. 11개의 PDE 패밀리가 확인되었다. PDE 동종효소의 수퍼패밀리는 적어도 9개 유전자 패밀리(유형), PDE1 내지 PDE11로 구성된다. 일부 PDE 패밀리는 매우 다양하며, 몇몇 아형 및 많은 이소형-스플라이스 변이체로 구성된다.
비특이적 PDE 억제제의 예는 테오필린 및 관련 잔틴 화합물, 카페인, 아미노필린 등이다. 빈포세틴은 PDE1 선택적 억제제이다. 알려진 PDE2 선택적 억제제는 EHNA 또는 아나그렐리드이며, PDE3 선택적 억제제는 에녹시몬 또는 밀리논이다.
PDE4는 염증성 세포 및 면역 세포에서 발견되는 주요한 cAMP-대사성 효소이다. PDE4 억제제는 특히 천식, COPD 및 비염과 같은 염증성 폐 질환에서 항-염증성 약물로서 잠재성이 있는 것으로 입증되었다. 이들은 사이토카인 및 다른 염증성 시그널의 방출을 저해하고, 활성 산소종의 생산을 억제한다. 알려진 PDE4 억제제는 예를 들면, 메셈브린, 로리프램, 이부딜라스트 등이다.
PDE5 억제제는 사이토크롬 P450 효소 CYP3A4에 의해 주로 대사된다. HIV 프로테아제 억제제, 케토코나졸, 이트라코나졸 및 니트로-스프레이와 같은 다른 항-고혈압 약물을 포함하는, CYP3A4를 억제 또는 유도하는 다른 약물과의 유해한 약물 유해 상호작용이 존재할 가능성이 있다. PDE5 억제제의 예는 실데나필, 타다라필, 베테나필 또는 유데나필이다.
낭포성 섬유증(CF)은 상피막에서 클로라이드 채널로 작용하는 낭포성 섬유증 경막 전도도 조절인자(cystic fibrosis transmembrane conductance regulator; CFTR)로 알려진 1480개 아미노산 폴리펩타이드를 인코딩하는 염색체 7 상에서 230 kb 유전자 내 돌연변이로 인한 유전적 질환이다. 현재까지 1000개 이상의 돌연변이체 대립인자가 확인되었다. 가장 통상적인 돌연변이인 ΔF508은 낭포성 섬유증 경막 전도도 조절인자(CFTR) 단백질의 코돈 508에서 페닐알라닌 잔기의 결실이다. 이 돌연변이는 CFTR 기능의 심각한 감소를 야기하며, 상승된 땀 클로라이드, 기관지확장증이 있는 재발성 호흡기 감염, 및 췌장 기능부전의 조기-발병과 같은 외분비선 기능의 이상을 특징으로 하는 고전적인 낭포성 섬유증 표현형을 유도한다.
임상적으로, CF는 통상적으로 하나 또는 그 이상의 전형적인 CF 표현형적 특징이 대상체에서 존재하는 경우에 의심된다. CF는 단독의 만성 폐질환이거나, 매우 빈번하게는 위장 및 영양적 이상(예컨대, 췌장 기능부전 및 재발성 췌장염), 염 상실 증후군 및 남성 비뇨생식기 이상(즉, 폐쇄성 무정자증)과 연관된 만성 폐질환일 수 있다. 인간의 폐에서 농후하고 점착성인 분비물은 CFTR을 발현하는 원위 기도 및 점막하선을 폐색시킨다. 상기 질환의 병리학적 특징(hallmark) 중에는 이들 선의 관형 확장(점액에 의한 차단과 연관됨) 및 농후한 점성 호중구 우세 점액농즙성 파편에 의한 기도 표면의 플래스터링(plastering)이 있다. 폐의 염증은 낭포성 섬유증이 있는 대상체에서 호흡기 기능의 저하의 또 다른 주된 원인이며, 만성 감염의 발병을 선도할 수 있다. 췌장관 내의 점액 매복 및 농후한 결석은 특발성 또는 알콜성 췌장염으로 이전에 진단된 대상체의 큰 소그룹에서는 만성 섬유증, 선의 지방성 대체, 또는 이둘 모두를 유도한다.
낭포성 섬유증은 10,000명의 소아 중의 약 4명에게 영향을 미치는, 백인 집단에서 가장 통상적인 치명적 유전적 질환이다. 미국에서, 사망 연령 중간값(median age at death)은 1969년에 8.4세로부터 1998년에 14.3세로 상승하였다. 평균 사망 연령은 1969년에 14세로부터 2003년에는 32.4세로 상승하였다(낭포성 섬유증 재단). 1990년대에 출생한 소아의 경우에, 생존 중앙값(median survival)은 40년 이상인 것으로 예측된다. 기대 수명의 상당한 증가에 대한 주된 기여인자는 CF 대상체에서 만성 호흡기 감염의 개선된 치료 및 점액의 제거뿐만 아니라 개선된 영양 및 조기 진단이다.
기도 상피의 정단막으로부터 낭포성 섬유증 경막 전도도 조절인자(CFTR) 음이온 전도도의 상실은 기도 표면 액체층의 조절을 붕괴시킨다. 이것은 낭포성섬유증(CF)의 손상된 점액섬모 소거율, 기도 감염, 및 염증 특징을 유도한다. CFTR의 통상적인 ΔF508 돌연변이는 CF 환자의 >90%에서 적어도 하나의 대립인자 상에 존재하며, 환자의 >50%는 ΔF508에 대해 동형접합성이고, 나머지는 복합 이형접합성이다. CF 질환에서 중추적 문제는 이 통상적인 CFTR 변이체가 세포질세망(ER)으로부터 나와서 상피세포 정단막으로 이동할 수 있는 천연의 접혀진 상태에 도달할 수 없다는 점이다.
천연적인 형상의 획득이 방해되는 경우, CFTR은 분자 샤페론과의 과도하거나 장기간의 상호작용을 유지하고, 그 후에 잘못 접히거나 불완전하게 복합체 형성된 단백질에 대해서 ER을 단속하는 기전에 의한 분해에 대해 단백질을 표적화하는 것으로 생각된다. ER-연관된 분해(ERAD)는 비정상적인 단백질의 편재화, 및 소화를 위한 프로테아좀으로의 그들의 운반을 수반한다. ERAD가 단백질 합성의 속도보다 늦게 뒤처지거나 프로테아좀 억제제에 의한 치료 중에는, 돌연변이체 단백질의 응집체가 축적된다. CFTR은 유비퀴틴-프로테아좀 매개된 분해에 대한 기질로 확인되는 최초의 필수 막 포유동물 단백질이었으며, 단백질 형상 질병의 증가하는 리스트에 대한 모델로서 제공되고 있고, 이는 다양한 세트의 병리학적 방법론을 설명한다.
본질적으로, 세포에 의해서 생산된 모든 ΔF508 CFTR은 ERAD에 의해서 파괴된다. 또한, 그의 복잡한 접힘 패턴(folding pattern)으로 인하여 야생형(wt) 단백질의 60-70%는 유사하게 분해될 수 있지만, 이것은 세포 타입에 따라 달라질 수 있다. wt 및 ΔF508 CFTR의 미성숙 형태의 단백분해적 절단(cleavage) 패턴은 유사한 반면에 성숙 wt CFTR의 소화(digestion) 패턴은 상이하다. 이러한 발견은 변이체 단백질 구조의 형성과는 대조적으로, ER-유지된 돌연변이체 CFTR의 적어도 일부분이 표준 CFTR 접힘 경로에 따라 형성된 중간 형상으로 존재한다는 개념을 뒷받침한다. ΔF508 CFTR의 경우에, 이러한 중간 형상은 접힘 과정에서 임계적 단계 이상으로 진행할 수 없지만, 이것은 이 단계를 촉진시킬 수 있다면 ΔF508 CFTR이 구제될 수 있음을 내포하는 것이다.
저하된 온도, 화학적 샤페론과의 인큐베이션, 또는 약물학적 코렉터 (corrector)와 같은 다양한 실험적 조건은 ER로부터 ΔF508 CFTR의 일탈을 촉진시켜 세포 표면에서 기능적 음이온 채널을 수득할 수 있다. 또한, 연구자들은 wt CFTR로부터 다양한 부분적 CFTR 구조 또는 서브도메인의 공동발현에 의한 ΔF508 CFTR 기능의 회복을 보고하였다. 그러나, CFTR 서브영역이 돌연변이체 단백질 구제에 효과적이라는데 대한 의견의 일치는 분명하지 않으며, 이 효과의 기전은 여전히 모호한 채로 남아 있다. 또한, CFTR 단편-유도된 구제는 주로 CFTR 단편 및 전장 ΔF508 CFTR 둘 다를 외인성으로 과발현하는 세포에서 관찰되었다.
WO 08/098196은 트레프로스티닐을 사용하는 폐 섬유증의 치료를 기술한다. 그러나, 폐 섬유증은 폐에서 콜라겐 섬유질의 축적에 의해 야기된 간질성 폐 질환이며; 이는 들숨에 대한 폐의 능력을 제한한다: 폐는 그의 순응성을 잃고 기도 저항성은 증가한다(순응성 = 1/저항). 질환이 진행됨에 따라 혈관 저항성도 또한 증가한다. 폐 섬유증에서 트레프로스티닐의 작용 지점은 폐포 내의 맥관계 및 간질 공간이다.
Tissieres 등은 낭포성 섬유증 및 2차성 폐 고혈압의 치료를 위해 일로프로스트를 사용하는 연구를 기술한다. 에어로졸화된(aerolised) 일로프로스트는 폐 동맥압를 저하시키는데 효과적이었음이 개시된다(The annals of thoracic surgery, vol, 78, no.3, E48-E50).
US2001/006979 A1은 섬유성 질환의 치료를 위한 일로프로스트 또는 시카프로스트와 같은 프로스타사이클린 유사체의 사용을 기술한다.
낭포성 섬유증은 폐 섬유증과 연관이 없는데, 이는 기관지 상피에서 기원하는 질환이기 때문이다. CFTR의 부재로 인해, 기관지 상피를 덮고 있는 점막 내에 물이 너무 적고; 따라서, 섬모는 두꺼운 점막을 움직이지 못하고 점막섬모 소거가 작동하지 않는다(점막섬모 소거는 컨베이어 벨트와 같이 작용하는데, 여기서 섬모는 집중적 방식으로 율동적으로 박동하여 점액을 기관 및 인두 쪽으로 역 이동시키고, 여기에서 점액은 삼키기 또는 기침 등에 의해서 제거될 수 있음). 점막섬모가 고장나면, 세균은 기관지로부터 제거될 수 없고, 기관지는 세균에 의해 집락화되며, 폐를 파괴하는 폐 감염의 반복된 발작이 일어난다. 이러한 상황은 기관지 상피로 Cl-플럭스를 복원함으로써 치료될 수 있다. 따라서, 낭포성 섬유증에서 작용 지점은 기관지의 기도 상피이다. 작용 지점은 해부학적으로 뚜렷하며(폐 간질 대. 기관지 기도), 다양한 세트의 세포(섬유아세포, 혈관 평활근 세포, 상피 대 흡수성 및 분비성 기관지 상피 세포)를 포함하고, 아마도 또한 다른 수용체(프로스타사이클린 수용체 대 가능하게는 EP2-수용체)를 포함한다.
DE102005016345A1 및 US2005101608A1은 폐 고혈압의 치료를 위한 PDE5 억제제의 사용을 기술한다.
US2009325976A1은 폐 동맥 고혈압의 치료에 사용하기 위한 PDE 5 억제제와 조합하여 또한 사용될 수 있는 신규한 프로스타사이클린 유도체를 개시한다.
임상적으로 사용된 PDE 억제제는 Cobb B.R. 등에 의해 기술된 바와 같이 낮은 cAMP 수준의 설정에서 염화물 분비를 활성화시키기 위해 시험하였다(Am J Respir Cell Mol Biol. 2003 Sep;29(3 Pt 1):410-418).
PDE 5 억제제, 실데나필 및 바데나필, 및 낭포성 섬유증에서 클로라이드 수송에서의 이들이 역할은 Lubamba B. 등에 의해 기술된다(Am J RespirCrit Care Med. 2008 Mar 1;177(5):506-515).
PDE 5 억제제 및 △F508 CFTR 채널 기능에서 이의 역할은 Clarke Lane L.에 의해 기술된다(J RespirCrit Care Med. 2008 Mar 1;177(5):469-70).
WO2010106494A1에서 장애를 치료하기 위한 알려진 약한 PDE4 억제제인 메셈브린 HCl의 사용이 개시된다.
US20070249668은 PDE 억제제를 함유하는 조성물 및 적혈구 세포에서 ATP 함량을 증가시키기 위한 프로스타사이클린 유사체를 기술한다.
현재, 장기간에 걸쳐서 환자의 생명의 질을 현저하게 개선시키는 낭포성 섬유증의 치료는 이용한 것이 없다. 따라서, 본 발명의 목적은 폐의 상피 세포에서 △F508 CFTR의 발현 및/또는 클로라이드 채널 기능을 증진시킬 수 있는 치료용 조성물을 제공하는 것이다.
본 발명의 목적은 낭포성 섬유증을 예방 또는 치료하는데 사용하기 위한 적어도 하나의 PDE 4 억제제와 조합되게 적어도 하나의 프로스타사이클린 또는 그의 유사체, 유도체 또는 약학적으로 허용가능한 염을 포함하는 조성물을 제공함으로써 달성된다. 대안적인 구현예로서, 상기 조성물은 적어도 하나의 PDE5 및/또는 PD7 및/또는 PDE8 억제제를 추가로 포함할 수 있다.
구체적으로, 프로스타사이클린 유사체는 트레프로스티닐, 일로프로스트, 시카프로스트 또는 베라프로스트 또는 이들의 유도체 또는 약학적으로 허용가능한 염의 군으로부터 선택된다. 본 발명의 일 구현예에서, 트레프로스트닐 유도체는 트레프로스티닐의 산 유도체, 전구약물, 다형체 또는 이성체이다.
본 발명에 따르면, PDE4 억제제는 Ro 20-1724, 이부딜라스트, 로플루밀라스트 및 그의 N-옥사이드, 실로밀라스트, BAY 19-8004, CC3, AWD 12-281, SCH 351591, 시클라밀라스트, 피클라밀라스트, CGH2466, 메셈브린, 로리프램, 루테올린 및 드로타베린의 군으로부터 구체적으로 선택될 수 있다.
본 발명에 따르면, PDE5 억제제는 아바나필, 로데나필, 미로데나필, 실데나필 시트레이트, 타다라필, 바데나필 및 유데나필로부터 구체적으로 선택될 수 있고; PDE7 및 PDE8 억제제는 디피리다몰, BRL-50481 및 PF-04957325로부터 선택될 수 있다.
본 발명의 구체적 구현예에 따르면, 본 조성물은 구체적으로는 하나의 유형의 프로스타사이클린 유사체 및 하나의 유형의 PED4 억제제로 구성된다.
구체적인 구현예로서, 조성물은 트레프로스티닐과, RO 20-1724, 로플루밀라스트 및 이부딜라스트의 군으로부터 선택되는 PDE4 억제제를 포함한다.
본 발명의 추가적인 구현예에서, 조성물은 PDE5, PDE7 또는 PDE8 억제제로부터 선택되는 부가적인 PDE 억제제를 포함한다.
다른 구현예에서, 본 발명은 인터페론이 비함유된 조성물을 제공한다.
구체적으로, 본 발명의 조성물은 약학적 조성물로서 제형화된다.
임의의 알려진 투여 형태가 본 발명의 조합을 투여하기 위해 사용될 수 있는데, 예를 들면 이는 정맥내 또는 피하 투여 또는 흡입 투여, 또는 서방성 방출 형태, 정제 또는 캡슐의 군으로부터 선택되는 경구적으로 이용가능한 형태일 수 있다.
구체적인 구현예에 따르면, 트레프로스티닐 또는 그의 약학적으로 허용가능한 염의 유효량은 바람직하게는 약 1.0 ng/kg 체중이며, 이부딜라스트는 바람직하게는 5x30 mg 이하, 바람직하게는 2x30 mg 이하이고, PDE4 억제제의 유효량은 대략 0.5mg이다. 부가적으로, PDE5 및 PDE7 억제제들의 군의 하나 이상의 억제제는 각각의 억제제가 0.5 mg의 유효량으로 함유될 수 있다.
본 발명은 세포 내에서 cAMP 수준을 증가시키기 위한 시험관내 방법을 또한 제공하며, 여기서 상기 세포는 적어도 하나의 프로스타사이클린 또는 프로스타사이클린 유사체 및 적어도 하나의 PDE4 억제제 또는 그의 약학적으로 허용가능한 염과 접촉된다. 부가적으로, PDE5, PDE7 및/또는 PDE8 억제제는 상기 방법에 따라 추가적으로 사용될 수 있다.
구체적으로, 세포는 상피 세포이며, 더욱 구체적으로 이는 기관지상피 세포일 수 있다.
적어도 하나의 프로스타사이클린 또는 프로스타사이클린 유사체 및 적어도 하나의 PDE4 억제제 또는 그의 약학적으로 허용가능한 염을 포함하는 치료적 조합물이 또한 제공되며, 여기서 프로스타사이클린 유사체 및 PDE4 억제제는 함께 낭포성 섬유증과 관련된 적어도 하나의 증상을 치료 및/또는 예방하기에 충분한 양으로 제공된다. 더욱 구체적으로, 프로스타사이클린 유사체 및 PDE4 억제제는 흡입에 의한 투여를 위해 제형화된다.
대안적인 구현예에 따르면, 상기 치료적 조성물은 PDE5, PDE7 및 PDE8 억제제의 군으로부터 선택되는 적어도 하나의 추가적인 억제제를 함유할 수 있다.
도 1: 트레프로스티닐 단독 또는 PDE 4 억제제 이부딜라스트(100μM) 및 실로스타졸(100 μM)과의 조합으로 인큐베이션시킨 후 IB3-1 세포에서 cAMP의 축적.
도 2: 트레프로스티닐과 PDE 4 억제제 RO-20-1724(100μM) 및 로플루밀라스트(10 μM)와의 조합으로 인큐베이션시킨 후 IB3-1 세포에서 cAMP의 축적.
도 3: 일시적으로 CFTR-wt를 발현하는 인간 기관지 상피 IB3-1 세포주에서 트레프로스티닐에 의한 Cl-전류(Cl-current)의 활성화.
도 4: 디피리다몰, 이부딜라스트, RO20-1724 또는 로플루밀라스트의 지시된 농도의 부재 또는 존재하에서 10 μM 트레프로스티닐에 의해 자극된 IB3-1 세포에서 cAMP의 축적. 세포를 4시간 동안 [3H]아데닌으로 대사적으로 사전표지시키고, 이어서 30분 동안 지시된 화합물과 함께 인큐베이션시켰다. [3H]cAMP의 형성은 재료 및 방법에서 열거된 바와 같이 측정하였다. 데이터는 평균 ±s.e.m이다(n=3).
도 5: IB3-1 세포에서 트레포스티닐-유도된 cAMP 축적에 대한 농도-반응 곡선. 세포는 지시된 농도의 이부딜라스트, RO20-1724 또는 로플루밀라스트의 부재 및 존재하에서 트레프로스티닐의 농도를 증가시키면서 인큐베이션시켰다. 세포를 4시간 동안 [3H]아데닌으로 대사적으로 사전표지시키고, 이어서 30분 동안 지시된 화합물과 함께 인큐베이션시켰다. [3H]cAMP의 형성은 재료 및 방법에서 열거된 바와 같이 측정하였다. 데이터는 평균 ± s.e.m이다(n=3).
도 6: IB3-1 세포에서 기저 cAMP 축적에 대한 선택적 포스포디에스테라제 억제제의 효과. 세포를 4시간 동안 [3H]아데닌으로 대사적으로 사전표지시키고, 이어서 30분 동안 디피리다몰, Ro-20-1724 또는 로플루밀라스트의 지시된 농도의 부재(기저) 및 존재하에서 인큐베이션시켰다. [3H]cAMP의 형성은 재료 및 방법에서 열거된 바와 같이 측정하였다. 데이터는 평균 ± s.e.m이다(n=3).
PDE4 억제제와 조합한 프로스타사이클린 또는 그의 유사체 또는 약학적으로 허용가능한 염이 낭포성 섬유증을 치료하기 위해 사용될 수 있음이 본 발명자들에 의해 놀랍게도 밝혀졌다. 프로스타사이클린 또는 프로스타사이클린 유사체 및 PDE4 억제제의 조합이 단일 물질을 사용하는 것과 비교할 때, cAMP 증가에 상승적 효과를 가지는 것으로 나타났다. 상기 효과는 PDE5, PDE7 및 PDE8 억제제로부터 선택되는 추가적인 PDE 억제제의 존재에 의해 추가적으로 향상될 수 있다.
합성 프로스타사이클린 유사체는 이로 제한되는 것은 아니지만, 예를 들면 트레프로스티닐, 일로프로스트, 시카프로스트 또는 베라프로스트일 수 있다.
트레프로스티닐은 프로스타사이클린의 합성적 유사체이다. 트레프로스티닐은 레모듈린TM(RemodulinTM)으로 시판된다. 트레프로스티닐은 (1R,2R,3aS,9aS)-[[2,3,3a,4,9,9a-헥사하이드로-2-하이드록시-1-[(3S)-3-하이드록시옥틸]-1H-벤즈[f]인델-5-일]옥시]아세트산 모노소듐 염이다.
일로프로스트는 "일로메딘(Ilomedine)"으로 시판되며 5-{(E)-(1S,5S,6R,7R)-7-하이드록시-6[(E)-(3S, 4RS)-3-하이드록시-4-메틸-1-옥텐-6-이닐]-바이-사이클로[3.3.0]옥탄-3-일리덴}펜탄산이다.
베라프로스트는 2,3,3a,8b-테트라하이드로-2-하이드록시-1-(3-하이드록시-4-메틸-1-옥텐-6-이닐)-1H-사이클로펜타(b)벤조푸란-5-부탄산이다.
시카프로스트는 2-[(2E)-2-[(3aS,4S,5R,6aS)-5-하이드록시-4-[(3S,4S)-3-하이드록시-4-메틸노나-1,6-디이닐]-3,3a,4,5,6,6a-헥사하이드로-1H-펜탈렌-2-이리덴]에톡시]아세트산이다.
본 발명에 따른 프로스타사이클린, PDE4 및 PDE5, PDE7 또는 PDE8 억제제와 관련하여, 용어 "프로스타사이클린 유사체", "억제제 유사체" 또는 "PDE4, PDE5, PDE 7 또는 PDE8 억제제 유사체"는 상기 물질의 유도체 또는 유사체를 의미한다. 용어 "유사체" 또는 "유도체"는 구조 및 기능면에서 다른 화학 물질과 유사한 화학 분자에 관한 것이며, 이는 종종 모체 화학 물질과 동일한 기능을 유지하는 경우 하나 이상의 기(예컨대, 2, 3 또는 4개 기)의 변형에 의해 달라질 수 있는 하나의 요소 또는 기에 의해 구조적으로 상이하다. 이러한 변형은 당업자에게 통상적인 것이며, 예를 들면 산의 에스테르 또는 아미드와 같은 부가 또는 치환된 화학적 모이어티, 알코올 또는 티올에 대한 벤질기와 같은 보호기, 및 아민에 대한 tert-부틸카르보닐기를 포함한다. 또한 알킬 치환(예컨대, 메틸, 디메틸, 에틸, 등)과 같은 알킬 측쇄의 변형, 측쇄의 포화 또는 불포화의 수준에 대한 변형 및 페닐 및 페녹시와 같은 변형된 기의 부가가 포함된다. 유도체는 또한 비오틴 또는 아비딘 모이어티와 같은 결합체, 호스래디쉬 퍼옥사이드 등과 같은 효소 및 방사성-표지된, 생물발광, 화학발광 또는 형광 모이어티를 포함할 수 있다. 추가로, 모이어티는 본 명세서에 기술된 제제에 첨가되어 다른 바람직한 특성들 중에, 생체내 또는 생체외 반감기 증가, 또는 그의 세포 투과 특성의 증가와 같은 그의 약동학적 특성을 변경시킬 수 있다. 제약의 수많은 바람직한 특성(예컨대, 가용성, 생체이용률, 제조 등)을 증진시키는 것으로 알려진 전구 약물이 또한 포함된다. 용어 "유도체"는 기능적으로 등가이거나 기능적으로 개선된 분자를 제공하는 부가, 결실 및/또는 치환을 포함하는 모체 서열에 대해 행해진 변경을 그의 범주 내에 또한 포함한다.
적합한 프로스타사이클린 또는 프로스타사이클린 유사체 유도체는 이들로 제한되는 것은 아니지만, 트레프로스티닐, 일로프로스트, 시카프로스트 또는 베라프로스트의 산 유도체, 전구약물, 서방성 방출 형태, 흡입 형태 및 경구 형태를 포함한다.
본 발명의 구체적인 구현예에 따르면, 트레프로스티닐 유도체는 트레프로스티닐의 산 유도체, 전구약물, 다형체 또는 이성체의 군으로부터 선택된다.
유사하게, 일로프로스트, 시카프로스트 또는 베라프로스트 유도체는 이들로부터의 산 유도체, 전구약물, 다형체 또는 이성체일 수 있다. 용어 프로스타사이클린 유도체는 또한 그의 약학적으로 허용가능한 염을 포함한다. 본 발명의 프로스타사이클린 또는 프로스타사이클린 유사체의 약학적으로 허용가능한 염은 아미노 작용기와 같은 화합물의 산과 염기성 기 사이, 또는 카르복실 작용기와 같은 화합물의 염기와 산성기 사이에서 형성될 수 있다.
구체적으로, 프로스타사이클린 유사체의 생리학적으로 허용가능한 염은 염기 유래의 염을 포함한다. 염기 염은 암모늄 염(4급 암모늄 염), 나트륨 및 칼륨의 것들과 같은 알칼리 금속 염, 칼슘 및 마그네슘의 것들과 같은 알칼리 토 금속 염, 디사이클로헥실아민 및 N-메틸-D-글루카민과 같은 유기 염기를 가진 염, 아르기닌 및 리신과 같은 아미노산을 갖는 염을 포함한다.
구체적으로, 트레프로스티닐의 사용은 본 발명에 따른 잇점이 있다. 트레프로스티닐은 낭포성 섬유증 환자의 상피 세포에서 △F508 CFTR의 발현 및/또는 클로라이드 채널 기능을 성공적으로 증진시킬 수 있다.
프로스타사이클린 유사체와 PDE4 억제제의 조합 및 선택적으로 PDE5 및/또는 PDE7 및/또는 PDE8 억제제와의 조합이 기관지 상피 세포에서 cAMP 생산의 상승적 자극 및/또는 cAMP 함량의 증가를 유도함이 놀랍게도 나타났다.
흥미롭게도, 아나그렐리드 및 실로스타졸과 같은 PDE3 억제제는 실험에서 어떠한 cAMP의 축적도 유도하지 못했다.
IP 수용체를 통한 cAMP 생산을 자극하는 능력, 및 (상피 폐 세포와 같은) 소수의 세포 유형에 대한 IP 수용체의 제한된 존재를 고려할 때, 프로스타사이클린 또는 그의 유사체, 예를 들면 트레프로스티닐은 특히 상기 PDE4 억제제와 조합되는 경우 CF의 치료에 사용되어 기도 상피 내에서 cAMP 수준의 장기간의 증가를 유도할 수 있는 특이적 방식으로 CFTR 및 mutCFTR의 발현 및 게이팅(gating)을 유도할 수 있다.
추가적인 구현예에 따르면, 상기 cAMP 증가는 PDE5, PDE7 및/또는 PDE8 억제제의 군으로부터 추가로 선택된 PDE 억제제와 PDE4 억제제의 조합에 의해 추가적으로 유도될 수 있다.
PDE4 억제제는 COPD 및 천식의 치료에 대해 승인된다. COPD 및 천식에서 주된 대상은 기도 평활근 내벽의 과민반응을 감소시키기 위한 것이다. 평활근세포에서 cAMP 수준의 증가는 미오신 경쇄 키나아제 상의 작용을 통해 평활근의 완화를 야기하는 것으로 오랫동안 알려져 왔다. 추가로, PDE4 억제제는 단핵구, 호산구 및 호염기구 과립구, B 및 T 세포, 예컨대 염증 세포를 표적함으로써 알레르기성 천식을 일으키는 면역반응을 감소시키는 것으로 고려된다. 이들 기전 모두는 낭포성 섬유증에서의 작용 방식으로서 적절하지 않다. 낭포성 섬유증에서, cAMP 수준은 매우 다양한 세포 구획, 즉 기도 상피에서 증가되어야만 한다. 사실상, 우리가 아는한, PDE4가 기도 상피 내에서 수용체-매개된 cAMP 축적을 증진시키는 적절한 이소형임을 보여주는 어떠한 과학적 보고도 존재하지 않는다.
본 발명에 따르면, PDE4 효소에 대한 억제성 활성을 갖는 임의의 PDE4 억제제 또는 그의 유사체가 사용될 수 있다. 따라서, PDE4 억제제가 PDE 효소 또한 추가적으로 억제할 수 있다는 점을 배재할 수 없다.
구체적으로, PDE4 억제제는 특정 PDE4 억제제일 수 있다.
본 발명의 PDE4 억제제는 이들로 제한되는 것은 아니지만, Ro 20-1724, 이부딜라스트, 로플루밀라스트(3-(사이클로프로필메톡시)-N-(3,5-디클로로피리딘-4-일)-4-(디플루오로메톡시)벤즈아미드) 및 그의 N-옥사이드, 실로밀라스트, BAY 19-8004, CC3, AWD 12-281 (N-(3,5-디클로로-4-피리디닐)-2-[1-(4-플루오로벤질)-5-하이드록시-1H-인돌-3-일]-2-옥소아세트아미드), SCH 351591 (N-(3,5-디클로로-1-옥시도-4-피리디닐 )-8-메톡시-2-(트리플루오로메틸)-5-퀴놀린 카르복스아미드), 시클라밀라스트, 피클라밀라스트, CGH2466, 메셈브린, 로리프램, 루테올린 및 드로타베린 또는 이들의 작용적 유사체일 수 있다.
더욱 구체적으로, CF를 앓고 있는 개인의 기관지 상피 세포에서 cAMP 수준을 증가시킴으로써, CF를 예방 또는 치료하는데 사용하기 위한 조성물은 트레프로스티닐 및 로플루밀라스트 또는 트레프로스티닐 및 이부딜라스트 또는 트레프로스티닐 및 Ro-20-1724를 구체적으로 포함할 수 있다. PDE5 억제제는 평활근 세포에서 사이클릭 뉴클레오티드 제2 메신저 수준을 증가시키는 것으로 나타난다.
본 발명에 따르면, PDE5 효소에 대한 억제 활성을 갖는 임의의 PDE5 억제제 또는 그의 유사체가 사용될 수 있다. 따라서, PDE5 억제제가 다른 PDE 효소를 또한 추가적으로 억제할 수 있음을 배제하지 않는다.
본 발명에 따르면, 임의의 PDE5 억제제는 아바나필 (4-[(3-클로로-4-메톡시벤질)아미노]-2-[2-(하이드록시메틸)-1-피롤리디닐]-N-(2-피리미디닐메틸)-5-피리미딘카르복스아미드), 로데나필 (비스-(2-{4-[4-에톡시-3-(1-메틸-7-옥소-3-프로필-6,7-디하이드로-1H-피라졸로[4,3-d]피리미딘-5-일)-벤젠설포닐]피페라진-1-일}-에틸)카르보네이트), 미로데나필 (5-에틸-3,5-하이드로-2-[5-([4-(2-하이드록시에틸)-1-피페라지닐]설포닐)-2-프로폭시페닐]-7-프로필-4H-피롤로[3,2-d]피리미딘-4-원), 실데나필 시트레이트 (1-[4-에톡시-3-(6,7-디하이드로-1-메틸-7-옥소-3-프로필-1H-피라졸로[4,3-d]피리미딘-5-일) 페닐설포닐]-4-메틸피페라진), 타다라필 (6R-트랜스)-6-(1,3-벤조디옥솔-5-yl)-2,3,6,7,12,12a-헥사하이드로-2-메틸-피라지노 [1', 2':1,6] 피리도[3,4-b]인돌-1,4-디온), 바데나필 (4-[2-에톡시-5-(4-에틸피페라진-1-일)설포닐-페닐]-9-메틸-7-프로필-3,5,6,8-테트라자비사이클로[4.3.0] 노나-3,7,9-트리엔-2-원) 또는 유데나필 (3-(1-메틸-7-옥소-3-프로필-4,7-디하이드로-1H-피라졸로[4,3-d]피리미딘-5-일)-N-[2-(1-메틸피롤리딘-2-일)에틸]-4-프로폭시벤젠설폰아미드) 또는 이들의 작용적 유사체로부터 특이적으로 선택될 수 있다.
본 발명의 구체적 구현예에서, 조성물은 트레프로스티닐, 로플루밀라스트 및 선택적으로 PDE5, PDE7 또는 PDE8 억제제 또는 트레프로스티닐, 이부딜라스트 및 선택적으로 PDE5, PDE7 또는 PDE8 억제제 또는 트레프로스티닐, Ro-20-1724 및 선택적으로 PDE5, PDE7 또는 PDE8 억제제를 포함할 수 있다.
본 발명의 추가적인 구현예에서, 조성물은 베라프로스트, 로플루밀라스트 및 선택적으로 PDE5, PDE7 또는 PDE8 억제제 또는 베라프로스트, 이부딜라스트 및 선택적으로 PDE5, PDE7 또는 PDE8 억제제 또는 베라프로스트, Ro-20-1724 및 선택적으로 PDE5, PDE7 또는 PDE8 억제제를 포함할 수 있다.
본 발명의 추가적인 구현예에서, 조성물은 일로프로스트, 로플루밀라스트 및 선택적으로 PDE5, PDE7 또는 PDE8 억제제 또는 일로프로스트, 이부딜라스트 및PDE5, PDE7 또는 PDE8 억제제 또는 일로프로스트, Ro-20-1724 및 선택적으로 PDE5, PDE7 또는 PDE8 억제제를 포함할 수 있다.
본 발명의 추가적인 구현예에서, 조성물은 시카프로스트, 로플루밀라스트 및 선택적으로 PDE5, PDE7 또는 PDE8 억제제 또는 시카프로스트, 이부딜라스트 및 선택적으로 PDE5, PDE7 또는 PDE8 억제제 또는 시카프로스트, Ro-20-1724 및 선택적으로 PDE5, PDE7 또는 PDE8 억제제를 포함할 수 있다.
본 발명에 따르면, PDE7 또는 PDE8 효소에 대한 억제 활성을 갖는 임의의 PDE7 또는 PDE8 억제제 또는 그의 유사체가 사용될 수 있다. 따라서, PDE7 또는 PDE8 억제제는 PDE 효소 또한 추가적으로 억제할 수 있다는 점을 배재할 수 없다.
본 발명에 따르면, PDE7 억제제는 구체적으로 디피리다몰 및 BRL 50481로부터 선택될 수 있다.
본 발명에 따르면, PDE8 억제제는 구체적으로 1,5-치환된 니페코틱 아미드 및 PF-4957325로부터 선택될 수 있다.
본 발명의 대안적인 구현예에서, 조성물은 구체적으로 트레프로스티닐, 로플루밀라스트 및 디피리다몰 또는 트레프로스티닐, 이부딜라스트 및 디피리다몰 또는 트레프로스티닐, Ro-20-1724 및 디피리다몰을 포함할 수 있다.
본 발명의 추가의 대안적인 구현예에서, 조성물은 구체적으로 베라프로스트, 로플루밀라스트 및 디피리다몰 또는 베라프로스트, 이부딜라스트 및 디피리다몰 또는 베라프로스트, Ro-20-1724 및 디피리다몰을 포함한다.
본 발명의 다른 추가의 대안적인 구현예에서, 조성물은 구체적으로 일로프로스트, 로플루밀라스트 및 디피리다몰 또는 일로프로스트, 이부딜라스트 및 디피리다몰 또는 일로프로스트, Ro-20-1724 및 디피리다몰을 포함한다 .
본 발명의 추가적인 구현예에서, 조성물은 구체적으로 시카프로스트, 로플루밀라스트 및 디피리다몰 또는 시카프로스트, 이부딜라스트 및 디피리다몰 또는 시카프로스트, Ro-20-1724 및 디피리다몰을 포함할 수 있다.
대안적으로 본 조성물은 트레프로스티닐, 로플루밀라스트 및 BRL 50481 또는 트레프로스티닐, 이부딜라스트 및 BRL 50481 또는 트레프로스티닐, Ro-20-1724 및 BRL 50481을 포함할 수 있다.
대안적으로, 본 조성물은 구체적으로 트레프로스티닐, 로플루밀라스트 및 PF-4957325 또는 트레프로스티닐, 이부딜라스트 및 PF-4957325 또는 트레프로스티닐, Ro-20-1724 및 PF-4957325를 포함할 수 있다.
본 발명에 따르면, 용어 "적어도 하나" 또는 "하나"는 하나의 유형의 프로스타사이클린 또는 프로스타사이클린 유사체 및 하나의 유형의 PDE4 억제제 및 선택적으로 하나 이상의 PDE5, PDE7 또는 PDE8 억제제가 낭포성 섬유증의 치료 또는 예방에서의 사용을 위해, 구체적으로 기관지상피 세포에서 cAMP 수준을 증가시키기 위한 사용을 위해 존재함을 의미한다. 그러나, 대안적으로, 본 조성물은 하나 이상의 유형의 프로스타사이클린 또는 프로스타사이클린 유사체 및 하나 이상의 유형의 PDE4 억제제 및 선택적으로 하나 이상의 PDE5, PDE7 또는 PDE8 억제제, 구체적으로 둘, 셋, 넷 또는 그 이상의 유형의 프로스타사이클린 또는 프로스타사이클린 유사체 및 PDE4 및 선택적으로 PDE5, PDE7 및/또는 PDE8 억제제 또는 이들의 임의의 조합을 또한 포함할 수 있다.
본 발명은 트레프로스티닐 및 RO 20-1724, 로플루밀라스트 및 이부딜라스트의 군으로부터 선택되는 하나 이상의 PDE4 억제제를 포함하는 특정한 조성물을 추가적으로 제공한다.
본 발명의 조성물은 약학 조성물로서 제형화될 수 있다.
본 발명의 조성물은 투여용으로 사용될 수 있는 임의의 형태로 존재할 수 있다.
치료 또는 예방적 효과를 얻기 위한 본 발명에 따라 투여되는 화합물의 특정한 용량은 물론, 예를 들면, 투여의 경로, 환자 개인의 연령, 체중 및 반응, 치료되는 조건 및 환자의 증상의 중증도를 포함하는, 사례와 관련된 특수한 상황에 의해서 결정될 것이다.
일반적으로, 본 발명의 화합물은 가장 바람직하게는 임의의 부작용을 야기하지 않으면서 효과적인 결과를 제공할 농도로 투여되며, 단일 유닛 용량으로 투여될 수 있거나 바람직한 경우, 용량은 하루에 걸쳐 적합한 횟수로 투여되는 편리한 하부유닛으로 분배될 수 있다.
본 조성물은 다양한 전신 및 국소 제형으로 제공될 수 있다. 본 발명의 전신 또는 국소 제형은 경구, 구강내, 폐내, 직장, 자궁내, 피내, 국소, 피부, 비경구, 종양내, 두개내, 폐내, 볼, 설하, 코, 피하, 혈관내, 경막내, 흡입가능, 호흡가능, 관절내, 강내(intracavitary), 이식가능, 경피, 이온영동적, 안구내, 눈, 질, 광학, 정맥내, 근육내, 선내, 장기내, 림프관내, 서방형 및 장용 코팅 제형으로 구성된 군으로부터 선택된다. 이들 다양한 제형의 실제적인 제제 및 배합은 본 기술분야에 알려져 있으며 여기에서 상세히 기술할 필요가 없다. 조성물은 1일 1회 또는 수회 투여될 수 있다.
호흡, 코, 폐내 및 흡입 투여를 위해 적합한 제형은 국소, 경구 및 비경구 제형으로서 바람직하다. 일반적으로, 제형은 활성 화합물을 액체 담체, 미세하게 분배된 고체 담체, 또는 둘 모두와 함께 배합하여 균일하게 제공함으로써 제조되며, 필요한 경우, 그후 바람직한 제형으로 생성물을 성형하게 된다.
경구 투여를 위해 적합한 조성물은 캡슐, 카세제, 로렌지, 또는 정제와 같은 별개의 유닛 내에 존재할 수 있으며, 각각은 분말 또는 과립으로서; 수성 또는 비-수성 액체 내에 용액 또는 현탁액으로서; 또는 수-중-유 또는 유-중-수 에멀전으로서 조성물을 함유한다.
비경구 투여를 위해 적합한 조성물은 활성 화합물의 멸균 수성 및 비-수성 주사 용액이며, 이 제제는 바람직하게는 수용자의 혈액과 등장성이다. 이들 제제는 항산화제, 완충제, 저해제 및 수용자의 혈액과 등장성인 조성물을 만드는 용질을 함유할 수 있다. 수성 및 비-수성 멸균 현탁액은 현탁화제 및 증점제를 포함할 수 있다. 조성물은 단위-용량 또는 다중-용량 용기, 예를 들면 밀봉된 앰플 및 바이알 내에 존재할 수 있으며, 멸균 액체 담체, 예를 들면, 식염수 또는 사용 바로 전에 주사용수의 첨가만이 필요한 냉동-건조되거나 동결건조된 조건에서 저장될 수 있다.
코 및 점적주사가능한 제형은 보존제 및 등장화제와 함께 활성 화합물의 정제된 수성 용액을 포함한다. 이러한 제형은 바람직하게는 코 점막과 적합한 pH 및 등장성 상태로 조정된다.
본 발명에 따라 개시된 조성물은 임의의 적합한 방식에 의해 개체의 (폐 내로) 흡입, 호흡, 코 투여 또는 폐내 점적주사에 의해 호흡기 시스템 내로 투여될 수 있으며, 분말화되거나 액체 코, 폐내, 호흡적합 또는 흡입적합 입자로 구성된 에어로솔 또는 스프레이를 생성함으로써 바람직하게 투여된다. 활성 화합물을 포함하는 호흡적합 또는 흡입적합 입자는 호흡기도 또는 폐 그 자체 내로 예컨대, 흡입 또는 코 투여 또는 점적주사에 의해 개체에 흡입된다. 흡입 시 입 및 후두를 통해 통과하고 폐의 기관지 및 폐포 내로 진행하기에 크기가 충분히 작은 호흡적합 및 흡입적합 입자를 포함하는 제형은 본 발명에 따른 호흡적합 또는 흡입적합 액체 또는 고체 입자를 포함할 수 있다. 일반적으로, 입자는 직경이 약 0.05, 약 0.1, 약 0.5, 약 1, 약 2 내지 약 4, 약 6, 약 8, 약 10 마이크론 범위이다. 더욱 특히, 약 0.5 내지 약 5 ㎛ 미만의 직경이 호흡적합 또는 흡입적합이다. 에어로솔 또는 스프레이 내에 포함되는 비-호흡적합 크기의 입자는 목구멍 내에 축적되고 삼켜지는 경향이 있다. 따라서, 에어로솔 내에 비-호흡적합 입자의 양은 바람직하게는 최소화된다. 코 투여 또는 폐내 점적주사를 위해, 직경이 약 8, 약 10, 약 20, 약 25 내지 약 35, 약 50, 약 100, 약 150, 약 250, 약 500 ㎛인 범위의 입자 크기는 비강에서 잔류를 보장하거나 폐 내로의 점적주사 및 직접적인 침착을 위해 바람직하다. 액체 제형은 특히 신생아 및 유아에게 투여되는 경우 호흡기도 또는 코 및 폐 내로 뿜어질 수 있다.
활성 화합물을 포함하는 액체 입자의 에어로솔은 네뷸라이저를 사용하는 것과 같은 임의의 적합한 수단을 사용함으로써 생산될 수 있다. 네뷸라이저는 압축 가스, 전형적으로 공기 또는 산소의 가속화를 사용하여 치료적 에어로솔 미스트 내로 활성 성분의 용액 또는 현탁액을 형질전환시키는 상업적으로 이용가능한 장치이다. 네뷸라이저로 사용하기에 적합한 조성물은 액체 담체 내에 활성 성분으로 구성되며, 활성 성분은 40중량%이하의 조성물을 포함하지만, 바람직하게는 20중량% 미만의 담체는 전형적으로 물이거나, 바람직하게는 예를 들면, 나트륨 클로라이드를 첨가하여 체액과 등장성으로 만들어진, 희석된 알코올 용액이다. 선택적인 첨가제는 조성물이 멸균으로 제조되지 않는 경우, 예를 들면 메틸 하이드록시벤조에이트, 항산화제, 향미제, 휘발성 유, 완충제 및 계면활성제를 포함한다. 활성 화합물을 포함하는 고체 입자의 에어로솔은 임의의 고체 미립자 약제 에어로솔 발생기로 생산하는 것과 같을 수 있다. 상술된 바와 같은 호흡적합인 생산 입자, 고체 미립자 약제를 투여하기 위한 에어로솔 발생기는 인간 투여용으로 적합한 비율로 미리결정된 정량의 약제를 함유하는 에어로솔의 부피를 생성한다. 이러한 에어로솔 발생기의 예는 정량흡입기 및 취입기(insufflator)를 포함한다.
일 구현예에서, 운반 장치는 조성물의 단일 또는 다중 용량을 운반하는 건조 분말 흡입기(DPI)를 포함한다. 단일 용량 흡입기는 일회 적용을 위해 충분한 제형으로 멸균적으로 미리 충전된 일회용 키트로서 제공될 수 있다. 흡입기는 미리압축된 흡입기로서 제공될 수 있고, 제형은 천공이 가능하거나 개봉할 수 있는 캡슐 또는 카트리지 내 일 수 있다. 키트는 다양한 제형에 대해 다른 적합한 첨가제 중 다른 치료적 화합물, 부형제, 계면활성제(제형 성분 뿐만 아니라 치료적 제제로서 의도됨), 항산화제, 향미제 및 착색제, 충전제, 휘발성 유제, 완충제, 분산제, 계면활성제, 항산화제, 향미제, 벌킹제, 추진제 및 보존제와 같은 제제를 또한 분리된 용기 내에 포함할 수 있다. 트레프로스티닐과 같은 일부 프로스타사이클린 유사체, 또는 프로스타사이클린 또는 프로스타사이클린 유사체가 액체 기반 또는 페길화된 형태로서 제공되는 경우, 물질은 또한 데포(depot) 약제로서 투여될 수 있다.
PDE4, PDE5, PDE7 및 PDE8 억제제는 또한 대사적으로 안정하므로, 선택적으로 하나 이상의 PDE5, PDE7 또는 PDE8 억제제와 함께 프로스타사이클린 또는 프로스타사이클린 유사체 및 PDE4 억제제의 조합이 또한 데포 약제로서 제형화될 수 있다.
본 조성물의 에어로솔화한 운반은 폐에서 제제의 더 균질화된 분배를 유도할 수 있으므로, 깊은 폐 운반이 얻어진다. 이에 따라, 적용 용량은 폐 내의 작용 지점에서 제제의 지속된 존재로 인해 감소될 수 있다.
본 조성물은 예를 들면 네뷸라이저에 의해 제공될 수 있다. 네뷸라이저 운반 방법의 잇점은 적은 물질이 전신 순환에 도달한다는 점이다. 본 조성물은 1일 수회, 예를 들면 1일 5회 내지 10회 제공될 수 있지만, 선택적으로 하나 이상의 PDE5, PDE7 및/또는 PDE8 억제제와 조합하여, 프로스타사이클린 또는 프로스타사이클린 유사체 및 PDE4의 상승적 효과로 인하여, 투약 빈도는 일반적으로 감소될 수 있다.
본 조성물은 임의의 본 기술 분야에 알려진 약학적으로 허용가능한 물질 또는 담체 또는 부형제와 함께 투여될 수 있다. 이들은 이들로 한정되는 것은 아니지만, 예를 들면 물, NaOH, KOH와 같은 중화제, 안정화제, DMSO, 식염수, 베타인, 타우린 등일 수 있다.
용어 "약제학적으로 허용되는"은 연방 또는 주 정부의 규제기관에 의해서 승인되거나 미국에서 열거된 것을 의미한다.
용어 "담체"는 약제학적 조성물과 함께 투여되는 희석제, 보조제, 부형제 또는 비히클을 나타낸다. 식염수 용액 및 수성 덱스트로스 및 글리세롤 용액이 또한, 특히 주사용 용액을 위한 액체 담체로 사용될 수 있다. 적합한 부형제에는 전분, 글루코스, 락토오스, 수크로스, 젤라틴, 맥아, 쌀, 밀가루, 초크, 실리카겔, 스트레이트 나트륨, 글리세롤 모노스테아레이트, 탈크, 염화나트륨, 탈지 분유, 글리세롤, 프로필렌, 글리콜, 물, 에탄올 등이 포함된다. 적합한 약제학적 담체의 예는 문헌 ["Remington's Pharmaceutical Sciences" by E.W. Martin]에 기술되어 있다. 제형은 투여의 방식에 따라 선택되어야 한다.
본 발명의 조성물의 양, 구체적으로 프로스타사이클린 또는 프로스타사이클린 유사체 또는 이들의 약학적으로 허용가능한 염의 양은 당업자에 의해 선택될 수 있으며, 구체적으로 트레프로스티닐의 양은 적어도 1.0 ng/kg 체중이다. PDE4 또는 PDE5 억제제의 양은 또한 당업자에 의해 용이하게 선택될 수 있다. 구체적으로, PDE4 또는 PDE5 또는 PDE7 또는 PDE8 억제제의 양은 적어도 1일 1회, 구체적으로 적어도 1일 2회로 로플루밀라스트에 대해 약 0.5 mg 또는 이부딜라스트에 대해 약 30 mg이다.
본 발명은 세포에서 cAMP 수준을 증가시키기 위한 방법을 부가적으로 제공하며, 상기 세포는 적어도 하나의 프로스타사이클린 또는 프로스타사이클린 유사체 및 적어도 하나의 PDE4 및 선택적으로 적어도 하나의 PDE5, PD7 또는 PDE8 억제제와 접촉된다. 상기 세포에서 cAMP의 증가는 프로스타사이클린 또는 PDE4 및/또는 PDE5 또는 PDE7 또는 PDE8 억제제로의 단일 처리와 비교할 때 적어도 10%, 바람직하게는 적어도 25%, 바람직하게는 적어도 50%, 더욱 바람직하게는 적어도 100%일 수 있다.
적어도 하나의 프로스타사이클린 유사체 및 적어도 하나의 PDE4 및 선택적으로 적어도 하나의 PDE5 및/또는 PDE7 억제제 및/또는 PDE8 억제제 억제제를 포함하는 치료적 조합물이 제공되며, 여기서 프로스타사이클린 유사체 및 PDE4 및/또는 PDE5 억제제 및/또는 PDE7 억제제 및/또는 PDE8 억제제는 낭포성 섬유증과 관련된 적어도 하나의 증상을 치료 및/또는 예방하기에 충분한 양으로 함께 제공된다. 구체적으로, CF 환자의 폐의 상피 세포에서 cAMP 수준의 증가는 본 발명의 치료적 조합 제제를 투여함으로써 달성할 수 있다. 구체적으로, 적어도 하나의 프로스타사이클린 유사체 및 PDE4 및 선택적으로 하나 이상의 PDE5, PDE7 또는 PDE8 억제제는 흡입에 의한 투여용으로 제형화된다.
본 발명의 구체적인 구현예에서, 낭포성 섬유증을 치료하기 위한 조합 치료요법이 개시된다. 구체적인 구현예에 따르면, CF를 가진 환자의 기관지상피 세포에서 감소된 cAMP 수준과 관련된 증상은 본 발명의 조합 치료요법을 사용함으로써 치료 또는 예방될 수 있다. 가능하게는, 하나 이상의 추가적인 제제가 또한 투여될 수 있다.
프로스타사이클린 또는 프로스타사이클린 유사체 및 PDE4 및 선택적으로 PDE5, PDE7 또는 PDE8 억제제는 예를 들면, 단일 정제 또는 캡슐 또는 흡입 제형 또는 PDE4 및 본 발명의 다른 PDE 억제제 뿐만 아니라 프로스타사이클린 또는 프로스타사이클린 유사체와 별개로 투여될 수 있는 선택적 추가 제제와 함께 투여될 수 있다.
본 발명은 (i) 유효량의 프로스타사이클린 또는 프로스타사이클린 유사체, (ii) PDE4 억제제, 구체적으로 로플루밀라스트, Ro-20-1724 또는 이부딜라스트, 및 선택적으로 PDE5, PDE7 및 PDE8 억제제의 군으로부터 선택되는 하나 이상의 화합물, (iii) 하나 이상의 약학적으로 허용가능한 담체 및/또는 첨가제, 및 (iv) 개체, 바람직하게는 인간에서 낭포성 섬유증을 치료 또는 예방하는데 사용하기 위한 설명서를 포함하는, 개체에서 낭포성 섬유증과 관련된 상태를 치료 또는 예방하기 위한 키트 및 그의 용도를 추가적으로 제공한다.
상기 구성성분 (i) 및 (ii) 및 (iii)은 정맥내 투여, 흡입 또는 경구 투여를 위해 적합한 형태일 수 있다.
본 명세서에 기술된 실시예는 본 발명을 설명하는 것이며, 이들로 제한하고자 하는 것이 아니다. 본 발명의 다양한 구현예가 본 발명에 따라 기술된다. 다수의 변형 및 변화가 본 발명의 정신 및 범주를 벗어남이 없이 본 명세서에 기술되고 설명된 기술에 대해서 이루어질 수 있다. 따라서, 실시예는 단지 예시적인 것이며, 본 발명의 범위를 제한하는 것이 아닌 것으로 이해하여야 한다.
실시예
실시예 1:
IB3-1 세포를 완전 성장 배지(LHC-8 + 5% FCS)에서 6 웰-플레이트(도 1에서 0.2*106 세포/웰; 도 2에서 0.4 * 106 세포) 상에 플레이팅하였다. 다음날, 아데닌 뉴클레오티드 풀(pool)을 아데노신 디아미나제(1 유닛/㎖)를 함유하는 둘베코 변형 이글 배지(DMEM)에서 4시간 동안 [3H]아데닌(1μCi/웰)로 인큐베이션하여 대사적으로 표지하였다. 그리고나서 배지를 신선한 배지로 교체하였다; 트레프로스티닐(0.1 내지 30μM 범위 농도로 대수적으로 간격을 둠)의 단독 첨가 또는 명시된 농도의 PDE-억제제와 조합한 트레프로스티닐을 첨가함으로써 세포를 자극하였다. 30분간의 인큐베이션 후, 과염소산의 첨가에 의해 세포를 용해하였다.
[3H]cAMP의 생성을 Dowex 50WX-4 및 중성 알루미나 컬럼 상에서 순차적 크로마토그래피, 이어서 용출액의 액체 신틸레이션 계수에 의해 측정하였다. 분석은 3회 수행하였다.
결과는 도 1 및 2에 나타낸다. 도 1 및 도 2에서 최대 반응 사이의 차이점은 주로 도 2에서 세포/웰의 숫자가 도 1에서 적용된 것과 약 2배만큼 높다는 사실에 기인한 것이다.
실시예 2:
IB3-1 세포는 오로지 돌연변이된 CFTR-DF508을 내인적으로 발현하며, 이는 세포 내에 유지된다. 적절한 조작(예컨대, 약제-샤페론 또는 저온 인큐베이션)을 사용하면, 소포체로부터 ER로 돌연변이체 CFTR-DF508을 전위시키는 것이 가능하며; 세포 표면에서 삽입되는 경우, Cl- 전도도는 상승하는 cAMP에 의해 자극될 수 있다. 그러나, 결과의 Cl- 전도도는 낮다. cAMP 축적이 CFTR의 활성화로 형질전환된 트레프로스티닐에 의해 유도됨을 명백히 증명하기 위하여, 본 발명자들은 일시적으로 야생형 CFTR의 GFP-태그(GFP 태그는 세포 표면에서 단백질을 발현하였던 세포의 확인을 가능케 함)된 버전을 일시적으로 발현되게 하였다. 도 3에서 확인할 수 있는 바와 같이, 트레프로스티닐은 -40 mV 유지 전위 내지 +60 mV의 탈분극에 의해 유도된 전류의 왕성한 활성화를 야기하였다. 최대 효과는 지연되었는데, 즉 이는 화합물의 워시-인(wash-in) 후, 단지 수초간 관찰되었다. 유사하게, 턴-오프(turn-off) 반응에서는 또한 이력현상(hysteresis)이 존재하였다; 전류는 워시아웃 후에 단지 ~ 100 s만에 기저로 쇠퇴하였다. 이들 지연된 반응은 (i) 개입하는 시그널링 캐스캐이드(즉, Gs의 수용체-의존적인 활성화, cAMP 형성의 Gαs-의존적인 활성화 및 뒤이어 일어나는 CFTR의 단백질 키나제 A-의존적인 인산화) 및 (ii) 포스포디에스테라제에 의해 증가된 cAMP의 지연된 불활성화를 반영한다. 세포를 양성 대조군으로 사용하였던 직접적 활성자 아데닐일 사이클라제, 포스콜린으로 자극하는 경우, 유사한 지연을 또한 확인하였다.
이들 관찰은 트레프로스티닐이 기관지 상피 세포에서 CFTR을 활성화시킴을 증명한다.
방법:
전기생리학
Axoclamp 200B 패치 클램프 증폭기(Axon Instruments)를 사용하여 22±1.5℃에서 수행된 전류 기록을 위해서 전체 세포 패치 클램프 기술(whole cell patch clamp technique)을 사용하였다. 피펫을 기록용 피펫 용액(recording pipette solution)(조성: 110 mM CsCl, 5 mM EGTA, 2 mM MgCl2, 1 mM K2.ATP, 10 mM Hepes, CsOH에 의해서 7.2로 조정된 pH)으로 충진시킨 경우에 1 내지 2 MΩ의 저항을 가졌다. 전압-클램프 프로토콜 및 데이터 수집은 피클램프(pclamp) 6.0 소프트웨어(Axon Instruments)에 의해서 수행하였다. 데이터를 2 kHz(-3 dB)에서 저역 (low-pass) 여과하고, 10-20 kHz에서 디지털화하였다. 세포를 외부 용액(조성: 145 mM NaCl, 4.5 mM KCl, 2 mM CaCl2, 1 mM MgCl2, 5 mM 글루코즈, 10 mM Hepes, NaOH에 의해서 7.4로 조정된 pH)으로 연속적으로 과용해(superfuse)시켰다. 표시된 경우에, 외부 용액은 트레프로스티닐(10 μM) 또는 포스콜린(5 μM)을 함유하였으며, 용액들 사이의 교환은 전자식 제어 압력 밸브에 의해서 달성하였다.
실시예 1의 결과를 기초로 할때, 트레프로스티닐이 PDE 4 또는 5 억제제, 예컨대 10 μM 로플루밀라스트 또는 100 μM 이부딜라스트 또는 10-100 μM 타다라필 또는 실데나필 또는 바데나필과 결합하는 경우, 지연된 반응이 예상된다.
세포 배양:
I3B-1 세포를 5% 소 태아 혈청(FCS)을 함유하는 LHC-8 배지(Gibco) 중의 피브로넥틴(10 ㎍/㎖), 랫트 콜라겐 I(30 ㎍/㎖) 및 BSA(10 ㎍/㎖)로 코팅된 접시 (Nunc, 3.5 ㎝ 직경) 상에서 성장시켰다. 제조자의 설명에 따라 리포펙타민 플러스(Lipofectamine plus®; Invitrogen)를 사용하여 인간 GFP-태그된 야생형 CFTR의 발현을 구동시키는 플라스미드로 세포를 일시적으로 형질감염시켰다.
대표적인 전류 진폭은 +60 mV로 전체 세포 패치 클램프 배열에서 기록하였다. GFP-태그된 야생형 CFTR을 발현하는 일시적으로 형질감염된 IB3-1 세포를 형광 하에서 선택하고, -40 mV에서 유지 전위로 클램핑하였다. 탈분극은 50 ms 동안 +60 mV까지의 전압 단계에 의해서 유도되었으며, 전류 진폭을 기록하였다. 트레프로스티닐(10 μM 최종 농도, TP)의 워시-인은 50 s 시점에서 시작하고, 125 s에서 종결시켰다. 포스콜린은 275 s에서 워시-인하였으며, 375 s에서 제거하였다. 결과는 도 3에 나타낸다.
실시예 3
서론
이전 관찰은 인간 기도 상피 세포에서, 트레프로스티닐-유도된 cAMP 축적이 포스포디에스테라제-4(PDE4) 이성체의 억제제에 의해 특이적으로 증강되었음을 나타내었다.
재료 및 방법
세포주 및 세포 배양:
다음의 인간 기관지 상피 세포주를 ATCC를 통해 수득하였다: BEAS-2B(ATCC CRL-9609), NuLi-1(ATCC CRL-4011), IB3-1(ATCC CRL-2777), CuFi-1(ATCC CRL-4013). 세포를 ATCC 권고사항에서 상술된 배양 조건을 사용하여 번식시켰는데, 예컨대 I3B-1 세포를 5% CO2 가습 대기 하의 37℃에서 5% 소 태아 혈청(FCS)을 함유하는 LHC-8 배지(Gibco) 중의 피브로넥틴(10 ㎍/㎖), 랫트 콜라겐 I(30 ㎍/㎖) 및 BSA(10 ㎍/㎖)로 코팅된 접시 상에서 유지하였다. BEAS-2B 세포는 BEGM 배지(Lonza) 중의 콜라겐 IV(0.25% 아세트산 중의 60 ㎍/㎖)로 미리코팅된 접시 상에서 CO2 가습 대기 하의 37℃에서 유지하였다; BEGM 키트와 함께 제공된 GA-1000(젠타마이신-암포테리신 B 믹스)은 배지로 첨가하지 않았다. CFTR의 내인성 발현의 수준은 신뢰할만한 시그널을 수득하기에는 너무 낮았다. 따라서, BEAS-2B 세포를 제조자의 지시에 따라 리포펙타민 플러스(Invitrogen)를 사용하여 인간 GFP-태그된 야생형 CFTR의 발현을 구동시키는 플라스미드로 일시적으로 형질감염시켰다. GFP-태그된 CFTR를 발현하는 세포를 형광 현미경으로 확인하고 하기에 상술한 바와 같이 패치 클램프 기록을 적용하였다.
cAMP 축적 분석:
IB3-1 세포를 완전 성장 배지(LHC-8 + 5% FCS) 중의 6-웰 플레이트(2 내지 2.5*105 세포/웰)의 PDL-코팅된 웰 상에 접종하였다. 다음날, 세포 아데닌 뉴클레오티드 풀(pool)을 아데노신 디아미나제(1 유닛/㎖)의 존재하의 둘베코 변형 이글 배지(DMEM)에서 4시간 동안 [3H]아데닌(1μCi/웰)으로 인큐베이션하여 대사적으로 표지하였다. 이어서, 배지를 신선한 DMEM 배지로 교체하고, 37℃에서 20분 동안 다양한 농도의 하기 포스포디에스테라제(PDE) 억제제의 부재 및 존재 하에서, 아데닐일 사이클라제의 직접적인 활성자인 5 μM 포스콜린 또는 10 μM 트레프로스티닐을 첨가함으로써 자극하였다: 이부딜라스트(0.3 - 1000 μM), Ro-20-1724(0.03 - 300 μM), 로플루밀라스트(1 nM - 10 μM), 디피리다몰(0.01 - 100 μM), 암리논(1, 10, 100 μM), 아나그렐리드(1, 10, 100 μM), 에녹시몬(1, 10, 100 μM), 밀리논(1, 10, 100 μM) 및 실로스타졸(0.1 내지 100 μM). 일부 경우에서, 기저 cAMP 축적에 대한 이들 억제제의 효과는 PDE-억제제의 농도(즉, 1, 10 및 100 μM에서 디피리다몰, 이부딜라스트 및 Ro-20-1724; 로플루밀라스트의 0.1, 1 및 10 μM 에서 로플로밀라스트)를 증가시키면서 임의의 추가적인 자극의 부재하에서 세포를 인큐베이션함으로써 검사하였다. 트레프로스티닐에 대한 농도 반응 곡선은 트레프로스티닐(0.1 내지 30 μM) 단독 또는 100 μM Ro-20-1724, 100 μM 이부딜라스트 또는 5 μM 로플루밀라스트와의 조합을 첨가함으로써 수득하였다. 3회 수행한 반응은 0.1 mM (비표지된) cAMP와 함께 2.5% 과산화 수소를 첨가함으로써 중지하였다. [3H]cAMP는 Dowex 50W-X4 및 중성 알루미나 컬럼 상에서 순차적 크로마토그래피에 의해 분리하였다. [3H]cAMP의 생성은 액체 신틸레이션 계수에 의해 정량화하였다.
전기생리학 - 패치 클램프 기록:
Axoclamp 200B 패치 클램프 증폭기(Axon Instruments)를 사용하여 22±1.5℃에서 수행된 전류 기록을 위해서 전체 세포 패치 클램프 기술을 사용하였다. 피펫을 기록용 피펫 용액(recording pipette solution)(조성: 110 mM CsCl, 5 mM EGTA, 2 mM MgCl2, 1 mM K2.ATP, 10 mM Hepes, CsOH에 의해서 7.2로 조정된 pH)으로 충진시킨 경우에 1 내지 2 MΩ의 저항을 가졌다. 전압-클램프 프로토콜 및 데이터 수집은 pclamp 6.0 소프트웨어(Axon Instruments)에 의해서 수행하였다. 데이터를 2 kHz(-3 dB)에서 저역 여과하고, 10-20 kHz에서 디지털화하였다. 세포를 외부 용액(조성: 145 mM NaCl, 4.5 mM KCl, 2 mM CaCl2, 1 mM MgCl2, 5 mM 글루코즈, 10 mM Hepes, NaOH에 의해서 7.4로 조정된 pH)으로 연속적으로 과융해시켰다. 표시된 경우에, 외부 용액은 트레프로스티닐(10 μM) 또는 포스콜린(5 μM)을 함유하였으며, 용액들 사이의 교환은 전자식 제어 압력 밸브에 의해서 달성하였다.
포스포디에스테라제 억제제의 부재 및 존재하의 IB3 -1 세포주에서 cAMP 의 축적:
PDE-이소형의 조사는 PDE-억제제가 인간 기관지 상피 세포에서 cAMP 축적에 대한 확연한 효과를 가져야함을 예상한다. 게다가, 이 분석은 포스포디에스테라제의 추가적인 이소형의 존재에 대한 증거를 제공하였다. 따라서, PDE-4 선택적인 억제제인 로플루밀라스트 및 이부딜라스트를 시험하였고 이들의 효과를 다음의 몇몇의 추가적인 PDE-억제제의 효과와 비교하였다: RO20-1724, PDE4-선호를 가진 비-선택적인 PDE-억제제; 평균적(equilibrative) 뉴클레오사이드 트랜스포터-1 및 -2(ENT1- 및 ENT2)를 억제하고, 부가적으로 PDE5, PDE7A, PDE8A, PDE10A 및 PDE11을 억제하는 디피리다몰(Soderling et al., 1998; Hetman et al., 2000a&b; Omori & Kotera, 2007). PDE3-이소형의 선택적인 억제제인 암리논, 밀리논 및 실로스타졸; PDE2 및 PDE3을 억제하는 아나그렐리드. 이부딜라스트는 로플루밀라스트 보다 덜 선택적이며 또한 PDE10- 및 PDE11-이소형을 억제한다. 이러한 접근은 cAMP-수준의 조절에 대해 초점을 맞추었으며, 이에 따라 cGMP-특이적 효소 PDE5, PDE6 및 PDE9는 추가로 고려하지 않았다(Bender &Beavo, 2006; Omori &Kotera, 2007).
세포는 전형적으로 아데닐일 사이클라제의 수많은 이소형을 발현한다. 수많은 경우에, Gs로 커플링된 수용체는 아데닐일 사이클라제의 전체 세포 풀로 접근할 수 없다. 대조적으로, 포스콜린은 아데닐일 사이클라제의 모든 이소형을 자극한다. 포스포디에스테라제 억제제의 부재하에서, cAMP는 빠르게 가수분해되어 정상(steady) 상태에서 낮은 수준으로만 축적된다. 포스포디에스테라제의 억제는 cAMP의 축적을 초래한다. 로플루밀라스트, 이부딜라스트, 디피리다몰 및 RO20-1724은 5 μM 포스콜린에 의해 촉발된 cAMP 축적을 실질적으로 증강시켰다.
로플루밀라스트는 가장 강력한 억제제였으며 디피리다몰은 덜 강력한 억제제였다. 이부딜라스트 및 RO20-1724는 로플루밀라스트 보다 더 효과적이었다. 종합하면, 이들 데이터는 PDE4-이소형이 cAMP의 가수분해에 대해 상당한 수준으로 기여하였음을 시시하였다. cAMP 축적이 트레프로스티닐에 의해 촉발되었던 경우, 모든 억제제에 대한 농도-반응 곡선은 왼쪽으로 이동하였다. 이러한 왼쪽으로의 이동은 수용체 자극을 통해 생성되었던 cAMP가 포스포디에스테라제에 의한 분해에 더욱 용이하게 영향을 받을 수 있음을 나타낸다. 한가지 가능한 설명은 수용체의 부근에서 프스포디에스테라제의 고정이다(Francis et al., 2011). 디피리다몰의 더 높은 효능은 PDE8 또는 PDE10에 의한 가능한 기여를 또한 제안한다. 포스포디에스테라제 억제제의 주요 작용은 cAMP 축적을 증강시키는 것이다: 반면 Emax(즉, 최대 효과 증가), 작용제의 명백한 친화성(즉, 그의 EC50)은 이동하지 않는다.
외인성으로 첨가된 작용제(또는 포스콜린의)의 부재에서, PDE-억제제는 그자체로는 cAMP 축적에서 임의의 주목할만한 증가를 야기하지 않는다. 이는: 아데닐레이트 사이클라제의 기저 활성이 매우 낮고 cAMP의 형성을 촉매하기 위한 Gs의 수용체-의존적인 활성화를 통한 투입을 필요로 하는 것이 예상된다. 그러나, 세포 배양 조건 하에서, 즉 정의된 배지에서는 임의의 작용제가 존재하지 않는다.
PDE -억제는 CFTR 를 통해 트레프로스티닐 -유도된 Cl - 전류를 증강시킨다 :
PDE4-이소형의 억제가 트레프로스티닐-유도된 cAMP 축적을 증가시켰기 때문에, 이 조작은 낭포성 섬유증 경막 전도도 조절인자/Cl- 채널(CFTR)를 통한 클로라이드 전류에 대한 트레프로스티닐의 효과를 증강시키는 것으로 예상되었다. 이는 다음의 경우였다: 레프로스티닐은 CFTR의 지연된 활성화로서 야기하였다; 결과의 겉보기 전류는 -20 내지 -80 mV의 전압 점프에 의해 검출할 수 있다. 로플루밀라스트(및 이부딜라스트 및 RO20-1724와 같은 다른 PDE4 억제제)의 첨가는 전류의 추가적인 증가를 야기하였다. 전류는 CFTR에 의해 이동되는데, 이는 특이적 억제제에 의해 가역적으로 차단되기 때문이다.
결론
1) 인간 기도 상피 세포는 트레프로스티닐에 의해 표적될 수 있는 몇몇의 수용체를 발현하므로, 이에 따라 인간 기도 상피 세포에서 CFTR을 활성화시킨다.
2) PDE4-이소형은 인간 기도 상피 세포 내에 존재하며 PDE4-억제제는 트레프로스티닐에 대한 반응을 효과적으로 증가시킨다.
참조문헌
Aronoff DM, Peres CM, Serezani CH, Ballinger MN, Carstens JK, Coleman N, Moore BB, Peebles RS, Faccioli LH, Peters-Golden M (2007) Synthetic prostacyclin analogs differen-tially regulate macrophage function via distinct analog-receptor binding specificities. J Immunol 178:1628-1634.
Bender AT, Beavo JA (2006) Cyclic nucleotide phosphodiesterases: molecular regulation to clinical use. Pharmacol Rev 58:488 520
Francis SH, Blount MA, Corbin JD (2011) Mammalian cyclic nucleotide phosphodiesterases: molecular mechanisms and physiological functions. Physiol Rev 91:651-690.
Hetman JM, Soderling SH, Glavas NA, Beavo JA. (2000a) Cloning and characterization of PDE7B, a cAMP-specific phosphodiesterase.ProcNatlAcadSci U S A 97: 472-476
Hetman JM, Robas N, Baxendale R, Fidock M, Phillips SC, Soderling SH, Beavo JA (2000b) Cloning and characterization of two splice variants of human phosphodiesterase 11A.ProcNatlAcadSci U S A 97: 12891-12895
Houslay MD, Schafer P, Zhang KY (2005) Keynote review: phosphodiesterase-4 as a therapeutic target. Drug Discov Today 10:1503-1519
Omori K, Kotera J (2007) Overview of PDEs and their regulation. Circ. Res. 100:309-327
Nikam VS, Wecker G, Schermuly R, Rapp U, Szelepusa K, Seeger W, Voswinckel R (2011) Treprostinil inhibits adhesion and differentiation of fibrocytes via cAMP and Rap dependent ERK inactivation. Am J Respir Cell MolBiol 45: 692-703
Soderling SH, Bayuga SJ, Beavo JA (1998) Cloning and characterization of a cAMP-specific cyclic nucleotide phosphodiesterase. ProcNatlAcadSci U S A 95:8991-8996.
Wright JM, Zeitlin PL, Cebotaru L, Guggino SE, Guggino WB (2004) Gene expression profi-le analysis of 4-phenylbutyrate treatment of IB3-1 bronchial epithelial cell line de-monstrates a major influence on heat-shock proteins. Physiol Genomics16:204-211

Claims (15)

  1. 낭포성 섬유증의 예방 또는 치료에 사용하기 위한, 적어도 하나의 프로스타사이클린 또는 프로스타사이클린 유사체 또는 그의 약학적으로 허용가능한 염, 및 적어도 하나의 포디에스테라제(PDE) 4 억제제를 포함하는 조성물.
  2. 제1항에 있어서, 상기 프로스타사이클린 유사체가 트레프로스티닐(Treprostinil), 일로프로스트(Iloprost), 시카프로스트(Cicaprost) 또는 베라프로스트(Beraprost) 또는 이들의 약학적으로 허용가능한 염의 군으로부터 선택되는 것인 조성물.
  3. 제1항 또는 제2항에 있어서, 상기 프로스타사이클린 유사체가 트레프로스티닐의 산 유도체, 트레프로스티닐의 전구약물, 트레프로스티닐의 다형체 또는 트레프로스티닐의 이성체의 군으로부터 선택되는 것인 조성물.
  4. 제1항 내지 제3항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 PDE4 억제제가 Ro 20-1724, 이부딜라스트, 로플루밀라스트 및 그의 N-옥사이드, 실로밀라스트, BAY 19-8004, CC3, AWD 12-281, SCH 351591, 시클라밀라스트, 피클라밀라스트, CGH2466, 메셈브린, 로리프램, 루테올린 및 드로타베린의 군으로부터 선택되는 것인 조성물.
  5. RO 20-1724, 로플루밀라스트 및 이부딜라스트의 군으로부터 선택되는 트레프로스티닐 및 PDE4 억제제를 포함하는 조성물.
  6. 제1항 내지 제5항 중 어느 한 항에 있어서, PDE5, PDE7 또는 PDE8 억제제의 군으로부터 선택되는 추가적인 PDE 억제제가 함유된 것인 조성물.
  7. 제6항에 있어서, 상기 PDE5 억제제가 아바나필, 로데나필, 미로데나필, 실데나필 시트레이트, 타다라필, 바데나필 또는 유데나필로부터 선택되는 것인 조성물.
  8. 제6항에 있어서, 상기 PDE7 및 PDE8 억제제가 디피리다몰, BRL50481 및 PF-4957325로부터 선택되는 것인 조성물.
  9. 제1항 내지 제8항 중 어느 한 항에 있어서, 약학적 조성물인 조성물.
  10. 제1항 내지 제9항 중 어느 한 항에 있어서, 흡입용인 조성물.
  11. 제1항 내지 제9항 중 어느 한 항에 있어서, 정맥내 또는 피하 투여용, 또는 서방성 방출 형태, 정제 및 캡슐의 군으로부터 선택되는 경구적으로 이용가능한 형태인 것인 조성물.
  12. 제1항 내지 제11항 중 어느 한 항에 있어서, 트레프로스티닐 또는 그의 약학적으로 허용가능한 염의 유효량이 적어도 1.0 ng/kg 체중인 것인 조성물.
  13. 적어도 하나의 프로스타사이클린 또는 프로스타사이클린 유사체 및 적어도 하나의 PDE4 억제제 및 선택적으로 PDE5 억제제, PDE7 억제제 또는 PDE8 억제제 또는 이들의 약학적으로 허용가능한 염의 군으로부터 선택되는 적어도 하나의 억제제를 세포와 접촉시키는 것인 세포에서 cAMP 수준을 증가시키기 위한 방법.
  14. 적어도 하나의 프로스타사이클린 또는 프로스타사이클린 유사체 및 적어도 하나의 PDE4 억제제 및 선택적으로 PDE5 억제제, PDE7 억제제 또는 PDE8 억제제의 군으로부터 선택되는 적어도 하나의 억제제를 포함하는 치료적 조합물로서, 여기서 프로스타사이클린 또는 프로스타사이클린 유사체 및 PDE4 억제제 및 선택적으로 PDE5 억제제, PDE7 억제제 또는 PDE8 억제제의 군으로부터 선택되는 적어도 하나의 억제제가 낭포성 섬유증과 관련된 적어도 하나의 증상을 치료 및/또는 예방하기에 충분한 양으로 함께 제공되는 것인 치료적 조합물.
  15. 제14항에 있어서, 프로스타사이클린 또는 프로스타사이클린 유사체 및 PDE4 억제제 및 선택적으로 PDE5 억제제, PDE7 억제제 및 PDE8 억제제의 군으로부터 선택되는 적어도 하나의 억제제가 흡입용으로 제형화되는 것인 치료적 조합물.
KR1020137022407A 2011-02-07 2012-02-03 낭포성 섬유증의 치료를 위한 신규 조성물 KR101852222B1 (ko)

Applications Claiming Priority (3)

Application Number Priority Date Filing Date Title
EP11153541.5 2011-02-07
EP11153541 2011-02-07
PCT/EP2012/051880 WO2012107363A1 (en) 2011-02-07 2012-02-03 Novel composition for the treatment of cystic fibrosis

Publications (2)

Publication Number Publication Date
KR20140007865A true KR20140007865A (ko) 2014-01-20
KR101852222B1 KR101852222B1 (ko) 2018-04-25

Family

ID=43799687

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
KR1020137022407A KR101852222B1 (ko) 2011-02-07 2012-02-03 낭포성 섬유증의 치료를 위한 신규 조성물

Country Status (27)

Country Link
US (1) US9504663B2 (ko)
EP (1) EP2672957B1 (ko)
JP (2) JP5997182B2 (ko)
KR (1) KR101852222B1 (ko)
CN (1) CN103391766B (ko)
AU (1) AU2012215606B2 (ko)
BR (1) BR112013019335B1 (ko)
CA (1) CA2826183C (ko)
CL (1) CL2013002234A1 (ko)
CY (1) CY1119999T1 (ko)
DK (1) DK2672957T3 (ko)
EA (1) EA029760B1 (ko)
ES (1) ES2612510T3 (ko)
HR (1) HRP20170113T1 (ko)
HU (1) HUE031652T2 (ko)
IL (1) IL227738B (ko)
LT (1) LT2672957T (ko)
ME (1) ME02598B (ko)
PL (1) PL2672957T3 (ko)
PT (1) PT2672957T (ko)
RS (1) RS55624B1 (ko)
SG (1) SG192677A1 (ko)
SI (1) SI2672957T1 (ko)
SM (1) SMT201700099B (ko)
UA (1) UA113161C2 (ko)
WO (1) WO2012107363A1 (ko)
ZA (1) ZA201305276B (ko)

Families Citing this family (12)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
KR20180079458A (ko) 2009-06-12 2018-07-10 맨카인드 코포레이션 한정된 비표면적을 갖는 디케토피페라진 마이크로입자
US9505737B2 (en) 2013-01-11 2016-11-29 Corsair Pharma, Inc. Treprostinil derivative compounds and methods of using same
EP2943479B1 (en) 2013-01-11 2020-04-15 Corsair Pharma, Inc. Prodrugs of treprostinil
KR102499439B1 (ko) 2013-03-15 2023-02-13 맨카인드 코포레이션 미세결정성 디케토피페라진 조성물 및 방법
MX2020009878A (es) 2013-07-18 2022-07-27 Mannkind Corp Composiciones farmaceuticas en polvo seco estables al calor y metodos.
US9643911B2 (en) 2015-06-17 2017-05-09 Corsair Pharma, Inc. Treprostinil derivatives and compositions and uses thereof
US9394227B1 (en) 2015-06-17 2016-07-19 Corsair Pharma, Inc. Treprostinil derivatives and compositions and uses thereof
CN111108109A (zh) 2017-09-20 2020-05-05 利奥制药有限公司 取代的二氢噻吩并嘧啶及其作为磷酸二酯酶抑制剂的用途
EP3498283A1 (en) 2017-12-14 2019-06-19 Ipsol AG Glycosidic derivatives of treprostinil
JP7203846B2 (ja) * 2017-12-15 2023-01-13 ユニオン・セラピューティクス・アクティエセルスカブ 置換アゼチジンジヒドロチエノピリジンおよびホスホジエステラーゼ阻害剤としてのそれらの使用
CN113244395B (zh) * 2020-02-10 2024-07-23 广州市妇女儿童医疗中心 纤维化疾病机制及其治疗药物
US20220168297A1 (en) * 2020-12-01 2022-06-02 Reverspah Llc Methods and compositions for treating chronic obstructive pulmonary disease, asthma, pneumonia, bronchitis, cystic fibrosis, pulmonary edema, interstitial lung disease, sarcoidosis, idiopathic pulmonary fibrosis, acute respiratory distress syndrome, and pulmonary arterial hypertension

Family Cites Families (24)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US6020339A (en) * 1997-10-03 2000-02-01 Merck & Co., Inc. Aryl furan derivatives as PDE IV inhibitors
EP1019399A1 (en) * 1997-10-03 2000-07-19 Merck Frosst Canada & Co. Aryl thiophene derivatives as pde iv inhibitors
WO2000002450A1 (en) * 1998-07-08 2000-01-20 Fibrogen, Inc. Method for treatment of fibrosis related diseases by the administration of prostacyclin derivatives
CA2364653A1 (en) 1999-02-25 2000-08-31 Merck Frosst Canada & Co. Pde iv inhibiting compounds, compositions and methods of treatment
US6436965B1 (en) 2000-03-02 2002-08-20 Merck Frosst Canada & Co. PDE IV inhibiting amides, compositions and methods of treatment
BR0209149A (pt) 2001-04-25 2004-07-13 Altana Pharma Ag Ftalazinonas
BR0212233A (pt) 2001-08-31 2004-10-05 Sucampo Ag Abridor de canal de cloreto
MY140561A (en) 2002-02-20 2009-12-31 Nycomed Gmbh Dosage form containing pde 4 inhibitor as active ingredient
TWI347845B (en) 2002-03-06 2011-09-01 Nycomed Gmbh Pharmaceutical compositions,combinations,and kits for the treatment of respiratory diseases and use of the same
WO2004067006A1 (en) * 2003-01-27 2004-08-12 Pharmacia Corporation Combination of a pde iv inhibitor and a tnf-alpha antagonist
US20050101608A1 (en) * 2003-09-24 2005-05-12 Santel Donald J. Iloprost in combination therapies for the treatment of pulmonary arterial hypertension
RU2007106714A (ru) * 2004-07-26 2008-09-10 Байер Шеринг Фарма Аг (De) Лечение легочной гипертензии путем ингаляции илопростата с препаратом микрочастиц
US20080096915A1 (en) * 2005-01-13 2008-04-24 Greenberg Traurig LLP Compositions for the treatment of metabolic disorders
DE102005016345A1 (de) * 2005-04-09 2006-10-12 Bayer Healthcare Ag Neue Verwendung von 2-Phenyl-substituierten Imidazotriazinon-Derivaten
EP2111863B1 (en) * 2005-10-26 2012-03-28 Asahi Kasei Pharma Corporation Fasudil in combination with bosentan for the treament of pulmonary arterial hypertension
US8084221B2 (en) * 2006-04-01 2011-12-27 Saint Louis University Method of screening for a drug candidate that increases ATP release from RBCs stimulated via the Gs or Gi pathway
FR2903693B1 (fr) 2006-07-17 2012-03-30 Inst Nat Polytech Grenoble Sulfinates et halogenures de sulfonyle aromatiques, et leur preparation.
JP2010513533A (ja) * 2006-12-21 2010-04-30 コンサート ファーマシューティカルズ インコーポレイテッド プロスタサイクリン誘導体
US20090325976A1 (en) * 2006-12-21 2009-12-31 Concert Pharmaceuticals Inc. Prostacyclin derivatives
KR20090117781A (ko) * 2007-02-09 2009-11-12 유나이티드 세러퓨틱스 코오포레이션 간질성 폐질환 및 천식을 위한 트레프로스티닐 치료법
US20100179158A1 (en) * 2007-04-20 2010-07-15 Hoffman Charles S Inhibitors of cyclic amp phosphodiesterases
PT2408446T (pt) * 2009-03-20 2019-12-18 Hg&H Pharmaceuticals Pty Ltd Utilização de composições farmacêuticas contendo mesembrenona
BR112012002578B8 (pt) * 2009-08-07 2021-05-25 Scipharm Sarl usos de treprostinil ou de um derivado ou de um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo para tratamento da fibrose cística
EP2338520A1 (de) * 2009-12-21 2011-06-29 Ludwig Maximilians Universität Konjugat mit Zielfindungsligand und dessen Verwendung

Also Published As

Publication number Publication date
CL2013002234A1 (es) 2014-01-03
CA2826183C (en) 2019-05-14
US9504663B2 (en) 2016-11-29
EP2672957B1 (en) 2016-11-02
BR112013019335B1 (pt) 2022-05-31
CY1119999T1 (el) 2018-12-12
EA201300892A1 (ru) 2013-12-30
RS55624B1 (sr) 2017-06-30
AU2012215606A1 (en) 2013-08-01
NZ613118A (en) 2015-06-26
PL2672957T3 (pl) 2017-05-31
IL227738A0 (en) 2013-09-30
ME02598B (me) 2017-06-20
PT2672957T (pt) 2017-01-31
UA113161C2 (xx) 2016-12-26
CN103391766A (zh) 2013-11-13
DK2672957T3 (da) 2017-02-06
HRP20170113T1 (hr) 2017-03-24
ZA201305276B (en) 2014-09-25
EP2672957A1 (en) 2013-12-18
AU2012215606B2 (en) 2016-12-22
SG192677A1 (en) 2013-09-30
SI2672957T1 (sl) 2017-03-31
JP2016199574A (ja) 2016-12-01
WO2012107363A1 (en) 2012-08-16
JP5997182B2 (ja) 2016-09-28
EA029760B1 (ru) 2018-05-31
BR112013019335A2 (pt) 2020-10-27
LT2672957T (lt) 2017-02-10
SMT201700099B (it) 2017-03-08
KR101852222B1 (ko) 2018-04-25
CN103391766B (zh) 2018-05-25
US20140018430A1 (en) 2014-01-16
HUE031652T2 (en) 2017-07-28
JP2014505082A (ja) 2014-02-27
ES2612510T3 (es) 2017-05-17
IL227738B (en) 2019-05-30
CA2826183A1 (en) 2012-08-16

Similar Documents

Publication Publication Date Title
US9504663B2 (en) Composition for the treatment of cystic fibrosis
US10086001B2 (en) Composition for the treatment of cystic fibrosis
WO2012107364A1 (en) Novel composition for the treatment of cystic fibrosis
AU2007220047B2 (en) Inhibition of JAK2 as a treatment of pulmonary arterial hypertension
US20210379061A1 (en) Balipodect for treating or preventing autism spectrum disorders
NZ613118B2 (en) Novel composition for the treatment of cystic fibrosis
CN117999073A (zh) 纳多洛尔通过阻断抑制蛋白-2途径来治疗慢性阻塞性肺病的用途

Legal Events

Date Code Title Description
A201 Request for examination
E902 Notification of reason for refusal
E701 Decision to grant or registration of patent right
GRNT Written decision to grant