KR20130135887A - 두피 병태에 대한 바이오마커로서의 ｉｄｅ 의 용도 - Google Patents

Abstract

본 발명의 주제는 특히 IDE 의 아미노산 서열, 또는 그 유사체 또는 단편, 또는 상기 서열을 인코딩하는 하나 이상의 핵산 서열의 두피의 비듬 병태에 대한 바이오마커 또는 활성제로서의 용도이다.

Description

두피 병태에 대한 바이오마커로서의 ＩＤＥ 의 용도 {USE OF IDE AS A BIOMARKER FOR A SCALP CONDITION}

본 발명은 피부, 특히 두피의 비듬 병태에 대한 미용적 및/또는 치료적 바이오마커 (biomarker) 및 표적물의 분야, 나아가 이의 활성제로서의 용도에 관한 것이다.

본 발명의 목적을 위해, 용어 "피부"란, 체모 또는 모발로 덮혀 있는 피부 영역 및 점막을 비롯한 인체의 전반적인 표피를 의미한다. 더욱 구체적으로, 본 발명에서 고려되는 피부는 바람직하게는 입술 및 얼굴 피부, 목둘레선 또는 두피, 보다 더욱 바람직하게는 두피의 피부이다.

피부는 세포들이 합쳐져 서로 통합적으로 부착되어 있는 조직이다. 이는 피부기름샘 또는 땀샘 및 모낭을 포함하는 외부 코팅을 형성한다. 피부, 특히 두피는 지속적으로 재생하는 상피조직이다. 재생 또는 박리는, 경미하고 그리고 보이지 않게 표면 상피 세포를 제거하는, 조화롭게 미세 조절되는 프로세스이다.

그러나, 각종 이유로, 각질층 세포가 비정상적 또는 불규칙하게 박리되어, 두피의 경우에서는 "인설" 또는 "비듬"이라 칭해지는 육안으로 볼 수 있는 대형의 두터운 세포 무리가 형성될 수 있거나, 또는 다른 상황에서는 각질층이 얇아질 수 있다. 비정상적 또는 불규칙 박리로 인한 박리 장애는 표피의 방벽 (barrier) 특성을 취약하게 하거나 심지어는 결핍되게 할 수 있다.

인설 또는 비듬의 출현을 촉진하는 인자의 예로, 효모 말라세지아 종 (Malassezia sp.) 에 의한 모낭 또는 피부의 수화 결함 또는 콜로니화, 스트레스, 동절기, 과량의 피지를 들 수 있다. 이들 인자는 특히 피부 염증을 일으키고/일으키거나 촉진하는 공통적인 특징을 가진다. 이러한 염증은 인설 또는 비듬의 출현을 강화시키거나 또는 심지어는 이들의 존재를 증가시킨다. 특히, 비듬이 없는 개체의 두피 표면에서 정상의 공생적 식물군의 일부를 구성하는 말라세지아 종 유형의 효모는, 비듬의 경우, 또는 관련 지루성 피부염의 경우에서, 그의 비율이 상당히 증가된다. 두피 환경식물군 (ecoflora) 의 불균형이 비듬의 존재를 촉진 또는 심지어 증강시키는 인자이다.

인설 또는 비듬이 존재하는 병태는 그의 보기 흉한 명백한 성질로 인해 사교적이지 못하게 하는, 빈도가 잦은 재발가능한 만성의 병태이다. 더욱이, 두피의 비듬 병태 또는 피부의 비정상적 박리는, 표피의 방벽 기능 손상에 의해 초래될 수 있거나, 또는 이것이 가려움 감각 또는 소양증을 야기시켜 긁게 만들 수 있기 때문에, 인설 또는 비듬의 출현 현상 및 그 대가인 두피 또는 피부의 자극을 증폭시킨다.

두피의 비듬 병태는 지성 타입 또는 건성 타입일 수 있다. 두피의 건성 비듬 병태는 피부 수화 장애 동안, 특히 두피 표피의 실질적 건조 동안 더 자주 드러나고, 증폭된다. 게다가, 두피는 피부기름샘이 풍부하기 때문에, 비듬 병태는 과도한 피지의 존재 하에서 더 손쉽게 발생할 수 있고 더 용이하게 소양성이 될 수 있다. 그리하여, 과도한 피지 분비 또는 과지루 (hyperseborrhea) 는, 불쾌감, 불편감, 미용 장애 (esthetic disorder) 또는 심지어 피부 병리학과 일반적으로 연관있는 두피의 지성 비듬 병태, 또는 지성 비듬의 출현을 촉진시킨다.

비듬 병태는 일반적으로 다양한 국소 또는 전신 치료에 응답한다. 그러나, 이들 치료의 효능은 단지 현상유지이며, 사용자의 철저한 역할 준수 (충분한 사용 횟수 및 충분한 적용 시간) 가 요구된다. 그러나, 이들 치료를 매일 장기간 이용하면 습관화 현상을 초래할 수 있고, 치료를 중단한다면 그 효능이 저하되고 반발 현상 발생과 연관되는 것이 일반적이다. 이러한 현상은 과지루를 통해 나타나며, 이는 비듬 병태를 악화시키고 두피의 방벽 기능을 손상시킨다. 더욱이, 특정 항비듬 활성제의 표피 세포 또는 두피 환경식물군에 대한 공격성이 또한 두피의 방벽 기능에 영향을 미칠 수 있어 비듬 병태를 악화시킨다. 마지막으로, 항비듬 치료의 효능은 보통 서서히 진전되므로 장 기간에 걸친 철저한 적용을 필요로 한다. 이러한 지체 시간으로 말미암아 종종 치료를 따르는데 실패하게 만든다. 결과적으로, 이들 치료 이용에 있어서 실패가 많다.

발현, 생물학적 활성 또는 성숙이 개질, 감소 또는 증가되는 다수의 표피 인자들이 피부, 특히 두피의 재생 또는 박리 프로세스에 직·간접적으로 관여되는 것으로 공지되어 있다.

이들 인자는 피부에 대한 바이오마커로서, 스크리닝 (screening) 표적으로서 또는 심지어 미용적 활성제로서 사용될 수 있다.

그러나, 피부의 박리, 특히 비듬 개시와 관련 있는 밀접한 메카니즘 및 인자에 대해서 여전히 다수의 비공지된 인자들이 남아있다.

따라서, 피부의 박리, 더욱 특히 두피의 비듬 병태를 특성화 (characterization) 하는 신규한 바이오마커에 대한 필요성이 존재한다.

또한, 피부 관리용, 특히 피부 박리 장애, 더욱 특히 두피의 비듬 병태의 예방 및/또는 치료용 활성제 또는 물리적 치료의 스크리닝을 위한 신규한 표적이 요구된다.

또한, 피부 박리 장애, 더욱 특히 두피의 비듬 병태의 예방 및/또는 치료를 위한 신규한 활성제 또는 신규한 치료법이 요구된다.

또한, 피부 관리를 위한, 특히 피부 박리 장애, 더욱 특히 두피의 비듬 장애를 예방 및/또는 치료하기 위한 신규한 미용적 표적이 요구된다.

또한 효율적이며 독실한 치료 준수에 악영향을 미치기 쉬운 부작용이 없는, 두피의 비듬 병태를 예방, 감소 및/또는 치료하기 위한 신규한 미용적 치료법에 대한 요구가 여전히 존재한다.

또한, 두피 환경식물군에 악영향을 미치지 않고, 또는 심지어 건강한 환경식물군의 존재까지도 강화시키는 두피의 비듬 병태 치료법이 요구된다.

또한, 두피의 수화도를 유지, 또는 강화 조차 가능하게 할 수 있는 비듬 병태의 치료법도 요구된다.

두피의 방벽 특성을 유지, 또는 강화 조차 가능하게 할 수 있는 비듬 병태의 치료법도 요구된다.

상술된 부작용이 없고, 특히, 과지루, 지루성 피부염 또는 소양성 병태를 유발하지 않는 비듬 병태의 치료법이 요구된다.

나아가, 염증을 유발하지 않는 비듬 병태의 치료법도 요구된다.

본 발명의 목적은 상기 요구를 만족시키는 것이다.

따라서, 제 1 주제 중 하나에 따르면, 본 발명은 (i) SEQ ID No.: 1 로 나타낸 핵산 서열, 또는 SEQ ID No.: 1 의 유사체 (analog) 또는 단편으로 인코딩된 (encoded) 하나 이상의 아미노산 서열, 또는 (ii) 하나 이상의 핵산 서열의, 피부의 비정상적인 박리, 바람직하게는 두피의 비듬 병태의 예방 및/또는 치료를 위한, 상기 아미노산 서열 또는 상기 핵산 서열의 활성, 발현 또는 성숙을 조절할 수 있는 활성제 또는 물리적 치료의 스크리닝에서의 용도에 관한 것이다.

뜻밖에, 2D 차 전기영동 프로테오믹 분석 과정 동안, 본 발명자들은 비침습성 (noninvasive) 두피 샘플을 이용해 인슐린-분해 효소, 또는 인슐리신 (insulysine) 또는 인슐리나아제 또는 IDE 가 두피의 비듬 병태의 민감하고 특이적인 바이오마커인 것으로 판명된 점을 발견한 바 있다.

더욱 구체적으로, 본 발명자들은 IDE 의 발현 수준, 더욱 특히 서열 SEQ ID No.: 8 내지 SEQ ID No.: 14 로 동정되고 IDE 유래된 펩티드의 발현 수준이, 비듬이 없는 두피와 비교시, 비듬 병태를 보이는 두피에서 체계적으로 증가되었음을 관찰했다. IDE 발현 변화와 피부의 비정상적인 박리간 관계가 처음으로 성립되었다. 즉, 본 발명자가 아는 바로는, 상기 효소가 비정상적인 박리의 마커로서 동정된 바 없었으며, 하물며 비듬 병태의 마커는 더 아니었다.

상기 관찰은 IDE 의, 또는 이로부터 유래된 펩티드 단편의, 또는 이들 폴리펩티드를 인코딩하는 핵산의, 피부의 비정상적인 박리, 특히 비듬 병태에 대해 활성적인 신규한 제제의 스크리닝을 위한, 또는 피부 바이오마커로서의 용도, 나아가 두피의 비듬 병태의 예방 및/또는 치료를 위한, 상기 효소의 활성을 조정하는 제제의 용도도 입증한다.

본 발명의 목적을 위해, 용어 "발현"은 아미노산 서열, 예를 들어 단백질 또는 펩티드, 또는 핵산 서열, 예를 들어 mRNA 에 있어서, 기준과 비교된 그 함량 또는 그 함량의 변화를 의미한다.

본 발명의 목적을 위해, 용어 "성숙"은 아미노산 서열, 예를 들어 단백질 또는 펩티드, 또는 핵산 서열, 예를 들어 mRNA 에 있어서, 세포 환경에서의 그 합성이 뒤따르는 개질을 의미한다. 예를 들어, 아미노산 서열의 경우, 용어 "성숙"은 번역후 개질, 예컨대 특정 아미노산의 글리코실화, 파르네실화 또는 아세틸화, 또는 "신호" 또는 "분비"서열의 제거 또는 특정 생물학적 특성을 갖는 서열의 방출을 도모하는 단백질분해 단계를 의미한다. 핵산 서열의 경우, 용어 "성숙"은 예를 들어 pre-mRNA 의 대체 스플라이싱을 의미한다.

본 발명의 목적을 위해, 용어 "활성"이란, 아미노산 서열, 예를 들어 단백질 또는 펩티드에 있어서, 적절한 경우 성숙 후 아미노산 서열의 생물학적 활성, 예컨대 효소적 활성, 수용체에 대한 아고니스트 또는 안타고니스트 활성, 효소-활성화 또는 효소-저해 활성, 또는 "구조적"활성을 의미한다.

더욱 특히, 본 발명의 목적을 위해, SEQ ID No. 8 로 나타낸 본 발명의 아미노산에 대한 용어 "활성"은 이의 단백질분해 활성, 특히 이의 통상의 기질, 예컨대 인슐린, 글루카곤, 브라디키닌 또는 칼리딘에 관한 단백질분해 활성을 의미한다.

본 발명의 목적을 위해, 용어 "활성"은 핵산 서열, 예를 들어 mRNA 에 있어서 그의 번역을 의미한다.

IDE (또한 인슐리신 또는 인슐리나아제로 공지됨) 는 M16A 프로테아제 패밀리에 속하는, 110 kDa 및 1019 개의 아미노산의 아연 메탈로프로테아제 (P14735; EC = 3.4.24.56) 이다. 이는 소형 생물활성 펩티드, 예컨대 인슐린, β-아밀로이드, 아밀린, 글루카곤, 인슐린 성장 인자 II (IGF-II), β-엔도르핀, 소마토스타틴 및 심방 나트륨이뇨 펩티드의 가수분해에 관여한다 (Guo et al. 2009).

IDE 의 발현은 뇌, 간 및 근육에서 특히 활발하고, 특히 과립층에 편재되어있고, 각칠층에 존재하는 것으로 기술되어 있다 (Radulescu et al., 2007). IDE 는 알츠하이머병의 특징적인 β-아밀로이드 퇴적물의 분해에 특히 연루되어 있다 (Kim et al. 2007; Miners et al. 2009). 또한, 이는 유형 II 당뇨병 및 고인슐린혈증의 병리에 관여된다 (Groves et al. 2003).

또한, 이는 인슐린 공급 및 IDE 저해제에 의해 보상받을 수 있는, 상피 내 반흔 형성 결손과 연관된 것으로서 기재되어 있다 (Shearer et al. 1997). IDE 는 또한 바이러스 민감도와 연관될 수도 있다 (Ali et al. 2009).

본 주제 중 또한 또 다른 하나에 따르면, 본 발명은 본 발명의 아미노산 서열, 본 발명의 핵산 서열의 활성, 발현 또는 성숙을 조절하는 유효량의 하나 이상의 제제의, 두피의 방벽 특성 장애의 예방 및/또는 치료를 위한 활성제로서의 미용적 용도에 관한 것이다.

바람직하게, 조절제는 본 발명의 아미노산 서열의 효소적 활성을 저해하는 제제이다.

더욱 바람직하게, 이러한 저해성 제제는 두피의 비듬 병태의 예방 및/또는 치료에 사용될 수 있다.

본 발명의 목적을 위해, 본 발명의 화합물의 "유효량" 이란 용어는 원하는 효과, 더욱 특히 피부의 비정상적 또는 불규칙한 박리, 바람직하게는 두피의 비듬 병태에 관한 미용적 또는 보정 효과를 수득하기에 충분하고 필수적인 본 화합물의 양을 의미한다.

본 발명의 목적을 위해, 용어 "예방"은 주어진 현상 (즉, 본 발명에서는 피부의 비정상적 또는 불규칙한 박리, 바람직하게는 두피의 비듬 병태) 의 발생 위험을 저하시키는 것 또는 늦추는 것을 의미한다.

본 주제 중 또 다른 하나에 따르면, 본 발명은 (i) 하나 이상의 본 발명의 아미노산 서열 또는 (ii) 하나 이상의 본 발명의 핵산 서열의, 피부의 박리, 바람직하게는 두피의 비듬 병태에 대한 바이오마커로서의 용도에 관한 것이다.

본 발명의 목적을 위해, 용어 "바이오마커"란, 존재/부재, 함량 또는 활성도 또는 이러한 매개변수의 변화가 생물학적, 생리적 또는 병리적 프로세스에 있어서 특유하거나, 또는 활성제의 투여 또는 물리적 치료에 의해 유도되어진 상기 프로세스에 대한 영향 또는 작용에서 특유한 분자 또는 분자의 활성을 의미한다.

본 주제 중 또 다른 하나에 따르면, 본 발명은 피부의 미용적 치료 효능을 특성화하기 위한, (i) 하나 이상의 본 발명의 아미노산 서열 또는 (ii) 하나 이상의 본 발명의 핵산 서열의 용도에 관한 것이다.

바람직한 구현예에 따르면, 효능이 특성화된 미용적 치료가 피부의 비정상적 박리, 바람직하게는 두피의 비듬 병태의 미용적 치료일 수 있다.

또 다른 구현예에 따르면, 본 발명은 (i) 하나 이상의 본 발명의 아미노산 서열 또는 (ii) 하나 이상의 본 발명의 핵산 서열의, 피부의 비정상적인 박리, 바람직하게는 두피의 비듬 병태의 예방 및/또는 치료로 공지되어 있는 일련의 활성제들 중, 상기 박리 또는 상기 비듬 병태에 대해 최대의 이로운 효과를 발휘하는 것으로 여겨지는 활성제를 선택하기 위한 용도에 관한 것이다.

본 주제 중 또 다른 하나에 따르면, 본 발명은 유효량의 (i) 하나 이상의 본 발명의 아미노산 서열 또는 (ii) 하나 이상의 본 발명의 핵산 서열 또는 (iii) 하나 이상의 본 발명의 조절제의 단리된 재건 피부의 제조를 위한 용도에 관한 것이다.

유리하게도, 본 발명의 단리된 피부의 모델이 피부 박리 장애, 특히 두피의 비듬 병태를 복원하는데 사용될 수 있다.

본 주제 중 또 다른 하나에 따르면, 본 발명은 적어도 하기로 이루어진 단계를 포함하는, 피부의 비정상적인 박리, 바람직하게는 두피의 비듬 병태의 특성화 방법에 관한 것이다:

a) 피부, 바람직하게는 두피의 단리된 샘플에서, 상기 아미노산 서열 또는 상기 핵산 서열의 발현, 성숙 또는 활성의 정성적 또는 정량적 측정을 수행하는 단계, 및

b) 단계 a) 에서 수행된 상기 측정을 기준 측정과 비교하는 단계.

본 주제 중 또 다른 하나에 따르면, 본 발명은 적어도 하기로 이루어진 단계를 포함하는, 피부의 비정상적인 박리, 바람직하게는 두피의 비듬 병태를 예방 및/또는 치료하기 위한, 본 발명의 아미노산 서열 또는 본 발명의 핵산 서열의 활성, 발현 또는 성숙을 조절할 수 있는 활성제 또는 물리적 치료의 스크리닝 방법에 관한 것이다:

a) 상기 아미노산 서열 또는 상기 핵산 서열을 상기 서열의 활성, 발현 또는 성숙에 유리한 조건 하에 배치하는 단계,

b) 상기 아미노산 서열 또는 상기 핵산 서열을 시험될 하나 이상의 활성제와 접촉시키거나 또는 상기 아미노산 서열 또는 상기 핵산 서열을 시험될 물리적 치료법에 노출시키는 단계,

c) 상기 아미노산 서열 또는 상기 핵산 서열의 발현, 성숙 또는 활성의 정성적 또는 정량적 측정을 수행하는 단계, 및

d) 상기 측정을 기준 측정과 비교하는 단계.

이들 주제 중 또 다른 하나에 따르면, 본 발명은 피부의 비정상적인 박리, 바람직하게는 두피의 비듬 병태를 예방 및/또는 치료하는 이를 필요로 하는 개체에서의 미용 방법으로서, 상기 개체에 활성제로서 상기 서열의 활성, 발현 또는 성숙을 조절하는 하나 이상의 제제를 포함하는 하나 이상의 조성물을 투여하는 것으로 이루어진 단계 하나 이상을 포함하는 방법에 관한 것, 바람직하게는 하기에 정의된 바와 같은 방법이다.

이들 주제 중 또 다른 하나에 따르면, 본 발명은 적어도 하기로 이루어진 단계를 포함하는, 피부의 비정상적인 박리, 바람직하게는 두피의 비듬 병태의 미용적 치료의 이를 필요로 하는 개체에서의 효능을 특성화하는 미용 방법에 관한 것이다:

a) 상기 개체에서 취한, 제 1 의 단리된 피부 샘플, 바람직하게는 단리된 두피 샘플에서, 미용적 치료를 실시하기 전에, 하나 이상의 본 발명의 아미노산 서열 또는 하나 이상의 본 발명의 핵산 서열의 발현, 성숙 또는 활성의 적어도 제 1 의 정성적 또는 정량적 측정을 수행하는 단계,

b) 상기 개체에서 취한, 제 2 의 단리된 피부 샘플, 바람직하게는 단리된 두피 샘플에서, 미용적 치료를 실시한 후에, 상기 아미노산 서열 또는 상기 핵산 서열의 발현, 성숙 또는 활성의 적어도 제 2 의 정성적 또는 정량적 측정을 수행하는 단계, 및

c) 제 1 및 제 2 의 측정을, 특히 이로부터 미용적 치료 실시의 하나 이상의 효과에 대한 정보를 추론하기 위해 비교하는 단계.

하나의 바람직한 구현예에 따르면, 본 발명에 따른 방법 또는 용도는 생체 내, 시험관 내 또는 생체 외, 보다 더욱 바람직하게 시험관 내 또는 생체 외에서 실시될 수 있다.

또한 또 다른 구현예에 따르면, 본 발명은 SEQ ID No.: 9 ~ SEQ ID No.: 14 에서 선택된 아미노산 서열, 또는 이의 유사체 또는 단편으로 나타낸 단리된 펩티드에 관한 것이다.

상기 주제들 중 또한 또 다른 하나에 따르면, 본 발명은 SEQ ID No.: 8 내지 SEQ ID No.: 14 로부터 선택된 아미노산 서열, 또는 그 유사체 또는 단편으로 나타낸 펩티드, 또는 그 펩티드를 인코딩하는 핵산 서열을 포함하는 조성물에 관한 것이다.

상기 주제들 중 또 다른 또 하나에 따르면, 본 발명은 SEQ ID No.: 8 또는 그 단편 또는 유사체로 나타낸 단백질의 발현이 억제 또는 증가된 하나 이상의 세포를 포함하는 다세포성 피부 모델에 관한 것이다. 바람직하게, 상기 세포 모델은 시험관 내 또는 생체 외 모델이다.

본 발명은 피부에 대한, 특히 피부의, 박리에 대한, 특별히 비정상적 박리에 대한, 보다 특히 두피의 비듬 병태에 대한, 신규한 민감성 및 특이적 바이오마커를 제안하는 이점을 가진다.

IDE 의 각질층 내 존재, 더욱 특히 상기 단백질로부터 특이적으로 유도된 펩티드의 존재 관찰은 국소 샘플을 단순히 취하는 것에 의해 상기 단백질, 또는 상응 펩티드의 발현 또는 활성의 정량적 또는 정성적 측정을 유리하게도 가능하게 한다.

샘플링 방법은 예를 들어 고려 중인 표피에 접착 요소를 적용시키는 것으로 이루어진 뿔상 디스크형 (corneodisc) 또는 스트리핑 (stripping) 유형의 기법일 수 있다. 상기 접착 요소가 떼어질 때, 피부 표면의 일부가 제거된다. 단백질 추출 후, 후자를 이어서 통상의 방법, 예를 들어 ELISA 면역 효소 어세이 또는 웨스턴 블롯 분석, 더욱 특히 2D 차 전기영동 프로테오믹 분석에 의해 분석할 수 있다.

마찬가지로, 본 발명은 피부 박리 장애, 특히 두피의 비듬 병태의 예방 및/또는 치료를 위한 신규한 활성제 또는 신규한 물리적 치료법의 스크리닝에 적합한 신규한 바이오마커를 제공할 수 있는 이점을 가진다.

마찬가지로, 또 다른 이점에 따르면, 본 발명은 피부 박리 장애, 특히 두피의 비듬 병태를 예방 및/또는 치료하기 위한 신규한 활성제를 제공한다.

유리하게도, 본 발명에 의해 제안된 신규한 활성제는 두피의 방벽 특성을 강화시킨다.

두피의 방벽 특성의 보호 및 강화는 피부 염증의 감소, 균형잡힌 방벽의 유지, 방벽의 일관성 및 균형잡힌 환경식물군의 보존을 가능하게 한다.

이후, 두피는 덜 자극되고 덜 가렵고, 덜 유약하고 더 수화성이며, 비듬의 양이 감소된다.

아미노산 및 핵산 서열

인슐린-분해 효소 (IDE) 또는 인슐리신은, 제거된 개시 메티오닌을 포함하고 상기의 유전자는 염색체 10, 유전자자리 10q23-q25 에 위치되어 있는 1019 개의 아미노산 (SEQ ID No.: 8) 의 단백질이다.

달리 지시되지 않는 한, 용어 "IDE" 는 본 특허 출원에서, 가능하게 번역후 성숙을 겪는 SEQ ID No.: 8 내지 SEQ ID No.: 14 로 나타낸 아미노산 서열을 의미하는 것으로 의도된다.

바람직한 구현예에 따르면, 용어 "IDE" 는 더욱 구체적으로 SEQ ID No.: 8 로 나타낸 아미노산 서열, 더욱 바람직하게는 개시 메티오닌이 제거되어 있는 SEQ ID No.: 8 로부터 유래된 서열로 나타낸 아미노산 서열을 의미하는 것으로 의도된다.

한 구현예에 따르면, 본 발명에 적합한 아미노산 서열은 SEQ ID No.: 1 로 나타낸 핵산 서열 또는 상기 서열의 유사체 또는 단편으로 인코딩될 수 있다.

본 발명에 따른 아미노산 서열 또는 핵산 서열의 용어 "유사체"는, 상기 기준 서열과 85% 이상, 바람직하게는 90% 이상, 더욱 바람직하게는 95% 이상의 서열 상동성을 갖고, 경우에 따라, 동일한 성질의 생물학적 활성을 갖거나 또는 동일한 성질의 생물학적 활성을 가진 아미노산 서열을 인코딩하는, 임의의 아미노산 서열 또는 핵산 서열을 의미하는 것으로 의도된다. 본 발명에 사용되기에 적합한 유사체로서, 데이타베이스 Homologene (http://www.ncbi.nlm.nih.gov/homologene) 에 동정된 상동 서열을 언급할 수 있다. 용어 "핵산 서열의 유사체"는, 특히 핵산 코드의 축퇴 (degeneracy) 에 의해 생기고, 본 발명에 따른, 특히 상기에 정의된 바와 같은 아미노산 서열을 인코딩하는 핵산 서열을 의미하는 것으로 의도된다.

본 발명에 따른 아미노산 서열과 관련된 "동일한 성질의 생물학적 활성" 이란 용어는 특히 IDE 의 통상적인 속성인 단백질 분해 특성, 예를 들어 인슐린, 브라디키닌, 칼리딘, β-아밀로이드 펩티드 또는 글루카곤을 가수분해하는 능력을 의미한다. 특히, 본 발명에 따른 아미노산 서열은 더욱 특히 아밀로이드 유형의 구조를 형성하는 기질을 분해하는 능력으로 특징지워진다.

서열 상동성은 시각적인 비교에 의해, 또는 디폴트 매개변수로 사용되고 www.ncbi.nlm.nih.gov 에서 이용가능한 BLAST 프로그램과 같은 그 분야에서 일반적으로 사용되는 임의의 컴퓨터 기기를 통해 측정될 수 있다.

본 발명에 따른 아미노산 서열의 유사체는 펩티도미메틱 (peptidomimetic) 제제일 수 있다.

본 발명의 아미노산 서열의 유사체는, 하나 이상의 아미노산의 결실 또는 삽입에서, 또는 하나 이상의 아미노산의 치환에서 또는 대체 스플라이싱에서 비롯되는, 본 발명에 따른 펩티드의 서열 내 하나 이상의 돌연변이(들) 및/또는 변이(들) 로부터 발생되어진 개질로써 만들 수 있다. 이들 개질의 몇 가지는 조합될 수 있다.

유리하게도, 본 발명의 아미노산 서열의 유사체는 기준 아미노산 서열과 필적하는 보존성 치환을 포함할 수 있다.

본 발명에서 고려될 수 있는 돌연변이의 예로서, 완전히는 아니지만, 하나 이상의 아미노산 잔기를 유사한 친수도 지수 (hydropathic index) 를 가지나 폴리펩티드의 생물학적 특성에는 실질적으로 영향을 미치지 않는 아미노산 잔기로 대체하는 것을 언급할 수 있다. 친수도 지수는 그의 소수성 및 그의 전하에 따라 아미노산을 배정하는 지수이다 (Kyte et al. 1982).

본 발명에 의해 표적된 아미노산 서열 또는 그 유사체는 하나 이상의 번역후 성숙(들) 을 겪는 아미노산 서열일 수 있다.

용어 "번역후 성숙(들)"이란, 세포 내 그 합성의 말미에 아미노산 서열이 겪기 쉬운 모든 개질, 예를 들어 하나 이상의 인산화(들), 하나 이상의 티올화(들) (thiolation), 하나 이상의 아세틸화(들), 하나 이상의 글리코실화(들), 하나 이상의 지질화(들), 예컨대 파르네실화 또는 팔미토일화, 구조적 재배열, 예컨대 디술파이드 가교 형성 및/또는 펩티드 서열 내 절단을 포함하는 것으로 의도된다.

더욱이 아미노산 서열의 유사체는 실질적으로 그 아미노산 서열과 동일한 생물학적 활성을 가진다.

나아가, 1차 아미노산 서열은 프로테아제-유형 효소, 예컨대 트립신에 의해 특이적으로 인지된 부위들을 포함할 수 있는데, 이들 부위들이 실제로 인지되어지면, 단백질분해에 의해 상기 서열의 절단이 유도될 것이라는 점은 공지되어 있다. 이 단백질 분해는 그 결과 다양한 펩티드 또는 본 발명의 아미노산 서열의 단편을 생성하게 한다.

결론적으로, 본 발명은 또한 적절한 경우 그 단백질분해로부터 야기된 IDE 단편으로 확장된다.

본 발명의 목적을 위해, "아미노산 서열의 단편" 이란 표현은, 3 개 이상, 또는 나아가 4 개 이상, 보다 더욱 6 개 이상의 연이은 아미노산의 상기 기준 서열을 포함하거나, 또는 3 내지 100 개의 연이은 아미노산의 상기 기준 서열, 바람직하게는 4 내지 90 개, 바람직하게 6 내지 80 개, 더욱 바람직하게 9 내지 70 개의 연이은 아미노산의 상기 서열을 포함하고 동일한 성질의 생물학적 활성을 가진 본 발명에 따른 아미노산 서열의 임의의 일부를 의미한다.

본 발명의 목적을 위해, "핵산 서열의 단편"이란 용어는, 9 개 이상, 또는 보다 12 개 이상, 보다 더욱 18 개 이상의 연이은 염기쌍의 상기 기준 서열, 또는 9 내지 300 개의 연이은 염기쌍의 상기 기준 서열, 바람직하게는 12 내지 270 개, 바람직하게 18 내지 240 개, 더욱 바람직하게 27 내지 210 개의 연이은 염기쌍의 상기 서열을 포함하고, 상기 서열로 인코딩된 아미노산 서열과 동일한 성질의 생물학적 활성을 가진 아미노산 서열을 인코딩하는 핵산 서열을 의미한다.

한 구현예에 따르면, 본 발명에 적합한 아미노산 서열은 SEQ ID No.: 8 내지 14 로부터 선택된 서열 또는 그 유사체 또는 단편, 바람직하게는 SEQ ID No.: 9, SEQ ID No.: 10, SEQ ID No.: 11, SEQ ID No.: 12, SEQ ID No.: 13 및 SEQ ID No.: 14 로 나타낸 서열, 또는 그 유사체 또는 단편으로 나타낸 아미노산 서열일 수 있다.

또 다른 구현예에 따르면, 본 발명에서 사용되기에 적합한 아미노산 서열은, 적절한 경우 IDE 의 효소적 또는 화학적 분해 이후, 또는 화학적 또는 생물학적 합성에 의해, 또는 상기 아미노산 서열을 천연적으로 발현하는 생물학적 조직, 예를 들어 피부로부터의 추출에 의해 또는 그의 트랜스펙션 이후 수득될 수 있는 천연 또는 합성 아미노산 서열, 나아가 그의 다양한 번역 후 형태 또는 나아가 상술된 아미노산 서열을 전체 또는 부분 포함하는 서열인 임의의 천연 또는 합성 아미노산 서열, 예를 들어 변이체 및 유사체일 수 있다.

당업자는 재조합 DNA, 예를 들어 매뉴얼 [Molecular Cloning - A Laboratory Manual (2nd edition), Sambrook et al., 1989, Vol. I-III, Coldspring Harbor Laboratory, Coldspring Harbor Press, NY, (Sambrook)] 에 기재된 것을 바탕으로 하는 프로세스를 통해 본 발명에 따른 아미노산 서열을 수득할 수 있다.

또 다른 구현예에 따르면, 본 발명에 적합한 아미노산 서열은 또한 또 다른 아미노산 서열, 친수성 또는 소수성 표적 제제, 생전환 전구체 또는 형광, 방사능 또는 비색 라벨링제 또는 대안적으로 항체 라벨링제와 융합된 상기 정의된 바와 같은 아미노산 서열일 수도 있다.

비제한적인 방식으로, 본 발명에 따른 아미노산 서열과 커플링될 수 있는 화합물의 예로서, 녹색 형광 단백질과 같은 형광 단백질, 형광 화학적 화합물, 예컨대 로다민, 플루오레세인, 또는 Texas Red®, 인광성 화합물, 방사능 원소, 예컨대 ³H, ¹⁴C, ³⁵S, ¹²¹I 또는 ¹²⁵I, 또는 비색 라벨링제, 예컨대 갈락토시다아제, 퍼록시다아제, 클로람페니콜 아세틸트랜스퍼라아제, 루시퍼라아제 또는 알칼리 포스파타아제의 작용에 민감한 크로모겐 기질, 또는 항체 라벨링제, 예컨대 His-Tag 을 들 수 있다.

본 발명의 아미노산 서열과 커플링될 수 있는 화합물의 성질에 따라, 커플링은 화학적 프로세스를 통해, 특히 반응 화학 작용으로써, 또는 당업자에게 공지된 분자 생물학 프로세스를 통해 수행될 수 있다.

한 구현예에 따르면, 본 발명은 본 발명의 아미노산 서열을 인코딩하는 핵산 서열 및 본 발명의 다양한 사용 및 프로세스에서의 그의 실시에 관한 것이다.

따라서, 본 발명은 또한 SEQ ID No.: 1 로 나타낸 핵산 서열, 특히 데옥시리보핵산 서열 또는 리보핵산 서열, 또는 그 유사체 또는 단편에 관한 것이다.

유리하게, 본 발명의 아미노산 서열은 SEQ ID No.: 1, SEQ ID No.: 2, SEQ ID No.: 3, SEQ ID No.: 4, SEQ ID No.: 5, SEQ ID No.: 6 또는 SEQ ID No.: 7 로 나타낸 서열, 또는 그 유사체 또는 단편으로부터 선택된 핵산 서열로 인코딩될 수 있다.

바람직하게, 본 발명의 핵산 서열은 SEQ ID No.: 2, SEQ ID No.: 3, SEQ ID No.: 4, SEQ ID No.: 5, SEQ ID No.: 6 또는 SEQ ID No.: 7 로부터 선택된 서열, 또는 그 유사체 또는 단편으로 나타낼 수 있다.

본 발명의 핵산 서열은 임의의 가능한 기원의 것, 즉 동물, 특히 포유 동물, 보다 더욱 특히 인간, 또는 식물, 또는 미생물, 예컨대 바이러스, 파아지 또는 박테리아, 그 중 진균류 기원 (상기 기원의 유기체 내 천연적으로 존재하는지 여부에 대한 어떠한 선입견 없이) 일 수 있다.

한 구현예에 따르면, 본 발명은 또한 본 발명에 따른 고려 중인 아미노산 서열을 인코딩하는 단리 및 정제된 핵산 서열, 나아가 그 유사체 및 단편에 관한 것이다.

본 발명에 따른 핵산 서열은 본 발명에 따른 폴리펩티드를 인코딩하는 서열에 상응하는 센스, 안티센스 또는 간섭 (interfering) 서열을 포함할 수 있다.

본 발명의 주제는 또한 센스 또는 안티센스, 특히 소형 간섭 RNA (siRNA), 본 발명의 핵산 서열, 또는 본 발명의 단백질 또는 펩티드를 인코딩 하는 서열에 적어도 상응하는 서열 또는 그 단편 또는 유사체를 포함하는 핵산 서열, 특히 리보핵산 서열 또는 데옥시리보핵산 서열이다.

본 발명은 또한 효소의 활성을 조절할 수 있는 RNA 또는 DNA 압타머 서열에 관한 것이다.

본 발명은 또한 표준 기법을 통해 수득된 모노클로날 또는 폴리클로날 항체, 또는 바람직하게는 예를 들어 Ablynx 사에서 제안한 바와 같은 "Nanobodies" 또는 AbD Serotec 사에 의해 제안된 것과 같이, 파아지 디스플레이 기법을 통한 IDE 에 대항해 선택된 재조합 인간 항체에 관한 것이다.

피부 박리 및 비듬 병태

이전에 지시한 바와 같이, 과도한 건조 또는 과도한 피지 분비를 보이는 두피는 비듬 병태를 나타낼 수 있는데, 이는 경우에 따라 건성 또는 지성 비듬 조각의 존재, 또는 나아가 소양증 및/또는 표피의 염증을 특징으로 할 수 있다.

건성 비듬 병태는 두피의 건조증을 반영하며, 이는 이의 각질층의 과도하게 빠른 재생과 조합될 수 있다. 건성 비듬 조각은 일반적으로 작고 백색 또는 회색이며, 두피에 퍼져 있고 복착 상태에서 불쾌한 시작적 효과를 불러 일으킨다. 두피의 건조와 연관 있는 가려움증은 홍반, 소양증 또는 심지어 염증을 야기할 수 있다.

지성 비듬 병태는 지루성 피부염의 형태들 중 하나이다. 이를 앓고 있는 개체는 축적되어 한 뭉치를 형성하는 크고 기름기가 많은 황색의 인설로 덮힌 홍반성 두피를 가진다. 이들은 소양성 두피를 가지며 종종 영향권에서 작열감을 가진다. 두피의 지성 비듬 병태는 두피 표피에서 피지의 과도한 분비 동안 나타나고 증폭된다. 이의 중증 형태인 지성 비듬 병태는 지루성 피부염 형태일 수 있다.

이러한 현상은 병원성 미생물, 특히 말라세지아 종의 존재에 의해 증폭될 수 있다. 피지로부터 지방산을 방출하는 특성을 가진 상기 미생물은 표피의 방벽 기능에 손상을 입혀 염증을 야기할 수 있다.

두피의 비듬 공격 동안, 피부 방벽은 불균형을 이루어, 그 완결성 및 그 수화성이 손상되고 그 환경식물군은 교란된다. 두피의 피부는 자극되고 소양성이며, 취약하고, 덜 수화성이고 감염에 민감성이다.

본 발명의 핵산 서열 또는 아미노산 서열, 또는 본 발명의 조절제의 이용은 환경식물군 및 보습의 재확립, 및 두피의 소양증 감소를 도모한다. 상기 감소는 두피의 스크래칭 상태, 및 이로부터 발생된 방벽 기능의 손상 면에서의 감소에 의해 반영된다. 그에 따라 치료 효능은 현저히 개선되고 보다 훨씬 빠르게 진전된다. 이후, 피부는 자극을 덜 받아 소양성이 덜해지고, 비듬 존재가 감소, 심지어는 제거된다.

따라서 본 발명에 따른 용도, 방법 및 조성물이 하기에 대해 가장 특히 효과적인 것으로 입증된다:

- 과도한 건성과 연관된 두피의 장애, 특히 미용 장애 또는 심지어 건조증의 예방 및/또는 치료,

- 과도한 피지 배출 및/또는 분비와 연관된 두피의 장애, 특히 미용 장애의 예방 및/또는 치료,

- 두피의 비듬 병태 (건성 또는 지성 여부와 관계 없음) 의 예방 및/또는 치료,

- 건성 또는 지성 두피의 항균성 방어의 개선 및/또는 재확립,

- 피부 및 두피의 쾌적함 개선,

- 두피의 위생 및/또는 관리 개선,

- 두피의 컨디션을 좋게함,

- 두피의 피부의 방벽 기능의 완결성의 보존 및/또는 강화

- 두피의 생역학적 특성의 유지 및/또는 회복,

- 두피의 균형있는 환경식물군의 재확립,

- 두피의 비듬 병태와 연관된 소양증 및/또는 지루성 피부염의 예방 및/또는 치료, 및/또는

- 두피의 비듬 병태와 연관된 염증의 예방 및/또는 치료.

유리하게도, 본 발명은 두피의 방벽 특성의 장애를 예방 및/또는 치료하는데 수행될 수 있다.

이하 설명된 바, 본 발명에서 고려 중인 두피의 비듬 병태는 두피의 건선과는 다르다.

더 일반적으로, 본 발명은 피부의 박리, 특히 비정상적 또는 불규칙한 박리에 대해, 피부의 항상성, 특히 표피의 방벽 특성을 유지 또는 회복하기 위한 목적으로 수행될 수 있다. 즉, 본 발명은 또한 두피의 방벽 특성의 장애를 예방 및/또는 치료하기 위해 수행될 수도 있다.

박리의 탈조절성의 심각도에 따라, 후속의 피부 박리 장애가 미용 분야 또는 치료 분야에 속해질 수 있다. 관련 분야의 함수로서 피부 박리 장애를 구별하는 것은 당업자의 일반적인 지식 및 통상 실시의 몫이다.

비정상적 또는 불규칙 박리는 피부의 방벽 기능의 장애가 종종 수반되는 각질층의 비대해짐 또는 얇아짐에 의해 반영될 수 있다. 미용적 측면에서, 비정상적 박리를 보이는 피부는 건조함 또는 피부의 건조증, 거침, 비듬 또는 인설의 징후를 보이는 피부일 수 있다.

비정상적인 박리가 매우 심화되는 경우, 피부의 상태는 치료 분야에 속해질 수 있고 아토피성 피부염, 비늘증 또는 건선을 제공할 수 있다.

바이오마커

본 발명의 바이오마커는 유리하게도 피부의 박리, 특히 비정상적 박리, 및 바람직하게 두피의 비듬 병태를 특성화 하는 것을 가능하게 한다.

본 발명의 한 구현예에 따르면, 본 발명의 바이오마커의 활성, 발현 또는 성숙에서의 증가 또는 감소는 피부의 비정상적 또는 불규칙적 박리, 바람직하게 두피의 비듬 병태를 가리킬 수 있다.

바람직한 구현예에 따르면, 본 발명의 바이오마커의 활성, 발현 또는 성숙에서의 증가는 두피의 비듬 병태를 가리킬 수 있다.

바이오마커는 특히 피부의 비정상적 또는 불규칙적 박리에 대해 미용적 피부 치료의 효능을 특성화하는데 사용될 수 있다. 특히, 그 효능이 특성화된 미용적 치료는 두피의 비듬 병태의 치료일 수 있다.

바이오마커의 활성, 발현 또는 성숙에서의 증가 또는 감소는 유효한 미용적 치료를 나타낼 수 있고, 피부의 비정상적 또는 불규칙한 박리에 대하여, 특히 두피의 비듬 병태에 관해서 유익한 효과를 발휘하기 위한 치료를 나타낼 수 있다.

바이오마커의 활성, 발현 또는 성숙 면에서의 감소 또는 증가는 당업자에게 공지된 임의의 방법에 따라 수득된 기준 측정과 비교하여 측정될 수 있다.

제공된 매개변수의 관점에서 "기준 측정"은, 예를 들어 기준 샘플에서 결정된 또는 매개변수에 영향을 끼칠 것으로 추정되는 치료법의 부재 하 샘플에서 결정된, "제어" 또는 "정상" 조건 하 수행된 상기 매개변수의 정성적 또는 정량적 측정이다.

본 발명에서 사용하기 적합한 샘플은 개체에서 또는 재건 피부의 시험관 내 모델에서 취한 단리된 피부의 샘플일 수 있다.

예를 들어, 본 발명에 따른 아미노산 서열 또는 핵산 서열에 대한 기준 측정은, 정상적 또는 규칙적인 박리를 보이는 생리적으로 건강한 피부의 샘플에서 측정된, 또는 미용적 치료 전 피부, 특히 피부 박리 장애를 보이는 피부의 샘플에서 측정된, 상기 서열의 발현, 성숙 또는 활성과 비교된 정량적 또는 정성적 값일 수 있다.

바람직하게, 기준 측정은 통계적 측정, 즉 평균치를 수득하기 위한 각종 샘플들에서 반복되어진 측정치이다.

기준 측정은 시험 측정과 병행 또는 순차적으로 수행될 수 있다.

이는 또한 "역사적인" 측정일 수 있다, 즉 시험 측정 전에 실시되어, 예를 들어 후속 사용을 위해 데이타베이스에 저장된 것일 수 있다.

시험 측정과 기준 측정과의 비교, 및 두 측정간의 편차 관찰 또는 편차 부재는 측정된 매개 변수에 대한 정보, 예를 들어 본 발명에 따른 아미노산 서열, 또는 핵산 서열의 발현, 성숙, 또는 활성에서의 감소 또는 증가를 얻는 것을 가능하게 한다.

이러한 정보는 후속해서 피부의 정상적 또는 규칙적인 박리의 존재, 또는 반대로 피부의 비정상적 또는 불규칙한 박리의 존재를 측정하는데 사용될 수 있다.

사용된 본 발명의 바이오마커가 아미노산 서열인 경우, 피부의 비정상적 또는 불규칙적 박리는 정상 기준치의 1.2 배 이상, 바람직하게는 1.5 배 이상, 더욱 바람직하게는 2 배 이상의 상기 서열의 발현 편차에 의해 반영될 수 있다.

본 발명은 또한 표피 세포 모델에서 또는 재건 단리된 피부에서 취한 피부의 샘플 상에서 그 상태를 기술하기 위해 수행될 수 있다.

또 다른 측면에 따르면, 본 발명의 바이오마커는 피부 박리 장애의 예방 및/또는 치료용 일련의 활성제 중에서 상기 장애와 관련해 최대의 유효한 효과를 발휘하는 것으로 추정되는 활성제를 선택하는데 사용될 수 있다.

본 발명이 선택 사용이 이루어지는 일련의 활성제는 박리 장애를 치료하는데 종래 사용되어진 일련의 활성제일 수 있다. 더욱 구체적으로, 본 발명의 바이오마커가 두피의 비듬 병태를 보이는 개체의 치료에 가장 적합한 활성제를 선택하는데 사용될 수 있다. 이 경우, 고려될 활성제는 비듬 병태의 치료에 통상 사용되는 것이다.

즉, 본 발명의 바이오마커는 피부 박리 장애, 특히 두피의 비듬 병태를 보이는 개체에 대해 맞춤식 상담 서비스를 확립하는데 사용될 수 있다.

정상 기준에 대한 바이오마커의 편차 정도에 따라, 상담자는 치료에 양호하게 순응하게 하는데 불리할 것으로 입증될 수 있는 악 또는 부작용의 발생 위험을 감소시키면서 동시에 정상에 대한 바이오마커의 최선의 보정을 수득하기 위해 가장 적합한 제품을 선택할 수 있다.

또 다른 측면에 따르면, 본 발명의 바이오마커는, 피부의 비정상적 박리, 바람직하게 두피의 비듬 병태에 대해 활성인 것으로 추정되는 제품의 효능 평가 전용의 임상 시험을 수행하기 위한 개체 군의 선택 및 구성 방법에서 사용될 수 있다.

유리하게는, 임상 시험 이후 유의한 결과를 얻도록, 기준치에 대해 동일한 정도의 바이오마커의 편차를 갖는 개체의 균일한 군들을 정의내리기 위해 본 발명의 바이오마커를 사용할 수 있다.

한 구현예에 따르면, 본 발명은 피부의 박리 상태를 특성화하는 방법, 특히 시험관 내 또는 생체 외 방법에 관한 것이다.

본 발명의 방법은 비정상적 또는 불규칙적 박리로부터 야기된 피부 박리 장애, 더욱 특히 두피의 비듬 병태를 특성화하는 것을 가능하게 한다.

또 다른 구현예에 따르면, 본 발명은 적어도 하기로 이루어진 단계를 포함하는, 미용적 피부 치료법, 바람직하게는 비정상적 피부 박리, 바람직하게 두피의 비듬 병태의 치료법을, 이를 필요로 하는 개체에서 특성화하기 위한, 미용적 또는 비치료적 방법, 특히 시험관 내 또는 생체 외 방법에 관한 것이다:

a) 상기 개체에서 취한, 제 1 의 단리된 피부 샘플, 바람직하게는 단리된 두피 샘플에서, 미용적 치료를 실시하기 전에, 하나 이상의 본 발명의 아미노산 서열 또는 하나 이상의 본 발명의 핵산 서열의 발현, 성숙 또는 활성의 적어도 제 1 의 정성적 또는 정량적 측정을 수행하는 단계,

b) 상기 개체에서 취한, 제 2 의 단리된 피부 샘플, 바람직하게는 단리된 두피 샘플에서, 미용적 치료를 실시한 후에, 상기 본 발명의 아미노산 서열 또는 상기 본 발명의 핵산 서열의 발현, 성숙 또는 활성의 적어도 제 2 의 정성적 또는 정량적 측정을 수행하는 단계, 및

c) 제 1 및 제 2 의 측정을, 특히 이로부터 미용적 치료 실시의 하나 이상의 효과에 대한 정보를 추론하기 위해 비교하는 단계.

단계 a) 및 b) 에서 실시된 측정은 서로 필적하는 것이므로, 따라서 동일한 매개변수에 대한 것임은 말할 나위도 없다.

바람직하게, 본 발명의 방법은 피부의 비정상적 또는 불규칙적 박리, 특히 두피의 비듬 병태를 정상화할 수 있는 미용적 치료법의 효과를 증명 가능하게 한다.

더욱 바람직하게, 본 발명의 방법은 미용적 치료의 효능, 특히 두피의 비듬 병태의 치료를 특성화하는 것을 가능하게 한다.

본 발명의 핵산 서열의 발현, 성숙 또는 활성의 정성적 또는 정량적 측정은 당업자에게 공지된 임의의 방법에 의해 결정될 수 있다.

본 발명에 적합한 방법의 예로서, 정량적 폴리머라아제 사슬 반응 (Q-PCR) 또는 비정량적 폴리머라아제 사슬 반응 (PCR) 의 역 전사효소의 존재 또는 부재 하 (RT-PCR 또는 Q-RT-PCR) 의 것, 노던 블롯, 리보뉴클레아제 보호 어세이 방법, DNA 칩을 이용한 방법, 트랜스크립톰 칩을 이용한 방법, 올리고뉴클레오티드 칩을 이용한 방법, 제자리 하이브리드화 (in situ hybridization) 을 언급할 수 있다.

본 발명의 핵산 서열, 특히 mRNA 서열을 검출하는데 적합한 제제의 예로서, 본 발명의 핵산 서열과 하이브리드화될 수 있는 라벨링된 핵산 프로브를 언급할 수 있다.

상기 핵산 프로브는 당업자에게 공지된 임의의 방법에 의해 용이하게 수득될 수 있다.

따라서, 본 발명에 따른 핵산 서열은 서열 SEQ ID No.: 1, SEQ ID No.: 2, SEQ ID No.: 3, SEQ ID No.: 4, SEQ ID No.: 5, SEQ ID No.: 6, 또는 SEQ ID No.: 7, 또는 그 유사체 또는 단편 중 하나 이상에 고 엄격성 조건 하에서 하이브리드화되는 센스 및/또는 안티센스 올리고뉴클레오티드 프라이머를 제조하는데 사용될 수 있다.

핵산 서열의 발현은 또한, 웨스턴 블롯, ELISA, BRADFORD 법 또는 LOWRY 법, 또는 이하에 지시된 바와 같이 2D 전기영동 등 그 분야에서 공지된 임의의 기술을 통해, 상기 서열에 의해 인코딩된 아미노산 서열의 발현을 측정함으로써 간접적으로 측정될 수 있다.

본 발명의 아미노산 서열의 발현, 성숙 또는 활성의 정성적 또는 정량적 측정은 당업자에게 공지된 임의의 방법으로써 수행될 수 있다.

아미노산 서열의 발현, 성숙 또는 활성을 검출하는 방법으로는, 웨스턴 블롯, 슬롯 블롯, 돗 블롯, 싱글플렉스 또는 멀티플렉스 타입의 ELISA (Enzyme Linked Immuno-Sorbent Assay; 효소-결합 면역흡착 측정법) 법, 프로테오믹 또는 글리코믹 방법, 2D 차 전기영동 프로테오믹 분석, 은-기재 염색으로의, 쿠마시 블루로의 또는 SYPRO 로의 폴리아크릴아미드 겔 중 폴리펩티드의 염색 방법, 면역형광법, UV 흡수법, 통상적, 전자 또는 공초점 현미경으로써의 면역조직화학법, FRET (fluorescence resonance energy transfer;형광성 공명 에너지 전이) 방법, TR-FRET (time resolved FRET; 시간 분석형 FRET) 방법, FLIM (fluorescence lifetime imaging microscopy; 형광수명 이미지 현미경) 방법, FSPIM (fluorescence spectral imaging microscopy; 형광 스펙트럼 이미지 현미경) 방법, FRAP (fluorescence recovery after photobleaching; 광표백후 형광 회수) 방법, 리포터 유전자 방법, AFM (atomic force microscopy; 원자력 현미경) 방법, 표면 플라즈몬 공명 방법, 미세열량측정 방법, 유동 세포분석 방법, 바이오센서 방법, 방사면역측정 (RIA) 방법, 등전점전기영동 방법, 및 효소 시험, 펩티드 칩, 당 칩, 항체 칩을 이용한 방법, 질량 분광측정법, 및 SELDI-TOF 유형의 분광측정법 (Ciphergen), 또는 MRM (다중 반응 모니터링) 유형의 질량 분광을 통한 정량적 방법을 들 수 있다.

더욱 일반적으로, 더 정량적 및 민감성인 단백질 용액을 이용한 면역효소검정 방법이 특히 사용될 수 있다. 이들 ELISA-유형의 방법은 표적-항원-특이적 포획 항체 및 검출 항체의 쌍을 조합한다. 시판 중인 항체 또는 특이적으로 개발된 폴리클로날, 모노클로날 또는 재조합 항체가 사용될 수 있다. 고 용량 멀티플렉스 ELISA 기법이 또한 사용될 수 있다. 따라서, Luminex 비즈 (예, Bio-Rad 사의 Bioplex) 상 항체와 같은 유형의 멀티플렉스 접근법, MesoScale Discovery (MSD) 사의 화학발광에 의한 싱글플렉스 또는 멀티플렉스 접근법, 또는 평면 표면 상 항체와 같은 유형의 것 (항체 배열) (예, MesoScale Discovery 사에 의해 제안된 접근법) 을 들 수 있다.

특히, 항체를 통해, 적절한 경우 라벨링 형태의 항체를 통해 본 발명의 아미노산 서열의 발현을 검출하는 것이 유리할 수 있다. 상기 항체는 직접 검출가능하거나, 또는 또 다른 시약과의 반응에 의해 검출가능한 기질을 통해 라벨링될 수 있다.

용어 "항체"는 당업자에게 공지된 임의의 유전공학 기법을 통해 또는 완전한 항체의 효소적 또는 화학적 절단에 의해 제조될 수 있는, 일반적으로는 모노클로날 또는 폴리클로날 항체, 나아가 항원과 결합가능한 면역글로불린 단편을 지칭하는 것으로 의도된다.

표피 상태를 평가하기 위한 도구로서 사용될 수 있는 항체는 문헌 [Antibodies: A Laboratory Manual, Cold Spring Harbor Laboratory Press, Cold Spring Harbor, N.Y. (1990)] 에 기재된 바와 같이, 당업자에게 공지된 임의의 방법을 통해 수득될 수 있다.

바람직한 구현예에 따르면, 2D 차 전기영동 프로테오믹 분석으로써, 또는 iTRAQ 등압 라벨링을 통해, 또는 라벨링 없는 스펙트럼 계수, 또는 세포 배양이 포함되는 경우 SILAC 유형으로 해, 본 발명의 아미노산 서열의 발현을 검출하는 것이 유리할 수 있다.

상기 방법은 당업자에게 공지되어 있으며, 유리하게도 이하 실시예에서 기술한 바와 같이 실시될 수 있다.

특히, 본 발명의 아미노산 서열과 관련된 용어 "활성"이란, 이전에 지시된 바와 같은 단백질분해 활성, 또는 예를 들어 상기 정의된 바와 같은 피부 박리 장애, 특히 두피의 비듬 병태의 감소, 예방 또는 치료를 위한 활성을 의미한다.

상기 활성은 당업자에게 공지된 임의의 방법을 통해, 예를 들면 인슐린, 글루카곤 또는 β-아밀로이드 단백질 등의 IDE 의 통상의 기질 상 단백질분해 활성 평가로써 측정될 수 있다.

바람직하게, 피부 상태 측정 또는 피부에 대한 미용적 치료의 효능의 특성화는 본 발명의 아미노산 서열, 바람직하게는 SEQ ID No.: 8 내지 SEQ ID No.: 14 로부터 선택된 서열, 또는 그 유사체 또는 단편에 해당하는 아미노산 서열의 발현에 있어서의 변화를 측정함으로써 수행될 수 있다.

본 발명의 방법은 특히 유리한데, 그 이유는 그 실시가 침습적 기술에 의지하지 않기 때문이다. 따라서, 표피의 샘플은 "스트리핑" 기법에 의해 수득될 수 있고, 당업자에게 공지된 통상의 분석 기법에 의해 직접 분석될 수 있다.

이러한 스트리핑은, 3M 사의 Blenderm®, D’squam (CuDERM 사의 시판 접착제), 시아노아크릴레이트 글루 또는 배니시 "스트리핑"법 또는 뿔상디스크형 등의 표피의 표면에 적용된 접착제 표면이다. 이들 스트리핑으로써, 단백질 함유물에 접근될 수 있도록 부착 각질세포 및 그들의 세포간 공간의 함유물이 샘플링된 후, 후속해서 추출에 적용된다.

본 발명의 방법에 적합한 샘플의 채취는 또한 예를 들어, 유체 회로와 조합된 특허 FR 2 667 778 에 기재된 바와 같이 베인 터빈 형 또는 나선형 세포 유형의 부속물을 통해 피부 표면의 "세정"으로써, 또는 단순히 피부의 표면에 버퍼 방울의 첨가/샘플링으로써 더욱 직접적으로 실시될 수 있다.

지침으로서, 본 발명을 실시하는데 적합한 기타 샘플링 방법, 예컨대 트윈 블레이드 시스템을 통해 각질층의 상부를 스크래핑하는 것에 의한 방법을 언급할 수 있다. 이 기법은 인설의 수집을 가능하게 하고, 이후 이것을 미네랄, 아미노산 또는 지질 함유물을 측정하기 위해 다양한 기술로써 직접 분석할 수 있다.

유리하게는, 본 발명의 마커 중 하나가, 미용적 치료법의, 또는 스킨케어, 특히 두피 케어용 미용적 활성제의 효능을 평가하는 관점에서, 개체의 더 효율적이고 더 엄격한 예비임상 선택의 목적을 위해 사용될 수 있다.

마찬가지로, 본 발명의 바이오마커는 시험관 내, 생체 외 또는 생체 내에서 활성제의 효능을 평가하기 위해 상기 지시된 바와 같이 유리하게 사용될 수 있다.

마찬가지로, 본 발명의 바이오마커는 개체의 피부 바이오마커 발현 프로파일에 따라 개체에 대한 미용적 치료를 위한 맞춤식 조언을 확립하는데 있어서 사용될 수 있다.

스크리닝

본 측면 중 하나에 따르면, 본 발명은 스킨케어용 활성제 또는 물리적 치료법의 스크리닝을 위한, 또는 특히 시험관 내 또는 생체 외에서의 스크리닝 방법에 있어서의, 본 발명의 바이오카머의 용도에 관한 것이다.

스크리닝된 활성제 또는 물리적 치료법은 피부의 비정상적 또는 불규칙한 박리의 예방 및/또는 치료에, 바람직하게는 두피의 비듬 병태의 예방 및/또는 치료에 특히 사용될 수 있다.

본 발명의 용도 또는 스크리닝 방법은 본 발명에 따른 아미노산 서열 또는 핵산 서열의 활성, 발현 또는 성숙의 측정과 기준 측정의 비교를 포함할 수 있다.

기준 측정은 상기 정의된 바와 같을 수 있다.

특히, 기준 측정은 시험될 활성제 또는 물리적 치료법의 부재 하, 샘플에서 측정된 상기 서열의 발현, 성숙 또는 활성에 대한 정량 또는 정성 값일 수 있다.

따라서, 기준 측정은 본 발명의 방법의 단계, 특히 상기 정의된 바와 같은 본 발명의 방법의 단계 a), b) 및 c) 를 시험될 활성제 또는 물리적 치료법의 부재 하에서 반복함으로써 수득될 수 있다.

기준 측정과의 시험 측정의 비교, 및 두 측정들 간의 편차 관측 또는 편차 부재는 시험될 활성제 또는 물리적 치료법의 효과에 대한 정보를 얻는 것을 가능하게 한다.

본 발명의 아미노산 서열 또는 핵산 서열의 발현, 성숙 또는 활성의 정성적 또는 정량적 측정은 당업자에게 공지된 임의의 방법에 의해, 특히 앞서 기술한 바와 같이 수행될 수 있다.

한 구현예에 따르면, 본 발명의 아미노산 서열의 활성을 조절할 수 있는 활성제 또는 물리적 치료법에 대한 스크리닝은, 예를 들어 리포터 유전자 시스템과 같이 아미노산 서열이 연루되어 있을 수 있는 신호전달 또는 대사 경로에 속한 표적 분자의 활성 또는 발현을 측정함으로써 수행될 수 있다.

한 구현예에 따르면, 본 발명의 방법은 무세포 시스템에서, 즉, 세포를 포함하지 않지만 세포 기능을 재현하는 시스템에서 또는 단리된 세포 샘플에서 수행될 수 있다.

본 발명에 따른 방법은 단리된 세포 샘플 상, 무세포 샘플 상, 단리된 아미노산 서열 상, 또는 본 발명의 단리된 핵산 서열 상에서 수행될 수 있다. 이들 샘플 또는 서열은 피부 생검에 의해, 배양 세포에서, 특히 표피 모델에서, 또는 비침습적 피부 표면 샘플링으로부터, 특히 각질층의 접착제 ("테이프 스트립핑") 에 의해, 또는 상기 기재된 바와 같이 단순 세정에 의해, 또는 대안적으로 서열과 관련해서는 합성을 통해 수득될 수 있다.

본 발명에 따른 활성제 또는 물리적 치료법의 스크리닝을 위한 상기 샘플 또는 서열의 용도는 당 분야에서의 당업자의 일반 상식 범위에 들어간다.

유리하게, 본 발명에 적합한 세포 샘플로서, 본 발명의 아미노산 서열을 발현하는 각질형성세포 또는 임의의 기타 피부 세포 유형의 샘플을 언급할 수 있다.

바람직하게, 활성제 또는 물리적 치료법에 대한 스크리닝은, 본 발명의 아미노산, 및 바람직하게는 SEQ ID No.: 8 내지 SEQ ID No.: 14 로부터 선택된 서열, 또는 그 유사체 또는 단편에 해당하는 것, 바람직하게는 SEQ ID No.: 9 내지 SEQ ID No.: 14 로부터 선택된 서열, 또는 유사체 또는 단편에 해당하는 것의 발현 또는 활성 면에서의 변동을, 스크리닝된 활성제 또는 물리적 치료법의 존재 및 부재 하에서 측정함으로써 수행될 수 있다.

조절제

본 발명의 목적을 위해, "조절제" 또는 "본 발명에 따른 아미노산 서열 또는 핵산 서열의 발현, 성숙 또는 활성을 조절할 수 있는 활성제 또는 물리적 치료법" 이란 표현은, 본 발명에 따른 적어도 하나의 아미노산 서열 또는 하나의 핵산 서열에, 또는 세포내 또는 세포외 신호전달 경로의 또는 대사 경로의 요소 상에 작용할 수 있거나, 또는 상기 아미노산 서열 또는 상기 핵산 서열을 비롯한 전사 및/또는 번역을 조절하기 위한 임의의 화합물 또는 물리적 현상을 의미한다.

본 발명에 따른 바람직한 조절제 또는 물리적 치료법은, 직접적으로 하나 이상의 본 발명의 아미노산 서열 또는 하나 이상의 본 발명의 핵산 서열에 작용해 그 발현, 성숙 또는 활성을 조절하는 화합물 또는 물리적 치료법일 수 있다.

본 발명의 목적을 위해, 용어 "조절"은 주어진 효과 측면에서, 상기 효과를 고무시키거나 또는 저해하는 작용을 의미한다.

본 발명에 따른 스크리닝으로부터 유래된 활성제 또는 물리적 치료법은 미용적 목적으로, 특히 피부 박리 장애에 대해, 특히 피부의 방벽 특성의 장애, 특히 두피의 방벽 특성의 장애에 대해 유리하게 사용될 수 있다.

바람직한 구현예에 따르면, 본 발명의 조절제는 본 발명의 아미노산 서열의 활성, 발현 또는 성숙을 저해하는 제제이다. 보다 더욱 바람직하게, 본 발명의 조절제는 본 발명의 아미노산 서열의 효소적 활성을 저해하는 제제이다.

본 발명의 아미노산 서열의 효소적 활성을 저해하는 조절제는 ATP, ADP, N-에틸말레이미드, 1,10-페난트롤린, 바시트라신, 인슐린, hGH, PMSF, 지방산, 예컨대 팔미트산, 리놀레산, 팔미토일-CoA, 리놀레오일-CoA, 금속 이온, 예컨대 Mg²⁺, Mn²⁺, Zn²⁺, Li⁺, 다이노르핀, 유비퀴틴, 금속-킬레이트제, 특히 Zn-킬레이트제, 예컨대 EDTA, 하기 화학식을 갖는 하이드록사메이트 펩티드로부터 선택될 수 있다:

[식 중, R₁, R₂, R₃, R₄, R₅ 및 R₆ 은 서로 독립적이며,

이때:

- R₁ 은 H, OH, O-(C₁-C₆)알킬 또는 (C₁-C₆)알킬이고,

- R₂ 은 (C₅-C₁₀)아릴, 하나 이상의 N, O 또는 S 를 포함하는 (C₅-C₁₀)헤테로아릴, 페닐, 1-나프틸, 2-나프틸 (적절하게는, 할로겐, 특히 Cl 또는 F 로 치환), (C₁-C₆)알킬 또는 O-(C₁-C₆)알킬, 니트릴, CN, (C₅-C₁₀)아릴, 하나 이상의 N, O 또는 S 를 포함하는 (C₅-C₁₀)헤테로아릴, 또는 CO₂H 이고,

- R₃ 은 NHC(=NH)NH₂, NH₂, NHC(O)(C₁-C₆)알킬 또는 NHC(O)(C₅-C₁₀)아릴이고,

- R₄ 는 [C(=O)CH(CH₂)_oR₇NH]_pH 또는 [C(=O)CH(CH₂)_oR₇NH]pC(=O)Me (이때, R₇ 은 4-하이드록시페닐, CO₂H, 3-인돌릴, 또는 페닐이고, o 는 0 내지 3 범위이고, p 는 0 내지 2 범위임) 이고,

- R₅ 는 H 또는 Me 이고,

- R₆ 는 H 또는 Me 이고,

- m 은 0 내지 3 범위이고, n 은 0 내지 3 범위임].

본 발명에서 사용하기에 적합한 하이드록사메이트 펩티드는 WO 2008/156 701 에 더 특히 개시되어 있다.

바람직하게, 본 발명에서 사용하기에 적합한 하이드록사메이트 펩티드는 상기 화학식 (I) 의 화합물일 수 있다 (R₂ 는 2-나프틸이고, R₃ 은 NHC(=NH)NH₂ 이고, R₁, R₄, R₅ 및 R₆ 은 상기 정의된 바와 같음).

보다 더욱 바람직하게, R₂ 는 아릴, 헤테로아릴, 치환된 아릴, 치환된 헤테로아릴, 할로-치환된 아릴, 예컨대 2-플루오로페닐, 3-플루오로페닐, 4-플루오로페닐, 할로-치환된 헤테로아릴, 알킬- 또는 아릴-치환된 아릴, 알킬- 또는 아릴-치환된 헤테로아릴, 예컨대 2-tert-부틸, 3-tert-부틸, 4-tert-부틸, 페닐, 1-나프틸, 2-나프틸, 2-벤조티오펜, -트랜스-CH=CH-페닐, 2-페닐, 3-페닐 또는 4-페닐일 수 있다.

보다 더욱 바람직하게, 본 발명에서 사용하기에 적합한 하이드록사메이트 펩티드는 하기로부터 선택될 수 있다:

.

앞서 언급된 저해제 이외에, IDE 저해제로서, 효소의 활성 부위 또는 제 2 결합부 (exosite) 를 차단하는, 뉴클레오시드 포스페이트 유형의 화합물, 또는 IDE 의 펩티드 단편 및 나아가 간섭 RNA, DNA 또는 RNA 압타머, 또는 항체를 언급할 수 있다.

본 발명의 한 구현예에 따르면, 본 발명의 조절제, 특히 본 발명의 아미노산 서열의 활성, 발현 또는 성숙을 저해하는 제제는 두피의 비듬 병태의 예방 및/또는 치료에 유리하게 사용될 수 있다. 더욱 바람직하게, 본 발명은 두피의 비듬 병태의 예방 및/또는 치료를 위한 본 발명의 아미노산 서열의 효소적 활성을 저해하는 조절제의 용도에 관한 것이다.

또 다른 측면에 따르면, 본 발명은 또한 본 발명의 아미노산 서열의 활성, 발현 또는 성숙의 활성화제, 특히 본 발명의 아미노산 서열의 효소적 활성의 활성화제로부터 선택된 본 발명의 조절제에 관한 것이다.

한 구현예에 따르면, 효소적 활성을 활성화하는 조절제는 수라민, 소마토스타틴, 브래디키닌, β-엔도르핀, 다이노르핀, ATP, iPPP, ADP, AMP, 지방산, 특히 예컨대 도코사헥사엔산 (docosahexaenoic acid), 및 하기 화학식을 갖는 화합물로부터 선택될 수 있다:

.

이들 화합물은 특히 문헌 [Cabrol et al. (PLoSOne, 2009)] 에 기재되어 있다.

IDE 의 효소적 활성의 활성화제 중, 또한 효소를 활성화하는, 뉴클레오시드 포스페이트, IDE 의 펩티드 단편 또는 항체를 언급할 수도 있다.

본 발명에 따른 용도 또는 방법에 따라 스크리닝될 수 있는 조절제로서, 또한 효소의 활성 부위 또는 제 2 결합부를 차단할 수 있거나, 효소를 예를 들면 알로스테릭 작용을 통해 활성화할 수 있는 항체, 특히 재조합 항체 뱅크에서 유래된 것, 예컨대 Antibodies By Design 사에서 유래된 항체, 또는 간섭 RNA, 예컨대 siRNA, miRNA 또는 shRNA, 또는 RNA 또는 DNA 압타머가 언급될 수도 있다.

조성물

본 발명은 생리적 또는 미용적 허용가능 매질 중 유효량의 하나 이상의 본 발명의 아미노산 서열 또는 본 발명의 하나 이상의 핵산 서열, 또는 상기 아미노산 서열 또는 상기 핵산 서열의 활성, 발현 또는 성숙을 조절가능한 하나 이상의 활성제를 포함하는 조성물, 특히 미용 조성물에 관한 것이다.

더욱 특히, 본 발명은 SEQ ID No.: 9 내지 SEQ ID No.: 14 로부터 선택된 아미노산 서열, 또는 그 유사체 또는 단편으로 나타낸 펩티드, 또는 상기 펩티드를 인코딩하는 핵산 서열을 포함하는 미용 조성물에 관한 것이다.

본 발명의 목적을 위해, "생리학적으로 허용가능한 매질"이란 표현은, 피부, 두피 또는 입술로 조성물의 국소 투여, 또는 경구 또는 비경구, 예컨대 피내 또는 피하 투여에 적합한 매질을 의미하는 것으로 의도된다.

본 발명의 조성물은 친수성 또는 친유성 겔화제, 친수성 또는 친유성 첨가제, 보존제, 항산화제, 용매, 향료, 충전제, 스크리닝제, 악취 흡수제 및 착색제 등의 고려 중인 분야에서 공통적인 보조제를 포함할 수 있다.

본 발명에 따른 조성물의 다양한 구성성분의 양은 고려 중인 분야에 통상 사용되는 것이다.

본 발명의 조성물에 포함된, 본 발명의 아미노산 서열 또는 핵산 서열, 또는 본 발명에 따른 활성제의 양 (또한, "유효량"이라고 지칭됨) 은 물론 활성제의 성질 및 원하는 효과에 따라 다르며, 그리하여 매우 가변적일 수 있다.

자릿수를 제공하기 위해, 조성물은 본 발명에 따른 아미노산 서열 또는 핵산 서열 또는 활성제를 조성물의 총 양의 0.00001% 내지 50% 에 해당하는 양으로, 특히 조성물의 총 양의 0.001% 내지 10% 에 해당하는 양으로, 더욱 특히 조성물의 총 양의 0.1% 내지 1% 에 해당하는 양으로 포함할 수 있다.

또 다른 구현예에 따르면, 본 발명의 미용적 조성물은 또한 하나 이상의 추가의 미용적 및/또는 치료적 활성제를 포함할 수도 있다.

추가의 활성제

본 발명의 문맥에서 사용될 수 있는 추가의 활성제의 예로서, 미용 오일, 예컨대 실리콘 오일, 트리글리세리드 유형의 식물성 오일, 탄화수소-기재 오일, 예컨대 파림 오일 (Parleam oil), 및 지방산과 지방 알코올의 에스테르를 언급할 수 있다.

또한, 피부 및/또는 그 부속기의 상태를 개선하기 위한 기타 활성제, 예컨대 보습 또는 가습 활성제 또는 천연 지질 방벽을 개선시키는 활성제, 예컨대 세라미드, 콜레스테롤 술페이트 및/또는 지방산, 및 그 혼합물을 이용 가능할 수 있다.

피부 및/또는 그 부속기에 대해 활성을 지닌 효소, 예컨대 프로테아제, 리파아제, 글루코시다아제, 아미다아제, 세레브로시다아제 및/또는 멜라나아제 및 그 혼합물을 이용할 수 있다.

본 발명의 실시에 적합한 활성제의 기타 예에는 하기가 포함된다: 진통 활성제, 항-효모 활성제, 항세균제, 항기생충 활성제, 항진균 활성제, 항바이러스 활성제, 스테로이드성 항염증 활성제, 마취 활성제, 항소양 활성제, 각질용해 활성제, 자유-라디칼 스카벤지 활성제, 지루성방지 활성제, 항비듬 활성제, 항여드름 활성제, 피부의 노화 방지 및/또는 그 상태의 개선을 위한 활성제, 항피부염 활성제, 자극방지 활성제, 면역조절 활성제, 건조 피부의 치료를 위한 활성제, 발한 활성제, 항건선 활성제, UV-보호 활성제, 항히스타민 활성제, 반흔형성 활성제, 자가-태닝 활성제, 항산화제, 예컨대 녹차 또는 그 활성 단편, 글리세롤, 라포나이트, 카페인, 방향족 에센셜 오일, 염료, 탈색소 활성제, 지질조절제, 연화, 리프레싱, 탈취, 탈감작, 표백 또는 영양 활성제, 피부 분화 및/또는 증식 및/또는 색소형성 감소를 위한 활성제, 및 그 혼합물.

또한, 추가의 활성제로서, Tween 20 또는 기타 약 세제, 킬레이트제, 생균제, Zn-피리티온 또는 기타 항진균제, 엘라그산, 박리성제 (prodesquamating agent) 및/또는 필링제, 항소양증 화합물, 폴리페놀 및 그 유도체, 당 및 환원당, 항염증제, 발한 또는 항피지분비제 (antisebacic agent) 등을 언급할 수 있다.

본 발명에 사용되기에 더욱 특히 적합할 수 있는 추가의 활성제로서, 또한 생균 미생물, 프리바이오틱 활성제, 피부 방어 인자의 합성을 촉진하는 활성제, 표피 세포의 분화/증식 평형을 재확립하는 활성제, 특히 레티놀 또는 레티놀-유사 유형의 활성제, 또는 보습 활성제를 들 수 있다.

미용적 용도

본 발명은 피부의 비정상적 또는 불규칙적 박리, 특히 두피의 방벽 특성의 장애 및 바람직하게 두피의 비듬 병태를 예방 및/또는 치료하기 위한 활성제로서, 유효량의 상기 아미노산 서열 또는 상기 핵산 서열의 활성, 발현 또는 성숙을 조절하는 하나 이상의 제제, 특히 앞서 정의된 조절제의 미용적 용도에 관한 것이다.

바람직한 구현예에 따르면, 본 발명의 용도로, 본 발명의 아미노산 서열의 활성, 발현 또는 성숙을 저해하는 조절제, 바람직하게 본 발명의 아미노산 서열의 효소적 활성의 저해제를 구현할 수 있다. 이러한 제제는 이전에 정의된 저해제로부터 특히 선택될 수 있다.

또 다른 구현예에 따르면, 본 발명의 용도로, 유리하게는 상기 정의된 활성화제로부터 선택된, 본 발명의 아미노산 서열의 효소적 활성을 활성화하는 조절제를 구현할 수 있다.

또 다른 측면에 따르면, 본 발명은 피부의 비정상적 또는 불규칙적 박리, 특히 두피의 비듬 병태의 예방 및/또는 치료를 필요로 하는 개체에서의 이의 미용적 또는 비치료적 방법에 관한 것이다.

본 발명의 방법은 활성제로서 특히 상기에서 정의된 바와 같이, 본 발명의 상기 서열의 활성, 발현 또는 성숙을 조절하는 하나 이상의 제제를 포함하는 하나 이상의 조성물을 상기 개체에 투여하는 것으로 이루어진 하나 이상의 단계를 포함할 수 있다.

바람직하게, 고려 중인 조절제는 특히 상기에서 정의된 바와 같은, 본 발명의 아미노산 서열의 효소적 활성을 저해하는 제제이다.

본 발명의 방법 또는 용도는, 특히 상기 정의된 바와 같은 피부 박리 장애, 및 바람직하게 두피의 비듬 병태의 예방 및/또는 치료를 가능하게 한다.

본 발명의 이용 방법은 인설 또는 비듬의 개수 및 크기를 감소시킬 수 있다.

유리하게, 본 발명에 따른 용도 또는 방법의 실시 결과, 두피의 미관이 개선되고, 그의 방벽 기능 특성이 회복될 수 있다.

일반적으로, 본 발명의 방법 또는 용도는 피부의 방벽 특성, 특히 두피의 방벽 특성을 강화시킬 수 있다.

바람직하게, 본 발명의 방법은 필요로 하는 개체의 피부의 적어도 한 부분에, 특히 두피에, 본 발명의 국소 조성물의 적어도 한 코트의 국소 적용을 포함할 수 있다.

본 발명에 따른 국소 적용에 의한 미용적 방법은, 유리하게, 피부를 관리 및/또는 정리하는데 의도된 본 발명의 조성물과는 다른 추가의 미용적 또는 피부과학적 조성물과 동시에, 시간에 걸쳐 연속적 또는 별개로 조합된 본 발명의 조성물의 적용을 포함할 수 있다.

본 발명의 또 다른 바람직한 구현예에 따르면, 본 발명의 미용적 방법은 경구적으로, 특히 미용적 목적을 위한 하나 이상의 음식 또는 식이 조성물의 투여에 의해 시행될 수 있다.

또 다른 바람직한 구현예에 따르면, 본 발명의 미용적 방법은 비경구적으로 실시될 수 있다. 본 발명의 미용적 방법의 비경구적 이행은 임의의 외과 수술을 제외하여 수행되고 단순히 심미적 목적을 위한 피부의 표면 치료를 수행하는데 목표한다.

따라서, 비경구적으로 이행된 본 발명의 미용적 방법은, 표피내 및/또는 피내 및/또는 피하 주입에 적합한 임의의 주입 기술 또는 장치에 의해 수행된다.

상기 투여는 예를 들어 메소테라피에 의해 수행될 수 있다.

그리하여, 비경구적으로 이행된 미용적 방법은 단지 피부의 표피상의 관통이기 때문에, 임의의 의학적 또는 치료적인 상황은 아니다.

비경구적으로, 전신 패치를 이용한 투여를 촉진하는 것이 대안적으로 가능하다.

본 발명에 따른 미용적 방법은 매일, 예를 들어 1 일 단일의 투여 비율로, 또는 1 일 2 또는 3 회로 분할한 투여의 비율로, 예를 들어 아침에 1 회, 저녁에 1 회로 실시될 수 있다.

본 발명에 따른 미용적 방법은, 1 주 내지 수 주 범위 또는 심지어 몇 달이라는 시기에 걸쳐 실시될 수 있으며, 상기 기간이 몇 달 또는 나아가 몇 년 동안 치료 없는 기간 후에 반복되는 것도 또한 가능하다.

본 발명에 따른 미용적 방법의 예로서, 본 발명의 조성물을, 예를 들어 1 일 1, 2, 또는 3 회의 비율로, 일반적으로는 4 주 이상의 확장된 기간에 걸쳐, 또는 심지어 4 내지 15 주에 걸쳐, 필요한 경우 1 이상의 정지기를 갖고 투여하는 것을 상상 가능하다.

재건 피부

또 다른 측면에 따르면, 본 발명은 유효량의 본 발명의 하나 이상의 아미노산 서열 또는 본 발명의 하나 이상의 핵산 서열 또는 본 발명의 하나 이상의 조절제의 단리된 재건 피부의 제조를 위한 용도에 관한 것이다.

미용적 및 피부과학적 적용을 위한 활성제 및 조제법의 안전성 및 효능을 평가하기 위해서, 가능한 한 생체 내 상태와 근접한 기관형적 모델을 개발함으로써 큰 이점이 존재하게 된다.

본 발명의 하나 이상의 아미노산 서열 또는 본 발명의 하나 이상의 핵산 서열 또는 본 발명의 하나 이상의 조절제의, 배양 배지 내에서의 용도는 개발된 모델의 품질을 개선시킬 수 있다.

또한, 본 발명의 용도는 박리된 피부를 재생시키는 단리된 재건 피부 모델을 수득 가능하게 한다. 특히, 상기 정의된 바와 같은 활성화 조절제의 사용이 박리를 재생시키고, 바람직하게 비듬 병태를 재생하는 피부 모델의 제조를 위해 고려될 수 있다.

또 다른 측면에 따르면, 적어도 유효량의 본 발명에 따른 하나 이상의 아미노산 서열, 하나 이상의 핵산 서열 또는 하나 이상의 조절제를 단리된 재건 피부, 특히 각질형성세포를 발생시킬 수 있는 세포에 접촉시키는 단계를 적어도 포함하는, 단리된 다계층화 상피 세포 모델, 바람직하게 단리된 재건 피부의 제조 방법에 관한 것이다.

재건 피부 모델은 다양한 세포 유형, 예컨대 각질형성세포, 섬유모세포, 랑게르한스 세포 및 멜라닌세포를 포함할 수 있다. 섬유모세포 유형의 세포는 임의로는 조사될 수 있다.

유리하게도, 본 발명의 재건 피부의 모델은 두피 모델로서 사용될 수 있다. 본 발명의 단리된 재건 두피의 모델은 두피 관리에 적합한 신규한 활성제, 더욱 특히 신규한 항비듬 활성제의 스크리닝 목적을 위해 유리하게 사용될 수 있다.

이러한 모델 및 그 제조는 당업자에게 공지되어 있다.

또 다른 측면에 따르면, 본 발명은 다계층화 상피 세포 모델, 바람직하게 재건 피부 모델의 제조 방법에 관한 것으로, 이는 상기 모델의 하나 이상의 세포 유형의 세포를 배양하는 하나 이상의 단계를 포함하고, 이때 상기 세포는 본 발명의 아미노산 서열 또는 핵산 서열의 발현을 억제 또는 증가시키도록 유전적으로 개질된 바 있다.

본 발명의 아미노산 서열 또는 핵산 서열의 발현을 억제하기 위해 유전적으로 개질된 세포 (이 세포는 "노크-아웃 (knock-out)" 으로서 지칭됨) 의 제조는 당업자에게 공지된 임의의 방법에 의해 실행될 수 있다.

예로서, 상기 세포는, 발현이 억제될 아미노산 서열을 발현시키는 유전자를 대신하거나 또는 이에 삽입하는 핵산 단편의 트랜스펙션 및 상동 재조합에 의해 수득될 수 있다.

마찬가지로, 발현이 억제될 유전자로부터 유래된 mRNA 에 특이적인 간섭 RNA 를 인코딩하는 핵산 서열의 세포로의 트랜스펙션에 의해 주어진 유전자의 발현을 억제하는 것이 가능할 수 있다.

본 발명의 아미노산 서열 또는 핵산 서열의 발현을 증가시키도록 유전적으로 개질된 세포의 생산은 당업자에게 공지된 임의의 방법을 통해 수행될 수 있다.

예로서, 상기 세포는 프로모터의 조절 하 본 발명의 아미노산 서열을 인코딩하는 유전자를 포함하는 플라스미드의 트랜스펙션에 의해 수득할 수 있다. 프로모터는 유전자의 유발 또는 구성성 또는 조직-특이적 발현을 가능하게 할 수 있다.

또한, 트랜스펙션될 세포의 염색체 내에 발현될 유전자의 도입을 가능하게 하는 각종 트랜스펙션 벡터를 이용할 수 있다.

유전자의 발현을 억제 또는 증가시킬 수 있는 모든 상기 분자 생물 기법은 당업자에게 공지되어 있어, 구체적으로 상술할 필요는 없다.

도면
도 1 : 은 IDE 로 동정된, 2D 차 전기영동 프로테오믹 분석에 의해 수득된 단백질 스폿의 확대율을 나타낸다.
도 2 : 는 도 1 에서 관찰된 스폿의 부피의 강도 그래프이다.
도 3 : 은 IDE 의 웨스턴 블롯에 의한 면역검출을 나타낸다.
도 4 : 는 도 3 에 나타낸 웨스턴 블롯 동안 검출된 밴드의 평균 강도를 나타낸다.
본 발명의 목적을 위해, 달리 지시 하지 않는 한, "하나"란, "하나 이상"의 의미인 것으로 이해되어야 한다.
이하 실시예 및 도면은 본 발명의 예시로 제시된 것이며 본 발명을 제한하는 것은 아니다.

실시예

실시예 1

두피에서의 IDE 의 발현

1- 재료 및 방법

비듬이 없는 및 비듬이 있는 두피의 비침습성 샘플을 이용한 2D 차 전기영동 프로테오믹 분석을 수행했다.

6 명의 비듬이 없는 지원자 (부착 비듬 등급 0 내지 0.25) 및 6 명의 비듬이 있는 지원자 (부착 비듬 등급 3.25 내지 4) 로 연구를 수행했다. 지원자는 36 세 내지 39 세의 숏컷 남성이다. 지원자의 비듬 상태 등급화는 0 내지 5 의 부착 비듬의 점수 규모를 제공하는 하기의 표준 분류에 따라 전문가에 의해 수행된다.

2 cm 의 면적으로 뿔상디스크형으로써 샘플을 취한다 (Ref. GODS100, CuDerm). 각 샘플에 대해서 4 개의 포화 뿔상디스크를 만든다. 가용성 단백질을 천연 버퍼 (TBS, 1M NaCl, 1% Triton X100) 로 추출한다.

여과 후, 단백질을 아세톤 첨가에 의해 침전시킨다. 단백질 펠릿을 40 mM 의 DTT 로 보충된 추출 버퍼 III (BioRad; Ref.: 163-2104) 에서 용해한다.

지원자에 대응하는 각 샘플에 있어서, 2-차원 전기영동을, 1 차로 11 cm 스트립 상 IEF 분리 pH 3-11 (GE-Healthcare) 에 따르고, 10.5-14% Criterion 구배 겔 (Bio-Rad) 에 대한 2 차에 따라 공급자 권고사항에 준수하여 수행한다.

공급자 프로토콜에 준수해 사용된 SyproRuby (ref. S4942, Invitrogen) 로 겔을 염색한 후, 하기의 매개변수에 따라 이미지 획득 후, 이미지 분석을 Progenesis™ 소프트웨어로 수행한다 : 여기 (Excitation): 460/80; 발광: 620/30; 해상: 50 μm; 노출 3 s; 플랫 필드: 1 s; 노출 1.

제 1 단계로, 이미지들을 함께 나란히 배열하고 강도를 정규화한다. 제 2 단계에서, 그룹 정의 후, 통계적 분석을 Progenesis Samespots software (NonLinear Dynamics) 로 수행한다. "p 값" (0.05 미만), "폴드" (2 초과, 한 그룹의 가장 강렬한 스폿 및 또 다른 한 그룹의 최소로 강렬한 스폿 사이의 강도 비) 및 "q 값" (0.8 초과) 의 함수로 스폿의 선택을 실시한다.

이후, 선택된 스폿을 오려내어 단백질을 트립신으로 소화시키고 LC-MS/MS 로 분석한다.

단백질 데이타뱅크 UniRef100.15.3.9606.호모-사피엔스에서 정보를 얻어 단백질을 동정한다.

2- 결과

IDE 는 상기 정의된 기준에 따라 비듬이 존재하는 군에서의 과발현을 지지하는 선택된 스폿들 중에서 동정된다.

각 지원자의 상기 단백질 스폿의 확대 및 그 스폿의 부피의 그래프 구현을 도 1 및 도 2 에 나타낸다.

이들 결과는 피부, 특히 피부 박리, 더욱 특히 두피의 비듬 병태에 대한 바이오마커로서의 IDE 의 용도를 입증한다. 즉, IDE 는 미용적 피부 치료의 효능 특성화 또는 두피의 비듬 병태의 치료용 활성제의 스크리닝에 유리하게 사용될 수 있다.

실시예 2

피부에서 IDE 의 발현의 웨스턴 블롯의 확인

1- 재료 및 방법

실시예 1 에서 상기 기술된 샘플의 농도를 일직선으로 만들고, 2 ㎍ 을 10-20% Criterion 겔 (BioRad) 의 웰에 침착시킨다. 그리하여 단백질을 SDS-PAGE 전기영동에 의해 분리한다. 표준 프로토콜에 따라 PVDF 멤브레인 상으로의 반건조 트랜스퍼 후, 단백질을 관심 단백질에 대한 1차 항체와 4℃에서 하룻밤 인큐베이션한다. 이후, 2차 인큐베이션을 1차 항체에 대항하는 2차 항체 (퍼록시다아제에 커플링됨) 으로 수행한다.

전기화학발광 키트를 표적 단백질을 밝히기 위해 사용한다.

이미지를 FluorSmax (Biorad) 로 획득하고 밴드를 Quantity-One 소프트웨어 (Biorad) 를 이용해 정량화한다. 시판 중인 항-IDE 항체를 1/5000 의 희석으로 사용하였다 (ref. AB28560, AbCam).

2- 결과

도 3 은 수득된 웨스턴 블롯 이미지를 나타낸다. 검출된 밴드의 평균 강도는 도 4 의 막대그래프로써 나타낸다.

IDE 의 면역검출은, 비듬이 있는 개체에서의 과발현을 보인다. 이 관측으로, 실시예 1 에서 관측한 차별적 동정이 확인된다.

문헌

Ali et al. (2009). "The insulin degrading enzyme binding domain of varicella-zoster virus (VZV) glycoprotein E is important for cell-to-cell spread and VZV infectivity, while a glycoprotein I binding domain is essential for infection." Virology 386(2): 270-279.

Cabrol et al. (2009). "Small-molecule activators of insulin-degrading enzyme discovered through high-throughput compound screening." PLoS One 4(4): e5274.

Camberos et al. (2001). "ATP inhibits insulin-degrading enzyme activity." Exp. Biol. Med. (Maywood) 226(4): 334-341.

Groves et al. (2003). "Association and haplotype analysis of the insulin-degrading enzyme (IDE) gene, a strong positional and biological candidate for type 2 diabetes susceptibility." Diabetes 52(5): 1300-1305.

Guo et al. (2010). "Molecular Basis for the Recognition and Cleavages of IGF-II, TGF-alpha, and Amylin by Human Insulin-Degrading Enzyme." J. Mol. Biol. 395(2): 430-443.

Kim et al. (2007). "Decreased catalytic activity of the insulin-degrading enzyme in chromosome 10-linked Alzheimer disease families." J. Biol. Chem. 282(11): 7825-7832.

Miners et al. (2009). "Neprilysin and insulin-degrading enzyme levels are increased in Alzheimer disease in relation to disease severity." J. Neuropathol. Exp. Neurol. 68(8): 902-914.

Radulescu et al. (2007). "Immunohistochemical demonstration of the zinc metalloprotease insulin-degrading enzyme in normal and malignant human breast: Correlation with tissue insulin levels." Int. J. Oncol. 30:73-80.

Shearer et al. (1997). "Insulin is degraded extracellularly in wounds by insulin-degrading enzyme (EC 3.4.24.56)." Am. J. Physiol. 273(4 Pt 1): E657-664.

Kyte et al. (1982), J. Mol. Biol., 157: 105.

Mehul et al. (2000) "Identification and Cloning of a New Calmodulin-like Protein from Human Epidermis" J. Biol. Chem. 275(17):12841-12847

Sambrook et al. (1989), Vol. I-III, Coldspring Harbor Laboratory, Coldspring Harbor Press, NY.

"Antibodies: A Laboratory Manual", Cold Spring Harbor Laboratory Press, Cold Spring Harbor, N.Y. (1990).

서열목록

SEQUENCE LISTING <110> L'OREAL <120> Utilisation de l'IDE comme biomarqueur d'un etat du cuir chevelu <130> OA10490/S1894/KLP/HG/cf <160> 14 <170> PatentIn version 3.3 <210> 1 <211> 3060 <212> DNA <213> Homo Sapiens <400> 1 atgcggtacc ggctagcgtg gcttctgcac cccgcactgc ccagcacctt ccgctcagtc 60 ctcggcgccc gcctgccgcc tccggagcgc ctgtgtggtt tccaaaaaaa gacttacagc 120 aaaatgaata atccagccat caagagaata ggaaatcaca ttaccaagtc tcctgaagac 180 aagcgagaat atcgagggct agagctggcc aatggtatca aagtacttct tatcagtgat 240 cccaccacgg ataagtcatc agcagcactt gatgtgcaca taggttcatt gtcggatcct 300 ccaaatattg ctggcttaag tcatttttgt gaacatatgc tttttttggg aacaaagaaa 360 taccctaaag aaaatgaata cagccagttt ctcagtgagc atgcaggaag ttcaaatgcc 420 tttactagtg gagagcatac caattactat tttgatgttt ctcatgaaca cctagaaggt 480 gccctagaca ggtttgcaca gttttttctg tgccccttgt tcgatgaaag ttgcaaagac 540 agagaggtga atgcagttga ttcagaacat gagaagaatg tgatgaatga tgcctggaga 600 ctctttcaat tggaaaaagc tacagggaat cctaaacacc ccttcagtaa atttgggaca 660 ggtaacaaat atactctgga gactagacca aaccaagaag gcattgatgt aagacaagag 720 ctactgaaat tccattctgc ttactattca tccaacttaa tggctgtttg tgttttaggt 780 cgagaatctt tagatgactt gactaatctg gtggtaaagt tattttctga agtagagaac 840 aaaaatgttc cattgccaga atttcctgaa caccctttcc aagaagaaca tcttaaacaa 900 ctttacaaaa tagtacccat taaagatatt aggaatctct atgtgacatt tcccatacct 960 gaccttcaga aatactacaa atcaaatcct ggtcattatc ttggtcatct cattgggcat 1020 gaaggtcctg gaagtctgtt atcagaactt aagtcaaagg gctgggttaa tactcttgtt 1080 ggtgggcaga aggaaggagc ccgaggtttt atgtttttta tcattaatgt ggacttgacc 1140 gaggaaggat tattacatgt tgaagatata attttgcaca tgtttcaata cattcagaag 1200 ttacgtgcag aaggacctca agaatgggtt ttccaagagt gcaaggactt gaatgctgtt 1260 gcttttaggt ttaaagacaa agagaggcca cggggctata catctaagat tgcaggaata 1320 ttgcattatt atcccctaga agaggtgctc acagcggaat atttactgga agaatttaga 1380 cctgacttaa tagagatggt tctcgataaa ctcagaccag aaaatgtccg ggttgccata 1440 gtttctaaat cttttgaagg aaaaactgat cgcacagaag agtggtatgg aacccagtac 1500 aaacaagaag ctataccgga tgaagtcatc aagaaatggc aaaatgctga cctgaatggg 1560 aaatttaaac ttcctacaaa gaatgaattt attcctacga attttgagat tttaccgtta 1620 gaaaaagagg cgacaccata ccctgctctt attaaggata cagctatgag caaactttgg 1680 ttcaaacaag atgataagtt ttttttgccg aaggcttgtc tcaactttga atttttcagc 1740 ccatttgctt atgtggaccc cttgcactgt aacatggcct atttgtacct tgagctcctc 1800 aaagactcac tcaacgagta tgcatatgca gcagagctag caggcttgag ctatgatctc 1860 caaaatacca tctatgggat gtatctttca gtgaaaggtt acaatgacaa gcagccaatt 1920 ttactaaaga agattattga gaaaatggct acctttgaga ttgatgaaaa aagatttgaa 1980 attatcaaag aagcatatat gcgatctctt aacaatttcc gggctgaaca gcctcaccag 2040 catgccatgt actacctccg cttgctgatg actgaagtgg cctggactaa agatgagtta 2100 aaagaagctc tggatgatgt aacccttcct cgccttaagg ccttcatacc tcagctcctg 2160 tcacggctgc acattgaagc ccttctccat ggaaacataa caaagcaggc tgcattagga 2220 attatgcaga tggttgaaga caccctcatt gaacatgctc ataccaaacc tctccttcca 2280 agtcagctgg ttcggtatag agaagttcag ctccctgaca gaggatggtt tgtttatcag 2340 cagagaaatg aagttcacaa taactgtggc atcgagatat actaccaaac agacatgcaa 2400 agcacctcag agaatatgtt tctggagctc ttctgtcaga ttatctcgga accttgcttc 2460 aacaccctgc gcaccaagga gcagttgggc tatatcgtct tcagcgggcc acgtcgagct 2520 aatggcatac agggcttgag attcatcatc cagtcagaaa agccacctca ctacctagaa 2580 agcagagtgg aagctttctt aattaccatg gaaaagtcca tagaggacat gacagaagag 2640 gccttccaaa aacacattca ggcattagca attcgtcgac tagacaaacc aaagaagcta 2700 tctgctgagt gtgctaaata ctggggagaa atcatctccc agcaatataa ttttgacaga 2760 gataacactg aggttgcata tttaaagaca cttaccaagg aagatatcat caaattctac 2820 aaggaaatgt tggcagtaga tgctccaagg agacataagg tatccgtcca tgttcttgcc 2880 agggaaatgg attcttgtcc tgttgttgga gagttcccat gtcaaaatga cataaatttg 2940 tcacaagcac cagccttgcc acaacctgaa gtgattcaga acatgaccga attcaagcgt 3000 ggtctgccac tgtttcccct tgtgaaacca catattaact tcatggctgc aaaactctga 3060 <210> 2 <211> 60 <212> DNA <213> Homo Sapiens <400> 2 gggctagagc tggccaatgg tatcaaagta cttcttatca gtgatcccac cacggataag 60 <210> 3 <211> 60 <212> DNA <213> Homo Sapiens <400> 3 gaatctttag atgacttgac taatctggtg gtaaagttat tttctgaagt agagaacaaa 60 <210> 4 <211> 36 <212> DNA <213> Homo Sapiens <400> 4 ggttacaatg acaagcagcc aattttacta aagaag 36 <210> 5 <211> 27 <212> DNA <213> Homo Sapiens <400> 5 atggctacct ttgagattga tgaaaaa 27 <210> 6 <211> 204 <212> DNA <213> Homo Sapiens <400> 6 accaaggagc agttgggcta tatcgtcttc agcgggccac gtcgagctaa tggcatacag 60 ggcttgagat tcatcatcca gtcagaaaag ccacctcact acctagaaag cagagtggaa 120 gctttcttaa ttaccatgga aaagtccata gaggacatga cagaagaggc cttccaaaaa 180 cacattcagg cattagcaat tcgt 204 <210> 7 <211> 63 <212> DNA <213> Homo Sapiens <400> 7 acacttacca aggaagatat catcaaattc tacaaggaaa tgttggcagt agatgctcca 60 agg 63 <210> 8 <211> 1019 <212> PRT <213> Homo Sapiens <400> 8 Met Arg Tyr Arg Leu Ala Trp Leu Leu His Pro Ala Leu Pro Ser Thr 1 5 10 15 Phe Arg Ser Val Leu Gly Ala Arg Leu Pro Pro Pro Glu Arg Leu Cys 20 25 30 Gly Phe Gln Lys Lys Thr Tyr Ser Lys Met Asn Asn Pro Ala Ile Lys 35 40 45 Arg Ile Gly Asn His Ile Thr Lys Ser Pro Glu Asp Lys Arg Glu Tyr 50 55 60 Arg Gly Leu Glu Leu Ala Asn Gly Ile Lys Val Leu Leu Ile Ser Asp 65 70 75 80 Pro Thr Thr Asp Lys Ser Ser Ala Ala Leu Asp Val His Ile Gly Ser 85 90 95 Leu Ser Asp Pro Pro Asn Ile Ala Gly Leu Ser His Phe Cys Glu His 100 105 110 Met Leu Phe Leu Gly Thr Lys Lys Tyr Pro Lys Glu Asn Glu Tyr Ser 115 120 125 Gln Phe Leu Ser Glu His Ala Gly Ser Ser Asn Ala Phe Thr Ser Gly 130 135 140 Glu His Thr Asn Tyr Tyr Phe Asp Val Ser His Glu His Leu Glu Gly 145 150 155 160 Ala Leu Asp Arg Phe Ala Gln Phe Phe Leu Cys Pro Leu Phe Asp Glu 165 170 175 Ser Cys Lys Asp Arg Glu Val Asn Ala Val Asp Ser Glu His Glu Lys 180 185 190 Asn Val Met Asn Asp Ala Trp Arg Leu Phe Gln Leu Glu Lys Ala Thr 195 200 205 Gly Asn Pro Lys His Pro Phe Ser Lys Phe Gly Thr Gly Asn Lys Tyr 210 215 220 Thr Leu Glu Thr Arg Pro Asn Gln Glu Gly Ile Asp Val Arg Gln Glu 225 230 235 240 Leu Leu Lys Phe His Ser Ala Tyr Tyr Ser Ser Asn Leu Met Ala Val 245 250 255 Cys Val Leu Gly Arg Glu Ser Leu Asp Asp Leu Thr Asn Leu Val Val 260 265 270 Lys Leu Phe Ser Glu Val Glu Asn Lys Asn Val Pro Leu Pro Glu Phe 275 280 285 Pro Glu His Pro Phe Gln Glu Glu His Leu Lys Gln Leu Tyr Lys Ile 290 295 300 Val Pro Ile Lys Asp Ile Arg Asn Leu Tyr Val Thr Phe Pro Ile Pro 305 310 315 320 Asp Leu Gln Lys Tyr Tyr Lys Ser Asn Pro Gly His Tyr Leu Gly His 325 330 335 Leu Ile Gly His Glu Gly Pro Gly Ser Leu Leu Ser Glu Leu Lys Ser 340 345 350 Lys Gly Trp Val Asn Thr Leu Val Gly Gly Gln Lys Glu Gly Ala Arg 355 360 365 Gly Phe Met Phe Phe Ile Ile Asn Val Asp Leu Thr Glu Glu Gly Leu 370 375 380 Leu His Val Glu Asp Ile Ile Leu His Met Phe Gln Tyr Ile Gln Lys 385 390 395 400 Leu Arg Ala Glu Gly Pro Gln Glu Trp Val Phe Gln Glu Cys Lys Asp 405 410 415 Leu Asn Ala Val Ala Phe Arg Phe Lys Asp Lys Glu Arg Pro Arg Gly 420 425 430 Tyr Thr Ser Lys Ile Ala Gly Ile Leu His Tyr Tyr Pro Leu Glu Glu 435 440 445 Val Leu Thr Ala Glu Tyr Leu Leu Glu Glu Phe Arg Pro Asp Leu Ile 450 455 460 Glu Met Val Leu Asp Lys Leu Arg Pro Glu Asn Val Arg Val Ala Ile 465 470 475 480 Val Ser Lys Ser Phe Glu Gly Lys Thr Asp Arg Thr Glu Glu Trp Tyr 485 490 495 Gly Thr Gln Tyr Lys Gln Glu Ala Ile Pro Asp Glu Val Ile Lys Lys 500 505 510 Trp Gln Asn Ala Asp Leu Asn Gly Lys Phe Lys Leu Pro Thr Lys Asn 515 520 525 Glu Phe Ile Pro Thr Asn Phe Glu Ile Leu Pro Leu Glu Lys Glu Ala 530 535 540 Thr Pro Tyr Pro Ala Leu Ile Lys Asp Thr Ala Met Ser Lys Leu Trp 545 550 555 560 Phe Lys Gln Asp Asp Lys Phe Phe Leu Pro Lys Ala Cys Leu Asn Phe 565 570 575 Glu Phe Phe Ser Pro Phe Ala Tyr Val Asp Pro Leu His Cys Asn Met 580 585 590 Ala Tyr Leu Tyr Leu Glu Leu Leu Lys Asp Ser Leu Asn Glu Tyr Ala 595 600 605 Tyr Ala Ala Glu Leu Ala Gly Leu Ser Tyr Asp Leu Gln Asn Thr Ile 610 615 620 Tyr Gly Met Tyr Leu Ser Val Lys Gly Tyr Asn Asp Lys Gln Pro Ile 625 630 635 640 Leu Leu Lys Lys Ile Ile Glu Lys Met Ala Thr Phe Glu Ile Asp Glu 645 650 655 Lys Arg Phe Glu Ile Ile Lys Glu Ala Tyr Met Arg Ser Leu Asn Asn 660 665 670 Phe Arg Ala Glu Gln Pro His Gln His Ala Met Tyr Tyr Leu Arg Leu 675 680 685 Leu Met Thr Glu Val Ala Trp Thr Lys Asp Glu Leu Lys Glu Ala Leu 690 695 700 Asp Asp Val Thr Leu Pro Arg Leu Lys Ala Phe Ile Pro Gln Leu Leu 705 710 715 720 Ser Arg Leu His Ile Glu Ala Leu Leu His Gly Asn Ile Thr Lys Gln 725 730 735 Ala Ala Leu Gly Ile Met Gln Met Val Glu Asp Thr Leu Ile Glu His 740 745 750 Ala His Thr Lys Pro Leu Leu Pro Ser Gln Leu Val Arg Tyr Arg Glu 755 760 765 Val Gln Leu Pro Asp Arg Gly Trp Phe Val Tyr Gln Gln Arg Asn Glu 770 775 780 Val His Asn Asn Cys Gly Ile Glu Ile Tyr Tyr Gln Thr Asp Met Gln 785 790 795 800 Ser Thr Ser Glu Asn Met Phe Leu Glu Leu Phe Cys Gln Ile Ile Ser 805 810 815 Glu Pro Cys Phe Asn Thr Leu Arg Thr Lys Glu Gln Leu Gly Tyr Ile 820 825 830 Val Phe Ser Gly Pro Arg Arg Ala Asn Gly Ile Gln Gly Leu Arg Phe 835 840 845 Ile Ile Gln Ser Glu Lys Pro Pro His Tyr Leu Glu Ser Arg Val Glu 850 855 860 Ala Phe Leu Ile Thr Met Glu Lys Ser Ile Glu Asp Met Thr Glu Glu 865 870 875 880 Ala Phe Gln Lys His Ile Gln Ala Leu Ala Ile Arg Arg Leu Asp Lys 885 890 895 Pro Lys Lys Leu Ser Ala Glu Cys Ala Lys Tyr Trp Gly Glu Ile Ile 900 905 910 Ser Gln Gln Tyr Asn Phe Asp Arg Asp Asn Thr Glu Val Ala Tyr Leu 915 920 925 Lys Thr Leu Thr Lys Glu Asp Ile Ile Lys Phe Tyr Lys Glu Met Leu 930 935 940 Ala Val Asp Ala Pro Arg Arg His Lys Val Ser Val His Val Leu Ala 945 950 955 960 Arg Glu Met Asp Ser Cys Pro Val Val Gly Glu Phe Pro Cys Gln Asn 965 970 975 Asp Ile Asn Leu Ser Gln Ala Pro Ala Leu Pro Gln Pro Glu Val Ile 980 985 990 Gln Asn Met Thr Glu Phe Lys Arg Gly Leu Pro Leu Phe Pro Leu Val 995 1000 1005 Lys Pro His Ile Asn Phe Met Ala Ala Lys Leu 1010 1015 <210> 9 <211> 20 <212> PRT <213> Homo Sapiens <400> 9 Gly Leu Glu Leu Ala Asn Gly Ile Lys Val Leu Leu Ile Ser Asp Pro 1 5 10 15 Thr Thr Asp Lys 20 <210> 10 <211> 20 <212> PRT <213> Homo Sapiens <400> 10 Glu Ser Leu Asp Asp Leu Thr Asn Leu Val Val Lys Leu Phe Ser Glu 1 5 10 15 Val Glu Asn Lys 20 <210> 11 <211> 12 <212> PRT <213> Homo Sapiens <400> 11 Gly Tyr Asn Asp Lys Gln Pro Ile Leu Leu Lys Lys 1 5 10 <210> 12 <211> 9 <212> PRT <213> Homo Sapiens <400> 12 Met Ala Thr Phe Glu Ile Asp Glu Lys 1 5 <210> 13 <211> 68 <212> PRT <213> Homo Sapiens <400> 13 Thr Lys Glu Gln Leu Gly Tyr Ile Val Phe Ser Gly Pro Arg Arg Ala 1 5 10 15 Asn Gly Ile Gln Gly Leu Arg Phe Ile Ile Gln Ser Glu Lys Pro Pro 20 25 30 His Tyr Leu Glu Ser Arg Val Glu Ala Phe Leu Ile Thr Met Glu Lys 35 40 45 Ser Ile Glu Asp Met Thr Glu Glu Ala Phe Gln Lys His Ile Gln Ala 50 55 60 Leu Ala Ile Arg 65 <210> 14 <211> 21 <212> PRT <213> Homo Sapiens <400> 14 Thr Leu Thr Lys Glu Asp Ile Ile Lys Phe Tyr Lys Glu Met Leu Ala 1 5 10 15 Val Asp Ala Pro Arg 20

Claims (17)

1. (i) 핵산 서열 SEQ ID No.: 1, 또는 SEQ ID No.: 1 의 유사체 또는 단편으로 인코딩된 하나 이상의 아미노산 서열, 또는 (ii) 하나 이상의 상기 핵산 서열의, 두피의 비듬 병태의 예방 및/또는 치료를 위한, 상기 아미노산 서열 또는 상기 핵산 서열의 활성, 발현 또는 성숙을 조절할 수 있는 활성제 또는 물리적 치료의 스크리닝에서의 시험관 내 또는 생체 외 용도.
2. 제 1 항에 있어서, 상기 핵산 서열이 SEQ ID No.: 2 내지 SEQ ID No.: 7, 또는 그 유사체 또는 단편으로부터 선택되는 용도.
3. 제 1 항 또는 제 2 항에 있어서, 상기 아미노산 서열이 SEQ ID No.: 8 내지 SEQ ID No.: 14 또는 그 유사체 또는 단편으로부터 선택되는 용도.
4. 제 1 항 내지 제 3 항 중 어느 한 항에서 정의된 바와 같은 아미노산 서열, 또는 제 1 항 또는 제 2 항에서 정의된 바와 같은 핵산 서열의 활성, 발현 또는 성숙을 조절하는 유효량의 하나 이상의 제제의, 두피의 비듬 병태를 예방 및/또는 치료하기 위한 활성제로서의 미용적 용도.
5. 제 4 항에 있어서, 조절제가 ATP, ADP, N-에틸말레이미드, 1,10-페난트롤린, 바시트라신, 인슐린, hGH, PMSF, 팔미트산, 리놀레산, 팔미토일-CoA, 리놀레오일-CoA 와 같은 지방산, Mg²⁺, Mn²⁺, Zn²⁺, Li⁺ 와 같은 금속 이온, 다이노르핀, 유비퀴틴, 금속-킬레이트제, 특히 EDTA, 하기의 화학식을 갖는 하이드록사메이트 펩티드와 같은 Zn-킬레이트제로부터 선택되는, 상기 아미노산 서열의 효소적 활성을 저해하는 제제인 용도:
   

   

   
   [식 중, R₁, R₂, R₃, R₄, R₅ 및 R₆ 은 서로 독립적이며,
   이때:
   - R₁ 은 H, OH, O-(C₁-C₆)알킬 또는 (C₁-C₆)알킬이고,
   - R₂ 은 (C₅-C₁₀)아릴, 하나 이상의 N, O 또는 S 를 포함하는 (C₅-C₁₀)헤테로아릴, 페닐, 1-나프틸, 2-나프틸 (적절하게는, 할로겐, 특히 Cl 또는 F 로 치환), (C₁-C₆)알킬 또는 O-(C₁-C₆)알킬, 니트릴, CN, (C₅-C₁₀)아릴, 하나 이상의 N, O 또는 S 를 포함하는 (C₅-C₁₀)헤테로아릴, 또는 CO₂H 이고,
   - R₃ 은 NHC(=NH)NH₂, NH₂, NHC(O)(C₁-C₆)알킬 또는 NHC(O)(C₅-C₁₀)아릴이고,
   - R₄ 는 [C(=O)CH(CH₂)_oR₇NH]_pH 또는 [C(=O)CH(CH₂)_oR₇NH]pC(=O)Me (이때, R₇ 은 4-하이드록시페닐, CO₂H, 3-인돌릴, 또는 페닐이고, o 는 0 내지 3 범위이고, p 는 0 내지 2 범위임) 이고,
   - R₅ 는 H 또는 Me 이고,
   - R₆ 는 H 또는 Me 이고,
   - m 은 0 내지 3 범위이고, n 은 0 내지 3 범위임].
6. 제 1 항 내지 제 3 항 중 어느 한 항에서 정의된 바와 같은 아미노산 서열, 또는 제 1 항 또는 제 2 항에서 정의된 바와 같은 핵산 서열의 활성, 발현 또는 성숙을 조절하는 유효량의 하나 이상의 제제의, 두피의 방벽 특성 장애를 예방 및/또는 치료하기 위한 활성제로서의 미용적 용도로서, 상기 조절제는 수라민, 소마토스타틴, 브래디키닌, β-엔도르핀, 다이노르핀, ATP, iPPP, ADP, AMP, 지방산, 특히, 예컨대 도코사헥사엔산 및 하기 화합물:
   

   

   
   로부터 선택되는 상기 아미노산 서열의 효소적 활성의 활성화제인 미용적 용도.
7. (i) 하나 이상의 제 1 항 내지 제 3 항 중 어느 한 항에서 정의된 바와 같은 아미노산 서열, 또는 (ii) 하나 이상의 제 1 항 또는 제 2 항에서 정의된 바와 같은 핵산 서열의, 두피의 비듬 병태에 대한 바이오마커로서의 시험관 내 또는 생체 외 용도.
8. (i) 하나 이상의 제 1 항 내지 제 3 항 중 어느 한 항에서 정의된 바와 같은 아미노산 서열, 또는 (ii) 하나 이상의 제 1 항 또는 제 2 항에서 정의된 바와 같은 핵산 서열의, 두피의 비듬 병태의 미용적 치료의 효능을 특성화하기 위한 시험관 내 또는 생체 외 용도.
9. (i) 하나 이상의 제 1 항 내지 제 3 항 중 어느 한 항에서 정의된 바와 같은 아미노산 서열, 또는 (ii) 하나 이상의 제 1 항 또는 제 2 항에서 정의된 바와 같은 핵산 서열의, 두피의 비듬 병태의 예방 및/또는 치료로 공지된 일련의 활성제 중에서, 상기 비듬 병태에 대해 최대의 유익한 효과를 발휘하는 것으로 추정되는 활성제를 선택하기 위한 시험관 내 또는 생체 외 용도.
10. 유효량의 (i) 하나 이상의 제 1 항 내지 제 3 항 중 어느 한 항에서 정의된 바와 같은 아미노산 서열, 또는 (ii) 하나 이상의 제 1 항 또는 제 2 항에서 정의된 바와 같은 핵산 서열, 또는 (iii) 하나 이상의 상기 서열의 활성, 발현 또는 성숙을 조절하는 제제, 바람직하게는 제 5 항 또는 제 6 항에서 정의된 바와 같은 제제의, 비듬 병태를 복원하는 단리된 재건 피부의 제조를 위한 시험관 내 또는 생체 외 용도.
11. 적어도 하기로 이루어진 단계를 포함하는, 두피의 비듬 병태를 특성화하기 위한 시험관 내 또는 생체 외 방법:
    a) 두피의 단리된 샘플에서, 제 1 항 내지 제 3 항 중 어느 한 항에서 정의된 바와 같은 아미노산 서열 또는 제 1 항 또는 제 2 항에서 정의된 바와 같은 핵산 서열의 발현, 성숙 또는 활성의 정성적 또는 정량적 측정을 수행하는 단계, 및
    b) 단계 a) 에서 실시된 상기 측정을 기준 측정과 비교하는 단계.
12. 적어도 하기로 이루어진 단계를 포함하는, 두피의 비듬 병태를 예방 및/또는 치료하기 위한, 제 1 항 내지 제 3 항 중 어느 한 항에서 정의된 바와 같은 아미노산 서열 또는 제 1 항 또는 제 2 항에서 정의된 바와 같은 핵산 서열의 활성, 발현 또는 성숙을 조절할 수 있는 활성제 또는 물리적 치료의 시험관 내 또는 생체 외 스크리닝 방법:
    a) 상기 아미노산 서열 또는 상기 핵산 서열을, 상기 서열의 활성, 발현 또는 성숙에 유리한 조건 하에 배치하는 단계,
    b) 상기 아미노산 서열 또는 상기 핵산 서열을 시험될 하나 이상의 활성제와 접촉시키거나, 또는 상기 아미노산 서열 또는 상기 핵산 서열을 시험될 물리적 치료에 노출시키는 단계,
    c) 상기 아미노산 서열 또는 상기 핵산 서열의 발현, 성숙 또는 활성의 정성적 또는 정량적 측정을 수행하는 단계, 및
    d) 상기 측정을 기준 측정과 비교하는 단계.
13. 두피의 비듬 병태의 예방 및/또는 치료에 대한, 이를 필요로 하는 개체에서의 미용적 방법으로서, 상기 개체에 활성제로서 상기 서열의 활성, 발현 또는 성숙을 조절하는, 바람직하게는 제 5 항 또는 제 7 항에서 정의된 바와 같은 하나 이상의 제제를 포함하는 하나 이상의 조성물을 투여하는 것으로 이루어진 하나 이상의 단계를 포함하는 방법.
14. 적어도 하기로 이루어진 단계를 포함하는, 두피의 비듬 병태의 미용적 치료의, 이를 필요로 하는 개체에서의, 효능을 특성화하는 시험관 내 또는 생체 외 미용적 방법:
    a) 상기 개체에서 취한 제 1 의 단리된 두피 샘플에서, 미용적 치료를 실시하기 전에, 하나 이상의 제 1 항 내지 제 3 항 중 어느 한 항에서 정의된 바와 같은 아미노산 서열 또는 하나 이상의 제 1 항 또는 제 2 항에서 정의된 바와 같은 핵산 서열의 발현, 성숙 또는 활성의 적어도 제 1 의 정성적 또는 정량적 측정을 수행하는 단계,
    b) 상기 개체에서 취한 제 2 의 단리된 두피 샘플에서, 미용적 치료를 실시한 후에, 상기 아미노산 서열 또는 상기 핵산 서열의 발현, 성숙 또는 활성의 적어도 제 2 의 정성적 또는 정량적 측정을 수행하는 단계, 및
    c) 제 1 및 제 2 의 측정을, 특히 미용적 치료 실시의 하나 이상의 효과에 대한 정보를 상기로부터 추론하기 위해 비교하는 단계.
15. SEQ ID No.: 9 내지 SEQ ID No.: 14, 또는 그 유사체 또는 단편으로부터 선택되는 단리된 펩티드.
16. 제 15 항에 따라 정의된 바와 같은 펩티드 또는 그 펩티드를 인코딩하는 핵산 서열을 포함하는 조성물.
17. SEQ ID No.: 8, 또는 그 단편 또는 유사체의 단백질의 발현이 억제 또는 증가되어진 하나 이상의 세포를 포함하는 다세포성 시험관 내 또는 생체 외 피부 모델.

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