CN117999073A - 纳多洛尔通过阻断抑制蛋白-2途径来治疗慢性阻塞性肺病的用途 - Google Patents

Abstract

本发明涉及通过使用β‑肾上腺素能反向激动剂(特别包括纳多洛尔)抑制β‑抑制蛋白(抑制蛋白‑2)途径来治疗慢性阻塞性肺病(COPD)和其它影响呼吸道的疾病和病症的组合物和方法。所述组合物和方法可以用于治疗与SARS‑CoV‑2感染相关的肺症状。

Description

纳多洛尔通过阻断抑制蛋白-2途径来治疗慢性阻塞性肺病的 用途

Mitchell Glass博士

对相关申请的交叉引用

本申请要求Mitchell Glass博士的标题为“Use of Nadolol to Treat ChronicObstructive Pulmonary Disease by Blockage of the Arrestin-2Pathway”并在2021年3月9日提交的美国临时专利申请系列号63/158,701的权益，其内容通过本引用整体并入本文中。

发明领域

本发明涉及纳多洛尔通过抑制β-抑制蛋白(arrestin)(抑制蛋白-2)途径来治疗慢性阻塞性肺病(COPD)和影响呼吸道的其它疾病和病症的用途，包括用于抑制β-抑制蛋白途径的方法和组合物。

发明背景

慢性阻塞性肺病(COPD)是一类特征在于长期呼吸问题和气流不良的阻塞性肺病。COPD的主要症状包括呼吸短促和咳嗽伴痰产生；所述咳嗽通常是慢性的。COPD通常是一种进行性疾病，这意味着它会随着时间的推移而恶化。最终，对于COPD患者来说，日常活动、甚至穿衣或行走等活动都变得困难。COPD是在发达国家和发展中国家中的发病和死亡的主要原因。

COPD分为慢性支气管炎和肺气肿以及这两种病症的组合。慢性支气管炎是以上皮变化为标志的几种病症之一，所述上皮变化可能包括纤毛上皮细胞的损失、增加的腺体数目和增加的杯形细胞数目，从而造成增加的粘液产生和异常的粘液产生。这些病症包括、但不限于伴有或不伴有气道阻塞的慢性支气管炎以及伴有或不伴有肺气肿的慢性支气管炎。

COPD是一个重大的公共卫生问题。在2020年，预计COPD在疾病负担方面在全球排名第五，并在死亡率方面排名第三。由于持续暴露于COPD危险因素和世界人口的老龄化，预计COPD的患病率和负担在未来几十年中增加。在传统上，发病率衡量指标包括医师就诊、急诊科就诊和住院治疗。COPD的发病率随着年龄的增长而增加，并可能受其它共病慢性病症(例如，心血管疾病、肌肉骨骼病损或糖尿病)影响，所述其它共病慢性病症在COPD患者中常见并可能影响患者的健康状况，以及干扰COPD管理。增加的COPD死亡率主要由吸烟在许多人群和亚人群中的持续流行、降低的由其它常见死因引起的死亡率以及世界人口的老龄化推动。COPD还与严重的经济负担有关。COPD的严重程度与护理费用之间存在直接关联，并且费用的分配随着疾病的进展而变化。例如，随着COPD严重程度增加，住院治疗和流动供氧费用飙升。在发展中国家，直接医疗费用可能不如COPD对工作场所和家庭生产力的影响重要。在1990年，COPD是全球损失的失能调整生命年(DALY)的第12位主要原因，占总数的2.1％。据预测，在2030年，COPD将成为全球损失的DALY的第七位主要原因。

在中国这个具有极高吸烟率的国家，慢性支气管炎作为一种健康风险是特别显著的。在此背景下，就中国而言，COPD的诊断仅适用于戒烟者。慢性支气管炎是一个更广泛的术语，并包括COPD以及在从未吸烟的患者和当前吸烟者中发生的类似病状。COPD影响13.7％的40岁以上的中国人口。

COPD的最常见症状是痰产生、排痰性咳嗽和呼吸短促。这些症状会持续很长一段时间，并且通常随着时间的推移而恶化。慢性咳嗽经常是出现的第一症状。在疾病进程的早期，它可能只是偶尔发生，或者可能不会导致痰。如果咳嗽每年持续三个月以上并且持续至少两年有痰产生且咳嗽没有其它解释，则定义为慢性支气管炎。大多数慢性支气管炎继发于吸烟，这是一种与COPD密切相关的综合征，其可能会或可能不会出现COPD的典型气流减少。产生的痰的量可以在数小时或数天内变化。在某些情况下，咳嗽可能不存在，或者可能偶尔发生，或者可能不产生。在某些情况下，剧烈咳嗽可以导致短暂的意识丧失、膀胱失控或肋骨骨折。COPD患者经常具有持续异常长的时间段的鼻炎(“普通感冒”)发作史。

在COPD中，呼吸短促常常是最烦扰患者的症状。通常，呼吸短促在长时间劳累时加重，并且随着时间的推移而加重。在COPD的晚期或末期肺疾病中，它发生在休息期间，并且可能始终存在。呼吸短促是COPD患者的焦虑和差生活质量的一个根源。在COPD中，呼出(呼气)可能比吸入(吸气)耗费更长的时间。胸闷可能发生，但不是COPD的常见症状。气流受阻的COPD患者可能具有哮鸣、干啰音(支气管呼吸音)或减弱的吸气或呼气声音(其用听诊器检查胸部时听得见)。桶状胸可能在COPD患者中发生，但相对罕见。随着疾病的进展，可能出现三脚架定位以辅助呼吸。

晚期COPD会导致肺动脉高压，这又会使心脏的右心室紧张。这种病症被称为肺性心脏病，其可以导致腿部肿胀和颈部静脉膨出的症状。COPD是肺性心脏病的最常见原因。

由于共同的风险因素，COPD经常与一种或多种另外的病症一起发生。这些另外的病症包括缺血性心脏病、高血压、糖尿病(通常2型糖尿病)、肌萎缩、骨质疏松症、肺癌、焦虑障碍、性功能障碍和抑郁。疲倦和疲劳在具有晚期疾病的患者中常见。可能出现手指甲杵状变(Fingernail clubbing)，但并不是COPD所特有的。

COPD的急性恶化被定义为在已经被诊断出COPD的患者中增加的呼吸急促、增加的痰产生、痰颜色从清澈变为绿色或黄色、或者咳嗽的频率或强度的增加。恶化可能出现呼吸困难的迹象，诸如快速呼吸、快心率、出汗、颈部肌肉活动频繁、皮肤呈蓝色，并且在非常重度恶化的情况下，出现意识错乱或好斗行为。用听诊器检查时，在肺部也可能听到湿啰音(罗音)。

在发达国家，COPD的主要原因是烟草烟气。在某些国家，职业暴露和来自室内火的污染可能是COPD的原因。通常，在COPD的症状出现之前，向COPD的原因的暴露必须发生长时间，通常是几十年。遗传因素还发挥作用。与COPD的发生或严重程度相关的遗传因素包括、但不限于α-1抗胰蛋白酶(AATD)的遗传性缺乏(J.K.Stoller和L.S.Aboussousan，“Alpha1-Antitrypsin Deficiency,”Lancet 365:2235-2236(2005))。单个基因，诸如编码基质金属蛋白酶12(MMP-12)和谷胱甘肽S-转移酶的基因已经与肺功能下降或COPD风险相关联。几项全基因组关联研究已经将许多遗传基因座与COPD(或与FEV₁或FEV₁/FVC作为表型)联系起来，包括在α-烟碱乙酰胆碱受体、刺猬相互作用蛋白(HHIP)和几种其它物质附近的标志物。

具有哮喘或气道高反应性的患者患COPD的风险增加。具有感染性疾病诸如结核病或AIDS的患者患COPD的风险也更大。

COPD的急性恶化通常由细菌性或病毒性感染、暴露于环境污染以及在某些情况下暴露于寒冷触发。具有越严重的基础疾病的患者具有越频繁的恶化。此外，具有COPD的患者可能经历肺栓塞。

关于COPD的病理生理学，COPD是一类阻塞性肺病，其中存在慢性的、不完全可逆的气流不良(气流受限)和无法充分呼气(空气滞留)。气流不良是肺组织故障(被称为肺气肿)和小气道疾病(被称为阻塞性细支气管炎)的结果。这两个因素的相对贡献因人而异。小气道的严重破坏可以导致形成大的局灶性肺积气，称为大疱，其替代肺组织。这种形式的疾病被称为大疱性肺气肿。

COPD作为对吸入的刺激物的显著的且慢性的炎症应答而发生。慢性细菌感染也可能加剧这种炎症状态。涉及的炎症细胞包括嗜中性粒细胞和巨噬细胞，这是两种类型的白细胞。吸烟者另外具有Tc₁淋巴细胞累及，并且某些COPD患者具有与在哮喘中类似的嗜酸性粒细胞累及。这种细胞应答的一部分是由炎症介质诸如趋化因子引起。与肺损伤有关的其它过程包括由烟草烟气中的高浓度自由基产生并由炎症细胞释放的氧化性应激，以及蛋白酶抑制剂不足以抑制的蛋白酶对肺部结缔组织的破坏。肺部结缔组织的破坏会导致肺气肿，这然后促进气流不良，并最后促进呼吸气体的吸收和释放不良。在COPD中经常发生的一般肌萎缩可能部分地由于肺向血液中释放的炎症介质。气道变窄是由于气道内的炎症和瘢痕形成而发生。这会导致无法充分呼吸。在呼出时气流减少最大，因为在此时胸部的压力会压缩气道。这可以导致更多的来自上一次呼吸的空气在下一次呼吸开始时残留在肺内，从而导致在任何给定时间肺中空气总体积的增加，该过程被称为充气过度或空气滞留。由运动引起的充气过度与COPD中的呼吸短促有关，因为当肺部已经被部分填充时，吸入会不太舒服。充气过度在恶化期间也可能恶化。

某些COPD患者也具有一定程度的对刺激物的气道高反应性，类似于在哮喘患者中所见。

由于气道阻塞、充气过度和减少的呼吸欲望导致的通气减少，气体交换不良可以造成血液中的低氧水平和最终的高二氧化碳水平。在恶化期间，气道炎症也会增加，从而导致增加的充气过度、减少的呼气气流以及气体传输恶化。这也可以导致通气不足，并最终导致低血氧水平。低氧水平如果长时间存在，可以导致肺部动脉狭窄，而肺气肿则会导致肺部毛细血管破裂。这两种变化都会导致肺动脉血压升高，从而可能造成肺性心脏病。

对于超过35岁至40岁的具有呼吸短促、慢性咳嗽、痰产生或冬季频繁感冒以及该疾病危险因素暴露史的任何人，应当考虑COPD的诊断。然后使用肺量计法来确认诊断。肺量计法测量存在的气流阻塞的量，并通常在使用支气管扩张剂(一种打开气道的药物)后进行。测量两种主要组分来做出诊断：一秒钟用力呼气量(FEV₁)，其为在第一秒呼吸时可以呼出的最大空气量，以及用力肺活量(FVC)，其为在单次大呼吸中可以呼出的最大空气量。通常，75-80％的FVC在第一秒内出现，并且在具有COPD症状的人中小于70％的FEV₁/FVC比率将人定义为患有该疾病。

关于COPD的治疗，还没有治愈COPD的方法，但其症状是可治疗的，并且可以延迟其进展。管理的主要目标是减少危险因素、管理稳定的COPD、预防和治疗急性恶化以及管理相关疾病。已经证明会降低死亡率的唯一措施是戒烟和补充氧气。戒烟可以大大降低COPD的死亡率。在COPD的管理或治疗中已经使用或建议的其它措施包括针对流感病毒的疫苗接种、针对肺炎球菌细菌的疫苗接种、针对流感嗜血菌的疫苗接种、锻炼计划和体重管理。

许多药物已经被用于尝试治疗或控制COPD。一般而言，这些药物可以提供症状的显著缓解，但不能治疗根本疾病。这些药物的使用与上述管理措施不同，包括可能使用药物诸如烟碱(作为烟碱替代疗法)、安非他酮或伐尼克兰。

吸入性支气管扩张剂是使用的主要药物。支气管扩张剂的两种主要类型是β₂-激动剂和抗胆碱能药。这两种类型的支气管扩张剂都以短效或长效形式存在。在具有轻度疾病的COPD患者中，通常根据需要推荐短效药剂。在具有更严重疾病的COPD患者中，通常推荐长效药剂；长效药剂通过减轻充气过度部分地起作用。如果长效支气管扩张剂不足，通常会添加吸入性皮质类固醇。

短效β₂-激动剂包括沙丁胺醇、非诺特罗、左旋沙丁胺醇和特布他林。长效β₂-激动剂(LABA)包括沙美特罗、福莫特罗、阿福特罗、茚达特罗、妥洛特罗和维兰特罗。抗胆碱能药包括异丙托溴铵、氧托溴铵和噻托溴铵。异丙托溴铵和氧托溴铵是短效抗胆碱能药，而噻托溴铵是长效抗胆碱能药。其它抗胆碱能剂包括长效毒蕈碱样拮抗剂(LAMA)阿地溴铵、乌美溴铵(umeclidinium bromide)、格隆溴铵和格隆铵(glycopyrronium)甲苯磺酸盐。

用于治疗COPD的皮质类固醇包括曲安奈德、丙酸氟替卡松、倍氯米松、布地奈德、环索奈德、氟尼缩松、莫米松、泼尼松和甲泼尼龙。尽管皮质类固醇通常以吸入形式使用，但它们也可以口服施用，诸如通过摄取丸剂；具体地，泼尼松和甲泼尼龙通常口服施用。

已经尝试了各种治疗组合，包括来自两类药剂(β₂-激动剂、抗胆碱能药和皮质类固醇)的药剂的组合，以及来自所有三类药剂的药剂的组合。

再其它类别的药物可以或已经用在COPD中。这些另外类别的药剂包括甲基黄嘌呤、抗生素、磷酸二酯酶4-抑制剂、白三烯拮抗剂、溶粘蛋白剂和肥大细胞稳定剂。

甲基黄嘌呤包括茶碱、可可碱、氨茶碱、IBMX(3-异丁基-1-甲基黄嘌呤)、副黄嘌呤和己酮可可碱。

可以用于治疗COPD或更优选地与COPD相关的继发感染的抗生素包括大环内酯类的抗生素，包括红霉素、阿奇霉素、克拉霉素、非达米星和泰利霉素。

磷酸二酯酶-4抑制剂包括罗氟司特、西洛司特和异丁司特。

白三烯拮抗剂包括孟鲁司特、普仑司特和扎鲁司特。

溶粘蛋白剂包括羧甲半胱氨酸、N-乙酰半胱氨酸、氨溴索、溴己新、厄多司坦、美司坦、碘化甘油和重组人DNA酶。

肥大细胞稳定剂包括色甘酸、酮替芬(ketoxifen)、奥洛他定、卢帕他定、美泊利单抗(mepolizumab)、奥马珠单抗、吡嘧司特、氮卓斯汀和曲尼司特。

但是，尽管有多种药物可用于治疗COPD及其后遗症和并发症，仍然迫切需要改进的COPD治疗。具体地，需要可以调节根本疾病过程而不是仅仅治疗症状的COPD治疗。

此外，其它肺气道疾病和病症具有类似的症状和病程，并接受类似的治疗；这样的另外的肺气道疾病和病症包括、但不限于：哮喘(特别是中度或重度哮喘)、支气管扩张、支气管炎、丘-施二氏综合征(Churg-Strauss syndrome)、囊性纤维化的肺后遗症、肺气肿、变应性鼻炎、肺炎以及与SARS-CoV-2感染相关的肺症状(R.C.Boucher，“Muco-ObstructiveLung Diseases,”NewEngl.J.Med.380:1941-1953(2019))。为了多种原因，SARS-CoV-2的出现具有重要意义。COPD患者极易被SARS-CoV-2感染，且这样的患者倾向于具有更严重得多的疾病，死亡风险也增加。因此，迫切需要改进的用于治疗这些另外的呼吸病症或呼吸相关病症、特别是SARS-CoV-2感染的方法。

发明概述

改进的用于治疗COPD和如上所述的其它呼吸病症或呼吸相关病症(包括SARS-CoV-2)的治疗方法和组合物是基于纳多洛尔(一种具有β-肾上腺素能反向激动剂活性的非特异性β-阻滞剂)在阻断β-抑制蛋白(抑制蛋白-2)途径中、特别是在阻断气道上皮细胞β₂受体处的信号传递中的活性。术语“β-抑制蛋白”和“抑制蛋白-2”在本文中可互换地使用，并表示相同的蛋白和由该蛋白介导的途径。

本发明的一个方面是一种用于在遭受肺气道疾病的受试者中治疗肺气道疾病的方法，所述方法包含施用治疗上有效量的纳多洛尔或纳多洛尔的衍生物或类似物以抑制β-抑制蛋白途径从而治疗所述肺气道疾病。通常，所述肺气道疾病选自慢性阻塞性肺病(COPD)、哮喘、支气管扩张、支气管炎、丘-施二氏综合征、囊性纤维化的肺后遗症、肺气肿、变应性鼻炎、肺炎和与SARS-CoV-2感染相关的肺症状。优选地，所述肺气道疾病是COPD。

通常，所述方法包含施用治疗上有效量的纳多洛尔。通常，所述纳多洛尔是纳多洛尔的RSR立体异构体。

在一个替代方案中，所述方法发挥上调肺β₂-肾上腺素能受体的治疗效果。通常，所述方法发挥增加肺气道对β₂-肾上腺素能激动剂药物的松弛反应性的治疗效果。通常，所述方法发挥逆转粘液化生和粘液细胞化生的治疗效果。

通常，通过选自以下的途径施用所述纳多洛尔或纳多洛尔的衍生物或类似物：口服、持续释放口服、胃肠外、舌下、含服、通过吹入施用和通过吸入施用。通常，通过随时间以从最低剂量开始并增加至最高剂量的一系列分级剂量的剂量滴定来进行纳多洛尔或纳多洛尔的衍生物或类似物的施用。通常，当达到最高剂量时，继续以该剂量施用所述纳多洛尔或纳多洛尔的衍生物或类似物。优选地，通过吸入途径或口服途径施用纳多洛尔或纳多洛尔的衍生物。更优选地，通过吸入途径施用纳多洛尔或纳多洛尔的衍生物。

通常，纳多洛尔或纳多洛尔的衍生物或类似物的持续释放口服施用方法导致血流中纳多洛尔或纳多洛尔的衍生物或类似物的连续水平。通常，通过吸入施用来施用纳多洛尔的方法包含通过加压计量剂量吸入器(pMDI)、干燥粉末吸入器或喷雾器施用的剂量的施用，其剂量产生或不产生在通常与口服给药相关的范围内的可测量的血液水平。通常，吸入剂量将通过pMDI来递送并且将在最小有效口服剂量的约1％至约10％的范围内。

通常，β-抑制蛋白的抑制会阻止或逆转β₂-肾上腺素能受体的脱敏。通常，β-抑制蛋白的抑制也会阻止或逆转β₂-肾上腺素能受体的内化。通常，β-抑制蛋白的抑制会阻止或逆转第二信使特异性的蛋白激酶或特异性的G-蛋白偶联受体激酶对β₂-肾上腺素能受体的磷酸化。通常，β-抑制蛋白的抑制也会阻止或逆转支架磷酸二酯酶对第二信使的降解。

在一个替代方案中，所述方法进一步包含施用治疗上有效量的β₂-选择性的肾上腺素能激动剂。通常，所述β₂-选择性的肾上腺素能激动剂选自沙丁胺醇、阿福特罗、班布特罗、比托特罗、溴沙特罗、布酚宁、卡布特罗、克仑特罗、氯丙那林、可尔特罗、多巴酚丁胺、非诺特罗、福莫特罗、异他林、异丙肾上腺素、左旋沙丁胺醇(levabuterol)、左沙丁胺醇(levosalbutamol)、马布特罗、间羟异丙肾上腺素(metaprotenerol)、甲氧那明、吡布特罗、丙卡特罗、雷托巴胺、瑞普特罗、利托君、沙美特罗、特布他林、齐帕特罗、及其盐、溶剂化物和前药。

在另一个替代方案中，所述方法进一步包含施用治疗上有效量的皮质类固醇。通常，所述皮质类固醇选自AZD-5423(2,2,2-三氟-N-[(1R,2S)-1-{[1-(4-氟苯基)-1H-吲唑-5-基]氧基}-1-(3-甲氧基苯基)-2-丙烷基]乙酰胺)、倍氯米松、布地奈德、环索奈德、地夫可特、氟尼缩松、氟替卡松、甲泼尼龙、莫米松、泼尼松龙、泼尼松、地塞米松和曲安西龙、及其盐、溶剂化物和前药。

在又另一个替代方案中，所述方法进一步包含施用治疗上有效量的抗胆碱能药物。通常，所述抗胆碱能药物选自异丙托溴铵、噻托溴铵、氧托溴铵、abediterol、阿地溴铵、格隆溴铵、乌美溴铵、及其盐、溶剂化物和前药。

在又另一个替代方案中，所述方法进一步包含施用治疗上有效量的至少一种生物药。通常，所述至少一种生物药选自抗-IL4抗体、抗-IL13抗体、IL4和IL13的抑制剂、抗-IL5抗体和抗-IL8抗体。

在再另一个替代方案中，所述方法进一步包含施用治疗上有效量的黄嘌呤化合物。通常，所述黄嘌呤化合物选自茶碱、延长释放茶碱、氨茶碱、可可碱、恩丙茶碱、二羟丙茶碱、异丁茶碱、胆茶碱、阿比茶碱、阿罗茶碱、巴米茶碱、咖啡因、8-氯茶碱、二羟丙茶碱、多索茶碱、恩丙茶碱、依他茶碱、呋拉茶碱、1-异丁基-1-甲基黄嘌呤、羟丙茶碱和占替诺(xanthinol)、及其盐、溶剂化物和前药。

在又另一个替代方案中，所述方法进一步包含施用治疗上有效量的抗-IgE抗体。通常，所述抗-IgE抗体是单克隆抗体或从单克隆抗体衍生出的基因工程抗体；所述抗体可以是人源化的，诸如奥马珠单抗。

在又另一个替代方案中，所述方法进一步包含施用治疗上有效量的白三烯拮抗剂。通常，所述白三烯拮抗剂选自孟鲁司特、普仑司特和扎鲁司特、及其盐、溶剂化物和前药。

在再另一个替代方案中，所述方法进一步包含施用治疗上有效量的磷酸二酯酶IV抑制剂。通常，所述磷酸二酯酶IV抑制剂选自罗氟司特、西洛司特、吡拉米司特和异丁司特、及其盐、溶剂化物和前药。

在又另一个替代方案中，所述方法进一步包含施用治疗上有效量的5-脂氧合酶抑制剂。通常，所述5-脂氧合酶抑制剂选自齐留通和芬留顿、及其盐、溶剂化物和前药。

在再另一个替代方案中，所述方法进一步包含施用治疗上有效量的肥大细胞稳定剂。通常，所述肥大细胞稳定剂选自氮卓斯汀、色甘酸、酮替芬、洛度沙胺、奈多罗米、奥洛他定和吡嘧司特、及其盐、溶剂化物和前药。

在又另一个替代方案中，所述方法进一步包含施用治疗上有效量的抑制蛋白-2抑制剂。

可以用在根据本发明的方法中的抑制蛋白-2抑制剂的一种替代物是抑制蛋白-2的蛋白片段。

可以用在根据本发明的方法中的抑制蛋白-2制剂的另一种替代物是式(A-I)的化合物，其具有下面定义的取代基的替代基团。

可以用在根据本发明的方法中的抑制蛋白-2制剂的另一种替代物是选自DHA(二十二碳六烯酸)和EPA(二十碳五烯酸)的ω-3脂肪酸。

可以用在根据本发明的方法中的抑制蛋白-2抑制剂的又另一种替代物是选自以下的CXCR2抑制剂：SB225002(N-(2-溴苯基)-N′-(2-羟基-4-硝基苯基)脲),AZD5069(N-(2-((2,3-二氟苄基)硫基)-6-(((2R,3S)-3,4-二羟基丁烷-2-基)氧基)嘧啶-4-基)氮杂环丁烷-1-磺酰胺)；SB265610(1-(2-溴苯基)-3-(4-氰基-1H-苯并[d][1,2,3]三唑-7-基)脲)；navarixin；danirixin；CXCR2-IN-1(1-(2-氯-3-氟苯基)-3-[4-氯-2-羟基-3-(1-甲基哌啶-4-基)磺酰基苯基]脲)；SRT3109(N-(2-((2,3-二氟苄基)硫基)-6-((3,4-二羟基丁烷-2-基)氨基)嘧啶-4-基)氮杂环丁烷-1-磺酰胺)；和SRT3190(N-[2-[(2,3-二氟苯基)甲基硫烷基]-6-[[(2S,3R)-3,4-二羟基丁烷-2-基]氨基]嘧啶-4-基]氮杂环丁烷-1-磺酰胺)。

可以用在根据本发明的方法中的抑制蛋白-2抑制剂的再另一种替代物是MyD88抑制剂。通常，所述MyD88抑制剂选自ST2825((4R,7R,8aR)-1′-[2-[4-[[2-(2,4-二氯苯氧基)乙酰基]氨基]苯基]乙酰基]-6-氧代螺[3,4,8,8a-四氢-2H-吡咯并[2,1-b][1,3]噻嗪-7,2′-吡咯烷]-4-甲酰胺)和T6167923(4-(3-溴苯基)磺酰基-N-(1-噻吩-2-基乙基)哌嗪-1-甲酰胺)。

可以用在根据本发明的方法中的抑制蛋白-2抑制剂的又另一种替代物是MD2抑制剂。通常，所述MD2抑制剂是L48H37((3E,5E)-1-乙基-3,5-二[(2,3,4-三甲氧基苯基)亚甲基]哌啶-4-酮)。

可以用在根据本发明的方法中的抑制蛋白-2抑制剂的再另一种替代物是六磷酸肌醇(IP6)。

可以用在根据本发明的方法中的抑制蛋白-2抑制剂的又另一种替代物是barbadin。

可以用在根据本发明的方法中的抑制蛋白-2抑制剂的再另一种替代物是蛋白激酶A的抑制剂。通常，所述蛋白激酶A的抑制剂选自：(i)H89(N-[2-[[3-(4-溴苯基)-2-丙烯基]氨基]乙基]-5-异喹啉磺酰胺二盐酸盐)；(ii)N-(ω-十一烯酰基)苯丙氨酸；(iii)3′,5′-环状单硫代磷酸酯-R；(iv)H-7(5-(2-甲基哌嗪-1-基)磺酰基异喹啉二盐酸盐)；(v)H-9(N-(2-氨基乙基)-5-异喹啉磺酰胺；(vi)6-22酰胺；(vii)蛋白激酶A抑制剂，其选自：法舒地尔；N-[2-(磷酸化溴代硝基精氨酰基氨基)乙基]-5-异喹啉磺酰胺；1-(5-喹啉磺酰基)哌嗪；4-氰基-3-甲基异喹啉；乙酰氨基-4-氰基-3-甲基异喹啉；8-溴-2-单酰基腺苷-3,5-环状单硫代磷酸酯；腺苷3,5-环状单硫代磷酸酯；2-O-单丁基-环磷酸腺苷；8-氯-环磷酸腺苷；N-[2-(肉桂酰基氨基酸)]-5-异喹啉酮；反相-8-己基氨基腺苷3,5-单硫代磷酸酯；反相-8-哌啶基腺苷-环磷酸腺苷；反相-腺苷3,5-环状单硫代磷酸酯；5-碘结核菌素；8-羟基腺苷-3,5-单硫代磷酸酯；钙磷酸蛋白C；瑞香素；反相-8-氯苯基-环磷酸腺苷；反相-环磷酸腺苷；反相-8-Br-环磷酸腺苷；1-(5-异喹啉磺酰基)-2-甲基哌啶；8-羟基腺苷-3′,5′-单磷酸酯；8-己基氨基腺苷-3′,5′-单磷酸酯；和反相-腺苷3′,5′-环状单磷酸酯。

可以用在根据本发明的方法中的抑制蛋白-2抑制剂的又另一种替代物是磷脂酶C抑制剂。通常，所述磷脂酶C抑制剂选自马兜铃酸钠；D609(三环癸烷-9-基黄原酸钠)；D-赤式-二氢鞘氨醇；U-73122(1-(6-((17β-3-甲氧基雌-1,3,5(10)-三烯-17-基)氨基)己基)-1H-吡咯-2,5-二酮)；吡咯烷硫代氨基甲酸酯；硫酸新霉素；thielavin B；依地福新；杂环基取代的苯胺基磷脂酶C抑制剂；DCIC(3,4-二氯异香豆素)；和calporoside或calporoside的衍生物。

在再另一个替代方案中，所述方法进一步包含施用治疗上有效量的GRK抑制剂。通常，所述GRK抑制剂是提供一氧化氮或有关的氧化还原物质的一氧化氮供体。所述GRK抑制剂间接充当抑制蛋白-2的抑制剂。

本发明的另一个方面是一种药物组合物，其包含：

(1)治疗上有效量的纳多洛尔或纳多洛尔的衍生物或类似物，以抑制β-抑制蛋白途径从而治疗肺气道疾病；和

(2)药学上可接受的载体。

通常，通过所述药物组合物的施用可治疗的肺气道疾病选自慢性阻塞性肺病(COPD)、哮喘、支气管扩张、支气管炎、丘-施二氏综合征、囊性纤维化的肺后遗症、肺气肿、变应性鼻炎、肺炎和与SARS-CoV-2感染相关的肺症状。优选地，通过所述药物组合物的施用可治疗的肺气道疾病是慢性阻塞性肺病。

通常，所述药物组合物包含治疗上有效量的纳多洛尔。

通常，所述药物组合物的施用发挥上调肺β₂-肾上腺素能受体的治疗效果。通常，所述药物组合物的施用发挥增加肺气道对β₂-肾上腺素能激动剂药物的松弛反应性的治疗效果。通常，所述药物组合物的施用发挥逆转粘液化生和粘液细胞化生的治疗效果。

通常，将所述药物组合物配制用于通过选自以下的途径施用：口服、持续释放口服、胃肠外、舌下、含服、通过吹入施用和通过吸入施用。优选地，将所述药物组合物配制用于通过吸入施用。

通常，在根据本发明的药物组合物中，纳多洛尔或纳多洛尔的衍生物或类似物是纳多洛尔。

通常，当将所述组合物配制用于持续释放口服施用时，所述药物组合物的施用导致血流中纳多洛尔或纳多洛尔的衍生物或类似物的连续水平。

通常，当所述组合物包含纳多洛尔时，所述组合物中纳多洛尔的量选自每单位剂量1mg、3mg、5mg、10mg、15mg、30mg、50mg和70mg。

在另一个替代方案中，所述组合物进一步包含治疗上有效量的β₂-选择性的肾上腺素能激动剂。合适的β₂-选择性的肾上腺素能激动剂如上所述。

在又另一个替代方案中，所述组合物进一步包含治疗上有效量的皮质类固醇。合适的皮质类固醇如上所述。

在再另一个替代方案中，所述组合物进一步包含治疗上有效量的抗胆碱能药物。合适的抗胆碱能药物如上所述。

在又另一个替代方案中，所述组合物进一步包含治疗上有效量的黄嘌呤化合物。合适的黄嘌呤化合物如上所述。

在再另一个替代方案中，所述组合物进一步包含治疗上有效量的抗-IgE抗体。合适的抗-IgE抗体如上所述。

在又另一个替代方案中，所述组合物进一步包含治疗上有效量的至少一种生物药。合适的生物药如上所述。

在又另一个替代方案中，所述组合物进一步包含治疗上有效量的白三烯拮抗剂。合适的白三烯拮抗剂如上所述。

在再另一个替代方案中，所述组合物进一步包含治疗上有效量的磷酸二酯酶IV抑制剂。合适的磷酸二酯酶IV抑制剂如上所述。

在又另一个替代方案中，所述组合物进一步包含治疗上有效量的5-脂氧合酶抑制剂。合适的5-脂氧合酶抑制剂如上所述。

在再另一个替代方案中，所述组合物进一步包含治疗上有效量的肥大细胞稳定剂。合适的肥大细胞稳定剂如上所述。

在又另一个替代方案中，所述组合物进一步包含治疗上有效量的抑制蛋白-2抑制剂。可以被包括在根据本发明的组合物中的抑制蛋白-2抑制剂如上所述，并且包括、但不限于：式(A-I)的化合物；ω-3脂肪酸；CXCR2抑制剂；MyD88抑制剂；MD2抑制剂；治疗上有效量的GRK抑制剂，诸如，但不限于提供一氧化氮或有关的氧化还原物质的一氧化氮供体；六磷酸肌醇(IP6)；barbadin；蛋白激酶A的抑制剂；或磷脂酶C抑制剂。

在根据本发明的组合物中，药学上可接受的载体可以是、但不限于选自以下的药学上可接受的载体：溶剂、分散介质、包衣剂、抗细菌剂、抗真菌剂、等渗剂、吸收延迟剂、防腐剂、用于口服施用的甜味剂、增稠剂、缓冲剂、液体载体、润湿剂、增溶剂、或乳化剂；酸化剂、抗氧化剂、碱化剂、承载剂、螯合剂、着色剂、络合剂、助悬剂或增粘剂、风味剂或香料、油、渗透促进剂、聚合物、硬化剂、蛋白、碳水化合物、填充剂、和润滑剂。

附图简述

参考以下描述、所附权利要求和附图，将更好地理解本发明的这些和其它特征、方面和优点，在附图中：

图1是容纳反向激动剂或反向激动剂与其它治疗剂的组合的剂型的泡罩包的图，所述剂型根据本发明用于治疗慢性阻塞性肺病或影响呼吸道的其它疾病或病症。

图2A是显示醋甲胆碱激发显著增强小鼠哮喘模型中的气道阻力(R_aw)的图。

图2B的类似图显示了作为对照的盐水激发不会显著增强小鼠哮喘模型中的气道阻力。

图2C的类似图显示了对哮喘小鼠的单次静脉内推注沙丁胺醇的施用降低了气道对醋甲胆碱激发的反应性水平和气道阻力水平。

图2D的类似图显示了在醋甲胆碱激发之前将沙丁胺醇递送给小鼠28天时没有观察到保护作用。

图2E的类似图显示了当给哮喘小鼠单次静脉内推注阿普洛尔(一种具有部分激动剂活性的β-肾上腺素能拮抗剂)时它们的气道反应性减弱。

图2F的类似图显示了当将哮喘小鼠暴露于阿普洛尔28天时，它们的平均醋甲胆碱剂量-应答关系类似于在未治疗的小鼠中所得到的结果，从而证实该药物在长期施用后没有提供益处。

图2G的类似图显示了卡维地洛的单次静脉内推注增强了在小鼠哮喘模型中的气道反应性。

图2H的类似图显示了卡维地洛的长期施用减轻了哮喘小鼠对醋甲胆碱激发的气道反应性。

图2I的类似图显示了纳多洛尔的单次静脉内推注也增强了哮喘小鼠的气道反应性，类似于关于卡维地洛所观察到的效果。

图2J的类似图显示了纳多洛尔的长期施用减轻了哮喘小鼠对醋甲胆碱激发的气道反应性，类似于关于卡维地洛在长期施用该药物后所观察到的效果。

图3的图显示了β-肾上腺素能受体配体的施用对针对胆碱能刺激的峰值气道反应性的影响：((A)用β-肾上腺素能激动剂沙丁胺醇治疗以后；(B)用β-肾上腺素能受体反向激动剂急性治疗以后；和(C)用β-肾上腺素能受体反向激动剂长期治疗以后)。

图4是一系列落射荧光显微照片，显示用纳多洛尔治疗后β-肾上腺素能受体密度的增加。

图5A的图显示了卡维地洛和沙丁胺醇的联合疗法对用醋甲胆碱攻击的哮喘小鼠的气道高反应性的影响。

图5B是显示图5A中呈现的结果的汇总图。

图6的图显示了纳多洛尔和氨茶碱的急性联合疗法对用醋甲胆碱攻击的哮喘小鼠的气道高反应性的影响。

图7的图显示了用各种治疗(包括长期纳多洛尔施用)处理的小鼠中磷脂酶C与肌动蛋白的比率，以表明长期纳多洛尔施用降低了磷脂酶C的活性。

图8A的图显示了沙丁胺醇施用对气道高反应性的影响。

图8B的图显示了高剂量阿普洛尔施用对气道高反应性的影响。

图8C的图显示了低剂量阿普洛尔施用对气道高反应性的影响。

图8D的图显示了高剂量卡维地洛施用对气道高反应性的影响。

图8E的图显示了低剂量卡维地洛施用对气道高反应性的影响。

图8F的图显示了高剂量纳多洛尔施用对气道高反应性的影响。

图8G的图显示了低剂量纳多洛尔施用对气道高反应性的影响。

图9的一组图显示了美托洛尔和噻吗洛尔的长期剂量对哮喘小鼠的气道高反应性的影响：(A)美托洛尔和噻吗洛尔的实验结果；(B)未受攻击的小鼠(对照)和未经治疗的受攻击小鼠(NTX)的历史对照。

图10的显微照片显示，一名患有致死性哮喘的8岁女孩的支气管内出现粘液栓。

图11的一系列显微照片显示，纳多洛尔可有效预防粘液化生，而拮抗剂阿普洛尔不可有效预防粘液化生：左上，对照；右上，未经治疗的致敏/攻击小鼠显示粘液化生；左下，用阿普洛尔治疗以后的致敏/攻击小鼠显示粘液化生没有改善；右下，用纳多洛尔治疗以后的致敏/攻击小鼠显示粘液化生的几乎完全消除。

图12的示意图显示了纳多洛尔的作用机理与长效β-肾上腺素受体激动剂(LABA)的作用机理的对比，并且纳多洛尔(“INV102”)通过抑制β₂气道受体中的β-抑制蛋白途径而逆转上皮变化。

图13的图显示了与用安慰剂的结果相比，纳多洛尔对用纳多洛尔治疗的吸烟者中粘蛋白5AC的水平的影响。

图14的图显示了相对于安慰剂(右图)，纳多洛尔对戒烟成功的影响(左图)；对于有至少5次戒烟计划失败史的患者，纳多洛尔的施用使吸烟量减少≥70％。

图15的一组图显示，纳多洛尔不会阻断在患有轻度哮喘的受试者中在醋甲胆碱攻击后施用的沙丁胺醇(2.5mg，通过喷雾施用)的施用的有效性。

图16的图显示，与卡维地洛、普萘洛尔和阿普洛尔相比，纳多洛尔阻断β-抑制蛋白途径。

图17的一组显微照片显示了以下情况的呼吸道上皮：无气道疾病的正常受试者(左上)；严重哮喘(右上)；慢性支气管炎(左下)；和囊性纤维化(右下)。

定义

尽管与本文描述的那些相似或等效的任何方法和材料可以用于实践或试验本文描述的实施方案或在本发明范围内的其它实施方案，但是本文描述了某些优选的方法、组合物、材料和装置。但是，在该背景下，必须理解，本发明不限于本文描述的特定分子、组合物、方法或方案，因为本发明的这些方面可以根据例行实验和优化而变化，正如本领域通常已知的那样。还应当理解，在说明书和权利要求书中使用的术语仅仅是为了描述特定版本或实施方案的目的，并且不旨在限制如本领域技术人员所理解的本文中所描述的实施方案的范围。

除非另有定义，否则在本文中使用的所有技术和科学术语具有与本发明所属领域的普通技术人员通常理解的相同的含义。但是，在任何含义冲突的情况下，应当以本说明书和权利要求书(包括其中的定义)为准。因此，在本文描述的实施方案的上下文中，以下定义适用。

如在本文中和在所附权利要求书中所使用的，单数形式“一种”、“一个”和“该”包括对复数的引用，除非上下文另外清楚地指明。因此，例如，对“一种抑制蛋白-2抑制剂”的提及是对一种或多种抑制蛋白-2抑制剂或本领域技术人员已知的其等同物的提及。如上所述，术语“抑制蛋白-2”和“β-抑制蛋白”在本文中可互换地使用。

本文中使用的术语“包含”、“包括”及其语言变体表示本发明的所列举的特征、元件、方法步骤或其它组分的存在，而不排除另外的/列举的特征、元件、方法步骤或其它组分的存在。相反，术语”由……组成”及其语言变体表示本发明的所列举的特征、元件、方法步骤或其它组分的存在，并且排除本发明的任何未列举的特征、元件、方法步骤或其它组分，除了通常相关的杂质外。短语“基本上由……组成”及其语言变体表示本发明的所列举的特征、元件、方法步骤或其它组分以及不实质上影响所述组合物、系统或方法的基本性质的本发明的任何另外特征、元件、方法步骤或其它组分的存在。使用开放的“包含”语言来描述本文中的许多实施方案；这样的实施方案也涵盖以“基本上由……组成”或”由……组成”语言的方式描述的实施方案，其可以可替换地使用这样的语言来要求保护或描述，除非上下文明确排除“基本上由……组成”或”由……组成”语言。

本文中使用的所有化学名称，包括取代基的名称，应当根据IUPAC的化学命名惯例和/或修改的形式进行解释，其中在取代基内的官能团按照它们从支架或主结构分支的顺序读出。例如，在修改的命名法中，甲基磺酰基丙醇表示CH₂SO₂CH₂CH₂CH₂OH或

作为另一个例子，根据修改的命名法，甲基胺取代基是

而氨基甲基取代基是

本文中使用的术语”受试者”泛指任何动物，包括、但不限于人类和非人哺乳动物。提及的非人哺乳动物包括、但不限于社会上或经济上重要的动物或用于研究的动物，包括牛、绵羊、山羊、马、猪、美洲驼羊、羊驼、狗、猫、兔、豚鼠、大鼠和小鼠。除非详细说明，否则根据本发明的方法和组合物不限于人类的治疗。一般而言，当打算治疗人类时，可以使用术语“患者”代替“受试者”。

本文中使用的术语“有效量”、“治疗有效量”或其它等效术语表示足以实现有益的或期望的结果的一种或多种化合物的量或组合物的量。有益的或期望的结果通常是所治疗的疾病或病症的严重程度、症状或持续时间的减小，并且通常可以表征为有效治疗、改善或预防期望的疾病或病症或表现出可检测的治疗或预防效果的治疗剂或组合物的量。除非特别指出，否则这样的术语的使用不可被解释为暗示本文描述的任何疾病或病症的完全治愈。有效量可以在一次或多次施用、应用或剂量中施用，并且不旨在限于特定制剂或施用途径，除非指定特定制剂或施用途径。通过治疗有效量的施用诱导的效果可以通过例如化学标志物、抗原水平或生理指标(诸如气道阻力)的变化来检测。治疗效果还包括身体症状的减少，诸如减少的支气管收缩或减少的气道阻力，并且可以包括受试者或其护理人员注意到的健康状况的主观改善、疲劳的减轻或增加的能量。用于受试者的精确治疗有效量将取决于：受试者的大小、体重和健康，影响受试者的病症的性质和程度，为治疗正在治疗的特定疾病或病症或影响受试者的其它疾病或病症而施用的其它治疗剂的施用，以及影响所施用的治疗剂的药代动力学的变量(诸如肝功能和肾功能)。因此，提前指定准确的有效量是没有用的。但是，对于给定情况的治疗有效量可以通过例行实验来确定并且是在临床医师的判断范围内。

本文中使用的术语“施用”或其它等效术语表示提供旨在向受试者或在体内、在体外或离体向细胞、组织或器官提供治疗性治疗的药物、前药、药物组合物或其它试剂的行为。向人体的示例性施用途径可以是通过脑或脊髓的蛛网膜下的空间(鞘内)、眼(眼科)、口(口服)、皮肤(局部或透皮)、鼻(鼻部)、肺或呼吸道的其它部分(吸入)、口腔粘膜(含服)、耳、直肠、阴道、通过注射(诸如，但不限于静脉内地、皮下地、腹膜内地或通过本领域已知的其它注射途径)。

本文中使用的术语“共同施用”和“共施用”表示向受试者施用至少两种药剂(诸如β-肾上腺素能反向激动剂和抑制蛋白-2抑制剂)或疗法。在某些实施方案中，两种或更多种药剂或疗法的共同施用是并行的。在其它实施方案中，在第二药剂/疗法之前施用第一药剂/疗法。本领域技术人员理解，所使用的各种药剂或疗法的制剂和/或施用途径可以变化。本领域技术人员可以容易地确定用于共同施用的适当剂量。在某些实施方案中，当共同施用药剂或疗法时，以比其单独施用而言适当的剂量更低的剂量施用各种药剂或疗法。因此，共同施用在这样的实施方案中是特别合乎需要的：当药剂或疗法的共同施用会降低潜在有害的药剂的必需剂量时，和/或当两种或更多种药剂的共同施用导致受试者对药剂之一的有益效果敏化(通过另一种药剂的共同施用)。本文中使用的术语“并行施用”表示两种或更多种活性剂的施用在时间上足够接近以实现组合的治疗效果，该效果优选大于通过单独任一种药剂的施用所实现的效果。这样的并行施用可以同时进行，例如，通过将活性剂一起在共同的药学上可接受的载体中(从而形成含有两种或更多种活性剂的药物组合物)以药物组合物的一个或多个剂量施用。

本文中使用的术语“药物组合物”表示一种或多种活性剂与至少一种惰性的或有活性的载体的组合，使得该组合物特别适合用于体外、体内或离体诊断或治疗用途。

如本文中使用的，本文中使用的术语“药学上可接受的”或“药理学上可接受的”表示组合物或在组合物内的组分，当施用给受试者时，其基本上不产生不良反应，诸如、但不限于有毒的、变应性的或不希望的免疫反应。

本文中使用的术语“药学上可接受的载体”表示标准药物载体中的任一种，所述标准药物载体包括、但不限于磷酸盐缓冲盐水溶液、水、乳剂(诸如油/水或水/油乳剂)以及各种类型的润湿剂、任何的和所有的溶剂、分散介质、包衣剂、月桂基硫酸钠、等渗剂和吸收延迟剂、崩解剂(诸如马铃薯淀粉或淀粉羟乙酸钠)等。所述载体也可以包括稳定剂和防腐剂。

本文中使用的术语“药学上可接受的盐”表示用在本发明的方法中或者是本发明的组合物的组分的化合物的任何药学上可接受的盐(例如，酸或碱)，其在施用给受试者后，能够提供本发明的化合物或其活性代谢物或残余物。如本领域技术人员已知的，本发明的化合物的盐可以衍生自无机或有机酸和碱。酸的例子包括、但不限于盐酸、氢溴酸、硫酸、硝酸、高氯酸、富马酸、马来酸、磷酸、羟乙酸、乳酸、水杨酸、琥珀酸、对甲苯磺酸、酒石酸、乙酸、柠檬酸、甲磺酸、乙磺酸、甲酸、苯甲酸、丙二酸、萘-2-磺酸、苯磺酸、和本领域已知的适合形成药学上可接受的盐的其它酸。其它酸(诸如草酸)尽管自身不是药学上可接受的，但是可以用于制备在得到本发明的化合物和它们的药学上可接受的酸加成盐时可用作中间体的盐。碱的例子包括、但不限于碱金属(诸如钠或钾)氢氧化物、碱土金属(诸如钙或镁)氢氧化物、氨和式NW₄ ⁺的化合物，其中W是C₁-C₄烷基等。盐的例子包括、但不限于乙酸盐、己二酸盐、海藻酸盐、天冬氨酸盐、苯甲酸盐、苯磺酸盐、硫酸氢盐、丁酸盐、柠檬酸盐、樟脑酸盐、樟脑磺酸盐、环戊烷丙酸盐、二葡萄糖酸盐、十二烷基硫酸盐、乙磺酸盐、富马酸盐、flucoheptanoate、甘油磷酸盐、半硫酸盐、庚酸盐、己酸盐、盐酸盐、氢溴酸盐、氢碘酸盐、2-羟基乙磺酸盐、乳酸盐、马来酸盐、甲磺酸盐、2-萘磺酸盐、烟酸盐、草酸盐、palmoate、果胶酸盐、过硫酸盐、苯基丙酸盐、苦味酸盐、新戊酸盐、丙酸盐、琥珀酸盐、酒石酸盐、硫氰酸盐、甲苯磺酸盐、十一烷酸盐等。盐的其它例子包括与合适的阳离子诸如Na⁺、NH₄ ⁺和NW₄ ⁺(其中W是C₁-C₄烷基基团)等化合的本发明的化合物的阴离子。对于治疗用途，本文化合物的盐被认为是药学上可接受的。但是，非药学上可接受的酸和碱的盐也可用于例如制备或纯化药学上可接受的化合物。

本文中使用的术语“关于向受试者施用化合物的说明书”及其语法等效词包括关于使用在试剂盒中包含的组合物来治疗病症的说明书。例如，这样的说明书为治疗医师提供给药、施用途径或决策树，以将患者特异性特征与治疗动作过程相关联。这样的说明书可以是根据本发明的试剂盒的一部分。

如本文中使用的，在普遍接受的受体理论的双状态模型中，术语“激动剂”被定义为对受体的活性位点具有亲和力并由此优先稳定受体的活性状态的物质，或产生受体活化并增强那些受体的信号传递的物质，包括、但不限于药物、激素或神经递质。无论作用机理如何，激动剂产生受体的活化并增强那些受体的信号传递。

如本文中使用的，在受体理论的双状态模型中，术语“拮抗剂”被定义为不优先稳定受体的任一种形式(有活性或无活性)的物质，或阻止或阻碍激动剂和/或反向激动剂的作用的物质，包括、但不限于药物、激素和神经递质。不管作用机理如何，拮抗剂阻止或阻碍激动剂和/或反向激动剂的作用。

如本文中使用的，在受体理论的双状态模型中，术语“反向激动剂”被定义为对受体的无活性状态具有亲和力并由此优先稳定受体的无活性状态的物质，或产生受体的灭活和/或阻止或阻碍激动剂的活化从而减少来自那些受体的信号传递的物质，包括、但不限于药物、激素或神经递质。

本文中使用的术语“抑制蛋白-2抑制剂”表示直接地或间接地阻断抑制蛋白-2对β-肾上腺素能受体、特别是β₂-肾上腺素能受体的一种或多种作用并因此增强这样的受体在结合激动剂时的活性的任何化合物。所述化合物可以直接与抑制蛋白-2相互作用，或可以与一种或多种具有稳定或活化抑制蛋白-2的作用的另外分子相互作用。

本文中使用的术语“烷基”表示具有1至12个碳原子、或在某些情况下至多50个或更多个碳原子的无支链、支链或环状饱和烃基残基或它们的组合，其可以任选地被取代；当未被取代时，所述烷基残基仅含有C和H。通常，所述无支链或支链饱和烃基残基具有1至6个碳原子，优选1至4个碳原子，更优选1至3个碳原子，其在本文中被称为“低级烷基”。当所述烷基残基是环状并且包括环时，应当理解，所述烃基残基包括至少三个碳原子，这是形成环的最小数目。烷基基团可以是直链、支链、环状或它们的组合，并且可以含有1至50个或更多个碳原子，诸如直链或支链C₁-C₂₀烷烃。烷基基团的例子包括但不限于甲基、乙基、丙基、异丙基、环丙基、丁基异构体(例如正丁基、异丁基和叔丁基)、环丁基异构体(例如环丁基、甲基环丙基等)、戊基异构体、环戊烷异构体、己基异构体、环己烷异构体等。除非另有说明(例如，被取代的烷基基团、杂烷基、烷氧基基团、卤代烷基、烷基胺、硫代烷基、或含有至少一个除碳或氢之外的原子的其它基团)，否则烷基基团仅含有碳和氢原子。本文中使用的术语“直链烷基”表示碳和氢原子的链(例如，乙烷、丙烷、丁烷、戊烷、己烷或其它例子)。直链烷基基团可以通过命名--(CH₂)_qCH₃来表示，其中q是0-49。命名“C₁-C₁₂烷基”或类似的命名表示具有1至12个碳原子的烷基诸如甲基、乙基、丙基异构体(例如正丙基或异丙基)、丁基异构体、环丁基异构体(例如环丁基或甲基环丙基)、戊基异构体、环戊基异构体、己基异构体、环己基异构体、庚基异构体、环庚基异构体、辛基异构体、环辛基异构体、壬基异构体、环壬基异构体、癸基异构体、环癸基异构体或本领域已知的其它替代物。类似的命名表示具有在不同范围内的碳原子数目的烷基。本文中使用的术语“C_x-C_y”当与化学部分(诸如烷基、烯基、炔基或碳环)结合使用时，意在包括在链或环中含有x至y个碳的基团。例如，术语“C_x-C_y烷基”表示被取代的或未被取代的饱和烃基，包括在链中含有x至y个碳的直链烷基和支链烷基基团，包括卤代烷基基团诸如三氟甲基和2,2,2-三氟乙基或其它替代物。术语“C_x-C_y烯基”和“C_x-C_y炔基”表示被取代的或未被取代的不饱和脂族基团，其长度与上述烷基类似且可能被取代，但是其分别含有至少一个双键或三键。术语“C_x-C_y碳环”表示被取代的或未被取代的碳环，其含有x至y个环碳。本文中使用的术语“支链烷基”表示没有双键或三键的碳和氢原子的链，其在链中含有叉、分支和/或分裂(例如，3,5-二甲基-2-乙基己烷、2-甲基-戊烷、1-甲基-环丁烷、邻-二乙基-环己烷或其它替代物)。“支化”表示碳链的分叉，而“取代”表示非碳/非氢原子在部分中的存在。除非另有说明(例如，被取代的支链烷基基团、支链杂烷基、支链烷氧基基团、支链卤代烷基、支链烷基胺、支链硫基烷基或其它替代物)，否则支链烷基基团仅含有碳和氢原子。

本文中使用的术语“碳环”、“碳环基”或“碳环的”表示在环中仅含有碳原子的环状环，而术语“杂环”或“杂环的”表示包含杂原子的环。碳环可以是完全饱和的或部分饱和的，但不是芳族的。例如，一般术语“碳环基”涵盖环烷基。碳环的和杂环的结构涵盖具有单环、二环或多个(多环)环系统的化合物；并且这样的系统可以混合芳族环、杂环和碳环。根据与所描述的化合物的其余部分连接的环来描述混合环系统。二环或多环可以包括稠合环或螺环。碳环可以包括3至10元单环、6至12元二环和6至12元桥环。二环或多环碳环的每个环可以选自饱和环、不饱和环和芳族环。在一个示例性实施方案中，芳族碳环(例如，苯基)可以稠合至饱和的或不饱和的环，例如，环己烷、环戊烷或环己烯。在某些实施方案中，所述碳环是芳族碳环。在某些实施方案中，所述碳环是环烷基。在某些实施方案中，所述碳环是环烯基。示例性的碳环包括环戊基、环己基、环己烯基、金刚烷基、苯基、茚满基和萘基。烯基基团可以任选地被一个或多个取代基(诸如本文描述的那些取代基)取代。“非芳族碳环”包括饱和的、不饱和的、被取代的或未被取代的环和环系统，但不包括芳族或芳基环或环系统。

本文中使用的术语“环烷基”表示完全饱和的单环或多环烃环系统。当由两个或更多个环组成时，所述环可以以稠合、桥连或螺连方式连接在一起。本申请的环烷基基团可以在3至10个碳(C₃至C₁₀)的范围内。环烷基基团可以是未被取代的、被取代的、支链的和/或无支链的。典型的环烷基基团包括、但不限于环丙基、环丁基、环戊基、环己基等。如果被取代，取代基可以是烷基或可以选自上面关于烷基基团的取代所指出的那些，除非另外指出。虽然本文中使用的“烷基”包括环烷基和环烷基烷基基团，但术语“环烷基”可以在本文中用于描述通过环碳原子连接的碳环非芳族基团，并且“环烷基烷基”可以用于描述通过烷基连接基连接至分子的碳环非芳族基团。

本文中使用的术语“杂烷基”表示如本文中定义的烷基基团，其中一个或多个碳原子独立地被一个或多个杂原子(例如，氧、硫、氮、磷、硒、硅或它们的组合)替换。含有非碳取代的烷基基团可以是直链烷基、支链烷基、环烷基(例如，环杂烷基)或它们的组合。非碳可以位于末端位置(例如，2-己醇)或与烷基基团成为一体(例如，乙醚)。一般而言，术语“杂”表示在主链残基内通常含有1-3个O、S或N杂原子或其组合的基团；因此，相应的烷基、烯基或炔基基团的至少一个碳原子被指定的杂原子之一替换，以分别形成杂烷基、杂烯基或杂炔基基团。在某些情况下，可以存在超过3个杂原子。除非在说明书中另外具体地说明，否则杂烷基基团可以如本文所述任选地被取代。代表性的杂烷基基团包括、但不限于--OCH₂OMe、--OCH₂CH₂OMe或--OCH₂CH₂OCH₂CH₂NH₂。为了化学稳定性的原因，还理解，除非另外指出，否则这样的基团不包括超过两个连续杂原子，除非氧代基团存在于N或S上，如在硝基或磺酰基基团中。

本文中使用的术语“亚杂烷基”表示如上所述的烷基残基，其中烷基的一个或多个碳原子被杂原子(例如，O、N或S)或如上所述的另一种杂原子替换。“亚杂烷基”或“亚杂烷基链”表示将分子的其余部分连接至残基基团的直链或支链二价杂烷基链。除非在说明书中另外具体地说明，否则亚杂烷基基团可以如本文所述任选地被取代。代表性的亚杂烷基基团包括、但不限于--OCH₂CH₂O--、--OCH₂CH₂OCH₂CH₂O--或--OCH₂CH₂OCH₂CH₂OCH₂CH₂O--。

本文中使用的术语“任选地被取代”指示，被称为任选地被取代的特定基团可以不具有非氢取代基，或者所述基团可以具有与所得到的分子的化学和药理学活性一致的一个或多个非氢取代基，并从而形成稳定的化合物，即不会自发地经历转化(诸如通过重排、环化、消除、水解、内酯或内酰胺形成或其它反应)的化合物。如果未另行规定，则可能存在的这样的取代基的总数等于所描述的基团的未取代形式上存在的氢原子的总数；可以存在少于这样的取代基的最大数目。当任选的取代基通过双键诸如羰基氧(C＝O)连接时，该基团在任选的取代基所连接的碳原子上占据两个可用价，因此可以被包括的取代基的总数根据可用价的数目而减少。本文中使用的术语“取代”，无论是用作“任选地被取代”的一部分还是以其它方式使用，当用于修饰特定基团、部分或残基时，是指一个或多个氢原子各自彼此独立地被相同的或不同的一个或多个取代基替换。本文描绘的结构的取代可以导致双键或其它键的除去或移动，如本领域技术人员将理解的。在某些实施方案中，被取代表示具有取代基的部分，用氧代、亚氨基或硫代基团替换相同碳原子上的两个氢原子，诸如取代单个碳上的两个氢原子。本文中使用的术语“取代”考虑包括有机化合物的所有可允许的取代基，其在本发明的上下文中不会显著改变所述化合物的药理学活性。在一个宽泛的方面，所述可允许的取代基包括有机化合物的无环的和环状的、支链的和无支链的、碳环的和杂环的、芳族的和非芳族的取代基。可允许的取代基对于适当的有机化合物而言可以是一种或多种，且可以是相同的或不同的。所述杂原子(诸如氮)可以具有氢取代基和/或本文描述的有机化合物的任何可允许的取代基，所述取代基满足杂原子的化合价。

本文中使用的术语“卤代烷基”或“卤代烷烃”表示被一个或多个卤素残基取代的如上定义的烷基残基，例如，三氟甲基、二氯甲基、溴甲基、2,2,2-三氟乙基、1-氟甲基-2-氟乙基等。在某些实施方案中，所述氟代烷基残基的烷基部分任选地进一步被取代。卤素取代的烷烃(“卤代烷烃”)的例子包括卤代甲烷(例如，氯甲烷、溴甲烷、氟甲烷、碘甲烷)、二卤代甲烷和三卤代甲烷(例如，三氯甲烷、三溴甲烷、三氟甲烷、三碘甲烷)、1-卤代乙烷、2-卤代乙烷、1,2-二卤代乙烷、1-卤代丙烷、2-卤代丙烷、3-卤代丙烷、1,2-二卤代丙烷、1,3-二卤代丙烷、2,3-二卤代丙烷、1,2,3-三卤代丙烷、以及烷烃(或被取代的烷烃)和卤素(例如，Cl、Br、F或I)的任何其它合适的组合。当烷基基团被超过一个卤素残基取代时，每个卤素可以独立地选择，例如，1-氯,2-氟乙烷。

本文中使用的术语“芳基”表示具有众所周知的芳香性特征的单环或稠合二环部分；例子包括苯基和萘基，其可以任选地被取代。芳族环的另外例子包括呋喃、苯并呋喃、异苯并呋喃、吡咯、吲哚、异吲哚、噻吩、苯并噻吩、苯并(c)噻吩、咪唑、苯并咪唑、嘌呤、吡唑、吲唑、噁唑、苯并噁唑、异噁唑、苯并异噁唑、噻唑、苯并噻唑、苯、萘、吡啶、喹诺酮、异喹啉、吡嗪、喹喔啉、嘧啶、喹唑啉、哒嗪、噌啉、酞嗪、三嗪(例如，1,2,3-三嗪；1,2,4-三嗪；1,3,5-三嗪)和噻二唑。术语“芳族碳环”表示在环结构内不存在杂原子的芳族环，诸如，但不限于苯或萘。可以使用的其它术语包括“芳族环”、“芳基基团”或“芳基环”。

本文中使用的术语“杂环”、“杂环基”、“杂环”或“杂环基团”意指稳定的4-、5-、6-或7-元单环杂环或7-、8-、9-、10-、11-、12-、13-或14-元二环杂环，其是饱和的、部分不饱和的或完全不饱和的或芳族的，并且其由碳原子和1、2、3或4个独立地选自N、O和S的杂原子组成；并且包括其中上面定义的杂环中的任一个被稠合至苯环的任何二环基团。其它杂原子(诸如P、Se、B或Si)可以被包括在某些替代物中。所述氮和硫杂原子可以任选地被氧化。所述氮原子可以是被取代的或未被取代的(即，N或NR，其中R是H或另一种取代基，如果被定义的话)。所述杂环可以在任何杂原子或碳原子处与其侧基连接，从而产生稳定的结构。如果所得化合物是稳定的，那么本文描述的杂环可以在碳原子上或在氮原子上被取代。在杂环中的氮可以任选地被季铵化。优选的是，当在杂环中的S和O原子的总数超过1时，则这些杂原子不彼此相邻。当使用术语“杂环”、“杂环基”、“杂环”或“杂环基团”时，其意图包括杂芳基，除非排除杂芳基。杂环的例子包括、但不限于吖啶基、吖辛因基、苯并咪唑基、苯并呋喃基、苯并噻吩基、苯并噁唑基、苯并噁唑啉基、苯并噻唑基、苯并三唑基、苯并四唑基、苯并异噁唑基、苯并异噻唑基、苯并咪唑啉基、咔唑基、咔啉基、色满基、色烯基、噌啉基、十氢喹啉基、2H,6H-1,5,2-二噻嗪基、二氢呋喃并[2,3-b]四氢呋喃、呋喃基、呋咱基、咪唑烷基、咪唑啉基、咪唑基、1H-吲唑基、吲哚烯基(indolenyl)、吲哚啉基、吲嗪基、吲哚基、3H-吲哚基、靛红酰基(isatinoyl)、异苯并呋喃基、异色满基、异吲唑基、异吲哚啉基、异吲哚基、异喹啉基、异噻唑基、异噻唑并吡啶基、异噁唑基、异噁唑并吡啶基、亚甲基二氧基苯基、吗啉基、萘啶基、八氢异喹啉基、噁二唑基、1,2,3-噁二唑基、1,2,4-噁二唑基、1,2,5-噁二唑基、1,3,4-噁二唑基、噁唑烷基、噁唑基、羟吲哚基、嘧啶基、菲啶基、菲咯啉基、吩嗪基、吩噻嗪基、phenoxathinyl、吩噁嗪基、酞嗪基、哌嗪基、哌啶基、哌啶酮基、4-哌啶酮基、胡椒基、蝶啶基、嘌呤基、吡喃基、吡嗪基、吡唑烷基、吡唑啉基、吡唑基、哒嗪基、吡啶并噁唑、吡啶并咪唑、吡啶并噻唑、吡啶基、嘧啶基、吡咯烷基、吡咯啉基、2-吡咯烷酮基、2H-吡咯基、吡咯基、喹唑啉基、喹啉基、4H-喹嗪基、喹喔啉基、奎宁环基、四氢呋喃基、四氢异喹啉基、四氢喹啉基、四唑基、6H-1,2,5-噻二嗪基、1,2,3-噻二唑基、1,2,4-噻二唑基、1,2,5-噻二唑基、1,3,4-噻二唑基、噻蒽基、噻唑基、噻吩基、噻吩并噻唑基、噻吩并噁唑基、噻吩并咪唑基、噻吩基、三嗪基、1,2,3-三唑基、1,2,4-三唑基、1,2,5-三唑基、1,3,4-三唑基和呫吨基。还包括含有例如上述杂环的稠环和螺环化合物。

本文中使用的术语“非芳族杂环”表示如本文中定义的环烷基或环烯基，其中一个或多个环碳被选自--O--、--N＝、--NR--、--C(O)--、--S--、--S(O)--或--S(O)₂--的部分替换，其中R是氢、C₁-C₈烷基或氮保护基团，前提条件是，所述基团的环不含有两个相邻的O或S原子。在某些替代方案中，可以包括其它杂原子，包括P、Se、B或Si。本文中使用的非芳族杂环的非限制性例子包括吗啉代、吡咯烷基、吡咯烷基-2-酮、哌嗪基、哌啶基、哌啶基酮、1,4-二氧杂-8-氮杂-螺(4.5)癸-8-基、2H-吡咯基、2-吡咯啉基、3-吡咯啉基、1,3-二氧杂环戊烷基、2-咪唑啉基、咪唑烷基、2-吡唑啉基、吡唑烷基、1,4-二氧杂环己烷基、1,4-二硫杂环己烷基、硫代吗啉基、氮杂环庚烷基、六氢-1,4-二氮杂环庚三烯基、四氢呋喃基、二氢呋喃基、四氢噻吩基、四氢吡喃基、二氢吡喃基、四氢噻喃基、氧硫杂环己烷基、氮杂环丁基、氧杂环丁基、硫杂环丁基、氧杂环庚烷基、硫杂环庚烷基、1,2,3,6-四氢吡啶基、2H-吡喃基、4H-吡喃基、二氧杂环己烷基、1,3-二氧杂环戊烷基、二硫杂环己烷基、二硫杂环戊烷基、二氢吡喃基、二氢噻吩基、二氢呋喃基、咪唑啉基、咪唑烷基、3-氮杂双环(3.1.0)己烷基和3-氮杂双环(4.1.0)庚烷基、3,8-二氮杂双环(3.2.1)辛烷基和2,5-二氮杂双环(2.2.1)庚烷基。在某些实施方案中，非芳族杂环是氮杂环丙烷、硫杂丙环、氧杂环丙烷、氧杂氮杂环丙烷、二氧杂环丙烷、氮杂环丁烷、氧杂环丁烷、硫杂环丁烷、二氮杂环丁烷、二氧杂环丁烷、二硫杂环丁烷、吡咯烷、四氢呋喃、硫杂环戊烷、咪唑烷、吡唑烷、噁唑烷、异噁唑烷、噻唑烷、异噻唑烷、二氧杂环戊烷、二硫杂环戊烷、哌啶、氧杂环己烷、硫杂环己烷、哌嗪、吗啉、硫代吗啉、二氧杂环己烷、二噻烷、三氧杂环己烷、三硫杂环己烷(thithiane)、氮杂环庚烷、氧杂环庚烷、硫杂环庚烷、高哌嗪或氮杂环辛烷。

本文中使用的术语“杂芳基”或“杂芳族”表示单环的、二环的或多环的环系统，其中所述系统中的至少一个环是芳族的并且含有至少一个杂原子，例如，氮、氧和硫。杂芳族环系统中的每个环可以含有3至7个环原子。示例性的杂芳族单环环系统包括5至7元环，其环结构包括1至4个杂原子，例如1或2个杂原子。杂原子的包含使得5元环和6元环具有芳香性。典型的杂芳族系统包括单环的C₅-C₆杂芳族基团诸如吡啶基、嘧啶基、吡嗪基、噻吩基、呋喃基、吡咯基、吡唑基、噻唑基、噁唑基、三唑基、三嗪基、四唑基、四嗪基和咪唑基、以及如下形成的稠合二环部分：将这些单环杂芳族基团之一与苯环或与任何杂芳族单环基团稠合以形成C₈-C₁₀二环基团诸如吲哚基、苯并咪唑基、吲唑基、苯并三唑基、异喹啉基、喹啉基、苯并噻唑基、苯并呋喃基、吡唑基吡啶基、喹唑啉基、喹喔啉基、噌啉基和本领域已知的其它环系统。就整个环系统的离域电子分布而言具有芳香性特征的任何单环或稠环二环系统被包括在该定义中。该定义还包括二环基团，其中至少直接连接至分子的其余部分的环具有芳香性特征，包括作为芳香性特征的离域电子分布。通常，所述环系统含有5至12个环成员原子和至多4个杂原子，其中所述杂原子选自N、O和S。经常地，所述单环杂芳基含有5至6个环成员和至多3个选自N、O和S的杂原子；经常地，所述二环杂芳基含有8至10个环成员和至多4个选自N、O和S的杂原子。在杂芳基环结构中的杂原子的数目和位置符合众所周知的芳香性和稳定性的限制，其中稳定性要求杂芳族基团足够稳定以在生理温度下暴露于水而不会快速降解。本文中使用的术语“羟基杂芳基”表示包含一个或多个羟基基团作为取代基的杂芳基基团；如下面进一步详述的，可以任选地包括另外的取代基。本文中使用的术语“卤代芳基”和“卤代杂芳基”表示分别被至少一个卤代基团取代的芳基和杂芳基基团，其中“卤代”表示选自氟、氯、溴和碘的卤素，通常，所述卤素选自氯、溴和碘；如下面详述的，可以任选地包括另外的取代基。本文中使用的术语“卤代烷基”、“卤代烯基”和“卤代炔基”表示分别被至少一个卤代基团取代的烷基、烯基和炔基基团，其中“卤代”表示选自氟、氯、溴和碘的卤素，通常，所述卤素选自氯、溴和碘；如下面详述的，可以任选地包括另外的取代基。当列出值的范围时，诸如关于烷基基团中的碳原子数目，其意图涵盖在该范围内的每个值和子范围。例如，“C₁-C₆烷基”包括具有1、2、3、4、5或6个碳原子和所有可能的子范围的烷基基团。

本文中使用的术语“羟基芳基”表示包含一个或多个羟基基团作为取代基的芳基基团；如下面进一步详述的，可以任选地包括另外的取代基。

本文中使用的术语“溶剂化物”是指，通过溶剂化(溶剂分子与溶质的分子或离子的组合)形成的化合物，或由溶质离子或分子(即本发明的化合物)与一个或多个溶剂分子组成的聚集体。术语“溶剂化物”通常是指涉及不同程度的离子键合和/或共价键合(包括氢键合)的化合物的物理缔合。在某些情况下，所述溶剂化物将能够分离，例如当一个或多个溶剂原子掺入结晶固体的晶格中时。术语“溶剂化物”涵盖溶液相和可分离的溶剂化物。其中溶剂不是水的合适的溶剂化物包括、但不限于乙醇化物或甲醇化物。当水为溶剂时，对应的溶剂化物是“水合物”。水合物的例子包括、但不限于半水合物、一水合物、二水合物、三水合物、六水合物和其它水合形式。本领域普通技术人员应当理解，用于根据本发明的方法或组合物中的本文所述化合物的药学上可接受的盐和/或前药也可以以溶剂化物形式存在。当所述溶剂化物是水合物时，所述水合物通常如下形成：通过水合，其为本发明的化合物的制备的一部分；或通过本发明的无水化合物对水分的自然吸收。另外，化合物可以作为笼形包合物或其它复合物存在，它们是治疗剂-宿主包合络合物，其中治疗剂和宿主以化学计量的或非化学计量的量存在。

本文中使用的术语“酯”是指本发明的化合物的任何酯，其中所述分子的任何--COOH官能团被--COOR官能团替换，其中所述酯的R部分是形成稳定酯部分的任何含碳基团，包括、但不限于烷基、烯基、炔基、环烷基、环烷基烷基、芳基、芳基烷基、杂环基、杂环基烷基及其被取代的衍生物。本发明化合物的可水解酯是其羧基以可水解的酯基团的形式存在的化合物。也就是说，这些酯是药学上可接受的并且可以在体内水解成相应的羧酸。

本文中使用的术语“烯基”表示具有一个或多个碳-碳双键的无支链的、支链的或环状的烃基残基。通常，所述烃基残基具有2至12个碳原子(C₂-C₁₂烯基)。在某些实施方案中，烯基包含2至8个碳原子(C₂-C₈烯基)。在某些实施方案中，烯基包含2至6个碳原子(即，C₂-C₆烯基)。在其它实施方案中，烯基包含2至4个碳原子(即，C₂-C₄烯基)。所述烯基通过单键连接至分子的其余部分，例如，乙烯基(即，乙烯基)、丙-1-烯基(即，烯丙基)、丁-1-烯基、戊-1-烯基、戊-1,4-二烯基等。烯基基团可以任选地被一个或多个取代基(诸如本文描述的那些取代基)取代。关于“烯基”的使用，多个双键的存在不可产生芳族环结构。

本文中使用的术语“炔基”表示具有一个或多个碳-碳三键的无支链的、支链的或环状的烃基残基；所述残基还可以包括一个或多个双键。通常，所述烃基残基具有2至12个碳原子(C₂-C₁₂炔基)。在某些实施方案中，烯基包含2至8个碳原子(C₂-C₈炔基)。在某些实施方案中，烯基包含2至6个碳原子(即，C₂-C₆炔基)。在其它实施方案中，烯基包含2至4个碳原子(即，C₂-C₄炔基)。所述炔基通过单键连接至分子的其余部分，例如，乙炔基、丙炔基、丁炔基、戊炔基、己炔基等。关于“炔基”的使用，除了一个或多个三键之外多个双键的存在不可产生芳族环结构。

本文中使用的术语“亚烷基”或“亚烷基链”表示将分子的其余部分连接至残基基团的直链或支链二价烃链，其仅由碳和氢组成，不含不饱和度，并且优选地具有1至12个碳原子，例如，亚甲基、亚乙基、亚丙基、亚正丁基等。所述亚烷基链通过单键连接至分子的其余部分并且通过单键连接至残基基团。亚烷基链与分子的其余部分和与残基基团的连接点可以是通过链内的任何两个碳。在某些实施方案中，亚烷基包含1至10个碳原子(即，C₁-C₁₀亚烷基)。在某些实施方案中，亚烷基包含1至8个碳原子(即，C₁-C₈亚烷基)。在其它实施方案中，亚烷基包含1至5个碳原子(即，C₁-C₅亚烷基)。在其它实施方案中，亚烷基包含1至4个碳原子(即，C₁-C₄亚烷基)。在其它实施方案中，亚烷基包含1至3个碳原子(即，C₁-C₃亚烷基)。在其它实施方案中，亚烷基包含1至2个碳原子(即，C₁-C₂亚烷基)。在其它实施方案中，亚烷基仅包含一个碳原子(即，C₁亚烷基或-CH₂-基团)。亚烷基基团可以任选地被一个或多个取代基(诸如本文描述的那些取代基)取代。

本文中使用的术语“亚烯基”或“亚烯基链”表示将分子的其余部分连接至残基基团的直链或支链二价烃链，其仅由碳和氢组成，含有至少一个碳-碳双键，并且优选地具有2至12个碳原子。所述亚烯基链通过单键连接至分子的其余部分并且通过单键连接至残基基团。亚烯基链与分子的其余部分和与残基基团的连接点可以是通过链内的任何两个碳。在某些实施方案中，亚烯基包含2至10个碳原子(即，C₂-C₁₀亚烯基)。在某些实施方案中，亚烯基包含2至8个碳原子(即，C₂-C₈亚烯基)。在其它实施方案中，亚烯基包含2至5个碳原子(即，C₂-C₅亚烯基)。在其它实施方案中，亚烯基包含2至4个碳原子(即，C₂-C₄亚烯基)。在其它实施方案中，亚烯基包含2至3个碳原子(即，C₂-C₃亚烯基)。在其它实施方案中，亚烯基包含2个碳原子(即，C₂亚烯基)。亚烯基基团可以任选地被一个或多个取代基(诸如本文描述的那些取代基)取代。

本文中使用的“亚炔基”或“亚炔基链”表示将分子的其余部分连接至残基基团的直链或支链二价烃链，其仅由碳和氢组成，含有至少一个碳-碳三键，并且优选地具有2至12个碳原子。所述亚炔基链通过单键连接至分子的其余部分并且通过单键连接至残基基团。亚炔基链与分子的其余部分和与残基基团的连接点可以是通过链内的任何两个碳。在某些实施方案中，亚炔基包含2至10个碳原子(即，C₂-C₁₀亚炔基)。在某些实施方案中，亚炔基包含2至8个碳原子(即，C₂-C₈亚炔基)。在其它实施方案中，亚炔基包含2至5个碳原子(即，C₂-C₅亚炔基)。在其它实施方案中，亚炔基包含2至4个碳原子(即，C₂-C₄亚炔基)。在其它实施方案中，亚炔基包含2至3个碳原子(即，C₂-C₃亚炔基)。在其它实施方案中，亚炔基包含2个碳原子(即，C₂亚炔基)。亚烯基基团可以任选地被一个或多个取代基(诸如本文描述的那些取代基)取代。

本文中使用的术语“胺”或“氨基”包括伯胺、仲胺和叔胺，其中在氮上的每个非氢基团可以选自烷基、芳基等。胺包括、但不限于--NH₂、--NH-苯基、--NH--CH₃、--NH--CH₂CH₃和--N(CH₃)苄基。所述氨基基团可以任选地被取代。例如，该术语可以包括NR′R″，其中每个R′和R″独立地是H，或是烷基、烯基、炔基、酰基、芳基或芳基烷基基团，并且所述烷基、烯基、炔基、酰基、芳基或芳基烷基基团中的每个任选地被本文描述为适合用于相应基团的取代基取代；R′和R″基团以及它们所连接的氮原子可以任选地形成3至8元环，其可以是饱和的、不饱和的或芳族的，并且其含有1-3个独立地选自N、O和S的杂原子作为环成员，并且其任选地被描述为适合用于烷基基团的取代基取代，或者如果NR′R″是芳族基团，则其任选地被描述为典型地用于杂芳基基团的取代基取代。

本文中使用的术语“酰胺”或“酰氨基”包括C-和N-酰胺基团，例如，分别--C(O)NR₂和--NRC(O)R基团，其中R可以是H、烷基、芳基或其它基团，其可以任选地被取代。因此，酰氨基团包括、但不限于--C(O)NH₂、--NHC(O)H、--C(O)NHCH₂CH₃、--NHC(O)CH₃或--C(O)N(CH₂CH₃)苯基。

本文中使用的“酰基”涵盖包含连接在羰基碳原子的两个可用价位置之一处的烷基、烯基、炔基、芳基或芳基烷基残基的基团，并且杂酰基表示对应的基团，其中至少一个不是羰基碳的碳已经被选自N、O和S的杂原子替换。

类似地，本文中使用的“芳基烷基”和“杂芳基烷基”表示通过连接基团(诸如亚烷基，包括被取代的或未被取代的、饱和的或不饱和的、环状的或无环的连接基)与其连接点键合的芳族和杂芳族环系统。通常，所述连接基是C₁-C₈烷基。这些连接基还可以包括羰基基团，从而使它们能够提供取代基作为酰基或杂酰基部分。在芳基烷基或杂芳基烷基基团中的芳基或杂芳基环可以被上面关于芳基基团描述的相同取代基取代。优选地，芳基烷基基团包括任选地被以下基团取代的苯环：上面关于芳基基团定义的基团和未被取代的或被1或2个C₁-C₄烷基基团或杂烷基基团取代的C₁-C₄亚烷基，其中所述烷基或杂烷基基团可以任选地环化以形成环诸如环丙烷、二氧杂环戊烷或氧杂环戊烷。类似地，杂芳基烷基基团优选地包括任选地被以下基团取代的C₅-C₆单环杂芳基基团：在上面描述为芳基基团上的典型取代基的基团和未被取代的或被1或2个C₁-C₄烷基基团或杂烷基基团取代的C₁-C₄亚烷基，或者它包括任选地被取代的苯环或C₅-C₆单环杂芳基和未被取代的或被1或2个C₁-C₄烷基或杂烷基基团取代的C₁-C₄亚杂烷基，其中所述烷基或杂烷基基团可以任选地环化以形成环诸如环丙烷、二氧杂环戊烷或氧杂环戊烷。

本文中使用的术语“杂原子”表示不是碳或氢的任何原子，诸如氮、氧或硫。当它是链或环的主链或骨架的一部分时，杂原子必须是至少二价的，并且通常将选自N、O、P和S，更通常选自N、O和P。在某些上下文中，术语“杂原子”可以包括其它原子，包括硒、硅或硼。

本文中使用的术语“烷酰基”表示共价地连接至羰基(C＝O)基团的烷基基团。术语“低级烷酰基”表示这样的烷酰基基团：其中所述烷酰基基团的烷基部分是C₁-C₆。所述烷酰基基团的烷基部分可以如上所述任选地被取代。可以可替换地使用术语“烷基羰基”。类似地，术语“烯基羰基”和“炔基羰基”表示分别连接至羰基基团的烯基或炔基基团。

本文中使用的术语“烷氧基”表示共价地连接至氧原子的烷基基团；所述烷基基团可以被认为替换羟基基团的氢原子。术语“低级烷氧基”表示这样的烷氧基基团：其中所述烷氧基基团的烷基部分是C₁-C₆。所述烷氧基基团的烷基部分可以如上所述任选地被取代。本文中使用的术语“卤代烷氧基”表示其中烷基部分被一个或多个卤素基团取代的烷氧基基团。

本文中使用的术语“磺基”表示磺酸(—SO₃H)取代基。

本文中使用的术语“氨磺酰基”表示具有结构—S(O₂)NH₂的取代基，其中所述基团的NH₂部分的氮可以如上所述任选地被取代。

本文中使用的术语“羧基”表示结构—C(O₂)H的基团。

本文中使用的术语“氨基甲酰基”表示结构—C(O₂)NH₂的基团，其中所述基团的NH₂部分的氮可以如上所述任选地被取代。

本文中使用的术语“单烷基氨基烷基”和“二烷基氨基烷基”表示结构—Alk₁-NH-Alk₂和—Alk₁-N(Alk₂)(Alk₃)的基团，其中Alk₁、Alk₂和Alk₃表示如上所述的烷基基团。

本文中使用的术语“烷基磺酰基”表示结构—S(O)₂-Alk的基团，其中Alk表示如上所述的烷基基团。术语“烯基磺酰基”和“炔基磺酰基”分别类似地表示共价地结合至烯基和炔基基团的磺酰基基团。术语“芳基磺酰基”表示结构—S(O)₂-Ar的基团，其中Ar表示如上所述的芳基基团。术语“芳氧基烷基磺酰基”表示结构—S(O)₂-Alk-O-Ar的基团，其中Alk是如上所述的烷基基团且Ar是如上所述的芳基基团。术语“芳基烷基磺酰基”表示结构—S(O)₂-AlkAr的基团，其中Alk是如上所述的烷基基团且Ar是如上所述的芳基基团。

本文中使用的术语“烷氧基羰基”表示包括烷基基团的酯取代基，其中所述羰基碳是与所述分子的连接点。一个例子是乙氧基羰基，其为CH₃CH₂OC(O)—。类似地，术语“烯基氧基羰基”、“炔基氧基羰基”和“环烷基羰基”分别表示包括烯基基团、炔基基团或环烷基基团的类似酯取代基。类似地，术语“芳氧基羰基”表示包括芳基基团的酯取代基，其中所述羰基碳是与所述分子的连接点。类似地，术语“芳氧基烷基羰基”表示包括烷基基团的酯取代基，其中所述烷基基团本身被芳氧基基团取代。

当参考官能团或取代基、特别参考化合物的化学结构使用时，本文中使用的术语“不存在”是指，特定官能团或取代基不存在于所描述的化合物中。当参考取代基使用时，所述取代基的不存在通常是指，与所述取代基的键不存在并且该键的不存在用H原子补偿。当参考链或环内的位置使用时，所述位置的不存在通常是指，否则通过不存在的位置连接的两个位置替代性地通过共价键直接连接。

发明详述

本发明的方法和组合物是基于β-肾上腺素能反向激动剂纳多洛尔的抑制抑制蛋白-2(β-抑制蛋白)途径的活性、特别是阻断在气道上皮细胞β₂受体处的信号传递的能力。

I.纳多洛尔的性能

纳多洛尔的结构在下面显示为式(I)：

纳多洛尔是在下面显示为式(II(a))、(II(b))、(II(c))和(II(d))的四种立体异构体的混合物：

(II(a))；(II(b))；(II(c))；和(II(d))。

纳多洛尔的最有活性的立体异构体是RSR立体异构体。

纳多洛尔是极性的和亲水的，具有低脂质溶解度。

如下所述，在某些替代方案中，可以使用纳多洛尔的衍生物或类似物。纳多洛尔的特定衍生物或类似物是式(I)的化合物：

其中R₁是氢或低级烷基，R₂是氢或低级烷基，且m和n是1至3，前提条件是，其中R₁和R₂都是氢且m是1，n不是1。

本发明的一个实施方案是一种治疗受β-抑制蛋白途径的调节影响的疾病或病症的方法，其包括施用治疗上有效量的β-肾上腺素能受体、特别是β₂-肾上腺素能受体的反向激动剂，所述受体的调节被涉及在所述疾病或病症中。通常，所述疾病或病症是呼吸系统疾病或病症，包括、但不限于哮喘、慢性阻塞性肺病(COPD)、支气管炎、支气管扩张、肺气肿、变应性鼻炎、囊性纤维化的肺后遗症、丘-施二氏综合征、肺炎和与SARS-CoV-2感染相关的肺症状。

在经典受体理论中，考虑了两类G蛋白偶联受体(GPCR)配体：激动剂和拮抗剂。受体被认为以单一静止状态存在，其仅在激动剂结合以产生活化的受体状态后诱导细胞信号传递。在该模型中，拮抗剂的结合不会产生细胞信号传递，而只是阻止受体被激动剂结合和活化。然后，Costa和Herz证实，受体可以被操纵进入组成型或自发活性状态，其在没有激动剂占据存在下产生细胞信号传递。他们还提供了某些化合物使那些自发活性受体失活的证据(T.Costa和A.Herz，“Antagonists with Negative Intrinsic Activity at 8OpioidReceptors Coupled to GTP-Binding Proteins,”Proc.Natl.Acad.Sci.USA 86:7321-7325(1989))。进一步的证据表明，GPCR以组成型或自发活性状态存在，其在某种程度上被反向激动剂灭活(R.A.de Ligt等人，“Inverse Agonism at G Protein-CoupledReceptors:(Patho)physiological Relevance and Implications for DrugDiscovery,”Br.J.Pharmacol.130:1-12(2000)；G.Milligan等人，“Inverse Agonism:Pharmacological Curiosity or Potential Therapeutic Strategy？,”Trends Pharmacol.Sci.16:10-13(2000))。

使用反向激动剂诸如纳多洛尔来调节β-肾上腺素能受体、特别是β₂-肾上腺素能受体的活性的基础一般涉及反向激动剂存在的认识以及反向激动剂长期治疗对受体功能的影响的理解。反向激动剂是什么以及它如何发挥作用？受体，诸如对肾上腺素(epinephrine)作出应答的β-肾上腺素能受体(“β-肾上腺素受体”)通常以两种状态(活性状态和无活性状态)之间的平衡存在。当受体与激动剂(诸如用于β-肾上腺素受体的肾上腺素)结合时，它们会阻止所述受体循环回到无活性状态，从而根据质量作用定律转移在活性状态和无活性状态之间的平衡。发生这种情况是因为那些与激动剂结合的受体脱离了平衡。通常，拮抗剂与受体结合，但阻止激动剂的结合。但是，被称为“反向激动剂”的分子与处于无活性状态的受体结合，从而造成活性状态和无活性状态之间的平衡向无活性状态转移。这不仅仅是阻断激动剂结合的问题。此外，在体内存在一群自发活性受体。这些受体提供了活性的基线构成水平；所述活性不会完全“停止”。

如上面指出的，已经充分证实，β-肾上腺素能激动剂的长期施用会造成激动剂依赖性脱敏。在急性施用β-激动剂后，肾上腺素能受体被内化，由此阻止它们被进一步再刺激以实现肺松弛。在长期施用β-激动剂下，β-肾上腺素能受体的总数实际上被下调。结果可能是在哮喘患者中或在患有慢性呼吸系统疾病的其它患者中观察到的对长效β-激动剂的反应性丧失，并且被称为耐受性或快速耐受性，如上所述。

根据本发明的治疗方法的一个方面基于下述发现：反向激动剂的长期施用具有上调活性β-肾上腺素受体的群体的作用。观察到的活性可能是由于受体的组成性基线活性或受体对内源性激动剂的应答水平增加的组合效应。这导致了一个看似矛盾的结果，即乍一看似乎会降低生理功能(诸如通过造成哮喘中的气道高反应性)的药物的施用，如果长期施用的话，却可以通过上调与该生理功能相关的自发活性β-肾上腺素能受体的群体来增强该生理功能。这是“矛盾药理学”原理的具体应用(R.Lin等人，“Changes inβ₂-Adrenoceptorand Other Signaling Proteins Produced by Chronic Administration of“Beta-Blockers”in a Murine Asthma Model,”Pulm.Pharmacol.Ther.21:115-124(2008))，并且特别适用于中度至重度哮喘以及其它呼吸系统疾病或病症。

沿着这些思路，心脏选择性的β-肾上腺素能反向激动剂(优选用于β₁-肾上腺素能受体亚型的那些)的使用已经被证实在患有慢性阻塞性肺病(COPD)的高血压和充血性心力衰竭(CHF)患者中是安全的。

如下面所述，本发明提供了β-肾上腺素能反向激动剂的活性β-肾上腺素受体受体结合形式在治疗COPD和以气道高反应性为特征的其它疾病中的用途，所述其它疾病包括、但不限于肺气肿、哮喘、丘-施二氏综合征、慢性支气管炎和支气管扩张。特别优选的β-肾上腺素能反向激动剂是纳多洛尔，其如下所述具有抑制抑制蛋白-2(β-抑制蛋白)的附加性质。所述反向激动剂可以是纯的或基本上纯的对映异构或非对映异构形式，或者可以是外消旋混合物。在许多情况下，当所述化合物仅具有一个手性中心时，这样的化合物的活性形式是L形式。就纳多洛尔而言，其具有3个手性中心和潜在的12种异构体，但通常在合成过程中仅形成两种，最有活性的形式是纳多洛尔的RSR形式(在纳多洛尔中的手性中心的指定是根据Cahn-Ingold-Prelog体系)。如上所述，在某些替代方案中，可以使用纳多洛尔的衍生物或类似物，诸如、但不限于式(I)的化合物。本文中使用的“类似物”表示在结构上与母体化合物相似但组成略有不同(例如，一个原子或官能团不同、被添加或除去)的化学化合物。所述类似物可能具有或不具有与原始化合物不同的化学或物理性质，并且可能具有或不具有改善的生物和/或化学活性。例如，与母体化合物相比，所述类似物可能更亲水或疏水，或者它可能具有改变的反应性。所述类似物可以模仿母体化合物的化学和/或生物活性(即，它可以具有相似或相同的活性)，或者在某些情况下，可以具有增加的或减少的活性。所述类似物可以是原始化合物的天然或非天然存在的变体。其它类型的类似物包括异构体(对映异构体、非对映异构体等)和化合物的其它类型的手性变体，以及结构异构体。本文中使用的“衍生物”表示化学化合物的化学或生物学修饰形式，其在结构上类似于母体化合物并且(实际上或理论上)可衍生自该母体化合物。“衍生物”与“类似物”的不同之处在于，母体化合物可以是生成“衍生物”的起始材料，而所述母体化合物不一定可以用作生成“类似物”的起始材料。衍生物可能具有或不具有与母体化合物不同的化学或物理性质。例如，与母体化合物相比，所述衍生物可能更亲水或疏水，或者它可能具有改变的反应性。衍生化(即，修饰)可以涉及所述分子内的一个或多个部分的置换(例如，官能团的改变)。术语“衍生物”还包括母体化合物的缀合物和前药(即，可以在生理条件下转化为原始化合物的化学修饰的衍生物)。

尽管已知许多对呼吸道组织中的β-肾上腺素能受体具有活性的反向激动剂，包括：纳多洛尔，通常用作盐酸盐；布拉洛尔，通常用作盐酸盐；卡拉洛尔，通常用作盐酸盐；卡维地洛，通常用作盐酸盐；ICI-118,551(3-(异丙基氨基)-1-[(7-甲基-4-茚满基)氧基]丁烷-2-醇)，通常用作盐酸盐；左布诺洛尔，通常用作盐酸盐；美托洛尔，通常用作酒石酸盐或琥珀酸盐；索他洛尔，通常用作盐酸盐；和噻吗洛尔，通常用作盐酸盐，以及这些化合物的溶剂化物和这些化合物的其它盐和这些化合物的前药，纳多洛尔的性质使其成为用在本发明的方法和组合物中的优选化合物。使其成为用在根据本发明的方法和组合物中的优选化合物的纳多洛尔的性质包括如下所讨论的抑制蛋白2(β-抑制蛋白)的抑制。

II.抑制蛋白-2(β-抑制蛋白)

抑制蛋白(其包括抑制蛋白-2(β-抑制蛋白)和该家族的其它成员，包括抑制蛋白-1、抑制蛋白-3和抑制蛋白-4)是对于调节在G-蛋白偶联受体(GPCR)处的信号转导而言重要的蛋白的小家族的成员。响应于刺激，GPCR活化异源三聚体G蛋白。为了关闭这种应答，或者为了适应持续的刺激，需要使活性受体敏化。脱敏的第一步是通过一系列丝氨酸/苏氨酸激酶(被称为G蛋白偶联受体激酶(GRK))来磷酸化G-蛋白偶联受体。GRK介导的磷酸化专门为抑制蛋白结合准备活化的受体。然后，与所述受体结合的抑制蛋白进一步阻断G-蛋白介导的信号传递并靶向受体进行内化，并将信号传递重定向至替代性G-蛋白非依赖性途径，诸如β-抑制蛋白介导的信号传递。根据J.S.Smith等人，“偏向的Signaling:From SimpleSwitches to Allosteric Microprocessors,”Nat.Rev.Drug Discovery 17:243-260(2018)，G蛋白偶联受体(GPCR)是在基因组中编码的最常见受体，占具有约有800个成员的编码人基因组的1％以上，并在每个器官系统内表达。所有GPCR共享一个共同的架构，其由一个细胞外N端序列、七个跨膜(TM)结构域(TM1-TM7)(通过三个细胞外环和三个细胞内环连接)以及一个细胞内C端结构域组成。GPCR是宽范围的细胞外刺激(包括蛋白、激素、小分子、神经递质、离子和光)的传感器。GPCR信号传递主要通过与三个蛋白家族的相互作用来控制：G蛋白、G蛋白受体激酶(GRK)和β-抑制蛋白(抑制蛋白-2蛋白)，它们在受体处执行不同的功能。在刺激后，GPCR活化异源三聚体G蛋白。在传统上，激动剂结合会造成GPCR的构象变化，从而诱导鸟嘌呤交换因子(GEF)活性，该活性催化异源三聚体G-蛋白的Gα亚基上的GTP交换为GDP。这又导致异源三聚体复合物解离成Gα和Gβγ亚基。解离的亚基促进第二信使效应物诸如环磷酸腺苷(cAMP)、三磷酸肌醇(IP3)、二酰基甘油(DAG)和其它第二信使的形成，以及其它受体和通道的调节，诸如内向整流钾通道的活化。

与大多数生物系统类似，负反馈回路已经进化到在受体刺激后淬灭持续的第二信使信号传递，以维持生物稳态。在配体结合和G蛋白活化以后，所述受体在其细胞质环和C端上主要通过GRK而磷酸化，这会增强抑制蛋白-2与所述受体的结合。抑制蛋白(包括抑制蛋白-2)首先因其在介导受体脱敏中的作用而被发现，通过该过程，重复的刺激在数秒至数分钟内降低信号传递应答，这通过GPCR与G蛋白相互作用的空间位阻来实现。抑制蛋白-2还通过与网格蛋白包被的凹坑的相互作用介导受体内化。这可以导致下调，即由于这些内化的受体被运输到蛋白酶体或溶酶体，受体数目在几分钟到几小时内持续减少。未被降解的内化的受体也可以再循环至质膜。现在确定，除了充当G蛋白信号传递的负调节剂外，抑制蛋白-2还通过充当衔接子和支架与多种信号传递介质偶联，包括丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)、AKT、SRC、核因子-κB(NF-κB)和磷酸肌醇3-激酶(PI3K)。这些途径与经典的G蛋白信号传递分开，但可以涉及经常在时间上不同的类似信号传递级联。最近，还已经认识到，某些与抑制蛋白-2紧密相互作用的受体保持在胞内体上的催化GEF(鸟嘌呤核苷酸交换因子)活性，在内化后继续促进G蛋白信号传递。因此，抑制蛋白-2可以调节受体活性的几乎所有方面，包括脱敏、下调、运输和信号传递。

大多数活化或阻断GPCR的药物被认为同等地或基本上同等地靶向由不同G蛋白和β-抑制蛋白介导的不同信号传递途径。这些激动剂被认为以与内源性参考激动剂(经常被称为平衡的激动剂)类似的方式放大下游信号传递途径，而大多数拮抗剂被认为抑制由那些激动剂活化的所有第二信使系统。但是，先前认识到，选择性的激动剂或拮抗剂可以特异性地靶向特定的受体连接的效应物系统或有限数目的受体连接的效应物系统。事实上，已经描述了许多选择性地活化某些途径、同时阻断受体下游的其它途径的配体。与上述平衡的激动剂相比，这些“在功能上选择性的”或“偏向的”激动剂可以选择性地活化G蛋白，同时阻断抑制蛋白，或反之亦然。这种行为最初在许多GPCR系统中鉴定出，包括垂体腺苷酸环化酶活化肽(PACAP)受体配体，其差异性地活化不同的G蛋白，这通过效能逆转来测量。自从发现β-抑制蛋白介导的信号传递以来，偏向激动作用已经成为一个日益活跃的研究领域，并为多个GPCR鉴定出大量的偏向配体。

偏向激动作用的发现对于理解GPCR生物学具有重要意义。首先，偏向激动作用与受体信号传递的双状态模型不一致，并且因此它改变了传统上理解的效力概念。本文中使用的术语“效力”被定义为配体在与受体结合后产生可计量的应答的能力。所述可计量的应答通常、但不一定是促进正常生理功能或治疗疾病或病症的应答。

其次，偏向的信号传递表明，GPCR不应建模为二元开关，而应建模为响应于不同的配体生成多种构象的变构微处理器。这些配体还具有重要的临床意义，因为选择性地活化或抑制特定信号传递级联可以产生更具针对性的药物并减少副作用。

导致偏向信号传递应答的发生的因素如下。使用三元复合物作为受体活性的一般模型，受体的激动剂活化需要三个主要组分来启动信号传递：配体、受体和至少一个或多个传感器(传感器的数目取决于特定系统)。这三种(或在某些情况下更多)组分发挥变构作用；例如，配体可以增加受体对其所相互作用的传感器(诸如G蛋白或β-抑制蛋白)的亲和力，而传感器与细胞内受体结构域的结合可以稳定构象，这会增加对特定配体的亲和力。变构效应是一种广泛存在的现象，其描述了在大分子位点处发生的相互作用以相互方式调节相同大分子上在空间上不同的结合位点处的相互作用的能力。变构效应的概念首先是针对酶而提出，但也适用于许多其它蛋白，具体地，但非排它地，多亚基蛋白。本文中使用的“亲和力”是配体与受体结合的程度的测量，通常以解离常数(K_d)的方式表示。解离常数(以摩尔单位表示)越小，配体与受体的结合越紧密，并且因此配体与受体之间的亲和力越高。亲和力取决于细胞环境，并且因此，对G蛋白偶联受体(诸如β₂-肾上腺素能受体)的亲和力受传感器(诸如G蛋白或β-抑制蛋白，也被称为抑制蛋白-2)影响。

在配体-受体相互作用和信号传递的双状态模型中，受体仅存在二元条件：无活性状态(其不能信号传递)和活性状态(其可以结合并活化传感器)。所述受体被建模为一个开关，激动剂稳定“开”状态，且拮抗剂稳定“关”状态。激动剂效力可以被定义为配体通过稳定活性受体构象来改变受体的信号传递状态的能力。偏向激动作用的现象证实，受体并不是充当仅编码跨二元谱范围内的活性状态的简单开关，也就是说，激动剂或拮抗剂同等地活化或抑制受体下游的所有信号传递途径。相反，配体结合导致多个GPCR介导的效应物的活化或抑制，在该背景下包括β-肾上腺素能受体诸如β₂受体。这些效应物经常依赖于G蛋白、GRK和β-抑制蛋白信号传递的不同阶段。作为编码二元“开”或“关”信号的替代，一种更适当的模型是这样的模型：其中GPCR充当具有多维效力的变构微处理器，以不同的传感器耦合效率对不同的分子做出响应。在理论上，在受体表面上与分子结合的任何位点都会稳定不同的受体构象并诱导特定的药理学输出。因此，药物的生理活性不一定与在正构结合位点处的相互作用关联。如上所述的三元复合物的三种组分(即配体、受体和一个或多个传感器)中的任何一种都可以促成这样的偏向应答。对配体偏向的一般理解是，由于配体诱导的变构受体的不同构象的产生，配体偏向通过受体传递至下游传感器。这可能涉及多种机制的参与，包括受体的二级或三级结构的变化以及在翻译后修饰受体的细胞内环和C端(诸如通过磷酸化或泛素化)的蛋白的募集。

抑制蛋白-2以两种方式阻断GPCR偶联。首先，抑制蛋白-2与受体的细胞质面的结合会封闭异源三聚体G-蛋白的结合位点，从而阻止其活化并导致脱敏。其次，抑制蛋白-2将受体与内化机制的元件、网格蛋白(其为构建小囊泡以在细胞内运输分子的蛋白)和网格蛋白衔接子AP2连接起来，所述AP2通过包被的凹坑促进受体内化并随后转运到被称为胞内体的内部细胞隔室。随后，所述受体可以被引导至降解隔室(溶酶体)或再循环回到质膜，在那里它可以再次参与信号传递。抑制蛋白-受体相互作用的强度在这些替代方案的发生中发挥着重要作用：更紧密的复合物往往会增加受体降解的可能性(B类)，而更短暂的复合物有利于重复利用(A类)，尽管相互作用的强度是不完全是决定性的。

抑制蛋白(包括抑制蛋白-2)是细长的分子，其中几种分子内相互作用决定了该蛋白的两个结构域的相对起源。在未刺激的细胞中，抑制蛋白以基本的“无活性”构象定位于细胞质中。活性磷酸化GPCR将抑制蛋白募集到质膜。受体结合会诱导总体构象变化，其涉及两个抑制蛋白结构域的移动以及其含有网格蛋白和AP2结合位点的C-端尾巴的释放。如上所述，受体结合的抑制蛋白中这些位点的增加的可达性将抑制蛋白-受体复合物靶向包被的凹坑。抑制蛋白还结合微管(细胞“骨架”的一部分)，在那里它们呈现不同于游离形式和受体结合形式的另一种构象。微管结合的抑制蛋白将某些蛋白募集到细胞骨架，这影响它们的活性和/或将其重定向到微管相关蛋白。抑制蛋白在细胞核和细胞质之间穿梭。它们的细胞核功能尚不完全清楚，但已经证实，所有四种哺乳动物抑制蛋白亚型都会从细胞核中除去它们的配偶体中的某些，诸如蛋白激酶JNK3或泛素连接酶Mdm2。抑制蛋白还通过增强某些基因的转录来改变基因表达。

GPCR的脱敏(上述的一种现象，其导致诸如β-肾上腺素能激动剂等药剂的活性的丧失，通常在长期施用这样的药剂后发生)具有多种机制。简而言之，脱敏的经典范例涉及通过第二信使刺激的蛋白激酶(即，PKA或PKC，被称为异源脱敏)或特异性的G-蛋白偶联受体激酶(GRK，被称为同源脱敏)实现受体磷酸化以及随后抑制蛋白的结合在空间上阻止受体和G蛋白之间的进一步偶联的双重步骤。这两种作用一起调节受体与效应分子的功能偶联，并在激动剂诱导的同源脱敏过程中控制受体的亚细胞定位。但是，另一种抑制蛋白-2介导的脱敏调节机制涉及在效应物附近支架磷酸二酯酶(PDE)对第二信使(诸如腺苷酸环化酶产生的cAMP)的降解。尽管过去认为这两个脱敏过程是相互独立的，但抑制蛋白-2和PDE向活化的β-肾上腺素受体的募集显示出非常相似的动力学，从而提示，抑制蛋白-2可能充当将PDE易位至活化的受体的穿梭机。该观察被以下事实加强：缺乏抑制蛋白-2表达的细胞在β-肾上腺素受体刺激后不能募集PDE，该功能通过向细胞中引入外源性抑制蛋白-2得以恢复。随后在心肌细胞中进行的研究表明，抑制蛋白-2介导的PDE向活化的β-肾上腺素受体的募集会促进从Gs到Gi偶联的转换，从而将受体转向进一步限制cAMP产生的途径，从而阻断通过β-肾上腺素受体实现的进一步信号传递。

激动剂的暴露导致GPCR在隔离或内化过程中运输到细胞内隔室中。内化最初被鉴定为脱敏受体的重新致敏的关键步骤，但最近被证实会启动细胞信号传递诸如有丝分裂途径。如下发现了抑制蛋白-2在内化过程中的核心作用：证明抑制蛋白-2的过表达会挽救在其隔离能力上受损的内化缺陷的β-肾上腺素受体突变体，并且反之，用抑制蛋白-2缺陷型突变体可以抑制β-肾上腺素受体内化。

抑制蛋白-2介导受体内化的机制是通过其与网格蛋白-包被的凹坑(CCP)机制的蛋白相互作用的能力。现在理解，抑制蛋白-2充当衔接子分子，通过衔接蛋白AP-2直接结合网格蛋白。在胞质溶胶中GRK2和PI3激酶之间的直接激动剂依赖性相互作用促进了AP-2向质膜的募集，然后两种酶快速易位到质膜，它们在那里与激动剂活化的受体相互作用。PI3激酶在膜处对3,4,5-磷脂酰肌醇的产生增强了AP-2的募集，从而促进胞吞作用。令人感兴趣的是，内化过程还需要PI3激酶的蛋白激酶活性，其作用是磷酸化细胞骨架原肌球蛋白，从而允许肌动蛋白聚合。

受体和隔离机制组分之间的复合物形成取决于抑制蛋白-2的磷酸化状态。在未刺激状态下，抑制蛋白-2被丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)ERK1/2组成性地磷酸化，从而降低其与网格蛋白相互作用的能力，并从而减少GPCR的隔离。在GPCR(诸如β-肾上腺素受体)的激动剂刺激下，细胞质抑制蛋白-2被募集至质膜，在那里它快速地去磷酸化，该作用促进其与肌动蛋白的结合和随后的胞吞作用。

一旦内化到细胞内隔室中，受体(诸如β-肾上腺素受体)注定会再循环回质膜，或者可替换地成为胞吞后降解的目标。决定受体命运的细胞过程之一是泛素化—将多个泛素分子添加至底物蛋白的赖氨酸残基上，这种作用标志着它被蛋白酶体降解。事实上，包括β-肾上腺素受体在内的多种GPCR会经历激动剂介导的泛素化。但是，虽然β₂-肾上腺素受体的泛素化对于受体降解而言是必需的，但是β₂-肾上腺素受体内化也需要在激动剂刺激下同时发生的抑制蛋白-2的泛素化。使用突变体的结果表明，抑制蛋白-2的泛素化状态除了决定其运输模式外，还决定受体-抑制蛋白-2复合物的稳定性。

抑制蛋白-2还充当衔接子分子，其促进与蛋白诸如ERK和受体和非受体酪氨酸激酶的多蛋白信号传递复合物的形成。这种相互作用不依赖于G蛋白，并且起作用来活化有丝分裂途径，诸如由ERK1/2-MAPK级联介导的途径。

抑制蛋白-2与活化的受体的相互作用是由GRK家族的成员来介导；对于β₂-肾上腺素受体，这些成员至少包括GRK5和GRK6。这些GRK诱导受体磷酸化，其在缺乏G蛋白活化(对于β₂-肾上腺素受体)的情况下导致激动剂刺激的ERK活化。

此外，CXC4受体通过活化抑制蛋白-2介导的途径在活化炎症中发挥作用。

下面在治疗方法和组合物(包括涉及已经被证实与抑制蛋白-2相互作用的蛋白的治疗方法和组合物)的方面进一步阐述了抑制蛋白-2的这些不同作用和活性。

III.COPD和其它呼吸病症的治疗方法

因此，本发明的一个方面是一种用于治疗慢性阻塞性肺病(COPD)和如上所述的其它呼吸系统疾病或病症的方法，其包括向COPD患者施用治疗上有效量的纳多洛尔或其衍生物或类似物来抑制抑制蛋白-2的活性，由此阻止β₂-肾上腺素受体的脱敏。

优选地，纳多洛尔或纳多洛尔的衍生物或类似物是纳多洛尔本身。可替换地，在本发明范围内还预见到式(I)的纳多洛尔的类似物：

其中R₁是氢或低级烷基，R₂是氢或低级烷基，且m和n是1至3，前提条件是，其中R₁和R₂都是氢且m是1，n不是1。本文中使用的术语“低级烷基”被定义为1至6个碳原子、更优选1至3个碳原子的直链或支链烃基残基。下面描述了纳多洛尔的其它衍生物或类似物。

可以用在根据本发明的方法中的纳多洛尔的衍生物或类似物可以包括盐，其中存在于纳多洛尔的衍生物或类似物中的部分具有一个或多个可以接受或提供质子的基团，取决于它们存在的溶液的pH。这些部分包括羧基部分、羟基部分、氨基部分、磺酸部分和已知参与酸-碱反应的其它部分。纳多洛尔的衍生物或类似物的叙述包括诸如在生理pH或在药物组合物的pH出现的盐形式，除非明确地排除。示例性的药学上可接受的盐包括通过药理学活性化合物与无机酸或有机酸或无机碱的反应制备的那些盐，诸如包括硫酸盐、焦硫酸盐、硫酸氢盐、亚硫酸盐、亚硫酸氢盐、磷酸盐、磷酸一氢盐、磷酸二氢盐、偏磷酸盐、焦磷酸盐、氯化物、溴化物、碘化物、乙酸盐、丙酸盐、癸酸盐、辛酸盐、丙烯酸盐、甲酸盐、异丁酸盐、己酸盐、庚酸盐、丙炔酸盐、草酸盐、丙二酸盐、琥珀酸盐、辛二酸盐、癸二酸盐、富马酸盐、马来酸盐、丁炔-1,4-二酸盐、己炔-1,6-二酸盐、苯甲酸盐、氯苯甲酸盐、甲基苯甲酸盐、二硝基苯甲酸盐、羟基苯甲酸盐、甲氧基苯甲酸盐、邻苯二甲酸盐、磺酸盐、二甲苯磺酸盐、苯基乙酸盐、苯基丙酸盐、苯基丁酸盐、柠檬酸盐、乳酸盐、β-羟基丁酸盐、乙醇酸盐、酒石酸盐、甲烷-磺酸盐、丙烷磺酸盐、萘-1-磺酸盐、萘-2-磺酸盐和扁桃酸盐在内的盐。如果药理学活性化合物具有一个或多个碱性官能团，则期望的药学上可接受的盐可以通过本领域可用的任何合适的方法来制备，例如，用无机酸或用有机酸处理游离碱，所述无机酸是诸如盐酸、氢溴酸、硫酸、硝酸、磷酸等，所述有机酸是诸如乙酸、马来酸、琥珀酸、扁桃酸、富马酸、丙二酸、丙酮酸、草酸、羟乙酸、水杨酸、吡喃糖苷酸(pyranosidyl acid)(诸如葡糖醛酸或半乳糖醛酸)、α-羟酸(诸如柠檬酸或酒石酸)、氨基酸(诸如天冬氨酸或谷氨酸)、芳族酸(诸如苯甲酸或肉桂酸)、磺酸(诸如对甲苯磺酸或乙磺酸)等。如果药理学活性化合物具有一个或多个酸性官能团，则期望的药学上可接受的盐可以通过本领域可用的任何合适的方法来制备，例如，用无机或有机碱诸如胺(伯胺、仲胺或叔胺)、碱金属氢氧化物或碱土金属氢氧化物等处理游离酸。合适的盐的示例性例子包括衍生自氨基酸(诸如甘氨酸和精氨酸)、氨、伯胺、仲胺和叔胺和环状胺(诸如哌啶、吗啉和哌嗪)的有机盐，以及衍生自钠、钙、钾、镁、锰、铁、铜、锌、铝和锂的无机盐。

类似地，通过使适合用于根据本发明的方法的化合物或其类似物或衍生物上的羧基、羟基或磺酸部分与酸(对于羟基部分)或醇(对于羧基或磺酸部分)反应以形成酯，可以形成前药酯。通常，所述酸或醇包括1至6个碳的低级烷基基团，诸如甲基、乙基、丙基、异丙基、丁基、异丁基和叔丁基。这些基团可以进一步被取代基诸如羟基或如上所述的其它取代基取代，只要这样的取代基不会实质上损害前药的水解或所得水解产物的生物利用度。这样的前药是本领域众所周知的并且不需要在此进一步描述。通过酯键的水解，通常通过细胞内酶，将前药转化成活性化合物。可以用于形成前药酯的其它合适的部分是本领域众所周知的。例如，前药可以包括通过使母体酸化合物与合适的胺反应而制备的酰胺。在某些情况下，需要制备双酯型前药，诸如(酰氧基)烷基酯或((烷氧基羰基)氧基)烷基酯。作为前药的合适酯包括、但是不一定限于甲基、乙基、丙基、异丙基、正丁基、异丁基、叔丁基、吗啉代乙基和N,N-二乙基甘醇酰氨基。通过具有合适的羧酸基团的化合物的酸形式在介质(诸如甲醇)中与酸或碱酯化催化剂(例如，NaOH或H₂SO₄)的反应，可以制备甲酯前药。使用乙醇代替甲醇，以类似的方式制备乙酯前药。通过合适的化合物的钠盐(在介质诸如二甲基甲酰胺中)与4-(2-氯乙基)吗啡盐酸盐(可得自Aldrich Chemical Co.,Milwaukee,Wis.，美国)的反应，可以制备吗啉基乙酯前药。前药系统的使用描述于T.等人，“Design andPharmaceutical Applications of Prodrugs”，Drug Discovery Handbook(S.C.Gad，编,Wiley-Interscience,Hoboken,NJ,2005)，第17章，第733-796页。

药学上可接受的盐包括如上所述的盐。其它药学上可接受的盐是本领域已知的。

如上所述，要治疗的受试者可以是人患者或社会上或经济上重要的动物。除非另有说明，否则根据本发明的方法和组合物不限于人类的治疗。

通常，当使用纳多洛尔、纳多洛尔的衍生物或类似物、或者纳多洛尔或纳多洛尔衍生物或类似物的前药的持续释放口服施用时，所述施用产生纳多洛尔、纳多洛尔的衍生物或类似物的连续水平，或者在施用前药的情况下，由所述前药在受试者血流中的体内代谢产生的活性剂。通常，所述方法发挥上调肺β₂-肾上腺素受体的治疗效果。通常，所述方法还发挥抑制在肺β₂-肾上腺素受体处的抑制蛋白-2的活性的治疗效果。通常，所述方法还发挥增加对β₂-肾上腺素能激动剂药物的肺松弛反应性的治疗效果。这提供了联合疗法，在下面详细描述。通常，通过吸入施用所述纳多洛尔，在下面详细描述。

纳多洛尔、纳多洛尔的衍生物或类似物、或者纳多洛尔或纳多洛尔衍生物或类似物的前药可以与一种或多种药物赋形剂结合施用。所述药物赋形剂可以包括、但是不一定限于碳酸钙、磷酸钙、各种糖或各种类型的淀粉、纤维素衍生物、明胶、植物油、聚乙二醇和生理上相容的溶剂。其它药物赋形剂是本领域众所周知的。纳多洛尔、纳多洛尔的衍生物或类似物、或者纳多洛尔或纳多洛尔衍生物或类似物的前药可以与一种或多种药学上可接受的载体结合施用。示例性的药学上可接受的载体包括、但不限于任何的和/或所有的溶剂，包括水性的和非水性的溶剂、分散介质、包衣剂、抗细菌剂和/或抗真菌剂、等渗剂和/或吸收延迟剂和/或类似物。其它药物赋形剂和载体是本领域已知的，并且包括、但不限于：防腐剂；用于口服施用的甜味剂；增稠剂；缓冲剂；液体载体；润湿剂、增溶剂或乳化剂；酸化剂；抗氧化剂；碱化剂；承载剂；螯合剂；着色剂；络合剂；助悬剂或增粘剂；风味剂或香料；油；渗透促进剂；聚合物；硬化剂；蛋白；碳水化合物；填充剂；和润滑剂。这样的试剂用于药学活性物质的用途是本领域众所周知的，并且可以根据诸如以下因素来选择用于包含在剂型中的合适试剂：每单位剂量要包含的纳多洛尔或其它活性剂的量，预期施用途径，剂型的物理形式，以及患者对施用的顺应性的优化。除了任何常规介质、载体或试剂与一种或多种活性成分不相容之外，考虑其在根据本发明的组合物中的用途。补充性活性成分也可以掺入所述组合物中，特别是如下文在联合疗法中所述。对于在本发明中使用的任何化合物的施用，制品应当满足FDA生物制品标准办公室或监管药物的其它监管组织所要求的无菌性、致热原性、一般安全性和纯度标准。

因而，纳多洛尔、纳多洛尔的衍生物或类似物、或者纳多洛尔或纳多洛尔衍生物或类似物的前药可以配制用于口服、持续释放口服、含服、舌下、吸入、吹入或胃肠外施用。

如果在常规或持续释放制品中口服施用纳多洛尔、纳多洛尔的衍生物或类似物、或者纳多洛尔或纳多洛尔衍生物或类似物的前药，则通常在常规单元剂型诸如片剂、胶囊剂、丸剂、糖锭、糯米纸囊剂、粉剂或液体诸如溶液、悬浮液、酊剂或糖浆剂中施用它。口服制剂通常包括通常采用的赋形剂，例如药用级的甘露醇、乳糖、淀粉、硬脂酸镁、糖精钠、纤维素、碳酸镁和其它常规药物赋形剂。在某些限定的实施方案中，口服药物组合物将包含惰性稀释剂和/或可同化的可食用载体，和/或它们可以包封在硬或软壳明胶胶囊中。可替换地，可以将它们压制成片剂。作为另一种选择，特别是对于兽医实践，可以将它们直接掺入食品中。对于口服治疗施用，它们可以与赋形剂掺合或以可摄取片剂、含服片剂、糖衣丸、丸剂、糖锭、胶囊剂、糯米纸囊剂或其它常规剂型的形式使用。

所述片剂、丸剂、糖锭、胶囊剂、糯米纸囊剂或其它常规剂型还可以含有下述：粘合剂，诸如黄蓍胶、阿拉伯胶、玉米淀粉、山梨醇、淀粉粘液、聚乙烯吡咯烷酮或明胶；赋形剂或填充剂诸如磷酸二钙、乳糖、微晶纤维素或糖；崩解剂诸如马铃薯淀粉、交联羧甲基纤维素钠或淀粉羟乙酸钠或海藻酸；润滑剂诸如硬脂酸镁、硬脂酸、滑石粉、聚乙二醇或二氧化硅；甜味剂，诸如蔗糖、乳糖或糖精；润湿剂诸如月桂基硫酸钠；或矫味剂，诸如薄荷、冬青油、橙味剂或樱桃味剂。当剂量单位形式是胶囊剂时，除了上述类型的材料之外，它还可以含有液体载体。各种其它材料可以作为包衣剂存在或以其它方式改变剂量单位的物理形式和性质。例如，可以给片剂、丸剂或胶囊剂涂布紫胶、糖或两者。本发明的药物组合物可以以其本身已知的方式制备，例如，借助于常规混合、溶解、造粒、糖衣丸制造、悬浮、乳化、包囊、包埋或低压冻干过程。

可以如下得到用于口服使用的药物制品：将所述活性化合物与固体赋形剂混合，任选地碾磨所得的混合物，加工颗粒的混合物，在加入合适的助剂(如果需要的话)以后，得到片剂或糖衣丸芯。合适的赋形剂具体地是，填充剂诸如糖，包括乳糖、蔗糖、甘露醇或山梨醇；纤维素制品诸如、例如，玉米淀粉、小麦淀粉、米淀粉、马铃薯淀粉、明胶、黄蓍树胶、甲基纤维素、羟丙基甲基纤维素、羧甲基纤维素钠和/或聚乙烯吡咯烷酮(PVP)。如果需要的话，可以加入崩解剂，诸如交联的聚乙烯吡咯烷酮、琼脂或海藻酸或其盐诸如海藻酸钠。

可以给糖衣丸芯提供合适的包衣。为此目的，可以使用浓缩的糖溶液，其中可以任选地含有阿拉伯胶、滑石、聚乙烯吡咯烷酮、聚羧乙烯凝胶、聚乙二醇和/或二氧化钛、漆溶液和合适的有机溶剂或溶剂混合物。可以将染料或颜料加入片剂或糖衣丸包衣中用于识别或表征活性化合物剂量的不同组合或单一活性化合物的不同剂量。

可以口服使用的药物制剂包括：由明胶制成的推入-配合式胶囊剂以及由明胶和塑化剂(诸如甘油或山梨醇)制成的软密封胶囊剂。所述推入-配合式胶囊剂可以含有与下列成分混合的活性成分：填充剂，例如乳糖；粘合剂，例如淀粉；和/或润滑剂，例如滑石或硬脂酸镁；和任选的稳定剂。在软胶囊剂中，所述活性化合物可以溶解或悬浮在合适的液体(诸如脂肪油、液体石蜡或液体聚乙二醇)中。另外，可以加入稳定剂。

在一个替代方案中，使用持续释放制剂。持续释放制剂是本领域众所周知的。例如，它们可以包括多糖诸如黄原胶和槐豆胶与以下物质的结合使用：载体诸如二甲基硅氧烷，硅酸，甘露聚糖和半乳聚糖的混合物，黄原胶，和微粉化的海藻，如Baichwal的美国专利号6,039,980中所公开的。其它持续释放制剂掺入可生物降解的聚合物，诸如在Saikawa等人的美国专利号6,740,634中公开的乳酸-羟乙酸聚合物。再其它持续释放制剂掺入可膨胀晶格，其包括基于聚乙烯醇和聚乙二醇的聚合物，如Keith的美国专利号4,428,926中所公开的。再其它持续释放制剂是基于Rohm&Haas的Eudragit^TM聚合物，其包括具有季铵基团作为官能团的丙烯酸酯和甲基丙烯酸酯的共聚物以及具有中性酯基团的丙烯酸乙酯-甲基丙烯酸甲酯共聚物。适合用在根据本发明的方法中的特别优选的延长释放组合物是含有纳多洛尔作为其活性成分的延长释放组合物。

口服液体制品可以是例如水性或油性混悬液、溶液、乳剂、糖浆剂、酊剂或酏剂的形式，或者可以呈现为干燥产品用于在使用前用水或其它合适的媒介物重构。这样的液体制品可以含有常规添加剂，诸如助悬剂，例如，山梨醇浆、甲基纤维素、葡萄糖/糖浆、明胶、羟甲基纤维素、羧甲基纤维素、硬脂酸铝凝胶或氢化的可食用脂肪；乳化剂，诸如卵磷脂、脱水山梨糖醇单油酸酯或阿拉伯胶；非水性媒介物(其可以包括食用油)，例如，扁桃仁油、分馏椰子油、油酯、丙二醇或乙醇；或防腐剂，例如，对羟基苯甲酸甲酯、对羟基苯甲酸丙酯或山梨酸。所述制品还可以适当地含有缓冲盐、调味剂、着色剂或甜味剂(例如，甘露醇)。

本领域技术人员认识到，施用途径是吸收速率或效率的重要决定因素。例如，消化道途径(例如，口服、直肠、舌下或含服)通常被认为是最安全的施用途径。药物向循环中的递送是缓慢的，因此消除了药物血液水平的快速升高，这种快速升高潜在地具有不利的急性影响。尽管这被认为是最安全的施用途径，但也存在某些缺点。一个重要的缺点是，吸收速率会变化，如果血液水平的小范围将药物的期望治疗效果与其毒性效应区分开来，即如果所述药物具有相对低的治疗指数，则这是一个重大问题。而且，患者顺应性并不总是得到保证，特别是如果选择直肠施用途径或者如果患者认为口服施用不愉快的话。此外，在口服施用时，在药物到达其靶位点之前可以发生广泛的肝脏代谢。另一种施用途径是胃肠外施用，其绕过消化道。胃肠外施用的一个重要优点是，药物到达其靶位点的时间缩短，从而产生快速应答，这在紧急情况下至关重要。此外，胃肠外施用允许递送更准确的剂量。胃肠外施用还允许药物的更快吸收，这可以导致增加的不良作用。与消化道施用不同，胃肠外施用需要药物的无菌制剂，并且无菌技术是必不可少的。胃肠外施用的最显著缺点是它不适合用于不溶性物质。除了消化道和胃肠外施用途径之外，局部和吸入施用也是有用的。药物的局部施用可用于治疗局部病症；但是，通常很少存在全身吸收。药物的吸入会提供向循环中的快速进入，并且是气态和挥发性药物或者可蒸发或雾化的药物的常见施用途径。当药物的靶标存在于肺系统中(根据本发明的组合物和方法就是如此)时，这也是期望的施用途径。

纳多洛尔的一种特别优选的施用途径是通过吸入。通常，通过吸入施用纳多洛尔包括：通过使用加压计量剂量吸入器(pMDI)、干燥粉末吸入器或喷雾器来施用所施用的剂量；通过吸入施用所述剂量可能会或可能不会产生在与口服给药相关的范围内纳多洛尔的可测量的血液水平。通常，吸入的剂量将在最小有效口服剂量的约1％至约10％的范围内通过pMDI递送。

加压计量剂量吸入器由三个主要部件组成；通过深冲由铝或不锈钢制成的罐，其中装有制剂；计量阀，其允许在每次致动时分配计量的量的制剂；和致动器(或吹口)，其允许患者操作该装置并将气溶胶引导到患者的肺中。所述制剂本身由药物、液化气体推进剂和(在许多情况下)稳定赋形剂组成。所述致动器含有配套的排出喷嘴，并且通常包括防尘帽以阻止污染。为了使用吸入器，患者按下罐的顶部，用其拇指支撑致动器的下部。装置的致动会释放单次计量剂量的制剂，其含有溶解或悬浮在推进剂中的药物。挥发性推进剂分解成微滴，随后这些微滴快速蒸发，从而产生由微米大小的药物颗粒组成的气溶胶，其然后被吸入。加压计量剂量吸入器公开在Bonelli等人的美国专利号10,806,701中。

干燥粉末吸入器通常将药物保存在用于手动装载的胶囊中或以专有形式保存在吸入器内。一旦吸入器被装载或致动，操作者将吸入器的吹口插入其嘴中并进行急速深吸，从而确保药物到达肺的下部，屏住其呼吸5-10秒。某些粉末吸入器使用乳糖作为赋形剂。干燥粉末吸入器公开在Bilgic的美国专利号10,842,952中。

喷雾器使用氧气、压缩空气或超声能量将溶液或悬浮液分解成小气溶胶微滴，其从装置的吹口吸入。气溶胶是气体和固体或液体颗粒的混合物。最常见的喷雾器是喷射喷雾器，有时被称为雾化器。其它形式的喷雾器是软雾吸入器、超声波喷雾器和振动网喷雾器。喷雾器公开在Maeda等人的美国专利号10,799,902、Alizoti等人的美国专利号10,786,638和Eicher等人的美国专利号10,716,907中。

当化合物被配制用于胃肠外施用(例如，配制用于通过静脉内、肌肉内、皮下、病灶内或腹膜内途径或本领域已知的其它途径注射)时，许多选项是可能的。含有有效量的纳多洛尔、纳多洛尔的衍生物或类似物、或者纳多洛尔或纳多洛尔衍生物或类似物的前药作为活性成分的水性组合物的制备将是本领域技术人员已知的。通常，这样的组合物可以制备为注射剂，作为液体溶液和/或混悬液。还可以制备固体形式，其适合用于在注射前通过添加液体来制备溶液和/或混悬液。所述制品也可以被乳化。适合用用于注射使用的药物形式包括无菌水性溶液和/或分散体；包括芝麻油、花生油、合成的脂肪酸酯诸如油酸乙酯、甘油三酯和/或丙二醇水溶液的制剂；和/或用于临时制备无菌可注射溶液和/或分散体的无菌粉末。水性注射混悬液可以含有增加混悬液粘度的物质，例如羧甲基纤维素钠、山梨醇或葡聚糖。任选地，所述混悬液也可以含有合适的稳定剂或者增加所述化合物溶解度的试剂，以便制备高度浓缩的溶液。在所有情况下，该形式必须是无菌的和/或必须是流体，其程度使得溶液将容易地穿过注射器和合适直径的针头进行施用。它在制造和储存的条件下必须是稳定的，并且必须保存免于微生物(诸如细菌或真菌)的污染作用。

可以在与表面活性剂(诸如羟丙基纤维素)适当地混合的水中制备作为游离碱或药理学上可接受的盐的活性化合物的溶液。还可以在甘油、液体聚乙二醇和/或其混合物中和/或在油中制备分散体。在储存和使用的普通条件下，这些制品含有防腐剂以阻止微生物的生长。合适的非致敏性和非变应原性防腐剂是本领域众所周知的。

所述载体还可以是溶剂和/或分散介质，其含有例如水、乙醇、多元醇(例如，甘油、丙二醇和/或液体聚乙二醇和/或类似物)、其合适混合物和/或植物油。例如，通过使用包衣诸如卵磷脂，通过维持合适的颗粒尺寸(在分散体的情况下)，和/或通过使用表面活性剂，可以维持适当的流动性。通过包含各种抗细菌剂和/或抗真菌剂，例如，对羟基苯甲酸酯、氯丁醇、苯酚、山梨酸或硫柳汞，可以防止微生物的作用。在许多情况下，包括等渗剂(例如糖或氯化钠)将是优选的。在许多情况下，优选的是，在生理上相容的缓冲剂诸如Hanks氏溶液、林格氏溶液或生理盐水缓冲液中制备溶液。通过在组合物中使用延迟吸收剂例如单硬脂酸铝和/或明胶，可以实现可注射组合物的延长吸收。

如下制备无菌可注射溶液：将所需量的活性化合物与上面列举的各种其它成分(根据需要)一起掺入适当的溶剂中，随后灭菌。通常通过过滤进行灭菌。通常，如下制备分散体：将各种灭菌的活性成分掺入含有基本分散介质和/或其它所需成分的无菌媒介物中。就用于制备无菌可注射溶液的无菌粉末而言，优选的制备方法是真空干燥和/或冷冻干燥技术，其从其先前无菌过滤的溶液产生活性成分加上任何另外所需成分的粉末。还考虑制备用于直接注射的更高浓度的或高度浓缩的溶液，其中考虑使用二甲亚砜(DMSO)作为溶剂以导致极快的渗透，从而将高浓度的活性剂递送至小区域(如果需要的话)。

对于在水溶液中的胃肠外施用，例如，如果必要的话应当适当缓冲该溶液和/或首先用足够的盐水、葡萄糖或其它张度剂使液体稀释剂等渗。这些特定的水溶液特别适合用于静脉内、肌肉内、皮下或腹膜内施用。在这方面，本领域技术人员考虑到本公开内容会知道可以采用的无菌水性介质。例如，可以将一个剂量溶解在1mL的等渗NaCl溶液中，并且加入1000mL皮下输液流体中或者注射到所提议的输注部位中(参见，例如，“Remington'sPharmaceutical Sciences”(第15版)，第1035-1038页，1570-1580)。剂量上的一些变化必然随所治疗的受试者的情况而出现。负责施用的人在每种情况下将确定各个受试者的适当剂量。根据本发明的化合物和组合物还可以配制用于通过快速推注或连续输注进行胃肠外施用，并且可以以单位剂量形式存在，例如作为安瓿、管形瓶、小体积输注剂或预装注射器，或者在添加防腐剂的多次剂量容器中。

根据本发明的组合物的另一种施用途径是使用剂型诸如鼻溶液、鼻喷雾剂、气雾剂或吸入剂经鼻施用。鼻溶液通常是被设计成以滴剂或喷雾剂施用至鼻道的水溶液。鼻溶液通常被制备成在许多方面与鼻分泌物相似，从而维持正常的纤毛作用。因此，鼻水溶液通常是等渗的和/或轻微缓冲的，以维持约5.5至约6.5的pH。此外，如果需要的话，在制剂中可以包含与在眼科制品中使用的那些类似的抗微生物防腐剂和/或适当的药物稳定剂。各种市售的鼻制品是已知的并且可以包括例如抗生素或抗组胺药。使用合适的推进剂，诸如二氯二氟甲烷、三氯氟甲烷、二氯四氟乙烷、1,1,1,2,3,3,3-七氟丙烷、1,1,1,2-四氟乙烷、二氧化碳或其它合适的气体，可以将喷雾组合物配制为例如水性溶液或混悬液或从加压包递送的气雾剂。

适合用于其它施用模式的另外制剂包括阴道栓剂和/或子宫托。还可以使用直肠子宫托或栓剂。栓剂是各种重量或形状的固体剂型，通常含药，用于插入直肠、阴道或尿道中。在插入后，栓剂软化、融化和/或溶解到腔液中。一般而言，对于栓剂，常规粘合剂或载体可以包括聚亚烷基二醇、可可脂或甘油三酯。

可以可替换地使用其它剂型，包括、但不限于脂质体制剂、软膏剂、乳膏剂、洗剂、粉剂或乳膏剂。例如，可以用水性或油性基质配制软膏剂和乳膏剂，并添加合适的胶凝剂和/或溶剂。因此，这样的基质可以例如包括水和/或油诸如液体石蜡或植物油诸如花生油或蓖麻油或溶剂诸如聚乙二醇。可以使用的增稠剂包括软石蜡、硬脂酸铝、鲸蜡硬脂醇、聚乙二醇、微晶蜡和蜂蜡。可以用水性或油性基质配制洗剂，并且通常还将含有一种或多种乳化剂、稳定剂、分散剂、助悬剂或增稠剂。

借助于任何合适的粉末基质例如，滑石粉、乳糖或淀粉，可以形成外用粉末。

由于反向激动剂和与其相互作用的β-肾上腺素能受体之间相互作用的性质，随着受影响组织中的受体密度响应于反向激动剂的施用而增加，治疗应答随着时间的推移而逐渐发展。因此，在一个特别优选的替代方案中，在施用开始时滴定剂量，并逐渐增加。换而言之，将β-肾上腺素能反向激动剂，特别是纳多洛尔、纳多洛尔的衍生物或类似物，或者纳多洛尔或纳多洛尔衍生物或类似物的前药，以一系列分级剂量随时间施用，从最低剂量开始并增加至最高剂量。当达到最高剂量时，继续以该剂量(维持剂量)施用β-肾上腺素能反向激动剂。例如，对于口服施用的纳多洛尔，治疗可以从1mg剂量开始，然后逐渐增加到3mg、5mg、10mg、15mg，并然后达到更高的维持剂量诸如25mg、30mg、50mg、70mg、100mg或认为必要的更高剂量，取决于要治疗的特定病症、严重程度以及病症对治疗的应答。在本发明的上下文中，“要治疗的特定病症”通常是慢性阻塞性肺病，尽管类似的剂量方案也可以用于治疗如上所述的其它疾病和病症。

因此，本发明的另一个方面是泡罩包，其包括纳多洛尔、纳多洛尔的衍生物或类似物、或者纳多洛尔或纳多洛尔衍生物或类似物的前药的从最低初始剂量到最高维持剂量的剂量范围。一般而言，这样的泡罩包包含：

(1)下基板；

(2)中间剂量保持器，其成形以产生多个空腔并且放置在下基板上方，所述空腔成形以保持纳多洛尔、纳多洛尔的衍生物或类似物、或者纳多洛尔或纳多洛尔衍生物或类似物的前药的剂型；

(3)放置在中间剂量保持器上方的上基板，其具有多个孔，每个孔被定位成适应相应的空腔；其中所述剂型具有从最低剂量开始并渐进到最高剂量的分级剂量；和

(4)放置在空腔中的纳多洛尔、纳多洛尔的衍生物或类似物、或者纳多洛尔或纳多洛尔衍生物或类似物的前药的剂型。

合适的泡罩包10如图1所示，并包括：下基板12，其通常为箔；中间剂量保持器14，其成形以产生多个空腔16、18、20和22，它们成形以保持放置在下基板上方的丸剂、胶囊剂或其它剂型；和上基板24，其放置在具有孔26、28、30和32的中间剂量保持器14上方，每个孔被定位以适应空腔16、18、20和22。这里仅示出了四个空腔和孔，但是根据本发明的泡罩包10可以容纳更大数目的剂型，诸如10、20或30个。通常，下基板12、上基板24或两者在其上面都具有印刷的说明书，以识别每个丸剂、胶囊剂或其它剂型的剂量，并为患者提供关于在施用丸剂、胶囊剂或其它剂型时要遵循的顺序的指导。中间剂量保持器14通常由透明塑料或其它透明材料制成，使得可以看到剂型。所述剂型可以是分级剂量，从最低剂量开始并增加至最高剂量，其通常是维持剂量，如上所述。可替换地，所述剂型可以是至少两种剂量：(1)维持剂量，其是一系列分级剂量中的最高剂量；和(2)至少一个备用恢复剂量(例如，将在错过剂量时使用)或将在特定条件下施用的较低剂量。所述特定条件可以是，例如，施用抗生素，诸如红霉素或新霉素，其中通常需要较低的剂量，或者当肾或肝功能障碍增加药物的半衰期时，这需要较低的剂量来达到当肾和肝功能均正常时的相同血清浓度。

在设定纳多洛尔、纳多洛尔的衍生物或类似物、或者纳多洛尔衍生物或类似物的前药的合适剂量时必须考虑各种因素。这些因素包括患者是否正在服用其它药物，所述其它药物可以改变纳多洛尔、纳多洛尔的衍生物或类似物、或者纳多洛尔衍生物或类似物的前药的药代动力学，从而造成它们更快速地或更缓慢地降解。这些药物可以例如影响肝或肾功能，或者可以诱导一种或多种细胞色素P450酶的合成，所述酶可以代谢纳多洛尔、纳多洛尔的衍生物或类似物、或者纳多洛尔衍生物或类似物的前药。具体地，如果患者正在服用抗生素红霉素或新霉素，通常需要减少维持剂量。因此，本发明的另一个方面是一种泡罩包，其具有备用恢复剂量和较低剂量，用于当患者服用这些抗生素时使用。在另一个替代方案中，当患者正在服用诱导一种或多种细胞色素P450酶(其可以代谢纳多洛尔、纳多洛尔的衍生物或类似物、或者纳多洛尔衍生物或类似物的前药)的合成的药物时，根据本发明的泡罩包可以包括一种或多种较高剂量以供临时使用。

用在根据本发明的方法和组合物中的β-肾上腺素能反向激动剂(具体地，纳多洛尔、或纳多洛尔的衍生物或类似物、或者纳多洛尔衍生物或类似物的前药)的毒性和治疗效果，可以通过标准药物程序在细胞培养物或实验动物中确定，例如，用于确定LD₅₀(对群体的50％致死的剂量)和ED₅₀(在群体的50％中治疗上有效的剂量)。毒性和疗效之间的剂量比是治疗指数，且它可以表示为比率LD₅₀/ED₅₀；表现出大治疗指数的化合物是优选的。从这些细胞培养试验和动物研究获得的数据，可以用于构成用于人的剂量范围。这样的化合物的剂量优选地在包括ED₅₀又几乎没有或没有毒性的循环浓度范围内。根据所用剂型和所用施用途径，剂量可以在此范围内变化。

对于在本发明的方法中使用的任何化合物，可以从细胞培养测定初步估计治疗有效剂量。例如，可以在动物模型中配制剂量以达到包括在细胞培养物中确定的IC₅₀的循环血浆浓度范围(即，当考虑慢性效应时，实现受体信号传递的半数最大改善的试验化合物的浓度)。这样的信息可以用来更准确地确定在人类中有用的剂量。例如，通过HPLC或本领域已知的其它方法，诸如气相色谱法，可以测量血浆中的水平。

精确的制剂、施用途径和剂量可以由个别医师考虑到患者的状况来选择(参见，例如，Fingl等人,The Pharmacological Basis of Therapeutics,1975，第1章第1页)。应当指出，主治医师会知道由于毒性或由于器官功能障碍如何以及何时终止、中断或调整施用。相反，如果临床应答不充分(排除毒性)，主治医师也会知道将治疗调整至更高水平。在感兴趣的障碍的管理中施用的剂量的大小将随以下因素而变化：要治疗的病症的严重程度，诸如，但不限于慢性阻塞性肺病，和施用途径。例如，通过标准预后评价方法，可以部分地评价病症的严重程度。此外，所述剂量以及可能的剂量频率也将根据个体患者的年龄、体重和应答而变化。与上述讨论的程序相当的程序可以用在兽医学中。

根据所治疗的具体病症，可以配制这样的药剂并全身性地或局部地施用。通常，施用是全身性的。配制和施用的技术可以参见Remington’s Pharmaceutical Sciences，第18版，Mack Publishing Co.,Easton,Pa.(1990)。合适的途径可以包括口服、直肠、透皮、阴道、透粘膜或肠施用；胃肠外递送，包括肌肉内、皮下或骨髓内注射、以及鞘内、直接心室内、静脉内、腹膜内、鼻内或眼内注射，仅举几个例子。通常，为了施用纳多洛尔、纳多洛尔的衍生物或类似物、或者纳多洛尔或纳多洛尔衍生物或类似物的前药来治疗病症(诸如，但不限于慢性阻塞性肺病)，口服施用是优选的。

对于注射，本发明的药剂可以配制在水溶液中。对于透粘膜施用，在所述制剂中使用适合要渗透的屏障的渗透剂。这样的渗透剂是本领域内公知的。

使用药学上可接受的载体将本文公开的用于实施本发明的化合物配制成适合全身施用的剂量是在本发明的范围内。通过适当选择载体和合适的制造实践，本发明的组合物、特别是被配制为溶液的那些可以胃肠外地施用，诸如通过静脉内注射。使用本领域众所周知的药学上可接受的载体，可以容易地将所述化合物配制成适合用于口服施用的剂量。这样的载体使得可以将本发明的化合物配制为片剂、丸剂、胶囊剂、液体、凝胶、糖浆剂、浆剂、混悬剂等，以供要治疗的患者口服摄入。

适合用在本发明中的药物组合物包括这样的组合物：其中含有有效量的活性成分以实现其预期目的。有效量的确定完全是在本领域技术人员的能力范围内，特别是根据本文中提供的详细公开内容。除了活性成分外，这些药物组合物还可以含有合适的药学上可接受的载体，包含有利于将活性化合物加工成药用制品的赋形剂和助剂。被配制用于口服施用的制品可以是片剂、糖衣丸、胶囊剂或溶液的形式。本发明的药物组合物可以以其本身已知的方式来制备，例如，借助于常规混合、溶解、造粒、糖衣丸制造、悬浮、乳化、包囊、包埋或低压冻干过程。

用于胃肠外施用的药物制剂包括活性水溶性形式的活性化合物的水溶液。另外，可以将活性化合物的混悬液制成适当的油性注射混悬液。合适的亲脂溶剂或媒介物包括脂肪油诸如芝麻油，或合成的脂肪酸酯，诸如油酸乙酯或甘油三酯。水性注射混悬液可以含有增加混悬液粘度的物质，例如羧甲基纤维素钠、山梨醇或葡聚糖。任选地，所述混悬液也可以含有合适的稳定剂或者增加所述化合物溶解度的试剂，以便制备高度浓缩的溶液。

可以如下得到用于口服使用的药物制品：将所述活性化合物与固体赋形剂混合，任选地碾磨所得的混合物，加工颗粒的混合物，在加入合适的助剂(如果需要的话)以后，得到片剂或糖衣丸芯。合适的赋形剂具体地是，填充剂诸如糖，包括乳糖、蔗糖、甘露醇或山梨醇；纤维素制品诸如、例如，玉米淀粉、小麦淀粉、米淀粉、马铃薯淀粉、明胶、黄蓍树胶、甲基纤维素、羟丙基甲基纤维素、羧甲基纤维素钠和/或聚乙烯吡咯烷酮(PVP)。如果需要的话，可以加入崩解剂，例如交联聚乙烯吡咯烷酮、琼脂或海藻酸或其盐例如海藻酸钠。

可以给糖衣丸芯提供合适的包衣。为此目的，可以使用浓缩的糖溶液，其中可以任选地含有阿拉伯胶、滑石、聚乙烯吡咯烷酮、聚羧乙烯凝胶、聚乙二醇和/或二氧化钛、漆溶液和合适的有机溶剂或溶剂混合物。可以向片剂或糖衣丸包衣中加入染料或色素，用于鉴别或者表征活性化合物剂量的不同组合。

可以口服使用的药物制剂包括：由明胶制成的推入-配合式胶囊剂以及由明胶和塑化剂(诸如甘油或山梨醇)制成的软密封胶囊剂。所述推入-配合式胶囊剂可以含有与下列成分混合的活性成分：填充剂，例如乳糖；粘合剂，例如淀粉；和/或润滑剂，例如滑石或硬脂酸镁；和任选的稳定剂。在软胶囊剂中，所述活性化合物可以溶解或悬浮在合适的液体(诸如脂肪油、液体石蜡或液体聚乙二醇)中。另外，可以加入稳定剂。

通常，在根据本发明的方法中，以每日剂量或每日多次施用反向激动剂，具体地，纳多洛尔、纳多洛尔的衍生物或类似物、或纳多洛尔的前药、或纳多洛尔的衍生物或前药，取决于反向激动剂的半衰期。可替换地，可以不太频繁地施用反向激动剂，诸如每隔一天、每三天、每四天、每周等。药代动力学领域的技术人员将认识到理解与特定药物的给药相关的药物的生物利用度和半衰期的重要性。众所周知，如果剂量之间的时间间隔小于其半衰期的四倍，药物就会在体内蓄积，在这种情况下，药物的体内总储存量呈指数增加至平台或稳态浓度。药物在平台期的平均体内总储存量是剂量、剂量间隔、药物的生物利用度和药物的消除速率的函数。因此，本领域普通技术人员能够确定给定药物的剂量和剂量间隔以实现期望的效果。

本发明的另一个实施方案是掺入多种药物或联合疗法的方法和组合物，其用于治疗肺气道疾病，具体地，用于治疗慢性阻塞性肺病。患有肺气道疾病的患者经常会施用多种药物，它们联合起作用以控制其症状。

尽管申请人无意受该理论束缚，但据信，在许多情况下，与反向激动剂、特别是纳多洛尔、纳多洛尔衍生物或类似物、或纳多洛尔或纳多洛尔衍生物或类似物的前药、以及与激动剂一起共同治疗优于单独使用激动剂的治疗。这些结果表明，与反向激动剂一起共同治疗可能增加激动剂的治疗效果并阻止相关GPCR的脱敏。这种形式的联合疗法的一种原理可能在于疾病或病症的急性发作或恶化的治疗。即使使用反向激动剂的治疗降低了这样的急性发作或恶化的频率，仍然需要治疗急性发作或恶化。这可以通过反向激动剂和激动剂的共同施用来完成。

在一种特别合乎需要的组合中，将β-肾上腺素能反向激动剂与β₂-选择性的肾上腺素能激动剂联合施用以治疗肺气道疾病。β₂-选择性的肾上腺素能激动剂通常选自abediterol、阿福特罗、班布特罗、比托特罗、卡莫特罗、克仑特罗、氯丙那林、多巴酚丁胺、非诺特罗、福莫特罗、indicaterol、异丙肾上腺素、异克舒令、左旋沙丁胺醇、马布特罗、奥西那林、奥达特罗、吡布特罗、丙卡特罗、利托君、沙丁胺醇、沙美特罗、特布他林、维兰特罗和齐帕特罗、以及它们的盐、溶剂化物和前药。这些药剂就其作用持续时间而言各不相同，通常分类为短效、长效或超长效药剂。用于与纳多洛尔联合使用的特别优选的β₂-选择性的肾上腺素能激动剂包括异丙肾上腺素、沙丁胺醇和沙美特罗。联合疗法的原理得到数据的支持，数据显示使用反向激动剂的治疗会造成受体数目的上调。在这种情况下，在病理应答以信号传递缺陷为特征的那些情况下，与激动剂的共同治疗预计会增加细胞信号传递并恢复正常功能。沿着这些思路，反向激动剂对气道阻力的抑制性应答将通过激动剂的共同施用在量级上增强。由于反向激动剂的存在，这些激动剂的效能可能降低，但应答的总量级会增加。这将阻止经常与长期激动剂治疗相关的脱敏。

当使用联合疗法时，根据上述原理可以确定组合中每个成员的剂量。但是，在许多情况下，固定剂量组合是合乎需要的并且可以使用。在固定剂量组合中，β-肾上腺素能反向激动剂的剂量如上所述，而β₂-选择性的肾上腺素能激动剂的所需剂量可以如上所述确定。组合中每个成员的剂量的确定或固定剂量组合的使用也适用于如下所述的β-肾上腺素能反向激动剂和其它治疗剂的其它组合。

在另一种合乎需要的组合中，将β-肾上腺素能反向激动剂与皮质类固醇一起施用。根据本发明特别优选使用的皮质类固醇包括、但是不一定限于倍氯米松、布地奈德(budenoside)、环索奈德、氟尼缩松、氟替卡松、甲泼尼龙、泼尼松龙、泼尼松、地塞米松和曲安西龙、以及它们的盐、溶剂化物和前药。

在又另一种合乎需要的组合中，将β-肾上腺素能反向激动剂与抗胆碱能药一起施用。根据本发明特别优选使用的抗胆碱能药包括、但是不一定限于毒蕈碱受体拮抗剂，特别是季铵毒蕈碱受体拮抗剂诸如异丙托溴铵、噻托溴铵、氧托溴铵、阿地溴铵、格隆溴铵、乌美溴铵、以及它们的盐、溶剂化物和前药。

在又另一种合乎需要的组合中，将β-肾上腺素能反向激动剂与黄嘌呤化合物一起施用。根据本发明特别优选使用的黄嘌呤化合物包括、但是不一定限于茶碱、延长释放茶碱、氨茶碱、可可碱、恩丙茶碱、二羟丙茶碱、异丁茶碱、胆茶碱、阿比茶碱、阿罗茶碱、巴米茶碱、安布茶碱、8-氯茶碱、多索茶碱、呋拉茶碱、IBMX(1-甲基-3-(2-甲基丙基)-7H-嘌呤-2,6-二酮)、MRS-1706(N-(4-乙酰基苯基)-2-[4-(2,3,6,7-四氢-2,6-二氧代-1,3-二丙基-1H-嘌呤-8-基)苯氧基]乙酰胺)、羟丙茶碱和咖啡因、以及它们的盐、溶剂化物和前药。

在又另一种合乎需要的组合中，将β-肾上腺素能反向激动剂与抗-IgE抗体一起施用。如本文中使用的，除非进一步定义或限制，否则术语“抗体”涵盖多克隆和单克隆抗体、以及遗传工程改造抗体诸如具有适当结合特异性的嵌合的、人源化的或全人的抗体。如本文中使用的，除非进一步定义，否则术语“抗体”也涵盖抗体片段诸如sFv、Fv、Fab、Fab′和F(ab)′₂片段。在许多情况下，优选使用单克隆抗体。在某些情况下，抗体可以包括包含抗体的抗原结合位点的融合蛋白，以及包含抗原识别位点(即，抗原结合位点)的任何其它修饰的免疫球蛋白分子，只要所述抗体表现出期望的生物活性。抗体可以是五种主要免疫球蛋白类别中的任一种：IgA、IgD、IgE、IgG和IgM或其亚类(同种型)(例如，IgG1、IgG2、IgG3、IgG4、IgA1和IgA2)，基于它们的重链恒定结构域(分别被称为α、δ、ε、γ和μ)的同一性。不同类别的免疫球蛋白具有不同的且众所周知的亚基结构和三维构型。抗体可以是裸露的或与其它分子缀合，包括、但不限于毒素、治疗剂、抗代谢药或放射性同位素；在某些情况下，缀合通过连接基或通过非共价相互作用(诸如抗生物素蛋白-生物素或抗生蛋白链菌素-生物素连接)发生。通常，所述抗-IgE抗体是单克隆抗体或从单克隆抗体衍生出的基因工程抗体。优选地，所述抗-IgE抗体是人源化的。特别优选的人源化的抗-IgE抗体是特异性地结合人IgE的IgG1κ单克隆抗体并且在奥马珠单抗的名称下销售。

在又另一种合乎需要的组合中，将β-肾上腺素能反向激动剂与白三烯拮抗剂一起施用。根据本发明特别优选使用的白三烯拮抗剂包括、但是不一定限于孟鲁司特、普仑司特和扎鲁司特、以及它们的盐、溶剂化物和前药。

在又另一种合乎需要的组合中，将β-肾上腺素能反向激动剂与磷酸二酯酶IV抑制剂一起施用。根据本发明特别优选的磷酸二酯酶IV抑制剂包括、但是不一定限于罗氟司特、西洛司特、吡拉米司特和异丁司特、以及它们的盐、溶剂化物和前药。磷酸二酯酶IV是肺部的主要异形体，并且该酶的抑制剂正在考虑用于治疗哮喘和COPD。

在又另一种合乎需要的组合中，将β-肾上腺素能反向激动剂与5-脂氧合酶抑制剂一起施用。根据本发明特别优选的5-脂氧合酶抑制剂包括、但不限于齐留通和芬留顿、以及它们的盐、溶剂化物和前药。

在又另一种合乎需要的组合中，将β-肾上腺素能反向激动剂与肥大细胞稳定剂一起施用。根据本发明特别优选的肥大细胞稳定剂包括、但不限于氮卓斯汀、色甘酸、酮替芬、洛度沙胺、奈多罗米、奥洛他定和吡嘧司特、以及它们的盐、溶剂化物和前药。

在又另一种合乎需要的组合中，将β-肾上腺素能反向激动剂与生物药一起施用(B.L.Walker和R.Leigh，“Use of Biologicals as Immunotherapy in Asthma andRelated Diseases,”Expert Rev.Clin.Immunol.4:753-756(2008))。通常，所述至少一种生物药选自抗-IL4抗体、抗-IL13抗体、IL4和IL13的抑制剂、抗-IL5抗体和抗-IL8抗体。抗-IL4抗体包括、但不限于人源化的抗-IL4单克隆抗体pasolizumab。抗-IL13抗体包括、但不限于人抗-IL13单克隆抗体CAT-354。IL4和IL13的抑制剂是单克隆抗体度匹鲁单抗，其为与白介素-4受体的α亚基(IL4Rα)结合的单克隆抗体，其调节IL4和IL13途径的信号传递；因此，它充当受体拮抗剂(A.L.Kau和P.E.Korenblat，“Anti-Interleukin 4and 13forAsthma Treatment in the Era of Endotypes,”Curr.Opin.Allergy Clin.Immunol.14:570-575(2014))。抗-IL5抗体包括、但不限于单克隆抗体贝那利珠单抗(benralizumab)、美泊利单抗和瑞替珠单抗(reslizumab)。抗-IL8抗体包括、但不限于人单克隆抗体BMS-986253。

如上所述，本领域普通技术人员可以选择β-肾上腺素能反向激动剂和另外治疗剂的施用途径以优化治疗效率。但是，在一个优选的替代方案中，通过吸入施用β-肾上腺素能反向激动剂和另外的治疗剂。在另一个优选的替代方案中，口服施用β-肾上腺素能反向激动剂，而通过吸入施用另外的治疗剂。通常优选通过吸入施用另外的治疗剂，因为这些另外的治疗剂中的某些可能具有毒性。但是，其它途径是可能的。

气溶胶疗法允许实现几乎理想的收益风险比，因为非常小剂量的吸入药物会提供最佳的治疗，并具有最小的不良作用。适合用在根据本发明的方法中的多种另外的治疗剂可在气溶胶制剂中得到，包括β₂-肾上腺素能激动剂、皮质类固醇和抗胆碱能药。但是，通过气雾化施用的药物的治疗效率不仅取决于药物本身的药理学性质，而且取决于递送装置的特征。递送装置的特征影响在肺中沉积的药物的量和在气道中的药物分布模式。

气溶胶是细颗粒的空气悬浮液。所述颗粒可以是固体或液体。气溶胶颗粒是非均匀分散的(即颗粒具有一定的尺寸范围)，并且气溶胶颗粒尺寸分布最好通过对数正态分布来描述。颗粒倾向于沉降(沉积)、相互粘附(凝结)、以及粘附在管道和粘膜等结构上(沉积)。由气溶胶递送的颗粒可以基于其空气动力学行为方便地进行表征。一种参数是质量中位数空气动力学直径(MMAD)。根据定义，具有1μm的MMAD的颗粒分布具有与单位密度和1μm直径的微滴相同的平均沉降速率。

气溶胶颗粒的尺寸以及影响呼吸系统的变量都会影响吸入的气溶胶在气道中的沉积。在一个方面，大于10μm直径的颗粒不可能沉积在肺中。但是，小于0.5μm的颗粒可能到达肺泡或可能被呼出。因此，具有在1μm至5μm之间的直径的颗粒最有效地沉积在下呼吸道中。这些尺寸的颗粒对于递送疾病和病症(诸如慢性阻塞性肺病)的治疗剂而言是最有效的。

在可吸入微滴(即直径小于5μm的微滴)内所含的气溶胶质量的百分比取决于所使用的吸入装置。缓慢的、稳定的吸入会增加穿透肺的周边部分的颗粒的数目。随着吸入量增加，气溶胶可以更外围地穿透到支气管树中。在吸入完成后，屏住呼吸一段时间，使已经穿透到肺周围的那些颗粒通过重力沉降到气道中。增加的吸气流速(通常在急性哮喘患者中观察到)会导致增加的吸入药物损失。发生这种情况是因为气溶胶颗粒撞击上气道和前几个支气管分支的分叉处。与肺气道疾病相关的其它因素也可能改变气溶胶沉积。气道阻塞和肺实质中的变化经常与患有哮喘或影响呼吸道的其它疾病或病症(诸如慢性阻塞性肺病)的患者的外周气道中的肺沉积相关。

在气溶胶施用中，鼻子在颗粒沉积在肺中之前有效地捕获颗粒；因此，用口呼吸气雾化的颗粒是优选的。气雾化的颗粒从许多部位丢失。通常，到达小气道的雾化剂量的量≤15％。在许多情况下，大约90％的吸入剂量被吞咽，并然后从胃肠道吸收。到达气道的小部分剂量也被吸收到血流中。因此，吞咽的剂量部分以与口服制剂相同的方式被吸收和代谢，而到达气道的剂量部分被吸收到血流中并以与静脉内剂量相同的方式代谢。

当局部施用药物(通过气溶胶递送到肺)时，期望的治疗效果取决于局部组织浓度，这可能与血浆药物浓度没有直接关系。如果施用足够大剂量的任何药物，任何吸入的β₂-激动剂或皮质类固醇都可以容易地表现出全身活性。这有几个含义。首先，对于要吸入的药物的选择，局部药物必须组合在靶器官内的高内在活性和全身吸收的药物的快速灭活。其次，具有低口服生物利用度(无论是由于胃肠道吸收差还是肝脏首过代谢高)的药物会预期减少的全身性不良作用。由于大多数吸入的药物以低剂量施用且具有低口服生物利用度，因此这些药物的血浆浓度远低于口服施用后的浓度。此外，还应考虑影响肺吸收的因素。最近证实，健康的吸烟者比健康的不吸烟者更快地通过肺吸收特布他林。这可能影响药物的起效。还已经发现，在10名囊性纤维化患者中吸入的沙丁胺醇的生物利用度大于在健康成人中。这种生物利用度差异的一项提议的机制是，在囊性纤维化患者中的慢性患病的气管支气管树导致该组织中沙丁胺醇的更高的渗透性。

最后，吸入药物的绝对肺生物利用度难以评估，因为血液浓度较低，并且应区分肺和口服吸收，以便尽可能准确地确定肺生物利用度。木炭可以用于吸附吸入的特布他林的吞咽部分，以区分药物的肺吸收。近年来，证实了在吸入沙丁胺醇后30分钟内的尿液收集代表了递送至肺的药物量。该技术可适用于其它吸入药物的生物利用度的确定。用于确定吸入药物的生物利用度的其它技术也是本领域已知的；这些包括使用FEV1测量的药效动力学方法、使用放射性地标记的制剂的肺沉积研究或主要使用尿排泄测量的药代动力学研究。

治疗性气溶胶通常通过喷射喷雾器内液体的雾化或通过静置液体池的振动(超声雾化)而产生。也可以施用预制气溶胶。后者的例子包括MDI和干燥粉末装置。无论使用何种递送装置，都应教会患者正确使用它。

所有喷射喷雾器都通过类似的操作原理工作，以熟悉的香水雾化器为代表。液体被放置在密闭容器的底部，并通过来自压缩机或穿过该装置的压缩气体圆筒的空气射流来产生气溶胶。超声喷雾器通过以约1mHz的频率振动传感器上方的液体来产生气溶胶。这会产生颗粒云，其被气流从装置中带给患者。喷雾器可以产生不同量、大小和颗粒(panicles)分布的气溶胶，取决于喷雾器的设计及其操作方式。应当指出，并非所有喷雾器都具有提供最佳效力所需的规格(MMAD、流量、输出)。最近的一项研究对比了健康志愿者中来自4个喷雾器的肺沉积，并表明，中位肺气溶胶沉积(表示为最初加载到喷雾器中的剂量的百分比)在从2％到19％的范围内。雾化的气溶胶对于5岁以下儿童以及在重度哮喘或慢性阻塞性肺病(其中呼吸功能不全可能损害从MDI或干燥粉末吸入器的吸入)的治疗中是特别有用的。为了使不良作用最小化，应当控制雾化溶液的pH和同渗浓度。

由于其便利性和有效性，计量剂量吸入器(MDI)可能是用于向门诊患者递送吸入药物的最广泛使用的治疗气雾剂。目前使用的大多数MDI含有药物在推进剂中的悬浮液。MDI有2个主要组件：(i)罐，即含有推进剂、活性药物的封闭塑料或金属圆筒以及计量室；和(ii)致动器，即容纳所述罐并将释放的气溶胶引导至患者的气道的模制塑料容器。

选择推进剂混合物以实现最佳药物递送所需的蒸气压和喷雾特征。以前使用氯氟烃，但由于环境担忧，现在采用非氯化推进剂。精细粉碎的药物颗粒(通常小于1μm)被悬浮在加压(液化)推进剂中。为了防止药物凝结，通常添加表面活性剂诸如脱水山梨糖醇油酸酯、卵磷脂或油酸；其它表面活性剂是本领域已知的。计量室通常含有25至100μL。当罐被压入致动器时，计量室的内容物被释放。几乎同时，推进剂开始蒸发，排出的液体分解成颗粒并以巨大的动量向前推进。为了最佳肺药物沉积，药物应当在持续约5秒的缓慢吸气开始时释放，然后屏气10秒。已经设计了多种吸入辅助装置来提高MDI的有效性。这些对于手与呼吸的协调性较差的患者最有用。短管(例如圆锥体或球体)可以将气溶胶直接导入口腔，或者可收缩袋可以充当气溶胶储存器，其将悬浮颗粒保持3至5秒，在此期间患者可以吸入药物。但是，当使用这些装置中的任一种时，进入口咽部后的气溶胶速度降低，并且向肺的药物利用度和在口咽部中的沉积减少。

已经设计干燥粉末吸入器来向难以使用MDI的患者(诸如儿童和年长患者)递送药剂。一般而言，将适当的剂量与流动助剂或填充剂(诸如大乳糖或葡萄糖颗粒)一起放入胶囊中。在装置内部，所述胶囊最初被针头刺穿(例如，)或被剪成两半(例如，)。在吸入过程中，所述胶囊旋转或螺旋桨转动，从而创造造成胶囊的内容物进入吸入的空气中并被破碎成适合递送到气道的小颗粒的条件。分散粉末所需的能量来自患者的吸气努力。最近，已经推出了更方便的多次剂量干燥粉末吸入器(例如)。与干燥粉末吸入器相关的潜在问题包括食管刺激，以及因此由于粉末在气道中的直接作用而导致的咳嗽。此外，由于胶囊未能释放药物或聚集的粉末未能破碎，胶囊壁可能带有药物。这可能造成基本上所有的药物沉积在口腔中。这些粉末装置不含有氯氟烃，并且可以提供MDI的替代物。

对于本文提出作为另外治疗剂的几种化合物，包括β₂-激动剂和皮质类固醇，已经提出了气雾剂用于治疗影响呼吸道的疾病和病症的临床用途，所述疾病和病症是诸如、但不限于慢性阻塞性肺病和哮喘以及通过根据本发明的方法和组合物可治疗的其它疾病和病症。

对于β₂-激动剂，在人类中可获得有限的药代动力学数据，主要是因为治疗活性所需的吸入药物的低剂量产生低于测定限度的在体液中的药物浓度。关于那些药物的肺生物利用度知之甚少。普遍认为，当通过MDI施用时，平均10％的吸入剂量到达肺。据报道，来自MDI的特布他林的平均肺生物利用度为9.1％。当添加口服组分(剂量的吞咽部分)时，该值上升至16.5％，即6.7％的增加。药物沙美特罗和福莫特罗具有不同的作用机理，其支气管扩张作用的持续时间较长(12至18小时)。沙美特罗显得独特，因为它具有将β₂-激动剂分子锚定到受体的长侧链。福莫特罗似乎是一种极其有效的经典β₂-激动剂。基于尿排泄数据计算，在吸入后福莫特罗的消除半衰期为1.7至2.3小时。鉴定出葡糖醛酸缀合物。但是，福莫特罗可能具有较长的消除半衰期，但尚未在人体中检测到。沙美特罗被配制为昔萘酸盐(羟基萘甲酸盐)。关于该药物的药代动力学性能知之甚少。沙美特罗通过羟基化被广泛代谢，大部分剂量在72小时内主要在粪便中消除。由于其长消除半衰期(12至15天)，该分子的羟基萘甲酸部分在重复施用期间会在血浆中积累。

对于抗胆碱能剂，这类的母体化合物是阿托品。乙酰胆碱的毒蕈碱受体的合成激动剂是季铵化合物，并且因此难以穿过膜屏障。由于在吸入药物后阿托品的全身吸收是几乎完全的，因此这种施用途径可以产生显著的全身毒性(Harrison等人.1986)。异丙托溴铵是这类药物中唯一经过充分研究的代表。通过胃肠道的吸收缓慢，在口服摄入药物以后3小时已经记录血浆峰浓度。口服摄入后的绝对生物利用度仅为30％。代谢药物的消除发生在尿液和胆汁中。无论何种施用途径，平均消除半衰期为约3.5小时。用吸入的异丙托铵观察到的血浆浓度比用口服施用的等效支气管扩张剂量观察到的血浆浓度低一千倍。这解释了为什么在吸入治疗剂量的异丙托溴铵后不会发生全身性抗胆碱能作用。这些性能大概被其它季铵抗胆碱能剂诸如氧托溴铵(如上所述的替代物)共有。

皮质类固醇通常通过吸入施用，这可以预防通常与全身皮质类固醇治疗相关的某些不良作用。为了生产具有显著局部活性的化合物，在氢化可的松分子中的某些羟基基团被丙酮化合物或酯基团置换。用于治疗哮喘患者的局部活性皮质类固醇药物包括倍氯米松、戊酸倍他米松、布地奈德、曲安西龙、氟替卡松和氟尼缩松。在这些中，倍氯米松和布地奈德被最广泛使用。众多临床研究的结果已经证实，倍氯米松和布地奈德的效力差异不大。通过使用间隔装置来减少口咽沉积，并且可以通过漱口来预防念珠菌病的发生。布地奈德的血浆清除率经计算为84±27L/h，这是泼尼松龙的平均清除率的约10倍。由于该高清除率，布地奈德的消除半衰期是短的(2.8±1.1小时)。吞咽部分的全身利用度是10.7±4.3％，表明存在广泛的首过代谢。立体选择性代谢得到证实，并且当以每千克体重为基础计算时，两种对映异构体的血浆清除率在6名哮喘儿童中比在11名健康成人中高出约50％。因此，与口服施用药物相比，通过吸入施用布地奈德会降低全身性不良作用的风险。已知肺酯酶会水解倍氯米松。吸收的倍氯米松和酯酶-水解产物(17-丙酸倍氯米松和倍氯米松)在通过肝脏过程中迅速转化为较低活性的代谢物。全身吸收的氟替卡松的首过肝脏代谢是几乎完全的，并且因此吸入的药物具有有利的药代动力学特性。关于氟尼缩松、曲安西龙和戊酸倍他米松的药代动力学性能，已经发表的数据很少。

为了确保吸入药物的最大效果，应当考虑药物的药理学特征和用于雾化药物的装置。对于β₂-激动剂，可以采用具有不同肺处置技术的不同制剂，诸如用于MDI施用、用于使用干燥粉末吸入器施用或用于雾化的溶液。来自干燥粉末吸入器的单位剂量是来自MDI的释放的两倍，但它们具有等同的支气管扩张作用。装置的特征各不相同。对于计量剂量吸入器，通常12-40％的剂量沉积在肺中，但至多80％沉积在口咽部中。当MDI与间隔器一起使用时，通常约20％的剂量沉积在肺中，但只有至多5％沉积在口咽部中；因此，间隔物的使用可以减少在口咽部沉积的药物的比例。对于干燥粉末吸入器，通常11-16％的剂量沉积在肺中，并且31-72％沉积在口咽部中。对于喷雾器，通常7-32％的剂量沉积在肺中，并且1-9％沉积在口咽部中。本领域普通技术人员可以确保使用适当的吸入治疗装置并且可以准备合适的说明书。关于使用吸入疗法的考虑因素描述于A.-M.Tabaret和B.Schmit，“Pharmacokinetic Optimisation of Asthma Treatment,”Clin.Pharmacokinet.26:396-418(1994)。

对于所有这些组合，本发明进一步涵盖泡罩包，其含有β-肾上腺素能反向激动剂和另外的治疗剂(诸如β₂-选择性的肾上腺素能激动剂、皮质类固醇、抗胆碱能剂、黄嘌呤化合物、抗-IgE抗体、白三烯拮抗剂、磷酸二酯酶-4抑制剂、5-脂氧合酶抑制剂、肥大细胞稳定剂或生物药)的固定剂量组合；或者，在分开的丸剂、胶囊剂或其它剂型中，如上所述的β-肾上腺素能反向激动剂和另外的治疗剂。当需要口服施用反向激动剂和另外的治疗剂时，这些泡罩包的使用是适当的。所述泡罩包遵循在上面和图1中描述的总体设计，并且通常包括对患者的适当说明。

一般而言，当使用固定剂量组合时，所述泡罩包包含：

(1)下基板；

(2)中间剂量保持器，其成形以产生多个空腔并且放置在下基板上方，所述空腔成形以保持含有如上所述的β-肾上腺素能反向激动剂和至少一种另外的治疗剂的上述药物组合物的剂型；

(3)放置在中间剂量保持器上方的上基板，其具有多个孔，每个孔被定位成适应相应的空腔；和

(4)放置在所述空腔中的所述药物组合物的剂型。

当β-肾上腺素能反向激动剂和另外的治疗剂要在分开的剂型中施用时，所述泡罩包通常包含：

(1)下基板；

(2)中间剂量保持器，其成形以产生多个空腔并且放置在下基板上方，所述空腔成形以保持以下物质的剂型：(a)第一药物组合物，其包含：(i)治疗有效量的β-肾上腺素能反向激动剂；和(ii)第一药学上可接受的载体；和(b)第二药物组合物，其包含：(i)治疗有效量的有效治疗肺气道疾病的第二治疗剂，所述第二治疗剂选自β₂-选择性的肾上腺素能激动剂、皮质类固醇、抗胆碱能剂、黄嘌呤化合物、抗-IgE抗体、白三烯拮抗剂、磷酸二酯酶-4抑制剂、5-脂氧合酶抑制剂、肥大细胞稳定剂和生物药；和(ii)第二药学上可接受的载体；

(3)放置在中间剂量保持器上方的上基板，其具有多个孔，每个孔被定位成适应相应的空腔；和

(4)放置在所述空腔中的第一和第二药物组合物的剂型。

所述第一和第二药物组合物的剂型如上所述。通常，在这种安排中，第一药物组合物的剂型包括在低剂量开始并包括直至最高维持剂量的剂量范围的剂量。其它剂量形式安排是可能的。

对于泡罩包，其它安排也是可能的。

在根据本发明的又另一个替代方案中，与治疗上有效量的抑制蛋白-2抑制剂一起施用纳多洛尔、纳多洛尔的衍生物或类似物、或者纳多洛尔或纳多洛尔衍生物或类似物的前药。本文中使用的术语“抑制蛋白-2抑制剂”表示直接地或间接地阻断抑制蛋白-2在β-肾上腺素能受体、特别是β₂-肾上腺素能受体上的一种或多种作用并从而增强这样的受体当结合激动剂时的活性的任何化合物。

Lymperopoulos等人的美国专利号10,172,907公开了作为抑制蛋白-2抑制剂的抑制蛋白-2的蛋白片段，特别是具有以下序列的片段:Glu-Thr-Pro-Val-Asp-Thr-Asn-Leu-Ile-Glu-Leu-Asp-Thr-Asn-Asp-Asp-Asp-Ile-Val-Phe-Glu-Asp-Phe-Ala-Arg-Gln-Arg-Leu-Lys-Gly-Met-Lys-Asp-Asp-Lys-Asp-Glu-Glu-Asp-Asp-Gly-Thr-Gly-Ser-Pro-His-Leu-Asn-Asn-Arg(SEQ ID NO:1)。

Thakur等人的美国专利号9,926,275公开了抑制蛋白-2的小分子抑制剂，包括式(A-I)的化合物：

其中：

(1)v和vi指示在式(A-I)中指出的特定键；

(2)R⁴⁹选自式(A-I(a))、(A-I(b))、(A-I(c))和(A-I(d))：

/>

其中X⁷、X⁸和X⁹各自独立地是O、N或S；

(2)R⁵⁴、R⁵⁵和R⁵⁶各自独立地是H、氰基、氨基或被取代的或未被取代的烷基、烷酰基、烷酰氧基或芳基基团(当X⁷、X⁸或X⁹分别是N时)和不存在(当X⁷、X⁸或X⁹分别是O或S时)；

(3)R⁵⁰是被取代的或未被取代的芳基或杂芳基基团；

(4)R⁵¹和R⁵²各自独立地是H或被取代的或未被取代的烷基基团，或R⁵¹和R⁵²一起形成3-或4-元环烷基环；

(5)R⁵³是被取代的芳基基团，其中所述取代基中的一个且仅一个是式(A-I(e))的部分：

(i)其中R⁵⁷或R⁵⁸中的一个是式(A-I(f))的部分：

且另一个是H、叠氮基、三氟甲基diazirido、异氰基、异硫氰基、五氟硫烷基或被取代的或未被取代的烷基、烷酰基、烷酰氧基、芳酰基或芳酰氧基基团；

(ii)R⁵⁹和R⁶⁰各自独立地是H、卤素、叠氮基、三氟甲基diazirido、异氰基、异硫氰基、五氟硫酰基或被取代的或未被取代的烷基、烷酰基、烷酰氧基、芳酰基或芳酰氧基基团；

(iii)Y⁹是CH；

(iv)Y¹⁰和Y¹¹各自独立地是C或N，前提条件是，当Y¹⁰或Y¹¹是N时，则R⁵⁷或R⁵⁸分别不存在；

(v)Y¹²是CH、N、O、S、S(O)或S(O)₂；

(vi)R⁶¹、R⁶²和R⁶³各自独立地是H、叠氮基、三氟甲基diazirido、异氰基、异硫氰基或被取代的或未被取代的烷基基团；

(vii)R⁶⁴是H或被取代的或未被取代的烷基基团(当Y¹²是CH或N时)和不存在(当Y¹²是O、S、S(O)或S(O)₂时)；且

(viii)t是0或1；且

(6)s是0或1。

Olefsky等人的美国专利号8,987,332公开了作为抑制蛋白-2的抑制剂的ω-3脂肪酸，包括DHA(二十二碳六烯酸)和EPA(二十碳五烯酸)。

Sur等人的美国专利申请公开号2016/0311911公开了CXCR2抑制剂可以抑制抑制蛋白-2的活性，这是由于CXCR2和抑制蛋白之间的相互作用。CXCR2抑制剂包括、但不限于：SB225002(N-(2-溴苯基)-N′-(2-羟基-4-硝基苯基)脲),AZD5069(N-(2-((2,3-二氟苄基)硫基)-6-(((2R,3S)-3,4-二羟基丁烷-2-基)氧基)嘧啶-4-基)氮杂环丁烷-1-磺酰胺)；SB265610(1-(2-溴苯基)-3-(4-氰基-1H-苯并[d][1,2,3]三唑-7-基)脲)；navarixin；danirixin；CXCR2-IN-1(1-(2-氯-3-氟苯基)-3-[4-氯-2-羟基-3-(1-甲基哌啶-4-基)磺酰基苯基]脲)；SRT3109(N-(2-((2,3-二氟苄基)硫基)-6-((3,4-二羟基丁烷-2-基)氨基)嘧啶-4-基)氮杂环丁烷-1-磺酰胺)；和SRT3190(N-[2-[(2,3-二氟苯基)甲基硫烷基]-6-[[(2S,3R)-3,4-二羟基丁烷-2-基]氨基]嘧啶-4-基]氮杂环丁烷-1-磺酰胺)；MyD88抑制剂包括、但不限于：ST2825((4R,7R,8aR)-1′-[2-[4-[[2-(2,4-二氯苯氧基)乙酰基]氨基]苯基]乙酰基]-6-氧代螺[3,4,8,8a-四氢-2H-吡咯并[2,1-b][1,3]噻嗪-7,2′-吡咯烷]-4-甲酰胺)和T6167923(4-(3-溴苯基)磺酰基-N-(1-噻吩-2-基乙基)哌嗪-1-甲酰胺)；和MD2抑制剂包括、但不限于L48H37((3E,5E)-1-乙基-3,5-二[(2,3,4-三甲氧基苯基)亚甲基]哌啶-4-酮)。

Stamler等人的美国专利申请2004/0053852公开了阻止G-蛋白偶联受体的脱敏的方法。这些G-蛋白偶联受体(GPCR)包括β-肾上腺素能受体以及α-肾上腺素能受体、阿片受体和前列腺素受体。GPCR具有与其相关的G-蛋白受体激酶(GRK)。GRK磷酸化激动剂占据的受体，从而促进β-抑制蛋白分子(包括抑制蛋白-2)的结合，所述分子抑制所述受体与其相关G蛋白之间的相互作用，同时还促进所述受体的内化。GRK的活性因此抑制了GPCR的信号传递。典型应答是降低的GPCR水平和GPCR的脱敏，换而言之，通常与特定GPCR结合的激动剂不能活化受体，这在某些情况下可以导致GPCR不能控制与一个特定GPCR或多个GPCR的活性缺乏相关的疾病事件。一氧化氮供体(NO供体)(其提供一氧化氮或有关的氧化还原物质并提供用一氧化氮鉴定的生物活性，优选S-亚硝基谷胱甘肽(GSNO))会抑制GRK的活性，从而允许GPCR发出信号并循环至细胞表面。这会阻止GPCR的脱敏并从而允许足够量的GPCR可用且有活性，以控制与一个特定GPCR或多个GPCR的活性缺乏相关的疾病事件。

NO供体包括C-亚硝基化合物，其中亚硝基部分连接至叔碳，诸如在Stamler等人的美国专利号6,359,182中公开的化合物。这些化合物包括以单体为基础具有从约225至约1000或从约225至约600(对于口服施用)的分子量的C-亚硝基化合物，其中亚硝基基团连接至叔碳，其通过具有小于约25的pK_a的碳酸的亚硝酰化获得。所述化合物优选是水溶性的并且优选在作为酮基的一部分的亚硝酰化碳的α位含有碳原子。在某些替代方案中，所述化合物通过具有小于10的pK_a的碳酸的亚硝酰化获得，并且对于这样的化合物，可以通过谷胱甘肽增强活性。在一个替代方案中，对于这样的化合物，取代基Q连接至叔碳并且由含有1至12个链原子的链部分组成，所述链原子由共价地键合至环状部分的1至10个碳原子、0至2个氮原子和0至2个氧原子组成，所述环状部分是单环、二环、三环、四环或五环且含有5至24个环原子，所述环原子由2至20个碳原子、0至4个氮原子、0至1个氧原子和0至1个硫原子组成。

在另一个替代方案中，所述C-硝基化合物是式(N-I)的化合物：

其中所述抗衡离子是氢且其中R₁和R₂选自C₁-C₆烷基和C₆-C₂₀芳基，它们可以被选自氨基、羟基或羧基的取代基取代。这样的化合物包括二聚的2-[4′-(α-亚硝基)异丁酰基苯基]丙酸。

这样的化合物也包括含有式(N-II)的部分的C-亚硝基化合物：

其中X是S、O或NR，其中R选自C₁-C₆烷基，其为未被取代的或被一个或多个含有1至10个碳原子的醇、醚、酯或酰胺基团取代；通常，这些化合物具有100至约1000的分子量。该替代方案的优选亚属包含结构

其中X是S、O或NR，其中R如上面所定义且n是0至4；这些化合物可以可替换地质子化以除去负电荷。所述结构可以被C₁-C₆烷基或C₁-C₆烷基羰基取代，并且可以包括这样的修饰：在环中X的侧链碳或在括号内的碳也可以是另一个环的一部分。

所述化合物包括乙酰基水杨酸的C-亚硝基衍生物、普萘洛尔的C-亚硝基衍生物、纳多洛尔的C-亚硝基衍生物、卡维地洛的C-亚硝基衍生物、哌唑嗪的C-亚硝基衍生物、tinolol的C-亚硝基衍生物、美托洛尔的C-亚硝基衍生物、吲哚洛尔的C-亚硝基衍生物、拉贝洛尔的C-亚硝基衍生物、氨苯蝶啶的C-亚硝基衍生物、呋塞米的C-亚硝基衍生物、依那普利的C-亚硝基衍生物、雷米普利的C-亚硝基衍生物、洛伐他汀的C-亚硝基衍生物、普伐他汀的C-亚硝基衍生物、吉非贝齐的C-亚硝基衍生物、氯贝丁酯的C-亚硝基衍生物、硝苯地平的C-亚硝基衍生物、氨氯地平的C-亚硝基衍生物、地尔硫卓的C-亚硝基衍生物、维拉帕米的C-亚硝基衍生物、西咪替丁的C-亚硝基衍生物、雷尼替丁的C-亚硝基衍生物、沙丁胺醇的C-亚硝基衍生物、异丙托溴铵的C-亚硝基衍生物、美金刚的C-亚硝基衍生物、10-脱乙酰基浆果赤霉素III的C-亚硝基衍生物、泰素的C-亚硝基衍生物、普瑞玛尼的C-亚硝基衍生物、达塞曲匹的C-亚硝基衍生物、超氧化物歧化酶模拟物的C-亚硝基衍生物、别嘌呤醇的C-亚硝基衍生物、塞来昔布的C-亚硝基衍生物、吲哚美辛的C-亚硝基衍生物、thioflosulide的C-亚硝基衍生物和依托度酸的C-亚硝基衍生物。

六磷酸肌醇(IP6)被描述为抑制蛋白多价螯合剂(Y.K.Peterson和L.M.Luttrell，“The Diverse Roles of Arrestin Scaffolds in G Protein-Coupled ReceptorSignaling,”Pharmacol.Rev.69:256-297(2017))。

另外，已知的是，第二信使刺激的激酶也在GPCR偶联的受体的脱敏中发挥作用。对于G_s偶联的受体(其包括β₁-、β₂-和β₃-肾上腺素能受体)，有关的第二信使刺激的激酶是cAMP依赖性蛋白激酶，也被称为蛋白激酶A(R.J.Lefkowitz，“G Protein CoupledReceptors III.New Roles for Receptor Kinases andβ-Arrestins in ReceptorSignaling and Desensitization,”J.Biol.Chem.273:18677-18680(1998))。在该背景下，磷酸化发生在位于受体的第三个细胞质环或羧基端尾巴中的丝氨酸残基上。磷酸化直接改变受体构象，从而损害受体与相应G蛋白的相互作用。这种类型的受体调节通常介导一类被称为异源或非激动剂特异性脱敏的脱敏，因为任何提高cAMP的刺激物都有可能引起任何含有适当蛋白激酶A(PKA)共有磷酸化位点的GPCR的磷酸化和由此产生的脱敏。

介导G蛋白偶联受体的快速的、激动剂特异性的或同源的脱敏的主要细胞机制由两步过程组成，其中激动剂占据的受体被GRK磷酸化，并然后结合抑制蛋白，后者在空间上阻断向G蛋白的信号传递。GRK催化的活性可能是变构的；调节GRK活性的其它因子包括蛋白激酶C、脂质和钙-结合蛋白诸如恢复蛋白或钙调蛋白。GPCR的GRK磷酸化会增强抑制蛋白的结合以及这些受体的内化和隔离。因此，如下所述，可以干扰该过程的任何方面的任何药剂都可用于抑制抑制蛋白的活性并从而阻止β-肾上腺素能受体的脱敏。

可以抑制抑制蛋白的活性的药剂的一种替代物是抑制蛋白本身的抑制剂。抑制蛋白的抑制剂包括barbadin。

可以抑制抑制蛋白的活性的药剂的另一种替代物是GRK的抑制剂。GRK的抑制剂公开在Stamler等人的美国专利申请公开号2004/0053852中。GRK会磷酸化激动剂占据的GPCR，由此促进β-抑制蛋白分子与磷酸化的GPCR的结合。因此，抑制GRK活性的药剂也可以阻断β-抑制蛋白的活性。这些药剂包括提供一氧化氮或相关物质的NO供体，包括S-亚硝基、O-亚硝基、C-亚硝基和N-亚硝基化合物。这些化合物包括、但不限于S-亚硝基谷胱甘肽(GSNO)、S-亚硝基-N-乙酰基青霉胺、S-亚硝基-半胱氨酸及其乙酯、S-亚硝基-半胱氨酰基甘氨酸、S-亚硝基-γ-甲基-L-同型半胱氨酸、S-亚硝基-L-同型半胱氨酸、S-亚硝基-γ-硫代-L-亮氨酸、S-亚硝基-δ-硫代-L-亮氨酸和S-亚硝基白蛋白。可用于本文中的其它NO供体的例子是硝普钠(nipride)、亚硝酸乙酯、硝酸甘油、SIN1(吗多明)、furoxamines和N-羟基-(N-亚硝胺)。

可以用于阻断抑制蛋白的活性的另一种药剂是抑制蛋白多价螯合剂IP6(六磷酸肌醇)(Y.K.Peterson和L.M.Luttrell，“The Diverse Roles of Arrestin Scaffolds inG Protein-Coupled Receptor Signaling,”Pharmacol.Rev.69:256-297(2017))。

另外，根据R.J.Lefkowitz，“G Protein Coupled Receptors III.New Roles forReceptor Kinases andβ-Arrestins in Receptor Signaling and Desensitization,”J.Biol.Chem.273:18677-18680(1998)，蛋白激酶A抑制剂也可用于阻断抑制蛋白的活性。

蛋白激酶A抑制剂包括以下药剂：(1)H89(N-[2-[[3-(4-溴苯基)-2-丙烯基]氨基]乙基]-5-异喹啉磺酰胺二盐酸盐)(J.Leemhuis等人，“The Protein Kinase A InhibitorH89 Acts on Cell Morphology by Inhibiting Rho Kinase,”J.Pharmacol.Exp.Ther.300:1000-1007(2002)；(2)N-(ω-十一烯酰基)苯丙氨酸(Stolz等人的美国专利号7,871,635)；(3)3′,5′-环状单硫代磷酸酯-R,H-7(5-(2-甲基哌嗪-1-基)磺酰基异喹啉二盐酸盐),H-8(N-[2-(甲基氨基)乙基]-5-异喹啉磺酰胺二盐酸盐),和H-9(N-(2-氨基乙基)-5-异喹啉磺酰胺)(Berggren等人的美国专利号9,744,332)；(4)6-22酰胺，具有序列Thr-Tyr-Ala-Asp-Phe-Ile-Ala-Ser-Gly-Arg-Thr-Gly-Arg-Arg-Asn-Ala-Ile-NH₂(SEQ ID NO:2)的肽(Ambron等人的美国专利号10,485,845)；蛋白激酶A抑制剂，包括法舒地尔,N-[2-(磷酸化溴代硝基精氨酰基氨基)乙基]-5-异喹啉磺酰胺,1-(5-喹啉磺酰基)哌嗪,4-氰基-3-甲基异喹啉，乙酰氨基-4-氰基-3-甲基异喹啉,8-溴-2-单酰基腺苷-3,5-环状单硫代磷酸酯，腺苷3,5-环状单硫代磷酸酯,2-O-单丁基-环磷酸腺苷,8-氯-环磷酸腺苷,N-[2-(肉桂酰基氨基酸)]-5-异喹啉酮，反相-8-己基氨基腺苷3,5-单硫代磷酸酯，反相-8-哌啶基腺苷-环磷酸腺苷，反相-腺苷3,5-环状单硫代磷酸酯,5-碘结核菌素,8-羟基腺苷-3,5-单硫代磷酸酯，钙磷酸蛋白C，瑞香素，反相-8-氯苯基-环磷酸腺苷，反相-环磷酸腺苷，反相-8-Br-环磷酸腺苷,1-(5-异喹啉磺酰基)-2-甲基哌啶,8-羟基腺苷-3′,5′-单磷酸酯,8-己基氨基腺苷-3′,5′-单磷酸酯,和反相-腺苷3′,5′-环状单磷酸酯(Dai的美国专利申请公开号2019/0343861)；erbstatin(Emans等人的美国专利申请公开号2008/0138834)；蛋白激酶A抑制剂，包括腺苷3′,5′-环状硫代磷酸酯,8-溴-腺苷3′,5′-环状单硫代磷酸酯,4-氰基-3-甲基异喹啉,1-(5-异喹啉磺酰基)-2-甲基哌嗪,N-[2-(甲基氨基)乙基]-5-异喹啉磺酰胺，异喹啉磺酰胺,N-2-氨基乙基)-5-异喹啉磺酰胺,N-[2-((对溴肉桂基)氨基)乙基]-5-异喹啉磺酰胺和(5-异喹啉磺酰基)哌嗪(Jang等人的美国专利申请公开号2006/0099568)；KT 5720((9R,10S,12S)-2,3,9,10,11,12-六氢-10-羟基-9-甲基-1-氧代-9,12-环氧-1H-二吲哚并[1,2,3-fg:3′,2′,1′-kl]吡咯并[3,4-i][1,6]苯并二吖辛因-10-甲酸己酯)；肉豆蔻酰基化的PKI 14-22酰胺(Myr-Gly-Arg-Thr-Gly-Arg-Arg-Asn-Ala-Ile-NH₂)；cAMPs-Rp三乙基铵盐((R)-腺苷，环状3',5'-(硫代磷酸氢酯)三乙基铵)；瑞香素；HA-100(5-(1-哌嗪基磺酰基)异喹啉二盐酸盐)；和HA-100(5-(1-哌嗪基磺酰基)异喹啉二盐酸盐)。

另外，如在实施例5中所示，酶磷脂酶C在导致哮喘症状的途径中起关键作用，因为它裂解在膜磷脂中的磷酸二酯键，导致1,2-甘油二酯的形成。然后通过甘油二酯脂肪酶和甘油单酯脂肪酶的连续作用从甘油二酯中释放花生四烯酸盐。一旦释放，一部分花生四烯酸盐就会被迅速代谢，产生氧化产物，包括类花生酸类诸如前列腺素。因此，可以抑制磷脂酶C活性的任何治疗都与哮喘的治疗相关。类似地，磷脂酶C的抑制剂也与其它呼吸系统疾病和病症诸如慢性阻塞性肺病以及可以通过根据本发明的方法和组合物治疗的其它疾病和病症的治疗相关。

因此，在根据本发明的又另一个替代方案中，与治疗上有效量的磷脂酶C抑制剂一起施用纳多洛尔、纳多洛尔的衍生物或类似物、或者纳多洛尔或纳多洛尔衍生物或类似物的前药。

磷脂酶C抑制剂包括、但不限于：马兜铃酸钠；D609(三环癸烷-9-基黄原酸钠)；D-赤式-二氢鞘氨醇；U-73122(1-(6-((17β-3-甲氧基雌-1,3,5(10)-三烯-17-基)氨基)己基)-1H-吡咯-2,5-二酮)；吡咯烷硫代氨基甲酸酯；硫酸新霉素；thielavin B；依地福新；在Lagu等人的美国专利号7,262,197、Lagu等人的美国专利申请公开号2004/0242639、Lagu等人的美国专利申请公开号2004/0235855和Lagu等人的美国专利申请公开号2004/0235827中描述的化合物，包括杂环基取代的苯胺基化合物，包括：N-[2-[4-(二苯基甲基)-1-哌嗪基]-5-(1-哌嗪基羰基)苯基]-4-甲基-苯甲酰胺；5-(4-氯苯基)-N-[2-[4-(二苯基甲基)-1-哌嗪基]-5-(1-哌嗪基羰基)苯基]-2-甲基-3-呋喃羧酰胺；N-[2-[4-(二苯基甲基)-1-哌嗪基]-5-(1-哌嗪基羰基)苯基]-2-呋喃羧酰胺；N-[2-[4-(二苯基甲基)-1-哌嗪基]-5-(1-哌嗪基羰基)苯基]-丙酰胺；3-[[(苯基氨基)羰基]氨基]-4-[4-(苯基甲基)-1-哌啶基]-苯甲酰胺；3-[[(苯基氨基)羰基]氨基]-4-(4-苯基-1-哌啶基)-苯甲酰胺；3-[[(1,3-苯并二氧杂环戊烯-5-基氨基)羰基]氨基]-4-(4-苯基-1-哌啶基)-苯甲酰胺；N-[2-(4,4-二苯基-1-哌啶基)-5-(1-哌嗪基羰基)苯基]-N′-苯基-脲；N-[5-(氨基羰基)-2-[4-(苯基甲基)-1-哌啶基]苯基]肼-甲酰胺；4-[4-(二苯基甲基)-1-哌啶基]-3-[[(苯基氨基)羰基]氨基]-苯甲酰胺；4-[4-(二苯基亚甲基)-1-哌啶基]-3-[[(苯基氨基)羰基]氨基]-苯甲酰胺；N-[2-[4-(二苯基甲基)-1-哌啶基]-4-(1-哌嗪基羰基)苯基]-N′-苯基-脲；N-环己基-N-[2-[4-(二苯基甲基)-1-哌啶基]-4-(1-哌嗪基羰基)苯基]-脲；4-[4-(2-甲氧基苯基)-1-哌嗪基]-3-[[(苯基氨基)羰基]氨基]-苯甲酰胺；3-[[(苯基氨基)羰基]氨基]-4-[4-(苯基甲基)-1-哌嗪基]-苯甲酰胺；4-[4-[双(4-氟苯基)甲基]-1-哌嗪基]-3-[[(苯基氨基)羰基]氨基]-苯甲酰胺；4-[4-[双(4-氟苯基)甲基]-1-哌嗪基]-3-[[[(2-氟苯基)氨基]羰基]氨基]-苯甲酰胺；4-[4-(二苯基甲基)-1-哌嗪基]-3-[[[(4-硝基苯基)氨基]羰基]氨基]-苯甲酰胺；4-[4-(二苯基甲基)-1-哌嗪基]-3-[[[(苯基甲基)氨基]羰基]氨基]-苯甲酰胺,3-[[[(3,5-二甲基苯基)氨基]羰基]氨基]-4-[4-(二苯基甲基)-1-哌嗪基]-苯甲酰胺；4-[4-(二苯基甲基)-1-哌嗪基]-3-[[(苯基氨基)羰基]氨基]-苯甲酰胺；4-[4-(9H-芴-9-基)-1-哌嗪基]-3-[[(苯基氨基)羰基]氨基]-苯甲酰胺；3-[[(环己基氨基)羰基]氨基]-4-[4-(二苯基甲基)-1-哌嗪基]-苯甲酰胺；4-[4-(二苯基甲基)-1-哌嗪基]-3-[[[[(1S)-1-苯基乙基]氨基]羰基]氨基]-苯甲酰胺；3-[[(丁基氨基)羰基]氨基]-4-[4-(二苯基甲基)-1-哌嗪基]-苯甲酰胺；4-[4-(二苯基甲基)-1-哌嗪基]-3-[[[(4-氟苯基)氨基]羰基]氨基]-苯甲酰胺；3-[[(1,3-苯并二氧杂环戊烯-5-基氨基)羰基]氨基]-4-[4-[二-(4-氟苯基)甲基]-1-哌嗪基]-苯甲酰胺；4-[4-[双(4-氟苯基)甲基]-1-哌嗪基]-3-[[[(2,4-二甲基苯基)氨基]羰基]氨基]-苯甲酰胺；4-[4-[双(4-氟苯基)甲基]-1-哌嗪基]-3-[[[(1-苯基乙基)氨基]羰基]氨基]-苯甲酰胺；4-[4-[双(4-氟苯基)甲基]-1-哌嗪基]-3-[[[(2-甲氧基苯基)氨基]羰基]氨基]-苯甲酰胺；4-[4-[双(4-氟苯基)甲基]-1-哌嗪基]-3-[[[(2,4-二甲氧基苯基)氨基]羰基]氨基]-苯甲酰胺；4-[4-[双(4-氟苯基)甲基]-1-哌嗪基]-3-[[[[4-(二甲基氨基)苯基]氨基]羰基]氨基]-苯甲酰胺；4-[4-[双(4-氟苯基)甲基]-1-哌嗪基]-3-[[[(4-甲氧基苯基)氨基]羰基]氨基]-苯甲酰胺；4-[4-[双(4-氟苯基)甲基]-1-哌嗪基]-3-[[[(苯基甲基)氨基]硫代甲基]氨基]-苯甲酰胺；4-[4-[双(4-氟苯基)甲基]-1-哌嗪基]-3-[[(苯基氨基)硫代甲基]氨基]-苯甲酰胺；N-[2-[4-(二苯基甲基)-1-哌嗪基]-5-[(4-甲基-1-哌嗪基)羰基]苯基]-N′-苯基脲；N-[2-[4-(二苯基甲基)-1-哌嗪基]-5-[(六氢-1H-1,4-二氮杂环庚三烯-1-基)羰基]苯基]-N′-苯基脲,N-环己基-N′-[2-[4-(二苯基甲基)-1-哌嗪基]-5-[(六氢-1H-1,4-二氮杂环庚三烯-1-基)羰基]-苯基]脲；N-(2-氨基乙基)-4-[4-(二苯基甲基)-1-哌嗪基]-3-[[(苯基氨基)羰基]氨基]-苯甲酰胺；和N-(2-氨基乙基)-3-[[(环己基氨基)羰基]氨基]-4-[4-(二苯基甲基)-1-哌嗪基]-苯甲酰胺；N-[2-[4-(二苯基甲基)-1-哌嗪基]-5-(1-哌嗪基羰基)苯基]-4-甲基-苯甲酰胺；5-(4-氯苯基)-N-[2-[4-(二苯基甲基)-1-哌嗪基]-5-(1-哌嗪基羰基)苯基]-2-甲基-3-呋喃羧酰胺；N-[2-[4-(二苯基甲基)-1-哌嗪基]-5-(1-哌嗪基羰基)苯基]-2-呋喃羧酰胺；N-[2-[4-(二苯基甲基)-1-哌嗪基]-5-(1-哌嗪基羰基)苯基]-丙酰胺；N-[2-[4-(二苯基甲基)-1-哌嗪基]-5-(1-哌嗪基羰基)苯基]-4-甲基-苯磺酰胺；4-氯-N-[2-[4-(二苯基甲基)-1-哌嗪基]-5-(1-哌嗪基羰基)苯基]-苯磺酰胺；N-[2-[4-(二苯基甲基)-1-哌嗪基]-5-(1-哌嗪基羰基)苯基]-1-丁烷磺酰胺；N-[2-[4-(二苯基甲基)-1-哌嗪基]-5-(1-哌嗪基羰基)苯基]-甲磺酰胺；N-[2-[4-(二苯基甲基)-1-哌嗪基]-5-(甲基磺酰基)苯基]-N-苯基-脲；N-[2-[4-[双(4-氟苯基)甲基]-1-哌嗪基]-5-(羟甲基)苯基]-N-苯基-脲；和4-[4-[双(4-氟苯基)甲基]-1-哌嗪-基]-3-[[(苯基氨基)羰基]氨基]-苯甲酸甲酯；DCIC(3,4-二氯异香豆素)；和calporoside或calporoside衍生物，包括在Eder等人的美国专利号6,596,984中公开的化合物，包括式(C-I)的化合物：

其中：

(1)R₁、R₂和R₃独立地选自H和C₁-C₁₀酰基；且

(2)R₄是H或-C(O)(CH₂)_nCOOH，其中n是1至7，

前提条件是，R₁、R₂、R₃和R₄不都是H；

和RHC-80267(1,6-二-(环己基肟基羰基氨基)-己烷)。

在根据本发明的方法和组合物中，如上所述可用于与β-肾上腺素能反向激动剂联合使用的除纳多洛尔或纳多洛尔的衍生物或类似物之外的小分子可以任选地被一个或多个基本上不影响所述小分子的药理学活性的基团取代。上文已经提供了可以用作任选取代基的许多常见基团的定义；但是，任何基团从这些定义中的省略不可被认为意味着这样的基团不可用作任选取代基，只要满足任选取代基的化学和药理学要求即可。

本文中使用的术语“烷基”表示1至12个碳原子的无支链、支链或环状饱和烃基残基或它们的组合，所述碳原子可以任选地被取代；所述烷基残基当未被取代时仅含有C和H。通常，所述无支链或支链饱和烃基残基是1至6个碳原子，其在本文中被称为“低级烷基”。当所述烷基残基是环状并且包括环时，应当理解，所述烃基残基包括至少3个碳原子，这是形成环的最小数目。本文中使用的术语“烯基”表示具有一个或多个碳-碳双键的无支链的、支链的或环状的烃基残基。本文中使用的术语“炔基”表示具有一个或多个碳-碳三键的无支链的、支链的或环状的烃基残基；所述残基还可以包括一个或多个双键。关于“烯基”或“炔基”的使用，多个双键的存在不可产生芳族环。本文中使用的术语“羟基烷基”、“羟基烯基”和“羟基炔基”分别表示包含一个或多个羟基基团作为取代基的烷基、烯基或炔基基团；如下面详述的，可以任选地包括另外的取代基。

可用于取代指定的基团、部分或残基中的饱和碳原子的取代基包括、但不限于—Z^a、＝O、—OZ^b、—SZ^b、＝S^-、—NZ^cZ^c、＝NZ^b、＝N—OZ^b、三卤甲基、—CF₃、—CN、—OCN、—SCN、—NO、—NO₂、＝N₂、—N₃、—S(O)₂Z^b、—S(O)₂NZ^b、—S(O₂)O^-、—S(O₂)OZ^b、—OS(O₂)OZ^b、—OS(O₂)O^-、—OS(O₂)OZ^b、—P(O)(O^-)₂、—P(O)(OZ^b)(O^-)、—P(O)(OZ^b)(OZ^b)、—C(O)Z^b、—C(S)Z^b、—C(NZ^b)Z^b、—C(O)O^-、—C(O)OZ^b、—C(S)OZ^b、—C(O)NZ^cZ^c、—C(NZ^b)NZ^cZ^c、—OC(O)Z^b、—OC(S)Z^b、—OC(O)O^-、—OC(O)OZ^b、—OC(S)OZ^b、—NZ^bC(O)Z^b、—NZ^bC(S)Z^b、—NZ^bC(O)O^-、—NZ^bC(O)OZ^b、—NZ^bC(S)OZ^b、—NZ^bC(O)NZ^cZ^c、—NZ^bC(NZ^b)Z^b、—NZ^bC(NZ^b)NZ^cZ^c，其中Z^a选自烷基、环烷基、杂烷基、环杂烷基、芳基、芳基烷基、杂芳基和杂芳基烷基；每个Z^b独立地是氢或Z^a；且每个Z^c独立地是Z^b，或可替换地，两个Z^c可以与它们所键合的氮原子一起形成4-、5-、6-或7-元环杂烷基环结构，其可以任选地包括1至4个相同的或不同的选自N、O和S的杂原子。作为具体例子，—NZ^cZ^c意在包括—NH₂、—NH-烷基、—N-吡咯烷基和—N-吗啉基，但不限于那些具体替代物并且包括本领域已知的其它替代物。类似地，作为另一个具体例子，被取代的烷基意在包括—亚烷基-O-烷基、—亚烷基-杂芳基、—亚烷基-环杂芳基、—亚烷基-C(O)OZ^b、—亚烷基-C(O)NZ^bZ^b和—CH₂—CH₂—C(O)-CH₃，但不限于那些具体替代物并且包括本领域已知的其它替代物。所述一个或多个取代基与它们所键合的原子一起可以形成环状环，包括，但不限于环烷基和环杂烷基。

类似地，可用于取代指定的基团、部分或残基中的不饱和碳原子的取代基包括、但不限于—Z^a、卤素、—O^-、—OZ^b、—SZ^b、—S^-、—NZ^cZ^c、三卤甲基、—CF₃、—CN、—OCN、—SCN、—NO、—NO₂、—N₃、—S(O)₂Z^b、—S(O₂)O^-、—S(O₂)OZ^b、—OS(O₂)OZ^b、—OS(O₂)O^-、—P(O)(O^-)₂、—P(O)(OZ^b)(O^-)、—P(O)(OZ^b)(OZ^b)、—C(O)Z^b、—C(S)Z^b、—C(NZ^b)Z^b、—C(O)O^-、—C(O)OZ^b、—C(S)OZ^b、—C(O)NZ^cZ^c、—C(NZ^b)NZ^cZ^c、—OC(O)Z^b、—OC(S)Z^b、—OC(O)O^-、—OC(O)OZ^b、—OC(S)OZ^b、—NZ^bC(O)OZ^b、—NZ^bC(S)OZ^b、—NZ^bC(O)NZ^cZ^c、—NZ^bC(NZ^b)Z^b和—NZ^bC(NZ^b)NZ^cZ^c，其中Z^a、Z^b和Z^c如上面所定义。

类似地，可用于取代杂烷基和环杂烷基基团中的氮原子的取代基包括、但不限于—Z^a、卤素、—O^-、—OZ^b、—SZ^b、—S^-、—NZ^cZ^c、三卤甲基、—CF₃、—CN、—OCN、—SCN、—NO、—NO₂、—S(O)₂Z^b、—S(O₂)O^-、—S(O₂)OZ^b、—OS(O₂)OZ^b、—OS(O₂)O^-、—P(O)(O^-)₂、—P(O)(OZ^b)(O^-)、—P(O)(OZ^b)(OZ^b)、—C(O)Z^b、—C(S)Z^b、—C(NZ^b)Z^b、—C(O)OZ^b、—C(S)OZ^b、—C(O)NZ^cZ^c、—C(NZ^b)NZ^cZ^c、—OC(O)Z^b、—OC(S)Z^b、—OC(O)OZ^b、—OC(S)OZ^b、—NZ^bC(O)Z^b、—NZ^bC(S)Z^b、—NZ^bC(O)OZ^b、—NZ^bC(S)OZ^b、—NZ^bC(O)NZ^cZ^c、—NZ^bC(NZ^b)Z^b和—NZ^bC(NZ^b)NZ^cZ^c，其中Z^a、Z^b和Z^c如上面所定义。

本文所述化合物可以含有一个或多个手性中心和/或双键，且因此，可以作为立体异构体诸如双键异构体(即，几何异构体诸如E和Z)、对映异构体或非对映异构体存在。本发明包括每种分离的立体异构形式(诸如对映异构纯的异构体、E和Z异构体和其它立体异构形式)以及不同手性纯度程度或E和Z百分比的立体异构体的混合物，包括外消旋混合物、非对映异构体的混合物以及E和Z异构体的混合物。因此，本文中描述的化学结构包括解释的化合物的所有可能的对映异构体和立体异构体，包括立体异构纯的形式(例如，几何纯的、对映异构纯的或非对映异构纯的)和对映异构的和立体异构的混合物。使用技术人员众所周知的分离技术或手性合成技术，可以将对映异构的和立体异构的混合物拆分成它们的组分对映异构体或立体异构体。这样的分离技术包括、但不限于手性高压液相色谱法(HPLC)以及手性盐的形成和结晶。本发明包括每种分离的立体异构形式以及不同手性纯度程度的立体异构体的混合物，包括外消旋混合物。它还涵盖各种非对映异构体。其它结构可能看起来描绘了特定异构体，但这仅仅是为了方便，并且不旨在将本发明限制于所描绘的烯烃异构体。当化学名称没有指定化合物的异构形式时，它表示所述化合物的可能异构形式中的任一种或那些异构形式的混合物。

所述化合物还可以以几种互变异构形式存在，并且本文对一种互变异构体的描绘仅为了方便起见，并且还被理解为涵盖所示形式的其它互变异构体。因此，本文中描述的化学结构包括解释的化合物的所有可能的互变异构形式。本文中使用的术语“互变异构体”包括由氢原子的至少一种形式迁移和化合价的至少一种变化(例如，单键变为双键、三键变为双键、三键变为单键，或反之亦然)产生的两种或更多种可互变的化合物。存在的互变异构体的确切比率可以取决于几种因素，包括pH、溶剂和温度。互变异构化反应可以由酸或碱催化。互变异构化的例子包括酮/烯醇、酰胺/酰亚胺、内酰胺/内酰亚胺和烯胺/亚胺。

除了上述取代基之外，烷基、烯基和炔基基团可以可替换地或另外被C₁-C₈酰基、C₂-C₈杂酰基、C₆-C₁₀芳基、C₃-C₈环烷基、C₃-C₈杂环基或C₅-C₁₀杂芳基取代，其中每个可以任选地被取代。并且，另外，当两个能够形成具有5至8个环成员的环的基团存在于相同或相邻的原子上时，这两个基团可以任选地与它们所连接的取代基中的一个或多个原子一起形成这样的环。

“杂烷基”、“杂烯基”和“杂炔基”等与相应的烃基(烷基、烯基和炔基)基团类似地定义，但是术语“杂”表示在主链残基内含有1-3个O、S或N杂原子或其组合的基团；因此，相应的烷基、烯基或炔基基团的至少一个碳原子被指定的杂原子之一替换，以分别形成杂烷基、杂烯基或杂炔基基团。为了化学稳定性的原因，还理解，除非另外指出，否则这样的基团不包括超过两个连续杂原子，除非氧代基团存在于N或S上，如在硝基或磺酰基基团中。

类似地，“杂环基”可以用于描述这样的非芳族环状基团：其含有至少一个杂原子(通常选自N、O和S)作为环成员并且其通过环原子连接到分子，所述环原子可以是C(碳连接的)或N(氮连接的)；并且“杂环基烷基”可以用于描述通过连接基连接至另一个分子的这样的基团。所述杂环基可以是完全饱和的或部分饱和的，但非芳族的。适合用于环烷基、环烷基烷基、杂环基和杂环基烷基基团的大小和取代基与上面关于烷基基团描述的那些相同。所述杂环基基团通常含有1、2或3个选自N、O和S的杂原子作为环成员；并且所述N或S可以被在杂环系统中的这些原子上常见的基团取代。本文中使用的这些术语还包括含有一个或两个双键的环，只要所连接的环不是芳族环即可。被取代的环烷基和杂环基基团还包括稠合至芳族环或杂芳族环的环烷基或杂环，条件是该基团的连接点是环烷基或杂环基环而不是芳族/杂芳族环。

本文中使用的“酰基”涵盖包含连接在羰基碳原子的两个可用价位置之一处的烷基、烯基、炔基、芳基或芳基烷基残基的基团，并且杂酰基表示对应的基团，其中至少一个不是羰基碳的碳已经被选自N、O和S的杂原子替换。

酰基和杂酰基基团通过羰基碳原子的开放价键合至它们所连接的任何基团或分子。通常，它们是：C₁-C₈酰基基团，其包括甲酰基、乙酰基、新戊酰基和苯甲酰基；和C₂-C₈杂酰基基团，其包括甲氧基乙酰基、乙氧基羰基和4-吡啶酰基。

类似地，“芳基烷基”和“杂芳基烷基”表示通过连接基团(诸如亚烷基，包括被取代的或未被取代的、饱和的或不饱和的、环状的或无环的连接基)与其连接点键合的芳族和杂芳族环系统。通常，所述连接基是C₁-C₈烷基。这些连接基还可以包括羰基基团，从而使它们能够提供取代基作为酰基或杂酰基部分。在芳基烷基或杂芳基烷基基团中的芳基或杂芳基环可以被上面关于芳基基团描述的相同取代基取代。优选地，芳基烷基基团包括任选地被上面关于芳基基团定义的基团取代的苯环和未被取代的或被1或2个C₁-C₄烷基基团或杂烷基基团取代的C₁-C₄亚烷基，其中所述烷基或杂烷基基团可以任选地环化以形成环诸如环丙烷、二氧杂环戊烷或氧杂环戊烷。类似地，杂芳基烷基基团优选地包括：C₅-C₆单环杂芳基基团，其任选地被在上面描述为在芳基基团上的典型取代基的基团取代；和C₁-C₄亚烷基，其是未被取代的或被1或2个C₁-C₄烷基基团或杂烷基基团取代，或者它包括任选地被取代的苯环或C₅-C₆单环杂芳基和未被取代的或被1或2个C₁-C₄烷基或杂烷基基团取代的C₁-C₄亚杂烷基，其中所述烷基或杂烷基基团可以任选地环化以形成环诸如环丙烷、二氧杂环戊烷或氧杂环戊烷。

在芳基烷基或杂芳基烷基基团被描述为任选地被取代的情况下，所述取代基可以是在所述基团的烷基或杂烷基部分上或芳基或杂芳基部分上。任选地存在于烷基或杂烷基部分上的取代基通常与上面关于烷基基团描述的那些相同；任选地存在于芳基或杂芳基部分上的取代基通常与上面关于芳基基团描述的那些相同。

本文中使用的“芳基烷基”基团如果未被取代则为烃基基团，并且通过环和亚烷基或类似连接基中碳原子的总数来描述。因此，苄基基团是C₇-芳基烷基基团，且苯基乙基是C₈-芳基烷基。

如上所述的“杂芳基烷基”表示包含通过连接基团连接的芳基基团的部分，并且与“芳基烷基”的差别在于，芳基部分的至少一个环原子或在连接基团中的一个原子是选自N、O和S的杂原子。所述杂芳基烷基基团在本文中根据合并的环和连接基中的原子总数来描述，并且它们包括通过杂烷基连接基连接的芳基基团；通过烃基连接基诸如亚烷基连接的杂芳基基团；和通过杂烷基连接基连接的杂芳基基团。因此，例如，C7-杂芳基烷基将包括吡啶基甲基、苯氧基和N-吡咯基甲氧基。

本文中使用的“亚烷基”表示二价烃基基团；因为它是二价的，所以它可以将两个其它基团连接在一起。通常它表示—(CH₂)_n—，其中n是1-8并且优选地n是1-4，尽管在指定的情况下，亚烷基也可以被其它基团取代，并且可以具有其它长度，并且开放价不需要位于链的相反末端。一般术语“亚烷基”涵盖更具体的例子，诸如“亚乙基”，其中n是2，“亚丙基”，其中n是3，和“亚丁基”，其中n是4。亚烷基的烃基基团可以如上所述任选地被取代。

一般而言，在取代基中包含的任何烷基、烯基、炔基、酰基或芳基或芳基烷基基团本身可以任选地被另外的取代基取代。如果没有另外描述取代基，这些取代基的性质与关于主要取代基本身所列举的那些相似。

本文中使用的“氨基”表示—NH₂，但在氨基被描述为“被取代”或“任选地被取代”的情况下，该术语包括NR′R″，其中每个R′和R″独立地是H或是烷基、烯基、炔基、酰基、芳基或芳基烷基基团，并且烷基、烯基、炔基、酰基、芳基或芳基烷基基团中的每个任选地被本文描述为适合相应基团的取代基取代；所述R′和R″基团以及它们所连接的氮原子可以任选地形成3至8元环，其可以是饱和的、不饱和的或芳族的，并且其含有1-3个独立地选自N、O和S的杂原子作为环成员，并且其任选地被描述为适合于烷基基团的取代基取代，或者如果NR′R″是芳族基团，则其任选地被描述为典型地用于杂芳基基团的取代基取代。

取代基的其它组合是本领域已知的并且描述在例如Jung等人的美国专利号8,344,162中，通过本引用并入本文。例如，术语“硫代羰基”和包括“硫代羰基”的取代基的组合包括这样的羰基基团：其中双键硫替换在该基团中的正常双键氧。术语“亚烷基”和类似术语表示指定的烷基基团、烯基基团、炔基基团或环烷基基团，其具有从单个碳原子除去的两个氢原子，使得该基团与所述结构的其余部分双键键合。

因此，根据本发明的方法和组合物涵盖除纳多洛尔或上述纳多洛尔的类似物或衍生物之外的小分子的类似物和衍生物，其任选地被取代，前提条件是，所述任选地被取代的小分子在其活性方面具有与定义的未被取代的小分子基本上等同的药理学活性。所述活性可以通过本领域已知的方法测定，包括酶测定、对气道高反应性的体内测定、任选地被取代的小分子对抑制蛋白-2浓度或活性的影响的测定、确定任选地被取代的小分子对β₂-肾上腺素能受体的活性的影响的测定、以及本领域已知的其它方法。这样的任选地被取代的小分子包括、但是不一定限于其中取代被认为是生物电子等排的分子。生物电子等排性是用于预测化合物的生物活性的众所周知的工具，其基于以下前提：具有相似尺寸、形状和电子密度的化合物可以具有相似的生物活性。为了形成给定分子的生物电子等排体，可以将原始分子中的一个或多个原子或基团用该原子或基团的已知生物电子等排替换物替换。已知生物电子等排替换物包括、但是不一定限于-F、--OH、--NH₂、--Cl和-CH₃的可互换性，-Br和-i-C₃H₇的可互换性；-I和-t-C₄H₉的可互换性；-O--、--S--、--NH₂--、--CH₂--和-Se--的可互换性；在环状或非环状部分中-N＝、--CH＝和-P＝的可互换性；苯基和吡啶基基团的可互换性；-C＝C-和-S—(例如，苯和噻吩)的可互换性；芳族氮(R₁-N(R₃)-R₂)和不饱和的碳((R₁-C(＝R₃)-R₂)的可互换性；以及-CO--、--SO--和-SO₂--的可互换性。生物电子等排替换物的其它替代方案是本领域已知的。

当在根据本申请的方法或组合物中采用的治疗活性化合物是蛋白、蛋白片段、多肽或肽时，可以通过包含一个或多个保守氨基酸置换来修饰所述蛋白、蛋白片段、多肽或肽，只要这样的保守氨基酸置换基本上保留治疗活性化合物的生物活性。更具体地，在肽或蛋白中，氨基酸的合适保守置换是本领域技术人员已知的，并且通常可以在不改变所得分子的生物活性的情况下进行。本领域技术人员公知，一般而言，在多肽的非必需区域中的单个氨基酸置换不会实质上改变生物活性(参见，例如，Watson等人,Molecular Biology ofthe Gene，第4版,1987,Benjamin/Cummings,第224页)。具体地，这样的保守变体具有经修饰的氨基酸序列，使得所述改变不会实质上改变蛋白(保守变体)的二级或三级结构和/或活性，在该上下文中指特异性结合活性。保守氨基酸置换通常涉及将氨基酸用具有相似性质(例如，酸性的、碱性的、带正电荷的或带负电荷的、极性的或非极性的、或其它相似性)的残基置换，使得即使关键氨基酸的置换也不会实质上改变结构和/或活性。提供在功能上相似的氨基酸的保守置换表是本领域众所周知的。例如，选择保守置换的一种示例性指南包括(原始残基后跟示例性置换)：Ala/Gly或Ser；Arg/Lys；Asn/Gln或His；Asp/Glu；Cys/Ser；Gln/Asn；Gly/Asp；Gly/Ala或Pro；His/Asn或Gln；Ile/Leu或Val；Leu/Ile或Val；Lys/Arg或Gln或Glu；Met/Leu或Tyr或Ile；Phe/Met或Leu或Tyr；Ser/Thr；Thr/Ser；Trp/Tyr；Tyr/Trp或Phe；Val/Ile或Leu。一种替代性示例性指南使用以下六组，每组含有彼此互为保守置换的氨基酸：(1)丙氨酸(A或Ala)，丝氨酸(S或Ser)，苏氨酸(T或Thr)；(2)天冬氨酸(D或Asp)，谷氨酸(E或Glu)；(3)天冬酰胺(N或Asn)，谷氨酰胺(Q或Gln)；(4)精氨酸(R或Arg)，赖氨酸(K或Lys)；(5)异亮氨酸(I或Ile)，亮氨酸(L或Leu)，甲硫氨酸(M或Met)，缬氨酸(V或Val)；和(6)苯丙氨酸(F或Phe)，酪氨酸(Y或Tyr)，色氨酸(W或Trp)；(也参见，例如，Creighton(1984)Proteins,W.H.Freeman and Company；Schulz和Schimer(1979)Principles ofProtein Structure,Springer-Verlag)。本领域技术人员将理解，上述置换不是唯一可能的保守置换。例如，为了某些目的，可以将所有带电荷的氨基酸视为彼此的保守置换，无论它们带正电荷还是负电荷。作为另一个例子，为了某些目的，可以将所有非极性氨基酸视为彼此的保守置换。

因此，本发明的一个方面是一种用于在遭受肺气道疾病的受试者中治疗肺气道疾病的方法，所述方法包含施用治疗上有效量的纳多洛尔或纳多洛尔的衍生物或类似物以抑制β-抑制蛋白途径从而治疗所述肺气道疾病。

通常，所述肺气道疾病选自慢性阻塞性肺病(COPD)、哮喘、支气管扩张、支气管炎、丘-施二氏综合征、囊性纤维化的肺后遗症、肺气肿、变应性鼻炎、肺炎和与SARS-CoV-2感染相关的肺症状。优选地，所述肺气道疾病是慢性阻塞性肺病(COPD)；所述COPD可以与另一种疾病或病症(诸如SARS-CoV-2感染)相关。

通常，所述方法包含施用治疗上有效量的纳多洛尔。纳多洛尔的优选立体异构体是如上所述的RSR立体异构体。

可替换地，所述方法包含施用治疗上有效量的纳多洛尔的衍生物或类似物，其为式(I)的化合物：

其中R₁是氢或低级烷基，R₂是氢或低级烷基，且m和n是1至3，前提条件是，其中R₁和R₂都是氢且m是1，n不是1。

通常，所述方法发挥减少肺气道收缩高反应性的治疗效果。通常，所述方法还发挥上调肺β₂-肾上腺素能受体的治疗效果。通常，所述方法还发挥增加肺气道对β₂-肾上腺素能激动剂药物的松弛反应性的治疗效果。

通常，通过选自以下的途径施用所述纳多洛尔或纳多洛尔的衍生物或类似物：口服、持续释放口服、胃肠外、舌下、含服、通过吹入施用和通过吸入施用。优选地，通过吸入施用所述纳多洛尔或纳多洛尔的衍生物或类似物；该途径对于纳多洛尔的施用是特别合乎需要的。当通过吸入施用纳多洛尔时，诸如在包含纳多洛尔、药学上可接受的赋形剂和在某些替代方案中至少一种另外的治疗活性剂的组合物中，所述施用可以产生使用经批准用于505(j)一般途径的测定方法(USP方法)时消失的纳多洛尔血液水平或不可检测的纳多洛尔血液水平。

通常，当采用持续释放口服施用时，纳多洛尔或纳多洛尔的衍生物或类似物的施用方法导致血流中纳多洛尔或纳多洛尔的衍生物或类似物的连续水平。并且，通常，以从最低剂量开始并增加至最高剂量的一系列分级剂量随时间施用所述纳多洛尔或纳多洛尔的衍生物或类似物。在该替代方案中，优选地，当达到最高剂量时，继续以该剂量施用所述纳多洛尔或纳多洛尔的衍生物或类似物。

通常，在根据本发明的方法中，β-抑制蛋白的抑制会阻止或逆转β₂-肾上腺素能受体的脱敏。并且，通常，在根据本发明的方法中，β-抑制蛋白的抑制会阻止或逆转β₂-肾上腺素能受体的内化。另外，通常，在根据本发明的方法中，β-抑制蛋白的抑制会阻止或逆转第二信使特异性的蛋白激酶或特异性的G-蛋白偶联受体激酶对β₂-肾上腺素能受体的磷酸化。类似地，通常，在根据本发明的方法中，β-抑制蛋白的抑制会阻止或逆转支架磷酸二酯酶对第二信使的降解。通常，在根据本发明的方法中，β-抑制蛋白的抑制会阻止或逆转粘液化生或杯形细胞增生的发生。

在根据本发明的方法的一个替代方案中，所述方法进一步包含施用治疗上有效量的至少一种另外的治疗剂。

在一个替代方案中，所述另外的治疗剂是β₂-选择性的肾上腺素能激动剂。通常，所述β₂-选择性的肾上腺素能激动剂选自沙丁胺醇、阿福特罗、班布特罗、比托特罗、溴沙特罗、布酚宁、卡布特罗、克仑特罗、氯丙那林、可尔特罗、多巴酚丁胺、非诺特罗、福莫特罗、异他林、异丙肾上腺素、左旋沙丁胺醇、左沙丁胺醇、马布特罗、间羟异丙肾上腺素、甲氧那明、吡布特罗、丙卡特罗、雷托巴胺、瑞普特罗、利托君、沙美特罗、特布他林、齐帕特罗、及其盐、溶剂化物和前药。

在另一个替代方案中，所述另外的治疗剂是皮质类固醇。通常，所述皮质类固醇选自AZD-5423(2,2,2-三氟-N-[(1R,2S)-1-{[1-(4-氟苯基)-1H-吲唑-5-基]氧基}-1-(3-甲氧基苯基)-2-丙烷基]乙酰胺)、倍氯米松、布地奈德、环索奈德、地夫可特、氟尼缩松、氟替卡松、甲泼尼龙、莫米松、泼尼松龙、泼尼松、地塞米松和曲安西龙、及其盐、溶剂化物和前药。

在另一个替代方案中，所述另外的治疗剂是抗胆碱能药物。通常，所述抗胆碱能药物选自异丙托溴铵、噻托溴铵、氧托溴铵、abediterol、阿地溴铵、格隆溴铵、乌美溴铵、及其盐、溶剂化物和前药。

在又另一个替代方案中，所述另外的治疗剂是生物药(B.L.Walker和R.Leigh，“Use of Biologicals as Immunotherapy in Asthma and Related Diseases,”Expert Rev.Clin.Immunol.4:753-756(2008))。通常，所述生物药选自抗-IL4抗体、抗-IL13抗体、IL4和IL13的抑制剂、抗-IL5抗体和抗-IL8抗体。抗-IL4抗体包括、但不限于人源化的抗-IL4单克隆抗体、pasolizumab。抗-IL13抗体包括、但不限于人抗-IL13单克隆抗体、CAT-354。IL4和IL13的抑制剂是单克隆抗体度匹鲁单抗，其为与白介素-4受体的α亚基(IL4Rα)结合的单克隆抗体，其调节IL4和IL13途径的信号传递；因此，它充当受体拮抗剂(A.L.Kau和P.E.Korenblat，“Anti-Interleukin 4and 13for Asthma Treatment in the Era ofEndotypes,”Curr.Opin.AllergyClin.Immunol.14:570-575(2014))。抗-IL5抗体包括、但不限于单克隆抗体贝那利珠单抗、美泊利单抗和瑞替珠单抗。抗-IL8抗体包括、但不限于人单克隆抗体BMS-986253。

在又另一个替代方案中，所述另外的治疗剂是黄嘌呤化合物。通常，所述黄嘌呤化合物选自茶碱、延长释放茶碱、氨茶碱、可可碱、恩丙茶碱、二羟丙茶碱、异丁茶碱、胆茶碱、阿比茶碱、阿罗茶碱、巴米茶碱、咖啡因、8-氯茶碱、二羟丙茶碱、多索茶碱、恩丙茶碱、依他茶碱、呋拉茶碱、1-异丁基-1-甲基黄嘌呤、羟丙茶碱和占替诺、及其盐、溶剂化物和前药。

在再另一个替代方案中，所述另外的治疗剂是抗-IgE抗体。通常，所述抗-IgE抗体是单克隆抗体或从单克隆抗体衍生出的基因工程抗体。通常，所述抗-IgE抗体是人源化的。合适的抗-IgE抗体是奥马珠单抗。

在再另一个替代方案中，所述另外的治疗剂是白三烯拮抗剂。通常，所述白三烯拮抗剂选自孟鲁司特、普仑司特和扎鲁司特、及其盐、溶剂化物和前药。

在再另一个替代方案中，所述另外的治疗剂是磷酸二酯酶IV抑制剂。通常，所述磷酸二酯酶IV抑制剂选自罗氟司特、西洛司特、吡拉米司特和异丁司特、及其盐、溶剂化物和前药。

在又另一个替代方案中，所述另外的治疗剂是5-脂氧合酶抑制剂。通常，所述5-脂氧合酶抑制剂选自齐留通和芬留顿、及其盐、溶剂化物和前药。

在再另一个替代方案中，所述另外的治疗剂是肥大细胞稳定剂。通常，所述肥大细胞稳定剂选自氮卓斯汀、色甘酸、酮替芬、洛度沙胺、奈多罗米、奥洛他定和吡嘧司特、及其盐、溶剂化物和前药。

在又另一个替代方案中，所述另外的治疗剂是抑制蛋白-2抑制剂。

合适的抑制蛋白-2抑制剂包括、但不限于：抑制蛋白-2的蛋白片段；式(A-I)的化合物：

其中:

(1)v和vi指示在式(A-I)中指出的特定键；

(2)R⁴⁹选自式(A-I(a))、(A-I(b))、(A-I(c))和(A-I(d))：

其中X⁷、X⁸和X⁹各自独立地是O、N或S；

(2)R⁵⁴、R⁵⁵和R⁵⁶各自独立地是H、氰基、氨基或被取代的或未被取代的烷基、烷酰基、烷酰氧基或芳基基团(当X⁷、X⁸或X⁹分别是N时)和不存在(当X⁷、X⁸或X⁹分别是O或S时)；

(3)R⁵⁰是被取代的或未被取代的芳基或杂芳基基团；

(4)R⁵¹和R⁵²各自独立地是H或被取代的或未被取代的烷基基团，或R⁵¹和R⁵²一起形成3-或4-元环烷基环；

(5)R⁵³是被取代的芳基基团，其中所述取代基中的一个且仅一个是式(A-I(e))的部分：

(i)其中R⁵⁷或R⁵⁸中的一个是式(A-I(f))的部分：

且另一个是H、叠氮基、三氟甲基diazirido、异氰基、异硫氰基、五氟硫烷基或被取代的或未被取代的烷基、烷酰基、烷酰氧基、芳酰基或芳酰氧基基团；

(ii)R⁵⁹和R⁶⁰各自独立地是H、卤素、叠氮基、三氟甲基diazirido、异氰基、异硫氰基、五氟硫酰基或被取代的或未被取代的烷基、烷酰基、烷酰氧基、芳酰基或芳酰氧基基团；

(iii)Y⁹是CH；

(iv)Y¹⁰和Y¹¹各自独立地是C或N，前提条件是，当Y¹⁰或Y¹¹是N时，则R⁵⁷或R⁵⁸分别不存在；

(v)Y¹²是CH、N、O、S、S(O)或S(O)₂；

(vi)R⁶¹、R⁶²和R⁶³各自独立地是H、叠氮基、三氟甲基diazirido、异氰基、异硫氰基或被取代的或未被取代的烷基基团；

(vii)R⁶⁴是H或被取代的或未被取代的烷基基团(当Y¹²是CH或N时)和不存在(当Y¹²是O、S、S(O)或S(O)₂时)；且

(viii)t是0或1；且

(6)s是0或1；

ω-3脂肪酸，其可以选自DHA(二十二碳六烯酸)和EPA(二十碳五烯酸)；CXCR2抑制剂，其可以选自SB225002(N-(2-溴苯基)-N′-(2-羟基-4-硝基苯基)脲),AZD5069(N-(2-((2,3-二氟苄基)硫基)-6-(((2R,3S)-3,4-二羟基丁烷-2-基)氧基)嘧啶-4-基)氮杂环丁烷-1-磺酰胺)；SB265610(1-(2-溴苯基)-3-(4-氰基-1H-苯并[d][1,2,3]三唑-7-基)脲)；navarixin；danirixin；CXCR2-IN-1(1-(2-氯-3-氟苯基)-3-[4-氯-2-羟基-3-(1-甲基哌啶-4-基)磺酰基苯基]脲)；SRT3109(N-(2-((2,3-二氟苄基)硫基)-6-((3,4-二羟基丁烷-2-基)氨基)嘧啶-4-基)氮杂环丁烷-1-磺酰胺)；和SRT3190(N-[2-[(2,3-二氟苯基)甲基硫烷基]-6-[[(2S,3R)-3,4-二羟基丁烷-2-基]氨基]嘧啶-4-基]氮杂环丁烷-1-磺酰胺)；MyD88抑制剂，其可以选自ST2825((4R,7R,8aR)-1′-[2-[4-[[2-(2,4-二氯苯氧基)乙酰基]氨基]苯基]乙酰基]-6-氧代螺[3,4,8,8a-四氢-2H-吡咯并[2,1-b][1,3]噻嗪-7,2′-吡咯烷]-4-甲酰胺)和T6167923(4-(3-溴苯基)磺酰基-N-(1-噻吩-2-基乙基)哌嗪-1-甲酰胺)；MD2抑制剂，其可以是L48H37((3E,5E)-1-乙基-3,5-二[(2,3,4-三甲氧基苯基)亚甲基]哌啶-4-酮)；六磷酸肌醇(IP6)；barbadin；蛋白激酶A的抑制剂，其可以选自：(i)H89(N-[2-[[3-(4-溴苯基)-2-丙烯基]氨基]乙基]-5-异喹啉磺酰胺二盐酸盐)；(ii)N-(ω-十一烯酰基)苯丙氨酸；(iii)3′,5′-环状单硫代磷酸酯-R；(iv)H-7(5-(2-甲基哌嗪-1-基)磺酰基异喹啉二盐酸盐)；(v)H-9(N-(2-氨基乙基)-5-异喹啉磺酰胺；(vi)6-22酰胺；(vii)蛋白激酶A抑制剂，其选自：法舒地尔；N-[2-(磷酸化溴代硝基精氨酰基氨基)乙基]-5-异喹啉磺酰胺；1-(5-喹啉磺酰基)哌嗪；4-氰基-3-甲基异喹啉；乙酰氨基-4-氰基-3-甲基异喹啉；8-溴-2-单酰基腺苷-3,5-环状单硫代磷酸酯；腺苷3,5-环状单硫代磷酸酯；2-O-单丁基-环磷酸腺苷；8-氯-环磷酸腺苷；N-[2-(肉桂酰基氨基酸)]-5-异喹啉酮；反相-8-己基氨基腺苷3,5-单硫代磷酸酯；反相-8-哌啶基腺苷-环磷酸腺苷；反相-腺苷3,5-环状单硫代磷酸酯；5-碘结核菌素；8-羟基腺苷-3,5-单硫代磷酸酯；钙磷酸蛋白C；瑞香素；反相-8-氯苯基-环磷酸腺苷；反相-环磷酸腺苷；反相-8-Br-环磷酸腺苷；1-(5-异喹啉磺酰基)-2-甲基哌啶；8-羟基腺苷-3′,5′-单磷酸酯；8-己基氨基腺苷-3′,5′-单磷酸酯；和反相-腺苷3′,5′-环状单磷酸酯；和磷脂酶C抑制剂，其可以选自马兜铃酸钠；D609(三环癸烷-9-基黄原酸钠)；D-赤式-二氢鞘氨醇；U-73122(1-(6-((17β-3-甲氧基雌-1,3,5(10)-三烯-17-基)氨基)己基)-1H-吡咯-2,5-二酮)；吡咯烷硫代氨基甲酸酯；硫酸新霉素；thielavin B；依地福新；杂环基取代的苯胺基磷脂酶C抑制剂；DCIC(3,4-二氯异香豆素)；和calporoside或calporoside的衍生物。

在再另一个替代方案中，所述另外的治疗剂是GRK抑制剂。GRK的抑制剂可以被视作抑制蛋白-2的间接抑制剂。GRK的抑制剂包括、但不限于提供一氧化氮或有关的氧化还原物质的一氧化氮供体，包括：S-亚硝基谷胱甘肽；C-亚硝基化合物，其中亚硝基部分连接至叔碳；式(N-I)的化合物：

其中所述抗衡离子是氢且其中R₁和R₂选自C₁-C₆烷基和C₆-C₂₀芳基，其任选地被选自氨基、羟基或羧基的取代基取代，特别是二聚的2-[4′-(α-亚硝基)异丁酰基苯基]丙酸；C-亚硝基化合物，其含有式(N-II)的部分：

/>

其中X是S、O或NR，其中R选自C₁-C₆烷基，其为未被取代的或被一个或多个含有1至10个碳原子的醇、醚、酯或酰胺基团取代；化合物，其选自乙酰基水杨酸的C-亚硝基衍生物、普萘洛尔的C-亚硝基衍生物、纳多洛尔的C-亚硝基衍生物、卡维地洛的C-亚硝基衍生物、哌唑嗪的C-亚硝基衍生物、tinolol的C-亚硝基衍生物、美托洛尔的C-亚硝基衍生物、吲哚洛尔的C-亚硝基衍生物、拉贝洛尔的C-亚硝基衍生物、氨苯蝶啶的C-亚硝基衍生物、呋塞米的C-亚硝基衍生物、依那普利的C-亚硝基衍生物、雷米普利的C-亚硝基衍生物、洛伐他汀的C-亚硝基衍生物、普伐他汀的C-亚硝基衍生物、吉非贝齐的C-亚硝基衍生物、氯贝丁酯的C-亚硝基衍生物、硝苯地平的C-亚硝基衍生物、氨氯地平的C-亚硝基衍生物、地尔硫卓的C-亚硝基衍生物、维拉帕米的C-亚硝基衍生物、西咪替丁的C-亚硝基衍生物、雷尼替丁的C-亚硝基衍生物、沙丁胺醇的C-亚硝基衍生物、异丙托溴铵的C-亚硝基衍生物、美金刚的C-亚硝基衍生物、10-脱乙酰基浆果赤霉素III的C-亚硝基衍生物、泰素的C-亚硝基衍生物、普瑞玛尼的C-亚硝基衍生物、达塞曲匹的C-亚硝基衍生物、超氧化物歧化酶模拟物的C-亚硝基衍生物、别嘌呤醇的C-亚硝基衍生物、塞来昔布的C-亚硝基衍生物、吲哚美辛的C-亚硝基衍生物、thioflosulide的C-亚硝基衍生物和依托度酸的C-亚硝基衍生物；和化合物，其选自S-亚硝基谷胱甘肽(GSNO)、S-亚硝基-N-乙酰基青霉胺、S-亚硝基-半胱氨酸、S-亚硝基-半胱氨酸乙酯、S-亚硝基-半胱氨酰基甘氨酸、S-亚硝基-γ-甲基-L-同型半胱氨酸、S-亚硝基-L-同型半胱氨酸、S-亚硝基-γ-硫代-L-亮氨酸、S-亚硝基-δ-硫代-L-亮氨酸、S-亚硝基白蛋白、硝普钠(nipride)、亚硝酸乙酯、硝酸甘油、SIN1(吗多明)、furoxamines和N-羟基-(N-亚硝胺)。

本发明的再另一个方面是一种药物组合物，其包含：

(1)治疗上有效量的纳多洛尔或纳多洛尔的衍生物或类似物以抑制β-抑制蛋白途径从而治疗所述肺气道疾病；和

(2)药学上可接受的载体。

可以配制所述药物组合物来治疗选自以下的肺疾病：慢性阻塞性肺病(COPD)、哮喘、支气管扩张、支气管炎、丘-施二氏综合征、囊性纤维化的肺后遗症、肺气肿、变应性鼻炎、肺炎和与SARS-CoV-2感染相关的肺症状。具体地，可以配制所述药物组合物来治疗COPD。

优选地，所述组合物包含纳多洛尔。但是，在一个替代方案中，所述组合物可以包含如上所述的纳多洛尔的衍生物或类似物或纳多洛尔的前药。

通常，所述药物组合物的施用发挥减少肺气道收缩高反应性的治疗效果。也通常，所述药物组合物的施用发挥上调肺β₂-肾上腺素能受体的治疗效果。也通常，所述药物组合物的施用发挥增加肺气道对β₂-肾上腺素能激动剂药物的松弛反应性的治疗效果。

通常，将所述药物组合物配制用于通过选自以下的途径施用：口服、持续释放口服、胃肠外、舌下、含服、通过吹入施用和通过吸入施用。优选地，将所述药物组合物配制用于通过持续释放口服途径施用，特别当所述药物组合物包含纳多洛尔时。

在一个替代方案中，所述药物组合物的施用导致血流中纳多洛尔或纳多洛尔的衍生物或类似物的连续水平,特别当将所述组合物配制用于通过持续释放口服途径施用时。

当所述药物组合物包含纳多洛尔时，在一个替代方案中，所述组合物中纳多洛尔的量选自每单位剂量1mg、3mg、5mg、10mg、15mg、30mg、50mg和70mg。

所述组合物可以进一步包含至少一种用于治疗肺气道疾病的另外治疗剂，如上面关于用于治疗肺气道疾病的方法所述。通常，所述至少一种另外的治疗剂是用于治疗慢性阻塞性肺病。

所述组合物可以进一步包含治疗上有效量的如上所述的β₂-选择性的肾上腺素能激动剂。

可替换地，所述组合物可以进一步包含治疗上有效量的如上所述皮质类固醇。

可替换地，所述组合物可以进一步包含治疗上有效量的如上所述生物药。

在另一个替代方案中，所述组合物可以进一步包含治疗上有效量的抗胆碱能药物。

在又另一个替代方案中，所述组合物可以进一步包含治疗上有效量的如上所述的黄嘌呤化合物。

在再另一个替代方案中，所述组合物可以进一步包含治疗上有效量的如上所述的抗-IgE抗体。

在再另一个替代方案中，所述组合物可以进一步包含治疗上有效量的如上所述的白三烯拮抗剂。

在再另一个替代方案中，所述组合物可以进一步包含治疗上有效量的磷酸二酯酶IV抑制剂。

在再另一个替代方案中，所述组合物可以进一步包含治疗上有效量的如上所述的5-脂氧合酶抑制剂。

在再另一个替代方案中，所述组合物可以进一步包含治疗上有效量的如上所述的肥大细胞稳定剂。

在再另一个替代方案中，所述组合物可以进一步包含治疗上有效量的抑制蛋白-2抑制剂，诸如，但不限于：抑制蛋白-2的蛋白片段；如上所述的式(A-I)的化合物；如上所述的ω-3脂肪酸；如上所述的CXCR2抑制剂；如上所述的MyD88抑制剂；如上所述的MD2抑制剂；六磷酸肌醇；或barbadin。

在再另一个替代方案中，所述组合物可以进一步包含治疗上有效量的如上所述的GRK抑制剂。GRK的抑制剂可以充当抑制蛋白-2的间接抑制剂。

在再另一个替代方案中，所述组合物可以进一步包含治疗上有效量的如上所述的蛋白激酶A的抑制剂。蛋白激酶A的抑制剂可以充当抑制蛋白-2的间接抑制剂。

在再另一个替代方案中，所述组合物可以进一步包含治疗上有效量的如上所述的磷脂酶C的抑制剂。磷脂酶C的抑制剂可以充当抑制蛋白-2的间接抑制剂。

在根据本发明的组合物中，通常，所述药学上可接受的载体选自溶剂、分散介质、包衣剂、抗细菌剂、抗真菌剂、等渗剂、吸收延迟剂、防腐剂、甜味剂(对于口服施用)、增稠剂、缓冲剂、液体载体、润湿剂、增溶剂、或乳化剂；酸化剂、抗氧化剂、碱化剂、承载剂、螯合剂、着色剂、络合剂、助悬剂或增粘剂、风味剂或香料、油、渗透促进剂、聚合物、硬化剂、蛋白、碳水化合物、填充剂和润滑剂。

下述实施例例证了本发明。这些实施例仅为了例证目的而包括，并且无意限制本发明。

实施例

实施例1

通过长期施用β-肾上腺素能反向激动剂来实现的气道阻力减少

方法

将6周龄的Balb/cJ小鼠(Jackson Animal Laboratory,Bar Harbor,Maine)圈养在无特定病原体的条件下，并用不含鸡卵白蛋白的饮食饲喂。在表现出人哮喘的主要特征(诸如肺嗜酸性粒细胞性炎症、气道高反应性和异质气道狭窄)的鼠模型中检查了非选择性的β-肾上腺素能反向激动剂卡维地洛(GlaxoSmithKline,King of Prussia,PA)和纳多洛尔(Sigma Chemical,St.Louis,MO)以及沙丁胺醇(Sigma Chemical,St.Louis,MO)(一种β₂-肾上腺素能部分激动剂)的施用的影响。在以密切时间关系进行的实验中，将在药物治疗的动物中获得的结果与在媒介物治疗的相应物(对照)中获得的结果进行对比。实施例1的研究的结果量度包括药物治疗的小鼠和未治疗的动物之间在基线气道阻力、对胆碱能刺激的气道反应性程度和支气管肺泡灌洗(BALF)细胞构成方面的统计学显著差异。在方案第2、9和16天，通过皮下注射25μg吸附到氢氧化铝的卵白蛋白来致敏小鼠。随后，从方案第23天到第27天，每天给小鼠鼻内施用50μL含有25μg卵白蛋白的盐水溶液。一组卵白蛋白致敏的盐水攻击的小鼠充当卵白蛋白的全身致敏和呼吸道攻击的对照。在鼻内施用之前，用氟烷蒸气使小鼠镇静。对于实施例1的研究，卵白蛋白致敏的和卵白蛋白攻击的小鼠、以及卵白蛋白致敏的和盐水攻击的小鼠将分别被称为哮喘小鼠和对照小鼠。使用的药物是沙丁胺醇(一种β₁/β₂-肾上腺素能激动剂)、阿普洛尔(一种具有部分激动剂活性的β₁/β₂-肾上腺素能拮抗剂)、以及纳多洛尔和卡维地洛(两种非选择性的β₁/β₂肾上腺素能反向激动剂)。

为了检查β-肾上腺素能配体疗法的持续时间对哮喘鼠模型的表型的影响，对不同组的哮喘小鼠急性或长期施用实验药物。

在方案第28天，在测定气道对醋甲胆碱的反应性之前15分钟，对接受急性疗法的哮喘小鼠施用β-肾上腺素能药或生理盐水的单次静脉内输注。施用给小鼠的卡维地洛、纳多洛尔、阿普洛尔和沙丁胺醇的剂量分别为24mg/kg、72mg/kg、72mg/kg和0.15mg/kg。接受长期疗法的哮喘小鼠在方案第1至28天期间接受β-肾上腺素能药治疗。接受β-拮抗剂的那些可以自由接近分别用2400ppm、250ppm或7200ppm浓度的卡维地洛、纳多洛尔或阿普洛尔治疗过的食物。基于先前公开的研究中在小鼠中产生治疗效果的浓度来选择这些浓度。给非哮喘小鼠饲喂正常食物。使用渗透微型泵(#2004,Durect Corporation,Cupertino,CA)以0.5mg/kg/天的剂量递送沙丁胺醇28天。

在方案第28天，将小鼠麻醉、切开气管并连接到计算机控制的小动物呼吸机(Flexivent,Scientific Respiratory Equipment,Inc.，蒙特利尔，加拿大)。使用强迫振荡技术测量气道阻力(R_aw)。还测定了支气管肺泡灌洗液(BALF)的细胞组成。在未治疗的哮喘小鼠中，气道反应性程度和在BALF中回收的嗜酸性粒细胞的数目显著高于卵白蛋白致敏的盐水攻击的(对照)小鼠。但是，观察到，在与接受急性β-肾上腺素能拮抗剂治疗的小鼠以密切时间关系研究的未治疗的哮喘小鼠中的气道反应性程度和在BALF中回收的嗜酸性粒细胞的数目低于在与接受慢性β-肾上腺素能拮抗剂疗法的小鼠伴随地研究的未治疗的哮喘小鼠中得到的结果。

为了诱导气道收缩，使用注射器输液泵(Raze Scientific Instruments,Stanford,CN)以恒定速率静脉内地输注含有150μg/mL乙酰基-α-甲基胆碱氯化物(醋甲胆碱)(Sigma Chemical,St.Louis,MO)的溶液。醋甲胆碱输注以0.008mL/min开始，其速率逐步加倍直至最大0.136mL/min。将每个醋甲胆碱剂量施用3至5分钟，在此期间以1分钟间隔采样数据，并然后取平均值。

数据分析

计算呼吸系统的复杂输入阻抗，并取在19.75Hz的呼吸系统阻抗的实部值来反映气道阻力(R_aw)的量级。为了检查每只动物的气道反应性程度，绘制了作为醋甲胆碱剂量的函数的R_aw值。响应于醋甲胆碱刺激而达到的最大R_aw值被称为R_aw峰。对于在醋甲胆碱剂量-R_aw应答曲线中达到平台的小鼠，使用GraphPad Prism4(GraphPad Software,Inc.)通过线性插值计算ED₅₀。为了对比两组，使用多组Student氏t-检验的方差分析，获得β-肾上腺素能药治疗的和未治疗的小鼠的结果。将Bonferroni检验用于检查实验组之间的统计差异。使用双尾配对t检验评估急性药物治疗对基线呼吸系统机制(mechanics)的影响。P<0.05的值被认为是显著的。

图2

图2A和2B显示，与哮喘小鼠在盐水激发后的微小应答不同，醋甲胆碱激发显著增强哮喘小鼠中的气道阻力(R_aw)。这证实，在本研究中的小鼠模型表现出气道高反应性，这是在人哮喘中以及在人慢性阻塞性肺病和其它肺疾病或与过度炎症相关的病症中气道功能障碍的关键特征。

在图2C中，对哮喘小鼠施用的沙丁胺醇的单次静脉内推注降低了气道对醋甲胆碱激发的反应性水平以及预期的气道阻力水平，从而证明了该药剂的急性作用。但是，在图2D中，当向小鼠递送沙丁胺醇28天时，没有观察到保护。当人对这些药物产生耐受性时，已经在人类中观察到在长期施用β-肾上腺素能激动剂后气道高反应性的这种减少缺乏。对这样的β-肾上腺素能激动剂的耐受性问题也与这些药物用于治疗慢性阻塞性肺病的施用相关。

在图2E中，当给哮喘小鼠单次静脉内推注阿普洛尔(一种具有部分激动剂活性的β-肾上腺素能拮抗剂)时，它们的气道反应性减弱，如与在未治疗的相应物中所得的结果相比在≥408μg/kg/min(P<0.05)的醋甲胆碱剂量时R_aw值的显著下降所指示。在急性施用阿普洛尔后气道反应性的减少与关于沙丁胺醇观察到的结果相似，与阿普洛尔所具有的部分激动剂活性一致。在图2F中，当将哮喘小鼠暴露于阿普洛尔28天时，它们的平均醋甲胆碱剂量-应答关系类似于在未治疗的小鼠中所得到的结果，从而证实该药物在长期施用后没有提供益处，沙丁胺醇也是如此。这再次直接类似于人患者在长期施用这样的药物后所观察到的耐受性，包括当施用这样的药物用于治疗慢性阻塞性肺病时。

在图2G中，卡维地洛的单次静脉内推注增强了哮喘小鼠的气道反应性。这与之前在人类中的观察结果一致，即β-肾上腺素能拮抗剂向哮喘患者的急性递送可以导致严重的气道收缩。相反，在图2H中，卡维地洛的长期施用降低了哮喘小鼠对醋甲胆碱激发的反应性。

在图2I中，纳多洛尔的单次静脉内推注也增强了哮喘小鼠的气道反应性，这类似于关于卡维地洛观察到的结果。如在图2J中所示，纳多洛尔的长期递送也导致气道反应性的下降，这比卡维地洛治疗造成的下降更明显。事实上，在慢性纳多洛尔治疗的哮喘小鼠中获得的平均醋甲胆碱剂量-R_aw应答关联与在接受急性沙丁胺醇治疗的小鼠中获得的结果相似。

图3

图3显示了β-肾上腺素能受体配体的施用对哮喘小鼠中气道对胆碱能刺激的反应性峰值的影响。通过检查各个醋甲胆碱剂量-应答曲线并选择由任何醋甲胆碱剂量(最常见的是倒数第二个剂量，408μg kg^-1min^-1)产生的最高R_aw值，确定每只小鼠的峰R_aw。显示了以下情况的平均峰R_aw±SEM：用β-肾上腺素能受体激动剂沙丁胺醇治疗后(A)，用各种药剂急性治疗后(B)(ALP＝阿普洛尔；CAR＝卡维地洛；NAD；纳多洛尔)；以及使用(B)中所用的相同药剂长期治疗后，所有这些与未治疗的哮喘小鼠(NTX)(黑色条，n＝7-25)和对照小鼠(对照，白色条，n＝6-21)进行对比。值为n＝8-19只小鼠的对醋甲胆碱的峰R_aw值的平均值±SEM。请注意(B)中y-轴标尺的变化。*，P<0.05，相对于NTX；#，P<0.05，相对于对照(ANOVA)。

实施例1的结果适用于慢性阻塞性肺病以及哮喘，因为这两种疾病都涉及气道阻力的恶化并且与过度炎症的后果相关。

实施例2

慢性反向激动剂治疗增加β-肾上腺素能受体数目，如通过放射性配体结合所测量 的

如下测量哮喘小鼠中的β₂-肾上腺素能受体数目。如下治疗哮喘小鼠(卵白蛋白攻击的)：对照，无药物治疗+醋甲胆碱攻击；沙丁胺醇，一种短效β₂激动剂；卡维地洛，一种具有α₁-肾上腺素能拮抗剂活性的β₁,β₂，非选择性的反向激动剂；纳多洛尔，一种高特异性的、亲水的β₁,β₂，非选择性的反向激动剂；和阿普洛尔，一种β-肾上腺素能拮抗剂。药物治疗是在醋甲胆碱攻击之前15分钟的单次治疗或持续28天(通过皮下渗透微型泵连续递送沙丁胺醇，并且阿普洛尔、卡维地洛和纳多洛尔是在动物食物中)。将小鼠处死并如下分离肺膜。将冷冻的肺组织使用polytron(Pro 200,Pro Scientific,Inc.)在含有0.32M蔗糖和25mMTris(pH 7.4)的冰冷缓冲液中匀浆化。将匀浆物在4℃在1000×g离心10min。将所得上清液在4℃在40,000×g离心20min。将沉淀物悬浮于冰冷的25mM Tris-HCl缓冲液(pH 7.4)中并在4℃在40,000×g离心20min。将最终沉淀物悬浮于200μL的25mM Tris-HCIl(pH 7.4)中；用BCA蛋白测定试剂盒测定膜蛋白浓度。放射性配体受体结合温育混合物含有膜(约10μg蛋白)、递增浓度(5-7500pM)的在25mM Tris-HCI(pH 7.4)中的(-)3-[¹²⁵I]氰基吲哚洛尔(ICYP)和结合缓冲液，最终体积为250μL。将普萘洛尔用于测定非特异性结合。在37℃进行温育2小时并通过穿过玻璃纤维过滤器的快速真空过滤来终止。将过滤器用250μL冷的洗涤缓冲液(25mM Tris-HCI,pH 7.4)洗涤三次，并在计数器中测定放射性。所有实验一式三份进行，并且值为每组n＝3-5只动物的平均值±SEM。将受体密度表示为每毫克蛋白的位点飞摩尔数(femtomoles of sites per milligram of protein)。通过饱和结合曲线的非线性回归确定B_max。将表观K_D值(在括号内)表示为pM。请注意，15分钟和28天时间点表示药物治疗的持续时间。将所有小鼠在相同年龄处死，并且因此对于媒介物治疗组(对照和NTX)，各组是相同的并且将结果汇总。#P<0.05，相对于对照；*P<0.05，相对于NTX(Student氏t-检验)。

放射性配体结合揭示，与未经治疗的、未攻击的小鼠相比，在醋甲胆碱攻击的、但在其它方面未治疗的哮喘小鼠中的β₂-肾上腺素能受体水平似乎略低，如在表1中所示。长期阿普洛尔治疗导致β₂-肾上腺素能受体水平的稍微下降。长期沙丁胺醇治疗也是如此。最显著的是，卡维地洛治疗的小鼠表现出的β₂-肾上腺素能受体水平比未治疗的小鼠增加了10倍以上，从而证明这种β-肾上腺素能反向激动剂在长期施用后增加受体水平的效力。类似地，纳多洛尔治疗的小鼠表现出的受体水平比未经治疗的、醋甲胆碱攻击的哮喘小鼠增加了近八倍。

表1

通过放射性配体结合来确定β-肾上腺素能受体密度

实施例2的结果与慢性阻塞性肺病有关，因为β₂-肾上腺素能受体的密度对于对激动剂的应答而言是重要的，所述激动剂不仅用于治疗慢性阻塞性肺病，而且用于治疗如上所述的其它呼吸系统疾病和病症。

实施例3

长期反向激动剂治疗增加β-肾上腺素能受体数目，如通过免疫化学所监测的

对于β₂-肾上腺素能受体水平的免疫组织化学分析，使用未药物治疗的对照小鼠和用β₂-肾上腺素能反向激动剂纳多洛尔长期治疗的小鼠。将小鼠处死并切离肺。然后将肺在4％低聚甲醛中固定(45分钟，0℃)。固定后，将肺在PBS中洗涤(60分钟)并放置在递增浓度的蔗糖中(10％蔗糖/5％甘氨酸在PBS中的溶液30min；20％蔗糖/10％甘氨酸在PBS中的溶液30min；30％蔗糖/15％甘氨酸在PBS中的溶液12h，在4℃)。将肺包埋在OCT中并用Tissue-Tek II低温恒温器切割12-μm切片。将切片风干并用4％低聚甲醛固定15分钟。在PBS中洗涤3次后，将载玻片用5％奶在PBS中的溶液封闭1小时，并然后与在封闭溶液中的抗-β₂-肾上腺素能受体抗体(1:200，Santa Cruz Biotechnology)一起温育过夜。将载玻片在PBS中洗涤并与二级抗体(1:200,Cy3山羊抗-兔抗体，16h，在4℃)一起温育。将对照载玻片与抗体特异性封闭肽一起温育，以证明一级抗体的结合特异性。用PBS洗涤后，安装盖玻片并通过落射荧光显微术观察。

如在图4中所示，在用纳多洛尔治疗的动物的肺中抗-β₂-肾上腺素能受体抗体的标记比未治疗的动物的肺中的标记强烈得多(A，对照+抗体；B，对照+抗体+封闭肽；C，纳多洛尔+抗体；D，纳多洛尔+抗体+封闭肽)。在β₂-肾上腺素能受体肽存在下温育后该信号传递丧失，表明该抗体特异性地结合β₂-肾上腺素能受体。该观察结果与实施例2的放射性配体结合数据一致，并且表明β₂-肾上腺素能反向激动剂药物的长期施用有效地上调β₂-肾上腺素能受体。

实施例4

卡维地洛和沙丁胺醇的组合对气道高反应性的影响

将卡维地洛和沙丁胺醇的联合疗法与单独用卡维地洛的单一疗法对哮喘小鼠的气道高反应性的影响进行对比。

将6周龄的小鼠(Balb/cJ)圈养在无特定病原体的条件下，并用不含鸡卵白蛋白的饮食饲喂。用吸附到氢氧化铝上的卵白蛋白使小鼠全身致敏。如下治疗小鼠：CAR/SAL 28D＝施用卡维地洛(2400ppm在动物食物中)和沙丁胺醇(在Alzet#2400渗透微型泵中皮下递送0.5mg/kg/天)28天的小鼠(n＝6-12)；NTX S/C＝无药物治疗28天的小鼠(n＝6-12)；对照＝无药物治疗28天、随后不攻击的小鼠(n＝6-12)；CARHD 28D＝单独施用卡维地洛(2400ppm在动物食物中)28天的小鼠(n＝6-12)；CARHD 28D SAL AC＝施用卡维地洛(2400ppm在动物食物中)28天的小鼠(n＝6-12)，并在测量气道高反应性之前15分钟，以1.2mg/kg的剂量施用沙丁胺醇。

为了测量28天后的气道高反应性，将除CTRL(对照)小鼠外的所有小鼠用卵白蛋白攻击，并然后将所有小鼠麻醉，切开气管，并连接至Flexivent小动物呼吸机，以通过强迫振荡技术测量气道阻力(R_aw)。为了诱导气道收缩，使用注射器输液泵输注含有150μg/mL的醋甲胆碱的溶液。醋甲胆碱输注以0.008mL/min开始，并且其速率逐步加倍直至最大0.136mL/min。施用每个醋甲胆碱剂量直至达到平台，在此期间以1分钟间隔采样数据3-5分钟，并然后取平均值。

在图5A中，在最高剂量的醋甲胆碱下，两种组合药物治疗在预防支气管收缩方面同样有效，并且与仅用盐水溶液攻击的对照小鼠没有统计学显著差异。卡维地洛单一疗法导致比这些治疗更高的支气管收缩，但低于未药物治疗的致敏的和攻击的(NTX S/C)小鼠。因此，β₂-肾上腺素能反向激动剂和激动剂与长期或急性施用的激动剂的联合疗法可有效改善气道对变应原和醋甲胆碱攻击的高反应性，并且比单独的β₂-肾上腺素能反向激动剂的单一疗法有所改进。

该数据总结于图5B中，其表明，卡维地洛和沙丁胺醇的组合对于降低治疗的气道高反应性最有效，其结果显示在图5A中。这表明使用β₂-肾上腺素能反向激动剂和激动剂的联合疗法的有效性。

实施例5

与氨茶碱的联合疗法对纳多洛尔的急性气道效应的影响

如在实施例1中所述使小鼠对变应原卵白蛋白致敏。然后用变应原攻击小鼠，并然后进行醋甲胆碱诱导的支气管收缩攻击、非药物治疗、NTX S/C或在醋甲胆碱攻击前15分钟用0.72mg/kg纳多洛尔腹膜内预治疗(纳多洛尔急性治疗)。

在时间点1(时间＝-10min)，测定小鼠的基线气道阻力。在时间点2(时间＝-5min)，将醋甲胆碱输注进小鼠体内以达到其EC70。在时间点3(时间＝0min)，以100mg/kg的剂量腹膜内施用氨茶碱。

在图6中，用纳多洛尔对小鼠的预治疗导致与未药物治疗的致敏的和变应原攻击的小鼠相同的基线气道阻力。但是，在醋甲胆碱攻击后，纳多洛尔治疗的小鼠表现出约4.5单位相对于2.5单位的高得多的气道阻力。在施用氨茶碱后，未经治疗的小鼠和纳多洛尔治疗的小鼠的气道阻力出现显著且持续的下降。

Z.Callaerts-Vegh等人，“Effects of Acute and Chronic Administration ofβ-Adrenoceptor Ligands on Airway Function in a Murine Model of Asthma,”Proc.Natl.Acad.Sci.USA 101:4948-4953(2004)已经证实，虽然长期施用的纳多洛尔会预防相同小鼠哮喘模型中的气道高反应性，但是急性施用的纳多洛尔会恶化气道高反应性。这些数据证实，甲基黄嘌呤氨茶碱的添加可以减轻纳多洛尔施用对气道高反应性的急性影响。这是有益的，因为哮喘受试者有机会长期施用纳多洛尔以阻止支气管收缩。然后，这些受试者可以共同施用甲基黄嘌呤诸如氨茶碱以阻止纳多洛尔的急性有害影响。这些影响在持续时间上是暂时的，但可以损害患者对治疗方案的顺应性。

实施例6

沙丁胺醇或纳多洛尔治疗对培养的气管平滑肌细胞中磷脂酶C与肌动蛋白的比率 的影响

培养的气管平滑肌细胞得自暴露于以下治疗的小鼠：NS/NC＝非哮喘的、未攻击的小鼠；S/C＝哮喘小鼠；Sal.Ac＝哮喘小鼠，急性沙丁胺醇治疗；Sal.Ch＝哮喘小鼠，长期沙丁胺醇治疗；Nad.Ac＝哮喘小鼠，急性纳多洛尔高剂量治疗；和Nad.Ch＝哮喘小鼠，慢性纳多洛尔高剂量治疗。

在气道功能实验后，通过手术从经过药物或媒介物治疗的麻醉小鼠切除气管。将气管切碎，将细胞铺板并在培养物中生长。平滑肌细胞生长得更快并占据培养皿。使细胞在含有治疗或媒介物对照中所用的药物的培养基中生长。通过使用对磷脂酶C(PLC-β1)具有特异性的抗体进行免疫印迹来测定该酶。肌动蛋白用作负载对照，并且将PLC-β1的量表示为与肌动蛋白的比率。

酶磷脂酶C在导致哮喘症状的途径中起着关键作用，因为它会裂解膜磷脂中的磷酸二酯键，导致1,2-甘油二酯的形成。然后通过甘油二酯脂肪酶和甘油单酯脂肪酶的连续作用从甘油二酯释放花生四烯酸。一旦释放，一部分花生四烯酸就会被迅速代谢，产生氧化产物，包括类花生酸类诸如前列腺素。因此，可以抑制磷脂酶C活性的任何治疗都与哮喘的治疗相关。类似地，磷脂酶C的抑制剂也与其它呼吸系统疾病和病症诸如慢性阻塞性肺病的治疗相关。

结果显示在图7中。图7所示的结果表明，纳多洛尔的长期施用显著降低了磷脂酶C的活性。这表明，纳多洛尔的这种长期施用对于哮喘、慢性阻塞性肺病以及影响呼吸道并与炎症和气道高反应性相关的其它疾病和病症是有效的，并阻止导致哮喘症状和其它这样的病症的某些机制的活化。

实施例7

低剂量和高剂量β-肾上腺素能受体药物对气道阻力的影响

对于这些实验，将沙丁胺醇用于通过微型泵以0.5mg/kg/天的剂量长期施用，并用于在攻击前15分钟通过静脉内推注以0.15mg/kg的剂量急性施用。将阿普洛尔以在食物中的7200ppm的高剂量使用，或以在食物中的720ppm的低剂量使用。将卡维地洛以在食物中的2400ppm的高剂量使用，或以在食物中720ppm的低剂量使用。将纳多洛尔以在食物中250ppm的高剂量使用，或以在食物中25ppm的低剂量使用。还试验了以在食物中1ppm的纳多洛尔，这些结果与未治疗的小鼠相同。

结果显示在图8A(沙丁胺醇)；8B(高剂量阿普洛尔)；8C(低剂量阿普洛尔)；8D(高剂量卡维地洛)；8E(低剂量卡维地洛)；8F(高剂量纳多洛尔)；和8G(低剂量纳多洛尔)中。在这些简图中，对照＝对照小鼠，非哮喘的，未药物治疗的；NTX＝哮喘小鼠，未药物治疗的；AC＝急性施用；2d＝长期施用2天；28d＝长期施用28天。将气道阻力(R_aw)绘制为cm H₂O ml^-1s。数据特别显示了β-肾上腺素能反向激动剂卡维地洛和纳多洛尔在长期施用时提供针对气道高反应性的保护作用。

实施例8

气道阻力的降低与β-肾上腺素能受体密度的上调的相关性

在沙丁胺醇、阿普洛尔、卡维地洛和纳多洛尔的三个不同施用阶段气道阻力的降低与β-肾上腺素能受体密度的上调的相关性显示在表2中。所述药剂的施用阶段为15分钟、2天、28天。只有反向激动剂卡维地洛和纳多洛尔在超过15分钟的阶段中显示出β肾上腺素能受体密度的增加；卡维地洛在28天时显示出受体密度的增加，而纳多洛尔在2天和28天时显示出受体密度的增加。气道阻力(R_aw)的降低与受体密度的增加之间存在确切的相关性。这有力地支持了联合疗法的概念，例如使用反向激动剂和激动剂。

表2

气道阻力的降低与β₂-肾上腺素能受体密度的上调的相关性

实施例9

使用美托洛尔和噻吗洛尔的长期治疗对哮喘小鼠中的气道反应性的影响

对于两种另外的反向激动剂美托洛尔(通过皮下注射每天3次施用20mg/kg的剂量持续7天)和噻吗洛尔(在食物中的20mg/kg剂量持续7天)遵循实施例1的方案，如在实施例1中那样使用哮喘小鼠和醋甲胆碱攻击。如在实施例1中那样测量气道阻力(R_aw)。美托洛尔和噻吗洛尔的结果显示在图9A中。将结果与历史对照进行对比，如在图9B中所示：对照，无药物治疗，无醋甲胆碱攻击；NTX，无药物治疗，用醋甲胆碱攻击。结果指示，使用美托洛尔和噻吗洛尔的长期治疗可有效降低哮喘小鼠的气道高反应性。

实施例10

纳多洛尔的施用会预防粘液化生

粘液化生的发生可以导致哮喘和与慢性气道阻塞相关的其它气道疾病中的严重后果。图10是一张显微照片，其显示一名患有致死性哮喘的8岁女孩的支气管内出现粘液栓。

图11的一系列显微照片显示，纳多洛尔可有效预防粘液化生，而拮抗剂阿普洛尔不可有效预防粘液化生：左上，对照；右上，未经治疗的致敏/攻击小鼠显示粘液化生；左下，用阿普洛尔治疗以后的致敏/攻击小鼠显示粘液化生没有改善；右下，用纳多洛尔治疗以后的致敏/攻击小鼠显示粘液化生的几乎完全消除。

因此，纳多洛尔在消除或预防粘液化生方面非常有效，这又可以阻止否则由于粘液在呼吸道中的积累可能发生的严重后果。

实施例11

纳多洛尔通过抑制β-抑制蛋白途径来逆转上皮变化

纳多洛尔通过抑制β₂-肾上腺素能受体中的β-抑制蛋白途径来逆转上皮变化，这又在施用β₂-肾上腺素能激动剂来治疗影响呼吸道的疾病和病症(诸如哮喘)时产生更大的治疗效力。这在根本疾病或病症的短期恶化的治疗中是特别重要的；对于哮喘等疾病，这样的短期恶化可以证实是致死的。图12的示意图显示了纳多洛尔的作用机理与长效β-肾上腺素受体激动剂(LABA)的作用机理的对比，并且纳多洛尔(“INV102”)通过抑制β₂气道受体中的β-抑制蛋白途径而逆转上皮变化。

实施例13

纳多洛尔减少粘液相关的蛋白粘蛋白5AC的积累

纳多洛尔减少粘液相关的蛋白粘蛋白5AC的积累。图13的图显示了与用安慰剂的结果相比，纳多洛尔对用纳多洛尔治疗的吸烟者中粘蛋白5AC的水平的影响。当P<0.05时，结果是统计上显著的。给药结束后，表型回归平均值，表明需要长期治疗以增强和维持益处。

实施例14

纳多洛尔的施用会提高尝试戒烟的患者成功的可能性

纳多洛尔的施用会提高尝试戒烟的患者成功的可能性。图14的图显示了相对于安慰剂(右图)，纳多洛尔对戒烟成功的影响(左图)；对于有至少5次戒烟计划失败史的患者，纳多洛尔的施用使吸烟量减少≥70％。

实施例15

纳多洛尔的施用不会阻断沙丁胺醇施用在轻度哮喘患者中的有效性

纳多洛尔的施用不会阻断沙丁胺醇施用在轻度哮喘患者中的有效性，如在图15中所示。图15的一组图显示，纳多洛尔不会阻断在患有轻度哮喘的受试者中在醋甲胆碱攻击后施用的沙丁胺醇(2.5mg，通过喷雾施用)的施用的有效性。沙丁胺醇是一种短效β₂-肾上腺素能受体激动剂。

实施例16

纳多洛尔起作用以阻断β-抑制蛋白途径

纳多洛尔起作用以阻断β-抑制蛋白途径，如上所述，当施用β₂-肾上腺素能激动剂来治疗影响呼吸道的疾病和病症(诸如哮喘)时，这导致更大的治疗效力。相比之下，卡维地洛、普萘洛尔和阿普洛尔不会阻断β-抑制蛋白途径，如在图16中所示。β-阻滞剂通常与通过β-抑制蛋白途径的不良粘液产生有关；纳多洛尔阻断了这条途径。如在图16中所示，纳多洛尔与cAMP积累无关。

实施例17

纳多洛尔可以恢复呼吸道上皮的正常状态

如上所示，纳多洛尔通过其作为β-肾上腺素能反向激动剂和抑制β-抑制蛋白途径的活性的作用，可以恢复呼吸道上皮的正常状态。图17的一组显微照片显示了以下情况的呼吸道上皮：无气道疾病的正常受试者(左上)；严重哮喘(右上)；慢性支气管炎(左下)；和囊性纤维化(右下)。这些疾病和病症属于可以通过施用如上所述的纳多洛尔以及也如上所述的其它药剂来治疗的疾病和病症。

本发明的优点

本发明提供了通过涉及抑制抑制蛋白-2(β-抑制蛋白)的新机制来治疗肺气道疾病和病症的改进的方法和组合物。这些方法和组合物在治疗慢性阻塞性肺病(COPD)中是特别有用的，并且还可以用于治疗与SARS-CoV-2感染相关的肺症状，特别是在具有COPD或其它慢性呼吸病症的患者中。这些方法和组合物避免了耐受性或快速耐受，所述耐受性或快速耐受经常是使用诸如β-肾上腺素能激动剂等药剂的常规疗法的治疗结果。从本质上讲，反向激动剂的使用迫使身体通过改善其自身的信号传递机制来应对肺气道疾病从而做出应答。因此，采用反向激动剂的组合物和方法具有用于治疗这样的疾病和病症而不诱导耐受性的广泛潜力。这有望在不干扰短期急性疗法的情况下，在治疗这样的病症方面取得优异的长期结果。根据本发明的方法和组合物具有良好的耐受性并且可以与用于治疗肺气道疾病及其后遗症的其它方法一起使用。

如本文在说明书和权利要求书中所使用的，过渡短语“包含”和等同语言还涵盖关于本文提出的任何权利要求的范围的过渡短语“基本上由……组成”和”由……组成”，除非较窄的过渡短语被明确排除。

根据本发明的方法具有用于制备药物的工业适用性，所述药物用于治疗肺气道疾病，包括，但不限于慢性阻塞性肺病。根据本发明的方法还具有用于治疗这样的肺气道疾病的工业适用性。根据本发明的组合物具有作为药物组合物的工业适用性，特别是用于治疗肺气道疾病。

本发明的方法权利要求提供了超出自然法则的一般应用的具体方法步骤，并且要求实践所述方法步骤的人除了在权利要求中列举或暗示的自然法则的具体应用之外还采用本领域常规已知的步骤以外的步骤，并且因此将权利要求的范围限制于其中列举的具体应用。在某些上下文中，这些权利要求涉及使用现有药物的新方法。本文描述的方法还涵盖本文描述的化合物、化合物的组合或组合物用于治疗本文描述的疾病或病症的用途，以及制备用于治疗本文描述的疾病或病症的药物的方法。

可以在不存在本文未具体公开的任何一个或多个要素、一个或多个限制的情况下适当地实践本文示例性地描述的发明。因此，例如，术语“包含”、“包括”、“含有”等应被广泛地且非限制性地解读。另外，本文使用的术语和表达已经被用作描述而不是限制的术语，并且这样的术语和表达的使用无意排除将来显示和描述的任何等同物或其任何部分，并且应当认识到，在本发明要求保护的范围内可能做出各种修改。因此，应当理解，尽管优选实施方案和任选特征已经具体地公开了本发明，但是，本领域技术人员可以对本文公开的发明进行修改和变化，并且这样的修改和变化被认为落入本文公开的发明的范围内。本文已经广泛地且一般性地描述了本发明。落在一般公开内容的范围内的较窄的种类和亚类分组中的每一个也形成这些发明的一部分。这包括每项发明的一般描述，带有从该属中删除任何主题的条件性或否定性限制，无论除去的材料是否具体存在于其中。

另外，在以马库什群组的方式描述本发明的特征或方面的情况下，本领域技术人员将认识到，本发明也因此以马库什群组的任何个体成员或成员亚组的方式进行描述。还应当理解，以上描述意图是示例性的且非限制性的。在审阅以上描述后，许多实施方案对于本领域技术人员来说将是显而易见的。因此，本发明的范围不应参考上述描述来确定，而是应参考所附权利要求以及这样的权利要求所赋予的等同方案的完整范围来确定。所有文章和参考文献(包括专利公开)的公开内容通过引用并入本文。

Claims (169)

1.一种用于在遭受肺气道疾病的受试者中治疗肺气道疾病的方法，所述方法包含施用治疗上有效量的纳多洛尔或纳多洛尔的衍生物或类似物以抑制β-抑制蛋白途径从而治疗所述肺气道疾病。

2.权利要求1所述的方法，其中所述肺气道疾病选自慢性阻塞性肺病(COPD)、哮喘、支气管扩张、支气管炎、丘-施二氏综合征、囊性纤维化的肺后遗症、肺气肿、变应性鼻炎、肺炎和与SARS-CoV-2感染相关的肺症状。

3.权利要求2所述的方法，其中所述肺气道疾病是慢性阻塞性肺病。

4.权利要求1所述的方法，其中所述方法包含施用治疗上有效量的纳多洛尔。

5.权利要求1所述的方法，其中所述方法包含施用治疗上有效量的纳多洛尔的衍生物或类似物，其为式(I)的化合物：

其中R₁是氢或低级烷基，R₂是氢或低级烷基，且m和n是1至3，前提条件是，其中R₁和R₂都是氢且m是1，n不是1。

6.权利要求1所述的方法，其中所述方法发挥减少肺气道收缩高反应性的治疗效果。

7.权利要求1所述的方法，其中所述方法发挥上调肺β₂-肾上腺素能受体的治疗效果。

8.权利要求1所述的方法，其中所述方法发挥增加肺气道对β₂-肾上腺素能激动剂药物的松弛反应性的治疗效果。

9.权利要求1所述的方法，其中所述方法发挥逆转粘液化生和粘液细胞化生的治疗效果。

10.权利要求1所述的方法，其中通过选自以下的途径施用所述纳多洛尔或纳多洛尔的衍生物或类似物：口服、持续释放口服、胃肠外、舌下、含服、通过吹入施用和通过吸入施用。

11.权利要求10所述的方法，其中通过吸入施用所述纳多洛尔或纳多洛尔的衍生物或类似物。

12.权利要求11所述的方法，其中所述纳多洛尔或纳多洛尔的衍生物或类似物是纳多洛尔。

13.权利要求10所述的方法，其中口服施用所述纳多洛尔或纳多洛尔的衍生物或类似物。

14.权利要求13所述的方法，其中所述纳多洛尔或纳多洛尔的衍生物或类似物是纳多洛尔。

15.权利要求10所述的方法，其中通过持续释放口服施用所述纳多洛尔或纳多洛尔的衍生物或类似物。

16.权利要求15所述的方法，其中所述纳多洛尔或纳多洛尔的衍生物或类似物是纳多洛尔。

17.权利要求1所述的方法，其中通过随时间以从最低剂量开始并增加至最高剂量的一系列分级剂量的滴定过程来施用所述剂量的纳多洛尔或纳多洛尔的衍生物或类似物。

18.权利要求17所述的方法，其中，当达到最高剂量时，继续以该剂量施用所述纳多洛尔或纳多洛尔的衍生物或类似物。

19.权利要求17所述的方法，其中所述纳多洛尔或纳多洛尔的衍生物或类似物是纳多洛尔。

20.权利要求13所述的方法，其中所述纳多洛尔或纳多洛尔的衍生物或类似物的施用导致血流中纳多洛尔或纳多洛尔的衍生物或类似物的连续水平。

21.权利要求15所述的方法，其中所述纳多洛尔或纳多洛尔的衍生物或类似物的施用导致血流中纳多洛尔或纳多洛尔的衍生物或类似物的连续水平。

22.权利要求1所述的方法，其中β-抑制蛋白的抑制会阻止或逆转β₂-肾上腺素能受体的脱敏。

23.权利要求1所述的方法，其中β-抑制蛋白的抑制会阻止或逆转β₂-肾上腺素能受体的内化。

24.权利要求1所述的方法，其中β-抑制蛋白的抑制会阻止或逆转粘液化生或杯形细胞增生的发生。

25.权利要求24所述的方法，其中通过吸入施用所述纳多洛尔或纳多洛尔的衍生物。

26.权利要求25所述的方法，其中所述纳多洛尔或纳多洛尔的衍生物是纳多洛尔。

27.权利要求4所述的方法，其中所述纳多洛尔是纳多洛尔的RSR立体异构体。

28.权利要求1所述的方法，其中β-抑制蛋白的抑制会阻止或逆转第二信使特异性的蛋白激酶或特异性的G-蛋白偶联受体激酶对β₂-肾上腺素能受体的磷酸化。

29.权利要求1所述的方法，其中β-抑制蛋白的抑制会阻止或逆转支架磷酸二酯酶对第二信使的降解。

30.权利要求1所述的方法，其中所述方法进一步包含施用治疗上有效量的另外的药剂。

31.权利要求30所述的方法，其中所述纳多洛尔或纳多洛尔的衍生物或类似物是纳多洛尔。

32.权利要求30所述的方法，其中所述另外的药剂是β₂-选择性的肾上腺素能激动剂。

33.权利要求32所述的方法，其中所述β₂-选择性的肾上腺素能激动剂选自沙丁胺醇、阿福特罗、班布特罗、比托特罗、溴沙特罗、布酚宁、卡布特罗、克仑特罗、氯丙那林、可尔特罗、多巴酚丁胺、非诺特罗、福莫特罗、异他林、异丙肾上腺素、左旋沙丁胺醇、左沙丁胺醇、马布特罗、间羟异丙肾上腺素、甲氧那明、吡布特罗、丙卡特罗、雷托巴胺、瑞普特罗、利托君、沙美特罗、特布他林、齐帕特罗、及其盐、溶剂化物和前药。

34.权利要求30所述的方法，其中所述另外的药剂是皮质类固醇。

35.权利要求34所述的方法，其中所述皮质类固醇选自AZD-5423(2,2,2-三氟-N-[(1R,2S)-1-{[1-(4-氟苯基)-1H-吲唑-5-基]氧基}-1-(3-甲氧基苯基)-2-丙烷基]乙酰胺)、倍氯米松、布地奈德、环索奈德、地夫可特、氟尼缩松、氟替卡松、甲泼尼龙、莫米松、泼尼松龙、泼尼松、地塞米松和曲安西龙、及其盐、溶剂化物和前药。

36.权利要求30所述的方法，其中所述另外的药剂是抗胆碱能药物。

37.权利要求36所述的方法，其中所述抗胆碱能药物选自异丙托溴铵、噻托溴铵、氧托溴铵、abediterol、阿地溴铵、格隆溴铵、乌美溴铵、及其盐、溶剂化物和前药。

38.权利要求30所述的方法，其中所述另外的药剂是黄嘌呤化合物。

39.权利要求38所述的方法，其中所述黄嘌呤化合物选自茶碱、延长释放茶碱、氨茶碱、可可碱、恩丙茶碱、二羟丙茶碱、异丁茶碱、胆茶碱、阿比茶碱、阿罗茶碱、巴米茶碱、咖啡因、8-氯茶碱、二羟丙茶碱、多索茶碱、恩丙茶碱、依他茶碱、呋拉茶碱、1-异丁基-1-甲基黄嘌呤、羟丙茶碱和占替诺、及其盐、溶剂化物和前药。

40.权利要求30所述的方法，其中所述另外的药剂是抗-IgE抗体。

41.权利要求40所述的方法，其中所述抗-IgE抗体是单克隆抗体或从单克隆抗体衍生出的基因工程抗体。

42.权利要求41所述的方法，其中所述抗-IgE抗体是人源化的。

43.权利要求42所述的方法，其中所述抗-IgE抗体是奥马珠单抗。

44.权利要求30所述的方法，其中所述另外的药剂是白三烯拮抗剂。

45.权利要求44所述的方法，其中所述白三烯拮抗剂选自孟鲁司特、普仑司特和扎鲁司特、及其盐、溶剂化物和前药。

46.权利要求30所述的方法，其中所述另外的药剂是磷酸二酯酶IV抑制剂。

47.权利要求46所述的方法，其中所述磷酸二酯酶IV抑制剂选自罗氟司特、西洛司特、吡拉米司特和异丁司特、及其盐、溶剂化物和前药。

48.权利要求30所述的方法，其中所述另外的药剂是5-脂氧合酶抑制剂。

49.权利要求48所述的方法，其中所述5-脂氧合酶抑制剂选自齐留通和芬留顿、及其盐、溶剂化物和前药。

50.权利要求30所述的方法，其中所述另外的药剂是肥大细胞稳定剂。

51.权利要求50所述的方法，其中所述肥大细胞稳定剂选自氮卓斯汀、色甘酸、酮替芬、洛度沙胺、奈多罗米、奥洛他定和吡嘧司特、及其盐、溶剂化物和前药。

52.权利要求30所述的方法，其中所述另外的药剂是生物药。

53.权利要求52所述的方法，其中所述生物药选自抗-IL4抗体、抗-IL13抗体、IL4和IL13的抑制剂、抗-IL5抗体和抗-IL8抗体。

54.权利要求53所述的方法，其中所述生物药是抗-IL4抗体。

55.权利要求54所述的方法，其中所述抗-IL4抗体是pasolizumab。

56.权利要求53所述的方法，其中所述生物药是抗-IL13抗体。

57.权利要求56所述的方法，其中所述抗-IL13抗体是CAT-354。

58.权利要求53所述的方法，其中所述生物药是IL4和IL13的抑制剂。

59.权利要求58所述的方法，其中所述IL4和IL13的抑制剂是度匹鲁单抗。

60.权利要求53所述的方法，其中所述生物药是抗-IL5抗体。

61.权利要求60所述的方法，其中所述抗-IL5抗体选自贝那利珠单抗、美泊利单抗和瑞替珠单抗。

62.权利要求53所述的方法，其中所述生物药是抗-IL8抗体。

63.权利要求62所述的方法，其中所述抗-IL8抗体是BMS-986253。

64.权利要求1所述的方法，其中所述方法进一步包含施用治疗上有效量的抑制蛋白-2抑制剂。

65.权利要求64所述的方法，其中所述抑制蛋白-2抑制剂是抑制蛋白-2的蛋白片段。

66.权利要求64所述的方法，其中所述抑制蛋白-2抑制剂是式(A-I)的化合物：

其中:

(1)v和vi指示在式(A-I)中指出的特定键；

(2)R⁴⁹选自式(A-I(a))、(A-I(b))、(A-I(c))和(A-I(d))：

其中X⁷、X⁸和X⁹各自独立地是O、N或S；

(2)当X⁷、X⁸或X⁹分别是N时，R⁵⁴、R⁵⁵和R⁵⁶各自独立地是H、氰基、氨基或被取代的或未被取代的烷基、烷酰基、烷酰氧基或芳基基团，当X⁷、X⁸或X⁹分别是O或S时，R⁵⁴、R⁵⁵和R⁵⁶不存在；

(3)R⁵⁰是被取代的或未被取代的芳基或杂芳基基团；

(4)R⁵¹和R⁵²各自独立地是H或被取代的或未被取代的烷基基团，或R⁵¹和R⁵²一起形成3-或4-元环烷基环；

(5)R⁵³是被取代的芳基基团，其中所述取代基中的一个且仅一个是式(A-I(e))的部分：

(i)其中R⁵⁷或R⁵⁸中的一个是式(A-I(f))的部分：

且另一个是H、叠氮基、三氟甲基diazirido、异氰基、异硫氰基、五氟硫烷基或被取代的或未被取代的烷基、烷酰基、烷酰氧基、芳酰基或芳酰氧基基团；

(ii)R⁵⁹和R⁶⁰各自独立地是H、卤素、叠氮基、三氟甲基diazirido、异氰基、异硫氰基、五氟硫酰基或被取代的或未被取代的烷基、烷酰基、烷酰氧基、芳酰基或芳酰氧基基团；

(iii)Y⁹是CH；

(iv)Y¹⁰和Y¹¹各自独立地是C或N，前提条件是，当Y¹⁰或Y¹¹是N时，则R⁵⁷或R⁵⁸分别不存在；

(v)Y¹²是CH、N、O、S、S(O)或S(O)₂；

(vi)R⁶¹、R⁶²和R⁶³各自独立地是H、叠氮基、三氟甲基diazirido、异氰基、异硫氰基或被取代的或未被取代的烷基基团；

(vii)当Y¹²是CH或N时，R⁶⁴是H或被取代的或未被取代的烷基基团，当Y¹²是O、S、S(O)或S(O)₂时，R⁶⁴不存在；且

(viii)t是0或1；且

(6)s是0或1。

67.权利要求64所述的方法，其中所述抑制蛋白-2抑制剂是选自DHA(二十二碳六烯酸)和EPA(二十碳五烯酸)的ω-3脂肪酸。

68.权利要求64所述的方法，其中所述抑制蛋白-2抑制剂是选自以下的CXCR2抑制剂：SB225002(N-(2-溴苯基)-N′-(2-羟基-4-硝基苯基)脲),AZD5069(N-(2-((2,3-二氟苄基)硫基)-6-(((2R,3S)-3,4-二羟基丁烷-2-基)氧基)嘧啶-4-基)氮杂环丁烷-1-磺酰胺)；SB265610(1-(2-溴苯基)-3-(4-氰基-1H-苯并[d][1,2,3]三唑-7-基)脲)；navarixin；danirixin；CXCR2-IN-1(1-(2-氯-3-氟苯基)-3-[4-氯-2-羟基-3-(1-甲基哌啶-4-基)磺酰基苯基]脲)；SRT3109(N-(2-((2,3-二氟苄基)硫基)-6-((3,4-二羟基丁烷-2-基)氨基)嘧啶-4-基)氮杂环丁烷-1-磺酰胺)；和SRT3190(N-[2-[(2,3-二氟苯基)甲基硫烷基]-6-[[(2S,3R)-3,4-二羟基丁烷-2-基]氨基]嘧啶-4-基]氮杂环丁烷-1-磺酰胺)。

69.权利要求64所述的方法，其中所述抑制蛋白-2抑制剂是MyD88抑制剂。

70.权利要求69所述的方法，其中所述MyD88抑制剂选自ST2825((4R,7R,8aR)-1′-[2-[4-[[2-(2,4-二氯苯氧基)乙酰基]氨基]苯基]乙酰基]-6-氧代螺[3,4,8,8a-四氢-2H-吡咯并[2,1-b][1,3]噻嗪-7,2′-吡咯烷]-4-甲酰胺)和T6167923(4-(3-溴苯基)磺酰基-N-(1-噻吩-2-基乙基)哌嗪-1-甲酰胺)。

71.权利要求64所述的方法，其中所述抑制蛋白-2抑制剂是MD2抑制剂。

72.权利要求71所述的方法，其中所述MD2抑制剂是L48H37((3E,5E)-1-乙基-3,5-二[(2,3,4-三甲氧基苯基)亚甲基]哌啶-4-酮)。

73.权利要求64所述的方法，其中所述纳多洛尔或纳多洛尔的衍生物或类似物是纳多洛尔。

74.权利要求1所述的方法，其中所述方法进一步包含施用治疗上有效量的GRK抑制剂。

75.权利要求74所述的方法，其中所述GRK抑制剂是提供一氧化氮或有关的氧化还原物质的一氧化氮供体。

76.权利要求75所述的方法，其中所述一氧化氮供体是S-亚硝基谷胱甘肽。

77.权利要求75所述的方法，其中所述一氧化氮供体是C-亚硝基化合物，其中亚硝基部分连接至叔碳。

78.权利要求75所述的方法，其中所述一氧化氮供体是式(N-I)的化合物：

其中所述抗衡离子是氢且其中R₁和R₂选自C₁-C₆烷基和C₆-C₂₀芳基，其任选地被选自氨基、羟基或羧基的取代基取代。

79.权利要求75所述的方法，其中所述一氧化氮供体是二聚的2-[4′-(α-亚硝基)异丁酰基苯基]丙酸。

80.权利要求75所述的方法，其中所述一氧化氮供体是C-亚硝基化合物，其含有式(N-II)的部分：

其中X是S、O或NR，其中R选自C₁-C₆烷基，其为未被取代的或被一个或多个含有1至10个碳原子的醇、醚、酯或酰胺基团取代。

81.权利要求75所述的方法，其中所述一氧化氮供体选自乙酰基水杨酸的C-亚硝基衍生物、普萘洛尔的C-亚硝基衍生物、纳多洛尔的C-亚硝基衍生物、卡维地洛的C-亚硝基衍生物、哌唑嗪的C-亚硝基衍生物、tinolol的C-亚硝基衍生物、美托洛尔的C-亚硝基衍生物、吲哚洛尔的C-亚硝基衍生物、拉贝洛尔的C-亚硝基衍生物、氨苯蝶啶的C-亚硝基衍生物、呋塞米的C-亚硝基衍生物、依那普利的C-亚硝基衍生物、雷米普利的C-亚硝基衍生物、洛伐他汀的C-亚硝基衍生物、普伐他汀的C-亚硝基衍生物、吉非贝齐的C-亚硝基衍生物、氯贝丁酯的C-亚硝基衍生物、硝苯地平的C-亚硝基衍生物、氨氯地平的C-亚硝基衍生物、地尔硫卓的C-亚硝基衍生物、维拉帕米的C-亚硝基衍生物、西咪替丁的C-亚硝基衍生物、雷尼替丁的C-亚硝基衍生物、沙丁胺醇的C-亚硝基衍生物、异丙托溴铵的C-亚硝基衍生物、美金刚的C-亚硝基衍生物、10-脱乙酰基浆果赤霉素III的C-亚硝基衍生物、泰素的C-亚硝基衍生物、普瑞玛尼的C-亚硝基衍生物、达塞曲匹的C-亚硝基衍生物、超氧化物歧化酶模拟物的C-亚硝基衍生物、别嘌呤醇的C-亚硝基衍生物、塞来昔布的C-亚硝基衍生物、吲哚美辛的C-亚硝基衍生物、thioflosulide的C-亚硝基衍生物和依托度酸的C-亚硝基衍生物。

82.权利要求75所述的方法，其中所述一氧化氮供体选自S-亚硝基-N-乙酰基青霉胺、S-亚硝基-半胱氨酸、S-亚硝基-半胱氨酸乙酯、S-亚硝基-半胱氨酰基甘氨酸、S-亚硝基-γ-甲基-L-同型半胱氨酸、S-亚硝基-L-同型半胱氨酸、S-亚硝基-γ-硫代-L-亮氨酸、S-亚硝基-δ-硫代-L-亮氨酸、S-亚硝基白蛋白、硝普钠(nipride)、亚硝酸乙酯、硝酸甘油、SIN1(吗多明)、furoxamines和N-羟基-(N-亚硝胺)。

83.权利要求64所述的方法，其中所述纳多洛尔或纳多洛尔的衍生物或类似物是纳多洛尔。

84.权利要求64所述的方法，其中所述抑制蛋白-2抑制剂是六磷酸肌醇(IP6)。

85.权利要求64所述的方法，其中所述抑制蛋白-2抑制剂是barbadin。

86.权利要求64所述的方法，其中所述抑制蛋白-2抑制剂是蛋白激酶A的抑制剂。

87.权利要求86所述的方法，其中所述蛋白激酶A的抑制剂选自：(i)H89(N-[2-[[3-(4-溴苯基)-2-丙烯基]氨基]乙基]-5-异喹啉磺酰胺二盐酸盐)；(ii)N-(ω-十一烯酰基)苯丙氨酸；(iii)3′,5′-环状单硫代磷酸酯-R；(iv)H-7(5-(2-甲基哌嗪-1-基)磺酰基异喹啉二盐酸盐)；(v)H-9(N-(2-氨基乙基)-5-异喹啉磺酰胺；(vi)6-22酰胺；(vii)蛋白激酶A抑制剂，其选自：法舒地尔；N-[2-(磷酸化溴代硝基精氨酰基氨基)乙基]-5-异喹啉磺酰胺；1-(5-喹啉磺酰基)哌嗪；4-氰基-3-甲基异喹啉；乙酰氨基-4-氰基-3-甲基异喹啉；8-溴-2-单酰基腺苷-3,5-环状单硫代磷酸酯；腺苷3,5-环状单硫代磷酸酯；2-O-单丁基-环磷酸腺苷；8-氯-环磷酸腺苷；N-[2-(肉桂酰基氨基酸)]-5-异喹啉酮；反相-8-己基氨基腺苷3,5-单硫代磷酸酯；反相-8-哌啶基腺苷-环磷酸腺苷；反相-腺苷3,5-环状单硫代磷酸酯；5-碘结核菌素；8-羟基腺苷-3,5-单硫代磷酸酯；钙磷酸蛋白C；瑞香素；反相-8-氯苯基-环磷酸腺苷；反相-环磷酸腺苷；反相-8-Br-环磷酸腺苷；1-(5-异喹啉磺酰基)-2-甲基哌啶；8-羟基腺苷-3′,5′-单磷酸酯；8-己基氨基腺苷-3′,5′-单磷酸酯；和反相-腺苷3′,5′-环状单磷酸酯。

88.权利要求64所述的方法，其中所述抑制蛋白-2抑制剂是磷脂酶C抑制剂。

89.权利要求88所述的方法，其中所述磷脂酶C抑制剂选自马兜铃酸钠；D609(三环癸烷-9-基黄原酸钠)；D-赤式-二氢鞘氨醇；U-73122(1-(6-((17β-3-甲氧基雌-1,3,5(10)-三烯-17-基)氨基)己基)-1H-吡咯-2,5-二酮)；吡咯烷硫代氨基甲酸酯；硫酸新霉素；thielavin B；依地福新；杂环基取代的苯胺基磷脂酶C抑制剂；DCIC(3,4-二氯异香豆素)；和calporoside或calporoside的衍生物。

90.一种药物组合物，其包含：

(a)治疗上有效量的纳多洛尔或纳多洛尔的衍生物或类似物，以抑制β-抑制蛋白途径从而治疗肺气道疾病；和

(b)药学上可接受的载体。

91.权利要求90所述的药物组合物，其中所述肺气道疾病选自慢性阻塞性肺病(COPD)、哮喘、支气管扩张、支气管炎、丘-施二氏综合征、囊性纤维化的肺后遗症、肺气肿、变应性鼻炎、肺炎和与SARS-CoV-2感染相关的肺症状。

92.权利要求91所述的药物组合物，其中所述肺气道疾病是慢性阻塞性肺病。

93.权利要求90所述的药物组合物，其中所述组合物包含治疗上有效量的纳多洛尔。

94.权利要求93所述的药物组合物，其中所述纳多洛尔是纳多洛尔的RSR立体异构体。

95.权利要求90所述的药物组合物，其中所述组合物包含治疗上有效量的纳多洛尔的衍生物或类似物，其为式(I)的化合物：

其中R₁是氢或低级烷基，R₂是氢或低级烷基，且m和n是1至3，前提条件是，其中R₁和R₂都是氢且m是1，n不是1。

96.权利要求90所述的药物组合物，其中所述组合物的施用发挥减少肺气道收缩高反应性的治疗效果。

97.权利要求90所述的药物组合物，其中所述组合物的施用发挥上调肺β₂-肾上腺素能受体的治疗效果。

98.权利要求90所述的药物组合物，其中所述组合物的施用发挥增加肺气道对β₂-肾上腺素能激动剂药物的松弛反应性的治疗效果。

99.权利要求90所述的药物组合物，其中所述方法发挥逆转粘液化生和粘液细胞化生的治疗效果。

100.权利要求90所述的药物组合物，其中将所述组合物配制用于通过选自以下的途径施用：口服、持续释放口服、胃肠外、舌下、含服、通过吹入施用和通过吸入施用。

101.权利要求100所述的药物组合物，其中将所述组合物配制用于通过吸入施用。

102.权利要求101所述的药物组合物，其中所述纳多洛尔或纳多洛尔的衍生物或类似物是纳多洛尔。

103.权利要求102所述的药物组合物，其中所述组合物的施用产生纳多洛尔的转瞬即逝的血液水平。

104.权利要求102所述的药物组合物，其中所述组合物的施用产生纳多洛尔的不可检测的血液水平。

105.权利要求100所述的药物组合物，其中将所述组合物配制用于口服施用。

106.权利要求100所述的药物组合物，其中将所述组合物配制用于持续释放口服施用。

107.权利要求106所述的药物组合物，其中所述药物组合物的施用导致血流中纳多洛尔或纳多洛尔的衍生物或类似物的连续水平。

108.权利要求107所述的药物组合物，其中所述纳多洛尔或纳多洛尔的衍生物或类似物是纳多洛尔。

109.权利要求93所述的组合物，其中每单位剂量的所述组合物的纳多洛尔的量选自每单位剂量1mg、3mg、5mg、10mg、15mg、30mg、50mg和70mg。

110.权利要求90所述的组合物，其中所述组合物进一步包含治疗上有效量的另外的治疗剂。

111.权利要求110所述的组合物，其中所述纳多洛尔或纳多洛尔的衍生物或类似物是纳多洛尔。

112.权利要求110所述的组合物，其中所述组合物进一步包含治疗上有效量的β₂-选择性的肾上腺素能激动剂。

113.权利要求112所述的组合物，其中所述β₂-选择性的肾上腺素能激动剂选自沙丁胺醇、阿福特罗、班布特罗、比托特罗、溴沙特罗、布酚宁、卡布特罗、克仑特罗、氯丙那林、可尔特罗、多巴酚丁胺、非诺特罗、福莫特罗、异他林、异丙肾上腺素、左旋沙丁胺醇、左沙丁胺醇、马布特罗、间羟异丙肾上腺素、甲氧那明、吡布特罗、丙卡特罗、雷托巴胺、瑞普特罗、利托君、沙美特罗、特布他林、齐帕特罗、及其盐、溶剂化物和前药。

114.权利要求110所述的组合物，其中所述组合物进一步包含治疗上有效量的皮质类固醇。

115.权利要求114所述的组合物，其中所述皮质类固醇选自AZD-5423(2,2,2-三氟-N-[(1R,2S)-1-{[1-(4-氟苯基)-1H-吲唑-5-基]氧基}-1-(3-甲氧基苯基)-2-丙烷基]乙酰胺)、倍氯米松、布地奈德、环索奈德、地夫可特、氟尼缩松、氟替卡松、甲泼尼龙、莫米松、泼尼松龙、泼尼松、地塞米松和曲安西龙、及其盐、溶剂化物和前药。

116.权利要求110所述的组合物，其中所述组合物进一步包含治疗上有效量的抗胆碱能药物。

117.权利要求116所述的组合物，其中所述抗胆碱能药物选自异丙托溴铵、噻托溴铵、氧托溴铵、abediterol、阿地溴铵、格隆溴铵、乌美溴铵、及其盐、溶剂化物和前药。

118.权利要求116所述的组合物，其中所述组合物进一步包含治疗上有效量的黄嘌呤化合物。

119.权利要求118所述的组合物，其中所述黄嘌呤化合物选自茶碱、延长释放茶碱、氨茶碱、可可碱、恩丙茶碱、二羟丙茶碱、异丁茶碱、胆茶碱、阿比茶碱、阿罗茶碱、巴米茶碱、咖啡因、8-氯茶碱、二羟丙茶碱、多索茶碱、恩丙茶碱、依他茶碱、呋拉茶碱、1-异丁基-1-甲基黄嘌呤、羟丙茶碱和占替诺、及其盐、溶剂化物和前药。

120.权利要求110所述的组合物，其中所述组合物进一步包含治疗上有效量的抗-IgE抗体。

121.权利要求120所述的组合物，其中所述抗-IgE抗体是单克隆抗体或从单克隆抗体衍生出的基因工程抗体。

122.权利要求121所述的组合物，其中所述抗-IgE抗体是人源化的。

123.权利要求122所述的组合物，其中所述抗-IgE抗体是奥马珠单抗。

124.权利要求110所述的组合物，其中所述组合物进一步包含治疗上有效量的白三烯拮抗剂。

125.权利要求124所述的组合物，其中所述白三烯拮抗剂选自孟鲁司特、普仑司特和扎鲁司特、及其盐、溶剂化物和前药。

126.权利要求110所述的组合物，其中所述组合物进一步包含治疗上有效量的磷酸二酯酶IV抑制剂。

127.权利要求126所述的组合物，其中所述磷酸二酯酶IV抑制剂选自罗氟司特、西洛司特、吡拉米司特和异丁司特、及其盐、溶剂化物和前药。

128.权利要求110所述的组合物，其中所述组合物进一步包含治疗上有效量的5-脂氧合酶抑制剂。

129.权利要求128所述的组合物，其中所述5-脂氧合酶抑制剂选自齐留通和芬留顿、及其盐、溶剂化物和前药。

130.权利要求110所述的组合物，其中所述组合物进一步包含治疗上有效量的肥大细胞稳定剂。

131.权利要求128所述的组合物，其中所述肥大细胞稳定剂选自氮卓斯汀、色甘酸、酮替芬、洛度沙胺、奈多罗米、奥洛他定和吡嘧司特、及其盐、溶剂化物和前药。

132.权利要求110所述的组合物，其中所述另外的药剂是生物药。

133.权利要求132所述的组合物，其中所述生物药选自抗-IL4抗体、抗-IL13抗体、IL4和IL13的抑制剂、抗-IL5抗体和抗-IL8抗体。

134.权利要求133所述的组合物，其中所述生物药是抗-IL4抗体。

135.权利要求134所述的组合物，其中所述抗-IL4抗体是pasolizumab。

136.权利要求133所述的组合物，其中所述生物药是抗-IL13抗体。

137.权利要求136所述的组合物，其中所述抗-IL13抗体是CAT-354。

138.权利要求133所述的组合物，其中所述生物药是IL4和IL13的抑制剂。

139.权利要求138所述的组合物，其中所述IL4和IL13的抑制剂是度匹鲁单抗。

140.权利要求133所述的组合物，其中所述生物药是抗-IL5抗体。

141.权利要求140所述的组合物，其中所述抗-IL5抗体选自贝那利珠单抗、美泊利单抗和瑞替珠单抗。

142.权利要求133所述的组合物，其中所述生物药是抗-IL8抗体。

143.权利要求142所述的组合物，其中所述抗-IL8抗体是BMS-986253。

144.权利要求110所述的组合物，其中所述组合物进一步包含治疗上有效量的抑制蛋白-2抑制剂。

145.权利要求144所述的组合物，其中所述抑制蛋白-2抑制剂是抑制蛋白-2的蛋白片段。

146.权利要求144所述的组合物，其中所述抑制蛋白-2抑制剂是式(A-I)的化合物：

其中:

(1)v和vi指示在式(A-I)中指出的特定键；

(2)R⁴⁹选自式(A-I(a))、(A-I(b))、(A-I(c))和(A-I(d))：

/>

其中X⁷、X⁸和X⁹各自独立地是O、N或S；

(2)当X⁷、X⁸或X⁹分别是N时，R⁵⁴、R⁵⁵和R⁵⁶各自独立地是H、氰基、氨基或被取代的或未被取代的烷基、烷酰基、烷酰氧基或芳基基团，当X⁷、X⁸或X⁹分别是O或S时，R⁵⁴、R⁵⁵和R⁵⁶不存在；

(3)R⁵⁰是被取代的或未被取代的芳基或杂芳基基团；

(4)R⁵¹和R⁵²各自独立地是H或被取代的或未被取代的烷基基团，或R⁵¹和R⁵²一起形成3-或4-元环烷基环；

(5)R⁵³是被取代的芳基基团，其中所述取代基中的一个且仅一个是式(A-I(e))的部分：

(i)其中R⁵⁷或R⁵⁸中的一个是式(A-I(f))的部分：

且另一个是H、叠氮基、三氟甲基diazirido、异氰基、异硫氰基、五氟硫烷基或被取代的或未被取代的烷基、烷酰基、烷酰氧基、芳酰基或芳酰氧基基团；

(ii)R⁵⁹和R⁶⁰各自独立地是H、卤素、叠氮基、三氟甲基diazirido、异氰基、异硫氰基、五氟硫酰基或被取代的或未被取代的烷基、烷酰基、烷酰氧基、芳酰基或芳酰氧基基团；

(iii)Y⁹是CH；

(iv)Y¹⁰和Y¹¹各自独立地是C或N，前提条件是，当Y¹⁰或Y¹¹是N时，则R⁵⁷或R⁵⁸分别不存在；

(v)Y¹²是CH、N、O、S、S(O)或S(O)₂；

(vi)R⁶¹、R⁶²和R⁶³各自独立地是H、叠氮基、三氟甲基diazirido、异氰基、异硫氰基或被取代的或未被取代的烷基基团；

(vii)当Y¹²是CH或N时，R⁶⁴是H或被取代的或未被取代的烷基基团，当Y¹²是O、S、S(O)或S(O)₂时，R⁶⁴不存在；且

(viii)t是0或1；且

(6)s是0或1。

147.权利要求144所述的组合物，其中所述抑制蛋白-2抑制剂是选自DHA(二十二碳六烯酸)和EPA(二十碳五烯酸)的ω-3脂肪酸。

148.权利要求144所述的组合物，其中所述抑制蛋白-2抑制剂是选自以下的CXCR2抑制剂：SB225002(N-(2-溴苯基)-N′-(2-羟基-4-硝基苯基)脲),AZD5069(N-(2-((2,3-二氟苄基)硫基)-6-(((2R,3S)-3,4-二羟基丁烷-2-基)氧基)嘧啶-4-基)氮杂环丁烷-1-磺酰胺)；SB265610(1-(2-溴苯基)-3-(4-氰基-1H-苯并[d][1,2,3]三唑-7-基)脲)；navarixin；danirixin；CXCR2-IN-1(1-(2-氯-3-氟苯基)-3-[4-氯-2-羟基-3-(1-甲基哌啶-4-基)磺酰基苯基]脲)；SRT3109(N-(2-((2,3-二氟苄基)硫基)-6-((3,4-二羟基丁烷-2-基)氨基)嘧啶-4-基)氮杂环丁烷-1-磺酰胺)；和SRT3190(N-[2-[(2,3-二氟苯基)甲基硫烷基]-6-[[(2S,3R)-3,4-二羟基丁烷-2-基]氨基]嘧啶-4-基]氮杂环丁烷-1-磺酰胺)。

149.权利要求144所述的组合物，其中所述抑制蛋白-2抑制剂是MyD88抑制剂。

150.权利要求149所述的组合物，其中所述MyD88抑制剂选自ST2825((4R,7R,8aR)-1′-[2-[4-[[2-(2,4-二氯苯氧基)乙酰基]氨基]苯基]乙酰基]-6-氧代螺[3,4,8,8a-四氢-2H-吡咯并[2,1-b][1,3]噻嗪-7,2′-吡咯烷]-4-甲酰胺)和T6167923(4-(3-溴苯基)磺酰基-N-(1-噻吩-2-基乙基)哌嗪-1-甲酰胺)。

151.权利要求144所述的组合物，其中所述抑制蛋白-2抑制剂是MD2抑制剂。

152.权利要求151所述的组合物，其中所述MD2抑制剂是L48H37((3E,5E)-1-乙基-3,5-二[(2,3,4-三甲氧基苯基)亚甲基]哌啶-4-酮)。

153.权利要求110所述的组合物，其中所述组合物进一步包含治疗上有效量的GRK抑制剂。

154.权利要求153所述的组合物，其中所述GRK抑制剂是提供一氧化氮或有关的氧化还原物质的一氧化氮供体。

155.权利要求154所述的组合物，其中所述一氧化氮供体是S-亚硝基谷胱甘肽。

156.权利要求154所述的组合物，其中所述一氧化氮供体是C-亚硝基化合物，其中亚硝基部分连接至叔碳。

157.权利要求154所述的组合物，其中所述一氧化氮供体是式(N-I)的化合物：

其中所述抗衡离子是氢且其中R₁和R₂选自C₁-C₆烷基和C₆-C₂₀芳基，其任选地被选自氨基、羟基或羧基的取代基取代。

158.权利要求154所述的组合物，其中所述一氧化氮供体是二聚的2-[4′-(α-亚硝基)异丁酰基苯基]丙酸。

159.权利要求154所述的组合物，其中所述一氧化氮供体是C-亚硝基化合物，其含有式(N-II)的部分：

其中X是S、O或NR，其中R选自C₁-C₆烷基，其为未被取代的或被一个或多个含有1至10个碳原子的醇、醚、酯或酰胺基团取代。

160.权利要求154所述的组合物，其中所述一氧化氮供体选自乙酰基水杨酸的C-亚硝基衍生物、普萘洛尔的C-亚硝基衍生物、纳多洛尔的C-亚硝基衍生物、卡维地洛的C-亚硝基衍生物、哌唑嗪的C-亚硝基衍生物、tinolol的C-亚硝基衍生物、美托洛尔的C-亚硝基衍生物、吲哚洛尔的C-亚硝基衍生物、拉贝洛尔的C-亚硝基衍生物、氨苯蝶啶的C-亚硝基衍生物、呋塞米的C-亚硝基衍生物、依那普利的C-亚硝基衍生物、雷米普利的C-亚硝基衍生物、洛伐他汀的C-亚硝基衍生物、普伐他汀的C-亚硝基衍生物、吉非贝齐的C-亚硝基衍生物、氯贝丁酯的C-亚硝基衍生物、硝苯地平的C-亚硝基衍生物、氨氯地平的C-亚硝基衍生物、地尔硫卓的C-亚硝基衍生物、维拉帕米的C-亚硝基衍生物、西咪替丁的C-亚硝基衍生物、雷尼替丁的C-亚硝基衍生物、沙丁胺醇的C-亚硝基衍生物、异丙托溴铵的C-亚硝基衍生物、美金刚的C-亚硝基衍生物、10-脱乙酰基浆果赤霉素III的C-亚硝基衍生物、泰素的C-亚硝基衍生物、普瑞玛尼的C-亚硝基衍生物、达塞曲匹的C-亚硝基衍生物、超氧化物歧化酶模拟物的C-亚硝基衍生物、别嘌呤醇的C-亚硝基衍生物、塞来昔布的C-亚硝基衍生物、吲哚美辛的C-亚硝基衍生物、thioflosulide的C-亚硝基衍生物和依托度酸的C-亚硝基衍生物。

161.权利要求154所述的组合物，其中所述一氧化氮供体选自S-亚硝基-N-乙酰基青霉胺、S-亚硝基-半胱氨酸乙酯、S-亚硝基-半胱氨酰基甘氨酸、S-亚硝基-γ-甲基-L-同型半胱氨酸、S-亚硝基-L-同型半胱氨酸、S-亚硝基-γ-硫代-L-亮氨酸、S-亚硝基-δ-硫代-L-亮氨酸、S-亚硝基白蛋白、硝普钠(nipride)、亚硝酸乙酯、硝酸甘油、SIN1(吗多明)、furoxamines和N-羟基-(N-亚硝胺)。

162.权利要求144所述的组合物，其中所述抑制蛋白-2抑制剂是六磷酸肌醇(IP6)。

163.权利要求144所述的组合物，其中所述抑制蛋白-2抑制剂是barbadin。

164.权利要求144所述的组合物，其中所述抑制蛋白-2抑制剂是蛋白激酶A的抑制剂。

165.权利要求164所述的组合物，其中所述蛋白激酶A的抑制剂选自：(i)H89(N-[2-[[3-(4-溴苯基)-2-丙烯基]氨基]乙基]-5-异喹啉磺酰胺二盐酸盐)；(ii)N-(ω-十一烯酰基)苯丙氨酸；(iii)3′,5′-环状单硫代磷酸酯-R；(iv)H-7(5-(2-甲基哌嗪-1-基)磺酰基异喹啉二盐酸盐)；(v)H-9(N-(2-氨基乙基)-5-异喹啉磺酰胺；(vi)6-22酰胺；(vii)蛋白激酶A抑制剂，其选自：法舒地尔；N-[2-(磷酸化溴代硝基精氨酰基氨基)乙基]-5-异喹啉磺酰胺；1-(5-喹啉磺酰基)哌嗪；4-氰基-3-甲基异喹啉；乙酰氨基-4-氰基-3-甲基异喹啉；8-溴-2-单酰基腺苷-3,5-环状单硫代磷酸酯；腺苷3,5-环状单硫代磷酸酯；2-O-单丁基-环磷酸腺苷；8-氯-环磷酸腺苷；N-[2-(肉桂酰基氨基酸)]-5-异喹啉酮；反相-8-己基氨基腺苷3,5-单硫代磷酸酯；反相-8-哌啶基腺苷-环磷酸腺苷；反相-腺苷3,5-环状单硫代磷酸酯；5-碘结核菌素；8-羟基腺苷-3,5-单硫代磷酸酯；钙磷酸蛋白C；瑞香素；反相-8-氯苯基-环磷酸腺苷；反相-环磷酸腺苷；反相-8-Br-环磷酸腺苷；1-(5-异喹啉磺酰基)-2-甲基哌啶；8-羟基腺苷-3′,5′-单磷酸酯；8-己基氨基腺苷-3′,5′-单磷酸酯；和反相-腺苷3′,5′-环状单磷酸酯。

166.权利要求144所述的组合物，其中所述抑制蛋白-2抑制剂是磷脂酶C抑制剂。

167.权利要求166所述的组合物，其中所述磷脂酶C抑制剂选自马兜铃酸钠；D609(三环癸烷-9-基黄原酸钠)；D-赤式-二氢鞘氨醇；U-73122(1-(6-((17β-3-甲氧基雌-1,3,5(10)-三烯-17-基)氨基)己基)-1H-吡咯-2,5-二酮)；吡咯烷硫代氨基甲酸酯；硫酸新霉素；thielavin B；依地福新；杂环基取代的苯胺基磷脂酶C抑制剂；DCIC(3,4-二氯异香豆素)；和calporoside或calporoside的衍生物。

168.权利要求90所述的组合物，其中所述药学上可接受的载体选自溶剂、分散介质、包衣剂、抗细菌剂、抗真菌剂、等渗剂、吸收延迟剂、防腐剂、用于口服施用的甜味剂、增稠剂、缓冲剂、液体载体、润湿剂、增溶剂、或乳化剂；酸化剂、抗氧化剂、碱化剂、承载剂、螯合剂、着色剂、络合剂、助悬剂或增粘剂、风味剂或香料、油、渗透促进剂、聚合物、硬化剂、蛋白、碳水化合物、填充剂和润滑剂。

169.权利要求164所述的组合物，其中所述纳多洛尔或纳多洛尔的衍生物或类似物是纳多洛尔。